(57)【要約】  本発明は、特に、癌、特に肺癌の治療に使用するための、（ａ）第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤及び（ｂ）サイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤を含む組合せ製剤に関する。本発明は、癌の治療のための医薬品の調製のためのそのような組合せの使用；癌の治療を必要とする対象に、共同で治療上有効な量の前記組合せを投与することを含む、前記対象の癌を治療する方法；そのような組合せ及びその商業的包装を含む医薬組成物にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）とサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤の組合せ製剤。
【請求項２】
前記第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤が、式（Ｉ）の化合物
【化１】
2020529423.tif 000010
であるナザルチニブ又はその薬学的に許容できる塩である、請求項１に記載の組合せ製剤。
【請求項３】
前記サイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤が、リボシクリブ又はその薬学的に許容できる塩である、請求項１又は２に記載の組合せ製剤。
【請求項４】
前記式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容できる塩が、メシル酸塩又は塩酸塩、好ましくはメシル酸塩である、請求項２又は３に記載の組合せ製剤。
【請求項５】
同時の、別々な、又は連続的な使用のための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組合せ製剤。
【請求項６】
患者の癌の治療に使用するための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組合せ製剤。
【請求項７】
前記癌が肺癌である、請求項６に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項８】
前記肺癌が、非小細胞肺癌、とりわけＥＧＦＲ変異非小細胞肺癌である、請求項７に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項９】
前記癌が、ＥＧＦＲの異常な活性化、とりわけＥＧＦＲの増幅、又はＥＧＦＲの体細胞変異を特徴とする、請求項６〜８のいずれか一項に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項１０】
前記癌を患っている前記患者が、治療ナイーブ患者（すなわち、ＥＧＦＲ変異非小細胞肺癌の全身性抗新生物療法による前治療を全く受けなかった患者）である、請求項６〜９のいずれか一項に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項１１】
前記癌を患っている前記患者が、チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ＥＧＦＲ  ＴＫＩ又は第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる前治療を受けたことがある、請求項６〜９のいずれか一項に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項１２】
前記癌が、ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤による治療に対して耐性であるか、又はＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤による治療に対する耐性を発生させつつあるか、又はＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤による治療に対する耐性を発生させる高いリスクがある、請求項６〜１１のいずれか一項に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項１３】
前記癌が、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｃ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ａ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８６１Ｑ変異、ＥＧＦＲエクソン１９欠失、ＥＧＦＲエクソン２０挿入、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異、ＥＧＦＲ  Ｔ８５４Ａ変異、若しくはＥＧＦＲ  Ｄ７６１Ｙ変異、又はこれらの任意の組合せを有することを特徴とする、請求項６〜１２のいずれか一項に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項１４】
前記癌がＮＳＣＬＣであり、前記ＮＳＬＣが、ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異、ＥＧＦＲエクソン１９欠失、又は両方を有する、請求項６〜１３のいずれか一項に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項１５】
前記ＮＳＣＬＣが、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異をさらに有する、請求項１４に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項１６】
前記ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異が新規変異である、請求項１５に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項１７】
前記ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異が後天性変異である、請求項１５に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項１８】
前記癌が、第一世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、エルロニチニブ、ゲフィチニブ、イコチニブ、又はこれらの任意の組合せ）による治療及び／又は第二世代ＴＫＩ（例えば、アファチニブ、ダコミチニブ、又は両方）による治療の後で進行した、請求項１１、１２、１３、１４、１５、１６、又は１７のいずれか一項に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項１９】
癌を患っている前記患者が、第三世代ＴＫＩ、例えば、オシメルチニブに対して治療ナイーブである、請求項６〜１８のいずれか一項に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項２０】
前記癌が、シスのＥＧＦＲ  Ｃ７９７ｍ／Ｔ７９０Ｍを特徴とする、請求項６〜１９のいずれか一項に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項２１】
前記癌が、ＭＥＴ増幅又はエクソン１４スキッピング変異及び／又はＢＲＡＦ融合若しくは変異をさらに特徴とする、請求項２０に記載の使用のための組合せ製剤。
【請求項２２】
ＥＧＦＲ変異肺癌の治療のための、サイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤と組み合わせて使用する医薬品の調製のための式Ｉの化合物又はその薬学的な許容できる塩の使用。
【請求項２３】
ＥＧＦＲ変異肺癌の治療のための、式Ｉの化合物又はその薬学的な許容できる塩と組み合わせて使用する医薬品の調製のためのサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤の使用。
【請求項２４】
癌、とりわけ肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）の治療のための、サイクリンＤキナーゼ４／６阻害剤、特に７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド又はその薬学的に許容できる塩との併用療法に使用するための、第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤、特に（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド又はその薬学的に許容できる塩。
【請求項２５】
癌、とりわけ肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）の治療のための、第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤、特に（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド又はその薬学的に許容できる塩との併用療法に使用するための、サイクリンＤキナーゼ４／６阻害剤、特に７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド又はその薬学的に許容できる塩。
【請求項２６】
肺癌を治療する方法であって、それを必要とする対象に、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組合せ製剤を、前記肺癌に対して共同で治療上有効である量で、同時に、別々に、又は連続的に投与することを含む方法。
【請求項２７】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の組合せ製剤及びそれを必要とするヒト患者への前記組合せ製剤の同時の、別々な、又は連続的な投与の説明を含む、肺癌の治療に使用するための商業的包装。
【請求項２８】
ＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療を必要とするヒトのＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを治療する方法であって
（ａ）治療上有効な量の第三世代ＥＦＧＲチロシンキナーゼ阻害剤（ナザルチニブ又はその薬学的に許容できる塩など）を、単独療法として、微小残存病変が達成されるまで（すなわち腫瘍量減少が、少なくとも１か月の間隔をあけて実施される２回の評価の間で５％未満になるまで）投与すること；それに続いて
（ｂ）第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ナザルチニブ又はその薬学的に許容できる塩など）とサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤、特に、化合物Ｂ（リボシクリブ）又はその薬学的に許容できる塩の、治療上有効な量の組合せ製剤を投与すること
を含む方法。
【請求項２９】
（ａ）化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩が、単独療法として、微小残存病変が達成されるまで投与され；且つ
（ｂ）化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩とサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤、特にリボシクリブ又はその薬学的に許容できる塩の組合せ製剤がその後に投与される、
ＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するためのナザルチニブ又はその薬学的に許容できる塩。
【請求項３０】
（ａ）化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩が、単独療法として、癌を患っている患者の腫瘍量減少が、少なくとも１か月の間隔をあけて実施される２回の評価の間で５％未満になるまで投与され）；且つ
（ｂ）化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩とリボシクリブ又はその薬学的に許容できる塩の組合せ製剤が、その後に投与される、
ＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するためのナザルチニブ又はその薬学的に許容できる塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒト対象の癌、例えば、肺癌、及びとりわけ非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を治療する方法及びそのような治療に有用な組合せ製剤（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ）に関する。とりわけ、本発明は、（ａ）第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）、特に（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド、又はその薬学的に許容できる塩、及び（ｂ）サイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤、特に７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、又はその薬学的に許容できる塩を含む組合せ製剤を提供する。癌、とりわけ肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）の治療における使用のためのそのような組合せ；癌、とりわけ肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）の治療のための医薬品の調製のためのそのような組合せの使用；癌、とりわけ肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）の治療を必要としているヒト対象の癌、とりわけ肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）を治療する方法であって、前記対象に、共同で治療上有効な（ｊｏｉｎｔｌｙ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ）量の前記組合せを投与することを含む方法；そのような組合せ及びその商業的包装を含む医薬組成物も提供される。
【背景技術】
【０００２】
肺癌は、世界中で最もよくみられる死に至る癌であり、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）は肺癌症例のおよそ８５％を占める。欧米諸国では、１０〜１５％の非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者が、その腫瘍中に上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）変異を示し、アジア諸国は、３０〜４０％もの高い割合を報告した。最も優勢な発癌性ＥＧＦＲ変異（Ｌ８５８Ｒ及びｅｘ１９ｄｅｌ）は、ＥＧＦＲ  ＮＳＣＬＣの約８５％を占める。
【０００３】
ＥＧＦＲ変異患者には、第一選択療法としてＥＦＧＲ阻害剤が与えられる。しかし、ほとんどの患者に、一般に１０〜１４か月以内に獲得耐性が生じる。エルロチニブ、ゲフィチニブ、及びイコチニブなど、第一世代ＴＫＩとも称される第一世代可逆的ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）により治療された一次ＥＧＦＲ変異を有するＮＳＣＬＣ患者の最高５０％において、二次「ゲートキーパー」Ｔ７９０Ｍ変異が生じる。
【０００４】
第二世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（アファチニブ及びダコミチニブなど）は、この耐性の機構を克服しようとして開発された。これらは、ＥＧＦＲ  ＡＴＰ部位でシステイン７９７に共有結合する不可逆な薬剤である。第二世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩは、前臨床モデルで、活性化［Ｌ８５８Ｒ、ｅｘ１９ｄｅｌ］変異と後天性Ｔ７９０Ｍ変異の両方に対して強力である。しかし、それらの臨床的有効性は、おそらくは同時に起こる野生型（ＷＴ）ＥＧＦＲ阻害により起こされる重度の有害作用のため、限定的であることが分かった。第二世代阻害剤に対する耐性もすぐに生じ、第一世代及び第二世代ＴＫＩを服用する事実上全ての患者がおよそ９〜１３か月後に耐性になる。
【０００５】
これにより、第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ、例えば、ナザルチニブ（ＥＧＦ８１６）、ロシレチニブ、ＡＳＰ８２７３、及びオシメルチニブ（Ｔａｇｒｉｓｓｏ（登録商標））の開発に至った。第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩは、ＷＴ  ＥＧＦＲ温存性であり（ｓｐａｒｉｎｇ）、また活性化ＥＧＦＲ変異［Ｌ８５８Ｒ及びｅｘ１９ｄｅｌなど］及び後天性Ｔ７９０Ｍへの相対的に等しい効力を有する。オシメルチニブは、最近、米国において、疾患がＥＧＦＲ  ＴＫＩ療法を受けている間又はその後に進行した進行性のＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ＋  ＮＳＣＬＣ患者の治療に認可された。
【０００６】
しかし、これらの第三世代の薬剤に対する耐性もすぐに発生する。これらの新たな薬剤に対する耐性はあまり詳細に特徴づけられていないが、いくつかの場合に、オシメルチニブ治療で進行した患者の血漿試料に見られる三次ＥＧＦＲ  Ｃ７９７Ｓ変異（Ｔｈｒｅｓｓ  ｅｔ  ａｌ（Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２１（６），２０１５，ｐｐ  ５６０−５６２）、ＭＥＴ若しくはＦＧＦＲ１の増幅、又はＢＲＡＦの変異（Ｈｏ  ｅｔ  ａｌ，（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｔｈｏｒａｃｉｃ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２０１６）と関連することが見出された。
【０００７】
そのため、ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）、特に第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療の過程において耐性の発生を予防若しくは遅らせ（例えば、より永続性のある寛解を誘導することにより）；且つ／又はＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤、特に第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療の過程において獲得された耐性を克服若しくは逆転させる治療選択肢が依然として必要とされている。ＥＧＦＲ  ＴＫＩの有効性にもかかわらず疾患は依然として不治であるので、ＮＳＣＬＣ、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣにおける新たな治療選択肢を開発する継続した必要性も依然としてある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明者らは、ＣＤＫ４／６の不活性化が、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣモデルにおいて第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、ＥＧＦ８１６）の抗増殖効果を大幅に改善することを発見した。これは、有効な治療が現在まったく存在しないこの臨床状況での有効な治療選択肢の可能性を開くものである。
【０００９】
したがって、本発明の目的は、癌、特に非小細胞肺癌、より特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療を改善する療法を提供することである。とりわけ、本発明の目的は、初期の反応を深くし、且つ／又は薬剤耐性、特にＥＧＦＲ  ＴＫＩ療法に対する耐性の出現を予防若しくは遅らせる安全で忍容性がある治療を提供することである。本明細書に記載される組合せ製剤は、安全で忍容性があり、Ｔ７９０Ｍ＋  ＥＧＦＲ変異進行性ＮＳＣＬＣを含む、治療ナイーブ及び／又は第三世代ＥＧＦＲ−ＴＫＩナイーブなＴ７９０Ｍ＋  ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣにおけるＥＧＦ８１６に対する反応の深さ及び／又は期間も改善すると期待されている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、本発明の一態様として、（ａ）第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ及び（ｂ）サイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤を含む組合せ製剤を提供する。
【００１１】
本発明は、（ａ）式Ｉの化合物、すなわち（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（本明細書で「化合物Ａ」と称される）、又はその薬学的に許容できる塩、及び
（ｂ）サイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤
を含む組合せ製剤も提供する。
【００１２】
好ましい態様において、本発明は、（ａ）（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（本明細書で「化合物Ａ」と称される）として知られる式Ｉの化合物又はその薬学的に許容できる塩及び
（ｂ）リボシクリブ又はその薬学的に許容できる塩
を含む組合せ製剤を提供する。
【００１３】
別の態様において、本発明は、第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤のリボシクリブ又はその薬学的に許容できる塩と組み合わせた投与に好適な投与計画に関する。本発明は、ＥＧＦＲ  ＴＫＩ癌療法の早期における第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）と、それに続いて、腫瘍が微小残存病変の状態である場合、その後の比較的安定な疾患制御の期間の間の第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩとＣＤＫ４／６阻害剤の組合せ製剤の投与の治療有効性を最大にする治療計画を与える。
【００１４】
本発明の治療剤が、単剤としての第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ、例えば、化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩の、比較的安定な疾患制御（すなわち微小残存病変の状態）を達成するのに十分な期間の投与と、それに続く化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩とサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤、特に、化合物Ｂ又はその薬学的に許容できる塩の組合せの投与を含む投与計画に従って有用に投与され得ることが想定される。
【００１５】
したがって、本発明は、ＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療を必要とするヒトのＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
（ａ）治療上有効な量の第三世代ＥＦＧＲチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩）を、単独療法として、微小残存病変が達成されるまで（すなわち、腫瘍量減少が、少なくとも１か月の間隔をあけて実施される２回の評価の間で５％未満である）投与すること；それに続いて
（ｂ）治療上有効な量の前記第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩）とサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤、特に、化合物Ｂ又はその薬学的に許容できる塩の組合せ製剤を投与すること
を含む方法を提供する。
【００１６】
本発明は、
（ａ）第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩など）が、単独療法として、微小残存病変が達成されるまで（すなわち、腫瘍量減少が、少なくとも１か月の間隔をあけて実施される２回の評価の間で５％未満である）投与され；且つ
（ｂ）第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩など）とサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤、特に、化合物Ｂ又はその薬学的に許容できる塩の組合せ製剤がその後に投与される、
ＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療を必要とするヒトのＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療における使用のための第三世代ＥＦＧＲチロシンキナーゼ阻害剤（化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩など）を提供する。
【００１７】
好ましい態様において、本発明は、（ａ）（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミドとしても知られる式Ｉの化合物（本明細書で「ナザルチニブ」又は「化合物Ａ」とも称される）又はその薬学的に許容できる塩及び（ｂ）７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドであるサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤（本明細書で「リボシクリブ」又は「化合物Ｂ」とも称される）又はその薬学的に許容できる塩を含む、本発明の組合せと称される組合せ製剤にも関する。
【００１８】
別の態様において、本発明は、同時の、別々な、又は連続的な使用のための本発明の組合せに関する。
【００１９】
別の態様において、本発明は、癌、特に非小細胞肺癌、より特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００２０】
別の態様において、本発明は、癌、特に非小細胞肺癌、より特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを治療する方法であって、それを必要とする対象に、本発明の組合せを、前記癌に対して共同で治療上有効な量で同時に、別々に、又は連続的に投与することを含む方法に関する。
【００２１】
別の態様において、本発明は、癌、特に非小細胞肺癌、より特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療のための医薬品の調製のための本発明の組合せの使用に関する。
【００２２】
本発明は、癌、とりわけ肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）の治療のための、サイクリンＤキナーゼ４／６阻害剤、特に７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、又はその薬学的に許容できる塩との併用療法に使用するための第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤、特に（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド又はその薬学的に許容できる塩も提供する。
【００２３】
癌、とりわけ肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）の治療のための、第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤、特に（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド又はその薬学的に許容できる塩との併用療法に使用するためのサイクリンＤキナーゼ４／６阻害剤、特に７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド又はその薬学的に許容できる塩も提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１Ａ】図１：ＥＧＦ８１６とＬＥＥ０１１との組合せの相乗効果を示す、ＥＧＦ８１６対ＬＥＥ０１１の投与量マトリックス（ｄｏｓｅ  ｍａｔｒｉｘ）阻害％値である。
【図１Ｂ】（上記の通り。）
【図２】ＥＧＦ８１６とＬＥＥ０１１との組合せのＲｂリン酸化に対する効果。ＥＧＦ８１６とＬＥＥ０１１との組合せによるＲｂの抑制増大が観察され、組合せの追加された有効性に寄与するようである。
【図３】４種のＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ細胞株（ＰＣ９、ＨＣＣ８２７、ＨＣＣ４００６、及びＭＧＨ７０７）におけるＥＧＦ８１６及びＬＥＥ０１１の長期生存能力実験。細胞数の代理としてコンフルエンスが２×／週あたり２回（２×）測定され、０日目でのコンフルエンスに対する割合として示される。ＥＧＦＲ阻害剤とＣＤＫ４／６阻害剤の組合せは、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ細胞の再成長を緩徐化する。
【図４】単剤化合物Ａ（ＥＧＦ８１６）及び化合物Ｂ（ＬＥＥ０１１）又は組合せ（化合物Ａ  ＋化合物Ｂ）処置の存在下での、経時的に記録されたインビボ腫瘍体積変化。
【図５】単剤の単剤化合物Ａ（ＥＧＦ８１６）及び化合物Ｂ（ＬＥＥ０１１）又は組合せ（化合物Ａ＋化合物Ｂ）処置の経時的な腫瘍Ｒｂリン酸化の免疫組織化学的な薬力学分析。ＥＧＦ８１６及びＬＥＥ０１１は共にＲｂリン酸化を阻害し、ＮＣＩ−Ｈ１９７５モデルで観察された腫瘍成長阻害の量と相関している。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
一態様において、本発明は、第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ及びサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤を含む組合せ製剤に関する。この組合せ製剤は本明細書において「本発明の組合せ」と称される。
【００２６】
本発明は、（ａ）（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（本明細書で「化合物Ａ」とも称される）としても知られる式Ｉの化合物
【化１】
2020529423.tif 000002
又はその薬学的に許容できる塩、及び（ｂ）サイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤を含む組合せ製剤にも関する。
【００２７】
本発明の組合せの好ましい実施形態は、（ａ）（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（本明細書で「化合物Ａ」とも称される）としても知られる以下の式Ｉの化合物である化合物
【化２】
2020529423.tif 000003
又はその薬学的に許容できる塩、及び（ｂ）７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド（本明細書で「リボシクリブ」又は「化合物Ｂ」とも称される）であるサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤又はその薬学的に許容できる塩を含む組合せ製剤である。
【００２８】
第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤
第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩは、野生型（ＷＴ）ＥＧＦＲ温存性であり、活性化ＥＧＦＲ変異［Ｌ８５８Ｒ及びｅｘ１９ｄｅｌなど］及び後天性Ｔ７９０Ｍに相対的な等しい効力も有する。
【００２９】
本明細書に記載される本組合せ製剤及び好ましい用量で使用される好ましい第三世代ＥＧＦＲ阻害剤は、ナザルチニブ及び「ＥＧＦ８１６」としても知られる化合物Ａである。化合物Ａは、活性化及び獲得耐性変異（Ｌ８５８Ｒ、ｅｘ１９ｄｅｌ、及びＴ７９０Ｍ）を選択的に阻害すると同時に野生型（ＷＴ）ＥＧＦＲを温存する上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の標的化された共有結合的な不可逆的阻害剤である（Ｊｉａ  ｅｔ  ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  Ｏｃｔｏｂｅｒ  １，２０１４  ７４；１７３４参照）。化合物Ａは、ＥＧＦＲ変異（Ｌ８５８Ｒ、ｅｘ１９ｄｅｌ、及びＴ７９０Ｍ）癌モデル（インビトロ及びインビボ）において有意な有効性を示し、臨床的に意義があり効能がある濃度でのＷＴ  ＥＧＦＲ阻害を全く示さない。用量依存性抗腫瘍有効性がいくつかの異種移植片モデルで観察され、化合物Ａは忍容性が良好であり、効能のある投与量で体重減少が全く観察されなかった。
【００３０】
化合物Ａが、Ｔ７９０Ｍを有する進行性非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を患っている患者による臨床試験において永続性のある抗腫瘍活性を示すことが発見された（Ｔａｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ３４，ｎｏ．１５  ｓｕｐｐｌ（Ｍａｙ  ２０１６）参照）。
【００３１】
化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩を含む医薬組成物は、参照により本明細書に全体として組み込まれる国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットに記載されている。化合物Ａ及びその調製並びにそれを含む好適な医薬製剤は、国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレット、例えば実施例５に開示されている。化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩は、経口医薬組成物として、カプセル製剤又は錠剤の形態で投与できる。化合物Ａの薬学的に許容できる塩には、そのメシル酸塩及び塩酸塩がある。好ましくは、薬学的に許容できる塩はメシル酸塩である。
【００３２】
本明細書に記載される組合せ及び本明細書に記載される投与計画に有用な他の第三世代ＴＫＩには、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）、オルムチニブ（ＢＩ  １４８２６９４／ＨＭ６１７１３）、ＡＳＰ８２７３、ＰＦ−０６７４７７７５、及びアビチニブがある。
【００３３】
サイクリン依存性キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤
用語「サイクリンＤキナーゼ４／６」（又は「ＣＤＫ４／６」）阻害剤は、細胞が成長及び分裂する方法を制御するのに重要な役割を果たすサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）４及び６として知られる酵素の活性を遮断する化合物を指すように本明細書で定義される。ＣＤＫ４／６は、ＥＧＦＲ及び他の受容体型チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の下流にホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）及び哺乳類ラパマイシン標的（ｍＴＯＲ）を経てシグナルを送り、細胞増殖を促進する。本願の教示に基づくと、本明細書に記載される組合せ製剤及び治療計画における組合せパートナーとしてのＣＤＫ４／６阻害剤、特にパルボシクリブ（ＰＤ０３３２９９１）、リボシクリブ（ＬＥＥ０１１）、トリラシクリブ、及びアベマシクリブ（ＬＹ２８３５２１９）などの選択的ＣＤＫ４／６阻害剤は、細胞周期の制御を元に戻し、腫瘍成長を停止させ、本明細書に記載される癌など、経路異常を示す癌を有する患者に臨床的有益性をもたらすことが期待される。
【００３４】
本組合せの好ましいサイクリン依存性キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤は、リボシクリブ又はその薬学的に許容できる塩である。リボシクリブは「ＬＥＥ０１１」としても知られており、以下の式（ＩＩ）の化合物である
【化３】
2020529423.tif 000004
【００３５】
リボシクリブの化学名は７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドである。この化合物は、本明細書で「化合物Ｂ」とも称される。リボシクリブ（Ｋｉｓｑａｌｉ（登録商標））は、最近、任意のアロマターゼ阻害剤と組み合わせたＨＲ＋／ＨＥＲ２−転移性乳癌の第一選択治療として米国でＦＤＡ認可を受けた。化合物Ｂ又はその薬学的に許容できる塩を含む医薬組成物は、参照により本明細書に全体として組み込まれている国際公開第２０１０／０２０６７５号パンフレットに記載されており、化合物Ｂの好適な調製も、国際公開第２０１０／０２０６７５号パンフレット、例えば実施例７４に記載されている。
【００３６】
前臨床インビトロ実験は、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ細胞の増殖／生存率の低下における化合物Ａとリボシクリブの相乗効果を示した。リボシクリブは、ｐＲｂのＣＤＫ４／６特異的なリン酸化を阻害し、それによりＧ１期で細胞周期進行を停止させる。サイクリンＤ１は、変異体ＥＧＦＲシグナル伝達の重要な下流エフェクターであり、サイクリンＤ１−ＣＤＫ４／６軸が、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣにおいて重要な役割を果たすことを示唆する（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２００６，Ｙｕ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２００７）。本明細書に記載される教示に基づくと、リボシクリブが、ＣＤＫ４／６シグナル伝達がナザルチニブ治療の状況で耐性又は腫瘍細胞の持続性の一因である腫瘍において活性があると期待される。
【００３７】
特記されない限り、又は本文により明らかに示されない場合、又は非該当でない場合、表現「本発明の組合せ」は、第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ及びサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤を含む組合せ製剤に関する。本発明の組合せの好ましい実施形態は、化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩と化合物Ｂ又はその薬学的に許容できる塩の組合せ製剤である。
【００３８】
特記されない限り、又は本文により明らかに示されない場合、又は非該当でない場合、本発明の組合せに有用な治療剤への言及は、化合物の遊離塩基と化合物の全ての薬学的に許容できる塩の両方を含む。
【００３９】
一態様において、本発明は、同時の、別々な、又は連続的な使用のための本発明の組合せに関する。
【００４０】
一態様において、本発明は、癌、特に非小細胞肺癌、より特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００４１】
用語「組合せ」又は「組合せ製剤」は、治療剤、例えば、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容できる塩及びサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤が、一緒に、同じ時間で独立に、又は時間間隔内で別々に投与され得る、１用量単位形態の固定された組合せ（ｆｉｘｅｄ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）、固定されていない組合せ（ｎｏｎ−ｆｉｘｅｄ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）、又は組合せ投与のための要素のキットのいずれかを指すように本明細書で定義され、それは、好ましくは、組合せパートナーが、協調的な効果、例えば、相乗効果を示すことを可能にする。用語「固定された組合せ」は、治療剤、例えば、式Ｉの化合物及びサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤が、単一の実体又は剤形の形態であることを意味する。
【００４２】
用語「固定されていない組合せ」は、治療剤、例えば、式Ｉの化合物又はその薬学的に許容できる塩及びサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤が、別々な実体又は剤形として、同時に、並行に、又は具体的な時間制限なしで連続的に患者に投与されることを意味し、好ましくは、そのような投与は、２種の治療剤の治療上有効なレベルを、それを必要とするヒトの体内で提供する。
【００４３】
本明細書での用語「相乗効果」は、効果を生み出す、例えば、癌、その症状の症候性増悪を遅延させ、又は耐性発生を克服し、又は前治療のために獲得された耐性を逆転させる、単独で投与される各治療剤の効果の単純な付加より大きい、例えば、（ａ）式Ｉの化合物又はその薬学的に許容できる塩、及び（ｂ）サイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤などの２種の治療剤の作用を指す。相乗効果は、例えば、シグモイド−Ｅｍａｘ式（Ｈｏｌｆｏｒｄ，Ｎ．Ｈ．Ｇ．ａｎｄ  Ｓｃｈｅｉｎｅｒ，Ｌ．Ｂ．，Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．６：４２９−４５３（１９８１））、Ｌｏｅｗｅの相加性の式（Ｌｏｅｗｅ，Ｓ．ａｎｄ  Ｍｕｉｓｃｈｎｅｋ，Ｈ．，Ａｒｃｈ．Ｅｘｐ．Ｐａｔｈｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１１４：３１３−３２６（１９２６））、及び半数効果の式（Ｃｈｏｕ，Ｔ．Ｃ．ａｎｄ  Ｔａｌａｌａｙ，Ｐ．，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇｕｌ．２２：２７−５５（１９８４））などの好適な方法を利用して計算できる。上記で言及された各式を実験データに適用して、対応するグラフを生成させ、薬物組合せの効果の評価を支援することができる。上記で言及された式と関連する対応するグラフは、それぞれ、濃度効果曲線、アイソボログラム曲線、及び併用指数曲線である。相乗効果は、当業者により公知である方法に従って、組合せの相乗効果スコアを計算することにより、さらに示すことができる。
【００４４】
用語「薬学的に許容できる塩」は、化合物の生物学的な有効性及び性質を保持し、典型的には生物学的にも他の面でも望ましくないことがない塩を指す。化合物は、アミノ基の存在により酸付加塩を形成することが可能であり得る。
【００４５】
用語「１つの（ａ）」及び「１つの（ａｎ）」及び「前記（ｔｈｅ）」及び本発明を説明する文脈での（特に以下の請求項の文脈での）類似の言及は、本明細書で特記されない限り又は文脈により明らかに矛盾しない限り、単数と複数の両方を包含すると解釈されるものとする。複数形が、化合物、塩などに使用される場合、これは、単一の化合物、塩なども意味するように解釈される。
【００４６】
用語「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」又は「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、対象の少なくとも１つの症状を軽減し、減少させ、若しくは緩和する治療、又は疾患の進行の遅延に影響する治療を指すように本明細書で定義される。例えば、治療は、疾患の１つ又はいくつかの症状の減弱でも、癌などの疾患の完全な根絶でもあり得る。本発明の意味の中で、用語「治療する（ｔｒｅａｔ）」は、ＥＧＦＲ阻害剤治療に対する耐性の発生又は他の面での疾患の悪化を停止し、その進行を遅延させ、及び／又はそのリスクを減少させることも示す。
【００４７】
本明細書での用語「対象」又は「患者」は、癌、好ましくは肺癌、例えば、ＮＳＣＬＣ、とりわけ、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを患っているヒトを指す。
【００４８】
用語「投与」は、また、複数の治療剤が必ずしも同じ投与経路又は同じ時間に投与されない治療計画も含むものとする。
【００４９】
本明細書での用語「共同で治療活性がある」又は「共同治療効果」は、治療剤が、好ましくは、治療されるヒト対象において、依然として有益な（好ましくは相乗的な）相互作用（共同治療効果）を示す時間間隔で、別々に（互いに時間をずらして、特に順序特異的に）与えられ得ることを意味する。これが当てはまるかどうかは、とりわけ、少なくとも特定の期間の間、両治療剤が、治療されるヒトの血液中に存在することを示す血液レベルを把握することにより決定できる。
【００５０】
治療剤の組合せの「有効量」又は「治療上有効な量」という用語は、組合せにより治療される癌の臨床的に観察可能な徴候及び症状のベースラインを超える観察可能な改善を提供するのに十分な量を指すように本明細書で定義される。
【００５１】
用語「約」は、所与の値の統計的に許容できる変位量を指し、典型的には±５％又は１０％である。他方で、数値が用語「約」を伴わずに引用されている場合、この数値が当技術分野において統計的に許容できるその値の変位量を含むことが理解されるだろう。
【００５２】
本明細書での表現「微小残存病変が達成されるまで」は、腫瘍量減少が、少なくとも１か月の間隔をあけて実施される２回の評価の間で５％未満となるまでを意味する。本明細書で提供される組合せ製剤及び治療計画は、ＴＫＩ治療ナイーブ患者である患者、すなわちＮＳＣＬＣ、例えば、進行性ＮＳＣＬＣの前治療を全く受けたことがない患者に有用であり得ることが想定される。これらの患者が第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩナイーブ患者を含むことも想定される。
【００５３】
そのため、本発明は、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを含む非小細胞肺癌の第一選択治療に使用するための本明細書に記載される組合せを提供する。
【００５４】
患者は、組合せ製剤から利益を得るようであり、本明細書で提供される治療計画は、前治療された患者、例えば、第一世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ、及びイコチニブ）及び／又は第二世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、アファチニブ及びダコミチニブ）による前治療を受けたことがある患者も含む。
【００５５】
腫瘍評価及び腫瘍量の推定は、ＲＥＣＩＳＴ基準（Ｔｈｅｒａｓｓｅ  ｅｔ  ａｌ  ２０００），Ｎｅｗ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｔｏ  Ｅｖａｌｕａｔｅ  ｔｈｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｉｎ  Ｓｏｉｌｄ  Ｔｕｍｏｒｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｖｏｌ．９２；２０５−１６及び改定されたＲＥＣＩＳＴガイドライン（バージョン１．１）（Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ  ２００９）Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ；４５：２２８−２４７に基づいて実行できる。
【００５６】
以下の表に説明されているものなどのいくつかの反応基準を利用して、治療に対する腫瘍の反応を推定できる。
【００５７】
標的病変の反応基準
【００５８】
【表１】
2020529423.tif 000005
【００５９】
腫瘍量（ｔｕｍｏｒ  ｂｕｒｄｅｎ）（腫瘍量（ｔｕｍｏｒ  ｌｏａｄ）とも呼ばれる）は、体内の癌細胞の数、腫瘍のサイズ、又は癌の量を指す。癌を患っている対象は、１種以上の薬剤による療法で進行したか、若しくはもはやそれに反応しないか、又は、彼若しくは彼女が患っている癌が進行し、すなわち腫瘍量が増加した場合に、１種以上の薬剤に非忍容であることを含むと定義される。ＮＳＣＬＣなどの癌又は腫瘍の進行は、新たな腫瘍の検出又は転移の検出又は腫瘍縮小の停止により示され得る。癌の進行及び腫瘍量増加又は減少の推定は、当技術分野に周知である方法によりモニターできる。例えば、進行は、Ｘ線、ＣＴスキャン、若しくはＭＲＩによるなどの癌の目視検査により、又は腫瘍バイオマーカー検出によりモニターできる。癌の成長増大は、癌の進行を示し得る。腫瘍量の推定の推定は、標的病変の径和のベースラインからの変化のパーセントにより決定できる。腫瘍量推定は、それにより腫瘍量の増加又は減少が決定されるが、通常種々の間隔で、例えば、連続する推定が少なくとも１、２、３か月、好ましくは１か月あけて実施される。
【００６０】
本発明の組合せは、特に、肺癌の治療に有用である。本発明の組合せにより治療され得る肺癌は非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）であり得る。最もよく見られる種類のＮＳＣＬＣは、扁平上皮癌、大細胞癌、及び肺腺癌である。あまり見られない種類のＮＳＣＬＣには、多形性、カルチノイド腫瘍、唾液腺肉腫、及び分類不能肉腫がある。ＮＳＣＬＣ、とりわけ肺腺癌は、ＥＧＦＲの異常な活性化、とりわけＥＧＦＲの増幅、又はＥＧＦＲの体細胞変異を特徴とすることがある。
【００６１】
このように治療される肺癌にはＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣがある。本発明の組合せが進行性ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療において有用であることが想定される。進行性ＮＳＣＬＣは、局所進行性又は転移性のいずれかのＮＳＣＬＣを有する患者を指す。局所進行性ＮＳＣＬＣは、手術を含む決定的な集学的治療を受ける余地がないステージＩＩＩＢ  ＮＳＣＬＣであると定義される。転移性ＮＳＣＬＣはステージＩＶ  ＮＳＣＬＣを指す。
【００６２】
本明細書に記載される方法により治療され得るＥＧＦＲ変異癌の特定のために、ＥＧＦＲ変異状態は、当技術分野で利用可能な試験、例えば、ＱＩＡＧＥＮ  ｔｈｅｒａｓｃｒｅｅｎ（登録商標）ＥＧＦＲ試験又は他のＦＤＡ認可試験により決定され得る。ｔｈｅｒａｓｃｒｅｅｎ  ＥＧＦＲ  ＲＧＱ  ＰＣＲ  Ｋｉｔは、ＥＧＦＲ癌遺伝子中の特定の変異の検出のための、ＦＤＡ認可の定性的リアルタイムＰＣＲアッセイである。ＥＧＦＲ変異の証拠は、既存のローカルデータ及び腫瘍試料の試験から得ることができる。ＥＧＦＲ変異状態は、任意の利用可能な腫瘍組織から決定できる。
【００６３】
本発明は、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えばＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００６４】
治療すべき癌、特に肺癌、より特にＥＧＦＲ変異非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）は、ＥＧＦ８１６及び他の第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤の結合部位であるＥＧＦＲ  Ｃ７９７の変異を有し得る。
【００６５】
ＥＧＦＲ中のＣ７９７Ｓ変異（すなわち、７９７位でのシステインからセリンを起こす単一点変異）は、現在までに、オシメルチニブにより治療された患者及びＥＧＦ８１６により治療された少なくとも１人の患者において耐性の機構として臨床的に観察された。ＥＧＦＲ  Ｃ７９７Ｓ変異は、第三世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩのＥＧＦＲへの結合を妨げると仮定されている。Ｃ７９７Ｓ変異は、Ｔ７９０Ｍ変異とは異なるＥＧＦＲアレルで起こることがあり、すなわちＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣは、Ｃ７９７ｍ／Ｔ７９０Ｍをトランスに（ｉｎ  ｔｒａｎｓ）有し得る。Ｃ７９７Ｓ変異がＴ７９０Ｍ変異とＥＧＦＲの同じアレルで起こる場合、変異はシス（ｉｎ  ｃｉｓ）であるといわれる（シスのＣ７９７ｍ／Ｔ７９０Ｍ）。
【００６６】
癌、特に肺癌、より特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）は、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｃ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ａ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８６１Ｑ変異、ＥＧＦＲエクソン１９欠失、ＥＧＦＲエクソン２０挿入、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異、ＥＧＦＲ  Ｔ８５４Ａ変異、ＥＧＦＲ  Ｄ７６１Ｙ変異、ＥＧＦＲ  Ｃ７９７Ｓ変異、又はこれらの任意の組合せも有し得る。
【００６７】
本発明の本組合せ製剤は、ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異、ＥＧＦＲエクソン１９欠失、又は両方を有するＮＳＣＬＣの治療に特に有用であり得る。治療すべきＮＳＣＬＣは、新規変異でも後天性変異でもあり得るさらなるＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異も有し得る。後天性変異は、第一世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、エルロニチニブ（ｅｒｌｏｎｉｔｉｎｉｂ）、ゲフィチニブ、イコチニブ、又はこれらの任意の組合せ）による治療及び／又は第二世代ＴＫＩ（例えば、アファチニブ、ダコミチニブ、又は両方）による治療の後に起こった可能性がある。
【００６８】
本発明の本組合せ製剤は、第三世代ＴＫＩ、例えばオシメルチニブに関して治療ナイーブである患者にも有用であり得る。併用療法から利益を得ることができる患者には、癌、例えば、Ｃ７９７ｍ／Ｔ７９０Ｍもシスで有するＮＳＣＬＣ（すなわち、シスのＣ７９７変異及びＴ７９０Ｍ）を患っている患者がいる。Ｃ７９７ｍは、ＥＧＦＲ  Ｃ７９７での変異であり、ＥＧＦ８１６及び他の第三世代ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤に対する耐性を与える。さらに、これらの患者は、ＭＥＴ増幅、エクソン１４スキッピング変異、ＢＲＡＦ融合又は変異、及びこれらの任意の組合せから選択される追加の変異を有する腫瘍も提示し得る。
【００６９】
好ましい実施形態において、治療すべきＮＳＣＬＣは、ＥＧＦＲエクソン１９欠失、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異、若しくはＥＧＦＲエクソン１９欠失とＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍの両方から；又はＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異、若しくはＥＧＦＲ  Ｌ８５８ＲとＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍの両方から選択されるＥＧＦＲ変異を有する。
【００７０】
別の実施形態において、本発明は、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ  Ｃ７９７Ｓ変異を有することを特徴とするＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの使用のための本発明の組合せを提供する。
【００７１】
一実施形態において、本発明は、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を有することを特徴とするＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００７２】
一実施形態において、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異は新規変異である。用語「新規変異」は、ＥＧＦＲ阻害剤による治療の開始前に、ヒトにおいて検出可能又は検出された遺伝子の変化を指すように本明細書で定義される。新規変異は、遺伝物質の複製のエラー又は細胞分裂のエラーにより通常起こった変異であり、例えば、新規変異は、両親のどちらかの生殖細胞（卵又は精子）中又は受精卵自体の中の変異からも、体細胞中に起こる変異からも生じ得る。
【００７３】
「新規」Ｔ７９０Ｍは、ＥＧＦＲを阻害することが知られている療法により以前に全く治療されたことがないＮＳＣＬＣ患者中のＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異の存在であると定義される。
【００７４】
別の実施形態において、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異は後天性変異であり、例えば、癌治療の前には検出可能でも検出されてもいないが、癌治療、特に１種以上のＥＧＦＲ阻害剤、例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ、又はアファチニブによる治療の過程で検出可能になるか又は検出された変異である。
【００７５】
一実施形態において、本発明は、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を、ＥＧＦＲ  Ｃ７９７Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｃ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ａ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８６１Ｑ変異、ＥＧＦＲエクソン１９欠失、及びＥＧＦＲエクソン２０挿入からなるリストから選択される他の変異と組み合わせて有することを特徴とするＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００７６】
一実施形態において、本発明は、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を、ＥＧＦＲ  Ｃ７９７Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｃ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ａ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８６１Ｑ変異、ＥＧＦＲエクソン１９欠失、及びＥＧＦＲエクソン２０挿入からなるリストから選択される他の変異と組み合わせて有することを特徴とし、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異が新規変異であるＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００７７】
別の実施形態において、本発明は、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を、ＥＧＦＲ  Ｃ７９７Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｃ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ａ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８６１Ｑ変異、ＥＧＦＲエクソン１９欠失、及びＥＧＦＲエクソン２０挿入からなるリストから選択される他の変異と組み合わせて有することを特徴とし、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異が後天性変異であるＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００７８】
一実施形態において、本発明は、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、Ｃ７９７Ｓ、Ｇ７１９Ｓ、Ｇ７１９Ｃ、Ｇ７１９Ａ、Ｌ８５８Ｒ、Ｌ８６１Ｑ、エクソン１９欠失変異、及びエクソン２０挿入変異からなる群から選択されるＥＧＦＲ変異を有することを特徴とするＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。好ましい実施形態において、本発明は、以下の変異：ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ及びＥＧＦＲエクソン１９欠失の少なくとも１つを有することを特徴とする癌の治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００７９】
一実施形態において、本発明は、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、Ｃ７９７Ｓ、Ｇ７１９Ｓ、Ｇ７１９Ｃ、Ｇ７１９Ａ、Ｌ８５８Ｒ、Ｌ８６１Ｑ、エクソン１９欠失変異、及びエクソン２０挿入変異からなる群から選択されるＥＧＦＲ変異を有することを特徴とし、Ｔ７９０Ｍ、Ｔ８５４Ａ、及びＤ７６１Ｙ変異からなる群から選択される少なくとも１つのさらなるＥＧＦＲ変異を有することをさらに特徴とするＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００８０】
好ましい実施形態において、本発明は、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異又はＥＧＦＲエクソン１９欠失を有し、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異をさらに有することを特徴とするＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００８１】
一実施形態において、本発明は、癌がＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤による治療に耐性であるか、又はＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤による治療に対する耐性を発生させているか、又はＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤による治療に対する耐性を発生させる高いリスクがある、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤には、エルロチニブ、ゲフィチニブ、アファチニブ、及びオシメルチニブがある。
【００８２】
別の実施形態において、本発明は、癌がＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤による治療に耐性であるか、又はＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤による治療に対する耐性を発生させているか、又はＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤による治療に対する耐性を発生させる高いリスクがあり、ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤が、エルロチニブ、ゲフィチニブ、及びアファチニブからなる群から選択される、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療に使用するための本発明の組合せに関する。
【００８３】
本発明の組合せは、予後不良患者、特に、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ阻害剤を利用する治療に対して耐性になるＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ、例えば、ＥＧＦＲ阻害剤による治療に最初は反応していたが、その後再発した患者の癌を有する予後不良患者の治療にも好適である。さらなる例において、前記患者は、サイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤を利用する治療を受けていなかった。この癌は、１種以上のＥＧＦＲ阻害剤による前治療の間に耐性を獲得した可能性がある。例えば、ＥＧＦＲ標的療法は、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、ＸＬ−６４７、ＨＫＩ−２７２（ネラチニブ）、ＢＩＢＷ２９９２（アファチニブ）、ＥＫＢ−５６９（ペリチニブ）、ＡＶ−４１２、カネルチニブ、ＰＦ００２９９８０４、ＢＭＳ  ６９０５１４、ＨＭ７８１−３６ｂ、ＷＺ４００２、ＡＰ−２６１１３、セツキシマブ、パニツムマブ、マツズマブ、トラスツズマブ、ペルツズマブ、本発明の化合物Ａ、又はその薬学的に許容できる塩による治療を含み得る。とりわけ、ＥＧＦＲ標的療法は、ゲフィチニブ、エルロチニブ、及びアファチニブによる治療を含み得る。獲得耐性の機構には、ＥＧＦＲ遺伝子自体の中の二次変異の発生、例えば、Ｔ７９０Ｍ、ＥＧＦＲ増幅；及び／又はＦＧＦＲ脱制御、ＦＧＦＲ変異、ＦＧＦＲリガンド変異、ＦＧＦＲ増幅、ＭＥＴ増幅、若しくはＦＧＦＲリガンド増幅があるが、これらに限定されない。一実施形態において、獲得耐性は、ＥＧＦＲ中のＴ７９０Ｍ変異の存在を特徴とする。
【００８４】
本発明の組合せは、癌が、唯一の治療剤としてのＥＧＦＲ阻害剤を利用する治療に耐性を発生させている、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを有する患者の治療にも好適である。ＥＧＦＲ阻害剤は、第一世代阻害剤（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ、及びイコチニブ）、第二世代阻害剤（例えば、アファチニブ及びダコミチニブ）又は第三世代阻害剤（例えば、オシメルチニブ又はナザルチニブ）であり得る。
【００８５】
本発明の組合せは、癌が、唯一の治療剤としてのＥＧＦＲ阻害剤による治療に対して耐性を発生させる高いリスクがある、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを有する患者の治療にも好適である。ＥＧＦＲ変異を有するほとんど全ての癌患者、とりわけＮＳＣＬＣ患者が、時間とともにゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、又はオシメルチニブなどのＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤による治療に耐性を発生させるので、前記患者の癌は、常に、唯一の治療剤としてのＥＧＦＲ阻害剤による治療に対して耐性を発生させる高いリスクがある。そのため、ＥＧＦＲ  Ｃ７９７Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｃ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ａ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８６１Ｑ変異、ＥＧＦＲエクソン１９欠失、ＥＧＦＲエクソン２０挿入、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異、ＥＧＦＲ  Ｔ８５４Ａ変異、若しくはＥＧＦＲ  Ｄ７６１Ｙ変異、又はこれらの任意の組合せを有する癌は、唯一の治療剤としてのＥＧＦＲ阻害剤による治療に対する耐性を発生させる高いリスクがある。
【００８６】
本明細書に提供される組合せ及び治療計画は、下記に好適であり得る：
・ＥＧＦＲ感受性変異（例えば、Ｌ８５８Ｒ及び／又はｅｘ１９ｄｅｌ）を有する局所進行性又は転移性ＮＳＣＬＣを有する治療ナイーブ患者；
・第一世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ又は第二世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる前治療での進行の後にＥＧＦＲ感受性変異及び後天性Ｔ７９０Ｍ変異（例えば、Ｌ８５８Ｒ及び／又はｅｘ１９ｄｅｌ、Ｔ７９０Ｍ＋）を有する局所進行性又は転移性ＮＳＣＬＣを有する患者：これらの患者には、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を標的とする薬剤（すなわち第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ）を服用しなかった患者が含まれる。
・ＥＧＦＲ感受性変異及び「新規」Ｔ７９０Ｍ変異（すなわち、ＥＧＦＲ  ＴＫＩを含むＥＧＦＲを阻害することが知られている薬剤による前治療が全くない）を有する局所進行性又は転移性ＮＳＣＬＣを有する患者：これらの患者には、以前の第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩを服用しなかった患者が含まれる。
【００８７】
そのため、本発明は、癌、特に肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）を有する患者を治療する方法であって、治療上有効な量のナザルチニブ若しくはその薬学的に許容できる塩及び／又は治療上有効な量の本発明の組合せを、本明細書に記載される変異の１つ以上を有する癌、特に肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）を有すると以前に決定された患者に選択的に投与することを含む方法を含む。
【００８８】
本発明は、癌、特に肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）を有する患者を治療する方法であって：
（ａ）患者が、本明細書に記載される変異の１つ以上を有する癌を有することを決定すること又は決定したこと；並びに
（ｂ）治療上有効な量のナザルチニブ若しくはその薬学的に許容できる塩及び／又は治療上有効な量の本発明の組合せを前記患者に投与すること
を含む方法にも関する。
【００８９】
本発明は、癌、特に肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）を有する患者を治療する方法であって、本明細書に記載される変異の１つ以上を有することが以前に決定された患者に基づいて、治療のために患者を選択すること及び治療上有効な量のナザルチニブ若しくはその薬学的に許容できる塩及び／又は治療上有効な量の本発明の組合せを前記患者に投与することを含む方法にも関する。
【００９０】
表現「本明細書に記載される変異の１つ以上」内に、ＥＧＦＲ  Ｃ７９７Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｓ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ｃ変異、ＥＧＦＲ  Ｇ７１９Ａ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ変異、ＥＧＦＲ  Ｌ８６１Ｑ変異、ＥＧＦＲエクソン１９欠失、ＥＧＦＲエクソン２０挿入、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異、ＥＧＦＲ  Ｔ８５４Ａ変異、若しくはＥＧＦＲ  Ｄ７６１Ｙ変異、又はこれらの任意の組合せが本明細書において含まれる。
【００９１】
別の態様において、本発明は、本発明の組合せ及び少なくとも１種の薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物に関する。
【００９２】
本明細書では、用語「薬学的に許容できる担体」は、当業者には公知である通り（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ参照）、患者にとって一般に安全であると認識されている溶媒、分散媒、コーティング、界面活性剤、酸化防止剤、保存剤（例えば、抗菌剤、抗真菌剤）、等張剤、吸収遅延剤、塩、保存剤、薬物安定剤、結合剤、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、着香剤、染料、緩衝剤（例えば、マレイン酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、酢酸、炭酸水素ナトリウム、リン酸ナトリウムなど）など、及び同種のもの並びにこれらの組合せを含む。従来の担体が化合物Ａ又は化合物Ｂと不適合性でない限り、医薬組成物又は医薬品中でのその使用が企図される。
【００９３】
別の態様において、本発明は、肺癌の治療のためのサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤と組み合わせて使用するための医薬品の調製のための化合物Ａ又はその薬学的な許容できる塩の使用に関する。別の態様において、本発明は、肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、より特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療のための、化合物Ａ又はその薬学的な許容できる塩と組み合わせて使用するための医薬品の調製のためのサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤の使用に関する。
【００９４】
別の態様において、本発明は、肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを治療する方法であって、それを必要とする対象に、本発明の組合せを、前記肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣに対して共同で治療上有効である量で、同時に、別々に、又は連続的に投与することを含む方法に関する。
【００９５】
用量
本明細書に引用される用量又は投与量は、そうでないと明確に言及されない限り、遊離塩基として計算される、化合物Ａ又は化合物Ｂの医薬品中に存在する量を指す。
【００９６】
化合物Ａが単独療法として本明細書に記載される投与計画で投与される場合、化合物Ａの投与量は、５０〜３５０ｍｇの範囲、より好ましくは５０〜１５０ｍｇの範囲から選択され得る。化合物Ａは、５０、７５、１００、１５０、２００、２２５、２５０、３００ｍｇ  １日１回の用量で投与され得る。そのため、化合物Ａは、５０、７５、１００、又は１５０ｍｇ  １日１回；より好ましくは、５０、７５、又は１００ｍｇ  １日１回の用量で投与され得る。５０、７５、又は１００ｍｇの投与量は、有効性の減少なしに、より良好に忍容され得る。好ましい実施形態において、化合物Ａは、１００ｍｇ  １日１回の用量で投与され得る。
【００９７】
併用療法の一部として投与される場合、化合物Ａは、好ましくは１日１回与えられ、２５〜１５０ｍｇ、好ましくは２５〜１００ｍｇの用量で投与され得る。好ましい実施形態において、化合物Ａは、２５、５０、７５、又は１００ｍｇ、例えば、１日１回の用量で、併用療法の一部として投与され得る。好ましくは、投与量は、５０、７５、及び１００ｍｇの遊離塩基と称される原薬から選択されるが、それは、これらの投与量が、有効性の減少なしに、より良好に忍容され得るからである。好ましい実施形態において、化合物Ａは、１００ｍｇ  １日１回の用量で併用療法の一部として投与される。
【００９８】
化合物Ｂの１日量は、２００〜９００ｍｇの範囲、好ましくは２００〜６００ｍｇの範囲、より好ましくは２００〜４００ｍｇの範囲から選択され得る。化合物Ｂは、好ましくは１日１回投与される。用量は、２００、３００、又は４００ｍｇの化合物Ｂであり得る。所与の併用療法サイクルにおいて（例えば、２８日サイクル）、化合物Ｂが３週間服用され１週間休まれ得ることが想定される。
【００９９】
本発明の組合せ製剤のいくつかの実施形態が以下に列挙される。
【０１００】
【表２】
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【０１０１】
本発明の組合せの個別の治療剤、すなわち第三世代ＥＧＦＲ阻害剤及びＣＤＫ４／６阻害剤は、療法の過程の間に異なる時間に別々に投与しても、分割された又は単一の組合せ形態で同時に投与してもよい。例えば、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを治療する、本発明による方法は、同時又は任意の順番で連続的な、共同で治療上有効な量で、好ましくは相乗的に有効な量での、例えば、本明細書に記載される量に対応する毎日又は間欠的な用量での、（ｉ）遊離又は薬学的に許容できる塩形態の化合物Ａの投与、及び（ｉｉ）遊離又は薬学的に許容できる塩形態のサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤、好ましくは化合物Ｂの投与を含み得る。
【０１０２】
本発明の組合せが、本明細書で先に記載された有益な効果をもたらすことを、確立された試験モデルにより示すことができる。当業者は、関連する試験モデルを選択して、そのような有益な効果を証明することが完全に可能である。本発明の組合せの薬理活性及び／又は本明細書に記載される投与計画の薬理活性は、例えば、臨床試験又は基本的に本明細書で以下に記載されるインビボ若しくはインビトロ試験手順で示すことができる。
【０１０３】
ある重要な態様において、本発明は、単剤第三世代ＥＧＦＲ阻害剤と比べて、又は第２の組合せパートナーと比べて、臨床的有益性がある療法であって、治療耐性疾患の出現を予防又は遅延する可能性を有する療法を提供することを目指している。
【０１０４】
本発明者らは、第一選択状況における第一／第二世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩに対する臨床反応及び第二選択以降におけるＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異ＮＳＣＬＣにおけるＥＧＦ８１６に対する臨床反応が、一般的に、最大の腫瘍反応の迅速な獲得と、それに続く長期間の比較的安定な疾患制御を特徴とすることを観察した。この安定な疾患制御の期間に、微小残存病変の状態があり、薬剤耐性クローンの成長の前に腫瘍組織は比較的休止したままである。いったんこの腫瘍縮小プラトーが得られると、第三世代ＥＧＦＲ阻害剤とＣＤＫ４／６阻害剤の組合せの投与が、癌の治療において特に有益だろうと想定される。単剤療法に加えて組合せ追加療法があれば、生存可能な「パーシスター」腫瘍細胞の標的化において有益だろうが、そのため、薬剤耐性クローンの出現を予防できる。
【０１０５】
そのため、本発明は、ＥＧＦＲ阻害剤、好適には第三世代ＥＧＦＲ阻害剤の初期の有効性、及び本発明の組合せの相乗効果を利用する投与計画を提供する。
【０１０６】
本発明は、ＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療を必要とするヒトのＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
（ａ）治療上有効な量の第三世代ＥＦＧＲ阻害剤（化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩などを、単独療法として、微小残存病変が達成されるまで（すなわち、腫瘍量減少が、少なくとも１か月の間隔をあけて実施される２回の評価の間で５％未満になるまで）投与すること；それに続いて
（ｂ）化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩とサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤、特に、化合物Ｂ又はその薬学的に許容できる塩の治療上有効な量の組合せ製剤を投与すること
を含む方法を提供する。
【０１０７】
本発明は、ＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療を必要とするヒトのＥＧＦＲ変異肺癌、特にＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣの治療における使用のための化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩であって、
（ａ）化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩が、単独療法として、微小残存病変が達成されるまで（すなわち、腫瘍量減少が、少なくとも１か月の間隔をあけて実施される２回の評価の間で５％未満になるまで）投与され；且つ
（ｂ）化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩とサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤、特に、化合物Ｂ又はその薬学的に許容できる塩の組合せ製剤がその後に投与される、化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩を提供する。
【０１０８】
癌の進行、腫瘍量の増加又は減少、及びＥＧＦＲ阻害剤による治療に対する反応は、当技術分野に周知である方法によりモニターされ得る。そのため、進行及び治療に対する反応は、Ｘ線、ＣＴスキャン、若しくはＭＲＩによるなどの癌の目視検査により、又は腫瘍バイオマーカー検出によりモニターされ得る。例えば、癌の成長増大は、癌の進行及び療法に対する反応の欠如を示す。ＮＳＣＬＣなどの癌又は腫瘍の進行は、新たな腫瘍の検出又は転移の検出又は腫瘍縮小の停止により示され得る。腫瘍量減少又は腫瘍量増加の推定を含む腫瘍評価は、ＲＥＣＩＳＴ基準（Ｔｈｅｒａｓｓｅ  ｅｔ  ａｌ  ２０００），Ｎｅｗ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｔｏ  Ｅｖａｌｕａｔｅ  ｔｈｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｉｎ  Ｓｏｉｌｄ  Ｔｕｍｏｒｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｖｏｌ．９２；２０５−１６及び改定されたＲＥＣＩＳＴガイドライン（バージョン１．１）（Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ  ２００９）Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ；４５：２２８−２４７に基づいて実行できる。腫瘍進行は、治療が開始した後の複数の時点の間の腫瘍状態の比較により、又は治療が開始した後の時点と、関連する治療の開始前の時点の腫瘍状態の比較により決定され得る。
【０１０９】
そのため、微小残存病変又は安定な疾患反応の状態の獲得の決定は、Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  Ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ（ＲＥＣＩＳＴ  １．１）又はＷＨＯ基準を利用して決定され得る。安定な疾患（安定又はＳＤ）反応は、標的病変が、治療開始以降の標的病変の最長径（ＬＤ）の最小和を基準として、部分奏功（ＰＲ）に該当する充分な縮小も、進行性疾患（ＰＤ）に該当する充分な増加も示さない反応であると定義され得る。他の反応基準は、下記の通り定義され得る。
完全奏功（ＣＲ）：全標的病変の消失。
部分奏功（ＰＲ）：ベースラインＬＤ和を基準とした、標的病変のＬＤの和の少なくとも３０％の減少。
進行性疾患（ＰＤ）：治療開始以降に確認されたＬＤの最小和を基準とした、標的病変のＬＤの和の少なくとも２０％の増加又は１つ以上の新たな病変の出現。
【０１１０】
単独療法としての第三世代ＥＧＦＲ阻害剤が投与される治療期間は、微小残存病変を達成するのに充分な期間であり、当業者により容易に測定され得る。治療期間は、１、２、３、４、５、６以上の２８日サイクル、好ましくは２又は３サイクルからなり得る。
【０１１１】
別の態様において、本発明は、本発明の組合せ及び本発明の組合せの、それを必要とする患者への同時の、別々な、又は連続的な投与の説明書を含む商業的包装に関する。一実施形態において、本発明は、癌、特に肺癌、特に非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ、及び好ましくは癌が変異ＥＧＦＲを特徴とし；例えば、変異ＥＧＦＲが、Ｃ７９７Ｓ、Ｇ７１９Ｓ、Ｇ７１９Ｃ、Ｇ７１９Ａ、Ｌ８５８Ｒ、Ｌ８６１Ｑ、エクソン１９欠失変異、エクソン２０挿入変異、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ、Ｔ８５４Ａ、若しくはＤ７６１Ｙ変異、又はこれらの任意の組合せを含み、且つ、好ましくは、前記癌が、１種以上のＥＧＦＲ阻害剤による前治療の間に耐性を獲得し、又は１種以上のＥＧＦＲ阻害剤による治療に対して耐性を発生させ、又はＥＧＦＲ阻害剤による治療に対する耐性を発生させる高いリスクがある癌の治療に使用するための、第三世代ＥＧＦＲ阻害剤化合物Ａ又はその薬学的に許容できる塩、及びサイクリンＤキナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）阻害剤、好ましくは化合物Ｂ又はその薬学的に許容できる塩と同時の、別々な、又は連続的な使用のための説明書を含む商業的包装を提供する。
【０１１２】
以下の実施例は、上述された本発明を説明するが、本発明の範囲を決して限定しないものとする。該当する分野における当業者に公知である他の試験モデルも、特許請求される発明の有益な効果を決定できる。
【実施例】
【０１１３】
実施例１：化合物のオンターゲット活性及び組合せ効果を示す、近位バイオマーカー（ｐｒｏｘｉｍａｌ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒ）に関する機構的併用試験
この実験は、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ細胞株に対する化合物Ａ（ＥＧＦ８１６）と化合物Ｂ（ＬＥＥ０１１）の組合せ効果を試験するために、及び観察される抗増殖性相乗効果が、近位読取り（ｐｒｏｘｉｍａｌ  ｒｅａｄｏｕｔｓ）の機構的解析により決定されるオンターゲット有効性により推進されることを示すために実施する。
【０１１４】
いくつかのＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ細胞株を、下記の通り、異なる濃度のＥＧＦ８１６及びＬＥＥ０１１組合せにより７２時間処理した。ＮＣＩ−Ｈ１９７５（変異Ｌ８５８Ｒ、Ｔ７９０Ｍを有する）、ＰＣ−１４（変異ｅｘ  １９  ｄｅｌ又はエクソン１９欠失を有する）、ＨＣＣ８２７（変異ｅｘ１９ｄｅｌを有する）、及びＨＣＣ４００６（変異ｅｘ１９ｄｅｌを有する）細胞を、１０％ウシ胎児血清（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号Ｆ４１３５）を補ったＲＰＭＩ−１６４０増殖培地（ＡＴＣＣ、カタログ番号２０−２００１）中で、３７℃で、加湿５％ＣＯ２インキュベーター中で培養した。機構的試験のために、細胞を、組織培養処理済み６−ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ３５０６）に、ＨＣＣ８２７、ＮＣＩ−Ｈ１９７５、ＨＣＣ４００６、及びＰＣ−９（変異エクソン１９欠失を有する）に関して、それぞれウェルあたり４００ｋ、４００ｋ、１００Ｋ、及び５０ｋ細胞の密度で播種し、一晩付着させた。次いで、細胞を、０、０．１２、０．３３３μＭ  ＥＧＦ８１６対０、０．３１２、２．５μＭ  ＬＥＥ０１１の濃度でＥＧＦ８１６とＬＥＥ０１１の３×３マトリックス組合せ処理に曝露させた。７２時間の処理後、細胞を、プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｓｉｇｍａ  Ｐ８３４０）、ホスファターゼ阻害剤カクテル２（Ｓｉｇｍａ  Ｐ５７２６）、及びホスファターゼ阻害剤カクテル３（Ｓｉｇｍａ  Ｐ００４４）を含む、ウェルあたり１００μｌのＲＩＰＡ緩衝液（Ｓｉｇｍａ  Ｒ０２７８）に溶解させた。Ｃｅｌｌ  Ｌｉｆｔｅｒ（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ３００８）を使用して剥がしながら、細胞を氷上で１０分間溶解させた。次いで、ライセートを、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  ５４１７Ｒマイクロ遠心分離機で、４℃で、１４０００ｒｐｍでマイクロ遠心分離した。
【０１１５】
ウェスタンブロット
ライセートの総タンパク量を、製造業者の説明に従ってＢＣＡアッセイ（Ｐｉｅｒｃｅ  ２３２２７）により測定し、試料を、２００ｍＭ  ＤＴＴを含むＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＬＤＳ  Ｓａｍｐｌｅ  Ｂｕｆｆｅｒ（ＮＰ０００７））を使用してウェスタンブロット用に調製し、９５℃で１０分間煮て、マイクロ遠心分離し、ウェルあたり２０μｇ総タンパクをロードした。ＭＯＰＳ泳動用緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＮＰ０００１）を使用して、ＮｕＰＡＧＥ  ４−１２％Ｂｉｓ  Ｔｒｉｓ  ｇｅｌ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＷＧ１４０２ＢＯＸ）を使用して、タンパク質を分子量に基づいて分離した。次いで、ニトロセルローストランスファースタック（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＩＢ３０１００１）と共にｉＢＬＯＴ  ｇｅｌ  ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｄｅｖｉｃｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、タンパク質をニトロセルロースメンブレン上に転写した。次いで、メンブレンを、ロッキングプラットフォーム上で、５％脱脂乳を含むＴＢＳ−Ｔ（０．１％ｗ／ｖ）により、最低１時間室温でブロックした。ホスホＥＧＦＲ  Ｙ１０６８、ホスホＲｂ  Ｓ８０７／８１１、サイクリンＤ１及びＧＡＰＤＨの抗体を以下の供給源から得て（それぞれ、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ３７７７番、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ８５１６番、Ａｂｃａｍ  ａｂ１６６６３、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ＭＡＢ３７４）、製造業者の説明通りに希釈し、４℃で一晩インキュベートした。一晩のインキュベーション後、メンブレンをＴＢＳ−Ｔ（０．１％ｗ／ｖ）により、最低で３×５分の洗浄の間洗浄した。ＨＲＰコンジュゲート抗体（ロバ抗ウサギＩｇＧ  ＨＲＰ  Ａｍｅｒｓｈａｍ  ＮＡ９３４、ロバ抗マウスＩｇＧ  ＨＲＰ  Ａｍｅｒｓｈａｍ  ＮＡ９３１）を、５％脱脂乳を含むＴＢＳ−Ｔ（０．１％ｗ／ｖ）に希釈し、メンブレン上で２時間室温でインキュベートした。メンブレンをＴＢＳ−Ｔ（０．１％ｗ／ｖ）により最低で３×５分の洗浄の間洗浄し、次いで化学発光試薬（Ｐｉｅｒｃｅ  ３４０９６）に曝露させ、ＧＥ  Ｉｍａｇｅｑｕａｎｔ  ＬＡＳ４０００を使用して画像化した。
【０１１６】
増殖アッセイ
細胞を、３８４−ウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号４３３２）中の８０μｌの培地に、ウェルあたり１０００細胞の密度で、８チャネル標準カセットを備えたＭｕｌｔｉＤｒｏｐ  Ｃｏｍｂｉ（Ｔｈｅｒｍｏ−Ｆｉｓｈｅｒ）を使用して播種した。ウェル全体にわたる細胞の均一な分布を促進するため、細胞を１０００ＲＰＭで短時間遠心分離し、室温で３０分間インキュベートした。全プレートを、３７℃、５％ＣＯ２で、化合物添加の前に、２４時間インキュベートした。化合物ストックを、適切な培地中に新たに調製し、２００ｎｌピンツールを備えたＰＡＡロボットを使用して加えた。最低で３つの反復ウェル中で、７２時間後に単剤及び組合せ効果を顕微鏡イメージングにより評価した。画像化するために、細胞をプレートに固定し、ＷｅｌｌＭａｔｅディスペンサーにより、制御された分注速度でＰＢＳ中１０％ＰＦＡ、０．３％ＴＸ−１００の溶液により透過処理した。細胞核を、Ｈｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２（Ｈ３５７０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）により染色し、全ての必要な洗浄工程を、ＢｉｏＴｅｋウォッシャーにより実施した。
【０１１７】
ＩｎＣｅｌｌ  Ａｎａｌｙｚｅｒ  ２０００（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、２８−９５３４−６３）から得た画像はＴＩＦＦフォーマットであり、２０４８×２０４８ピクセルのサイズを有し、３８４−ウェルプレートのウェル全部を捉えていた。自動化画像解析パイプラインを、オープンソースの統計プログラミング言語Ｒで書かれたカスタムメイドスクリプト及びＢｉｏＣｏｎｄｕｃｔｏｒ  ｐａｃｋａｇｅ  ＥＢＩｍａｇｅの機能を利用して確立した。目標は、ウェルあたりの生存可能な核（細胞）の数を、細胞生存率の近似値として定量化することであった。パイプラインは、７工程から構成されていた：（Ｉ．）画像の平滑化により強度ピークの数を減少させること、（ＩＩ．）閾値関数の適用により、フォアグラウンド（シグナル）をバックグラウンド（ノイズ）から分離すること、（ＩＩＩ．）核のシードとして機能するフォアグラウンド中の極大値の特定、（ＩＶ．）近接した極大値のフィルタリング、（Ｖ．）残りの極大値からの核の増殖、（ＶＩ．）及び増殖させた核からの物体特徴の抽出（核の数、大きさの特徴、及び強度の特徴）。最終工程（ＶＩＩ．）として、カウントからデブリ（例えば、断片化された核）を除くため、ＤＭＳＯ−及びスタウロスポリン−処理されたウェル中に特定された物体を使用して、それぞれ、生存可能な核及び断片化された核の特徴分布を得た。これらを使用して、生存可能な核と断片化された核を識別するカットオフを設定した。断片化された核の数を、特定された物体の総数から引き、結果をそのウェルでの最終カウントとして報告した。
【０１１８】
結果
試験された細胞株は、両化合物による単剤治療に対して、アッセイの過程にわたる細胞の成長の減少により強調される著しい感受性を示した。グリッド投与量マトリックスにわたる観察値とＬｏｅｗｅモデル値の間の差から計算した相乗効果スコアにより、ＣＨＡＬＩＣＥソフトウェアを使用してＬｏｅｗｅ相加性モデルに対して、相乗効果を推定した。Ｌｏｅｗｅ  Ｅｘｃｅｓｓグリッドマトリックス内のより高い値は、相乗効果の増加が観察される濃度を示す。技法及び計算のより詳細な説明は、Ｌｅｈａｒ  ｅｔ  ａｌ．“Ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ  ｄｒｕｇ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ”，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２００９，Ｊｕｌｙ；２７（７），６５９−６６６に見出すことができる。
【０１１９】
組み合わせて処理されると、相乗レベルが、試験された細胞株全体にわたって観察され、８×８グリッド投与量マトリックス内にプロットされた増加するＬｏｅｗｅ  Ｅｘｃｅｓｓ値により強調される通り、抗増殖性効果が相乗的に増加したことが観察された（図１、７２時間の時点での値を示す）。
【０１２０】
４種のＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ細胞（ＰＣ−１４、ＮＣＩ−Ｈ１９７５、ＨＣＣ８２７、及びＨＣＣ４００６）を、単独及び組み合わせたＥＧＦ８１６及びＬＥＥ０１１により、７２時間処理した。次いで、細胞を回収し、タンパク質ライセートを、ホスホ−ＥＧＦＲ（ＥＧＦＲ  Ｙ１０６８）、ホスホ−Ｒｂ（Ｒｂ  Ｓ８０７／８１１）、サイクリンＤ１、又はＧＡＰＤＨに関してイムノブロット分析にかけた。ＥＧＦＲリン酸化は、全細胞株にわたってＥＧＦ８１６により用量依存的に阻害されるが、網膜芽細胞腫（Ｒｂ）リン酸化は、４種の細胞株のうち３種でＬＥＥ０１１単剤により阻害される。ＥＧＦ８１６とＬＥＥ０１１との組合せは、４種の細胞株のうち３種でＲｂリン酸化の量の減少を導いた（図２）。
【０１２１】
変動する組合せ相乗レベルは、機構的読取りと相関し、より高い相乗的な細胞株は、両化合物により影響されるＲｂリン酸化を含む、近位と遠位の両方のオンターゲット活性を示す機構的マーカーに対する大きい影響を示す。
【０１２２】
このように、ＥＧＦ８１６とＬＥＥ０１１との組合せが機構的に合わさり、Ｒｂリン酸化を阻害し、観察される抗増殖性相乗効果の量と相関することが示された。ＥＧＦ８１６とＬＥＥ０１１との組合せによるＲｂのこの抑制増大は、臨床状況での組合せの追加される有効性に寄与しそうである。
【０１２３】
実施例２：長期生存能力試験：ＥＧＦＲｉとＣＤＫ４／６ｉの組合せは、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ細胞の再成長を緩徐化する
ＰＣ９（３，０００／ウェル）、ＨＣＣ８２７（１０，０００／ウェル）、ＨＣＣ４００６（５０００／ウェル）、及びＭＧＨ７０７（５０００／ウェル）細胞を９６−ウェルプレートに播種し、翌日に、単独又はＬＥＥ０１１（１０００ｎＭ）と組み合わせたＥＧＦ８１６（３００ｎＭ）により４週間処理した。薬物を週に２回新しくした。細胞コンフルエンスを細胞数の代理として使用し、ｉｎｃｕｃｙｔｅ  ｚｏｏｍ（Ｅｓｓｅｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）により、処理の開始時及びその後週に２回（２×）測定した。
【０１２４】
ＥＧＦ８１６による単剤処理は、様々な程度のアポトーシス及び細胞周期停止を、試験された４種のＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ細胞株（ＰＣ９、ＨＣＣ８２７、ＨＣＣ４００６、及びＭＧＨ７０７）にもたらすが、全ての場合で、細胞は、４週間の処理時間の最後までに、ＥＧＦＲｉの存在下でゆっくりと再成長し始めることができる。この再成長がＣＤＫ４／６の残存活性により媒介されたかどうかを試験するため、ＬＥＥ０１１をＥＧＦ８１６と組み合わせた。全ての場合で、組合せはＥＧＦ８１６薬物耐性細胞の再成長を緩徐化し、このようにＬＥＥ０１１との組合せにおけるＬＥＥ０１１の追加の有効性を示した（図３−図３における用語「８１６＋ＬＥＥ」は「ＥＧＦ８１６とＬＥＥ０１１」の組合せを指す）。
【０１２５】
実施例３：単独又は組み合わせた化合物Ａ及び化合物Ｂのインビボ有効性試験
ＥＧＦＲ変異、Ｌ８５８Ｒ及びＴ７９０Ｍを有する患者から誘導された異種移植片モデルにおいて、組合せ活性が、以下に議論される通り化合物Ｂと化合物Ａの同時処理によりインビボで観察された（図４）。
【０１２６】
腫瘍細胞培養
ＮＣＩ−Ｈ１９７５細胞を、１０％ウシ胎児血清、２ｍＭグルタミン、１００単位／ｍＬペニシリンＧナトリウム、２５μｇ／ｍＬゲンタマイシン、及び１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン硫酸塩を含むＲＰＭＩ  １６４０培地中で対数中期まで成長させた。腫瘍細胞を、３７℃の加湿インキュベーター中、５％ＣＯ２及び９５％空気の雰囲気中で、組織培養フラスコ中で培養した。
【０１２７】
インビボ移植及び腫瘍成長
マウスへの移植に使用するＮＣＩ−Ｈ１９７５細胞を対数期成長の間に収集し、５０％Ｍａｔｒｉｇｅｌ（商標）（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を含む冷ＰＢＳに再懸濁させた。各マウスの右脇腹に、１×１０７細胞（０．２ｍＬ細胞懸濁液）を皮下注射した。腫瘍を、２つの寸法でカリパスにより測り、その平均体積が望まれる１００〜１５０ｍｍ３範囲に近づくとともに成長をモニターした。
【０１２８】
試験物品
化合物Ａ（ＥＧＦ８１６）及び化合物Ｂ（ＬＥＥ０１１）を−２０℃で保存し、貯蔵及び取扱いの間光から保護した。化合物Ａ（遊離塩基）を０．５％ＭＣ／０．５％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０に溶解させ、透明な溶液が得られるまでボルテックスにかけた。投与溶液を毎日新たに調製し、４℃で保存した。投与溶液を毎週新たに調製し、４℃で保存した。化合物Ｂ（コハク酸塩として、７９％遊離塩基）を、９．４５４ｍｇ／ｍＬ（１０ｍｇ／ｍＬ遊離塩基）で、０．５％メチルセルロースの脱イオン水溶液（ビヒクル１）に溶解させた。投与溶液を毎週新たに調製し、光から保護して４℃で保存した。
【０１２９】
処置計画
化合物Ａ（遊離塩基）を（１０ｍｇ／ｋｇ又は３０ｍｇ／ｋｇ遊離塩基）で経口的に（ｐ．ｏ．）、連続４５日間（１日１回（ｑｄ）×４５）投薬した。化合物Ｂ（コハク酸塩）を、９４．９４ｍｇ／ｋｇ（８０ｍｇ／ｋｇ遊離塩基に等しい）経口的に、ｑｄ×２１又はｑｄ×４５で投薬した。１０ｍｇ／ｋｇ及び３２ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ（遊離塩基）を、また化合物Ｂ（コハク酸塩）と共に経口的に、ｑｄ×４５で投薬した。対照マウスには、化合物Ａ（遊離塩基）及び化合物Ｂ（コハク酸塩）ビヒクルを、経口的にｑｄ×２１で投薬した。投薬体積、１０ｍＬ／ｋｇ（０．２ｍＬ／２０ｇマウス）は、前の金曜日のＢＷ（体重）が先送りされる週末以外、投薬の日に測定された各動物の体重に合わせて調整した。
【０１３０】
図４は、インビボで、単剤化合物Ａ（ＥＧＦ８１６）が著しい腫瘍退縮をもたらし、それがより高い投与量で増加したことを示す。単剤化合物Ｂ（ＬＥＥ０１１又はリボシクリブ）は、試験されたモデルで単剤活性を全く示さなかったが、より低い化合物Ａ投与量の有効性を高め、組合せの相乗効果を強調している。
【０１３１】
免疫組織化学（ＩＨＣ）
免疫組織化学的な分析を、単独で又は組み合わせた化合物により経時的に処置されたＮＣＩ−Ｈ１９７５（変異Ｌ８５８Ｒ、Ｔ７９０Ｍを有する）腫瘍で実施したが、オンターゲット活性の近位（ＬＥＥ０１１）及び遠位（ＥＧＦ８１６）薬力学マーカーである、Ｒｂリン酸化の減少に対する影響を示した。
【０１３２】
ホスホＲｂ（Ｓｅｒ８０７／８１１）、ウサギモノクローナル抗ヒト抗体を、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（カタログ番号８５１６）から得た。ＩＨＣを、Ｖｅｎｔａｎａ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＸＴ  ａｕｔｏｓｔａｉｎｅｒで、１：４００抗体希釈液で実施した。ＩＨＣ染色の後に、スライドを、増加する濃度のエタノール（９５〜１００％）中で、次いでキシレン中で脱水し、それに続いてカバーガラスをかけた。ＩＨＣスライドを、光学顕微鏡法により評価し、Ｌｅｉｃａ／Ａｐｅｒｉｏ  ＳｃａｎＳｃｏｐｅスライドスキャナー（Ｖｉｓｔａ、ＣＡ）によりスキャンした。ＩＨＣ画像解析を、Ａｐｅｒｉｏカラーデコンボリューションアルゴリズムを利用して、試料全体に適用した。画像解析スコアを、強、中、及び弱の正のデジタル信号を、ヒトが読み取れるスコアに変換して計数した（０〜３００、スコア＝％弱の正Ｘ１＋％中の正Ｘ２＋％強の正Ｘ３）。
【０１３３】
結果
インビボで、単剤ＥＧＦ８１６は、著しい腫瘍退縮をもたらし、それはより高い投与量で増加した。単剤ＬＥＥ０１１（リボシクリブ）は、試験されたモデルで単剤活性を全く示さなかったが、より低いＥＧＦ８１６投与量の有効性を増加させ、ＥＧＦ８１６とＬＥＥ０１１標的の両方の下流であるホスホＲｂ薬力学読取りにも反映された正の機能的組合せ相乗効果（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ｓｙｎｅｒｇｙ）を強調している（図５）。まとめると、実施例１〜３は、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣにおいてＥＧＦＲ及びＣＤＫ４／６の阻害を組み合わせると、抗増殖有効性の増大をもたらし得ることを表す。長期生存能力実験は、ＬＥＥ０１１の追加が、複数のモデルでＥＧＦ８１６薬剤耐性細胞の増殖を緩徐化することを示した。この相乗効果は、Ｒｂリン酸化の阻害に対する効果増大に、一部分反映されている。まとめると、これらのデータは、ＥＧＦ８１６とＬＥＥ０１１との組合せが、治療耐性疾患の生成を遅延させることができ、臨床における追加された利益を与え得ることを示唆する。
【０１３４】
実施例４：ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを有する患者を対象とした、リボシクリブと組み合わせたＥＧＦ８１６のＩｂ相、非盲検、用量漸増及び／又は用量拡大
この試験に適格な患者は、どの療法によっても現在不治の疾患である進行性ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを有する患者である。単剤としてのＥＧＦ８１６（化合物Ａ）による治療は、第一選択の治療ナイーブ患者において、又は後天性ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍゲートキーパー変異を有するか、且つ／若しくは以前の第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩにナイーブである患者において、患者の大多数に臨床的有益性をもたらすと期待されている。しかし、単剤ＥＧＦ８１６を受けている期間の後に、全患者が治療耐性及び最終的な疾患進行を生じさせると予期されている。
【０１３５】
リボシクリブは、ＣＤＫ４／６シグナル伝達が、ＥＧＦ８１６治療の状況で耐性又は腫瘍細胞の持続性の一因である腫瘍において活性があると期待されている。上記で示された通り、前臨床実験は、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣ細胞の増殖／生存能力の減少におけるＥＧＦ８１６とリボシクリブとの相乗効果を示した。それはＣＹＰ３Ａ４／５の阻害剤であるので、リボシクリブは、共に投与されると、ＥＧＦ８１６の曝露を増加させる可能性を有する。
【０１３６】
そのため、本試験は、ＥＧＦ８１６の臨床的有効性を改善するその可能性を支持する確実な根拠を有する。本試験の潜在的な利益は、治療耐性疾患の出現を予防又は遅延させる可能性と共に、単剤ＥＧＦＲ  ＴＫＩと比較して改善された臨床的有益性である。
【０１３７】
試験設計
これは、進行性ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを有する成人患者を対象とした、リボシクリブと組み合わせたＥＧＦ８１６のＩｂ相、非盲検、非無作為化用量漸増試験と、それに続く、リボシクリブと組み合わせたＥＧＦ８１６の用量拡大試験である。患者は、進行した状態で（ｉｎ  ｔｈｅ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｓｅｔｔｉｎｇ）治療ナイーブでありＥＧＦＲに感受性変異（ｅｘ１９ｄｅｌ又はＬ８５８Ｒ）を有するか、又は第一若しくは第二世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ、アファチニブ）を服用して進行し、且つ腫瘍内にＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を有さなければならない。患者は、以前に第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、オシメルチニブ、ロシレチニブ、ＡＳＰ８２７３）を以前に服用したことがあってはならない。
【０１３８】
組入れ基準
本試験への組入れに適格な患者は、以下の条件を満たさなければならない：
・１８歳以上の患者（男性又は女性）。
・患者は、組織学的に又は細胞学的に確認された局所進行性（ステージＩＩＩＢ）又は転移性（ステージＩＶ）ＥＧＦＲ変異（ｅｘ１９ｄｅｌ、Ｌ８５８Ｒ）ＮＳＣＬＣを有していなくてはならない。
・ＥＧＦＲ変異状態及び治療経験の要件：
・治療ナイーブ患者は、ＥＧＦＲ感受性変異（例えば、Ｌ８５８Ｒ及び／又はｅｘ１９ｄｅｌ）を有する局所進行性又は転移性ＮＳＣＬＣを有するが、進行性ＮＳＣＬＣの全身性抗新生物療法を全く受けておらず、ＥＧＦＲ  ＴＫＩ治療を受けるのに適格である。ＥＧＦＲエクソン２０挿入／複製を有する患者は適格でない。備考：進行した状況で１サイクルのみの化学療法を受けた患者は許容される。
・第一世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ、又はイコチニブ）又は第二世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、アファチニブ又はダコミチニブ）による前治療を受けている間の進行後にＥＧＦＲ感受性変異及び後天性Ｔ７９０Ｍ変異（例えば、Ｌ８５８Ｒ及び／又はｅｘ１９ｄｅｌ、Ｔ７９０Ｍ＋）を有する局所進行性又は転移性ＮＳＣＬＣを有する患者。これらの患者は、進行した状況で、ＥＧＦＲ  ＴＫＩを含む５以上の以前の抗新生物療法を受けなかった可能性があり、ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を標的とする薬剤（すなわち第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ）を服用しなかった可能性がある。ＥＧＦＲ  ＴＫＩ服用時の進行の後に、ＥＧＦＲ変異試験を実施しなくてはならない。
・ＥＧＦＲ感受性変異及び「新規」Ｔ７９０Ｍ変異（すなわち、ＥＧＦＲ  ＴＫＩを含む、ＥＧＦＲを阻害することが知られている薬剤による前治療が全くない）を有する局所進行性又は転移性ＮＳＣＬＣを有する患者。これらの患者は、進行した状況で４以上の以前の抗新生物療法を受けなかった可能性があり、以前の第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩを全く服用しなかった可能性がある。
・ＥＣＯＧパフォーマンスステータス：０〜１
【０１３９】
用量漸増パートと拡大パートの両方の全患者は、ＥＧＦ８１６  １００ｍｇ  ｑｄを単剤としておよそ５回の２８日サイクルの間服用し（治療期間１）、次いで、ＥＧＦ８１６  １００ｍｇ  ｑｄをリボシクリブと組み合わせて服用する（治療期間２）。
【０１４０】
併用療法への割り付けは、およそ４サイクルのＥＧＦ８１６治療の後で回収された腫瘍試料及びｃｆＤＮＡの標的ゲノムプロファイリングの結果に一部基づく。
【０１４１】
併用療法を受ける患者は、シスのＥＧＦＲ  Ｃ７９７変異及び／Ｔ７９０Ｍを特徴とする腫瘍を有する患者も含む。シスのＣ７９７変異及びＴ７９０Ｍを特徴とし、ＭＥＴ増幅又はエクソン１４スキッピング変異及び／又はＢＲＡＦ融合若しくは変異も示す腫瘍を有する患者も含まれる。Ｃ７９７変異は、ＥＧＦ８１６の作用機序に対する直接的な耐性機構である。リボシクリブは、変化したＥＧＦＲ、ＢＲＡＦ及びＭＥＴの下流で通常様式（ｃｏｍｍｏｎ  ｍｏｄｅｓ）を遮断する。そのため、組合せパートナーとしてのリボシクリブは、そのような患者のための有用な療法であると期待されている。
【０１４２】
有効性評価は、ベースラインで、及び治療の間８週ごとに（２サイクルごと）に実施する。そのため、患者が併用療法を始める前に、少なくとも２つのベースライン後の有効性評価が得られているだろう。併用療法の開始前に疾患進行を経験する患者は、臨床的有益性を経験する患者に関して例外とするのでない限り、試験を中止する。
【０１４３】
開始投与量
【０１４４】
【表３】
2020529423.tif 000007
【０１４５】
化合物Ａの１日量は、２５、５０、７５、１００、又は１５０ｍｇから選択してよい。
【０１４６】
この併用試験では、ＥＧＦ８１６（化合物Ａ）は、１００ｍｇ  ｑｄ（錠剤；食品あり又はなし）で、連続的な毎日の投薬スケジュールで投与される。先の試験で、ＥＧＦ８１６に対する全奏効率は、１００ｍｇ毎日と１５０ｍｇ毎日で類似であることがわかったが、１００ｍｇ毎日では発疹及び下痢の割合がより低いことが観察された。したがって、ＥＧＦ８１６の１００ｍｇ１日量を最初に選択するが、それは、特に組合せが重複毒性をもたらす場合、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣに対する有効性を維持しながら、１５０ｍｇよりも良好に忍容されることが予期されるからである。１００ｍｇ  ｑｄ投与量は、薬物間相互作用が、単剤ＥＧＦ８１６と比べて、１００ｍｇ  ｑｄのＥＧＦ８１６の曝露を増加させ得る充分に大きい忍容性の幅を組合せに与えることが期待される。推奨されるレジメンがまだ決定されていない組合せの第１のコホートのＰＫデータに基づくと、ＥＧＦ８１６曝露を１００ｍｇ  ｑｄのＥＧＦ８１６単剤の曝露とほとんど同じに保つために、ＥＧＦ８１６投与量を、ＥＧＦ８１６曝露の増加をもたらす組合せでは減少させることができる。
【０１４７】
リボシクリブ開始投与量は、連続的な投薬スケジュールで２００ｍｇ  ｑ．ｄ．（錠剤；食品あり又はなし）であり、６００ｍｇ  ｑｄまで増加し得る；３週間服用／１週間休薬の投薬スケジュールも調査され得る。このリボシクリブレジメンは、単剤リボシクリブのＭＴＤ（９００ｍｇ  ｑｄ、３週間服用／１週間休薬）のおよそ３０％である。リボシクリブがＥＧＦ８１６の曝露を増加させることが予測されているので、サイクルの過程の間のＥＧＦ８１６曝露の変動を避けるためにリボシクリブの連続的な投薬を開始レジメンに選択する。ＥＧＦ８１６は、リボシクリブ曝露に影響するとは予測されていない。
【０１４８】
リボシクリブと組み合わせたＥＧＦ８１６の提案される開始レジメンは、ＥＧＦ８１６  １００ｍｇ及びリボシクリブ２００ｍｇであり、それぞれ連続的に１日１回投与する。それらの以前の安全性データ及び薬物間相互作用（ＤＤＩ）の仮定に基づいて、開始投与組合せは、ＢＬＲＭ内でＥＷＯＣ基準を満たす。
【０１４９】
連続的な投薬は、治療サイクルの期間、中断なく薬剤を投与することを意味する。そのため、連続的な１日１回投与は、所与の治療期間の間、休薬日のない治療剤の１日１回の投与を指す。
【０１５０】
ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを有する患者のリボシクリブと組み合わせた化合物Ａの安全性及び忍容性を特性化するために、及び推奨される投与量及びレジメンを決定するために、試験の用量漸増パートの設計を選択する。必要な場合、用量漸増は、リボシクリブと組み合わせた化合物ＡのＭＴＤ（最大耐用量）の確立を可能にし、ベイズ流ロジスティック回帰モデル（ＢＬＲＭ）により導かれるだろう。
【０１５１】
ＢＬＲＭは、癌患者の最大耐用量（ＭＴＤ）を推定するための定評のある方法である。適応的ＢＬＲＭ（ａｄａｐｔｉｖｅ  ＢＬＲＭ）は、試験に参加する未来の患者における用量規制毒性（ＤＬＴ）のリスクを制御するために、過量投与制御を伴う用量漸増（ＥＷＯＣ）原則により導かれるだろう。小さいデータセットへのベイズ流反応適応的モデル（Ｂａｙｅｓｉａｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ａｄａｐｔｉｖｅ  ｍｏｄｅｌ）の使用は、ＥＭＥＡ（“Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  ｏｎ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌｓ  ｉｎ  ｓｍａｌｌ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ”，Ｆｅｂｒｕａｒｙ  １，２００７）により受け入れられ、多くの刊行物（Ｂａｂｂ  ｅｔ  ａｌ  １９９８，Ｎｅｕｅｎｓｃｈｗａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ  ２００８，Ｎｅｕｅｎｓｃｈｗａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ  ２０１０）により支持され、その開発及び適切な使用は、ＦＤＡのＣｒｉｔｉｃａｌ  Ｐａｔｈ  Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅの一態様である。
【０１５２】
選択された用量段階
その後の組合せコホートのためのＥＧＦ８１６用量段階（１００、７５、又は５０ｍｇ）の選択は、より早い組合せコホートのＥＧＦ８１６  ＰＫに依存するだろう。
【０１５３】
【表４】
2020529423.tif 000008
【０１５４】
治療継続期間：
患者は、ＲＥＣＩＳＴ  １．１による疾患進行、許容できない毒性、新たな抗新生物療法の開始、治験責任医師若しくは患者の判断による中止、追跡不能、死亡、又は試験の終了まで、割り付けられた治療を受け続ける。
【０１５５】
本試験の目的及び関連するエンドポイント：
【０１５６】
【表５】
2020529423.tif 000009
【図１Ａ】
2020529423.tif 000011
【図１Ｂ】
2020529423.tif 000012
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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