(57)【要約】ＨＩＶ  ｇｐ１２０およびＣＤ３に結合する多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）が、開示される。そのような抗体を使用してＨＩＶ感染を処置または予防する方法もまた、開示される。本開示は、とりわけ、ＨＩＶを処置または予防するための組成物および方法を提供する。より具体的には、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）エンベロープ（Ｅｎｖ）糖タンパク質ＧＰ１２０（ｇｐ１２０）および第２の抗原（例えば、分化クラスター３（ＣＤ３）、抗ＩｇＡ受容体（ＣＤ８９））を標的とする多重特異性抗体、ならびにその使用が、本明細書において提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト免疫不全ウイルス−１（ＨＩＶ−１）エンベロープ（Ｅｎｖ）糖タンパク質ｇｐ１２０（ｇｐ１２０）およびヒトＣＤ３に結合する多重特異性抗体であって、
（ａ）第１の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および第１の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、第１の抗原結合性ドメインであって、ｇｐ１２０に結合し、
（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ相補性決定領域（ＣＤＲ）１、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ−ＣＤＲ２、
（ｉｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ−ＣＤＲ３、
（ｉｖ）配列番号４のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ１、
（ｖ）配列番号５のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ２、および
（ｖｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ３を含む、第１の抗原結合性ドメインと、
（ｂ）ヒトＣＤ３に結合する第２の抗原結合性ドメインと
を含む、多重特異性抗体。
【請求項２】
前記第１のＶＨが、配列番号７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
前記第１のＶＬが、配列番号８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項４】
配列番号８の６６位、６７位、６７Ａ位、および６７Ｃ位（Ｋａｂａｔの番号付け）におけるアミノ酸が、変更されていない、請求項３に記載の抗体。
【請求項５】
前記第１のＶＬが、配列番号８１と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項６】
前記第１のＶＬが、配列番号８２と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項７】
前記第１のＶＬが、配列番号８３と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項８】
前記第１のＶＬが、配列番号８４と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項９】
前記第１の抗原結合性ドメインが、配列番号９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１０】
前記第１の抗原結合性ドメインが、配列番号１０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１２】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８１のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１３】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８２のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１４】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８３のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１５】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１６】
前記多重特異性抗体が、二重特異性抗体である、請求項１から１５のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１７】
前記第２の抗原結合性ドメインが、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、前記第２のＶＨが、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ３を含む、請求項１から１６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１８】
前記第２の抗原結合性ドメインが、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、前記第２のＶＬが、
（ｉ）配列番号１４のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１から１６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１９】
前記第２の抗原結合性ドメインが、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、
前記第２のＶＨが、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ３を含み、
前記第２のＶＬが、
（ｉ）配列番号１４のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１から１６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２０】
前記第２のＶＨが、配列番号１７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２１】
前記第２のＶＬが、配列番号１８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２２】
前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２３】
前記第２の抗原結合性ドメインが、配列番号１９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２４】
前記第２の抗原結合性ドメインが、配列番号２０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２５】
カッパ−ラムダボディ、二重親和性再標的化分子（ＤＡＲＴ）、ノブ・イン・ホール、鎖交換操作ドメインボディ（ＳＥＥＤボディ）、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴｅ）、ＣｒｏｓｓＭａｂ、Ｆｃａｂ、ダイアボディ、タンデムダイアボディ（ＴａｎｄＡｂ）、またはＤｕｏＢｏｄｙである、請求項１から２４のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２６】
前記第１の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、ヒトＩｇＡ１、およびヒトＩｇＡ２からなる群から選択される第１の重鎖定常領域に融合されており、前記第２の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、ヒトＩｇＡ１、およびヒトＩｇＡ２からなる群から選択される第２の重鎖定常領域に融合されている、請求項１から２４のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２７】
前記第１の重鎖定常領域が、ヒトＩｇＧ１であり、前記第２の重鎖定常領域が、ヒトＩｇＧ１である、請求項２６に記載の抗体。
【請求項２８】
前記第１の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトラムダ定常領域である第１の軽鎖定常領域に融合されており、前記第２の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトラムダ定常領域である第２の軽鎖定常領域に融合されている、請求項２６または２７に記載の抗体。
【請求項２９】
（ａ）前記第１の重鎖定常領域が、Ｆ４０５Ｌアミノ酸変異を含み、
（ｂ）前記第２の重鎖定常領域が、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３０】
（ａ）前記第１の重鎖定常領域が、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、
（ｂ）前記第２の重鎖定常領域が、Ｆ４０５Ｌアミノ酸変異を含む、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３１】
前記第１の重鎖定常領域および前記第２の重鎖定常領域のエフェクター機能が、低減または抑止されている、請求項２６から３０のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３２】
前記第１の重鎖定常領域が、Ｎ２９７Ａ変異もしくはＮ２９７Ｑ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含み、かつ／または前記第２の重鎖定常領域が、Ｎ２９７Ａ変異もしくはＮ２９７Ｑ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む、請求項２６から３０のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３３】
ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体であって、
（Ａ）ｇｐ１２０に結合する第１のアームであって、
（ｉ）第１の重鎖であり、
（ａ）Ｆ４０５ＬまたはＫ４０９Ｒ変異のいずれかである第１の変異を含む、第１の重鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む、第１のＶＨを含む、第１の重鎖と、
（ｉｉ）第１の軽鎖であり、
（ａ）第１の軽鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、第１のＶＬを含む、第１の軽鎖と
を含む、第１のアームと、
（Ｂ）ヒトＣＤ３に結合する第２のアームであって、
（ｉ）第２の重鎖であり、
（ａ）Ｆ４０５ＬまたはＫ４０９Ｒ変異のいずれかである第２の変異を含む、第２の重鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む、第２のＶＨを含む、第２の重鎖と、
（ｉｉ）第２の軽鎖であり、
（ａ）第２の軽鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、第２のＶＬを含む、第２の軽鎖と
を含む、第２のアームとを含み、前記第１の変異および前記第２の変異が、異なる変異である、二重特異性抗体。
【請求項３４】
前記第１のＶＨが、配列番号７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項３５】
前記第１のＶＬが、配列番号８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３または３４に記載の抗体。
【請求項３６】
配列番号８の６６位、６７位、６７Ａ位、および６７Ｃ位（Ｋａｂａｔの番号付け）におけるアミノ酸が、変更されていない、請求項３５に記載の抗体。
【請求項３７】
前記第１の重鎖が、配列番号９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から３６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３８】
前記第１の軽鎖が、配列番号１０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から３７のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３９】
前記第２のＶＨが、配列番号１７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から３８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項４０】
前記第２のＶＬが、配列番号１８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から３９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項４１】
前記第２の重鎖が、配列番号１９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から４０のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項４２】
前記第２の軽鎖が、配列番号２０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から４１のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項４３】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４４】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８１のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４５】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８２のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４６】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８３のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４７】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８４のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４８】
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号１０のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４９】
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号４０のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項５０】
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号７８のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項５１】
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号７９のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項５２】
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号８０のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項５３】
細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む、請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項５４】
（ｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、（ｉｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の重鎖可変領域または第１の重鎖をコードする核酸分子、（ｉｉｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、および（ｉｖ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第２の重鎖可変領域または第２の重鎖をコードする核酸分子を含む、組成物。
【請求項５５】
（ｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、（ｉｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の重鎖可変領域または第１の重鎖をコードする核酸分子、および／または（ｉｉｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、および（ｉｖ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第２の重鎖可変領域または第２の重鎖をコードする核酸分子を含む、宿主細胞。
【請求項５６】
組織培養物中の、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ、酵母、ＣＨＯ、ＹＢ／２０、ＮＳ０、ＰＥＲ−Ｃ６、ＨＥＫ−２９３Ｔ、ＮＩＨ−３Ｔ３、ＨｅＬａ、ＢＨＫ、Ｈｅｐ  Ｇ２、ＳＰ２／０、Ｒ１．１、Ｂ−Ｗ、Ｌ−Ｍ、ＣＯＳ１、ＣＯＳ７、ＢＳＣ１、ＢＳＣ４０、ＢＭＴ１０細胞、植物細胞、昆虫細胞、およびヒト細胞からなる群から選択される、請求項５５に記載の宿主細胞。
【請求項５７】
ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合する抗体を産生する方法であって、請求項５５または５６に記載の宿主細胞を、前記核酸分子が発現され、前記抗体が産生されるような条件下において培養するステップを含む、方法。
【請求項５８】
試料中のｇｐ１２０およびＣＤ３を発現する細胞を検出するための方法であって、前記試料を、請求項１から５３のいずれか一項に記載の抗体と接触させるステップを含む、方法。
【請求項５９】
請求項１から５３のいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項６０】
請求項１から５３のいずれか一項に記載の抗体または請求項５９に記載の医薬組成物、ならびにａ）検出試薬、ｂ）ｇｐ１２０および／もしくはＣＤ３抗原、ｃ）ヒトへの投与のための使用もしくは販売の承認を表す通知、またはｄ）これらの組合せを含むキット。
【請求項６１】
ヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防することを必要とするヒト被験体においてヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防する方法であって、前記ヒト被験体に、治療有効量の、請求項１から５３のいずれか一項に記載の抗体または請求項５９に記載の医薬組成物を投与するステップを含む、方法。
【請求項６２】
重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、ｇｐ１２０に結合する抗体であって、前記ＶＨが、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるチロシン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるフェニルアラニン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるスレオニン、または６７位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるグリシンを含む、抗体。
【請求項６３】
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６４】
前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６５】
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６６】
配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６７】
配列番号４０、７８、７９、または８０のうちのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６８】
配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号４０、７８、７９、または８０のうちのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６９】
細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む、請求項６２から６８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項７０】
請求項６２から６９のいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項７１】
請求項６２から６８のいずれか一項に記載の抗体をコードする単数または複数の核酸。
【請求項７２】
請求項７１に記載の単数または複数の核酸を含む単数または複数のベクター。
【請求項７３】
請求項７２に記載の単数または複数のベクターを含む宿主細胞。
【請求項７４】
抗ｇｐ１２０抗体を産生する方法であって、請求項７３に記載の宿主細胞を、前記単数または複数の核酸が発現され、前記抗体が産生されるような条件下において培養するステップを含む、方法。
【請求項７５】
ヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防することを必要とするヒト被験体においてヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防する方法であって、前記ヒト被験体に、治療有効量の、請求項６２から６９のいずれか一項に記載の抗体または請求項７０に記載の医薬組成物を投与するステップを含む、方法。
【請求項７６】
重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、ｇｐ１２０に結合する抗体断片であって、前記ＶＨが、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるチロシン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるフェニルアラニン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるスレオニン、または６７位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるグリシンを含む、抗体断片。
【請求項７７】
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含む、請求項７６に記載の抗体断片。
【請求項７８】
前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項７６に記載の抗体断片。
【請求項７９】
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項７６に記載の抗体断片。
【請求項８０】
Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、またはダイアボディである、請求項７６から７９のいずれか一項に記載の抗体断片。
【請求項８１】
細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む、請求項７６から８０のいずれか一項に記載の抗体断片。
【請求項８２】
請求項７６から８１のいずれか一項に記載の抗体断片と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項８３】
請求項７６から８０のいずれか一項に記載の抗体断片をコードする単数または複数の核酸。
【請求項８４】
請求項８３に記載の単数または複数の核酸を含む単数または複数のベクター。
【請求項８５】
請求項８４に記載の単数または複数のベクターを含む宿主細胞。
【請求項８６】
抗ｇｐ１２０抗体断片を産生する方法であって、請求項８５に記載の宿主細胞を、前記単数または複数の核酸が発現され、前記抗体断片が産生されるような条件下において培養するステップを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１７年６月２１日に出願された米国仮特許出願第６２／５２３，１４１号に対する優先権を主張し、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、この配列表は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。２０１８年６月２０日に作成された前記ＡＳＣＩＩのコピーは、３５６４８−００５４ＷＯ１＿ＳＬ．ｔｘｔという名称であり、サイズが１６４，１１４バイトである。
【０００３】
分野
本開示は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染の処置および予防のための抗体に関する。具体的には、広範に中和する抗ＨＩＶ抗体を含む多重特異性抗体、ならびにＨＩＶ複製を低減させるために、ならびにＨＩＶ感染の処置および予防において、これらの抗体を使用するための方法が、本明細書において提供される。
【背景技術】
【０００４】
背景
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染および関連疾患は、世界中で主要な公衆衛生上の問題である。ＨＩＶ感染のために最も新しく認可された治療は、ウイルスの逆転写酵素、プロテアーゼ酵素およびインテグラーゼを標的化するが、これらの既存の薬物に対するＨＩＶの耐性、長期毒性、および毎日の投薬レジメンへの患者の順守の欠如が、これらの治療に関連する問題であることが証明されている。従って、新たなＨＩＶ薬物を発見および開発することが重要である。
ＷＯ２０１２／０３０９０４は、複数のクレード由来のＨＩＶ−１種による感染を阻害することが可能な、ＨＩＶ感染ドナーのメモリーＢ細胞に由来するヒト抗ＨＩＶ抗体を記載している。しかし、これらの抗体の治療的使用は、免疫原性、薬物動態、抗原特異性、エフェクター機能および製造に関連する問題に起因して限定されている。従って、治療的使用のための有利な特性を有する新規抗ＨＩＶ抗体が、当該分野で必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２０１２／０３０９０４号
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示は、とりわけ、ＨＩＶを処置または予防するための組成物および方法を提供する。より具体的には、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）エンベロープ（Ｅｎｖ）糖タンパク質ＧＰ１２０（ｇｐ１２０）および第２の抗原（例えば、分化クラスター３（ＣＤ３）、抗ＩｇＡ受容体（ＣＤ８９））を標的とする多重特異性抗体、ならびにその使用が、本明細書において提供される。
【０００７】
一態様では、本開示は、ヒト免疫不全ウイルス−１（ＨＩＶ−１）エンベロープ（Ｅｎｖ）糖タンパク質ｇｐ１２０（ｇｐ１２０）およびヒトＣＤ３（例えば、ヒトＣＤ３ε）に結合する多重特異性抗体を提供する。抗体は、第１の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および第１の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、第１の抗原結合性ドメインを含む。第１の抗原結合性ドメインは、ｇｐ１２０に結合し、配列番号１のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ相補性決定領域（ＣＤＲ）１、配列番号２のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号４のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。この抗体は、ヒトＣＤ３（例えば、ヒトＣＤ３ε）に結合する第２の抗原結合性ドメインも含む。ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【０００８】
別の態様では、本開示は、ヒト免疫不全ウイルス−１（ＨＩＶ−１）エンベロープ（Ｅｎｖ）糖タンパク質ｇｐ１２０（ｇｐ１２０）およびＩｇＡ受容体、ＣＤ８９に結合する多重特異性抗体を提供する。抗体は、第１の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および第１の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、第１の抗原結合性ドメインを含む。第１の抗原結合性ドメインは、ｇｐ１２０に結合し、配列番号１のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ相補性決定領域（ＣＤＲ）１、配列番号２のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号４のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。この抗体は、ＣＤ８９（例えば、ヒトＣＤ８９／ＦＣＡＲ、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ−Ｐ２４０７１）に結合する第２の抗原結合性ドメインも含む。ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【０００９】
上の２つの態様の一部の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第１のＶＬは、配列番号８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。これらの実施形態のある特定の事例では、配列番号８の６６位、６７位、６７Ａ位、および６７Ｃ位（Ｋａｂａｔ番号付け）のうちの１つまたは複数におけるアミノ酸は、変更されていない。ある特定の実施形態では、第１のＶＬは、配列番号８１と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、第１のＶＬは、配列番号８２と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、第１のＶＬは、配列番号８３と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、第１のＶＬは、配列番号８４と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、上記のＶＨは、直接、または介在アミノ酸（複数可）（例えば、Ｇ−Ｓリンカー配列）を介して、配列番号５６〜６５に示されるアミノ酸配列のうちの１つに連結されている。他の事例では、上記のＶＨは、直接、または介在アミノ酸（複数可）（例えば、Ｇ−Ｓリンカー配列）を介して、配列番号６６〜７５に示されるアミノ酸配列のうちの１つに連結されている。一部の事例では、上記のＶＨは、直接、または介在アミノ酸（複数可）（例えば、Ｇ−Ｓリンカー配列）を介して、配列番号７７内に０〜１０個のアミノ酸置換（例えば、半減期を増加させるおよび／またはエフェクター機能を減少させる置換）を有するアミノ酸配列に連結されている。ある特定の実施形態では、上記のＶＨは、直接、または介在アミノ酸（複数可）（例えば、Ｇ−Ｓリンカー配列）を介して、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１、例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、ならびにＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に記載されている「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント「ＩｇＧ３  Ｃ−」）を含むアミノ酸配列に連結されている。
【００１０】
上の２つの態様の一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号９と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号１０と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号４０と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号７８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号７９と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号８０と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００１１】
上の２つの態様のある特定の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８のアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８１のアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８２のアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８３のアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８４のアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、上記のＶＨは、直接、または介在アミノ酸（複数可）（例えば、Ｇ−Ｓリンカー配列）を介して、配列番号５６〜６５に示されるアミノ酸配列のうちの１つに連結されている。他の事例では、上記のＶＨは、直接、または介在アミノ酸（複数可）（例えば、Ｇ−Ｓリンカー配列）を介して、配列番号６６〜７５に示されるアミノ酸配列のうちの１つに連結されている。一部の事例では、上記のＶＨは、直接、または介在アミノ酸（複数可）（例えば、Ｇ−Ｓリンカー配列）を介して、配列番号７７内に０〜１０個のアミノ酸置換（例えば、半減期を増加させるおよび／またはエフェクター機能を減少させる置換）を有するアミノ酸配列に連結されている。ある特定の場合には、上記のＶＨは、直接、または介在アミノ酸（複数可）（例えば、Ｇ−Ｓリンカー配列）を介して、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１、例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、ならびにＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に記載されている「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント「ＩｇＧ３  Ｃ−」）を含むアミノ酸配列に連結されている。
【００１２】
上の２つの態様の一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を有する重鎖を含み、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を有する重鎖を含み、配列番号４０に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を有する重鎖を含み、配列番号７８に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を有する重鎖を含み、配列番号７９に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を有する重鎖を含み、配列番号８０に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００１３】
ある特定の実施形態では、多重特異性抗体は、二重特異性抗体である。
【００１４】
ある特定の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、ヒトＣＤ３に結合し、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含む。第２のＶＨは、配列番号１１のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、第２のＶＬは、配列番号１４のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１５のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【００１５】
ある特定の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、ヒトＣＤ３に結合し、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、第２のＶＨは、配列番号１１のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ３を含み、第２のＶＬは、配列番号１４のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１５のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【００１６】
ある特定の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、ヒトＣＤ８９に結合し、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含む。第２のＶＨは、配列番号９８のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号９９のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号１００のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、第２のＶＬは、配列番号１０３のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１０４のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１０５のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【００１７】
ある特定の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、ヒトＣＤ８９に結合し、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、第２のＶＨは、配列番号９８のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号９９のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号１００のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ３を含み、第２のＶＬは、配列番号１０３のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１０４のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１０５のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【００１８】
一部の実施形態では、第２のＶＨは、配列番号１７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第２のＶＬは、配列番号１８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００１９】
一実施形態では、第２のＶＨは、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１８に示されるアミノ酸配列を含む。
【００２０】
一部の実施形態では、第２のＶＨは、配列番号９６と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第２のＶＬは、配列番号１０１と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００２１】
一実施形態では、第２のＶＨは、配列番号９６に示されるアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１０１に示されるアミノ酸配列を含む。
【００２２】
ある特定の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、配列番号１９と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、配列番号２０と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００２３】
ある特定の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、配列番号９７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、配列番号１０２と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００２４】
一部の実施形態では、抗体は、カッパ−ラムダボディ、二重親和性再標的化分子（ＤＡＲＴ）、ノブ・イン・ホール、鎖交換操作ドメインボディ（ＳＥＥＤボディ）、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴｅ）、ＣｒｏｓｓＭａｂ、Ｆｃａｂ、ダイアボディ、タンデムダイアボディ（ＴａｎｄＡｂ）、またはＤｕｏＢｏｄｙ（登録商標）である。
【００２５】
ある特定の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、ヒトＩｇＡ１、およびヒトＩｇＡ２からなる群から選択される第１の重鎖定常領域に融合されている。一部の事例では、第１の抗原結合性ドメインは、直接、または介在アミノ酸配列を介して、第１の重鎖定常領域に融合されており、ここで、定常領域は、ヒトＩｇＧ１（例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するが、ＩｇＧ１ヒンジ領域が、ＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に記載されている「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント「「ＩｇＧ３  Ｃ−」）で置き換えられていることを除く。一部の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、ヒトＩｇＡ１、およびヒトＩｇＡ２からなる群から選択される第２の重鎖定常領域に融合されている。一部の事例では、第２の抗原結合性ドメインは、直接、または介在アミノ酸配列を介して、第２の重鎖定常領域に融合されており、ここで、定常領域は、ヒトＩｇＧ１（例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するが、ＩｇＧ１ヒンジ領域が、ＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に記載されている「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント「ＩｇＧ３  Ｃ−」）で置き換えられていることを除く。
【００２６】
具体的な実施形態では、第１の重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ１であり、第２の重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ１である。
【００２７】
一部の実施形態では、第１の抗原結合性ドメインは、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトラムダ定常領域である第１の軽鎖定常領域に融合されている。他の実施形態では、第２の抗原結合性ドメインは、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトラムダ定常領域である第２の軽鎖定常領域に融合されている。
【００２８】
一実施形態では、第１の重鎖定常領域は、以下のＦ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、またはＦ４０５Ｙアミノ酸変異のうちの１つを含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｌアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ａアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｄアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｅアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｈアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｉアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｋアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｍアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｎアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｑアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｓアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｔアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｖアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｗアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｙアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む。
【００２９】
別の実施形態では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、以下のＦ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、またはＦ４０５Ｙアミノ酸変異のうちの１つを含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｌアミノ酸変異を含む。別の事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ａアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｄアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｅアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｈアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｉアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｋアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｍアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｎアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｑアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｓアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｔアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｖアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｗアミノ酸変異を含む。１つの事例では、第１の重鎖定常領域は、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、第２の重鎖定常領域は、Ｆ４０５Ｙアミノ酸変異を含む。
【００３０】
ある特定の実施形態では、第１の重鎖定常領域および第２の重鎖定常領域のエフェクター機能は、低減または抑止されている（例えば、野生型ＩｇＧ１  Ｆｃを有する抗体のエフェクター機能と比較して）。
【００３１】
一部の実施形態では、第１の重鎖定常領域は、Ｎ２９７Ａ変異もしくはＮ２９７Ｑ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含み、かつ／または第２の重鎖定常領域は、Ｎ２９７Ａ変異もしくはＮ２９７Ｑ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。
【００３２】
別の態様では、本開示は、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体を提供する。二重特異性抗体は、ｇｐ１２０に結合する第１のアームを含む。第１のアームは、Ｆ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、もしくはＦ４０５Ｙアミノ酸変異、またはＫ４０９Ｒ変異のうちのいずれか１つである第１の変異を含む第１の重鎖定常領域と、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む第１のＶＨとを含む、第１の重鎖を含む。１つの事例では、第１のアームは、Ｆ４０５ＬまたはＫ４０９Ｒ変異のうちのいずれか１つである第１の変異を含む第１の重鎖定常領域を含む、第１の重鎖を含む。第１のアームはまた、第一の軽鎖定常領域と、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む第１のＶＬとを含む、第１の軽鎖を含む。二重特異性抗体は、ＣＤ３（例えば、ヒトＣＤ３（例えば、ヒトＣＤ３ε）に結合する第２のアームを含む。第２のアームは、Ｆ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、もしくはＦ４０５Ｙアミノ酸変異、またはＫ４０９Ｒ変異のうちのいずれか１つである第２の変異を含む第２の重鎖定常領域と、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む第２のＶＨとを含む、第２の重鎖を含む。１つの事例では、第２のアームは、Ｆ４０５ＬまたはＫ４０９Ｒ変異のうちのいずれか１つである第２の変異を含む第２の重鎖定常領域を含む、第２の重鎖を含む。第２のアームは、第２の軽鎖定常領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む第２のＶＬとを含む、第２の軽鎖を含む。第１の変異および第２の変異は、異なる変異である。
【００３３】
別の態様では、本開示は、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体を提供する。二重特異性抗体は、ｇｐ１２０に結合する第１のアームを含む。第１のアームは、Ｆ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、もしくはＦ４０５Ｙアミノ酸変異、またはＫ４０９Ｒ変異のうちのいずれか１つである第１の変異を含む第１の重鎖定常領域と、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む第１のＶＨとを含む、第１の重鎖を含む。１つの事例では、第１のアームは、Ｆ４０５ＬまたはＫ４０９Ｒ変異のうちのいずれか１つである第１の変異を含む第１の重鎖定常領域を含む、第１の重鎖を含む。第１のアームはまた、第１の軽鎖定常領域と、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む第１のＶＬとを含む、第１の軽鎖を含む。二重特異性抗体は、ＣＤ８９（例えば、ヒトＣＤ８９）に結合する第２のアームを含む。第２のアームは、Ｆ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、もしくはＦ４０５Ｙアミノ酸変異、またはＫ４０９Ｒ変異のうちのいずれか１つである第２の変異を含む第２の重鎖定常領域と、配列番号９８のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号９９のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号１００のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む第２のＶＨとを含む、第２の重鎖を含む。１つの事例では、第２のアームは、Ｆ４０５ＬまたはＫ４０９Ｒ変異のうちのいずれか１つである第２の変異を含む第２の重鎖定常領域を含む、第２の重鎖を含む。第２のアームは、第２の軽鎖定常領域と、配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む第２のＶＬとを含む、第２の軽鎖を含む。第１の変異および第２の変異は、異なる変異である。
【００３４】
上の２つの態様のある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体アームは、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体アームは、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体アームは、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体アームは、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体アームは、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体アームは、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【００３５】
一部の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第１のＶＬは、配列番号８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。これらの実施形態のある特定の事例では、配列番号８の６６位、６７位、６７Ａ位、および６７Ｃ位（Ｋａｂａｔ番号付け）のうちの１つまたは複数におけるアミノ酸は、変更されていない。ある特定の実施形態では、第１のＶＬは、配列番号８１と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、第１のＶＬは、配列番号８２と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、第１のＶＬは、配列番号８３と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、第１のＶＬは、配列番号８４と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の事例では、上記のＶＨは、直接、または介在アミノ酸（複数可）（例えば、Ｇ−Ｓリンカー配列）を介して、配列番号７７内に１〜１０個のアミノ酸置換（例えば、半減期を増加させるおよび／またはエフェクター機能を減少させる置換）を有するアミノ酸配列に連結されている。
【００３６】
一部の実施形態では、第１の重鎖は、配列番号９と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第１の軽鎖は、配列番号１０と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第１の軽鎖は、配列番号４０と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第１の軽鎖は、配列番号７８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第１の軽鎖は、配列番号７９と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第１の軽鎖は、配列番号８０と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００３７】
ある特定の実施形態では、第２のＶＨは、配列番号１７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第２のＶＬは、配列番号１８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００３８】
ある特定の実施形態では、第２のＶＨは、配列番号９６と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、第２のＶＬは、配列番号１０１と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００３９】
一部の実施形態では、第２の重鎖は、配列番号１９と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、第２の重鎖は、配列番号２０と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００４０】
一部の実施形態では、第２の重鎖は、配列番号９７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、第２の重鎖は、配列番号１０２と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００４１】
一実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１８のアミノ酸配列を含む。
【００４２】
一実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号９６のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１０１のアミノ酸配列を含む。
【００４３】
別の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８１のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１８のアミノ酸配列を含む。
【００４４】
別の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８１のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号９６のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１０１のアミノ酸配列を含む。
【００４５】
さらなる実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８２のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１８のアミノ酸配列を含む。
【００４６】
さらなる実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８２のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号９６のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１０１のアミノ酸配列を含む。
【００４７】
別の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８３のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１８のアミノ酸配列を含む。
【００４８】
別の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８３のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号９６のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１０１のアミノ酸配列を含む。
【００４９】
さらに別の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８４のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１８のアミノ酸配列を含む。
【００５０】
さらに別の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８４のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号９６のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１０１のアミノ酸配列を含む。
【００５１】
別の実施形態では、第１の重鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖は、配列番号１０のアミノ酸配列を含み、および／または第２の重鎖は、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖は、配列番号２０のアミノ酸配列を含む。
【００５２】
さらに別の実施形態では、第１のＶＨは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、第１のＶＬは、配列番号８４のアミノ酸配列を含み、および／または第２のＶＨは、配列番号９６のアミノ酸配列を含み、第２のＶＬは、配列番号１０１のアミノ酸配列を含む。
【００５３】
別の実施形態では、第１の重鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列を含み、および／または第２の重鎖は、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖は、配列番号２０のアミノ酸配列を含む。
【００５４】
別の実施形態では、第１の重鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列を含み、および／または第２の重鎖は、配列番号９７のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖は、配列番号１０２のアミノ酸配列を含む。
【００５５】
別の実施形態では、第１の重鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖は、配列番号７８のアミノ酸配列を含み、および／または第２の重鎖は、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖は、配列番号２０のアミノ酸配列を含む。
【００５６】
別の実施形態では、第１の重鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖は、配列番号７８のアミノ酸配列を含み、および／または第２の重鎖は、配列番号９７のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖は、配列番号１０２のアミノ酸配列を含む。
【００５７】
さらに別の実施形態では、第１の重鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖は、配列番号７９のアミノ酸配列を含み、および／または第２の重鎖は、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖は、配列番号２０のアミノ酸配列を含む。
【００５８】
さらに別の実施形態では、第１の重鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖は、配列番号７９のアミノ酸配列を含み、および／または第２の重鎖は、配列番号９７のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖は、配列番号１０２のアミノ酸配列を含む。
【００５９】
さらなる実施形態では、第１の重鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖は、配列番号８０のアミノ酸配列を含み、および／または第２の重鎖は、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖は、配列番号２０のアミノ酸配列を含む。
【００６０】
さらなる実施形態では、第１の重鎖は、配列番号９のアミノ酸配列を含み、第１の軽鎖は、配列番号８０のアミノ酸配列を含み、および／または第２の重鎖は、配列番号９７のアミノ酸配列を含み、第２の軽鎖は、配列番号１０２のアミノ酸配列を含む。
【００６１】
上の態様および実施形態の全てのある特定の実施形態では、抗体は、細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む。
【００６２】
さらなる態様では、本開示は、上に開示されている抗体の第１の抗原結合性ドメインの第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子を含む、組成物を提供する。別の態様では、本開示は、上に開示されている抗体の第１の抗原結合性ドメインの第１の重鎖可変領域または第１の重鎖をコードする核酸分子を含む、組成物を提供する。さらに別の態様では、本開示は、上に開示されている抗体の第２の抗原結合性ドメインの第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子を含む、組成物を提供する。さらに別の態様では、本開示は、上に開示されている抗体の第２の抗原結合性ドメインの第２の重鎖可変領域または第２の重鎖をコードする核酸分子を含む、組成物を提供する。
【００６３】
別の態様では、本開示は、上記の核酸うちの１つまたは複数を含む宿主細胞を特徴とする。ある特定の事例では、宿主細胞は、二重特異性抗体の４つ全ての鎖を含む。他の事例では、宿主細胞は、二重特異性抗体のｇｐ１２０結合性アームをコードする核酸を含む。他の事例では、宿主細胞は、二重特異性抗体のＣＤ３結合性アームをコードする核酸を含む。さらに他の事例では、宿主細胞は、二重特異性抗体のＣＤ８９結合性アームをコードする核酸を含む。一部の実施形態では、宿主細胞は、組織培養物中の、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ、酵母（例えば、Ｐｉｃｈｉａ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、ＣＨＯ、ＹＢ／２０、ＮＳ０、ＰＥＲ−Ｃ６、ＨＥＫ−２９３Ｔ、ＮＩＨ−３Ｔ３、ＨｅＬａ、ＢＨＫ、Ｈｅｐ  Ｇ２、ＳＰ２／０、Ｒ１．１、Ｂ−Ｗ、Ｌ−Ｍ、ＣＯＳ１、ＣＯＳ７、ＢＳＣ１、ＢＳＣ４０、ＢＭＴ１０細胞、植物細胞、昆虫細胞、およびヒト細胞からなる群から選択される。
【００６４】
さらに別の態様では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合する抗体（またはｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合する抗体）を産生する方法を、特徴とする。上記の宿主細胞を、核酸分子が発現され、抗体が産生されるような条件下において培養するステップを含む、方法。
【００６５】
別の態様では、試料中のｇｐ１２０およびＣＤ３（またはＣＤ８９）を発現する細胞を検出するための方法が、開示される。本方法は、試料を、本明細書に記載される抗体と接触させるステップを含む。
【００６６】
さらに別の態様では、本開示は、本明細書に記載される抗体と、薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を提供する。
【００６７】
さらなる実施形態では、本開示は、本明細書に記載される抗体、ならびにａ）検出試薬、ｂ）ｇｐ１２０および／もしくはＣＤ３および／もしくはＣＤ８９抗原、ｃ）ヒトへの投与のための使用もしくは販売に関する承認を表す通知、またはｄ）これらの組合せを含むキットを特徴とする。
【００６８】
また、ヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防することを必要とするヒト被験体においてヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防する方法も、提供される。本方法は、ヒト被験体に、治療有効量の、本明細書において開示されている抗体または医薬組成物を投与するステップを含む。一部の実施形態では、ヒト免疫不全ウイルス感染は、ＨＩＶ−１感染である。一部の実施形態では、患者におけるウイルスは、Ｎ３３２  ＰＮＧ陽性であるＥｎｖを有する。ある特定の実施形態では、ＨＩＶは、クレードＢ、Ｇ、Ａ、ＡＣ、またはＡＥのものである。
【００６９】
別の態様では、本開示は、ｇｐ１２０に結合する抗体を特徴とする。この抗体は、ＶＨおよびＶＬを含む。ＶＨは、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む。ＶＬは、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。加えて、ＶＬは、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるチロシン、フェニルアラニン、もしくはスレオニン、または６７位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるグリシンを含む。
【００７０】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【００７１】
一部の実施形態では、ＶＨは、配列番号７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＶＨは、直接、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して、抗体のエフェクター機能を低減させるおよび／または薬物動態学的半減期を増加させる０〜１０個（例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換を含む、ヒトＩｇＧ１定常領域（例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に連結されている。一部の事例では、抗体は、ＩｇＧ３抗体に由来するヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に開示されている「オープン」ＩｇＧ３Ｃ−ヒンジバリアント）、ならびにヒトＩｇＧ１抗体（例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３領域を有する。
【００７２】
ある特定の実施形態では、ＶＬは、配列番号８１、８２、８３、または８４と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００７３】
一部の実施形態では、重鎖は、配列番号９と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００７４】
ある特定の実施形態では、軽鎖は、配列番号４０、７８、７９、または８０と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００７５】
一実施形態では、抗体は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号４０のうちのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む。
【００７６】
別の実施形態では、抗体は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号７８のうちのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む。
【００７７】
さらに別の実施形態では、抗体は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号７９のうちのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む。
【００７８】
別の実施形態では、抗体は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号８０のうちのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む。
【００７９】
一部の実施形態では、上記の抗体は、細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む。
【００８０】
別の態様では、本開示は、本態様の抗体と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を特徴とする。
【００８１】
別の態様では、本開示は、本態様の抗体をコードする核酸に関する。
【００８２】
別の態様では、本開示は、上記の単数または複数の核酸を含む単数または複数のベクターを提供する。
【００８３】
さらに別の態様では、本開示は、上記の単数または複数のベクターを含む宿主細胞を特徴とする。
【００８４】
さらなる態様では、本開示は、抗ｇｐ１２０抗体を産生するための方法を提供する。本方法は、上記の宿主細胞を、単数または複数の核酸が発現され、抗体が産生されるような条件下において培養するステップを含む。
【００８５】
また、ヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防することを必要とするヒト被験体においてヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防する方法も特徴とする。本方法は、ヒト被験体に、治療有効量の、本態様の抗体または医薬組成物を投与するステップを含む。一部の実施形態では、ヒト免疫不全ウイルス感染は、ＨＩＶ−１感染である。一部の実施形態では、患者におけるＨＩＶは、Ｎ３３２  ＰＮＧ陽性であるＥｎｖを有する。ある特定の実施形態では、ＨＩＶは、クレードＢ、Ｇ、Ａ、ＡＣ、またはＡＥのものである。
【００８６】
別の態様では、本開示は、ｇｐ１２０に結合する抗体断片を特徴とする。この抗体断片は、ＶＨおよびＶＬを含む。ＶＨは、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む。ＶＬは、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む。加えて、ＶＬは、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるチロシン、フェニルアラニン、もしくはスレオニン、または６７位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるグリシンを含む。
【００８７】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体断片は、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体断片は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体断片は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、抗ｇｐ１２０抗体断片は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体断片は、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体断片は、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【００８８】
一部の実施形態では、ＶＨは、配列番号７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００８９】
ある特定の実施形態では、ＶＬは、配列番号８１、８２、８３、または８４と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【００９０】
一部の実施形態では、抗体断片は、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、またはダイアボディである。
【００９１】
一部の実施形態では、上記の抗体断片は、細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む。
【００９２】
別の態様では、本開示は、本態様の抗体断片と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を特徴とする。
【００９３】
別の態様では、本開示は、本態様の抗体断片をコードする単数または複数の核酸に関する。
【００９４】
別の態様では、本開示は、上記の単数または複数の核酸を含む単数または複数のベクターを提供する。
【００９５】
さらに別の態様では、本開示は、上記の単数または複数のベクターを含む宿主細胞を特徴とする。
【００９６】
さらなる態様では、本開示は、抗ｇｐ１２０抗体断片を産生するための方法を提供する。本方法は、上記の宿主細胞を、単数または複数の核酸が発現され、抗体断片が産生されるような条件下において培養するステップを含む。
【００９７】
別の態様では、本開示は、ＨＩＶを処置または予防することを必要とするヒト被験体においてＨＩＶを処置または予防するための方法を特徴とする。本方法は、ヒト対象に、治療有効量の、本態様の抗体断片または医薬組成物を投与するステップを含む。一部の実施形態では、ヒト免疫不全ウイルス感染は、ＨＩＶ−１感染である。一部の実施形態では、患者におけるＨＩＶは、Ｎ３３２  ＰＮＧ陽性であるＥｎｖを有する。ある特定の実施形態では、ＨＩＶは、クレードＢ、Ｇ、Ａ、ＡＣ、またはＡＥのものである。
【００９８】
別途定義されない限り、本明細書において使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって広く理解されているものと同じ意味を有する。本明細書に記載される方法および材料に類似するかまたはそれと同等の方法および材料を、本発明の実施または試験において使用することができるが、例示的な方法および材料が、以下に記載されている。本明細書において記載される全ての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照によりその全体が組み込まれる。矛盾が生じた場合には、定義を含め、本出願が優先される。材料、方法、および実施例は、例示に過ぎず、限定することを意図するものではない。
【００９９】
本発明の他の特性および利点は、以下の詳細な記載および特許請求の範囲から明らかである。
【発明を実施するための形態】
【０１００】
詳細な記載
本明細書に記載される多重特異性抗体は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）エンベロープ（Ｅｎｖ）タンパク質ｇｐ１２０（ｇｐ１２０）および分化クラスター３（ＣＤ３）（例えば、ＣＤ３ε）に結合し、ＨＩＶ感染細胞を死滅させるのに有効である。例えば、多重特異性抗体は、２つの抗原結合性アームを有する二重特異性抗体であり、ここで、この二重特異性抗体は、一方のアームで、ＨＩＶ感染細胞上の抗原（例えば、ｇｐ１２０）に結合し、他方のアームで、Ｔ細胞上の抗原（例えば、ＣＤ３）に結合することにより、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞および／またはＣＤ８＋Ｔ細胞）を、ＨＩＶ感染細胞に向けさせ、ＨＩＶ感染細胞の殺滅をもたらすことができる。ＣＤ３およびｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体は、ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞を、ｇｐ１２０発現細胞（例えば、ＨＩＶ感染細胞）を死滅させるために、再び向けさせることができる。Ｔ細胞は、そのＴ細胞受容体の特異性に依存せずに、ＨＩＶ感染細胞を死滅させる。一実施形態では、二重特異性抗体は、抗ｇｐ１２０×抗ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）である。本開示のＤｕｏｂｏｄｙは、当該技術分野において公知の他の二重特異性プラットフォームよりも優れた重大な利点を有する。例えば、ＤＡＲＴプラットフォームよりも優れたＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）プラットフォームの主要な利点は、本明細書において開示されているＤｕｏｂｏｄｙが、標的細胞（例えば、ＨＩＶ感染細胞）を死滅させるために、ＣＤ４＋Ｔ細胞を動員することができることである。ＣＤ４＋Ｔ細胞に媒介される殺滅は、ＤＡＲＴでは観察されていない（Sloan  et  al.,  PLOS  Pathogens,  11(11):e1005233.  doi:10.1371/journal.ppat.1005233  (2015)を参照されたい）。これは、ＨＩＶ処置における標的もまたＣＤ４＋Ｔ細胞であるため、重大な利点である。ＨＩＶ処置のための活動に自然エフェクター細胞を必要とする抗体を使用することに伴う１つの懸念は、潜伏感染状態にあるＣＤ４＋Ｔ細胞が存在する組織に、エフェクター細胞が存在しない場合があることであるが、これは、ＣＤ４＋Ｔ細胞自体がエフェクター細胞であり得る場合にはあまり問題にはならない。
【０１０１】
ＨＩＶ−１は、ＨＩＶの主要なファミリーであり、世界中の全ての感染の９５％を占める。ＨＩＶ−２は、主として、西アフリカのいくつかの国において見られる。
【０１０２】
ＨＩＶウイルスは、特定のグループＭ、Ｎ、ＯおよびＰへと分割され、そのうちＭは、「主要な」グループであり、世界的にＨＩＶ／ＡＩＤＳの大部分の原因である。それらの遺伝子配列に基づいて、グループＭは、別個の地理的場所における有病率によって、サブタイプ（クレードとも呼ばれる）へとさらに下位分割される。
【０１０３】
グループＭの「サブタイプ」または「クレード」は、遺伝子配列データによって規定されるＨＩＶ−１グループＭのサブタイプである。グループＭサブタイプの例には、サブタイプＡ〜Ｋが含まれる。サブタイプの一部は、より毒性が高いことが公知であり、または異なる薬物療法に対して耐性である。各々番号が与えられた、異なるサブタイプのウイルス間の組換えに由来する「循環組換え形態」またはＣＲＦもまた存在する。例えば、ＣＲＦ１２＿ＢＦは、サブタイプＢとＦとの間の組換えである。サブタイプＡは、西アフリカにおいて一般的である。サブタイプＢは、ヨーロッパ、アメリカ、日本、タイおよびオーストラリアにおいて支配的な形態である。サブタイプＣは、南アフリカ、東アフリカ、インド、ネパール、および中国の一部において支配的な形態である。サブタイプＤは一般に、東および中央アフリカにおいてのみ見られる。サブタイプＥは、ＣＲＦ０１＿ＡＥとしてサブタイプＡと組み換えられたものに限られ、非組換え体として同定されたことはない。サブタイプＦは、中央アフリカ、南アメリカおよび東ヨーロッパにおいて見出されている。サブタイプＧ（およびＣＲＦ０２＿ＡＧ）は、アフリカおよび中央ヨーロッパにおいて見出されている。サブタイプＨは、中央アフリカに限定される。サブタイプＩは、現在はＣＲＦ０４＿ｃｐｘと説明される株を記述するために元々使用され、ｃｐｘは、いくつかのサブタイプの「複雑な」組換えを意味する。サブタイプＪは、北、中央および西アフリカ、ならびにカリブ海地域において主に見出される。サブタイプＫは、コンゴ民主共和国およびカメルーンに限定される。これらのサブタイプは、サブ−サブタイプ、例えば、Ａ１およびＡ２またはＦ１およびＦ２へとさらに分割される場合がある。２０１５年には、サブタイプＤプロテアーゼを有するサブタイプＡ、サブタイプＤおよびサブタイプＧの組換え体である株ＣＲＦ１９が、キューバにおいてＡＩＤＳへの迅速な進行と強く関連することが見出された。
【０１０４】
本開示は、とりわけ、ＨＩＶ感染細胞の表面上のｇｐ１２０ポリペプチドを標的とする中和抗体（例えば、広範に中和するＡｂ）を提供する。ウイルスエンベロープタンパク質に対する中和抗体は、感受性細胞の感染をブロックすることによって、ＨＩＶ−１曝露に対する適応免疫防御を提供する。広範な中和は、抗体が、異なるクレードに由来するＨＩＶ−１分離株を中和し得ることを示す。したがって、本開示によって包含される抗体は、交差クレードの結合活性を有する。
【０１０５】
ｇｐ１２０
エンベロープ糖タンパク質ｇｐ１２０（またはｇｐ１２０）は、ＨＩＶの外層の部分である１２０ｋＤａの糖タンパク質である。これは、３つのｇｐ１２０分子が一緒に連結されｇｐ４１タンパク質によって膜に固定されたものからなる、ウイルス膜スパイクとして現れる。ｇｐ１２０は、細胞表面受容体との相互作用を通じて、宿主細胞へのＨＩＶの侵入を促進するので、ウイルス感染に必須である。これらの受容体としては、ＤＣ−ＳＩＧＮ、ヘパラン硫酸プロテオグリカン、およびＣＤ４受容体が挙げられる。ヘルパーＴ細胞上のＣＤ４への結合により、ｇｐ１２０およびｇｐ４１における構造変化のカスケードの開始が誘導され、これにより、ウイルスと宿主細胞膜との融合がもたらされる。
【０１０６】
ｇｐ１２０は、ＨＩＶ  ｅｎｖ遺伝子によってコードされる。ｅｎｖ遺伝子は、およそ８５０個のアミノ酸の遺伝子産物をコードする。一次ｅｎｖ産物は、タンパク質ｇｐ１６０であり、これが、小胞体において、細胞プロテアーゼフューリンによって切断されて、ｇｐ１２０（約４８０個のアミノ酸）およびｇｐ４１（約３４５個のアミノ酸）となる。
【０１０７】
ＨＩＶクローンＷＩＴＯの例示的なｇｐ１６０ポリペプチドのアミノ酸配列を、以下に提供する（Ｖ３超可変ループが、太字で示されており、Ｎ３３２潜在的Ｎ−結合型グリコシル化部位が、太字かつ下線で示されている）：
【化１】
2020529192.tif 000002
【化２】
2020529192.tif 000003
【０１０８】
例示的なｇｐ１２０ポリペプチドのアミノ酸配列を、以下に提供する：
【化３】
2020529192.tif 000004
【０１０９】
別の例示的なｇｐ１２０ポリペプチド（ｗｗｗ．ｂｉｏａｆｒｉｃａ．ｎｅｔ／ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ／ＥＮＶ−ＧＰ１２０ｐｒｏｔ．ｈｔｍｌを参照されたい）のアミノ酸配列を、以下に提供する：
【化４】
2020529192.tif 000005
【０１１０】
同じ患者に由来する経時的分離株間では程度が低いが、単一の患者分離株内ですら存在する、独立したヒト免疫不全ウイルス１型（ＨＩＶ−１）分離株間におけるゲノム多様性は、ＨＩＶ−１の周知の特性である。この配列の不均一性は、ゲノム全体に分布しているが、ほとんどの不均一性は、ｅｎｖ遺伝子に位置している。いくつかの異なる分離株からの予測されるアミノ酸配列の比較により、配列の不均一性が、表面糖タンパク質ｇｐ１２０の５つの可変領域（Ｖ１からＶ５と表記される）に集合していることが示されている。Ｖ３領域は、３５個のアミノ酸の長さしかないが、相当な配列変動性を呈する。興味深いことに、この変動性にもかかわらず、Ｖ３領域には、ＣＤ４＋細胞との相互作用を媒介する決定基が含まれる。ｇｐ１２０変動性の増加は、より高いレベルのウイルス複製をもたらし、多様なＨＩＶ−１バリアントにより感染した個体におけるウイルスの適合性の増加を示唆している。潜在的Ｎ−結合型グリコシル化部位（ＰＮＧＳ）における変動性もまた、ウイルスの適合性の増加をもたらす。ＰＮＧＳは、長鎖炭水化物のｇｐ１２０の高可変領域への結合を可能にする。したがって、ｅｎｖにおけるＰＮＧＳの数は、中和抗体に対するより高いかまたは低い感受性を提供することによって、ウイルスの適合性に影響を及ぼし得る。
【０１１１】
ｇｐ１２０のＶ３領域のコンセンサス配列（Milich  et  al.,  J  Virol.,  67(9):5623-5634  (1993)を、以下に提供する：
【化５】
2020529192.tif 000006
【０１１２】
抗ｇｐ１２０抗体
本開示は、抗ｇｐ１２０抗体を特徴とする。ある特定の実施形態では、これらの抗体は、細胞表面上に発現されるＨＩＶ−１抗原に結合し、感染細胞を排除するまたは死滅させる。
【０１１３】
ある特定の実施形態では、これらの抗体は、ＨＩＶ−１を標的とする中和抗体（例えば、モノクローナル）である。「中和抗体」は、宿主におけるおよび／またはｉｎ  ｖｉｔｒｏの標的細胞における感染を開始および／または永続化するＨＩＶの能力を中和することができる抗体である。本開示は、中和モノクローナルヒト抗体であって、ＨＩＶ由来の抗原、例えば、ｇｐ１２０ポリペプチドを認識する、抗体を提供する。ある特定の実施形態では、「中和抗体」は、中和指数（neutralization  index）＞１．５または＞２．０で、ＨＩＶ−１ウイルス、例えば、ＳＦ１６２および／またはＪＲ−ＣＳＦの侵入を阻害し得る（Kostrikis  LG  et  al.,  J.  Virol.,70(1):  445-458  (1996)）。
【０１１４】
一部の実施形態では、これらの抗体は、ＨＩＶ−１を標的とする広範に中和する抗体（例えば、モノクローナル）である。「広範に中和する抗体」とは、中和アッセイにおいて、１つよりも多いＨＩＶ−１ウイルス種（多様なクレードおよびクレード内の異なる株由来）を中和する抗体を意味する。広範に中和する抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、またはそれよりも多くの異なる株を中和し得、株は、同じかまたは異なるクレードに属する。特定の実施形態では、広範に中和する抗体は、少なくとも２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの異なるクレードに属する複数のＨＩＶ−１種を中和し得る。ある特定の実施形態では、抗体の阻害濃度は、中和アッセイにおいて、投入ウイルスの約５０％を中和するのに約０．０００１μｇ／ｍｌ未満、約０．００１μｇ／ｍｌ未満、約０．０１μｇ／ｍｌ未満、約０．１μｇ／ｍｌ未満、約０．５μｇ／ｍｌ未満、約１．０μｇ／ｍｌ未満、約５μｇ／ｍｌ未満、約１０μｇ／ｍｌ未満、約２５μｇ／ｍｌ未満、約５０μｇ／ｍｌ未満、または約１００μｇ／ｍｌ未満であり得る。
【０１１５】
一実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＰＣＴ出願公開ＷＯ２０１２／０３０９０４号においてＰＧＴ−１２１  ＬＯ６として記載される抗体に関する。以下の表１は、ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６抗体の関連する配列情報を提供する。
【０１１６】
【表１−１】
2020529192.tif 000007
【表１−２】
2020529192.tif 000008
【０１１７】
ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６抗体、すなわち、ＰＧＴ−１２２と高度に関連する抗体の結晶構造および実験的分析により、ＰＧＴ１２２が、抗原に結合するためにＣＤＲの外側のアミノ酸残基も（ＣＤＲと一緒に）利用していることが明らかになった。例えば、この抗体は、フレームワーク領域内に、抗原と接触するさらなる領域を有するようである（例えば、Experimental  Validation  for  PGT121  and  related  antibodies:  Sok  et  al.,  PLOS  Pathogens,  9,  e1003754  (2013)を参照されたい）。Ｅｎｖウイルス抗原に結合したＰＧＴ１２２の高分解能の構造が決定されている（例えば、Julien  J.P.  et  al.,  Science,  342,  14777-14783  (2013)、およびPancera,  M.  et  al.,  Nature,  514,  455-461  (2014)を参照されたい）。ＰＧＴ１２１の構造は、Julien  JP  et  al.,  PLOS  Pathogens  9,  e1003342  (2013)、およびMouquet  H  et  al.,  PNAS,  109,  E3268-E3277  (2012)に記載されている。ＰＧＴ１２２の構造は、Julien  JP  et  al.,  PLOS  Pathogens  9,  e1003342  (2013),  PDB  ID  4JY5に記載されており、ＰＧＴ１２３の構造は、Julien  JP  et  al.,  PLOS  Pathogens  9,  e1003342  (2013)に記載されている。ＰＧＴ１２２およびＰＧＴ１２３抗体は、ＰＧＴ１２１抗体と密接に関連しており、したがって、ＰＧＴ１２２／Ｅｎｖ構造は、ＰＧＴ１２１、ＰＧＴ１２２、およびＰＧＴ１２３構造の知識と一緒に、Ｅｎｖに結合したＰＧＴ１２１の構造を非常に正確にモデル化し、Ｅｎｖへの結合に関与するＰＧＴ１２１の残基を高い信頼度で予測するために使用することができる。ＰＧＴ１２２およびＰＧＴ１２２／Ｅｎｖ構造に対する類似性に基づいて予測される、ｇｐ１２０抗原と接触するＰＧＴ１２１  ＬＯ６抗体の残基を、以下に提供し、フレームワーク残基を太字で示す（Ｋａｂａｔ番号付け）：
ＶＨ（Ｋａｂａｔ番号付け）：
３３、５６、５８、９９、１００、１００Ａ、１００Ｂ、１００Ｃ、１００Ｄ、１００Ｅ、１００Ｇ、１００Ｉ、１００Ｊ、１００Ｋ、１００Ｌおよび
ＶＬ（Ｋａｂａｔ番号付け）：
【化６】
2020529192.tif 000009
【０１１８】
さらに、ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６抗体は、上に列挙したものに加えて、未知のアミノ酸位置において抗体と接触し得る抗原の多くの異なるバリアント、例えば、異なるウイルス株に結合することが示されている。異なるウイルス株は、異なるＥｎｖ（即ち、抗原）配列および異なるグリコシル化パターンを有し、単一のＥｎｖ配列でさえ、不均一なグリコシル化パターンを有し得、異なるＨＩＶ−１バリアントのＥｎｖタンパク質またはさらには同じＥｎｖタンパク質上の異なるグリコシル化パターンを認識するために、広範に結合するまたは中和する抗体を必要とする。例えば、ＰＧＴ１２１のエピトープは、Ｅｎｖ  Ｖ３ループ、特に、Ｎ３３２位におけるＮ−結合型グリカンから構成される。Ｖ３ループは、細胞指向性およびウイルスクレードの主要な決定因子である。複数のクレードの１１７個のＣＣＲ５指向性ウイルスの中で、Ｎ３３２グリカンをコードするウイルスＤＮＡ配列中の潜在的Ｎ−結合型グリコシル化（ＰＮＧ）モチーフの存在は、クレードＢ、Ｇ、Ａ、ＡＣおよびＡＥのウイルスの中で、ＰＧＴ１２１による中和に対する感受性と、統計的に有意に関連した。Ｇｉｌｅａｄが出資した臨床試験に参加している患者から単離された５０のクレードＢ  Ｅｎｖ配列のうち、Ｎ３３２  ＰＮＧモチーフを有するＣＣＲ５指向性Ｅｎｖの９４％が、ＰＧＴ１２１による中和に対して感受性であったことと比較すると、ＣＣＲ５指向性、Ｎ３３２  ＰＮＧ陽性ではないウイルスはたった２６％であった（Ｐ＜０．０００１）。したがって、Ｅｎｖクレード、向性（tropism）、およびＮ３３２  ＰＮＧモチーフの存在の遺伝的決定は、ＰＧＴ１２１による中和感受性を高度に予測し、ＰＧＴ１２１およびその誘導体による中和に対するウイルス感受性を予測するためのマーカーとして有用であり得る。
【０１１９】
本開示は、ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６抗体のバリアントを提供する。ある特定の実施形態では、これらのバリアントは、ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６抗体と比較して、実質的に同じかまたはｇｐ１２０に対する増加した結合親和性を有する。結合親和性は、ＥＬＩＳＡ、ＳＰＲ、ＢＬＩ、またはフローサイトメトリーを含む、当該技術分野において公知の任意のアッセイを使用して決定することができる。ある特定の実施形態では、これらのバリアントは、ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６抗体と比較して、ｐＨ６．０でのＦｃＲｎに対する増加した結合親和性を有する。一部の実施形態では、これらのバリアントは、ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６抗体と比較して、ＨＩＶ−１に対する増加した中和を有する。ある特定の実施形態では、バリアントは、ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６抗体と比較して、低減された免疫原性を有する。ある特定の実施形態では、Ｅｎｖタンパク質への本開示のバリアントの結合は、以下の残基中またはその周囲のＥｎｖの領域が関与すると予測される（ＨＩＶ  Ｅｎｖ  ＨＸＢ２番号付け）：Ｖ３ループ（３２４〜３２８、３３０）および関連するＮ３３２グリカンならびにＶ１ループの一部分（１３５〜１３７）および関連するＮ１３７グリカン、残基４１５〜４１７。Ｅｎｖ結合のための抗体パラトープには、抗原と直接的に接触する以下の領域内の残基が関与すると予測される（Ｋａｂａｔ番号付け）：ＣＤＲＨ１（３３）、ＣＤＲＨ２（５０、５６、５８）、ＣＤＲＨ３（９９、１００、１００Ａ、１００Ｂ、１００Ｃ、１００Ｄ、１００Ｅ、１００Ｇ、１００Ｉ、１００Ｌ）、ＣＤＲＬ１（２８、２９、３０）、ＣＤＲＬ２（５０、５１、５２）、ＬＦＲ３（６６、６７、６７Ａ、６７Ｂ、および６７Ｃ）、ならびにＣＤＲＬ３（９３、９４、９５Ａ、９５Ｂ）。
【０１２０】
ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６重鎖可変ドメイン配列（Ｋａｂａｔ番号付けによる）（配列番号１２６）
【化７】
2020529192.tif 000010
【０１２１】
ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６軽鎖可変ドメイン配列（Ｋａｂａｔ番号付けによる：ＶＬは、１０７位（Ｖ）で終了する、すなわち、Ｇ１０８はＶＬの一部ではないことに留意されたい）（配列番号１２７）
【化８】
2020529192.tif 000011
【０１２２】
ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６抗体の１つの例示的なバリアントは、ＰＧＴ−１２１．６０抗体であり、その関連する配列情報は、以下の表２に提供されている。
【表２−１】
2020529192.tif 000012
【表２−２】
2020529192.tif 000013
【０１２３】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体１
例示的な抗ｇｐ１２０抗体１は、ＰＧＴ−１２１．６０抗体に関連する。例示的な抗ｇｐ１２０抗体１（ＰＧＴ１２１．６０ヒトＩｇＧ１  ＦＥＡＲＬＳ／ヒトラムダ）の関連するアミノ酸配列は、表３に提供されている。
【表３−１】
2020529192.tif 000014
【表３−２】
2020529192.tif 000015
【表３−３】
2020529192.tif 000016
【０１２４】
抗ｇｐ１２０抗体は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を包含し得る。一実施形態では、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａの定義に基づいて定義される。具体的な実施形態では、Ｃｈｏｔｈｉａの定義は、Chothia  and  Lesk,  J  Mol  Biol.  196(4):901-17  (1987)、およびMorea  et  al.,  Methods,  20:267-279  (2000)による定義を使用する、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｔｕｄｉｏによるものである。別の具体的な実施形態では、Ｃｈｏｔｈｉａの定義は、Ａｂｙｓｉｓ定義によるＣｈｏｔｈｉａに基づく。別の実施形態では、ＣＤＲは、ＩＭＧＴの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、Ｈｏｎｅｇｇｅｒの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、ｃｏｎｔａｃｔの定義に基づいて定義される。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【０１２５】
ある特定の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の重鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、抗ｇｐ１２０抗体は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖および可変軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の重鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【０１２６】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖は、ＣＨ１ドメインおよびヒンジ領域を含む重鎖定常領域に連結されている。一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖は、ＣＨ３ドメインを含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖は、ＩｇＧ４に由来するＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、およびＣＨ２ドメイン、ならびにＣＨ３ドメイン（例えば、ＩｇＧ１に由来する）を含む、重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖は、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１、例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、ならびにＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号において「ＩｇＧ３  Ｃ−」と表記される「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント（例えば、このＰＣＴ公開の図２Ａを参照されたい））を含む、重鎖定常領域に連結されている。このＩｇＧ３ヒンジバリアントは、Ｆａｂアームの可動性の改善、および三量体内での相互作用に十分である２００Ａ０の距離にまたがる能力を呈すると予測される。ある特定の実施形態では、そのようなキメラ抗体は、キメラ抗体の安定性を増加させる、１つまたは複数の追加の変異を、重鎖定常領域に含む。ある特定の実施形態では、重鎖定常領域は、抗体の特性を改変する（例えば、Ｆｃ受容体結合を減少させる、抗体のグリコシル化を増加または減少させる、Ｃ１ｑへの結合を減少させる、半減期を増加させる、エフェクター機能を減少させる）置換を含む。
【０１２７】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ＩｇＧ抗体である。一実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１である。別の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ２である。一部の実施形態では、抗体は、キメラ重鎖定常領域（例えば、ＩｇＧ４のＣＨ１、ヒンジ、およびＣＨ２領域、ならびにＩｇＧ１のＣＨ３領域を有する）を有する。
【０１２８】
ＩｇＧ抗体は、種々のアロタイプおよびイソアロタイプ（isoallotype）で存在する。特定の実施形態では、本開示の抗体は、Ｇ１ｍ１；ｎＧ１ｍ２；Ｇ１ｍ３；Ｇ１ｍ１７，１；Ｇ１ｍ１７，１，２；Ｇ１ｍ３，１；またはＧ１ｍ１７のアロタイプを有するＩｇＧ１重鎖を含む。これらのアロタイプまたはイソアロタイプのそれぞれは、ＩｇＧ１重鎖定常領域（Ｆｃ）内の示された位置（ＥＵ番号付け）における以下のアミノ酸残基によって特徴付けられる：
Ｇ１ｍ１：Ｄ３５６、Ｌ３５８；
ｎＧ１ｍ１：Ｅ３５６、Ｍ３５８；
Ｇ１ｍ３：Ｒ２１４、Ｅ３５６、Ｍ３５８、Ａ４３１；
Ｇ１ｍ１７，１：Ｋ２１４、Ｄ３５６、Ｌ３５８、Ａ４３１；
Ｇ１ｍ１７，１，２：Ｋ２１４、Ｄ３５６、Ｌ３５８、Ｇ４３１；
Ｇ１ｍ３，１：Ｒ２１４、Ｄ３５６、Ｌ３５８、Ａ４３１；および
Ｇ１ｍ１７：Ｋ２１４、Ｅ３５６、Ｍ３５８、Ａ４３１．
【０１２９】
具体的な実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１のＶＨは、以下に提供される野生型ＩｇＧ１ｍ３配列（代表的なアロタイプ決定残基が、太字で示されている）に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている：
【化９】
2020529192.tif 000017
【０１３０】
ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１のＶＨ（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、配列番号７７に１〜１０個（例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）のアミノ酸置換（例えば、エフェクター機能を低減するためおよび／または半減期を増加させるために行われる置換）を有する変異体ＩｇＧ１ｍ３配列に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。例示的なアミノ酸置換は、本開示において後述されている。
【０１３１】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトカッパ抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、Ｋｍ１；Ｋｍ１，２；またはＫｍ３から選択されるアロタイプを有するカッパ軽鎖を含む。これらのアロタイプのそれぞれは、ＩｇＧ１軽鎖内の示された位置（ＥＵ番号付け）における以下のアミノ酸残基によって特徴付けられる：
Km1:  V153,  L191;
Km1,2:  A153,  L191;  および
Km3:  A153,  V191.
【０１３２】
ある特定の実施形態では、本開示の抗体は、以下のアミノ酸配列のうちの１つを含むＩｇＧ１カッパ軽鎖を含み、以下には、代表的なアロタイプ決定残基が、太字で示されている：
Ｋｍ１：
TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNVLQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKLYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（配列番号８５）；
Ｋｍ１，２：
TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKLYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（配列番号８６）；または
Ｋｍ３：
TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC（配列番号８７）。
【０１３３】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトラムダ抗体である。それぞれの個々のヒトは、ラムダ１、ラムダ２、ラムダ３、ラムダ４、ラムダ５、ラムダ６、およびラムダ７から選択される軽鎖をコードする、７〜１１個の異なるラムダ軽鎖遺伝子を含む。特定の実施形態では、本開示の抗体は、ラムダ１、ラムダ２、ラムダ３、ラムダ４、ラムダ５、ラムダ６、およびラムダ７から選択されるラムダ軽鎖を含む。特定の実施形態では、本明細書に記載される抗体は、以下のアミノ酸配列のうちの１つを含むラムダ軽鎖を含み、以下には、代表的なラムダ決定残基が、太字で示されている：
【化１０】
2020529192.tif 000018
【０１３４】
具体的な実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１のＶＬ（例えば、配列番号８に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号８内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、野生型ヒトラムダ２配列（配列番号８９）に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１のＶＬは、配列番号８９内に１〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個）の置換を有する変異体ヒトラムダ２配列に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。
【０１３５】
特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１ｍ３／ヒトラムダ２抗体である。
【０１３６】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体１などの抗体は、例えば、抗体のアミノ酸配列をコードする核酸を調製し、それを発現させることによって、作製することができる。
【０１３７】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体２
別の例示的な抗ｇｐ１２０抗体である例示的な抗ｇｐ１２０抗体２は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１と同じ６つのＣＤＲを有する。この抗体は、配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＨ配列と、以下に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＬ配列とを含む：
【化１１】
2020529192.tif 000019
【０１３８】
ある特定の事例では、ＶＬは、ヒトラムダ定常領域に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。
【０１３９】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体２は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる重鎖と、以下に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる軽鎖とを含む：
【化１２】
2020529192.tif 000020
【０１４０】
一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【０１４１】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体２の可変重鎖（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、ＣＨ１ドメインおよびヒンジ領域を含む重鎖定常領域に連結されている。一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体２の可変重鎖（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、ＣＨ３ドメインを含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体２の可変重鎖（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、ＩｇＧ４に由来するＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、およびＣＨ２ドメイン、ならびにＣＨ３ドメイン（例えば、ＩｇＧ１に由来する）を含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖は、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１、例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、ならびにＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に記載される「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント「ＩｇＧ３  Ｃ−」）を含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、そのようなキメラ抗体は、キメラ抗体の安定性を増加させる、１つまたは複数の追加の変異を、重鎖定常領域に含む。ある特定の実施形態では、重鎖定常領域は、抗体の特性を改変する（例えば、Ｆｃ受容体結合を減少させる、抗体のグリコシル化を増加または減少させる、Ｃ１ｑへの結合を減少させる、半減期を増加させる、エフェクター機能を減少させる）置換を含む。
【０１４２】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ＩｇＧ抗体である。一実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１である。別の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ２である。一部の実施形態では、抗体は、キメラ重鎖定常領域（例えば、ＩｇＧ４のＣＨ１、ヒンジ、およびＣＨ２領域、ならびにＩｇＧ１のＣＨ３領域を有する）を有する。
【０１４３】
特定の実施形態では、本開示の抗体は、Ｇ１ｍ１；ｎＧ１ｍ２；Ｇ１ｍ３；Ｇ１ｍ１７，１；Ｇ１ｍ１７，１，２；Ｇ１ｍ３，１；またはＧ１ｍ１７のアロタイプを有するＩｇＧ１重鎖を含む。
【０１４４】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトカッパ抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、Ｋｍ１；Ｋｍ１，２；またはＫｍ３から選択されるアロタイプを有するカッパ軽鎖を含む。ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトラムダ抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、ラムダ１、ラムダ２、ラムダ３、ラムダ４、ラムダ５、ラムダ６、およびラムダ７から選択されるラムダ軽鎖を含む。
【０１４５】
特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１ｍ３／ヒトラムダ２抗体である。
【０１４６】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体２のＶＨ（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、野生型ＩｇＧ１ｍ３配列（配列番号７７）に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体２のＶＨ（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、配列番号７７に１〜１０個（例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）のアミノ酸置換（例えば、エフェクター機能を低減するためおよび／または半減期を増加させるための置換）を有する変異体ＩｇＧ１ｍ３配列に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。例示的なアミノ酸置換は、本開示において後述されている。
【０１４７】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体２のＶＬ（例えば、配列番号８１に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号８１内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、野生型ヒトラムダ２配列（配列番号８９）に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体２のＶＬ（例えば、配列番号８１に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号８１内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、配列番号８９内に１〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個）の置換を有する変異体ヒトラムダ２配列に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。
【０１４８】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体２は、単一特異性抗体または多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）のいずれかとして、使用することができる。全長抗体または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、ダイアボディ）が、本開示によって包含される。
【０１４９】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体２などの抗体は、例えば、抗体のアミノ酸配列をコードする核酸を調製し、それを発現させることによって、作製することができる。
【０１５０】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体３
別の例示的な抗ｇｐ１２０抗体である例示的な抗ｇｐ１２０抗体３は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１と同じ６つのＣＤＲを有する。この抗体は、配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＨ配列と、以下に提供されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＬ配列とを含む：
【化１３】
2020529192.tif 000021
【０１５１】
ある特定の事例では、ＶＬは、ヒトラムダ定常領域に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。
【０１５２】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体３は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる重鎖と、以下に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる軽鎖とを含む：
【化１４】
2020529192.tif 000022
【化１５】
2020529192.tif 000023
【０１５３】
一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【０１５４】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体３の可変重鎖は、ＣＨ１ドメインおよびヒンジ領域を含む重鎖定常領域に連結されている。一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体３の可変重鎖は、ＣＨ３ドメインを含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体３の可変重鎖は、ＩｇＧ４に由来するＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、およびＣＨ２ドメイン、ならびにＣＨ３ドメイン（例えば、ＩｇＧ１に由来する）を含む、重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖は、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１、例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、ならびにＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に記載される「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント「ＩｇＧ３  Ｃ−」）を含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、そのようなキメラ抗体は、キメラ抗体の安定性を増加させる、１つまたは複数の追加の変異を、重鎖定常領域に含む。ある特定の実施形態では、重鎖定常領域は、抗体の特性を改変する（例えば、Ｆｃ受容体結合を減少させる、抗体のグリコシル化を増加または減少させる、Ｃ１ｑへの結合を減少させる、半減期を増加させる、エフェクター機能を減少させる）置換を含む。
【０１５５】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ＩｇＧ抗体である。一実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１である。別の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ２である。一部の実施形態では、抗体は、キメラ重鎖定常領域（例えば、ＩｇＧ４のＣＨ１、ヒンジ、およびＣＨ２領域、ならびにＩｇＧ１のＣＨ３領域を有する）を有する。
【０１５６】
特定の実施形態では、本開示の抗体は、Ｇ１ｍ１；ｎＧ１ｍ２；Ｇ１ｍ３；Ｇ１ｍ１７，１；Ｇ１ｍ１７，１，２；Ｇ１ｍ３，１；またはＧ１ｍ１７のアロタイプを有するＩｇＧ１重鎖を含む。
【０１５７】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトカッパ抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、Ｋｍ１；Ｋｍ１，２；またはＫｍ３から選択されるアロタイプを有するカッパ軽鎖を含む。ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトラムダ抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、ラムダ１、ラムダ２、ラムダ３、ラムダ４、ラムダ５、ラムダ６、およびラムダ７から選択されるラムダ軽鎖を含む。
【０１５８】
特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１ｍ３／ヒトラムダ２抗体である。
【０１５９】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体３のＶＨ（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、野生型ＩｇＧ１ｍ３配列（配列番号７７）に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体３のＶＨ（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、配列番号７７に１〜１０個（例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）のアミノ酸置換（例えば、エフェクター機能を低減するためおよび／または半減期を増加させるための）を有する変異体ＩｇＧ１ｍ３配列に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。例示的なアミノ酸置換は、本開示において後述されている。
【０１６０】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体３のＶＬ（例えば、配列番号８２に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号８２内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、野生型ヒトラムダ２配列（配列番号８９）に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体３のＶＬ（例えば、配列番号８２に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号８２内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、配列番号８９内に１〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個）の置換を有する変異体ヒトラムダ２配列に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。
【０１６１】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体３は、単一特異性抗体または多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）のいずれかとして、使用することができる。全長抗体または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、ダイアボディ）が、本開示によって包含される。
【０１６２】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体３などの抗体は、例えば、抗体のアミノ酸配列をコードする核酸を調製し、それを発現させることによって、作製することができる。
【０１６３】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体４
別の例示的な抗ｇｐ１２０抗体である例示的な抗ｇｐ１２０抗体４は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１と同じ６つのＣＤＲを有する。この抗体は、配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＨ配列と、以下に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＬ配列とを含む：
【化１６】
2020529192.tif 000024
【０１６４】
ある特定の事例では、ＶＬは、ヒトラムダ定常領域に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。
【０１６５】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体４は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる重鎖と、以下に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる軽鎖とを含む：
【化１７】
2020529192.tif 000025
【０１６６】
一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【０１６７】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体４の可変重鎖は、ＣＨ１ドメインおよびヒンジ領域を含む重鎖定常領域に連結されている。一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体４の可変重鎖は、ＣＨ３ドメインを含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体４の可変重鎖は、ＩｇＧ４に由来するＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、およびＣＨ２ドメイン、ならびにＣＨ３ドメイン（例えば、ＩｇＧ１に由来する）を含む、重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖は、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１、例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、ならびにＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に記載される「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント「ＩｇＧ３  Ｃ−」）を含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、そのようなキメラ抗体は、キメラ抗体の安定性を増加させる、１つまたは複数の追加の変異を、重鎖定常領域に含む。ある特定の実施形態では、重鎖定常領域は、抗体の特性を改変する（例えば、Ｆｃ受容体結合を減少させる、抗体のグリコシル化を増加または減少させる、Ｃ１ｑへの結合を減少させる、半減期を増加させる、エフェクター機能を減少させる）置換を含む。
【０１６８】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ＩｇＧ抗体である。一実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１である。別の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ２である。一部の実施形態では、抗体は、キメラ重鎖定常領域（例えば、ＩｇＧ４のＣＨ１、ヒンジ、およびＣＨ２領域、ならびにＩｇＧ１のＣＨ３領域を有する）を有する。
【０１６９】
特定の実施形態では、本開示の抗体は、Ｇ１ｍ１；ｎＧ１ｍ２；Ｇ１ｍ３；Ｇ１ｍ１７，１；Ｇ１ｍ１７，１，２；Ｇ１ｍ３，１；またはＧ１ｍ１７のアロタイプを有するＩｇＧ１重鎖を含む。
【０１７０】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトカッパ抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、Ｋｍ１；Ｋｍ１，２；またはＫｍ３から選択されるアロタイプを有するカッパ軽鎖を含む。ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトラムダ抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、ラムダ１、ラムダ２、ラムダ３、ラムダ４、ラムダ５、ラムダ６、およびラムダ７から選択されるラムダ軽鎖を含む。
【０１７１】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体４のＶＨ（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、野生型ＩｇＧ１ｍ３配列（配列番号７７）に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体４のＶＨ（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、配列番号７７に１〜１０個（例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）のアミノ酸置換（例えば、エフェクター機能を低減するためおよび／または半減期を増加させるための）を有する変異体ＩｇＧ１ｍ３配列に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。例示的なアミノ酸置換は、本開示において後述されている。
【０１７２】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体４のＶＬ（例えば、配列番号８３に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号８３内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、野生型ヒトラムダ２配列（配列番号８９）に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体４のＶＬ（例えば、配列番号８３に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号８３内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、配列番号８９内に１〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個）の置換を有する変異体ヒトラムダ２配列に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。
【０１７３】
特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１ｍ３／ヒトラムダ２抗体である。
【０１７４】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体４は、単一特異性抗体または多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）のいずれかとして、使用することができる。全長抗体または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、ダイアボディ）を、利用することができる。
【０１７５】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体４などの抗体は、例えば、抗体のアミノ酸配列をコードする核酸を調製し、それを発現させることによって、作製することができる。
【０１７６】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体５
別の例示的な抗ｇｐ１２０抗体である例示的な抗ｇｐ１２０抗体５は、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１と同じ６つのＣＤＲを有する。この抗体は、配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＨ配列と、以下に提供されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＬ配列とを含む：
【化１８】
2020529192.tif 000026
【０１７７】
ある特定の事例では、ＶＬは、ヒトラムダ定常領域に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。
【０１７８】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体５は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる重鎖と、以下に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる軽鎖とを含む。
【化１９】
2020529192.tif 000027
【０１７９】
一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、本開示の抗ｇｐ１２０抗体は、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【０１８０】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体５の可変重鎖は、ＣＨ１ドメインおよびヒンジ領域を含む重鎖定常領域に連結されている。一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体５の可変重鎖は、ＣＨ３ドメインを含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体５の可変重鎖は、ＩｇＧ４に由来するＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、およびＣＨ２ドメイン、ならびにＣＨ３ドメイン（例えば、ＩｇＧ１に由来する）を含む、重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖は、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１、例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、ならびにＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に記載される「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント「ＩｇＧ３  Ｃ−」）を含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、そのようなキメラ抗体は、キメラ抗体の安定性を増加させる、１つまたは複数の追加の変異を、重鎖定常領域に含む。ある特定の実施形態では、重鎖定常領域は、抗体の特性を改変する（例えば、Ｆｃ受容体結合を減少させる、抗体のグリコシル化を増加または減少させる、Ｃ１ｑへの結合を減少させる、半減期を増加させる、エフェクター機能を減少させる）置換を含む。
【０１８１】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ＩｇＧ抗体である。一実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１である。別の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ２である。一部の実施形態では、抗体は、キメラ重鎖定常領域（例えば、ＩｇＧ４のＣＨ１、ヒンジ、およびＣＨ２領域、ならびにＩｇＧ１のＣＨ３領域を有する）を有する。
【０１８２】
特定の実施形態では、本開示の抗体は、Ｇ１ｍ１；ｎＧ１ｍ２；Ｇ１ｍ３；Ｇ１ｍ１７，１；Ｇ１ｍ１７，１，２；Ｇ１ｍ３，１；またはＧ１ｍ１７のアロタイプを有するＩｇＧ１重鎖を含む。
【０１８３】
ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトカッパ抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、Ｋｍ１；Ｋｍ１，２；またはＫｍ３から選択されるアロタイプを有するカッパ軽鎖を含む。ある特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトラムダ抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、ラムダ１、ラムダ２、ラムダ３、ラムダ４、ラムダ５、ラムダ６、およびラムダ７から選択されるラムダ軽鎖を含む。
【０１８４】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体５のＶＨ（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、野生型ＩｇＧ１ｍ３配列（配列番号７７）に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体５のＶＨ（例えば、配列番号７に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号７内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、配列番号７７に１〜１０個（例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）のアミノ酸置換（例えば、エフェクター機能を低減するためおよび／または半減期を増加させるための）を有する変異体ＩｇＧ１ｍ３配列に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。例示的なアミノ酸置換は、本開示において後述されている。
【０１８５】
一部の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体５のＶＬ（例えば、配列番号８４に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号８４内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、野生型ヒトラムダ２配列（配列番号８９）に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体５のＶＬ（例えば、配列番号８４に対して少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％の同一性を有するか、または配列番号８４内に０〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、もしくは５個）のアミノ酸置換（例えば、保存的置換）を有するアミノ酸配列）は、配列番号８９内に１〜５個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個）の置換を有する変異体ヒトラムダ２配列に、直接連結されているか、または介在アミノ酸配列（例えば、Ｇ−Ｓリンカー）を介して連結されている。
【０１８６】
特定の実施形態では、抗ｇｐ１２０抗体は、ヒトＩｇＧ１ｍ３／ヒトラムダ２抗体である。
【０１８７】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体５は、単一特異性抗体または多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）のいずれかとして、使用することができる。全長抗体または抗原結合性断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、ダイアボディ）が、本開示によって包含される。
【０１８８】
例示的な抗ｇｐ１２０抗体５などの抗体は、例えば、抗体のアミノ酸配列をコードする核酸を調製し、それを発現させることによって、作製することができる。
【０１８９】
ＣＤ３
分化クラスター（ＣＤ３）は、イプシロン（ε）、ガンマ（γ）、デルタ（δ）、およびゼータ（ζ）の４つの異なるポリペプチド鎖から構成され、二量体の３つの対（εγ、εδ、ζζ）としてアセンブルし、機能する、多量体タンパク質複合体である。ＣＤ３タンパク質は、Ｎ末端細胞外領域、膜貫通ドメイン、および細胞質側尾部を有し、この細胞質側尾部に、免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）が位置している。ＣＤ３ε、γ、およびδの細胞外ドメインは、免疫グロブリン様ドメインを含み、したがって、免疫グロブリンスーパーファミリーの一部と考えられている。ＣＤ３／Ｔ細胞共受容体は、ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞の両方を活性化するのを補助する。
【０１９０】
ヒトＣＤ３εのアミノ酸配列は、ＵＮｉＰｒｏｔＫＢ−Ｐ０７７６６において見出すことができ、以下に提供されている（シグナル配列が、下線で示されている）：
【化２０】
2020529192.tif 000028
ヒトＣＤ３δのアミノ酸配列は、ＵＮｉＰｒｏｔＫＢ−Ｐ０４２３４において見出すことができ、以下に提供されている（シグナル配列が、下線で示されている）：
【化２１】
2020529192.tif 000029
【０１９１】
ヒトＣＤ３に結合する抗体は、当該技術分野において周知である（例えば、Kuhn  &  Weiner,  Immunotherapy,  8(8):889-906  (2016)、国際公開ＷＯ２０１５／１０４３４６号を参照されたい））。ＣＤ３εに対して向けられた抗ＣＤ３抗体であるＯＫＴ３（Ｍｕｒｏｍａｂ）は、実質臓器移植において免疫抑制を誘導し、拒絶反応を予防および処置するためにヒトにおいて使用することが臨床的に承認されている（Norman,  Therapeutic  Drug  Monitoring,  17,  615-620  (1995)）。ｈＯＫＴ３γ１（Ａｌａ−Ａｌａ）およびＭＧＡ０３１という名称でも公知のテプリズマブは、ＯＫＴ３の相補性決定領域をヒトＩｇＧ１骨格にグラフトすることによって開発されたヒト化ＩｇＧ１抗体である。そのＦｃ部分に２つの点変異を導入することにより、ＦｃＲへの結合が減少する。オテリキシズマブ（ＣｈＡｇｌｙＣＤ３、ＴＲＸ４、ＧＳＫ２１３６５２５）は、ラット抗体ＹＴＨ１２．５から得られた。このヒト化ＩｇＧ１は、γ１  Ｆｃ部分に、グリコシル化を回避し、それによって、ＦｃＲ結合を阻害する、単一の変異を有する。ビシリズマブ（Ｎｕｖｉｏｎ、ＨｕＭ２９１）は、そのＦｃ領域における２つの点変異によって非有糸分裂誘発性にしたヒト化ＩｇＧ２抗体である。フォラルマブ（２８Ｆ１１−ＡＥ、ＮＩ−０４０１）は、完全ヒト抗ＣＤ３  ｍＡｂであり、ｍＡｂが、ＣＤ３／ＴＣＲのモジュレーションおよびＴ細胞枯渇を維持すると同時に、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでは非ＦｃＲ結合性であり、ｉｎ  ｖｉｖｏではわずかなサイトカイン放出のみを呈するように、このヒトＩｇＧ１のＦｃ部分は変異されていた。
【０１９２】
抗ＣＤ３抗体の非限定的な例はまた、米国特許出願公開第２０１６／０３３３０９５号Ａ１に開示されている。
【０１９３】
ある特定の実施形態では、本開示の抗ＣＤ３抗体は、ヒトＣＤ３に結合する。一部の事例では、本開示の抗ＣＤ３抗体は、ヒトＣＤ３εに結合する。他の実施形態では、本開示の抗ＣＤ３抗体は、ヒトＣＤ３δに結合する。
【０１９４】
例示的な抗ＣＤ３抗体１
例示的な抗ＣＤ３抗体１の関連する配列情報は、表４に提供されている。
【表４−１】
2020529192.tif 000030
【表４−２】
2020529192.tif 000031
【表４−３】
2020529192.tif 000032
【０１９５】
抗ＣＤ３抗体は、例示的な抗ＣＤ３抗体１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を包含し得る。一実施形態では、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、ＩＭＧＴの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、Ｈｏｎｅｇｇｅｒの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、Ａｂｙｓｉｓ定義からのＣｈｏｔｈｉａに基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ／ＡｂＭ  ＣＤＲに基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、ｃｏｎｔａｃｔの定義に基づいて定義される。これらのＣＤＲは、例えば、ＡｂＹｓｉｓデータベース（ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆ．ｏｒｇ．ｕｋ／ａｂｙｓｉｓ／ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿ｉｎｐｕｔ／ｋｅｙ＿ａｎｎｏｔａｔｉｏｎ／ｋｅｙ＿ａｎｎｏｔａｔｉｏｎ．ｃｇｉ）を使用することによって決定することができる。
【０１９６】
ある特定の事例では、抗ＣＤ３抗体は、例示的な抗ＣＤ３抗体１の可変重鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３抗体は、例示的な抗ＣＤ３抗体１の重鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、抗ＣＤ３抗体は、例示的な抗ＣＤ３抗体１の可変軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、抗ＣＤ３抗体は、例示的な抗ＣＤ３抗体１の軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＤ３抗体は、例示的な抗ＣＤ３抗体１の可変重鎖および可変軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３抗体は、例示的な抗ＣＤ３抗体１の重鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、例示的な抗ＣＤ３抗体１の軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１９７】
一部の実施形態では、例示的な抗ＣＤ３抗体１の可変重鎖は、ＣＨ１ドメインおよびヒンジ領域を含む重鎖定常領域に連結されている。一部の実施形態では、例示的な抗ＣＤ３抗体１の可変重鎖は、ＣＨ３ドメインを含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ＣＤ３抗体１の可変重鎖は、ＩｇＧ４に由来するＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、およびＣＨ２ドメイン、ならびにＣＨ３ドメイン（例えば、ＩｇＧ１に由来する）を含む、重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の可変重鎖は、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１、例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、ならびにＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に記載される「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント「ＩｇＧ３  Ｃ−」）を含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、そのようなキメラ抗体は、キメラ抗体の安定性を増加させる、１つまたは複数の追加の変異を、重鎖定常領域に含む。ある特定の実施形態では、重鎖定常領域は、抗体の特性を改変する（例えば、Ｆｃ受容体結合を減少させる、抗体のグリコシル化を増加または減少させる、Ｃ１ｑへの結合を減少させる、半減期を増加させる、エフェクター機能を減少させる）置換を含む。
【０１９８】
ある特定の実施形態では、抗ＣＤ３抗体は、ＩｇＧ抗体である。一実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１である。別の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ２である。一部の実施形態では、抗体は、キメラ重鎖定常領域（例えば、ＩｇＧ４のＣＨ１、ヒンジ、およびＣＨ２領域、ならびにＩｇＧ１のＣＨ３領域を有する）を有する。
【０１９９】
特定の実施形態では、本開示の抗体は、Ｇ１ｍ１；ｎＧ１ｍ２；Ｇ１ｍ３；Ｇ１ｍ１７，１；Ｇ１ｍ１７，１，２；Ｇ１ｍ３，１；またはＧ１ｍ１７のアロタイプを有するＩｇＧ１重鎖を含む。
【０２００】
具体的な実施形態では、例示的な抗ＣＤ３抗体１のＶＨは、野生型ＩｇＧ１ｍ３  Ｆｃ（配列番号７７）に連結されている。ある特定の事例では、例示的な抗ＣＤ３抗体１のＶＨは、（例えば、エフェクター機能を低減させるためおよび／または半減期を増加させるために）配列番号７７に行われる１〜１０個（例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）のアミノ酸置換を有する変異型ＩｇＧ１ｍ３配列に連結されている。例示的なアミノ酸置換は、以下に記載されている。
【０２０１】
具体的な実施形態では、例示的な抗ＣＤ３抗体１のＶＬは、ヒトラムダ２配列（配列番号８９）に連結されている。ある特定の事例では、例示的な抗ＣＤ３抗体１のＶＬは、配列番号８９に行われる１〜１０個（例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）のアミノ酸置換を有する変異型ヒトラムダ２配列に連結されている。そのようなアミノ酸置換は、以下に記載されている。
【０２０２】
ある特定の実施形態では、抗ＣＤ３抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトラムダ抗体である。
【０２０３】
例示的な抗ＣＤ３抗体１などの抗体は、例えば、抗体のアミノ酸配列をコードする核酸を調製し、それを発現させることによって、作製することができる。
【０２０４】
ＣＤ８９
ＩｇＡ受容体のＦｃ断片（ＦＣＡＲ）としても公知のＣＤ８９（分化クラスター８９）は、膜貫通受容体ＦｃαＲＩである。ＦｃαＲＩは、免疫グロブリンＡ（ＩｇＡ）抗体の重鎖定常領域に結合する。ＦｃαＲＩは、好中球、単球、マクロファージ、および好酸球を含む、骨髄系列細胞の細胞表面上に発現される。
【０２０５】
ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ−Ｐ２４０７１に由来するヒトＣＤ８９のアミノ酸配列を、以下に提供する：
【化２２】
2020529192.tif 000033
【０２０６】
ヒトＣＤ８９に結合する抗体は、当該技術分野において周知である（例えば、Fishwild  et  al.,  Nature  Biotechnol.,  14(7):845-851  (1996)、Duval  et  al.,  J.  Virol.,  82(9):  4671-4674  (2008)、米国特許出願公開第２００３／００８２６４３号を参照されたい）。一部の実施形態では、抗ＣＤ８９抗体は、１４．１、７．４、または８．２（それぞれ、１４Ａ８、７Ｆ１２、および８Ｄ２とも称される）のうちの１つである。これらの抗体またはそのバリアントのいずれも、本明細書に開示される多重特異性抗体において利用することができる。
【０２０７】
ある特定の実施形態では、本開示の抗ＣＤ８９抗体または本明細書に開示される多重特異性抗体は、配列番号９５に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるポリペプチドに結合する。
【０２０８】
例示的な抗ＣＤ８９抗体１
例示的な抗ＣＤ８９抗体１の関連する配列情報は、以下の表に提供されている。
【表３１−１】
2020529192.tif 000034
【表３１−２】
2020529192.tif 000035
【０２０９】
抗ＣＤ８９抗体は、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を包含し得る。一実施形態では、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、ＩＭＧＴの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、Ｈｏｎｅｇｇｅｒの定義に基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、Ａｂｙｓｉｓ定義からのＣｈｏｔｈｉａに基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ／ＡｂＭ  ＣＤＲに基づいて定義される。別の実施形態では、ＣＤＲは、ｃｏｎｔａｃｔの定義に基づいて定義される。これらのＣＤＲは、例えば、ＡｂＹｓｉｓデータベース（ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆ．ｏｒｇ．ｕｋ／ａｂｙｓｉｓ／ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿ｉｎｐｕｔ／ｋｅｙ＿ａｎｎｏｔａｔｉｏｎ／ｋｅｙ＿ａｎｎｏｔａｔｉｏｎ．ｃｇｉ）を使用することによって決定することができる。
【０２１０】
ある特定の事例では、抗ＣＤ８９抗体は、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の可変重鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ８９抗体は、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の重鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、抗ＣＤ８９抗体は、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の可変軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、抗ＣＤ８９抗体は、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、抗ＣＤ８９抗体は、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の可変重鎖および可変軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ８９抗体は、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の重鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の軽鎖に対して少なくとも８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２１１】
一部の実施形態では、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の可変重鎖は、ＣＨ１ドメインおよびヒンジ領域を含む重鎖定常領域に連結されている。一部の実施形態では、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の可変重鎖は、ＣＨ３ドメインを含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の可変重鎖は、ＩｇＧ４に由来するＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域、およびＣＨ２ドメイン、ならびにＣＨ３ドメイン（例えば、ＩｇＧ１に由来する）を含む、重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、例示的な抗ＣＤ８９抗体１の可変重鎖は、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１、例えば、ＩｇＧ１ｍ３アロタイプ）に由来するＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン、ならびにＩｇＧ３ヒンジ領域（例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０９６２２１号に記載される「オープン」ＩｇＧ３ヒンジバリアント「ＩｇＧ３  Ｃ−」）を含む重鎖定常領域に連結されている。ある特定の実施形態では、そのようなキメラ抗体は、キメラ抗体の安定性を増加させる、１つまたは複数の追加の変異を、重鎖定常領域に含む。ある特定の実施形態では、重鎖定常領域は、抗体の特性を改変する（例えば、Ｆｃ受容体結合を減少させる、抗体のグリコシル化を増加または減少させる、Ｃ１ｑへの結合を減少させる、半減期を増加させる、エフェクター機能を減少させる）置換を含む。
【０２１２】
ある特定の実施形態では、抗ＣＤ８９抗体は、ＩｇＧ抗体である。一実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１である。別の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ２である。一部の実施形態では、抗体は、キメラ重鎖定常領域（例えば、ＩｇＧ４のＣＨ１、ヒンジ、およびＣＨ２領域、ならびにＩｇＧ１のＣＨ３領域を有する）を有する。
【０２１３】
特定の実施形態では、本開示の抗体は、Ｇ１ｍ１；ｎＧ１ｍ２；Ｇ１ｍ３；Ｇ１ｍ１７，１；Ｇ１ｍ１７，１，２；Ｇ１ｍ３，１；またはＧ１ｍ１７のアロタイプを有するＩｇＧ１重鎖を含む。
【０２１４】
具体的な実施形態では、例示的な抗ＣＤ８９抗体１のＶＨは、野生型ＩｇＧ１ｍ３  Ｆｃ（配列番号７７）に連結されている。ある特定の事例では、例示的な抗ＣＤ８９抗体１のＶＨは、（例えば、エフェクター機能を低減させるためおよび／または半減期を増加させるために）配列番号７７に行われる１〜１０個（例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）のアミノ酸置換を有する変異型ＩｇＧ１ｍ３配列に連結されている。例示的なアミノ酸置換は、以下に記載されている。
【０２１５】
具体的な実施形態では、例示的な抗ＣＤ８９抗体１のＶＬは、ヒトラムダ２配列（配列番号８９）に連結されている。ある特定の事例では、例示的な抗ＣＤ８９抗体１のＶＬは、配列番号８９に行われる１〜１０個（例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）のアミノ酸置換を有する変異型ヒトラムダ２配列に連結されている。そのようなアミノ酸置換は、以下に記載されている。
【０２１６】
ある特定の実施形態では、抗ＣＤ８９抗体は、ヒトＩｇＧ１／ヒトラムダ抗体である。
【０２１７】
例示的な抗ＣＤ８９抗体１などの抗体は、例えば、抗体のアミノ酸配列をコードする核酸を調製し、それを発現させることによって、作製することができる。
【０２１８】
多重特異性抗体
別の態様では、本開示は、多重特異性抗体を特徴とする。多重特異性抗体は、２つまたはそれより多い異なるエピトープに結合する抗体である（例えば、二重特異性抗体、三価抗体、四価抗体）。上記の抗ｇｐ１２０および抗ＣＤ３抗体または抗ｇｐ１２０および抗ＣＤ８９は、多重特異性抗体の一部として構成され得る。多重特異性抗体は、多重特異性抗体の抗ｇｐ１２０または抗ＣＤ３（もしくは抗ＣＤ８９）抗体の結合性部位が結合しない、少なくとも１つの他の抗原または１つの他のエピトープへの結合性部位を有し得る。抗ｇｐ１２０／抗ＣＤ３多重特異性抗体または抗ｇｐ１２０／抗ＣＤ８９多重特異性抗体は、二量体化ドメインおよび３つまたはそれより多い（例えば、３つ、４つ、５つ、６つの）抗原結合性部位を含み得る。例示的な二量体化ドメインは、Ｆｃ領域を含む（かまたはそれからなる）。抗ｇｐ１２０／抗ＣＤ３多重特異性抗体または抗ｇｐ１２０／抗ＣＤ８９多重特異性抗体は、３つ〜約８つ（すなわち、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ）の抗原結合性部位を含み得る（かまたはそれからなり得る）。多重特異性抗体は、必要に応じて、少なくとも１つのポリペプチド鎖（例えば、２つのポリペプチド鎖、３つのポリペプチド鎖）を含み、ここで、そのポリペプチド鎖（複数可）は、３つまたはそれより多い可変ドメインを含む。例えば、ポリペプチド鎖（複数可）は、例えば、ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−（Ｘ２）ｎ−ＦｃまたはＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−（Ｘ２）ｎ−ＶＤ３−（Ｘ３）ｎ−Ｆｃを含み得、ここで、ＶＤ１は、第１の可変ドメインであり、ＶＤ２は、第２の可変ドメインであり、ＶＤ３は、第３の可変ドメインであり、Ｆｃは、Ｆｃ領域のポリペプチド鎖であり、Ｘ１、Ｘ２、およびＸ３は、アミノ酸またはペプチドスペーサーを表し、ｎは、０または１である。ある特定の事例では、可変ドメインは、それぞれが、ｓｃＦｖであってもよい。多重特異性抗体は、抗体のポリペプチド鎖をコードする核酸の組換え発現によって容易に産生することができる。
【０２１９】
二重特異性抗体
一態様では、多重特異性抗体は、二重特異性抗体である。二重特異性抗体は、２つの異なるエピトープに対する結合特異性を有する抗体である。二重特異性抗体は、２つの「アーム」を有する。二重特異性抗体の一方のアームは、１つのエピトープに結合し、他方のアームは、別のエピトープに結合する。一実施形態では、二重特異性抗体の一方のアームは、第１の抗原に結合し、二重特異性抗体の他方のアームは、第２の抗原に結合する。別の実施形態では、二重特異性抗体の２つのアームは、同じ抗原の２つの異なるエピトープに結合する。
【０２２０】
一態様では、本開示は、ｇｐ１２０に特異的に結合し、第２の抗原（細胞防御機序を感染細胞に集中および局在化させるように、例えば、白血球上のトリガー分子、例えば、Ｔ細胞受容体分子（例えば、ＣＤ３）、またはＩｇＧのＦｃ受容体（ＦｃγＲ）、例えば、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）、もしくはＣＤ８９）に特異的に結合する二重特異性抗体を特徴とする。
【０２２１】
特定の実施形態では、二重特異性抗体の一方のアームは、ｇｐ１２０に特異的に結合し、他方のアームは、ＣＤ３（例えば、ヒトＣＤ３（例えば、ヒトＣＤ３ε、ヒトＣＤ３δ））に特異的に結合する。別の特定の実施形態では、二重特異性抗体の一方のアームは、ｇｐ１２０に特異的に結合し、他方のアームは、ＣＤ８９（例えば、ヒトＣＤ８９）に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の６つのＣＤＲを含む。一部の場合には、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔに従って定義される。他の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａに従って定義される。さらに他の実施形態では、ＣＤＲは、ＩＭＧＴの定義に従って定義される。さらに他の実施形態では、ＣＤＲは、Ｈｏｎｅｇｇｅｒの定義に従って定義される。ある特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１のＶＨ（配列番号７）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１のＶＬ（配列番号８）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１のＶＨ（配列番号７）およびＶＬ（配列番号８）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体２のＶＨ（配列番号７）およびＶＬ（配列番号８１）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体３のＶＨ（配列番号７）およびＶＬ（配列番号８２）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体４のＶＨ（配列番号７）およびＶＬ（配列番号８３）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ｇ��１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体５のＶＨ（配列番号７）およびＶＬ（配列番号８４）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の重鎖（配列番号９）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の軽鎖（配列番号１０）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体１の重鎖（配列番号９）および軽鎖（配列番号１０）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体２の重鎖（配列番号９）および軽鎖（配列番号４０）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体３の重鎖（配列番号９）および軽鎖（配列番号７８）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体４の重鎖（配列番号９）および軽鎖（配列番号７９）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の事例では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ｇｐ１２０抗体５の重鎖（配列番号９）および軽鎖（配列番号８０）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。一実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号７および配列番号８の��ミノ酸配列を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号７および配列番号８１のアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号７および配列番号８２のアミノ酸配列を含む。さらに別の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号７および配列番号８３のアミノ酸配列を含む。さらなる実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号７および配列番号８４のアミノ酸配列を含む。１つの特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号９および配列番号１０のアミノ酸配列を含む。別の特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号９および配列番号４０のアミノ酸配列を含む。さらに別の特定の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号９および配列番号７８のアミノ酸配列を含む。さらなる実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号９および配列番号７９のアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号９および配列番号８０のアミノ酸配列を含む。一部の事例では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号２１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号３８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるタンパク質に結合する。一部の事例では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、遊離ＨＩＶ−１ウイルスに結合する。一部の事例では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、ＨＩＶ−１感染細胞に結合する。一部の事例では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、遊離ＨＩＶ−１ウイルスおよびＨＩＶ−１感染細胞の両方に結合する。ある特定の場合には、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、ＨＩＶ−１の少なくとも２つの異なる株（例えば、グループＭ、グループＮ、グループＯ、またはグループＰ）に結合する。一実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、ｐＷＩＴＯ．ｃ／２４７４（受託番号ＪＮ９４４９４８およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号１１７３９）に結合する。別の実施形態では、ｇｐ１２０に結合する二重特異性抗体のアームは、ｐＣＨ０５８．ｃ／２９６０（受託番号ＪＮ９４４９４０およびＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍカタログ番号７０００１００５８）に結合する。
【０２２２】
ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ヒトＣＤ３抗体１の６つのＣＤＲを含む。一部の場合には、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔに従って定義される。他の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａに従って定義される。さらに他の実施形態では、ＣＤＲは、ＩＭＧＴの定義に従って定義される。さらに他の実施形態では、ＣＤＲは、Ｈｏｎｅｇｇｅｒの定義に従って定義される。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ＣＤ３抗体１のＶＨ（配列番号１７）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ＣＤ３抗体１のＶＬ（配列番号１８）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ヒトＣＤ３抗体１のＶＨ（配列番号１７）およびＶＬ（配列番号１８）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ヒトＣＤ３抗体１の重鎖（配列番号１９）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ＣＤ３に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ヒトＣＤ３抗体１の軽鎖（配列番号２０）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ヒトＣＤ３抗体１の重鎖（配列番号１９）および軽鎖（配列番号２０）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、ヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号１７および配列番号１８のアミノ酸配列を含む。別の特定の実施形態では、ヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号１９および配列番号２０のアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体のアームは、ヒトＣＤ３εに結合する。
【０２２３】
ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ヒトＣＤ８９抗体１の６つのＣＤＲを含む。一部の場合には、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔに従って定義される。他の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａに従って定義される。さらに他の実施形態では、ＣＤＲは、ＩＭＧＴの定義に従って定義される。さらに他の実施形態では、ＣＤＲは、Ｈｏｎｅｇｇｅｒの定義に従って定義される。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ＣＤ８９抗体１のＶＨ（配列番号９６）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ＣＤ８９抗体１のＶＬ（配列番号１０１）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ヒトＣＤ８９抗体１のＶＨ（配列番号９６）およびＶＬ（配列番号１０１）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ヒトＣＤ８９抗体１の重鎖（配列番号９７）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ＣＤ８９に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ヒトＣＤ８９抗体１の軽鎖（配列番号１０２）と少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体のアームは、例示的な抗ヒトＣＤ８９抗体１の重鎖（配列番号９７）および軽鎖（配列番号１０２）のそれぞれと少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、ヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号９６および配列番号１０１のアミノ酸配列を含む。別の特定の実施形態では、ヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体のアームは、配列番号９７および配列番号１０２のアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、ヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体のアームは、ヒトＣＤ８９に結合する。
【０２２４】
ある特定の実施形態では、二重特異性抗体の一方のアームは、ｇｐ１２０に結合するｓｃＦｖを含む。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体の一方のアームは、ヒトＣＤ３に結合するｓｃＦｖを含む。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体の一方のアームは、ヒトＣＤ８９に結合するｓｃＦｖを含む。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体には、キメラ抗体またはヒト化抗体が含まれ得る。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、Ｆ（ａｂ’）２断片を含み得る。
【０２２５】
一態様では、本開示の二重特異性抗体は、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３（例えば、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ）に結合し、ＨＩＶ−１感染細胞の殺滅を実行することができる。１つの事例では、ｇｐ１２０に結合するそのような二重特異性抗体は、配列番号１のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号４のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。１つの事例では、ヒトＣＤ３に結合するそのような二重特異性抗体は、配列番号１１のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１３のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１４のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１５のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１６のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。別の事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号１のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号４のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のＶＬ−ＣＤＲ３を含み、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号１１のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１３のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１４のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１５のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１６のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２２６】
別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号７と同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号７と同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号８、８１、８２、８３、または８４と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号８、８１、８２、８３、または８４と同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号８、８１、８２、８３、または８４と同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号９と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号９と同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号９と同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号１０、４０、７８、７９、または８０と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号１０、４０、７８、７９、または８０と同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号１０、４０、７８、７９、または８０と同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【０２２７】
別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号１７と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号１７と同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号１７と同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号１８と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号１８と同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号１８と同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号１９と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号１９と同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号１９と同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号２０と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号２０と同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ３結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号２０と同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【０２２８】
一態様では、本開示の二重特異性抗体は、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合し、ＨＩＶ−１感染細胞の殺滅を実行することができる。ＣＤ８９は、主として好中球に発現される、ＩｇＡ受容体であり、したがって、この二重特異性抗体は、ＨＩＶ感染細胞を死滅させるための好中球の動員を増強するであろう。１つの事例では、ｇｐ１２０に結合するそのような二重特異性抗体は、配列番号１のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号４のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。１つの事例では、ヒトＣＤ８９に結合するそのような二重特異性抗体は、配列番号９８のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号９９のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１００のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１０３のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１０４のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１０５のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。別の事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合する二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号１のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号４のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のＶＬ−ＣＤＲ３を含み、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、配列番号９８のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号９９のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１００のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１０３のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１０４のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１０５のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２２９】
別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号７と同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号７と同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号８、８１、８２、８３、８４と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号８、８１、８２、８３、または８４と同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号８、８１、８２、８３、または８４と同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号９と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号９と同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号９と同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号１０、４０、７８、７９、または８０と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号１０、４０、７８、７９、または８０と同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのｇｐ１２０結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号１０、４０、７８、７９、または８０と同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【０２３０】
別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、配列番号９６と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号９６と同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号９６と同一であるアミノ酸配列を有するＶＨを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、配列番号１０１と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号１０１と同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号１０１と同一であるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、配列番号９７と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号９７と同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号９７と同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、配列番号１０２と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換、挿入、および／または欠失を除き、配列番号１０２と同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。別の事例では、そのような二重特異性抗体は、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個）の置換を除き、配列番号１０２と同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【０２３１】
ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、０〜１０個のアミノ酸置換を中に含む、ヒトＩｇＧ１抗体に由来するＦｃドメインを有する。Ｆｃドメインは、二重特異性抗体の一方の成分（例えば、ｇｐ１２０結合性部分）に由来する１つの「レッグ（leg）」（ヒンジ−ＣＨ２−ＣＨ３）と、二重特異性抗体の第２の成分（例えば、ＣＤ３結合性部分またはＣＤ８９結合性部分）に由来する別の「レッグ」（ヒンジ−ＣＨ２−ＣＨ３）を含む。置換は、一方または両方の「レッグ」におけるものであり得る。ある特定の実施形態では、Ｆｃドメインは、一方または両方の「レッグ」における以下の変異（ＥＵ番号付け）：Ｎ２９７ＡもしくはＮ２９７Ｑ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６５Ａ、またはＰ３３１Ｓのうちの１つまたは複数（１つ、２つ、３つ、４つ、または５つ）を有する。
【０２３２】
本明細書において開示されている通りのｇｐ１２０およびＣＤ３に結合するまたはｇｐ１２０およびＣＤ８９に結合する二重特異性抗体は、２つの異なるモノクローナル抗体を化学的に連結させることによって、または２つのハイブリドーマ細胞株を融合してハイブリッド−ハイブリドーマを産生することによって、調製することができる。利用することができる他の二重特異性抗体技術プラットフォームとしては、例えば、Κλ−ボディ、ＳＭＩＰ、ＤＮＬ、Ｃｏｖｘ−ボディ、ペプチボディ、鎖交換操作ドメインボディ（ＳＥＥＤボディ）、ｄＡｂ、ダイアボディ、アフィボディ、フィノマー（Fynomer）、Ｋｕｎｉｔｚドメイン、ＴａｎｄＡｂ、ナノボディ、Ａｌｂｕ−ｄａｂ、ＤＡＲＴ、ＤＶＤ−ＩＧ、ｓｃＦｖ−Ｉｇ、ＳＶＤ−Ｉｇ、ｄＡｂ−Ｉｇ、ノブ・イン・ホール、ＢｉＴｅプラットフォーム、ＣｒｏｓｓＭａｂ（登録商標）プラットフォーム、ＤｕｏＢｏｄｙ（登録商標）、およびＴｒｉｏｍＡｂ（登録商標）が挙げられる。本明細書において開示されている二重特異性抗体を作製するのに利用することができる二重特異性形式の非限定的な例は、Del  Bano  et  al.,  Antibodies,  5:1  (2016)、Garber  et  al.,  Nature  Reviews  Drug  Discovery,  13:799-801  (2014)に提供されている。
【０２３３】
一実施形態では、本開示の二重特異性抗体分子は、一方のアームがｇｐ１２０などの第１の抗原に対する特異性を有し、第２のアームがヒトＣＤ３またはヒトＣＤ８９などの第２の抗原に対する特異性を有する、異なる抗原結合性領域を含む２つのアームを有する単一の抗体を含む。別の実施形態では、本開示の二重特異性抗体分子は、ｇｐ１２０などの第１の抗原に特異的な１つの抗原結合性領域またはアームと、ヒトＣＤ３またはヒトＣＤ８９などの第２の抗原に特異的な第２の抗原結合性領域またはアームとを有する、単一の抗体を含む。さらに別の実施形態では、本開示の二重特異性抗体分子は、例えば、余剰のペプチドリンカーによってタンデムに連結された２つのｓｃＦｖを介して、ｇｐ１２０などの第１の抗原に対する第１の特異性と、ヒトＣＤ３またはヒトＣＤ８９などの第２の抗原に対する第２の特異性とを有する一本鎖抗体を含む。さらなる実施形態では、本開示の二重特異性抗体分子は、二重可変ドメイン抗体（ＤＶＤ−Ｉｇ）を含み、ここで、それぞれの軽鎖および重鎖は、短いペプチド結合を通じて、２つの可変ドメインをタンデムに含む（Wu  et  al.,  Generation  and  Characterization  of  a  Dual  Variable  Domain  Immunoglobulin  (DVD-IgTM)  Molecule,  In:  Antibody  Engineering,  Springer  Berlin  Heidelberg  (2010)）。一部の実施形態では、二重特異性抗体は、化学的に連結された二重特異性（Ｆａｂ’）２断片である。他の実施形態では、二重特異性抗体は、Ｔａｎｄａｂ（すなわち、２つの一本鎖ダイアボディの融合により、標的抗原のそれぞれに対して２つの結合性部位を有する四価の二重特異性抗体がもたらされたもの）を含む。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、ｓｃＦｖとダイアボディの組合せにより多価分子を生じる、フレキシボディである。さらに別の実施形態では、二重特異性抗体は、タンパク質キナーゼＡにおける「二量体化およびドッキングドメイン」に基づく「ドック・アンド・ロック（dock  and  lock）」分子を含み、これは、Ｆａｂに適用されると、２つの同一なＦａｂ断片が異なるＦａｂ断片に連結されたものからなる三価の二重特異性結合タンパク質をもたらし得る。別の事例では、本開示の二重特異性抗体は、例えば、２つのｓｃＦｖがヒトＦａｂアームの両端に融合されたものを含む、「スコーピオン分子」を含む。さらに別の実施形態では、本開示の二重特異性抗体は、ダイアボディを含む。
【０２３４】
二重特異性抗体の例示的なクラスとしては、ヘテロ二量体化を強制的に行う相補的ＣＨ３ドメインを有するＩｇＧ様分子；全長ＩｇＧ抗体が、余剰なＦａｂ断片またはＦａｂ断片の部分に融合された、ＩｇＧ融合分子；一本鎖Ｆｖ分子または安定化ダイアボディが、重鎖定常ドメイン、Ｆｃ−領域、またはその部分に融合されたＦｃ融合分子；異なるＦａｂ断片が一緒に融合された、Ｆａｂ融合分子；分子の２つの側面がそれぞれ、少なくとも２つの異なる抗体のＦａｂ断片またはＦａｂ断片の部分を含む、組換えＩｇＧ様二重標的化分子；異なる一本鎖Ｆｖ分子または異なるダイアボディまたは異なる重鎖抗体（例えば、ドメイン抗体、ナノボディ）が、互いにかまたは別のタンパク質もしくは担体分子に融合した、ｓｃＦｖに基づく重鎖抗体およびダイアボディに基づく重鎖抗体（例えば、ドメイン抗体、ナノボディ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２３５】
Ｆａｂ融合二重特異性抗体の例としては、Ｆ（ａｂ）２（Ｍｅｄａｒｅｘ／ＡＭＧＥＮ）、Dual-ActionまたはＢｉｓ−Ｆａｂ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ドック・アンド・ロック（ＤＮＬ）（ＩｍｍｕｎｏＭｅｄｉｃｓ）、Bivalent  Bispecific（Ｂｉｏｔｅｃｎｏｌ）、およびＦａｂ−Ｆｖ（ＵＣＢ−Ｃｅｌｌｔｅｃｈ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２３６】
ｓｃＦｖに基づくドメイン抗体およびダイアボディに基づくドメイン抗体の例としては、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（Bispecific  T  Cell  Engager）（ＢＩＴＥ）（Ｍｉｃｒｏｍｅｔ、タンデムダイアボディ（Ｔａｎｄａｂ）（Ａｆｆｉｍｅｄ）、Dual  Affinity  Retargeting  Technology（ＤＡＲＴ）（ＭａｃｒｏＧｅｎｉｃｓ）、一本鎖ダイアボディ（Ａｃａｄｅｍｉｃ）、ＴＣＲ様抗体（ＡＩＴ、ＲｅｃｅｐｔｏｒＬｏｇｉｃｓ）、ヒト血清アルブミンＳｃＦｖ融合物（Human  Serum  Albumin  ScFv  Fusion）（Ｍｅｒｒｉｍａｃｋ）、およびＣＯＭＢＯＤＹ（Ｅｐｉｇｅｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）、二重標的化ナノボディ（Ａｂｌｙｎｘ）、ならびに二重標的化重鎖のみのドメイン抗体（dual  targeting  heavy  chain  only  domain  antibody）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２３７】
Ｄｕｏｂｏｄｙ
本開示の二重特異性抗体は、ｇｐ１２０および第２の抗原（例えば、ヒトＣＤ３、例えば、ヒトＣＤ３εもしくはヒトＣＤ３δ、ヒトＣＤ８９）に結合する、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）であり得る。Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、二重特異性抗体の一方の重鎖の定常領域のＣＨ３領域におけるＫ４０９Ｒ変異と、他方の重鎖の定常領域のＣＨ３領域におけるＦ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、およびＦ４０５Ｙからなる群から選択される変異とを含む、二重特異性ＩｇＧ１抗体である。具体的な実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、二重特異性抗体の一方の重鎖の定常領域のＣＨ３領域におけるＫ４０９Ｒ変異と、他方の重鎖の定常領域のＣＨ３領域におけるＦ４０５Ｌ変異とを含む、二重特異性ＩｇＧ１抗体である。
【０２３８】
ある特定の実施形態では、上記のｇｐ１２０に結合する第１の抗原結合性ドメインは、Ｆ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、およびＦ４０５Ｙからなる群から選択される変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含み、上記のヒトＣＤ３（またはヒトＣＤ８９）に結合する第２の抗原結合性ドメインは、Ｋ４０９Ｒ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。
【０２３９】
一実施形態では、上記のｇｐ１２０に結合する第１の抗原結合性ドメインは、Ｆ４０５Ｌ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含み、上記のヒトＣＤ３に結合する第２の抗原結合性ドメインは、Ｋ４０９Ｒ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。
【０２４０】
他の実施形態では、上記のｇｐ１２０に結合する第１の抗原結合性ドメインは、Ｋ４０９Ｒ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含み、上記のヒトＣＤ３（またはヒトＣＤ８９）に結合する第２の抗原結合性ドメインは、Ｆ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、およびＦ４０５Ｙからなる群から選択される変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。
【０２４１】
一実施形態では、上記のｇｐ１２０に結合する第１の抗原結合性ドメインは、Ｋ４０９Ｒ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含み、上記のヒトＣＤ３（またはヒトＣＤ８９）に結合する第２の抗原結合性ドメインは、Ｆ４０５Ｌ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む。
【０２４２】
Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤＲならびにＶＨおよびＶＬは、上に詳述されている抗ｇｐ１２０、抗ＣＤ３、または抗ＣＤ８９アミノ酸配列のうちのいずれかであり得る。
【０２４３】
一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームは、配列番号１のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号４のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームは、配列番号１１のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１３のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１４のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１５のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１６のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。別の事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号１のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号４のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のＶＬ−ＣＤＲ３を含み、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号１１のＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２のＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１３のＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１４のＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１５のＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１６のＶＬ−ＣＤＲ３を含む。
【０２４４】
一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームは、配列番号７のＶＨおよび配列番号８のＶＬを含む。一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームは、配列番号７のＶＨおよび配列番号８１のＶＬを含む。一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームは、配列番号７のＶＨおよび配列番号８２のＶＬを含む。一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームは、配列番号７のＶＨおよび配列番号８３のＶＬを含む。一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームは、配列番号７のＶＨおよび配列番号８４のＶＬを含む。一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームは、配列番号１７のＶＨおよび配列番号１８のＶＬを含む。一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ８９結合性アームは、配列番号９６のＶＨおよび配列番号１０１のＶＬを含む。別の事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７のＶＨおよび配列番号８のＶＬを含み、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号１７のＶＨおよび配列番号１８のＶＬを含む。別の事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７のＶＨおよび配列番号８のＶＬを含み、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、配列番号９６のＶＨおよび配列番号１０１のＶＬを含む。１つの事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７のＶＨおよび配列番号８１のＶＬを含み、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号１７のＶＨおよび配列番号１８のＶＬを含む。１つの事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７のＶＨおよび配列番号８１のＶＬを含み、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号９６のＶＨおよび配列番号１０１のＶＬを含む。１つの事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７のＶＨおよび配列番号８２のＶＬを含み、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号１７のＶＨおよび配列番号１８のＶＬを含む。１つの事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７のＶＨおよび配列番号８２のＶＬを含み、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号９６のＶＨおよび配列番号１０１のＶＬを含む。１つの事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７のＶＨおよび配列番号８３のＶＬを含み、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号１７のＶＨおよび配列番号１８のＶＬを含む。１つの事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７のＶＨおよび配列番号８３のＶＬを含み、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、配列番号９６のＶＨおよび配列番号１０１のＶＬを含む。１つの事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７のＶＨおよび配列番号８４のＶＬを含み、そのヒトＣＤ３結合性アームに、配列番号１７のＶＨおよび配列番号１８のＶＬを含む。１つの事例では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、そのｇｐ１２０結合性アームに、配列番号７のＶＨおよび配列番号８４のＶＬを含み、そのヒトＣＤ８９結合性アームに、配列番号９６のＶＨおよび配列番号１０１のＶＬを含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、配列番号９の第１の重鎖および配列番号１０の第１の軽鎖、ならびに配列番号１９の第２の重鎖および配列番号２０の第２の軽鎖を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、配列番号９の第１の重鎖および配列番号１０の第１の軽鎖、ならびに配列番号９７の第２の重鎖および配列番号１０２の第２の軽鎖を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、配列番号９の第１の重鎖および配列番号４０の第１の軽鎖、ならびに配列番号１９の第２の重鎖および配列番号２０の第２の軽鎖を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、配列番号９の第１の重鎖および配列番号４０の第１の軽鎖、ならびに配列番号９７の第２の重鎖および配列番号１０２の第２の軽鎖を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、配列番号９の第１の重鎖および配列番号７８の第１の軽鎖、ならびに配列番号１９の第２の重鎖および配列番号２０の第２の軽鎖を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、配列番号９の第１の重鎖および配列番号７８の第１の軽鎖、ならびに配列番号９７の第２の重鎖および配列番号１０２の第２の軽鎖を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、配列番号９の第１の重鎖および配列番号７９の第１の軽鎖、ならびに配列番号１９の第２の重鎖および配列番号２０の第２の軽鎖を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、配列番号９の第１の重鎖および配列番号７９の第１の軽鎖、ならびに配列番号９７の第２の重鎖および配列番号１０２の第２の軽鎖を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、配列番号９の第１の重鎖および配列番号８０の第１の軽鎖、ならびに配列番号１９の第２の重鎖および配列番号２０の第２の軽鎖を含む。別の実施形態では、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９に結合するＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、配列番号９の第１の重鎖および配列番号８０の第１の軽鎖、ならびに配列番号９７の第２の重鎖および配列番号１０２の第２の軽鎖を含む。一実施形態では、抗ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）または抗ｇｐ１２０×ＣＤ８９  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）���重鎖のうちの一方は、以下に記載される１つのアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、もしくは９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるか、または１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、もしくは１０個）のアミノ酸置換を除いて以下に提供されるアミノ酸配列のうちの１つと同一である、アミノ酸配列を含む：
【化２３】
2020529192.tif 000036
【化２４】
2020529192.tif 000037
【０２４５】
一実施形態では、抗ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）または抗ｇｐ１２０×ＣＤ８９  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖のうちの一方は、以下に記載される１つのアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、もしくは９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％同一であるか、または１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、もしくは１０個）のアミノ酸置換を除いて以下に提供される１つのアミノ酸配列と同一である、アミノ酸配列を含む：
【化２５】
2020529192.tif 000038
【化２６】
2020529192.tif 000039
【化２７】
2020529192.tif 000040
【０２４６】
一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の一方の重鎖定常領域は、配列番号６４に示されるアミノ酸配列を含み、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の他方の重鎖定常領域は、配列番号７４に示されるアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の一方の重鎖定常領域は、配列番号６５に示されるアミノ酸配列を含み、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の他方の重鎖定常領域は、配列番号７５に示されるアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の一方の重鎖定常領域は、配列番号６２に示されるアミノ酸配列を含み、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の他方の重鎖定常領域は、配列番号７２に示されるアミノ酸配列を含む。さらに別の実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の一方の重鎖定常領域は、配列番号６３に示されるアミノ酸配列を含み、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の他方の重鎖定常領域は、配列番号７３に示されるアミノ酸配列を含む。
【０２４７】
一実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有し、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの軽鎖は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を有する。別の実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有し、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの軽鎖は、配列番号４０に示されるアミノ酸配列を有する。別の実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有し、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの軽鎖は、配列番号７８に示されるアミノ酸配列を有する。別の実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有し、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの軽鎖は、配列番号７９に示されるアミノ酸配列を有する。さらに別の実施形態では、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有し、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの軽鎖は、配列番号８０に示されるアミノ酸配列を有する。
【０２４８】
一実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームの重鎖は、配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなり、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームの軽鎖は、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。
【０２４９】
一実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ８９  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ８９結合性アームの重鎖は、配列番号９７に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなり、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームの軽鎖は、配列番号１０２に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。
【０２５０】
一実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または９８％同一であるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号１０、４０、７８、７９、または８０に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または９８％同一であるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ３に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームの重鎖が、配列番号１９に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または９８％同一であるアミノ酸配列を含み、ＣＤ３結合性アームの軽鎖が、配列番号２０に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または９８％同一であるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。
【０２５１】
一実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ８９  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または９８％同一であるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号１０、４０、７８、７９、または８０に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または９８％同一であるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ８９に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ８９結合性アームの重鎖が、配列番号９７に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または９８％同一であるアミノ酸配列を含み、ＣＤ８９結合性アームの軽鎖が、配列番号１０２に示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、または９８％同一であるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。
【０２５２】
１つの具体的な実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ３に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームの重鎖が、配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含み、ＣＤ３結合性アームの軽鎖が、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。ある特定の実施形態では、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換が、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖定常領域の一方または両方の任意の成分（例えば、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３）内に行われていてもよい。ある特定の事例では、アミノ酸置換は、変更されていないポリペプチドと比較して、エフェクター機能を変更（例えば、低減）させる、および／または半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
【０２５３】
１つの具体的な実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ８９  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ８９に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ８９結合性アームの重鎖が、配列番号９７に示されるアミノ酸配列を含み、ＣＤ８９結合性アームの軽鎖が、配列番号１０２に示されるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。ある特定の実施形態では、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換が、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖定常領域の一方または両方の任意の成分（例えば、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３）内に行われていてもよい。ある特定の事例では、アミノ酸置換は、変更されていないポリペプチドと比較して、エフェクター機能を変更（例えば、低減）させる、および／または半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
【０２５４】
別の具体的な実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号４０に示されるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ３に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームの重鎖が、配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含み、ＣＤ３結合性アームの軽鎖が、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。ある特定の実施形態では、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換が、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖定常領域の一方または両方の任意の成分（例えば、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３）内に行われていてもよい。ある特定の事例では、アミノ酸置換は、変更されていないポリペプチドと比較して、エフェクター機能を変更（例えば、低減）させる、および／または半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
【０２５５】
別の具体的な実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ８９  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号４０に示されるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ８９に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ８９結合性アームの重鎖が、配列番号９７に示されるアミノ酸配列を含み、ＣＤ８９結合性アームの軽鎖が、配列番号１０２に示されるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。ある特定の実施形態では、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換が、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖定常領域の一方または両方の任意の成分（例えば、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３）内に行われていてもよい。ある特定の事例では、アミノ酸置換は、変更されていないポリペプチドと比較して、エフェクター機能を変更（例えば、低減）させる、および／または半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
【０２５６】
別の具体的な実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号７８に示されるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ３に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームの重鎖が、配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含み、ＣＤ３結合性アームの軽鎖が、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。ある特定の実施形態では、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換が、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖定常領域の一方または両方の任意の成分（例えば、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３）内に行われていてもよい。ある特定の事例では、アミノ酸置換は、変更されていないポリペプチドと比較して、エフェクター機能を変更（例えば、低減）させる、および／または半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
【０２５７】
別の具体的な実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ８９  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号７８に示されるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ８９に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ８９結合性アームの重鎖が、配列番号９７に示されるアミノ酸配列を含み、ＣＤ８９結合性アームの軽鎖が、配列番号１０２に示されるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。ある特定の実施形態では、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換が、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖定常領域の一方または両方の任意の成分（例えば、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３）内に行われていてもよい。ある特定の事例では、アミノ酸置換は、変更されていないポリペプチドと比較して、エフェクター機能を変更（例えば、低減）させる、および／または半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
【０２５８】
別の具体的な実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号７９に示されるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ３に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームの重鎖が、配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含み、ＣＤ３結合性アームの軽鎖が、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。ある特定の実施形態では、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換が、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖定常領域の一方または両方の任意の成分（例えば、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３）内に行われていてもよい。ある特定の事例では、アミノ酸置換は、変更されていないポリペプチドと比較して、エフェクター機能を変更（例えば、低減）させる、および／または半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
【０２５９】
別の具体的な実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ８９  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号７９に示されるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ８９に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ８９結合性アームの重鎖が、配列番号９７に示されるアミノ酸配列を含み、ＣＤ８９結合性アームの軽鎖が、配列番号１０２に示されるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。ある特定の実施形態では、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換が、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖定常領域の一方または両方の任意の成分（例えば、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３）内に行われていてもよい。ある特定の事例では、アミノ酸置換は、変更されていないポリペプチドと比較して、エフェクター機能を変更（例えば、低減）させる、および／または半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
【０２６０】
別の具体的な実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号８０に示されるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ３に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３結合性アームの重鎖が、配列番号１９に示されるアミノ酸配列を含み、ＣＤ３結合性アームの軽鎖が、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。ある特定の実施形態では、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換が、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖定常領域の一方または両方の任意の成分（例えば、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３）内に行われていてもよい。ある特定の事例では、アミノ酸置換は、変更されていないポリペプチドと比較して、エフェクター機能を変更（例えば、低減）させる、および／または半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
【０２６１】
別の具体的な実施形態では、ｇｐ１２０×ＣＤ８９  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、２つのアーム、すなわち、ｇｐ１２０に結合する重鎖および軽鎖を含む、第１のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０結合性アームの重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、ｇｐ１２０結合性アームの軽鎖が、配列番号８０に示されるアミノ酸配列を含む、第１のアームと、ＣＤ８９に結合する重鎖および軽鎖を含む、第２のアームであって、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ８９結合性アームの重鎖が、配列番号９７に示されるアミノ酸配列を含み、ＣＤ８９結合性アームの軽鎖が、配列番号１０２に示されるアミノ酸配列を含む、第２のアームとを含む。ある特定の実施形態では、１〜１０個（すなわち、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個）のアミノ酸置換が、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の重鎖定常領域の一方または両方の任意の成分（例えば、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３）内に行われていてもよい。ある特定の事例では、アミノ酸置換は、変更されていないポリペプチドと比較して、エフェクター機能を変更（例えば、低減）させる、および／または半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの置換は、保存的アミノ酸置換であり得る。
【０２６２】
特定の実施形態では、抗体は、脱フコシル化されている。一部の実施形態では、抗体は、１つまたは複数のタグを含む。ある特定の実施形態では、１つまたは複数のタグは、アビジンタグを含む。
【０２６３】
Ｆｃ改変
ある特定の実施形態では、本開示の抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標））は、ＩｇＧ１ｍ３アミノ酸配列（すなわち、配列番号７７）と比較して、重鎖定常領域（Ｆｃ）中に１つまたは複数のアミノ酸配列改変を含む。ある特定の実施形態では、本開示の抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標））は、ＰＧＴ−１２１．６０抗体と比較して、重鎖定常領域（Ｆｃ）中に１つまたは複数のアミノ酸配列改変を含む。特定の実施形態では、これらの改変は、ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６抗体と比較して、改変された抗体の安定性を増加させるか、または結合親和性を増加させる。特定の実施形態では、これらの改変は、ＰＧＴ−１２１．６０抗体と比較して、改変された抗体の安定性を増加させるか、または結合親和性を増加させる。特定の実施形態では、これらの改変のうちのある特定のものは、抗体の半減期を増加させる。ある特定の実施形態では、これらの改変のうちのある特定のものは、抗体のエフェクター機能を減少させる。他の実施形態では、これらの改変のうちのある特定のものは、抗体エフェクター機能を減少させ、抗体の半減期を増加させる。
【０２６４】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数の改変は、以下のＦｃアミノ酸置換（ＥＵ番号付け）またはそれらの組合せから選択される：Ｌ２３４Ｆ；Ｌ２３５Ｅ；Ｇ２３６Ａ；Ｓ２３９Ｄ；Ｆ２４３Ｌ；Ｄ２６５Ｅ；Ｄ２６５Ａ；Ｓ２６７Ｅ；Ｈ２６８Ｆ；Ｒ２９２Ｐ；Ｎ２９７Ｑ；Ｎ２９７Ａ；Ｓ２９８Ａ；Ｓ３２４Ｔ；Ｉ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ；Ａ３３０Ｌ；Ｌ２３４Ｆ；Ｌ２３５Ｅ；Ｐ３３１Ｓ；Ｆ２４３Ｌ；Ｙ３００Ｌ；Ｖ３０５Ｉ；Ｐ３９６Ｌ；Ｓ２９８Ａ；Ｅ３３３Ａ；Ｋ３３４Ａ；Ｅ３４５Ｒ；Ｌ２３５Ｖ；Ｆ２４３Ｌ；Ｒ２９２Ｐ；Ｙ３００Ｌ；Ｐ３９６Ｌ；Ｍ４２８Ｌ；Ｅ４３０Ｇ；Ｎ４３４Ｓ；Ｇ２３６Ａ、Ｓ２６７Ｅ、Ｈ２６８Ｆ、Ｓ３２４Ｔ、およびＩ３３２Ｅ；Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、およびＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ；Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、およびＰ３３１Ｓ；Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、およびＰ３９６Ｌ；Ｇ２３６Ａ、Ｈ２６８Ｆ、Ｓ３２４Ｔ、およびＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ｈ２６８Ｆ、Ｓ３２４Ｔ、およびＩ３３２Ｅ；Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、およびＫ３３４Ａ；Ｌ２３５Ｖ、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、およびＰ３９６Ｌ；Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ｓ２９８Ａ、およびＩ３３２Ｅ；Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｍ４２８Ｌ、およびＮ４３４Ｓ；Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、Ｍ４２８Ｌ、およびＮ４３４Ｓ；Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、およびＡ３３０Ｌ；Ｍ４２８ＬおよびＮ４３４３Ｓ；Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ；Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０ＬおよびＩ３３２Ｅ；ならびにＧ２３６ＡおよびＩ３３２Ｅ。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の改変は、Ｎ２９７Ａ、Ｄ２６５Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｎ２９７Ｑ、およびＰ３３１Ｓからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の改変は、Ｎ２９７ＡまたはＤ２６５Ａである。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の改変は、Ｌ２３４ＦおよびＬ２３５Ｅである。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の改変は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３４Ｅ、およびＤ２６５Ａである。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の改変は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３４Ｅ、およびＮ２９７Ｑである。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の改変は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、およびＰ３３１Ｓである。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の改変は、Ｄ２６５ＡおよびＮ２９７Ｑである。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の改変は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６５Ａ、Ｎ２９７Ｑ、およびＰ３３１Ｓである。
【０２６５】
Ｆｃ受容体結合を低減させる変異としては、例えば、Ｎ２９７Ａ；Ｎ２９７Ｑ；Ｄ２６５Ａ；Ｌ２３４Ｆ／Ｌ２３５Ｅ；Ｌ２３４Ｆ／Ｌ２３５Ｅ／Ｎ２９７Ｑ；Ｌ２３４Ｆ／Ｌ２３５Ｅ／Ｐ３３１Ｓ；Ｄ２６５Ａ／Ｎ２９７Ｑ；ならびにＬ２３４Ｆ／Ｌ２３５Ｅ／Ｄ２６５Ａ／Ｎ２９７Ｑ／Ｐ３３１Ｓ（全てＥＵ番号付け）が挙げられる。ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ）は、Ｌ２３４ＦおよびＬ２３５Ｅ変異を含む。ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ）は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、およびＤ２６５Ａ変異を含む。ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ）は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、およびＤ２６５Ａ変異を含む。ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ）は、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｑ変異を含む。ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ）は、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｑ変異、ならびにＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、およびＤ２６５Ａ変異を含む。ある特定の実施形態では、１つ、２つ、３つ、４つ、またはそれより多いアミノ酸置換が、抗体のエフェクター機能を変更するために、Ｆｃ領域に導入される。例えば、これらの置換は、アミノ酸残基２３４、２３５、２３６、２３７、２６５、２９７、３１８、３２０、および３２２（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される位置にある。これらの位置は、抗体が、エフェクターリガンド（例えば、Ｆｃ受容体または補体のＣ１成分）に対して変化した（例えば、低減された）親和性を有するが、親抗体の抗原結合能力は維持するように、異なるアミノ酸残基で置き換えられ得る。ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ）は、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、およびＧ２３６Ａ変異（ＥＵ番号付け）を含む。一部の実施形態では、抗体は、Ａ３２７Ｇ、Ａ３３０Ｓ、およびＰ３３１Ｓ変異（ＥＵ番号付け）を含む。一部の実施形態では、抗体は、Ｋ３２２Ａ変異（ＥＵ番号付け）を含む。一部の実施形態では、抗体は、Ｅ３１８Ａ、Ｋ３２０Ａ、およびＫ３２２Ａ（ＥＵ番号付け）変異を含む。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｌ２３５Ｅ（ＥＵ番号付け）変異を含む。
【０２６６】
抗体の半減期を増加させる変異は、当該技術分野において公知である。一実施形態では、本明細書に記載される抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標））の定常領域は、２５２位（ＥＵ番号付け）におけるメチオニンからチロシンへの置換、２５４位（ＥＵ番号付け）におけるセリンからスレオニンへの置換、および２５６位（ＥＵ番号付け）におけるスレオニンからグルタミン酸への置換を含む。例えば、米国特許第７，６５８，９２１号を参照されたい。「ＹＴＥ変異体」と表記されるこの種類の変異体は、同じ抗体の野生型バージョンと比べて、４倍増加した半減期を呈する（Dall'Acqua  t  al.,  J  Biol  Chem,  281:  23514-24  (2006)、Robbie  et  al.,  Antimicrob  Agents  Chemotherap.,  57(12):6147-6153  (2013)）。ある特定の実施形態では、抗体は、２５１〜２５７位、２８５〜２９０位、３０８〜３１４位、３８５〜３８９位、および４２８〜４３６位（ＥＵ番号付け）におけるアミノ酸残基の１つ、２つ、３つ、またはそれより多いアミノ酸置換を含む、ＩｇＧ定常ドメインを含む。他の実施形態では、本明細書に記載される抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標））は、Ｍ４２８ＬおよびＮ４３４３Ｓ置換（ＥＵ番号付け）を含む。他の実施形態では、本明細書に記載される抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標））は、Ｔ２５０ＱおよびＭ４２８Ｌ（ＥＵ番号付け）変異を含む。他の実施形態では、本明細書に記載される抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標））は、Ｈ４３３ＫおよびＮ４３４Ｆ（ＥＵ番号付け）変異を含む。
【０２６７】
特定の実施形態では、抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標））は、２つもしくはそれより多い、３つもしくはそれより多い、４つもしくはそれより多い、５つもしくはそれより多い、６つもしくはそれより多い、６つもしくはそれより少ない、５つもしくはそれより少ない、４つもしくはそれより少ない、３つもしくはより少ない、２つもしくはそれより少ない、または１つの、改変されたＦｃアミノ酸残基を含む。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６４Ａ変異を含み、これらは、集合的に「ＦＥＡ」と称される。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６４Ａ、およびＦ４０５Ｌ変異を含み、これらは、集合的に「ＦＥＡＬ」と称される。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６４Ａ変異、ならびにＦ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、およびＦ４０５Ｙからなる群から選択される変異を含む。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６４Ａ、およびＫ４０９Ｒ変異を含み、これらは、集合的に「ＦＥＡＲ」と称される。ある特定の実施形態では、ＦＥＡＬおよびＦＥＡＲは、本明細書に記載される二重特異性抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標））に含まれる。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｍ４２８ＬおよびＮ４３４Ｓ変異を含み、これらは、集合的にＬＳと称される。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６４Ａ、Ｆ４０５Ｌ、Ｍ４２８Ｌ、およびＮ４３４Ｓ変異を含み、これらは、集合的に「ＦＥＡＬＬＳ」と称される。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６４Ａ、Ｍ４２８Ｌ、およびＮ４３４Ｓ変異を、Ｆ４０５Ｌ、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、およびＦ４０５Ｙからなる群から選択される１つのさらなる変異とともに、含む。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６４Ａ、Ｋ４０９Ｒ、Ｍ４２８Ｌ、およびＮ４３４Ｓ変異を含み、これらは、集合的に「ＦＥＡＲＬＳ」と称される。ある特定の実施形態では、ＦＥＡＬＬＳおよびＦＥＡＲＬＳは、本明細書に記載される二重特異性抗体（例えば、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標））に含まれる。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ａ３３０Ｌ（「ＤＥＡＬ」）を含む。ある特定の実施形態では、抗体は、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ａ３３０Ｌ、Ｍ４２８Ｌ、およびＮ４３４Ｓ変異（「ＤＥＡＬＬＳ」）を含む。ＦＥＡ変異は、エフェクター機能を減少または抑止するが、一方で、ＤＥＡＬ変異は、活性化ＦｃγＲへのＦｃの結合を増強させることによって、エフェクター機能を増加または増強させる。ＬＳ変異は、抗体の薬物動態学的半減期を増加させる。
【０２６８】
エフェクター機能を低減または抑止することにより、ＣＤ３×ｇｐ１２０多重特異性／二重特異性抗体は、（ｉ）ＨＩＶに感染していないものも含め、二重特異性分子が結合したＴ細胞が、自然エフェクター細胞、例えば、ＮＫ細胞、マクロファージによって殺滅されないことを確実にし、（ｉｉ）自然エフェクター細胞上のＦｃγＲに結合しないことまたはそれに対して低減された結合を有することにより、Ｔ細胞が、標的細胞の非存在下において活性化されないことも確実にする。標的細胞の非存在下におけるＴ細胞の活性化は、サイトカイン応答をもたらすことになり、これは許容されないであろう。自然エフェクター細胞上のＦｃγＲへの二重特異性分子の結合により、Ｔ細胞上のＣＤ３分子のクラスタリングが引き起こされ、抗原に依存しないＴ細胞活性化がもたらされる。
【０２６９】
コンジュゲート抗体
本明細書において開示されている抗体のいずれも、高分子物質、例えば、ポリマー（例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ＰＥＧ修飾ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）（ＰＥＩ−ＰＥＧ）、ポリグルタミン酸（ＰＧＡ）（Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）コポリマー）、ヒアルロン酸、放射性材料（例えば、９０Ｙ、１３１Ｉ、１２５Ｉ、３５Ｓ、３Ｈ、１２１Ｉｎ、９９Ｔｃ）、蛍光物質（例えば、フルオレセインおよびローダミン）、発光物質（例えば、ルミノール）、ハプテン、酵素（例えば、グルコースオキシダーゼ）、金属キレート、ビオチン、アビジン、ならびに薬物を含む、様々な分子に結合した、コンジュゲート抗体であってもよい。
【０２７０】
上記のコンジュゲート抗体は、本明細書に記載される抗体またはその低分子量形態に、化学的改変を行うことによって調製することができる。抗体を改変するための方法は、当該技術分野において周知である（例えば、米国特許第５，０５７，３１３号および同第５，１５６，８４０号）。
【０２７１】
核酸
本開示はまた、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３抗原に結合するか、またはｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９抗原に結合する、本明細書に記載される多重特異性抗体をコードするヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチド、そのようなポリヌクレオチドを含むベクター、ならびにそのようなポリヌクレオチドまたは発現ベクターを含む宿主細胞（例えば、哺乳動物細胞、酵母、Ｅ．ｃｏｌｉ）も特徴とする。本明細書において提供される抗体のうちのいずれかをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド、ならびにそのようなポリヌクレオチド配列を含むベクター、例えば、宿主細胞、例えば、哺乳動物細胞における効率的な発現のための発現ベクターが、本明細書において提供される。
【０２７２】
一態様では、本開示は、ｇｐ１２０に結合する抗体（例えば、例示的な抗ｇｐ１２０抗体２、例示的な抗ｇｐ１２０抗体３、例示的な抗ｇｐ１２０抗体４、例示的な抗ｇｐ１２０抗体５）のＶＨ、ＶＬ、またはＶＨおよびＶＬをコードするヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチドを提供する。
【０２７３】
別の態様では、本開示は、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３ポリペプチドに結合し、本明細書に記載されるアミノ酸配列を含む、抗体をコードするヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチドを提供する。
【０２７４】
別の態様では、本開示は、ｇｐ１２０およびヒトＣＤ８９ポリペプチドに結合し、本明細書に記載されるアミノ酸配列を含む、抗体をコードするヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチドを提供する。
【０２７５】
別の態様では、本開示は、本発明による抗体またはその抗原結合性断片をコードするポリヌクレオチドまたは核酸分子を提供する。一部の実施形態では、核酸分子は、本出願の抗体軽鎖（もしくはその断片）または抗体軽鎖（もしくはその断片）、またはその両方をコードする。他の実施形態では、核酸は、ＤＮＡ、ｃＤＮＡ、またはｍＲＮＡである。一部の他の実施形態では、核酸分子は、宿主細胞における発現を増強するために、コドン最適化されている。
【０２７６】
別の態様では、本明細書に記載される抗体のＣＤＲ、軽鎖、または重鎖をコードするヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチドが、本明細書において提供される。ポリヌクレオチドは、本明細書に記載される抗体のＶＬ  ＣＤＲを含む軽鎖または軽鎖可変ドメインをコードする、ヌクレオチド配列を含み得る（例えば、上の表を参照されたい）。ポリヌクレオチドは、本明細書に記載される抗体のＶＨ  ＣＤＲを含む重鎖または重鎖可変ドメインをコードする、ヌクレオチド配列を含み得る（例えば、上の表を参照されたい）。一実施形態では、本明細書に記載されるポリヌクレオチドは、それぞれ、配列番号４、５、および６に、またはそれぞれ配列番号１４、１５、および１６に示されるアミノ酸配列を含む、ＶＬ−ＣＤＲを有する可変軽鎖または軽鎖をコードする。別の実施形態では、本明細書に記載されるポリヌクレオチドは、それぞれ、配列番号１、２、および３に、またはそれぞれ配列番号１１、１２、および１３に示されるアミノ酸配列を含む、ＶＨ−ＣＤＲを有する可変重鎖または重鎖をコードする。一実施形態では、本明細書に記載されるポリヌクレオチドは、配列番号８、１８、または１０１に示されるアミノ酸配列を含む、ＶＬドメインをコードする。別の実施形態では、本明細書に記載されるポリヌクレオチドは、配列番号７、１７、または９６に示されるアミノ酸配列を含む、ＶＨドメインをコードする。さらに別の実施形態では、本明細書に記載されるポリヌクレオチドは、配列番号１０、２０、または１０２に示されるアミノ酸配列を含む、軽鎖をコードする。別の実施形態では、本明細書に記載されるポリヌクレオチドは、配列番号９、１９、または９７に示されるアミノ酸配列を含む、重鎖をコードする。
【０２７７】
また、例えば、コドン最適化、異種シグナル配列での置き換え、およびｍＲＮＡ不安定性エレメントの排除によって最適化された抗ｇｐ１２０および抗ＣＤ３（または抗ＣＤ８９）抗体をコードする、ポリヌクレオチドもまた、本開示によって包含される。最適化された核酸を生成するための方法は、例えば、米国特許第５，９６５，７２６号、同第６，１７４，６６６号、同第６，２９１，６６４号、同第６，４１４，１３２号、および同第６，７９４，４９８号に記載されている方法を適応することによって、実行することができる。
【０２７８】
ベクターおよび宿主細胞
本開示はまた、本明細書において開示されている核酸（複数可）を含むベクターも包含する。ベクターは、任意の型のもの、例えば、組換えベクター、例えば発現ベクターであり得る。ベクターには、プラスミド、コスミド、細菌人工染色体（ＢＡＣ）および酵母人工染色体（ＹＡＣ）、ならびにバクテリオファージまたは植物もしくは動物（ヒトを含む）ウイルスに由来するベクターが含まれるがこれらに限定されない。ベクターは、提案された宿主細胞によって認識される複製起点を含み得、発現ベクターの場合、宿主細胞によって認識されるプロモーターおよび他の調節領域を含み得る。特定の実施形態では、ベクターは、プロモーターおよび必要に応じてさらなる調節エレメントに作動可能に連結された、本開示の抗体をコードするポリヌクレオチドを含む。ある特定のベクターは、それらが導入される宿主における自律的複製が可能である（例えば、細菌複製起点を有するベクターは、細菌中で複製できる）。他のベクターは、宿主中への導入の際に宿主のゲノム中に組み込まれ得、それによって、宿主ゲノムと一緒に複製される。ベクターとしては、本明細書において開示されている抗体の組換え産生に好適なものが挙げられるが、これに限定されない。
【０２７９】
ベクターの選択は、続く組換え手順および使用される宿主に依存する。宿主細胞中へのベクターの導入は、とりわけ、リン酸カルシウムトランスフェクション、ウイルス感染、ＤＥＡＥ−デキストラン媒介性トランスフェクション、リポフェクタミントランスフェクション、またはエレクトロポレーションによってもたらされ得る。ベクターは、自律的に複製し得る、またはそれらが組み込まれた染色体と一緒に複製し得る。ある特定の実施形態では、ベクターは、１つまたは複数の選択マーカーを含有する。マーカーの選択は、最適な宿主細胞に依存し得る。これらには、カナマイシン、ネオマイシン、ピューロマイシン、ハイグロマイシン、ｚｅｏｃｉｎ、単純ヘルペスウイルス由来のチミジンキナーゼ遺伝子（ＨＳＶ−ＴＫ）、およびマウス由来のジヒドロ葉酸レダクターゼ遺伝子（ｄｈｆｒ）が含まれるがこれらに限定されない。抗体を単離するために使用され得るタンパク質またはペプチドをコードする１つまたは複数の核酸分子に作動可能に連結された、本明細書に記載される抗体をコードする１つまたは複数の核酸分子を含むベクターもまた、本開示によって包含される。これらのタンパク質またはペプチドには、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、マルトース結合タンパク質、金属結合性ポリヒスチジン、緑色蛍光タンパク質、ルシフェラーゼおよびベータ−ガラクトシダーゼが含まれるがこれらに限定されない。
【０２８０】
特定の実施形態では、使用されるベクターは、ｐｃＤＮＡ（商標）３．１＋（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、ＭＡ）である。
【０２８１】
本開示はまた、本明細書に記載される核酸またはベクターを含む宿主細胞も提供する。種々の宿主細胞のいずれかが使用され得る。一実施形態では、宿主細胞は、原核生物細胞、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉである。別の実施形態では、宿主細胞は、真核生物細胞、例えば、哺乳動物細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＣＯＳ細胞、ＢＨＫ細胞、ＮＳＯ細胞またはＢｏｗｅｓ黒色腫細胞である。ヒト宿主細胞の例は、とりわけ、ＨｅＬａ、９１１、ＡＴ１０８０、Ａ５４９、２９３およびＨＥＫ２９３Ｔ細胞である。
【０２８２】
用語「核酸分子」とは、ヌクレオチドのポリマー形態を指し、これには、ＲＮＡのセンス鎖およびアンチセンス鎖の両方、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、ならびに上記の合成形態および混合ポリマーが含まれる。本明細書で使用する場合、核酸分子という用語は、ポリヌクレオチドという用語と相互交換可能であり得る。一部の実施形態では、ヌクレオチドとは、リボヌクレオチド、デオキシヌクレオチドまたはいずれかの型のヌクレオチドの改変形態、およびそれらの組み合わせを指す。用語には、ＤＮＡの一本鎖形態および二本鎖形態もまた含まれるがこれらに限定されない。さらに、ポリヌクレオチド、例えば、ｃＤＮＡまたはｍＲＮＡは、天然に存在するおよび／または天然に存在しないヌクレオチド連結によって一緒に連結された、天然に存在するヌクレオチドおよび改変型ヌクレオチドのいずれかまたは両方を含み得る。核酸分子は、当業者によって容易に理解されるように、化学的もしくは生化学的に改変され得、または非天然のもしくは誘導体化されたヌクレオチド塩基を含有し得る。かかる改変には、例えば、標識、メチル化、アナログによる１つまたは複数の天然に存在するヌクレオチドの置換、ヌクレオチド間改変、例えば、無荷電連結（例えば、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホルアミデート、カルバメートなど）、荷電連結（例えば、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエートなど）、ペンダント部分（例えば、ポリペプチド）、インターカレーター（例えば、アクリジン、ソラレンなど）、キレーター、アルキル化剤、および改変型連結（例えば、アルファアノマー核酸など）が含まれる。上記用語は、一本鎖、二本鎖、部分的二重鎖、三重鎖、ヘアピン、環状および南京錠（ｐａｄｌｏｃｋｅｄ）コンフォメーションを含む、任意のトポロジカルコンフォメーションを含むこともまた意図する。核酸配列に対する言及は、特記しない限り、その相補体を包含する。従って、特定の配列を有する核酸分子に対する言及は、その相補的配列を有するその相補鎖を包含すると理解すべきである。用語は、コドン最適化された核酸もまた含む。
【０２８３】
用語「作動可能に連結した」とは、通常は物理的に連結された、互いに機能的な関係にある２つまたはそれよりも多くの核酸配列エレメントを指す。例えば、プロモーターが、コード配列の転写または発現を開始または調節できる場合、プロモーターは、コード配列に作動可能に連結しており、この場合、コード配列は、プロモーター「の制御下」にある
と理解すべきである。
【０２８４】
「置換」とは、本明細書で使用する場合、それぞれ、異なるアミノ酸またはヌクレオチドによる１つまたは複数のアミノ酸またはヌクレオチドの置き換えを示す。
【０２８５】
「単離された」核酸とは、その天然の環境の構成要素から分離された核酸分子を指す。単離された核酸には、その核酸分子を元々含有する細胞中に含有される核酸分子が含まれるが、核酸分子は、染色体外に、またはその天然の染色体位置とは異なる染色体位置に存在する。「抗体またはその断片をコードする単離された核酸」とは、単一のベクターまたは別々のベクター中のかかる核酸分子（複数可）、および宿主細胞中の１つまたは複数の位置に存在するかかる核酸分子（複数可）を含む、抗体の重鎖および軽鎖（またはそれらの断片）をコードする１つまたは複数の核酸分子を指す。
【０２８６】
用語「ベクター」とは、本明細書で使用する場合、それが連結された別の核酸を伝播させることが可能な核酸分子を指す。この用語には、自己複製性核酸構造としてのベクター、ならびにそれが導入された宿主細胞のゲノム中に取り込まれたベクターが含まれる。一部のベクターは、本出願の核酸分子またはポリヌクレオチドの送達に好適である。ある特定のベクターは、それらが動作可能に連結した核酸の発現を指示することが可能である。かかるベクターは、本明細書で「発現ベクター」と呼ばれる。
【０２８７】
用語「宿主細胞」、「宿主細胞株」および「宿主細胞培養物」は、相互交換可能に使用され、かかる細胞の子孫を含む、外因性核酸が導入された細胞を指す。宿主細胞には、形質転換された初代細胞および継代の数にかかわらずそれらに由来する子孫を含む、「形質転換体」および「形質転換された細胞」が含まれる。子孫は、核酸含量が親細胞と完全に同一でなくてもよいが、変異を含有し得る。元々形質転換された細胞においてスクリーニングまたは選択されたのと同じ機能または生物学的活性を有する変異体子孫が、本明細書に含まれる。
【０２８８】
ポリヌクレオチド「バリアント」は、この用語が本明細書で使用される場合、１つまたは複数の置換、欠失、付加および／または挿入において、本明細書に具体的に開示されるポリヌクレオチドとは典型的には異なる、ポリヌクレオチドである。かかるバリアントは、天然に存在していてもよく、あるいは例えば、本発明のポリヌクレオチド配列のうち１つもしくは複数を改変し、本明細書に記載されるコードされるポリペプチドの１つもしくは複数の生物学的活性を評価すること、および／または当該分野で周知のいくつかの技術のいずれかを使用することによって、合成により生成され得る。
【０２８９】
ポリペプチド「バリアント」は、この用語が本明細書で使用される場合、１つまたは複数の置換、欠失、付加および／または挿入において、本明細書に具体的に開示されるポリペプチドとは典型的には異なる、ポリペプチドである。かかるバリアントは、天然に存在していてもよく、あるいは例えば、上記本発明のポリペプチド配列のうち１つもしくは複数を改変し、本明細書に記載されるポリペプチドの１つもしくは複数の生物学的活性を評価すること、および／または当該分野で周知のいくつかの技術のいずれかを使用することによって、合成により生成され得る。一実施形態では、抗体またはその抗原結合性断片は、バリアント１、バリアント２、バリアント３、および／またはバリアント４を含む。一部の実施形態では、抗体またはその抗原結合性断片は、バリアント１を含む。一部の実施形態では、抗体またはその抗原結合性断片は、バリアント２を含む。一部の実施形態では、抗体またはその抗原結合性断片は、バリアント３を含む。一部の実施形態では、抗体またはその抗原結合性断片は、バリアント４を含む。
【０２９０】
用語「バリアント」とは、任意の天然に存在する、または１つもしくは複数のヌクレオチドもしくはアミノ酸変異を含む操作された分子もまた指し得る。一実施形態では、分子は抗体である。例えば、体細胞バリアントは、同じＢ細胞系統の一部であるまたはそれに由来する全ての関連する天然に存在する抗体を包含し得る。操作されたバリアントは、抗体に対してなされた、全ての単一の変異またはコンビナトリアル変異を包含し得る。
【０２９１】
抗体を産生する方法
ｇｐ１２０に結合する単一特異性抗体、ならびにｇｐ１２０およびヒトＣＤ３（例えば、ヒトＣＤ３εもしくはヒトＣＤ３δ）に結合する二重特異性抗体は、抗体の合成のための当該技術分野において公知の任意の方法によって、例えば、化学合成または組換え発現技法によって、産生することができる。
【０２９２】
単一特異性抗体を作製する方法は、当該技術分野において非常に周知されている。二重特異性抗体を作製する方法は、例えば、米国特許第５，７３１，１６８号、同第５，８０７，７０６号、同第５，８２１，３３３号、ならびに米国出願公開第２００３／０２０７３４号および同第２００２／０１５５５３７号に記載されている。二重特異性四価抗体およびそれを作製する方法は、例えば、国際公開ＷＯ０２／０９６９４８号および同ＷＯ００／４４７８８号に記載されており、それらのいずれの開示も、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。加えて、二重特異性抗体を作製することに関する他の刊行物としては、国際公開ＷＯ９１／００３６０号、同ＷＯ９２／０８８０２号、同ＷＯ９２／０５７９３号、および同ＷＯ９３／１７７１５号、Tutt  et  al.,  J.  Immunol.  147:60-69  (1991)、米国特許第４，４７４，８９３号、同第４，７１４，６８１号、同第４，９２５，６４８号、同第５，５７３，９２０号、同第５，６０１，８１９号、および同第９，２１２，２３０号、ならびにKostelny  et  al.,  J.  Immunol.  148:1547-1553  (1992)が挙げられる。
【０２９３】
一実施形態では、本開示の二重特異性抗体は、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）である。Ｄｕｏｂｏｄｙは、例えば、国際公開ＷＯ２００８／１１９３５３号、同ＷＯ２０１１／１３１７４６号、同ＷＯ２０１１／１４７９８６号、および同ＷＯ２０１３／０６０８６７号、Labrijn  AF  et  al.,  PNAS,  110(13):  5145-5150  (2013)、Gramer  et  al.,  mAbs,  5(6):  962-973  (2013)、ならびにLabrijn  et  al.,  Nature  Protocols,  9(10):  2450-2463  (2014)に記載されているＤｕｏＢｏｄｙ（登録商標）技術プラットフォーム（Ｇｅｎｍａｂ  Ａ／Ｓ）によって作製することができる。この技術を使用して、２つの重鎖および２つの軽鎖を含む第１の単一特異性抗体の半分を、２つの重鎖および２つの軽鎖を含む第２の単一特異性抗体の半分と組み合わせることができる。結果として得られるヘテロ二量体は、第１の抗体に由来する１つの重鎖および１つの軽鎖が、第２の抗体に由来する１つの重鎖および１つの軽鎖と対合したものを含む。両方の単一特異性抗体が、異なる抗原上の異なるエピトープを認識する場合、結果として得られるヘテロ二量体は、二重特異性抗体である。
【０２９４】
ＤｕｏＢｏｄｙ（登録商標）プラットフォームについては、単一特異性抗体のそれぞれが、ＣＨ３ドメインに単一の点変異を有する重鎖定常領域を含む。これらの点変異は、得られた二重特異性抗体のＣＨ３ドメイン間において、変異を有さない単一特異性抗体のうちのいずれかにおけるＣＨ３ドメイン間のものよりも強力な相互作用を可能にする。それぞれの単一特異性抗体における単一の点変異は、重鎖定常領域のＣＨ３ドメイン内の残基３６６、３６８、３７０、３９９、４０５、４０７、または４０９（ＥＵ番号付け）におけるものであり得る（国際公開ＷＯ２０１１／１３１７４６号を参照されたい）。さらに、単一の点変異は、一方の単一特異性抗体において、他方の単一特異性抗体と比べて、異なる残基に位置する。例えば、一方の単一特異性抗体は、変異Ｆ４０５Ｌ（ＥＵ番号付け、残基４０５におけるフェニルアラニンからロイシンへの変異）、またはＦ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、およびＦ４０５Ｙ変異のうちの１つを含み得るが、他方の単一特異性抗体は、変異Ｋ４０９Ｒ（ＥＵ番号付け、残基４０９におけるリシンからアルギニンへの変異）を含み得る。単一特異性抗体の重鎖定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプ（例えば、ヒトＩｇＧ１アイソタイプ）であり得、ＤｕｏＢｏｄｙ（登録商標）技術によって産生される二重特異性抗体は、Ｆｃに媒介されるエフェクター機能を変更する（例えば、低減させる）、および／または半減期を改善するように、改変され得る。Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）を作製する１つの方法は、以下を含む：（ｉ）ＣＨ３ドメインに単一のマッチする点変異（すなわち、Ｋ４０９ＲならびにＦ４０５Ｌ（またはＦ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｄ、Ｆ４０５Ｅ、Ｆ４０５Ｈ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｋ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｎ、Ｆ４０５Ｑ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｖ、Ｆ４０５Ｗ、およびＦ４０５Ｙ変異のうちの１つ）（ＥＵ番号付け））を含む２つの親ＩｇＧ１の別個の発現、（ｉｉ）半分子の組換えを可能にするように、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで許容される酸化還元条件下において親ＩｇＧ１を混合すること、（ｉｉｉ）鎖間ジスルフィド結合の再酸化を可能にするための還元体の除去、ならびに（ｉｖ）クロマトグラフィーに基づく方法または質量分析（ＭＳ）に基づく方法を使用して、交換効率および最終産物を分析すること（Labrijn  et  al.,  Nature  Protocols,  9(10):  2450-2463  (2014)を参照されたい）。
【０２９５】
二重特異性抗体を作製する別の例示的な方法は、ノブ・イン・ホール技術によるものである（Ridgway  et  al.,  Protein  Eng.,  9:617-621  (1996)、国際公開ＷＯ２００６／０２８９３６号）。二重特異性抗体を作製する際の重大な欠点であるＩｇ重鎖の誤対合の問題は、この技術では、ＩｇＧ内のＣＨ３ドメインの界面を形成している選択されたアミノ酸を変異させることによって、低減される。２つの重鎖が直接的に相互作用するＣＨ３ドメイン内の位置において、小さな側鎖を有するアミノ酸（ホール）が一方の重鎖の配列内に導入され、大きな側鎖を有するアミノ酸（ノブ）が、他方の重鎖の対応する相互作用残基位置に導入される。一部の事例では、本開示の抗体は、二重特異性抗体を優先的に形成するように、ＣＨ３ドメインが、２つのポリペプチド間の界面において相互作用する選択されたアミノ酸を変異させることによって改変されている、免疫グロブリン鎖を有する。二重特異性抗体は、同じサブクラスまたは異なるサブクラスの免疫グロブリン鎖から構成され得る。１つの事例では、ｇｐ１２０およびＣＤ３に結合する二重特異性抗体は、「ノブ鎖」におけるＴ３６６Ｗ（ＥＵ番号付け）変異、ならびに「ホール鎖」におけるＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ（ＥＵ番号付け）変異を含む。ある特定の実施形態では、例えば、Ｙ３４９Ｃ変異を「ノブ鎖」に導入し、Ｅ３５６Ｃ変異またはＳ３５４Ｃ変異を「ホール鎖」に導入することによって、追加の鎖間ジスルフィド架橋が、ＣＨ３ドメイン間に導入される。ある特定の実施形態では、Ｒ４０９Ｄ、Ｋ３７０Ｅ変異が、「ノブ鎖」に導入され、Ｄ３９９Ｋ、Ｅ３５７Ｋ変異が、「ホール鎖」に導入される。他の実施形態では、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗ変異が、鎖のうちの一方に導入され、Ｅ３５６Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ変異が、対応する鎖に導入される。一部の実施形態では、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗ変異が、一方の鎖に導入され、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ変異が、対応する鎖に導入される。一部の実施形態では、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗ変異が、一方の鎖に導入され、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ変異が、対応する鎖に導入される。さらに他の実施形態では、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗ変異が、一方の鎖に導入され、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ変異が、対応する鎖に導入される（全てＥＵ番号付け）。
【０２９６】
二重特異性抗体を作製する別の例示的な方法は、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ（登録商標））プラットフォームを使用することによるものである。ＢｉＴＥは、可動性ペプチドリンカー（例えば、ＧＧＧＧＳ（配列番号７６））を介して、第１のｓｃＦｖ（例えば、ｇｐ１２０に結合するｓｃＦｖ）を、第２のｓｃＦｖ（例えば、ヒトＣＤ３に結合するｓｃＦｖ）に、遺伝子融合することによって、作製される。例えば、Staerz  et  al.,  Nature,  314:628-631  (1985)、Mack  et  al.,  PNAS,  92:7021-7025  (1995)、Huehls  et  al.,  Immunol.  Cell  Biol.,  93:290-296  (2015)を参照されたい。
【０２９７】
二重特異性抗体を作製する別の例示的な方法は、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）プラットフォームを使用することによるものである。この技術は、Ｈｏｌｌｉｇｅｒら（PNAS,  90:6444-6448  (1993)）のダイアボディ形式に基づくものであり、ＶＨ鎖およびＶＬ鎖の安定性および最適な対合がさらに改善される（Johnson  et  al.,  J  Mol.  Biol.,  399:436-449  (2010)、Sung  et  al.,  J  Clin  Invest.,  125(11):  4077-4090  (2015)）。
【０２９８】
二重特異性抗体を作製するさらに別の例示的な方法は、三官能性ハイブリッド抗体プラットフォーム、Ｔｒｉｏｍａｂ（登録商標）を使用することによるものである。このプラットフォームは、異なるアイソタイプ、マウスＩｇＧ２ａおよびラットＩｇＧ２ｂの２つの全長抗体の半分から構成される、キメラ構築を用いる。この技術は、種によって優先される重鎖／軽鎖対合関係に依拠するものである。Lindhofer  et  al.,  J  Immunol.,  155:219-225  (1995)を参照されたい。
【０２９９】
二重特異性抗体を作製するさらなる例示的な方法は、ＴａｎｄＡｂ（登録商標）プラットフォームを使用することによるものである。この技術は、ダイアボディの概念に基づくが、鎖内対合を防止するための短いリンカーを含む単一のポリペプチド鎖ＶＨ１−ＶＬ２−ＶＨ２−ＶＬ１として設計される。この一本鎖のヘッドトゥーテールの二量体化により、四価のホモ二量体の形成がもたらされる（Kipriyanov  et  al.,  J  Mol.  Biol.,  293:41-56  (1999)）。
【０３００】
二重特異性抗体を作製するためのさらに別の方法は、ＣｒｏｓｓＭａｂ技術である。ＣｒｏｓｓＭａｂは、２つの全長抗体の半分によって構築されるキメラ抗体である。正しい鎖対合のために、これは、２つの技術を組み合わせている：（ｉ）２つの重鎖間の正しい対合を優先的に行うノブ・イン・ホール、および（ｉｉ）２つのＦａｂのうちの一方の重鎖と軽鎖との間での交換により、軽鎖の誤対合を回避する非対称性を導入すること。Ridgway  et  al.,  Protein  Eng.,  9:617-621  (1996)、Schaefer  et  al.,  PNAS,  108:11187-11192  (2011)を参照されたい。ＣｒｏｓｓＭａｂは、２つもしくはそれより多い標的を標的とするため、または１つの標的に対する二価性、例えば、２：１形式を導入するために、２つまたはそれより多い抗原結合性ドメインを組み合わせることができる。
【０３０１】
本開示の多重特異性抗体は、細菌細胞または真核生物細胞において産生することができる。抗体はまた、形質転換された細胞株（例えば、ＣＨＯ、２９３Ｅ、２９３Ｔ、ＣＯＳ、ＮＩＨ３Ｔ３）などの真核生物細胞において産生することもできる。加えて、抗体（例えば、ｓｃＦｖ）は、酵母細胞、例えば、Ｐｉｃｈｉａ（例えば、Powers  et  al.,  J  Immunol  Methods.  251:123-35  (2001)を参照されたい）、Ｈａｎｓｅｕｌａ、またはＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓにおいて発現させることができる。一実施形態では、本明細書に記載される二重特異性抗体は、ＣＨＯ細胞株において産生される。目的の抗体を産生するために、抗体をコードするポリヌクレオチドを構築し、それを発現ベクターに導入した後、好適な宿主細胞において発現させる。標準的な分子生物学技法を使用して、組換え発現ベクターを調製し、宿主細胞にトランスフェクトし、形質転換体を選択し、宿主細胞を培養し、抗体を回収する。
【０３０２】
抗体を、細菌細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）において発現させようとする場合、発現ベクターは、細菌細胞におけるベクターの増幅を許容する特徴を有さなければならない。加えて、Ｅ．ｃｏｌｉ、例えば、ＪＭ１０９、ＤＨ５α、ＨＢ１０１、またはＸＬ１−Ｂｌｕｅを宿主として使用する場合、ベクターは、Ｅ．ｃｏｌｉにおける効率的な発現を可能にすることができる、プロモーター、例えば、ｌａｃＺプロモーター（Ward  et  al.,  341:544-546  (1989)、ａｒａＢプロモーター（Better  et  al.,  Science,  240:1041-1043  (1988)）、またはＴ７プロモーターを有さなければならない。そのようなベクターの例としては、例えば、Ｍ１３系統のベクター、ｐＵＣ系統のベクター、ｐＢＲ３２２、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ、ｐＣＲ−Ｓｃｒｉｐｔ、ｐＧＥＸ−５Ｘ−１（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、「ＱＩＡｅｘｐｒｅｓｓ  ｓｙｓｔｅｍ」（ＱＩＡＧＥＮ）、ｐＥＧＦＰ、およびｐＥＴ（この発現ベクターが使用される場合、宿主は、Ｔ７  ＲＮＡポリメラーゼを発現するＢＬ２１であることが好ましい）が挙げられる。発現ベクターは、抗体分泌のためのシグナル配列を含み得る。Ｅ．ｃｏｌｉの周辺質への産生については、ｐｅｌＢシグナル配列（Lei  et  al.,  J.  Bacteriol.,  169:4379  (1987)）を、抗体分泌のためのシグナル配列として使用してもよい。細菌発現については、塩化カルシウム法またはエレクトロポレーション法を使用して、発現ベクターを細菌細胞へ導入することができる。
【０３０３】
抗体を、動物細胞、例えば、ＣＨＯ、ＣＯＳ、およびＮＩＨ３Ｔ３細胞において発現させようとする場合、発現ベクターには、これらの細胞における発現に必要とされるプロモーター、例えば、ＳＶ４０プロモーター（Mulligan  et  al.,  Nature,  277:108  (1979)）、ＭＭＬＶ−ＬＴＲプロモーター、ＥＦ１αプロモーター（Mizushima  et  al.,  Nucleic  Acids  Res.,  18:5322  (1990)）、またはＣＭＶプロモーターが含まれる。免疫グロブリンまたはそのドメインをコードする核酸配列に加えて、組換え発現ベクターは、追加の配列、例えば、宿主細胞におけるベクターの複製を調節する配列（例えば、複製起点）および選択可能なマーカー遺伝子を保持し得る。選択可能なマーカー遺伝子は、ベクターが導入されている宿主細胞の選択を容易にする（例えば、米国特許第４，３９９，２１６号、同第４，６３４，６６５号、および同第５，１７９，０１７号を参照されたい）。例えば、典型的には、選択可能なマーカー遺伝子は、ベクターが導入されている宿主細胞に、薬物、例えば、Ｇ４１８、ハイグロマイシン、またはメトトレキサートに対する耐性を付与する。選択可能なマーカーを有するベクターの例としては、ｐＭＡＭ、ｐＤＲ２、ｐＢＫ−ＲＳＶ、ｐＢＫ−ＣＭＶ、ｐＯＰＲＳＶ、およびｐＯＰ１３が挙げられる。
【０３０４】
一実施形態では、抗体は、哺乳動物細胞において産生される。抗体を発現させるための例示的な哺乳動物宿主細胞としては、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）（例えば、Kaufman  and  Sharp  (1982)  Mol.  Biol.  159:601-621に記載されているように、ＤＨＦＲ選択可能マーカーとともに使用される、Urlaub  and  Chasin  (1980)  Proc.  Natl.  Acad.  Sci.  USA  77:4216-4220に記載されているｄｈｆｒ−  ＣＨＯ細胞を含む）、ヒト胎児性腎臓２９３細胞（例えば、２９３、２９３Ｅ、２９３Ｔ）、ＣＯＳ細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、リンパ球細胞株、例えば、ＮＳ０骨髄腫細胞およびＳＰ２細胞、ならびにトランスジェニック動物、例えば、トランスジェニック哺乳動物に由来する細胞が挙げられる。例えば、細胞は、乳腺上皮細胞である。
【０３０５】
抗体発現のための例示的な系において、本開示の二重特異性抗体の抗体重鎖および抗体軽鎖をコードする組換え発現ベクターは、リン酸カルシウムに媒介されるトランスフェクションによって、ｄｈｆｒ−  ＣＨＯ細胞に導入される。具体的な実施形態では、ｄｈｆｒ−  ＣＨＯ細胞は、ＤＧ４４細胞株、例えば、ＤＧ４４ｉの細胞である（例えば、Derouaz  et  al.,  Biochem  Biophys  Res  Commun.,  340(4):1069-77  (2006)を参照されたい）。組換え発現ベクター内で、抗体重鎖および軽鎖の遺伝子は、それぞれ、高レベルの遺伝子転写を作動させるために、エンハンサー／プロモーター調節エレメント（例えば、ＳＶ４０、ＣＭＶ、アデノウイルスなどに由来する、ＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメント、またはＳＶ４０エンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメントなど）に、動作可能なように連結されている。組換え発現ベクターはまた、ＤＨＦＲ遺伝子も保持し、これにより、メトトレキサート選択／増幅を使用して、ベクターがトランスフェクトされているＣＨＯ細胞の選択が可能となる。選択された形質転換体宿主細胞を培養して、抗体重鎖および軽鎖の発現を可能にし、抗体が、培養培地から回収される。
【０３０６】
多重特異性抗体はまた、トランスジェニック動物によって産生することもできる。例えば、米国特許第５，８４９，９９２号は、トランスジェニック哺乳動物の乳腺において抗体を発現させる方法について記載している。ミルク特異的プロモーターおよび目的の抗体をコードする核酸および分泌のためのシグナル配列を含む、導入遺伝子を、構築する。そのようなトランスジェニック哺乳動物の雌によって産生されるミルクには、分泌された目的の抗体が含まれている。抗体は、ミルクから精製することができるか、または一部の適用では、直接的に使用することができる。本明細書に記載される核酸のうちの１つまたは複数を含む動物もまた、提供される。
【０３０７】
本開示の多重特異性抗体は、宿主細胞内または宿主細胞外（例えば、培地）から単離し、実質的に純粋で均質な抗体として精製することができる。抗体の精製に一般的に使用される単離および精製のための方法を、抗体の単離および精製に使用することができるが、任意の特定の方法に限定されない。抗体は、例えば、カラムクロマトグラフィー、濾過、限外濾過、塩析、溶媒沈降、溶媒抽出、蒸留、免疫沈降、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動、等電点電気泳動法、透析、および再結晶化を適切に選択し、組み合わせることによって、単離および精製することができる。クロマトグラフィーには、例えば、親和性クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性クロマトグラフィー、ゲル濾過、逆相クロマトグラフィー、および吸着クロマトグラフィーが含まれる（Strategies  for  Protein  Purification  and  Characterization:  A  Laboratory  Course  Manual.  Ed  Daniel  R.  Marshak  et  al.,  Cold  Spring  Harbor  Laboratory  Press,  1996）。クロマトグラフィーは、ＨＰＬＣおよびＦＰＬＣなどの液相クロマトグラフィーを使用して実行することができる。親和性クロマトグラフィーに使用されるカラムとしては、プロテインＡカラムおよびプロテインＧカラムが挙げられる。プロテインＡカラムを使用するカラムの例としては、Ｈｙｐｅｒ  Ｄ、ＰＯＲＯＳ、およびＳｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）が挙げられる。本開示にはまた、これらの精製方法を使用して高度に精製された抗体も含まれる。
【０３０８】
医薬組成物
本開示は、本明細書に記載される抗体、または本明細書に記載される抗体をコードするポリヌクレオチドと、薬学的に許容される希釈剤、担体または賦形剤とを含む医薬組成物もまた含む。ある特定の実施形態では、医薬組成物は、治療有効量の、抗体またはポリヌクレオチドを含む。
【０３０９】
種々の薬学的に許容される希釈剤、担体および賦形剤、ならびに医薬組成物の調製および使用のための技術は、本開示に照らせば、当業者に公知である。例示的な医薬組成物ならびに薬学的に許容される希釈剤、担体および賦形剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  第２０版（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  ２００３年）にも記載されている。特定の実施形態では、各担体、希釈剤または賦形剤は、医薬組成物の他の成分と適合性であり、被験体にとって傷害性でないという意味で、「許容される」。しばしば、薬学的に許容される担体は、ｐＨ緩衝水溶液である。薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤として機能し得る材料の一部の例には、無菌水；緩衝液、例えば、リン酸緩衝食塩水；糖、例えば、ラクトース、グルコースおよびスクロース；デンプン、例えば、トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプン；セルロースおよびその誘導体、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよびセルロースアセテート；トラガント末；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤、例えば、カカオバターおよび坐剤ワックス；油、例えば、ラッカセイ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびダイズ油；グリコール、例えば、プロピレングリコール；ポリオール、例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール；エステル、例えば、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；寒天；緩衝剤、例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張食塩水；リンゲル溶液；エチルアルコール；リン酸緩衝溶液；ならびに医薬製剤において用いられる他の非毒性の適合性の物質が含まれる。湿潤剤、乳化剤および滑沢剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、離型剤（ｒｅｌｅａｓｅ  ａｇｅｎｔ）、コーティング剤、甘味剤、矯味矯臭剤および芳香剤、防腐剤ならびに抗酸化剤もまた、組成物中に存在し得る。
【０３１０】
医薬組成物の製剤化および送達の方法は、一般に、処置される部位および疾患に従って適合される。例示的な製剤には、ミセル、リポソームまたは薬物放出カプセル中にカプセル化された製剤（低速放出のために設計された生体適合性コーティング内に取り込まれた活性薬剤）；摂取可能な製剤；外用使用のための製剤、例えば、クリーム剤、軟膏剤およびゲル剤；ならびに他の製剤、例えば、吸入剤、エアロゾル剤およびスプレー剤が含まれる、非経口投与、例えば、静脈内、動脈内、筋内または皮下投与に適切なものが含まれるがこれらに限定されない。
【０３１１】
使用の方法
本開示は、ＨＩＶ感染または関連する疾患もしくは障害を処置および予防することを必要とする被験体（例えば、ヒト被験体）においてＨＩＶ感染または関連する疾患もしくは障害を処置および予防するための方法であって、それを必要とする被験体に、有効量の、本明細書に記載される抗体または抗体をコードするポリヌクレオチドを提供するステップを含む、方法を提供する。本明細書で使用する場合、被験体への療法（therapy）の投与の文脈における「有効量」という用語は、所望される予防的または治療的効果を達成する、療法の量を指す。ポリヌクレオチドは、ベクター、例えば、ウイルスベクター中に存在し得る。特定の実施形態では、関連の疾患または障害は、ＨＩＶによる感染によって引き起こされる。特定の実施形態では、これは、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）である。特定の実施形態では、被験体は、ウイルス学的に抑制されたＨＩＶ感染哺乳動物であるが、他の実施形態では、被験体は、処置を経験していないＨＩＶ感染哺乳動物である。ある特定の実施形態では、処置を経験していない被験体は、１０３コピー／ｍｌから１０５コピー／ｍｌの間のウイルス量を有し、ある特定の実施形態では、ウイルス学的に抑制された被験体は、５０コピー／ｍｌ未満のウイルス量を有する。特定の実施形態では、被験体は、哺乳動物、例えばヒトである。ある特定の実施形態では、被験体は、ＨＩＶ、例えば、ＨＩＶ−１もしくはＨＩＶ−２感染または関連の疾患もしくは障害、例えば、ＡＩＤＳと診断されており、あるいはＨＩＶ、例えば、ＨＩＶ−１もしくはＨＩＶ−２感染または関連の疾患もしくは障害、例えば、ＡＩＤＳを発症するリスクがあるとみなされる。ＨＩＶ関連の疾患または障害のリスクがある被験体には、感染した人と接触した患者、またはいくつかの他の方法でＨＩＶに曝露された患者が含まれる。予防剤の投与は、疾患または障害が予防され、あるいはその進行が遅延されるように、ＨＩＶ関連の疾患または障害に特徴的な症状の顕在化の前に行われ得る。
【０３１２】
また、被験体（例えば、ヒト被験体）におけるＨＩＶウイルス力価、ウイルス複製、ウイルス増殖、またはＨＩＶウイルスＤＮＡ、ＨＩＶプロウイルスＤＮＡ、もしくはＨＩＶウイルスタンパク質の量の増加を予防または阻害するための方法も提供される。一実施形態では、本方法は、それを必要とする被験体に、被験体における１つまたは複数のＨＩＶ株または分離株のＨＩＶ力価、ウイルス複製、またはＨＩＶタンパク質の量の増加を予防するのに有効な量の、本明細書に記載される抗体またはその抗体をコードするポリヌクレオチドを提供するステップを含む。ある特定の実施形態では、本方法は、１つまたは複数の時点で、例えば、被験体に本開示の抗体が提供される前および提供された後に、ＨＩＶウイルスのまたはプロウイルスのＤＮＡまたはタンパク質の量を測定するステップをさらに含む。被験体におけるＨＩＶウイルスのまたはプロウイルスのＤＮＡまたはタンパク質の量を決定するための方法およびバイオマーカーは、当該技術分野において公知かつ利用可能であり、例えば、Siliciano,  J.D.  et  al.,  Curr  Opin.  HIV  AIDS,  5(6):491-7  (2010)、およびRouzioux,  C.  et  al.,  Curr  Opin  HIV  AIDS,  8(3):170-5  (2013)に記載されている。
【０３１３】
本明細書に記載されるＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、抗レトロウイルス組合せ療法（ｃＡＲＴ）により抑制された患者から単離されたＣＤ４＋Ｔ細胞において、ｅｘ  ｖｉｖｏで潜伏性ＨＩＶを再活性化することができ、したがって、実際に、ＨＩＶウイルス力価を増加させ得る。Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、潜伏感染状態の細胞を活性化してｇｐ１２０を発現させ、次いで、排除の標的となる可能性があるため、これが、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の利点である。ＣＤ３への結合により、部分的Ｔ細胞活性化表現型が誘導され得、潜伏感染状態のＣＤ４＋Ｔ細胞の活性化により、ウイルス発現がもたらされる。したがって、ＨＩＶの潜伏を逆転させることを必要とする被験体においてＨＩＶの潜伏を逆転させる方法もまた、特徴とされる。本方法は、それを必要とするヒト被験体に、本明細書に記載されるｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）を投与するステップを含む。ある特定の実施形態では、本方法は、１つまたは複数の時点で、例えば、被験体に本開示のＤｕｏｂｏｄｙ（登録商標）が提供される前および提供された後に、ＨＩＶ  ＲＮＡ、ウイルスのまたはプロウイルスのＤＮＡまたはタンパク質の量を測定するステップをさらに含む。
【０３１４】
ある特定の態様では、本開示の抗体は、例えば、本明細書に記載されるＨＩＶ単離物などのある特定のウイルスを阻害する方法、本明細書に記載されるＨＩＶ単離物などのある特定のウイルスの感染の予防的な阻害または防止、試料中の本明細書に記載されるＨＩＶ単離物などのある特定のウイルスの検出、本明細書に記載されるＨＩＶ単離物などのある特定のウイルスの阻害、本明細書に記載されるＨＩＶ単離物などのある特定のウイルスの診断において使用され得る。
【０３１５】
哺乳動物被験体、例えば、ヒトのｉｎ  ｖｉｖｏ処置のために、被験体には、本明細書に記載される多重特異性抗体を含む医薬組成物が投与または提供され得る。ｉｎ  ｖｉｖｏ治療に使用される場合、本明細書に記載される抗体は、典型的に、治療有効量（すなわち、患者のウイルス負荷および／またはウイルスの蓄積を排除するかまたは低減させる量）で、患者に投与または提供される。抗体は、例えば、ボーラスとしてもしくはある期間にわたる持続注入による静脈内投与、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液包内、髄腔内、経口、局所、または吸入経路によるものなどであるがこれらに限定されない公知の方法に従って、哺乳動物被験体、例えば、ヒトに投与または提供される。抗体は、可能な場合には、標的細胞部位において非経口で投与され得るか、または静脈内投与され得る。一実施形態では、被験体への抗体の投与は、静脈内経路によるものである。別の実施形態では、被験体への抗体の投与は、皮下経路によるものである。特定の実施形態では、本開示の医薬組成物は、被験体に、全身的に、非経口で、または局所的に、投与される。
【０３１６】
ある特定の実施形態では、本開示は、ＨＩＶ感染を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の、本明細書において開示されている抗体を投与するステップを含む、方法を提供する。
【０３１７】
組合せ療法
ある特定の実施形態では、ＨＩＶ感染を有するかまたはＨＩＶ感染を有するリスクがあるヒトにおいて、ＨＩＶ感染を処置または予防するための方法であって、ヒトに、治療有効量の、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物を、治療有効量の１つまたは複数の（例えば、１つ、２つ、３つ、１つもしくは２つ、または１つ〜３つの）追加の治療剤と組み合わせて投与するステップを含む、方法が、提供される。一実施形態では、ＨＩＶ感染を有するかまたはＨＩＶ感染を有するリスクがあるヒトにおいて、ＨＩＶ感染を処置するための方法であって、ヒトに、治療有効量の、本明細書において開示されている抗体またはその薬学的に許容される塩を、治療有効量の１つまたは複数の（例えば、１つ、２つ、３つ、１つもしくは２つ、または１つ〜３つの）追加の治療剤と組み合わせて投与するステップを含む、方法が、提供される。
【０３１８】
一実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物を、１つまたは複数の（例えば、１つ、２つ、３つ、１つもしくは２つ、または１つ〜３つの）追加の治療剤、ならびに薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて含む、医薬組成物が、提供される。
【０３１９】
ある特定の実施形態では、本開示は、ＨＩＶ感染を処置するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物を、治療有効量の、ＨＩＶ感染を処置するのに好適である１つまたは複数の追加の治療剤と組み合わせて投与するステップを含む、方法を提供する。
【０３２０】
ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、１つ、２つ、３つ、４つ、またはそれより多い追加の治療剤と組み合わされる。ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、２つの追加の治療剤と組み合わされる。他の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、３つの追加の治療剤と組み合わされる。さらなる実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、４つの追加の治療剤と組み合わされる。１つ、２つ、３つ、４つまたはそれより多い追加の治療剤は、同じクラスの治療剤から選択される異なる治療剤であってよく、および／または異なるクラスの治療剤から選択されてもよい。
【０３２１】
ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体は、１つまたは複数の追加の治療剤とともに投与される。本明細書において開示されている抗体の、１つまたは複数の追加の治療剤との共投与は、概して、治療有効量の本明細書において開示されている抗体および１つまたは複数の追加の治療剤が、いずれも患者の体内に存在するような、本明細書において開示されている化合物および１つまたは複数の追加の治療剤の同時または逐次投与を指す。逐次投与される場合、組合せ物は、２回またはそれより多い投与で投与され得る。
【０３２２】
共投与は、単位投薬量の１つまたは複数の追加の治療剤の投与の前または後における、単位投薬量の本明細書において開示されている抗体の投与を含む。例えば、本明細書において開示されている抗体は、１つまたは複数の追加の治療剤の投与の数秒以内、数分以内、または数時間以内に、投与され得る。一部の実施形態では、単位用量の本明細書において開示されている抗体が、最初に投与され、続いて、数秒または数分以内に、単位用量の１つまたは複数の追加の治療剤が投与される。代替として、単位用量の１つまたは複数の追加の治療剤が、最初に投与され、続いて、数秒または数分以内に、単位用量の本明細書において開示されている抗体が投与される。他の実施形態では、単位用量の本明細書において開示されている抗体が、最初に投与され、続いて、数時間（例えば、１〜１２時間）後に、単位用量の１つまたは複数の追加の治療剤が投与される。さらに他の実施形態では、単位用量の１つまたは複数の追加の治療剤が、最初に投与され、続いて、数時間（例えば、１〜１２時間）後に、単位用量の本明細書において開示されている抗体が投与される。
【０３２３】
ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体は、患者への同時投与のための単位剤形で、例えば、経口投与用の固体剤形として、１つまたは複数の追加の治療剤と組み合わされる。
【０３２４】
ある特定の実施形態では、本開示の抗体は、液体として製剤化され、これは、必要に応じてＨＩＶを処置するのに有用な追加の治療剤（複数可）を含有し得る。ある特定の実施形態では、液体は、ＨＩＶを処置するための別の活性成分、例えば、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、ＨＩＶの逆転写酵素の非ヌクレオシドまたは非ヌクレオチド阻害剤、ＨＩＶの逆転写酵素のヌクレオシドまたはヌクレオチド阻害剤、ＨＩＶインテグラーゼ阻害剤、ＨＩＶ非触媒部位（またはアロステリック）インテグラーゼ阻害剤、薬物動態学的エンハンサー、およびこれらの組合せを含有し得る。
【０３２５】
ある特定の実施形態では、そのような製剤は、毎日１回の投薬に好適である。上の実施形態では、追加の治療剤は、抗ＨＩＶ剤であり得る。一部の事例では、追加の治療剤は、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素のＨＩＶ非ヌクレオシドまたは非ヌクレオチド阻害剤、逆転写酵素のＨＩＶヌクレオシドまたはヌクレオチド阻害剤、ＨＩＶインテグラーゼ阻害剤、ＨＩＶ非触媒部位（またはアロステリックな）インテグラーゼ阻害剤、ＨＩＶ侵入阻害剤、ＨＩＶ成熟化阻害剤、潜伏逆転剤（ｌａｔｅｎｃｙ  ｒｅｖｅｒｓｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、ＨＩＶカプシドを標的とする化合物、免疫ベースの療法、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤、ＨＩＶ抗体、二重特異性抗体および「抗体様」治療用タンパク質、ＨＩＶ  ｐ１７マトリックスタンパク質阻害剤、ＩＬ−１３アンタゴニスト、ペプチジル−プロリルシス−トランスイソメラーゼＡモジュレーター、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ阻害剤、補体Ｃ５ａ受容体アンタゴニスト、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、ＨＩＶ  ｖｉｆ遺伝子モジュレーター、Ｖｉｆ二量体化アンタゴニスト、ＨＩＶ−１ウイルス感染性因子阻害剤、ＴＡＴタンパク質阻害剤、ＨＩＶ−１  Ｎｅｆモジュレーター、Ｈｃｋチロシンキナーゼモジュレーター、混合系列キナーゼ−３（ＭＬＫ−３）阻害剤、ＨＩＶ−１スプライシング阻害剤、Ｒｅｖタンパク質阻害剤、インテグリンアンタゴニスト、核タンパク質阻害剤、スプライシング因子モジュレーター、ＣＯＭＭドメイン含有タンパク質１モジュレーター、ＨＩＶリボヌクレアーゼＨ阻害剤、レトロサイクリンモジュレーター、ＣＤＫ−９阻害剤、樹状ＩＣＡＭ−３結合ノンインテグリン１（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ＩＣＡＭ−３  ｇｒａｂｂｉｎｇ  ｎｏｎｉｎｔｅｇｒｉｎ  １）阻害剤、ＨＩＶ  ＧＡＧタンパク質阻害剤、ＨＩＶ  ＰＯＬタンパク質阻害剤、補体因子Ｈモジュレーター、ユビキチンリガーゼ阻害剤、デオキシシチジンキナーゼ阻害剤、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤、プロタンパク質転換酵素ＰＣ９刺激物質、ＡＴＰ依存性ＲＮＡヘリカーゼＤＤＸ３Ｘ阻害剤、逆転写酵素プライミング複合体阻害剤、Ｇ６ＰＤおよびＮＡＤＨ−オキシダーゼ阻害剤、薬物動態学的賦活薬、ＨＩＶ遺伝子療法、ＨＩＶワクチン、ならびにこれらの組合せであり得る。
【０３２６】
一部の実施形態では、追加の治療剤は、ＨＩＶのための併用薬物、ＨＩＶを処置するための他の薬物、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、ＨＩＶ逆転写酵素阻害剤、ＨＩＶインテグラーゼ阻害剤、ＨＩＶ非触媒部位（またはアロステリックな）インテグラーゼ阻害剤、ＨＩＶ侵入（融合）阻害剤、ＨＩＶ成熟化阻害剤、潜伏逆転剤、カプシド阻害剤、免疫ベースの療法、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＨＩＶ抗体、および二重特異性抗体、および「抗体様」治療用タンパク質、ならびにこれらの組合せからなる群から選択される。
【０３２７】
本開示の抗体とともに用いられ得る併用薬物の例として、ＡＴＲＩＰＬＡ（登録商標）（エファビレンツ、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩、およびエムトリシタビン）；ＣＯＭＰＬＥＲＡ（登録商標）（ＥＶＩＰＬＥＲＡ（登録商標）；リルピビリン、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩、およびエムトリシタビン）；ＳＴＲＩＢＩＬＤ（登録商標）（エルビテグラビル、コビシスタット、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩、およびエムトリシタビン）；ＴＲＵＶＡＤＡ（登録商標）（テノホビルジソプロキシルフマル酸塩およびエムトリシタビン；ＴＤＦ＋ＦＴＣ）；ＤＥＳＣＯＶＹ（登録商標）（テノホビルアラフェナミドおよびエムトリシタビン）；ＯＤＥＦＳＥＹ（登録商標）（テノホビルアラフェナミド、エムトリシタビン、およびリルピビリン）；ＧＥＮＶＯＹＡ（登録商標）（テノホビルアラフェナミド、エムトリシタビン、コビシスタット、およびエルビテグラビル）；ダルナビル、テノホビルアラフェナミドヘミフマル酸塩、エムトリシタビン、およびコビシスタット；エファビレンツ、ラミブジン、およびテノホビルジソプロキシルフマル酸塩；ラミブジンおよびテノホビルジソプロキシルフマル酸塩；テノホビルおよびラミブジン；テノホビルアラフェナミドおよびエムトリシタビン；テノホビルアラフェナミドヘミフマル酸塩およびエムトリシタビン；テノホビルアラフェナミドヘミフマル酸塩、エムトリシタビン、およびリルピビリン；テノホビルアラフェナミドヘミフマル酸塩、エムトリシタビン、コビシスタット、およびエルビテグラビル；ＣＯＭＢＩＶＩＲ（登録商標）（ジドブジンおよびラミブジン；ＡＺＴ＋３ＴＣ）；ＥＰＺＩＣＯＭ（登録商標）（ＬＩＶＥＸＡ（登録商標）；アバカビル硫酸塩およびラミブジン；ＡＢＣ＋３ＴＣ）；ＫＡＬＥＴＲＡ（登録商標）（ＡＬＵＶＩＡ（登録商標）；ロピナビルおよびリトナビル）；ＴＲＩＵＭＥＱ（登録商標）（ドルテグラビル、アバカビル、およびラミブジン）；ＴＲＩＺＩＶＩＲ（登録商標）（アバカビル硫酸塩、ジドブジン、およびラミブジン；ＡＢＣ＋ＡＺＴ＋３ＴＣ）；アタザナビルおよびコビシスタット；アタザナビル硫酸塩およびコビシスタット；アタザナビル硫酸塩およびリトナビル；ダルナビルおよびコビシスタット；ドルテグラビルおよびリルピビリン；ドルテグラビルおよびリルピビリン塩酸塩；ドルテグラビル、アバカビル硫酸塩、およびラミブジン；ラミブジン、ネビラピン、およびジドブジン；ラルテグラビルおよびラミブジン；ドラビリン、ラミブジン、およびテノホビルジソプロキシルフマル酸塩；ドラビリン、ラミブジン、およびテノホビルジソプロキシル；ドルテグラビル＋ラミブジン、ラミブジン＋アバカビル＋ジドブジン、ラミブジン＋アバカビル、ラミブジン＋テノホビルジソプロキシルフマル酸塩、ラミブジン＋ジドブジン＋ネビラピン、ロピナビル＋リトナビル、ロピナビル＋リトナビル＋アバカビル＋ラミブジン、ロピナビル＋リトナビル＋ジドブジン＋ラミブジン、テノホビル＋ラミブジン、およびテノホビルジソプロキシルフマル酸塩＋エムトリシタビン＋リルピビリン塩酸塩、ロピナビル、リトナビル、ジドブジンおよびラミブジン；Ｖａｃｃ−４ｘおよびロミデプシン；ならびにＡＰＨ−０８１２が挙げられる。
【０３２８】
本開示の抗体と組み合わせることができるＨＩＶを処置するための他の薬物の例として、アセマンナン、アリスポリビル、ＢａｎＬｅｃ、デフェリプロン、Ｇａｍｉｍｕｎｅ、メテンケファリン、ナルトレキソン、Ｐｒｏｌａｓｔｉｎ、ＲＥＰ  ９、ＲＰＩ−ＭＮ、ＶＳＳＰ、Ｈ１ｖｉｒａｌ、ＳＢ−７２８−Ｔ、１，５−ジカフェオイルキナ酸、ｒＨＩＶ７−ｓｈｌ−ＴＡＲ−ＣＣＲ５ＲＺ、ＡＡＶ−ｅＣＤ４−Ｉｇ遺伝子療法、ＭａｚＦ遺伝子療法、ＢｌｏｃｋＡｉｄｅ、ＡＢＸ−４６４、ＡＧ−１１０５、ＡＰＨ−０８１２、ＢＩＴ−２２５、ＣＹＴ−１０７、ＨＧＴＶ−４３、ＨＰＨ−１１６、ＨＳ−１０２３４、ＩＭＯ−３１００、ＩＮＤ−０２、ＭＫ−１３７６、ＭＫ−８５０７、ＭＫ−８５９１、ＮＯＶ−２０５、ＰＡ−１０５００４０（ＰＡ−０４０）、ＰＧＮ−００７、ＳＣＹ−６３５、ＳＢ−９２００、ＳＣＢ−７１９、ＴＲ−４５２、ＴＥＶ−９０１１０、ＴＥＶ−９０１１２、ＴＥＶ−９０１１１、ＴＥＶ−９０１１３、ＲＮ−１８、Ｉｍｍｕｇｌｏ、およびＶＩＲ−５７６が挙げられる。
【０３２９】
本開示の抗体と組み合わせることができるＨＩＶプロテアーゼ阻害剤の例として、アンプレナビル、アタザナビル、ブレカナビル、ダルナビル、ホスアンプレナビル、ホスアンプレナビルカルシウム、インジナビル、インジナビル硫酸塩、ロピナビル、ネルフィナビル、ネルフィナビルメシル酸塩、リトナビル、サキナビル、サキナビルメシル酸塩、チプラナビル、ＤＧ−１７、ＴＭＢ−６５７（ＰＰＬ−１００）、Ｔ−１６９、ＢＬ−００８、およびＴＭＣ−３１０９１１が挙げられる。
【０３３０】
本開示の抗体と組み合わせることができる、逆転写酵素のＨＩＶ非ヌクレオシドまたは非ヌクレオチド阻害剤の例として、ダピビリン、デラビルジン、デラビルジンメシル酸塩、ドラビリン、エファビレンツ、エトラビリン、レンチナン、ネビラピン、リルピビリン、ＡＣＣ−００７、ＡＩＣ−２９２、ＫＭ−０２３、およびＶＭ−１５００が挙げられる。
【０３３１】
本開示の抗体と組み合わせることができる、逆転写酵素のＨＩＶヌクレオシドまたはヌクレオチド阻害剤の例として、アデホビル、アデホビルジピボキシル、ａｚｖｕｄｉｎｅ、エムトリシタビン、テノホビル、テノホビルアラフェナミド、テノホビルアラフェナミドフマル酸塩、テノホビルアラフェナミドヘミフマル酸塩、テノホビルジソプロキシル、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩、テノホビルジソプロキシルヘミフマル酸塩、ＶＩＤＥＸ（登録商標）およびＶＩＤＥＸ  ＥＣ（登録商標）（ジダノシン、ｄｄｌ）、アバカビル、アバカビル硫酸塩、アロブジン、アプリシタビン、センサブジン、ジダノシン、エルブシタビン、フェスティナビル、フォサルブジンチドキシル、ＣＭＸ−１５７、ダピビリン、ドラビリン、エトラビリン、ＯＣＲ−５７５３、テノホビルジソプロキシルオロテート、ホジブジンチドキシル、ラミブジン、ホスファジド、スタブジン、ザルシタビン、ジドブジン、ＧＳ−９１３１、ＧＳ−９１４８、およびＫＰ−１４６１が挙げられる。
【０３３２】
本開示の抗体と組み合わせることができるＨＩＶインテグラーゼ阻害剤の例として、エルビテグラビル、クルクミン、クルクミンの誘導体、チコリ酸、チコリ酸の誘導体、３，５−ジカフェオイルキナ酸、３，５−ジカフェオイルキナ酸の誘導体、アウリントリカルボン酸、アウリントリカルボン酸の誘導体、カフェ酸フェネチルエステル、カフェ酸フェネチルエステルの誘導体、チルホスチン、チルホスチンの誘導体、ケルセチン、ケルセチンの誘導体、ラルテグラビル、ドルテグラビル、ＪＴＫ−３５１、ビクテグラビル、ＡＶＸ−１５５６７、カボテグラビル（長時間作用型注射剤）、ジケトキノリン−４−１誘導体、インテグラーゼ−ＬＥＤＧＦ阻害剤、ｌｅｄｇｉｎｓ、Ｍ−５２２、Ｍ−５３２、ＮＳＣ−３１０２１７、ＮＳＣ−３７１０５６、ＮＳＣ−４８２４０、ＮＳＣ−６４２７１０、ＮＳＣ−６９９１７１、ＮＳＣ−６９９１７２、ＮＳＣ−６９９１７３、ＮＳＣ−６９９１７４、スチルベン二スルホン酸、Ｔ−１６９およびカボテグラビルが挙げられる。
【０３３３】
本開示の抗体と組み合わせることができるＨＩＶ非触媒部位、またはアロステリック、インテグラーゼ阻害剤（ＮＣＩＮＩ）の例としては、ＣＸ−０５０４５、ＣＸ−０５１６８、およびＣＸ−１４４４２が挙げられる。
【０３３４】
本開示の抗体と組み合わせることができるＨＩＶ侵入（融合）阻害剤の例として、セニクリビロック、ＣＣＲ５阻害剤、ｇｐ４１阻害剤、ＣＤ４結合阻害剤、ｇｐ１２０阻害剤、およびＣＸＣＲ４阻害剤が挙げられる。
【０３３５】
本開示の抗体と組み合わせることができるＣＣＲ５阻害剤の例として、アプラビロック、ビクリビロック、マラビロク、セニクリビロック、ＰＲＯ−１４０、アダプタビル（ＲＡＰ−１０１）、ニフェビロック（ＴＤ−０２３２）、抗ＧＰ１２０／ＣＤ４またはＣＣＲ５二重特異性抗体、Ｂ−０７、ＭＢ−６６、ポリペプチドＣ２５Ｐ、ＴＤ−０６８０、およびｖＭＩＰ（Ｈａｉｍｉｐｕ）が挙げられる。
【０３３６】
本開示の抗体と組み合わせることができるｇｐ４１阻害剤の例として、アルブビルチド、エンフビルチド、ＢＭＳ−９８６１９７、エンフビルチドバイオベター、エンフビルチドバイオシミラー、ＨＩＶ−１融合阻害剤（Ｐ２６−Ｂａｐｃ）、ＩＴＶ−１、ＩＴＶ−２、ＩＴＶ−３、ＩＴＶ−４、ＰＩＥ−１２トリマーおよびシフュービルタイドが挙げられる。
【０３３７】
本開示の抗体と組み合わせることができるＣＤ４結合阻害剤の例として、イバリズマブおよびＣＡＤＡ類似体が挙げられる。
【０３３８】
本開示の抗体と組み合わせることができるｇｐ１２０阻害剤の例として、Ｒａｄｈａ−１０８（ｒｅｃｅｐｔｏｌ）３Ｂ３−ＰＥ３８、ＢａｎＬｅｃ、ベントナイトベースのナノメディシン、ホステムサビルトロメタミン、ＩＱＰ−０８３１、およびＢＭＳ−６６３０６８が挙げられる。
【０３３９】
本開示の抗体と組み合わせることができるＣＸＣＲ４阻害剤の例として、プレリキサフォル、ＡＬＴ−１１８８、Ｎ１５ペプチド、およびｖＭＩＰ（Ｈａｉｍｉｐｕ）が挙げられる。
【０３４０】
本開示の抗体と組み合わせることができるＨＩＶ成熟化阻害剤の例として、ＢＭＳ−９５５１７６およびＧＳＫ−２８３８２３２が挙げられる。
【０３４１】
本開示の抗体と組み合わせることができる潜伏逆転剤の例としては、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤、プロテアソーム阻害剤、例えば、ベルケイド、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）活性化剤、Ｓｍｙｄ２阻害剤、ＢＥＴ−ブロモドメイン４（ＢＲＤ４）阻害剤、イオノマイシン、ＰＭＡ、ＳＡＨＡ（スベラニロヒドロキサム酸、またはスベロイル、アニリド、およびヒドロキサム酸）、ＮＩＺ−９８５、ＩＬ−１５、ＪＱ１、ジスルフィラム、アムホテリシンＢ、ならびにユビキチン阻害剤、例えば、ラルガゾール（largazole）類似体、ならびにＧＳＫ−３４３が挙げられる。ＨＤＡＣ阻害剤の例としては、ロミデプシン、ボリノスタット、およびパノビノスタットが挙げられる。ＰＫＣ活性化剤の例としては、インドラクタム、プロストラチン、インゲノールＢ、およびＤＡＧ−ラクトンが挙げられる。
【０３４２】
本開示の抗体と組み合わせることができるカプシド阻害剤の例として、カプシド重合阻害剤またはカプシド破壊化合物、ＨＩＶヌクレオカプシドｐ７（ＮＣｐ７）阻害剤、例えば、アゾジカーボンアミド、ＨＩＶｐ２４カプシドタンパク質阻害剤、ＡＶＩ−６２１、ＡＶＩ−１０１、ＡＶＩ−２０１、ＡＶＩ−３０１、およびＡＶＩ−ＣＡＮ１−１５シリーズが挙げられる。
【０３４３】
本開示の抗体と組み合わせることができる免疫ベースの療法の例として、ｔｏｌｌ様受容体モジュレーター、例えば、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２およびＴＬＲ１３；プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ−１）モジュレーター；プログラム死−リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）モジュレーター；ＩＬ−１５アゴニスト；ＤｅｒｍａＶｉｒ；インターロイキン−７；プラケニル（ヒドロキシクロロキン）；プロロイキン（アルデスロイキン、ＩＬ−２）；インターフェロンアルファ；インターフェロンアルファ−２ｂ；インターフェロンアルファ−ｎ３；ペグ化インターフェロンアルファ；インターフェロンガンマ；ヒドロキシウレア；ミコフェノール酸モフェチル（ＭＰＡ）およびそのエステル誘導体ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）；リバビリン；リンタトリモド、ポリマーポリエチレンイミン（ＰＥＩ）；ゲポン；リンタトリモド；ＩＬ−１２；ＷＦ−１０；ＶＧＶ−１；ＭＯＲ−２２；ＢＭＳ−９３６５５９；ＣＹＴ−１０７、インターロイキン−１５／Ｆｃ融合タンパク質、ノルムフェロン、ペグインターフェロンアルファ−２ａ、ペグインターフェロンアルファ−２ｂ、組換え型インターロイキン−１５、ＲＰＩ−ＭＮ、ＧＳ−９６２０、およびＩＲ−１０３が挙げられる。
【０３４４】
本開示の抗体と組み合わせることができるＰＩ３Ｋ阻害剤の例として、イデラリシブ、アルペリシブ、ブパルリシブ、ＣＡＩオロテート、コパンリシブ、デュベリシブ、ゲダトリシブ、ネラチニブ、パヌリシブ、ペリホシン、ピクチリシブ、ピララリシブ、プキチニブメシル酸塩、リゴセルチブ、リゴセルチブナトリウム、ソノリシブ、タセリシブ、ＡＭＧ−３１９、ＡＺＤ−８１８６、ＢＡＹ−１０８２４３９、ＣＬＲ−１４０１、ＣＬＲ−４５７、ＣＵＤＣ−９０７、ＤＳ−７４２３、ＥＮ−３３４２、ＧＳＫ−２１２６４５８、ＧＳＫ−２２６９５７７、ＧＳＫ−２６３６７７１、ＩＮＣＢ−０４００９３、ＬＹ−３０２３４１４、ＭＬＮ−１１１７、ＰＱＲ−３０９、ＲＧ−７６６６、ＲＰ−６５３０、ＲＶ−１７２９、ＳＡＲ−２４５４０９、ＳＡＲ−２６０３０１、ＳＦ−１１２６、ＴＧＲ−１２０２、ＵＣＢ−５８５７、ＶＳ−５５８４、ＸＬ−７６５、およびＺＳＴＫ−４７４が挙げられる。
【０３４５】
本開示の抗体と組み合わせることができるインテグリンアルファ−４／ベータ−７アンタゴニストの例としては、ＰＴＧ−１００、ＴＲＫ−１７０、アブリルマブ、エトロリズマブ、カロテグラストメチル、およびベドリズマブが挙げられる。
【０３４６】
本開示の抗体と組み合わせることができる、ＨＩＶ抗体、二重特異性抗体、および「抗体様」治療用タンパク質の例として、ＤＡＲＴ（登録商標）、ＤＵＯＢＯＤＩＥＳ（登録商標）、ＢＩＴＥＳ（登録商標）、ＸｍＡｂ（登録商標）、ＴａｎｄＡｂ（登録商標）、Ｆａｂ誘導体、ｂＮＡｂ（幅広く中和するＨＩＶ−１抗体）、ＢＭＳ−９３６５５９、ＴＭＢ−３６０、およびＨＩＶ  ｇｐ１２０またはｇｐ４１を標的とするもの、ＨＩＶを標的とする抗体リクルート分子、抗ＣＤ６３モノクローナル抗体、抗ＧＢウイルスＣ抗体、抗ＧＰ１２０／ＣＤ４、ＣＣＲ５二重特異性抗体、抗ｎｅｆ単一ドメイン抗体、抗Ｒｅｖ抗体、ラクダ類由来の抗ＣＤ１８抗体、ラクダ類由来の抗ＩＣＡＭ−１抗体、ＤＣＶａｘ−００１、ｇｐ１４０標的抗体、ｇｐ４１ベースのＨＩＶ治療用抗体、ヒト組換え型ｍＡｂ（ＰＧＴ−１２１）、イバリズマブ、Ｉｍｍｕｇｌｏ、ＭＢ−６６が挙げられる。このような方式でＨＩＶを標的とするものの例として、バビツキシマブ、ＵＢ−４２１、Ｃ２Ｆ５、Ｃ２Ｇ１２、Ｃ４Ｅ１０、Ｃ２Ｆ５＋Ｃ２Ｇ１２＋Ｃ４Ｅ１０、３ＢＮＣ−１１７、ＰＧＴ１４５、ＰＧＴ１２１、ＰＧＤＭ１４００、ＭＤＸ０１０（イピリムマブ）、ＶＲＣ０１、Ａ３２、７Ｂ２、１０Ｅ８、ＶＲＣ−０７−５２３、ＶＲＣ−ＨＩＶＭＡＢ０８０−００−ＡＢ、ＭＧＤ−０１４およびＶＲＣ０７が挙げられる。ＨＩＶを標的とする抗体のさらなる例としては、ＰＧＴ１２２、ＰＧＴ１２３、ＰＧＴ１２４、１０−１０７４、ＰＧＴ１３３、ＰＧＴ１３４、ＰＧ１６、ＰＧ９、ＰＧＴ１５１などが挙げられる。
【０３４７】
本開示の抗体と組み合わせることができる薬物動態学的賦活薬の例として、コビシスタットおよびリトナビルが挙げられる。
【０３４８】
本開示の抗体と組み合わせることができる追加の治療剤の例として、ＷＯ２００４／０９６２８６（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＷＯ２００６／０１５２６１（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＷＯ２００６／１１０１５７（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＷＯ２０１２／００３４９７（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＷＯ２０１２／００３４９８（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＷＯ２０１２／１４５７２８（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＷＯ２０１３／００６７３８（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＷＯ２０１３／１５９０６４（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＷＯ２０１４／１００３２３（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＵＳ２０１３／０１６５４８９（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ）、ＵＳ２０１４／０２２１３７８（Ｊａｐａｎ  Ｔｏｂａｃｃｏ）、ＵＳ２０１４／０２２１３８０（Ｊａｐａｎ  Ｔｏｂａｃｃｏ）、ＷＯ２００９／０６２２８５（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＷＯ２０１０／１３００３４（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＷＯ２０１３／００６７９２（Ｐｈａｒｍａ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ）、ＵＳ２０１４０２２１３５６（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＵＳ２０１００１４３３０１（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＷＯ２０１３／０９１０９６（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）に開示された化合物が挙げられる。
【０３４９】
本開示の抗体と組み合わせることができるＨＩＶワクチンの例として、ペプチドワクチン、組換え型サブユニットタンパク質ワクチン、生ベクターワクチン、ＤＮＡワクチン、ＣＤ４由来のペプチドワクチン、ワクチン併用、ｒｇｐ１２０（ＡＩＤＳＶＡＸ）、ＡＬＶＡＣ  ＨＩＶ（ｖＣＰ１５２１）／ＡＩＤＳＶＡＸ  Ｂ／Ｅ（ｇｐ１２０）（ＲＶ１４４）、モノマー性ｇｐ１２０  ＨＩＶ−１サブタイプＣワクチン、Ｒｅｍｕｎｅ、ＩＴＶ−１、Ｃｏｎｔｒｅ  Ｖｉｒ、Ａｄ５−ＥＮＶＡ−４８、ＤＣＶａｘ−００１（ＣＤＸ−２４０１）、Ｖａｃｃ−４ｘ、Ｖａｃｃ−Ｃ５、ＶＡＣ−３Ｓ、マルチクレード（ｍｕｌｔｉｃｌａｄｅ）ＤＮＡ組換え型アデノウイルス−５（ｒＡｄ５）、Ｐｅｎｎｖａｘ−Ｇ、Ｐｅｎｎｖａｘ−ＧＰ、ＨＩＶ−ＴｒｉＭｉｘ−ｍＲＮＡワクチン、ＨＩＶ−ＬＡＭＰ−ｖａｘ、Ａｄ３５、Ａｄ３５−ＧＲＩＮ、ＮＡｃＧＭ３／ＶＳＳＰ  ＩＳＡ−５１、ポリ−ＩＣＬＣアジュバントワクチン、ＴａｔＩｍｍｕｎｅ、ＧＴＵ−ｍｕｌｔｉＨＩＶ（ＦＩＴ−０６）、ｇｐ１４０［デルタ］Ｖ２．ＴＶ１＋ＭＦ−５９、ｒＶＳＶＩＮ  ＨＩＶ−１  ｇａｇワクチン、ＳｅＶ−Ｇａｇワクチン、ＡＴ−２０、ＤＮＫ−４、ａｄ３５−Ｇｒｉｎ／ＥＮＶ、ＴＢＣ−Ｍ４、ＨＩＶＡＸ、ＨＩＶＡＸ−２、ＮＹＶＡＣ−ＨＩＶ−ＰＴ１、ＮＹＶＡＣ−ＨＩＶ−ＰＴ４、ＤＮＡ−ＨＩＶ−ＰＴ１２３、ｒＡＡＶ１−ＰＧ９ＤＰ、ＧＯＶＸ−Ｂ１１、ＧＯＶＸ−Ｂ２１、ＴＶＩ−ＨＩＶ−１、Ａｄ−４（Ａｄ４−ｅｎｖ  Ｃｌａｄｅ  Ｃ＋Ａｄ４−ｍＧａｇ）、ＥＮ４１−ＵＧＲ７Ｃ、ＥＮ４１−ＦＰＡ２、ＰｒｅＶａｘＴａｔ、ＡＥ−Ｈ、ＭＹＭ−Ｖ１０１、ＣｏｍｂｉＨＩＶｖａｃ、ＡＤＶＡＸ、ＭＹＭ−Ｖ２０１、ＭＶＡ−ＣＭＤＲ、ＤＮＡ−Ａｄ５  ｇａｇ／ｐｏｌ／ｎｅｆ／ｎｅｖ（ＨＶＴＮ５０５）、ＭＶＡＴＧ−１７４０１、ＥＴＶ−０１、ＣＤＸ−１４０１、ｒｃＡＤ２６．ＭＯＳ１．ＨＩＶ−Ｅｎｖ、Ａｄ２６．Ｍｏｄ．ＨＩＶワクチン、ＡＧＳ−００４、ＡＶＸ−１０１、ＡＶＸ−２０１、ＰＥＰ−６４０９、ＳＡＶ−００１、ＴｈＶ−０１、ＴＬ−０１、ＴＵＴＩ−１６、ＶＧＸ−３３００、ＩＨＶ−００１、およびウイルス様粒子ワクチン、例えば、偽ビリオンワクチン、ＣｏｍｂｉＶＩＣＨｖａｃ、ＬＦｎ−ｐ２４Ｂ／Ｃ融合ワクチン、ＧＴＵベースのＤＮＡワクチン、ＨＩＶｇａｇ／ｐｏｌ／ｎｅｆ／ｅｎｖ  ＤＮＡワクチン、抗ＴＡＴ  ＨＩＶワクチン、コンジュゲートポリペプチドワクチン、樹状細胞ワクチン、ｇａｇベースのＤＮＡワクチン、ＧＩ−２０１０、ｇｐ４１  ＨＩＶ−１ワクチン、ＨＩＶワクチン（ＰＩＫＡアジュバント）、Ｉｉ−ｋｅｙ／ＭＨＣクラスＩＩエピトープハイブリッドペプチドワクチン、ＩＴＶ−２、ＩＴＶ−３、ＩＴＶ−４、ＬＩＰＯ−５、マルチクレードＥｎｖワクチン、ＭＶＡワクチン、Ｐｅｎｎｖａｘ−ＧＰ、ｐｐ７１欠損ＨＣＭＶベクターＨＩＶ  ｇａｇワクチン、組換え型ペプチドワクチン（ＨＩＶ感染）、ＮＣＩ、ｒｇｐ１６０  ＨＩＶワクチン、ＲＮＡｃｔｉｖｅ  ＨＩＶワクチン、ＳＣＢ−７０３、Ｔａｔ  Ｏｙｉワクチン、ＴＢＣ−Ｍ４、治療用ＨＩＶワクチン、ＵＢＩ  ＨＩＶ  ｇｐ１２０、Ｖａｃｃ−４ｘ＋ロミデプシン、変異型ｇｐ１２０���リペプチドワクチン、ｒＡｄ５  ｇａｇ−ｐｏｌ  ｅｎｖ  Ａ／Ｂ／Ｃワクチンが挙げられる。
【０３５０】
本開示の抗体と組み合わせることができる産児調節（避妊）に使用される治療剤としては、酢酸シプロテロン、デソゲストレル、ジエノゲスト、ドロスピレノン、吉草酸エストラジオール、エチニルエストラジオール、エチノジオール、エトノゲストレル、レボメフォレート、レボノルゲストレル、リネストレノール、酢酸メドロキシプロゲステロン、メストラノール、ミフェプリストン、ミソプロストール、酢酸ノメゲストロール、ノルエルゲストロミン、ノルエチンドロン、ノルエチノドレル、ノルゲスチメート、オルメロキシフェン、酢酸セゲステロン（segestersone  acetate）、酢酸ウリプリスタル、およびこれらの任意の組合せが挙げられる。
【０３５１】
特定の実施形態では、本明細書で開示されている抗体、または薬学的に許容されるその塩は、ＡＴＲＩＰＬＡ（登録商標）（エファビレンツ、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩、およびエムトリシタビン）；ＣＯＭＰＬＥＲＡ（登録商標）（ＥＶＩＰＬＥＲＡ（登録商標）；リルピビリン、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩、およびエムトリシタビン）；ＳＴＲＩＢＩＬＤ（登録商標）（エルビテグラビル、コビシスタット、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩、およびエムトリシタビン）；ＴＲＵＶＡＤＡ（登録商標）（テノホビルジソプロキシルフマル酸塩およびエムトリシタビン；ＴＤＦ＋ＦＴＣ）；ＤＥＳＣＯＶＹ（登録商標）（テノホビルアラフェナミドおよびエムトリシタビン）；ＯＤＥＦＳＥＹ（登録商標）（テノホビルアラフェナミド、エムトリシタビン、およびリルピビリン）；ＧＥＮＶＯＹＡ（登録商標）（テノホビルアラフェナミド、エムトリシタビン、コビシスタット、およびエルビテグラビル）；アデホビル；アデホビルジピボキシル；コビシスタット；エムトリシタビン；テノホビル；テノホビルジソプロキシル；テノホビルジソプロキシルフマル酸塩；テノホビルアラフェナミド；テノホビルアラフェナミドヘミフマル酸塩；ＴＲＩＵＭＥＱ（登録商標）（ドルテグラビル、アバカビル、およびラミブジン）；ドルテグラビル、アバカビル硫酸塩、およびラミブジン；ラルテグラビル；ラルテグラビルおよびラミブジン；マラビロク；エンフビルチド；ＡＬＵＶＩＡ（登録商標）（ＫＡＬＥＴＲＡ（登録商標）；ロピナビルおよびリトナビル）；ＣＯＭＢＩＶＩＲ（登録商標）（ジドブジンおよびラミブジン；ＡＺＴ＋３ＴＣ）；ＥＰＺＩＣＯＭ（登録商標）（ＬＩＶＥＸＡ（登録商標）；アバカビル硫酸塩およびラミブジン；ＡＢＣ＋３ＴＣ）；ＴＲＩＺＩＶＩＲ（登録商標）（アバカビル硫酸塩、ジドブジン、およびラミブジン；ＡＢＣ＋ＡＺＴ＋３ＴＣ）；リルピビリン；リルピビリン塩酸塩；アタザナビル硫酸塩およびコビシスタット；アタザナビルおよびコビシスタット；ダルナビルおよびコビシスタット；アタザナビル；アタザナビル硫酸塩；ドルテグラビル；エルビテグラビル；リトナビル；アタザナビル硫酸塩およびリトナビル；ダルナビル；ラミブジン；プロラスチン；ホスアンプレナビル；ホスアンプレナビルカルシウムエファビレンツ；エトラビリン；ネルフィナビル；ネルフィナビルメシル酸塩；インターフェロン；ジダノシン；スタブジン；インジナビル；インジナビル硫酸塩；テノホビルおよびラミブジン；ジドブジン；ネビラピン；サキナビル；サキナビルメシル酸塩；アルデスロイキン；ザルシタビン；チプラナビル；アンプレナビル；デラビルジン；デラビルジンメシル酸塩；Ｒａｄｈａ−１０８（ｒｅｃｅｐｔｏｌ）；ラミブジンおよびテノホビルジソプロキシルフマル酸塩；エファビレンツ、ラミブジン、およびテノホビルジソプロキシルフマル酸塩；ホスファジド；ラミブジン、ネビラピン、およびジドブジン；アバカビル；ならびにアバカビル硫酸塩から選択される１、２、３、４種またはそれよりも多くの追加の治療剤と組み合わせる。
【０３５２】
具体的な実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、ＨＩＶの逆転写酵素のヌクレオシドまたはヌクレオチド阻害剤、およびＨＩＶの逆転写酵素の非ヌクレオシド阻害剤と組み合わされる。別の具体的な実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、ＨＩＶの逆転写酵素のヌクレオシドまたはヌクレオチド阻害剤およびＨＩＶプロテアーゼ阻害化合物と組み合わされる。追加の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、ＨＩＶの逆転写酵素のヌクレオシドまたはヌクレオチド阻害剤、逆転写酵素のＨＩＶ非ヌクレオシド阻害剤、および薬物動態学的エンハンサーと組み合わされる。ある特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、少なくとも１つのＨＩＶの逆転写酵素のヌクレオシド阻害剤、インテグラーゼ阻害剤、および薬物動態学的エンハンサーと組み合わされる。別の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、２つの逆転写酵素のＨＩＶヌクレオシドまたはヌクレオチド阻害剤と組み合わされる。
【０３５３】
特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、硫酸アバカビル、テノホビル、テノホビルジソプロキシル、フマル酸テノホビルジソプロキシル、ヘミフマル酸テノホビルジソプロキシル、テノホビルアラフェナミド、またはヘミフマル酸テノホビルアラフェナミドと組み合わされる。
【０３５４】
特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、テノホビル、テノホビルジソプロキシル、フマル酸テノホビルジソプロキシル、テノホビルアラフェナミド、またはヘミフマル酸テノホビルアラフェナミドと組み合わされる。
【０３５５】
特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、硫酸アバカビル、テノホビル、テノホビルジソプロキシル、フマル酸テノホビルジソプロキシル、テノホビルアラフェナミド、およびヘミフマル酸テノホビルアラフェナミドからなる群から選択される第１の追加の治療剤、ならびにエムトリシタビンおよびラミブジンからなる群から選択される第２の追加の治療剤と組み合わされる。
【０３５６】
特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、テノホビル、テノホビルジソプロキシル、フマル酸テノホビルジソプロキシル、テノホビルアラフェナミド、およびヘミフマル酸テノホビルアラフェナミドからなる群から選択される第１の追加の治療剤、ならびに第２の追加の治療剤と組み合わされ、ここで、第２の追加の治療剤は、エムトリシタビンである。
【０３５７】
別の特定の実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物は、酢酸シプロテロン、デソゲストレル、ジエノゲスト、ドロスピレノン、吉草酸エストラジオール、エチニルエストラジオール、エチノジオール、エトノゲストレル、レボメフォレート、レボノルゲストレル、リネストレノール、酢酸メドロキシプロゲステロン、メストラノール、ミフェプリストン、ミソプロストール、酢酸ノメゲストロール、ノルエルゲストロミン、ノルエチンドロン、ノルエチノドレル、ノルゲスチメート、オルメロキシフェン、酢酸セゲステロン、酢酸ウリプリスタル、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される第１の追加の治療剤（避妊薬）と組み合わされる。
【０３５８】
キット
本開示はまた、本明細書に記載される１つまたは複数の抗体またはそのコンジュゲートを含むキットも包含する。１つの事例では、本明細書に記載される医薬組成物の成分のうちの１つまたは複数、例えば、本明細書において提供される１つまたは複数の抗体が充填された、１つまたは複数の容器を含む、医薬品パックまたはキットが、本明細書において提供される。一部の事例では、キットは、本明細書に記載される医薬組成物を含む。一実施形態では、本明細書において開示されている抗体またはその医薬組成物を、１つまたは複数の（例えば、１つ、２つ、３つ、１つもしくは２つ、または１つ〜３つの）追加の治療剤（例えば、上に開示されたもの）と組み合わせて含む、キットが、提供される。そのような容器（複数可）には、必要に応じて、医薬品または生物学的製品の製造、使用、または販売を規制している政府機関によって規定された形式の通知が付随し得、その通知には、その機関による、ヒトへの投与のための製造、使用、または販売の承認が示されている。
【実施例】
【０３５９】
以下の実施例は、特許請求される本発明をより良好に例示するために提供されるものであり、本発明の範囲を制限すると解釈されるものではない。特定の材料について言及されている範囲について、これは、単に例示目的であり、本発明を制限することを意図するものではない。当業者であれば、発明的な能力を発揮することなく、また本発明の範囲から逸脱することなく、同等の手段または反応物に発展させることができる。
【０３６０】
（実施例１）
ウイルス中和活性
ＰＧＴ１２１は、ＨＩＶサブタイプＢ単離物の広範な適用範囲（ｃｏｖｅｒａｇｅ）を有する非常に強力な中和抗体である（ＩＣ５０  ０．０３μｇ／ｍｌ、８０％の幅）。ＰＧＴ１２１およびそのバリアントの中和の効力（ＩＣ５０またはＩＣ９５として測定される）および幅（試験したパネルから中和された単離物の％）を、２つの異なる公開されたアッセイ形式：ｉ）シュードタイプ化された、ならびに複製能のあるＨＩＶ単離物に対する抗体のスクリーニングに適合する、ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲレポーター細胞株に基づくアッセイ（Ｌｉら、２００５年、Ｊ  Ｖｉｒ  ７９巻（１６号）：１０１０８〜１０１２５頁）；およびｉｉ）目的のＨＩＶ  Ｅｎｖバリアントでシュードタイプ化されたルシフェラーゼレポーターウイルスを使用するＭｏｎｏｇｒａｍ  ＨＩＶ  ＰｈｅｎｏＳｅｎｓｅ中和アッセイ（Ｍｏｎｏｇｒａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）（Ｒｉｃｈｍａｎら、２００３年、ＰＮＡＳ  １００巻（７号）：４１４４〜４１４９頁）を使用して検査した。
【０３６１】
レポーター細胞株に基づくＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ中和アッセイ、マルチサイクルウイルス複製アッセイ（Ｓｐｅｎｌｅｈａｕｅｒら、２００１年、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、ｄｏｉ：１０．１００６／ｖｉｒｏ．２０００．０７８０）では、患者血漿試料（ＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍ）から増幅された、実験室に適合されたＨＩＶ−１  ＢａＬ株ならびにサブタイプＢ単離物９３ＨＴ５９３、９２ＵＳ６５７、９２ＵＳ７１２および９２ＵＳ７２７を含む、５つの複製能のある臨床単離物のパネルに対して、抗体をスクリーニングした。
【０３６２】
いくつかのバリアントＰＧＴ−１２１抗体の中和効力は、試験した５つのウイルスについてＰＧＴ−１２１（本明細書においてＰＧＴ−１２１  ＬＯ６とも呼ぶ）のものと同等であることが観察されたが、これは、これらの抗体中に存在する改変が、ＰＧＴ−１２１と比較して、抗原認識および結合の決定因子に対する最小限の影響を有していたことを示唆している（以下の表５は、ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−Ｌｕｃ細胞に関するものである）。他のバリアント（例えば、ＰＧＴ１２１．６０およびＰＧＴ１２１．６１）は、ＰＧＴ１２１と比較して、この限定されたウイルスに対する中和効力において２〜３倍の増加を示した。
【０３６３】
【表５】
2020529192.tif 000041
【０３６４】
Ｍｏｎｏｇｒａｍ中和アッセイでは、Ｅｎｖ（ｇｐ１６０）コード領域を、ＨＩＶ＋ＡＲＴナイーブウイルス血症患者から単離された血漿ウイルスＲＮＡから増幅し、発現ベクター中にクローニングして、患者血漿試料中に存在するウイルス擬似種分布を維持した。次いで、発現ベクターを使用して、患者由来Ｅｎｖタンパク質を発現するＨＩＶ−１偽ウイルス群を生成した。クレードＢの臨床単離物の２つのパネルを、Ｍｏｎｏｇｒａｍ中和アッセイのために生成した：パネル１（Ｍｏｎｏｇｒａｍ臨床単離物パネル）は、Ｍｏｎｏｇｒａｍライブラリーコレクションに由来する６３の単離物を含み、３３種またはそれよりも多くのＣＣＲ５指向性ウイルス、１５種またはそれよりも多くのＣＸＣＲ４指向性（Ｘ４）および１５種またはそれよりも多くの二重混合（ＤＭ）指向性のウイルスを含んでおり；ならびにパネル２（Ｇｉｌｅａｄ臨床単離物パネル）は、臨床試験に登録されたＡＲＴナイーブＨＩＶ患者に由来するプレＡＲＴベースライン血漿試料から単離された１４２のサブタイプＢのウイルスを含み、１１３のＣＣＲ５指向性（Ｒ５）ウイルス、２８の二重または混合指向性（ＤＭ）のウイルスおよび１つのＣＸＣＲ４指向性（Ｘ４）ウイルスを含んでいた。ＨＩＶ−１  Ｅｎｖが、クレード間、ならびにクレード内で、患者単離物間で有意な多様性を示すことを考慮すると、ＰＧＴ１２１およびバリアントの中和活性も、Ｍｏｎｏｇｒａｍのライブラリーコレクションに由来するウイルスのパネルを使用して、非Ｂクレードを表すウイルスに対してプロファイリングした。Ｍｏｎｏｇｒａｍ  ＨＩＶ  ＰｈｅｎｏＳｅｎｓｅ  Ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙを使用して、患者単離物の大きいコレクションをプロファイリングすることによって、生成されたＰＧＴ１２１およびバリアントの幅と効力の両方のより精密なプロファイリングを可能にした。その結果を、表６〜９を示す。結果は、ＰＧＴ１２１．６０などのＰＧＴ１２１のバリアントが選択されたウイルスに対する中和活性の増強を示すことを示していた。
【０３６５】
【表６】
2020529192.tif 000042
【０３６６】
【表７】
2020529192.tif 000043
【０３６７】
【表８−１】
2020529192.tif 000044
【表８−２】
2020529192.tif 000045
【０３６８】
【表９−１】
2020529192.tif 000046
【表９−２】
2020529192.tif 000047
【表９−３】
2020529192.tif 000048
【表９−４】
2020529192.tif 000049
【０３６９】
これらの実験により、Ｆｃ増強されたＰＧＴ１２１によるＸ４指向性ＨＩＶ中和の予想外の改善が示された。ＨＩＶは、Ｔ細胞への進入のために、ＣＤ４に加えて、ＣＸＣＲ４またはＣＣＲ５の２つの共受容体を使用することができる。共受容体の結合は、本明細書に記載の広範に中和する抗体の標的であるＥｎｖによって媒介される。かくして、異なる配列を有するＨＩＶの異なる株は、ＣＸＣＲ４（Ｘ４指向性として公知である）、ＣＣＲ５（Ｒ５指向性として公知である）、またはその両方（Ｘ４／Ｒ５もしくは二重指向性として公知である）を優先的に使用する。Ｒ５とＸ４指向性の両方を示すウイルスプール（二重混合またはＤＭと呼ばれる）は、Ｒ５、Ｘ４および／または二重指向性の株の混合物を含有し得る。ＰＧＴ１２１は一般に、Ｘ４単離物に対する弱い感度（低い効力および幅）を示し、Ｒ５指向性ウイルスを優先的に中和する。Ｆｃ変異ＤＥＡＬ＋ＬＳのＰＧＴ１２１への付加（ＰＧＴ１２１．５６）は、ＤＭおよびＸ４指向性ウイルスに対するその中和活性を特異的に増強した（少なくとも１つの単離物について、メジアンＩＣ５０の２倍および最大で約２０倍の増強）。一部のＰＧＴ１２１  Ｆａｂバリアント（例えば、ＰＧＴ１２１．１３およびＰＧＴ１２１．２２）はＲ５  ＤＭおよびＸ４ウイルスに対する中和効力の低減を示したが、ＷＴ  Ｆａｂを含むＰＧＴ１２１．５６などの、ＤＥＡＬ＋ＬＳ  Ｆｃ変異を担持する操作されたＰＧＴ１２１  Ｆａｂバリアントのいくつかは、Ｒ５ウイルスと比較してＤＭおよびＸ４ウイルスを中和する際により強力であった（Ｐ＜０．０００１）（データは示されない）。このことは非常に予想外である。なぜなら、ＨＩＶ中和はＦｃドメインよりもむしろＦａｂドメインによって専ら媒介されると考えられるからである。Ｒ５単離物のうち、中和の２〜３倍の増強が、試験した単離物の約４６％において観察された。ＤＥＡＬ＋ＬＳ変異は、本開示のある特定の抗体およびその断片中に存在する。ＰＧＴ１２１．５６に導入された追加の改変は、選択されたバリアント（例えば、ＰＧＴ１２１．６０）の中和活性をさらに改善した。
【０３７０】
適用範囲の幅を、≦１５μｇ／ｍｌのＩＣ９５で中和されたウイルスの百分率として算出した。≦１５μｇ／ｍｌのＩＣ９５を有するウイルスにわたってメジアンＩＣ９５値を算出することによって、効力を決定した。合計で８９のクレードＢの単離物を含む、ＨＩＶ−１単離物の両パネルに対して試験した場合、本開示の抗体は、ＰＧＴ１２１と比較して中和活性の喪失を示さなかった（データは示さない）。ある特定の抗体の効力は、ＰＧＴ１２１とほぼ同一であり、中和の幅をわずかに改善した。中和プロファイリングはまた、広い範囲のＨＩＶ−１臨床単離物に由来する多様なＥｎｖ抗原を認識し、これに結合する、ＰＧＴ−１２１と比較した抗体の能力の代理評価としても役立った。種々の抗体のプロファイリングに由来するデータにより、中和効力が低減した抗体は、ＡＤＣＣ活性の低減も示すことが示され（データは示さない）、抗体の中和活性とＡＤＣＣ活性との間の正の相関を示唆し、ＡＤＣＣ幅の評価のための代用物としての中和幅の使用を支持している。
【０３７１】
（実施例２）
免疫原性研究
３つの方法を使用して免疫原性を評価し、ＰＧＴ１２１中の免疫原性モチーフを除去するための操作を導いた。ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏ予測ツールを使用して、ＰＧＴ１２１抗体中の免疫原性の潜在的なリスクの部位を同定し、また、新規Ｔ細胞エピトープの導入を防止しながら、製造可能性を改善するための操作努力（例えば、グリコシル化部位の除去、低ｐＨ保持安定性の改善）を導いた。この分析に基づいて、機能的活性に影響するリスクが低いフレームワーク領域の改変を、本開示の抗体中で行って、免疫原性を低減させた。さらに、本開示のある抗体の可変ドメイン内の潜在的に免疫原性のモチーフをさらに同定するために、ｅｘ  ｖｉｖｏでのヒトＴ細胞活性化アッセイであるＥｐｉＳｃｒｅｅｎ（商標）（Ａｎｔｉｔｏｐｅ，Ｌｔｄ．、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫ）を使用した。抗体に由来する重複１５アミノ酸ペプチド、およびＫＬＨ（キーホールリンペットヘモシアニン、陽性対照）に応答する、様々なＨＬＡハプロタイプを表す、５０人の健康なドナーにおいて誘導されたＣＤ４＋Ｔ細胞応答を、Ｈ−チミジン取込みアッセイを使用して評価して、Ｔ細胞増殖を測定した。このアッセイは、抗体操作を導くための一次抗体配列中の特異的Ｔ細胞エピトープの局在化を可能にした。それは、試験した抗体に関するＴ細胞エピトープの相対的免疫原性の順位付けも提供した（データは示されない）。
【０３７２】
選択された抗体バリアントの臨床免疫原性のリスクを評価するために、ＥｐｉＳｃｒｅｅｎ（商標）時間経過Ｔ細胞アッセイ（Ａｎｔｉｔｏｐｅ，Ｌｔｄ．、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫ）を使用して、インタクトな抗体により誘導されるＴ細胞活性化を測定した。全分子アッセイを、記載のように行った（ＢａｋｅｒおよびＪｏｎｅｓ  ２００７年、Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｄｅｖｅｌ．  １０巻：２１９〜２２７頁）。かくして、このアッセイは、Ｔ細胞エピトープ含量だけでなく、ネイティブＩｇＧのプロセシングも考慮に入れる。ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏでのアッセイおよびペプチド走査アッセイと違って、全分子のｅｘ  ｖｉｖｏ  Ｔ細胞活性化アッセイは、所与の抗体の相対的臨床リスクの評価を提供することができ、ある特定の事例では、記載のように臨床免疫原性の比率を予測するために使用することができる（ＢａｋｅｒおよびＪｏｎｅｓ  ２００７年、Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｄｅｖｅｌ．  １０巻：２１９〜２２７頁）。
【０３７３】
多くの臨床段階の抗体がこのアッセイで試行され、臨床免疫原性をほとんど示さないか、全く示さない抗体は、このアッセイにおいて１０％に近いか、またはそれ未満のスコアを有するが、アレムツズマブおよびインフリキシマブなどの高い臨床免疫原性を示す抗体は、２５〜４０％の範囲のスコアを示す（ＢａｋｅｒおよびＪｏｎｅｓ  ２００７年、Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｄｅｖｅｌ．  １０巻：２１９〜２２７頁）。ＰＧＴ１２１．４２、ＰＧＴ１２１．６０、ＰＧＴ１２１．６１およびＰＧＴ１２１．６５は、ＰＧＴ１２１  ＷＴ（すなわち、ＰＧＴ−１２１  ＬＯ６）と比較した場合、低減したドナー応答率を示したが、これは、これらのバリアントに関する臨床免疫原性のリスクの低減を支持している（データは示されない）。
【０３７４】
（実施例３）
ＦｃＲｎ結合
新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）は、ヒトおよび前臨床種におけるＩｇＧ分子の薬物動態を調節する際に主要な役割を果たすことが示されているＦｃ受容体である。エンドサイトーシスの後、酸性ｐＨ（＜６．５）で、ＦｃＲｎは高い親和性でＩｇＧのＦｃ部分に結合する。ＦｃＲｎに結合したＩｇＧは、リサイクルされて細胞外空間に戻り、生理的ｐＨで、ＩｇＧ結合親和性が低減され、ＩｇＧが放出されて循環中に戻る。ＦｃＲｎ経路によってサルベージされない遊離ＩｇＧは、リソソーム中で内因性アミノ酸に分解される。ｐＨ６．０／７．０でのＦｃＲｎへのＩｇＧの相対的結合親和性特徴は、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＩｇＧの半減期を順位付けるために十分に確立された相関物（ｃｏｒｒｅｌａｔｅ）および薬物動態最適化のための設計特色になっている。
【０３７５】
異なるｐＨでの様々な抗体バリアントのＦｃＲｎへの抗体の結合を決定した。９６ウェルのＭａｘｉｓｏｒｐプレートを、１００μｌの５μｇ／ｍｌのＦｃＲｎで被覆した。プレートを４℃で一晩インキュベートした後、０．０５％Ｔｗｅｅｎ  ２０洗浄緩衝液で３回洗浄した後、室温で２時間、４％スキムミルクでブロックした。プレートを室温で１時間、一次抗体の３倍系列希釈物と共にインキュベートした。次いで、プレートを３回洗浄し、４％スキムミルク中で希釈された１００μＬのＦａｂ−抗ヒトＦａｂ−ＨＲＰまたはヤギ抗ヒトＩｇＧ−ＨＲＰ二次抗体を添加した。次いで、プレートを室温で５０分インキュベートし、３回洗浄し、１００μＬの新鮮なＴＭＢ基質を添加した。プレートを、穏やかに振盪しながらベンチ上で３分間発色（ｄｅｖｅｌｏｐ）させた。プレートを１００μＬの１Ｍ  ＨＣｌでクエンチし、軽く振盪し、ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ  ｍ５プレートリーダー上、Ａ４５０で読み取った。
【０３７６】
ＰＧＴ−１２１と比較して、ＦｃＲｎと相互作用するＩｇＧのＦｃ部分中にＬＳ変異を含む本開示の抗体は、ヒトＦｃＲｎに関するｐＨ７．０／６．０の比によって表されるように、ｐＨ６．０でＦｃＲｎ結合の有意な改善を示し、７．０の中性ｐＨでは結合にあまり影響しなかった。結合の改善は、ＬＳ変異の存在に起因するものであり、ＰＧＴ−１２１と比較してヒトにおける長い半減期を提供すると予測される。データを、表１０に示す。
【０３７７】
【表１０】
2020529192.tif 000050
【０３７８】
このデータは、ＰＧＴ１２１．５６またはＰＧＴ１２１．４２を超える、ＰＧＴ１２１．６０および６１の有意な改善を示す。ＰＧＴ１２１．５６は、ＤＥＡＬ＋ＬＳ  Ｆｃを有するＷＴ  Ｆａｂである。これは、ＰＧＴ１２１．６０および６１中のＦａｂ変異がＦｃＲｎ結合を改善することを示唆する。ＰＧＴ１２１．６４およびＰＧＴ１２１．６５は、この改善を示さないが、これは、これらの２つのバリアント中のＦａｂ改変が実際にＦｃＲｎ結合を低減させ得ることを示唆している。
【０３７９】
（実施例４）
ｉｎ  ｖｉｖｏでのプロファイリング
ＰＧＴ１２１および本出願に由来するいくつかの抗体をアッセイして、その基本的な薬物動態プロファイルを特徴付けて、本開示の抗体中に存在するＦａｂ／Ｆｃ改変が、ＰＧＴ１２１の固有の薬物動態挙動を増強し、それを有意に摂動させないことを確実にした。ＰＧＴ１２１および本開示のいくつかの他の抗体のｉｎ  ｖｉｖｏでの処分を、２匹のオスのナイーブなカニクイザル（ｎ＝２）において単回静脈内（ＩＶ）１．０ｍｇ／ｋｇ用量後に特徴付けた。血清試料をサルから収集し、生物分析学的方法（本明細書に記載される）を使用して分析して、非コンパートメント薬物動態分析（ＮＣＡ）により、血清濃度−時間プロファイルおよび平均血清薬物動態パラメーターを決定した。
【０３８０】
別の試験では、ＰＧＴ１２１、ＰＧＴ１２１  ＬＳ、ならびにＰＧＴ１２１．４２およびＰＧＴ１２１．６０の新しいロットの固有の薬物動態挙動を、３匹のオスのナイーブなカニクイザル（ｎ＝３）において単回ＩＶ  １０．０ｍｇ／ｋｇ用量後に特徴付けた。血清試料を収集し、生物分析学的方法（本明細書に記載される）を使用して分析して、非コンパートメント薬物動態分析（ＮＣＡ）により、血清濃度−時間プロファイルおよび平均血清薬物動態パラメーターを決定した。ＰＧＴ１２１、ＰＧＴ１２１．４２、ＰＧＴ１２１．４３、ＰＧＴ１２１．６０およびＰＧＴ１２１．６１の平均血清薬物動態パラメーターを、濃度−時間プロファイルの非コンパートメント薬物動態分析から決定し、表１１に記載する。ｉｎ  ｖｉｖｏで試験した本開示の全ての抗体は、ＰＧＴ１２１と比較して、同等であるか、または改善された薬物動態（本明細書で定義される）を有していた。
【０３８１】
【表１１】
2020529192.tif 000051
【０３８２】
ＰＧＴ１２１、ＰＧＴ１２１  ＬＳ、ＰＧＴ１２１．４２、およびＰＧＴ１２１．６０の平均血清薬物動態パラメーターを、濃度−時間プロファイルの非コンパートメント薬物動態分析から決定し、表１２に記載する。
【０３８３】
【表１２】
2020529192.tif 000052
【０３８４】
ｉｎ  ｖｉｖｏで試験した本開示の全ての抗体は、ＰＧＴ１２１と比較して、同等であるか、または改善された薬物動態（本明細書で定義される）を有していた。ＰＧＴ１２１．６０は、ＰＧＴ１２１と比較して、試験したウイルスに対する増加した効力を示した（データは示されない）。ＰＧＴ１２１バリアント、例えば、ＰＧＴ１２１．６０、ＰＧＴ１２１．６４、およびＰＧＴ１２１．６５は、試験した全てのウイルス分離株にわたって、改善された効力を示した（データは示されない）。これは、なされた改変（おそらくＣＤＲの外側の抗原接触残基に対してなされた改変）が中和効力を改善したことを示唆する。ＰＧＴ１２１．６０は、ＰＧＴ１２１と比較して、Ｂサブタイプおよび非Ｂサブタイプを表すウイルスに対する増加した中和活性を示した（データは示されない）。
【０３８５】
（実施例５）
ＨＩＶ感染細胞を死滅させる、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙの能力の評価
例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）（Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０部分の重鎖配列は、以下に提供されており、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０部分の軽鎖は、配列番号１０に示される配列を有し、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３部分の重鎖配列は、以下に提供されており、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３部分の軽鎖は、配列番号２０に示される配列を有していた）、ならびに単一特異性ＰＧＴ１２１．６０（配列番号４１および１０）の殺滅活性を、２２個の初代ＨＩＶ−１分離株またはクローンに対して、評価した。それぞれのウイルスは、平均４人の健常なＰＢＭＣドナーで評価した（表１３を参照されたい）。死滅させた感染細胞の比率（Ｅｍａｘ）は、例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）（平均±標準偏差、７０％±１１％）では、ＰＧＴ１２１．６０（平均±標準偏差、５６％±１６％、対応のあるＴ検定、Ｐ＝０．００１）よりも有意に高かった。例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）はまた、ＰＧＴ１２１．６０よりも有意に強力であり、ＰＧＴ１２１．６０の１．０３４μｇ／ｍＬ±１．４０８μｇ／ｍＬ（対応のあるＴ検定、Ｐ＝０．００７）と比較して、０．１２９μｇ／ｍＬ±０．０７４μｇ／ｍＬのＥＣ５０値を達成した。ＰＧＴ１２１．６０と比較した例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＥＣ５０の平均倍数変化は、２１倍であった。
【０３８６】
【表１３】
2020529192.tif 000053
【０３８７】
まとめると、例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）は、ＰＧＴ１２１．６０よりも有意に低い濃度で、有意に高い比率のＨＩＶ感染細胞を死滅させる。
【０３８８】
Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のｇｐ１２０部分の重鎖配列：
【化２８】
2020529192.tif 000054
【化２９】
2020529192.tif 000055
【０３８９】
Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）のＣＤ３部分の重鎖配列：
【化３０】
2020529192.tif 000056
【０３９０】
方法
ＰＢＭＣエフェクター細胞による感染細胞の殺滅
例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）に依存するＨＩＶ感染ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅およびＰＧＴ−１２１．６０に依存するＨＩＶ感染ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅を、初代休止ＨＩＶ感染ＣＤ４＋Ｔ細胞を標的細胞として使用し、自己ＰＢＭＣをエフェクター細胞として使用して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて調査した。初代ＣＤ４＋Ｔ細胞を、１２００×ｇで２時間のスピンフェクションによって、５０〜１００ｎｇのｐ２４／１００万個の細胞を用いて感染させ、ＲＰＭＩ培地（１０％のＦＢＳおよび１％のペニシリン／ストレプトマイシンを補充）において、３０Ｕ／ｍＬのＩＬ−２（Ｒｏｃｈｅカタログ番号１１０１１４５６００１）とともに、３７℃で５日間培養した。ｄｅ  ｎｏｖｏ抗原発現を可能にするために５日間静置した後、スピンフェクトしたＣＤ４＋Ｔ細胞培養物を、３回洗浄して、遊離ウイルスを除去し、９６ウェルプレートに、２×１０５個の細胞／ウェルで播種し、ヒト血清ＩｇＧ（５ｍｇ／ｍＬ最終濃度）の存在下において、１時間、７つの濃度の例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）またはＰＧＴ−１２１．６０の１０倍連続希釈物とともにインキュベートした。ＣＤ４＋Ｔ細胞標的がオプソニン化している間に、エフェクター細胞を調製した。凍結保存していた自己ＰＢＭＣを解凍し、ＰＫＨ６７を製造業者の指示に従って使用して膜染色を行い、４×１０５個の細胞／ウェルで、オプソニン化標的細胞に添加して、２：１のＥ：Ｔ比を得た。エフェクター細胞を、１ウェル当たり２００μＬの最終体積で、２４〜４８時間、オプソニン化した標的細胞とともに共培養した。
【０３９１】
ＨＩＶ感染標的細胞の殺滅は、フローサイトメトリーによって決定した。共培養期間の終わりに、細胞を、ＰＢＳで２回洗浄し、１００μＬのＬｉｖｅ／Ｄｅａｄ  Ａｑｕａ（ＰＢＳ中に１／１０００で希釈）で、染色が１００μＬのＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ＋２％ＦＢＳ）の添加により不活性にされるまで、１０分間染色した。次いで、細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、抗ＣＤ４−ＰＥ／Ｃｙ７  ｍＡｂ（ＦＡＣＳ緩衝液中に１／５０で希釈）とともに、２０分間インキュベートした後、ＦＡＣＳ緩衝液で３回洗浄し、１００μＬのＣｙｔｏｆｉｘ／Ｃｙｔｏｐｅｒｍで、１０分間、固定および透過処理した。細胞を、次いで、ＰｅｒｍＷａｓｈで１回洗浄し、ＦＡＣＳ緩衝液＋１０％ＰｅｒｍＷａｓｈ中の抗ｐ２４−ＰＥ  ｍＡｂとともに、２５分間インキュベートした。最後に、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液で３回洗浄し、１２０μＬのＦＡＣＳ緩衝液中に再懸濁し、ＬＳＲ  ＦｏｒｔｅｓｓａまたはＸ２０  ＦＡＣＳ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）においてフローサイトメトリーデータを取得し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェア（ＴｒｅｅＳｔａｒ）を使用して分析した。
【０３９２】
データの分析
ＰＢＭＣによる感染初代ＣＤ４＋Ｔ細胞の殺滅に関して、フローサイトメトリーによるＨＩＶ感染標的細胞の計数には、以下のゲーティング戦略を使用した：リンパ球を、前方および側方散乱に基づいて選択し、生存リンパ球を、Ｌｉｖｅ／Ｄｅａｄ  Ａｑｕａの陰性染色によって選択した。次いで、接種されたＣＤ４＋Ｔ細胞を表すＰＫＨ６７陰性の生存リンパ球を選択し、ＨＩＶ感染細胞を、ｐ２４  Ｇａｇ＋、ＣＤ４ｌｏｗ（ＨＩＶに媒介されるＣＤ４の下方モジュレーションに起因する）細胞として同定した。ＨＩＶ感染パーセントは、ＨＩＶに感染している（ｐ２４  Ｇａｇ＋、ＣＤ４ｌｏｗ陽性）接種（ＰＫＨ６７陰性）ＣＤ４＋Ｔ細胞のパーセントによって表した。
【０３９３】
例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）で処置したウェルまたはＰＧＴ−１２１．６０で処置したウェルにおけるＨＩＶ感染標的細胞のパーセントを、未処置のウェル（ヒト血清ＩｇＧのみで処置、９６ウェルプレート当たりｎ＝２〜１０）におけるＨＩＶ感染標的細胞の平均パーセントと比較した。ＨＩＶ感染標的細胞の殺滅パーセントは、以下の等式を使用して計算した：
１００−（（処置したウェルにおけるＨＩＶ感染標的細胞％／未処置のウェルにおけるＨＩＶ感染標的細胞％）×１００）。
【０３９４】
例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）またはＰＧＴ−１２１．６０によって死滅させた感染細胞の最大割合（maximal  fraction）（Ｅｍａｘ）、ならびに最大半量の殺滅をもたらす濃度（ＥＣ５０）を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（Ｌａ  Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）ソフトウェアを使用して、３パラメーターの非線形回帰（等式１）によって適合される用量応答曲線から得た。
等式１：
【数１】
2020529192.tif 000057
式中、Ｙ＝殺滅％、Ｘ＝抗体濃度、Ｂｏｔｔｏｍ＝抗体の非存在下における応答、Ｔｏｐ＝最大応答。
【０３９５】
見かけのＥｍａｘが４０％を下回る用量応答曲線は、ＥＣ５０値を１００μｇ／ｍＬを上回るとして報告し、０％以下の絶対値を有するＥｍａｘには、０％を割り当てた。
【０３９６】
（実施例６）
抗ｇｐ１２０抗体バリアントの評価
加速ストレス条件下において（２５℃、４０℃）、ＰＧＴ−１２１．６０の軽鎖可変ドメインの５９位におけるアスパラギン酸は、異性化を受けてＩｓｏＡｓｐとなる。Ａｓｐ５９は、ＨＩＶ  Ｅｎｖ  Ｎ３３２結合モチーフの一部を形成しており、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）の喪失をもたらすＰＧＴ−１２１．６０によるｇｐ１２０結合に極めて重要である。この化学的傾向（chemical  liability）は、薬品の凍結乾燥によって軽減された。
【０３９７】
ＰＧＴ−１２１．６０を、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）分子のアームのうちの１つとして選択した。凍結乾燥は、上首尾の商業的戦略であるが、開発および製造を能率的にし、ロットごとの一致性を改善し、Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）形式の液体製剤を可能にするために、ＰＧＴ−１２１．６０から異性化の傾向を排除することが、望ましかった。Ｔ細胞エピトープを再導入することなく、生物活性を維持しながら、アスパラギン酸異性化部位を除去することが、操作の目標であった。操作により得られた上位のバリアントのうちの４つ（バリアント１、バリアント２、バリアント３、およびバリアント４）を、ＰＧＴ−１２１．６０  ＡＤＣＣレポーター細胞に基づくアッセイを使用した結合および効力の試験を含む、特徴付けへと進めた。
【０３９８】
バリアントは４つ全てが、以下に提供される同じ重鎖アミノ酸配列を有する：
【化３１】
2020529192.tif 000058
【０３９９】
バリアント１は、配列番号４０に示される軽鎖配列を有する。バリアント２は、配列番号７８に示される軽鎖配列を有する。バリアント３は、配列番号７９に示される軽鎖配列を有する。バリアント４は、配列番号８０に示される軽鎖配列を有する。
【０４００】
結合の研究
上記の様々なバリアント抗体の、ｇｐ１２０  ＨＩＶ  ＥＮＶタンパク質への結合を、決定した。３８４ウェルのＭａｘｉｓｏｒｐプレートに、２５μｌの、５μｇ／ｍｌのｇｐ１２０をコーティングした。プレートを、４℃で一晩インキュベートした。プレートを、ＰＢＳ０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０洗浄緩衝液で４回洗浄し、６００ｒｐｍで振盪させながら、室温において１時間、７５μｌのＰＢＳ５％ＢＳＡでブロッキングした。プレートを、６００ｒｐｍで振盪させながら、室温で１時間、一次抗体の３倍連続希釈物とともにインキュベートした。次いで、プレートを、ＰＢＳ０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で４回洗浄し、２５μｌのヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）ＨＲＰ二次抗体を、ＰＢＳ１％ＢＳＡ中に希釈し、６００ｒｐｍで振盪させながら、室温で４０分間インキュベートした。プレートを、ＰＢＳ０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０で４回洗浄し（The  plates  where  washed  4  times  with  PBS  0.05%  Tween  20）、２５μｌの新しいＴＭＢ基質を添加した。プレートを、６００ｒｐｍで振盪させながら、９０秒間顕色させ、２５μｌの１Ｍ  ＨＣｌでクエンチした。プレートを、Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ  ｍ５プレートリーダーにおいて、Ａ４５０で読み取った。
【０４０１】
ＰＧＴ−１２１．６０と比較して、フレームワーク挿入ループ内のアスパラギン酸異性化部位に変異を含む本開示のバリアント抗体は、ｇｐ１２０への結合の改善および減少の両方を有していた。配列活性関連性分析により、残基５９におけるアスパラギン酸の維持に、明確かつ強力な優先性が示された。グリシンは、残基５９において許容されたが、一方でグルタミン、グルタミン酸、およびアスパラギンは、抗体がｇｐ１２０に結合する能力に負の影響を与えた。残基６０では、導入されたアミノ酸のより嵩高い側基が、許容された。データを、以下の表１４に示す。
【０４０２】
【表１４】
2020529192.tif 000059
（上の表において、分子の横の文字は、軽鎖の５９位および６０位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるアミノ酸に対応する。変異した残基（複数可）は、太字で示されている。）
【０４０３】
このデータは、バリアント２、バリアント１、およびバリアント３のｇｐ１２０結合における、ＰＧＴ１２１．６０および他のバリアントを上回る改善を示しており、アスパラギン酸異性化部位の変異が、ｇｐ１２０への結合に影響を及ぼし得ることが示唆される。これらのバリアントは、ＤＥＡＬ＋ＬＳ  Ｆｃ（すなわち、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ａ３３０Ｌ、Ｍ４２８Ｌ、およびＮ４３４Ｓ変異（「ＤＥＡＬＬＳ」）を有するＦｃ）を用いて試験した。
【０４０４】
効力の研究
ＰＧＴ−１２１．６０  ＡＤＣＣアッセイは、ＨＴ５９３を発現する標的細胞株を組み込み、ＨＴ５９３は、ＰＧＴ−１２１．６０におけるｉｓｏＡｓｐの傾向に感受性であることが知られているため、このアッセイを選択した。ＡＤＣＣレポーター細胞に基づくアッセイは、ＡＤＣＣ活性の代替尺度として、ＰＧＴ−１２１．６０が活性化Ｔ細胞の核内因子（ＮＦＡＴ）に媒介されるルシフェラーゼ発現を誘導する能力を測定する。このアッセイにおいて、ＦｃγＲＩＩＩａ受容体（Ｖ１５８）およびＮＦＡＴにより調節されるルシフェラーゼを発現するＪｕｒｋａｔ細胞を、漸増濃度のＰＧＴ−１２１．６０参照標準、対照、および試料の存在下において、ｇｐ１２０を発現するヒト胎児性腎臓（ＨＥＫ）細胞とともに、インキュベートする。ＰＧＴ−１２１．６０は、ＨＥＫ細胞表面上のｇｐ１２０に結合し、Ｊｕｒｋａｔ細胞上のＦｃγＲＩＩＩａに効果的に架橋し、ＮＦＡＴを介してルシフェラーゼ遺伝子発現を活性化する。相対発光単位（ＲＬＵ）を、ＰＧＴ−１２１．６０濃度に対してプロットし、平行ライン分析プログラムを使用して、参照標準と比べた対照および試料の効力を決定する。第１の参照標準（ＲＳ）として、ＰＧＴ−１２１．６０に、１００％の相対効力（ＲＰ）値を割り当てた。
【０４０５】
ＰＧＴ−１２１．６０バリアント、すなわち、バリアント１、バリアント２、バリアント３、およびバリアント４の試料を、０．５ｍｇ／ｍＬの中間濃度に希釈し、タンパク質の濃度を、ＵＶ分光光度法（２８０ｎｍの最大吸光度−３２０ｎｍの吸光度）によって確認した。中間体を、続いて、０．６ｎｇ／ｍＬ  ４．９６μｇ／ｍＬの初期濃度範囲に希釈した。試料（対照、２５℃、４週間）を、次いで、上記のＡＤＣＣアッセイに従って試験したが、ただし、熱ストレスを与えた試料を、ＰＧＴ−１２１．６０参照標準ではなく、それらのそれぞれの対照（１００％のＲＰとして割り当てた）に対して定量したことを除いた。
【０４０６】
ＰＧＴ．１２１．６０バリアントであるバリアント１、バリアント２、バリアント３、およびバリアント４の試料を、２５℃で４週間のインキュベーションによって、熱ストレスに供した。次いで、これらを、ＰＧＴ．１２１．６０  ＡＤＣＣレポーター細胞に基づくアッセイにおいて、２〜８℃で保管していたそれらのそれぞれの未処置対照とともに、試験した。結果を、表１５に示す。
【０４０７】
【表１５】
2020529192.tif 000060
【０４０８】
結果は、熱処置したＰＧＴ−１２１．６０が、減少した活性（６５％ＲＰ）を示す一方で、バリアント２、バリアント３、バリアント４、およびバリアント１のバリアントのＡＤＣＣ活性（それぞれ９６％、１０４％、９５％、および１００％）は、２５℃で４週間、処置によって影響を受けなかったことを示す。
【０４０９】
（実施例７）
ＨＩＶ中和活性の評価
抗体によるＨＩＶ−１中和の効力（ＩＣ５０またはＩＣ９５として測定）および幅（試験したパネルからの中和された分離株に対する％）を、（ｉ）ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲレポーター細胞株に基づくアッセイ、およびｉｉ）Ｍｏｎｏｇｒａｍ  ＨＩＶ  ＰｈｅｎｏＳｅｎｓｅ  Ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ（Ｍｏｎｏｇｒａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）において、実施例１に記載されるように試験した。
【０４１０】
ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲレポーター細胞株に基づく中和アッセイにおいて、抗体を、４０個のクレードＢの複製能力のあるＨＩＶ−１分離株およびクローンのパネルに対して、試験した。
【０４１１】
バリアント１〜４の中和効力は、ＰＧＴ−１２１．６０の中和効力と類似であった（ＰＧＴ−１２１．６０と比較した、それぞれのバリアントの対応のあるスチューデントのＴ検定のＰ値は、≧０．３７２であった）。ＰＧＴ−１２１．６０と比較して、バリアントのＩＣ５０値の幾何平均倍数変化は、バリアント１の１．０３５から、バリアント２の１．５３９に及び、ＰＧＴ−１２１．６０におけるイソアスパラギン酸傾向を抑止する変異が、ＰＧＴ−１２１．６０のＨＩＶ中和活性に有意に影響を及ぼさなかったことが示された。バリアント１〜４の中和活性は、試験した４０個のウイルスのうちの１つについて、完全に抑止された（ウイルス８３３９）。結果を、表１６に示す。
【０４１２】
【表１６−１】
2020529192.tif 000061
【表１６−２】
2020529192.tif 000062
【０４１３】
Ｍｏｎｏｇｒａｍ  ＨＩＶ  ＰｈｅｎｏＳｅｎｓｅ  Ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙにおいて、バリアント１〜３のＨＩＶ中和活性を、Ｇｉｌｅａｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｓｏｌａｔｅｓパネル（ｎ＝１４２個のウイルス）に対して、ＦＥＡＲ／ＦＥＡＬ  Ｆｃを有する二重特異性形式で評価した。ＦＥＡＲ／ＦＥＡＬ二重特異性形式において評価した場合、バリアント１〜３の効力は、ＰＧＴ−１２１．６０  ＤＥＡＬ＋ＬＳと比較して４．１倍〜５．３倍低減された（表１７）。バリアントをＤＥＡＬ＋ＬＳ形式において評価したＣＥＭ．ＮＫｒ．ＣＣＲ５．ＬｕｃＲに基づくアッセイの結果と合わせると、結果から、二重特異性Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）形式は、変異がＰＧＴ−１２１．６０におけるイソアスパラギン酸傾向を抑止するためのものでなく、ＨＩＶ中和活性を４〜５倍損なうものであることが示される。
【０４１４】
【表１７−１】
2020529192.tif 000063
【表１７−２】
2020529192.tif 000064
【表１７−３】
2020529192.tif 000065
【表１７−４】
2020529192.tif 000066
【表１７−５】
2020529192.tif 000067
【表１７−６】
2020529192.tif 000068
【表１７−７】
2020529192.tif 000069
【０４１５】
（実施例８）
Ｔ細胞活性化
ＣＤ３＋Ｔ細胞と目的の抗原を発現する標的細胞との、ＣＤ３二重特異性抗体によるライゲーションにより、Ｔ細胞活性化が生じる。Ｔ細胞活性化は、一般に、抗原陽性標的細胞の非存在下において、ＣＤ３二重特異性抗体では見られない。このＴ細胞活性化の抗原陽性標的細胞の存在への依存性により、全般的なＴ細胞活性化を防止し、全般的なＴ細胞活性化に関連する有害事象、例えば、サイトカイン放出症候群を制限することができる。
【０４１６】
両方の抗原の存在下においてのみＴ細胞を活性化するｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）の能力を評価するために、本発明者らは、ＨＩＶ非感染ドナー（ｎ＝２）およびＨＩＶ感染ドナー（ｎ＝２）から単離した初代ＰＢＭＣを、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）バリアント１、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）バリアント２、またはＰＧＴ−１２１．６０、ならびに（ｉ）ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）による殺滅に感受性であるＨＩＶ−１ウイルス（７５５２）を感染させたか、（ｉｉ）ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）による殺滅に耐性であるＨＩＶ−１ウイルス（ＴＨＲＯ）を感染させたか、または（ｉｉｉ）非感染であるかのいずれかであるＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞とともに、インキュベートした。ＰＢＭＣおよびＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞を、標的細胞に対するエフェクター細胞の比１：１０で、共培養して、標的細胞に結合するエフェクター細胞の数を最大化させ、それによって、活性化エフェクター細胞を検出する能力を最大化させた。ＨＩＶ非感染ドナー（ｎ＝２）およびＨＩＶ感染ドナー（ｎ＝２）の両方に由来するエフェクター細胞を、評価した。結果を、表１８〜２３に示す。
【０４１７】
ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙバリアント１（表１８および１９）ならびにｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙバリアント２（表２０および２１）の両方が、初代ＣＤ４  Ｔ細胞およびＣＤ８  Ｔ細胞における、Ｔ細胞活性化マーカーであるＣＤ６９およびＣＤ２５の用量依存性の上方調節を誘導した。ＰＤ−１のわずかな上方調節もまた、観察された。Ｋｉ６７の上方調節は観察されなかった。ＨＩＶ非感染ドナーおよびＨＩＶ感染ドナーに由来するＴ細胞は、同様に応答した。活性化マーカーの上方調節は、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙによる殺滅に感受性であるＨＩＶ−１ウイルス（７５５２）を感染させたＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞の存在下においてのみ観察されたため、活性化マーカーの上方調節は、両方の抗原へのｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙの結合に依存性であった。エフェクター細胞を、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙによる殺滅に耐性であるＨＩＶウイルス（ＴＨＲＯ）を感染させたＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞、または非感染のＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞とともに共培養した場合には、活性化マーカーの上方調節は観察されなかった。Ｔ細胞には結合しないＰＧＴ−１２１．６０は、ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞が、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）による殺滅に感受性のウイルスに感染しているか感染していないかにかかわらず、Ｔ細胞活性化マーカーの上方調節を誘導しなかった（表２２および２３）。
【０４１８】
【表１８−１】
2020529192.tif 000070
【表１８−２】
2020529192.tif 000071
【０４１９】
【表１９】
2020529192.tif 000072
【０４２０】
【表２０−１】
2020529192.tif 000073
【表２０−２】
2020529192.tif 000074
【０４２１】
【表２１−１】
2020529192.tif 000075
【表２１−２】
2020529192.tif 000076
【０４２２】
【表２２−１】
2020529192.tif 000077
【表２２−２】
2020529192.tif 000078
【０４２３】
【表２３−１】
2020529192.tif 000079
【表２３−２】
2020529192.tif 000080
【０４２４】
方法
ＨＩＶ非感染ドナー（ｎ＝２）およびＨＩＶ感染ドナー（ｎ＝２）から得られた、ｌｅｕｋｏｐａｋからＦｉｃｏｌ  ｐａｑｕｅによって単離した１×１０４個のヒト初代Ｔ細胞を、（ｉ）ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）による殺滅に感受性であるＨＩＶ−１ウイルス（７５５２）に感染させたか、（ｉｉ）ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）による殺滅に耐性であるＨＩＶ−１ウイルス（ＴＨＲＯ）に感染させたか、または（ｉｉｉ）非感染であるかのいずれかである、１×１０５個のＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞とともに、３７℃で２４時間、共培養することによって、Ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙにより誘導されるＴ細胞活性化マーカーの上方調節を評価した。次いで、ウェルを、ＦＡＣＳ緩衝液で３回洗浄し、Ｌｉｖｅ／Ｄｅａｄ  Ａｍｃｙａｎ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ、カタログ番号Ｌ３４９６６）を製造業者の指示に従って染色し、ＦＡＣＳ緩衝液で３回洗浄し、ＦＡＣＳ緩衝液中に希釈した以下の抗体とともに、室温で２０分間インキュベートした：抗ＣＤ４−ＢＶ７１１（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号５６３０２８）、抗ＣＤ８−ＡＰＣ／Ｃｙ７（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号５６０１７９）、抗ＣＤ２５−ＰＥ／Ｃｙ７（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号５５７７４１）、抗ＣＤ６９−ＰｅｒＣＰ／Ｃｙ５．５（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、カタログ番号３１０９２６）、抗ＰＤ−１−ＢＶ６０５（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、カタログ番号３２９９２４）、抗Ｋｉ６７−ＡＦ７００（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号５６１２７７）。次いで、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液で３回洗浄し、１００μＬのＣｙｔｏｆｉｘ／Ｃｙｔｏｐｅｒｍで１０分間固定および透過処理し、ＰｅｒｍＷａｓｈで１回洗浄し、１２０μＬのＦＡＣＳ緩衝液中に再懸濁し、フローサイトメトリーデータをＬＳＲ  ＦｏｒｔｅｓｓａまたはＸ２０  ＦＡＣＳ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）において取得し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェア（ＴｒｅｅＳｔａｒ）を使用して分析した。
【０４２５】
それぞれの活性化マーカーを発現するＣＤ４およびＣＤ８  Ｔ細胞の最大割合（Ｅｍａｘ）、ならびに５０％Ｅｍａｘをもたらす濃度（ＥＣ５０）を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（Ｌａ  Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）ソフトウェアを使用して、３パラメーターの非線形回帰（等式１）によって適合される用量応答曲線から得た。
等式１：
【数２】
2020529192.tif 000081
式中、Ｙ＝活性化％、Ｘ＝抗体濃度、Ｂｏｔｔｏｍ＝抗体の非存在下における応答、Ｔｏｐ＝最大応答。
【０４２６】
Ｔ細胞活性化について、ベースライン（抗体対照なしのウェル）を上回るＥｍａｘが５％を下回る用量応答曲線は、ＥＣ５０値を、１００μｇ／ｍＬ（試験した最大濃度）を上回るとして報告した。
【０４２７】
（実施例９）
ＰＢＭＣエフェクター細胞を使用したＨＩＶ感染ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅
殺滅活性を、４つの初代ＨＩＶ−１分離株および分子クローンに対して、評価した。それぞれのウイルスを、２人の健常なドナーに由来するＰＢＭＣエフェクター細胞を使用して評価し、結果を表２４に示す。死滅させた感染細胞の比率（Ｅｍａｘ）は、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）（例示、バリアント１、およびバリアント２）（中央値７６％）では、ＰＧＴ−１２１．６０（中央値１８％、マンホイットニー、Ｐ＜０．０００１）およびＰＧＴ−１２１（中央値０％、マンホイットニー、Ｐ＜０．０００１）よりも有意に高かった。
【０４２８】
ＰＧＴ−１２１．６０およびＰＧＴ−１２１と比較して有意に多い数の感染細胞を死滅させることに加えて（Ｅｍａｘ）、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（例示、バリアント１、および２；メジアンＥＣ５０、０．０４２ｕｇ／ｍＬ）は、感染細胞の殺滅に関して、ＰＧＴ−１２１（メジアンＥＣ５０、＞１００ｕｇ／ｍＬ；マンホイットニー、Ｐ＜０．０００１）よりも有意に強力であり、ＰＧＴ−１２１．６０（メジアンＥＣ５０、＞１００ｕｇ／ｍＬ；マンホイットニー、Ｐ＝０．１１５７）よりも強力である傾向にあった。
【０４２９】
ＰＧＴ−１２１．６０（中央値１８％）とＰＧＴ−１２１（中央値０％）との間の感染細胞殺滅効率（Ｅｍａｘ）における差は、統計学的に有意であった（マンホイットニー、Ｐ＝０．０１８）。さらに、ＰＧＴ−１２１．６０は、ＰＧＴ−１２１（Ｐ＝０．１２８）よりも強力な傾向にあった。結果は、ＣＤ３二重特異性Ｄｕｏｂｏｄｙが、ＰＧＴ−１２１．６０（エフェクター増強ＩｇＧ１  ｍＡｂ）またはＰＧＴ−１２１（ＩｇＧ１  ｍＡｂ）よりも、増加したＨＩＶ感染細胞殺滅を示したことを示唆する。
【０４３０】
【表２４】
2020529192.tif 000082
【０４３１】
方法
ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞に、２０μｇ／ｍＬのＤＥＡＥデキストランを含有するＲ１０＋１＋１（ＲＭＰＩに、１０％ＦＢＳ、１％ペニシリン／ストレプトマイシン、１％ＨＥＰＥＳを加えたもの）培地中の、ＨＩＶ−１分離株９２ＵＳ６５７、１４８９、８３９８、および７５５２を感染させ、３７℃で４時間インキュベートした。接種の４時間後に、ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞を、Ｒ１０＋１＋１で３倍に希釈し、４８〜７２時間培養して、ＨＩＶ  Ｅｎｖのｄｅ  ｎｏｖｏ発現を可能にした。感染ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞を、３回洗浄して、遊離ウイルスを除去し、白色の９６ウェルプレートに、２×１０４個の細胞／ウェルで播種し、ヒト血清ＩｇＧ（５ｍｇ／ｍＬの最終濃度）の存在下において、７つの濃度のｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）またはＰＧＴ−１２１．６０の１０倍連続希釈物とともに、１時間インキュベートし、その後、２×１０５個のＰＢＭＣ／ウェルを、オプソニン化ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞に添加し、最終体積１００μＬにおいて、３７℃で４８時間インキュベートした。１００μＬ／ウェルのＯＮＥ−Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼ試薬の添加によって、ＨＩＶ感染ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅を決定し、相対発光単位（ＲＬＵ）を、ルミノメーターにおいて、製造業者の指示に従って測定した。
【０４３２】
ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）およびＰＧＴ−１２１．６０によるＨＩＶ感染ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅は、ｇｐ１２０×ＣＤ３  ＤｕｏｂｏｄｙまたはＰＧＴ−１２１．６０で処置したウェルのＲＬＵから決定し、未処置ウェルにおけるＨＩＶ感染ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞（ヒト血清ＩｇＧのみで処置、９６ウェルプレート当たりｎ＝２〜１０）のＲＬＵと比較した。ＨＩＶ感染ＣＥＭ−ＮＫｒ−ＣＣＲ５−ＬｕｃＲ  ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅パーセントは、以下の等式を使用して計算した：
１００−（（処置ウェルにおけるＨＩＶ感染標的細胞のＲＬＵ  ／未処置ウェルにおけるＨＩＶ感染標的細胞のＲＬＵ）×１００）。
【０４３３】
死滅させた感染細胞の最大割合（Ｅｍａｘ）、ならびに５０％殺滅をもたらす濃度（ＩＣ５０）を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（Ｌａ  Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）ソフトウェアを使用して、３パラメーターの非線形回帰（等式１）によって適合される用量応答曲線から得た。
等式１：
【数３】
2020529192.tif 000083
式中、Ｙ＝殺滅％、Ｘ＝抗体濃度、Ｂｏｔｔｏｍ＝抗体の非存在下における応答、Ｔｏｐ＝最大応答。
【０４３４】
感染細胞殺滅について、見かけのＥｍａｘが１０％を下回る用量応答曲線は、ＩＣ５０値を１００μｇ／ｍＬを上回るとして報告し、０％以下の絶対値を有するＥｍａｘには、０％を割り当てた。
【０４３５】
（実施例１０）
扁桃由来の単核細胞を使用したＨＩＶ感染初代ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅
ｃＡＲＴ抑制ＨＩＶ感染被験体における潜伏性ＨＩＶ感染細胞の主要な蓄積は、リンパ節に存在する。リンパ組織に存在するエフェクター細胞を利用する抗体の能力を、ＨＩＶ−１セロネガティブ扁桃から単離した単核細胞をエフェクター細胞として使用し、ＨＩＶ−１感染初代ＣＤ４  Ｔ細胞を標的細胞として使用して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ殺滅アッセイにおいて試験した。扁桃ドナーからの自己ＰＢＭＣは入手可能でなかったため、異種初代ＣＤ４  Ｔ細胞を、標的細胞およびＰＢＭＣエフェクター細胞の供給源として使用した。
【０４３６】
単一のドナーに由来する扁桃由来の単核細胞（ＴＤＭＣ）および２人のドナーに由来する末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、ならびに２つのＨＩＶ−１ウイルス（ＣＨＯ５８および９２ＵＳ７２７）に感染した標的細胞により得られた結果を、表２５および２６に示す。ＴＤＭＣおよびＰＢＭＣの両方が、例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙおよびバリアント１またはバリアント２から構成されるＤｕｏｂｏｄｙによる、ＨＩＶ感染ＣＤ４  Ｔ細胞のロバストな殺滅を媒介し、ＴＤＭＣについては、ＥｍａｘおよびＩＣ５０濃度が、それぞれ、６６％〜８２．６％および０．０１３〜０．０５３μｇ／ｍＬの範囲に及び、ＰＢＭＣについては、ＥｍａｘおよびＩＣ５０濃度が、それぞれ、６２％〜８４％および０．００１〜０．０２４ｕｇ／ｍＬの範囲に及んだ。対照的に、ＰＢＭＣだけは、ＰＧＴ１２１．６０（または陰性対照のＤｕｏｂｏｄｙであるパリビズマブ×ＣＤ３）を利用して、ＨＩＶ感染ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅を媒介することができたが、ＴＤＭＣはできなかった。
【０４３７】
【表２５】
2020529192.tif 000084
【０４３８】
【表２６】
2020529192.tif 000085
【０４３９】
方法
ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）およびＰＧＴ−１２１．６０に依存するＨＩＶ感染ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅を、初代休止ＨＩＶ感染ＣＤ４＋Ｔ細胞を標的細胞として使用し、末梢血単核細胞および扁桃由来の単核細胞をエフェクター細胞として使用して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて調査した。罹患していない扁桃を、扁桃摘出術を受けた健康な同意しているドナーから得た。扁桃は、扁桃摘出術から８時間以内に、抗生物質を含有するＤＭＥＭ培地中、研究室へと輸送し、処理した。扁桃由来の単核細胞（ＴＤＭＣ）を単離するために、まず脂肪および焼灼された（quarterized）組織を除去した。扁桃を、外科用メスを使用して２ｍｍ３の切片にし、１００μｍのナイロン製の細胞ストレーナー（Ｆａｌｃｏｎ）を通して分散させた。ＤＭＥＭに１％ＦＢＳを加えたもので洗浄した後、ＴＤＭＣを、Ｆｉｃｏｌ  ｐａｑｕｅによって細胞懸濁物から回収し、９０％ＤＭＳＯ、１０％ＦＢＳ中で凍結保存し、液体窒素中で保管した。
【０４４０】
初代ＣＤ４＋Ｔ細胞を、１２００×ｇで２時間のスピンフェクションによって、５０〜１００ｎｇのｐ２４／細胞１００万個で感染させ、ＲＰＭＩ培地（１０％のＦＢＳおよび１％のペニシリン／ストレプトマイシンを補充）において、３０Ｕ／ｍＬのＩＬ−２（Ｒｏｃｈｅカタログ番号１１０１１４５６００１）とともに、３７℃で５日間培養した。ｄｅ  ｎｏｖｏ抗原発現を可能にするために５日間静置した後、スピンフェクトしたＣＤ４＋Ｔ細胞培養物を、３回洗浄して、遊離ウイルスを除去し、９６ウェルプレートに、２×１０５個の細胞／ウェルで播種し、ヒト血清ＩｇＧ（５ｍｇ／ｍＬ  最終濃度）の存在下において、７つの濃度のｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）またはＰＧＴ−１２１．６０の１０倍連続希釈物とともに１時間インキュベートした。ＣＤ４＋Ｔ細胞標的がオプソニン化している間に、エフェクター細胞を調製した。凍結保存していたＰＢＭＣおよびＴＤＭＣを解凍し、ＰＫＨ６７を製造業者の指示に従って使用して膜染色を行い、４×１０５個の細胞／ウェルで、オプソニン化標的細胞に添加して、２：１のＥ：Ｔ比を得た。エフェクター細胞を、１ウェル当たり２００μＬの最終体積で、４８時間、オプソニン化した標的細胞とともに共培養した。
【０４４１】
ＨＩＶ感染標的細胞の殺滅は、フローサイトメトリーによって決定した。共培養期間の終わりに、細胞を、ＰＢＳで２回洗浄し、１００μＬのＬｉｖｅ／Ｄｅａｄ  Ａｑｕａ（ＰＢＳ中に１／１０００で希釈）で、染色が１００μＬのＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ＋２％ＦＢＳ）の添加により不活性になるまで、１０分間染色した。次いで、細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、抗ＣＤ４−ＰＥ／Ｃｙ７  ｍＡｂ（ＦＡＣＳ緩衝液中に１／５０で希釈）とともに、２０分間インキュベートした後、ＦＡＣＳ緩衝液で３回洗浄し、１００μＬのＣｙｔｏｆｉｘ／Ｃｙｔｏｐｅｒｍで、１０分間、固定および透過処理した。細胞を、次いで、ＰｅｒｍＷａｓｈで１回洗浄し、ＦＡＣＳ緩衝液＋１０％ＰｅｒｍＷａｓｈ中の抗ｐ２４−ＰＥ  ｍＡｂとともに、２５分間インキュベートした。最後に、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液で３回洗浄し、１２０μＬのＦＡＣＳ緩衝液中に再懸濁し、フローサイトメトリーデータをＬＳＲ  ＦｏｒｔｅｓｓａまたはＸ２０  ＦＡＣＳ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）において取得し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェア（ＴｒｅｅＳｔａｒ）を使用して分析した。
【０４４２】
ＰＢＭＣおよびＴＤＭＣによる感染初代ＣＤ４＋Ｔ細胞の殺滅に関して、フローサイトメトリーによるＨＩＶ感染標的細胞の計数には、以下のゲーティング戦略を使用した：リンパ球を、前方および側方散乱に基づいて選択し、生存リンパ球を、Ｌｉｖｅ／Ｄｅａｄ  Ａｑｕａの陰性染色によって選択した。次いで、接種されたＣＤ４＋Ｔ細胞を表すＰＫＨ６７陰性の生存リンパ球を選択し、ＨＩＶ感染細胞を、ｐ２４  Ｇａｇ＋、ＣＤ４ｌｏｗ（ＨＩＶに媒介されるＣＤ４の下方モジュレーションに起因する）細胞として同定した。ＨＩＶ感染パーセントは、ＨＩＶに感染している（ｐ２４  Ｇａｇ＋、ＣＤ４ｌｏｗ陽性）接種（ＰＫＨ６７陰性）ＣＤ４＋Ｔ細胞のパーセントによって表した。
【０４４３】
ＰＧＴ−１２１．６０で処置したウェルにおけるＨＩＶ感染標的細胞のパーセントを、未処置のウェル（ヒト血清ＩｇＧのみで処置、９６ウェルプレート当たりｎ＝２〜１０）におけるＨＩＶ感染標的細胞の平均パーセントと比較した。ＨＩＶ感染標的細胞の殺滅パーセントは、以下の等式を使用して計算した：
１００−（（処置したウェルにおけるＨＩＶ感染標的細胞％／未処置のウェルにおけるＨＩＶ感染標的細胞％）×１００）。
【０４４４】
ＰＧＴ−１２１．６０によって死滅させた感染細胞の最大割合（Ｅｍａｘ）、ならびに５０％殺滅をもたらす濃度（ＩＣ５０）を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（Ｌａ  Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）ソフトウェアを使用して、３パラメーターの非線形回帰（等式１）によって適合される用量応答曲線から得た。
等式１：
【数４】
2020529192.tif 000086
式中、Ｙ＝殺滅％、Ｘ＝抗体濃度、Ｂｏｔｔｏｍ＝抗体の非存在下における応答、Ｔｏｐ＝最大応答。
【０４４５】
感染細胞殺滅について、見かけのＥｍａｘが４０％を下回る用量応答曲線は、ＩＣ５０値を１０μｇ／ｍＬを上回るとして報告し、０％以下の絶対値を有するＥｍａｘには、０％を割り当てた。
【０４４６】
（実施例１１）
Ｔ細胞サブセットによるＨＩＶ感染ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅
どのＴ細胞サブセットが、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ依存性のＨＩＶ感染細胞の殺滅を媒介することができるかを調査するために、本発明者らは、単離したＴ細胞サブセット、すなわち、メモリーＣＤ８  Ｔ細胞、ナイーブＣＤ４  Ｔ細胞、メモリーＣＤ４  Ｔ細胞、エフェクターメモリーＣＤ４  Ｔ細胞、およびγΔ  Ｔ細胞が、ＨＩＶ感染ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅を媒介する能力を評価した。
【０４４７】
表２７に示される結果は、試験した全てのＴ細胞サブセット（すなわち、メモリーＣＤ８  Ｔ細胞、ナイーブＣＤ４  Ｔ細胞、メモリーＣＤ４  Ｔ細胞、エフェクターメモリーＣＤ４  Ｔ細胞、およびγΔ  Ｔ細胞）が、例示的なｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）バリアント１、およびｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）バリアント２を利用して、強力で（ＥＣ５０、０．００６〜０．１４μｇ／ｍＬ）有効な（Ｅｍａｘ、２７％〜６８％）Ｄｕｏｂｏｄｙ依存性の、ＨＩＶ−１  ＷＩＴＯ感染性分子クローンを感染させたＴ細胞の殺滅を媒介することができたことを示す。対照的に、ＣＤ８およびＣＤ４  Ｔ細胞サブセットは、ＰＧＴ−１２１．６０を利用してＨＩＶ感染Ｔ細胞の効果的な殺滅を媒介することができなかった。結果はまた、γΔ  Ｔ細胞が、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙよりも効力は低減されていたが（ＥＣ５０が、１２ｕｇ／ｍＬに対して、０．０２ｕｇ／ｍＬ〜０．１４ｕｇ／ｍＬ）、ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙによって達成されるものと匹敵するＥｍａｘで（４８％に対して、４３％〜６８％）ＰＧＴ−１２１．６０によるＨＩＶ感染Ｔ細胞の効果的な殺滅を媒介することができたことも示した。ＰＧＴ−１２１．６０が、γΔ  Ｔ細胞によるＨＩＶ感染Ｔ細胞の抗体依存性殺滅を媒介する能力は、γΔ  Ｔ細胞が、ＦｃγＲ  ＣＤ１６を発現し、抗体依存性細胞傷害性を媒介することができるという刊行物と一致する（Tokuyama  et  al,  2008、Seidel  et  al,  2014、Chen  &  Freedman,  2008）。
【０４４８】
【表２７】
2020529192.tif 000087
【０４４９】
方法
ｇｐ１２０×ＣＤ３  Ｄｕｏｂｏｄｙ（登録商標）およびＰＧＴ−１２１．６０に依存する、Ｔ細胞サブセットによるＨＩＶ感染ＣＤ４  Ｔ細胞の殺滅を、実施例５において記載されているＰＢＭＣエフェクター細胞による感染細胞殺滅アッセイ（the  Infected-Cell  Killing  by  PBMC  Effector  Cells  Assay）を以下の改変を行って使用して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて調査した：全ＰＢＭＣをエフェクター細胞として使用するのではなく、表２１に詳述されている細胞単離キットを使用して、製造業者のプロトコールに従って単離したＴ細胞サブセットを、エフェクター細胞として、標的に対するエフェクターの比２：１で使用した。Ｅｍａｘが１０％以下であった場合、ＥＣ５０値は、１０ｕｇ／ｍＬ（試験した最大濃度）を上回るとして報告した。
【０４５０】
【表２８】
2020529192.tif 000088
【０４５１】
（実施例１１）
ヒト血小板結合
ヒト血小板への結合を評価するために、フローサイトメトリーに基づく血小板結合アッセイを行い、ＰＧＴ−１２１．６０と比較した。多血小板血漿（ＰＲＰ）試料を、３人の健常なヒトドナーの全血から調製し、１０００μｇ／ｍｌまたは２５０μｇ／ｍｌの濃度で、試験物品で処置した。ＲＳＶ融合タンパク質を標的とするモノクローナル抗体パリビズマブ（Ｐａｌｉ）およびそれに由来するｄｕｏｂｏｄｙであるＰａｌｉ×ＣＤ３を、非抗ＨＩＶ  Ｅｎｖ対照抗体として使用した。
【０４５２】
表２９に示される結果は、１０００μｇ／ｍｌのＰＧＴ−１２１．６０のヒト血小板への結合のＭＦＩが、３人のドナーに由来する試料において、染色バックグラウンドよりも、４０〜１００倍増加し、一方でｇｐ１２０×ＣＤ３  ＤｕｏｂｏｄｙバリアントのＭＦＩは、同じ試料において１５〜５０倍増加したことを示す。この品目を、結合アッセイにおいて２５０μｇ／ｍｌで試験した場合には、血小板染色のＭＦＩは、ＰＧＴ−１２１．６０では比較して４〜７倍、バリアントについては１〜３倍まで低減した。非抗ＨＩＶ  Ｅｎｖ対照抗体ＰａｌｉおよびＰａｌｉ×ＣＤ３のＭＦＩは、いずれの試験濃度においても、バックグラウンドレベルであった。ＰＧＴ−１２１．６０と比較して、バリアントは、低いヒト血小板結合活性を示した。Ｄｕｏｂｏｄｙバリアントの平均結合ＭＦＩは、１０００μｇ／ｍｌの濃度において、ＰＧＴ−１２１．６０の３５〜４７％であった（表３０）。
【０４５３】
【表２９−１】
2020529192.tif 000089
【表２９−２】
2020529192.tif 000090
【０４５４】
【表３０】
2020529192.tif 000091
【０４５５】
方法
多血小板血漿（ＰＲＰ）試料を、ヒト全血試料から調製した。簡単に述べると、全血試料を、室温において、ブレーキ無しで１７０×ｇで１５分間遠心分離した。遠心分離の後に、ＰＲＰを、それぞれの試料の上部の層から収集し、次いで、改変ＨＴ（ｍＨＴ）緩衝液（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、２．８ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１２ｍＭ  ＮａＨＣＯ３、０．４ｍＭ  Ｎａ２ＨＰＯ４、０．３５％ＢＳＡ、５．５ｍＭグルコース、ｐＨ７．４）中に５倍希釈した。希釈した試験抗体（５０μＬ）を、等体積のＰＲＰ試料に添加し、室温で４５分間インキュベートした。インキュベーションの終わりに、等体積のＢＤ  ＦＡＣＳ染色緩衝液（２％ウシ胎児血清を有するリン酸緩衝食塩水）を添加し、アッセイプレートを、室温で５分間、２０００×ｇで遠心分離した。上清を、吸引し、洗浄したＰＲＰ試料を、ｍＨＴ緩衝液中に再懸濁させ、４℃で３０分間、ＰＥ抗ＣＤ６１、ＦＩＴＣ抗ＣＤ４１、およびＡＰＣ抗ヒトＩｇＧ二次抗体で染色した。染色した後に、ＰＲＰ試料を、ＢＤ  ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、１２５μＬのＢＤ  ＦＡＣＳ染色緩衝液中に再懸濁させ、ＢＤ  ＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａ（商標）細胞分析装置（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）およびＦｌｏｗＪｏソフトウェア（ＴｒｅｅＳｔａｒ、Ａｓｈｌａｎｄ、ＯＲ）を用いてフローサイトメトリーによって分析した。
【０４５６】
血小板集団を、ＰＥ抗ＣＤ４１およびＦＩＴＣ抗ＣＤ６１の二重陽性のＦＡＣＳ事象として定義した。血小板集団のＡＰＣ抗ヒトＩｇＧの平均蛍光強度（ＭＦＩ）値を、定量した。バックグラウンドの染色（ＡＰＣ抗ヒトＩｇＧ二次抗体のみによって決定される）に対するそれぞれの試験物品のＭＦＩの倍数増加を、次いで、計算した。ｇｐ１２０×ＣＤ３  ｄｕｏｂｏｄｙバリアントの血小板結合活性を、ＰＧＴ−１２１．６０のものと比較するために、それぞれの試料において、１０００μｇ／ｍｌでのＰＧＴ−１２１．６０に対するそれぞれのｄｕｏｂｏｄｙバリアントのＭＦＩの割合を、計算した。
【０４５７】
他の実施形態
本発明は、その詳細な説明とともに記載されているが、前記の説明は、例示を意図するものであり、添付の特許請求の範囲によって定められる本発明の範囲を制限することを意図するものではない。他の態様、利点、および修正が、以下の特許請求の範囲内に含まれる。
【配列表】
2020529192000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和2年2月14日(2020.2.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト免疫不全ウイルス−１（ＨＩＶ−１）エンベロープ（Ｅｎｖ）糖タンパク質ｇｐ１２０（ｇｐ１２０）およびヒトＣＤ３に結合する多重特異性抗体であって、
（ａ）第１の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および第１の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、第１の抗原結合性ドメインであって、ｇｐ１２０に結合し、
（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ相補性決定領域（ＣＤＲ）１、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ−ＣＤＲ２、
（ｉｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ−ＣＤＲ３、
（ｉｖ）配列番号４のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ１、
（ｖ）配列番号５のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ２、および
（ｖｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ３を含む、第１の抗原結合性ドメインと、
（ｂ）ヒトＣＤ３に結合する第２の抗原結合性ドメインと
を含む、多重特異性抗体。
【請求項２】
前記第１のＶＨが、配列番号７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
前記第１のＶＬが、配列番号８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項４】
配列番号８の６６位、６７位、６７Ａ位、および６７Ｃ位（Ｋａｂａｔの番号付け）におけるアミノ酸が、変更されていない、請求項３に記載の抗体。
【請求項５】
前記第１のＶＬが、配列番号８１と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項６】
前記第１のＶＬが、配列番号８２と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項７】
前記第１のＶＬが、配列番号８３と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項８】
前記第１のＶＬが、配列番号８４と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項９】
前記第１の抗原結合性ドメインが、配列番号９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１０】
前記第１の抗原結合性ドメインが、配列番号１０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１２】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８１のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１３】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８
２のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１４】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８３のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１５】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１６】
前記多重特異性抗体が、二重特異性抗体である、請求項１から１５のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１７】
前記第２の抗原結合性ドメインが、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、前記第２のＶＨが、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ３を含む、請求項１から１６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１８】
前記第２の抗原結合性ドメインが、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、前記第２のＶＬが、
（ｉ）配列番号１４のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１から１６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１９】
前記第２の抗原結合性ドメインが、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、
前記第２のＶＨが、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ３を含み、
前記第２のＶＬが、
（ｉ）配列番号１４のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ３を含む、請求項１から１６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２０】
前記第２のＶＨが、配列番号１７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２１】
前記第２のＶＬが、配列番号１８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２２】
前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２３】
前記第２の抗原結合性ドメインが、配列番号１９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２４】
前記第２の抗原結合性ドメインが、配列番号２０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２５】
カッパ−ラムダボディ、二重親和性再標的化分子（ＤＡＲＴ）、ノブ・イン・ホール、鎖交換操作ドメインボディ（ＳＥＥＤボディ）、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴｅ）、ＣｒｏｓｓＭａｂ、Ｆｃａｂ、ダイアボディ、タンデムダイアボディ（ＴａｎｄＡｂ）、またはＤｕｏＢｏｄｙである、請求項１から２４のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２６】
前記第１の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、ヒトＩｇＡ１、およびヒトＩｇＡ２からなる群から選択される第１の重鎖定常領域に融合されており、前記第２の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、ヒトＩｇＡ１、およびヒトＩｇＡ２からなる群から選択される第２の重鎖定常領域に融合されている、請求項１から２４のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２７】
前記第１の重鎖定常領域が、ヒトＩｇＧ１であり、前記第２の重鎖定常領域が、ヒトＩｇＧ１である、請求項２６に記載の抗体。
【請求項２８】
前記第１の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトラムダ定常領域である第１の軽鎖定常領域に融合されており、前記第２の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトラムダ定常領域である第２の軽鎖定常領域に融合されている、請求項２６または２７に記載の抗体。
【請求項２９】
（ａ）前記第１の重鎖定常領域が、Ｆ４０５Ｌアミノ酸変異を含み、
（ｂ）前記第２の重鎖定常領域が、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３０】
（ａ）前記第１の重鎖定常領域が、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、
（ｂ）前記第２の重鎖定常領域が、Ｆ４０５Ｌアミノ酸変異を含む、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３１】
前記第１の重鎖定常領域および前記第２の重鎖定常領域のエフェクター機能が、低減または抑止されている、請求項２６から３０のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３２】
前記第１の重鎖定常領域が、Ｎ２９７Ａ変異もしくはＮ２９７Ｑ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含み、かつ／または前記第２の重鎖定常領域が、Ｎ２９７Ａ変異もしくはＮ２９７Ｑ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む、請求項２６から３０のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３３】
ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体であって、
（Ａ）ｇｐ１２０に結合する第１のアームであって、
（ｉ）第１の重鎖であり、
（ａ）Ｆ４０５ＬまたはＫ４０９Ｒ変異のいずれかである第１の変異を含む、第１の重鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む、第１のＶＨを含む、第１の重鎖と、
（ｉｉ）第１の軽鎖であり、
（ａ）第１の軽鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、
第１のＶＬを含む、第１の軽鎖と
を含む、第１のアームと、
（Ｂ）ヒトＣＤ３に結合する第２のアームであって、
（ｉ）第２の重鎖であり、
（ａ）Ｆ４０５ＬまたはＫ４０９Ｒ変異のいずれかである第２の変異を含む、第２の重鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む、第２のＶＨを含む、第２の重鎖と、
（ｉｉ）第２の軽鎖であり、
（ａ）第２の軽鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、第２のＶＬを含む、第２の軽鎖と
を含む、第２のアームとを含み、前記第１の変異および前記第２の変異が、異なる変異である、二重特異性抗体。
【請求項３４】
前記第１のＶＨが、配列番号７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項３５】
前記第１のＶＬが、配列番号８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３または３４に記載の抗体。
【請求項３６】
配列番号８の６６位、６７位、６７Ａ位、および６７Ｃ位（Ｋａｂａｔの番号付け）におけるアミノ酸が、変更されていない、請求項３５に記載の抗体。
【請求項３７】
前記第１の重鎖が、配列番号９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から３６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３８】
前記第１の軽鎖が、配列番号１０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から３７のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３９】
前記第２のＶＨが、配列番号１７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から３８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項４０】
前記第２のＶＬが、配列番号１８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から３９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項４１】
前記第２の重鎖が、配列番号１９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から４０のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項４２】
前記第２の軽鎖が、配列番号２０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３から４１のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項４３】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４４】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８
１のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４５】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８２のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４６】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８３のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４７】
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８４のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４８】
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号１０のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項４９】
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号４０のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項５０】
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号７８のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項５１】
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号７９のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項５２】
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号８０のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の抗体。
【請求項５３】
細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む、請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項５４】
（ｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、（ｉｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の重鎖可変領域または第１の重鎖を
コードする核酸分子、（ｉｉｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、および（ｉｖ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第２の重鎖可変領域または第２の重鎖をコードする核酸分子を含む、組成物。
【請求項５５】
（ｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、（ｉｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の重鎖可変領域または第１の重鎖をコードする核酸分子、および／または（ｉｉｉ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、および（ｉｖ）請求項１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第２の重鎖可変領域または第２の重鎖をコードする核酸分子を含む、宿主細胞。
【請求項５６】
組織培養物中の、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ、酵母、ＣＨＯ、ＹＢ／２０、ＮＳ０、ＰＥＲ−Ｃ６、ＨＥＫ−２９３Ｔ、ＮＩＨ−３Ｔ３、ＨｅＬａ、ＢＨＫ、Ｈｅｐ  Ｇ２、ＳＰ２／０、Ｒ１．１、Ｂ−Ｗ、Ｌ−Ｍ、ＣＯＳ１、ＣＯＳ７、ＢＳＣ１、ＢＳＣ４０、ＢＭＴ１０細胞、植物細胞、昆虫細胞、およびヒト細胞からなる群から選択される、請求項５５に記載の宿主細胞。
【請求項５７】
ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合する抗体を産生する方法であって、請求項５５または５６に記載の宿主細胞を、前記核酸分子が発現され、前記抗体が産生されるような条件下において培養するステップを含む、方法。
【請求項５８】
試料中のｇｐ１２０およびＣＤ３を発現する細胞を検出するための方法であって、前記試料を、請求項１から５３のいずれか一項に記載の抗体と接触させるステップを含む、方法。
【請求項５９】
請求項１から５３のいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項６０】
請求項１から５３のいずれか一項に記載の抗体または請求項５９に記載の医薬組成物、ならびにａ）検出試薬、ｂ）ｇｐ１２０および／もしくはＣＤ３抗原、ｃ）ヒトへの投与のための使用もしくは販売の承認を表す通知、またはｄ）これらの組合せを含むキット。
【請求項６１】
ヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防することを必要とするヒト被験体においてヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防する方法において使用するための、請求項１から５３のいずれか一項に記載の抗体を含む組成物または請求項５９に記載の医薬組成物。
【請求項６２】
重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、ｇｐ１２０に結合する抗体であって、前記ＶＨが、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるチロシン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるフェニルアラニン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるスレオニン、または６７位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるグリシンを含む、抗体。
【請求項６３】
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６４】
前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６５】
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６６】
配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６７】
配列番号４０、７８、７９、または８０のうちのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６８】
配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号４０、７８、７９、または８０のうちのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む、請求項６２に記載の抗体。
【請求項６９】
細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む、請求項６２から６８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項７０】
請求項６２から６９のいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項７１】
請求項６２から６８のいずれか一項に記載の抗体をコードする単数または複数の核酸。
【請求項７２】
請求項７１に記載の単数または複数の核酸を含む単数または複数のベクター。
【請求項７３】
請求項７２に記載の単数または複数のベクターを含む宿主細胞。
【請求項７４】
抗ｇｐ１２０抗体を産生する方法であって、請求項７３に記載の宿主細胞を、前記単数または複数の核酸が発現され、前記抗体が産生されるような条件下において培養するステップを含む、方法。
【請求項７５】
ヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防することを必要とするヒト被験体においてヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防する方法において使用するための、請求項６２から６９のいずれか一項に記載の抗体を含む組成物または請求項７０に記載の医薬組成物。
【請求項７６】
重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、ｇｐ１２０に結合する抗体断片であって、前記ＶＨが、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるチロシン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるフェニルアラニン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるスレオニン、または６７位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるグリシンを含む、抗体断片。
【請求項７７】
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含む、請求項７６に記載の抗体断片。
【請求項７８】
前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項７６に記載の抗体断片。
【請求項７９】
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、請求項７６に記載の抗体断片。
【請求項８０】
Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、またはダイアボディである、請求項７６から７９のいずれか一項に記載の抗体断片。
【請求項８１】
細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む、請求項７６から８０のいずれか一項に記載の抗体断片。
【請求項８２】
請求項７６から８１のいずれか一項に記載の抗体断片と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項８３】
請求項７６から８０のいずれか一項に記載の抗体断片をコードする単数または複数の核酸。
【請求項８４】
請求項８３に記載の単数または複数の核酸を含む単数または複数のベクター。
【請求項８５】
請求項８４に記載の単数または複数のベクターを含む宿主細胞。
【請求項８６】
抗ｇｐ１２０抗体断片を産生する方法であって、請求項８５に記載の宿主細胞を、前記単数または複数の核酸が発現され、前記抗体断片が産生されるような条件下において培養するステップを含む、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９９】
本発明の他の特性および利点は、以下の詳細な記載および特許請求の範囲から明らかである。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
ヒト免疫不全ウイルス−１（ＨＩＶ−１）エンベロープ（Ｅｎｖ）糖タンパク質ｇｐ１２０（ｇｐ１２０）およびヒトＣＤ３に結合する多重特異性抗体であって、
（ａ）第１の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および第１の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、第１の抗原結合性ドメインであって、ｇｐ１２０に結合し、
（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ相補性決定領域（ＣＤＲ）１、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ−ＣＤＲ２、
（ｉｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含む第１のＶＨ−ＣＤＲ３、
（ｉｖ）配列番号４のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ１、
（ｖ）配列番号５のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ２、および
（ｖｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含む第１のＶＬ−ＣＤＲ３を含む、第１の抗原結合性ドメインと、
（ｂ）ヒトＣＤ３に結合する第２の抗原結合性ドメインと
を含む、多重特異性抗体。
（項目２）
前記第１のＶＨが、配列番号７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１に記載の抗体。
（項目３）
前記第１のＶＬが、配列番号８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１または２に記載の抗体。
（項目４）
配列番号８の６６位、６７位、６７Ａ位、および６７Ｃ位（Ｋａｂａｔの番号付け）におけるアミノ酸が、変更されていない、項目３に記載の抗体。
（項目５）
前記第１のＶＬが、配列番号８１と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１または２に記載の抗体。
（項目６）
前記第１のＶＬが、配列番号８２と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１または２に記載の抗体。
（項目７）
前記第１のＶＬが、配列番号８３と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１または２に記載の抗体。
（項目８）
前記第１のＶＬが、配列番号８４と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１または２に記載の抗体。
（項目９）
前記第１の抗原結合性ドメインが、配列番号９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む、項目１から８のいずれか一項に記載の抗体。
（項目１０）
前記第１の抗原結合性ドメインが、配列番号１０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、項目１から９のいずれか一項に記載の抗体。
（項目１１）
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８のアミノ酸配列を含む、項目１に記載の抗体。
（項目１２）
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８１のアミノ酸配列を含む、項目１に記載の抗体。
（項目１３）
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８
２のアミノ酸配列を含む、項目１に記載の抗体。
（項目１４）
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８３のアミノ酸配列を含む、項目１に記載の抗体。
（項目１５）
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８４のアミノ酸配列を含む、項目１に記載の抗体。
（項目１６）
前記多重特異性抗体が、二重特異性抗体である、項目１から１５のいずれか一項に記載の抗体。
（項目１７）
前記第２の抗原結合性ドメインが、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、前記第２のＶＨが、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ３を含む、項目１から１６のいずれか一項に記載の抗体。
（項目１８）
前記第２の抗原結合性ドメインが、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、前記第２のＶＬが、
（ｉ）配列番号１４のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ３を含む、項目１から１６のいずれか一項に記載の抗体。
（項目１９）
前記第２の抗原結合性ドメインが、第２のＶＨおよび第２のＶＬを含み、
前記第２のＶＨが、
（ｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１３のアミノ酸配列を含む第２のＶＨ−ＣＤＲ３を含み、
前記第２のＶＬが、
（ｉ）配列番号１４のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ２、および
（ｉｉｉ）配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＶＬ−ＣＤＲ３を含む、項目１から１６のいずれか一項に記載の抗体。
（項目２０）
前記第２のＶＨが、配列番号１７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
（項目２１）
前記第２のＶＬが、配列番号１８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
（項目２２）
前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、項目１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
（項目２３）
前記第２の抗原結合性ドメインが、配列番号１９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する重鎖を含む、項目１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
（項目２４）
前記第２の抗原結合性ドメインが、配列番号２０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、項目１７から１９のいずれか一項に記載の抗体。
（項目２５）
カッパ−ラムダボディ、二重親和性再標的化分子（ＤＡＲＴ）、ノブ・イン・ホール、鎖交換操作ドメインボディ（ＳＥＥＤボディ）、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴｅ）、ＣｒｏｓｓＭａｂ、Ｆｃａｂ、ダイアボディ、タンデムダイアボディ（ＴａｎｄＡｂ）、またはＤｕｏＢｏｄｙである、項目１から２４のいずれか一項に記載の抗体。
（項目２６）
前記第１の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、ヒトＩｇＡ１、およびヒトＩｇＡ２からなる群から選択される第１の重鎖定常領域に融合されており、前記第２の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトＩｇＧ１、ヒトＩｇＧ２、ヒトＩｇＧ３、ヒトＩｇＧ４、ヒトＩｇＡ１、およびヒトＩｇＡ２からなる群から選択される第２の重鎖定常領域に融合されている、項目１から２４のいずれか一項に記載の抗体。
（項目２７）
前記第１の重鎖定常領域が、ヒトＩｇＧ１であり、前記第２の重鎖定常領域が、ヒトＩｇＧ１である、項目２６に記載の抗体。
（項目２８）
前記第１の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトラムダ定常領域である第１の軽鎖定常領域に融合されており、前記第２の抗原結合性ドメインが、直接、または介在アミノ酸配列を介して、ヒトラムダ定常領域である第２の軽鎖定常領域に融合されている、項目２６または２７に記載の抗体。
（項目２９）
（ａ）前記第１の重鎖定常領域が、Ｆ４０５Ｌアミノ酸変異を含み、
（ｂ）前記第２の重鎖定常領域が、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含む、項目２６から２８のいずれか一項に記載の抗体。
（項目３０）
（ａ）前記第１の重鎖定常領域が、Ｋ４０９Ｒアミノ酸変異を含み、
（ｂ）前記第２の重鎖定常領域が、Ｆ４０５Ｌアミノ酸変異を含む、項目２６から２８のいずれか一項に記載の抗体。
（項目３１）
前記第１の重鎖定常領域および前記第２の重鎖定常領域のエフェクター機能が、低減または抑止されている、項目２６から３０のいずれか一項に記載の抗体。
（項目３２）
前記第１の重鎖定常領域が、Ｎ２９７Ａ変異もしくはＮ２９７Ｑ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含み、かつ／または前記第２の重鎖定常領域が、Ｎ２９７Ａ変異もしくはＮ２９７Ｑ変異を含むヒトＩｇＧ１重鎖定常領域を含む、項目２６から３０のいずれか一項に記載の抗体。
（項目３３）
ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合する二重特異性抗体であって、
（Ａ）ｇｐ１２０に結合する第１のアームであって、
（ｉ）第１の重鎖であり、
（ａ）Ｆ４０５ＬまたはＫ４０９Ｒ変異のいずれかである第１の変異を含む、第１の重鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む、第１のＶＨを含む、第１の重鎖と、
（ｉｉ）第１の軽鎖であり、
（ａ）第１の軽鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、
第１のＶＬを含む、第１の軽鎖と
を含む、第１のアームと、
（Ｂ）ヒトＣＤ３に結合する第２のアームであって、
（ｉ）第２の重鎖であり、
（ａ）Ｆ４０５ＬまたはＫ４０９Ｒ変異のいずれかである第２の変異を含む、第２の重鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、および配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含む、第２のＶＨを含む、第２の重鎖と、
（ｉｉ）第２の軽鎖であり、
（ａ）第２の軽鎖定常領域、ならびに
（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含む、第２のＶＬを含む、第２の軽鎖と
を含む、第２のアームとを含み、前記第１の変異および前記第２の変異が、異なる変異である、二重特異性抗体。
（項目３４）
前記第１のＶＨが、配列番号７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目３５）
前記第１のＶＬが、配列番号８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目３３または３４に記載の抗体。
（項目３６）
配列番号８の６６位、６７位、６７Ａ位、および６７Ｃ位（Ｋａｂａｔの番号付け）におけるアミノ酸が、変更されていない、項目３５に記載の抗体。
（項目３７）
前記第１の重鎖が、配列番号９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目３３から３６のいずれか一項に記載の抗体。
（項目３８）
前記第１の軽鎖が、配列番号１０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目３３から３７のいずれか一項に記載の抗体。
（項目３９）
前記第２のＶＨが、配列番号１７と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目３３から３８のいずれか一項に記載の抗体。
（項目４０）
前記第２のＶＬが、配列番号１８と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目３３から３９のいずれか一項に記載の抗体。
（項目４１）
前記第２の重鎖が、配列番号１９と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目３３から４０のいずれか一項に記載の抗体。
（項目４２）
前記第２の軽鎖が、配列番号２０と少なくとも７０％同一であるアミノ酸配列を含む、項目３３から４１のいずれか一項に記載の抗体。
（項目４３）
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目４４）
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８
１のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目４５）
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８２のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目４６）
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８３のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目４７）
前記第１のＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記第１のＶＬが、配列番号８４のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２のＶＨが、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＶＬが、配列番号１８のアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目４８）
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号１０のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目４９）
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号４０のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目５０）
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号７８のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目５１）
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号７９のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目５２）
前記第１の重鎖が、配列番号９のアミノ酸配列を含み、前記第１の軽鎖が、配列番号８０のアミノ酸配列を含み、および／または前記第２の重鎖が、配列番号１９のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖が、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、項目３３に記載の抗体。
（項目５３）
細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む、項目１から５２のいずれか一項に記載の抗体。
（項目５４）
（ｉ）項目１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、（ｉｉ）項目１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の重鎖可変領域または第１の重鎖を
コードする核酸分子、（ｉｉｉ）項目１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、および（ｉｖ）項目１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第２の重鎖可変領域または第２の重鎖をコードする核酸分子を含む、組成物。
（項目５５）
（ｉ）項目１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、（ｉｉ）項目１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第１の抗原結合性断片の第１の重鎖可変領域または第１の重鎖をコードする核酸分子、および／または（ｉｉｉ）項目１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第１の軽鎖可変領域または第１の軽鎖をコードする核酸分子、および（ｉｖ）項目１から５２のいずれか一項に記載の抗体の第２の抗原結合性断片の第２の重鎖可変領域または第２の重鎖をコードする核酸分子を含む、宿主細胞。
（項目５６）
組織培養物中の、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ、酵母、ＣＨＯ、ＹＢ／２０、ＮＳ０、ＰＥＲ−Ｃ６、ＨＥＫ−２９３Ｔ、ＮＩＨ−３Ｔ３、ＨｅＬａ、ＢＨＫ、Ｈｅｐ  Ｇ２、ＳＰ２／０、Ｒ１．１、Ｂ−Ｗ、Ｌ−Ｍ、ＣＯＳ１、ＣＯＳ７、ＢＳＣ１、ＢＳＣ４０、ＢＭＴ１０細胞、植物細胞、昆虫細胞、およびヒト細胞からなる群から選択される、項目５５に記載の宿主細胞。
（項目５７）
ｇｐ１２０およびヒトＣＤ３に結合する抗体を産生する方法であって、項目５５または５６に記載の宿主細胞を、前記核酸分子が発現され、前記抗体が産生されるような条件下において培養するステップを含む、方法。
（項目５８）
試料中のｇｐ１２０およびＣＤ３を発現する細胞を検出するための方法であって、前記試料を、項目１から５３のいずれか一項に記載の抗体と接触させるステップを含む、方法。
（項目５９）
項目１から５３のいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
（項目６０）
項目１から５３のいずれか一項に記載の抗体または項目５９に記載の医薬組成物、ならびにａ）検出試薬、ｂ）ｇｐ１２０および／もしくはＣＤ３抗原、ｃ）ヒトへの投与のための使用もしくは販売の承認を表す通知、またはｄ）これらの組合せを含むキット。
（項目６１）
ヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防することを必要とするヒト被験体においてヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防する方法であって、前記ヒト被験体に、治療有効量の、項目１から５３のいずれか一項に記載の抗体または項目５９に記載の医薬組成物を投与するステップを含む、方法。
（項目６２）
重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、ｇｐ１２０に結合する抗体であって、前記ＶＨが、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるチロシン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるフェニルアラニン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるスレオニン、または６７位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるグリシンを含む、抗体。
（項目６３）
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含む、項目６２に記載の抗体。
（項目６４）
前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、項目６２に記載の抗体。
（項目６５）
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、項目６２に記載の抗体。
（項目６６）
配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む重鎖を含む、項目６２に記載の抗体。
（項目６７）
配列番号４０、７８、７９、または８０のうちのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、項目６２に記載の抗体。
（項目６８）
配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号４０、７８、７９、または８０のうちのいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む、項目６２に記載の抗体。
（項目６９）
細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む、項目６２から６８のいずれか一項に記載の抗体。
（項目７０）
項目６２から６９のいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
（項目７１）
項目６２から６８のいずれか一項に記載の抗体をコードする単数または複数の核酸。
（項目７２）
項目７１に記載の単数または複数の核酸を含む単数または複数のベクター。
（項目７３）
項目７２に記載の単数または複数のベクターを含む宿主細胞。
（項目７４）
抗ｇｐ１２０抗体を産生する方法であって、項目７３に記載の宿主細胞を、前記単数または複数の核酸が発現され、前記抗体が産生されるような条件下において培養するステップを含む、方法。
（項目７５）
ヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防することを必要とするヒト被験体においてヒト免疫不全ウイルス感染を処置または予防する方法であって、前記ヒト被験体に、治療有効量の、項目６２から６９のいずれか一項に記載の抗体または項目７０に記載の医薬組成物を投与するステップを含む、方法。
（項目７６）
重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、ｇｐ１２０に結合する抗体断片であって、前記ＶＨが、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ２、および配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＬ−ＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるチロシン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるフェニルアラニン、６７Ａ位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるスレオニン、または６７位（Ｋａｂａｔ番号付け）におけるグリシンを含む、抗体断片。
（項目７７）
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含む、項目７６に記載の抗体断片。
（項目７８）
前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、項目７６に記載の抗体断片。
（項目７９）
前記ＶＨが、配列番号７のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬが、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４のアミノ酸配列を含む、項目７６に記載の抗体断片。
（項目８０）
Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、またはダイアボディである、項目７６から７９のいずれか一項に記載の抗体断片。
（項目８１）
細胞傷害剤、放射性同位体、治療剤、抗ウイルス剤、または検出可能な標識をさらに含む、項目７６から８０のいずれか一項に記載の抗体断片。
（項目８２）
項目７６から８１のいずれか一項に記載の抗体断片と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
（項目８３）
項目７６から８０のいずれか一項に記載の抗体断片をコードする単数または複数の核酸。
（項目８４）
項目８３に記載の単数または複数の核酸を含む単数または複数のベクター。
（項目８５）
項目８４に記載の単数または複数のベクターを含む宿主細胞。
（項目８６）
抗ｇｐ１２０抗体断片を産生する方法であって、項目８５に記載の宿主細胞を、前記単数または複数の核酸が発現され、前記抗体断片が産生されるような条件下において培養するステップを含む、方法。
【国際調査報告】
2020529192.tif 000092
2020529192.tif 000093
2020529192.tif 000094