(57)【要約】  外科手術中に収集される生物学的体液などの体液中の血液ボリュームの概算のための方法、器具及びデバイスが開示される。本方法及び本デバイスが、ポリＤＡＤＭＡＣなどのＲＢＣ凝集剤と、その種類の動物ための概算の血液ヘマトクリット値と、さらには、使用される収集デバイスに対応する計算されるＲＢＣ詰込比との使用を含む。さらに、血液インジケータパネル（ＢＩＰ）が提供され、この血液インジケータパネルが、観察される赤血球沈下ボリュームと、その種類の動物の平均ヘマトクリット値と、収集デバイスのための計算されるＲＢＣ詰込比「η」値とから計算される一連のマーキングを備える。さらに、小児科（約２００ｍｌから２５０ｍｌ）、成人（約１，０００ｍｌ〜１，５００ｍｌ）、および獣医学（約５００ｍｌ〜２，５００ｍｌ）の収集容器が開示され、これが、体液中の血液ボリュームを概算するのに使用されるためのＲＢＣ凝集剤を有する。【選択図】図１８
2020504314.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験者から得られる体液中の血液ボリュームを概算するための視覚的方法であって、
ＲＢＣ凝集剤を含有する容器の中に、既知のヘマトクリット値を有する被験者からの体液のいくらかのボリュームを受け取るステップと、
ＲＢＣの安定した沈降が可能となるのに十分な時間で前記容器の中の沈下ＲＢＣのボリュームを視覚的に決定するステップと、
前記体液中の血液のボリュームを決定するステップであって、前記体液中の血液ボリュームの視覚的概算を提供するために、ＲＢＣの前記安定した沈降のレベルが、前記容器のＲＢＣ詰込比および平均ヘマトクリット値のために較正される、ステップと、
を含む、
視覚的方法。
【請求項２】
前記ＲＢＣ凝集剤が、約１２００ｍｌのボリュームを有する容器の中で約０．３％から約０．７５％までの量のポリＤＡＤＭＡＣである、請求項１に記載の視覚的方法。
【請求項３】
前記被験者が人間である、請求項１に記載の視覚的方法。
【請求項４】
被験者が獣医学の動物である、請求項１に記載の視覚的方法。
【請求項５】
生物学的体液中の血液のボリュームが、式
Ｖｍ＝Ｖｂ×Ｈｃｔ×η
に従って計算されるボリュームＶｂである、請求項１に記載の視覚的方法。
【請求項６】
少なくとも２つの入口ポートと、ＲＢＣ凝集剤と、約１００ｍｌ、約２５０ｍｌ、約５００ｍｌ、約１０００ｍｌ、約１，２００ｍｌ、または約２，０００ｍｌのボリューム容量と、を備える、容器。
【請求項７】
前記ＲＢＣ凝集剤が、約０．３％から約０．７５％までの量のポリＤＡＤＭＡＣであり、前記容器の前記ボリューム容量が約１，２００ｍｌである、請求項６に記載の容器。
【請求項８】
一連の較正される血液ボリュームマーキングを備え、前記マーキングが前記容器の容積測定用の液体測定に対応していない、請求項６に記載の容器。
【請求項９】
キャップを備え、前記キャップが吸引管を受けるのに適する少なくとも１つの入口ポートと、前記容器に真空吸引を加えるのに適する第２のポートとを有する、請求項６に記載の容器。
【請求項１０】
ＲＢＣ凝集剤と、一連の較正される血液ボリュームマーキングと、少なくとも２つのポートと、設置用のループ状部分と、約２５０ｍｌ、約５００ｍｌ、約７５０ｍｌ、約１，２００ｍｌ、または２，５００ｍｌのボリューム容量とを備える、折り畳み式の体液収集容器。
【請求項１１】
前記ＲＢＣ凝集剤がポリＤＡＤＭＡＣを含む、請求項１０に記載の折り畳み式の体液収集容器。
【請求項１２】
体液中の血液ボリュームを概算するために使用される血液インジケータパネルであって、前記パネルが、哺乳類の血液を含む液体中の概算の血液ボリュームに対応する一連の較正されるマーキングを備える、血液インジケータパネル。
【請求項１３】
前記較正されるマーキングが、ＲＢＣ凝集剤の存在下での収集デバイス内の沈下ＲＢＣのボリューム測定と、体液収集デバイスの所定のＲＢＣ詰込比と、対象の動物の平均ヘマトクリット値とから計算される、請求項１２に記載の血液インジケータパネル。
【請求項１４】
前記ＲＢＣ凝集剤がポリＤＡＤＭＡＣを含む、請求項１３に記載の血液インジケータパネル。
【請求項１５】
前記一連の較正されるマーキングが、前記収集デバイス中の液体のメートル法の容積測定尺度を示さない、請求項１３に記載の血液インジケータパネル。
【請求項１６】
前記一連の較正されるマーキングが、前記収集デバイス中に収集される成人から得られた体液物質中の血液ボリュームの概算値を提供し、前記血液インジケータパネルが、前記成人からの血液の平均ヘマトクリット値と、約１２００ｍｌのボリュームを有する収集デバイスのために決定されるＲＢＣ詰込比と、に適合するように較正される、請求項１３に記載の血液インジケータパネル。
【請求項１７】
前記動物が、馬、人間、または雌牛である、請求項１２に記載の血液インジケータパネル。
【請求項１８】
１２００ｍｌの収集キャニスタの中に配置されるのに適する、約１２００ｍｌのボリュームを有するバッグを備える、請求項１０に記載の折り畳み式の体液収集容器。
【請求項１９】
前記バッグが血液インジケータパネルを備え、前記血液インジケータパネルが、前記バッグ内に含有される液体中の血液ボリュームの視覚的評価を提供するための較正される一連のマーキングを備える、請求項１８に記載の折り畳み式の体液収集容器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
[0001]本出願は、その全体が本明細書に組み込まれる、２０１７年１月１１日に出願される米国仮特許出願第６２／４４５０６７号の優先権を主張するものである。
【背景技術】
【０００２】
[0002]手術中、血液、生理的食塩水、およびいくつかの事例では小組織が被験者の身体から抜かれ、収集容器の中に収集される。通常、このような抜くプロセスは吸引を伴う。収集キャニスタ内の成分が、多くの事例で、少なくともいくらかのボリュームの血液を含む。しかし、含まれる血液のボリュームは任意の程度の精度で評価することが困難である。被験者の健康にとって失血評価が非常に重要であるが、失血評価は、現在、担当の医療専門家／麻酔専門医により、外科手術中に採用される生理的食塩水ユニット（ｓａｌｉｎｅ  ｕｎｉｔ）をカウントすることを伴う粗雑な技法のみによって評価されている。手術の最後に、通常、麻酔専門医が全体の手術中に使用された生理的食塩水のボリュームを決定してこの生理的食塩水のボリュームを収集キャニスタの中の収集された混合物質の合計のボリュームから減算することにより、失血の量を見積もることになる。
【０００３】
[0003]血液はＲＢＣから構成され、ＲＢＣは、手術時に収集される血液／体液の混合物を沈澱させるのに多くの時間を必要とする（３時間から６時間にわたる）。沈下ＲＢＣボリュームの読取値も提供するのにも時間がかかることとは別に、沈下ＲＢＣボリュームは、血液の必要量を評価するための血液ボリュームの十分な概算値を提供しないことが分かっている。失血を見積もるための現在の技法は課題を伴うものであり、これには、ヒューマンエラー（「使用された」生理的食塩水バッグを数えること、残留生理的食塩水の詳細を明らかにすること）、および従来の血液含有体液の分析に関連する深刻な時間的制約、が含まれる。
【０００４】
[0004]外科的事象中の失血を正確に見積もることができないことは、患者にとっての多数の潜在的な深刻な健康問題（ｈｅａｌｔｈ  ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ）を引き起こすことになり、さらには医療コストも増大させる。例えば、失血が低く見積もられると、被験者に対して必要な輸血を提供することに失敗する可能性がある。さらにこれにより、多くの事例において、被験者が貧血となり、この場合は患者を安定させるために入院を延長することが必要となり、および／またはこれは死亡に繋がる場合もある。失血を過度に見積もる場合は、不必要な輸血および／または不必要な医学的介入が行われる可能性があり、さらには血液ユニットが無駄になる可能性がある。また、このようなことにより、疫病伝播のリスクが増大する可能性もある（例えば、ＨＩＶ、肝炎）。
【０００５】
[0005]医療技術では、失血を正確に見積もるための技法および器具を改善することが依然として必要とされる。体液中の血液ボリュームをより正確に監視および概算するための方法が必要とされている。より正確な血液ボリュームの概算を実現するのに適する体液収集製品も必要とされており、これは、不必要な医療処置およびその結果として行われる介入に付随する医療コストを低減する働きをすることになる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
[0006]概して、また全体的な意味として、本発明は、液体中の、また特には外科手術中に収集される液体中の、血液ボリュームをより高い信頼性で正確に概算するための、器具、デバイス、および方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
[0007]本開示では、血漿含有体液、生理的食塩水、または任意の他の体液（例えば、尿）から分離される赤血球（ＲＢＣ：ｒｅｄ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌ）ボリュームの特性評価が、絶対的な分離または完全な分離（ａｂｓｏｌｕｔｅ  ｏｒ  ｔｏｔａｌ  ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ）を意味するのではなく、体液中のＲＢＣの安定した沈降の概算を意味することを理解されたい。ＲＢＣ沈降は室温で評価されるものであり、重力（遠心分離ではない）による試料液体中のＲＢＣ沈下に関連する。
【０００８】
[0008]液体中の血液ボリュームを概算するための方法。一態様において、ＲＢＣ凝集剤を使用して、人間または獣医学の動物などの哺乳類からの失血を測定するための方法が提供される。この方法は、いくつかの実施形態では、ＲＢＣ凝集剤を中に有する容器の中に液体を提供することを含み、ここでは、液体中に含有される血液中のＲＢＣが沈降することになり、それより、視覚的で実質的に同時的なＲＢＣ沈降ボリュームを可能にする。沈下ＲＢＣボリュームは液体中の血液ボリュームに等しくないが、ＲＢＣ沈降ボリュームが液体中の血液ボリュームを概算するのに使用される。この方法は、ＲＢＣ凝集剤の存在により観察されるＲＢＣ沈降ボリュームと、収集デバイスのアスペクト比と、平均ヘマトクリット値とを採用して、液体中の血液ボリュームの視覚的に確認可能な概算を実現する。本デバイスおよび本方法を使用する、血液を含有するかまたは可能性として血液を含有する液体／体液中の血液ボリュームの視覚的に確認可能な概算は、本明細書で説明される技法を使用して、１時間未満で達成され得、また１５分〜３０分の範囲の迅速さで達成され得る。ＲＢＣ凝集剤の存在によりＲＢＣ沈降を実現するために促進される非常に短い時間枠と、その結果としての概算の血液ボリュームの視覚的評価とにより、患者の健康状態が維持されるという、さらには医療従事者の要員が大幅に節約されるという、有利な利点が得られる。
【０００９】
[0009]本方法はまた、液体中の血液の存在を検出するのに使用され得、またこの手法で、血液汚染物質の存在のために、材料（食材、水、製薬品など）を試験するのに使用され得る。対象となる材料が本明細書で説明されるＲＢＣ凝集剤に接触するように配置され、ＲＢＣ沈降の存在のために検査される。ＲＢＣ沈降は材料中の血液の存在を示すものである。
【００１０】
[0010]血液インジケータパネル。いくつかの態様では、血液を含有するかまたは血液を含有することが疑わしい体液中の血液ボリュームの概算に相互に関連付けられるように較正される所定の区分を有する血液インジケータパネル（ＢＩＰ：Ｂｌｏｏｄ  Ｉｎｄｉｃａｔｏｒ  Ｐａｎｅｌ）が提供され、さらには、特定の哺乳類（人間／人間ではない動物）からの血液のための専用のＢＩＰを用意するための方法が提供される。所定のＢＩＰに関連付けられる特定の収集デバイスも提示される。
【００１１】
[0011]ＢＩＰが、ＲＢＣ凝集剤の存在により、体液中の血液ボリュームの概算を提供するために、任意の従来の体液収集デバイスおよび／または収集バッグと共に使用され得る。ＢＩＰが、評価されている血液タイプの見積もりの平均ヘマトクリット値と、さらには、収集される血液含有体液のための決定されたデバイスに充填されたＲＢＣボリュームと、を組み込む計算を採用する。ＢＩＰは、具体的には、獣医学（ウマ、ウシ、イヌ、ネコ）、人間、および人間用途（成人、幼児）のために提供される。ＢＩＰを参照することは、収集デバイス上での沈下ＲＢＣボリュームとの相互参照により、混合体液／混合液体中の血液ボリュームを見積もるための効率的な手法を提供する（個別の計算を実施することを必要としない）。いくつかの実施形態では、ＢＩＰが従来の容積測定尺度を用いずに使用され得、液体中の血液ボリュームを確認するための較正された血液ボリュームのマーキングのみを有する。このような事例では、血液のタイプおよびデバイスが、沈下ＲＢＣレベルを参照することなく概算される血液ボリューム測定値を提供するように予め較正されている。
【００１２】
[0012]体液／液体中のＲＢＣ凝集剤およびＲＢＣ凝集。一態様では、ＲＢＣを凝集させるのに適しており、それにより重力によるＲＢＣの沈降を促進するような、特定の凝集剤が示される。ＲＢＣ凝集剤が存在しない場合での体液中のＲＢＣが沈下するのに必要となる数時間と比べて、手術中にまたは他の医療手術の事象中に収集される、吸引物または他の手術流出液などの生物学的体液との組み合わせで、ＲＢＣ凝集剤が、約１５分から約３０分の範囲内など、混合体液中でのＲＢＣの迅速な沈降を促進する。
【００１３】
[0013]本発明の説明で使用される場合の凝集は、血液を含むかまたは可能性として血液を含む体液中での、ＲＢＣのクラスターの合着または形成として定義される。したがって、この方法は、本明細書で開示される方法に従って物質中のＲＢＣおよび概算の血液ボリュームを検出するのを実現することにより、血液汚染物質を検出するのに、さらには物質中の血液量を定量化するのに使用され得る。
【００１４】
[0014]潜在的に血液を含む体液には、生理的食塩水、手術吸引物、尿、胆汁、他の生物学的廃棄物、唾液、組織標本、消化液、脳脊髄液、リンパ、腹水、羊水、およびこれらの任意の混合物または組み合わせ、が含まれる。この点に関して、実質的には、安定した沈下ＲＢＣのレベルを提供することを目的として室温で約３０分未満の範囲内でＲＢＣの合着を促進することができる任意の構成成分または化学剤が、本デバイスを提供することを目的とするための、および本発明で使用されるためのＲＢＣ凝集剤として有用であるとみなされる。実質的には、負電荷を帯びたＲＢＣに対して正の表面荷電を加えることができる任意の構成成分または化学成分が、本デバイスおよび本方法の一部として、ＲＢＣ沈降の速度を向上させるのに十分であることに加えて、ＲＢＣのより迅速な合着または凝集を促進するのに有用であると考えられる。
【００１５】
[0015]血液含有体液中に存在するＲＢＣはＲＢＣ凝集剤の存在により互いに結合され、このようにしてより重い粒子を形成し、これらの重い粒子が、中に試料／材料を収集しているところの容器／ボトル／管／折り畳み式バッグまたは他のベッセル内で沈下する。ＲＢＣが沈下すると、沈下ＲＢＣのボリュームが記録され、哺乳類（動物／人間）の所定のヘマトクリット値と、収集ベッセルに関連付けられる計算されたＲＢＣ詰込比と、共に採用されて、液体中のまたは混合された収集標本中の概算の血液ボリュームの実時間の推定値を提供する。
【００１６】
[0016]いくつかの実施形態では、凝集剤はポリジアリルジメチルアンモニウムクロライド（ポリＤＡＤＭＡＣ）である。実質的には、好適には約１５分の範囲内で、物質がＲＢＣの互いに対しての凝集作用（ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ）を促進することできさらにはＲＢＣの凝集時間を短縮することができさらには安定した沈降のレベルを形成することができる限りにおいて、任意の物質または化学物質が本発明の実施におけるＲＢＣ凝集剤として使用され得る。ＲＢＣ凝集剤の量は、約６０分未満の範囲内で、体液中に存在するＲＢＣの安定した沈降を促進するのに十分であるべきである。いくつかの実施形態では、ＲＢＣ凝集剤の量は、遠心分離なしで、室温において、約５分内、約１０分内、約１５分内、約２０分内、約２５分内、または約３０分内で、あるいは約５分から約２０分の時間範囲内で、体液中のＲＢＣの安定した沈降を促進するのに十分である量であるべきである。ＲＢＣ凝集剤の量は、血液を含む液体などの、液体中のＲＢＣの表面にカチオン電荷を加えるのに十分でなければならない。
【００１７】
[0017]ＲＢＣ凝集剤として使用されるための分子および物質には、高分子ＲＢＣ凝集剤および非高分子ＲＢＣ凝集剤が含まれる。高分子ＲＢＣ凝集剤の場合、ＲＢＣ凝集剤が、少なくとも、約１００，０００Ｄａ、約２００，０００Ｄａ、３００，０００Ｄａ、または４００，０００Ｄａの分子量、またはこれらの混合物を有さなければならず、相対的に正電荷を有さなければならない。例えば、高分子ＲＢＣ凝集剤には、ＰＥＩ、ＰＡＭ、ポリ（ａｃｉｙｌａｍｉｄｅ−ｃｏ−ａｃｒｙｌａｔｅ）、またはＲＢＣの表面に正電荷を加えることができる任意の他の相対的に高い分子量（約１，４００，０００Ｄａ以上）の正電荷を帯びたポリマー、が含まれてよい。非高分子ＲＢＣ凝集剤には、ＨＣｌまたは他の酸性分子などの、酸が含まれてよい。
【００１８】
[0018]他の適切な高分子量のカチオンポリマーＲＢＣ凝集剤が、１つまたは複数のカチオンモノマーのビニル付加重合、および１つまたは複数のカチオンモノマーと１つまたは複数のカチオンモノマーとの共重合などの、重合によって調製され得る。カチオンモノマーＲＢＣ凝集剤はカチオンモノマーを使用して形成され得るが、カチオン帯電性ポリマーを製造するのに特定の非イオンのビニル付加ポリマーを反応させることも可能である。この種類のポリマーには、マンニッヒ誘導体を製造するためのジメチルアミンおよびホルムアルデヒドに対してのポリアクリルアミドの反応を介して調製されるようなポリマーが含まれる。
【００１９】
[0019]ＲＢＣ凝集剤は、油中水型乳剤として、または水の中で分散した状態として、水溶液中で固体形態として使用され得る。ＲＢＣ凝集剤として採用され得る代表的なカチオンポリマーには、メタクリル酸ジメチルアミノエチル（ＤＭＡＥＭ）；ジメチルアミノエチルアクリラート（ＤＭＡＥＡ）；アクリル酸ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥＡ）；メタクリル酸ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥＭ）、を有する（メタ）アクリルアミドのコポリマーまたはターポリマー、あるいは硫酸ジメチル、塩化メチル、または塩化ベンジルを用いて作られる、それらの四級アンモニウムの形態、が含まれる。代替的実施形態では、ＲＢＣ凝集剤が、ジメチルアミノエチルアクリレート塩化メチル第四塩−アクリルアミドコポリマー、アクリル酸ナトリウム−アクリルアミドコポリマー、および加水分解ポリアクリルアミドポリマーを含むことができる。
【００２０】
[0020]ＲＢＣが、収集デバイス内で、またはＲＢＣ凝集剤を有する、収集デバイスの寸法に従うように設計される折り畳み式バッグの中で、沈下した後、沈下ＲＢＣボリュームが、血液ボリューム概算値を提供するように較正されている、収集デバイスおよび／または折り畳み式バッグ上の段階的なマーキングを使用して見積もられ得る。詰込比ηが決定され得る。詰込比ηは、遠心分離後のＲＢＣボリュームに対しての沈下ＲＢＣボリュームを使用して計算される。詰込比が決定されると、失血ボリューム（Ｖｂ）などの合計の血液ボリューム、または収集デバイスの中の収集体液中の合計の血液量が、沈下ＲＢＣボリューム（Ｖｍ）、被験者のヘマトクリット値（Ｈｃｔ）（または、複数の同様の被験者から決定される平均ＨＣＴ）、および詰込比ηを用いて、以下の式に従って、見積もられ得る：
Ｖｂ＝Ｖｍ／（Ｈｃｔ×η）      １）
【００２１】
[0021]通常、凝集剤がない場合、ＲＢＣ沈降速度または赤血球沈降速度（ＥＳＲ：ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ  ｓｅｄｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ｒａｔｅ）が比較的低いか、または肉眼では検出不可能である（図１８を参照）。凝集剤の存在なしで遠心分離なしで室温で収集容器内でＲＢＣが沈下するのには数時間または数日かかる可能性がある。任意の特定の作用メカニズムに限定することを意図しないが、これは、少なくとも部分的に、ＲＢＣ間に自然に存在する静電反発力を原因とする可能性がある。これはＲＢＣが自然に負電荷を帯びているからである。ＲＢＣ凝集剤のポリＤＡＤＭＡＣなどの、ＲＢＣ凝集剤が存在する場合、ＲＢＣ沈下速度が大幅に向上する。ＲＢＣ凝集剤が存在する場合、ＲＢＣ沈降が約２０分未満で起こり、安定したＲＢＣ沈降ボリュームを形成し、これが肉眼で容易に視認可能である。ＲＢＣ沈降ボリュームの観察可能な変化が毎分約０．５％未満である場合、ＲＢＣ沈降ボリュームが本方法の目的のためには十分に安定であるとみなされる。
【００２２】
[0022]キャニスタ、収集バッグ、および容器。収集に適するおよび失血の視覚的な見積もりに適する、キャニスタ、収集バッグ、および容器を含めた、収集デバイスが提供される。収集デバイスは、円形、正方形、八角形、円筒形、円錐形、または実質的に任意の構成、の形態をとることができる。収集デバイスは十分に透明であるべきであるか、または収集デバイス内の沈降ＲＢＣなどの物質のレベルの視覚的な検出を少なくとも可能にする程度で不透明であるべきである。収集デバイスが、ハードプラスチックまたはガラス、またはプラスチック材料などの、固体材料または可撓性材料のデバイスであってよい。収集デバイスが、デバイス自体のボリュームと、ＲＢＣ凝集を促進するのに適するＲＢＣ凝集剤の量とに関連付けられる一連の容積測定区分を有することができる。ＲＢＣ凝集剤はまた、遠心分離なしで、室温で、凝集剤に関連付けられるＲＢＣの３０分未満、もしくは、約５分未満、約１０分未満、約１５分未満、またはさらには約２０分未満の範囲内での沈下を可能にするのに十分な分子量を有するものとして説明され得る。ＲＢＣ凝集剤は一定の乾燥重量の凝集剤として収集デバイス内に設けられよいか、キャリア溶液中の一定量の凝集剤として収集デバイス内に設けられてよいか、または収集デバイス上のプレコーティングとして設けられてよい（少なくとも１つの表面に、表面全体に、部分的な領域に、またはデバイスの内側に沿うストリップとして、一様にコーティングされる、などである）。これらの説明は例として提供されるものであり、本デバイスおよび本方法の使用および実施のために構想され得るような潜在的な実施形態を限定することを意図されない。
【００２３】
[0023]以下のリストが、提示されている、処理されたおよび／または凝集剤を含有する収集容器の例示の説明を提供する。
【００２４】
[0024]１，２００ｍｌの容器（例えば、キャニスタ構成を有する）、５ｍｌおよび／または１０ｍｌの段階的なマーキング、１つまたは複数の入口ポート、ならびに１つまたは複数の出口ポート（第１の入口ポートのところで管を通してレセプタクルの中に体液を引き入れるために吸引力を加えるのに適する管に取り付けられるのに適する）。
【００２５】
[0025]５００ｍｌの容器（例えば、キャニスタ構成を有する）、１ｍｌおよび／または５ｍｌの段階的なマーキング、１つまたは複数の入口ポート、ならびに１つまたは複数の出口ポート（第１の入口ポートのところで管を通してレセプタクルの中に生体液を引き入れることを目的として吸引力を加えるのに適する管に取り付けられるのに適する）。
【００２６】
[0026]１００ｍｌ、２５０ｍｌ、または５００ｍｌの容器（キャニスタ構成または円錐構成を有する）、１ｍｌおよび／または５ｍｌの段階的なマーキング、１つまたは複数の入口ポート、１つまたは複数の出口ポート。ここでは、少なくとも１つの入口ポートが、吸引力を適用して体液または他の物質を容器の中に引き入れるための管を取り付けるのに適する。これらのデバイスは、特には、小児科での使用またはより小規模の外科手術（洞手術）に適用可能である。
【００２７】
[0027]５００ｍｌの折り畳み式エンベロープ（１ｍｌおよび／または５ｍｌの段階的なマーキングと、１つまたは２つの入口ポート（再密閉可能）と、第１の入口ポートのところで管を通してレセプタクルの中に体液を引き入れるための吸引力を加えるのに適する管を取り付けるのに適する１つまたは複数の出口ポートと、を有する）。
【００２８】
[0028]１００ｍｌ、２００ｍｌ、２５０ｍｌ、３００ｍｌ、４００ｍｌ、５００ｍｌ、１，２００ｍｌ、および２，５００ｍｌのボリュームの折り畳み式エンベロープ（任意選択で、５ｍｌおよび／または１０ｍｌの段階的なマーキングを有する）、１つまたは２つの入口ポート（再密閉可能）、ならびに１つまたは複数の出口ポート（第１の入口ポートのところで管を通してレセプタクルの中に体液を引き入れることを目的として、バッグを真空デバイスに接続するための管を取り付けるのに適する）（図１３）。折り畳み式バッグは、生理的食塩水バッグ容器の場合と同様に、プラスチック材料から用意されるべきであり、ポリＤＡＤＭＡＣなどの適切な量の凝集剤を含有することになる。また、折り畳み式バッグは、ｉｖポールなどの取付具にバッグを吊り下げるのを容易にするための一方の端部のところに位置するハンドルまたは他のループ状部分（図１３、♯１０）をさらに有することになる。さらに、ＢＩＰがバッグに含まれてよいかまたはバッグに対してのアタッチメントとして配置されてもよく、ＢＩＰが、収集体液中に含有される血液のボリュームの概算の測定値を視覚的に確認可能にするのを実現することになる。バッグが、生理的食塩水バッグおよび供給バッグの場合に一般的であるように、従来の容積測定マーキングをさらに有することができる。
【００２９】
[0029]１００ｍｌ、２５０ｍｌ、および５００ｍｌの円錐収集レセプタクル（任意選択で、１ｍｌ、５ｍｌ、および／または１０ｍｌの段階的なマーキングを有する）、ＲＢＣ凝集剤、１つまたは２つの入口ポート（再密閉可能）、ならびに１つまたは複数の出口ポート（第１の入口ポートのところで管を通してレセプタクルの中に体液を引き入れることを目的として吸引力を加えるのに適する管を取り付けるのに適する）。これらのより小さい収集デバイスは、より少量（約５００ｍｌ未満）の血液ボリュームの監視ためのという特定の用途を有し、より高い精度を達成する。これらのより小さいデバイス、および／または円錐レセプタクルのサイズに特有の較正される血液ボリュームマーキングを有する、より小さいデバイスの中に嵌合されるように設計される折り畳み式バッグが、特には、新生児、小児科、および他の深刻な外科的状況で有用である。
【００３０】
[0030]体液中の血液ボリュームおよび失血を見積もる方法。別の態様では、液体中の血液ボリュームを見積もる方法が提供される。特定の実施形態では、この方法が、外科手術中に収集される体液からの、患者からの血液ボリュームロスを見積もるのに使用される。
【００３１】
[0031]この方法が、収集デバイス内での重力によるＲＢＣ沈降を可能にするのに十分な時間において、相対的な正電荷をＲＢＣの表面に加えるのに適する、ＲＢＣ凝集剤を有する収集デバイスの中にいくらかのボリュームの液体を収集することを含む。十分な時間後の沈降ＲＢＣのボリュームが、体液中の動物／人間の血液のタイプの見積もられるヘマトクリット値と共に、上記式１を使用して収集液体中の概算血液ボリューム値を計算することを目的として、特定の収集デバイスのために決定される計算されるＲＢＣ詰込比と共に使用される。別法として、本発明の一部として、血液インジケータパネル（ＢＩＰ）と称される較正マーキングパネル内でこれらの計算が行われ、血液インジケータパネルが血液収集デバイス内に含まれ得る。したがって、凝集剤を含有する収集デバイス内で収集される体液中のＲＢＣが沈降するとき、迅速で視覚的な血液ボリューム評価が実現され得る。いくつかの実施形態では、ＢＩＰが、５０ｍｌ、１００ｍｌ、２００ｍｌ、４００ｍｌ、および６００ｍｌの見積もられる血液ボリュームに合致する較正マーカーと、従来の１２００ｍｌのキャニスタなどで一般的であるように、従来的な容積測定のマーキング（例えば、５ｍｌ毎、１０ｍｌ毎）を有する体液収集デバイス内でＢＩＰに位置合わせするための容積測定アライメントマーキングとを有することになる。
【００３２】
[0032]血液ボリューム評価システム。体液収集キャニスタならびに／あるいはエンベロープおよび管類システム。本発明はさらに、血液ボリューム区分を用いて較正される、適切な量のＲＢＣ凝集剤を有する上記のレセプタクルのうちの任意の１つまたは複数のレセプタクルと、ある領域からレセプタクル上の第１のポートの中へと体液を吸引するのに適する第１の長さの管類と、レセプタクルの中に真空を加えるための、吸引力の供給源およびレセプタクルの第２のポートに接続されるのに適する第２の長さの管類と、を有することになるキットを提供する。このシステムがキットとして提供され得、インストラクショナルインサート（ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｌ  ｉｎｓｅｒｔ）をさらに有することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】[0033]２００ｕｌの３倍希釈のＳｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１のストック溶液と混合した５０ｍｌの２０％、４０％、および６５％のウシ血液を示す図である。１−収集キャニスタ、２−沈下ＲＢＣのレベル（重力による）、３−沈下ＲＢＣのレベル（重力による）、４−沈下ＲＢＣのレベル（重力による）、６−キャニスタ内の合計の体液レベル、７−キャニスタ内の合計のレベル、１０−凝集剤。
【図２】[0034]多様な赤血球沈降速度を有する多様なアスペクト比を有する容器を示す図である。１−目盛り付きの円錐管、２−円錐管上の０．５ｍｌの間隔を有する目盛り、３−沈降ＲＢＣのレベル（重力）、４−１００ｍｌの収集キャニスタ、５−キャニスタ内の合計の体液レベル、６−沈降ＲＢＣのレベル（重力）、１０−凝集剤
【図３Ａ】[0035]経時的な沈下ボリューム変化（生理的食塩水中の３０％血液）、３０％の血液濃度を有する血液／生理的食塩水の混合物試料の場合のＲＢＣ沈降ボリュームの経時的な変化を示すグラフである。
【図３Ｂ】経時的な沈下ボリューム変化（生理的食塩水中の４０％血液）。４０％の血液濃度を有する血液／生理的食塩水の混合物試料の場合の赤血球沈降ボリュームの経時的な変化を示すグラフである。
【図３Ｃ】経時的な沈下ボリューム変化（生理的食塩水中の６５％血液）。６５％の血液濃度を有する血液／生理的食塩水の混合物試料の場合のＲＢＣ沈降ボリュームの経時的な変化を示すグラフである。
【図３Ｄ】経時的な平均のＲＢＣ沈降ボリュームを測定するための実験のセットアップを示す図である。１−ガラスの目盛り付きのシリンダ、２−沈降ＲＢＣ（重力）、２−合計の体液レベル。
【図４】[0036]左側から右側へと、それぞれ、５３．３３％、４０％、および２６．７％まで生理的食塩水で希釈されたときの１０ｍｌの８０％血液中のＲＢＣの沈降を示す図である。すべての濃度が等しい充填ＲＢＣボリュームまで沈下した。１−凝集剤を有する１２００ｍｌの収集キャニスタ、２−沈下ＲＢＣレベル、３−キャニスタ内の合計の体液。
【図５Ａ】[0037]ｉｖポール（６）上にある凝集剤およびキャップ（１５）を有する収集キャニスタ（８）を備える手術室を示す図である。キャップ（１５）が、吸引ポート（２）と、入口ポート（４）と、真空ポート（１１）とを有する。入口ポート（４）が必要に応じて収集キャニスタに生理的食塩水または他の希釈剤を加えるのに使用され得る。収集キャニスタ（８）が血液インジケータパネル（ＢＩＰ）（５）を有することができる。吸引ポート（２）が管（１）を受け、管（１）が、患者（７）の外科手術中に手術野から生物学的体液を吸引するのに使用される。
【図５Ｂ】収集キャニスタ（８）が、吸引ポート（２）と、入口ポート（４）と、真空ポート（１１）とを有するキャップ（１５）を有する図である。患者から吸引された体液が真空ポート（１１）を通して収集キャニスタへと引かれる吸引力を介して、収集キャニスタ（８）の中へと抜かれることになる。
【図６】[0038]キャリア溶液の凝集剤材料の超音波噴霧化（３、４、５）による容器の内壁に対して粒子状懸濁液（４）が塗布され得るときの凝集剤を示す図である。任意の従来の超音波噴霧化デバイス（２）およびシリンジポンプが、例えばポリＤＡＤＭＡＣなどの凝集剤を用いて、１２００ｍｌのキャニスタなどの収集デバイスをコーティングするのに使用され得る。
【図７Ａ】[0039]超音波噴霧化デバイス（３）を使用しての、１２００ｍｌのキャニスタなどの収集容器（１）の表面（２）上へのポリＤＡＤＭＡＣコーティング（凝集剤粒子（１０））の塗布を示す図である。
【図７Ｂ】表面上へのポリＤＡＤＭＡＣコーティングの２つのバッチを用いて処理される１２００ｍｌのキャニスタ（１）を示す図である（凝集剤粒子、１０）。
【図８】[0040]キャップ（１）を有する凝集剤（１０）で処理されるキャニスタを示す図であって、キャップ（１）が、いくらかのボリュームの血液混合物を有する容器に対して一定の長さの管類（４）によりキャニスタを接続する第１の入口ポート（４）と、キャニスタの中に吸引力を発生させることを目的として一定の長さの管類を通してキャニスタを真空源に接続する第２の真空ポート（５）とを有する。
【図９Ａ】[0041]２０％の血液／生理的食塩水の混合物の実験の場合における２０分の時間にわたってのＲＢＣ沈下ボリュームの変化を示すグラフである。合計の血液／生理的食塩水混合物のボリュームは、２００ｍｌである。血液ボリューム（沈下していないＲＢＣボリューム）の概算を実現するためにＢＩＰの一部としてマーカーが作られている。
【図９Ｂ】２０％の血液／生理的食塩水の混合物の実験の場合における２０分の時間にわたってのＲＢＣ沈下ボリュームの変化を示すグラフである。合計の血液／生理的食塩水混合物のボリュームは、４００ｍｌである。血液ボリューム（沈下していないＲＢＣボリューム）の概算を実現するためにＢＩＰの一部としてマーカーが作られている。
【図９Ｃ】２０％の血液／生理的食塩水の混合物の実験の場合における２０分の時間にわたってのＲＢＣ沈下ボリュームの変化を示すグラフである。合計の血液／生理的食塩水混合物のボリュームは、８００ｍｌである。血液ボリューム（沈下していないＲＢＣボリューム）の概算を実現するためにＢＩＰの一部としてマーカーが作られている。
【図９Ｄ】２０％の血液／生理的食塩水の混合物の実験の場合における２０分の時間にわたってのＲＢＣ沈下ボリュームの変化を示すグラフである。合計の血液／生理的食塩水混合物のボリュームは、１２００ｍｌである。血液ボリューム（沈下していないＲＢＣボリューム）の概算を実現するためにＢＩＰの一部としてマーカーが作られている。
【図１０Ａ】[0042]４０％の血液／生理的食塩水の場合における２０分の時間にわたってＲＢＣ沈下ボリュームの変化を示すグラフである。合計の血液／生理的食塩水混合物のボリュームは、２００ｍｌである。
【図１０Ｂ】４０％の血液／生理的食塩水の場合における２０分の時間にわたってＲＢＣ沈下ボリュームの変化を示すグラフである。合計の血液／生理的食塩水混合物のボリュームは、４００ｍｌである。
【図１０Ｃ】４０％の血液／生理的食塩水の場合における２０分の時間にわたってＲＢＣ沈下ボリュームの変化を示すグラフである。合計の血液／生理的食塩水混合物のボリュームは、８００ｍｌである。
【図１０Ｄ】４０％の血液／生理的食塩水の場合における２０分の時間にわたってＲＢＣ沈下ボリュームの変化を示すグラフである。合計の血液／生理的食塩水混合物のボリュームは、１２００ｍｌである。（注釈：各チャートのボリューム測定値が、凝集剤を用いて処理される１２００ｍｌのキャニスタのために用意されるマーカーから得られる。血液ボリュームの概算値を表すために血液インジケータパネル（ＢＩＰ）の一部としてマーカーが提供される。マーカーが、約２０ｍｌ程度で変化する可能性がある、血液ボリューム（沈下していないＲＢＣボリューム）の概算値を提供すると見積もられる。）
【図１１Ａ】[0043]ポリＤＡＤＭＡＣ（凝集剤粒子、１０）でコーティングされる１２００ｍｌのキャニスタ（１）の中の２０％のウシ血液／生理的食塩水の混合物の場合において１０分〜１５分で観察されるＲＢＣの安定した沈下を示す図である。キャニスタ上の容積測定区分に従って、キャニスタ内の沈下ＲＢＣボリュームが、約１１０ｍｌのボリュームレベル（２）と、９５０ｍｌの合計のボリューム（３）とにおいて観察された。
【図１１Ｂ】ポリＤＡＤＭＡＣ（凝集剤粒子、１０）でコーティングされる１２００ｍｌのキャニスタ（１）の中の４０％のウシ血液／生理的食塩水の混合物の場合における約１５分〜２０分後のＲＢＣの安定した沈下を示す図である。キャニスタの従来の容積測定区分に従って、キャニスタ内の沈下ＲＢＣボリュームが、約２４０ｍｌのボリュームレベル（２）と、約１１５０ｍｌの合計のボリューム（３）とにおいて観察された。
【図１２】[0044]凝集剤で処理される３つのキャニスタ（左側から右側へ、Ｉ、ＩＩ、およびＩＩＩが付される）が、血液インジケータパネル（４）を有するように用意されている。示されるように、血液インジケータパネル（４）が分離されるインジケータパネルとして提示され、キャニスタ上の従来の容積測定マーキングに並ぶように設けられ得る。血液インジケータパネルが、血液ボリュームの概算値を提供する一連の較正されるマーキングを有する。各キャニスタ内で検査される血液／生理的食塩水の混合物が、５０％の血液（Ｉ）、３０％の血液（ＩＩ）、および２０％（ＩＩＩ）である。キャニスタ１２ＩＩＩのＢＩＰ（垂直方向の白色棒を参照されたい）が、凝集剤（凝集剤粒子、１２）の存在時の約５０ｍｌの沈下ＲＢＣレベルを示しており、これが約１１６ｍｌの較正ＢＩＰ読取値に対応する。
【図１３】[0045]ＢＩＰ（２０）と、入口ポート（３）と、容器上に配置されることになる真空ポート（４）と、生理的食塩水または他の希釈剤を加えるのを可能にするための第２の入口ポート（１５）とを有する、凝集剤を有する折り畳み式のプラスチックバッグの血液レセプタクルを示す図である。バッグが、静脈ポールまたは他の取付具の上にバッグを配置するのを可能にするように適合されるフック（１０）をさらに有するべきである。
【図１４】[0046]ＢＩＰ（５）と、ＲＢＣ凝集剤（４）と、入口ポート（２）と、真空ポート（６）と、第２の入口ポート（３）とを有する、凝集剤（臨界ボリューム、小児用途）を有する円錐収集デバイスを示す図である。
【図１５】[0047]ＢＩＰを示す図である。１２００ｍｌの収集容器と共に使用されるのに適する典型的なＢＩＰが、少なくとも以下の較正される概算の血液ボリューム：５０ｍｌ、５０ｍｌ、１００ｍｌ、２００ｍｌ、４００ｍｌ、および６００ｍｌ、のためのマーカーを有することができる。ＢＩＰが、最大約５０％未満の血液を含有する収集体液中の血液ボリュームの正確な概算値を提供することになる。ＢＩＰ（２０）が、較正される一連の血液ボリュームマーキング、６（５０ｍｌ）、７（１００ｍｌ）、８（２００ｍｌ）、９（４００ｍｌ）、および１０（６００ｍｌ）を有する。ＢＩＰが容積測定の沈下ＲＢＣボリューム基準ツール（１）と並ぶように示されており、この基準ツール（１）が、１５（約２５ｍｌ）、４（約５０ｍｌ）、３（約１２５ｍｌ）、および２（約２５０ｍｌ）である、収集デバイスの従来の容積測定の測定値を有する。沈下ＲＢＣのボリュームは、収集体液中の血液のボリュームの直接的な測定値（ＢＩＰ上に示される）を提供するものではない。代わりに、沈下ＲＢＣレベルは基準点であり、この基準点から概算の血液ボリュームが視覚的に確認され得る。
【図１６Ａ】[0048]コントロールの（熱処理されない凝集剤でコーティングされるキャニスタ）、および実験の（熱処理される凝集剤でコーティングされる）キャニスタでの、ＲＢＣ沈降の速度のチャートデータ。１０００ｍｌの２０％の血液の生理的食塩水混合物を使用して試験を実施した。熱処理されたキャニスタが、キャニスタの中に導入される２０％および４０％の血液／生理的食塩水の混合物の両方において、３分間、凝集剤含有キャニスタに接触させて、ＲＢＣを凝集させる能力を維持した。
【図１６Ｂ】コントロールの（熱処理されない凝集剤でコーティングされるキャニスタ）、および実験の（熱処理される凝集剤でコーティングされる）キャニスタでの、ＲＢＣ沈降の速度のチャートデータ。５００ｍｌの４０％の血液の生理的食塩水混合物を使用して試験を実施した。熱処理されたキャニスタが、キャニスタの中に導入される２０％および４０％の血液／生理的食塩水の混合物の両方において、６分間、凝集剤含有キャニスタに接触させて、ＲＢＣを凝集させる能力を維持した。
【図１７Ａ】[0049]高温の時間経過した凝集剤でコーティングされたキャニスタ（高温処理されていない凝集剤のキャニスタ（パネルＩＩ（２０％の血液））と比較されるパネルＩ（２０％の血液））での、ウシ血液からのＲＢＣの沈下を示す図である。
【図１７Ｂ】高温の時間経過した凝集剤でコーティングされたキャニスタ（高温処理されていない凝集剤のキャニスタ（パネルＩＩ（４０％の血液））と比較されるパネルＩ（４０％の血液））での、ウシ血液からのＲＢＣの沈下を示す図である。
【図１８】[0050]ウマ血液の調査を示す図である。凝集剤を有するかまたは凝集剤を有さない１００ｍｌの容器の中でのＲＢＣ沈降の比較（容器上の治療単位の（ｃｏｕｒｓｅ）容積測定マーキングを使用する視検から概算される容積測定読取値。凝集剤を有する１００ｍｌの容器のＲＢＣ沈降。凝集剤を用いる１０％の血液（ｗ／Ｆ）；凝集剤を用いる２０％の血液（ｗ／Ｆ）；凝集剤を用いる３０％の血液（ｗ／Ｆ）；凝集剤を用いる４０％の血液（ｗ／Ｆ）；凝集剤を用いる５０％の血液（ｗ／Ｆ）；凝集剤を用いる６５％の血液（ｗ／Ｆ）。試験時間（０分から２５分）にわたって室温で検査した、凝集剤を用いない１０％の血液（ｗ／ｏ  Ｆ）；凝集剤を用いない２０％の血液（ｗ／ｏ  Ｆ）；凝集剤を用いない３０％の血液（ｗ／ｏ  Ｆ）；凝集剤を用いない４０％の血液（ｗ／ｏ  Ｆ）（図示せず）；凝集剤を用いない５０％の血液（ｗ／ｏ  Ｆ）（図示せず）；凝集剤を用いない６５％の血液（ｗ／ｏ  Ｆ）、の混合物では、ＲＢＣの視覚的に検出可能な沈降が観察されなかった）。
【図１９】[0051]ウマの新鮮な血液の調査を示す図である。凝集剤でコーティングされた１２００ｍｌのキャニスタの中での６１．６％の血液／生理的食塩水の混合物からのＲＢＣ沈降。約４００ｍｌの新鮮なウマ血液を２５０ｍｌの生理的食塩水と組み合わせた。ＲＢＣ沈降のボリュームを記録した。ＲＢＣが１分以内で沈澱し始めた（５００ｍｌのＲＢＣ沈降ボリューム）。１５分までにＲＢＣが約３００ｍｌのボリュームまで沈下し、観察期間の終了時までこの沈降ボリュームで安定した状態を維持した。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
[0052]特に明記しない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語が、本開示の関連する当業者によって一般に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書で説明される方法および器具に類似するかまたはそれらと等価である任意の方法および器具が本テクノロジの実施または試験で使用され得るが、本明細書では好適な方法および器具が説明される。
【００３５】
[0053]本明細書で使用される場合の「凝集剤」という用語は、室温での体液中のＲＢＣの合着を促進することができ、さらには遠心分離なしで室温で３０分未満で沈下ＲＢＣマスを形成することができる、カチオン電荷を有する分子を意味することを意図される。
【００３６】
[0054]文脈が単一の要素のみが存在することを明確に必要としない限りにおいては、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」により要素に言及することは２つ以上の要素の存在の可能性を排除しない。したがって、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」は通常は「少なくとも１つ」を意味する。
【００３７】
[0055]本明細書で使用される場合の「患者」または「被験者」は、癌または他の悪性腫瘍の徴候またはそのような危険を有する個人を意味する。患者は人間または人間ではない動物であってよく、例えば、馬、犬、雌牛、豚、または他の動物などの、動物を含んでよい。同様に、患者または被験者には、成人または若年者（例えば、子供）を含めた人間の患者が含まれてよい。さらに、患者または被験者は、好適には哺乳類（例えば、人間、または人間でない動物）である、任意の生物を意味してよく、その生物から、血液ボリュームを決定することが所望され、および／または血液ボリュームの、本明細書で企図される配合物の投与により決定および／または監視を行うことが所望される。
【００３８】
[0056]本明細書で使用される場合の「約」は、記載される濃度、長さ、分子量、ｐＨ、配列同一性、時間枠、温度、またはボリュームなど、の値の統計的に意味のある範囲内にあることを意味する。このような値または範囲は、通常、所与の値または範囲の、２０％の範囲内、より一般的には１０％の範囲内、さらに一般的には５％の範囲内にあるような、指標の範囲内にあってよい。「約」によって包含される許容される変化は調査下の特定のシステムに依存することになり、当業者には容易に認識され得る。
【００３９】
[0057]以下の実施例は本発明の好適な実施形態の実証のために提示されるものである。
【００４０】
実施例１−ＲＢＣ凝集剤
[0058]本実施例は、血液を含有するかまたは血液を含有することが疑わしい流体中のＲＢＣ凝集剤として使用され得る物質を提示する。表１の以下の化学物質がＲＢＣ凝集剤として提供され得る。
【表１】
2020504314.tif 000003
【００４１】
実験室試験及びダウンセレクション
[0059]表１に列記される確認されるすべての化学物質を試験して適性に関して評価した。Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（ミシガン州、ノバイ）から購入されるウシ全血を使用して、ＲＢＣ凝集剤として上記の各化学物質の適性を決定した。全血は、抗凝血物質としてクエン酸ナトリウムを含有する。生理的食塩水を用いて全血を希釈して以下の血液濃度を提供した：２０％、３０％、４０％、５０％、６５％、および８０％。これらを本調査で検査した。
【００４２】
[0060]ゼラチンがＲＢＣ凝集作用を誘発したが、沈降を引き起こさなかった。最終的に、ゼラチンが全体の血液／生理的食塩水の混合物試料をゲル構造へと変質させた。血漿および生理的食塩水からＲＢＣを分離しないと、ゼラチンはこの用途には適さない。
【００４３】
[0061]デキストラン８０＋ＣａＣｌ２も、血漿および生理的食塩水からＲＢＣを分離することなく、血液／生理的食塩水の混合物試料をゲルへと変質させた。
【００４４】
[0062]１．８％の高濃度酸の６Ｎ  ＨＣＬを加えることにより血液／生理的食塩水の混合物試料の酸処理を実施した。試料のｐＨが約４．５まで変化した。この酸処理がＲＢＣの凝集作用および沈降を引き起こした。しかし、比較的多量の強酸を使用することはこの用途においてコスト効率的ではなく、また、強酸はプロセスにおいて取り扱うことが困難である。したがって、酸処理はＥＳＲを向上させるために使用され得る。
【００４５】
[0063]正電荷を帯びたポリマーであるＰＥＩは、血漿および生理的食塩水からのＲＢＣ沈降を引き起こした。ＰＥＩは酸性条件下（つまり、ｐＨ＜７．０）で溶解されなければならない。言い換えると、血液を含有する生物学的体液中でのＲＢＣ沈降を促進するためにＰＥＩが使用され得る前に、中性ｐＨにおいて血液／生理的食塩水の混合物試料が、ｐＨを下げるために最初に酸を加えられることを必要とする。ＰＥＩおよびポリＤＡＤＭＡＣの相対的有効性を比較した。ＰＥＩによって誘発されるＥＳＲ（赤血球沈降）はポリＤＡＤＭＡＣのＥＳＲより低いことが分かった。ＰＥＩは、血液を含有する生物学的物質（体液）でのＲＢＣのための許容される凝集剤である。
【００４６】
[0064]ＰＡＭは負電荷または正電荷のいずれかを帯びていてよいポリマーである。負電荷を帯びたポリマーは負電荷を帯びたＲＢＣの凝集および沈下を誘発しない。正電荷を帯びたＰＡＭはこの用途のために使用されると予期され得る。
【００４７】
[0065]ミョウバンは正電荷を帯びた分子である。ミョウバンは低速のＥＳＲを促進したが、その速度および量は大幅に低い。凝集剤の相対分子量は適切な凝集剤としての使用のために考察された。その理由は、凝集剤の相対分子量が重力によるＲＢＣの沈下を促進するからである。ＰＥＩおよびポリＤＡＤＭＡＣを用いた研究で、このようなポリマーのより高い分子量が、より迅速なＲＢＣ沈降を引き起こすことが分かった。
【００４８】
[0066]ポリＤＡＤＭＡＣは別の１つの正電荷を帯びたポリマーである。また、ポリＤＡＤＭＡＣは中性ｐＨで水溶性である。血液／生理的食塩水の混合物試料の存在時のポリＤＡＤＭＡＣはＲＢＣ沈降を迅速に引き起こす能力を有する。沈降を引き起こすためにポリＤＡＤＭＡＣの重量は少量のみ必要である。血液を含有する生物学的混合物中の血液の量に比例して必要となるポリＤＡＤＭＡＣのフラクションを決定するための定量調査を以下に説明する。また、これらの調査は、過度の量のポリＤＡＤＭＡＣがＲＢＣ沈降を妨害または停止さえする可能性があることを示した。これはＲＢＣが正電荷を帯びたポリＤＡＤＭＡＣによってコーティングされるかまたは囲まれることが理由である可能性があり、これはコーティングされるＲＢＣが負電荷ではなく正電荷により互いに反発してそれにより凝集作用および沈降を妨害および／または防止するからである。
【００４９】
[0067]低コストで高分子量（少なくとも１００ＫＤａ、２００ＫＤａ、３００ＫＤａ、または約４００ＫＤａ）の正電荷を帯びたポリＤＡＤＭＡＣが、ＲＢＣ沈降を迅速に誘発するための好適なコスト効率の高い凝集剤として確認された。他の高分子の正電荷を帯びたポリマー凝集剤（例えば、ＰＥＩ、ＰＡＭなど）も本方法の実施および容器ベッセルの形成に有用である。ＲＢＣ沈降を実現するための方法の一部として酸処理も有用であることも予期される。
【００５０】
実施例２−失血の見積もり
[0068]本実施例は、体液中に含有されるＲＢＣのための効果的な凝集剤としてのポリＤＡＤＭＡＣの材料と、血液、および生理的食塩水を含めた他の液体、を含有する体液中の合計の血液ボリュームを見積もるためのこの凝集剤の使用と、を実証する。
【００５１】
[0069]高分子量（少なくとも、１００ＫＤａ、２００ＫＤа、３００ＫＤа、または４００ＫＤа）の研究グレードのポリＤＡＤＭＡＣを、産業グレードポリＤＡＤＭＡＣと共に、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから入手した（カタログ番号４０９０２２または４０９０３０）。産業グレードの製品は「Ｓｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１」の製品名でＫｅｍｉｒａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌから市販されおり、２０％の濃度のポリＤＡＤＭＡＣを含有する。この物質が水処理で使用される。研究グレードの製品と産業グレードの製品との間で有効性を比較するための調査を実施した。この調査により、Ｓｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１が研究グレードの製品と同様のＲＢＣ沈降の結果をもたらすことが分かった。産業グレードの製品のコストは研究グレードの製品のコストより低い。Ｃ−５９１の純度はばらつきがあり、それによりＲＢＣ凝集にいくらかの違いが出た。研究グレードおよび産業グレードのポリＤＡＤＭＡＣの使用では、２０ｗｔ．％である水のストック溶液を水を用いて６．６７ｗｔ．％の希釈標準溶液まで希釈して、溶液の粘性を低下させ、取り扱いの容易さを向上させた。１２００ｍｌの収集キャニスタのための凝集剤の乾燥重量は、ポリＤＡＤＭＡＣで６００ｍｇであった。
【００５２】
[0070]ＲＢＣ沈降を促進するのに必要である凝集剤の量。Ｓｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１（製造業者から入手される（粘性液、Ｈ２Ｏ中で２０ｗｔ．％））をＲＢＣ凝集剤をとして使用して、ウシ血液と生理的食塩水の混合物を試験した。より迅速なＲＢＣ沈降速度を促進するために必要な凝集剤の量を検査した。混合物中のＲＢＣの許容される迅速性（１５分以内）を実現するために、約０．４％（ｖ／ｖ％）のみのＳｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１の希釈標準溶液を全体の血液／生理的食塩水の混合物のボリュームに加えることが必要であることが分かった。例えば、１リットルの血液／生理的食塩水の混合物試料では、混合物中の血液濃度に関係なく、４ｍｌのみのＳｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１の希釈標準溶液が必要である。これは、１．２リットルのキャニスタのための約３２０ｍｇのポリＤＡＤＭＡＣの凝集剤へと換算される。
【００５３】
[0071]図１は、それぞれ、２０％、４０％、および６５％の血液濃度（図の左側から右側）を有する３つの５０ｍｌボリュームの血液／生理的食塩水の混合物試料を示す。等しい量の２００μｌ（つまり、５０ｍｌの０．４％）のＳｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１の希釈標準溶液を加えて、これらのすべての血液濃度での赤血球沈降を誘発した。しかし、以下で考察するように、特定の混合物での血液の濃度に応じて沈降速度が異なることが分かった。
【００５４】
[0072]また、試験により、より低いまたはより高い濃度のＳｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１の希釈標準溶液が使用され得ることが分かった。例えば、０．３％（ｖ／ｖ％）程度の低さおよび０．６％（ｖ／ｖ％）の程度の高さの濃度も有効であることが分かったが、正確な上限および下限は決定していない。６％（ｖ／ｖ％）の濃度のＳｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１の希釈標準得溶液を、２０％の血液濃度を有する血液／生理的食塩水の混合物試料に加えることで、最小限の沈下を誘発することが分かったが、これは沈降のための上限とはなり得ない。
【００５５】
[0073]血液容器（レセプタクルまたはキャニスタ）のアスペクト比。実験中、ＲＢＣ沈降速度が、部分的に、容器のアスペクト比Ｄ：Ｈによって決定されることが分かった。ここでは、例えば図２に示されるように、Ｄが容器の直径であり、Ｈが容器の高さである。アスペクト比Ｄ：Ｈは容器の形状に依存する。Ｄ：Ｈが大きいときに沈降速度が高い。その理由は、Ｄが大きいと、凝集ＲＢＣが重力により沈下するための領域またはスペースが大きくなるからである。したがって、異なる血液収集容器（または、キャニスタ）が使用される場合、沈降速度が異なることになる。
【００５６】
[0074]実験中に分かった別のことは、血液／生理的食塩水の混合物試料を加える前にＳｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１を容器の中に配置する場合に、さらには既に容器を血液／生理的食塩水の混合物試料で充填した後でＳｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１を容器に加える場合に、Ｓｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１凝集剤が沈降ＲＢＣを凝集させることである。
【００５７】
[0075]沈降速度および血液濃度。本調査により、また、血液／生理的食塩水の混合物中の血液濃度がＲＢＣ沈降速度に影響を与えることが示された。ここでは、高い濃度を含有する試料に対して低い血液濃度を有する試料では沈降速度が高い。図３Ａ、３Ｂ、および３Ｃが、例えば、それぞれ、３０％、４０％、および６５％の血液／生理的食塩水の混合物試料中のＲＢＣの沈降速度を示す。
【００５８】
[0076]沈降速度の違いを判断するためにこれらの研究において目盛り付きのガラスシリンダ（図３Ｄ）を使用した。この実験では、３０％、４０％、および６５％の血液濃度を有する３つの６０ｍｌの血液／生理的食塩水の混合物試料を使用した。最初に、Ｓｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１の希釈標準溶液の２４０μＬ（つまり、６０ｍｌの０．４％）の液滴をガラスシリンダに加えた。次いで、６０ｍｌの血液／生理的食塩水の混合物試料をガラスシリンダに加えた。ガラスシリンダ内の体液層の明瞭な差異によりＲＢＣの分離を視覚的に観察した。ここでは、沈下ＲＢＣがシリンダの底部に向かうようなより不透明な体液層であり、血漿／生理的食塩水層が沈下ＲＢＣ層の上方にあるより明瞭な体液層である。シリンダの段階的なマーキングを参照することによりシリンダ内の沈下ＲＢＣボリュームを記録し、これを毎分記録した。
【００５９】
[0077]時間０において視覚的分離が開始されていないために、時間０において沈下ＲＢＣボリュームを６０ｍｌに設定した。時間０の後、ＲＢＣが血漿／生理的食塩水層から沈下し始め、初期では高い沈降速度で容器の底部に向かって沈下するが、沈降速度は経時的に低下する。この点に関して、血漿／生理的食塩水層から分離されたＲＢＣの量が増大するにつれて、血漿および生理的食塩水から分離することになるＲＢＣが減ることになる。最終的に、ＲＢＣ沈降速度が非常に低くなり、ＲＢＣボリューム変化速度が毎分０．５％未満になる。この時点で、沈下ＲＢＣのボリュームが安定したとみなされる。言い換えると、沈下ＲＢＣのボリューム変化が毎分０．５％未満の場合に安定した沈降が達成される。Ｖｍとして示される「充填ＲＢＣボリューム」は、ＲＢＣ沈降を安定したとみなす場合の容器の底部のところのＲＢＣ層のボリュームである。
【００６０】
[0078]図３Ａが、凝集剤と混合したほぼ直後に３０％の血液濃度を有する血液／生理的食塩水の試料混合物がＲＢＣ沈降を開始したことを示している。沈降の大部分が１分以内に完了した。試料を凝集剤と混合した約１０分後に安定したＲＢＣ沈降が達成された。安定した充填ＲＢＣボリュームＶｍが約９．５ｍｌであった。４０％の血液濃度を有する血液／生理的食塩水の混合物試料の場合、沈降速度がわずかに低かった（図３Ｂ）。大部分のＲＢＣの沈降のほとんどが、３０％の血液濃度の試料の場合に観察された１分ではなく、２分で起こった。４０％濃度の試料場合の安定した沈降は約１５分で達成され、Ｖｍは約１４ｍｌであった。６５％血液濃度の試料の場合、沈降はより低速であった（図３Ｃ）。安定した沈降を観察するまでに６０分以上かかった。血液／生理的食塩水の混合物中の血液ボリュームを判断するための方法は、５０％以下の血液を含有する液体において最適で一貫性があった。迅速な沈降とは、室温で凝集剤を加えてから１５分以内で生理的食塩水／血液の混合物中のＲＢＣの安定した沈降を達成することを特徴とする（沈下中に混合物をかき混ぜない）。
【００６１】
[0079]体液中の血液濃度を約５０％未満で維持するのを保証するために、血液（最適なＲＢＣ分離のため）、追加の生理的食塩水、または他の血液希釈剤が加えられ得る。高濃度の血液を有する血液／生理的食塩水の混合物でも依然として迅速な沈降を達成することができることが分かった。沈降速度の低下が見られる場合に沈降は再開することができる１つの手法として、追加のボリュームの生理的食塩水を加えて血液をさらに希釈することができる。図４に示されるように、３つのボトルの中に、８０％血液濃度（クエン酸ナトリウムの抗凝血物質を含有するウシ血液）を有する３つの１０ｍｌの血液／生理的食塩水の混合物試料を用意した。すべての試料を、３０μＬ（１０ｍｌの約０．３％）のＳｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１希釈標準溶液（約２ｍｇの乾燥重量のＳｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１）と混合した。試料の希釈前には沈降が観察されなかった。血液濃度を希釈するために、各ボトルに生理的食塩水を加えた。図４の左側から右側へ、５ｍｌ、１０ｍｌ、および２０ｍｌの生理的食塩水を加えて、試料を、５３、３％、４０％、および２６．７％の血液濃度までそれぞれ希釈した。容器をわずかにかき混ぜて加えた生理的食塩水を試料と混合した。希釈時、ＲＢＣが沈降し始めた。
【００６２】
[0080]２６．７％血液濃度の混合物および４０％血液濃度の混合物が約１０分で安定した沈降を達成した。５３．３％血液濃度の混合物が約１６分で安定した沈降を達成した。図４に示されるように、存在する生理的食塩水の量が異なっていても、すべての３つの試料の最終的な充填ＲＢＣボリュームＶｍ（つまり、容器の底部のところのより暗い底部層）が等しい。この結果は、最初の１０ｍｌの８０％血液濃度の混合物が等しい量の８ｍｌの血液ボリュームを含有することを理由として、達成された。この調査から以下のことが示された：１）ＲＢＣ沈降速度の向上させるのを補助することを目的として血液／生理的食塩水の混合物を希釈するためにさらなる生理的食塩水が加えられ得ること、および２）容器の底部に凝集したＲＢＣのボリューム（つまり、充填ＲＢＣボリューム）が血液／生理的食塩水の混合物中の生理的食塩水の量の影響を受けないことを理由として合計の血液ボリュームがＲＢＣの沈降を介して見積もられ得ること。
【００６３】
[0081]上記で考察される他の凝集剤または他の化学処理を用いて、最適な凝集剤濃度および血液／生理的食塩水比を決定するために、上で概説した試験プロトコルを使用するさらなる試験を行うことができることに留意されたい。
【００６４】
[0082]再現性。４０％血液濃度（クエン酸ナトリウムの抗凝血物質を含有するウシ血液）の混合物（図１０Ａ）を使用してＲＢＣ沈降の調査を３回繰り返した。図１０Ａのプロット中の線の多様なポイントで標準偏差誤差バーが示されている。この実験の再現性は非常に良好であり、特に沈降が安定に近づくときの線上のポイントのところでの再現性が良好であった。線上のポイントでのより長い標準偏差誤差バーによって示されるように初期状態では比較的大きいばらつきが生じるが、これらのばらつきは、これらのポイントのところで沈下ＲＢＣ層の迅速なボリューム変化により生じる視覚的読み取り誤差による可能性が高い。沈降が安定に近づくとデータのばらつきが非常に小さくなる。言い換えると、沈降が安定しているとき、充填ＲＢＣボリュームＶｍのばらつきが小さい。
【００６５】
[0083]合計の血液ボリュームの見積もり。合計の血液ボリュームの見積もりの実現可能性を実証するために、沈降ＲＢＣボリュームＶｍに基づく血液／生理的食塩水の混合物中の合計の血液ボリュームを見積もるためのアルゴリズムを開発した。実際のＲＢＣボリュームがＶｃとして示され（遠心分離によって決定される）、合計の血液ボリュームがＶｂとして示され、患者のヘマトクリット値がＨｃｔとして示される場合、以下の関係が得られる。
【数１】
2020504314.tif 000004
【００６６】
[0084]Ｈｃｔは手術前に測定される患者データから入手可能であり、Ｖｍは上述の方法に基づいて測定可能であることから、ＶｍとＶｃとの間の詰込比（η）の値が経験的に事前に決定される場合（詰込比ηを決定するための方法を実証する方法および実施例が本明細書で提示されている）、合計の血液ボリュームＶｂが見積もられ得る。
【００６７】
[0085]詰込比ηの値は血液タイプごとに異なっていてよい（例えば、人間対人間ではない動物）。また、詰込比の値は、血液を収集するのに使用される容器のサイズおよび形状（アスペクト比）によって変化する可能性があることから容器固有である可能性がある。この点に関して、リコール試験（ｒｅｃａｌｌ  ｔｅｓｔ）が、容器の形状の影響を受けるＥＳＲ（赤血球沈降速度）を示している。したがって、等しい血液タイプおよび血液測定のための等しい容器形状が使用される場合、詰込比ηは等しい値を維持する。
【００６８】
[0086]詰込比ηは、既知のヘマトクリット値と、血液／生理的食塩水の混合物中の既知の血液ボリュームとを使用することによって経験的に決定される。好適には、詰込比ηの値は、多様な既知の血液濃度を有する複数の血液／生理的食塩水の混合物からの平均の詰込比の値を得ることによって決定されることになる。この点に関して、同じ種の動物（ウシ、ウマ、人間）からの血液と、所定のサイズおよび形状を有する容器とを用いて調査を行うことにより、本明細書で説明される凝集剤の存在により、多様な既知の血液／生理的食塩水の濃度の混合物を検査して、適切な詰込比ηが計算され得る。検査される異なる血液／生理的食塩水の混合物の数が増大すると、得られる平均の詰込比の値の統計的信頼性が上がることになる。上で考察したように、収集体液の血液濃度は、いくつかの実施形態では、約５０％以下の血液である。加えて、一般的であるような数の被験者（動物／人間）のから得られる複数のヘマトクリット値から平均のヘマトクリット値が決定され得る。ヘマトクリット値は、当業者には既知であるような伝統的な毛細管遠心分離の方法（ｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ）を使用して計算され得る。特定の収集事象中の血液ボリュームが既知である場合、人間のグループまたは馬のグループなどの、１つグループの動物の平均のヘマトクリット値が、本明細書で説明される式および方法で使用され得る値Ｖｃを提供することになる。
【００６９】
[0087]上述したように、詰込比ηの値は、好適には、所定の収集容器の中にある１つグループの血液／生理的食塩水の混合物試料から計算される平均の詰込比の値である。ＲＢＣ凝集剤の存在によって促進されて、実際のＲＢＣボリュームＶｃおよび沈下ＲＢＣボリューム（通常は重力によるもの、室温）Ｖｍが複数の個別の試料に対して決定されることになり、平均の詰込比の値が決定されることになる。実際のＲＢＣボリュームＶｃを決定するために、混合物試料に加えられる血液のヘマトクリット値が、その試料に加えられた血液ボリュームに掛け合わされる。
【００７０】
[0088]次いで、充填ＲＢＣボリュームＶｍが、上述したように、容器上の従来の容積測定の段階的なマーキングを使用して各混合物試料に対して決定され得る。つまり、凝集剤が存在することで、ＲＢＣ沈降のボリュームを読み取ることによりＶｍが決定され得る。本方法の一部として、等しいタイプおよび等しい量（全体の体液混合ボリューム中の濃度）のＲＢＣ凝集剤が収集容器に加えられるべきである。表２に示されるように、凝集剤であるポリＤＡＤＭＡＣの濃度が変化させられる場合でも、詰込比ηが比較的一定を維持した。したがって、凝集剤濃度の範囲（全体の液体ボリューム中の凝集剤の、約０．３％、０．４％、および０．７５％の凝集剤の範囲）が、詰込比に有意に影響を与えることなく、ＲＢＣ沈降を誘発するのに使用され得る。加えて、表２中のデータは、凝集剤濃度が比較的一定を維持する場合に詰込比が液体混合物（血液／生理的食塩水）中の血液ボリュームの量の影響を比較的受けないことを実証する。
【００７１】
[0089]各混合物試料の、実際のＲＢＣボリュームＶｃおよび沈下した充填ＲＢＣボリュームＶｍを用いて、各試料（つまり、各々の多様な血液濃度の混合物）における詰込比ηの値が決定され得る。この場合、平均の詰込比の値が計算され得る。例えば、ウシ血液の場合、計算した平均の詰込比が１．６１であった（表２を参照）。
【００７２】
[0090]詰込比の値の経験的決定を実証するために、商業的供給メーカーから購入したウシ血液の詰込比の値ηを決定した。これらの血液物質はクエン酸ナトリウムを含有する（抗凝血物質として）。ボリューム（ｍｌ）のための目盛りを付けられたプラスチックキャニスタを使用した。これが図４に示されている。結果が以下の表２に示される。実験前に、複数のウシ血液試料からウシ血液の平均ヘマトクリット値Ｈｃｔを計算して、３７．３％の平均値を有すると判断した。この平均Ｈｃｔを以下の表で使用し、試料中の血液ボリュームの本発明の概算で使用した。個別のＨｃｔ値を決定するために伝統的な毛細管遠心分離の方法を使用した。
【００７３】
[0091]
【表２】
2020504314.tif 000005
【００７４】
[0092]これらの実験から結果として得られた詰込比の値は比較的小さいばらつきを示した。これらの実験では、上記のチャート内のすべての血液／生理的食塩水の混合物試料の血液濃度が５０％未満である。その理由は、生理的食塩水を加えることにより、より多量の血液を有する混合物を希釈して５０％未満の血液を有する混合物を提供することができるからである。Ｈｃｔが３７．３％であり、平均詰込比ηの値が１．６１に等しいことが判明した後、血液／生理的食塩水の混合物の全体の血液ボリュームが以下の式（式１から得られる）を使用して見積もられ得る。
【数２】
2020504314.tif 000006
【００７５】
[0093]上記の式の１．６７という数字は１／３７．３％（平均Ｈｃｔ）×１．６１（表２からの平均η値）の計算値である。
【００７６】
[0094]以下の表は、上記の式および本明細書で説明される技法を使用して決定される血液ボリュームの計算を介して決定される試料中の血液の概算ボリューム（ｍｌ）と比較される、各試料中に存在することが既知である実際の血液の間の比較を提示する。これらの結果が、ＲＢＣ凝集剤（例えば、ポリＤＡＤＭＡＣなどの高分子凝集剤）の存在時における、哺乳動物血液（例えば、ウシ血液）を含有する液体試料中の血液ボリュームの概算値を提供するのに、本明細書で提供される式および技法が使用され得ることを実証している。加えて、これらのデータは、収集された混合された血液／生理的食塩水の液体試料中に存在する概算の血液ボリュームが、液体中の実際の血液ボリュームと密接な相互関係を有することを示す。
【表３】
2020504314.tif 000007
【００７７】
[0095]表２に記載される２０％血液は、１０００ｍｌの体液混合物ごとにおいて、２００ｍｌウシ血液と８００ｍｌ生理的食塩水とから構成される。
【００７８】
実施例３−体液収集キャニスタ
[0096]本実施例が、ＲＢＣ凝集剤を有する特定の体液収集容器の用意を実証する。
【００７９】
[0097]血液含有液体収集容器。以下の実施例で使用される体液収集容器は図７Ｂに示される１２００ｍｌ吸引キャニスタである。このキャニスタ（１）に対してポリＤＡＤＭＡＣである凝集剤を塗布した。この凝集剤はキャニスタの底部および壁に分散凝集剤粒子（２）の薄層として現れる。
凝集剤−ポリＤＡＤＭＡＣ。ポリＤＡＤＭＡＣの供給源としてＫｅｍｉｒａの「Ｓｕｐｅｒｆｌｏｃ  Ｃ−５９１」を使用した。この製品の純度品質は一定していなかった。したがって、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈバージョンの高分子量（２００〜３５０ＫＤａ）の２０％ポリＤＡＤＭＡＣ（Ｓｉｇｍａカタログ♯４０９０２２）を使用した。結果により、ＳｉｇｍａバージョンのポリＤＡＤＭＡＣが試験結果を大幅に向上させることが示された。しかし、実質的には、本発明の実施においてさらには本明細書で説明される凝集剤を含有する処理される体液収集容器の作成において、任意の数の多様な供給源の凝集剤が使用され得ることが見込まれる。
【００８０】
実施例４−血液含有混合物の血液ボリューム概算のための、１２００ｍｌ収集キャニスタのための凝集剤としてのポリＤＡＤＭＡＣの最適化
[0098]手術室内で、未知のボリュームの血液を含めることになるいくらかのボリュームの体液を収集するために生物学的体液廃棄物収集キャニスタが使用され得る。１２００ｍｌのキャニスタボリューム中の血液のボリュームは１０ｍｌから１２００ｍｌの範囲で変化してよい。また、収集体液中の血液ボリュームは、動物の具体的な種と、性別と、患者の重量とに応じて、またさらには実施される特定の医療手術に応じて、変化する可能性がある。しかし、一般的な成人の人間の外科手術中の収集キャニスタ中の収集体液中の血液ボリュームは、一般的には、約２０％から約５０％の血液を含有する。標準的な病院の手術設備で使用される血液ボリューム決定のための従来の技法は、ほとんどの時間において少なくとも５０％〜７５％で不正確であるような血液ボリュームの概算的な見積もりしか提供せず、外科手術を完了して数時間後にしか利用可能とならない。
【００８１】
[0099]多くの事例において、外科手術中に吸引される体液中の血液量は５０％以下である。体液が５０％を超える血液を含有するような事例では、本方法および本デバイスが、ＲＢＣ凝集剤であるポリＤＡＤＭＡＣの存在による体液中のＲＢＣの沈降を促進することを目的として、血液濃度を低下させるために、体液に生理的食塩水または他の希釈剤を加えることにより、血液ボリュームを正確に決定するのに使用され得る。
【００８２】
[0100]本実施例は、血液ボリュームの比較的正確な見積もりを達成するのに使用され得るポリＤＡＤＭＡＣなどのＲＢＣ凝集剤の比較的一定の量が約５０％以下の血液濃度を含有する体液である、ことを実証する。これが、ＲＢＣ凝集剤を含有する較正されたキャニスタの中の沈下ＲＢＣのボリュームを視覚的に読み取ることによって達成される。この場合、混合物の血液ボリュームを決定するための計算において、沈下ＲＢＣのこのボリュームが使用される。混合物中の血液ボリュームを正確に概算するのには沈下ＲＢＣボリュームの値のみでは不十分である。
【００８３】
[0101]３つの異なる血液／生理的食塩水の混合物において４０％の血液のテストを試験した。試験した４０％血液／生理的食塩水のボリュームは、２００ｍｌ、８００ｍｌ、および１２００ｍｌであった。Ｓｉｇｍａ−ＡｌｄｒｉｃｈのポリＤＡＤＭＡＣ（水中の２０ｗｔ．％）の水溶液を生理的食塩水を用いて希釈して、水中で６．６７ｗｔ．％のポリＤＡＤＭＡＣの希釈標準溶液を提供した。この調査における凝集剤の概算の量を提供するためにこの希釈標準溶液を使用した。
【００８４】
[0102]表４が、検査される４０％血液／生理的食塩水の混合物の各々のボリュームにおいて最適な量の凝集剤を提示する。最適な量の凝集剤は、混合物からの最も高い速度の赤血球沈降を実現するのに必要である凝集剤の量として示されている。検査した各々の混合物ボリュームのＲＢＣがキャニスタ内での視覚的に認識可能なレベルの沈降を達成した。ここでは、室温で血液／生理的食塩水の混合物を凝集剤と組み合わせてから約１５分後に、比較的明瞭な体液が、沈下ＲＢＣの視覚的に識別可能なメニスカスの上方に観察された。混合物中に提供された凝集剤の量に応じて沈降速度が変化することが観察された。
【００８５】
[0103]表４から、約０．７５ｍｌから約１．５ｍｌの凝集剤希釈標準溶液（ｆｌｏｃｃｕｌａｎｔ  ｗｏｒｋｉｎｇ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）（約５０ｍｇから約１００ｍｇの乾燥重量のポリＤＡＤＭＡＣ）の平均値が、１００ｍｌのボリュームの血液／生理的食塩水の混合物中での迅速なＲＢＣ沈降を促進するのに最適であった。約１２００ｍｌのボリュームを有するより大きい１，２００ｍｌキャニスタの場合、最大１，２００ｍｌのボリュームの血液／生理的食塩水の混合物では、約９ｍｌのポリＤＡＤＭＡＣの凝集剤希釈標準溶液（つまり、約６００ｍｇの乾燥重量のポリＤＡＤＭＡＣ）がキャニスタの底部またはキャニスタの壁に設けられることになり、それにより迅速なＲＢＣ沈降を促進する。以下の調査では、１００ｍｌ（つまり、０．７５％ｖ／ｖ）の血液／生理的食塩水の混合物ごとに、約０．７５ｍｌから約１．５ｍｌの凝集剤希釈標準溶液を使用した。この濃度値は、産業グレードの凝集剤のＳｕｐｅｒｆｌｏｃｋ  Ｃ−５９１バージョンのポリＤＡＤＭＡＣを使用する場合の本明細書で説明した調査で使用される０．４％および０．６％よりわずかに高い。
【００８６】
[0104]示される０．７５％ｖ／ｖのポリＤＡＤＭＡＣ濃度に基づいて、最大１，２００ｍｌ血液含有体液を収集することができる１，２００ｍｌのキャニスタでは、約９ｍｌのポリＤＡＤＭＡＣの希釈標準溶液（つまり、約６００ｍｇの乾燥重量のポリＤＡＤＭＡＣ）を必要とすることになる。
【表４】
2020504314.tif 000008
【００８７】
[0105]表４は、４０％血液／生理的食塩水の混合物の多様なボリュームのためのＲＢＣの沈降を達成するのに最適である凝集剤の量を実証する。示されるように、９ｍｌのＲＢＣ凝集剤であるポリＤＡＤＭＡＣ（約６００ｍｇの乾燥重量）が、１２００ｍｌ血液生理的食塩水混合物のボリュームでの最適なＲＢＣ沈降を実現した。
【００８８】
実施例５−凝集剤で処理されたキャニスタを用意する方法
[0106]本実施例が、具体的には血液含有体液の、体液収集容器の中におよび／またはその上に凝集剤を設けて分布させることができる種々の方法を説明する。特定の高分子凝集剤であるポリＤＡＤＭＡＣが本実施例では使用されるが、本明細書で説明される方法およびデバイスを提供するための本発明の実施において多くの他の高分子凝集剤または非高分子凝集剤が使用されてもよい。
【００８９】
[0107]キャニスタ壁上の垂直方向の帯状コーティング。１，２００キャニスタに、６００ｍｇの凝集剤を含有する９ｍｌの物質をコーティングした。キャニスタの中にある２．５４ｃｍ（１”）の幅の垂直方向の帯の形態でキャニスタをコーティングした。このようにして、血液／生理的食塩水の混合物によって浸漬される凝集剤のみが溶解されるかまたは混合物の中へと解放され、それによりＲＢＣ沈降を引き起こす。言い換えると、ポリＤＡＤＭＡＣコーティングの垂直方向の帯が、血液／生理的食塩水の混合物の量に比例する、制御される形の凝集剤の解放を実現することができる。
【００９０】
[0108]垂直方向の帯状コーティングを塗布するのに２つの方法を使用した。１つの方法は、キャニスタ壁に直接に２．５４ｃｍ（１”）の帯を提供するためにブラシを使用することである。もう１つの方法は、２．５４ｃｍ（１”）の幅のクリアーテープ上に凝集剤コーティングを塗布して、そのクリアーテープをキャニスタ壁に付着させることである。キャニスタが疎水性表面を有することから、凝集剤溶液を壁上に留まらせておくことが困難である可能性がある。疎水性のキャニスタ壁を親水性へと変化させるためのオゾン処理が開発された。この技法を使用して凝集剤の付着性を向上させた。
【００９１】
[0109]垂直方向の凝集剤の帯をコーティングした後で、商業的供給メーカーから購入したウシ血液を用いてキャニスタを試験した。凝集剤の帯を有するキャニスタがＲＢＣ沈降を促進した。しかし、沈降速度はある程度低いものであった。ＲＢＣがキャニスタの底部のところまで沈下するのに２０分以上かかった。一般に、ＲＢＣ沈降速度は高い方が望ましい。任意の理論または具体的な作動機構のみに限定することを意図しないが、より低い速度は、少なくとも部分的に、凝集剤コーティングが溶解して血液／生理的食塩水のボリューム全体に広がるのに要する時間に関連する可能性がある。単一の帯のコーティングから凝集剤が血液／生理的食塩水の混合物の全体へと広がるのにはより時間を要する。キャニスタ全体に分布されるより薄いコーティングは、凝集剤の溶解および分布を加速すると予期される。
【００９２】
[0110]超音波噴霧化テクノロジを使用するキャニスタ全体への一様なコーティング。血液収集キャニスタの内部に対してコーティングを行うのに超音波ベースの方法を使用した。超音波噴霧化コーティングは、それ自体はスプレーコーティングとは異なり、常圧で低速（通常、毎秒７．６２ｃｍ〜１２．７ｃｍ程度（毎秒３〜５インチ程度））のコーディングである。圧電変換器が電気入力を振動の形態の機械的エネルギーへと変換する。高周波音の振動が液体をファインミストスプレーへと噴霧化する（図６）。圧力を受けない低速のスプレーがオーバースプレーの量を大幅に低減する。その理由は、液滴が基板から跳ね返るのではなく基板上に定着する傾向を有するからである。ミストスプレーパターンが正確に制御および成形され得る。これらの種類の特別なスプレー成形設備を使用することにより、０．１７８ｃｍ（０．０７０インチ）もの幅の小ささから、０．３ｍ〜０．６１ｍ（１〜２フィート）のもの幅の大きさまでの、スプレーパターンを生成することができる。このプロセスで使用される噴霧化デバイスは６０ｋＨｚの超音波ノズルを有する。
【００９３】
[0111]図７が超音波噴霧器を使用するキャニスタの手動コーティングプロセスを示す。噴霧器の先端部がキャニスタ壁に沿って移動し、キャニスタの底部から始まってキャニスタの頂部まで段階的に上方に移動する。ミスティスプレーによってコーティングされる領域が透明な壁から曇った表面へと変化し、それにより、キャニスタ壁の全体を覆うことになるように、および視覚的な観察に基づいてコーティングを可能な限り一様にするように、手動コーティングプロセスを案内する。将来的には、一様なコーティングを行うための自動のコーティングプロセスが開発され得る。
【００９４】
[0112]多様な濃度のポリＤＡＤＭＡＣを使用し、乾燥プロセスを加速するためにメタノールおよびエタノールなどの高度に気化したアルコール（ｈｉｇｈ  ｖａｐｏｒｉｚｅｄ  ａｌｃｏｈｏｌ）をスプレー溶液に組み込むことにより、複数のパラメータを試験した。ポリＤＡＤＭＡＣ希釈標準溶液（ＤＩ水（脱イオン水）の中に用意した）が、超音波噴霧化デバイスを使用して強度設定「１０」で凝集剤を堆積させるために最適なミスティスプレーを提供した（図７Ａ）。シリンジポンプの設定は６０ｍｌ／ｈであった。１，２００ｍｌのキャニスタ壁の全体を覆うのに約４．５ｍｌの凝集剤コーティング液が必要であった。したがって、９ｍｌの凝集剤溶液をキャニスタ上に塗布するために、２つのバッチの凝集剤コーティングが必要であった。９ｍｌのボリュームの凝集剤溶液は約６００ｍｇのポリＤＡＤＭＡＣを含有する。
【００９５】
[0113]オーブンの内部で数時間かけて、または室温で２４時間かけて、各コーティングの間でキャニスタを完全に乾燥することが可能であった。図７Ｂが、キャニスタの壁全体に２つのバッチのコーティングを塗布されたキャニスタを示す。より強力な超音波噴霧化デバイスを使用するとコーティング液の濃度を上げることが可能である。この方式では、上述した凝集材料濃度を提供する場合、９ｍｌのボリュームではなく４．５ｍｌの溶液中に含有されるすべてのポリＤＡＤＭＡＣを供給する場合には、単一のバッチのコーティングを使用することができる。
【００９６】
[0114]以下のプロトコルが凝集剤で処理（コーティング）されるキャニスタを用意するための手動ステップを提供する。
【００９７】
[0115]コーティングの用意
１．１パート（ｐａｒｔ）の２０ｗｔ．％ポリＤＡＤＭＡＣ（Ｓｉｇｍａカタログ♯４０９０２２）を２パートのＤＩ水と混合することによりポリＤＡＤＭＡＣ希釈標準溶液を用意する。
２．６０ｍｌのシリンジにポリＤＡＤＭＡＣ希釈標準溶液を充填する。
３．超音波噴霧化デバイスを「１０」の強度設定に設定する。
４．シリンジポンプの速度を６０ｍｌ／ｈｒに設定し、４．５ｍｌのボリュームを供給する。
【００９８】
[0116]手動コーティングプロセス
１．超音波噴霧化デバイスをオンにし、キャニスタの底部から超音波ノズルの移動を開始し、キャニスタの壁および底部にミスティスプレーを塗布する。
２．螺旋経路に沿ってキャニスタの底部から頂部まで超音波ノズルを段階的に移動させ、壁上のすべての場所がポリＤＡＤＭＡＣで必ずコーティングされるようにする。ポリＤＡＤＭＡＣミストでコーティングした領域が以下の写真で見ると霧状の外見を示す。
３．通常、キャニスタ全体に対して１回のコーティングを行うのに４．５ｍｌの希釈ポリＤＡＤＭＡＣで十分である。
４．コーティングされたキャニスタを室温で一晩乾燥させる。
５．コーティングの第１の層の乾燥後、上述した手法と同様の手法で第２の層をキャニスタに適用する。２つの層のコーティングの後、合計で９ｍｌの希釈ポリＤＡＤＭＡＣがキャニスタ上に塗布されることになる。
６．再びキャニスタを一晩乾燥させる。キャニスタを使用する準備が整う。
【００９９】
実施例６−ポリＤＡＤＭＡＣでコーティングされた１２００ｍｌキャニスタの詰込比（η）の見積もり
[0117]１，２００ｍｌのボリュームを有し、手術室で採用される生物学的廃棄物キャニスタの寸法を有するキャニスタを使用して、ポリＤＡＤＭＡＣでコーティングされた１２００ｍｌのキャニスタを用意した。図５では、手術室設備の中に典型的な構成のこのようなキャニスタが提供される。最初に、このコーティングされたキャニスタに関連付けられる詰込比ηを決定した。
【０１００】
[0118]本調査では商業的供給メーカーから購入したウシ血液を使用した。この血液を冷蔵しておき、試験時に２３℃まで温めた。さらに、凝固を防止するためにウシ血液にクエン酸ナトリウムを含有させた。
【０１０１】
[0119]凝集剤で処理したキャニスタにウシ血液および生理的食塩水を加え、血液／生理的食塩水の所定の比を達成した。定常操作中に血液を含有する液体を収集キャニスタの中に提供するプロセスをシミュレートするために、以下の技法に従って、例えば６００ｍｌのボリュームの血液／生理的食塩水の混合物（４０％血液）を、凝集剤で処理されたキャニスタに供給した。２４０ｍｌの血液を有するようにキャニスタＡを用意し、３６０ｍｌの生理的食塩水を含有するようにキャニスタＢを用意した。吸引プローブとして血清用ピペットを使用した。管類を介して吸引プローブをキャニスタ上の入口ポート（患者ポート）に接続した。さらに、キャニスタ上の第２のポートを使用してキャニスタを真空ラインに接続し、キャニスタの中に真空を加えるのに真空ラインを使用した。真空下で、血液を有する容器または生理的食塩水を有する容器の中にピペットを配置して、二者択一的に、それぞれの体液を凝集剤含有キャニスタ（ポリＤＡＤＭＡＣ）の中へと吸引した（図８）。このようにして、キャニスタの中に合計で６００ｍｌの体液ボリュームの４０％血液を提供した。
【０１０２】
[0120]すべての血液および生理的食塩水を第３のキャニスタの中に吸引した後、凝集剤の存在下で血漿および生理的食塩水から離れるＲＢＣの分離／沈下を評価するために混合物を監視した。ＲＢＣ沈下ボリュームの線を、２０分間、毎分記録した。
【０１０３】
[0121]多様なボリュームの４０％血液／生理的食塩水の混合物溶液（２００ｍｌ、４００ｍｌ、８００ｍｌ、および１２００ｍｌ）を使用して調査を行った。各調査を３回繰り返した。図１０Ａ〜１０Ｄが、４０％血液混合物を用いて２０分間のＲＢＣ沈下ボリュームの変化を示す。２００ｍｌ、４００ｍｌ、８００ｍｌ、および１２００ｍｌのボリュームの２０％血液／生理的食塩水混合物溶液を用いて、やはり調査を３回実施した（図９Ａ〜９Ｄ）。キャニスタ内に収集された体液の多様なボリュームおよび多様な血液濃度混合物で有効となるような平均詰込比ηを得ることを目的として、２０％および４０％の２つの血液濃度、そして、これらの血液濃度の２００ｍｌから１２００ｍｌのボリュームの４つを検査した。
【０１０４】
[0122]２０％の血液混合物（２０％血液／８０％生理的食塩水）の場合、凝集剤で処理されたキャニスタ内でＲＢＣが非常に迅速に沈下した。室温において、１０分から１５分の範囲内で３０ｍｌ（Ｖｍ）のＲＢＣの視覚的に観察可能な沈下に達した（図１１Ａ）。２０％および４０％血液調製品の４つのすべての異なる全体の混合物ボリュームの、３回繰り返した実験からの平均Ｖｍおよび計算されたＶｉｃ（測定したウシ血液のヘマトクリット値（３５．４％）、および本調査で使用される未知の血液ボリュームに基づく）が、表５に列記される。
【０１０５】
[0123]これらの実験は、室温においてポリＤＡＤＭＡＣコーティングが血液／生理的食塩水の混合物からの１５分の範囲内のＲＢＣの迅速な沈降を促進したことを実証した。凝集剤が存在しない場合の、室温でのこれらの血液／生理的食塩水の混合物の中でのＲＢＣの沈降は３〜６時間を要することになる。
【０１０６】
[0124]詰込比ηの見積もり。上記の実験からのデータを使用して、沈下ＲＢＣボリューム（Ｖｍ）と実際のＲＢＣボリューム（Ｖｃ）との間の詰込比η（式１を参照）が経験的に決定され得る。表５が、１．２０の平均値を有する１２００ｍｌのＭｅｄｉ−Ｖａｃのキャニスタの場合の経験的に決定される詰込比を示す。この詰込比が、２００ｍｌから１２００ｍｌの広範囲のボリュームさらには広範囲の血液濃度を包含することから、詰込比のばらつきが比較的大きく、１３％を超える。また、詰込比のこれらのばらつきは血液ボリュームロスの見積もりのばらつきに影響を与える。個別の血液混合物の各々に対して以下の詰込比ηの値を計算した。次いで、平均値ηを計算した
【表５】
2020504314.tif 000009
【０１０７】
[0125]この調査では、使用したウシ血液の平均ヘマトクリット値が３５．４％であり、得られた平均詰込比ηが１．２であった。式１のところの式を使用して、凝集剤含有キャニスタの中に収集された体液中の血液のボリュームを見積もるための以下の式を作った。
【数３】
2020504314.tif 000010
【０１０８】
[0126]各々の血液混合物１〜８の失血の見積もりが以下の表６に提示され、試料中の既知の血液量と比較される。
【表６】
2020504314.tif 000011
【０１０９】
[0127］上記の表で実証されるように、本式を使用して計算される失血の量は、体液中の実際の血液量と相互に関連付けられるものであった。したがって、本方法および本デバイスは、外科的設備（ｓｕｒｇｉｃａｌ  ｓｅｔｔｉｎｇ）における内科医／医療専門家のための血液ボリュームロスのための同時的（ｃｏｎｔｅｍｐｏｒａｎｅｏｕｓ）な視覚的インジケータツールを提供するものであること実証しており、これは従来のアプローチ（生理的食塩水バッグを使用する評価、および／または患者の体液の収集の全体からの手術後における見積もり）より正確である。
【０１１０】
[0128]電気的手順、温度手順、または他の器具操作手順を一切必要とすることなく、凝集剤の存在下での目盛り付きのキャニスタ内での沈下ＲＢＣの観察されるボリューム（ｍｌ）に基づいて、上記の式を使用して血液インジケータパネルを案出した。これは収集体液中の全体の血液ボリュームの概算のための直接的な視覚的ツールを提供する。
【０１１１】
実施例７−生物学的体液レセプタクル中の血液ボリューム評価のための血液ボリュームインジケータパネルの作成
[0129]レセプタクル（凝集剤含有キャニスタなど）の中の沈下ＲＢＣの視検を介して使用者が血液ボリュームを容易に見積もることができるようにするために、較正されたマーキングを有する血液ボリュームインジケータパネルが体液収集レセプタクルために提供される。これは、収集レセプタクル中での凝集剤の存在下で沈下ＲＢＣのレベルから、収集体液中の全体の血液ボリュームの概算を示すものである。これらの収集レセプタクルは従来の容積測定尺度を含んでも含まなくてもよいと考えられる。
【０１１２】
[0130]本レセプタクル（キャニスタなど）血液ボリュームインジケータパネルのための段階的なマーキングを作るために、以下の式を使用する：
Ｖｍ＝Ｖｂ×Ｈｃｔ×η      ２）
【０１１３】
[0131]式２は、同程度の年齢、同じ性別の、同じ種からの複数の動物／人間から計算される平均Ｈｃｔを採用する。例えば、人間の成人男性の場合、平均Ｈｃｔは約４５％である。
【０１１４】
[0132]この調査では、以下の式を使用して大型の哺乳類のための血液インジケータパネルを作った。
【０１１５】
[0133]式３
Ｖｍ＝０．４３×Ｖｂ
【０１１６】
[0134]この式は、ウシ血液について計算する場合（表５）、３５．４％のウシ血液の平均Ｈｃｔと、平均詰込比η＝１．２０とを使用する。
【０１１７】
[0135]血液ボリュームインジケータパネル上に５０ｍｌの見積もり用血液ボリュームマークが設けられ、これは、式３を使用すると、約２１．５ｍｌの視覚的に認識可能な沈下ＲＢＣボリュームに対応する（表７を参照）。１００ｍｌの見積もり用血液ボリューム較正マークが血液ボリュームインジケータパネル上に生成され得、これが、レセプタクルの４３．０２ｍｌ沈下ＲＢＣボリュームの線に対応する、などである。
【０１１８】
[0136]血液ボリュームインジケータパネルの段階的なマーキングが視覚的に認識可能な一連のマーキングを提供し、これが、キャニスタ中の材料のボリュームの測定に関連しないが、キャニスタの中の収集された体液中の血液ボリュームの概算に関連する。典型的な血液インジケータパネル（ＢＩＰ）の図が図１５に提供される（左側のパネル６を参照されたい。５０ｍｌ、１００ｍｌ、２００ｍｌ、４００ｍｌ、６００ｍｌの較正マーキング）。標準的な容積測定マーキング（図１６を参照。右側のパネル１）を有する従来の収集ベッセル上に血液インジケータパネルを有することで、数学的計算の実施あるいは収集材料または沈降材料の他の操作を必要とすることなく、収集体液中の血液ボリュームの直接的な視角的見積もりを実現することになる。示されるように、ＢＰＩの較正されたマーキングで示される血液ボリュームが体液中の沈下ＲＢＣの従来のボリュームに一致しない。代わりに、沈下ＲＢＣのボリュームが、血液ボリュームの概算値を提供することを目的として、ヘマトクリット値および所定のアスペクト比と共に計算の一部として、使用される。凝集剤が存在しない場合、液体中の血液ボリュームが約３〜６時間未満の範囲内での概算を行うことが不可能となる。その理由は、とりわけ、３〜６時間ではＲＢＣの十分な沈下がまだ開始されていないからである。加えて、凝集剤が存在する場合、迅速なＲＢＣ沈降のみを促進するが、液体中の血液量を迅速には概算しない。本結果で実証されるように、液体中の沈下ＲＢＣのボリュームは、既知の血液量を含有する試験体液中に含有されていることが分かっている実際の血液量の約５０％未満であった。凝集剤の存在下での沈下ＲＢＣのボリュームは、液体中の概算の血液ボリュームを提供するためには、血液の平均ヘマトクリット値および詰込比に対応するようにさらに修正される必要がある。
【０１１９】
[0137]ＢＩＰパネルは平均ヘマトクリット値（Ｈｃｔ）の導出に基づいて作られ、例えば、人間、ウシ、ウマなどの平均Ｈｃｔに基づいて作られる。性別、種、年齢などを理由とした、個別のＨｃｔの差などの、個別の患者／動物のＨｃｔの差を修正することを目的として、ＢＩＰ上に示される概算の血液ボリューム値が、有意に高いかまたは有意に低い個別のヘマトクリット値を修正するファクタによって調整され得る。例えば、患者からの測定されるＨｃｔ値が低い場合、例えば、人間の成人男性の典型的なＨｃｔの８０％である場合、その患者のために観察されるパネル上の血液ボリュームインジケータ値が８０％で割られ、レセプタクル中の見積もりの血液ボリュームのより近い概算値を提供する。より具体的には、パネル上の血液ボリュームインジケータ値がインジケータパネル上の段階的なマーキングに従って５０ｍｌである場合、この患者から収集される生物学的物質中の実際の血液ボリュームが計算されて６２．５ｍｌとなり、ここでは、患者のＨｃｔが典型的なＨｃｔ値の８０％である。同様に、患者の測定されるＨｃｔ値が高い場合、例えば典型的な成人男性のヘマトクリット値の１１０％である場合、血液ボリュームインジケータパネル上の血液ボリュームインジケータが１１０％で割られ、それにより、より低い血液ボリュームを得る。例えば、血液ボリュームインジケータパネル上の血液ボリュームインジケータ値が１００ｍｌである場合、その患者の実際の血液ボリュームロスが計算されて９０．９ｍｌとなり、それにより平均Ｈｃｔより高い（例えば、１０％高い）患者のための修正を行う。図８が、血液ボリュームインジケータパネルを有する１２００ｍｌのキャニスタを示す。
【０１２０】
[0138]収集キャニスタ上に配置されているときの特定の血液インジケータパネルが図１２に示される。このＢＩＰは、ウシ血液を使用する２０％血液／生理的食塩水の混合物または４０％血液／生理的食塩水の混合物のボリュームの血液ボリューム見積もりを実現するために作られたものである。また、この血液インジケータパネルは、液体試料中の人間の血液のボリュームを評価するのに有用となり得る。これは、ウシおよび人間が共に哺乳類であり、ウシおよび人間からの血液が、平均ヘマトクリット値の類似性を含めた、多くの特性を共通して有することが理由である。
【表７】
2020504314.tif 000012
【０１２１】
[0139]この調査は、ＲＢＣ凝集剤であるポリＤＡＤＭＡＣでコーティングされた生物学的体液収集キャニスタ（１２００ｍｌ）を使用するＢＩＰのプロトタイプをうまく開発した。このサイズのキャニスタは成人および小児の人間の患者のために手術室で使用される。ウシ血液を使用したこのプロトタイプの評価は、この例示のＲＢＣ凝集剤の存在下でのＲＢＣの迅速な沈降と、２０分以内の安定したＲＢＣ沈降の達成とを示すものであった。特別な設計のＢＩＰ上の較正マーキングをこの収集キャニスタのために設計した。これらの較正マーキングは、収集した哺乳類の液体中の全体の血液ボリュームの視覚的見積もりを実現するのに使用され得る。患者の測定されたヘマトクリット値が、較正ＢＩＰマーキングを作るのに使用された典型的なヘマトクリット値とは異なる場合、較正血液ボリュームが、百分率の血液ヘマトクリット値を個別の血液ボリュームの量に対応させるように、修正され得る。
【０１２２】
[0140]以下で、成人男性および成人女性のための平均ヘマトクリット値を提示する：通常のＨｃｔ値：男性−４２〜５２％（平均Ｈｃｔ、４７）；女性−３７〜４７％（平均Ｈｃｔ、４２）。
【０１２３】
実施例８−凝集剤を有する１００ｍｌキャニスタの作成
[0141]約５０ｍｇの凝集剤を含有するための１００ｍｌのキャニスタを用意した。この実施例では、使用されたＲＢＣ凝集剤がポリＤＡＤＭＡＣであった。凝集剤を、本明細書で説明したポリＤＡＤＭＡＣ希釈標準溶液のあるボリュームとして提供した。
【０１２４】
[0142]典型的な手術室の設定では、少量のボリュームの血液含有体液および他の物質（組織、尿、非血液体液、など）が手術野から吸引されることになる。これらの体液が吸引されることで、患者から未確定の血液が失われることになる。これらの少量の、場合によっては臨界ボリュームの、収集体液中の失血の見積もりに対応するために、本発明によれば、より小さい容器が用意され得る。したがって、ポリＤＡＤＭＡＣなどのＲＢＣ凝集剤を含有するこれらの１００ｍｌのレセプタクルが提供される。この１００ｍｌのレセプタクルは少量の収集体液中に血液ボリュームを決定するのに特に有用である。これらのデバイスは、例えば、小児用途（幼児）、さらには臨界ボリュームが低いような体液収集手順で、使用され得る。
【０１２５】
[0143]この１００ｍｌ収集デバイスのアスペクト比を計算したら０．９６であった。実施例９で説明される調査ではＲＢＣ凝集剤を有する小型の１００ｍｌ容器を使用した。
【０１２６】
実施例９−新鮮な血液のロスの見積もり
[0144]本実施例は、哺乳類の新鮮な血液を含有する体液（抗凝血物質を有さない）中の失血を見積もるのに使用されための方法およびデバイスの有用性を実証するために提供される。この実施例では、体液中に存在する非血液物質が生理的食塩水であった。本実施例は、新鮮な冷蔵されていない哺乳類の血液のボリュームを使用して失血を見積もるための技法を検査するものである。また、血液はクエン酸カルシウムを含有せず、また任意の他の抗凝血物質も含有しない。本調査では、新鮮な血液標本を成馬から得た。したがって、本デバイスおよび本方法は、人間および獣医学の動物（馬、犬、猫、雌牛、雄牛、羊、豚など）を含めた、哺乳類での失血の概算で特に有用である。
【０１２７】
[0145]この実施例では、既知の臨床病理を有さずまた任意の既知の薬物療法を受けていない生きている成馬（約１２歳、５４４ｋｇ（１，２００ポンド）の重量）から血液を収集した。この動物は歩行困難な脚部の治療を受けており、痛みに対処するために神経遮断を施されていた。クエン酸ナトリウム（上の実施例で使用される）などの抗凝血物質を含有する商業的供給メーカーからの収集血液とは異なり、本調査で使用される馬からの収集血液には抗凝血物質または他の薬剤が存在しなかった。
【０１２８】
[0146]本調査では、合計で１００ｍｌのボリューム容量を有する合計で１２個のキャニスタを使用した。キャニスタの側部に沿って、５０ｍｌの増分および１００ｍｌの増分の区分を用いてキャニスタに目盛りを付けた。１００ｍｌキャニスタのアスペクト比、Ｄ：Ｈ（直径対高さ）を計算したら約０．９６であった。比較のための、１２００ｍｌキャニスタのアスペクト比は約０．６１である。通常、収集デバイスのアスペクト比が増大すると、収集液体中の任意の血液中に含有されるＲＢＣが収集デバイス内でより迅速に沈澱する。したがって、１００ｍｌ収集デバイスのＲＢＣ沈降の速度は、ＲＢＣ凝集剤の存在下での同様の条件下において、１２００ｍｌキャニスタのＲＢＣの沈降速度より高速であると予測された。
【０１２９】
[0147]１００ｍｌの乾燥したキャニスタに、研究グレード（Ｓｉｇｍａカタログ♯４０９０２２）のポリＤＡＤＭＡＣである５０ｍｇのＲＢＣ凝集剤が入れられた（実施例７を参照）。ＰＥＩおよびＰＡＭなどを含めた、他のＲＢＣ凝集剤さらには産業グレードのバージョンのこれらの凝集剤も、本方法および本デバイスで有用であると予期され得る。
【０１３０】
[0148]次いで、表８に示される量の新鮮なウマ血液および生理的食塩水を各々のキャニスタに加えて、２０分間、ＲＢＣ沈降ボリュームを毎分記録した。
【表８】
2020504314.tif 000013
【０１３１】
[0149]成馬から血液を抜き取り、一定のボリュームの新鮮な体温の血液を上記に示した量の各々のキャニスタに加えた。各々のキャニスタの蓋を定位置に配置し、中身を混合し、生理的食塩水と、血液と、凝集剤との適切な混合物を確実に得た。各キャニスタは室温で平穏な状態で静置したままとし、観察した。ＲＢＣの沈降が観察された時間を１分の間隔で最大３０分記録した。図１８が多様な混合物のＲＢＣ沈降速度を示す。凝集剤の存在しない血液混合物では実質的に視覚的に検出可能なＲＢＣ沈降が観察されなかった。対照的に、凝集剤を含有するすべての血液混合物では室温で５分以内で迅速なＲＢＣ沈降が観察された。
【０１３２】
[0150]表９が種々の大型の動物のヘマトクリット値を提示する。本開示で説明される適切にカスタマイズされる血液インジケータパネルおよび血液ボリューム概算方法を提供するために、平均赤血球ヘモグロビン量（ＭＣＨ：ｍｅａｎ  ｃｏｒｐｕｓｃｕｌａｒ  ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｌ）、平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ：ｍｅａｎ  ｃｏｒｐｕｓｃｕｌａｒ  ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）、平均赤血球容積（ＭＣＶ：ｍｅａｎ  ｃｏｒｐｕｓｃｕｌａｒ  ｖｏｌｕｍｅ）、および血中血球容積（ＰＣＶ：ｐａｃｋｅｄ  ｃｅｌｌ  ｖｏｌｕｍｅ）の値を採用することができる。
【表９】
2020504314.tif 000014
【表１０】
2020504314.tif 000015
【表１１】
2020504314.tif 000016
【０１３３】
実施例１０−凝集剤の存在下での新鮮なウマ血液（抗凝血物質を有さない）を有するキャニスタを使用する体液中の血液ボリュームの見積もり
[0151]成馬（１２歳、約５４４ｋｇ（約１，２００ポンド））から新鮮な血液を抜き取る形で本実施例を実施した。この馬の血液は抗凝血物質を一切含まない。馬の血液のヘマトクリット値は３２％から５３％の間である。抜き取った直後で馬の血液を使用し、ポリＤＡＤＭＡＣ（６００ｍｇ）である凝集剤の存在下で生理的食塩水を組み合わせるときには体温のままであった（約１０１°Ｆ、３８．３℃）。
【０１３４】
[0152]凝集剤として約９ｍｌｓのポリＤＡＤＭＡＣ希釈標準溶液のスプレー塗布によってコーティングした１，２００ｍｌキャニスタを使用した。ここでは、凝集剤として全体として約６００ｍｇの乾燥重量のポリＤＡＤＭＡＣを用いて１，２００ｍｌキャニスタを一様にコーティングした。キャニスタの壁に沿って凝集剤が一様に分布されることから、解放されることになる凝集剤の量は、処理されるキャニスタの中に提供される体液の量に比例することになる。
【０１３５】
[0153]以下の沈下ＲＢＣのボリュームを経時的に記録した。
【０１３６】
[0154]４００ｍｌのボリュームの新鮮な馬の血液（冷蔵されない、体温、抗凝血物質を有さない）を、処理されたキャニスタの中に配置した。既知のボリュームの２５０ｍｌの生理的食塩水をキャニスタに加えた。キャニスタの中の体液の合計のボリュームは６５０ｍｌであった。これが６１．５％の血液溶液を提供した。混合の直後に、沈下ＲＢＣのボリュームＶｍ（重力のみで、遠心分離なし）を最大３０分間記録した。
【０１３７】
[0155]平穏な状態で３０分沈下させた後で、キャニスタを手動で撹拌し、再び室温に静置した。室温でのＲＢＣの沈下の徴候（ｅｖｉｄｅｎｃｅ）を見るために、撹拌血液含有キャニスタを再び観察した。
【表１２】
2020504314.tif 000017
【０１３８】
[0156]３０分間の観察後、キャニスタが手動で振られ、静置させられる。ＲＢＣの再沈降が起こり、３０分間、毎分観察した。沈下ＲＢＣレベルの観察の結果は表１４に示されるようなものとなった。
【表１３】
2020504314.tif 000018
【０１３９】
[0157]この調査から、新鮮全血（ｗｈｏｌｅ  ｆｒｅｓｈ  ｂｌｏｏｄ）を含有する溶液中のＲＢＣの沈下ボリュームは、室温で最大３０〜４０分、比較的安定した状態を維持することが実証される。撹拌すると、新鮮な血液試料中のＲＢＣが再び沈下し、認識可能なＲＢＣ沈降容積測定線Ｖｍを非常に迅速に提供した（１６〜１９分に対して３〜４分、約２５０ｍｌから３０ｍｌの沈下ＲＢＣボリューム）ようであった。体液中に存在する新鮮な血液の実際の既知のボリュームは４００ｍｌであった。
【０１４０】
[0158]その種類の動物の平均ヘマトクリット値（４２．５％、馬の平均Ｈｃｔ）と、Ｖｍ（観察可能な沈下ＲＢＣボリューム（ｍｌ））と、沈下ＲＢＣボリューム（Ｖｍ）およびＨｃｔの情報のウマ血液試料の複数回の評価を用いる実験を介して馬の血液に対して決定される新しい詰込比値（ｎ）と、を使用する式により、血液ボリュームの全体の概算値を計算することができ、視覚的な血液インジケータパネルが作られ得、馬などの大型の動物と共に使用されるための収集キャニスタの垂直方向軸に沿って設けられ得る。この視覚的な血液インジケータパネルが、馬の血液を含有する生物学的体液中の血液ボリュームの迅速に視覚的に認識可能な概算値を提供することになる。処理されたキャニスタまたは他のレセプタクルのための血液インジケータパネルの開発の成果は、ウマ血液のボリュームロスの視覚的インジケータを提供するのに使用され得、特には、現在利用可能であるものと比較してより正確にウマの失血を評価するのに使用され得る。ここでは、一般的な所定の程度以上の実験的最適化のトライアル・アンド・エラーなしで、獣医学の当業者によって提供される情報および結果を採用してウマ血液インジケータパネルを開発することができる。
実施例１１−失血の見積もりを使用のための、人間の小児への応用
[0159]本実施例は、小児科患者の失血の効率的な測定のためのキャニスタおよび方法を提供するために提示されるものである。本実施例で使用される場合の小児科患者は、最大３２ｋｇ（７０ポンド）から３６ｋｇ（８０ポンド）の体重を有する最高１２歳の個人として定義される。
【０１４１】
[0160]人間の全体の血液ボリューム（ＴＢＶ：ｔｏｔａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｖｏｌｕｍｅ）は身体の体重に関連する。子供のＴＢＶは約７５〜８０ｍｌ／ｋｇであり、新生児期はより高い（最初の１か月の終了時までに８５ｍｌ／ｋｇから１０５ｍｌ／ｋｇのピーク値まで上昇し、その後の数か月で次第に低下する）。したがって、３．５ｋｇの２週間の新生児のＴＢＶは約３５０ｍｌであり、対して１０ｋｇの１５か月の幼児のＴＢＶは約８００ｍｌである。
【０１４２】
[0161]小児科患者の全体の血液ボリュームは大幅に少ないことから、小児科患者から収集されるより少量の血液ボリュームから失血を正確に見積もるように設計される血液収集・失血見積もりシステムおよびデバイスを提供することが特に重要である。したがって、本発明のこの特別に設計される小児科用の失血見積もりデバイスは、本明細書で説明される凝集剤を有する容器と、約５００ｍｌなどといったように（または、幼児または新生児の場合には約２５０ｍｌ）１０００ｍｌ未満の全ボリューム容量を有するキャニスタ区分と、を用いて制作される。
【０１４３】
[0162]小児科患者の血液ボリュームの多量の急激なロスは循環を危険な状態にする可能性があることから、特に小児科患者のＴＢＶ（約１０ｍｌ／ｋｇ）の約１２％の失血ボリュームを検出するのを可能にするように失血を注意深く監視しなければならない（この子供が安定状態にあり、手術の開始時に正常な血中ヘモグロビン（Ｈｂ）レベルを有するものとする）。
【０１４４】
[0163]例えば、適切な小児科用失血収集デバイスは、いくつかの実施形態では、２５０ｍｌｓの容量を有する。キャニスタが、好適には、一般的な小児失血ボリュームのための適切なアスペクト比Ｄ：Ｈを提供する。デバイスのＤ（直径）は、通常、５．０８ｃｍ（２インチ）から７．６２ｃｍ（３インチ）の間であり、約５．０８ｃｍ（２インチ）から約７．６２ｃｍ（３インチ）のＨ（高さ）を有する。これらの小さい寸法では、収集される失血ボリュームが、適度に迅速ではあるが監視可能であるＲＢＣの沈降速度を実現し、それにより、小児科患者に輸血を行うことが望ましいようなボリュームに失血量が達したことを担当の内科医に警告を出す。キャニスタの中に収集された血液において１５分以内にＲＢＣ沈降を実現するような沈降速度を達成することが好適である。
【０１４５】
[0164]いくつかの実施形態では、２５０ｍｌキャニスタが円錐形状を有する（図１４）。凝集剤が外科的介入事象のときに容器に提供されるか、または前処理としてキャニスタに提供され得る（スプレーコーティングなどによる）。
【０１４６】
[0165]２５０ｍｌの収集デバイスに加えられることになる凝集剤の量は、約５０ｍｇから約１５０ｍｇであるか、約１２５ｍｇであるか、あるいは溶液の全ボリュームの少なくとも０．３％、０．４％、または０．７５％を達成するのに十分な量である。
【０１４７】
[0166]説明のために、１２％以上の失血が起こる場合の計算には、小児グループの患者の以下の平均の全血液ボリュームを使用することができる。また、小児科患者のクラス／グループ（未熟新生児、満期新生児、幼児）のための平均ヘマトクリット値を計算することができ、キャニスタの１つの軸に並べられるように、これらの患者グループのための平均ヘマトクリット値のマーキングが設けられ、それにより、この手術を受けている患者のために得られたヘマトクリット値を参照するためのおよびそれと比較するための、担当する内科医または麻酔医ために用意された視覚的基準を提供する。
・未熟新生児  ９５ｍｌ／ｋｇ
・満期新生児  ８５ｍｌ／ｋｇ
・幼児  ８０ｍｌ／ｋｇ
【０１４８】
[0167]特定の重量範囲および／または年齢の人間の子供のための、あるいは成人男性または成人女性のための平均ヘマトクリット値と、Ｖｍ（観察可能な沈下ＲＢＣボリューム（ｍｌ））と、人間の血液のため決定される詰込比（ｎ）と、を使用する式により、全体の血液ボリュームの概算値を計算することができる。沈下ＲＢＣボリューム（Ｖｍ）およびＨｃｔの情報の人間の血液試料の複数回の評価を用いて、収集キャニスタの垂直方向軸に沿って配置されることになる視覚的血液ボリュームインジケータパネルを人間のために用意することができ、特には小児科の人間モデルのために用意することができる。この視覚的な血液ボリュームインジケータパネルが、人間の血液を含有する生物学的体液中に含有される約２５０ｍｌ未満のボリュームの血液ボリュームの迅速に視覚的に認識可能な概算値を提供することになる。液体中の人間の血液ボリューム評価のための、および特には少量の人間の失血の評価のための、血液インジケータパネルを有する垂直方向のキャニスタまたは他のレセプタクルの開発は、一般的な所定の程度以上のトライアル・アンド・エラーなしで、本明細書で提供される教示を前提として、当業者によって発展され得る。
【０１４９】
実施例１２−失血収集のための折り畳み式の処理された容器 
[0168]本実施例は、生物学的体液ロスを収集するのに使用され得る、および失血を見積もるのに使用され得る、折り畳み式プラスチック状の容器（バッグ）を提示する。このような折り畳み式デバイスは特には戦場の状況において特に有用であると考えられるか、または医療設備のためのスペースが限られているような任意の他の状況において特に有用であると考えられる。
【０１５０】
[0169]このプラスチックバッグの容器は、本明細書で説明されるＲＢＣ沈降および失血の見積もり機能を実現するのに適するような、一定量のＲＢＣ凝集剤を有することになると考えられる。いくつかの態様では、バッグが、箱、キャニスタ、または他の構造などの、支持用容器内に配置され得る。バッグが、容積測定尺度（ミリメートルなど）に対応する、バッグの垂直方向軸に沿う複数のマーキングをさらに有することができる。
【０１５１】
[0170]いくつかの態様では、約３００ミリグラムから約４，７００ミリグラムの間のポリＤＡＤＭＡＣなどの凝集剤を含有する約１，０００ｍｌのボリューム容量を有するクリアーなプラスチックバッグが、バッグの中に配置されることになる。バッグが、いくつかの実施形態では、５０ｍｌ、１００ｍｌ、２００ｍｌ、２５０ｍｌ、４００ｍｌ、５００ｍｌ、６００ｍｌ、７５０ｍｌ、および１リットルのマーカーの較正される区分を有することになる。バッグが接着ストリップなどの形態のＢＩＰをさらに有することができ、ＢＩＰがバッグ上に配置され得、収集バッグ／容器の中の沈下ＲＢＣレベルに基づいて液体中の概算の血液ボリュームの視覚的に認識可能なインジケータを提供するのに使用され得る。この実施形態の例示の描写が図１３に提示される。ＲＢＣ凝集剤と、図１１Ａに示されるキャニスタなどの、１２００ｍｌ収集キャニスタのための設計される人間の血液のための較正されるＢＩＰとを有するインサートバッグが、さらに提供される。このような実施形態では、キャニスタ自体にＲＢＣ凝集剤を用いて処理する必要はなく、代わりに、インサートバッグがＲＢＣ凝集剤を含有することになる。インサートバッグが、やはり任意選択で、人間の血液のための較正されるＢＩＰをさらに有することができる。
【０１５２】
実施例１３−失血収集キット
[0171]血液ボリュームインジケータパネルを有する凝集剤含有キャニスタ（１．２ｍｌ、５００ｍｌ、２５０ｍｌ、１０ｍｌ）が、一定の長さの吸引用管類と、キャニスタおよび／または折り畳み式エンベロープの中の生理的食塩水を加えるのに適する第２の長さの管類とを備えるキットとして一体に提供され得る。
【０１５３】
[0172]インストラクショナルインサートがエンドユーザのためのキットとして提供され得る。
【０１５４】
実施例１４−高温エージングの安定性試験
[0173]この実施例はＲＢＣ凝集剤であるポリＤＡＤＭＡＣの安定性を実証するものであり、ポリＤＡＤＭＡＣでコーティングされたキャニスタを高温に露出した後に、血液含有体液中のＲＢＣの合着（凝集）を実現するための活動を維持した。
【０１５５】
[0174]この調査では、血液の成分を含有することになる外科手術中に収集される生物学的液体物質などの物質を収集するためのキャニスタ上のコーティングとして提供されるポリＤＡＤＭＡＣを凝集剤として使用した。コーティングしたキャニスタを５５℃で６週間インキュベートとした（室温での１年間の貯蔵期間に相当する）。次いで、コーティングしたキャニスタを、高温エージングの後、高温エージング試験を行っていないコーティングしたキャニスタと機能試験において比較した。
【０１５６】
[0175]物質：
１）コントロールグループ−６００ｍｇのポリＤＡＤＭＡＣ（図１）でコーティングした（室温（≒２２℃）で一晩で乾燥させた）４つのキャニスタ（Ｃａｒｄｉｎａｌ  Ｈｅａｌｔｈ）。
２）実験グループ−６００ｍｇのポリＤＡＤＭＡＣ（図１）でコーティングした（室温（≒２２℃）で一晩で乾燥させた）４つのキャニスタ（Ｃａｒｄｉｎａｌ  Ｈｅａｌｔｈ）。次いで、キャニスタを、５５℃に設定した対流式オーブンで６週間インキュベートした。
３）ウシの全血（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌｏｔ＃２４３０１）を冷蔵庫で保管し、実験前に室温まで温めた。
４）室温の等張食生理的食塩水（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｌｏｔ＃９９４４４８）。
【０１５７】
[0176]方法
１）実験ロットおよびコントロールロットからそれぞれ、４つのキャニスタを無作為に選択した。
２）商業的供給メーカーから購入したウシの全血（クエン酸ナトリウムを含有する）を室温で等張食生理的食塩水と混合して、それぞれ、２０％および４０％ｖ／ｖの濃度の血液を得た。２０％血液混合物が合計１０００ｍｌのボリュームを有し、４０％血液混合物が合計５００ｍｌのボリュームを有した。
３）キャニスタに対して１回で２つの試験を行った：１つの実験キャニスタ  対  １つのコントロールキャニスタ。混合された血液および生理的食塩水の溶液を真空吸引を介してキャニスタの中に導入した。
４）キャニスタ上の既存の区分に従って、赤血球ボリュームの沈下を２０分間、毎分記録した。
５）２０分後、２つのグループを比較する画像が得られた。
６）データを、比較のために、ＲＢＣ沈下ボリューム対時間の関数としてチャート化した。
【０１５８】
[0177]結果：図１６Ａおよび図１６Ｂが、血液・生理的食塩水混合物をコントロールキャニスタおよび実験キャニスタ（熱処理した）の中に導入した後のＲＢＣの沈下を比較した。２０％血液と生理的食塩水との１０００ｍｌの混合物（図１６Ａ）および４０％血液と生理的食塩水との５００ｍｌの混合物（図１６Ｂ）を使用して試験を実施した。両方とも２００ｍｌのウシ血液を含有する。各試験を１回繰り返した。データが、２０％血液試験でのＲＢＣ沈下のボリューム変化曲線が密に重なり合うことを示している。コントロールキャニスタおよび実験キャニスタの中に混合物を導入して約１５分後、すべてのＲＢＣボリューム沈下が約１２５ｍｌで安定化した。４０％血液試験では、１つの実験でボリューム沈下に遅延が生じたが、１５分後にすべてのボリューム沈下が約１２５ｍｌで安定した。図１７がコントロールキャニスタおよび実験キャニスタの両方での沈下ＲＢＣの絵を示している。図１７Ａ（パネルＩおよびＩＩ）ならびに図１７Ｂ（パネルＩおよびＩＩ）が、コントロールキャニスタおよび実験キャニスタ（熱処理した）に血液および生理的食塩水の混合物を導入した後のＲＢＣの沈下を比較する。２０％ウシ血液と生理的食塩水との１０００ｍｌの混合物（図１７Ａ）および４０％血液と生理的食塩水との５００ｍｌの混合物（図１７Ｂ）を使用して試験を実施した。両方の体液が２００ｍｌのウシ血液を含有することが既知であった。各試験を１回繰り返した。
【０１５９】
[0178]データが、２０％血液試験でのＲＢＣ沈下のボリューム変化曲線が密に重なり合うことを示している。コントロールキャニスタ（図１７Ａ）および実験キャニスタ（図１７Ｂ）の中に混合物を導入して約１５分後、すべてのＲＢＣボリューム沈下レベルが約１２５ｍｌで安定化した。
【０１６０】
[0179]４０％血液試験では、１つの実験でボリューム沈下に遅延が生じたが、１５分後に約１２５ｍｌの容積測定マークのところで沈下ＲＢＣのボリュームが安定化した。
図１７Ａおよび１７Ｂが、コントロールキャニスタ（１７Ａ）および実験キャニスタ（１７Ｂ）の沈下ＲＢＣボリュームを示す。
【０１６１】
[0180]この調査は、コントロールキャニスタと、熱処理後の実験キャニスタとの間での機能に認識可能な違いがないことを実証した。５５℃での６週間のエージング試験後のポリＤＡＤＭＡＣでコーティングされているキャニスタは、ポリＤＡＤＭＡＣの機能的劣化や、液体中のＲＢＣの凝集促進のための有効性の低下を示していない。凝集剤でコーティングされるキャニスタ（ポリＤＡＤＭＡＣでコーティングされるキャニスタ）は、室温で保管される体液中の血液ボリュームの見積もりを実現するための凝集活動の損失なしで少なくとも１年の貯蔵期間を有すると予測される。
【０１６２】
[0181]上に記載される実施例は、対象の生体分子に対して行われ得る選択される修正のための予測のための方法の実施形態を如何にして作って使用するかの完全な開示および説明を、当業者に与えるために提供されるものであり、本発明者によって本開示の範囲としてみなされている範囲のみに限定することを意図されない。本開示を実行するための上述の形態の修正形態は当業者によって使用され得、以下の特許請求の範囲の範囲内にあることを意図される。
【０１６３】
[0182]本開示が特定の方法またはシステムのみに限定されず、もちろん変化し得ることを理解されたい。また、本明細書で使用される用語が特定の実施形態のみを説明することを目的としており、限定的であることを意図されないことも理解されたい。
【０１６４】
[0183]本開示の複数の実施形態を説明してきた。しかし、本開示の精神および範囲から逸脱することなく種々の修正形態が作ら得ることを理解されたい。したがって、他の実施形態も以下の特許請求の範囲の範囲内にある。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図９Ｃ】
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【図９Ｄ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１０Ｄ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
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【図１８】
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【図１９】
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【国際調査報告】
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