(57)【要約】態様では、本開示は、化合物（ＩＩ）【化１】2020529418.tif 000054 組成物、及びそれを必要とする患者に化合物及び組成物を投与する方法を提供する。別の態様では、本開示は、癌、たとえば、リンパ性白血病を治療する化合物及び組成物に関する。本開示はさらに、２つのホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）アイソフォームγ及びδを阻害する化合物、前記化合物を含む医薬組成物、ならびに非ホジキンリンパ腫の治療、改善及び／または予防のために前記化合物及び医薬組成物を使用する方法を提供する。【選択図】図１
2020529418.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（ＩＩ）：
【化１】
2020529418.tif 000044
の化合物またはその塩であって、式中、
ＸはＮまたはＣＹを表し；
Ｙは水素を表し；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはハロを表し；
Ｒ６はメチル、エチル、またはシクロプロピルを表し；
Ｒ７は水素を表し、またはＲ６及びＲ７はＲ７が連結されるＮと一緒にピロリジン環を形成し；
Ｒ８は
【化２】
2020529418.tif 000045
を表し；
Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は独立して水素、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはハロを表し；且つ   
Ｑは直接結合を表す、化合物またはその塩。
【請求項２】
式（ＩＩａ）または（ＩＩｂ）
【化３】
2020529418.tif 000046
であり、式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が独立して水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはハロであり；
Ｒ６がメチル、エチル、またはシクロプロピルであり；
Ｒ９がハロまたはメチルであり；且つ
Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２がそれぞれ水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはハロである請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が独立して水素、メチル、Ｆまたは重水素であり；
Ｒ９がＣｌ、Ｆまたはメチルであり；且つ
Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２がそれぞれ水素である請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
前記化合物が式（ＩＩａ’）または（ＩＩｂ’）：
【化４】
2020529418.tif 000047
である請求項２または３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が独立して水素、Ｆ、または重水素であり、；
Ｒ６がメチルであり；且つ
Ｒ９がＣｌまたはメチルである先行請求項のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
以下の式：
【化５】
2020529418.tif 000048
の１つに係る化合物またはその塩であって、式中、
Ｒはメチル、エチル、またはシクロプロピルであり、且つ
Ｒ’は水素またはメチルである、化合物またはその塩。
【請求項７】
以下の式：
【化６】
2020529418.tif 000049
【化７】
2020529418.tif 000050
の１つに係る化合物またはその塩。
【請求項８】
以下の式：
【化８】
2020529418.tif 000051
の１つに係る化合物またはその塩。
【請求項９】
以下の式：
【化９】
2020529418.tif 000052
の化合物であって、式中、
ＸはＣＨまたはＮであり；
Ｚはメチル、Ｃｌ、またはＦであり；
ＲはＮＨ２またはメチルであり；且つ
Ｒ’は水素、メチル、ＮＨ２、またはＯＨである、化合物。
【請求項１０】
ＸがＮであり、Ｒ’が水素である請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
以下の式：
【化１０】
2020529418.tif 000053
の１つの化合物。
【請求項１２】
前記化合物がＲ６が連結される不斉炭素に関して（Ｓ）立体異性体もしくは（Ｒ）立体異性体である、または前記化合物が（Ｓ）立体異性体及び（Ｒ）立体異性体の非ラセミ混合物である、または前記化合物が（Ｓ）異性体単独もしくは（Ｒ）異性体単独である先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
前記化合物がＰＩ３Ｋδの阻害剤、ＰＩ３Ｋγの阻害剤、またはＰＩ３ＫδとＰＩ３Ｋγの双方の阻害剤である先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
前記化合物がＰＩ３ＫδとＰＩ３Ｋγの双方の阻害剤である請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
先行請求項のいずれか１項に記載の化合物と、薬学上許容できるキャリアとを含む医薬組成物。
【請求項１６】
前記化合物が医薬組成物の形態であり、前記化合物がＰＩ３ＫδとＰＩ３Ｋγの二重阻害剤であり、または前記組成物がＰＩ３Ｋδ阻害剤である１つの活性剤とＰＩ３Ｋγ阻害剤である第２の活性剤とを含む先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１７】
非ホジキンリンパ腫を治療する方法であって、それを必要とする対象に先行請求項のいずれか１項に記載の有効量の化合物または組成物を投与することを含む、方法。
【請求項１８】
前記非ホジキンリンパ腫がＴ細胞リンパ腫である請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記Ｔ細胞リンパ腫が末梢Ｔ細胞リンパ腫である請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
リンパ腫または白血病を治療する方法であって、それを必要とする対象に請求項１〜１６のいずれか１項に記載の有効量の化合物または組成物を投与することを含む、方法。
【請求項２１】
前記リンパ腫または白血病が、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、Ｔ細胞リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫（ＰＴＣＬ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｂ細胞リンパ腫、または慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記リンパ腫または白血病がＴ−ＡＬＬである請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
さらに前記対象に少なくとも１つの化学療法剤を共投与することを含む請求項１７〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記化学療法剤が、アクチノマイシン、アムサクリン、アントラサイクリン、ブスルファン、シスプラチン、シトキサン、エピルビシン、ヘキサメチルメラミンオキサリプラチン、イフォスファミド、ミトキサントロン、タキソテレ、テニポシド、トリエチレンチオホスホルアミド、ハイドロコルチゾン、コルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プレドニゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、オキサリプラチン、ゾレドロン酸、イバンドロネート、ベラパミル、ポドフィロトキシン、カルボプラチン、プロカルバジン、メクロレタミン、サイクロホスファミド、カンプトテシン、イフォスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ビスルファン、ニトロソ尿素、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリコマイシン、マイトマイシン、エトポシド（ＶＰ１６）、タモキシフェン、トランス白金、５−フルオロウラシル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、メソトレキセート、Ｌ−アスパラギナーゼ、ラパマイシン、ジベンザゼピン（ＤＢＺ）、ウラムスチン、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、オキサリプラチン、イダルビシン、トポテカン、プレメトレキセド、６−メルカプトプリン、ダルカルバジン、フルダラビン、５−フルオロウラシル、アラビノシルシトシン、５−フルオロウラシル、アラビノシルシトシン、カペシタビン、ゲムシタビン、デシタビン、ビンカアルカロイド、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、ドセタキセル（タキソテレ（登録商標））、イクサベピロン（イグゼンプラ（登録商標））、及びそれらの組み合わせである請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記化学療法剤が、ハイドロコルチゾン、コルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プレドニゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン及びそれらの組み合わせから成る群から選択されるグルココルチコイドである請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記化学療法剤がデキサメタゾンである請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記化合物が、有効量の前記化合物と薬学上許容できるキャリアとを含む医薬組成物の形態である請求項１７〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記組成物が単位剤形の中にある請求項２７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
態様では、本開示は、化合物、組成物、及びそれを必要とする患者に化合物及び組成物を投与する方法を提供する。別の態様では、本開示は癌、たとえば、リンパ性白血病またはリンパ腫を治療するための化合物及び組成物に関する。本開示はさらに、２つのホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）のアイソフォームγ及びδを阻害する化合物、そのような化合物を含む医薬組成物、及びＰＩ３Ｋの機能亢進から生じる疾患、たとえば、非ホジキンリンパ腫の治療、改善及び／または予防のための化合物及び／または医薬組成物の使用方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
ＰＩ３Ｋのシグナル伝達経路は、ヒトの癌にて最も高度に変異がある系の１つである。ＰＩ３Ｋのシグナル伝達はヒトにて他の多数の疾患における重要な因子でもある。ＰＩ３Ｋのシグナル伝達は、アレルギー性接触皮膚炎、関節リウマチ、変形性関節症、炎症性腸疾患、慢性閉塞性肺疾患、乾癬、多発性硬化症、喘息、糖尿病合併症に関連する疾病、及び急性冠状症候群のような循環器系の炎症性合併症を含む多数の病態に関与する。ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔのシグナル伝達経路は多数の種類の腫瘍の増大、増殖及び生存を促進する。
【０００３】
ＰＩ３Ｋは、ｐ１１０の触媒性（α、β、γまたはδとして分類される）サブユニットとｐ５０、ｐ５５、ｐ８５またはｐ１０１の調節性サブユニットを含むヘテロ二量体の複合体として存在する。ＰＩ３Ｋは活性化のメカニズムによって定義される２つのサブクラスＩａ及びＩｂに分けることができる。
【０００４】
クラスＩａのＰＩ３Ｋには、ｐ１１０α、ｐ１１０β及びｐ１１０δの触媒ドメインが含まれ、そのそれぞれは調節性タンパク質と会合し、ＴＣＲを含む幾つかの細胞表面受容体との結合の際、直接または間接的に活性化される。
【０００５】
クラスＩｂのＰＩ３Ｋはｐ１１０γのみから成り、それはｐ１０１アダプター分子と会合し、主としてＧタンパク質共役受容体によって刺激される。
【０００６】
この経路の最初の活性化は、たとえば、細胞表面受容体との増殖因子の相互作用を介して細胞膜の内層の中に含有される特定脂質のリン酸化を生じてセカンドメッセンジャーであるホスファチジルイノシトール（３,４,５）−三リン酸（ＰＩＰ３）を生じる。ＰＩＰ３は次いで、ＰＤＫ−１及びＡｋｔのような重要な下流のエフェクターを活性化し、後者は生物活性に関連するクラスＩのＰＩ３Ｋを進展させるのに決定的に重要である。
【０００７】
いったん活性化されると、Ａｋｔは、多数の細胞内タンパク質をリン酸化することによって―細胞の生存、成長、増殖、移動及び血管新生を含む―下流の反応に介在する。この経路は高等真核生物の細胞全てに存在し、高度に保存されている。
【０００８】
ＰＴＥＮは、これらの脂質キナーゼの活性化に反応して生成されるＰＩＰ３のレベルを制限することによってＰＩ３Ｋの潜在的な癌促進性活性に対抗することに関与する非冗長細胞膜ホスファターゼである。ＰＴＥＮ腫瘍抑制遺伝子における突然変異は多数の種類のヒト癌で共通する。これらの突然変異は過活動性のＰＩ３Ｋ／Ａｋｔのシグナル伝達及び化学療法剤への耐性を生じる。突然変異によるＰＴＥＮ機能の喪失は原発Ｔ−ＡＬＬ試料のおよそ４０％で観察されていることが報告されている。この関係は、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔシグナル伝達経路の過剰活性化がこの血液悪性腫瘍の共通する特徴であることを示唆している。
【０００９】
ＰＴＥＮはＰＩ３Ｋ活性の生存促進性効果に正常に対抗する腫瘍抑制遺伝子であり、Ｔ細胞前駆細胞におけるＰＴＥＮの機能喪失突然変異はＴ−ＡＬＬに関連することが多い。
【００１０】
上記で議論した４つのＰＩ３Ｋアイソフォームのうち、２つのアイソフォーム、ガンマ（γ）及びデルタ（δ）はＰＴＥＮ機能の非存在下でＴ細胞前駆細胞にて白血病誘発を推進するのに十分である。
【００１１】
クラスＩのＰＩ３Ｋのデルタ（δ）アイソフォームは特に、多数の疾患及び生物過程に関与している。ＰＩ３Ｋ−δ（ｐ１１０δ）は主として、たとえば、Ｔ細胞、樹状細胞、好中球、肥満細胞、Ｂ細胞及びマクロファージのような造血細胞で発現される。ＰＩ３Ｋ−δは、たとえば、Ｔ細胞の機能、Ｂ細胞の活性化、肥満細胞の活性化、樹状細胞の機能、及び好中球の活性のような哺乳類の免疫系の機能に不可欠に関与する。免疫系の機能におけるその不可欠の役割のゆえに、ＰＩ３Ｋ−δは、たとえば、アレルギー反応、炎症性疾患、炎症が介在する血管新生、関節リウマチ、及びたとえば、狼瘡、喘息、肺気腫や他の呼吸器疾患のような自己免疫疾患のような望ましくない免疫応答に関連する多数の疾患にも関与する。
【００１２】
ＰＩ３Ｋ−γ（ｐ１１０γ）は主として造血細胞で発現され、炎症、自然免疫応答及び適応免疫応答、骨髄細胞の分化、免疫細胞輸送、及び肥満細胞の機能にも関与する。ＰＩ３Ｋ−γも白血球のシグナル伝達で役割を担い、炎症、関節リウマチ、及びたとえば、狼瘡のような自己免疫疾患に関与している。従って、クラスＩのＰＩ３Ｋアイソフォームｐ１１０γ及びｐ１１０δは、その組み合わせた活性にある程度頼ってもよい類似の生物学的役割を有するという十分な証拠が存在する。このことは、いずれかのアイソフォームの遺伝子欠失が胸腺におけるＴ細胞発生の全体に対して限定された影響を有するのに対してｐ１１０γ及びｐ１１０δ双方の欠失はＴ細胞発生において重度の発生欠損を生じるという観察によって証明される。
【００１３】
さらに、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）の動物モデルにて疾患の進行及び腫瘍細胞の生存と同様に疾患の発生を防ぐことができることはＰＩ３Ｋ−γ及びＰＩ３Ｋ−δ双方の遺伝子欠失及び二重阻害を介して示されている。
【００１４】
Ｔ−ＡＬＬは小児ＡＬＬ症例の約１５％及び成人ＡＬＬ症例の約２５％を占める進行性の血液悪性腫瘍である。患者は高い循環芽球数及びＣＮＳの浸潤を呈することが多い。強化治療にもかかわらず、小児及び青年の２５％及び成人の５０％は従来の治療法を諦めるであろう。悲しいことに、一次耐性疾患または再発Ｔ−ＡＬＬを呈する患者は予後不良である。小児についての追加の懸念は、永続的な臓器損傷、生殖機能不全及び第２の癌を含む現在の治療の晩発効果である。従って、腫瘍の維持に寄与するＴ−ＡＬＬにおける重要な経路を選択的に標的とするが、標準の化学療法よりも低い毒性を有する薬剤を開発する緊急のニーズが残っている。
【００１５】
ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴシグナル伝達経路は、ＩＬ−７及びプレＴＣＲシグナル伝達を含む正常なＴ細胞発生を制御する複数の生存因子及び増殖因子の重要なメディエーターである。ＰＴＥＮ欠損マウスにおけるＰＩ３Ｋ−ＡＫＴシグナル伝達の異常な活性化は胸腺細胞を悪性のＴ細胞リンパ芽球性白血病に形質転換する。さらに、ＰＴＥＮの変異喪失及びその結果のＰＩ３Ｋ−ＡＫＴシグナル伝達経路の活性化はヒトＴ−ＡＬＬ細胞株の約７０％に存在し；注目すべきは、原発Ｔ−ＡＬＬ症例の＞４０％はＰＴＥＮ／ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ経路にて突然変異を含有すると報告され、それはこの重要な腫瘍形成の中心を制御する（すなわち、ＣＫ２及びＲＡＳを介して）多数の上流の因子のせいで過小評価される可能性がある数字である。
【００１６】
クラスとしてのＰＩ３Ｋ阻害剤は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）及び末梢Ｔ細胞リンパ腫（ＰＴＣＬ）のような悪性リンパ腫にて有望な臨床活性を実証していない。濾胞性リンパ腫の認可された適応についてでさえ、ＰＩ３Ｋ阻害剤であるイデラリシブ及びコパンリシブは一次（全患者の４０％は全く応答を有さない）耐性及び獲得耐性（最終的に全患者が疾患の進行を発生する）によって限定される。ＰＴＣＬは米国では毎年７，０００人を超える新しい患者を冒す。しかし、ＰＴＣＬ患者の転帰は不十分のままであり、長期生存は１５％を下回る。
【００１７】
ＰＩ３Ｋの機能亢進から生じるＴ−ＡＬＬ及び他の疾患を治療するための追加のＰＩ３Ｋ阻害剤の開発に対する要求がある。特に、ＰＴＣＬを治療するためのＰＩ３Ｋ阻害剤に対するニーズがある。
【発明の概要】
【００１８】
実施形態では、本開示は式（Ｉ）：
【化１】
2020529418.tif 000003
の化合物を提供し、式中、
Ａは縮合５−または６−員環の芳香族基またはヘテロ芳香族基を表し；
ＸはＮまたはＣＹを表し；
Ｙは水素またはハロゲンを表し；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、ＮＯ２、またはＯＣＦ３を表し；
Ｒ６はＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６シクロアルキルを表し；
Ｒ７は水素、アルキル、またはハロゲンを表し；または
Ｒ６及びＲ７は、Ｒ７が連結されるＮと一緒に、任意で置換された５−または６−員環の環を形成し；
Ｒ８はヘテロ芳香族基（たとえば、ピリジン）、または縮合系（たとえば、プリン）；
Ｑは直接結合、カルボニル、またはアルキレンである。
【００１９】
実施形態では、本開示は式（ＩＩ）：
【化２】
2020529418.tif 000004
の化合物を提供し、式中、
ＸはＮ、Ｏ、またはＣＹを表し；
Ｙは水素またはハロゲンを表し；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、ＮＯ２、またはＯＣＦ３を表し；
Ｒ６はＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６シクロアルキルを表し；
Ｒ７は水素、アルキル、またはハロゲンを表し；または
Ｒ６及びＲ７は、Ｒ７が連結されるＮと一緒に任意で置換された５−または６−員環の環を形成し；
Ｒ８はヘテロ芳香族基（たとえば、ピリジン）、または縮合系（たとえば、プリン）を表し；
Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は独立して水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはハロゲンを表し；
Ｑは直接結合、カルボニル、またはアルキレンを表す。
【００２０】
本開示は式（ＩＩａ）または（ＩＩｂ）：
【化３】
2020529418.tif 000005
の化合物を提供し、式中、
Ｒ１〜Ｒ６及びＲ９〜Ｒ１２は式（ＩＩ）で定義されたとおりである。一部の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはハロであり；Ｒ６はメチル、エチル、またはシクロプロピルであり；Ｒ９はハロまたはメチルであり；且つＲ１０、Ｒ１１、及びＲ１２はそれぞれ水素、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはハロである。たとえば、一部の実施形態ではＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して水素、メチル、Ｆまたは重水素であり；Ｒ９はＣｌ、Ｆまたはメチルであり；且つＲ１０、Ｒ１１、及びＲ１２はそれぞれ水素である。一部の例では、Ｒ６に結合する不斉炭素は式（ＩＩａ’）または（ＩＩｂ’）
【化４】
2020529418.tif 000006
で示される立体化学構造、すなわち、Ｓ−エナンチオマーを有する。
【００２１】
実施形態では、本開示は式（ＩＩＩ）：
【化５】
2020529418.tif 000007
の化合物を提供し、式中、
ＸはＮ、Ｏ、またはＣＹを表し；
Ｙは水素またはハロゲンを表し；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、ＮＯ２、またはＯＣＦ３を表し；
Ｒ８はヘテロ芳香族基（たとえば、ピリジン）、または縮合系（たとえば、プリン）を表し；
Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は独立して水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはハロゲンを表し；
Ｑは直接結合、カルボニル、またはアルキレンを表す。
【００２２】
実施形態では、本開示は式（ＩＶ）：
【化６】
2020529418.tif 000008
の化合物を提供し、式中、
ＸはＮ、Ｏ、またはＣＹを表し；
Ｙは水素またはハロゲンを表し；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して水素重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、ＮＯ２、またはＯＣＦ３を表し；
Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は独立して水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはハロゲンを表し；且つ
Ｒ１３はＨ、Ｎ、またはＯを表し；且つ
Ｒ１４はＮＨ２またはメチルを表す。
【００２３】
実施形態では、本開示はそれを必要とする患者に本明細書に記載されている化合物を投与する方法を提供する。別の態様では、本開示は、それを必要とする患者または個体に有効量の本明細書に記載されている化合物を投与することによって、癌、たとえば、リンパ性白血病を治療する、予防するまたは改善する方法を提供する。
【００２４】
実施形態では、本開示はそれを必要とする対象に有効量の本明細書に記載されている化合物を投与することを含む、リンパ系悪性腫瘍の影響を治療する、予防するまたは改善する方法に言及する。態様では、化合物はホスホイノシチド３−キナーゼ−デルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤及びホスホイノシチド３−キナーゼ−ガンマ（ＰＩ３Ｋγ）阻害剤である。
【００２５】
実施形態では、ホスホイノシチド３−キナーゼ−デルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤は、本開示の式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、表Ｉ、表ＩＩ、表ＩＩＩの化合物、化合物Ｅｘ．１−１〜１−５０、化合物Ｅｘ．２−１〜２−４、及び化合物Ｅｘ．３−１〜３−３４のいずれかの化合物である。
【００２６】
本開示は、それを必要とする対象に有効量の本明細書で開示されている化合物を投与することを含む、リンパ系の癌、たとえば、リンパ腫及び白血病を治療する方法に関する。特定の実施形態では、投与される化合物は式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩａ’）、（ＩＩｂ）または（ＩＩｂ’）の化合物である。リンパ系の癌は、リンパ腫または白血病、たとえば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、Ｔ細胞リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫（ＰＴＣＬ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｂ細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ），及び本明細書で開示されているその他であることができる。特定の態様では、本開示は、それを必要とする対象に有効量の本明細書で開示されている化合物を投与することを含む、ＰＴＣＬを治療する方法を提供する。特定の実施形態では、投与される化合物は式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩａ’）、（ＩＩｂ）または（ＩＩｂ’）の化合物である。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】（Ａ）は、ＰＩ３Ｋγ／δの遮断が、ＰＴＥＮにおける機能喪失型変異及びＮＯＴＣＨ１における機能獲得型変異の蓄積を許すことによって最終的にＴ−ＡＬＬを生じる、転写因子癌遺伝子ＬＭＯ２の過剰発現により誘導されるＴ−ＡＬＬの発癌性特徴を好転させることを示す図である。ＮＯＴＣＨ１活性を遮断するガンマセクレターゼ阻害剤化合物Ｅ（「ＣｏｍｐＥ」）の効果を比較のために示す。（Ｂ）は癌に罹ったマウスに対するＣＡＬ−１３０と対比してデュベリシブの効果を比較する。
【図２】（Ａ，Ｂ）二重ＰＩ３Ｋγ／δ阻害剤（ＣＡＬ−１３０対ＩＰＩ−１４５）の生物学的評価を示す。（Ａ）野生型マウス（Ｂ６背景）に単回経口用量を投与した後のＩＰＩ−１４５（本明細書に記載されているようなＥｘ．１−１１）に対比したＣＡＬ−１３０の血漿濃度を示す。（Ａ）はＩＰＩ−１４５（本明細書に記載されているようなＥｘ．１−１１）に対比してＣＡＬ−１３０で処理する直前、及び処理の４日後、Ｔ−ＡＬＬを伴ったＬｃｋ／Ｐｔｅｎｆｌ／ｆｌ／Ｌｕｃの生物発光画像を示す。薬剤処理の前／後での芽球数を示す。
【図３】（Ａ）マウスのＰＴＥＮヌル／ＮＯＴＣＨ１活性化Ｔ−ＡＬＬ細胞株の生存性に対する化合物ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３及びＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４（それぞれ本明細書に記載されているようなＥｘ．番号１−３及び１−４）の効果を示す。（Ｂ）ｐ１１０γ及びｐ１１０δの触媒ドメインを双方とも欠いているマウスＰＴＥＮヌルＴ−ＡＬＬ細胞株に対する本開示の化合物ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４（本明細書に記載されているようなＥｘ．番号１−４）の効果の限定された殺傷を示す。
【図４】（Ａ）は本開示の化合物の化学構造を示す。（Ｂ）ＣＡＬ−１３０と比べたＴ−ＡＬＬ細胞株の生存率に対する化合物ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３及びＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４（それぞれ、本明細書に記載されているようなＥｘ．番号１−３及び１−４）の効果を示す。（Ｃ）はｐ１１０γ及びｐ１１０δを欠いているＴ−ＡＬＬ細胞株に対する化合物ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７（本明細書に記載されているようなＥｘ．番号．１−５０）の限定された殺傷効果を示す。
【図５】（Ａ）ＣＡＬ−１３０の構造解析及び修飾を示す。（Ｂ）ＰＩ３ＫγとＰＩ３Ｋδの二重阻害剤の合成の例を示す。
【図６】ＮＯＤ．Ｃｇ−ＰｒｋｄｃｓｃｉｄＩｌ２ｒｇｔｍ１Ｗｊｌ／Ｓｚマウスに生着した初代Ｔ-ＡＬＬ異種移植片を示す。フローサイトメトリーによるヒトＣＤ４５の解析によって腫瘍の発達をモニターする。この異種移植モデルは、初代ヒトＴ-ＡＬＬ細胞をＮＯＤ．Ｃｇ−ＰｒｋｄｃｓｃｉｄＩｌ２ｒｇｔｍ１Ｗｊｌ／Ｓｚマウスに生着させることにより初代ヒトＴ-ＡＬＬ細胞の薬剤反応の詳細な分析を行うことによってマウスでの腫瘍研究を補完することになる。
【図７】Ｔ−ＡＬＬ細胞株をＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−１、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−２、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４、及び他のＰＩ３Ｋ阻害剤で７２時間処理した後の結果（ＰＩ細胞死）を比較する図である。
【図８】Ｔ−ＡＬＬ細胞株をＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−１、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−２、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４、及びＣＡＬ−１３０で７２時間処理した後の結果（ＰＩ陽性細胞）を示す図である。
【図９】Ｔ−ＡＬＬ細胞株をＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−５で処理した後の結果（ＰＩ陽性細胞）を示す図である。
【図１０】Ｔ−ＡＬＬ細胞株をＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−６で処理した後の結果（ＰＩ陽性細胞）を示す図である。
【図１１】Ｔ−ＡＬＬ細胞株をＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７で処理した後の結果（ＰＩ陽性細胞）を示す図である。
【図１２】ＬＭ０−２−００７細胞をＣＡＬ−１３０及び種々の濃度のＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−５で処理した結果を示す。
【図１３】ＬＭ０−２−００７細胞をＣＡＬ−１３０及び種々の濃度のＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−６で処理した結果を示す。
【図１４】ＬＭ０−２−００７細胞をＣＡＬ−１３０及び種々の濃度のＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７で処理した結果を示す。
【図１５】（処理前）ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３でマウスを処理した生体内での結果を示す。
【図１６】（処理後）ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３でマウスを処理した生体内での結果を示す。
【図１７】悪性Ｂ細胞リンパ腫細胞（ＯＣＩ−ＬＹ−１０）を用いたＰＩ３Ｋγ／δ阻害剤についての細胞生存能アッセイ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ）にてＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７をテナリシブと比較する図である。
【図１８】ＣＴＣＬ株（ＨＨ及びＨ９）またはＴ−ＡＬＬ株（ＰＦ３８２及びＣＣＲＦ−ＣＥＭ）を用いたＰＩ３Ｋγ／δ阻害剤についての細胞生存能アッセイ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ）にてデュベリシブ及びテナリシブとＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−６及びＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７を比較する図である。
【図１９】ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−６、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７、デュベリシブ及びテナリシブについてのＴ−ＡＬＬ  ＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞株における細胞生存能アッセイ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ）の結果を比較する図である。
【図２０】ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−６、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７、デュベリシブ及びテナリシブについてのＴ−ＡＬＬ  ＰＦ−３８２細胞株における生存能アッセイ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ）の結果を比較する図である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本開示は、化合物、組成物、及びそれを必要とする患者に本明細書に記載されている化合物または組成物を投与する方法を提供する。別の態様では、本開示は、それを必要とする患者または個体に有効量の本明細書に記載されている化合物または組成物を投与することを含む、癌、たとえば、リンパ性白血病を治療する、予防するまたは改善する方法を提供する。
【００２９】
別の実施形態では、本開示は、それを必要とする対象に有効量の本明細書に記載されている化合物または組成物を投与することを含む、リンパ系悪性腫瘍の影響を治療する、予防するまたは改善する方法に言及する。態様では、化合物は、ホスホイノシチド３−キナーゼ−デルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤及びホスホイノシチド３−キナーゼ−ガンマ（ＰＩ３Ｋγ）阻害剤である。実施形態では、リンパ系悪性腫瘍は、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）またはＴ細胞急性リンパ芽球性リンパ腫である。実施形態では、リンパ系悪性腫瘍は、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）である。
【００３０】
実施形態では、本明細書に記載されている組成物及び方法での使用が可能である本明細書に記載されている化合物は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、表Ｉ、表ＩＩ、表ＩＩＩ、及び化合物Ｅｘ．１−１〜１−５０、化合物Ｅｘ．２−１〜２−４、及び化合物Ｅｘ．３−１〜３−３４の化合物、及びそれらの組み合わせを含むか、それらから成るか、または本質的にそれらから成る。態様では、組成物は医薬組成物または医薬形態に製剤化される。本開示は、薬学上または生理的に許容できる塩形態（たとえば、酸付加塩、塩基付加塩、ヘミ塩）、溶媒和物（たとえば、水和物）、互変異性体（たとえば、ケト・エノール互変異性体）、異性体形態のすべて（たとえば、Ｒ−及びＳ−エナンチオマー）及びラセミ混合物、及び１以上の水素原子が重水素である化合物を含む、本明細書で開示されている且つ本明細書で開示されている式によって包含される化合物のすべての形態を含む。
【００３１】
実施形態では、本開示は式（Ｉ）：
【化７】
2020529418.tif 000009
の化合物を提供し、式中、
Ａは縮合５−または６−員環の芳香族基またはヘテロ芳香族基を表し；
ＸはＮ、Ｏ、またはＣＹを表し；
Ｙは水素またはハロゲンを表し；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して、水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール、ヘテロアリール、ハロゲン、ＮＯ２、またはＯＣＦ３を表し；
Ｒ６はＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６シクロアルキルを表し；
Ｒ７は水素、アルキル、またはハロゲンを表し；または
Ｒ６及びＲ７はＲ７が連結されるＮと一緒に、任意で置換された５−または６−員環の環を形成し；
Ｒ８はヘテロ芳香族基（たとえば、ピリジン）、または縮合系（たとえば、プリン）を表し；
Ｑは直接結合、カルボニル、またはアルキレンを表す。
【００３２】
実施形態では、Ａは任意で置換されたフェニル、アリール、及びヘテロアリールを表す。別の実施形態では、Ａは任意で置換されたフェニル、ピリジン、ピリミジン、チオフェンから成る群から選択される。別の実施形態では、Ａは任意で置換されたフェニルを表す。
【００３３】
実施形態では、本開示は式（ＩＩ）：
【化８】
2020529418.tif 000010
の化合物を提供し、式中、
ＸはＮ、Ｏ、またはＣＹを表し；
Ｙは水素またはハロゲンを表し；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５、独立して、水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリールヘテロアリール、ハロゲン、ＮＯ２、またはＯＣＦ３を表し；
Ｒ６はＣ１−Ｃ６アルキルまたはＣ１−Ｃ６シクロアルキルを表し；
Ｒ７は水素、アルキル、またはハロゲンを表し；または
Ｒ６及びＲ７はＲ７が連結されるＮと一緒に任意で置換された５−または６−員環の環を形成し；
Ｒ８はヘテロ芳香族基（たとえば、ピリジン）、または縮合系（たとえば、プリン）を表し；
Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはハロゲンを表し；
Ｑは直接結合、カルボニル、またはアルキレンを表す。
【００３４】
実施形態では、本開示は式（ＩＩＩ）：
【化９】
2020529418.tif 000011
の化合物を提供し、式中、
ＸはＮ、Ｏ、またはＣＹを表し；
Ｙは水素またはハロゲンを表し；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して、水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、ＮＯ２、またはＯＣＦ３を表し
Ｒ８はヘテロ芳香族基（たとえば、ピリジン）、または縮合系（たとえば、プリン）を表し；
Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはハロゲンを表し；
Ｑは直接結合、カルボニル、またはアルキレンを表す。
【００３５】
実施形態では、本開示は式（ＩＶ）：
【化１０】
2020529418.tif 000012
の化合物を提供し、式中、
ＸはＮ、Ｏ、またはＣＹを表し；
Ｙは水素またはハロゲンを表し；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して、水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、ＮＯ２、またはＯＣＦ３を表し；
Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２は独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはハロゲンを表し；且つ
Ｒ１３はＨ、Ｎ、またはＯを表し；且つ（Ｒ１３を確認してください）
Ｒ１４はＮＨ２またはメチルを表す。
【００３６】
実施形態では、Ｙは水素を表す。
【００３７】
実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して水素、重水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはハロゲンを表す。別の実施形態では、、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は独立して水素、重水素、メチル、フッ素、または塩素を表す。
【００３８】
実施形態では、Ｒ６はＣ１−Ｃ６アルキルを表す。別の実施形態では、Ｒ６はメチルを表す。
【００３９】
実施形態では、Ｒ７は水素を表す。
【００４０】
実施形態では、Ｒ６及びＲ７はＲ７が連結されるＮと一緒に任意で置換された５−員環の環を形成する。
【００４１】
実施形態では、Ｒ８は以下
【化１１】
2020529418.tif 000013
の１つを表す。
【００４２】
実施形態では、式（Ｉ）、（ＩＩ）、または（ＩＩＩ）の化合物はＣＡＬ−１３０を表さない。
【００４３】
実施形態では、本開示に係るＰＩ３Ｋδ及びＰＩ３Ｋγ阻害剤は式（Ｉ）の化合物を含むか、それから成るか、または本質的にそれから成る。
【００４４】
別の実施形態では、本開示に係るＰＩ３Ｋδ及びＰＩ３Ｋγ阻害剤は式（ＩＩ）の化合物を含むか、それから成るか、または本質的にそれから成る。
【００４５】
別の実施形態では、本開示に係るＰＩ３Ｋδ及びＰＩ３Ｋγ阻害剤は式（ＩＩＩ）の化合物を含むか、それから成るか、または本質的にそれから成る。
【００４６】
別の実施形態では、本開示に係るＰＩ３Ｋδ及びＰＩ３Ｋγ阻害剤は式（ＩＶ）の化合物を含むか、それから成るか、または本質的にそれから成る。
【００４７】
表１は式（ＩＩ）：
【化１２】
2020529418.tif 000014
の追加の例となる化合物を一覧表にし、式中、
Ｒ７、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２はそれぞれ水素である。
【表１】
2020529418.tif 000015
【表２】
2020529418.tif 000016
【表３】
2020529418.tif 000017
【表４】
2020529418.tif 000018
【表５】
2020529418.tif 000019
【００４８】
表２は式（ＩＩＩ）：
【化１３】
2020529418.tif 000020
の追加の例となる化合物を一覧表にし、式中、ＸはＮであり；Ｒ９はＦであり；且つ、Ｒ１〜Ｒ５及びＲ１０〜Ｒ１２はそれぞれ水素である。
【表６】
2020529418.tif 000021
【００４９】
表３は式（ＩＶ）：
【化１４】
2020529418.tif 000022
の追加の例となる化合物を一覧表にし、式中、Ｒ１〜Ｒ５及びＲ１０〜Ｒ１２はそれぞれ水素である。
【表７】
2020529418.tif 000023
【表８】
2020529418.tif 000024
【００５０】
式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）を介した、または表１、２及び３で一覧表されている、または具体的な化合物として示されている上記化合物のいずれかは、たとえば、式（Ｉ）にてＲ６が連結される不斉炭素に関して（Ｓ）または（Ｒ）の立体異性体であってもよい。あるいは、上記に記載されている化合物のいずれか１つは（Ｓ）異性体及び（Ｒ）異性体の非ラセミ混合物であってもよく、または化合物は（Ｓ）異性体単独もしくは（Ｒ）異性体単独であってもよい。
【００５１】
ＣＡＬ１０１、ＣＡＬ−１３０及びデュベリシブは既知のＰＩ３Ｋ阻害剤の例である一方で、ＣＵ−１７０３７は本発明の特定の実施形態を表す：
【化１５】
2020529418.tif 000025
【００５２】
本明細書で使用されるとき、「Ｍｅ」はメチルであり、「Ｅｔ」はエチルであり、「Ｄ」は重水素である。
【００５３】
態様では、本開示は、薬学上許容できるキャリアと有効量のホスホイノシチド３−キナーゼ−デルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤及びホスホイノシチド３−キナーゼ−ガンマ（ＰＩ３Ｋγ）阻害剤とを含む、リンパ系悪性腫瘍の影響を治療するための医薬組成物を提供する。
【００５４】
実施形態では、単位剤形での医薬組成物。さらなる実施形態では、医薬組成物はさらに、有効量のデキサメタゾンを含む。
【００５５】
実施形態では、本明細書に記載されている方法または組成物はさらに、少なくとも１つの化学療法剤を対象に同時投与することを含む。実施形態では、化学療法剤は、アクチノマイシン、アムサクリン、アントラサイクリン、ブスルファン、シスプラチン、シトキサン、エピルビシン、ヘキサメチルメラミンオキサリプラチン、イフォスファミド、ミトキサントロン、タキソテレ、テニポシド、トリエチレンチオホスホルアミド、ハイドロコルチゾン、コルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プレドニゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、オキサリプラチン、ゾレドロン酸、イバンドロネート、ベラパミル、ポドフィロトキシン、カルボプラチン、プロカルバジン、メクロレタミン、サイクロホスファミド、カンプトテシン、イフォスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ビスルファン、ニトロソ尿素、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、プリコマイシン、マイトマイシン、エトポシド（ＶＰ１６）、タモキシフェン、トランス白金、５−フルオロウラシル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、メソトレキセート、Ｌ−アスパラギナーゼ、ラパマイシン、ジベンザゼピン（ＤＢＺ）、ウラムスチン、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、オキサリプラチン、イダルビシン、トポテカン、プレメトレキセド、６−メルカプトプリン、ダルカルバジン、フルダラビン、５−フルオロウラシル、アラビノシルシトシン、５−フルオロウラシル、アラビノシルシトシン、カペシタビン、ゲムシタビン、デシタビン、ビンカアルカロイド、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、ドセタキセル（タキソテレ（登録商標））、イクサベピロン（イグゼンプラ（登録商標））、及びそれらの組み合わせから成る群から選択される。
【００５６】
実施形態では、化学療法剤は、ハイドロコルチゾン、コルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プレドニゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン及びそれらの組み合わせから成る群から選択されるグルココルチコイドである。
【００５７】
実施形態では、化学療法剤はデキサメタゾンである。
【００５８】
態様では、本開示は、有効量のホスホイノシチド３−キナーゼを対象に投与することを含む、対象にて変異したホスファターゼとテンシンホモログ（ＰＴＥＮ）遺伝子によって発生し得るようなＰＩ３Ｋ／ＡＫＴシグナル伝達経路の活性化に関連するリンパ系悪性腫瘍の影響を治療する、予防するまたは改善する方法を提供する。
【００５９】
態様では、本開示は、ホスホイノシチド３−キナーゼ−デルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤とホスホイノシチド３−キナーゼ−ガンマ（ＰＩ３Ｋγ）阻害剤とを含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）を患っている対象を治療する方法を提供する。実施形態では、方法はさらに、ハイドロコルチゾン、コルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プレドニゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン及びそれらの組み合わせから成る群から選択される有効量のグルココルチコイドを投与することを含む。実施形態では、グルココルチコイドはデキサメタゾンである。
【００６０】
態様では、本開示は、それを必要とする患者に本明細書に記載されている化合物または組成物を含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）を患っている対象にて腫瘍量を減らす方法を提供する。態様では、方法はさらに、ハイドロコルチゾン、コルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プレドニゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン及びそれらの組み合わせから成る群から選択される有効量のグルココルチコイドを投与することを含む。実施形態では、グルココルチコイドはデキサメタゾンである。
【００６１】
態様では、本開示は、対象の試料から対象が変異したＰＴＥＮ遺伝子及び／またはＰＩ３Ｋ／ＡＫＴシグナル伝達経路の活性化を有するかどうかを判定することを含む、ホスホイノシチド３−キナーゼ−デルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤とホスホイノシチド３−キナーゼ−ガンマ（ＰＩ３Ｋγ）阻害剤との同時治療から恩恵を受けてもよい対象を特定する方法を提供し、その際、変異したＰＴＥＮ遺伝子及び／またはＰＩ３Ｋ／ＡＫＴシグナル伝達経路の活性化の存在が、ＰＩ３Ｋδ阻害剤及びＰＩ３Ｋγ阻害剤による同時治療から恩恵を受けてもよい対象を示す。
【００６２】
態様では、本開示は、
（ａ）細胞を化合物と接触させることと
（ｂ）細胞にて抗原受容体が誘導する活性を化合物が調節するかどうかを判定することとを含む、ホスホイノシチド３−キナーゼ−デルタ（ＰＩ３Ｋδ）及びホスホイノシチド３−キナーゼ−ガンマ（ＰＩ３Ｋγ）双方の阻害活性を有する化合物を特定する方法を提供し、その際、抗原受容体が誘導する活性を調節する化合物がＰＩ３Ｋδ及びＰＩ３Ｋγ双方の阻害活性を有する。
【００６３】
態様では、ＰＩ３Ｋδ阻害剤はＰＩ３Ｋδの活性レベルまたは発現レベルを下げることができる作用物質である。好ましくは、ＰＩ３Ｋδ阻害剤は、ＰＩ３Ｋγに対する阻害効果を有することも本開示に従って許容できることを除いて、的外れの効果をほとんど有さない、または有さない。
【００６４】
さらに好適なＰＩ３Ｋδ阻害剤には限定しないで、ＡＭＧ−３１９（Ａｍｇｅｎ，Ｔｈｏｕｓａｎｄ  Ｏａｋｓ，Ｃａｌｉｆ．）；ＰＩ３−デルタ阻害剤、セルゾーム（Ｃｅｌｌｚｏｍｅ  ＡＧ，Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）；ＰＩ３−デルタ／ガンマ阻害剤、セルゾーム（Ｃｅｌｌｚｏｍｅ  ＡＧ）；ＣＨＲ−４４３２（Ｃｈｒｏｍａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｌｔｄ．，Ａｂｉｎｇｄｏｎ，ＵＫ）；ＸＬ−４９９（Ｅｖｏｔｅｃｈ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）；ＣＡＬ−１２０（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，Ｃａｌｉｆ．）；ＣＡＬ−１２９（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）；ＣＡＬ−１３０（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）；ＣＡＬ−２５３（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）；ＣＡＬ−２６３（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）；ＧＳ−１１０１（ＣＡＬ−１０１）（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）；ベンズイミダゾール系、ジェネンテック（Ｒｏｃｈｅ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ  Ｉｎｃ．，Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆ．）；ＰＩ３キナーゼデルタ阻害剤、ジェネンテック（Ｒｏｃｈｅ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ，Ｉｎｃ．）；ＰＩ３キナーゼ阻害剤、ロシュ−４（Ｒｏｃｈｅ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ，Ｉｎｃ．）；ＰＩ３キナーゼ阻害剤、ロシュ（Ｒｏｃｈｅ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ，Ｉｎｃ．）；ＰＩ３キナーゼ阻害剤、ロシュ−５（Ｒｏｃｈｅ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ，Ｉｎｃ．）；ピクチリシブ（Ｒｏｃｈｅ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ，Ｉｎｃ．）；ＰＩ３キナーゼデルタ阻害剤、インコゼン（Ｉｎｃｏｚｅｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｐｖｔ．Ｌｔｄ．，Ｈｙｄｒａｂａｄ，Ｉｎｄｉａ）；ＰＩ３キナーゼデルタ阻害剤−２、インコゼン（Ｉｎｃｏｚｅｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）；ＰＩ３−デルタ阻害剤、インテリキン（Ｉｎｔｅｌｌｉｋｉｎｅ  Ｉｎｃ．，Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，Ｃａｌｉｆ．）；ＰＩ３−デルタ／ガンマ阻害剤、インテリキン（Ｉｎｔｅｌｌｉｋｉｎｅ，Ｉｎｃ．）；ＰＩ３Ｋデルタ／ガンマ阻害剤、インテリキン−１（Ｉｎｔｅｌｌｉｋｉｎｅ，Ｉｎｃ．）；ＫＡＲ−４１３９（Ｋａｒｕｓ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｃｈｉｌｗｏｒｔｈ，ＵＫ）；ＫＡＲ−４１４１（Ｋａｒｕｓ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）；ＰＩ３キナーゼデルタ阻害剤、メルクＫＧａＡ（Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ，Ｎ．Ｊ．）；ＯＸＹ−１１１Ａ（ＮｏｒｍＯｘｙｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｒｉｇｈｔｏｎ，Ｍａｓｓ．）；ＰＩ３−アルファ／デルタ阻害剤、パスウエイセラピューティクス（Ｐａｔｈｗａｙ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｌｔｄ．，Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆ．）；ＰＩ３−デルタ阻害剤、パスウエイセラピューティクス−１（Ｐａｔｈｗａｙ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｌｔｄ．）；ＰＩ３−デルタ阻害剤、パスウエイセラピューティクス−２（Ｐａｔｈｗａｙ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｌｔｄ．）；ＰＩ３−デルタ／ガンマ阻害剤、パスウエイセラピューティクス（Ｐａｔｈｗａｙ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｌｔｄ．）；ＳＦ−１１２６（Ｓｅｍａｆｏｒｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，  Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，Ｉｎｄ．）；Ｘ−３３９（Ｘｃｏｖｅｒ���，Ｗｅｓｔ  Ｐａｌｍ  Ｂｅａｃｈ，Ｆｌａ．）；ＩＣ８７１１４（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）；ＴＧ１００−１１５（Ｔａｒｇｅｇｅｎ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．）；及びそれらの組み合わせが挙げられる。好ましくは、ＰＩ３Ｋδ阻害剤はＣＡＬ−１３０である。ＰＩ３Ｋδ阻害剤はｓｈＲＮＡまたはｓｉＲＮＡ、好ましくはｓｈＲＮＡを含む核酸であってもよい。
【００６５】
態様では、ＰＩ３Ｋγ阻害剤は、ＰＩ３Ｋγの活性レベルまたは発現レベルを下げることができる作用物質である。好ましくは、ＰＩ３Ｋγ阻害剤は、上記でさらに詳細に述べられているように、ＰＩ３Ｋδに対する阻害効果も有することが本開示に従って許容できることを除いて、的外れな効果をほとんど有さない、または有さない。
【００６６】
さらに好適なＰＩ３Ｋγ阻害剤には限定しないで、ＰＩ３−デルタ／ガンマ阻害剤、Ｃｅｌｌｚｏｍｅ（Ｃｅｌｌｚｏｍｅ  ＡＧ）；ＰＩ３−ガンマ阻害剤、セルゾーム（Ｃｅｌｌｚｏｍｅ  ＡＧ）；ＰＩ３−ガンマ阻害剤、エボテック（Ｅｖｏｔｅｃ）；ＰＩ３キナーゼ阻害剤、ロシュ（Ｒｏｃｈｅ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ，Ｉｎｃ．）；ピクチリシブ（Ｒｏｃｈｅ  Ｈｏｌｄｉｎｇｓ，Ｉｎｃ．）；ＩＰＩ−１４５（Ｉｎｔｅｌｌｉｋｉｎｅ，Ｉｎｃ．）；ＰＩ３−デルタ／ガンマ阻害剤、インテリキン（Ｉｎｔｅｌｌｉｋｉｎｅ，Ｉｎｃ．）；ＰＩ３Ｋデルタ／ガンマ阻害剤、インテリキン−１（Ｉｎｔｅｌｌｉｋｉｎｅ  Ｉｎｃ．）；ＫＩＮ−１（Ｋａｒｕｓ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）；ＰＩ３−デルタ／ガンマ阻害剤、パスウエイセラピューティクス（Ｐａｔｈｗａｙ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｌｔｄ．）；ＰＩ３−ガンマ阻害剤、パスウエイセラピューティクス（Ｐａｔｈｗａｙ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  Ｌｔｄ．）；ＳＣ−１０３９８０（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．）；ＳＦ−１１２６（Ｓｅｍａｆｏｒｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＡＳ−０４１１６４（５−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イルメチレン−チアゾリジン−２，４−ジオン）；ＡＳ−６０４８５０（５−（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イルメチレン）−チアゾリジン−２，４−ジオン）；ＴＧ１００−１１５（Ｔａｒｇｅｇｅｎ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．）；ＡＳ−６０５２４０（５−キノキシリン−６−メチレン−１，３−チアゾリジン−２，４−ジオン）；ＣＡＬ−１３０（Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）；及びそれらの組み合わせが挙げられる。好ましくは、ＰＩ３Ｋγ阻害剤はＣＡＬ−１３０である。ＰＩ３Ｋγ阻害剤はｓｈＲＮＡまたはｓｉＲＮＡ、好ましくはｓｈＲＮＡを含む核酸であってもよい。
【００６７】
本開示では、ＰＩ３Ｋδ及びＰＩ３Ｋγの双方を阻害するが、他のＰＩ３Ｋアイソフォームには影響を有さないまたは限定された影響を有する単一の化合物または組成物も熟考される。
【００６８】
本開示では、１以上のＰＩ３Ｋδ及び／またはＰＩ３Ｋγの阻害剤及び／または１以上の化学療法剤は、内科医によって最も適当だと考えられるとき、それを必要とする対象に同一組成物で一緒に、別々の組成物で同時に共投与されてもよく、または別々の組成物として異なる時に投与されてもよい。
【００６９】
本開示では、ＰＩ３Ｋ阻害剤の「有効量」または「治療上有効な量」は、ＰＩ３Ｋγ阻害剤であれ、ＰＩ３Ｋδ阻害剤であれ、対象に投与されたとき、本明細書に記載されているような有益なまたは所望の成績を達成するのに十分であるそのような阻害剤の量である。有効な剤形、投与の方式及び投与量は経験的に決定されてもよく、そのような決定を行うことは当該技術の技量の範囲内にある。投与量は、投与の経路、排泄の速度、治療の持続期間、投与される任意の他の薬剤の独自性、哺乳類、たとえば、ヒト患者の年齢、大きさ及び種、ならびに医学及び獣医学の当該技術で周知の類似の因子で変化するであろうことが当業者によって理解される。一般に、本開示に係るＰＩ３Ｋ阻害剤の好適な用量は、副作用がなくまたは最低限の副作用で所望の効果を生じるのに有効な最低用量である、ＰＩ３Ｋ阻害剤のその量であろう。ＰＩ３Ｋγ阻害剤またはＰＩ３Ｋδ阻害剤の有効な用量は、ＰＩ３Ｋγ阻害剤またはＰＩ３Ｋδ阻害剤の用量が同時にＰＩ３Ｋγ及びＰＩ３Ｋδの活性レベルまたは発現レベルを低下させるまたは抑制するという条件で、１日を通して２、３、４、５、６以上の分割用量として投与されてもよく、適当な間隔で別々に投与されてもよい。
【００７０】
本開示に係るＰＩ３Ｋ阻害剤、特にＰＩ３Ｋγ阻害剤及び／またはＰＩ３Ｋδ阻害剤の投与量の好適な非限定例は、約５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇを含む約１ｎｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ、たとえば、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇである。ＰＩ３Ｋ阻害剤の他の代表的な投与量には、約１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１２５ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ、６００ｍｇ／ｋｇ、７００ｍｇ／ｋｇ、８００ｍｇ／ｋｇ、９００ｍｇ／ｋｇ、または１０００ｍｇ／ｋｇが挙げられる。
【００７１】
本開示の別の実施形態は、本開示は、対象にて変異したホスファターゼとテンシンホモログ（ＰＴＥＮ）遺伝子及び／またはＰＩ３Ｋ／ＡＫＴシグナル伝達経路の活性化に関連するリンパ系悪性腫瘍の影響を治療する、予防するまたは改善する方法である。方法は有効量のＰＩ３Ｋδ阻害剤及びＰＩ３Ｋγ阻害剤を対象に投与することを含む。
【００７２】
本明細書で使用されるとき、「変異したホスファターゼとテンシンホモログ（ＰＴＥＮ）遺伝子」はＰＴＥＮのエクソンまたはイントロンの配列における１以上の変化を有することを意味する。「変異したＰＴＥＮ遺伝子に関連する」リンパ系悪性腫瘍は、ＰＴＥＮ遺伝子配列における１以上の変化が見いだされ、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴシグナル伝達経路の活性化を生じるリンパ系悪性腫瘍を意味する。そのようなリンパ系悪性腫瘍には、たとえば、Ｔ−ＡＬＬ、リンパ芽球性リンパ腫、大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、大細胞型Ｂ細胞リンパ腫及び骨髄腫が挙げられる。
【００７３】
態様では、本開示はリンパ系悪性腫瘍またはリンパ系での生体組織もしくは細胞の異常な増殖を治療する方法を提供する。そのような異常な増殖は近隣の組織を侵襲し、破壊してもよく、且つ身体の他の部分に広がってもよい。用語「リンパ系」は、限定しないで骨髄、胸腺、リンパ管、Ｔ細胞及びその前駆細胞、と同様にＢ細胞及びその前駆細胞を含む、一緒に機能して疾患に対して特定の抵抗性を生じる細胞、組織凝集体、及び臓器のすべてを指す。
【００７４】
態様では、本開示は、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）及び複合ホジキンリンパ腫とＮＨＬを治療する及び／または予防する方法を提供する。ホジキンリンパ腫には、リンパ球が豊富な古典的なホジキンリンパ腫、混合細胞性の古典的なホジキンリンパ腫、リンパ球が枯渇した古典的なホジキンリンパ腫、及び結節性リンパ球優勢ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞ＮＨＬ、Ｔ細胞ＮＨＬ、未知の系列のＮＨＬ、Ｂ細胞ＮＨＬ、前駆Ｂ細胞ＮＨＬ（たとえば、Ｂリンパ芽球性白血病及びＢリンパ芽球性リンパ腫）、慢性リンパ性白血病、小リンパ性リンパ腫、前リンパ性白血病、マントル細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫、節外性辺縁帯リンパ腫、結節性辺縁帯リンパ腫、ヘアリー細胞白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫、縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、形質細胞腫、及び多発性骨髄腫／形質細胞白血病が挙げられる。Ｔ細胞ＮＨＬには、前駆Ｔ細胞ＮＨＬ（たとえば、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）及びＴ細胞急性リンパ芽球性リンパ腫）、菌状息肉腫、セザリー症候群、成人Ｔ細胞白血病、成人Ｔ細胞リンパ腫、ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、悪性ＮＫ細胞白血病、Ｔ細胞大顆粒リンパ性白血病、Ｔ細胞前リンパ性白血病、及び末梢Ｔ細胞リンパ腫（たとえば、血管免疫芽球性リンパ腫、皮下脂肪織炎様Ｔ細胞リンパ腫、未分化大細胞型リンパ腫、肝脾Ｔ細胞リンパ腫、腸症型Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、原発皮膚未分化大細胞型リンパ腫）が挙げられる。好ましくは、リンパ系悪性腫瘍はＴ−ＡＬＬまたはＴ細胞急性リンパ芽球性リンパ腫である。別の好まれる実施形態では、リンパ系悪性腫瘍はＴ−ＡＬＬである。
【００７５】
この実施形態の態様の１つでは、方法はさらに、有効量の本明細書で開示されているような化学療法剤、たとえば、グルココルチコイドを投与することを含む。好ましくは、化学療法剤はデキサメタゾンである。
【００７６】
本開示のさらに別の実施形態は、リンパ系悪性腫瘍の影響を治療する医薬組成物である。医薬組成物は薬学上許容できるキャリアと、有効量の本明細書に記載されているＰＩ３Ｋδ阻害剤及びＰＩ３Ｋγ阻害剤とを含む。一実施形態では、ＰＩ３Ｋδ阻害剤及びＰＩ３Ｋγ阻害剤は、ＩＰＩ−１４５／デュベリシブ、ＲＰ６５３０、ＣＵＸ−０３１９０、ＣＵＸ−０３１９３、ＣＵＸ−０３１９８Ａ、ＣＵＸ−０３１９８Ｂ、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−１、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−２、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３、及びＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−５、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−６、及びＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７から成る群から選択される。
【００７７】
ＣＵ−１７０３７と名付けられた化合物を含む代表的な構造は以下のとおりである：
【化１６】
2020529418.tif 000026
【００７８】
この実施形態の医薬組成物は二重阻害剤を含有する単一組成物であってもよく、単一組成物は、一方がＰＩ３Ｋδ阻害剤であり、他方がＰＩ３Ｋγ阻害剤である２つの活性剤を含有し、または、それぞれＰＩ３Ｋδ阻害剤もしくはＰＩ３Ｋγ阻害剤である少なくとも１つの活性剤を含有する２以上の組成物であってもよい。
【００７９】
別の態様では、医薬組成物はさらに、有効量の本明細書に記載されているような化学療法剤、たとえば、グルココルチコイドを含む。好ましくは、化学療法剤はデキサメタゾンである。
【００８０】
この実施形態の医薬組成物は二重阻害剤を含有する単一組成物であってもよく、単一組成物は、一方がＰＩ３Ｋδ阻害剤であり、他方がＰＩ３Ｋγ阻害剤である２つの活性剤を含有し、または、それぞれＰＩ３Ｋδ阻害剤もしくはＰＩ３Ｋγ阻害剤である少なくとも１つの活性剤を含有する２以上の組成物であってもよい。
【００８１】
この実施形態の態様では、方法はさらに、有効量の本明細書に記載されているような化学療法剤、たとえば、グルココルチコイドを投与することを含む。好ましくは、化学療法剤はデキサメタゾンである。
【００８２】
本開示の別の実施形態はＴ−ＡＬＬを患っている対象にて腫瘍量を減らす方法である。この方法は、本明細書に記載されているＰＩ３Ｋδ阻害剤及びＰＩ３Ｋγ阻害剤を含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む。
【００８３】
本明細書で使用されるとき、「腫瘍量」は対象の体内における腫瘍（良性であれ、悪性であれ）細胞の数、または腫瘍のサイズを意味する。
【００８４】
この実施形態の態様の１つでは、方法はさらに、有効量の本明細書で開示されているような化学療法剤、たとえば、本明細書でも定義されているようなグルココルチコイドを投与することを含む。好ましくは、化学療法剤はデキサメタゾンである。
【００８５】
本開示のさらに別の実施形態は、ＰＩ３Ｋδ阻害剤及びＰＩ３Ｋγ阻害剤の同時治療から恩恵が得られてもよい対象を特定する方法である。この方法は対象が変異したＰＴＥＮ遺伝子を有するかどうかを対象の試料から判定することを含み、その際、変異したＰＴＥＮ遺伝子の存在とそれに続くＰＩ３Ｋ／ＡＫＴシグナル伝達経路の活性化は同時治療から恩恵が得られてもよい対象を示す。
【００８６】
この実施形態では、試料は従来の手段によって対象から得られる。そのような試料はＤＮＡを含有し、組織試料及び／または、たとえば、末梢血試料のような血液試料であってもよい。そのような試料はまた腫瘍からの生検であってもよい。対象が変異したＰＴＥＮ遺伝子を有するかどうかを判定することは、当該技術で既知の従来の遺伝子型決定法を用いて、または実施例を含めて本明細書で開示されている方法を含む従来の手段を用いてＰＴＥＮ遺伝子産物についてアッセイすることによって実施されてもよい。対象がＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ経路の活性化を有するかどうかを判定することは、ＡＫＴのリン酸化を検出するウエスタンブロットアッセイによって、またはリンフローアッセイによって実施される。
【００８７】
本開示の追加の実施形態は、ＰＩ３Ｋδ及びＰＩ３Ｋγ双方の阻害活性を有する化合物を同定する方法である。この方法は、（ａ）細胞を化合物と接触させることと、（ｂ）化合物が細胞にて抗原受容体が誘導する活性を調節するかどうかを判定することとを含み；その際、抗原受容体が誘導する活性を調節する化合物はＰＩ３Ｋδ及びＰＩ３Ｋγ双方の阻害活性を有する。
【００８８】
本明細書で使用されるとき、「抗原受容体が誘導する活性」は、Ｔ細胞受容体のシグナル伝達、たとえば、ＡＫＴ、ＧＳＫ３β、ｍＴＯＲ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、生存促進性タンパク質のリン酸化、及びＣＤ４Ｔ細胞におけるカルシウム流出から生じる事象を意味する。そのような活性のアッセイは本明細書で開示されているとおりである。
【００８９】
本開示の医薬組成物は、経口摂取のために、または眼への局所投与のための軟膏もしくは点眼剤として、または適当な方法、たとえば、腹腔内、皮下、局所、皮内、吸入、肺内、直腸、膣、舌下、筋肉内、静脈内、動脈内、髄腔内もしくはリンパ液内のような非経口投与または他の投与のための所望の且つ有効な方法で投与されてもよい。さらに、本開示の医薬組成物は他の治療と併せて投与されてもよい。本開示の医薬組成物は所望であれば、カプセル化されてもよく、またはさもなければ、胃液もしくは他の分泌物から保護されてもよい。
【００９０】
本開示の医薬組成物は薬学上許容でき、且つ１以上の薬学上許容できるキャリア及び任意で１以上の他の薬剤、成分及び／または物質との混和物にて１以上の有効成分を含む。選択される投与の経路にかかわらず、本開示の作用物質／化合物は当業者に既知の従来の方法によって薬学上許容できる剤形に製剤化される。たとえば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  （２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．）を参照のこと。
【００９１】
薬学上許容できるキャリアは当該技術で周知であり（たとえば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，  Ｐａ．）及びＴｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．）を参照のこと）、それらには、糖類（たとえば、ラクトース、スクロース、マンニトール、及びソルビトール）、デンプン、セルロース調製物、リン酸カルシウム（たとえば、リン酸二カルシウム、リン酸三カルシウム及びリン酸水素カルシウム）、クエン酸ナトリウム、水、水溶液（たとえば、生理食塩水、塩化ナトリウム注射液、リンガー注射液、デキストロース注射液、デキストロース及び塩化ナトリウム注射液、乳酸加リンガー注射液）、アルコール（たとえば、エチルアルコール、プロピルアルコール、及びベンジルアルコール）、ポリオール（たとえば、グリセロール、プロピレングリコール、及びポリエチレングリコール）、有機エステル（たとえば、オレイン酸エチル及びトリグリセリド）、生分解性ポリマー（たとえば、ポリラクチド−ポリグリセリド、ポリ（オルソエステル）、及びポリ（無水物））、エラストマーマトリクス、リポソーム、ミクロスフェア、油（たとえば、コーン、胚芽、オリーブ、キャスター、ゴマ、綿実、及びラッカセイ）、ココアバター、蝋状物質（たとえば、坐薬ワックス）、パラフィン、シリコーン、タルク、珪酸塩、等が挙げられる。本開示の医薬組成物で使用される薬学上許容できる各キャリアは、製剤の他の成分と相溶性である及び対象に対して有害ではないという意味で「許容でき」なければならない。選択される剤形及び投与の意図される経路に好適なキャリアは当該技術で周知であり、選択される剤形及び投与の方法についてに許容できるキャリアは当該技術の普通の技量を用いて決定することができる。
【００９２】
本開示の医薬組成物は任意で、そのような医薬組成物にて一般に使用される追加の成分及び／または物質を含有してもよい。それらの成分及び物質は当該技術で周知であり、それらには、（１）充填剤または増量剤、たとえば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、及びケイ酸；（２）結合剤、たとえば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、スクロース及びアラビアゴム；（３）保湿剤、たとえば、グリセロール；（４）崩壊剤、たとえば、寒天−寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカのデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、デンプングリコール酸ナトリウム、架橋したナトリウムカルボキシメチルセルロース及び炭酸ナトリウム；（５）溶解抑制剤、たとえば、パラフィン；（６）吸収加速剤、たとえば、四級アンモニウム化合物；（７）湿潤剤、たとえば、セチルアルコール及びモノステアリン酸グリセロール；（８）吸収剤、たとえば、カオリン及びベントナイト粘土；（９）潤滑剤、たとえば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、及びラウリル硫酸ナトリウム；（１０）懸濁剤、たとえば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微細結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天−寒天及びトラガカント；（１１）緩衝剤；（１２）賦形剤、たとえば、ラクトース、乳糖、ポリエチレングリコール、動物及び植物の脂肪、油、蝋状物質、パラフィン、ココアバター、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルク、サリチル酸塩、酸化亜鉛、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、及びポリアミド粉末；（１３）不活性希釈剤、たとえば、水または他の溶媒；（１４）保存剤；（１５）表面活性剤；（１６）分散剤；（１７）制御放出剤及び吸収遅延剤、たとえば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリクス、生分解性ポリマー、リポソーム、ミクロスフェア、モノステアリン酸アルミニウム、ゼラチン及び蝋状物質；（１８）乳白剤；（１９）アジュバント；（２０）湿潤剤；（２１）乳化剤及び懸濁剤；（２２）可溶化剤及び乳化剤、たとえば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１,３−ブチレングリコール、油（特に、綿実油、ラッカセイ油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、及びソルビタンの脂肪酸エステル；（２３）高圧ガス、たとえば、クロロフルオロ炭化水素及び揮発性非置換の炭化水素、たとえば、ブタン及びプロパン；（２４）抗酸化剤；（２５）製剤を意図されるレシピエントの血液と等張にする作用物質、たとえば、糖類及び塩化ナトリウム；（２６）増粘剤；（２７）コーティング物質、たとえば、レシチン；ならびに（２８）甘味剤、風味剤、着色剤、芳香剤及び保存剤が挙げられる。そのような成分または物質のそれぞ��は、製剤の他の成分と相溶性である及び対象に対して有害ではないという意味で「許容でき」なければならない。選択される剤形及び投与の意図される経路に好適な成分及び物質は当該技術で周知であり、選択される剤形及び投与の方法についてに許容できる成分及び物質は当該技術の普通の技量を用いて決定することができる。
【００９３】
経口投与に好適な医薬組成物は、カプセル剤、カシェ、丸薬、錠剤、粉剤、顆粒剤、水性または非水性の液体における溶液または懸濁液、水中油または油中水の液状エマルション、エリキシルまたはシロップ、トローチ、ボーラス、舐剤またはペーストの形態であってもよい。これらの製剤は当該技術で既知の方法によって、たとえば、従来のパンコーティング、混合、造粒または凍結乾燥のプロセスによって調製されてもよい。
【００９４】
経口投与用の固形剤形（カプセル剤、錠剤、丸薬、糖衣錠、粉剤、顆粒剤、等）は、たとえば、有効成分（複数可）を１以上の薬学上許容できるキャリア及び任意で１以上の充填剤、増量剤、結合剤、保湿剤、崩壊剤、溶解抑制剤、吸収加速剤、湿潤剤、吸収剤、潤滑剤及び／または着色剤と共に混合することによって調製されてもよい。類似の型の固形組成物は、好適な賦形剤を用いた軟質及び硬質の充填ゼラチンカプセル剤における充填剤として採用されてもよい。錠剤は、任意で１以上の補助成分と共に圧縮することまたは成形することによって作製されてもよい。好適な結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、保存剤、崩壊剤、表面活性剤または分散剤を用いて、圧縮された錠剤が調製されてもよい。成形された錠剤は好適な機械で成形することによって作製されてもよい。錠剤及び他の固形剤形、たとえば、糖衣錠、カプセル剤、丸薬及び顆粒剤は任意で、医薬製剤技術で周知のコーティング及びシェル、たとえば、腸溶コーティング及び他のコーティングと共に得られてもよいし、または調製されてもよい。それらはまた、その中の有効成分の緩慢な放出または制御された放出を提供するように製剤化されてもよい。それらは、たとえば、細菌保持フィルターを介した濾過によって無菌化されてもよい。これらの組成物は任意で乳白剤も含有してもよく、それらが任意で遅延する方法にて消化管の特定の部分で有効成分のみを、または有効成分を優先的に放出するような組成物のものであってもよい。有効成分はマイクロカプセル化された形態にあってもよい。
【００９５】
経口投与用の液体剤形には、薬学上許容できるエマルション、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップ及びエリキシルが含まれる。液体剤形は当該技術で一般に使用される好適な不活性希釈剤を含有してもよい。不活性希釈剤に加えて、経口組成物は補助剤、たとえば、湿潤剤、乳化剤及び懸濁剤、甘味剤、風味剤、着色剤、芳香剤及び保存剤も含んでもよい。懸濁液は懸濁剤を含有してもよい。
【００９６】
直腸投与用または膣投与用の医薬組成物は坐薬として提示されてもよく、それは１以上の有効成分（複数可）を、室温では固体であるが、体温では液体であるので直腸または膣腔では溶解し、活性化合物を放出する１以上の好適な非刺激性キャリアと共に混合することによって調製されてもよい。膣投与に好適である医薬組成物には、当該技術で適当であることが知られているような薬学上許容できるキャリアを含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、ペースト、泡状または噴霧の製剤が挙げられる。
【００９７】
局所投与用または経皮投与用の剤形には、粉剤、噴霧剤、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ジェル、溶液、貼付剤、点滴剤及び吸入剤が挙げられる。活性剤（複数可）／活性化合物（複数可）は無菌条件下で好適な薬学上許容できるキャリアと共に混合されてもよい。軟膏、ペースト、クリーム及びジェルは賦形剤を含有してもよい。粉剤及び噴霧剤は賦形剤及び高圧ガスを含有してもよい。
【００９８】
非経口投与に好適な医薬組成物は、１以上の薬学上許容できる無菌等張の水溶液または非水性溶液、分散液、懸濁液またはエマルション、または使用直前に無菌の注射用の溶液もしくは分散液に再構成されてもよい無菌の粉末との組み合わせで１以上の作用物質（複数可）／化合物（複数可）を含み、それは、好適な抗酸化剤、緩衝液、製剤を意図されるレシピエントの血液と等張にする溶質、または懸濁剤または増粘剤を含有してもよい。たとえば、コーティング物質の使用によって、分散液の場合、必要とされる粒度の維持によって、及び界面活性剤の使用によって適正な流動性を維持することができる。これらの組成物は好適な補助剤、たとえば、湿潤剤、乳化剤及び分散剤も含有してもよい。等張剤を含めることも望ましくてもよい。加えて、吸収を遅延させる作用物質の包含によって注射用医薬形態の延長された吸収がもたらされてもよい。
【００９９】
場合によっては、薬剤（たとえば、医薬製剤）の効果を延長するために、皮下注射または筋肉内注射からのその吸収を減速することが望ましい。これは、乏しい水溶性を有する結晶性または非晶質の物質の液状懸濁液の使用によって達成されてもよい。
【０１００】
活性剤／薬剤の吸収の速度はその後、溶解のその速度に左右され、次にそれは結晶のサイズ及び結晶形態に左右されてもよい。あるいは、非経口で投与された作用物質／薬剤の遅延した吸収は活性剤／薬剤を油性溶剤に溶解することまたは懸濁することによって達成されてもよい。生分解性ポリマーにて有効成分のマイクロカプセルマトリクスを形成することによって注射用デポー形態が作製されれもよい。有効成分のポリマーに対する比率及び採用される特定のポリマーの性質に応じて、有効成分放出の速度を制御することができる。体組織に適合するリポソームまたはマイクロエマルションに薬剤を捕捉することによってもデポー注射用製剤が調製されてもよい。たとえば、細菌保持フィルターを介した濾過によって注射用物質を無菌化することができる。
【０１０１】
製剤は、単位用量または複数回用量の密封された容器、たとえば、アンプル及びバイアルで提示されてもよく、使用直前に無菌液体キャリア、たとえば、注射用水の添加のみを必要とする凍結乾燥状態で保存されてもよい。即時注射の溶液及び懸濁液は上記に記載されている種類の無菌の粉末、顆粒及び錠剤から調製されてもよい。
【０１０２】
「核酸」、または「オリゴヌクレオチド」または「ポリヌクレオチド」は本明細書で使用されるとき、一緒に共有結合した少なくとも２つのヌクレオチドを意味する。核酸の多数の変異体が所与の核酸のとして同じ目的で使用されてもよい。従って、核酸はまた、実質的に同一の核酸及びその相補体も包含する。
【０１０３】
核酸は一本鎖もしくは二本鎖であってもよく、または二本鎖及び一本鎖の配列双方の一部を含有してもよい。核酸は、ＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ及びｃＤＮＡの双方、ＲＮＡまたはハイブリットであってもよく、その際、核酸は、デオキシリボヌクレオチドとリボヌクレオチドの組み合わせ、及びウラシル、アデニン、チミン、シトシン、グアニン、イノシン、キサンチン、ヒポキサンチン、イソシトシン及びイソグアニンを含む塩基の組み合わせを含有してもよい。核酸は一本鎖分子として合成されてもよく、または合成遺伝子を用いて細胞（試験管内または生体内）で発現させてもよい。核酸は、化学合成法によって、または組換え法によって得られてもよい。
【０１０４】
核酸は、ＲＮＡ、たとえば、米国特許出願番号１１／４２９，７２０、１１／３８４，０４９、１１／４１８，８７０、及び１１／４２９，７２０及び公開された国際出願番号ＷＯ２００５／１１６２５０及びＷＯ２００６／１２６０４０に記載されているようなｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、短いヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、短い干渉ＲＮＡ（ｓＲＮＡ）、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、転写遺伝子スプライシングＲＮＡ（ｐｔｇｓＲＮＡ）、Ｐｉｗｉ−相互作用ＲＮＡ、プリ−ｍｉＲＮＡ、プレ−ｍｉＲＮＡ、マイクロ−ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、または抗−ｍｉＲＮＡであってもよい。
【０１０５】
ｓｉＲＮＡ遺伝子ターゲティングは細胞への一時的なｓｉＲＮＡの移動によって実施されてもよく、脂質が介在する形質移入としてのそのような従来の方法（たとえば、リポソームへの被包、カチオン性脂質、コレステロール及び／または縮合ポリマーとの複合体形成、エレクトロポレーションまたは微量注入）によって達成されてもよい。ｓｉＲＮＡ遺伝子ターゲティングはまた、抗体とコンジュゲートされたｓｉＲＮＡの投与によって、またはｓｉＲＮＡに結合する二本鎖（ｄｓ）ＲＮＡ結合ドメイン（ＤＲＢＤ）にコンジュゲートされた細胞浸透ペプチドを含む融合タンパク質と複合体形成したｓｉＲＮＡの投与によって実施されてもよい（たとえば、米国特許出願公開番号２００９／００９３０２６を参照のこと）。
【０１０６】
ｓｈＲＮＡ分子は互いに逆相補性である２つの配列領域を有し、分子内のやり方で互いで二本鎖を形成することができる。ｓｈＲＮＡ遺伝子ターゲティングは、細胞に導入されたベクター、たとえば、ウイルスベクター（たとえば、レンチウイルスベクター、アデノウィルスベクター、またはアデノ随伴ウイルスベクター）を用いて実施されてもよい。ｓｉＲＮＡ分子及びｓｈＲＮＡ分子の設計及び合成は当該技術で既知であり、且つ、たとえば、Ｇｅｎｅ  Ｌｉｎｋ（Ｈａｗｔｈｏｒｎｅ，Ｎ．Ｙ．）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐ．（Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ．）、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、及びＤｈａｒｍａｃｏｎ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｌａｆａｙｅｔｔｅ，Ｃｏｌｏ．）から商業的に購入されてもよい。
【０１０７】
核酸はアプタマー、イントラマーまたはスピエゲルマーであってもよい。用語「アプタマー」は特定の分子標的に結合する核酸またはオリゴヌクレオチドを指す。アプタマーは、大きな組み合わせライブラリから標的特異的なアプタマー配列を選択する試験管内の進化過程（たとえば、米国特許第５，２７０，１６３号で開示されているＳＥＬＥＸ（指数関数的濃縮によるリガンドの系統的進化）に由来する。アプタマー組成物は二本鎖または一本鎖であってもよく、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、ヌクレオチド誘導体または他のヌクレオチド様分子を含んでもよい。アプタマーのヌクレオチド成分は修飾された糖基（たとえば、リボヌクレオチドの２’−ＯＨ基は２’−Ｆまたは２’−ＮＨ２によって置き換えられてもよい）を有してもよく、それは所望の特性、たとえば、ヌクレアーゼに対する耐性または血中での長い寿命を改善してもよい。アプタマーは他の分子、たとえば、高分子量キャリアにコンジュゲートされて循環系からのアプタマーのクリアランスを減速してもよい。アプタマーは、たとえば、架橋剤の光活性化によってその同族のリガンドに特異的に架橋されてもよい。
【０１０８】
用語「イントラマー」は生体内で発現されるアプタマーを指す。たとえば、ワクシニアウイルスに基づくＲＮＡ発現系は、白血球の細胞質で特定のＲＮＡアプタマーを高レベルで発現させるのに使用されている。
【０１０９】
用語「スピエゲルマー」はＬ−ＤＮＡ、Ｌ−ＲＮＡまたは他の左巻きのヌクレオチド誘導体またはヌクレオチド様分子を含むアプタマーを指す。左巻きのヌクレオチドを含有するアプタマーは、右巻きのヌクレオチドを含有する基質で正常に作用する天然に存在する酵素による分解に耐性である。
【０１１０】
少なくとも１つの異なる結合、たとえば、ホスホルアミデート結合、ホスホロチオエート結合、ホスホロチジオエート結合、またはＯ−メチルホスホロアミダイト結合及びペプチド核酸の主鎖と結合を有してもよい核酸類似体が含まれてもよいが、核酸は一般にホスホジエステル結合を含有するであろう。他の類似体核酸には、米国特許第５，２３５，０３３号及び同第５，０３４，５０６号で開示されているものを含めて、正の主鎖、非イオン性の主鎖、及び非リボース主鎖を持つものが挙げられる。１以上の天然に存在しないまたは修飾されたヌクレオチドを含有する核酸も核酸の定義の範囲内に含まれる。修飾されたヌクレオチド類似体は、たとえば、核酸分子の５’末端及び／または３’末端に位置してもよい。ヌクレオチド類似体の代表例は糖が修飾されたまたは主鎖が修飾されたリボヌクレオチドから選択されてもよい。しかしながら、核酸塩基が修飾されたリボヌクレオチド、すなわち、天然に存在する核酸塩基の代わりに天然に存在しない核酸塩基を含有するリボヌクレオチド、たとえば、５位で修飾されたウリジンまたはシチジン、たとえば、５−（２−アミノ）プロピルウリジン、５−ブロモウリジン；８位で修飾されたアデノシン及びグアノシン、たとえば、８−ブロモグアノシン；デアザヌクレオチド、たとえば、７−デアザアデノシン；Ｏ−及びＮ−アルキル化ヌクレオチド、たとえば、Ｎ６−メチルアデノシンも好適であることが言及されるべきである。２’−ＯＨ基は、Ｈ、ＯＲ、Ｒ、ハロ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲ２またはＣＮから選択される基によって置き換えられてもよく、その際、ＲはＣ１−Ｃ６アルキル、アルケニルまたはアルキニルであり、ハロはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。修飾されたヌクレオチドは、Ｋｒｕｔｚｆｅｌｄｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，（Ｏｃｔ．３０，２００５），Ｓｏｕｔｓｃｈｅｋ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，４３２：１７３−１７８（２００４），及び米国特許出願公開番号２００５０１０７３２５で開示されているような、たとえば、ヒドロキシプロリノール結合を介してコレステロールにコンジュゲートされたヌクレオチドも含む。修飾されたヌクレオチド及び核酸は米国特許出願公開番号２００２０１１５０８０で開示されているようなロックド核酸（ＬＮＡ）も含んでもよい。追加の修飾されたヌクレオチド及び核酸は米国特許出願公開番号２００５０１８２００５で開示されている。リボース・リン酸主鎖の修飾は種々の理由で行われて、たとえば、生理的環境にてそのような分子の安定性及び半減期を高めてもよく、細胞膜を横切る拡散を増強してもよく、バイオチップのプローブとしてもよい。天然に存在する核酸と類似体の混合物を作製してもよく、あるいは、様々な核酸類似体の混合物、及び天然に存在する核酸と類似体の混合物を作製してもよい。
【０１１１】
本明細書で使用されるとき、用語「ペプチド」、「ポリペプチド」及び「タンパク質」は相互交換可能である。本開示では、これらの用語はアミノ酸の連結された配列を意味し、それは天然、合成、または修飾、または天然と合成の組み合わせであってもよい。その用語には、抗体、抗体模倣体、ドメイン抗体、リポカリン、標的とされたプロテアーゼ、及びポリペプチド模倣体が含まれる。その用語にはまた、ペプチドまたはペプチド断片に対する抗体を生じるように意図されるペプチドまたはペプチド断片を含有するワクチンも含まれる。
【０１１２】
本明細書で使用されるとき、用語「多糖類」は、グリコシド結合によって一緒に連結された反復単位（単糖類または二糖類のいずれか）から形成される高分子糖質構造を意味する。単糖類または二糖類の単位は同一であってもよいし、または異なっていてもよい。多糖類の非限定例には、デンプン、グリコーゲン、セルロース及びキチンが挙げられる。
【０１１３】
本明細書で使用されるとき、用語「有機小分子」または「無機小分子」には、生物過程に影響を及ぼすように作用することができる、多糖類、ポリペプチド及び核酸以外の化学的部分または他の部分が含まれる。小分子には、現在知られ、且つ使用されている多数の治療剤を挙げることができ、それは生物機能（複数可）についてのスクリーニングの目的でそのような分子のライブラリで合成することができる。小分子はサイズで高分子とは区別される。本開示の小分子は普通、約５，０００ダルトン（Ｄａ）未満、好ましくは約２，５００Ｄａ未満、さらに好ましくは１，０００Ｄａ未満、最も好ましくは約５００Ｄａ未満の分子量を有する。
【０１１４】
本明細書で使用されるとき、用語「有機化合物」は、たとえば、核酸、ポリペプチド及び多糖類のような生物製剤以外の炭素に基づく化合物を指す。炭素に加えて、有機化合物はカルシウム、塩素、フッ素、銅、水素、鉄、カリウム、窒素、酸素、イオウ及び他の元素を含有してもよい。有機化合物は芳香族の形態または脂肪族の形態であってもよい。有機化合物はの非限定例には、アセトン、アルコール、アニリン、炭水化物、単糖類、二糖類、アミノ酸、ヌクレオシド、ヌクレオチド、脂質、レチノイド、ステロイド、プロテオグリカン、ケトン、アルデヒド、飽和、不飽和及びポリ不飽和の脂肪、油及び蝋状物質、アルケン、エステル、エーテル、チオール、スルフィド、環状化合物、複素環化合物、イミダゾール及びフェノールが挙げられる。有機化合物には本明細書で使用されるとき、ニトロ化有機化合物及びハロゲン化（塩素化）有機化合物が挙げられる。本開示に従て同定される小分子の収集、及び小分子は、たとえば、加速器質量分析法（ＡＭＳ）のような技法によって特徴づけられる。
【０１１５】
好まれる小分子は、相対的に簡単であり、安価に製造され、製剤化され、さもなければ調製される。好まれる小分子は種々の保存条件下で安定である。好まれる小分子は高分子と強力に会合して、生物活性があり、改善された医薬特性を有する分子を形成してもよい。改善された医薬特性には、所望の生物活性に有利である循環時間、分布、代謝、修飾、排泄、分泌、消失及び安定性での変化が挙げられる。改善された医薬特性には、化学実体の毒性特性及び有効性特性の変化が挙げられる。
【０１１６】
態様では、及び本明細書に記載されているように、ＰＩ３Ｋγ及びＰＩ３Ｋδは、その合わせた欠失がマウスにて腫瘍の発達を有意に損傷したので、ＰＴＥＮヌルＴ−ＡＬＬにおける腫瘍形成のボトルネックとして作用することができる。記載はさらに、（１）病んだマウスの腫瘍量を有意に低下させ、生存を延長した、且つ（２）ヒト初代Ｔ−ＡＬＬ細胞にてＡｋｔのリン酸化を止め、アポトーシス促進経路を活性化した先導する二重ＰＩ３Ｋγ／δ阻害剤（ＣＡＬ−１３０）を特定することによってこのＰＩ３Ｋの「渇望」を活用することが可能であることを実証している。本開示はさらに、ＰＩ３Ｋγ／δの合わせた活性に対するＰＴＥＮヌルＴ−ＡＬＬの依存を実証している。
【０１１７】
これは、薬剤処理の効果を評価するために遺伝子発現特性を生成することによっても達成された。全般的遺伝子発現プロファイルは、転写因子ＬＭＯ２の過剰発現によって推進されるマウスＰＴＥＮヌル／ＮＯＴＣＨ活性化Ｔ−ＡＬＬ細胞株を用いて３つ組で得られた。このモデルでは、腫瘍細胞はその双方がヒトＴ-ＡＬＬでは上方調節されるＰＩ３Ｋ経路及びＮＯＴＣＨ１の活性化を特徴とする。腫瘍細胞は、ＣＡＬ−１３０（２．５μＭ）またはガンマセクレターゼ阻害剤（ＧＳＩ）化合物Ｅ（１μＭ）の存在下で培養された。化合物Ｅは、Ｔ-ＡＬＬの腫瘍の形成、増殖及び生存を支えるとも考えられているＮＯＴＣＨ１の活性を遮断する。細胞増殖、代謝及び生存の主要な調節因子である癌原遺伝子ｃＭｙｃの発現に影響を及ぼすことが知られている時点（それぞれ１２時間及び４８時間）で、薬剤処理した細胞を回収した。カットオフとして０．０００５の偽発見率（ＦＤＲ）を用いてＰＩ３Ｋγ／δの遮断（赤丸）またはＧＳＩ（緑丸）のいずれかによって変化した遺伝子での重複を説明するベン図を作り出した（図１）。注目すべきは、ＧＳＩ単剤療法によって変化した遺伝子の大半（約６２％）を含む１０倍多い遺伝子がＰＩ３Ｋγ／δの遮断に続いて影響を受け、高度に有意な知見だった（Ｆｉｓｈｅｒの抽出検定、ｐ＜２．２×１０−１６）。
【０１１８】
野生型のマウス胸腺細胞と比べたＴ−ＡＬＬ試料における差別的発現に基づいて遺伝子すべてを順位付けすることによってマウスのＴ−ＡＬＬ疾患特性をさらに定義した。ＰＩ３Ｋγ／δ及びＮＯＴＣＨ１の疾患特性全体に対する寄与を判定するために、差別的に発現された遺伝子におけるＣＡＬ−１３０または化合物Ｅによる処理に続いて、２００の転写上最も活性化された及び抑制された遺伝子の遺伝子セット濃縮解析（ＧＳＥＡ）を行った。双方の薬剤はＴ−ＡＬＬ疾患特性を有意に好転したが、白血病の表現型を維持することにおけるこれらのシグナル伝達経路の重要性を強調して（図１Ｂ）、濃縮は、化合物Ｅについての−２．６のＮＥＳ（基準化した濃縮スコア）（Ｐ＝０．００６）に対してＣＡＬ−１３０についての−５．８（ｐ＜０．０００１）のＣＡＬ−１３０のＮＥＳではるかに有意性が大きかった。これらの結果は、ＰＩ３Ｋγ／δがＴ−ＡＬＬにて主要な役割を担い、この白血病に関連する主要な癌遺伝子であると考えられたＮＯＴＣＨ１よりも疾患特性を制御する多くの遺伝子を調節していることを示している。
【０１１９】
ＰＩ３Ｋ阻害剤であるデュベリシブ（ＩＰＩ−１４５）はＴ−ＡＬＬマウスの腫瘍量を減らすことまたは生存全体を延ばすことで有効ではなかった（図１Ｂを参照；４５日（ＣＡＬ−１３０：１０ｍｇ／ｋｇでｔｉｄに対して１８日（ＩＰＩ−１４５：３０ｍｇ／ｋｇでｔｉｄ）の平均生存）。
【０１２０】
培養されたＴ−ＡＬＬ細胞を殺傷する能力についてアッセイすると、請求されている化合物は広い範囲の効力を示すことが見いだされている。一部の化合物はＣＡＬ−１３０よりもさらに高い活性を示した（たとえば、マイクロモル濃度ではなくナノモル濃度で殺傷する）し、悪性のまたは再発したＴ−ＡＬＬのために治療に開発される潜在性を有してもよい。
【０１２１】
多様なＰＩ３Ｋγ／δ阻害剤のこのコホートはＴ−ＡＬＬと同様に異常なＰＩ３Ｋ活性に関連する他の疾患のような癌の治療に開発される潜在性を有する。これらの化合物はさらに、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔシグナル伝達研究におけるＰＩ３Ｋγ／δ活性を阻害するための、と同様に研究のための種々の濃度で細胞死を誘導するための有望なツールとして役立つ。
【０１２２】
小分子ＰＩ３Ｋγ／δ二重阻害剤のさらなる最適化を行った。図５Ａにて説明しているように、ＣＡＬ−１３０の構造は４つの主要な領域：領域Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤに細分することができる。ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３及びＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４はＴ−ＡＬＬの細胞死を誘導することにおいてＣＡＬ−１３０よりも大きな有効性を示す。領域Ａでは、フェニル環は様々な置換基、たとえば、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ３、ＯＣＨ３を含む。
【０１２３】
一部の類似体では、フェニル環は、たとえば、ピリジン、ピリミジン、チオフェンのようなヘテロアリール基で置き換えることができる。領域Ｂでは、窒素（Ｘ＝Ｎ）がＣＨ基（Ｘ＝ＣＨ）で置き換えられる。領域Ｃでは、領域Ａに類似して、一部の類似体ではフェニル環は多数の様々な置換基を持つことができ、または様々な置換パターンを有することができる。領域Ｄでは、たとえば、図５Ａで一覧表にされたものが導入される。図５Ｂは、領域Ａにてフェニル基の代わりにチオフェンを持ち、領域Ｂにてピリミジノン環における窒素の代わりにＣＨ基を持ち、領域Ｃにて非置換のフェニル環を持ち、領域Ｄにてピリミジン環を持つ類似体の合成の例を提示する。
【０１２４】
本開示の一実施形態では、リンパ系悪性腫瘍の影響を治療する、予防するまたは改善する方法である。この方法は、それを必要とする対象に有効量のＰＩ３Ｋδ阻害剤及びＰＩ３Ｋγ阻害剤を投与することを含む。
【０１２５】
本明細書で使用されるとき、「対象」は哺乳類、好ましくはヒトである。ヒトに加えて、本開示の範囲内での哺乳類のカテゴリーには、たとえば、農業用動物、家畜、実験動物、等が含まれる。農業用動物の一部の例には、ウシ、ブタ、ウマ、ヤギ、等が挙げられる。家畜の一部の例には、イヌ、ネコ、等が挙げられる。実験動物の一部の例には、ラット、マウス、ウサギ、モルモット、等が挙げられる。
【０１２６】
本明細書で使用されるとき、用語「治療する」、「治療」及びその文法的変形は、個々の対象を、その対象、たとえば、患者にて生理的応答または転帰を得ることが所望であるプロトコール、投薬計画、過程または療法の影響下におくことを意味する。特に、本開示の方法及び組成物を用いて、疾患の症状の発生を減速してもよく、または疾患もしくは状態の発症を遅延させてもよく、または疾患発生の進行を止めてもよい。しかしながら、治療されたあらゆる対象が特定の治療プロトコール、投薬計画、プロセスまたは治療薬に反応しなくてもよいわけではないので、治療することは所望の生理的反応または転帰が各対象及びあらゆる対象または対象、たとえば、患者、集団で達成されることを必要としない。従って、所与の対象または対象、たとえば、患者、集団は治療に反応できなくてもよいし、または不適切に反応してもよい。
【０１２７】
本明細書で使用されるとき、用語「改善する」、「改善すること」及びその文法的変形は対象にて疾患の症状の重症度を減らすことを意味する。
【０１２８】
本明細書で使用されるとき、用語「予防する」、「予防すること」及びその文法的変形は、投与の時点で疾患または状態を有すると診断されていないが、疾患もしくは状態を発症すると予想され得るまたは疾患もしくは状態の高いリスクがあり得る対象に本開示の化合物または組成物を投与することを意味する。予防することには、年齢、家族歴、遺伝子異常または染色体異常のせいで、疾患または状態についての１以上の生体マーカーの存在のせいで、及び／または環境因子のせいで、疾患または状態に罹り易い素因があると考えられる対象への本開示の少なくとも１つの化合物または組成物の投与も含まれる。
【０１２９】
本明細書で使用されるとき、「生物製剤」は、生物に由来し、もしくは生物によって生産され、または生体内に由来する作用物質もしくはその誘導体もしくはその産物を模倣するように合成される物質を意味する。生物製剤は、たとえば、核酸、ポリペプチドまたは多糖類であってもよい。好ましくは、生物製剤は核酸、タンパク質またはそれらの組み合わせである。さらに好ましくは、核酸はｓｈＲＮＡを含む。
【０１３０】
本明細書で使用されるとき、「化学物質」は明確な化学組成と生物製剤ではない特有の性質とを有する物質を意味する。化学物質の非限定例には小型有機化合物及び小型無機化合物が挙げられる。
【０１３１】
以下の実施例は本開示の特定の態様を説明するのに役立ち、本開示を限定するように意図するものではない。
【実施例】
【０１３２】
実施例は他のＰＩ３Ｋγ／δ阻害剤を超える改善された特性を示す代表的な化合物に関する。たとえば、表Ｉ、ＩＩ及びＩＩＩに記載されている化合物は他のＰＩ３Ｋγ／δ阻害剤と比べて優れた生物学的効果を示す。たとえば、図４に記載されているように、たとえば、Ｉ−５０、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−１、−２、−３、−４、−５、−６、及び−７、且つ、特にＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−５、−６、及び−７のような化合物は良好な薬物動態を有し、腫瘍細胞生存で同様の減少を達成するのにＣＡＬ−１３０と比べて約１０倍未満が必要とされてもよい。本明細書に記載されている化合物は、たとえば、これら２つのｐ１１０アイソフォームを欠いているＴ−ＡＬＬ細胞株の処理が限定された細胞殺傷を生じるので、ＰＩ３Ｋγ及びＰＩ３Ｋδのｐ１１０触媒ドメインに対して選択性であるとも思われる。
【０１３３】
実施例１：ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−１
【化１７】
2020529418.tif 000027
工程１：２−メチル−６−ニトロ−Ｎ−（ｏ−トリル）ベンズアミドの合成
２−メチル−６−ニトロ安息香酸（４．０ｇ，２２．０ミリモル）とトルエン（２０ｍＬ）と塩化チオニル（ＳＯＣｌ２）（１０ｇ，８４ミリモル）との混合物を還流にて２時間加熱した。次いで反応物を４５℃で減圧下にて濃縮し、得られた酸塩化物にＴＨＦ（３０ｍＬ）を加えた。氷／水槽にて冷却しながら、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０ｍＬ）とｏ−トルイジン（２．４ｇ，２２．４ミリモル）とを加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで混合物を減圧下で濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に溶解した。この溶液を１ＮのＨＣｌ（２×２０ｍＬ）及びＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２×２０ｍＬ）で洗浄し、真空で濃縮して白っぽい固形物として２−メチル−６−ニトロ−Ｎ−（ｏ−トリル）ベンズアミド（５．９４ｇ，収率：１００％）を得た。
【０１３４】
工程２：塩化２−メチル−６−ニトロ−Ｎ−（ｏ−トリル）ベンズイミドイルの合成
２−メチル−６−ニトロ−Ｎ−（ｏ−トリル）ベンズアミド（３．０ｇ，１１ミリモル）とトルエン（２０ｍＬ）と塩化チオニル（６．０ｍＬ）とＤＭＦ（４０μＬ）との混合物を２．５時間還流した。得られた溶液を４５℃で減圧下にて濃縮し、黄色の油として粗生成物を得た（３．０８ｇ、さらに精製することなく使用した）。
【０１３５】
工程３：（Ｓ）−（１−（２−メチル−６−ニトロ−Ｎ−（ｏ−トリルベンズアミド）−１−オキソプロパン−２−ｙｌ）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
工程２で調製した粗生成物（３．０８ｇ）（塩化２−メチル−６−ニトロ−Ｎ−（ｏ−トリル）ベンズイミドイル）をＣＨ２Ｃｌ２（８．０ｍＬ）に溶解し、０〜５℃にてＢｏｃ−Ｌ−アラニン（１．９ｇ，１７．４ミリモル）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３ｍＬ）とのＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）溶液に加えた。反応混合物をこの温度で１時間撹拌し、次いで室温に一晩温めた。得られた溶液を１０％のクエン酸水溶液（２×１５ｍＬ）で洗浄し、その後、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、真空で濃縮した。ヘキサン中２０％の酢酸エチルで溶出するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによる精製によって固形物として所望の生成物（３．２２ｇ、収率：６７％）を得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４４２（Ｍ＋１）。
【０１３６】
工程４：（Ｓ）−（１−（５−メチル−４−オキソ−３−（ｏ−トリル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−２−イル）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
酢酸（３０ｍＬ）における亜鉛粉末（４．８ｇ）と（Ｓ）−（１−（２−メチル−６−ニトロ−Ｎ−（ｏ−トリルベンズアミド）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．２２ｇ，７．３ミリモル，工程３で調製した）との懸濁液を室温で４時間撹拌した。混合物を真空で濃縮し、得られた残留物をＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）に溶解した。溶液をＮａＨＣＯ３（２×１０ｍＬ）飽和水溶液で洗浄し、真空で濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィー（ヘキサン中２０％の酢酸エチル）によって残留物を精製し、白色固形物として生成物を得た（８２２ｍｇ，収率２８．６％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝３９４（Ｍ＋１）。
【０１３７】
工程５：（Ｓ）−２−（１−アミノエチル）−５−メチル−３−（ｏ−トリル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オンの合成
（Ｓ）−（１−（５−メチル−４−オキソ−３−（ｏ−トリル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−２−イル）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８２２ｍｇ，２．１ミリモル，工程４で調製した）とトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）とのＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）における混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空で濃縮し、ＴＦＡ塩（８４２ｍｇ）として１００％の収率で生成物を提供した。ＭＳ：ｍ／ｚ＝２９４（Ｍ＋１）。
【０１３８】
工程６： （Ｓ）−２，４−ジアミノ−６−（（１−（５−メチル−４−オキソ−３−（ｏ−トリル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−２−イル）エチル）アミノ）ピリミジン−５−カルボニトリル（ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−１）の合成
（Ｓ）−２−（１−アミノエチル）−５−メチル−３−（ｏ−トリル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン（１２ｍｇ，０．４ミリモル，工程５で調製した）と２，４−ジアミノ−６−クロロピリミジン−５−カルボニトリル（１０ｍｇ，０．０３４ミリモル）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ）とフッ化カリウム（１８ｍｇ）とのＤＭＳＯ（１ｍＬ）における混合物を９０℃で一晩加熱した。反応混合物を室温に冷却し、混合物に、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を加えた。溶液を蒸留水（３×５ｍＬ）、１ＮのＨＣｌ（水溶液）及びＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２×５ｍＬ）で洗浄した。真空で溶媒を蒸発させ、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ２０：１）によって粗生成物を精製して白色固形物として所望の生成物、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−１を提供した（４．８ｍｇ，収率：３３％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４２７（Ｍ＋１）。
【０１３９】
実施例２：ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−２
【化１８】
2020529418.tif 000028
（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−６−（（１−（５−メチル−４−オキソ−３−（ｏ−トリル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−２−イル）エチル）アミノ）ピリミジン−５−カルボニトリル（ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−２）の合成
（Ｓ）−２−（１−アミノエチル）−５−メチル−３−（ｏ−トリル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン（１３３ｍｇ，０．４５ミリモル）と２−アミノ−４−クロロ−６−メチルピリミジン−５−カルボニトリル（８６ｍｇ，０．５１ミリモル）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２ｍＬ）とフッ化カリウム（９６ｍｇ）とのＤＭＳＯ（５ｍＬ）における混合物を９０℃で一晩加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を加えた。溶液をＨ２Ｏ（３×５ｍＬ）、１ＮのＨＣｌ（水溶液）、及びＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２×５ｍＬ）で洗浄し、その後真空で濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ２０：１）によって粗生成物を精製し、白色固形物として所望の生成物、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−２を提供した（１１５ｍｇ，６０％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４２６（Ｍ＋１）。
【０１４０】
実施例３：ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３
【化１９】
2020529418.tif 000029
（Ｓ）−２，４−ジアミノ−６−（（１−（８−クロロ−１−オキソ−２−フェニル−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチル）アミノ）ピリミジン−５−カルボニトリル（ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３）の合成
（Ｓ）−３−（１−アミノエチル）−８−クロロ−２−フェニルイソキノリン−１（２Ｈ）−オン（２３ｍｇ，０．０７７ミリモル）と２，４−ジアミノ−６−クロロピリミジン−５−カルボニトリル（１３ｍｇ，０．０８ミリモル）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ）とフッ化カリウム（２１ｍｇ）とのＤＭＳＯ（１ｍＬ）における混合物を９０℃で一晩加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を加えた。溶液をＨ２Ｏ（３×５ｍＬ）で洗浄し、真空で濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ２０：１）によって粗生成物を精製し、白色固形物として所望の生成物、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３を提供した（２３ｍｇ，収率７０％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３２（Ｍ＋１）。
【０１４１】
実施例４：ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４
【化２０】
2020529418.tif 000030
（Ｓ）−２−アミノ−４−（（１−（８−クロロ−１−オキソ−２−フェニル−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチル）アミノ）−６−メチルピリミジン−５−カルボニトリル（ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４）の合成
（Ｓ）−３−（１−アミノエチル）−８−クロロ−２−フェニルイソキノリン−１（２Ｈ）−オン（２３ｍｇ，０．０７７ミリモル）と２−アミノ−４−クロロ−６−メチルピリミジン−５−カルボニトリル（１３ｍｇ，０．０８ミリモル）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ）とフッ化カリウム（２１ｍｇ）とのＤＭＳＯ（１ｍＬ）における混合物を９０℃で一晩加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を加えた。溶液をＨ２Ｏ（３×５ｍＬ）で洗浄し、真空で濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ２０：１）によって粗生成物を精製し、白色固形物として所望の生成物、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４を提供した（３０ｍｇ，９１％収率）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３１（Ｍ＋１）。
【０１４２】
実施例５：ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−５
【化２１】
2020529418.tif 000031
１−（８−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソクロメン−３−イル）エチルカルバミン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチルの合成
２−クロロ−６−メチル安息香酸（０．８ｇ，４．７ミリモル）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液にｎ−ヘキシルリチウム（８．８ｍＬ，２．３Ｍ，２０．２ミリモル）をゆっくり加え、混合物を−２０℃で２０分間撹拌した。別のフラスコにて、１−（メトキシ（メチル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イルカルバミン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１．４ｇ，６．１ミリモル）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液にｉＰｒＭｇＣｌ（６．３３ｍＬ，２Ｍ）を加え、混合物を−１０℃で２０分間撹拌した。得られた混合物を−２０℃にてカニューレを介して上記フラスコに移した。得られた混合物を室温にゆっくり加熱し、室温を１．５時間保持した。水で反応を止め、２ＮのＨＣｌ（水溶液）で酸性化し、酢酸エチルで抽出した（３×５０ｍＬ）。真空で有機層を乾燥させ、濃縮した。ＤＣＭ中１０％のメタノールによるカラムクロマトグラフィーによって所望の生成物を提供した。生成物を無水酢酸（１０ｍＬ）に溶解し、ＤＭＡＰ（１０ｍｇ）をその溶液に加えた。反応混合物を７０℃で２時間保持した。溶媒を真空で取り除き、ヘキサン中２５％の酢酸エチルによるカラムクロマトグラフィーによって粗生成物を精製し、１−（８−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソクロメン−３−イル）エチルカルバミン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１．３ｇ，８６％）を提供した。
【０１４３】
【化２２】
2020529418.tif 000032
（Ｓ）−（４−（３−クロロ−２−（（３，５−ジフルオロフェニル）カルバモイル）フェニル）−３−オキソブタン−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
１−（８−クロロ−１−オキソ−１Ｈ−イソクロメン−３−イル）エチルカルバミン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１．１７ｇ，３．６２ミリモル）のＤＣＭ（２５ｍＬ）溶液を３，５−ジフルオロアニリン（２．３３ｇ，１８．１ミリモル）とトリメチルアルミニウム（９．０５ｍＬ，２Ｍ，１８．１ミリモル）とのＤＣＭ（２５ｍＬ）溶液にゆっくり加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌し、Ｒｏｃｈｅｌｌｅ塩によって反応をゆっくり止めた。有機相を乾燥させ、真空で濃縮し、ＤＣＭ中０〜１０％のメタノールによるカラムクロマトグラフィーによって精製し、生成物（１．５３ｇ、９３．５％）を提供した。
【０１４４】
【化２３】
2020529418.tif 000033
（Ｓ）−２，４−ジアミノ−６−（１−（８−クロロ−２−（３，５−ジフルオロフェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチルアミノ）ピリミジン−５−カルボニトリル（ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−５）の合成
４−（３−クロロ−２−（３，５−ジフルオロフェニルカルバモイル）フェニル）−３−オキソブタン−２−イルカルバミン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（５１ｍｇ，０．１１ミリモル）のＤＣＭ（３ｍＬ）溶液にジオキサン（３ｍＬ）中４ＮのＨＣｌを加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を取り除き、粗生成物をＤＭＳＯ（１．２ｍＬ）に溶解した。溶液に２，４−ジアミノ−６−クロロピリミジン−５−カルボニトリル（２３ｍｇ）及びＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ）を加えた。得られた混合物を１２５℃で一晩撹拌した。真空で溶媒を蒸発させ、ＤＣＭ中１２％のメタノールによる分取ＴＬＣによって粗生成物を精製し、所望の生成物、（Ｓ）−２，４−ジアミノ−６−（１−（８−クロロ−２−（３，５−ジフルオロフェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチルアミノ）ピリミジン−５−カルボニトリル（ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−５）（８．７ｍｇ，１６．５％）を提供した。
【０１４５】
実施例６：ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−６
【化２４】
2020529418.tif 000034
工程１：２−クロロ−Ｎ−（３−フルオロフェニル）−６−メチルベンズアミドの合成
２−クロロ−６−メチル安息香酸（７．５ｇ，４４ミリモル）と塩化チオニル（３０ｍＬ）との混合物を７０℃で３時間加熱し、４５℃にて減圧下で濃縮した。得られた酸塩化物をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解し、３−フルオロアニリン（８．３ｇ，７４．８ミリモル）及びトリメチルアミン（７．５ｍＬ）と混合した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次いで減圧下で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）に溶解した。溶液を２ＮのＨＣｌ（水溶液）（２×２０ｍＬ）及びＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２×２０ｍＬ）で洗浄し、真空で濃縮した。クロマトグラフィーによって生成物を精製し、白色固形物として２−クロロ−Ｎ−（３−フルオロフェニル）−６−メチルベンズアミド（１０．５ｇ，収率：１００％）を得た。
【０１４６】
工程２：（Ｓ）−（１−（８−クロロ−２−（３−フルオロフェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
−３０℃にてアルゴンのもとで撹拌された２−クロロ−Ｎ−（３−フルオロフェニル）−６−メチルベンズアミド（２．６３ｇ，１０ミリモル）の無水ＴＨＦ（６０ｍＬ）混合物に２．５Ｍのｎ−ブチルリチウムのヘキサン（２．６ｍＬ，２．５当量）溶液を３０分間かけて一滴ずつ加えた。得られた混合物を−３０℃で３０分間撹拌した。
【０１４７】
−３０℃にてアルゴンのもとで撹拌された（Ｓ）−（１−（メトキシ（メチル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．７ｇ，１．５当量）の無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）撹拌混合物に−３０℃と−１０℃の間の温度にて塩化イソプロピルマグネシウムのＴＨＦ（３．２ｍＬ，１．６５当量）溶液を３０分間かけて一滴ずつ加えた。次いで、内部温度を−３０℃〜−１０℃の間で保ちながら、この溶液を上記反応混合物にゆっくり加えた。得られた混合物を−１５℃で１時間撹拌し、次いで水（４０ｍＬ）で反応を止め、その後、−１０℃〜０℃にて濃ＨＣｌで酸性化してｐＨを１〜３に合わせた。混合物を室温に温め、真空で濃縮した。残留物をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶解し、次いで、濃ＨＣｌ（２５ｍＬ）を加えた。得られた混合物を還流で１時間撹拌した。反応混合物を真空で濃縮し、体積を約４５ｍＬに減らした。残留物をヘプタンと酢酸エチルの２：１混合物で抽出した（２×６０ｍＬ）。内部温度を−１０℃〜−０℃の間で保ちながら、水性層を濃縮した水酸化アンモニウムで塩基性化し、ｐＨを９〜１０に合わせた。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄した。溶液を真空で濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ５：１）によって生成物を精製し、白色固形物として（Ｓ）−（１−（８−クロロ−２−（３−フルオロフェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．５６ｇ，収率１３％）を得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４１７（Ｍ＋１）。
【０１４８】
工程３：（Ｓ）−３−（１−アミノエチル）−８−クロロ−２−（３−フルオロフェニル）イソキノリン−１（２Ｈ）−オンの合成
（Ｓ）−（１−（８−クロロ−２−（３−フルオロフェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５６０ｍｇ，１．３４ミリモル，工程２で調製した）とトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）とのＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）における混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空で濃縮し、定量的な収量にて固形物として所望の生成物、（Ｓ）−３−（１−アミノエチル）−８−クロロ−２−（３−フルオロフェニル）イソキノリン−１（２Ｈ）−オンを得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１７（Ｍ＋１）。
【０１４９】
工程４：（Ｓ）−２，４−ジアミノ−６−（（１−（８−クロロ−２−（３−フルオロフェニル）−１−オキソ−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチル）アミノ）ピリミジン−５−カルボニトリル（ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−６）の合成
（Ｓ）−３−（１−アミノエチル）−８−クロロ−２−（３−フルオロフェニル）イソキノリン−１（２Ｈ）−オン（５９ｍｇ，０．１８ミリモル，工程３で調製した）と２，４−ジアミノ−６−クロロピリミジン−５−カルボニトリル（３８ｍｇ，０．２２ミリモル）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ）とフッ化カリウム（３６ｍｇ）とのＤＭＳＯ（３ｍＬ）における混合物を９０℃で一晩加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を加えた。溶液をＨ２Ｏ（３×５ｍＬ）、１ＮのＨＣｌ（水溶液）、及びＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２×５ｍＬ）で洗浄した。有機抽出物を真空で濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ２０：１）によって粗生成物を精製し、白色固形物として所望の生成物、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−６を提供した（２１ｍｇ，収率：２６％）。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４５０（Ｍ＋１）。
【０１５０】
実施例７：ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７
【化２５】
2020529418.tif 000035
工程１：２−クロロ−６−メチル−Ｎ−（フェニル−ｄ５）ベンズアミドの合成
２−クロロ−６−メチル安息香酸（４．２ｇ，２４ミリモル）と塩化チオニル（３０ｍＬ）との混合物を７０℃で３時間加熱し、４５℃で減圧下にて濃縮した。得られた酸塩化物をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解し、アニリン−ｄ５（２．０ｇ，２０ミリモル）及びトリエチルアミン（４ｍＬ，過剰）と混合した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、その後、減圧下で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）に溶解し、２ＮのＨＣｌ（水溶液）（２×２０ｍＬ）及びＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２×２０ｍＬ）で洗浄した。溶液を真空で濃縮して固形物として２−クロロ−６−メチル−Ｎ−（フェニル−ｄ５）ベンズアミド（５．０ｇ，収率：１００％）を得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝２４９（Ｍ−１）。
【０１５１】
工程２：（Ｓ）−（１−（８−クロロ−１−オキソ−２−（フェニル−ｄ５）−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
−３０℃にてアルゴンのもとで撹拌された２−クロロ−６−メチル−Ｎ−（フェニル−ｄ５）ベンズアミド（６３０ｍｇ，２．５ミリモル）の無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）混合物に−３０℃で温度を保ちながら、２．５Ｍのｎ−ブチルリチウムのヘキサン（１０ｍＬ，２．５当量）溶液を３０分間かけて一滴ずつ加えた。次いで得られた混合物を−３０℃で３０分間撹拌した。−３０℃にてアルゴンのもとで撹拌された無水ＴＨＦ（６０ｍＬ）における（Ｓ）−（１−（メトキシ（メチル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．７ｇ，１．５当量）の撹拌された混合物に、−３０℃〜−１０℃の間での内部温度を保持しながら、塩化イソプロピルマグネシウムのＴＨＦ（１２．４ｍＬ，１．６５当量）溶液を３０分間かけて一滴ずつ加えた。得られた混合物を−３０℃で３０分間撹拌した。−３０℃〜−１０℃の間での内部温度を保持しながら、次いでこの溶液を上記反応混合物にゆっくり加えた。得られた混合物を−１５℃で１時間撹拌し、次いで水（５０ｍＬ）で反応を止め、−１０℃〜０℃にて濃ＨＣｌで酸性化し、ｐＨを１〜３に合わせた。混合物を室温に温め、真空で濃縮した。残留物をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶解し、次いで濃ＨＣｌ（２５ｍＬ）を加えた。得られた混合物を還流で１時間撹拌した。反応混合物を真空で濃縮して体積を約４５ｍＬに減らした。残留物をヘプタンと酢酸エチルの２：１混合物で抽出した（２×２０ｍＬ）。内部温度を−１０℃〜−０℃の間で保ちながら、水性層を濃縮した水酸化アンモニウムで塩基性化し、ｐＨを９〜１０に合わせた。次いで混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３×５０ｍＬ）で抽出し、ブラインで洗浄した。溶液を真空で濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ１０：１）によって生成物を精製し、白色固形物として（Ｓ）−（１−（８−クロロ−１−オキソ−２−（フェニル−ｄ５）−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４０ｍｇ，収率：１３．９％）を得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４０４（Ｍ＋１）。
【０１５２】
工程３：（Ｓ）−３−（１−アミノエチル）−８−クロロ−２−（フェニル−ｄ５）イソキノリン−１（２Ｈ）−オンの合成
工程２で調製した（Ｓ）−（１−（８−クロロ−１−オキソ−２−（フェニル−ｄ５）−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４０ｍｇ，０．３４ミリモル）とトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）とのＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）における混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空で濃縮して定量的な収量での所望の生成物、（Ｓ）−３−（１−アミノエチル）−８−クロロ−２−（フェニル−ｄ５）イソキノリン−１（２Ｈ）−オンを提供した。ＭＳ：ｍ／ｚ＝３０４（Ｍ＋１）。
【０１５３】
工程４：（Ｓ）−２，４−ジアミノ−６−（（１−（８−クロロ−１−オキソ−２−（フェニル−ｄ５）−１，２−ジヒドロイソキノリン−３−イル）エチル）アミノ）ピリミジン−５−カルボニトリル（ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７）の合成
工程３で調製した（Ｓ）−３−（１−アミノエチル）−８−クロロ−２−（フェニル−ｄ５）イソキノリン−１（２Ｈ）−オン（４５ｍｇ，０．１５ミリモル）と２，４−ジアミノ−６−クロロピリミジン−５−カルボニトリル（３８ｍｇ，０．２２ミリモル）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ）とフッ化カリウム（３６ｍｇ）とのＤＭＳＯ（３ｍＬ）における混合物を９０℃で一晩加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を加えた。溶液をＨ２Ｏ（３×１０ｍＬ）、１ＮのＨＣｌ（水溶液）及びＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２×５ｍＬ）で洗浄した。有機抽出物を真空で濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ２０：１）によって粗生成物を精製し、白色固形物として所望の生成物、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７（２３ｍｇ，収率３５％）を得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３７（Ｍ＋１）。
【０１５４】
実施例８
【化２６】
2020529418.tif 000036
（Ｓ）−２−（５−フルオロ−４−オキソ−３−フェニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
２−アミノ−６−フルオロ安息香酸（０．５ｇ，３．２２ミリモル）と（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−カルボン酸（０．６９ｇ，３．２２ミリモル）とのピリジン（３ｍＬ）溶液に亜リン酸トリフェニル（２．１１ｍＬ，８．０５ミリモル）を加えた。反応混合物を７０℃に加熱し、前記温度で２時間保持した。アニリン（０．３５ｍＬ，３．９ミリモル）を上記混合物に加え、次いでそれを８時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、重炭酸ナトリウム水溶液、水、及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空で濃縮した。ヘキサン中２５％の酢酸エチルによるカラムクロマトグラフィーによって生成物（０．９９ｇ、７５％）を提供した。
【０１５５】
【化２７】
2020529418.tif 000037
（Ｓ）−５−フルオロ−３−フェニル−２−（ピロリジン−２−イル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オンの合成
上記生成物、（Ｓ）−２−（５−フルオロ−４−オキソ−３−フェニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルをＤＣＭ／ＴＦＡ（比２：１）に溶解し、反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで濃縮して定量的な収量にて生成物、（Ｓ）−５−フルオロ−３−フェニル−２−（ピロリジン−２−イル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オンを提供した。
【０１５６】
【化２８】
2020529418.tif 000038
（Ｓ）−２−（１−（２−アミノ−７Ｈ−プリン−６−イル）ピロリジン−２−イル）−５−フルオロ−３−フェニルキナゾリン−４（３Ｈ）−オンの合成
（Ｓ）−５−フルオロ−３−フェニル−２−（ピロリジン−２−イル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン（０．０７ミリモル）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液に２−アミノ−６−クロロプリンとＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０４ｍＬ）とを加え、反応混合物をアルゴンのもと１５０℃で１時間撹拌した。溶媒を取り除き、粗生成物をジクロロメタン中１０％のメタノールによる分取ＴＬＣによって精製し、生成物、（Ｓ）−２−（１−（２−アミノ−７Ｈ−プリン−６−イル）ピロリジン−２−イル）−５−フルオロ−３−フェニルキナゾリン−４（３Ｈ）−オン（１８．９ｍｇ，６０％）を提供した。
【０１５７】
実施例８
【化２９】
2020529418.tif 000039
（Ｓ）−２，４−ジアミノ−６−（２−（５−フルオロ−４−オキソ−３−フェニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−２−イル）ピロリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボニトリルの合成
（Ｓ）−５−フルオロ−３−フェニル−２−（ピロリジン−２−イル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン（０．０６ミリモル）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液に２，４−ジアミノ−６−クロロピリミジン−５−カルボニトリル（１０．２ｍｇ）とＤＩＰＥＡ（０．０３１ｍＬ，０．１８ミリモル）とを加え、得られた混合物をアルゴンのもと１２５℃で２時間撹拌した。次いで、真空で溶媒を取り除き、粗混合物をジクロロメタン中１０％のメタノールによる分取ＴＬＣによって精製し、生成物、（Ｓ）−２，４−ジアミノ−６−（２−（５−フルオロ−４−オキソ−３−フェニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−２−イル）ピロリジン−１−イル）ピリミジン−５−カルボニトリル（２０．９ｍｇ，７９％）を得た。
【０１５８】
実施例９
【化３０】
2020529418.tif 000040
（Ｓ）−２−アミノ−４−（２−（５−フルオロ−４−オキソ−３−フェニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−２−イル）ピロリジン−１−イル）−６−メチルピリミジン−５−カルボニトリルの合成
（Ｓ）−５−フルオロ−３−フェニル−２−（ピロリジン−２−イル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン（０．０６ミリモル）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液に２−アミノ−４−クロロ−６−メチルピリミジン−５−カルボニトリル（１０．１ｍｇ）とＤＩＰＥＡ（０．０３１ｍＬ，０．１８ミリモル）とを加え、得られた混合物をアルゴンのもと１２５℃で２時間撹拌した。次いで、溶媒を取り除き、粗混合物をジクロロメタン中１０％のメタノールによる分取ＴＬＣによって精製し、生成物、（Ｓ）−２−アミノ−４−（２−（５−フルオロ−４−オキソ−３−フェニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−２−イル）ピロリジン−１−イル）−６−メチルピリミジン−５−カルボニトリル（２２．２ｍｇ，８４％）を得た。
【０１５９】
実施例１０：ＰＩ３Ｋの阻害
ＰＩ３Ｋα、ＰＩ３Ｋβ、ＰＩ３Ｋγ、及びＰＩ３Ｋδの阻害について以下で示す化合物を調べた：
【化３１】
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【０１６０】
不動化した、活性部位に向けられたリガンドと競合する化合物の能力を定量的に測定する競合結合アッセイに基づくＫＩＮＯＭＥｓｃａｎ（商標）（ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ）を用いて化合物を調べた。３つの成分、ＤＮＡタグを付けたキナーゼと不動化したリガンドと試験化合物とを組み合わせることによってアッセイを行う。不動化したリガンドと競合する試験化合物の能力はＤＮＡタグの定量的ＰＣＲを介して測定する。
【０１６１】
ほとんどのアッセイについては、キナーゼタグを付けたＴ７ファージ株をＢＬ２１株に由来するＥ.ｃｏｌｉ宿主で調製した。Ｅ.ｃｏｌｉは対数期に増殖させ、Ｔ７ファージを感染させ、溶解まで３２℃で振盪しながらインキュベートした。溶解物を遠心分離し、濾過して細胞残渣を取り除いた。残りのキナーゼはＨＥＫ−２９３細胞で産生され、その後、ｑＰＣＲ検出のためにＤＮＡでタグ付けした。ストレプトアビジンをコーティングした磁気ビーズをビオチン化小分子リガンドで室温にて３０分間処理し、キナーゼアッセイ用の親和性樹脂を生成した。リガンド結合するビーズを過剰なビオチンでブロックし、ブロック緩衝液（ＳｅａＢｌｏｃｋ（Ｐｉｅｒｃｅ）、１％ＢＳＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、１ｍＭのＤＴＴ）で洗浄して未結合のリガンドを取り除き、非特異的な結合を減らした。結合反応は、１×結合緩衝液（２０％ＳｅａＢｌｏｃｋ、０．１７×ＰＢＳ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、６ｍＭのＤＴＴ）にてキナーゼとリガンド結合した親和性ビーズと試験化合物とを組み合わせることによって組み立てた。試験化合物は１００％ＤＭＳＯにて１１１Ｘストックとして調製した。Ｋｄは３つのＤＭＳＯ対照点と共に１１点の化合物の３倍連続希釈を用いて決定した。Ｋｄ測定のための化合物はすべて、１００％ＤＭＳＯにて音響移送（非接触分注）によって分配される。次いで化合物はＤＭＳＯの最終濃度が０．９％であるようにアッセイに直接希釈された。反応はすべてポリプロピレンの３８４穴プレートで行った。それぞれは０．０２ｍＬの最終容量だった。アッセイプレートを振盪しながら室温で１時間インキュベートし、親和性ビーズを洗浄緩衝液（１×ＰＢＳ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０）で洗浄した。次いでビーズを溶出緩衝液（１×ＰＢＳ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０、０．５μＭの非ビオチン化親和性リガンド）に再浮遊させ、振盪しながら室温で３０分間インキュベートした。溶出液におけるキナーゼ濃度はｑＰＣＲによって測定した。
【０１６２】
各試験化合物の１１点の３倍連続希釈は１００×最終試験濃度での１００％ＤＭＳＯで調製し、その後、アッセイにて１×（ＤＭＳＯの最終濃度＝１％）に希釈した。ほとんどのＫｄは化合物の一番上の濃度＝３０，０００ｎＭを用いて決定した。決定された当初のＫｄが＜０．５ｎＭ（調べた最低濃度）であった場合、一番低い濃度から開始した連続希釈で測定を繰り返した。４０，０００ｎＭとして報告されたＫｄ値はＫｄが＞３０，０００ｎＭであると判定されたことを示す。
【０１６３】
結合定数（Ｋｄ）はＨｉｌｌ方程式：
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を用いて標準の用量反応曲線で算出された。
【０１６４】
Ｈｉｌｌ傾きは−１に設定した。Ｌｅｖｅｎｂｅｒｇ−Ｍａｒｑｕａｒｄｔのアルゴリズムによる非線形最小二乗適合を用いて曲線を適合させた。以下の表４は、ＰＩＫ３ＣＡがＰＩ３Ｋαであり、ＰＩＫ３ＣＢがＰＩ３Ｋβであり、ＰＩＫ３ＣＤがＰＩ３Ｋγであり、且つＰＩＫ３ＣＧがＰＩ３Ｋδであるこれらの化合物について見いだされた結果を示す。
【表９】
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【０１６５】
実施例１１：細胞アッセイ
ＬＭ０−２−００７、ＯＣＩ−ＬＹ−１０、ＨＨ、Ｈ９、ＰＦ３８２及びＣＣＲＦ−ＣＥＭを含む多数の癌細胞に対する有効性（ＡＴＰ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ）またはヨウ化プロピジウム（ＰＩ）の取り込みを測定することによる細胞生存率）について化合物、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−１、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−２、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−４、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−５、ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−６及びＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−７、ならびに参照化合物ＣＡＬ−１３０、テナリシブ、デュベリシブを評価した。結果は図７〜１４及び１７〜２０に示す。
【０１６６】
実施例１２：ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３処理
ルシフェラーゼを発現する遺伝的に誘発したＴ−ＡＬＬのマウスを１０ｍｇ／ｋｇの化合物ＤＷＬ−ＰＩ３Ｋ−３で１２時間ごとに７日間処理した。結果は、処理後のルシフェリンシグナルの喪失及びＫｉ６７／ｔｈｙ１．２陽性細胞の減少によって証拠付けされたように腫瘍量の有意な低下を実証している図１６〜１７に示す。
【０１６７】
本出願の全体を通して引用されている参考文献、係属中の特許出願及び公開された特許すべての内容は参照によって明白に本明細書に組み入れられる。
【０１６８】
前述の実施形態は例示のみの目的で提示されている。関連分野の当業者は本発明の精神及び範囲から逸脱することなく種々の修正が行われてもよいことを理解する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８−１】
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【図１８−２】
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【図１９−１】
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【図１９−２】
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【図２０】
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【国際調査報告】
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