(57)【要約】  本発明は片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物に関する。該化合物は、ベータ−ヒドロキシ酪酸（βＨＢ）またはその薬学的に許容される塩、アセトアセタート（ＡｃＡｃ）またはその薬学的に許容される塩、βＨＢまたはＡｃＡｃ  １，３−ブタンジオの代謝前駆体、およびアセトアセチル−または３−ヒドロキシブチラート部分を含む化合物から選択される。本発明は更に、βＨＢ、ＡｃＡｃまたはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．ベータ−ヒドロキシ酪酸（βＨＢ）またはその薬学的に許容される塩、
ｂ．アセトアセタート（ＡｃＡｃ）またはその薬学的に許容される塩、
ｃ．１，３−ブタンジオール（ＣＡＳ番号１０７  ８８  ０）および
トリアセチン（ＣＡＳ番号１０２−７６−１）
から選択される、βＨＢもしくはＡｃＡｃの代謝前駆体、またはその薬学的に許容される塩、ならびに
ｄ．式
【化１】
2020504746.tif 000008
・Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ：「Ｄ−ベータ−ヒドロキシブチラート−Ｄ−１，３−ブタンジオール」、
・ＩＩ：「（３Ｒ）−ヒドロキシブチル−（３Ｒ）−ヒドロキシブチラート」、
・ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｃ：「アセトアセチル−１，３−ブタンジオール」、
・ＩＶ：「アセトアセチル−Ｒ−３−ヒドロキシブチラート」および
・Ｖａ、Ｖｂ、Ｖｃ、Ｖｄ、Ｖｅ：「アセトアセチルグリセロール」
のいずれか１つにより示される、アセトアセチル−もしくは３−ヒドロキシブチラート部分を含む化合物、またはその薬学的に許容される塩
から選択される、片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項２】
該化合物が、βＨＢ、βＨＢの代謝前駆体、３−ヒドロキシブチラート部分を含む化合物およびそれらの薬学的に許容される塩から選択される、請求項１記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項３】
該化合物がβＨＢまたはその薬学的に許容される塩である、請求項１または２記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項４】
該化合物がＤ−βＨＢまたはその薬学的に許容される塩である、請求項１〜３のいずれか１項記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項５】
前記の薬学的に許容される塩が、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アルギニン塩、リジン塩、ヒスチジン塩、オルニチン塩、クレアチン塩、アグマチン塩、シトルリン塩、メチルグルカミン塩およびカルニチン塩、またはこれら塩の組合せ、特に、カルシウム塩およびナトリウム塩の組合せから選択される、請求項１〜４のいずれか１項記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項６】
塩の該組合せがリジン塩とカルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩および／またはナトリウム塩との組合せ、特に、リジン塩、カルシウム塩およびナトリウム塩の組合せを含む、請求項５記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項７】
該治療または予防が、片頭痛発作の頻度を減少させること、片頭痛発作の重症度を軽減すること、片頭痛症状の重症度を軽減すること、疾患進行を予防すること、疾患慢性化を予防することを含む、請求項１〜６のいずれか１項記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項８】
片頭痛の症状が、以下の症状、すなわち、中等度ないし強度の主に片側性の頭痛、光、騒音および／または臭いに対する敏感性、悪心または吐き気、顔面痛、眼の痛み、バランス障害、換語困難、他の神経症状、例えば感覚または運動障害、異痛症、あるいは片頭痛発作に付随、先行もしくは続発することが知られている特徴の任意の他のもの、例えば疲労、悪心、認知困難、疲労感、激しい空腹感または口渇、性欲減退、うつ病、躁病、気分変動、ならびに脳の構造および機能における変化、例えば白質病変または機能的連結性の障害の少なくとも２つを含む、請求項１〜７のいずれか１項記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項９】
該化合物が、請求項８記載の片頭痛発作の症状の１つまたは幾つかの発生の前に投与される、請求項１〜８のいずれか１項記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項１０】
投与すべき１日量が０．０５ｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇ体重、特に、０．１ｇ／ｋｇ〜０．７ｇ／ｋｇ体重、より詳細には、０．２ｇ／ｋｇ〜０．４ｇ／ｋｇ体重である、請求項１〜９のいずれか１項記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項１１】
該１日量が１〜６用量、特に２または３用量に分割される、請求項１０記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項１２】
該１日量が、少なくとも１ヶ月間、特に、少なくとも６ヶ月間、より詳細には、少なくとも１年間、より一層詳細には、２年間にわたって投与される、請求項１０または１１記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項１３】
対象への該医薬組成物の投与が、０．３ｍＭ〜６ｍＭへの、特に、０．４ｍＭ〜４ｍＭへの、より一層詳細には、１ｍＭ〜４ｍＭへの、血中ケトン体（ＫＢ）レベルの上昇を引き起こす、請求項１〜１２のいずれか１項記載の片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項記載の化合物を含む、片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための医薬組成物。
【請求項１５】
該医薬組成物が、ロイシン、リジン、イソロイシン、トリプトファン、チロシンおよびフェニルアラニンを含む群から選択されるアミノ酸を更に含む組合せ医薬である、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１３のいずれか１項記載の化合物の含有量が少なくとも２５％（ｗ／ｗ）、特に、少なくとも３５％（ｗ／ｗ）、より詳細には、５０％〜１００％（ｗ／ｗ）である、請求項１４〜１５のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１７】
経口投与用に処方されている、請求項１４〜１６のいずれか１項記載の医薬組成物。
【請求項１８】
経口投与用の粉末として処方されている、請求項１７記載の医薬組成物。
【請求項１９】
該医薬組成物が飲料である、請求項１４〜１６のいずれか１項記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は片頭痛または片頭痛症状の予防または治療のためのＤベータ−ヒドロキシ酪酸（βＨＢ）または代謝前駆体の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
片頭痛
片頭痛は、世界の人口の約１５％が罹患している、複雑で遺伝的に不均一で一般的で衰弱性の神経障害である。片頭痛は、最も生産性の高い年代で発生率のピークを示すため、多大な苦痛をもたらすだけでなく、社会にも相当な負担を与え、欧州だけでも毎年約１８５億ユーロの損失をもたらしている。それは、４〜７２時間持続する、再発性の中等度ないし重度の、典型的には拍動性の片側性頭痛発作により特徴づけられ、これはあらゆる種類の身体活動によって悪化し、光、音もしくは臭気に対する恐怖症、悪心またはそれらの組合せを伴う。それは、前兆の存在（前兆を伴う片頭痛（ＭＡ））または非存在（前兆を伴わない片頭痛（ＭＯ））に基づいて２つの主要な亜群に分類される非常に不均一な障害であり、そのような前兆は、一過性で可逆的な視覚障害、感覚障害または運動障害の段階であり、典型的には、片頭痛患者の３分の１において、発作自体の最大１時間前に生じる。片頭痛は頭痛（発作）段階を遥かに超えるものである。なぜなら、片頭痛は、典型的には、頭痛に最大１２時間先行する予兆期（ｐｒｅｍｏｎｉｔｏｒｙ  ｐｈａｓｅ）、および片頭痛に続発し数時間または数日間持続しうる後発症状期（ｐｏｓｔｄｒｏｍａｌ  ｐｈａｓｅ）において、神経症状を伴うからである。現在のところ、一次性片頭痛発症メカニズムは尚もほとんど知られていない。
【０００３】
片頭痛の治療法
現在の片頭痛治療の選択肢は限られており、それらの作用メカニズムも完全には理解されていない。予防的な片頭痛治療の主な目標は、頭痛の頻度を減少させること、および機能を回復させることを含むが、追加的な重要な目標は慢性片頭痛への進行の予防でありうる。現在までに認可されている予防薬（例えば、ベータ遮断薬、抗けいれん薬または抗うつ薬）はいずれも、片頭痛に特異的ではなく、ほとんどは、有意な（しばしば許容できな）副作用を伴う。更に、それらの片頭痛予防特性はせいぜい中程度である（片頭痛頻度における平均２５％未満の減少）。したがって、代替的な抗片頭痛治療法を開発することに対する多大な医学的要求が存在する。本発明の目的は、有効性の改善および副作用の低減を示す、片頭痛の治療のための新規治療用物質を提供することである。
【０００４】
ケトン食療法／ＫＢの内因性上昇およびグルコースの減少
ケトン原性（ｋｅｔｏｇｅｎｉｃ）食事（ケトン食療法）（ＫＤ）は、長期間の絶食が抗けいれん作用を示すという観察の後、約１００年前に開発された。その高い脂肪含有量、低い炭水化物およびタンパク質含有量により、それは飢餓の代謝作用を模倣するものである。ＫＤは、難治性てんかんの治療の際の有効な代替法であることが示されており、そのメカニズムは尚も十分には理解されていないが、その広範な神経保護メカニズムおよび多数の神経学的病態（例えば、代謝障害、例えばミトコンドリア障害、神経変性障害、例えばパーキンソン病およびアルツハイマー病（ＡＤ）、外傷および虚血、ナルコレプシー、そしておそらく、更には鬱病または自閉症）におけるその使用可能性に関する実験的証拠が増加しつつある。それでも、ケトン症の利益に関する臨床的証拠は尚も大部分が難治性てんかんに限定されている。この場合、ＫＤにより達成されるＫＢレベルの上昇は長期間（最大数年間）にわたって十分に許容されることが示されている。しかし、厳しいＫＤは、多数の患者集団のための実施可能な長期的な解決策になりそうもない。なぜなら、外来治療の状況でそれを実施することは困難であり、患者のアドヒアランス（能動的治療参加）が制限されうるからである。
【０００５】
外因性ＫＢ
食事での炭水化物およびタンパク質の摂取には無関係に、軽度ないし中等度の栄養性ケトン症を誘発するための代替手段は、外因性ケトン原性物質、例えば中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、ケトン原性アミノ酸、βＨＢまたはＡｃＡｃサプリメント、そして最近ではケトエステル（互いにエステル化されたβＨＢおよび／またはＡｃＡｃ）での食事補給である。ＫＢ自体の食事補給は炭水化物およびタンパク質の制限を必要とせず、したがって、コンプライアンス（遵守）の可能性を高める。なぜなら、特に、炭水化物食はほとんどの文化において一般的だからである。
【０００６】
ＫＤ自体と比較して、ＫＢ補給の治療効果は、現在のところ、それほど十分には確立されていない。ヒトにおいてＭＣＴを使用した研究が示唆するところによると、それらは安全であるが、より高い治療量においては、十分には耐えられない。ケトンエステルは非常に不快な味の問題を有し、高い血中ケトン濃度が得られうるが、ほとんどの研究は強制飼養動物において行われている。ケトン原性酸の直接投与は、消化管での急速な吸収の後のアシドーシスの可能性ゆえに、潜在的に危険である。
【０００７】
前記の最新技術に基づいて、本発明の目的は、嗜好性の改善および消化管の苦痛の軽減を伴う安全な方法で血中ＫＢレベルを外的に上昇させ、それにより、患者のコンプライアンスを高めることによる、片頭痛に対する新規治療選択肢を提供することである。この目的は本明細書の特許請求の範囲により達成される。
【発明の概要】
【０００８】
発明の説明
用語および定義
本明細書の文脈においては、「ＫＢ」はケトン体を意味する。ケトン体は、飢餓、空腹時、グルコース欠乏またはカロリー制限の際に脂肪組織から放出される脂肪酸から肝臓により産生される内因性代謝産物である。それらは、グルコースおよびＫＢ以外の他のいかなるエネルギー基質をも代謝できない、身体のほとんどの組織、とりわけ脳により、グルコースに代わる代替エネルギー基質として使用されうる。内因性ＫＢには、ベータ−ヒドロキシブチラート（βＨＢ；３ベータヒドロキシブチラートとしても公知である）およびアセトアセタート（ＡｃＡｃ）が含まれる。同様にケトン原性である幾つかの天然外因性物質が存在し、例えば、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）が挙げられる。最近になって、他の外因性ケトン原性物質、例えばβＨＢ無機塩類またはケトエステルが利用可能となった。
【０００９】
本明細書の文脈においては、「ケトン原性アミノ酸」なる語は、ケトン体の前駆体であるアセチル−ＣｏＡへと分解されうるアミノ酸を意味する。ロイシンおよびリジンは、専らケトン原性であるケトン原性アミノ酸である。イソロイシン、フェニルアラニン、トリプトファンおよびチロシンは、グルコース原性（グルコース生成性）でもあるケトン原性アミノ酸である。
【００１０】
本明細書の文脈においては、「βＨＢ」はベータ−ヒドロキシ酪酸またはベータ−ヒドロキシブチラート（ＣＡＳ番号３００−８５−６）を意味する。
【００１１】
本明細書の文脈においては、「Ｄ−βＨＢ」はβＨＢのＤエナンチオマーを意味する。
【００１２】
本明細書の文脈においては、「ＡｃＡｃ」はアセトアセタート（ＣＡＳ番号５４１−５０−４）を意味する。
【００１３】
本明細書の文脈においては、「ＬＬ」はＬ−ロイシンを意味する。
【００１４】
本明細書の文脈においては、「ＬＹ」はＬ−リジンを意味する。
【００１５】
本明細書の文脈においては、「ケトン原性食事（ＫＤ）」なる語は、高い脂肪含有量、低い炭水化物含有量および中程度のタンパク質含有量を有する食事を意味する。
【００１６】
本明細書の文脈においては、「軽度ないし中等度の栄養性ケトン症」なる語は、適切な栄養により得られる、０．４〜４ｍｍｏｌ／ｌの血中ケトン体の濃度を指す。
【００１７】
本明細書の文脈においては、「トリグリセリド」なる語は、グリセロール（ＣＡＳ番号５６−８１−５）と３つの脂肪酸とに由来するエステルを意味する。
【００１８】
本明細書の文脈においては、「脂肪酸」なる語は、４〜２８個の炭素原子の鎖を含む脂肪族モノカルボン酸を意味する。鎖は飽和または不飽和でありうる。「遊離脂肪酸」なる語は、他の分子、例えばグリセロールに結合していない脂肪酸を意味する。
【００１９】
本明細書の文脈においては、「中鎖脂肪酸（ＭＣＦＡ）」なる語は、６〜１２個の炭素原子の鎖を含む脂肪族モノカルボン酸を意味する。鎖は飽和している。
【００２０】
本明細書の文脈においては、「中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）」なる語は、グリセロール（ＣＡＳ番号５６−８１−５）と３つのＭＣＦＡとに由来するエステルを意味する。
【００２１】
本明細書の文脈においては、「トリアセチン」は１，２，３−トリアセトキシプロパン（ＣＡＳ番号１０２−７６−１）を意味する。
【００２２】
発明の詳細な説明
第１の態様において、本発明は、片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法における使用のための化合物を提供する。該化合物は、
ａ．ベータ−ヒドロキシ酪酸（βＨＢ）、
ｂ．アセトアセタート（ＡｃＡｃ）、
ｃ．βＨＢまたはＡｃＡｃの代謝前駆体、
ｄ．アセトアセチル−または３−ヒドロキシブチラート部分を含む化合物
から選択される。
【００２３】
該代謝前駆体は１，３−ブタンジオール（ＣＡＳ番号１０７  ８８  ０）およびトリアセチン（ＣＡＳ番号１０２−７６−１）から選択される。
【００２４】
アセトアセチル−または３−ヒドロキシブチラート部分を含む化合物は以下の式（Ｉａ）〜（Ｖｅ）のいずれか１つにより示される。
【化１】
2020504746.tif 000002
2020504746.tif 000003
【００２５】
式（Ｉａ）は３−ヒドロキシブチル  ３−ヒドロキシブタノアートを示す。
【００２６】
式（Ｉｂ）は（３−ヒドロキシ−１−メチル−プロピル）３−ヒドロキシブタノアートを示す。
【００２７】
式（Ｉｃ）は３−（３−ヒドロキシブタノイルオキシ）ブチル  ３−ヒドロキシブタノアートを示す。
【００２８】
式（ＩＩ）は３−（３−ヒドロキシブタノイルオキシ）ブタン酸を示す。
【００２９】
式（ＩＩＩａ）は３−ヒドロキシブチル  ３−オキソブタノアートを示す。
【００３０】
式（ＩＩＩｂ）は（３−ヒドロキシ−１−メチル−プロピル）３−オキソブタノアートを示す。
【００３１】
式（ＩＩＩｃ）は３−（３−オキソブタノイルオキシ）ブチル  ３−オキソブタノアートを示す。
【００３２】
式（ＩＶ）は３−（３−オキソブタノイルオキシ）ブタン酸を示す。
【００３３】
式（Ｖａ）は２，３−ジヒドロキシプロピル  ３−オキソブタノアートを示す。
【００３４】
式（Ｖｂ）は［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）エチル］３−オキソブタノアートを示す。
【００３５】
式（Ｖｃ）は［２−ヒドロキシ−３−（３−オキソブタノイルオキシ）プロピル］３−オキソブタノアートを示す。
【００３６】
式（Ｖｄ）は［３−ヒドロキシ−２−（３−オキソブタノイルオキシ）プロピル］３−オキソブタノアートを示す。
【００３７】
式（Ｖｅ）は２，３−ビス（３−オキソブタノイルオキシ）プロピル  ３−オキソブタノアートを示す。
【００３８】
βＨＢ、ＡｃＡｃ、βＨＢまたはＡｃＡｃの代謝前駆体、およびアセトアセチル−または３−ヒドロキシブチラート部分を含む化合物は、薬学的に許容される塩の形態でありうる。
【００３９】
ある実施形態においては、該化合物はβＨＢの薬学的に許容されるエステルである。
【００４０】
ある実施形態においては、該化合物はＡｃＡｃの薬学的に許容されるエステルである。
【００４１】
ある実施形態においては、Ｄ−βＨＢの代謝前駆体は、Ｄ−βＨＢを使用して合成されたエステル化分子である。
【００４２】
ある実施形態においては、該化合物は、１価アルコール、２価アルコールまたは３価アルコールとのβＨＢまたはＡｃＡｃのエステルである。
【００４３】
ある実施形態においては、該化合物はβＨＢの薬学的に許容されるアミドである。
【００４４】
ある実施形態においては、該化合物はＡｃＡｃの薬学的に許容されるアミドである。
【００４５】
ある実施形態においては、該化合物はβＨＢ、ＡｃＡｃまたはそれらの薬学的に許容される塩から選択される。
【００４６】
ある実施形態においては、該化合物は、βＨＢ、βＨＢの代謝前駆体、および３−ヒドロキシブチラート部分を含む化合物、ならびに前記化合物の薬学的に許容される塩から選択される。
【００４７】
ある実施形態では、該化合物はβＨＢまたはその薬学的に許容される塩である。
【００４８】
ある実施形態においては、該化合物はＤ−βＨＢまたはその薬学的に許容される塩である。
【００４９】
ある実施形態においては、Ｄ−βＨＢは、ＡｃＡｃも供給する形態で投与される。ある実施形態においては、Ｄ−βＨＢは代謝前駆体として投与され、これは、ヒトまたは動物の体に投与された場合に、例えば肝臓により代謝されてＤ−βＨＢおよびＡｃＡｃを、好ましくは生理学的比率で産生する。
【００５０】
本発明の化合物の生理学的に許容される塩は、特に、ケトン原性アミノ酸およびミネラル混合物と組合されて、化合物の嗜好性を改善する方法を提供する。
【００５１】
ある実施形態においては、薬学的に許容される塩は、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アルギニン塩、リジン塩、ヒスチジン塩、オルニチン塩、クレアチン塩、アグマチン塩、シトルリン塩、メチルグルカミン塩およびカルニチン塩から選択され、それらは、おそらく、他のケトン原性物質と組合されうる。該塩はまた、より複雑な薬学的に許容される塩でありうる。
【００５２】
ある実施形態においては、薬学的に許容される塩は前記塩の幾つかの組合せである。幾つかの産物（例えば、純粋なナトリウム塩）の望ましくない結果を回避するために、幾つかの無機塩の組合せ、またはリジン塩および幾つかの無機塩の組合せを使用することが好ましい。異なる無機塩の数を増加させることにより、総耐用量が増加されうる。
【００５３】
ある実施形態においては、塩の組合せはリジン塩ならびにカルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩およびナトリウム塩の混合物を含む。ある実施形態においては、塩の組合せはリジン塩およびカルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩またはナトリウム塩の混合物を含む。ある実施形態においては、塩の組合せはリジン塩、カルシウム塩、カリウム塩および／またはマグネシウム塩および／またはナトリウム塩を含む。
【００５４】
ある実施形態においては、塩の組合せはリジン塩と無機塩との組合せである。ある実施形態においては、塩の組合せはリジン塩、カルシウム塩およびナトリウム塩の組合せである。
【００５５】
ある実施形態においては、塩の組合せはカルシウム塩とナトリウム塩との組合せである。
【００５６】
塩は異性体Ｄ−βＨＢまたはラセミ体ＤＬ−βＨＢを含有しうる。
【００５７】
該化合物は、単独で、または他のケトン原性物質と組合せて提供されうる。
【００５８】
ある実施形態においては、該化合物は、
（ｉ）片頭痛発作の頻度を減少させるため；
（ｉｉ）片頭痛発作の重症度を軽減するため；
（ｉｉｉ）片頭痛に関連した神経学的症状のいずれか、例えば、音、光および／または臭気に対する恐怖症、視覚障害、知覚障害または運動障害、異痛症を軽減するため；
（ｉｖ）片頭痛に付随、先行または続発することが知られている他の特徴のいずれか、例えば、疲労、悪心、認知困難、疲労感、激しい空腹感または口渇、筋肉痛、性欲減退、うつ病、躁病、気分変動を軽減するため；
（ｖ）片頭痛に関連した構造的または機能的神経細胞損傷、例えば、白質病変または機能的連結性の障害を逆転、遅延または予防するため；
（ｖｉ）急性片頭痛から慢性片頭痛への移行を予防、遅延または逆転させるために提供される。
【００５９】
ある実施形態においては、治療または予防は、片頭痛発作の頻度を減少させる、片頭痛発作の重症度を軽減する、片頭痛症状の重症度を軽減する、疾患進行を予防する、および／または疾患慢性化を予防する効果を有する。
【００６０】
ある実施形態においては、片頭痛の症状は以下の症状の少なくとも２つを含む：中等度ないし強度の主に片側性の頭痛、光、騒音および／または臭いに対する敏感性、悪心または吐き気、顔面痛、眼の痛み、バランス障害、換語困難、異痛症、あるいは片頭痛発作に付随、先行または続発することが知られている特徴の任意の他のもの、例えば、疲労、悪心、認知困難、疲労感、激しい空腹感または口渇、筋肉痛、性欲減退、うつ病、躁病、気分変動、ならびに脳の構造および機能における変化、例えば、白質病変または機能的連結性の障害。
【００６１】
ある実施形態においては、該化合物は、片頭痛発作の症状、特に前段落で列挙したものが生じる前に投与されるべきである。
【００６２】
ある実施形態においては、投与すべき１日量は０．０５ｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇ体重（＝３．５〜７０ｇ／７０ｋｇ）である。ある実施形態においては、投与すべき１日量は０．１ｇ〜０．７ｇ／ｋｇ体重（＝７〜４９ｇ／７０ｋｇ）である。ある実施形態においては、投与すべき１日量は０．２ｇ／ｋｇ〜０．４ｇ／ｋｇ体重（＝１４〜２８ｇ／７０ｋｇ）である。
【００６３】
ある実施形態においては、投与すべき１日量は３．５ｇ〜７０ｇである。ある実施形態においては、投与すべき１日量は５ｇ〜５０ｇである。ある実施形態においては、投与すべき１日量は１０ｇ〜４０ｇである。ある実施形態においては、投与すべき１日量は１０ｇ〜４０ｇである。
【００６４】
ある実施形態においては、投与すべき１日量は１０ｇである。ある実施形態においては、投与すべき１日量は２０ｇである。
【００６５】
本発明者らは、血中ＫＢレベル（薬物動態）、耐容性および片頭痛発作頻度に対する種々のケトン原性物質、例えばＬＬ、ＬＹ、ラセミおよびＤ−βＨＢの効果を調べた。ＭＣＴは、耐容性および嗜好性に関する公知の問題ゆえに、使用されなかった。
【００６６】
ＬＬは約４時間にわたって血中βＨＢの非常に僅かな増加（最大０．３５ｍｍｏｌ／ｌ）をもたらすが、ＬＹはそうではないことが示された。ケトン原性アミノ酸は十分な耐容性を有さず、患者が１日当たり２６ｇのアミノ酸を摂取することは不可能であった。苦い味がその問題に更に寄与していた。
【００６７】
比較すると、βＨＢは十分な耐容性を有さず、血中ＫＢレベルに強い影響を及ぼした。
【００６８】
驚くべきことに、Ｄ−βＨＢ異性体は、ラセミ体と比較して、血中βＨＢレベルにおける３倍以上の上昇（最大１．９４ｍｍｏｌ／ｌ）をもたらした。レベルは４時間以上にわたって上昇したままであった。また、ラセミ混合物で観察されたとおり、血中グルコースの同時低下は認められなかった。参加者は、味が改善された（不快感が低下した）と報告しており、２ヶ月間の摂取でさえも、より少ない消化管の副作用が観察された。有効性データが示唆しているところによると、驚くべきことに、１日僅か１０ｇのＤ−βＨＢが４０ｇのラセミ混合物の有効性に匹敵する可能性があり、１０ｇのＤ−βＨＢでは片頭痛の日数における平均６８．５％の低下が認められ、一方、４０ｇのラセミ体βＨＢでは７２％の低下が認められた。
【００６９】
ＫＤまたは空腹時に肝臓によって産生される量より遥かに少量（約１５０ｇの代わりに２０ｇ）の外因性ＫＢが片頭痛予防効果を有することが見出された。ラセミ体βＨＢ塩はＬＬの約２倍（最大０．６２ｍｍｏｌ／ｌ）のβＨＢ血中レベルの増加をもたらしたが、半減期は非常に短く、そのレベルは２時間後にベースラインに戻った。また、血中グルコースレベルの実質的な低下が観察された。ラセミ体βＨＢの耐容性および嗜好性、特に消化管の不調および悪心は問題があった。１日２０ｇは片頭痛の日の平均頻度を５１％減少させることが判明した。この減少は２５〜８０％の範囲であった。かなり良好な有効性にもかかわらず、５人の患者のうちの２人のみがラセミ体βＨＢ塩を摂取し続けたに過ぎなかった。ラセミ体βＨＢの用量を４０ｇに増加させると、片頭痛の日数における７２％の更なる減少がもたらされる。しかし、この増加用量は副作用を悪化させた。
【００７０】
ある実施形態においては、１日量は１〜６用量に分割される。ある実施形態においては、１日量は２用量に分割される。ある実施形態においては、１日量は３用量に分割される。
【００７１】
ある実施形態においては、１日量は少なくとも１ヶ月間にわたって投与されるべきである。ある実施形態においては、１日量は少なくとも６ヶ月間にわたって投与されるべきである。ある実施形態においては、１日量は少なくとも１年間にわたって投与されるべきである。ある実施形態においては、１日量は２年間にわたって投与されるべきである。
【００７２】
ある実施形態においては、対象への該化合物の投与は０．３ｍＭ〜６ｍＭへの血中ケトン体（ＫＢ）レベルの上昇を引き起こす。ある実施形態においては、対象への該化合物の投与は０．４ｍＭ〜４ｍＭへの血中ケトン体（ＫＢ）レベルの上昇を引き起こす。ある実施形態においては、対象への該化合物の投与は１ｍＭ〜４ｍＭへの血中ケトン体（ＫＢ）レベルの上昇を引き起こす。
【００７３】
本発明の第２の態様においては、本発明の第１の態様による化合物を含む、片頭痛および／またはその症状の治療または予防における使用のための医薬組成物を提供する。医薬組成物は医薬または栄養補助剤でありうる。
【００７４】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物は製剤または剤形である。ある実施形態においては、剤形は粉末、錠剤、気体または溶液である。
【００７５】
リジンの潜在的に苦い味を隠すために、医薬組成物はステビアおよび／または他の人工甘味料（サッカリン、アセスルファム、スクラロース）、メントール、柑橘類、ベリーまたは他の香料を含みうる。
【００７６】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物は、ロイシン、リジン、イソロイシン、トリプトファン、チロシンおよびフェニルアラニンを含む群から選択されるアミノ酸を更に含む組合せ医薬である。該組合せ医薬の成分は同時または連続的に投与されうる。
【００７７】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物における本発明の第１の態様の化合物の含有量は少なくとも２５％（ｗ／ｗ）である。本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物における本発明の第１の態様の化合物の含有量は少なくとも３５％（ｗ／ｗ）である。本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物における本発明の第１の態様の化合物の含有量は５０％〜１００％（ｗ／ｗ）である。
【００７８】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物は、片頭痛の日数が１ヶ月当たり１〜３１日である片頭痛と診断された対象に投与されるべきである。
【００７９】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物は、片頭痛発作の症状が生じる前に投与されるべきである。
【００８０】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物に含まれる前記化合物の投与される１日量は（疾患の重症度に応じて）０．０５ｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇ体重、好ましくは０．１ｇ／ｋｇ〜０．７ｇ／ｋｇ体重である。より好ましくは０．２ｇ／ｋｇ〜０．４ｇ／ｋｇ体重である。
【００８１】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、１日量は１〜６用量、特に２または３用量に分割される。
【００８２】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、１日用量は少なくとも１ヶ月間、好ましくは少なくとも６ヶ月間、最も好ましくは２年間にわたって投与されるべきである。
【００８３】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物は経口投与用に処方（製剤化）される。本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物は非経口投与用に処方される。本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物は他の任意の形態の通常の投与用に処方化される。
【００８４】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物は経口投与用の粉末として処方される。粉末は摂取前に水に溶解される。
【００８５】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、医薬組成物は飲料である。
【００８６】
本発明のこの態様の或る実施形態においては、対象への該医薬組成物の投与は０．３ｍＭ〜６ｍＭへの、特に０．４ｍＭ〜４ｍＭへの、より詳細には１ｍＭ〜４ｍＭへの、血中ケトン体（ＫＢ）レベルの上昇を引き起こす。
【００８７】
本発明者らの結果は、これを達成するためには、１日当たり患者１人当たり５ｇ〜７０ｇのβＫＢ、特に５ｇ〜４０ｇのβＨＢ、より詳細には１０ｇ〜２０ｇのβＨＢが必要であることを示唆している。片頭痛の消散のために必要な増加は疾患の重症度（すなわち、１ヶ月当たりの片頭痛の日数）に左右される。
【００８８】
本発明のもう１つの態様においては、本発明の第１の態様の化合物または本発明の第２の態様の医薬組成物を、それを要する対象に投与することを含む、片頭痛および／またはその症状の治療または予防方法を提供する。
【００８９】
ある実施形態においては、それを要する対象は１ヶ月当たり１〜３１日の片頭痛の日数の片頭痛に罹患している。
【００９０】
ある実施形態においては、それを要する対象は、片頭痛の以下の症状の少なくとも２つの発現を示す：中等度ないし強度の主に片側性の頭痛、光、騒音および／または臭いに対する敏感性、悪心または吐き気、顔面痛、眼の痛み、バランス障害、換語困難、他の神経症状、例えば、感覚または運動障害、異痛症、あるいは片頭痛発作に付随、先行もしくは続発することが知られている特徴の任意の他のもの、例えば、疲労、悪心、認知困難、疲労感、激しい空腹感または口渇、性欲減退、うつ病、躁病、気分変動、ならびに脳の構造および機能における変化、例えば、白質病変または機能的連結性の障害。
【００９１】
単一の分離可能な特徴に対する代替物が本明細書において「実施形態」として記載されている場合は常に、そのような代替物は自由に組合されて、本明細書に開示されている本発明の個別の実施形態を構成しうると理解されるべきである。
【００９２】
本発明は以下の実施例および図面によって更に例示され、それらから、更なる実施形態および利点が導き出されうる。これらの実施例は本発明を例示するためのものであり、その範囲を限定するためのものではない。
【図面の簡単な説明】
【００９３】
【図１】図１は、１０ｇのβＨＢ（黒）と比較した場合の、２名の片頭痛患者における１３ｇのＬ−ロイシン（ＬＬ）（食前）（灰色）の薬物動態を示す。２名の片頭痛患者における、それぞれ、１３ｇのＬＬ（灰色）および１０ｇのβＨＢ（黒）の摂取の前（ベースライン＝０時間）および後（０．５、１、２、３、４ｈ（時間）後）のβＨＢ血中レベル（単位：ｍｍｏｌ／ｌ）（ｙ軸）が示されている。物質を、水に溶解された粉末形態で、空腹時に投与した。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応する試験片（試験紙）を使用して、血中βＨＢ濃度を測定した。エラーバーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表す。
【図２】図２は５名の片頭痛患者における１０ｇのラセミ体ベータ−ヒドロキシブチラート（βＨＢ）（食前）の薬物動態およびグルコースレベルに対するその効果を示す。（Ａ）５名の片頭痛患者における１０ｇのβＨＢの摂取の前（ベースライン＝０時間）および後（０．５、１、２、３、４時間後）のβＨＢ血中レベル（単位：ｍｍｏｌ／ｌ）（ｙ軸）が示されている。βＨＢを、水に溶解された粉末化ナトリウム−カルシウム塩形態で、空腹時に投与した。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中βＨＢ濃度を測定した。エラーバーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表す。（Ｂ）５名の片頭痛患者における１０ｇのβＨＢ（食前）の摂取の前（ベースライン値＝０時間）および後（０．５、１、２、３、４時間後）の血中グルコースレベル（単位：ｍｍｏｌ／ｌ）（ｙ軸）が示されている。１時間以降からの血中グルコースの上昇はβＨＢの摂取の１時間後の混合食物の朝食の摂取（食物摂取は矢印で示されている）に対応し、これは、低血糖の可能性を予防するために与えられた。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中グルコース濃度を測定した。エラーバーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表す。
【図３】図３は片頭痛の日数に対する毎日２０μｇのβＨＢの効果を示す。４名の中−高頻度頭痛患者（１ヶ月当たり６〜２２日の片頭痛日数）の群におけるベースライン（黒色）での平均片頭痛日数（ｙ軸）および毎日２０ｇのβＨＢでの４週間の介入後の片頭痛日数の減少（灰色）が示されている。平均と同様に、ベースライン時の中央値は１８日の片頭痛日数であり、介入後には７日の片頭痛日数である。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中βＨＢ濃度を測定した。エラーバーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表す。
【図４】図４Ａは、片頭痛を有する日数に対する２０ｇのβＨＢまたは４０ｇのβＨＢの用量依存的効果を示す。２名の慢性片頭痛患者（１ヶ月当たり２０または２２日の片頭痛日数）におけるベースライン（灰色）における平均片頭痛日数（ｙ軸）および２０ｇのβＨＢ（灰色）および４０ｇのβＨＢ（点付き白色）での４週間の介入後の片頭痛日数の減少が示されている。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中βＨＢ濃度を測定した。エラーバーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表す。図４Ｂは、毎日０、２０および４０ｇのβＨＢに対する用量反応曲線（ベースラインからの片頭痛日数の減少率（％））を示す。２名の慢性片頭痛患者（１ヶ月当たり２０または２２日の片頭痛日数）における、毎日０ｇのβＨＢの４週間の摂取の後（０ｇ）、毎日２０ｇのβＨＢの４週間の摂取の後（２０ｇ）および毎日４０ｇのβＨＢの４週間の摂取の後（４０ｇ）の、ベースライン（ｙ軸）からの片頭痛日数の減少率（％）が示されている。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中βＨＢ濃度を測定した。エラーバーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表す。
【図５】図５は５名の参加者における１０ｇのＤ−ベータ−ヒドロキシブチラート（βＨＢ）（食事前）の薬物動態およびグルコースレベルに対するその効果を示す。（Ａ）１０ｇのβＨＢの摂取の前（ベースライン＝０時間）および後（０．５、１、２、３時間、４時間）のβＨＢ血中レベル（単位：ｍｍｏｌ／ｌ）（ｙ軸）が示されている。Ｄ−βＨＢを、水に溶解された粉末化混合ミネラルおよびリジン塩形態で、空腹時に投与した。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中βＨＢ濃度を測定した。エラーバーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表す。（Ｂ）１０ｇのβＨＢ（食前）の摂取の前（ベースライン値＝０時間）および後の血中グルコースレベル（単位：ｍｍｏｌ／ｌ）（ｙ軸）。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中グルコース濃度を測定した。エラーバーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表す。
【図６】図６は１０ｇのラセミ体βＨＢ（黒色）またはＤ−βＨＢ（灰色）の摂取の前（ベースライン値＝０時間）および後の血中グルコースレベル（単位：ｍｍｏｌ／ｌ；ｙ軸）に対する１０ｇのラセミ体ベータ−ヒドロキシブチラート（βＨＢ）または１０ｇのＤ−βＨＢのいずれかの１回の投与の効果の比較を示す。ラセミ体βＨＢの場合の１時間以降からの血中グルコースの上昇はβＨＢの摂取の１時間後の混合食物の朝食の摂取（食物摂取は矢印で示されている）に対応し、これは、低血糖の可能性を予防するために与えられた。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中グルコース濃度を測定した。エラーバーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表す。
【図７】図７はベースライン時の５名の参加者における１０ｇのラセミ体ＤＬ−ベータ−ヒドロキシブチラート（βＨＢ）（黒色）および１０ｇのＤ−βＨＢ（灰色）（食前）の薬物動態の比較を示す。１０ｇのβＨＢの摂取の前（ベースライン＝０時間）および後（０．５、１、２、３、４時間）のβＨＢ血中レベル（単位：ｍｍｏｌ／ｌ）（ｙ軸）が示されている。ラセミ体βＨＢは粉末化ナトリウム−カルシウム塩形態で与えられ、Ｄ−βＨＢは粉末化混合ミネラルおよびリジン塩形態で与えられ、両方とも水中に溶解されており、空腹時に与えられた。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中βＨＢ濃度を測定した。エラーバーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）を表す。
【図８】図８は、毎日１０ｇのＤ−βＨＢと比較した場合の１０ｇのラセミ体βＨＢの、片頭痛頻度に対する効果を示す。２名の高頻度片頭痛患者（１ヶ月当たり１７および１０日の片頭痛日数）におけるベースライン時（白色）の平均片頭痛日数（ｙ軸）、および１０ｇのラセミ体βＨＢ（灰色）および１０ｇのＤ−βＨＢ（黒色）での８週間の介入の後の１ヶ月当たりの平均片頭痛日数の減少が示されている。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中βＨＢ濃度を測定した。
【００９４】
実施例
１．パイロット実験
国際頭痛学会分類第３版（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｈｅａｄａｃｈｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ３）に従い熟練神経内科医によって中頻度ないし高頻度または慢性の片頭痛を有すると診断された患者が参加した。彼らは、いずれかの有意な他の神経学的、精神医学的または医学的障害を有する場合には、除外された。過去３ヶ月間に１ヶ月当たり少なくとも平均６日の片頭痛日数が要求された。１０名の片頭痛患者（年齢範囲：２５〜６１歳、男性１名、発作頻度範囲：６〜２４片頭痛日数／月）をパイロット研究に加え、以下の４つの条件に無作為に割り当てた：１）Ｌ−ロイシン（ＬＬ）、２）Ｌ−リジン（ＬＹ）、３）ラセミ体βＨＢ、４）Ｄ−βＨＢ。
【００９５】
１．１．片頭痛患者４名における１３ｇのＬ−ロイシンおよび１３ｇのＬ−リジンの予備的薬物動態
Ｌ−ロイシン（ＬＬ）およびＬ−リジン（ＬＹ）は２つの完全ケトン原性アミノ酸である。種々の段階を経て、未使用のケトン原性アミノ酸（すなわち、ロイシンまたはリジン）は代謝されてＫＢになる。このことは一般に公知であるが、本発明者らの知る限りでは、そのようなケトン原性アミノ酸が血中βＨＢレベルを上昇させる程度および時間枠に関するデータは存在しない。薬物動態に関しては、４名の片頭痛患者に、空腹時に１３ｇのＬＬまたは１３ｇのＬＹを摂取するように指示した。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中βＨＢおよびグルコース濃度を以下の５つの時点で測定した：１）ベースライン（摂取直前）、２）摂取の０．５時間後、３）摂取の１時間後、４）摂取の２時間後、５）摂取の３時間後、および６）摂取の４時間後。１３ｇが１０ｇのβＨＢと同じ粒子数（ｍｍｏｌ）にほぼ対応する。βＨＢの最高平均濃度は２時間後および３時間後に見出され（平均＝０．３５ｍｍｏｌ／ｌ；ＳＥＭ＝０．０５）、４時間以上にわたって上昇状態が維持された（図１を参照されたい）。ＬＹに関しては、血中βＨＢの上昇は全く測定できなかった。
【００９６】
Ｌ−ロイシン（３名の患者）およびＬ−リジン（２名の患者）の介入の予備的結果：
最後の３ヶ月にわたる毎月の片頭痛発作頻度をまとめ、平均をベースライン比較のために用いた。２６ｇのＬＬまたは２６ｇのＬＹを１日２回（それぞれ、朝食の１時間前および夕食の１時間前）、４週間にわたって摂取するように患者に指示した。その期間中、服薬または食習慣における他のいかなる変化をも控えるように彼らに指示した。主要評価項目は、片頭痛が生じた日数の、ベースラインからの変化であった。片頭痛が生じた日数を、モバイルアプリ（ｍｙｈｅａｄａｃｈｅ．ｃｈ）またはペンおよび紙の日記を用いて記録し、参加者間で平均した。
【００９７】
毎日２６ｇのＬＬまたはＬＹが摂取された場合（１日に１３ｇを２回）、試験の開始時から、下痢または悪心のような有害事象が全患者において生じ、粉末の苦味が耐えられなかった。ＬＬ群における１名の患者は該試験の薬物動態学的部分において早くも脱落した。用量を劇的に減少させる必要があった。それらのケトン原性アミノ酸の高用量の長期的使用は、嗜好性および実施可能性の問題ゆえに、実施できそうもない。また、用量の減少はデータを比較不可能にし、血中βＨＢレベルにおける非常に僅か又は測定不可能な増加は、作用メカニズムに関して、結果を解釈困難にしたであろう。
【００９８】
１．２．片頭痛患者５名における１０ｇのラセミ体βＨＢの予備的薬物動態
薬物動態を決定するために、水中に溶解された１０ｇのラセミ体ベータ−ヒドロキシブチラート（βＨＢ）を以下の３つの異なる条件で患者に経口的に与えた：（１）食後（食事の後）、（２）食前（食事の前）、（３）食事の１時間前。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中βＨＢおよびグルコース濃度を以下の５つの時点で測定した：１）ベースライン（摂取直前）、２）摂取の０．５時間後、３）摂取の１時間後、４）摂取の２時間後、５）摂取の３時間後、および６）摂取の４時間後。βＨＢ血中レベルの最大上昇は、βＨＢが絶食状態で摂取された場合に示された（結果は図２Ａに示されている）。βＨＢの最高平均濃度は約１時間後に見出され（平均＝０．６２ｍｍｏｌ／ｌ；ＳＥＭ＝０．０８）、これはＬＬの量の約２倍である。該レベルは２時間後にベースライン近くまで低下した。
【００９９】
グルコースレベルに対するβＨＢの効果を調べるために、グルコースレベルをβＨＢと同時に測定した。図２Ｂは、０．５時間後および１時間後のβＨＢ血中レベルの増加が血中グルコースレベルの同時実質的低下を伴うことを示している。低血糖を予防するために、混合食を与え、測定を継続した。
【０１００】
１．３．患者５名における２０ｇのラセミ体βＨＢの予備的有効性（５名の患者に対する非盲検介入）
最後の３ヶ月にわたる毎月の片頭痛発作頻度をまとめ、平均をベースライン比較のために用いた。２０ｇのβＨＢ、２６ｇのＬＬまたは２６ｇのＬＹを１日２回（それぞれ、朝食の１時間前および夕食の１時間前）、４週間にわたって摂取するように患者に指示した。その期間中、服薬または食習慣における他のいかなる変化をも控えるように彼らに指示した。主要評価項目は、片頭痛が生じた日数の、ベースラインからの変化であった。片頭痛が生じた日数を、モバイルアプリ（ｍｙｈｅａｄａｃｈｅ．ｃｈ）またはペンおよび紙の日記を用いて記録し、参加者間で平均した。
【０１０１】
耐えられない有害事象が１名の患者において生じた。該患者は摂取後に重度の悪心および眩暈を報告し、介入開始の８日後に脱落した。残りの４名の患者も消化管の不調を経験したが、それは、該粉末が夕食と共に又は夕食後に摂取された場合には、若干改善した。嗜好性は依然として問題であり、不快な味が報告された。要約すると、ラセミ体βＨＢの耐容性および嗜好性、特に消化管の不調および悪心は問題であり、これは、摂取後の血中グルコースの付随的低下によって更に悪化しうるであろう。
【０１０２】
ベースラインと比較して、片頭痛の日数における５１％の平均的減少が認められた（平均ベースライン＝１６．２５日、ＳＥＭ＝３．７１；βＨＢ後の平均＝８日、ＳＥＭ＝２．９２；図３を参照されたい）。この減少は２５〜８０％の範囲であった。かなり良好な有効性にもかかわらず、４週間が完了した後、５名の患者のうち２名のみがラセミ体βＨＢ塩を摂取し続けたに過ぎなかった。
【０１０３】
用量反応データ（βＨＢの２０ｇと４０ｇとの比較）：
それら２名の慢性片頭痛患者（１ヶ月当たり２０日または２２日の片頭痛日数）は２０ｇのラセミ体βＨＢを毎日４週間にわたって摂取するよう指示され、１週間の洗い流し期間の後、次の４週間は４０ｇのβＨＢへと用量を２倍にする。介入期間中、片頭痛日数を記録し、患者は他のいかなる生活様式または服薬の変更をも控えるように指示された。平均ベースライン発作頻度は２１日の片頭痛日数（ＳＥＭ＝１）であり、４週間の毎日２０ｇのβＨＢの摂取の後に１１．５日に低下し、４週間の毎日４０ｇのβＨＢの摂取の後に６日に低下した（図４Ａを参照されたい）。この予防効果は用量の増加にほぼ正比例し、２０ｇのβＨＢは、ベースラインから、片頭痛日数における４６％の減少（ＳＥＭ＝１８．８６）をもたらし、４０ｇのβＨＢは７２％の減少（ＳＥＭ＝１２．９５；図４Ｂを参照されたい）をもたらす。この予備的観察は、βＨＢの片頭痛予防効果が用量依存的である可能性が高いことを示唆している。それでも、用量の増加は両方の患者において副作用をも更に増加させ、１日当たり４０ｇの不快な味の粉末は、長期間摂取することも困難であるようであった。
【０１０４】
１．４．参加者５名における１０ｇのＤ−βＨＢの予備的薬物動態
水中に溶解された１０ｇのＤ−ベータ−ヒドロキシブチラート（βＨＢ）を参加者に絶食状態で経口的に与えた。携帯用ポイントオブケア血中ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標））および対応試験片を使用して、血中βＨＢおよびグルコース濃度を以下の５つの時点で測定した：１）ベースライン（摂取直前）、２）摂取の０．５時間後、３）摂取の１時間後、４）摂取の２時間後、５）摂取の３時間後、および６）摂取の４時間後（図５Ａを参照されたい）。ラセミ体βＨＢの場合と同様に、βＨＢの最高平均濃度は約１時間後に見出された（平均＝１．９４ｍｍｏｌ／ｌ；ＳＥＭ＝０．４８）。しかし、本発明者らが驚いたことに、ピークレベルは、ラセミ体βＨＢで得られた量の３倍以上であった（図７を参照されたい）。また、βＨＢレベルは４時間後でさえも上昇状態のままであった（図５Ａ）。
【０１０５】
グルコースレベルに対するＤ−βＨＢの効果を調べるために、グルコースレベルをβＨＢと同時に測定した。本発明者らが驚いたことに、約２ｍｍｏｌ／ｌへのβＨＢ血中レベルの高い平均的上昇は血中グルコースレベルにおける付随的変化を伴わず、これは４時間にわたって完全に安定しているようである（図５を参照されたい）。これは、患者がラセミ体βＨＢで経験した血中グルコースの低下とは対照的である（図６を参照されたい）。それは、同量のＤ−βＨＢを摂取した場合には生じないようであった。
【０１０６】
１．５．患者２名における１０ｇのラセミ体βＨＢと１０ｇのＤ−βＨＢとの予備的有効性の比較（非盲検介入）
最後の３ヶ月にわたる毎月の片頭痛発作頻度をまとめ、平均をベースライン比較のために用いた。１０ｇのラセミ体βＨＢを８週間摂取し、ついで１週間の洗い流し期間の後、１０ｇのＤ−βＨＢを毎日８週間摂取するように患者に指示した。その期間中、服薬または食習慣における他のいかなる変化をも控えるように彼らに指示した。主要評価項目は、片頭痛が生じた日数の、ベースラインからの変化であった。片頭痛が生じた日数を、モバイルアプリ（ｍｙｈｅａｄａｃｈｅ．ｃｈ）またはペンおよび紙の日記を用いて記録し、参加者間で平均した。
【０１０７】
８週間の１０ｇのラセミ体βＨＢの摂取中に、ベースラインと比較して、片頭痛日数における１８．５％の平均減少が認められた（平均ベースライン＝１３．５日、ＳＥＭ＝２．８６；βＨＢ後の平均＝１１日、ＳＥＭ＝１．１５；図８を参照されたい）。８週間の１０ｇのＤ−βＨＢの摂取中に、ベースラインと比較して、片頭痛日数における６８．５％の平均減少が認められた（平均ベースライン＝１３．５日、ＳＥＭ＝２．８６；βＨＢ後の平均＝４．２５日、ＳＥＭ＝０．４３；図８を参照されたい）。片頭痛日数におけるこの減少は、４０ｇのラセミ体βＨＢで観察された効果に匹敵する（共に、片頭痛が生じた日数における約７０％の減少）。
【０１０８】
嗜好性および副作用プロファイルは、Ｄ−βＨＢおよび減少用量を使用した場合、遥かに改善された。与えられた用量で副作用は報告されなかった。そしてどちらの患者もＤ−βＨＢの摂取を毎日継続している。
【０１０９】
これらの非常に予備的な知見は、驚くべきことに、Ｄ−βＨＢが他のケトン原性物質より遥かに高く血中βＨＢレベルをヒトにおいて上昇させうるらしいことだけでなく、ＫＤ中に人体が産生した用量の一部だけ（約１５０ｇ対１０ｇ）で片頭痛頻度における顕著な減少（最大７０％）をも招くことを示唆している。また、それは他のケトン原性物質より遥かに良好な耐容性を有し、より美味であるようであり、血中グルコースレベルにおける潜在的に望ましくない低下をもたらさないようである。この知見は、Ｄ−βＨＢが片頭痛患者における代謝産物として作用するだけでなく、片頭痛に関連した病態生理学的メカニズムに正の影響を及ぼすシグナル伝達分子としても作用することを示唆している。
【０１１０】
２．臨床試験
臨床試験の説明：片頭痛の予防的治療のための外因性ケトン体の安全性、耐容性および有効性：クロスオーバー無作為化プラセボ対照二重盲検試験。
【０１１１】
２．１．臨床試験の概要
【表１】
2020504746.tif 000004
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【０１１２】
２．２．試験医薬
血中ケトン濃度を外因的に上昇させるために、本発明者らは、片頭痛またはその症状の治療または予防のための医薬または栄養補助剤の製造における、Ｄ−βＨＢまたはその代謝前駆体の単独での又は他のケトン原性物質と組合された使用を提示する。
【０１１３】
実現可能性に関する理由およびミネラル負荷のために、後記の第２相試験における患者には１８ｇの無機塩形態のβＨＢを投与する。以下においては、試験医薬はベルム（ｖｅｒｕｍ）と称される。
【０１１４】
２．３．試験デザイン
該試験は、１回の積極的介入（βＨＢ）および１つのプラセボ群を伴う、二重盲検無作為化プラセボ対照、安全性、耐容性および有効性試験である。１８〜６５歳の４５名の中ないし高頻度片頭痛患者（１ヶ月当たり５〜１４日の片頭痛日数）が含まれる。参加者は、試験の全期間を通して、詳細な頭痛の記録（ｗｗｗ．ｍｙｈｅａｄａｃｈｅ．ｃｈ）を付けることが要求される。
【０１１５】
試験期間は４週間の慣らし期間から始まり、その期間には治験的治療は行われない（図１を参照されたい）。慣らし期間の目的はベースライン比較のための観察である。慣らし期間の後、１２週間の介入期間が続き、このとき、被験者は試験医薬または対応プラセボの投与を受ける（１日３回）。最初の介入期間の後、４週間の洗い流し期間、および第２の４週間の慣らし期間が続き、その期間中は更なる介入は行われない。この後、第２の介入期間が続き、このとき、参加者は「交差（ｃｒｏｓｓ−ｏｖｅｒ）」する、すなわち、最初の介入の代替治療を受ける（彼らが最初の１２週間にベルムの投与を受けた場合には、彼らは第２の１２週間にはプラセボの投与を受け、あるいはその逆である）。
【表２】
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【０１１６】
２．４．目標とする結果
２．４．１．主要有効性評価項目
主な目的は、中頻度ないし高頻度の偶発的片頭痛患者において、ベースラインから最後の４週間の介入までの４週間当たりの片頭痛日数の減少に関して、ベルム（ｖｅｒｕｍ）がプラセボより優れていることを示すことである。
【０１１７】
ペンおよび紙での詳細な頭痛日記（ｗｗｗ．ｍｙｈｅａｄａｃｈｅ．ｃｈに類似したもの）を用いて、毎月の片頭痛頻度の減少（すなわち、主要結果）を評価する。片頭痛が生じた日数（頭痛日記で評価される）の減少は片頭痛予防に関するＲＣＴにおける標準的な主要有効性評価項目である。頭痛日記はＩＯＳおよびアンドロイドアプリとして利用可能であり、使いやすい。片頭痛に関連した特徴、例えば、発作の開始、発作の長さ（時間単位）、発作の重症度（０〜１０）、服用薬（量および用量）、関連症状および潜在的誘発要因を記録する。
【０１１８】
２．４．２．副次的有効性評価項目
副次的目的は、以下の副次的エンドポイントに関して、外的に誘発された軽度ケトン症の、ベルムによる治療効果を評価することである。
【０１１９】
・片頭痛の日数における５０％を超える減少と定義される、治療応答者の割合。
【０１２０】
・最後の４週間の介入中の、任意の重症度の頭痛日数の、ベースライン（ＩＣＨＤ−３基準を満たす）からの変化。
【０１２１】
・最後の４週間の追跡調査期間中の、任意の重症度の頭痛日数の、ベースライン（ＩＣＨＤ−３基準を満たす）からの変化。
【０１２２】
・最後の４週間の介入中の、ベースラインからの急性片頭痛薬（鎮痛薬またはトリプタン）の摂取（急性頭痛薬の使用日数により測定される）の変化。
【０１２３】
・最後の４週間の介入中の、ベースラインからの平均片頭痛強度（各片頭痛エピソードに関する０〜１０のＶＡＳで評価される）の変化。
【０１２４】
・ベースラインから最後の４週間の介入までの、障害の変化［片頭痛関連障害が生じた日数（０〜２７０）を示す片頭痛障害評価（ＭＩＤＡＳ）および頭痛影響試験６（ＨＩＴ−６）により評価される］。
【０１２５】
副次的結果は、頭痛日記（ｍｙｈｅａｄａｃｈｅ．ｃｈ）およびアンケートを用いて測定され、これは、それぞれ、ベースライン来院時、１２週間の介入の後の来院時および洗い流し期間の後、紙コピーとして提供される。
【０１２６】
２．４．３．探索的分析
探索目的は、酸化ストレスのマーカーおよび遺伝子解析に関して、Ｄ−βＨＢ補給により外的に誘発される軽度ケトン症の潜在的作用メカニズムを評価することである。
【０１２７】
・最後の４週間の介入中の、酸化的およびニトロソ化ストレスマーカー（マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）、カルボニル化タンパク質、ニトラート、ニトリット、ニトロチロシン）の、ベースラインからの血清中濃度変化（ＥＬＩＳＡおよび質量分析により検査される）
・試験に関与した全患者の遺伝子プロファイル（ＳＮＰ）、ならびに主要評価および副次的評価との遺伝的マーカーの相関性。
【０１２８】
・ミトコンドリア関連遺伝子クエン酸シンターゼ、チトクロームＣオキシダーゼサブユニット１、コハク酸デヒドロゲナーゼサブユニットＡ）に特に焦点を当てた、発現マイクロアレイを使用する介入の前および後の遺伝子発現変化。
【０１２９】
・可能な共変量としての主要評価および副次的評価と組合された、患者の遺伝的プロファイルとの遺伝子発現変化の相関性（ｅＱＴＬ分析）。
【０１３０】
・もう１つの探索目的はベースラインから最後の４週間の介入期間までのピークＢＫレベルおよびグルコースレベルの変化を調べることである。血中ＫＢおよびグルコースレベルは、午前中、試験薬の摂取の３０分後および６０分後、週１回、携帯用ポイントオブケア血液ケトン測定器（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｘｔｒａ（登録商標）および対応試験片）を使用して測定される。
【０１３１】
２．４．４．耐容性および安全性評価項目
安全性および耐容性は以下により決定される。
【０１３２】
・プラセボ治療と積極的治療との間の治療起因有害事象（薬物との潜在的因果関係にかかわらず任意の事象）の比較。
【０１３３】
・プラセボ治療と積極的治療との間の、主任研究者によりインピュテーションされた治療関連有害事象（例えば、消化管の不調）の比較。
【０１３４】
・ベースラインおよび／またはプラセボ群と比較した場合の、通常の検査およびバイタルサイン（後記を参照されたい）における任意の有意な変化。
【０１３５】
・治療の安全性を判定するために、来院２、３および４において、通常の検査（腎および肝機能検査、電解質、全血球数、Ｃ反応性タンパク質、血清コレステロール、トリグリセリド、血清タンパク質、アルブミン、グルコース、Ｈｂａ１ｃ）を行う。重要なパラメータ（血圧、心拍数、体重、身長）は毎回の来院時に測定される。
【０１３６】
２．５．試験被験者の選択
２．５．１．募集
募集戦略
バーゼル大学病院神経科（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｂａｓｅｌ）での医師の診察中に、試験に関して、神経科医（例えば、Ｂｅｒｎｈａｒｄ  Ｄｅｃａｒｄ博士）が患者に知らせる。地元の薬局、地元の神経内科医院、Ｂｒｕｄｅｒｈｏｌｚｓｐｉｔａｌ（Ｋａｎｔｏｎｓｓｐｉｔａｌ  Ｂａｓｅｌｌａｎｄ）の神経科およびＢａｄ  Ｚｕｒｚａｃｈの頭痛クリニック（Ｈｅａｄａｃｈｅ  Ｃｌｉｎｉｃ）（Ｓａｎｄｏｒ教授によるもの）に、より多数の宣伝チラシが展示される。また、ＵＳＢ（ＥＫＮＺ−Ｎｕｍｂｅｒ  １９４／１３）における片頭痛−スポーツ介入研究に関して過去に連絡した患者が、本研究に同意し本研究の選択基準を満たしていれば、該患者に再度連絡を取る。本研究のために過去に連絡した約３００名の、研究に関心のある患者が、片頭痛予防に関する将来の研究のために連絡されることに同意した。更に、大学図書館だけでなく、神経内科および総合医学部の待合室にも宣伝チラシが公開される。宣伝チラシに似たお知らせが、研究専用のバーゼル大学（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｂａｓｅｌ）“Ｍａｒｋｔｐｌａｔｚ”のウェブページ（ｈｔｔｐｓ：／／ｍａｒｋｔ．ｕｎｉｂａｓ．ｃｈ／ｎｃ／ｉｎｓｅｒａｔｅ／ｋａｔｅｇｏｒｉｅ／ｊｏｂ−ａｎｇｅｂｏｔ−ｓｔｕｄｉｅｎ／）およびＵＳＢウェブサイト（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｕｎｉｓｐｉｔａｌ−ｂａｓｅｌ．ｃｈ／ｌｅｈｒｅ−ｆｏｒｓｃｈｕｎｇ／ｓｔｕｄｉｅｎｉｎｓｅｒａｔｅ／）にそれぞれ掲載される。
【０１３７】
募集の実施可能性
中頻度ないし高頻度の片頭痛患者においては、治験に対する心構えは高い。なぜなら、現在の治療選択肢は非常に限られており、しばしば、耐えられない副作用を伴うからである。片頭痛は、よく見られる障害であり、本発明者らは、片頭痛の新規形態の発明に関する研究に進んで参加する３００名の患者の集団を既に有する。また、共同出願人は、彼の頭痛クリニックを通して、そしてＵＳＢの神経科と一緒になって、大きな患者集団に対するアクセスを有し、約１００名の患者が選択基準を満たしている。本発明者らは、５０名の適格患者の募集に関して、問題を予想していない。
【０１３８】
２．５．２．包含および除外基準
包含基準：被験者
１．１８歳〜６５歳である。
【０１３９】
２．ＩＣＨＤ−３  Ｂｅｔａ分類基準に従い、片頭痛（前兆を伴う又は伴わない）と以前に診断されている。
【０１４０】
３．１ヶ月当たり５日〜１４日の片頭痛日数（過去３ヶ月間にわたって）を有し、少なくとも２つの片頭痛は４時間以上持続する。
【０１４１】
４．片頭痛の発症年齢が５０歳未満である。
【０１４２】
５．片頭痛および片頭痛以外の適応症に対するいずれかの予防薬（片頭痛症状の急性緩和のために服用される医薬以外）および栄養補助食品（例えば、Ｑ１０、リボフラビンなど）のうち、臨床医の見解では本試験目的を妨げる可能性があるもの（例えば、抗うつ薬、抗けいれん薬、ベータブロッカー）の服用開始またはその種類、投与量もしくは頻度の変更を行うのを本研究の持続期間にわたって控えることに同意する。
【０１４３】
６．片頭痛および片頭痛以外の適応症に対するいずれかの予防薬（片頭痛症状の急性緩和のために服用される医薬以外）および栄養補助食品（例えば、Ｑ１０、リボフラビンなど）のうち、臨床医の見解では本試験目的を妨げる可能性があるもの（例えば、抗うつ薬、抗けいれん薬、ベータブロッカー）の種類、投与量もしくは頻度を、研究開始前の少なくとも３ヶ月間、変更していない。
【０１４４】
７．意図されたとおりにケトン原性粉末またはプラセボを使用すること、フォローアップ来院要件を含む本研究の要件の全てに従うこと、被験者の日記および他の自己評価アンケートにおける必要研究データを記録することに同意し、血液サンプルを採取することに同意する。
【０１４５】
８．書面によるインフォームドコンセントを提供することが可能である。
【０１４６】
除外基準：被験者
１．研究中に経口または注射用ステロイドを要する付随的医学的状態を有する。
【０１４７】
２．研究者の見解では本研究評価を混乱させる可能性がある、いずれかの有意な神経学的、精神医学的または他の医学的状態の病歴を有する。
【０１４８】
３．甲状腺疾患に対して現在治療を受けている、またはその履歴を有する。
【０１４９】
４．心血管疾患（特に高血圧）またはその既往歴を有する。
【０１５０】
５．二次性頭痛の疑いのある既知病歴を有する。
【０１５１】
６．頭痛または他の身体疼痛に対して、単純鎮痛薬または非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）またはトリプタンを、１ヶ月に１０日を超えて、現在服用している。
【０１５２】
７．処方オピオイドを現在服用している。
【０１５３】
８．過去６か月以内に偶発性片頭痛に戻った薬物乱用頭痛（ＭｏＨ）の過去の診断を有する。
【０１５４】
９．慢性片頭痛に関するＩＣＨＤ−３ベータ分類（Ｂｅｔａ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ）基準（毎月１５日を超える頭痛日数）を満たす。
【０１５５】
１０．片頭痛の予防のための少なくとも３クラスの薬物療法の適切な治験（２ヶ月以上）に失敗した。
【０１５６】
１１．片頭痛予防のための手術を受けた。
【０１５７】
１２．過去６ヶ月以内にボトックス注射を受けた。
【０１５８】
１３．妊娠している、または研究期間中に妊娠する予定である、出産適齢期である、および一般に受け入れられた形態の受胎調節を用いることを望まない。
【０１５９】
１４．いずれかの他の治療用臨床試験に現在参加している、または過去３０日以内に臨床試験に参加したことがある。
【０１６０】
１５．影響を受けやすい集団に属している、またはインフォームド・コンセントを提供する、フォローアップ要件を遵守する若しくは自己評価を提供する彼もしくは彼女の能力が損なわれるいずれかの状態を有する（例えば、ホームレス、発達障害者および囚人）。
【０１６１】
１６．ホルモンに基づく避妊薬を開始、変更または中止することを考えている。
【０１６２】
２．６．統計
主な目的は、中頻度ないし高頻度の偶発的片頭痛患者において、ベースラインから最後の４週間の介入までの４週間当たりの片頭痛日数の減少に関して、ケトン原性サプリメントがプラセボより優れていることを示すことである。主要エンドポイントである、最後の４週間の治療における片頭痛の日数は、各患者について２回、すなわち、プラセボ治療期間後に１回およびベルム（ｖｅｒｕｍ）治療期間後に１回、測定される。治療開始前の４週間における片頭痛日数が両方の治療期間に関して評価され、したがって、共変量として用いられる２つのベースライン値が存在する。これは、ベースライン片頭痛頻度またはキャリーオーバー効果における潜在的な季節変動を補正する目的を有する
一次分析は、線形混合効果回帰モデルを用いて行われる。主要モデルは、応答変数としての主要エンドポイント（最後の４週間の治療における片頭痛日数）、共変量としてのそれぞれのベースライン値、主効果としての治療（ベルム対プラセボ）および期間（第１対第２）、２つの相互作用項、すなわち、「治療×期間」および「治療×ベースライン値」、ならびにランダム効果としての患者を含む。治療と期間との間の有意な相互作用項はキャリーオーバー効果を示す。主要エンドポイントがベースライン値に対してどの程度強く相関しているかが不明であるため、該モデルにおける共変量としてベースラインを含めるのが適切かどうかは不明である。したがって、前記の一次モデルは、赤池の情報基準（ＡＩＣ）により、相互作用項「治療×ベースライン値」の非存在下および相互作用項「治療×ベースライン値」とベースライン値との両方の非存在下のモデルと比較される。
【０１６３】
主な分析はＩＴＴセットにおいて行われる。欠落値は、第１１．５節に記載されているとおりにインピュテーションされる。
【０１６４】
亜群分析：以下の先験的に定められた亜群を調べる：性別（男性／女性）、前兆を伴う片頭痛（有／無）、片頭痛日数のベースライン頻度（中＝５〜９日／４週；高＝１０〜１４日／４週）。各亜群に関して、該亜群の主効果および相互作用項「亜群×治療」が前記統計モデルに追加される。亜群間で治療効果における差を示す、相互作用効果に関する傾向（ｐ＜０．１０）の場合には、別々のモデルが各亜群に適合するであろう。
【０１６５】
感度分析：亜群分析を伴わない主要分析はＰＰセットにおいて反復される。ＩＴＴ分析の結果からの潜在的な逸脱が詳細に記載される。
【０１６６】
副次的エンドポイントは、対応ベースライン尺度を共変量として、主要エンドポイントに関して記載されているとおりに分析される。更なる探索目的は、ベースラインから最後の４週間のフォローアップ期間までの、４週間当たりの片頭痛日数に対するＢＫレベルの相関性を調べることである。両方の変数の時間経過がグラフ表示され、精査される。更に、相互相関が計算される。その他の探索目的（遺伝子発現変化、治療応答の根底にある潜在的遺伝的根拠および酸化ストレスのマーカーの変化）の統計的考慮事項は後記に概説されている。
【０１６７】
統計分析は、Ｒ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｒ−ｐｒｏｊｅｃｔ．ｏｒｇ／）を使用して行われる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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