(57)【要約】デュアルユースの濾過およびクロマトグラフィ用ポッドを含む、液体細胞培養液から組換えタンパク質を捕捉および精製する方法、濾過およびクロマトグラフィ用ポッド、ならびにこれらポッドの使用を、本明細書に提供する。2020529605.tif 000009
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
壁によって形成されかつ上端と下端とを有するコンテナを具備し、
該壁が該下端とともにシールを形成し、かつ
該壁、該上端、および該下端のうち1つまたは複数が、液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む、
濾過およびクロマトグラフィ用ポッド。
【請求項２】
半多孔質または多孔質材料が、（a）細胞がポッド外部からポッド内部に流入することを許容しないこと、および（b）樹脂を該ポッド内部に保持または実質的に保持すること、の1つまたは両方によって特徴付けられる、請求項1記載のポッド。
【請求項３】
細胞が哺乳類細胞である、請求項2記載のポッド。
【請求項４】
細胞が昆虫細胞または酵母細胞である、請求項2記載のポッド。
【請求項５】
細胞が細菌細胞である、請求項2記載のポッド。
【請求項６】
前記材料が半透膜または多孔質膜である、請求項1〜5のいずれか一項記載のポッド。
【請求項７】
前記材料が半透性または多孔質のメッシュである、請求項1〜5のいずれか一項記載のポッド。
【請求項８】
メッシュがナイロンで作られる、請求項7記載のポッド。
【請求項９】
前記材料が約50 nm〜約50 μmの孔径を有する、請求項1〜8のいずれか一項記載のポッド。
【請求項１０】
前記材料が約100 nm〜約30 μmの孔径を有する、請求項9記載のポッド。
【請求項１１】
前記材料が約500 nm〜約20 μmの孔径を有する、請求項10記載のポッド。
【請求項１２】
前記材料が約1 μm〜約10 μmの孔径を有する、請求項11記載のポッド。
【請求項１３】
前記材料が約2 μm〜約5 μmの孔径を有する、請求項12記載のポッド。
【請求項１４】
コンテナが約1 mL〜約500 mLの内部体積を有する、請求項1〜13のいずれか一項記載のポッド。
【請求項１５】
コンテナが約1 mL〜約250 mLの内部体積を有する、請求項14記載のポッド。
【請求項１６】
コンテナが約1 mL〜約100 mLの内部体積を有する、請求項15記載のポッド。
【請求項１７】
下端が、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを具備する、請求項1〜16のいずれか一項記載のポッド。
【請求項１８】
壁が、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを具備する、請求項1〜16のいずれか一項記載のポッド。
【請求項１９】
下端と壁とが、それぞれ、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを具備する、請求項1〜16のいずれか一項記載のポッド。
【請求項２０】
上端が、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを具備する、請求項1〜16のいずれか一項記載のポッド。
【請求項２１】
上端と下端とが、それぞれ、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを具備する、請求項1〜16のいずれか一項記載のポッド。
【請求項２２】
前記少なくとも1つのエリアの各々が、約1 mm2〜約25 cm2の表面積を有する、請求項1〜21のいずれか一項記載のポッド。
【請求項２３】
前記少なくとも1つのエリアの各々が、約1 mm2〜約20 cm2の表面積を有する、請求項22記載のポッド。
【請求項２４】
前記少なくとも1つのエリアの各々が、約1 mm2〜約10 cm2の表面積を有する、請求項23記載のポッド。
【請求項２５】
前記少なくとも1つのエリアの各々が、約1 mm2〜約5 cm2の表面積を有する、請求項24記載のポッド。
【請求項２６】
前記少なくとも1つのエリアの各々が、約1 mm2および2.5 cm2の表面積を有する、請求項25記載のポッド。
【請求項２７】
前記少なくとも1つのエリアの各々が、約1 mm2および約1 cm2の表面積を有する、請求項26記載のポッド。
【請求項２８】
下端が平らである、請求項1〜27のいずれか一項記載のポッド。
【請求項２９】
下端が半球形を有する、請求項1〜27のいずれか一項記載のポッド。
【請求項３０】
下端が円錐形を有する、請求項1〜27のいずれか一項記載のポッド。
【請求項３１】
壁が円柱形を有する、請求項1〜30のいずれか一項記載のポッド。
【請求項３２】
壁が円錐形を有する、請求項1〜30のいずれか一項記載のポッド。
【請求項３３】
壁が球形を有する、請求項1〜30のいずれか一項記載のポッド。
【請求項３４】
壁が半球形を有する、請求項1〜30のいずれか一項記載のポッド。
【請求項３５】
壁が砂時計形を有する、請求項1〜30のいずれか一項記載のポッド。
【請求項３６】
ポッドが、コンテナ内部に配されたクロマトグラフィ樹脂をさらに具備する、請求項1〜35のいずれか一項記載のポッド。
【請求項３７】
クロマトグラフィ樹脂が市販のクロマトグラフィ樹脂である、請求項36記載のポッド。
【請求項３８】
クロマトグラフィ樹脂がアフィニティクロマトグラフィ樹脂である、請求項36または37記載のポッド。
【請求項３９】
アフィニティクロマトグラフィ樹脂が、プロテインA樹脂、プロテインG樹脂、プロテインL樹脂、ニッケル樹脂、または磁性ビーズ樹脂である、請求項38記載のポッド。
【請求項４０】
クロマトグラフィ樹脂が約1 mL〜約500 mLの体積を有する、請求項36〜39のいずれか一項記載のポッド。
【請求項４１】
クロマトグラフィ樹脂が約1 mL〜約250 mLの体積を有する、請求項40記載のポッド。
【請求項４２】
クロマトグラフィ樹脂が約1 mL〜約100 mLの体積を有する、請求項41記載のポッド。
【請求項４３】
クロマトグラフィ樹脂が約1 mL〜約50 mLの体積を有する、請求項42記載のポッド。
【請求項４４】
クロマトグラフィ樹脂が、約1 x 10-6〜約1 x 10-10の無菌性保証水準を有する、請求項36〜43のいずれか一項記載のポッド。
【請求項４５】
請求項1〜44記載のいずれかのポッドを具備する、キット。
【請求項４６】
ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための手段をさらに具備する、請求項45記載のキット。
【請求項４７】
培養容器が、振盪フラスコ、振盪チューブ、バイオリアクター、またはマルチウェルプレートである、請求項46記載のキット。
【請求項４８】
バイオリアクターがパーフュージョンバイオリアクターである、請求項47記載のキット。
【請求項４９】
バイオリアクターがフィードバッチ（feed batch）バイオリアクターである、請求項47記載のキット。
【請求項５０】
（a）請求項18、19、および22〜44のいずれか一項記載の少なくとも1つのポッドと；
（b）流体が壁を通って該ポッド内部から該ポッド外部に漏れることが防止されるよう、該壁における前記1つまたは複数のエリアの各々の上に確実固定できる、1つまたは複数のパネルと
を具備する、キット。
【請求項５１】
（a）請求項18、19、および22〜44のいずれか一項記載のポッドと；
（b）流体が壁における前記少なくとも1つのエリアを通って該ポッド内部から該ポッド外部に漏れることが防止されるよう、該壁における前記少なくとも1つのエリアを覆うため該ポッド上に確実固定できる、外側スリーブと
を具備する、キット。
【請求項５２】
スリーブが、空のクロマトグラフィカラムである、請求項51記載のキット。
【請求項５３】
（a）請求項1〜44のいずれか一項記載のポッドと；
（b）下端上に安定的に固定できる溶離アウトレット、および
上端上に安定的に固定できる緩衝剤リザーバ
のうち、1つまたは両方と
を具備する、キット。
【請求項５４】
ポッドと溶離アウトレットとを具備する、請求項53記載のキット。
【請求項５５】
ポッドと緩衝剤リザーバとを具備する、請求項53記載のキット。
【請求項５６】
ポッドと、溶離アウトレットと、緩衝剤リザーバとを具備する、請求項53記載のキット。
【請求項５７】
溶離アウトレットが漏斗である、請求項53、54、および56のいずれか一項記載のキット。
【請求項５８】
溶離アウトレットが、ポートを有する平らな表面を具備する、請求項53、54、および56のいずれか一項記載のキット。
【請求項５９】
溶離アウトレットが、該溶離アウトレットを通る流体のフローを調節できるよう構成される、請求項53、54、および56〜58のいずれか一項記載のキット。
【請求項６０】
溶離アウトレットが、該溶離アウトレットを通る流体のフローを調節できるよう構成されない、請求項53、54、および56〜58のいずれか一項記載のキット。
【請求項６１】
溶離アウトレットが、ポッドにねじ留めまたはクリック留めされうる、請求項53、54、および56〜60のいずれか一項記載のキット。
【請求項６２】
（a）請求項18、19、および22〜44のいずれか一項記載のポッドと；
（b）流体が壁における前記少なくとも1つのエリアを通って該ポッド内部から該ポッド外部に漏れることが防止されるよう、可動式外側スリーブが回転すると該壁における該少なくとも1つのエリアが覆われうるように該壁に接続された、可動式外側スリーブと
を具備する、キット。
【請求項６３】
ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための手段をさらに具備する、請求項50〜62のいずれか一項記載のキット。
【請求項６４】
（a）請求項17および20〜44のいずれか一項記載のポッドと；
（b）ポッドの長軸を培養容器内部における水平位置に安定的に位置決めするための手段と
を具備する、キット。
【請求項６５】
（a）請求項1〜19、22〜28、31、および36〜44のいずれか一項記載のポッドと；
（b）上端と、流体コンジットを具備する細長の円柱形ボディと、下端と、を有するインレットシステムであって、該インレットシステムの該上端が流体インレットを具備し、かつ該ポッドの上端に安定的に取り付けられるよう構成され；そして該ポッドに安定的に接続された時に、該流体インレットおよび該流体コンジットを通りそして該インレットシステムの該下端から出て該ポッド内に入る流体のフローを可能にし；かつ、該インレットシステムの該細長の円柱形ボディが、該ポッドの壁の内側にフィットするよう構成されている、インレットシステムと；
（c）流体アウトレットを具備するアウトレットシステムであって、該ポッドの下端に安定的に取り付けられるよう構成され、そして該ポッドの該下端に安定的に接続された時に、該流体アウトレットを通って該ポッドから出る流体のフローを可能にする、アウトレットシステムと
を具備する、キット。
【請求項６６】
インレットシステムの上端とポッドの上端とが、該ポッドの該上端を該インレットシステムの該上端に安定的に取り付けることを可能にするねじ切りを含む、請求項65記載のキット。
【請求項６７】
インレットシステムの上端におけるねじ切り、またはポッドの上端におけるねじ切りが、Oリングを具備する、請求項65または66記載のキット。
【請求項６８】
ポッドがクロマトグラフィ樹脂を含有し；かつ
インレットシステムと該ポッドとが安定的に取り付けられた時に、該インレットシステムの下端が該クロマトグラフィ樹脂に近接するよう、該インレットシステムと該ポッドとが構成される
請求項65〜67のいずれか一項記載のキット。
【請求項６９】
ポッドの内面とインレットシステムの下端とが、該ポッドと該インレットシステムの該下端との安定的な取り付けを可能にするよう構成される、請求項68記載のキット。
【請求項７０】
ポッドの内面とインレットシステムの下端とが、該ポッドと該インレットシステムの該下端との安定的な取り付けを可能にするねじ切りを具備する、請求項69記載のキット。
【請求項７１】
ポッドの内面におけるねじ切り、またはインレットシステムの下端におけるねじ切りが、Oリングを具備する、請求項70記載のキット。
【請求項７２】
アウトレットシステムとポッドの下端とが、該アウトレットシステムを該ポッドの該下端に安定的に取り付けることを可能にするねじ切りを具備する、請求項65〜71のいずれか一項記載のキット。
【請求項７３】
アウトレットシステムにおけるねじ切り、またはポッドの下端におけるねじ切りが、Oリングを具備する、請求項72記載のキット。
【請求項７４】
流体インレットが、チュービングへの取り付けが可能である、請求項65〜73のいずれか一項記載のキット。
【請求項７５】
流体アウトレットが、チュービングへの取り付けが可能である、請求項65〜74のいずれか一項記載のキット。
【請求項７６】
（d）ポッドの長軸を培養容器内部における水平位置に安定的に位置決めするための手段
をさらに具備する、請求項65〜75のいずれか一項記載のキット。
【請求項７７】
液体細胞培養によって産生された組換えタンパク質を捕捉する方法であって、請求項36〜44記載のいずれかのポッドをある期間にわたって該液体細胞培養液に接触させる段階を具備し、
該接触の段階は、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも一部分が該液体細胞培養液に接触するという結果をもたらし、かつ、該接触は、クロマトグラフィ樹脂による該組換えタンパク質の捕捉という結果をもたらす条件下で行われる、方法。
【請求項７８】
液体細胞培養液が培養容器内に配される、請求項77記載の方法。
【請求項７９】
液体細胞培養によって産生された組換えタンパク質を精製する方法であって、以下の段階を含む、方法：
（a）請求項36〜44記載のいずれかのポッドをある期間にわたって液体細胞培養液に接触させる段階であって、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも一部分が該液体細胞培養液に接触するという結果をもたらし、かつ、該接触は、クロマトグラフィ樹脂による該組換えタンパク質の捕捉という結果をもたらす条件下で行われる、段階；および
（b）該期間後に該クロマトグラフィ樹脂から該組換えタンパク質を溶離し、これにより該組換えタンパク質を精製する段階。
【請求項８０】
（b）の後に、（c）1つまたは複数の追加的な単位操作を組換えタンパク質に対して行う段階、をさらに含む、請求項79記載の方法。
【請求項８１】
（c）の後に、組換えタンパク質を組換えタンパク質製剤に製剤化する段階、をさらに含む、請求項80記載の方法。
【請求項８２】
段階（a）と段階（b）との間にクロマトグラフィ樹脂を洗浄する段階、をさらに含む、請求項77〜81のいずれか一項記載の方法。
【請求項８３】
接触の段階が無菌条件下で行われる、請求項77〜82のいずれか一項記載の方法。
【請求項８４】
前記期間が約5分間〜約2週間である、請求項77〜83のいずれか一項記載の方法。
【請求項８５】
前記期間が約5分間〜約168時間である、請求項84記載の方法。
【請求項８６】
前記期間が約5分間〜約96時間である、請求項85記載の方法。
【請求項８７】
前記期間が約5分間〜約48時間である、請求項86記載の方法。
【請求項８８】
前記期間が約5分間〜約24時間である、請求項87記載の方法。
【請求項８９】
前記期間が約5分間〜約12時間である、請求項88記載の方法。
【請求項９０】
前記期間が、液体細胞培養が指数増殖期にある時に生じる、請求項77〜89のいずれか一項記載の方法。
【請求項９１】
前記期間が、液体細胞培養が定常増殖期にある時に生じる、請求項77〜89のいずれか一項記載の方法。
【請求項９２】
前記少なくとも1つのエリアの総表面積の少なくとも30%が、段階（a）における前記期間にわたって液体細胞培養液と接触する、請求項77〜91のいずれか一項記載の方法。
【請求項９３】
前記少なくとも1つのエリアの総表面積の少なくとも50%が、段階（a）における前記期間にわたって液体細胞培養液と接触する、請求項92記載の方法。
【請求項９４】
前記少なくとも1つのエリアの総表面積の少なくとも75%が、段階（a）における前記期間にわたって液体細胞培養液と接触する、請求項93記載の方法。
【請求項９５】
前記少なくとも1つのエリアの総表面積の少なくとも90%が、段階（a）における前記期間にわたって液体細胞培養液と接触する、請求項94記載の方法。
【請求項９６】
液体細胞培養液が培養容器内に配される、請求項77〜95のいずれか一項記載の方法。
【請求項９７】
培養容器が、振盪チューブ、振盪フラスコ、またはバイオリアクターである、請求項96記載の方法。
【請求項９８】
バイオリアクターがパーフュージョンバイオリアクターである、請求項97記載の方法。
【請求項９９】
バイオリアクターがフェッドバッチバイオリアクターである、請求項97記載の方法。
【請求項１００】
液体細胞培養液が、細菌細胞、酵母細胞、植物細胞、または哺乳類細胞を含む、請求項77〜99のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０１】
哺乳類細胞がヒト細胞である、請求項100記載の方法。
【請求項１０２】
哺乳類細胞がチャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞である、請求項101記載の方法。
【請求項１０３】
前記1つまたは複数の追加的な単位操作が、ウイルス不活化、ウイルス濾過、研磨、サイズ排除クロマトグラフィ、陽イオン交換クロマトグラフィ、陰イオン交換クロマトグラフィ、疎水性相互作用クロマトグラフィ、混合モードクロマトグラフィ、および限外濾過／ダイアフィルトレーションからなる群より選択される、請求項80記載の方法。
【請求項１０４】
組換えタンパク質が分泌タンパク質である、請求項77〜103のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０５】
組換えタンパク質が、タグを伴うかまたは伴わない任意のタンパク質である、請求項77〜104のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０６】
組換えタンパク質が、抗体、抗原結合性抗体断片、酵素、または融合タンパク質である、請求項77〜104のいずれか一項記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、その全内容が参照により本明細書に組み入れられる、2017年8月1日に提出された米国特許仮出願第62/539,943号に対する優先権を主張する。
【０００２】
技術分野
本開示はバイオテクノロジーの分野に関し、より具体的には組換えタンパク質の捕捉および精製に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
組換えタンパク質を生産するための現在の技法およびツールは、多くの場合、労働集約的で、時間がかかり、費用がかさみ、かつエラーが生じやすい。ユーザー操作を要する工程ごとに、とりわけタンパク質回収率が損なわれる可能性がある。
【発明の概要】
【０００４】
概要
本開示は、液体細胞培養液から組換えタンパク質を捕捉および精製するための新規の濾過およびクロマトグラフィ用ポッドの生成に、少なくとも部分的に基づく。以下に詳述しかつ実施例において例示するように、本発明の濾過およびクロマトグラフィ用ポッドは、例えば、速度、使いやすさ、タンパク質安定性の向上、ならびに、複数の培養容器および他の消耗品を使う必要性が解消され、それにより関心対象の組換えタンパク質の迅速な捕捉および精製が可能になること、など、組換えタンパク質を精製するこれまでの方法にまさる複数の恩典を提供する。本出願よって特許請求される発明の他の利点も、本明細書に説明する。
【０００５】
したがって、壁によって形成されかつ上端と下端とを有するコンテナを含む、濾過およびクロマトグラフィ用ポッドを本明細書に提供する。壁は下端とともにシールを形成する。そして、壁、上端、および下端のうち1つまたは複数は、液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、下端は、半多孔質または多孔質材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。
【０００６】
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料は、（a）細胞がポッド外部からポッド内部に流入することを許容しないこと、および（b）樹脂をポッド内部に保持または実質的に保持すること、の1つまたは両方によって特徴付けられる。いくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料は、細胞がポッド外部からポッド内部に流入することを許容しない。いくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料は、樹脂をポッド内部に保持または実質的に保持する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料は、細胞がポッド外部からポッド内部に流入することを許容しないこと、および、樹脂をポッド内部に保持または実質的に保持すること、によって特徴付けられる。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、細胞は哺乳類細胞である。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、細胞は昆虫細胞または酵母細胞である。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、細胞は細菌細胞（例えば大腸菌（E. coli）細胞）である。本明細書に説明するいずれかのポッド、方法、キット、または他の任意の局面のいくつかの態様において、細胞は細菌細胞でない。いくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料は、樹脂をポッド構造内部に保持または実質的に保持する。
【０００７】
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は半透膜または多孔質膜である。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は半透性または多孔質のメッシュである。いくつかの態様において、メッシュは親水性材料または疎水性材料でコーティングされる。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、メッシュはナイロンまたはポリエステルで作られる。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は約50 nm〜約100 μmの孔径を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は約50 nm〜約50 μmの孔径を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は約100 nm〜約50 μmの孔径を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は約10 μm〜約50 μmの孔径を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は約20 μm〜約50 μmの孔径を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は約100 nm〜約30 μmの孔径を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は約500 nm〜約20 μmの孔径を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は約1 μm〜約10 μmの孔径を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は約2 μm〜約5 μmの孔径を有する。
【０００８】
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、コンテナは約0.1 mL〜約500 mLの内部体積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、コンテナは約0.1 mL〜約250 mLの内部体積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、コンテナは約0.1 mL〜約100 mLの内部体積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、下端は、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、壁は、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、下端と壁は、それぞれ、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、上端は、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、上端と下端は、それぞれ、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの各々は、約1 mm2〜約25 cm2の表面積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの各々は、約1 mm2〜約20 cm2の表面積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの各々は、約1 mm2〜約10 cm2の表面積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの各々は、約1 mm2〜約5 cm2の表面積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの各々は、約1 mm2および2.5 cm2の表面積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの各々は、約1 mm2および約1 cm2の表面積を有する。
【０００９】
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、下端は平らである。いくつかの態様において、下端は半球形を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、下端は円錐形を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、壁は円柱形を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、壁は円錐形を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、壁は球形を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、壁は半球形を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、壁は砂時計形を有する。
【００１０】
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、ポッドは、コンテナ内部に配されたクロマトグラフィ樹脂をさらに含む。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂は市販のクロマトグラフィ樹脂である。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂はアフィニティクロマトグラフィ樹脂である。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、アフィニティクロマトグラフィ樹脂は、プロテインA樹脂、プロテインG樹脂、プロテインL樹脂、ニッケル樹脂、または磁性ビーズ樹脂である。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂は約0.1 mL〜約500 mLの体積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂は約0.1 mL〜約250 mLの体積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂は約0.1 mL〜約100 mLの体積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂は約0.1 mL〜約50 mLの体積を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂は、約1 x 10-6〜約1 x 10-10の無菌性保証水準を有する。
【００１１】
本明細書に説明するいずれかのポッドを含むキットもまた、本明細書に提供する。これらキットのいくつかの態様は、本明細書に説明するいずれかのポッドを使用するための指示をさらに含んでもよい。本明細書に提供するいずれかのキットのいくつかの態様は、ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための手段をさらに含んでもよい。本明細書に説明するいずれかのキットのいくつかの態様において、培養容器は、振盪フラスコ、振盪チューブ、バイオリアクター、またはマルチウェルプレートである。本明細書に説明するいずれかのキットのいくつかの態様において、バイオリアクターはパーフュージョンバイオリアクターである。本明細書に説明するいずれかのキットのいくつかの態様において、バイオリアクターはフィードバッチ（feed batch）バイオリアクターである。
【００１２】
（a）本明細書に説明するいずれかのポッドと；（b）流体が壁を通ってポッド内部からポッド外部に漏れることが防止されるよう、壁における前記1つまたは複数のエリアの各々の上に確実固定できる、1つまたは複数のパネルと、を含むキットもまた、本明細書に提供する。
【００１３】
（a）本明細書に説明するいずれかのポッドと；（b）流体が壁における前記少なくとも1つのエリアを通ってポッド内部からポッド外部に漏れることが防止されるよう、壁における前記少なくとも1つのエリアを覆うためポッド上に確実固定できる、外側スリーブと、を含むキットもまた、本明細書に提供する。いくつかの態様において、スリーブは空のクロマトグラフィカラムである。
【００１４】
（a）本明細書に説明するいずれかのポッドのポッドと；（b）下端上に安定的に固定できる溶離アウトレット、および上端上に安定的に固定できる緩衝剤リザーバのうち、1つまたは両方と、を含むキットもまた、本明細書に提供する。本明細書に説明するいずれかのキットのいくつかの態様において、キットは、ポッドと溶離アウトレットとを含む。本明細書に説明するいずれかのキットのいくつかの態様において、キットは、ポッドと緩衝剤リザーバとを含む。本明細書に説明するいずれかのキットのいくつかの態様において、キットは、ポッドと、溶離アウトレットと、緩衝剤リザーバとを含む。本明細書に提供するいずれかのキットのいくつかの態様において、溶離アウトレットは漏斗である。本明細書に提供するいずれかのキットのいくつかの態様において、溶離アウトレットは、ポートを有する平らな表面を含む。本明細書に提供するいずれかのキットのいくつかの態様において、溶離アウトレットは、溶離アウトレットを通る流体のフローを調節できるよう構成される。本明細書に提供するいずれかのキットのいくつかの態様において、溶離アウトレットは、溶離アウトレットを通る流体のフローを調節できるよう構成されない。本明細書に提供するいずれかのキットのいくつかの態様において、溶離アウトレットは、ポッドにねじ留めまたはクリック留めできる。本明細書に提供するいずれかのキットのいくつかの態様において、溶離アウトレットは、（例えばポッドまたは溶離アウトレットに固定された）1つまたは複数の（例えば2つまたは3つの）Oリングを用いてポッドにシールされてもよい。
【００１５】
（a）本明細書に説明するいずれかのポッドと；（b）流体が壁における前記少なくとも1つのエリアを通ってポッド内部からポッド外部に漏れることが防止されるよう、可動式外側スリーブが回転すると壁における前記少なくとも1つのエリアが覆われうるように壁に接続された、可動式外側スリーブと、を含むキットもまた、本明細書に提供する。本明細書に提供するいずれかのキットのいくつかの態様において、キットは、ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための手段をさらに含む。
【００１６】
（a）本明細書に説明するいずれかのポッドと；（b）ポッドの長軸を培養容器内部における水平位置に安定的に位置決めするための手段と、を含むキットを、本明細書に提供する。ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための手段の、非限定的な例を、図11〜19、36、および37に示す。
【００１７】
（a）本明細書に説明するいずれかのポッドと；（b）上端と、流体コンジットを含む細長の円柱形ボディと、下端とを有するインレットシステムであって、インレットシステムの上端が流体インレットを具備し、かつポッドの上端に安定的に取り付けられるよう構成され；そしてポッドに安定的に接続された時に、流体インレットおよび流体コンジットを通りそしてインレットシステムの下端から出てポッド内に入る流体のフローを可能にし；かつ、インレットシステムの細長の円柱形ボディが、ポッドの壁の内側にフィットするよう構成された、インレットシステムと；（c）流体アウトレットを具備するアウトレットシステムであって、ポッドの下端に安定的に取り付けられるよう構成され、そしてポッドの下端に安定的に接続された時に、流体アウトレットを通ってポッドから出る流体のフローを可能にする、アウトレットシステムと、を含むキットもまた、本明細書に提供する。これらキットのいくつかの態様において、インレットシステムの上端とポッドの上端は、ポッドの上端をインレットシステムの上端に安定的に取り付けることを可能にするねじ切りを含む。これらキットのいくつかの態様において、インレットシステムの上端におけるねじ切り、またはポッドの上端におけるねじ切りは、Oリングを具備する。これらキットのいくつかの態様において、ポッドはクロマトグラフィ樹脂（例えば本明細書に説明する例示的なタイプのクロマトグラフィ樹脂のいずれか）を含有し；かつ、インレットシステムおよびポッドは、インレットシステムとポッドとが安定的に取り付けられた時に、インレットシステムの下端がクロマトグラフィ樹脂に近接するように構成される。これらキットのいくつかの態様において、ポッドの内面とインレットシステムの下端は、ポッドとインレットシステムの下端との安定的な取り付けを可能にするよう構成される。これらキットのいくつかの態様において、ポッドの内面とインレットシステムの下端は、ポッドとインレットシステムの下端との安定的な取り付けを可能にするねじ切りを含む。これらキットのいくつかの態様において、ポッドの内面におけるねじ切り、またはインレットシステムの下端におけるねじ切りは、Oリングを含む。これらキットのいくつかの態様において、アウトレットシステムとポッドの下端は、アウトレットシステムをポッドの下端に安定的に取り付けることを可能にするねじ切りを含む。これらキットのいくつかの態様において、アウトレットシステムにおけるねじ切り、またはポッドの下端におけるねじ切りは、Oリングを含む。これらキットのいくつかの態様において、流体インレットはチュービングへの取り付けが可能である。これらキットのいくつかの態様において、流体アウトレットはチュービングへの取り付けが可能である。これらキットのいくつかの態様は、（d）ポッドの長軸を培養容器（例えば、本明細書に説明するいずれかの培養容器）内部における水平位置に安定的に位置決めするための手段をさらに含む。これらキットのいくつかの態様は、（d）ポッドの長軸を培養容器（例えば、本明細書に説明するいずれかの培養容器）内部における垂直位置に安定的に位置決めするための手段をさらに含む。
【００１８】
液体細胞培養によって産生された組換えタンパク質を捕捉する方法であって、本明細書に説明するいずれかのポッドをある期間にわたって液体細胞培養液に接触させる段階を含み、その接触の段階は、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも一部分が液体細胞培養液に接触するという結果をもたらし、かつ、その接触は、クロマトグラフィ樹脂による組換えタンパク質の捕捉という結果をもたらす条件下で行われる、方法もまた、本明細書に提供する。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、液体細胞培養液は培養容器内に配される。
【００１９】
液体細胞培養によって産生された組換えタンパク質を精製する方法であって、（a）本明細書に説明するいずれかのポッドをある期間にわたって液体細胞培養液に接触させる段階であって、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも一部分が液体細胞培養液に接触するという結果をもたらし、かつ、その接触は、クロマトグラフィ樹脂による組換えタンパク質の捕捉という結果をもたらす条件下で行われる、段階；および（b）前記期間後にクロマトグラフィ樹脂から組換えタンパク質を溶離し、これにより組換えタンパク質を精製する段階、を含む方法もまた、本明細書に提供する。
【００２０】
本明細書に提供するいずれかの方法のいくつかの態様において、方法は、（b）の後に、（c）1つまたは複数の追加的な単位操作を組換えタンパク質に対して行う段階、をさらに含む。本明細書に提供するいずれかの方法のいくつかの態様において、方法は、（c）の後に、組換えタンパク質を組換えタンパク質製剤に製剤化する段階、をさらに含む。本明細書に提供するいずれかの方法のいくつかの態様において、方法は、段階（a）と段階（b）との間にクロマトグラフィ樹脂を洗浄する段階、をさらに含む。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、接触の段階は無菌条件下で行われる。
【００２１】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記期間は約5分間〜約2週間である。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記期間は約5分間〜約168時間である。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記期間は約5分間〜約96時間である。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記期間は約5分間〜約48時間である。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記期間は約5分間〜約24時間である。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記期間は約5分間〜約12時間である。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記期間は、液体細胞培養が指数増殖期にある時に生じる。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記期間は、液体細胞培養が定常増殖期にある時に生じる。いくつかの態様において、接触の段階は、液体細胞培養が死滅期にある時に生じる。
【００２２】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの総表面積の少なくとも30%が、段階（a）における前記期間にわたって液体細胞培養液と接触する。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの総表面積の少なくとも50%が、段階（a）における前記期間にわたって液体細胞培養液と接触する。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの総表面積の少なくとも75%が、段階（a）における前記期間にわたって液体細胞培養液と接触する。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの総表面積の少なくとも90%が、段階（a）における前記期間にわたって液体細胞培養液と接触する。
【００２３】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、液体細胞培養液は培養容器内に配される。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、培養容器は、プレート（例えばマルチウェルプレート）、振盪チューブ、振盪フラスコ、またはバイオリアクターである。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、バイオリアクターはパーフュージョンバイオリアクターである。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、バイオリアクターはフェッドバッチバイオリアクターである。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、液体細胞培養液は、細菌細胞、酵母細胞、昆虫細胞、植物細胞、または哺乳類細胞を含む。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、哺乳類細胞はヒト細胞である。いくつかの態様において、哺乳類細胞はチャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞またはNS0細胞である。
【００２４】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、前記1つまたは複数の追加的な単位操作は、ウイルス不活化、ウイルス濾過、研磨、サイズ排除クロマトグラフィ、陽イオン交換クロマトグラフィ、陰イオン交換クロマトグラフィ、疎水性相互作用クロマトグラフィ、混合モードクロマトグラフィ、および限外濾過／ダイアフィルトレーションからなる群より選択される。
【００２５】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、組換えタンパク質は分泌タンパク質である。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、組換えタンパク質は、タグ（例えば蛍光タグ、放射性同位元素、ポリヒスチジンタグ（HISタグ）、c-mycタグ、FLAGタグ、マルトース結合タンパク質（MBP）タグ、アルブミン結合タンパク質（ABP）タグ、バクテリオファージT7エピトープ（T7-タグ）、ビオチンカルボキシルキャリアタンパク質（BCCP）タグ、ブルータングウイルスタグ（B-タグ）、カルモジュリン結合ペプチドタグ、セルロース結合ドメインタグ、キチン結合ドメインタグ、コリン結合ドメインタグ、ガラクトース結合タンパク質タグ、Glu-Gluエピトープタグ、ヒトインフルエンザ赤血球凝集素タグ、Halo Tag（登録商標）、ヒスチジンアフィニティタグ（HAT）、ポリアルギニンタグ（Asp-タグ）、ポリフェニルアラニンタグ（Phe-タグ）、S-TAG、ストレプトアビジン結合ペプチド、ストレプトアビジンタグ、Strep-タグ、酵素（例えばアルカリホスファターゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（CAT）、グルタチオンS-トランスフェラーゼ）、またはFcタグ）を伴うかまたは伴わない任意のタンパク質である。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、組換えタンパク質は、抗体、抗原結合性抗体断片、酵素、または融合タンパク質である。
【００２６】
別段の定義がない限り、本明細書において用いるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。方法および材料は本発明における使用について本明細書に説明する；当技術分野において公知である他の好適な方法および材料もまた用いられてよい。材料、方法、および実施例は例示的なものにすぎず、限定的な意図はない。本明細書において言及するすべての刊行物、特許出願、特許、配列、データベースエントリー、および他の参照物は、その全体が参照により組み入れられる。矛盾が生じた場合は、定義も含めて本明細書が優先する。
【００２７】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および図面、ならびに特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図1A〜1Eは、本明細書に提供する、異なる例示的なポッドおよびキットを示した図である。
【図２】ポッドがバイオリアクター内に配された時にポッドの縦軸がほぼ水平である、本明細書に提供するポッドの例示的態様である。
【図３】バイオリアクターから取り外され、そして縦軸がほぼ垂直になるよう回転されかつ下端が溶離アウトレットに接続された後の、図2における例示的ポッドを示した図である。任意で、ポッドの上端が緩衝剤リザーバ（図には示していない）に接続されてもよい。
【図４】容器の側壁とポッドとにおける穴を通って横断したロッドによって容器（例えばバイオリアクター）内に配された、本明細書に説明するポッドを例示的に描いた図である。
【図５】還元条件および非還元条件下において従来のバッチ捕捉法（Trad.）と本発明の捕捉精製法（Cap. & Pure）とを比較した、ドデシル硫酸ナトリウム・ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（SDS-PAGE）分析の代表的な像である。E = 1 μgの溶離サンプル; FT = フロースルーサンプル; W = 洗浄サンプル; M = Biorad Precision Plusラダーマーカー; 「-」 = ブランク。
【図６】AKTA精製法、従来のバッチ捕捉法、および本発明の捕捉精製法の実験タイムラインを、トランスフェクション後4日目を起点として比較した、代表的な線図である。
【図７】表2に概略を示した4つの異なる条件下における高速液体クロマトグラフィ（HPLC）トレースを示した代表的なグラフである。
【図８】表3に概略を示した4つの異なる条件下におけるHPLCトレースを示した代表的なグラフである。
【図９】表4に概略を示した2つの異なる条件下におけるHPLCトレースを示した代表的なグラフである。
【図１０】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための異なる例示的手段を示した2次元図面である。対称的な二叉のクローは、本明細書に説明するいずれかの例示的ポッドを培養容器でホールドできる。
【図１１】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための異なる例示的手段を示した2次元図面である。対称的な二叉のクローは、本明細書に説明するいずれかの例示的ポッドを培養容器でホールドできる。
【図１２】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための異なる例示的手段を示した2次元図面である。対称的な二叉のクローは、本明細書に説明するいずれかの例示的ポッドを培養容器でホールドできる。
【図１３】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための異なる例示的手段を示した2次元図面である。対称的な二叉のクローは、本明細書に説明するいずれかの例示的ポッドを培養容器でホールドできる。
【図１４】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための例示的手段の部品を示した2次元図面である；部品の中央は、本明細書に説明するいずれかの例示的ポッドを培養容器でホールドできる対称的な二叉クローに（図16〜19に示すように）取り付け可能である。
【図１５】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための例示的手段の部品を示した2次元図面である；部品の中央は、本明細書に説明するいずれかの例示的ポッドを培養容器でホールドできる対称的な二叉クローに（図16〜19に示すように）取り付け可能である。
【図１６】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための異なる例示的手段を示した2次元図面である。対称的な二叉のクローは、本明細書に説明するいずれかの例示的ポッドを培養容器でホールドできる。
【図１７】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための異なる例示的手段を示した2次元図面である。対称的な二叉のクローは、本明細書に説明するいずれかの例示的ポッドを培養容器でホールドできる。
【図１８】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための異なる例示的手段を示した2次元図面である。対称的な二叉のクローは、本明細書に説明するいずれかの例示的ポッドを培養容器でホールドできる。
【図１９】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための異なる例示的手段を示した2次元図面である。対称的な二叉のクローは、本明細書に説明するいずれかの例示的ポッドを培養容器でホールドできる。
【図２０】分析用TOSOH Supergel TSK mAb HTPカラム上に注入した2 μgのタンパク質サンプルについて、図27および28に示したものと同様のデバイスを用いた同時精製、または従来のバッチ捕捉および溶離による、溶離プロフィールを重ね合わせて示した図である。いずれの場合も、清澄上清からデバイスまたは自由浮動する樹脂を除去した後、抗体を含有する清澄上清をプロテインA樹脂に曝してから、プロテインA樹脂からの洗浄および溶離を行った。
【図２１】図20と同じ清澄上清を用いたが、AKTAシステムと充填カラム内に含有されたproA樹脂とを用いた、分析用TOSOH Supergel TSK mAb HTPカラム上に注入した2 μgのサンプルについて、溶離プロフィールを示した図である。
【図２２】本明細書に提供する例示的ポッドを示した図である。
【図２３】本明細書に提供する例示的ポッドを示した図である。
【図２４】本明細書に提供する例示的キットを示した図である。
【図２５】本明細書に提供する例示的キットを示した図である。
【図２６】本明細書に提供する例示的キットを示した図である。
【図２７】本明細書に提供する例示的キットを示した図である。
【図２８】本明細書に提供する例示的キットを示した図である。
【図２９】本明細書に提供する例示的ポッドを示した図である。
【図３０】本明細書に提供する例示的ポッドを示した図である。
【図３１】本明細書に提供する例示的ポッドを示した図である。
【図３２】図27および28に示した、プロテインA樹脂を含有するデバイスによる溶離プロフィールを示した図である；プロテインA樹脂は、未濾過の上清に曝し、そしてAKTAシステムを用いて溶離を行った。
【図３３】図27および28に示した、プロテインA樹脂を含有するデバイスによる溶離プロフィールを示した図である；プロテインA樹脂は、未濾過の上清に曝し、そしてAKTAシステムを用いて溶離を行った。
【図３４】本明細書に提供する例示的アダプターを示した図である。
【図３５】本明細書に説明する例示的ポッドに取り付けられた、本明細書に提供する例示的アダプターを示した図である。
【図３６】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための例示的手段を示した図である。
【図３７】ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための例示的手段を示した図である。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
詳細な説明
壁によって形成されかつ上端と下端とを有するコンテナを含む、濾過およびクロマトグラフィ用ポッドを本明細書に提供する；壁は下端とともにシールを形成する；そして、壁、上端、および下端のうち1つまたは複数は、液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。これらポッドのいずれかを含むキット、液体細胞培養液中で産生された組換えタンパク質を捕捉するためこれらポッドを用いる方法、および、液体細胞培養によって産生された組換えタンパク質を精製するためこれらポッドを用いる方法もまた、本明細書に提供する。
【００３０】
これらポッド、キット、および方法の非限定的な局面を以下に説明する。そしてこれらは限定されることなく任意の組み合わせで用いられてよい。これらポッド、キット、および方法の追加的局面は当技術分野において公知である。
【００３１】
本明細書に提供するポッド、キット、および方法は、タンパク質発現系に由来する組換えタンパク質（例えば、組換えタンパク質を発現している安定的な細胞などの組換え細胞によって産生されたタンパク質）を捕捉または精製するために必要な時間に、予期せぬ短縮をもたらすことを可能にする。例えば、組換えタンパク質は、約5分間〜約20時間、約5分間〜約18時間、約5分間〜約16時間、約5分間〜約14時間、約5分間〜約12時間、約5分間〜約10時間、約5分間〜約8時間、約5分間〜約6時間、約5分間〜約4時間、約5分間〜約3時間、約5分間〜約2時間、約5分間〜約1時間、約5分間〜約30分間、約5分間〜約20分間、約5分間〜約10分間、約10分間〜約20時間、約10分間〜約18時間、約10分間〜約16時間、約10分間〜約14時間、約10分間〜約12時間、約10分間〜約10時間、約10分間〜約8時間、約10分間〜約6時間、約10分間〜約4時間、約10分間〜約3時間、約10分間〜約2時間、約10分間〜約1時間、約10分間〜約30分間、約10分間〜約20分間、約20分間〜約20時間、約20分間〜約18時間、約20分間〜約16時間、約20分間〜約14時間、約20分間〜約12時間、約20分間〜約10時間、約20分間〜約8時間、約20分間〜約6時間、約20分間〜約4時間、約20分間〜約3時間、約20分間〜約2時間、約20分間〜約1時間、約20分間〜約30分間、約30分間〜約20時間、約30分間〜約18時間、約30分間〜約16時間、約30分間〜約14時間、約30分間〜約12時間、約30分間〜約10時間、約30分間〜約8時間、約30分間〜約6時間、約30分間〜約4時間、約30分間〜約3時間、約30分間〜約2時間、約30分間〜約1時間、約1時間〜約20時間、約1時間〜約18時間、約1時間〜約16時間、約1時間〜約14時間、約1時間〜約12時間、約1時間〜約10時間、約1時間〜約8時間、約1時間〜約6時間、約1時間〜約4時間、約1時間〜約3時間、約1時間〜約2時間、約2時間〜約20時間、約2時間〜約18時間、約2時間〜約16時間、約2時間〜約14時間、約2時間〜約12時間、約2時間〜約10時間、約2時間〜約8時間、約2時間〜約6時間、約2時間〜約4時間、約2時間〜約3時間、約3時間〜約20時間、約3時間〜約18時間、約3時間〜約16時間、約3時間〜約14時間、約3時間〜約12時間、約3時間〜約10時間、約3時間〜約8時間、約3時間〜約6時間、約3時間〜約4時間、約4時間〜約20時間、約4時間〜約18時間、約4時間〜約16時間、約4時間〜約14時間、約4時間〜約12時間、約4時間〜約10時間、約4時間〜約8時間、約4時間〜約6時間、約6時間〜約20時間、約6時間〜約18時間、約6時間〜約16時間、約6時間〜約14時間、約6時間〜約12時間、約6時間〜約10時間、約6時間〜約8時間、約8時間〜約20時間、約8時間〜約18時間、約8時間〜約16時間、約8時間〜約14時間、約8時間〜約12時間、約8時間〜約10時間、約10時間〜約20時間、約10時間〜約18時間、約10時間〜約16時間、約10時間〜約14時間、約10時間〜約12時間、約12時間〜約20時間、約12時間〜約18時間、約12時間〜約16時間、約12時間〜約14時間、約14時間〜約20時間、約14時間〜約18時間、約14時間〜約16時間、約16時間〜約20時間、約16時間〜約18時間、または約18時間〜約20時間以内に捕捉または精製されてもよい。
【００３２】
ポッド
壁によって形成されかつ上端と下端とを有するコンテナを含む、濾過およびクロマトグラフィ用ポッドを本明細書に提供する；壁は下端とともにシールを形成する；そして、壁、上端、および下端のうち1つまたは複数は、液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。半多孔質または多孔質材料は、ヒートシーリングによって、ポッドの壁、上端、および／または下端に取り付けられてもよい。半多孔質または多孔質材料をポッドの壁、上端、および／または下端に取り付けるための他の手段は当技術分野において公知である。本明細書に提供するポッドおよびキットの非限定的な例を図1A〜1E、図2、図3、図4、図22〜31、および図35に示す。いくつかの態様において、例えば図1Aに示すようなポッドの設計は、半多孔質または多孔質材料によって形成されたポッドの側面の表面の一部または全部を覆うよう適合した1つまたは複数のパネルを、任意で含んでもよい。そうした覆いの取り付けにより、以降の複製段階がさらに容易になる可能性がある。
【００３３】
半多孔質／多孔質材料
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料は、樹脂をポッド構造内に保持または実質的に保持する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの実施例において、半多孔質または多孔質材料は、（a）細胞がポッド外部からポッド内部に流入することを許容しないこと、および（b）樹脂をポッド内部に保持または実質的に保持すること、（c）親水性または疎水性のコーティングでコーティングされること、の1つまたは両方によって特徴付けられる。いくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料は、細胞がポッド外部からポッド内部に流入することを許容しない。いくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料は、樹脂をポッド内部に保持または実質的に保持する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料は、細胞がポッド外部からポッド内部に流入することを許容しないこと、および、樹脂をポッド内部に保持または実質的に保持すること、によって特徴付けられる。
【００３４】
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの実施例において、半多孔質または多孔質材料は、（a）哺乳類細胞がポッド外部からポッド内部に流入することを許容しないこと、および（b）樹脂をポッド内部に保持または実質的に保持すること、の1つまたは両方によって特徴付けられる。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの実施例において、半多孔質または多孔質材料は、哺乳類細胞がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容しない。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの実施例において、半多孔質または多孔質材料は、（a）昆虫細胞がポッド外部からポッド内部に流入することを許容しないこと、および（b）樹脂をポッド内部に保持または実質的に保持すること、の1つまたは両方によって特徴付けられる。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの実施例において、半多孔質または多孔質材料は、昆虫細胞または酵母細胞がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容しない。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの実施例において、半多孔質または多孔質材料は、細菌細胞がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容しない。
【００３５】
いくつかの実施例において、材料は半透膜または多孔質膜である。いくつかの実施例において、材料は半透性または多孔質のメッシュ（例えばナイロンメッシュ）である。
【００３６】
いくつかの実施例において、材料は、ポリエステル、親水性コーティングを伴うポリエステル、酢酸セルロース、硝酸セルロース、ポリエーテルスルホン（PES）、ポリスチレン、ポリプロピレン、アクリル酸コポリマー、ポリ塩化ビニル（PVC）、ポリフッ化ビニリデン（PVDF）、ポリテトラフルオロエチレン（PTFE）、およびポリカーボネートのうち、1つまたは複数を（少なくとも部分的に）含んでもよい。いくつかの態様において、材料は精密織りされたポリマー（例えば、任意の精密織りされたポリマー）である。いくつかの態様において、材料はSefarフィルムである（例えばSefarの米国ウェブサイト www.sefar.us を参照されたい）。いくつかの態様において、材料は、Sefarが販売するPetexメッシュである。
【００３７】
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は、約50 nm〜約50 μm、約50 nm〜約45 μm、約50 nm〜約40 μm、約50 nm〜約35 μm、約50 nm〜約30 μm、約50 nm〜約25 μm、約50 nm〜約20 μm、約50 nm〜約18 μm、約50 nm〜約16 μm、約50 nm〜約14 μm、約50 nm〜約12 μm、約50 nm〜約10 μm、約50 nm〜約8 μm、約50 nm〜約6 μm、約50 nm〜約5 μm、約50 nm〜約4 μm、約50 nm〜約3 μm、約50 nm〜約2 μm、約50 nm〜約1 μm、約50 nm〜約500 nm、約50 nm〜約100 nm、約100 nm〜約50 μm、約100 nm〜約45 μm、約100 nm〜約40 μm、約100 nm〜約35 μm、約100 nm〜約30 μm、約100 nm〜約25 μm、約100 nm〜約20 μm、約100 nm〜約18 μm、約100 nm〜約16 μm、約100 nm〜約14 μm、約100 nm〜約12 μm、約100 nm〜約10 μm、約100 nm〜約8 μm、約100 nm〜約6 μm、約100 nm〜約5 μm、約100 nm〜約4 μm、約100 nm〜約3 μm、約100 nm〜約2 μm、約100 nm〜約1 μm、約100 nm〜約500 nm、約500 nm〜約50 μm、約500 nm〜約45 μm、約500 nm〜約40 μm、約500 nm〜約35 μm、約500 nm〜約30 μm、約500 nm〜約25 μm、約500 nm〜約20 μm、約500 nm〜約18 μm、約500 nm〜約16 μm、約500 nm〜約14 μm、約500 nm〜約12 μm、約500 nm〜約10 μm、約500 nm〜約8 μm、約500 nm〜約6 μm、約500 nm〜約5 μm、約500 nm〜約4 μm、約500 nm〜約3 μm、約500 nm〜約2 μm、約500 nm〜約1 μm、約1 μm〜約50 μm、約1 μm〜約45 μm、約1 μm〜約40 μm、約1 μm〜約35 μm、約1 μm〜約30 μm、約1 μm〜約25 μm、約1 μm〜約20 μm、約1 μm〜約18 μm、約1 μm〜約16 μm、約1 μm〜約14 μm、約1 μm〜約12 μm、約1 μm〜約10 μm、約1 μm〜約8 μm、約1 μm〜約6 μm、約1 μm〜約5 μm、約1 μm〜約4 μm、約1 μm〜約3 μm、約1 μm〜約2 μm、約2 μm〜約50 μm、約2 μm〜約45 μm、約2 μm〜約40 μm、約2 μm〜約35 μm、約2 μm〜約30 μm、約2 μm〜約25 μm、約2 μm〜約20 μm、約2 μm〜約18 μm、約2 μm〜約16 μm、約2 μm〜約14 μm、約2 μm〜約12 μm、約2 μm〜約10 μm、約2 μm〜約8 μm、約2 μm〜約6 μm、約2 μm〜約5 μm、約2 μm〜約4 μm、約2 μm〜約3 μm、約3 μm〜約50 μm、約3 μm〜約45 μm、約3 μm〜約40 μm、約3 μm〜約35 μm、約3 μm〜約30 μm、約3 μm〜約25 μm、約3 μm〜約20 μm、約3 μm〜約18 μm、約3 μm〜約16 μm、約3 μm〜約14 μm、約3 μm〜約12 μm、約3 μm〜約10 μm、約3 μm〜約8 μm、約3 μm〜約6 μm、約3 μm〜約5 μm、約3 μm〜約4 μm、約4 μm〜約50 μm、約4 μm〜約45 μm、約4 μm〜約40 μm、約4 μm〜約35 μm、約4 μm〜約30 μm、約4 μm〜約25 μm、約4 μm〜約20 μm、約4 μm〜約18 μm、約4 μm〜約16 μm、約4 μm〜約14 μm、約4 μm〜約12 μm、約4 μm〜約10 μm、約4 μm〜約8 μm、約4 μm〜約6 μm、約4 μm〜約5 μm、約5 μm〜約50 μm、約5 μm〜約45 μm、約5 μm〜約40 μm、約5 μm〜約35 μm、約5 μm〜約30 μm、約5 μm〜約25 μm、約5 μm〜約20 μm、約5 μm〜約18 μm、約5 μm〜約16 μm、約5 μm〜約14 μm、約5 μm〜約12 μm、約5 μm〜約10 μm、約5 μm〜約8 μm、約5 μm〜約6 μm、約6 μm〜約50 μm、約6 μm〜約45 μm、約6 μm〜約40 μm、約6 μm〜約35 μm、約6 μm〜約30 μm、約6 μm〜約25 μm、約6 μm〜約20 μm、約6 μm〜約18 μm、約6 μm〜約16 μm、約6 μm〜約14 μm、約6 μm〜約12 μm、約6 μm〜約10 μm、約6 μm〜約8 μm、約8 μm〜約50 μm、約8 μm〜約45 μm、約8 μm〜約40 μm、約8 μm〜約35 μm、約8 μm〜約30 μm、約8 μm〜約25 μm、約8 μm〜約20 μm、約8 μm〜約18 μm、約8 μm〜約16 μm、約8 μm〜約14 μm、約8 μm〜約12 μm、約8 μm〜約10 μm、約10 μm〜約50 μm、約10 μm〜約45 μm、約10 μm〜約40 μm、約10 μm〜約35 μm、約10 μm〜約30 μm、約10 μm〜約25 μm、約10 μm〜約20 μm、約10 μm〜約18 μm、約10 μm〜約16 μm、約10 μm〜約14 μm、約10 μm〜約12 μm、約12 μm〜約50 μm、約12 μm〜約45 μm、約12 μm〜約40 μm、約12 μm〜約35 μm、約12 μm〜約30 μm、約12 μm〜約25 μm、約12 μm〜約20 μm、約12 μm〜約18 μm、約12 μm〜約16 μm、約12 μm〜約14 μm、約14 μm〜約50 μm、約14 μm〜約45 μm、約14 μm〜約40 μm、約14 μm〜約35 μm、約14 μm〜約30 μm、約14 μm〜約25 μm、約14 μm〜約20 μm、約14 μm〜約18 μm、約14 μm〜約16 μm、約16 μm〜約50 μm、約16 μm〜約45 μm、約16 μm〜約40 μm、約16 μm〜約35 μm、約16 μm〜約30 μm、約16 μm〜約25 μm、約16 μm〜約20 μm、約16 μm〜約18 μm、約18 μm〜約50 μm、約18 μm〜約45 μm、約18 μm〜約40 μm、約18 μm〜約35 μm、約18 μm〜約30 μm、約18 μm〜約25 μm、約18 μm〜約20 μm、約20 μm〜約50 μm、約20 μm〜約45 μm、約20 μm〜約40 μm、約20 μm〜約35 μm、約20 μm〜約30 μm、約20 μm〜約25 μm、約25 μm〜約50 μm、約25 μm〜約45 μm、約25 μm〜約40 μm、約25 μm〜約35 μm、約25 μm〜約30 μm、約30 μm〜約50 μm、約30 μm〜約45 μm、約30 μm〜約40 μm、約30 μm〜約35 μm、約35 μm〜約50 μm、約35 μm〜約45 μm、約35 μm〜約40 μm、約40 μm〜約50 μm、約40 μm〜約45 μm、または約45 μm〜約50 μmの孔径または平均孔径を有する。本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、材料は、約30 μm〜約70 μm、約30 μm〜約68 μm、約30 μm〜約66 μm、約30 μm〜約64 μm、約30 μm〜約62 μm、約30 μm〜約60 μm、約30 μm〜約58 μm、約30 μm〜約56 μm、約30 μm〜約54 μm、約30 μm〜約52 μm、約30 μm〜約50 μm、約30 μm〜約48 μm、約30 μm〜約46 μm、約30 μm〜約44 μm、約30 μm〜約42 μm、約30 μm〜約40 μm、約30 μm〜約38 μm、約30 μm〜約36 μm、約30 μm〜約34 μm、約30 μm〜約32 μm、約32 μm〜約70 μm、約32 μm〜約68 μm、約32 μm〜約66 μm、約32 μm〜約64 μm、約32 μm〜約62 μm、約32 μm〜約60 μm、約32 μm〜約58 μm、約32 μm〜約56 μm、約32 μm〜約54 μm、約32 μm〜約52 μm、約32 μm〜約50 μm、約32 μm〜約48 μm、約32 μm〜約46 μm、約32 μm〜約44 μm、約32 μm〜約42 μm、約32 μm〜約40 μm、約32 μm〜約38 μm、約32 μm〜約36 μm、約32 μm〜約34 μm、約34 μm〜約70 μm、約34 μm〜約68 μm、約34 μm〜約66 μm、約34 μm〜約64 μm、約34 μm〜約62 μm、約34 μm〜約60 μm、約34 μm〜約58 μm、約34 μm〜約56 μm、約34 μm〜約54 μm、約34 μm〜約52 μm、約34 μm〜約50 μm、約34 μm〜約48 μm、約34 μm〜約46 μm、約34 μm〜約44 μm、約34 μm〜約42 μm、約34 μm〜約40 μm、約34 μm〜約38 μm、約34 μm〜約36 μm、約36 μm〜約70 μm、約36 μm〜約68 μm、約36 μm〜約66 μm、約36 μm〜約64 μm、約36 μm〜約62 μm、約36 μm〜約60 μm、約36 μm〜約58 μm、約36 μm〜約56 μm、約36 μm〜約54 μm、約36 μm〜約52 μm、約36 μm〜約50 μm、約36 μm〜約48 μm、約36 μm〜約46 μm、約36 μm〜約44 μm、約36 μm〜約42 μm、約36 μm〜約40 μm、約36 μm〜約38 μm、約38 μm〜約70 μm、約38 μm〜約68 μm、約38 μm〜約66 μm、約38 μm〜約64 μm、約38 μm〜約62 μm、約38 μm〜約60 μm、約38 μm〜約58 μm、約38 μm〜約56 μm、約38 μm〜約54 μm、約38 μm〜約52 μm、約38 μm〜約50 μm、約38 μm〜約48 μm、約38 μm〜約46 μm、約38 μm〜約44 μm、約38 μm〜約42 μm、約38 μm〜約40 μm、約40 μm〜約70 μm、約40 μm〜約68 μm、約40 μm〜約66 μm、約40 μm〜約64 μm、約40 μm〜約62 μm、約40 μm〜約60 μm、約40 μm〜約58 μm、約40 μm〜約56 μm、約40 μm〜約54 μm、約40 μm〜約52 μm、約40 μm〜約50 μm、約40 μm〜約48 μm、約40 μm〜約46 μm、約40 μm〜約44 μm、約40 μm〜約42 μm、約42 μm〜約70 μm、約42 μm〜約68 μm、約42 μm〜約66 μm、約42 μm〜約64 μm、約42 μm〜約62 μm、約42 μm〜約60 μm、約42 μm〜約58 μm、約42 μm〜約56 μm、約42 μm〜約54 μm、約42 μm〜約52 μm、約42 μm〜約50 μm、約42 μm〜約48 μm、約42 μm〜約46 μm、約42 μm〜約44 μm、約44 μm〜約70 μm、約44 μm〜約68 μm、約44 μm〜約66 μm、約44 μm〜約64 μm、約44 μm〜約62 μm、約44 μm〜約60 μm、約44 μm〜約58 μm、約44 μm〜約56 μm、約44 μm〜約54 μm、約44 μm〜約52 μm、約44 μm〜約50 μm、約44 μm〜約48 μm、約44 μm〜約46 μm、約46 μm〜約70 μm、約46 μm〜約68 μm、約46 μm〜約66 μm、約46 μm〜約64 μm、約46 μm〜約62 μm、約46 μm〜約60 μm、約46 μm〜約58 μm、約46 μm〜約56 μm、約46 μm〜約54 μm、約46 μm〜約52 μm、約46 μm〜約50 μm、約46 μm〜約48 μm、約48 μm〜約70 μm、約48 μm〜約68 μm、約48 μm〜約66 μm、約48 μm〜約64 μm、約48 μm〜約62 μm、約48 μm〜約60 μm、約48 μm〜約58 μm、約48 μm〜約56 μm、約48 μm〜約54 μm、約48 μm〜約52 μm、約48 μm〜約50 μm、約50 μm〜約70 μm、約50 μm〜約68 μm、約50 μm〜約66 μm、約50 μm〜約64 μm、約50 μm〜約62 μm、約50 μm〜約60 μm、約50 μm〜約58 μm、約50 μm〜約56 μm、約50 μm〜約54 μm、約50 μm〜約52 μm、約52 μm〜約70 μm、約52 μm〜約68 μm、約52 μm〜約66 μm、約52 μm〜約64 μm、約52 μm〜約62 μm、約52 μm〜約60 μm、約52 μm〜約58 μm、約52 μm〜約56 μm、約52 μm〜約54 μm、約54 μm〜約70 μm、約54 μm〜約68 μm、約54 μm〜約66 μm、約54 μm〜約64 μm、約54 μm〜約62 μm、約54 μm〜約60 μm、約54 μm〜約58 μm、約54 μm〜約56 μm、約56 μm〜約70 μm、約56 μm〜約68 μm、約56 μm〜約66 μm、約56 μm〜約64 μm、約56 μm〜約62 μm、約56 μm〜約60 μm、約56 μm〜約58 μm、約58 μm〜約70 μm、約58 μm〜約68 μm、約58 μm〜約66 μm、約58 μm〜約64 μm、約58 μm〜約62 μm、約58 μm〜約60 μm、約60 μm〜約70 μm、約60 μm〜約68 μm、約60 μm〜約66 μm、約60 μm〜約64 μm、約60 μm〜約62 μm、約62 μm〜約70 μm、約62 μm〜約68 μm、約62 μm〜約66 μm、約62 μm〜約64 μm、約64 μm〜約70 μm、約64 μm〜約68 μm、約64 μm〜約66 μm、約66 μm〜約70 μm、約66 μm〜約68 μm、または約68 μm〜約70 μmの孔径または平均孔径を有する。
【００３８】
半多孔質／多孔質材料によって覆われるエリア
ポッドのいくつかの態様において、壁、上端、および下端のうち1つまたは複数は、液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた少なくとも1つの（例えば1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、または20個の）エリアを含む。これらポッドのいくつかの態様において、ポッドは、（液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する）半多孔質または多孔質材料によって覆われた、壁における1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、もしくは15個のエリア；および／または、（液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する）半多孔質または多孔質材料によって覆われた、下端における1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、もしくは15個のエリア；および／または、（液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する）半多孔質または多孔質材料によって覆われた、上端における1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、もしくは15個のエリアを含む。
【００３９】
本明細書に説明するポッドのいくつかの実施例において、壁は、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。本明細書に説明するポッドのいくつかの実施例において、下端および壁は、それぞれ、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。いくつかの実施例において、上端は、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを具備する。いくつかの実施例において、上端および下端は、それぞれ、前記材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを含む。
【００４０】
本明細書に説明するポッドのいくつかの態様において、壁、上端、および下端のうち1つまたは複数における、（液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する）半多孔質または多孔質材料によって覆われたエリアの総数は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、または30である。本明細書に説明するポッドのいくつかの態様において、壁、上端、および下端のうち1つまたは複数における、（液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する）半多孔質または多孔質材料によって覆われたエリアの総数は、1〜30、1〜28、1〜26、1〜24、1〜22、1〜20、1〜18、1〜16、1〜14、1〜12、1〜10、1〜8、1〜6、1〜4、1〜3、1もしくは2、2〜30、2〜28、2〜26、2〜24、2〜22、2〜20、2〜18、2〜16、2〜14、2〜12、2〜10、2〜8、2〜6、2〜4、2もしくは3、3〜30、3〜28、3〜26、3〜24、3〜22、3〜20、3〜18、3〜16、3〜14、3〜12、3〜10、3〜8、3〜6、3もしくは4、4〜30、4〜28、4〜26、4〜24、4〜22、4〜20、4〜18、4〜16、4〜14、4〜12、4〜10、4〜8、4〜6、6〜30、6〜28、6〜26、6〜24、6〜22、6〜20、6〜18、6〜16、6〜14、6〜12、6〜10、6〜8、8〜30、8〜28、8〜26、8〜24、8〜22、8〜20、8〜18、8〜16、8〜14、8〜12、8〜10、10〜30、10〜28、10〜26、10〜24、10〜22、10〜20、10〜18、10〜16、10〜14、10〜12、12〜30、12〜28、12〜26、12〜24、12〜22、12〜20、12〜18、12〜16、12〜14、14〜30、14〜28、14〜26、14〜24、14〜22、14〜20、14〜18、14〜16、16〜30、16〜28、16〜26、16〜24、16〜22、16〜20、16〜18、18〜30、18〜28、18〜26、18〜24、18〜22、18〜20、20〜30、20〜28、20〜26、20〜24、22〜22、22〜30、22〜28、22〜26、22〜24、24〜30、24〜28、24〜26、26〜30、26〜28、または28〜30である。
【００４１】
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料によって覆われた前記少なくとも1つのエリアのうち1つまたは複数は、円形、楕円形、正方形、長方形、細長の形（例えば細長の線または長方形）、星形、ジグザグ形、またはヘビ形である。
【００４２】
いくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料によって覆われた前記少なくとも1つのエリアのうち1つまたは複数（例えば各々）は、約0.5 mm2〜約60 cm2、約0.5 mm2〜約58 cm2、約0.5 mm2〜約56 cm2、約0.5 mm2〜約54 cm2、約0.5 mm2〜約52 cm2、約0.5 mm2〜約50 cm2、約0.5 mm2〜約48 cm2、約0.5 mm2〜約46 cm2、約0.5 mm2〜約44 cm2、約0.5 mm2〜約42 cm2、約0.5 mm2〜約40 cm2、約0.5 mm2〜約38 cm2、約0.5 mm2〜約36 cm2、約0.5 mm2〜約34 cm2、約0.5 mm2〜約32 cm2、0.5 mm2〜約30 cm2、約0.5 mm2〜約28 cm2、約0.5 mm2〜約26 cm2、約0.5 mm2〜約24 cm2、約0.5 mm2〜約22 cm2、約0.5 mm2〜約20 cm2、約0.5 mm2〜約18 cm2、約0.5 mm2〜約16 cm2、約0.5 mm2〜約14 cm2、約0.5 mm2〜約12 cm2、約0.5 mm2〜約10 cm2、約0.5 mm2〜約8 cm2、約0.5 mm2〜約6 cm2、約0.5 mm2〜約5 cm2、約0.5 mm2〜約4 cm2、約0.5 mm2〜約3 cm2、約0.5 mm2〜約2 cm2、約0.5 mm2〜約1 cm2、約0.5 mm2〜約5 mm2、約0.5 mm2〜約2 mm2、約0.5 mm2〜約1 mm2、約1 mm2〜約60 cm2、約1 mm2〜約58 cm2、約1 mm2〜約56 cm2、約1 mm2〜約54 cm2、約1 mm2〜約52 cm2、約1 mm2〜約50 cm2、約1 mm2〜約48 cm2、約1 mm2〜約46 cm2、約1 mm2〜約44 cm2、約1 mm2〜約42 cm2、約1 mm2〜約40 cm2、約1 mm2〜約38 cm2、約1 mm2〜約36 cm2、約1 mm2〜約34 cm2、約1 mm2〜約32 cm2、約1 mm2〜約30 cm2、約1 mm2〜約28 cm2、約1 mm2〜約26 cm2、約1 mm2〜約24 cm2、約1 mm2〜約22 cm2、約1 mm2〜約20 cm2、約1 mm2〜約18 cm2、約1 mm2〜約16 cm2、約1 mm2〜約14 cm2、約1 mm2〜約12 cm2、約1 mm2〜約10 cm2、約1 mm2〜約8 cm2、約1 mm2〜約6 cm2、約1 mm2〜約5 cm2、約1 mm2〜約4 cm2、約1 mm2〜約3 cm2、約1 mm2〜約2 cm2、約1 mm2〜約1 cm2、約1 mm2〜約5 mm2、約1 mm2〜約2 mm2、約2 mm2〜約60 cm2、約2 mm2〜約58 cm2、約2 mm2〜約56 cm2、約2 mm2〜約54 cm2、約2 mm2〜約52 cm2、約2 mm2〜約50 cm2、約2 mm2〜約48 cm2、約2 mm2〜約46 cm2、約2 mm2〜約44 cm2、約2 mm2〜約42 cm2、約2 mm2〜約40 cm2、約2 mm2〜約38 cm2、約2 mm2〜約36 cm2、約2 mm2〜約34 cm2、約2 mm2〜約32 cm2、約2 mm2〜約30 cm2、約2 mm2〜約28 cm2、約2 mm2〜約26 cm2、約2 mm2〜約24 cm2、約2 mm2〜約22 cm2、約2 mm2〜約20 cm2、約2 mm2〜約18 cm2、約2 mm2〜約16 cm2、約2 mm2〜約14 cm2、約2 mm2〜約12 cm2、約2 mm2〜約10 cm2、約2 mm2〜約8 cm2、約2 mm2〜約6 cm2、約2 mm2〜約5 cm2、約2 mm2〜約4 cm2、約2 mm2〜約3 cm2、約2 mm2〜約2 cm2、約2 mm2〜約1 cm2、約2 mm2〜約5 mm2、約5 mm2〜約60 cm2、約5 mm2〜約58 cm2、約5 mm2〜約56 cm2、約5 mm2〜約54 cm2、約5 mm2〜約52 cm2、約5 mm2〜約50 cm2、約5 mm2〜約48 cm2、約5 mm2〜約46 cm2、約5 mm2〜約44 cm2、約5 mm2〜約42 cm2、約5 mm2〜約40 cm2、約5 mm2〜約38 cm2、約5 mm2〜約36 cm2、約5 mm2〜約34 cm2、約5 mm2〜約32 cm2、約5 mm2〜約30 cm2、約5 mm2〜約28 cm2、約5 mm2〜約26 cm2、約5 mm2〜約24 cm2、約5 mm2〜約22 cm2、約5 mm2〜約20 cm2、約5 mm2〜約18 cm2、約5 mm2〜約16 cm2、約5 mm2〜約14 cm2、約5 mm2〜約12 cm2、約5 mm2〜約10 cm2、約5 mm2〜約8 cm2、約5 mm2〜約6 cm2、約5 mm2〜約5 cm2、約5 mm2〜約4 cm2、約5 mm2〜約3 cm2、約5 mm2〜約2 cm2、約5 mm2〜約1 cm2、約1 cm2〜約60 cm2、約1 cm2〜約58 cm2、約1 cm2〜約56 cm2、約1 cm2〜約54 cm2、約1 cm2〜約52 cm2、約1 cm2〜約50 cm2、約1 cm2〜約48 cm2、約1 cm2〜約46 cm2、約1 cm2〜約44 cm2、約1 cm2〜約42 cm2、約1 cm2〜約40 cm2、約1 cm2〜約38 cm2、約1 cm2〜約36 cm2、約1 cm2〜約34 cm2、約1 cm2〜約32 cm2、約1 cm2〜約30 cm2、約1 cm2〜約28 cm2、約1 cm2〜約26 cm2、約1 cm2〜約24 cm2、約1 cm2〜約22 cm2、約1 cm2〜約20 cm2、約1 cm2〜約18 cm2、約1 cm2〜約16 cm2、約1 cm2〜約14 cm2、約1 cm2〜約12 cm2、約1 cm2〜約10 cm2、約1 cm2〜約8 cm2、約1 cm2〜約6 cm2、約1 cm2〜約5 cm2、約1 cm2〜約4 cm2、約1 cm2〜���3 cm2、約1 cm2〜約2 cm2、約2 cm2〜約60 cm2、約2 cm2〜約58 cm2、約2 cm2〜約56 cm2、約2 cm2〜約54 cm2、約2 cm2〜約52 cm2、約2 cm2〜約50 cm2、約2 cm2〜約48 cm2、約2 cm2〜約46 cm2、約2 cm2〜約44 cm2、約2 cm2〜約42 cm2、約2 cm2〜約40 cm2、約2 cm2〜約38 cm2、約2 cm2〜約36 cm2、約2 cm2〜約34 cm2、約2 cm2〜約32 cm2、約2 cm2〜約30 cm2、約2 cm2〜約28 cm2、約2 cm2〜約26 cm2、約2 cm2〜約24 cm2、約2 cm2〜約22 cm2、約2 cm2〜約20 cm2、約2 cm2〜約18 cm2、約2 cm2〜約16 cm2、約2 cm2〜約14 cm2、約2 cm2〜約12 cm2、約2 cm2〜約10 cm2、約2 cm2〜約8 cm2、約2 cm2〜約6 cm2、約2 cm2〜約5 cm2、約2 cm2〜約4 cm2、約2 cm2〜約3 cm2、約3 cm2〜約60 cm2、約3 cm2〜約58 cm2、約3 cm2〜約56 cm2、約3 cm2〜約54 cm2、約3 cm2〜約52 cm2、約3 cm2〜約50 cm2、約3 cm2〜約48 cm2、約3 cm2〜約46 cm2、約3 cm2〜約44 cm2、約3 cm2〜約42 cm2、約3 cm2〜約40 cm2、約3 cm2〜約38 cm2、約3 cm2〜約36 cm2、約3 cm2〜約34 cm2、約3 cm2〜約32 cm2、約3 cm2〜約30 cm2、約3 cm2〜約28 cm2、約3 cm2〜約26 cm2、約3 cm2〜約24 cm2、約3 cm2〜約22 cm2、約3 cm2〜約20 cm2、約3 cm2〜約18 cm2、約3 cm2〜約16 cm2、約3 cm2〜約14 cm2、約3 cm2〜約12 cm2、約3 cm2〜約10 cm2、約3 cm2〜約8 cm2、約3 cm2〜約6 cm2、約3 cm2〜約5 cm2、約3 cm2〜約4 cm2、約4 cm2〜約60 cm2、約4 cm2〜約58 cm2、約4 cm2〜約56 cm2、約4 cm2〜約54 cm2、約4 cm2〜約52 cm2、約4 cm2〜約50 cm2、約4 cm2〜約48 cm2、約4 cm2〜約46 cm2、約4 cm2〜約44 cm2、約4 cm2〜約42 cm2、約4 cm2〜約40 cm2、約4 cm2〜約38 cm2、約4 cm2〜約36 cm2、約4 cm2〜約34 cm2、約4 cm2〜約32 cm2、約4 cm
2〜約30 cm2、約4 cm2〜約28 cm2、約4 cm2〜約26 cm2、約4 cm2〜約24 cm2、約4 cm2〜約22 cm2、約4 cm2〜約20 cm2、約4 cm2〜約18 cm2、約4 cm2〜約16 cm2、約4 cm2〜約14 cm2、約4 cm2〜約12 cm2、約4 cm2〜約10 cm2、約4 cm2〜約8 cm2、約4 cm2〜約6 cm2、約4 cm2〜約5 cm2、約5 cm2〜約60 cm2、約5 cm2〜約58 cm2、約5 cm2〜約56 cm2、約5 cm2〜約54 cm2、約5 cm2〜約52 cm2、約5 cm2〜約50 cm2、約5 cm2〜約48 cm2、約5 cm2〜約46 cm2、約5 cm2〜約44 cm2、約5 cm2〜約42 cm2、約5 cm2〜約40 cm2、約5 cm2〜約38 cm2、約5 cm2〜約36 cm2、約5 cm2〜約34 cm2、約5 cm2〜約32 cm2、約5 cm2〜約30 cm2、約5 cm2〜約28 cm2、約5 cm2〜約26 cm2、約5 cm2〜約24 cm2、約5 cm2〜約22 cm2、約5 cm2〜約20 cm2、約5 cm2〜約18 cm2、約5 cm2〜約16 cm2、約5 cm2〜約14 cm2、約5 cm2〜約12 cm2、約5 cm2〜約10 cm2、約5 cm2〜約8 cm2、約5 cm2〜約6 cm2、約6 cm2〜約60 cm2、約6 cm2〜約58 cm2、約6 cm2〜約56 cm2、約6 cm2〜約54 cm2、約6 cm2〜約52 cm2、約6 cm2〜約50 cm2、約6 cm2〜約48 cm2、約6 cm2〜約46 cm2、約6 cm2〜約44 cm2、約6 cm2〜約42 cm2、約6 cm2〜約40 cm2、約6 cm2〜約38 cm2、約6 cm2〜約36 cm2、約6 cm2〜約34 cm2、約6 cm2〜約32 cm2、約6 cm2〜約30 cm2、約6 cm2〜約28 cm2、約6 cm2〜約26 cm2、約6 cm2〜約24 cm2、約6 cm2〜約22 cm2、約6 cm2〜約20 cm2、約6 cm2〜約18 cm2、約6 cm2〜約16 cm2、約6 cm2〜約14 cm2、約6 cm2〜約12 cm2、約6 cm2〜約10 cm2、約6 cm2〜約8 cm2、約8 cm2〜約60 cm2、約8 cm2〜約58 cm2、約8 cm2〜約56 cm2、約8 cm2〜約54 cm2、約8 cm2〜約52 cm2、約8 cm2〜約50 cm2、約8 cm2〜約48 cm2、約8 cm2〜約46 cm2、約8 cm2〜約44 cm2、約8 cm2〜約42 cm2、約8 cm2〜約40 cm2、約8 cm2〜約38 cm2、約8 cm2〜約36 cm2、約8 cm2〜約34 cm2、約8 cm2〜約32 cm2、約8 cm2〜約30 cm2、約8 cm2〜約28 cm2、約8 cm2〜約26 cm2、約8 cm2〜約24 cm2、約8 cm2〜約22 cm2、約8 cm2〜約20 cm2、約8 cm2〜約18 cm2、約8 cm2〜約16 cm2、約8 cm2〜約14 cm2、約8 cm2〜約12 cm2、約8 cm2〜約10 cm2、約10 cm2〜約60 cm2、約10 cm2〜約58 cm2、約10 cm2〜約56 cm2、約10 cm2〜約54 cm2、約10 cm2〜約52 cm2、約10 cm2〜約50 cm2、約10 cm2〜約48 cm2、約10 cm2〜約46 cm2、約10 cm2〜約44 cm2、約10 cm2〜約42 cm2、約10 cm2〜約40 cm2、約10 cm2〜約38 cm2、約10 cm2〜約36 cm2、約10 cm2〜約34 cm2、約10 cm2〜約32 cm2、約10 cm2〜約30 cm2、約10 cm2〜約28 cm2、約10 cm2〜約26 cm2、約10 cm2〜約24 cm2、約10 cm2〜約22 cm2、約10 cm2〜約20 cm2、約10 cm2〜約18 cm2、約10 cm2〜約16 cm2、約10 cm2〜約14 cm2、約10 cm2〜約12 cm2, 約12 cm2〜約60 cm2、約12 cm2〜約58 cm2、約12 cm2〜約56 cm2、約12 cm2〜約54 cm2、約12 cm2〜約52 cm2、約12 cm2〜約50 cm2、約12 cm2〜約48 cm2、約12 cm2〜約46 cm2、約12 cm2〜約44 cm2、約12 cm2〜約42 cm2、約12 cm2〜約40 cm2、約12 cm2〜約38 cm2、約12 cm2〜約36 cm2、約12 cm2〜約34 cm2、約12 cm2〜約32 cm2、約12 cm2〜約30 cm2、約12 cm2〜約28 cm2、約12 cm2〜約26 cm2、約12 cm2〜約24 cm2、約12 cm2〜約22 cm2、約12 cm2〜約20 cm2、約12 cm2〜約18 cm2、約12 cm2〜約16 cm2、約12 cm2〜約14 cm2、約14 cm2〜約60 cm2、約14 cm2〜約58 cm2、約14 cm2〜約56 cm2、約14 cm2〜約54 cm2、約14 cm2〜約52 cm2、約14 cm2〜約50 cm2、約14 cm2〜約48 cm2、約14 cm2〜約46 cm2、約14 cm2〜約44 cm2、約14 cm2〜約42 cm2、約14 cm2〜約40 cm2、約14 cm2〜約38 cm2、約14 cm2〜約36 cm2、約14 cm2〜約34 cm2、約14 cm2〜約32 cm2、約14 cm2〜約30 cm2、約14 cm2〜約28 cm2、約14 cm2〜約26 cm2、約14 cm2〜約24 cm2、約14 cm2〜約22 cm2、約14 cm2〜約20 cm2、約14 cm2〜約18 cm2、約14 cm2〜約16 cm2、約16 cm2〜約60 cm2、約16 cm2〜約58 cm2、約16 cm2〜約56 cm2、約16 cm2〜約54 cm2、約16 cm2〜約52 cm2、約16 cm2〜約50 cm2、約16 cm2〜約48 cm2、約16 cm2〜約46 cm2、約16 cm2〜約44 cm2、約16 cm2〜約42 cm2、約16 cm2〜約40 cm2、約16 cm2〜約38 cm2、約16 cm2〜約36 cm2、約16 cm2〜約34 cm2、約16 cm2〜約32 cm2、約16 cm2〜約30 cm2、約16 cm2〜約28 cm2、約16 cm2〜約26 cm2、約16 cm2〜約24 cm2、約16 cm2〜約22 cm2、約16 cm2〜約20 cm2、約16 cm2〜約18 cm2、約18 cm2〜約60 cm2、約18 cm2〜約58 cm2、約18 cm2〜約56 cm2、約18 cm2〜約54 cm2、約18 cm2〜約52 cm2、約18 cm2〜約50 cm2、約18 cm2〜約48 cm2、約18 cm2〜約46 cm2、約18 cm2〜約44 cm2、約18 cm2〜約42 cm2、約18 cm2〜約40 cm2、約18 cm2〜約38 cm2、約18 cm2〜約36 cm2、約18 cm2〜約34 cm2、約18 cm2〜約32 cm2、約18 cm2〜約30 cm2、約18 cm2〜約28 cm2、約18 cm2〜約26 cm2、約18 cm2〜約24 cm2、約18 cm2〜約22 cm2、約18 cm2〜約20 cm2、約20 cm2〜約60 cm2、約20 cm2〜約58 cm2、約20 cm2〜約56 cm2、約20 cm2〜約54 cm2、約20 cm2〜約52 cm2、約20 cm2〜約50 cm2、約20 cm2〜約48 cm2、約20 cm2〜約46 cm2、約20 cm2〜約44 cm2、約20 cm2〜約42 cm2、約20 cm2〜約40 cm2、約20 cm2〜約38 cm2、約20 cm2〜約36 cm2、約20 cm2〜約34 cm2、約20 cm2〜約32 cm2、約20 cm2〜約30 cm2、約20 cm2〜約28 cm2、約20 cm2〜約26 cm2、約20 cm2〜約24 cm2、約20 cm2〜約22 cm2、約22 cm2〜約60 cm2、約22 cm2〜約58 cm2、約22 cm2〜約56 cm2、約22 cm2〜約54 cm2、約22 cm2〜約52 cm2、約22 cm2〜約50 cm2、約22 cm2〜約48 cm2、約22 cm2〜約46 cm2、約22 cm2〜約44 cm2、約22 cm2〜約42 cm2、約22 cm2〜約40 cm2、約22 cm2〜約38 cm2、約22 cm2〜約36 cm2、約22 cm2〜約34 cm2、約22 cm2〜約32 cm2、約22 cm2〜約30 cm2、約22 cm2
〜約28 cm2、約22 cm2〜約26 cm2、約22 cm2〜約24 cm2、約24 cm2〜約60 cm2、約24 cm2〜約58 cm2、約24 cm2〜約56 cm2、約24 cm2〜約54 cm2、約24 cm2〜約52 cm2、約24 cm2〜約50 cm2、約24 cm2〜約48 cm2、約24 cm2〜約46 cm2、約24 cm2〜約44 cm2、約24 cm2〜約42 cm2、約24 cm2〜約40 cm2、約24 cm2〜約38 cm2、約24 cm2〜約36 cm2、約24 cm2〜約34 cm2、約24 cm2〜約32 cm2、約24 cm2〜約30 cm2、約24 cm2〜約28 cm2、約24 cm2〜約26 cm2、約26 cm2〜約60 cm2、約26 cm2〜約58 cm2、約26 cm2〜約56 cm2、約26 cm2〜約54 cm2、約26 cm2〜約52 cm2、約26 cm2〜約50 cm2、約26 cm2〜約48 cm2、約26 cm2〜約46 cm2、約26 cm2〜約44 cm2、約26 cm2〜約42 cm2、約26 cm2〜約40 cm2、約26 cm2〜約38 cm2、約26 cm2〜約36 cm2、約26 cm2〜約34 cm2、約26 cm2〜約32 cm2、約26 cm2〜約30 cm2、約26 cm2〜約28 cm2、約28 cm2〜約60 cm2、約28 cm2〜約58 cm2、約28 cm2〜約56 cm2、約28 cm2〜約54 cm2、約28 cm2〜約52 cm2、約28 cm2〜約50 cm2、約28 cm2〜約48 cm2、約28 cm2〜約46 cm2、約28 cm2〜約44 cm2、約28 cm2〜約42 cm2、約28 cm2〜約40 cm2、約28 cm2〜約38 cm2、約28 cm2〜約36 cm2、約28 cm2〜約34 cm2、約28 cm2〜約32 cm2、約28 cm2〜約30 cm2、約30 cm2〜約60 cm2、約30 cm2〜約58 cm2、約30 cm2〜約56 cm2、約30 cm2〜約54 cm2、約30 cm2〜約52 cm2、約30 cm2〜約50 cm2、約30 cm2〜約48 cm2、約30 cm2〜約46 cm2、約30 cm2〜約44 cm2、約30 cm2〜約42 cm2、約30 cm2〜約40 cm2、約30 cm2〜約38 cm2、約30 cm2〜約36 cm2、約30 cm2〜約34 cm2、約30 cm2〜約32 cm2, 約32 cm2〜約60 cm2、約32 cm2〜約58 cm2、約32 cm2〜約56 cm2、約32 cm2〜約54 cm2、約32 cm2〜約52 cm2、約32 cm2〜約50 cm2、約32 cm2〜約48 cm2、約32 cm2〜約46 cm2、約32 cm2〜約44 cm2、約32 cm2〜約42 cm2、約32 cm2〜約40 cm2、約32 cm2〜約38 cm2、約32 cm2〜約36 cm2、約32 cm2〜約34 cm2、約34 cm2〜約60 cm2、約34 cm2〜約58 cm2、約34 cm2〜約56 cm2、約34 cm2〜約54 cm2、約34 cm2〜約52 cm2、約34 cm2〜約50 cm2、約34 cm2〜約48 cm2、約34 cm2〜約46 cm2、約34 cm2〜約44 cm2、約34 cm2〜約42 cm2、約34 cm2〜約40 cm2、約34 cm2〜約38 cm2、約34 cm2〜約36 cm2、約36 cm2〜約60 cm2、約36 cm2〜約58 cm2、約36 cm2〜約56 cm2、約36 cm2〜約54 cm2、約36 cm2〜約52 cm2、約36 cm2〜約50 cm2、約36 cm2〜約48 cm2、約36 cm2〜約46 cm2、約36 cm2〜約44 cm2、約36 cm2〜約42 cm2、約36 cm2〜約40 cm2、約36 cm2〜約38 cm2、約38 cm2〜約60 cm2、約38 cm2〜約58 cm2、約38 cm2〜約56 cm2、約38 cm2〜約54 cm2、約38 cm2〜約52 cm2、約38 cm2〜約50 cm2、約38 cm2〜約48 cm2、約38 cm2〜約46 cm2、約38 cm2〜約44 cm2、約38 cm2〜約42 cm2、約38 cm2〜約40 cm2、約40 cm2〜約60 cm2、約40 cm2〜約58 cm2、約40 cm2〜約56 cm2、約40 cm2〜約54 cm2、約40 cm2〜約52 cm2、約40 cm2〜約50 cm2、約40 cm2〜約48 cm2、約40 cm2〜約46 cm2、約40 cm2〜約44 cm2、約40 cm2〜約42 cm2、約42 cm2〜約60 cm2、約42 cm2〜約58 cm2、約42 cm2〜約56 cm2、約42 cm2〜約54 cm2、約42 cm2〜約52 cm2、約42 cm2〜約50 cm2、約42 cm2〜約48 cm2、約42 cm2〜約46 cm2、約42 cm2〜約44 cm2、約44 cm2〜約60 cm2、約44 cm2〜約58 cm2、約44 cm2〜約56 cm2、約44 cm2〜約54 cm2、約44 cm2〜約52 cm2、約44 cm2〜約50 cm2、約44 cm2〜約48 cm2、約44 cm2〜約46 cm2、約46 cm2〜約60 cm2、約46 cm2〜約58 cm2、約46 cm2〜約56 cm2、約46 cm2〜約54 cm2、約46 cm2〜約52 cm2、約46 cm2〜約50 cm2、約46 cm2〜約48 cm2、約48 cm2〜約60 cm2、約48 cm2〜約58 cm2、約48 cm2〜約56 cm2、約48 cm2〜約54 cm2、約48 cm2〜約52 cm2、約48 cm2〜約50 cm2、約50 cm2〜約60 cm2、約50 cm2〜約58 cm2、約50 cm2〜約56 cm2、約50 cm2〜約54 cm2、約50 cm2〜約52 cm2、約52 cm2〜約60 cm2、約52 cm2〜約58 cm2、約52 cm2〜約56 cm2、約52 cm2〜約54 cm2、約54 cm2〜約60 cm2、約54 cm2〜約58 cm2、約54 cm2〜約56 cm2、���56 cm2〜約60 cm2、約56 cm2〜約58 cm2、または約58 cm2〜約60 cm2の表面積を有する。
【００４３】
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、半多孔質または多孔質材料によって覆われた前記少なくとも1つのエリアの表面積の総和は、約0.5 mm2〜約150 cm2、約0.5 mm2〜約140 cm2、約0.5 mm2〜約130 cm2、約0.5 mm2〜約120 cm2、約0.5 mm2〜約110 cm2、約0.5 mm2〜約100 cm2、約0.5 mm2〜約90 cm2、約0.5 mm2〜約80 cm2、約0.5 mm2〜約70 cm2、約0.5 mm2〜約60 cm2、約0.5 mm2〜約50 cm2、約0.5 mm2〜約40 cm2、約0.5 mm2〜約30 cm2、約0.5 mm2〜約20 cm2、約0.5 mm2〜約18 cm2、約0.5 mm2〜約16 cm2、約0.5 mm2〜約14 cm2、約0.5 mm2〜約12 cm2、約0.5 mm2〜約10 cm2、約0.5 mm2〜約8 cm2、約0.5 mm2〜約6 cm2、約0.5 mm2〜約5 cm2、約0.5 mm2〜約4 cm2、約0.5 mm2〜約3 cm2、約0.5 mm2〜約2 cm2、約0.5 mm2〜約1 cm2、約0.5 mm2〜約5 mm2、約5 mm2〜約150 cm2、約5 mm2〜約140 cm2、約5 mm2〜約130 cm2、約5 mm2〜約120 cm2、約5 mm2〜約110 cm2、約5 mm2〜約100 cm2、約5 mm2〜約90 cm2、約5 mm2〜約80 cm2、約5 mm2〜約70 cm2、約5 mm2〜約60 cm2、約5 mm2〜約50 cm2、約5 mm2〜約40 cm2、約5 mm2〜約30 cm2、約5 mm2〜約20 cm2、約5 mm2〜約18 cm2、約5 mm2〜約16 cm2、約5 mm2〜約14 cm2、約5 mm2〜約12 cm2、約5 mm2〜約10 cm2、約5 mm2〜約8 cm2、約5 mm2〜約6 cm2、約5 mm2〜約5 cm2、約5 mm2〜約4 cm2、約5 mm2〜約3 cm2、約5 mm2〜約2 cm2、約5 mm2〜約1 cm2、約1 cm2〜約150 cm2、約1 cm2〜約140 cm2、約1 cm2〜約130 cm2、約1 cm2〜約120 cm2、約1 cm2〜約110 cm2、約1 cm2〜約100 cm2、約1 cm2〜約90 cm2、約1 cm2〜約80 cm2、約1 cm2〜約70 cm2、約1 cm2〜約60 cm2、約1 cm2〜約50 cm2、約1 cm2〜約40 cm2、約1 cm2〜約30 cm2、約1 cm2〜約20 cm2、約1 cm2〜約18 cm2、約1 cm2〜約16 cm2、約1 cm2〜約14 cm2、約1 cm2〜約12 cm2、約1 cm2〜約10 cm2、約1 cm2〜約8 cm2、約1 cm2〜約6 cm2、約1 cm2〜約5 cm2、約1 cm2〜約4 cm2、約1 cm2〜約3 cm2、約1 cm2〜約2 cm2、約2 cm2〜約150 cm2、約2 cm2〜約140 cm2、約2 cm2〜約130 cm2、約2 cm2〜約120 cm2、約2 cm2〜約110 cm2、約2 cm2〜約100 cm2、約2 cm2〜約90 cm2、約2 cm2〜約80 cm2、約2 cm2〜約70 cm2、約2 cm2〜約60 cm2、約2 cm2〜約50 cm2、約2 cm2〜約40 cm2、約2 cm2〜約30 cm2、約2 cm2〜約20 cm2、約2 cm2〜約18 cm2、約2 cm2〜約16 cm2、約2 cm2〜約14 cm2、約2 cm2〜約12 cm2、約2 cm2〜約10 cm2、約2 cm2〜約8 cm2、約2 cm2〜約6 cm2、約2 cm2〜約5 cm2、約2 cm2〜約4 cm2、約2 cm2〜約3 cm2、約3 cm2〜約150 cm2、約3 cm2〜約140 cm2、約3 cm2〜約130 cm2、約3 cm2〜約120 cm2、約3 cm2〜約110 cm2、約3 cm2〜約100 cm2、約3 cm2〜約90 cm2、約3 cm2〜約80 cm2、約3 cm2〜約70 cm2、約3 cm2〜約60 cm2、約3 cm2〜約50 cm2、約3 cm2〜約40 cm2、約3 cm2〜約30 cm2、約3 cm2〜約20 cm2、約3 cm2〜約18 cm2、約3 cm2〜約16 cm2、約3 cm2〜約14 cm2、約3 cm2〜約12 cm2、約3 cm2〜約10 cm2、約3 cm2〜約8 cm2、約3 cm2〜約6 cm2、約3 cm2〜約5 cm2、約3 cm2〜約4 cm2、約4 cm2〜約150 cm2、約4 cm2〜約140 cm2、約4 cm2〜約130 cm2、約4 cm2〜約120 cm2、約4 cm2〜約110 cm2、約4 cm2〜約100 cm2、約4 cm2〜約90 cm2、約4 cm2〜約80 cm2、約4 cm2〜約70 cm2、約4 cm2〜約60 cm2、約4 cm2〜約50 cm2、約4 cm2〜約40 cm2、約4 cm2〜約30 cm2、約4 cm2〜約20 cm2、約4 cm2〜約18 cm2、約4 cm2〜約16 cm2、約4 cm2〜約14 cm2、約4 cm2〜約12 cm2、約4 cm2〜約10 cm2、約4 cm2〜約8 cm2、約4 cm2〜約6 cm2、約4 cm2〜約5 cm2、約5 cm2〜約150 cm2、約5 cm2〜約140 cm2、約5 cm2〜約130 cm2、約5 cm2〜約120 cm2、約5 cm2〜約110 cm2、約5 cm2〜約100 cm2、約5 cm2〜約90 cm2、約5 cm2〜約80 cm2、約5 cm2〜約70 cm2、約5 cm2〜約60 cm2、約5 cm2〜約50 cm2、約5 cm2〜約40 cm2、約5 cm2〜約30 cm2、約5 cm2〜約20 cm2、約5 cm2〜約18 cm2、約5 cm2〜約16 cm2、約5 cm2〜約14 cm2、約5 cm2〜約12 cm2、約5 cm2〜約10 cm2、約5 cm2〜約8 cm2、約5 cm2〜約6 cm2、約6 cm2〜約150 cm2、約6 cm2〜約140 cm2、約6 cm2〜約130 cm2、約6 cm2〜約120 cm2、約6 cm2〜約110 cm2、約6 cm2〜約100 cm2、約6 cm2〜約90 cm2、約6 cm2〜約80 cm2、約6 cm2〜約70 cm2、約6 cm2〜約60 cm2、約6 cm2〜約50 cm2、約6 cm2〜約40 cm2、約6 cm2〜約30 cm2、約6 cm2〜約20 cm2、約6 cm2〜約18 cm2、約6 cm2〜約16 cm2、約6 cm2〜約14 cm2、約6 cm2〜約12 cm2、約6 cm2〜約10 cm2、約6 cm2〜約8 cm2、約8 cm2〜約150 cm2、約8 cm2〜約140 cm2、約8 cm2〜約130 cm2、約8 cm2〜約120 cm2、約8 cm2〜約110 cm2、約8 cm2〜約100 cm2、約8 cm2〜約90 cm2、約8 cm2〜約80 cm2、約8 cm2〜約70 cm2、約8 cm2〜約60 cm2、約8 cm2〜約50 cm2、約8 cm2〜約40 cm2、約8 cm2〜約30 cm2、約8 cm2〜約20 cm2、約8 cm2〜約18 cm2、約8 cm2〜約16 cm2、約8 cm2〜約14 cm2、約8 cm2〜約12 cm2、約8 cm2〜約10 cm2、約10 cm2〜約150 cm2、約10 cm2〜約140 cm2、約10 cm2〜約130 cm2、約10 cm2〜約120 cm2、約10 cm2〜約110 cm2、約10 cm2〜約100 cm2、約10 cm2〜約90 cm2、約10 cm2〜約80 cm2、約10 cm2〜約70 cm2、約10 cm2〜約60 cm2、約10 cm2〜約50 cm2、約10 cm2〜約40 cm2、約10 cm2〜約30 cm2、約10 cm2〜約20 cm2、約10 cm2〜約18 cm2、約10 cm2〜約16 cm2、約10 cm2〜約14 cm2、約10 cm2〜約12 cm2、約12 cm2〜約150 cm2、約12 cm2〜約140 cm2、約12 cm2〜約130 cm2、約12 cm2〜約120 cm2、約12 cm2〜約110 cm2、約12 cm2〜約100 cm2、約12 cm2〜約90 cm2、約12 cm2〜約80 cm2、約12 cm2〜約70 cm2、約12 cm2〜約60 cm2、約12 cm2〜約50 cm2、約12 cm2〜約40 cm2、約12 cm2〜約30 cm2、約12 cm2〜約20 cm2、約12 cm2〜約18 cm2、約12 cm2〜約16 cm2、約12 cm2〜約14 cm2、約14 cm2〜約150 cm2、約14 cm
2〜約140 cm2、約14 cm2〜約130 cm2、約14 cm2〜約120 cm2、約14 cm2〜約110 cm2、約14 cm2〜約100 cm2、約14 cm2〜約90 cm2、約14 cm2〜約80 cm2、約14 cm2〜約70 cm2、約14 cm2〜約60 cm2、約14 cm2〜約50 cm2、約14 cm2〜約40 cm2、約14 cm2〜約30 cm2、約14 cm2〜約20 cm2、約14 cm2〜約18 cm2、約14 cm2〜約16 cm2、約16 cm2〜約150 cm2、約16 cm2〜約140 cm2、約16 cm2〜約130 cm2、約16 cm2〜約120 cm2、約16 cm2〜約110 cm2、約16 cm2〜約100 cm2、約16 cm2〜約90 cm2、約16 cm2〜約80 cm2、約16 cm2〜約70 cm2、約16 cm2〜約60 cm2、約16 cm2〜約50 cm2、約16 cm2〜約40 cm2、約16 cm2〜約30 cm2、約16 cm2〜約20 cm2、約16 cm2〜約18 cm2、約18 cm2〜約150 cm2、約18 cm2〜約140 cm2、約18 cm2〜約130 cm2、約18 cm2〜約120 cm2、約18 cm2〜約110 cm2、約18 cm2〜約100 cm2、約18 cm2〜約90 cm2、約18 cm2〜約80 cm2、約18 cm2〜約70 cm2、約18 cm2〜約60 cm2、約18 cm2〜約50 cm2、約18 cm2〜約40 cm2、約18 cm2〜約30 cm2、約18 cm2〜約20 cm2、約20 cm2〜約150 cm2、約20 cm2〜約140 cm2、約20 cm2〜約130 cm2、約20 cm2〜約120 cm2、約20 cm2〜約110 cm2、約20 cm2〜約100 cm2、約20 cm2〜約90 cm2、約20 cm2〜約80 cm2、約20 cm2〜約70 cm2、約20 cm2〜約60 cm2、約20 cm2〜約50 cm2、約20 cm2〜約40 cm2、約20 cm2〜約30 cm2、約30 cm2〜約150 cm2、約30 cm2〜約140 cm2、約30 cm2〜約130 cm2、約30 cm2〜約120 cm2、約30 cm2〜約110 cm2、約30 cm2〜約100 cm2、約30 cm2〜約90 cm2、約30 cm2〜約80 cm2、約30 cm2〜約70 cm2、約30 cm2〜約60 cm2、約30 cm2〜約50 cm2、約30 cm2〜約40 cm2、約40 cm2〜約150 cm2、約40 cm2〜約140 cm2、約40 cm2〜約130 cm2、約40 cm2〜約120 cm2、約40 cm2〜約110 cm2、約40 cm2〜約100 cm2、約40 cm2〜約90 cm2、約40 cm2〜約80 cm2、約40 cm2〜約70 cm2、約40 cm2〜約60 cm2、約40 cm2〜約50 cm2、約50 cm2〜約150 cm2、約50 cm2〜約140 cm2、約50 cm2〜約130 cm2、約50 cm2〜約120 cm2、約50 cm2〜約110 cm2、約50 cm2〜約100 cm2、約50 cm2〜約90 cm2、約50 cm2〜約80 cm2、約50 cm2〜約70 cm2、約50 cm2〜約60 cm2、約60 cm2〜約150 cm2、約60 cm2〜約140 cm2、約60 cm2〜約130 cm2、約60 cm2〜約120 cm2、約60 cm2〜約110 cm2、約60 cm2〜約100 cm2、約60 cm2〜約90 cm2、約60 cm2〜約80 cm2、約60 cm2〜約70 cm2、約70 cm2〜約150 cm2、約70 cm2〜約140 cm2、約70 cm2〜約130 cm2、約70 cm2〜約120 cm2、約70 cm2〜約110 cm2、約70 cm2〜約100 cm2、約70 cm2〜約90 cm2、約70 cm2〜約80 cm2、約80 cm2〜約150 cm2、約80 cm2〜約140 cm2、約80 cm2〜約130 cm2、約80 cm2〜約120 cm2、約80 cm2〜約110 cm2、約80 cm2〜約100 cm2、約80 cm2〜約90 cm2、約90 cm2〜約150 cm2、約90 cm2〜約140 cm2、約90 cm2〜約130 cm2、約90 cm2〜約120 cm2、約90 cm2〜約110 cm2、約90 cm2〜約100 cm2、約100 cm2〜約150 cm2、約100 cm2〜約140 cm2、約100 cm2〜約130 cm2、約100 cm2〜約120 cm2、約100 cm2〜約110 cm2、約110 cm2〜約150 cm2、約110 cm2〜約140 cm2、約110 cm2〜約130 cm2、約110 cm2〜約120 cm2、約120 cm2〜約150 cm2、約120 cm2〜約140 cm2、約120 cm2〜約130 cm2、約130 cm2〜約150 cm2、約130 cm2〜約140 cm2、または約140 cm2〜約150 cm2である。
【００４４】
液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを壁が具備する、本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた前記少なくとも1つのエリアによって占められる、壁の総表面積のパーセンテージは、約0.1%〜約95%、約0.1%〜約90%、約0.1%〜約85%、約0.1%〜約80%、約0.1%〜約75%、約0.1%〜約70%、約0.1%〜約65%、約0.1%〜約60%、約0.1%〜約55%、約0.1%〜約50%、約0.1%〜約45%、約0.1%〜約40%、約0.1%〜約35%、約0.1%〜約30%、約0.1%〜約25%、約0.1%〜約20%、約0.1%〜約18%、約0.1%〜約16%、約0.1%〜約14%、約0.1%〜約12%、約0.1%〜約10%、約0.1%〜約8%、約0.1%〜約6%、約0.1%〜約5%、約0.1%〜約4%、約0.1%〜約3%、約0.1%〜約2%、約0.1%〜約1%、約0.1%〜約0.5%、約0.1%〜約0.2%、約0.2%〜約95%、約0.2%〜約90%、約0.2%〜約85%、約0.2%〜約80%、約0.2%〜約75%、約0.2%〜約70%、約0.2%〜約65%、約0.2%〜約60%、約0.2%〜約55%、約0.2%〜約50%、約0.2%〜約45%、約0.2%〜約40%、約0.2%〜約35%、約0.2%〜約30%、約0.2%〜約25%、約0.2%〜約20%、約0.2%〜約18%、約0.2%〜約16%、約0.2%〜約14%、約0.2%〜約12%、約0.2%〜約10%、約0.2%〜約8%、約0.2%〜約6%、約0.2%〜約5%、約0.2%〜約4%、約0.2%〜約3%、約0.2%〜約2%、約0.2%〜約1%、約0.2%〜約0.5%、約0.5%〜約95%、約0.5%〜約90%、約0.5%〜約85%、約0.5%〜約80%、約0.5%〜約75%、約0.5%〜約70%、約0.5%〜約65%、約0.5%〜約60%、約0.5%〜約55%、約0.5%〜約50%、約0.5%〜約45%、約0.5%〜約40%、約0.5%〜約35%、約0.5%〜約30%、約0.5%〜約25%、約0.5%〜約20%、約0.5%〜約18%、約0.5%〜約16%、約0.5%〜約14%、約0.5%〜約12%、約0.5%〜約10%、約0.5%〜約8%、約0.5%〜約6%、約0.5%〜約5%、約0.5%〜約4%、約0.5%〜約3%、約0.5%〜約2%、約0.5%〜約1%、約1%〜約95%、約1%〜約90%、約1%〜約85%、約1%〜約80%、約1%〜約75%、約1%〜約70%、約1%〜約65%、約1%〜約60%、約1%〜約55%、約1%〜約50%、約1%〜約45%、約1%〜約40%、約1%〜約35%、約1%〜約30%、約1%〜約25%、約1%〜約20%、約1%〜約18%、約1%〜約16%、約1%〜約14%、約1%〜約12%、約1%〜約10%、約1%〜約8%、約1%〜約6%、約1%〜約5%、約1%〜約4%、約1%〜約3%、約1%〜約2%、約2%〜約95%、約2%〜約90%、約2%〜約85%、約2%〜約80%、約2%〜約75%、約2%〜約70%、約2%〜約65%、約2%〜約60%、約2%〜約55%、約2%〜約50%、約2%〜約45%、約2%〜約40%、約2%〜約35%、約2%〜約30%、約2%〜約25%、約2%〜約20%、約2%〜約18%、約2%〜約16%、約2%〜約14%、約2%〜約12%、約2%〜約10%、約2%〜約8%、約2%〜約6%、約2%〜約5%、約2%〜約4%、約2%〜約3%、約3%〜約95%、約3%〜約90%、約3%〜約85%、約3%〜約80%、約3%〜約75%、約3%〜約70%、約3%〜約65%、約3%〜約60%、約3%〜約55%、約3%〜約50%、約3%〜約45%、約3%〜約40%、約3%〜約35%、約3%〜約30%、約3%〜約25%、約3%〜約20%、約3%〜約18%、約3%〜約16%、約3%〜約14%、約3%〜約12%、約3%〜約10%、約3%〜約8%、約3%〜約6%、約3%〜約5%、約3%〜約4%、約4%〜約95%、約4%〜約90%、約4%〜約85%、約4%〜約80%、約4%〜約75%、約4%〜約70%、約4%〜約65%、約4%〜約60%、約4%〜約55%、約4%〜約50%、約4%〜約45%、約4%〜約40%、約4%〜約35%、約4%〜約30%、約4%〜約25%、約4%〜約20%、約4%〜約18%、約4%〜約16%、約4%〜約14%、約4%〜約12%、約4%〜約10%、約4%〜約8%、約4%〜約6%、約4%〜約5%、約5%〜約95%、約5%〜約90%、約5%〜約85%、約5%〜約80%、約5%〜約75%、約5%〜約70%、約5%〜約65%、約5%〜約60%、約5%〜約55%、約5%〜約50%、約5%〜約45%、約5%〜約40%、約5%〜約35%、約5%〜約30%、約5%〜約25%、約5%〜約20%、約5%〜約18%、約5%〜約16%、約5%〜約14%、約5%〜約12%、約5%〜約10%、約5%〜約8%、約5%〜約6%、約6%〜約95%、約6%〜約90%、約6%〜約85%、約6%〜約80%、約6%〜約75%、約6%〜約70%、約6%〜約65%、約6%〜約60%、約6%〜約55%、約6%〜約50%、約6%〜約45%、約6%〜約40%、約6%〜約35%、約6%〜約30%、約6%〜約25%、約6%〜約20%、約6%〜約18%、約6%〜約16%、約6%〜約14%、約6%〜約12%、約6%〜約10%、約6%〜約8%、約8%〜約95%、約8%〜約90%、約8%〜約85%、約8%〜約80%、約8%〜約75%、約8%〜約70%、約8%〜約65%、約8%〜約60%、約8%〜約55%、約8%〜約50%、約8%〜約45%、約8%〜約40%、約8%〜約35%、約8%〜約30%、約8%〜約25%、約8%〜約20%、約8%〜約18%、約8%〜約16%、約8%〜約14%、約8%〜約12%、約8%〜約10%、約10%〜約95%、約10%〜約90%、約10%〜約85%、約10%〜約80%、約10%〜約75%、約10%〜約70%、約10%〜約65%、約10%〜約60%、約10%〜約55%、約10%〜約50%、約10%〜約45%、約10%〜約40%、約10%〜約35%、約10%〜約30%、約10%〜約25%、約10%〜約20%、約10%〜約18%、約10%〜約16%、約10%〜約14%、約10%〜約12%、約12%〜約95%、約12%〜約90%、約12%〜約85%、約12%〜約80%、約12%〜約75%、約12%〜約70%、約12%〜約65%、約12%〜約60%、約12%〜約55%、約12%〜約50%、約12%〜約45%、約12%〜約40%、約12%〜約35%、約12%〜約30%、約12%〜約25%、約12%〜約20%、約12%〜約18%、約12%〜約16%、約12%〜約14%、約14%〜約95%、約14%〜約90%、約14%〜約85%、約14%〜約80%、約14%〜約75%、約14%〜約70%、約14%〜約65%、約14%〜約60%、約14%〜約55%、約14%〜約50%、約14%〜約45%、約14%〜約40%、約14%〜約35%、約14%〜約30%、約14%〜約25%、約14%〜約20%、約14%〜約18%、約14%〜約16%、約16%〜約95%、約16%〜約90%、約16%〜約85%、約16%〜約80%、約16%〜約75%、約16%〜約70%、約16%〜約65%、約16%〜約60%、約16%〜約55%、約16%〜約50%、約16%〜約45%、約16%〜約40%、約16%〜約35%、約16%〜約30%、約16%〜約25%、約16%〜約20%、約16%〜約18%、約18%〜約95%、約18%〜約90%、約18%〜約85%、約18%〜約80%、約18%〜約75%、約18%〜約70%、約18%〜約65%、約18%〜約60%、約18%〜約55%、約18%〜約50%、約18%〜約45%、約18%〜約40%、約18%〜約35%、約18%〜約30%、約18%〜約25%、約18%〜約20%、約20%〜約95%、約20%〜約90%、約20%〜約85%、約20%〜約80%、約20%〜約75%、約20%〜約70%、約20%〜約65%、約20%〜約60%、約20%〜約55%、約20%〜約50%、約20%〜約45%、約20%〜約40%、約20%〜約35%、約20%〜約30%、約20%〜約25%、約25%〜約95%、約25%〜約90%、約25%〜約85%、約25%〜約80%、約25%〜約75%、約25%〜約70%、約25%〜約65%、約25%〜約60%、約25%〜約55%、約25%〜約50%、約25%〜約45%、約25%〜約40%、約25%〜約35%、約25%〜約30%、約30%〜約95%、約30%〜約90%、約30%〜約85%、約30%〜約80%、約30%〜約75%、約30%〜約70%、約30%〜約65%、約30%〜約60%、約30%〜約55%、約30%〜約50%、約30%〜約45%、約30%〜約40%、約30%〜約35%、約35%〜約95%、約35%〜約90%、約35%〜約85%、約35%〜約80%、約35%〜約75%、約35%〜約70%、約35%〜約65%、約35%〜約60%、約35%〜約55%、約35%〜約50%、約35%〜約45%、約35%〜約40%、約40%〜約95%、約40%〜約90%、約40%〜約85%、約40%〜約80%、約40%〜約75%、約40%〜約70%、約40%〜約65%、約40%〜約60%、約40%〜約55%、約40%〜約50%、約40%〜約45%、約45%〜約95%、約45%〜約90%、約45%〜約85%、約45%〜約80%、約45%〜約75%、約45%〜約70%、約45%〜約65%、約45%〜約60%、約45%〜約55%、約45%〜約50%、約50%〜約95%、約50%〜約90%、約50%〜約85%、約50%〜約80%、約50%〜約75%、約50%〜約70%、約50%〜約65%、約50%〜約60%、約50%〜約55%、約55%〜約95%、約55%〜約90%、約55%〜約85%、約55%〜約80%、約55%〜約75%、約55%〜約70%、約55%〜約65%、約55%〜約60%、約60%〜約95%、約60%〜約90%、約60%〜約85%、約60%〜約80%、約60%〜約75%、約60%〜約70%、約60%〜約65%、約65%〜約95%、約65%〜約90%、約65%〜約85%、約65%〜約80%、約65%〜約75%、約65%〜約70%、約70%〜約95%、約70%〜約90%、約70%〜約85%、約70%〜約80%、約70%〜約75%、約75%〜約95%、約75%〜約90%、約75%〜約85%、約75%〜約80%、約80%〜約95%、約80%〜約90%、約80%〜約85%、約85%〜約95%、約85%〜約90%、または約90%〜約95%である。
【００４５】
液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを下端が具備する、本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた前記少なくとも1つのエリアによって占められる、下端の総表面積のパーセンテージは、約1%〜約100%、約1%〜約95%、約1%〜約90%、約1%〜約85%、約1%〜約80%、約1%〜約75%、約1%〜約70%、約1%〜約65%、約1%〜約60%、約1%〜約55%、約1%〜約50%、約1%〜約45%、約1%〜約40%、約1%〜約35%、約1%〜約30%、約1%〜約25%、約1%〜約20%、約1%〜約18%、約1%〜約16%、約1%〜約14%、約1%〜約12%、約1%〜約10%、約1%〜約8%、約1%〜約6%、約1%〜約5%、約1%〜約4%、約1%〜約3%、約1%〜約2%、約2%〜約100%、約2%〜約95%、約2%〜約90%、約2%〜約85%、約2%〜約80%、約2%〜約75%、約2%〜約70%、約2%〜約65%、約2%〜約60%、約2%〜約55%、約2%〜約50%、約2%〜約45%、約2%〜約40%、約2%〜約35%、約2%〜約30%、約2%〜約25%、約2%〜約20%、約2%〜約18%、約2%〜約16%、約2%〜約14%、約2%〜約12%、約2%〜約10%、約2%〜約8%、約2%〜約6%、約2%〜約5%、約2%〜約4%、約2%〜約3%、約3%〜約100%、約3%〜約95%、約3%〜約90%、約3%〜約85%、約3%〜約80%、約3%〜約75%、約3%〜約70%、約3%〜約65%、約3%〜約60%、約3%〜約55%、約3%〜約50%、約3%〜約45%、約3%〜約40%、約3%〜約35%、約3%〜約30%、約3%〜約25%、約3%〜約20%、約3%〜約18%、約3%〜約16%、約3%〜約14%、約3%〜約12%、約3%〜約10%、約3%〜約8%、約3%〜約6%、約3%〜約5%、約3%〜約4%、約4%〜約100%、約4%〜約95%、約4%〜約90%、約4%〜約85%、約4%〜約80%、約4%〜約75%、約4%〜約70%、約4%〜約65%、約4%〜約60%、約4%〜約55%、約4%〜約50%、約4%〜約45%、約4%〜約40%、約4%〜約35%、約4%〜約30%、約4%〜約25%、約4%〜約20%、約4%〜約18%、約4%〜約16%、約4%〜約14%、約4%〜約12%、約4%〜約10%、約4%〜約8%、約4%〜約6%、約4%〜約5%、約5%〜約100%、約5%〜約95%、約5%〜約90%、約5%〜約85%、約5%〜約80%、約5%〜約75%、約5%〜約70%、約5%〜約65%、約5%〜約60%、約5%〜約55%、約5%〜約50%、約5%〜約45%、約5%〜約40%、約5%〜約35%、約5%〜約30%、約5%〜約25%、約5%〜約20%、約5%〜約18%、約5%〜約16%、約5%〜約14%、約5%〜約12%、約5%〜約10%、約5%〜約8%、約5%〜約6%、約6%〜約100%、約6%〜約95%、約6%〜約90%、約6%〜約85%、約6%〜約80%、約6%〜約75%、約6%〜約70%、約6%〜約65%、約6%〜約60%、約6%〜約55%、約6%〜約50%、約6%〜約45%、約6%〜約40%、約6%〜約35%、約6%〜約30%、約6%〜約25%、約6%〜約20%、約6%〜約18%、約6%〜約16%、約6%〜約14%、約6%〜約12%、約6%〜約10%、約6%〜約8%、約8%〜約100%、約8%〜約95%、約8%〜約90%、約8%〜約85%、約8%〜約80%、約8%〜約75%、約8%〜約70%、約8%〜約65%、約8%〜約60%、約8%〜約55%、約8%〜約50%、約8%〜約45%、約8%〜約40%、約8%〜約35%、約8%〜約30%、約8%〜約25%、約8%〜約20%、約8%〜約18%、約8%〜約16%、約8%〜約14%、約8%〜約12%、約8%〜約10%、約10%〜約100%、約10%〜約95%、約10%〜約90%、約10%〜約85%、約10%〜約80%、約10%〜約75%、約10%〜約70%、約10%〜約65%、約10%〜約60%、約10%〜約55%、約10%〜約50%、約10%〜約45%、約10%〜約40%、約10%〜約35%、約10%〜約30%、約10%〜約25%、約10%〜約20%、約10%〜約18%、約10%〜約16%、約10%〜約14%、約10%〜約12%、約12%〜約100%、約12%〜約95%、約12%〜約90%、約12%〜約85%、約12%〜約80%、約12%〜約75%、約12%〜約70%、約12%〜約65%、約12%〜約60%、約12%〜約55%、��12%〜約50%、約12%〜約45%、約12%〜約40%、約12%〜約35%、約12%〜約30%、約12%〜約25%、約12%〜約20%、約12%〜約18%、約12%〜約16%、約12%〜約14%、約14%〜約100%、約14%〜約95%、約14%〜約90%、約14%〜約85%、約14%〜約80%、約14%〜約75%、約14%〜約70%、約14%〜約65%、約14%〜約60%、約14%〜約55%、約14%〜約50%、約14%〜約45%、約14%〜約40%、約14%〜約35%、約14%〜約30%、約14%〜約25%、約14%〜約20%、約14%〜約18%、約14%〜約16%、約16%〜約100%、約16%〜約95%、約16%〜約90%、約16%〜約85%、約16%〜約80%、約16%〜約75%、約16%〜約70%、約16%〜約65%、約16%〜約60%、約16%〜約55%、約16%〜約50%、約16%〜約45%、約16%〜約40%、約16%〜約35%、約16%〜約30%、約16%〜約25%、約16%〜約20%、約16%〜約18%、約18%〜約100%、約18%〜約95%、約18%〜約90%、約18%〜約85%、約18%〜約80%、約18%〜約75%、約18%〜約70%、約18%〜約65%、約18%〜約60%、約18%〜約55%、約18%〜約50%、約18%〜約45%、約18%〜約40%、約18%〜約35%、約18%〜約30%、約18%〜約25%、約18%〜約20%、約20%〜約100%、約20%〜約95%、約20%〜約90%、約20%〜約85%、約20%〜約80%、約20%〜約75%、約20%〜約70%、約20%〜約65%、約20%〜約60%、約20%〜約55%、約20%〜約50%、約20%〜約45%、約20%〜約40%、約20%〜約35%、約20%〜約30%、約20%〜約25%、約25%〜約100%、約25%〜約95%、約25%〜約90%、約25%〜約85%、約25%〜約80%、約25%〜約75%、約25%〜約70%、約25%〜約65%、約25%〜約60%、約25%〜約55%、約25%〜約50%、約25%〜約45%、約25%〜約40%、約25%〜約35%、約25%〜約30%、約30%〜約100%、約30%〜約95%、約30%〜約90%、約30%〜約85%、約30%〜約80%、約30%〜約75%、約30%〜約70%、約30%〜約65%、約30%〜約60%、約30%〜約55%、約30%〜約50%、約30%〜約45%、約30%〜約40%、約30%〜約35%、約35%〜約100%、約35%〜約95%、約35%〜約90%、約35%〜約85%、約35%〜約80%、約35%〜約75%、約35%〜約70%、約35%〜約65%、約35%〜約60%、約35%〜約55%、約35%〜約50%、約35%〜約45%、約35%〜約40%、約40%〜約100%、約40%〜約95%、約40%〜約90%、約40%〜約85%、約40%〜約80%、約40%〜約75%、約40%〜約70%、約40%〜約65%、約40%〜約60%、約40%〜約55%、約40%〜約50%、約40%〜約45%、約45%〜約100%、約45%〜約95%、約45%〜約90%、約45%〜約85%、約45%〜約80%、約45%〜約75%、約45%〜約70%、約45%〜約65%、約45%〜約60%、約45%〜約55%、約45%〜約50%、約50%〜約100%、約50%〜約95%、約50%〜約90%、約50%〜約85%、約50%〜約80%、約50%〜約75%、約50%〜約70%、約50%〜約65%、約50%〜約60%、約50%〜約55%、約55%〜約100%、約55%〜約95%、約55%〜約90%、約55%〜約85%、約55%〜約80%、約55%〜約75%、約55%〜約70%、約55%〜約65%、約55%〜約60%、約60%〜約100%、約60%〜約95%、約60%〜約90%、約60%〜約85%、約60%〜約80%、約60%〜約75%、約60%〜約70%、約60%〜約65%、約65%〜約100%、約65%〜約95%、約65%〜約90%、約65%〜約85%、約65%〜約80%、約65%〜約75%、約65%〜約70%；約70%〜約100%、約70%〜約95%、約70%〜約90%、約70%〜約85%、約70%〜約80%、約70%〜約75%、約75%〜約100%、約75%〜約95%、約75%〜約90%、約75%〜約85%、約75%〜約80%、約80%〜約100%、約80%〜約95%、約80%〜約90%、約80%〜約85%、約85%〜約100%、約85%〜約95%、約85%〜約90%、約90%〜約100%、約90%〜約95%、または約95%〜約100%である。
【００４６】
液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた少なくとも1つのエリアを上端が具備する、本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの態様において、液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する半多孔質または多孔質材料によって覆われた前記少なくとも1つのエリアによって占められる、上端の総表面積のパーセンテージは、約1%〜約100%、約1%〜約95%、約1%〜約90%、約1%〜約85%、約1%〜約80%、約1%〜約75%、約1%〜約70%、約1%〜約65%、約1%〜約60%、約1%〜約55%、約1%〜約50%、約1%〜約45%、約1%〜約40%、約1%〜約35%、約1%〜約30%、約1%〜約25%、約1%〜約20%、約1%〜約18%、約1%〜約16%、約1%〜約14%、約1%〜約12%、約1%〜約10%、約1%〜約8%、約1%〜約6%、約1%〜約5%、約1%〜約4%、約1%〜約3%、約1%〜約2%、約2%〜約100%、約2%〜約95%、約2%〜約90%、約2%〜約85%、約2%〜約80%、約2%〜約75%、約2%〜約70%、約2%〜約65%、約2%〜約60%、約2%〜約55%、約2%〜約50%、約2%〜約45%、約2%〜約40%、約2%〜約35%、約2%〜約30%、約2%〜約25%、約2%〜約20%、約2%〜約18%、約2%〜約16%、約2%〜約14%、約2%〜約12%、約2%〜約10%、約2%〜約8%、約2%〜約6%、約2%〜約5%、約2%〜約4%、約2%〜約3%、約3%〜約100%、約3%〜約95%、約3%〜約90%、約3%〜約85%、約3%〜約80%、約3%〜約75%、約3%〜約70%、約3%〜約65%、約3%〜約60%、約3%〜約55%、約3%〜約50%、約3%〜約45%、約3%〜約40%、約3%〜約35%、約3%〜約30%、約3%〜約25%、約3%〜約20%、約3%〜約18%、約3%〜約16%、約3%〜約14%、約3%〜約12%、約3%〜約10%、約3%〜約8%、約3%〜約6%、約3%〜約5%、約3%〜約4%、約4%〜約100%、約4%〜約95%、約4%〜約90%、約4%〜約85%、約4%〜約80%、約4%〜約75%、約4%〜約70%、約4%〜約65%、約4%〜約60%、約4%〜約55%、約4%〜約50%、約4%〜約45%、約4%〜約40%、約4%〜約35%、約4%〜約30%、約4%〜約25%、約4%〜約20%、約4%〜約18%、約4%〜約16%、約4%〜約14%、約4%〜約12%、約4%〜約10%、約4%〜約8%、約4%〜約6%、約4%〜約5%、約5%〜約100%、約5%〜約95%、約5%〜約90%、約5%〜約85%、約5%〜約80%、約5%〜約75%、約5%〜約70%、約5%〜約65%、約5%〜約60%、約5%〜約55%、約5%〜約50%、約5%〜約45%、約5%〜約40%、約5%〜約35%、約5%〜約30%、約5%〜約25%、約5%〜約20%、約5%〜約18%、約5%〜約16%、約5%〜約14%、約5%〜約12%、約5%〜約10%、約5%〜約8%、約5%〜約6%、約6%〜約100%、約6%〜約95%、約6%〜約90%、約6%〜約85%、約6%〜約80%、約6%〜約75%、約6%〜約70%、約6%〜約65%、約6%〜約60%、約6%〜約55%、約6%〜約50%、約6%〜約45%、約6%〜約40%、約6%〜約35%、約6%〜約30%、約6%〜約25%、約6%〜約20%、約6%〜約18%、約6%〜約16%、約6%〜約14%、約6%〜約12%、約6%〜約10%、約6%〜約8%、約8%〜約100%、約8%〜約95%、約8%〜約90%、約8%〜約85%、約8%〜約80%、約8%〜約75%、約8%〜約70%、約8%〜約65%、約8%〜約60%、約8%〜約55%、約8%〜約50%、約8%〜約45%、約8%〜約40%、約8%〜約35%、約8%〜約30%、約8%〜約25%、約8%〜約20%、約8%〜約18%、約8%〜約16%、約8%〜約14%、約8%〜約12%、約8%〜約10%、約10%〜約100%、約10%〜約95%、約10%〜約90%、約10%〜約85%、約10%〜約80%、約10%〜約75%、約10%〜約70%、約10%〜約65%、約10%〜約60%、約10%〜約55%、約10%〜約50%、約10%〜約45%、約10%〜約40%、約10%〜約35%、約10%〜約30%、約10%〜約25%、約10%〜約20%、約10%〜約18%、約10%〜約16%、約10%〜約14%、約10%〜約12%、約12%〜約100%、約12%〜約95%、約12%〜約90%、約12%〜約85%、約12%〜約80%、約12%〜約75%、約12%〜約70%、約12%〜約65%、約12%〜約60%、約12%〜約55%、��12%〜約50%、約12%〜約45%、約12%〜約40%、約12%〜約35%、約12%〜約30%、約12%〜約25%、約12%〜約20%、約12%〜約18%、約12%〜約16%、約12%〜約14%、約14%〜約100%、約14%〜約95%、約14%〜約90%、約14%〜約85%、約14%〜約80%、約14%〜約75%、約14%〜約70%、約14%〜約65%、約14%〜約60%、約14%〜約55%、約14%〜約50%、約14%〜約45%、約14%〜約40%、約14%〜約35%、約14%〜約30%、約14%〜約25%、約14%〜約20%、約14%〜約18%、約14%〜約16%、約16%〜約100%、約16%〜約95%、約16%〜約90%、約16%〜約85%、約16%〜約80%、約16%〜約75%、約16%〜約70%、約16%〜約65%、約16%〜約60%、約16%〜約55%、約16%〜約50%、約16%〜約45%、約16%〜約40%、約16%〜約35%、約16%〜約30%、約16%〜約25%、約16%〜約20%、約16%〜約18%、約18%〜約100%、約18%〜約95%、約18%〜約90%、約18%〜約85%、約18%〜約80%、約18%〜約75%、約18%〜約70%、約18%〜約65%、約18%〜約60%、約18%〜約55%、約18%〜約50%、約18%〜約45%、約18%〜約40%、約18%〜約35%、約18%〜約30%、約18%〜約25%、約18%〜約20%、約20%〜約100%、約20%〜約95%、約20%〜約90%、約20%〜約85%、約20%〜約80%、約20%〜約75%、約20%〜約70%、約20%〜約65%、約20%〜約60%、約20%〜約55%、約20%〜約50%、約20%〜約45%、約20%〜約40%、約20%〜約35%、約20%〜約30%、約20%〜約25%、約25%〜約100%、約25%〜約95%、約25%〜約90%、約25%〜約85%、約25%〜約80%、約25%〜約75%、約25%〜約70%、約25%〜約65%、約25%〜約60%、約25%〜約55%、約25%〜約50%、約25%〜約45%、約25%〜約40%、約25%〜約35%、約25%〜約30%、約30%〜約100%、約30%〜約95%、約30%〜約90%、約30%〜約85%、約30%〜約80%、約30%〜約75%、約30%〜約70%、約30%〜約65%、約30%〜約60%、約30%〜約55%、約30%〜約50%、約30%〜約45%、約30%〜約40%、約30%〜約35%、約35%〜約100%、約35%〜約95%、約35%〜約90%、約35%〜約85%、約35%〜約80%、約35%〜約75%、約35%〜約70%、約35%〜約65%、約35%〜約60%、約35%〜約55%、約35%〜約50%、約35%〜約45%、約35%〜約40%、約40%〜約100%、約40%〜約95%、約40%〜約90%、約40%〜約85%、約40%〜約80%、約40%〜約75%、約40%〜約70%、約40%〜約65%、約40%〜約60%、約40%〜約55%、約40%〜約50%、約40%〜約45%、約45%〜約100%、約45%〜約95%、約45%〜約90%、約45%〜約85%、約45%〜約80%、約45%〜約75%、約45%〜約70%、約45%〜約65%、約45%〜約60%、約45%〜約55%、約45%〜約50%、約50%〜約100%、約50%〜約95%、約50%〜約90%、約50%〜約85%、約50%〜約80%、約50%〜約75%、約50%〜約70%、約50%〜約65%、約50%〜約60%、約50%〜約55%、約55%〜約100%、約55%〜約95%、約55%〜約90%、約55%〜約85%、約55%〜約80%、約55%〜約75%、約55%〜約70%、約55%〜約65%、約55%〜約60%、約60%〜約100%、約60%〜約95%、約60%〜約90%、約60%〜約85%、約60%〜約80%、約60%〜約75%、約60%〜約70%、約60%〜約65%、約65%〜約100%、約65%〜約95%、約65%〜約90%、約65%〜約85%、約65%〜約80%、約65%〜約75%、約65%〜約70%；約70%〜約100%、約70%〜約95%、約70%〜約90%、約70%〜約85%、約70%〜約80%、約70%〜約75%、約75%〜約100%、約75%〜約95%、約75%〜約90%、約75%〜約85%、約75%〜約80%、約80%〜約100%、約80%〜約95%、約80%〜約90%、約80%〜約85%、約85%〜約100%、約85%〜約95%、約85%〜約90%、約90%〜約100%、約90%〜約95%、または約95%〜約100%である。
【００４７】
コンテナ
いくつかの実施例において、コンテナの下端は、平らであるか、半球形を有するか、または円錐形を有する。
【００４８】
本明細書に説明するいずれかのポッドのいくつかの実施例において、コンテナは、約0.05 mL〜約1,000 mL、約0.05 mL〜約950 mL、約0.05 mL〜約900 mL、約0.05 mL〜約850 mL、約0.05 mL〜約800 mL、約0.05 mL〜約750 mL、約0.05 mL〜約700 mL、約0.05 mL〜約650 mL、約0.05 mL〜約600 mL、約0.05 mL〜約550 mL、約0.05 mL〜約500 mL、約0.05 mL〜約450 mL、約0.05 mL〜約400 mL、約0.05 mL〜約350 mL、約0.05 mL〜約300 mL、約0.05 mL〜約250 mL、約0.05 mL〜約200 mL、約0.05 mL〜約150 mL、約0.05 mL〜約100 mL、約0.05 mL〜約90 mL、約0.05 mL〜約80 mL、約0.05 mL〜約70 mL、約0.05 mL〜約60 mL、約0.05 mL〜約50 mL、約0.05 mL〜約45 mL、約0.05 mL〜約40 mL、約0.05 mL〜約35 mL、約0.05 mL〜約30 mL、約0.05 mL〜約25 mL、約0.05 mL〜約20 mL、約0.05 mL〜約15 mL、約0.05 mL〜約10 mL、約0.05 mL〜約8 mL、約0.05 mL〜約6 mL、約0.05 mL〜約5 mL、約0.05 mL〜約4 mL、約0.05 mL〜約3 mL、約0.05 mL〜約2 mL、約0.05 mL〜約1 mL、約0.05 mL〜約0.5 mL、約0.05 mL〜約0.1 mL、約0.1 mL〜約1,000 mL、約0.1 mL〜約950 mL、約0.1 mL〜約900 mL、約0.1 mL〜約850 mL、約0.1 mL〜約800 mL、約0.1 mL〜約750 mL、約0.1 mL〜約700 mL、約0.1 mL〜約650 mL、約0.1 mL〜約600 mL、約0.1 mL〜約550 mL、約0.1 mL〜約500 mL、約0.1 mL〜約450 mL、約0.1 mL〜約400 mL、約0.1 mL〜約350 mL、約0.1 mL〜約300 mL、約0.1 mL〜約250 mL、約0.1 mL〜約200 mL、約0.1 mL〜約150 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mL〜約300 mL、約40 mL〜約250 mL
、約40 mL〜約200 mL、約40 mL〜約150 mL、約40 mL〜約100 mL、約40 mL〜約90 mL、約40 mL〜約80 mL、約40 mL〜約70 mL、約40 mL〜約60 mL、約40 mL〜約50 mL、約40 mL〜約45 mL、約45 mL〜約1,000 mL、約45 mL〜約950 mL、約45 mL〜約900 mL、約45 mL〜約850 mL、約45 mL〜約800 mL、約45 mL〜約750 mL、約45 mL〜約700 mL、約45 mL〜約650 mL、約45 mL〜約600 mL、約45 mL〜約550 mL、約45 mL〜約500 mL、約45 mL〜約450 mL、約45 mL〜約400 mL、約45 mL〜約350 mL、約45 mL〜約300 mL、約45 mL〜約250 mL、約45 mL〜約200 mL、約45 mL〜約150 mL、約45 mL〜約100 mL、約45 mL〜約90 mL、約45 mL〜約80 mL、約45 mL〜約70 mL、約45 mL〜約60 mL、約45 mL〜約50 mL、約50 mL〜約1,000 mL、約50 mL〜約950 mL、約50 mL〜約900 mL、約50 mL〜約850 mL、約50 mL〜約800 mL、約50 mL〜約750 mL、約50 mL〜約700 mL、約50 mL〜約650 mL、約50 mL〜約600 mL、約50 mL〜約550 mL、約50 mL〜約500 mL、約50 mL〜約450 mL、約50 mL〜約400 mL、約50 mL〜約350 mL、約50 mL〜約300 mL、約50 mL〜約250 mL、約50 mL〜約200 mL、約50 mL〜約150 mL、約50 mL〜約100 mL、約50 mL〜約90 mL、約50 mL〜約80 mL、約50 mL〜約70 mL、約50 mL〜約60 mL、約60 mL〜約1,000 mL、約60 mL〜約950 mL、約60 mL〜約900 mL、約60 mL〜約850 mL、約60 mL〜約800 mL、約60 mL〜約750 mL、約60 mL〜約700 mL、約60 mL〜約650 mL、約60 mL〜約600 mL、約60 mL〜約550 mL、約60 mL〜約500 mL、約60 mL〜約450 mL、約60 mL〜約400 mL、約60 mL〜約350 mL、約60 mL〜約300 mL、約60 mL〜約250 mL、約60 mL〜約200 mL、約60 mL〜約150 mL、約60 mL〜約100 mL、約60 mL〜約90 mL、約60 mL〜約80 mL、約60 mL〜約70 mL、約70 mL〜約1,000 mL、約70 mL〜約950 mL、約70 mL〜約900 mL、約70 mL〜約850 mL、約70 mL〜約800 mL、約70 mL〜約750 mL、約70 mL〜約700 mL、約70 mL〜約650 mL、約70 mL〜約600 mL、約70 mL〜約550 mL、約70 mL〜約500 mL、約70 mL〜約450 mL、約70 mL〜約400 mL、約70 mL〜約350 mL、約70 mL〜約300 mL、約70 mL〜約250 mL、約70 mL〜約200 mL、約70 mL〜約150 mL、約70 mL〜約100 mL、約70 mL〜約90 mL、約70 mL〜約80 mL、約80 mL〜約1,000 mL、約80 mL〜約950 mL、約80 mL〜約900 mL、約80 mL〜約850 mL、約80 mL〜約800 mL、約80 mL〜約750 mL、約80 mL〜約700 mL、約80 mL〜約650 mL、約80 mL〜約600 mL、約80 mL〜約550 mL、約80 mL〜約500 mL、約80 mL〜約450 mL、約80 mL〜約400 mL、約80 mL〜約350 mL、約80 mL〜約300 mL、約80 mL〜約250 mL、約80 mL〜約200 mL、約80 mL〜約150 mL、約80 mL〜約100 mL、約80 mL〜約90 mL、約90 mL〜約1,000 mL、約90 mL〜約950 mL、約90 mL〜約900 mL、約90 mL〜約850 mL、約90 mL〜約800 mL、約90 mL〜約750 mL、約90 mL〜約700 mL、約90 mL〜約650 mL、約90 mL〜約600 mL、約90 mL〜約550 mL、約90 mL〜約500 mL、約90 mL〜約450 mL、約90 mL〜約400 mL、約90 mL〜約350 mL、約90 mL〜約300 mL、約90 mL〜約250 mL、約90 mL〜約200 mL、約90 mL〜約150 mL、約90 mL〜約100 mL、約100 mL〜約1,000 mL、約100 mL〜約950 mL、約100 mL〜約900 mL、約100 mL〜約850 mL、約100 mL〜約800 mL、約100 mL〜約750 mL、約100 mL〜約700 mL、約100 mL〜約650 mL、約100 mL〜約600 mL、約100 mL〜約550 mL、約100 mL〜約500 mL、約100 mL〜約450 mL、約100 mL〜約400 mL、約100 mL〜約350 mL、約100 mL〜約300 mL、約100 mL〜約250 mL、約100 mL〜約200 mL、約100 mL〜約150 mL、約150 mL〜約1,000 mL、約150 mL〜約950 mL、約150 mL〜約900 mL、約150 mL〜約850 mL、約150 mL〜約800 mL、約150 mL〜約750 mL、約150 mL〜約700 mL、約150 mL〜約650 mL、約150 mL〜約600 mL、約150 mL〜約550 mL、約150 mL〜約500 mL、約150 mL〜約450 mL、約150 mL〜約400 mL、約150 mL〜約350 mL、約150 mL〜約300 mL、約150 mL〜約250 mL、約150 mL〜約200 mL、約200 mL〜約1,000 mL、約200 mL〜約950 mL、約200 mL〜約900 mL、約200 mL〜約850 mL、約200 mL〜約800 mL、約200 mL〜約750 mL、約200 mL〜約700 mL、約200 mL〜約650 mL、約200 mL〜約600 mL、約200 mL〜約550 mL、約200 mL〜約500 mL、約200 mL〜約450 mL、約200 mL〜約400 mL、約200 mL〜約350 mL、約200 mL〜約300 mL、約200 mL〜約250 mL、約250 mL〜約1,000 mL、約250 mL〜約950 mL、約250 mL〜約900 mL、約250 mL〜約850 mL、約250 mL〜約800 mL、約250 mL〜約750 mL、約250 mL〜約700 mL、約250 mL〜約650 mL、約250 mL〜約600 mL、約250 mL〜約550 mL、約250 mL〜約500 mL、約250 mL〜約450 mL、約250 mL〜約400 mL、約250 mL〜約350 mL、約250 mL〜約300 mL、約300 mL〜約1,000 mL、約300 mL〜約950 mL、約300 mL〜約900 mL、約300 mL〜約850 mL、約300 mL〜約800 mL、約300 mL〜約750 mL、約300 mL〜約700 mL、約300 mL〜約650 mL、約300 mL〜約600 mL、約300 mL〜約550 mL、約300 mL〜約500 mL、約300 mL〜約450 mL、約300 mL〜約400 mL、約300 mL〜約350 mL、約350 mL〜約1,000 mL、約350 mL〜約950 mL、約350 mL〜約900 mL、約350 mL〜約850 mL、約350 mL〜約800 mL、約350 mL〜約750 mL、約350 mL〜約700 mL、約350 mL〜約650 mL、約350 mL〜約600 mL、約350 mL〜約550 mL、約350 mL〜約500 mL、約350 mL〜約450 mL、約350 mL〜約400 mL、約400 mL〜約1,000 mL、約400 mL〜約950 mL、約400 mL〜約900 mL、約400 mL〜約850 mL、約400 mL〜約800 mL、約400 mL〜約750 mL、約400 mL〜約700 mL、約400 mL〜約650 mL、約400 mL〜約600 mL、約400 mL〜約550 mL、約400 mL〜約500 mL、約400 mL〜約450 mL、約450 mL〜約1,000 mL、約450 mL〜約950 mL、約450 mL〜約900 mL、約450 mL〜約850 mL、約450 mL〜約800 mL、約450 mL〜約750 mL、約450 mL〜約700 mL、約450 mL〜約650 mL、約450 mL〜約600 mL、約450 mL〜約550 mL、約450 mL〜約500 mL、約500 mL〜約1,000 mL、約500 mL〜約950 mL、約500 mL〜約900 mL、約500 mL〜約850 mL、約500 mL〜約800 mL、約500 mL〜約750 mL、約500 mL〜約700 mL、約500 mL〜約650 mL、約500 mL〜約600 mL、約500 mL〜約550 mL、約550 mL〜約1,000 mL、約550 mL〜約950 mL、約550 mL〜約900 mL、約550 mL〜約850 mL、約550 mL〜約800 mL、約550 mL〜約750 mL、約550 mL〜約700 mL、約550 mL〜約650 mL、約550 mL〜約600 mL、約600 mL〜約1,000 mL、約600 mL〜約950 mL、約600 mL〜約900 mL、約600 mL〜約850 mL、約600 mL〜約800 mL、約600 mL〜約750 mL、約600 mL〜約700 mL、約600 mL〜約650 mL、約650 mL〜約1,000 mL、約650 mL〜約950 mL、約650 mL〜約900 mL、約650 mL〜約850 mL、約650 mL〜約800 mL、約650 mL〜約750 mL、約650 mL〜約700 mL、約700 mL〜約1,000 mL、約700 mL〜約950 mL、約700 mL〜約900 mL、約700 mL〜約850 mL、約700 mL〜約800 mL、約700 mL〜約750 mL、約750 mL〜約1,000 mL、約750 mL〜約950 mL、約750 mL〜約900 mL、約750 mL〜約850 mL、約750 mL〜約800 mL、約800 mL〜約1,000 mL、約800 mL〜約950 mL、約800 mL〜約900 mL、約800 mL〜約850 mL、約850 mL〜約1,000 mL、約850 mL〜約950 mL、約850 mL〜約900 mL、約900 mL〜約1,000 mL、約900 mL〜約950 mL、または約950 mL〜約1,000 mLの内部体積を有する。
【００４９】
壁
壁は、ポリエチレン（PE）、ポリプロピレン（PP）、ポリスチレン（PS）、ポリ塩化ビニル（PVC）、アクリルポリマー、ポリエステル、シリコーンゴム、ケイ素、ポリウレタン、ハロゲン化プラスチック（例えば塩素化ポリエチレン、塩素化ポリ塩化ビニル、クロロスルホン化ポリエチレン、ポリクロロプレン、フッ化エチレンプロピレン）、二軸延伸ポリプロピレン（BOPP）、バイオプラスチック、セロハン、エタン由来プラスチック、ナイロン、ポリ乳酸（PLA）、ポリエチレンテレフタレート（PEまたはPETEプラスチックコード1）、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリユロテン（polyeurothene）、またはポリ(メチルメタクリレート)で構築されるかまたは部分的に構築されてもよい。壁を構築してもよい、さらなる例示的な組成物として、Bakelite（フェノールホルムアルデヒド樹脂）、KevlarもしくはTwaron（パラアラミド）、Kynar（ポリフッ化ビニリデン）、Mylar（ポリエチレンテレフタレートフィルム）、Neoprene（ポリクロロプレン）、ナイロン（ポリアミド6,6）、Orlon（ポリアクリロニトリル）、Rilsan（ポリアミド11および12）、Technora（コポリアミド）、Teflon（ポリテトラフルオロエチレン）、Ultem（ポリイミド）、Vectran（芳香族ポリアミド）、Viton（ポリテトラフルオロエチレン）、またはZylon（ポリ-p-フェニレン-2,6-ベンゾビスオキサゾール（PBO）が含まれる。ポッドのいくつかの態様において、壁は、ナイロン、ポリプロピレン、またはポリビニルアルコール（PVA）で構築されるかまたは部分的に構築されてもよい。
【００５０】
ポッドのいくつかの態様において、壁は、円柱形、円錐形、長方形、正方形、球形、半球形、砂時計形、または楕円形を有する。
【００５１】
クロマトグラフィ樹脂
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、ポッドは、コンテナ内部に配されたクロマトグラフィ樹脂をさらに含む。いくつかの実施例において、クロマトグラフィ樹脂は市販のクロマトグラフィ樹脂である。他の実施例において、クロマトグラフィ樹脂は市販のクロマトグラフィ樹脂でない。
【００５２】
クロマトグラフィ樹脂は、当技術分野において公知である任意のクロマトグラフィ樹脂であってもよい。例えば、クロマトグラフィ樹脂は、アフィニティクロマトグラフィ樹脂 （例えばプロテインA樹脂、プロテインG樹脂、プロテインL樹脂、ニッケル樹脂、もしくは磁性ビーズ樹脂）、疎水性相互作用クロマトグラフィ樹脂、混合モードクロマトグラフィ樹脂、分子ふるいクロマトグラフィ樹脂であってもよい。いくつかの態様において、樹脂は、関心対象の組換えタンパク質に特異的である、例えば作用物質（例えば抗体、抗体断片、ペプチド、および核酸など）に接合された樹脂などの、特異的アフィニティ樹脂である。いくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂は耐アルカリ樹脂である。いくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂は、滅菌されたクロマトグラフィ樹脂である。
【００５３】
コンテナ内部に配されたクロマトグラフィ樹脂は、約0.1 mL〜約500 mL、約0.1 mL〜約490 mL、約0.1 mL〜約480 mL、約0.1 mL〜約460 mL、約0.1 mL〜約440 mL、約0.1 mL〜約420 mL、約0.1 mL〜約400 mL、約0.1 mL〜約380 mL、約0.1 mL〜約360 mL、約0.1 mL〜約340 mL、約0.1 mL〜約320 mL、約0.1 mL〜約300 mL、約0.1 mL〜約280 mL、約0.1 mL〜約260 mL、約0.1 mL〜約250 mL、約0.1 mL〜約240 mL、約0.1 mL〜約220 mL、約0.1 mL〜約210 mL、約0.1 mL〜約200 mL、約0.1 mL〜約190 mL、約0.1 mL〜約180 mL、約0.1 mL〜約170 mL、約0.1 mL〜約160 mL、約0.1 mL〜約150 mL、約0.1 mL〜約140 mL、約0.1 mL〜約130 mL、約0.1 mL〜約120 mL、約0.1 mL〜約110 mL、約0.1 mL〜約100 mL、約0.1 mL〜約90 mL、約0.1 mL〜約80 mL、約0.1 mL〜約70 mL、約0.1 mL〜約60 mL、約0.1 mL〜約50 mL、約0.1 mL〜約40 mL、約0.1 mL〜約30 mL、約0.1 mL〜約25 mL、約0.1 mL〜約20 mL、約0.1 mL〜約15 mL、約0.1 mL〜約10 mL、約0.1 mL〜約5 mL、約0.1 mL〜約2 mL、約0.1 mL〜約1 mL、約0.2 mL〜約500 mL、約0.2 mL〜約490 mL、約0.2 mL〜約480 mL、約0.2 mL〜約460 mL、約0.2 mL〜約440 mL、約0.2 mL〜約420 mL、約0.2 mL〜約400 mL、約0.2 mL〜約380 mL、約0.2 mL〜約360 mL、約0.2 mL〜約340 mL、約0.2 mL〜約320 mL、約0.2 mL〜約300 mL、約0.2 mL〜約280 mL、約0.2 mL〜約260 mL、約0.2 mL〜約250 mL、約0.2 mL〜約240 mL、約0.2 mL〜約220 mL、約0.2 mL〜約210 mL、約0.2 mL〜約200 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mL〜約500 mL、約200 mL〜約490 mL、約200 mL〜約480 mL、約200 mL〜約460 mL、約200 mL〜約440 mL、約200 mL〜約420 mL、約200 mL〜約400 mL、約200 mL〜約380 mL、約200 mL〜約360 mL、約200 mL〜約340 mL、約200 mL〜約320 mL、約200 mL〜約300 mL、約200 mL〜約280 mL、約200 mL〜約260 mL、約200 mL〜約250 mL、約200 mL〜約240 mL、約200 mL〜約220 mL、約200 mL〜約210 mL、約210 mL〜約500 mL、約210 mL〜約490 mL、約210 mL〜約480 mL、約210 mL〜約460 mL、約210 mL〜約440 mL、約210 mL〜約420 mL、約210 mL〜約400 mL、約210 mL〜約380 mL、約210 mL〜約360 mL、約210 mL〜約340 mL、約210 mL〜約320 mL、約210 mL〜約300 mL、約210 mL〜約280 mL、約210 mL〜約260 mL、約210 mL〜約250 mL、約210 mL〜約240 mL、約210 mL〜約220 mL、約220 mL〜約500 mL、約220 mL〜約490 mL、約220 mL〜約480 mL、約220 mL〜約460 mL、約220 mL〜約440 mL、約220 mL〜約420 mL、約220 mL〜約400 mL、約220 mL〜約380 mL、約220 mL〜約360 mL、約220 mL〜約340 mL、約220 mL〜約320 mL、約220 mL〜約300 mL、約220 mL〜約280 mL、約220 mL〜約260 mL、約220 mL〜約250 mL、約220 mL〜約240 mL、約240 mL〜約500 mL、約240 mL〜約490 mL、約240 mL〜約480 mL、約240 mL〜約460 mL、約240 mL〜約440 mL、約240 mL〜約420 mL、約240 mL〜約400 mL、約240 mL〜約380 mL、約240 mL〜約360 mL、約240 mL〜約340 mL、約240 mL〜約320 mL、約240 mL〜約300 mL、約240 mL〜約280 mL、約240 mL〜約260 mL、約240 mL〜約250 mL、約250 mL〜約500 mL、約250 mL〜約490 mL、約250 mL〜約480 mL、約250 mL〜約460 mL、約250 mL〜約440 mL、約250 mL〜約420 mL、約250 mL〜
約400 mL、約250 mL〜約380 mL、約250 mL〜約360 mL、約250 mL〜約340 mL、約250 mL〜約320 mL、約250 mL〜約300 mL、約250 mL〜約280 mL、約250 mL〜約260 mL、約260 mL〜約500 mL、約260 mL〜約490 mL、約260 mL〜約480 mL、約260 mL〜約460 mL、約260 mL〜約440 mL、約260 mL〜約420 mL、約260 mL〜約400 mL、約260 mL〜約380 mL、約260 mL〜約360 mL、約260 mL〜約340 mL、約260 mL〜約320 mL、約260 mL〜約300 mL、約260 mL〜約280 mL、約280 mL〜約500 mL、約280 mL〜約490 mL、約280 mL〜約480 mL、約280 mL〜約460 mL、約280 mL〜約440 mL、約280 mL〜約420 mL、約280 mL〜約400 mL、約280 mL〜約380 mL、約280 mL〜約360 mL、約280 mL〜約340 mL、約280 mL〜約320 mL、約280 mL〜約300 mL、約300 mL〜約500 mL、約300 mL〜約490 mL、約300 mL〜約480 mL、約300 mL〜約460 mL、約300 mL〜約440 mL、約300 mL〜約420 mL、約300 mL〜約400 mL、約300 mL〜約380 mL、約300 mL〜約360 mL、約300 mL〜約340 mL、約300 mL〜約320 mL、約320 mL〜約500 mL、約320 mL〜約490 mL、約320 mL〜約480 mL、約320 mL〜約460 mL、約320 mL〜約440 mL、約320 mL〜約420 mL、約320 mL〜約400 mL、約320 mL〜約380 mL、約320 mL〜約360 mL、約320 mL〜約340 mL、約340 mL〜約500 mL、約340 mL〜約490 mL、約340 mL〜約480 mL、約340 mL〜約460 mL、約340 mL〜約440 mL、約340 mL〜約420 mL、約340 mL〜約400 mL、約340 mL〜約380 mL、約340 mL〜約360 mL、約360 mL〜約500 mL、約360 mL〜約490 mL、約360 mL〜約480 mL、約360 mL〜約460 mL、約360 mL〜約440 mL、約360 mL〜約420 mL、約360 mL〜約400 mL、約360 mL〜約380 mL、約380 mL〜約500 mL、約380 mL〜約490 mL、約380 mL〜約480 mL、約380 mL〜約460 mL、約380 mL〜約440 mL、約380 mL〜約420 mL、約380 mL〜約400 mL、約400 mL〜約500 mL、約400 mL〜約490 mL、約400 mL〜約480 mL、約400 mL〜約460 mL、約400 mL〜約440 mL、約400 mL〜約420 mL、約420 mL〜約500 mL、約420 mL〜約490 mL、約420 mL〜約480 mL、約420 mL〜約460 mL、約420 mL〜約440 mL、約440 mL〜約500 mL、約440 mL〜約490 mL、約440 mL〜約480 mL、約440 mL〜約460 mL、約460 mL〜約500 mL、約460 mL〜約490 mL、約460 mL〜約480 mL、約480 mL〜約500 mL、約480 mL〜約490 mL、または約490 mL〜約500 mLの体積を有してもよい。
【００５４】
いくつかの態様において、ポッド内に配されたクロマトグラフィ樹脂は、約1 x 10-6〜約1 x 10-10、約1 x 10-6〜約0.5 x 10-10、約1 x 10-6〜約1 x 10-9、約1 x 10-6〜約0.5 x 10-9、約1 x 10-6〜約1 x 10-8、約1 x 10-6〜約0.5 x 10-8、約1 x 10-6〜約1 x 10-7、約1 x 10-6〜約0.5 x 10-7、約0.5 x 10-7〜約1 x 10-10、約0.5 x 10-7〜約0.5 x 10-10、約0.5 x 10-7〜約1 x 10-9、約0.5 x 10-7〜約0.5 x 10-9、約0.5 x 10-7〜約1 x 10-8、約0.5 x 10-7〜約0.5 x 10-8、約0.5 x 10-7〜約1 x 10-7、約1 x 10-7〜約1 x 10-10、約1 x 10-7〜約0.5 x 10-10、約0.5 x 10-7〜約1 x 10-9、約1 x 10-7〜約0.5 x 10-9、約1 x 10-7〜約1 x 10-8、約1 x 10-7〜約0.5 x 10-8、約0.5 x 10-8〜約1 x 10-10、約0.5 x 10-8〜約0.5 x 10-10、約0.5 x 10-8〜約1 x 10-9、約0.5 x 10-8〜約0.5 x 10-9、約0.5 x 10-8〜約1 x 10-8、約1 x 10-8〜約1 x 10-10、約1 x 10-8〜約0.5 x 10-10、約1 x 10-8〜約1 x 10-9、約1 x 10-8〜約0.5 x 10-9、約0.5 x 10-9〜約1 x 10-10、約0.5 x 10-9〜約0.5 x 10-10、約0.5 x 10-9〜約1 x 10-9、約1 x 10-9〜約1 x 10-10、約1 x 10-9〜約0.5 x 10-10、または約0.5 x 10-10〜約1 x 10-10の無菌性保証水準を有する。
【００５５】
キット
本明細書に説明するいずれかのポッドを含むキットもまた、本明細書に提供する。（a）本明細書に説明するいずれかのポッド（液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを可能にする半多孔質または多孔質材料によって覆われた1つまたは複数のエリアを、コンテナの壁において含むポッド）と；（b）流体が壁を通ってポッド内部からポッド外部に漏れることが防止されるよう、壁における前記1つまたは複数のエリアの各々の上に確実固定できる、1つまたは複数のパネルと、を含むキットもまた、本明細書に提供する。（a）本明細書に説明するいずれかのポッド（液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを可能にする半多孔質または多孔質材料によって覆われた1つまたは複数のエリアを、コンテナの壁において含むポッド）と；（b）流体が壁における前記少なくとも1つのエリアを通ってポッド内部からポッド外部に漏れることが防止されるよう、壁における前記1つまたは複数のエリアを覆うためポッド上に確実固定できる、外側スリーブと、を含むキットもまた、本明細書に提供する。
【００５６】
（a）本明細書に説明するいずれかのポッドのポッドと；（b）下端上に安定的に固定できる溶離アウトレット、および上端上に安定的に固定できる緩衝剤リザーバのうち、1つまたは両方と、を含むキットもまた、本明細書に提供する。（a）本明細書に説明するいずれかのポッド（液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを可能にする半多孔質または多孔質材料によって覆われた1つまたは複数のエリアを、コンテナの壁において含むポッド）と；（b）流体が壁における前記少なくとも1つのエリアを通ってポッド内部からポッド外部に漏れることが防止されるよう、可動式スリーブが回転すると壁における前記1つまたは複数のエリアが覆われうるように壁に接続された、可動式外側スリーブと、を含むキットもまた、本明細書に提供する。（a）本明細書に説明するいずれかのポッドと；（b）ポッドの長軸を培養容器内部における水平位置に安定的に位置決めするための手段と、を含むキットもまた、本明細書に提供する。
【００５７】
本明細書に説明するいずれのキットも、ポッドを培養容器内部に安定的に位置決めするための手段を含んでもよい。ポッドを培養容器（例えば本明細書に説明するいずれかの培養容器）内部に安定的に位置決めするための例示的な手段は、ブラケットと；ブレースと；培養容器における開口部上にフィットし、かつ（ポッドを培養容器内に落とすことなく）ポッドを培養容器に挿入することを可能にするアダプターと、を含んでもよい。いくつかの態様において、ポッドを培養容器（例えば本明細書に説明するいずれかの培養容器）内部に安定的に位置決めするための手段は、可撓性であり、そして、ポッドが培養容器内に落ちることなく液体培養の動きとともに動くことを可能にする。いくつかの態様において、ポッドを培養容器（例えば本明細書に説明するいずれかの培養容器）内部に安定的に位置決めするための手段は、剛性であり、そして、ポッドが培養容器内に落ちることなく液体培養の動きに耐えることを可能にする。ポッドを培養容器（例えば本明細書に説明するいずれかの培養容器）内部に安定的に位置決めするための手段の、非限定的な例を、図10〜19、36、および37に示す。
【００５８】
いくつかの態様において、ポッドは、ポッドを培養容器内部にテープ留めすることによって安定的に固定される。いくつかの態様において、ポッドは、ポッドを培養容器内部にスナップ留めすることによって安定的に固定される。
【００５９】
いくつかの態様において、キットは、例えば自動化された高スループットの精製アプローチをさらに容易にするなどのため、複数のポッドを編集してプレートアレイにすることを可能にするためのアダプターマニホールドを含む。
【００６０】
培養容器の非限定的な例には、マルチウェルプレート（例えば6ウェルプレート、12ウェルプレート、18ウェルプレート、24ウェルプレート、48ウェルプレート、96ウェルプレート、もしくは384ウェルプレート）、振盪フラスコ（例えばErlenmeyerフラスコもしくはT-フラスコ）、振盪チューブ（例えばEppendorfチューブ）、ウェイブバッグ（wave bag）、バイオリアクター（例えばベンチトップバイオリアクター、パーフュージョンバイオリアクター、フェッドバッチバイオリアクター）、回転チューブバイオリアクターが含まれる。バイオリアクターのさらなる例は当技術分野において公知である。
【００６１】
本明細書に説明するいずれかのキットのいくつかの態様は、流体が壁を通ってポッド内部からポッド外部に漏れることが防止されるよう、壁における前記1つまたは複数の（例えば1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10個の）エリアの各々の上に確実固定できる、1つまたは複数の（例えば1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10個の）パネルをさらに含んでもよい。前記1つまたは複数のパネルは、壁を作るために使われてもよい、本明細書に説明するいずれかの例示的材料のうち、1つまたは複数で作られてもよい。前記1つまたは複数のパネルは、本明細書に説明するいずれかのエリアを覆うように設計される。前記1つまたは複数のパネルは、本明細書に説明する、壁における前記1つまたは複数のエリアを覆うため、壁内にクリック留め、スナップ留め、またはねじ留めされるよう設計されてもよい。
【００６２】
本明細書に説明するキットのいくつかの態様は、流体が壁における前記少なくとも1つのエリアを通ってポッド内部からポッド外部に漏れることが防止されるよう、壁における前記少なくとも1つのエリアを覆うためポッド上に確実固定できる外側スリーブを、さらに含んでもよい。当技術分野において認識されうるように、スリーブは、壁における前記少なくとも1つのエリアを覆うためコンテナ上にスライドさせることができるよう、少なくとも部分的に可撓性ゴムまたはケイ素で構築されてもよい。いくつかの態様において、スリーブは、コンテナ上にフィットする空のクロマトグラフィカラムであってもよい。
【００６３】
本明細書に説明するキットのいくつかの態様は、流体が壁における前記少なくとも1つのエリアを通ってポッド内部からポッド外部に漏れることが防止されるよう、可動式外側スリーブが回転すると壁における前記少なくとも1つのエリアが覆われうるように壁に接続された、可動式外側スリーブを、さらに含んでもよい。いくつかの態様において、壁における前記少なくとも1つのエリアを覆うために必要な可動式外側スリーブの回転は、時計回りである。いくつかの態様において、壁における前記少なくとも1つのエリアを覆うために必要な可動式外側スリーブの回転は、反時計回りである。代替的態様において、流体が壁における前記少なくとも1つのエリアを通ってポッド内部からポッド外部に漏れることが防止されるよう、可動式外側スリーブが上または下にスライドすると壁における前記少なくとも1つのエリアが覆われうるように、可動式外側スリーブが壁に接続される。
【００６４】
キットのいくつかの態様は、下端上に安定的に固定できる溶離アウトレットをさらに含む。溶離アウトレットは、漏斗であってもよく、またはポートを有する平らな表面であってもよい。いくつかの態様において、溶離アウトレットは、コンテナ内部から出る流体のフローを制御するための手段を含んでもよい。コンテナ内部から出る流体のフローを制御するための手段の、非限定的な例には、ねじ弁または活栓が含まれる。コンテナ内部から出る流体のフローを制御するためのさらなる例示的手段は当技術分野において公知である。他の実施例において、溶離アウトレットは、コンテナ内部から出る流体のフローを制御するための手段を含まない。溶離アウトレットは、コンテナの下端上にスナップ留め、クリック留め、またはねじ留めできるよう設計されてもよい。本明細書に提供するいずれかのキットのいくつかの態様において、緩衝剤リザーバは、（例えばポッドまたは緩衝剤リザーバに固定された）1つまたは複数の（例えば2つまたは3つの）Oリングを用いてポッドにシールされてもよい。
【００６５】
本明細書に説明するいずれかのキットのいくつかの態様は、上端上に安定的に固定できる緩衝剤リザーバをさらに含む。緩衝剤リザーバは、コンテナの上端上にスナップ留め、クリック留め、またはねじ留めされてもよい。緩衝剤リザーバは、コンテナに流入されてもよいある体積の流体をホールドできるよう、任意の形状を有してよい。例えば、緩衝剤リザーバは、円柱形、長方形、半球形、球形、または楕円形であってもよい。いくつかの態様において、緩衝剤リザーバは、緩衝剤リザーバからコンテナ内部に入る流体のフローを制御するための手段を含んでもよい。緩衝剤リザーバから出てコンテナに入る流体のフローを制御するための手段の、非限定的な例には、ねじ弁または活栓が含まれる。緩衝剤リザーバから出てコンテナに入る流体のフローを制御するためのさらなる例示的手段は当技術分野において公知である。他の実施例において、緩衝剤リザーバは、緩衝剤リザーバから出てコンテナ内部に入る流体のフローを制御するための手段を含まない。緩衝剤リザーバは、0.1 mL〜約500 mL、約0.1 mL〜約450 mL、約0.1 mL〜約400 mL、約0.1 mL〜約350 mL、約0.1 mL〜約300 mL、約0.1 mL〜約250 mL、約0.1 mL〜約200 mL、約0.1 mL〜約150 mL、約0.1 mL〜約100 mL、約0.1 mL〜約80 mL、約0.1 mL〜約60 mL、約0.1 mL〜約50 mL、約0.1 mL〜約40 mL、約0.1 mL〜約30 mL、約0.1 mL〜約20 mL、約0.1 mL〜約10 mL、約0.1 mL〜約5 mL、約0.1 mL〜約2 mL、約0.1 mL〜約1 mL、約0.2 mL〜約500 mL、約0.2 mL〜約450 mL、約0.2 mL〜約400 mL、約0.2 mL〜約350 mL、約0.2 mL〜約300 mL、約0.2 mL〜約250 mL、約0.2 mL〜約200 mL、約0.2 mL〜約150 mL、約0.2 mL〜約100 mL、約0.2 mL〜約80 mL、約0.2 mL〜約60 mL、約0.2 mL〜約50 mL、約0.2 mL〜約40 mL、約0.2 mL〜約30 mL、約0.2 mL〜約20 mL、約0.2 mL〜約10 mL、約0.2 mL〜約5 mL、約0.2 mL〜約2 mL、約0.2 mL〜約1 mL、0.5 mL〜約500 mL、約0.5 mL〜約450 mL、約0.5 mL〜約400 mL、約0.5 mL〜約350 mL、約0.5 mL〜約300 mL、約0.5 mL〜約250 mL、約0.5 mL〜約200 mL、約0.5 mL〜約150 mL、約0.5 mL〜約100 mL、約0.5 mL〜約80 mL、約0.5 mL〜約60 mL、約0.5 mL〜約50 mL、約0.5 mL〜約40 mL、約0.5 mL〜約30 mL、約0.5 mL〜約20 mL、約0.5 mL〜約10 mL、約0.5 mL〜約5 mL、約0.5 mL〜約2 mL、約2 mL〜約500 mL、約2 mL〜約450 mL、約2 mL〜約400 mL、約2 mL〜約350 mL、約2 mL〜約300 mL、約2 mL〜約250 mL、約2 mL〜約200 mL、約2 mL〜約150 mL、約2 mL〜約100 mL、約2 mL〜約80 mL、約2 mL〜約60 mL、約2 mL〜約50 mL、約2 mL〜約40 mL、約2 mL〜約30 mL、約2 mL〜約20 mL、約2 mL〜約10 mL、約2 mL〜約5 mL、約5 mL〜約500 mL、約5 mL〜約450 mL、約5 mL〜約400 mL、約5 mL〜約350 mL、約5 mL〜約300 mL、約5 mL〜約250 mL、約5 mL〜約200 mL、約5 mL〜約150 mL、約5 mL〜約100 mL、約5 mL〜約80 mL、約5 mL〜約60 mL、約5 mL〜約50 mL、約5 mL〜約40 mL、約5 mL〜約30 mL、約5 mL〜約20 mL、約5 mL〜約10 mL、約10 mL〜約500 mL、約10 mL〜約450 mL、約10 mL〜約400 mL、約10 mL〜約350 mL、約10 mL〜約300 mL、約10 mL〜約250 mL、約10 mL〜約200 mL、約10 mL〜約150 mL、約10 mL〜約100 mL、約10 mL〜約80 mL、約10 mL〜約60 mL、約10 mL〜約50 mL、約10 mL〜約40 mL、約10 mL〜約30 mL、約10 mL〜約20 mL、約20 mL〜約500 mL、約20 mL〜約450 mL、約20 mL〜約400 mL、約20 mL〜約350 mL、約20 mL〜約300 mL、約20 mL〜約250 mL、約20 mL〜約200 mL、約20 mL〜約150 mL、約20 mL〜約100 mL、約20 mL〜約80 mL、約20 mL〜約60 mL、約20 mL〜約50 mL、約20 mL〜約40 mL、約20 mL〜約30 mL、約30 mL〜約500 mL、約30 mL〜約450 mL、約30 mL〜約400 mL、約30 mL〜約350 mL、約30 mL〜約300 mL、約30 mL〜約250 mL、約30 mL〜約200 mL、約30 mL〜約150 mL、約30 mL〜約100 mL、約30 mL〜約80 mL、約30 mL〜約60 mL、約30 mL〜約50 mL、約30 mL〜約40 mL、約50 mL〜約500 mL、約50 mL〜約450 mL、約50 mL〜約400 mL、約50 mL〜約350 mL、約50 mL〜約300 mL、約50 mL〜約250 mL、約50 mL〜約200 mL、約50 mL〜約150 mL、約50 mL〜約100 mL、約50 mL〜約80 mL、または約50 mL〜約60 mLの体積の流体をホールドするよう設計されてもよい。
【００６６】
（a）本明細書に説明するいずれかのポッド（例えば、本明細書に説明するいずれかの特性または局面を任意の組み合わせで有するポッド）と；（b）上端と、流体コンジットを具備する細長の円柱形ボディと、下端とを有するインレットシステムであって、インレットシステムの上端が流体インレットを具備し、かつポッドの上端に安定的に取り付けられるよう構成され；そしてポッドに安定的に接続された時に、流体インレットおよび流体コンジットを通りそしてインレットシステムの下端から出てポッド内に入る流体のフローを可能にし；かつ、インレットシステムの細長の円柱形ボディが、ポッドの壁の内側にフィットするよう構成された、インレットシステムと；（c）流体アウトレットを具備するアウトレットシステムであって、ポッドの下端に安定的に取り付けられるよう構成され、そしてポッドの下端に安定的に接続された時に、流体アウトレットを通ってポッドから出る流体のフローを可能にする、アウトレットシステムと、を含むキットもまた、本明細書に提供する。これらキットのいくつかの態様において、インレットシステムの上端とポッドの上端は、ポッドの上端をインレットシステムの上端に安定的に取り付けることを可能にするねじ切りを含む。これらキットのいくつかの態様において、インレットシステムとポッドとが安定的に取り付けられた時に、インレットシステムの上端とポッドの上端は、シール（例えば流体タイトなシール）を形成する。これらキットのいくつかの態様において、インレットシステムの上端におけるねじ切り、またはポッドの上端におけるねじ切りは、Oリングを含む。インレットシステムの上端とポッドの上端との間に安定的な接続を提供するための他の手段は当技術分野において公知である。これらキットのいくつかの態様において、ポッドはクロマトグラフィ樹脂を含有し；かつ、インレットシステムおよびポッドは、インレットシステムとポッドとが安定的に取り付けられた時に、インレットシステムの下端がクロマトグラフィ樹脂に近接するように構成される。これらキットのいくつかの態様において、ポッドの内面とインレットシステムの下端は、ポッドとインレットシステムの下端との安定的な取り付けを可能にするよう構成される。これらキットのいくつかの態様において、インレットシステムとポッドとが安定的に取り付けられた時に、ポッドの内面とインレットシステムの下端は、シール（例えば流体タイトなシール）を形成する。これらキットのいくつかの態様において、ポッドの内面とインレットシステムの下端は、ポッドとインレットシステムの下端との安定的な取り付けを可能にするねじ切りを含む。これらキットのいくつかの態様において、ポッドの内面におけるねじ切り、またはインレットシステムの下端におけるねじ切りは、Oリングを含む。ポッドの内面とインレットシステムの下端との間に安定的な接続を提供するための他の手段は当技術分野において公知である。これらキットのいくつかの態様において、アウトレットシステムとポッドの下端は、アウトレットシステムをポッドの下端に安定的に取り付けることを可能にするねじ切りを含む。これらキットのいくつかの態様において、アウトレットシステムにおけるねじ切り、または���ッドの下端におけるねじ切りは、Oリングを含む。これらキットのいくつかの態様において、流体インレットはチュービング（例えばクロマトグラフィシステムに接続されたチュービング）への取り付けが可能である。これらキットのいくつかの態様において、流体アウトレットはチュービング（例えばクロマトグラフィシステムに接続されたチュービング）への取り付けが可能である。これらキットのいくつかの態様は、（d）ポッドの長軸を培養容器内部における水平位置に安定的に位置決めするための手段をさらに含む。これらキットのいくつかの態様は、（d）ポッドの長軸を培養容器内部における垂直位置に安定的に位置決めするための手段をさらに含む。これらキットのいくつかの態様において、インレットシステムの細長の円柱形ボディは、約0.1 cm〜約50 cm、約0.1 cm〜約45 cm、約0.1 cm〜約40 cm、約0.1 cm〜約35 cm、約0.1 cm〜約30 cm、約0.1 cm〜約25 cm、約0.1 cm〜約20 cm、約0.1 cm〜約18 cm、約0.1 cm〜約16 cm、約0.1 cm〜約14 cm、約0.1 cm〜約12 cm、約0.1 cm〜約10 cm、約0.1 cm〜約8 cm、約0.1 cm〜約6 cm、約0.1 cm〜約5 cm、約0.1 cm〜約4.5 cm、約0.1 cm〜約4.0 cm、約0.1 cm〜約3.5 cm、約0.1 cm〜約3.0 cm、約0.1 cm〜約2.5 cm、約0.1 cm〜約2.0 cm、約0.1 cm〜約1.5 cm、約0.1 cm〜約1.0 cm、約0.1 cm〜約0.5 cm、約0.5 cm〜約50 cm、約0.5 cm〜約45 cm、約0.5 cm〜約40 cm、約0.5 cm〜約35 cm、約0.5 cm〜約30 cm、約0.5 cm〜約25 cm、約0.5 cm〜約20 cm、約0.5 cm〜約18 cm、約0.5 cm〜約16 cm、約0.5 cm〜約14 cm、約0.5 cm〜約12 cm、約0.5 cm〜約10 cm、約0.5 cm〜約8 cm、約0.5 cm〜約6 cm、約0.5 cm〜約5 cm、約0.5 cm〜約4.5 cm、約0.5 cm〜約4.0 cm、約0.5 cm〜約3.5 cm、約0.5 cm〜約3.0 cm、約0.5 cm〜約2.5 cm、約0.5 cm〜約2.0 cm、約0.5 cm〜約1.5 cm、約0.5 cm〜約1.0 cm、約1.0 cm〜約50 cm、約1.0 cm〜約45 cm、約1.0 cm〜約40 cm、約1.0 cm〜約35 cm、約1.0 cm〜約30 cm、約1.0 cm〜約25 cm、約1.0 cm〜約20 cm、約1.0 cm〜約18 cm、約1.0 cm〜約16 cm、約1.0 cm〜約14 cm、約1.0 cm〜約12 cm、約1.0 cm〜約10 cm、約1.0 cm〜約8 cm、約1.0 cm〜約6 cm、約1.0 cm〜約5 cm、約1.0 cm〜約4.5 cm、約1.0 cm〜約4.0 cm、約1.0 cm〜約3.5 cm、約1.0 cm〜約3.0 cm、約1.0 cm〜約2.5 cm、約1.0 cm〜約2.0 cm、約1.0 cm〜約1.5 cm、約1.5 cm〜約50 cm、約1.5 cm〜約45 cm、約1.5 cm〜約40 cm、約1.5 cm〜約35 cm、約1.5 cm〜約30 cm、約1.5 cm〜約25 cm、約1.5 cm〜約20 cm、約1.5 cm〜約18 cm、約1.5 cm〜約16 cm、約1.5 cm〜約14 cm、約1.5 cm〜約12 cm、約1.5 cm〜約10 cm、約1.5 cm〜約8 cm、約1.5 cm〜約6 cm、約1.5 cm〜約5 cm、約1.5 cm〜約4.5 cm、約1.5 cm〜約4.0 cm、約1.5 cm〜約3.5 cm、約1.5 cm〜約3.0 cm、約1.5 cm〜約2.5 cm、約1.5 cm〜約2.0 cm、約2.0 cm〜約50 cm、約2.0 cm〜約45 cm、約2.0 cm〜約40 cm、約2.0 cm〜約35 cm、約2.0 cm〜約30 cm、約2.0 cm〜約25 cm、約2.0 cm〜約20 cm、約2.0 cm〜約18 cm、約2.0 cm〜約16 cm、約2.0 cm〜約14 cm、約2.0 cm〜約12 cm、約2.0 cm〜約10 cm、約2.0 cm〜約8 cm、約2.0 cm〜約6 cm、約2.0 cm〜約5 cm、約2.0 cm〜約4.5 cm、約2.0 cm〜約4.0 cm、約2.0 cm〜約3.5 cm、約2.0 cm〜約3.0 cm、約2.0 cm〜約2.5 cm、約2.5 cm〜約50 cm、約2.5 cm〜約45 cm、約2.5 cm〜約40 cm、約2.5 cm〜約35 cm、約2.5 cm〜約30 cm、約2.5 cm〜約25 cm、約2.5 cm〜約20 cm、約2.5 cm〜約18 cm、約2.5 cm〜約16 cm、約2.5 cm〜約14 cm、約2.5 cm〜約12 cm、約2.5 cm〜約10 cm、約2.5 cm〜約8 cm、約2.5 cm〜約6 cm、約2.5 cm〜約5 cm、約2.5 cm〜約4.5 cm、約2.5 cm〜約4.0 cm、約2.5 cm〜約3.5 cm、約2.5 cm〜約3.0 cm、約3.0 cm〜約50 cm、約3.0 cm〜約45 cm、約3.0 cm〜約40 cm、約3.0 cm〜約35 cm��約3.0 cm〜約30 cm、約3.0 cm〜約25 cm、約3.0 cm〜約20 cm、約3.0 cm〜約18 cm、約3.0 cm〜約16 cm、約3.0 cm〜約14 cm、約3.0 cm〜約12 cm、約3.0 cm〜約10 cm、約3.0 cm〜約8 cm、約3.0 cm〜約6 cm、約3.0 cm〜約5 cm、約3.0 cm〜約4.5 cm、約3.0 cm〜約4.0 cm、約3.0 cm〜約3.5 cm、約3.5 cm〜約50 cm、約3.5 cm〜約45 cm、約3.5 cm〜約40 cm、約3.5 cm〜約35 cm、約3.5 cm〜約30 cm、約3.5 cm〜約25 cm、約3.5 cm〜約20 cm、約3.5 cm〜約18 cm、約3.5 cm〜約16 cm、約3.5 cm〜約14 cm、約3.5 cm〜約12 cm、約3.5 cm〜約10 cm、約3.5 cm〜約8 cm、約3.5 cm〜約6 cm、約3.5 cm〜約5 cm、約3.5 cm〜約4.5 cm、約3.5 cm〜約4.0 cm、約4.0 cm〜約50 cm、約4.0 cm〜約45 cm、約4.0 cm〜約40 cm、約4.0 cm〜約35 cm、約4.0 cm〜約30 cm、約4.0 cm〜約25 cm、約4.0 cm〜約20 cm、約4.0 cm〜約18 cm、約4.0 cm〜約16 cm、約4.0 cm〜約14 cm、約4.0 cm〜約12 cm、約4.0 cm〜約10 cm、約4.0 cm〜約8 cm、約4.0 cm〜約6 cm、約4.0 cm〜約5 cm、約4.0 cm〜約4.5 cm、約4.5 cm〜約50 cm、約4.5 cm〜約45 cm、約4.5 cm〜約40 cm、約4.5 cm〜約35 cm、約4.5 cm〜約30 cm、約4.5 cm〜約25 cm、約4.5 cm〜約20 cm、約4.5 cm〜約18 cm、約4.5 cm〜約16 cm、約4.5 cm〜約14 cm、約4.5 cm〜約12 cm、約4.5 cm〜約10 cm、約4.5 cm〜約8 cm、約4.5 cm〜約6 cm、約4.5 cm〜約5 cm、約5 cm〜約50 cm、約5 cm〜約45 cm、約5 cm〜約40 cm、約5 cm〜約35 cm、約5 cm〜約30 cm、約5 cm〜約25 cm、約5 cm〜約20 cm、約5 cm〜約18 cm、約5 cm〜約16 cm、約5 cm〜約14 cm、約5 cm〜約12 cm、約5 cm〜約10 cm、約5 cm〜約8 cm、約5 cm〜約6 cm、約6 cm〜約50 cm、約6 cm〜約45 cm、約6 cm〜約40 cm、約6 cm〜約35 cm、約6 cm〜約30 cm、約6 cm〜約25 cm、約6 cm〜約20 cm、約6 cm〜約18 cm、約6 cm〜約16 cm、約6 cm〜約14 cm、約6 cm〜約12 cm、約6 cm〜約10 cm、約6 cm〜約8 cm、約8 cm〜約50 cm、約8 cm〜約45 cm、約8 cm〜約40 cm、約8 cm〜約35 cm、約8 cm〜約30 cm、約8 cm〜約25 cm、約8 cm〜約20 cm、約8 cm〜約18 cm、約8 cm〜約16 cm、約8 cm〜約14 cm、約8 cm〜約12 cm、約8 cm〜約10 cm、約10 cm〜約50 cm、約10 cm〜約45 cm、約10 cm〜約40 cm、約10 cm〜約35 cm、約10 cm〜約30 cm、約10 cm〜約25 cm、約10 cm〜約20 cm、約10 cm〜約18 cm、約10 cm〜約16 cm、約10 cm〜約14 cm、約10 cm〜約12 cm、約12 cm〜約50 cm、約12 cm〜約45 cm、約12 cm〜約40 cm、約12 cm〜約35 cm、約12 cm〜約30 cm、約12 cm〜約25 cm、約12 cm〜約20 cm、約12 cm〜約18 cm、約12 cm〜約16 cm、約12 cm〜約14 cm、約14 cm〜約50 cm、約14 cm〜約45 cm、約14 cm〜約40 cm、約14 cm〜約35 cm、約14 cm〜約30 cm、約14 cm〜約25 cm、約14 cm〜約20 cm、約14 cm〜約18 cm、約14 cm〜約16 cm、約16 cm〜約50 cm、約16 cm〜約45 cm、約16 cm〜約40 cm、約16 cm〜約35 cm、約16 cm〜約30 cm、約16 cm〜約25 cm、約16 cm〜約20 cm、約16 cm〜約18 cm、約18 cm〜約50 cm、約18 cm〜約45 cm、約18 cm〜約40 cm、約18 cm〜約35 cm、約18 cm〜約30 cm、約18 cm〜約25 cm、約18 cm〜約20 cm、約20 cm〜約50 cm、約20 cm〜約45 cm、約20 cm〜約40 cm、約20 cm〜約35 cm、約20 cm〜約30 cm、約20 cm〜約25 cm、約25 cm〜約50 cm、約25 cm〜約45 cm、約25 cm〜約40 cm、約25 cm〜約35 cm、約25 cm〜約30 cm、約30 cm〜約50 cm、約30 cm〜約45 cm、約30 cm〜約40 cm、約30 cm〜約35 cm、約35 cm〜約50 cm、約35 cm〜約45 cm、約35 cm〜約40 cm、約40 cm〜約50 cm、約40 cm〜約45 cm、もしくは約45 cm〜約50 cmの長さ；および／または、約0.1 cm〜約30 cm、約0.1 cm〜約28 cm、約0.1 cm〜約26 cm、約0.1 cm〜約24 cm、約0.1 cm〜約22 cm、約0.1 cm〜約20 cm、約0.1 cm〜約18 cm、約0.1 cm〜約16 cm、約0.1 cm〜約14 cm、約0.1 cm〜約12 cm、約0.1 cm〜約10 cm、約0.1 cm〜約9 cm、約0.1 cm〜約8 cm、約0.1 cm〜約7 cm、約0.1 cm〜約6 cm、約0.1 cm〜約5 cm���約0.1 cm〜約4 cm、約0.1 cm〜約3 cm、約0.1 cm〜約2 cm、約0.1 cm〜約1 cm、約0.1 cm〜約0.5 cm、約0.5 cm〜約30 cm、約0.5 cm〜約28 cm、約0.5 cm〜約26 cm、約0.5 cm〜約24 cm、約0.5 cm〜約22 cm、約0.5 cm〜約20 cm、約0.5 cm〜約18 cm、約0.5 cm〜約16 cm、約0.5 cm〜約14 cm、約0.5 cm〜約12 cm、約0.5 cm〜約10 cm、約0.5 cm〜約9 cm、約0.5 cm〜約8 cm、約0.5 cm〜約7 cm、約0.5 cm〜約6 cm、約0.5 cm〜約5 cm、約0.5 cm〜約4 cm、約0.5 cm〜約3 cm、約0.5 cm〜約2 cm、約0.5 cm〜約1 cm、約1 cm〜約30 cm、約1 cm〜約28 cm、約1 cm〜約26 cm、約1 cm〜約24 cm、約1 cm〜約22 cm、約1 cm〜約20 cm、約1 cm〜約18 cm、約1 cm〜約16 cm、約1 cm〜約14 cm、約1 cm〜約12 cm、約1 cm〜約10 cm、約1 cm〜約9 cm、約1 cm〜約8 cm、約1 cm〜約7 cm、約1 cm〜約6 cm、約1 cm〜約5 cm、約1 cm〜約4 cm、約1 cm〜約3 cm、約1 cm〜約2 cm、約2 cm〜約30 cm、約2 cm〜約28 cm、約2 cm〜約26 cm、約2 cm〜約24 cm、約2 cm〜約22 cm、約2 cm〜約20 cm、約2 cm〜約18 cm、約2 cm〜約16 cm、約2 cm〜約14 cm、約
2 cm〜約12 cm、約2 cm〜約10 cm、約2 cm〜約9 cm、約2 cm〜約8 cm、約2 cm〜約7 cm、約2 cm〜約6 cm、約2 cm〜約5 cm、約2 cm〜約4 cm、約2 cm〜約3 cm、約3 cm〜約30 cm、約3 cm〜約28 cm、約3 cm〜約26 cm、約3 cm〜約24 cm、約3 cm〜約22 cm、約3 cm〜約20 cm、約3 cm〜約18 cm、約3 cm〜約16 cm、約3 cm〜約14 cm、約3 cm〜約12 cm、約3 cm〜約10 cm、約3 cm〜約9 cm、約3 cm〜約8 cm、約3 cm〜約7 cm、約3 cm〜約6 cm、約3 cm〜約5 cm、約3 cm〜約4 cm、約4 cm〜約30 cm、約4 cm〜約28 cm、約4 cm〜約26 cm、約4 cm〜約24 cm、約4 cm〜約22 cm、約4 cm〜約20 cm、約4 cm〜約18 cm、約4 cm〜約16 cm、約4 cm〜約14 cm、約4 cm〜約12 cm、約4 cm〜約10 cm、約4 cm〜約9 cm、約4 cm〜約8 cm、約4 cm〜約7 cm、約4 cm〜約6 cm、約4 cm〜約5 cm、約5 cm〜約30 cm、約5 cm〜約28 cm、約5 cm〜約26 cm、約5 cm〜約24 cm、約5 cm〜約22 cm、約5 cm〜約20 cm、約5 cm〜約18 cm、約5 cm〜約16 cm、約5 cm〜約14 cm、約5 cm〜約12 cm、約5 cm〜約10 cm、約5 cm〜約9 cm、約5 cm〜約8 cm、約5 cm〜約7 cm、約5 cm〜約6 cm、約6 cm〜約30 cm、約6 cm〜約28 cm、約6 cm〜約26 cm、約6 cm〜約24 cm、約6 cm〜約22 cm、約6 cm〜約20 cm、約6 cm〜約18 cm、約6 cm〜約16 cm、約6 cm〜約14 cm、約6 cm〜約12 cm、約6 cm〜約10 cm、約6 cm〜約9 cm、約6 cm〜約8 cm、約6 cm〜約7 cm、約7 cm〜約30 cm、約7 cm〜約28 cm、約7 cm〜約26 cm、約7 cm〜約24 cm、約7 cm〜約22 cm、約7 cm〜約20 cm、約7 cm〜約18 cm、約7 cm〜約16 cm、約7 cm〜約14 cm、約7 cm〜約12 cm、約7 cm〜約10 cm、約7 cm〜約9 cm、約7 cm〜約8 cm、約8 cm〜約30 cm、約8 cm〜約28 cm、約8 cm〜約26 cm、約8 cm〜約24 cm、約8 cm〜約22 cm、約8 cm〜約20 cm、約8 cm〜約18 cm、約8 cm〜約16 cm、約8 cm〜約14 cm、約8 cm〜約12 cm、約8 cm〜約10 cm、約8 cm〜約9 cm、約9 cm〜約30 cm、約9 cm〜約28 cm、約9 cm〜約26 cm、約9 cm〜約24 cm、約9 cm〜約22 cm、約9 cm〜約20 cm、約9 cm〜約18 cm、約9 cm〜約16 cm、約9 cm〜約14 cm、約9 cm〜約12 cm、約9 cm〜約10 cm、約10 cm〜約30 cm、約10 cm〜約28 cm、約10 cm〜約26 cm、約10 cm〜約24 cm、約10 cm〜約22 cm、約10 cm〜約20 cm、約10 cm〜約18 cm、約10 cm〜約16 cm、約10 cm〜約14 cm、約10 cm〜約12 cm、約12 cm〜約30 cm、約12 cm〜約28 cm、約12 cm〜約26 cm、約12 cm〜約24 cm、約12 cm〜約22 cm、約12 cm〜約20 cm、約12 cm〜約18 cm、約12 cm〜約16 cm、約12 cm〜約14 cm、約14 cm〜約30 cm、約14 cm〜約28 cm、約14 cm〜約26 cm、約14 cm〜約24 cm、約14 cm〜約22 cm、約14 cm〜約20 cm、約14 cm〜約18 cm、約14 cm〜約16 cm、約16 cm〜約30 cm、約16 cm〜約28 cm、約16 cm〜約26 cm、約16 cm〜約24 cm、約16 cm〜約22 cm、約16 cm〜約20 cm、約16 cm〜約18 cm、約18 cm〜約30 cm、約18 cm〜約28 cm、約18 cm〜約26 cm、約18 cm〜約24 cm、約18 cm〜約22 cm、約18 cm〜約20 cm、約20 cm〜約30 cm、約20 cm〜約28 cm、約20 cm〜約26 cm、約20 cm〜約24 cm、約20 cm〜約22 cm、約22 cm〜約30 cm、約22 cm〜約28 cm、約22 cm〜約26 cm、約22 cm〜約24 cm、約24 cm〜約30 cm、約24 cm〜約28 cm、約24 cm〜約26 cm、約26 cm〜約30 cm、約26 cm〜約28 cm、もしくは約28 cm〜約30 cmの直径もしくは平均直径を有する。
【００６７】
いくつかの態様において、インレットシステム内の流体コンジットは、約0.1 mm〜約10 mm、約0.1 mm〜約9.5 mm、約0.1 mm〜約9.0 mm、約0.1 mm〜約9.0 mm、約0.1 mm〜約8.5 mm、約0.1 mm〜約8.0 mm、約0.1 mm〜約7.5 mm、約0.1 mm〜約7.0 mm、約0.1 mm〜約6.5 mm、約0.1 mm〜約6.0 mm、約0.1 mm〜約5.5 mm、約0.1 mm〜約5.0 mm、約0.1 mm〜約4.5 mm、約0.1 mm〜約4.0 mm、約0.1 mm〜約3.5 mm、約0.1 mm〜約3.0 mm、約0.1 mm〜約2.5 mm、約0.1 mm〜約2.0 mm、約0.1 mm〜約1.5 mm、約0.1 mm〜約1.0 mm、約0.1 mm〜約0.5 mm、約0.5 mm〜約10 mm、約0.5 mm〜約9.5 mm、約0.5 mm〜約9.0 mm、約0.5 mm〜約9.0 mm、約0.5 mm〜約8.5 mm、約0.5 mm〜約8.0 mm、約0.5 mm〜約7.5 mm、約0.5 mm〜約7.0 mm、約0.5 mm〜約6.5 mm、約0.5 mm〜約6.0 mm、約0.5 mm〜約5.5 mm、約0.5 mm〜約5.0 mm、約0.5 mm〜約4.5 mm、約0.5 mm〜約4.0 mm、約0.5 mm〜約3.5 mm、約0.5 mm〜約3.0 mm、約0.5 mm〜約2.5 mm、約0.5 mm〜約2.0 mm、約0.5 mm〜約1.5 mm、約0.5 mm〜約1.0 mm、約1.0 mm〜約10 mm、約1.0 mm〜約9.5 mm、約1.0 mm〜約9.0 mm、約1.0 mm〜約9.0 mm、約1.0 mm〜約8.5 mm、約1.0 mm〜約8.0 mm、約1.0 mm〜約7.5 mm、約1.0 mm〜約7.0 mm、約1.0 mm〜約6.5 mm、約1.0 mm〜約6.0 mm、約1.0 mm〜約5.5 mm、約1.0 mm〜約5.0 mm、約1.0 mm〜約4.5 mm、約1.0 mm〜約4.0 mm、約1.0 mm〜約3.5 mm、約1.0 mm〜約3.0 mm、約1.0 mm〜約2.5 mm、約1.0 mm〜約2.0 mm、または約1.0 mm〜約1.5 mmの内径を有する。
【００６８】
これらキットのいくつかの態様において、ポッドはクロマトグラフィ樹脂（例えば、本明細書に説明する任意のタイプのクロマトグラフィ樹脂）を含有し、かつ、インレットシステムとポッドは、インレットシステムとポッドとが安定的に取り付けられた時に、インレットシステムの下端がクロマトグラフィ樹脂からおよそ約1 mm〜約30 mm（例えば約1 mm〜約25 mm、約1 mm〜約20 mm、約1 mm〜約15 mm、約1 mm〜約10 mm、約1 mm〜約5 mm）になるよう、構成される。これらキットのいくつかの態様において、ポッドは、本明細書に説明する任意の体積のクロマトグラフィ樹脂を含有してもよい。
【００６９】
これらキットのいくつかの態様において、インレットシステムは概ね円錐形を有する。これらキットのいくつかの態様において、アウトレットシステムは概ね円錐形を有する。ポッドと、インレットシステムと、アウトレットシステムとを含むキットの、非限定的な例を、図27（アセンブリされていない状態）および図28（アセンブリされた状態）に示す。本明細書に説明する他のキットの非限定的な例を図1A〜1E、図3、図23〜26、および図35に示す。
【００７０】
これらキットのいくつかの態様は、（d）上端と下端とを有するアダプターであって、アダプターの上端はポッドの下端に安定的に取り付けられるよう構成され、かつアダプターの下端は1つまたは複数のブレードを有し、そして、アダプターの上端がポッドの下端に安定的に取り付けられた時に、前記1つまたは複数のブレードの位置決めによって、（例えば、液体がポッド外部からポッド内部に可逆的に流入することを許容する材料を通って）ポッドに入る流体のフローが促されるようなアダプターを、さらに含んでもよい。そうしたアダプターの非限定的な例を図34に示す。例示的ポッドに取り付けられた例示的アダプターを示した線図を、図35に示す。
【００７１】
これらキットのいくつかの態様において、ポッドの内面とアダプターの上端は、ポッドとアダプターの上端との安定的な取り付けを可能にするよう構成される。これらキットのいくつかの態様において、アダプターとポッドとが安定的に取り付けられた時に、ポッドの内面とアダプターの上端は、シール（例えば流体タイトなシール）を形成する。これらキットのいくつかの態様において、ポッドの内面とアダプターの上端は、ポッドとアダプターの上端との安定的な取り付けを可能にするねじ切りを含む。これらキットのいくつかの態様において、ポッドの内面におけるねじ切り、またはアダプターの上端におけるねじ切りは、Oリングを含む。ポッドの内面とアダプターの上端との間に安定的な接続を提供するための他の手段は当技術分野において公知である。
【００７２】
本明細書に説明するいずれかのキットのいくつかの態様は、本明細書に説明するいずれかの方法を行うための指示をさらに含んでもよい。
【００７３】
方法
液体細胞培養によって産生された組換えタンパク質を捕捉する方法であって、本明細書に提供するいずれかのポッドをある期間にわたって液体細胞培養液に接触させる段階を含み、その接触の段階は、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも一部分が液体細胞培養液に接触するという結果をもたらし、かつ、その接触は、クロマトグラフィ樹脂による組換えタンパク質の捕捉という結果をもたらす条件下で行われる、方法を、本明細書に提供する。
【００７４】
液体細胞培養によって産生された組換えタンパク質を精製する方法であって、（a）本明細書に提供するいずれかのポッドをある期間にわたって液体細胞培養液に接触させる段階であって、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも一部分が液体細胞培養液に接触するという結果をもたらし、かつ、その接触は、クロマトグラフィ樹脂による組換えタンパク質の捕捉という結果をもたらす条件下で行われる、段階；および、（b）前記期間後にクロマトグラフィ樹脂から組換えタンパク質を溶離し、これにより組換えタンパク質を精製する段階、を含む方法もまた、本明細書に提供する。いくつかの態様において、溶離（および随意的な洗浄の段階）は、クロマトグラフィシステム（例えばAKTAシステム）を用いて行われてもよい。
【００７５】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、ポッドは、コンテナ内部に配されたクロマトグラフィ樹脂（例えば、本明細書に説明するかまたは当技術分野において公知である任意のクロマトグラフィ樹脂）を含む、本明細書に説明するいずれかのポッドである。いくつかの態様において、ポッドは、ポッドの縦軸が液体細胞培養液中で概ね水平（例えば水平）に置かれるように配される。いくつかの態様において、ポッドは、ポッドの縦軸が液体細胞培養液中で概ね垂直（例えば垂直）に置かれるように配される。いくつかの態様において、ポッドは、市販のクロマトグラフィ樹脂であるクロマトグラフィ樹脂を含む。いくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂は、アフィニティクロマトグラフィ樹脂（例えばプロテインA樹脂、プロテインG樹脂、プロテインL樹脂、ニッケル樹脂、または磁性ビーズ樹脂）である。いくつかの態様において、接触の段階の後、ポッド内のクロマトグラフィ樹脂から組換えタンパク質が溶離される前に、ポッドまたはクロマトグラフィ樹脂がある期間にわたって冷凍または保存されてもよい。ポッドまたはクロマトグラフィ樹脂がある期間にわたって冷凍または保存されるいくつかの態様において、ポッドまたはクロマトグラフィ樹脂は、接触の段階の後、かつ、ポッドまたはクロマトグラフィ樹脂が洗浄緩衝剤に接触された後に、ある期間にわたって冷凍または保存されてもよい。
【００７６】
いくつかの態様において、接触の段階は、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも一部分（例えば、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも10%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも15%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも20%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも25%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも30%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも35%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも40%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも45%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも50%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも55%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも60%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも65%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも70%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも75%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも80%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも85%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも90%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも95%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも97%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも98%、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも99%）が液体細胞培養液に接触するという結果をもたらす。いくつかの態様において、前記少なくとも1つのエリアの総表面積の少なくとも20%（例えば、少なくとも25%、少なくとも30%、少なくとも35%、少なくとも40%、少なくとも45%、少なくとも50%、少なくとも55%、少なくとも60%、少なくとも65%、少なくとも70%、少なくとも75%、少なくとも80%、少なくとも81%、少なくとも82%、少なくとも83%、少なくとも84%、少なくとも85%、少なくとも86%、少なくとも87%、少なくとも88%、少なくとも89%、少なくとも90%、少なくとも91%、少なくとも92%、少なくとも93%、少なくとも94%、少なくとも95%、少なくとも96%、少なくとも97%、少なくとも98%、少なくとも99%）が、液体培養と接触する。
【００７７】
いくつかの態様において、接触は、クロマトグラフィ樹脂による組換えタンパク質の捕捉という結果をもたらす条件下で行われる。いくつかの態様において、捕捉は、クロマトグラフィ樹脂の結合能の最大60%〜100%（例えば、最大60%〜70%、最大60%〜75%、最大60%〜80%、最大60%〜85%、最大60%〜90%、最大60%〜95%、最大65%〜70%、最大65%〜75%、最大65%〜80%、最大65%〜85%、最大65%〜90%、最大65%〜95%、最大65%〜100%、最大70%〜75%、最大70%〜80%、最大70%〜85%、最大70%〜90%、最大70%〜95%、最大70%〜100%、最大75%〜80%、最大75%〜85%、最大75%〜90%、最大75%〜95%、最大75%〜100%、最大80%〜85%、最大80%〜90%、最大80%〜95%、最大80%〜100%、最大85%〜90%、最大85%〜95%、最大85%〜100%、最大90%〜95%、最大95%〜100%、最大50%〜55%、最大50%〜60%、最大50%〜65%、最大50%〜70%、最大50%〜75%、最大50%〜80%、最大50%〜85%、最大50%〜90%、最大50%〜95%、最大50%〜100%、最大55%〜60%、最大55%〜65%、最大55%〜70%、最大55%〜75%、最大55%〜80%、最大55%〜85%、最大55%〜90%、最大55%〜95%、最大55%〜100%、最大50%、最大51%、最大52%、最大53%、最大54%、最大55%、最大56%、最大57%、最大58%、最大59%、最大60%、最大61%、最大62%、最大63%、最大64%、最大65%、最大66%、最大67%、最大68%、最大69%、最大70%、最大71%、最大72%、最大73%、最大74%、最大75%、最大76%、最大77%、最大78%、最大79%、最大80%、最大81%、最大82%、最大83%、最大84%、最大85%、最大86%、最大87%、最大88%、最大89%、最大90%、最大91%、最大92%、最大93%、最大94%、最大95%、最大96%、最大97%、最大98%、最大99%、または100%）の水準まで組換えタンパク質が結合されるという結果をもたらしてもよい。
【００７８】
いくつかの態様において、捕捉は、約0.05 mg〜約80 mg（例えば、約0.05 mg〜約0.1 mg、約0.05 mg〜約0.2 mg、約0.05 mg〜約0.5 mg、約0.05 mg〜約0.6 mg、約0.05 mg〜約0.8 mg、約0.05 mg〜約1 mg、約0.05 mg〜約2 mg、約0.05 mg〜約5 mg、約0.05 mg〜約10 mg、約0.05 mg〜約15 mg、約0.05 mg〜約20 mg、約0.05 mg〜約25 mg、約0.05 mg〜約30 mg、約0.05 mg〜約35 mg、約0.05 mg〜約40 mg、約0.05 mg〜約45 mg、約0.05 mg〜約50 mg、約0.05 mg〜約55 mg、約0.05 mg〜約60 mg、約0.05 mg〜約65 mg、約0.05 mg〜約70 mg、約0.05 mg〜約75 mg、約0.05 mg〜約80 mg、約0.1 mg〜約0.2 mg、約0.1 mg〜約0.5 mg、約0.1 mg〜約0.6 mg、約0.1 mg〜約0.8 mg、約0.1 mg〜約1 mg、約0.1 mg〜約2 mg、約0.1 mg〜約5 mg、約0.1 mg〜約10 mg、約0.1 mg〜約15 mg、約0.1 mg〜約20 mg、約0.1 mg〜約25 mg、約0.1 mg〜約30 mg、約0.1 mg〜約35 mg、約0.1 mg〜約40 mg、約0.1 mg〜約45 mg、約0.1 mg〜約50 mg、約0.1 mg〜約55 mg、約0.1 mg〜約60 mg、約0.1 mg〜約65 mg、約0.1 mg〜約70 mg、約0.1 mg〜約75 mg、約0.1 mg〜約80 mg、約0.2 mg〜約0.5 mg、約0.2 mg〜約0.6 mg、約0.2 mg〜約0.8 mg、約0.2 mg〜約1 mg、約0.2 mg〜約2 mg、約0.2 mg〜約5 mg、約0.2 mg〜約10 mg、約0.2 mg〜約15 mg、約0.2 mg〜約20 mg、約0.2 mg〜約25 mg、約0.2 mg〜約30 mg、約0.2 mg〜約35 mg、約0.2 mg〜約40 mg、約0.2 mg〜約45 mg、約0.2 mg〜約50 mg、約0.2 mg〜約55 mg、約0.2 mg〜約60 mg、約0.2 mg〜約65 mg、約0.2 mg〜約70 mg、約0.2 mg〜約75 mg、約0.2 mg〜約80 mg、約0.5 mg〜約0.6 mg、約0.5 mg〜約0.8 mg、約0.5 mg〜約1 mg、約0.5 mg〜約2 mg、約0.5 mg〜約5 mg、約0.5 mg〜約10 mg、約0.5 mg〜約15 mg、約0.5 mg〜約20 mg、約0.5 mg〜約25 mg、約0.5 mg〜約30 mg、約0.5 mg〜約35 mg、約0.5 mg〜約40 mg、約0.5 mg〜約45 mg、約0.5 mg〜約50 mg、約0.5 mg〜約55 mg、約0.5 mg〜約60 mg、約0.5 mg〜約65 mg、約0.5 mg〜約70 mg、約0.5 mg〜約75 mg、約0.5 mg〜約80 mg、約0.6 mg〜約0.8 mg、約0.6 mg〜約1 mg、約0.6 mg〜約2 mg、約0.6 mg〜約5 mg、約0.6 mg〜約10 mg、約0.6 mg〜約15 mg、約0.6 mg〜約20 mg、約0.6 mg〜約25 mg、約0.6 mg〜約30 mg、約0.6 mg〜約35 mg、約0.6 mg〜約40 mg、約0.6 mg〜約45 mg、約0.6 mg〜約50 mg、約0.6 mg〜約55 mg、約0.6 mg〜約60 mg、約0.6 mg〜約65 mg、約0.6 mg〜約70 mg、約0.6 mg〜約75 mg、約0.6 mg〜約80 mg、約0.8 mg〜約1 mg、約0.8 mg〜約2 mg、約0.8 mg〜約5 mg、約0.8 mg〜約10 mg、約0.8 mg〜約15 mg、約0.8 mg〜約20 mg、約0.8 mg〜約25 mg、約0.8 mg〜約30 mg、約0.8 mg〜約35 mg、約0.8 mg〜約40 mg、約0.8 mg〜約45 mg、約0.8 mg〜約50 mg、約0.8 mg〜約55 mg、約0.8 mg〜約60 mg、約0.8 mg〜約65 mg、約0.8 mg〜約70 mg、約0.8 mg〜約75 mg、約0.8 mg〜約80 mg、約1 mg〜約2 mg、約1 mg〜約5 mg、約1 mg〜約10 mg、約1 mg〜約15 mg、約1 mg〜約20 mg、約1 mg〜約25 mg、約1 mg〜約30 mg、約1 mg〜約35 mg、約1 mg〜約40 mg、約1 mg〜約45 mg、約1 mg〜約50 mg、約1 mg〜約55 mg、約1 mg〜約60 mg、約1 mg〜約65 mg、約1 mg〜約70 mg、約1 mg〜約75 mg、約1 mg〜約80 mg、約2 mg〜約5 mg、約2 mg〜約10 mg、約2 mg〜約15 mg、約2 mg〜約20 mg、約2 mg〜約25 mg、約2 mg〜約30 mg、約2 mg〜約35 mg、約2 mg〜約40 mg、約2 mg〜約45 mg、約2 mg〜約50 mg、約2 mg〜約55 mg、約2 mg〜約60 mg、約2 mg〜約65 mg、約2 mg〜約70 mg、約2 mg〜約75 mg、約2 mg〜約80 mg、約5 mg〜約10 mg、約5 mg〜約15 mg、約5 mg〜約20 mg、約5 mg〜約25 mg、約5 mg〜約30 mg、約5 mg〜約35 mg、約5 mg〜約40 mg、約5 mg〜約45 mg、約5 mg〜約50 mg、約5 mg〜約55 mg、約5 mg〜約60 mg、約5 mg〜約65 mg、約5 mg〜約70 mg、約5 mg〜約75 mg、約5 mg〜約80 mg、約10 mg〜約15 mg、約10 mg〜約20 mg、約10 mg〜約25 mg、約10 mg〜約30 mg、約10 mg〜約35 mg、約10 mg〜約40 mg、約10 mg〜約45 mg、約10 mg〜約50 mg、約10 mg〜約55 mg、約10 mg〜約60 mg、約10 mg〜約65 mg、約10 mg〜約70 mg、約10 mg〜約75 mg、約10 mg〜約80 mg、約15 mg〜約20 mg、約15 mg〜約20 mg、約15 mg〜約25 mg、約15 mg〜約30 mg、約15 mg〜約35 mg、約15 mg〜約40 mg、約15 mg〜約45 mg、約15 mg〜約50 mg、約15 mg〜約55 mg、約15 mg〜約60 mg、約15 mg〜約65 mg、約15 mg〜約70 mg、約15 mg〜約75 mg、約15 mg〜約80 mg、約20 mg〜約25 mg、約20 mg〜約30 mg、約20 mg〜約35 mg、約20 mg〜約40 mg、約20 mg〜約45 mg、約20 mg〜約50 mg、約20 mg〜約55 mg、約20 mg〜約60 mg、約20 mg〜約65 mg、約20 mg〜約70 mg、約20 mg〜約75 mg、約20 mg〜約80 mg、約25 mg〜約30 mg、約25 mg〜約35 mg、約25 mg〜約40 mg、約25 mg〜約45 mg、約25 mg〜約50 mg、約25 mg〜約55 mg、約25 mg〜約60 mg、約25 mg〜約65 mg、約25 mg〜約70 mg、約25 mg〜約75 mg、約25 mg〜約80 mg、約30 mg〜約35 mg、約30 mg〜約40 mg、約30 mg〜約45 mg、約30 mg〜約50 mg、約30 mg〜約55 mg、約30 mg〜約60 mg、約30 mg〜約65 mg、約30 mg〜約70 mg、約30 mg〜約75 mg、約30 mg〜約80 mg、約35 mg〜約40 mg、約35 mg〜約45 mg、約35 mg〜約50 mg、約35 mg〜約55 mg、約35 mg〜約60 mg、約35 mg〜約65 mg、約35 mg〜約70 mg、約35 mg〜約75 mg、約35 mg〜約80 mg、約40 mg〜約45 mg、約40 mg〜約50 mg、約45 mg〜約55 mg、約45 mg〜約60 mg、約45 mg〜約65 mg、約45 mg〜約70 mg、約45 mg〜約75 mg、約45 mg〜約80 mg、約50 mg〜約55 mg、約50 mg〜約60 mg、約50 mg〜約65 mg、約50 mg〜約70 mg、約50 mg〜約75 mg、約50 mg〜約80 mg、約55 mg〜約60 mg、約55 mg〜約65 mg、約55 mg〜約70 mg、約55 mg〜約75 mg、約55 mg〜約80 mg、約60 mg〜約65 mg、約60 mg〜約70 mg、約60 mg〜約75 mg、約60 mg〜約80 mg、約65 mg〜約70 mg、約65 mg〜約75 mg、約65 mg〜約80 mg、約70 mg〜約75 mg、約70 mg〜約80 mg、約75 mg〜約80 mg）の組換えタンパク質がクロマトグラフィ樹脂上に捕捉されるという結果をもたらしてもよい。
【００７９】
いくつかの態様において、分析的サイズ排除クロマトグラフィ（SEC）によって決定される、捕捉の純度は、少なくとも45%（例えば、少なくとも46%、少なくとも47%、少なくとも48%、少なくとも49%、少なくとも50%、少なくとも51%、少なくとも52%、少なくとも53%、少なくとも54%、少なくとも55%、少なくとも56%、少なくとも57%、少なくとも58%、少なくとも59%、少なくとも60%、少なくとも61%、少なくとも62%、少なくとも63%、少なくとも64%、少なくとも65%、少なくとも66%、少なくとも67%、少なくとも68%、少なくとも69%、少なくとも70%、少なくとも71%、少なくとも72%、少なくとも73%、少なくとも74%、少なくとも75%、少なくとも76%、少なくとも78%、少なくとも79%、少なくとも80%、少なくとも81%、少なくとも82%、少なくとも83%、少なくとも84%、少なくとも85%、少なくとも86%、少なくとも87%、少なくとも88%、少なくとも89%、少なくとも90%、少なくとも91%、少なくとも92%、少なくとも93%、少なくとも94%、少なくとも95%、少なくとも96%、少なくとも97%、少なくとも98%、少なくとも99%、少なくとも99.2%、少なくとも99.4%、少なくとも99.5%、少なくとも99.6%、少なくとも99.7%、少なくとも99.8%、少なくとも99.9%）である。
【００８０】
期間
本明細書に提供するいずれかの方法のいくつかの態様において、本明細書に提供するいずれかのポッドを液体細胞培養液に接触させる段階は、ある期間（例えば約30秒間〜約2週間）にわたる。本明細書に提供するいずれかの方法のいくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂から組換えタンパク質を溶離する段階は、ある期間（例えば約30秒間〜約2週間）の後である。
【００８１】
いくつかの態様において、接触の段階および／またはクロマトグラフィ樹脂から組換えタンパク質を溶離させる段階の期間は、約30秒間〜約1分間、約30秒間〜45秒間、約30秒間〜約90秒間、約30秒間〜約2分間、約30秒間〜約150秒間、約30秒間〜約3分間、約30秒間〜約210秒間、約30秒間〜約4分間、約30秒間〜約270秒間、約30秒間〜約5分間、約1分間〜約2分間、約1分間〜約3分間、約1分間〜約4分間、約1分間〜約5分間、約2分間〜約3分間、約2分間〜約4分間、約2〜約5分間、約3分間〜約4分間、約3分間〜約5分間、約4分間〜約5分間、約5分間〜約2週間、約5分間〜約168時間、約5分間〜約162時間、約5分間〜約156時間、約5分間〜約150時間、約5分間〜約144時間、約5分間〜約138時間、約5分間〜約132時間、約5分間〜約126時間、約5分間〜約120時間、約5分間〜約114時間、約5分間〜約108時間、約5分間〜約102時間、約5分間〜約96時間、約5分間〜約90時間、約5分間〜約84時間、約5分間〜約78時間、約5分間〜約72時間、約5分間〜約66時間、約5分間〜約60時間、約5分間〜約54時間、約5分間〜約48時間、約5分間〜約42時間、約5分間〜約36時間、約5分間〜約30時間、約5分間〜約24時間、約5分間〜約18時間、約5分間〜約12時間、約5分間〜約6時間、約5分間〜約5時間、約5分間〜約240分間、約5分間〜約210分間、約5分間〜約180分間、約5分間〜約150分間、約5分間〜約120分間、約5分間〜約90分間、約5分間〜約60分間、約5分間〜約30分間、約5分間〜約20分間、約5分間〜約15分間、約5分間〜約10分間；約10分間〜約2週間、約10分間〜約168時間、約10分間〜約162時間、約10分間〜約156時間、約10分間〜約150時間、約10分間〜約144時間、約10分間〜約138時間、約10分間〜約132時間、約10分間〜約126時間、約10分間〜約120時間、約10分間〜約114時間、約10分間〜約108時間、約10分間〜約102時間、約10分間〜約96時間、約10分間〜約90時間、約10分間〜約84時間、約10分間〜約78時間、約10分間〜約72時間、約10分間〜約66時間、約10分間〜約60時間、約10分間〜約54時間、約10分間〜約48時間、約10分間〜約42時間、約10分間〜約36時間、約10分間〜約30時間、約10分間〜約24時間、約10分間〜約18時間、約10分間〜約12時間、約10分間〜約6時間、約10分間〜約5時間、約10分間〜約240分間、約10分間〜約210分間、約10分間〜約180分間、約10分間〜約150分間、約10分間〜約120分間、約10分間〜約90分間、約10分間〜約60分間、約10分間〜約30分間、約10分間〜約15分間、約10分間〜約20分間、約10分間〜約25分間；約20分間〜約2週間、約20分間〜約168時間、約20分間〜約162時間、約20分間〜約156時間、約20分間〜約150時間、約20分間〜約144時間、約20分間〜約138時間、約20分間〜約132時間、約20分間〜約126時間、約20分間〜約120時間、約20分間〜約114時間、約20分間〜約108時間、約20分間〜約102時間、約20分間〜約96時間、約20分間〜約90時間、約20分間〜約84時間、約20分間〜約78時間、約20分間〜約72時間、約20分間〜約66時間、約20分間〜約60時間、約20分間〜約54時間、約20分間〜約48時間、約20分間〜約42時間、約20分間〜約36時間、約20分間〜約30時間、約20分間〜約24時間、約20分間〜約18時間、約20分間〜約12時間、約20分間〜約6時間、約20分間〜約5時間、約20分間〜約240分間、約20分間〜約210分間、約20分間〜約180分間、約20分間〜約150分間、約20分間〜約120分間、約20分間〜約90分間、約20分間〜約60分間、約20分間〜約30分間、約20分間〜約25分間；約30���間〜約2週間、約30分間〜約168時間、約30分間〜約162時間、約30分間〜約156時間、約30分間〜約150時間、約30分間〜約144時間、約30分間〜約138時間、約30分間〜約132時間、約30分間〜約126時間、約30分間〜約120時間、約30分間〜約114時間、約30分間〜約108時間、約30分間〜約102時間、約30分間〜約96時間、約30分間〜約90時間、約30分間〜約84時間、約30分間〜約78時間、約30分間〜約72時間、約30分間〜約66時間、約30分間〜約60時間、約30分間〜約54時間、約30分間〜約48時間、約30分間〜約42時間、約30分間〜約36時間、約30分間〜約30時間、約30分間〜約24時間、約30分間〜約18時間、約30分間〜約12時間、約30分間〜約6時間、約30分間〜約5時間、約30分間〜約240分間、約30分間〜約210分間、約30分間〜約180分間、約30分間〜約150分間、約30分間〜約120分間、約30分間〜約90分間、約30分間〜約60分間；約40分間〜約2週間、約40分間〜約168時間、約40分間〜約162時間、約40分間〜約156時間、約40分間〜約150時間、約40分間〜約144時間、約40分間〜約138時間、約40分間〜約132時間、約40分間〜約126時間、約40分間〜約120時間、約40分間〜約114時間、約40分間〜約108時間、約40分間〜約102時間、約40分間〜約96時間、約40分間〜約90時間、約40分間〜約84時間、約40分間〜約78時間、約40分間〜約72時間、約40分間〜約66時間、約40分間〜約60時間、約40分間〜約54時間、約40分間〜約48時間、約40分間〜約42時間、約40分間〜約36時間、約40分間〜約30時間、約40分間〜約24時間、約40分間〜約18時間、約40分間〜約12時間、約40分間〜約6時間、約40分間〜約5時間、約40分間〜約240分間、約40分間〜約210分間、約40分間〜約180分間、約40分間〜約150分間、約40分間〜約120分間、約40分間〜約90分間、約40分間〜約60分間、約40分間〜約50分間、約40分間〜約45分間；約45分間〜約2週間、約45分間〜約168時間、約45分間〜約162時間、約45分間〜約156時間、約45分間〜約150時間、約45分間〜約144時間、約45分間〜約138時間、約45分間〜約132時間、約45分間〜約126時間、約45分間〜約120時間、約45分間〜約114時間、約45分間〜約108時間、約45分間〜約102時間、約45分間〜約96時間、約45分間〜約90時間、約45分間〜約84時間、約45分間〜約78時間、約45分間〜約72時間、約45分間〜約66時間、約45分間〜約60時間、約45分間〜約54時間、約45分間〜約48時間、約45分間〜約42時間、約45分間〜約36時間、約45分間〜約30時間、約45分間〜約24時間、約45分間〜約18時間、約45分間〜約12時間、約45分間〜約6時間、約45分間〜約5時間、約45分間〜約240分間、約45分間〜約210分間、約45分間〜約180分間、約45分間〜約150分間、約45分間〜約120分間、約45分間〜約90分間、約45分間〜約60分間、約45分間〜約50分間、約45分間〜約55分間；約60分間〜約2週間、約60分間〜約168時間、約60分間〜約162時間、約60分間〜約156時間、約60分間〜約150時間、約60分間〜約144時間、約60分間〜約138時間、約60分間〜約132時間、約60分間〜約126時間、約60分間〜約120時間、約60分間〜約114時間、約60分間〜約108時間、約60分間〜約102時間、約60分間〜約96時間、約60分間〜約90時間、約60分間〜約84時間、約60分間〜約78時間、約60分間〜約72時間、約60分間〜約66時間、約60分間〜約60時間、約60分間〜約54時間、約60分間〜約48時間、約60分間〜約42時間、約60分間〜約36時間、約60分間〜約30時間、約60分間〜約24時間、約60分間〜約18時間、約60分間〜約12時間、約60分間〜約6時間、約60分間〜約5時間、約60分間〜約240分間、約60分間〜約210分間、約60分間〜約180分間、約60分間〜約150分間、約60分間〜約120分間、約60分間〜約90分間、約60分間〜約85分間、約60分間〜約80分間、約60分間〜約75分間、約60分間〜約70分間；約70分間〜約2週間、約70分間〜約168時間、約70分間〜約162時間、約70分間〜約156時間、約70分間〜約150時間、約70分間〜約144時間、約70分間〜約138時間、約70分間〜約132時間、約70分間〜約126時間、約70分間〜約120時間、約70分間〜約114時間、約70分間〜約108時間、約70分間〜約102時間、約70分間〜約96時間、約70分間〜約90時間、約70分間〜約84時間、約70分間〜約78時間、約70分間〜約72時間、約70分間〜約66時間、約70分間〜約60時間、約70分間〜約54時間、約70分間〜約48時間、約70分間〜約42時間、約70分間〜約36時間、約70分間〜約30時間、約70分間〜約24時間、約70分間〜約18時間、約70分間〜約12時間、約70分間〜約6時間、約70分間〜約5時間、約70分間〜約240分間、約70分間〜約210分間、約70分間〜約180分間、約70分間〜約150分間、約70分間〜約120分間、約70分間〜約90分間、約70分間〜約85分間、約70分間〜約80分間；約75分間〜約80分間、約75分間〜約85分間、約75分間〜約90分間；約90分間〜約2週間、約90分間〜約168時間、約90分間〜約162時間、約90分間〜約156時間、約90分間〜約150時間、約90分間〜約144時間、約90分間〜約138時間、約90分間〜約132時間、約90分間〜約126時間、約90分間〜約120時間、約90分間〜約114時間、約90分間〜約108時間、約90分間〜約102時間、約90分間〜約96時間、約90分間〜約90時間、約90分間〜約84時間、約90分間〜約78時間、約90分間〜約72時間、約90分間〜約66時間、約90分間〜約60時間、約90分間〜約54時間、約90分間〜約48時間、約90分間〜約42時間、約90分間〜約36時間、約90分間〜約30時間、約90分間〜約24時間、約90分間〜約18時間、約90分間〜約12時間、約90分間〜約6時間、約90分間〜約5時間、約90分間〜約240分間、約90分間〜約210分間、約90分間〜約180分間、約90分間〜約150分間、約90分間〜約120分間、約90分間〜約100分間、約90分間〜約110分間、約100分間〜約110分間、約100分間〜約120分間；約120分間〜約2週間、約120分間〜約168時間、約120分間〜約162時間、約120分間〜約156時間、約120分間〜約150時間、約120分間〜約144時間、約120分間〜約138時間、約120分間〜約132時間、約120分間〜約126時間、約120分間〜約120時間、約120分間〜約114時間、約120分間〜約108時間、約120分間〜約102時間、約120分間〜約96時間、約120分間〜約90時間、約120分間〜約84時間、約120分間〜約78時間、約120分間〜約72時間、約120分間〜約66時間、約120分間〜約60時間、約120分間〜約54時間、約120分間〜約48時間、約120分間〜約42時間、約120分間〜約36時間、約120分間〜約30時間、約120分間〜約24時間、約120分間〜約18時間、約120分間〜約12時間、約120分間〜約6時間、約120分間〜約5時間、約120分間〜約240分間、約120分間〜約210分間、約120分間〜約180分間、約120分間〜約150分間、約120分間〜約130分間、約120分間〜約140分間、約130分間〜約140分間、約130分間〜約150分間、約140分間〜約150分間；約150分間〜約2週間、約150分間〜約168時間、約150分間〜約162時間、約150分間〜約156時間、約150分間〜約150時間、約150分間〜約144時間、約150分間〜約138時間、約150分間〜約132時間、約150分間〜約126時間、約150分間〜約120時間、約150分間〜約114時間、約150分間〜約108時間、約150分間〜約102時間、約150分間〜約96時間、約150分間〜約90時間、約150分間〜約84時間、約150分間〜約78時間、約150分間〜約72時間、約150分間〜約66時間、約150分間〜約60時間、約150分間〜約54時間、約150分間〜約48時間、約150分間〜約42時間、約150分間〜約36時間、約150分間〜約30時間、約150分間〜約24時間、約150分間〜約18時間、約150分間〜約12時間、約150分間〜約6時間、約150分間〜約5時間、約150分間〜約240分間、約150分間〜約210分間、約150分間〜約180分間；約180分間〜約2週間、約180分間〜約168時間、約180分間〜約162時間、約180分間〜約156時間、約180分間〜約150時間、約180分間〜約144時間、約180分間〜約138時間、約180分間〜約132時間、約180分間〜約126時間、約180分間〜約120時間、約180分間〜約114時間、約180分間〜約108時間、約180分間〜約102時間、約180分間〜約96時間、約180分間〜約90時間、約180分間〜約84時間、約180分間〜約78時間、約180分間〜約72時間、約180分間〜約66時間、約180分間〜約60時間、約180分間〜約54時間、約180分間〜約48時間、約180分間〜約42時間、約180分間〜約36時間、約180分間〜約30時間、約180分間〜約24時間、約180分間〜約18時間、約180分間〜約12時間、約180分間〜約6時間、約180分間〜約5時間、約180分間〜約240分間、約180分間〜約210分間、約180分間〜約200分間、約180分間〜約190分間、約190分間〜約200分間、約190分間〜約210分間；約210分間〜約2週間、約210分間〜約168時間、約210分間〜約162時間、約210分間〜約156時間、約210分間〜約150時間、約210分間〜約144時間、約210分間〜約138時間、約210分間〜約132時間、約210分間〜約126時間、約210分間〜約120時間、約210分間〜
約114時間、約210分間〜約108時間、約210分間〜約102時間、約210分間〜約96時間、約210分間〜約90時間、約210分間〜約84時間、約210分間〜約78時間、約210分間〜約72時間、約210分間〜約66時間、約210分間〜約60時間、約210分間〜約54時間、約210分間〜約48時間、約210分間〜約42時間、約210分間〜約36時間、約210分間〜約30時間、約210分間〜約24時間、約210分間〜約18時間、約210分間〜約12時間、約210分間〜約6時間、約210分間〜約5時間、約210分間〜約240分間、約210分間〜約230分間、約210分間〜約220分間；約240分間〜約2週間、約240分間〜約168時間、約240分間〜約162時間、約240分間〜約156時間、約240分間〜約150時間、約240分間〜約144時間、約240分間〜約138時間、約240分間〜約132時間、約240分間〜約126時間、約240分間〜約120時間、約240分間〜約114時間、約240分間〜約108時間、約240分間〜約102時間、約240分間〜約96時間、約240分間〜約90時間、約240分間〜約84時間、約240分間〜約78時間、約240分間〜約72時間、約240分間〜約66時間、約240分間〜約60時間、約240分間〜約54時間、約240分間〜約48時間、約240分間〜約42時間、約240分間〜約36時間、約240分間〜約30時間、約240分間〜約24時間、約240分間〜約18時間、約240分間〜約12時間、約240分間〜約6時間、約240分間〜約5時間、約240分間〜約280分間、約240分間〜約270分間、約240分間〜約260分間、約240分間〜約250分間；約270分間〜約280分間、約270分間〜約290分間、約270分間〜約5時間；約5時間〜約2週間、約5時間〜約168時間、約5時間〜約162時間、約5時間〜約156時間、約5時間〜約150時間、約5時間〜約144時間、約5時間〜約138時間、約5時間〜約132時間、約5時間〜約126時間、約5時間〜約120時間、約5時間〜約114時間、約5時間〜約108時間、約5時間〜約102時間、約5時間〜約96時間、約5時間〜約90時間、約5時間〜約84時間、約5時間〜約78時間、約5時間〜約72時間、約5時間〜約66時間、約5時間〜約60時間、約5時間〜約54時間、約5時間〜約48時間、約5時間〜約42時間、約5時間〜約36時間、約5時間〜約30時間、約5時間〜約24時間、約5時間〜約18時間、約5時間〜約12時間、約5時間〜約11時間、約5時間〜約10時間、約5時間〜約9時間、約5時間〜約8時間、約5時間〜約7時間、約5時間〜約6時間；約6時間〜約12時間、約6時間〜約8時間、約6時間〜約10時間、約8時間〜約10時間、約8時間〜約12時間；約8時間〜約2週間、約8時間〜約168時間、約8時間〜約162時間、約6時間〜約156時間、約6時間〜約150時間、約6時間〜約144時間、約6時間〜約138時間、約6時間〜約132時間、約6時間〜約126時間、約6時間〜約120時間、約6時間〜約114時間、約6時間〜約108時間、約6時間〜約102時間、約6時間〜約96時間、約6時間〜約90時間、約6時間〜約84時間、約6時間〜約78時間、約6時間〜約72時間、約6時間〜約66時間、約6時間〜約60時間、約6時間〜約54時間、約6時間〜約48時間、約6時間〜約42時間、約6時間〜約36時間、約6時間〜約30時間、約6時間〜約24時間、約6時間〜約18時間、約6時間〜約12時間、約6時間〜約11時間、約6時間〜約10時間、約6時間〜約9時間、約6時間〜約8時間、約6時間〜約7時間、約7時間〜約8時間；約12時間〜約2週間、約12時間〜約168時間、約12時間〜約162時間、約12時間〜約156時間、約12時間〜約150時間、約12時間〜約144時間、約12時間〜約138時間、約12時間〜約132時間、約12時間〜約126時間、約12時間〜約120時間、約12時間〜約114時間、約12時間〜約108時間、約12時間〜約102��間、約12時間〜約96時間、約12時間〜約90時間、約12時間〜約84時間、約12時間〜約78時間、約12時間〜約72時間、約12時間〜約66時間、約12時間〜約60時間、約12時間〜約54時間、約12時間〜約48時間、約12時間〜約42時間、約12時間〜約36時間、約12時間〜約30時間、約12時間〜約24時間、約12時間〜約18時間、約12時間〜約14時間、約12時間〜約16時間、約14時間〜約16時間、約14時間〜約18時間、約14時間〜約24時間、約14時間〜約36時間、約14時間〜約48時間、約14時間〜約36時間、約16時間〜約18時間、約16時間〜約20時間、約16時間〜約24時間、約16時間〜約36時間、約16時間〜約48時間、約18時間〜約24時間、約18時間〜約36時間、約18時間〜約48時間；約24時間〜約2週間、約24時間〜約168時間、約24時間〜約162時間、約24時間〜約156時間、約24時間〜約150時間、約24時間〜約144時間、約24時間〜約138時間、約24時間〜約132時間、約24時間〜約126時間、約24時間〜約120時間、約24時間〜約114時間、約24時間〜約108時間、約24時間〜約102時間、約24時間〜約96時間、約24時間〜約90時間、約24時間〜約84時間、約24時間〜約78時間、約24時間〜約72時間、約24時間〜約66時間、約24時間〜約60時間、約24時間〜約54時間、約24時間〜約48時間、約24時間〜約42時間、約24時間〜約36時間、約24時間〜約30時間、約30時間〜約36時間；約26時間〜約28時間、約26時間〜約30時間、約26時間〜約36時間、約26時間〜約48時間、約28時間〜約30時間、約28時間〜約36時間、約28時間〜約48時間、約30時間〜約36時間、約30時間〜約48時間；約36時間〜約2週間、約36時間〜約168時間、約36時間〜約162時間、約36時間〜約156時間、約36時間〜約150時間、約36時間〜約144時間、約36時間〜約138時間、約36時間〜約132時間、約36時間〜約126時間、約36時間〜約120時間、約36時間〜約114時間、約36時間〜約108時間、約36時間〜約102時間、約36時間〜約96時間、約36時間〜約90時間、約36時間〜約84時間、約36時間〜約78時間、約36時間〜約72時間、約36時間〜約66時間、約36時間〜約60時間、約36時間〜約54時間、約36時間〜約48時間、約36時間〜約42時間、約36時間〜約40時間、約40時間〜約42時間；約48時間〜約2週間、約48時間〜約168時間、約48時間〜約162時間、約48時間〜約156時間、約48時間〜約150時間、約48時間〜約144時間、約48時間〜約138時間、約48時間〜約132時間、約48時間〜約126時間、約48時間〜約120時間、約48時間〜約114時間、約48時間〜約108時間、約48時間〜約102時間、約48時間〜約96時間、約48時間〜約90時間、約48時間〜約84時間、約48時間〜約78時間、約48時間〜約72時間、約48時間〜約66時間、約48時間〜約60時間、約48時間〜約54時間；約60時間〜約2週間、約60時間〜約168時間、約60時間〜約162時間、約60時間〜約156時間、約60時間〜約150時間、約60時間〜約144時間、約60時間〜約138時間、約60時間〜約132時間、約60時間〜約126時間、約60時間〜約120時間、約60時間〜約114時間、約60時間〜約108時間、約60時間〜約102時間、約60時間〜約96時間、約60時間〜約90時間、約60時間〜約84時間、約60時間〜約78時間、約60時間〜約72時間、約60時間〜約66時間；約72時間〜約2週間、約72時間〜約168時間、約72時間〜約162時間、約72時間〜約156時間、約72時間〜約150時間、約72時間〜約144時間、約72時間〜約138時間、約72時間〜約132時間、約72時間〜約126時間、約72時間〜約120時間、約72時間〜約114時間、約72時間〜約108時間、約72時間〜約102時間、約72時間〜約96時間、���72時間〜約90時間、約72時間〜約84時間、約72時間〜約78時間；約84時間〜約2週間、約84時間〜約168時間、約84時間〜約162時間、約84時間〜約156時間、約84時間〜約150時間、約84時間〜約144時間、約84時間〜約138時間、約84時間〜約132時間、約84時間〜約126時間、約84時間〜約120時間、約84時間〜約114時間、約84時間〜約108時間、約84時間〜約102時間、約84時間〜約96時間、約84時間〜約90時間；約96時間〜約2週間、約96時間〜約168時間、約96時間〜約162時間、約96時間〜約156時間、約96時間〜約150時間、約96時間〜約144時間、約96時間〜約138時間、約96時間〜約132時間、約96時間〜約126時間、約96時間〜約120時間、約96時間〜約114時間、約96時間〜約108時間、約96時間〜約102時間；約108時間〜約2週間、約108時間〜約168時間、約108時間〜約162時間、約108時間〜約156時間、約108時間〜約150時間、約108時間〜約144時間、約108時間〜約138時間、約108時間〜約132時間、約108時間〜約126時間、約108時間〜約120時間、約108時間〜約114時間；約120時間〜約2週間、約120時間〜約168時間、約120時間〜約162時間、約120時間〜約156時間、約120時間〜約150時間、約120時間〜約144時間、約120時間〜約138時間、約120時間〜約132時間、約120時間〜約126時間；約132時間〜約2週間、約132時間〜約168時間、約132時間〜約162時間、約132時間〜約156時間、約132時間〜約150時間、約132時間〜約144時間、約132時間〜約138時間；約144時間〜約2週間、約144時間〜約168時間、約144時間〜約162時間、約144時間〜約156時間、約144時間〜約150時間；約156時間〜約2週間、約156時間〜約168時間、約156時間〜約162時間；または約168時間〜約2週間である。
【００８２】
本明細書に提供するいずれかの方法の接触の段階のいくつかの態様において、前記期間は、液体細胞培養が指数増殖期にあるときに生じる。本明細書に提供するいずれかの方法の接触の段階のいくつかの態様において、前記期間は、液体細胞培養が定常増殖期にあるときに生じる。いくつかの態様において、接触の段階は、液体細胞培養が死滅期にあるときに生じてもよい。本明細書に提供するいずれかの方法の接触の段階のいくつかの態様において、前記期間は、細胞培養の4日目に生じ、5日目まで続く。
【００８３】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、接触の段階は、1つまたは複数の（例えば2、3、4、5、6、7、8、9、10個の）ポッドを、ある期間（例えば本明細書に説明するいずれかの期間）にわたって、順次または同時に液体細胞培養液に接触させる段階を含んでもよい。
【００８４】
組換えタンパク質
本明細書に説明する組換えタンパク質には、受容体、抗体、抗原結合性抗体断片、抗体断片、融合タンパク質、リガンド、分泌タンパク質、酵素、組換えタンパク質製剤、および、タグを伴うかまたは伴わない任意の組換えタンパク質が非限定的に含まれる。タグの非限定的な例には、蛍光タンパク質（例えば緑色蛍光タンパク質、赤色蛍光タンパク質、シアン蛍光タンパク質、黄色蛍光タンパク質）、放射性同位元素、His-タグ、FLAG-タグ、c-mycタグ、マルトース結合タンパク質（MBP）タグ、アルブミン結合タンパク質（ABP）タグ、バクテリオファージT7エピトープ（T7-タグ）、ビオチンカルボキシルキャリアタンパク質（BCCP）タグ、ブルータングウイルスタグ（B-タグ）、カルモジュリン結合ペプチドタグ、セルロース結合ドメインタグ、キチン結合ドメインタグ、コリン結合ドメインタグ、ガラクトース結合タンパク質タグ、Glu-Gluエピトープタグ、ヒトインフルエンザ赤血球凝集素タグ、Halo Tag（登録商標）、ヒスチジンアフィニティタグ（HAT）、ポリアルギニンタグ（Asp-タグ）、ポリフェニルアラニンタグ（Phe-タグ）、S-TAG、ストレプトアビジン結合ペプチド、ストレプトアビジンタグ、Strep-タグ、酵素（例えばアルカリホスファターゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（CAT）、グルタチオンS-トランスフェラーゼ）が含まれる。いくつかの態様において、組換えタンパク質は多量体タンパク質（例えばヘテロ二量体タンパク質、ホモ二量体タンパク質、または三量体タンパク質）である。
【００８５】
本明細書に説明するいずれかの細胞において発現されてもよい例示的な組換え抗体および組換え抗体断片には、組換えIgG1（例えば組換えヒトIgG1）、組換えIgG2（例えば組換えヒトIgG2）、組換えIgG3（例えば組換えヒトIgG3）、組換えIgG4（例えば組換えヒトIgG4）、組換えIgM（例えば組換えヒトIgM）、組換えIgE（例えば組換えヒトIgE）、組換えIgD（例えば組換えヒトIgD）、組換えIgA（例えば組換えヒトIgA）、組換えFab、組換えscFv、組換えVNAR、組換えVHH、組換えダイアボディ（diabody）（例えば組換え二重特異性ダイアボディ）、組換えscFv-Fc、組換えIgNAR、組換え二重特異性ダイアボディ、組換え軽鎖可変ドメイン、組換え重鎖可変ドメイン、組換えトリアボディ（triabody）、組換えテトラボディ（tetrabody）、組換えタンデムscFv、組換えタンデムscFv-Fc、リコンバイン（recombine）、ant scFv-Fcノブイントゥホール（knobs-into-holes）、組換えscFv-Fc-scFv、組換えF(ab')2、組換えFab-scFv、組換え(Fab'scFv)2、組換えscDiabody-Fc、組換えscDiabody、組換えscDiabody-CH3、組換えIgG-scFv、組換えV-IgG、組換えIgG-V、組換えトゥーインワン（two-in-one）IgG、組換えデュアルV領域IgG、および、共通軽鎖を伴う組換えノブイントゥホールが含まれうる。
【００８６】
いくつかの態様において、組換えタンパク質は抗体である。本明細書において用いる「抗体（antibody）」という用語は、全抗体またはインタクトな抗体（例えばIgM、IgG、IgA、IgD、またはIgE）分子を指す。抗体は本質的に、2つの同一な重鎖タンパク質部分と2つの同一な軽鎖タンパク質部分とを含有する四量体であり、それらタンパク質部分は、ヒンジ領域におけるジスルフィド架橋によって一緒にホールドされ、ともに関連して「Y」形の配座を取る。「抗体」という用語は、モノクローナル抗体、キメラ化抗体またはキメラ抗体、ヒト化抗体、脱免疫化ヒト抗体、および完全ヒト抗体を含む。抗体は、例えば、ヒト、非ヒト霊長類（例えばサル、ヒヒ、またはチンパンジー）、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、アレチネズミ、ハムスター、ラット、およびマウスといった哺乳動物など、任意の様々な生物種において作られるかまたはこれに由来してもよい。いくつかの態様において、抗体は、例えば、その各々の開示内容の全部が参照により本明細書に組み入れられる、Fuh et al., J. Mol. Biol. 340:1073-1093, 2004およびKnappik et al., J. Mol. Biol. 296(11):57-86, 2000に説明されるように、例えば合成的に産生されたオリゴヌクレオチドを介するなどして、合成的に生成されてもよい。いくつかの態様において、抗体は、酵母および／またはヒト細胞における抗体ファージディスプレイによって生成されてもよい。
【００８７】
本明細書において用いる「抗体断片（antibody fragment）」、「抗原結合性断片（antigen-binding fragment）」という用語、または類似の用語は、例えば単鎖抗体（scFv）、Fd断片、Fab断片、Fab'断片、またはF(ab')2断片など、抗原に結合する能力を保持している抗体の断片を指す。scFvは、そのscFvが由来する抗体の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を両方とも含む、単一のポリペプチド鎖である。加えて、ダイアボディ（いずれもその開示内容の全部が参照により本明細書に組み入れられる、Poljak, Structure 2(12):1121-1123, 1994; Hudson et al., J. Immunol. Methods 23(1-2):177-189, 1999）、ミニボディ（minibody）、トリアボディ（Schoonooghe et al., BMC Biotechnol. 9:70, 2009）、ドメイン抗体（「重鎖免疫グロブリン」またはラクダ科抗体としても公知である；Holt et al., Trends Biotechnol. 21(11):484-490, 2003）；および、イントラボディ（intrabody）（その各々の開示内容の全部が参照により本明細書に組み入れられる、Huston et al., Human Antibodies 10(3-4):127-142, 2001; Wheeler et al., Mol. Ther. 8(3):355-366, 2003; Stocks, Drug Discov. Today 9(22): 960-966, 2004）も、抗体断片の定義に含まれ、そして、本明細書に説明する組成物に組み込まれかつ本明細書に説明する方法に用いられてもよい。
【００８８】
いくつかの態様において、組換えタンパク質は二重特異性抗体である。二重特異性抗体は、少なくとも2つの異なる抗原に対して結合特異性を有する、モノクローナルの、好ましくはヒト抗体またはヒト化抗体である。
【００８９】
従来、二重特異性抗体の組換え生産は、2つの重鎖／軽鎖ペアが異なる特異性を有する、2つの免疫グロブリン重鎖／軽鎖ペアの共発現をベースとしている（Milstein and Cuello, Nature 305:537-539, 1983）。望ましい結合特異性（抗体−抗原結合部位）を備えた抗体可変ドメインを、免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合することができる。重鎖可変領域の融合は、ヒンジ領域、CH2領域、およびCH3領域の少なくとも一部を含む、免疫グロブリン重鎖定常ドメインとの融合であることが好ましい。二重特異性抗体を生成するための、現在公知である例示的な方法について、さらに詳しくは、例えばSuresh et al., Methods Enzymol. 121:210, 1986; WO 96/27011; Brennan et al., Science 229:81, 1985; Shalaby et al., J. Exp. Med. 175:217-225, 1992; Kostelny et al., J. Immunol. 148(5):1547-1553, 1992; Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 90:6444-6448, 1993; Gruber et al., J. Immunol. 152:5368, 1994; およびTutt et al., J. Immunol. 147:60, 1991を参照されたい。
【００９０】
二重特異性抗体断片を組換え細胞培養から直接的に作成および単離するための様々な技法もまた説明されている。例えば、ロイシンジッパーを用いて二重特異性抗体が産生されている。例えばKostelny et al., J. Immunol. 148(5):1547-1553, 1992を参照されたい。Fosタンパク質およびJunタンパク質に由来するロイシンジッパーペプチドが、遺伝子融合によって、2つの異なる抗体のFab'部分にリンクされてもよい。抗体ホモ二量体をヒンジ領域において還元してモノマーを形成し、次に再酸化して抗体ヘテロ二量体を形成してもよい。この方法はまた、抗体ホモ二量体の生産に利用されてもよい。Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 90:6444-6448, 1993に説明されている「ダイアボディ」技術は、二重特異性抗体断片を作るための代替的機構を提供している。同断片は、リンカーによって軽鎖可変ドメイン（VL）に接続された重鎖可変ドメイン（VH）を含む；そのリンカーは、同じ鎖上でそれら2つのドメイン間のペアリングを可能にするには短すぎる。したがって、1つの断片のVHおよびVLドメインは、別の断片の相補的なVLおよびVHドメインとペアになるよう強いられ、これにより、2つの抗原結合部位が形成される。単鎖Fv（scFv）二量体の使用による、二重特異性抗体断片を作るための別のストラテジーもまた報告されている。例えばGruber et al., J. Immunol. 152:5368, 1994を参照されたい。代替的に、例えばZapata et al., Protein Eng. 8(10):1057-1062, 1995に説明されているように、抗体は「リニア抗体」であってもよい。簡潔には、これら抗体は、抗原結合領域のペアを形成する、タンデムFdセグメント（VH-CH1-VH-CH1）のペアを含む。リニア抗体は二重特異性または単一特異性であってもよい。
【００９１】
結合価が2より大きい抗体（例えば三重特異性抗体）は、例えばTutt et al., J. Immunol. 147:60, 1991において想定および説明されている。
【００９２】
本開示はまた、Wu et al., Nat Biotechnol. 25(11): 1290-1297, 2007に説明されているデュアル可変ドメイン免疫グロブリン（DVD-Ig）分子など、多重特異性抗体の変異形も包含する。DVD-Ig分子は、2つの異なる親抗体に由来する2つの異なる軽鎖可変ドメイン（VL）が、組換えDNA技法によって、直接的にまたは短いリンカーを介してタンデム型にリンクされ、それに軽鎖定常ドメインが続くように設計される。同様に、重鎖も、タンデム型にリンクされた2つの異なる重鎖可変ドメイン（VH）を含み、それに定常ドメインのCH1およびFc領域が続く。2つの親抗体からDVD-Ig分子を作るための方法は、例えばWO 08/024188およびWO 07/024715にさらに説明されている。いくつかの態様において、二重特異性抗体は、第二の特異性を備えた軽鎖可変領域が全抗体の重鎖可変領域に融合された、タンデム型Fab免疫グロブリンである。そうした抗体は、例えばWO 2015/103072に説明されている。
【００９３】
いくつかの態様において、組換えタンパク質は、ラクダ科抗体またはヒトコブラクダ抗体（例えば、フタコブラクダ（Camelus bactrianus）、ヒトコブラクダ（Calelus dromaderius）、またはアルパカ（Lama paccos）に由来する抗体）などのナノボディ（nanobody）である。そうした抗体は、大多数の哺乳動物に由来する典型的な2鎖抗体（断片）または4鎖抗体（全抗体）と異なり、一般に軽鎖を欠く。米国特許第5,759,808号; Stijlemans et al., J. Biol. Chem. 279:1256-1261, 2004; Dumoulin et al., Nature 424:783-788, 2003; および、Pleschberger et al., Bioconjugate Chem. 14:440-448, 2003を参照されたい。非ヒト起源の他の抗体と同様に、ヒトの配列により近く類似した配列を得るため、ラクダ科抗体のアミノ酸配列を組換えで変更してもよい；すなわち、ナノボディを「ヒト化」し、これにより、抗体の潜在的免疫原性をさらに低減してもよい。
【００９４】
いくつかの態様において、組換えタンパク質は、非抗体足場タンパク質である。これらタンパク質は、一般に、既存の抗原結合性タンパク質をコンビナトリアルケミストリーに基づいて適合させることによって得られる。例えば、異なる抗原に対するアフィニティをライブラリの一部が獲得した、トランスフェリン変異体の多様なライブラリを作り出すため、本明細書に説明するシステムを用いて、ヒトトランスフェリン受容体に対するヒトトランスフェリンの結合部位を多様化してもよい。Ali et al., J. Biol. Chem. 274:24066-24073, 1999。ヒトトランスフェリンの、受容体との結合に関与しない部分は、変化しないままであり、そして、抗体のフレームワーク領域のように、変異体の結合部位を提示するための足場として働く。
【００９５】
非抗体足場タンパク質の足場部分が、例えば、黄色ブドウ球菌（S. aureus）プロテインAのZドメイン、ヒトトランスフェリン、ヒト第10フィブロネクチンIII型ドメイン、ヒトトリプシンインヒビターのクニッツドメイン、ヒトCTLA-4、アンキリン反復タンパク質、ヒトリポカリン （例えばアンチカリン）、ヒトクリスタリン、ヒトユビキチン、または、テッポウウリ（E. elaterium）由来のトリプシンインヒビターの全部または一部を含んでもよいことが、当業者に理解されるであろう。
【００９６】
いくつかの態様において、組換えタンパク質は融合タンパク質である。本明細書に説明するいずれかの細胞によって産生されてもよい融合タンパク質の非限定的な例には、キメラ抗体（例えばヒト化抗体）；標識された抗体 （例えば、酵素または蛍光タンパク質タグで標識された抗体）；がん細胞の表面受容体に特異的に結合する、タンパク質性細胞毒で標識されたタンパク質リガンド；インビボで抗体の半減期を延長させる融合パートナーを伴う抗体（例えば、ヒトアルブミンに融合された抗体）；1つの軽鎖可変ドメインと1つの重鎖可変ドメインとが免疫細胞（例えばT細胞、マクロファージ、好中球、もしくは単球）上の抗原に結合し、かつ、他方の軽鎖可変ドメインと他方の重鎖可変ドメインとが標的細胞（例えばがん細胞もしくはウイルス感染細胞）または病原体（例えばウイルス、マイコバクテリウム、もしくは寄生生物）上の抗原に結合する、二重特異性抗体、が含まれる。
【００９７】
組換えタンパク質のさらなる例には、多様性要素が1つまたは複数の定常要素とフレーム内で融合された、リガンド、酵素、ペプチド、scFv、非抗体足場タンパク質、およびキメラ抗原受容体分子などが含まれるが、それに限定されるわけではない。いくつかの態様において、組換えタンパク質は、Fab、全抗体、MHCクラスI分子、MHCクラスI分子、T細胞受容体分子、二重特異性抗体、三重特異性抗体、インテグリン、腫瘍成長因子受容体の二量体、およびGタンパク質共役受容体などの多量体タンパク質であるが、それに限定されるわけではない。
【００９８】
細胞
液体細胞培養液は、例えば真核細胞など、任意の細胞を含んでもよい。本明細書において用いる「真核細胞（eukaryotic cell）」という用語は、膜に囲まれた明確な核を有する細胞を指す。そうした細胞には、例えば、哺乳類（例えば齧歯類、非ヒト霊長類、もしくはヒト）、昆虫、真菌、もしくは植物の細胞が含まれてもよい。いくつかの態様において、真核細胞は、出芽酵母（Saccharomyces cerevisiae）などの酵母細胞である。いくつかの態様において、真核細胞は、哺乳類、鳥類、植物、または昆虫の細胞など、より高等な真核細胞である。
【００９９】
組換えタンパク質を産生できる哺乳類細胞の非限定的な例には、例えば、齧歯類（例えばマウス、ラット、もしくはハムスター）またはヒトの細胞が含まれる。いくつかの態様において、哺乳類細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞、ヒト網膜PER.C6細胞、ヒトアミノサイト（aminocyte）CAP細胞、マウス黒色腫NS0細胞もしくはSp2/0細胞、アヒルEB66細胞、ハムスターBHK細胞、ヒト胎児腎臓（HEK 293）細胞、COS細胞、またはニワトリ由来B細胞株DT40である。いくつかの態様において、HEK 293細胞は、Freestyle HEK293-F細胞、HEK 293 6F、HEK293FT、HEK 293T細胞、またはExpi293F細胞である。CHO細胞は、接着性の単層として成長するかまたは懸濁液中で成長する上皮細胞である。TjioおよびPuck（Tjio et al., J. Exp. Med. 108: 259-271, 1958）によって単離された元の細胞から派生したCHO細胞株は、元のCHO細胞株と比較して、核酸配列の点突然変異、欠失、または組込みを含む可能性がある。CHO細胞のサブグループには、CHO DP-12細胞、CHO-K1細胞、CHO/dhfr-細胞、CHO-S細胞、CHO-GS細胞、CHO-K1 DUX B11細胞、CHO pro3-細胞、CHO- DG44細胞、CHO GAT-細胞、またはFreestyle CHO-S細胞が含まれうるが、それに限定されるわけではない。いくつかの態様において、真核細胞は初代細胞または細胞株である。いくつかの態様において、哺乳類細胞はがん細胞である。いくつかの態様において、哺乳類細胞は、「Cancer Cell Line Encyclopedia」（Barretina et al., Nature 483(7391):603-607, 2012、またはForbes et al., Curr. Protoc. Hum. Genet. 2008）に記載されたものを含む、ヒトがん細胞株である。いくつかの態様において、真核細胞は、Tリンパ球系細胞 （例えば初代T細胞もしくはT細胞株）、TCR発現を欠くT細胞由来細胞株（例えばTorres et al., J. Immunol. 2003を参照）、または、pro-B細胞（例えばUrashima et al., Am. J. Hematol. 1994を参照）、pre-B細胞（例えばAdachi et al., DNA Cell Biol. 2006を参照）、およびB細胞などのBリンパ球系細胞、ならびに、これらに由来する細胞株である。いくつかの態様において、B系細胞株は、1624-5（Holms et al., J. Exp. Med. 1986; Principato et al., Mol. Cell Biol. 1990）などのマウスpre-B細胞株、または、Ba/F3（Thermo Scientificより市販）などのpro-B細胞株である。哺乳類細胞は、分泌バージョンの組換えタンパク質を発現してもよい。いくつかの態様において、分泌バージョンの組換えタンパク質は一過性に発現される。いくつかの態様において、分泌バージョンの組換えタンパク質は安定的に発現される。
【０１００】
いくつかの態様において、液体細胞培養液は、昆虫細胞（例えばバキュロウイルス−昆虫細胞、ショウジョウバエ（Drosophila）細胞（例えばショウジョウバエS2細胞）、イラクサギンウワバ（Trichoplusia ni）細胞、鱗翅目細胞）、酵母細胞（例えば酵母細胞、ピキア・パストリス（Pichia pastoris）細胞）、植物細胞、または細菌細胞（例えば大腸菌細胞、バチルス・ブレビス（Baccillus brevis）細胞、巨大菌（Bacillus megaterium）細胞、枯草菌（Bacillus subtilis）細胞、カウロバクター・クレセンタス（Caulobacter crescentis）細胞）を含んでもよい。
【０１０１】
当業者には、本明細書に説明するタンパク質およびベクターが細胞（例えば哺乳類細胞、昆虫細胞、酵母細胞、細菌細胞、または植物細胞）内に導入されてもよいことが理解されるであろう。ベクター、およびベクターを細胞内に導入するための方法の、非限定的な例を、本明細書に説明する。
【０１０２】
細胞を培養する方法
細胞を培養する方法は当技術分野において周知である。細胞は、成長、増殖、生存能の持続、および分化に好都合である条件下で、インビトロで維持されうる。一般的に、細胞は、細胞の生存能および成長を支持するために必要な成長因子および栄養補助剤を含む液体培地に細胞を接触させることによって、培養されうる。「液体培地（liquid culture medium）」という用語は、細胞（例えば本明細書に説明するいずれかの細胞）がインビトロで成長または増殖できるだけの十分な栄養素を含有する流体を意味する。例えば液体培地は、アミノ酸（例えば20のアミノ酸）、プリン（例えばヒポキサンチン）、ピリミジン （例えばチミジン）、コリン、イノシトール、チアミン、葉酸、ビオチン、カルシウム、ナイアシンアミド、ピリドキシン、リボフラビン、チミジン、シアノコバラミン、ピルビン酸塩、リポ酸、マグネシウム、グルコース、ナトリウム、カリウム、鉄、銅、亜鉛、および重炭酸ナトリウムのうち、1つまたは複数を含有してもよい。
【０１０３】
いくつかの態様において、液体培地は哺乳動物由来の血清を含有してもよい。いくつかの態様において、液体培地は、哺乳動物由来の血清または別の抽出物を含有しない（限定液体培地）。いくつかの態様において、液体培地は、微量金属、哺乳類の成長ホルモン、および／または哺乳類の成長因子を含有してもよい。液体培地の別の例は最少培地（例えば、無機塩、炭素源、および水のみを含有する培地）である。液体培地の非限定的な例を本明細書に説明する。液体培地のさらなる例は当技術分野において公知であり、かつ市販されている。液体細胞培地は、任意の密度の、本明細書に説明する細胞（例えば任意の密度の哺乳類細胞）を含有してもよい。
【０１０４】
本明細書において用いる「動物由来成分不含液体培地（animal-derived component free liquid culture medium）」という用語は、哺乳動物に由来するいかなる成分も（例えばタンパク質または血清を）含有しない液体培地を意味する。本明細書において用いる「無血清液体培地（serum-free liquid culture medium）」という用語は、哺乳類の血清を含有しない液体培地を意味する。本明細書において用いる「血清含有液体培地（serum-containing liquid culture medium）」という用語は、哺乳類の血清を含有する液体培地を意味する。本明細書において用いる「液体合成培地（chemically-defined liquid culture medium）」という用語は、専門用語であり、すべての化学成分が公知である液体培地を意味する。例えば、液体合成培地は、ウシ胎仔血清、ウシ血清アルブミン、またはヒト血清アルブミンを含有しない；これらの製剤は典型的にアルブミンおよび脂質の複雑な混合物を含有するからである。本明細書において用いる「無タンパク質液体培地（protein-free liquid culture medium）」という用語は、いかなるタンパク質も（例えば検出可能ないかなるタンパク質も）含有しない液体培地を意味する。
【０１０５】
いくつかの態様において、細胞は、例えば約1日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、約40日間、約35日間、約30日間、約20日間、約25日間、約20日間、約15日間、約10日間、約8日間、約6日間、約4日間、もしくは約2日間（包含的）；約2日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、約40日間、約35日間、約30日間、約20日間、約25日間、約20日間、約15日間、約10日間、約8日間、約6日間、もしくは約4日間（包含的）；約4日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、約40日間、約35日間、約30日間、約20日間、約25日間、約20日間、約15日間、約10日間、約8日間、もしくは約6日間（包含的）；約6日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、約40日間、約35日間、約30日間、約20日間、約25日間、約20日間、約15日間、約10日間、もしくは約8日間（包含的）；約8日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、約40日間、約35日間、約30日間、約20日間、約25日間、約20日間、約15日間、もしくは約10日間（包含的）；約10日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、約40日間、約35日間、約30日間、約20日間、約25日間、約20日間、もしくは約15日間（包含的）；約15日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、約40日間、約35日間、約30日間、約20日間、約25日間、もしくは約20日間（包含的）；約20日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、約40日間、約35日間、約30日間、約20日間、もしくは約25日間（包含的）；約25日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、約40日間、約35日間、もしくは約30日間（包含的）；約30日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、約40日間、もしくは約35日間（包含的）；約35日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、約50日間、約45日間、もしくは約40日間（包含的）；約40日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、約55日間、もしくは約50日間（包含的）；約50日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、約60日間、もしくは約55日間（包含的）；約55日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、約65日間、もしくは約60日間（包含的）；約60日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、約70日間、もしくは約65日間（包含的）；約65日間〜約90日間、約85日間、約80日間、約75日間、もしくは約70日間（包含的）；約70日間〜約90日間、約85日間、約80日間、もしくは約75日間（包含的）；約75日間〜約90日間、約85日間、もしくは約80日間（包含的）；約80日間〜約90日間、もしくは約85日間（包含的）；または約85日間〜約90日間（包含的））などの長い期間にわたって、約20℃〜約40℃（例えば約39℃、約38℃、約37℃、約36℃、もしくは約35℃（包含的）；約34℃〜約40℃、約39℃、約38℃、約37℃、約36℃、約34℃、約32℃、約30℃、約28℃、約26℃、約24℃、約22℃、約20℃（包含的）；約20℃〜約40℃、約20℃〜約38℃、約20℃〜約36℃、約20℃〜約34℃、約20℃〜約32℃、約20℃〜約30℃、約20℃〜約28℃、約20℃〜約26℃、約20℃〜約24℃、約20℃〜約22℃（包含的）；約22℃〜約40℃、約22℃〜約38℃、約22℃〜約36℃、約22℃〜約34℃、約22℃〜約32℃、約22℃〜約30℃、約22℃〜約28℃、約22℃〜約26℃、約22℃〜約24℃（包含的）；約24℃〜約40℃、約24℃〜約38℃、約24℃〜約36℃、約24℃〜約34℃、約24℃〜約32℃、約24℃〜約30℃、約24℃〜約28℃、約24℃〜約26℃（包含的）；約26℃〜約40℃、約26℃〜約38℃、約26℃〜約36℃、約26℃〜約34℃、約26℃〜約32℃、約26℃〜約30℃、約26℃〜約28℃（包含的）；約28℃〜約40℃、約28℃〜約38℃、約28℃〜約36℃、約28℃〜約34℃、約28℃〜約32℃、約28℃〜約30℃、約30℃〜約40℃、約30℃〜約38℃、約30℃〜約36℃、約30℃〜約34℃、約30℃〜約32℃（包含的）；約32℃〜約40℃、約32℃〜約38℃、約32℃〜約36℃、約32℃〜約34℃、約34℃〜約40℃、約34℃〜約38℃、約34℃〜約36℃、約36℃〜約40℃、約36℃〜約38℃、約38℃〜約40℃（包含的）；約35℃〜約40℃、約39℃、約38℃、もしくは約37℃（包含的）；約36℃〜約40℃、約39℃、もしくは約38℃（包含的）；約37℃〜約40℃、もしくは約39℃（包含的）；または約38℃〜約40℃（包含的）で、約5%〜約12%（例えば約5%〜約10%、約5%〜約8%、約5%〜約7%、約6%〜約8%、約6%〜約10%、または約8%〜約10%）のCO2中で、培養されてもよい。いくつかの態様において、液体細胞培養液は、培養中に、ある期間にわたって（例えば持続的、周期的に）撹拌される。「撹拌（agitation）」という用語は、バイオリアクター内の液体培地の一部分をかき混ぜるかまたはその他動かすことを意味する。これは、例えばバイオリアクター内の液体培地中の溶存酸素濃度を高めるなどのために行われる。撹拌は、例えば器具（例えば振盪、揺動、もしくは傾動用プラットフォーム）またはプロペラなど、当技術分野において公知である任意の方法を用いて行われてもよい。バイオリアクター内の液体培地の一部分の撹拌を行うために用いられうる、例示的なデバイスおよび方法は、当技術分野において公知である。
【０１０６】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、液体細胞培養はパーフュージョン培養である。「パーフュージョン培養（perfusion culture）」という用語は専門用語である；そして、周期的または持続的に第一の液体培地を除去し、かつ、同時またはそのすぐ後に実質的に同体積の第二の液体培地を培養容器に添加することによって、培養容器（例えば本明細書に説明するいずれかの培養容器）内に存在する細胞を培養することを指す。いくつかの実施例において、（例えば培地の再供給レートが毎日であるなどの）培養期間中、インクリメンタルな（incremental）期間（例えば約24時間の期間、約1分間〜約24時間の期間、または24時間を超える期間）にわたって除去および添加される、第一の液体培地の体積に、インクリメンタルな変化（例えば増加または減少）が存在する。各日に除去および置換される培地の割合は、培養される特定の細胞、初回播種密度、および、特定の期間における細胞密度によって、異なりうる。
【０１０７】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、液体細胞培養はフェッドバッチ培養である。「フェッドバッチ培養（fed batch culture）」という用語は専門用語である；そして、液体細胞培養液から第一の液体培地または第二の液体培地を実質的または有意に除去することを伴わずに、周期的または持続的に第二の液体培地を第一の液体培地に添加することによって、培養容器内に存在する細胞を培養することを指す。第二の液体培地は第一の液体培地と同じであってもよい。フェッドバッチ培養のいくつかの実施例において、第二の液体培地は第一の液体培地の濃縮形態である。フェッドバッチ培養のいくつかの実施例において、第二の液体培地はドライパウダーとして添加される。
【０１０８】
液体細胞培養液は培養容器内に配されてもよい。培養容器の非限定的な例には、振盪フラスコ、振盪チューブ、ウェイブバッグ、T-フラスコ、トリプルフラスコ、スピナーフラスコ、ローラーボトル、バイオリアクター（例えばパーフュージョンバイオリアクター、フェッドバッチバイオリアクター）、またはマルチウェルプレート（例えば4ウェル細胞培養プレート、6ウェル細胞培養プレート、8ウェル細胞培養プレート、12ウェル細胞培養プレート、24ウェル細胞培養プレート、24ウェル細胞培養プレート）が含まれる。
【０１０９】
いくつかの態様において、培養容器は、約0.2 mL〜10,000 L（例えば約0.2 mL〜約9,000 L、約0.2 mL〜約8,000 L、約0.2 mL〜約7,000 L、約0.2 mL〜約6,000 L、約0.2 mL〜約5,000 L、約0.2 mL〜約4,000 L、約0.2 mL〜約3,000 L、約0.2 mL〜約2,000 L、約0.2 mL〜約1,000 L、約0.2 mL〜約950 L、約0.2 mL〜約900 L、約0.2 mL〜約850 L、約0.2 mL〜約800 L、約0.2 mL〜約750 mL、約0.2 mL〜約700 L、約0.2 mL〜約650 mL、約0.2 mL〜約600 L、約0.2 mL〜約550 L、約0.2 mL〜約500 L、約0.2 mL〜約450 L、約0.2 mL〜約400 L、約0.2 mL〜約300 L、約0.2 mL〜約200 L、約0.2 mL〜約190 L、約0.2 mL〜約180 L、約0.2 mL〜約170 L、約0.2 mL〜約160 L、約0.2 mL〜約150 L、約0.2 mL〜約140 L、約0.2 mL〜約130 L、約0.2 mL〜約120 L、約0.2 mL〜約110 L、約0.2 mL〜約100 L、約0.2 mL〜約90 L、約0.2 mL〜約85 L、約0.2 mL〜約80 L、約0.2 mL〜約75 L、約0.2 mL〜約70 L、約0.2 mL〜約65 L、約0.2 mL〜約60 L、約0.2 mL〜約55 L、約0.2 mL〜約50 L、約0.2 mL〜約45 L、約0.2 mL〜約40 L、約0.2 mL〜約35 L、約0.2 mL〜約30 L、約0.2 mL〜約25 L、約0.2 mL〜約20 L、約0.2 mL〜約15 L、約0.2 mL〜約10 L、約0.2 mL〜約5 L、約0.2 mL〜約4 L、約0.2 mL〜約4 L、約0.2 mL〜約3 L、約0.2 mL〜約2 L、約0.2 mL〜約1 L；約0.2 mL〜約900 mL、約0.2 mL〜約800 mL、約0.2 mL〜約700 mL、約0.2 mL〜約600 mL、約0.2 mL〜約500 mL、約0.2 mL〜約400 mL、約0.2 mL〜約300 mL、約0.2 mL〜約250 mL、約0.2 mL〜約100 mL、約0.2 mL〜約90 mL、約0.2 mL〜約80 mL、約0.2 mL〜約70 mL、約0.2 mL〜約60 mL、約0.2 mL〜約50 mL、約0.2 mL〜約40 mL、約0.2 mL〜約30 mL、約0.2 mL〜約25 mL、約0.2 mL〜約20 mL、約0.2 mL〜約15 mL、約0.2 mL〜約10 mL、約0.2 mL〜約5 mL、約0.2 mL〜約4 mL、約0.2 mL〜約3 mL、約0.2 mL〜約2 mL、約0.2 mL〜約1 mL；約0.4 mL〜10,000 L、約0.4 mL〜約9,000 L、約0.4 mL〜約8,000 L、約0.4 mL〜約7,000 L、約0.4 mL〜約6,000 L、約0.4 mL〜約5,000 L、約0.4 mL〜約4,000 L、約0.4 mL〜約3,000 L、約0.4 mL〜約2,000 L、約0.4 mL〜約1,000 L、約0.4 mL〜約950 L、約0.4 mL〜約900 L、約0.4 mL〜約850 L、約0.4 mL〜約800 L、約0.4 mL〜約750 L、約0.4 mL〜約700 L、約0.4 mL〜約650 L、約0.4 mL〜約600 L、約0.4 mL〜約550 L、約0.4 mL〜約500 L、約0.4 mL〜約450 L、約0.4 mL〜約400 L、約0.4 mL〜約350 L、約0.4 mL〜約300 L、約0.4 mL〜約250 L、約0.4 mL〜約200 L、約0.4 mL〜約190 L、約0.4 mL〜約180 L、約0.4 mL〜約170 L、約0.4 mL〜約160 L、約0.4 mL〜約150 L、約0.4 mL〜約140 L、約0.4 mL〜約130 L、約0.4 mL〜約120 L、約0.4 mL〜約110 L、約0.4 mL〜約100 L、約0.4 mL〜約90 L、約0.4 mL〜約85 L、約0.4 mL〜約80 L、約0.4 mL〜約75 L、約0.4 mL〜約70 L、約0.4 mL〜約65 L、約0.4 mL〜約60 L、約0.4 mL〜約55 L、約0.4 mL〜約50 L、約0.4 mL〜約45 L、約0.4 mL〜約40 L、約0.4 mL〜約35 L、約0.4 mL〜約30 L、約0.4 mL〜約25 L、約0.4 mL〜約20 L、約0.4 mL〜約15 L、約0.4 mL〜約10 L、約0.4 mL〜約5 L、約0.4 mL〜約4 L、約0.4 mL〜約4 L、約0.4 mL〜約3 L、約0.4 mL〜約2 L、約0.4 mL〜約1 L；約0.4 mL〜約900 mL、約0.4 mL〜約800 mL、約0.4 mL〜約700 mL、約0.4 mL〜約600 mL、約0.4 mL〜約500 mL、約0.4 mL〜約400 mL、約0.4 mL〜約300 mL、約0.4 mL〜約250 mL、約0.4 mL〜約100 mL、約0.4 mL〜約90 mL、約0.4 mL〜約80 mL、約0.4 mL〜約70 mL、約0.4 mL〜約60 mL、約0.4 mL〜約50 mL、約0.4 mL〜約40 mL、約0.4 mL〜約30 mL、約0.4 mL〜約25 mL、約0.4 mL〜約20 mL、約0.4 mL〜約15 mL、約0.4 mL〜約10 mL、約0.4 mL〜約5 mL、約0.4 mL〜約4 mL、約0.4 mL〜約3 mL、約0.4 mL〜約2 mL、約0.4 mL〜約1 mL；約0.6 mL〜10,000 L、約0.6 mL〜約9,000 L、約0.6 mL〜約8,000 L、約0.6 mL〜約7,000 L、約0.6 mL〜約6,000 L、約0.6 mL〜約5,000 L、約0.6 mL〜約4,000 L、約0.6 mL〜約3,000 L、約0.6 mL〜約2,000 L、約0.6 mL〜約1,000 L、約0.6 mL〜約950 L、約0.6 mL〜約900 L、約0.6 mL〜約850 L、約0.6 mL〜約800 L、約0.6 mL〜約750 L、約0.6 mL〜約700 L、約0.6 mL〜約650 L、約0.6 mL〜約600 L、約0.6 mL〜約550 L、約0.6 mL〜約500 L、約0.6 mL〜約450 L、約0.6 mL〜約400 L、約0.6 mL〜約350 L、約0.6 mL〜約300 L、約0.6 mL〜約250 L、約0.6 mL〜約200 L、約0.6 mL〜約190 L、約0.6 mL〜約180 L、約0.6 mL〜約170 L、約0.6 mL〜約160 L、約0.6 mL〜約150 L、約0.6 mL〜約140 L、約0.6 mL〜約130 L、約0.6 mL〜約120 L、約0.6 mL〜約110 L、約0.6 mL〜約100 L、約0.6 mL〜約90 L、約0.6 mL〜約85 L、約0.6 mL〜約80 L、約0.6 mL〜約75 L、約0.6 mL〜約70 L、約0.6 mL〜約65 L、約0.6 mL〜約60 L、約0.6 mL〜約55 L、約0.6 mL〜約50 L、約0.6 mL〜約45 L、約0.6 mL〜約40 L、約0.6 mL〜約35 L、約0.6 mL〜約30 L、約0.6 mL〜約25 L、約0.6 mL〜約20 L、約0.6 mL〜約15 L、約0.6 mL〜約10 L、約0.6 mL〜約5 L、約0.6 mL〜約4 L、約0.6 mL〜約4 L、約0.6 mL〜約3 L、約0.6 mL〜約2 L、約0.6 mL〜約1 L；約0.6 mL〜約900 mL、約0.6 mL〜約800 mL、約0.6 mL〜約700 mL、約0.6 mL〜約600 mL、約0.6 mL〜約500 mL、約0.6 mL〜約400 mL、約0.6 mL〜約300 mL、約0.6 mL〜約250 mL、約0.6 mL〜約100 mL、約0.6 mL〜約90 mL、約0.6 mL〜約80 mL、約0.6 mL〜約70 mL、約0.6 mL〜約60 mL、約0.6 mL〜約50 mL、約0.6 mL〜約40 mL、約0.6 mL〜約30 mL、約0.6 mL〜約25 mL、約0.6 mL〜約20 mL、約0.6 mL〜約15 mL、約0.6 mL〜約10 mL、約0.6 mL〜約5 mL、約0.6 mL〜約4 mL、約0.6 mL〜約3 mL、約0.6 mL〜約2 mL、約0.6 mL〜約1 mL；約0.8 mL〜10,000 L、約0.8 mL〜約9,000 L、約0.8 mL〜約8,000 L、約0.8 mL〜約7,000 L、約0.8 mL〜約6,000 L、約0.8 mL〜約5,000 L、約0.8 mL〜約4,000 L、約0.8 mL〜約3,000 L、約0.8 mL〜約2,000 L、約0.8 mL〜約1,000 L、約0.5 mL〜約950 L、約0.8 mL〜約900 L、約0.8 mL〜約850 L、約0.8 mL〜約800 L、約0.8 mL〜約750 L、約0.8 mL〜約700 L、約0.8 mL〜約650 L、約0.8 mL〜約600 L、約0.8 mL〜約550 L、約0.8 mL〜約500 L、約0.8 mL〜約450 L、約0.8 mL〜約400 L、約0.8 mL〜約350 L、約0.8 mL〜約300 L、約0.8 mL〜約250 L、約0.8 mL〜約200 L、約0.8 mL〜約190 L、約0.8 mL〜約180 L、約0.8 mL〜約170 L、約0.8 mL〜約160 L、約0.8 mL〜約150 L、約0.8 mL〜約140 L、約0.8 mL〜約130 L、約0.8 mL〜約120 L、約0.8 mL〜約110 L、約0.8 mL〜約100 L、約0.8 mL〜約90 L、約0.8 mL〜約85 L、約0.8 mL〜約80 L、約0.8 mL〜約75 L、約0.8 mL〜約70 L、約0.8 mL〜約65 L、約0.8 mL〜約60 L、約0.8 mL〜約55 L、約0.8 mL〜約50 L、約0.8 mL〜約45 L、約0.8 mL〜約40 L、約0.8 mL〜約35 L、約0.8 mL〜約30 L、約0.8 mL〜約25 L、約0.8 mL〜約20 L、約0.8 mL〜約15 L、約0.8 mL〜約10 L、約0.8 mL〜約5 L、約0.8 mL〜約4 L、約0.8 mL〜約4 L、約0.8 mL〜約3 L、約0.8 mL〜約2 L、約0.8 mL〜約1 L；約0.8 mL〜約900 mL、約0.8 mL〜約800 mL、約0.8 mL〜約700 mL、約0.8 mL〜約600 mL、約0.8 mL〜約500 mL、約0.8 mL〜約400 mL、約0.8 mL〜約300 mL、約0.8 mL〜約250 mL、約0.8 mL〜約100 mL、約0.8 mL〜約90 mL、約0.8 mL〜約80 mL、約0.8 mL〜約70 mL、約0.8 mL〜約60 mL、約0.8 mL〜約50 mL、約0.8 mL〜約40 mL、約0.8 mL〜約30 mL、約0.8 mL〜約25 mL、約0.8 mL〜約20 mL、約0.8 mL〜約15 mL、約0.8 mL〜約10 mL、約0.8 mL〜約5 mL、約0.8 mL〜約4 mL、約0.8 mL〜約3 mL、約0.8 mL〜約2 mL、約0.8 mL〜約1 mL；約1 mL〜10,000 L、約1 mL〜約9,000 L、約1 mL〜約8,000 L、約1 mL〜約7,000 L、約1 mL〜約6,000 L、約1 mL〜約5,000 L、約1 mL〜約4,000 L、約1 mL〜約3,000 L、約1 mL〜約2,000 L、約1 mL〜約1,000 L、約1 mL〜約950 L、約1 mL〜約900 L、約1 mL〜約850 L、約1 mL〜約800 L、約1 mL〜約750 L、約1 mL〜約700 L、約1 mL〜約650 L、約1 mL〜約600 L、約1 mL〜約550 L、約1 mL〜約500 L、約1 mL〜約450 L、約1 mL〜��400 L、約1 mL〜約350 L、約1 mL〜約300 L、約1 mL〜約250 L、約1 mL〜約200 L、約1 mL〜約190 L、約1 mL〜約180 L、約1 mL〜約170 L、約1 mL〜約160 L、約1 mL〜約150 L、約1 mL〜約140 L、約1 mL〜約130 L、約1 mL〜約120 L、約1 mL〜約110 L、約1 mL〜約100 L、約1 mL〜約90 L、約1 mL〜約80 L、約1 mL〜約70 L、約1 mL〜約60 L、約1 mL〜約50 L、約1 mL〜約40 L、約1 mL〜約30 L、約1 mL〜約20 L、約1 mL〜約10 L、約1 mL〜約5 L、約1 mL〜約4 L、約1 mL〜約3 L、約1 mL〜約2 L、約1 mL〜約1 L、約1 mL〜約900 mL、約1 mL〜約800 mL、約1 mL〜約700 mL、約1 mL〜約600 mL、約1 mL〜約500 mL、約1 mL〜約400 mL、約1 mL〜約300 mL、約1 mL〜約250 mL、約1 mL〜約100 mL、約1 mL〜約90 mL、約1 mL〜約80 mL、約1 mL〜約70 mL、約1 mL〜約60 mL、約1 mL〜約50 mL、約1 mL〜約40 mL、約1 mL〜約30 mL、約1 mL〜約25 mL、約1 mL〜約20 mL、約1 mL〜約15 mL、約1 mL〜約10 mL、約1 mL〜約5 mL；約1 mL〜約4 mL、約1 mL〜約3 mL、約1 mL〜約2 mL；約2 mL〜10,000 L、約2 mL〜約9,000 L、約2 mL〜約8,000 L、約2 mL〜約7,000 L、約2 mL〜約6,000 L、約2 mL〜約5,000 L、約2 mL〜約4,000 L、約2 mL〜約3,000 L、約2 mL〜約2,000 L、約2 mL〜約1,000 L、約2 mL〜約950 L、約2 mL〜約900 L、約2 mL〜約850 L、約2 mL〜約800 L、約2 mL〜約750 L、約2 mL〜約700 L、約2 mL〜約650 L、約2 mL〜約600 L、約2 mL〜約550 L、約2 mL〜約500 L、約2 mL〜約450 L、約2 mL〜約400 L、約2 mL〜約350 L、約2 mL〜約300 L、約2 mL〜約250 L、約2 mL〜約200 L；約2 mL〜約190 L、約2 mL〜約180 L、約2 mL〜約170 L、約2 mL〜約160 L、約2 mL〜約150 L、約2 mL〜約140 L、約2 mL〜約130 L、約2 mL〜約120 L、約2 mL〜約110 L、約2 mL〜約100 L、約2 mL〜約90 L、約2 mL〜約80 L、約2 mL〜約70 L、約2 mL〜約60 L、約2 mL〜約50 L、約2 mL〜約40 L、約2 mL〜約30 L、約2 mL〜約20 L、約2 mL〜約10 L、約2 mL〜約5 L、約2 mL〜約4 L、約2 mL〜約3 L、約2 mL〜約2 L、約2 mL〜約1 L、約2 mL〜約900 mL、約2 mL〜約800 mL、約2 mL〜約700 mL、約2 mL〜約600 mL、約2 mL〜約500 mL、約2 mL〜約400 mL、約2 mL〜約300 mL、約2 mL〜約250 mL、約2 mL〜約100 mL、約2 mL〜約90 mL、約2 mL〜約80 mL、約2 mL〜約70 mL、約2 mL〜約60 mL、約2 mL〜約50 mL、約2 mL〜約40 mL、約2 mL〜約30 mL、約2 mL〜約25 mL、約2 mL〜約20 mL、約2 mL〜約15 mL、約2 mL〜約10 mL、約2 mL〜約5 mL；約5 mL〜10,000 L、約5 mL〜約9,000 L、約5 mL〜約8,000 L、約5 mL〜約7,000 L、約5 mL〜約6,000 L、約5 mL〜約5,000 L、約5 mL〜約4,000 L、約5 mL〜約3,000 L、約5 mL〜約2,000 L、約5 mL〜約1,000 L、約5 mL〜約950 L、約5 mL〜約900 L、約5 mL〜約850 L、約5 mL〜約800 L、約5 mL〜約750 L、約5 mL〜約700 L、約5 mL〜約650 L、約5 mL〜約600 L、約5 mL〜約550 L、約5 mL〜約500 L、約5 mL〜約450 L、約5 mL〜約400 L、約5 mL〜約350 L、約5 mL〜約300 L、約5 mL〜約250 L、約5 mL〜約200 L；約5 mL〜約190 L、約5 mL〜約180 L、約5 mL〜約170 L、約5 mL〜約160 L、約5 mL〜約150 L、約5 mL〜約140 L、約5 mL〜約130 L、約5 mL〜約120 L、約5 mL〜約110 L、約5 mL〜約100 L、約5 mL〜約90 L、約5 mL〜約80 L、約5 mL〜約70 L、約5 mL〜約60 L、約5 mL〜約50 L、約5 mL〜約40 L、約5 mL〜約30 L、約5 mL〜約20 L、約5 mL〜約10 L、約5 mL〜約5 L、約5 mL〜約4 L、約5 mL〜約3 L、約5 mL〜約5 L、約5 mL〜約1 L、約5 mL〜約900 mL、約5 mL〜約800 mL、約5 mL〜約700 mL、約5 mL〜約600 mL、約5 mL〜約500 mL、約5 mL〜約400 mL、約5 mL〜約300 mL、約5 mL〜約250 mL、約5 mL〜約100 mL、約5 mL〜約90 mL、約5 mL〜約80 mL、約5 mL〜約70 mL、約5 mL〜約60 mL、約5 mL〜約50 mL、約5 mL〜約40 mL、約5 mL〜約30 mL、約5 mL〜約25 mL、約5 mL〜約20 mL、約5 mL〜約15 mL、約5 mL〜約10 mL；約10 mL〜10,000 L、約10 mL��約9,000 L、約10 mL〜約8,000 L、約10 mL〜約7,000 L、約10 mL〜約6,000 L、約10 mL〜約5,000 L、約10 mL〜約4,000 L、約10 mL〜約3,000 L、約10 mL〜約2,000 L、約10 mL〜約1,000 
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L〜約750 L、約100 L〜約800 L、約100 L〜約850 L、約100 L〜約900 L、約100 L〜約950 L、約100 L〜約1,000 L、約100 L〜約2,000 L、約100 L〜約3,000 L、約100 L〜約4,000 L、約100 L〜約5,000 L、約100 L〜約6,000 L、約100 L〜約7,000 L、約100 L〜約8,000 L、約100 L〜約9,000 L、約100 L〜10,000 L；約120 L〜約130 L、約120 L〜約140 L、約120 L〜約150 L、約120 L〜約160 L、約120 L〜約170 L、約120 L〜約180 L、約120 L〜約190 L、約120 L〜約200 L、約120 L〜約250 L、約120 L〜約300 L、約120 L〜約350 L、約120 L〜約400 L、約120 L〜約450 L、約120 L〜約500 L、約120 L〜約550 L、約120 L〜約600 L、約120 L〜約650 L、約120 L〜約700 L、約120 L〜約750 L、約120 L〜約800 L、約120 L〜約850 L、約120 L〜約900 L、約120 L〜約950 L、約120 L〜約1,000 L、約120 L〜約2,000 L、約120 L〜約3,000 L、約120 L〜約4,000 L、約120 L〜約5,000 L、約120 L〜約6,000 L、約120 L〜約7,000 L、約120 L〜約8,000 L、約120 L〜約9,000 L、約120 L〜10,000 L；約150 L〜約160 L、約150 L〜約170 L、約150 L〜約180 L、約150 L〜約190 L、約150 L〜約200 L、約150 L〜約250 L、約150 L〜約300 L、約150 L〜約350 L、約150 L〜約400 L、約150 L〜約450 L、約150 L〜約500 L、約150 L〜約550 L、約150 L〜約600 L、約150 L〜約650 L、約150 L〜約700 L、約150 L〜約750 L、約150 L〜約800 L、約150 L〜約850 L、約150 L〜約900 L、約150 L〜約950 L、約150 L〜約1,000 L、約150 L〜約2,000 L、約150 L〜約3,000 L、約150 L〜約4,000 L、約150 L〜約5,000 L、約150 L〜約6,000 L、約150 L〜約7,000 L、約150 L〜約8,000 L、約150 L〜約9,000 L、約150 L〜10,000 L；約200 L〜約250 L、約200 L〜約300 L、約200 L〜約350 L、約200 L〜約400 L、約200 L〜約450 L、約200 L〜約500 L、約200 L〜約550 L、約200 L〜約600 L、約200 L〜約650 L、約200 L〜約700 L、約200 L〜約750 L、約200 L〜約800 L、約200 L〜約850 L、約200 L〜約900 L、約200 L〜約950 L、約200 L〜約1,000 L、約200 L〜約2,000 L、約200 L〜約3,000 L、約200 L〜約4,000 L、約200 L〜約5,000 L、約200 L〜約6,000 L、約200 L〜約7,000 L、約200 L〜約8,000 L、約200 L〜約9,000 L、約200 L〜10,000 L；約250 L〜約300 L、約250 L〜約350 L、約250 L〜約400 L、約250 L〜約450 L、約250 L〜約500 L、約250 L〜約550 L、約250 L〜約600 L、約250 L〜約650 L、約250 L〜約700 L、約250 L〜約750 L、約250 L〜約800 L、約250 L〜約850 L、約250 L〜約900 L、約250 L〜約950 L、約250 L〜約1,000 L、約250 L〜約2,000 L、約250 L〜約3,000 L、約250 L〜約4,000 L、約250 L〜約5,000 L、約250 L〜約6,000 L、約250 L〜約7,000 L、約250 L〜約8,000 L、約250 L〜約9,000 L、約250 L〜10,000 L；約300 L〜約350 L、約300 L〜約400 L、約300 L〜約450 L、約300 L〜約500 L、約300 L〜約550 L、約300 L〜約600 L、約300 L〜約650 L、約300 L〜約700 L、約300 L〜約750 L、約300 L〜約800 L、約300 L〜約850 L、約300 L〜約900 L、約300 L〜約950 L、約300 L〜約1,000 L、約300 L〜約2,000 L、約300 L〜約3,000 L、約300 L〜約4,000 L、約300 L〜約5,000 L、約300 L〜約6,000 L、約300 L〜約7,000 L、約300 L〜約8,000 L、約300 L〜約9,000 L、約300 L〜10,000 L；約350 L〜約400 L、約350 L〜約450 L、約350 L〜約500 L、約350 L〜約550 L、約350 L〜約600 L、約350 L〜約650 L、約350 L〜約700 L、約350 L〜約750 L、約350 L〜約800 L、約350 L〜約850 L、約350 L〜約900 L、約350 L〜約950 L、約350 L〜約1,000 L、約350 L〜約2,000 L、約350 L〜約3,000 L、約350 L〜約4,000 L、約350 L〜約5,000 L、約350 L〜約6,000 L、約350 L〜約7,000 L、約350 L〜約8,000 L、約350 L〜約9,000 L、約350 L〜10,000 L；約400 L〜約450 L、約400 L〜約500 L、約400 L〜約550 L、約400 L〜約600 L、約400 L〜約650 L、約400 L〜約700 L、約400 L〜約750 L、約400 L〜約800 L、約400 L〜約850 L、約400 L〜約900 L、約400 L〜約950 L、約400 L〜約1,000 L、約400 L〜約2,000 L、約400 L〜約3,000 L、約400 L〜約4,000 L、約400 L〜約5,000 L、約400 L〜約6,000 L、約400 L〜約7,000 L、約400 L〜約8,000 L、約400 L〜約9,000 L、約400 L〜10,000 L；約450 L〜約500 L、約450 L〜約550 L、約450 L〜約600 L、約450 L〜約650 L、約450 L〜約700 L、約450 L〜約750 L、約450 L〜約800 L、約450 L〜約850 L、約450 L〜約900 L、約450 L〜約950 L、約450 L〜約1,000 L、約450 L〜約2,000 L、約450 L〜約3,000 L、約450 L〜約4,000 L、約450 L〜約5,000 L、約450 L〜約6,000 L、約450 L〜約7,000 L、約450 L〜約8,000 L、約450 L〜約9,000 L、約450 L〜10,000 L；約500 L〜約550 L、約500 L〜約600 L、約500 L〜約650 L、約500 L〜約700 L、約500 L〜約750 L、約500 L〜約800 L、約500 L〜約850 L、約500 L〜約900 L、約500 L〜約950 L、約500 L〜約1,000 L、約500 L〜約2,000 L、約500 L〜約3,000 L、約500 L〜約4,000 L、約500 L〜約5,000 L、約500 L〜約6,000 L、約500 L〜約7,000 L、約500 L〜約8,000 L、約500 L〜約9,000 L、約500 L〜10,000 L；約600 L〜約650 L、約600 L〜約700 L、約600 L〜約750 L、約600 L〜約800 L、約600 L〜約850 L、約600 L〜約900 L、約600 L〜約950 L、約600 L〜約1,000 L、約600 L〜約2,000 L、約600 L〜約3,000 L、約600 L〜約4,000 L、約600 L〜約5,000 L、約600 L〜約6,000 L、約600 L〜約7,000 L、約600 L〜約8,000 L、約600 L〜約9,000 L、約600 L〜10,000 L；約700 L〜約750 L、約700 L〜約800 L、約700 L〜約850 L、約700 L〜約900 L、約700 L〜約950 L、約700 L〜約1,000 L、約700 L〜約2,000 L、約700 L〜約3,000 L、約700 L〜約4,000 L、約700 L〜約5,000 L、約700 L〜約6,000 L、約700 L〜約7,000 L、約700 L〜約8,000 L、約700 L〜約9,000 L、約700 L〜10,000 L；約800 L〜約850 L、約800 L〜約900 L、約800 L〜約950 L、約800 L〜約1,000 L、約800 L〜約2,000 L、約800 L〜約3,000 L、約800 L〜約4,000 L、約800 L〜約5,000 L、約800 L〜約6,000 L、約800 L〜約7,000 L、約800 L〜約8,000 L、約800 L〜約9,000 L、約800 L〜10,000 L；約900 L〜約950 L、約900 L〜約1,000 L、約900 L〜約2,000 L、約900 L〜約3,000 L、約900 L〜約4,000 L、約900 L〜約5,000 L、約900 L〜約6,000 L、約900 L〜約7,000 L、約900 L〜約8,000 L、約900 L〜約9,000 L、約900 L〜10,000 L；約950 L〜約10,000 L）の総内部体積を有する。
【０１１０】
ベクター
組換えタンパク質（例えば本明細書に説明するいずれかの組換えタンパク質）をエンコードする核酸またはベクターを含んでもよい、液体細胞培養液中の細胞を、本明細書に提供する。本明細書に説明するいずれかの組換えタンパク質をエンコードする核酸は、発現ベクター内に含まれてもよい。当業者は、本明細書に説明する組換えタンパク質を作るために好適な発現ベクターを選択し、そしてその発現ベクターを用いて細胞中で組換えタンパク質を発現させることができるであろう。例えば、発現ベクターの選択において、ベクターが細胞中で複製できること、および／または、細胞の染色体中に組み込まれることが必要である可能性があるので、細胞が考慮されなければならない。組換えタンパク質の産生に用いられうる例示的な発現ベクターについても後述する。
【０１１１】
本開示に基づく「ベクター（vector）」は、細胞内で組換えタンパク質（例えば本明細書に説明するいずれかの組換えタンパク質）の発現を誘導できるポリヌクレオチドである。ベクターは、核酸の断片を宿主細胞（例えば本明細書に説明するいずれかの細胞）内に送達する、「分子キャリア（molecular carrier）」のように機能する。ベクターは、制御配列を含む発現カセットを含んでもよい。外来ポリヌクレオチドが、そこから発現されるようベクター核酸の発現カセット内に挿入されてもよい。本発明に基づくベクターは円または直線状の形態で存在してもよい。「ベクター」という用語はまた、外来核酸断片の転移を可能にする、人工染色体または同様のそれぞれの（respective）ポリヌクレオチドも含む。それぞれのベクターは、本明細書に説明するような組換えタンパク質を細胞内で産生するための発現ベクターとして用いられてもよい。
【０１１２】
本明細書に説明する組換えタンパク質をコードするDNAを運び、かつ（例えば真核細胞、哺乳類細胞、昆虫細胞、酵母細胞、細菌細胞の）形質転換に好適である、適切なベクターを構築する方法は、当技術分野において周知である。例えば、Ausubel et al., Eds. "Current Protocols in Molecular Biology" Current Protocols, 1993; およびSambrook et al., Eds. "Molecular Cloning: A Laboratory Manual," 2nd ed., Cold Spring Harbor Press, 1989を参照されたい。
【０１１３】
核酸を細胞内に導入する方法
本明細書に開示するいずれかの核酸および発現ベクターを細胞（例えば真核細胞、植物細胞）内に導入するため、当技術分野において公知である様々な異なる方法が用いられてよい。核酸を細胞内に導入するために用いられうる方法の非限定的な例には、リポフェクション、トランスフェクション、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、リン酸カルシウムトランスフェクション、デンドリマーベースのトランスフェクション、陽イオンポリマートランスフェクション、細胞スクイージング、ソノポレーション、形質転換、光トランスフェクション、インパレクション（impalection）、流体力学的送達、マグネトフェクション、ウイルス形質導入（例えばアデノウイルスおよびレンチウイルス形質導入）、およびナノ粒子トランスフェクションが含まれる。核酸を細胞内に導入するこれらおよび他の方法は当技術分野において周知である。いくつかの態様において、細胞内に導入された核酸は一過性に発現される。いくつかの態様において、細胞内に導入された核酸は細胞ゲノム内に組み込まれる。
【０１１４】
ポッドを液体細胞培養液に接触させる段階
接触の段階は、前記少なくとも1つのエリアの少なくとも一部分（例えば、少なくとも10%、少なくとも20%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%）が液体細胞培養液に接触するという結果をもたらす。いくつかの態様において、接触の段階は、クロマトグラフィ樹脂による組換えタンパク質の捕捉という結果をもたらす条件下で行われる。いくつかの態様において、接触の段階は無菌条件下で行われる。いくつかの態様において、接触の段階は、（例えば、揺動、傾動、（例えばプロペラを用いた）回転撹拌、ボルテックス、および／またはエアレーションによる）液体細胞培養液の撹拌中に行われてもよい。いくつかの態様において、接触の段階は、液体細胞培養が指数増殖期または定常増殖期にあるときに生じてもよい。いくつかの態様において、接触の段階は、液体細胞培養が死滅期にあるときに生じてもよい。本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、接触の段階は、液体細胞培養液の清澄上清中で生じてもよい。
【０１１５】
いくつかの態様において、接触の段階は、約20℃〜約40℃（例えば約20℃〜約40℃、約20℃〜約25℃、約20℃〜約30℃、約20℃〜約35℃、約20℃〜約37℃、約20℃〜約38℃、約20℃〜約39℃、約27℃〜約30℃、約25℃〜約30℃、約25℃〜約37℃、約25℃〜約38℃、約25℃〜約39℃、約25℃〜約40℃、約27℃〜約30℃、約27℃〜約35℃、約27℃〜約37℃、約27℃〜約38℃、約27℃〜約39℃、約30℃〜約35℃、約30℃〜約37℃、約30℃〜約38℃、約30℃〜約40℃、約35℃〜約38℃、または約32℃〜約38℃）の温度で行われる。
【０１１６】
いくつかの態様において、接触の段階は、約4℃〜約18℃（例えば約4℃〜約16℃、約4℃〜約14℃、約4℃〜約12℃、約4℃〜約10℃、約4℃〜約8℃、約4℃〜約6℃、約6℃〜約18℃、約6℃〜約16℃、約6℃〜約14℃、約6℃〜約12℃、約6℃〜約10℃、約6℃〜約8℃、約8℃〜約18℃、約8℃〜約16℃、約8℃〜約14℃、約8℃〜約12℃、約8℃〜約10℃、約10℃〜約18℃、約10℃〜約16℃、約10℃〜約14℃、約10℃〜約12℃、約12℃〜約18℃、約12℃〜約16℃、約12℃〜約14℃、約14℃〜約18℃、約14℃〜約16℃、または約16℃〜約18℃）の温度で行われる。
【０１１７】
いくつかの態様において、接触の段階は、ポッドが、水平から（例えば、培養容器（例えば本明細書に説明するいずれかの培養容器）の底から）、角度90°±50°（例えば、角度50°〜140°、角度50°〜135°、角度50°〜130°、角度50°〜125°、角度50°〜120°、角度50°〜115°、角度50°〜110°、角度50°〜105°、角度50°〜100°、角度50°〜95°、角度50°〜90°、角度50°〜85°、角度50°〜80°、角度50°〜75°、角度50°〜70°、角度50°〜65°、角度50°〜60°、角度55°〜140°、角度55°〜135°、角度55°〜130°、角度55°〜125°、角度55°〜120°、角度55°〜115°、角度55°〜110°、角度55°〜105°、角度55°〜100°、角度55°〜95°、角度55°〜90°、角度55°〜85°、角度55°〜80°、角度55°〜75°、角度55°〜70°、角度55°〜65°、角度55°〜60°、角度60°〜140°、角度60°〜135°、角度60°〜130°、角度60°〜125°、角度60°〜120°、角度60°〜115°、角度60°〜110°、角度60°〜105°、角度60°〜100°、角度60°〜95°、角度60°〜90°、角度60°〜85°、角度60°〜80°、角度60°〜75°、角度60°〜70°、角度60°〜65°、角度65°〜140°、角度65°〜135°、角度65°〜130°、角度65°〜125°、角度65°〜120°、角度65°〜115°、角度65°〜110°、角度65°〜105°、角度65°〜100°、角度65°〜95°、角度65°〜90°、角度65°〜85°、角度65°〜80°、角度65°〜75°、角度65°〜70°、角度70°〜140°、角度70°〜135°、角度70°〜130°、角度70°〜125°、角度70°〜120°、角度70°〜115°、角度70°〜110°、角度70°〜105°、角度70°〜100°、角度70°〜95°、角度70°〜90°、角度70°〜85°、角度70°〜80°、角度70°〜75°、角度75°〜140°、角度75°〜135°、角度75°〜130°、角度75°〜125°、角度75°〜120°、角度75°〜115°、角度75°〜110°、角度75°〜105°、角度75°〜100°、角度75°〜95°、角度75°〜90°、角度75°〜85°、角度75°〜80°、角度80°〜140°、角度80°〜135°、角度80°〜130°、角度80°〜125°、角度80°〜120°、角度80°〜115°、角度80°〜110°、角度80°〜105°、角度80°〜100°、角度80°〜95°、角度80°〜90°、角度80°〜85°、角度85°〜140°、角度85°〜135°、角度85°〜130°、角度85°〜125°、角度85°〜120°、角度85°〜115°、角度85°〜110°、角度85°〜105°、角度85°〜100°、角度85°〜95°、角度85°〜90°、角度90°〜140°、角度90°〜135°、角度90°〜130°、角度90°〜125°、角度90°〜120°、角度90°〜115°、角度90°〜110°、角度90°〜105°、角度90°〜100°、角度90°〜95°、角度95°〜140°、角度95°〜135°、角度95°〜130°、角度95°〜125°、角度95°〜120°、角度95°〜115°、角度95°〜110°、角度95°〜105°、角度95°〜100°、角度100°〜140°、角度100°〜135°、角度100°〜130°、角度100°〜125°、角度100°〜120°、角度100°〜115°、角度100°〜110°、角度100°〜105°、角度105°〜140°、角度105°〜135°、角度105°〜130°、角度105°〜125°、角度105°〜120°、角度105°〜115°、角度105°〜110°、角度110°〜140°、角度110°〜135°、角度110°〜130°、角度110°〜125°、角度110°〜120°、角度110°〜115°、角度115°〜140°、角度115°〜135°、角度115°〜130°、角度115°〜125°、角度115°〜120°、角度120°〜140°、角度120°〜135°、角度120°〜130°、角度120°〜125°、角度125°〜140°、角度125°〜135°、角度125°〜130°、角度130°〜140°、角度130°〜135°、角度135°〜140°、角度50°、角度55°、角度60°、角度65°、角度70°、角度75°、角度80°、角度85°、角度90°、角度95°、角度100°、角度105°、角度110°、角度115°、角度120°、角度125°、角度130°、角度135°、角度140°）にある時に生じてもよい。
【０１１８】
いくつかの態様において、接触の段階は、ポッドが、水平から（例えば、培養容器（例えば本明細書に説明するいずれかの培養容器）の底から）、角度180°±35°（例えば、角度145°〜180°、角度145°〜175°、角度145°〜170°、角度145°〜165°、角度145°〜160°、角度145°〜155°、角度145°〜150°、角度150°〜180°、角度150°〜175°、角度150°〜170°、角度150°〜165°、角度150°〜160°、角度150°〜155°、角度155°〜180°、角度155°〜175°、角度155°〜170°、角度155°〜165°、角度155°〜160°、角度160°〜180°、角度160°〜175°、角度160°〜170°、角度160°〜165°、角度165°〜180°、角度165°〜175°、角度165°〜170°、角度170°〜180°、角度170°〜175°、角度175°〜180°、角度145°、角度150°、角度155°、角度160°、角度165°、角度170°、角度175°、角度180°）にある時に生じてもよい。
【０１１９】
液体培地、および／または、クロマトグラフィ樹脂を含むポッドを滅菌する段階
いくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂を含むポッドが滅菌されてもよい。滅菌の方法の非限定的な例には、濾過、ガンマ線照射、電子ビーム照射、蒸気滅菌、オートクレービング、および化学的滅菌（例えば、塩化水素、ナトリウム-N-ラウロイルサルコシネート、水酸化ナトリウム、またはエタノール）が含まれる。
【０１２０】
いくつかの態様においてクロマトグラフィ樹脂は無菌である。本明細書において用いる「無菌保証水準（sterile assurance level）」という用語は、単一のユニット（例えばクロマトグラフィ樹脂）が、滅菌プロセスに供された後に非無菌状態になる確率を指す。いくつかの態様において、クロマトグラフィ樹脂は、約1 x 10-5〜約1 x 10-15（例えば、約1 x 10-5〜約1 x 10-10、約1 x 10-5〜約1 x 10-15、約1 x 10-6〜約1 x 10-10、約1 x 10-6〜約1 x 10-12、約1 x 10-6〜約1 x 10-15、約1 x 10-5、約1 x 10-6、約1 x 10-7、約1 x 10-7、約1 x 10-8、約1 x 10-9、約1 x 10-10、約1 x 10-11、約1 x 10-12、約1 x 10-13、約1 x 10-14、約1 x 10-15）の無菌性保証水準を有する。
【０１２１】
いくつかの態様において、液体細胞培養液中に存在する液体細胞培地は、無菌であるかかつ／または滅菌されてもよい。
【０１２２】
クロマトグラフィ樹脂を洗浄する段階
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、方法は、洗浄する段階をさらに含む。いくつかの態様において、洗浄の段階は、接触の段階と溶離の段階との間に行われる。いくつかの態様において、洗浄の段階は、洗浄緩衝剤を用いた、1回または複数回の洗浄（例えば、1、2、3、4、5、6、7、8、9、または10回）を含む。いくつかの態様において、洗浄の段階は、汚染物質または非特異的タンパク質を除去または実質的に除去する。いくつかの態様において、洗浄の段階は、ポッドのクロマトグラフィ樹脂が液体細胞培養液と接触される前にこれを平衡させる。
【０１２３】
いくつかの態様において、洗浄の段階は、ポッドを液体細胞培養液および／または培養容器から取り出す前に行われる。いくつかの態様において、洗浄の段階は、ポッドを液体細胞培養液および／または培養容器から取り出した後に行われる。いくつかの態様において、洗浄の段階は、ポッドを液体細胞培養液および／または培養容器から取り出した後に行われるのであり、かつ、洗浄緩衝剤をポッド内部に直接ピペッティングする段階を伴ってもよい。
【０１２４】
いくつかの態様において、洗浄の段階は、約2℃〜約25℃（例えば2℃〜約4℃、約2℃〜約6℃、約2℃〜約8℃、約2℃〜約10℃、約2℃〜約12℃、約4℃〜約6℃、約4℃〜約8℃、約4℃〜約10℃、約4℃〜約12℃、約6℃〜約8℃、約6℃〜約10℃、約6℃〜約12℃、約10℃〜約12℃、約10℃〜約25℃、約10℃〜約22℃、約10℃〜約20℃、約10℃〜約18℃、約10℃〜約14℃、約12℃〜約14℃、約12℃〜約16℃、約16℃〜約18℃、約16℃〜約20℃、約16℃〜約25℃、約20℃〜約22℃、約20℃〜約25℃、または約22℃〜約25℃）で行われる。
【０１２５】
いくつかの態様において、洗浄の段階は、約2 mM〜約6 mM（例えば約2 mM〜約5 mM、約2 mM〜約4 mM、約2 mM〜約3 mM、約3 mM〜約6 mM、約3 mM〜約5 mM、約3 mM〜約4 mM、約4 mM〜約6 mM、約4 mM〜約5 mM、約5 mM〜約6 mM、約2 mM、約3 mM、約4 mM、約5 mM、約6 mM）の酢酸アンモニウムを含有する洗浄緩衝剤を用いて行われる。いくつかの態様において、洗浄緩衝剤は塩類および／または洗剤をさらに含んでもよい。当技術分野において公知であるように、洗浄用緩衝剤は、組換えタンパク質をクロマトグラフィ樹脂から分離させるようには意図されていない。
【０１２６】
いくつかの態様において、洗浄の段階は、約0.05 mL〜約1,000 mL、約0.05 mL〜約950 mL、約0.05 mL〜約900 mL、約0.05 mL〜約850 mL、約0.05 mL〜約800 mL、約0.05 mL〜約750 mL、約0.05 mL〜約700 mL、約0.05 mL〜約650 mL、約0.05 mL〜約600 mL、約0.05 mL〜約550 mL、約0.05 mL〜約500 mL、約0.05 mL〜約450 mL、約0.05 mL〜約400 mL、約0.05 mL〜約350 mL、約0.05 mL〜約300 mL、約0.05 mL〜約250 mL、約0.05 mL〜約200 mL、約0.05 mL〜約150 mL、約0.05 mL〜約100 mL、約0.05 mL〜約90 mL、約0.05 mL〜約80 mL、約0.05 mL〜約70 mL、約0.05 mL〜約60 mL、約0.05 mL〜約50 mL、約0.05 mL〜約45 mL、約0.05 mL〜約40 mL、約0.05 mL〜約35 mL、約0.05 mL〜約30 mL、約0.05 mL〜約25 mL、約0.05 mL〜約20 mL、約0.05 mL〜約15 mL、約0.05 mL〜約10 mL、約0.05 mL〜約8 mL、約0.05 mL〜約6 mL、約0.05 mL〜約5 mL、約0.05 mL〜約4 mL、約0.05 mL〜約3 mL、約0.05 mL〜約2 mL、約0.05 mL〜約1 mL、約0.05 mL〜約0.5 mL、約0.05 mL〜約0.1 mL、約0.1 mL〜約1,000 mL、約0.1 mL〜約950 mL、約0.1 mL〜約900 mL、約0.1 mL〜約850 mL、約0.1 mL〜約800 mL、約0.1 mL〜約750 mL、約0.1 mL〜約700 mL、約0.1 mL〜約650 mL、約0.1 mL〜約600 mL、約0.1 mL〜約550 mL、約0.1 mL〜約500 mL、約0.1 mL〜約450 mL、約0.1 mL〜約400 mL、約0.1 mL〜約350 mL、約0.1 mL〜約300 mL、約0.1 mL〜約250 mL、約0.1 mL〜約200 mL、約0.1 mL〜約150 mL、約0.1 mL〜約100 mL、約0.1 mL〜約90 mL、約0.1 mL〜約80 mL、約0.1 mL〜約70 mL、約0.1 mL〜約60 mL、約0.1 mL〜約50 mL、約0.1 mL〜約45 mL、約0.1 mL〜約40 mL、約0.1 mL〜約35 mL、約0.1 mL〜約30 mL、約0.1 mL〜約25 mL、約0.1 mL〜約20 mL、約0.1 mL〜約15 mL、約0.1 mL〜約10 mL、約0.1 mL〜約8 mL、約0.1 mL〜約6 mL、約0.1 mL〜約5 mL、約0.1 mL〜約4 mL、約0.1 mL〜約3 mL、約0.1 mL〜約2 mL、約0.1 mL〜約1 mL、約0.1 mL〜約0.5 mL、約0.5 mL〜約1,000 mL、約0.5 mL〜約950 mL、約0.5 mL〜約900 mL、約0.5 mL〜約850 mL、約0.5 mL〜約800 mL、約0.5 mL〜約750 mL、約0.5 mL〜約700 mL、約0.5 mL〜約650 mL、約0.5 mL〜約600 mL、約0.5 mL〜約550 mL、約0.5 mL〜約500 mL、約0.5 mL〜約450 mL、約0.5 mL〜約400 mL、約0.5 mL〜約350 mL、約0.5 mL〜約300 mL、約0.5 mL〜約250 mL、約0.5 mL〜約200 mL、約0.5 mL〜約150 mL、約0.5 mL〜約100 mL、約0.5 mL〜約90 mL、約0.5 mL〜約80 mL、約0.5 mL〜約70 mL、約0.5 mL〜約60 mL、約0.5 mL〜約50 mL、約0.5 mL〜約45 mL、約0.5 mL〜約40 mL、約0.5 mL〜約35 mL、約0.5 mL〜約30 mL、約0.5 mL〜約25 mL、約0.5 mL〜約20 mL、約0.5 mL〜約15 mL、約0.5 mL〜約10 mL、約0.5 mL〜約8 mL、約0.5 mL〜約6 mL、約0.5 mL〜約5 mL、約0.5 mL〜約4 mL、約0.5 mL〜約3 mL、約0.5 mL〜約2 mL、約0.5 mL〜約1 mL、1 mL〜約1 L、約1 mL〜約900 mL、約1 mL〜約800 mL、約1 mL〜約700 mL、約1 mL〜約600 mL、約1 mL〜約500 mL、約1 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【０１２７】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、洗浄の段階は、1つまたは複数（例えば、本明細書に説明するいずれかの洗浄緩衝剤のうち2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、または8つ）の洗浄緩衝剤を含んでもよい。
【０１２８】
組換えタンパク質を溶離する段階
いくつかの態様において、本明細書に説明するいずれかのポッドが、溶離の段階を行う前に液体培地から取り出されてもよい。いくつかの態様において、ポッドのアフィニティクロマトグラフィ樹脂はプロテインA樹脂である。ポッドのアフィニティクロマトグラフィ樹脂がプロテインA樹脂であるいくつかの態様において、溶離の段階は、酸性のpHを伴う溶離緩衝剤を用いて行われる。いくつかの態様において、溶離緩衝剤はアルギニンまたはクエン酸塩を含む。いくつかの態様において、溶離緩衝剤は、約0.01 M〜約1 M（例えば約0.01 M〜約1 M、約0.01 M〜約0.8 M、約0.01 M〜約0.6 M、約0.01 M〜約0.4 M、約0.01 M〜約0.2 M、約0.01 M〜約0.1 M、約0.01 M〜約0.08 M、約0.01 M〜約0.06 M、約0.01 M〜約0.05 M、約0.01 M〜約0.04 M、約0.01 M〜約0.02 M；0.02 M〜約1 M、約0.02 M〜約0.8 M、約0.02 M〜約0.6 M、約0.02 M〜約0.4 M、約0.02 M〜約0.2 M、約0.02 M〜約0.1 M、約0.02 M〜約0.08 M、約0.02 M〜約0.06 M、約0.02 M〜約0.05 M、約0.02 M〜約0.04 M、0.04 M〜約1 M、約0.04 M〜約0.8 M、約0.04 M〜約0.6 M、約0.04 M〜約0.4 M、約0.04 M〜約0.2 M、約0.04 M〜約0.1 M、約0.04 M〜約0.08 M、約0.04 M〜約0.06 M、約0.04 M〜約0.05 M、0.05 M〜約1 M、約0.05 M〜約0.8 M、約0.05 M〜約0.6 M、約0.05 M〜約0.4 M、約0.05 M〜約0.2 M、約0.05 M〜約0.1 M、約0.05 M〜約0.08 M、約0.05 M〜約0.06 M、0.06 M〜約1 M、約0.06 M〜約0.8 M、約0.06 M〜約0.6 M、約0.06 M〜約0.4 M、約0.06 M〜約0.2 M、約0.06 M〜約0.1 M、約0.06 M〜約0.08 M、0.08 M〜約1 M、約0.08 M〜約0.8 M、約0.08 M〜約0.6 M、約0.08 M〜約0.4 M、約0.08 M〜約0.2 M、約0.08 M〜約0.1 M、0.1 M〜約1 M、約0.1 M〜約0.8 M、約0.1 M〜約0.6 M、約0.1 M〜約0.4 M、約0.1 M〜約0.2 M、0.2 M〜約1 M、約0.2 M〜約0.8 M、約0.2 M〜約0.6 M、約0.2 M〜約0.4 M、0.4 M〜約1 M、約0.4 M〜約0.8 M、約0.4 M〜約0.6 M、0.6 M〜約1 M、約0.6 M〜約0.8 M、0.8 M〜約1 M、約0.01 M、約0.02 M、約0.05 M、約0.05 M、約0.06 M、約0.08 M、約0.1 M、約0.2 M、約0.4 M、約0.5 M、約0.6 M、約0.8 M、または約1 M）のアルギニンまたはクエン酸塩を含む。いくつかの態様において、溶離緩衝剤は、約0.1〜約1 M（例えば約0.1〜約0.9 M、約0.1 M〜約0.8 M、約0.1 M〜約0.7 M、約0.1 M〜約0.6 M、約0.1 M〜約0.5 M、約0.1 M〜約0.4 M、約0.1 M〜約0.3 M、約0.1 M〜約0.2 M、約0.2 M〜約1 M、約0.2 M〜約0.9 M、約0.2 M〜約0.8 M、約0.2 M〜約0.7 M、約0.2 M〜約0.6 M、約0.2 M〜約0.5 M、約0.2 M〜約0.4 M、約0.2 M〜約0.3 M、約0.3 M〜約1 M、約0.3 M〜約0.9 M、約0.3 M〜約0.8 M、約0.3 M〜約0.7 M、約0.3 M〜約0.6 M、約0.3 M〜約0.5、約0.3 M〜約0.4 M、約0.4 M〜約1 M、約0.4 M〜約0.9 M、約0.4〜約0.8 M、約0.4 M〜約0.7 M、約0.4 M〜約0.6 M、約0.4 M〜約0.5 M、約0.5 M〜約1 M、約0.5 M〜約0.9 M、約0.5 M〜約0.8 M、約0.5 M〜約0.7 M、約0.5 M〜約0.6 M、約0.6 M〜約1 M、約0.6 M〜約0.9 M、約0.6 M〜約0.8 M、約0.6 M〜約0.7 M、約0.7 M〜約1 M、約0.7 M〜約0.9 M、約0.7 M〜約0.8 M、約0.8 M〜約1 M、約0.8 M〜約0.9 M、約0.9 M〜約1 M）の酢酸を含む。
【０１２９】
いくつかの態様において、溶離緩衝剤は、約0.1 Mのグリシン（pH 3.0）または約0.1 Mのクエン酸（pH 3.0）を含む。本明細書において用いるいずれかのクロマトグラフィ樹脂のいくつかの態様において、溶離された組換えタンパク質は、約1 Mのトリス（pH 9.0）を含有する緩衝剤を用いて中和される。本明細書において用いるいずれかのクロマトグラフィ樹脂のいくつかの態様において、溶離された組換えタンパク質は、約1 MのHEPES（pH 7.0）（例えば約0.01 M〜約1 M、約0.01 M〜約0.8 M、約0.01 M〜約0.6 M、約0.01 M〜約0.4 M、約0.01 M〜約0.2 M、約0.01〜約0.1 M、約0.01 M〜約0.05 M；約0.02 M〜約1 M、約0.02 M〜約0.8 M、約0.02 M〜約0.6 M、約0.02 M〜約0.4 M、約0.02 M〜約0.2 M、約0.02〜約0.1 M、約0.05 M〜約1 M、約0.05 M〜約0.8 M、約0.05 M〜約0.6 M、約0.05 M〜約0.4 M、約0.05 M〜約0.2 M、約0.05〜約0.1 M、約0.1 M〜約1 M、約0.1 M〜約0.8 M、約0.1 M〜約0.6 M、約0.1 M〜約0.4 M、約0.1 M〜約0.2 M、約0.2 M〜約1 M、約0.2 M〜約0.8 M、約0.2 M〜約0.6 M、約0.2 M〜約0.4 M、約0.4 M〜約1 M、約0.4 M〜約0.8 M、約0.4 M〜約0.6 M、約0.6 M〜約1 M、約0.6 M〜約0.8 M、または約0.8 M〜約1 M）を含有する緩衝剤を用いて中和される。
【０１３０】
いくつかの態様において、溶離は、約0.05 mL〜約1,000 mL、約0.05 mL〜約950 mL、約0.05 mL〜約900 mL、約0.05 mL〜約850 mL、約0.05 mL〜約800 mL、約0.05 mL〜約750 mL、約0.05 mL〜約700 mL、約0.05 mL〜約650 mL、約0.05 mL〜約600 mL、約0.05 mL〜約550 mL、約0.05 mL〜約500 mL、約0.05 mL〜約450 mL、約0.05 mL〜約400 mL、約0.05 mL〜約350 mL、約0.05 mL〜約300 mL、約0.05 mL〜約250 mL、約0.05 mL〜約200 mL、約0.05 mL〜約150 mL、約0.05 mL〜約100 mL、約0.05 mL〜約90 mL、約0.05 mL〜約80 mL、約0.05 mL〜約70 mL、約0.05 mL〜約60 mL、約0.05 mL〜約50 mL、約0.05 mL〜約45 mL、約0.05 mL〜約40 mL、約0.05 mL〜約35 mL、約0.05 mL〜約30 mL、約0.05 mL〜約25 mL、約0.05 mL〜約20 mL、約0.05 mL〜約15 mL、約0.05 mL〜約10 mL、約0.05 mL〜約8 mL、約0.05 mL〜約6 mL、約0.05 mL〜約5 mL、約0.05 mL〜約4 mL、約0.05 mL〜約3 mL、約0.05 mL〜約2 mL、約0.05 mL〜約1 mL、約0.05 mL〜約0.5 mL、約0.05 mL〜約0.1 mL、約0.1 mL〜約1,000 mL、約0.1 mL〜約950 mL、約0.1 mL〜約900 mL、約0.1 mL〜約850 mL、約0.1 mL〜約800 mL、約0.1 mL〜約750 mL、約0.1 mL〜約700 mL、約0.1 mL〜約650 mL、約0.1 mL〜約600 mL、約0.1 mL〜約550 mL、約0.1 mL〜約500 mL、約0.1 mL〜約450 mL、約0.1 mL〜約400 mL、約0.1 mL〜約350 mL、約0.1 mL〜約300 mL、約0.1 mL〜約250 mL、約0.1 mL〜約200 mL、約0.1 mL〜約150 mL、約0.1 mL〜約100 mL、約0.1 mL〜約90 mL、約0.1 mL〜約80 mL、約0.1 mL〜約70 mL、約0.1 mL〜約60 mL、約0.1 mL〜約50 mL、約0.1 mL〜約45 mL、約0.1 mL〜約40 mL、約0.1 mL〜約35 mL、約0.1 mL〜約30 mL、約0.1 mL〜約25 mL、約0.1 mL〜約20 mL、約0.1 mL〜約15 mL、約0.1 mL〜約10 mL、約0.1 mL〜約8 mL、約0.1 mL〜約6 mL、約0.1 mL〜約5 mL、約0.1 mL〜約4 mL、約0.1 mL〜約3 mL、約0.1 mL〜約2 mL、約0.1 mL〜約1 mL、約0.1 mL〜約0.5 mL、約0.5 mL〜約1,000 mL、約0.5 mL〜約950 mL、約0.5 mL〜約900 mL、約0.5 mL〜約850 mL、約0.5 mL〜約800 mL、約0.5 mL〜約750 mL、約0.5 mL〜約700 mL、約0.5 mL〜約650 mL、約0.5 mL〜約600 mL、約0.5 mL〜約550 mL、約0.5 mL〜約500 mL、約0.5 mL〜約450 mL、約0.5 mL〜約400 mL、約0.5 mL〜約350 mL、約0.5 mL〜約300 mL、約0.5 mL〜約250 mL、約0.5 mL〜約200 mL、約0.5 mL〜約150 mL、約0.5 mL〜約100 mL、約0.5 mL〜約90 mL、約0.5 mL〜約80 mL、約0.5 mL〜約70 mL、約0.5 mL〜約60 mL、約0.5 mL〜約50 mL、約0.5 mL〜約45 mL、約0.5 mL〜約40 mL、約0.5 mL〜約35 mL、約0.5 mL〜約30 mL、約0.5 mL〜約25 mL、約0.5 mL〜約20 mL、約0.5 mL〜約15 mL、約0.5 mL〜約10 mL、約0.5 mL〜約8 mL、約0.5 mL〜約6 mL、約0.5 mL〜約5 mL、約0.5 mL〜約4 mL、約0.5 mL〜約3 mL、約0.5 mL〜約2 mL、約0.5 mL〜約1 mL、1 mL〜約1 L、約1 mL〜約900 mL、約1 mL〜約800 mL、約1 mL〜約700 mL、約1 mL〜約600 mL、約1 mL〜約500 mL、約1 mL〜約250 mL、約1 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mL、約10 mL〜約250 mL、約10 mL〜約200 mL、約10 mL〜約150 mL、約10 mL〜約100 mL、約10 mL〜約90 mL、約10 mL〜約80 mL、約10 mL〜約70 mL、約10 mL〜約60 mL、約10 mL〜約50 mL、約10 mL〜約40 mL、約10 mL〜約30 mL、約10 mL〜約20 mL；約20 mL〜約1 L、約20 mL〜約900 mL、約20 mL〜約800 mL、約20 mL〜約700 mL、約20 mL〜約600 mL、約20 mL〜約500 mL、約20 mL〜約450 mL、約20 mL〜約400 mL、約20 mL〜約350 mL、約20 mL〜約300 mL、約20 mL〜約250 mL、約20 mL〜約200 mL、約20 mL〜約150 mL、約20 mL〜約100 mL、約20 mL〜約90 mL、約20 mL〜約80 mL、約20 mL〜約70 mL、約20 mL〜約60 mL、約20 mL〜約50 mL、約20 mL〜約40 mL、約20 mL〜約30 mL；約50 mL〜約1 L、約50 mL〜約900 mL、約50 mL〜約800 mL、約50 mL〜約700 mL、約50 mL〜約600 mL、約50 mL〜約500 mL、約50 mL〜約450 mL、約50 mL〜約400 mL、約50 mL〜約350 mL、約50 mL〜約300 mL、約50 mL〜約250 mL、約50 mL〜約200 mL、約50 mL〜約150 mL、約50 mL〜約100 mL、約50 mL〜約90 mL、約50 mL〜約80 mL、約50 mL〜約70 mL、約50 mL〜約60 mL；約100 mL〜約1 L、約100 mL〜約900 mL、約100 mL〜約800 mL、約100 mL〜約700 mL、約100 mL〜約600 mL、約100 mL〜約500 mL、約100 mL〜約450 mL、約100 mL〜約400 mL、約100 mL〜約350 mL、約100 mL〜約300 mL、約100 mL〜約250 mL、約100 mL〜約200 mL、約100 mL〜約150 mL；約150 mL〜約1 L、約150 mL〜約900 mL、約150 mL〜約800 mL、約150 mL〜約700 mL、約150 mL〜約600 mL、約150 mL〜約500 mL、約150 mL〜約250 mL、約150 mL〜約400 mL、約150 mL〜約350 mL、約150 mL〜約300 mL、約150 mL〜約250 mL、約150 mL〜約200 mL；約200 mL〜約1 L、約200 mL〜約900 mL、約200 mL〜約800 mL、約200 mL〜約700 mL、約200 mL〜約600 mL、約200 mL〜約500 mL、約200 mL〜約450 mL、約200 mL〜約400 mL、約200 mL〜約350 mL、約200 mL〜約300 mL、約200 mL〜約250 mL；約250 mL〜約1 L、約250 mL〜約900 mL、約250 mL〜約800 mL、約250 mL〜約700 mL、約250 mL〜約600 mL、約250 mL〜約500 mL、約250 mL〜約450 mL、約250 mL〜約400 mL、約250 mL〜約350 mL、約250 mL〜約300 mL；約300 mL〜約1 L、約300 mL〜約900 mL、約300 mL〜約800 mL、約300 mL〜約700 mL、約300 mL〜約600 mL、約300 mL〜約500 mL、約300 mL〜約450 mL、約300 mL〜約400 mL、約300 mL〜約350 mL；約350 mL〜約1 L、約350 mL〜約900 mL、約350 mL〜約800 mL、約350 mL〜約700 mL、約350 mL〜約600 mL、約350 mL〜約500 mL、約350 mL〜約450 mL；約350 mL〜約400 mL；約400 mL〜約1 L、約400 mL〜約900 mL、約400 mL〜約800 mL、約400 mL〜約700 mL、約400 mL〜約600 mL、約400 mL〜約500 mL、約400 mL〜約450 mL；約500 mL〜約1 L、約500 mL〜約900 mL、約500 mL〜約800 mL、約500 mL〜約700 mL、約500 mL〜約600 mL；約550 mL〜約1 L、約550 mL〜約900 mL、約550 mL〜約800 mL、約550 mL〜約700 mL、約550 mL〜約600 mL；約600 mL〜約1 L、約600 mL〜約900 mL、約600 mL〜約800 mL、約600 mL〜約700 mL；約600 mL〜約650 mL；約650 mL〜約1 L、約650 mL〜約900 mL、約650 mL〜約800 mL、約650 mL〜約700 mL；約700 mL〜約1 L、約700 mL〜約900 mL、約700 mL〜約800 mL、約700 mL〜約750 mL；約750 mL〜約1 L、約750 mL〜約900 mL、約750 mL〜約800 mL；約800 mL〜約1 L、約800 mL〜約900 mL、約800 mL〜約950 mL；約850 mL〜約1 L、約850 L〜約950 mL、約850 mL〜約900 mL、約900 mL〜約1 L、または約900 mL〜約950 mL）の溶離緩衝剤（例えば本明細書に説明するいずれかの溶離緩衝剤）を用いて行われる。
【０１３１】
いくつかの態様において、溶離は、約2℃〜約25℃（例えば2℃〜約4℃、約2℃〜約6℃、約2℃〜約8℃、約2℃〜約10℃、約2℃〜約12℃、約4℃〜約6℃、約4℃〜約8℃、約4℃〜約10℃、約4℃〜約12℃、約6℃〜約8℃、約6℃〜約10℃、約6℃〜約12℃、約10℃〜約12℃、約10℃〜約25℃、約10℃〜約22℃、約10℃〜約20℃、約10℃〜約18℃、約10℃〜約14℃、約12℃〜約14℃、約12℃〜約16℃、約16℃〜約18℃、約16℃〜約20℃、約16℃〜約25℃、約20℃〜約22℃、約20℃〜約25℃、約22℃〜約25℃）で行われる。
【０１３２】
いくつかの態様において、溶離される組換えタンパク質の総量は、約0.05 mg〜約80 mg（例えば約0.05 mg〜約0.1 mg、約0.05 mg〜約0.2 mg、約0.05 mg〜約0.5 mg、約0.05 mg〜約0.6 mg、約0.05 mg〜約0.8 mg、約0.05 mg〜約1 mg、約0.05 mg〜約2 mg、約0.05 mg〜約5 mg、約0.05 mg〜約10 mg、約0.05 mg〜約15 mg、約0.05 mg〜約20 mg、約0.05 mg〜約25 mg、約0.05 mg〜約30 mg、約0.05 mg〜約35 mg、約0.05 mg〜約40 mg、約0.05 mg〜約45 mg、約0.05 mg〜約50 mg、約0.05 mg〜約55 mg、約0.05 mg〜約60 mg、約0.05 mg〜約65 mg、約0.05 mg〜約70 mg、約0.05 mg〜約75 mg、約0.05 mg〜約80 mg、約0.1 mg〜約0.2 mg、約0.1 mg〜約0.5 mg、約0.1 mg〜約0.6 mg、約0.1 mg〜約0.8 mg、約0.1 mg〜約1 mg、約0.1 mg〜約2 mg、約0.1 mg〜約5 mg、約0.1 mg〜約10 mg、約0.1 mg〜約15 mg、約0.1 mg〜約20 mg、約0.1 mg〜約25 mg、約0.1 mg〜約30 mg、約0.1 mg〜約35 mg、約0.1 mg〜約40 mg、約0.1 mg〜約45 mg、約0.1 mg〜約50 mg、約0.1 mg〜約55 mg、約0.1 mg〜約60 mg、約0.1 mg〜約65 mg、約0.1 mg〜約70 mg、約0.1 mg〜約75 mg、約0.1 mg〜約80 mg、約0.2 mg〜約0.5 mg、約0.2 mg〜約0.6 mg、約0.2 mg〜約0.8 mg、約0.2 mg〜約1 mg、約0.2 mg〜約2 mg、約0.2 mg〜約5 mg、約0.2 mg〜約10 mg、約0.2 mg〜約15 mg、約0.2 mg〜約20 mg、約0.2 mg〜約25 mg、約0.2 mg〜約30 mg、約0.2 mg〜約35 mg、約0.2 mg〜約40 mg、約0.2 mg〜約45 mg、約0.2 mg〜約50 mg、約0.2 mg〜約55 mg、約0.2 mg〜約60 mg、約0.2 mg〜約65 mg、約0.2 mg〜約70 mg、約0.2 mg〜約75 mg、約0.2 mg〜約80 mg、約0.5 mg〜約0.6 mg、約0.5 mg〜約0.8 mg、約0.5 mg〜約1 mg、約0.5 mg〜約2 mg、約0.5 mg〜約5 mg、約0.5 mg〜約10 mg、約0.5 mg〜約15 mg、約0.5 mg〜約20 mg、約0.5 mg〜約25 mg、約0.5 mg〜約30 mg、約0.5 mg〜約35 mg、約0.5 mg〜約40 mg、約0.5 mg〜約45 mg、約0.5 mg〜約50 mg、約0.5 mg〜約55 mg、約0.5 mg〜約60 mg、約0.5 mg〜約65 mg、約0.5 mg〜約70 mg、約0.5 mg〜約75 mg、約0.5 mg〜約80 mg、約0.6 mg〜約0.8 mg、約0.6 mg〜約1 mg、約0.6 mg〜約2 mg、約0.6 mg〜約5 mg、約0.6 mg〜約10 mg、約0.6 mg〜約15 mg、約0.6 mg〜約20 mg、約0.6 mg〜約25 mg、約0.6 mg〜約30 mg、約0.6 mg〜約35 mg、約0.6 mg〜約40 mg、約0.6 mg〜約45 mg、約0.6 mg〜約50 mg、約0.6 mg〜約55 mg、約0.6 mg〜約60 mg、約0.6 mg〜約65 mg、約0.6 mg〜約70 mg、約0.6 mg〜約75 mg、約0.6 mg〜約80 mg、約0.8 mg〜約1 mg、約0.8 mg〜約2 mg、約0.8 mg〜約5 mg、約0.8 mg〜約10 mg、約0.8 mg〜約15 mg、約0.8 mg〜約20 mg、約0.8 mg〜約25 mg、約0.8 mg〜約30 mg、約0.8 mg〜約35 mg、約0.8 mg〜約40 mg、約0.8 mg〜約45 mg、約0.8 mg〜約50 mg、約0.8 mg〜約55 mg、約0.8 mg〜約60 mg、約0.8 mg〜約65 mg、約0.8 mg〜約70 mg、約0.8 mg〜約75 mg、約0.8 mg〜約80 mg、約1 mg〜約2 mg、約1 mg〜約5 mg、約1 mg〜約10 mg、約1 mg〜約15 mg、約1 mg〜約20 mg、約1 mg〜約25 mg、約1 mg〜約30 mg、約1 mg〜約35 mg、約1 mg〜約40 mg、約1 mg〜約45 mg、約1 mg〜約50 mg、約1 mg〜約55 mg、約1 mg〜約60 mg、約1 mg〜約65 mg、約1 mg〜約70 mg、約1 mg〜約75 mg、約1 mg〜約80 mg、約2 mg〜約5 mg、約2 mg〜約10 mg、約2 mg〜約15 mg、約2 mg〜約20 mg、約2 mg〜約25 mg、約2 mg〜約30 mg、約2 mg〜約35 mg、約2 mg〜約40 mg、約2 mg〜約45 mg、約2 mg〜約50 mg、約2 mg〜約55 mg、約2 mg〜約60 mg、約2 mg〜約65 mg、約2 mg〜約70 mg、約2 mg〜約75 mg、約2 mg〜約80 mg、約5 mg〜約10 mg、約5 mg〜約15 mg、約5 mg〜約20 mg、約5 mg〜約25 mg、約5 mg〜約30 mg、約5 mg〜約35 mg、約5 mg〜約40 mg、約5 mg〜約45 mg、約5 mg〜約50 mg、約5 mg〜約55 mg、約5 mg〜約60 mg、約5 mg〜約65 mg、約5 mg〜約70 mg、約5 mg〜約75 mg、約5 mg〜約80 mg、約10 mg〜約15 mg、約10 mg〜約20 mg、約10 mg〜約25 mg、約10 mg〜約30 mg、約10 mg〜約35 mg、約10 mg〜約40 mg、約10 mg〜約45 mg、約10 mg〜約50 mg、約10 mg〜約55 mg、約10 mg〜約60 mg、約10 mg〜約65 mg、約10 mg〜約70 mg、約10 mg〜約75 mg、約10 mg〜約80 mg、約15 mg〜約20 mg、約15 mg〜約20 mg、約15 mg〜約25 mg、約15 mg〜約30 mg、約15 mg〜約35 mg、約15 mg〜約40 mg、約15 mg〜約45 mg、約15 mg〜約50 mg、約15 mg〜約55 mg、約15 mg〜約60 mg、約15 mg〜約65 mg、約15 mg〜約70 mg、約15 mg〜約75 mg、約15 mg〜約80 mg、約20 mg〜約25 mg、約20 mg〜約30 mg、約20 mg〜約35 mg、約20 mg〜約40 mg、約20 mg〜約45 mg、約20 mg〜約50 mg、約20 mg〜約55 mg、約20 mg〜約60 mg、約20 mg〜約65 mg、約20 mg〜約70 mg、約20 mg〜約75 mg、約20 mg〜約80 mg、約25 mg〜約30 mg、約25 mg〜約35 mg、約25 mg〜約40 mg、約25 mg〜約45 mg、約25 mg〜約50 mg、約25 mg〜約55 mg、約25 mg〜約60 mg、約25 mg〜約65 mg、約25 mg〜約70 mg、約25 mg〜約75 mg、約25 mg〜約80 mg、約30 mg〜約35 mg、約30 mg〜約40 mg、約30 mg〜約45 mg、約30 mg〜約50 mg、約30 mg〜約55 mg、約30 mg〜約60 mg、約30 mg〜約65 mg、約30 mg〜約70 mg、約30 mg〜約75 mg、約30 mg〜約80 mg、約35 mg〜約40 mg、約35 mg〜約45 mg、約35 mg〜約50 mg、約35 mg〜約55 mg、約35 mg〜約60 mg、約35 mg〜約65 mg、約35 mg〜約70 mg、約35 mg〜約75 mg、約35 mg〜約80 mg、約40 mg〜約45 mg、約40 mg〜約50 mg、約45 mg〜約55 mg、約45 mg〜約60 mg、約45 mg〜約65 mg、約45 mg〜約70 mg、約45 mg〜約75 mg、約45 mg〜約80 mg、約50 mg〜約55 mg、約50 mg〜約60 mg、約50 mg〜約65 mg、約50 mg〜約70 mg、約50 mg〜約75 mg、約50 mg〜約80 mg、約55 mg〜約60 mg、約55 mg〜約65 mg、約55 mg〜約70 mg、約55 mg〜約75 mg、約55 mg〜約80 mg、約60 mg〜約65 mg、約60 mg〜約70 mg、約60 mg〜約75 mg、約60 mg〜約80 mg、約65 mg〜約70 mg、約65 mg〜約75 mg、約65 mg〜約80 mg、約70 mg〜約75 mg、約70 mg〜約80 mg、約75 mg〜約80 mg）である。
【０１３３】
1つまたは複数の追加的な単位操作
本明細書に提供するいずれかの方法のいくつかの態様において、組換えタンパク質に対して1つまたは複数の追加的な単位操作が行われてもよい。いくつかの態様において、前記1つまたは複数の追加的な単位操作は、ウイルス不活化、ウイルス濾過、研磨、サイズ排除クロマトグラフィ、陽イオン交換クロマトグラフィ、陰イオン交換クロマトグラフィ、疎水性相互作用クロマトグラフィ、混合モードクロマトグラフィ、逆相クロマトグラフィ、および限外濾過／ダイアフィルトレーションからなる群より選択される。いくつかの態様において、前記1つまたは複数の追加的な単位操作は、沈殿および／または変性した物質が除去されるクリーニングインプレース（cleaning in place）（CIP）を含む。
【０１３４】
本明細書に説明するいずれかの方法のいくつかの態様において、方法は、組換えタンパク質を製剤化する段階をさらに含んでもよい。いくつかの態様において、組換えタンパク質は組換えタンパク質製剤へと製剤化される。
【実施例】
【０１３５】
本発明を以下の実施例においてさらに説明する。これら実施例は、特許請求の範囲に説明される本発明の範囲を限定するわけではない。
【０１３６】
実施例1．清澄上清による、従来の精製方法と「捕捉精製」方法との比較試験
実験セットアップ
従来のIgG抗体であるコンストラクトC26を、1 Lの細胞培養スケールにおいて、HEK 293懸濁細胞中で5日間にわたって発現させた。コンストラクトC26のハーベスト時に、上清を、遠心分離と孔径0.22 μmのフィルターを通す濾過とによって清澄化した。清澄上清を4 x 250 mLのアリコートに分け、そして、試験に必要となるまで4℃で保存した。150 mLの清澄上清（または、AKTA精製については185 mL）を用いて、3つの異なる生成方法を試験した。3つすべての精製方法は、同じ溶離緩衝剤および同じ中和緩衝剤を用いて行った。AKTA方法では、PBS洗浄と、少なくとも1回のクエン酸塩洗浄とを用いる。第一の精製方法であるAKTAは、プレパックされたカラム（すなわち市販のカラム）内で不動化された樹脂を用いる、プログラムされた精製方法である。AKTA精製方法は方向性フローをベースとする。第二の精製方法は従来のバッチ捕捉法である。この従来のバッチ捕捉法は、清澄上清内で樹脂が自由浮動する状態での終夜振盪を含む。「捕捉精製」と呼ばれる第三の精製方法は、本明細書に説明するようなクロマトグラフィ濾過ポッドの使用を含む。捕捉精製方法はまた、従来のバッチ捕捉法と同一の終夜振盪も含む。
【０１３７】
結果
実験から、コンストラクトC26の収率および純度は、試験した3つすべての方法で同等であることが明らかになった（表1）。
【０１３８】
（表１）3つの精製方法を比較した、収率および純度の要約表
2020529605.tif 000003
* 純度は分析的サイズ排除クロマトグラフィ（SEC）により決定した。図20および21のクロマトグラフも参照されたい。
【０１３９】
AKTA精製方法では5 mLの樹脂を使用し、一方、従来のバッチ捕捉法および捕捉精製方法ではいずれも3 mLを使用した。それでも、3 mLの樹脂は、観察された樹脂の結合能に基づき、上清中における同等量のIgG抗体を捕捉するのに充分であった。次に、従来のバッチ精製方法および捕捉精製方法中に採取した、20 μLのフロースルー（FT）サンプル、20 μLの洗浄サンプル（W）、1 μgの溶離サンプル（E）を分析するため、SDS-PAGEを行った（図5）。両精製方法の還元および非還元サンプルをLife Tech 4〜12%ゲル上に流した。関心対象のタンパク質が、いずれの方法においてもフロースルー中または洗浄段階中に失われていなかったことから、両方法においてタンパク質捕捉が完了したことがSDS分析から示唆された。
【０１４０】
3つの方法の実験タイムラインの概要を図6に示す。図6に示すように、AKTA精製方法は完了までにトランスフェクション後7日間を要する可能性があり、5〜6時間以上が清澄化および実験装備のセットアップに当てられる。さらに、AKTA精製方法は流量による制約を受け、ゆえに、より大きな体積（1 L超）については完了までの時間が劇的に増大する可能性があり、時に、図6に示すよりも長い時間を要する可能性がある。加えて、AKTA精製方法を用いると、一度に1つのタンパク質しか生成できない。対照的に、従来のバッチ精製方法および捕捉精製方法は、図6に示すような時間フレームにおいて複数のタンパク質を同時に捕捉および精製できる。従来のバッチ精製方法は完了までにトランスフェクション後7日間を要する可能性があり、試験した3つの方法のうち最も労働集約的な方法である。AKTA精製方法および従来のバッチ方法はいずれも、本明細書に説明する捕捉および精製の方法よりはるかに多くの消耗品を要する。本発明の捕捉および精製の方法は労働集約性がはるかに低く、かつ、要するユーザー操作がごく少ない。本発明の捕捉および精製の方法はトランスフェクション後6日目までに完了できる。
【０１４１】
実施例2．平均孔径20 μmまたは40 μmの多孔質メッシュを含むポッドによる「捕捉精製」方法の試験
実験セットアップ
実施例1のように発現させたHISタグヒトタンパク質（C27）の培養750 mLをハーベストし、そしてハーベスト後処理のため2つのグループに分けた。表2において「濾過」と記した上清は、遠心分離により清澄化し、次に孔径0.22ミクロンのフィルターを通過させた。他方のグループはいかなる処理も行わず、表2において「未濾過」と記した。「濾過」および「未濾過」培地の125 mLアリコート2つを250 mLボトルに添加した。NI-NTAアフィニティ樹脂1 mLと、デバイスの底部（この場合における唯一の開口部）を覆う20ミクロンメッシュまたは40ミクロンメッシュのいずれかとを備えた、捕捉および精製用デバイスを、各ボトルに加えた。従来のバッチ捕捉条件はこの実験に含めなかった。実験条件および収率を以下の表2に詳しく示す。
【０１４２】
（表２）実験条件
2020529605.tif 000004
: コンストラクトC27に対する従来のバッチ捕捉の平均収率は約46 mg/mLである。
& 濃度を測定する前に除去された、濃縮処理中の凝集が、この条件の収率を低下させた。
【０１４３】
図7に示すように、4つすべての条件にわたって高い純度が見られた（約92%）。これらのデータは、40 μmの多孔質メッシュを使用しても20 μmの多孔質メッシュと比較して純度が損なわれなかったこと；および、本発明の捕捉および精製用デバイスで、HISアフィニティタグ精製を用いる従来のバッチ捕捉法と同等の収率が得られること、を示している。
【０１４４】
実施例3．40 μm多孔質メッシュを含むポッドを用いた精製方法の試験
実験セットアップ
一過性に発現したヒトIgGを捕捉する能力について、異なる実験セットアップを試験した。第一のセットアップ（条件#2および3）において、ポッドは、ポッドの下端にのみ多孔質メッシュを含んでいた。第二のセットアップ（条件#4）において、ポッドは、ポッドの上端および下端の両方に多孔質メッシュを有し、ポッドの壁にベントを備えていた（図4）。
【０１４５】
ポッドを、その縦軸が概ね垂直になるよう（濾過後または未濾過の液体細胞培養液中に）位置決めすることにより、両方のセットアップを、150 mLボトル中の約175 mL培地である、（実施例1および2において説明したような）濾過後または未濾過の液体細胞培養液中に配した。ポッドを液体細胞培養液から取り出した後、カラムを洗浄し、そして次に、それぞれPBSおよびクエン酸塩緩衝剤を用いて溶離した。
【０１４６】
（表３）IgG精製のための捕捉精製の実験条件
2020529605.tif 000005
【０１４７】
4つすべての条件について、収率をmg/Lで表3に示した。HPLCによる純度は4つすべての条件にわたって同じであったが（図8）、第三および第四のセットアップは従来のバッチ捕捉培養と比較して収率が高く、一方、第二のセットアップは低かった。
【０１４８】
実施例4．20 μm多孔質メッシュを有するポッドを用いた精製方法の試験
この試験において、濾過後の上清を用いる従来のバッチ捕捉培養方法を、未濾過の上清と、ポッドの下端にのみ多孔質メッシュを有する、実施例3において説明したようなポッドとを用いる方法と、比較した（表4）。
【０１４９】
（表４）実験条件
2020529605.tif 000006
【０１５０】
両方の条件について、収率をmg/Lで表4に示した。HPLCによる純度は両法の試験条件にわたって同じであったが（図9）、捕捉精製方法は従来のバッチ捕捉培養と比較して収率が高かった。
【０１５１】
実施例5．20 μmまたは40 μm多孔質メッシュを有するポッドを用いかつ吸収後の流量を制御するためストップコックを追加した精製方法の試験
この試験において、IgGの一過性発現0.9 Lと、それに続く精製とを用いて、従来のバッチ捕捉法を、ポッドと未濾過培地とを用いる方法と比較した。ポッドは、この場合、垂直の側部および基部に、20ミクロンまたは40ミクロンのいずれかのメッシュで覆われた開口部を有していた。0.9 Lの培養を5つの180 mLアリコートに分けた。これらアリコートのうち1つを遠心分離により清澄化し、そして孔径0.22ミクロンのフィルターに通して濾過した；他の4つのアリコートにおいて、細胞培地は処理せず、「未濾過」と呼んだ。すべてのアリコートを250 mLボトルに添加した。上述したような、かつ1.5 mLのプロテインA樹脂を内部に添加したポッドを、未濾過条件に加え、そして、1.5 mLのプロテインA樹脂を濾過条件に加えた。次に、すべての250 mLボトルを、振盪しながら終夜インキュベートした。流量を制御するための活栓の追加は、終夜インキュベート後にポッドを培地から取り出した後に行った。実験条件および結果について表5を参照されたい。
【０１５２】
（表５）実験条件および結果
2020529605.tif 000007
【０１５３】
すべての条件について収率を示した。純度は全条件について同等であったが、ポッドが従来のバッチ捕捉法と同様の収率を示すこともあった。
【０１５４】
実施例6．40 μm多孔質メッシュを含むポッドを用いた精製方法の試験
実験セットアップ
濾過後または未濾過のいずれかであるがそれ以外は同一である抗体含有細胞培地から抗体を捕捉する能力について、異なる実験セットアップを試験した。図27〜28に示すようなデバイスを用いたセットアップについては、上清を濾過しなかった。陽性対照としたセットアップについては、自由浮動する樹脂を添加する前に上清を濾過した。
【０１５５】
第一のセットアップでは、150 RPMの撹拌を伴う自由浮動バッチ捕捉環境において、濾過後の上清に曝した、自由浮動するプロテインAクロマトグラフィ樹脂2 mLを用いた。それに続く精製では、上清から樹脂を捕捉し、そして次に洗浄を行いかつ樹脂から抗体を溶離するため、重力流カラムを使用した。この重力カラムを25 mLのPBSで洗浄し、そして20 mLの溶離緩衝剤で溶離した。このクロマトグラフィカラムに、第三のセットアップにおいて用いたデバイス／ポッドとの接触に用いたものと同じである、濾過後の抗体含有細胞培地をロードした。
【０１５６】
第二のセットアップでは、150 RPMの撹拌を伴う自由浮動バッチ捕捉環境において、濾過後の上清に曝した、自由浮動するプロテインAクロマトグラフィ樹脂2.5 mLを用いた。それに続く精製では、上清から樹脂を捕捉し、そして次に洗浄を行いかつ樹脂から抗体を溶離するため、重力流カラムを使用した。この重力カラムを37.5 mLのPBSで洗浄し、そして30 mLの溶離緩衝剤で溶離した。このクロマトグラフィカラムに、第四のセットアップにおいて用いたデバイス／ポッドとの接触に用いたものと同じである、濾過後の細胞培地をロードした。
【０１５７】
第三のセットアップでは、2 mLのプロテインAクロマトグラフィ樹脂をロードした、図27および28に示すデバイスを用いた。ポッド／デバイス内のこの樹脂を75 mLのPBSで洗浄し、そして30 mLの溶離緩衝剤で溶離した。溶離緩衝剤をまずポッド／デバイス内の樹脂に接触させた後、5分間の休止を置いてから、追加の溶離緩衝剤を流してポッド／デバイス内の樹脂に通した。AKTAシステムを用いてクロマトグラフィを行った。ポッド／デバイス内の樹脂に、第一のセットアップにおいて用いたデバイス／ポッドとの接触に用いたものと同じである、濾過後の細胞培地をロードした。より具体的には、500 mLボトル内で、濾過後の細胞培地350 mLにポッドを接触させた。
【０１５８】
第四のセットアップでは、3 mLのプロテインAクロマトグラフィ樹脂をロードした、図27および28に示すデバイスを用いた。ポッド／デバイス内のこの樹脂を65 mLのPBSで洗浄し、そして25 mLの溶離緩衝剤で溶離した（流量は3 mL/分）。AKTAシステムを用いてクロマトグラフィを行った。ポッド／デバイス内の樹脂に、第二のセットアップにおいて用いたデバイス／ポッドとの接触に用いたものと同じである、濾過後の細胞培地をロードした。より具体的には、500 mLボトル内で、濾過後の細胞培地350 mLにポッドを接触させた。
【０１５９】
結果
データを以下の表6に示す。第三および第四のセットアップによるデバイス／ポッドの溶離から得たクロマトグラフを、それぞれ図32および33に示す。
【０１６０】
（表６）IgG精製のための捕捉精製の実験条件
2020529605.tif 000008
【０１６１】
上記のデータは、本明細書に提供するポッド／デバイスが、標準的なクロマトグラフィカラムの使用と比較して、同様の組換え抗体収率を提供することを示している。
【０１６２】
その他の態様
本発明をその詳細な説明とともに説明したが、以上の説明は、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲を、限定ではなく例示することを意図していることが理解されるべきである。他の局面、利点、および改変は以下の特許請求の範囲内である。
【図１】
2020529605.tif 000010
【図２】
2020529605.tif 000011
【図３】
2020529605.tif 000012
【図４】
2020529605.tif 000013
【図５】
2020529605.tif 000014
【図６】
2020529605.tif 000015
【図７】
2020529605.tif 000016
【図８】
2020529605.tif 000017
【図９】
2020529605.tif 000018
【図１０】
2020529605.tif 000019
【図１１】
2020529605.tif 000020
【図１２】
2020529605.tif 000021
【図１３】
2020529605.tif 000022
【図１４】
2020529605.tif 000023
【図１５】
2020529605.tif 000024
【図１６】
2020529605.tif 000025
【図１７】
2020529605.tif 000026
【図１８】
2020529605.tif 000027
【図１９】
2020529605.tif 000028
【図２０】
2020529605.tif 000029
【図２１】
2020529605.tif 000030
【図２２】
2020529605.tif 000031
【図２３】
2020529605.tif 000032
【図２４】
2020529605.tif 000033
【図２５】
2020529605.tif 000034
【図２６】
2020529605.tif 000035
【図２７】
2020529605.tif 000036
【図２８】
2020529605.tif 000037
【図２９】
2020529605.tif 000038
【図３０】
2020529605.tif 000039
【図３１】
2020529605.tif 000040
【図３２】
2020529605.tif 000041
【図３３】
2020529605.tif 000042
【図３４】
2020529605.tif 000043
【図３５】
2020529605.tif 000044
【図３６】
2020529605.tif 000045
【図３７】
2020529605.tif 000046
【国際調査報告】
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2020529605.tif 000048
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