(57)【要約】  本発明の目的は、ＡＭＰＫ調節不全を伴う疾患または状態、特にガンの治療または予防法を提供する。本発明は、式（Ｉ）により表される化合物およびその薬学的に許容される塩または溶媒和物と免疫チェックポイント阻害剤による併用療法を提供する。
2020520378.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）により表される化合物：
【化１】
2020520378.tif 000051
［式中、
Ｒ１は、ホルミルまたは−ＣＨ＝Ｎ−Ｏ−Ｙであり、ここで、Ｙは、水素原子またはＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２は、１〜５個のフッ素原子で置換されていてもよいＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３は、水素原子またはＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ４は、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、Ｃ３〜７シクロアルキルアミノ、または
環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−もしくは−ＳＯ２−を含有する３〜７員のヘテロシクロアルキルアミノであり、または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＞Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｚを形成し、
Ｚは、水素原子、Ｃ１〜６アルキル、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎ−Ｒ５または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ５であり、
ｎは、１〜４から選択される整数であり、
Ｒ５は、−ＣＯ２Ｒ６、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＲ７Ｒ８、−ＯＣＯＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２Ｒ９、ヒドロキシ、−ＮＨＳＯ２Ｒ９または−ＮＲ７Ｒ８であり、
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、水素原子、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ３〜７シクロアルキルからなる群から選択され、またはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−もしくは−ＳＯ２−をさらに含有してもよい窒素含有の３〜７員の複素環式環を形成し、ここで、複素環式環は、ヒドロキシおよびＣ１〜６アルキルから選択される１つもしくは複数の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ９は、Ｃ１〜６アルキルまたはＣ３〜７シクロアルキルである］、
その薬学的に許容される塩または溶媒和物を含有する、免疫チェックポイント阻害剤の投与との併用に用いるための組成物であることを特徴とする医薬組成物。
【請求項２】
Ｒ４が、ヒドロキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、シクロプロピルアミノおよびオキセタン−３−イルアミノからなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
Ｒ３およびＲ４が、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＞Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｚを形成し、ここで、Ｚが、水素原子、Ｃ１〜６アルキル、−ＣＨ２ＣＯ２Ｒ６、モルホリノエチル、ピペラジニルエチル、Ｎ−メチル−ピペラジニルエチルおよびＮ，Ｎ−ジメチルアミノ−エチルからなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
Ｒ１が、ホルミルである、請求項２または３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
Ｒ１が、−ＣＨ＝Ｎ−ＯＨである、請求項２または３に記載の化合物、その薬学的に許容される塩または溶媒和物。
【請求項６】
Ｒ１が、−ＣＨ＝Ｎ−ＯＭｅである、請求項２または３に記載の医薬組成物。
【請求項７】
式（Ｉ）で表される化合物が、３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒド、
［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−（３−クロロ−５−ホルミル−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ２−（ジメチルアミノ）アセテート、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−モルホリノエトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒド、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（２−（ジメチルアミノ）エトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−モルホリノエトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシイミノ）−シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
エチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−アミノ−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−（オキセタン−３−イルアミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−フルオロメトキシ−５−ホルミル−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］−アミノ］オキシ）酢酸、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−メトキシ−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸、
およびそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
免疫チェックポイント阻害剤が、抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ−１抗体、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択されることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
組成物が、ガンの治療または予防のために使用されることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ−１抗体であることを特徴とする、（１−１）〜（１−７）のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ−Ｌ１抗体であることを特徴とする、（１−１）〜（１−７）のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アスコクロリン誘導体と免疫チェックポイント阻害剤との併用療法に関する。本発明はまた、免疫チェックポイント阻害剤投与との併用に用いられるアスコクロリン誘導体を含む医薬組成物も対象とする。
【背景技術】
【０００２】
アデノシン一リン酸活性化タンパク質キナーゼ（ＡＭＰＫ）は、細胞エネルギーバランスのための重要な調節タンパク質であり、種々の器官における、特に骨格筋、肝臓および脂肪組織におけるグルコースおよび脂質代謝のマスタースイッチであると考えられる。
【０００３】
ＡＭＰＫはまた、ｍ−ＴＯＲの阻害を介した細胞増殖およびオートファジーの調節ならびにミトコンドリア生合成において重大な役割を有することも知られている。［Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖ．２００９、８９巻、１０２５頁、Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ／Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、２０１２、１３巻２５１頁、Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、２０１１、１３（９）巻、１０１６、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、２０１３、３６６巻、１５２頁、Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、２００６、５７４．１巻３３頁。］。
【０００４】
細胞内ＡＴＰレベルが低下すると、ＡＭＰまたはＡＤＰは、ＡＭＰＫのγ調節サブユニットに直接結合して、ＬＫＢ１（腫瘍サプレッサーとして公知である）またはＣＡＭＫＫ２（Ｃａ＋＋依存性キナーゼ）による、ＡＭＰＫのＴｈｒ１７２のリン酸化を促進する立体配座変化をもたらす。さらに、立体配座変化はまた、タンパク質ホスファターゼ２ＡおよびＣによる脱リン酸化からＡＭＰＫを保護し、その結果、ＡＭＰＫは活性化されたままとなる。
【０００５】
ＡＭＰＫの調節不全は、ガン、２型糖尿病、代謝症候群関連疾患（脂質異常症、脂肪過多症、アテローム動脈硬化性心血管疾患、高血圧症および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ））、炎症ならびにアルツハイマー病などの疾患の病原性因子であると考えられ、したがって、ＡＭＰＫは、これらの疾患の予防および治療の標的であると考えられる［ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ：Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、２０１３、１２３（７）巻２７６４頁、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、２０１３、３６６巻１３５頁；ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ：Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ、２０１５、６（１０）巻、７３６５頁；ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｅａｓｅ：Ｃｉｒｃ  Ｒｅｓ．、２００９  １０４（３）巻、２８２頁；ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ、Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ、２０１０  ５３巻、２４０６頁、Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２０１０、４２巻、６７６頁；Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ：Ｊ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｉｓ．２００９、１６（４）巻７３１頁］。
【０００６】
メトホルミンは、呼吸鎖複合体１の阻害を介してＡＭＰＫを間接的に活性化する抗高血糖剤として公知である［Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０１２、１２２巻、２５３頁］。しかし、メトホルミンは、インビトロ細胞実験では、驚くほど高濃度のｍＭレベルでしかＨｅｐＧ２細胞においてＡＭＰＫを活性化しないことが報告されている。
【０００７】
５−アミノイミダゾール−４−カルボキサミドリボヌクレオチド（ＡＩＣＡＲ）は、ＡＭＰ模倣物として公知である。ＡＩＣＡＲは、調節γ−サブユニットに結合することによってＡＭＰＫを直接活性化して、ＡＭＰＫのリン酸化を促進し、脱リン酸化からＡＭＰＫを保護する。Ａ−７６９６６２は、異なる結合様式を有する直接的ＡＭＰＫ活性化剤であると報告されている［Ｃｅｌｌ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ、２００６、３巻、４０３頁］。文献において他のＡＭＰＫ活性化剤が報告されているが、それらはいずれも、現在までのところ臨床的に使用されておらず、その理由の一部には、不十分なin vivo効力および／または安全性プロファイルがある。したがって、良好な効力および安全性プロファイルを有する新規なＡＭＰＫ活性化剤は、ＡＭＰＫ調節不全を伴う疾患の患者に治療上の利益をもたらすであろう。
【０００８】
４−Ｏ−メチル−アスコクロリン（ＭＡＣ）は、アスコクロリンの真菌代謝産物の誘導体であり、これは、ＨｅｐＧ２細胞においてＡＭＰＫを活性化する能力を有することが報告されている［Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、２０１１、４０６巻、３５３頁］。ＭＡＣを含む４−Ｏ−置換アスコクロリン誘導体が、ＪＰ  Ｈ０６−３０５９５９Ａ（１９９４年公開）に抗糖尿病剤として記載されており、天然アミノ酸を用いて形成されたシッフ塩基誘導体であるＭＡＣのプロドラッグが、ＷＯ２００４／０７４２３６に記載されている。しかし、いずれのアスコクロリン誘導体の開発も成功していない。
【０００９】
免疫チェックポイント阻害剤は、免疫システムにおけるシグナル伝達を阻害し、免疫システムを促進または阻害する分子として知られている。多くのガンは、Ｔ細胞のシグナル伝達を阻害することにより、自らを免疫システムから防御していることがよく知られている。ＣＴＬＡ４（細胞傷害性Tリンパ球抗原4）、ＰＤ−１（プログラム細胞死  １）、ＰＤ−Ｌ１（プログラブ細胞死リガンド  １）およびその関連物はガン免疫療法の標的と考えられ、免疫チェックポイント阻害剤はガンの治療に応用可能であると考えられている。免疫チェックポイント阻害剤としては、抗ＣＴＬＡ４抗体、イピリムマブ（ブリストルマイヤーズスクイッブ社）、2種の抗ＰＤ−１抗体、ニボルマブ（ブリストルマイヤーズスクイッブ）およびペンブロリズマブ（メルク社）、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体、アテゾリズマブ（ロシュ社）が、まず進行性黒色肉腫および尿路上皮ガンへの適用ですでに上市されている。
【００１０】
併用療法は、ガンを含む重篤な病気に対して広く用いられている。ガンの治療のための抗ＰＤ−１抗体とメトフォルミンの併用についての報告が知られている。（Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．，２０１７Ｊａｎ；５（１），９−１６）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】ＪＰ  Ｈ０６−３０５９５９Ａ
【特許文献２】ＷＯ２００４／０７４２３６
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖ．２００９、８９巻、１０２５頁
【非特許文献２】Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ／Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、２０１２、１３巻２５１頁
【非特許文献３】Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、２０１１、１３（９）巻、１０１６
【非特許文献４】Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、２０１３、３６６巻、１５２頁
【非特許文献５】Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、２００６、５７４．１巻３３頁
【非特許文献６】Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、２０１３、１２３（７）、２７６４
【非特許文献７】Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．、２０１３、３６６；１３５
【非特許文献８】Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ、２０１５、６（１０）、７３６５
【非特許文献９】Ｃｉｒｃ  Ｒｅｓ．、２００９、１０４（３）、２８２頁
【非特許文献１０】Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ、２０１０、５３、２４０６
【非特許文献１１】Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２０１０、４２、６７６
【非特許文献１２】Ｊ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｉｓ．２００９、１６（４）、７３１
【非特許文献１３】Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０１２、１２２、２５３
【非特許文献１４】Ｃｅｌｌ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ、２００６、３、４０３
【非特許文献１５】Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、２０１１、４０６巻、３５３頁
【非特許文献１６】Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．，２０１７Ｊａｎ；５（１）巻，９−１６頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明者らは、ＡＭＰＫを活性化し、かつＭＡＣ（ＰＣＴ出願：ＰＣＴ／ＪＰ２０１７／０００９０２）に比して、有意に代謝安定性が改善されたアスコクロリン誘導体を作成した。本発明者らは、これらのアスコクロリン誘導体がいくつかの病態モデル、特にガンおよび代謝疾患の病態モデルにおいて、in vivoでの優れた有効性を示すことを見出した。一方、ガンを含むいくつかの病気を治療又は予防する方法に関して、強いニーズが存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、鋭意、研究を行い、その結果、アスコクロリン誘導体と免疫チェックポイント阻害剤との併用により、ガンを含む病気の治療および予防に優れた効果を示すことを発見し、本発明を完成させた。
【００１５】
本発明は、アスコクロリン誘導体と免疫チェックポイント阻害剤との併用により、ガンを含む少なくとも一つの病気の治療および予防に関する。本発明はまた、ガンを含む少なくとも一つの病気の治療および予防のために、免疫チェックポイント阻害剤投与との併用に用いられるアスコクロリン誘導体を含む医薬組成物も対象とする。
【００１６】
本発明の一態様によれば、以下の発明が提供される：
【００１７】
（１−１）式（Ｉ）により表される化合物を含む医薬組成物：
【化１】
2020520378.tif 000003
式中、
Ｒ１は、ホルミルまたは−ＣＨ＝Ｎ−Ｏ−Ｙであり、ここで、Ｙは、水素原子またはＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２は、Ｃ１〜６アルキルであり、ここで、アルキルは、１〜５個のフッ素原子で置換されていてもよく、
Ｒ３は、水素原子またはＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ４は、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、Ｃ３〜７シクロアルキルアミノ、または
環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−もしくは−ＳＯ２−を含有する３〜７員のヘテロシクロアルキルアミノであり、または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＞Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｚを形成し、
Ｚは、水素原子、Ｃ１〜６アルキル、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎ−Ｒ５または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ５であり、
ｎは、１〜４から選択される整数であり、
Ｒ５は、−ＣＯ２Ｒ６、−ＣＯＮＲ７Ｒ８、−ＯＣＯＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２Ｒ９、ヒドロキシ、−ＮＨＳＯ２Ｒ９または−ＮＲ７Ｒ８であり、
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、水素原子、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ３〜７シクロアルキルからなる群から選択され、またはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−もしくは−ＳＯ２−をさらに含有してもよい窒素含有複素環式環を形成し、ここで、複素環式環は、ヒドロキシおよびＣ１〜６アルキルから選択される１つもしくは複数の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ９は、Ｃ１〜６アルキルまたはＣ３〜７シクロアルキルである］、
その組成物が免疫チェックポイント阻害剤投与との併用に用いられる、その薬学的に許容される塩または溶媒和物。
【００１８】
（１−２）Ｒ４が、ヒドロキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、シクロプロピルアミノおよびオキセタン−３−イルアミノからなる群から選択される、（１−１）に記載の医薬組成物。
【００１９】
（１−３）Ｒ３およびＲ４が、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＞Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｚを形成し、ここで、Ｚが、水素原子、Ｃ１〜６アルキル、−ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｒ５、モルホリノエチル、ピペラジニルエチル、Ｎ−メチル−ピペラジニルエチルおよびＮ，Ｎ−ジメチルアミノ−エチルからなる群から選択される、（１−１）に記載の医薬組成物。
【００２０】
（１−４）Ｒ１が、ホルミルである、（１−２）または（１−３）に記載の医薬組成物。
【００２１】
（１−５）Ｒ１が、−ＣＨ＝Ｎ−ＯＨである、（１−２）または（１−３）に記載の医薬組成物。
【００２２】
（１−６）Ｒ１が、−ＣＨ＝Ｎ−ＯＭｅである、（１−２）または（１−３）に記載の化合物、その薬学的に許容される塩または溶媒和物。
【００２３】
（１−７）３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒド、
［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−（３−クロロ−５−ホルミル−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ２−（ジメチルアミノ）アセテート、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−モルホリノエトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒド、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（２−（ジメチルアミノ）エトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−モルホリノエトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシイミノ）−シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
エチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−アミノ−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−（オキセタン−３−イルアミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−フルオロメトキシ−５−ホルミル−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］−アミノ］オキシ）酢酸、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−メトキシ−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸およびそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、（１）に記載の化合物からなる、（１−１）に記載の医薬組成物。
【００２４】
（１−８）免疫チェックポイント阻害剤が抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ−１抗体および抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される、（１−１）から（１−７）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００２５】
（１−９）医薬組成物が、ガンを治療又は予防するための使用である、（１−１）から（１−７）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００２６】
（１−１０）免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ−１抗体である、（１−１）から（１−７）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００２７】
（１−１１）免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、（１−１）から（１−７）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００２８】
（１−１２）免疫チェックポイント阻害剤が、０．１〜２００ｍｇ/ｋｇ/日の量で投与される、（１−１）から（１−１１）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００２９】
（１−１３）式（Ｉ）で表される化合物が１〜５００ｍｇ/ｋｇ/日の量で投与される、（１−１）から（１−１２）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００３０】
（２−１）式（Ｉ）で表される化合物の投与と併用される免疫チェックポイント阻害剤を含む医薬組成物。
【化２】
2020520378.tif 000004
式中、
Ｒ１は、ホルミルまたは−ＣＨ＝Ｎ−Ｏ−Ｙであり、ここで、Ｙは、水素原子またはＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２は、Ｃ１〜６アルキルであり、ここで、アルキルは、１〜５個のフッ素原子で置換されていてもよく、
Ｒ３は、水素原子またはＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ４は、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、Ｃ３〜７シクロアルキルアミノ、または
環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−もしくは−ＳＯ２−を含有する３〜７員のヘテロシクロアルキルアミノであり、または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＞Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｚを形成し、
Ｚは、水素原子、Ｃ１〜６アルキル、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎ−Ｒ５または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ５であり、
ｎは、１〜４から選択される整数であり、
Ｒ５は、−ＣＯ２Ｒ６、−ＣＯＮＲ７Ｒ８、−ＯＣＯＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２Ｒ９、ヒドロキシ、−ＮＨＳＯ２Ｒ９または−ＮＲ７Ｒ８であり、
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、水素原子、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ３〜７シクロアルキルからなる群から選択され、またはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−もしくは−ＳＯ２−をさらに含有してもよい窒素含有複素環式環を形成し、ここで、複素環式環は、ヒドロキシおよびＣ１〜６アルキルから選択される１つもしくは複数の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ９は、Ｃ１〜６アルキルまたはＣ３〜７シクロアルキルである］、
その薬学的に許容される塩または溶媒和物。
【００３１】
（２−２）Ｒ４が、ヒドロキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、シクロプロピルアミノおよびオキセタン−３−イルアミノからなる群から選択される、（２−１）に記載の医薬組成物。
【００３２】
（２−３）Ｒ３およびＲ４が、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＞Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｚを形成し、ここで、Ｚが、水素原子、Ｃ１〜６アルキル、−ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｒ５、モルホリノエチル、ピペラジニルエチル、Ｎ−メチル−ピペラジニルエチルおよびＮ，Ｎ−ジメチルアミノ−エチルからなる群から選択される、（２−１）に記載の医薬組成物。
【００３３】
（２−４）Ｒ１が、ホルミルである、（２−２）または（２−３）に記載の医薬組成物。
【００３４】
（２−５）Ｒ１が、−ＣＨ＝Ｎ−ＯＨである、（２−２）または（２−３）に記載の医薬組成物。
【００３５】
（２−６）Ｒ１が、−ＣＨ＝Ｎ−ＯＭｅである、（２−２）または（２−３）に記載の化合物、その薬学的に許容される塩または溶媒和物。
【００３６】
（２−７）３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒド、
［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−（３−クロロ−５−ホルミル−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ２−（ジメチルアミノ）アセテート、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−モルホリノエトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒド、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（２−（ジメチルアミノ）エトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−モルホリノエトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシイミノ）−シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
エチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−アミノ−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−（オキセタン−３−イルアミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−フルオロメトキシ−５−ホルミル−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］−アミノ］オキシ）酢酸、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−メトキシ−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸およびそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、式（Ｉ）に記載の化合物からなる、（２−１）に記載の医薬組成物。
【００３７】
（２−８）免疫チェックポイント阻害剤が抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ−１抗体および抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される、（２−１）から（２−７）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００３８】
（２−９）医薬組成物が、ガンを治療又は予防するための使用である、（２−１）から（２−７）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００３９】
（２−１０）免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ−１抗体である、（２−１）から（２−７）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００４０】
（２−１１）免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、（２−１）から（２−７）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００４１】
（２−１２）免疫チェックポイント阻害剤が、０．１〜２００ｍｇ/ｋｇ/日の量で投与される、（２−１）から（２−１１）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００４２】
（２−１３）式（Ｉ）で表される化合物が１〜５００ｍｇ/ｋｇ/日の量で投与される、（２−１）から（２−１２）のいずれか1つに記載の医薬組成物。
【００４３】
（３−１）式（Ｉ）で表される化合物を治療に有効な量を投与することからなる、ＡＭＰＫの調節不全に関連する病気の治療又は予防方法であって、
【化３】
2020520378.tif 000005
式中、
Ｒ１は、ホルミルまたは−ＣＨ＝Ｎ−Ｏ−Ｙであり、ここで、Ｙは、水素原子またはＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ２は、Ｃ１〜６アルキルであり、ここで、アルキルは、１〜５個のフッ素原子で置換されていてもよく、
Ｒ３は、水素原子またはＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ４は、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、Ｃ３〜７シクロアルキルアミノ、または
環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−もしくは−ＳＯ２−を含有する３〜７員のヘテロシクロアルキルアミノであり、または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＞Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｚを形成し、
Ｚは、水素原子、Ｃ１〜６アルキル、−ＣＯ（ＣＨ２）ｎ−Ｒ５または−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ５であり、
ｎは、１〜４から選択される整数であり、
Ｒ５は、−ＣＯ２Ｒ６、−ＣＯＮＲ７Ｒ８、−ＯＣＯＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２Ｒ９、ヒドロキシ、−ＮＨＳＯ２Ｒ９または−ＮＲ７Ｒ８であり、
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、水素原子、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ３〜７シクロアルキルからなる群から選択され、またはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−もしくは−ＳＯ２−をさらに含有してもよい窒素含有複素環式環を形成し、ここで、複素環式環は、ヒドロキシおよびＣ１〜６アルキルから選択される１つもしくは複数の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ９は、Ｃ１〜６アルキルまたはＣ３〜７シクロアルキルである］、
その薬学的に許容される塩または溶媒和物であって、治療に有効な量の免疫チェックポイント阻害剤の投与と併用することを特徴とする。
【００４４】
（３−２）Ｒ４が、ヒドロキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、シクロプロピルアミノおよびオキセタン−３−イルアミノからなる群から選択される、（３−１）に記載の方法。
【００４５】
（３−３）Ｒ３およびＲ４が、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＞Ｃ＝Ｎ−Ｏ−Ｚを形成し、ここで、Ｚが、水素原子、Ｃ１〜６アルキル、−ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｒ５、モルホリノエチル、ピペラジニルエチル、Ｎ−メチル−ピペラジニルエチルおよびＮ，Ｎ−ジメチルアミノ−エチルからなる群から選択される、（３−１）に記載の方法。
【００４６】
（３−４）Ｒ１が、ホルミルである、（３−２）または（３−３）に記載の方法。
【００４７】
（３−５）Ｒ１が、−ＣＨ＝Ｎ−ＯＨである、（３−２）または（3−３）に記載の方法。
【００４８】
（３−６）Ｒ１が、−ＣＨ＝Ｎ−ＯＭｅである、（３−２）または（３−３）に記載の方法。
【００４９】
（３−７）３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒド、
［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−（３−クロロ−５−ホルミル−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ２−（ジメチルアミノ）アセテート、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−モルホリノエトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒド、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（２−（ジメチルアミノ）エトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−モルホリノエトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシイミノ）−シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
エチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、
（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−アミノ−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール、
（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−（オキセタン−３−イルアミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−フルオロメトキシ−５−ホルミル−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］−アミノ］オキシ）酢酸、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸、
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−メトキシ−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸およびそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、式（Ｉ）に記載の化合物からなる、（3−１）に記載の方法。
【００５０】
（３−８）免疫チェックポイント阻害剤が抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ−１抗体および抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される、（３−１）から（３−７）のいずれか1つに記載の方法。
【００５１】
（３−９）病気がガンであることを特徴とする、（３−１）から（３−７）のいずれか1つに記載の方法。
【００５２】
（３−１０）免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ−１抗体である、（３−１）から（３−７）のいずれか1つに記載の方法。
【００５３】
（３−１１）免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、（３−１）から（３−７）のいずれか1つに記載の方法。
【００５４】
（３−１２）免疫チェックポイント阻害剤が、０．１〜２００ｍｇ/ｋｇ/日の量で投与される、（３−１）から（３−１１）のいずれか1つに記載の方法。
【００５５】
（３−１３）式（Ｉ）で表される化合物が１〜５００ｍｇ/ｋｇ/日の量で投与される、（３−１）から（３−１２）のいずれか1つに記載の方法。
【発明の効果】
【００５６】
本発明の医薬組成物は、ガンまたは腫瘍、例えばガン種、扁平上皮ガン（例えば、頸管、眼瞼、眼瞼結膜、膣、肺、口腔、皮膚、膀胱、舌、喉頭、および食道）、腺ガン（例えば、前立腺、小腸、子宮内膜、子宮頸管、大腸、肺、膵臓、食道、直腸、子宮、胃、乳腺、卵巣）、肉腫（例えば、筋原性肉腫など）、白血病、神経腫 、黒色腫、およびリンパ腫の治療または予防に有用である。 特に、黒色腫、非小細胞肺ガン（NSLC）、腎臓ガン、非ホジキンリンパ腫、頭頸部ガン、および尿路上皮ガンから選択される。
【００５７】
本発明の式（Ｉ）で示す化合物は、ＡＭＰＫが調節不全である疾患、例えば、代謝症候群、２型糖尿病、脂質異常症、脂肪過多症、アテローム動脈硬化性心血管疾患、高血圧症および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、炎症ならびにアルツハイマー病のための、予防または治療剤として有用である。さらに、本発明の式（Ｉ）で示す化合物は、ガン、例えば、肝細胞ガン、神経膠腫、乳ガン、前立腺ガンおよび非小細胞肺ガンならびにガン関連炎症のための、予防または治療剤として有用である。ガンの例としては、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ経路の活性化および／または腫瘍サプレッサーＬＫＢ１の損失を伴うガン、例えば、乳ガン（例えば、トリプルネガティブ乳ガン）、肝細胞ガン（特にソラフェニブ耐性ＨＣＣ）、結腸ガン、前立腺ガン、神経膠腫および非小細胞肺ガンが挙げられる。［Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ、６（１０）巻、７３６５頁、２０１５］。
【図面の簡単な説明】
【００５８】
【図１】ＨｅｐＧ２細胞におけるＡＭＰＫ活性化および下流シグナル、ＡＣＣを示しているウエスタンブロット分析の結果を示す図である。
【図２】ＳＤラットにおける化合物１９の薬物動態学的プロファイルを示す図である。
【図３】試験実施例６で行われた試験の、Ｇ１，Ｇ２、Ｇ３およびＧ５のガンの増殖曲線を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００５９】
本明細書において、「Ｃ１〜６アルキル」という用語は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖状または分岐状の飽和炭化水素基を指す。その例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ブチル、イソ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ペンタン−３−イルなどが挙げられる。
【００６０】
「Ｃ１〜６アルキルアミノ」という用語は、Ｃ１〜６アルキルが上で定義した通りである基：−ＮＨ−（Ｃ１〜６アルキル）を意味する。
【００６１】
「Ｃ３〜７シクロアルキル」という用語は、３〜７個の炭素原子を有する飽和炭素環式基を指す。その例としては、シクロプロピル（ｃＰｒ）、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが挙げられる。
【００６２】
「Ｃ３〜７シクロアルキルアミノ」という用語は、「Ｃ３〜７シクロアルキル」が上で定義した通りである基：−ＮＨ−（Ｃ３〜７シクロアルキル）を意味する。その例としては、シクロプロピルアミノ、シクロブチルアミノ、シクロペンチルアミノ、シクロヘキシルアミノ、シクロヘプチルアミノなどが挙げられる。
【００６３】
「３〜７員のヘテロシクロアルキルアミノ」という用語は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−および−ＳＯ２−から選択される１個または複数のヘテロ原子を含む３〜７個の環原子を有する飽和複素環式基で置換されているアミノ基を指す。その例としては、ピロリジニルアミノ、ピペリジニルアミノ、ピペラジニルアミノ、Ｎ−メチルピペラジニルアミノ、モルホリニルアミノ、チオモルホリニルアミノ、イミダゾリジニルアミノ、ホモピペリジニルアミノ、ホモピペラジニルアミノなどが挙げられる。
【００６４】
「窒素含有の３〜７員の複素環式環」という用語は、少なくとも１個の窒素原子と、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−および−ＳＯ２−から選択される１個または複数のヘテロ原子とを含む、３〜７個の環原子を有する複素環式環を指す。その例としては、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、Ｎ−メチルピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ホモピペリジン、ホモピペラジンなどが挙げられる。
【００６５】
本発明の一実施形態において、Ｒ１は、アルデヒド、−ＣＨ＝Ｎ−ＯＨ、−ＣＨ＝Ｎ−ＯＭｅおよび−ＣＨ＝Ｎ−ＯＥｔから選択される。
【００６６】
本発明の別の実施形態において、Ｒ２は、１〜３個のフッ素原子で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル、例えば、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＦ２、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３およびＣＨ２ＣＦ３、好ましくはＣＨ３またはＣＨ２Ｆである。
【００６７】
本発明の別の実施形態において、Ｒ３は、水素、メチルおよびエチルから選択される。
【００６８】
本発明の別の実施形態において、Ｒ４は、ヒドロキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、シクロプロピルアミノ、オキセタン−３−イルアミノ、（３−モルホリノプロピル）アミノ、ピロリジン−３−イルアミノまたは（３−（２−メチルピペリジン−１−イル）プロピル）アミノからなる群から選択される。好ましくは、Ｒ４は、ヒドロキシル、エチルアミノ、シクロプロピルアミノおよびオキセタン−３−イルアミノから選択される。
【００６９】
本発明の別の実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、基  ＝Ｎ−Ｏ−Ｚを形成し、ここで、Ｚは、水素原子、Ｃ１〜６アルキルまたは−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ５であり、Ｒ５は、上で定義した通りである。基  ＝Ｎ−Ｏ−Ｚの例としては、ヒドロキシイミノ、メトキシイミノ、（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）エトキシ）イミノ、（２−モルホリノエトキシ）イミノ、（２−（４−メチルピペラジニル）エトキシ）イミノ、（エトキシカルボニルメトキシ）イミノ、（カルボキシメトキシ）イミノ、（（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）アセトキシ）イミノが挙げられる。
【００７０】
具体的には、本発明の式１の化合物の例としては、表１に示した化合物（化合物１〜２８）が挙げられる。
［表１］
【化４】
2020520378.tif 000006
【表１−１】
2020520378.tif 000007
【表１−２】
2020520378.tif 000008
【００７１】
より具体的には、本発明の式（Ｉ）の化合物の例としては、以下の化合物：
１）３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
２）３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
３）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム；
４）（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドオキシム；
５）３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒド；
６）［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−（３−クロロ−５−ホルミル−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ２−（ジメチルアミノ）アセテート；
７）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム；
８）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
９）（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
１０）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
１１）（Ｅ）−３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
１２）３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−モルホリノエトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒド；
１３）３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
１４）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
１５）（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−３−（２−（ジメチルアミノ）エトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
１６）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−モルホリノエトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
１７）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ，Ｅ）−１，２，６−トリメチル−３−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシイミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
１８）エチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート；
１９）２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸；
２０）３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
２１）（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
２２）３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
２３）（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
２４）２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−アミノ−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール；
２５）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−（オキセタン−３−イルアミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
２６）２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−フルオロメトキシ−５−ホルミル−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸；
２７）２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−フルオロメトキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸；
２８）２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−メトキシ−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸；
およびそれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。
【００７２】
本発明の式（Ｉ）の化合物の例としてはまた、以下の化合物：
７−１）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム；
７−２）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドオキシム；
１３−１）３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
１３−２）３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
１４−１）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
１４−２）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
２０−１）３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
２０−２）３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
２１−１）（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
２１−２）（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
２２−１）３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
２２−２）３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド；
２３−１）（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
２３−２）（Ｅ）−３−クロロ−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル）−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル）−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
２４−１）２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−アミノ−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール；
２４−２）２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，６Ｒ）−３−アミノ−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール；
２５−１）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−（オキセタン−３−イルアミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
２５−２）（Ｅ）−３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−（（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−（オキセタン−３−イルアミノ）シクロヘキシル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イル）ベンズアルデヒドＯ−メチルオキシム；
も挙げられる。
【００７３】
本発明の一態様によれば、式（Ｉ）に示した化合物は、上に示した番号（５）、（８）、（９）、（１０）、（１１）、（１２）、（１４）、（１５）、（１６）、（１９）、（２１）、（２４）、（２５）、（２６）、（２７）、（２８）の化合物から選択される化合物、特に好ましくは、上に示した番号（５）、（１０）、（１２）、（１５）、（１６）、（１９）、（２１）および（２５）の化合物から選択される化合物が提供される。
【００７４】
本発明の式（Ｉ）に示した化合物は、ＡＭＰＫおよびその下流エフェクター、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）のリン酸化を増加させる活性を有する［試験実施例１］。さらに、本化合物は、４−Ｏ−メチル−アスコクロリン（ＭＡＣ）およびそのプロドラッグ、ＭＡＣとグリシンアミドとのシッフ塩基（ＷＯ２００４／０７４２３６における化合物＃１３）と比較して、肝臓ミクロソーム（ヒトおよびマウス）による分解に対する著しく改善された代謝安定性［試験実施例３］、１日１回の経口処置を可能とする改善されたＰＫプロファイル［試験実施例４］、および改善された溶解性［試験実施例２］を有する。
【００７５】
本発明の化合物は、薬学的に許容される塩の形態で投与され得る。「薬学的に許容される塩」という用語は、非毒性であり、かつ薬学的に許容される塩基または酸を用いて調製される塩を指す。本発明の式（Ｉ）の化合物が塩基性である場合、その薬学的に許容される塩は、一般に、化合物に適切な有機または無機酸を添加することにより調製される。酸付加塩の例としては、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グルタミン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩およびトシル酸塩が挙げられる。
【００７６】
さらに、本発明の式（Ｉ）の化合物が酸性である場合、その薬学的に許容される塩は、一般に、化合物に適切な有機または無機塩基を添加することにより調製される。塩基付加塩の例としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、カリウム、ナトリウムなどを含む無機塩基から誘導される塩が挙げられる。特に好ましいものは、アンモニウム塩、カルシウム塩、カリウム塩およびナトリウム塩である。塩基付加塩の例としてはまた、第１級、第２級および第３級アミン、例えば、アルギニン、ベタイン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、トリエチルアミン、トリプロピルアミンなどから誘導される塩も挙げられる。
【００７７】
本発明の式（Ｉ）に示した化合物は、プロドラッグとして投与され得る。プロドラッグは、当業者が一般に入手可能な技術的知識に沿って調製することができる。例えば、カルボキシ基（−ＣＯＯＨ）またはヒドロキシ基が本発明の化合物中に存在する場合、プロドラッグは、カルボキシ基をメチル、エチルもしくはピバロイルオキシメチルエステルなどの薬学的に許容されるエステル基に変換することにより、またはヒドロキシ基を酢酸エステルもしくはマレイン酸エステルなどの薬学的に許容されるエステル基に変換することにより調製することができる。プロドラッグの使用は、徐放製剤またはプロドラッグ製剤として使用するために溶解性または加水分解特性を修飾するのに有益であり得る。
【００７８】
一実施形態において、本発明の式（Ｉ）に示した化合物は、非晶質形態または結晶形態で使用され得る。結晶形態は、溶媒を含んで、水和物などの溶媒和物を形成し得る。本発明の式（Ｉ）の化合物を含有する、そのような溶媒和物、または任意の混合物、例えば、溶液、懸濁液もしくは固体混合物の任意の使用を、本発明が包含する。
【００７９】
本発明の一態様によれば、ガンを含むＡＭＰＫ調節不全を伴う疾患を処置または予防するための方法であって、それを必要とする患者に、式（Ｉ）により表される化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を免疫チェックポイント阻害剤と併用して投与するステップを含む方法が提供される。ＡＭＰＫ調節不全を伴う疾患は、ガンが好ましい。式（Ｉ）の化合物の投与の適切な経路は、当業者により決定され得る。その例としては、経口、直腸内、非経口（静脈内、筋肉内または皮下）、槽内、膣内、腹腔内、膀胱内、局所（点滴注入、散剤、軟膏、ゲル剤またはクリーム剤）投与、および吸入（口腔内または鼻腔スプレー）が挙げられる。式（Ｉ）の化合物の投与用の剤形には、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、丸剤、経口使用のための水性および非水性の液剤または懸濁液剤、ならびに容器に充填した非経口用液剤が含まれる。
【００８０】
本発明の一態様によれば、式（Ｉ）により表される化合物またはその薬学的に許容される塩と、免疫チェックポイント阻害剤との併用のために使用される薬学的に許容される賦形剤または添加剤とを含む医薬組成物が提供される。組成物は、適切な経路、例えば、経口、直腸内、非経口（静脈内、筋肉内または皮下）、槽内、膣内、腹腔内、膀胱内、局所（点滴注入、散剤、軟膏、ゲル剤またはクリーム剤）投与、および吸入（口腔内または鼻腔スプレー）で投与され得る。投与用の剤形には、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、丸剤、経口使用のための水性および非水性の液剤または懸濁液剤、ならびに容器に充填した非経口用液剤が含まれる。
【００８１】
医薬組成物は、医薬製剤として投与され得る。医薬製剤は、賦形剤、コーティング剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、溶剤および界面活性剤または乳化剤などの添加剤を使用して、周知の方法により調製することができる。
【００８２】
賦形剤の例としては、ジャガイモデンプンおよびトウモロコシデンプンなどのデンプン類、ラクトース、結晶セルロースならびにリン酸水素カルシウムが挙げられる。
【００８３】
コーティング剤の例としては、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、セラック、タルク、カルナウバロウおよびパラフィンが挙げられる。
【００８４】
滑沢剤の例としては、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸が挙げられる。
【００８５】
結合剤の例としては、ポリビニルピロリドン、マクロゴール、および賦形剤として例示した物質と同じ物質が挙げられる。
【００８６】
崩壊剤の例としては、賦形剤として例示した物質と同じ物質、およびクロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、ならびに化学修飾されたデンプンまたはセルロース類が挙げられる。
【００８７】
安定剤の例としては、メチルパラベンおよびプロピルパラベンなどのパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコールおよびフェニルエチルアルコールなどのアルコール類；塩化ベンザルコニウム；フェノールおよびクレゾールなどのフェノール類；チメロサール；デヒドロ酢酸；ならびにアスコルビン酸が挙げられる。
【００８８】
矯味矯臭剤の例としては、従来から使用されている甘味料が挙げられる。
【００８９】
希釈剤の例としては、賦形剤として例示した物質が挙げられる。
【００９０】
溶剤の例としては、エタノール、フェノール、クロロクレゾール、精製水および蒸留水が挙げられる。
【００９１】
界面活性剤または乳化剤の例としては、ポリソルベート８０、ステアリン酸ポリオキシル４０、ラウロマクロゴール、ダイズ油、Ｍａｉｓｉｎ３５−１（Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅ、フランス）およびＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（ＢＡＳＦ、ドイツ）が挙げられる。
【００９２】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩の用量は、症状、年齢、体重、相対的健康状態、他の投薬の存在、投与方法などに応じて異なる。例えば、患者（温血動物、特にヒト）に対する活性成分として、経口剤についての一般に有効な用量は、１日当たりの用量で、好ましくは体重１ｋｇ当たり０．１〜１０００ｍｇ、より好ましくは体重１ｋｇ当たり１〜３０ｍｇである。正常体重の成人患者に対する１日当たりの用量は、好ましくは１０〜１０００ｍｇの範囲内である。非経口剤について、１日当たりの用量は、好ましくは体重１ｋｇ当たり０．１〜１０００ｍｇ、より好ましくは体重１ｋｇ当たり１０〜８００ｍｇである。好ましくは、そのような用量が、症状に応じて、１日１回もしくは数回に分けて、または断続的なスケジュールで投与される。
【００９３】
免疫チェックポイント阻害剤としては、細胞障害性Ｔリンパ球関連タンパク４（ＣＴＬＡ４）阻害剤、プログラム細胞死タンパク１（ＰＤ−１）阻害剤，またはプログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）阻害剤が含まれる。本発明において、抗ＣＴＬＡ抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−１融合タンパクまたは抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、好ましく、免疫チェックポイント阻害剤として用いられる。抗ＣＴＬＡ抗体の例としては、イピリムマブおよびトレメリムマブがあげられる。抗ＰＤ−１融合タンパクの例としては、ＡＮＰ−２２４があげられる。抗ＰＤ−１抗体の例としては、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピデリズマブ（ＣＴ−０１１）、ＭＥＤＩ０６８０（ＡＭＰ−５１４）、ＲＥＧＮ２８１０，ＰＤＲ００１、ＪＳ００１−ＰＤ−１，ＳＨＲ−１２１０およびＢＭＳ−９３６５５９があげられる。特に、抗ＰＤ−１抗体としては、ニボルマブおよびペンブロリズマブが選択される。
抗ＰＤ−Ｌ１抗体としては、アテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ），アヴェルマブ（ＭＳＢ００１０７１８Ｃ）、ドルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６）およびＢＭＳ−９３６５５９が例として挙げられる。
【００９４】
免疫チェックポイント阻害剤は、良く知られたルート及び量で、式（Ｉ）の化合物と同時又は連続的に投与することが可能である。化合物が免疫チェックポイント阻害剤と同時に投与される場合は、これらの成分は、１単位剤型または２単位剤型またはそれ以上の別れた剤型の中に含有させることが可能である。併用療法においては、式（Ｉ）の化合物および免疫チェックポイント阻害剤は、別々の重複スケジュールで投与される。併用療法においては、式（Ｉ）の化合物および免疫チェックポイント阻害剤は、それぞれ単独で投与する場合より低い投与量にすることができると考えられる。
【００９５】
本発明において用いられる式（Ｉ）の化合物および免疫チェックポイント阻害剤の投与量は、患者の年齢、体重、症状、重篤度、治療効果、投与ルート、投与スケジュールおよび治療期間によって決められる。
【００９６】
本発明の一つの態様として、式（Ｉ）の化合物は１〜５００ｍｇ/ｋｇ/日、好ましくは１０〜３００ｍｇ/ｋｇ/日、より好ましくは２５〜５０ｍｇ/ｋｇ/日投与される。
【００９７】
本発明の一つの態様として、免疫チェックポイント阻害剤は０．１〜２００ｍｇ/ｋｇ/日、好ましくは１〜５０ｍｇ/ｋｇ/日、より好ましくは５〜１５ｍｇ/ｋｇ/日投与される。
【００９８】
本発明の一つの態様として、抗ＰＤ−１抗体は０．１〜２００ｍｇ/ｋｇ/日、好ましくは１〜５０ｍｇ/ｋｇ/日、より好ましくは５〜１５ｍｇ/ｋｇ/日投与される。
【００９９】
本発明の一つの態様として、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は０．１〜２００ｍｇ/ｋｇ/日、好ましくは１〜５０ｍｇ/ｋｇ/日、より好ましくは５〜１５ｍｇ/ｋｇ/日投与される。
【０１００】
本発明の一つの態様として、式（Ｉ）の化合物は１〜５００ｍｇ/ｋｇ/日、そして免疫チェックポイント阻害剤は０．１〜２００ｍｇ/ｋｇ/日投与される。また別の本発明の態様として、本発明の一つの態様として、式（Ｉ）の化合物は１０〜３００ｍｇ/ｋｇ/日、そして免疫チェックポイント阻害剤は１〜５０ｍｇ/ｋｇ/日投与される。またさらに別の本発明の態様として、式（Ｉ）の化合物は１〜５００ｍｇ/ｋｇ/日、そして免疫チェックポイント阻害剤は５〜１５ｍｇ/ｋｇ/日投与される。
【０１０１】
本発明における組成物は、ＡＭＰＫの調節不全に起因する病気、特にガンの治療および予防に使用できる。ガンまたは腫瘍としては、例えば特に、黒色腫、非小細胞肺ガン（NSLC）、腎臓ガン、非ホジキンリンパ腫、頭頸部ガン、胃ガン、食道ガン、卵巣ガン、肝ガン、乳ガン、大腸ガンおよび尿路上皮ガンがあげられる。
【０１０２】
式（Ｉ）により表される化合物を調製するための合成プロセスを、以下のスキームおよび実施例において例示する。
【０１０３】
出発物質であるアスコクロリンは、１９７０年に公開されたＪＰ  Ｓ４５−００９８３２Ｂに記載されている通りのＡｓｃｏｃｈｙｔｓ  ｖｉｃｉａｅ  Ｌｉｂｅｒｔの発酵により得ることができる。以下のスキームにおいて、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、ＹおよびＺは、すでに定義した通りである。
【化５】
2020520378.tif 000009
【０１０４】
スキーム１は、化合物（ＩＶ）、（ＶＩａ）または（ＶＩｂ）を生成するための方法を示す。Ｒ２がメチル（４−Ｏ−メチル−アスコクロリン）である化合物（ＩＩ）は、ＪＰ  Ｈ６−３０５９５９Ａに記載されている方法により調製することができる。Ｒ２がフッ素化アルキル基である化合物（ＩＩ）は、適切な溶媒中、塩基の存在下での、フルオロアルキル化剤によるＯ−アルキル化により得ることができる。塩基の例としては、炭酸カリウム、炭酸セシウムなどが挙げられる。フルオロアルキル化剤の例としては、ブロモフルオロメタン、ビス（トリフルオロメチル）−ビス（トリフルオロメチルオキシ）−スルファン、５−ｔｅｒｔ−ブチル−２’−（トリフルオロメトキシ）ビフェニリル−２−ジアゾニウムヘキサフルオロアンチモネート、２，２，２−トリス（フルオラニル）エチルメタンスルホネート、２−ジアゾ−１，１，１−トリス（フルオラニル）エタン、トリス（フルオラニル）メタン、１−クロラニル−４−［クロラニル−ビス（フルオラニル）メチル］スルホニル−ベンゼンなどが挙げられる。
【０１０５】
化合物（ＩＶ）は、ピリジン、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウムなどの塩基の存在下で、化合物（ＩＩ）をＮＨ２ＯＹ（ＩＩＩ）と反応させることにより調製することができる。化合物（ＶＩｂ）は、ピリジン、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウムなどの塩基の存在下で、化合物（ＩＶ）をＮＨ２ＯＺ（Ｖ）と反応させることにより調製することができる。化合物（ＶＩａ）は、上記と同じ反応条件において２当量以上のヒドロキシアミン（ＩＩＩ）を反応させることにより、化合物（ＩＩ）から直接調製することができる。
【０１０６】
Ｚが−（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｈである化合物（ＶＩｂ）は、Ｚが−（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ６である対応するエステル誘導体（ＶＩｂ）の塩基性加水分解により調製することができる。
【化６】
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【０１０７】
スキーム２は、化合物（Ｘ）を生成するための方法を示す。Ｒ２がメチルまたはフッ素化アルキルである化合物（ＶＩＩＩ）は、ＪＰ２００５−２２５８５１Ａに記載されている方法により、Ｒ２がメチルまたはフッ素化アルキルであるＯ−アセチル誘導体（ＶＩＩ）を介してアスコクロリンから調製することができる。中間体（ＩＸ）は、ピリジン、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウムなどの塩基の存在下で、中間体（ＶＩＩＩ）をＮＨ２Ｏ−Ｚ（Ｖ）と反応させることにより調製することができる。化合物（Ｘ）は、当業者に公知の方法による、適切な溶媒中の化合物（ＩＸ）のアセタール基の酸性加水分解により調製することができる。
【化７】
2020520378.tif 000011
【０１０８】
スキーム３は、化合物（Ｘ）を生成するための別の方法を示す。化合物（Ｘ）は、１００℃にてＴＨＦ／Ｈ２Ｏ中の塩酸で処理することにより、対応するオキシム誘導体（ＶＩ）から調製することができる。
【化８】
2020520378.tif 000012
【０１０９】
スキーム４は、化合物（ＸＩＩ）および（ＸＩＩＩ）を生成するための方法を示す。中間体（ＸＩ）は、適切な溶媒中で、中間体（ＶＩＩＩ）をアルキルリチウム、アルキルグリニャール剤またはアルキル銅リチウム試薬などのアルキル化剤と反応させることにより調製することができる。化合物（ＸＩＩ）は、適切な溶媒中の中間体（ＸＩ）のアセタール基の酸性加水分解により調製することができる。
【０１１０】
化合物（ＸＩＩＩ）は、適切な溶媒中で、中間体（ＩＶ）を上述のアルキル化剤と反応させることにより調製することができる。化合物（ＸＩＩＩ）はまた、ピリジン、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウムなどの塩基の存在下で、化合物（ＸＩＩ）をＮＨ２−ＯＹ（ＩＩＩ）と反応させることによっても調製することができる。化合物（ＸＩＩ）は、スキーム３に記載した反応条件と同様の反応条件下で、化合物（ＸＩＩＩ）から調製することもできる。
【化９】
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【０１１１】
スキーム５ａは、Ｒ１１がＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜７シクロアルキル、または環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−もしくは−ＳＯ２−を含有する３〜７員のヘテロシクロアルキルである化合物（ＸＶ）および（ＸＶＩ）を生成するための方法を示す。中間体（ＸＩＶ）は、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤を使用する、１つのステップの、または中間体イミン（ＸＶＩＩ）を介した段階的な、第１級アミン、Ｒ１１−ＮＨ２による中間体（ＶＩＩＩ）の還元的アミノ化により調製することができる。
【０１１２】
化合物（ＸＶ）は、当業者に公知の方法による、適切な溶媒中の化合物（ＸＩＶ）のアセタール基の酸性加水分解により調製することができる。化合物（ＸＶＩ）は、直接的、または中間体（ＸＶＩＩＩ）を介した段階的のいずれかでの、上記と同じ方法による、第１級アミン、Ｒ１１−ＮＨ２による中間体（ＩＶ）の還元的アミノ化により調製することができる。
【０１１３】
化合物（ＸＶ）はまた、スキーム３に記載した反応条件と同様の反応条件下で、式（ＸＶＩ）により表されるオキシムエーテル誘導体から調製することもできる。
【化１０】
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【０１１４】
Ｒ１１が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜７シクロアルキル、または環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−、−ＳＯ−もしくは−ＳＯ２−を含有する３〜７員のヘテロシクロアルキルアミノ、例えばオキセタンである、化合物（ＸＶＩ）は、２つのステップで：（ｉ）エタノール中の酢酸アンモニウム／シアノ水素化ホウ素ナトリウムによる還元的アミノ化、（ｉｉ）続いて、ジクロロメタン中の、オキセタン−３−オンおよびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムなどのＲ１１に対応するケトンによる、得られた中間体（ＸＩＸ）の第２の還元的アミノ化により、中間体（ＩＶ）から調製することができる。
【化１１】
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【０１１５】
スキーム６は、Ｒ１１が、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜７シクロアルキル、または環原子として−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ６−もしくは−ＳＯ２−を含有する３〜７員のヘテロシクロアルキルである、化合物（ＸＸＩ）を生成するための方法を示す。中間体（ＸＸ）は、スキーム２または３により調製することができる。化合物（ＸＸＩ）は、活性エステル法による、または当業者に公知の縮合剤を用いる、式Ｒ１２ＣＯ２Ｈのカルボン酸によるＸＸのエステル化により調製することができる。
【０１１６】
式（Ｉ）により表される本発明の化合物を遊離形態で得る場合、これは従来の方法で塩に変換することができる。
【実施例】
【０１１７】
以下、本発明を、実施例を用いてより具体的に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。
【０１１８】
ＮＭＲ分析は、Ｂｒｕｃｋｅｒ、ＡＶＡＮＣＥ  ４００ＭＨｚまたは３００ＭＨｚを使用して実施し、ＮＭＲデータはｐｐｍ（百万分率）での化学シフト（δ）として表し、試料溶媒からの重水素ロック信号を基準とした。質量スペクトルデータは、フォトダイオードアレイ、ＳＰＤ−Ｍ２０Ａ、ＥＳＩ−ＳＱＤ２０２０または２０１０を備えたＬＣ−ＭＳ、Ｓｈｉｍａｚｕ  ＬＣＭＳ−２０２０または−２０１０（島津製作所）を使用して取得した。
【０１１９】
市販の試薬はさらに精製することなく使用した。「室温」は、約２０℃〜２５℃の範囲の温度を意味する。すべての非水性反応を、窒素雰囲気下で行った。減圧下での溶媒の濃縮または蒸留は、ロータリーエバポレーターを使用したことを意味する。
【０１２０】
化合物の調製においては、官能基を、標的化合物を得るために必要に応じて保護基で保護し、続いて保護基の除去を行った。保護基の選択、ならびに保護基の導入または除去のための手順は、例えば、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（第２版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、１９９１）に記載されている方法に従って行った。
実施例１
【０１２１】
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチル−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−オキソシクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］ベンズアルデヒドの合成
【化１２】
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【０１２２】
アセトニトリル（１２０ｍＬ）中の３−クロロ−４，６−ジヒドロキシ−２−メチル−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−オキソシクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］ベンズアルデヒド、（アスコクロリン、６ｇ、１４．８２ｍｍｏｌ）の溶液、ブロモフルオロメタン（過剰）、炭酸セシウム（２．４ｇ、７．３８ｍｍｏｌ）を、２５０ｍＬの密封管に入れた。得られた混合物を２５℃で１６時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を真空下で濃縮した。得られた残留物を、石油エーテル／酢酸エチル（５：１）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物を比１：５のジクロロメタン／ヘキサンから再結晶して、表題化合物（４．５ｇ、７０％）をオフホワイトの固体として得た。
LC-MS (ES, m/z): 435 [M-H]-
1H-NMR (400MHz, DMSO, ppm):  δ 12.60 (s, 1H), 10.30 (s, 1H), 5.86 (m, 2H), 5.72 (s, 1H), 5.42 (m, 2H), 3.50 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.64 (s, 3H), 2.54-2.49 (m, 2H), 2.17 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.84 (s, 4H), 1.52 (m, 1H), 0.73-0.67 (m, 6H), 0.59 (s, 3H)
F-NMR (400MHz, DMSO, ppm):  δ -148.31。
実施例２
【０１２３】
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−５−（ジエトキシメチル）−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オンの合成
【化１３】
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【０１２４】
ステップ１
ピリジン（１２ｍＬ）中の３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチル−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−オキソシクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］ベンズアルデヒド［実施例１］（６００ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素雰囲気でパージおよび維持した５０ｍＬの丸底フラスコに入れ、無水酢酸（１９６ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。得られた溶液を２５℃で１．５時間撹拌した。次いで、混合物をジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、塩酸水溶液（０．３ｍｏｌ／Ｌ、２０ｍＬ×５）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮して、４−クロロ−３−（フルオロメトキシ）−６−ホルミル−５−メチル−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−オキソシクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］フェニルアセテート（５００ｍｇ、７６％）を白色固体として得た。
【０１２５】
ステップ２
エタノール（２２．５ｍＬ）中の４−クロロ−３−（フルオロメトキシ）−６−ホルミル−５−メチル−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−オキソシクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］フェニルアセテート（５００ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素雰囲気でパージおよび維持した２５０ｍＬの丸底フラスコに入れ、トリエチルアミン（０．０２ｍＬ）を２５℃で添加した。溶液を２５℃で５時間撹拌し、次いで真空下で濃縮して、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−５−（ジエトキシメチル）−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン（４１０ｍｇ、７７％）を黄色油状物として得た。
実施例３
【０１２６】
３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド（化合物１−１）の合成
【化１４】
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【０１２７】
Ｒ２がメチルである中間体（ＶＩＩＩ）：（４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−５−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−５−（ジエトキシメチル）−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−４，５，６−トリメチルオキサン−３−オンを、ＪＰ２００５−２２５８５１Ａに記載されている手順によりアスコクロリンから調製した。
【０１２８】
ステップ１
テトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−５−（ジエトキシメチル）−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン（１ｇ、２．０３ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素雰囲気でパージおよび維持した５０ｍＬの三口丸底フラスコに入れ、続いて−７８℃で撹拌しながらメチルマグネシウムブロミド（２ｍＬ、３．００当量、３Ｍ）を滴下添加した。得られた溶液を０℃で３時間撹拌した。次いで、反応物を、飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬ）の添加によりクエンチした。得られた混合物をジエチルエーテル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。得られた残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、４−クロロ−２−（ジエトキシメチル）−６−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−５−メトキシ−３−メチルフェノール（０．６ｇ、６０％）を薄黄色固体（ｍｐ．３９〜４０℃）として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、Ｃ１８シリカゲル；移動相、アセトニトリル／水＝７０／３０から１０分以内にＣＨ３ＣＮ／水＝９０／１０、次いで１０分以内にＣＨ３ＣＮまで増加；検出器、ＵＶ２１０ｎｍ。  LC-MS (ESI, m/z): 507 [M-H]- 。
1H-NMR (CD3CN, 400 MHz, ppm):  δ5.91 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 5.83 (s, 1H), 5.38-5.43 (m, 1H), 5.30 (d, J = 16 Hz, 1H), 3.72-3.79 (m, 5H), 3.62-3.68 (m, 2H), 3.46 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.87 (s, 3H), 1.45-1.70 (m, 3H), 1.29-1.35 (m, 2H), 1.20-1.25 (m, 7H), 1.12 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.80 (d, J = 5.6 Hz, 3H), 0.70 (d, J = 5.4 Hz, 3H) 。
【０１２９】
ステップ２
テトラヒドロフラン／水（１０ｍＬ／２０ｍＬ）中の４−クロロ−２−（ジエトキシメチル）−６−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−５−メトキシ−３−メチルフェノール（３５５ｍｇ、０．６９９ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素雰囲気でパージおよび維持した５０ｍＬの丸底フラスコに入れ、続いて酢酸（５ｍＬ）を添加した。得られた溶液を２５℃で５時間撹拌した。得られた溶液を真空下で濃縮した。得られた残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド（０．２６ｇ、７６％、化合物１）をオフホワイトの固体（ｍｐ．４２〜４３℃）として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、Ｃ１８シリカゲル；移動相、ＣＨ３ＣＮ／水＝７０／３０から１０分以内にＣＨ３ＣＮ／水＝９０／１０まで増加；検出器、ＵＶ２１０ｎｍ。
LC-MS (ESI, m/z): 433 [M-H]-
1H-NMR (CD3CN, 400 MHz, ppm):  δ10.25 (s, 1H), 5.89 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.40 (t, J = 1.2 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.48 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.63 (s, 3H), 1.87 (s, 3H), 1.57-1.78 (m, 3H), 1.33-1.47 (m, 3H), 1.09 (s, 3H), 0.79 (d, J = 3.2 Hz, 3H), 0.68 (d, J = 6.8 Hz, 3H) 。
実施例４
【０１３０】
３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド（化合物２）の合成
【化１５】
2020520378.tif 000019
【０１３１】
ステップ１
ピリジン（３０ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−５−（ジエトキシメチル）−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン（１ｇ、２．０３ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素の不活性雰囲気でパージおよび維持した５０ｍＬの三口丸底フラスコに入れ、続いてヒドロキシアミン塩酸塩（２００ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２５℃で１６時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮した。残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、４−クロロ−２−（ジエトキシメチル）−６−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−５−メトキシ−３−メチルフェノール（０．４０ｇ、３９％）をオフホワイトの固体（ｍｐ．６８〜７０℃）として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、Ｃ１８シリカゲル；移動相、ＣＨ３ＣＮ／水＝７０／３０から１５分以内にＣＨ３ＣＮ／水＝９０／１０、次いで１０分以内にアセトニトリルまで増加；検出器、ＵＶ２１０ｎｍ。
LC-MS: (ESI, m/z): 506 [M-H]-
1H-NMR: (CD3CN, 400 MHz, ppm):  δ 5.95 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.81 (s, 1H), 5.42 (q, J = 12.8 Hz, 4.8 Hz, 2H), 3.69-3.77 (m, 5H), 3.59-3.66 (m, 2H), 3.45 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.27-3.32 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.27 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 1.88 (s, 3H), 1.60-1.72 (m, 3H), 1.19-1.29 (m, 7H), 0.82 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.72 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.67 (s, 3H) 。
【０１３２】
ステップ２
テトラヒドロフラン／水（１０ｍＬ／２０ｍＬ）中の４−クロロ−２−（ジエトキシメチル）−６−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−５−メトキシ−３−メチルフェノール（３７０ｍｇ、０．７２６ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素雰囲気でパージおよび維持した１００ｍＬの二口丸底フラスコに入れ、続いて酢酸（１０ｍＬ）を添加した。混合物を２５℃で５時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮した。残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド（２２０ｍｇ、７０％、化合物２）を薄黄色固体（ｍｐ．１５８〜１６０℃）として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、Ｃ１８シリカゲル；移動相、ＣＨ３ＣＮ／水＝７０／３０から１０分以内にＣＨ３ＣＮ／水＝９０／１０まで増加；検出器、ＵＶ２１０ｎｍ。
LC-MS(ESI, m/z): 432 [M-H]-
1H-NMR (CD3CN, 400 MHz, ppm):  δ10.25 (s, 1H), 5.94 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 5.44 (q, J = 15.6 Hz, 6.8 Hz, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.50 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.29 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.21 (q, J = 13.6 Hz, 6.8 Hz, 1H), 1.90 (s, 3H), 1.60-1.69 (m, 3H), 1.20-1.33 (m, 1H), 0.81 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.71 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.66 (s, 3H) 。
実施例５
【０１３３】
４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−３−メトキシ−５−メチルフェノール（化合物３）の合成
【化１６】
2020520378.tif 000020
【０１３４】
ピリジン（１４ｍｌ）中の３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−オキソシクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］ベンズアルデヒド（７００ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ、アスコクロリン）の溶液を、２５ｍＬの丸底フラスコに入れ、続いてヒドロキシアミン塩酸塩（２９０ｍｇ、４．１７ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１６時間撹拌し、次いで真空下で濃縮した。ジクロロメタン（１００ｍｌ）で希釈した後、得られた溶液を塩酸水溶液（１Ｎ、５０ｍＬ×２）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。得られた残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（２２１．８ｍｇ、２９．６％）を白色固体として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、シリカゲル；移動相、ＣＨ３ＣＮ／水（０．０８％重炭酸アンモニウム）＝５０／５０から２５分以内にＣＨ３ＣＮ／水（０．０８％重炭酸アンモニウム）＝８０／２０まで増加；検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
LC-MS (ES, m/z): 449 [M+H]+
1H-NMR (CD3OD, 400MHz, ppm): 8.56 (s, 1H), 5.92 (d, J=16 Hz, 1H), 5.46 (m,2H), 3.78 (s, 3H), 3.52 (d, J=7.2 Hz, 2H), 3.41(m, 1H), 3.31 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.20 (m, 1H), 1.91(s, 3H), 1.67 (m, 3H), 1.33 (m, 1H), 0.91-0.69 (m, 9H) 。
実施例６
【０１３５】
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−２−メチルベンズアルデヒド（化合物５）の合成
【化１７】
2020520378.tif 000021
【０１３６】
ステップ１
ピリジン（１２．３ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−５−（ジエトキシメチル）−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン［実施例２］（４１０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）の溶液を、２５ｍＬの丸底フラスコに入れ、続いてヒドロキシアミン塩酸塩（８３．７ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ、１．５０当量）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で終夜撹拌し、次いでジクロロメタン（３００ｍＬ）で希釈した。有機層を塩化水素水溶液（０．３ｍｏｌ／Ｌ、２００ｍＬ×５）で洗浄した。有機層を合わせ、真空下で濃縮して、４−クロロ−２−（ジエトキシメチル）−５−（フルオロメトキシ）−６−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メチルフェノール（３３０ｍｇ、７８％）を黄色固体として得た。
【０１３７】
ステップ２
テトラヒドロフラン（６．６ｍＬ）中の４−クロロ−２−（ジエトキシメチル）−５−（フルオロメトキシ）−６−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メチルフェノール（３３０ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）の溶液を、２５０ｍＬの丸底フラスコに入れ、次いで水（１３．２ｍＬ）中の氷酢酸（６．６ｍＬ、５．５６当量）の溶液を２５℃で添加した。混合物を２５℃で４時間撹拌し、次いでジクロロメタン（１００ｍＬ×５）で抽出した。有機層を合わせ、溶液のｐＨ値を重炭酸ナトリウム水溶液で７〜８に調整した。得られた有機層を分離し、乾燥させ、真空下で濃縮した。得られた残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−２−メチルベンズアルデヒド（２００ｍｇ、７１％、化合物５）を黄色固体として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、Ｃ１８シリカゲル；移動相、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ＝５０／５０から２８分以内にＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ＝８０／２０まで増加；検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
LC-MS (ES, m/z):   452 [M+H] + 
1H-NMR (DMSO, 300MHz, ppm):  12.59(s, 1H) , 10.34 (s, 1H), 10.30 (s, 1H), 5.85-5.90 (t, 2H), 5.70 (s, 1H), 5.43 (s, 1H), 5.38 (d, J=4.5Hz, 2H) , 3.48-3.51 (d, J=7.5Hz,2H), 3.31-3.20 (m, 1H), 2.72-2.64 (d, J=24.9Hz, 1H), 2.26-2.18 (m, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.63-1.54 (m, 3H), 1.24-1.19(d, J=13.2Hz, 1H) 。
実施例７
【０１３８】
［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−（３−クロロ−５−ホルミル−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ２−（ジメチルアミノ）−アセテート（化合物６）の合成
【化１８】
2020520378.tif 000022
【０１３９】
ステップ１
ジクロロメタン（０．４ｍＬ）中の２−（ジメチルアミノ）酢酸（１５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の溶液を２５ｍＬの丸底フラスコに入れ、続いて１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドメチオジド（４５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（１５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で３０分間撹拌した。次いで、３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド、［化合物２、実施例３］（６０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を２５℃で２時間撹拌し、次いで水（１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。得られた残留物を以下の条件で分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（３０ｍｇ、４２％）を黄色固体として得た。
分取ＨＰＬＣ条件：カラム、Ｘ  Ｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８、１９×１５０ｍｍ  ５μｍ；移動相、ＣＨ３ＣＮ／水（０．０５％重炭酸アンモニウム）＝５０／５０から３０分以内にＣＨ３ＣＮ／水（０．０５％重炭酸アンモニウム）＝１００／０まで増加。検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
LC-MS: (ES, m/z): 519 [M+H]+
1H-NMR: (CD3OD, 400MHz,  ppm): 10.30 (s, 1H), 5.96 (d, J=16Hz, 1H), 5.46 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.52 (d, J=7.2Hz, 2H), 3.34(s, 2H), 3.31 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.47-2.32 (m, 7H), 1.95 (m, 4H), 1.76 (m, 2H), 1.39 (m, 1H), 0.97 (d, J=6.8Hz, 3H), 0.75-0.88 (m, 6H) 。  
【０１４０】
ステップ２
テトラヒドロフラン中塩化水素の溶液（０．０２２５Ｍ、１３ｍＬ）を、５０ｍＬの丸底フラスコ内の［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−（３−クロロ−５−ホルミル−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ２−（ジメチルアミノ）アセテート（１５０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）に添加した。混合物を２５℃で５分間撹拌し、次いで真空下で濃縮して、［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−（３−クロロ−５−ホルミル−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−４−メチルフェニル）−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ２−（ジメチルアミノ）アセテート塩酸塩（１０１．６ｍｇ、６３％）を薄黄色固体として得た。
LC-MS: (ES, m/z):519 [M+H]+
1H-NMR: (CD3OD, 300MHz, ppm): 10.30 (s, 1H), 5.96 (d, J=17.7Hz, 1H),4.34 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.52 (m, 2H), 2.81-3.15 (m, 6H), 3.31 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.45 (m, 1H), 1.60-2.11 (m, 7H), 1.39 (m, 1H), 0.97 (m, 3H), 0.78 (m, 6H) 。
実施例８
【０１４１】
４−クロロ−３−（フルオロメトキシ）−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物４）の合成
【化１９】
2020520378.tif 000023
【０１４２】
ピリジン（７．５ｍＬ）中の３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチル−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−オキソシクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］ベンズアルデヒド［実施例１］（２５０ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）の溶液を、２５ｍＬの丸底フラスコに入れ、続いてヒドロキシアミン塩酸塩（８０ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１６時間撹拌し、真空下で濃縮した。得られた残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（２０１．７ｍｇ、７５％、化合物４）を白色固体として得た。
以下を得るためのフラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、シリカゲル；移動相、ＣＨ３ＣＮ／水（０．０８％重炭酸アンモニウム）＝７０／３０から１５分以内にＣＨ３ＣＮ／水（０．０８％重炭酸アンモニウム）＝９０／１０まで増加；検出器、ＵＶ２２０ｎｍ。
LC-MS: (ES, m/z): 467 [M+H]+
1H-NMR: (CD3OD, 400MHz,ppm): 8.55 (s, 1H), 5.90 (d, J=16Hz, 1H), 5.72 (s, 1H), 5.58 (s, 1H), 5.39-5.47 (m, 1H), 3.58 (d, J=7.2Hz, 2H), 3.36-3.42 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.18 (t, 1H), 1.89 (s, 3H), 1.61-1.70 (m, 3H), 1.29-1.35 (m, 1H) 。
実施例９
【０１４３】
４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−３−メトキシ−５−メチルフェノール（化合物７−１）の合成
【化２０】
2020520378.tif 000024
【０１４４】
ピリジン（９．６ｍＬ）中の３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド［化合物１、実施例２］（１６０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）の溶液を、２５ｍＬの丸底フラスコに入れ、続いてヒドロキシアミン塩酸塩（２５．６ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ、１．００当量）を２５℃で添加した。混合物を２５℃で１６時間撹拌し、次いで真空下で濃縮した。得られた残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（１１４．０ｍｇ、６９％、化合物７−１）を白色固体として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、シリカゲル；移動相、ＣＨ３ＣＮ／水（０．０８％ＮＨ４ＨＣＯ３）＝７０／３０から１５分以内にＣＨ３ＣＮ／水（０．０８％ＮＨ４ＨＣＯ３）＝９０／１０まで増加；検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
LC-MS: (ES, m/z): 450 [M+H]+
1H-NMR: (CD3OD, 400MHz, ppm): 8.55 (s, 1H), 5.87 (d, J=16Hz, 1H), 5.42 (t, 1H), 5.24 (d, J=16Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.47-3.53 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 1.88 (s, 3H), 1.46-1.72 (m, 3H), 1.30-1.37 (m, 2H), 1.21 (m, 3H), 1.15 (s, 1H), 0.92 (s, 3H), 0.84 (d, J=7.2Hz, 3H), 0.72 (d, J=6.8Hz, 3H) 。
実施例１０
【０１４５】
４−クロロ−３−メトキシ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物８）の合成
【化２１】
2020520378.tif 000025
【０１４６】
表題化合物は、ヒドロキシアミン塩酸塩の代わりにＯ−メチルヒドロキシアミン塩酸塩を使用したこと以外は、実施例４に記載した方法と同様の方法により、４−Ｏ−メチル−アスコクロリンから調製した。
LC-MS: (ES, m/z): 477 [M+H]+
1H-NMR: (DMSO, 400MHz, ppm): δ 10.80 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 5.89(d, J = 16.1 Hz, 1H), 5.46-5.37(m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.45 (d, J=7.2Hz, 2H), 3.15-3.11 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.223 (q, J=6.8Hz, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.66 (m, 3H), 1.20 (td, J = 14.4, 13.1, 6.3 Hz, 1H), 0.80 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.65 (m, 6H)。
実施例１１
【０１４７】
４−クロロ−３−（フルオロメトキシ）−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（メトキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物９）の合成
【化２２】
2020520378.tif 000026
【０１４８】
表題化合物は、ヒドロキシアミン塩酸塩の代わりにＯ−メチルヒドロキシアミン塩酸塩を使用したこと以外は、実施例８に記載した方法と同様の方法により、４−Ｏ−フルオロメチル−アスコクロリンから調製した。
LC-MS (ES, m/z): [M+H]+: 495.
1H NMR (300 MHz, メタノール-d4) δ 8.60 (s, 1H), 5.89 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 5.64 (d, J = 54.3 Hz, 2H), 5.42 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 5.36 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.58 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.23-3.26 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.17 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 1.87 (s, 3H), 1.60-1.71 (m, 3H), 1.30-1.33 (m, 1H), 0.86 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.73 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.67 (s, 3H) 。
実施例１２
【０１４９】
４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物１０）の合成
【化２３】
2020520378.tif 000027
【０１５０】
ステップ１
ピリジン（４ｍＬ）中の３−クロロ−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチル−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−オキソシクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］ベンズアルデヒド（４−Ｏ−メチル−アスコクロリン、３５０ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）およびＮＨ２ＯＭｅ．ＨＣｌ（６９．３ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）の混合物を、アルゴン雰囲気でパージおよび維持した５０ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を室温で終夜撹拌し、真空下で濃縮した。残留物（４００ｍｇ）を以下の条件で分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン（２００．９ｍｇ、５４％）をオフホワイトの固体として得た。
分取ＨＰＬＣ条件（２＃−分析ＨＰＬＣ−ＳＨＩＭＡＤＺＵ（ＨＰＬＣ−１０））：カラム、ＸＢｒｉｄｇｅ分取Ｃ１８  ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；移動相、１０ｍｍｏｌ  ＮＨ４ＨＣＯ３およびＣＨ３ＣＮを含む水（１２分間、８０．０％ＣＨ３ＣＮを保持）；検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
LC-MS (ES, m/z): 448 [M+H]+
1H-NMR (DMSO, 300MHz, ppm): δ 10.80 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 5.88 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.37-5.51 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.46 (d, J=6.9Hz, 2H) , 2.56 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.15 (m, 1H), 1.80-2.06 (m, 4H), 1.41-1.59 (m, 1H), 0.70 (dd, J = 15.0, 6.7 Hz, 6H), 0.60 (s, 3H) 。
【０１５１】
ステップ２
ピリジン（５ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン（５００ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）およびＮＨ２ＯＨ．ＨＣｌ（８４．９ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ、１．１０当量）の混合物を、アルゴン雰囲気でパージおよび維持した５０ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を室温で終夜撹拌し、次いで真空下で濃縮した。残留物を以下の条件で分取ＨＰＬＣにより精製して、４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（２４６．５ｍｇ、４８％、化合物１０）を白色固体として得た。
分取ＨＰＬＣ条件：カラム：Ｘ  Ｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８、１９×２５０ｍｍ、５μｍ；移動相Ａ：水／１０ｍｍ  ＮＨ４ＨＣＯ３、移動相Ｂ：ＣＨ３ＣＮ；流速：３０ｍＬ／分；勾配：８分間で８８％Ｂから８８％Ｂ；２５４ｎｍ；検出器。
LC-MS (ES, m/z):  463 [M+H]+
1H-NMR (DMSO, 300MHz, ppm):δ 10.80 (s, 1H), 10.35 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 5.90 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 5.42 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.46 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 3.23 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.23 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 1.86 (s, 3H), 1.62 (d, J = 11.9 Hz, 3H), 1.18 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 0.80 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.68 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.61 (s, 3H) 。
実施例１３
【０１５２】
４−クロロ−３−（フルオロメトキシ）−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（ヒドロキシイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物１１）の合成
【化２４】
2020520378.tif 000028
【０１５３】
表題化合物は、実施例１２に記載した方法と同様の方法により、４−Ｏ−フルオロメチル−アスコクロリンから調製した。
LC-MS (ES, m/z): [M+H]+: 481.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.36 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 5.88 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 5.72 (d, J = 54.3 Hz, 2H) 5.42 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.37 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H) 3.50 (m, 2H), 3.23 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.21 (q, J = 6.6 Hz, 1H),  1.84 (s, 3H), 1.59 (m, 3H), 1.25 (m, 1H), 0.80 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.68 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.61 (s, 3H) 。
実施例１４
【０１５４】
４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−［［２−（ジメチルアミノ）エトキシ］イミノ］−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物１５）の合成
【化２５】
2020520378.tif 000029
【０１５５】
表題化合物は、ヒドロキシアミン塩酸塩の代わりにＯ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）ヒドロキシアミン塩酸塩を使用したこと以外は、実施例１２に記載した方法と同様の方法により調製した。
LC-MS (ES, m/z): 534 [M+H]+
1H-NMR (DMSO, 400MHz, ppm): δ10.79 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 5.89 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 5.33 - 5.48 (m, 2H), 3.98 (m, 5H), 3.74 (s, 3H), 3.45 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.13 (m, 1H), 2.46 (m, 2H), 2.39 (s,3H), 2.23 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 2.14 (s, 6H), 1.85 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 1.57 - 1.74 (m, 3H), 1.19 (m, 1H), 0.78 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.66 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.61 (s, 3H) 。
実施例１５
【０１５６】
４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチル−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−［［２−（モルホリン−４−イル）エトキシ］イミノ］シクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］フェノール（化合物１６）の合成
【化２６】
2020520378.tif 000030
【０１５７】
表題化合物は、ヒドロキシアミン塩酸塩の代わりにＯ−（２−（モルホリン−４−イル）エチル）ヒドロキシアミン塩酸塩を使用したこと以外は、実施例１２に記載した方法と同様の方法により調製した。
LC-MS (ES, m/z): 576 [M+H]+
1H-NMR (CD3CN, 300MHz, ppm): δ 8.55 (s, 1H), 5.93 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 5.36-5.50 (m, 2H), 4.07 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.51 (m, 6H), 3.14-3.28 (m, 1H), 2.55 (m, 2H), 2.46 (s, 7H), 2.20 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 1.89 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.58-1.72 (m, 3H), 1.25 (m, 1H), 0.81 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.67 (m, 6H) 。
実施例１６
【０１５８】
４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチル−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−［［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシ］イミノ］シクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］フェノール（化合物１７）の合成
【化２７】
2020520378.tif 000031
【０１５９】
表題化合物は、ヒドロキシアミン塩酸塩の代わりにＯ−（２−（Ｎ−メチルピペラジン−４−イル）エチル）ヒドロキシアミン塩酸塩を使用したこと以外は、実施例１２に記載した方法と同様の方法により調製した。
LC-MS (ES, m/z): 589 [M+H]+
1H-NMR (CDCl3, 400MHz, ppm): δ 10.80 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 5.92 (t, J=16.0Hz, 1H), 5.51 (m, 1H), 5.33 (m, 1H), 4.19 (m, 2H), 3.99 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.56 (d, J=7.2Hz, 2H), 3.28 (m, 1H), 2.42-2.70 (m, 13H), 2.32 (s, 3H), 2.14 (m, 1H), 1.93 (s, 3H), 1.63 (m, 3H), 1.29 (m, 1H), 0.88 (d, J=6.8Hz, 3H), 0.71 (m, 6H)。
実施例１７
【０１６０】
エチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート（化合物１８）の合成
【化２８】
2020520378.tif 000032
【０１６１】
表題化合物は、ヒドロキシアミン塩酸塩の代わりにエチル２−（アミノオキシ）アセテートを使用したこと以外は、実施例１２に記載した方法と同様の方法により調製した。
LC-MS (ES, m/z):  [M+H]+: 549
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 10.74 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 5.86 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 5.41 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.06 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.42 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.28 (s, 1H), 3.18 (dd, J = 12.9, 4.1 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.24 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 1.81 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 1.79 - 1.56 (m, 3H), 1.31 - 1.17 (m, 1H), 1.14 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.71 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.64 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.58 (s, 3H) 。
実施例１８
【０１６２】
４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物１４−１）の合成
【化２９】
2020520378.tif 000033
【０１６３】
ピリジン（５ｍＬ）中の３−クロロ−６−ヒドロキシ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−１，２，３，６−テトラメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド［化合物１、実施例２］（３５０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）およびメトキシルアミン塩酸塩（８５ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）の混合物を、５０ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を１０〜１５℃で１２時間撹拌し、真空下で濃縮した。残留物を以下の条件で分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（２０９．３ｍｇ、５５％）を薄黄色固体として得た。
分取ＨＰＬＣ条件（２＃−分析ＨＰＬＣ−ＳＨＩＭＡＤＺＵ（ＨＰＬＣ−１０））：カラム、ＸＢｒｉｄｇｅ  ＢＥＨ  Ｃ１８  ＯＢＤ分取カラム、５μｍ、１９ｍｍ  ２５０ｍｍ；移動相、１０ｍｍｏｌ  ＮＨ４ＨＣＯ３およびＣＨ３ＣＮを含む水（９分間、９０．０％ＣＨ３ＣＮを保持）；検出器、ｕｖ  ２５４および２２０ｎｍ。
LC-MS (ES, m/z): [M-H] 462
1H-NMR (DMSO, 400MHz ppm): δ 10.79 (s,1H), 8.64 (s,1H),5.82 (m,1H), 5.39 (m.1H), 5.22 (m,1H), 3.96 (s.3H), 3.74 (m,4H), 3.32-3.45 (m,2H), 2.50 (s,3H), 1.81 (m,3H), 1.47-1.59 (m,2H), 1.21-1.38 (m,3H), 1.13 (m,1H), 1.04 (s,3H), 0.85 (m,3H), 0.74 (m,3H), 0.64 (m,3H) 。
実施例１９
【０１６４】
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸（化合物１９）の合成
【化３０】
2020520378.tif 000034
エチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート［化合物１８、実施例１７］（３５０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の溶液を、２５ｍＬの丸底フラスコに入れ、続いて水／ＴＨＦ（０．５／１ｍＬ）中の水酸化リチウム（７６ｍｇ、３．１７ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を室温で終夜撹拌した。混合物のｐＨ値を塩酸水溶液（１Ｎ）で４に調整した。反応混合物をジクロロメタン（２ｍＬ×２）で抽出した。有機層を合わせ、次いで真空下で濃縮した。残留物を以下の条件で分取ＨＰＬＣにより精製して、２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸（３００ｍｇ、９０％、化合物１９）を白色固体として得た。
分取ＨＰＬＣ（２＃−分析ＨＰＬＣ−ＳＨＩＭＡＤＺＵ（ＨＰＬＣ−１０））：カラム、ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８  ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；移動相、０．０５％ＴＦＡおよびＣＨ３ＣＮを含む水（１１分間、７２．０％ＣＨ３ＣＮを保持）；検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
LC-MS: (ES, m/z): [M+H]+: 521.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.76 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 5.86 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 5.41 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.42 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 3.13 - 3.25 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.23 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 1.82 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 1.56 - 1.76 (m, 3H), 1.22 (s, 1H), 0.71 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.64 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.59 (s, 3H) 。
実施例２０
【０１６５】
３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチル−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−［［２−（モルホリン−４−イル）エトキシ］イミノ］シクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］ベンズアルデヒド（化合物１２）の合成
【化３１】
2020520378.tif 000035
【０１６６】
表題化合物は、ヒドロキシアミン塩酸塩の代わりにＯ−２−（モルホリン−４−イル）エチルヒドロキシアミン塩酸塩を使用したこと以外は、実施例６に記載した方法と同様の方法により調製した。
LC-MS (ES, m/z): [M+H]+: 565
1H NMR (300 MHz, クロロホルム-d) δ 12.55 (s, 1H), 10.29 (s, 1H), 5.91 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.70 (d, J = 54.3 Hz, 1H), 5.46 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 4.19 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.72 (m, 4H), 3.61 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 3.21 - 3.36 (m, 1H), 2.67 (d, J = 9.0 Hz, 5H), 2.55 (m, 4H), 2.15 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 1.52 - 1.74 (m, 3H), 1.30 (m, 1H), 0.89 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.73 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.69 (s, 3H)。
実施例２１
【０１６７】
４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物２１）の合成
【化３２】
2020520378.tif 000036
【０１６８】
ステップ１
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中に（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン［実施例１２、ステップ１］（３ｇ、６．７０ｍｍｏｌ）、Ｔｉ（ｉ−ＰｒＯ）４（１５．２ｇ、５３．５２ｍｍｏｌ）、エチルアミン塩酸塩（２．２ｇ、２６．８３ｍｍｏｌ）およびＭＳ  ４Ａ（１ｇ）の混合物を、２５０ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を油浴中、６８℃で終夜撹拌した。得られた混合物を２００ｍＬの酢酸エチルで希釈し、続いて１０ｍＬの飽和塩化アンモニウムを添加した。混合物を濾過し、濾液を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮して、４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（エチルイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（１．２ｇ、粗製）を褐色固体として得た。
【０１６９】
ステップ２
ジクロロメタン（２０ｍＬ）中の４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（エチルイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（１．２ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．０７ｇ、５．０５ｍｍｏｌ、２．００当量）の溶液を、１００ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を室温で５時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を真空下で濃縮した。残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、粗生成物（３５０ｍｇ）を得、これを以下の条件でキラル分取ＨＰＬＣにより精製して、４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（２１１．４ｍｇ、１８％、化合物２１）を橙色固体として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ−１）：カラム、Ｃ１８シリカゲル；移動相、水／アセトニトリル＝１：０から４０分以内に水／アセトニトリル＝０：１まで増加；検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
キラル分取ＨＰＬＣ条件：カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８  ＯＢＤカラム、５μｍ，１９×１５０ｍｍ；移動相Ａ：１０ｍｍｏｌ  ＮＨ４ＨＣＯ３を含む水、移動相Ｂ：ＡＣＮ；流速：２０ｍＬ／分；勾配：１０分間で７５％Ｂから９５％Ｂ；検出器２５４ｎｍ。
LC-MS (ES, m/z): 477 [M+H]+
1H-NMR (DMSO, 300MHz, ppm): δ 10.71-10.87 (br, 1H), 8.644 (s, 1H), 5.82 (t, J=16.2Hz, 1H), 5.39 (m, 1H), 5.25 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.44 (d, J=6.9Hz, 2H), 2.57-2.66 (m, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.28-2.36 (m, 1H), 1.74-1.82 (m, 4H), 1.12-1.50 (m, 6H), 0.98 (m, 3H), 0.86 (m, 3H), 0.77 (m, 3H), 0.63 (m, 3H) 。
実施例２２
【０１７０】
４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物２３）の合成
【化３３】
2020520378.tif 000037
【０１７１】
表題化合物は、エチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用したこと以外は、実施例２１に記載した方法と同様の方法により調製した。
LC-MS (ES, m/z): 489 [M+H]+
1H-NMR (DMSO, 300MHz, ppm): δ 10.79 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 5.80 (t, J=16.2Hz,1H), 5.37 (m, 1H), 5.24 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.44 (d, J=6.3Hz, 2H), 2.74 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 1.96 (m, 2H), 1.82 (s, 3H), 1.41-1.57 (m, 3H), 1.15-1.40 (m, 3H), 0.80 (s, 3H), 0.73 (m, 3H), 0.64 (m, 3H), 0.39 (m, 1H), 0.25 (m, 2H), 0.15 (m, 1H) 。
実施例２３
【０１７２】
２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−アミノ−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物２４）の合成
【化３４】
2020520378.tif 000038
【０１７３】
エタノール（１００ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−６−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン（３ｇ、６．７０ｍｍｏｌ）［実施例１２、ステップ１］、ＮａＢＨ３ＣＮ（２．７５ｇ、４３．７６ｍｍｏｌ）およびＮＨ４ＯＡｃ（２０ｇ、４０．００当量）の混合物を、アルゴン雰囲気でパージおよび維持した２５０ｍＬの丸底フラスコに入れた。得られた混合物を油浴中、７０℃で終夜撹拌した。得られた混合物を真空下で濃縮した。残留物をＨ２Ｏ（８０ｍＬ）で希釈した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせ、次いで真空下で濃縮した。残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（１．５ｇ、５０％、化合物２４）を黄色固体として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、Ｃ１８シリカゲル；移動相、ＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ＝０：９５から５５分以内にＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ＝９５：５まで増加；検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
LC-MS: (ES, m/z): [M+H]+  449
1H-NMR: (CDCl3,400MHz ppm): δ 10.77 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 5.93 (d, J=16.4Hz ,1H), 5.52 (m,1H), 5.19 (m,1H), 3.99 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 3.54 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.04-2.23 (m, 1H), 1.90 (m, 3H), 1.25-1.85 (m, 6H), 0.91-1.04 (m, 5H), 0.70-0.78 (m, 4H) 。
実施例２４
【０１７４】
４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチル−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−［（オキセタン−３−イル）アミノ］シクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］フェノール（化合物２５）の合成
【化３５】
2020520378.tif 000039
【０１７５】
５０ｍＬの密封管に、ＤＣＭ（１２ｍＬ）中の２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−アミノ−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−クロロ−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール（化合物２４；１ｇ、２．２３ｍｍｏｌ）、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（ＳＴＡＢ、７０９．８ｍｇ、３．３５ｍｍｏｌ）およびオキセタン−３−オン（３５３．６ｍｇ、４．９１ｍｍｏｌ）の溶液を入れた。混合物を室温で１８時間撹拌し、次いで真空下で濃縮した。残留物を以下の条件で分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（２３９．２ｍｇ、２１％、化合物２５）をオフホワイトの固体として得た。
分取ＨＰＬＣ条件（２＃−分析ＨＰＬＣ−ＳＨＩＭＡＤＺＵ（ＨＰＬＣ−１０））：カラム、ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８  ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；移動相、１０ｍｍｏｌ  ＮＨ４ＨＣＯ３およびＣＨ３ＣＮを含む水（１０分間、８２．０％ＡＣＮを保持）；検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
LC-MS: (ES, m/z): [M+H]+ 505
1H-NMR: (DMSO,400MHz ppm): δ10.80 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 5.84 (d, J=16.4Hz,1H), 5.41 (m,1H), 5.25 (d, J=15.6Hz,1H), 4.60 (m,2H), 4.27-4.36(m, 2H), 4.38 (s, 3H), 3.83 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.46 (d, J=7.2Hz, 2H), 2.42 (s, 3H), 1.84 (s, 3H), 1.45-1.58 (m, 3H), 1.35 (m, 2H), 1.21 (m, 1H), 0.89 (s, 3H), 0.81 (d, J=7.2Hz, 3H), 0.67 (m, 3H) 。
実施例２５
【０１７６】
３−クロロ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド（化合物２０）の合成
【化３６】
2020520378.tif 000040
【０１７７】
ＴＨＦ／水（２０ｍＬ／２ｍＬ）中の４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（エチルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−３−メトキシ−６−［（１Ｅ）−（メトキシイミノ）メチル］−５−メチルフェノール［化合物２１、実施例２１］（５００ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）、ホルムアルデヒド（４２５ｍｇ、５．２５ｍｍｏｌ、５．００当量、３７％）および塩酸（５００ｍｇ、５．３ｍｍｏｌ、５．００当量、３８％）の溶液を、３０ｍＬの密封管に入れた。混合物を１００℃で終夜撹拌し、次いで真空下で濃縮した。残留物を以下の条件で分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（５５．４ｍｇ、９．４％、化合物２０）をオフホワイトの固体として得た。
分取ＨＰＬＣ条件（２＃−分析ＨＰＬＣ−ＳＨＩＭＡＤＺＵ（ＨＰＬＣ−１０））：カラム、Ｇｅｍｉｎｉ−ＮＸ  ５ｕ  Ｃ１８  １１０Ａ、ＡＸＩＡ  Ｐａｃｋｅｄ、１５０×２１．２ｍｍ；移動相、カラム：移動相Ａ：１０ｍｍｏｌ  ＣＦ３ＣＯＯＨを含む水、移動相Ｂ：ＣＨ３ＣＮ；流速：３０ｍＬ／分；勾配：１０分間で６０％Ｂから９５％Ｂ；２５４ｎｍ；検出器、ｕｖ２５４ｎｍ。
LC-MS (ES, m/z): 448 [M+H]+  
1H-NMR (DMSO, 300 MHz, ppm)  12.62 (br, 1H), 10.27 (br, 1H), 7.90 (br, 1H), 7.43 (br, 1H), 5.94 (d, J=16.2Hz, 1H), 5.43 (t, J=7.5Hz, 1H), 5.34 (d, J=15.9Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.47 (d, J=7.5Hz, 2H), 3.28 (m, 1H), 2.96 (m, 2H), 2.62 (s, 3H), 1.85 (m, 5H), 1.70 (m, 1H), 1.50 (s, 3H), 1.20 (m, 3H), 0.88 (m, 3H), 0.83 (m, 3H), 0.74 (m, 3H).
実施例２６
【０１７８】
３−クロロ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−ヒドロキシ−４−メトキシ−２−メチルベンズアルデヒド（化合物２２）の合成
【化３７】
2020520378.tif 000041
【０１７９】
表題化合物は、実施例２５に記載した方法と同様の方法により、化合物２３（実施例２２）から調製した。
LC-MS (ES, m/z): 460 [M+H]+
1H-NMR (DMSO, 300 MHz, ppm): 12.60 (br, 1H), 10.27 (s, 1H), 5.80 (d, J=16.2Hz, 1H), 5.36 (t, J=7.2Hz, 1H), 5.25 (d, J=15.9Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.42 (d, J=6.9Hz, 2H), 2.75 (m, 1H), 2.62 (s, 3H), 1.96 (m, 2H), 1.82 (s, 3H), 1.20-1.61 (m, 6H), 0.80 (m, 3H), 0.71 (m, 3H), 0.63 (m, 3H), 0.35-0.47 (m, 1H), 0.24-0.31 (m, 2H), 0.06-0.18 (m, 1H) 。
実施例２７
【０１８０】
３−クロロ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチルベンズアルデヒド（化合物１３）の合成
【化３８】
2020520378.tif 000042
【０１８１】
ステップ１
５０ｍＬの丸底フラスコに、エタノール（１０ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−５−（ジエトキシメチル）−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン［実施例２］（９００ｍｇ、１．７６ｍｍｏｌ）、ＭＳ４Ａ（２００ｍｇ）およびシクロプロパンアミン（２ｇ、３５．０３ｍｍｏｌ、２０．００当量）の溶液を入れた。得られた溶液を３０℃で終夜撹拌した。得られた混合物を真空下で濃縮して、４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−（ジエトキシメチル）−３−（フルオロメトキシ）−５−メチルフェノール（０．９ｇ、９３％）を固体として得た。
【０１８２】
ステップ２
エタノール（２０ｍＬ）中の４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｅ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルイミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−（ジエトキシメチル）−３−（フルオロメトキシ）−５−メチルフェノール（１．１ｇ、２．００ｍｍｏｌ）および酢酸水素化ホウ素ナトリウム（４６４ｍｇ、２．１９ｍｍｏｌ）の溶液を、１００ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を室温で３時間撹拌し、真空下で濃縮した。残留物を、酢酸エチル／石油エーテル（１：１０）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−（ジエトキシメチル）−３−（フルオロメトキシ）−５−メチルフェノール（４６０ｍｇ、４２％）を固体として得た。
【０１８３】
ステップ３
ＴＨＦ／水／酢酸（１０／２０／１０ｍＬ）中の４−クロロ−２−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−６−（ジエトキシメチル）−３−（フルオロメトキシ）−５−メチルフェノール（４６０ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）の溶液を、１００ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を室温で３時間撹拌し、真空下で濃縮した。残留物を水（１０ｍＬ）に溶解した。混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、次いで真空下で濃縮した。残留物を以下の条件で分取ＨＰＬＣにより精製して、３−クロロ−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−３−（シクロプロピルアミノ）−１，２，６−トリメチルシクロヘキシル］−３−メチルペンタ−２，４−ジエン−１−イル］−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチルベンズアルデヒド（２０６．７ｍｇ、５２％、化合物１３）を薄黄色固体として得た。
分取ＨＰＬＣ条件（２＃−分析ＨＰＬＣ−ＳＨＩＭＡＤＺＵ（ＨＰＬＣ−１０））：カラム、Ｇｅｍｉｎｉ−ＮＸ  Ｃ１８  ＡＸＡＩ  Ｐａｃｋｅｄ、２１．２×１５０ｍｍ  ５μｍ  １１ｎｍ；移動相、１０ｍｍｏｌ  ＮＨ４ＨＣＯ３およびＣＨ３ＣＮを含む水（８分間、９５．０％ＣＨ３ＣＮを保持）；検出器、ｕｖ２５４ｎｍ。
LC-MS (ES, m/z): [M+H]+: 478.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.26 (s, 1H), 5.79 (d, J = 154.3 Hz, 2H), 5.78 (d, J = 16.2 Hz, 1H) 5.34 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 5.25 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 3.48 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.76 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 1.95-2.08 (m, 2H), 1.80(s, 3H), 1.20-1.48 (m, 5H), 0.79 (s, 3H), 0.69 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.59 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 035 (m, 1H), 0.24 (m, 1H), 0.11 (m, 1H) 。
実施例２８
【０１８４】
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−（フルオロメトキシ）−５−ホルミル−６−ヒドロキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸（化合物２６）の合成
【化３９】
2020520378.tif 000043
【０１８５】
ステップ１
エタノール（１０ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−５−（ジエトキシメチル）−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン［実施例２］（１．５ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（４７９ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）およびエチル２−（アミノオキシ）アセテートシュウ酸塩（６０５ｍｇ、２．８９ｍｍｏｌ）の溶液を、１００ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を合わせ、次いで真空下で濃縮した。残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、エチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−５−（ジエトキシメチル）−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート（１．０ｇ、５６％）を薄黄色固体として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、Ｃ１８シリカゲル；移動相、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ＝６０：４０から４０分以内にＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ＝９５：５まで増加；検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
ＬＣ−ＭＳ（ＥＳ、ｍ／ｚ）：６１２［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１８６】
ステップ２
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１：１、３０ｍＬ）中のエチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−５−（ジエトキシメチル）−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート（１ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）、水酸化リチウム（１１７ｍｇ、３．００当量）の混合物を、１００ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、（１５ｍＬ）を溶液に添加した。得られた溶液を室温でさらに６時間撹拌した。得られた混合物を真空下で濃縮し、２０ｍＬの水で希釈した。混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を合わせ、次いで真空下で濃縮した。残留物を以下の条件でフラッシュ分取ＨＰＬＣにより精製して、２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−（フルオロメトキシ）−５−ホルミル−６−ヒドロキシ−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）−酢酸（５３３．３ｍｇ、６４％、化合物２６）を薄黄色固体として得た。
フラッシュ分取ＨＰＬＣ条件（ＩｎｔｅｌＦｌａｓｈ−１）：カラム、Ｃ１８シリカゲル；移動相、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ＝５５：４５から４５分以内にＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ＝９５：５まで増加；検出器、ＵＶ２５４ｎｍ。
LC-MS (ES, m/z): [M+H]+ : 510.
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ12.58 (s, 2H), 10.30 (s, 1H), 5.88 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 5.79 (d, J = 53.7 Hz, 2H), 5.40 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 5.38 (m, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.50 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.23 (dd, J = 12.7, 4.0 Hz, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.27 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.82-1.59 (m, 3H), 1.35-1.19 (m, 1H), 0.75 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.68 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.62 (s, 3H) 。
実施例２９
【０１８７】
２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸（化合物２７）の合成
【化４０】
2020520378.tif 000044
【０１８８】
ステップ１
ピリジン（６ｍＬ）中の３−クロロ−４−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−２−メチル−５−［（２Ｅ，４Ｅ）−３−メチル−５−［（１Ｒ，２Ｒ，６Ｒ）−１，２，６−トリメチル−３−オキソシクロヘキシル］ペンタ−２，４−ジエン−１−イル］ベンズアルデヒド［実施例１］（６００ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）およびヒドロキシアミン塩酸塩（９３．５ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ、０．９８当量）の溶液を、１００ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を室温で２時間撹拌した。得られた混合物を真空下で濃縮して、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン（５００ｍｇ、粗製）を黄色油状物として得た。
【０１８９】
ステップ２
ピリジン（６ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキサン−１−オン（５００ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）およびエチル２−（アミノオキシ）アセテートシュウ酸塩（９２５ｍｇ、４．４２ｍｍｏｌ、４．００当量）の溶液を、１００ｍＬの丸底フラスコに入れた。混合物を室温で１時間撹拌した。得られた混合物を真空下で濃縮した結果、エチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート（５５０ｍｇ、粗製）を黄色固体として得た。
【０１９０】
ステップ３
テトラヒドロフラン（６ｍＬ）および水（２ｍＬ）中のエチル２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）アセテート（５５０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）、水酸化リチウム（８５３ｍｇ、３５．６２ｍｍｏｌ）の混合物を、１００ｍＬの丸底フラスコに入れた。得られた溶液を室温で１時間撹拌した。混合物を真空下で濃縮した。得られた混合物を酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせ、次いで真空下で濃縮した。残留物を以下の条件で分取ＨＰＬＣにより精製して、２−（［［（１Ｅ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−［（１Ｅ，３Ｅ）−５−［３−クロロ−２−（フルオロメトキシ）−６−ヒドロキシ−５−［（１Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］−４−メチルフェニル］−３−メチルペンタ−１，３−ジエン−１−イル］−２，３，４−トリメチルシクロヘキシリデン］アミノ］オキシ）酢酸（２４２．２ｍｇ、４６％、化合物２７）を固体として得た。
分取ＨＰＬＣ条件（分取ＨＰＬＣ＿ＭＣ１）：カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８  ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×１５０ｍｍ；移動相Ａ：水（０．１％ＦＡ）、移動相Ｂ：ＡＣＮ；流速：２０ｍＬ／分；勾配：８分間で５６％Ｂから８０％Ｂ；検出器：２５４ｎｍ。
LC-MS (ES, m/z): [M+H]+: 525, [M+Na-H]+: 547
1H-NMR (300MHz, CD3OD, ppm): δ 8.56(S, 1H), 5.89(d, J=16.2 Hz, 1H), 5.72(s, 1H), 5.54(s, 1H), 5.44-5.33(m, 2H), 4.48(s, 2H), 3.56(d, J=7.2 Hz, 2H), 3.39-3.32(m, 1H), 2.43(s, 3H), 2.19(q, J=6.6 Hz, 1H), 1.86(s, 3H), 1.77-1.59(m, 3H), 1.25-1.48(m, 1H), 0.84(d, J=6.0 Hz, 3H), 0.74-0.69(m, 6H) 。
試験実施例１
ＨｅｐＧ２細胞におけるＡＭＰＫおよびＡＣＣのリン酸化レベルに対する効果．
【０１９１】
ｐ−ＡＭＰＫおよびｐ−ＡＣＣレベルを、ｐ−ＡＭＰＫおよびｐ−ＡＣＣに対する抗体を使用するウエスタンブロット分析により測定した。以下の試薬を供給業者から購入し、以下に列挙する機器を使用した。
【０１９２】
試薬：ＡＭＰＫα（Ｄ５Ａ２）ウサギｍＡｂ、ホスホ−アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（Ｓｅｒ７９）（Ｄ７Ｄ１１）ウサギｍＡｂ、抗ウサギＩｇＧ、ＨＲＰ結合抗体およびベータ−アクチン（１３Ｅ５）ウサギｍＡｂを、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙから購入した。ＥＣＬウエスタンブロッティング検出試薬をＴｈｅｒｍｏから購入した。
【０１９３】
機器：ウエスタンブロットシステム（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／Ｂｉｏ−Ｒａｄ）、およびイメージングシステム（Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）
化合物処置
【０１９４】
ＨｅｐＧ２細胞を、３７℃でかつ５％ＣＯ２条件下で、１０％ＦＢＳを補充したＭＥＭ培地で培養した。ＨｅｐＧ２細胞（１×１０６細胞／ウェル）を６ウェル細胞培養プレートに２４時間播種した。細胞を無血清ＭＥＭ培地（３ｍｌ／ウェル）で２４時間飢餓状態にした。
試験化合物調製：
【０１９５】
化合物をＤＭＳＯに溶解して、それぞれ５、２５、５０ｍＭのストック溶液を作製した。化合物を希釈して、無血清ＭＥＭ培地における最終濃度を５、２５および５０μＭとした。
メトホルミン調製：
【０１９６】
メトホルミンをリン酸バッファー（ＰＢＳ）に溶解して、ストック濃度を１Ｍとした。メトホルミンを希釈して、無血清ＭＥＭ培地における最終濃度を５および５０ｍＭとした。
無血清ＭＥＭ培地を各ウェルから廃棄した。３ｍｌの１×化合物を各ウェルに添加した。細胞を３７℃、５％ＣＯ２のインキュベーター内で６時間インキュベートした（化合物５、化合物１９およびメトホルミン）。
ウエスタンブロット分析
【０１９７】
各試料からの全タンパク質（１０μｇ）を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥの試料ウェルにロードした。電気泳動を、ブルーマーカーがゲルの末端に達するまで、１２０Ｖ定電圧で行った。Ｂｉｏ−Ｒａｄ社製Ｔｒａｎｓ  ｂｌｏｔを３００ｍＡで４０分間使用して、タンパク質をＰＶＤＦ膜に転写した。転写後、膜をブロッキング緩衝液で、室温で２時間ブロッキングした。膜を、対応する一次抗体溶液とともに４℃で終夜インキュベートした。膜を１×ＴＢＳＴで５分間×３洗浄し、二次抗体溶液とともに室温で４５分間インキュベートした。膜を１×ＴＢＳＴで５分間×３洗浄し、検出を化学発光検出試薬で行った。結果を図１に示す。
試験実施例２
ｐＨ４．０およびｐＨ７．４のリン酸バッファー中における溶解度の測定
１）ストック溶液の調製
【０１９８】
試験化合物および陽性対照化合物のストック溶液を、ＤＭＳＯ中、３０ｍＭの濃度で調製した。ジクロフェナクをアッセイにおける陽性対照として使用した。
２）溶解度決定のための手順
【０１９９】
各化合物のストック溶液（１０μＬ）を、それらの適正な９６ウェルラックに順に入れ、続いてｐＨ４．０およびｐＨ７．４の９９０μＬのＰＢＳをキャップレスの溶解度試料プレートの各バイアル中に添加した。この研究を二重に実施した。１本の撹拌棒を各バイアルに添加し、次いでバイアルを、成形されたＰＴＤＥ／ＳＩＬ  ９６ウェルプレートカバーを使用して密封した。溶解度試料プレートをＴｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ  Ｃｏｍｆｏｒｔプレートシェーカーに移し、１，１００ｒｐｍで振盪しながら、２５℃で２時間インキュベートした。２時間のインキュベーション後、大きな磁石を用いて撹拌棒を取り出し、溶解度試料プレートからのすべての試料をフィルタープレート内に移した。すべての試料を、真空マニホールドを使用することにより濾過した。濾過した試料をメタノールで希釈した。
３）試料をＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより分析：
【０２００】
ＬＣシステムは、脱気装置ＤＧＵ−２０Ａ３、溶媒送達ユニットＬＣ−２０ＡＤ、システムコントローラーＣＢＭ−２０Ａ、カラムオーブンＣＴＯ−１０ＡＳＶＰおよびＣＴＣ分析ＨＴＣ  ＰＡＬシステムを備えたＳｈｉｍａｄｚｕ液体クロマトグラフ分離システムから構成された。質量分光分析は、ＥＳＩインターフェースを有するＡＢ  Ｉｎｃ（カナダ）のＡＰＩ４０００機器を使用して実施した。データ取得および制御システムは、ＡＢＩ  ＩｎｃのＡｎａｌｙｓｔ  １．６ソフトウェアを使用して作成した。測定の結果を表２に示す。
【表２】
2020520378.tif 000045
試験実施例３
マウスおよびヒトミクロソームに対する安定性の決定
【０２０１】
プールされたヒト肝臓ミクロソーム（Ｃａｔ．４５２１６１；Ｌｏｔ．２３４１８）をＣｏｒｎｉｎｇから購入し、プールされた雄性マウス肝臓ミクロソーム（Ｃａｔ．Ｍ１０００；Ｌｏｔ．１２１０３０２）をＸｅｎｏｔｅｃｈから購入した。ミクロソームは、使用前に−８０℃で貯蔵した。陰性対照において、ＮＡＤＰＨ溶液の代わりに、４０μＬの超高純度Ｈ２Ｏを使用した。陰性対照は、化学物質自体の不安定性から生じる、誤った方向に導く因子を排除するために使用した。ＮＡＤＰＨを有する試料を二重に調製した。陰性対照は一重に調製した。
【０２０２】
各マスター溶液への４μＬの２００μＭ化合物溶液の添加により反応を開始させて、２μＭの最終濃度を得た。ベラパミルをアッセイにおける陽性対照として使用した。５０μＬのアリコートを、０、１５、３０、４５および６０分の時点で反応溶液から採取した。ＩＳ（２００ｎＭイミプラミン、２００ｎＭラベタロールおよび２μＭケトプロフェン）を含む４体積の冷アセトニトリルの添加により、反応を停止させた。試料を３，２２０ｇで４０分間遠心分離した。上清の９０μＬのアリコートを９０μＬの超高純度Ｈ２Ｏと混合し、次いでＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析に使用した。結果は、ＮＡＤＰＨの存在下でヒトおよびマウスの肝臓ミクロソームとともに６０分間のインキュベートした後の試験化合物の残留％を示すことにより、表３に示す。
【表３】
2020520378.tif 000046
試験実施例４
【０２０３】
ＳＤラットにおいて、試験化合物の単回投与後に、血液中の化合物１９のＰＫプロファイルをＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより分析した。
試験動物：ＳＤラット（ｎ＝３匹／群）
溶媒：１０ｖ／ｖ％ＤＭＳＯおよび９０ｖ／ｖ％ＰＥＧ４００
用量（単一）：ｉｖ／１および５ｍｇ／ｋｇ、ｐｏ／５および２５ｍｇ／ｋｇ
分析機器および条件：ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ機器［ＬＣ：Ｓｈｉｍａｚｕ、ＭＳ：ＡＢ  ＡＰＩ４０００（イオン源：ＥＳＩ）］、ＬＣカラム：ＸＳＥＬＥＣＴ（商標）ＣＳＨ（商標）Ｃ１８  ２．５μｍ（２．１×５０ｍｍ）、移動相：５％アセトニトリル（０．１％ギ酸）および９５％アセトニトリル（０．１％ギ酸）。
結果を図２に示す。
試験実施例５
【０２０４】
６種のヒトガン細胞株に対する化合物の抗増殖活性をＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏアッセイキットにより決定した。すべての細胞をＡＴＣＣから取得し、供給業者により推奨される通りに培養した。細胞を指数増殖期にアッセイした。試料溶液を、ＤＭＳＯ中で、１０用量について３０ｍＭストックから３倍系列希釈により調製した。細胞を３７℃、５％ＣＯ２のインキュベーター内で９６時間インキュベートした後、抗増殖活性を、プロトコルに従ってＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏアッセイキットにより測定した。
【０２０５】
インキュベーションの４日目に、ｉ）１ウェル当たり１５μｌの試薬（ＣｅｌｌｔｉｔｅｒＧｌｏアッセイキット）を添加し、プレートをプレートシェーカー上で２分間振盪し（光を避けながら）、ｉｉ）プレートを室温に３０分間保ち（光を避けながら）、ｉｉｉ）発光値をマルチプレートリーダーにより記録した。結果を表４に示す。
【表４】
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試験実施例６
【０２０６】
化合物１９（Ｃｍｐｄ１９）を用いて、ＣＴ２６シンジェニックマウスモデルにおける有効試験を実施した。７〜９週令で体重が１９〜２１ｇのメスのＢＡＬＢ/ｃマウス（バイタルリバー、北京、中国）を用いた。ガンを増殖させるため、各マウスに、０．１ｍｌのリン酸バッファー中のＣＴ２６腫瘍細胞（２×１０５）を右側腹に皮下接種した。腫瘍細胞移植後5日目に、マウスのグループ分けを無作為に行い、5日目からＣｍｐｄ１９による処置を開始した。治療は、表5に示した試験計画に基づいて、担ガンマウスの治療を行った。
【表５】
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【０２０７】
抗ＰＤ−１抗体としては、抗マウスＰＤ−１抗体（ＣＤ２７９，クローン：ＲＭＰ１−１４，カタログ番号：ＢＥ０１４６、ＢｉｏＸｃｅｌｌ社製）を用いた。各薬剤の剤型は表６に示すとおりである。
【表６】
2020520378.tif 000049
【０２０８】
ガンの大きさの測定は、毎週3回ノギスを用いて行った。腫瘍体積（ｍｍ３）は、以下の式：ＴＶ＝（a x b2）/2を用いて推測した。“a”および”b”はそれぞれガンの長径と短径である。ＴＶは腫瘍増殖阻害度（ＴＧＩ、抗腫瘍効果の指標）の計算に利用した。以下の式：ＴＧＩ＝（１-Ｔ/Ｃ）ｘ  １００％、ちなみに“Ｔ“および”Ｃ“は、それぞれ治療および対照グループのガンの平均的相対体積（％ガン増殖）である。データは、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅを用いて分析を行い、図３には、平均値±ＳＤで表しており、エラーバーで示している。ｐ値は、ビークルコントロール（Ｇ１）をコントロールとして、Ｏｎｅ−ＷａｙＡＮＯＶＡＤｕｎｎｅｔｔテストで求めた。ｐ<０．０５の場合に、統計的に有意であるとした。ガン増殖阻害効果については、表７にまとめた。
【表７】
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Ｇ１：ビークル、Ｇ２：抗ＰＤ−１抗体、Ｇ３：Ｃｍｐｄ１９（５０ｍｇ/ｋｇ）、およびＧ５：Ｃｍｐｄ１９（５０ｍｇ/ｋｇ）+抗ＰＤ−１抗体のガン増殖曲線を図３にプロットした。
【０２０９】
全体として、抗ＰＤ−１抗体、Ｃｍｐｄ１９（５０ｍｇ/ｋｇ）またはＣｍｐｄ１９（２５ｍｇ/ｋｇ）の単独投与は、抗ガン活性が弱いか無いレベルで、ＴＧＩ値（％）がそれぞれ、１０．４％（ｐ＝０．３９３）、-１．４％（ｐ＝０．９４０）および６．５％（ｐ＝０．６３０）であった。抗ＰＤ−１抗体とＣｍｐｄ１９（５０ｍｇ/ｋｇ）の併用療法では、有意な抗ガン活性を示した。ＴＧＩ値は３３．２％（ｐ＝０．００６）であった。一方、抗ＰＤ−１抗体とＣｍｐｄ１９（２５ｍｇ/ｋｇ）の併用療法では中程度の抗ガン活性を示し、ＴＧＩ値は２１．４％（ｐ＝０．０７６）であった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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