(57)【要約】  式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学上許容可能な塩、これらの化合物を含んでなる医薬組成物、ＬＲＲＫ２キナーゼが関与する疾患の治療におけるこれらの化合物および組成物の使用。【化１】2020505397.tif 000049
2020505397.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2020505397.tif 000048
［式中、
Ｒ１は、
ａ）オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されていてもよいＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルであって、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシが、ハロ、ヒドロキシル、非置換Ｃ１−３アルキルおよび非置換Ｃ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１もしくは２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリル；または
ｂ）オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されていてもよいＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環であって、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシが、ハロ、ヒドロキシル、非置換Ｃ１−３アルキルおよび非置換Ｃ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環、
であり、ただし、Ｒ１は、２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イルではなく；
Ｒ２は、
ｆ）ハロ、ヒドロキシル、ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＣＨ２−およびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル、
シアノ、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＳＯ２ＣＨ３、
−ＣＯＣＨ３、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい４〜７員ヘテロシクリル環であって、
４〜７員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、前記置換基群が、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨ、ならびに、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ＣＨ２ＯＨ、非置換Ｃ１−３アルキルおよび非置換Ｃ１−３アルコキシルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい４〜６員ヘテロシクリル環を含む４〜７員ヘテロシクリル環、ただし、前記４〜６員ヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されており；
ｇ）−Ｏ−４〜６員ヘテロシクリル環であって、ヘテロシクリル環が、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい−Ｏ−４〜６員ヘテロシクリル環；
ｈ）シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＯ２Ｈおよび４〜６員ヘテロシクリル環からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル；
ｉ）−Ｏ−Ｃ３−６シクロアルキルであって、シクロアルキル基が、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよびＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい−Ｏ−Ｃ３−６シクロアルキル；ならびに
ｊ）ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＯ２Ｈおよび４〜６員ヘテロシクリル環からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ
からなる群から選択され；
Ｒ３は、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルキル、Ｃ１−３ハロアルコキシおよびＣ３−６シクロアルキルからなる群から選択され；かつ
Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルキル、Ｃ１−３ハロアルコキシおよびＣ３−６シクロアルキルからなる群から選択される］
の化合物またはその薬学上許容可能な塩。
【請求項２】
Ｒ１が、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−６（２Ｈ）−イル、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサニルおよびヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２，３−ｃ］ピロリルからなる群から選択されるＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルであって、縮合二環式ヘテロシクリルが、オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルである、請求項１に記載の化合物または薬学上許容可能な塩。
【請求項３】
Ｒ１が、Ｎ結合８〜１０員ヘテロスピラン環であって、ヘテロスピラン環が、オキソ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよいＮ結合８〜１０員ヘテロスピラン環であり、ただし、Ｒ１が、２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イルではない、請求項１に記載の化合物または薬学上許容可能な塩。
【請求項４】
Ｒ１が、オキシアザスピロ［２．５］オクタニル、ジオキシアザスピロ［２．６］ノナニル、ジオキシアザスピロ［３．５］ノナニル、ジオキシアザスピロ［４．４］ノナニル、ジアザスピロ［２．７］デカニル、ジアザスピロ［３．６］デカニル、ジアザスピロ［４．５］デカニル、オキサジアザスピロ［２．７］デカニル、オキサジアザスピロ［３．６］デカニルおよびオキサジアザスピロ［４．５］デカニルからなる群から選択されるＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環であって、ヘテロスピラン環が、１個のオキソ基で置換されていてもよいＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環である、請求項３に記載の化合物または塩。
【請求項５】
Ｒ１が、１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、３−オキサ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン−８−イルおよび４−オキサ−７−アザスピロ［２．５］オクタン−７−イルからなる群から選択されるＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環であって、ヘテロスピラン環が、１個のオキソ基で置換されていてもよいＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環である、請求項４に記載の化合物または塩。
【請求項６】
Ｒ１が、３−オキソ−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２−オキソ−３−オキサ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２−オキソ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、１−オキソ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン−８−イルおよび４−オキサ−７−アザスピロ［２．５］オクタン−７−イルからなる群から選択される、請求項５に記載の化合物または塩。
【請求項７】
Ｒ２が、
ハロ、ヒドロキシル、ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＣＨ２−およびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル、
シアノ、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＳＯ２ＣＨ３、
−ＣＯＣＨ３、ならびに
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい４〜７員ヘテロシクリル環であって、
４〜７員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、前記置換基群が、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシルおよびＣＨ２ＯＨからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい４〜６員ヘテロシクリル環を含む４〜７員ヘテロシクリル環であり、ただし、前記４〜６員ヘテロシクリル環が、前記置換可能な窒素原子に結合されている、請求項１〜６のいずれか一項に記載に記載の化合物または薬学上許容可能な塩。
【請求項８】
Ｒ２が、
１個のハロ、ヒドロキシルまたはＣ１−３アルコキシ基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＳＯ２ＣＨ３、
−ＣＯＣＨ３、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい５〜６員ヘテロシクリル環であって、５〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、前記置換基群が、酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環を含む５〜６員ヘテロシクリル環であり、ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環が、前記置換可能な窒素原子に結合されている、請求項７に記載の化合物または薬学上許容可能な塩。
【請求項９】
Ｒ２が、ハロからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい５〜６員ヘテロシクリル環であって、５〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、前記置換基群が、酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環を含む５〜６員ヘテロシクリル環であり、ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環が、前記置換可能な窒素原子に結合されている、請求項８に記載の化合物または塩。
【請求項１０】
Ｒ２が、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシルおよびＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキルである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物または薬学上許容可能な塩。
【請求項１１】
Ｒ２が、Ｏ−４〜６員ヘテロシクリル環であって、ヘテロシクリル環が、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＯ−４〜６員ヘテロシクリル環である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物または薬学上許容可能な塩。
【請求項１２】
Ｒ３が、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシルからなる群から選択される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物または薬学上許容可能な塩。
【請求項１３】
Ｒ３が、メチルおよびメトキシからなる群から選択される、請求項１２に記載の化合物または薬学上許容可能な塩。
【請求項１４】
Ｒ４が、Ｈ、クロロおよびメチルからなる群から選択される、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物または薬学上許容可能な塩。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩と、薬学上許容可能な賦形剤とを含んでなる、医薬組成物。
【請求項１６】
療法において使用するための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩。
【請求項１７】
パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療において使用するための、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩。
【請求項１８】
パーキンソン病の治療において使用するための、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩。
【請求項１９】
神経変性疾患の治療方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の請求項１〜１８のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物または薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる、方法。
【請求項２０】
前記神経変性疾患がパーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記神経変性疾患がパーキンソン病である、請求項１９または２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記対象がヒトである、請求項１９、２０または２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記対象が、ＬＲＲＫ２キナーゼにＧ２０１９Ｓ突然変異を呈するヒトである、請求項１９、２０、２１または２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療のための薬剤の製造における、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩の使用。
【請求項２５】
パーキンソン病の治療のための薬剤の製造における、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＬＲＲＫ２キナーゼ活性を阻害する新規化合物、それらの製造のための方法、それらを含有する組成物、ならびにＬＲＲＫ２キナーゼ活性に関連するもしくはＬＲＲＫ２キナーゼ活性を特徴とする疾患、例えば、パーキンソン病、アルツハイマー病および筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
パーキンソン病(Parkinson’s disease)（ＰＤ）は、脳の黒質(substantial nigra)領域におけるドーパミンニューロンの選択的変性および細胞死を特徴とする神経変性疾患である。パーキンソン病は一般に、孤発性であると考えられており、病因は未知であったが、ここ１５年で、この疾患の遺伝的基礎および関連の発病機序の理解の重要な進展があった。この進展の１つの領域は、ロイシンリッチリピートキナーゼ２(leucine rich repeat kinase 2)（ＬＲＲＫ２）タンパク質の理解である。家系研究において、ＬＲＲＫ２遺伝子のいくつかのミスセンス突然変異が常染色体優性パーキンソン病に強く関連付けられた（ＷＯ２００６０６８４９２およびＷＯ２００６０４５３９２；Trinh and Farrer 2013, Nature Reviews in Neurology 9: 445-454; Paisan-Ruiz et al., 2013, J. Parkinson’s Disease 3: 85-103参照）。ＬＲＲＫ２のＧ２０１９Ｓ突然変異は、最も多いミスセンス突然変異であり、孤発性パーキンソン病によく似た臨床像に関連する。ＬＲＲＫ２  Ｇ２０１９Ｓ突然変異もまた、孤発性パーキンソン病症例のおよそ１．５％に存在する（Gilks et al., 2005, Lancet, 365: 415-416参照）。ＬＲＲＫ２における既知の病原性コード化突然変異に加え、ＬＲＲＫ２のさらなるアミノ酸コード化変異体が同定されており、それもまたパーキンソン病を発症するリスクに関連付けられている（Ross et al., 2011 Lancet Neurology 10: 898-908参照）。さらに、ゲノムワイド関連研究(genome-wide association studies)（ＧＷＡＳ）では、ＬＲＲＫ２がパーキンソン病感受性遺伝子座として同定され、これはＬＲＲＫ２がＬＲＲＫ２タンパク質においてアミノ酸置換を引き起こす突然変異の無い孤発性パーキンソン病症例にも関連している可能性があることを示している（Satake et al., 2009 Nature Genetics 41:1303-1307; Simon-Sanchez et al 2009 Nature Genetics 41: 1308-1312参照）。
【０００３】
ＬＲＲＫ２は、ＲＯＣＯタンパク質ファミリーのメンバーであり、このファミリーの総てのメンバーは５つの保存されたドメインを共有している。最も多い病原性突然変異Ｇ２０１９Ｓは、ＬＲＲＫ２の保存性の高いキナーゼドメインに起こる。この突然変異は、組換えＬＲＲＫ２タンパク質のｉｎ  ｖｉｔｒｏ酵素アッセイにおいて（Jaleel et al., 2007, Biochem J, 405: 307-317参照）、およびＰＤ患者由来細胞から精製されたＬＲＲＫ２タンパク質において（Dzamko et al., 2010 Biochem. J. 430: 405-413参照）ＬＲＲＫ２キナーゼ活性の増強をもたらす。違う残基にアミノ酸置換をもたらす、頻度の低いＬＲＲＫ２病原性突然変異Ｒ１４４１もまた、ＬＲＲＫ２のＧＴＰアーゼドメインによるＧＴＰ加水分解の速度を減じることによりＬＲＲＫ２キナーゼ活性を上昇させることが示されている（Guo et al., 2007 Exp Cell Res. 313: 3658-3670; West et al., 2007 Hum. Mol Gen. 16: 223-232参照）。さらに、ＬＲＲＫ２の生理学的基質であるＲａｂタンパク質のリン酸化は、ＬＲＲＫ２の、ある範囲のパーキンソン病病原性突然変異によって増大することが示されている（Steger et al., 2016 eLife 5 e12813参照）。よって、この証拠は、ＬＲＲＫ２のキナーゼ活性およびＧＴＰアーゼ活性は病因に重要であること、およびＬＲＲＫ２キナーゼドメインは全体的なＬＲＲＫ２機能を調節し得ることを示す（Cookson, 2010 Nat. Rev. Neurosci. 11: 791-797参照）。
【０００４】
増強されたＬＲＲＫ２キナーゼ活性は細胞培養モデルにおいてニューロン毒性と関連していること（Smith et al., 2006 Nature Neuroscience 9: 1231-1233参照）、およびキナーゼ阻害化合物はＬＲＲＫ２により媒介される細胞死から保護すること（Lee et al., 2010 Nat. Med. 16: 998-1000参照）を示す証拠がある。ＬＲＲＫ２はまた、小グリア細胞により媒介されるα−シヌクレインのクリアランスの負のレギュレーターとして働くことも報告されており（Maekawa et al., 2016 BMC Neuroscience 17:77参照）、パーキンソン病の治療における神経毒性型のα−シヌクレインのクリアランスの促進におけるＬＲＲＫ２阻害剤の潜在的有用性が示唆される。
【０００５】
ＬＲＲＫ２  Ｇ２０１９Ｓパーキンソン病患者に由来する誘導多能性幹細胞(Induced pluripotent stem cells)（ｉＰＳＣ）は、神経突起成長の欠陥およびロテノン感受性の増強を示すことが判明しており、これはＧ２０１９Ｓ突然変異の遺伝子修正またはＬＲＲＫ２キナーゼ活性の小分子阻害剤による細胞の処理のいずれかによって改善され得る（Reinhardt et al., 2013 Cell Stem Cell 12: 354-367参照）。ミトコンドリアＤＮＡ損傷は、死後パーキンソン病検体の黒質における脆弱なドーパミンニューロン分子マーカーとして報告されている（Sanders et al 2014 Neurobiol. Dis. 70: 214-223参照）。ｉＳＰＣにおけるＬＲＲＫ２  Ｇ２０１９Ｓ突然変異に関連するこのようなミトコンドリア損傷のレベルの増大は、Ｇ２０１９Ｓ突然変異の遺伝子修正により遮断される（Sanders et al., 2014 Neurobiol. Dis. 62: 381-386参照）。
【０００６】
ＬＲＲＫ２機能および機能不全と自己貪食リソソーム経路を結びつけるさらなる証拠もある（Manzoni and Lewis, 2013 Faseb J. 27:3234-3429参照）。ＬＲＲＫ２タンパク質は、細胞のα−シヌクレイン分解能に悪影響を与えるシャペロン介在性自己貪食の欠陥をもたらす(Orenstein et al., 2013 Nature Neurosci. 16 394-406)。他の細胞モデルでは、選択的ＬＲＲＫ２阻害剤はマクロ自己貪食を刺激することが示されている（Manzoni et al., 2013 BBA Mol. Cell Res. 1833: 2900-2910参照）。これらのデータは、ＬＲＲＫ２キナーゼ活性の小分子阻害剤が、ＧＢＡ突然変異に関連するパーキンソン病の形態（Swan and Saunders-Pullman 2013 Curr. Neurol. Neurosci Rep. 13: 368参照）、他のα−シヌクレイン病、タウオパチー、アルツハイマー病（Li et al., 2010 Neurodegen. Dis. 7: 265-271参照）および他の神経変性疾患（Nixon 2013 Nat. Med. 19: 983-997参照）およびゴーシェ病（Westbroek et al., 2011 Trends. Mol. Med. 17: 485-493参照）を含む異常な自己貪食／リソソーム分解経路から起こる細胞プロテオスタシスの欠陥を特徴とする疾患の治療に有用性を持ち得ることを示唆する。自己貪食の促進剤として、ＬＲＲＫ２キナーゼの小分子阻害剤はまた、糖尿病、肥満、運動ニューロン病、癲癇および数種の癌（Rubinsztein et al., 2012 Nat.Rev. Drug Discovery 11: 709-730参照）、慢性閉塞性肺疾患および特発性肺線維症などの肺疾患（Araya et al., 2013 Intern. Med. 52: 2295-2303参照）、ならびに全身性紅斑性狼瘡などの自己免疫疾患（Martinez et al., 2016 Nature 533: 115-119参照）を含むその他の疾患の治療にも有用性を持ち得る。自己貪食および貪食プロセスの促進剤として、ＬＲＲＫ２キナーゼの小分子阻害剤はまた、結核（Rubinsztein et al., 2012 Nat.Rev. Drug Discovery 11: 709-730; Araya et al., 2013 Intern. Med. 52: 2295-2303; Gutierrez, Biochemical Society Conference; Leucine rich repeat kinase 2: ten years along the road to therapeutic intervention, Henley Business School, UK 12 July 2016参照）、ＨＩＶ、西ナイルウイルスおよびチクングニアウイルス（Shoji-Kawata et al., 2013 Nature 494: 201-206参照）などの疾患を含むある範囲の細胞内細菌感染、寄生虫感染およびウイルス感染の治療において宿主応答を増強する上での有用性も持ち得る。ＬＲＲＫ２阻害剤は、このような疾患の治療において、単独でまたは感染性病原体を直接標的とする薬物と組み合わせて有用性を持ち得る。さらに、正常対象の線維芽細胞に比べてニーマン・ピックＣ型(Niemann-Pick Type C)（ＮＰＣ）病患者の線維芽細胞で、ＬＲＲＫ２  ｍＲＮＡレベルの有意な上昇も見られ、このことは、異常なＬＲＲＫ２機能がリソソーム障害に役割を果たしている可能性があることを示す（Reddy et al., 2006 PLOS One 1 (1):e19 doi: 10.1371/journal.pone.0000019-supporting information Dataset S1参照）。この所見は、ＬＲＲＫ２阻害剤がＮＰＣの治療に有用性を持ち得ることを示唆する。
【０００７】
ＰＤ関連Ｇ２０１９Ｓ突然変異型のＬＲＲＫ２はまた、チューブリン関連タウのリン酸化を増強することも報告されており（Kawakami et al., 2012 PLoS ONE 7: e30834, doi 10.1371参照）、ＬＲＲＫ２はタウおよびα−シヌクレインの病原作用の上流で働くという疾病モデルが提案されている（Taymans & Cookson, 2010, BioEssays 32: 227-235参照）。これを支持して、トランスジェニックマウスモデルにおいて、ＬＲＲＫ２発現は不溶性タウの凝集の増大、およびタウのリン酸化の増大に関連付けられている（Bailey et al., 2013 Acta Neuropath. 126:809-827参照）。ＰＤ病原性突然変異体タンパク質ＬＲＲＫ２  Ｒ１４４１Ｇの過剰発現は、トランスジェニックマウスモデルにおいてパーキンソン病の症状および高リン酸化をもたらすことが報告されている（Li, Y. et al. 2009, Nature Neuroscience 12: 826-828参照）。従って、これらのデータは、キナーゼ触媒活性のＬＲＲＫ２阻害剤が、嗜銀顆粒病、ピック病、大脳皮質基底核変性症、進行性核上性麻痺および１７番染色体に連鎖する遺伝性前頭側頭型認知症とパーキンソニズム（ＦＴＤＰ−１７）などの、タウの高リン酸化を特徴とするタウオパチーの治療に有用であり得ることを示唆する（Goedert, M and Jakes, R (2005) Biochemica et Biophysica Acta 1739, 240-250参照）。加えて、ＬＲＲＫ２阻害剤は、薬物依存症に関連する離脱症状／再発などの、ドーパミンレベルの低下を特徴とする他の疾患の治療にも有用性を持ち得る（Rothman et al., 2008, Prog. Brain Res, 172: 385参照）。
【０００８】
他の研究では、トランスジェニックマウスモデルにおいて、Ｇ２０１９Ｓ突然変異型のＬＲＲＫ２の過剰発現が脳室下領域（ＳＶＺ）の神経前駆細胞の増殖および移動に欠陥をもたらし（Winner et al., 2011 Neurobiol. Dis. 41: 706-716参照）、細胞培養モデルにおいて、神経突起の長さおよび分岐を減じることも示されている（Dachsel et al., 2010 Parkinsonism & Related Disorders 16: 650-655参照）。さらに、ＳＶＺ神経前駆細胞の増殖および移動を促進する薬剤も脳卒中の齧歯類モデルにおいて虚血傷害後の神経学的転帰を改善することが報告されている（Zhang et al., 2010 J. Neurosci. Res. 88: 3275-3281参照）。これらの知見は、ＬＲＲＫ２の異常な活性を阻害する化合物が虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、脊髄損傷などのニューロン損傷後のＣＮＳ機能の回復を刺激するように計画された治療に有用性を持ち得ることを示唆する。
【０００９】
ＬＲＲＫ２の突然変異は、軽度認知障害（ＭＣＩ）からアルツハイマー病への遷移に臨床学的に関連していることも確認されている（ＷＯ２００７１４９７９８参照）。これらのデータは、ＬＲＲＫ２キナーゼ活性の阻害剤がアルツハイマー病、その他の認知症および関連の神経変性疾患などの疾患の治療に有用であり得ることを示唆する。
【００１０】
また、正常なＬＲＲＫ２タンパク質の異常な調節もいくつかの罹患組織およびモデルで見られる。ｍｉＲ−２０５によるＬＲＲＫ２の翻訳制御の正常な機構は、一部の孤発性ＰＤ症例では混乱が見られ、ＰＤ脳サンプルのｍｉＲ−２０５レベルの有意な低下と、それらのサンプルのＬＲＲＫ２タンパク質レベルの上昇が同時に見られる（Cho et al., (2013) Hum. Mol. Gen. 22: 608-620参照）。よって、ＬＲＲＫ２阻害剤は、正常なＬＲＲＫ２タンパク質のレベルが上昇している孤発性ＰＤ患者の治療において使用可能である。
【００１１】
マーモセットにおける実験的パーキンソン病モデルでは、ＬＲＲＫ２  ｍＲＮＡの上昇は、Ｌ−ドーパ誘導性ジスキネジアのレベルと相関する様式で見られる（Hurley, M.J et al., 2007 Eur. J. Neurosci. 26: 171-177参照）。これは、ＬＲＲＫ２阻害剤がこのようなジスキネジアの改善に有用性を持ち得ることを示唆する。
【００１２】
有意に高いレベルのＬＲＲＫ２  ｍＲＮＡがＡＬＳ患者筋肉生検サンプルにおいて報告されている（Shtilbans et al., 2011 Amyotrophic Lateral Sclerosis 12: 250-256参照）。高レベルのＬＲＲＫ２キナーゼ活性がＡＬＳの特有の特徴であり得ることが示唆される。よって、この所見は、ＬＲＲＫ２阻害剤はＡＬＳの治療に有用性を持ち得ることを示した。
【００１３】
また、ＬＲＲＫ２キナーゼ活性が小膠細胞の炎症誘発応答に役割を果たす可能性があるという証拠もある（Moehle et al., 2012, J. Neuroscience 32: 1602-1611参照）。この所見は、パーキンソン病、アルツハイマー病、多発性硬化症、ＨＩＶ誘発性認知症、筋萎縮性側索硬化症、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷および脊髄損傷を含む、ある範囲の神経変性疾患に寄与する異常な神経炎症機構の治療のためのＬＲＲＫ２阻害剤の潜在的有用性を示唆する。いくつかの証拠がまた、ＬＲＲＫ２がｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるニューロン前駆体分化の調節に役割を果たすことを示している（Milosevic, J. et al., 2009 Mol. Neurodegen. 4: 25参照）。この証拠は、ＬＲＲＫ２の阻害剤は、細胞に基づくＣＮＳ障害の治療における、必然としての治療適用のためのｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるニューロン前駆細胞の生産において有用性を持ち得ることを示唆する。
【００１４】
ＬＲＲＫ２  Ｇ２０１９Ｓ突然変異を有するパーキンソン病患者は、腎臓癌、乳癌、肺癌、前立腺癌ならびに急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む非皮膚癌の高い頻度を示すことが報告されている。ＬＲＲＫ２におけるＧ２０１９Ｓ突然変異はＬＲＲＫ２キナーゼドメインの触媒活性を増強することを示す証拠があるので、ＬＲＲＫ２の小分子阻害剤は、癌、例えば、腎臓癌、乳癌、肺癌、前立腺癌（例えば、固形腫瘍）および血液癌の治療において有用性を持ち得る（AML; Saunders-Pullman et al., 2010, Movement Disorders, 25:2536-2541; Inzelberg et al., 2012 Neurology 78: 781-786参照）。ＬＲＲＫ２の増幅および過剰発現はまた乳頭状腎臓癌および甲状腺癌でも報告されており、そこではＬＲＲＫ２とＭＥＴ癌遺伝子の間の協同作用が腫瘍細胞の成長および生存を促進し得る（Looyenga et al., 2011 PNAS 108: 1439-1444参照）。
【００１５】
いくつかの研究が、一般的なＬＲＲＫ２変異体と強直性脊椎炎（Danoy P, et al., 2010. PLoS Genet.; 6(12):e1001195；およびらい病感染（Zhang FR, et al. 2009, N Engl J Med. 361:2609-18参照）に対する感受性との遺伝的関連を示唆している。これらの知見は、ＬＲＲＫ２の阻害剤が強直性脊椎炎およびらい病感染の治療において有用性を持ち得ることを示唆する。
【００１６】
クローン病に関する３つのゲノムワイド関連スキャンのメタ分析では、ＬＲＲＫ２遺伝子を含有する遺伝子座を含む、疾患に関連するいくつかの遺伝子座が同定された（Barrett et al., 2008, Nature Genetics, 40: 955-962参照）。ＬＲＲＫ２がクローン病の病因に関連するシグナル伝達経路に含まれる可能性のあるＩＦＮ−γ標的遺伝子であるという証拠も持ち上がっている（Gardet et al., 2010, J. Immunology, 185: 5577-5585参照）。これらの知見は、ＬＲＲＫ２の阻害剤がクローン病の治療において有用性を持ち得ることを示唆する。
【００１７】
ＩＦＮ−γ標的遺伝子として、ＬＲＲＫ２は、多発性硬化症および関節リウマチなどの免疫系の他の疾患の基礎にあるＴ細胞機構にも役割を果たす可能性がある。ＬＲＲＫ２阻害剤のさらなる潜在的有用性は、Ｂリンパ球がＬＲＲＫ２発現細胞の主要集団を構成しているという、報告されている所見に由来する（Maekawa et al. 2010, BBRC 392: 431-435参照）。これは、ＬＲＲＫ２阻害剤が、リンパ腫、白血病、多発性硬化症（Ray et al., 2011 J. Immunol. 230: 109参照）、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、自己免疫性溶血性貧血、赤芽球ろう、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、エバンス症候群、血管炎、水疱性皮膚障害、１型糖尿病、シェーグレン症候群、デビック病および炎症性ミオパチー（Engel et al., 2011 Pharmacol. Rev. 63: 127-156; Homam et al., 2010 J. Clin. Neuromuscular Disease 12: 91-102参照）など、Ｂ細胞枯渇が有効である、または有効であり得る免疫系の疾患の治療に有効であり得ることを示唆する。
【００１８】
ＷＯ２０１６０３６５８６およびＷＯ２０１７０１２５７６は、ＬＲＲＫ２キナーゼの阻害剤として記載されている一連の化合物およびとりわけパーキンソン病を含む疾患の治療におけるそれらの使用を開示している。運動症状（例えば、歩行障害、すくみ足、およびバランスの悪い姿勢の制御）および非運動症状（例えば、ＰＤ関連認知症）の両面で疾病進行を休止させまたは緩徐化し、対症療法の漸増使用の必要性および関連する現行利用可能な治療の長期有害作用（例えば、ジスキネジアおよびオン／オフ揺動）を軽減し、より長期間自立を維持する新規な治療のアンメットニーズが存在する。
【発明の概要】
【００１９】
本発明は、第１の側面において、式（Ｉ）：
【化１】
2020505397.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、
ａ）オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されていてもよいＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルであって、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシが、ハロ、ヒドロキシル、非置換Ｃ１−３アルキルおよび非置換Ｃ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１もしくは２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリル；または
ｂ）オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されていてもよいＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環であって、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシが、ハロ、ヒドロキシル、非置換Ｃ１−３アルキルおよび非置換Ｃ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環、
であり、ただし、Ｒ１は、２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イルではなく；
Ｒ２は、
ａ）ハロ、ヒドロキシル、ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＣＨ２−およびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル、
シアノ、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＳＯ２ＣＨ３、
−ＣＯＣＨ３、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい４〜７員ヘテロシクリル環であって、
４〜７員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、前記置換基群が、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨ、ならびに、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ＣＨ２ＯＨ、非置換Ｃ１−３アルキルおよび非置換Ｃ１−３アルコキシルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい４〜６員ヘテロシクリル環を含む４〜７員ヘテロシクリル環、ただし、前記４〜６員ヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されており；
ｂ）−Ｏ−４〜６員ヘテロシクリル環であって、ヘテロシクリル環が、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい−Ｏ−４〜６員ヘテロシクリル環；
ｃ）シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＯ２Ｈおよび４〜６員ヘテロシクリル環からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル；
ｄ）−Ｏ−Ｃ３−６シクロアルキルであって、シクロアルキル基が、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよびＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい−Ｏ−Ｃ３−６シクロアルキル；ならびに
ｅ）ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＯ２Ｈおよび４〜６員ヘテロシクリル環からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ
からなる群から選択され；
Ｒ３は、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルキル、Ｃ１−３ハロアルコキシおよびＣ３−６シクロアルキルからなる群から選択され；かつ
Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルキル、Ｃ１−３ハロアルコキシおよびＣ３−６シクロアルキルからなる群から選択される］
の化合物およびそれらの塩を提供する。
【００２０】
本発明のさらなる側面において、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩と薬学上許容可能な担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。
【００２１】
本発明のさらなる側面は、パーキンソン病またはアルツハイマー病の治療または予防において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
発明の詳細な説明
以下、本発明の以上およびその他の側面を、本明細書に示される説明および方法論に関してさらに詳細に記載する。当然のことながら、本発明は、異なる側面で具現化でき、本明細書に示される実施形態に限定されると解釈されるべきではない。むしろ、これらの実施形態は、本開示が十分かつ完全となるよう、また、当業者に本発明の範囲を完全に伝えるように提供される。
【００２３】
本明細書における本発明の説明で使用される技術用語は、単に特定の実施形態を記載するためのものであり、本発明の限定を意図したものではない。本発明の実施形態および添付の特許請求の範囲の記載に使用する場合、単数形「１つの(a)」、「１つの(an)」および「その(the)」は、文脈がそうではないことを明示しない限り、複数形も同様に含むことを意図する。また、本明細書で使用する場合、「および／または」は、関連の列挙項目の１以上のいずれかおよび総てのあり得る組合せを包含することを意味する。さらに理解される。「含んでなる(comprises and/or comprising)」という用語は、本明細書で使用する場合、述べられた特徴、整数、工程、操作、要素、および／または成分の存在を明示し、１以上の他の特徴、整数、工程、操作、要素、成分、および／またはそれらの群の存在または付加を排除しない。
【００２４】
一般に、本明細書で使用する命名法および本明細書に記載の有機化学、医薬品化学、生物学における実験手順は、当技術分野で周知かつ一般的に使用されるものである。そうではないことが定義されない限り、本明細書で使用される総ての技術用語および科学用語は一般に、本開示が属する技術分野の熟練者により共通に理解されているものと同じ意味を有する。本明細書で使用される用語に複数の定義がある場合には、そうではないことが述べられない限り、この節のものが優先する。
【００２５】
Ａ．定義
本明細書で使用する場合、「アルキル」は、示された数の炭素原子を有する一価の飽和炭化水素鎖を意味する。例えば、Ｃ１−３アルキルは、１〜３個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。アルキル基は直鎖または分岐型であり得る。いくつかの実施形態では、分岐型アルキル基は、１、２、または３個の分岐を有し得る。例示的アルキル基としては、限定されるものではないが、メチル、エチル、およびプロピル（ｎ−プロピルおよびイソプロピル）が挙げられる。
【００２６】
本明細書で使用する場合、「アルコキシ」は、−Ｏ−アルキル基を意味する。例えば、Ｃ１−６アルコキシ基は、１〜６個の炭素原子を含む。Ｃ１−３アルコキシ基は、１〜３個の炭素原子を含む。例示的アルコキシ基としては、限定されるものではないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシル、ペンチルオキシ、およびヘキシルオキシが挙げられる。
【００２７】
本明細書で使用する場合、「シクロアルキル」は、示された数の炭素原子を有する飽和単環式炭化水素環を意味する。例えば、Ｃ３−６シクロアルキルは、環内の員原子として３〜６個の炭素原子を含む。Ｃ３−６シクロアルキルの例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられる。
【００２８】
本明細書で使用する場合、「ハロゲン」は、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、またはヨウ素（Ｉ）を意味する。「ハロ」は、ハロゲンラジカル：フルオロ（−Ｆ）、クロロ（−Ｃｌ）、ブロモ（−Ｂｒ）、またはヨード（−Ｉ）を意味する。
【００２９】
本明細書で使用する場合、「ハロアルキル」は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩから選択される１以上のハロゲン原子（これらはアルキル基の炭素原子のいずれかまたは総てにおいて、炭素原子と結合している水素原子に取って代わることにより置換され、同じであっても異なっていてもよい）を有する、上記で定義されるアルキル基を意味する。例えば、Ｃ１−３ハロアルキルは、１以上のハロゲン原子で置換されたＣ１−３アルキル基を意味する。いくつかの実施形態では、「ハロアルキル」は、ＦまたはＣｌから独立に選択される１以上のハロゲン原子で置換されたアルキル基を意味する。例示的ハロアルキル基としては、限定されるものではないが、クロロメチル、ブロモエチル、トリフルオロメチル、およびジクロロメチルが挙げられる。
【００３０】
本明細書で使用する場合、「ハロアルコキシ」は、基−Ｏ−ハロアルキルを意味する。例えば、Ｃ１−３ハロアルコキシ基は１〜６個の炭素原子を含有する。
【００３１】
本明細書で使用する場合、「ヘテロシクリル」は、飽和単環式環（この環は、環炭素原子と、窒素、酸素、または硫黄から独立に選択される１または複数の環ヘテロ原子からなる）から水素原子を除去することにより誘導される一価のラジカルである。一つの実施形態では、この環ヘテロ原子は窒素または酸素から独立に選択される。環原子の数は明示することができる。例えば、「５〜６員ヘテロシクリル」は、５〜６個の環原子からなる上記で定義されるようなヘテロシクリルである。窒素含有ヘテロシクリルという用語は、少なくとも１個の窒素環原子を含有する上記で定義されるようなヘテロシクリル環を意味する。酸素含有ヘテロシクリルという用語も同様に解釈されるべきである。−Ｏ−４〜６員ヘテロシクリル環という表現は、酸素原子を介して核に結合されている４〜６個の環原子からなる上記で定義されるようなヘテロシクリル環を意味する。他の環ヘテロ原子（窒素、酸素または硫黄）が付加的に存在してもよい。ヘテロシクリル環(herterocyclyl ring)の例としては、限定されるものではないが、オキセタニル、アゼチジニル、テトラヒドロフラニル（例えば、テトラヒドロフラン−２−イルおよびテトラヒドロフラン−３−イルを含む）、ピロリジニル（例えば、ピロリジン−１−イルおよびピロリジン−３−イルを含む）、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラニル(pyrany)またはオキサニル（例えば、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルまたはオキサイン−３−イルおよびテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルまたはオキサン−４−イルを含む）、ピペリジニル（例えば、ピペリジン−３−イルおよびピペリジン−４−ｙを含む）およびモルホリニル（例えば、モルホリン−２−イルおよびモルホリン−４−イルを含む）。
【００３２】
用語「縮合二環式ヘテロシクリル」は、炭素原子と窒素、酸素または硫黄から独立に選択される１、２または３個のヘテロ原子（ただし、ヘテロ原子は１個のみ酸素であり得る）からなる飽和二環式環（２つの環は１つの結合を共有する）から水素原子を除去することにより誘導される一価のラジカルを意味する。二環式ヘテロシクリル内の原子の数はは明示することができる。例えば、６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルという用語は、これらの２環に合計６〜９個の原子を有する縮合二環式ヘテロシクリルを意味する。Ｎ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルという用語は、それを介してそれが核に結合されている少なくとも１個の窒素環原子を含有する上記で定義されるような６〜９員縮合二環式ヘテロシクリル環を意味する。１または２個の他の環ヘテロ原子（窒素、酸素または硫黄）が付加的に存在してもよい（ただし、環ヘテロ原子は１個のみ酸素であり得る）。一つの実施形態では、Ｎ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルという用語は、それを介してそれが核に結合されている少なくとも１個の窒素環原子を含有する上記で定義されるような６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルを意味する。１または２個の他の環ヘテロ原子（窒素または酸素）が付加的に存在してもよい（ただし、環ヘテロ原子は１個のみ酸素であり得る）。縮合二環式ヘテロシクリル環およびＮ結合縮合二環式ヘテロシクリル環の例としては、限定されるものではないが、
【化２】
2020505397.tif 000004
が含まれる。
【００３３】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロスピラン環」は、１個だけの原子を介して接続された２環から水素原子を除去することにより誘導される一価のラジカルを意味する。ヘテロスピラン環は炭素原子と窒素および酸素から独立に選択される１または複数のヘテロ原子からなるが、スピロ原子は炭素でなければならない。ヘテロスピラン環内の原子の数は明示することができる。例えば、７〜１０員ヘテロスピラン環は、これらの２環内に合計７〜１０個の原子（スピロ原子を含む）を有するヘテロスピラン環を意味する。用語「Ｎ結合７〜１０員ヘテロスピラン環」は、それを介してそれが核に結合されている少なくとも１個の窒素環原子を含有する上記で定義されるような７〜１０員ヘテロスピラン環を意味する。ヘテロスピラン環およびＮ結合ヘテロスピラン環の例としては、限定されるものではないが、
【化３】
2020505397.tif 000005
が含まれる。
【００３４】
本明細書で使用する場合、ある基に関して「置換された」とは、その基内の員原子（例えば、炭素原子）と結合している１以上の水素原子が、定義された置換基の群から選択される置換基で置き換えられることを示す。用語「置換された」とは、そのような置換が置換原子および置換基の許容される価数に従い、その置換が安定な化合物（すなわち、再配列、環化、または排除などの変換を自発的に受けず、かつ、反応混合物からの単離に耐えるに十分ロバストなもの）をもたらすという暗黙の条件を含むと理解されるべきである。ある基が１以上の置換基を含み得ると記載される場合、その基内の１以上の（必要に応じて）員原子が置換されてよい。加えて、その基内の単一の員原子は、そのような置換がその原子の許容される価数に従う限り、２以上の置換基で置換されてもよい。
【００３５】
本明細書で使用する場合、「置換されていてもよい」とは、特定の基が非置換であっても、またはさらに定義されるように置換されていてもよいことを示す。
【００３６】
本明細書で使用する場合、用語「疾患」は、機能の遂行を中断もしくは阻害する、かつ／または罹患者にまたは人と接触した場合に、不快感、機能不全、苦痛、またはさらに死などの症状を生じさせる、身体または臓器の一部の状態における何らかの変化を意味する。疾病はまた、不調(distemper)、慢性的病的状態(ailing)、軽い病的状態(ailment)、疾病(malady)、障害(disorder)、病気(sickness)、病気(illness)、病訴(complain)、相互素因(interdisposition)および／または詐病(affectation)も含み得る。
【００３７】
本明細書で使用する場合、ある疾患に関して「治療」（“treat”, “treating” or “treatment”）とは、（１）その疾患またはその疾患の１以上の生物学的発現を改善すること、（２）（ａ）その疾患につながるもしくはその疾患の原因である生物学的カスケードの１以上の点、または（ｂ）その疾患の生物学的発現の１以上に干渉すること、（３）その疾患に関連する症状もしくは影響の１以上を緩和すること、（４）その疾患もしくはその疾患の生物学的発現の１以上の進行を遅らせること、および／または（５）ある疾患もしくはその疾患の生物学的発現の重篤度の可能性を小さくすることを意味する。対症的治療は、（１）、（３）および（５）の事項に示されるような治療を意味する。疾患修飾的治療は、（２）および（４）の事項に定義されるような治療を意味する。
【００３８】
本明細書で使用する場合、予防(“prevent”, “preventing” or “prevention”)とは、ある疾患もしくはその生物学的発現の発症の可能性を小さくする、または発症を遅らせるための薬物の予防的投与を意味する。
【００３９】
本明細書で使用する場合、「対象」は、哺乳動物対象（例えば、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、サルなど）、男性および女性の両対象を含み、また、新生児、幼児、若年、青年、成人および老人対象を含み、さらに限定されるものではないが、白人、黒人、アジア人、アメリカインディアンおよびヒスパニックを含む様々な人種および民族を含む、ヒト対象を意味する。
【００４０】
本明細書で使用する場合、「薬学上許容可能な塩」とは、対象化合物の所望の生物活性を保持し、かつ、望ましくない毒性学的影響が最小限である塩を意味する。これらの薬学上許容可能な塩は、化合物の最終的な単離および精製中にｉｎ  ｓｉｔｕで製造されてもよいし、またはその遊離酸もしくは遊離塩基の形態にある精製化合物を個別にそれぞれ好適な塩基もしくは酸と反応させることにより製造してもよい。
【００４１】
本明細書で使用する場合、本発明の化合物またはその他の薬学的に活性な薬剤に関して「治療上有効な量」とは、健全な医学的判断の範囲内で、患者の疾患を治療または予防するのに十分であるが、重篤な副作用を回避するに十分低い量（妥当な利益／リスク比で）を意味する。化合物の治療上有効な量は、選択される特定の化合物（例えば、その化合物の効力、有効性、および半減期を考慮する）、選択される投与経路、治療される疾患、治療される疾患の重篤度、治療される患者の齢、大きさ、体重、および健康状態、治療される患者の病歴、治療期間、併用療法の性質、所望の治療効果などの因子によって異なるが、やはり当業者によって常法により決定可能である。
【００４２】
Ｂ．化合物
本発明は、第１の側面において、式（Ｉ）の化合物またはその塩
【化４】
2020505397.tif 000006
［式中、
Ｒ１は、
ａ）オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されていてもよいＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリル、ここで、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシは、ハロ、ヒドロキシル、非置換Ｃ１−３アルキルおよび非置換Ｃ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい；または
ｂ）オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されていてもよいＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環、ここで、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシは、ハロ、ヒドロキシル、非置換Ｃ１−３アルキルおよび非置換Ｃ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、
であり、ただし、Ｒ１は２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イルではなく；
Ｒ２は、
ａ）
Ｃ１−３アルキル、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシル、ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＣＨ２−およびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい；
シアノ、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＳＯ２ＣＨ３、
−ＣＯＣＨ３、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい４〜７員ヘテロシクリル環、
ここで、前記４〜７員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合には、この置換基群はまたシアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよびＣ３−６シクロアルキルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい４〜６員ヘテロシクリル環を含み、このＣ３−６シクロアルキル基は、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ＣＨ２ＯＨ、非置換Ｃ１−３アルキルおよび非置換Ｃ１−３アルコキシルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよく、ただし、前記４〜６員ヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されている；
ｂ）−Ｏ−４〜６員ヘテロシクリル環、ここで、前記ヘテロシクリル環は、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい；
ｃ）シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＯ２Ｈおよび４〜６員ヘテロシクリル環からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル；
ｄ）−Ｏ−Ｃ３−６シクロアルキル、ここで、前記シクロアルキル基は、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよびＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい；ならびに
ｅ）ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＯ２Ｈおよび４〜６員ヘテロシクリル環からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ
からなる群から選択され；
Ｒ３は、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルキル、Ｃ１−３ハロアルコキシおよびＣ３−６シクロアルキルからなる群から選択され；かつ
Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルキル、Ｃ１−３ハロアルコキシおよびＣ３−６シクロアルキルからなる群から選択される］
を提供する。
【００４３】
一つの実施形態では、Ｒ１は、オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルである。
【００４４】
一つの実施形態では、Ｒ１は、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−６（２Ｈ）−イル、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサニルおよびヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２，３−ｃ］ピロリルからなる群から選択されるＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルであり、この縮合二環式ヘテロシクリルは、オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい。
【００４５】
一つの実施形態では、Ｒ１は、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−６（２Ｈ）−イル、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサニル、ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２，３−ｃ］ピロリルおよびオクタヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジニルからなる群から選択されるＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルであり、この縮合二環式ヘテロシクリルは、オキソおよびヒドロキシルからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい。
【００４６】
一つの実施形態では、Ｒ１は、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（２Ｈ）−イル、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル、ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２，３−ｃ］ピロール−５−イルおよびオクタヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−８−イルからなる群から選択されるＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルであり、この縮合二環式ヘテロシクリルは、オキソおよびヒドロキシルからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい。
【００４７】
一つの実施形態では、Ｒ１は、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル、ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−６（２Ｈ）−オン、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−１−オール、ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２，３−ｃ］ピロリルおよびオクタヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジニルからなる群から選択されるＮ結合６〜９員縮合二環式ヘテロシクリルである。
【００４８】
一つの実施形態では、Ｒ１は、Ｎ結合７〜１０員ヘテロスピラン環であり、このヘテロスピラン環は、オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルコキシルおよびＣ１−３アルキルからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよく、ここで、前記Ｃ１−３アルコキシルおよびＣ１−３アルキルは、ハロおよびヒドロキシルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよく、ただし、Ｒ１は２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イルではなく；
Ｒ１は、Ｎ結合７〜１０員ヘテロスピラン環であり、このヘテロスピラン環は、オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルコキシルおよびＣ１−３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよく、ただし、Ｒ１は２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イルではない。
【００４９】
一つの実施形態では、Ｒ１は、オキシアザスピロ［２．５］オクタニル、ジオキシアザスピロ［２．６］ノナニル、ジオキシアザスピロ［３．５］ノナニル、ジオキシアザスピロ［４．４］ノナニル、ジアザスピロ［２．７］デカニル、ジアザスピロ［３．６］デカニル、ジアザスピロ［４．５］デカニル、オキサジアザスピロ［２．７］デカニル、オキサジアザスピロ［３．６］デカニルおよびオキサジアザスピロ［４．５］デカニルからなる群から選択されるＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環であり、このヘテロスピラン環は、オキソ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルコキシルおよびＣ１−３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい。
【００５０】
一つの実施形態では、Ｒ１は、オキシアザスピロ［２．５］オクタニル、ジオキシアザスピロ［２．６］ノナニル、ジオキシアザスピロ［３．５］ノナニル、ジオキシアザスピロ［４．４］ノナニル、ジアザスピロ［２．７］デカニル、ジアザスピロ［３．６］デカニル、ジアザスピロ［４．５］デカニル、オキサジアザスピロ［２．７］デカニル、オキサジアザスピロ［３．６］デカニルおよびオキサジアザスピロ［４．５］デカニルからなる群から選択されるＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環であり、このヘテロスピラン環は、１個のオキソ基で置換されていてもよい。
【００５１】
一つの実施形態では、Ｒ１は、１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、３−オキサ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン−８−イルおよび４−オキサ−７−アザスピロ［２．５］オクタン−７−イルからなる群から選択されるＮ結合７〜１０員ヘテロスピラン環であり、このヘテロスピラン環は、１個のオキソ基で置換されていてもよい。
【００５２】
一つの実施形態では、Ｒ１は、３−オキソ−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２−オキソ−３−オキサ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２−オキソ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、１−オキソ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン−８−イルおよび４−オキサ−７−アザスピロ［２．５］オクタン−７−イルである。
【００５３】
一つの実施形態では、Ｒ２は、
ａ）
Ｃ１−３アルキル、このアルキル基は、１個のハロ、ヒドロキシルまたはＣ１−３アルコキシ基で置換されていてもよい、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＳＯ２ＣＨ３、
−ＣＯＣＨ３、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい５〜６員ヘテロシクリル環、
ここで、前記５〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、この置換基群はまた酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されている；
ｂ）−Ｏ−４〜６員ヘテロシクリル環、ここで、前記ヘテロシクリル環は、同じであっても異なっていてもよい１または２個のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよい；
ｃ）ヒドロキシルおよびＣ１−３アルキルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル；
ｄ）−Ｏ−Ｃ３−６シクロアルキル、ここで、前記シクロアルキル基は、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルキルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい；ならびに
ｅ）Ｃ１−６アルコキシ
からなる群から選択される。
【００５４】
一つの実施形態では、Ｒ２は、
ａ）
Ｃ１−３アルキル、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＳＯ２ＣＨ３、
−ＣＯＣＨ３、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい５〜６員ヘテロシクリル環、
ここで、前記５〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、この置換基群はまた酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されている；
ｂ）−Ｏ−４〜６員ヘテロシクリル環、ここで、前記ヘテロシクリル環は、同じであっても異なっていてもよい１または２個のＣ１−３アルキル基で置換されていてもよい；ならびに
ｃ）ヒドロキシルおよびＣ１−３アルキルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル
からなる群から選択される。
【００５５】
一つの実施形態では、Ｒ２は、
Ｃ１−３アルキル、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシル、ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＣＨ２−およびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい、
シアノ、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＳＯ２ＣＨ３、
−ＣＯＣＨ３、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい４〜７員ヘテロシクリル環であり、
ここで、前記４〜７員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、この置換基群はまた４〜６員ヘテロシクリル環を含み、この４〜６員ヘテロシクリル環は、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシルおよびＣＨ２ＯＨからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよく、ただし、前記４〜６員ヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されている。
【００５６】
一つの実施形態では、Ｒ２は、
Ｃ１−３アルキル、このアルキル基は、１個のハロ、ヒドロキシルまたはＣ１−３アルコキシ基で置換されていてもよい、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＳＯ２ＣＨ３、
−ＣＯＣＨ３、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい５〜６員ヘテロシクリル環であり、
ここで、前記５〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、この置換基群はまた酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されている。
【００５７】
一つの実施形態では、Ｒ２は、
Ｃ１−３アルキル、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい、
ハロ、
ヒドロキシル、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ、
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい５〜６員ヘテロシクリル環であり、
ここで、前記５〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、この置換基群はまた酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されている。
【００５８】
一つの実施形態では、Ｒ２は、
ハロ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい５〜６員ヘテロシクリル環であり、
ここで、前記５〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、この置換基群はまた酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されている。
【００５９】
一つの実施形態では、Ｒ２は、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニルおよびモルホリニルからなる群から選択される５〜６員ヘテロシクリル環であり、このヘテロシクリル環は、
ハロ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよく、
ここで、前記５〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、この置換基群はまた酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されている。
【００６０】
一つの実施形態では、Ｒ２は、ピペリジニルまたはピロリジニル環であり、この環は、
Ｃ１−３アルキル、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＣＯＣＨ２ＯＨ、および
酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環（ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、ピペリジニルまたはピロリジニル環の窒素に結合されている）
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい。
【００６１】
一つの実施形態では、Ｒ２は、
酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環（ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、ピペリジニル環の窒素原子に結合されている）；
Ｃ１−３アルキル、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい；
ハロ；
ヒドロキシル、および
ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいピペリジニル環である。
【００６２】
一つの実施形態では、Ｒ２は、ピペリジニルまたはピロリジニル環であり、この環は、
ハロ、および
酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環（ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、ピペリジニルまたはピロリジニル環の窒素原子に結合されている）
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい。
【００６３】
一つの実施形態では、Ｒ２は、
ハロ、および
酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環（ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、ピペリジニル環の窒素原子に結合されている）
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいピペリジニル環である。
【００６４】
一つの実施形態では、Ｒ２は、Ｃ１−３アルキルおよびヒドロキシルからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいピロリジニル環である。
【００６５】
一つの実施形態では、Ｒ２は、１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イルまたは１−（オキセタン−３−イル）−３−フルオロ−ピペリジン−４−イルである。
【００６６】
一つの実施形態では、Ｒ２は、１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イルである。
【００６７】
一つの実施形態では、Ｒ２は、テトラヒドロピラン−４−イルである。
【００６８】
一つの実施形態では、Ｒ２は、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＯ２Ｈおよび４〜６員ヘテロシクリル環からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキルである。
【００６９】
一つの実施形態では、Ｒ２は、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシルおよびＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキルである。
【００７０】
一つの実施形態では、Ｒ２は、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルキルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキルである。
【００７１】
一つの実施形態では、Ｒ２は、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルキルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいシクロヘキシルである。
【００７２】
一つの実施形態では、Ｒ２は、Ｏ−４〜６員ヘテロシクリル環であり、ここで、前記ヘテロシクリル環は、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい。
【００７３】
一つの実施形態では、Ｒ２はＯ−テトラヒドロフランであり、ここで、前記テトラヒドロフラン環は、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい。
【００７４】
一つの実施形態では、Ｒ３は、ＣＮ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルキル、およびＣ３シクロアルキルからなる群から選択される。一つの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシルからなる群から選択される。一つの実施形態では、Ｒ３は、メチルおよびメトキシからなる群から選択される。
【００７５】
一つの実施形態では、Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３ハロアルキルからなる群から選択される。一つの実施形態では、Ｒ４は、Ｈ、ハロおよびＣ１−３アルキルからなる群から選択される。一つの実施形態では、Ｒ４は、Ｈ、ハロおよびメチルからなる群から選択される。一つの実施形態では、Ｒ４は、Ｈ、フルオロ、クロロおよびメチルからなる群から選択される。一つの実施形態では、Ｒ４は、Ｈ、クロロおよびメチルからなる群から選択される。一つの実施形態では、Ｒ４は、クロロおよびメチルからなる群から選択される。一つの特定の実施形態では、Ｒ４はメチルである。
【００７６】
一つの実施形態では、本発明は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が上記で定義される通りであり、かつ、Ｒ２が、
Ｃ１−３アルキル、このアルキル基は、１個のハロ、ヒドロキシルまたはＣ１−３アルコキシ基で置換されていてもよい、
ハロ、
ヒドロキシル、
−ＳＯ２ＣＨ３、
−ＣＯＣＨ３、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい５〜６員ヘテロシクリル環であり、
ここで、前記５〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、この置換基群はまた酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は前記置換可能な窒素原子に結合されている、式（Ｉ）の化合物またはその塩を提供する。
【００７７】
この実施形態では、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は、前述の実施形態のいずれかと同様にさらに定義され得る。例えば、Ｒ３は、メチルおよびメトキシからなる群から選択され得、かつ／またはＲ４は、クロロおよびメチルからなる群から選択され得る。
【００７８】
一つの実施形態では、本発明は、
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が上記で定義される通りであり、かつ、Ｒ２が、
Ｃ１−３アルキル、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい、
ハロ、
ヒドロキシル、および
−ＣＯＣＨ２ＯＨ
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい５〜６員ヘテロシクリル環であり、
ここで、前記５〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、この置換基群はまた酸素を含有する４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記酸素を含有するヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されている、式（Ｉ）の化合物またはその塩を提供する。
【００７９】
この実施形態では、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は、前述の実施形態のいずれかと同様にさらに定義され得る。例えば、Ｒ３は、メチルおよびメトキシからなる群から選択され得、かつ／またはＲ４は、クロロおよびメチルからなる群から選択され得る。
【００８０】
一つの実施形態では、本発明は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が上記で定義される通りであり、かつ、Ｒ２が、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシルおよびＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキルである式（Ｉ）の化合物またはその塩を提供する。この実施形態では、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は、前述の実施形態のいずれかと同様にさらに定義され得る。例えば、Ｒ３は、メチルおよびメトキシからなる群から選択され得、かつ／またはＲ４は、クロロおよびメチルからなる群から選択され得る。
【００８１】
一つの実施形態では、本発明は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が上記で定義される通りであり、かつ、Ｒ２がＯ−４〜６員ヘテロシクリル環であり、前記ヘテロシクリル環は、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシル、ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＯ２Ｈからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、式（Ｉ）の化合物またはその塩を提供する。この実施形態では、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は、前述の実施形態のいずれかと同様にさらに定義され得る。例えば、Ｒ３は、メチルおよびメトキシからなる群から選択され得、かつ／またはＲ４は、クロロおよびメチルからなる群から選択され得る。
【００８２】
一つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩は、実施例Ａ−１〜Ａ−１３のいずれかの化合物またはその薬学上許容可能な塩である。一つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、実施例Ａ−１〜Ａ−１３のいずれかの化合物である。
【００８３】
一つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩は、実施例Ｂ−１〜Ｂ−１０のいずれかの化合物またはその薬学上許容可能な塩である。一つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、実施例Ｂ−１〜Ｂ−１０のいずれかの化合物である。
【００８４】
本明細書に記載の化合物の遊離塩基形態または遊離酸形態に加え、化合物の塩形態も本発明の範囲内にある。本明細書に記載の化合物の塩または薬学上許容可能な塩は、化合物の最終的な単離および精製中にｉｎ  ｓｉｔｕで製造されてもよいし、またはその遊離塩基形態もしくは遊離酸形態にある精製化合物を個別にそれぞれ好適な塩基もしくは酸と反応させることにより製造してもよい。好適な薬学的塩に関する総説としては、Berge et al, J. Pharm, Sci., 66, 1-19, 1977; P L Gould, International Journal of Pharmaceutics, 33 (1986), 201-217;およびBighley et al, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Marcel Dekker Inc, New York 1996, Volume 13, page 453-497を参照。
【００８５】
式（Ｉ）の特定の化合物は、塩基性基を含み、従って、好適な酸で処理することにより薬学上許容可能な酸付加塩を形成することができる。好適な酸としては、薬学上許容可能な無機酸および薬学上許容可能な有機酸が挙げられる。例示的な薬学上許容可能な酸付加塩としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、硝酸塩、メチル硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、スルファミン酸塩、リン酸塩、酢酸塩、ヒドロキシ酢酸塩、フェニル酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、イソ酪酸塩、吉草酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、アクリル酸塩、フマル酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、サリチル酸塩、ｐ−アミノサリチル酸塩(p-aminosalicyclate)、グリコール酸塩、乳酸塩、ヘプタン酸塩、フタル酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、マンデル酸塩、タンニン酸塩、ギ酸塩、ステアリン酸塩、アスコルビン酸塩、パルミチン酸塩、オレイン酸塩、ピルビン酸塩、パモ酸塩、マロン酸塩、ラウリン酸塩、グルタル酸塩、グルタミン酸塩、エストール酸塩、メタンスルホン酸塩（メシル酸塩）、エタンスルホン酸塩（エシル酸塩）、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、ｐ−アミノベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩（トシル酸塩）、およびナフタレン−２−スルホン酸塩が挙げられる。いくつかの実施形態では、薬学上許容可能な塩には、Ｌ−酒石酸塩、エタンジスルホン酸塩（エジシル酸塩）、硫酸塩、リン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩（トシル酸塩）、塩酸塩、メタンスルホン酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、マレイン酸塩、臭化水素酸塩、Ｌ−乳酸塩、マロン酸塩、およびＳ−カンファー−１０−スルホン酸塩が含まれる。特定の実施形態では、これらの塩のいくつかは溶媒和物を形成する。特定の実施形態では、これらの塩のいくつかは結晶性である。
【００８６】
式（Ｉ）の特定の化合物は、酸性基を含み、従って、好適な塩基で処理することにより薬学上許容可能な塩基付加塩を形成することができる。例示的な薬学上許容可能な塩基付加塩としては、限定されるものではないが、アルミニウム、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール（ＴＲＩＳ、トロメタミン）、アルギニン、ベネタミン（Ｎ−ベンジルフェネチルアミン）、ベンザチン（Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン）、ビス−（２−ヒドロキシエチル）アミン、ビスマス、カルシウム、クロロプロカイン、コリン、クレミゾール（１−ｐクロロベンジル−２−ピロリジン−１’−イルメチルベンズイミダゾール）、シクロヘキシルアミン、ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、ジエチルトリアミン、ジメチルアミン、ジメチルエタノールアミン、ドーパミン、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｌ−ヒスチジン、鉄、イソキノリン、レピジン、リチウム、リシン、マグネシウム、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、ピペラジン、ピペリジン、カリウム、プロカイン、キニーネ、キノリン、ナトリウム、ストロンチウム、ｔ−ブチルアミン、および亜鉛が含まれる。
【００８７】
式（Ｉ）の特定の化合物またはそれらの塩は立体異性形で存在し得る（例えば、それらは１以上の不斉炭素原子を含み得る）。個々の立体異性体（鏡像異性体およびジアステレオマー）およびこれらの混合物は本発明の範囲内に含まれる。異なる異性形は従来の方法によってあるものを他から分離または分割することができ、あるいはいずれかの所与の異性体を従来の合成方法によって、または立体特異的もしくは不斉合成によって得ることもできる。
【００８８】
式（Ｉ）の特定の化合物は、互変異性形で存在することができる。例えば、特定の化合物はケト−エノール互変異性を示す。いくつかの場合では、一対の互変異性体形のうち一方だけが式（Ｉ）の範囲内に入る。このような択一的互変異性体も本発明の一部となす。
【００８９】
本発明はまた、自然界に最も多く見られる原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子で１以上の原子が置換されているということ以外は式（Ｉ）の化合物またはそれらの塩と同じ、同位体標識化合物および塩も含む。式（Ｉ）の化合物またはそれらの塩に組み込むことができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、フッ素の同位体、例えば、３Ｈ、１１Ｃ、１４Ｃおよび１８Ｆが挙げられる。このような同位体で標識された式（Ｉ）の化合物またはそれらの塩は、薬物および／または基質組織分布アッセイで有用である。例えば、１１Ｃおよび１８Ｆ同位体は、ＰＥＴ（陽電子放出断層撮影法）で有用である。ＰＥＴは脳撮像法で有用である。同位体で標識された式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩は、一般に、以下に開示されている手順を行い、非同位体標識試薬を容易に入手できる同位体標識試薬で置き換えることによって調製することができる。一つの実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはそれらの塩は同位体で標識されない。
【００９０】
式（Ｉ）の特定の化合物またはそれらの塩は、固体または液体形態で存在し得る。固体状態では、式（Ｉ）の化合物または塩は、結晶形態もしくは非晶質形態で、またはそれらの混合物として存在し得る。結晶形態である式（Ｉ）の化合物または塩の場合、当業者は、結晶化の際に結晶格子に溶媒分子が組み込まれた薬学上許容可能な溶媒和物が形成され得ることを認識するであろう。溶媒和物は、エタノール、イソプロパノール、ＤＭＳＯ、酢酸、エタノールアミン、および酢酸エチルなどの非水性溶媒を含んでもよく、またはそれらは結晶格子中に組み込まれる溶媒として水を含んでもよい。結晶格子中に組み込まれる溶媒が水である溶媒和物は一般に「水和物」と呼ばれる。水和物は化学量論的水和物ならびに変動量の水を含有する組成物を含む。
【００９１】
当業者は、その種々の溶媒和物を含む結晶形態で存在する特定の式（Ｉ）の化合物、それらの薬学上許容可能な塩または溶媒和物は、多形（すなわち、異なる結晶構造で存在する能力）を示し得ることをさらに認識するであろう。これらの異なる結晶形態は一般に「多形体」として知られる。多形体は同じ化学組成を持つが、充填、幾何学的配置、および結晶性固体状態のその他の記述的特性が異なる。従って、多形体は、形状、密度、硬度、変形性、安定性、および溶解特性など、異なる物理特性を持ち得る。多形体は一般に、異なる融点、ＩＲスペクトル、およびＸ線粉末回折パターンを示し、これらが同定に使用できる。当業者は、例えば、化合物の製造に使用される反応条件または試薬を変更または調節することによって異なる多形体が製造され得ることを認識するであろう。例えば、温度、圧力、または溶媒の変化が多形体を生じ得る。加えて、ある多形体は、特定の条件下で別の多形体へ自発的に変換する場合がある。
【００９２】
当業者はまた、本発明が式（Ｉ）の化合物、またはそれらの薬学上許容可能な塩の種々の重水素化形態を含み得ることも認識するであろう。炭素原子と結合している利用可能な各水素原子は独立に重水素原子で置換され得る。当業者ならば、どのように式（Ｉ）の化合物、またはそれらの薬学上許容可能な塩の重水素化形態を合成すればよいかを知っている。市販の重水素化出発材料を式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学上許容可能な塩の重水素化形態の製造に用いてもよく、またはそれらは従来の技術を使用し、重水素化試薬（例えば、重水素化リチウムアルミニウム）を用いて合成してもよい。
【００９３】
Ｃ．使用方法
式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学上許容可能な塩はＬＲＲＫ２キナーゼ活性の阻害剤であり、従って、以下の神経疾患パーキンソン病、アルツハイマー病、認知症（レビー小体型認知症および血管性認知症、ＨＩＶ誘発性認知症を含む）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、加齢性記憶障害、軽度認知障害、嗜銀顆粒病、ピック病、大脳皮質基底核変性症、進行性核上麻痺、１７番染色体に連鎖する遺伝性前頭側頭型認知症とパーキンソニズム（ＦＴＤＰ−１７）、薬物依存症に関連する離脱症状／再発、Ｌ−ドーパ誘発性ジスキネジア、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、脊髄損傷および多発性硬化症の治療または予防において使用の可能性があると考えられる。ＬＲＲＫ２の阻害によって潜在的に治療可能な他の疾患には、限定されるものではないが、リソソーム障害（例えば、ニーマン・ピックＣ型病、ゴーシェ病）、クローン病、癌（甲状腺癌、腎臓癌（乳頭状腎臓癌を含む）、乳癌、肺癌および前立腺癌、白血病（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む）およびリンパ腫を含む）、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、自己免疫性溶血性貧血、赤芽球ろう、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、エバンス症候群、血管炎、水疱性皮膚障害、１型糖尿病、肥満、癲癇、慢性閉塞性肺疾患などの肺疾患、特発性肺線維症、シェーグレン症候群、デビック病、炎症性ミオパチー、強直性脊椎炎、細菌感染（らい病を含む）、ウイルス感染（結核、ＨＩＶ、西ナイルウイルスおよびチクングニアウイルスを含む）および寄生虫感染が含まれる。
【００９４】
本発明の一つの側面は、療法において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。一つの実施形態では、本発明は、上記の障害（すなわち、神経疾患および上記に挙げられた他の疾患）の治療または予防において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。一つの実施形態では、本発明は、パーキンソン病の治療または予防において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。一つの実施形態では、本発明は、パーキンソン病の治療において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。別の実施形態では、本発明は、アルツハイマー病の治療または予防において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。一つの実施形態では、本発明は、アルツハイマー病の治療において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。別の実施形態では、本発明は、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。
【００９５】
本発明のさらなる側面は、上記の障害（すなわち、神経疾患および上記に挙げられた他の疾患）の治療または予防のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩の使用を提供する。本発明のさらなる側面は、パーキンソン病の治療または予防のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩の使用を提供する。本発明のさらなる側面は、パーキンソン病の治療のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。別の実施形態では、本発明は、アルツハイマー病の治療または予防のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。一つの実施形態では、本発明は、アルツハイマー病の治療のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩の使用を提供する。別の実施形態では、本発明は、結核の治療のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を提供する。
【００９６】
本発明のさらなる側面は、上記に挙げられた（すなわち、神経疾患および上記に挙げられた他の疾患から選択される）障害の治療または予防の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明のさらなる側面は、パーキンソン病の治療または予防の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明のさらなる側面は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明のさらなる側面は、アルツハイマー病の治療または予防の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明のさらなる側面は、アルツハイマー病の治療の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明のさらなる側面は、結核の治療の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。ある実施形態において、対象はヒトである。
【００９７】
本発明に関して、パーキンソン病の治療は、孤発性パーキンソン病、および／または家族性パーキンソン病の治療に関する。一つの実施形態では、パーキンソン病の治療は、家族性パーキンソン病の治療である。家族性パーキンソン病患者は、以下のＬＲＲＫ２キナーゼ突然変異：Ｇ２０１９Ｓ突然変異、Ｎ１４３７Ｈ突然変異、Ｒ１４４１Ｇ突然変異、Ｒ１４４１Ｃ突然変異、Ｒ１４４１Ｈ突然変異、Ｙ１６９９Ｃ突然変異、Ｓ１７６１Ｒ突然変異、またはＩ２０２０Ｔ突然変異のうち１以上を呈するものである。別の実施形態では、家族性パーキンソン病患者は、パーキンソン病に関連するＬＲＲＫ２遺伝子座に他のコード突然変異（例えば、Ｇ２３８５Ｒ）または非コード一塩基多型を呈する。より詳しい実施形態では、家族性パーキンソン病は、ＬＲＲＫ２キナーゼにＧ２０１９Ｓ突然変異またはＲ１４４１Ｇ突然変異を呈する患者を含む。一つの実施形態では、パーキンソン病の治療は、家族性パーキンソン病の治療を指し、Ｇ２０１９Ｓ突然変異を有するＬＲＲＫ２キナーゼを発現する患者を含む。別の実施形態では、家族性パーキンソン病患者は、以上に高レベルの正常なＬＲＲＫ２キナーゼを発現する。
【００９８】
本発明に関して、パーキンソン病の治療は、孤発性パーキンソン病、および／または家族性パーキンソン病の治療に関する。一つの実施形態では、パーキンソン病の治療は、家族性パーキンソン病の治療である。家族性パーキンソン病患者は、以下のＬＲＲＫ２キナーゼ突然変異：Ｇ２０１９Ｓ突然変異、Ｎ１４３７Ｈ突然変異、Ｒ１４４１Ｇ突然変異、Ｒ１４４１Ｃ突然変異、Ｒ１４４１Ｈ突然変異、Ｙ１６９９Ｃ突然変異、Ｓ１７６１Ｒ突然変異、またはＩ２０２０Ｔ突然変異のうち１以上を呈するものである。別の実施形態では、家族性パーキンソン病患者は、パーキンソン病に関連するＬＲＲＫ２遺伝子座に他のコード突然変異（例えば、Ｇ２３８５Ｒ）または非コード一塩基多型を呈する。より詳しい実施形態では、家族性パーキンソン病は、ＬＲＲＫ２キナーゼにＧ２０１９Ｓ突然変異またはＲ１４４１Ｇ突然変異を呈する患者を含む。一つの実施形態では、パーキンソン病の治療は、家族性パーキンソン病の治療を指し、Ｇ２０１９Ｓ突然変異を有するＬＲＲＫ２キナーゼを発現する患者を含む。別の実施形態では、家族性パーキンソン病患者は、以上に高レベルの正常なＬＲＲＫ２キナーゼを発現する。
【００９９】
一つの実施形態では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とするＬＲＲＫ２キナーゼにＧ２０１９Ｓ突然変異を呈するヒトに治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【０１００】
一つの実施形態では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、ヒトにおいてＬＲＲＫ２キナーゼのＧ２０１９Ｓ突然変異を検査すること、およびそれを必要とするＬＲＲＫ２キナーゼにＧ２０１９Ｓ突然変異を呈するヒトに治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【０１０１】
パーキンソン病の治療は、対症的であり得るか、または疾患修飾的であり得る。一つの実施形態では、パーキンソン病の治療は、対症的治療を意味する。一つの実施形態では、パーキンソン病の治療は、疾患修飾的治療を意味する。
【０１０２】
本発明の化合物はまた、家族歴、嗅覚欠陥、便秘、認知障害、歩行または分子的、生化学的、免疫学的もしくはイメージング技術から得られる疾病進行の生物学的指標などの疾病進行に関連する１以上の微細な特徴の手段により重篤なパーキンソン症候群へ進行しやすいとして特定された患者の治療においても有用であり得る。これに関して、治療は症候的または疾患修飾的であり得る。
【０１０３】
本発明に関して、アルツハイマー病の治療は、孤発性アルツハイマー病および／または家族性アルツハイマー病の治療を意味する。アルツハイマー病の治療は対症的であり得るか、または疾患修飾的であり得る。一つの実施形態では、アルツハイマー病の治療は症候的治療を意味する。
【０１０４】
本発明に関して、認知症（レビー小体型認知症および血管性認知症、ＨＩＶ誘発性認知症を含む）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、加齢性記憶障害、軽度認知障害、嗜銀顆粒病、ピック病、大脳皮質基底核変性症、進行性核上麻痺、１７番染色体に連鎖する遺伝性前頭側頭型認知症とパーキンソニズム（ＦＴＤＰ−１７）、多発性硬化症、リソソーム障害（例えば、ニーマン・ピックＣ型病、ゴーシェ病）、クローン病、癌（甲状腺癌、腎臓癌（乳頭状腎臓癌を含む）、乳癌、肺癌および前立腺癌、白血病（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む）およびリンパ腫を含む）、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、自己免疫性溶血性貧血、赤芽球ろう、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、エバンス症候群、血管炎、水疱性皮膚障害、１型糖尿病、肥満、癲癇、慢性閉塞性肺疾患などの肺疾患、特発性肺線維症、シェーグレン症候群、デビック病、炎症性ミオパチー、強直性脊椎炎の治療は症候的または疾患修飾的であり得る。特定の実施形態では、これらの障害の治療は、症候的治療を意味する。
【０１０５】
本発明はまた、細胞に基づくＣＮＳ障害の治療における、必然としての治療適用のためのｉｎ  ｖｉｔｒｏニューロン前駆細胞の生産におけるＬＲＲＫ２阻害剤の使用も提供する。
【０１０６】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩がパーキンソン病の治療における使用に意図される場合、それはパーキンソン病の対症的治療として有用であることが主張されている薬剤と併用可能である。このような他の治療薬の好適な例としては、Ｌ−ドーパ、およびドーパミン作動薬（例えば、プラミペキソール、ロピニロール）が挙げられる。
【０１０７】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩がアルツハイマー病の治療における使用に意図される場合、それはアルツハイマー病の疾患修飾的または対症的いずれかの治療として有用であることが主張されている薬剤と併用可能である。このような他の治療薬の好適な例は、例えば、コリン作動性伝達を修飾することが知られているもの、例えば、Ｍ１ムスカリン性受容体作動薬またはアロステリックモジュレーター、Ｍ２ムスカリン性拮抗薬、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤（例えば、テトラヒドロアミノアクリジン、塩酸ドネペジル、リバスチグミンおよびガランタミン）、ニコチン性受容体作動薬またはアロステリックモジュレーター（例えば、α７拮抗薬もしくはアロステリックモジュレーターまたはα４β２作動薬もしくはアロステリックモジュレーター）、ＰＰＡＲ作動薬（例えば、ＰＰＡＲγ作動薬）、５−ＨＴ４受容体部分作動薬、５−ＨＴ６受容体拮抗薬、例えば、ＳＢ−７４２４５７、または５ＨＴ１Ａ受容体拮抗薬およびＮＭＤＡ受容体拮抗薬もしくはモジュレーター、または疾患修飾性薬剤、例えば、βもしくはγ−セクレターゼ阻害剤、例えば、セマガセスタット、ミトコンドリア安定剤、微小管安定剤またはタウ病態のモジュレーター、例えば、タウ凝集阻害剤（例えば、メチレンブルーおよびＲＥＭＢＥＲ（商標））、ＮＳＡＩＤＳ、例えば、タレンフルルビル、トラミプロシル；または抗体、例えば、バピネオズマブもしくはソラネズマブ；プロテオグリカン、例えば、トラミプロセートなどの対症的薬剤であり得る。
【０１０８】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が細菌感染、寄生虫感染またはウイルス感染の治療における使用に意図される場合、それは感染性病原体を直接標的とする対症的治療として有用であることが主張されている薬剤と併用可能である。
【０１０９】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が他の治療薬と併用される場合、その化合物は、任意の好都合な経路により逐次または同時に投与され得る。
【０１１０】
本発明はまた、さらなる側面において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩を１以上のさらなる治療薬とともに含んでなる組合せを提供する。
【０１１１】
上記に言及される組合せは、好都合には、医薬処方物の形態で使用するために提供され得、従って上記で定義されるような組合せを薬学上許容可能な担体または賦形剤とともに含んでなる医薬処方物は、本発明のさらなる側面を含んでなる。このような組合せの個々の成分は、別個のまたは合剤としての医薬処方物で逐次または同時に投与することができる。
【０１１２】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩が、同じ病態に対して有効な第２の治療薬と併用される場合、各化合物の用量は、その化合物が単独で使用される場合とは異なり得る。適当な用量は当業者により容易に認識されるであろう。
【０１１３】
Ｄ．組成物
式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学上許容可能な塩は、対象に投与する前に医薬組成物として処方され得る。一つの側面によれば、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学上許容可能な塩と薬学上許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物を提供する。別の側面によれば、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学上許容可能な塩と薬学上許容可能な賦形剤と混合することを含んでなる医薬組成物の製造方法を提供する。
【０１１４】
医薬組成物は、単位用量当たりに所定量の有効成分を含有する単位投与形で提供され得る。このような単位は、治療される疾患、投与経路ならびに対象の齢、体重および状態に応じて、例えば、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、または１ｍｇ〜５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、５００ｍｇ、７５０ｍｇまたは１ｇの本発明の化合物を含有してよく、または医薬組成物は、単位用量当たりに所定量の有効成分を含有する単位投与形で提供され得る。他の実施形態では、単位投与組成物は、本明細書に記載の一日用量もしくは部分用量、またはその適当な分数の有効成分を含有するものである。さらに、このような医薬組成物は、当業者に周知のいずれの方法によって作製してもよい。
【０１１５】
式（Ｉ）の化合物の治療上有効な量は、例えば、意図されるレシピエントの齢および体重、治療を必要とする正確な病態およびその重篤度、処方物の性質、および投与経路を含むいくつかの因子によって決まり、最終的には投薬を指示する担当者の裁量下にある。しかしながら、本明細書に記載される疾患の治療のための式（Ｉ）の化合物の治療上有効な量は、一般に、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇレシピエント体重／日の範囲、より通常には、１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。よって、７０ｋｇの成体哺乳動物では、１日当たりの実際の量は通常７０〜７００ｍｇであると思われ、この量は１日当たり単回用量で与えてもよいし、または１日当たり２回、３回、４回、５回または６回用量など、１日当たり複数の分割用量で与えてもよい。あるいは、投与は間欠的に、例えば、１日おきに１回、週に１回または月に１回行うことができる。治療上有効な薬学上許容可能な量の塩または溶媒和物などは、式（Ｉ）の化合物それ自体の治療上有効な量の割合として決定され得る。類似の用量が上記に言及される他の疾患の処置にも適当であると想定される。
【０１１６】
本発明の医薬組成物は、１種類以上の式（Ｉ）の化合物を含有し得る。いくつかの実施形態では、これらの医薬組成物は、２種類以上の本発明の化合物を含有し得る。例えば、いくつかの実施形態では、これらの医薬組成物は、２種類以上の式（Ｉ）の化合物を含有し得る。加えて、これらの医薬組成物は、１種類以上の付加的な薬学上有効な化合物を場合によりさらに含んでなってもよい。
【０１１７】
本明細書で使用する場合、「薬学上許容可能な賦形剤」は、医薬組成物に形態または稠度を与える上で含まれる薬学上許容可能な材料、組成物またはビヒクルを意味する。各賦形剤は、混合した際に、対象に投与した際に本発明の化合物の有効性を実質的に低下させる相互作用および薬学上許容されない医薬組成物を生じる相互作用が回避されるよう、その医薬組成物の他の成分と適合し得る。
【０１１８】
本発明の化合物および薬学上許容可能な１または複数の賦形剤は、所望の投与経路により対象に投与するために適合された投与形へと処方され得る。例えば、投与形には、（１）経口投与（頬側または舌下を含む）に適合したもの、例えば、錠剤、カプセル剤、カプレット剤、丸剤、トローチ剤、散剤、シロップ剤、エリキシル剤(elixers)、懸濁液、溶液、エマルション、サシェ剤、およびカシェ剤；（２）非経口投与（皮下、筋肉内、静脈内または皮内を含む）に適合したもの、例えば、無菌溶液、懸濁液、および再構成用散剤；（３）経皮投与に適合したもの、例えば、経皮パッチ；（４）直腸投与に適合したもの、例えば、坐剤；（５）鼻腔吸入に適合したもの、例えば、ドライパウダー、エアロゾル、懸濁液、および溶液；ならびに（６）局所投与（頬側、舌下または経皮を含む）に適合したもの、例えば、クリーム、軟膏、ローション、溶液、ペースト、スプレー、フォーム、およびゲルが含まれる。このような組成物は製薬分野で公知の任意の方法により、例えば、式（Ｉ）の化合物を担体または賦形剤と会合させることによって調製され得る。
【０１１９】
経口投与に適合した医薬組成物は、カプセル剤もしくは錠剤などの個別単位；散剤または顆粒；水性もしくは非水性液中の溶液もしくは懸濁液；可食フォームもしくはホイップ；または水中油型液体エマルションもしくは油中水型液体エマルションとして提供され得る。
【０１２０】
好適な薬学上許容可能な賦形剤は、選択される特定の投与形によって異なり得る。加えて、好適な薬学上許容可能な賦形剤は、組成物中で役立ち得る特定の機能に関して選択され得る。例えば、ある種の薬学上許容可能な賦形剤は、均一な投与形の製造を助けるそれらの能力のために選択され得る。ある種の薬学上許容可能な賦形剤は、安定な投与形の製造を助けるそれらの能力のために選択され得る。ある種の薬学上許容可能な賦形剤は、患者に投与された際に本発明の１または複数の化合物をある器官または身体部分から別の器官または身体部分に運搬または輸送するのを助けるそれらの能力のために選択され得る。ある種の薬学上許容可能な賦形剤は、患者のコンプライアンスを高めるそれらの能力のために選択され得る。
【０１２１】
好適な薬学上許容可能な賦形剤としては、下記の種の賦形剤：希釈剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、造粒剤、被覆剤、湿潤剤、溶媒、補助溶媒、沈殿防止剤、乳化剤、甘味剤、香味剤、矯味剤、着色剤、固化防止剤、湿潤剤(hemectants)、キレート剤、可塑剤、増粘剤、抗酸化剤、保存剤、安定剤、界面活性剤、および緩衝剤が含まれる。当業者は、ある種の薬学上許容可能な賦形剤が２つ以上の機能を果たすことがあり、どのくらいの賦形剤が処方物中に存在するか、および他にどんな成分が処方物中に存在するかによって別の機能を果たすことがあることを認識するであろう。
【０１２２】
当業者は、本発明で使用するための適当な量で好適な薬学上許容可能な賦形剤を選択できるだけの当技術分野の知識と技量を有する。加えて、薬学上許容可能な賦形剤を記載し、好適な薬学上許容可能な賦形剤の選択に有用であり得る、当業者に利用可能ないくつかの情報源がある。例としては、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)、The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited)、およびThe Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)が挙げられる。
【０１２３】
本発明の医薬組成物は、当業者に公知の技術および方法を用いて調製される。当技術分野で慣用される方法のいくつかはRemington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)に記載されている。
【０１２４】
一つの側面において、本発明は、治療上有効な量の本発明の化合物と希釈剤または増量剤とを含んでなる、錠剤またはカプセル剤などの固体経口投与形を対象とする。好適な希釈剤および増量剤としては、ラクトース、スクロース、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、およびアルファー化デンプン）、セルロースおよびその誘導体（例えば、微晶質セルロース）、硫酸カルシウムおよび第二リン酸カルシウムが含まれる。経口固体投与形は、結合剤をさらに含んでなり得る。好適な結合剤としては、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、およびアルファー化デンプン）、ゼラチン、アラビアガム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、トラガカントガム、グアーガム、ポビドン、およびセルロースおよびその誘導体（例えば、微晶質セルロース）が含まれる。経口固体投与形は、崩壊剤をさらに含んでなり得る。好適な崩壊剤としては、クロスポビドン、グリコール酸ナトリウムデンプン、クロスカルメロース、アルギン酸、およびカルボキシメチルセルロースナトリウムが含まれる。経口固体投与形は、滑沢剤をさらに含んでなり得る。好適な滑沢剤としては、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、およびタルクが含まれる。
【０１２５】
特定の実施形態では、本発明は、０．０１〜１０００ｍｇの１以上の式（Ｉ）の化合物またはその薬学上許容可能な塩と０．０１〜５ｇの１以上の薬学上許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物を対象とする。
【０１２６】
別の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の化合物またはその薬学上許容可能な塩と薬学上許容可能な賦形剤とを含んでなる、神経変性疾患の治療のための医薬組成物を対象とする。別の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の化合物またはその薬学上許容可能な塩と薬学上許容可能な賦形剤とを含んでなる、パーキンソン病の治療のための医薬組成物を対象とする。
【０１２７】
Ｅ．化合物の製造方法
本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物の製造において使用される方法は所望の化合物によって決まる。特定の置換基の選択およびその特定の置換基の種々の可能性のある位置などの因子は総て、本発明の特定の化合物の製造においてたどるべき経路で役割を果たす。それらの因子は当業者によって容易に認識される。
【０１２８】
一般に、本発明の化合物は、当技術分野で公知の標準的技術およびそれに類似の既知の方法によって製造することができる。式（Ｉ）の化合物を製造する一般法を以下に示す。以下の一般実験スキームに記載される出発材料および試薬は総て市販されているか、または当技術分野で公知の方法によって製造することができる。
【０１２９】
当業者は、本明細書に記載の置換基が本明細書に記載の合成方法に適合しない場合、その置換基を、反応条件に対して安定である好適な保護基で保護できることを認識するであろう。保護基は反応手順の好適な時点で除去して所望の中間体または目的化合物を得ることができる。好適な保護基およびそのような好適な保護基を用いて種々の置換基を保護および脱保護する方法は当業者に周知であり、その例はT. Greene and P. Wuts, Protecting Groups in ChemicalSynthesis (第3版), John Wiley & Sons, NY (1999)に見出すことができる。場合によっては、置換基は、用いる反応条件下で反応性であるように特に選択することができる。これらの状況下で、これらの反応条件は、選択された置換基を、中間体化合物として有用であるか、または目的化合物中の所望の置換基である別の置換基に変換する。
【０１３０】
一般スキーム１は、本発明の化合物を製造するための例示的合成法を示す。
一般スキーム１
【化５】
2020505397.tif 000007
【０１３１】
一般スキーム１は、式（Ｉ）の化合物を表す化合物３を製造するための例示的合成を提供する。スキーム１において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は式Ｉに定義される通りである。
【０１３２】
工程（ｉ）は、約１００℃などの好適な温度下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などの適当な溶媒中、Ｃｓ２ＣＯ３などの適当な塩基を用いて、化合物１を化合物２と反応させることによる置換反応であり得、化合物３が得られる。
【０１３３】
あるいは、工程（ｉ）は、還流などの好適な温度で、トルエンなどの好適な溶媒中、Ｋ３ＰＯ４などの好適な塩基の存在下、ＣｕＩおよびＮ，Ｎ’−ジメチル−シクロヘキサン−１，２−ジアミンなどの適当な試薬を用いるカップリング反応であり得、化合物３が得られる。
【０１３４】
あるいは、工程（ｉ）は、１００℃などの好適な温度で、トルエンなどの好適な溶媒中、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどの好適な塩基の存在下、Ｐｄ２ｄｂａ３およびジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２’，４’，６’−トリイソプロピル−［１，１’−ビフェニル］−２−イル）ホスフィンなどの適当な試薬を用いるカップリング反応であり得、化合物３が得られる。
【０１３５】
一般スキーム２
【化６】
2020505397.tif 000008
【０１３６】
一般スキーム２は、Ｒ２がＲ２の炭素原子を介してインダゾール環に接続され、Ｒ２ａがＲ２を表し、ここで、これはＲ２の炭素原子を介してインダゾール環に接続されている
いる中間体１を製造するための例示的合成を提供する。保護基Ｐ１は、例えば、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル（ＴＨＰ）、（トリメチルシリル）エトキシ）メチル（ＳＥＭ）またはアセチル（Ａｃ）などのいずれの好適な保護基であってもよい。
【０１３７】
中間体５は、工程（ｉ）において、２０℃〜４０℃などの好適な温度下、ＤＣＭなどの適当な溶媒中、ＴｓＯＨなどの好適な酸の存在下で、出発材料４をＤＨＰなどの好適な試薬と反応させることにより得ることができる。
【０１３８】
工程（ｉｉ）は、６０℃〜１００℃などの好適な温度で、１，４−ジオキサンなどの適当な溶媒中、Ｎａ２ＣＯ３などの好適な塩基の存在下で、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２などの適当なパラジウム触媒を用いる中間体５とボロン酸またはエステルの間のクロスカップリング反応である。
【０１３９】
工程（ｉｉｉ）は、−６０℃〜−１０℃などの好適な温度下での、ＴＨＦなどの好適な溶媒中、Ｈ２Ｏ２などの好適な酸化試薬との反応を含み、中間体７が得られる。
【０１４０】
工程（ｉｖ）は、２５℃〜８０℃などの適当な温度で、ＭｅＯＨなどの極性溶媒中、Ｐｄ／Ｃなどの好適な触媒の存在下での、水素などの好適な還元試薬との反応である。
【０１４１】
工程（ｖ）は、０℃〜２５℃などの好適な温度下での、ＤＣＭなどの好適な溶媒中、ＤＭＰなどの酸化剤との酸化反応であり得、中間体８が得られる。
【０１４２】
工程（ｖｉ）および（ｖｉｉｉ）は、−７８℃〜０℃などの好適な温度下での、ＤＣＭなどの好適な溶媒中、ＤＡＳＴなどの流動化剤との反応を含む。
【０１４３】
工程（ｖｉｉｉ）（ｘ）および（ｘｉ）は、脱保護反応である。一般に、中間体を２５℃〜４０℃などの好適な温度下、１，４−ジオキサンなどの好適な溶媒中、ＨＣｌなど好適な酸と反応させると中間体１が得られる。
【０１４４】
一般スキーム３
【化７】
2020505397.tif 000009
【０１４５】
一般スキーム３は、中間体１を製造するための例示的合成を提供する。Ｒ２がＲ２の酸素原子または窒素原子を介してインダゾール環に接続している場合。Ｒ２ｂは、Ｒ２がＲ２の酸素原子を介してインダゾール環に接続している場合のＲ２を表す。Ｒ２ｃは、Ｒ２がＲ２の窒素原子を介してインダゾール環に接続している場合のＲ２を表す。保護基Ｐ１は、例えば、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル（ＴＨＰ）、（トリメチルシリル）エトキシ）メチル（ＳＥＭ）またはアセチル（Ａｃ）などのいずれの好適な保護基であってもよい。
【０１４６】
工程（ｉ）は、８０℃〜１２０℃などの好適な温度で、ＤＭＦなどの適当な溶媒中、ＫＯＡｃなどの適当な塩基の存在下、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４などの適当な触媒を用いた４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）などの好適な試薬との反応と、その後の２５℃〜８０℃などの適当な温度で、ＴＨＦなどの好適な溶媒中、ＮａＯＨなどの適当な塩基の存在下、Ｈ２Ｏ２などの好適な試薬との反応である。
【０１４７】
工程（ｉｉ）は、２５℃〜１００℃などの好適な温度で、ＣＨ３ＣＮなどの適当な溶媒中、Ｃｓ２ＣＯ３などの好適な塩基の存在下、２−ヨードプロパンなどの好適なアルキル化試薬との反応(recaction)である。
【０１４８】
工程（ｉｉｉ）は、８０℃〜１３０℃などの好適な温度下、ＰｈＭｅなどの適当な溶媒中、Ｃｓ２ＣＯ３などの適当な塩基およびＢＩＮＡＰなどの適当なリガンドの存在下、Ｐｄ２（ｄｂａ）３などの適当なパラジウム触媒を用いた、１−メチルピペラジンなどの種々のアミンとのバックワルドカップリング反応、または８０℃〜１３０℃などの好適な温度下、ＤＣＭなどの適当な溶媒中、ＬｉＨＭＤＳなどの適当な塩基およびＤＭＥＤＡなどの適当なリガンドの存在下（またはリガンドの不在下）、Ｃｕ（ＯＡｃ）２などの適当な銅触媒を用いた、４−ヒドロキシ−４−メチルピペリジン−２−オンなどの種々のアミドとのウルマンカップリング反応であり得る。
【０１４９】
工程（ｉｖ）および（ｖ）は、２５℃〜４０などの好適な温度下、１，４−ジオキサンなどの好適な溶媒中、ＨＣｌなどの好適な酸との脱保護反応である。
【０１５０】
一般スキーム４
【化８】
2020505397.tif 000010
【０１５１】
一般スキーム４は、中間体２を製造するための例示的合成を提供する。
【０１５２】
工程（ｉ）は、２５℃〜１００℃などの好適な温度下、ＥｔＯＨなどの適当な溶媒中、ＴＥＡなどの適当な塩基を用いた種々のアミンとの反応であり得、中間体２が得られる。
【実施例】
【０１５３】
一般実験手順
以下の記載および実施例は本発明を説明する。これらの実施例は本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、本発明の化合物、組成物、および方法を製造および使用するために当業者に指針を与えることを意図する。本発明の特定の実施形態が記載されるが、当業者ならば、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく種々の変更および改変が行えることを認識するであろう。
【０１５４】
本出願に記載される化合物の化学名は、ＩＵＰＡＣ命名法の原理に従う。
【０１５５】
マイクロ波照射による反応混合物の加熱は、Ｓｍｉｔｈ  Ｃｒｅａｔｏｒ（Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｆｏｒｂｏｒｏ／ＭＡ、現バイオタージ所有から購入）、Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒ（Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙから購入）またはＥｘｐｌｏｒｅｒ（ＣＥＭ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒ、Ｍａｔｔｈｅｗｓ／ＮＣにより供給）マイクロ波で行った。
【０１５６】
本明細書では、実施例の反応の後処理および生成物の精製に従来の技術が使用され得る。
【０１５７】
以下の実施例において有機層または有機相の乾燥に関する言及は、従来の技術に従い、硫酸マグネシウムまたは硫酸ナトリウムで溶液を乾燥させ、乾燥剤を濾去することを意味し得る。生成物は一般に減圧下での蒸発により溶媒を除去することにより得ることができる。
【０１５８】
実施例における化合物の精製は、クロマトグラフィーおよび／または好適な溶媒を用いた再結晶化などの従来の方法により行うことができる。クロマトグラフィー法は当業者に公知であり、例えば、カラムクロマトグラフィー、フラッシュクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）、およびＭＤＡＰ（質量分析自動分取(mass directed auto-preparation)、質量分析ＬＣＭＳ精製とも呼ばれる）が含まれる。ＭＤＡＰは、例えば、W. Goetzinger et al, Int. J. Mass Spectrom., 2004, 238, 153-162に記載されている。
【０１５９】
ＡｎａｌｔｅｃｈシリカゲルＧＦおよびＥ．Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０  Ｆ−２５４薄層プレートを薄層クロマトグラフィーに使用した。フラッシュクロマトグラフィーおよび重力クロマトグラフィーは双方ともＥ．Ｍｅｒｃｋ  Ｋｉｅｓｅｌゲル６０（２３０〜４００メッシュ）シリカゲルで行った。分取ＨＰＬＣは、Ｇｉｌｓｏｎ分取システムを使用し、１０−８０勾配（アセトニトリル中０．１％ＴＦＡ／０．１％ＴＦＡ水溶液）または１０−８０勾配（（アセトニトリル／水）で溶出するＬｕｎａ  ５ｕ  Ｃ１８（２）  １００Ａ逆相カラムを用いて行った。この適用において精製のために使用されたＣｏｍｂｉＦｌａｓｈシステムはＩｓｃｏ，Ｉｎｃから購入した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ精製は、プレパックＳｉＯ２カラム、２５４ｎｍのＵＶ波長を用いる検出器および混合溶媒を用いて行った。
【０１６０】
用語「ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ」、「バイオタージ（登録商標）」、「バイオタージ７５」および「バイオタージＳＰ４（登録商標）」は、本明細書で使用する場合、プレパックシリカゲルカートリッジを用いる市販の自動精製システムを意味する。
【０１６１】
最終化合物はＬＣＭＳ（以下に挙げる条件）またはＮＭＲで同定した。１Ｈ  ＮＭＲまたは１９ＦＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ４００ＭＨｚ分光計を用いて記録した。ＣＤＣｌ３はジューテリオクロロホルムであり、ＤＭＳＯ−ｄ６はヘキサジューテリオジメチルスルホキシドであり、およびＣＤ３ＯＤはテトラジューテリオメタノールである。化学シフトは、内部標準テトラメチルシラン（ＴＭＳ）またはＮＭＲ溶媒から低磁場側へのパーツ・パー・ミリオン(parts per million)（ｐｐｍ）で報告する。ＮＭＲデータの略記は次の通りである：ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線、ｄｄ＝二重の二重線、ｄｔ＝二重の三重線、ａｐｐ＝明瞭、ｂｒ＝幅広。Ｊはヘルツで測定されたＮＭＲ結合定数を示す。
【０１６２】
温度は総て摂氏度で示す。他の総ての略号はＡＣＳ  Ｓｔｙｌｅ  Ｇｕｉｄｅ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ、ワシントンＤＣ、１９８６）に記載の通りである。
【０１６３】
絶対立体化学は、当業者に公知の方法、例えば、Ｘ線または振動円偏光二色性(Vibrational circular dichroism)（ＶＣＤ）により決定することができる。
【０１６４】
鏡像異性体またはジアステレオ異性体が記載され、キラル中心の絶対立体化学が未知の場合、キラル中心における「＊」の使用は、そのキラル中心の絶対立体化学が未知であること、すなわち、描かれている化合物が単一のＲ鏡像異性体か単一のＳ鏡像異性体のいずれかであり得ることを表す。鏡像異性体またはジオステレオ異性体のキラル中心の絶対立体化学が既知である場合には、そのキラル中心では「＊」を用いずに、適当であれば太線の楔記号
【化９】
2020505397.tif 000011
またはハッシュの楔記号
【化１０】
2020505397.tif 000012
が使用される。
【０１６５】
幾何異性体またはシス−トランス異性体が記載され、その異性体の絶対立体配座が未知の場合、その幾何異性性またはシス−トランス異性に関連する原子の１つにおける「＊」の使用は、その原子におけるまたはその原子の周囲の絶対立体配座が未知であること、すなわち、描かれている化合物が単一のシス異性体か単一のトランス鏡像異性体のいずれかであり得ることを表す。
【０１６６】
以下に示される手順では、一般に、各出発材料の後に中間体が挙げられる。これは単に熟練の化学者に対する補助として示されるものである。出発材料は、必ずしも参照されたバッチから製造されたものでなくてもよい。
【０１６７】
ＬＣＭＳ条件：
１）酸性法：
ａ．機器：ＨＰＬＣ：Ｗａｔｅｒｓ  ＵＰＣ２およびＭＳ：Ｑｄａ
移動相：０．１％ＦＡ／０．１％ＭｅＣＮを含有する水
カラム：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  １．７μｍ  ２．１×５０ｍｍおよび１．７μｍ  ２．１×１００ｍｍ
検出：ＭＳおよびフォトダイオードアレイ検出器（ＰＤＡ）
ｂ．機器：ＨＰＬＣ：ＳｈｉｍａｄｚｕおよびＭＳ：２０２０
移動相：０．１％ＦＡ／０．１％ＭｅＣＮを含有する水
カラム：Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ５μｍ  ５０×４．６ｍｍおよびＳｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ５μｍ１５０×４．６ｍｍ
検出：ＭＳおよびフォトダイオードアレイ検出器（ＰＤＡ）
２）塩基性条件：
機器：ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０およびＭＳ：６１２０
移動相：Ｈ２Ｏ中０．１％ＮＨ４ＯＨ／ＡＣＮ中０．１％ＮＨ４ＯＨ
カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５μｍ  ５０×４．６ｍｍおよびＸｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５μｍ  １５０×４．６ｍｍ
検出：ＭＳおよびフォトダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）
【０１６８】
分取ＨＰＬＣ条件
機器：Ｗａｔｅｒｓ機
カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８カラム  ＯＢＤ（１０μｍ、１９×２５０ｍｍ）、Ｘｂｒｉｇｅ  ｐｒｅｐ  Ｃ１８  １０μｍ  ＯＢＤ  ＴＭ  １９×１５０ｍｍ、Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  １０×２５０ｍｍ  ５μｍ、ＸＢＲＩＤＧＥ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  １０×１５０ｍｍ  ５μｍなど
酸性法：
移動相：０．１％ＴＦＡ／アセトニトリルを含有する水
塩基性法：
移動相：０．１％ＮＨ４ＯＨ／アセトニトリルを含有する水
【０１６９】
キラル分取ＨＰＬＣ：
Ｔｈａｒ  ＳＦＣ  Ｐｒｅｐ  ８０（ＴｈａｒＳＦＣ  ＡＢＰＲ１、ＴｈａｒＳＦＣ  ＳＦＣ  Ｐｒｅｐ  ８０  ＣＯ２ポンプ、ＴｈａｒＳＦＣ補助溶媒ポンプ、ＴｈａｒＳＦＣ冷却熱交換器および循環槽、ＴｈａｒＳＦＣ質量流量計、ＴｈａｒＳＦＣスタティックミキサー、ＴｈａｒＳＦＣインジェクションモジュール、Ｇｉｌｓｏｎ  ＵＶ検出器、ＴｈａｒＳＦＣ画分コレクションモジュール
【０１７０】
キラルＨＰＬＣ分析：
機器：Ｔｈａｒ  ＳＦＣ  Ｐｒｅｐ  ８０（ＴｈａｒＳＦＣ  ＡＢＰＲ１、ＴｈａｒＳＦＣ  ＳＦＣ  Ｐｒｅｐ  ８０  ＣＯ２ポンプ、ＴｈａｒＳＦＣ補助溶媒ポンプ、ＴｈａｒＳＦＣ冷却熱交換器および循環槽、ＴｈａｒＳＦＣ質量流量計、ＴｈａｒＳＦＣスタティックミキサー、ＴｈａｒＳＦＣインジェクションモジュール、Ｇｉｌｓｏｎ  ＵＶ検出器、ＴｈａｒＳＦＣ画分コレクションモジュール
カラムおよび移動相：以下の実施例に記載。
【０１７１】
略号および供給源
本明細書では以下、下記の略号および供給源を使用する：
Ａｃ  −  アセチル
ＭｅＣＮ  −  アセトニトリル
Ａｔｍ  −  気圧
Ａｑ．  −  水溶液
ＢＩＮＡＰ  −  ２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル
Ｂｏｃ  −  ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
Ｂｏｃ２Ｏ  −  二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｎ  −  ベンジル
ｔ−Ｂｕ  −  ｔｅｒｔ−ブチル
ｃｏｎｃ．  −  濃
ＤＡＳＴ−  Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ硫黄トリフルオリド
ＤＣＥ−  １，２−ジクロロエタン
ＤＣＭ  −  ジクロロメタン
ＤＥＡ  −  ジエタノールアミン
ＤＭＥＤＡ  −  Ｎ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン
デス・マーチン  −  １，１，１−トリス（アセチルオキシ）−１，１−ジヒドロ−１，２−ベンズヨードキソール−３−（１Ｈ）−オン
ＤＨＰ  −  ３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン
ＤＩＢＡＬ−Ｈ  −  水素化ジイソブチルアルミニウム
ＤＩＥＡ  −  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＩＰＥＡ  −  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ  −  Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＡＰ  −  ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＥＤＡ  −  Ｎ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン
ＤＭＦ  −  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＰ  −  デス・マーチンペルヨージナン
ＤＭＳＯ  −  ジメチルスルホキシド
ＤＰＰＦ  −  １，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン
ＥＡ  −  酢酸エチル
ＥＤＣ  −  １−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩
ＥＤＣＩ  −  ３−（エチルイミノメチレンアミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパン−１−アミン
ＥｔＯＨ／ＥｔＯＨ  −  エタノール
Ｅｔ２Ｏ  −  ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ  −  酢酸エチル
Ｅｔ３Ｎ  −  トリエチルアミン
ＦＡ  −  ギ酸
ＨＥＰ  −  ヘプタン
Ｈｅｘ  −  ヘキサン
ＨＯＡｃ  −  酢酸
ＨＡＴＵ  −  ２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウランヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＢＴ  −  ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＩＰＡ  −  イソプロピルアルコール
ｉＰｒＯＨ／ｉＰｒＯＨ  −  イソプロピルアルコール
ｍ−ＣＰＢＡ  −  メタ−クロロペルオキシ安息香酸
ＭＯＭＣｌ  −  モノクロロジメチルエーテル
Ｍｅ  −  メチル
ＭｅＯＨ  −  メタノール
ＭｓＣｌ  −  塩化メタンスルホニル
ＮａＨＭＤＳ  −  ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド
ＮＩＳ  −  Ｎ−ヨードスクシンイミド
ＮＭＰ  −  １−メチル−２−ピロリドン
ＮＭＯ  −  ４−メチルモルホリン４−オキシド
ＰＥ  −  石油エーテル
ＰＭＢ  −  ｐ−メトキシベンジル
Ｐｄ２（ｄｂａ）３    −  トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム
Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２  −  １，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウム（ＩＩ）ジクロリドジクロロメタン錯体
Ｐｈ３Ｐ  −  トリフェニルホスフィン
ＰｈＮＴｆ２  −  Ｎ，Ｎ−ビス−（トリフルオロメタンスルホニル）アニリン
ＰＰＴＳ  −  ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム
ＰＴＳＡ  −  ｐ−トルエンスルホン酸
ｒｔ／ＲＴ  −  室温
Ｒｔ  −  保持時間
ｓａｔ．  −  飽和
ＳＥＭ−Ｃｌ  −  ２−（トリメチルシリル）エトキシメチルクロリド
ＳＦＣ  −  超臨界流体クロマトグラフィー
ＴＢＡＩ  −  ヨウ化テトラブチルアンモニウム
ＴＢＤＰＳＣｌ  −  ｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジフェニルシラン
ＴＥＡ  −  トリエチルアミン
ＴＦＡ  −  トリフルオロ酢酸
ＴＦＡＡ  −  無水トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ  −  テトラヒドロフラン
ＴＬＣ  −  薄層クロマトグラフィー
ＴｓＣｌ  −  塩化４−トルエンスルホニル
ＴｓＯＨ  −  ｐ−トルエンスルホン酸
【０１７２】
説明Ａ−１
４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（Ｄ  Ａ−１）
ＨＩ（５５％、５０ｍＬ）中、ＮａＩ（１１．９ｇ、７９．７ｍｍｏｌ）の溶液に、４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（１０．０ｇ、６１．３ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた懸濁液を４０℃に加熱し、１時間撹拌した。この反応混合物を冷却し、濾過した。固体を水で洗浄し、次いで、メタノール（５０ｍＬ）で摩砕した。この混合物を濾過し、標題化合物（９．０ｇ、収率４２％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.07 (s, 1H), 2.67 (s, 3H)。
ＬＣＭＳ（移動相：２．５分で５〜９５％アセトニトリル)：Ｒｔ＝１．５９分、ＭＳ理論値：３４６；ＭＳ実測値：３４７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７３】
説明Ａ−２
４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（Ｄ  Ａ−２）
ＨＩ（水中５５％、３０ｍＬ）中、ＮａＩ（５．５ｇ、３６．３ｍｍｏｌ）の溶液に、４，６−ジクロロ−２−メトキシピリミジン（５ｇ、２７．９ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を４０℃に加熱し、１４時間撹拌した。この反応混合物を室温に冷却し、氷水（５０ｍＬ）に注いだ。濾物を氷水で３回洗浄し、生成物を白色固体として得た（３．２ｇ、収率３２％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から２０％水（０．１％ＴＦＡ）および８０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：純度１００％、Ｒｔ＝４．７２分；ＭＳ理論値：３６２、ＭＳ実測値：３６３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７４】
説明Ａ−３
（Ｒ）−２−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（Ｄ  Ａ−３）
ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中、（Ｒ）−オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（２０９ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６４３ｍｇ、４．９７ｍｍｏｌ）の溶液に、４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（６００ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で３６時間撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１で溶出）により精製し、生成物（３７７ｍｇ、収率６３．１％）を淡黄色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.65 (s, 1H), 4.54〜4.17 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.14〜3.02 (m, 3H), 2.67 (t, J = 11.2 Hz, 1H), 2.23〜2.13 (m, 2H), 1.98〜1.74 (m, 4H), 1.51〜1.41 (m, 1H)。
【０１７５】
説明Ａ−４
（Ｓ）−２−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（Ｄ  Ａ−４）
ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中、（Ｓ）−オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（２０９ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６４３ｍｇ、４．９７ｍｍｏｌ）の溶液に、４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（６００ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で３６時間撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１：１で溶出）により精製し、生成物（３８５ｍｇ、収率６５％）を淡黄色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.65 (s, 1H), 4.49〜4.17 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.14〜3.00 (m, 3H), 2.67 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 2.23〜2.13 (m, 2H), 1.98〜1.75 (m, 4H), 1.51〜1.41 (m, 1H)。
【０１７６】
説明Ａ−５
（Ｒ）−２−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（Ｄ  Ａ−５）
ＴＨＦ／ＥｔＯＨ（５ｍＬ／５ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（３００ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（１１０ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＥＡ（３３８ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）を加えた。次に、この反応物を室温で１日間撹拌した。次に、この反応物を濃縮し、カラム（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝７：１〜４：１〜１：１）により精製し、黄色固体（２７０ｍｇ、収率：９０．５％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２分で６０％水（０．１％ＴＦＡ）および４０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．２４分；ＭＳ理論値：３４４、ＭＳ実測値：３４５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７７】
説明Ａ−６
（Ｓ）−２−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（Ｄ  Ａ−６）
ＴＨＦ／ＥｔＯＨ（５ｍＬ／５ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（２００ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン二塩酸塩（１１５ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（２２５ｍｇ、１．７４ｍｍｏｌ）を加えた。次に、この反応物を室温で２日間撹拌した。次に、この反応物を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝４：１〜１：１）により精製し、所望の生成物を灰白色固体として得た（９０ｍｇ、収率：４５）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２分で６０％水（０．１％ＴＦＡ）および４０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．２６分；ＭＳ理論値：３４４、ＭＳ実測値：３４５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７８】
説明Ａ−７
シス−５−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２，３−ｃ］ピロール（Ｄ  Ａ−７）
実施１：ＤＭＦ（１．０ｍｌ）中、ｒｅｌ−（３ａＲ，６ａＲ）−ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［３，２−ｃ］ピロール（９８ｍｇ、０．８６６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（３００ｍｇ、０．８６６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．７０ｍｌ、４．２４ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した。
【０１７９】
この反応混合物を、さらなる後処理手順のために、次回の実施の反応混合物と合わせた。
【０１８０】
実施２：ＤＭＦ（１．５ｍｌ）中、ｒｅｌ−（３ａＲ，６ａＲ）−ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［３，２−ｃ］ピロール（１３０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（４００ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．０ｍｌ、６．０５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した。
【０１８１】
この反応溶液を、前回の実施の反応混合物と合わせ、濃縮乾固し、この黄色残留油状物を氷冷(ice)飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液（２０ｍｌ）で希釈した。得られたものをＥｔＯＡｃ（３×２５ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層をブライン（２０ｍｌ）により洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、残渣を、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝３／１で溶出されるシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２での湿式充填）により精製し、純粋な所望の生成物を黄色の濃厚油状物として得た（５１４ｍｇ、２バッチでの収率：７６％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．０８分；ＭＳ理論値：３３１、ＭＳ実測値：３３２［Ｍ＋Ｈ］＋。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.59 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 3.99 (q, J = 7.6 Hz, 1H), 3.92-3.86 (m, 1H), 3.72 (br s, 2H), 3.52 (br s, 1H), 3.29 (br s, 1H), 3.00 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.23-2.14 (m, 1H), 1.92-1.88 (m, 1H)。
【０１８２】
説明Ａ−８
３−（ピラジン−２−イル）プロパン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−８）
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中、２−メチルピラジン（６．５８ｇ、７０．０ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素雰囲気下、−７８℃でＴＨＦ（６０ｍＬ）中、ＬＤＡ（ＴＨＦ中２．０Ｍ、４５．５ｍＬ、９１．０ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。この混合物を−７８℃で３０分間撹拌した後、２−ブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（１３．７ｇ、７０．０ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を−７８℃で２時間撹拌した。次に、この混合物を水（１００ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝６：１）により精製し、標題化合物（５．４ｇ、収率３７％）を淡黄色油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.49-8.47 (m, 2H), 8.40 (s, 1H), 3.09 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.72 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.40 (s, 9H)。
【０１８３】
説明Ａ−９
３−（ピペラジン−２−イル）プロパン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−９）
メタノール（１５０ｍＬ）中、３−（ピラジン−２−イル）プロパン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５．４９ｇ、２６．４ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％湿潤、１．５ｇ）の懸濁液を、５５ｐｓｉより上で、５０℃で１８時間水素化した。この反応混合物を濾過し、濾液を減圧で濃縮し、標題化合物（４．７ｇ、８３％）を淡黄色油状物として得、これを、それ以上精製せずに次の工程に使用した。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 2.97-2.59 (m, 6H), 2.39-2.24 (m, 3H), 1.60-1.53 (m, 2H), 1.43 (s, 9H)。
【０１８４】
説明Ａ−１０
３−（４−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）ピペラジン−２−イル）プロパン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−１０）
メタノール（１０ｍＬ）中、３−（ピペラジン−２−イル）プロパン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．５７ｇ、２．６６ｍｍｏｌ）および４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（９６２ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．４０ｇ、４．０ｍｍｏｌ）の混合物を７０℃で１時間撹拌した。この反応混合物をそのまま減圧で濃縮した。残渣を水（８０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）で分液した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）により精製し、標題化合物（０．８４ｇ、収率７０％）を淡黄色油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.62 (s, 1H), 4.13-4.08 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.09-2.60 (m, 5H), 2.36-2.32 (m, 2H), 1.77-1.66 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)。
【０１８５】
説明Ａ−１１
２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）−４−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−１１）
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中、３−（４−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）ピペラジン−２−イル）プロパン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８４０ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３８０ｍｇ、３．７５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｂｏｃ２Ｏ（４９０ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で５時間撹拌した。この混合物を水（７０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝６：１）により精製し、標題化合物（０．９２ｇ、収率９０％）を淡黄色油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.61 (s, 1H), 4.25-3.98 (m, 4H), 3.90 (s, 3H), 3.19-2.99 (m, 3H), 2.29-2.16 (m, 2H), 1.90-1.87 (m, 1H), 1.73-1.68 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.43 (s, 9H)。
【０１８６】
説明Ａ−１２
６−ブロモ−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ａ−１２）
クロロホルム（１５０ｍＬ）中、５−ブロモ−２，４−ジメチルアニリン（１５．０ｇ、７５．０ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴下でＡｃ２Ｏ（１５．０、１５０ｍｍｏｌ）を加えた。ＫＯＡｃ（８．００ｇ、８２．５ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６（１０．０ｇ、３７．５ｍｍｏｌ）および亜硝酸イソアミル（２６．３ｇ、２２５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を３６時間還流させた。この反応混合物を濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）に溶解させた。この有機溶液を水（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解させ、ＮａＯＨ（４Ｍ、４０．０ｍＬ、１６０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）とで分液した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  １０：１から５：１へ）により精製し、標題化合物（５．１ｇ、収率３２％）を橙色の固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.20 (br, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 2.50 (s, 3H)。
【０１８７】
説明Ａ−１３
６−ブロモ−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ａ−１３）
乾燥ＤＣＭ（１２０ｍＬ）中、６−ブロモ−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（５．１０ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＤＨＰ（４．１０ｇ、４８．４ｍｍｏｌ）、ＴｓＯＨ（０．８００ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）およびＭｇ２ＳＯ４（５．０ｇ）を加えた。この反応混合物を３５℃に加熱し、１時間撹拌した。この反応混合物を濾過し、濾液をＮａ２ＣＯ３（１０％、１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  ５０：１から２０：１へ）により精製し、標題化合物（６．０ｇ、収率８４％）を橙色の固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.90 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 5.63 (dd, J = 9.6, 3.0 Hz, 1H), 4.05-4.00 (m, 1H), 3.78-3.70 (m, 1H), 2.58-2.44 (m, 4H), 2.20-2.02 (m, 2H), 1.78-1.65 (m, 3H)。
ＬＣＭＳ（移動相：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ）：３分でＲｔ＝２．１９分；ＭＳ理論値：２９４；ＭＳ実測値：２９５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８８】
説明Ａ−１４
４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−１４）
ジオキサン（１５０ｍＬ）および水（１３０ｍＬ）中、６−ブロモ−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（５．５０ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）、４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６．９０ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（４．９０ｇ、４６．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（６５８ｍｇ、０．９００ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物をＮ２で３回脱気し、次いで、８０℃で一晩撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）とで分液した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製し、標題化合物（７．３ｇ、収率９９％）をやや褐色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.92 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 5.67 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 5.63 (br s, 1H), 4.07-4.01 (m, 3H), 3.78-3.70 (m, 1H), 3.67-3.64 (m, 2H), 2.62-2.53 (m, 1H), 2.45-2.39 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.18-2.12 (m, 1H), 2.07-2.02 (m, 1H), 1.81-1.73 (m, 2H), 1.69-1.61 (m, 1H), 1.52 (s, 9H)。
【０１８９】
説明Ａ−１５およびＡ−１６
３−ヒドロキシ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸トランス−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−１５およびＤ  Ａ−１６）
乾燥ＴＨＦ（３００ｍＬ）中、４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３３．０ｇ、８３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、１０℃でＢＨ３−ＴＨＦ（１Ｍ、３３２ｍＬ、３３２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を徐々に室温に温め、一晩撹拌した。この反応混合物を０℃に冷却し、ＮａＯＨ（水溶液、２Ｍ、１２５ｍＬ、２４９ｍｍｏｌ）を注意深く加えた。Ｈ２Ｏ２（３０％、８７ｍＬ、８３０ｍｍｏｌ）を続いて加えた。ＮａＯＨおよびＨ２Ｏ２を添加する間、温度は１０℃より低く維持した。この混合物を１時間室温で撹拌した。この反応混合物に、Ｎａ２ＳＯ３（１０％、１００ｍＬ）を加え、２０分間撹拌した。有機層を分離し、水溶液をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  ３：１から１：１へ）により精製し、主要生成物として３−ヒドロキシ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−１５）（２３ｇ、収率６７％）を白色固体としておよび微量生成物として４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−１６）（６．７ｇ、収率２０％）をやや褐色の固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.90 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 5.68 (dd, J = 9.6 Hz, 2.7 Hz, 1H), 4.33-4.28 (m, 2H), 4.06-4.02 (m, 1H), 3.80-3.72 (m, 1H), 3.00-2.82 (m, 3H), 2.65-2.51 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.22-2.11 (m, 1H), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.88-1.80 (m, 2H), 1.77-1.63 (m, 5H), 1.51 (s, 9H)。
【０１９０】
説明Ａ−１７
５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（Ｄ  Ａ−１７）
４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０ｇ、２．５ｍｍｏｌ）をＨＣｌ／ＭｅＯＨ（５ｍｏｌ／Ｌ、１０ｍＬ）に溶解させた。次に、この混合物を６時間撹拌した。この混合物を減圧下で濃縮し、標題化合物（８２０ｍｇ、収率＞１００％）を淡黄色固体として得、これを精製せずに次の工程に使用した。
ＬＣ−ＭＳ：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ、Ｒｔ＝１．１３分、ＭＳ理論値：２１５、ＭＳ実測値：２１６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９１】
説明Ａ−１８
４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−１８）
ＣＨ３ＯＨ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２ｍＬ）中、５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（６００ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴下でＫＯＨ（２６８ｍｇ、４．７８ｍｍｏｌ）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（７８１ｍｇ、３．５８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で２時間撹拌した。この反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフ（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  １０：１から４：１へ）により精製し、標題化合物（３５３ｍｇ、収率４７％）を黄色の油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.15 (br s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 4.34 (br s, 2H), 2.95-2.81 (m, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.86-1.81 (m, 2H), 1.69-1.61 (m, 2H), 1.51 (s, 9H)。
【０１９２】
説明Ａ−１９
３−フルオロ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−１９）
乾燥ＤＣＭ（２００ｍＬ）中、３−ヒドロキシ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（トランス）−ｔｅｒｔ−ブチル（２４．５ｇ、５９．０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２下、−６５℃でＤＡＳＴ（３８．０ｇ、２３６ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を徐々に室温に温め、２時間撹拌した。この反応混合物を注意深くＮａ２ＣＯ３水溶液（１０％、３００ｍＬ）に注ぎ、２０分間撹拌した。有機層を分離し、水溶液をＤＣＭ（２５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製し、標題化合物（１１．８ｇ、収率４８％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.92 (s, 1H) ,7.52 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 5.74-5.67 (m, 1H), 4.80-4.59 (m, 2H), 4.21 (br, 1H), 4.07-3.99 (m, 1H), 3.80-3.71 (m, 1H), 3.25-3.19 (m, 1H), 2.89-2.79 (m, 2H), 2.65-2.51 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.19-2.15 (m, 1H), 2.15-2.04 (m, 1H), 1.93-1.88 (m, 1H), 1.80-1.74 (m, 5H), 1.52 (s, 9H)。
ＬＣＭＳ：５〜９５％CH3CN、３分でＲｔ＝２．２５分；ＭＳ理論値：４１７、ＭＳ実測値：４１８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９３】
説明Ａ−２０
（シス）−６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（Ｄ  Ａ−２０）
ＨＣｌ／ジオキサン（６ｍｏｌ／Ｌ、４０ｍＬ）中、３−フルオロ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（２．５０ｇ、６．００ｍｍｏｌ）の混合物を室温で６時間撹拌した。この反応混合物を０℃に冷却し、濾過した。固体を冷１，４−ジオキサン（５ｍＬ）で洗浄し、標題化合物（１．４ｇ、収率１００％）を白色固体として得、これをそのまま次の工程に使用した。
ＬＣ−ＭＳ：５〜９５％ＣＨ３ＣＮ、Ｒｔ＝１．７３分；ＭＳ理論値：２３３、ＭＳ実測値：２３４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９４】
説明Ａ−２１
（シス）−６−（３−フルオロ−１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ａ−２１）
メタノール（５ｍＬ）および１，２−ジクロロエタン（５０ｍＬ）中、（シス）−６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（１．４０ｇ、６．００ｍｍｏｌ）およびオキセタン−３−オン（２．１６ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ３ＣＮ（１．１３ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）を加えた。次に、この混合物を室温で３時間撹拌した。この反応混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝３０：１）により精製し、標題化合物（１．０ｇ、収率５７．６％）を白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ：５％〜９５％ＣＨ３ＣＮ、Ｒｔ＝１．８５分；ＭＳ理論値：２８９、ＭＳ実測値：２９０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９５】
説明Ａ−２２
６−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ａ−２２）
２−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（９３９ｍｇ、４．４７ｍｍｏｌ）、６−ブロモ−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（１２００ｍｇ、４．０７ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加物（３３２ｍｇ、０．４０７ｍｍｏｌ）およびリン酸三カリウム（２５８９ｍｇ、１２．２０ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＭＦ（１０ｍＬ）および水（２．５００ｍＬ）を加えた。この反応混合物を１００℃に３時間加熱した。この反応混合物を酢酸エチルで希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、シリカカラム（ＰＥ中３０％ＥＡ）により精製し、６−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾールを得た（６１０ｍｇ、２．０４４ｍｍｏｌ、５０．収率３％）。
ＭＳ：２９９．０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９６】
説明Ａ−２３
５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ａ−２３）
６−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（６１０ｍｇ、２．０４４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ−Ｃ（４３５ｍｇ、０．４０９ｍｍｏｌ、１０％）およびメタノール（１０ｍＬ）の混合物を、水素バルーン雰囲気下、室温で１６時間撹拌し、次いで、濾過した。濾液を濃縮し、粗５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾールを得た（６１４ｍｇ、２．０４４ｍｍｏｌ、収率１００％）。
ＭＳ：３０１．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９７】
説明Ａ−２４
５−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ａ−２４）
５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（６１０ｍｇ、２．０３１ｍｍｏｌ）、ＨＣｌ（４．０６ｍＬ、２０．３１ｍｍｏｌ）およびメタノール（５ｍＬ）の溶液を室温で１６時間撹拌した。この反応溶液を、ＮａＨＣＯ３水溶液によりｐＨ＝７に中和し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を乾燥させ、濃縮し、５−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾールを得た（４３０ｍｇ、１．９８８ｍｍｏｌ、収率９８％）。
ＭＳ：２１７．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９８】
説明Ａ−２５
２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）−４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−２５）
トルエン（８ｍＬ）中、５−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（０．２２ｇ、１．０ｍｍｏｌ）および２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）−４−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．５５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（０．１５ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチル−シクロヘキサン−１，２−ジアミン（０．２３ｇ、１．６ｍｍｏｌ）およびリン酸カリウム（０．３４ｇ、１．６ｍｍｏｌ）の混合物を、１１０℃の窒素雰囲気で１８時間撹拌した。室温に冷却した後、この混合物を希釈アンモニア溶液（１０％、５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝４：１）により精製し、粗生成物の混合物を得、これを分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ、２０〜９５％）によりさらに精製し、標題化合物（０．２２ｇ、収率３５％）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.76 (s, 1H), 8.06 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.38-3.99 (m, 9H), 3.65-3.57 (m, 2H), 3.27-3.06 (m, 4H), 2.48 (s, 3H), 2.30-2.19 (m, 2H), 1.99-1.79 (m, 6H), 1.49 (s, 9H), 1.41 (s, 9H)。
【０１９９】
説明Ａ−２６およびＡ−２７
２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）−４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ピーク１、Ｄ  Ａ−２６；ピーク２、Ｄ  Ａ−２７）
２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）−４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．２２ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）をキラル分取カラム（ＩＣ、Ｈｅｘ；ＥｔＯＨ＝６０：４０、１２ｍＬ／分、２５４ｎｍ）により精製し、ピーク１（Ｄ  Ａ−２６、８５ｍｇ、収率３９％）を白色固体としておよびピーク２（Ｄ  Ａ−２７、８０ｍｇ、収率３６％）を白色固体として得た。
ピーク１: 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.76 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.38-4.11 (m, 8H), 4.02-4.00 (m, 1H), 3.65-3.57 (m, 2H), 3.27-3.04 (m, 4H), 2.48 (s, 3H), 2.30-2.19 (m, 2H), 1.97-1.75 (m, 6H), 1.49 (s, 9H), 1.41 (s, 9H)。
【０２００】
キラルＨＰＬＣ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣ  ５μｍ  ４．６×２５０ｍｍ、Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝６０：４０、流速:１．０ｍｌ／分、２３０ｎｍ、Ｔ＝３０℃。Ｒｔ＝１０．１８９分、１００%ｅｅ。
【０２０１】
ピーク２: 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.76 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.38-4.14 (m, 8H), 4.03-4.00 (m, 1H), 3.64-3.57 (m, 2H), 3.27-3.04 (m, 4H), 2.48 (s, 3H), 2.30-2.19 (m, 2H), 1.99-1.75 (m, 6H), 1.49 (s, 9H), 1.41 (s, 9H)。
【０２０２】
キラル条件：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣ  ５μｍ  ４．６×２５０ｍｍ、Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝６０：４０、流速(Flow): ：１．０ｍｌ／分、２３０ｎｍ、Ｔ＝３０℃。Ｒｔ＝１２．６２６分、１００%ｅｅ。
【０２０３】
説明Ａ−２８
５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ａ−２８）
ＤＣＥ（１５ｍＬ）中、５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（８２０ｍｇの粗物質、２．５０ｍｍｏｌ）の溶液に、オキセタン−３−オン（１．８０ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温で４０分間撹拌した。次に、この混合物を氷浴下で冷却し、この混合物に、ＮａＢＨ３ＣＮ（４７３ｍｇ、７．５０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温に温め、２時間撹拌した。次に、この反応混合物をＮａ２ＣＯ３水溶液（１０％、１００ｍＬ）に注ぎ、１５分間撹拌した。次に、この混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝４０：１）により精製し、標題化合物（４７３ｍｇ、収率７０％）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.11 (br, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 4.72-4.69 (m, 4H), 3.61-3.52 (m, 1H), 2.96-2.93 (m, 2H), 2.88-2.78 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.06-1.98 (m, 2H), 1.90-1.82 (m, 4H)。
ＬＣ−ＭＳ：［移動相：２．５分で５〜９５％アセトニトリル]：Ｒｔ＝１．３７分；ＭＳ理論値：２７１；ＭＳ実測値：２７２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０４】
説明Ａ−２９
３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−１−オール（Ｄ  Ａ−２９）
ＴＨＦ（１６０ｍＬ）中、２−（アリル（ベンジル）アミノ）酢酸エチル（２．００ｇ、８．５８ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＴｉＣｌ（ＯｉＰｒ）３（１．０ｍＬ、３．４２ｍｍｏｌ）を一度に加えた。次に、塩化イソプロピルマグネシウム（ＴＨＦ中２Ｍ、２１．６ｍＬ、４３．０ｍｍｏｌ）を、シリンジポンプにより３時間かけて滴下した。添加後、この混合物を室温で一晩撹拌した。この反応物を水（２０ｍＬ）で急冷した。この混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で希釈した。有機溶液をブライン（１００ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィー（ＡＣＮ／水：３０〜１００％）により精製し、粗物質（ＮＭＲによる純度７０％を有する７１０ｍｇ）を得た。この粗物質を順相クロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２：メタノール＝８０：１）によりさらに精製し、所望の化合物（３２０ｍｇ、収率２０％）を淡黄色油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.30-7.22 (m, 5H), 3.65 (s, 2H), 3.16-3.13 (m, 1H), 2.80-2.77 (m, 1H), 2.67-2.61 (m, 2H), 1.47-1.41 (m, 1H), 1.19-1.16 (m, 1H), 0.95-0.91 (m, 1H)。
【０２０５】
説明Ａ−３０
３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−１−オール（Ｄ  Ａ−３０）
メタノール（２０ｍＬ）中、３−ベンジル−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−１−オール（３２０ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＰｄ（ＯＨ）２（５０ｍｇ）を加えた。この混合物をＮ２（バルーン）下で３時間撹拌した。この混合物を濾過し、濾液を真空濃縮し、ＮＭＲによる純度９０％を有する所望の化合物（１５０ｍｇ、収率９０％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.15-3.08 (m, 2H), 3.01-2.97 (m, 1H), 2.74-2.70 (m, 1H), 1.43-1.38 (m, 1H), 1.09-1.04 (m, 1H), 0.67-0.64 (m, 1H)。
【０２０６】
説明Ａ−３１
４−（１−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−３１）
トルエン（２０ｍＬ）中、４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７８０ｍｇ、２．４８ｍｍｏｌ）の混合物に、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（１．１０ｇ、３．２２ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（２．６０ｇ、１２．４０ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（４７６ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’−ジメチル−シクロヘキサン−１，２−ジアミン（２９８ｍｇ、２．０９ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１００℃に加熱し、３時間撹拌した。この反応混合物を室温に冷却し、水（１００ｍＬ）に注いだ。所望のものをＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラム（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１２：１）により精製し、標題化合物（８００ｍｇ、収率６２％）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.65 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 4.39-4.24 (m, 2H), 2.99-2.81 (m, 3H), 2.77 (s, 3H), 2.49 (s, 3H), 1.90-1.1.79 (m, 2H), 1.77-1.63 (m, 2H), 1.51 (s, 9H)。
【０２０７】
説明Ａ−３２
４−（１−（６−（１−ヒドロキシ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ａ−３２）
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中、４−（１−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（４００ｍｇ、０．７５０ｍｍｏｌ）、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−１−オール（１５０ｍｇ粗物質、１．２１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（６９ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（９７５ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２雰囲気下でＸｐｈｏｓ（３８ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を８時間還流させた。この反応混合物を濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）とで分液した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラム（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝５：１）により精製し、粗生成物（７５ｍｇ）を褐色油状物として得た。粗物質を分取ＴＬＣ（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝２：１）によりさらに精製し、標題化合物（４０ｍｇ、収率１１％）を淡黄色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.74 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 4.37-4.25 (m, 2H), 3.68-3.63 (m, 2H), 2.97-2.84 (m, 3H), 2.60 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 1.90-1.76 (m, 6H), 1.51 (s, 9H), 1.30-1.26 (m, 2H), 0.71-0.67 (m, 1H)。
【０２０８】
説明Ａ−３３
８−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）オクタヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン（Ｄ  Ａ−３３）
ＴＨＦ（２０ｍＬ）およびｉ−ＰｒＯＨ（２０ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（２００ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、オクタヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン（１１９ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３５７ｍｇ、２．７６ｍｍｏｌ）の混合物を５０℃で一晩撹拌した。この反応溶液を濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈した。得られた混合物をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝２０：１）により精製し、生成物を黄色固体として得た（１６０ｍｇ、収率７７％）
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で６０％水（０．１％ＦＡ）および４０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．４９分；ＭＳ理論値：３７６、ＭＳ実測値：３７７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０９】
説明Ｂ−１
４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（Ｄ  Ｂ−１）
ＨＩ（５５％、５０ｍＬ）中、ＮａＩ（１１．９ｇ、７９．７ｍｍｏｌ）の溶液に、４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（１０．０ｇ、６１．３ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた懸濁液を４０℃に加熱し、１時間撹拌した。この反応混合物を冷却し、濾過した。固体を水で洗浄し、次いで、メタノール（５０ｍＬ）で摩砕した。この混合物を濾過し、標題化合物（９．０ｇ、収率４２％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.07 (s, 1H), 2.67 (s, 3H)。
ＬＣＭＳ（移動相：２．５分で５〜９５％アセトニトリル）：Ｒｔ＝１．５９分、ＭＳ理論値：３４６；ＭＳ実測値：３４７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１０】
説明Ｂ−２
４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（Ｄ  Ｂ−２）
ＨＩ（水中５５％、３０ｍＬ）中、ＮａＩ（５．５ｇ、３６．３ｍｍｏｌ）の溶液に、４，６−ジクロロ−２−メトキシピリミジン（５ｇ、２７．９ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を４０℃に加熱し、１４時間撹拌した。この反応混合物を室温に冷却し、氷水（５０ｍＬ）に注いだ。濾物を氷水で３回洗浄し、生成物を白色固体として得た（３．２ｇ、収率３２％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から２０％水（０．１％ＴＦＡ）および８０％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．７２分；ＭＳ理論値：３６２、ＭＳ実測値：３６３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１１】
説明Ｂ−３
８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン（Ｄ  Ｂ−３）
ＴＨＦ／ＥｔＯＨ（５ｍＬ／５ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（３００ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）およびヘミシュウ酸２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン（３０３ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（３３８ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で４８時間撹拌した。この反応物を４０℃に加熱し、さらに４時間撹拌した。この反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝７：１〜４：１）により精製し、所望の生成物を黄色固体として得た（２３０ｍｇ、収率：７６％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２分で６０％水（０．１％ＴＦＡ）および４０％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．３３分；ＭＳ理論値：３４７、ＭＳ実測値：３４８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１２】
説明Ｂ−４
８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−３−オキサ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−オン（Ｄ  Ｂ−４）
ＤＩＰＥＡ（４９６ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）を、ＥｔＯＨ／ＴＨＦ（７ｍＬ／７ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（４８８ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）および３−オキサ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−オン（２００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この反応物を室温で２日間撹拌した。溶媒を除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝６：１）により精製し、所望の生成物を白色固体として得た（３００ｍｇ、収率：５７％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で６０％水（０．１％ＦＡ）および４０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．２５分；ＭＳ理論値：３７４、ＭＳ実測値：３７５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１３】
説明Ｂ−５
８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−オン（Ｄ  Ｂ−５）
ＥｔＯＨ／ＴＨＦ（８ｍＬ／８ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（０．５ｇ、１．４５ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−オン塩酸塩（２７５ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（５６１ｍｇ、４．３５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温で２日間撹拌した。
【０２１４】
この反応混合物を濃縮した。残渣をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１）により精製し、標題化合物を黄色固体として得た（３８０ｍｇ、収率：７０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．０１分；ＭＳ理論値：３７２  ＭＳ実測値：３７３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０２１５】
説明Ｂ−６
７−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−４−オキサ−７−アザスピロ［２．５］オクタン（Ｄ  Ｂ−６）
ＴＨＦ／ＥｔＯＨ（５ｍｌ／５ｍｌ）中、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（３００ｍｇ、０．８６７ｍｍｏｌ）および４−オキサ−７−アザスピロ［２．５］オクタン塩酸塩（１３０ｍｇ、０．８６９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（４５０ｍｇ、３．４８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した。この混合物を濃縮し、残渣を、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝７／１で溶出されるカラムクロマトグラフィーにより精製し、所望の生成物を桃色固体として得た（２１０ｍｇ、収率：７３％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で６０％水（０．１％ＴＦＡ）および４０％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．６１分；ＭＳ理論値：３３１、ＭＳ実測値：３３２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１６】
説明Ｂ−７
８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−１−オン（Ｄ  Ｂ−７）
ＤＭＳＯ（６ｍＬ）中、１  ４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（３４６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）および２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−１−オン（２７２ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（３０３ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）の混合物を６０℃で４時間撹拌した。この混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ×３）で抽出した。抽出物を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。有機相を濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製し、標題化合物（３１９ｍｇ、８６％）を黄色固体として得た。
1HNMR (300 MHz, CDCl3): δ6.80 (s, 1H), 6.09 (br, 1H), 4.16 (d, J = 10.5 Hz, 2H), 3.40-3.29 (m, 4H), 2.44 (s, 3H), 2.12-2.07 (m, 2H), 1.96-1.88 (m, 4H)。
【０２１７】
説明Ｂ−８
３−オキソ−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−カルボン酸ベンジル（Ｄ  Ｂ−８）
ベンゼン（２５ｍｌ）中、４−オキソピペリジン−１−カルボン酸ベンジル（２．３３ｇ、１０ｍｍｏｌ）、２−ヒドロキシアセトアミド（８２５ｍｇ、１１ｍｍｏｌ）およびＴｓＯＨ．Ｈ２Ｏ（９５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の混合物を、ディーンスターク装置で、Ａｒ下、１２０℃で７２時間撹拌した。この反応混合物を濃縮し、残渣を逆相ＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ＝０：１００〜１００：０）により精製し、所望の生成物を白色固体として得た（７２５ｍｇ、収率：２５％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で８０％水（０．１％ＦＡ）および２０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１１分；ＭＳ理論値：２９０、ＭＳ実測値：２９１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１８】
説明Ｂ−９
１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−３−オン（Ｄ  Ｂ−９）
ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中、３−オキソ−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−８−カルボン酸ベンジル（７２５ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２（１００ｍｇ）の混合物をＮ２下、室温で１８時間撹拌した。この反応混合物を濾過し、濾液を濃縮し、所望の粗生成物を油状物として得た（３５１ｍｇ、収率：９０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．２３分；ＭＳ理論値：１５６、ＭＳ実測値：１５７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１９】
説明Ｂ−１０
８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−３−オン（Ｄ  Ｂ−１０）
ＴＨＦ／ＥｔＯＨ（４０ｍｌ／４０ｍｌ）中、１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−３−オン（３５１ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）および４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（７７８ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（８８７ｍｇ、６．８８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で１８時間撹拌した。この反応混合物を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（溶出剤：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝６／１〜１／１、次いで、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝４０／１）により精製し、所望の生成物を固体として得た（６８０ｍｇ、収率：８１％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で７０％水（０．１％ＦＡ）および３０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．３６分；ＭＳ理論値：３７４、ＭＳ実測値：３７５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２０】
説明Ｂ−１１
６−ブロモ−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ｂ−１１）
クロロホルム（１５０ｍＬ）中、５−ブロモ−２，４−ジメチルアニリン（１５．０ｇ、７５．０ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴下、Ａｃ２Ｏ（１５．０、１５０ｍｍｏｌ）を加えた。ＫＯＡｃ（８．００ｇ、８２．５ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６（１０．０ｇ、３７．５ｍｍｏｌ）および亜硝酸イソアミル（２６．３ｇ、２２５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を３６時間還流させた。この反応混合物を濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）に溶解させた。有機溶液を水（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解させ、ＮａＯＨ（４Ｍ、４０．０ｍＬ、１６０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）とで分液した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  １０：１から５：１へ）により精製し、標題化合物（５．１ｇ、収率３２％）を橙色の固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.20 (br, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 2.50 (s, 3H)。
【０２２１】
説明Ｂ−１２
６−ブロモ−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ｂ−１２）
乾燥ＤＣＭ（１２０ｍＬ）中、６−ブロモ−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（５．１０ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＤＨＰ（４．１０ｇ、４８．４ｍｍｏｌ）、ＴｓＯＨ（０．８００ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）およびＭｇ２ＳＯ４（５．０ｇ）を加えた。この反応混合物を３５℃に加熱し、１時間撹拌した。この反応混合物を濾過し、濾液をＮａ２ＣＯ３（１０％、１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  ５０：１から２０：１へ）により精製し、標題化合物（６．０ｇ、収率８４％）を橙色の固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.90 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 5.63 (dd, J = 9.6, 3.0 Hz, 1H), 4.05-4.00 (m, 1H), 3.78-3.70 (m, 1H), 2.58-2.44 (m, 4H), 2.20-2.02 (m, 2H), 1.78-1.65 (m, 3H)。
ＬＣＭＳ：（移動相：５〜９５％ＡＣＮ）、３分でＲｔ＝２．１９分；ＭＳ理論値：２９４；ＭＳ実測値：２９５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２２】
説明Ｂ−１３
４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ｂ−１３）
ジオキサン（１５０ｍＬ）および水（１３０ｍＬ）中、６−ブロモ−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（５．５０ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）、４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６．９０ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（４．９０ｇ、４６．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（６５８ｍｇ、０．９００ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物をＮ２で３回脱気し、次いで、８０℃で一晩撹拌した、溶媒を真空下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）とで分液した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製し、標題化合物（７．３ｇ、収率９９％）をやや褐色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.92 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 5.67 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 5.63 (br, 1H), 4.07-4.01 (m, 3H), 3.78-3.70 (m, 1H), 3.67-3.64 (m, 2H), 2.62-2.53 (m, 1H), 2.45-2.39 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.18-2.12 (m, 1H), 2.07-2.02 (m, 1H), 1.81-1.73 (m, 2H), 1.69-1.61 (m, 1H), 1.52 (s, 9H)。
【０２２３】
説明Ｂ−１４およびＢ−１５
３−ヒドロキシ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸トランス−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ｂ−１４およびＤ  Ｂ−１５）
乾燥ＴＨＦ（３００ｍＬ）中、４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３３．０ｇ、８３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、１０℃でＢＨ３−ＴＨＦ（１Ｍ、３３２ｍＬ、３３２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を徐々に室温に温め、一晩撹拌した。この反応混合物を０℃に冷却し、ＮａＯＨ（水溶液、２Ｍ、１２５ｍＬ、２４９ｍｍｏｌ）を注意深く加えた。Ｈ２Ｏ２（３０％、８７ｍＬ、８３０ｍｍｏｌ）を続いて加えた。ＮａＯＨおよびＨ２Ｏ２を添加する間、温度は１０℃より低く維持した。この混合物を室温で１時間撹拌し、この反応混合物に、Ｎａ２ＳＯ３（１０％、１００ｍＬ）を加え、２０分間撹拌した。有機層を分離し、水溶液をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  ３：１から１：１へ）により精製し、主要生成物として３−ヒドロキシ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸トランスｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ｂ−１４）（２３ｇ、収率６７％）を白色固体としておよび微量生成物として４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ｂ−１５）（６．７ｇ、収率２０％）をやや褐色の固体として得た。
Ｄ  Ｂ−１４: 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.90 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 5.68 (dd, J = 9.6 Hz, 2.7 Hz, 1H), 4.33-4.28 (m, 2H), 4.06-4.02 (m, 1H), 3.80-3.72 (m, 1H), 3.00-2.82 (m, 3H), 2.65-2.51 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.22-2.11 (m, 1H), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.88-1.80 (m, 2H), 1.77-1.63 (m, 5H), 1.51 (s, 9H)。
【０２２４】
説明Ｂ−１６
５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（Ｄ  Ｂ−１６）
４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０ｇ、２．５ｍｍｏｌ）をＨＣｌ／ＭｅＯＨ（５ｍｏｌ／Ｌ、１０ｍＬ）に溶解させた。次に、この混合物を６時間撹拌した。この混合物を減淡黄色固体として圧下で濃縮し、標題化合物（８２０ｍｇ、収率＞１００％）を得、これを精製せずに次の工程に使用した。
ＬＣ−ＭＳ：５〜９５％ＡＣＮ、Ｒｔ＝１．１３分、ＭＳ理論値：２１５、ＭＳ実測値：２１６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２５】
説明Ｂ−１７
５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ｂ−１７）
ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（５Ｍ、２００ｍＬ）を、ＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）中、４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５５．４ｇ、１３８．８ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した。この溶液を濃縮し、次いで、Ｎａ２ＣＯ３水溶液およびＮａＯＨ水溶液をｐＨ＞１２まで加えた。この混合物を濾過し、固体を乾燥させ、生成物を白色固体として得た（２９．３ｇ、収率＝９８％，）
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．８５分；ＭＳ理論値：２１５、ＭＳ実測値：２１６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２６】
説明Ｂ−１８
４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ｂ−１８）
ＣＨ３ＯＨ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２ｍＬ）中、５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（６００ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴下ＫＯＨ（２６８ｍｇ、４．７８ｍｍｏｌ）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（７８１ｍｇ、３．５８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で２時間撹拌した。この反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフ（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  １０：１から４：１へ）により精製し、標題化合物（３５３ｍｇ、収率４７％）を黄色油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.15 (br, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 4.34 (br, 2H), 2.95-2.81 (m, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.86-1.81 (m, 2H), 1.69-1.61 (m, 2H), 1.51 (s, 9H)。
【０２２７】
説明Ｂ−１９
５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ｂ−１９）
ＤＣＥ（１５ｍＬ）中、５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（８２０ｍｇの粗物質、２．５０ｍｍｏｌ）の溶液に、オキセタン−３−オン（１．８０ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温で４０分間撹拌した。次に、この混合物を氷浴下で冷却し、この混合物に、ＮａＢＨ３ＣＮ（４７３ｍｇ、７．５０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温に温め、２時間撹拌した。次に、この反応混合物をＮａ２ＣＯ３水溶液（１０％、１００ｍＬ）に注ぎ、１５分間撹拌した。次に、この混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝４０：１）により精製し、標題化合物（４７３ｍｇ、収率７０％）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.11 (br, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 4.72-4.69 (m, 4H), 3.61-3.52 (m, 1H), 2.96-2.93 (m, 2H), 2.88-2.78 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.06-1.98 (m, 2H), 1.90-1.82 (m, 4H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：５〜９５％アセトニトリル２．５分で］：Ｒｔ＝１．３７分；ＭＳ理論値：２７１；ＭＳ実測値：２７２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２８】
説明Ｂ−２０
トリフルオロメタンスルホン酸１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカ−７−エン−８−イル（Ｄ  Ｂ−２０）
ＴＨＦ（１５０ｍＬ）中、１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン−８−オン（１０ｇ、６４．１ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ビス（トリフルオロメチルスルホニル）アニリン（２５．２ｇ、７０．５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２下、−７８℃でＬｉＨＭＤＳ（７０．５ｍＬ、７０．５ｍｍｏｌ）を滴下した。この混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、室温に温めた。この反応物をＮＨ４Ｃｌ水溶液（１５０ｍＬ）で急冷し、この混合物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５０ｍＬ×３）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮乾固した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ→ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製し、生成物トリフルオロメタンスルホン酸１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカ−７−エン−８−イルを淡黄色油状物として得た。（２２．９ｇ、定量的）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.66 (t, J = 4.0 Hz, 1H), 3.99 (br, 4H), 2.53 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.41 (s, 2H), 1.91 (t, J = 6.4 Hz, 2H)。
【０２２９】
説明Ｂ−２１
５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ｂ−２１）
ジオキサン（５０ｍＬ）中、６−ブロモ−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（５．７８ｇ、１９．６ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（９．９５ｇ、３９．２ｍｍｏｌ）およびＣＨ３ＣＯＯ−Ｋ＋（７．６８ｇ、７８．３ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（６．６０ｇ、５．０９ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を９０℃に加熱し、Ｎ２下で一晩撹拌した。この混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣をシリカカラム（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  １００：１から６０：１へ）により精製し、所望の生成物（２．７ｇ、収率４１％）を黄色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.98 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 5.77 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 4.05-4.02 (m, 1H), 3.81-3.75 (m, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.19-2.13 (m, 1H), 2.04-2.00 (m, 1H), 1.84-1.72 (m, 2H), 1.65-1.59 (m, 2H), 1.38 (s, 12H)。
ＬＣ−ＭＳ：［移動相：４分で９０％水（０．０２％ＮＨ４ＯＡｃ）および１０％ＡＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ４ＯＡｃ）および９５％ＡＣＮへ］、Ｒｔ＝２．９１４分  ＭＳ理論値：３４２、ＭＳ実測値：３４３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３０】
説明Ｂ−２２
５−メチル−６−（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカ−７−エン−８−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ｂ−２２）
１，４−ジオキサン／Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ／１０ｍＬ）中、５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（３．０ｇ、８．７７ｍｍｏｌ）、トリフルオロメタンスルホン酸１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカ−７−エン−８−イル（３．０ｇ、１０．５２ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（３．６ｇ、２６．３０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（６４２ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物をＮ２下、１００℃で４時間撹拌した。この反応混合物を水（３００ｍＬ）に注ぎ、この混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮乾固した。残渣を、ＥｔＯＡｃ：石油エーテル＝１：１０〜１：３で溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、生成物５−メチル−６−（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカ−７−エン−８−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（２．３ｇ、収率７４．０％）を白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．５分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．３０分；ＭＳ理論値：３５４；ＭＳ実測値：３５５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３１】
説明Ｂ−２３
５−メチル−６−（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン−８−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ｂ−２３）
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中、５−メチル−６−（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカ−７−エン−８−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（２．３ｇ、６．４９ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（２３０ｍｇ）の混合物をＮ２下、室温で一晩撹拌した。この反応混合物を濾過し、濾過ケークをＭｅＯＨ（３０ｍＬ×３）で洗浄した。濾液を濃縮乾固し、生成物５−メチル−６−（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン−８−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（１．８ｇ、収率７７．６％）を白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：移動相：２．５分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．２９５分；ＭＳ理論値：３５６、ＭＳ実測値：３５７［Ｍ＋Ｈ］＋
【０２３２】
説明Ｂ−２４
４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）シクロヘキサノン（Ｄ  Ｂ−２４）
ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中、５−メチル−６−（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン−８−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（１２０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（４ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この反応物を濃縮乾固し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）に溶解させた。この溶液を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮乾固した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル＝１：１０〜１：２で溶出）により精製し、生成物４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）シクロヘキサノン（６０ｍｇ、収率７７．３％）を黄色油状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.97 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 3.36〜3.28 (m, 1H), 2.59〜2.55 (m, 4H), 2.51 (s, 3H), 2.26〜2.21 (m, 2H), 1.96〜1.89 (m, 2H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．５分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．２３分；ＭＳ理論値：２２８；ＭＳ実測値：２２９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３３】
説明Ｂ−２５
４−（１−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）シクロヘキサノン（Ｄ  Ｂ−２５）
ＴＨＦ（５００ｍＬ）中、４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）シクロヘキサノン（７．０ｇ、３０．７ｍｍｏｌ）、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（２０．０ｇ、５７．８ｍｍｏｌ）の溶液を脱気し、次いで、ＣｕＩ（２．０ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（２１．２ｇ、１００．００ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を脱気し、Ｎ１，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン（２ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した、次いで、この反応物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。この混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液（２００ｍＬ×２）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄した。この溶液を乾燥させ、濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（シリカ  ＥｔＯＡｃ：ＤＣＭ＝０：１００〜５：１００）により精製し、白色固体を得た。この固体をＤＭＦ／水で再結晶させ、生成物を白色固体として得た（４．５ｇ、収率３３％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.70 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 3.37 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.62〜2.59 (m, 4H), 2.55 (s, 3H), 2.30〜2.26 (m, 2H), 2.09〜1.98 (m, 2H)。
【０２３４】
説明Ｂ−２６およびＢ−２７
シス−４−（１−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−１−メチルシクロヘキサノール（Ｄ  Ｂ−２６、Ｒｔ：２．１５３分；Ｄ  Ｂ−２７、Ｒｔ：２．０２７分）
ＭｅＭｇＢｒ（０．４ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）を、室温で、ＴＨＦ（５ｍＬ）中、４−（１−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）シクロヘキサノン（２２３ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に加え、この反応物を室温で１０分間撹拌した。この反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）で急冷し、この混合物をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出した。この溶液を乾燥させ、濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ＝１：３、１５ｇのシリカゲル）により精製し、２種の白色固体を得た。
【０２３５】
ピーク１：９９ｍｇ、収率４３％
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で７０％水（０．１％ＦＡ）および３０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝２．１５３分；ＭＳ理論値：４６２、ＭＳ実測値：４６３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３６】
ピーク２：８０ｍｇ、収率３５％
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で７０％水（０．１％ＦＡ）および３０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝２．０２７分；ＭＳ理論値：４６２、ＭＳ実測値：４６３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３７】
説明Ｂ−２８
５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−オール（Ｄ  Ｂ−２８）
ＴＨＦ（８０ｍＬ）およびＮａＯＨ水溶液（１Ｎ、４０ｍＬ）中、５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（２．７０ｇ、７．８９ｍｍｏｌ）の溶液に、０〜１５℃でＨ２Ｏ２水溶液（３７％、４．４８ｇ、３９．５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を飽和ＮａＨＳＯ３（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残渣をシリカカラム（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝６：１）により精製し、粗物質をＰＥ（３．５ｍＬ）でスラリー化し、所望の生成物（１．７０ｇ、収率９４％）を黄色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.85 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 5.58 (dd, J = 9.6, 2.7 Hz, 1H), 5.44 (s, 1H), 4.04-3.99 (m, 1H), 3.75-3.66 (m, 1H), 2.60-2.47 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.17-2.01 (m, 2H), 1.81-1.63 (m, 3H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：４分で９０％水（０．０２％ＮＨ４ＯＡｃ）および１０％ＡＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ４ＯＡｃ）および９５％ＡＣＮへ］：Ｒｔ＝２．１１３分、ＭＳ理論値：２３２、ＭＳ実測値：２３３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３８】
説明Ｂ−２９
メタンスルホン酸テトラヒドロフラン−３−イル（Ｄ  Ｂ−２９）
０℃で、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中、テトラヒドロフラン−３−オール（５００ｍｇ、５．６８ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（８６０ｍｇ、８．５２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｓＣｌ（８４２ｍｇ、７．３９ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応物を室温で４時間撹拌した。この反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、標題化合物（７００ｍｇ、７４％）を黄色油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ5.36-5.31 (m, 1H), 4.06-3.86 (m, 4H), 3.06 (s, 3H), 2.29-2.22 (m, 2H)。
【０２３９】
説明Ｂ−３０
５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−６−（（テトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ｂ−３０）
ＤＭＦ（２．０ｍＬ）中、５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−オール（１５０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、メタンスルホン酸テトラヒドロフラン−３−イル（１２９ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１８０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２雰囲気下、８０℃で一晩撹拌した。この反応物を水（５０ｍＬ）で希釈し(dilutre)、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×２）で抽出し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝３：１）により精製し、標題化合物（１５０ｍｇ、７７％）を黄色油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ7.86 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.66 (dd, J = 9.3, 2.1 Hz, 1H), 5.09-5.04 (m, 1H), 4.14-3.96 (m, 5H), 3.79-3.71 (m, 1H), 2.63-2.51 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.17-2.04 (m, 4H), 1.81-1.69 (m, 3H)。
【０２４０】
説明Ｂ−３１
５−メチル−６−（（テトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ  Ｂ−３１）
ＤＣＭ（２ｍＬ）中、５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−６−（（テトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）−１Ｈ−インダゾール（１５０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（２ｍＬ）を加えた。得られた混合物を室温で５時間撹拌した。この反応物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し(dilutre)、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝２：３）により精製し、標題化合物（９５ｍｇ、８６％）を黄色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ7.92 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 5.02-4.96 (m, 1H), 4.13-3.93 (m, 4H), 2.29 (s, 3H), 2.27-2.20 (m, 2H)。
【０２４１】
説明Ｂ−３２
８−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）−２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン（Ｄ  Ｂ−３２）
ｉ−ＰｒＯＨ（１０ｍＬ）およびＤＭＳＯ（４ｍＬ）中、２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナンオキサレート（５００ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）、４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（４５３ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（４１５ｍｇ、４．１１ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で４時間撹拌した。この混合物にＨ２Ｏ（５０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（３０＊３ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２：１）により精製し、化合物（４０８ｍｇ、８２％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.70 (s, 1H), 4.63 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.42 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.86 (s, 2H), 3.71 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.54 (s, 2H)。
【０２４２】
説明Ｂ−３３
４−（１−（２−メトキシ−６−（２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン−８−イル）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ  Ｂ−３３）
トルエン（３ｍＬ）中、８−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）−２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン（１２７ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸塩（１００ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（３０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（１３３ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（４５ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で５時間撹拌した。この混合物に、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）加え、ＮＨ３．Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ×３）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１／１）により精製し、化合物（１７０ｍｇ、９７％）を黄色油状物として得た。
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ8.71 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.64 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.48 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.31 (br, 2H), 4.12 (s, 3H), 3.96 (s, 2H), 3.76-3.74 (m, 6H), 3.69-3.67 (m, 6H), 3.63-3.61 (m, 4H), 3.58-3.56 (m, 4H), 2.48 (s, 3H)。
【０２４３】
実施例Ａ−１
６−（３−フルオロ−１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１−（６−（（Ｒ）−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（単一の未知の異性体１）
【化１１】
2020505397.tif 000013
【０２４４】
乾燥トルエン（５ｍＬ）中、６−シス−３−フルオロ−１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（７０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）（ピーク１）、（Ｒ）−２−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（１０４ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（４６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１０８ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，２−エタンジアミン（４３ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を加えた。この懸濁液をＮ２で脱気し、８５℃で２時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を加え、得られた混合物をブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ２７６７  Ｓｅｐａｘ  Ａｍｅｔｈｙｓｔ  ２１．２×１００ｍｍ  ５μｍ、相：ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）：５％〜９５％、流速：１５ｍＬ／分、２１４ｎｍ／２５４ｎｍ）により精製し、生成物（２４ｍｇ、収率１９．０％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.88 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.95〜4.81 (m, 1H), 4.81〜4.63 (m, 4H), 4.48〜4.41 (br, 1H), 4.14 (s, 3H), 3.69〜3.62 (m, 1H), 3.25〜3.07 (m, 5H), 2.84〜2.72 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.31〜1.70 (m, 10H), 1.55〜1.45 (m, 2H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ -184.0 (s, 1F)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝５．１７分；ＭＳ理論値：５２１、ＭＳ実測値：５２２［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラル純度：Ｒｔ＝８．９１５分；ｅｅ％＝９９．５％。
キラリティー法：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ４．６×２５０ｍｍ、相：ヘキサン：イソプロパノール（０．２％ジエチルアミン）＝６５／３５、Ｆ：１．０ｍＬ／分、Ｗ：２１４ｎｍ、Ｔ：２５℃。
【０２４５】
実施例Ａ−２
６−（３−フルオロ−１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１−（６−（（Ｓ）−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（単一の未知の異性体２）
【化１２】
2020505397.tif 000014
【０２４６】
乾燥トルエン（５ｍＬ）中、（シス）−６−（３−フルオロ−１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（７０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）（ピーク２）、（Ｓ）−２−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（１０４ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（４６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１０８ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，２−エタンジアミン（４３ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を加えた。この懸濁液をＮ２で脱気し、８５℃で２時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を加え、得られた混合物をブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ２７６７、Ｓｅｐａｘ  Ａｍｅｔｈｙｓｔ  ２１．２×１００ｍｍ  ５μｍ、相：ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）：５％〜９５％、流速：１５ｍＬ／分、２１４ｎｍ／２５４ｎｍ）により精製し、生成物（５０ｍｇ、収率３９．７％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.88 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.95〜4.81 (m, 1H), 4.81〜4.63 (m, 4H), 4.48〜4.41 (br, 1H), 4.14 (s, 3H), 3.69〜3.62 (m, 1H), 3.25〜3.07 (m, 5H), 2.84〜2.72 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.31〜1.70 (m, 10H), 1.55〜1.45 (m, 2H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ -184.0 (s, 1F)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝５．３５分；ＭＳ理論値：５２１、ＭＳ実測値：５２２［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラル純度：Ｒｔ＝１２．４５０分；ｅｅ％＝９９．１％。
キラリティー法：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ４．６×２５０ｍｍ、相：ヘキサン：イソプロパノール（０．２％ジエチルアミン）＝６５／３５、Ｆ：１．０ｍＬ／分、Ｗ：２１４ｎｍ、Ｔ：２５℃。
【０２４７】
実施例Ａ−３
６−（３−フルオロ−１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１−（６−（（Ｓ）−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（単一の未知の異性体１）
【化１３】
2020505397.tif 000015
【０２４８】
乾燥トルエン（５ｍＬ）中、（シス）−６−（３−フルオロ−１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（７０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）（ピーク１）、（Ｓ）−２−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（１０４ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（４６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１０８ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，２−エタンジアミン（４３ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を加えた。この懸濁液をＮ２で脱気し、８５℃で２時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を加え、得られた混合物をブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ２７６７／Ｑｄａ、ＷａｔｅｒｓＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１５０ｍｍ  ５μｍ、相：ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）：５％〜９５％、流速：２０ｍＬ／分、２１４ｎｍ／２５４ｎｍ）により精製し、生成物（７０ｍｇ、収率５５．５％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.88 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.95〜4.81 (m, 1H), 4.81〜4.63 (m, 4H), 4.48〜4.41 (br, 1H), 4.14 (s, 3H), 3.69〜3.62 (m, 1H), 3.25〜3.07 (m, 5H), 2.84〜2.72 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.31〜1.70 (m, 10H), 1.55〜1.45 (m, 2H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ -184.0 (s, 1F)。
ＬＣ−ＭＳ（移動相：１０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝５．１５分；ＭＳ理論値：５２１、ＭＳ実測値：５２２［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラル純度：Ｒｔ＝９．６９７分；ｅｅ％＝９９．８％。
キラリティー法：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ４．６×２５０ｍｍ、相：ヘキサン：イソプロパノール（０．２％ジエチルアミン）＝６５／３５、Ｆ：１．０ｍＬ／分、Ｗ：２１４ｎｍ、Ｔ：２５℃。
【０２４９】
実施例Ａ−４
６−（３−フルオロ−１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１−（６−（（Ｒ）−ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（単一の未知の異性体２）
【化１４】
2020505397.tif 000016
【０２５０】
乾燥トルエン（５ｍＬ）中、（シス）−６−（３−フルオロ−１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（７０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）（ピーク２）、（Ｒ）−２−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（１０４ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（４６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１０８ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，２−エタンジアミン（４３ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を加えた。この懸濁液をＮ２で脱気し、８５℃で２時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を加え、得られた混合物をブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ２７６７  Ｓｅｐａｘ  Ａｍｅｔｈｙｓｔ  ２１．２×１００ｍｍ  ５μｍ、相：ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）：５％〜９５％、流速：１５ｍＬ／分、２１４ｎｍ／２５４ｎｍ）により精製し、生成物（７０ｍｇ、収率５５．５％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.88 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.95〜4.81 (m, 1H), 4.81〜4.63 (m, 4H), 4.48〜4.41 (br, 1H), 4.14 (s, 3H), 3.69〜3.62 (m, 1H), 3.25〜3.07 (m, 5H), 2.84〜2.72 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.31〜1.70 (m, 10H), 1.55〜1.45 (m, 2H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ -184.0 (s, 1F)。
ＬＣ−ＭＳ（移動相：１０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝５．１６分；ＭＳ理論値：５２１、ＭＳ実測値：５２２［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラル純度：Ｒｔ＝１１．８９８分；ｅｅ％＝９９．４％。
キラリティー法：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ４．６×２５０ｍｍ、相：ヘキサン：イソプロパノール（０．２％ジエチルアミン）＝６５／３５、Ｆ：１．０ｍＬ／分、Ｗ：２１４ｎｍ、Ｔ：２５℃。
【０２５１】
実施例Ａ−５
２−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−６（２Ｈ）−オン（鏡像異性体１）
【化１５】
2020505397.tif 000017
【０２５２】
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中、２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）−４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、ピーク１）の溶液に、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（７Ｍ、５ｍＬ）を加えた。この混合物を室温で１時間撹拌した。この混合物をそのまま減圧で濃縮し、所望の酸および対応するメチルエステルの混合物として粗固体を得た（６２ｍｇ）。粗固体をＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２ｍＬ／２ｍＬ）中、水酸化リチウム一水和物（４２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）で処理し、１時間撹拌した。この反応混合物を分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ、０５〜９５％）により精製し、実施例５（鏡像異性体１、７ｍｇ、収率１１％）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.65 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 4.60-4.46 (m, 2H), 4.01-3.85 (m, 6H), 3.57-3.46 (m, 3H), 3.12-3.05 (m, 1H), 2.89-2.69 (m, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.28-2.12 (m, 3H), 1.76-1.58 (m, 5H)。
ＬＣ−ＭＳ［ＸＢ−Ｃ１８、¢４．６×５０ｍｍ  ５μｍ；移動相：６．５分で９５％水（０．０２％ＮＨ４ＯＡｃ）および５％ＣＨ３ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ４ＯＡｃ）および９５％ＣＨ３ＣＮへ］：Ｒｔ＝４．１８０分；ＭＳ理論値：４６２；ＭＳ実測値：４６３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２５３】
実施例Ａ−６
２−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−６（２Ｈ）−オン（鏡像異性体２）
【化１６】
2020505397.tif 000018
【０２５４】
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中、２−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）−４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）（ピーク２）の溶液に、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（７Ｍ、５ｍＬ）を加えた。この混合物を室温で１時間撹拌した。この反応物をそのまま減圧で濃縮し、所望の酸および対応するメチルエステルの混合物として黄色の粗固体を得た。粗固体を、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２ｍＬ／２ｍＬ）中、水酸化リチウム一水和物（４２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）で処理し、１時間撹拌した。この混合物を分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ、０５〜９５％）により精製し、実施例Ｅ  Ａ−６（鏡像異性体２、７ｍｇ、収率１２％）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.67 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 4.61-4.45 (m, 2H), 4.01-3.84 (m, 6H), 3.57-3.45 (m, 3H), 3.12-3.06 (m, 1H), 2.89-2.69 (m, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.27-2.12 (m, 3H), 1.72-1.57 (m, 5H)。
ＬＣ−ＭＳ［ＸＢ−Ｃ１８、¢４．６×５０ｍｍ  ５μｍ；移動相：６．５分で９５％水（０．０２％ＮＨ４ＯＡｃ）および５％ＣＨ３ＣＮから５％水（０．０２％ＮＨ４ＯＡｃ）および９５％ＣＨ３ＣＮへ］：Ｒｔ＝４．１７６分；ＭＳ理論値：４６２；ＭＳ実測値：４６３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２５５】
実施例Ａ−７
（Ｒ）−１−（６−（ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール
【化１７】
2020505397.tif 000019
【０２５６】
トルエン（４ｍｌ）中、５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（７９ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−２−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（１００ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（１２３ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（５５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ａｒ下でＮ１，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン（５１ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を加えた。次に、この反応混合物を９５℃で３時間撹拌した。ＴＬＣは、反応が完了していたことを示した。次に、これを濾過し、ＤＣＭで洗浄した。濾液を濃縮し、カラム（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１：１、次いで、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１〜４０：１〜３０：１〜２０：１）により精製し、所望の生成物を白色固体として得た（９４ｍｇ、収率：６６．３％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.78 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 4H), 4.70- 4.49 (m, 2H), 3.56 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.17-3.15 (m, 4H), 2.98-2.95 (m, 2H), 2.85-2.78 (m, 3H), 2.65 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) , 2.31-2.22 (m, 3H), 2.17 (s, 1H), 2.06-2.04 (m, 3H), 1.84-1.80 (m, 2H), 1.56-1.52 (m, 2H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．６０分；ＭＳ理論値：４８７．３１、ＭＳ実測値：４８８．０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２５７】
実施例Ａ−８
（Ｓ）−１−（６−（ヘキサヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン−２（１Ｈ）−イル）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール
【化１８】
2020505397.tif 000020
【０２５８】
トルエン（２ｍｌ）中、５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（７１ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−２−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）オクタヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジン（９０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（１１０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（５０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ａｒ下でＮ１，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン（４６ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を加えた。次に、この反応物を９５℃で４時間撹拌した。ＴＬＣは、反応が完了していたことを示した。次に、これを濾過し、ＤＣＭで洗浄した。濾液を濃縮し、カラム（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１〜４０：１〜３０：１〜２０：１）により精製し、黄色固体を得た。（２０ｍｇ、収率：１５．７％，）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.78 (br, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 4H), 4.70-4.49 (m, 2H), 3.56 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.17-3.15 (m, 2H), 2.98-2.95 (m, 2H), 2.85-2.78 (m, 2H), 2.65 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) , 2.31-2.22 (m, 2H), 2.07-1.94 (m, 8H), 1.70-1.65 (m, 1H), 1.70-1.50 (m, 3H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．５８分；ＭＳ理論値：４８７、ＭＳ実測値：４８８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２５９】
実施例Ａ−９
工程１：
２，２，２−トリフルオロ酢酸３−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−１−オール
【化１９】
2020505397.tif 000021
【０２６０】
ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中、４−（１−（６−（１−ヒドロキシ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。添加後、この混合物を室温に温め、２時間撹拌した。この混合物を濃縮し、標題化合物（３５ｍｇ、収率＞１００％）を得、これをそのまま次の工程に使用した。
ＬＣＭＳ（移動相：４分で５〜９５％アセトニトリル）：Ｒｔ＝２．５６５分；ＭＳ理論値：４０４；ＭＳ実測値：４０５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６１】
工程２：
３−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−１−オール
【化２０】
2020505397.tif 000022
【０２６２】
ＣｌＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ（４ｍＬ）およびメタノール（０．５ｍＬ）中、２，２，２−トリフルオロ酢酸３−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−１−オール（７０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でオキセタン−３−オン（１３ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を室温で３０分間撹拌し、次いで、ＮａＢＨ３ＣＮ（２２ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で一晩撹拌した。この混合物を飽和Ｎａ２ＣＯ３溶液（５ｍＬ）に注いだ。所望のものを酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：メタノール＝３０：１）により精製し、標題化合物（４．７ｍｇ）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.81 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 4.72-4.70 (m, 4H), 3.67-3.55 (m, 4H), 2.99-2.96 (m, 2H), 2.87-2.83 (m, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.08-1.94 (m, 7H), 1.88-1.79 (m, 1H), 1.30-1.27 (m, 1H), 0.72-0.68 (m, 1H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：６．５分で９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮから５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮへ］：Ｒｔ＝２．９９２分；ＭＳ理論値：４６０；ＭＳ実測値：４６１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６３】
実施例Ａ−１０およびＡ−１１
シス−５−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２，３−ｃ］ピロール（ピーク１、単一の未知の鏡像異性体、Ｒｔ＝５．８９３分；ピーク２、単一の未知の鏡像異性体、Ｒｔ＝７．０９５分）の合成
【化２１】
2020505397.tif 000023
【０２６４】
Ｎ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン（８０ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）を、Ａｒ下でトルエン（４ｍｌ）中、シス−５−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２，３−ｃ］ピロール（１８３ｍｇ、０．５５３ｍｍｏｌ）、５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（１５０ｍｇ、０．５５３ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（８６ｍｇ、０．４５３ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（２８９ｍｇ、１．３６０ｍｍｏｌ）の混合物に加えた。この反応物を１００℃で３時間撹拌した。冷却した反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（溶出剤：ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝２０：１）により精製し、所望の生成物を白色固体として得た（２００ｍｇ、収率：７６％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.83 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 4H), 4.65 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.02 (q, J = 7.6 Hz, 1H), 3.93-3.83 (m, 3H), 3.66 (dd, J = 12.4, 4.8 Hz, 1H), 3.56 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.46-3.42 (m, 1H), 3.06-3.03 (m, 1H), 2.97 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 2.85-2.82 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.20-2.17 (m, 1H), 2.03-1.94 (m, 7H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝５．０１分；ＭＳ理論値：４７４、ＭＳ実測値：４７５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６５】
ラセミシス−５−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２，３−ｃ］（２０２ｍｇ）のキラル分取ＨＰＬＣ（方法：カラム：ＡＤ−Ｈ；カラムサイズ：０．４６ｃｍ  Ｉ．Ｄ．×１５ｃｍ  Ｌ；移動相：ＣＯ２：ＥＴＯＨ（０．１％ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）＝６０：４０；流速：０．５ｍｌ／分；波長：ＵＶ２５４ｎｍ；温度：２５℃；ＥｔＯＨ中のサンプル溶液）によるキラル分割により、ピーク１を淡黄色固体として（Ｒｔ＝５．８９３分、７９．９ｍｇ、収率：３９％）およびピーク２を淡黄色固体として（Ｒｔ＝７．０９５分、９０．８ｍｇ、収率：４４％）得た。
【０２６６】
実施例Ａ−１０
ピーク１: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.83 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 4.71 (d, J = 6.4 Hz, 4H), 4.65 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.02 (q, J = 7.6 Hz, 1H), 3.93-3.88 (m, 3H), 3.66 (dd, J = 12.4, 4.4 Hz, 1H), 3.56 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.46-3.42 (m, 1H), 3.06-3.03 (m, 1H), 2.97 (d, J = 11.8 Hz, 2H), 2.85-2.81 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.20-2.17 (m, 1H), 2.04-1.94 (m, 7H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．８８分；ＭＳ理論値：４７４、ＭＳ実測値：４７５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６７】
実施例Ａ−１１
ピーク２ 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.83 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 4H), 4.65 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.02 (q, J = 7.6 Hz, 1H), 3.93-3.86 (m, 3H), 3.66 (dd, J = 12.4, 4.4 Hz, 1H), 3.56 (t, J = 6.6 Hz, 1H), 3.46-3.42 (m, 1H), 3.06-3.03 (m, 1H), 2.97 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 2.85-2.81 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.20-2.17 (m, 1H), 2.04-1.94 (m, 7H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．９６分；ＭＳ理論値：４７４、ＭＳ実測値：４７５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６８】
実施例Ａ−１２およびＡ−１３
８−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）オクタヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン（単一の未知の鏡像異性体１、Ｒｔ＝２．４７１分；単一の未知の鏡像異性体２、Ｒｔ＝２．８７３分）
【化２２】
2020505397.tif 000024
【０２６９】
トルエン／ＴＨＦ（１０ｍＬ／２ｍＬ）中、５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（１１５ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）、８−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）オクタヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン（１６０ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（８１ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１８１ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＭＥＤＡ（７５ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物をＮ２で３回脱気した。この反応物を８０℃で２時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）を加え、得られた混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ  ２８１、ＹＭＣ−Ａｃｔｕｓ  Ｔｒｉａｒｔ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８−Ｓ  ２５０×２０ｍｍ  １０μｍ、移動相：ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）：１５〜９５％、流速：２０ｍｌ／分、２５４ｎｍ）により精製し、生成物を淡黄色固体として得た（２００ｍｇ、収率：９１％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１３分；ＭＳ理論値：５１９、ＭＳ実測値：５２０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７０】
化合物８−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）オクタヒドロピラジノ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン（２００ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をキラル分取ＨＰＬＣ（ＡＤ−Ｈ、０．４６ｃｍ  Ｉ．Ｄ．×１５ｃｍ  Ｌ、移動相：ＣＯ２：ＥｔＯＨ（０．１％ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）＝６０：４０、流速：０．５ｍＬ／分、波長：ＵＶ２５４ｎｍ、温度：２５℃）により精製し、２種の淡黄色固体として生成物を得た。
【０２７１】
実施例Ａ−１２（単一の未知の鏡像異性体１、Ｒｔ＝２．４７１分）
（１．４ｍｇ、収率：１％）。
【０２７２】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.76 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.70 (d, J = 6.4 Hz, 4H), 4.40〜4.27 (m, 2H), 4.15 (s, 3H), 3.89〜3.81 (m, 2H), 3.76〜3.71 (m, 1H), 3.59〜3.52 (m, 1H), 3.32 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 3.18(t, J = 11.6 Hz, 1H), 2.93 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 2.87〜2.80 (m, 2H), 2.74 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 2.68〜2.61 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.44〜2.27 (m, 3H), 2.05〜1.99 (m, 2H), 1.92〜1.83 (m, 4H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝３．７９分；ＭＳ理論値：５１９、ＭＳ実測値：５２０［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ［ＡＤ  ４．６×２５０ｍｍ、５μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）（ＣＡ−ＨＰＬＣ−０２３）、相：ヘキサン／ＥｔＯＨ（０．２％ＤＥＡ）＝６０／４０、流速：０．５ｍＬ／分、温度：３５℃］：Ｒｔ：２．４７１分、ｅｅ：１００％
【０２７３】
実施例Ａ−１３（単一の未知の鏡像異性体１、Ｒｔ＝２．８７３分）
（１０９．３ｍｇ、収率：５５％）
【０２７４】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.76 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.70 (d, J = 6.4 Hz, 4H), 4.40〜4.27 (m, 2H), 4.15 (s, 3H), 3.90〜3.81 (m, 2H), 3.74 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 3.58〜3.51 (m, 1H), 3.32 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.18(t, J = 12.0 Hz, 1H), 2.94 (d, J = 10.8 Hz, 2H), 2.87〜2.80 (m, 2H), 2.73 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.65 (t, J = 11.2 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.42〜2.27 (m, 3H), 2.04〜1.98 (m, 2H), 1.91〜1.85 (m, 4H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝３．７７分；ＭＳ理論値：５１９、ＭＳ実測値：５２０［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ［ＡＤ  ４．６×２５０ｍｍ、５μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）（ＣＡ−ＨＰＬＣ−０２３）、相：ヘキサン／ＥｔＯＨ（０．２％ＤＥＡ）＝６０／４０、流速：０．５ｍＬ／分、温度：３５℃］：Ｒｔ：２．８７３分、ｅｅ：９９．７１％
【０２７５】
実施例Ｂ−１
８−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−３−オン
【化２３】
2020505397.tif 000025
【０２７６】
Ａｒ下、トルエン（８ｍｌ）中、５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（２１７ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−１−オキサ−４，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−３−オン（３００ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（３３９ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）およびＣｕＩ（１５２ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン（１４１ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を１００℃で３時間撹拌した。ＴＬＣは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物を濾過し、濾過ケークをＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（溶出剤：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１／１から０／１へ、次いで、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝３０／１から２５／１へ）により精製し、純粋な所望の生成物を黄色固体として得た（３０ｍｇ、収率：７％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.81 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 4.71 (d, J = 6.4 Hz, 4H), 4.32 (s, 2H), 4.32-4.25 (m, 2H), 3.58-3.48 (m, 3H), 2.97 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 2.84 (br, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.05-1.93 (m, 8H), 1.86-1.79 (m, 2H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０．０分で６０％水（０．１％ＮＨ４ＯＨ）および４０％ＡＣＮ（０．１％ＮＨ４ＯＨ）から５％水（０．１％ＮＨ４ＯＨ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＮＨ４ＯＨ）へ］：Ｒｔ＝３．６１分；ＭＳ理論値：５１７、ＭＳ実測値：５１８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７７】
実施例Ｂ−２
８−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−３−オキサ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−オン
【化２４】
2020505397.tif 000026
【０２７８】
ＤＭＥＤＡ（６５ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を、Ａｒ下、トルエン（８ｍＬ）中、８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−３−オキサ−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−オン（１１８ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（１００ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（７０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１５６ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この反応物を１００℃で３．５時間撹拌した。この混合物を濾過し、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１）により精製し、生成物を白色固体として得た（５０ｍｇ、収率：３１％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０．０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝５．６１２分；ＭＳ理論値：５１７、ＭＳ実測値：５１８［Ｍ＋Ｈ］＋。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.81 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.71 (d, J = 6.5 Hz, 4H), 4.22 (s, 2H), 3.96-3.79 (m, 2H), 3.79-3.63 (m, 2H), 3.64-3.45 (m, 1H), 2.97 (d, J = 10.3 Hz, 2H), 2.89-2.77 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.07-1.82 (m, 10H)。
【０２７９】
実施例Ｂ−３
２−（６−（６−（シス−４−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−２−メチルピリミジン−４−イル）−２，６−ジアザスピロ［３．４］オクタン−７−オン（Ｒｔ＝６．４７分）
【化２５】
2020505397.tif 000027
【０２８０】
ＮＭＰ（３ｍＬ）中、シス−４−（１−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−１−メチルシクロヘキサノール（７０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、２，６−ジアザスピロ［３．４］オクタン−７−オン塩酸塩（１２２ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１９４ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）の混合物を３０℃で一晩撹拌し、次いで、水（２０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して粗物質を得た。この粗物質を分取ＨＰＬＣにより精製し、生成物を白色固体として得た（３５ｍｇ、収率：５０％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.851 (s, 1H), 8.061 (s, 1H), 7.492 (s, 1H), 6.615 (s, 1H), 6.218 (s, 1H), 4.180-4.250 (m, 4H), 2.781 (s, 1H), 2.629 (s, 3H), 2.454 (s, 6H), 1.987-1.924 (t, 2H), 1.866-1.764 (m, 4H), 1. 661-1.603 (t, 4H), 1.324 (s, 3H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で７０％水（０．１％ＴＦＡ）および３０％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝６．４７分；ＭＳ理論値：４６０、ＭＳ実測値：４６１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８１】
分取ＨＰＬＣ法：
Ｗａｔｅｒｓ  ２７６７／Ｑｄａ、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１５０ｍｍ  ５μｍ  ２０ｍｌ／分
Ａ：Ｈ２Ｏ、Ｂ：ＣＡＮ
【表１】
2020505397.tif 000028
【０２８２】
実施例Ｂ−４
８−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン
【化２６】
2020505397.tif 000029
【０２８３】
トルエン（４ｍｌ）中、５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（１７９ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）および８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン（２３０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（２８０ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１２６ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ａｒ下、Ｎ１，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン（１１６ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を９５℃で３．５時間撹拌した。ＴＬＣは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物を濾過し、ＤＣＭで洗浄した。濾液を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１：１、次いで、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１）により精製し、所望の生成物を白色固体として得た（２４０ｍｇ、収率：７４％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.82 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.71 (d, J = 6.4 Hz, 4H), 4.65 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.49 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.98 (s , 2H), 3.76 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.67 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 3.58-3.55 (m, 1H), 2.98 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 2.90-2.85 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.05-1.84 (m, 6H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．８５分；ＭＳ理論値：４９０、ＭＳ実測値：４９１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８４】
実施例Ｂ−５
トリフルオロ酢酸８−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−オン
【化２７】
2020505397.tif 000030
【０２８５】
トルエン（１０ｍＬ）中、８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−１，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−オン（２２３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）および５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（１６４ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｋ３ＰＯ４（２５４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１１４ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびＮ１，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン（５３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を脱気し、Ａｒで保護し、次いで、１００℃で５時間加熱した。この反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製し、標題化合物をＴＦＡ塩としての黄色固体として得た（５０ｍｇ）。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.60 (br, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.68 (d J=8.8 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.86-4.78(m, 4H), 4.34-4.32 (m, 1H), 3.82-3.57 (m, 6H), 3.24-3.10 (m, 3H), 2.64 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.27-1.63 (m, 12H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で８０％水（０．１％ＦＡ）および２０％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．４４分；ＭＳ理論値：５１５、ＭＳ実測値：５１６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８６】
機器：Ｗａｔｅｒｓ  ２７６７／Ｑｄａ
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ２０×２５０  ｍｍ  １０μｍ、Ｒａｔｅ：３０ｍｌ／分
波長：２１４ｎｍ／２５４ｎｍ、トリガー：２５４ｎｍ
移動相Ａ：Ｈ２（０．１％ＴＦＡ）、移動相Ｂ：ＡＣＮ
勾配法：
【０２８７】
【表２】
2020505397.tif 000031
【０２８８】
実施例Ｂ−６
８−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−１−オン
【化２８】
2020505397.tif 000032
【０２８９】
トルエン（１５ｍＬ）中、８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−１−オン（１４０ｍｇ、０．３７６ｍｍｏｌ）の溶液に、５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（１０３ｍｇ、０．３７６ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１０８ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン（６７ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１６０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を、Ｎ２保護を伴って１００℃で３時間撹拌した。この反応混合物をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）で希釈し、次いで、濾過した。濾液を真空濃縮して残渣を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝５：１〜２：１）により精製して生成物（１２０ｍｇ）を得た。この生成物を分取ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝３：１）によりさらに精製し、生成物（５７ｍｇ）を黄色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.74 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.62 (s, 2H), 7.00 (s, 1H), 4.58-4.30 (m, 6H), 3.48-3.44 (m, 1H), 3.25-3.16 (m, 3H), 2.90-2.82 (m, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.05 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.96-1.91 (m, 2H), 1.85-1.82 (m, 2H), 1.74-1.62 (m, 5H), 1.47-1.43 (m, 2H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９分で９５％水（０．１％ＦＡ）および５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．５４分；ＭＳ理論値：５１５、ＭＳ実測値：５１６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９０】
実施例Ｂ−７
７−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−４−オキサ−７−アザスピロ［２．５］オクタン
【化２９】
2020505397.tif 000033
【０２９１】
Ａｒ下、トルエン（２ｍｌ）中、５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（８１ｍｇ、０．２９８ｍｍｏｌ）、７−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−４−オキサ−７−アザスピロ［２．５］オクタン（１００ｍｇ、０．３０２ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（１２７ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）およびＣｕＩ（５７ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン（５３ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を９５℃で３時間撹拌した。
【０２９２】
この反応混合物を濾過し、濾過ケークをＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝１５／１で溶出させるカラムクロマトグラフィーにより精製し、純粋な所望の生成物を白色固体として得た（７６ｍｇ、収率：５３％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０．０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝５．１１分；ＭＳ理論値：４７４、ＭＳ実測値：４７５［Ｍ＋Ｈ］＋。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.82 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 4H), 3.87 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.80 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 3.66 (s, 2H), 3.57 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 2.97 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 2.85-2.81 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.05-2.00 (m, 2H), 1.94 (br, 4H), 0.90-0.55 (m, 4H), 0.68 (m, 2H)。
【０２９３】
実施例Ｂ−８
８−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（（テトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−１−オン
【化３０】
2020505397.tif 000034
【０２９４】
トルエン（３ｍＬ）中、８−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−１−オン（１１９ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、５−メチル−６−（（テトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）−１Ｈ−インダゾール（７０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（９０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（６１ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１３６ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で２時間撹拌した。この混合物を濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（ｇｉｌｓｏｎ−２  Ｋｉｎｅｔｅ  ＥＶＯ  Ｃ１８、５μｍ  ２１．２×１５０ｍｍ；２０−５０％Ｂ、Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ＨＣｌ）、Ｂ：ＡＣＮ、ＵＶ：２１４ｎｍ、流速２０ｍｌ／分）により精製し、標題化合物を白色固体として得た（９７ｍｇ、６６％）。
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ8.16 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 5.54 (br, 1H), 5.07 (br, 1H), 4.40-4.37 (m, 2H), 4.13-3.95 (m, 6H), 3.40 (t, J = 6.4, 2H), 3.03 (s, 3H), 2.34-2.27 (m, 5H), 2.14-2.07 (m, 4H), 1.81-1.76 (m, 2H)。
ＬＣ−ＭＳ［カラム：Ｃ１８；カラムサイズ：４．６×５０ｍｍ；移動相：Ｂ（ＡＣＮ）：Ａ（０．１％ＴＦＡ）；６分勾配（Ｂ％）］：Ｒｔ＝３．０８８分、ＭＳ理論値：４６２、ＭＳ実測値：４６３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９５】
実施例Ｂ−９
８−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（１−（オキセタン−３−イル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン
【化３１】
2020505397.tif 000035
【０２９６】
ＤＣＭ（４ｍＬ）中、８−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン（１３９ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、オキセタン−３−オン（１１１ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）、Ｎａ（ＣＮ）ＢＨ３（３９ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）の混合物に、ＡｃＯＨ（２滴）を加えた。この混合物を室温で４時間撹拌した。この混合物を濃縮した。粗物質を（ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８、５μｍ、１９×１５０ｍｍ、０５−５０％ＡＣＮ−Ｈ２Ｏ（０．１％ＨＣｌ）、流速：１５ｍｌ／分、ＧＴ  １０分）分取ＨＰＬＣにより精製して溶液Ａを得た。この溶液ＡをＮａＨＣＯ３（水溶液）で洗浄した。有機層を濃縮し、標題化合物を白色固体として得た（２７ｍｇ、１７％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ8.80 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.74-4.71 (M, 4H), 4.69 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.52 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.20 (s, 3H), 4.01 (s, 2H), 3.81-3.80 (m, 2H), 3.71 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.61-3.58 (m, 1H), 2.97 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 2.88 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.09-2.03 (m, 2H), 1.98-1.91 (m, 4H)。
ＬＣ−ＭＳ［Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｋｉｎｅｔｅｘ  ５μｍ  ＥＶＯ  Ｃ１８、５０×４．６ｍｍ；移動相：Ｂ（ＡＣＮ）：Ａ（０．０２％ＮＨ４ＯＡｃ）；６分勾配（Ｂ％）］：Ｒｔ＝３．７９５分；ＭＳ理論値：５０６、ＭＳ実測値：５０７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９７】
実施例Ｂ−１０
８−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン
ＴＦＡ（１ｍＬ）およびＤＣＭ（４ｍＬ）中、４−（１−（２−メトキシ−６−（２，５−ジオキサ−８−アザスピロ［３．５］ノナン−８−イル）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１７０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の溶液を室温で５時間撹拌した。この反応物に飽和ＮａＨＣＯ３を加えてｐＨ＞７に調整した。この混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、化合物（１３９ｍｇ、１００％）を白色固体として得た。
【０２９８】
Ｆ．生物学的データ
上述のように、本発明の化合物はＬＲＲＫ２キナーゼ阻害剤であり、ＬＲＲＫ２により媒介される疾患の治療に有用である。本発明の化合物の生物学的活性は、ＬＲＲＫ２キナーゼ阻害剤としての候補化合物の活性を決定するための任意の好適なアッセイ、ならびに組織およびｉｎ  ｖｉｖｏモデルを用いて決定することができる。
【０２９９】
１）全長Ｇ２０１９ヒトＬＲＲＫ２阻害質量分析アッセイ
昆虫細胞の培養
Ｓｆ９昆虫細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カールスバッド、ＣＡ）を２７℃、５００ｍｌ静置フラスコ中、ＳＦ９００  ＩＩ  ＳＦＭで維持した。これらの細胞は指数関数的増殖相で維持し、週に２回継代培養した。より大容量とするためには、細胞を２リットルの振盪フラスコ（Ｅｒｌｅｎｍｅｙｅｒ、Ｃｏｒｎｉｎｇ）にて、２７℃のインキュベーター振盪機にて１２０ｒｐｍで振盪しながら増殖させた。
【０３００】
ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミドの調製
ＰＣＲクローニングに使用したプライマー：
ｐＨＴＢＶ−Ｆ：配列番号１
ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ１：配列番号２
ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｒ１：配列番号３
ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ２：配列番号４
ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｒ２：配列番号５
ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ３：配列番号６
ｐＨＴＢＶ−Ｒ：配列番号７
【０３０１】
製造者の説明書（ＫＯＤ−２１１、ＴＯＹＯＢＯ）に従って高忠実度ＰＣＲポリメラーゼＫＯＤ−Ｐｌｕｓを使用し、上記のプライマーを用いてＢｉｏＣａｔ  １１６３１３から、Ｎ末端Ｆｌａｇタグを有する全長ヒトＬＲＲＫ２（アミノ酸１〜２５２７）を増幅した。ＰＣＲ産物をＢａｍＨＩおよびＫｐｎＩで消化し、ＢａｍＨＩおよびＫｐｎＩで消化したｐＨＴＢＶ１ｍｃｓ３（ＢｉｏＣａｔ  １２７５５５）に連結した。標的フラグメントの配列をＤＮＡシークエンシングのよって決定した。構築物ＢｉｏＣａｔ１４１３５１はＮｏｖｏｐｒｏｔｅｉｎにより作製された。
【０３０２】
Ｇ２０１９全長Ｆｌａｇ−ＬＲＲＫ２コード配列は、配列番号８である。
【０３０３】
ヒトＧ２０１９全長ＬＲＲＫ２  ｆｌａｇタグを有するタンパク質の翻訳タンパク質配列は、配列番号９である。
【０３０４】
ＢａｃＭａｍウイルスの作製
組換えＢａｃＭａｍウイルスを作製するために、ＳＦ９細胞を６穴組織培養ディッシュに９×１０５細胞／穴で播種し、２０分間付着させた。トランスフェクション手順は、ＡＥＳＯＰ  ＡＰ５９１１ｖ２を用いて行った。簡単に述べれば、ＤＨ１０Ｂａｃコンピテント細胞（１０３６１−０１２、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を遺伝子型が通常のヒトＬＲＲＫ２  ＢａｃＭａｍプラスミドで形質転換させて組換えバキュロウイルスＤＮＡを作製した。Ｓｆ９昆虫細胞を組換えバキュロウイルスＤＮＡとセルフェクチン（１０３６２−１００、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の混合物で同時トランスフェクトした。２７℃で４時間のインキュベーション後に、トランスフェクション培地を、５％ＨＩ  ＦＢＳ（１０１００１４７、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含有するＳｆ−９００  ＩＩＩ  ＳＦＭ培地に置き換えた。細胞をさらに４日間インキュベートした。バキュロウイルス（Ｐ０ウイルス原株）を含有する感染細胞培養培地を回収し、さらにＳｆ９細胞を感染多重度（ＭＯＩ）（ｐｆｕ／細胞）０．１で感染させることにより増幅した。
【０３０５】
ＢａｃＰＡＫＲａｐｉｄ力価によるＢａｃＭａｍウイルス力価の定量
プラーク形成単位（ｐｆｕ）／ｍｌとして測定されるウイルス力価は、ＢａｃＰＡＫ  Ｐａｐｉｄ力価キット（６３１４０６、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を製造のプロトコールに従って用いて決定した。９６ウェルプレートに３×１０５細胞／ウェルで播種したＳｆ９細胞を、ウイルス原株の希釈系とともに２７℃で１時間インキュベートし、各ウェルに５０μｌメチルセルロースのオーバーレイを加えた後に４３〜４７時間インキュベーションを行った。次に、これらの細胞を４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）中で固定した。これらの細胞を希釈正常ヤギ血清でブロッキングした後、それらの細胞にマウス抗ｇｐ６４抗体を加えた。３０分のインキュベーション後に、細胞を０．１％トリトン−Ｘ１００（ＰＢＳＴ）含有リン酸緩衝生理食塩水で洗浄し、さらに３０分間、ヤギ抗マウス抗体／ＨＲＰコンジュゲートとともにインキュベートした。その後、単一の感染細胞および感染細胞巣を暗青色により検出する青色ペルオキシダーゼ基質とのインキュベーションを行った。
【０３０６】
タンパク質発現
Ｆｌａｇタグを有する全長Ｇ２０１９ヒトＬＲＲＫ２の発現
ＨＥＫ２９３  ６Ｅ細胞（ＢｉｏＣａｔ：  １２０３６３）を、３７℃のインキュベーターにて、１１０ｒｐｍで回転するオービタルシェーカー上、５％ＣＯ２加湿雰囲気でインキュベートした。形質導入当日に細胞生存率は９８％より高く、細胞密度は１×１０６〜１．５×１０６細胞／ｍｌの範囲であった。
【０３０７】
ＨＥＫ２９３  ６Ｅ細胞を１，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、次いで、これらの細胞を０．１％Ｆ−６８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ：２４０４０−０３２）を含むが抗生物質（Ｇ４１８）は含まない新鮮なＦｒｅｅｓｔｙｌｅ  ２９３発現培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ：１２３３８）に１×１０６細胞／ｍｌの密度で再懸濁させた。
【０３０８】
Ｆｌａｇ−ｈｕ  ＬＲＲＫ２（遺伝子型的に正常な）遺伝子を有するＢａｃＭａｍウイルスを４０，０００ｇで２時間遠心分離し、次いで、新鮮なＦｒｅｅｓｔｙｌｅ  ２９３発現培地に再懸濁させた。再懸濁させたウイルスをＭＯＩ  １０で細胞に加えた。これらにての細胞を３７℃のインキュベーターにて１１０ｒｐｍで回転するオービタルシェーカー上、空気中５％ＣＯ２の加湿雰囲気でインキュベートした。培養物を形質導入後およそ４８時間で、４，０００ｒｐｍで２０分間の遠心分離により採取し、精製のためにペレットを冷凍した。
【０３０９】
タンパク質精製
Ｆｌａｇタグを有する全長Ｇ２０１９ヒトＬＲＲＫ２の精製
細胞ペレットを２０ｍＬの溶解バッファー（５０ｍＭトリスＨＣｌ  ｐＨ７．５  ４℃、５００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％トリトンＸ−１００、１０％グリセロール、直前に２ｍＭ  ＤＴＴを添加）に、供給者により示唆されている推奨濃度のプロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ：０４６９３１３２００１）およびベンゾナーゼ（Ｍｅｒｃｋ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ：７０７４６−３ＣＮ）とともに再懸濁させた。懸濁細胞を氷上で３０分間（２秒オン／４秒オフ、振幅２０％）の音波処理により溶解させ、４℃にて１０，０００ｒｐｍで３０分間遠心分離した。上清を抗Ｆｌａｇ磁性ビーズ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ：Ｍ８８２３）の細胞培養物１ｍＬ／リットルとともに４℃で３時間インキュベートした後、それらのビーズを５ｍＬ／リットル細胞培養物の結合バッファー（５０ｍＭトリスｐＨ７．５＠  ４Ｃ、５００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％トリトンＸ−１００、１０％グリセロール、直前に２ｍＭ  ＤＴＴを添加）により３回洗浄した。Ｆｌａｇタグを有するＬＲＲＫ２タンパク質を溶出バッファー（５０ｍＭトリスｐＨ７．５＠  ４Ｃ、５００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％トリトンＸ−１００、１０％グリセロール、直前に２ｍＭ  ＤＴＴを添加、２５０ｕｇ／ｍｌ  Ｆｌａｇペプチド（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ：Ｆ３２９０））により４℃で２時間溶出した。ＦｌａｇペプチドをＺｅｂａ  Ｓｐｉｎ脱塩カラム７Ｋ  ＭＷＣＯ（Ｔｈｅｒｍｏ−Ｆｉｓｈｅｒ：８９８９３）により除去し、溶出されたＬＲＲＫ２タンパク質のバッファーを、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  Ｆｉｌｔｅｒ  Ｕｎｉｔｓ（１００ｋＤ）（Ｍｅｒｃｋ：ＵＦＣ９１００９６）を用いて保存バッファー（５０ｍＭトリスｐＨ７．５＠４Ｃ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０２％トリトンＸ−１００、２ｍＭ  ＤＴＴおよび５０％グリセロール）に交換した。ＬＲＲＫ２タンパク質を含有する画分をプールし、アリコートに分け、−８０℃で保存した。タンパク質濃度をブラッドフォードタンパク質アッセイにより決定し、タンパク質純度をＮｕＰＡＧ  Ｎｏｖｅｘ  ４−１２％ビス−トリスタンパク質ゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ：ＮＰ０３２２ＢＯＸ）により分析した。
【０３１０】
全長Ｇ２０１９ヒトＬＲＲＫ２阻害質量分析アッセイ
ロイシンリッチリピートキナーゼ２（ＬＲＲＫ２）阻害に関するこのアッセイは、ハイスループットＲａｐｉｄＦｉｒｅ質量分析アッセイを用いたペプチド「ＬＲＲＫｔｉｄｅ」（ＬＲＲＫｔｉｄｅ：ＲＬＧＲＤＫＹＫＴ＊ＬＲＱＩＲＱ  “＊”はリン酸化の部位を意味する）およびリン酸化「ＬＲＲＫｔｉｄｅ」の直接的測定に基づく。阻害剤は、ＬＲＲＫｔｉｄｅのホスホ−ＬＲＲＫｔｉｄｅへの変換を低減する化合物として定義される。
【０３１１】
アッセイプロトコール
１．１０ｍＭの試験化合物を１００％ＤＭＳＯに溶解させ、１対４の連続希釈を行った。次に、この希釈系１００ｎＬを、第６列と第１８列を除く３８４ウェルｖ底ポリプロピレンプレートに加えた。対照ウェルとしての第６列と第１８列には１００ｎＬのＤＭＳＯを加えた。アッセイ希釈により試験化合物の最高最終アッセイ濃度は１００μＭとなった。
【０３１２】
２．プレストップアッセイ対照として用いるために、実験室級の水中１％ギ酸５０μｌを第１８列に、マルチドロップコンビディスペンサーを用いて加えた。
【０３１３】
３．アッセイバッファー（５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ（ｐＨ７．２）、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、５％グリセロール、０．００２５％トリトンＸ−１００および１ｍＭ  ＤＴＴ）中、５０ｎＭの精製組換え全長Ｆｌａｇ−ＬＲＲＫ２を含有する「酵素溶液」５μＬを総てのウェルに、マルチドロップコンビディスペンサーを用いて加え、最終アッセイ濃度を２５ｎＭ  ＬＲＲＫ２酵素とした。これにより第６列（酵素およびＤＭＳＯ）は０％阻害となり、第１８列は１００％阻害（プレストップ対照）となった。その後、試験プレートを室温で３０分間インキュベートした。
【０３１４】
４．５０ｕＭ  ＬＲＲＫｔｉｄｅペプチド基質および４ｍＭ  ＡＴＰを含有する「基質溶液」５μＬをプレートの総てのウェルに、マルチドロップコンビディスペンサーを用いて加え、最終アッセイ濃度を２５ｕＭ  ＬＲＲＫｔｉｄｅおよび２ｍＭ  ＡＴＰとした。次に、試験プレートを室温で１時間インキュベートした（インキュベーションは、酵素バッチの違いによる反応の速度および直線性によって異なり得る）。
【０３１５】
５．実験室級の水中１％ギ酸５０μｌを総てのウェル（第１８列を除く）に加えて反応物を急冷し、プレートを３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。次に、試験プレートを、ＡＢ  Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ  ４０００三連四重極質量分析計に接続したＡｇｉｌｅｎｔ  ＲａｐｉｄＦｉｒｅハイスループット固相抽出システムにて、以下の設定で分析した。
【０３１６】
ＲａｐｉｄＦｉｒｅ設定：
・Ｓｉｐ高(Sip Height)＝２ｍｍ、吸引＝５００ｍｓ、ロード時間＝３０００ｍｓ、溶出時間＝３０００ｍｓ、再平衡化(Requilibration)＝５００ｍｓ。
・流速：ポンプ１＝１．５ｍＬ／分、ポンプ２  １．２５ｍＬ／分  ポンプ３＝０．８ｍＬ／分
質量分析計設定
・ＬＲＲＫｔｉｄｅ検出設定：Ｑ１質量６４４．８Ｄａ、Ｑ３質量６３８．８、デクラスタリング電位７６ボルト、衝突エネルギー３７ボルト、ＣＸＰ  ３４ボルト。
・ホスホ−ＬＲＲＫｔｉｄｅ検出設定：Ｑ１質量６７１．４Ｄａ、Ｑ３質量６３８．８、デクラスタリング電位７６ボルト、衝突エネルギー３７ボルト、ＣＸＰ  ３４ボルト
・Ｃ４カートリッジを使用し、ランニングバッファーは：Ａ（水性）水中０．１％ギ酸Ｂ（有機）０．１％ギ酸、８０％アセトニトリル、２０％水であった。
【０３１７】
６．データはＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅソフトウエア（ＩＤＢＳ）を用いて解析した。ＬＲＲＫｔｉｄｅからホスホ−ＬＲＲＫｔｉｄｅへの変換率％は、下式を用いて計算した。
％変換率＝（ホスホ−ＬＲＲＫｔｉｄｅ生成物ピーク面積／（ホスホ−ＬＲＲＫｔｉｄｅ生成物ピーク面積＋ＬＲＲＫｔｉｄｅ基質ピーク面積））＊１００
【０３１８】
２）組換え細胞ＬＲＲＫ２  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイ
細胞においてＬＲＲＫ２キナーゼ活性に対する化合物の活性を決定するために、観察されたＬＲＲＫ２  Ｓｅｒ  ９３５リン酸化のＬＲＲＫ２キナーゼ依存性調節(Dzamko et al., 2010, Biochem. J. 430: 405-413)を用い、組換え全長ＬＲＲＫ２タンパク質を過剰発現するように操作されたヒト神経芽腫細胞株ＳＨ−ＳＹ５ＹにおけるＬＲＲＫ２  Ｓｅｒ９３５リン酸化の、定量的な３８４ウェルプレートに基づくイムノアッセイを開発した。
【０３１９】
全長組換えＬＲＲＫ２を発現するＢａｃＭａｍウイルスはＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎから購入し、３％ウシ胎仔血清を添加したＳｆ−９００  ＩＩＩ  ＳＦＭ培地にて、４〜５日間、ＭＯＩ０．３でＳＦ−９細胞に接種することにより増幅した。次に、感染細胞培養物を２０００ｇで２０分間遠心分離し、ウイルス上清力価を抗ｇｐ６４プラークアッセイにより決定し、４℃で保存した。
【０３２０】
アフィニティー精製した抗ホスホＬＲＲＫ２  Ｓｅｒ９３５ヒツジポリクローナル抗体(Dzamko et al., 2010, Biochem. J. 430: 405-413)を標準的な方法（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）によりビオチン化した。抗ＬＲＲＫ２ウサギポリクローナル抗体は、Ｎｏｖｕｓ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓから購入した。ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎタンパク質Ａ  ＩｇＧキット（アクセプタービーズおよびドナービーズを含む）は、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒから購入した。
【０３２１】
ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞を、１０％透析ウシ胎仔血清を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２培地で増殖させ、３７℃にて、０．５％トリプシン−ＥＤＴＡで５分間処理した後、４分間１０００ｒｐｍで遠心分離することにより回収した。細胞ペレットをＯｐｔｉ−ＭＥＭ血清低減培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に２００，０００細胞／ｍｌで再懸濁させ、ＢａｃＭａｍ  ＬＲＲＫ２ウイルスとＭＯＩ＝５０で混合した。５０μｌの細胞溶液を３８４ウェルプレートの各ウェルに分注し、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。
【０３２２】
試験化合物の希釈系をＯｐｔｉ−ＭＥＭ血清低減培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で調製し、最高最終アッセイ濃度が１０μＭとなるように５．６μｌを化合物プレートから細胞アッセイプレートに移した。対照としての特定のウェルにはＤＭＳＯを用いた。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で６０分間インキュベートした。次に、培地を除去し、２０μｌの細胞溶解バッファー（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を添加して４℃で２０分間インキュベートすることにより細胞を溶解させた。次に、１０μｌの抗体／アクセプタービーズ混合物［ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ検出バッファー（２５ｍＭヘペス（ｐＨ７．４）、０．５％トリトンＸ−１００、１ｍｇ／ｍｌデキストラン５００および０．１％ＢＳＡ）中、（１／１０００ビオチン化−ｐＳ９３５  ＬＲＲＫ２抗体、１／１０００総ＬＲＲＫ２抗体、１／１００アクセプタービーズ］を各ウェルに加え、プレートを暗所、周囲温度で２時間インキュベートした。１０μｌのドナービーズ溶液（ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ検出バッファー中、１／３３．３ドナービーズ）を各ウェルに加えた。暗所、周囲温度でさらに２時間インキュベートした後、プレートをＥｎＶｉｓｉｏｎ（商標）プレートリーダーにて、励起６８０ｎｍを用い、発光５２０〜６２０ｎｍで読み取った。用量反応曲線データは、シグモイド用量反応モデルに基づいた。
【０３２３】
薬理学的データ
実施例Ａ−１〜Ａ−１３の化合物を組換え細胞ＬＲＲＫ２  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイで試験したところ、ｐＩＣ５０＞６を示した。実施例Ａ−１〜Ａ−４およびＡ−１３の化合物は、組換え細胞ＬＲＲＫ２  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイでｐＩＣ５０≧７を示した。実施例Ａ−１３の化合物は、組換え細胞ＬＲＲＫ２  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイで８．１のｐＩＣ５０を示した。
【０３２４】
さらに実施例Ａ−１〜Ａ−７の化合物を全長Ｇ２０１９ヒトＬＲＲＫ２阻害質量分析アッセイで試験したところ、ｐＩＣ５０≧６．５を示した。
【０３２５】
配列表
ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ｐＨＴＢＶ−ＦのＰＣＲクローニングに使用した配列番号１のプライマー
【化３２】
2020505397.tif 000036
配列番号２  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ１のＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化３３】
2020505397.tif 000037
配列番号３  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｒ１のＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化３４】
2020505397.tif 000038
配列番号４  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ２のＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化３５】
2020505397.tif 000039
配列番号５  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｒ２のＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化３６】
2020505397.tif 000040
配列番号６  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ３のＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化３７】
2020505397.tif 000041
配列番号７  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ｐＨＴＢＶ−ＲのＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化３８】
2020505397.tif 000042
配列番号８  Ｇ２０１９全長Ｆｌａｇ−ＬＲＲＫ２コード配列
【化３９】
2020505397.tif 000043
2020505397.tif 000044
2020505397.tif 000045
配列番号９  ヒトＧ２０１９全長ＬＲＲＫ２  ｆｌａｇタグを有するタンパク質の翻訳タンパク質配列
【化４０】
2020505397.tif 000046
配列番号１０：‘ＬＲＲＫｔｉｄｅ’ペプチド
【化４１】
2020505397.tif 000047
【配列表】
2020505397000001.app
【国際調査報告】
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