(57)【要約】  本開示は薬学の分野に関し、具体的には、がんの処置で使用するためのＷｎｔ阻害剤およびＰＤ−１阻害剤に関する。具体的には、本開示は、がんの処置で使用するための、Ｗｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容される塩とＰＤ−１阻害剤またはその薬学的に許容される塩とを含む医薬組み合わせ、この組み合わせを投与することを含むがんの処置方法、およびがんの処置用の医薬品の製造のためのこの組み合わせの使用に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんの処置で使用するための、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩と、（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩とを含む医薬組み合わせであって、（ｉ）を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜１５日目に毎日投与し、（ｉｉ）を１回のサイクル当たり少なくとも１回投与する、医薬組み合わせ。
【請求項２】
（ｉ）を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜８日目の間に投与する、請求項１に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項３】
（ｉ）を最初のサイクルの間にのみ投与する、請求項１または２に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項４】
（ｉ）を４回のサイクルの間にのみ投与する、請求項１または２に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項５】
各サイクルは２８日間である、請求項１〜４のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項６】
（ｉ）を１日２回投与する、請求項１〜５のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項７】
（ｉ）を１２時間間隔で投与する、請求項６に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項８】
（ｉ）の１日用量は２．５ｍｇ／日、５ｍｇ／日、７．５ｍｇ／日、１０ｍｇ／日、２０ｍｇ／日、４０ｍｇ／日、８０ｍｇ／日、１２０ｍｇ／日または１８０ｍｇ／日である、請求項１〜７のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項９】
（ｉ）の１日用量は２．５ｍｇ／日、５ｍｇ／日または１０ｍｇ／日である、請求項８に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項１０】
（ｉ）の１日用量は１０ｍｇ／日である、請求項８または９のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項１１】
（ｉｉ）をサイクルにおいて２週間毎にまたは４週間毎に投与する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項１２】
（ｉｉ）を４週間毎に投与する、請求項１１に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項１３】
（ｉｉ）は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、ＰＤＲ−００１またはそれらの薬学的な塩から選択される、請求項１１または１２に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項１４】
（ｉｉ）はＰＤＲ−００１またはその薬学的な塩である、請求項１３に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項１５】
（ｉｉ）を３００〜４００ｍｇ／日の単回用量で静脈内投与する、請求項１３に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項１６】
前記単回用量は４００ｍｇ／日である、請求項１５に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項１７】
最大４回のサイクルにわたり、２．５ｍｇ／日の（ｉ）を１〜８日目に投与し、４００ｍｇ／日の（ｉｉ）を４週間毎に１回投与する、請求項１、２、５〜９または１１〜１６のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項１８】
最大４回のサイクルにわたり、２．５ｍｇ／日の（ｉ）を１〜１５日目に投与し、４００ｍｇ／日の（ｉｉ）を４週間毎に１回投与する、請求項１、５〜９または１１〜１６のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項１９】
２．５ｍｇ／日の（ｉ）をサイクル１の間にのみ投与し、４００ｍｇ／日の（ｉｉ）を４週間毎に投与する、請求項３〜９または１１〜１８のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項２０】
最大４回のサイクルにわたり、５ｍｇ／日の（ｉ）を１〜８日目に投与し、４００ｍｇ／日の（ｉｉ）を４週間毎に１回投与する、請求項１、２、５〜９または１１〜１６のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項２１】
最大４回のサイクルにわたり、５ｍｇ／日の（ｉ）を１〜１５日目に投与し、４００ｍｇ／日の（ｉｉ）を４週間毎に１回投与する、請求項１、５〜９または１１〜１６のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項２２】
５ｍｇ／日の（ｉ）をサイクル１の間にのみ投与し、４００ｍｇ／日の（ｉｉ）を４週間毎に投与する、請求項３〜９、１１〜１６、２０または２１のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項２３】
最大４回のサイクルにわたり、１０ｍｇ／日の（ｉ）を１〜８日目に毎日投与し、４００ｍｇ／日の（ｉｉ）を４週間毎に投与する、請求項１、２、５〜１６のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項２４】
最大４回のサイクルにわたり、１０ｍｇ／日の（ｉ）を１〜１５日目に投与し、４００ｍｇ／日の（ｉｉ）を４週間毎に投与する、請求項１または５〜１６のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項２５】
１０ｍｇ／日の（ｉ）をサイクル１の間にのみ投与し、４００ｍｇ／日の（ｉｉ）を４週間毎に投与する、請求項１、３〜１６、２３または２４のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項２６】
（ｉｉ）を４週間毎に連続的に投与する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ。
【請求項２７】
がんの処置用の医薬品の製造のための（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩の抗ＰＤ−１抗体分子または薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用であって、（ｉ）および（ｉｉ）を請求項１〜２６のいずれか一項で定義されたように投与し、好ましくは、（ｉ）を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜１６日目に毎日投与し、（ｉｉ）を１回のサイクル当たり少なくとも１回投与する、使用。
【請求項２８】
（ｉ）を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜１６日目に投与する、各サイクルの１〜８日目に投与する、または最初のサイクルの間にのみ投与する、請求項２７に記載のがんの処置用の医薬品の製造のための（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩の（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用。
【請求項２９】
（ｉ）の１日用量は２．５ｍｇ／日、５ｍｇ／日、７．５ｍｇ／日、１０ｍｇ／日、２０ｍｇ／日、４０ｍｇ／日、８０ｍｇ／日、１２０ｍｇ／日または１８０ｍｇ／日である、請求項２７または２８に記載のがんの処置用の医薬品の製造のための（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩の（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用。
【請求項３０】
（ｉ）の１日用量は１０ｍｇ／日である、請求項２７〜２９のいずれか一項に記載のがんの処置用の医薬品の製造のための（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩の（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用。
【請求項３１】
（ｉｉ）を３００〜４００ｍｇ／日の単回用量で投与する、請求項２７〜３０のいずれか一項に記載のがんの処置用の医薬品の製造のための（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩の（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用。
【請求項３２】
（ｉｉ）を４００ｍｇ／日の単回用量で投与する、請求項２７〜３０のいずれか一項に記載のがんの処置用の医薬品の製造のための（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩の（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用。
【請求項３３】
（ｉ）および（ｉｉ）を請求項１７〜２５のいずれか一項で定義されたように投与する、請求項２７に記載のがんの処置用の医薬品の製造のための（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩の（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用。
【請求項３４】
がんの処置方法であって、必要とする患者に有効量の（ｉ）および（ｉｉ）を投与することを含み、（ｉ）を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜１５日目の間に毎日投与し、（ｉｉ）を１回のサイクル当たり少なくとも１回投与する、方法。
【請求項３５】
有効量の（ｉ）および（ｉｉ）を請求項１〜２６のいずれか一項で定義されたように投与することを含む、請求項３４に記載のがんの処置方法。
【請求項３６】
前記がんは、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、頭頸部扁平上皮癌、膵がん、胃腸がん、直腸結腸がん、肺の扁平上皮がん、食道の扁平上皮がん、子宮頸部の扁平上皮がん、または黒色腫である、請求項１〜２６に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ、請求項２７〜３３に記載の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドもしくはその薬学的に許容される塩の（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子もしくはその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用、または請求項３４〜３６に記載のがんの処置方法。
【請求項３７】
前記がんは、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、膵がん、または黒色腫である、請求項１〜２６もしくは３６に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ、請求項２７〜３３もしくは３６に記載の２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドもしくはその薬学的に許容される塩の抗ＰＤ−１抗体分子もしくはその薬学的な塩との組み合わせでの使用、または請求項３４〜３６に記載のがんの処置方法。
【請求項３８】
（ｉ）および（ｉｉ）は骨吸収低下において相乗的に活性である、請求項１〜２６、３６もしくは３７に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ、請求項２７〜３３、３６もしくは３７に記載の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドもしくはその薬学的に許容される塩の（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子もしくはその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用、または請求項３４〜３７に記載のがんの処置方法。
【請求項３９】
（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を経口でまたは静脈内に投与し、最も好ましくは経口で投与する、請求項１〜２６もしくは３６〜３８に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ、請求項２７〜３３もしくは３６〜３８に記載の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドもしくはその薬学的に許容される塩の抗ＰＤ−１抗体分子もしくはその薬学的な塩との組み合わせでの使用、または請求項３４〜３８に記載のがんの処置方法。
【請求項４０】
抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、ＰＤＲ−００１またはそれらの薬学的な塩から選択される、請求項１〜２６もしくは３６〜３９に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ、請求項２７〜３３もしくは３６〜３９に記載の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドもしくはその薬学的に許容される塩の抗ＰＤ−１抗体分子との組み合わせでの使用、または請求項３４〜３９に記載のがんの処置方法。
【請求項４１】
前記抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）はＰＤＲ−００１またはその薬学的な塩である、請求項１〜２６もしくは３６〜４０に記載のがんの処置で使用するための医薬組み合わせ、請求項２７〜３３もしくは３６〜４０に記載の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドもしくはその薬学的に許容される塩の抗ＰＤ−１抗体分子との組み合わせでの使用、または請求項３４〜４０に記載のがんの処置方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
開示の分野
本開示は薬学の分野に関し、具体的には、がんの処置で使用するためのＷｎｔ阻害剤および抗ＰＤ−１抗体分子に関する。具体的には、本開示は、がんの処置で使用するための、Ｗｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩とを含む医薬組み合わせ、この組み合わせを投与することを含むがんの処置方法、およびがんの処置用の医薬品の製造のためのこの組み合わせの使用に関する。
【０００２】
開示の背景
Ｗｎｔ（Ｗｉｎｇｌｅｓｓ）ファミリーは、胚形成中の細胞間相互作用を調節しかつ発癌、加齢および線維化に関与する、高度に保存された分泌タンパク質の一群である。Ｗｎｔ遺伝子は３０年前にマウス乳房腫瘍中で発がん遺伝子と同定されており、多くの研究において重要な発がん経路であることが確認されている。Ｗｎｔ遺伝子ファミリーは、Ｉｎｔ１／Ｗｎｔ１がん原遺伝子とＤｒｏｓｏｐｈｉｌａ  Ｗｎｔ１相同体であるＤｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｗｉｎｇｌｅｓｓ（「Ｗｇ」）とに関連する分泌タンパク質の大きなクラスをコードする（Cadigan et al. Genes & Development 1997, 11, 3286）。
【０００３】
プログラム死１（ＰＤ−１）タンパク質は、Ｔ細胞調節因子の拡張ＣＤ２８／ＣＴＬＡ４ファミリーの阻害メンバーである（Okazaki et al. Curr. Opin. Immunol. 2002, 14, 391779; Bennett et al. J. Immunol. 2003, 170, 711）。ＣＤ２８受容体のリガンドは関連するＢ７分子の一群を含み、「Ｂ７スーパーファミリー」としても既知である（Coyle et al. Nature Immunol. 2001, 2(3), 203; Sharpe et al. Nature Rev. Immunol. 2002, 2, 116; Collins et al. Genome Biol. 2005, 6, 223.1; Korman et al. Adv. Immunol. 2007, 90, 297）。このＢ７スーパーファミリーのいくつかのメンバーが知られており、Ｂ７．１（ＣＤ８０）、Ｂ７．２（ＣＤ８６）、誘導性共刺激因子リガンド（ＩＣＯＳ−Ｌ）、プログラム死−１リガンド（ＰＤ−Ｌ１；Ｂ７−Ｈ１）、プログラム死−２リガンド（ＰＤ−Ｌ２；Ｂ７−ＤＣ）、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４およびＢ７−Ｈ６が挙げられる（Collins et al. Genome Biol. 2005, 6, 223.1）。ＣＤ２８ファミリーの他のメンバーとして、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ−４、ＩＣＯＳおよびＢＴＬＡが挙げられる。ＰＤ−１は単量体として存在すると示唆されており、他のＣＤ２８ファミリーのメンバーに特徴的な不対システイン残基を欠いている。ＰＤ−１は、活性化されたＢ細胞、Ｔ細胞および単球で発現される。
【０００４】
ＰＤ−Ｌ１は様々なヒトがんに大量に含まれている（Dong et al. Nat. Med. 2002, 8, 787）。ＰＤ−１は、ＴＣＲシグナルを負に調節する免疫阻害タンパク質として知られている（Ishida et al. EMBO J. 1992, 11, 3887; Blank et al. Immunol. Immunother. 2006, 56(5), 739）。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１との間の相互作用は免疫チェックポイントとして働くことができ、そのため、例えば腫瘍浸潤リンパ球の減少、Ｔ細胞受容体に媒介される増殖の減少および／またはがん細胞による免疫回避が引き起こされ得る（Dong et al. J. Mol. Med. 2003, 81, 281; Blank et al. Cancer Immunol. Immunother. 2005, 54, 307; Konishi et al. Clin. Cancer Res. 2004, 10, 5094）。免疫抑制はＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２との局所的相互作用を阻害することにより回復され得、この効果は、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ２との相互作用が同様にブロックされる場合に加算される（Iwai et al. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 2002, 99:12293-7; Brown et al. J. Immunol. 2003, 170, 1257）。
【０００５】
Ｗｎｔ経路シグナル伝達が様々ながんで重要であり得ることを、いくつかの系統の証拠が示唆する。古典的Ｗｎｔ経路の成分（例えばＡＰＣおよびβ−カテニン）の変異は、いくつかの悪性腫瘍の発病において重要な役割を果たす可能性がある。ヒト転移性黒色腫サンプルの近年の分子解析から、ＷＮＴ／ｂ−カテニンシグナル伝達経路の活性化とＴ細胞遺伝子発現シグネチャの非存在との間の相互関係が明らかになった（Spranger et al. Nature 2015, 523, 231）。
【０００６】
開示の概要
がん治療における免疫応答の調節での免疫チェックポイント経路の重要性を考えると、免疫系を活性化するまたは免疫療法に対する抵抗性を克服する新規の併用療法を開発する必要性が存在する。
【０００７】
本発明は、本明細書で定義された医薬組み合わせを提供することにより、この必要性に対処する。
【０００８】
本開示の第１の態様は、がんの処置で使用するための、以下の式（ｉ）：
【０００９】
【化１】
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のＷｎｔ阻害剤（２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド［式（Ｉ）の化合物］またはその薬学的に許容される塩）と、（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩とを含む医薬組み合わせであって、（ｉ）を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜１５日目に毎日投与し、（ｉｉ）を１回のサイクル当たり少なくとも１回投与する、医薬組み合わせである。
【００１０】
本開示の別の態様は、がんの処置用の医薬品の製造のための、式（ｉ）のｗｎｔ阻害剤（２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩）の抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）または薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用であって、（ｉ）および（ｉｉ）を本明細書で定義されたように投与し、好ましくは、（ｉ）を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜１５日目に毎日投与し、（ｉｉ）を１回のサイクル当たり少なくとも１回投与する、使用を提供する。
【００１１】
本開示の更に別の態様は、がんの処置方法であって、必要とする患者に有効量の（ｉ）および（ｉｉ）を投与することを含み、（ｉ）を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜１５日目に毎日投与し、（ｉｉ）を１回のサイクル当たり少なくとも１回投与する、方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】１５日間の曝露後の腫瘍生検から単離したＲＮＡサンプルのＮａｎｏＳｔｒｉｎｇで測定した遺伝子発現を示す図である。
【図２】本分析での９対の対象に関するスクリーニング来診およびサマリー来診（summary visit）でのＣＤ３発現を示すグラフである。
【図３】本試験のために選択したＴ細胞シグネチャのうちの１つを示す図である。
【図４】処置後のＷｎｔ経路の調節を示すグラフである。
【図５】ＣＤ１０３＋樹状細胞の動員と関連するケモカインシグネチャを示すグラフである。
【図６】ＣＤ８＋Ｔ細胞の動員と関連するケモカインシグネチャを示すグラフである。
【図７Ａ】図７Ａおよび図７Ｂ：様々なタイプのがん細胞に関するＣａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｔｌａｓｔ（ＴＣＧＡ）でのＴ細胞とＷｎｔシグネチャとの間の相関性を示す図である。
【図７Ｂ】（上記の通り。）
【図８】臨床試験のデザインを示す図である。
【００１３】
開示の詳細な記述
近年では、古典的Ｗｎｔシグナル伝達の重要な活性化因子として分泌型糖タンパク質Ｒ−スポンジン１〜４（ＲＳＰＯ１〜４）が現れている。ＲＳＰＯは、ロイシンリッチ反復含有Ｇタンパク質共役型受容体（ＬＧＲ４〜６）ならびに膜貫通Ｅ３ユビキチンリガーゼＲＩＮＧフィンガー４３／亜鉛およびＲＩＮＧフィンガー３（ＲＮＦ４３／ＺＮＲＦ３）に結合し、三元複合体を形成する（Chen et al. Genes Dev; 2013, 27, 1345）。ＲＮＦ４３／ＺＮＲＦ３は、ＦｚおよびＬＲＰ６の代謝回転を促進することによりＷｎｔシグナル伝達に拮抗する（Hao et al. Nature 2012, 485 (7397), 195-200; Koo et al. Nature, 2012, 488 (7413), 665）。ＲＳＰＯの結合によりＲＮＦ４３／ＺＮＲＦ３のエンドサイトーシスが誘導され、それにより、膜結合ＦｚおよびＬＲＰ６のレベルが上昇し、Ｗｎｔリガンドに媒介されるシグナル伝達が増強される。標的細胞内でのシグナル伝達を活性化するためには、Ｗｎｔタンパク質が適宜分泌されて、細胞外空間を横切って運搬されなければならない。ポーキュパイン（porcupine）は、Ｗｎｔタンパク質にパルミトイル基を付加する膜結合型Ｏ−アシルトランスフェラーゼ（ＭＢＯＡＴ）である（Takada et al. Dev. Cell 2006, 11, 791）。古典的Ｗｎｔ経路の成分（例えばＡＰＣおよびβ−カテニン）の変異はいくつかの悪性腫瘍の発病で重要な役割を果たし、この遺伝的損傷は上流のＷｎｔ経路の調節に影響を及ぼす。Ｗｎｔ経路シグナル伝達の阻害は近年、副作用および用量制限毒性等のいくつかの欠点を伴った。そのような欠点は、Ｗｎｔ阻害剤の抗腫瘍効力を制限していた。これとは別に、Ｗｎｔ経路の活性化は免疫療法に対する抵抗性に関係しており、腫瘍が免疫検出を回避してチェックポイント阻害剤への臨床的利益が減少し得る機序を提供する（Spranger et al. Nature 2015, 523, 231）。例えば、本開示のＷｎｔ阻害剤、即ち２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドを試験し、ｐＬＲＰ６およびＡＸＩＮ２ｑＰＣＲのレベルを皮膚および腫瘍の生検で分析した。処置後の皮膚サンプルの生検では、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩によりｐＬＲＰ６およびＡＸＩＮ２のレベルが阻害されており、このことはＷｎｔ経路の阻害を示す。残念ながら、他の研究では、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩は、単剤として単独では細胞毒性遺伝子シグネチャの増加および腫瘍効力の欠如を示した。加えて、動物研究では、ラット研究において小柱の減少が示され、ラットモデルおよびイヌモデルにおいて消化（ＧＩ）管、骨および歯で毒性が示され、かつラットでは骨髄におよびイヌでは腎臓に影響を及ぼす副次的効果が示された。
【００１４】
Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）単独による患者の処置により腫瘍中での免疫シグネチャの変化がもたらされたこと、およびこの変化をもたらすには単剤Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）による８〜１５日間の処置で十分であったことを発見している。この発見により、Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）と抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩との断続的投与によって樹状細胞およびＴ細胞を増感させ得、そのためＰＤ−１阻害の効果を増強させるのに十分であり得、同時に慢性のＷｎｔ投与の特に骨への毒性の一部が軽減されるとの結論を下すに至った。
【００１５】
Ｗｎｔシグナル伝達経路は骨芽細胞（骨形成に関与する）の発生および生存に必要であり、破骨細胞（骨吸収に関与する）を負に調節する。これに関連して、Ｗｎｔ阻害剤は骨吸収を引き起こすことおよび骨をもろくすることが分かった。Ｗｎｔ阻害剤の臨床試験では一部の患者が骨折を経験しており、このことは骨芽細胞および破骨細胞へのＷｎｔ経路阻害の効果に関係している可能性がある。従って、より短い期間（例えば、最大４回の治療サイクルの１〜１５日目のみの毎日）にわたるＷｎｔ阻害剤（ｉ）（例えば２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩）の投与により、Ｗｎｔ阻害剤が骨への臨床的に関連する変化を引き起こすリスクを低減することができる。加えて、このＷｎｔ阻害剤の短い断続的投与は、活性樹状細胞シグネチャの上方調節をもたらすのに十分であった。このことは関連性があり、なぜならば、このサブタイプの樹状細胞は、抗腫瘍応答のためにＴ細胞を動員するのにおよび活性化させるのに重要だからである。がん処置でのＷｎｔシグナル伝達の阻害により、樹状細胞およびＴ細胞の活性化の阻害の放出を介してＰＤ−１阻害に対する応答速度が改善される。全体として、Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）と抗ＰＤ−１抗体分子との組み合わせ（Ｗｎｔ阻害剤を処置サイクルの初期（例えば８または１５日）でのみ投与する）は、両方の化合物の相互に協調した効果を示すことができ、かつ例えばＷｎｔ阻害剤（ｉ）単独の使用と比較して良好な効力および大幅に低下した安全プロファイルを提供することができる。
【００１６】
本開示によれば、Ｗｎｔ阻害剤は、細胞中でのＷｎｔシグナル伝達の活性を標的とする、低減するまたは阻害する化合物である。例えば、このＷｎｔ阻害剤はポーキュパイン阻害剤でもあり得る。このＷｎｔ阻害剤（ｉ）は、国際公開第２０１０／１０１８４９号パンフレットで開示された化合物である。抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的な塩と組み合わせるＷｎｔ阻害剤は、国際公開第２０１０／１０１８４９号パンフレット（化合物８６、実施例１０）で開示された以下の式（Ｉ）：
【００１７】
【化２】
2020506159.tif 000004
の２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩である。
【００１８】
従って、本開示は、がんの処置で使用するための、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩と、（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩とを含む医薬組み合わせであって、式（ｉ）の化合物（即ち、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド）またはその薬学的に許容される塩を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜１５日目に毎日投与し、本明細書で説明した抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）を１回のサイクル当たり少なくとも１回投与する、医薬組み合わせを提供する。このＷｎｔ阻害剤を４回のサイクルにわたり投与することができる。
【００１９】
本開示では、用語「医薬組み合わせ」は、固定されていない組み合わせを指す。用語「固定されていない組み合わせ」は、活性成分、例えば、式（ｉ）の化合物（即ち、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド）またはその薬学的に許容される塩および抗ＰＤ−１抗体分子または薬学的に許容される塩形態を両方とも、同時にまたは具体的な時間制限なしに逐次的に別々の実体として患者に投与し、そのような投与により、患者の体内でこれら２種の化合物の治療上有効なレベルが提供されることを意味する。
【００２０】
用語「組み合わせ」または「との組み合わせ」は、治療または治療薬が同時に投与されなければならないことおよび／または一緒に送達されるように製剤化されなければならない（ただし、この送達方法は本明細書で説明された範囲内である）ことを意味することを意図するものではない。この組み合わせ中の治療薬を、１種または複数種の他の追加の治療または治療薬と同時に、前にまたは後に投与することができる。治療薬または治療プロトコルを任意の順序で投与することができる。一般に、各薬剤を、その薬剤に関して決定した用量および／またはタイムスケジュールで投与する。この組み合わせで用いられる追加の治療薬を異なる組成物と一緒にまたは別々に投与することができることが更に認識されるだろう。一般に、組み合わせで用いられる追加の治療薬は、それらが個々に用いられるレベルを超えないレベルで用いられることが予想される。一部の実施形態では、組み合わせで用いられるレベルは、個々に用いられる場合と比べて低い。
【００２１】
本開示のＷｎｔ阻害剤と組み合わせて使用され得る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、本明細書で開示されたいずれかの抗ＰＤ−１抗体である。例えば、この抗ＰＤ−１抗体分子は、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）由来の少なくとも１つの抗原結合領域（例えば、可変領域またはその抗原結合断片）を含み得る；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１つの抗原結合領域（例えば、可変領域またはその抗原結合断片）を含み得る；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含み得る。この抗ＰＤ１抗体分子は好ましくは、ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ）、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ）、ピディリズマブ、ＰＤＲ−００１またはそれらの薬学的な塩から選択される。最も好ましくは、この抗ＰＤ−１抗体分子はＰＤＲ−００１またはその薬学的な塩である。ＰＤＲ−００１と指定された抗ＰＤ−１抗体分子はＰＣＴ／ＣＮ２０１６／０９９４９４で説明された。より具体的には、ＰＤＲ−００１阻害剤またはその薬学的に許容される塩は、表１で説明されたＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＥのＨＣＤＲ１アミノ酸配列、ＨＣＤＲ２アミノ酸配列およびＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、表１で説明されたＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＥのＬＣＤＲ１アミノ酸配列、ＬＣＤＲ２アミノ酸配列およびＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。
【００２２】
本開示の抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）由来の少なくとも１種、２種、３種もしくは４種の可変領域を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１種、２種、３種もしくは４種の可変領域を含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む。
【００２３】
本開示の抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）由来の少なくとも１種もしくは２種の重鎖可変領域を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１種もしくは２種の重鎖可変領域を含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む。
【００２４】
本開示の抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）由来の少なくとも１種もしくは２種の軽鎖可変領域を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１種もしくは２種の軽鎖可変領域を含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む。
【００２５】
本開示の抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えばＩｇＧ４（例えばヒトＩｇＧ４）の重鎖定常領域を含む。このヒトＩｇＧ４は、ＥＵナンバリングによる２２８位で置換（例えば、ＳｅｒからＰｒｏへの置換）を含む。この抗ＰＤ−１抗体分子は、ＩｇＧ１（例えばヒトＩｇＧ１）の重鎖定常領域を含む。このヒトＩｇＧ１は、ＥＵナンバリングによる２９７位で置換（例えば、ＡｓｎからＡｌａへの置換）を含む。このヒトＩｇＧ１はまた、ＥＵナンバリングによる２６５位での置換、ＥＵナンバリングによる３２９位での置換、または両方（例えば、２６５位でのＡｓｐからＡｌａへの置換および／または３２９位でのＰｒｏからＡｌａへの置換）も含むことができる。このヒトＩｇＧ１はまた、ＥＵナンバリングによる２３４位での置換、ＥＵナンバリングによる２３５位での置換、または両方（例えば、２３４位でのＬｅｕからＡｌａへの置換および／または２３５位でのＬｅｕからＡｌａへの置換）も含む。この重鎖定常領域は、表３に記載のアミノ配列またはこれと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％または更に高く同一）の配列を含む。
【００２６】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えばカッパ軽鎖定常領域（例えばヒトカッパ軽鎖定常領域）を含む。この軽鎖定常領域は、表３に記載のアミノ配列またはこれと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％または更に高く同一）の配列を含む。
【００２７】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩はまた、例えば、ＩｇＧ４（例えばヒトＩｇＧ４）の重鎖定常領域およびカッパ軽鎖定常領域（例えばヒトカッパ軽鎖定常領域）も含み、例えば、表３に記載のアミノ配列またはこれと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％または更に高く同一）の配列を含む重鎖定常領域および軽鎖定常領域も含む。このヒトＩｇＧ４は、ＥＵナンバリングによる２２８位で置換（例えばＳｅｒからＰｒｏへの置換）を含む。このＰＤ−１抗体分子は、ＩｇＧ１（例えばヒトＩｇＧ１）の重鎖定常領域およびカッパ軽鎖定常領域（例えばヒトカッパ軽鎖定常領域）を含み、例えば、表３に記載のアミノ配列またはこれと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％または更に高く同一）の配列を含む重鎖定常領域および軽鎖定常領域を含む。このヒトＩｇＧ１はまた、ＥＵナンバリングによる２９７位で置換（例えばＡｓｎからＡｌａへの置換）も含むことができる。このヒトＩｇＧ１は、ＥＵナンバリングによる２６５位での置換、ＥＵナンバリングによる３２９位での置換、または両方（例えば、２６５位でのＡｓｐからＡｌａへの置換および／または３２９位でのＰｒｏからＡｌａへの置換）を含む。このヒトＩｇＧ１は、ＥＵナンバリングによる２３４位での置換、ＥＵナンバリングによる２３５位での置換、または両方（例えば、２３４位でのＬｅｕからＡｌａへの置換および／または２３５位でのＬｅｕからＡｌａへの置換）を含む。
【００２８】
本開示の抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩はまた、例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのアミノ酸配列を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列を含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む、重鎖可変ドメインおよび定常ドメイン、軽鎖可変ドメインおよび定常領域、または両方も含む。この抗ＰＤ−１抗体分子は、表４に示す重鎖、軽鎖もしくは両方に由来のリーダー配列またはこれと実質的に同一の配列を任意選択で含む。
【００２９】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の重鎖可変領域に由来する少なくとも１種、２種もしくは３種の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１種、２種もしくは３種の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む。
【００３０】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、表１に示すまたは表１に示すヌクレオチド配列にコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域に由来する少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ（または合わせて全てのＣＤＲ）を含む。これらのＣＤＲのうちの１つもしくは複数（または合わせて全てのＣＤＲ）は、表１に示すまたは表１に示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたは更に多い変化（例えば、アミノ酸の置換または欠失）を有する。
【００３１】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の軽鎖可変領域に由来する少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲを含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲを含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む。
【００３２】
本抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、表１に示すまたは表１に示すヌクレオチド配列にコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域に由来する少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ（または合わせて全てのＣＤＲ）を含む。これらのＣＤＲのうちの１つもしくは複数（または合わせて全てのＣＤＲ）は、表１に示すまたは表１に示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたは更に多い変化（例えば、アミノ酸の置換または欠失）を有する。
【００３３】
本抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の軽鎖可変領域に由来する少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲを含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲを含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む。
【００３４】
本抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、表１に示すまたは表１に示すヌクレオチド配列にコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域に由来する少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ（または合わせて全てのＣＤＲ）を含む。これらのＣＤＲのうちの１つもしくは複数（または合わせて全てのＣＤＲ）は、表１に示すまたは表１に示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたは更に多い変化（例えば、アミノ酸の置換または欠失）を有する。ある特定の実施形態では、この抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は軽鎖ＣＤＲ中に置換を含み、例えば、軽鎖のＣＤＲ１中に、ＣＤＲ２中におよび／またはＣＤＲ３中に１つまたは複数の置換を含む。この抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、軽可変領域の１０２位で軽鎖ＣＤＲ３中に置換を含み、例えば、表１に係る軽可変領域（例えば、改変配列の配列番号５４または７０）の１０２位でシステインからチロシンへの置換またはシステインからセリン残基への置換を含む。
【００３５】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、表１に示すまたは表１に示すヌクレオチド配列にコードされるアミノ酸配列を含む重鎖および軽鎖の可変領域に由来する少なくとも１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種のＣＤＲ（または合わせて全てのＣＤＲ）を含む。一実施形態では、これらのＣＤＲのうちの１つもしくは複数（または合わせて全てのＣＤＲ）は、表１に示すまたは表１に示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたは更に多い変化（例えば、アミノ酸の置換または欠失）を有する。
【００３６】
本開示の抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）に由来する６種全てのＣＤＲを含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる６種全てのＣＤＲまたは密接に関係するＣＤＲ（例えば、同一であるＣＤＲ、または少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つまたは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有するＣＤＲ）を含む。この抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩はまた、本明細書で説明されたあらゆるＣＤＲを含むこともできる。この抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は軽鎖ＣＤＲ中に置換を含み、例えば、軽鎖のＣＤＲ１中に、ＣＤＲ２中におよび／またはＣＤＲ３中に１つまたは複数の置換を含む。本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、軽可変領域の１０２位で軽鎖ＣＤＲ３中に置換を含み、例えば、表１に係る軽可変領域の１０２位でシステインからチロシンへの置換またはシステインからセリン残基への置換を含む。
【００３７】
本開示の抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の重鎖可変領域に由来する、Ｋａｂａｔ他に従う少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ（例えば、表１に記載したＫａｂａｔ定義に従う少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ）を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる、Ｋａｂａｔ他に従う少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ（例えば、表１に記載したＫａｂａｔ定義に従う少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ）を含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む；または表１に示すＫａｂａｔ他に従う１種、２種もしくは３種のＣＤＲに対して少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つもしくは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有する配列を含む。
【００３８】
本発明の抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の軽鎖可変領域に由来する、Ｋａｂａｔ他に従う少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ（例えば、表１に記載したＫａｂａｔ定義に従う少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ）を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる、Ｋａｂａｔ他に従う少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ（例えば、表１に記載したＫａｂａｔ定義に従う少なくとも１種、２種もしくは３種のＣＤＲ）を含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む；または表１に示すＫａｂａｔ他に従う１種、２種もしくは３種のＣＤＲに対して少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つもしくは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有する配列を含む。
【００３９】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の重鎖および軽鎖の可変領域に由来する、Ｋａｂａｔ他に従う少なくとも１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種のＣＤＲ（例えば、表１に記載したＫａｂａｔ定義に従う少なくとも１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種のＣＤＲ）を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる、Ｋａｂａｔ他に従う少なくとも１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種のＣＤＲ（例えば、表１に記載したＫａｂａｔ定義に従う少なくとも１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種のＣＤＲ）を含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む；または表１に示すＫａｂａｔ他に従う１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種のＣＤＲに対して少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つもしくは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有する配列を含む。
【００４０】
本開示の抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の重鎖および軽鎖の可変領域に由来する、Ｋａｂａｔ他に従う６種全てのＣＤＲ（例えば、表１に記載したＫａｂａｔ定義に従う６種全てのＣＤＲ）を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる、Ｋａｂａｔ他に従う６種全てのＣＤＲ（例えば、表１に記載したＫａｂａｔ定義に従う６種全てのＣＤＲ）を含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む；または表１に示すＫａｂａｔ他に従う６種全てのＣＤＲに対して少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つもしくは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有する配列を含む。本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、本明細書で説明された任意のＣＤＲを含むことができる。
【００４１】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の重鎖可変領域に由来する少なくとも１種、２種もしくは３種のＣｈｏｔｈｉａ高頻度可変ループ（例えば、表１に記載したＣｈｏｔｈｉａ定義に従う少なくとも１種、２種もしくは３種の高頻度可変ループ）を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１種、２種もしくは３種のＣｈｏｔｈｉａ高頻度可変ループ（例えば、表１に記載したＣｈｏｔｈｉａ定義に従う少なくとも１種、２種もしくは３種の高頻度可変ループ）を含む；またはＰＤ−１に接触するそれらの高頻度可変ループに由来するアミノ酸を少なくとも含む；または表１に示すＣｈｏｔｈｉａ他に従う１種、２種もしくは３種の高頻度可変ループに対して少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つもしくは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有するアミノ酸を含む。
【００４２】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の軽鎖可変領域の少なくとも１種、２種もしくは３種のＣｈｏｔｈｉａ高頻度可変ループ（例えば、表１に記載したＣｈｏｔｈｉａ定義に従う少なくとも１種、２種もしくは３種の高頻度可変ループ）を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１種、２種もしくは３種のＣｈｏｔｈｉａ高頻度可変ループ（例えば、表１に記載したＣｈｏｔｈｉａ定義に従う少なくとも１種、２種もしくは３種の高頻度可変ループ）を含む；またはＰＤ−１に接触するそれらの高頻度可変ループに由来するアミノ酸を少なくとも含む；または表１に示すＣｈｏｔｈｉａ他に従う１種、２種もしくは３種の高頻度可変ループに対して少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つもしくは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有するアミノ酸を含む。
【００４３】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の重鎖および軽鎖の可変領域に由来する少なくとも１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種の高頻度可変ループ（例えば、表１に記載したＣｈｏｔｈｉａ定義に従う少なくとも１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種の高頻度可変ループ）を含む；または表１で説明されたもしくは表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種の高頻度可変ループ（例えば、表１に記載したＣｈｏｔｈｉａ定義に従う少なくとも１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種の高頻度可変ループ）を含む；またはＰＤ−１に接触するそれらの高頻度可変ループに由来するアミノ酸を少なくとも含む；または表１に示すＣｈｏｔｈｉａ他に従う１種、２種、３種、４種、５種もしくは６種の高頻度可変ループに対して少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つもしくは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有するアミノ酸を含む。
【００４４】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の６種全ての高頻度可変ループ（例えば、表１に記載したＣｈｏｔｈｉａ定義に従う６種全ての高頻度可変ループ）または密接に関係する高頻度可変ループ（例えば、同一である高頻度可変ループ、または少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つまたは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有する高頻度可変ループを含む；または表１に示すＣｈｏｔｈｉａ他に従う６種全ての高頻度可変ループに対して少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つもしくは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有する高頻度可変ループを含む。本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、本明細書で説明された任意の高頻度可変ループを含むことができる。
【００４５】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の対応する高頻度可変ループと同一のカノニカル構造を有する少なくとも１種、２種または３種の高頻度可変ループを含み、例えば、本明細書で説明された抗体の重鎖および／または軽鎖の可変ドメインの少なくともループ１および／またはループ２と同一のカノニカル構造を有する少なくとも１種、２種または３種の高頻度可変ループを含む。（例えば、高頻度可変ループのカノニカル構造の説明に関してChothia et al. J. Mol. Biol. 1992, 227, 799; Tomlinson et al. J. Mol. Biol. 1992, 227:776-798を参照されたい）。この構造を、これらの参考文献に記載されている表の精査により決定することができる。
【００４６】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、表１において本明細書で説明したＫａｂａｔ他およびＣｈｏｔｈｉａ他に従って定義されるＣＤＲまたは高頻度可変ループの組み合わせも含むことができる。
【００４７】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、Ｋａｂａｔ定義およびＣｈｏｔｈｉａ定義に従う、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢもしくはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の重鎖可変領域に由来する少なくとも１種、２種または３種のＣＤＲまたは高頻度可変ループ（例えば、表１に記載したＫａｂａｔ定義およびＣｈｏｔｈｉａ定義に従う少なくとも１種、２種または３種のＣＤＲまたは高頻度可変ループ）を含む；または表１中のヌクレオチド配列によりコードされる少なくとも１種、２種または３種のＣＤＲまたは高頻度可変ループを含む；または上述した配列のいずれかと実質的に同一（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％もしくは更に高く同一）の配列を含む；または表１に示すＫａｂａｔおよび／またはＣｈｏｔｈｉａに従う１種、２種または３種のＣＤＲまたは高頻度可変ループに対して少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つもしくは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有する配列を含む。
【００４８】
例えば、本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許与される塩は、例えば表１に示すように、Ｋａｂａｔ他に従うＶＨ  ＣＤＲ１もしくはＣｈｏｔｈｉａ他に従うＶＨ高頻度可変ループ１またはそれらの組み合わせを含むことができる。ＫａｂａｔとＶＨ  ＣＤＲ１のＣｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲとの組み合わせは、アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＴＹＷＭＨ（配列番号２２４）またはこのアミノ酸配列と実質的に同一の（例えば、少なくとも１つのアミノ酸改変を有するが最大でも２つ、３つまたは４つの改変（例えば、置換、欠失もしくは挿入、例えば保存的置換）を有する）アミノ酸配列を含む。例えば、この抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば表１に示すように、Ｋａｂａｔ他に従うＶＨ  ＣＤＲ２〜３とＫａｂａｔ他に従うＶＬ  ＣＤＲ１〜３とを更に含むことができる。従って、フレームワーク領域（ＦＷ）は、Ｋａｂａｔ他に従って定義されるＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ他に従って定義される高頻度可変ループとの組み合わせに基づいて定義される。例えば、抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば表１に示すように、Ｃｈｏｔｈｉａ他に従うＶＨ高頻度可変ループ１に基づいて定義されるＶＨ  ＦＷ１とＫａｂａｔ他に従うＶＨ  ＣＤＲ１〜２に基づいて定義されるＶＨ  ＦＷ２とを含むことができる。この抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、Ｋａｂａｔ他に従うＶＨ  ＣＤＲ２〜３に基づいて定義されるＶＨ  ＦＷ３〜４とＫａｂａｔ他に従うＶＬ  ＣＤＲ１〜３に基づいて定義されるＶＬ  ＦＷ１〜４とを更に含むことができる。
【００４９】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、Ｋａｂａｔ定義およびＣｈｏｔｈｉａ定義に従う、本明細書で説明された抗体（例えば、ＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢまたはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−Ｅのいずれかから選択される抗体）の軽鎖可変領域に由来する少なくとも１種、２種または３種のＣＤＲ（例えば、表１に記載したＫａｂａｔ定義およびＣｈｏｔｈｉａ定義に従う少なくとも１種、２種または３種のＣＤＲ）を含む。
【００５０】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は以下を含む：
（ａ）配列番号４のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、ならびに配列番号１３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）配列番号１から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ；
（ｃ）配列番号２２４のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号１３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ；または
（ｄ）配列番号２２４のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ、ならびに配列番号１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ。
【００５１】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、配列番号１、配列番号４または配列番号２２４から選択されるＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２または配列番号５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、配列番号１０または配列番号１３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１１または配列番号１４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３２または配列番号３３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。
【００５２】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと配列番号７０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインとを含むことができる。
【００５３】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、例えば、配列番号９１のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号７２のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含むことができる。
【００５４】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、表１に記載したＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢまたはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＥのＨＣＤＲ１アミノ酸配列、ＨＣＤＲ２アミノ酸配列およびＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、表１に記載したＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＢまたはＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＥのＬＣＤＲ１アミノ酸配列、ＬＣＤＲ２アミノ酸配列およびＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。
【００５５】
本開示に係る抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩は、表１に記載したＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＥのＨＣＤＲ１アミノ酸配列、ＨＣＤＲ２アミノ酸配列およびＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、表１に記載したＢＡＰ０４９−Ｃｌｏｎｅ−ＥのＬＣＤＲ１アミノ酸配列、ＬＣＤＲ２アミノ酸配列およびＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。
【００５６】
抗ＰＤ−１抗体分子または本開示の抗ＰＤ−１抗体分子は、それらの機能への実質的な影響を有しない追加の保存的なまたは非必須のアミノ酸置換を有し得ることが理解される。
【００５７】
用語「抗体分子」は、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むタンパク質（例えば免疫グロブリン鎖またはその断片）を指す。用語「抗体分子」は、例えば、モノクローナル抗体（免疫グロブリンＦｃ領域を有する完全長抗体を含む）を含む。抗体分子は、完全長抗体、または完全長免疫グロブリン鎖、または完全長抗体もしくは完全長免疫グロブリン鎖の抗原結合断片もしくは機能的断片を含む。抗体分子は多重特異的抗体分子でもあり得、例えば、抗体分子は複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、この複数のうちの第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列は第１のエピトープに対する結合特異性を有し、この複数のうちの第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列は第２のエピトープに対する結合特異性を有する。
【００５８】
用語「薬学的に許容される塩」は、例えば酸付加塩として形成され得、好ましくは有機酸または無機酸との酸付加塩として形成され得る。適切な無機酸は例えばハロゲン酸であり、例えば塩酸である。適切な有機酸は例えばカルボン酸またはスルホン酸であり、例えばフマル酸またはメタンスルホン酸である。単離または精製の目的のために、薬学的に許容されない塩（例えば、ピクリン酸塩または過塩素酸塩）を使用することも可能である。治療上での使用の場合には、薬学的に許容される塩または遊離化合物のみを用い（製剤の形態で適用可能）、従ってこれらが好ましい。本明細書における遊離化合物へのあらゆる言及は、適切におよび便宜上、対応する塩にも言及していると理解されるべきである。本阻害剤の塩は、本明細書で説明されているように、好ましくは薬学的に許容される塩であり、薬学的に許容される塩を形成する適切な対イオンは当分野で既知である。
【００５９】
用語「薬学的に許容される」は、合理的な利益／リスク比に見合った、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応もしくは他の問題または合併症なしのヒトおよび動物の組織と接触した使用に適している化合物、材料、組成物および／または剤形を指す。
【００６０】
用語「阻害」または「阻害剤」は、所与の分子（例えば抗ＰＤ−１抗体分子等の免疫チェックポイント阻害剤）のある特定のパラメータ（例えば活性）の減少を含む。例えば、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％または更に多い活性（例えばＰＤ−１活性またはＰＤ−Ｌ１活性）の阻害は本用語に含まれる。そのため、阻害は１００％である必要はない。
【００６１】
用語「がん」は、異常な細胞増殖の迅速で制御不能な増殖を特徴とする疾患を指す。がん細胞は局所的に広がり得る、または血流およびリンパ系を介して身体の他の部分へと広がり得る。様々ながんの例は以下であるがこれらに限定されない：白血病、前立腺がん、腎がん、肝がん、脳がん、リンパ腫、卵巣がん、肺がん、子宮頸がん、皮膚がん、乳がん、頭頸部扁平上皮癌（ＮＨＳＣＣ）、膵がん、消化器がん、大腸がん、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、肺の扁平上皮がん、食道の扁平上皮がん、子宮頸部の扁平上皮がん、または黒色腫。本開示によれば、上述した組み合わせによる処置に特に適している疾患条件は、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、膵がん、肺の扁平上皮がん、食道の扁平上皮がん、子宮頸部の扁平上皮がん、または黒色腫である。
【００６２】
用語「腫瘍」および「がん」は本明細書では互換的に使用され、例えば、両方の用語とも固形および液性（例えば、びまん性腫瘍または循環腫瘍）を包含する。一実施形態では、用語「がん」または「腫瘍」は、悪性のがんおよび腫瘍ならびに進行性のがんおよび腫瘍を含む。
【００６３】
用語「処置」は、例えば、疾患を治癒させることまたは疾患の退行もしくは疾患の悪化の遅延への効果を有することを目的とした、そのような処置を必要とする温血動物（具体的にはヒト）への、本明細書で説明されたＷｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と抗ＰＤ−１抗体分子またはその薬学的に許容される塩との組み合わせの治療的投与を含む。任意の疾患または障害の用語「処置する（treat）」、「処置する（treating）」または「処置」は、疾患または障害の発病または発症または悪化の予防または遅延を目的とした、この疾患または障害の改善（例えば、疾患またはその臨床症状のうちの少なくとも１つの発症の遅延または停止または低減）を指す。
【００６４】
Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を、各サイクルの１〜１５日目または各サイクルの１〜８日目に毎日投与することができる。Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドを最大４回のサイクルで投与することができる。Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）を４回のサイクルの間に投与することができる。このＷｎｔ阻害剤（ｉ）を最初のサイクルのみで投与することもできる。好ましくは、Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜１５日目の間に投与する。最も好ましくは、Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）を最大４回のサイクルにわたり各サイクルの１〜８日目に毎日投与する。本発明はまた、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を最初のサイクルの間にのみ投与することも提供する。本発明はまた、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を４回のサイクルの間にのみ投与することも提供する。本明細書で開示されたＷｎｔ阻害剤を１日に１回投与することができる、または２回の連続用量の間に１２時間の間隔で１日に２回投与することができる。組み合わせパートナー（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子を、臨床的に意義がある限り、より多くのサイクルにわたり投与し続けることができる。一実施形態では、（ｉｉ）抗ＰＤ−１抗体分子を、最大４回のサイクルにわたりまたは４回のサイクルにわたり投与する。
【００６５】
本明細書で開示された組み合わせパートナーを、あるサイクルの同日または異なる日に投与する。用語「サイクル」は、定期的に繰り返される、日数または月数で表される具体的な期間を指す。本明細書で開示されたサイクルは、より好ましくは日数で表される。例えば、サイクルは２８日、３０日、６０日、９０日であり得るがこれらに限定されない。最も好ましくは、本開示で言及される「サイクル」は２８日の長さである。そのようなサイクルを数回（例えば、２回、３回、４回、５回等）繰り返すことができ、各サイクルは同じ長さであり、臨床的に意義がある（即ち、腫瘍増殖が少なくとも低減されもしくは制御されまたは腫瘍が縮小しかつ有害事象が許容される）限り繰り返され得る。本組み合わせパートナーのうちの一方（例えばＷｎｔ阻害剤）を最大４回のサイクルにわたり投与し、他方の組み合わせパートナーをより多くのサイクルにわたり投与し続けることができる。本開示の（ｉ）の投与による処置を、最も好ましくは、最大４回のサイクル（特に４回のサイクル）にわたり繰り返す。本Ｗｎｔ阻害剤を最大４回のサイクルにわたり投与し得るが、本明細書では、一定の期間後に（例えば、この化合物が身体から完全に除去されておりかつ最大４回のサイクルにわたり投与されているＷｎｔ阻害剤があらゆるプラスの効果をもたらしていない場合に）、単独で、または抗ＰＤ−１抗体分子により引き起こされる効果の強化を介して、Ｗｎｔ阻害剤を最大４回のサイクルからなる別のならびにわたり再び投与し得ることが企図されている。最大４回のサイクル（１回のみのサイクルまたは４回のみのサイクルを含む）からなる最初の並びと、最大４回のサイクルからなる２番目またはより後の並びとの間の期間は、Ｗｎｔ経路の阻害によりもたらされる効果（例えば骨密度の減少）の任意の蓄積を予防するのに十分な長さでなければならない。
【００６６】
Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を、２．５ｍｇ／日、５ｍｇ／日、７．５ｍｇ／日、１０ｍｇ／日、２０ｍｇ／日、４０ｍｇ／日、８０ｍｇ／日、１２０ｍｇ／日または１８０ｍｇ／日の１日用量にて経口でまたは静脈内に（最も好ましくは経口で）投与することができる。好ましくは、この１日用量は２．５ｍｇ／日、５ｍｇ／日または１０ｍｇ／日である。最も好ましくは、この１日用量は１０ｍｇ／日である。
【００６７】
本開示によれば、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を、例えば不活性の希釈剤または担体と共に医薬組成物で経口投与することができる。
【００６８】
本開示に従って、ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ）、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ）、ピディリズマブ、ＰＤＲ−００１またはそれらの薬学的な塩から選択される抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩をがんの処置で使用し得、あるサイクルにおいて２週間毎にまたは４週間毎に投与する。最も好ましくは、本明細書で説明された抗ＰＤ−１抗体分子ＰＤＲ−００１（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩をがんの処置で使用する。最も好ましくは、ＰＤＲ−００１（ｉｉ）を４週間毎に投与する。ＰＤＲ−００１を、３００〜４００ｍｇ／日の用量で注射（例えば皮下注射または静脈内注射）により投与する。好ましくは、抗ＰＤ−１抗体分子ＰＤＲ−００１またはその薬学的に許容される塩を、３００〜４００ｍｇ／日の単回用量で静脈内投与する。最も好ましくは、抗ＰＤ−１抗体分子ＰＤＲ−００１（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩を４００ｍｇ／日の単回用量で投与する。最も好ましくは、抗ＰＤ−１抗体分子ＰＤＲ−００１またはその薬学的に許容される塩を４週間毎に４００ｍｇ／日の用量で投与する。この用量を、単回ボーラスまたはいくつかの分割した用量で投与することができる。
【００６９】
具体的には、投与スケジュールは、（最初のサイクルのみまたは４回のサイクルのみまたは最大４回のサイクルにわたる各サイクルの１〜１５日目または１〜８日目での）式（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩のＷｎｔ阻害剤の２．５ｍｇ／日、５ｍｇ／日または１０ｍｇ／日、ならびに２週間毎または４週間毎の抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩の３００ｍｇ／日〜４００ｍｇ／日など様々であり得る。例えば、本開示によれば、２．５ｍｇ／日の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を１〜８日目または１〜１５日目に投与し、抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩を４００ｍｇ／日の用量で４回のサイクルまたは最大４回のサイクルにわたり４週間毎に１回投与する。別の例は、本開示によれば、５ｍｇ／日の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を１〜８日または１〜１５日目に投与すること、および抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩を４００ｍｇ／日の用量で４回のサイクルまたは最大４回のサイクルにわたり４週間毎に１回投与することからなる。更に別の例は、本開示によれば、１０ｍｇ／日の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩の１〜８日または１〜１５日目の投与、および抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩を４００ｍｇ／日の用量で４回のサイクルまたは最大４回のサイクルにわたり４週間毎に１回投与することを提供する。
【００７０】
別の例は、本開示によれば、２．５ｍｇ／日の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩のサイクル１の間のみの投与、および抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩の４００ｍｇ／日の用量での４週間毎の投与を提供する。別の例は、本開示によれば、５ｍｇ／日の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩をサイクル１の間のみに投与すること、および抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩を４００ｍｇ／日の用量で４週間毎に投与することを提供する。更に別の例は、本開示によれば、１０ｍｇ／日の（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩のサイクル１の間のみの投与、および抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩の４００ｍｇ／日の用量での４週間毎の投与を提供する。
【００７１】
本抗体分子を当分野で既知の様々な方法により投与し得るが、多くの治療用途の場合には、投与の好ましい経路／様式は静脈内への注射または注入である。例えば、この抗体分子を２０ｍｇ超／分（例えば２０〜４０ｍｇ／分）の速度で静脈内注入により投与し得、概して約３００〜４００ｍｇ／日の用量に達するように４０ｍｇ以上／分の速度で静脈内注入により投与し得る。静脈内への注射または注入の場合、治療組成物は概して、無菌でありかつ製造および貯蔵の条件下にて安定でなければならない。この組成物を、溶液、マイクロエマルション、分散液、リポソーム、または高濃度の抗体に適した他の要求構造として製剤化することができる。無菌の注射用溶液を、必要な量の活性化合物（即ち抗体または抗体部分）を必要に応じて１種の成分または成分の組み合わせと共に適切な溶媒に組み込んだ後にろ過滅菌することにより調製することができる。一般に、基礎の分散媒体と必要な他の成分とを含む無菌ビヒクル中に活性化合物を組み込むことにより、分散液を調製する。無菌注射用溶液の調製のための無菌粉末の場合、好ましい調製方法は、既に無菌ろ過された溶液からの活性成分と任意の追加の所望の成分との粉末が得られる真空乾燥および凍結乾燥である。例えば、レシチン等のコーティングの使用により、分散液の場合には必要な粒径の維持により、および界面活性剤の使用により、溶液の適切な流動性を維持することができる。注射用組成物に吸収を遅延させる薬剤（例えばモノステアリン酸塩およびゼラチン）を含ませることにより、この組成物の持続的吸収をもたらすことができる。
【００７２】
投与の経路および／または様式は所望される結果に応じて変わることが理解されるだろう。例えば、活性化合物を、移植片、経皮貼布およびマイクロカプセル化送達システム等の制御放出製剤等の、この化合物を急速な放出から保護する担体と一緒に調製することができる。エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸等の生分解性で生体適合性のポリマーを使用することができる。そのような製剤の多くの調製方法に特許が付与されている、または当業者に広く知られている（例えば、Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978）。
【００７３】
同様に、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を、抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）または薬学的に許容される塩と組み合わせて、がんの処置用の医薬品の製造のために使用することができる。
【００７４】
更に、本開示はまた、がんの処置方法であって、必要とする患者に有効量の組み合わせパートナー（例えば、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩および抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩）を投与することを含む方法も提供する。
【００７５】
用語「患者」または「対象」は温血動物を指す。最も好ましい実施形態では、対象または患者はヒトである。対象または患者は、本明細書で開示されているように疾患または障害と診断されているかつ疾患または障害の処置を必要とするヒトであることができる。
【００７６】
がんの処置用の医薬品の製造に使用される場合、またはそれを必要とする患者のがんを処置する方法で使用される場合、（ｉ）および（ｉｉ）を、上記で説明した用量および投与スケジュールで使用することができる。
【００７７】
最も好ましくは、本組み合わせは、Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩と、抗ＰＤ−１抗体分子ＰＤＲ−００１（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩とを含む。両方の組み合わせパートナー（ｉ）および（ｉｉ）を、本明細書で説明された投与スケジュールに従って投与することができる。例えば、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を、最大４回のサイクルにわたり（例えば４回のサイクルにわたり）各サイクルのまたは最初のサイクルの間のみの１〜１５日目または１〜８日目に毎日投与することができる。ＰＤＲ−００１（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩を、１回のサイクル当たり少なくとも１回投与する。例えば、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩を、２．５ｍｇ／日、５ｍｇ／日、７．５ｍｇ／日、１０ｍｇ／日、２０ｍｇ／日、４０ｍｇ／日、８０ｍｇ／日、１２０ｍｇ／日、１８０ｍｇ／日の用量にて、この特有の組み合わせで投与する。好ましくは、この用量は２．５ｍｇ／日、５ｍｇ／日または１０ｍｇ／日である。最も好ましくは、この用量は１０ｍｇ／日である。ＰＤＲ−００１阻害剤（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩を３００〜４００ｍｇ／日の単回用量で投与し、最も好ましくは４００ｍｇ／日の単回用量で投与する。
【００７８】
更に、本開示はまた、がんの処置方法であって、必要とする患者に有効量の組み合わせパートナー（例えば、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩および抗ＰＤ−１抗体分子（ｉｉ）またはその薬学的に許容される塩）を投与することを含む方法も提供する。
【００７９】
組み合わせパートナー（ｉ）および（ｉｉ）は、本明細書で説明されたように、Ｗｎｔシグナル伝達経路の阻害によりもたらされる副作用（例えば骨密度の減少）を低下させつつ相乗的に活性であり得る。
【００８０】
本開示の組み合わせパートナーの用語「有効量」または「治療上有効な量」は、所望の治療結果を達成するのに必要な投与量でかつ期間にわたり有効な量を指す。この組み合わせパートナーの治療上有効な量は、個体の疾患状態、年齢、性別および体重等の因子に従って変動し得る。治療上有効な量はまた、治療上有益な結果が本明細書で説明された組み合わせのあらゆる毒性または有害な効果を上回る量でもある。好ましくは、「治療上有効な投与量」は、測定可能なパラメータ（例えば腫瘍増殖速度）を、未処置の対象と比較して少なくとも約２０％阻害し、より好ましくは少なくとも約４０％阻害し、更により好ましくは少なくとも約６０％阻害し、更により好ましくは少なくとも８０％阻害する。
【実施例】
【００８１】
実施例１：
ＮａｎｏＳｔｒｉｎｇは、最大約１０００種の遺伝子からなる選択されたパネルに関して遺伝子発現を測定する。これを、標的ＲＮＡ（リボ核酸）に直接ハイブリダイズする独特のバーコード型プローブを使用して実行する。次いで、このＲＮＡプローブハイブリッドをゲル上で泳動させ、バーコードを線形化する。次いでこのバーコードを計数し、次いで内部で開発したパイプラインを使用して正規化する。
【００８２】
腫瘍生検を、スクリーニング時におよび式（Ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドのＷｎｔ阻害剤による処置の８日〜２８日目に実施した。腫瘍をホルマリンで固定し、パラフィン（ＦＦＰＥ）に埋め込んだ、またはＲＮＡ  Ｌａｔｅｒ中に直接置いた。このサンプルを、薬力学（ＰＤ）マーカーＡＸＩＮ２のリアルタイムｑＰＣＲ分析用にＲＮＡが単離されているＧｅｎｏｐｔｉｘに移した。残留ＲＮＡを、遺伝子発現が（２０１６）ＮａｎｏＳｔｒｉｎｇ  ｐａｎ−ｃａｎｃｅｒ免疫プロファイリングパネルおよび免疫関連遺伝子のカスタム設計パネルを使用してプロファイルされるａｓｓａｙ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（ＡＲＬ）に移した。サンプルを特定の適応症内で正規化した（例えば、黒色腫サンプルまたは膵がんサンプルを別々に正規化した）以外はＮａｎｏＳｔｒｉｎｇが推奨する方法を使用して遺伝子発現を正規化し、ｇｅＮｏｒｍ安定性測定基準を使用してハウスキーピング遺伝子を選択した［ＰＭＩＤ：１２１８４８０８］。ある特定の遺伝子が両方のパネルで重複し、本発明者らはこの遺伝子を使用して、変異性および他の品質管理パラメータを評価した。ＮａｎｏＳｔｒｉｎｇ正規化手順により課せられたＱＣ測定基準ならびにヘマトキシリンおよびエオシン（Ｈ＆Ｅ）染色済の隣接するコア生検の手動の審査により、コホートを１１対のサンプルに絞り込んだ。更に２つのサンプルを、これらは主成分分析において異常値であることが分かったことから除去し、分析コホート用に９対のサンプルを残した。本明細書で説明された計数データを、１つを除いてＮａｎｏＳｔｒｉｎｇが推奨する方法に従って正規化し、即ち、サンプルを本明細書で説明された特定の適応症内で正規化し、約４０種のハウスキーピング遺伝子（これらの市販のがん免疫パネルに関してＮａｎｏＳｔｒｉｎｇウェブサイトで定義されている、２０１６年）を、複数のサンプルにわたる生物学的正規化に使用した。
【００８３】
腫瘍−免疫微小環境中での表現型変化に関するデータを探るために、これまでは遺伝シグネチャを使用した。活性化されたＷＮＴシグナル伝達を有する遺伝子操作マウスでは腫瘍微小環境中で樹状細胞およびＴ細胞が阻害されることが既に分かっているが、この効果は可逆的であるとは分かっていない。従って、本発明者らの目的は、Ｗｎｔ阻害剤で処置した患者からのサンプル中での遺伝子発現分析を使用して、腫瘍中でのＷＮＴシグナル伝達の近位の免疫細胞への阻害効果がＷＮＴ経路の薬理学的阻害により反転され得る程度を決定することであった。
【００８４】
式（Ｉ）の化合物が腫瘍免疫微小環境への影響を有するか否かを理解するために、本発明者らは、免疫遺伝子発現とＰＤマーカーＡＸＩＮ２との関係に注目した。このマーカーを使用することにより、本発明者らは、所与の腫瘍中でＷＮＴ経路が阻害されている程度を理解することができる。個々の遺伝子に注視する代わりに、本発明者らは、特定の経路または細胞機能を説明する遺伝子のセット（遺伝子シグネチャ）の幾何平均発現を使用した。ある遺伝子シグネチャは、ＣＤ８＋Ｔ−細胞の動員と関連するケモカインシグネチャであり［ＰＭＩＤ：１９２９３１９０］、他のシグネチャは、活性化されたＣＤ１０３＋樹状細胞と関連する［ＰＭＩＤ：２５９７０２４８］。ＡＸＩＮ２発現で観測される倍数変化から明らかなように、全ての対象がＷＮＴ経路の強い阻害を示すわけではなかった。興味深いことに、ＡＸＩＮ２阻害とケモカインシグネチャおよび樹状細胞シグネチャの発現の増加との関係は明白な直線関係であると思われる（以下を参照されたい）。本発明者らは、ＷＮＴ経路の薬理学系阻害により周囲の樹状細胞集団の随伴性の刺激がもたらされることを観測した。これらの樹状細胞は、刺激された場合には腫瘍へとＴ細胞を動員するように機能する。重要なことに、このことはＷｎｔ阻害剤への曝露の１５日後に観測し、このことは、式（Ｉ）の化合物の断続的投与をチェックポイント阻害剤と組み合わせて、これまでは免疫浸潤がなかった腫瘍と関連する抗腫瘍免疫応答を刺激することができることを支持した。
【００８５】
遺伝子シグネチャにより、本発明者らは、たとえサンプルサイズが小さくても、所与の適応症における多くのサンプルにわたる強い相関関係ならびに生物学的関連性を観測することができた。Ｗｎｔ阻害剤で処置された患者のサンプルではＴ細胞シグネチャが発現されており、これは、複数の患者および処置条件（例えば様々な用量レベル）にわたる（図２）。図２は、この分析での９対の対象に関するスクリーニング来診でのＣＤ３発現とサマリー来診で示されるＴ細胞レベルとの間の強い相関関係を示す。
【００８６】
本発明者らの研究で使用した遺伝子シグネチャのうちの１つは、図３に示すＴ細胞シグネチャであった。
【００８７】
式（ｉ）のＷｎｔ阻害剤によるＷｎｔ経路の調節を、そのようなＷｎｔ阻害剤（即ち、（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド）が腫瘍−免疫微小環境に影響を及ぼす方法と共に考慮した（図４）。ＡＸＩＮ２発現の変化（全く同一のＲＮＡサンプルを使用して測定した）を、Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドがＷＮＴ経路にどれくらい影響を及ぼすかの尺度として使用した。ＡＸＩＮ２発現の変化を、線形モデルにより免疫シグネチャ変化に適合させた。
【００８８】
図４の各グラフは以下の通りに示される：Ｙ軸は、Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドへの曝露後の所与の免疫シグネチャの変化を示し、Ｘ軸はＡＸＩＮ２の変化を示す。両方ともｌｏｇ２スケールである。正の値は、所与のシグネチャまたはＡＸＩＮ２での遺伝子の平均発現の増加を示す。第１に、Ｉ型インターフェロンシグネチャとＡＸＩＮ２阻害との間に弱い関係を観測した。第２に、インターフェロンガンマ（即ち、ＩＩ型インターフェロン）とＡＸＩＮ２阻害との間に関係を観測した。インターフェロンガンマは概して、ＣＤ８＋Ｔ細胞により発現される。最後に、ＡＸＩＮ２阻害と肥満細胞およびＴ調節（Ｔ−ｒｅｇ）のシグネチャとの間に中程度の逆相関を観測した。これらの細胞タイプは両方とも、腫瘍−免疫微小環境中では免疫抑制であることを観測している。興味深いことに、ＡＸＩＮ２阻害とケモカインシグネチャ（図６）および樹状細胞シグネチャ（図５）の発現の増加との間は明白な直線関係であると思われる。このことは、ＷＮＴ経路の薬理学系阻害により周囲の樹状細胞集団の随伴性の刺激がもたらされるという第１の観測である。
【００８９】
次いで、ＷＮＴシグナル伝達の増加に応じてＣＤ１０３＋樹状細胞中で調節されることが確認された（Spranger et al,. Nature 2015, 523, 231）特定の遺伝子のうちのいくつかを使用して、一種の特定のシグネチャを作成し、これをＡＩＸＩＮ２阻害に対してモデル化した（図５）。図５では、各点は１例の患者由来の一対のサンプルを表す。Ｘ軸上にプロットされているのは、スクリーニングから処置時までの腫瘍中のＡＸＩＮ２発現のｌｏｇ２倍数変化である。Ｙ軸上でプロットされているのは、スクリーニングから処置時までの腫瘍中の樹状細胞シグネチャの発現のｌｏｇ２倍数変化である。樹状シグネチャに含まれる遺伝子は、ＢＡＴＦ３、ＩＴＧＡＥ、ＩＲＦ８、ＣＣＲ５、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＸＣＬ１である。傾向線は、ロバスト線形モデルを使用してデータ点を回帰させることにより作成された線形推定値である。各点に隣接する数字は、処置の開始と処置時の生検との間の日数を表す。Ｓｐｒａｎｇｅｒ他（Nature 2015, 523, 231）によれば、Ｗｎｔ応答性である遺伝子は、ＢＡＴＦ３、ＩＴＧＡＥ、ＩＲＦ８、ＣＣＲ５、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＸＣＬ１である。ここで、他のシグネチャのうちのいくつかと同様に、ＡＸＩＮ２阻害とＣＤ１０３＋樹状細胞の活性化に関連する遺伝子の発現の増加との間に正の関係を観測した。このことは関連性があり、なぜならば、抗腫瘍応答のためのＴ細胞の認可および活性化にはこの樹状細胞のサブタイプが重要だからである。
【００９０】
これらのデータは、Ｗｎｔ阻害剤（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩が、免疫細胞浸潤を増加させかつＣＤ１０３＋樹状細胞の阻害を緩和することにより腫瘍−免疫微小環境に影響を及ぼしていることを示唆する。これらの細胞は、抗腫瘍免疫応答を駆動する細胞毒性Ｔ細胞の活性化および動員に重要である。このことは、樹状細胞へのＷｎｔ阻害剤の効果と共同するために、Ｔ細胞の阻害を緩和する抗ＰＤ−１抗体分子（ＰＤ−１阻害剤とも称される）を添加することを支持する。
【００９１】
腫瘍中へのＣＤ８＋Ｔ細胞の動員と強く相関することが発見されている別の遺伝子シグネチャも調べた。この遺伝子シグネチャは主にケモカインからなり、上述したＳｐｒａｎｇｅｒ他（Nature 2015, 523, 231）の樹状細胞シグネチャと一部が重複する。これらのケモカインは、用量依存的にＣＤ８＋Ｔ細胞を動員することが分かっている。ＣＤ８＋Ｔ細胞動員と相関するケモカインは、ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０である。本発明者らが、患者サンプル中でこのケモカインシグネチャ中の遺伝子の平均発現を測定してＡＸＩＮ２阻害と比較すると、本発明者らは、ＷＮＴ経路が阻害される程度と、この遺伝子シグネチャの発現との間に直線関係をまた観測した（図６）。図６において、各点は、１例の患者由来の一対のサンプルを表す。Ｘ軸上にプロットされているのは、スクリーニングから処置時までの腫瘍中のＡＸＩＮ２発現のｌｏｇ２倍数変化である。Ｙ軸上でプロットされているのは、スクリーニングから処置時までの腫瘍中のケモカインシグネチャの発現のｌｏｇ２倍数変化である。このケモカインシグネチャに含まれる遺伝子は、ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０である。傾向線は、ロバスト線形モデルを使用してデータ点を回帰させることにより作成された線形推定値である。各点に隣接する数字は、処置の開始と処置時の生検との間の日数を表す。図６に示すように、樹状細胞は、刺激された場合にはＴ細胞を腫瘍へと動員するように機能する。重要なことに、これは、ＷＮＴ阻害剤（ｉ）２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容される塩への曝露の約１５日後に観測され、このことは、ＷＮＴ阻害剤（ｉ）の断続的投与をチェックポイント阻害剤と組み合わせて、これまでは免疫浸潤がなかった腫瘍と関連する抗腫瘍免疫応答を刺激することができることを示唆する。
【００９２】
Ｔ細胞とＣａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｔｌａｓ（ＴＣＧＡ）でのＷｎｔ／ＣＴＮＮＢ１シグネチャとの間の逆相関は、がん細胞の起源の組織に関わりなく扁平上皮がん間で一貫していることが分かった（Sanger et al., 2015）。この逆相関はまた、ＴＮＢＣに最も密接に関連する遺伝子発現ベースのサブタイプである基底様乳がんでも強かった（Bertucci et al., 2008）。図７は、がん細胞のいくつかの様々なタイプでの相関を示す。Ｗｎｔ１シグネチャは、以下の６種のＣＴＮＮＢ１標的：ＥＦＮＢ３、ＡＰＣ２、ＨＮＦ１Ａ、ＴＣＦ１２およびＶＥＧＦＡからなる。
【００９３】
【表１−１】
2020506159.tif 000005
【００９４】
【表１−２】
2020506159.tif 000006
【００９５】
【表１−３】
2020506159.tif 000007
【００９６】
【表１−４】
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【００９７】
【表１−５】
2020506159.tif 000009
【００９８】
【表１−６】
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【００９９】
【表１−７】
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【０１００】
【表１−８】
2020506159.tif 000012
【０１０１】
【表２−１】
2020506159.tif 000013
【０１０２】
【表２−２】
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【０１０３】
【表２−３】
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【０１０４】
【表２−４】
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【０１０５】
【表３−１】
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【０１０６】
【表３−２】
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【０１０７】
【表４】
2020506159.tif 000019
【０１０８】
実施例２：臨床試験の概要
以下の臨床試験を使用して、実施例の１の理論的根拠、発見および結論を確認する。実施例１から予想される安全性および有効性も更に評価する。
【０１０９】
【表５−１】
2020506159.tif 000020
【０１１０】
【表５−２】
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【０１１１】
【表５−３】
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【０１１２】
【表５−４】
2020506159.tif 000023
【０１１３】
臨床試験デザインを図８に示す。
【０１１４】
実施例３：単独でのおよび免疫療法との組み合わせでの膵臓成長の抑制
以下の実験的研究を使用して、実施例１の論理的根拠、発見および結論を確認する。実施例１から予想される有効性も更に評価する。
【０１１５】
本研究は、単独または抗ＰＤ−１分子との組み合わせのいずれかでの式（Ｉ）の化合物の、ＰＤＸ−ＣＲＥ  ＫＲＡＳＧ１２ＤＰ５３Ｒ１７２Ｈ／＋マウスにおける膵臓腫瘍細胞の増殖を抑制する能力を調べる。
【０１１６】
処置群：
Ａ）ビヒクル
Ｂ）式（Ｉ）の化合物、５ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ、ＰＯ
Ｃ）式（Ｉ）の化合物、５ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ、ＰＯおよび抗ＰＤ１（１週間に２回のｉｐ）
Ｄ）式（Ｉ）の化合物、５ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ、ＰＯおよびアイソタイプコントロール（１週間に２回のｉｐ）
各処置群には約１０〜１５匹のマウスが存在する。
【０１１７】
処置期間：マウスが触診可能な腫瘍量を有する場合に処置を開始する。マウスを、膵がんの症状を示す場合に回収する（中央値１２０日）。処置動物およびコントロール動物のコホートは、腫瘍免疫および炎症性浸潤の分析のための短期処置（７日未満）後のサンプルである。
【０１１８】
超音波により腫瘍増殖をモニタリングする。膵がんの症状までの時間および転移拡散もモニタリングする。分化、アポトーシス、増殖および老化のマーカーに関するＨＣも同様にモニタリングする。
【０１１９】
読み取り：細胞核β−カテニン、ＢｒｄＵ取り込み、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ３＋（Ｔ−リンパ球）、Ｆ４／８−（マクロファージ）およびＮＩＭＰ（好中球）に関するＩＨＣ。コホート動物のために単離されたＲＮＡの形態の物質およびｄｔａ、ならびに短期介入後の免疫および炎症のシグネチャのためにＧＳＥＡと組み合わせたＲＮＡＳｅｑによる全トランスクリプトーム分析を決定する。
【０１２０】
実施例４：単独でのおよび免疫療法との組み合わせでの黒色腫増殖の抑制
以下の実験的研究を使用して、実施例１の論理的根拠、発見および結論を確認する。実施例１から予想される有効性も更に評価する。
【０１２１】
本研究は、単独または抗ＰＤ−１分子との組み合わせのいずれかでの式（Ｉ）の化合物の、ＴｙｒＣｒｅＥＲ  ＢＲａｆＶ６００Ｅ／＋Ｐｔｅｎｆｌ／＋およびＴｙｒＣｒｅＥＲ  ＢＲａｆＶ６００Ｅ／＋Ｐｔｅｎｆｌ／＋Ｃａｔｎｂｌｏｘ（ｅｘ３）／＋マウスにおける黒色腫腫瘍細胞の増殖を抑制する能力を調べる。
【０１２２】
処置群：
Ａ）ビヒクル
Ｂ）式（Ｉ）の化合物、５ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ、ＰＯ
Ｃ）式（Ｉ）の化合物、５ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ、ＰＯおよび抗ＰＤ１（１週間に２回のｉｐ）
Ｄ）式（Ｉ）の化合物、５ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ、ＰＯおよびアイソタイプコントロール（１週間に２回のｉｐ）
各処置群には約１０〜１５匹のマウスが存在する。
【０１２３】
処置期間：処置を、黒色腫（５ｍｍ直径）の確立時に開始し、腫瘍が終点（直径１５ｍｍ）に達するまで継続する。腫瘍増殖をノギス測定によりモニタリングする。
【０１２４】
読み取り：ノギス測定による腫瘍増殖、病理学的検査による腫瘍細胞型、β−カテニンに関するＩＨＣ、およびＷｎｔ標的遺伝子のｑＰＣＲ、ＩＨＣによる間質細胞／浸潤免疫細胞マーカー。
【０１２５】
実施例５：単独でのおよび免疫療法との組み合わせでの黒色腫増殖の抑制
以下の実験的研究を使用して、実施例１の論理的根拠、発見および結論を確認する。実施例１から予想される有効性も更に評価する。
【０１２６】
本研究は、単独または抗ＰＤ−１分子との組み合わせのいずれかでの式（Ｉ）の化合物の、マウス由来黒色腫が移植されたＣＤ−１ヌードマウスまたはＣ５７ＢＬ／＾マウス（ＴｙｒＣｒｅＥＲ  ＢＲａｆＶ６００Ｅ／＋Ｐｔｅｎｆｌ／＋およびＴｙｒＣｒｅＥＲ  ＢＲａｆＶ６００Ｅ／＋Ｐｔｅｎｆｌ／＋Ｃａｔｎｂｌｏｘ（ｅｘ３）／＋マウス）における黒色腫腫瘍細胞の増殖を抑制する能力を調べる。
【０１２７】
処置群：
Ａ）ビヒクル
Ｂ）式（Ｉ）の化合物、５ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ、ＰＯ
Ｃ）式（Ｉ）の化合物、５ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ、ＰＯおよび抗ＰＤ１（１週間に２回のｉｐ）
Ｄ）式（Ｉ）の化合物、５ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ、ＰＯおよびアイソタイプコントロール（１週間に２回のｉｐ）
各処置群には約１０〜１５匹のマウスが存在する。
【０１２８】
処置期間：処置を、黒色腫（５ｍｍ直径）の確立時に開始し、腫瘍が終点（直径１５ｍｍ）に達するまで継続する。腫瘍増殖をノギス測定によりモニタリングする。
【０１２９】
読み取り：ノギス測定による腫瘍増殖、病理学的検査による腫瘍細胞型、β−カテニンに関するＩＨＣ、およびＷｎｔ標的遺伝子のｑＰＣＲ、ＩＨＣによる間質細胞／浸潤免疫細胞マーカー。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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