(57)【要約】  本発明は、神経変性疾患の治療及び/又は予防のための、細菌組成物に基づく細菌療法であって、前記組成物が、ラクトバチルス・ファーメンタム種、ラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種、ラクトバチルス・プランタルム種及びラクトバチルス・サリバリウス種、及びその混合物に属する有効量の細菌微生物を含む、細菌療法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における少なくとも1つの神経変性疾患に関連する症状及び/又は障害の予防的及び/又は治癒的治療における使用のための、少なくとも1つの細菌株を含む混合物の有効量を含むか又はそれからなる組成物であって;前記混合物が:
-  ラクトバチルス・ファーメンタム種に属する少なくとも1つの細菌株;
-  ラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種に属する少なくとも1つの細菌株;
-  ラクトバチルス・プランタルム種に属する少なくとも1つの細菌株;及び
-  ラクトバチルス・サリバリウス種に属する少なくとも1つの細菌株
を含むか又はそれからなり、
前記神経変性疾患が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症(ALS)又はルーゲーリック病、老年認知症、ハンチントン病、進行性核上性麻痺、前頭側頭認知症及びレビー小体認知症から選択される、組成物。
【請求項２】
筋萎縮性側索硬化症(ALS)に関連する症状及び/又は障害の予防的及び/又は治癒的治療における使用のための、請求項1に記載の使用のための組成物。
【請求項３】
前記混合物が、ストレプトコッカス・サーモフィラス種に属する少なくとも1つの細菌株を更に含む、請求項1又は2に記載の使用のための組成物。
【請求項４】
前記混合物が、2007年3月20日にAnidral Srl(現在Probiotical SpA)によってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM19187を有するラクトバチルス・ファーメンタムLF10、2008年12月10日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22106を有するラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種LDD01、2001年10月16日にMofin SrlによってベルギーのBCCM LMG研究所に寄託された寄託番号LMG P-21021を有するラクトバチルス・プランタルムLP01、2009年7月23日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22776を有するラクトバチルス・サリバリウスLS03及び、任意選択により、2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29197を有するL.ファーメンタムLF18及び2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29198を有するL.ファーメンタムLF19の株、及びその混合物の有効量を含むか又はそれからなる、請求項1から3のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項５】
前記混合物が、2011年9月19日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM25246を有する細菌株ストレプトコッカス・サーモフィラスST10を含む、請求項1から4のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項６】
タラガムを含み、前記タラガムが好ましくはE471として識別される、請求項1から5のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項７】
経口的に投与される、請求項1から6のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項８】
前記混合物が、2007年3月20日にAnidral Srl(現在Probiotical SpA)によってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM19187を有するラクトバチルス・ファーメンタムLF10、2008年12月10日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22106を有するラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種LDD01、2001年10月16日にMofin SrlによってベルギーのBCCM LMG研究所に寄託された寄託番号LMG P-21021を有するラクトバチルス・プランタルムLP01及び2009年7月23日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22776を有するラクトバチルス・サリバリウスLS03の菌株を、1:1:1:1の質量比で、及び、任意選択により、2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29197を有するL.ファーメンタムLF18及び2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29198を有するL.ファーメンタムLF19及びその混合物を含むか又はそれからなる、請求項1から7のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項９】
2011年9月19日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM25246を有する細菌株ストレプトコッカス・サーモフィラスST10及びタラガムを更に含み、前記タラガムが、好ましくはE471として識別される、請求項1から8のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、神経変性疾患の治療及び/又は予防のための、細菌組成物に基づく細菌療法であって、前記組成物が、ラクトバチルス・ファーメンタム種(Lactobacillus fermentum)、ラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種(Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii)、ラクトバチルス・プランタルム種(Lactobacillus plantarum)及びラクトバチルス・サリバリウス種(Lactobacillus salivarius)、及びその混合物に属する有効量の細菌微生物を含む、細菌療法に関する。
【背景技術】
【０００２】
筋萎縮性側索硬化症(ALS)は、運動ニューロンとそれらの筋肉との接続に影響し、治療法が存在しない、症状の発症後の2〜5年内に呼吸不全により死に至る、特に致命的な神経変性疾患である。ALSにおけるニューロンの欠損は、他の変性疾患に生じるものよりもはるかに急速なプロセスである(Kanazawa I. 「How do neurons die in neurodegenerative diseases?」 Trends Mol Med. 2001; 7(8):339〜44頁)。細胞死に至る病原性の機構についての知識が改善しているにもかかわらず、ALSは神経科学上の大きな謎の1つを継続して代表している。ALSの病因は不明であり、病因は依然として不透明である。90%のケースでは、散発性であるが、10%のケースでは、遺伝要因があり、疾患に関連する約30の遺伝子がこれまでに同定されている。ALSは、異なる素因となる遺伝子が、疾患の徴候における環境因子と相互作用する、多因子性疾患であると考えられている。
【０００３】
最近のデータにより、栄養状態が、ALSを有する患者の生存について非依存性の予後因子を表すことが実証された(Gallo V.ら「Prediagnostic body fat and risk of death from amyotrophic lateral sclerosis: the EPIC cohort」 Neurology. 2013、80(9):829〜38頁)。疾患の経過の間に又は一部のケースでは、その発症前でさえも、異化亢進性状態を生じ、その起源は不確かである。筋萎縮を導くことによって、疾患は、典型的には除脂肪体重の喪失を発生し、除脂肪体重が、エネルギー消費又はREE(静止エネルギー消費)を決定する主な要因であるので、異化亢進の存在は逆説的である。したがって、文献は、これらの患者が、本質的には異化亢進性ではなく、呼吸不全などの疾患要因の進行の間に、補助的な呼吸筋の働きの増加に伴い、残りの筋肉の働きに代償性の増加を伴う進行性の運動能力障害又は追加的に感染による慢性炎症状態(サイレントなものを含む)が、カロリー消費の増加に寄与し得ることを示唆している。しかしながら、最近の研究は、ALS患者のサンプルにおいて代謝亢進と呼吸機能との間の相関関係が存在しないことを実証することによって、これらのデータを問うているが、異化亢進性状態は、年齢、性別及び除脂肪体重のパーセンテージと相関している。したがって、機能的な状況に対してではなく、疾患自体に関連する他の因子が、活動を開始する可能性があるとの仮説が立てられている。
【０００４】
ALSの発生及び進化におけるミクログリア活性化及び反応性アストロサイトによる神経炎症の役割が、多数の研究で実証された(Boillee Sら「ALS: a disease of motor neurons and their not neuronal neighbours」 Neuron 2006; 52:39〜59頁;Boillee Sら「Onset and progression in inherited ALS determined by motor neurons and microglia」 Science 2006、312:1389〜1392頁)。
【０００５】
クロストリジウム属の一部の株は、運動系に選択的に影響する神経毒を産生することができる。最もよく知られている株は、ボツリズム又はテタヌスを引き起こすものであるが、他の株、例えば、クロストリジウム・バラティ(Clostridium baratii)及びクロストリジウム・ブチリカム(Clostridium butyricum)は、神経毒を産生し、その神経系における作用は完全に明らかになっていない。
【０００６】
S. Wuら、「Leaky intestine and impaired microbiome in an amyotrophic lateral sclerosis mouse model」 Physiol Rep、3(4)、2015、e12356によって実施された研究は、ALSの進行における腸管上皮及びマイクロバイオームの潜在的な役割を示唆すると予想される。
【０００７】
Y. Zhangら、「Target Intestinal Microbiota to Alleviate Disease Progression in Amyotrophic Lateral Sclerosis」 Clinical Therapeutics、Vol. 39、No. 2、2017によって実施された研究では、ALSによって影響されたマウスを、酪酸ナトリウムで治療した。この研究から、酪酸塩での治療が、腸の微生物叢のホメオスタシスを回復するように見えることが示唆される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Kanazawa I. 「How do neurons die in neurodegenerative diseases?」 Trends Mol Med. 2001; 7(8):339〜44頁
【非特許文献２】Gallo V.ら「Prediagnostic body fat and risk of death from amyotrophic lateral sclerosis: the EPIC cohort」 Neurology. 2013、80(9):829〜38頁
【非特許文献３】Boillee Sら「ALS: a disease of motor neurons and their not neuronal neighbours」 Neuron 2006; 52:39〜59頁
【非特許文献４】Boillee Sら「Onset and progression in inherited ALS determined by motor neurons and microglia」 Science 2006、312:1389〜1392頁
【非特許文献５】S. Wuら、「Leaky intestine and impaired microbiome in an amyotrophic lateral sclerosis mouse model」 Physiol Rep、3(4)、2015、e12356
【非特許文献６】Y. Zhangら、「Target Intestinal Microbiota to Alleviate Disease Progression in Amyotrophic Lateral Sclerosis」 Clinical Therapeutics、Vol. 39、No. 2、2017
【非特許文献７】Cedarbaum、J.M.ら、Journal of the Neurological Sciences 1999、169、13〜21頁
【非特許文献８】Quanjer、Philip H.ら、GLI-2012、1〜16頁
【非特許文献９】Franks A.H.ら、「Variations of bacterial populations in human feces measured by fluorescent in situ hybridization with group-specific 16S rRNA-targeted oligonucleotide probes」 Appl Environ Microbiol 1998 64(9):3336〜45頁
【非特許文献１０】Harmsen H.J.M. 「A 16S rRNA-targeted probe for detection of lactobacilli and enterococci in faecal samples by fluorescent in situ hybridization」 Microb Ecol Health Dis. 1999、11:3〜12頁
【非特許文献１１】Collins M.D.ら「The phylogeny of the genus Clostridium: proposal of five new genera and eleven new species combinations」 Int J Syst Bacteriol. 1994; 44(4):812〜26頁
【非特許文献１２】4.Bloedt K.ら「Evaluation of new selective culture media and a rapid fluorescence in situ hybridization assay for identification of Clostridium difficile from stool samples」 J Med Microbiol 2009; 58(Pt 7):874〜7頁
【非特許文献１３】Langendijk P.S.ら「Quantitative fluorescence in situ hybridization of Bifidobacterium spp. with genus-specific 16S rRNA-targeted probes and its application in fecal samples」 Appl Environ Microbiol 1995; 61(8):3069〜75頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の1つの課題は、投与が容易であり、容易に認容でき、すなわち実質的に重大な副作用はなく、天然由来のものである、ALSなどの神経変性疾患の治療における使用のための組成物に関する。
【００１０】
本発明の別の課題は、投与が容易であり、容易に認容でき、すなわち実質的に重大な副作用がない、ALSなどの神経変性疾患の治療における使用のための第1及び第2の組成物の投与を提供する方法又は治療レジメンに関する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の主題は、少なくとも1つの変性疾患の治療における使用のための、添付の独立請求項で定義した通りの特徴を有する組成物及び方法(又は治療レジメン)である。
【００１２】
本発明の好ましい実施形態は、以下の詳細な説明から明らかになり、添付の特許請求の範囲で特許請求される。
【００１３】
本発明の文脈では、用語「組成物」は、医薬組成物、又は医療機器用の組成物、又は食品サプリメント用の組成物、又は食品組成物に関する。
【００１４】
広範な実験法に従って、本発明者らは、細菌株を含有する、神経変性疾患、例えば、ALSの治療的及び/又は予防的治療のために有用な組成物を開発した。
【００１５】
本発明の範囲内で、神経変性疾患の「治療」は、対象の健康状態を改善すること、現存の状態を維持すること及び/又は前記健康状態の急速な悪化を予防すること(悪化を減速すること)を目的とした治療を意味する。
【００１６】
本発明の範囲内で、神経変性疾患の「予防」は、対象におけるそのような疾患の発症に加えて、既存の病理学的な状態又は障害の合併症又は影響としての発症も回避することを目的とした治療を意味する。
【００１７】
「神経変性疾患」は、ニューロンに影響する細胞死又は重篤な変性の慢性で、選択的なプロセスによって特徴付けられる中枢又は末梢神経系の病状を意味する。神経変性疾患の非限定的な例は、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症(ALS)又はルーゲーリック病、老年認知症、ハンチントン病、進行性核上性麻痺、前頭側頭認知症及びレビー小体認知症である。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】ALS-FRS-Rスケールで測定された疾患能力障害の経過における本発明の組成物(対プラセボ)での治療の効果を示す図である。ALS-FRS-R(IR 25%)パラメータは、患者の健康の状態を定義するために、臨床医によって使用されるパラメータである。
【図２】努力肺活量(FVC)の観点から疾患の経過における本発明の組成物(対プラセボ)での治療の効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
一態様では、本発明は、対象における少なくとも1つの神経変性疾患に関連する症状及び/又は障害の予防的及び/又は治癒的治療における使用のための、少なくとも1つの細菌株を含むか又はそれからなる有効量の混合物を含む組成物であって、前記使用が前記対象に対する組成物の投与を含み、前記対象が好ましくはALSによって影響される、組成物を提供する。
【００２０】
本発明による使用のための組成物では、前記少なくとも1つの細菌株は、好ましくは、ラクトバチルス属又は連鎖球菌属に属する、より好ましくは、ストレプトコッカス・サーモフィラス種(Streptococcus thermophilus)、ラクトバチルス・ファーメンタム種、ラクトバチルス・デルブリュック種、ラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種、ラクトバチルス・プランタルム種及びラクトバチルス・サリバリウス種又はその混合物から選択される。
【００２１】
更により好ましい実施形態では、前記少なくとも1つの細菌株は、(I)2011年9月19日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM25246を有するストレプトコッカス・サーモフィラスST10、(II)2007年3月20日にAnidral Srl(現在Probiotical SpA)によってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM19187を有するラクトバチルス・ファーメンタムLF10、(III)2008年12月10日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22106を有するラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種LDD01、(IV)2001年10月16日にMofin SrlによってベルギーのBCCM LMG研究所に寄託された寄託番号LMG P-21021を有するラクトバチルス・プランタルムLP01、(V)2009年7月23日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22776を有するラクトバチルス・サリバリウスLS03及び、任意選択により、(VI)2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29197を有するL.ファーメンタムLF18及び、(VII)2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29198を有するL.ファーメンタムLF19及びその混合物を含むか又はそれからなる群から選択される。
【００２２】
全て細菌株を、ブタペスト条約の規約に従って寄託した。
【００２３】
前述の細菌株(I)から(IV)のセットは、炎症性サイトカインの分泌を妨害する及び腸関連リンパ組織の細胞による調節性及び抗炎症性サイトカインの分泌を誘導する、有意な抗炎症活性を発揮することができる。更にまた、そのような微生物は、ALSの典型的な症状の発生、悪化及び/又は持続に潜在的に関わる、カンジダ属の酵母と細菌群の両方に対する障壁作用を実施する(クロストリジウム属及びいくつかの大腸菌群が特に参照される)。前述の細菌株のセットは、カンジダ属の酵母に対する阻害作用と組み合わされた抗炎症活性を発揮する。この理由のために、前記セットの細菌株は、粘液付着性ゲル化複合体(muco-adhering gelling complex)によって確実にされる生理的な腸障壁の回復を直接的に補助することができ、したがって、腸関連リンパ組織(GALT)及び、より一般的には、全身レベルで、免疫細胞の慢性過敏反応性を維持する、毒素、炎症誘発性分子及びアレルゲンの吸収を妨害する。
【００２４】
詳細には、2007年3月20日にAnidral Srl(現在Probiotical SpA)によってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM19187を有する細菌株L.ファーメンタムLF10は、とりわけ、カンジダ属(C.アルビカンス(C.albicans)、C.グラブラータ(C.glabrata)、C.パラシローシス(C.parapsilosis)、C.トロピカリス(C.tropicalis)及びC.クルセイ(C.krusei)の五種が特に参照される)に属する酵母を妨害する、特定の作用(及び任意選択で、存在する場合、2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29197を有するL.ファーメンタムLF18及び2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29198を有するL.ファーメンタムLF19との相乗作用)を発揮する。更にまた、細菌株L.ファーメンタムLF10は、GALTにより調節性及び抗炎症性サイトカイン(例えば、IL-10)の分泌を誘導する。
【００２５】
2008年12月10日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22106を有する細菌株L.デルブリュック種デルブリュック亜種LDD01は、GALTによる調節性及び抗炎症性サイトカインの分泌を誘導する強い抗炎症活性及び様々な属の腸の細菌、とりわけ、全ての大腸菌群(大腸菌(E.coli)及び肺炎桿菌(Klebsiella pneumoniae))及びクロストリジウム・ディフィシレ(Clostridium difficile)に対する拮抗作用を発揮する。
【００２６】
2001年10月16日にMofin SrlによってベルギーのBCCM LMG研究所に寄託された寄託番号LMG P-21021を有する細菌株L.プランタルムLP01は、中でもIL-10を産生するので、有意な抗炎症活性を発揮し、大腸菌群、特に大腸菌に対する阻害活性を補助する。
【００２７】
2008年12月10日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22106を有する細菌株L.デルブリュック種デルブリュック亜種LDD01及び2001年10月16日にMofin SrlによってベルギーのBCCM LMG研究所に寄託された寄託番号LMG P-21021を有する細菌株L.プランタルムLP01は、腸内のバランス失調に対して強い作用を一緒に発揮する。
【００２８】
最終的に、2009年7月23日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22776を有する細菌株L.サリバリウスLS03は、重要な免疫調節活性を発揮する。
【００２９】
好ましい実施形態では、本発明による組成物による治療の方法は、1日に1、2又は3用量に分けられる、1用量当たり1株当たり生存可能な細胞、1×109から1×1012個、好ましくは、1×1010から1×1011個から構成される1日投与量を含む。
【００３０】
一実施形態では、本発明の前記組成物に含有される、混合物は、5つの細菌株(I)から(V)を質量比1:1:1:1:1で含むか又はそれからなる。
【００３１】
一実施形態では、対象に対する組成物の投与は、経口で、例えば丸剤、錠剤の形態で行われ、これは、再構成されるか又は口内で溶解する被覆、顆粒又は粉末であってもよく、例えば、細菌株を含有する小包又はスティックパック、溶液、懸濁液、シロップ、食品又は当業者に公知の任意の他の形態であってもよい。
【００３２】
本発明による治療が2つ以上の細菌株の投与を含む場合、本発明による前記投与が、同時に、例えば、単一の製剤(全ての細菌株を一緒に)、又は急速に連続して、例えば、2又はそれ以上の製剤(任意の順序で対象によって摂取される)、2つの別個の組成物中で時間間隔(例えば、1から10分間内)を接近させてあけて連続して、起こりうることが理解されているものとする。
【００３３】
本発明による使用のための組成物は、1つ又は複数の細菌株に加えて、一般に使用される及び当業者に公知のもののうちの、少なくとも1つの不活性な成分、例えば、少なくとも1つの賦形剤を含みうる。
【００３４】
「不活性成分」は、完成した製品に見出されるが、活性成分ではなく、それにもかかわらず、その安定性、放出又は他の特性を修飾することができる、薬学的、食品又は栄養補助食品の形態の生産に関して補助的な任意の物質又は物質の組合せを意味する。薬学、栄養補助食品又は食品産業の製剤の当業者に公知である、前記不活性成分の非限定的な例は、賦形剤、例えば、希釈剤、吸収剤、滑沢剤、着色剤、界面活性剤、抗酸化剤、甘味剤、結合剤、脱凝集剤等である。
【００３５】
一実施形態では、本発明による使用のための組成物は、1つ又は複数の細菌株に加えて、少なくとも1つの天然又は合成起源の更なる化合物を含む。前記化合物の非限定的な例は、ビタミン、抗酸化剤、又は植物性物質及び調製物(植物性)である。
【００３６】
好ましい実施形態では、本発明による使用のための組成物は、前記少なくとも1つの細菌株に加えて、少なくとも1つの植物性ガム及び/又は動物及び/又は植物性ゼラチンを含有する。
【００３７】
ガムは、粉末又はフレークの形態で脱水又は凍結乾燥又は乾燥させた材料であり、これが水と接触させて水(水性ゲル)又はガムゼラチン中でガムゲルを産生する。或いは、調製済みのゲル又はゼラチンも有効に使用することができる。
【００３８】
一実施形態では、植物性ガム及び/又は動物及び/又は植物性ゼラチンは、アロエ属、例えば、アロエ・ベラ(Aloe vera)(又はアロエ・バルバデンシス・ミラー(Aloe barbadensis Miller)、アロエ科の植物)又はアロエ・アルボレセンス(Aloe arborescens)、アルギナート、キシログルカン(又はキシロゲル)、カラゲナン、ペクチン及び寒天を含むか又はそれからなる群から選択される。
【００３９】
一実施形態では、本発明による組成物は、ガラクトマンナン、例えば、タラガム、グアールガム又は食品、栄養補助食品及び/又は薬学的使用に適切な他のガムに基づくガムを含む;本発明による組成物は、好ましくは、E471と表示される、タラガム(例えば、カエサルピニアスピノサ(Caesalpinia spinosa)の地下種子から得られる)を、特定の細菌株(I)から(VI)と連関させて含む。
【００４０】
本発明の一実施形態では、神経変性疾患(例えば、ALS)によって影響される対象の治療は、上記のような組成物(本発明の前記第1の組成物)の投与に加えて、(i)オウシュウヨモギ(Artemisia vulgaris)、(ii)キャラウェイ(Carum carvi)、(iii)ラベンダー・アングスティフォリア(Lavender angustifolia)、別名ラワンデュラ・オフィキナリス(Lavandula officinalis)、(iv)セイヨウハッカ(Mentha piperita)、及びその混合物を含むか又はそれからなる群から選択される、少なくとも1つの物質を含む第2の組成物、例えば、食品サプリメント(本発明の前記第2の組成物)の投与を含む。
【００４１】
前記サプリメント(第2の組成物)は、好ましくは、全体的に天然の様式で、ALSの典型的な症状の発症、持続及び/又は悪化に潜在的に関わる微生物の群及び属の腸濃度を低減するように、特異的に選択される、植物起源の少なくとも4つの活性成分を含有する。前記第2の組成物は、好ましくは、神経変性疾患によって影響された対象に、1から4週、好ましくは、2から3週の範囲の初期の連続期間投与される。引き続いて又は同時に、本発明の組成物(本発明の前記第1の組成物)はまた、同じ対象に、4から16週、好ましくは、12週又は3か月の範囲の連続期間投与される。この様式では、前記第2の組成物(サプリメント)の3連続月の治療で投与される本発明の組成物の有効性を増強することも可能である。
【００４２】
4つの植物調製物のセットは、好ましくは、1:1:1:1の質量比で、選択的な抗菌性、抗真菌性及び抗寄生虫性活性を発揮する。選択された油のうち、ラベンダー及びクミン(キャラウェイ(Carum carvi))は、殺菌活性を有する最も重要な植物複合体(phytocomplex)を代表する。特に、キャラウェイ(Carum carvi)(クミン)は、腸内細菌科(様々な種の赤痢菌属、サルモネラ属及びエルシニア属が特に参照される)に対する、おそらく、そのテルペン成分の効力によって高度に活性である(Moon、2006)。2種の油も、特に抗発酵性及び駆風性特性を有する。ラベンダーも、高いパーセンテージのポリフェノールの存在によって、クロストリジウム科、カンピロバクター属の様々な種及び著しい腐敗作用を有するいくつかの腐生微生物、例えば、エンテロバクター属種及び腸球菌属種に対して良好な作用を有する。真菌界に関して、腸の免疫活性化に関与する主な株のうち、ムコール属種、コウジカビ、アオカビ及び上記全てのカンジダ属に言及することができる。本発明の食品サプリメント(本発明の前記第2の組成物)に存在する油は、真菌における、その直接的な抗生物質作用のため、高度に有効であると考えられるラベンダー油を含む。他の重要な精油は、大多数のコウジカビ及びアオカビに対して著しい作用を有するミント油である。更にまた、ミントは、副交感神経作用特性を有する:自律的な神経系の結果として生じる刺激が、消化能力を非常に改善する(D’Auria、2005)。寄生虫分野(原生動物及び蠕虫類の両方の観点から)で最も重要な作用を提供する精油は、オウシュウヨモギである。
【００４３】
上記特定の4つの活性成分(i)から(iv)の連関は、抗菌性、抗真菌性及び抗寄生虫性活性の連携を発揮することができる。
【００４４】
前記サプリメント(本発明の前記第2の組成物)は、液体形態、例えば、5mlから50ml、好ましくは、10mlから25mlから構成される容量を有する溶液である。前記第2の組成物は、以下の濃度の全ての4つの上に言及された活性成分のストック溶液を含む:(i)オウシュウヨモギ、200mg/50mlから600mg/50ml、例えば、400mg/ml;(ii)クミン、150mg/50mlから550mg/50ml、例えば、350mg/50ml;(iii)ラベンダー・アングスティフォリア、別名ラワンデュラ・オフィキナリス、450mg/50mlから850mg/50ml、例えば、650mg/50ml及び(iv)セイヨウハッカ、400mg/50mlから800mg/50ml、例えば、600mg/50ml;全ての4つの活性成分(i)から(iv)は、好ましくは、1:1:1:1の比で存在する。
【００４５】
本発明の主題は、神経変性疾患の治療及び/又は予防のための有効量で、少なくとも1つの細菌株を含むか又はそれからなる混合物を含む組成物に関する。
【００４６】
本発明の主題は、神経変性疾患の治療及び/又は予防のための前記第1及び第2の組成物の投与を含むか又はそれからなる方法(又は治療レジメン)に更に関する。
【００４７】
本発明の組成物では、前記少なくとも1つの細菌株は、好ましくは、(I)2011年9月19日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM25246を有するストレプトコッカス・サーモフィラスST10、(II)2007年3月20日にAnidral Srl(現在Probiotical SpA)によってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM19187を有するラクトバチルス・ファーメンタムLF10、(III)2008年12月10日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22106を有するラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種LDD01、(IV)2001年10月16日にMofin SrlによってベルギーのBCCM LMG研究所に寄託された寄託番号LMG P-21021を有するラクトバチルス・プランタルムLP01、(V)2009年7月23日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22776を有するラクトバチルス・サリバリウスLS03及び、任意選択により、(VI)2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29197を有するL.ファーメンタムLF18及び(VII)2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29198を有するL.ファーメンタムLF19及びその混合物を含むか又はそれからなる群から選択される。
【００４８】
1つの好ましい実施形態では、各々の細菌株は、1株当たり1×109から1×1012個、好ましくは、1×1010から1×1011個の生存可能な細胞から構成される量で本発明の組成物に存在することができる。
【００４９】
より好ましくは、前記組成物は、少なくとも1つの植物性ガム、例えば、タラガム、及び/又は少なくとも1つの動物ゼラチンを更に含む。
【００５０】
本発明の組成物は、固体、例えば、再構成される粉末又は顆粒の形態で又は口内で溶解する液体又は半流動性形態、例えば、懸濁液又はゲルであってもよい、並びに口内で少なくとも部分的に溶解能がある、カプセル、錠剤、又は粉末の形態で又は水可溶性の、顆粒、ペレット又は微粒子及び任意選択により小包に含有されて、スティックパックで又はカプセル又はミニ錠剤、液体又は半流動性調製物、ゲル、懸濁液、溶液、二相液体システム及び均等な形態での非限定的な例によるなどの当業者に公知の任意の投与の形態であってもよい。
【００５１】
以下の実験の部は、その範囲を限定することなく、本発明の実際上の実施形態の例を提供する。
【００５２】
実験の部
ALSなどの神経変性疾患における特に選択された細菌株の有効性を評価する目的に関して、予備的な調査を末梢血多形核細胞において実施した。
【００５３】
本発明者らによって実施されたin vitro研究は、先天性及び獲得免疫応答に関与した主な細胞亜集団における微生物の選択された株の効果を分析することが目的であった。
【００５４】
以下のin vitro試験を実施した。
【００５５】
炎症誘発性刺激(TNFアルファ及びIL-1ベータ)に対する修復又は保護の効果を評価するために、試験をCACO-2(腸上皮組織のin vitroモデル)の24ウェルプレート中で集密にまで増殖させた株において実施した。
【００５６】
所望の細胞集団(PBMC-末梢血単核球)を、健常ドナー及び/又はパーキンソン又はALS患者からの静脈血のサンプルから標準法(デキストラン及びフィコール遠心分離)を使用して単離した。
【００５７】
どの細胞亜集団が、選択された株での刺激後に誘導され増殖するかを決定する目的に関して、マルチパラメータサイトフルオロメトリー分析を実施した。先天性及び獲得免疫応答に関与した主な細胞亜集団を調査した。
【００５８】
サイトカインの濃度を、E.L.I.S.A.(酵素結合免疫吸着アッセイ法)によって決定した。サイトカイン、例えば、TNF-α、IFN-γ、IL-1ベータ、IL-18、IL17A及びTh2型サイトカイン、主にIL-10を調査した。
【００５９】
酸化ストレスの評価を、分光光度法によって評価される高ホモシステイン血症のin vitroモデルを有する患者の血漿で実施した。
【００６０】
本発明による治療の有効性及び許容性を決定する臨床研究
【００６１】
課題
主な課題は、健常対象と比較して、筋萎縮性側索硬化症(ALSと省略)を有する患者中の腸細菌のいくつかの種の濃度を定量することであり、これは腸細菌の前記種の濃度で特定の乳酸桿菌を有する天然ゲル化複合体(細菌によってin situで産生されるEPS-エキソポリサッカライド)の連関を含む本発明の組成物での治療の結果として発生しうる及びALS-FRS-Rスケール(例えば、Cedarbaum、J.M.ら、Journal of the Neurological Sciences 1999、169、13〜21頁による)及び肺活量測定(これは、とりわけ、臨床医学における基礎的な重要性の診断上の指標を表すパラメータであるFVC(「努力肺活量」)(例えば、Quanjer、Philip H.ら、GLI-2012、1〜16頁による、肺活量測定に対する参照値)を測定することに使用される)で測定された能力障害との相関性を有しうる影響/修飾を引き続いて評価するためになされる。パラメータALSFRS(筋萎縮性側索硬化症機能評価スケール:Amyotrophic Lateral Sclerosis Functional Rating Scale)は、ALSを有する患者の日常生活動作(ADL)を行うことにおける身体的な機能を測定する特定の質問に基づく有効な尺度である。
【００６２】
研究は、以下も目的としていた:a)腸細菌のレベルがALSを有する患者における栄養状態と有意な連関を有するかどうか及び本発明の組成物での治療がそれを修飾するかどうかの評価;b)本発明による組成物での治療が、患者の生活の質に影響を与えるかどうかの評価。
【００６３】
患者及び方法
研究計画。
研究は、単一施設、第2相、ランダム化、二重盲検、プラセボ対照臨床試験であった。
【００６４】
対象。
ALSを有する50名の対象(男性30名及び女性20名)の1年の登録に関して準備された計画が、ALSに専門化した神経学臨床センターに承認された。
【００６５】
組み入れ基準:El Escorial判定基準に従う明確な又は推定されたALSの診断;18から75歳の間の範囲の年齢;疾患の期間(診断時から)<3年;FVC(努力肺活量)>50%。
除外基準:付随する病態(胃腸管疾患、ALS以外の運動ニューロン疾患、他の神経学的システムの臨床上の関与、悪性の新形成、炎症性及び自己免疫性疾患、重大な心循環器系及び呼吸器系疾患)によって影響された患者;ALSの家族歴;PEG又は経鼻胃管の患者;>18時間の期間の気管切開又は非侵襲性人工呼吸;動員に先行する8週に腸内細菌叢を修飾しうる薬物又は乳酸桿菌の摂取;妊娠中である又は治療期間中に妊娠中となりうる女性、登録の3か月前における実験的な療法に参加、インフォームドコンセント書類を理解できない患者。
【００６６】
評価
全ての患者は神経学的な評価を経験し、これにはALS-FRS-Rスケール、肺活量測定及び努力肺活量(FVC%)及び呼気量(FEV1)の測定に基づく書類の完了並びに生活の質の測定に関する尺度でのALSAQ-40質問表の完了が含まれる。全ての患者は、以下を含む食事の評価を更に経験した:自身の自律的に飲食、咀嚼及び嚥下する能力における欠陥の病歴及び課題評価に基づく評価;病前体重と比較した重量減少の評価;食事歴(24時間にわたる平均カロリー及びタンパク質摂取の評価);身長及び体重の測定;肥満度指数(BMI)の計算=体重[kg]/身長[m]2。全ての個人及び臨床データ及び病歴を、データシートに記録した。
【００６７】
ランダム化
組み入れ基準を満たす患者を、コンピュータプログラムによって生成したコード番号を、割り当てを荷う独立した統計学者がランダム化した。比は1:1であった。対象の第1及び第2の群を、このようにして形成した(治療群及び対照又はプラセボ群)。1か月の導入期間後、第1の群の対象(治療群)は、20連続日(第1の治療段階)、抗菌性、抗真菌性及び駆虫性活性を有する植物起源の4つの天然活性成分の連関を含有する食品サプリメント(本発明の前記第2の組成物)を受けた。一方、第2の群の対象(対照又はプラセボ群)は、前記食品サプリメントと区別できない形態で10mlの容量のプラセボの量を受けた。第1の治療段階の終了時に、第1の群の対象は、細菌株(I)2011年9月19日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM25246を有するストレプトコッカス・サーモフィラスST10によってin situで産生された特定のゲル化複合体(EPS-エキソポリサッカライド)の連関に基づく、固体形態での本発明の組成物も受け、1回投与されると、(II)から(V)と表示される4つの選択された細菌株を3か月受けた(第2の治療段階)。一方、第2の群の対象は、本発明の組成物と区別できない形態での等量の不活性物質を受けた。治療の第3月の終わりに、ランダム化コードを開示し、プラセボ群の対象は、植物起源の4つの天然活性成分(活性成分(i)から(iv))を含有する食品サプリメント、続いて本発明の組成物(細菌株(I)から(V))の経口投与での治療が始まる可能性があり、一方、第1の群の対象(治療群)は、維持目的のため「無期限(sine die)」継続的に細菌株を継続的に取る可能性がある。研究プロトコールでは、続く3か月に対する投与を準備したが、患者がサプリメントを取ることは不定期間継続させた。
【００６８】
手順
1.研究の目的の情報を与え、インフォームドコンセント書類に署名した後、患者は、糞便サンプルの提供を求められた。サンプル抽出を、本発明の組成物又はプラセボでの治療の第3月終わりに繰り返した。更にサンプルを、両群の動員後6か月収集した。
【００６９】
2.特定の微生物の群及び種のアッセイを、全DNAの抽出及び引き続く蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)による定量に基づく特定の標準化プロトコールに従って行った。サンプルを、落射蛍光顕微鏡を使用して3連で分析した。データを、糞便1g当たりの細胞の数として表した。
【００７０】
細菌のアッセイ
糞便サンプルを、盲検に基づいて滅菌試験管中にただちに収集し、マイナス20℃で凍結し、引き続いてクロストリジウム属、腸内細菌科、全大腸菌群及び乳酸桿菌である属/科に属する細菌を定量するために使用した(Franks A.H.ら、「Variations of bacterial populations in human feces measured by fluorescent in situ hybridization with group-specific 16S rRNA-targeted oligonucleotide probes」 Appl Environ Microbiol 1998 64(9):3336〜45頁;Harmsen H.J.M. 「A 16S rRNA-targeted probe for detection of lactobacilli and enterococci in faecal samples by fluorescent in situ hybridization」 Microb Ecol Health Dis. 1999、11:3〜12頁)。
【００７１】
上に言及された細菌群に加えて、全酵母も定量した。特に、クロストリジウム属内で、定量を、C.ディフィシレ(C.difficile)及びクラスターI/IIの最も代表的な種であるC.バラティ(C.baratii)、C.ヒストリティカム(C.hystoliticum)、C.ブチリカム(C.butyricum)、C.プレフリンジェンス(C.prefringens)、C.ボツリナム(C.botulinum)及びC.テタニ(C.tetani)に関して行った(Collins M.D.ら「The phylogeny of the genus Clostridium: proposal of five new genera and eleven new species combinations」 Int J Syst Bacteriol. 1994; 44(4):812〜26頁;4.Bloedt K.ら「Evaluation of new selective culture media and a rapid fluorescence in situ hybridization assay for identification of Clostridium difficile from stool samples」 J Med Microbiol 2009; 58(Pt 7):874〜7頁;Langendijk P.S.ら「Quantitative fluorescence in situ hybridization of Bifidobacterium spp. with genus-specific 16S rRNA-targeted probes and its application in fecal samples」 Appl Environ Microbiol 1995; 61(8):3069〜75頁)。
【００７２】
続くプロトコールは、要約すると、以下のステップを含んでいた:糞便サンプルを解凍し、滅菌PBS(0.1M、pH7.0)に1:10(w/v)で希釈した。試験管を2000×gで2分間遠心分離し、糞便スラリーのアリコートを4%パラホルムアルデヒドで一晩4°Cで固定した。固定化後、細胞をPBSで洗浄し、5分間13,000×gで遠心分離し、PBS/エタノール溶液(1:1)に再懸濁し、ハイブリダイゼーション前の少なくとも4時間-20℃で保存した。
【００７３】
細菌集団を、5’に蛍光色素でマークし、rRNA 16Sをコードする遺伝子に対して特異的な、オリゴヌクレオチドプローブを使用するFISH分析によって定量した。
【００７４】
ハイブリダイズされた細胞を、洗浄し、引き続く落射蛍光顕微鏡を使用して数えるために、真空下フィルター上で固定した。15のランダムな顕微鏡視野を、各試験について計数し、各フィルター上の細胞の数を計算するために使用した。
【００７５】
最終的なデータを、糞便物質1g当たりの細胞の数として表した。
【００７６】
研究のために収集された生体材料の貯蔵/使用
生体サンプルを、計画された分析を行うために必要な度にのみ貯蔵した。
【００７７】
治療
使用した組成物の説明
食品サプリメント(本発明の前記第2の組成物):導入期間後の最初の20日(第1の治療段階)に使用される、(i)オウシュウヨモギE.O.(400mg/50ml)に基づく活性成分(ストック溶液)、(ii)キャラウェイE.O.(350mg/50ml)、(iii)ラベンダー・アングスティフォリア、別名ラワンデュラ・オフィキナリス(650mg/50ml)及び(iv)セイヨウハッカ(600mg/50ml)の組成物を有する。前記食品サプリメントは、適切な感覚受容性特性を確実なものにする適切な果実ジュースと15滴のストック溶液を混合することによって調製された、特定のすぐに使える溶液を含有する10ml単回用量容器に供給される。4つの活性成分の連関は、抗菌性、抗真菌性及び抗寄生虫性/駆虫性活性を発揮し、全体的に天然様式で、ALSの症状の発症及び/又は悪化に潜在的に関連するいくつかの有害な微生物の属/種(クロストリジウムが特に参照される)の腸濃度を低減することができる。したがって、前記サプリメントの投与の目的は、本発明の組成物での治療前の腸環境を至適に調製することであった。
【００７８】
使用した本発明の組成物:サプリメントでの治療後の3か月(第2の治療段階)に使用される。組成物は、存在する場合、タラガム及び2011年9月19日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM25246を有する細菌株ストレプトコッカス・サーモフィラスST10によって産生されるエキソポリサッカライド(EPS)の相補的な作用によって全胃腸管に伸展する、機械的な障壁効果を発揮することができる、特定の粘液付着性ゲル化複合体(2011年9月19日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM25246を有する菌株ストレプトコッカス・サーモフィラスST10によってin situで産生されたEPS-天然エキソポリサッカライド、1回投与される)によって発揮される作用によって特徴付けられ、これは、それぞれ腸管の最初及び次の半分において作用する。ガムは、常在性の微生物叢により、それが器官の管腔に進行する間に実際に次第に分解されるが、S.サーモフィラスST10によるEPSの分泌は、徐々に、より適切な状態になり(1用量当たり20億個の生存可能な細胞)、したがって最終的に腸壁の生理的な障壁効果を回復させ、管腔区域において微生物叢によって産生される抗原、アレルゲン及び神経毒の吸収を全体的に天然の様式で防止することができる、全体の機械的な保護を提供する。本発明の組成物は、微生物の存在によって媒介される、上記の障壁効果を強化する相乗作用を更に有する:ラクトバチルス・ファーメンタムLF18(任意選択)、ラクトバチルス・ファーメンタムLF19(任意選択)、ラクトバチルス・ファーメンタムLF10(1用量当たり40億個の生存可能な細胞)、ラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種LDD01、ラクトバチルス・プランタルムLP01及びラクトバチルス・サリバリウスLS03(1用量当たり1株当たり20億個の生存可能な細胞)。株(I)から(v)の合計濃度は、1用量当たり120億個である。
【００７９】
投与量
食品サプリメント(研究の最初の20日):患者は、10mlの適切な溶液で充填済みの60単回使用容器を与えられた。投与量は、3回の毎日の主な食事の後に取られる、対象当たり1日3容器である。本発明の組成物(続く3か月):患者は、最初の30日に1日に2小包を取るとの指示を受け、次に、続く2か月にわたり1日に1小包で継続して、食事前に少なくとも半時間、室温でガラス半分の蒸留水(still water)に1小包の内容物を溶解した後に、空腹時に朝及び/又は晩に取る。
【００８０】
治療プロトコールの終わりに、本発明の組成物を受けた第1の群の対象の患者は、一般に行われている機械的な作用を有する成分を存在させることなく、1用量当たり各株の10億個の生存可能な細胞の投与量で、4つの又は、任意選択により、6つの上記の微生物(I)から(VI)を含む組成物、すなわち、タラガム及び研究の間に観察されたポジティブな効果を維持する目的で、S.サーモフィラスST10株によってin situで産生されるエキソポリサッカライド-EPSでの補充を「無期限」継続した。第2の群の対象(対照群)はプロトコールを開始するが、治療の結果が有意であった場合、第1の群の対象(治療群)が続いた。
【００８１】
植物起源の4つの活性成分(i)から(iv)を、投与した;それらを特異的に選択して、全体的に天然の様式で、ALSの典型的な症状の発症、持続及び/又は悪化に潜在的に関わる微生物の群及び属の腸濃度を低減させる。この様式では、3か月の治療後に投与される本発明の組成物の有効性を増強することも可能である。
【００８２】
経過観察
患者を、1か月の導入期間、サプリメント(t20)での20日治療の間、及び本発明の組成物での治療の間に1か月間隔で定期的に経過観察した。引き続いて、少なくとも6か月(t50、t80、t110及びt200)の間に3か月間隔で定期的に経過観察した。各検査の機会に、対象は、評価手順を経験し、これはALS-FRS-Rスケール、肺活量測定及び努力肺活量(FVC%)の測定に基づく書類の完了並びに生活の質の測定に関する尺度でのALSAQ-40質問表の完了を含む神経学的な評価を含んだ。全ての患者は、以下を含む食事の評価を更に経験した:自身の自律的に飲食、咀嚼及び嚥下する能力における欠陥の病歴及び課題評価に基づく評価;病前体重と比較した重量減少の評価;食事歴(24時間にわたる平均カロリー及びタンパク質摂取の評価);体重の測定;及び肥満度指数(BMI)の計算。
【００８３】
一次転帰:ALS-FRS-Rスケール及びFVCで測定された疾患の進行。治療の前後での各腸細菌種の濃度。
【００８４】
二次転帰:BMIで測定された栄養状態の変動。ALSAQ-40スケールで測定された生活の質の変動。
【００８５】
結果
図1及び図2に示すように、本発明による組成物の投与は、努力肺活量(FVC)の観点及びALS-FRS-Rスケールに従って評価される能力障害の観点の両方で、ヒト対象における疾患の経過を改善する。図1及び図2は、疾患ALSの経過において本発明による治療によって提供される重要な技術的な効果を示す。図1では、病状の改善は、第2の群の対象(対照又はプラセボ群)と比較した第1の群の対象(治療群)におけるALS-FRS-Rパラメータの(有意な程度までの)増加によって与えられる。同じ有意な改善は、図2においてFVCパラメータを参照して観察された。
【００８６】
本発明の実施形態FRnは、以下の通りである:
【００８７】
FR1.対象における少なくとも1つの神経変性疾患に関連する症状及び/又は障害の予防的及び/又は治癒的治療における使用のための、少なくとも1つの細菌株を含む混合物の有効量を含むか又はそれからなる組成物であって;前記使用が、ラクトバチルス・ファーメンタム種、ラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種、ラクトバチルス・プランタルム種及びラクトバチルス・サリバリウス種、及びその混合物に属する前記少なくとも1つの細菌株の投与を含む、組成物。
【００８８】
FR2.前記混合物が:
-  ラクトバチルス・ファーメンタム種に属する少なくとも1つの細菌株;
-  ラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種に属する少なくとも1つの細菌株;
-  ラクトバチルス・プランタルム種に属する少なくとも1つの細菌株;及び
-  ラクトバチルス・サリバリウス種に属する少なくとも1つの細菌株
を含むか又はそれからなる、FR1に記載の使用のための組成物。
【００８９】
FR3.前記混合物が、ストレプトコッカス・サーモフィラス種に属する少なくとも1つの細菌株を更に含む、FR1又はFR2に記載の使用のための組成物。
【００９０】
FR4.神経変性疾患が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症(ALS)又はルーゲーリック病、老年認知症、ハンチントン病、進行性核上性麻痺、前頭側頭認知症及びレビー小体認知症から選択され;好ましくは、筋萎縮性側索硬化症(ALS)である、先行する実施形態FR1-FR3のいずれか1つに記載の使用のための組成物。
【００９１】
FR5.前記混合物が、2007年3月20日にAnidral Srl(現在Probiotical SpA)によってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM19187を有するラクトバチルス・ファーメンタムLF10、2008年12月10日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22106を有するラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種LDD01、2001年10月16日にMofin SrlによってベルギーのBCCM LMG研究所に寄託された寄託番号LMG P-21021を有するラクトバチルス・プランタルムLP01、2009年7月23日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22776を有するラクトバチルス・サリバリウスLS03及び、任意選択により、2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29197を有するL.ファーメンタムLF18及び2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29198を有するL.ファーメンタムLF19の株、及びその混合物の有効量を含むか又はそれからなる、先行する実施形態FR1-FR4のいずれか1つに記載の使用のための組成物。
【００９２】
FR6.前記混合物が、2011年9月19日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM25246を有する細菌株ストレプトコッカス・サーモフィラスST10を含む、先行する実施形態FR1-FR5のいずれか1つに記載の使用のための組成物。
【００９３】
FR7.タラガムを含み、タラガムが好ましくはE471として識別される、先行する実施形態FR1-FR6のいずれか1つに記載の使用のための組成物。
【００９４】
FR8.経口的に投与される、先行する実施形態FR1-FR7のいずれか1つに記載の使用のための組成物。
【００９５】
FR9.混合物が、細菌株、2007年3月20日にAnidral Srl(現在Probiotical SpA)によってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM19187を有するラクトバチルス・ファーメンタムLF10、2008年12月10日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22106を有するラクトバチルス・デルブリュック種デルブリュック亜種LDD01、2001年10月16日にMofin SrlによってベルギーのBCCM LMG研究所に寄託された寄託番号LMG P-21021を有するラクトバチルス・プランタルムLP01及び2009年7月23日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM22776を有するラクトバチルス・サリバリウスLS03を、1:1:1:1の質量比で、並びに、任意選択により、2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29197を有するL.ファーメンタムLF18及び2014年7月30日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM29198を有するL.ファーメンタムLF19及びその混合物を含むか又はそれからなる、先行する実施形態FR1-FR8のいずれか1つに記載の使用のための組成物。
【００９６】
FR10.前記組成物が、2011年9月19日にProbiotical SpAによってドイツのDSMZ研究所に寄託された寄託番号DSM25246を有する細菌株ストレプトコッカス・サーモフィラスST10及びタラガムを更に含み、タラガムが好ましくはE471として識別される、先行する実施形態FR1-FR9のいずれか1つに記載の使用のための組成物。
【図１】
2020520969.tif 000002
【図２】
2020520969.tif 000003
【国際調査報告】
2020520969.tif 000004
2020520969.tif 000005
2020520969.tif 000006