(57)【要約】  ＬＲＲＫ２キナーゼ活性を阻害する新規化合物、それらの製造のための方法、それらを含有する組成物、ならびにＬＲＲＫ２キナーゼ活性に関連するもしくはＬＲＲＫ２キナーゼ活性を特徴とする疾患、例えば、パーキンソン病、アルツハイマー病および筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療または予防におけるそれらの使用が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：
【化１】
2020506966.tif 000151
［式中、
Ｒ１は、ＣＮ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルキル、およびＣ３シクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３ハロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は、
ａ）
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−６アルキルであって、前記アルキル基は、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルコキシおよびシクロプロピルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−６アルキル、および
Ｃ１−６アルコキシルであって、前記アルコキシル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−６アルコキシル
からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環、
ここで、前記Ｎ結合４〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合には、前記置換基はまた、ハロ、ヒドロキシル、およびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよい４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記４〜６員ヘテロシクリル環は前記置換可能な窒素原子に結合されている；
ｂ）ＮＨＲ８；ならびに
ｃ）ＯＲ８
からなる群から選択され；
Ｒ４およびＲ５は、Ｈ、ヒドロキシルおよびハロからなる群から独立に選択され；
Ｒ６は、ハロ、ヒドロキシルまたは−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｃ１−３アルキルであり、ここで、ｎは、０、１、２または３であり；
Ｒ７は、
Ｈ、
シクロプロピル、
ハロ、ヒドロキシル、およびＣ１−３アルコキシルからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル、
−ＣＨ２ＣＨ２−および−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−であって、ここで、１つの末端炭素が、別の末端炭素原子が結合されている炭素原子と連結して環を形成している、−ＣＨ２ＣＨ２−および−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−
からなる群から選択され；
Ｒ８は、
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルコキシルおよび
ハロおよびヒドロキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ４−６シクロアルキル；ならびに
窒素または酸素を含み、かつ、
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルコキシルおよび
ハロまたはヒドロキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基で場合により置換されていてもよいＣ１−３アルキル
からなる群から独立に選択される１以上の置換基で置換されていてもよい４〜６員ヘテロシクリル
からなる群から独立に選択される］。
【請求項２】
Ｒ１がＣ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項３】
Ｒ２がＨ、ハロおよびＣ１−３アルキルからなる群から選択される、請求項１または請求項２のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項４】
Ｒ４およびＲ５がＨおよびフルオロからなる群から独立に選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項５】
Ｒ４およびＲ５が両方ともＨである、請求項８に記載の化合物または塩。
【請求項６】
Ｒ３が、
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルキルであって、前記アルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−３アルキル、ならびに
Ｃ１−３アルコキシルであって、前記アルコキシル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−３アルコキシル
からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項７】
Ｒ６がフルオロまたはヒドロキシルである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項８】
Ｒ７がＨである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物または塩。
【請求項９】
【化２】
2020506966.tif 000152
である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる、医薬組成物。
【請求項１１】
療法において使用するための、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１２】
パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療のための、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１３】
パーキンソン病の治療のための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１４】
神経変性疾患の治療方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の請求項１〜１３のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１５】
前記神経変性疾患が、パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記神経変性疾患がパーキンソン病である、請求項１４または１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記対象がヒトである、請求項１４、１５または１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記対象が、ＬＲＲＫ２キナーゼにＧ２０１９Ｓ突然変異を呈するヒトである、請求項１４、１５、１６または１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療のための薬剤の製造における、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項２０】
パーキンソン病の治療のための薬剤の製造における、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＬＲＲＫ２キナーゼ活性を阻害する新規化合物、それらの製造のための方法、それらを含有する組成物、ならびにＬＲＲＫ２キナーゼ活性に関連するもしくはＬＲＲＫ２キナーゼ活性を特徴とする疾患、例えば、パーキンソン病、アルツハイマー病および筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
パーキンソン病(Parkinson’s disease)（ＰＤ）は、脳の黒質(substantial nigra)領域におけるドーパミンニューロンの選択的変性および細胞死を特徴とする神経変性疾患である。パーキンソン病は一般に、孤発性であると考えられており、病因は未知であったが、ここ１５年で、この疾患の遺伝的基礎および関連の発病機序の理解の重要な進展があった。この進展の１つの領域は、ロイシンリッチリピートキナーゼ２(leucine rich repeat kinase 2)（ＬＲＲＫ２）タンパク質の理解である。家系研究において、ＬＲＲＫ２遺伝子のいくつかのミスセンス突然変異が常染色体優性パーキンソン病に強く関連付けられた（ＷＯ２００６０６８４９２およびＷＯ２００６０４５３９２；Trinh and Farrer 2013, Nature Reviews in Neurology 9: 445-454; Paisan-Ruiz et al., 2013, J. Parkinson’s Disease 3: 85-103参照）。ＬＲＲＫ２のＧ２０１９Ｓ突然変異は、最も多いミスセンス突然変異であり、孤発性パーキンソン病によく似た臨床像に関連する。ＬＲＲＫ２  Ｇ２０１９Ｓ突然変異もまた、孤発性パーキンソン病症例のおよそ１．５％に存在する（Gilks et al., 2005, Lancet, 365: 415-416参照）。ＬＲＲＫ２における既知の病原性コード化突然変異に加え、ＬＲＲＫ２のさらなるアミノ酸コード化変異体が同定されており、それもまたパーキンソン病を発症するリスクに関連付けられている（Ross et al., 2011 Lancet Neurology 10: 898-908参照）。さらに、ゲノムワイド関連研究(genome-wide association studies)（ＧＷＡＳ）では、ＬＲＲＫ２がパーキンソン病感受性遺伝子座として同定され、これはＬＲＲＫ２がＬＲＲＫ２タンパク質においてアミノ酸置換を引き起こす突然変異の無い孤発性パーキンソン病症例にも関連している可能性があることを示している（Satake et al., 2009 Nature Genetics 41:1303-1307; Simon-Sanchez et al 2009 Nature Genetics 41: 1308-1312参照）。
【０００３】
ＬＲＲＫ２は、ＲＯＣＯタンパク質ファミリーのメンバーであり、このファミリーの総てのメンバーは５つの保存されたドメインを共有している。最も多い病原性突然変異Ｇ２０１９Ｓは、ＬＲＲＫ２の保存性の高いキナーゼドメインに起こる。この突然変異は、組換えＬＲＲＫ２タンパク質のｉｎ  ｖｉｔｒｏ酵素アッセイにおいて（Jaleel et al., 2007, Biochem J, 405: 307-317参照）、およびＰＤ患者由来細胞から精製されたＬＲＲＫ２タンパク質において（Dzamko et al., 2010 Biochem. J. 430: 405-413参照）ＬＲＲＫ２キナーゼ活性の増強をもたらす。違う残基にアミノ酸置換をもたらす、頻度の低いＬＲＲＫ２病原性突然変異Ｒ１４４１もまた、ＬＲＲＫ２のＧＴＰアーゼドメインによるＧＴＰ加水分解の速度を減じることによりＬＲＲＫ２キナーゼ活性を上昇させることが示されている（Guo et al., 2007 Exp Cell Res. 313: 3658-3670; West et al., 2007 Hum. Mol Gen. 16: 223-232参照）。さらに、ＬＲＲＫ２の生理学的基質であるＲａｂタンパク質のリン酸化は、ＬＲＲＫ２の、ある範囲のパーキンソン病病原性突然変異によって増大することが示されている（Steger et al., 2016 eLife 5 e12813参照）。よって、この証拠は、ＬＲＲＫ２のキナーゼ活性およびＧＴＰアーゼ活性は病因に重要であること、およびＬＲＲＫ２キナーゼドメインは全体的なＬＲＲＫ２機能を調節し得ることを示す（Cookson, 2010 Nat. Rev. Neurosci. 11: 791-797参照）。
【０００４】
増強されたＬＲＲＫ２キナーゼ活性は細胞培養モデルにおいてニューロン毒性と関連していること（Smith et al., 2006 Nature Neuroscience 9: 1231-1233参照）、およびキナーゼ阻害化合物はＬＲＲＫ２により媒介される細胞死から保護すること（Lee et al., 2010 Nat. Med. 16: 998-1000参照）を示す証拠がある。ＬＲＲＫ２はまた、小グリア細胞により媒介されるα−シヌクレインのクリアランスの負のレギュレーターとして働くことも報告されており（Maekawa et al., 2016 BMC Neuroscience 17:77参照）、パーキンソン病の治療における神経毒性型のα−シヌクレインのクリアランスの促進におけるＬＲＲＫ２阻害剤の潜在的有用性が示唆される。
【０００５】
ＬＲＲＫ２  Ｇ２０１９Ｓパーキンソン病患者に由来する誘導多能性幹細胞(Induced pluripotent stem cells)（ｉＰＳＣ）は、神経突起成長の欠陥およびロテノン感受性の増強を示すことが判明しており、これはＧ２０１９Ｓ突然変異の遺伝子修正またはＬＲＲＫ２キナーゼ活性の小分子阻害剤による細胞の処理のいずれかによって改善され得る（Reinhardt et al., 2013 Cell Stem Cell 12: 354-367参照）。ミトコンドリアＤＮＡ損傷は、死後パーキンソン病検体の黒質における脆弱なドーパミンニューロン分子マーカーとして報告されている（Sanders et al 2014 Neurobiol. Dis. 70: 214-223参照）。ｉＳＰＣにおけるＬＲＲＫ２  Ｇ２０１９Ｓ突然変異に関連するこのようなミトコンドリア損傷のレベルの増大は、Ｇ２０１９Ｓ突然変異の遺伝子修正により遮断される（Sanders et al., 2014 Neurobiol. Dis. 62: 381-386参照）。
【０００６】
ＬＲＲＫ２機能および機能不全と自己貪食リソソーム経路を結びつけるさらなる証拠もある（Manzoni and Lewis, 2013 Faseb J. 27:3234-3429参照）。ＬＲＲＫ２タンパク質は、細胞のα−シヌクレイン分解能に悪影響を与えるシャペロン介在性自己貪食の欠陥をもたらす(Orenstein et al., 2013 Nature Neurosci. 16 394-406)。他の細胞モデルでは、選択的ＬＲＲＫ２阻害剤はマクロ自己貪食を刺激することが示されている（Manzoni et al., 2013 BBA Mol. Cell Res. 1833: 2900-2910参照）。これらのデータは、ＬＲＲＫ２キナーゼ活性の小分子阻害剤が、ＧＢＡ突然変異に関連するパーキンソン病の形態（Swan and Saunders-Pullman 2013 Curr. Neurol. Neurosci Rep. 13: 368参照）、他のα−シヌクレイン病、タウオパチー、アルツハイマー病（Li et al., 2010 Neurodegen. Dis. 7: 265-271参照）および他の神経変性疾患（Nixon 2013 Nat. Med. 19: 983-997参照）およびゴーシェ病（Westbroek et al., 2011 Trends. Mol. Med. 17: 485-493参照）を含む異常な自己貪食／リソソーム分解経路から起こる細胞プロテオスタシスの欠陥を特徴とする疾患の治療に有用性を持ち得ることを示唆する。自己貪食の促進剤として、ＬＲＲＫ２キナーゼの小分子阻害剤はまた、糖尿病、肥満、運動ニューロン病、癲癇および数種の癌（Rubinsztein et al., 2012 Nat.Rev. Drug Discovery 11: 709-730参照）、慢性閉塞性肺疾患および特発性肺線維症などの肺疾患（Araya et al., 2013 Intern. Med. 52: 2295-2303参照）、ならびに全身性紅斑性狼瘡などの自己免疫疾患（Martinez et al., 2016 Nature 533: 115-119参照）を含むその他の疾患の治療にも有用性を持ち得る。自己貪食および貪食プロセスの促進剤として、ＬＲＲＫ２キナーゼの小分子阻害剤はまた、結核（Rubinsztein et al., 2012 Nat.Rev. Drug Discovery 11: 709-730; Araya et al., 2013 Intern. Med. 52: 2295-2303; Gutierrez, Biochemical Society Conference; Leucine rich repeat kinase 2: ten years along the road to therapeutic intervention, Henley Business School, UK 12 July 2016参照）、ＨＩＶ、西ナイルウイルスおよびチクングニアウイルス（Shoji-Kawata et al., 2013 Nature 494: 201-206参照）などの疾患を含むある範囲の細胞内細菌感染、寄生虫感染およびウイルス感染の治療において宿主応答を増強する上での有用性も持ち得る。ＬＲＲＫ２阻害剤は、このような疾患の治療において、単独でまたは感染性病原体を直接標的とする薬物と組み合わせて有用性を持ち得る。さらに、正常対象の線維芽細胞に比べてニーマン・ピックＣ型(Niemann-Pick Type C)（ＮＰＣ）病患者の線維芽細胞で、ＬＲＲＫ２  ｍＲＮＡレベルの有意な上昇も見られ、このことは、異常なＬＲＲＫ２機能がリソソーム障害に役割を果たしている可能性があることを示す（Reddy et al., 2006 PLOS One 1 (1):e19 doi: 10.1371/journal.pone.0000019-supporting information Dataset S1参照）。この所見は、ＬＲＲＫ２阻害剤がＮＰＣの治療に有用性を持ち得ることを示唆する。
【０００７】
ＰＤ関連Ｇ２０１９Ｓ突然変異型のＬＲＲＫ２はまた、チューブリン関連タウのリン酸化を増強することも報告されており（Kawakami et al., 2012 PLoS ONE 7: e30834, doi 10.1371参照）、ＬＲＲＫ２はタウおよびα−シヌクレインの病原作用の上流で働くという疾病モデルが提案されている（Taymans & Cookson, 2010, BioEssays 32: 227-235参照）。これを支持して、トランスジェニックマウスモデルにおいて、ＬＲＲＫ２発現は不溶性タウの凝集の増大、およびタウのリン酸化の増大に関連付けられている（Bailey et al., 2013 Acta Neuropath. 126:809-827参照）。ＰＤ病原性突然変異体タンパク質ＬＲＲＫ２  Ｒ１４４１Ｇの過剰発現は、トランスジェニックマウスモデルにおいてパーキンソン病の症状および高リン酸化をもたらすことが報告されている（Li, Y. et al. 2009, Nature Neuroscience 12: 826-828参照）。従って、これらのデータは、キナーゼ触媒活性のＬＲＲＫ２阻害剤が、嗜銀顆粒病、ピック病、大脳皮質基底核変性症、進行性核上性麻痺および１７番染色体に連鎖する遺伝性前頭側頭型認知症とパーキンソニズム（ＦＴＤＰ−１７）などの、タウの高リン酸化を特徴とするタウオパチーの治療に有用であり得ることを示唆する（Goedert, M and Jakes, R (2005) Biochemica et Biophysica Acta 1739, 240-250参照）。加えて、ＬＲＲＫ２阻害剤は、薬物依存症に関連する離脱症状／再発などの、ドーパミンレベルの低下を特徴とする他の疾患の治療にも有用性を持ち得る（Rothman et al., 2008, Prog. Brain Res, 172: 385参照）。
【０００８】
他の研究では、トランスジェニックマウスモデルにおいて、Ｇ２０１９Ｓ突然変異型のＬＲＲＫ２の過剰発現が脳室下領域（ＳＶＺ）の神経前駆細胞の増殖および移動に欠陥をもたらし（Winner et al., 2011 Neurobiol. Dis. 41: 706-716参照）、細胞培養モデルにおいて、神経突起の長さおよび分岐を減じることも示されている（Dachsel et al., 2010 Parkinsonism & Related Disorders 16: 650-655参照）。さらに、ＳＶＺ神経前駆細胞の増殖および移動を促進する薬剤も脳卒中の齧歯類モデルにおいて虚血傷害後の神経学的転帰を改善することが報告されている（Zhang et al., 2010 J. Neurosci. Res. 88: 3275-3281参照）。これらの知見は、ＬＲＲＫ２の異常な活性を阻害する化合物が虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、脊髄損傷などのニューロン損傷後のＣＮＳ機能の回復を刺激するように計画された治療に有用性を持ち得ることを示唆する。
【０００９】
ＬＲＲＫ２の突然変異は、軽度認知障害（ＭＣＩ）からアルツハイマー病への遷移に臨床学的に関連していることも確認されている（ＷＯ２００７１４９７９８参照）。これらのデータは、ＬＲＲＫ２キナーゼ活性の阻害剤がアルツハイマー病、その他の認知症および関連の神経変性疾患などの疾患の治療に有用であり得ることを示唆する。
【００１０】
また、正常なＬＲＲＫ２タンパク質の異常な調節もいくつかの罹患組織およびモデルで見られる。ｍｉＲ−２０５によるＬＲＲＫ２の翻訳制御の正常な機構は、一部の孤発性ＰＤ症例では混乱が見られ、ＰＤ脳サンプルのｍｉＲ−２０５レベルの有意な低下と、それらのサンプルのＬＲＲＫ２タンパク質レベルの上昇が同時に見られる（Cho et al., (2013) Hum. Mol. Gen. 22: 608-620参照）。よって、ＬＲＲＫ２阻害剤は、正常なＬＲＲＫ２タンパク質のレベルが上昇している孤発性ＰＤ患者の治療において使用可能である。
【００１１】
マーモセットにおける実験的パーキンソン病モデルでは、ＬＲＲＫ２  ｍＲＮＡの上昇は、Ｌ−ドーパ誘導性ジスキネジアのレベルと相関する様式で見られる（Hurley, M.J et al., 2007 Eur. J. Neurosci. 26: 171-177参照）。これは、ＬＲＲＫ２阻害剤がこのようなジスキネジアの改善に有用性を持ち得ることを示唆する。
【００１２】
有意に高いレベルのＬＲＲＫ２  ｍＲＮＡがＡＬＳ患者筋肉生検サンプルにおいて報告されている（Shtilbans et al., 2011 Amyotrophic Lateral Sclerosis 12: 250-256参照）。高レベルのＬＲＲＫ２キナーゼ活性がＡＬＳの特有の特徴であり得ることが示唆される。よって、この所見は、ＬＲＲＫ２阻害剤はＡＬＳの治療に有用性を持ち得ることを示した。
【００１３】
また、ＬＲＲＫ２キナーゼ活性が小膠細胞の炎症誘発応答に役割を果たす可能性があるという証拠もある（Moehle et al., 2012, J. Neuroscience 32: 1602-1611参照）。この所見は、パーキンソン病、アルツハイマー病、多発性硬化症、ＨＩＶ誘発性認知症、筋萎縮性側索硬化症、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷および脊髄損傷を含む、ある範囲の神経変性疾患に寄与する異常な神経炎症機構の治療のためのＬＲＲＫ２阻害剤の潜在的有用性を示唆する。いくつかの証拠がまた、ＬＲＲＫ２がｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるニューロン前駆体分化の調節に役割を果たすことを示している（Milosevic, J. et al., 2009 Mol. Neurodegen. 4: 25参照）。この証拠は、ＬＲＲＫ２の阻害剤は、細胞に基づくＣＮＳ障害の治療における、必然としての治療適用のためのｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるニューロン前駆細胞の生産において有用性を持ち得ることを示唆する。
【００１４】
ＬＲＲＫ２  Ｇ２０１９Ｓ突然変異を有するパーキンソン病患者は、腎臓癌、乳癌、肺癌、前立腺癌ならびに急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む非皮膚癌の高い頻度を示すことが報告されている。ＬＲＲＫ２におけるＧ２０１９Ｓ突然変異はＬＲＲＫ２キナーゼドメインの触媒活性を増強することを示す証拠があるので、ＬＲＲＫ２の小分子阻害剤は、癌、例えば、腎臓癌、乳癌、肺癌、前立腺癌（例えば、固形腫瘍）および血液癌の治療において有用性を持ち得る（AML; Saunders-Pullman et al., 2010, Movement Disorders, 25:2536-2541; Inzelberg et al., 2012 Neurology 78: 781-786参照）。ＬＲＲＫ２の増幅および過剰発現はまた乳頭状腎臓癌および甲状腺癌でも報告されており、そこではＬＲＲＫ２とＭＥＴ癌遺伝子の間の協同作用が腫瘍細胞の成長および生存を促進し得る（Looyenga et al., 2011 PNAS 108: 1439-1444参照）。
【００１５】
いくつかの研究が、一般的なＬＲＲＫ２変異体と強直性脊椎炎（Danoy P, et al., 2010. PLoS Genet.; 6(12):e1001195；およびらい病感染（Zhang FR, et al. 2009, N Engl J Med. 361:2609-18参照）に対する感受性との遺伝的関連を示唆している。これらの知見は、ＬＲＲＫ２の阻害剤が強直性脊椎炎およびらい病感染の治療において有用性を持ち得ることを示唆する。
【００１６】
クローン病に関する３つのゲノムワイド関連スキャンのメタ分析では、ＬＲＲＫ２遺伝子を含有する遺伝子座を含む、疾患に関連するいくつかの遺伝子座が同定された（Barrett et al., 2008, Nature Genetics, 40: 955-962参照）。ＬＲＲＫ２がクローン病の病因に関連するシグナル伝達経路に含まれる可能性のあるＩＦＮ−γ標的遺伝子であるという証拠も持ち上がっている（Gardet et al., 2010, J. Immunology, 185: 5577-5585参照）。これらの知見は、ＬＲＲＫ２の阻害剤がクローン病の治療において有用性を持ち得ることを示唆する。
【００１７】
ＩＦＮ−γ標的遺伝子として、ＬＲＲＫ２は、多発性硬化症および関節リウマチなどの免疫系の他の疾患の基礎にあるＴ細胞機構にも役割を果たす可能性がある。ＬＲＲＫ２阻害剤のさらなる潜在的有用性は、Ｂリンパ球がＬＲＲＫ２発現細胞の主要集団を構成しているという、報告されている所見に由来する（Maekawa et al. 2010, BBRC 392: 431-435参照）。これは、ＬＲＲＫ２阻害剤が、リンパ腫、白血病、多発性硬化症（Ray et al., 2011 J. Immunol. 230: 109参照）、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、自己免疫性溶血性貧血、赤芽球ろう、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、エバンス症候群、血管炎、水疱性皮膚障害、１型糖尿病、シェーグレン症候群、デビック病および炎症性ミオパチー（Engel et al., 2011 Pharmacol. Rev. 63: 127-156; Homam et al., 2010 J. Clin. Neuromuscular Disease 12: 91-102参照）など、Ｂ細胞枯渇が有効である、または有効であり得る免疫系の疾患の治療に有効であり得ることを示唆する。
【００１８】
ＷＯ２０１６０３６５８６およびＷＯ２０１７０１２５７６は、ＬＲＲＫ２キナーゼの阻害剤として記載されている一連の化合物およびとりわけパーキンソン病を含む疾患の治療におけるそれらの使用を開示している。運動症状（例えば、歩行障害、すくみ足、およびバランスの悪い姿勢の制御）および非運動症状（例えば、ＰＤ関連認知症）の両面で疾病進行を休止させまたは緩徐化し、対症療法の漸増使用の必要性および関連する現行利用可能な治療の長期有害作用（例えば、ジスキネジアおよびオン／オフ揺動）を軽減し、より長期間自立を維持する新規な治療のアンメットニーズが存在する。
【発明の概要】
【００１９】
本発明は、第１の側面において、式（Ｉ）化合物およびそれらの薬学的に許容可能な塩：
【化１】
2020506966.tif 000002
［式中、
Ｒ１は、ＣＮ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルキル、およびＣ３シクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３ハロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は、
ａ）
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−６アルキルであって、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルコキシおよびシクロプロピルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−６アルキル、および
Ｃ１−６アルコキシルであって、このアルコキシル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基(substitutents)で置換されていてもよい、Ｃ１−６アルコキシル
からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環、
ここで、前記Ｎ結合４〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合には、前記置換基(substitutents)群はまた、ハロ、ヒドロキシル、およびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基(substitutents)で置換されていてもよい４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記４〜６員ヘテロシクリル環は前記置換可能な窒素原子に結合されている；
ｂ）ＮＨＲ８；ならびに
ｃ）ＯＲ８
からなる群から選択され；
Ｒ４およびＲ５は、Ｈ、ヒドロキシルおよびハロからなる群から独立に選択され；
Ｒ６は、ハロ、ヒドロキシルまたは−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｃ１−３アルキルであり、ここで、ｎは、０、１、２または３であり；
Ｒ７は、
Ｈ、
シクロプロピル、
ハロ、ヒドロキシル、およびＣ１−３アルコキシルからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基(substitutents)で置換されていてもよいＣ１−３アルキル、
−ＣＨ２ＣＨ２−および−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−であって、ここで、１つの末端炭素が、別の末端炭素原子が結合されている炭素原子と連結して環を形成している、−ＣＨ２ＣＨ２−および−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−
からなる群から選択され；
Ｒ８は、
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルコキシルおよび
ハロおよびヒドロキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ４−６シクロアルキル；ならびに
窒素または酸素を含み、かつ、
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルコキシルおよび
ハロまたはヒドロキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル
からなる群から独立に選択される１以上の置換基で置換されていてもよい４〜６員ヘテロシクリル
からなる群から独立に選択される］
を提供する。
【００２０】
本発明のさらなる側面において、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と薬学的に許容可能な担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。
【００２１】
本発明のさらなる側面は、パーキンソン病、アルツハイマー病、または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療または予防において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【発明の具体的説明】
【００２２】
以下、本発明の以上およびその他の側面を、本明細書に示される説明および方法論に関してさらに詳細に記載する。当然のことながら、本発明は、異なる側面で具現化でき、本明細書に示される実施態様に限定されると解釈されるべきではない。むしろ、これらの実施態様は、本開示が十分かつ完全となるよう、また、当業者に本発明の範囲を完全に伝えるように提供される。
【００２３】
本明細書における本発明の説明で使用される技術用語は、単に特定の実施態様を記載するためのものであり、本発明の限定を意図したものではない。本発明の実施態様および添付の特許請求の範囲の記載に使用する場合、単数形「１つの(a)」、「１つの(an)」および「その(the)」は、文脈がそうではないことを明示しない限り、複数形も同様に含むことを意図する。また、本明細書で使用する場合、「および／または」は、関連の列挙項目の１以上のいずれかおよび総てのあり得る組合せを包含することを意味する。さらに理解される。「含んでなる(comprises and/or comprising)」という用語は、本明細書で使用する場合、述べられた特徴、整数、工程、操作、要素、および／または成分の存在を明示し、１以上の他の特徴、整数、工程、操作、要素、成分、および／またはそれらの群の存在または付加を排除しない。
【００２４】
一般に、本明細書で使用する命名法および本明細書に記載の有機化学、医薬品化学、生物学における実験手順は、当技術分野で周知かつ一般的に使用されるものである。そうではないことが定義されない限り、本明細書で使用される総ての技術用語および科学用語は一般に、本開示が属する技術分野の熟練者により共通に理解されているものと同じ意味を有する。本明細書で使用される用語に複数の定義がある場合には、そうではないことが述べられない限り、この節のものが優先する。
【００２５】
Ａ．定義
本明細書で使用する場合、「アルキル」は、示された数の炭素原子を有する一価の飽和炭化水素鎖を意味する。例えば、Ｃ１−３アルキルは、１〜３個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。アルキル基は直鎖または分岐型であり得る。いくつかの実施態様では、分岐型アルキル基は、１、２、または３個の分岐を有し得る。例示的アルキル基としては、限定されるものではないが、メチル、エチル、およびプロピル（ｎ−プロピルおよびイソプロピル）が挙げられる。
【００２６】
本明細書で使用する場合、「アルコキシ」は、−Ｏ−アルキル基を意味する。例えば、Ｃ１−６アルコキシ基は、１〜６個の炭素原子を含む。Ｃ１−３アルコキシ基は、１〜３個の炭素原子を含む。例示的アルコキシ基としては、限定されるものではないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシル、ペンチルオキシ、およびヘキシルオキシが挙げられる。
【００２７】
本明細書で使用する場合、「シクロアルキル」は、示された数の炭素原子を有する飽和単環式炭化水素環を意味する。例えば、Ｃ３−６シクロアルキルは、環内の員原子として３〜６個の炭素原子を含む。Ｃ３−６シクロアルキルの例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられる。
【００２８】
本明細書で使用する場合、「ハロゲン」は、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、またはヨウ素（Ｉ）を意味する。「ハロ」は、ハロゲンラジカル：フルオロ（−Ｆ）、クロロ（−Ｃｌ）、ブロモ（−Ｂｒ）、またはヨード（−Ｉ）を意味する。
【００２９】
本明細書で使用する場合、「ハロアルキル」は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩから選択される１以上のハロゲン原子（これらはアルキル基の炭素原子のいずれかまたは総てにおいて、炭素原子と結合している水素原子に取って代わることにより置換され、同じであっても異なっていてもよい）を有する、上記で定義されるアルキル基を意味する。例えば、Ｃ１−３ハロアルキルは、１以上のハロゲン原子で置換されたＣ１−３アルキル基を意味する。いくつかの実施態様では、「ハロアルキル」は、ＦまたはＣｌから独立に選択される１以上のハロゲン原子で置換されたアルキル基を意味する。例示的ハロアルキル基としては、限定されるものではないが、クロロメチル、ブロモエチル、トリフルオロメチル、およびジクロロメチルが挙げられる。
【００３０】
本明細書で使用する場合、「ヘテロシクリル」または「ヘテロシクリル環(herterocyclyl ring)」は、飽和単環式環（この環は、環炭素原子と、窒素、酸素、または硫黄から独立に選択される１または複数の環ヘテロ原子からなる）から水素原子を除去することにより誘導される一価のラジカルである。一つの実施態様では、この環は、環炭素原子と、窒素、酸素または硫黄から独立に選択される１〜３個の環ヘテロ原子からなる。一つの実施態様では、環ヘテロ原子は、窒素または酸素から独立に選択される。環原子の数は明示することができる。例えば、「４〜６員ヘテロシクリル」は、４〜６個の環原子からなる上記で定義されるようなヘテロシクリルである。Ｎ結合４〜６員ヘテロシクリル環という用語は、それを介してそれが核に結合されている少なくとも１個の窒素環原子を含有する上記で定義されるような４〜６員ヘテロシクリル環を意味する。その他の環ヘテロ原子（窒素、酸素または硫黄）が付加的に存在してもよい。ヘテロシクリルを含有する窒素という用語は、少なくとも１個の窒素環原子を含有する上記で定義されるようなヘテロシクリル環を意味する。その他の環ヘテロ原子（窒素、酸素または硫黄）が付加的に存在してもよい。ヘテロシクリルを含有する酸素という用語も同様に解釈されるべきである。ヘテロシクリル環(herterocyclyl ring)の例としては、限定されるものではないが、アゼチジニル、テトラヒドロフラニル（例えば、テトラヒドロフラン−２−イルおよびテトラヒドロフラン−３−イルを含む）、ピロリジニル（例えば、ピロリジン−１−イルおよびピロリジン−３−イルを含む）、ピペリジニル（例えば、ピペリジン−３−イルおよびピペリジン−４−イ(piperidin-4-y)を含む）、モルホリニル（例えば、モルホリン−２−イルおよびモルホリン−４−イルを含む）が含まれる。
【００３１】
本明細書で使用する場合、ある基に関して「置換された」とは、その基内の員原子（例えば、炭素原子）と結合している１以上の水素原子が、定義された置換基の群から選択される置換基で置き換えられることを示す。用語「置換された」とは、そのような置換が置換原子および置換基の許容される価数に従い、その置換が安定な化合物（すなわち、再配列、環化、または排除などの変換を自発的に受けず、かつ、反応混合物からの単離に耐えるに十分ロバストなもの）をもたらすという暗黙の条件を含むと理解されるべきである。ある基が１以上の置換基を含み得ると記載される場合、その基内の１以上の（必要に応じて）員原子が置換されてよい。加えて、その基内の単一の員原子は、そのような置換がその原子の許容される価数に従う限り、２以上の置換基で置換されてもよい。置換ヘテロシクリル環の例としては、限定されるものではないが、
【化２】
2020506966.tif 000003
が含まれる。
本明細書で使用する場合、「置換されていてもよい(optionally substituted)」とは、特定の基が非置換であっても、またはさらに定義されるように置換されていてもよいことを示す。
【００３２】
本明細書で使用する場合、用語「疾患」は、機能の遂行を中断もしくは阻害する、かつ／または罹患者にまたは人と接触した場合に、不快感、機能不全、苦痛、またはさらに死などの症状を生じさせる、身体または臓器の一部の状態における何らかの変化を意味する。疾病はまた、不調(distemper)、慢性的病的状態(ailing)、軽い病的状態(ailment)、疾病(malady)、障害(disorder)、病気(sickness)、病気(illness)、病訴(complain)、相互素因(interdisposition)および／または詐病(affectation)も含み得る。
【００３３】
本明細書で使用する場合、ある疾患に関して「治療」（“treat”, “treating” or “treatment”）とは、（１）その疾患またはその疾患の１以上の生物学的発現を改善すること、（２）（ａ）その疾患につながるもしくはその疾患の原因である生物学的カスケードの１以上の点、または（ｂ）その疾患の生物学的発現の１以上に干渉すること、（３）その疾患に関連する症状もしくは影響の１以上を緩和すること、（４）その疾患もしくはその疾患の生物学的発現の１以上の進行を遅らせること、および／または（５）ある疾患もしくはその疾患の生物学的発現の重篤度の可能性を小さくすることを意味する。対症的治療は、（１）、（３）および（５）の事項に示されるような治療を意味する。疾患修飾的治療は、（２）および（４）の事項に定義されるような治療を意味する。
【００３４】
本明細書で使用する場合、予防(“prevent”, “preventing” or “prevention”)とは、ある疾患もしくはその生物学的発現の発症の可能性を小さくする、または発症を遅らせるための薬物の予防的投与を意味する。
【００３５】
本明細書で使用する場合、「対象」は、哺乳動物対象（例えば、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、サルなど）、男性および女性の両対象を含み、また、新生児、幼児、若年、青年、成人および老人対象を含み、さらに限定されるものではないが、白人、黒人、アジア人、アメリカインディアンおよびヒスパニックを含む様々な人種および民族を含む、ヒト対象を意味する。
【００３６】
本明細書で使用する場合、「薬学的に許容可能な塩」とは、対象化合物の所望の生物活性を保持し、かつ、望ましくない毒性学的影響が最小限である塩を意味する。これらの薬学的に許容可能な塩は、化合物の最終的な単離および精製中にｉｎ  ｓｉｔｕで製造されてもよいし、またはその遊離酸もしくは遊離塩基の形態にある精製化合物を個別にそれぞれ好適な塩基もしくは酸と反応させることにより製造してもよい。
【００３７】
本明細書で使用する場合、本発明の化合物またはその他の薬学的に活性な薬剤に関して「治療上有効な量」とは、健全な医学的判断の範囲内で、患者の疾患を治療または予防するのに十分であるが、重篤な副作用を回避するに十分低い量（妥当な利益／リスク比で）を意味する。化合物の治療上有効な量は、選択される特定の化合物（例えば、その化合物の効力、有効性、および半減期を考慮する）、選択される投与経路、治療される疾患、治療される疾患の重篤度、治療される患者の齢、大きさ、体重、および健康状態、治療される患者の病歴、治療期間、併用療法の性質、所望の治療効果などの因子によって異なるが、やはり当業者によって常法により決定可能である。
【００３８】
Ｂ．化合物
本発明は、第１の側面において、式（Ｉ）の化合物およびその塩：
【化３】
2020506966.tif 000004
［式中、
Ｒ１は、ＣＮ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルキル、およびＣ３シクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３ハロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は、
ｄ）
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−６アルキルであって、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルコキシおよびシクロプロピルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−６アルキル、および
Ｃ１−６アルコキシルであって、このアルコキシル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基(substitutents)で置換されていてもよい、Ｃ１−６アルコキシル
からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環、
ここで、前記Ｎ結合４〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合には、前記置換基(substitutents)群はまた、ハロ、ヒドロキシル、およびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基(substitutents)で置換されていてもよい４〜６員ヘテロシクリル環を含み、ただし、前記４〜６員ヘテロシクリル環は前記置換可能な窒素原子に結合されている；
ｅ）ＮＨＲ８；ならびに
ｆ）ＯＲ８
からなる群から選択され；
Ｒ４およびＲ５は、Ｈ、ヒドロキシルおよびハロからなる群から独立に選択され；
Ｒ６は、ハロ、ヒドロキシルまたは−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｃ１−３アルキルであり、ここで、ｎは、０、１、２または３であり；
Ｒ７は、
Ｈ、
シクロプロピル、
ハロ、ヒドロキシル、およびＣ１−３アルコキシルからなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基(substitutents)で置換されていてもよいＣ１−３アルキル、
−ＣＨ２ＣＨ２−および−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−であって、ここで、１つの末端炭素が、別の末端炭素原子が結合されている炭素原子と連結して環を形成している、−ＣＨ２ＣＨ２−および−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−
からなる群から選択され；
Ｒ８は、
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルコキシルおよび
ハロおよびヒドロキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル
からなる群から独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ４−６シクロアルキル；ならびに
窒素または酸素を含み、かつ、
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルコキシルおよび
ハロまたはヒドロキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル
からなる群から独立に選択される１以上の置換基で置換されていてもよい４〜６員ヘテロシクリル
からなる群から独立に選択される］
を提供する。
【００３９】
一つの実施態様では、Ｒ１は、Ｃ１−３アルキルおよびＣ１−３アルコキシルからなる群から選択される。一つの実施態様では、Ｒ１は、メチルまたはメトキシからなる群から選択される。一つの実施態様では、Ｒ１は、メチルである。
【００４０】
一つの実施態様では、Ｒ２は、Ｈ、ハロおよびＣ１−３アルキルからなる群から選択される。一つの実施態様では、Ｒ２は、Ｃ１−３アルキルである。一つの実施態様では、Ｒ２は、Ｈ、ハロおよびメチルからなる群から選択される。一つの実施態様では、Ｒ２は、Ｈ、フルオロ、クロロおよびメチルからなる群から選択される。一つの実施態様では、Ｒ２は、Ｈ、クロロおよびメチルからなる群から選択される。一つの実施態様では、Ｒ２は、クロロおよびメチルからなる群から選択される。一つの実施態様では、Ｒ２は、メチルである。
【００４１】
一つの実施態様では、Ｒ３は、
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−６アルキルであって、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−３アルコキシおよびシクロプロピルからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−６アルキル、
Ｃ１−６アルコキシルであって、このアルコキシル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１または２個の置換基(substitutents)で置換されていてもよい、Ｃ１−６アルコキシル
からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環であり、
前記Ｎ結合４〜６員ヘテロシクリル環が置換可能な窒素原子を含有する場合、さらなる４〜６員ヘテロシクリル環は、ハロ、ヒドロキシル、およびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基(substitutents)で置換されていてもよく、ただし、前記さらなる４〜６員ヘテロシクリル環は、前記置換可能な窒素原子に結合されている。
【００４２】
一つの実施態様では、Ｒ３は、
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルキルであって、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−３アルキル、ならびに
Ｃ１−３アルコキシルであって、このアルコキシル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１または２個の置換基(substitutents) で置換されていてもよい、Ｃ１−３アルコキシル
からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環である。
【００４３】
一つの実施態様では、Ｒ３は、
ハロ、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルキルであって、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−３アルキル、ならびに
Ｃ１−３アルコキシルであって、このアルコキシル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１または２個の置換基(substitutents)で置換されていてもよい、Ｃ１−３アルコキシル
からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、モルホリニル、アゼチジニル、ピロリジニルおよびピペラジニルからなる群から選択されるＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環である。
【００４４】
一つの実施態様では、Ｒ３は、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルキルであって、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−３アルキル、ならびに
Ｃ１−３アルコキシルであって、このアルコキシル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１または２個の置換基(substitutents)で置換されていてもよい、Ｃ１−３アルコキシル
からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいモルホリニル、アゼチジニル、ピロリジニルおよびピペラジニルからなる群から選択されるＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環である。
【００４５】
一つの実施態様では、Ｒ３は、
ヒドロキシル、
Ｃ１−３アルキルであって、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい、Ｃ１−３アルキル、ならびに
Ｃ１−３アルコキシルであって、このアルコキシル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１または２個の置換基(substitutents)で置換されていてもよい、Ｃ１−３アルコキシル
からなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよいＮ結合モルホリニル環である。
【００４６】
一つの実施態様では、Ｒ３は、１個のＣ１−３アルキル置換基で置換されていてもよいＮ結合モルホリニル環であり、このアルキル基は、ハロ、ヒドロキシルおよびＣ１−３アルコキシからなる群から独立に選択される１または２個の置換基で置換されていてもよい。
【００４７】
一つの実施態様では、Ｒ３は、モルホリン−４−イルである。
【００４８】
一つの実施態様では、Ｒ３は、３−メチルモルホリン−４−イルである。
【００４９】
一つの実施態様では、Ｒ３は、（２−ヒドロキシエチル）−モルホリン−４−イルである。
【００５０】
一つの実施態様では、Ｒ３は、３−ヒドロキシルアゼチジン−１−イルである。
【００５１】
一つの実施態様では、Ｒ３は、ハロ、ヒドロキシル、およびＣ１−３アルコキシルから独立に選択される１、２または３個の置換基(substitutents)で置換されていてもよいさらなる４〜６員ヘテロシクリル環で置換された、置換可能な窒素原子を含有するＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環であって、ただし、このさらなる４〜６員ヘテロシクリル環は前記置換可能な窒素原子に結合されている。
【００５２】
一つの実施態様では、Ｒ３は、前記置換可能な窒素原子上でオキセタニル基で置換された、置換可能な窒素原子を含有するＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環である。
【００５３】
一つの実施態様では、Ｒ４およびＲ５は、Ｈおよびハロからなる群から独立に選択される。一つの実施態様では、Ｒ４およびＲ５は、Ｈおよびフルオロからなる群から独立に選択される。一つの実施態様では、Ｒ４およびＲ５は、両方とも水素である。一つの実施態様では、Ｒ４はＨであり、かつ、Ｒ５はフルオロである。
【００５４】
一つの実施態様では、Ｒ６は、フルオロまたはヒドロキシルである。
【００５５】
一つの実施態様では、Ｒ６は、−ＳＯ２ＣＨ３である。
【００５６】
一つの実施態様では、Ｒ７はＨである。
【００５７】
一つの実施態様では、Ｒ６はヒドロキシルであり、かつ、Ｒ７はメチルである。
【００５８】
一つの実施態様では、本発明は、実施例１〜４３のいずれかの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩である、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００５９】
一つの実施態様では、本発明は、
【化４】
2020506966.tif 000005
から選択される化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【００６０】
一つの実施態様では、本発明は、
２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−モルホリノピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）エタノール、
２−（４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）エタノール、
１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール、
（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール、
１−（３−フルオロ−４−（１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール、
１−フルオロ−３−（４−（１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール、および
２−フルオロ−３−（４−（１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オール
から選択される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００６１】
本明細書に記載の化合物の遊離塩基形態に加え、化合物の塩形態も本発明の範囲内にある。本明細書に記載の化合物の塩または薬学的に許容可能な塩は、化合物の最終的な単離および精製中にｉｎ  ｓｉｔｕで製造されてもよいし、またはその遊離塩基形態にある精製化合物を個別にそれぞれ好適な塩基もしくは酸と反応させることにより製造してもよい。好適な薬学的塩に関する総説としては、Berge et al, J. Pharm, Sci., 66, 1-19, 1977; P L Gould, International Journal of Pharmaceutics, 33 (1986), 201-217;およびBighley et al, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Marcel Dekker Inc, New York 1996, Volume 13, page 453-497を参照。
【００６２】
式（Ｉ）の特定の化合物は、塩基性基を含み、従って、好適な酸で処理することにより薬学的に許容可能な酸付加塩を形成することができる。好適な酸としては、薬学的に許容可能な無機酸および薬学的に許容可能な有機酸が挙げられる。例示的な薬学的に許容可能な酸付加塩としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、硝酸塩、メチル硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、スルファミン酸塩、リン酸塩、酢酸塩、ヒドロキシ酢酸塩、フェニル酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、イソ酪酸塩、吉草酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、アクリル酸塩、フマル酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、サリチル酸塩、ｐ−アミノサリチル酸塩(p-aminosalicyclate)、グリコール酸塩、乳酸塩、ヘプタン酸塩、フタル酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、マンデル酸塩、タンニン酸塩、ギ酸塩、ステアリン酸塩、アスコルビン酸塩、パルミチン酸塩、オレイン酸塩、ピルビン酸塩、パモ酸塩、マロン酸塩、ラウリン酸塩、グルタル酸塩、グルタミン酸塩、エストール酸塩、メタンスルホン酸塩（メシル酸塩）、エタンスルホン酸塩（エシル酸塩）、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、ｐ−アミノベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩（トシル酸塩）、およびナフタレン−２−スルホン酸塩が挙げられる。いくつかの実施態様では、薬学的に許容可能な塩には、Ｌ−酒石酸塩、エタンジスルホン酸塩（エジシル酸塩）、硫酸塩、リン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩（トシル酸塩）、塩酸塩、メタンスルホン酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、マレイン酸塩、臭化水素酸塩、Ｌ−乳酸塩、マロン酸塩、およびＳ−カンファー−１０−スルホン酸塩が含まれる。特定の実施態様では、これらの塩のいくつかは溶媒和物を形成する。特定の実施態様では、これらの塩のいくつかは結晶性である。
【００６３】
式（Ｉ）の特定の化合物またはそれらの塩は立体異性形で存在し得る（例えば、それらは１以上の不斉炭素原子を含み得る）。個々の立体異性体（鏡像異性体およびジアステレオマー）およびこれらの混合物は本発明の範囲内に含まれる。異なる異性形は従来の方法によってあるものを他から分離または分割することができ、あるいはいずれかの所与の異性体を従来の合成方法によって、または立体特異的もしくは不斉合成によって得ることもできる。
【００６４】
式（Ｉ）の特定の化合物は、互変異性形で存在することができる。例えば、特定の化合物はケト−エノール互変異性を示す。いくつかの場合では、一対の互変異性体形のうち一方だけが式（Ｉ）の範囲内に入る。このような択一的互変異性体も本発明の一部となす。
【００６５】
本発明はまた、自然界に最も多く見られる原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子で１以上の原子が置換されているということ以外は式（Ｉ）の化合物またはそれらの塩と同じ、同位体標識化合物および塩も含む。式（Ｉ）の化合物またはそれらの塩に組み込むことができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、フッ素の同位体、例えば、３Ｈ、１１Ｃ、１４Ｃおよび１８Ｆが挙げられる。このような同位体で標識された式（Ｉ）の化合物またはそれらの塩は、薬物および／または基質組織分布アッセイで有用である。例えば、１１Ｃおよび１８Ｆ同位体は、ＰＥＴ（陽電子放出断層撮影法）で有用である。ＰＥＴは脳撮像法で有用である。同位体で標識された式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩は、一般に、以下に開示されている手順を行い、非同位体標識試薬を容易に入手できる同位体標識試薬で置き換えることによって調製することができる。一つの実施態様では、式（Ｉ）の化合物またはそれらの塩は同位体で標識されない。
【００６６】
式（Ｉ）の特定の化合物またはそれらの塩は、固体または液体形態で存在し得る。固体状態では、式（Ｉ）の化合物または塩は、結晶形態もしくは非晶質形態で、またはそれらの混合物として存在し得る。結晶形態である式（Ｉ）の化合物または塩の場合、当業者は、結晶化の際に結晶格子に溶媒分子が組み込まれた薬学的に許容可能な溶媒和物が形成され得ることを認識するであろう。溶媒和物は、エタノール、イソプロパノール、ＤＭＳＯ、酢酸、エタノールアミン、および酢酸エチルなどの非水性溶媒を含んでもよく、またはそれらは結晶格子中に組み込まれる溶媒として水を含んでもよい。結晶格子中に組み込まれる溶媒が水である溶媒和物は一般に「水和物」と呼ばれる。水和物は化学量論的水和物ならびに変動量の水を含有する組成物を含む。
【００６７】
当業者は、その種々の溶媒和物を含む結晶形態で存在する特定の式（Ｉ）の化合物、それらの薬学的に許容可能な塩または溶媒和物は、多形（すなわち、異なる結晶構造で存在する能力）を示し得ることをさらに認識するであろう。これらの異なる結晶形態は一般に「多形体」として知られる。多形体は同じ化学組成を持つが、充填、幾何学的配置、および結晶性固体状態のその他の記述的特性が異なる。従って、多形体は、形状、密度、硬度、変形性、安定性、および溶解特性など、異なる物理特性を持ち得る。多形体は一般に、異なる融点、ＩＲスペクトル、およびＸ線粉末回折パターンを示し、これらが同定に使用できる。当業者は、例えば、化合物の製造に使用される反応条件または試薬を変更または調節することによって異なる多形体が製造され得ることを認識するであろう。例えば、温度、圧力、または溶媒の変化が多形体を生じ得る。加えて、ある多形体は、特定の条件下で別の多形体へ自発的に変換する場合がある。
【００６８】
当業者はまた、本発明が式（Ｉ）の化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩の種々の重水素化形態を含み得ることも認識するであろう。炭素原子と結合している利用可能な各水素原子は独立に重水素原子で置換され得る。当業者ならば、どのように式（Ｉ）の化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩の重水素化形態を合成すればよいかを知っている。市販の重水素化出発材料を式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩の重水素化形態の製造に用いてもよく、またはそれらは従来の技術を使用し、重水素化試薬（例えば、重水素化リチウムアルミニウム）を用いて合成してもよい。
【００６９】
Ｃ．使用方法
式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩はＬＲＲＫ２キナーゼ活性の阻害剤であり、従って、以下の神経疾患パーキンソン病、アルツハイマー病、認知症（レビー小体型認知症および血管性認知症、ＨＩＶ誘発性認知症を含む）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、加齢性記憶障害、軽度認知障害、嗜銀顆粒病、ピック病、大脳皮質基底核変性症、進行性核上麻痺、１７番染色体に連鎖する遺伝性前頭側頭型認知症とパーキンソニズム（ＦＴＤＰ−１７）、薬物依存症に関連する離脱症状／再発、Ｌ−ドーパ誘発性ジスキネジア、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、脊髄損傷および多発性硬化症の治療または予防において使用の可能性があると考えられる。ＬＲＲＫ２の阻害によって潜在的に治療可能な他の疾患には、限定されるものではないが、リソソーム障害（例えば、ニーマン・ピックＣ型病、ゴーシェ病）、クローン病、癌（甲状腺癌、腎臓癌（乳頭状腎臓癌を含む）、乳癌、肺癌および前立腺癌、白血病（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む）およびリンパ腫を含む）、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、自己免疫性溶血性貧血、赤芽球ろう、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、エバンス症候群、血管炎、水疱性皮膚障害、１型糖尿病、肥満、癲癇、慢性閉塞性肺疾患などの肺疾患、特発性肺線維症、シェーグレン症候群、デビック病、炎症性ミオパチー、強直性脊椎炎、細菌感染（らい病を含む）、ウイルス感染（結核、ＨＩＶ、西ナイルウイルスおよびチクングニアウイルスを含む）および寄生虫感染が含まれる。
【００７０】
本発明の一つの側面は、療法において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。一つの実施態様では、本発明は、上記の障害（すなわち、神経疾患および上記に挙げられた他の疾患）の治療または予防において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療または予防において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。別の実施態様では、本発明は、アルツハイマー病の治療または予防において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。一つの実施態様では、本発明は、アルツハイマー病の治療において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。別の実施態様では、本発明は、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療において使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００７１】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療または予防において使用するための１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オールまたはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００７２】
別の実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療において使用するための１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オールまたはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００７３】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療または予防において使用するための（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノールまたはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００７４】
別の実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療において使用するための（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノールまたはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００７５】
本発明のさらなる側面は、上記の障害（すなわち、神経疾患および上記に挙げられた他の疾患）の治療または予防のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明のさらなる側面は、パーキンソン病の治療または予防のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明のさらなる側面は、パーキンソン病の治療のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。別の実施態様では、本発明は、アルツハイマー病の治療または予防のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。一つの実施態様では、本発明は、アルツハイマー病の治療のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。別の実施態様では、本発明は、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療のための薬剤の製造における式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００７６】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療または予防のための薬剤の製造における１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オールまたはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００７７】
別の実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療または予防のための薬剤の製造における１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オールまたはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００７８】
さらに別の実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療のための薬剤の製造における１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オールまたはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００７９】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療または予防のための薬剤の製造における（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノールまたはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００８０】
別の実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療または予防のための薬剤の製造における（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノールまたはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００８１】
さらに別の実施態様では、本発明は、パーキンソン病のための薬剤の製造における（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノールまたはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００８２】
本発明のさらなる側面は、上記に挙げられた（すなわち、神経疾患および上記に挙げられた他の疾患から選択される）障害の治療または予防の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明のさらなる側面は、パーキンソン病の治療または予防の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明のさらなる側面は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明のさらなる側面は、アルツハイマー病の治療または予防の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明のさらなる側面は、アルツハイマー病の治療の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明のさらなる側面は、結核の治療の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。ある実施態様において、対象はヒトである。
【００８３】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００８４】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の治療の方法であって、それを必要とするヒトに治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００８５】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とする対象に治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００８６】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とするヒトに治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００８７】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とするヒトに治療上有効な量の以下から選択される化合物
【化５】
2020506966.tif 000006
またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００８８】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とするヒトに治療上有効な量の１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オールを投与することを含んでなる方法を提供する。
【００８９】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とするヒトに治療上有効な量の１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オールまたはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００９０】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とするヒトに治療上有効な量の（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノールを投与することを含んでなる方法を提供する。
【００９１】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とするヒトに治療上有効な量の（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノールまたはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００９２】
一つの実施態様では、本発明は、実施例１〜４３のいずれかの化合物またはその薬学的に許容可能な塩である式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。一つの実施態様では、本発明は、実施例１〜４３のいずれかの化合物である式１の化合物を提供する。
【００９３】
本発明に関して、パーキンソン病の治療は、孤発性パーキンソン病、および／または家族性パーキンソン病の治療に関する。一つの実施態様では、パーキンソン病の治療は、家族性パーキンソン病の治療である。家族性パーキンソン病患者は、以下のＬＲＲＫ２キナーゼ突然変異：Ｇ２０１９Ｓ突然変異、Ｎ１４３７Ｈ突然変異、Ｒ１４４１Ｇ突然変異、Ｒ１４４１Ｃ突然変異、Ｒ１４４１Ｈ突然変異、Ｙ１６９９Ｃ突然変異、Ｓ１７６１Ｒ突然変異、またはＩ２０２０Ｔ突然変異のうち１以上を呈するものである。別の実施態様では、家族性パーキンソン病患者は、パーキンソン病に関連するＬＲＲＫ２遺伝子座に他のコード突然変異（例えば、Ｇ２３８５Ｒ）または非コード一塩基多型を呈する。より詳しい実施態様では、家族性パーキンソン病は、ＬＲＲＫ２キナーゼにＧ２０１９Ｓ突然変異またはＲ１４４１Ｇ突然変異を呈する患者を含む。一つの実施態様では、パーキンソン病の治療は、家族性パーキンソン病の治療を指し、Ｇ２０１９Ｓ突然変異を有するＬＲＲＫ２キナーゼを発現する患者を含む。別の実施態様では、家族性パーキンソン病患者は、以上に高レベルの正常なＬＲＲＫ２キナーゼを発現する。
【００９４】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、それを必要とするＬＲＲＫ２キナーゼにＧ２０１９Ｓ突然変異を呈するヒトに治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００９５】
一つの実施態様では、本発明は、パーキンソン病の治療の方法であって、ヒトにおいてＬＲＲＫ２キナーゼのＧ２０１９Ｓ突然変異を検査すること、およびそれを必要とするＬＲＲＫ２キナーゼにＧ２０１９Ｓ突然変異を呈するヒトに治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含んでなる方法を提供する。
【００９６】
パーキンソン病の治療は、対症的であり得るか、または疾患修飾的であり得る。一つの実施態様では、パーキンソン病の治療は、対症的治療を意味する。一つの実施態様では、パーキンソン病の治療は、疾患修飾的治療を意味する。
【００９７】
本発明の化合物はまた、家族歴、嗅覚欠陥、便秘、認知障害、歩行または分子的、生化学的、免疫学的もしくはイメージング技術から得られる疾病進行の生物学的指標などの疾病進行に関連する１以上の微細な特徴の手段により重篤なパーキンソン症候群へ進行しやすいとして特定された患者の治療においても有用であり得る。これに関して、治療は症候的または疾患修飾的であり得る。
【００９８】
本発明に関して、アルツハイマー病の治療は、孤発性アルツハイマー病および／または家族性アルツハイマー病の治療を意味する。アルツハイマー病の治療は対症的であり得るか、または疾患修飾的であり得る。一つの実施態様では、アルツハイマー病の治療は症候的治療を意味する。
【００９９】
本発明に関して、認知症（レビー小体型認知症および血管性認知症、ＨＩＶ誘発性認知症を含む）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、加齢性記憶障害、軽度認知障害、嗜銀顆粒病、ピック病、大脳皮質基底核変性症、進行性核上麻痺、１７番染色体に連鎖する遺伝性前頭側頭型認知症とパーキンソニズム（ＦＴＤＰ−１７）、多発性硬化症、リソソーム障害（例えば、ニーマン・ピックＣ型病、ゴーシェ病）、クローン病、癌（甲状腺癌、腎臓癌（乳頭状腎臓癌を含む）、乳癌、肺癌および前立腺癌、白血病（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む）およびリンパ腫を含む）、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、自己免疫性溶血性貧血、赤芽球ろう、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、エバンス症候群、血管炎、水疱性皮膚障害、１型糖尿病、肥満、癲癇、慢性閉塞性肺疾患などの肺疾患、特発性肺線維症、シェーグレン症候群、デビック病、炎症性ミオパチー、強直性脊椎炎の治療は症候的または疾患修飾的であり得る。特定の実施態様では、これらの障害の治療は、症候的治療を意味する。
【０１００】
本発明はまた、細胞に基づくＣＮＳ障害の治療における、必然としての治療適用のためのｉｎ  ｖｉｔｒｏニューロン前駆細胞の生産におけるＬＲＲＫ２阻害剤の使用も提供する。
【０１０１】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩がパーキンソン病の治療における使用に意図される場合、それはパーキンソン病の対症的治療として有用であることが主張されている薬剤と併用可能である。このような他の治療薬の好適な例としては、Ｌ−ドーパ、およびドーパミン作動薬（例えば、プラミペキソール、ロピニロール）が挙げられる。
【０１０２】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩がアルツハイマー病の治療における使用に意図される場合、それはアルツハイマー病の疾患修飾的または対症的いずれかの治療として有用であることが主張されている薬剤と併用可能である。このような他の治療薬の好適な例は、例えば、コリン作動性伝達を修飾することが知られているもの、例えば、Ｍ１ムスカリン性受容体作動薬またはアロステリックモジュレーター、Ｍ２ムスカリン性拮抗薬、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤（例えば、テトラヒドロアミノアクリジン、塩酸ドネペジル、リバスチグミンおよびガランタミン）、ニコチン性受容体作動薬またはアロステリックモジュレーター（例えば、α７拮抗薬もしくはアロステリックモジュレーターまたはα４β２作動薬もしくはアロステリックモジュレーター）、ＰＰＡＲ作動薬（例えば、ＰＰＡＲγ作動薬）、５−ＨＴ４受容体部分作動薬、５−ＨＴ６受容体拮抗薬、例えば、ＳＢ−７４２４５７、または５ＨＴ１Ａ受容体拮抗薬およびＮＭＤＡ受容体拮抗薬もしくはモジュレーター、または疾患修飾性薬剤、例えば、βもしくはγ−セクレターゼ阻害剤、例えば、セマガセスタット、ミトコンドリア安定剤、微小管安定剤またはタウ病態のモジュレーター、例えば、タウ凝集阻害剤（例えば、メチレンブルーおよびＲＥＭＢＥＲ（商標））、ＮＳＡＩＤＳ、例えば、タレンフルルビル、トラミプロシル；または抗体、例えば、バピネオズマブもしくはソラネズマブ；プロテオグリカン、例えば、トラミプロセートなどの対症的薬剤であり得る。
【０１０３】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が細菌感染、寄生虫感染またはウイルス感染の治療における使用に意図される場合、それは感染性病原体を直接標的とする対症的治療として有用であることが主張されている薬剤と併用可能である。
【０１０４】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が他の治療薬と併用される場合、その化合物は、任意の好都合な経路により逐次または同時に投与され得る。
【０１０５】
本発明はまた、さらなる側面において、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を１以上のさらなる治療薬とともに含んでなる組合せを提供する。
【０１０６】
上記に言及される組合せは、好都合には、医薬処方物の形態で使用するために提供され得、従って上記で定義されるような組合せを薬学的に許容可能な担体または賦形剤とともに含んでなる医薬処方物は、本発明のさらなる側面を含んでなる。このような組合せの個々の成分は、別個のまたは合剤としての医薬処方物で逐次または同時に投与することができる。
【０１０７】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が、同じ病態に対して有効な第２の治療薬と併用される場合、各化合物の用量は、その化合物が単独で使用される場合とは異なり得る。適当な用量は当業者により容易に認識されるであろう。
【０１０８】
Ｄ．組成物
式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩は、対象に投与する前に医薬組成物として処方され得る。一つの側面によれば、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩と薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物を提供する。別の側面によれば、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩と薬学的に許容可能な賦形剤と混合することを含んでなる医薬組成物の製造方法を提供する。
【０１０９】
医薬組成物は、単位用量当たりに所定量の有効成分を含有する単位投与形で提供され得る。このような単位は、治療される疾患、投与経路ならびに対象の齢、体重および状態に応じて、例えば、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、または１ｍｇ〜５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、５００ｍｇ、７５０ｍｇまたは１ｇの本発明の化合物を含有してよく、または医薬組成物は、単位用量当たりに所定量の有効成分を含有する単位投与形で提供され得る。他の実施態様では、単位投与組成物は、本明細書に記載の一日用量もしくは部分用量、またはその適当な分数の有効成分を含有するものである。さらに、このような医薬組成物は、当業者に周知のいずれの方法によって作製してもよい。
【０１１０】
式（Ｉ）の化合物の治療上有効な量は、例えば、意図されるレシピエントの齢および体重、治療を必要とする正確な病態およびその重篤度、処方物の性質、および投与経路を含むいくつかの因子によって決まり、最終的には投薬を指示する担当者の裁量下にある。しかしながら、本明細書に記載される疾患の治療のための式（Ｉ）の化合物の治療上有効な量は、一般に、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇレシピエント体重／日の範囲、より通常には、１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。よって、７０ｋｇの成体哺乳動物では、１日当たりの実際の量は通常７０〜７００ｍｇであると思われ、この量は１日当たり単回用量で与えてもよいし、または１日当たり２回、３回、４回、５回または６回用量など、１日当たり複数の分割用量で与えてもよい。あるいは、投与は間欠的に、例えば、１日おきに１回、週に１回または月に１回行うことができる。治療上有効な薬学的に許容可能な量の塩または溶媒和物などは、式（Ｉ）の化合物それ自体の治療上有効な量の割合として決定され得る。類似の用量が上記に言及される他の疾患の処置にも適当であると想定される。
【０１１１】
本発明の医薬組成物は、１種類以上の式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学上許容
可能な塩を含有し得る。いくつかの実施態様では、これらの医薬組成物は、２種類以
上の本発明の化合物を含有し得る。例えば、いくつかの実施態様では、これらの医薬
組成物は、２種類以上の式（Ｉ）の化合物またはそれらの薬学的に許容可能な塩をを含
有し得る。加えて、これらの医薬組成物は、１種類以上の付加的な医薬品有効成分
（ＡＰＩ）を場合によりさらに含んでなってもよい。
【０１１２】
本明細書で使用する場合、「薬学的に許容可能な賦形剤」は、医薬組成物に形態または稠度を与える上で含まれる薬学的に許容可能な材料、組成物またはビヒクルを意味する。各賦形剤は、混合した際に、対象に投与した際に本発明の化合物の有効性を実質的に低下させる相互作用および薬学上許容されない医薬組成物を生じる相互作用が回避されるよう、その医薬組成物の他の成分と適合し得る。
【０１１３】
本発明の化合物および薬学的に許容可能な１または複数の賦形剤は、所望の投与経路により対象に投与するために適合された投与形へと処方され得る。例えば、投与形には、（１）経口投与（頬側または舌下を含む）に適合したもの、例えば、錠剤、カプセル剤、カプレット剤、丸剤、トローチ剤、散剤、シロップ剤、エリキシル剤(elixers)、懸濁液、溶液、エマルション、サシェ剤、およびカシェ剤；（２）非経口投与（皮下、筋肉内、静脈内または皮内を含む）に適合したもの、例えば、無菌溶液、懸濁液、および再構成用散剤；（３）経皮投与に適合したもの、例えば、経皮パッチ；（４）直腸投与に適合したもの、例えば、坐剤；（５）鼻腔吸入に適合したもの、例えば、ドライパウダー、エアロゾル、懸濁液、および溶液；ならびに（６）局所投与（頬側、舌下または経皮を含む）に適合したもの、例えば、クリーム、軟膏、ローション、溶液、ペースト、スプレー、フォーム、およびゲルが含まれる。このような組成物は製薬分野で公知の任意の方法により、例えば、式（Ｉ）の化合物を担体または賦形剤と会合させることによって調製され得る。
【０１１４】
経口投与に適合した医薬組成物は、カプセル剤もしくは錠剤などの個別単位；散剤または顆粒；水性もしくは非水性液中の溶液もしくは懸濁液；可食フォームもしくはホイップ；または水中油型液体エマルションもしくは油中水型液体エマルションとして提供され得る。
【０１１５】
好適な薬学的に許容可能な賦形剤は、選択される特定の投与形によって異なり得る。加えて、好適な薬学的に許容可能な賦形剤は、組成物中で役立ち得る特定の機能に関して選択され得る。例えば、ある種の薬学的に許容可能な賦形剤は、均一な投与形の製造を助けるそれらの能力のために選択され得る。ある種の薬学的に許容可能な賦形剤は、安定な投与形の製造を助けるそれらの能力のために選択され得る。ある種の薬学的に許容可能な賦形剤は、患者に投与された際に本発明の１または複数の化合物をある器官または身体部分から別の器官または身体部分に運搬または輸送するのを助けるそれらの能力のために選択され得る。ある種の薬学的に許容可能な賦形剤は、患者のコンプライアンスを高めるそれらの能力のために選択され得る。
【０１１６】
好適な薬学的に許容可能な賦形剤としては、下記の種の賦形剤：希釈剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、造粒剤、被覆剤、湿潤剤、溶媒、補助溶媒、沈殿防止剤、乳化剤、甘味剤、香味剤、矯味剤、着色剤、固化防止剤、湿潤剤(hemectants)、キレート剤、可塑剤、増粘剤、抗酸化剤、保存剤、安定剤、界面活性剤、および緩衝剤が含まれる。当業者は、ある種の薬学的に許容可能な賦形剤が２つ以上の機能を果たすことがあり、どのくらいの賦形剤が処方物中に存在するか、および他にどんな成分が処方物中に存在するかによって別の機能を果たすことがあることを認識するであろう。
【０１１７】
当業者は、本発明で使用するための適当な量で好適な薬学的に許容可能な賦形剤を選択できるだけの当技術分野の知識と技量を有する。加えて、薬学的に許容可能な賦形剤を記載し、好適な薬学的に許容可能な賦形剤の選択に有用であり得る、当業者に利用可能ないくつかの情報源がある。例としては、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)、The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited)、およびThe Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)が挙げられる。
【０１１８】
本発明の医薬組成物は、当業者に公知の技術および方法を用いて調製される。当技術分野で慣用される方法のいくつかはRemington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)に記載されている。
【０１１９】
一つの側面において、本発明は、治療上有効な量の本発明の化合物と希釈剤または増量剤とを含んでなる、錠剤またはカプセル剤などの固体経口投与形を対象とする。好適な希釈剤および増量剤としては、ラクトース、スクロース、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、およびアルファー化デンプン）、セルロースおよびその誘導体（例えば、微晶質セルロース）、硫酸カルシウムおよび第二リン酸カルシウムが含まれる。経口固体投与形は、結合剤をさらに含んでなり得る。好適な結合剤としては、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、およびアルファー化デンプン）、ゼラチン、アラビアガム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、トラガカントガム、グアーガム、ポビドン、およびセルロースおよびその誘導体（例えば、微晶質セルロース）が含まれる。経口固体投与形は、崩壊剤をさらに含んでなり得る。好適な崩壊剤としては、クロスポビドン、グリコール酸ナトリウムデンプン、クロスカルメロース、アルギン酸、およびカルボキシメチルセルロースナトリウムが含まれる。経口固体投与形は、滑沢剤をさらに含んでなり得る。好適な滑沢剤としては、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、およびタルクが含まれる。
【０１２０】
特定の実施態様では、本発明は、０．０１〜１０００ｍｇの１以上の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と０．０１〜５ｇの１以上の薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物を対象とする。
【０１２１】
別の実施態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる、神経変性疾患の治療のための医薬組成物を対象とする。別の実施態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる、パーキンソン病の治療のための医薬組成物を対象とする。
【０１２２】
Ｅ．化合物の製造方法
本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物またはそれらの塩の製造において使用される方法は所望の化合物によって決まる。特定の置換基の選択およびその特定の置換基の種々の可能性のある位置などの因子は総て、本発明の特定の化合物の製造においてたどるべき経路で役割を果たす。それらの因子は当業者によって容易に認識される。
【０１２３】
一般に、本発明の化合物は、当技術分野で公知の標準的技術およびそれに類似の既知の方法によって製造することができる。式（Ｉ）の化合物を製造する一般法を以下に示す。以下の一般実験スキームに記載される出発材料および試薬は総て市販されているか、または当技術分野で公知の方法によって製造することができる。
【０１２４】
当業者は、本明細書に記載の置換基が本明細書に記載の合成方法に適合しない場合、その置換基を、反応条件に対して安定である好適な保護基で保護できることを認識するであろう。保護基は反応手順の好適な時点で除去して所望の中間体または目的化合物を得ることができる。好適な保護基およびそのような好適な保護基を用いて種々の置換基を保護および脱保護する方法は当業者に周知であり、その例はT. Greene and P. Wuts, Protecting Groups in ChemicalSynthesis (第3版), John Wiley & Sons, NY (1999)に見出すことができる。場合によっては、置換基は、用いる反応条件下で反応性であるように特に選択することができる。これらの状況下で、これらの反応条件は、選択された置換基を、中間体化合物として有用であるか、または目的化合物中の所望の置換基である別の置換基に変換する。
【０１２５】
一般スキーム１は、本発明の化合物を製造するための例示的合成法を示す。
【０１２６】
一般スキーム１
【化６】
2020506966.tif 000007
一般スキーム１は、式（Ｉ）の化合物を表す化合物３を製造するための例示的合成
を提供する。スキーム１において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は式Ｉに定義される通りである。
【０１２７】
工程（ｉ）は、約１００℃などの好適な温度下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などの適当な溶媒中、Ｃｓ２ＣＯ３などの適当な塩基を用いて、化合物１を化合物２と反応させることによる置換反応であり得、化合物３が得られる。
【０１２８】
あるいは、工程（ｉ）は、還流などの好適な温度で、トルエンなどの好適な溶媒中、Ｋ３ＰＯ４などの好適な塩基の存在下、ＣｕＩおよびＮ，Ｎ’−ジメチル−シクロヘキサン−１，２−ジアミンなどの適当な試薬を用いるカップリング反応であり得、化合物３が得られる。
【０１２９】
あるいは、工程（ｉ）は、１００℃などの好適な温度で、トルエンなどの好適な溶媒中、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどの好適な塩基の存在下、Ｐｄ２ｄｂａ３およびジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２’，４’，６’−トリイソプロピル−［１，１’−ビフェニル］−２−イル）ホスフィンなどの適当な試薬を用いるカップリング反応であり得、化合物３が得られる。
【０１３０】
一般スキーム２
【化７】
2020506966.tif 000008
一般スキーム２は、中間体１を製造するための例示的合成を提供する。保護基Ｐ１は、例えば、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル（ＴＨＰ）、（トリメチルシリル）エトキシ）メチル（ＳＥＭ）またはアセチル（Ａｃ）など、任意の好適な保護基であり得る。
【０１３１】
中間体５は、工程（ｉ）において、２０℃〜４０℃などの好適な温度下、ＤＣＭなどの適当な溶媒中、ＴｓＯＨなどの好適な酸の存在下で、出発材料４をＤＨＰなどの好適な試薬と反応させることにより得ることができる。
【０１３２】
工程（ｉｉ）は、６０℃〜１００℃などの好適な温度で、１，４−ジオキサンなどの適当な溶媒中、Ｎａ２ＣＯ３などの好適な塩基の存在下で、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２などの適当なパラジウム触媒を用いる中間体５とボロン酸またはエステルの間のクロスカップリング反応である。
【０１３３】
工程（ｉｉｉ）は、−６０℃〜−１０℃などの好適な温度下での、ＴＨＦなどの好適な溶媒中、Ｈ２Ｏ２などの好適な酸化試薬との反応を含み、中間体７が得られる。
【０１３４】
工程（ｉｖ）は、２５℃〜８０℃などの適当な温度で、ＭｅＯＨなどの極性溶媒中、Ｐｄ／Ｃなどの好適な触媒の存在下での、水素などの好適な還元試薬との反応である。
【０１３５】
工程（ｖ）は、０℃〜２５℃などの好適な温度下での、ＤＣＭなどの好適な溶媒中、ＤＭＰなどの酸化剤との酸化反応であり得、中間体８が得られる。
【０１３６】
工程（ｖｉ）および（ｖｉｉｉ）は、−７８℃〜０℃などの好適な温度下での、ＤＣＭなどの好適な溶媒中、ＤＡＳＴなどの流動化剤との反応を含む。
【０１３７】
工程（ｖｉｉｉ）（ｘ）および（ｘｉ）は、脱保護反応である。一般に、中間体を２５℃〜４０℃などの好適な温度下、１，４−ジオキサンなどの好適な溶媒中、ＨＣｌなど好適な酸と反応させると中間体１が得られる。
【０１３８】
一般スキーム３
【化８】
2020506966.tif 000009
一般スキーム３は、中間体２を製造するための例示的合成を提供する。
【０１３９】
Ｒ３がＮ結合４〜６員ヘテロシクリル環またはＮＨＲ７である場合、工程（ｉ）は、２５℃〜１００℃などの好適な温度下、ＥｔＯＨなどの適当な溶媒中、ＴＥＡなどの適当な塩基を用いる異なるアミンとの反応であり得、中間体２が得られる。
【０１４０】
Ｒ３がＯＲ７である場合、工程（ｉ）はカップリング反応である。アルコール（Ｒ７ＯＨ）を０℃などの好適な温度で、好適な溶媒中、水素化ナトリウムなどの好適な塩基により脱プロトン化すると過渡的中間体が得られる。次に、室温などの好適な温度で、ＴＨＦなどの好適な溶媒中、中間体１２を過渡的中間体と反応させる。
【実施例】
【０１４１】
一般実験手順
以下の記載および実施例は本発明を説明する。これらの実施例は本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、本発明の化合物、組成物、および方法を製造および使用するために当業者に指針を与えることを意図する。本発明の特定の実施態様が記載されるが、当業者ならば、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく種々の変更および改変が行えることを認識するであろう。
【０１４２】
本出願に記載される化合物の化学名は、一般に、ＣｈｅｍＤｒａｗ  Ｕｌｔｒａ（ＣｈａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ）から生成し、かつ／またはＩＵＰＡＣ命名法の原理に従う。
【０１４３】
マイクロ波照射による反応混合物の加熱は、Ｓｍｉｔｈ  Ｃｒｅａｔｏｒ（Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｆｏｒｂｏｒｏ／ＭＡ、現バイオタージ所有から購入）、Ｅｍｒｙｓ  Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒ（Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙから購入）またはＥｘｐｌｏｒｅｒ（ＣＥＭ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒ、Ｍａｔｔｈｅｗｓ／ＮＣにより供給）マイクロ波で行った。
【０１４４】
本明細書では、実施例の反応の後処理および生成物の精製に従来の技術が使用され得る。
【０１４５】
以下の実施例において有機層または有機相の乾燥に関する言及は、従来の技術に従い、硫酸マグネシウムまたは硫酸ナトリウムで溶液を乾燥させ、乾燥剤を濾去することを意味し得る。生成物は一般に減圧下での蒸発により溶媒を除去することにより得ることができる。
【０１４６】
実施例における化合物の精製は、クロマトグラフィーおよび／または好適な溶媒を用いた再結晶化などの従来の方法により行うことができる。クロマトグラフィー法は当業者に公知であり、例えば、カラムクロマトグラフィー、フラッシュクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）、およびＭＤＡＰ（質量分析自動分取(mass directed auto-preparation)、質量分析ＬＣＭＳ精製とも呼ばれる）が含まれる。ＭＤＡＰは、例えば、W. Goetzinger et al, Int. J. Mass Spectrom., 2004, 238, 153-162に記載されている。
【０１４７】
ＡｎａｌｔｅｃｈシリカゲルＧＦおよびＥ．Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０  Ｆ−２５４薄層プレートを薄層クロマトグラフィーに使用した。フラッシュクロマトグラフィーおよび重力クロマトグラフィーは双方ともＥ．Ｍｅｒｃｋ  Ｋｉｅｓｅｌゲル６０（２３０〜４００メッシュ）シリカゲルで行った。分取ＨＰＬＣは、Ｇｉｌｓｏｎ分取システムを使用し、１０−８０勾配（アセトニトリル中０．１％ＦＡ／０．１％ＦＡ水溶液）または１０−８０勾配（（アセトニトリル／水）で溶出するＬｕｎａ  ５ｕ  Ｃ１８（２）  １００Ａ逆相カラムを用いて行った。この適用において精製のために使用されたＣｏｍｂｉＦｌａｓｈシステムはＩｓｃｏ，Ｉｎｃから購入した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ精製は、プレパックＳｉＯ２カラム、２５４ｎｍのＵＶ波長を用いる検出器および混合溶媒を用いて行った。
【０１４８】
用語「ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ」、「バイオタージ（登録商標）」、「バイオタージ７５」および「バイオタージＳＰ４（登録商標）」は、本明細書で使用する場合、プレパックシリカゲルカートリッジを用いる市販の自動精製システムを意味する。
【０１４９】
最終化合物はＬＣＭＳ（以下に挙げる条件）またはＮＭＲで同定した。１Ｈ  ＮＭＲまたは１９ＦＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ４００ＭＨｚ分光計を用いて記録した。ＣＤＣｌ３はジューテリオクロロホルムであり、ＤＭＳＯ−ｄ６はヘキサジューテリオジメチルスルホキシドであり、およびＣＤ３ＯＤはテトラジューテリオメタノールである。化学シフトは、内部標準テトラメチルシラン（ＴＭＳ）またはＮＭＲ溶媒から低磁場側へのパーツ・パー・ミリオン(parts per million)（ｐｐｍ）で報告する。ＮＭＲデータの略記は次の通りである：ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線、ｄｄ＝二重の二重線、ｄｔ＝二重の三重線、ａｐｐ＝明瞭、ｂｒ＝幅広。Ｊはヘルツで測定されたＮＭＲ結合定数を示す。
【０１５０】
温度は総て摂氏度で示す。他の総ての略号はＡＣＳ  Ｓｔｙｌｅ  Ｇｕｉｄｅ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ、ワシントンＤＣ、１９８６）に記載の通りである。
【０１５１】
絶対立体化学は、当業者に公知の方法、例えば、Ｘ線または振動円偏光二色性(Vibrational circular dichroism)（ＶＣＤ）により決定することができる。
【０１５２】
鏡像異性体またはジアステレオ異性体が記載され、キラル中心の絶対立体化学が未知の場合、キラル中心における「＊」の使用は、そのキラル中心の絶対立体化学が未知であること、すなわち、描かれている化合物が単一のＲ鏡像異性体か単一のＳ鏡像異性体のいずれかであり得ることを表す。鏡像異性体またはジオステレオ異性体のキラル中心の絶対立体化学が既知である場合には、そのキラル中心では「＊」を用いずに、適当であれば太線の楔記号
【化９】
2020506966.tif 000010
またはハッシュの楔記号
【化１０】
2020506966.tif 000011
が使用される。
【０１５３】
幾何異性体またはシス−トランス異性体が記載され、その異性体の絶対立体配座が未知の場合、その幾何異性性またはシス−トランス異性に関連する原子の１つにおける「＊」の使用は、その原子におけるまたはその原子の周囲の絶対立体配座が未知であること、すなわち、描かれている化合物が単一のシス異性体か単一のトランス鏡像異性体のいずれかであり得ることを表す。
【０１５４】
以下に示される手順では、一般に、各出発材料の後に中間体が挙げられる。これは単に熟練の化学者に対する補助として示されるものである。出発材料は、必ずしも参照されたバッチから製造されたものでなくてもよい。
【０１５５】
ＬＣＭＳ条件：
１）酸性法：
ａ．機器：ＨＰＬＣ：Ｗａｔｅｒｓ  ＵＰＣ２およびＭＳ：Ｑｄａ
移動相：０．１％ＦＡ／０．１％ＭｅＣＮを含有する水
カラム：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  １．７μｍ  ２．１×５０ｍｍおよび１．７μｍ  ２．１×１００ｍｍ
検出：ＭＳおよびフォトダイオードアレイ検出器（ＰＤＡ）
ｂ．機器：ＨＰＬＣ：ＳｈｉｍａｄｚｕおよびＭＳ：２０２０
移動相：０．１％ＦＡ／０．１％ＭｅＣＮを含有する水
カラム：Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ５μｍ  ５０×４．６ｍｍおよびＳｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ５μｍ１５０×４．６ｍｍ
検出：ＭＳおよびフォトダイオードアレイ検出器（ＰＤＡ）
２）塩基性条件：
機器：ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０およびＭＳ：６１２０
移動相：Ｈ２Ｏ中０．１％ＮＨ４ＯＨ／ＡＣＮ中０．１％ＮＨ４ＯＨ
カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５μｍ  ５０×４．６ｍｍおよびＸｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５μｍ  １５０×４．６ｍｍ
検出：ＭＳおよびフォトダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）
【０１５６】
分取ＨＰＬＣ条件
機器：Ｗａｔｅｒｓ機
カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８カラム  ＯＢＤ（１０μｍ、１９×２５０ｍｍ）、Ｘｂｒｉｇｅ  ｐｒｅｐ  Ｃ１８  １０μｍ  ＯＢＤ  ＴＭ  １９×１５０ｍｍ、Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  １０×２５０ｍｍ  ５μｍ、ＸＢＲＩＤＧＥ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  １０×１５０ｍｍ  ５μｍなど
酸性法：
移動相：０．１％ＴＦＡ／アセトニトリルを含有する水
塩基性法：
移動相：０．１％ＮＨ４ＯＨ／アセトニトリルを含有する水
【０１５７】
キラル分取ＨＰＬＣ：
Ｔｈａｒ  ＳＦＣ  Ｐｒｅｐ  ８０（ＴｈａｒＳＦＣ  ＡＢＰＲ１、ＴｈａｒＳＦＣ  ＳＦＣ  Ｐｒｅｐ  ８０  ＣＯ２ポンプ、ＴｈａｒＳＦＣ補助溶媒ポンプ、ＴｈａｒＳＦＣ冷却熱交換器および循環槽、ＴｈａｒＳＦＣ質量流量計、ＴｈａｒＳＦＣスタティックミキサー、ＴｈａｒＳＦＣインジェクションモジュール、Ｇｉｌｓｏｎ  ＵＶ検出器、ＴｈａｒＳＦＣ画分コレクションモジュール
【０１５８】
キラルＨＰＬＣ分析：
機器：Ｔｈａｒ  ＳＦＣ  Ｐｒｅｐ  ８０（ＴｈａｒＳＦＣ  ＡＢＰＲ１、ＴｈａｒＳＦＣ  ＳＦＣ  Ｐｒｅｐ  ８０  ＣＯ２ポンプ、ＴｈａｒＳＦＣ補助溶媒ポンプ、ＴｈａｒＳＦＣ冷却熱交換器および循環槽、ＴｈａｒＳＦＣ質量流量計、ＴｈａｒＳＦＣスタティックミキサー、ＴｈａｒＳＦＣインジェクションモジュール、Ｇｉｌｓｏｎ  ＵＶ検出器、ＴｈａｒＳＦＣ画分コレクションモジュール
カラムおよび移動相：以下の実施例に記載。
【０１５９】
略号および供給源
本明細書では以下、下記の略号および供給源を使用する：
Ａｃ  −  アセチル
ＭｅＣＮ  −  アセトニトリル
Ａｔｍ  −  気圧
Ａｑ．  −  水溶液
ＢＩＮＡＰ  −  ２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル
Ｂｏｃ  −  ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
Ｂｏｃ２Ｏ  −  二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｎ  −  ベンジル
ｔ−Ｂｕ  −  ｔｅｒｔ−ブチル
ｃｏｎｃ．  −  濃
ＤＡＳＴ−  Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ硫黄トリフルオリド
ＤＣＥ−  １，２−ジクロロエタン
ＤＣＭ  −  ジクロロメタン
ＤＥＡ  −  ジエタノールアミン
ＤＭＥＤＡ  −  Ｎ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン
デス・マーチン  −  １，１，１−トリス（アセチルオキシ）−１，１−ジヒドロ−１，２−ベンズヨードキソール−３−（１Ｈ）−オン
ＤＨＰ  −  ３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン
ＤＩＢＡＬ−Ｈ  −  水素化ジイソブチルアルミニウム
ＤＩＥＡ  −  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＩＰＥＡ  −  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ  −  Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＡＰ  −  ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＥＤＡ  −  Ｎ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン
ＤＭＦ  −  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＰ  −  デス・マーチンペルヨージナン
ＤＭＳＯ  −  ジメチルスルホキシド
ＤＰＰＦ  −  １，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン
ＥＡ  −  酢酸エチル
ＥＤＣ  −  １−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩
ＥＤＣＩ  −  ３−（エチルイミノメチレンアミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパン−１−アミン
ＥｔＯＨ／ＥｔＯＨ  −  エタノール
Ｅｔ２Ｏ  −  ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ  −  酢酸エチル
Ｅｔ３Ｎ  −  トリエチルアミン
ＦＡ  −  ギ酸
ＨＥＰ  −  ヘプタン
Ｈｅｘ  −  ヘキサン
ＨＯＡｃ  −  酢酸
ＨＡＴＵ  −  ２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウランヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＢＴ  −  ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＩＰＡ  −  イソプロピルアルコール
ｉＰｒＯＨ／ｉＰｒＯＨ  −  イソプロピルアルコール
ｍ−ＣＰＢＡ  −  メタ−クロロペルオキシ安息香酸
ＭＯＭＣｌ  −  モノクロロジメチルエーテル
Ｍｅ  −  メチル
ＭｅＯＨ  −  メタノール
ＭｓＣｌ  −  塩化メタンスルホニル
ＮａＨＭＤＳ  −  ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド
ＮＩＳ  −  Ｎ−ヨードスクシンイミド
ＮＭＰ  −  １−メチル−２−ピロリドン
ＮＭＯ  −  ４−メチルモルホリン４−オキシド
ＰＥ  −  石油エーテル
ＰＭＢ  −  ｐ−メトキシベンジル
Ｐｄ２（ｄｂａ）３    −  トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム
Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２  −  １，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウム（ＩＩ）ジクロリドジクロロメタン錯体
Ｐｈ３Ｐ  −  トリフェニルホスフィン
ＰｈＮＴｆ２  −  Ｎ，Ｎ−ビス−（トリフルオロメタンスルホニル）アニリン
ＰＰＴＳ  −  ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム
ＰＴＳＡ  −  ｐ−トルエンスルホン酸
ｒｔ／ＲＴ  −  室温
Ｒｔ  −  保持時間
ｓａｔ．  −  飽和
ＳＥＭ−Ｃｌ  −  ２−（トリメチルシリル）エトキシメチルクロリド
ＳＦＣ  −  超臨界流体クロマトグラフィー
ＴＢＡＩ  −  ヨウ化テトラブチルアンモニウム
ＴＢＤＰＳＣｌ  −  ｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジフェニルシラン
ＴＥＡ  −  トリエチルアミン
ＴＦＡ  −  トリフルオロ酢酸
ＴＦＡＡ  −  無水トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ  −  テトラヒドロフラン
ＴＬＣ  −  薄層クロマトグラフィー
ＴｓＣｌ  −  塩化４−トルエンスルホニル
ＴｓＯＨ  −  ｐ−トルエンスルホン酸
【０１６０】
説明１
６−ブロモ−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１）
【化１１】
2020506966.tif 000012
クロロホルム（１５０ｍＬ）中、５−ブロモ−２，４−ジメチルアニリン（１５．０ｇ、７５．０ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴下でＡｃ２Ｏ（１５．０、１５０ｍｍｏｌ）を加えた。ＫＯＡｃ（８．００ｇ、８２．５ｍｍｏｌ）、１８−クラウン−６（１０．０ｇ、３７．５ｍｍｏｌ）および亜硝酸イソアミル（２６．３ｇ、２２５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を３６時間還流した。この反応混合物を濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）に溶解させた。有機溶液を水（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解させ、ＮａＯＨ（４Ｍ、４０．０ｍＬ、１６０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）とで分液した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  １０：１から５：１へ）により精製し、標題化合物（５．１ｇ、収率３２％）を橙色の固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.20 (br s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 2.50 (s, 3H)。
【０１６１】
説明２
６−ブロモ−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ２）
【化１２】
2020506966.tif 000013
乾燥ＤＣＭ（１２０ｍＬ）中、６−ブロモ−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（５．１０ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で、ＤＨＰ（４．１０ｇ、４８．４ｍｍｏｌ）、ＴｓＯＨ（０．８００ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）およびＭｇ２ＳＯ４（５．０ｇ）を加えた。この反応混合物を３５℃に加熱し、１時間撹拌した。この反応混合物を濾過し、濾液をＮａ２ＣＯ３溶液（１０％、１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  ５０：１から２０：１）により精製し、標題化合物（６．０ｇ、収率８４％）を橙色の固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.90 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 5.63 (dd, J = 9.6, 3.0 Hz, 1H), 4.05-4.00 (m, 1H), 3.78-3.70 (m, 1H), 2.58-2.44 (m, 4H), 2.20-2.02 (m, 2H), 1.78-1.65 (m, 3H)。
ＬＣＭＳ：（移動相：３分で５−９５％ＣＨ３ＣＮ）、Ｒｔ＝２．１９分；ＭＳ理論値：２９４；ＭＳ実測値：２９５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１６２】
説明３
４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル  （Ｄ３）
【化１３】
2020506966.tif 000014
ジオキサン（１５０ｍＬ）および水（１３０ｍＬ）中、６−ブロモ−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（５．５０ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）、４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６．９０ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（４．９０ｇ、４６．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（６５８ｍｇ、０．９００ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物をＮ２で３時間脱気し、次いで、８０℃で一晩撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）とで分液した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製し、標題化合物（７．３０ｇ、収率９９％）をやや褐色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.92 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 5.67 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 5.63 (br s, 1H), 4.07-4.01 (m, 3H), 3.78-3.70 (m, 1H), 3.67-3.64 (m, 2H), 2.62-2.53 (m, 1H), 2.45-2.39 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.18-2.12 (m, 1H), 2.07-2.02 (m, 1H), 1.81-1.73 (m, 2H), 1.69-1.61 (m, 1H), 1.52 (s, 9H)。
【０１６３】
説明４
３−ヒドロキシ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸トランス−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ４）
【化１４】
2020506966.tif 000015
乾燥ＴＨＦ（２００ｍＬ）中、４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２１．０ｇ、５２．８３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２下で、内部温度を5℃未満にして、ＢＨ３−ＴＨＦ溶液（１Ｍ、２１１ｍＬ、２１１ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温に温め、一晩撹拌した。ＴＬＣは、出発材料が消費されていたことを示した。０℃に冷却した後、ＮａＯＨ（水溶液、２Ｍ、７９ｍＬ、１５８ｍｍｏｌ）を注意深く滴下し、内部温度を１０℃未満に維持した。次に、Ｈ２Ｏ２（３０％、２０．０ｍＬ、１５１ｍｍｏｌ）を滴下し、内部温度をなお１０℃未満に維持した。この混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、氷浴下、１５０ｍＬの１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３溶液で急冷し、２０分間撹拌した。溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ  １０：１から２：１へ）により精製し、標題化合物（１６．５ｇ、収率７５％）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.92 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 5.70-5.67 (m, 1H), 4.49-4.44 (m, 1H), 4.30-4.17 (m, 1H), 4.05-3.91 (m, 2H), , 3.82-3.72 (m, 1H), 3.04-2.96 (m, 1H), 2.86-2.72 (m, 2H), 2.63-2.53 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.21-2.16 (m, 1H), 2.07-2.02 (m, 1H), 1.99-1.67 (m, 6H), 1.52 (s, 9H)。
【０１６４】
説明５
３−フルオロ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ５）
【化１５】
2020506966.tif 000016
乾燥ＤＣＭ（２００ｍＬ）中、３−ヒドロキシ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（トランス）−ｔｅｒｔ−ブチル（２４．５ｇ、５９．０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２下、−６５℃でＤＡＳＴ（３８．０ｇ、２３６ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を徐々に室温に温め、２時間撹拌した。この反応混合物をＮａ２ＣＯ３水溶液（１０％、３００ｍＬ）に注意深く注ぎ、２０分間撹拌した。有機層を分割し、水溶液をＤＣＭ（２５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製し、標題化合物（１１．８ｇ、収率４８％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.92 (s, 1H) ,7.52 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 5.74-5.67 (m, 1H), 4.80-4.59 (m, 2H), 4.21 (br s, 1H), 4.07-3.99 (m, 1H), 3.80-3.71 (m, 1H), 3.25-3.19 (m, 1H), 2.89-2.79 (m, 2H), 2.65-2.51 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.19-2.15 (m, 1H), 2.15-2.04 (m, 1H), 1.93-1.88 (m, 1H), 1.80-1.74 (m, 5H), 1.52 (s, 9H)。
ＬＣＭＳ（５−９５％ＣＨ３ＣＮ）：Ｒｔ＝２．２５分  ３分；ＭＳ理論値：４１７；ＭＳ実測値：４１８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１６５】
説明６
（（シス）−６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ６）
【化１６】
2020506966.tif 000017
ＣＨ３ＯＨ（１０ｍＬ）中、３−フルオロ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（１．６０ｇ、３．８４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌ／ＣＨ３ＯＨ（５Ｍ、２０ｍＬ）を加えた。この混合物を０℃１時間撹拌した。この反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２００ｍＬ）に注いだ。この混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムＣ１８（水中５％−６０％ＣＨ３ＣＮ）により精製し、標題化合物（６００ｍｇ、収率４９％）を黄色油状物として得た。
ＬＣＭＳ（移動相：２．５分で５−９５％アセトニトリル）：Ｒｔ＝１．４６分；ＭＳ理論値：３１７；ＭＳ実測値：３１８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１６６】
説明７
（シス）−６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（Ｄ７）
【化１７】
2020506966.tif 000018
ＨＣｌ／ジオキサン（６ｍｏｌ／Ｌ、４０ｍＬ）中、３−フルオロ−４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（２．５０ｇ、６．００ｍｍｏｌ）の混合物を室温で６時間撹拌した。この反応混合物を０℃に冷却し、濾過した。固体を冷１，４−ジオキサン（５ｍＬ）で洗浄し、標題化合物（１．４ｇ、収率１００％）を白色固体として得、これをそのまま次の工程に使用した。
ＬＣ−ＭＳ（５−９５％  ＣＨ３ＣＮ）：Ｒｔ＝１．７３分；ＭＳ理論値：２３３、ＭＳ実測値：２３４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１６７】
説明８
３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ８）
【化１８】
2020506966.tif 000019
ＣＨ３ＯＨ（５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１ｍＬ）中、（シス）−６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（５００ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴下、ＫＯＨ（２４２ｍｇ、４．２９ｍｍｏｌ）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（７００ｍｇ、３．２１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で２時間撹拌した。この反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝２０：１）により精製し、標題化合物（１８０ｍｇ、収率２５％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.98 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 4.76-4.54 (m, 2H), 4.27-4.10 (m, 1H), 3.25-3.14 (m, 1H), 2.91-2.76 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.97-1.84 (m, 1H), 1.71-1.62 (m, 1H), 1.51 (s, 9H)。
【０１６８】
説明９およびＤ１０
３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（単一のシス異性体１）（Ｄ９）および３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（単一のシス異性体２）（Ｄ１０）
【化１９】
2020506966.tif 000020
３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（１４０ｍｇ、０．４２０ｍｍｏｌ）を、方法（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＢ  ５μｍ  ２０＊２５０ｎｍ、Ｈｅｘ：ｉ−ＰｒＯＨ＝８０：２０、流速(Flow)：２０ｍＬ／分、２０５ｎｍ、Ｔ＝３０℃）を用いたキラル分取ＨＰＬＣにより分割し、３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（鏡像異性体１）（Ｄ９）（６８ｍｇ、収率４８％）を白色固体としておよび３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（シス）−ｔｅｒｔ−ブチル（鏡像異性体２）（Ｄ１０）（４７ｍｇ、収率３３％）を白色固体として得た。
【０１６９】
単一のシス異性体１、Ｄ９：
ＬＣＭＳ（移動相：２．５分で５−９５％アセトニトリル）：Ｒｔ＝１．６４分；ＭＳ理論値：３３３  ＭＳ実測値：３３２［Ｍ−Ｈ］−。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.07 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 4.78-4.53 (m, 2H), 4.32-4.12 (m, 1H), 3.26-3.13 (m, 1H), 2.93-2.75 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.94-1.79 (m, 1H), 1.69-1.60 (m, 1H), 1.49 (s, 9H)。
キラルＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＢ  ５μｍ  ４．６×２５０ｍｍ、相：Ｈｅｘ／ＩＰＡ＝８０／２０、流速：１ｍＬ／分、温度：３０℃）；Ｒｔ＝６．１４２分、１００％ｅｅ。
【０１７０】
単一のシス異性体２、Ｄ１０：
ＬＣＭＳ：（移動相：２．５分で５−９５％アセトニトリル）、Ｒｔ＝１．６４分；ＭＳ理論値：３３３  ＭＳ実測値：３３２［Ｍ−Ｈ］−。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.45 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 4.75-4.55 (m, 2H), 4.26-4.16 (m, 1H), 3.24-3.17 (m, 1H), 2.90-2.74 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.93-1.87 (m, 1H), 1.70-1.61 (m, 1H), 1.50 (s, 9H)。
キラルＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＢ  ５μｍ  ４．６×２５０ｍｍ、相：Ｈｅｘ／ＩＰＡ＝８０／２０、流速：１ｍＬ／分、温度：３０℃）：Ｒｔ＝７．６７１分、１００％ｅｅ
【０１７１】
説明１１
６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１１）
【化２０】
2020506966.tif 000021
ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）中、３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ９、１００ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＨＣｌ／ＭｅＯＨ（５Ｍ、１ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温に温め、一晩撹拌した。溶媒を真空下で除去し、Ｎａ２ＣＯ３溶液（５ｍＬ）を加えた。これをＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、乾燥させ、濾過し、濃縮し、粗生成物を白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．４９分；ＭＳ理論値：２３３、ＭＳ実測値：２３４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７２】
説明１２
６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１２）
【化２１】
2020506966.tif 000022
標題化合物を、ＤＭＦ中、６−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１０）、１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３の懸濁液から出発し、Ｄ１１に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．２９分；ＭＳ理論値：２７９．１、ＭＳ実測値：２８０．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７３】
説明１３
４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（Ｄ１３）
【化２２】
2020506966.tif 000023
ＨＩ（５５％、７．５ｍＬ）中、ＮａＩ（１．１０ｇ、７．３４ｍｍｏｌ）の溶液に、４，６−ジクロロ−２−メトキシピリミジン（１．００ｇ、５．５９ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を４０℃に加熱し、１０時間撹拌した。この反応混合物を室温に冷却し、氷水（５０ｍＬ）に注ぎ、濾過して粗固体を得た。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製し、標題生成物（６４０ｍｇ、収率３１．７％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.85 (s, 1H), 4.00 (s, 3H)。
【０１７４】
説明１４
４−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）モルホリン（Ｄ１４）：
【化２３】
2020506966.tif 000024
Ｅｔ３Ｎ（８５０ｇ、８．４０ｍｍｏｌ）およびＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（１．００ｇ、２．８０ｍｏｌ）およびモルホリン（２４０ｍｇ、２．８０ｍｏｌ）の混合物を室温で一晩撹拌した。この反応溶液を飽和ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝３：１）により精製し、標題生成物（８５０ｍｇ、収率：９５％）を白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で８０％水（０．１％ＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．８９分；ＭＳ理論値：３２１．０、ＭＳ実測値：３２２．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７５】
説明１５
（Ｒ）−４−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン（Ｄ１５）：
【化２４】
2020506966.tif 000025
ｉ−ＰｒＯＨ／ＴＨＦ（１０ｍＬ／１０ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（７２５ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−３−メチルモルホリン塩酸塩（２０２ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＥＤＡ（７７６ｍｇ、６ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を８０℃で一晩撹拌し、次いで、濃縮して残渣を得た。粗物質をクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝７：１）により精製し、標題生成物を無色の油状物として得（５００ｍｇ、収率：７５％）、これをそのまま次の工程に使用した。
【０１７６】
説明１６
シス−３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−（（Ｒ）−３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１６）：
【化２５】
2020506966.tif 000026
トルエン／ＴＨＦ（５ｍＬ／１ｍＬ）中、シス−３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ９、８０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−４−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン（８７ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ１，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン（３２ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（５１ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１１０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を９０℃、２時間Ｎ２下で撹拌し、水溶液ＮＨ３．Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮した。クロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝５：１）により精製し、標題生成物を白色油状物として得た（１２５ｍｇ、収率：９６％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で４０％水（０．１％ＦＡ）および６０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）］：Ｒｔ＝４．５６分；ＭＳ理論値：５４０．６、ＭＳ実測値：５４１．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７７】
説明１７
シス−（３Ｒ）−４−（６−（６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン塩酸塩（Ｄ１７）：
【化２６】
2020506966.tif 000027
ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）中、シス−３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−（（Ｒ）−３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１６、１２５ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）の溶液に、氷浴中でＨＣｌ・ＥｔＯＡｃ（２．００ｍＬ、３．５０ｍｏｌ／Ｌ）をゆっくり滴下した。この反応混合物を室温で３０分撹拌し、次いで、濃縮し、粗物質を白色固体として得た（８０ｍｇ）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．８３分；ＭＳ理論値：４４０．５、ＭＳ実測値：４４１．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７８】
説明１８
シス−２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−（（Ｒ）−３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸エチル（Ｄ１８）：
【化２７】
2020506966.tif 000028
ＤＭＦ（２ｍＬ）中、シス−（３Ｒ）−４−（６−（６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン塩酸塩（Ｄ１７、７５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ））の溶液に、氷浴中、Ｅｔ３Ｎ（５２ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）および２−ブロモ酢酸エチル（５７ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で２時間撹拌し、水（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、標題生成物を白色固体として得た（９０ｍｇ）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で７０％水（０．１％ＦＡ）および３０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．５４分；ＭＳ理論値：５２６．６、ＭＳ実測値：５２７．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７９】
説明１９
シス−３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−（（Ｒ）−３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１９）：
【化２８】
2020506966.tif 000029
標題化合物を、９０℃で、トルエン／ＴＨＦ中シス−３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボキシラート（Ｄ１０）、（Ｒ）−４−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン、Ｎ１，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン、ＣｕＩおよびＫ３ＰＯ４から出発し、Ｄ１６に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で４０％水（０．１％ＦＡ）および６０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．４８分；ＭＳ理論値：５４０．６、ＭＳ実測値：５４１．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８０】
説明２０
シス−（３Ｒ）−４−（６−（６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン塩酸塩（Ｄ２０）：
【化２９】
2020506966.tif 000030
標題化合物を、シス−３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−（（Ｒ）−３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１９）から出発し、Ｄ１７に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．８７分；ＭＳ理論値：４４０．５、ＭＳ実測値：４４１．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８１】
説明２１
シス−２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−（（Ｒ）−３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸エチル（Ｄ２１）：
【化３０】
2020506966.tif 000031
標題化合物を、シス−（３Ｒ）−４−（６−（６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン塩酸塩および２−ブロモ酢酸エチル（Ｄ２０）から出発し、Ｄ１８に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で７０％水（０．１％ＦＡ）および３０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）］：Ｒｔ＝１．５４分；ＭＳ理論値：５２６．６、ＭＳ実測値：５２７．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８２】
説明２２〜５０
以下の化合物を、Ｄ１３、Ｄ１６、Ｄ１７およびＤ１８に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
【表１】
2020506966.tif 000032
2020506966.tif 000033
2020506966.tif 000034
2020506966.tif 000035
2020506966.tif 000036
【０１８３】
説明５０
４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ５０）：
【化３１】
2020506966.tif 000037
Ｎ２下、ＭｅＯＨ（２Ｌ）中、４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８０ｇ、粗）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０ｇ、１２％／Ｗ）を加えた。この反応混合物を３回脱気し、室温で２日間撹拌すした。この混合物を濾過し、濾液を濃縮し、粗生成物を白色固体として得た（６５．８ｇ）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：移動相：２．０分で３０％水（０．１％ＦＡ）および７０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．６３分；ＭＳ理論値：３９９．２、ＭＳ実測値：４００．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８４】
説明５１
５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ５１）：
【化３２】
2020506966.tif 000038
ＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）中、４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５５．４ｇ、１３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（５Ｍ、２００ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌し、次いで、濃縮し、Ｎａ２ＣＯ３溶液で処理し、ＮａＯＨ溶液でｐＨ＞１２まで塩基性化した。この混合物を濾過し、所望の生成物を白色固体として得た（２９．３ｇ、収率＝９８％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．８５分；ＭＳ理論値：２１５、ＭＳ実測値：２１６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８５】
説明５２
４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ５２）：
【化３３】
2020506966.tif 000039
ＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ）中、５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（１．００ｇ、４．６４ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（９３０ｍｇ、９．２０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｂｏｃ２Ｏ（１．００ｇ、４．６０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で３時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物を濃縮乾固した。残渣をＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝３：１で溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、所望の生成物を白色固体として得た（９００ｍｇ、収率：６１％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.77 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 4.12-4.07 (m, 2H), 3.17 (s, 1H), 2.94-2.84 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 1.77 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 1.55-1.47 (m, 2H), 1.43 (s, 9H)。
【０１８６】
説明５３
１−（４−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）エタノン（Ｄ５３）：
【化３４】
2020506966.tif 000040
ＴＨＦ／ＥｔＯＨ＝１／１（３０ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（８６９ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）および１−（モルホリン−２−イル）エタノン（４００ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で、ＤＩＥＡ（１．２４ｇ、９．６０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝５：１）は、反応が完了していたことを示した。この反応混合物を濃縮乾固し、残渣をＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１０：１で溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標題生成物を白色固体として得た（６５０ｍｇ、収率：７４％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１３分；ＭＳ理論値：３６３．０、ＭＳ実測値：３６４．０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８７】
説明５４
４−（１−（６−（２−アセチルモルホリノ）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ５４）：
【化３５】
2020506966.tif 000041
トルエン（３０ｍＬ）中、１−（４−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）エタノン（５７６ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）および４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５００ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＣｕＩ（４５３ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（６７２ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン（２８１ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１００℃で５時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物を濃縮し、残渣をＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝３：１で溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標題生成物を白色固体として得た（５５０ｍｇ、収率：６３％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝２．０１分；ＭＳ理論値：５５０．３、ＭＳ実測値：５５１．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８８】
説明５５
１−（４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）エタノン（Ｄ５５）：
【化３６】
2020506966.tif 000042
ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中、４−（１−（６−（２−アセチルモルホリノ）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５４０ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）の溶液に、２，２，２−トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物を濃縮し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）およびＮＨ３．Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（２×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮乾固し、目的生成物を白色固体として得た（４０６ｍｇ、収率：９２％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．７９分；ＭＳ理論値：４５０．２、ＭＳ実測値：４５１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８９】
説明５６
１−（４−（６−（６−（１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）エタノン（Ｄ５６）：
【化３７】
2020506966.tif 000043
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中、１−（４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）エタノン（３８０ｍｇ、０．８４０ｍｍｏｌ）、１−フルオロ−２−ヨードエタン（１７６ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（３２６ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。ＬＣ−ＭＳは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（２×５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮乾固した。残渣をＥｔＯＡｃで溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標題生成物を白色固体として得た（２３５ｍｇ、収率：５６％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．８０分；ＭＳ理論値：４９６．６、ＭＳ実測値：４９７．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９０】
説明５７
４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（Ｄ５７）
【化３８】
2020506966.tif 000044
ＨＩ（５５％、５０ｍＬ）中、ＮａＩ（１１．９ｇ、７９．７ｍｍｏｌ）の溶液に、４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（１０．０ｇ、６１．３ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。この反応混合物を４０℃に加熱し、１時間撹拌し、次いで、濾過し、水次いで、メタノール（５０ｍＬ）で洗浄し、濾過した。濾過ケークを乾燥させ、標題化合物（９．０ｇ、収率４２％）を白色固体として得た。
1H NMRm (400 MHz、CDCl3): δ 8.07 (s, 1H), 2.67 (s, 3H)。
ＬＣＭＳ（移動相：２．５分で５−９５％アセトニトリル）：Ｒｔ＝１．５９分、ＭＳ理論値：３４６；ＭＳ実測値：３４７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９１】
説明５８
６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロ−１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ５８）
【化３９】
2020506966.tif 000045
ＤＭＦ（２ｍＬ）中、６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１１）（８０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および１−ブロモ−２−フルオロエタン（５２．０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｋ２ＣＯ３（１４１ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を２５℃で１日間撹拌し、水で急冷し、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、乾燥させ、濾過し、濃縮した。シリカゲル(silico gel)カラム（ＥｔＯＡｃ〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝２０：１）により精製し、標題生成物（４０ｍｇ、収率４１．８％）を白色固体として得た。
【０１９２】
説明５９
６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロ−１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ５９）
【化４０】
2020506966.tif 000046
標題化合物を、２５℃で、ＤＭＦ中、６−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１２）、１−ブロモ−２−フルオロエタン、Ｋ２ＣＯ３の懸濁液から出発し、Ｄ５８に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．２９分；ＭＳ理論値：２７９．１、ＭＳ実測値：２８０．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９３】
説明６０
１−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（Ｄ６０）
【化４１】
2020506966.tif 000047
標題化合物を、ｉ−ＰｒＯＨ中、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン、アゼチジン−３−オール塩酸塩およびＴＥＡの懸濁液から出発し、Ｄ１４に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.69(s, 1H), 5.79 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.59-4.52 (m, 1H)、4.22-4.18 (m, 2H), 3.72 (dd, J = 9.6, 4.4 Hz, 2H), 2.29 (s, 3H)。
ＬＣＭＳ：（移動相：２．５分で５−９５％アセトニトリル）、Ｒｔ＝１．１８分、ＭＳ理論値：２９１；ＭＳ実測値：２９２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９４】
説明６１
４−ヨード−２−メチル−６−（３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アゼチジン−１−イル）ピリミジン（Ｄ６１）
【化４２】
2020506966.tif 000048
乾燥ＤＣＭ（２０ｍＬ）中、１−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（１．２０ｇ、４．１２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、室温で、ＤＨＰ（１．３８ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）およびＴｓＯＨ（２８０ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を加熱還流し、２０時間撹拌した。この反応混合物をＤＣＭで１００ｍＬに希釈し、次いで、Ｎａ２ＣＯ３（飽和、５０ｍＬ）およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝５：１）  により精製し、標題化合物（１．５ｇ、収率９７％）を無色の油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.48 (s, 1H), 4.70-4.60 (m, 2H), 4.33-4.18 (m, 2H), 4.08-3.92 (m, 2H), 3.90-3.80 (m, 1H), 3.57-3.48 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 1.89-1.69 (m, 2H), 1.64-1.49 (m, 4H)。
ＬＣＭＳ（移動相：２．５分で５−９５％アセトニトリル）：Ｒｔ＝１．５９分、ＭＳ理論値：３７５；ＭＳ実測値：３７６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９５】
説明６２
６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロ−１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１−（２−メチル−６−（３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アゼチジン−１−イル）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ６２）
【化４３】
2020506966.tif 000049
標題化合物を、乾燥トルエン中、６−（３−フルオロ−１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１−（２−メチル−６−（３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アゼチジン−１−イル）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ５８）、４−ヨード−２−メチル−６−（３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アゼチジン−１イル）ピリミジン、ＣｕＩおよびＫ３ＰＯ４の懸濁液ならびにＮ，Ｎ−ジメチル−１，２−エタンジアミンから出発し、Ｄ１６に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
【０１９６】
説明６３
６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロ−１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１−（２−メチル−６−（３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アゼチジン−１−イル）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ６３）
【化４４】
2020506966.tif 000050
標題化合物を、乾燥トルエン中、６−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−フルオロ−１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ５９）、４−ヨード−２−メチル−６−（３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アゼチジン−１−イル）ピリミジン、ＣｕＩおよびＫ３ＰＯ４の懸濁液ならびにＮ，Ｎ−ジメチル−１，２−エタンジアミンから出発し、Ｄ１６に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１８分；ＭＳ理論値：５２６．３、ＭＳ実測値：５２７．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９７】
説明６４
４−（５−メチル−１−（２−メチル−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ６４）：
【化４５】
2020506966.tif 000051
標題化合物を、トルエン／ＴＨＦ中４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルおよび（Ｒ）−４−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリンの混合物、Ｎ１，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン、ＣｕＩおよびＫ３ＰＯ４から出発し、Ｄ１６に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０．０分で４０％水（０．１％ＦＡ）および６０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）］：Ｒｔ＝５．９９分；ＭＳ理論値：５０６．６、ＭＳ実測値：５０７．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９８】
説明６５
（Ｒ）−３−メチル−４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン（Ｄ６５）：
【化４６】
2020506966.tif 000052
標題化合物を、ＥｔＯＡｃ中４−（５−メチル−１−（２−メチル−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルおよびＨＣｌ・ＥｔＯＡｃから出発し、Ｄ１７に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
【０１９９】
説明６６
２−（４−（５−メチル−１−（２−メチル−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸（Ｒ）−エチル（Ｄ６６）：
【化４７】
2020506966.tif 000053
標題化合物を、ＤＭＦ中、（Ｒ）−３−メチル−４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリンの溶液、Ｅｔ３Ｎおよび２−ブロモ酢酸エチルから出発し、Ｄ１８に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で７０％水（０．１％ＦＡ）および３０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１７分；ＭＳ理論値：４９２．６、ＭＳ実測値：４９３．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２００】
説明６７
４−（１−（２−メトキシ−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ６７）：
【化４８】
2020506966.tif 000054
標題化合物を、トルエン／ＴＨＦ中４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル、（Ｒ）−４−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン、ＣｕＩ（２０ｍｇ）、Ｋ３ＰＯ４の混合物およびＤＭＥＤＡから出発し、Ｄ１６に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.72 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.46 (br, 1H), 4.29 (br, 2H), 4.11〜4.10 (m, 1H), 4.11 (s, 3H), 4.03〜3.99 (m, 1H), 3.78〜3.73 (m, 2H), 3.61〜3.53 (m, 1H), 3.37〜3.30 (m, 1H), 3.02〜2.85 (m, 3H), 2.47 (s, 3H), 1.86 (m, 2H), 1.71〜1.65 (m, 2H), 1.50 (s, 9H), 1.34 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。
【０２０１】
説明６８
（Ｒ）−４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン塩酸塩（Ｄ６８）の合成：
【化４９】
2020506966.tif 000055
標題化合物を、ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ中４−（１−（２−メトキシ−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルの溶液から出発し、Ｄ１７に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
【０２０２】
説明６９
２−（４−（１−（２−メトキシ−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸（Ｒ）−エチル（Ｄ６９）：
【化５０】
2020506966.tif 000056
標題化合物を、２−ブロモ酢酸エチルならびにＤＭＦ中（Ｒ）−４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン塩酸塩およびＥｔ３Ｎの溶液から出発し、Ｄ１８に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
【０２０３】
説明７０
４−（１−（２−メトキシ−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ７０）：
【化５１】
2020506966.tif 000057
標題化合物を、トルエン／ＴＨＦ中４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル、（Ｓ）−４−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン、ＣｕＩおよびＫ３ＰＯ４の懸濁液ならびにＤＭＥＤＡから出発し、Ｄ１６に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．０７分；ＭＳ理論値：５２２．３、ＭＳ実測値：５２３．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０４】
説明７１
（Ｓ）−４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリン（Ｄ７１）：
【化５２】
2020506966.tif 000058
標題化合物を、ＥｔＯＡｃ中４−（１−（２−メトキシ−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチルの溶液およびＨＣｌ／ＥｔＯＡｃから出発し、Ｄ１７に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．２１分；ＭＳ理論値：４２２．２、ＭＳ実測値：４２３．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０５】
説明７２
２−（４−（１−（２−メトキシ−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸（Ｓ）−エチル（Ｄ７２）：
【化５３】
2020506966.tif 000059
標題化合物を、２−ブロモ酢酸エチルならびにＤＭＦ中（Ｓ）−４−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）−３−メチルモルホリンおよびＥｔ３Ｎの溶液から出発し、Ｄ１８に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．３４分；ＭＳ理論値：５０８．３、ＭＳ実測値：５０９．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０６】
説明７３
４−（アゼチジン−１−イル）−６−ヨード−２−メトキシピリミジン（Ｄ７３）
【化５４】
2020506966.tif 000060
ＴＨＦ（１０．０ｍＬ）およびｉ−ＰｒＯＨ（１０．０ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（３６２ｍｇ、１．００ｍｏｌ）、アゼチジン（８６．０ｍｇ、１．５０ｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３８８ｇ、３．００ｍｍｏｌ）の混合物を室温で一晩撹拌した。この反応溶液を濃縮し、クロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝２：１）により精製し、標題生成物（２６９ｍｇ、収率：９２．０％）を白色固体として得た。
【０２０７】
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．３８分；ＭＳ理論値：２９１．０、ＭＳ実測値：２９２．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０８】
説明７４
４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ７４）
【化５５】
2020506966.tif 000061
トルエン／ＴＨＦ（５．０ｍＬ／１ｍＬ）中、３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸シス−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ９、ピーク１、６０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、４−（アゼチジン−１−イル）−６−ヨード−２−メトキシピリミジン（６３ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（３４ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（７６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＭＥＤＡ（３２ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物をＮ２で３回脱気し、次いで、８０℃で２時間撹拌した。この反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝２：１）により精製し、標題生成物（５８ｍｇ、収率：６５％）を淡黄色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．３０分；ＭＳ理論値：４９６．３、ＭＳ実測値：４９７．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０９】
説明７５
１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ７５）
【化５６】
2020506966.tif 000062
ＣＨ２Ｃｌ２（５．０ｍＬ）中、４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ７４、５８ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１．０ｍＬ）を滴下した。この反応溶液を室温で６０分間撹拌し、濃縮し、標題生成物（５９ｍｇ、収率：１００％）を淡黄色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．２３分；ＭＳ理論値：３９６．２、ＭＳ実測値：３９７．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１０】
説明７６
２−（４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）酢酸エチル（Ｄ７６、ピーク１から）
【化５７】
2020506966.tif 000063
ＤＭＦ（２．０ｍＬ）中、１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ７５、５９ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（６０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の溶液に、２−ブロモ酢酸エチル（４０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。この反応溶液を室温で６０分間撹拌し、次いで、飽和ＮＨ４Ｃｌで急冷し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１：１）により精製し、標題生成物（４９ｍｇ、収率：８８％）を淡黄色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．６６分；ＭＳ理論値：４８２．２、ＭＳ実測値：４８３．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１１】
説明７７
４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ７７）
【化５８】
2020506966.tif 000064
標題化合物を、トルエン／ＴＨＦ中３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸シス−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１０、ピーク２）、４−（アゼチジン−１−イル）−６−ヨード−２−メトキシピリミジン（Ｄ７３）、ＣｕＩおよびＫ３ＰＯ４の懸濁液ならびにＤＭＥＤＡから出発し、Ｄ７４に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．３０分；ＭＳ理論値：４９６．３、ＭＳ実測値：４９７．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１２】
説明７８
１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ７８、ピーク２から）
【化５９】
2020506966.tif 000065
標題化合物を、ＣＨ２Ｃｌ２中４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ７７）の溶液およびＴＦＡから出発し、Ｄ７４に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．２３分；ＭＳ理論値：３９６．２、ＭＳ実測値：３９７．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１３】
説明７９
２−（４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）酢酸エチル（Ｄ７９、ピーク２から）
【化６０】
2020506966.tif 000066
標題化合物を、２−ブロモ酢酸エチル（３７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）から出発し、ＤＭＦ中、１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−６−（３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール（Ｄ７８）およびＥｔ３Ｎの溶液をゆっくり加え、Ｄ７５に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．６６分；ＭＳ理論値：４８２．２、ＭＳ実測値：４８３．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１４】
説明８０
４−（５−クロロ−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ８０）
【化６１】
2020506966.tif 000067
ＭｅＯＨ（４０．０ｍＬ）中、６−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）−５−クロロ−１Ｈ−インダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１１７、６００ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＮａＯＨ水溶液（１Ｍ、４０．０ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌し、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ×３）で希釈した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮乾固した。残渣をＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１：１で溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標題生成物を白色固体として得た（４００ｍｇ、収率：８６．０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．５７分；ＭＳ理論値：３３５．８、ＭＳ実測値：３３６．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１５】
説明８１
４−（５−クロロ−１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ８１）
【化６２】
2020506966.tif 000068
ＤＭＦ（８０．０ｍＬ）中、４−（５−クロロ−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．００ｇ、６．００ｍｍｏｌ）、４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（９７８ｍｇ、６．００ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（５．９０ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）の混合物を５０℃で５時間撹拌した。この反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を水（５０ｍＬ×３）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝５：１）で溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して粗生成物を得た。この粗物質をＭｅＯＨから再結晶化させ、標題生成物を白色固体として得た（３８０ｍｇ、１３．収率０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で２０％水（０．１％ＴＦＡ）および８０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝３．４４分；ＭＳ理論値：４６１．１、ＭＳ実測値：４６２．１［Ｍ＋Ｈ］＋
【０２１６】
説明８２
５−クロロ−１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ８２）
【化６３】
2020506966.tif 000069
ＣＨ２Ｃｌ２（８０．０ｍＬ）中、４−（５−クロロ−１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３８０ｍｇ、０．８２０ｍｍｏｌ）の溶液に、２，２，２−トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌し、ＮＨ３．Ｈ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮乾固し、標題生成物を白色固体として得た（３１０ｍｇ、収率：１００％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．８１分；ＭＳ理論値：３６１．０、ＭＳ実測値：３６２．０［Ｍ＋Ｈ］＋
【０２１７】
説明８３
１−（４−（５−クロロ−１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ８３）
【化６４】
2020506966.tif 000070
ＤＭＦ（４０．０ｍＬ）中、５−クロロ−１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（３００ｍｇ、０．８３０ｍｍｏｌ）および１−ブロモプロパン−２−オン（１６４ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｅｔ３Ｎ（２４２ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌し、濃縮し、Ｈ２Ｏ（５０．０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を水（５０ｍＬ×３）およびブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃで溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標題生成物を白色固体として得た（２４０ｍｇ、収率：６９．０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．８２分；ＭＳ理論値：４１７．１、ＭＳ実測値：４１８．１［Ｍ＋Ｈ］＋
【０２１８】
説明８４
（Ｒ）−１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ８４）
【化６５】
2020506966.tif 000071
ＤＭＦ（３０．０ｍＬ）中、１−（４−（５−クロロ−１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（１２０ｍｇ、０．２９０ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−モルホリン−２−イルメタノール塩酸塩（Ｄ１１４、４４．０ｍｇ、０．２９０ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で、ＤＩＥＡ（１８７ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を８０℃で一晩撹拌し、室温に冷却し、水（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を水（５０ｍＬ×３）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、濾過し、濃縮し、標題生成物を黄色固体として得た（１１０ｍｇ、収率：７６．０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．７８分；ＭＳ理論値：４９８．２、ＭＳ実測値：４９９．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１９】
説明８５
１−（４−（５−クロロ−１−（６−（（Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（Ｄ８５）
【化６６】
2020506966.tif 000072
ＭｅＯＨ（３０．０ｍＬ）中、（Ｒ）−１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（１１０ｍｇ、０．２２０ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、ＮａＢＨ４（２４．０ｍｇ、０．６６０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を０℃で３時間撹拌し、Ｈ２Ｏ（５０．０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を水およびブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝２０：１）で溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標題生成物を白色固体として得た（７８．０ｍｇ、収率：７０．０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．７７分；ＭＳ理論値：５００．２、ＭＳ実測値：５０１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２０】
説明８６
（Ｓ）−１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ８６）
【化６７】
2020506966.tif 000073
ＤＭＦ（３０．０ｍＬ）中、１−（４−（５−クロロ−１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（１２０ｍｇ、０．２９０ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−モルホリン−２−イルメタノール塩酸塩（４４．０ｍｇ、０．２９０ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で、ＤＩＥＡ（１８７ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を８０℃で一晩撹拌し、室温に冷却し、水（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を水（５０ｍＬ×３）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、標題生成物を黄色固体として得た（１１０ｍｇ、収率：７６．０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．７８分；ＭＳ理論値：４９８．２、ＭＳ実測値：４９９．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２１】
説明８７
４−（１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸シス−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ８７）
【化６８】
2020506966.tif 000074
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中、３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸シス−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ９、ピーク１）（５００ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）および４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジン（３００ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．６０ｇ、４．９１ｍｍｏｌ）の混合物を４０℃で２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、ブライン（１００ｍＬ×３）で洗浄した。有機層を乾燥させ、濃縮した。残渣をカラム（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１０：１）により精製し、標題生成物を灰白色固体として得た（５００ｍｇ、７２．収率０％）。固体をＭｅＯＨから再結晶化させ、純粋な生成物を白色固体として得た（３４２ｍｇ、収率５０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．８１分；ＭＳ理論値：４５９．２、ＭＳ実測値：４６０．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２２】
説明８８
１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−６−（シス−３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（Ｄ８８）
【化６９】
2020506966.tif 000075
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中、４−（１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸シス−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ８７、３００ｍｇ、０．６５０ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ、６Ｎ）を加えた。この反応混合物を室温で１時間撹拌し、濃縮し、標題生成物を白色固体として得た（２８０ｍｇ）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．３７分；ＭＳ理論値：３５９．１、ＭＳ実測値：３６０．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２３】
説明８９
１−（シス−４−（１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ８９）
【化７０】
2020506966.tif 000076
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中、１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−６−（シス−３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（Ｄ８８、２６０ｍｇ、０．６００ｍｍｏｌ）の溶液に、１−ブロモプロパン−２−オン（２７４ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温で１時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、ブライン（６０ｍＬ×３）で洗浄し、乾燥させ、濃縮し、標題生成物を灰白色固体として得た（３１０ｍｇ）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．３７分；ＭＳ理論値：４１５．２、ＭＳ実測値：４１６．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２４】
説明９０
１−（シス−３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ９０）
【化７１】
2020506966.tif 000077
ＮＭＰ（１０ｍＬ）中、１−（シス−４−（１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ８９、７０．７ｍｇ、０．１７０ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−モルホリン−２−イルメタノール塩酸塩（Ｄ１１６、１５３ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１ｍＬ）の溶液を６０℃で２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、ブライン（５０ｍＬ×３）で洗浄した。有機溶液を乾燥させ、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝１／１０）により精製し、標題生成物を白色固体として得た（７９．０ｍｇ、９９．０％収率）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．０９分；ＭＳ理論値：４９６．３、ＭＳ実測値：４９７．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２５】
説明９１
１−（シス−３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ９１）
【化７２】
2020506966.tif 000078
標題化合物を、６０℃で２時間、ＮＭＰ中、１−（シス−４−（１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ８９）、（Ｓ）−モルホリン−２−イルメタノール塩酸塩およびＥｔ３Ｎの溶液から出発し、Ｄ９０に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．０５分；ＭＳ理論値：４９６．３、ＭＳ実測値：４９７．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２６】
説明９２
４−（１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸シス−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ９２）
【化７３】
2020506966.tif 000079
標題化合物を、４０℃で２時間、ＤＭＦ中、３−フルオロ−４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸シス−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１０、ピーク２）、４，６−ジクロロ−２−メチルピリミジンおよびＣｓ２ＣＯ３の混合物から出発し、Ｄ８７に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．８１分；ＭＳ理論値：４５９．２、ＭＳ実測値：４６０．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２７】
説明９３
１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−６−（シス−３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール塩酸塩（Ｄ９３）
【化７４】
2020506966.tif 000080
標題化合物を、室温で１時間、ＭｅＯＨおよびＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ中、４−（１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−カルボン酸シス−ｔｅｒｔ−ブチルの混合物から出発し、Ｄ８８に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．３７分；ＭＳ理論値：３５９．１、ＭＳ実測値：３６０．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２８】
説明９４
１−（シス−４−（１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ９４）
【化７５】
2020506966.tif 000081
標題化合物を、室温で１時間、ＤＭＦ中１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−６−（シス−３−フルオロピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール塩酸塩の溶液、１−ブロモプロパン−２−オンおよびＥｔ３Ｎから出発しＤ８９に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．３７分；ＭＳ理論値：４１５．２、ＭＳ実測値：４１６．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２９】
説明９５
１−（シス−３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ９５）
【化７６】
2020506966.tif 000082
標題化合物を、６０℃で２時間、ＮＭＰ中、１−（４−（１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−シス−３−フルオロピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ９４）、（Ｒ）−モルホリン−２−イルメタノール塩酸塩およびＥｔ３Ｎの溶液から出発し、Ｄ９０に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ」］：Ｒｔ＝１．１４分；ＭＳ理論値：４９６．２６、ＭＳ実測値：４９７．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３０】
説明９６
１−（シス−３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ９６）
【化７７】
2020506966.tif 000083
ＮＭＰ（５．００ｍＬ）中、１−（シス−４−（１−（６−クロロ−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）３−フルオロピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ９４、７５．０ｍｇ、０．１８０ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−モルホリン−２−イルメタノール塩酸塩（１３８ｍｇ、０．９００ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１２５ｍｇ）の溶液を６０℃で２時間撹拌した。この反応溶液を飽和ＮＨ４Ｃｌ（８０．０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲル(silico gel)クロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２＝１／１５）により精製し、標題生成物を白色固体として得た（１２０ｍｇ）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１４分；ＭＳ理論値：４９６．３、ＭＳ実測値：４９７．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３１】
説明９７
４−（１−（６−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ９７）
【化７８】
2020506966.tif 000084
トルエン（３．００ｍＬ）中、１−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（２９１ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３１５ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（３８．０ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（４２４ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（５６．０ｍｇ、０．４００ｍｍｏｌ）の懸濁液を１００℃で一晩撹し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、ＮＨ３．Ｈ２Ｏ（１５ｍＬ×３）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１：１）により精製し、標題化合物（４２０ｍｇ、８８％）を白色固体として得た。
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ8.75 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.59 (s, 1H), 4.84-4.81 (m, 1H), 4.43-4.29 (m, 4H), 4.02-3.98 (m, 2H), 2.98-2.85 (m, 3H), 2.61 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 1.89-1.86 (m, 2H), 1.78-1.72 (m, 3H), 1.50 (s, 9H)。
【０２３２】
説明９８
１−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（Ｄ９８）
【化７９】
2020506966.tif 000085
ＭｅＯＨ（２．００ｍＬ）中、４−（１−（６−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（４２０ｍｇ、０．８８０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（２Ｍ、１ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温で３時間撹拌し、濃縮し、標題生成物（３３２ｍｇ、９９．０％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ［カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｋｉｎｅｔｅｘ  ５μｍ  ＥＶＯ、Ｃ１８；カラムサイズ：４．６×５０ｍｍ；移動相：Ｂ（ＣＨ３ＣＮ）、Ａ（水中０．０２％ＮＨ４Ａｃ）；４分勾配（Ｂ％）］：Ｒｔ＝１．５８０分、ＭＳ理論値：３７８、ＭＳ実測値：３７９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３３】
説明９９
１−フルオロ−３−（４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（Ｄ９９）
【化８０】
2020506966.tif 000086
ＤＭＦ（１０．０ｍＬ）中、５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１１４、７８７ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ）、２−（フルオロメチル）オキシラン（１．００ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２．６０ｇ、７．８９ｍｍｏｌ）の混合物を密閉試験管にて８０℃で一晩撹拌した。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（３０．０ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ×２）で洗浄した。有機溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝３０：１〜１０：１）により精製し、標題生成物（４２０ｍｇ、収率：４３％）を黄色油状物として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で７０％水（０．１％ＴＦＡ）および３０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝３．０４分；ＭＳ理論値：３７５．２、ＭＳ実測値：３７６．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３４】
説明１００
１−フルオロ−３−（４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（Ｄ１００）
【化８１】
2020506966.tif 000087
ＣＨ２Ｃｌ２（１０．０ｍＬ）中、１−フルオロ−３−（４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（Ｄ９９、４２０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（２．００ｍＬ）を滴下した。この反応溶液を室温で一晩撹拌し、濃縮し、水（２０．０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（５．００ｍＬ）で希釈した。得られた混合物を固体Ｋ２ＣＯ３でｐＨ約９に塩基性化し、次いで、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝５：１）により精製し、標題生成物（１８５ｍｇ、収率：５７．０％）を黄色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で７０％水（０．１％ＴＦＡ）および３０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝３．８５分；ＭＳ理論値：２９１．２、ＭＳ実測値：２９２．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３５】
説明１０１
２−ヒドロキシ−３−（４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン酸メチル（Ｄ１０１）
【化８２】
2020506966.tif 000088
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中、５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１１４、４．４０ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）、オキシラン−２−カルボン酸メチル（４．５０ｇ、４４．１ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１４．４ｇ、４４．１ｍｍｏｌ）の混合物を８０℃で密閉試験管にて一晩撹拌した。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（８０．０ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ×２）で洗浄した。有機溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝３０：１）により精製し、標題生成物（１．７０ｇ、収率：２９．０％）を黄色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で７０％水（０．１％ＴＦＡ）および３０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝３．２８分；ＭＳ理論値：４０１．２、ＭＳ実測値：４０２．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３６】
説明１０２
２−フルオロ−３−（４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン酸メチル（Ｄ１０２）
【化８３】
2020506966.tif 000089
ＣＨ２Ｃｌ２（１５．０ｍＬ）中、２−ヒドロキシ−３−（４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン酸メチル（Ｄ１０１、１．７０ｇ、４．２３ｍｍｏｌ）の溶液に、−６０℃、Ｎ２下で、ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中、ＤＡＳＴ（２．００ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。この反応混合物を室温で４時間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３で急冷し、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。分離した有機部分を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝１００：１）により精製し、標題生成物（６２０ｍｇ、収率：３６．０％）を黄色油状物として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で７０％水（０．１％ＴＦＡ）および３０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１０分；ＭＳ理論値：４０３．２、ＭＳ実測値：４０４．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３７】
説明１０３
２−フルオロ−３−（４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オール（Ｄ１０３）
【化８４】
2020506966.tif 000090
ＭｅＯＨ（１０．０ｍＬ）中、２−フルオロ−３−（４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン酸メチル（Ｄ１０２、６２０ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（１７４ｍｇ、４．６１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で３０分間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３で急冷し、ＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈し、ブライン（２０ｍＬ×２）で洗浄した。分離した有機部分を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、標題生成物（５６０ｍｇ、収率：９７．０％）を黄色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で７０％水（０．１％ＴＦＡ）および３０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．０２分；ＭＳ理論値：３７５．２、ＭＳ実測値：３７６．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３８】
説明１０４
２−フルオロ−３−（４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オール（Ｄ１０４）
【化８５】
2020506966.tif 000091
ＣＨ２Ｃｌ２（５．００ｍＬ）中、２−フルオロ−３−（４−（５−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オール（Ｄ１０３、５６０ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１ｍＬ）を滴下した。この反応溶液を室温で一晩撹拌し、濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。分離した有機溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝１０：１）により精製し、標題生成物（２４５ｍｇ、収率：５６．０％）を黄色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で７０％水（０．１％ＴＦＡ）および３０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．０６分；ＭＳ理論値：２９１．２、ＭＳ実測値：２９２．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３９】
説明１０５
４−（アゼチジン−１−イル）−６−ヨード−２−メトキシピリミジン（Ｄ１０５）
【化８６】
2020506966.tif 000092
ＤＭＳＯ（２０．０ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（２．００ｇ、５．５２ｍｍｏｌ）、アゼチジン（０．５７０ｇ、６．０７ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（１．６７ｇ、１６．６ｍｍｏｌ）の混合物を６０℃で一晩撹し、Ｈ２Ｏ（２５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×２）で抽出し、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝８／１）により精製し、標題生成物（０．６４０ｇ、４０．０％）を白色油状物として得た。
1HNMR (300 MHz, CDCl3): 6.29 (s, 1H), 4.07 (t, J = 8.0 Hz, 4H), 3.89 (s, 3H), 2.45-2.38 (m, 2H)。
【０２４０】
説明１０６
４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１０６）
【化８７】
2020506966.tif 000093
トルエン（４ｍＬ）中、４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３００ｍｇ、０．９５０ｍｍｏｌ）、４−（アゼチジン−１−イル）−６−ヨード−２−メトキシピリミジン（３０４ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（２７．０ｍｇ、０．１９０ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１８．０ｍｇ、０．０９５０ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（４０３ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で３時間撹拌し、Ｈ２Ｏ（１５ｍＬ）およびＮＨ３．Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を濃縮し、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝３／１）により精製し、粗生成物（４６０ｍｇ、１００％）を黄色油状物として得た。
ＬＣＭＳ［カラム：Ｃ１８；カラムサイズ：４．６×３０ｍｍ  ５μｍ；Ｄｉｋｗａ  Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ  ｐｌｕｓ；移動相：Ｂ（ＣＨ３ＣＮ）、Ａ（水中０．０２％ＮＨ４Ａｃ＋５％ＣＨ３ＣＮ）；４分勾配（Ｂ％）  ０５−９５−ＰＯＳ；流速：１．５ｍｌ／分］：Ｒｔ＝２．８２４分；ＭＳ理論値：４７８、ＭＳ実測値：４７９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４１】
説明１０７
１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１０７）
【化８８】
2020506966.tif 000094
ＤＣＭ（５ｍＬ）およびＴＦＡ（５ｍＬ）中、４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１０６、４６０ｍｇ、０．９６０ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１時間撹拌し、濃縮し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３でｐＨ＝８〜９まで塩基性化し、濾過しした。濾過ケークを乾燥させ、標題生成物（３５０ｍｇ、９６．０％）を黄色固体として得た。
ＬＣＭＳ［カラム：Ｃ１８；カラムサイズ：４．６×３０ｍｍ  ５μｍ；Ｄｉｋｗａ  Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ  ｐｌｕｓ；移動相：Ｂ（ＣＨ３ＣＮ）、Ａ（水中０．０２％ＮＨ４Ａｃ＋５％ＣＨ３ＣＮ；４分勾配（Ｂ％）０５−９５−ＰＯＳ；流速：１．５ｍｌ／分］：Ｒｔ＝１．８８０分；ＭＳ理論値：３７８、ＭＳ実測値：３７９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４２】
説明１０８
４−（１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１０８）
【化８９】
2020506966.tif 000095
トルエン（３ｍＬ）中、（Ｒ）−（４−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール（Ｄ１１６、３３５ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ５２、３１５ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（３８．０ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４（４２４ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（５６．０ｍｇ、０．４００ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で４時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、ＮＨ３．Ｈ２Ｏ（１５ｍＬ×３）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１：１）により精製し、標題生成物（４２０ｍｇ、８０．０％）を白色固体として得た。
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ8.75 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.38-4.25 (m, 5H), 4.15-4.05 (m, 2H), 3.81-3.65 (m, 5H), 3.15-3.11 (m, 1H), 3.08-2.83 (m, 5H), 2.62 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 1.51 (s, 10H)。
【０２４３】
説明１０９
（Ｒ）−（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール（Ｄ１０９）
【化９０】
2020506966.tif 000096
ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中、４−（１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１０８、４２０ｍｇ、０．８００ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（２Ｍ、１ｍＬ）を加えた。この混合物を室温で３時間撹拌し、濃縮し、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶解させ、アンバーライトで処理した。この混合物を室温で３０分間撹拌し、濾過した。濾液を濃縮し、標題生成物（３２７ｍｇ、９６％）を白色固体として得た。
1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ8.75 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.36-4.27 (m, 2H), 3.98-3.94 (m, 1H), 3.40-3.56 (m, 9H), 3.34-2.97 (m, 6H), 2.83-2.74 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.46 (s, 3H)。
【０２４４】
説明１１０
１−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（Ｄ１１０）
【化９１】
2020506966.tif 000097
ｉ−ＰｒＯＨ（１０ｍＬ）中、４，６−ジヨード−２−メトキシピリミジン（２．００ｇ、５．５２ｍｍｏｌ）、アゼチジン−３−オール（６６５ｍｇ、６．０７ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（１．６７ｇ、１６．６ｍｍｏｌ）の混合物を５０℃で５時間撹拌し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーカラム（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝４／１から１／１へ）により精製し、標題生成物（１．５７ｇ、９３．０％）を黄色固体として得た。
1HNMR (300 MHz, CDCl3): 6.32 (s, 1H), 4.80 (br s, 1H), 3.97-3.92 (m, 4H), 3.89 (s, 3H), 2.68 (s, 1H)。
【０２４５】
説明１１１
４−（１−（６−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１１１）
【化９２】
2020506966.tif 000098
トルエン（４ｍＬ）中、４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ５２、５００ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）、１−（６−ヨード−２−メトキシピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（Ｄ１１０、５３７ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（１１４ｍｇ、０．８００ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（６１．０ｍｇ、０．３２０ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（６７４ｍｇ、３．１８ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で３時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）で希釈し、ＮＨ３．Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーカラム（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２／１から１／１へ）により精製し、標題生成物（４４５ｍｇ、５８．０％）を黄色油状物として得た。
1H-NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 8.71 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.82 (br s, 1H), 4.43-4.26 (m, 4H), 4.26-3.92 (m, 5H), 3.01-2.82 (m, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.45-2.39 (m, 1H), 1.88-1.85 (m, 2H), 1.71-1.60 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)。
【０２４６】
説明１１２
１−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（Ｄ１１２）
【化９３】
2020506966.tif 000099
ＤＣＭ（４ｍＬ）中、４−（１−（６−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１１１、３５０ｍｇ、０．７１０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温で２時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３でｐＨ＝９〜１０に調整し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、標題化合物（２７０ｍｇ、９７％）を黄色油状物として得た。
ＬＣＭＳ［カラム：Ｃ１８；カラムサイズ：４．６×３０ｍｍ  ５μｍ；Ｄｉｋｗａ  Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ  ｐｌｕｓ；移動相：Ｂ（ＣＨ３ＣＮ）、Ａ（水中０．０２％ＮＨ４Ａｃ＋５％ＣＨ３ＣＮ）；４分勾配（Ｂ％）１０−９５−ＰＯＳ；流速：１．５ｍｌ／分］：Ｒｔ＝１．４７９分；ＭＳ理論値：３９４、ＭＳ実測値：３９５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４７】
説明１１３
（Ｓ）−（４−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール（Ｄ１１３）
【化９４】
2020506966.tif 000100
ＣＨ３ＯＨ（５ｍＬ）中、（Ｓ）−モルホリン−２−イルメタノール塩酸塩（４３０ｍｇ  粗、２．８０ｍｍｏｌ）の溶液に、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（１．１０ｇ、３．１０ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（８５０ｍｇ、８．４０ｍｍｏｌ）を得た。得られた混合物を６０℃に２時間温めた。ＴＬＣは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を濃縮した。粗物質をシリカゲルゲル(gel silico)カラム（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝５：１）により精製し、標題化合物（７６０ｍｇ、収率８１％）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.79 (s, 1H), 4.18-4.01 (m, 3H), 3.79-3.58 (m, 4H), 3.08-2.99 (m, 1H), 2.92-2.84 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 1.97-1.90 (m, 1H)。
【０２４８】
説明１１４
５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１１４）
【化９５】
2020506966.tif 000101
ＴＨＦ（２００ｍＬ）中、５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ５１、１０．０ｇ、４６．５ｍｍｏｌ）およびＤＨＰ（７．８０ｇ、９３．０ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ｐ−ＴｓＯＨ（８８４ｍｇ、４．７０ｍｍｏｌ）を一度に加えた。次に、この反応混合物を６０℃で一晩撹拌した。次に、この反応混合物を濃縮し、ＤＣＭ（１．５Ｌ）に再溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝１／１５）により精製し、生成物を褐色固体として得た（６．７０ｇ、４８．収率０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１０８分；ＭＳ理論値：２９９．２０、ＭＳ実測値：３００．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４９】
説明１１５
（Ｒ）−モルホリン−２−イルメタノール塩酸塩（Ｄ１１５）
【化９６】
2020506966.tif 000102
２−（ヒドロキシメチル）モルホリン−４−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（５００ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌した。ＴＬＣは、反応が完了していたことを示した。この反応物を濃縮し、標題化合物（４２０ｍｇ、収率＞１００％）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.67 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 3.94-3.88 (m, 1H), 3.77-3.67 (m, 2H), 3.45-3.33 (m, 2H), 3.13 (t, J = 12.6 Hz, 2H), 2.95-2.87 (m, 1H), 2.78-2.67 (m, 1H)。
【０２５０】
説明１１６
（Ｒ）−（４−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール（Ｄ１１６）
【化９７】
2020506966.tif 000103
ＣＨ３ＯＨ（１０ｍＬ）中、（Ｒ）−モルホリン−２−イルメタノール塩酸塩（４２３ｍｇ  粗、２．３０ｍｍｏｌ）の溶液に、４，６−ジヨード−２−メチルピリミジン（９５４ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（８３５ｍｇ、８．２５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を７０℃に温め、２時間撹拌した。ＬＣＭＳは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物を濃縮して溶媒を除去し、水（４０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラム（ＰＥ：ＥＡ＝２：１）により精製し、標題化合物（６３９ｍｇ、収率８３％）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.79 (s, 1H), 4.22-4.01 (m, 3H), 3.79-3.56 (m, 4H), 3.08-2.98 (m, 1H), 2.88-2.84 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.09-2.04 (m, 1H)。
【０２５１】
説明１１７
６−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）−５−クロロ−１Ｈ−インダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１１７）
【化９８】
2020506966.tif 000104
ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中、５−クロロ−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ８２、２．００ｇ、８．４９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．７２ｇ、１７．０ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で（Ｂｏｃ）２Ｏ（２．０３ｇ、９．３３ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で３時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物を濃縮乾固し、残渣をＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝５：１で溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標題生成物を白色固体として得た（１．５０ｇ、収率：４０．０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝２．０７分；ＭＳ理論値：４５７．８、ＭＳ実測値：４５８．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２５２】
説明１１８
４−（５−クロロ−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１１８）
【化９９】
2020506966.tif 000105
ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中、６−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）−５−クロロ−１Ｈ−インダゾール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｄ１１７、６００ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＮａＯＨ水溶液（１Ｍ、４０ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。ＬＣ−ＭＳは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機液をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮乾固し、残渣をＰＥ：ＥｔＯＡｃ（１：１）で溶出されるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標題生成物を白色固体として得た（４００ｍｇ、収率：８６．０％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．５７分；ＭＳ理論値：３３５．８、ＭＳ実測値：３３６．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２５３】
実施例１
２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−モルホリノピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）エタノール（単一の未知の異性体１）
【化１００】
2020506966.tif 000106
ＴＨＦ（２ｍＬ）中、２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−モルホリノピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸エチル（Ｄ２７、９０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＡｌＨ４（３３ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで、ＥｔＯＡｃおよび飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で急冷し、濾過し、濃縮した。Ｃ１８フラッシュカラム（アセトニトリル：水＝５：９５〜９０：１０）により精製し、標題生成物を白色固体として得た（３６ｍｇ、収率：４４％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.87 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.92 (td, J = 9.2, 4.8 Hz, 0.5 H), 4.80 (td, J = 10.0, 4.8 Hz, 0.5 H), 4.11 (s, 3H), 3.81〜3.67 (m, 10 H), 3.42〜3.39 (m, 1H), 3.18〜3.09 (m, 1H), 3.03 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 2.74〜2.66 (m, 2H), 2.59〜2.55 (m, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.37 (td, J = 10.4, 4.4 Hz, 1 H), 2.26 (t, J = 12.0 Hz, 1 H), 2.00〜1.96 (m, 1H), 1.90〜1.80 (m, 1H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ 183.92 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ、純度９７．５９％］：Ｒｔ＝３．５６分；ＭＳ理論値：４７０．２、ＭＳ実測値：４７１．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ（カラム：ＡＤカラムサイズ：３×１００ｍｍ、３μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）（ＵＰＣ）。注入量：１０μｌ、移動相：ＣＯ２／ＭｅＯＨ／ＤＥＡ＝８０／２０／０．０２、流速：１．８ｍｌ／分、波長：ＵＶ２５４ｎｍ、温度：３５℃）：Ｒｔ＝２．６５３分、ｅｅ：１００％
【０２５４】
実施例２
２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−モルホリノピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）エタノール（単一の未知の異性体２）
【化１０１】
2020506966.tif 000107
標題化合物を、ＬｉＡｌＨ４およびＴＨＦ中２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−モルホリノピリミジン−４−イル）５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸エチルの溶液から出発し、Ｅ１に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.87 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.92〜4.86 (m, 0.5 H), 4.80 (m, 0.5 H), 4.11 (s, 3H), 3.81〜3.67 (m, 10 H), 3.42〜3.38 (m, 1H), 3.17〜3.08 (m, 1H), 3.03 (d, J = 12.0 Hz, 1 H), 2.73〜2.66 (m, 2H), 2.58〜2.55 (m, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.37〜2.31 (m, 1 H), 2.29〜2.23 (m, 1 H), 2.01〜1.95 (m, 1H), 1.90〜1.82 (m, 1H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ 183.92 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ、純度９８．７９％］：Ｒｔ＝３．６０分；ＭＳ理論値：４７０．２、ＭＳ実測値：４７１．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ［カラム：ＡＤカラムサイズ：３×１００ｍｍ，３μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）（ＵＰＣ）。注入量：１０μｌ、移動相：ＣＯ２／ＭｅＯＨ／ＤＥＡ＝８０／２０／０．０２、流速：１．８ｍｌ／分、波長：ＵＶ２５４ｎｍ、温度：３５℃］：Ｒｔ＝３．１７４分、ｅｅ：１００％
【０２５５】
実施例３
シス−２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−（（Ｒ）−３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）エタノール（単一の未知の異性体１）：
【化１０２】
2020506966.tif 000108
標題化合物を、乾燥させたＴＨＦ中シス−２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−（（Ｒ）−３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸エチル（Ｄ１８）、ＬｉＡｌＨ４の混合物から出発し、Ｅ１に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.87 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.88〜4.76 (m, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 4.02〜3.99 (d, J = 12Hz,1H), 3.77〜3.68 (m, 4H), 3.58〜3.56 (m, 1H), 3.42〜3.33 (m, 2H), 3.05〜3.03 (m, 1H), 3.02〜2.99 (m, 1H), 2.69 (s, 2H), 2.56 (s, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.02〜1.98 (m, 2H), 2.34〜2.26 (m, 2H), 2.00〜1.98 (m, 1H), 1.86〜1.82 (m, 1H), 1.35〜1.33 (d, J = 8 Hz,3H)。
19F NMR (376.5 MHz, CDCl3): δ 183.92 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０．０分で８０％水（０．１％ＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝３．９６分；ＭＳ理論値：４８４．６、ＭＳ実測値：４８５．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ［ＡＤ  ３．０×１００ｍｍ、３μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）（ＵＰＣ）、相：ＣＯ２／ＭｅＯＨ／ＤＥＡ＝８５／１５／０．１５、流速：２ｍＬ／分、温度：３５℃］：Ｒｔ＝１．２３５分、９６．３％ｅｅ。
【０２５６】
実施例４
シス−２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−（（Ｒ）−３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）エタノール（単一の未知の異性体２）：
【化１０３】
2020506966.tif 000109
標題化合物を、２−（３−フルオロ−４−（１−（２−メトキシ−６−（（Ｒ）−３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）アセタート（Ｄ２１）から出発し、Ｅ１に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.87 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.8 (s, 1H), 4.89〜4.76 (m, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 4.02〜3.98 (d, J = 16.0Hz,1H), 3.80〜3.74 (m, 4H), 3.68〜3.62 (m, 1H), 3.42〜3.39 (m, 2H), 3.145〜3.08 (m, 1H), 3.02〜2.99 (m, 1H), 2.71〜2.68 (m, 2H), 2.57 (s, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.36〜2.25 (m, 2H), 2.23〜2.00 (m, 1H), 1.97〜1.89 (m, 2H), 1.35〜1.33 (d, J = 8.0Hz,3H)。
19F NMR (376.5 MHz, CDCl3): δ 183.92 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０．０分で８０％水（０．１％ＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．１０分；ＭＳ理論値：４８４．６、ＭＳ実測値：４８５．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ［ＡＤ  ３．０×１００ｍｍ、３μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）（ＵＰＣ）、相：ＣＯ２／ＭｅＯＨ／ＤＥＡ＝８５／１５／０．１５、流速：２ｍＬ／分、温度：３５℃］：Ｒｔ＝１．３８１分、９８．１％ｅｅ。
【０２５７】
実施例５〜１２
実施例５〜３２は、Ｅ１に関して記載されているものと同様の手順を用いて製造した。
【０２５８】
【表２】
2020506966.tif 000110
2020506966.tif 000111
2020506966.tif 000112
2020506966.tif 000113
2020506966.tif 000114
2020506966.tif 000115
【０２５９】
＊移動相：９分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ、
＊＊キラル法：カラム：ＡＤカラムサイズ：３×１００ｍｍ，３μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）（ＵＰＣ）。注入量：１０μｌ移動相：ＣＯ２／ＭｅＯＨ／ＤＥＡ＝８０／２０／０．０２、流速：１．８ｍｌ／分、波長：ＵＶ２５４ｎｍ、温度：３５℃、
＊＊＊移動相：９分で５０％水（０．１％ＮＨ３ＯＨ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＮＨ３ＯＨ）から５％水（０．１％ＮＨ３ＯＨ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＮＨ３ＯＨ）へ
＊＊＊＊ＵＰＣ、カラム：ＡＤ、５μｍ、０．４６ｃｍ  Ｉ．Ｄ．×２５ｃｍ  Ｌ。注入量：３μｌ移動相：ＣＯ２／ＥｔＯＨ／ＡＣＮ／ＤＥＡ  ７５／２１／９／０．０２５、流速：３ｍＬ／分、波長：ＵＶ２５４ｎｍ、温度：３５℃、
【０２６０】
実施例１３〜１６
１−（４−（６−（６−（１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）エタノール（単一の未知の異性体１；単一の未知の異性体２；単一の未知の異性体３；単一の未知の異性体４）：
【化１０４】
2020506966.tif 000116
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中、１−（４−（６−（６−（１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）エタノン（２５７ｍｇ、０．５２０ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＮａＢＨ４（３９．０ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で３時間撹拌した。ＬＣＭＳは、反応が完了していたことを示した。この反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した。分離した水層をＣＨ２Ｃｌ２（２×３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、粗生成物を白色固体として得た（２５４ｍｇ、収率：９８％）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．７９分；ＭＳ理論値：４９８．６、ＭＳ実測値：４９９．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６１】
キラル分割：
方法：カラム：ＡＤ−Ｈ；カラムサイズ：０．４６ｃｍ  Ｉ．Ｄ．×１５ｃｍ  Ｌ；注入量：２ｕｌ；移動相：ＣＯ２：ＥｔＯＨ（０．０５％ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）＝６０：４０；流速：０．５ｍｌ；波長：ＵＶ２５４ｎｍ；温度：２５℃；ＥｔＯＨ中のサンプル溶液
【０２６２】
単一の未知の異性体１
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.74 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.70〜4.68 (m, 1H), 4.58〜4.56 (m, 1H), 4.37〜4.24 (m, 2H), 4.14 (s, 3H), 4.02〜4.01 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.95〜3.94 (m, 1H), 3.69〜3.68 (m, 1H), 3.47〜3.42 (m, 1H), 3.15〜3.01 (m, 4H), 2.85〜2.74 (m, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.32〜2.25 (m, 2H), 2.10 (s, 1H), 1.92〜1.90 (m, 4H), 1.30〜1.28 (d, J = 8.0 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3):δ 217.725(s)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で９５％水（０．１％ＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：純度１００％；Ｒｔ＝４．６６分；ＭＳ理論値：４９８．６、ＭＳ実測値：４９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６３】
単一の未知の異性体２
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.74 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.70〜4.68 (m, 1H), 4.59〜4.56 (m, 1H), 4.37〜4.26 (m, 2H), 4.14 (s, 3H), 4.05〜4.02 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.97〜3.93 (m, 1H), 3.72〜3.66 (m, 1H), 3.46〜3.43 (m, 1H), 3.16〜3.02 (m, 4H), 2.83〜2.75 (m, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.32〜2.26 (m, 2H), 2.10 (s, 1H), 1.92〜1.90 (m, 4H), 1.30〜1.28 (d, J = 8.0 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3):δ217.711(s)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で９５％水（０．１％ＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：純度９８．５９％；Ｒｔ＝４．６５分；ＭＳ理論値：４９８．６、ＭＳ実測値：４９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６４】
単一の未知の異性体３
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.75 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.70〜4.68 (m, 1H), 4.58〜4.56 (m, 1H), 4.34〜4.22 (m, 2H), 4.14 (s, 3H), 4.08〜4.06 (m, 1H), 3.79〜3.76 (m, 1H), 3.70〜3.65 (m, 1H), 3.36〜3.32 (m, 1H), 3.16〜3.09 (m, 3H), 2.94〜2.74 (m, 4H), 2.46 (s, 4H), 2.32〜2.26 (m, 2H), 1.92〜1.90 (m, 4H), 1.30〜1.28 (d, J = 8.0 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3):δ217.711(s)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で９５％水（０．１％ＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：純度９７．１４％；Ｒｔ＝４．５５分；ＭＳ理論値：４９８．６、ＭＳ実測値：４９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６５】
単一の未知の異性体４
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.75 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.70〜4.67 (m, 1H), 4.58〜4.56 (m, 1H), 4.34〜4.22 (m, 2H), 4.14 (s, 3H), 4.09〜4.06 (m, 1H), 3.79〜3.76 (m, 1H), 3.71〜3.64 (m, 1H), 3.36〜3.31 (m, 1H), 3.16〜3.08 (m, 3H), 2.83〜2.74 (m, 4H), 2.46 (s, 4H), 2.32〜2.26 (m, 2H), 1.92〜1.90 (m, 4H), 1.29〜1.28 (d, J = 4.0 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3):δ217.732(s)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で９５％水（０．１％ＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ］：純度９８．５９％；Ｒｔ＝４．５２分；ＭＳ理論値：４９８．６、ＭＳ実測値：４９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６６】
実施例１７
１−（６−（６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロ−１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−２−メチルピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（単一のシス異性体１）
【化１０５】
2020506966.tif 000117
ＤＣＭ（６ｍＬ）中、６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロ−１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１−（２−メチル−６−（３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アゼチジン−１−イル）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ６２：４０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。この反応混合物を室温に温め、一晩撹拌した。溶媒およびＴＦＡを真空下で除去し、分取ＨＰＬＣにより精製し、標題生成物（８．５ｍｇ、収率２５．３％）を象牙色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.90 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 4.84(m ,2H), 4.69 - 4.71 (t, J = 4.4Hz, 1H), 4.57 - 4.59 (t, J = 4.4Hz, 1H), 4.40- 4.44 (t, J = 7.6Hz, 2H), 4.00 - 4.02 (m, 1H), 3.44 - 3.48 (m, 1H), 3.05 - 3.07 (d, 2H), 2.83 - 2.90 (m, 2H), 2.64 (s, 1H), 2.48 (s, 1H), 2.30- 2.37 (m, 2H), 1.93 - 1.95 (m, 2H)。
19F NMR (400 MHz, CDCl3): δ -181.7 (s, 1F), -216.8(s, 1F)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ、純度９５．９％］：Ｒｔ＝５．１５分；ＭＳ理論値：４４２．２３、ＭＳ実測値：４４３．７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６７】
実施例１８
１−（６−（６−（（３Ｓ，４Ｒ）−３−フルオロ−１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−２−メチルピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（単一のシス鏡像異性体２）
【化１０６】
2020506966.tif 000118
標題化合物を、ＤＣＭおよびＴＦＡ中、６−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−フルオロ−１−（２−フルオロエチル）ピペリジン−４−イル）−５−メチル−１−（２−メチル−６−（３−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）アゼチジン−１−イル）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ６３）の溶液から出発し、Ｅ１７に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.90 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 4.83 - 4.84(m ,2H), 4.70 (m, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.40- 4.44 (t, J = 7.6Hz, 2H), 3.99 - 4.02 (m, 1H), 3.44 - 3.48 (m, 1H), 3.05 - 3.07 (d, 2H), 2.83 - 2.90 (m, 2H), 2.64 (s, 1H), 2.48 (s, 1H), 2.30- 2.37 (m, 2H), 1.93 - 1.95 (m, 2H)。
19F NMR (400 MHz, CDCl3): δ -181.789 (s, 1F), -216.896(d, J = 6.0 Hz,1F)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ、純度１００％］：Ｒｔ＝２．６２分；ＭＳ理論値：４４２．２３、ＭＳ実測値：４４３．７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６８】
実施例１９
（Ｒ）−２−（４−（５−メチル−１−（２−メチル−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）エタノール
【化１０７】
2020506966.tif 000119
標題化合物を、乾燥ＴＨＦ中２−（４−（５−メチル−１−（２−メチル−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸（Ｒ）−エチルの溶液およびＬｉＡｌＨ４から出発し、Ｅ１に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.81 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 4.47〜4.46 (m, 1H), 4.16〜4.13 (d, J = 13.2 Hz, 1 H), 4.02〜3.99 (m, 1H), 3.81〜3.73 (m, 2H), 3.68 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.63 (td, J = 12.0, 2.8 Hz, 1H), 3.32 (td, J = 12.8, 3.6 Hz, 1H), 3.14(d, J = 11.6 Hz, 2H), 2.88〜2.84 (m, 2H), 2.65〜2.64 (m, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.29〜2.27 (m, 2H), 1.93〜1.72 (m, 4H), 1.33 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０．０分で７０％水（０．１％ＦＡ）および３０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）］：Ｒｔ＝４．１２分；ＭＳ理論値：４５０．６、ＭＳ実測値：４５１．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６９】
実施例２０
（Ｒ）−２−（４−（１−（２−メトキシ−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）エタノール
【化１０８】
2020506966.tif 000120
標題化合物を、ＬｉＡｌＨ４およびＴＨＦ中２−（４−（１−（２−メトキシ−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸（Ｒ）−エチルの溶液から出発し、Ｅ１に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.77 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 4.47 (br, 1H), 4.14 (s, 3H), 4.14〜4.07 (m, 1H), 4.02〜3.99 (m, 1H), 3.78〜3.73 (m, 2H0, 3.68〜3.64 (m, 2H), 3.61〜3.55 (m, 1H), 3.37〜3.29 (m, 1H), 3.10 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 2.86 (m, 1H), 2.64〜2.60 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.28〜2.26 (m, 2H), 1.90〜1.82 (m, 4H), 1.34 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ、純度９６．９％］：Ｒｔ＝４．８５分；ＭＳ理論値：４６６．６、ＭＳ実測値：４６７．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７０】
実施例２１
（Ｓ）−２−（４−（１−（２−メトキシ−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）エタノール
【化１０９】
2020506966.tif 000121
標題化合物を、ＴＨＦ中２−（４−（１−（２−メトキシ−６−（３−メチルモルホリノ）ピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）酢酸（Ｓ）−エチルの溶液およびＬｉＡｌＨ４から出発し、Ｅ１に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.77 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.47〜4.45 (m, 1H), 4.14 (s, 3H), 4.11 (d, J = 13.6 Hz, 1 H), 4.02 (dd, J = 11.2, 3.2 Hz, 1H), 3.81〜3.71 (m, 2H), 3.65 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.62 (td, J = 12.0, 2.8 Hz, 1H), 3.36 (td, J = 13.2, 4.0 Hz, 1H), 3.11(d, J = 11.2 Hz, 2H), 2.89〜2.83 (m, 1H), 2.61 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.30〜2.24 (m, 2H), 1.93〜1.72 (m, 4H), 1.35 (d, J = 6.8 Hz, 3H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９分で９０％水（０．１％ＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）から５％水（０．１％ＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＦＡ）へ、純度９８．９％］：Ｒｔ＝４．９６分；ＭＳ理論値：４６６．３、ＭＳ実測値：４６７．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７１】
実施例２２
２−（４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）エタノール（単一の未知の異性体、Ｒｔ＝３．３８１分）
【化１１０】
2020506966.tif 000122
ＴＨＦ（５ｍＬ）中、２−（４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）酢酸エチル（Ｄ７６、４９ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＡｌＨ４（１９ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で６０分間撹拌し、ＥｔＯＡｃおよび飽和ＮＨ４Ｃｌで急冷し、濾過した。濾液を濃縮し、Ｃ１８フラッシュカラム（アセトニトリル：水＝５：９５〜９５：５）により精製し、標題生成物（１８．０ｍｇ、収率：４０．０％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.89 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.90 (td, J = 9.6, 4.4 Hz, 0.5 H), 4.78 (td, J = 9.6, 4.4 Hz, 0.5 H), 4.18(t, J = 7.6 Hz, 4 H), 4.11 (s, 3H), 3.68(s, 2H), 3.41〜3.38 (m, 1 H), 3.18〜3.08 (m, 1H), 3.02 (d, J = 11.6 Hz, 1 H), 2.73〜2.64 (m, 2H), 2.54〜2.51 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.48〜2.39 (m, 2 H), 2.37 (td, J = 10.0, 4.4 Hz, 1 H), 2.29 (td, J = 11.6, 2.4 Hz, 1 H), 2.02〜1.96 (m, 1H), 1.88〜1.77 (m, 1H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ 183.92 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．０２分；ＭＳ理論値：４４０．２、ＭＳ実測値：４４１．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ［方法：カラム：ＡＤカラムサイズ：３×１００ｍｍ、３μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）（ＵＰＣ）。注入量：１０μｌ、移動相：ＣＯ２／ＭｅＯＨ／ＤＥＡ＝８０／２０／０．０２、流速：１．８ｍｌ／分、波長：ＵＶ２５４ｎｍ、温度：３５℃］：Ｒｔ＝３．３８１分、ｅｅ：９９．９２％
【０２７２】
実施例２３
２−（４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）エタノール（単一の未知の異性体、Ｒｔ＝３．３８１分）
【化１１１】
2020506966.tif 000123
標題化合物を、ＬｉＡｌＨ４およびＴＨＦ中２−（４−（１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−３−フルオロピペリジン−１−イル）酢酸エチル（Ｄ７９）の溶液から出発し、Ｅ２２に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.89 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 4.90 (td, J = 10.0, 4.4 Hz, 0.5 H), 4.78 (td, J = 10.0, 4.4 Hz, 0.5 H), 4.18 (t, J = 7.2 Hz, 4 H), 4.11 (s, 3H), 3.68 (s, 2H), 3.41〜3.38 (m, 1 H), 3.18〜3.09 (m, 1H), 3.02 (d, J = 10.8 Hz, 1 H), 2.74〜2.64 (m, 2H), 2.54〜2.51 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.48〜2.38 (m, 2 H), 2.37 (td, J = 10.4, 4.0 Hz, 1 H), 2.29 (td, J = 12.0, 2.4 Hz, 1 H), 2.00〜1.94 (m, 1H), 1.87〜1.78 (m, 1H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ 183.92 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．００分；ＭＳ理論値：４４０．２、ＭＳ実測値：４４１．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ［方法：カラム：ＡＤカラムサイズ：３ｍｍ×１００ｍｍ、３μｍ（Ｄａｉｃｅｌ）（ＵＰＣ）。注入量：１０μｌ、移動相：ＣＯ２／ＭｅＯＨ／ＤＥＡ＝８０／２０／０．０２、流速：１．８ｍｌ／分、波長：ＵＶ２５４ｎｍ、温度：３５℃］：Ｒｔ＝４．８６８分、ｅｅ：９７．２２％
【０２７３】
実施例２４および２５
１−（４−（５−クロロ−１−（６−（（Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（単一の未知の異性体１、Ｒｔ＝４．３２３分；単一の未知の異性体２、Ｒｔ＝４．５５０分）
【化１１２】
2020506966.tif 000124
混合物（Ｄ８５）をＳＦＣによりキラル分割して以下の異性体をえた。
【０２７４】
キラル分割：
方法：カラム：ＡＤ−Ｈ；カラムサイズ：０．４６ｃｍ×１５ｃｍ；移動相：ＣＯ２：ＩＰＡ（０．１％ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）＝７０：３０；流速：０．５ｍｌ；波長：ＵＶ２５４ｎｍ；温度：２５℃；ＥｔＯＨ中のサンプル
【０２７５】
ピーク１（Ｅ２４）：単一の未知の異性体１
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.91 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.32〜4.28 (m, 2H), 4.08〜4.05 (m, 1H), 3.88 (s, 1H), 3.78〜3.74 (m, 1H), 3.71〜3.68 (m, 3H), 3.23〜3.09 (m, 3H), 3.01〜2.92 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.56〜2.50 (m, 1H), 2.41〜2.39 (m, 1H), 2.38〜2.34 (m, 1H) , 2.16〜2.13 (m, 1H), 2.04〜2.01 (m, 2H), 1.91〜1.75 (m, 3H), 1.18 (s, 1H), 1.16 (s, 3H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．７７分；ＭＳ理論値：５００．２、ＭＳ実測値：５０１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝４．３２３分、ｅｅ：１００％
【０２７６】
ピーク２（Ｅ２５）：単一の未知の異性体２
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.90 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.30 (s, 2H), 4.09〜4.05 (m, 1H), 3.89 (s, 1H), 3.78〜3.74 (m, 1H), 3.71〜3.68 (m, 3H), 3.22〜3.11 (m, 3H), 2.98〜2.96 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.52 (s, 1H), 2.38〜2.37 (m, 1H), 2.30 (s, 1H), 2.15 (s, 1H), 2.04〜2.01 (m, 2H), 1.87〜1.78 (m, 3H), 1.17 (s, 1H), 1.16 (s, 3H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．７８分；ＭＳ理論値：５００．２、ＭＳ実測値：５０１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝４．５５０分、ｅｅ：９８．１％
【０２７７】
実施例２６および２７
１−（４−（５−クロロ−１−（６−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（単一の未知の異性体１、Ｒｔ＝４．２０３分；単一の未知の異性体２、Ｒｔ＝４．４１３分）
【化１１３】
2020506966.tif 000125
標題化合物を、０℃で３時間、ＭｅＯＨおよびＮａＢＨ４中、（Ｓ）−１−（４−（５−クロロ−１−（６−（２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ８６）の溶液から出発し、Ｅ２４およびＥ２５に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．７７分；ＭＳ理論値：５００．２、ＭＳ実測値：５０１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７８】
キラル分割：
方法：カラム：ＡＤ−Ｈ；カラムサイズ：０．４６ｃｍ×１５ｃｍ移動相：ＣＯ２：ＩＰＡ（０．１％ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）＝７０：３０；流速：０．５ｍｌ；波長：ＵＶ２５４ｎｍ；温度：２５℃；ＥｔＯＨ中のサンプル
【０２７９】
ピーク１（Ｅ２６）：単一の未知の異性体１
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.90 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.30 (s, 2H), 4.08〜4.05 (m, 1H), 3.89 (s, 1H), 3.80〜3.74 (m, 1H), 3.71〜3.68 (m, 3H), 3.22〜3.11 (m, 3H), 3.00〜2.95 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.52 (s, 1H), 2.40〜2.37 (m, 1H), 2.33〜2.30 (m, 1H) , 2.15 (s, 1H), 2.04〜2.01 (m, 2H), 1.88〜1.75 (m, 3H), 1.17 (s, 1H), 1.16 (s, 3H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．７８分；ＭＳ理論値：５００．２、ＭＳ実測値：５０１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラル  ＨＰＬＣ：Ｒｔ＝４．２０３分、ｅｅ：１００％
【０２８０】
ピーク２（Ｅ２７）：単一の未知の異性体２
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.90 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.30 (s, 2H), 4.08〜4.05 (m, 1H), 3.89 (s, 1H), 3.80〜3.74 (m, 1H), 3.71〜3.67 (m, 3H), 3.22〜3.11 (m, 3H), 3.00〜2.95 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.52 (s, 1H), 2.41〜2.37 (m, 1H), 2.33〜2.30 (m, 1H) , 2.15 (s, 1H), 2.04〜2.01 (m, 2H), 1.88〜1.75 (m, 3H), 1.17 (s, 1H), 1.16 (s, 3H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．６分で５０％水（０．１％ＴＦＡ）および５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝０．７８分；ＭＳ理論値：５００．２、ＭＳ実測値：５０１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝４．４１３分、ｅｅ：９９．７％
【０２８１】
実施例２８および２９
シス−１−（３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（単一の未知の異性体１、Ｒｔ＝５．６０９分；単一の未知の異性体２、Ｒｔ＝６．１０１分）
【化１１４】
2020506966.tif 000126
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中、１−（シス−３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ９０、７９ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、ピーク１から）の溶液に、ＮａＢＨ４（１２ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で１時間撹拌し、水（０．５ｍＬ）で急冷し、ＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈した。分離した有機層を乾燥させ、濾過し、濃縮し、標題生成物を白色固体として得た（８２ｍｇ、粗）。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．２４分；ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８２】
キラル分割：
方法：ＡＤ−Ｈ、カラムサイズ：０．４６ｃｍ×１５ｃｍ、移動相：ＣＯ２／ＥＴＯＨ（０．１％ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）＝６０／４０、流速：０．５ｍＬ／分、波長：ＵＶ２５４ｎｍ、温度：２５℃。
【０２８３】
ピーク１（Ｅ２８）：単一の未知の異性体１
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.91 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.97〜4.79 (m, 1H), 4.31〜4.29 (m, 2H), 4.08〜4.05 (m, 1H), 3.92 (br, 1H), 3.81〜3.67 (m, 4H), 3.40〜3.34 (m, 2H), 3.14〜3.11 (m, 3H), 2.98〜2.91 (m, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.62〜2.51 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.39〜2.33 (m, 1H), 2.15〜2.07 (m, 1H), 2.01〜1.97 (m, 2H), 1.90〜1.81 (m, 1H), 1.19 (d, J = 6.0 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ 183.93 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１６分；ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝５．６０９分、ｅｅ：１００％
【０２８４】
ピーク２（Ｅ２９）：単一の未知の異性体２
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.91 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.94〜4.76 (m, 1H), 4.33〜4.27 (m, 2H), 4.09〜4.05 (m, 1H), 3.93〜3.88 (m, 1H), 3.79〜3.67 (m, 4H), 3.52〜3.49 (m, 1H), 3.33 (brs, 1H), 3.15〜3.08 (m, 2H), 2.98〜2.91 (m, 2H), 2.62 (s, 3H), 2.50〜2.40 (m, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.23〜2.20 (m, 1H), 2.01〜1.95 (m, 3H), 1.19 (d, J = 6.0 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ 183.93 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１７分；ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝６．１０１分、ｅｅ：９９．２２％
【０２８５】
実施例３０および３１
１−（シス−３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（単一の未知の異性体１、Ｒｔ＝４．９６７分；単一の未知の異性体２、Ｒｔ＝５．７０６分）
【化１１５】
2020506966.tif 000127
標題化合物を、室温で１時間、一度のＮａＢＨ４およびＭｅＯＨ（５ｍＬ）中１−（シス−３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｒ）−２−（ヒドロキシ−メチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）−プロパン−２−オン（Ｅ９５）の溶液から出発し、Ｅ２８およびＥ２９に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．２９分；ＭＳ理論値：４９８．２８、ＭＳ実測値：４９９．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８６】
キラル分割：
方法：カラム：ＡＤ−Ｈ；カラムサイズ：０．４６ｃｍ×１５ｃｍ；移動相：ＣＯ２：ＥｔＯＨ（０．１％ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）＝６０：４０；流速：０．５ｍＬ／分；波長：ＵＶ２５４ｎｍ；温度：２５℃；ＥｔＯＨ中のサンプル
【０２８７】
ピーク１（Ｅ３０）：単一の未知の異性体１
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.93〜4.72 (m, 1H), 4.33〜4.27 (m, 2H), 4.09〜4.05 (m, 1H), 3.95〜3.90 (m, 1H), 3.80〜3.67 (m, 4H), 3.54〜3.48 (m, 1H), 3.33 (br, 1H), 3.15〜3.11 (m, 2H), 2.95〜2.91 (m, 2H), 2.62 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.51〜2.40 (m, 3H), 2.25〜2.18 (m, 1H), 1.98〜1.89 (m, 3H), 1.19 (d, J = 6.0 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ 183.93 (s, 1F),
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１７分；ＭＳ理論値：４９８．２８、ＭＳ実測値：４９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝４．９６７分、ｅｅ１００％；
【０２８８】
ピーク２（Ｅ３１）：単一の未知の異性体２
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.98〜4.86 (m, 1H), 4.33〜4.28 (m, 2H), 4.08〜4.05 (m, 1H), 3.96 (br, 1H), 3.78〜3.67 (m, 4H), 3.39〜3.36 (m, 2H), 3.15〜3.11 (m, 3H), 2.97〜2.91 (m, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.60〜2.37 (m, 3H), 2.16 (br, 1H), 2.02〜1.97 (m, 3H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ 184.01 (s, 1F)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．１８分；ＭＳ理論値：４９８．２８、ＭＳ実測値：４９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝５．７０６分、ｅｅ９８．４８％；
【０２８９】
実施例３２および３３
シス−１−（３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（単一の未知の異性体１、Ｒｔ＝４．９３０分；単一の未知の異性体２、Ｒｔ＝５．２６３分）
【化１１６】
2020506966.tif 000128
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中、１−（シス−３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ９１、１１０ｍｇ、０．２２０ｍｍｏｌ、ピーク１から）の溶液に、ＮａＢＨ４（４２．０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で１時間撹拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（６０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、標題生成物（１００ｍｇ、粗）を白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：１０．０分で９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．４６分；ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９０】
キラル分割：
方法：ＡＤ−Ｈ、カラムサイズ：０．４６ｃｍ×１５ｃｍ、移動相：ＣＯ２：ＥｔＯＨ（０．１％ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）＝６０：４０、流速：０．５ｍＬ／分、波長：ＵＶ２５４ｎｍ、温度：２５℃
【０２９１】
ピーク１（Ｅ３２）：単一の未知の異性体１
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.91 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.94〜4.80 (m, 1H), 4.29〜4.27 (m, 2H), 4.06〜4.03 (m, 1H), 3.91 (br, 1H), 3.77〜3.75 (m, 1H), 3.71〜3.67 (m, 3H), 3. 34〜3.32 (m, 2H), 3.14〜3.08 (m, 2H), 2.97〜2.95 (m, 1H), 2.84 (s, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.53〜2.50 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.39〜2.33 (m, 2H), 2.11〜2.09 (m, 1H), 2.00〜1.98 (m, 2H), 1.97〜1.85 (m, 1H), 1.19〜1.18 (d, J = 6.0 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ 183.391 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．３３分；ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝４．９３０分、ｅｅ：１００％
【０２９２】
ピーク２（Ｅ３３）：単一の未知の異性体２
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.90 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.92〜4.79 (m, 1H), 4.30〜4.27 (m, 2H), 4.06〜4.05 (m, 1H), 3.92〜3.90 (m, 1H), 3.77〜3.72 (m, 1H), 3.69〜3.65 (m, 3H), 3.51〜3.50 (m, 1H), 3.33〜3.31 (m, 1H), 3.15〜3.08 (m, 2H), 2.94〜2.91 (m, 2H), 2.61 (s, 3H), 2.56 (s, 3H), 2.47〜2.40 (m, 2H), 2.22〜2.18 (s, 1H), 1.96〜1.94 (m, 3H), 1.61〜1.58 (m, 1H), 1.20〜1.18 (d, J = 6.4 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ 183.917 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．３４分；ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝５．２６３分、ｅｅ：１００％
【０２９３】
実施例３４および３５
シス−１−（３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（ピーク２から）（単一の未知の異性体１、Ｒｔ＝４．８６１分；単一の未知の異性体２、Ｒｔ＝５．９４７分）
【化１１７】
2020506966.tif 000129
標題化合物を、ＮａＢＨ４および１−（シス−３−フルオロ−４−（１−（６−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オン（Ｄ９６）溶液から出発し、Ｅ２７およびＥ２８に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：２．０分で９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝１．３０分；ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９４】
キラル分割：
方法：ＡＤ−Ｈ、カラムサイズ：０．４６ｃｍ×１５ｃｍ、移動相：ＣＯ２：ＥｔＯＨ（０．１％ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）＝６０：４０、流速：０．５ｍＬ／分、波長：ＵＶ２５４ｎｍ、温度：２５℃
【０２９５】
ピーク１（Ｅ３４）：単一の未知の異性体１
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.90 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.90〜4.77 (m, 1H), 4.32〜4.29 (m, 2H), 4.07〜4.05 (m, 1H), 3.92 (br, 1H), 3.79〜3.74 (m, 1H), 3.71〜3.67 (m, 3H), 3. 52〜3.49 (m, 1H), 3.32 (br, 1H), 3.13〜3.11 (m, 2H), 2.94〜2.91 (m, 2H), 2.61 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.48〜2.40 (m, 2H), 2.18〜2.17 (m, 1H), 2.04 (br, 1H), 1.97〜1.94 (m, 2H), 1.19〜1.18 (d, J = 6.0 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ 183.913 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．３３分、ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝４．８６１分、ｅｅ：１００％
【０２９６】
ピーク２（Ｅ３５）：単一の未知の異性体２
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.91 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.97〜4.84 (m, 1H), 4.30〜4.28 (m, 2H), 4.09〜4.04 (m, 1H), 3.93 (br, 1H), 3.74〜3.70 (m, 1H), 3.69〜3.67 (m, 3H), 3.39〜3.34 (m, 1H), 3.14〜3.11 (m, 3H), 2.94〜2.90 (m, 1H), 2.84 (br, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.54〜2.50 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.37〜2.34 (m, 1H), 2.16 (s, 1H), 2.16〜2.01 (m, 2H), 1.63〜1.62 (m, 1H), 1.20〜1.18 (d, J = 6.4 Hz, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ 183.593 (s)
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で９５％水（０．１％ＴＦＡ）および５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．３４分、ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ＝５．９４７分、ｅｅ：１００％
【０２９７】
実施例３６
１−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシプロピル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール
【化１１８】
2020506966.tif 000130
アセトニトリル（４ｍＬ）中、１−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（Ｄ９８、３３０ｍｇ、０．８７０ｍｍｏｌ）の溶液に、２−（トリフルオロメチル）オキシラン（４８９ｍｇ、４．４０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を３０℃で一晩撹拌し、濃縮した。粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０：１）により精製し、標題生成物（２００ｍｇ、４７％）を白色固体として得た。
1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ8.74 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.13 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 5.79 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.63-4.61 (m, 1H), 4.31-4.27 (m, 2H), 4.19 (s, 1H), 3.83-3.79 (m, 2H), 3.31 (s, 9H), 3.10-3.07 (m, 2H), 2.33-2.21 (m, 2H), 1.83-1.67 (m, 4H)。
ＬＣＭＳ［カラム：ＷａｔｅｒｓＸ−ｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５ｕｍ；カラムサイズ：４．６ｍｍ×５０ｍｍ；移動相：Ｂ（ＣＨ３ＣＮ）、Ａ（水中０．０２％ＮＨ４Ａｃ）；６分勾配（Ｂ％）］：Ｒｔ＝２．９６６分、ＭＳ理論値：４９０、ＭＳ実測値：４９１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９８】
実施例３７
１−フルオロ−３−（４−（１−（６−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール
【化１１９】
2020506966.tif 000131
トルエン（１０ｍＬ）中、１−フルオロ−３−（４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−２−オール（Ｄ１００、１５０ｍｇ、０．５１０ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−（４−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール（Ｄ１１３、１７３ｍｇ、０．５１０ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（９８．０ｍｇ、０．５１０ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（２１９ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｎ１，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン（９１．０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物をＮ２で３回脱気し、Ｎ２下、８０℃で２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（３０ｍＬ×２）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝１０：１）、次いで、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（５／９５から９５／５へ）で溶出するＣ１８により精製し、標題生成物（６０ｍｇ、収率：２３％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.80 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 4.60〜4.57 (m, 0.5 H), 4.49〜4.45 (m, 1H), 4.37〜4.27 (m, 2.5H), 4.08〜3.95 (m, 2H), 3.77〜3.65 (m, 5H), 3.20〜2.82 (m, 5H), 2.64 (s, 3H), 2.59〜2.49 (m, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.23〜2.17 (m, 1H), 2.00〜1.81 (m, 5H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ -231.972
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９分で９０％水（０．１％ＴＦＡ）および１０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝４．４１分；ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９９】
実施例３８
２−フルオロ−３−（４−（１−（６−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）モルホリノ）−２−メチルピリミジン−４−イル）−５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オール
【化１２０】
2020506966.tif 000132
トルエン（１０ｍＬ）中、２−フルオロ−３−（４−（５−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）ピペリジン−１−イル）プロパン−１−オール（Ｄ１００、１５０ｍｇ、０．５１０ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−（４−（６−ヨード−２−メチルピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール（Ｄ１１３、１７３ｍｇ、０．５１０ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（９８．０ｍｇ、０．５１０ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（２１９ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｎ１，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン（９１．０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物をＮ２で３回脱気し、Ｎ２下、８０℃で３時間撹拌し、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝１０：１）により精製し、次いで、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（５／９５から９５／５へ）で溶出するＣ１８により精製し、標題生成物（８５．０ｍｇ、収率：３３．０％）を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.77 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.83〜4.78 (m, 0.5 H), 4.71〜4.66 (m, 0.5 H), 4.32〜4.28 (m, 2H), 4.08〜4.04 (m, 1H), 3.97〜3.95 (m, 1H), 3.92〜3.90 (m, 1H), 3.79〜3.65 (m, 4H), 3.32〜3.29 (m, 1H), 3.18〜3.07 (m, 2H), 2.98〜2.82 (m, 4H), 2.64 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.38〜2.29 (m, 2H), 1.94〜1.88 (m, 4)。
19F NMR (376 MHz, CDCl3): δ -190.88
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝３．５０分；ＭＳ理論値：４９８．３、ＭＳ実測値：４９９．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３００】
実施例３９
（Ｓ）−（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール
【化１２１】
2020506966.tif 000133
ＴＨＦ（５ｍＬ）中、（Ｓ）−（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール（Ｄ１００、１２０ｍｇ、０．２８４ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（７５．０ｍｇ、０．７１０ｍｍｏｌ）の混合物に、（メチルスルホニル）エテン（６６．０ｍｇ、０．６２５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を６５℃で３時間撹拌し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を濃縮し、分取ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）により精製し、標題生成物（１９．０ｍｇ、１３．０％）を黄色固体として得た。
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ8.79 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.30 (t, J = 11.2 Hz, 2H), 4.09-4.05 (m, 1H), 3.81-3.77 (m, 1H), 3.75-3.65 (m, 3H), 3.22 (br s, 2H), 3.15-3.08 (m, 6H), 2.98-2.92 (m, 3H), 2.86 (t, J = 11.2 Hz, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.28 (t, J = 10.4 Hz, 2H), 1.98-1.82 (m, 5H)。
ＬＣ−ＭＳ［カラム：Ｃ１８；カラムサイズ：４．６×５０ｍｍ；移動相：Ｂ（ＭｅＣＮ）、Ａ（水中０．０２％ＮＨ４Ａｃ）；勾配（Ｂ％）］：Ｒｔ＝３．６３７分、ＭＳ理論値：５２８、ＭＳ実測値：５２９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０１】
実施例４０
１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール
【化１２２】
2020506966.tif 000134
ＴＨＦ（５ｍＬ）中、１−（６−（アゼチジン−１−イル）−２−メトキシピリミジン−４−イル）−５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール（Ｄ１１２，１５０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（１１０ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）の混合物に、（メチルスルホニル）エテン（９３．０ｍｇ、０．８８０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を６５℃で２時間撹拌し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を濃縮し、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）で摩砕し、濾過した。このケークを分取ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）により精製し、標題生成物（２７．０ｍｇ、１４．０％）を白色固体として得た。
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ8.74 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.17 (t, J = 7.2 Hz, 4H), 4.09 (s, 3H), 3.20 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.10-3.09 (m, 5H), 2.98-2.93 (m, 2H), 2.85 (t, J = 11.2 Hz, 1H), 2.45-2.40 (m, 5H), 2.25 (t, J = 11.2 Hz, 2H), 1.94-1.91 (m, 2H), 1.83-1.75 (m, 2H)。
ＬＣ−ＭＳ［カラム：Ｃ１８；カラムサイズ：４．６×５０ｍｍ；移動相：Ｂ（ＣＨ３ＣＮ）、Ａ（水中０．０２％ＮＨ４Ａｃ）；勾配（Ｂ％）］：Ｒｔ＝３．８１７分、ＭＳ理論値：４８４、ＭＳ実測値：４８５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０２】
実施例４１
（Ｒ）−（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール
【化１２３】
2020506966.tif 000135
標題化合物を、６５℃で３時間、ＴＨＦ中、（Ｒ）−（４−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）モルホリン−２−イル）メタノール（Ｄ１０９）、Ｎａ２ＣＯ３、（メチルスルホニル）エテンの混合物から出発し、Ｅ４０に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ8.79 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.59 (s, 1H), 4.33-4.26 (m, 2H), 4.09-4.05 (m, 1H), 3.80-3.65 (m, 4H), 3.23-3.19 (m, 2H), 3.14-3.11 (m, 6H), 2.98-2.95 (m, 3H), 2.89-2.83 (m, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.30-2.25 (m, 2H), 1.99-1.84 (m, 5H)。
ＬＣＭＳ［カラム：ＷａｔｅｒｓＸ−ｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５μｍ；カラムサイズ：４．６ｍｍ×５０ｍｍ；移動相：Ｂ（ＣＨ３ＣＮ）、Ａ（水中０．０２％ＮＨ４Ａｃ）；６分勾配（Ｂ％）］：Ｒｔ＝３．３７５分、ＭＳ理論値：５２８、ＭＳ実測値：５２９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０３】
実施例４２
１−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール
【化１２４】
2020506966.tif 000136
標題化合物を、ＴＨＦ中、１−（２−メトキシ−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オールおよびＮａ２ＣＯ３の溶液から出発し、Ｅ４０に関して記載されているものと同様の手順により製造した。
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ8.73 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.83 (br s, 1H), 4.43-4.39 (m, 2H), 4.09 (s, 3H), 4.03-3.99 (m, 2H), 3.21-3.17 (m, 2H), 3.10-3.07 (m, 5H), 2.95-2.84 (m, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.29-2.21 (m, 3H), 1.94-1.76 (m, 4H)。
ＬＣ−ＭＳ［カラム：Ｃ１８；カラムサイズ：４．６ｍｍ×５０ｍｍ；移動相：Ｂ（ＣＨ３ＣＮ）、Ａ（水中０．０２％ＮＨ４Ａｃ）；勾配（Ｂ％）］：Ｒｔ＝３．５３１分、ＭＳ理論値：５００、ＭＳ実測値：５０１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０４】
実施例４３
１−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（１−（２−（メチルスルホニル）エチル）ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール
【化１２５】
2020506966.tif 000137
ＥｔＯＨ（５ｍＬ）中、１−（２−メチル−６−（５−メチル−６−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ピリミジン−４−イル）アゼチジン−３−オール（Ｄ９８，１００ｍｇ、０．２６０ｍｍｏｌ）の混合物に、１−ブロモ−２−（メチルスルホニル）エタン（３５．０ｍｇ、０．３１０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で２時間撹拌し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製し、ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ、１５／８５から９５／５へ）で溶出し、標題生成物を白色固体として得た（１８．０ｍｇ、収率：１４．０％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.73 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 5.58 (br, 1H), 4.75 (br, 1H), 4.39〜4.34 (m, 2H), 3.96〜3.95 (m, 2H), 3.57〜3.51 (m, 3H), 3.35〜3.34 (m, 2H), 3.01 (s, 3H), 2.71 (br, 1H), 2.56(s, 3H), 2.40〜2.37 (m, 4H), 2.16〜2.13 (m, 2H), 2.04〜2.00 (m, 2H), 1.99〜1.97 (m, 2H)。
ＬＣ−ＭＳ［移動相：９．０分で８０％水（０．１％ＴＦＡ）および２０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）から５％水（０．１％ＴＦＡ）および９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ］：Ｒｔ＝２．５６分、ＭＳ理論値：４８４．６、ＭＳ実測値：４８５．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０５】
Ｆ．アッセイおよびデータ
上述のように、本発明の化合物はＬＲＲＫ２キナーゼ阻害剤であり、ＬＲＲＫ２により媒介される疾患の治療に有用である。本発明の化合物の生物学的活性および／または特性は、ＬＲＲＫ２キナーゼ阻害剤としての候補化合物の活性を決定するためのアッセイを含む任意の好適なアッセイ、ならびに組織およびｉｎ  ｖｉｖｏモデルを用いて決定することができる。
【０３０６】
１．アッセイ
ａ．全長Ｇ２０１９ヒトＬＲＲＫ２阻害質量分析アッセイ
ロイシンリッチリピートキナーゼ２（ＬＲＲＫ２）阻害に関するこのアッセイは、ハイスループットＲａｐｉｄＦｉｒｅ質量分析アッセイを用いたペプチド「ＬＲＲＫｔｉｄｅ」（ＬＲＲＫｔｉｄｅ：ＲＬＧＲＤＫＹＫＴ＊ＬＲＱＩＲＱ  “＊”はリン酸化の部位を意味する）およびリン酸化「ＬＲＲＫｔｉｄｅ」の直接的測定に基づく。阻害剤は、ＬＲＲＫｔｉｄｅのホスホ−ＬＲＲＫｔｉｄｅへの変換を低減する化合物である。
【０３０７】
ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミドの調製
ＰＣＲクローニングに使用したプライマー：
ｐＨＴＢＶ−Ｆ：配列番号１
ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ１：配列番号２
ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｒ１：配列番号３
ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ２：配列番号４
ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｒ２：配列番号５
ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ３：配列番号６
ｐＨＴＢＶ−Ｒ：配列番号７
ｐＨＴＢＶ１−Ｎ−Ｆｌａｇ−ｈｕ  ＬＲＲＫ２は、上記のプライマーを用い、ｐｃＤＮＡ３．１（＋）＿ヒト＿ＬＲＲＫ２（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿９４０９８０．３）からＮ末端Ｆｌａｇタグを有する全長ＬＲＲＫ２配列を増幅するＰＣＲにより作製し、ｐＨＴＢＶ１ｍｃｓ３ベクターのＢａｍＨＩ部位とＫｐｎＩ部位の間にクローニングした。
【０３０８】
Ｇ２０１９全長Ｆｌａｇ−ＬＲＲＫ２コード配列は、配列番号８である。
【０３０９】
ヒトＧ２０１９全長Ｎ末端ｆｌａｇタグを有するＬＲＲＫ２タンパク質の翻訳されたアミノ酸配列は、配列番号９である。
【０３１０】
昆虫細胞の培養
Ｓｆ９昆虫細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カールスバッド、ＣＡ）を２７℃、５００ｍｌ振盪フラスコ（Ｅｒｌｅｎｍｅｙｅｒ、Ｃｏｒｎｉｎｇ）中、ＳＦ９００  ＩＩ  ＳＦＭで維持した。これらの細胞は指数関数的増殖相で維持し、週に２回継代培養した。より大容量とするためには、細胞を２リットルの振盪フラスコ（Ｅｒｌｅｎｍｅｙｅｒ、Ｃｏｒｎｉｎｇ）にて、２７℃のインキュベーター振盪機にて１２０ｒｐｍで振盪しながら増殖させた。
【０３１１】
ＢａｃＭａｍウイルスの作製
組換えＢａｃＭａｍウイルスを作製するために、ＤＨ１０Ｂａｃコンピテント細胞（１０３６１−０１２、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を遺伝子型が通常のヒトＬＲＲＫ２  ＢａｃＭａｍプラスミドで形質転換させて組換えバキュロウイルスＤＮＡを作製した。Ｓｆ９昆虫細胞を組換えバキュロウイルスＤＮＡとセルフェクチン（１０３６２−１００、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の混合物で同時トランスフェクトした。２７℃で４時間のインキュベーション後に、トランスフェクション培地を、５％ＨＩ  ＦＢＳ（１０１００１４７、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含有するＳｆ−９００  ＩＩＩ  ＳＦＭ培地に置き換えた。細胞をさらに４日間インキュベートした。バキュロウイルス（Ｐ０ウイルス原株）を含有する感染細胞培養培地を回収し、さらに２００ｍｌのＳｆ９細胞に２００〜３００ｕｌのＰ０を感染させることにより増幅した。
【０３１２】
ＢａｃＰＡＫＲａｐｉｄ力価によるＢａｃＭａｍウイルス力価の定量
プラーク形成単位（ｐｆｕ）／ｍｌとして測定されるウイルス力価は、ＢａｃＰＡＫ  Ｐａｐｉｄ力価キット（６３１４０６、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を製造のプロトコールに従って用いて決定した。９６ウェルプレートに３×１０５細胞／ウェルで播種したＳｆ９細胞を、ウイルス原株の希釈系とともに２７℃で１時間インキュベートし、各ウェルに５０μｌメチルセルロースのオーバーレイを加えた後に４３〜４７時間インキュベーションを行った。次に、これらの細胞を４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）中で固定した。これらの細胞を希釈正常ヤギ血清でブロッキングした後、それらの細胞にマウス抗ｇｐ６４抗体を加えた。３０分のインキュベーション後に、細胞を０．２％トリトン−Ｘ１００（ＰＢＳＴ）含有リン酸緩衝生理食塩水で洗浄し、さらに３０分間、ヤギ抗マウス抗体／ＨＲＰコンジュゲートとともにインキュベートした。その後、単一の感染細胞および感染細胞巣を暗青色により検出する青色ペルオキシダーゼ基質とのインキュベーションを行った。
【０３１３】
タンパク質発現および精製
ａ）Ｆｌａｇタグを有する全長Ｇ２０１９ヒトＬＲＲＫ２の発現
ＨＥＫ２９３  ６Ｅ細胞を、３７℃のインキュベーターにて、１１０ｒｐｍで回転するオービタルシェーカー上、５％ＣＯ２加湿雰囲気でインキュベートした。形質導入当日に細胞生存率は９８％より高く、細胞密度は１×１０６〜１．５×１０６細胞／ｍｌの範囲であった。
【０３１４】
ＨＥＫ２９３  ６Ｅ細胞を１，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、次いで、これらの細胞を０．１％Ｆ−６８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ：２４０４０−０３２）を含むが抗生物質（Ｇ４１８）は含まない新鮮なＦｒｅｅｓｔｙｌｅ  ２９３発現培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ：１２３３８）に１×１０６細胞／ｍｌの密度で再懸濁させた。
【０３１５】
Ｆｌａｇ−ｈｕ  ＬＲＲＫ２（遺伝子型的に正常な）遺伝子を有するＢａｃＭａｍウイルスを４０，０００ｇで２時間遠心分離し、次いで、新鮮なＦｒｅｅｓｔｙｌｅ  ２９３発現培地に再懸濁させた。再懸濁させたウイルスをＭＯＩ  １０で細胞に加えた。これらにての細胞を３７℃のインキュベーターにて１１０ｒｐｍで回転するオービタルシェーカー上、空気中５％ＣＯ２の加湿雰囲気でインキュベートした。培養物を形質導入後およそ４８時間で、４，０００ｒｐｍで２０分間の遠心分離により採取し、精製のためにペレットを冷凍した。
【０３１６】
ｂ）Ｆｌａｇタグを有する全長Ｇ２０１９ヒトＬＲＲＫ２の精製
細胞ペレットを（２０ｍＬ／リットル細胞培養物）の溶解バッファー（５０ｍＭトリスＨＣｌ  ｐＨ７．５  ４℃、５００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％トリトンＸ−１００、１０％グリセロール、直前に２ｍＭ  ＤＴＴを添加）に、供給者により示唆されている推奨濃度のプロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ：０４６９３１３２００１）およびベンゾナーゼ（Ｍｅｒｃｋ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ：７０７４６−３ＣＮ）とともに再懸濁させた。懸濁細胞を氷上で３０分間（２秒オン／４秒オフ、振幅２０％）の音波処理により溶解させ、４℃にて１０，０００ｒｐｍで３０分間遠心分離した。上清を抗Ｆｌａｇ磁性ビーズ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ：Ｍ８８２３）の細胞培養物１ｍＬ／リットルとともに４℃で３時間インキュベートした後、それらのビーズを５ｍＬ（カラム容量）の結合バッファー（５０ｍＭトリスｐＨ７．５＠  ４Ｃ、５００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％トリトンＸ−１００、１０％グリセロール、直前に２ｍＭ  ＤＴＴを添加）により３回洗浄した。Ｆｌａｇタグを有するＬＲＲＫ２タンパク質を溶出バッファー（５０ｍＭトリスｐＨ７．５＠  ４Ｃ、５００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％トリトンＸ−１００、１０％グリセロール、直前に２ｍＭ  ＤＴＴを添加、２５０ｕｇ／ｍｌ  Ｆｌａｇペプチド（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ：Ｆ３２９０））により４℃で２時間溶出した。ＦｌａｇペプチドをＺｅｂａ  Ｓｐｉｎ脱塩カラム７Ｋ  ＭＷＣＯ（Ｔｈｅｒｍｏ−Ｆｉｓｈｅｒ：８９８９３）により除去し、溶出されたＬＲＲＫ２タンパク質のバッファーを、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ  Ｆｉｌｔｅｒ  Ｕｎｉｔｓ（１００ｋＤ）（Ｍｅｒｃｋ：ＵＦＣ９１００９６）を用いて保存バッファー（５０ｍＭトリスｐＨ７．５＠４Ｃ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０２％トリトンＸ−１００、２ｍＭ  ＤＴＴおよび５０％グリセロール）に交換した。ＬＲＲＫ２タンパク質を含有する画分をプールし、アリコートに分け、−８０℃で保存した。タンパク質濃度をブラッドフォードタンパク質アッセイにより決定し、タンパク質純度をＮｕＰＡＧ  Ｎｏｖｅｘ  ４−１２％ビス−トリスタンパク質ゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ：ＮＰ０３２２ＢＯＸ）により分析した。
【０３１７】
アッセイプロトコール
１）１０ｍＭの試験化合物を１００％ＤＭＳＯに溶解させ、１対４の連続希釈を行った。次に、この希釈系１００ｎＬを、第６列と第１８列を除く３８４ウェルｖ底ポリプロピレンプレートに加えた。対照ウェルとしての第６列と第１８列には１００ｎＬのＤＭＳＯを加えた。アッセイ希釈により試験化合物の最高最終アッセイ濃度は１００μＭとなった。
【０３１８】
２）プレストップアッセイ対照として用いるために、実験室級の水中１％ギ酸５０μｌを第１８列に、マルチドロップコンビディスペンサーを用いて加えた。
【０３１９】
３）アッセイバッファー（５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ（ｐＨ７．２）、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、５％グリセロール、０．００２５％トリトンＸ−１００および１ｍＭ  ＤＴＴ）中、５０ｎＭの精製組換え全長Ｆｌａｇ−ＬＲＲＫ２を含有する「酵素溶液」５μＬを総てのウェルに、マルチドロップコンビディスペンサーを用いて加え、最終アッセイ濃度を２５ｎＭ  ＬＲＲＫ２酵素とした。これにより第６列（酵素およびＤＭＳＯ）は０％阻害となり、第１８列は１００％阻害（プレストップ対照）となった。その後、試験プレートを室温で３０分間インキュベートした。
【０３２０】
４）５０ｕＭ  ＬＲＲＫｔｉｄｅペプチド基質および４ｍＭ  ＡＴＰを含有する「基質溶液」５μＬをプレートの総てのウェルに、マルチドロップコンビディスペンサーを用いて加え、最終アッセイ濃度を２５ｕＭ  ＬＲＲＫｔｉｄｅおよび２ｍＭ  ＡＴＰとした。次に、試験プレートを室温で１時間インキュベートした（インキュベーションは、酵素バッチの違いによる反応の速度および直線性によって異なり得る）。
【０３２１】
５）実験室級の水中１％ギ酸５０μｌを総てのウェル（第１８列を除く）に加えて反応物を急冷し、プレートを３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。次に、試験プレートを、ＡＢ  Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ  ４０００三連四重極質量分析計に接続したＡｇｉｌｅｎｔ  ＲａｐｉｄＦｉｒｅハイスループット固相抽出システムにて、以下の設定で分析した。
【０３２２】
ＲａｐｉｄＦｉｒｅ設定：
・Ｓｉｐ高(Sip Height)＝２ｍｍ、吸引＝５００ｍｓ、ロード時間＝３０００ｍｓ、溶出時間＝３０００ｍｓ、再平衡化(Requilibration)＝５００ｍｓ。
・流速：ポンプ１＝１．５ｍＬ／分、ポンプ２  １．２５ｍＬ／分  ポンプ３＝０．８ｍＬ／分
質量分析計設定
・ＬＲＲＫｔｉｄｅ検出設定：Ｑ１質量６４４．８Ｄａ、Ｑ３質量６３８．８、デクラスタリング電位７６ボルト、衝突エネルギー３７ボルト、ＣＸＰ  ３４ボルト。
・ホスホ−ＬＲＲＫｔｉｄｅ検出設定：Ｑ１質量６７１．４Ｄａ、Ｑ３質量６３８．８、デクラスタリング電位７６ボルト、衝突エネルギー３７ボルト、ＣＸＰ  ３４ボルト
・Ｃ４カートリッジを使用し、ランニングバッファーは：Ａ（水性）水中０．１％ギ酸Ｂ（有機）０．１％ギ酸、８０％アセトニトリル、２０％水であった。
・衝突ガス：１２、カーテンガス：２５、イオン源ガス（１）：６０、イオン源ガス（２）：６０、イオンスプレー電圧：５５００、温度：６００、インターフェースヒーター(Interfaec Heater)：オン。
・分解能Ｑ１：低、分解能Ｑ３：低。
【０３２３】
６）データはＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅソフトウエア（ＩＤＢＳ）を用いて解析した。ＬＲＲＫｔｉｄｅからホスホ−ＬＲＲＫｔｉｄｅへの変換率％は、下式を用いて計算した。
％変換率＝（ホスホ−ＬＲＲＫｔｉｄｅ生成物ピーク面積／（ホスホ−ＬＲＲＫｔｉｄｅ生成物ピーク面積＋ＬＲＲＫｔｉｄｅ基質ピーク面積））＊１００
【０３２４】
ｂ．組換え細胞ＬＲＲＫ２  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイ
細胞においてＬＲＲＫ２キナーゼ活性に対する化合物の活性を決定するために、観察されたＬＲＲＫ２  Ｓｅｒ  ９３５リン酸化のＬＲＲＫ２キナーゼ依存性調節(Dzamko et al., 2010, Biochem. J. 430: 405-413)を用い、組換え全長ＬＲＲＫ２タンパク質を過剰発現するように操作されたヒト神経芽腫細胞株ＳＨ−ＳＹ５ＹにおけるＬＲＲＫ２  Ｓｅｒ９３５リン酸化の、定量的な３８４ウェルプレートに基づくイムノアッセイを開発した。
【０３２５】
全長組換えＬＲＲＫ２を発現するＢａｃＭａｍウイルスはＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎから購入し、３％ウシ胎仔血清を添加したＳｆ−９００  ＩＩＩ  ＳＦＭ培地にて、４〜５日間、ＭＯＩ０．３でＳＦ−９細胞に接種することにより増幅した。次に、感染細胞培養物を２０００ｇで２０分間遠心分離し、ウイルス上清力価を抗ｇｐ６４プラークアッセイにより決定し、４℃で保存した。
【０３２６】
アフィニティー精製した抗ホスホＬＲＲＫ２  Ｓｅｒ９３５ヒツジポリクローナル抗体(Dzamko et al., 2010, Biochem. J. 430: 405-413)を標準的な方法（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）によりビオチン化した。抗ＬＲＲＫ２ウサギポリクローナル抗体は、Ｎｏｖｕｓ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓから購入した。ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎタンパク質Ａ  ＩｇＧキット（アクセプタービーズおよびドナービーズを含む）は、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒから購入した。
【０３２７】
ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞を、１０％透析ウシ胎仔血清を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２培地で増殖させ、３７℃にて、０．５％トリプシン−ＥＤＴＡで５分間処理した後、４分間１０００ｒｐｍで遠心分離することにより回収した。細胞ペレットをＯｐｔｉ−ＭＥＭ血清低減培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に２００，０００細胞／ｍｌで再懸濁させ、ＢａｃＭａｍ  ＬＲＲＫ２ウイルスとＭＯＩ＝５０で混合した。５０μｌの細胞溶液を３８４ウェルプレートの各ウェルに分注し、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。
【０３２８】
試験化合物の希釈系をＯｐｔｉ−ＭＥＭ血清低減培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で調製し、最高最終アッセイ濃度が１０μＭとなるように５．６μｌを化合物プレートから細胞アッセイプレートに移した。対照としての特定のウェルにはＤＭＳＯを用いた。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で６０分間インキュベートした。次に、培地を除去し、２０μｌの細胞溶解バッファー（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を添加して４℃で２０分間インキュベートすることにより細胞を溶解させた。次に、１０μｌの抗体／アクセプタービーズ混合物［ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ検出バッファー（２５ｍＭヘペス（ｐＨ７．４）、０．５％トリトンＸ−１００、１ｍｇ／ｍｌデキストラン５００および０．１％ＢＳＡ）中、（１／１０００ビオチン化−ｐＳ９３５  ＬＲＲＫ２抗体、１／１０００総ＬＲＲＫ２抗体、１／１００アクセプタービーズ］を各ウェルに加え、プレートを暗所、周囲温度で２時間インキュベートした。１０μｌのドナービーズ溶液（ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ検出バッファー中、１／３３．３ドナービーズ）を各ウェルに加えた。暗所、周囲温度でさらに２時間インキュベートした後、プレートをＥｎＶｉｓｉｏｎ（商標）プレートリーダーにて、励起６８０ｎｍを用い、発光５２０〜６２０ｎｍで読み取った。用量反応曲線データは、シグモイド用量反応モデルに基づいた。
【０３２９】
ｃ．ＦＡＳＳＩＦ溶解度アッセイ
化合物溶解度は、ｐＨ６．５の絶食状態の人工腸液（ＦａＳＳＩＦ）で評価した。特定の量の試験化合物を特定の容量のＦａＳＳＩＦに加え、約１ｍｇ／ｍｌの懸濁液を調製した。この懸濁液を水浴シェーカーにて３７℃で２４時間インキュベートした。４時間および２４時間で懸濁液を１４Ｋ  ｒｐｍで１５分間遠心分離した。１００μｌの上清を抜き取り、同容量の５０％アセトニトリル水溶液で希釈し、ＵＰＬＣ（超高速液体クロマトグラフィー）で分析した。ＦａＳＳＩＦ溶解度は試験化合物のピーク面積に基づいて計算した。
【０３３０】
ＦａＳＳＩＦ（１７０ｍｌ）の調製  １００ｍｇのレシチンおよび２７４ｍｇ（無水当量）のＮａＴａｕｒｏｃｈｏｌａｔｅを約１５０ｍｌのｐＨ６．５バッファー中に溶解させた。溶液をｐＨ６．５のバッファーで１７０ｍｌの容量とした。
【０３３１】
ｐＨ６．５バッファー溶液（１Ｌ）の調製  ４．０８３ｇのＫＨ２ＰＯ４および７．４５６ｇ  ＫＣｌを８００ｍｌの水に溶解させた後、１００ｍｌの０．１Ｍ  ＮａＯＨを加えた。この溶液を水で１Ｌの容量とした。このバッファー溶液のｐＨ値を測定し、６．５０±０．１に調整した。
【０３３２】
ＵＰＬＣ較正および溶解度計算のための標準溶液  ２μＭ、２０μＭおよび２００μＭ  ＤＭＳＯ（水中５０％ＡＣＮ）溶液。
【０３３３】
ＵＰＬＣ法およびパラメーター
機器：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣシステム
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８（１．７μｍ、２．１×５０ｍｍ）
移動相：Ａ：水中０．１％ＴＦＡ／Ｂ：ＣＡＮ中０．１％ＴＦＡ
勾配：０分（Ａ９５％／Ｂ５％）、２分（Ａ５％／Ｂ９５％）、２．５分（Ａ５％／Ｂ９５％）、２．６分（Ａ９５％／Ｂ５％）、３分（Ａ９５％／Ｂ５％）
流速：０．８ｍＬ／分；カラム温度：４０℃；注入容量：１．０μＬ；ＵＶ検出：２８０ｎｍ
【０３３４】
ｄ．ＣＬＮＤ溶解度アッセイ
化合物の動力学的溶解度は、公知のプロトコール（例えば、Bhattachar S. N.; Wesley J. A.; Seadeek C., Evaluation of the Chemiluminescent Nitrogen Detector for Solubility Determinations to Support Drug Discovery, J. Pharm. Biomed. Anal. 2006 (41):152-157; Kestranek A, Chervenek A, Logenberger J, Placko S. Chemiluminescent Nitrogen Detection (CLND) to Measure Kinetic Aqueous Solubility, Curr Protoc Chem Biol., 2013, 5(4):269-80参照）に基づき、ＣＬＮＤ（化学発光窒素検出）溶解度アッセイによって評価することができる。一般に、試験化合物の１０ｍＭ  ＤＭＳＯ保存溶液５μｌをｐＨ７．４リン酸緩衝生理食塩水で１００μｌに希釈し、室温で１時間平衡し、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ＭｕｌｔｉｓｃｒｅｅｎＨＴＳ−ＰＣＦフィルタープレート（ＭＳＳＬ  ＢＰＣ）で濾過した。濾液を、適宜較正したフローインジェクション化学発光窒素検出により定量する。
【０３３５】
２．アッセイデータ
実施例Ｅ１〜Ｅ２１、Ｅ２５〜Ｅ２８、Ｅ３０、Ｅ３１、Ｅ３４、およびＥ３７〜Ｅ４１の化合物を組換え細胞ＬＲＲＫ２  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイで試験したところ、≧６．５のｐＩＣ５０を示した。
【０３３６】
実施例Ｅ１〜Ｅ９、Ｅ１１、Ｅ１３〜Ｅ１７、Ｅ２５〜Ｅ２８、Ｅ３０、Ｅ３１、Ｅ３４、およびＥ３７〜Ｅ４１の化合物を組換え細胞ＬＲＲＫ２  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイで試験したところ、≧７のｐＩＣ５０を示した。
【０３３７】
実施例１は組換え細胞ＬＲＲＫ２  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎアッセイで８．３のｐＩＣ５０を示した。加えて、Ｅ２９、Ｅ３２、Ｅ３３、およびＥ４２は、それぞれ８．２、８．０、８．０および８．７のｐＩＣ５０を示した。
【０３３８】
実施例Ｅ３〜Ｅ６、Ｅ１０〜Ｅ１２、Ｅ１７〜Ｅ２１、およびＥ２５〜Ｅ３１の化合物を全長Ｇ２０１９ヒトＬＲＲＫ２阻害質量分析アッセイで試験したところ、≧６．５のｐＩＣ５０を示した。実施例３２は、８．０のｐＩＣ５０を示した。
【０３３９】
３．配列表
ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ｐＨＴＢＶ−ＦのＰＣＲクローニングに使用した配列番号１のプライマー
【化１２６】
2020506966.tif 000138
配列番号２  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ１のＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化１２７】
2020506966.tif 000139
配列番号３  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｒ１のＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化１２８】
2020506966.tif 000140
配列番号４  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ２のＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化１２９】
2020506966.tif 000141
配列番号５  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｒ２のＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化１３０】
2020506966.tif 000142
配列番号６  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ＬＲＲＫ２  ｗｔ−Ｆ３のＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化１３１】
2020506966.tif 000143
配列番号７  ヒトＧ２０１９  ＬＲＲＫ２プラスミド調製物：ｐＨＴＢＶ−ＲのＰＣＲクローニングに使用したプライマー
【化１３２】
2020506966.tif 000144
配列番号８  Ｇ２０１９全長Ｆｌａｇ−ＬＲＲＫ２コード配列
【化１３３】
2020506966.tif 000145
2020506966.tif 000146
2020506966.tif 000147
配列番号９  ヒトＧ２０１９全長ＬＲＲＫ２  ｆｌａｇタグを有するタンパク質の翻訳タンパク質配列
【化１３４】
2020506966.tif 000148
2020506966.tif 000149
配列番号１０：‘ＬＲＲＫｔｉｄｅ’ペプチド
【化１３５】
2020506966.tif 000150
【配列表】
2020506966000001.app
【国際調査報告】
2020506966.tif 000153
2020506966.tif 000154
2020506966.tif 000155