(57)【要約】  本発明はシグナル伝達物質としてのコンセンサスインターフェロンを含むキメラタンパク質に関する。いくつかの実施形態では、前記コンセンサスインターフェロンは改変されており、１つ又は複数の変異を含む。ある実施形態では、前記改変型コンセンサスインターフェロンはＩＦＮＡＲ１に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異を含み、且つＩＦＮＡＲ２に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異を含む。本発明は、前記キメラタンパク質を含む医薬組成物及び様々な疾患の治療におけるそれらの使用を提供する。本発明は、前記キメラタンパク質の有効量を投与することを含む、がんを治療するための方法に関する。【選択図】図１Ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント、及び
（ｂ）目的の抗原又は受容体に特異的に結合する認識ドメインを含む、１つ又は複数の標的化部分、
を含み、前記コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント及び前記１つ又は複数の標的化部分が１つ又は複数のリンカーにより連結されていてもよい、キメラタンパク質。
【請求項２】
前記コンセンサスインターフェロンが配列番号１又は配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項３】
前記バリアントコンセンサスインターフェロンが配列番号３〜配列番号６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項４】
前記バリアントコンセンサスインターフェロンがＰＥＧ化されている、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項５】
前記バリアントコンセンサスインターフェロンがインターフェロンα／β受容体（ＩＦＮＡＲ）に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異を含む、請求項１に記載のキメラタンパク質。
【請求項６】
前記バリアントコンセンサスインターフェロンがＩＦＮＡＲ１に対する親和性が低下している、請求項５に記載のキメラタンパク質。
【請求項７】
前記バリアントコンセンサスインターフェロンがＩＦＮＡＲ２に対する親和性が低下している、請求項５に記載のキメラタンパク質。
【請求項８】
前記１つ又は複数の変異が、１つ又は複数の標的化部分への結合によって回復可能である親和性の低下をもたらすものであり、請求項５〜請求項７のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項９】
前記標的化部分が腫瘍細胞を指向する、請求項１〜請求項８のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１０】
前記標的化部分が免疫細胞を指向する、請求項１〜請求項９のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１１】
前記免疫細胞が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、マクロファージ、好中球、骨髄性抑制性細胞、及びＮＫ細胞から選択される、請求項１０に記載のキメラタンパク質。
【請求項１２】
前記標的化部分が、全長抗体、単一ドメイン抗体、組換え重鎖抗体（ＶＨＨ）、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、サメ重鎖抗体（ＶＮＡＲ）、マイクロプロテイン（例えばシステインノットタンパク質、ノッチン）、ＤＡＲＰｉｎ、アンチカリン、アドネクチン、アプタマー、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ペプチド模倣分子、受容体の天然リガンド、又は合成分子である認識ドメインを含む、請求項１〜請求項１１のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１３】
前記認識ドメインが単一ドメイン抗体（ＮＡＮＯＢＯＤＹ）である、請求項１〜請求項１２のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１４】
前記認識ドメインが、ＶＨＨ、ヒト化ＶＨＨ、又はラクダ化ＶＨＨである、請求項１〜請求項１３のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１５】
前記認識ドメインが前記目的の抗原又は受容体の機能が調整する、請求項１〜請求項１４のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１６】
前記認識ドメインが前記目的の抗原又は受容体に結合するがその機能を調整しない、請求項１〜請求項１５のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１７】
２つ以上の標的化部分を含む、請求項１〜請求項１６のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１８】
１種類又は複数種類の追加の改変型シグナル伝達物質をさらに含む、請求項１〜請求項１７のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項１９】
前記キメラタンパク質が、２種類のシグナル伝達物質、２つの標的化部分、又は２種類のシグナル伝達物質と２つの標的化部分との両方を含む、請求項１〜請求項１８のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項２０】
前記キメラタンパク質が３種類のシグナル伝達物質、３つの標的化部分、又は３種類のシグナル伝達物質と３つの標的化部分との両方を含む、請求項１〜請求項１９のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項２１】
前記改変型シグナル伝達物質が、受容体に対する親和性又は活性を未変異のシグナル伝達物質と比べて低下させる１つ又は複数の変異を含む、請求項１８に記載のキメラタンパク質。
【請求項２２】
前記１つ又は複数の変異によって活性が減弱している、請求項２１に記載のキメラタンパク質。
【請求項２３】
アゴニスト活性又はアンタゴニスト活性が減弱している、請求項２２に記載のキメラタンパク質。
【請求項２４】
前記１つ又は複数の変異が、配列番号２における３３番目、１４５番目、１４６番目、１４９番目、１５０番目、及び１５４番目のアミノ酸位置に存在する、請求項２２又は請求項２３に記載のキメラタンパク質。
【請求項２５】
前記１つ又は複数の変異が、Ｒ３３Ａ、Ｒ１４５Ｘ１、Ａ１４６Ｘ２、Ｍ１４９Ａ、Ｒ１５０Ａ、及びＬ１５４Ａ（式中、Ｘ１はＡ、Ｓ、Ｔ、Ｙ、Ｌ、及びＩから選択され、Ｘ２はＧ、Ｈ、Ｙ、Ｋ、及びＤから選択される）から選択される、請求項２４に記載のキメラタンパク質。
【請求項２６】
前記１つ又は複数の変異が配列番号２における１２１番目のアミノ酸位置に存在する、請求項２２又は請求項２３に記載のキメラタンパク質。
【請求項２７】
前記変異がＫ１２１Ｅである、請求項２６に記載のキメラタンパク質。
【請求項２８】
前記改変型シグナル伝達物質が自身の活性をアゴニスト活性からアンタゴニスト活性へ変換する１つ又は複数の変異を含む、請求項２２又は請求項２３に記載のキメラタンパク質。
【請求項２９】
前記１つ又は複数の変異が、１つ又は複数の標的化部分への結合によって回復可能である親和性又は活性の低下をもたらすものである、請求項２１に記載のキメラタンパク質。
【請求項３０】
前記キメラタンパク質が、がん、感染症、免疫障害、自己免疫疾患、心血管疾患、創傷、虚血関連疾患、神経変性疾患、及び／又は代謝性疾患のうちの１つ又は複数を有する患者における使用に適している、請求項１〜請求項２９のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項３１】
請求項１〜請求項３０のいずれか一項に記載のキメラタンパク質のうちの１つをコードする組換え核酸組成物。
【請求項３２】
請求項３１に記載の核酸を含む宿主細胞。
【請求項３３】
請求項１〜請求項３２のいずれか一項に記載のキメラタンパク質の有効量を、該キメラタンパク質の投与を必要とする患者に投与することを含むがんの治療方法。
【請求項３４】
前記がんが、基底細胞がん、胆管がん、膀胱がん、骨がん、脳及び中枢神経系のがん、乳がん、腹膜がん、子宮頸がん、絨毛癌、大腸がん、結合組織がん、消化器がん、子宮内膜がん、食道がん、眼のがん、頭頚部がん、胃がん（胃腸がんを含む）、神経膠芽腫、肝細胞癌、肝癌、上皮内新生物、腎臓がん、喉頭がん、白血病、肝臓がん、肺がん（例えば、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌）、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、口腔がん（口唇、舌、口、及び咽頭）、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸がん、呼吸器がん、唾腺癌、肉腫（例えば、カポジ肉腫）、皮膚がん、扁平上皮がん、胃がん、精巣がん、甲状腺がん、子宮又は子宮内膜のがん、泌尿器がん、外陰がん、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫並びにＢ細胞リンパ腫を含むリンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非分割細胞ＮＨＬ、巨大腫瘤病変ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、及びワルデンストレーム型マクログロブリン血症を含む）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、有毛細胞白血病、慢性骨髄芽球性白血病、並びに他のがん腫及び肉腫、及び移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、並びに母斑症に関連する異常血管増殖、浮腫（例えば脳腫瘍に関連する浮腫）、及びメグズ症候群のうちの１つ又は複数から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記がんが有毛細胞白血病である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記がんが黒色腫である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
前記がんがカポジ肉腫である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３８】
請求項１〜請求項３０のいずれか一項に記載のキメラタンパク質の有効量を該キメラタンパク質の投与を必要とする患者に投与することを含む肝炎の治療方法。
【請求項３９】
前記肝炎が慢性Ｃ型肝炎感染症に起因する、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
リバリビンの投与をさらに含む請求項３８又は請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
医薬として使用される請求項１〜請求項４０のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項４２】
がんの治療において使用される請求項１〜請求項４１のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項４３】
肝炎の治療において使用される請求項１〜請求項４２のいずれか一項に記載のキメラタンパク質。
【請求項４４】
医薬の製造における請求項１〜請求項４３のいずれか一項に記載のキメラタンパク質の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は２０１７年２月６日に出願された米国仮特許出願第６２／４５４，９９２号の利益と優先権を主張するものであり、その内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０００２】
技術分野
本発明はコンセンサスインターフェロンを含むキメラタンパク質及び治療薬としてのそれらの使用に部分的に関する。
【０００３】
配列表
本出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩフォーマットで提出され、参照によりその全体が本明細書に取り込まれる配列表を含む。２０１８年１月２９日に作成されたそのＡＳＣＩＩコピーはＯＲＮ−０２４ＰＣ＿ＳＴ２５．ｔｘｔという名称であり、サイズが３２７，６８０バイトである。
【背景技術】
【０００４】
Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ）は、免疫応答において主要な役割を果たす多機能性サイトカインファミリーを構成する。ヒトＩ型ＩＦＮには１３種類の別個の非対立遺伝子性αサブタイプ、１種類のβサブタイプ、及び１種類のωサブタイプが含まれる。Ｉ型インターフェロンは全て、ＩＦＮＡＲ１サブユニットとＩＦＮＡＲ２サブユニットから構成されるＩ型インターフェロンα／β受容体（ＩＦＮＡＲ）という共通の受容体に結合するようである。Ｉ型ＩＦＮが結合するとＩＦＮＡＲはＪＡＫ−ＳＴＡＴシグナル伝達経路を活性化して様々な生物学的作用を誘発する。ＩＦＮサブタイプについて差異的な活性が報告されており、例えばウイルス性肝炎を含む様々な疾患及び障害の治療のために臨床で使用されている（ＩＦＮ−α２）。
【０００５】
コンセンサスインターフェロン（ＣＩＦＮ、インターフェロンアルファコン−１又はＩｎｆｅｒｇｅｎ（登録商標）としても知られる）は、数種類の非対立遺伝子性ＩＦＮ−αサブタイプの間で最も共通して見られるアミノ酸を含むように改変された合成組換えＩ型インターフェロンである。コンセンサスインターフェロンは野生型ＩＦＮ−α２ａと比較して１０倍高い抗ウイルス活性を有していることがｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究によって実証されている。コンセンサスインターフェロンは米国食品医薬品局（ＦＤＡ）により慢性Ｃ型肝炎感染症の治療について認可された。
【０００６】
その薬物動態学的特性に起因して、コンセンサスインターフェロンの臨床用途は重篤な副作用及び低い患者コンプライアンスを欠点とする。米国ではコンセンサスインターフェロンは１５μｇの濃度で週に３回使用されている。皮下注射後にコンセンサスインターフェロンは高レベルに達するが、血清濃度は次の投与までにほぼ検出限界未満まで低下する。この動態学的プロファイルにより、ウイルスには回復及び増殖する機会がもたらされる。より高い用量及び／又はより高頻度の投与を含むプロトコルが試験されてきたが、それらにはインフルエンザ様の症状、筋肉痛、白血球減少症、血小板減少症、好中球減少症、うつ、及び体重減少を含む重篤な副作用が伴う。高い患者脱落率も報告されている。
【０００７】
よって、薬物動態学的特性及び治療特性が改善されており、且つ、毒性プロファイルが最小である、安全で有効なコンセンサスインターフェロンに基づいた治療法の必要性が存在する。
【発明の概要】
【０００８】
ある態様では、本発明は、シグナル伝達物質としてのコンセンサスインターフェロンを含むキメラタンパク質に関する。ある実施形態では、コンセンサスインターフェロンは、配列番号１又は配列番号２のアミノ酸配列、又はそのバリアントを含む。いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンは改変されており、１つ又は複数の変異を含む。いくつかの実施形態では、１つ又は複数の変異によってコンセンサスインターフェロンの生物活性が低下する。例えば、１つ又は複数の変異によって治療受容体に対するコンセンサスインターフェロンの親和性が低下する場合がある。ある実施形態では、治療受容体は、インターフェロンα／β受容体（ＩＦＮＡＲ）であり、それはＩＦＮＡＲ１サブユニットとＩＦＮＡＲ２サブユニットから構成される。ある実施形態では、改変型コンセンサスインターフェロンは、ＩＦＮＡＲ１に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異を含む。別の実施形態では、改変型コンセンサスインターフェロンは、ＩＦＮＡＲ２に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異を含む。ある実施形態では、改変型コンセンサスインターフェロンは、ＩＦＮＡＲ１に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異を含み、且つ、ＩＦＮＡＲ２に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異を含む。
【０００９】
いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、改変されていてもよい１種類又は複数種類の追加のシグナル伝達物質、例えば、限定されないが、インターフェロン、インターロイキン、及び腫瘍壊死因子を含む。様々な実施形態では、本開示のキメラタンパク質により、非標的化コンセンサスインターフェロン又はＩＦＮ−α２ａ若しくはＩＦＮ−α２ｂなどの非改変野生型ＩＦＮ−αと比較して、安全性、及び／又は治療活性、及び／又は薬物動態プロファイル（例えば、血清中半減期の増加）の改善がもたらされる。
【００１０】
様々な実施形態において、キメラタンパク質は、目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する認識ドメイン（例えば、限定されないが、単一ドメイン抗体など、様々な抗体フォーマットを含む抗原認識ドメイン）を有する１つ又は複数の標的化部分を含む。様々な実施形態において、標的化部分は、限定されないが、Ｔ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、抗腫瘍性マクロファージ（例えばＭ１マクロファージ）、Ｂ細胞、及び樹状細胞を含み得る１種類又は複数種類の免疫細胞上に見られるものを含む、目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する認識ドメインを有する。いくつかの実施形態では、認識ドメインは、目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合し、１種類又は複数種類の免疫細胞を効果的に動員する。いくつかの実施形態では、目的の標的（例えば、抗原、受容体）は、１種類又は複数種類の腫瘍細胞上に存在することがある。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、免疫細胞、例えば腫瘍細胞を死滅させ得る及び／又は抑制し得る免疫細胞などを、作用部位（非限定的な例として、腫瘍微小環境など）に動員し得る。いくつかの実施形態では、認識ドメインは、非細胞構造体の一部である目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。
【００１１】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、様々な疾患又は障害、例えば、がん、感染症、免疫障害、自己免疫疾患、心血管疾患、創傷治癒、虚血関連疾患、神経変性疾患、代謝性疾患、並びに他の多くの疾患及び障害の治療に使用され、且つ、本発明は様々な治療方法を包含する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１Ａ】野生型ヒトＩＦＮα２である「ＩＦＮａ２」の段階希釈物を用いて細胞を１５分間刺激した後のＣＤ２０陽性細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化をＣＤ２０陰性細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化と比較して示すグラフである。ＳＴＡＴ１リン酸化をＦＡＣＳで定量し、ＣＤ２０陽性ＰＢＭＣ及びＣＤ２０陰性ＰＢＭＣについてプロットした。
【図１Ｂ】野生型ヒトＩＦＮα２に連結された抗ヒトＣＤ２０  ＶＨＨである「ＣＤ２０  ＩＦＮａ２」の段階希釈物を用いて細胞を１５分間刺激した後のＣＤ２０陽性細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化をＣＤ２０陰性細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化と比較して示すグラフである。ＳＴＡＴ１リン酸化をＦＡＣＳで定量し、ＣＤ２０陽性ＰＢＭＣ及びＣＤ２０陰性ＰＢＭＣについてプロットした。
【図１Ｃ】Ｒ１４９Ａ変異型ヒトＩＦＮα２に連結された抗ヒトＣＤ２０  ＶＨＨである「ＣＤ２０−ＩＦＮａ２＿Ｒ１４９Ａ」の段階希釈物を用いて細胞を１５分間刺激した後のＣＤ２０陽性細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化をＣＤ２０陰性細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化と比較して示すグラフである。ＳＴＡＴ１リン酸化をＦＡＣＳで定量し、ＣＤ２０陽性ＰＢＭＣ及びＣＤ２０陰性ＰＢＭＣについてプロットした。
【図１Ｄ】コンセンサスＩＦＮα２（配列番号２）に連結された抗ヒトＣＤ２０  ＶＨＨである「ＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ」の段階希釈物を用いて細胞を１５分間刺激した後のＣＤ２０陽性細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化をＣＤ２０陰性細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化と比較して示すグラフである。ＳＴＡＴ１リン酸化をＦＡＣＳで定量し、ＣＤ２０陽性ＰＢＭＣ及びＣＤ２０陰性ＰＢＭＣについてプロットした。
【図１Ｅ】Ｒ１５０Ａ変異型コンセンサスＩＦＮα２（配列番号２）に連結された抗ヒトＣＤ２０  ＶＨＨである「ＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ＿Ｒ１５０Ａ」の段階希釈物を用いて細胞を１５分間刺激した後のＣＤ２０陽性細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化をＣＤ２０陰性細胞におけるＳＴＡＴ１リン酸化と比較して示すグラフである。ＳＴＡＴ１リン酸化をＦＡＣＳで定量し、ＣＤ２０陽性ＰＢＭＣ及びＣＤ２０陰性ＰＢＭＣについてプロットした。
【図２Ａ】ＩＦＮａ２（図２Ａ）、ＣＤ２０−ＩＦＮａ２（図２Ｂ）、ＣＤ２０−ＩＦＮａ２＿Ｒ１４９Ａ（図２Ｃ）、ＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ（図２Ｄ）、及びＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ＿Ｒ１５０Ａ（図２Ｅ）を用いて細胞を６時間刺激した後の親ＨＬ１１６細胞又は派生ＨＬ１１６−ｈｕＣＤ２０細胞におけるルシフェラーゼ活性を示すグラフである。三連での測定の平均ルシフェラーゼ値（±ＳＴＤＥＶ）をプロットした。
【図２Ｂ】ＣＤ２０−ＩＦＮａ２を用いて細胞を６時間刺激した後の親ＨＬ１１６細胞又は派生ＨＬ１１６−ｈｕＣＤ２０細胞におけるルシフェラーゼ活性を示すグラフである。三連での測定の平均ルシフェラーゼ値（±ＳＴＤＥＶ）をプロットした。
【図２Ｃ】ＣＤ２０−ＩＦＮａ２＿Ｒ１４９Ａを用いて細胞を６時間刺激した後の親ＨＬ１１６細胞又は派生ＨＬ１１６−ｈｕＣＤ２０細胞におけるルシフェラーゼ活性を示すグラフである。三連での測定の平均ルシフェラーゼ値（±ＳＴＤＥＶ）をプロットした。
【図２Ｄ】ＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎを用いて細胞を６時間刺激した後の親ＨＬ１１６細胞又は派生ＨＬ１１６−ｈｕＣＤ２０細胞におけるルシフェラーゼ活性を示すグラフである。三連での測定の平均ルシフェラーゼ値（±ＳＴＤＥＶ）をプロットした。
【図２Ｅ】ＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ＿Ｒ１５０Ａを用いて細胞を６時間刺激した後の親ＨＬ１１６細胞又は派生ＨＬ１１６−ｈｕＣＤ２０細胞におけるルシフェラーゼ活性を示すグラフである。三連での測定の平均ルシフェラーゼ値（±ＳＴＤＥＶ）をプロットした。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明はコンセンサスインターフェロンを含む標的化キメラタンパク質が有益な治療特性及び副作用の減少を示すという発見に部分的に基づく。例えば、本発明のキメラタンパク質は、高活性であり、及び／又は長時間作用するが、副作用の誘発が最小限である。本発明によってキメラタンパク質を含む医薬組成物及び様々な疾患の治療におけるそれらの使用が提供される。
【００１４】
改変（例えばコンセンサス）インターフェロン又はそのバリアント
ある態様では、本発明は改変型インターフェロンを含むキメラタンパク質を提供する。ある態様では、本発明はコンセンサスインターフェロンを含むキメラタンパク質を提供する。コンセンサスインターフェロンは、数種類のヒト非対立遺伝子性ＩＦＮ−αサブタイプの配列を詳しく調べ、それぞれ対応する位置において最も頻繁に観察されるアミノ酸を選定することにより作成される。コンセンサスインターフェロンは、ＩＦＮ−α２ｂと１６６アミノ酸のうちの２０アミノ酸において異なっており（８８％の相同性）、ＩＦＮ−βとの比較によってアミノ酸位置の３０％超で同一性が示される。様々な実施形態において、コンセンサスインターフェロンは以下のアミノ酸配列を含む。
【化１】
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【００１５】
いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンは１つのアミノ酸によって配列番号１のアミノ酸配列と異なる配列番号２のアミノ酸を含み、すなわち、配列番号２は配列番号１の開始メチオニン残基を含まない。
【化２】
2020505955.tif 000004
【００１６】
様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、改変型のコンセンサスインターフェロン、すなわちコンセンサスインターフェロンバリアントをシグナル伝達物質として含む。様々な実施形態において、コンセンサスインターフェロンバリアントには、コンセンサスインターフェロンの機能的な派生体、類似体、前駆体、アイソフォーム、スプライスバリアント、又は断片が包含される。
【００１７】
ある実施形態では、キメラタンパク質は、その内容全体が参照により本明細書に取り込まれる米国特許第４，６９５，６２３号、同第４，８９７，４７１号、同第５，５４１，２９３号、及び同第８，４９６，９２１号に開示されるようなコンセンサスインターフェロンバリアントのうちのいずれかを含む。例えば、コンセンサスインターフェロンバリアントは、米国特許第４，６９５，６２３号、同第４８９７４７１号、及び同第５５４１２９３号に開示されるようなＩＦＮ−ＣＯＮ２又はＩＦＮ−ＣＯＮ３のアミノ酸配列を含んでいてもよい。ある実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントはＩＦＮ−ＣＯＮ２（配列番号３）のアミノ酸配列を含む。
【００１８】
ある実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントはＩＦＮ−ＣＯＮ３（配列番号４）のアミノ酸配列を含む。
【００１９】
ある実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、米国特許第８，４９６，９２１号に開示されるバリアントのうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。例えば、コンセンサスバリアントは配列番号５のアミノ酸配列を含む場合がある。
【００２０】
別の実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、配列番号６のアミノ酸配列を含み得る。
【００２１】
いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントはＰＥＧ化されていてもよく、すなわちＰＥＧ部分を含む。ある実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは配列番号６のＳ１５６Ｃの位置に結合したＰＥＧ部分を含み得る。
【００２２】
いくつかの実施形態では、改変型インターフェロンは、配列Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ（配列番号２７８）を得るために配列Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ（配列番号２７７）内の４１番目の位置にＡｓｐの挿入を有し（したがって、ＩＦＮ−α２ａ配列に対して配列の番号を付け直すことになる）、且つ、以下のＡｒｇ２３Ｌｙｓ、Ｌｅｕ２６Ｐｒｏ、Ｇｌｕ５３Ｇｌｎ、Ｔｈｒ５４Ａｌａ、Ｐｒｏ５６Ｓｅｒ、Ａｓｐ８６Ｇｌｕ、Ｉｌｅ１０４Ｔｈｒ、Ｇｌｙ１０６Ｇｌｕ、Ｔｈｒ１１０Ｇｌｕ、Ｌｙｓ１１７Ａｓｎ、Ａｒｇ１２５Ｌｙｓ、及びＬｙｓ１３６Ｔｈｒの変異を有するヒトＩＦＮ−α２ａのバリアントである。コンセンサスインターフェロンについて記載する本明細書中の全ての実施形態は同様にこの改変型インターフェロンに適用される。
【００２３】
その他のコンセンサスインターフェロンバリアント配列が当技術分野において知られている。様々な実施形態において、前記改変型コンセンサスインターフェロンは、コンセンサスインターフェロンバリアントの任意の既知のアミノ酸配列と、少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、又は少なくとも約９９％の配列同一性（例えば約６０％、約６１％、約６２％、約６３％、約６４％、約６５％、約６６％、約６７％、約６８％、約６９％、約７０％、約７１％、約７２％、約７３％、約７４％、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、又は約９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含む。
【００２４】
いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、本明細書に開示されるコンセンサスインターフェロン又はコンセンサスインターフェロンバリアント配列、例えば配列番号１〜６のうちのいずれかと、少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、又は少なくとも約９９％の配列同一性（例えば約６０％、約６１％、約６２％、約６３％、約６４％、約６５％、約６６％、約６７％、約６８％、約６９％、約７０％、約７１％、約７２％、約７３％、約７４％、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、又は約９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含む。
【００２５】
様々な実施形態において、コンセンサスインターフェロンバリアントは、１つ又は複数のアミノ酸変異を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、前記１つ又は複数のアミノ酸変異は、独立して置換、挿入、欠失、及び短縮化から選択され得る。
【００２６】
いくつかの実施形態では、アミノ酸変異は、アミノ酸置換であり、保存的置換及び／又は非保存的置換が含まれ得る。
【００２７】
「保存的置換」は、例えば、含まれるアミノ酸残基の極性、電荷、サイズ、溶解性、疎水性、親水性、及び／又は両親媒性についての類似性に基づいて行われてもよい。２０種類の天然アミノ酸は、（１）疎水性：Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；（５）鎖の配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；及び（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅの６つの標準的アミノ酸グループにグループ分けできる。
【００２８】
本明細書において使用される場合、「保存的置換」は、上記の６つの標準的アミノ酸グループのうちの同じグループに記載される別のアミノ酸によるアミノ酸の交換であると規定される。例えば、ＡｓｐのＧｌｕによる交換によってそのように改変されたポリペプチド内で１個の負の電荷が維持される。さらに、グリシン及びプロリンはそれらのαヘリックスを混乱させる能力に基づいて互いに置換され得る。
【００２９】
本明細書において使用される場合、「非保存的置換」は、上記の６つの標準的アミノ酸グループ（１）〜（６）のうちの異なるグループに記載される別のアミノ酸によるアミノ酸の交換であると規定される。
【００３０】
様々な実施形態において、置換には、非典型的アミノ酸（例えば、一般的には、セレノシステイン、ピロロリシン、Ｎ−ホルミルメチオニン、β−アラニン、ＧＡＢＡ、及びδ−アミノレブリン酸、４−アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）、一般的アミノ酸のＤ−異性体、２，４−ジアミノ酪酸、α−アミノイソ酪酸、４−アミノ酪酸、Ａｂｕ、２−アミノ酪酸、γ−Ａｂｕ、ε−Ａｈｘ、６−アミノヘキサン酸、Ａｉｂ、２−アミノイソ酪酸、３−アミノプロピオン酸、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、ヒドロキシプロリン、サルコシン、シトルリン、ホモシトルリン、システイン酸、ｔ−ブチルグリシン、ｔ−ブチルアラニン、フェニルグリシン、シクロヘキシルアラニン、β−アラニン、フルオロアミノ酸、デザイナーアミノ酸、例えばβ−メチルアミノ酸、Ｃ  α−メチルアミノ酸、Ｎ  α−メチルアミノ酸、及びアミノ酸類似体）も含まれ得る。
【００３１】
様々な実施形態において、コンセンサスインターフェロンは、１つ又は複数の変異を有するように改変されている。いくつかの実施形態では、それらの変異によって、コンセンサスインターフェロンバリアントは、未変異型、例えば野生型のコンセンサスインターフェロン（例えば配列番号１又は２のアミノ酸配列を有するコンセンサスインターフェロン）と比べて、結合親和性の低下、内在性活性の低下、及び特定の生物活性の低下のうちのうちの１つ又は複数など、１つ又は複数の活性が低下する。例えば、未変異型、例えば野生型のコンセンサスインターフェロンに対するて、結合親和性の低下、内在性活性の低下、及び特定の生物活性の低下などの前記１つ又は複数の活性の低下は、ＩＦＮＡＲなどの治療受容体において起こり得る。結果として、様々な実施形態において、それらの変異によって、前記コンセンサスインターフェロンバリアントは、未変異型、例えば、野生型のコンセンサスインターフェロンと比べて、全身毒性が低減され、副作用が低減され、オフターゲット作用が低減される。
【００３２】
様々な実施形態において、コンセンサスインターフェロンは、ＩＦＮＡＲなどの治療受容体での結合親和性又は活性を低下させる変異を有するように改変されている。いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンによりもたらされる活性は、治療受容体における受容体活性化作用（例えば、治療部位における細胞効果の活性化）である。例えば、コンセンサスインターフェロンは治療受容体を活性化してもよい。前記実施形態では、変異によって、コンセンサスインターフェロンバリアントは治療受容体における活性化活性が低下することになる。
【００３３】
いくつかの実施形態では、治療受容体における親和性又は活性の低下は、標的化部分との結合によって回復可能である。他の実施形態では、治療受容体における親和性又は活性の低下は、標的化部分との結合によって実質的に回復することがない。様々な実施形態において、本発明の治療キメラタンパク質は、コンセンサスインターフェロンバリアントが治療受容体における結合親和性又は活性を弱める変異を有するため、オフターゲット作用を減少させる。様々な実施形態において、これにより、例えば、野生型コンセンサスインターフェロンに見られる副作用が低減する。様々な実施形態において、コンセンサスインターフェロンバリアントは、治療活性部位への途中では実質的に不活性であり、特異的に標的化された細胞種に対して実質的に作用し、望まれない副作用が大いに低減される。
【００３４】
様々な実施形態において、コンセンサスインターフェロンバリアントは、１種類又は複数種類の治療受容体に対するコンセンサスインターフェロンバリアントの親和性、例えば、結合（例えばＫＤ）及び／又は活性化（例えば、ＫＡ及び／又はＥＣ５０として測定可能なもの）を減弱又は低下させる１つ又は複数の変異を有する。様々な実施形態において、治療受容体における親和性の低下によって治療受容体からの活性及び／又はシグナル伝達が減弱している。
【００３５】
様々な実施形態において、コンセンサスインターフェロンバリアントは、ＩＦＮＡＲのＩＦＮＡＲ１サブユニットへの結合又は親和性を低下させる１つ又は複数の変異を有する。ある実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、ＩＦＮＡＲ１における親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、ＩＦＮＡＲのＩＦＮＡＲ２サブユニットへの結合又は親和性を低下させる１つ又は複数の変異を有する。いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、ＩＦＮＡＲ１サブユニットとＩＦＮＡＲ２サブユニットの両方への結合又は親和性を低下させる１つ又は複数の変異を有する。
【００３６】
いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、ＩＦＮＡＲ１への結合又はＩＦＮＡＲ１に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異、及びＩＦＮＡＲ２への結合又はＩＦＮＡＲ２に対する親和性を実質的に低下させるか又は除去する１つ又は複数の変異を有する。いくつかの実施形態では、そのようなコンセンサスインターフェロンバリアントを有するキメラタンパク質により、標的選択的なＩＦＮＡＲ１活性（例えば、ＩＦＮＡＲ１活性は、標的化部分を介した標的化により回復可能である）がもたらされ得る。
【００３７】
いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、ＩＦＮＡＲ２への結合又はＩＦＮＡＲ２に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異、及びＦＮＡＲ１への結合又はＦＮＡＲ１に対する親和性を実質的に低下させるか又は除去する１つ又は複数の変異を有する。いくつかの実施形態では、そのようなコンセンサスインターフェロンバリアントを含むキメラタンパク質により、標的選択的なＩＦＮＡＲ２活性（例えば、ＩＦＮＡＲ２活性は標的化部分を介した標的化により回復可能である）がもたらされ得る。
【００３８】
いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、ＩＦＮＡＲ１への結合又はＩＦＮＡＲ１に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異、及びＩＦＮＡＲ２への結合又はＩＦＮＡＲ２に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異を有する。いくつかの実施形態では、そのようなコンセンサスインターフェロンバリアントを有するキメラタンパク質により、標的選択的なＩＦＮＡＲ１及び／又はＩＦＮＡＲ２活性（例えば、ＩＦＮＡＲ１及び／ＩＦＮＡＲ２活性は標的化部分を介した標的化により回復可能である）がもたらされ得る。
【００３９】
様々な実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、野生型コンセンサスインターフェロンと比べて、治療受容体（例えば、ＩＦＮＡＲ又はそのサブユニットであるＩＦＮＡＲ１及び／又はＩＦＮＡＲ２のうちのいずれか１つ）に対して、約１％、又は約３％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、又は約１０％〜２０％、約２０％〜４０％、約５０％、約４０％〜６０％、約６０％〜８０％、約８０％〜１００％の親和性を有する。いくつかの実施形態では、結合親和性は、野生型コンセンサスインターフェロンと比べて、少なくとも約２倍低く、約３倍低く、約４倍低く、約５倍低く、約６倍低く、約７倍低く、約８倍低く、約９倍低く、少なくとも約１０倍低く、少なくとも約１５倍低く、少なくとも約２０倍低く、少なくとも約２５倍低く、少なくとも約３０倍低く、少なくとも約３５倍低く、少なくとも約４０倍低く、少なくとも約４５倍低く、少なくとも約５０倍低く、少なくとも約１００倍低く、少なくとも約１５０倍低く、又は約１０〜５０倍低く、約５０〜１００倍低く、約１００〜１５０倍低く、約１５０〜２００倍低く、又は２００倍以上低い。
【００４０】
いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントは、コンセンサスインターフェロンバリアントの受容体に対する親和性を低下させる１つ又は複数の変異を含む。いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンバリアントの受容体に対する結合親和性は、標的化部分の受容体に対する結合親和性よりも低い。いくつかの実施形態では、この結合親和性の差は、同じ細胞でのコンセンサスインターフェロンバリアント／受容体の結合親和性と標的化部分／受容体の結合親和性の間にある。いくつかの実施形態では、この結合親和性の差によって、コンセンサスインターフェロンバリアントは、オンターゲット作用を局在化させることができ、且つ、野生型コンセンサスインターフェロンに見られる副作用の根底にあるオフターゲット作用を最小限にすることができる。いくつかの実施形態では、この結合親和性は、少なくとも約２倍低く、少なくとも約５倍低く、少なくとも約１０倍低く、少なくとも約１５倍低く、少なくとも約２５倍低く、少なくとも約５０倍低く、少なくとも約１００倍低く、又は少なくとも約１５０倍低い。
【００４１】
受容体結合活性は、当技術分野において知られている方法を用いて測定可能である。例えば、親和性及び／又は結合活性は、結合データのスキャッチャードプロット分析及びコンピューターフィッティング（例えばＳｃａｔｃｈａｒｄ，１９４９）によって、又はＢｒｅｃｈｔら（１９９３）によって記載されるようなフロースルー条件下での反射型干渉分光法によって評価可能であり、それらの文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【００４２】
様々な実施形態において、治療受容体における活性の減弱、つまり治療受容体における弱まった親和性は、治療活性部位において抗原に対して高い親和性を有する標的化部分（例えば、本明細書に記載される抗体又は抗体フォーマット）との結合によって回復可能である。標的化は、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアントを標的化部分に連結することにより実現される。ある実施形態では、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアントはアミノ末端を介して標的化部分に連結される。別の実施形態では、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアントはカルボキシ末端を介して標的化部分に連結される。このように、本開示のキメラタンパク質は、いくつかの実施形態において、治療受容体において局所したオンターゲットの、制御された治療作用を実現する。
【００４３】
いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンは、配列番号２における３３番目及び／又は１４５〜１５５番目のうちの１つ又は複数のアミノ酸、例えば１４５番目、１４６番目、１４９番目、１５０番目及び／又は１５４番目のアミノ酸位置に変異を有するように改変されている。いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロンは、配列番号２における３３番目及び／又は１４５〜１５５番目のうちの１つ又は複数のアミノ酸、例えば１４５番目、１４６番目、１４９番目、１５０番目及び／又は１５４番目のアミノ酸位置に変異を有するように改変されており、それらの置換は疎水性であってもよく、且つ、アラニン、バリン、ロイシン、及びイソロイシンから選択される。いくつかの実施形態では、コンセンサスインターフェロン変異体は、配列番号２におけるＲ３３Ａ、Ｒ１４５Ｘ１、Ａ１４６Ｘ２、Ｍ１４９Ａ、Ｒ１５０Ａ、及びＬ１５４Ａから選択される１つ又は複数の変異を含む（式中、Ｘ１はＡ、Ｓ、Ｔ、Ｙ、Ｌ、及びＩから選択され、Ｘ２はＧ、Ｈ、Ｙ、Ｋ、及びＤから選択される）。
【００４４】
ある実施形態では、コンセンサスインターフェロンは、配列番号２における１２１番目のアミノ酸（すなわち、Ｋ１２１）に変異を有するように改変されている。ある実施形態では、コンセンサスインターフェロンは、配列番号２におけるＫ１２１Ｅ変異を含む。
【００４５】
改変（例えばコンセンサス）インターフェロン又はそのバリアントを含む治療薬
標的化部分の細胞動員
様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する認識ドメインを有する１つ又は複数の標的化部分をさらに含む。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、又はそれより多くの標的化部分を含んでいてもよい。例示的な実施形態では、本発明のキメラタンパク質は２つ以上の標的化部分を含む。前記実施形態では、それらのキメラタンパク質は（例えば、シナプスを作成するために）２つの異なる細胞を標的とすることができ、又は（例えば、より集中したシグナル伝達物質作用を得るために）同一の細胞を標的とすることができる。
【００４６】
様々な実施形態において、目的の標的（例えば、抗原、受容体）を１種類又は複数種類の免疫細胞上に見出すことができ、それらの免疫細胞としては、限定されないが、Ｔ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、抗腫瘍性マクロファージ（例えばＭ１マクロファージ）、Ｂ細胞、樹状細胞、又はそれらのサブセットを挙げることができる。いくつかの実施形態では、認識ドメインは目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合し、１種類又は複数種類の免疫細胞を直接的又は間接的に効果的に動員する。いくつかの実施形態では、目的の標的（例えば、抗原、受容体）を１種類又は複数種類の腫瘍細胞上に見出すことができる。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、免疫細胞を直接的又は間接的に動員し、例えば、いくつかの実施形態では、治療部位（例えば、１種類又は複数種類の疾患細胞又は治療効果が調整される細胞を含む場所）へ動員し得る。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、免疫細胞、例えば腫瘍細胞を死滅させ得る及び／又は抑制し得る免疫細胞を作用部位（非限定的な例として、腫瘍微小環境など）へ直接的又は間接的に動員し得る。
【００４７】
様々な実施形態において、キメラタンパク質は、非細胞構造体部分である標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する認識ドメインを有する標的化部分を有する。いくつかの実施形態では、抗原又は受容体は、完全な細胞又は細胞構造体の不可欠な構成要素ではない。いくつかの実施形態では、抗原又は受容体は細胞外抗原又は受容体である。いくつかの実施形態では、標的は非タンパク質性非の細胞性マーカーであり、それには、限定されないが、ＤＮＡ又はＲＮＡを含む核酸、例えば、ネクローシス腫瘍細胞から放出されたＤＮＡ、又はコレステロールなどの細胞外沈着物が含まれる。
【００４８】
いくつかの実施形態では、目的の標的（例えば、抗原、受容体）は、間質若しくは細胞外マトリックス（ＥＣＭ）又はそれらの関連マーカーの非細胞成分の一部である。本明細書において使用される場合、間質は組織又は器官の結合支持骨格を指す。間質には、線維芽細胞／筋線維芽細胞、グリア細胞、上皮細胞、脂肪細胞、免疫細胞、血管細胞、平滑筋細胞、及び免疫細胞などの細胞と細胞外マトリックス（ＥＣＭ）及び細胞外分子との集合物が含まれることがある。様々な実施形態において、目的の標的（例えば、抗原、受容体）は、細胞外マトリックス及び細胞外分子など、間質の非細胞成分の一部である。本明細書において使用される場合、ＥＣＭは全ての組織及び器官内に存在する非細胞成分を指す。ＥＣＭは、限定されないが、タンパク質、糖タンパク質、プロテオグリカン、及び多糖類を含む、多くの生化学的に別個の構成成分から構成される。ＥＣＭのこれらの構成成分は、通常は、隣接する細胞によって産生され、エクソサイトーシスによってＥＣＭに分泌される。分泌されるとＥＣＭ構成成分は凝集して巨大分子の複雑なネットワーク構造を形成することが多い。様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＥＣＭの任意の構成成分上に局在する標的（例えば、抗原若しくは受容体又は非タンパク質性分子）を認識する標的化部分を含む。ＥＣＭの構成成分の例としては、プロテオグリカン、非プロテオグリカン多糖類、線維、及び他のＥＣＭタンパク質、又はＥＣＭ非タンパク質、例えば多糖類及び／又は脂質、又はＥＣＭ結合分子（例えばタンパク質又は非タンパク質、例えば多糖類、核酸、及び／又は脂質）が挙げられるがこれらに限定されない。
【００４９】
いくつかの実施形態では、標的化部分は、ＥＣＭプロテオグリカン上の標的（例えば、抗原、受容体）を認識する。プロテオグリカンはグリコシル化されたタンパク質である。基本的なプロテオグリカン単位は、１つ又は複数の共有結合したグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）鎖をコアタンパク質と共に含む。プロテオグリカンは正に荷電したナトリウムイオン（Ｎａ＋）を誘引する正味の負の電荷を有し、それにより浸透作用を介して水分子を誘引し、ＥＣＭ及び常在性細胞を水和状態に保つ。プロテオグリカンはＥＣＭ内に増殖因子を捕捉及び貯蔵することにも役立つ場合がある。本発明のキメラタンパク質が標的とし得るプロテオグリカンの例としては、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、及びケラタン硫酸が挙げられるがこれらに限定されない。ある実施形態では、標的化部分は、ヒアルロン酸などの非プロテオグリカン多糖類上の標的（例えば、抗原、受容体）を認識する。
【００５０】
いくつかの実施形態では、標的化部分は、ＥＣＭ線維上の標的（例えば、抗原、受容体）を認識する。ＥＣＭ線維としては、コラーゲン線維及びエラスチン線維が挙げられる。いくつかの実施形態では、標的化部分は、コラーゲン又はコラーゲン線維上の１つ又は複数のエピトープを認識する。コラーゲンはＥＣＭ中に最も大量に存在するタンパク質である。コラーゲンは線維性タンパク質としてＥＣＭ中に存在し、常在性細胞に構造的支持を提供する。１つ又は複数の実施形態において、標的化部分は、限定されないが、線維性コラーゲン（Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、Ｖ型、ＸＩ型）、ＦＡＣＩＴコラーゲン（ＩＸ型、ＸＩＩ型、ＸＩＶ型）、短鎖コラーゲン（ＶＩＩＩ型、Ｘ型）、基底膜コラーゲン（ＩＶ型）、及び／又はＶＩ型、ＶＩＩ型、若しくはＸＩＩＩ型のコラーゲンを含むＥＣＭ内に存在する様々な種類のコラーゲンを認識して、結合する。エラスチン線維は組織に弾性を与え、それにより必要時に組織が伸長した後に元の状態まで戻ることが可能になる。いくつかの実施形態では、標的部分は、エラスチン上又はエラスチン線維上の１つ又は複数のエピトープを認識する。
【００５１】
いくつかの実施形態では、標的化部分は、限定されないが、テネイシン、フィブロネクチン、フィブリン、ラミニン、又はナイドジェン／エンタクチンを含む、１種類又は複数種類のＥＣＭタンパク質を認識する。
【００５２】
ある実施形態では、標的化部分はテネイシンを認識して結合する。糖タンパク質であるテネイシン（ＴＮ）ファミリーには、テネイシン−Ｃ、テネイシン−Ｒ、テネイシン−Ｘ、及びテネイシンＷの少なくとも４つのメンバーが含まれる。テネイシンタンパク質の一次構造は、同じ連続配列、すなわち、アミノ末端７アミノ酸リピート、上皮成長因子（ＥＧＦ）様リピート、フィブロネクチンＩＩＩ型ドメインリピート、及びカルボキシル末端フィブリノーゲン球状ドメインの順で並んだ数個の共通モチーフを含む。各タンパク質メンバーは、ＥＧＦ様リピート及びフィブロネクチンＩＩＩ型リピートの数と性質についての典型的な多様性と関連している。も特にテネイシン−Ｃに関してはアイソフォームバリアント存在する。２７種類を超えるテネイシン−Ｃのスプライスバリアント及び／又はアイソフォームが知られている。特定の実施形態では、標的化部分は、テネイシン−ＣＡ１を認識して結合する。同様に、テネイシン−Ｒも様々なスプライスバリアント及びアイソフォームを有する。テネイシン−Ｒは、通常、二量体又は三量体として存在する。テネイシン−Ｘはテネイシンファミリーの中で最大のメンバーであり、三量体として存在することが知られている。テネイシン−Ｗは三量体として存在する。いくつかの実施形態では、標的化部分はテネイシンタンパク質上の１つ又は複数のエピトープを認識する。いくつかの実施形態では、標的化部分は、単量体型、及び／又は二量体型、及び／又は三量体型、及び／又は六量体型のテネイシンタンパク質を認識する。
【００５３】
ある実施形態では、標的化部分はフィブロネクチンを認識して結合する。フィブロネクチンはＥＣＭ中のコラーゲン線維と細胞を連結する糖タンパク質であり、細胞がＥＣＭを介して移動することを可能にする。インテグリンに結合すると、フィブロネクチンは折り畳み構造がほどけて機能的二量体を形成する。いくつかの実施形態では、標的化部分は単量体型及び／又は二量体型のフィブロネクチンを認識する。いくつかの実施形態では、標的化部分は、フィブロネクチン上の１つ又は複数のエピトープを認識する。例示的な実施形態では、標的化部分は、フィブロネクチン細胞外ドメインＡ（ＥＤＡ）又はフィブロネクチン細胞外ドメインＢ（ＥＤＢ）を認識する。ＥＤＡレベルの上昇は、乾癬、リウマチ性関節炎、糖尿病、及びがんを含む様々な疾患及び障害に関連している。いくつかの実施形態では、標的化部分は、ＥＤＡアイソフォームを含有するフィブロネクチンを認識し、がん細胞を含む疾患細胞にキメラタンパク質を標的化するために利用され得る。いくつかの実施形態では、標的化部分は、ＥＤＢアイソフォームを含有するフィブロネクチンを認識する。様々な実施形態において、そのような標的化部分は、腫瘍新生血管を含む腫瘍細胞にキメラタンパク質を標的化するために利用され得る。
【００５４】
ある実施形態では、標的化部分はフィブリンを認識して結合する。フィブリンはＥＣＭのマトリックスネットワーク構造中に見出されることが多い別のタンパク質物質である。フィブリンは、フィブリンの重合を引き起こすフィブリノーゲンに対するトロンビンプロテアーゼの作用によって形成される。いくつかの実施形態では、標的化部分はフィブリン上の１つ又は複数のエピトープを認識する。いくつかの実施形態では、標的化部分は単量体型及び多量体型のフィブリンを認識する。
【００５５】
ある実施形態では、標的化部分はラミニンを認識して結合する。ラミニンは、細胞及び器官のためのタンパク質ネットワークの基盤である基底膜の主要構成成分である。ラミニンは、α鎖、β鎖、及びγ鎖を含むヘテロ三量体タンパク質である。いくつかの実施形態では、標的化部分はラミニン上の１つ又は複数のエピトープを認識する。いくつかの実施形態では、標的化部分は単量体型、二量体型、及び三量体型のラミニンを認識する。
【００５６】
ある実施形態では、標的化部分はナイドジェン又はエンタクチンを認識して結合する。ナイドジェン／エンタクチンは非常によく保存された硫酸化糖タンパク質のファミリーである。それらの糖タンパク質は基底膜の主要構造形成成分を構成し、基底膜においてラミニン及びコラーゲンＩＶネットワーク構造を連結するように機能する。このファミリーのメンバーには、ナイドジェン−１及びナイドジェン−２が含まれる。様々な実施形態において、標的化部分は、ナイドジェン−１及び／又はナイドジェン−２上のエピトープを認識する。
【００５７】
様々な実施形態において、標的化部分は、本明細書に記載される標的（例えば、ＥＣＭタンパク質）のうちのいずれかの上に存在するエピトープを認識する抗原認識ドメインを含む。ある実施形態では、抗原認識ドメインは、タンパク質上に存在する１つ又は複数の直鎖状エピトープを認識する。本明細書において使用される場合、直鎖状エピトープとは、前記タンパク質上に存在するアミノ酸の任意の連続配列のことをいう。別の実施形態では、抗原認識ドメインは、前記タンパク質上に存在する１つ又は複数の立体構造エピトープを認識する。本明細書において使用される場合、立体構造エピトープとは、抗原認識ドメインにより認識可能である特徴及び／又は形状及び／又は三次構造を有する三次元表面を形成する（不連続であってもよい）アミノ酸の１つ又は複数のセクションのことをいう。
【００５８】
様々な実施形態において、標的化部分は、本明細書に記載される標的（例えばＥＣＭタンパク質）のうちのいずれかの全長、及び／又は成熟型、及び／又はアイソフォーム、及び／又はスプライスバリアント、及び／又は断片、及び／又は他の任意の天然若しくは合成の類似体、バリアント、若しくは変異体に結合してもよい。様々な実施形態において、標的化部分は、単量体、二量体、三量体、四量体、ヘテロ二量体、多量体、及び会合体を含む、本明細書に記載される任意の形態のタンパク質に結合してもよい。様々な実施形態において、標的化部分は、グリコシル化型及び／又はリン酸化型など、本明細書に記載される翻訳後修飾型のタンパク質に結合してもよい。
【００５９】
様々な実施形態において、標的化部分は、ＤＮＡなどの細胞外分子を認識する抗原認識ドメインを含む。いくつかの実施形態では、標的化部分は、ＤＮＡを認識する抗原認識ドメイン含む。ある実施形態では、前記ＤＮＡは、ネクローシス腫瘍細胞又はアポトーシス腫瘍細胞又は他の疾患細胞から細胞外空間に放出される。
【００６０】
様々な実施形態において、標的化部分は、アテローム性動脈硬化プラークに関連する１種類又は複数種類の非細胞構造体を認識する抗原認識ドメイン含む。２種類のアテローム性動脈硬化プラークが知られている。線維−脂質（線維−脂肪）性プラークは、動脈の内膜下の脂肪含有細胞の蓄積を特徴とする。内皮の下にプラークのアテローム性コアを覆う線維性被膜が存在する。コアには、組織コレステロール及びコレステロールエステル含量が高い脂肪含有細胞（マクロファージ及び平滑筋細胞）、フィブリン、プロテオグリカン、コラーゲン、エラスチン、及び細胞破片が含まれる。進行したプラークでは、プラークの中央コアは、通常は（死んだ細胞から放出された）細胞外コレステロール沈着物を含有し、それにより空の針状の割れ目を有するコレステロール結晶を含む領域を形成する。プラークの辺縁には比較的に若い泡沫細胞及び毛細血管が存在する。線維性プラークは、動脈壁内で、内膜の下にも局在することで壁を肥厚及び増大させることになり、時には局在する斑状のプラークが管腔を狭めるとともに筋肉層をいくらか萎縮させる。線維性プラークは、コラーゲン線維（好酸性）、カルシウム沈殿物（好ヘマトキシリン性）、及び脂肪含有細胞を含有する。いくつかの実施形態では、標的化部分は、フィブリン、プロテオグリカン、コラーゲン、エラスチン、細胞破片、及びカルシウム又は他の鉱物沈着物若しくは沈殿物など、これらのプラークの非細胞成分うちの１つ又は複数を認識し、結合する。いくつかの実施形態では、細胞破片は、死んだ細胞から放出された核酸、例えばＤＮＡ又はＲＮＡである。
【００６１】
様々な実施形態において、標的化部分は、神経変性疾患に関連する脳プラークに見られる１種類又は複数種類の非細胞構造体を認識する抗原認識ドメイン含む。いくつかの実施形態では、標的化部分は、アルツハイマー病の患者の脳に見られるアミロイドプラーク中に局在する１種類又は複数種類の非細胞構造体を認識して結合する。例えば、標的化部分は、アミロイドプラークの主要成分であるアミロイドβペプチドを認識して結合することがある。いくつかの実施形態では、標的化部分は、ハンチントン病の患者に見られる脳プラーク中に局在する１種類又は複数種類の非細胞構造体を認識して結合する。様々な実施形態において、標的化部分は、レビー小体型認知症及び封入体筋炎などの他の神経変性疾患又は筋骨格疾患に関連するプラークに見られる１種類又は複数種類の非細胞構造体を認識し、結合する。
【００６２】
いくつかの実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、非細胞構造体に結合する２つ以上の標的化部分を有し得る。いくつかの実施形態では、２つの標的化部分が存在し、一方が細胞を標的とし、他方が非細胞構造体を標的とする。様々な実施形態において、標的化部分は、細胞、例えば疾患細胞及び／又はエフェクター細胞を直接的又は間接的に動員することができる。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、腫瘍の免疫攻撃に有利である免疫細胞のバランスを変化させることができ、又はそのような変化を伴う方法において使用される。例えば、本開示のキメラタンパク質は、腫瘍を死滅させ得る及び／又は抑制し得る細胞（例えば、Ｔ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、抗腫瘍性マクロファージ（例えば、Ｍ１マクロファージ）、Ｂ細胞、樹状細胞、又はそれらのサブセット）に有利であり、且つ、腫瘍を防護する細胞（例えば、骨髄性抑制性細胞（ＭＤＳＣ）、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、腫瘍関連好中球（ＴＡＮ）、Ｍ２マクロファージ、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）、又はそれらのサブセット）に抵抗するように、免疫細胞の比率を臨床的に重要な部位において変化させることができる。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、制御性Ｔ細胞に対するエフェクターＴ細胞の比率を増加させることができる。
【００６３】
例えば、いくつかの実施形態では、認識ドメインは、Ｔ細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、認識ドメインはＴ細胞を直接的又は間接的に動員する。ある実施形態では、認識ドメインは、エフェクターＴ細胞に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、認識ドメインは、エフェクターＴ細胞を直接的又は間接的に動員し、例えばいくつかの実施形態では、治療部位（例えば、１種類又は複数種類の疾患細胞又は治療効果が調整される細胞を含む場所）へ動員する。エフェクターＴ細胞の例としては、細胞傷害性Ｔ細胞（例えばαβＴＣＲ、ＣＤ３＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＯ＋）；ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞（例えばαβＴＣＲ、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＣＲ７＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＩＬ−７Ｒ／ＣＤ１２７＋）；ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞（例えばαβＴＣＲ、ＣＤ３＋、ＣＤ８＋、ＣＣＲ７＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＩＬ−７Ｒ／ＣＤ１２７＋）；エフェクターメモリーＴ細胞（例えばＣＤ６２Ｌｌｏｗ、ＣＤ４４＋、ＴＣＲ、ＣＤ３＋、ＩＬ−７Ｒ／ＣＤ１２７＋、ＩＬ−１５Ｒ＋、ＣＣＲ７ｌｏｗ）；セントラルメモリーＴ細胞（例えばＣＣＲ７＋、ＣＤ６２Ｌ＋、ＣＤ２７＋、又はＣＣＲ７ｈｉ、ＣＤ４４＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＴＣＲ、ＣＤ３＋、ＩＬ−７Ｒ／ＣＤ１２７＋、ＩＬ−１５Ｒ＋）；ＣＤ６２Ｌ＋エフェクターＴ細胞；初期エフェクターメモリーＴ細胞（ＣＤ２７＋ＣＤ６２Ｌ−）及び後期エフェクターメモリーＴ細胞（ＣＤ２７−ＣＤ６２Ｌ−）（それぞれＴｅｍＥ及びＴｅｍＬ）を含むＣＤ８＋エフェクターメモリーＴ細胞（ＴＥＭ）；ＣＤ１２７（＋）ＣＤ２５（ｌｏｗ／−）エフェクターＴ細胞；ＣＤ１２７（−）ＣＤ２５（−）エフェクターＴ細胞；ＣＤ８＋幹細胞メモリーエフェクター細胞（ＴＳＣＭ）（例えばＣＤ４４（ｌｏｗ）ＣＤ６２Ｌ（ｈｉｇｈ）ＣＤ１２２（ｈｉｇｈ）ｓｃａ（＋））；ＴＨ１エフェクターＴ細胞（例えばＣＸＣＲ３＋、ＣＸＣＲ６＋及びＣＣＲ５＋、又はαβＴＣＲ、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＩＬ−１２Ｒ＋、ＩＦＮγＲ＋、ＣＸＣＲ３＋）；ＴＨ２エフェクターＴ細胞（例えばＣＣＲ３＋、ＣＣＲ４＋及びＣＣＲ８＋、又はαβＴＣＲ、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＩＬ−４Ｒ＋、ＩＬ−３３Ｒ＋、ＣＣＲ４＋、ＩＬ−１７ＲＢ＋、ＣＲＴＨ２＋）；ＴＨ９エフェクターＴ細胞（例えばαβＴＣＲ、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋）；ＴＨ１７エフェクターＴ細胞（例えばαβＴＣＲ、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＩＬ−２３Ｒ＋、ＣＣＲ６＋、ＩＬ−１Ｒ＋）；ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＯ＋ＣＣＲ７＋エフェクターＴ細胞、ＩＣＯＳ＋エフェクターＴ細胞；ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＯ＋ＣＣＲ７（−）エフェクターＴ細胞；並びにＩＬ−２、ＩＬ−４及び／又はＩＦＮ−γを分泌するエフェクターＴ細胞が挙げられる。
【００６４】
目的のＴ細胞抗原（及び、適用可能な場合は細胞外ドメインも含まれる）の例としては、例えば、ＣＤ８、ＣＤ３、ＳＬＡＭＦ４、ＩＬ−２Ｒα、４−１ＢＢ／ＴＮＦＲＳＦ９、ＩＬ−２Ｒβ、ＡＬＣＡＭ、Ｂ７−１、ＩＬ−４Ｒ、Ｂ７−Ｈ３、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦＳ、ＣＥＡＣＡＭ１、ＩＬ−６Ｒ、ＣＣＲ３、ＩＬ−７Ｒα、ＣＣＲ４、ＣＸＣＲ１／ＩＬ−ＳＲＡ、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＩＬ−１０Ｒα、ＣＣＲ７、ＩＬ−１０Ｒβ、ＣＣＲＳ、ＩＬ−１２Ｒβ１、ＣＣＲ９、ＩＬ−１２Ｒβ２、ＣＤ２、ＩＬ−１３Ｒα１、ＩＬ−１３、ＣＤ３、ＣＤ４、ＩＬＴ２／ＣＤＳ５ｊ、ＩＬＴ３／ＣＤＳ５ｋ、ＩＬＴ４／ＣＤＳ５ｄ、ＩＬＴ５／ＣＤＳ５ａ、インテグリンα４／ＣＤ４９ｄ、ＣＤＳ、インテグリンαＥ／ＣＤ１０３、ＣＤ６、インテグリンαＭ／ＣＤ１１ｂ、ＣＤＳ、インテグリンαＸ／ＣＤ１１ｃ、インテグリンβ２／ＣＤｌＳ、ＫＩＲ／ＣＤ１５Ｓ、ＣＤ２７／ＴＮＦＲＳＦ７、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＣＤ２Ｓ、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＣＤ３０／ＴＮＦＲＳＦＳ、ＫＩＲ２ＤＬ４／ＣＤ１５Ｓｄ、ＣＤ３１／ＰＥＣＡＭ−１、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＣＤ４０リガンド／ＴＮＦＳＦ５、ＬＡＧ−３、ＣＤ４３、ＬＡＩＲ１、ＣＤ４５、ＬＡＩＲ２、ＣＤＳ３、ロイコトリエンＢ４−Ｒ１、ＣＤＳ４／ＳＬＡＭＦ５、ＮＣＡＭ−Ｌ１、ＣＤ９４、ＮＫＧ２Ａ、ＣＤ９７、ＮＫＧ２Ｃ、ＣＤ２２９／ＳＬＡＭＦ３、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、ＮＴ−４、ＣＤ６９、ＮＴＢ−Ａ／ＳＬＡＭＦ６、共通γ鎖／ＩＬ−２Ｒγ、オステオポンチン、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＰＤ−１、ＣＲＴＡＭ、ＰＳＧＬ−１、ＣＴＬＡ−４、ＲＡＮＫ／ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸ３ＣＬ１、Ｌ−セレクチン、ＣＸＣＲ３、ＳＩＲＰβ１、ＣＸＣＲ４、ＳＬＡＭ、ＣＸＣＲ６、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＤＮＡＭ−１、サイモポエチン、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＴＩＭ−１、ＥｐｈＢ６、ＴＩＭ−２、Ｆａｓ／ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＩＭ−３、Ｆａｓリガンド／ＴＮＦＳＦ６、ＴＩＭ−４、ＦｃγＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＴＩＭ−６、ＴＮＦＲ１／ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、グラニュライシン、ＴＮＦＲＩＩＩ／ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＲＡＩＬ  Ｒ１／ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＩＣＡＭ−１／ＣＤ５４、ＴＲＡＩＬ  Ｒ２／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＲＡＩＬＲ３／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＩＦＮ−γＲ１、ＴＲＡＩＬＲ４／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＩＦＮ−γＲ２、ＴＳＬＰ、ＩＬ−１Ｒ１、及びＴＳＬＰ  Ｒが挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらのＴ細胞抗原の例のうちの１つ又は複数に結合する。
【００６５】
非限定的な例として、様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上に発現するチェックポイントマーカー、例えばＰＤ−１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＣＤ１３７、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ４０Ｌ、ＴＩＭ３、及びＡ２ａＲのうちの１つ又は複数を指向する標的化部分を有する。
【００６６】
例えば、いくつかの実施形態では、認識ドメインは、Ｂ細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、認識ドメインは、Ｂ細胞を直接的又は間接的に動員し、例えば、いくつかの実施形態では、治療部位（例えば、１種類又は複数種類の疾患細胞又は治療効果が調整される細胞を含む場所）へ動員する。目的のＢ細胞抗原の例としては、例えば、ＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ７２、ＣＤ７３、ＣＤ７４、ＣＤｗ７５、ＣＤｗ７６、ＣＤ７７、ＣＤ７８、ＣＤ７９ａ／ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ８３、ＣＤ８４、ＣＤ８５、ＣＤ８６、ＣＤ８９、ＣＤ９８、ＣＤ１２６、ＣＤ１２７、ＣＤｗ１３０、ＣＤ１３８、ＣＤｗ１５０、及びＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらのＢ細胞抗原の例のうちの１つ又は複数に結合する。
【００６７】
他の例として、いくつかの実施形態では、認識ドメインは、ナチュラルキラー細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、認識ドメインは、ナチュラルキラー細胞を直接的又は間接的に動員し、例えばいくつかの実施形態では、治療部位（例えば、１種類又は複数種類の疾患細胞又は治療効果が調整される細胞を含む場所）へ動員する。目的のナチュラルキラー細胞抗原の例としては、例えば、ＴＩＧＩＴ、２Ｂ４／ＳＬＡＭＦ４、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、ＫＩＲ３ＤＬ１、ＣＤ９４、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ６９、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＤＮＡＭ−１、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、Ｆｃ−εＲＩＩ、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、Ｆｃ−γＲ１／ＣＤ６４、ＭＩＣＡ、Ｆｃ−γＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＭＩＣＢ、Ｆｃ−γＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、ＭＵＬＴ−１、Ｆｃ−γＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ネクチン−２／ＣＤ１１２、Ｆｃ−γＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＮＫＧ２Ａ、ＦｃＲＨ１／ＩＲＴＡ５、ＮＫＧ２Ｃ、ＦｃＲＨ２／ＩＲＴＡ４、ＮＫＧ２Ｄ、ＦｃＲＨ４／ＩＲＴＡ１、ＮＫｐ３０、ＦｃＲＨ５／ＩＲＴＡ２、ＮＫｐ４４、Ｆｃ受容体様分子３／ＣＤ１６−２、ＮＫｐ４６／ＮＣＲ１、ＮＫｐ８０／ＫＬＲＦ１、ＮＴＢ−Ａ／ＳＬＡＭＦ６、Ｒａｅ−１、Ｒａｅ−１α、Ｒａｅ−１β、Ｒａｅ−１δ、Ｈ６０、Ｒａｅ−１ε、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、Ｒａｅ−１γ、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、ＴＲＥＭ−１、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、ＴＲＥＭ−２、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、ＴＲＥＭ−３、ＫＩＲ／ＣＤ１５８、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＵＬＢＰ−１、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＵＬＢＰ−２、ＫＩＲ２ＤＬ４／ＣＤ１５８ｄ、及びＵＬＢＰ−３が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらのＮＫ細胞抗原の例のうちの１つ又は複数に結合する。
【００６８】
また、いくつかの実施形態では、認識ドメインはマクロファージ／単球に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、認識ドメインはマクロファージ／単球を直接的又は間接的に動員し、例えばいくつかの実施形態では、治療部位（例えば、１種類又は複数種類の疾患細胞又は治療効果が調整される細胞を含む場所）へ動員する。目的のマクロファージ／単球抗原の例としては、例えば、ＳＩＲＰ１ａ、Ｂ７−１／ＣＤ８０、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、Ｂ７−Ｈ１、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、共通β鎖、インテグリンα４／ＣＤ４９ｄ、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦ８、インテグリンαＸ／ＣＤ１１ｃ、ＣＣＬ６／Ｃ１０、インテグリンβ２／ＣＤ１８、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、インテグリンβ３／ＣＤ６１、ＣＤ３１／ＰＥＣＡＭ−１、ラテキシン（Ｌａｔｅｘｉｎ）、ＣＤ３６／ＳＲ−Ｂ３、ロイコトリエンＢ４Ｒ１、ＣＤ４０／ＴＮＦＲＳＦ５、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲ−Ｂ２、ＣＤ４３、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ４５、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＤ６８、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、ＣＤ９７、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＤ１６３、ＬＲＰ−１、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、ＭＡＲＣＯ、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＭＤ−１、ＥＣＦ−Ｌ、ＭＤ−２、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＭＧＬ２、エンドグリン／ＣＤ１０５、オステオアクチビン／ＧＰＮＭＢ、Ｆｃ−γＲＩ／ＣＤ６４、オステオポンチン、Ｆｃ−γＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＰＤ−Ｌ２、Ｆｃ−γＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、シグレック−３／ＣＤ３３、Ｆｃ−γＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ＳＩＧＮＲ１／ＣＤ２０９、Ｆｃ−γＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＳＬＡＭ、ＧＭ−ＣＳＦ  Ｒα、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＬＲ３、ＩＦＮ−γＲ１、ＴＬＲ４、ＩＦＮ−γＲ２、ＴＲＥＭ−１、ＩＬ−１ＲＩＩ、ＴＲＥＭ−２、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、ＴＲＥＭ−３、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、２Ｂ４／ＳＬＡＭＦ４、ＩＬ−１０Ｒα、ＡＬＣＡＭ、ＩＬ−１０Ｒβ、アミノペプチダーゼＮ／ＡＮＰＥＰ、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、共通β鎖、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、Ｃ１ｑＲ１／ＣＤ９３、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、ＣＣＲ１、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、ＣＣＲ２、インテグリンα４／ＣＤ４９ｄ、ＣＣＲ５、インテグリンαＭ／ＣＤ１１ｂ、ＣＣＲ８、インテグリンαＸ／ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、インテグリンβ２／ＣＤ１８、ＣＤ１４、インテグリンβ３／ＣＤ６１、ＣＤ３６／ＳＲ−Ｂ３、ＬＡＩＲ１、ＣＤ４３、ＬＡＩＲ２、ＣＤ４５、ロイコトリエンＢ４−Ｒ１、ＣＤ６８、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲ−Ｂ２、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ９７、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、凝固因子ＩＩＩ／組織因子、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸ３ＣＬ１、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＸＣＲ４、ＬＲＰ−１、ＣＸＣＲ６、Ｍ−ＣＳＦ  Ｒ、ＤＥＰ−１／ＣＤ１４８、ＭＤ−１、ＤＮＡＭ−１、ＭＤ−２、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＭＭＲ、エンドグリン／ＣＤ１０５、ＮＣＡＭ−Ｌ１、Ｆｃ−γＲＩ／ＣＤ６４、ＰＳＧＬ−１、Ｆｃ−γ���ＩＩＩＩＣＤ１６、ＲＰ１０５、Ｇ−ＣＳＦ  Ｒ、Ｌ−セレクチン、ＧＭ−ＣＳＦ  Ｒα、シグレック−３／ＣＤ３３、ＨＶＥＭ／ＴＮＦＲＳＦ１４、ＳＬＡＭ、ＩＣＡＭ−１／ＣＤ５４、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＲＥＭ−１、ＩＬ−６Ｒ、ＴＲＥＭ−２、ＣＸＣＲ１／ＩＬ−８ＲＡ、ＴＲＥＭ−３、及びＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分はこれらのマクロファージ／単球抗原の例のうちの１つ又は複数に結合する。
【００６９】
また、いくつかの実施形態では、認識ドメインは樹状細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、認識ドメインは樹状細胞を直接的又は間接的に動員し、例えば、いくつかの実施形態では、治療部位（例えば、１種類又は複数種類の疾患細胞又は治療効果が調整される細胞を含む場所）へ動員する。目的の樹状細胞抗原の例としては、例えば、ＣＬＥＣ９Ａ、ＸＣＲ１、ＲＡＮＫ、ＣＤ３６／ＳＲＢ３、ＬＯＸ−１／ＳＲ−Ｅ１、ＣＤ６８、ＭＡＲＣＯ、ＣＤ１６３、ＳＲ−Ａ１／ＭＳＲ、ＣＤ５Ｌ、ＳＲＥＣ−１、ＣＬ−Ｐ１／ＣＯＬＥＣ１２、ＳＲＥＣ−ＩＩ、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲＢ２、ＲＰ１０５、ＴＬＲ４、ＴＬＲ１、ＴＬＲ５、ＴＬＲ２、ＴＬＲ６、ＴＬＲ３、ＴＬＲ９、４−ＩＢＢリガンド／ＴＮＦＳＦ９、ＩＬ−１２／ＩＬ−２３  ｐ４０、４−アミノ−１，８−ナフタルイミド、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、ＣＣＬ２１／６Ｃｋｉｎｅ、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、８−オキソ−ｄＧ、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、８Ｄ６Ａ、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、Ａ２Ｂ５、インテグリンα４／ＣＤ４９ｄ、Ａａｇ、インテグリンβ２／ＣＤ１８、ＡＭＩＣＡ、ランゲリン、Ｂ７−２／ＣＤ８６、ロイコトリエンＢ４Ｒ１、Ｂ７−Ｈ３、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦ８、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、Ｃ１ｑＲ１／ＣＤ９３、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＣＣＲ６、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ  ＣＣＲ７、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＤ４０／ＴＮＦＲＳＦ５、ＭＡＧ／シグレック−４−ａ、ＣＤ４３、ＭＣＡＭ、ＣＤ４５、ＭＤ−１、ＣＤ６８、ＭＤ−２、ＣＤ８３、ＭＤＬ−１／ＣＬＥＣ５Ａ、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＭＭＲ、ＣＤ９７、ＮＣＡＭＬ１、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、オステオアクチビンＧＰＮＭＢ、Ｃｈｅｒｎ２３、ＰＤ−Ｌ２、ＣＬＥＣ−１、ＲＰ１０５、ＣＬＥＣ−２、ＣＬＥＣ−８、シグレック−２／ＣＤ２２、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、シグレック−３／ＣＤ３３、ＤＣ−ＳＩＧＮ、シグレック−５、ＤＣ−ＳＩＧＮＲ／ＣＤ２９９、シグレック−６、ＤＣＡＲ、シグレック−７、ＤＣＩＲ／ＣＬＥＣ４Ａ、シグレック−９、ＤＥＣ−２０５、シグレック−１０、デクチン−１／ＣＬＥＣ７Ａ、シグレック−Ｆ、デクチン−２／ＣＬＥＣ６Ａ、ＳＩＧＮＲ１／ＣＤ２０９、ＤＥＰ−１／ＣＤ１４８、ＳＩＧＮＲ４、ＤＬＥＣ、ＳＬＡＭ、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、Ｆｃ−γＲ１／ＣＤ６４、ＴＬＲ３、Ｆｃ−γＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＴＲＥＭ−１、Ｆｃ−γＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、ＴＲＥＭ−２、Ｆｃ−γＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ＴＲＥＭ−３、Ｆｃ−γＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、及びバニロイドＲ１が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらのＤＣ抗原の例のうちの１つ又は複数に結合する。
【００７０】
いくつかの実施形態では、認識ドメインは、限定されないが、巨核球、血小板、赤血球、肥満細胞、好塩基球、好中球、好酸球、又はそれらのサブセットから選択される免疫細胞上の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、認識ドメインは、巨核球、血小板、赤血球、肥満細胞、好塩基球、好中球、好酸球、又はそれらの部分集合を直接的又は間接的に動員し、例えば、いくつかの実施形態では、治療部位（例えば、１種類又は複数種類の疾患細胞又は治療効果が調整される細胞を含む場所）へ動員する。
【００７１】
いくつかの実施形態では、認識ドメインは巨核球及び／又は血小板に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。目的の巨核球抗原及び／又は血小板抗原の例としては、例えば、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ、ＧＰＩｂ、ｖＷＦ、ＰＦ４、及びＴＳＰが挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらの巨核球抗原及び／又は血小板抗原の例のうちの１つ又は複数に結合する。
【００７２】
いくつかの実施形態では、認識ドメインは赤血球に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。目的の赤血球抗原の例としては、例えば、ＣＤ３４、ＣＤ３６、ＣＤ３８、ＣＤ４１ａ（血小板糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ）、ＣＤ４１ｂ（ＧＰＩＩｂ）、ＣＤ７１（トランスフェリン受容体）、ＣＤ１０５、グリコプロテインＡ、グリコプロテインＣ、ｃ−ｋｉｔ、ＨＬＡ−ＤＲ、Ｈ２（ＭＨＣ−ＩＩ）、及びＲｈ抗原が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらの赤血球抗原の例のうちの１つ又は複数に結合する。
【００７３】
いくつかの実施形態では、認識ドメインは肥満細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。目的の肥満細胞抗原の例としては、例えば、ＳＣＦＲ／ＣＤ１１７、ＦｃεＲＩ、ＣＤ２、ＣＤ２５、ＣＤ３５、ＣＤ８８、ＣＤ２０３ｃ、Ｃ５Ｒ１、ＣＭＡ１、ＦＣＥＲ１Ａ、ＦＣＥＲ２、ＴＰＳＡＢ１が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらの肥満細胞抗原の例のうちの１つ又は複数に結合する。
【００７４】
いくつかの実施形態では、認識ドメインは好塩基球に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。目的の好塩基球抗原の例としては、例えば、ＦｃεＲＩ、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ１２３、ＣＤ１３、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ１０７ｂ、及びＣＤ１６４が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらの好塩基球抗原の例のうちの１つ又は複数に結合する。
【００７５】
いくつかの実施形態では、認識ドメインは好中球に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。目的の好中球抗原の例としては、例えば、７Ｄ５、ＣＤ１０／ＣＡＬＬＡ、ＣＤ１３、ＣＤ１６（ＦｃＲＩＩＩ）、ＣＤ１８タンパク質（ＬＦＡ−１、ＣＲ３、及びｐ１５０、９５）、ＣＤ４５、ＣＤ６７、及びＣＤ１７７が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらの好中球抗原の例のうちの１つ又は複数に結合する。
【００７６】
いくつかの実施形態では、認識ドメインは好酸球に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。目的の好酸球抗原の例としては、例えば、ＣＤ３５、ＣＤ４４、及びＣＤ６９が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分はこれらの好酸球抗原のうちの１つ又は複数に結合する。
【００７７】
様々な実施形態において、認識ドメインは当業者に知られている任意の適切な標的、抗原、受容体、又は細胞表面マーカーに結合してもよい。いくつかの実施形態では、抗原又は細胞表面マーカーは組織特異的マーカーである。組織特異的マーカーの例としては、ＡＣＥ、ＣＤ１４、ＣＤ３４、ＣＤＨ５、ＥＮＧ、ＩＣＡＭ２、ＭＣＡＭ、ＮＯＳ３、ＰＥＣＡＭ１、ＰＲＯＣＲ、ＳＥＬＥ、ＳＥＬＰ、ＴＥＫ、ＴＨＢＤ、ＶＣＡＭ１、ＶＷＦなどの内皮細胞表面マーカー；ＡＣＴＡ２、ＭＹＨ１０、ＭＹＨ１１、ＭＹＨ９、ＭＹＯＣＤなどの平滑筋細胞表面マーカー；ＡＬＣＡＭ、ＣＤ３４、ＣＯＬ１Ａ１、ＣＯＬ１Ａ２、ＣＯＬ３Ａ１、ＦＡＰ、ＰＨ−４などの線維芽細胞（間質）細胞表面マーカー；ＣＤ１Ｄ、Ｋ６ＩＲＳ２、ＫＲＴ１０、ＫＲＴ１３、ＫＲＴ１７、ＫＲＴ１８、ＫＲＴ１９、ＫＲＴ４、ＫＲＴ５、ＫＲＴ８、ＭＵＣ１、ＴＡＣＳＴＤ１などの上皮細胞表面マーカー；ＣＤ１３、ＴＦＮＡ、アルファ−ｖベータ−３（αＶβ３）、Ｅ−セレクチンなどの血管新生マーカー；及びＡＤＩＰＯＱ、ＦＡＢＰ４、及びＲＥＴＮなどの脂肪細胞表面マーカーが挙げられるがこれらに限定されない。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらの抗原のうちの１つ又は複数に結合する。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらの抗原を有する細胞のうちの１つ又は複数に結合する。
【００７８】
いくつかの実施形態では、認識ドメインは腫瘍細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、認識ドメインは腫瘍細胞を直接的又は間接的に動員する。例えば、いくつかの実施形態では、腫瘍細胞の直接的又は間接的な動員は、腫瘍細胞を死滅させ得る及び／又は抑制し得る１種類又は複数種類のエフェクター細胞（例えば、本明細書に記載されるような免疫細胞）に対するものである。
【００７９】
腫瘍細胞又はがん細胞は、身体の器官及び身体の系の正常な機能に干渉する、細胞又は組織の無制御増殖、及び／又は細胞生存の異常増加、及び／又はアポトーシスの抑制に関連する。例えば、腫瘍細胞としては、良性及び悪性のがん、ポリープ、過形成、並びに休眠腫瘍又は微小転移巣が挙げられる。腫瘍細胞の例としては、基底細胞がん、胆管がん、膀胱がん、骨がん、脳及び中枢神経系のがん、乳がん、腹膜がん、子宮頸がん、絨毛癌、大腸がん、結合組織がん、消化器がん、子宮内膜がん、食道がん、眼のがん、頭頚部がん、胃がん（胃腸がんを含む）、神経膠芽腫、肝細胞癌、肝癌、上皮内新生物、腎臓がん、喉頭がん、白血病、肝臓がん、肺がん（例えば、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌）、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、口腔がん（口唇、舌、口、及び咽頭）、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸がん、呼吸器がん、唾腺癌、肉腫、皮膚がん、扁平上皮がん、胃がん、精巣がん、甲状腺がん、子宮又は子宮内膜のがん、泌尿器がん、外陰がん、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫並びにＢ細胞リンパ腫を含むリンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非分割細胞ＮＨＬ、巨大腫瘤病変ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、及びワルデンストレーム型マクログロブリン血症を含む）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、有毛細胞白血病、慢性骨髄芽球性白血病、並びに他の癌及び肉腫、及び移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、並びに母斑症に関連する異常血管増殖、浮腫（例えば脳腫瘍に関連する浮腫）、及びメグズ症候群の細胞が挙げられるがこれらに限定されない。
【００８０】
腫瘍細胞又はがん細胞としては、これらに限定されないが、癌（例えば、腺癌、基底細胞癌、扁平上皮癌、及び移行上皮癌を含む様々なサブタイプ）、肉腫（例えば、骨肉腫及び軟組織肉腫を含む）、白血病（例えば、急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、及び有毛細胞白血病を含む）、リンパ腫及び骨髄腫（例えば、ホジキン及び非ホジキンリンパ腫、軽鎖骨髄腫、非分泌型骨髄腫、ＭＧＵＳ、及び形質細胞腫を含む）、及び中枢神経系がん（例えば、脳がん（例えば、神経膠腫（例えば、星状細胞腫、希突起神経膠腫、及び上衣腫）、髄膜腫、下垂体腺腫、及び神経腫）、及び脊髄腫瘍（例えば、髄膜腫及び神経繊維腫））が挙げられ。
【００８１】
腫瘍抗原の例としては、ＭＡＲＴ−１／メランＡ、ｇｐ１００、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰＩＶ）、アデノシンデアミナーゼ結合タンパク質（ＡＤＡｂｐ）、シクロフィリンｂ、大腸がん関連抗原（ＣＲＣ）−００１７−１Ａ／ＧＡ７３３、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）及びその免疫原性エピトープであるＣＡＰ−１及びＣＡＰ−２、ｅｔｖ６、ａｍｌ１、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）及びその免疫原性エピトープであるＰＳＡ−１、ＰＳＡ−２、及びＰＳＡ−３、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、Ｔ細胞受容体／ＣＤ３ζ鎖、ＭＡＧＥファミリー腫瘍抗原（例えば、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ５、ＭＡＧＥ−Ａ６、ＭＡＧＥ−Ａ７、ＭＡＧＥ−Ａ８、ＭＡＧＥ−Ａ９、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＧＥ−Ａ１１、ＭＡＧＥ−Ａ１２、ＭＡＧＥ−Ｘｐ２（ＭＡＧＥ−Ｂ２）、ＭＡＧＥ−Ｘｐ３（ＭＡＧＥ−Ｂ３）、ＭＡＧＥ−Ｘｐ４（ＭＡＧＥ−Ｂ４）、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＧＥ−Ｃ３、ＭＡＧＥ−Ｃ４、ＭＡＧＥ−Ｃ５）、ＧＡＧＥファミリー腫瘍抗原（例えば、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＧＡＧＥ−３、ＧＡＧＥ−４、ＧＡＧＥ−５、ＧＡＧＥ−６、ＧＡＧＥ−７、ＧＡＧＥ−８、ＧＡＧＥ−９）、ＢＡＧＥ、ＲＡＧＥ、ＬＡＧＥ−１、ＮＡＧ、ＧｎＴ−Ｖ、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、チロシナーゼ、ｐ５３、ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｐ２１ｒａｓ、ＲＣＡＳ１、α−フェトプロテイン、Ｅ−カドヘリン、α−カテニン、β−カテニン及びγ−カテニン、ｐ１２０ｃｔｎ、ｇｐ１００  Ｐｍｅｌ１１７、ＰＲＡＭＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ｃｄｃ２７、大腸腺腫症タンパク質（ＡＰＣ）、フォドリン、コネキシン３７、Ｉｇイディオタイプ、ｐ１５、ｇｐ７５、ＧＭ２ガングリオシド及びＧＤ２ガングリオシド、ヒトパピローマウイルスタンパク質などのウイルス産物、Ｓｍａｄファミリー腫瘍抗原、ｌｍｐ−１、ＮＡ、ＥＢＶコード核内抗原（ＥＢＮＡ）−１、脳グリコーゲンホスホリラーゼ、ＳＳＸ−１、ＳＳＸ−２（ＨＯＭ−ＭＥＬ−４０）、ＳＳＸ−１、ＳＳＸ−４、ＳＳＸ−５、ＳＣＰ−１ＣＴ−７、ｃ−ｅｒｂＢ−２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＡＧＳ１６、ＭＵＣ１、ＧＰＮＭＢ、Ｅｐ−ＣＡＭ、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＰＭＳＡ、及びＢＣＭＡ（ＴＮＦＲＳＦ１７）が挙げられるがこれらに限定されない。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的化部分は、これらの腫瘍抗原のうちの１つ又は複数に結合する。ある実施形態では、キメラタンパク質はＨＥＲ２に結合する。別の実施形態では、キメラタンパク質はＰＤ−Ｌ２に結合する。
【００８２】
いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、マクロファージ、ＮＫ細胞、又はそれらのサブセットから選択される免疫細胞を指向する標的化部分のうちの１つ又は複数を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分のうちの１つ又は複数を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）Ｔ細胞（限定されないが、エフェクターＴ細胞を含む）を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）Ｂ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）樹状細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）マクロファージを指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）ＮＫ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。
【００８３】
非限定的な例として、様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＣＤ８、ＳＬＡＭＦ４、ＩＬ−２Ｒα、４−１ＢＢ／ＴＮＦＲＳＦ９、ＩＬ−２Ｒβ、ＡＬＣＡＭ、Ｂ７−１、ＩＬ−４Ｒ、Ｂ７−Ｈ３、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦＳ、ＣＥＡＣＡＭ１、ＩＬ−６Ｒ、ＣＣＲ３、ＩＬ−７Ｒα、ＣＣＲ４、ＣＸＣＲ１／ＩＬ−ＳＲＡ、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＩＬ−１０Ｒα、ＣＣＲ７、ＩＬ−１０Ｒβ、ＣＣＲＳ、ＩＬ−１２Ｒβ１、ＣＣＲ９、ＩＬ−１２Ｒβ２、ＣＤ２、ＩＬ−１３Ｒα１、ＩＬ−１３、ＣＤ３、ＣＤ４、ＩＬＴ２／ＣＤＳ５ｊ、ＩＬＴ３／ＣＤＳ５ｋ、ＩＬＴ４／ＣＤＳ５ｄ、ＩＬＴ５／ＣＤＳ５ａ、インテグリンα４／ＣＤ４９ｄ、ＣＤＳ、インテグリンαＥ／ＣＤ１０３、ＣＤ６、インテグリンαＭ／ＣＤ１１ｂ、ＣＤＳ、インテグリンαＸ／ＣＤ１１ｃ、インテグリンβ２／ＣＤｌＳ、ＫＩＲ／ＣＤ１５Ｓ、ＣＤ２７／ＴＮＦＲＳＦ７、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＣＤ２Ｓ、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＣＤ３０／ＴＮＦＲＳＦＳ、ＫＩＲ２ＤＬ４／ＣＤ１５Ｓｄ、ＣＤ３１／ＰＥＣＡＭ−１、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＣＤ４０リガンド／ＴＮＦＳＦ５、ＬＡＧ−３、ＣＤ４３、ＬＡＩＲ１、ＣＤ４５、ＬＡＩＲ２、ＣＤＳ３、ロイコトリエンＢ４−Ｒ１、ＣＤＳ４／ＳＬＡＭＦ５、ＮＣＡＭ−Ｌ１、ＣＤ９４、ＮＫＧ２Ａ、ＣＤ９７、ＮＫＧ２Ｃ、ＣＤ２２９／ＳＬＡＭＦ３、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、ＮＴ−４、ＣＤ６９、ＮＴＢ−Ａ／ＳＬＡＭＦ６、共通γ鎖／ＩＬ−２Ｒγ、オステオポンチン、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＰＤ−１、ＣＲＴＡＭ、ＰＳＧＬ−１、ＣＴＬＡ−４、ＲＡＮＫ／ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸ３ＣＬ１、Ｌ−セレクチン、ＣＸＣＲ３、ＳＩＲＰβ１、ＣＸＣＲ４、ＳＬＡＭ、ＣＸＣＲ６、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＤＮＡＭ−１、サイモポエチン、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＴＩＭ−１、ＥｐｈＢ６、ＴＩＭ−２、Ｆａｓ／ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＩＭ−３、Ｆａｓリガンド／ＴＮＦＳＦ６、ＴＩＭ−４、ＦｃγＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＴＩＭ−６、ＴＮＦＲ１／ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、グラニュライシン、ＴＮＦＲＩＩＩ／ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＲＡＩＬ  Ｒ１／ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＩＣＡＭ−１／ＣＤ５４、ＴＲＡＩＬ  Ｒ２／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＲＡＩＬＲ３／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＩＦＮ−γＲ１、ＴＲＡＩＬＲ４／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＩＦＮ−γＲ２、ＴＳＬＰ、ＩＬ−１Ｒ１、又はＴＳＬＰ  Ｒへの標的化に仲介される、Ｔ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。
【００８４】
非限定的な例として、様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）Ｔ細胞上に発現するチェックポイントマーカー、例えばＰＤ−１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＣＤ１３７、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ４０Ｌ、ＴＩＭ３、及びＡ２ａＲのうちの１つ又は複数を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。
【００８５】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、ＰＤ−１を指向する１つ又は複数の標的化部分を有する。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＰＤ−１ポリペプチドに選択的に結合する１つ又は複数の標的化部分を有する。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＰＤ−１ポリペプチドに選択的に結合する１つ又は複数の抗体、抗体誘導体若しくは抗体フォーマット、ペプチド若しくはポリペプチド、又は融合タンパク質を含む。
【００８６】
ある実施形態では、標的化部分は、抗ＰＤ−１抗体であるペムブロリズマブ（ＭＫ−３４７５、キイトルーダとしても知られる）又はその断片を含む。ペムブロリズマブ及び他のヒト化抗ＰＤ−１抗体は、Ｈａｍｉｄ，ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、３６９（２）：ｐｐ．１３４−４４、米国特許第８，３５４，５０９号、及び国際公開第２００９／１１４３３５号に開示されており、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、ペムブロリズマブ、又は本明細書に記載される方法に使用するための抗原結合断片は、（配列番号７）のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は（配列番号８）のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【００８７】
ある実施形態では、標的化部分は、抗ＰＤ−１抗体であるニボルマブ（ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ−１１０６、ＯＮＯ−４５３８、ＯＰＤＩＶＯとしても知られる）又はその断片を含む。ニボルマブ（クローン５Ｃ４）、及びＰＤ−１に特異的に結合する他のヒトモノクローナル抗体は、米国特許第８，００８，４４９号及び国際公開第２００６／１２１１６８号に開示されており、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、ニボルマブ又はその抗原結合断片は、（配列番号９）のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は（配列番号１０）のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【００８８】
ある実施形態では、標的化部分は抗ＰＤ−１抗体であるピディリズマブ（ＣＴ−０１１、ｈＢＡＴ又はｈＢＡＴ−１としても知られる）又はその断片を含む。ピディリズマブ及び他のヒト化抗ＰＤ−Ｉモノクローナル抗体は、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号及び国際公開第２００９／１０１６１１号に開示されており、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための抗ＰＤ−１抗体又はその抗原結合断片は、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号１５〜１８、すなわち、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号１５（配列番号１１）、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号１６（配列番号１２）、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号１７（配列番号１３）、及び米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号１８（配列番号１４）から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、及び／又は米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号２０〜２４、すなわち、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号２０（配列番号１５）、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号２１（配列番号１６）、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号２２（配列番号１７）、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号２３（配列番号１８）、及び米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号２４（配列番号１９）から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖を含む。
【００８９】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号１８を含む軽鎖（配列番号１４）及び米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号の配列番号２２を含む重鎖（配列番号１７）を含む。
【００９０】
ある実施形態では、標的化部分はＡＭＰ−５１４（ＭＥＤＩ−０６８０としても知られる）を含む。
【００９１】
ある実施形態では、標的化部分は、国際公開第２０１０／０２７８２７号及び国際公開第２０１１／０６６３４２号に開示されている、ＰＤ−Ｌ２−Ｆｃ融合タンパク質であるＡＭＰ−２２４を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。前記実施形態では、標的化部分は、国際公開第２０１０／０２７８２７号の配列番号４を含む標的化ドメイン（配列番号２０）、及び／又は国際公開第２０１０／０２７８２７号の配列番号８３を含むＢ７−ＤＣ融合タンパク質（配列番号２１）を含んでいてもよい。
【００９２】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１１／０３１８３７３号又は米国特許第８，９０７，０５３号に開示されるＡＵＮＰ１２ペプチド又は他のペプチドのいずれかを含む。例えば、標的化部分は、以下の配列（配列番号２２）を有するＡＵＮＰ１２（すなわち、米国特許出願公開第２０１１／０３１８３７３号の化合物８又は配列番号４９）を含む場合がある。
【化３】
2020505955.tif 000005
【００９３】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１４／００４４７３８号に開示されるような抗ＰＤ−１抗体である１Ｅ３又はその断片を含み、その文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための１Ｅ３又はその抗原結合断片は、（配列番号２３）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号２４）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【００９４】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１４／００４４７３８号に開示されるような抗ＰＤ−１抗体である１Ｅ８又はその断片を含み、その文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための１Ｅ８又はその抗原結合断片は、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号２６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【００９５】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１４／００４４７３８号に開示されるような抗ＰＤ−１抗体である１Ｈ３又はその断片を含み、その文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための１Ｈ３又はその抗原結合断片は、（配列番号２７）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号２８）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【００９６】
ある実施形態では、標的化部分は、例えば、米国特許第８，９０７，０６５号及び国際公開第２００８／０７１４４７号に開示されるような抗ＰＤ−１ナノボディを含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、抗ＰＤ−１ナノボディは、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３４７〜３５１（米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３４７（配列番号２９）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３４８（配列番号３０）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３４９（配列番号３１）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３５０（配列番号３２）、及び米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３５１（配列番号３３））を含む。
【００９７】
ある実施形態では、２０１０／０３６９５９号に開示されるような抗ＰＤ−１抗体のうちのいずれか１つ又はその断片を含み、それらの文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号２５〜２９（米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号２５（配列番号３４）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号２６（配列番号３５）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号２７（配列番号３６）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号２８（配列番号３７）、及び米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号２９（配列番号３８））から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３０〜３３（米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３０（配列番号３９）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３１（配列番号４０）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３２（配列番号４１）、及び米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３３（配列番号４２））から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【００９８】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、ＴＳＲ−０４２（Ｔｅｓａｒｏ社）、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社）、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社）、及びＢＧＢ−Ａ３１７（ＢｅｉＧｅｎｅ社）から選択される１つ又は複数の抗ＰＤ−１抗体又はその抗体断片を含む。
【００９９】
様々な実施形態において,本開示のキメラタンパク質は、ＰＤ−Ｌ１を指向する１つ又は複数の標的化部分を有する。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチドに選択的に結合する１つ又は複数の標的化部分を有する。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチドに選択的に結合する１つ又は複数の抗体、抗体誘導体若しくは抗体フォーマット、ペプチド若しくはポリペプチド、又は融合タンパク質を含む。
【０１００】
ある実施形態では、標的化部分は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体であるＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブとしても知られる）又はその断片を含む。ＭＥＤＩ４７３６はＰＤ−Ｌ１に対して選択的であり、ＰＤ−１受容体及びＣＤ８０受容体へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する。本明細書に記載される方法に使用するためのＭＥＤＩ４７３６及びその抗原結合断片は、重鎖と軽鎖、又は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む。ＭＥＤＩ４７３６の配列は国際公開第２０１６／０６２７２号に開示されており、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するためのＭＥＤＩ４７３６又はその抗原結合断片は、（配列番号４３）のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は（配列番号４４）のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１０１】
例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するためのＭＥＤＩ４７３６又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１６／０６２７２号の配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（配列番号４５）、及び／又は国際公開第２０１６／０６２７２号の配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（配列番号４６）を含む。
【０１０２】
ある実施形態では、標的化部分は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体であるアテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＲＧ７４４６としても知られる）又はその断片を含む。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するためのアテゾリズマブ又はその抗原結合断片は、（配列番号４７）のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は（配列番号４８）のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１０３】
ある実施形態では、標的化部分は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体であるアベルマブ（ＭＳＢ００１０７１８Ｃとしても知られる）又はその断片を含む。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するためのアベルマブ又はその抗原結合断片は、（配列番号４９）のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は（配列番号５０）のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１０４】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１３／０３０９２５０号及び国際公開第２００７／００５８７４号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体であるＢＭＳ−９３６５５９（１２Ａ４、ＭＤＸ−１１０５としても知られる）又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するためのＢＭＳ−９３６５５９又はその抗原結合断片は、（配列番号５１）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号５２）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１０５】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１３／０３０９２５０号及び国際公開第２００７／００５８７４号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である３Ｇ１０又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための３Ｇ１０又はその抗原結合断片は、（配列番号５３）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号５４）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１０６】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１３／０３０９２５０号及び国際公開第２００７／００５８７４号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である１０Ａ５又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための１０Ａ５又はその抗原結合断片は、（配列番号５５）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号５６）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１０７】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１３／０３０９２５０号及び国際公開第２００７／００５８７４号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である５Ｆ８又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための５Ｆ８又はその抗原結合断片は、（配列番号５７）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号５８）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１０８】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１３／０３０９２５０号及び国際公開第２００７／００５８７４号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である１０Ｈ１０又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための１０Ｈ１０、又はその抗原結合断片は、（配列番号５９）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号６０）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１０９】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１３／０３０９２５０号及び国際公開第２００７／００５８７４号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である１Ｂ１２又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための１Ｂ１２又はその抗原結合断片は、（配列番号６１）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号６２）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１１０】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１３／０３０９２５０号及び国際公開第２００７／００５８７４号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である７Ｈ１又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための７Ｈ１又はその抗原結合断片は、（配列番号６３）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号６４）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１１１】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１３／０３０９２５０号及び国際公開第２００７／００５８７４号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である１１Ｅ６又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、は本明細書に記載される方法に使用するための１１Ｅ６又その抗原結合断片は、（配列番号６５）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号６６）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１１２】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１３／０３０９２５０号及び国際公開第２００７／００５８７４号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である１２Ｂ７又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための１２Ｂ７又はその抗原結合断片は、（配列番号６７）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号６８）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１１３】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１３／０３０９２５０号及び国際公開第２００７／００５８７４号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である１３Ｇ４又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための１３Ｇ４又はその抗原結合断片は、（配列番号６９）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号７０）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１１４】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１４／００４４７３８号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である１Ｅ１２又はその断片を含み、その文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための１Ｅ１２又はその抗原結合断片は、（配列番号７１）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号７２）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１１５】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１４／００４４７３８号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である１Ｆ４又はその断片を含み、その文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための１Ｆ４又はその抗原結合断片は、（配列番号７３）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号７４）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１１６】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１４／００４４７３８号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である２Ｇ１１又はその断片を含み、その文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための２Ｇ１１又はその抗原結合断片は、（配列番号７５）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号７６）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１１７】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１４／００４４７３８号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である３Ｂ６又はその断片を含み、その文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための３Ｂ６又はその抗原結合断片は、（配列番号７７）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号７８）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１１８】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１４／００４４７３８号及び国際公開第２０１２／１４５４９３号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である３Ｄ１０又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための３Ｄ１０又はその抗原結合断片は、（配列番号７９）のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は（配列番号８０）のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１１９】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号及び国際公開第２０１０／０３６９５９号に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体のうちのいずれか１つを含み、それらの文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３４〜３８（米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３４（配列番号８１）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３５（配列番号８２）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３６（配列番号８３）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３７（配列番号８４）、及び米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３８（配列番号８５））から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３９〜４２（米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号３９（配列番号８６）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４０（配列番号８７）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４１（配列番号８８）、及び米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４２（配列番号８９））から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１２０】
ある実施形態では、標的化部分は国際公開第２０１１／０６６３８９号、米国特許第８，７７９，１０８号、及び米国特許出願公開第２０１４／０３５６３５３号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である２．７Ａ４又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための２．７Ａ４又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号２のアミノ酸配列（配列番号９０）を含む重鎖可変領域、及び／又は国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号７のアミノ酸配列（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１２１】
ある実施形態では、標的化部分は国際公開第２０１１／０６６３８９号、米国特許第８，７７９，１０８号、及び米国特許出願公開第２０１４／０３５６３５３号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である２．９Ｄ１０又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための２．９Ｄ１０又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号１２のアミノ酸配列（配列番号９２）を含む重鎖可変領域、及び／又は国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号１７のアミノ酸配列（配列番号９３）を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１２２】
ある実施形態では、標的化部分は国際公開第２０１１／０６６３８９号、米国特許第８，７７９，１０８号、及び米国特許出願公開第２０１４／０３５６３５３号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である２．１４Ｈ９又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための２．１４Ｈ９又はその抗原結合断片は国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号２２のアミノ酸配列（配列番号９４）を含む重鎖可変領域、及び／又は国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号２７のアミノ酸配列（配列番号９５）を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１２３】
ある実施形態では、標的化部分は国際公開第２０１１／０６６３８９号、米国特許第８，７７９，１０８号、及び米国特許出願公開第２０１４／０３５６３５３号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である２．２０Ａ８又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための２．２０Ａ８又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号３２のアミノ酸配列（配列番号９６）を含む重鎖可変領域、及び／又は国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号３７のアミノ酸配列（配列番号９７）を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１２４】
ある実施形態では、標的化部分は国際公開第２０１１／０６６３８９号、米国特許第８，７７９，１０８号、及び米国特許出願公開第２０１４／０３５６３５３号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である３．１５Ｇ８又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための３．１５Ｇ８又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号４２のアミノ酸配列（配列番号９８）を含む重鎖可変領域、及び／又は国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号４７のアミノ酸配列（配列番号９９）を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１２５】
ある実施形態では、標的化部分は国際公開第２０１１／０６６３８９号、米国特許第８，７７９，１０８号、及び米国特許出願公開第２０１４／０３５６３５３号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である３．１８Ｇ１又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、３．１８Ｇ１、又は本明細書に記載される方法に使用するための、抗原結合断片は、国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号５２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（配列番号１００）、及び／又は国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号５７のアミノ酸配列（配列番号１０１）を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１２６】
ある実施形態では、標的化部分は国際公開第２０１１／０６６３８９号、米国特許第８，７７９，１０８号、及び米国特許出願公開第２０１４／０３５６３５３号、及び米国特許出願公開第２０１４／０３５６３５３号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である２．７Ａ４ＯＰＴ又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための２．７Ａ４ＯＰＴ又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号６２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（配列番号１０２）、及び／又は国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号６７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（配列番号１０３）を含む。
【０１２７】
ある実施形態では、標的化部分は国際公開第２０１１／０６６３８９号、米国特許第８，７７９，１０８号、及び米国特許出願公開第２０１４／０３５６３５３号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１抗体である２．１４Ｈ９ＯＰＴ又はその断片を含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための２．１４Ｈ９ＯＰＴ又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号７２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（配列番号１０４）、及び／又は国際公開第２０１１／０６６３８９号の配列番号７７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（配列番号１０５）を含む。
【０１２８】
ある実施形態では、標的化部分は、国際公開第２０１６／０６１１４２号に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体のうちのいずれか１つを含み、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号１８、３０、３８、４６、５０、５４、６２、７０、及び７８（国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号１８（配列番号１０６）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号３０（配列番号１０７）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号３８（配列番号１０８）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号４６（配列番号１０９）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号５０（配列番号１１０）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号５４（配列番号１１１）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号６２（配列番号１１２）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号７０（配列番号１１３）、及び国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号７８（配列番号１１４））から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号２２、２６、３４、４２、５８、６６、７４、８２、及び８６（国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号２２（配列番号１１５）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号２６（配列番号１１６）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号３４（配列番号１１７）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号４２（配列番号１１８）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号５８（配列番号１１９）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号６６（配列番号１２０）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号７４（配列番号１２１）、国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号８２（配列番号１２２）、及び国際公開第２０１６／０６１１４２号の配列番号８６（配列番号１２３））から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１２９】
ある実施形態では、標的化部分は、国際公開第２０１６／０２２６３０号に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体のうちのいずれか１つを含み、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号２、６、１０、１４、１８、２２、２６、３０、３４、３８、４２、及び４６（国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号２（配列番号１２４）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号６（配列番号１２５）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号１０（配列番号１２６）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号１４（配列番号１２７）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号１８（配列番号１２８）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号２２（配列番号１２９）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号２６（配列番号１３０）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号３０（配列番号１３１）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号３４（配列番号１３２）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号３８（配列番号１３３）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号４２（配列番号１３４）、及び国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号４６（配列番号１３５））から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号４、８、１２、１６、２０、２４、２８、３２、３６、４０、４４、及び４８（国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号４（配列番号１３６）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号８（配列番号１３７）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号１２（配列番号１３８）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号１６（配列番号１３９）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号２０（配列番号１４０）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号２４（配列番号１４１）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号２８（配列番号１４２）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号３２（配列番号１４３）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号３６（配列番号１４４）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号４０（配列番号１４５）、国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号４４（配列番号１４６）、及び国際公開第２０１６／０２２６３０号の配列番号４８（配列番号１４７））から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１３０】
ある実施形態では、標的化部分は国際公開第２０１５／１１２９００号に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体のうちのいずれか１つを含み、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号３８、５０、８２、及び８６（国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号３８（配列番号１４８）、国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号５０（配列番号１４９）、国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号８２（配列番号１５０）、及び国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号８６（配列番号１５１））から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号４２、４６、５４、５８、６２、６６、７０、７４、及び７８（国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号４２（配列番号１５２）、国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号４６（配列番号１５３）、国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号５４（配列番号１５４）、国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号５８（配列番号１５５）、国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号６２（配列番号１５６）、国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号６６（配列番号１５７）、国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号７０（配列番号１５８）、国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号７４（配列番号１５９）、及び国際公開第２０１５／１１２９００号の配列番号７８（配列番号１６０））から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１３１】
ある実施形態では、標的化部分は、国際公開第２０１０／０７７６３４号及び米国特許第８，２１７，１４９号に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体のうちのいずれか１つを含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗ＰＤ−Ｌ１抗体又はその抗原結合断片は、国際公開第２０１０／０７７６３４号の配列番号２０のアミノ酸配列を含む重鎖領域（配列番号１６１）、及び／又は国際公開第２０１０／０７７６３４号の配列番号２１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（配列番号１６２）を含む。
【０１３２】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１２／００３９９０６号に開示されるＣＮＣＭ  Ｉ−４１２２、ＣＮＣＭ  Ｉ−４０８０、及びＣＮＣＭ  Ｉ−４０８１のＣＮＣＭ受託番号で入手可能なハイブリドーマから得ることが可能な抗ＰＤ−Ｌ１抗体のうちのいずれか１つを含み、その文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０１３３】
ある実施形態では、標的化部分は、例えば米国特許第８，９０７，０６５号及び国際公開第２００８／０７１４４７号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ１ナノボディを含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１ナノボディには、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３９４〜３９９（米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３９４（配列番号１６３）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３９５（配列番号１６４）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３９６（配列番号１６５）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３９７（配列番号１６６）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３９８（配列番号１６７）、及び米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号３９９（配列番号１６８））が含まれる。
【０１３４】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、ＰＤ−Ｌ２を指向する１つ又は複数の標的化部分を有する。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＰＤ−Ｌ２ポリペプチドに選択的に結合する１つ又は複数の標的化部分を有する。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質はＰＤ−Ｌ２ポリペプチドに選択的に結合する１つ又は複数の抗体、抗体誘導体若しくは抗体フォーマット、ペプチド若しくはポリペプチド、又は融合タンパク質を含む。
【０１３５】
ある実施形態では、標的化部分は、例えば米国特許第８，９０７，０６５号及び国際公開第２００８／０７１４４７号に開示されるような抗ＰＤ−Ｌ２ナノボディを含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、それらの抗ＰＤ−Ｌ２ナノボディは、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号４４９〜４５５（米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号４４９（配列番号１６９）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号４５０（配列番号１７０）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号４５１（配列番号１７１）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号４５２（配列番号１７２）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号４５３（配列番号１７３）、米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号４５４（配列番号１７４）、及び米国特許第８，９０７，０６５号の配列番号４５５（配列番号１７５））を含む。
【０１３６】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号及び国際公開第２０１０／０３６９５９号に開示される抗ＰＤ−Ｌ２抗体のうちのいずれか１つを含み、それらの文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４３〜４７（米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４３（配列番号１７６）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４４（配列番号１７７）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４５（配列番号１７８）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４６（配列番号１７９）、及び米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４７（配列番号１８０））から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４８〜５１（米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４８（配列番号１８１）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号４９（配列番号１８２）、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号５０（配列番号１８３）、及び米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号の配列番号５１（配列番号１８４））から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１３７】
様々な実施形態において、本発明の標的化部分は、本明細書に開示される配列のうちのいずれかに対して、少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は１００％同一である（例えば、本明細書に開示される配列のうちのいずれかと約６０％、約６１％、約６２％、約６３％、約６４％、約６５％、約６６％、約６７％、約６８％、約６９％、約７０％、約７１％、約７２％、約７３％、約７４％、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、又は約１００％の配列が同一である）ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及び／又はＰＤ−Ｌ２を標的とする配列を含み得る。
【０１３８】
様々な実施形態において、本発明の標的化部分は、本明細書に開示されるようなＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及び／又はＰＤ−Ｌ２を標的とする、重鎖配列、軽鎖配列、重鎖可変領域配列、軽鎖可変領域配列、相補性決定領域（ＣＤＲ）配列、及びフレームワーク領域配列の任意の組合せを含み得る。
【０１３９】
ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及び／又はＰＤ−Ｌ２に選択的に結合又はこれらを標的とするその他の抗体、抗体誘導体若しくは抗体フォーマット、ペプチド若しくはポリペプチド、又は融合タンパク質は、国際公開第２０１１／０６６３８９号、米国特許出願公開第２００８／００２５９８０号、米国特許出願公開第２０１３／００３４５５９号、米国特許第８，７７９，１０８号、米国特許出願公開第２０１４／０３５６３５３号、米国特許第８，６０９，０８９号、米国特許出願公開第２０１０／０２８３３０号、米国特許出願公開第２０１２／０１１４６４９号、国際公開第２０１０／０２７８２７号、国際公開第２０１１／０６６３４２号、米国特許第８，９０７，０６５号、国際公開第２０１６／０６２７２２号、国際公開第２００９／１０１６１１号、国際公開第２０１０／０２７８２７号、国際公開第２０１１／０６６３４２号、国際公開第２００７／００５８７４号、国際公開第２００１／０１４５５６号、米国特許出願公開第２０１１／０２７１３５８号、国際公開第２０１０／０３６９５９号、国際公開第２０１０／０７７６３４号、米国特許第８，２１７，１４９号、米国特許出願公開第２０１２／００３９９０６号、国際公開第２０１２／１４５４９３号、米国特許出願公開第２０１１／０３１８３７３号、米国特許第８，７７９，１０８号、米国特許出願公開第２０１４／００４４７３８号、国際公開第２００９／０８９１４９号、国際公開第２００７／００５８７号、国際公開第２０１６／０６１１４２号、国際公開第２０１６／０２２６３号、国際公開第２０１０／０７７６３４号、及び国際公開第２０１５／１１２９００号に開示されており、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０１４０】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＣＤ８への標的化に仲介される、Ｔ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質はＴ細胞上のＣＤ８を指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１４１】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＣＤ４への標的化に仲介される、Ｔ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上のＣＤ４を指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１４２】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＣＤ３、ＣＸＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ９、ＣＤ７０、ＣＤ１０３、又は１種類若しくは複数種類の免疫チェックポイントマーカーへの標的化に仲介される、Ｔ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上のＣＤ３を指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上に発現したＣＤ３を指向する１つ又は複数の標的化部分を有する。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＣＤ３ポリペプチドに選択的に結合する１つ又は複数の標的化部分を有する。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＣＤ３ポリペプチドに選択的に結合する１つ又は複数の抗体、抗体誘導体若しくは抗体フォーマット、ペプチド若しくはポリペプチド、又は融合タンパク質を含む。
【０１４４】
ある実施形態では、標的化部分は、抗ＣＤ３抗体であるムロモナブ−ＣＤ３（オルソクローンＯＫＴ３としても知られる）又はその断片を含む。ムロモナブ−ＣＤ３は、米国特許第４，３６１，５４９号及びＷｉｌｄｅ，ｅｔ  ａｌ．（１９９６）５１：ｐｐ．８６５−８９４に開示されており、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するためのムロモナブ−ＣＤ３又はその抗原結合断片は、（配列番号１８５）のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は（配列番号１８６）のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１４５】
ある実施形態では、標的化部分は、抗ＣＤ３抗体であるオテリキシズマブ又はその断片を含む。オテリキシズマブは、米国特許出願公開第２０１６／００００９１６号及びＣｈａｔｅｎｏｕｄ，ｅｔ  ａｌ．（２０１２）９：ｐｐ．３７２−３８１に開示されており、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するためのオテリキシズマブ又はその抗原結合断片は、配列番号１８７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号１８８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１４６】
ある実施形態では、標的化部分は、抗ＣＤ３抗体であるテプリズマブ（ＭＧＡ０３１及びｈＯＫＴ３γ１（Ａｌａ−Ａｌａ）としても知られる）又はその断片を含む。テプリズマブは、Ｃｈａｔｅｎｏｕｄ，ｅｔ  ａｌ．（２０１２）９：ｐｐ．３７２−３８１に開示されており、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するためのテプリズマブ又はその抗原結合断片は、配列番号１８９のアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号１９０のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１４７】
ある実施形態では、標的化部分は抗ＣＤ３抗体であるビシリズマブ（ヌヴィオン（登録商標）、ＨｕＭ２９１としても知られる）又はその断片を含む。ビシリズマブは、米国特許第５，８３４，５９７号及び国際公開第２００４／０５２３９７号及びＣｏｌｅ，ｅｔ  ａｌ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、（１９９９）６８：ｐｐ．５６３−５７１に開示されており、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するためのビシリズマブふぃ又はその抗原結合断片は、配列番号１９１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は配列番号１９２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１４８】
ある実施形態では、標的化部分は抗ＣＤ３抗体であるフォラルマブ（ｆｏｒａｌｕｍａｂ）（ＮＩ−０４０１としても知られる）又はその断片を含む。様々な実施形態において、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１４／０１９３３９９号、米国特許第７，７２８，１１４号、米国特許出願公開第２０１０／０１８３５５４号、及び米国特許第８，５５１，４７８号に開示される抗ＣＤ３抗体のうちのいずれか１つを含み、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０１４９】
例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための抗ＣＤ３抗体又はその抗原結合断片は、米国特許第７，７２８，１１４号の配列番号２及び６（米国特許第７，７２８，１１４号の配列番号２（配列番号１９３）及び米国特許第７，７２８，１１４号の配列番号６（配列番号１９４））のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び／又は米国特許第７，７２８，１１４号の配列番号４及び８（米国特許第７，７２８，１１４号の配列番号４（配列番号１９５）及び米国特許第７，７２８，１１４号の配列番号８（配列番号１９６））のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０１５０】
ある実施形態では、標的化部分は米国特許第７，７２８，１１４号の配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び米国特許第７，７２８，１１４号の配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。ある実施形態では、標的化部分は米国特許出願公開第２０１６／０１６８２４７号に開示される抗ＣＤ３抗体のうちのいずれか１つを含み、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、国特許出願公開第２０１６／０１６８２４７号の配列番号６〜９（米国特許出願公開第２０１６／０１６８２４７号の配列番号６（配列番号１９７）、米国特許出願公開第２０１６／０１６８２４７号の配列番号７（配列番号１９８）、米国特許出願公開第２０１６／０１６８２４７号の配列番号８（配列番号１９９）、及び米国特許出願公開第２０１６／０１６８２４７号の配列番号９（配列番号２００））から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は米国特許出願公開第２０１６／０１６８２４７号の配列番号１０〜１２（米国特許出願公開第２０１６／０１６８２４７号の配列番号１０（配列番号２０１）、米国特許出願公開第２０１６／０１６８２４７号の配列番号１１（配列番号２０２）、及び米国特許出願公開第２０１６／０１６８２４７号の配列番号１２（配列番号２０３））から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１５１】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１５／０１７５６９９号に開示される抗ＣＤ３抗体のうちのいずれか１つを含み、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、米国特許出願公開第２０１５／０１７５６９９号の配列番号９（配列番号２０４）から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は米国特許出願公開第２０１５／０１７５６９９号の配列番号１０（配列番号２０５）から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１５２】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許第８，７８４，８２１号に開示される抗ＣＤ３抗体のうちのいずれか１つを含み、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号２、１８、３４、５０、６６、８２、９８、及び１１４（米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号２（配列番号２０６）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号１８（配列番号２０７）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号３４（配列番号２０８）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号５０（配列番号２０９）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号６６（配列番号２１０）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号８２（配列番号２１１）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号９８（配列番号２１２）、及び米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号１１４（配列番号２１３））から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号１０、２６、４２、５８、７４、９０、１０６、及び１２２（米国特許第８７８４８２１号の配列番号１０（配列番号２１４）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号２６（配列番号２１５）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号４２（配列番号２１６）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号５８（配列番号２１７）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号７４（配列番号２１８）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号９０（配列番号２１９）、米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号１０６（配列番号２２０）、及び米国特許第８，７８４，８２１号の配列番号１２２（配列番号２２１）から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１５３】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１５／０１１８２５２号に開示される抗ＣＤ３結合コンストラクトのうちのいずれか１つを含み、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、米国特許出願公開第２０１５／０１１８２５２号の配列番号６及び８６（米国特許出願公開第２０１５／０１１８２５２号の配列番号６（配列番号２２２）及び米国特許出願公開第２０１５／０１１８２５２号の配列番号８６（配列番号２２３））から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は米国特許出願公開第２０１５／０１７５６９９号の配列番号３（米国特許出願公開第２０１５／０１１８２５２号の配列番号３（配列番号２２４））から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１５４】
ある実施形態では、標的化部分は、米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号に開示される抗ＣＤ３結合タンパク質のうちのいずれか１つを含み、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。例示的な実施形態では、本明細書に記載される方法に使用するための前記抗体又はその抗原結合断片は、米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号の配列番号６〜９（米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号の配列番号６（配列番号２２５）、米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号の配列番号７（配列番号２２６）、米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号の配列番号８（配列番号２２７）、及び米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号の配列番号９（配列番号２２８））から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号の配列番号１〜４（米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号の配列番号１（配列番号２２９）、米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号の配列番号２（配列番号２３０）、米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号の配列番号３（配列番号２３１）、及び米国特許出願公開第２０１６／００３９９３４号の配列番号４（配列番号２３２））から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１５５】
様々な実施形態において本発明の標的化部分は、本明細書に開示される配列のうちのいずれかに対して、少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は１００％同一である（例えば、本明細書に開示される配列のうちのいずれかと、約６０％、約６１％、約６２％、約６３％、約６４％、約６５％、約６６％、約６７％、約６８％、約６９％、約７０％、約７１％、約７２％、約７３％、約７４％、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、又は約１００％の配列が同一である）ＣＤ３を標的とする配列を含み得る。
【０１５６】
様々な実施形態において本発明の標的化部分は、本明細書に開示されるようなＣＤ３を標的とする重鎖配列、軽鎖配列、重鎖可変領域配列、軽鎖可変領域配列、相補性決定領域（ＣＤＲ）配列、及びフレームワーク領域配列の任意の組合せを含み得る。様々な実施形態において、本発明の標的化部分は、Ｘ３５−３、ＶＩＴ３、ＢＭＡ０３０（ＢＷ２６４／５６）、ＣＬＢ−Ｔ３／３、ＣＲＩＳ７、ＹＴＨ１２．５、Ｆ１１１−４０９、ＣＬＢ−Ｔ３．４．２、ＴＲ−６６、ＷＴ３２、ＳＰｖ−Ｔ３ｂ、１１Ｄ８、ＸＩＩＩ−１４１、ＸＩＩＩ−４６、ＸＩＩＩ−８７、１２Ｆ６、Ｔ３／ＲＷ２−８Ｃ８、Ｔ３／ＲＷ２−４Ｂ６、ＯＫＴ３Ｄ、Ｍ−Ｔ３０１、ＳＭＣ２、ＷＴ３１、及びＦ１０１．０１を含むがこれらに限定されないＣＤ３特異的抗体のいずれかの重鎖配列、軽鎖配列、重鎖可変領域配列、軽鎖可変領域配列、相補性決定領域（ＣＤＲ）配列、及びフレームワーク領域配列を含み得る。これらのＣＤ３特異的抗体は当技術分野においてよく知られており、具体的にはＴｕｎｎａｃｌｉｆｆｅ、（１９８９）Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１、ｐｐ．５４６−５５０に記載されており、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０１５７】
ＣＤ３に選択的に結合する又は標的とするその他の抗体、抗体誘導体若しくは抗体フォーマット、ペプチド若しくはポリペプチド、又は融合タンパク質は、米国特許出願公開第２０１６／００００９１６号、米国特許第４，３６１，５４９号、同第５，８３４，５９７号、同第６，４９１，９１６号、同第６，４０６，６９６号、同第６，１４３，２９７号、同第６，７５０，３２５号、及び国際公開第２００４／０５２３９７号に開示されており、それらの文献の開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０１５８】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＰＤ−１への標的化に仲介される、Ｔ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。
【０１５９】
非限定的な例として、様々な実施形態において本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ７２、ＣＤ７３、ＣＤ７４、ＣＤｗ７５、ＣＤｗ７６、ＣＤ７７、ＣＤ７８、ＣＤ７９ａ／ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ８３、ＣＤ８４、ＣＤ８５、ＣＤ８６、ＣＤ８９、ＣＤ９８、ＣＤ１２６、ＣＤ１２７、ＣＤｗ１３０、ＣＤ１３８、又はＣＤｗ１５０への標的化に仲介される、Ｂ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質はＣＤ２０を指向する標的化部分を有する。
【０１６０】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、又はＣＤ７０への標的化に仲介される、Ｂ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。
【０１６１】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＣＤ２０への標的化に仲介される、Ｂ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質はＢ細胞上のＣＤ２０を指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。例として、いくつかの実施形態では、ＣＤ２０標的化部分は、以下の配列を有する組換え重鎖抗体（heavy-chain-only antibody）（ＶＨＨ）である。
【化４】
2020505955.tif 000006
【０１６２】
非限定的な例として、様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、２Ｂ４／ＳＬＡＭＦ４、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、ＫＩＲ３ＤＬ１、ＣＤ９４、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ６９、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＤＮＡＭ−１、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、Ｆｃ−εＲＩＩ、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、Ｆｃ−γＲ１／ＣＤ６４、ＭＩＣＡ、Ｆｃ−γＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＭＩＣＢ、Ｆｃ−γＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、ＭＵＬＴ−１、Ｆｃ−γＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ネクチン−２／ＣＤ１１２、Ｆｃ−γＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＮＫＧ２Ａ、ＦｃＲＨ１／ＩＲＴＡ５、ＮＫＧ２Ｃ、ＦｃＲＨ２／ＩＲＴＡ４、ＮＫＧ２Ｄ、ＦｃＲＨ４／ＩＲＴＡ１、ＮＫｐ３０、ＦｃＲＨ５／ＩＲＴＡ２、ＮＫｐ４４、Ｆｃ受容体様分子３／ＣＤ１６−２、ＮＫｐ４６／ＮＣＲ１、ＮＫｐ８０／ＫＬＲＦ１、ＮＴＢ−Ａ／ＳＬＡＭＦ６、Ｒａｅ−１、Ｒａｅ−１α、Ｒａｅ−１β、Ｒａｅ−１δ、Ｈ６０、Ｒａｅ−１ε、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、Ｒａｅ−１γ、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、ＴＲＥＭ−１、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、ＴＲＥＭ−２、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、ＴＲＥＭ−３、ＫＩＲ／ＣＤ１５８、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＵＬＢＰ−１、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＵＬＢＰ−２、ＫＩＲ２ＤＬ４／ＣＤ１５８ｄ、又はＵＬＢＰ−３への標的化に仲介される、ＮＫ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。
【０１６３】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、Ｋｉｒ１α、ＤＮＡＭ−１、又はＣＤ６４への標的化に仲介される、ＮＫ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。
【０１６４】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＫＩＲ１への標的化に仲介される、ＮＫ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞上のＫＩＲ１を指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１６５】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＴＩＧＩＴ又はＫＩＲ１への標的化に仲介される、ＮＫ細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞上のＴＩＧＩＴを指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１６６】
非限定的な例として、様々な実施形態において本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＣＬＥＣ−９Ａ、ＸＣＲ１、ＲＡＮＫ、ＣＤ３６／ＳＲＢ３、ＬＯＸ−１／ＳＲ−Ｅ１、ＣＤ６８、ＭＡＲＣＯ、ＣＤ１６３、ＳＲ−Ａ１／ＭＳＲ、ＣＤ５Ｌ、ＳＲＥＣ−１、ＣＬ−Ｐ１／ＣＯＬＥＣ１２、ＳＲＥＣ−ＩＩ、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲＢ２、ＲＰ１０５、ＴＬＲ４、ＴＬＲ１、ＴＬＲ５、ＴＬＲ２、ＴＬＲ６、ＴＬＲ３、ＴＬＲ９、４−ＩＢＢリガンド／ＴＮＦＳＦ９、ＩＬ−１２／ＩＬ−２３  ｐ４０、４−アミノ−１、８−ナフタルイミド、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、ＣＣＬ２１／６Ｃｋｉｎｅ、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、８−オキソ−ｄＧ、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、８Ｄ６Ａ、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、Ａ２Ｂ５、インテグリンα４／ＣＤ４９ｄ、Ａａｇ、インテグリンβ２／ＣＤ１８、ＡＭＩＣＡ、ランゲリン、Ｂ７−２／ＣＤ８６、ロイコトリエンＢ４Ｒ１、Ｂ７−Ｈ３、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦ８、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、Ｃ１ｑＲ１／ＣＤ９３、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＣＣＲ６、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ  ＣＣＲ７、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＤ４０／ＴＮＦＲＳＦ５、ＭＡＧ／シグレック−４−ａ、ＣＤ４３、ＭＣＡＭ、ＣＤ４５、ＭＤ−１、ＣＤ６８、ＭＤ−２、ＣＤ８３、ＭＤＬ−１／ＣＬＥＣ５Ａ、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＭＭＲ、ＣＤ９７、ＮＣＡＭＬ１、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、オステオアクチビンＧＰＮＭＢ、Ｃｈｅｒｎ２３、ＰＤ−Ｌ２、ＣＬＥＣ−１、ＲＰ１０５、ＣＬＥＣ−２、シグレック−２／ＣＤ２２、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、シグレック−３／ＣＤ３３、ＤＣ−ＳＩＧＮ、シグレック−５、ＤＣ−ＳＩＧＮＲ／ＣＤ２９９、シグレック−６、ＤＣＡＲ、シグレック−７、ＤＣＩＲ／ＣＬＥＣ４Ａ、シグレック−９、ＤＥＣ−２０５、シグレック−１０、デクチン−１／ＣＬＥＣ７Ａ、シグレック−Ｆ、デクチン−２／ＣＬＥＣ６Ａ、ＳＩＧＮＲ１／ＣＤ２０９、ＤＥＰ−１／ＣＤ１４８、ＳＩＧＮＲ４、ＤＬＥＣ、ＳＬＡＭ、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、Ｆｃ−γＲ１／ＣＤ６４、ＴＬＲ３、Ｆｃ−γＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＴＲＥＭ−１、Ｆｃ−γＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、ＴＲＥＭ−２、Ｆｃ−γＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ＴＲＥＭ−３、Ｆｃ−γＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、又はバニロイドＲ１への標的化に仲介される、樹状細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。
【０１６７】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＣＬＥＣ−９Ａ、ＤＣ−ＳＩＧＮ、ＣＤ６４、ＣＬＥＣ４Ａ、又はＤＥＣ２０５への標的化に仲介される、樹状細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞にを指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、樹状細胞上のＣＬＥＣ９Ａを指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１６８】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＣＬＥＣ９Ａへの標的化に仲介される、樹状細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は樹状細胞上のＣＬＥＣ９Ａを指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１６９】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＸＣＲ１への標的化に仲介される、樹状細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は樹状細胞上のＸＣＲ１を指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１７０】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＲＡＮＫへの標的化に仲介される、樹状細胞を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞に対する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は樹状細胞上のＲＡＮＫを指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１７１】
非限定的な例として、様々な実施形態において本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＳＩＲＰ１ａ、Ｂ７−１／ＣＤ８０、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、Ｂ７−Ｈ１、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、共通β鎖、インテグリンα４／ＣＤ４９ｄ、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦ８、インテグリンαＸ／ＣＤ１１ｃ、ＣＣＬ６／Ｃ１０、インテグリンβ２／ＣＤ１８、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、インテグリンβ３／ＣＤ６１、ＣＤ３１／ＰＥＣＡＭ−１、ラテキシン（Ｌａｔｅｘｉｎ）、ＣＤ３６／ＳＲ−Ｂ３、ロイコトリエンＢ４Ｒ１、ＣＤ４０／ＴＮＦＲＳＦ５、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲ−Ｂ２、ＣＤ４３、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ４５、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＤ６８、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、ＣＤ９７、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＤ１６３、ＬＲＰ−１、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、ＭＡＲＣＯ、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＭＤ−１、ＥＣＦ−Ｌ、ＭＤ−２、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＭＧＬ２、エンドグリン／ＣＤ１０５、オステオアクチビン／ＧＰＮＭＢ、Ｆｃ−γＲＩ／ＣＤ６４、オステオポンチン、Ｆｃ−γＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＰＤ−Ｌ２、Ｆｃ−γＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、シグレック−３／ＣＤ３３、Ｆｃ−γＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ＳＩＧＮＲ１／ＣＤ２０９、Ｆｃ−γＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＳＬＡＭ、ＧＭ−ＣＳＦ  Ｒα、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＬＲ３、ＩＦＮ−γＲ１、ＴＬＲ４、ＩＦＮ−γＲ２、ＴＲＥＭ−１、ＩＬ−１ＲＩＩ、ＴＲＥＭ−２、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、ＴＲＥＭ−３、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、２Ｂ４／ＳＬＡＭＦ４、ＩＬ−１０Ｒα、ＡＬＣＡＭ、ＩＬ−１０Ｒβ、アミノペプチダーゼＮ／ＡＮＰＥＰ、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、共通β鎖、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、Ｃ１ｑＲ１／ＣＤ９３、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、ＣＣＲ１、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、ＣＣＲ２、ＣＤ２０６、インテグリンα４／ＣＤ４９ｄ、ＣＣＲ５、インテグリンαＭ／ＣＤ１１ｂ、ＣＣＲ８、インテグリンαＸ／ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、インテグリンβ２／ＣＤ１８、ＣＤ１４、インテグリンβ３／ＣＤ６１、ＣＤ３６／ＳＲ−Ｂ３、ＬＡＩＲ１、ＣＤ４３、ＬＡＩＲ２、ＣＤ４５、ロイコトリエンＢ４−Ｒ１、ＣＤ６８、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲ−Ｂ２、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ９７、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＤ１６３、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、凝固因子ＩＩＩ／組織因子、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸ３ＣＬ１、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＸＣＲ４、ＬＲＰ−１、ＣＸＣＲ６、Ｍ−ＣＳＦ  Ｒ、ＤＥＰ−１／ＣＤ１４８、ＭＤ−１、ＤＮＡＭ−１、ＭＤ−２、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＭＭＲ、エンドグリン／ＣＤ１０５、ＮＣＡＭ−Ｌ１、Ｆｃ−γＲＩ／ＣＤ６４、ＰＳＧＬ−１、Ｆｃ−γＲＩＩＩＩＣＤ１６、ＲＰ１０５、Ｇ−ＣＳＦ  Ｒ、Ｌ−セレクチン、ＧＭ−ＣＳＦ  Ｒα、シグレック−３／ＣＤ３３、ＨＶＥＭ／ＴＮＦＲＳＦ１４、ＳＬＡＭ、ＩＣＡＭ−１／ＣＤ５４、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＲＥＭ−１、ＩＬ−６Ｒ、ＴＲＥＭ−２、ＣＸＣＲ１／ＩＬ−８Ｒ���、ＴＲＥＭ−３、又はＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１への標的化に仲介される、単球／マクロファージを指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。
【０１７２】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、Ｂ７−Ｈ１、ＣＤ３１／ＰＥＣＡＭ−１、ＣＤ１６３、ＣＣＲ２、又はマクロファージマンノース受容体ＣＤ２０６への標的化に仲介される、単球／マクロファージを指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。
【０１７３】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）例えば、ＳＩＲＰ１ａへの標的化に仲介される、単球／マクロファージを指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、マクロファージ細胞上のＳＩＲＰ１ａを指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１７４】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、チェックポイントマーカー、例えばＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２、ＣＤ２８／ＣＤ８０又はＣＤ８６、ＣＴＬＡ４／ＣＤ８０又はＣＤ８６、ＩＣＯＳ／ＩＣＯＳＬ又はＢ７ＲＰ１、ＢＴＬＡ／ＨＶＥＭ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＣＤ１３７／ＣＤ１３７Ｌ、ＯＸ４０／ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ２７、ＣＤ４０Ｌ、ＴＩＭ３／Ｇａｌ９、及びＡ２ａＲうちの１つ又は複数を指向する１つ又は複数の標的化部分を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）Ｔ細胞上のチェックポイントマーカー、例えば、ＰＤ−１を指向する標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共に腫瘍細胞を指向する標的化部分、例えば、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２を有する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上のＰＤ−１を指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１を指向する第二の標的化部分を有する。別の実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上のＰＤ−１を指向する標的化部分及び腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ２を指向する第二の標的化部分を有する。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、同一又は異なる免疫細胞に対する２つ以上の標的化部分を含む。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（ｉ）Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、マクロファージ、ＮＫ細胞、又はそれらのサブセットから選択される免疫細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を有し、且つ（ｉｉ）本明細書に記載されるシグナル伝達物質（例えば、コンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のうちのいずれかと共にＴ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、マクロファージ、ＮＫ細胞、又はそれらのサブセットから選択される同一又は別の免疫細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を有する。
【０１７６】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及び同一又は別のＴ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びＢ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及び樹状細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びマクロファージを指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｔ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びＮＫ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。例えば、例示的な実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ＣＤ８に対する標的化部分とＣｌｅｃ９Ａに対する標的化部分を含み得る。別の例示的な実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ＣＤ８に対する標的化部分とＣＤ３に対する標的化部分を含み得る。別の例示的な実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ＣＤ８に対する標的化部分とＰＤ−１に対する標的化部分を含み得る。
【０１７７】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｂ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及び同一又は別のＢ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｂ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びＴ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質はＢ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及び樹状細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｂ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びマクロファージを指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、Ｂ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びＮＫ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。
【０１７８】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、樹状細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及び同一又は別の樹状細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、樹状細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びＴ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、樹状細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びＢ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、樹状細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びマクロファージを指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、樹状細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びＮＫ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。
【０１７９】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、マクロファージを指向する１つ又は複数の標的化部分及び同一又は別のマクロファージを指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、マクロファージを指向する１つ又は複数の標的化部分及びＴ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、マクロファージを指向する１つ又は複数の標的化部分及びＢ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、マクロファージを指向する１つ又は複数の標的化部分及び樹状細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、マクロファージを指向する１つ又は複数の標的化部分及びＮＫ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。
【０１８０】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及び同一又は別のＮＫ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びＴ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びＢ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及びマクロファージを指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分及び樹状細胞を指向する１つ又は複数の標的化部分を含む。
【０１８１】
ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、腫瘍細胞を指向する標的化部分及び同一又は異なる腫瘍細胞を指向する第二の標的化部分を含む。前記実施形態では、標的化部分は本明細書に記載される腫瘍抗原のうちのいずれかに結合し得る。
【０１８２】
ｐ39
いくつかの実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞、褐色脂肪細胞）、肝臓脂質細胞、肝細胞、腎細胞（例えば、腎臓傍細胞、腎臓唾腺、乳腺など）、導管細胞（精嚢、前立腺などの導管細胞）、腸管刷子縁細胞（微絨毛を含む）、外分泌腺線条部細胞、胆嚢上皮細胞、輸精管非線毛細胞、精巣上体主細胞、精巣上体基底細胞、内皮細胞、エナメル芽上皮細胞（歯のエナメル質分泌）、耳の前庭系の半月状面上皮細胞（プロテオグリカン分泌）、コルチ器歯間上皮細胞（有毛細胞を覆う分泌性被蓋膜）、疎性結合組織線維芽細胞、角膜線維芽細胞（角膜実質細胞）、腱線維芽細胞、骨髄細網組織線維芽細胞、非上皮性線維芽細胞、周皮細胞、椎間板の髄核細胞、セメント芽細胞／セメント細胞（歯根骨様ｅｗａｎ細胞の分泌物）、象牙芽細胞／象牙細胞（歯の象牙質分泌物）、硝子軟骨細胞、線維軟骨細胞、弾性軟骨細胞、骨芽細胞／骨細胞、骨始原細胞（骨芽細胞の幹細胞）、眼の硝子体の硝子体細胞、耳の外リンパ腔の星状細胞、肝星状細胞（伊藤細胞）、膵星状細胞、骨格筋細胞、衛星細胞、心筋細胞、平滑筋細胞、虹彩の筋上皮細胞、外分泌腺の筋上皮細胞、外分泌上皮細胞（例えば、唾液腺細胞、乳腺細胞、涙腺細胞、汗腺細胞、皮脂腺細胞、前立腺細胞、胃腺細胞、膵腺房細胞、肺細胞）、ホルモン分泌細胞（例えば、下垂体細胞、神経分泌細胞、腸管細胞及び呼吸管細胞、甲状腺細胞、副甲状腺細胞、副腎細胞、精巣ライディッヒ細胞、膵島細胞）、角化上皮細胞、湿性層状バリア上皮細胞、神経細胞（例えば、介在神経細胞、主細胞、星状細胞、希突起神経膠細胞、及び上衣細胞などの感覚変換細胞、自律神経細胞、感覚器官及び末梢神経支持細胞、及び中枢神経系神経細胞、及び膠細胞）から選択される１種類又は複数種類の細胞に見られる標的を含む目的の標的（例えば、抗原、受容体）に結合する認識ドメインを有する１つ又は複数の標的化部分を含む。
【０１８３】
標的化部分の形式
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質の標的化部分は、抗体又はその誘導体など、特異的結合が可能なタンパク質系物質である。ある実施形態では、標的化部分は抗体を含む。様々な実施形態において、抗体は２本の重鎖と２本の軽鎖を含む全長多量体タンパク質である。それぞれの重鎖は１つの可変領域（例えばＶＨ）と少なくとも３つの定常領域（例えばＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３）を含み、それぞれの軽鎖は１つの可変領域（ＶＬ）と１つの定常領域（ＣＬ）を含む。可変領域は抗体の特異性を決定する。それぞれの可変領域は、比較的保存された４つのフレームワーク領域（ＦＲ）によって挟まれた相補性決定領域（ＣＤＲ）としても知られる３つの超可変領域を含む。それら３つのＣＤＲは、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と呼ばれ、抗体の結合特異性に寄与する。いくつかの実施形態では、抗体はキメラ抗体である。いくつかの実施形態では、抗体はヒト化抗体である。
【０１８４】
いくつかの実施形態では、標的化部分は抗体誘導体又は抗体フォーマットを含む。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質の標的化部分は、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる、米国特許第７，４１７，１３０号、米国特許出願公開第２００４／１３２０９４号、米国特許第５，８３１，０１２号、米国特許出願公開第２００４／０２３３３４号、米国特許第７，２５０，２９７号、米国特許第６，８１８，４１８号、米国特許出願公開第２００４／２０９２４３号、米国特許第７，８３８，６２９号、米国特許第７，１８６，５２４号、米国特許第６，００４，７４６号、米国特許第５，４７５，０９６号、米国特許出願公開第２００４／１４６９３８号、米国特許出願公開第２００４／１５７２０９号、米国特許第６，９９４，９８２号、米国特許第６，７９４，１４４号、米国特許出願公開第２０１０／２３９６３３号、米国特許第７，８０３，９０７号、米国特許出願公開第２０１０／１１９４４６号、及び／又は米国特許第７，１６６，６９７号などの米国特許明細書又は米国特許出願明細書に記載されるような、単一ドメイン抗体、組換え重鎖抗体（ＶＨＨ）、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、サメ重鎖抗体（ＶＮＡＲ）、マイクロプロテイン（システインノットタンパク質、ノッチン）、ＤＡＲＰｉｎ、テトラネクチン、アフィボディ、トランスボディ、アンチカリン、アドネクチン、アフィリン、ミクロボディ、ペプチドアプタマー、オルタラーゼ（ａｌｔｅｒａｓｅ）、プラスチック抗体、ファイロマー（ｐｈｙｌｏｍｅｒ）、ストラドボディ、マキシボディ、エビボディ、フィノマー（ｆｙｎｏｍｅｒ）、アルマジロリピートタンパク質、クニッツ（Ｋｕｎｉｔｚ）ドメイン、アビマー（ａｖｉｍｅｒ）、アトリマー（ａｔｒｉｍｅｒ）、プロボディ、イムノボディ、トリオマブ、トロイボディ、ペプボディ、ワクチボディ（ｖａｃｃｉｂｏｄｙ）、ユニボディ、アフィマー、デュオボディ、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ペプチド模倣分子、又は合成分子である。Ｓｔｏｒｚ、ＭＡｂｓ．、２０１１年５月〜６月、３（３）：ｐｐ．３１０−３１７も参照されたい。
【０１８５】
ある実施形態では、標的化部分は、例えばラクダＶＨＨ、サメＶＨＨ、又はデザインＶＨＨなどのＶＨＨ抗体を産生する生物に由来するＶＨＨなどの単一ドメイン抗体を含む。ＶＨＨは、天然重鎖抗体に特有の構造的及び機能的特性を含む抗体由来治療タンパク質である。ＶＨＨ技術は、軽鎖を有しないラクダ抗体に由来する完全機能性抗体に基づいている。これらの重鎖抗体は、単一の可変ドメイン（ＶＨＨ）と２つの定常ドメイン（ＣＨ２及びＣＨ３）を含む。ＶＨＨはＮＡＮＯＢＯＤＹ又はＮＡＮＯＢＯＤＩＥＳの商標で商業的に入手可能である。
【０１８６】
ある実施形態では、標的化部分はＶＨＨを含む。いくつかの実施形態では、ＶＨＨはヒト化ＶＨＨ又はラクダ化ＶＨＨである。
【０１８７】
いくつかの実施形態では、ＶＨＨは完全ヒトＶＨドメイン、例えば、ＨＵＭＡＢＯＤＹ（Ｃｒｅｓｃｅｎｄｏ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ社、英国、ケンブリッジ）を含む。いくつかの実施形態では、完全ヒトＶＨドメイン、例えば、ＨＵＭＡＢＯＤＹは、一価、二価、又は三価である。いくつかの実施形態では、完全ヒトＶＨドメイン、例えばＨＵＭＡＢＯＤＹは、単一特異性又は多重特異性、例えば、単一特異性、二特異性、又は三特異性である。例示的な完全ヒトＶＨドメイン、例えば、ＨＵＭＡＢＯＤＹは、例えば、国際公開第２０１６／１１３５５５号及び国際公開第２０１６／１１３５５７号に記載されており、それらの文献の開示の全体が参照により取り込まれる。
【０１８８】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質の標的化部分は、細胞受容体への天然リガンドなど、細胞受容体への特異的結合が可能なタンパク質物質である。様々な実施形態において、細胞受容体は１種類又は複数種類の免疫細胞上に見られ、それらの免疫細胞には、限定されないが、Ｔ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、抗腫瘍性マクロファージ（例えばＭ１マクロファージ）、Ｂ細胞、樹状細胞、又はそれらのサブセットを挙げることができる。いくつかの実施形態では、細胞受容体は巨核球、血小板、赤血球、肥満細胞、好塩基球、好中球、好酸球、又はそれらのサブセットに見られる。
【０１８９】
いくつかの実施形態では、標的化部分はケモカインなどの天然リガンドである。本発明のキメラタンパク質に含まれる得る例示的ケモカインとしては、ＣＣＬ１、ＣＣＬ２、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ６、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ９、ＣＣＬ１０、ＣＣＬ１１、ＣＣＬ１２、ＣＣＬ１３、ＣＣＬ１４、ＣＣＬ１５、ＣＣＬ１６、ＣＬ１７、ＣＣＬ１８、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２１、ＣＣＬ２２、ＣＣＬ２３、ＣＣＬ２４、ＣＬＬ２５、ＣＣＬ２６、ＣＣＬ２７、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、ＣＸＣＬ４、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ６、ＣＸＣＬ７、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１２、ＣＸＣＬ１３、ＣＸＣＬ１４、ＣＸＣＬ１５、ＣＸＣＬ１６、ＣＸＣＬ１７、ＸＣＬ１、ＸＣＬ２、ＣＸ３ＣＬ１、ＨＣＣ−４、及びＬＤＧＦ−ＰＢＰが挙げられるがこれらに限定されない。例示的な実施形態では、標的化部分は、樹状細胞受容体ＸＣＲ１を認識して結合するケモカインであるＸＣＬ１であってもよい。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ８を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ１である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ２又はＣＣＲ９を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ２である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１、ＣＣＲ５、又はＣＣＲ９を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ３である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１、ＣＣＲ５、又はＣＣＲ９を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ４である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１、ＣＣＲ３、ＣＣＲ、４又はＣＣＲ５を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ５である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ６である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ２又はＣＣＲ９を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ７である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ２Ｂ、ＣＣＲ５、又はＣＣＲ９を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ８である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ９である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ１０である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ５、又はＣＣＲ９を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ１１である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ５、又はＣＣＲ９を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ１３である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１又はＣＣＲ９を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ１４である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１又はＣＣＲ３を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ１５である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ５、又はＣＣＲ８を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ１６である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ４を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ１７である。別の例示的な実施形態では、記標的化部分は、ＣＣＲ７を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ１９である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ６を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ２０である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ７を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ２１である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ４を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ２２である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ２３である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ３を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ２４である。別の例示的な実施形態では、標的化部分はＣ、ＣＣＲ９を認識して結合するケモカインであるＣＬ２５である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ３を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ２６である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ１０を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ２７である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＣＲ３又はＣＣＲ１０を認識して結合するケモカインであるＣＣＬ２８である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ１又はＣＸＣＲ２を認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ１である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ２を認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ２である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ２を認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ３である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ３Ｂを認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ４である。別の例示的な実施形態では、標的化部分はＣＸＣＬ５であり、ＣＸＣＲ２を認識して結合するケモカインである。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ１又はＣＸＣＲ２を認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ６である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ１又はＣＸＣＲ２を認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ８である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ３を認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ９である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ３を認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ１０である。別の例示的な実施形態では、標的化部分はＣＸＣＬ１１であり、ＣＸＣＲ３又はＣＸＣＲ７を認識して結合するケモカインである。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ４又はＣＸＣＲ７を認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ１２である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ５を認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ１３である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ６を認識して結合するケモカインであるＣＸＣＬ１６である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸＣＲ２を認識して結合するケモカインであるＬＤＧＦ−ＰＢＰである。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＸＣＲ１を認識して結合するケモカインであるＸＣＬ２である。別の例示的な実施形態では、標的化部分は、ＣＸ３ＣＲ１を認識して結合するケモカインであるＣＸ３ＣＬ１である。
【０１９０】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、標的化部分の様々な組み合わせを含む。例示的な実施形態では、本開示のキメラタンパク質は２つの標的化部分を含む場合があり、両方の標的化部分が抗体又は抗体誘導体である。別の例示的な実施形態では、本開示のキメラタンパク質は２つの標的化部分を含む場合があり、両方の標的化部分が細胞受容体の天然リガンドである。その他の例示的な実施形態では、本開示のキメラタンパク質は２つの標的化部分を含む場合があり、それらの標的化部分のうちの一方が抗体又は抗体誘導体であり、他方の標的化部分が細胞受容体の天然リガンドである。
【０１９１】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質の認識ドメインは、目的の標的（例えば、抗原、受容体）の機能を調整し（非限定的な例として、部分的又は完全に中和し）、例えば、抗原が有する生物学的作用を実質的に阻害、抑制、又は中和する。例えば、様々な認識ドメインが、腫瘍を有する患者などの免疫系を能動的に抑制している、又は抑制する能力を有する、１種類又は複数種類の腫瘍抗原を対象とする場合がある。例えば、いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、免疫抑制シグナル（例えば、チェックポイント抑制因子）、例えば、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、Ｂ７−Ｈ４、ＧＩＴＲ、ガレクチン−９、ＨＶＥＭ、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、Ｂ７−Ｈ３、ＣＤ２４４、ＣＤ１６０、ＴＩＧＩＴ、ＳＩＲＰα、ＩＣＯＳ、ＣＤ１７２ａ、及びＴＭＩＧＤ２のうちの１つ又は複数の機能を調整する。例えば、いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、非限定的な例として、ＰＤ−Ｌ１若しくはＰＤ−Ｌ２とのＰＤ−１の結合、及び／又はＡＰ２Ｍ１、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＳＨＰ−２、及びＰＰＰ２Ｒ５Ａのうちの１つ又は複数とのＣＴＬＡ−４の結合による免疫抑制シグナルの伝達を妨害、阻止、抑制、及び／又は阻害するように改変されている。
【０１９２】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質の認識ドメインは、目的の標的（例えば、抗原、受容体）に結合するがその機能を調整せず、例えば、認識ドメインは、結合抗体であるか、又は結合抗体に類似している。例えば、様々な実施形態において、認識ドメインは単に抗原又は受容体を標的化するが、該抗原又は受容体が有する生物学的作用を実質的に阻害、抑制、又は機能調整しない。例えば、上述の（例えば、全長抗体などと比較して）小さい抗体フォーマットの中には、接近し難いエピトープを標的とする能力を有し、且つ、より広範な位置での特異的な結合をもたらすものもある。様々な実施形態において、認識ドメインは、生物活性にとって重要である抗原又は受容体の部位（例えば、抗原の活性部位）から物理的に離れているエピトープに結合する。
【０１９３】
そのような非中和性結合は、エフェクター抗原、例えば本明細書に記載される任意のエフェクター抗原を介して、活性免疫細胞を必要部位へ直接的又は間接的に動員するために本開示のキメラタンパク質を使用する方法を含む、本発明の様々な実施形態において使用される。例えば、様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、腫瘍を減少させる、又は除去する方法において、ＣＤ８を介して細胞傷害性Ｔ細胞を腫瘍細胞へ直接的又は間接的に動員するために使用され得る（例えば、本開示のキメラタンパク質は、抗ＣＤ８認識ドメイン及び抗腫瘍抗原認識ドメインを含んでいてもよい）。前記実施形態では、ＣＤ８発現性細胞傷害性Ｔ細胞を直接的又は間接的に動員するが、ＣＤ８活性を機能的に調整しないことが望ましい。反対に、これらの実施形態では、ＣＤ８シグナル伝達は、腫瘍減少作用又は腫瘍除去作用に重要である。他の例として、本開示のキメラタンパク質は、腫瘍を減少させるか又は除去する様々な方法において、ＣＬＥＣ９Ａを介して樹状細胞（ＤＣ）を直接的又は間接的に動員するために使用される（例えば、本開示のキメラタンパク質は、抗ＣＬＥＣ９Ａ認識ドメイン及び抗腫瘍抗原認識ドメインを含んでいてもよい）。前記実施形態では、ＣＬＥＣ９Ａ発現性ＤＣを直接的又は間接的に動員するが、ＣＬＥＣ９Ａ活性を機能的に調整しないことが望ましい。反対に、これらの実施形態では、ＣＬＥＣ９Ａシグナル伝達は、腫瘍減少作用又は腫瘍除去作用に重要である。
【０１９４】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質の認識ドメインは、例えば、樹状細胞上のＸＣＲ１に結合する。例えば、前記認識ドメインは、いくつかの実施形態では、ＸＣＬ１の全体若しくは一部、又は非中和性抗ＸＣＲ１因子を含む。
【０１９５】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質の認識ドメインは、免疫調節性（例えば、免疫刺激性又は免疫抑制性）抗原に結合する。様々な実施形態において、免疫調節性抗原は、４−１ＢＢ、ＯＸ−４０、ＨＶＥＭ、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳリガンド、ＯＸ−４０リガンド、ＬＩＧＨＴ（ＣＤ２５８）、ＧＩＴＲリガンド、ＣＤ７０、Ｂ７−１、Ｂ７−２、ＣＤ３０リガンド、ＣＤ４０リガンド、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳリガンド、ＣＤ１３７リガンド、及びＴＬ１Ａのうちの１つ又は複数である。様々な実施形態において、このような免疫刺激性抗原は腫瘍細胞上に発現する。様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質の認識ドメインは、このような免疫刺激性抗原に結合するが機能を調節せず、したがって該抗原を発現する細胞の潜在的な腫瘍減少能力又は腫瘍除去能力を減少又は消失させることなくこれらの細胞を動員することが可能になる。
【０１９６】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質の認識ドメインは、中和活性を有する２つの認識ドメインを含むか、非中和（例えば、結合）活性を有する２つの認識ドメイン含むか、又は中和活性を有する１つの認識ドメイン及び非中和（例えば、結合）活性を有する１つの認識ドメインを含むキメラタンパク質という状態であってもよい。
【０１９７】
その他のシグナル伝達物質
ある態様では、本発明は、コンセンサスインターフェロン又は本明細書に記載されるバリアントに加えて、１種類又は複数種類のシグナル伝達物質（例えば、免疫調節因子）を含むキメラタンパク質を提供する。例示的な実施形態では、キメラタンパク質は、コンセンサスインターフェロン又は本明細書に記載されるバリアントに加えて、２種類、３種類、４種類、５種類、６種類、７種類、８種類、９種類、１０種類、又はそれより多くの種類のシグナル伝達物質を含み得る。様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質は、該伝達物質の受容体のうちの１つ又は複数に対する親和性又は活性が低下するように改変されており、それによって活性（アゴニズム又はアンタゴニズムを含む）が減弱され、及び／又はキメラタンパク質の非特異的シグナル伝達若しくは望ましくない隔離を防止する。
【０１９８】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質は、野生型ではアンタゴニスト的であり、そのアンタゴニスト活性を減弱させる１つ又は複数の変異を有する。様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質は１つ又は複数の変異のためにアンタゴニスト的であり、例えばアゴニスト的シグナル伝達物質がアンタゴニスト的シグナル伝達物質に変換され、そのような変換されたシグナル伝達物質は、（例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号に記載されるように）所望によりそのアンタゴニスト活性を減弱させる１つ又は複数の変異も有してもよい。
【０１９９】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質は、改変型のサイトカイン、増殖因子、及びホルモンから選択される。そのようなサイトカイン、増殖因子、及びホルモンの代表的な例としては、リンホカイン、モノカイン；ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモン、及びウシ成長ホルモンなどの従来のポリペプチドホルモン；副甲状腺ホルモン；チロキシン、インスリン；プロインスリン；リラキシン；プロリラキシン；濾胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、及び黄体形成ホルモン（ＬＨ）などの糖タンパク質ホルモン；肝細胞増殖因子；線維芽細胞増殖因子；プロラクチン；胎盤性ラクトゲン；腫瘍壊死因子−α及び腫瘍壊死因子−β；ミュラー管抑制物質；マウス性腺刺激ホルモン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮細胞増殖因子；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；ＮＧＦ−αなどの神経成長因子；血小板由来増殖因子；ＴＧＦ−α及びＴＧＦ−βなどのトランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）；インスリン様成長因子−Ｉ及びインスリン様成長因子−ＩＩ；骨誘導因子；例えば、インターフェロン−α、インターフェロン−β、及びインターフェロン−γ（並びにインターフェロンＩ型、ＩＩ型、及びＩＩＩ型）などのインターフェロン；マクロファージ−ＣＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ）、顆粒球マクロファージ−ＣＳＦ（ＧＭ−ＣＳＦ）、及び顆粒球−ＣＳＦ（Ｇ−ＣＳＦ）などのコロニー刺激因子（ＣＳＦ）；例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−１α、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、及びＩＬ−１８などのインターロイキン（ＩＬ）；例えば、ＴＮＦ−α又はＴＮＦ−βなどの腫瘍壊死因子、及び例えば、ＬＩＦ及びｋｉｔリガンド（ＫＬ）を含む他のポリペプチド因子が挙げられるがこれらに限定されない。本明細書において使用される場合、サイトカイン、増殖因子、及びホルモンとしては、天然起源のタンパク質、又は組換え細菌細胞培養系、組換え真核生物細胞培養系、若しくは組換え哺乳類細胞培養系から産生されるタンパク質、及び天然配列のサイトカインの生物学的活性同等物が挙げられる。
【０２００】
いくつかの実施形態では、追加のシグナル伝達物質は、限定されないが、ＴＧＦ−α及びＴＧＦ−βなどのトランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、インスリン様成長因子−Ｉ及びインスリン様成長因子−ＩＩなどのインスリン様成長因子、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、ヘレグリン、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）から選択される増殖因子の改変型である。
【０２０１】
ある実施形態では、増殖因子は改変型の線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）である。ＦＧＦの例としては、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、ＦＧＦ７、ＦＧＦ８、ＦＧＦ９、ＦＧＦ１０、ＦＧＦ１１、ＦＧＦ１２、ＦＧＦ１３、ＦＧＦ１４、マウスＦＧＦ１５、ＦＧＦ１６、ＦＧＦ１７、ＦＧＦ１８、ＦＧＦ１９、ＦＧＦ２０、ＦＧＦ２１、ＦＧＦ２２、及びＦＧＦ２３が挙げられるがこれらに限定されない。
【０２０２】
ある実施形態では、増殖因子は改変型の血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）である。ＶＥＧＦの例としては、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦ−Ｂ、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ、及びＰＧＦ、並びにＶＥＧＦ１２１、ＶＥＧＦ１２１ｂ、ＶＥＧＦ１４５、ＶＥＧＦ１６５、ＶＥＧＦ１６５ｂ、ＶＥＧＦ１８９、及びＶＥＧＦ２０６など、ＶＥＧＦ−Ａの様々なアイソフォームを含むそれらのアイソフォームが挙げられるがこれらに限定されない。
【０２０３】
ある実施形態では、増殖因子は改変型のトランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）である。ＴＧＦの例としては、ＴＧＦ−α及びＴＧＦ−β、並びにＴＧＦβ１、ＴＧＦβ２、及びＴＧＦβ３を含むＴＧＦ−βの様々なサブタイプを含むそれらのサブタイプが挙げられるがこれらに限定されない。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、追加のシグナル伝達物質は、限定されないが、ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン、性腺刺激ホルモン放出ホルモン、アンドロゲン、エストロゲン、甲状腺刺激ホルモン、濾胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、プロラクチン、成長ホルモン、副腎皮質刺激ホルモン、抗利尿ホルモン、オキシトシン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン、ソマトスタチン、ドーパミン、メラトニン、チロキシン、カルシトニン、副甲状腺ホルモン、糖質コルチコイド、鉱質コルチコイド、アドレナリン、ノルアドレナリン、プロゲステロン、インスリン、グルカゴン、アミリン、カルシトリオール、カルシフェロール、心房性ナトリウム利尿ペプチド、ガストリン、セクレチン、コレシストキニン、ニューロペプチドＹ、グレリン、ＰＹＹ３−３６、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、レプチン、トロンボポエチン、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、及びアンギオテンシノーゲンから選択されるホルモンの改変型である。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、追加のシグナル伝達物質は、免疫調節因子、例えばインターロイキン、インターフェロン、及び腫瘍壊死因子のうちの１つ又は複数である。
【０２０６】
いくつかの実施形態では、追加のシグナル伝達物質はインターロイキンであり、それには例えばＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＬ−３５、ＩＬ−３６、又はその断片、バリアント、類似体、若しくはファミリーメンバーが含まれる。インターロイキンは、リンパ球、単球、及びマクロファージによって合成される一群の多機能性サイトカインである。公知の機能としては、免疫細胞（例えば、ヘルパーＴ細胞、Ｂ細胞、好酸球、及びリンパ球）の増殖刺激、好中球、及びＴリンパ球の化学遊走、及び／又はインターフェロンの阻害が挙げられる。インターロイキン活性は当技術分野において知られているアッセイ法、すなわち、Ｍａｔｔｈｅｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｃｌｅｍｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．編，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ、ワシントンＤ．Ｃ．、１９８７、ｐｐ．２２１−２２５、及びＯｒｅｎｃｏｌｅ  ａｎｄ  Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ、（１９８９）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ、１、ｐｐ．１４−２０のアッセイ法を用いて決定可能である。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、シグナル伝達物質は、インターフェロンＩ型、ＩＩ型、及びＩＩＩ型などの改変型のインターフェロンである。インターフェロンの例としては、例えば、インターフェロン−α−１、２、４、５、６、７、８、１０、１３、１４、１６、１７、及び２１、インターフェロン−β及びインターフェロン−γ、インターフェロンκ、インターフェロンε、インターフェロンτ、及びインターフェロンωが挙げられる。
【０２０８】
いくつかの実施形態では、追加のシグナル伝達物質は、改変型の腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）又はＴＮＦファミリーのタンパク質であり、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、ＬＴ−β、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ３０Ｌ、ＦＡＳＬ、４−１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、及びＴＲＡＩＬが挙げられるがこれらに限定されない。
【０２０９】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質は、１つ又は複数の変異を有するシグナル伝達物質の改変型（例えば変異体）である。様々な実施形態において、変異によって、改変型シグナル伝達物質は、未改変型又は未変異型、すなわち野生型のシグナル伝達物質と比べて（例えば、同じシグナル伝達物質を野生型と改変型（例えば変異体型）との間で比較して）、結合親和性の低下、内在性活性の低下、及び特定の生物活性の低下のうちの１つ又は複数など、活性のうちの１つ又は複数が減衰される。様々な実施形態において、変異によって、改変型シグナル伝達物質は、未改変又は未変異の、すなわち未変異型コンセンサス配列のインターフェロンと比べて、結合親和性の低下、内在性活性の低下、及び特定の生物活性の低下のうちの１つ又は複数など、活性のうちの１つ又は複数が減衰される。いくつかの実施形態では、結合又は親和性を減衰又は低下させる変異としては、結合又は親和性を実質的に低下させる、又は除去する変異が挙げられる。いくつかの実施形態では、結合又は親和性を減衰又は低下させる変異は、結合又は親和性を実質的に低下させるか又は除去する変異とは異なる。結果として、様々な実施形態において、変異によって、シグナル伝達物質は、未変異型、すなわち野生型のシグナル伝達物質と比べて（例えば、同じシグナル伝達物質を野生型と改変型（例えば変異体型）との間で比較して）より安全になり、例えば、全身毒性が低減され、副作用が低減され、オフターゲット作用が低減される。様々な実施形態において、それらの変異によって、シグナル伝達物質は、未変異型のインターフェロン、例えば未変異型コンセンサス配列のインターフェロンと比べてより安全になり、例えば、全身毒性が低減され、副作用が低減され、オフターゲット作用が低減される。
【０２１０】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質は、その受容体のうちの１つ又は複数に対する結合親和性又は活性を低下させる１つ又は複数の変異を有するように改変されている。いくつかの実施形態では、シグナル伝達物質は、受容体に対する結合親和性又は活性を実質的に低下させるか又は除去する１つ又は複数の変異を有するように改変されている。いくつかの実施形態では、野生型シグナル伝達物質による活性は受容体におけるアゴニズム（例えば、治療部位における細胞作用の活性化）である。例えば、野生型シグナル伝達物質はその受容体を活性化する場合がある。前記実施形態では、変異によって、改変型シグナル伝達物質は、受容体における活性化活性が低下するか又は除去されることになる。例えば、変異によって改変型シグナル伝達物質が低減された活性化シグナルを標的細胞に送達することになる場合があるか、又は活性化シグナルが除去される可能性がある。いくつかの実施形態では、野生型シグナル伝達物質による活性は受容体におけるアンタゴニズム（例えば、治療部位における細胞作用の阻害又は減弱）である。例えば、野生型シグナル伝達物質は受容体を減弱又は阻害する場合がある。これらの実施形態では、変異によって改変型シグナル伝達物質は受容体におけるアンタゴナイズ活性が低下するか又は除去されることになる。例えば、変異によって改変型シグナル伝達物質が低減された抑制シグナルを標的細胞に送達することになる場合があるか、又は抑制シグナルが除去される可能性がある。様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、１つ又は複数の変異のためにアンタゴニスト的であり、例えばアゴニスト的シグナル伝達物質が（例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号に記載されるように）アンタゴニスト的シグナル伝達物質に変換される。所望により、変換されたシグナル伝達物質は、その受容体のうちの１種類又は複数種類に対するその結合親和性又は活性を低下させるか、又はその受容体のうちの１種類又は複数種類に対する結合親和性若しくは活性を実質的に低下させるか若しくは除去する、１つ又は複数の変異を有していてもよい。
【０２１１】
いくつかの実施形態では、受容体における親和性又は活性の低下は、標的化部分のうちの１つ又は複数との結合によって回復可能である。別の実施形態では、受容体における親和性又は活性の低下は、標的化部分のうちの１つ又は複数の活性によって実質的に回復することがない。
【０２１２】
様々な実施形態において、標的化部分が実質的な活性化に必要とされる消失した／不十分な結合（及び／又は、限定されないが、結合活性など）を補償するので、追加のシグナル伝達物質は標的細胞上で活性を有する。様々な実施形態において、改変型シグナル伝達物質は、治療活性部位への途中では実質的に不活性であり、特異的に標的化した細胞種に対して実質的に作用し、望まれない副作用が大いに低減される。
【０２１３】
いくつかの実施形態では、追加のシグナル伝達物質は、ある受容体（すなわち、治療受容体）に対する結合又は親和性を減弱又は低下させる１つ又は複数の変異、及び第２の受容体における結合又は親和性を実質的に低下させるか又は除去する１つ又は複数の変異を含み得る。前記実施形態では、これらの変異は同じ位置にあってもよく、異なる位置にあってもよい（すなわち、同じ変異又は複数の変異であってもよい）。いくつかの実施形態では、ある受容体における結合及び／又は活性を低下させる変異は、別の受容体において実質的に低下させるか又は除去する変異と異なる。いくつかの実施形態では、ある受容体における結合及び／又は活性を低下させる変異は、別の受容体において実質的に低下させるか又は除去する変異と同一である。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、治療受容体において結合及び／又は活性を減弱させることで、（例えば、野生型シグナル伝達物質と比べて）より制御されたオンターゲット治療効果を可能にする変異、及び別の受容体において結合及び／又は活性を実質的に低下させるか又は除去することで、（例えば、野生型シグナル伝達物質と比べて）副作用を減少させる変異の両方の変異を有する改変型シグナル伝達物質を有する。
【０２１４】
いくつかの実施形態では、結合又は活性の実質的な低下又は除去は、標的化部分によって実質的に回復することがない。いくつかの実施形態では、結合又は活性の実質的な低下又は除去は、標的化部分によって回復可能である。様々な実施形態において、第２の受容体における結合又は活性の実質的な低下又は除去によっても他方の受容体が介在する有害作用が防止され得る。あるいは、又はさらに、他方の受容体における結合又は活性の実質的な低下又は除去により、治療キメラタンパク質が治療作用部位から離れて隔離されることが減少するか又は無くなるので、治療効果が改善されることになる。例えば、いくつかの実施形態では、これにより、他方の受容体における消失を補償する高用量の本開示のキメラタンパク質の必要性がなくなる。用量を低下させるそのような能力により、副作用の可能性がさらに低くなる。
【０２１５】
様々な実施形態において、追加の改変シグナル伝達物質は、その受容体のうちの１つ又は複数に対して、シグナル伝達物質の親和性を低下、実質的に低下、又は除去、例えば結合（例えばＫＤ）及び／又は活性化（例えば、改変型シグナル伝達物質が、例えば、ＫＡ及び／又はＥＣ５０として測定可能な受容体のアゴニストであるとき）及び／又は阻害（例えば、改変型シグナル伝達物質が、例えば、ＫＩ及び／又はＩＣ５０として測定可能な受容体のアンタゴニストであるとき）させる、１つ又は複数の変異を含む。様々な実施形態において、シグナル伝達物質の受容体における親和性の低下によって活性（アゴニズム又はアンタゴニズムを含む）が減弱される。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、野生型シグナル伝達物質と比べて、受容体に対する親和性が、約１％、又は約３％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、又は約１０％〜２０％、約２０％〜４０％、約５０％、約４０％〜６０％、約６０％〜８０％、約８０％〜１００％である。いくつかの実施形態では、結合親和性は、野生型シグナル伝達物質と比べて（非限定的な例として、未変異のコンセンサスインターフェロンとの比較を含む）、少なくとも約２倍低く、約３倍低く、約４倍低く、約５倍低く、約６倍低く、約７倍低く、約８倍低く、約９倍低く、少なくとも約１０倍低く、少なくとも約１５倍低く、少なくとも約２０倍低く、少なくとも約２５倍低く、少なくとも約３０倍低く、少なくとも約３５倍低く、少なくとも約４０倍低く、少なくとも約４５倍低く、少なくとも約５０倍低く、少なくとも約１００倍低く、少なくとも約１５０倍低く、又は約１０〜５０倍低く、約５０〜１００倍低く、約１００〜１５０倍低く、約１５０〜２００倍低く、又は２００倍超低い。
【０２１６】
キメラタンパク質がある受容体における結合を低下させる変異、及び第２の受容体における結合を実質的に低下させるか又は除去する変異を有する実施形態において、ある受容体に対する改変型シグナル伝達物質の結合親和性の減弱又は低下は他方の受容体に対する親和性の実質的な低下又は除去に満たない。いくつかの実施形態では、ある受容体に対する改変型シグナル伝達物質の結合親和性の減弱又は低下は、他方の受容体に対する親和性の実質的な低下又は除去よりも約１％、又は約３％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、又は約９５％少ない。様々な実施形態において、実質的な低下又は除去は、減弱又は低下よりも高い程度の結合親和性及び／又は活性の低下を意味する。
【０２１７】
様々な実施形態において、追加の改変型シグナル伝達物質は、例えば、野生型シグナル伝達物質と比べて（非限定的な例として、未変異のコンセンサスインターフェロンとの比較を含む）、該シグナル伝達物質の内在性活性を約７５％、約７０％、約６０％、約５０％、約４０％、約３０％、約２５％、約２０％、約１０％、約５％、約３％、又は約１％まで低下させる１つ又は複数の変異を含む。
【０２１８】
様々な実施形態において、追加の改変型シグナル伝達物質は、シグナル伝達物質が本明細書に記載されるようなサイトカイン、増殖因子、及びホルモンのうちのいずれか１つの受容体に対する親和性及び／又は活性を低下させることになる、１つ又は複数の変異を含む。
【０２１９】
いくつかの実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質は、該シグナル伝達物質の受容体に対する親和性を低下させることになる１つ又は複数の変異を含み、この親和性は標的化部分の受容体に対する結合親和性よりも低い。いくつかの実施形態では、この結合親和性の差は、同じ細胞でのシグナル伝達物質／受容体の結合親和性と標的化部分／受容体の結合親和性との間の差である。いくつかの実施形態では、この結合親和性の差によって、シグナル伝達物質、例えば変異型シグナル伝達物質は、オンターゲット作用を局在化させることができ、且つ、野生型シグナル伝達物質に見られる副作用の根底にあるオフターゲット作用を最小限にすることができる。いくつかの実施形態では、この結合親和性は、少なくとも約２倍低く、少なくとも約５倍低く、少なくとも約１０倍低く、少なくとも約１５倍低く、少なくとも約２５倍低く、少なくとも約５０倍低く、少なくとも約１００倍低く、又は少なくとも約１５０倍低い。
【０２２０】
受容体結合活性は、当技術分野において知られている方法を用いて測定可能である。例えば、親和性及び／又は結合活性は、結合データのスキャッチャードプロット分析及びコンピューターフィッティング（例えばＳｃａｔｃｈａｒｄ，１９４９）によって、又はＢｒｅｃｈｔら（１９９３）によって記載されるようなフロースルー条件下での反射型干渉分光法によって評価可能であり、それらの文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０２２１】
本明細書に記載される野生型シグナル伝達物質のアミノ酸配列は、当技術分野においてよく知られている。よって、様々な実施形態において、追加の改変型シグナル伝達物質は、本明細書に記載されるシグナル伝達物質の公知の野生型アミノ酸配列と、少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、又は少なくとも約９９％の配列同一性（例えば、約６０％、約６１％、約６２％、約６３％、約６４％、約６５％、約６６％、約６７％、約６８％、約６９％、約７０％、約７１％、約７２％、約７３％、約７４％、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、又は約９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含む。
【０２２２】
様々な実施形態において、追加の改変型シグナル伝達物質は、本明細書に開示される配列のうちのいずれかと、少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、又は少なくとも約９９％の配列同一性（例えば、約６０％、約６１％、約６２％、約６３％、約６４％、約６５％、約６６％、約６７％、約６８％、約６９％、約７０％、約７１％、約７２％、約７３％、約７４％、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、又は約９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含む。
【０２２３】
様々な実施形態において、追加の改変型シグナル伝達物質は、１つ又は複数のアミノ酸変異を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、前記１つ又は複数のアミノ酸変異は、独立して、置換、挿入、欠失、及び短縮化から選択され得る。
【０２２４】
いくつかの実施形態では、アミノ酸変異はアミノ酸置換であり、該アミノ酸変異には本明細書に記載されるような保存的置換及び／又は非保存的置換が含まれ得る。
【０２２５】
本明細書に記載されるように、追加の改変型シグナル伝達物質は、１種類又は複数種類の受容体における親和性及び／又は活性に影響する変異を有する。様々な実施形態において、治療受容体、例えば所望の治療効果（例えばアゴニズム又はアンタゴニズム）を介在する受容体において親和性及び／又は活性が低下している。様々な実施形態において。改変型シグナル伝達物質は、受容体、例えば（無差別的な（promiscuity）結合などの結果として）所望の治療効果を介在しない受容体において、親和性及び／又は活性を実質的に低下させるか又は除去する変異を有する。いずれかの改変型シグナル伝達物質、例えば本明細書に記載されるようなサイトカイン、増殖因子、及びホルモンのうちの１つの受容体が当技術分野において知られている。
【０２２６】
受容体において親和性及び／又は活性の低下（例えばアゴニスト活性）の原因となる変異の例は、各々の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる、国際公開第２０１３／１０７７９１号（例えばインターフェロンに関して）、国際公開第２０１５／００７５４２号（例えばインターロイキンに関して）、及び国際公開第２０１５／００７９０３号（例えばＴＮＦに関して）に見出される。治療受容体において親和性及び／又は活性（例えばアンタゴニスト活性）の低下をもたらす変異の例は、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号に見出される。
【０２２７】
いくつかの実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質は、Ｉ型サイトカイン受容体、ＩＩ型サイトカイン受容体、ケモカイン受容体、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリー内の受容体、ＴＧＦ−β受容体、免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリー内の受容体、及び／又はチロシンキナーゼスーパーファミリー内の受容体に対する該シグナル伝達物質の親和性及び／又は活性が低下させる１つ又は複数の変異を含む。
【０２２８】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質の受容体はＩ型サイトカイン受容体である。Ｉ型サイトカイン受容体は当技術分野において知られており、これらに限定されないが、ＩＬ２（β−サブユニット）、ＩＬ３、ＩＬ４、ＩＬ５、ＩＬ６、ＩＬ７、ＩＬ９、ＩＬ１１、ＩＬ１２、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＬＩＦ、及びＣＮＴＦの受容体が挙げられ、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、プロラクチン、及び成長ホルモンの受容体も挙げられる。Ｉ型サイトカイン受容体の例としては、ＧＭ−ＣＳＦ受容体、Ｇ−ＣＳＦ受容体、ＬＩＦ受容体、ＣＮＴＦ受容体、ＴＰＯ受容体、及びＩ型ＩＬ受容体が挙げられるがこれらに限定されない。
【０２２９】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質の受容体はＩＩ型サイトカイン受容体である。ＩＩ型サイトカイン受容体は異種構造のサブユニットから構成される多量体受容体であり、主にインターフェロンの受容体である。このファミリーの受容体としては、インターフェロン−α、インターフェロン−β、及びインターフェロン−γ、ＩＬ１０、ＩＬ２２、及び組織因子の受容体が挙げられるがこれらに限定されない。ＩＩ型サイトカイン受容体の例としては、ＩＦＮ−α受容体（例えば、ＩＦＮＡＲ１及びＩＦＮＡＲ２）、ＩＦＮ−β受容体、ＩＦＮ−γ受容体（例えば、ＩＦＮＧＲ１及びＩＦＮＧＲ２）、及びＩＩ型ＩＬ受容体が挙げられるがこれらに限定されない。
【０２３０】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質の受容体はＧタンパク質共役受容体である。ケモカイン受容体は７回膜貫通構造を有するＧタンパク質共役受容体であり、シグナル伝達のためにＧタンパク質に共役している。ケモカイン受容体としては、ＣＣケモカイン受容体、ＣＸＣケモカイン受容体、ＣＸ３Ｃケモカイン受容体、及びＸＣケモカイン受容体（ＸＣＲ１）が挙げられるがこれらに限定されない。例示的なケモカイン受容体としては、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ３Ｂ、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＳＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＸＣＲ１、及びＣＸ３ＣＲ１が挙げられるがこれらに限定されない。
【０２３１】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質の受容体はＴＮＦＲファミリーメンバーである。腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）ファミリーメンバーは、伸長分子を形成するＣＸＸＣＸＸＣコアモチーフの周囲にある３つのジスルフィド結合から形成されるシステインリッチドメイン（ＣＲＤ）を共通して有する。例示的な腫瘍壊死因子受容体ファミリーメンバーとしては、ＣＤ１２０ａ（ＴＮＦＲＳＦ１Ａ）、ＣＤ１２０ｂ（ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ）、リンフォトキシンβ受容体（ＬＴＢＲ、ＴＮＦＲＳＦ３）、ＣＤ１３４（ＴＮＦＲＳＦ４）、ＣＤ４０（ＣＤ４０、ＴＮＦＲＳＦ５）、ＦＡＳ（ＦＡＳ、ＴＮＦＲＳＦ６）、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ（ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ）、ＣＤ２７（ＣＤ２７、ＴＮＦＲＳＦ７）、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ１３７（ＴＮＦＲＳＦ９）、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ（ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ）、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、（ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ）、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ（ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ）、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ（ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ）、ＲＡＮＫ（ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ）、オステオプロテゲリン（ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ）、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ（ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ）、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ（ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ）、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ（ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ）、ＴＮＦＲＳＦ１４（ＴＮＦＲＳＦ１４）、神経成長因子受容体（ＮＧＦＲ、ＴＮＦＲＳＦ１６）、ＴＮＦＲＳＦ１７（ＴＮＦＲＳＦ１７）、ＴＮＦＲＳＦ１８（ＴＮＦＲＳＦ１８）、ＴＮＦＲＳＦ１９（ＴＮＦＲＳＦ１９）、ＴＮＦＲＳＦ２１（ＴＮＦＲＳＦ２１）、及びＴＮＦＲＳＦ２５（ＴＮＦＲＳＦ２５）が挙げられる。
【０２３２】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質の受容体はＴＧＦ−β受容体である。ＴＧＦ−β受容体は１回貫通型セリン／トレオニンキナーゼ受容体である。ＴＧＦ−β受容体としてはＴＧＦＢＲ１、ＴＧＦＢＲ２、及びＴＧＦＢＲ３が挙げられるがこれらに限定されない。
【０２３３】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質の受容体はＩｇスーパーファミリー受容体である。免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーの受容体は免疫グロブリンとの構造的相同性を共通して有する。Ｉｇスーパーファミリーの受容体としては、インターロイキン−１受容体、ＣＳＦ−１Ｒ、ＰＤＧＦＲ（例えばＰＤＧＦＲＡ及びＰＤＧＦＲＢ）、及びＳＣＦＲが挙げられるがこれらに限定されない。
【０２３４】
様々な実施形態において、追加のシグナル伝達物質の受容体はチロシンキナーゼスーパーファミリー受容体である。チロシンキナーゼスーパーファミリーの受容体は当技術分野においてよく知られている。約５８種類の公知の受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）が存在し、それらは２０種類のサブファミリーにグループ分けされる。チロシンキナーゼスーパーファミリーの受容体としては、ＦＧＦ受容体及びそれらの様々なアイソフォーム、例えばＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、及びＦＧＦＲ５が挙げられるがこれらに限定されない。
【０２３５】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はインターフェロンαである。前記実施形態では、改変型ＩＦＮ−α物質は、ＩＦＮ−α／β受容体（ＩＦＮＡＲ）、すなわち、ＩＦＮＡＲ１鎖及び／又はＩＦＮＡＲ２鎖に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型ＩＦＮ−α物質は、ＩＦＮ−α／β受容体（ＩＦＮＡＲ）、すなわち、ＩＦＮＡＲ１鎖及び／又はＩＦＮＡＲ２鎖に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２３６】
変異体型のインターフェロンαが当業者に知られている。例示的な実施形態では、改変型シグナル伝達物質は配列番号２３３のアミノ酸配列を有するＩＦＮ−α２ａ対立遺伝子型である。
【０２３７】
例示的な実施形態では、改変型シグナル伝達物質は（ＩＦＮ−α２ａとアミノ酸位置２３の位置において異なる）配列番号２３４のアミノ酸配列を有するＩＦＮ−α２ｂ対立遺伝子型である。
【０２３８】
いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−α２変異体（ＩＦＮ−α２ａ又はＩＦＮ−α２ｂ）では１４４〜１５４番目、例えばアミノ酸の１４８番目、１４９番目、及び／又は１５３番目において、１つ又は複数のアミノ酸に変異が導入されている。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−α２変異体は、Ｌ１５３Ａ、Ｒ１４９Ａ、及びＭ１４８Ａから選択される１つ又は複数の変異を含む。そのような変異体は、例えば、国際公開第２０１３／１０７７９１号及びＰｉｅｈｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ．、（２０００）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ、２７５：ｐｐ．４０４２５−３３に記載されており、それらの文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０２３９】
いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−α２変異体は、ＩＦＮＡＲ１に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−α２変異体は、国際公開第２０１０／０３０６７１号に記載されるようなＦ６４Ａ、Ｎ６５Ａ、Ｔ６９Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、及びＹ８９Ａから選択される１つ又は複数の変異を含み、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０２４０】
いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−α２変異体は、国際公開第２００８／１２４０８６号に記載されるようなＫ１３３Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ｒ１４９Ａ、及びＬ１５３Ａから選択される１つ又は複数の変異を含み、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０２４１】
いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−α２変異体は、国際公開第２０１５／００７５２０号及び国際公開第２０１０／０３０６７１号に記載されるようなＲ１２０Ｅ及びＲ１２０Ｅ／Ｋ１２１Ｅから選択される１つ又は複数の変異を含み、それらの文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる。前記実施形態では、ＩＦＮ−α２変異体は野生型ＩＦＮ−α２活性をアンタゴナイズする。前記実施形態では、変異ＩＦＮ−α２は、ＩＦＮＡＲ１に対する親和性及び／又は活性が低下している一方でＩＦＮＲ２の親和性及び／又は活性は維持されている。
【０２４２】
いくつかの実施形態では、ヒトＩＦＮ−α２変異体は、（１）理論に捉われることを望むものではないが、アンタゴニスト作用を引き起こすＲ１２０Ｅ及びＲ１２０Ｅ／Ｋ１２１Ｅから選択される１つ又は複数の変異、及び（２）理論に捉われることを望むものではないが、例えば、ＩＦＮＡＲ２において、作用を減弱させるＫ１３３Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ｒ１４９Ａ、及びＬ１５３Ａから選択される１つ又は複数の変異を含む。ある実施形態では、ヒトＩＦＮ−α２変異体はＲ１２０Ｅ及びＬ１５３Ａを含む。
【０２４３】
いくつかの実施形態では、ヒトＩＦＮ−α２変異体は、開示の全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１３／０５９８８５号に開示されるような、Ｌ１５Ａ、Ａ１９Ｗ、Ｒ２２Ａ、Ｒ２３Ａ、Ｌ２６Ａ、Ｆ２７Ａ、Ｌ３０Ａ、Ｌ３０Ｖ、Ｋ３１Ａ、Ｄ３２Ａ、Ｒ３３Ｋ、Ｒ３３Ａ、Ｒ３３Ｑ、Ｈ３４Ａ、Ｄ３５Ａ、Ｑ４０Ａ、Ｄ１１４Ｒ、Ｌ１１７Ａ、Ｒ１２０Ａ、Ｒ１２５Ａ、Ｋ１３４Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ａ１４５Ｇ、Ａ１４５Ｍ、Ｍ１４８Ａ、Ｒ１４９Ａ、Ｓ１５２Ａ、Ｌ１５３Ａ、及びＮ１５６Ａから選択される１つ又は複数の変異を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＦＮ−α２変異体は、国際公開第２０１３／０５９８８５号に開示されるような、Ｈ５７Ｙ、Ｅ５８Ｎ、Ｑ６１Ｓ、及び／又はＬ３０Ａの変異を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＦＮ−α２変異体は、国際公開第２０１３／０５９８８５号に開示されるような、Ｈ５７Ｙ、Ｅ５８Ｎ、Ｑ６１Ｓ、及び／又はＲ３３Ａの変異を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＦＮ−α２変異体は、国際公開第２０１３／０５９８８５号に開示されるような、Ｈ５７Ｙ、Ｅ５８Ｎ、Ｑ６１Ｓ、及び／又はＭ１４８Ａの変異を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＦＮ−α２変異体は、国際公開第２０１３／０５９８８５号に開示されるような、Ｈ５７Ｙ、Ｅ５８Ｎ、Ｑ６１Ｓ、及び／又はＬ１５３Ａの変異を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＦＮ−α２変異体は、国際公開第２０１３／０５９８８５号に開示されるような、Ｎ６５Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、及び／又はＹ８９Ａの変異を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＦＮ−α２変異体は、国際公開第２０１３／０５９８８５号に開示されるような、Ｎ６５Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、Ｙ８９Ａ、及び／又はＤ１１４Ａの変異を含む。
【０２４４】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はインターフェロンβである。前記実施形態では、改変型インターフェロンβ物質もまた、ＩＦＮ−α／β受容体（ＩＦＮＡＲ）、すなわち、ＩＦＮＡＲ１鎖及び／又はＩＦＮＡＲ２鎖に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型インターフェロンβ物質は、ＩＦＮ−α／β受容体（ＩＦＮＡＲ）、すなわち、ＩＦＮＡＲ１鎖及び／又はＩＦＮＡＲ２鎖に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２４５】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はインターフェロンγである。前記実施形態では、改変型インターフェロンγ物質は、インターフェロン−γ受容体（ＩＦＮＧＲ）、すなわち、ＩＦＮＧＲ１鎖及びＩＦＮＧＲ２鎖に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型インターフェロンγ物質は、インターフェロン−γ受容体（ＩＦＮＧＲ）、すなわち、ＩＦＮＧＲ１鎖及びＩＦＮＧＲ２鎖に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２４６】
いくつかの実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質は血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）である。ＶＥＧＦは、生理的血管新生だけでなく病理的血管新生においても主要な役割を果たし、血管透過性を制御し、且つ、ＶＥＧＦ受容体発現細胞に対して増殖因子として作用可能な強力な増殖因子である。特に、その他の機能としては、マクロファージ系統細胞及び内皮細胞における細胞遊走の刺激が挙げられる。数種類のＶＥＧＦファミリー増殖因子のメンバー、及び少なくとも３種類の受容体（ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、及びＶＥＧＦＲ−３）が存在する。ＶＥＧＦファミリーのメンバーは２種類以上のＶＥＧＦＲに結合し、活性化することができる。例えば、ＶＥＧＦ−ＡはＶＥＧＦＲ−１及びＶＥＧＦＲ−２に結合し、一方でＶＥＧＦ−ＣはＶＥＧＦＲ−２及びＶＥＧＦＲ−３に結合可能である。ＶＥＧＦＲ−１及びＶＥＧＦＲ−２の活性化は血管新生を制御し、一方でＶＥＧＦＲ−３の活性化はリンパ脈管新生に関連する。主な血管新生促進シグナルはＶＥＧＦＲ−２の活性化から生じる。ＶＥＧＦＲ−１の活性化は血管新生における負の役割と関連する可能性があると報告されている。ＶＥＧＦＲ−１シグナルの伝達は（骨における前転移ニッチの形成に寄与する）骨髄由来ＶＥＧＦＲ−１陽性細胞を介したｉｎ  ｖｉｖｏでの腫瘍成長にとって重要である。主に血管新生に依存する様々なヒト腫瘍の治療に使用するためのＶＥＧＦ−Ａ指向性／中和治療抗体に基づくいくつかの治療法が開発されている。しかしながらこれらの治療法には副作用が無いわけではない。これらの抗体が一般的な非細胞／組織特異的ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ相互作用阻害剤として作用することを考慮すると、このことは驚くべきことではないかもしれない。したがって、特定の標的細胞（例えば、腫瘍血管内皮細胞）にＶＥＧＦ（例えばＶＥＧＦ−Ａ）／ＶＥＧＦＲ−２阻害を限定することが好ましいことになる。
【０２４７】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦは、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦ−Ｂ、ＶＥＦＧ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ、又はＶＥＧＦ−Ｅ、並びにＶＥＧＦ１２１、ＶＥＧＦ１２１ｂ、ＶＥＧＦ１４５、ＶＥＧＦ１６５、ＶＥＧＦ１６５ｂ、ＶＥＧＦ１８９、及びＶＥＧＦ２０６など、ＶＥＧＦ−Ａの様々なアイソフォームを含むそれらのアイソフォームである。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）及び／又はＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１）に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）及び／又はＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１）に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１）に対する親和性及び／又は活性が低下しており、及び／又はＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。前記実施形態は、例えば、（理論に捉われることを望むものではないが、内皮細胞機能及び血管新生に対するＶＥＧＦＲ−２の効果を介する）創傷治癒方法又は虚血関連疾患の治療に使用される。様々な実施形態において、がん及び炎症促進活性と関連があるＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）への結合が回避される。様々な実施形態において、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）はデコイ受容体として作用し、したがってこの受容体における親和性が実質的に低下するか、又は除去され、治療薬の隔離が回避される。ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されており、及び／又はＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１）に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦはＶＥＧＦ−Ｃ又はＶＥＧＦ−Ｄである。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−３に対する親和性及び／又は活性が低下している。あるいは、改変型シグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−３に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２４８】
血管新生促進治療法はまた、様々な疾患（例えば虚血性心臓疾患、出血など）においても重要であり、それらの治療法にはＶＥＧＦに基づく治療法が含まれる。ＶＥＧＦＲ−２の活性化は血管新生促進性である（内皮細胞に対して作用する）。ＶＥＦＧＲ−１の活性化は炎症細胞（例えばマクロファージを含む）の遊走の刺激を引き起こし、炎症関連性高度血管透過性（hypervascular permeability）につながる可能性がある。ＶＥＦＧＲ−１の活性化は骨髄関連腫瘍ニッチ形成も促進し得る。したがって、この場合ではＶＥＧＦＲ−２活性化について選択的なＶＥＧＦに基づく治療法が望ましいことになる。さらに、細胞特異的標的化、例えば内皮細胞に対する細胞特異的標的化が望ましいことになる。
【０２４９】
いくつかの実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−２に対する親和性及び／又は活性（例えばアンタゴニスト活性）が低下しており、及び／又はＶＥＧＦＲ−１に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。腫瘍内皮細胞マーカー（例えばＰＳＭＡ及びその他）に結合する標的化部分を介して腫瘍血管内皮細胞に標的化される場合、そのようなコンストラクトは、特にこのようなマーカーについて陽性の細胞上で、ＶＥＧＦＲ−２活性化を阻害するが、一方で標的細胞への途中及び（活性が無い場合に）標的細胞上ではＶＥＧＦＲ−１を活性化しないので、炎症応答の誘導などが排除される。これにより、ＶＥＧＦ−Ａ中和治療法と比較して、より選択的で安全な多くの種類の腫瘍に対する血管新生抑制治療法が得られることになる。
【０２５０】
いくつかの実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−２に対する親和性及び／又は活性が低下しており（例えばアゴニスト活性）、及び／又はＶＥＧＦＲ−１に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。血管内皮への標的化を介して、いくつかの実施形態では、そのようなコンストラクトはＶＥＧＦＲ−１関連炎症応答誘導を引き起こさずに血管新生を促進する。したがって、そのようなコンストラクトは、ＶＥＧＦＲ−２及びＶＥＧＲ−１の全身性活性化が引き起こす副作用のリスクが実質的に低下した標的化された血管新生誘導効果を有することになる。
【０２５１】
例示的な実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＶＥＧＦ１６５であり、配列番号２３５のアミノ酸配列を有する。
【０２５２】
別の例示的な実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＶＥＧＦ１６５ｂであり、配列番号２３６のアミノ酸配列を有する。
【０２５３】
これらの実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＩ８３番目のアミノ酸に変異（例えば、Ｉ８３番目の置換変異、例えばＩ８３Ｋ、Ｉ８３Ｒ、又はＩ８３Ｈ）を有する。理論に捉われることを望むものではないが、そのような変異により受容体結合親和性の低下が引き起こされる場合があると考えられている。例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる米国特許第９，０７８，８６０号を参照されたい。
【０２５４】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＴＮＦ−αである。ＴＮＦは、細胞増殖制御、分化、アポトーシス、腫瘍形成、ウイルス複製、自己免疫、免疫細胞の機能及び輸送、炎症、並びに敗血症ショックを含む、多種多様な機能を有する多面的サイトカインであり、標的細胞上の２種類の別個の膜受容体、すなわちＴＮＦＲ１（ｐ５５）及びＴＮＦＲ２（ｐ７５）に結合する。ＴＮＦＲ１が非常に広範な発現パターンを示す一方でＴＮＦＲ２はリンパ球、Ｔｒｅｇ、内皮細胞、ある種の神経細胞、ミクログリア、心筋細胞、及び間葉系幹細胞のある特定の集団において優先的に発現する。幾らかの重複もあるものの、受容体活性化に応答して、非常に異なる生物学的経路が活性化される。原則として、理論に捉われることを望むものではないが、ＴＮＦＲ１シグナル伝達はアポトーシス（細胞死）の誘導に関連し、ＴＮＦＲ２シグナル伝達は細胞生存シグナルの活性化（例えばＮＦｋＢ経路の活性化）に関連する。ＴＮＦの投与は全身的には有毒であり、これは主としてＴＮＦＲ１の関与に起因する。しかしながら、ＴＮＦＲ２の活性化も広範囲の活性に関連しており、ＴＮＦＲ１の場合のように、ＴＮＦに基づく治療法の開発の観点から、ＴＮＦ標的化及びＴＮＦ活性の制御が重要であることに留意されたい。
【０２５５】
いくつかの実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質は、ＴＮＦＲ１及び／又はＴＮＦＲ２に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＴＮＦＲ１及び／又はＴＮＦＲ２に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。ＴＮＦＲ１が大半の組織において発現し、細胞死のシグナル伝達に関与する一方で対照的にＴＮＦＲ２は細胞生存シグナル伝達に関与する。よって、がんの治療方法に関する実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＴＮＦＲ１に対する親和性及び／又は活性が低下しており、及び／又はＴＮＦＲ２に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。これらの実施形態では、キメラタンパク質はアポトーシスが望まれる細胞、例えば腫瘍細胞又は腫瘍血管内皮細胞に標的化され得る。例えば神経変性障害の治療のための神経変性における細胞生存の促進方法に関する実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＴＮＦＲ２に対する親和性及び／又は活性が低下しており、及び／又はＴＮＦＲ１に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。換言すると、本開示のキメラタンパク質は、いくつかの実施形態では、細胞死シグナル又は生存シグナルのどちらかを好むことを可能にする改変型ＴＮＦ−α物質を含む。
【０２５６】
いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＴＮＦＲ１に対する親和性及び／又は活性が低下しており、及び／又はＴＮＦＲ２に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている改変型ＴＮＦを有する。そのようなキメラは、いくつかの実施形態では、野生型ＴＮＦ及び／又はＴＮＦＲ１に対する親和性及び／又は活性の低下の原因となる変異のみを有するキメラと比較して、より強力なアポトーシス誘導因子である。そのようなキメラは、いくつかの実施形態では、（例えば、がんの治療における）腫瘍細胞死又は腫瘍血管内皮細胞死の誘導に使用される。また、いくつかの実施形態では、これらのキメラは、例えばＴＮＦＲ２などを介したＴｒｅｇ細胞の活性化を回避又は抑制することで、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＴＮＦＲ１介在性抗腫瘍活性をさらに補助する。
【０２５７】
いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＴＮＦＲ２に対する親和性及び／又は活性が低下しており、及び／又はＴＮＦＲ１に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている改変型ＴＮＦを有する。いくつかの実施形態では、そのようなキメラはある種類の細胞の細胞生存のより強力な活性化因子であり、それは、限定されないが、神経新生の刺激を含む様々な疾患背景における特定の治療対象であり得る。さらに、そのようなＴＮＦＲ２をより好むキメラは、自己免疫疾患（例えば、クローン病、糖尿病、ＭＳ、大腸炎など、及び本明細書に記載される他の多くの疾患）の治療にも有用である。いくつかの実施形態では、キメラは自己反応性Ｔ細胞を標的とする。いくつかの実施形態では、キメラはＴｒｅｇ細胞の活性化と細胞傷害性Ｔ細胞の間接的抑制を促進する。
【０２５８】
いくつかの実施形態では、キメラ（例えば、ＴＮＦＲ２に対する親和性及び／又は活性が低下しており、及び／又はＴＮＦＲ１に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去された改変型ＴＮＦ）は、例えばＴＮＦＲ２の活性化及び／又はＴＮＦＲ１の回避によって、自己反応性Ｔ細胞の細胞死を引き起こす。理論に捉われることを望むものではないが、これらの自己反応性Ｔ細胞は、例えばＮＦｋＢ経路の活性／シグナル伝達の変化によって、それらの細胞のアポトーシス／細胞生存シグナルを変化させる。
【０２５９】
いくつかの実施形態では、ＴＮＦＲ２に基づいたキメラは、特に、様々な自己免疫疾患、心疾患、脱髄性神経変性障害、及び感染症を含む疾患において、その他の治療用途を有する。
【０２６０】
ある実施形態では、野生型ＴＮＦ−αは配列番号２３７のアミノ酸配列を有する。
【０２６１】
前記実施形態では、改変型ＴＮＦ−α物質は、２９番目、３１番目、３２番目、８４番目、８５番目、８６番目、８７番目、８８番目、８９番目、１４５番目、１４６番目、及び１４７番目のうちの１つ又は複数のアミノ酸位置に受容体結合親和性が低下した改変型ＴＮＦ−αを産生する変異を有する。例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる米国特許第７，９９３，６３６号を参照されたい。
【０２６２】
いくつかの実施形態では、改変型ヒトＴＮＦ−α部分は、例えば内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７９０３号に記載されるように、Ｒ３２、Ｎ３４、Ｑ６７、Ｈ７３、Ｌ７５、Ｔ７７、Ｓ８６、Ｙ８７、Ｖ９１、Ｉ９７、Ｔ１０５、Ｐ１０６、Ａ１０９、Ｐ１１３、Ｙ１１５、Ｅ１２７、Ｎ１３７、Ｄ１４３、及びＡ１４５のうちの１つ又は複数のアミノ酸位置に変異を有する（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＢＡＧ７０３０６、更新番号ＢＡＧ７０３０６．１、ＧＩ：１９７６９２６８５のヒトＴＮＦ配列に基づく付番）。いくつかの実施形態では、改変型ヒトＴＮＦ−α部分は、Ｒ３２Ｇ、Ｎ３４Ｇ、Ｑ６７Ｇ、Ｈ７３Ｇ、Ｌ７５Ｇ、Ｌ７５Ａ、Ｌ７５Ｓ、Ｔ７７Ａ、Ｓ８６Ｇ、Ｙ８７Ｑ、Ｙ８７Ｌ、Ｙ８７Ａ、Ｙ８７Ｆ、Ｖ９１Ｇ、Ｖ９１Ａ、Ｉ９７Ａ、Ｉ９７Ｑ、Ｉ９７Ｓ、Ｔ１０５Ｇ、Ｐ１０６Ｇ、Ａ１０９Ｙ、Ｐ１１３Ｇ、Ｙ１１５Ｇ、Ｙ１１５Ａ、Ｅ１２７Ｇ、Ｎ１３７Ｇ、Ｄ１４３Ｎ、Ａ１４５Ｇ、及びＡ１４５Ｔから選択される置換変異を有する。ある実施形態では、ヒトＴＮＦ−α部分は、Ｙ８７Ｑ、Ｙ８７Ｌ、Ｙ８７Ａ、及びＹ８７Ｆから選択される変異を有する。別の実施形態では、ヒトＴＮＦ−α部分は、Ｉ９７Ａ、Ｉ９７Ｑ、及びＩ９７Ｓから選択される変異を有する。その他の実施形態では、ヒトＴＮＦ−α部分はＹ１１５Ａ及びＹ１１５Ｇから選択される変異を有する。
【０２６３】
いくつかの実施形態では、改変型ＴＮＦ−α物質は、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２００８／１２４０８６号に記載されるような、Ｎ３９Ｙ、Ｓ１４７Ｙ、及びＹ８７Ｈから選択される１つ又は複数の変異を有する。
【０２６４】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＴＮＦ−βである。ＴＮＦ−βはホモ二量体、又はＬＴ−β（ＬＴ−α１β２）とヘテロ二量体を形成することができる。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＴＮＦＲ１及び／又はＴＮＦＲ２及び／又はヘルペスウイルス侵入メディエーター（ＨＥＶＭ）及び／又はＬＴ−βＲに対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２６５】
ある実施形態では、野生型ＴＮＦ−βは配列番号２３８のアミノ酸配列を有する。
【０２６６】
前記実施形態では、改変型ＴＮＦ−β物質は、ＴＮＦＲ２に対する受容体結合親和性が低下した改変型ＴＮＦ−βを産生する変異を１０６〜１１３番目の位置の１つ又は複数のアミノ酸に含み得る。ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、１０６〜１１３番目のアミノ酸位置に１つ又は複数の置換変異を有する。例示的な実施形態では、それらの置換変異は、Ｑ１０７Ｅ、Ｑ１０７Ｄ、Ｓ１０６Ｅ、Ｓ１０６Ｄ、Ｑ１０７Ｒ、Ｑ１０７Ｎ、Ｑ１０７Ｅ／Ｓ１０６Ｅ、Ｑ１０７Ｅ／Ｓ１０６Ｄ、Ｑ１０７Ｄ／Ｓ１０６Ｅ、及びＱ１０７Ｄ／Ｓ１０６Ｄから選択される。別の実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、１０６〜１１３番目の位置に約１個〜約３個のアミノ酸の挿入を有する。
【０２６７】
いくつかの実施形態では、追加の改変型作用物質は、その文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７９０３号に記載されるような単鎖三量体型であり得るＴＮＦファミリーメンバー（例えばＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β）である。
【０２６８】
いくつかの実施形態では、改変型作用物質は、ＴＮＦＲ１において親和性及び／又は活性が低下している、すなわちアンタゴニスト活性（例えば、天然のアンタゴニスト活性、又は１つ若しくは複数の変異の結果であるアンタゴニスト活性であり、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号を参照されたい）を有するＴＮＦファミリーメンバー（例えばＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β）である。これらの実施形態では、改変型作用物質は、ＴＮＦＲ２に対して親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されていてもよいＴＮＦファミリーメンバー（例えばＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β）である。いくつかの実施形態では、改変型作用物質は、ＴＮＦＲ２において親和性及び／又は活性が低下している、すなわちアンタゴニスト活性（例えば、天然のアンタゴニスト活性、又は１つ若しくは複数の変異の結果であるアンタゴニスト活性であり、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号を参照されたい）を有するＴＮＦファミリーメンバー（例えばＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β）である。これらの実施形態では、改変型作用物質は、ＴＮＦＲ１に対して親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されていてもよいＴＮＦファミリーメンバー（例えばＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β）である。前記実施形態のコンストラクトは、例えば、細胞特異的にＴＮＦ応答を減弱させる方法において使用される。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト的ＴＮＦファミリーメンバー（例えばＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β）は国際公開第２０１５／００７９０３号に記載されるような単鎖三量体型である。
【０２６９】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＴＲＡＩＬである。いくつかの実施形態では、改変型ＴＲＡＩＬ物質は、ＤＲ４（ＴＲＡＩＬ−ＲＩ）、及び／又はＤＲ５（ＴＲＡＩＬ−ＲＩＩ）、及び／又はＤｃＲ１、及び／又はＤｃＲ２に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型ＴＲＡＩＬ物質は、ＤＲ４（ＴＲＡＩＬ−ＲＩ）、及び／又はＤＲ５（ＴＲＡＩＬ−ＲＩＩ）、及び／又はＤｃＲ１、及び／又はＤｃＲ２に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２７０】
ある実施形態では、野生型ＴＲＡＩＬは配列番号２３９のアミノ酸配列を有する。
【０２７１】
前記実施形態では、改変型ＴＲＡＩＬ物質は、Ｔ１２７〜Ｒ１３２、Ｅ１４４〜Ｒ１４９、Ｅ１５５〜Ｈ１６１、Ｙ１８９〜Ｙ２０９、Ｔ２１４〜１２２０、Ｋ２２４〜Ａ２２６、Ｗ２３１、Ｅ２３６〜Ｌ２３９、Ｅ２４９〜Ｋ２５１、Ｔ２６１〜Ｈ２６４、及びＨ２７０〜Ｅ２７１のアミノ酸位置に変異を有し得る（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００３８０１、更新番号１０ＮＰ＿００３８０１．１、ＧＩ：４５０７５９３のヒト配列に基づく付番。上記参照）。
【０２７２】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＴＧＦαである。前記実施形態では、改変型ＴＧＦα物質は、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型ＴＧＦα物質は、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２７３】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＴＧＦβである。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＴＧＦＢＲ１及び／又はＴＧＦＢＲ２に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＴＧＦＢＲ１及び／又はＴＧＦＢＲ２に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＴＧＦＢＲ３に対する親和性及び／又は活性が低下しているか、実質的に低下しているか、又は除去されていてもよく、ＴＧＦＢＲ３は、理論に捉われることを望むものではないが、ＴＧＦ−β受容体のリガンドを貯蔵する作用を有する場合がある。いくつかの実施形態では、ＴＧＦβはＴＧＦＢＲ２よりもＴＧＦＢＲ１を好んでもよく、ＴＧＦＢＲ１よりもＴＧＦＢＲ２を好んでもよい。同様に、理論に捉われることを望むものではないが、ＬＡＰはＴＧＦ−β受容体のリガンドを貯蔵する作用を有する場合がある。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＴＧＦＢＲ１及び／又はＴＧＦＢＲ２に対する親和性及び／又は活性が低下しており、及び／又は潜在関連ペプチド（ＬＡＰ）に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。いくつかの実施形態では、そのようなキメラは、カムラチ・エンゲルマン病、又は不適切なＴＧＦβシグナル伝達と関連する他の疾患に使用される。
【０２７４】
いくつかの実施形態では、追加の改変型作用物質は、ＴＧＦＢＲ１、ＴＧＦＢＲ２、ＴＧＦＢＲ３のうちのうちの１つ又は複数において親和性及び／又は活性が低下している、すなわちアンタゴニスト活性（例えば、天然のアンタゴニスト活性、又は１つ若しくは複数の変異の結果であるアンタゴニスト活性であり、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号を参照されたい）を有するＴＧＦファミリーメンバー（例えばＴＧＦα、ＴＧＦβ）である。これらの実施形態では、改変型作用物質は、ＴＧＦＢＲ１、ＴＧＦＢＲ２、ＴＧＦＢＲ３うちの１つ又は複数において親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されていてもよいＴＧＦファミリーメンバー（例えばＴＧＦα、ＴＧＦβ）である。
【０２７５】
いくつかの実施形態では、追加の改変型作用物質は、ＴＧＦＢＲ１及び／又はＴＧＦＢＲ２において親和性及び／又は活性が低下している、すなわちアンタゴニスト活性（例えば、天然のアンタゴニスト活性、又は１つ若しくは複数の変異の結果であるアンタゴニスト活性であり、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号を参照されたい）を有するＴＧＦファミリーメンバー（例えばＴＧＦα、ＴＧＦβ）である。これらの実施形態では、改変型作用物質は、ＴＧＦＢＲ３において親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されていてもよいＴＧＦファミリーメンバー（例えばＴＧＦα、ＴＧＦβ）である。
【０２７６】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１である。ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１α又はＩＬ−１βである。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−１Ｒ１及び／又はＩＬ−１ＲＡｃＰに対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１Ｒ１及び／又はＩＬ−１ＲＡｃＰに対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１Ｒ２に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１Ｒ２に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。例えば、いくつかの実施形態では、本開示の改変型ＩＬ−１物質はＩＬ−１Ｒ２における相互作用を回避するので、治療薬に対するデコイ（decoy）及び／又はシンク（sink）としてのその機能を実質的に低下させる。
【０２７７】
ある実施形態では、野生型ＩＬ−１βは配列番号２４０のアミノ酸配列を有する。
【０２７８】
ＩＬ１は炎症促進性サイトカインであって、重要な免疫系調節因子である。ＩＬ１はＣＤ４  Ｔ細胞応答の強力な活性化因子であり、Ｔｈ１７細胞の割合を増やし、且つ、ＩＦＮγ産生細胞及びＩＬ−４産生細胞の増殖を増強する。ＩＬ−１はＣＤ８＋Ｔ細胞の強力な調節因子でもあり、抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖、分化、末梢への遊走、及び記憶を増強する。ＩＬ−１受容体はＩＬ−１Ｒ１及びＩＬ−１Ｒ２を含む。ＩＬ−１Ｒ１への結合及びＩＬ−１Ｒ１からのシグナル伝達は、ＩＬ−１がその生物学的（及び病理学的）活性の多くを媒介する機構を構成する。ＩＬ１−Ｒ２はデコイ受容体として機能することが可能であり、それによってＩＬ−１Ｒ１との相互作用及びＩＬ−１Ｒ１からのシグナル伝達に対するＩＬ−１の利用度を低下させる。
【０２７９】
いくつかの実施形態では、改変型ＩＬ−１は、ＩＬ−１Ｒ１に対する親和性及び／又は活性が低下している（例えばアゴニスト活性）。いくつかの実施形態では、改変型ＩＬ−１は、ＩＬ−１Ｒ２に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。前記実施形態では、回復可能なＩＬ−１／ＩＬ−１Ｒ１シグナル伝達、及びＩＬ−Ｒ２における治療用キメラの消失の阻止、及びその結果としての（例えば、野生型、又はＩＬ−Ｒ１に対する減弱変異のみを有するキメラと比べて）必要とされるＩＬ−１用量の減少が見られる。そのようなコンストラクトは、例えば、抗がん反応を開始するために免疫系を刺激することを含むがんの治療方法において使用される。
【０２８０】
いくつかの実施形態では、改変型ＩＬ−１は、ＩＬ−１Ｒ１に対する親和性及び／又は活性が低下している（例えば、アンタゴニスト活性、例えば、天然のアンタゴニスト活性、又は１つ若しくは複数の変異の結果であるアンタゴニスト活性であり、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号を参照されたい）。いくつかの実施形態では、改変型ＩＬ−１は、ＩＬ−１Ｒ２に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。前記実施形態では、回復可能ではないＩＬ−１／ＩＬ−１Ｒ１シグナル伝達、及びＩＬ−Ｒ２における治療用キメラの消失の阻止、及びその結果としての（例えば、野生型、又はＩＬ−Ｒ１に対する減弱変異のみを有するキメラと比べて）必要とされるＩＬ−１用量の減少が見られる。そのようなコンストラクトは、例えば、免疫系を抑制することを含む自己免疫疾患の治療方法において使用される。
【０２８１】
前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、Ｉ型ＩＬ−１Ｒに対する結合親和性が低下し、且つ生物活性が低下した改変型ヒトＩＬ−１βを産生する、５２〜５４番目のアミノ酸の欠失を有する。例えば、文献の内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第１９９４／０００４９１号を参照されたい。いくつかの実施形態では、改変型ヒトＩＬ−１βは、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５４２号及び国際公開第２０１５／００７５３６号に記載されるようなＩＬ−１Ｒへの結合の低下を示す、Ａ１１７Ｇ／Ｐ１１８Ｇ、Ｒ１２０Ｘ、Ｌ１２２Ａ、Ｔ１２５Ｇ／Ｌ１２６Ｇ、Ｒ１２７Ｇ、Ｑ１３０Ｘ、Ｑ１３１Ｇ、Ｋ１３２Ａ、Ｓ１３７Ｇ／Ｑ１３８Ｙ、Ｌ１４５Ｇ、Ｈ１４６Ｘ、Ｌ１４５Ａ／Ｌ１４７Ａ、Ｑ１４８Ｘ、Ｑ１４８Ｇ／Ｑ１５０Ｇ、Ｑ１５０Ｇ／Ｄ１５１Ａ、Ｍ１５２Ｇ、Ｆ１６２Ａ、Ｆ１６２Ａ／Ｑ１６４Ｅ、Ｆ１６６Ａ、Ｑ１６４Ｅ／Ｅ１６７Ｋ、Ｎ１６９Ｇ／Ｄ１７０Ｇ、Ｉ１７２Ａ、Ｖ１７４Ａ、Ｋ２０８Ｅ、Ｋ２０９Ｘ、Ｋ２０９Ａ／Ｋ２１０Ａ、Ｋ２１９Ｘ、Ｅ２２１Ｘ、Ｅ２２１Ｓ／Ｎ２２４Ａ、Ｎ２２４Ｓ／Ｋ２２５Ｓ、Ｅ２４４Ｋ、Ｎ２４５Ｑ（Ｘは任意のアミノ酸の変更、例えば非保存的変更であり得る）から選択される１つ又は複数の置換変異を有する（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿０００５６７、更新番号ＮＰ−０００５６７．１、ＧＩ：１０８３５１４５のヒトＩＬ−１β配列に基づく付番）。いくつかの実施形態では、改変型ヒトＩＬ−１βは、Ｒ１２０Ａ、Ｒ１２０Ｇ、Ｑ１３０Ａ、Ｑ１３０Ｗ、Ｈ１４６Ａ、Ｈ１４６Ｇ、Ｈ１４６Ｅ、Ｈ１４６Ｎ、Ｈ１４６Ｒ、Ｑ１４８Ｅ、Ｑ１４８Ｇ、Ｑ１４８Ｌ、Ｋ２０９Ａ、Ｋ２０９Ｄ、Ｋ２１９Ｓ、Ｋ２１９Ｑ、Ｅ２２１Ｓ、及びＥ２２１Ｋから選択される１つ又は複数の変異を有し得る。ある実施形態では、改変型ヒトＩＬ−１βは、Ｑ１３１Ｇ及びＱ１４８Ｇの変異を含む。ある実施形態では、改変型ヒトＩＬ−１βは、Ｑ１４８Ｇ及びＫ２０８Ｅの変異を含む。ある実施形態では、改変型ヒトＩＬ−１βは、Ｒ１２０Ｇ及びＱ１３１Ｇの変異を含む。ある実施形態では、改変型ヒトＩＬ−１βは、Ｒ１２０Ｇ及びＨ１４６Ｇの変異を含む。ある実施形態では、改変型ヒトＩＬ−１βは、Ｒ１２０Ｇ及びＫ２０８Ｅの変異を含む。ある実施形態では、改変型ヒトＩＬ−１βは、Ｒ１２０Ｇ、Ｆ１６２Ａ、及びＱ１６４Ｅの変異を含む。
【０２８２】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−２である。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−２Ｒα及び／又はＩＬ−２Ｒβ及び／又はＩＬ−２Ｒγに対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−２Ｒβ及び／又はＩＬ−２Ｒγに対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−２Ｒαに対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。前記実施形態は、例えば改変型ＩＬ−２がＩＬ−２Ｒβ及び／又はＩＬ−２Ｒγにおいてアゴニスト的である場合に、がんの治療に適切であり得る。例えば、本開示のコンストラクトは、ＩＬ２受容体β及びγを有する（抗腫瘍作用を提供し得る）ＣＤ８＋Ｔ細胞の活性の減弱に有利であり、且つ、ＩＬ２受容体α、β、及びγを有する（免疫抑制性腫瘍促進作用を提供し得る）Ｔｒｅｇに不利である。さらに、いくつかの実施形態では、ＩＬ−２ＲαよりもＩＬ−２Ｒβ及び／又はＩＬ−２Ｒγを優先することで、肺水腫などのＩＬ−２の副作用が回避される。また、ＩＬ−２に基づいたキメラは、例えば、改変型ＩＬ−２がＩＬ−２Ｒβ及び／又はＩＬ−２Ｒγにおいてアンタゴニスト的である（例えば、天然のアンタゴニスト活性、又は１つ若しくは複数の変異の結果であるアンタゴニスト活性であり、これについては、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号を参照されたい）場合に自己免疫疾患の治療に有用である。例えば、本開示のコンストラクトは、ＩＬ２受容体β及びγを有するＣＤ８＋Ｔ細胞の活性の減弱に有利であり（したがって、免疫応答を減弱し）、且つ、ＩＬ２受容体α、β、及びγを有するＴｒｅｇに不利である。あるいは、いくつかの実施形態では、ＩＬ−２を有するキメラはＴｒｅｇの活性化、したがって免疫抑制に有利であり、ＣＤ８＋Ｔ細胞の活性化に不利である。例えば、これらのコンストラクトは疾患、又は免疫抑制から利益を受け得る疾患、例えば自己免疫疾患の治療に使用される。
【０２８３】
いくつかの実施形態では、キメラタンパク質はＣＤ８＋Ｔ細胞を指向する本明細書に記載されるような標的化部分、並びにＩＬ−２Ｒβ及び／又はＩＬ−２Ｒγに対する親和性及び／又は活性が低下しており、及び／又はＩＬ−２Ｒαに対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている改変型ＩＬ−２物質を有する。いくつかの実施形態では、これらのコンストラクトは標的化ＣＤ８＋Ｔ細胞活性を提供し、且つ、Ｔｒｅｇ細胞に対しては一般的に不活性である（又は活性が実質的に低下している）。いくつかの実施形態では、そのようなコンストラクトは（例えば、理論に捉われることを望むものではないが、Ｔｒｅｇを刺激しないことにより）野生型ＩＬ−２と比較して免疫刺激作用が増強されており、その一方でＩＬ−２に関連する全身毒性を除去又は低減する。
【０２８４】
ある実施形態では、野生型ＩＬ−２は配列番号２４１のアミノ酸配列を有する。
【０２８５】
前記実施形態では、改変型ＩＬ−２物質は、アミノ酸Ｌ７２（Ｌ７２Ｇ、Ｌ７２Ａ、Ｌ７２Ｓ、Ｌ７２Ｔ、Ｌ７２Ｑ、Ｌ７２Ｅ、Ｌ７２Ｎ、Ｌ７２Ｄ、Ｌ７２Ｒ、又はＬ７２Ｋ）、アミノ酸Ｆ４２（Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｇ、Ｆ４２Ｓ、Ｆ４２Ｔ、Ｆ４２Ｑ、Ｆ４２Ｅ、Ｆ４２Ｎ、Ｆ４２Ｄ、Ｆ４２Ｒ、又はＦ４２Ｋ）、及びアミノ酸Ｙ４５（Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｇ、Ｙ４５Ｓ、Ｙ４５Ｔ、Ｙ４５Ｑ、Ｙ４５Ｅ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｄ、Ｙ４５Ｒ又はＹ４５Ｋ）に１つ又は複数の変異を有する。理論に捉われることを望むものではないが、野生型ＩＬ−２と比較すると、これらの改変型ＩＬ−２物質は、高親和性ＩＬ−２受容体に対して親和性が低下しており、且つ、中親和性ＩＬ−２受容体に対する親和性が維持されていると考えられている。例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる米国特許出願公開第２０１２／０２４４１１２号を参照されたい。
【０２８６】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−３である。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、共通β（βｃ又はＣＤ１３１）サブユニットと対合した特有のα鎖を含むヘテロ二量体であるＩＬ−３受容体に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、共通β（βｃ又はＣＤ１３１）サブユニットと対合した特有のα鎖を含むヘテロ二量体であるＩＬ−３受容体に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２８７】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−４である。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は１型及び／又は２型ＩＬ−４受容体に対する親和性及び／又が低下している。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は１型及び／又は２型ＩＬ−４受容体に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。１型ＩＬ−４受容体は、ＩＬ−４Ｒαサブユニットと共通γ鎖から構成され、特異的にＩＬ−４に結合する。２型ＩＬ−４受容体は、ＩＬ−１３Ｒα１として知られる異なるサブユニットに結合したＩＬ−４Ｒαサブユニットを含む。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、２型ＩＬ−４受容体に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２８８】
ある実施形態では、野生型ＩＬ−４は配列番号２４２のアミノ酸配列を有する。
【０２８９】
前記実施形態では、改変型ＩＬ−４物質は、アミノ酸Ｒ１２１（Ｒ１２１Ａ、Ｒ１２１Ｄ、Ｒ１２１Ｅ、Ｒ１２１Ｆ、Ｒ１２１Ｈ、Ｒ１２１Ｉ、Ｒ１２１Ｋ、Ｒ１２１Ｎ、Ｒ１２１Ｐ、Ｒ１２１Ｔ、Ｒ１２１Ｗ）、アミノ酸Ｅ１２２（Ｅ１２２Ｆ）、Ｙ１２４（Ｙ１２４Ａ、Ｙ１２４Ｑ、Ｙ１２４Ｒ、Ｙ１２４Ｓ、Ｙ１２４Ｔ）、及びアミノ酸Ｓ１２５（Ｓ１２５Ａ）に１つ又は複数の変異を有する。理論に捉われることを望むものではないが、これらの改変型ＩＬ−４物質は、Ｉ型受容体が介在する活性を維持するが、他の受容体が介在する生物活性を著しく低下させると考えられている。例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる米国特許第６，４３３，１５７号を参照されたい。
【０２９０】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−６である。ＩＬ−６は、リガンド結合性ＩＬ−６Ｒ鎖（ＣＤ１２６）とシグナル伝達要素ｇｐ１３０を含む細胞表面Ｉ型サイトカイン受容体複合体を介してシグナルを伝達する。ＩＬ−６はＩＬ−６Ｒの細胞外部分である可溶型ＩＬ−６Ｒ（ｓＩＬ−６Ｒ）にも結合し得る。ＳＩＬ−６Ｒ／ＩＬ−６複合体は、神経突起伸長及び神経細胞生存に関与することがあり、したがって再ミエリン化を介した神経再生に重要であり得る。よって、いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−６Ｒ／ｇｐ１３０及び／又はｓＩＬ−６Ｒに対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−６Ｒ／ｇｐ１３０及び／又はｓＩＬ−６Ｒに対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２９１】
ある実施形態では、野生型ＩＬ−６は配列番号２４３のアミノ酸配列を有する。
【０２９２】
前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、５８番目、１６０番目、１６３番目、１７１番目、又は１７７番目のアミノ酸に１つ又は複数の変異を有する。理論に捉われることを望むものではないが、これらの改変型ＩＬ−６物質はＩＬ−６Ｒαに対する結合親和性の低下及び生物活性の低下を示すと考えられている。例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第９７／１０３３８号を参照されたい。
【０２９３】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１０である。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−１０受容体−１及びＩＬ−１０受容体−２に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−１０受容体−１及びＩＬ−１０受容体−２に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２９４】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１１である。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−１１Ｒα及び／又はＩＬ−１１Ｒβ及び／又はｇｐ１３０に対する親和性及び／又は活性が低下している。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−１１Ｒα及び／又はＩＬ−１１Ｒβ及び／又はｇｐ１３０に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２９５】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１２である。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−１２Ｒβ１及び／又はＩＬ−１２Ｒβ２に対する親和性及び／又は活性が低下している。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−１２Ｒβ１及び／又はＩＬ−１２Ｒβ２に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２９６】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１３である。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−４受容体（ＩＬ−４Ｒα）及びＩＬ−１３Ｒα１に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＬ−４受容体（ＩＬ−４Ｒα）又はＩＬ−１３Ｒα１に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０２９７】
ある実施形態では、野生型ＩＬ−１３は配列番号２４４のアミノ酸配列を有する。
【０２９８】
前記実施形態では、改変型ＩＬ−１３物質は、１３番目、１６番目、１７番目、６６番目、６９番目、９９番目、１０２番目、１０４番目、１０５番目、１０６番目、１０７番目、１０８番目、１０９番目、１１２番目、１１３番目、及び１１４番目のアミノ酸に１つ又は複数の変異を有する。理論に捉われることを望むものではないが、これらの改変型ＩＬ−１３物質は低下した生物活性を示すと考えられている。例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２００２／０１８４２２号を参照されたい。
【０２９９】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１８である。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１８Ｒα及び／又はＩＬ−１８Ｒβに対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＩＬ−１８Ｒα及び／又はＩＬ−１８Ｒβに対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、シグナル伝達に必要なＴＩＲドメインを欠いているＩＬ−１８ＲαのアイソフォームであるＩＩ型ＩＬ−１８Ｒαに対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去さている。
【０３００】
ある実施形態では、野生型ＩＬ−１８は配列番号２４５のアミノ酸配列を有する。
【０３０１】
前記実施形態では、改変型ＩＬ−１８物質は、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５４２号に記載されるように、Ｙ３７〜Ｋ４４、Ｒ４９〜Ｑ５４、Ｄ５９〜Ｒ６３、Ｅ６７〜Ｃ７４、Ｒ８０、Ｍ８７〜Ａ９７、Ｎ１２７〜Ｋ１２９、Ｑ１３９〜Ｍ１４９、Ｋ１６５〜Ｋ１７１、Ｒ１８３、及びＱ１９０〜Ｎ１９１から選択されるアミノ酸又はアミノ酸領域に１つ又は複数の変異を含み得る（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＡＡＶ３８６９７、更新番号ＡＡＶ３８６９７．１、ＧＩ：５４６９６６５０のヒトＩＬ−１８配列に基づく付番）。
【０３０２】
ある実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質はＩＬ−３３である。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＳＴ−２受容体及びＩＬ−１ＲＡｃＰに対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＳＴ−２受容体及びＩＬ−１ＲＡｃＰに対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。
【０３０３】
ある実施形態では、野生型ＩＬ−３３は配列番号２４６のアミノ酸配列を有する。
【０３０４】
前記実施形態では、改変型ＩＬ−３３物質は、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５４２号に記載されるように、Ｉ１１３〜Ｙ１２２、Ｓ１２７〜Ｅ１３９、Ｅ１４４〜Ｄ１５７、Ｙ１６３〜Ｍ１８３、Ｅ２００、Ｑ２１５、Ｌ２２０〜Ｃ２２７、及びＴ２６０〜Ｅ２６９から選択されるアミノ酸又はアミノ酸領域に１つ又は複数の変異を含み得る（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿２５４２７４、更新番号ＮＰ＿２５４２７４．１、ＧＩ：１５５５９２０９のヒト配列に基づく付番）。
【０３０５】
ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質は上皮成長因子（ＥＧＦ）である。ＥＧＦは強力な増殖因子のファミリーのメンバーである。メンバーには、ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、及び他のもの、例えばＴＧＦα、アンフィレギュリン、ニューレギュリン、エピレギュリン、ベータセルリンが含まれる。ＥＧＦファミリー受容体には、ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ１）、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、及びＥｒｂＢ４が含まれる。これらの受容体は、ホモ二量体受容体サブタイプ及び／又はヘテロ二量体受容体サブタイプとして機能する場合がある。異なるＥＧＦファミリーメンバーは、様々な受容体サブタイプに対して異なった選択性を示す。例えば、ＥＧＦは、ＥｒｂＢ１／ＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ１／ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ４／ＥｒｂＢ２、及び他のいくつかのヘテロ二量体サブタイプと結合する。ＨＢ−ＥＧＦは類似のパターンを有するが、ＥｒｂＢ４／４とも結合する。ＥＧＦ（ＥＧＦ様）増殖因子シグナル伝達の調整には正の調整でも負の調整でも高い治療上の興味を引く。例えば、ＥＧＦＲシグナルの伝達が主要な増殖促進シグナルを構成している様々ながんの治療において、ＥＧＦＲシグナル伝達の阻害は興味を引く。あるいは、ＥＧＦＲシグナル伝達の刺激には、例えば、創傷治癒（急性及び慢性）の促進、口腔粘膜炎（放射線療法を含むがこれに限定されない様々ながん療法の主要な副作用）における治療上の興味を引く。
【０３０６】
いくつかの実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質は、ＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、及び／又はＥｒｂＢ４に対する親和性及び／又は活性が低下している。前記実施形態は、例えば、創傷を治療する方法において使用される。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、１つ又は複数のＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、及びＥｒｂＢ４に結合し、その受容体の活性をアンタゴナイズする。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、及び／又はＥｒｂＢ４に対する親和性及び／又は活性が低下しており、それによってその受容体の活性が減弱されるようにアンタゴナイズされる。前記実施形態は、例えば、がんの治療において使用される。ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＥｒｂＢ１に対する親和性及び／又は活性が低下している。ＥｒｂＢ１は、選択性があまり無いために大半が副作用を有するキナーゼ阻害剤（例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、ブリガチニブ、及びイコチニブ）の治療上の標的である。いくつかの実施形態では、アンタゴニストによるＥｒｂＢ１シグナル伝達の減弱はＥＧＦの受容体を標的とする他の作用物質よりも標的に的中し、副作用が少ない。
【０３０７】
いくつかの実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質は、ＥｒｂＢ１に対する親和性及び／又は活性が低下しており（例えばアンタゴニスト活性、例えば、天然のアンタゴニスト活性、又は１つ若しくは複数の変異の結果であるアンタゴニスト活性であり、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号を参照されたい）、及び／又はＥｒｂＢ４若しくは相互作用し得る他のサブタイプに対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。標的化部分を介した特異的標的化により、ＥｒｂＢ１／ＥｒｂＢ１受容体活性化の細胞選択的抑制（アンタゴニズム、例えば、天然のアンタゴニスト活性、又は１つ若しくは複数の変異の結果であるアンタゴニスト活性であり、これについては、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１５／００７５２０号を参照されたい）が達成されることになるが、阻害関連副作用に関連する可能性がある他の受容体サブタイプには関係しない。したがって、身体のすべての種類の細胞においてＥＧＦＲ活性を阻害するＥＧＦＲキナーゼ阻害剤とは対照的に、そのようなコンストラクトは、副作用が低減された細胞（例えば、受容体の増幅、過剰発現などのためにＥＧＦＲシグナル伝達が活性化されている腫瘍細胞）選択的抗ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ１）薬作用を提供することになる。
【０３０８】
いくつかの実施形態では、追加の改変型シグナル伝達物質は、ＥｒｂＢ４及び／又は相互作用し得る他のサブタイプに対する親和性及び／又は活性が低下している（例えばアゴニスト活性）。標的化部分を介した特定の標的細胞への標的化により、ＥｒｂＢ１シグナル伝達の（例えば、上皮細胞）選択的活性化が達成される。いくつかの実施形態では、そのようなコンストラクトは、副作用が減少した（創傷治癒を促進する）創傷の治療、特に慢性状態の治療、及び治療薬の局所適用以外の適用（例えば、全身創傷治癒）に使用される。
【０３０９】
ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、インスリン又はインスリン類似体である。いくつかの実施形態では、改変型インスリン又はインスリン類似体は、インスリン受容体及び／又はＩＧＦ１受容体若しくはＩＧＦ２受容体に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型インスリン又はインスリン類似体は、インスリン受容体及び／又はＩＧＦ１受容体若しくはＩＧＦ２受容体に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。インスリン受容体における応答の減弱によって糖尿病、肥満、代謝障害などの管理が可能になり、一方でＩＧＦ１受容体又はＩＧＦ２受容体から離すことによってがん促進作用が回避される。
【０３１０】
ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、インスリン様成長因子−Ｉ又はインスリン様成長因子−ＩＩ（ＩＧＦ−１又はＩＧＦ−２）である。ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＩＧＦ−１である。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、インスリン受容体及び／又はＩＧＦ１受容体に対する親和性及び／又は活性が低下している。ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質ＩＧＦ１受容体に結合し、その受容体の活性をアンタゴナイズし得る。前記実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、ＩＧＦ１受容体に対する親和性及び／又は活性が低下しており、それによってその受容体の活性が減弱されるようにアンタゴナイズされる。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、インスリン受容体及び／又はＩＧＦ１受容体に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去さている。いくつかの実施形態では、改変型シグナル伝達物質のＩＧＦ２受容体に対する親和性及び／又は活性が低下していることでその受容体の活性が減弱されるようにアンタゴナイズされる。ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質は、インスリン受容体に対する実質的に親和性及び／又は活性が低下しているか又は除去されており、したがってインスリンシグナル伝達に干渉しない。様々な実施形態においてこれはがんの治療に適用される。様々な実施形態において本開示の作用物質はＩＲアイソフォームＡががん治療に対して耐性となることを防止する。
【０３１１】
ある実施形態では、改変型シグナル伝達物質はＥＰＯである。様々な実施形態において改変型ＥＰＯ作用物質は、野生型ＥＰＯ又は本明細書に記載される他のＥＰＯに基づいた作用物質と比べて、ＥＰＯ受容体（ＥＰＯＲ）受容体及び／又はエフリン受容体（ＥｐｈＲ）に対する親和性及び／又は活性が低下している。いくつかの実施形態では、改変型ＥＰＯ作用物質は、ＥＰＯ受容体（ＥＰＯＲ）受容体及び／又はＥｐｈ受容体（ＥｐｈＲ）に対する親和性及び／又は活性が実質的に低下しているか又は除去されている。ＥＰＯ受容体の例としては、ＥＰＯＲホモ二量体又はＥＰＯＲ／ＣＤ１３１ヘテロ二量体が挙げられるがこれらに限定されない。ベータ共通受容体（βｃＲ）もＥＰＯ受容体として挙げられる。Ｅｐｈ受容体の例としては、ＥＰＨＡ１、ＥＰＨＡ２、ＥＰＨＡ３、ＥＰＨＡ４、ＥＰＨＡ５、ＥＰＨＡ６、ＥＰＨＡ７、ＥＰＨＡ８、ＥＰＨＡ９、ＥＰＨＡ１０、ＥＰＨＢ１、ＥＰＨＢ２、ＥＰＨＢ３、ＥＰＨＢ４、ＥＰＨＢ５、及びＥＰＨＢ６が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、改変型ＥＰＯタンパク質は、ＥＰＯタンパク質が１種類又は複数種類のＥＰＯ受容体又はＥｐｈ受容体を含む受容体（例えば、ＥＰＯＲ−ＥＰＨＢ４、ＥＰＯＲ−βｃＲ−ＥＰＯＲを非限定的な例として含むヘテロ二量体、ヘテロ三量体）に対する親和性が低下する原因となる、１つ又は複数の変異を含む。内容全体が参照により本明細書に取り込まれる欧州特許出願公開第２４９２３５５号の受容体も提示され、ＮＥＰＯＲが非限定的な例として挙げられる。
【０３１２】
ある実施形態では、ヒトＥＰＯは配列番号２４７のアミノ酸配列を有する（最初の２７アミノ酸はシグナルペプチドである）。
【０３１３】
ある実施形態では、ヒトＥＰＯタンパク質は、配列番号２４８の配列を有する１６６アミノ酸残基からなる糖タンパク質である成熟型の（シグナルペプチドが切除されている）ＥＰＯである。
【０３１４】
ヒトＥＰＯタンパク質の構造は、ヘリックスＡ、ヘリックスＢ、ヘリックスＣ、及びヘリックスＤを含む４つのヘリックスバンドルを含むと予想される。様々な実施形態において、改変型ＥＰＯタンパク質は、生物活性にとって重要であるＥＰＯタンパク質の４つの領域、すなわち１０〜２０番目、４４〜５１番目、９６〜１０８番目、及び１４２〜１５６番目のアミノ酸残基内に位置する１つ又は複数の変異を含む。いくつかの実施形態では、１つ又は複数の変異は、１１〜１５番目、４４〜５１番目、１００〜１０８番目、及び１４７〜１５１番目の残基に位置する。これらの残基は、ヘリックスＡ（Ｖａｌ１１、Ａｒｇ１４、及びＴｙｒ１５）、ヘリックスＣ（Ｓｅｒ１００、Ａｒｇ１０３、Ｓｅｒ１０４、及びＬｅｕ１０８）、ヘリックスＤ（Ａｓｎ１４７、Ａｒｇ１５０、Ｇｌｙ１５１、及びＬｅｕ１５５）、及びＡ／Ｂ接続ループ（４２〜５１番目の残基）に局在する。いくつかの実施形態では、改変型ＥＰＯタンパク質は、４１番目〜５２番目のアミノ酸の間の残基、並びに１４７番目、１５０番目、１５１番目、及び１５５番目のアミノ酸に変異を含む。理論に捉われることを望むものではないが、これらの残基の変異は、受容体結合及びｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物活性の両方に対してかなりの効果を有すると考えられている。いくつかの実施形態では、改変型ＥＰＯタンパク質は、１１番目、１４番目、１５番目、１００番目、１０３番目、１０４番目、及び１０８番目の残基に変異を含む。理論に捉われることを望むものではないが、これらの残基の変異は、受容体結合活性に対して適度な効果を有し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物活性に対してより大きな効果を有すると考えられている。置換の例としては、Ｖａｌ１１Ｓｅｒ、Ａｒｇ１４Ａｌａ、Ａｒｇ１４Ｇｌｎ、Ｔｙｒ１５Ｉｌｅ、Ｐｒｏ４２Ａｓｎ、Ｔｈｒ４４Ｉｌｅ、Ｌｙｓ４５Ａｓｐ、Ｖａｌ４６Ａｌａ、Ｔｙｒ５１Ｐｈｅ、Ｓｅｒ１００Ｇｌｕ、Ｓｅｒ１００Ｔｈｒ、Ａｒｇ１０３Ａｌａ、Ｓｅｒ１０４Ｉｌｅ、Ｓｅｒ１０４Ａｌａ、Ｌｅｕ１０８Ｌｙｓ、Ａｓｎ１４７Ｌｙｓ、Ａｒｇ１５０Ａｌａ、Ｇｌｙ１５１Ａｌａ、及びＬｅｕ１５５Ａｌａのうちの１つ又は複数が挙げられるがこれらに限定されない。
【０３１５】
いくつかの実施形態では、改変型ＥＰＯタンパク質は、生物活性をもたらすが結合はもたらさない変異、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれるＥｌｉｏｔ，ｅｔ  ａｌ．Ｍａｐｐｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｃｔｉｖｅ  Ｓｉｔｅ  ｏｆ  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ｈｕｍａｎ  Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ、１９９７年１月１５日、Ｂｌｏｏｄ：８９（２）に記載される変異を含む。
【０３１６】
いくつかの実施形態では、改変型ＥＰＯタンパク質は、受容体との接触に関与するＥＰＯタンパク質の表面残基に関係する１つ又は複数の変異を含む。理論に捉われることを望むものではないが、これらの表面残基の変異はタンパク質フォールディングに影響する可能性が低く、したがって生物活性が幾らか保持されると考えられている。変異導入可能な表面残基の例としては、１４７番目及び１５０番目の残基が挙げられるがこれらに限定されない。例示的な実施形態では、変異は置換であり、Ｎ１４７Ａ、Ｎ１４７Ｋ、Ｒ１５０Ａ及びＲ１５０Ｅのうちの１つ又は複数が含まれる。
【０３１７】
いくつかの実施形態では、改変型ＥＰＯタンパク質は、残基Ｎ５９、Ｅ６２、Ｌ６７、及びＬ７０における１つ又は複数の変異、及びジスルフィド結合形成に影響する１つ又は複数の変異を含む。理論に捉われることを望むものではないが、これらの変異はフォールディングに影響し、及び／又は埋没した位置に存在すると予測され、したがって間接的に生物活性に影響すると考えられている。
【０３１８】
ある実施形態では、改変型ＥＰＯタンパク質は受容体への結合を著しく低下させるＫ２０Ｅ置換を含む。内容全体が参照により本明細書に取り込まれるＥｌｌｉｏｔ，ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｂｌｏｏｄ、８９：ｐｐ．４９３−５０２を参照されたい。
【０３１９】
本発明のキメラＥＰＯタンパク質に組み込まれ得るその他のＥＰＯ変異は、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれるＥｌｌｉｏｔｔ，ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｂｌｏｏｄ、８９：ｐｐ．４９３−５０２及び内容全体が参照により本明細書に取り込まれるＴａｙｌｏｒ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）ＰＥＤＳ、２３（４）：ｐｐ．２５１−２６０に開示されている。
【０３２０】
様々な実施形態において、シグナル伝達物質は毒素又は毒性酵素である。いくつかの実施形態では、毒素又は毒性酵素は植物及び細菌に由来する。毒素又は毒性酵素の例としては、ジフテリア毒素、緑膿菌毒素、炭疽毒素、リシン及びサポニンなどのリボソーム不活性化タンパク質（ＲＩＰ）、モデシン、アブリン、ゲロニン、及びヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質が挙げられるがこれらに限定されない。その他の毒素としては、開示の全体が参照により本明細書に取り込まれるＭａｔｈｅｗ，ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ、１００（８）：ｐｐ．１３５９−６５に開示される毒素が挙げられる。前記実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、細胞種特異的に細胞死を誘導するために利用され得る。前記実施形態では、毒素は、本明細書中の他のシグナル伝達物質について記載されるように、効果を減弱させるためにその毒素の親和性及び／又は活性を低下させるために改変、例えば変異導入され得る。
【０３２１】
リンカー及び官能基
いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は１つ又は複数のリンカーを含んでいてもよい。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、標的化部分とシグナル伝達物質（例えばコンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）を接続するリンカーを含む。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質（例えばコンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）内にリンカーを含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、キメラタンパク質に、明細書に記載されるような様々な官能基、残基、又は部分を連結するために利用され得る。いくつかの実施形態では、リンカーは、結合領域及び結合タンパク質の安定性、配向特性、結合特性、中和特性、及び／又はクリアランス特性に影響しない、又はそれらを低下させない単一のアミノ酸、又は複数のアミノ酸である。様々な実施形態において、リンカーは、ペプチド、タンパク質、糖、又は核酸から選択される。
【０３２２】
いくつかの実施形態では、単一のヌクレオチド配列として本明細書に記載されるリンカーのいずれかにより連結された本開示のキメラタンパク質をコードするベクターが提供され、そのようなキメラタンパク質を調製するために使用可能である。
【０３２３】
いくつかの実施形態では、リンカーの長さによって、標的化部分とシグナル伝達物質（例えばコンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）のそれらの受容体への効率的な結合が可能になる。例えば、いくつかの実施形態では、リンカーの長さによって、同じ細胞上の受容体への標的化部分のうちの１つとシグナル伝達物質の効率的な結合が可能になる。
【０３２４】
いくつかの実施形態では、リンカーの長さは、同じ細胞上の受容体への標的化部分のうちの１つの結合部位とシグナル伝達物質の結合部位との間の最小の距離に少なくとも等しい。いくつかの実施形態では、リンカーの長さは、同じ細胞上の受容体への標的化部分のうちの１つの結合部位とシグナル伝達物質の結合部位との間の最小の距離に少なくとも２倍、又は３倍、又は４倍、又は５倍、又は１０倍、又は２０倍、又は２５倍、又は５０倍、又は１００倍、又はそれより高い倍率の距離である。
【０３２５】
本明細書に記載されるように、リンカーの長さによって標的化部分のうちの１つとシグナル伝達物質の同じ細胞上の受容体への効率的な結合が可能になり、その結合は連続的に起こり、例えば標的化部分と受容体の結合がシグナル伝達物質と受容体の結合に先行する。
【０３２６】
いくつかの実施形態では、２つのリンカーが単一のキメラに存在し、それぞれのリンカーがシグナル伝達物質を標的化部分に接続している。様々な実施形態においてリンカーは、疾患細胞又はエフェクター細胞のどちらかの細胞の調整を妨害することになる立体障害を有しない、それらの細胞が有する部位の形成を可能にする長さを有する。
【０３２７】
本発明は様々なリンカー配列の使用を意図している。様々な実施形態において、リンカーは天然マルチドメインタンパク質に由来するか、又は内容全体が参照により本明細書に取り込まれるＣｈｉｃｈｉｌｉ，ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉ．、２２（２）：ｐｐ．１５３−１６７；Ｃｈｅｎ，ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ．、６５（１０）：ｐｐ．１３５７−１３６９などに記載されるような実験に基づいたリンカーであってもよい。いくつかの実施形態では、リンカーは、内容全体が参照により本明細書に取り込まれるＣｈｅｎ，ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ．、６５（１０）：ｐｐ．１３５７−１３６９及びＣｒａｓｔｏ，ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．、１３（５）：ｐｐ．３０９−３１２に記載されるようなリンカー設計データベース及びコンピュータープログラムを使用して設計され得る。様々な実施形態において、リンカーは機能的であってもよい。例えば、限定されないが、リンカーは、本開示のキメラタンパク質のフォールディング及び／又は安定性を改善し、発現を改善し、薬物動態を改善し、及び／又は生物活性を改善するように機能する場合がある。
【０３２８】
いくつかの実施形態では、リンカーはポリペプチドである。いくつかの実施形態では、リンカーの長さは約１００アミノ酸未満である。例えば、リンカーの長さは、約１００アミノ酸未満、約９５アミノ酸未満、約９０アミノ酸未満、約８５アミノ酸未満、約８０アミノ酸未満、約７５アミノ酸未満、約７０アミノ酸未満、約６５アミノ酸未満、約６０アミノ酸未満、約５５アミノ酸未満、約５０アミノ酸未満、約４５アミノ酸未満、約４０アミノ酸未満、約３５アミノ酸未満、約３０アミノ酸未満、約２５アミノ酸未満、約２０アミノ酸未満、約１９アミノ酸未満、約１８アミノ酸未満、約１７アミノ酸未満、約１６アミノ酸未満、約１５アミノ酸未満、約１４アミノ酸未満、約１３アミノ酸未満、約１２アミノ酸未満、約１１アミノ酸未満、約１０アミノ酸未満、約９アミノ酸未満、約８アミノ酸未満、約７アミノ酸未満、約６アミノ酸未満、約５アミノ酸未満、約４アミノ酸未満、約３アミノ酸未満、又は約２アミノ酸未満であってもよい。いくつかの実施形態では、リンカーはポリペプチドである。いくつかの実施形態では、リンカーの長さは約１００アミノ酸を超える。例えば、リンカーの長さは、約１００アミノ酸超、約９５アミノ酸超、約９０アミノ酸超、約８５アミノ酸超、約８０アミノ酸超、約７５アミノ酸超、約７０アミノ酸超、約６５アミノ酸超、約６０アミノ酸超、約５５アミノ酸超、約５０アミノ酸超、約４５アミノ酸超、約４０アミノ酸超、約３５アミノ酸超、約３０アミノ酸超、約２５アミノ酸超、約２０アミノ酸超、約１９アミノ酸超、約１８アミノ酸超、約１７アミノ酸超、約１６アミノ酸超、約１５アミノ酸超、約１４アミノ酸超、約１３アミノ酸超、約１２アミノ酸超、約１１アミノ酸超、約１０アミノ酸超、約９アミノ酸超、約８アミノ酸超、約７アミノ酸超、約６アミノ酸超、約５アミノ酸超、約４アミノ酸超、約３アミノ酸超、又は約２アミノ酸超であってもよい。いくつかの実施形態では、リンカーは可動性がある。別の実施形態では、リンカーは可動性に欠ける。
【０３２９】
２つ以上の標的化部分を有するキメラタンパク質に関するいくつかの実施形態では、あるリンカーが２つの標的化部分を相互接続し、このリンカーの長さは短く、あるリンカーが標的化部分とシグナル伝達物質を接続し、このリンカーは２つの標的化部分を接続するリンカーよりも長い。例えば、２つの標的化部分を接続するリンカーと標的化部分とシグナル伝達物質を接続するリンカーとの間のアミノ酸長の差は、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１９アミノ酸、約１８アミノ酸、約１７アミノ酸、約１６アミノ酸、約１５アミノ酸、約１４アミノ酸、約１３アミノ酸、約１２アミノ酸、約１１アミノ酸、約１０アミノ酸、約９アミノ酸、約８アミノ酸、約７アミノ酸、約６アミノ酸、約５アミノ酸、約４アミノ酸、約３アミノ酸、又は約２アミノ酸であり得る。
【０３３０】
様々な実施形態において、リンカーはグリシン残基とセリン残基から実質的に（例えば、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％、又は約９７％のグリシン及びセリン）構成される。例えば、いくつかの実施形態では、リンカーは（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎであり、式中、ｎは約１〜約８、例えば１、２、３、４、５、６、７、又は８である（それぞれ配列番号２４９〜配列番号２５６）。ある実施形態では、リンカー配列はＧＧＳＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号２５７）である。その他のリンカーの例としては、ＬＥ、ＧＧＧＧＳ（配列番号２４９）、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ｎ＝１〜４）（配列番号２４９〜配列番号２５２）、（Ｇｌｙ）８（配列番号２５８）、（Ｇｌｙ）６（配列番号２５９）、（ＥＡＡＡＫ）ｎ（ｎ＝１〜３）（配列番号２６０〜配列番号２６２）、Ａ（ＥＡＡＡＫ）ｎＡ（ｎ＝２〜５）（配列番号２６３〜配列番号２６６）、ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡ（配列番号２６３）、Ａ（ＥＡＡＡＫ）４ＡＬＥＡ（ＥＡＡＡＫ）４Ａ（配列番号２６７）、配列ＰＡＰＡＰ（配列番号２６８）、ＫＥＳＧＳＶＳＳＥＱＬＡＱＦＲＳＬＤ（配列番号２６９）、ＥＧＫＳＳＧＳＧＳＥＳＫＳＴ（配列番号２７０）、ＧＳＡＧＳＡＡＧＳＧＥＦ（配列番号２７１）、及びＸがいずれかのアミノ酸、例えば、Ａｌａ、Ｌｙｓ、又はＧｌｕを示す（ＸＰ）ｎの配列を有するリンカーが挙げられるがこれらに限定されない。様々な実施形態においてリンカーはＧＧＳである。
【０３３１】
いくつかの実施形態では、リンカーは、ＧＧＧＳＥ（配列番号２７２）、ＧＳＥＳＧ（配列番号２７３）、ＧＳＥＧＳ（配列番号２７４）、ＧＥＧＧＳＧＥＧＳＳＧＥＧＳＳＳＥＧＧＧＳＥＧＧＧＳＥＧＧＧＳＥＧＧＳ（配列番号２７５）、及び４アミノ酸間隔ごとに無作為に配置されたＧ、Ｓ、及びＥからなるリンカーうちの１つ又は複数である。
【０３３２】
いくつかの実施形態では、リンカーは、抗体の（例えば、サブクラス（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４、並びにＩｇＡ１及びＩｇＡ２）を含むＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥの）ヒンジ領域である。様々な実施形態において、リンカーは、抗体の（例えば、サブクラス（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４、並びにＩｇＡ１及びＩｇＡ２）を含むＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥ）のヒンジ領域である。ＩｇＧクラス、ＩｇＡクラス、ＩｇＤクラス、及びＩｇＥクラスの抗体に見られるヒンジ領域は可動性スペーサーとして作用し、Ｆａｂ部分が空間中を自由に動くことを可能にする。定常領域と対照的に、ヒンジドメインは構造的に多様であり、免疫グロブリンのクラス及びサブクラスの中で配列と長さの両方について異なっている。例えば、ヒンジ領域の長さと可動性はＩｇＧサブクラス間で異なっている。ＩｇＧ１のヒンジ領域は２１６〜２３１番目のアミノ酸を包含し、そのヒンジ領域は自由に曲がりやすいため、Ｆａｂ断片はその対称軸を中心に回転可能であり、且つ、２つの重鎖間ジスルフィド架橋のうちの最初の架橋を中心とした球内で移動可能である。ＩｇＧ２はＩｇＧ１よりも短いヒンジを有し、１２個のアミノ酸残基及び４個のジスルフィド架橋を含む。ＩｇＧ２のヒンジ領域はグリシン残基を欠いており、比較的に短く、且つ、追加の重鎖間ジスルフィド結合によって安定化された堅固なポリプロリンダブルヘリックスを含む。これらの特性によりＩｇＧ２分子の可動性が制限される。ＩｇＧ３は、（２１個のプロリンと１１個のシステインを含む）６２個のアミノ酸を含み、可動ではないポリプロリンダブルヘリックスを形成する、特有の長いヒンジ領域（ＩｇＧ１ヒンジの約４倍の長さ）によって他のサブクラスと異なる。ＩｇＧ３ではＦａｂ断片はＦｃ断片から比較的に離れており、それにより分子の可動性がより高くなる。ＩｇＧ３の長いヒンジはまた、他のサブクラスと比較して大きい分子量の原因となる。ＩｇＧ４のヒンジ領域はＩｇＧ１のヒンジ領域よりも短く、その可動性はＩｇＧ１のヒンジ領域の可動性とＩｇＧ２のヒンジ領域の可動性との中間である。ヒンジ領域の可動性は、ＩｇＧ３＞ＩｇＧ１＞ＩｇＧ４＞ＩｇＧ２の順に低下すると報告されている。
【０３３３】
結晶学的研究によれば、免疫グロブリンのヒンジ領域は、機能的に３つの領域、すなわち上部ヒンジ領域、コア領域、及び下部ヒンジ領域にさらに細分化可能である。Ｓｈｉｎ，ｅｔ  ａｌ．１９９２、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、１３０：ｐｐ．８７を参照されたい。上部ヒンジ領域は、ＣＨ１のカルボキシ末端から動きを制限するヒンジ内の最初の残基、一般的には２本の重鎖間に鎖間ジスルフィド結合を形成する１番目のシステイン残基までのアミノ酸を含む。上部ヒンジ領域の長さは抗体のセグメントの可動性と相関している。コアヒンジ領域は、重鎖間ジスルフィド架橋を有し、下部ヒンジ領域はＣＨ２ドメインのアミノ末端に連結し、且つ、ＣＨ２内の残基を含む。野生型ヒトＩｇＧ１のコアヒンジ領域は配列Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ（配列番号２７６）を含み、ジスルフィド結合の形成によって二量体化されると旋回軸として作用すると考えられる環状オクタペプチドが生じ、これにより可動性が与えられる。様々な実施形態において、本開示のリンカーは、任意の抗体の（例えば、サブクラス（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４、並びにＩｇＡ１及びＩｇＡ２）を含むＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥの）上部ヒンジ領域、コア領域、及び下部ヒンジ領域のうちの１つ、２つ、又は３つを含む。ヒンジ領域は１つ又は複数のグリコシル化部位を含む場合もあり、それらの部位には炭水化物結合のための多数の構造的に異なる種類の部位が含まれる。例えば、ＩｇＡ１はヒンジ領域の１７個のアミノ酸セグメント内に５つのグリコシル化部位を含み、それらの部位は分泌性免疫グロブリンにとって有利な特性であると考えられる腸管プロテアーゼに対するヒンジ領域ポリペプチドの耐性を付与する。様々な実施形態において、本発明のリンカーは１つ又は複数のグリコシル化部位を含む。様々な実施形態において、リンカーはヒトＩｇＧ４抗体のヒンジ−ＣＨ２−ＣＨ３ドメインである。
【０３３４】
所望により本開示のキメラタンパク質はＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインのうちの一方又は両方を含む抗体Ｆｃ領域に連結可能であり、及び所望によりヒンジ領域に連結可能である。例えば、単一のヌクレオチド配列としてＦｃ領域に連結された本開示のキメラタンパク質をコードするベクターを使用してそのようなポリペプチドを調製することが可能である。
【０３３５】
いくつかの実施形態では、リンカーはＰＥＧなどの合成リンカーである。
【０３３６】
様々な実施形態において、リンカーには機能的であってもよい。例えば、限定されないが、リンカーは、本開示のキメラタンパク質のフォールディング及び／又は安定性を改善し、発現を改善し、薬物動態を改善し、及び／又は生物活性を改善するように機能してもよい。別の例では、リンカーは、キメラタンパク質を特定の細胞種又は特定の場所へ標的化するように機能してもよい。
【０３３７】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、１つ又は複数の官能基、残基、又は部分を含んでいてもよい。様々な実施形態において、１つ又は複数の官能基、残基、又は部分は、本明細書に記載されるシグナル伝達物質又は標的化部分うちのいずれかに結合されるか、又は遺伝的に融合される。いくつかの実施形態では、前記官能基、残基、又は部分によって、本発明のキメラタンパク質に１種類又は複数種類の所望の特性又は機能が付与される。前記官能基の例、及びそれらの官能基を本開示のキメラタンパク質に導入するための方法の例は当技術分野において知られており、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１６版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ社、イーストン、ペンシルバニア州（１９８０）を参照されたい。
【０３３８】
様々な実施形態において、キメラタンパク質の各々は、半減期を延長するか、又は薬力学的特性及び薬物動態学的特性を改善するために、別の作用物質と結合（conjugate）及び／又は融合されてもよい。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＰＥＧ、ＸＴＥＮ（例えば、ｒＰＥＧなど）、ポリシアル酸（ＰＯＬＹＸＥＮ）、アルブミン（例えば、ヒト血清アルブミン又はＨＡＳ）、エラスチン様タンパク質（ＥＬＰ）、ＰＡＳ、ＨＡＰ、ＧＬＫ、ＣＴＰ、トランスフェリンなどのうちの１つ又は複数と融合又は結合されてもよい。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は抗体又はＦｃ断片などの抗体断片と融合又は結合されてもよい。例えば、キメラタンパク質は、ヒト免疫グロブリン（Ｉｇ）ＧのＦｃドメインのＮ末端又はＣ末端のいずれかに融合されてもよい。様々な実施形態において、個々のキメラタンパク質のそれぞれは、内容全体が参照により本明細書に取り込まれるＢｉｏＤｒｕｇｓ、（２０１５）２９：２１５−２３９に記載される作用物質のうちの１つ又は複数に融合されている。
【０３３９】
いくつかの実施形態では、官能基、残基、又は部分は、適切な薬学的に許容可能な重合体、例えばポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）又はその誘導体（メトキシポリ（エチレングリコール）、すなわちｍＰＥＧなど）を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分の結合によりキメラタンパク質の半減期が増加し、及び／又は免疫原性が低下する。一般に任意の適切な形態のＰＥＧ化、例えば抗体及び抗体断片（限定されないが、ＶＨＨなどの単一ドメイン抗体を含む）の技術分野において使用されるＰＥＧ化などを用いることができる。例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれるＣｈａｐｍａｎ、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、５４ｐｐ．、５３１−５４５（２００２）、Ｖｅｒｏｎｅｓｅ及びＨａｒｒｉｓ、Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．、５４、ｐｐ．４５３−４５６（２００３）、Ｈａｒｒｉｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｓｓ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ．Ｄｉｓｃｏｖ．、２（２００３）、及び国際公開第０４／０６０９６５号を参照されたい。タンパク質のＰＥＧ化のための様々な試薬は市販もされており、例えば米国のＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社より入手可能である。いくつかの実施形態では、部位特異的ＰＥＧ化、特にシステイン残基を介した部位特異的ＰＥＧ化が用いられる（例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれるＹａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、１６、１０、ｐｐ．７６１−７７０（２００３）を参照されたい）。いくつかの実施形態では、当技術分野において知られている方法を用いて、ＰＥＧ結合のための１つ又は複数のシステイン残基を適切に導入するように本発明のキメラタンパク質が改変されているか、又はＰＥＧ結合のための１つ又は複数のシステイン残基を含むアミノ酸配列がキメラタンパク質のアミノ末端及び／又はカルボキシ末端に融合されていてもよい。
【０３４０】
いくつかの実施形態では、官能基、残基、又は部分は、Ｎ結合グリコシル化又はＯ結合グリコシル化を含む。いくつかの実施形態では、Ｎ結合グリコシル化又はＯ結合グリコシル化は、同時翻訳修飾及び／又は翻訳後修飾の一部として導入される。
【０３４１】
いくつかの実施形態では、官能基、残基、又は部分は、１つ又は複数の検出可能な標識又は他のシグナル生成基若しくは部分を含む。適切な標識、並びにそれらの標識を結合するための方法、使用するための方法、及び検出するための方法が当技術分野において知られており、蛍光標識（フルオレセイン、イソチオシアネート、ローダミン、フィコエリトリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、ｏ−フタルアルデヒド、及びフルオレスカミン、並びにＥｕ又はランタニド系列の他の金属などの蛍光性金属など）、燐光発光標識、化学発光標識又は生物発光標識（ルミナール、イソルミノール、セロマチック・アクリジニウムエステル（theromatic acridinium ester）、イミダゾール、アクリジニウム塩、シュウ酸エステル、ジオキセタン、又はＧＦＰ及びその類似体など）、放射性同位体、金属、金属キレート若しくは金属カチオン、又はｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、若しくはｉｎ  ｓｉｔｕの診断及び画像撮影での使用に特に適している他の金属若しくは金属カチオン、並びに発色団及び酵素（リンゴ酸デヒドロゲナーゼ、ブドウ球菌ヌクレアーゼ、δ−Ｖ−ステロイドイソメラーゼ、酵母アルコールデヒドロゲナーゼ、α−グリセロリン酸デヒドロゲナーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、ビオチンアビジンペルオキシダーゼ、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、アスパラギナーゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、リボヌクレアーゼ、ウレアーゼ、カタラーゼ、グルコース−ＶＩ−リン酸デヒドロゲナーゼ、グルコアミラーゼ、及びアセチルコリンエステラーゼなど）が挙げられるがこれらに限定されない。他の適切な標識としては、核磁気共鳴分光法又は電子スピン共鳴分光法を使用して検出可能な部分が挙げられる。本発明のそのような標識されたＶＨＨ及びポリペプチドは、例えば、（ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、ＥＩＡ、及び他の「サンドイッチアッセイ」などのそれ自体が公知の免疫アッセイを含む）インビトロアッセイ、ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイ、又はｉｎ  ｓｉｔｕアッセイ、並びに特定の標識の選択に依存したｉｎ  ｖｉｖｏの診断及び画像撮影目的のために使用され得る。
【０３４２】
いくつかの実施形態では、官能基、残基、又は部分は、本開示のキメラタンパク質に結合されているか（attached）、又は遺伝的に融合されたタグを含む。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、単一のタグを含んでいてもよく、複数のタグを含んでいてもよい。タグは、例えば、キメラタンパク質の標的、又は腫瘍抗原などの目的の他のいずれかの抗原への結合を阻害又は妨害しないペプチド、糖、又はＤＮＡ分子である。様々な実施形態において、タグは、少なくとも約３〜５アミノ酸長、５〜８アミノ酸長、８〜１２アミノ酸長、１２〜１５アミノ酸長、又は１５〜２０アミノ酸長である。タグの例は、例えば、米国特許出願公開第２０１３／００５８９６２号に記載されている。いくつかの実施形態では、タグは、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）タグ及びヒスチジン（Ｈｉｓ）タグなどのアフィニティータグである。ある実施形態では、キメラタンパク質はＨｉｓタグを含む。
【０３４３】
いくつかの実施形態では、官能基、残基、又は部分は、例えば金属又は金属カチオンのうちの１つをキレートするためのキレート基を含む。例えば、適切なキレート基としては、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）又はエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）が挙げられるがこれらに限定されない。
【０３４４】
いくつかの実施形態では、官能基、残基、又は部分は、ビオチン−（ストレプト）アビジン結合対などの特定の結合対の一部である官能基を含む。そのような官能基は、その結合対の他方に結合されている別のタンパク質、ポリペプチド、化学化合物に、すなわち結合対の形成を介して、本発明のキメラタンパク質を連結するために使用され得る。例えば、本発明のキメラタンパク質はビオチンと結合され、アビジン又はストレプトアビジンに結合した別のタンパク質、ポリペプチド、化合物、又は担体に連結されてもよい。例えば、そのような複合体化キメラタンパク質は、検出可能なシグナル生成物質がアビジン又はストレプトアビジンに結合されている診断系などにおいてレポーターとして使用され得る。そのような結合対は、製薬目的に適切な担体を含む担体への本開示のキメラタンパク質の結合のためにも使用され得る。ある非限定的な例は、Ｃａｏ  ａｎｄ  Ｓｕｒｅｓｈ、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ、８、４、ｐｐ．２５７（２０００）に記載されるリポソーム製剤である。そのような結合対は、治療活性物質を本発明のキメラタンパク質に連結するためにも使用され得る。
【０３４５】
キメラタンパク質の作製
本発明のキメラタンパク質を作製するための方法は本明細書に記載される。例えば、本発明のキメラタンパク質をコードするＤＮＡ配列（例えば、シグナル伝達物質（例えばコンセンサスインターフェロン又はそのバリアント）、標的化部分、及びリンカーをコードするＤＮＡ配列）は、当技術分野において知られている方法を用いて化学的に合成可能である。発現制御配列などを含む他の適切なヌクレオチド配列に、合成ＤＮＡ配列をライゲーションして所望のキメラタンパク質をコードする遺伝子発現コンストラクトを作製することができる。よって、様々な実施形態において、本発明は、本発明のキメラタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む単離核酸を提供する。
【０３４６】
本発明のキメラタンパク質をコードする核酸を発現ベクターに組み込む（ライゲーションする）ことができ、該ベクターは、トランスフェクション法、形質転換法、又は形質導入法によって宿主細胞に導入するされ得る。例えば、本発明のキメラタンパク質をコードする核酸は、レトロウイルス形質導入によって宿主細胞に導入され得る。宿主細胞の例には、大腸菌細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ヒト胎児由来腎臓２９３（ＨＥＫ２９３）細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞がん細胞（例えば、Ｈｅｐ  Ｇ２）、及び骨髄腫細胞がある。形質転換宿主細胞は、それらの宿主細胞が本発明のキメラタンパク質をコードする遺伝子を発現することを可能にする条件下で培養され得る。よって、様々な実施形態において、本発明は、本発明のキメラタンパク質をコードする核酸を含む発現ベクターを提供する。様々な実施形態において、本発明は、そのような発現ベクターを含む宿主細胞をさらに提供する。
【０３４７】
具体的な発現及び精製の条件は使用する発現系に応じて異なることになる。例えば、遺伝子を大腸菌内で発現させる場合、最初に、Ｔｒｐ又はＴａｃなどの適切な細菌プロモーター及び原核生物シグナル配列の下流に改変遺伝子を配置することにより遺伝子を発現ベクターにクローニングする。別の例では、改変遺伝子をＣＨＯ細胞などの真核生物宿主細胞内で発現させる場合、最初に、例えば、適切な真核生物プロモーター、分泌シグナル、エンハンサー、及び様々なイントロンを含む発現ベクターに改変遺伝子を挿入する。トランスフェクション法、形質転換法、又は形質導入法を用いて遺伝子コンストラクトを宿主細胞に導入することができる。
【０３４８】
本発明のキメラタンパク質は、該タンパク質をコードする発現ベクターをトランスフェクションした宿主細胞を、該キメラタンパク質を発現させる条件下で培養することにより作製可能である。発現後、当技術分野においてよく知られている方法、例えばグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）タグ及びヒスチジンタグなどのアフィニティータグを用いて、又はクロマトグラフィーによって、タンパク質を回収及び精製することができる。
【０３４９】
よって、様々な実施形態において、本発明は、本発明のキメラタンパク質をコードする核酸を提供する。様々な実施形態において、本発明は、本発明のキメラタンパク質をコードする核酸を含む宿主細胞を提供する。
【０３５０】
様々な実施形態において、本開示のコンセンサスインターフェロン又はコンセンサスインターフェロンを含むキメラタンパク質は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば患者内で発現されてもよい。例えば、様々な実施形態において本開示のコンセンサスインターフェロン又はコンセンサスインターフェロンを含むキメラタンパク質は、コンセンサスインターフェロンを含む本開示のコンセンサスインターフェロンキメラタンパク質をコードする核酸の形態で投与されてもよい。様々な実施形態において、核酸はＤＮＡ又はＲＮＡである。いくつかの実施形態では、本開示のコンセンサスインターフェロン又はコンセンサスインターフェロンを含むキメラタンパク質は、修飾ｍＲＮＡ、すなわち１つ又は複数の修飾ヌクレオチドを含むｍＲＮＡによってコードされる。いくつかの実施形態では、修飾ｍＲＮＡは、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる米国特許第８，２７８，０３６号に見られる１種類又は複数種類の修飾を含む。いくつかの実施形態では、修飾ｍＲＮＡは、ｍ５Ｃ、ｍ５Ｕ、ｍ６Ａ、ｓ２Ｕ、Ψ、及び２’−Ｏ−メチル−Ｕのうちの１つ又は複数を含む。いくつかの実施形態では、本発明は、本開示のキメラタンパク質のうちの１つ又は複数をコードする修飾ｍＲＮＡの投与に関する。いくつかの実施形態では、本発明は修飾ｍＲＮＡを含む遺伝子治療ベクターに関する。いくつかの実施形態では、本発明は修飾ｍＲＮＡの投与を含む遺伝子治療方法に関する。様々な実施形態において、核酸は、腫瘍溶解性ウイルス、例えばアデノウイルス、レオウイルス、麻疹ウイルス、ヘルペス単純ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、又はワクシニアウイルスの形態である。
【０３５１】
薬学的に許容可能な塩及び賦形剤
本明細書に記載されるキメラタンパク質は、無機酸又は有機酸と反応可能な十分に塩基性である官能基、又は無機塩基若しくは有機塩基と反応可能なカルボキシル基を有することで薬学的に許容可能な塩を形成することができる。当技術分野においてよく知られているように、薬学的に許容可能な酸から薬学的に許容可能な酸付加塩が形成される。そのような塩としては、例えば、全体が参照により本明細書に取り込まれるＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、６６、ｐｐ．２−１９（１９７７）及びＴｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ；Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ．、Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ及びＣ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（編）、Ｖｅｒｌａｇ、チューリッヒ（スイス）２００２に記載される薬学的に許容可能な塩が挙げられる。
【０３５２】
薬学的に許容可能な塩としては、非限定的な例として、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物塩、臭化物塩、ヨウ化物塩、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、過リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩（gentisinate）、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩、パモ酸塩、フェニル酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アクリル酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、ナフタレン−２−安息香酸塩、イソ酪酸塩、フェニル酪酸塩、α−ヒドロキシ酪酸塩、ブチン−１，４−ジカルボン酸塩、ヘキシン−１，４−ジカルボン酸塩、カプリン酸塩、カプリル酸塩、桂皮酸塩、グリコール酸塩、ヘプタン酸塩、馬尿酸塩、リンゴ酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、ニコチン酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、プロピオル酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、セバシン酸塩、スベリン酸塩、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エチルスルホン酸塩、２−ヒドロキシエチルスルホン酸塩、メチルスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ナフタレン−１，５−スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、及び酒石酸塩が挙げられる。
【０３５３】
「薬学的に許容可能な塩」という用語は、カルボン酸官能基などの酸性官能基を有する本発明の組成物と塩基の塩も指す。適切な塩基としては、ナトリウム、カリウム、及びリチウムなどのアルカリ金属の水酸化物；カルシウム及びマグネシウムなどのアルカリ土類金属の水酸化物；アルミニウム及び亜鉛などの他の金属の水酸化物；アンモニア、及び有機アミン、例えば非置換又はヒドロキシ置換されたモノ−、ジ−、又はトリ−アルキルアミン、ジシクロヘキシルアミン；トリブチルアミン；ピリジン；Ｎ−メチル，Ｎ−エチルアミン；ジエチルアミン；トリエチルアミン；モノ−、ビス−、又はトリス−（２−ＯＨ−低級アルキルアミン）、例えばモノ−、ビス−、又はトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン、２−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン、又はトリス−（ヒドロキシメチル）メチルアミン；Ｎ，Ｎ−ジ−低級アルキル−Ｎ−（ヒドロキシル−低級アルキル）−アミン、例えばＮ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アミン又はトリ−（２−ヒドロキシエチル）アミン；Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン；並びにアルギニン、リジンなどのアミノ酸などが挙げられるがこれらに限定されない。
【０３５４】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組成物は薬学的に許容可能な塩の形態である。
【０３５５】
医薬組成物及び製剤
様々な実施形態において、本発明は、本明細書に記載されるキメラタンパク質及び薬学的に許容可能な担体又は賦形剤を含む医薬組成物に関する。本明細書に記載される任意の医薬組成物は、薬学的に許容可能な担体又は溶媒を含む組成物の一成分として対象に投与可能である。そのような組成物は、適切な投与のための形態にするために適切な量の薬学的に許容可能な賦形剤を含んでいてもよい。
【０３５６】
様々な実施形態において、製薬用賦形剤は、水、及び油などの液体であってもよく、その油には石油起源、動物起源、植物起源、又は合成起源の油、例えばピーナッツ油、大豆油、鉱物油、ゴマ油などが含まれる。それらの製薬用賦形剤は、例えば、生理食塩水、アカシアガム、ゼラチン、デンプン糊、タルク、ケラチン、コロイド状シリカ、尿素などであってもよい。さらに、補助剤、安定化剤、増粘剤、滑沢剤、及び着色剤を使用してもよい。ある実施形態では、対象に投与される場合、薬学的に許容可能な賦形剤は無菌である。水は本明細書に記載されるいずれかの作用物質が静脈内投与される場合に有用な賦形剤である。生理食塩水溶液、並びにブドウ糖水溶液及びグリセロール溶液は、液体賦形剤、具体的には注射剤用の液体賦形剤としても使用可能である。適切な製薬用賦形剤としては、デンプン、グルコース、ラクトース、ショ糖、ゼラチン、モルト、コメ、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールなどが挙げられる。本明細書に記載されるいずれの作用物質も、少量の湿潤剤若しくは乳化剤、又はｐＨ緩衝剤を含んでいてもよい。適切な製薬用賦形剤の他の例は、参照により本明細書に取り込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、ｐｐ．１４４７−１６７６（Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、第１９版、１９９５）に記載されている。
【０３５７】
本発明は、本記載の医薬組成物（及び／又は追加治療薬）を様々な剤型で含む。本明細書に記載される本発明の医薬組成物（及び／又は追加治療薬）はいずれも、液剤、懸濁剤、乳剤、滴剤、錠剤、丸剤、ペレット剤、カプセル剤、液剤含有カプセル剤、ゼラチンカプセル剤、粉剤、徐放性製剤、坐剤、乳剤、エアロゾル剤、スプレー剤、懸濁剤、凍結乾燥粉剤、凍結懸濁剤、乾燥粉剤、又は使用に適した他の任意の形態であってもよい。ある実施形態では、組成物はカプセル剤の剤形である。別の実施形態では、組成物は錠剤の剤形である。さらに別の実施形態では、医薬組成物は軟質ゲルカプセル剤の剤形で製剤される。その他の実施形態では、医薬組成物はゼラチンカプセル剤の剤形で製剤される。さらに別の実施形態では、医薬組成物は液剤として製剤される。
【０３５８】
本発明の医薬組成物（及び／又はその他の作用物質）は必要な場合に可溶化剤を含むこともできる。また、作用動物質は当技術分野において知られている適切な溶媒又は送達装置によって送達可能である。本明細書において概説される併用療法は、単一の送達溶媒又は送達装置で共送達可能である。
【０３５９】
本発明の医薬組成物（及び／又はその他の作用物質）を含む本発明の製剤は、便宜上、単位剤形として提供されてよく、調剤学の分野においてよく知られている任意の方法によって調製されてもよい。そのような方法は、１種類又は複数種類の付属成分を構成する担体と治療薬を会合させる工程を含むことが一般的である。通常、製剤は、治療薬を液状担体、細粒化固形担体、又はそれらの両方と均一、且つ、密接に会合させた後、必要に応じてその産物を所望の製剤の剤形に成形すること（例えば、湿式又は乾式造粒、粉末ブレンドなどの後に当技術分野において知られている従来法を用いた打錠）により調製される。
【０３６０】
様々な実施形態において、本明細書に記載される医薬組成物（及び／又はその他の作用物質）はいずれも、本明細書に記載される投与方法に適合した組成物として、常法に従って製剤される。
【０３６１】
投与経路としては、例えば、口腔経路、皮内経路、筋肉内経路、腹膜内経路、静脈内経路、皮下経路、鼻腔内経路、硬膜外経路、舌下経路、鼻腔内経路、脳内経路、膣内経路、経皮経路、直腸経路、吸入による経路、又は局所経路が挙げられる。投与は局所性投与又は全身性投与であってもよい。いくつかの実施形態では、投与は経口的に達成される。別の実施形態では、投与は非経口注射によって行われる。投与方法は医師の裁量に任せてよく、部分的にはその病気の部位に依存する。ほとんどの場合、本明細書に記載される作用物質はいずれも、投与されると血流に放出される。
【０３６２】
ある実施形態では、本明細書に記載されるキメラタンパク質は、経口投与に適合した組成物として常法に従って製剤される。経口送達用の組成物は、例えば、錠剤、トローチ剤、水性若しくは油性懸濁剤、顆粒剤、粉剤、乳剤、カプセル剤、シロップ剤、又はエリキシル剤などの剤形であってもよい。経口投与される組成物は、薬学的に口に合う調剤を提供するために、１種類又は複数種類の薬剤、例えば、果糖、アスパルテーム、又はサッカリンなどの甘味剤；ペパーミント、冬緑油、又はサクランボなどの香味剤；着色剤、及び保存料を含むことができる。さらに錠剤又は丸剤の剤形の場合、組成物を被覆することで胃腸管での崩壊及び吸収を遅らせ、それによって長期間にわたって持続的作用をもたらすことができる。本明細書に記載される任意のキメラタンパク質の浸透圧活性駆動化合物の周囲を覆う選択的透過膜も経口投与組成物に適切である。これらの後者のプラットフォームでは、カプセル周囲の環境の液体が駆動化合物により吸収され、該駆動化合物は膨潤して穴を通してその作用物質又は作用物質組成物を押し出す。これらの送達プラットフォームは、即放性製剤のスパイク状プロファイルとは対照的に、基本的にゼロ次の送達プロファイルを生成することができる。モノステアリン酸グリセロール又はステアリン酸グリセロールなどの時間遅延物質も有用であり得る。経口組成物は、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、及び炭酸マグネシウムなどの標準的賦形剤を含むことができる。ある実施形態では、賦形剤は製薬グレードのものである。懸濁剤は、活性化合物に加えて、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天、トラガカントなど、及びそれらの混合物などの懸濁剤を含有してもよい。
【０３６３】
非経口投与（例えば、静脈内、筋肉内、腹膜内、皮下、及び関節内の注射及び点滴）に適切な剤形としては、例えば、液剤、懸濁剤、分散剤、乳剤などが挙げられる。それらの剤形は、使用直前に無菌注射媒体中に溶解又は懸濁可能な無菌固形組成物（例えば凍結乾燥組成物）の形態で製造されてもよい。無菌固形組成物は、例えば、当技術分野において知られている懸濁剤又は分散剤を含んでよい。非経口投与に適切な製剤成分としては、注射用水、生理食塩水溶液、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、又は他の合成溶媒などの無菌希釈剤；ベンジルアルコール又はメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；ＥＤＴＡなどのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩、又はリン酸塩などの緩衝剤；及び塩化ナトリウム又はブドウ糖などの浸透圧調節剤が挙げられる。
【０３６４】
静脈内投与について、適切な担体としては、生理食塩水、静菌水、クレモフォールＥＬ（商標）（ＢＡＳＦ社、パーシッパニー、ニュージャージー州）、又はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。担体は、製造条件下及び貯蔵条件下で安定でなくてはならず、且つ、微生物に抗して保存される必要がある。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコール）、及びそれらの適切な混合物を含む溶媒又は分散媒であってもよい。
【０３６５】
本明細書において提供される組成物は、単独で、又は他の適切な構成成分と組み合わせて、吸入によって投与されるエアロゾル製剤に製剤され得る（すなわち、「噴霧化」され得る）。エアロゾル製剤は、加圧可能な噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、プロパン、及び窒素などに混入可能である。
【０３６６】
本明細書に記載される本発明の医薬組成物（及び／又はその他の作用物質）はいずれも、当業者によく知られている制御放出手段又は持続放出手段によって、又は送達装置によって投与可能である。例としては、各々の全体が参照により本明細書に取り込まれる、米国特許第３，８４５，７７０号、同第３，９１６，８９９号、同第３，５３６，８０９号、同第３，５９８，１２３号、同第４，００８，７１９号、同第５，６７４，５３３号、同第５，０５９，５９５号、同第５，５９１，７６７号、同第５，１２０，５４８号、同第５，０７３，５４３号、同第５，６３９，４７６号、同第５，３５４，５５６、及び同第５，７３３，５５６号に記載されるものが挙げられるがこれらに限定されない。そのような剤形は、例えば、ヒドロプロピルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、他のポリマーマトリックス、ゲル、透過膜、浸透圧系、多層被覆、微小粒子、リポソーム、ミクロスフィア、又は所望の放出プロファイルを実現するための色々な割合でのそれらの組合せを使用する１種類又は複数種類の有効成分の制御放出又は持続放出の実現に有用であり得る。本明細書に記載される製剤を含む、当業者に知られている適切な制御放出製剤又は持続放出製剤は、本明細書に記載される作用物質の有効成分との使用について容易に選択可能である。したがって、本発明は、経口投与に適切な単回単位剤形、例えば、これらに限定されないが、制御放出又は持続放出に適合した、錠剤、カプセル剤、ゲルキャップ剤、及びカプレット剤を提供する。
【０３６７】
有効成分の制御放出又は持続放出は、これらに限定されないが、ｐＨの変化、温度変化、適切な波長の光による刺激、酵素の濃度若しくは利用可能性、水の濃度若しくは利用可能性、又は他の生理学的な条件若しくは化合物を含む様々な条件によって刺激可能である。
【０３６８】
別の実施形態では、治療される標的領域の近くに制御放出系を配置することができ、したがって全身用量のうちの一部のみが必要とされる（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ、上掲、２、ｐｐ．１１５−１３８（１９８４）を参照されたい）。Ｌａｎｇｅｒ、１９９０、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４９：ｐｐ．１５２７−１５３３）による総説内で考察されている他の制御放出系を使用してもよい。
【０３６９】
医薬製剤は無菌であることが好ましい。滅菌は、例えば、無菌濾過膜を介した濾過により達成され得る。組成物が凍結乾燥される場合、凍結乾燥及び再構成の前か、又はその後にフィルター滅菌を実施することができる。
【０３７０】
投与及び投与量
本発明に従って投与される本開示のキメラタンパク質の実際の用量は、特定の剤形及び投与方法に応じて異なることが理解される。当業者は本開示のキメラタンパク質の作用を改変し得る多数の要因（例えば、体重、性別、食事、投与時間、投与経路、排出率、対象の状態、薬品の組合せ、遺伝的性質、及び反応感度）を考慮に入れることができる。投与は最大許容量内で連続投与又は１回若しくは複数回の分割投与によって実施可能である。当業者は従来の用量投与試験を用いて所与の条件について最適な投与速度を確認することができる。
【０３７１】
いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質の適切な投薬量は、対象の体重１ｋｇ当たり約０．０１μｇ〜約１００ｍｇ、対象の体重１ｋｇ当たり約０．０１μｇ〜約１０ｍｇ、又は対象の体重１ｋｇ当たり約０．０１μｇ〜約１ｍｇの範囲内であり、例えば、体重１ｋｇ当たり約０．０１μｇ、約０．０２μｇ、約０．０３μｇ、約０．０４μｇ、約０．０５μｇ、約０．０６μｇ、約０．０７μｇ、約０．０８μｇ、約０．０９μｇ、約０．１ｍｇ、約０．２ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．４ｍｇ、約０．５ｍｇ、約０．６ｍｇ、約０．７ｍｇ、約０．８ｍｇ、約０．９ｍｇ、約１ｍｇ、約１．１ｍｇ、約１．２ｍｇ、約１．３ｍｇ、約１．４ｍｇ、約１．５ｍｇ、約１．６ｍｇ、約１．７ｍｇ、約１．８ｍｇ、１．９ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、又は約１００ｍｇであり、それらの上限と下限の値の間の全ての値と範囲を含む。
【０３７２】
本開示のキメラタンパク質の個々の用量は、例えば、単位剤形当たり約１μｇ〜約１００ｍｇ、約１μｇ〜約９０ｍｇ、約１μｇ〜約８０ｍｇ、約１μｇ〜約７０ｍｇ、約１μｇ〜約６０ｍｇ、約１μｇ〜約５０ｍｇ、約１μｇ〜約４０ｍｇ、約１μｇ〜約３０ｍｇ、約１μｇ〜約２０ｍｇ、約１μｇ〜約１０ｍｇ、約１μｇ〜約５ｍｇ、約１μｇ〜約３ｍｇ、約１μｇ〜約１ｍｇ、又は単位剤形当たり約１μｇ〜約５０μｇを含有する単位剤形（例えば、錠剤、カプセル剤、又は液剤）として投与可能である。例えば、単位剤形は、約１μｇ、約２μｇ、約３μｇ、約４μｇ、約５μｇ、約６μｇ、約７μｇ、約８μｇ、約９μｇ、約１０μｇ、約１１μｇ、約１２μｇ、約１３μｇ、約１４μｇ、約１５μｇ、約１６μｇ、約１７μｇ、約１８μｇ、約１９μｇ、約２０μｇ、約２１μｇ、約２２μｇ、約２３μｇ、約２４μｇ、約２５μｇ、約２６μｇ、約２７μｇ、約２８μｇ、約２９、約３０μｇ、約３５μｇ、約４０μｇ、約４５μｇ、約５０μｇ、約６０μｇ、約７０μｇ、約８０μｇ、約９０μｇ、約０．１ｍｇ、約０．２ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．４ｍｇ、約０．５ｍｇ、約０．６ｍｇ、約０．７ｍｇ、約０．８ｍｇ、約０．９ｍｇ、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、又は約１００ｍｇであってもよく、それらの上限と下限の値の間の全ての値と範囲を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は約９μｇの本開示のキメラタンパク質を含有する単位剤形として投与される。別の実施形態では、キメラタンパク質は約１５μｇの本開示のキメラタンパク質を含有する単位剤形として投与される。
【０３７３】
ある実施形態では、キメラタンパク質は、約１μｇ〜約１００ｍｇの１日量、約１μｇ〜約９０ｍｇの１日量、約１μｇ〜約８０ｍｇの１日量、約１μｇ〜約７０ｍｇの１日量、約１μｇ〜約６０ｍｇの１日量、約１μｇ〜約５０ｍｇの１日量、約１μｇ〜約４０ｍｇの１日量、約１μｇ〜約３０ｍｇの１日量、約１μｇ〜約２０ｍｇの１日量、約０１μｇ〜約１０ｍｇの１日量、約１μｇ〜約５ｍｇの１日量、約１μｇ〜約３ｍｇの１日量、又は約１μｇ〜約１ｍｇの１日量で投与される。様々な実施形態においてキメラタンパク質は約１μｇ、約２μｇ、約３μｇ、約４μｇ、約５μｇ、約６μｇ、約７μｇ、約８μｇ、約９μｇ、約１０μｇ、約１１μｇ、約１２μｇ、約１３μｇ、約１４μｇ、約１５μｇ、約１６μｇ、約１７μｇ、約１８μｇ、約１９μｇ、約２０μｇ、約２１μｇ、約２２μｇ、約２３μｇ、約２４μｇ、約２５μｇ、約２６μｇ、約２７μｇ、約２８μｇ、約２９、約３０μｇ、約３５μｇ、約４０μｇ、約４５μｇ、約５０μｇ、約６０μｇ、約７０μｇ、約８０μｇ、約９０μｇ、約０．１ｍｇ、約０．２ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．４ｍｇ、約０．５ｍｇ、約０．６ｍｇ、約０．７ｍｇ、約０．８ｍｇ、約０．９ｍｇ、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、又は約１００ｍｇの１日用量、それらの上限と下限の値の間の全ての値と範囲を含む１日用量で投与される。ある実施形態では、キメラタンパク質は約９μｇの１日用量で投与される。別の実施形態では、キメラタンパク質は約１５μｇの１日用量で投与される。
【０３７４】
本発明のある特定の実施形態によれば、本開示のキメラタンパク質を含む医薬組成物は、例えば、１日に１回より多い回数（例えば、１日に約２回、約３回、約４回、約５回、約６回、約７回、約８回、約９回、又は約１０回）、１日に約１回、２日毎に約１回、３日毎に約１回、１週間に約１回、２週間毎に約１回、毎月に約１回、２か月毎に約１回、３か月毎に約１回、６か月毎に約１回、又は毎年に約１回投与されてもよい。ある実施形態では本開示のキメラタンパク質を含む医薬組成物は１週間に約３回投与される。
【０３７５】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は長期間にわたって投与され得る。例えば、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、少なくとも約４週間、少なくとも約５週間、少なくとも約６週間、少なくとも約７週間、少なくとも約８週間、少なくとも約９週間、少なくとも約１０週間、少なくとも約１１週間、又は少なくとも約１２週間本明細書に記載されるように投与され得る。例えば、本開示のキメラタンパク質は、１２週間、２４週間、３６週間、又は４８週間投与され得る。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも約１か月間、少なくとも約２か月間、少なくとも約３か月間、少なくとも約４か月間、少なくとも約５か月間、少なくとも約６か月間、少なくとも約７か月間、少なくとも約８か月間、少なくとも約９か月間、少なくとも約１０か月間、少なくとも約１１か月間、又は少なくとも約１２か月間投与される。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも約１年間、少なくとも約２年間、少なくとも約３年間、少なくとも約４年間、又は少なくとも約５年間投与され得る。
【０３７６】
併用療法及び追加治療薬
様々な実施形態において、本発明の医薬組成物は追加治療薬と併せて共投与される。共投与は同時投与であってもよく、又は連続投与であってもよい。
【０３７７】
ある実施形態では、追加治療薬と本発明のキメラタンパク質は同時に対象に投与される。「同時」という用語は、本明細書において使用される場合、追加治療薬と本開示のキメラタンパク質が約６０分間以内に、例えば約３０分間以内、約２０分間以内、約１０分間以内、約５分間以内、又は約１分間以内に投与されることを意味する。追加治療薬及び本開示のキメラタンパク質の投与は、単一の製剤（例えば、追加治療薬及び本開示のキメラタンパク質を含有する製剤）の同時投与、又は別々の製剤（例えば、追加治療薬を含有する第一の製剤と本開示のキメラタンパク質を含有する第二の製剤）の同時投与によるものであってもよい。
【０３７８】
治療薬の投与タイミングが追加治療薬と本開示のキメラタンパク質の薬理学的活性が時間的に重なるようなものであり、それによって複合治療効果が発揮される場合、共投与はそれらの治療薬が同時に投与されることを必要としない。例えば、追加治療薬と本開示のキメラタンパク質は連続的に投与してもよい。「連続的」という用語は、本明細書において使用される場合、追加治療薬と本開示のキメラタンパク質が約６０分を超える時間を空けて投与されることを意味する。例えば、追加治療薬と本開示のキメラタンパク質の順次投与の間の時間は、約６０分間以上、約２時間以上、約５時間以上、約１０時間以上、約１日以上、約２日以上、約３日以上、約１週間以上、約２週間以上、又は約１か月間以上であってもよい。最適な投与時間は、投与される追加治療薬及び本開示のキメラタンパク質の代謝速度、排出率、及び／又は薬力学的活性に依存する。追加治療薬又は本開示のキメラタンパク質細胞のどちらが最初に投与されてもよい。
【０３７９】
共投与は同じ投与経路によって対象に治療薬を投与することも必要としない。むしろ、各々の治療薬は任意の適切な経路によって、例えば非経口的又は非−非経口的に投与可能である。
【０３８０】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるキメラタンパク質は、別の治療薬と共投与された場合に相乗的に作用する。前記実施形態では、本開示のキメラタンパク質及び追加治療薬は、それらの薬剤が単剤療法に関連して使用される場合に用いられる用量よりも少ない用量で投与され得る。
【０３８１】
いくつかの実施形態では、本発明は追加治療薬としての化学療法剤に関する。例えば、限定されないが、本開示のキメラタンパク質と化学療法剤のそのような組合せは、本明細書中のいずれかに記載されるようにがんの治療に使用される。化学療法剤の例としては、チオテパ及びＣＹＴＯＸＡＮ（シクロホスファミド）などのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファンなどのスルホン酸アルキル；ベンゾドパ（benzodopa）、カルボコン、メツレドパ（meturedopa）、及びウレドパ（uredopa）などのアジリジン類；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、及びトリメチローロメラミン（trimethylolomelamine）を含むエチレンイミン類及びメチラメラミン類；アセトゲニン類（例えば、ブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン合成類似体、カルゼレシン合成類似体、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン類（例えば、クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体であるＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチインＡ；スポンジスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、コロフォスファミド（cholophosphamide）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノボエンビキン（novembichin）、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード類；カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムスチンなどのニトロソウレア類；エンジイン抗生物質（例えば、カリチアマイシン、特にカリチアマイシンγＩＩ及びカリチアマイシンωＩＩ（例えば、Ａｇｎｅｗ．Ｃｈｅｍ  Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．、３３：ｐｐ．１８３−１８６（１９９４）を参照されたい）などの抗生物質；ダイネミシンＡを含むダイネミシン；クロドロネートなどのビスホスホネート；エスペラミシン；並びにネオカルジノスタチン発色団及び関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン類、アクチノマイシン、アントラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン類、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン類、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（ドキソルビシン）（モルホリノドキソルビシン、シアノモルホリノドキソルビシン、２−ピロリノドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン；マイトマイシンＣなどのマイトマイシン類；ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン類、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（potfiromycin）、ピューロマイシン、クエラマイシン（quelamycin）、ロドルビシン（rodorubicin）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン；メ��トレキサート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝拮抗剤；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンなどのピリミジン類似体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン類；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎剤；フォリン酸などの葉酸補充剤；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート；デメコルシン；ジアジコン；エルフォルミチン（elformithine）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダミン；メイタンシン及びアンサマイトシン類などのメイタンシノイド類；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール（mopidanmol）；ニトラエリン（nitraerine）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ社、ユージーン、オレゴン州）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン類（例えば、Ｔ−２トキシン、ベラキュリン（verracurin）Ａ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド類、例えば、ＴＡＸＯＬ（パクリタキセル）（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  ｏｎｃｏｌｏｇｙ社、プリンストン、ニュージャージー州）、クレモフォール非含有ＡＢＲＡＸＡＮＥ（パクリタキセルのアルブミン添加ナノ粒子製剤）、（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ社、シャンバーグ、イリノイ州）、及びＴＡＸＯＴＥＲＥ（ドセタキセル）（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ社、アントニー、フランス）；クロラムブシル；ＧＥＭＺＡＲ（ゲムシタビン）；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン、オキサリプラチン、及びカルボプラチンなどのプラチナ類似体；ビンブラスチン；プラチナ；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（ビノレルビン）；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ、ＣＰＴ−１１）（イリノテカンと５−ＦＵ及びロイコボリンからなる治療レジメンを含む）；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド類；カペシタビン；コンブレタスタチン；ロイコボリン（ＬＶ）；オキサリプラチン治療レジメン（ＦＯＬＦＯＸ）を含むオキサリプラチン；Ｔｙｋｅｒｂ（ラパチニブ）；細胞増殖を減少させるＰＫＣ−α阻害剤、Ｒａｆ阻害剤、Ｈ−Ｒａｓ阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、Ｔｅｒｃｅｖａ（エルロチニブ））、及びＶＥＧＦ−Ａ阻害剤、並びに上記のいずれかの薬学的に許容可能な塩、酸、又は誘導体が挙げられるがこれらに限定されない。さらに、治療方法は放射線の使用をさらに含み得る。さらに、治療方法は光線力学的療法の使用をさらに含み得る。
【０３８２】
限定されないが、感染症用途を含むいくつかの実施形態では、本発明は追加治療薬としての抗感染症薬に関する。いくつかの実施形態では、抗感染症薬は、アバカビル、アシクロビル、アデフォビル、アンプレナビル、アタザナビル、シドフォビル、ダルナビル、デラビルジン、ジダノシン、ドコサノール、エファビレンツ、エルビテグラビル、エムトリシタビン、エンフビルチド、エトラビリン、ファムシクロビル、及びホスカルネットを含むがこれらに限定されない抗ウイルス剤である。いくつかの実施形態では、抗感染症薬は、セファロスポリン抗生物質（セファレキシン、セフロキシム、セファドロキシル、セファゾリン、セファロシン、セファクロル、セファマンドール、セフォキシチン、セフプロジル、及びセフトビプロール）；フルオロキノロン抗生物質（シプロ、レバクイン、フロキシン、テクイン、アベロックス、及びノルフロックス）；テトラサイクリン抗生物質（テトラサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、及びドキシサイクリン）；ペニシリン抗生物質（アモキシシリン、アンピシリン、ペニシリンＶ、ジクロキサシリン、カルベニシリン、バンコマイシン、及びメチシリン）；モノバクタム抗生物質（アズトレオナム）、及びカルバペネム抗生物質（エルタペネム、ドリペネム、イミペネム／シラスタチン、及びメロペネム）を含むがこれらに限定されない抗細菌剤である。いくつかの実施形態では、抗感染症薬は、抗マラリア剤（例えば、クロロキン、キニン、メフロキン、プリマキン、ドキシサイクリン、アルテメテル／ルメファントリン、アトバコン／プログアニル、及びスルファドキシン／ピリメタミン）、メトロニダゾール、チニダゾール、イベルメクチン、ピランテルパモ酸塩、及びアルベンタゾールを含む。
【０３８３】
例示的な実施形態では、本発明は追加治療薬としての肝炎治療薬の使用に関する。様々な実施形態において、肝炎治療薬としては、イントロンＡ（ＩＮＴＲＯＮ  Ａ）などのＩＦＮ−α又はペガシス（Ｐｅｇａｓｙｓ）若しくはペグイントロン（ＰＥＧ−ＩＮＴＲＯＮ）などのＰＥＧ化ＩＦＮ−α、リバビリン、ボセプレビル、シメプレビル、ソホスブビル、シメプレビル、ダクラタスビル、レジパスビル／ソホスブビル（Ｈａｒｖｏｎｉ）、オムビタスビル／パリタプレビル／リトナビル（Ｔｅｃｈｎｉｖｉｅ）、オムビタスビル／パリタプレビル／リトナビル／ダサブビル（Ｖｉｅｋｉｒａ  Ｐａｋ）、ラミブジン、アデフォビル、エンテカビル、テルビブジン、エンテカビル、テノホビル、ベルパタスビル、エルバスビル、グラゾプレビル、ダサブビル、及びそれらの任意の組合せが挙げられるがこれらに限定されない。ある実施形態では、追加治療薬は、ＩＦＮ−α（例えば、イントロンＡ）又はＰＥＧ化ＩＦＮ−α（例えば、ペガシス又はペグイントロン）である。別の実施形態では、追加治療薬はリバビリンである。
【０３８４】
いくつかの実施形態では、本発明は、本開示のキメラタンパク質と免疫抑制剤を使用する併用療法に関する。いくつかの実施形態では、本発明は免疫抑制剤で治療中の患者へのＣｌｅｃ９Ａ結合性薬剤の投与に関する。
【０３８５】
ある実施形態では、免疫抑制剤はＴＮＦである。例示的な実施形態では、本開示のキメラタンパク質はＴＮＦと共投与された場合に相乗的に作用する。例示的な実施形態では、本開示のキメラタンパク質は腫瘍又はがんの治療に使用するＴＮＦと共投与された場合に相乗的に作用する。例えば、本発明のキメラタンパク質とＴＮＦの共投与は、相乗的に作用して腫瘍又はがんを減少させるか又は除去するか、あるいは腫瘍若しくはがんの成長及び／又は進行及び／又は転移を遅らせる場合がある。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質とＴＮＦを組み合わせることによって、それらの薬剤単剤療法に関連して単独で使用される場合と比較して改善された安全性プロファイルが示され得る。いくつかの実施形態では、キメラタンパク質及びＴＮＦは、それらの薬剤が単剤療法に関連して使用される場合に用いられる用量よりも少ない用量で投与され得る。
【０３８６】
限定されないが、自己免疫用途を含むいくつかの実施形態では、追加治療薬はステロイド系抗炎症剤又は非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）などの抗炎症剤である免疫抑制剤である。ステロイド、特に副腎の副腎皮質コステロイド及びそれらの合成類似体は当技術分野においてよく知られている。本発明において有用な副腎皮質ステロイドの例としては、ヒドロキシルトリアムシノロン、α−メチルデキサメタゾン、β−メチルベタメタゾン、プロピオン酸ベクロメタゾン、安息香酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、吉草酸クロベタゾール、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、酢酸ジフロラゾン、吉草酸ジフルコルトロン、フルアドレノロン（fluadrenolone）、フルクロロンアセトニド、ピバル酸フルメタゾン、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルコルチン（flucortine）ブチルエステル、フルオコルトロン、酢酸フルプレドニデン（フルプレドニリデン）、フルランドレノロン、ハルシノニド、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、コルチゾン、コルトドキソン、フルセトニド（flucetonide）、フルドロコルチゾン、酢酸ジフルオロゾン、フルラドレノロンアセトニド、メドリゾン、アムシナフェル（amcinafel）、アムシナフィド、ベタメタゾン及びそのエステルの平衡物（balance）、クロロプレドニゾン、クロコルトロン、クレスシノロン（clescinolone）、ジクロリゾン、ジフルルプレドネート、フルクロロニド、フルニソリド、フルオロメタロン、フルペロロン、フルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、メプレドニゾン、パラメタゾン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プロピオン酸ベクロメタゾンが挙げられるがこれらに限定されない。本明細書において使用され得る（ＮＳＡＩＤＳ）としては、サリチル酸、アセチルサリチル酸、メチルサリチル酸、グリコールサリチル酸、サリチルアミド、ベンジル−２、５−ジアセトキシ安息香酸、イブプロフェン、スリンダク、ナプロキセン、ケトプロフェン、エトフェナメート、フェニルブタゾン、及びインドメタシンが挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、免疫抑制剤は、アルキル化剤、代謝拮抗剤（例えば、アザチオプリン、メトトレキサート）、細胞傷害性抗生物質、抗体（例えば、バシリキシマブ、ダクリズマブ、及びムロモナブ）、抗イムノフィリン薬（例えば、サイクロスポリン、タクロリムス、シロリムス）、インターフェロン、オピオイド、ＴＮＦ結合タンパク質、ミコフェノレート、及び低分子生物剤（例えば、フィンゴリモド、ミリオシン）などの細胞分裂阻害剤であってもよい。その他の抗炎症剤は、例えば、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる米国特許第４，５３７，７７６号に記載されている。
【０３８７】
いくつかの実施形態では、本発明は、追加治療薬として肥満治療に使用される様々な薬剤に関する。肥満治療に使用される薬剤の例としては、オルリスタット（例えば、ＡＬＬ１、ＸＥＮＩＣＡＬ）、ロルカセリン（例えば、ＢＥＬＶＩＱ）、フェンテルミン−トピラマート（例えば、ＱＳＹＭＩＡ）、シブトラミン（例えば、ＲＥＤＵＣＴＩＬ又はＭＥＲＪＤＩＡ）、リモナバン（ＡＣＯＭＰＬＩＡ）、エキセナチド（例えば、ＢＹＥＴＴＡ）、プラムリンチド（例えば、ＳＹＭＬＩＮ）フェンテルミン、ベンズフェタミン、ジエチルプロピオン、フェンジメトラジン、ブプロピオン、及びメトホルミンが挙げられるがこれらに限定されない。食物中の特定の栄養素を吸収する身体の能力に干渉する薬剤、例えばオルリスタット（例えば、ＡＬＵ、ＸＥＮＩＣＡＬ）、グルコマンナン、及びグアーガムも追加薬剤に含まれる。食欲を抑制する薬剤、例えばカテコールアミン類及びそれらの誘導体（フェンテルミン及び他のアンフェタミン系薬剤など）、様々な抗うつ剤及び気分安定剤（例えば、ブプロピオン及びトピラマート）、食欲低下薬（例えば、デクセドリン、ジゴキシン）も追加薬剤に含まれる。身体の代謝を上げる薬剤も追加薬剤に含まれる。
【０３８８】
いくつかの実施形態では、追加治療薬は、食欲抑制剤、神経伝達物質再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、セロトニン作動薬、ＧＡＢＡ作動性シグナル伝達の調節薬、抗けいれん薬、抗うつ薬、モノアミンオキシダーゼ阻害剤、Ｐ物質（ＮＫ１）受容体アンタゴニスト、メラノコルチン受容体アゴニスト及びアンタゴニスト、リパーゼ阻害剤、脂肪吸収阻害剤、エネルギー摂取又は代謝の調節薬、カンナビノイド受容体調節薬、嗜癖治療薬、メタボリックシンドローム治療薬、ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体（ＰＰＡＲ）調節薬；ジペプチジルペプチダーゼ４（ＤＰＰ−４）アンタゴニスト、心血管疾患治療薬、高トリグリセリド治療薬、低ＨＤＬ治療薬、高コレステロール血症治療薬、及び高血圧治療薬の中から選択され得る。心血管疾患用の薬剤としては、スタチン（例えば、ロバスタチン、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン、及びプラバスタチン）及びオメガ−３薬（例えば、ＬＯＶＡＺＡ、ＥＰＡＮＱＶＡ、ＶＡＳＣＥＰＡ、エステル化オメガ−３類、通常、魚油、オキアミ油、藻類油）が挙げられる。いくつかの実施形態では、追加薬剤は、アンフェタミン、ベンゾジアゼピン、スルホニルウレア、メグリチニド、チアゾリジンジオン、ビグアニド、β−ブロッカー、ＸＣＥ阻害剤、利尿薬、硝酸塩、カルシウムチャネル遮断薬、フェンテルミン、シブトラミン、ロルカセリン、セチリスタット、リモナバン、タラナバン、トピラマート、ガバペンチン、バルプロ酸、ビガバトリン、ブプロピオン、チアガビン、セルトラリン、フルオキセチン、トラゾドン、ゾニサミド、メチルフェニデート、バレニクリン、ナルトレキソン、ジエチルプロピオン、フェンジメトラジン、レパグリニド、ナテグリニド、グリメピリド、メトホルミン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、及びシタグリプチンの中から選択され得る。
【０３８９】
いくつかの実施形態では、本発明は、追加治療薬として糖尿病治療に使用される薬剤に関する。抗糖尿病薬の例としては、スルホニルウレア（例えば、ＤＹＭＥＬＯＲ（アセトヘキサミド）、ＤＩＡＢＩＮＥＳＥ（クロルプロパミド）、ＯＲＩＮＡＳＥ（トルブタミド）、及びＴＯＬＩＮＡＳＥ（トラザミド）、ＧＬＵＣＯＴＲＯＬ（グリピジド）、ＧＬＵＣＯＴＲＯＬ  ＸＬ（徐放性）、ＤＩＡＢＥＴＡ（グリブリド）、ＭＩＣＲＯＮＡＳＥ（グリブリド）、ＧＬＹＮＡＳＥ  ＰＲＥＳＴＡＢ（グリブリド）、及びＡＭＡＲＹＬ（グリメピリド））；ビグアナイド（例えば、メトホルミン（ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ  ＸＲ、ＲＩＯＭＥＴ、ＦＯＲＴＡＭＥＴ、及びＧＬＵＭＥＴＺＡ））；チアゾリジンジオン（例えば、ＡＣＴＯＳ（ピオグリタゾン）及びＡＶＡＮＤＩＡ（ロシグリタゾン）；α−グルコシダーゼ阻害剤（例えば、ＰＲＥＣＯＳＥ（アカルボース）及びＧＬＹＳＥＴ（ミグリトール）；メグリチニド（例えば、ＰＲＡＮＤＩＮ（レパグリニド）及びＳＴＡＲＬＩＸ（ナテグリニド））；ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）阻害剤（例えば、ＪＡＮＵＶＩＡ（シタグリプチン）、ＮＥＳＩＮＡ（アログリプチン）、ＯＮＧＬＹＺＡ（サキサグリプチン）、及びＴＲＡＤＪＥＮＴＡ（リナグリプチン））；ナトリウム−グルコース共役輸送体２（ＳＧＬＴ２）阻害剤（例えばＩＮＶＯＫＡＮＡ（カナグリフロジン））、及び混合丸剤（例えば、グリブリド（スルホニルウレア）とメトホルミンの合剤であるＧＬＵＣＯＶＡＮＣＥ、グリピジド（スルホニルウレア）とメトホルミンの合剤であるＭＥＴＡＧＬＩＰ、及び１錠の丸剤の中にメトホルミンとロシグリタゾン（ＡＶＡＮＤＩＡ）の両方を使用しているＡＶＡＮＤＡＭＥＴ、ＫＡＺＡＮＯ（アログリプチンとメトホルミン）、ＯＳＥＮＩ（アログリプチンとピオグリタゾン）、経口ＭＥＴＦＯＲＭＩＮ、経口ＡＣＴＯＳ、ＢＹＥＴＴＡ皮下注、経口ＪＡＮＵＶＩＡ、経口ＷＥＬＣＨＯＬ、経口ＪＡＮＵＭＥＴ、経口グリピジド、経口グリメピリド、経口ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、ＬＡＮＴＵＳ皮下注、経口グリブリド、経口ＯＮＧＬＹＺＡ、経口ＡＭＡＲＹＩ、ＬＡＮＴＵＳ  ＳＯＬＯＳＴＡＲ皮下注、ＢＹＤＵＲＥＯＮ皮下注、ＬＥＶＥＭＩＲ  ＦＬＥＸＰＥＮ皮下注、経口ＡＣＴＯＰＬＵＳ  ＭＥＴ、経口ＧＬＵＭＥＴＺＡ、経口ＴＲＡＤＪＥＮＴＡ、経口ブロモクリプチン、経口ＫＯＭＢＩＧＬＹＺＥ  ＸＲ、経口ＩＮＶＯＫＡＮＡ、経口ＰＲＡＮＤＩＮ、ＬＥＶＥＭＩＲ皮下注、経口ＰＡＲＬＯＤＥＬ、経口ピオグリタゾン、ＮＯＶＯＬＯＧ皮下注、ＮＯＶＯＬＯＧ  ＦＬＥＸＰＥＮ皮下注、ＶＩＣＴＯＺＡ  ２−ＰＡＫ皮下注、ＨＵＭＡＬＯＧ皮下注、経口ＳＴＡＲＬＩＸ、経口ＦＯＲＴＡＭＥＴ、経口ＧＬＵＣＯＶＡＮＣＥ、経口ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ  ＸＲ、ＮＯＶＯＬＯＧ  Ｍｉｘ７０−３０ＦＬＥＸＰＥＮ皮下注、経口ＧＬＹＢＵＲＩＤＥ−ＭＥＴＦＯＲＭＩＮ、経口アカルボース、ＳＹＭＬＩＮＰＥＮ  ６０皮下注、経口ＧＬＵＣＯＴＲＯＩ  ＸＬ、ＮＯＶＯＬＩＮ  Ｒ注、経口ＧＬＵＣＯＴＲＯＬ、経口ＤＵＥＴＡＣＴ、経口シタグリプチン、ＳＹＭＬＩＮＰＥＮ  １２０皮下注、ＨＵＭＡＬＯＧ  ＫＷＩＫＰＥＮ皮下��、経口ＪＡＮＵＭＥＴ  ＸＲ、経口ＧＬＩＰＩＺＩＤＥ−ＭＥＴＦＯＲＭＩＮ、経口ＣＹＣＬＯＳＥＴ、ＨＵＭＡＬＯＧ  ＭＩＸ  ７５−２５皮下注、経口ナテグリニド、ＨＵＭＡＬＯＧ  ＭＩＸ  ７５−２５  ＫＷＩＫＰＥＮ皮下注、皮下ＨＵＭＵＬＩＮ７０／３０、経口ＰＲＥＣＯＳＥ、皮下ＡＰＩＤＲＡ、ヒューマリンＲ注、経口ジェンタデュエット、ビクトーザ皮下注  ３−パック、ノボリン７０／３０皮下注、ＮＯＶＯＬＩＮ  Ｎ皮下注、インスリンデテミル皮下注、経口微粒子化グリブリド、経口ＧＬＹＮＡＳＥ、ＨＵＭＵＬＩＮ  Ｎ皮下注、インスリングラルギン皮下注、経口ＲＩＯＭＥＴ、経口ピオグリタゾン−メトホルミン、ＡＰＩＤＲＡ  ＳＯＬＯＳＴＡＲ皮下注、インスリンリスプロ皮下注、経口ＧＬＹＳＥＴ、ＨＵＭＵＬＩＮ  ７０／３０  Ｐｅｎ皮下注、経口コレセベラム、経口シタグリプチン−メトホルミン、経口ＤＩＡＢＥＴＡ、ヒトインスリン・レギュラー注、ＨＵＭＵＬＩＮ  Ｎ  Ｐｅｎ皮下注、エキセナチド皮下注、ＨＵＭＡＬＯＧ  Ｍｉｘ  ５０−５０  ＫＷＩＫＰＥＮ皮下注、リラグルチド皮下注、経口ＫＡＺＡＮＯ、経口レパグリニド、経口クロルプロパミド、インスリンアスパルト皮下注、ＮＯＶＯＬＯＧ  Ｍｉｘ  ７０−３０皮下注、ＨＵＭＡＬＯＧ  Ｍｉｘ  ５０−５０皮下注、経口サキサグリプチン、経口ＡＣＴＯＰＬＵＳ  Ｍｅｔ  ＸＲ、経口ミグリトール、組換えＮＰＨヒトインスリン皮下注、ＮＰＨインスリン及びヒトインスリン・レギュラー皮下注、経口トラザミド、経口ミフェプリストン、インスリンアスパルトプロタム−インスリンアスパルト皮下注、経口レパグリニド−メトホルミン、経口サキサグリプチン−メトホルミン、経口リナグリプチン−メトホルミン、経口ＮＥＳＩＮＡ、経口ＯＳＥＮＩ、経口トルブタミド、インスリンリスプロプロタミン及びインスリンリスプロ皮下注、プラムリンチド皮下注、インスリングルリジン皮下注、経口ピオグリタゾン−グリメピリド、経口ＰＲＡＮＤＩＭＥＴ、ＮＯＶＯＬＯＧ  ＰｅｎＦｉｌｌ皮下注、経口リナグリプチン、皮下注用エキセナチド細粒、経口ＫＯＲＬＹＭ、経口アログリプチン、経口アログリプチン−ピオグリタゾン、経口アログリプチン−メトホルミン、経口カナグリフロジン、リスプロ（ＨＵＭＡＬＯＧ）；アスパルト（ＮＯＶＯＬＯＧ）；グルリジン（ＡＰＩＤＲＡ）；レギュラー（ＮＯＶＯＬＩＮ  Ｒ又はＨＵＭＵＬＩＮ  Ｒ）；ＮＰＨ（ＮＯＶＯＬＩＮ  Ｎ又はＨＵＭＵＬＩＮ  Ｎ）；グラルギン（ＬＡＮＴＵＳ）；デテミル（ＬＥＶＥＭＩＲ）；ＨＵＭＵＬＩＮ又はＮＯＶＯＬＩＮ  ７０／３０、及びＮＯＶＯＬＯＧ  Ｍｉｘ  ７０／３０  ＨＵＭＡＬＯＧ  ＭＩＸ  ７５／２５又は５０／５０が挙げられるがこれらに限定されない。
【０３９０】
いくつかの実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞療法と併用された場合に相乗的に作用する。例示的な実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、腫瘍又はがんの治療においてＣＡＲ−Ｔ細胞療法と併用された場合に相乗的に作用する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質物質は、血液系腫瘍の治療においてＣＡＲ−Ｔ細胞療法と併用された場合に相乗的に作用する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、固形腫瘍の治療においてＣＡＲ−Ｔ細胞療法と併用された場合に相乗的に作用する。例えば、本開示のキメラタンパク質とＣＡＲ−Ｔ細胞の使用は、相乗的に作用して腫瘍又はがんを減少させるか又は除去するか、あるいは腫瘍若しくはがんの成長及び／又は進行及び／又は転移を遅らせることがある。様々な実施形態において本発明のキメラタンパク質はＣＡＲ−Ｔ細胞の細胞分裂を誘導する。様々な実施形態において本発明のキメラタンパク質はＣＡＲ−Ｔ細胞の増殖を誘導する。様々な実施形態において本発明のキメラタンパク質はＣＡＲ−Ｔ細胞のアネルギーを防止する。
【０３９１】
様々な実施形態において、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法には、限定されないが、炭酸脱水素酵素ＩＸ（ＣＡＩＸ）、５Ｔ４、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４７、ＣＳ１、ＣＤ１３８、ルイスＹ抗原、Ｌ１−ＣＡＭ、ＭＵＣ１６、ＲＯＲ−１、ＩＬ１３Ｒα２、ｇｐ１００、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）、ヒトパピローマウイルス１６Ｅ６型（ＨＰＶ−１６Ｅ６）、ＣＤ１７１、葉酸受容体α（ＦＲ−α）、ＧＤ２、ヒト上皮成長因子受容体２（ＨＥＲ２）、メソテリン、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、及び血管内皮細胞増殖因子受容体２（ＶＥＧＦ−Ｒ２）、並びに当技術分野においてよく知られている他の腫瘍抗原などの抗原（例えば、腫瘍抗原）を標的とするＣＡＲ−Ｔ細胞が含まれる。追加の腫瘍抗原の例としては、ＭＡＲＴ−１／メランＡ、ｇｐ１００、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰＩＶ）、アデノシンデアミナーゼ結合タンパク質（ＡＤＡｂｐ）、シクロフィリンｂ、大腸がん関連抗原（ＣＲＣ）−００１７−１Ａ／ＧＡ７３３、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、及びその免疫原性のエピトープであるＣＡＰ−１及びＣＡＰ−２、ｅｔｖ６、ａｍｌ１、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）及びその免疫原性のエピトープであるＰＳＡ−１、ＰＳＡ−２、及びＰＳＡ−３、Ｔ細胞受容体／ＣＤ３ζ鎖、ＭＡＧＥファミリー腫瘍抗原（例えば、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ５、ＭＡＧＥ−Ａ６、ＭＡＧＥ−Ａ７、ＭＡＧＥ−Ａ８、ＭＡＧＥ−Ａ９、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＧＥ−Ａ１１、ＭＡＧＥ−Ａ１２、ＭＡＧＥ−Ｘｐ２（ＭＡＧＥ−Ｂ２）、ＭＡＧＥ−Ｘｐ３（ＭＡＧＥ−Ｂ３）、ＭＡＧＥ−Ｘｐ４（ＭＡＧＥ−Ｂ４）、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＧＥ−Ｃ３、ＭＡＧＥ−Ｃ４、ＭＡＧＥ−Ｃ５）、ＧＡＧＥファミリー腫瘍抗原（例えば、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＧＡＧＥ−３、ＧＡＧＥ−４、ＧＡＧＥ−５、ＧＡＧＥ−６、ＧＡＧＥ−７、ＧＡＧＥ−８、ＧＡＧＥ−９）、ＢＡＧＥ、ＲＡＧＥ、ＬＡＧＥ−１、ＮＡＧ、ＧｎＴ−Ｖ、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、チロシナーゼ、ｐ５３、ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｐ２１ｒａｓ、ＲＣＡＳ１、α−フェトプロテイン、Ｅ−カドヘリン、α−カテニン、β−カテニン及びγ−カテニン、ｐ１２０ｃｔｎ、ｇｐ１００  Ｐｍｅｌ１１７、ＰＲＡＭＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ｃｄｃ２７、大腸腺腫症タンパク質（ＡＰＣ）、フォドリン、コネキシン３７、Ｉｇイディオタイプ、ｐ１５、ｇｐ７５、ＧＭ２及びＧＤ２ガングリオシド、ヒトパピローマウイルスタンパク質などのウイルス産物、Ｓｍａｄファミリー腫瘍抗原、ｌｍｐ−１、ＮＡ、ＥＢＶコード核内抗原（ＥＢＮＡ）−１、脳グリコーゲンホスホリラーゼ、ＳＳＸ−１、ＳＳＸ−２（ＨＯＭ−ＭＥＬ−４０）、ＳＳＸ−１、ＳＳＸ−４、ＳＳＸ−５、ＳＣＰ−１ＣＴ−７、ｃ−ｅｒｂＢ−２、ＣＤ１９、ＣＤ３７、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＡＧＳ１６、ＭＵＣ１、ＧＰＮＭＢ、Ｅｐ−ＣＡＭ、ＰＤ−Ｌ１、及びＰＤ−Ｌ２が挙げられるがこれらに限定されない。
【０３９２】
例示的なＣＡＲ−Ｔ細胞療法としては、ＪＣＡＲ０１４（Ｊｕｎｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社）、ＪＣＡＲ０１５（Ｊｕｎｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社）、ＪＣＡＲ０１７（Ｊｕｎｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社）、ＪＣＡＲ０１８（Ｊｕｎｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社）、ＪＣＡＲ０２０（Ｊｕｎｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社）、ＪＣＡＲ０２３（Ｊｕｎｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社）、ＪＣＡＲ０２４（Ｊｕｎｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社）、ＣＴＬ０１９（Ｎｏｖａｒｔｉｓ社）、ＫＴＥ−Ｃ１９（Ｋｉｔｅ  Ｐｈａｒｍａ社）、ＢＰＸ−４０１（Ｂｅｌｌｉｃｕｍ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社）、ＢＰＸ−５０１（Ｂｅｌｌｉｃｕｍ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社）、ＢＰＸ−６０１（Ｂｅｌｌｉｃｕｍ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社）、ｂｂ２１２１（Ｂｌｕｅｂｉｒｄ  Ｂｉｏ社）、ＣＤ−１９スリーピングビューティー細胞（Ｚｉｏｐｈａｒｍ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ社）、ＵＣＡＲＴ１９（Ｃｅｌｌｅｃｔｉｓ社）、ＵＣＡＲＴ１２３（Ｃｅｌｌｅｃｔｉｓ社）、ＵＣＡＲＴ３８（セレクティス社）、ＵＣＡＲＴＣＳ１（Ｃｅｌｌｅｃｔｉｓ社）、ＯＸＢ−３０２（Ｏｘｆｏｒｄ  ＢｉｏＭｅｄｉｃａ社）、ＭＢ−１０１（Ｍｕｓｔａｎｇ  Ｂｉｏ社）及びＩｎｎｏｖａｔｉｖｅ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ社によって開発されたＣＡＲ−Ｔ細胞が挙げられるがこれらに限定されない。
【０３９３】
いくつかの実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、多発性硬化症（ＭＳ）を併用治療する方法において、３−インターフェロン、グラチラマー酢酸塩、Ｔ−インターフェロン、ＩＦＮ−β−２（米国特許出願公開第２００２／００２５３０４号）、スピロゲルマニウム（例えば、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−アザ−８，８−ジメチル−８−ゲルマンスピロ［４：５］デカン、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−アザ−８，８−ジエチル−８−ゲルマスピロ［４：５］デカン、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−アザ−８，８−ジプロピル−８−ゲルマスピロ［４：５］デカン、及びＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−アザ−８，８−ジブチル−８−ゲルマスピロ［４：５］デカン）、ビタミンＤ類似体（例えば、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３（例えば、米国特許第５，７１６，９４６号を参照されたい））、プロスタグランジン（例えば、ラタノプロスト、ブリモニジン、ＰＧＥ１、ＰＧＥ２及びＰＧＥ３；例えば、米国特許出願公開第２００２／０００４５２５号を参照されたい）、テトラサイクリン及び誘導体（例えば、ミノサイクリン及びドキシサイクリン；例えば、米国特許出願公開第２００２／００２２６０８号を参照されたい）、ＶＬＡ−４結合抗体（例えば、米国特許出願公開第２００９／０２０２５２７号を参照されたい）、副腎皮質刺激ホルモン、副腎皮質ステロイド、プレドニゾン、メチルプレドニゾン、２−クロロデオキシアデノシン、ミトキサントロン、スルファサラジン、メトトレキサート、アザチオプリン、シクロホスファミド、サイクロスポリン、フマル酸塩、抗ＣＤ２０抗体（例えば、リツキシマブ）、及びチザニジン塩酸塩を含むがこれらに限定されない１種類又は複数種類のＭＳ治療薬と共に使用される。
【０３９４】
いくつかの実施形態では、キメラタンパク質は、ＭＳの１種類又は複数種類の症状を治療する１種類又は複数種類の治療薬と併用される。そのような作用物質としては、アマンタジン、バクロフェン、パパベリン、メクリジン、ヒドロキシジン、スルファメトキサゾール、シプロフルオキサシン、ドクサート、ペモリン、ダントロレン、デスモプレシン、デキサメタゾン、トルテロジン、フェニトイン、オキシブチニン、ビサコジル、ベンラファキシン、アミトリプチリン、メテナミン、クロナゼパム、イソニアジド、バルデナフィル、ニトロフラントイン、サイリウム親水性ムシロイド、アルプロスタジル、ガバペンチン、ノルトリプチリン、パロキセチン、臭化プロパンテリン、モダフィニル、フルオキセチン、フェナゾピリジン、メチルプレドニゾロン、カルバマゼピン、イミプラミン、ジアゼパム、シルデナフィル、ブプロピオン、及びセルトラリンが挙げられるがこれらに限定されない。
【０３９５】
いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、本明細書に記載される疾患修飾療法（ＤＭＴ）（例えば、表Ａに記載の薬剤）のうちの１種類又は複数種類の療法と共に多発性硬化症を併用治療する方法において使用される。いくつかの実施形態では、本発明は、１種類又は複数種類の本開示の結合性薬剤を使用しない本明細書に記載されるＤＭＴ（例えば、下記の表Ａに記載される薬剤）のうちの１種類又は複数種類を使用する場合と比較して改善された治療効果を実現する。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質と１種類又は複数種類のＤＭＴを組み合わせることによって相乗的な治療効果が生じる。
【０３９６】
疾患修飾療法の例としては、限定されないが、以下のものが挙げられる。
【表１】
2020505955.tif 000007
2020505955.tif 000008
2020505955.tif 000009
2020505955.tif 000010
【０３９７】
いくつかの実施形態では、本発明は輸血との併用療法に関する。例えば、本開示の組成物は輸血を補う。いくつかの実施形態では、本発明は鉄補給剤との併用療法に関する。
【０３９８】
いくつかの実施形態では、本発明は１種類又は複数種類のＥＰＯ系薬剤との併用療法に関する。例えば、本開示の組成物は他のＥＰＯ系薬剤に対するアジュバントとして使用され得る。いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、他のＥＰＯ系薬剤に対する維持療法として使用される。他のＥＰＯ系薬剤としては、ＤＡＲＢＥＰＯＥＴＩＮ（Ａｒａｎｅｓｐ社）、ＥＰＯＣＥＰＴ（Ｌｕｐｉｎ  Ｐｈａｒｍａ社）、ＮＡＮＯＫＩＮＥ（Ｎａｎｏｇｅｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ社）、ＥＰＯＦＩＴ（Ｉｎｔａｓ  Ｐｈａｒｍａ社）、ＥＰＯＧＥＮ（Ａｍｇｅｎ社）、ＥＰＯＧＩＮ、ＥＰＲＥＸ、（Ｊａｎｓｓｅｎ−Ｃｉｌａｇ社）、ＢＩＮＯＣＲＩＴ７（Ｓａｎｄｏｚ社）、ＰＲＯＣＲＩＴを含むがこれらに限定されないエポエチンα；ＮＥＯＲＥＣＯＲＭＯＮ（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ  Ｒｏｃｈｅ社）、ＲＥＣＯＲＭＯＮ、メトキシポリエチレングリコール−エポエチンβ（ＭＩＲＣＥＲＡ；Ｒｏｃｈｅ社）を含むがこれらに限定されないエポエチンβ；ＤＹＮＥＰＯ（赤血球生成刺激タンパク質；Ｓｈｉｒｅ  ＰＬＣ社）を含むがこれに限定されないエポエチンδ；ＥＰＯＭＡＸを含むがこれに限定されないエポエチンω；ＳＩＬＡＰＯ（ＳＴＡＤＡ社）及びＲＥＴＡＣＲＩＴ（Ｈｏｓｐｉｒａ社）を含むがこれらに限定されないエポエチンζ、及び他のＥＰＯを含み、それらの他のＥＰＯにはＥＰＯＣＥＰＴ（Ｌｕｐｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社）、ＥＰＯＴＲＵＳＴ（Ｐａｎａｃｅａ  Ｂｉｏｔｅｃ社）、ＥＲＹＰＲＯ  ＳＡＦＥ（Ｂｉｏｃｏｎ社）、ＲＥＰＯＩＴＩＮ（Ｓｅｒｕｍ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｏｆ  Ｉｎｄｉａ）、ＶＩＮＴＯＲ（Ｅｍｃｕｒｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社）、ＥＰＯＦＩＴ（Ｉｎｔａｓ  Ｐｈａｒｍａ社）、ＥＲＹＫＩＮＥ（Ｉｎｔａｓ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ社）、ＷＥＰＯＸ（Ｗｏｃｋｈａｒｄｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社）、ＥＳＰＯＧＥＮ（ＬＧ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、ＲＥＬＩＰＯＩＥＴＩＮ（Ｒｅｌｉａｎｃｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、ＳＨＡＮＰＯＩＥＴＩＮ（Ｓｈａｎｔｈａ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｃｓ社）、ＺＹＲＯＰ（Ｃａｄｉｌａ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）、ＥＰＩＡＯ（Ｒｈｕｅｐｏ社）（Ｓｈｅｎｙａｎｇ  Ｓｕｎｓｈｉｎｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ社）、ＣＩＮＮＡＰＯＩＥＴＩＮ（Ｃｉｎｎａｇｅｎ社）挙げられるがこれらに限定されない。
【０３９９】
いくつかの実施形態では、本発明は１種類又は複数種類の免疫調節因子、例えば、限定されないが、免疫チェックポイントを調整する薬剤との併用療法に関する。様々な実施形態において、免疫調節因子は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及びＰＤ−Ｌ２のうちの１つ又は複数を標的とする。様々な実施形態において、免疫調節因子はＰＤ−１阻害剤である。様々な実施形態において免疫調節因子はＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及びＰＤ−Ｌ２のうちの１つ又は複数に特異的な抗体である。例えば、いくつかの実施形態では、免疫調節因子は、限定されないが、ニボルマブ、（ＯＮＯ−４５３８／ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ１１０６、ＯＰＤＩＶＯ；Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ社）、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ；Ｍｅｒｃｋ社）、ピディリズマブ（ＣＴ−０１１；Ｃｕｒｅ  Ｔｅｃｈ社）、ＭＫ−３４７５（Ｍｅｒｃｋ社）、ＢＭＳ９３６５５９（Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ社）、ＭＰＤＬ３２８ＯＡ（Ｒｏｃｈｅ社）などの抗体である。いくつかの実施形態では、免疫調節因子はＣＤ１３７又はＣＤ１３７Ｌのうちの１つ又は複数を標的とする。様々な実施形態において免疫調節因子はＣＤ１３７又はＣＤ１３７Ｌのうちの１つ又は複数に特異的な抗体である。例えば、いくつかの実施形態では、免疫調節因子は、限定されないが、ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３及び抗４−１ＢＢ抗体としても知られる）などの抗体である。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、固形腫瘍及び／又はＢ細胞非ホジキンリンパ腫及び／又は頭頚部がん及び／又は多発性骨髄腫の治療のためにウレルマブと（所望によりニボルマブ、リリルマブ、及びウレルマブのうちの１つ又は複数と）組み合わせられる。いくつかの実施形態では、免疫調節因子は、ＣＴＬＡ−４、ＡＰ２Ｍ１、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＳＨＰ−２、及びＰＰＰ２Ｒ５Ａのうちの１つ又は複数を標的とする薬剤である。様々な実施形態において、免疫調節因子は、ＣＴＬＡ−４、ＡＰ２Ｍ１、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＳＨＰ−２、及びＰＰ、Ｐ２Ｒ５Ａのうちの１つ又は複数に特異的な抗体である。例えば、いくつかの実施形態では、免疫調節因子は、限定されないが、イピリムマブ（ＭＤＸ−０１０、ＭＤＸ−１０１、Ｙｅｒｖｏｙ；ＢＭＳ社）及び／又はトレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ社）などの抗体である。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、黒色腫、前立腺がん、及び肺がんうちの１つ又は複数の治療のためにイピリムマブと（所望によりバビツキシマブと）組み合わせられる。様々な実施形態において免疫調節因子はＣＤ２０を標的とする。様々な実施形態において免疫調節因子はＣＤ２０に特異的な抗体である。例えば、いくつかの実施形態では、免疫調節因子は、限定されないが、オファツムマブ（Ｇｅｎｍａｂ社）、オビヌツズマブ（Ｇａｚｙｖａ社）、ＡＭＥ−１３３ｖ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ社）、オクレリズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ社）、ＴＲＵ−０１５（Ｔｒｕｂｉｏｎ社／Ｅｍｅｒｇｅｎｔ社）、ベルツズマブ（ＩＭＭＵ−１０６）などの抗体である。
【０４００】
いくつかの実施形態では、本発明は、内容全体が参照により本明細書に取り込まれる国際公開第２０１３／１０７７９号、国際公開第２０１５／００７５３６号、国際公開第２０１５／００７５２０号、国際公開第２０１５／００７５４２号、及び国際公開第２０１５／００７９０３号に記載される１種類又は複数種類のキメラ作用物質との併用療法に関する。
【０４０１】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるキメラタンパク質は、修飾されている誘導体、すなわち、任意の種類の分子のその組成物への共有結合により、その共有結合がその組成物の活性を妨害しないように修飾されている誘導体を含む。例えば、限定されないが、誘導体としては、特に、グリコシル化、脂質化、アセチル化、ＰＥＧ化、リン酸化、アミド化、公知の保護基／ブロッキング基による誘導体化、タンパク質分解切断、細胞性リガンド又は他のタンパク質への結合などによって修飾されている組成物が挙げられる。特異的な化学切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝合成などを含むがこれらに限定されない公知の方法によって多数の化学的修飾のうちのいずれかを実施することができる。
【０４０２】
さらに他の実施形態では、本明細書に記載されるキメラタンパク質は細胞傷害性薬剤をさらに含み、例示的な実施形態では、毒素、化学療法剤、放射性同位体、及びアポトーシス又は細胞死を引き起こす薬剤を含む。本明細書に記載される組成物にはそのような薬剤が複合体化され得る。
【０４０３】
したがって、本明細書に記載されるキメラタンパク質は、化学リンカー、例えば蛍光色素、酵素、基質、生物発光物質、放射性物質、及び化学発光部分などの検出可能部分、又は例えばストレプトアビジン、アビジン、ビオチン、細胞毒素、細胞傷害剤、及び放射性物質などの機能性部分など、エフェクター部分を翻訳後に付加するために改変される場合がある。
【０４０４】
細胞傷害剤の例としては、メトトレキサート、アミノプテリン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、シタラビン、５−フルオロウラシル、ダカルバジン；メクロレタミン、チオテパ、クロラムブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）、マイトマイシンＣ、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、１−メチルニトロソウレア、シクロホスファミド、メクロレタミン、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、ｃｉｓ−ジクロロジアミンプラチナ（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン、及びカルボプラチン（パラプラチン）などのアルキル化剤；ダウノルビシン（以前のダウノマイシン）、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、デトルビシン、カルミノマイシン、イダルビシン、エピルビシン、ミトキサントロン、及びビサントレンを含むアントラサイクリン類；ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ）、ブレオマイシン、カリチアマイシン、ミトラマイシン、及びアントラマイシン（ＡＭＣ）を含む抗生物質；及びビンカアルカロイド、ビンクリスチン、及びビンブラスチンなどの抗有糸分裂剤が挙げられるがこれらに限定されない。他の細胞傷害剤としては、パクリタキセル（タキソール）、リシン、緑膿菌外毒素、ゲムシタビン、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、エトポシド、テニポシド、コルヒチン、ジヒドロキシアントラシンジオン（dihydroxy anthracin dione）、１−デヒドロテストステロン、糖質コルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ピューロマイシン、プロカルバジン、ヒドロキシウレア、アスパラギナーゼ、副腎皮質ステロイド、ミトタン（Ｏ，Ｐ’−（ＤＤＤ））、インターフェロン、及びこれらの細胞傷害剤の混合物が挙げられる。
【０４０５】
その他の細胞傷害剤としては、カルボプラチン、シスプラチン、パクリタキセル、ゲムシタビン、カリチアマイシン、ドキソルビシン、５−フルオロウラシル、マイトマイシンＣ、アクチノマイシンＤ、シクロホスファミド、ビンクリスチン、ブレオマイシン、ＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲアンタゴニスト、プラチン類、タキソール類、イリノテカン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、ロイコボリン、ステロイド類、シクロホスファミド、メルファラン、ビンカアルカロイド類（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、及びビノレルビン）、ムスチン、チロシンキナーゼ阻害剤、放射線療法、性ホルモンアンタゴニスト、選択性アンドロゲン受容体調節薬、選択性エストロゲン受容体調節薬、ＰＤＧＦアンタゴニスト、ＴＮＦアンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニスト、インターロイキン（例えばＩＬ−１２又はＩＬ−２）、ＩＬ−１２Ｒアンタゴニスト、毒素結合モノクローナル抗体、腫瘍抗原特異的モノクローナル抗体、アービタックス、アバスチン、ペルツズマブ、抗ＣＤ２０抗体、リツキサン、オクレリズマブ、オファツムマブ、ＤＸＬ６２５、ハーセプチン（登録商標）、又はそれらの任意の組合せなどの化学療法剤が含まれるがこれらに限定されない。リシン、ジフテリア毒素、及び緑膿菌毒素などの植物及び細菌に由来する毒性酵素を治療薬（例えば抗体）に複合体化して細胞種特異的死滅試薬としてもよい（Ｙｏｕｌｅ，ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、７７：ｐｐ．５４８３（１９８０）、Ｇｉｌｌｉｌａｎｄ，ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、７７：ｐｐ．４５３９（１９８０）、Ｋｒｏｌｉｃｋ，ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、７７：ｐｐ．５４１９（１９８０））。
【０４０６】
他の細胞傷害剤としては、米国特許第６，６５３，１０４号内でＧｏｌｄｅｎｂｅｒｇによって説明されているような細胞傷害性リボヌクレアーゼが挙げられる。本発明の実施形態は、α粒子又はβ粒子を放射する放射性核種が複合体形成剤を使用して、又は使用せずに、安定的に本開示のキメラタンパク質に結合している放射性免疫複合体にも関する。そのような放射性核種には、リン−３２、スカンジウム−４７、銅−６７、ガリウム−６７、イットリウム−８８、イットリウム−９０、ヨウ素−１２５、ヨウ素−１３１、サマリウム−１５３、ルテチウム−１７７、レニウム−１８６、又はレニウム−１８８などのβ放射体、及びアスタチン−２１１、鉛−２１２、ビスマス−２１２、ビスマス−２１３、又はアクチニウム−２２５などのα放射体が含まれる。
【０４０７】
検出可能部分の例としては、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アセチルコリンエステラーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、及びルシフェラーゼがさらに挙げられるがこれらに限定されない。その他の蛍光物質の例としては、ローダミン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ウンベリフェロン、ジクロロトリアジニルアミン、フィコエリトリン、及び塩化ダンシルが挙げられるがこれらに限定されない。その他の化学発光部分の例としてはルミノールが挙げられるがこれらに限定されない。その他の生物発光物質の例としては、ルシフェリン及びエクオリンが挙げられるがこれらに限定されない。その他の放射性物質の例としては、ヨウ素−１２５、炭素−１４、硫黄−３５、トリチウム、及びリン−３２が挙げられるがこれらに限定されない。
【０４０８】
治療方法
本明細書に記載される方法と組成物は、がん、感染症、免疫障害、貧血、自己免疫疾患、心血管疾患、創傷治癒、虚血関連疾患、神経変性疾患、代謝性疾患、並びに他の多くの疾患及び障害を含むがこれらに限定されない様々な疾患及び障害の治療に適用される。
【０４０９】
さらに、本開示の作用物質のうちのいずれも、がん、感染症、免疫障害、炎症性疾患又は症状、及び自己免疫疾患を含むがこれらに限定されない様々な疾患及び障害の治療に、又はそれらの様々な疾患及び障害を治療するための医薬の製造に使用され得る。
【０４１０】
いくつかの実施形態では、本発明は、慢性肉芽腫症、大理石骨病、特発性肺線維症、フリードライヒ運動失調症、アトピー性皮膚炎、シャーガス病、がん、心不全、自己免疫疾患、鎌状赤血球症、サラセミア、失血、輸血反応、糖尿病、ビタミンＢ１２欠乏症、コラーゲン血管疾患、シュワックマン症候群、血小板減少性紫斑病、セリアック病、甲状腺機能低下症又はアジソン病などの内分泌不全状態、クローン病などの自己免疫疾患、全身性エリテマトーデス、リウマチ性関節炎又は若年性リウマチ性関節炎、潰瘍性大腸炎、好酸球性筋膜炎などの免疫障害、低免疫グロブリン血症、又は胸腺腫／胸腺がん、移植片対宿主病、前白血病、非造血系症候群（例えばダウン症候群、デュボヴィッツ症候群、ゼッケル症候群）、フェルティー症候群、溶血性尿毒症症候群、骨髄異形成症候群、発作性夜間ヘモグロビン尿症、骨髄線維症、汎血球減少症、赤芽球癆、シェーンライン・ヘノッホ紫斑病、マラリア、タンパク質欠乏症、月経過多、全身性硬化症、肝硬変、代謝低下状態、及びうっ血性心不全のうちの１つ又は複数の治療に関し、又はそれらのうちの１つ又は複数を有する患者に関する。
【０４１１】
いくつかの実施形態では、本発明は、慢性肉芽腫症、大理石骨病、特発性肺線維症、フリードライヒ運動失調症、アトピー性皮膚炎、シャーガス病、マイコバクテリウム感染症、がん、強皮病、肝炎、Ｃ型肝炎、敗血症ショック、及びリウマチ性関節炎のうちの１つ又は複数の治療に関し、又はそれらのうちの１つ又は複数を有する患者に関する。
【０４１２】
いくつかの実施形態では、本発明は、がんの治療、又はがんを有する患者に関する。本明細書において使用される場合、がんとは身体の器官及び系の正常な機能実行に干渉し得る任意の無制御細胞増殖であり、がんには原発腫瘍と転移腫瘍の両方が含まれる。元の場所から移動し、且つ、生命維持に必要な器官に広まった原発腫瘍又は原発がんはそれらの冒された器官の機能悪化を介して最終的に対象の死を引き起こし得る。転移腫瘍は原発腫瘍由来がん細胞の身体の他の部分への転移の結果として生じるがん細胞又はがん細胞群であり、原発腫瘍の場所とは異なる。転移腫瘍は最終的に対象の死を引き起こす場合がある。例えば、がんには良性及び悪性のがん、ポリープ、過形成、並びに休眠腫瘍又は微小転移巣が含まれ得る。
【０４１３】
治療され得るがんの例としては、細胞腫、例えば、腺がん、基底細胞がん、扁平上皮がん、及び移行上皮がん）、肉腫（例えば、骨肉腫及び軟組織肉腫を含む）、白血病（例えば、急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、及び有毛細胞白血病を含む）、リンパ腫及び骨髄腫（例えば、ホジキン及び非ホジキンリンパ腫、軽鎖骨髄腫、非分泌型骨髄腫、ＭＧＵＳ、及び形質細胞腫を含む）、及び中枢神経系がん（例えば、脳がん（例えば、神経膠腫（例えば星状細胞腫、希突起神経膠腫、及び上衣腫）、髄膜腫、下垂体腺腫、及び神経腫）、及び脊髄腫瘍（例えば髄膜腫及び神経繊維腫））を含む様々なサブタイプのものなどの細胞腫が挙げられるがこれらに限定されない。
【０４１４】
治療され得るがんの例としては、基底細胞がん、胆管がん、膀胱がん、骨がん、脳及び中枢神経系のがん、乳がん、腹膜がん、子宮頸部がん、絨毛癌、大腸がん、結合組織がん、消化器がん、子宮内膜がん、食道がん、眼のがん、頭頚部がん、胃がん（胃腸がんを含む）、神経膠芽腫、肝細胞癌、肝癌、上皮内新生物、腎臓がん、喉頭がん、白血病、肝臓がん、肺がん（例えば、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌）、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、口腔がん（口唇、舌、口、及び咽頭）、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸がん、呼吸器がん、唾腺癌、肉腫（例えば、カポジ肉腫）、皮膚がん、扁平上皮がん、胃がん、精巣がん、甲状腺がん、子宮又は子宮内膜のがん、泌尿器がん、外陰がん、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫並びにＢ細胞リンパ腫を含むリンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非分割細胞ＮＨＬ、巨大腫瘤病変ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、及びワルデンストレーム型マクログロブリン血症を含む）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、有毛細胞白血病、慢性骨髄芽球性白血病、並びに他のがん腫及び肉腫、及び移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、並びに母斑症に関連する異常血管増殖、浮腫（例えば脳腫瘍に関連する浮腫）、及びメグズ症候群が挙げられるがこれらに限定されない。ある実施形態では、本発明は有毛細胞白血病を含む白血病の治療に関する。別の実施形態では、本発明は悪性黒色腫を含む黒色腫の治療に関する。その他の実施形態では、本発明はＡＩＤＳ関連カポジ肉腫を含むカポジ肉腫の治療に関する。
【０４１５】
いくつかの実施形態では、本発明は、微生物感染症及び／又は慢性感染症の治療、あるいは微生物感染症及び／又は慢性感染症を有する患者に関する。感染症の例としては、シャーガス病、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ、結核、骨髄炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、エプスタイン・バーウイルス又はパルボウイルス、Ｔ細胞白血病ウイルス、細菌過剰症候群、真菌又は寄生生物の感染症が挙げられるがこれらに限定されない。
【０４１６】
いくつかの実施形態では、本発明は肝炎の治療に関する。治療され得る例示的な肝炎としてはＡ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、自己免疫性肝炎、アルコール性肝炎、急性肝炎、及び慢性肝炎が挙げられるがこれらに限定されない。
【０４１７】
例示的な実施形態では、本発明は慢性Ｃ型肝炎の治療に関する。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、遺伝子型１（例えば、１ａ、１ｂ）、遺伝子型２（例えば２ａ、２ｂ、２ｃ及び２ｄ）、遺伝子型３（例えば、３ａ、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、及び３ｆ）、遺伝子型４（例えば、４ａ、４ｂ、４ｃ、４ｄ、４ｅ、４ｆ、４ｇ、４ｈ、４ｉ及び４ｊ）、遺伝子型５ａ、及び遺伝子型６ａを含む遺伝子型のＣ型肝炎ウイルスのうちのいずれか一種に感染した患者を治療するために活用され得る。
【０４１８】
様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、標準抗ウイルス治療にあまり応答しないか、又は全く応答しない患者、他には標準Ｃ型肝炎治療による治療が困難な患者を治療するために活用され得る。ある実施形態では、キメラタンパク質は、リバビリンを併用する、又は併用しないＩＦＮ−α療法（例えば、ＩＦＮ−α２ａ、ＩＦＮ−α２ｂ、又はＰＥＧ化ＩＦＮ−α）に対して低い応答を示すか、又は応答を示さない患者を治療するために活用され得る。ある実施形態では、キメラタンパク質は、ＰＥＧ化インターフェロンとリバビリンの併用療法に対して低い応答を示すか、又は応答を示さない患者を治療するために活用され得る。ある実施形態では、本発明は、それまでのＩＦＮ−α療法に応答しなかった遺伝子型１又は他のいずれかの遺伝子型のＣ型肝炎ウイルスに感染した患者の治療に関する。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、高いベースラインウイルス量（例えば、８００，０００ＩＵ／ｍＬ超）を有する患者を治療するために使用され得る。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、肝線維症及び／又は肝硬変が進行した患者を含む重篤な肝臓損傷を有する患者を治療するために活用され得る。
【０４１９】
いくつかの実施形態では、本発明は抗ウイルス療法を受けたことがない患者の治療に関する。他の実施形態では、本発明はそれまでの抗ウイルス療法に応答しなかった患者の治療に関する。いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は病気が再発した患者を治療するために使用され得る。
【０４２０】
いくつかの実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、白人、アフリカ系アメリカ人、ヒスパニック、及びアジア人を含む全ての人種群における肝炎ウイルス感染症の治療に有効であり得る。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質はリバビリンを併用する、又は併用しないＩＦＮ−α療法にはあまり応答しないアフリカ系アメリカ人の治療に特に有効であり得る。
【０４２１】
様々な実施形態において、本発明の標的化キメラタンパク質は、非標的化コンセンサスインターフェロン又は非改変野生型ＩＦＮ−α（例えば、ＩＦＮ−α２ａ又はＩＦＮ−α２ｂ）又は改変型ＩＦＮ−α（例えば、ＰＥＧ化ＩＦＮ−α）と比較して改善された安全性を実現する。例示的な実施形態では、本開示のキメラタンパク質の投与には非標的化コンセンサスインターフェロン又は非改変野生型ＩＦＮ−α又は改変型ＩＦＮ−αの使用に付随する副作用などの最小限の副作用（例えば、インフルエンザ様の症状、筋肉痛、白血球減少症、血小板減少症、好中球減少症、うつ、及び体重減少）が付随する。
【０４２２】
いくつかの実施形態では、本発明の標的化キメラタンパク質は、非標的化コンセンサスインターフェロン又は非改変野生型ＩＦＮ−α（例えば、ＩＦＮ−α２ａ又はＩＦＮ−α２ｂ）又は改変型ＩＦＮ−α（例えば、ＰＥＧ化ＩＦＮ−α）と比較して改善された治療活性を示す。いくつかの実施形態では、本発明の標的化キメラタンパク質は非標的化コンセンサスインターフェロン又は非改変野生型ＩＦＮ−α（例えば、ＩＦＮ−α２ａ又はＩＦＮ−α２ｂ）又は改変型ＩＦＮ−α（例えば、ＰＥＧ化ＩＦＮ−α）と比較して改善された薬物動態プロファイル（例えば、より長い血清中半減期及び安定性）を示す。
【０４２３】
理論に捉われることを望むものではないが、そのような有利な安全性並びに薬物動態学上及び治療上のプロファイルのため、本開示のキメラタンパク質は患者を高投与量及び／又は長期間にわたって治療するために使用され得ると考えられている。例えば、本開示のキメラタンパク質は慢性Ｃ型肝炎感染症に対する初期の導入療法のために高投与量で使用され得る。別の例では本開示のキメラタンパク質は疾患の再発を防止するための長期維持療法に使用され得る。
【０４２４】
様々な実施形態において、本開示の組成物は、１種類又は複数種類の炎症性疾患又は症状、例えば、炎症、急性炎症、慢性炎症、呼吸器疾患、アテローム性硬化症、再狭窄、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、敗血症ショック、リウマチ性関節炎、炎症性腸疾患、骨盤内炎症性疾患、疼痛、眼炎症性疾患、セリアック病、リー症候群、グリセロールキナーゼ欠損症、家族性好酸球増加症（ＦＥ）、常染色体劣性痙攣性運動失調症、炎症性喉頭疾患；結核、慢性胆嚢炎、気管支拡張症、珪肺症、及び他の塵肺症を治療又は予防するために使用される。
【０４２５】
様々な実施形態において、本開示の組成物は、１種類又は複数種類の自己免疫性疾患又は症状、例えば、多発性硬化症、真性糖尿病、ループス、セリアック病、クローン病、潰瘍性大腸炎、ギラン・バレー症候群、硬皮、グッドパスチャー症候群、ウェゲナー肉芽腫症、自己免疫性てんかん、ラスムッセン脳炎、原発性胆管硬化症、硬化性胆管炎、自己免疫性肝炎、アジソン病、橋本甲状腺炎、線維筋痛症、メニエール症候群；移植拒絶（例えば、同種移植片拒絶反応の防止）悪性貧血、リウマチ性関節炎、全身性エリテマトーデス、皮膚筋炎、シェーグレン症候群、エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、ライター症候群、グレーブス病、及び他の自己免疫疾患を治療又は予防するために使用される。
【０４２６】
様々な実施形態において、本開示の組成物は、冠動脈心疾患（ＣＨＤ）、脳血管性疾患（ＣＶＤ）、大動脈弁狭窄症、末梢血管疾患、アテローム性硬化症、動脈硬化症、心筋梗塞（心臓発作）、脳血管性疾患（脳卒中）、一過性虚血性発作（ＴＩＡ）、狭心症（安定型及び不安定型）、心房細動、不整脈、弁膜症、及び／又はうっ血性心不全を含むがこれらに限定されない心臓及び血管を冒す疾患又は症状など、心血管疾患を治療、管理、又は予防するために使用される。
【０４２７】
様々な実施形態において、本開示の組成物は、１種類又は複数種類の代謝関連障害を治療又は予防するために使用される。様々な実施形態において、本発明は、１型糖尿病、２型糖尿病、及び肥満関連糖尿病を含む糖尿病の治療、管理、又は予防に有用である。本発明の組成物と方法は糖尿病関連障害の治療又は予防に有用であり、糖尿病関連障害には糖尿病性腎症、高血糖症、耐糖能異常、インスリン抵抗性、肥満、脂質異常症、脂質異常血症、高脂質血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、低ＨＤＬレベル、高ＬＤＬレベル、アテローム性硬化症及びその続発症、血管再狭窄、過敏性腸症候群、クローン病及び潰瘍性大腸炎を含む炎症性腸疾患、他の炎症症状、膵臓炎、腹部肥満、神経変性疾患、網膜症、腫瘍性疾患、脂肪肉腫などの脂肪細胞腫瘍と脂肪細胞がん、前立腺がん、並びに胃がん、乳がん、膀胱がん、及び結腸がんを含む他のがん、血管新生、アルツハイマー病、乾癬、高血圧、メタボリックシンドローム（例えば、以下の障害、すなわち腹部肥満、高トリグリセリド血症、低ＨＤＬコレステロール、高血圧、及び高空腹時血漿グルコースのうちの３つ以上を有する人物）、卵巣高アンドロゲン症（多嚢胞性卵巣症候群）、及びインスリン抵抗性が一要素である睡眠時無呼吸症などの他の障害が含まれるがこれらに限定されない。本発明の組成物及び方法は、遺伝的肥満又は環境的肥満を含む肥満、及び肥満関連障害の治療、管理、又は予防に有用である。本明細書において肥満関連障害は肥満に付随し、肥満が原因となり、又は肥満により生じる。肥満関連障害の例としては、肥満、糖尿病、多食症、過食症、及び大食症、高血圧、血漿中インスリン濃度上昇及びインスリン抵抗性、脂質異常血症、高脂血症、子宮内膜がん、乳がん、前立腺がん、腎臓がん、及び結腸がん、骨関節炎、閉塞型睡眠時無呼吸症、胆石、心疾患、異常心拍リズム及び不整脈、心筋梗塞、うっ血性心不全、冠動脈心疾患、突然死、脳卒中、多嚢胞性卵巣症、頭蓋咽頭腫、プラダー・ウィリー症候群、フレーリヒ症候群、ＧＨ欠損性対象、正常範囲内変異型小人症、ターナー症候群、及び代謝活性の低下又は総除脂肪体重の割合としての休息時エネルギー消費の低下を示す他の病態、例えば急性リンパ芽球性白血病の子供が挙げられる。肥満関連障害のその他の例は、メタボリックシンドローム、インスリン抵抗性症候群、生殖ホルモン異常症、性及び生殖機能不全、例えば男性における生殖障害、不稔、性腺機能不全症と女性における男性型多毛症、母体肥満に関連する胎児欠損、肥満関連胃食道逆流症などの胃腸運動障害、肥満低換気症候群（ピックウィック症候群）などの呼吸器障害、息切れ、心血管障害、血管の全身性炎症などの炎症、動脈硬化症、高コレステロール血症、腰痛、胆嚢疾患、高尿酸血症、痛風、及び腎臓がん、及び麻酔危険度の上昇である。本発明の組成物と方法はアルツハイマー病の治療にも有用である。
【０４２８】
様々な実施形態において、本開示の組成物は、１種類又は複数種類の呼吸器疾患、例えば特発性肺線維症（ＩＰＦ）、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気管支拡張症、アレルギー性鼻炎、副鼻腔炎、肺血管収縮、炎症、アレルギー、呼吸障害、呼吸困難症候群、嚢胞性線維症、肺高血圧、肺血管収縮、肺気腫、ハンタウイルス肺性症候群（ＨＰＳ）、レフラー症候群、グッドパスチャー症候群、胸膜炎、肺臓炎、肺水腫、肺線維症、サルコイドーシス、呼吸器合胞体ウイルス感染症の合併症、及び他の呼吸器疾患を治療又は予防するために使用される。
【０４２９】
いくつかの実施形態では、本発明は、１種類又は複数種類の神経変性疾患を治療又は予防するために使用される。神経変性疾患の例としては、フリードライヒ運動失調症、多発性硬化症（限定されないが、良性多発性硬化症、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）、二次性進行型多発性硬化症（ＳＰＭＳ）、進行性再発型多発性硬化症（ＰＲＭＳ）、及び一次性進行型多発性硬化症（ＰＰＭＳ）を含む）、アルツハイマー病（限定されないが、若年性アルツハイマー病、遅発性アルツハイマー病、及び家族性アルツハイマー病（ＦＡＤ）を含む）、パーキンソン病とパーキンソン症候群（限定されないが、特発性パーキンソン病、血管性パーキンソン症、薬剤性パーキンソン症候群、レビー小体型認知症、遺伝性パーキンソン病、若年性パーキンソン病を含む）、ハンチントン病、筋委縮性側索硬化症（ＡＬＳ；限定されないが、孤発性ＡＬＳ、家族性ＡＬＳ、西太平洋地域ＡＬＳ、若年性ＡＬＳ、平山病を含む）が挙げられるがこれらに限定されない。
【０４３０】
様々な実施形態において、本開示のキメラタンパク質は、創傷、例えば、非治癒性創傷、潰瘍、火傷、又は凍傷、慢性又は急性創傷、開いているか又は閉じた創傷、内部又は外部の創傷（外部創傷の例は、貫通創傷及び非貫通創傷である）の治療に使用される。
【０４３１】
様々な実施形態において本開示のキメラタンパク質は、虚血、非限定的な例として、急性冠動脈虚血症候群、急性肺障害（ＡＬＩ）、急性心筋梗塞（ＡＭＩ）、急性呼吸困難症候群（ＡＲＤＳ）、動脈閉塞性疾患、動脈硬化症、関節軟骨欠損、無菌性全身炎症、アテローム性心血管疾患、自己免疫疾患、骨折、骨折、脳浮腫、脳灌流圧低下、バージャー病、火傷、がん、心血管疾患、軟骨損傷、脳梗塞、脳虚血、脳卒中、脳血管性疾患、化学療法誘発性末梢神経障害、慢性感染症、慢性腸管虚血、跛行、うっ血性心不全、結合組織損傷、打撲傷、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、重症虚血肢（ＣＬＩ）、クローン病、深部静脈血栓症、深部創傷、潰瘍治癒遅延、創傷治癒遅延、糖尿病（Ｉ型及びＩＩ型）、糖尿病性神経障害、糖尿病誘発性虚血、播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）、塞栓性脳虚血、凍傷、移植片対宿主病、遺伝性出血性末梢血管拡張症、虚血性血管疾患、高酸素症、低酸素症、炎症、炎症性腸疾患、炎症性疾患、腱損傷、間欠性跛行症、腸管虚血、虚血、虚血性脳疾患、虚血性心臓疾患、虚血性末梢血管疾患、胎盤虚血、虚血性腎臓疾患、虚血性血管疾患、虚血性再灌流障害、裂傷、左主幹冠動脈疾患、虚血肢、下肢虚血、心筋梗塞、心筋虚血、器官虚血、骨関節炎、骨粗鬆症、骨肉腫、パーキンソン病、末梢動脈疾患（ＰＡＤ）、末梢動脈疾患、末梢性虚血、末梢神経障害、末梢血管疾患、前がん、肺水腫、肺性塞栓、リモデリング疾患、腎虚血、網膜虚血、網膜症、敗血症、皮膚潰瘍、臓器移植、脊髄損傷、脳卒中、軟骨下骨嚢胞、血栓症、血栓性脳虚血、組織虚血、一過性虚血性発作（ＴＩＡ）、外傷性脳損傷、潰瘍性大腸炎、腎臓の血管疾患、血管炎症、フォンヒッペル・リンダウ症候群、又は組織若しくは器官に対する創傷の治療に使用される。
【０４３２】
様々な実施形態において本発明は慢性腎臓疾患（例えば、透析）により生じる貧血、及び／又は抗がん剤（例えば、化学療法）により生じる貧血、及び／又はＨＩＶ治療（例えばジドブシン（ＩＮＮ）又はアジドチミジン（ＡＺＴ））により生じる貧血を含む貧血、炎症性腸疾患（例えば、クローン病及び潰瘍性大腸炎）、炎症症状（例えば、関節炎、狼瘡、ＩＢＤ）に関連する貧血、糖尿病に関連する貧血、精神分裂病、大脳マラリア、再生不良性貧血、及びがんの治療（例えば、化学療法及び／又は放射線）による脊髄形成異常、及び様々な骨髄異型性症候群（例えば、鎌状赤血球貧血、ヘモグロビンＳＣ病、ヘモグロビンＣ病、アルファ及びベータサラセミア、早産後の新生児貧血、及び同等の症状）のうちの１つ又は複数の治療に関する。
【０４３３】
いくつかの実施形態では、本発明は、貧血、すなわち赤血球の数及び／又は赤血球に見られるヘモグロビンの量が正常に満たない状態の治療、又は貧血を有する患者に関する。様々な実施形態において、貧血は急性貧血でも慢性貧血でもよい。例えば、本開示の貧血としては、鉄欠乏性貧血、腎性貧血、慢性疾患／炎症の貧血、大球性胃酸欠乏性貧血、若年性悪性貧血、及び先天性悪性貧血などの悪性貧血、がん関連貧血、抗がん関連貧血（例えば化学療法関連貧血、放射線療法関連貧血）、赤芽球癆、過剰量の芽細胞を伴う難治性貧血、再生不良性貧血、Ｘ連鎖鉄芽球性貧血、溶血性貧血、鎌状赤血球貧血、ＥＳＡの産生不全に起因する貧血、脊髄形成異常症候群、低色素性貧血、小赤血球性貧血、鉄芽球性貧血、自己免疫性溶血性貧血、クーリー貧血、地中海性貧血、ダイアモンド・ブラックファン貧血、ファンコーニ貧血、及び薬剤誘発性溶血性貧血が挙げられるれるがこれらに限定されない。貧血は、低酸素症、慢性疲労症、集中力欠如、青白い肌、低血圧、めまい、及び心不全を含む重篤な症状の原因となることがある。
【０４３４】
いくつかの実施形態では、本発明は、慢性腎不全の結果生じる貧血の治療に関する。いくつかの実施形態では本発明は透析、血液透析、腹膜透析、血液濾過、血液透析濾過、及び腎臓移植を含む１種類又は複数種類の腎代替療法を使用した結果生じる貧血の治療に関する。
【０４３５】
いくつかの実施形態では、本発明は、透析を受けていない慢性腎臓疾患の患者の治療に関する。例えば、本発明は、ステージ１のＣＫＤ、又はステージ２のＣＫＤ、又はステージ３のＣＫＤ、又はステージ４のＣＫＤ、又はステージ５のＣＫＤの患者に関する。いくつかの実施形態では、本患者は、ステージ４のＣＫＤ又はステージ５のＣＫＤの患者である。いくつかの実施形態では、本開示の患者は、腎臓移植を受けたことがある。いくつかの実施形態では、本発明は急性腎障害（ＡＫＩ）の患者の貧血の治療に関する。
【０４３６】
いくつかの実施形態では、貧血は化学療法によって誘発される。例えば、化学療法は任意の骨髄抑制性化学療法であってもよい。ある実施形態では、化学療法は、レブリミド、サロミド、デキサメタゾン、アドリアマイシン、及びドキシルのうちの１つ又は複数である。いくつかの実施形態では、化学療法はシスプラチン（例えば、ＰＬＡＴＩＮＯＬ）及びカルボプラチン（例えば、ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ）を含む１種類又は複数種類のプラチナ系薬品である。いくつかの実施形態では、化学療法は本明細書に記載される化学療法剤のうちのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、化学療法は内容全体が参照により本明細書に取り込まれるＧｒｏｏｐｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ、（１９９９）９１（１９）：ｐｐ．１６１６−１６３４に記載されるいずれかの薬剤である。いくつかの実施形態では、本開示の組成物及び方法は、後期ステージがん（例えば、ステージＩＶ、又はステージＩＩＩ、又はステージＩＩのがん）の患者の化学療法関連貧血の治療に使用される。いくつかの実施形態では、本開示の組成物及び方法は、投与集中（ｄｏｓｅ−ｄｅｎｓｅ）化学療法又は他の積極的な化学療法レジメンを受けているがん患者の化学療法関連貧血の治療に使用される。
【０４３７】
いくつかの実施形態では、本発明は、１種類又は複数種類の血液系のがん、例えば、白血病、リンパ腫、及び多発性骨髄腫の患者の貧血の治療に関する。そのようながんは骨髄を直接的に冒す。さらに、本発明は、骨又は骨髄に転移した転移がんに関する。いくつかの実施形態では、本発明は放射線療法を受けている患者の貧血の治療に関する。そのような放射線療法は、骨髄に損傷を与え、その赤血球産生能を低下させる場合がある。その他の実施形態では、本発明は、鉄、ビタミンＢ１２、及び葉酸のうちの１つ又は複数の低下又は欠乏がある患者の貧血の治療に関する。その他の実施形態では、本発明は、限定されないが、手術後の出血、又は内部出血を引き起こしている腫瘍からの出血を含む多量の出血がある患者の貧血の治療に関する。その他の実施形態では、本発明は、慢性疾患の貧血がある患者の貧血の治療に関する。
【０４３８】
いくつかの実施形態では、本開示の方法及び組成物は赤血球生産を刺激する。いくつかの実施形態では、本開示の方法及び組成物は、骨髄中の発生運命の決まった始原細胞の分裂及び分化を刺激する。
【０４３９】
本発明のある特定の実施形態は、がん患者における化学療法誘発性貧血の治療に特に有用である。いくつかの実施形態では本開示の方法及び組成物により、がん患者の化学療法が終わった後に本開示のキメラタンパク質の投与を続けることが可能になる。いくつかの実施形態では、本開示の方法及び組成物により、非がん患者と比べて用量を減少させることなくがん患者の治療が可能になる。いくつかの実施形態では、本開示の方法及び組成物により、化学療法を受けており、且つ、治癒可能と考えられているがん患者の治療が可能になる。様々な実施形態においてがん患者には血栓の履歴、最近の手術、長期のベッドでの静養又は活動の制限、及び化学療法剤での治療のうちの１つ又は複数がある。
【０４４０】
キット
本発明は本明細書に記載されるいずれかの作用物質（例えば、様々な追加治療薬を含む、又は含まないキメラタンパク質）を投与するためのキットも提供する。キットは材料又は構成要素の集合体であり、本明細書に記載される本発明の医薬組成物のうちの少なくとも１つを含む。したがって、いくつかの実施形態では、キットは本明細書に記載される医薬組成物のうちの少なくとも１つを含む。
【０４４１】
キットを構成する構成要素の正確な種類は意図する目的に依存する。ある実施形態では、キットはヒト対象の治療を目的として構成されている。
【０４４２】
キットには取扱説明書が含まれていてもよい。取扱説明書は、通常、所望の結果を達成するために、例えばがんを治療するために、キットの構成要素の使用時に用いる方法を説明する明確な表現を含んでいる。所望により、キットは、希釈剤、緩衝剤、薬学的に許容可能な担体、注射器、カテーテル、塗布器、ピペット若しくは計測具、包帯、又は当業者には理解することが容易であるような他の有用な道具類一式のような他の有用な構成要素を含んでいてもよい。
【０４４３】
キットに組み合わせられた材料及び構成要素は、それらの操作性と有用性を維持する任意の簡便、且つ、適切な方法で保管され、実施者に提供され得る。例えば、構成要素は室温、冷蔵温度、又は冷凍温度で提供され得る。構成要素は、通常、適切な包装材の中に入れられている。様々な実施形態において、包装材は、好ましくは無菌で汚染混入物質を含まない環境を提供するためによく知られている方法で作製される。包装材は、キットの内容物及び／又は目的、及び／又はそのキットの構成要素を表示する外部ラベルを有してもよい。
【０４４４】
定義
本明細書において使用される場合、「ａ」、「ａｎ」、又は「ｔｈｅ」は１又は１より多くを意味し得る。
【０４４５】
具体的に説明されない限り、又は文脈から明らかではない限り、本明細書において使用される場合、「又は（ｏｒ）」という用語は包括的であり、且つ、「又は（ｏｒ）」と「及び（ａｎｄ）」の両方を含むと理解される。
【０４４６】
さらに、「約」という用語は、参照する数字と接続して使用されるとき、その参照する数字±その参照する数字の最大で１０％、例えば、表示値の（±）１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．１％、０．０５％、又は０．０１％を意味する。例えば、「約５０」という言葉は４５〜５５の範囲を包含する。
【０４４７】
「有効量」は、医学的利用に関連して使用されるとき、目的の疾患の測定可能な治療、予防、又は発病率の低下をもたらすために有効な量である。
【０４４８】
本明細書において使用される場合、薬剤又は刺激が存在する場合にそのような調整が存在しない場合と比較して活性及び／又は効果の読み出しが著しい量低減している場合、例えば、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、又はそれ以上、少なくとも約１００％を含むそれ以下低減している場合、何かが「減少」している。当業者が理解するように、いくつかの実施形態では、活性が減少し、且つ、何らかの下流読み出し値が減少することになるが、他のものは増加する場合がある。
【０４４９】
反対に、薬剤又は刺激が存在する場合にそのような薬剤又は刺激が存在しない場合と比較して活性及び／又は効果の読み出しが著しい量増大している場合、例えば、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、又はそれ以上、少なくとも約１００％を含むそれ以上、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍増大している場合、活性が「増加」している。
【０４５０】
本明細書において参照される場合、全ての組成比率は、別段の定めが無い限り組成物の総重量に対する比率である。本明細書において使用される場合、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」という単語とその変形には、リスト中の事物の列挙が本技術の組成物及び方法に有用であり得る他の同様の事物を除外することにならないように非限定的であることが意図されている。同様に、「できる（ｃａｎ）」及び「してもよい（ｍａｙ）」という単語及びそれらの変形には、ある実施形態がある特定の要素又は特徴を含み得る、又は含むことがあるという記述がそれらの要素又は特徴を含まない本技術の他の実施形態を除外しないように非限定的であることが意図されている。
【０４５１】
「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、又は「有する（ｈａｖｉｎｇ）」などの用語の同義語としての「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という開放型の用語が本発明を説明し、且つ、本発明を主張するために本明細書において使用されているが、本発明又は本発明の実施形態は「から成る（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」又は「から基本的に成る（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」などの代替的な用語を使用して代わりに説明されることがある。
【０４５２】
本明細書において使用される場合、「好ましい」及び「好ましくは」という単語はある特定の状況下である特定の利益を生じる本技術の実施形態を指す。しかしながら、他の実施形態が同一又は他の状況下で好まれることもある。さらに、１つ又は複数の好ましい実施形態の列挙は他の実施形態が有用ではないことを意味しているのではなく、本技術の範囲から他の実施形態を除外することを意図するものではない。
【０４５３】
治療効果を達成するために必要とされる本明細書に記載される組成物の量は、その特定の目的のために従来法に従って実験に基づいて決定され得る。治療目的での治療薬の投与のためには、それらの治療薬を薬理学的に有効な用量で投与することが一般的である。「薬理学的有効量」、「薬理学的有効用量」、「治療有効量」、又は「有効量」は、所望の生理学的効果を生み出すために十分な量、又は所望の結果を達成することが可能な量、特に障害又は疾患を治療することが可能な量のことである。本明細書において使用される場合の有効量には、例えば、障害又は疾患の症状の発生を遅らせ、障害又は疾患の症状の経過を変え（例えば、その疾患の症状の進行を遅らせ）、障害又は疾患の１種類又は複数種類の症状又は兆候を抑制又は除去し、且つ、障害又は疾患の症状を反転させるのに十分な量が含まれる。治療上の利益には、改善が実現するかしないか関係なく、根底にある疾患又は障害の進行を停止させること、又は遅らせることも含まれる。
【０４５４】
有効量、毒性、及び治療効力は、例えば、ＬＤ５０（集団の約５０％にとって致死的である用量）及びＥＤ５０（集団の約５０％において治療的に有効である用量）を決定するための細胞培養物又は実験動物における標準的な薬学的方法によって決定可能である。投与量は使用する剤形及び利用する投与経路に応じて異なっていてもよい。毒性効果と治療効果との間の用量の比率が治療指数であり、それはＬＤ５０／ＥＤ５０という比率で表現可能である。いくつかの実施形態では、高い治療指数を示す組成物及び方法が好ましい。治療有効用量は、最初に、例えば細胞培養アッセイを含むｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイから推定可能である。また、細胞培養又は適切な動物モデルにおいて決定されるようなＩＣ５０を含む循環血漿中濃度範囲を達成するために、動物モデルにおいて用量を明確化することができる。血漿中の本開示の組成物のレベルは、例えば、高速液体クロマトグラフィーによって測定可能である。どの特定の投薬の効果も適切なバイオアッセイによってモニター可能である。医師によって投薬量が決定され、観察される治療の効果に適合するように必要に応じて調節され得る。
【０４５５】
ある特定の実施形態では、効果によって少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約５０％、少なくとも約７０％、又は少なくとも約９０％の定量可能な変化が生じる。いくつかの実施形態では、効果によって約１０％、約２０％、約３０％、約５０％、約７０％、又は約９０％以上もの定量可能な変化が生じる。治療上の利益には、改善が実現するかしないか関係なく、根底にある疾患又は障害の進行を停止させること、又は遅らせることも含まれる。
【０４５６】
本明細書において使用される場合、「治療方法」は、本明細書に記載される疾患又は障害を治療するための組成物の使用、及び／又は本明細書に記載される疾患又は障害を治療するための医薬の製造における使用に対して同等に適用可能である。本発明は、以下の非限定的な実施例によってさらに例示される。
【実施例】
【０４５７】
実施例１：コンセンサスＩＦＮ含有キメラタンパク質の構築と特性解析
本実施例では、コンセンサスインターフェロン（「ＩＦＮａ＿ｃｏｎ」）（すなわち、配列番号２）又は改変型コンセンサスインターフェロン（ＩＮＦａ＿ｃｏｎ＿Ｒ１５０Ａ）（すなわち、Ｒ１５０Ａ変異を有する配列番号２）、及びヒトＣＤ２０（配列番号２７９）を標的とする組換え重鎖抗体（ＶＨＨ）を含むキメラタンパク質（Ａｃタフェロン（ＡＦＮ））を構築し、それらのキメラタンパク質の特性を解析した。
【０４５８】
コンセンサスインターフェロンに基づくＡＦＮを（ｉ）ＣＤ２０陽性末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びＣＤ２０陰性末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）におけるＳＴＡＴ１リン酸化のＦＡＣＳでの定量、又は（ｉｉ）親ＨＬ１１６細胞株及びＣＤ２０安定トランスフェクション導入ＨＬ１１６細胞株における６−１６レポーター活性によって検討した。
【０４５９】
ＡＦＮの作成、作出、及び精製
コンセンサスインターフェロンに基づくＡＦＮ（ＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ）を作成するため、ヒトＣＤ２０（配列番号２９）を標的とするＶＨＨの配列に可動性の２０×Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ可動性リンカーを介して融合したＩＦＮａ＿ｃｏｎ（配列番号２）をコードする核酸配列を構築した。得られたＡＦＮ核酸コンストラクトに変異を導入して残基Ａｒｇ１５０にＡｌａへの変異（Ｒ１５０Ａ）を有するコンセンサスインターフェロン（ＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ＿Ｒ１５０Ａ）を作成した。得られたＡＦＮ核酸コンストラクトを細菌発現用のｐＨＥＮ６Ｃベクターに挿入した。１ｍＭのＩＰＴＧを使用してＡＦＮの細菌での発現を一晩誘導し、細胞を沈殿させ、ＴＥＳ緩衝液（０．２Ｍ  トリス  ｐＨ８．０、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．５Ｍ  ショ糖）及びＴＥＳ／４緩衝液を使用して周辺質抽出物を調製した。製造業者のガイドラインに従ってＴＡＬＯＮ金属アフィニティー樹脂を使用してタンパク質を抽出物から精製し、ＰＤ１０カラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）を使用して試料からイミダゾールを除去した。
【０４６０】
ＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ１リン酸化
Ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐ（ＳｔｅｍＣｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を使用した密度勾配遠心分離を用いて健康なドナーのバフィーコートに由来するＰＢＭＣを単離した。細胞をＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ中の２％ＦＢＳ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ）で２回洗浄し、抗ヒトＣＤ２０−ＦＩＴＣ（ＳｉｎｏＢｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ社）を用いて４℃で２０分間染色した。２回の洗浄後、野生型ヒトＩＦＮα２（ＩＦＮａ２）又は様々な融合タンパク質（すなわち、ＣＤ２０−ＩＦＮａ２、ＣＤ２０−ＩＮＦａ２＿Ｒ１４９Ａ、ＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ、及びＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ＿Ｒ１５０Ａ）の段階希釈物で細胞を３７℃で１５分間刺激した。固定（１０分間、３７℃、固定緩衝液Ｉ；ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、透過処理（３０分間、氷上、Ｐｅｒｍ  ＩＩＩ緩衝液Ｉ；ＢＤバイオサイエンス社）、及び洗浄の後、抗ＳＴＡＴ１  ｐＹ７０１抗体（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）で細胞を染色した。ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）を使用して試料を捕捉し、ＦｌｏｗＪｏ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  １０．２ソフトウェア（ＬＬＣ社）で分析した。
【０４６１】
親ＨＬ１１６細胞株及びＣＤ２０安定トランスフェクションＨＬ１１６細胞株における６−１６レポーター活性
ＨＬ１１６クローンはヒトＨＴ１０８０細胞株（ＡＴＣＣ  ＣＣＬ−１２１）に由来する。該クローンは、ＩＦＮ誘導性６−１６プロモーターによって制御されるホタルルシフェラーゼ遺伝子を含む。ヒトＣＤ２０配列をコードする発現ベクターを親ＨＬ１１６細胞にトランスフェクションした。Ｇ４１８含有培地中で安定なトランスフェクションクローンを選択した。親ＨＬ１１６細胞及びＨＬ１１６−ｈＣＤ２０細胞を９６ウェル当たり２０，０００細胞の割合で播種して一晩経過後にＩＦＮα２（ＩＦＮａ２）又は融合タンパク質（すなわち、ＣＤ２０−ＩＦＮａ２、ＣＤ２０−ＩＮＦａ２＿Ｒ１４９Ａ、ＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ、及びＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ＿Ｒ１５０Ａ）の段階希釈物で６時間刺激した。細胞溶解物中でルシフェラーゼ活性を測定した。
【０４６２】
結果
ＣＤ２０陽性細胞及びＣＤ２０陰性細胞は、野生型ヒトＩＦＮα２（ＩＦＮａ２）に対して同等の感受性を有する（図１Ａ）。ＣＤ２０標的化ＶＨＨへのＩＦＮａ２又はＩＦＮａ＿ｃｏｎの融合（それぞれＣＤ２０−ＩＮＦａ２及びＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ）によって、ＣＤ２０陰性細胞と比較してＣＤ２０陽性細胞においてＳＴＡＴ１リン酸化の著しい増加がもたらされた（図１Ｂ及び図１Ｄ）。ＣＤ２０陰性細胞における活性は、ＣＤ２０−ＩＦＮａ２（ＣＤ２０−ＩＦＮａ２＿Ｒ１４９Ａ）におけるＩＦＮａ２の変異（すなわち、Ｒ１４９Ａ）又はＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ（ＣＤ２０−ＩＦＮａ＿ｃｏｎ＿Ｒ１５０Ａ）におけるＩＦＮａ＿ｃｏｎの変異（すなわち、Ｒ１５０Ａ）によってほぼ完全に消失した（図１Ｃ及び図１Ｅ）。ＣＤ２０抗原がＰＢＭＣ上で発現しているときに活性の消失を正常状態まで回復した（図１Ｃ及び図１Ｅ）。
【０４６３】
６−１６レポーター細胞株を使用して同様の結果を得た（図２Ａ〜Ｅ）。
【０４６４】
これらの結果は、変異の結果として生物活性が低下している変異型コンセンサスインターフェロンを標的化部分に融合することによって、標的化部分の標的を発現する細胞上で変異型コンセンサスインターフェロンの生物活性が回復することを示している。したがって、本開示の技術のキメラタンパク質はインターフェロン経路の標的化された細胞特異的な活性化を実現する。
【０４６５】
均等論
本発明を本発明の特定の実施形態との関係で説明してきたが、本発明はさらに改変することが可能であり、本出願は、一般的には本発明の原理に従い、且つ、本発明が関係する技術分野内の公知の慣例又は慣行の範囲内に入り、且つ、本明細書においてこれまでに示されており、添付されている特許請求の範囲の通りの基本的な特徴に適用可能であるような本開示からの逸脱を含む、本発明の任意の変形形態、使用、又は改変を包含するものとされていることが理解される。
【０４６６】
当業者は本明細書に具体的に記載される具体的な実施形態と同等の多数の実施形態を理解するか、又はわずかに日常的な実験法を使うだけで確認することができる。そのような同等の実施形態は以下の特許請求の範囲に包含されるものとする。
【０４６７】
参照による援用
本明細書において参照された全ての特許及び文献はそれらの全体が参照により本明細書に取り込まれる。
【０４６８】
本明細書において記載された文献は、単に本出願の出願日の前のそれらの開示を示すものである。本明細書は、本発明が先行発明によるそのような公開に先行するという権利が無いことを認めたものと解釈されるべきではない。
【０４６９】
本明細書において使用される場合、全ての見出しは単に編成のためであり、本発明を限定することを一切意図してはいない。いずれの個々の段落の内容も全ての段落に同等に適用可能であり得る。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図１Ｅ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図２Ｅ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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