(57)【要約】【課題】【解決手段】本発明は膵臓疾患の診断用組成物に係り、より詳しくは膵臓癌を診断することができる組成物、これを含む診断用キット及び前記組成物を用いて診断のための情報を提供する方法に関する。本発明は膵臓癌の発病可能性を正確に予測又は把握することができ、さらに他の種類の癌とも効果的に区別して診断することができる。また、本発明は、個体から獲得した血液、血清又は血漿などから得られた単核球を用いて非浸襲的な方法で簡単にかつ速かに膵臓癌を診断することができる。【選択図】  図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−１０Ｒ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９）及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １ｉｓｏｆｏｒｍ１）からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤を含む、膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項２】
前記組成物は目的とする個体から分離された単核球に対するものである、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項３】
前記組成物は、インターロイキン１０受容体又はインターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤を含む、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項４】
前記組成物は、インターロイキン２２受容体又はインターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤をさらに含む、請求項３に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項５】
前記組成物は、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤をさらに含む、請求項３に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項６】
前記タンパク質の発現水準を測定する製剤は、前記タンパク質に特異的に結合する抗体、オリゴペプチド、リガンド、ＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）及びアプタマー（ａｐｔａｍｅｒ）からなる群から選択された１種以上を含む、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項７】
前記ｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤は、前記ｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ及びアンチセンスヌクレオチドからなる群から選択された１種以上を含む、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項８】
前記膵臓疾患は膵臓癌である、請求項１に記載の膵臓疾患の診断用組成物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の診断用組成物を含む、膵臓疾患の診断用キット。
【請求項１０】
前記キットは、ＲＴ−ＰＣＲキット、ＤＮＡチップキット、ＥＬＩＳＡキット、プロテインチップキット、ラピッド（ｒａｐｉｄ）キット又はＭＲＭ（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ）キットである、請求項９に記載の膵臓疾患の診断用キット。
【請求項１１】
目的とする個体から分離された生検に対して、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−１０Ｒ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９）及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １ｉｓｏｆｏｒｍ１）からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階を含む、膵臓疾患の診断のための情報提供方法。
【請求項１２】
前記生検は、個体から分離された血液、血清及び血漿からなる群から選択された１種以上である、請求項１１に記載の情報提供方法。
【請求項１３】
前記生検は、個体から分離された単核球及びエクソソームの１種以上を含む、請求項１２に記載の情報提供方法。
【請求項１４】
前記生検からインターロイキン１０受容体又はインターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階を含む、請求項１１に記載の情報提供方法。
【請求項１５】
前記生検でインターロイキン２２受容体又は前記インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階をさらに含む、請求項１４に記載の情報提供方法。
【請求項１６】
前記生検でインターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階をさらに含む、請求項１４に記載の情報提供方法。
【請求項１７】
前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記タンパク質又は前記ｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準より高い場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定する、請求項１１に記載の情報提供方法。
【請求項１８】
前記目的とする個体から分離された生検で測定されたインターロイキン１０受容体又は前記インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準の２倍以上の場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定する、請求項１４に記載の情報提供方法。
【請求項１９】
前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン２２受容体又は前記インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準より高い場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定する、請求項１５に記載の情報提供方法。
【請求項２０】
前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン２２受容体又は前記インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準の１．５倍以上の場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定する、請求項１９に記載の情報提供方法。
【請求項２１】
前記膵臓疾患は膵臓癌である、請求項１１に記載の情報提供方法。
【請求項２２】
（ａ）疾患患者から分離された生検でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階、
（ｂ）前記患者に候補薬剤を投与する段階、及び
（ｃ）前記候補薬剤の投与後、前記患者から分離された生検でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階を含む、疾患治療用薬物スクリーニング方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は多様な疾患を診断することができる組成物に係り、例えば膵臓癌などを診断することができる組成物、これを含む診断用キット及び前記組成物を用いて診断のための情報を提供する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代人の主要疾患のうち、癌の治療方法と診断方法に関する研究は発病頻度の高い肺癌、肝臓癌、胃癌などを中心に比較的活発に進んでいる。しかし、発病頻度の低い食道癌、大膓癌、膵臓癌などに対する研究は相対的に低調な実情である。特に、膵臓癌は初期にはあまり症状を感じないが、既に全身に転移した後に痛症と体重減少などの症状が現れることが一般的であってもっと治癒率が低い方であるので、定期的な診断が非常に重要である。臨床症状は大部分が徐々に発病し、食欲減退、虚弱になりやすく、体重減少は一番有り勝ちな症状である。膵臓癌は５年生存率が１〜４％、中央生存期間５ヶ月に至る致命的な癌であり、人体の癌の中で最も不良な予後を示している。また、８０〜９０％の患者で、診断時に完治を期待する根治的切除が不可能な状態で発見されるから予後が不良であり、治療は主に坑癌療法に依存しているので、どの人体癌よりも早期診断法の開発が切実に要望されている。
【０００３】
現在まで膵臓癌に効果があると知られた５−フルオロウラシル（５−ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ）、ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）、タルセバ（ｔａｒｃｅｖａ）を含めた数種の抗癌剤の治療効果は極めて低調であり、坑癌治療に対する反応率は１５％前後に過ぎない。このような事実は膵臓癌患者の予後を向上させるためにはより効果的な早期診断法及び治療法の開発が切実に要求されていることを示唆する。
【０００４】
膵臓癌の診断は、胃、十二指膓のＸ線造影検査、皮膚及び肝を通しての胆道撮影と逆行性内視鏡胆道撮影術などによって施行されて来たが、最近超音波撮影及びコンピューター断層撮映が一番多く使われている。これらの方法によって疾病の病変が発見される場合、より精密な組職検査を行って比較的正確な検査結果を得ることもできるが、前記診断方法は正確度が落ちるか、患者に苦痛が伴うなど、その遂行方法が非常に不便であって被検者がこれを憚る実情である。よって、簡便で速かに膵臓癌有無を診断することができる検査方法の開発が要求されて来た。
【０００５】
これに関連して、韓国特許第１０−０８１９１２２号はマトリリン（ｍａｔｒｉｌｉｎ）、トランスサイレチン（ｔｒａｎｓｔｈｙｒｅｔｉｎ）及びストラチフィン（ｓｔｒａｔｉｆｉｎ）を膵臓癌マーカーとして用いた技術を開示しており、韓国特許出願公開第２０１２−００８２３７２号はさまざまな膵臓癌マーカーを用いた技術を開示している。また、韓国特許出願公開第２００９−０００３３０８号は個体の血液試料でＲＥＧ４タンパク質の発現量を検出して膵臓癌を診断する方法を開示しているし、韓国特許出願公開第２０１２−０００９７８１号は個体の膵臓癌診断に必要な情報を提供するために個体から分離された癌組職でＸＩＳＴ  ＲＮＡの発現量を測定する分析方法を、韓国特許出願公開第２００７−０１１９２５０号は正常人間の膵臓組職と比較して人間膵臓癌組職で違って発現した新規遺伝子ＬＢＦＬ３１３ファミリーを開示しており、アメリカ特許出願公開第２０１１／０２９４１３６号はケラチン８タンパク質などのバイオマーカーを用いた膵臓癌診断方法を開示している。しかし、マーカーごとにその診断効率及び正確性に大きな差を示すので、効果がもっと優れたマーカーを発掘する必要がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の一目的は、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２、ＩＬ−２２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９、ＩＬ−２９）又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １  ｉｓｏｆｏｒｍ１、ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）のタンパク質、又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定して、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーブス病（Ｇｒａｖｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、ハシモト病（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、自己免疫リンパ球増殖性症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ、ＡＬＰＳ）、重症筋無力症（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ  ｇｒａｖｉｓ）、カワサキ病（Ｋａｗａｓａｋｉ  ｄｉｓｅａｓｅ）又は乾癬（ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）などの疾患、好ましくは膵臓癌を簡便で正確に診断することができる組成物を提供しようとする。
【０００７】
本発明の他の目的は、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２、ＩＬ−２２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９、ＩＬ−２９）又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １ｉｓｏｆｏｒｍ１、ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）のタンパク質、又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定して、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーブス病（Ｇｒａｖｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、ハシモト病（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、自己免疫リンパ球増殖性症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ、ＡＬＰＳ）、重症筋無力症（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ  ｇｒａｖｉｓ）、カワサキ病（Ｋａｗａｓａｋｉ  ｄｉｓｅａｓｅ）又は乾癬（ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）などの疾患、好ましくは膵臓癌を簡便で正確に診断することができるキットを提供しようとする。
【０００８】
本発明のさらに他の目的は、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２、ＩＬ−２２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９、ＩＬ−２９）又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １ｉｓｏｆｏｒｍ１、ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）のタンパク質、又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定して、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーブス病（Ｇｒａｖｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、ハシモト病（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、自己免疫リンパ球増殖性症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ、ＡＬＰＳ）、重症筋無力症（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ  ｇｒａｖｉｓ）、カワサキ病（Ｋａｗａｓａｋｉ  ｄｉｓｅａｓｅ）又は乾癬（ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）などの疾患、好ましくは膵臓癌を診断するための情報を提供する方法を提供しようとする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
膵臓癌は初期にはあまり症状を感じないが、既に全身に転移した後に痛症と体重減少などの症状が現れることが一般的であってもっと治癒率が低い方であるので、定期的な診断が非常に重要である。臨床症状は大部分が徐々に発病し、食欲減退、虚弱になりやすく、体重減少は一番有り勝ちな症状である。膵臓癌は５年生存率が１〜４％、中央生存期間５ヶ月に至る致命的な癌であり、人体の癌の中で最も不良な予後を示している。また、８０〜９０％の患者で、診断時に完治を期待する根治的切除が不可能な状態で発見されるから予後が不良であり、治療は主に坑癌療法に依存しているので、どの人体癌よりも早期診断法の開発が切実に要望されている。
【００１０】
故に、本発明の発明者は、膵臓疾患の中で特に膵臓癌の早期診断に有用なマーカーを開発するために鋭意努力した結果、膵臓癌患者から分離された血液来由単核球でインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２、ＩＬ−２２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９、ＩＬ−２９）又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １ｉｓｏｆｏｒｍ１、ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）の発現が特異的に増加することを見つけて本発明を完成することになった。
【００１１】
本発明の一具現例によれば、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２、ＩＬ−２２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９、ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １ｉｓｏｆｏｒｍ１、ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤を含む疾患診断用組成物に関する。
【００１２】
本発明の診断用組成物を用いて発病有無又は発病可能性を予測することができる疾患種類としては、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーブス病（Ｇｒａｖｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、ハシモト病（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、自己免疫リンパ球増殖性症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ、ＡＬＰＳ）、重症筋無力症（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ  ｇｒａｖｉｓ）、カワサキ病（Ｋａｗａｓａｋｉ  ｄｉｓｅａｓｅ）及び乾癬（ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）などであり得るが、これに制限されるものではない。
【００１３】
特に、本発明は、前記診断用組成物を用いて膵臓疾患として、膵臓癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は膵臓炎（ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）を診断することができ、より好ましくは膵臓癌を診断することができる。具体的に、本発明の診断用組成物は正常群と膵臓癌の患者群を区別して検出又は診断することができる。それだけでなく、他の種類の癌、例えば肺癌又は大膓癌などと区別して膵臓癌を選別的に検出又は診断することができる。
【００１４】
本発明で、前記“膵臓癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）”とは膵臓細胞で起源する癌を意味する。膵臓癌にはさまざまな種類があるが、膵管細胞で発生した膵管腺癌種が９０％程度を占めているから、一般的に膵臓癌と言えば膵管腺癌種を意味する。その他に、嚢腫性癌（嚢腺癌）、内分泌腫瘍などがある。膵臓癌患者の中で約５〜１０％は遺伝素因を持っており、膵臓癌患者において膵臓癌の家族歴がある場合は約７．８％程度であり、一般人の膵臓癌発生率０．６％に比べて頻度が高い。膵臓癌は５年生存率が５％以下であって予後が非常に悪い癌である。その理由は、大部分癌が進んだ後に発見されるから、発見当時に手術切除が可能な場合が２０％以内であり、肉眼で見るのに全く切除されたと言っても微細転移によって生存率の向上が小さく、抗癌剤及び放射線治療に対する反応が低いからである。よって、生存率を向上させることができる最も重要な方法は、症状がないか非特異的であるときに早期に見つけて手術することである。
【００１５】
本発明で、前記“膵臓炎（ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）”とは膵臓（ｐａｎｃｒｅａｓ）で炎症が発生して生ずる疾病であり、急性膵臓炎（ａｃｕｔｅ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）及び晩成膵臓炎（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）がある。膵液（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｊｕｉｃｅ）はアミラーゼ（ａｍｙｌａｓｅ、炭水化物を加水分解する）、トリプシン（ｔｒｙｐｓｉｎ、タンパク質の加水分解作用）、リパーゼ（ｌｉｐａｓｅ、脂肪の加水分解作用）のような消化酵素を含む。膵臓炎はアルコール依存症（ａｌｃｏｈｏｌ  ａｂｕｓｅ）、胆石（ｇａｌｌｓｔｏｎｅｓ）などによって膵液が円滑に流れなくて前記酵素が膵臓の自己分解を誘発して発生するだけでなく、代謝障害、薬物、腹部損傷などの多様な原因などによっても発生する。膵臓炎は膵臓腺細胞の損傷、広範囲な癲癇性むくみ、出血及び損傷部位への好中球性顆粒球の移動を誘発する膵臓の炎症性疾患である。膵臓炎は大きく２類型に分けて見ることができ、癲癇性むくみ（ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ  ｅｄｅｍａ）と膵臓周辺の脂肪性怪死（ｐｅｒｉｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｆａｔ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ）が発見される軽症（ｍｉｌｄ  ｔｙｐｅ）の膵臓炎、膵臓周辺（ｐｅｒｉｐａｎｃｒｅａｔｉｃ）及び膵臓内部（ｉｎｔｒａｐａｎｃｒｅａｔｉｃ）の広範囲な脂肪性怪死、膵臓の実質壊死（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｐａｒｅｎｃｈｙｍａｌ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ）、出血を伴う重症（ｓｅｖｅｒｅ  ｔｙｐｅ）の膵臓炎がある（ＢａｎｋＰＡ．，Ａｍ．Ｊ．ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．，８９，ｐｐ１５１−１５２，１９９４．；Ｂｒａｄｌｅｙ  ＥＬ．，Ａｒｃｈ．Ｓｕｒｇ．，１２８、ｐｐ５８６−５９０，１９９３．；キム チャン ドク、大韓消化器学会誌，４６，ｐｐ３２１−３３２，２００５）。
【００１６】
また、本発明で、前記“自己免疫疾患”とは個体の自己組職に対して起きて指定された非悪性疾患又は障害である。全ての正常個体において一番重要な特性の一つは自己（ｓｅｌｆ）を構成している抗原物質に対しては有害に反応しないが、非自己（ｎｏｎ−ｓｅｌｆ）抗原に対してはこれを認識して反応して除去することができる。自己抗原に対する生体の無反応を免疫不応答（ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ  ｕｎｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ）又は寛容（ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）と言う。しかし、自己寛容を誘導又は維持することにおいて異常が生じれば、自己抗原に対して免疫反応が起こり、その結果、自己組職を攻撃する現象が発生し、前記過程によって発生する疾患を自己免疫疾患と言う。前記自己免疫疾患は自分の臓器組織又はその成分に対して抗体が生産される炎症性疾患であり、多数の組職と臓器に晩成的な全身的炎症を引き起こす疾病を総称することができる。
【００１７】
具体的に、本発明で、前記自己免疫疾患はリュウマチ関節炎（Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ、ＳＬＥ）、全身性エリテマトーデス（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ）、クローン病（Ｃｒｏｈｎｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、潰瘍性大腸炎（ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ  ｃｏｌｉｔｉｓ）、多発性硬化症（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、ブドウ膜炎（ｕｖｅｉｔｉｓ）、自己免疫髄膜炎（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ）、シェーグレン症侯群（Ｓｊｏｇｒｅｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、硬皮症（ｓｃｌｅｒｏｄｅｒｍａ）、ヴェーゲナー肉芽腫症（ｗｅｇｅｎｅｒ’ｓ  ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ）、サルコイドーシス（ｓａｒｃｏｉｄｏｓｉｓ）、敗血症性ショック、涙腺炎、脳卒中、動脈硬化症、血管再狭窄、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、じんましん、結膜炎、乾癬、全身性炎症反応症候群、多発性筋炎、皮膚筋炎、結節性多発性束関節炎、混合結合組職病、通風、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、糖尿性網膜症、多発性硬化症、晩成甲状腺炎、セリアック病、重症筋無力症、尋常性天疱瘡、ウイルス疾患、細菌性疾患、動脈硬化、血管腫、血管繊維腫、再かん流傷害又は心臓肥大症などを含むことができるが、これに制限されるものではない。
【００１８】
本発明で、前記“アレルギー（ａｌｌｅｒｇｙ）”は‘アトピー疾患（ａｔｏｐｉｃ  ｄｉｏｒｄｅｒ）’と互換して使われることができ、異物、すなわちアレルギー源（ａｌｌｅｒｇｅｎ）に対する特異に変形された反応を示す生化学的現象によって発生した疾患を意味することができる。
【００１９】
本発明で、前記アレルギーは、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、湿疹、喘息、過敏症、アレルギー性鼻炎（ａｌｌｅｒｇｉｃ  ｒｈｉｎｉｔｉｓ）、アレルギー性結膜炎（ａｌｌｅｒｇｉｃ  ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖｉｔｉｓ）、アレルギー性皮膚炎、じんま疹、昆虫アレルギー、食品アレルギー又は薬品アレルギーなどであり得るが、これに制限されるものではない。
【００２０】
本発明で、前記“診断”は特定の疾病又は疾患に対する対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）の感受性（ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ）を判定すること、対象が特定の疾病又は疾患を現在持っているかを判定すること、特定の疾病又は疾患にかかった対象の予後（ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ）（例えば、前転移性又は転移性癌状態の同定、癌の段階決定又は治療に対する癌の反応性決定）を判定すること、又はテラメトリックス（ｔｈｅｒａｍｅｔｒｉｃｓ）（例えば、治療効能に対する情報を提供するために客体の状態をモニタリングすること）を含む。本発明の目的上、前記診断は前述した疾患の発病有無又は発病可能性（危険性）を確認することである。
【００２１】
本発明の前記診断用組成物は、好ましくはインターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−１ＯＲ）又は前記インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤を含むことができる。
【００２２】
本発明で、前記“インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−１０Ｒ）”とはＩＩ型サイトカインレセプターであり、２個のαサブユニットと２個のβサブユニットからなる四量体にあたる。αサブユニットは、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、肥満細胞（ｍａｓｔ  ｃｅｌｌｓ）及び樹状細胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ）のような造血細胞で発現し、βサブユニットは多様に発現する。本発明において、前記インターロイキン１０受容体は、好ましくは配列番号１で表示されるインターロイキン１０受容体のβサブユニット（ＩＬ−１０ＲＢ）であり得る。
【００２３】
また、本発明で、前記組成物はインターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−２２Ｒ）又は前記インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤をさらに含むことにより、前記疾患を診断するのに正確度を高めることができる。
【００２４】
本発明で、前記“インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−２２Ｒ）”とはＩＩ型サイトカインレセプターであり、α１サブユニットとβ２サブユニットの異種二量体（ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒ）にあたり、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２）に結合する。本発明で、前記インターロイキン２２受容体は、好ましくは配列番号２で表示されるインターロイキン２２受容体α１サブユニット（ＩＬ−２２ＲＡ１）であり得る。
【００２５】
また、本発明で、前記組成物はインターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２、ＩＬ−２２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９、ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １ｉｓｏｆｏｒｍ１、ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤をさらに含むことにより、前記疾患を診断するのに正確度をより高めることができる。
【００２６】
本発明で、前記“インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｌｅｕｋｉｎ２２、ＩＬ−２２）”とは細胞免疫反応を仲栽する、ＩＬ−１０ファミリー又はＩＬ−１０スーパーファミリー（ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２４及びＩＬ−２６）と呼ばれるサイトカインのグループに属するサイトカインである。前記インターロイキン２２はＩＬ−１０Ｒ２及びＩＬ−２２Ｒ１のサブユニットからなる異種二量体細胞表面受容体に結合する。本発明で、前記インターロイキン２２は配列番号３のアミノ酸配列で表示されることができる。
【００２７】
本発明で、前記“インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９、ＩＬ−２９）”とは‘インターフェロンラムダ−１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ−１）’とも呼ばれ、染色体１９番に位置するインターロイキン２９遺伝子によってコーディングされるタンパク質であり、螺旋形のサイトカインファミリー（ｈｅｌｉｃａｌ  ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｆａｍｉｌｙ）に属し、ＩＩＩ型インターフェロンにあたる。前記インターロイキン２９は微生物に対する宿主防御に重要な役割をし、その発現水準はウイルスに感染された細胞で非常に増加している。本発明で、前記インターロイキン２９は配列番号４のアミノ酸配列で表示されることができる。
【００２８】
本発明で、前記“インターフェロンラムダ受容体１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ１、ＩＦＮＬＲ１）”とはＩＩ型サイトカイン受容体ファミリーに属する遺伝子によってコーディングされるタンパク質であり、インターロイキン１０受容体ベータサブユニットと結合して受容体複合体（ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｃｏｍｐｌｅｘ）を形成する。このような受容体複合体はインターロイキン２８Ａ、インターロイキン２８Ｂ及びインターロイキン２９と互いに作用することができる。本発明で、前記インターフェロンラムダ受容体１としては、配列番号５のアミノ酸配列で表示されるインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １ｉｓｏｆｏｒｍ１、ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）であり得る。
【００２９】
本発明で、前記発現水準の測定対象となるインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１のタンパク質又はこれをコードする遺伝子のｍＲＮＡは、目的とする個体から分離された生検、好ましくは個体から分離された血液、血清又は血漿、より好ましくは前記血液、血清又は血漿から分離された単核球又はエクソソームに存在するものであってもよい。
【００３０】
以前には、多様な疾患、特に膵臓疾患の診断のためにバイオマーカーの発現水準を測定するためには、主に膵臓組職から細胞を分離した後、前記細胞内のバイオマーカーの発現水準を測定して来た。このように膵臓疾患、好ましくは膵臓癌の診断のために膵臓組職から細胞を分離しなければならない面倒さと、膵臓癌の初期には何の自覚症状もないという理由で膵臓癌の初期診断がほとんど不可能な欠点があった。
【００３１】
しかし、本発明では、目的とする個体から分離された血液、血清又は血漿内に含まれた単核球又はエクソソームにおいて、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９、インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１又はこれらをコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定することにより、迅速で簡単でありながらも非常に正確に膵臓癌を含めた多様な疾患の発病有無と発病可能性を診断することができる。
【００３２】
具体的に、前記のように目的とする個体から分離された単核球又はエクソソームで本発明によるマーカーの発現水準を測定する場合、患者を開腹して組職（例えば、膵臓組職）から組職細胞を分離するなどの浸襲過程が必要なく、前記単核球又はエクソソームを含む生検を獲得するまではおよそ５分以内がかかり、前記単核球又はエクソソームから本発明による多様な疾患バイオマーカーの発現水準を測定することにもおよそ２時間以内がかかるので、非常に迅速で簡便に疾患の発病有無又は発病可能性を確認することができる。
【００３３】
本発明で、前記インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の発現水準を測定する製剤は特に制限しないが、好ましくは前記インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１のそれぞれのタンパク質に特異的に結合する抗体、オリゴペプチド、リガンド、ＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）及びアプタマー（ａｐｔａｍｅｒ）からなる群から選択された１種以上を含むことができる。
【００３４】
本発明で、前記“タンパク質の発現水準測定”とは膵臓癌を含めた本発明の疾患を診断するために生物学的試料で膵臓疾患の診断用マーカーであるインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１のタンパク質の存在有無と発現程度を確認する過程を意味する。前記受容体の発現水準測定又は比較分析方法としては、プロテインチップ分析、免疫測定法、リガンド結合法、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｍａｔｒｉｘ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｓｕｌｆａｃｅ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、放射線免疫分析、放射免疫拡散法、オクタロニー免疫拡散法、ロケット免疫電気泳動、組職免疫染色、補体結合分析法、２次元電気泳動分析、液相クロマトグラフィー質量分析（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ、ＬＣ−ＭＳ）、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ／Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）、ウエスタンブロット法及びＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍｅ  ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ）などがあるが、これに制限されるものではない。
【００３５】
本発明で、前記“抗体”とは抗原と特異的に結合して抗原抗体反応を引き起こす物質を示す。本発明の目的上、抗体はインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１に対して特異的に結合する抗体を意味する。本発明の抗体は多クローン抗体、単クローン抗体及び組み換え抗体のいずれも含む。前記抗体は当該分野に広く知られた技術を用いて容易に製造されることができる。例えば、多クローン抗体は前記インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の抗原を動物に注射し、動物から採血して抗体を含む血清を収得する過程を含む、当該分野に広く知られた方法によって生産されることができる。このような多クローン抗体は、ヤギ、兎、羊、猿、馬、豚、牛、犬などの任意の動物から製造されることができる。また、単クローン抗体は当該分野に広く知られたハイブリドーマ法（ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  ｍｅｔｈｏｄ；Ｋｏｈｌｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７６）  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６：５１１−５１９参照）、又は把持抗体ライブラリ技術（Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８，１９９１；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８、１−５９７，１９９１参照）を用いて製造されることができる。前記方法で製造された抗体はゲル電気泳動、透析、塩沈澱、イオン交換クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィーなどの方法を用いて分離、精製されることができる。また、本発明の抗体は、２個の全長の軽鎖及び２個の全長の中鎖を有する完全な形態だけではなく、抗体分子の機能的な断片を含む。抗体分子の機能的な断片とは、少なくとも抗原結合機能を保有している断片を意味し、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖなどがある。
【００３６】
本発明で、前記“ＰＮＡ（Ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）”とは人工的に合成された、ＤＮＡ又はＲＮＡに似ている重合体を示し、１９９１年デンマークコペンハーゲン大学のＮｉｅｌｓｅｎ、Ｅｇｈｏｌｍ、ＢｅｒｇとＢｕｃｈａｒｄｔ教授によって初めて紹介された。ＤＮＡはリン酸−リボース糖骨格を有するに対し、ＰＮＡはペプチド結合によって連結された繰り返されたＮ−（２−アミノエチル）−グリシン骨格を有し、これによってＤＮＡ又はＲＮＡに対する結合力と安全性が大きく増加して分子生物学、診断分析及びアンチセンス治療法に使われている。ＰＮＡは文献［Ｎｉｅｌｓｅｎ  ＰＥ，Ｅｇｈｏｌｍ  Ｍ，Ｂｅｒｇ  ＲＨ，Ｂｕｃｈａｒｄｔ  Ｏ（Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  １９９１）。“Ｓｅｑｕｅｎｃｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ＤＮＡ  ｂｙ  ｓｔｒａｎｄ  ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ａ  ｔｈｙｍｉｎｅ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｐｏｌｙａｍｉｄｅ”．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５４（５０３７）：１４９７−１５００］に詳細に開示されている。
【００３７】
本発明で、前記“アプタマー”はオリゴヌクレオチド又はペプチド分子であり、アプタマーの一般的な内容は文献［Ｂｏｃｋ  ＬＣ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３５５（６３６０）：５６４６（１９９２）；Ｈｏｐｐｅ−Ｓｅｙｌｅｒ  Ｆ，ＢｕｔｚＫ  “Ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｐｔａｍｅｒｓ：ｐｏｗｅｒｆｕｌ  ｎｅｗ  ｔｏｏｌｓ  ｆｏｒ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ”．Ｊ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．７８（８）：４２６３０（２０００）；Ｃｏｈｅｎ  ＢＡ、Ｃｏｌａｓ  Ｐ，Ｂｒｅｎｔ  Ｒ．“Ａｎ  ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ  ｃｅｌｌ−ｃｙｃｌｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  ａ  ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ｌｉｂｒａｒｙ”．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．９５（２４）：１４２７２７（１９９８）］に詳細に開示されている。
【００３８】
本発明による診断用組成物において、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤は、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１のそれぞれをコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ及びアンチセンスヌクレオチドからなる群から選択された１種以上を含むことができる。本発明によるインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の情報は知られているので、当業者であればこれに基づいて前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを容易にデザインすることができるであろう。
【００３９】
本発明で、前記“ｍＲＮＡの発現水準測定”とは、膵臓癌を含めた本発明の疾患を診断するために、生物学的試料でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡ存在有無と発現程度を確認する過程でｍＲＮＡの量を測定することを意味する。このための分析方法としては、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）、競争的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（Ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  ＲＴ−ＰＣＲ）、実時間逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（Ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ＲＴ−ＰＣＲ）、ＲＮａｓｅ保護分析法（ＲＰＡ；ＲＮａｓｅ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｓｓａｙ）、ノーザンブロット法（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ  ｂｌｏｔｔｉｎｇ）、ＤＮＡチップなどがあるが、これに制限されるものではない。
【００４０】
本発明で、前記“プライマー”は標的遺伝子配列を認知する断片であり、順方向及び逆方向のプライマー対を含むが、好ましくは、特異性及び敏感性を有する分析結果を提供するプライマー対である。プライマーの核酸配列が試料内に存在する非標的配列と一致しない配列であるので、相補的なプライマー結合部位を含む標的遺伝子配列のみ増幅し、非特異的増幅を引き起こさないプライマーであるとき、高い特異性が付与されることができる。
【００４１】
本発明で、前記“プローブ”とは試料内の検出しようとする標的物質と特異的に結合することができる物質を意味し、前記結合によって特異的に試料内の標的物質の存在を確認することができる物質を意味する。プローブの種類は当該分野で通常的に使われる物質で、制限はないが、好ましくはＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）、ＬＮＡ（ｌｏｃｋｅｄ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ＲＮＡ又はＤＮＡ、最も好ましくはＰＮＡである。より具体的に、前記プローブはバイオ物質であって、生物に来由するかこれと類似したもの又は生体外で製造されたものを含むものであり、例えば酵素、タンパク質、抗体、微生物、動植物細胞及び器官、神経細胞、ＤＮＡ、及びＲＮＡであってもよい。ＤＮＡはｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、オリゴヌクレオチドを含み、ＲＮＡはゲノムＲＮＡ、ｍＲＮＡ、オリゴヌクレオチドを含み、タンパク質の例としては、抗体、抗原、酵素、ペプチドなどを含むことができる。
【００４２】
本発明で、前記“ＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄｓ）”とは、２’−Ｏ、４’−Ｃメチレンブリッジを含む核酸アナログを意味する［Ｊ  Ｗｅｉｌｅｒ，ＪＨｕｎｚｉｋｅｒ  ａｎｄ  Ｊ  Ｈａｌｌ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  （２００６）１３，４９６．５０２］。ＬＮＡヌクレオチドはＤＮＡとＲＮＡの一般的核酸塩基を含み、Ｗａｔｓｏｎ−Ｃｒｉｃｋ塩基対規則に従って塩基対を形成することができる。しかし、メチレンブリッジによる分子の‘ｌｏｃｋｉｎｇ’によって、ＬＮＡはＷａｔｓｏｎ−Ｃｒｉｃｋ結合において理想的形状を形成することができなくなる。ＬＮＡがＤＮＡ又はＲＮＡオリゴヌクレオチドに含まれれば、ＬＮＡはより早く相補的ヌクレオチド鎖と対を成して二重螺旋の安全性を高めることができる。本発明で、前記“アンチセンス”はアンチセンスオリゴマーがワットソンクリック塩基対の形成によってＲＮＡ内の標的配列と混成化し、標的配列内で典型的にｍＲＮＡとＲＮＡ：オリゴマー異種二量体の形成を許容する、ヌクレオチド塩基の配列及びサブユニット間バックボーンを有するオリゴマーを意味する。オリゴマーは標的配列に対する正確な配列相補性又は近似相補性を有することができる。
【００４３】
本発明の他の具現例によれば、本発明による診断用組成物を含む疾患の診断用キットに関する。
【００４４】
本発明の診断用キットを用いて発病有無又は発病可能性を予測することができる疾患の種類としては、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーブス病（Ｇｒａｖｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、ハシモト病（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、自己免疫リンパ球増殖性症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ、ＡＬＰＳ）、重症筋無力症（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ  ｇｒａｖｉｓ）、カワサキ病（Ｋａｗａｓａｋｉ  ｄｉｓｅａｓｅ）、乾癬（ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）などであり得るが、これに制限されるものではない。
【００４５】
特に、本発明は、前記診断用キットを用いて膵臓疾患として膵臓癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は膵臓炎（ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）を診断することができ、より好ましくは膵臓癌を診断することができる。具体的に、本発明のキットを使う場合、正常群と膵臓癌の患者群を区別して検出又は診断することができる。それだけでなく、他の種類の癌、例えば肺癌又は大膓癌などと区別して膵臓癌を選別的に検出又は診断することができる。
【００４６】
本発明で、前記キットはＲＴ−ＰＣＲキット、ＤＮＡチップキット、ＥＬＩＳＡキット、プロテインチップキット、ラピッド（ｒａｐｉｄ）キット又はＭＲＭ（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ）キットであり得るが、これに制限されるものではない。
【００４７】
本発明の前記疾患の診断用キットは、分析方法に適した１種又はそれ以上の他の構成成分組成物、溶液又は装置をさらに含むことができる。
【００４８】
例えば、前記診断用キットは、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応を遂行するために必要な必須要素をさらに含むことができる。逆転写ポリメラーゼ連鎖反応キットは、マーカータンパク質をコードする遺伝子に対して特異的なプライマー対を含む。プライマーは前記遺伝子の核酸配列に特異的な配列を有するヌクレオチドであり、約７ｂｐ〜５０ｂｐの長さ、より好ましくは約１０ｂｐ〜３０ｂｐの長さを有することができる。また、対照群遺伝子の核酸配列に特異的なプライマーを含むことができる。その他に、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応キットは、テストチューブ又は他の適切な容器、反応緩衝液（ｐＨ及びマグネシウム濃度は多様）、デオキシヌクレオチド（ｄＮＴＰｓ）、Ｔａｑ−ポリメラーゼ及び逆転写酵素のような酵素、ＤＮａｓｅ、ＲＮａｓｅ抑制剤、ＤＥＰＣ−水（ＤＥＰＣ−ｗａｔｅｒ）、滅菌水などを含むことができる。
【００４９】
また、本発明の診断用キットは、ＤＮＡチップを遂行するために必要な必須要素を含むことができる。ＤＮＡチップキットは、遺伝子又はその断片にあたるｃＤＮＡ又はオリゴヌクレオチド（ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）が付着されている基板、及び蛍光標識プローブを製作するための試薬、製剤、酵素などを含むことができる。また、基板は、対照群遺伝子又はその断片にあたるｃＤＮＡ又はオリゴヌクレオチドを含むことができる。
【００５０】
また、本発明の診断用キットは、ＥＬＩＳＡを遂行するために必要な必須要素を含むことができる。ＥＬＩＳＡキットは、前記タンパク質に対して特異的な抗体を含む。抗体はマーカータンパク質に対する特異性及び親和性が高く、他のタンパク質に対する交差反応性がほとんどない抗体であり、単クローン抗体、多クローン抗体又は組み換え抗体である。また、ＥＬＩＳＡキットは、対照群タンパク質に特異的な抗体を含むことができる。その他に、ＥＬＩＳＡキットは、結合した抗体を検出することができる試薬、例えば標識された２次抗体、発色団（ｃｈｒｏｍｏｐｈｏｒｅｓ）、酵素（例えば、抗体と共役する）及びその基質又は抗体と結合することができる他の物質などを含むことができる。
【００５１】
本発明のさらに他の具現例によれば、目的とする個体から分離された生検でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階を含む、疾患の診断のための情報提供方法に関する。
【００５２】
本発明の情報提供方法で発病有無又は発病可能性を予測することができる疾患種類としては、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーブス病（Ｇｒａｖｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、ハシモト病（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、自己免疫リンパ球増殖性症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ、ＡＬＰＳ）、重症筋無力症（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ  ｇｒａｖｉｓ）、カワサキ病（Ｋａｗａｓａｋｉ  ｄｉｓｅａｓｅ）又は乾癬（ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）などであり得るが、これに制限されるものではない。
【００５３】
本発明は、前述した疾患の中でも特に膵臓疾患として、膵臓癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は膵臓炎（ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）、より好ましくは膵臓癌の発病有無と発病可能性を比較的正確に診断及び予測することができる。
【００５４】
本発明の情報提供方法による場合、正常群と膵臓癌の患者群を区別して検出又は診断することができるだけではなく、他の種類の癌、例えば肺癌又は大膓癌などと区別して膵臓癌を選別的に検出又は診断することができる。
【００５５】
本発明で、前記自己免疫疾患及びアレルギーの具体的な種類は本発明の診断用組成物に記載したものと重複するので、以下ではその記載を省略する。
【００５６】
本発明で、前記“目的とする個体”とは、前記列挙した疾患の発病有無が不確実な個体で、発病可能性が高い個体を意味する。
【００５７】
また、本発明で、前記個体から分離された“生検”とは、発病可能性の高い患者の皮膚を切開せず、中空針などを生体内器官に刺入して病理組職学的検査用で採取した組職であり、例えば患者の組職、細胞、血液、血清、血漿、唾液又は痰などを含むことができ、好ましくは患者の血液、血清又は血漿、より好ましくは前記血液、血清又は血漿から分離された単核球又はエクソソームであり得る。
【００５８】
以前には、膵臓疾患の診断のためにバイオマーカーの発現水準を測定するためには、主に疾患の発生が予測される組職（例えば、膵臓組職）から細胞を分離した後、前記細胞内のバイオマーカーの発現水準を測定して来た。しかし、本発明は、目的とする個体から分離された血液、血清又は血漿内に含まれた単核球又はエクソソームにおいて本発明による疾患バイオマーカーの発現水準を測定することにより、迅速で簡単であるが非常に正確に膵臓癌を含めた多様な疾患の発病有無と発病可能性を予測することができる。
【００５９】
具体的に、前記のように単核球又はエクソソームにおいて本発明によるマーカーの発現水準を測定する場合、患者を開腹して疾患組職から組職細胞を分離するなどの浸襲過程が必要なく、前記単核球を含む生検を獲得するまではおよそ５分以内がかかるので、前記単核球から本発明によるバイオマーカーの発現水準を測定することにもおよそ２時間以内がかかるので、非常に迅速で簡便に疾患の発病有無又は発病可能性を確認することができる。
【００６０】
本発明の情報提供方法は、好ましくは前記のように分離された生検でバイオマーカーでインターロイキン１０受容体又は前記インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定することができる。
【００６１】
また、本発明は、前記生検から膵臓癌を含めた本発明の疾患を診断するための他のバイオマーカーでインターロイキン２２受容体又は前記インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階をさらに含むことによって診断の正確度をより高めることができる。
【００６２】
また、本発明は、前記生検で膵臓癌を含めた本発明の疾患のさらに他のバイオマーカーでインターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階をさらに含むことにより、前記疾患を診断することにおいて正確度をより高めることができる。
【００６３】
本発明で、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の発現水準を測定する製剤は特に制限しないが、好ましくは前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１のそれぞれに特異的に結合する抗体、オリゴペプチド、リガンド、ＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）及びアプタマー（ａｐｔａｍｅｒ）からなる群から選択された１種以上を含むことができる。
【００６４】
好ましくは、本発明で、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の発現水準は前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１に特異的に結合する抗体を用いて測定及び比較することができる。前記抗体と生物学的試料内の該当タンパク質が抗原抗体複合体を形成するようにし、これを検出する方法を用いる。
【００６５】
本発明で、前記“抗原抗体複合体”は生物学的試料中の該当遺伝子の存在又は不在を確認するためのタンパク質抗原とこれを認知する抗体の結合物を意味する。前記抗原抗体複合体の検出は当該分野に知られているような方法、例えば分光学的、光化学的、生物化学的、免疫化学的、電気的、吸光的、化学的及びその他の方法を用いて検出することができる。
【００６６】
一方、本発明は、前記タンパク質発現水準測定又は比較分析方法としては、プロテインチップ分析、免疫測定法、リガンド結合法、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｍａｔｒｉｘ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｓｕｌｆａｃｅ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、放射線免疫分析、放射免疫拡散法、オクタロニー免疫拡散法、ロケット免疫電気泳動、組職免疫染色、補体結合分析法、２次元電気泳動分析、液相クロマトグラフィー質量分析（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ、ＬＣ−ＭＳ）、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ／Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）、ウエスタンブロット法及びＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍｅ  ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ）などがあるが、これに制限されるものではない。
【００６７】
また、本発明で、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤は、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１のそれぞれのタンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ及びアンチセンスヌクレオチドからなる群から選択された１種以上を含むことができる。本発明による前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９及び前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の情報は知られているので、当業者であればこれに基づいて前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを容易にデザインすることができるであろう。
【００６８】
本発明は、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準の測定又は比較は逆転写ポリメラーゼ連鎖反応、競争的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応、実時間逆転写ポリメラーゼ連鎖反応、ＲＮａｓｅ保護分析法、ノーザンブロット法又はＤＮＡチップなどを使うことができるが、これに制限されるものではない。前記測定方法によって正常対照群でのｍＲＮＡ発現量と疾患発病有無を診断しようとする個体のｍＲＮＡ発現量を確認することができ、これらの発現量程度を比較することによって膵臓癌などの疾患の発病可能性及び有無を診断又は予測することができる。
【００６９】
本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定されたインターロイキン１０受容体又は前記インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準より高い場合、疾患の中で特に膵臓疾患の発病可能性が高いと判定することができ、より好ましくは正常対照群での発現水準の２倍以上、３倍以上、４倍以上、５倍以上、６倍以上、７倍以上、８倍以上又は９倍以上の場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定することができる。
【００７０】
本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定されたインターロイキン１０受容体の発現水準として、例えばインターロイキン１０受容体を発現する細胞数の比率が正常対照群に比べて３倍〜２０倍、４倍〜１８倍、５倍〜１３倍、７倍〜１１倍、又は８倍〜１０倍の場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。好ましくは、前記目的とする個体から分離された生検で測定されたインターロイキン１０受容体の発現水準が正常対照群での発現水準の８倍〜１０倍増加した場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。
【００７１】
また、本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準の２倍〜２０倍、２倍〜１５倍、２．５倍〜１５倍、２倍〜１０倍又は２．５倍〜１０倍の場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。好ましくは、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準の２．５倍〜１０倍増加した場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。
【００７２】
また、本発明は、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン２２受容体又は前記インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準より高い場合、疾患の中で特に膵臓疾患の発病可能性が高いと判定することができ、より好ましくは、正常対照群での発現水準の１．５倍以上、２倍以上、３倍以上、４倍以上、５倍以上又は６倍以上の場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定することができる。
【００７３】
また、本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン２２受容体の発現水準として、例えば前記インターロイキン２２受容体を発現する細胞数の比率が正常対照群に比べて２倍〜１０倍、２倍〜１０倍、３倍〜９倍、４倍〜８倍、５倍〜７倍、又は６倍〜７倍の場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。また、本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群に比べて１．５倍〜１０倍、１．５倍〜９倍、１．５倍〜８倍、又は２倍〜７倍の場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。
【００７４】
本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定されたインターロイキン２２又は前記インターロイキン２２をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準より高い場合、疾患の中で特に膵臓疾患の発病可能性が高いと判定することができ、より好ましくは、正常対照群での発現水準の２倍以上、３倍以上、４倍以上、５倍以上又は６倍以上の場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定することができる。
【００７５】
また、本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン２２の発現水準として、例えば前記インターロイキン２２を発現する細胞数の比率が正常対照群に比べて３倍〜１６倍、４倍〜１５倍、４倍〜１３倍、５倍〜１０倍、５倍〜８倍、５倍〜７倍、又は６倍〜７倍の場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。
【００７６】
また、本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン２２をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群に比べて２倍〜１５倍、２．５倍〜１５倍、３倍〜１３倍、３．５倍〜１３倍、４倍〜１３倍、又は４倍〜１０倍の場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。
【００７７】
本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定されたインターロイキン２９又は前記インターロイキン２９をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準より高い場合、疾患の中で特に膵臓疾患の発病可能性が高いと判定することができ、より好ましくは、正常対照群での発現水準の２倍以上、３倍以上、４倍以上、５倍以上又は６倍以上の場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定することができる。
【００７８】
また、本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン２９の発現水準として、例えば前記インターロイキン２９を発現する細胞数の比率が正常対照群に比べて３倍〜１６倍、４倍〜１５倍、４倍〜１３倍、５倍〜１０倍、５倍〜８倍、５倍〜７倍、又は６倍〜７倍の場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。
【００７９】
また、本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターロイキン２９をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群に比べて２倍〜１５倍、２．５倍〜１５倍、３倍〜１３倍、３．５倍〜１３倍、４倍〜１３倍、又は４倍〜１０倍の場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。
【００８０】
本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定されたインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群での発現水準より高い場合、疾患の中で特に膵臓疾患の発病可能性が高いと判定することができ、より好ましくは、正常対照群での発現水準の１．５倍以上、２倍以上、３倍以上、４倍以上、５倍以上又は６倍以上の場合、膵臓疾患の発病可能性が高いと判定することができる。
【００８１】
また、本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の発現水準として、例えば前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１を発現する細胞数の比率が正常対照群に比べて３倍〜１６倍、４倍〜１５倍、４倍〜１３倍、５倍〜１０倍、５倍〜８倍、５倍〜７倍、又は６倍〜７倍の場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。
【００８２】
また、本発明で、前記目的とする個体から分離された生検で測定された前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群に比べて１．５倍〜１５倍、２倍〜１５倍、２．５倍〜１５倍、３倍〜１３倍、３．５倍〜１３倍、４倍〜１３倍、又は４倍〜１０倍の場合、膵臓疾患、特に膵臓癌の発病可能性が高いと判定することができる。
【００８３】
本発明は、前記のようにインターロイキン１０受容体のマーカー、好ましくはインターロイキン１０受容体及びインターロイキン２２受容体のマーカー、より好ましくはインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体と、それに加えてインターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の少なくとも一つのマーカーの発現水準を測定することによって膵臓癌の発病可能性を高正確度で診断することができる。
【００８４】
さらに、本発明で、前記のように目的とする個体から分離された生検でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定して、疾患、特に膵臓疾患、好ましくは膵臓癌の発病可能性が高いと予測又は診断する場合、前記目的とする個体に対してその疾患に対する薬剤投与（膵臓癌に対する抗癌剤など）、放射線治療、又は免疫治療などの適切な治療を行う段階をさらに含むことができる。
【００８５】
本発明のさらに他の具現例によれば、（ａ）疾患患者から分離された生検でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階、
（ｂ）前記患者に候補薬剤を投与する段階、及び
（ｃ）前記候補薬剤の投与後、前記患者から分離された生検でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階を含む、疾患治療用薬物スクリーニング方法に関する。
【００８６】
本発明の薬物スクリーニング方法で薬物の効用性又は感受性を予測することができる疾患種類としては、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーブス病（Ｇｒａｖｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、ハシモト病（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、自己免疫リンパ球増殖性症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ、ＡＬＰＳ）、重症筋無力症（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ  ｇｒａｖｉｓ）、カワサキ病（Ｋａｗａｓａｋｉ  ｄｉｓｅａｓｅ）又は乾癬（ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）などであり得るが、これに制限されるものではない。
【００８７】
本発明は、前述した疾患の中でも特に膵臓疾患として、膵臓癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）又は膵臓炎（ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ）、より好ましくは膵臓癌に対する治療用薬物の効用性又は感受性を比較的正確に予測することができる。
【００８８】
本発明で、前記自己免疫疾患及びアレルギーの具体的な種類は本発明の診断用組成物に記載したものと重複するので、以下でその記載を省略する。
【００８９】
また、本発明で、前記個体から分離された“生検”とは、発病可能性の高い患者の皮膚を切開せず、中空針などを生体内器官に刺入して病理組職学的検査用で採取した組職であり、例えば患者の組職、細胞、血液、血清、血漿、唾液又は痰などを含むことができ、好ましくは患者の血液、血清又は血漿、より好ましくは前記血液、血清又は血漿から分離された単核球又はエクソソームであり得る。
【００９０】
本発明の薬物スクリーニング方法は、好ましくは前記（ａ）及び（ｃ）段階で患者から分離された生検に対してバイオマーカーでインターロイキン１０受容体又は前記インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定することができる。
【００９１】
また、本発明は、前記（ａ）及び（ｃ）段階で患者から分離された生検に対してインターロイキン１０受容体又は前記インターロイキン１０受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準の他にも、インターロイキン２２受容体又は前記インターロイキン２２受容体をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準をさらに測定することによって治療用薬物の感受性予測正確度をより高めることができる。
【００９２】
また、本発明は、前記（ａ）及び（ｃ）段階で患者から分離された生検に対してインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体又はこれらをコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準の他にも、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準をさらに測定することによって前記疾患に対する治療用薬物の感受性予測時にその正確度をより高めることができる。
【００９３】
本発明で、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の発現水準を測定するための製剤は特に制限しないが、好ましくは前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１のそれぞれに特異的に結合する抗体、オリゴペプチド、リガンド、ＰＮＡ（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）及びアプタマー（ａｐｔａｍｅｒ）からなる群から選択された１種以上を含むことができる。
【００９４】
好ましくは、本発明で、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の発現水準は、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１のそれぞれに特異的に結合する抗体を用いて測定及び比較することができる。前記抗体と生物学的試料内の該当タンパク質が抗原抗体複合体を形成するようにし、これを検出する方法を用いる。
【００９５】
本発明で、前記“抗原抗体複合体”は生物学的試料中の該当遺伝子の存在又は不在を確認するためのタンパク質抗原とこれを認知する抗体の結合物を意味する。前記抗原抗体複合体の検出は当該分野に知られたような方法、例えば分光学的、光化学的、生物化学的、免疫化学的、電気的、吸光的、化学的及びその他の方法を用いて検出することができる。
【００９６】
一方、本発明は、前記タンパク質発現水準測定又は比較分析方法としては、プロテインチップ分析法、免疫測定法、リガンド結合法、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｍａｔｒｉｘ  Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ（Ｓｕｌｆａｃｅ  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｌａｓｅｒ  Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｉｍｅ  ｏｆ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）分析、放射線免疫分析、放射免疫拡散法、オクタロニー免疫拡散法、ロケット免疫電気泳動、組職免疫染色、補体結合分析法、２次元電気泳動分析、液相クロマトグラフィー質量分析（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ、ＬＣ−ＭＳ）、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ／Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）、ウエスタンブロット法及びＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍｅ  ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ）などがあるが、これに制限されるものではない。
【００９７】
また、本発明で、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定するための製剤は、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１のそれぞれをコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ及びアンチセンスヌクレオチドからなる群から選択された１種以上を含むことができる。本発明による前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９及び前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１の情報は知られているので、当業者であればこれに基づいて前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを容易にデザインすることができるであろう。
【００９８】
本発明は、前記インターロイキン１０受容体、前記インターロイキン２２受容体、前記インターロイキン２２、前記インターロイキン２９又は前記インターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準の測定又は比較は逆転写ポリメラーゼ連鎖反応、競争的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応、実時間逆転写ポリメラーゼ連鎖反応、ＲＮａｓｅ保護分析法、ノーザンブロット法又はＤＮＡチップなどを使うことができるが、これに制限されるものではない。前記測定方法によって正常対照群でのｍＲＮＡ発現量と疾患発病有無を診断しようとする個体のｍＲＮＡ発現量を確認することができ、これらの発現量程度を比較することによって膵臓癌などの疾患の発病可能性及び有無を診断又は予測することができる。
【００９９】
本発明は、前記（ｃ）段階で測定したインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準が（ａ）段階で測定された同一バイオマーカーに対する発現水準より減少した場合、前記候補薬剤を疾患の治療に適した治療剤として選別する段階をさらに含むことができる。
【発明の効果】
【０１００】
本発明は、インターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及び／又はインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１のバイオマーカーの発現水準を測定することにより、膵臓疾患、自己免疫疾患、アレルギー、グレーブス病（Ｇｒａｖｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、ハシモト病（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、乾癬、カワサキ病（Ｋａｗａｓａｋｉ  ｄｉｓｅａｓｅ）及び自己免疫リンパ球増殖性症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ、ＡＬＰＳ）などの多様な疾患、特にその中でも膵臓癌の発病有無又は発病可能性を正確に予測又は診断するようにする。
【０１０１】
また、本発明は、個体から獲得した血液、血清又は血漿などから得られた単核球又はエクソソームから前記バイオマーカーの発現水準を測定して疾患の発病有無などを予測又は診断することができるので、従来に比べて非浸襲的方法で簡単で迅速でありながらも非常に正確に膵臓癌などの疾患を診断することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１０２】
【図１】実施例１でＦＡＣＳ分析を用いて正常対照群、膵臓癌患者、膵臓炎患者、肺癌患者及び大膓癌患者から採取した血液内総単核球細胞数に比べてＩＬ−２２が発現する単核球細胞数の比率を％で示した図である。
【図２】実施例１でＦＡＣＳ分析を用いて正常対照群、膵臓癌患者、膵臓炎患者、肺癌患者及び大膓癌患者から採取した血液内総単核球細胞数に比べてＩＬ−２２Ｒが発現する単核球細胞数の比率を％で示した図である。
【図３】実施例１でＦＡＣＳ分析を用いて正常対照群、膵臓癌患者、膵臓炎患者、肺癌患者及び大膓癌患者から採取した血液内総単核球細胞数に比べてＩＬ−１０Ｒが発現する単核球細胞数の比率を％で示した図である。
【図４】実施例２で正常対照群、膵臓癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液内単核球細胞でＩＬ−１０ＲＢのｍＲＮＡ発現水準を比較してグラフで示した図である。
【図５】実施例２で正常対照群、膵臓癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液内単核球細胞でＩＬ−２２ＲＡのｍＲＮＡ発現水準を比較してグラフで示した図である。
【図６】実施例３で正常対照群、膵臓癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液内単核球細胞でＩＬ−２２のｍＲＮＡ発現水準を比較してグラフで示した図である。
【図７】実施例３で正常対照群、膵臓癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液内単核球細胞でＩＬ−２９のｍＲＮＡ発現水準を比較してグラフで示した図である。
【図８】実施例４で正常対照群、膵臓癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液内単核球細胞でＩＦＮＬＲ１イソフォーム１のｍＲＮＡ発現水準を比較してグラフで示した図である。
【図９】実施例４で正常対照群、膵臓癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液内単核球細胞でＩＦＮＬＲ１イソフォーム３のｍＲＮＡ発現水準を比較してグラフで示した図である。
【図１０】実施例５で膵臓癌患者の手術の前と後に患者から採取した血液内総単核球細胞数に比べてＩＬ−２２が発現する単核球細胞数の比率を％で示した図である。
【図１１】実施例５で膵臓癌患者の手術の前と後に患者から採取した血液内総単核球細胞数に比べてＩＬ−２２Ｒが発現する単核球細胞数の比率を％で示した図である。
【図１２】実施例５で膵臓癌患者の手術の前と後に患者から採取した血液内総単核球細胞数に比べてＩＬ−１０Ｒが発現する単核球細胞数の比率を％で示した図である。
【図１３】実施例６で膵臓癌患者の手術前と手術後３ヶ月が経過した時点で患者から採取した血液内総単核球細胞数に比べてＩＬ−１０Ｒが発現する単核球細胞数の比率を測定した後、ｐａｉｒｅｄ  Ｔ  ｔｅｓｔで分析した結果をグラフで示した図である。
【図１４】実施例７で正常対照群、膵臓癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液内エクソソームでＩＬ−１０ＲＢのｍＲＮＡ発現水準を比較してグラフで示した図である。
【図１５】実施例７で正常対照群、膵臓癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液内エクソソームでＩＬ−２２ＲＡのｍＲＮＡ発現水準を比較してグラフで示した図である。
【図１６】実施例７で正常対照群、膵臓癌患者、胆管癌患者及び胆嚢癌患者から採取した血液内エクソソームでＩＦＮＬＲ１イソフォーム１のｍＲＮＡ発現水準を比較してグラフで示した図である。
【発明を実施するための形態】
【０１０３】
本発明の一具現例によれば、インターロイキン１０受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １０  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−１ＯＲ）、インターロイキン２２受容体（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＩＬ−２２Ｒ）、インターロイキン２２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２２、ＩＬ−２２）、インターロイキン２９（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  ２９、ＩＬ−２９）及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｌａｍｂｄａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  １ｉｓｏｆｏｒｍ１、ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する製剤を含む疾患診断用組成物に関する。
【０１０４】
本発明の他の具現例によれば、本発明による診断用組成物を含む疾患の診断用キットに関する。
【０１０５】
本発明のさらに他の具現例によれば、目的とする個体から分離された生検でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階を含む、疾患の診断のための情報提供方法に関する。
【０１０６】
本発明のさらに他の具現例によれば、（ａ）疾患患者から分離された生検でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階、
（ｂ）前記患者に候補薬剤を投与する段階、及び
（ｃ）前記候補薬剤の投与後、前記患者から分離された生検でインターロイキン１０受容体、インターロイキン２２受容体、インターロイキン２２、インターロイキン２９及びインターフェロンラムダ受容体１イソフォーム１からなる群から選択された１種以上のタンパク質又は前記タンパク質をコードする遺伝子のｍＲＮＡの発現水準を測定する段階を含む、疾患治療用薬物スクリーニング方法に関する。
【０１０７】
［発明の実施のための形態］
以下、本発明を下記の実施例に基づいて詳細に説明する。ただ、下記実施例は本発明を例示するものであるだけ、本発明の内容が下記の実施例によって限定されるものではない。
【０１０８】
［準備例１］
Ｈｉｓｔｏｐａｑ  １０７７はＳｉｇｍａから購入し、Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  ＡはＢｉｏｌｅｇｅｎｄから購入した。抗体として、Ａｌｅｘａ  ６４７抗−ＩＬ−２２、及びＰＥ抗−マウスＩＬ−１０ＲはＢｉｏｌｅｇｅｎｄから購入し、ＰｅｒＣＰマウスＩＬ−２２ＲはＲ＆Ｄから購入した。また、ＦＡＣＳバッファー（ｂｕｆｆｅｒ）としてはＢＳＡ（ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ  ａｌｂｕｍｉｎ）が０．５％含まれたＰＢＳ（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｂｕｆｆｅｒｅｄ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）を使った。細胞固定用バッファー（ｆｉｘａｔｉｏｎ  ｂｕｆｆｅｒ）及びパーマ／ウォッシュバッファー（Ｐｅｒｍ／ｗａｓｈ  ｂｕｆｆｅｒ）もＢｉｏｌｅｇｅｎｄから購入した。
【０１０９】
［実施例１］
１．単核球（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  ｃｅｌｌ；ＰＢＭＣ）の分離
膵臓癌患者３人、膵臓炎患者３人、正常対照群３人、肺癌患者３人、大膓癌患者３人からそれぞれ血液を採取して常温で保管した。血液の粘度が高い場合は単核球の分離が難しいので、１Ｘ  ＰＢＳに１：１で希釈して準備した。１５ｍｌ円錐管（ｃｏｎｉｃａｌ  ｔｕｂｅ）にフィコール（Ｈｉｓｔｏｐａｑ  １０７７、ｓｉｇｍａ）を血液と同じ体積で準備した。フィコール上に血液サンプルが混じらないように添加した。加速と減速を最小にし、４００ｇを３０分間遠心分離した。中間に白い細胞層（単核球）を別に回収した後、ＰＢＳを添加し、４００ｇを３分間遠心分離しながら洗浄した。洗浄された細胞を回収して５０μｌ  ＦＡＣＳバッファーに再浮遊させた後、ＰＥ抗−マウスＩＬ−１０Ｒ抗体及びＰｅｒＣＰマウスＩＬ−２２Ｒ抗体を添加し、アイス（ｉｃｅ）で１時間培養した。その後、ＦＡＣＳバッファーで２回洗浄し、ＦＡＣＳバッファー５００μｌに細胞を再浮遊させた。
【０１１０】
２．Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  Ａの処理
収集した細胞を計数し、１×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌでペニシリン及びストレプトマイシンを２％含むＲＰＭＩ１６４０培地に入れた後、Ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ  Ａを１Ｘで処理して６時間培養した。
【０１１１】
３．固定、パーマ及び染色
培養された細胞を回収し、ＦＡＣＳバッファー（０．５％ＢＳＡ  ｉｎ  ＰＢＳ）で２回洗浄した後、固定バッファーを５００μｌずつ入れ、アイスで３０分間固定した。ついで、ＦＡＣＳバッファーで２回洗浄し、パーマバッファー１ｍｌに再浮遊させた後、遠心分離を２０分間２回遂行した。その後、細胞をまた回収してパーマバッファー５０μｌに再浮遊させた後、Ａｌｅｘａ  ６４７抗−ＩＬ−２２抗体を添加し、アイスで１時間培養した。ＦＡＣＳで２回洗浄し、ＦＡＣＳバッファー５００μｌに再浮遊させた。
【０１１２】
４．ＦＡＣＳ分析
ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使って総単核球細胞数に比べてＩＬ−１０Ｒ、ＩＬ−２２Ｒ又はＩＬ−２２が発現する細胞数を％で示した。その結果は下記の表１及び図１〜３に示した。ただ、下記の表１で、データは平均±標準偏差で示し、統計的分析はＤｕｎｎ’ｓ  ｐｏｓｔ  ｈｏｃ分析を用いたＫｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓテストを使って遂行した。
【表１】
2020513574.tif 000003
【０１１３】
前記表１及び図１〜図３に示すように、膵臓炎患者及び膵臓癌患者でＩＬ−２２の発現水準は正常対照群でのＩＬ−２２の発現水準に比べてそれぞれ１．７倍又は０．９倍程度に相当する反面、前記ＩＬ−２２が結合するＩＬ−１０Ｒの発現水準は、膵臓炎患者の場合は正常対照群に比べておよそ１４．８倍が増加し、膵臓癌患者の場合は正常対照群に比べておよそ９．０倍が増加したことを確認することができた。しかし、肺癌患者の場合はＩＬ−１０Ｒの発現水準が正常対照群に比べておよそ２．７５倍増加し、大膓癌患者の場合は正常対照群の発現水準のおよそ０．７８倍にむしろ減少したことを確認することができた。
【０１１４】
また、ＩＬ−２２Ｒの発現水準に関連して、膵臓炎患者の場合は正常対照群に比べておよそ１８．６６倍増加し、膵臓癌患者の場合は正常対照群に比べておよそ６．５７倍増加したことを確認することができた。しかし、肺癌患者の場合はＩＬ−２２Ｒの発現水準が正常対照群の発現水準のおよそ０．２８倍に減少し、大膓癌患者の場合は正常対照群の発現水準のおよそ０．１７倍に、発現水準が著しく減少したことを確認することができた。
【０１１５】
また、ＩＬ−２２に比べてＩＬ−２２Ｒの発現水準に関連して、膵臓炎患者の場合はＩＬ−２２の発現水準に比べてＩＬ−２２Ｒの発現水準がおよそ９．９３倍であり、膵臓癌患者の場合はＩＬ−２２の発現水準に比べてＩＬ−２２Ｒの発現水準は６．３１倍であることから、ＩＬ−２２はＩＬ−２２Ｒに結合することにもかかわらず、ＩＬ−２２Ｒの発現水準がＩＬ−２２に比べて有意に増加することを確認することができた。しかし、肺癌患者の場合はＩＬ−２２の発現水準に比べてＩＬ−２２Ｒの発現水準がおよそ１．１８倍、大膓癌患者の場合はＩＬ−２２の発現水準に比べてＩＬ−２２Ｒの発現水準がおよそ１．７６倍であることから、ＩＬ−２２の発現水準とＩＬ−２２Ｒの発現水準が類似した結果を示した。
【０１１６】
このように、膵臓炎又は膵臓癌患者においてＩＬ−１０Ｒの発現水準は正常対照群又は他の種類の疾患と確実に区別される発現様相を示すことが分かり、膵臓炎及び膵臓癌も区分される発現様相を示すことが分かった。
【０１１７】
したがって、本発明は、前記方法を用いて膵臓炎及び膵臓癌を高正確度で検出及び診断することができるだけではなく、膵臓炎と膵臓癌も区別して診断することができる。
【０１１８】
［実施例２］
正常対照群４人、膵臓癌患者４人、胆管癌患者２人、胆嚢癌患者２人からそれぞれ血液を採取した後、前記実施例１と同様な方法で血液内単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、正常対照群に比べて前記単核球でＩＬ−１０Ｒベータサブユニット（ＩＬ−１０ＲＢ）とＩＬ−２２Ｒアルファサブユニット（ＩＬ−２２ＲＡ）のｍＲＮＡ発現水準の比率を測定し、その結果を図４及び図５に示した。
【０１１９】
図４及び図５に示すように、正常対照群に比べて膵臓癌患者から分離された単核球ではＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡの発現水準はおよそ３倍、ＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡの発現水準はおよそ６倍程度増加したが、胆管癌及び胆嚢癌患者の場合、ＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡの発現水準はおよそ１〜２倍増加し、ＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡの発現水準は胆管癌患者でむしろ減少する傾向を確認することができた。
【０１２０】
これから、膵臓癌の場合、他の癌種に比べて単核球で発現するＩＬ−１０ＲＢ及びＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡの発現水準が著しく増加することを確認することができた。
【０１２１】
［実施例３］
正常対照群４人、膵臓癌患者４人、胆管癌患者２人、胆嚢癌患者２人からそれぞれ血液を採取した後、前記実施例１と同様な方法で血液内単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、正常対照群に比べて前記単核球でのＩＬ−２２とＩＬ−２９のｍＲＮＡ発現水準の比率を測定し、その結果を図６及び図７に示した。
【０１２２】
図６及び図７に示すように、正常対照群に比べて膵臓癌患者から分離された単核球ではＩＬ−２２ｍＲＮＡとＩＬ−２９ｍＲＮＡの発現水準が４倍以上増加した反面、胆管癌患者では両マーカー共に発現水準が減少し、胆嚢癌患者の場合はおよそ２〜３倍程度のみ増加したことを確認することができた。
【０１２３】
これから、膵臓癌の場合、他の癌種に比べて単核球で発現するＩＬ−２２及びＩＬ−２９ｍＲＮＡの発現水準が著しく増加することを確認することができた。
【０１２４】
［実施例４］
正常対照群４人、膵臓癌患者４人、胆管癌患者２人、胆嚢癌患者２人からそれぞれ血液を採取した後、前記実施例１と同様な方法で血液内単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、正常対照群に比べて前記単核球でＩＬ−２９と結合するインターフェロン受容体１イソフォーム１（ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）とインターフェロン受容体１イソフォーム３（ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ３）のｍＲＮＡ発現水準の比率を測定し、その結果を図８及び図９に示した。
【０１２５】
図８及び図９に示すように、正常対照群に比べて膵臓癌患者から分離された単核球ではＩＬ−２９と結合するインターフェロン受容体１イソフォーム１のｍＲＮＡ発現水準が３倍以上増加したが、胆管癌及び胆嚢癌患者の場合はおよそ１〜２倍程度のみ増加したことを確認することができた。
【０１２６】
これから、膵臓癌患者の場合、他の癌種に比べて単核球で発現するインターフェロン受容体１イソフォーム１のｍＲＮＡの発現水準が著しく増加することを確認することができた。
【０１２７】
［実施例５］
膵臓癌切除術を受けた膵臓癌患者に対し、手術の前と後にそれぞれ血液を採取した後、前記実施例１と同様な方法で血液内単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使って総単核球細胞数に比べてＩＬ−１０Ｒ、ＩＬ−２２Ｒ又はＩＬ−２２が発現する細胞数を％で示した。その結果は下記の表２及び図１０〜図１２に示した。
【表２】
2020513574.tif 000004
【０１２８】
前記表２及び図１０〜図１２に示すように、膵臓癌患者において切除術によって膵臓癌組職の総量（ｍａｓｓ）が減少すれば、単核球でのＩＬ−１０Ｒ、ＩＬ−２２及びＩＬ−２２Ｒの発現水準が著しく減少することを確認することができ、特にＩＬ−１０Ｒの発現水準が有意に減少したことを確認することができた。
【０１２９】
［実施例６］
膵臓癌切除術を受けた膵臓癌患者に対し、手術前と手術後３ヶ月が経過した時点で血液を採取した後、前記実施例１と同様な方法で血液内単核球（ＰＢＭＣ）を分離し、ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使って総単核球細胞数に比べてＩＬ−１０Ｒ（ｍａｒｋｅｒ  Ｃ）が発現する細胞の頻度を測定した後、ｐａｉｒｅｄ  Ｔ  ｔｅｓｔに分析し、その結果を図１３に示した。
【０１３０】
図１３に示すように、切除術を用いて膵臓癌患者から癌組職を除去すれば、手術前と比較してＩＬ−１０Ｒを発現する単核球の比率が有意に減少したことを確認することができた。
【０１３１】
［実施例７］
正常対照群４人、膵臓癌患者４人、胆管癌患者２人、胆嚢癌患者２人からそれぞれ血液を採取した後、血漿（ｐｌａｓｍａ）内の循環するエクソソーム（ｅｘｏｓｏｍｅ）を分離し、正常対照群に比べて前記エクソソームでＩＬ−１０Ｒベータサブユニット（ＩＬ−１０ＲＢ）、ＩＬ−２２Ｒアルファ１（ＩＬ−２２ＲＡ）及びインターフェロン受容体１イソフォーム１（ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）のそれぞれのｍＲＮＡ発現水準の比率を測定し、その結果を図１４〜図１６に示した。
【０１３２】
図１４〜図１６に示すように、正常対照群に比べて膵臓癌患者から分離されたエクソソームではＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡの発現水準はおよそ４倍、ＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡの発現水準はおよそ１．５倍、インターフェロン受容体１イソフォーム１のｍＲＮＡ発現水準はおよそ２．５倍増加したことを確認することができた。しかし、胆管癌患者から分離されたエクソソームでは、正常対照群に比べてＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡの発現水準はおよそ１．５倍、インターフェロン受容体１イソフォーム１のｍＲＮＡ発現水準はおよそ１．５倍増加したことに過ぎなく、特にＩＬ−２２ＲＡ  ｍＲＮＡの発現水準は正常対照群に比べてむしろ減少したことを確認することができた。胆嚢癌患者の場合もそれから分離されたエクソソームではＩＬ−１０ＲＢ  ｍＲＮＡの発現水準は正常対照群と同等な水準を示し、ＩＬ−２２ＲＡとインターフェロン受容体１イソフォーム１のｍＲＮＡの発現水準は正常対照群に比べておよそ１．５倍以下で増加したことを確認することができた。
【０１３３】
これから、膵臓癌患者の場合、血漿から分離されるエクソソームで発現するＩＬ−１０ＲＢ、ＩＬ−２２ＲＡ及びインターフェロン受容体１イソフォーム１のｍＲＮＡの発現水準が正常対照群又は他の癌種に比べて著しく増加することを確認することができた。
【産業上の利用可能性】
【０１３４】
本発明は多様な疾患を診断することができる組成物に関するもので、例えば膵臓癌などを診断することができる組成物、これを含む診断用キット及び前記組成物を用いて診断のための情報を提供する方法に関するものである。
【配列表フリーテキスト】
【０１３５】
配列番号１（ＩＬ−１０ＲＢ）：ｍａｗｓｌｇｓｗｌｇｇｃｌｌｖｓａｌｇｍｖｐｐｐｅｎｖｒｍｎｓｖｎｆｋｎｉｌｑｗｅｓｐａｆａｋｇｎｌｔｆｔａｑｙｌｓｙｒｉｆｑｄｋｃｍｎｔｔｌｔｅｃｄｆｓｓｌｓｋｙｇｄｈｔｌｒｖｒａｅｆａｄｅｈｓｄｗｖｎｉｔｆｃｐｖｄｄｔｉｉｇｐｐｇｍｑｖｅｖｌａｄｓｌｈｍｒｆｌａｐｋｉｅｎｅｙｅｔｗｔｍｋｎｖｙｎｓｗｔｙｎｖｑｙｗｋｎｇｔｄｅｋｆｑｉｔｐｑｙｄｆｅｖｌｒｎｌｅｐｗｔｔｙｃｖｑｖｒｇｆｌｐｄｒｎｋａｇｅｗｓｅｐｖｃｅｑｔｔｈｄｅｔｖｐｓｗｍｖａｖｉｌｍａｓｖｆｍｖｃｌａｌｌｇｃｆａｌｌｗｃｖｙｋｋｔｋｙａｆｓｐｒｎｓｌｐｑｈｌｋｅｆｌｇｈｐｈｈｎｔｌｌｆｆｓｆｐｌｓｄｅｎｄｖｆｄｋｌｓｖｉａｅｄｓｅｓｇｋｑｎｐｇｄｓｃｓｌｇｔｐｐｇｑｇｐｑｓ
配列番号２（ＩＬ−２２ＲＡ）：ｍｒｔｌｌｔｉｌｔｖｇｓｌａａｈａｐｅｄｐｓｄｌｌｑｈｖｋｆｑｓｓｎｆｅｎｉｌｔｗｄｓｇｐｅｇｔｐｄｔｖｙｓｉｅｙｋｔｙｇｅｒｄｗｖａｋｋｇｃｑｒｉｔｒｋｓｃｎｌｔｖｅｔｇｎｌｔｅｌｙｙａｒｖｔａｖｓａｇｇｒｓａｔｋｍｔｄｒｆｓｓｌｑｈｔｔｌｋｐｐｄｖｔｃｉｓｋｖｒｓｉｑｍｉｖｈｐｔｐｔｐｉｒａｇｄｇｈｒｌｔｌｅｄｉｆｈｄｌｆｙｈｌｅｌｑｖｎｒｔｙｑｍｈｌｇｇｋｑｒｅｙｅｆｆｇｌｔｐｄｔｅｆｌｇｔｉｍｉｃｖｐｔｗａｋｅｓａｐｙｍｃｒｖｋｔｌｐｄｒｔｗｔｙｓｆｓｇａｆｌｆｓｍｇｆｌｖａｖｌｃｙｌｓｙｒｙｖｔｋｐｐａｐｐｎｓｌｎｖｑｒｖｌｔｆｑｐｌｒｆｉｑｅｈｖｌｉｐｖｆｄｌｓｇｐｓｓｌａｑｐｖｑｙｓｑｉｒｖｓｇｐｒｅｐａｇａｐｑｒｈｓｌｓｅｉｔｙｌｇｑｐｄｉｓｉｌｑｐｓｎｖｐｐｐｑｉｌｓｐｌｓｙａｐｎａａｐｅｖｇｐｐｓｙａｐｑｖｔｐｅａｑｆｐｆｙａｐｑａｉｓｋｖｑｐｓｓｙａｐｑａｔｐｄｓｗｐｐｓｙｇｖｃｍｅｇｓｇｋｄｓｐｔｇｔｌｓｓｐｋｈｌｒｐｋｇｑｌｑｋｅｐｐａｇｓｃｍｌｇｇｌｓｌｑｅｖｔｓｌａｍｅｅｓｑｅａｋｓｌｈｑｐｌｇｉｃｔｄｒｔｓｄｐｎｖｌｈｓｇｅｅｇｔｐｑｙｌｋｇｑｌｐｌｌｓｓｖｑｉｅｇｈｐｍｓｌｐｌｑｐｐｓｒｐｃｓｐｓｄｑｇｐｓｐｗｇｌｌｅｓｌｖｃｐｋｄｅａｋｓｐａｐｅｔｓｄｌｅｑｐｔｅｌｄｓｌｆｒｇｌａｌｔｖｑｗｅｓ
配列番号３（ＩＬ−２２）：ｍａａｌｑｋｓｖｓｓｆｌｍｇｔｌａｔｓｃｌｌｌｌａｌｌｖｑｇｇａａａｐｉｓｓｈｃｒｌｄｋｓｎｆｑｑｐｙｉｔｎｒｔｆｍｌａｋｅａｓｌａｄｎｎｔｄｖｒｌｉｇｅｋｌｆｈｇｖｓｍｓｅｒｃｙｌｍｋｑｖｌｎｆｔｌｅｅｖｌｆｐｑｓｄｒｆｑｐｙｍｑｅｖｖｐｆｌａｒｌｓｎｒｌｓｔｃｈｉｅｇｄｄｌｈｉｑｒｎｖｑｋｌｋｄｔｖｋｋｌｇｅｓｇｅｉｋａｉｇｅｌｄｌｌｆｍｓｌｒｎａｃｉ
配列番号４（ＩＬ−２９）：ｍａａａｗｔｖｖｌｖｔｌｖｌｇｌａｖａｇｐｖｐｔｓｋｐｔｔｔｇｋｇｃｈｉｇｒｆｋｓｌｓｐｑｅｌａｓｆｋｋａｒｄａｌｅｅｓｌｋｌｋｎｗｓｃｓｓｐｖｆｐｇｎｄｌｒｌｌｑｖｒｅｒｐｖａｌｅａｅｌａｌｔｌｋｖｌｅａａａｇｐａｌｅｄｖｌｄｑｐｌｈｔｌｈｈｉｌｓｑｌｑａｃｉｑｐｑｐｔａｇｐｒｐｒｇｒｌｈｈｗｌｈｒｌｑｅａｐｋｋｅｓａｇｃｌｅａｓｖｔｆｎｌｆｒｌｌｔｒｄｌｋｙｖａｄｇｎｌｃｌｒｔｓｔｈｐｅｓｔ
配列番号５（ＩＦＮＬＲ１  ｉｓｏｆｏｒｍ１）：ｍａｇｐｅｒｗｇｐｌｌｌｃｌｌｑａａｐｇｒｐｒｌａｐｐｑｎｖｔｌｌｓｑｎｆｓｖｙｌｔｗｌｐｇｌｇｎｐｑｄｖｔｙｆｖａｙｑｓｓｐｔｒｒｒｗｒｅｖｅｅｃａｇｔｋｅｌｌｃｓｍｍｃｌｋｋｑｄｌｙｎｋｆｋｇｒｖｒｔｖｓｐｓｓｋｓｐｗｖｅｓｅｙｌｄｙｌｆｅｖｅｐａｐｐｖｌｖｌｔｑｔｅｅｉｌｓａｎａｔｙｑｌｐｐｃｍｐｐｌｄｌｋｙｅｖａｆｗｋｅｇａｇｎｋｔｌｆｐｖｔｐｈｇｑｐｖｑｉｔｌｑｐａａｓｅｈｈｃｌｓａｒｔｉｙｔｆｓｖｐｋｙｓｋｆｓｋｐｔｃｆｌｌｅｖｐｅａｎｗａｆｌｖｌｐｓｌｌｉｌｌｌｖｉａａｇｇｖｉｗｋｔｌｍｇｎｐｗｆｑｒａｋｍｐｒａｌｄｆｓｇｈｔｈｐｖａｔｆｑｐｓｒｐｅｓｖｎｄｌｆｌｃｐｑｋｅｌｔｒｇｖｒｐｔｐｒｖｒａｐａｔｑｑｔｒｗｋｋｄｌａｅｄｅｅｅｅｄｅｅｄｔｅｄｇｖｓｆｑｐｙｉｅｐｐｓｆｌｇｑｅｈｑａｐｇｈｓｅａｇｇｖｄｓｇｒｐｒａｐｌｖｐｓｅｇｓｓａｗｄｓｓｄｒｓｗａｓｔｖｄｓｓｗｄｒａｇｓｓｇｙｌａｅｋｇｐｇｑｇｐｇｇｄｇｈｑｅｓｌｐｐｐｅｆｓｋｄｓｇｆｌｅｅｌｐｅｄｎｌｓｓｗａｔｗｇｔｌｐｐｅｐｎｌｖｐｇｇｐｐｖｓｌｑｔｌｔｆｃｗｅｓｓｐｅｅｅｅｅａｒｅｓｅｉｅｄｓｄａｇｓｗｇａｅｓｔｑｒｔｅｄｒｇｒｔｌｇｈｙｍａｒ
【図１】
2020513574.tif 000005
【図２】
2020513574.tif 000006
【図３】
2020513574.tif 000007
【図４】
2020513574.tif 000008
【図５】
2020513574.tif 000009
【図６】
2020513574.tif 000010
【図７】
2020513574.tif 000011
【図８】
2020513574.tif 000012
【図９】
2020513574.tif 000013
【図１０】
2020513574.tif 000014
【図１１】
2020513574.tif 000015
【図１２】
2020513574.tif 000016
【図１３】
2020513574.tif 000017
【図１４】
2020513574.tif 000018
【図１５】
2020513574.tif 000019
【図１６】
2020513574.tif 000020
【配列表】
2020513574000001.app
【国際調査報告】
2020513574.tif 000021
2020513574.tif 000022
2020513574.tif 000023
2020513574.tif 000024