(57)【要約】  熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備であって、上記設備は、熱不安定性物質が導入される少なくとも１つの噴射ユニット（１）、上記設備がカプセル化に使用される場合のカプセル化材料、溶媒、添加剤、および上記熱不安定性物質から液滴を得るための噴射ガス流を含む。上記設備は、上記溶媒を蒸発させるために上記液滴および乾燥ガスが導入される乾燥ユニット（２）をさらに備え、生成されたマイクロカプセルを上記乾燥ガスから分離するように構成される収集ユニット（３）をさらに備える。上記収集ユニット（３）は、カートリッジフィルタ収集機、サイクロン収集機、またはこれら２つの組み合わせから選択される。また、提示される上記設備で実施される、熱不安定性物質の工業的カプセル化のための方法も記載する。
2020504674.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）以下をそれぞれ少なくとも１つ有する、少なくとも１つの噴射ユニット（１）：
溶液のための注入口（６）、
噴射ガスのための注入口（８）、および
噴霧された溶液の液滴を放出する、液滴のための排出口（１４）；
（ｉｉ）以下をそれぞれ少なくとも１つ備える、上記噴射ユニット（１）の後に配置される、少なくとも１つの乾燥ユニット（２）：
乾燥ガスのための注入口（７）、
液滴のための注入口（１１）、
上記乾燥ガスを有する液滴が、上記液滴の溶媒が蒸発するまで移動し、マイクロカプセルを形成する、長手方向容器（１２）、および
容器上記マイクロカプセルおよび蒸発した溶媒を浚う乾燥ガスが上記容器（１２）から放出される、マイクロカプセルおよび乾燥ガスのための排出口（１３）；
（ｉｉｉ）上記乾燥ユニット（２）の後に配置され、生成される上記マイクロカプセルを、上記乾燥ガスから分離するように構成される、少なくとも１つの収集ユニット（３）：
を備えることを特徴とする、熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備。
【請求項２】
上記収集ユニット（３）が、カートリッジフィルタ収集機、サイクロン収集機、またはこれら２つの組み合わせから選択されることを特徴とする、請求項１に記載の熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備。
【請求項３】
上記噴射ユニット（１）が、ネブライザ型噴射器であることを特徴とする、請求項１に記載の熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備。
【請求項４】
上記噴射ユニット（１）が、エレクトロネブライザ型噴射器であることを特徴とする、請求項１に記載の熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備。
【請求項５】
上記収集ユニット（３）が、溶媒濃縮装置（１０）をさらに備えることを特徴とする、請求項１に記載の熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備。
【請求項６】
上記溶媒濃縮装置（１０）が、乾燥ガスのための排出口（５）に配置されていることを特徴とする、請求項５に記載の熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備。
【請求項７】
上記収集ユニット（３）が、乾燥ガス再循環装置をさらに備えることを特徴とする、請求項１に記載の熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備。
【請求項８】
上記噴射ユニット（３）が、上記乾燥ガスの予備乾燥装置をさらに備えることを特徴とする、請求項１に記載の熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備。
【請求項９】
上記乾燥ユニット（２）が、圧力制御装置をさらに備えることを特徴とする、請求項１に記載の熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備。
【請求項１０】
上記噴射ユニット（１）が、噴射ガスのための注入口を２つ備え、
１つの噴射ガスのための注入口（８）は、上記溶液の注入口（６）と同軸に配置され、
別の１つの噴射ガスのための注入口は、上記溶液の注入口（６）に対してある程度傾斜して配置される、
ことを特徴とする、請求項１に記載の熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載されているような設備内で実施される、熱不安定性物質の工業的カプセル化のための方法であって、
（ａ）以下を含むポリマー溶液を調製する工程、
カプセル化される熱不安定物質、
カプセル化前駆体、
エタノール、水およびこれらの組み合わせから選択される有機溶媒または水性溶媒、および
（ｂ）噴射ガス流の存在下で、工程（ａ）で得られるポリマー溶液から液滴を形成する工程、
（ｃ）マイクロカプセルを得るために、制御された温度の乾燥ユニット中で、工程（ｂ）で得られる液滴を乾燥させる工程、および
（ｄ）収集ユニットによって、工程（ｃ）で得られるマイクロカプセルを収集する工程、
を含む方法。
【請求項１２】
工程（ｃ）が、周囲温度または亜周囲温度で実施されることを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
工程（ａ）の上記カプセル化前駆体が、動物、植物および微生物タンパク質から選択されることを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
工程（ａ）の上記カプセル化前駆体が、乳清、カゼイン、天然ポリペプチドから選択されるか、または微生物、コラーゲン、大豆タンパク質およびゼインの遺伝子改変から得られることを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
工程（ａ）の上記カプセル化前駆体が、ゼインおよび乳清タンパク質から選択されることを特徴とする、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
工程（ａ）の上記カプセル化前駆体が、ラクトース、スクロース、マルトースおよびフルクトオリゴ糖から選択されるオリゴ糖であることを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
工程（ａ）の上記カプセル化前駆体が、フルクトオリゴ糖であることを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
工程（ａ）の上記カプセル化前駆体が、プルラン、ＦｕｃｏＰｏｌ、アルギネート、ペクチン、キトサン、ゴム、カラゲネート、デンプン、デキストラン、マルトデキストリン、セルロース、グリコーゲンおよびキチンから選択される多糖類であることを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
工程（ａ）の上記カプセル化前駆体が、プルラン、デキストラン、マルトデキストリン、デンプン、およびこれらの任意の組み合わせから選択されることを特徴とする、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
工程（ａ）で添加剤を使用することを特徴とする、請求項１１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
上記添加剤が界面活性剤であることを特徴とする、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
上記噴射ユニットの上記排出口において、上記溶液および噴射ガス流に０．１ｋＶ〜５００ｋＶの電圧を加えることで、液滴を形成する工程（ｂ）が実施されることを特徴とする、請求項１０〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
上記噴射ユニットの上記排出口において、上記溶液および噴射ガス流に５ｋＶ〜１５ｋＶの電圧を加えることで、液滴を形成する工程（ｂ）が実施されることを特徴とする、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
交流で電圧を加えることで、液滴を形成する工程（ｂ）が実施されることを特徴とする、請求項１０〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
＜技術分野＞
本発明は、医薬、生物医学、農業、化粧品および食品分野の範囲内にある。より具体的には、プロバイオティクス型官能性成分、多価不飽和脂肪酸、抗酸化剤などの熱不安定性物質の乾燥および／またはカプセル化のための設備および方法を記載する。
【０００２】
＜背景技術＞
一般に化学製品、特に食品サプリメント、化粧品および医薬品のマイクロカプセル化または微粒子の形成に使用される工業技術は、噴霧乾燥および凍結乾燥である。
【０００３】
噴霧乾燥技術は、カプセル化剤と一緒に混合される製品を含む噴霧器によって生成されるエアロゾルに、対向流の熱風を使用する。一般に、工業ユニットは、噴霧される溶液を供給するためのシステム、噴霧器、高温乾燥チャンバ、および微粒子収集機からなる。これらの場合、収集機は、サイクロン収集機、カートリッジ収集機などであり得る。噴霧乾燥の技術的課題は、高温（一般的に１００℃より高い）の使用により不安定な製品が劣化するので、安定な製品を用いた作業に限定されることである。
【０００４】
凍結乾燥は、低温（−８０℃）で凍結し、その後、真空状態とすることで溶媒を昇華させる方法である。この技術は、不安定な製品を用いた作業を可能にするが、適切な凍結保護剤の使用を必要とする。さらに、凍結乾燥に関する別の技術的課題として、凍結乾燥はバッチ形式で実行されるので、電力消費が高く、生産チェーンへ組み入れることが困難であるため、アップスケールが非常に高価であることが挙げられる。
【０００５】
不安定な製品を用いた作業を可能にする噴霧冷却技術も、当該技術分野において知られている。この技術は、低融点植物油（３２〜４２℃）を使用する。この技術は、油をその融点以上に加熱する工程、およびエアロゾルを生成させた後、油を冷却する工程からなる。目的は、製品をマイクロカプセルに固化することである。これらの材料の低融点は、熱不安定性材料に対する潜在的な損傷を低減する。問題は、それが可逆的なプロセスであり、製品を冷蔵し続けなければならないことである。さらに、この技術は、使用されるカプセル化物質の種類によって制限され、当該カプセル化物質は低融点油でなければならない。さらに、それは好ましくない異臭および臭気を生成し得る油溶性分子に対してより低い耐性を示すなど、他の問題を有する。すなわち、油溶性分子は、カプセルを通過することができる（カプセル化された状態を維持する能力が制限される）。したがって、現在、その工業的使用は限られている。
【０００６】
いわゆる溶液吹き付け(solution blowing)は、古典的なネブライザを使用するが、ポリマーからの繊維の製造に使用される。発明にはまた、この方法が、生成される繊維の直径をより強力に制御するために電場を加えることで変化することもまた記載される。噴霧されるポリマーと相互作用する電場を生成する異なる点の間で、電圧の差が加わる。
【０００７】
フローフォーカシングは、上記と同様の技術であり、生成されるジェットを強力に制御することで液滴および微粒子のサイズをより強力に制御するために、電場の替わりに流体場を用いる。これは、従来のネブライザを使用するよりも、微粒子のサイズをより強力に制御することを可能にする。フローフォーカシングは、噴射器（一般的にチューブ）からなり、それを通して使用溶液および溶液ジェットのサイズを低減させる同軸空気流が噴射され、液滴のサイズ、すなわち生成される微粒子のサイズを制御することを可能にする。この技術によって生成される液滴のサイズが小さいことで、周囲温度での乾燥を容易にし、不安定な製品の有効性を維持する。しかし、この技術に関する最大の技術的課題は、他の実験的技術（例えば、電気スプレー）と同様に、噴射器の性能が低いために、生産性の低い作業に限定されることである。
【０００８】
例えば、文献ＵＳ２０１１１７１３３５およびその特許ファミリーが、当該技術分野において知られている。上記文献は、電場を有するネブライザ、および生成されたナノファイバーを収集する収集トレーからなる、ナノファイバーを製造するための電気延伸システムを開示する。このシステムでは、ナノサイズであるために急速に乾燥するナノファイバーが生成され、次いで、ナノファイバーが強く接着される平坦な収集機に収集される。これが、ナノファイバーの工業化を困難にする。
【０００９】
また当該技術分野では、例えば、噴霧乾燥技術および凍結乾燥技術を用いてプロバイオティクスバクテリアＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓをカプセル化する、カプセル化方法について記載されたK. Lejaらによる文献“Production of dry Lactobacillus rhamnosus GG preparations by spray drying and lyophilization in aqueous two-phase systems” in Acta Scientiarum Polonorum, Technologia Alimentaria 8 4 (2009)が知られている。この文献は、カプセルの有効性が使用されるカプセル化方法よりも、使用されるポリマー溶液に依存することを証明する科学的研究である。実施例では、脱脂乳、ＰＶＰおよびデキストリンが使用される。
【００１０】
C. Jacobsenによる“Food Enrichment with Omega-3 Fatty Acids” in Woodhead Publishing Series in Food Science, Technology and Nutrition (2013)の文献もまた知られており、これは、特に噴霧乾燥カプセル化技術を含む、異なるカプセル化剤を用いてオメガ−３脂肪酸をマイクロカプセル化するための異なる技術を記載している。同様に、DY Yingによる文献“Microencapsulated Lactobacillus rhamnosus GG Powders: Relationship of Powder Physical Properties to Probiotic Survival during Storage” in Journal of Food Science, 2010 Nov-Dec; 75 (9):E588-95は、Ｈｙｌｏｎ  ＶＩＩデンプンを有するＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓプロバイオティクスバクテリアカプセルの有効性に関する研究を提示している。上記文献は、特に、噴霧乾燥技術を用いるカプセル化方法を記載している。
【００１１】
特許文献ＵＳ２０１２０２６３６２６Ａ１は、少なくとも１つの水性液体および特にＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓを含む捕捉されたプロバイオティクスバクテリアを含むカプセルを含む飲用可能な製品を開示している。上記文献はまた、使用されやすいいくつかのプロバイオティクスカプセル化技術およびそれらの欠点を開示する。
【００１２】
文書ＷＯ０２０６０２７５は、少なくとも２つの非混和性液体の安定な帯電同軸ジェットを使用して、マイクロおよびナノメートルサイズのカプセルまたは微粒子を製造するためのプロセスを開示している。ここで、例えば、第１の液体は第２の液体によって取り囲まれており、第２の液体は、障壁または保護被膜を提供する。この方法は、誘電性雰囲気中、好ましくは不活性ガス雰囲気中または真空中で実施され得る。
【００１３】
＜発明の概要＞
本発明は、熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備を提案する。さらに、本発明は、当該技術分野の解決策における記載された欠点を克服することを可能にする、熱不安定性物質の工業的カプセル化を用いた乾燥方法を開示する。本発明は、乾燥のために使用する場合においてマイクロ、サブマイクロおよびナノ粒子の生成を可能にし、カプセル化のために使用する場合においてマイクロ、サブマイクロおよびナノカプセルの生成を可能にする。しかし、示される特定の実施例で得られたサイズであることから、明細書および好ましい実施形態全体を通してマイクロカプセルについて言及する。
【００１４】
本発明は、マイクロカプセル内に残る活性成分の制御された放出を達成するために、またはその生物学的利用可能性を増加させるために、熱不安定性物質のカプセル化を可能にし、例えば、製品の投与量をスムーズに運び、かつ均質化すること、風味を遮蔽すること、一般的に湿気、光および周囲酸素からマイクロカプセル内の製品を保護することを可能にした。
【００１５】
「熱不安定性物質」とは、その安定性を維持するために被膜されなければならない物質であると理解される。本発明における上記物質の例としては、微生物、酵素、多価不飽和脂肪酸、抗酸化剤、ビタミン、必須元素および任意の誘導分子または化合物が挙げられる。
【００１６】
これらの例は、ゼイン(Zein)、乳清タンパク質およびプルラン(pullulan)などの天然マトリックス、またはＰＥＯ（ポリエチレンオキシド）もしくはＰＶＰ（ポリビニルピロリドン）などの合成マトリックスを含む、様々なマトリックス中の精油または酵素のカプセル化を意味する。
【００１７】
本発明の目的は、以下を含む、熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備である：
好ましくはネブライザまたはエレクトロネブライザである噴射ユニット、
上記噴射ユニットの後に配置される乾燥ユニット、および
上記乾燥ユニットの後に配置される収集ユニット。
【００１８】
上記設備は、電気スプレーおよびフローフォーカシングなどの他の生産性の低い技術によって提供される制御された温度で、熱不安定性材料のマイクロカプセルの工業的な量を得ることを可能にし、保護（マイクロカプセル内の熱不安定性材料内容物の保護）を維持または強化する。
【００１９】
噴射ユニットは、噴射器を備え、噴射器の入口には、カプセル化される熱不安定性物質を含む溶液、カプセル化材料、溶媒、および必要な添加剤が導入される。本明細書を通して、噴射される溶液について言及する場合、液体（液体または混和性液体−固体の混合物）、エマルジョン（不混和性液体の混合物）または懸濁液（液体中の不溶性固体の混合物）について区別なく言及する。
【００２０】
噴射ユニットは、噴射器排出口において、電場を加えることによって、液滴のサイズをより効率的に集束または制御することができる液滴を投射する（この例示的な実施形態では、噴射ユニットがエレクトロネブライザとすることができる）。そのため、１つの例示的な実施形態では、噴射ユニットが電極（典型的には円形）を備え、当該電極は噴射器噴射器排出口に配置される。
【００２１】
噴射ユニットが、噴射器排出口において電場を含む場合、交流（ＡＣ）および直流（ＤＣ）の両方で高電圧を加えることによって生成される上記電場を、溶液が通過すると、噴霧時に溶液が帯電する。電場を加えることにより、噴射ユニット内で生成される液滴のサイズおよびサイズの単分散性をより良好に制御することが可能になる。熱不安定性物質がカプセル化され、乾燥のために熱風を使用しなければ、生成される液滴は、その後の乾燥時間を短縮するために非常に小さくなければならない。
【００２２】
当該技術分野における他の解決策とは対照的に、この設備では、噴射ユニットの噴射器排出口において、熱風は使用されない。したがって、熱不安定性化合物のカプセル化に関して、より良好な安定性および保護結果が達成される。これは、噴霧乾燥に基づく現在知られている解決策に関する改善を意味する。また、これは、制御された、典型的には周囲の温度条件下において、単一ステップで実行される連続プロセスであるので、凍結乾燥よりも有利である。
【００２３】
噴射ユニットは、圧縮装置、圧電装置、超音波装置、振動装置などを備える、ネブライザ型、噴霧器型またはエアゾール型の噴射器を備える。本発明の一実施形態では、噴射ユニットは、液体溶液のための注入口および噴射ガスのための２つの注入口を備える種類の圧縮ネブライザを備える。この例示的な実施形態では、噴射ユニットは、噴射ガスのための注入口を２つ備え、そのうち１つの噴射ガスのための注入口は、溶液の注入口と同軸に配置され、他方の噴射ガスのための注入口は、溶液の注入口に対してある程度傾斜して配置される。
【００２４】
すなわち、噴射ガスのための注入口の１つは、任意のネブライザにおけるように、溶液流に対して同軸方向に、噴射ガスが投射されるように配置され、他方の注入口は、噴射ガスの溶液流に対してある角度で投射され、液体ジェット流に対して衝突するように配置される。これは、液滴サイズを、より大きく低減することを可能にする。この場合、設備は、空気、窒素または他のガスおよびこれらの混合物であり得るガス流と共に使用され得る。例えば、保護雰囲気中で、または可燃性溶媒を使用する場合に作業するために、不活性ガスが使用される。
【００２５】
上述のように、噴射ユニットは、そのサイズが噴射器の種類に依存する液滴を投射し、具体的には、好ましくは噴射ユニットが上述のようなネブライザを備え、液滴のサイズは、溶液の流量、噴射ガスの流量、および溶液の特性（主に表面張力、導電率、および粘度）に依存する。
【００２６】
さらに、本発明は、液滴のサイズおよびそれらの単分散性をより強力に制御するために、外部電場を加えることを提案する。そのため、１つの例示的な実施形態では、噴射ユニットは、噴射器排出口に直に配置される電極（典型的には円形）を備える。噴霧時、液体は、直流および交流の両方の高電圧で作用する上記電極を通過することで帯電する。
【００２７】
乾燥ユニットにおいて、噴射ユニットで形成された液滴は、制御された温度で乾燥される。乾燥ユニットを移動する際に、形成されたマイクロカプセルを含む、溶液の溶媒が蒸発する。乾燥ユニットを完全に循環した後、溶媒は完全に蒸発し、所望のマイクロカプセルを生じ、その後、収集ユニットによって収集される。乾燥ユニットは、溶媒を気化させるために高温加熱の必要なしに、制御された温度、典型的には周囲温度または亜周囲温度で乾燥およびカプセル化することができることに留意されたい。周囲温度で熱不安定性物質が使用される場合、上記設備および方法は、例えば５℃のような、亜周囲温度で作業することを可能にする。
【００２８】
乾燥ユニットは、容器を備える。噴射ユニットおよび乾燥ガス注入口は、上記容器の一端にある。収集ユニットは、それと反対側の端部にある。乾燥ガスは、制御された温度で乾燥ユニットに導入される。乾燥ガスは、空気、窒素または他のガスおよびこれらの混合物であってもよい。
【００２９】
噴射ユニットに対する乾燥ユニットの配置は、それら両方が同軸であってもよく、それらの間で任意の角度で傾斜していてもよい。本発明では、好ましくは同軸配置を提案する。乾燥ガスは、制御された温度、典型的には周囲温度で乾燥ユニットに導入される。乾燥ガスは、特定の方向から乾燥ユニットに導入されるので、噴射ユニット内で生成された液滴を乾燥ガスと共に浚う。液滴が乾燥ユニットを通って循環するにつれて、液滴中の溶媒が蒸発し、それによって所望のマイクロカプセルを生じる。
【００３０】
乾燥ユニットの幾何学的形状は、演繹的に、液滴を乾燥させるための適切な滞留時間を可能にするものであれば、どのようなものであってもよい。最適な幾何学的形状は、可変の円形断面を有するシリンダであり、注入口から出口にかけての断面が増大する。これにより、液滴が最大である領域で、より強力に浚うことを可能にし、さらにこれは、ある程度の長さの間、滞留時間をより長くすることを可能にする。
【００３１】
別の例示的な実施形態では、設備は、第２の注入口を備える、上記設備の長手方向軸に垂直に配置される乾燥ユニットを備える。これらの乾燥ユニットは、スリーブおよび第２のガス流を含む。この第２のガス流は、乾燥ユニットの表面に配置された穴または細孔を通って、乾燥ユニットの表面に垂直な方向に注入される。これにより、乾燥ユニットの壁への付着による材料の損失を低減することができる。第２のガス流は、空気、窒素または他のガスおよびそれらの混合物であってもよい。
【００３２】
乾燥ガス流量は、噴射ユニットから注入された全ての溶媒を吸収するのに十分でなければならない。水性溶液が使用される場合、乾燥ガスが吸収することができる水の最大量は、使用される乾燥ガスの相対湿度が大きいほど小さい。
【００３３】
すなわち、例えば、施設外からの空気が乾燥ガスとして使用され、本方法が雨の日に高湿度で実施されている場合、固定された溶媒体積を蒸発させるのに必要な乾燥ガスの量は、本方法が乾燥日に実施される場合よりも多い（外気は相対湿度が低いため）。
【００３４】
同様に、より多く浚うことおよびより多くマイクロカプセルを収集することを望む場合、より小さい乾燥ユニットの断面サイズが選択され、これは、一般に、円筒形状を有する。これは、乾燥ガスの流量を維持し、乾燥ユニットの断面積を減少させると、上記乾燥ユニットの内部を通る際の浚う速度が増加するからである。
【００３５】
さらに、より速いガスの流速（例えば、先に説明したように、乾燥ユニットの断面のサイズを減少させることによって得られる）によって、より短い滞留時間、およびそれによるより短い乾燥時間を生じることに留意されたい。これは、より大きなマイクロカプセルを乾燥させることを困難にし得る。したがって、この設備は、各溶液を浚う速度および滞留時間を最適化するための、特定の折衷溶液(solucion de compromiso)を有するように設計される。この設備は、カプセル化のために使用される溶液に従って浚う量および乾燥時間を最適化するための折衷寸法(dimensiones de compromiso)を維持するように設計される。乾燥時間は、液滴が乾燥ユニット内に残る時間に関連するので、滞留時間とも呼ばれる。
【００３６】
乾燥ユニットの設計は、使用される溶媒およびカプセル化される熱不安定性物質に依存するが、これは両方の要因が、噴射ユニットによって生成される液滴のサイズおよびその蒸発力学に強く影響するからである。最適な速度および滞留時間を可能にする最適な乾燥ユニットの直径および長さは、例えば、約１ｋｇ／ｈの乾燥製品またはカプセル化製品の工業収率を有する設備では、典型的には直径２〜２００ｃｍ、および長さ２０ｃｍ〜２０ｍの範囲であるが、これらに限定されない。より大きな工業設備は、予測可能なより大きな直径および長さを使用してもよい。
【００３７】
したがって、提案される設備は、その高い収率のために工業的使用に最適であり、連続的にかつ単一のステップで、熱不安定性物質のマイクロカプセルを得るための方法を実施することができる。
【００３８】
溶媒の蒸発をより効率的に制御する目的で、設備、より具体的には乾燥ユニットは、異なる圧力で、真空中であっても作動することができる。
【００３９】
収集ユニットは、乾燥ガスから生成されるマイクロカプセルの効率的な分離を可能にする。収集ユニットは、静電荷の有無にかかわらず、少なくとも１つのサイクロン分離、遠心分離または濾過装置を備えてもよい。収集ユニットは、好ましくはカートリッジフィルタ収集機またはサイクロン収集機である。１つの例示的な実施形態では、収集ユニットは、直列に配置されたサイクロン収集機およびカートリッジフィルタを備える。これにより、サイクロン収集機内に大きなマイクロカプセルを、カートリッジフィルタ収集機内に小さなマイクロカプセルを、収集することが可能になる。
【００４０】
可燃性溶媒を使用する場合、不活性ガス、典型的には窒素を使用することが好ましく、本方法が実施される設備は、通気装置および抑制装置を備えるＡＴＥＸ分類された材料およびユニットから製造されなければならない。
【００４１】
上記装置が、乾燥製品または無菌カプセル化を得るために使用される場合、噴射ガスおよび乾燥ガスは、典型的にはＨＥＰＡ  Ｈ１４フィルターまたは同様のものを通過させて、濾過されなければならず、または典型的には紫外線、エチレンオキシド、放射線など、またはそれらの組み合わせへ曝露することによって滅菌されなければならない。この場合、溶液の調製および収集された製品の取り扱いの両方は、クリーンルーム滅菌設備または同様の設備において行われる。
【００４２】
同様に、好ましい実施形態では、収集ユニットは、収集ユニットの下流の乾燥ガス排出口に配置された溶媒濃縮装置を備える。別の例示的な実施形態では、上記乾燥ガス排出口で収集された乾燥ガスは、噴射ユニットおよび／または乾燥ユニットに再供給するために再循環される。典型的には、使用される溶媒または乾燥ガスが高価である場合、または安全性または無菌性の理由から、溶媒の再使用あるいは、クローズドループによる溶媒の再供給は特に興味深い。設備はまた、液滴の乾燥またはそのクローズドループ再循環を容易にするために、流入ガスを予備乾燥するための装置を備え得る。この場合は、乾燥ガスが周囲空気である場合の好ましい実施形態である。
【００４３】
上述のように、本発明の別の目的は、上述のような設備で実施される熱不安定性物質の工業的カプセル化のための方法である。上記方法は、カプセル化される熱不安定性構造、カプセル化前駆体、および好ましくはエタノール、イソプロパノール、水、およびこれらの組み合わせから選択される有機溶媒または水性溶媒を含むポリマー溶液を調製する工程を少なくとも１つ含む。
【００４４】
上記方法は、噴射ガス流の存在下で、先に得られるポリマー溶液から液滴を形成する工程をさらに含む。続いて、上記方法は、制御された温度の乾燥ユニット中で、得られる液滴を乾燥させる工程、および上記収集ユニットによって、乾燥後に得られる対応するマイクロカプセルを収集する工程を含む。
【００４５】
＜図面の簡単な説明＞
本発明の特性をより正確に理解できるようにするために、本発明の実際的な実施形態の好ましい例について、本発明の説明を補足する目的で、当該説明には、以下に限定することはないが、例示として本発明の一体部分の構成を表す一組の図面が添付されている。
【００４６】
図１ａは、噴射ユニット（１）、乾燥ユニット（２）および収集ユニット（３）を見ることができる、熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備の例示的な実施形態を示す。
【００４７】
図１ｂは、噴射ユニット（１）の液滴排出口（１４）に配置された電気回路（９）を備える、熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備の別の例示的な実施形態を示す。
【００４８】
図２ａ〜２ｄは、噴射ユニットがネブライザであり、ゼインおよびプルランがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【００４９】
図３は、図２ａ〜２ｄに示される実施例に従って得られたマイクロカプセルおよび非カプセル化オメガ−３のＫＢｒペレットについての、赤外線透過分光法によって得られた１に標準化された生存率の比較研究を示す。
【００５０】
図４ａ〜４ｈは、噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、エタノール７０％が溶媒として使用され、ゼインがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【００５１】
図５ａ〜５ｈは、噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、水が溶媒として使用され、プルランがカプセル化材料として使用され、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として使用される設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【００５２】
図６ａ〜６ｆは、種々の市販のオメガ−３カプセル化法の手段によって得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【００５３】
図７ａ〜７ｂは、噴射ユニットがネブライザである設備において、ラクトバチルス・ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）をカプセル化するために得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【００５４】
図８ａ〜８ｈは、噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、乳清タンパク質がカプセル化前駆体として、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として、全乳が液体マトリックスとして使用されている設備内でカプセル化された、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓについての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真および粒度グラフを示す。
【００５５】
図９は、凍結保護剤としてマルトデキストリンを使用する標準的な方法に従って凍結乾燥することによって得られたＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ微粒子と、噴射ユニットがネブライザである場合および噴射ユニットがエレクトロネブライザである場合に、記載された方法および設備を使用して得られた微粒子との間の比較を示す生存率研究を示す。
【００５６】
＜発明の好ましい実施形態＞
以下は、１ｋｇ／ｈの乾燥またはカプセル化製品の製造スケールを示す、熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備の例示的な実施形態の説明である。より高い生産量を生成する設備は、記載されたものよりも大きな拡張可能な設備および処理パラメータを必要とすることが予想される。したがって、提案されたパラメータが、本質上限定的であると考えてはならない。同様に、提案される設備における熱不安定性物質を工業的にカプセル化するための方法の例示的な実施形態もまた、記載される。
【００５７】
図１に示すように、設備は少なくとも以下のものを備える；
（ｉ）以下をそれぞれ少なくとも１つ有する、少なくとも１つの噴射ユニット（１）：
少なくとも１つの溶液のための注入口（６）を有する噴射器（上記溶液は、カプセル化される熱不安定性物質、カプセル化プロセスに上記設備が使用される場合のカプセル化材料、溶媒および必要な添加剤を既に含んでいる）、
噴射ガスのための注入口（８）、および
溶液が液滴の状態で噴霧して排出する際の、液滴のための排出口（１４）；
（ｉｉ）以下を備える、上記噴射ユニット（１）の後に配置される、少なくとも１つの乾燥ユニット（２）：
少なくとも１つの乾燥ガスのための注入口（７）および噴射ユニット（１）から排出する、液滴のための注入口（１１）、および
好ましくは円筒形の構成を有し、長手方向に水平に配置され、液滴の全ての溶媒の蒸発を可能にするのに十分な長さを有する、長手方向容器（１２）、および
マイクロカプセルが通る、マイクロカプセルおよび乾燥ガスのための排出口（１３）（上記マイクロカプセルは、溶媒を含まない液滴であって、上記溶媒は、上記乾燥ユニットを循環中に蒸発される）；
（ｉｉｉ）上記乾燥ユニットの後に配置され、生成される上記マイクロカプセルを、上記乾燥ガスから分離するように構成され、生成される上記マイクロカプセルのための排出口（４）および乾燥ガスのための排出口（５）を備える、少なくとも１つの収集ユニット（３）（上記乾燥ガスは、上記乾燥ユニットで蒸発した溶媒を浚う）。
【００５８】
本発明の１つの例示的な実施形態では、収集ユニットは、収集ユニット（３）の下流の乾燥ガスのための排出口（５）に配置される溶媒濃縮装置（１０）をさらに備える。別の例示的な実施形態では、上記設備が、乾燥ガスを噴射ユニット（１）および／または乾燥ユニット（２）に向け直すことを可能にする乾燥ガス再循環装置を備えてもよい。
【００５９】
１つの例示的な実施形態では、噴射ユニットの噴射器は、上述のようなネブライザからなるネブライザである。１つの例示的な実施形態では、噴射ガス流量は、１〜５００ＬＰＭである。溶液、エマルジョンまたは懸濁液の形態で見出すことができる、噴射される液体の流量は、好ましくは１ｍｌ／ｈ〜５０Ｌ／ｈの範囲である。
【００６０】
例示的な一実施形態では、設備が噴射ユニット（１）の排出口に高圧電気回路（９）をさらに備える。回路に使用される電圧は、噴射される溶液の流量に依存し、１００ｋＶ〜５００ｋＶの範囲である。得られる効果は、溶液の帯電、液滴の放射の集束および液滴の形成における協働、液滴サイズの制御の改善である。高圧電気回路は、より均一なサイズ分布も生成するので、液滴の単分散性にも影響を及ぼす。高い単分散性は、カプセル化された熱不安定性材料の保護または放出においてより正確な均質性を可能にし、そしてカプセル化プロセスに対するより強力な制御を可能にする。よって、高い単分散性は、最終製品に必須であり得る。
【００６１】
１つの例示的な実施形態では、乾燥ガス流量が１０〜１００，０００ｍ３／ｈの範囲である。水性溶液を用いて作業する場合、乾燥ガスが加湿されることにより、乾燥はより難しくなり、したがって、乾燥ユニット内の溶液から水分を除去するのに、より長い時間がかかる。
【００６２】
そのため、これらの場合、設備は、上記ユニットに導入される上記乾燥ガスをより乾燥させるために、乾燥ガスを予備乾燥するための装置を備えてもよく、これによって、設備の収率を増加させる。エタノール、イソプロパノールおよび他の非水性溶液が使用される場合、乾燥ガス（典型的には空気）が溶媒を含まないため、乾燥はより容易である。したがって、乾燥ガスはエタノールを含まないため、乾燥ユニットにおけるエタノールの蒸発速度に影響を及ぼさない。
【００６３】
設備内の溶媒の蒸発をより効率的に制御するために、１つの例示的な実施形態では、乾燥ユニットは、異なる圧力で、真空中であっても作動することを可能にする圧力制御装置をさらに備える。
【００６４】
好ましくは、上記設備は、直径１〜５０マイクロメートルのサイズのマイクロカプセルを得るために設計される。１０〜１００，０００ｍ３／ｈの典型的な乾燥流量では、乾燥ユニットの最適な直径および長さは、直径２０〜２００ｃｍ、長さ２０ｃｍ〜２０ｍである。以下に説明される例示的な実施形態では、乾燥ユニットは、円錐形の注入口および排出口を有する、直径６０ｃｍ、長さ２ｍの円筒形の容器を備える。
【００６５】
本発明の別の目的は、前述の設備で実施される熱不安定性物質の工業的カプセル化のための方法である。この方法は、以下の工程を含む：
（ａ）以下を含むポリマー溶液を調製する工程、
カプセル化される熱不安定物質、
カプセル化前駆体、
エタノール、イソプロパノール、水およびこれらの組み合わせから選択される水性溶媒または有機溶媒、および
（ｂ）噴射ガス流の存在下で、工程（ａ）で得られる上記ポリマー溶液から液滴を形成する工程、
（ｃ）マイクロカプセルを得るために、周囲温度の乾燥ユニット中で、１０ｍ３／ｈ〜１００，０００ｍ３／ｈの範囲の空気流を用いて、工程（ｂ）で得られる液滴を乾燥させる工程、および
（ｄ）収集ユニットによって、工程（ｃ）で得られるマイクロカプセルを収集する工程。
【００６６】
明細書を通して、工程（ａ）のポリマー溶液は、溶液（すなわち、液体の混合物または混和性液体−固体の混合物）、エマルジョン（すなわち、非混和性液体の混合物）、または懸濁液（すなわち、液体中の不溶性固体の混合物）であり得ることが理解される。
【００６７】
好ましくは、工程（ａ）のカプセル化前駆体は、動物、植物および微生物タンパク質から選択される。より好ましくは、工程（ａ）のカプセル化前駆体は、乳清、カゼイン、天然ポリペプチドから選択されるか、または微生物、コラーゲン、大豆タンパク質およびゼインの遺伝子改変から得られる。さらにより好ましくは、段階（ａ）のカプセル化前駆体は、ゼインと乳清タンパク質から選択される。
【００６８】
別の例示的な実施形態では、工程（ａ）のカプセル化前駆体は、ラクトース、スクロース、マルトースおよびフラクトオリゴ糖から選択されるオリゴ糖である。より好ましくは、工程（ａ）のカプセル化前駆体は、フルクトオリゴ糖である。
【００６９】
別の例示的な実施形態では、工程（ａ）のカプセル化前駆体は、アルギネート、ガラクトマンナン、ペクチン、キトサン、ゴム、カラゲネート、プルラン、ＦｕｃｏＰｏｌ、デンプン、デキストラン、マルトデキストリン、セルロース、グリコーゲンおよびキチンから選択される多糖である。より好ましくは、工程（ａ）のカプセル化前駆体は、プルラン、デキストラン、マルトデキストリン、デンプン、およびこれらの任意の組み合わせから選択される。
【００７０】
工程（ａ）では、任意で、溶液の特性を最適化するために添加剤が使用される。本発明において、添加剤は、可塑剤、張力活性剤、乳化剤、界面活性剤、抗酸化剤またはそれらの任意の組み合わせから選択される物質であると理解される。本発明における添加剤の例としては、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）、Ｓｐａｎ（登録商標）およびＴｅｇｏ（登録商標）と商業的に名付けられた界面活性剤、より好ましくはＴｅｇｏ（登録商標）が挙げられる。これらは食品への使用が許可されている。
【００７１】
好ましくは、噴射ユニットの排出口において、溶液および乾燥ガス流に０．１ｋＶ〜５００ｋＶの電圧を加えることで液滴を形成する工程（ｂ）が実施される。より好ましくは、噴射ユニットの排出口において、溶液および乾燥ガス流に５ｋＶ〜６０ｋＶの電圧を加えることで、液滴を形成する段階（ｂ）が実施される。好ましくは、加える電圧は５ｋＶ〜１５ｋＶの範囲である。
【００７２】
別の例示的な実施形態では、交流で電圧を加えることで、液滴を形成する段階（ｂ）が実施される。
【００７３】
１つの例示的な実施形態では、段階（ｂ）の噴射ガス流量は、１〜５００ＬＰＭの範囲である。
【００７４】
好ましくは、直径が１〜２０マイクロメートルのマイクロカプセルを得るために、工程（ｃ）において、１０ｍ３／ｈ〜１００，０００ｍ３／ｈの範囲の乾燥ガス流量を用いる。
【００７５】
保護される熱不安定性化合物は、好ましくは微生物、抗酸化剤、ウイルス、酵素、多価不飽和脂肪酸、必須元素、または任意の誘導分子もしくは誘導化合物である。
【００７６】
別の好ましい実施形態によれば、熱不安定性化合物は、抗酸化剤（ビタミンＣ、ビタミンＥ、カロテノイド、フラボノイドおよびレスベラトロールなどのフェノール化合物）および天然もしくは合成の抗酸化濃縮物もしくは単離物、生物医学およびプロバイオティクスに役立つ細胞などの生物学的生物（ＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓおよびＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍなど）、Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、ＲｈｏｄｏｂａｃｔｅｒａｌｓおよびＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓなどの他の微生物、プレバイオティクス（ラクツロース、ガラクトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖、マルトオリゴ糖、キシロオリゴ糖、および大豆オリゴ糖）、シンバイオティクス、機能性繊維、オレイン酸、多価不飽和脂肪酸（オメガ−３およびオメガ−６）および他の海洋油、フィトステロール、フィトエストロゲン、タンパク質成分（ＡＯＮおよびその誘導体、ラクトフェリン、オボトランスフェリン、ラクトペルオキシダーゼ、リゾチーム、大豆たんぱく質、免疫グロブリン、生物活性ペプチド）ならびに栄養補助食品および医薬品、生物医学、化粧品、食品および化学工業のための他の付加価値製剤および物質などの商業的な場において、周囲条件、加工条件または貯蔵条件によって不安定化され得る医薬製品からなる群から選択されるか、またはこれらの任意の組み合わせから選択される。
【００７７】
より好ましくは、熱不安定性化合物が以下の物質からなる群から選択される：
カロテノイドおよびポリフェノール
プロバイオティクス（ＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓおよびＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）
骨および組織再生に生物医学的に役立つ細胞
多価不飽和脂肪酸（オメガ−３およびオメガ−６）
ラクトフェリン、オボトランスフェリン、ラクトペルオキシダーゼ、リゾチーム、大豆タンパク質、免疫グロブリンから選択される、技術的に有用な酵素および他のタンパク質
抗高血圧および抗菌ペプチドから選択される生物活性ペプチド。
【００７８】
以下に、カプセル化される熱不安定性物質がオメガ−３およびプロバイオティクスである、種々の例示的な方法を示す。特定の例示的な実施形態では、選択されるプロバイオティクスは、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓであった。
【００７９】
実施例１．１および１．２において、オメガ−３脂肪酸をカプセル化するための方法および対応する生存率の研究が記載されるが、以下に限定されるものではない。
【００８０】
〔実施例１．１  噴射器としてネブライザを用いたオメガ−３のカプセル化〕
この実施例では、従来のネブライザを噴射ユニットとして使用した。さらに、オメガ−３脂肪酸をカプセル化し、それによって酸化ならびに直接接触する食品への臭気および風味の転移を防ぐために、異なる天然ポリマー候補を使用する（例えば、ゼイン、プルラン、乳清タンパク質、および改変マルトデキストリン（Ｐｉｎｅｆｌｏｗ（登録商標）およびＮｕｔｒｉｏｓｅ（登録商標）））。最大のポテンシャルを有する物質、ゼインおよびプルランを用いて生成されたカプセルは、それぞれ図２ａおよび図２ｂの走査型電子顕微鏡写真で確認することができる。図２ａおよび図２ｂのそれぞれに対応するサイズ分布グラフである図２ｃおよび図２ｄで、２〜１０ミクロンの範囲内である最適なサイズを観察することができる。実験パラメータおよび使用範囲をそれぞれ表１および２に示す。
【００８１】
【表１】
2020504674.tif 000003
【００８２】
【表２】
2020504674.tif 000004
【００８３】
図３は、研究された全ての温度および相対湿度条件下で、本発明の設備によるカプセル化が、いかに製品（オメガ−３）の生存率を目に見えて改善するかが観察され得る生存率研究を示す。生存率曲線は、記載された設備および方法が、フリー（非カプセル化）製品の生存率よりも実質的に高い生存率を有するマイクロカプセルを得ることを可能にすることを示す。
【００８４】
〔実施例１．２  噴射器としてエレクトロネブライザを用いたオメガ−３のカプセル化〕
この例示的な実施形態では、噴射ユニットとしてエレクトロネブライザを使用し、実施例１．２と同じ天然ポリマーを使用した。図４ａ〜４ｄでは、マイクロカプセルの幾何学的形状における、本技術分野の効果を観察することができる。より具体的には、上記図は、電場を加えない場合のマイクロカプセル（図４ａ）、電場が１ｋＶである場合のマイクロカプセル（図４ｂ）、電場が５ｋＶである場合のマイクロカプセル（図４ｃ）、および電場が１０ｋＶである場合のマイクロカプセル（図４ｄ）を示す。これにより、最適化された電場が、いかにマイクロカプセルの幾何学的形状をより強力に制御することができるのかを観察することができ、これは、より高度な球形の幾何学的形状、高い単分散性およびサイズの制御を可能とする。ゼインの場合、実施例１．１において、カプセルが崩壊することを観察することができる。また、電場によって帯電されることで、これらのカプセルがそれらの球状構造をどのように維持するかを観察することができる。これは、溶媒の蒸発時に液滴が崩壊することを妨げる。図４ｅ〜４ｈは、それぞれ、図４ａ〜４ｄの顕微鏡写真の各々についての粒子サイズの分布を示す。実験パラメータおよび使用範囲を表３に示す。
【００８５】
【表３】
2020504674.tif 000005
【００８６】
熱不安定性物質オメガ−３に加えて、水、プルランおよびＴｅｇｏ（登録商標）を含む溶液を使用する場合、図５ａ〜５ｄに示されるような結果が得られる。ここで、結果は、電場ごとに示される（上記電場の値は、上述したように変化される：電場なし、１ｋＶの電場、５ｋＶの電場、および１０ｋＶの電場）。図５ｅ〜５ｈは、それぞれ、図５ａ〜５ｄの顕微鏡写真の各々についての粒度分布を示す。記載した結果を得るための、実験パラメータおよび使用範囲を表４に示す。
【００８７】
【表４】
2020504674.tif 000006
【００８８】
図６ａ〜６ｆは、既存の市販のマイクロカプセルを得るための異なる方法に対応する走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズ分布を示す。図６ａ〜６ｄは、当該技術分野で知られている方法を用いて得られた結果を示す。より具体的には、図６ａはＢＡＳＦ（窒素雰囲気中での噴霧乾燥）を使用して得られた結果を示し、図６ｂはＬＩＦＥ（空気中での噴霧乾燥）を使用して得られた結果を示し、図６ｃはＭＥＧ（空気中での噴霧乾燥）を使用して得られた結果を示し、図６ｄはＳＴＥＰＡＮ（窒素雰囲気化での噴霧乾燥）を使用して得られた結果を示す。
【００８９】
図６ｅおよび図６ｆは、本発明の方法を用いて得られた結果を示す（図６ｅは、噴射ユニットがネブライザである設備で本発明の方法を実施した場合に得られた結果を示し、図６ｆは、噴射ユニットがエレクトロネブライザである設備で本発明の方法を実施した場合に得られた結果を示す）。上記図に示されるように、本発明の方法および設備を使用すると、マイクロカプセルのサイズの有意な減少およびそれらの単分散性の改善が観察される。
【００９０】
同様に、表５は、一定量のオメガ−３マイクロカプセルを粉末ミルクおよび水と混合することによって実施された対照研究を示す。粉末ミルクおよび水の混合物を対照基準として使用し、試料を評価するため、以下の通りに分類した：
０：参照と比較して相違なし
１：参照と比較して小さな相違あり
３：参照と比較して明確な相違あり
５：参照と比較して大きな相違あり。
【００９１】
【表５】
2020504674.tif 000007
【００９２】
実施例２．１および実施例２．２は、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓプロバイオティクスをカプセル化するための方法を記載し、対応する生存率研究を記載するが、以下に限定されるものではない。
【００９３】
〔実施例２．１  噴射器としてネブライザを用いたプロバイオティクスのカプセル化〕
この例示的な実施形態では、ネブライザを噴射ユニットとして使用し、乳清タンパク質をポリマーとして使用して、プロバイオティクスをカプセル化した。図７ａは、得られたマイクロカプセルを示す走査型電子顕微鏡写真を示し、図７ｂは、得られた粒子サイズ分布のグラフを示す。表６は、この実施例の実験パラメータおよび使用範囲を示す。
【００９４】
【表６】
2020504674.tif 000008
【００９５】
〔実施例２．２  噴射器としてエレクトロネブライザを用いたプロバイオティクスのカプセル化〕
この場合、噴射ユニットとしてエレクトロネブライザを使用し、実施例２．１と同じ天然ポリマー（乳清タンパク質）を使用した。図８ａ〜８ｄは、異なる電流値（より具体的には、それぞれ、電流が、なし、１ｋＶ、５ｋＶ、および１０ｋＶ）を加えることによって得られたマイクロカプセルの走査型電子顕微鏡写真を示す。さらに、図８ｅ〜８ｈは、上記の場合に得られたマイクロカプセルのサイズの値を示す。表７は、この実施例の実験パラメータおよび使用範囲を示す。
【００９６】
図８は、マイクロカプセルサイズにおけるバクテリアの添加の効果を示す。
【００９７】
【表７】
2020504674.tif 000009
【００９８】
同様に、図９は、エレクトロネブライザを用いた実施例２．１および実施例２．２における本発明の設備によるカプセル化が、ネブライザを用いたカプセル化よりも良好な生存率を有するかを示す生存率研究を示す。
【００９９】
さらに、図において観察されるように、凍結乾燥法として知られている技術、すなわち参考技術として示される技術を用いて得られた結果よりも、エレクトロネブライザを用いたカプセル化およびネブライザを用いたカプセル化の両方が、より良好な結果を示している。
【０１００】
示された結果は、参照としてリン酸バッファー生理食塩水中にＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓのプロバイオティクス（１％）およびマルトデキストリン（１０％）を含む凍結乾燥モデル試料を用いた、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓプロバイオティクスプロバイオティクスについてのものである。
【図面の簡単な説明】
【０１０１】
【図１ａ】噴射ユニット（１）、乾燥ユニット（２）および収集ユニット（３）を見ることができる、熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備の例示的な実施形態を示す。
【図１ｂ】噴射ユニット（１）の液滴排出口（１４）に配置された電気回路（９）を含む、熱不安定性物質の工業的乾燥および／またはカプセル化のための設備の別の例示的な実施形態を示す。
【図２ａ】噴射ユニットがネブライザであり、ゼインおよびプルランがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図２ｂ】噴射ユニットがネブライザであり、ゼインおよびプルランがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図２ｃ】噴射ユニットがネブライザであり、ゼインおよびプルランがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた粒子サイズグラフを示す。
【図２ｄ】噴射ユニットがネブライザであり、ゼインおよびプルランがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた粒子サイズグラフを示す。
【図３】図２ａ〜２ｄに示される実施例に従って得られたマイクロカプセルおよび非カプセル化オメガ−３のＫＢｒペレットについての、赤外線透過分光法によって得られた１に標準化された生存率の比較研究を示す。
【図４ａ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、エタノール７０％が溶媒として使用され、ゼインがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図４ｂ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、エタノール７０％が溶媒として使用され、ゼインがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図４ｃ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、エタノール７０％が溶媒として使用され、ゼインがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図４ｄ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、エタノール７０％が溶媒として使用され、ゼインがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図４ｅ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、エタノール７０％が溶媒として使用され、ゼインがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた粒子サイズグラフを示す。
【図４ｆ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、エタノール７０％が溶媒として使用され、ゼインがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた粒子サイズグラフを示す。
【図４ｇ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、エタノール７０％が溶媒として使用され、ゼインがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた粒子サイズグラフを示す。
【図４ｈ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、エタノール７０％が溶媒として使用され、ゼインがカプセル化前駆体として使用されている設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた粒子サイズグラフを示す。
【図５ａ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、水が溶媒として使用され、プルランがカプセル化材料として使用され、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として使用される設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図５ｂ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、水が溶媒として使用され、プルランがカプセル化材料として使用され、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として使用される設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図５ｃ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、水が溶媒として使用され、プルランがカプセル化材料として使用され、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として使用される設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図５ｄ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、水が溶媒として使用され、プルランがカプセル化材料として使用され、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として使用される設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図５ｅ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、水が溶媒として使用され、プルランがカプセル化材料として使用され、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として使用される設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた粒子サイズグラフを示す。
【図５ｆ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、水が溶媒として使用され、プルランがカプセル化材料として使用され、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として使用される設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた粒子サイズグラフを示す。
【図５ｇ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、水が溶媒として使用され、プルランがカプセル化材料として使用され、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として使用される設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた粒子サイズグラフを示す。
【図５ｈ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、水が溶媒として使用され、プルランがカプセル化材料として使用され、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として使用される設備内でカプセル化された、オメガ−３についての１つの例示的な実施形態について得られた粒子サイズグラフを示す。
【図６ａ】種々の市販のオメガ−３カプセル化法の手段によって得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【図６ｂ】種々の市販のオメガ−３カプセル化法の手段によって得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【図６ｃ】種々の市販のオメガ−３カプセル化法の手段によって得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【図６ｄ】種々の市販のオメガ−３カプセル化法の手段によって得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【図６ｅ】種々の市販のオメガ−３カプセル化法の手段によって得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【図６ｆ】種々の市販のオメガ−３カプセル化法の手段によって得られた走査型電子顕微鏡写真および粒子サイズグラフを示す。
【図７ａ】噴射ユニットがネブライザである設備において、ラクトバチルス・ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）をカプセル化するために得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図７ｂ】噴射ユニットがネブライザである設備において、ラクトバチルス・ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）をカプセル化するために得られた粒子サイズグラフを示す。
【図８ａ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、乳清タンパク質がカプセル化前駆体として、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として、全乳が液体マトリックスとして使用されている設備内でカプセル化された、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓについての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図８ｂ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、乳清タンパク質がカプセル化前駆体として、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として、全乳が液体マトリックスとして使用されている設備内でカプセル化された、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓについての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図８ｃ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、乳清タンパク質がカプセル化前駆体として、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として、全乳が液体マトリックスとして使用されている設備内でカプセル化された、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓについての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図８ｄ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、乳清タンパク質がカプセル化前駆体として、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として、全乳が液体マトリックスとして使用されている設備内でカプセル化された、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓについての１つの例示的な実施形態について得られた走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図８ｅ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、乳清タンパク質がカプセル化前駆体として、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として、全乳が液体マトリックスとして使用されている設備内でカプセル化された、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓについての１つの例示的な実施形態について得られた粒度グラフを示す。
【図８ｆ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、乳清タンパク質がカプセル化前駆体として、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として、全乳が液体マトリックスとして使用されている設備内でカプセル化された、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓについての１つの例示的な実施形態について得られた粒度グラフを示す。
【図８ｇ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、乳清タンパク質がカプセル化前駆体として、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として、全乳が液体マトリックスとして使用されている設備内でカプセル化された、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓについての１つの例示的な実施形態について得られた粒度グラフを示す。
【図８ｈ】噴射ユニットがエレクトロネブライザであり、乳清タンパク質がカプセル化前駆体として、Ｔｅｇｏ（登録商標）が界面活性剤として、全乳が液体マトリックスとして使用されている設備内でカプセル化された、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓについての１つの例示的な実施形態について得られた粒度グラフを示す。
【図９】凍結保護剤としてマルトデキストリンを使用する標準的な方法に従って凍結乾燥することによって得られたＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ微粒子と、噴射ユニットがネブライザである場合および噴射ユニットがエレクトロネブライザである場合に、記載された方法および設備を使用して得られた微粒子との間の比較を示す生存率研究を示す。
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【図２ｃ】
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【図２ｄ】
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【図３】
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【図４ａ】
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【図４ｂ】
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【図４ｃ】
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【図４ｄ】
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【図４ｅ】
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【図４ｆ】
2020504674.tif 000022
【図４ｇ】
2020504674.tif 000023
【図４ｈ】
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【図５ａ】
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【図５ｂ】
2020504674.tif 000026
【図５ｃ】
2020504674.tif 000027
【図５ｄ】
2020504674.tif 000028
【図５ｅ】
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【図５ｆ】
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【図５ｇ】
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【図５ｈ】
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【図６ａ】
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【図６ｂ】
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【図６ｃ】
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【図６ｄ】
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【図６ｅ】
2020504674.tif 000037
【図６ｆ】
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【図７ａ】
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【図７ｂ】
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【図８ａ】
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【図８ｂ】
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【図８ｃ】
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【図８ｄ】
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【図８ｅ】
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【図８ｆ】
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【図８ｇ】
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【図８ｈ】
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【図９】
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【国際調査報告】
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