(57)【要約】  本発明は、ＴＮＦ関連サイトカインＬＩＧＨＴ（ＴＮＦＳＦ１４）に結合し、細胞受容体ヘルペスウイルス侵入メディエーター（ＨＶＥＭ）およびリンホトキシンβ受容体に結合するＬＩＧＨＴと競合する、抗原結合分子、特に抗体、その断片およびバリアント、ならびに炎症障害および免疫障害の治療および／または予防におけるその抗原結合分子の使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子であって、可溶性ＬＩＧＨＴと比較して膜結合ＬＩＧＨＴに対してより高い親和性を有する、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項２】
前記抗原結合分子が、可溶性ＬＩＧＨＴと比較して膜結合ＬＩＧＨＴに対して少なくとも約１０倍高い親和性を有する、請求項１に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項３】
前記抗原結合分子が、可溶性ＬＩＧＨＴと比較して膜結合ＬＩＧＨＴに対して少なくとも約５０倍高い親和性を有する、請求項１に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項４】
前記抗原結合分子が、
配列番号４０、８、４８、１６、２４、３２、５６、６４、７２、８０、８８、９６、１０４、１１２、および１２０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＨＣＤＲ３、ならびに／または
配列番号３６、４、４４、１２、２０、２８、５２、６０、６８、７６、８４、９２、１００、１０８、および１１６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＬＣＤＲ３を含む、請求項〜３のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項５】
前記抗原結合分子が、
配列番号４０、８、４８、１６、２４、３２、５６、６４、７２、８０、８８、９６、１０４、１１２、および１２０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３、ならびに／または
配列番号３６、４、４４、１２、２０、２８、５２、６０、６８、７６、８４、９２、１００、１０８、および１１６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項６】
前記抗原結合分子が、
配列番号３８、６、４６、１４、２２、３０、５４、６２、７０、７８、８６、９４、１０２、１１０、１１８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＨＣＤＲ１、
配列番号３９、７、４７、１５、２３、３１、５５、６３、７１、７９、８７、９５、１０３、１１１、１１９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＨＣＤＲ２、および
配列番号４０、８、４８、１６、２４、３２、５６、６４、７２、８０、８８、９６、１０４、１１２、および１２０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＨＣＤＲ３、
ならびに／または
配列番号３４、２、４２、１０、１８、２６、５０、５８、６６、７４、８２、９０、９８、１０６、１１４のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＬＣＤＲ１、
配列番号３５、３、４３、１１、１９、２７、５１、５９、６７、７５、８３、９１、９９、１０７、１１５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＬＣＤＲ２、および
配列番号３６、４、４４、１２、２０、２８、５２、６０、６８、７６、８４、９２、１００、１０８、および１１６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＬＣＤＲ３を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項７】
前記抗原結合分子が、
配列番号３８、６、４６、１４、２２、３０、５４、６２、７０、７８、８６、９４、１０２、１１０、１１８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、
配列番号３９、７、４７、１５、２３、３１、５５、６３、７１、７９、８７、９５、１０３、１１１、１１９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、および
配列番号４０、８、４８、１６、２４、３２、５６、６４、７２、８０、８８、９６、１０４、１１２、および１２０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３、
ならびに／または
配列番号３４、２、４２、１０、１８、２６、５０、５８、６６、７４、８２、９０、９８、１０６、１１４のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、
配列番号３５、３、４３、１１、１９、２７、５１、５９、６７、７５、８３、９１、９９、１０７、１１５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、および
配列番号３６、４、４４、１２、２０、２８、５２、６０、６８、７６、８４、９２、１００、１０８、および１１６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項８】
前記抗原結合分子が、
配列番号３７、配列番号５、配列番号４５、配列番号１３、配列番号２１、配列番号２９、配列番号５３、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５、配列番号９３、配列番号１０１、配列番号１０９、配列番号１１７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する重鎖可変領域、
および／または
配列番号３３、配列番号１、配列番号４１、配列番号９、配列番号１７、配列番号２５、配列番号４９、配列番号５７、配列番号６５、配列番号７３、配列番号８１、配列番号８９、配列番号９７、配列番号１０５、配列番号１１３からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項９】
前記抗原結合分子が、
配列番号３７、配列番号５、配列番号４５、配列番号１３、配列番号２１、配列番号２９、配列番号５３、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５、配列番号９３、配列番号１０１、配列番号１０９、配列番号１１７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、
および／または
配列番号３３、配列番号１、配列番号４１、配列番号９、配列番号１７、配列番号２５、配列番号４９、配列番号５７、配列番号６５、配列番号７３、配列番号８１、配列番号８９、配列番号９７、配列番号１０５、配列番号１１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項１０】
前記抗原結合分子が、
（ａ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｂ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号６）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号７）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号３）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｃ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号４６）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号４７）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４８）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号４２）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号４３）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号４４）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｄ）アミノ酸配列ＤＹＡＩＨ（配列番号８６）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＳＴＹＹＧＤＡＳＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号８７）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号８８）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＫＡＳＱＳＶＤＹＤＧＤＳＹＭＮ（配列番号８２）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＡＳＮＬＥＳ（配列番号８３）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ（配列番号８４）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｅ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号９４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号９５）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号９６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（配列番号９０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＴＳＮＬＡＳ（配列番号９１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号９２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｆ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号１０２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号１０３）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１０４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（配列番号９８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＴＳＮＬＡＳ（配列番号９９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号１００）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｇ）アミノ酸配列ＤＹＹＭＹ（配列番号１１０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＩＧＤＧＧＩＹＴＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１１１）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＧＴＧＤＧＦＡＹ（配列番号１１２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＬＥＳ（配列番号１０７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＹＴ（配列番号１０８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｈ）アミノ酸配列ＤＹＡＩＨ（配列番号１１８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＳＴＹＹＧＤＡＳＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号１１９）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号１２０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号１１４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＲＡＳＮＬＥＳ（配列番号１１５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＹＴ（配列番号１１６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｉ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｊ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｋ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｌ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｍ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｎ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｏ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｐ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｑ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｒ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｓ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｔ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｕ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｖ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｗ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｘ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｙ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｚ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（Ｉ）アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ＩＩ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ＩＩＩ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ＩＶ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（Ｖ）アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ＶＩ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ＶＩＩ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ＶＩＩＩ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ＩＸ）アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（Ｘ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ＸＩ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ＸＩＩ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ＸＩＩＩ）アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、からなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項１１】
前記抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子が、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｂ０４、３Ｄ１２、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｃ１０、３Ｅ０９  ２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項１２】
前記抗体が、６つ全てのＣＤＲ領域にわたる１〜１０、１〜５、または１〜２個の保存的アミノ酸置換を含む、請求項１１に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項１３】
前記抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子が、アミノ酸配列ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含むヒトＬＩＧＨＴのエピトープに結合する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項１４】
前記抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子が、ヒトＬＩＧＨＴのトリマーに１：１の比で結合する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項１５】
アミノ酸配列ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含むヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項１６】
ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子であって、ヒトＬＩＧＨＴのトリマーに１：１の比で結合する、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項１７】
ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の抗原結合分子とＬＩＧＨＴへの結合について競合する、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項１８】
前記抗原結合分子が、抗体またはその断片もしくは誘導体である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項１９】
前記抗体断片または誘導体が、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄＡｂ、Ｆｄ、またはダイアボディである、請求項１８に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項２０】
前記抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子が、モノクローナル抗体である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項２１】
前記抗体または抗体断片が、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、またはＩｇＹ抗体または抗体断片であり、任意に前記抗体または抗体断片が、ＩｇＧ抗体または抗体断片であり、さらに任意に前記抗体または抗体断片が、ＩｇＧ４抗体または抗体断片である、請求項１８〜２０のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗体または抗体断片。
【請求項２２】
前記抗原結合分子が、膜ＬＩＧＨＴのＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの結合またはＬＩＧＨＴ発現細胞のＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの結合を阻害する、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項２３】
前記抗原結合分子が、膜ＬＩＧＨＴのデコイ受容体３への、または膜ＬＩＧＨＴを発現する細胞のデコイ受容体３への結合を部分的に阻害する、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項２４】
前記抗原結合分子が、インビボまたはインビトロで投与される場合、ＩＬ−８の分泌を減少させる、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、薬学的に許容される賦形剤と、を含む、薬学的組成物。
【請求項２６】
請求項１〜２４のいずれかに記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子または請求項２５に記載の薬学的組成物を含み、追加の治療活性剤をさらに含む、キット。
【請求項２７】
医療における使用のための、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子、または請求項２５に記載の薬学的組成物、または請求項２６に記載のキット。
【請求項２８】
炎症障害もしくは疾患または自己免疫障害もしくは疾患の治療または予防における使用のための、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子、または請求項２５に記載の薬学的組成物、または請求項２６に記載のキット。
【請求項２９】
前記炎症または自己免疫障害または疾患が、強直性脊椎炎、アトピー性皮膚炎、セリアック病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、関節リウマチ、乾癬、細気管支炎、歯肉炎、移植拒絶反応、同種移植片拒絶反応、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）、喘息、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性心不全、慢性閉塞性肺疾患、腎臓病、敗血症性ショック、潰瘍性大腸炎、線維症、多発性硬化症、シェーグレン症候群、狼瘡、気道炎症、肝臓病、肝炎、セリアック病、皮膚炎、好酸球増多症、および原発性胆汁性胆管炎からなる群から選択される、請求項２８に記載の使用のための抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子または薬学的組成物またはキット。
【請求項３０】
前記炎症疾患が、潰瘍性大腸炎またはクローン病である、請求項２８に記載の使用のための抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子または薬学的組成物またはキット。
【請求項３１】
対象に、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子、または請求項２５に記載の薬学的組成物、または請求項２６に記載のキットの成分を投与することを含む、ＬＩＧＨＴ媒介疾患または障害の治療または予防のための方法。
【請求項３２】
ＬＩＧＨＴタンパク質のＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの結合またはＬＩＧＨＴ発現細胞のＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの結合を阻害する方法であって、前記ＬＩＧＨＴタンパク質またはＬＩＧＨＴ発現細胞を、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と接触させることを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＴＮＦ関連サイトカインＬＩＧＨＴ（ＴＮＦＳＦ１４）に結合し、細胞受容体ヘルペスウイルス侵入メディエーター（ＨＶＥＭ）およびリンホトキシンβ受容体に結合するＬＩＧＨＴと競合する、抗原結合分子、特に抗体、その断片およびバリアント、ならびに炎症障害および免疫障害の治療および／または予防におけるその抗原結合分子の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＴＮＦＳＦ１４またはＣＤ２５８としても知られている、ＬＩＧＨＴ（リンホトキシン様、誘導性発現を示し、ＨＶＥＭ、Ｔリンパ球によって発現する受容体についてＨＳＶ糖タンパク質Ｄと競合する）は、活性化Ｔ細胞上で上方調節される。ＬＩＧＨＴは、ナイーブＴ細胞上では発現しないが、活性化後に上方調節され、Ｔ細胞上で４時間以内に出現し、１２〜２４時間までにピークとなり、４８時間までに消失する（“Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ−ｒｅｌａｔｅｄ  ＬＩＧＨＴ  ｇｅｎｅ．Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｃａｌｃｉｕｍ−ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  ｃｏｎｔｒｏｌ”，Ｃａｓｔｅｌｌａｎｏ  Ｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２００２  Ｎｏｖ  ８；２７７：４２８４１−５１）。ＬＩＧＨＴはまた、未熟樹状細胞、ＮＫ細胞、および単球によって発現する（“Ｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎ／ｌｉｇｈｔ，ｌｙｍｐｈｏｉｄ  ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ  ａｎｄ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｄｉｓｅａｓｅ”．Ｇｏｍｍｅｒｍａｎ  ＪＬ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００３，３：６４２−６５５、“ＬＩＧＨＴ，ａ  ＴＮＦ−ｌｉｋｅ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ，ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ”．Ｔａｍａｄａ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０００，１６４：４１０５−４１１０）。ＬＩＧＨＴは、３つのＴＮＦＳＦ受容体：主にＴ細胞によって発現する、ヘルペスウイルス侵入メディエーター（ＨＶＥＭ）（“Ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＴＮＦ  Ｆａｍｉｌｙ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｈｅｒｐｅｓ  Ｖｉｒｕｓ  Ｅｎｔｒｙ  Ｍｅｄｉａｔｏｒ  ａｎｄ  Ｉｔｓ  Ｌｉｇａｎｄ  ＬＩＧＨＴ  ｏｎ  Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｔ  Ｃｅｌｌｓ：ＬＩＧＨＴ  Ｄｏｗｎ−Ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  Ｉｔｓ  Ｏｗｎ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ”．Ｍｏｒｅｌ  Ｙ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１，１６７：２４７９−２４８６）、間質および非リンパ性造血細胞によって発現する、リンホトキシンβ受容体（ＬＴＢＲ）（“ＬＩＧＨＴ，ａ  ｎｏｖｅｌ  ｌｉｇａｎｄ  ｆｏｒ  ｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎ  ｂｅｔａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｎｄ  ＴＲ２／ＨＶＥＭ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｔｕｍｏｒ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｖｉａ  ｇｅｎｅ  ｔｒａｎｓｆｅｒ”．Ｚｈａｉ  Ｙ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１９９８，１０２：１１４２−１１５１）、ならびに可溶性タンパク質デコイ受容体３（ＤｃＲ３／ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ）のリガンドである。
【０００３】
ＬＩＧＨＴはまず、Ｔ細胞増殖およびＩＦＮγ産生を促進することが示された際に、ＨＶＥＭに対して共刺激の役割を有すると同定され、ＤＣ上のＬＩＧＨＴの遮断は、同種Ｔ細胞応答を阻害した（“ＬＩＧＨＴ，ａ  ＴＮＦ−ｌｉｋｅ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ，ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ”Ｔａｍａｄａ  Ｋ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０００，１６４：４１０５−４１１０、“Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  ＴＲ２（“ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ  ｅｎｔｒｙ  ｍｅｄｉａｔｏｒ），ａ  ｎｅｗ  ｍｅｍｂｅｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＴＮＦ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ，ｂｌｏｃｋ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｍａｒｋｅｒｓ，ａｎｄ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ”．Ｈａｒｒｏｐ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９９８，１６１：１７８６−１７９４）。ＬＩＧＨＴ−ＨＶＥＭ相互作用は、ＮＫ細胞、好中球、および単球の活性化およびエフェクター機能を促進することも示されている（“ＬＩＧＨＴ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ｔｈｅ  ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ  ａｎｄ  ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ  ｖｉａ  ＨＶＥＭ”Ｈｅｏ  ＳＫ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ｂｉｏｌ  ２００６，７９：３３０−３３８、“ＨＶＥＭ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ  ｉｓ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｌｃｉｕｍ  ｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ”Ｈｅｏ  ＳＫ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００７，１７９：６３０５−６３１０）。
【０００４】
ＬＴβＲは主に間質細胞などの非造血細胞上で発現するが、ＬＩＧＨＴ−ＬＴβＲ媒介シグナル伝達はＤＣ活性化および増殖に関与することが最近示された（“Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎ  ｂｅｔａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ  ｉｓ  ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｆｏｒ  ｔｈｅｉｒ  ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ  ａｎｄ  ｅｘｐａｎｓｉｏｎ”．Ｗａｎｇ  ＹＧ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００７，１７５：６９９７−７００２）。ＬＴβＲシグナル伝達はまた、二次リンパ性構造の発達にとって重要であり（“Ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｉｍｍｕｎｅ  ｓｙｓｔｅｍ：ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎ  ａｎｄ  ＧＡＬＴ  ｏｒｇａｎｓ”．Ｓｐａｈｎ  ＴＷ  ｅｔ  ａｌ．Ｇｕｔ  ２００４，５３：４５６−４６５）、マウスにおけるＬＴβおよびＬＩＧＨＴ両方の欠失は、全ての二次リンパ性構造の不在をもたらした（“Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ＬＩＧＨＴ  ｃａｕｓｅｓ  ｄｅｆｅｃｔｓ  ｉｎ  ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｃｏｏｐｅｒａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎ  ｂｅｔａ  ｉｎ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｉｃ  ｌｙｍｐｈ  ｎｏｄｅ  ｇｅｎｅｓｉｓ”．Ｓｃｈｅｕ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  ２００２，１９５：１６１３−１６２４）。
【０００５】
ＬＩＧＨＴは、慢性炎症性自己免疫疾患のプロセスに関与しており（“ＬＩＧＨＴ，ａ  ｎｅｗ  ｍｅｍｂｅｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＴＮＦ  ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ，ａｎｄ  ｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎ  ａｌｐｈａ  ａｒｅ  ｌｉｇａｎｄｓ  ｆｏｒ  ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ  ｅｎｔｒｙ  ｍｅｄｉａｔｏｒ”，Ｍａｕｒｉ  ＤＮ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１９９８  Ｊａｎ；８（１）：２１−３０）、最近の証拠は、ＬＩＧＨＴが早期発症型炎症性腸疾患の一因であることを示す。
【０００６】
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）は、結腸および小腸の炎症状態の一群である。ＩＢＤの主要タイプは、クローン病（ＣＤ）および潰瘍性大腸炎（ＵＣ）である。膠原線維性大腸炎、リンパ球性大腸炎、虚血性大腸炎、便流変更性大腸炎、ベーチェット病、および分類不能大腸炎などの、ＩＢＤの他の形態からなる症例ははるかに少ない。
【０００７】
ＣＤとＵＣとの間の主な違いは、炎症性変化の場所および性質である。ＣＤは、口から肛門まで、消化管の任意の部分に影響を及ぼし得るが、症例の大部分は回腸末端で開始する。ＵＣは、対照的に、結腸および直腸に制限される。加えて、ＣＤおよびＵＣは、肝臓障害、関節炎、皮膚症状、および眼障害などの腸外症状を異なる割合で示す。
【０００８】
非常に異なる疾患であるが、ＣＤおよびＵＣの両方は、以下の症状：腹痛、嘔吐、下痢、直腸出血、骨盤領域における重度内部痙攣／筋痙攣、体重減少、ならびに関節炎、壊疽性膿皮症、および原発性硬化性胆管炎などの様々な関連愁訴または疾患のいずれかを示し得る。診断は、一般的には、病理学的病変の生検での結腸鏡検査による。ＩＢＤは、疼痛、嘔吐、下痢、および他の社会的に許容されない症状のために人の生活の質を制限し得るが、それ自体が致命的であることは稀である。ＩＢＤの治療は、医療システムにかなりの要求を突きつけ、医療コストの増加と関連している。ＩＢＤの最適な治療は、その形態に依存する。例えば、メサラジンは、ＣＤよりもＵＣにおいてより有用である。一般的には、重症度のレベルに応じて、ＩＢＤは、プレドニゾン、アザチオプリン（Ｉｍｕｒａｎ）、メトトレキサート、または６−メルカプトプリンなどの薬物での免疫抑制を必要とし得る。多くの場合、疾患再燃を制御するためにステロイドが使用される。最近では、ＴＮＦを中和する抗体（ＴＮＦ阻害剤）などの、タンパク質ベースの治療剤が使用されている。しかしながら、ＩＢＤを有する患者の３分の１のみがＴＮＦ阻害剤によく応答し、３分の１は全く応答を示さなかった。重度のＩＢＤの症例は、腸切除、狭窄形成、または一時的もしくは永久的な人工肛門形成もしくは回腸造瘻などの手術を必要とし得る。
【０００９】
通常、治療は、プレドニゾンなどの広範な抗炎症効果を有する薬物を投与することによって開始される。炎症の制御が成功した場合、患者は通常、Ａｓａｃｏｌ、メサラジンなどの、疾患を寛解に保つためのより軽い薬物に切り替えられる。不成功の場合、前述の免疫抑制薬物の（同様に抗炎症効果を有する）メサラジンとの組み合わせが、患者に応じて、投与されてもされなくてもよい。治療の目標は、寛解を達成することであり、その後、患者は通常、潜在的な副作用が少ないより軽い薬物に切り替えられる。しかしながら、時々、「再燃」として知られる、元の症状の急激な再発が起こり得る。状況に応じて、これは自然に消失するか、または投薬を必要とし得る。再燃間の時間は、数週間から数年の範囲であり得、患者および療法間で激しく変動する。
【００１０】
したがって、当該技術分野において、ヒトにおける使用について非免疫原性および安全である、ＩＢＤを治療するのに一貫してより効果的な向上した治療レジメンの差し迫った必要性がある。
【００１１】
新たな実験的アプローチが調査されている。阻害ＬＴβＲ−Ｆｃ融合タンパク質で処理されたマウスは、大腸炎、ＣＤ４＋Ｔ細胞媒介病理のＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＢ高Ｔ細胞導入モデルにおいて炎症症状を低減した（Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．１９９８  Ｄｅｃ；１１５（６）：１４６４−７５，“Ｂｏｔｈ  ｔｈｅ  ｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｆａｃｔｏｒ  ｐａｔｈｗａｙｓ  ａｒｅ  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｍｕｒｉｎｅ  ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  ｃｏｌｉｔｉｓ”，Ｍａｃｋａｙ  Ｆ  ｅｔ  ａｌ．）。ＬＩＧＨＴの構成トランスジェニックＴ細胞特異的発現は、ヒトＩＢＤに似ている自己免疫様病理を伴う重度の腸炎症を引き起こすことも示されている（“Ｔｈｅ  ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＬＩＧＨＴ  ｉｎ  ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｗａｎｇ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００５  Ｊｕｎ  １５；１７４：８１７３−８２、“Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ＬＩＧＨＴ  ｏｎ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｌｅａｄｓ  ｔｏ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ，ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｔｉｓｓｕｅ  ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｏｎ”，Ｓｈａｉｋｈ  ＲＢ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１，１６７：６３３０−７、“Ｔｈｅ  ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＬＩＧＨＴ，ａ  ＴＮＦ  ｆａｍｉｌｙ  ｍｅｍｂｅｒ，ｉｎ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ”，Ｗａｎｇ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１，１６７：５０９９−１０５、“Ｄｙｓｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ＬＩＧＨＴ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｎ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｍｅｄｉａｔｅｓ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ  ｔｏ  ＩｇＡ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ”，Ｗａｎｇ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．２００４，  １１３：８２６−３５）。ＬＩＧＨＴ発現リンパ球は、ＬＩＧＨＴトランスジェニック動物からの腸間膜リンパ節細胞がＲＡＧ−／−マウスに導入される場合、ＩＢＤ様症状（例えば、ヒトクローン病、裂溝潰瘍、回腸炎、ならびにＩＦＮ−ｙおよびＴＮＦの増加のサイトカインプロファイル）を誘導し得る（“Ｔｈｅ  ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＬＩＧＨＴ  ｉｎ  ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｗａｎｇ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００５；１７４：８１７３−８２）。ヒト疾患では、ＬＩＧＨＴ発現の増加は、活動性クローン病を有する患者において観察された（Ｃｏｈａｖｙ  ｅｔ  ａｌ  ２００５上記、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ  ２００５上記、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ  ２００４上記、“ＬＩＧＨＴ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｂｙ  ｍｕｃｏｓａｌ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｍａｙ  ｒｅｇｕｌａｔｅ  ＩＦＮ−ｇａｍｍａ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ”，Ｃｏｈａｖｙ  Ｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００４，１７３：２５１−８）。ＬＩＧＨＴは、ＩＢＤ患者の腸Ｔ細胞において上昇することも示された（���ｏｈａｖｙ  ｅｔ  ａｌ  ２００４上記）。遺伝的証拠はまた、ＩＢＤにおけるＬＩＧＨＴの役割を支持する（“Ｇｅｎｏｍｉｃ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＬＩＧＨＴ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｌｉｎｋａｇｅ  ｔｏ  ａｎ  ｉｍｍｕｎｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｌｏｃｕｓ  ｏｎ  ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  １９ｐｌ３．３  ａｎｄ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｉｓｏｆｏｒｍｓ  ｇｅｎｅｒａｔｅｄ  ｂｙ  ａｌｔｅｒｎａｔｅ  ｓｐｌｉｃｉｎｇ  ｏｒ  ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ”，Ｇｒａｎｇｅｒ  ＳＷ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１，１６７：５１２２−８）。ＬＩＧＨＴのゲノム特徴づけはまた、染色体１９ｐ１３．３上の免疫応答遺伝子座および選択的スプライシングまたはタンパク質分解によって生成される異なるアイソフォームへの結合を明らかにする（“Ｇｅｎｏｍｅｗｉｄｅ  ｓｅａｒｃｈ  ｉｎ  Ｃａｎａｄｉａｎ  ｆａｍｉｌｉｅｓ  ｗｉｔｈ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂｏｗｅｌ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｔｗｏ  ｎｏｖｅｌ  ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｌｏｃｉ”，Ｒｉｏｕｘ  ＪＤ  ｅｔ  ａｌ．Ｒｉｏｕｘ  ｅｔ  ａｌ．Ａｍ  Ｊ  Ｈｕｍ  Ｇｅｎｅｔ．２０００，６６：１８６３−７０、“Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂｏｗｅｌ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｉｓ  ｌｉｎｋｅｄ  ｔｏ  １９ｐ１３  ａｎｄ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ＩＣＡＭ−１２”，Ｌｏｗ  ＪＨ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｆｌａｍｍ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓ．２００４，１０：１７３−８１、“Ｔｈｅ  ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂｏｗｅｌ  ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｂｏｎｅｎ  ＤＫ，Ｃｈｏ  ＪＨ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ２００３，１２４：５２１−３６）。加えて、ＤｃＲ３における欠損バリアントは、ＩＢＤのいくつかの症例の病原において役割を有し、この群の腫瘍壊死因子ファミリーメンバーを標的とする介入がＩＢＤを有する患者の利益になり得ることが示されている（“Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｒｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ｄｅｆｅｃｔｉｖｅ  ｖａｒｉａｎｔｓ  ｏｆ  ｄｅｃｏｙ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ３  ｉｎ  ｐｅｄｉａｔｒｉｃ−ｏｎｓｅｔ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂｏｗｅｌ  ｄｉｓｅａｓｅ”，Ｃａｒｄｉｎａｌｅ  ＣＪ  ｅｔ  ａｌ．Ｇｅｎｅｓ  Ｉｍｍｕｎ．２０１３，１４：４４７−５２）。
【００１２】
ヒトＬＩＧＨＴ（ＬＩＧＨＴ）は、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）にも関与している。例えば、ＬＩＧＨＴは、Ｔ細胞に対する強力な共刺激活性を提供し、Ｂ７−ＣＤ２８経路とは無関係にＴｈ１サイトカインの増殖および産生を向上することが示されている（例えば、Ｔａｍａｄａ  ｅｔ  ａｌ  ２０００上記を参照されたい）。抗ＨＶＥＭモノクローナル抗体、またはＨＶＥＭ−ｌｇのいずれかによるＬＩＧＨＴ−ＨＶＥＭ共刺激のブロックは、同種Ｔ細胞応答を阻害する（例えば、Ｔａｍａｄａ  ｅｔ  ａｌ  ２０００上記、Ｈａｒｒｏｐ  ＪＡ  ｅｔ  ａｌ．１９９８上記を参照されたい）。
【００１３】
さらに、ＬＴβＲ−ｌｇまたはマウス抗ＬＩＧＨＴ抗体のインビボ投与は、マウス急性ＧｖＨＤモデルにおいて抗宿主細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答を阻害する（“Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔ−ｃｅｌｌ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ａｎｄ  ｇｒａｆｔ−ｖｅｒｓｕｓ−ｈｏｓｔ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｍｏｄｅｌｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  ＬＩＧＨＴ  ｃｏ−ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ  ｐａｔｈｗａｙ”，Ｔａｍａｄａ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ  Ｍｅｄ．２０００，６：２８３−９）。
【００１４】
ＨＶＥＭによって炎症誘発および阻害シグナル伝達を誘導する作用のほとんどは、細胞表面で制御される。これらの異なるシグナル伝達結果は、３つの重要な生物物理学的パラメータ：リガンドおよび受容体の特定の対合、可溶性または膜アンカー位置でのリガンドの形態、ならびにリガンド−受容体結合のシスまたはトランス文脈から生じる。リガンドおよび受容体の特異性は、炎症および阻害シグナル伝達を誘導する主要メカニズムを提供する。ＢＴＬＡ（ＢおよびＴリンパ球アテニュエーター）およびＬＩＧＨＴは、それ自体がＢＴＬＡの活性化リガンドであるＨＶＥＭ上の異なる部位に結合するので、ＨＶＥＭは受容体およびリガンドの両方として二重の役割を果たす。ＨＶＥＭの細胞外ドメインは、システインリッチドメイン、ＴＮＦＲスーパーファミリーのシグネチャーモチーフの４つの反復を含有する（“Ｔｈｅ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＴＮＦ  ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ”，Ｂｏｄｍｅｒ  ＪＬ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｃｉ．２００２；２７：１９−２６）。ＢＴＬＡ結合部位がＨＶＥＭのＮ末端にある第１のシステインリッチドメインに位置する一方で、相同性モデリングは、ＬＩＧＨＴがＨＶＥＭの反対面にある第２および第３のドメインにおいて結合することを示す（“Ａｔｔｅｎｕａｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ：ｔｈｅ  ｃｒｙｓｔａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＢＴＬＡ−ＨＶＥＭ  ｃｏｍｐｌｅｘ”，Ｃｏｍｐａａｎ  ＤＭ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２００５；２８０：３９５５３−３９５６１）。ＬＩＧＨＴ、ＩＩ型膜貫通タンパク質は、タンパク質分解し、可溶性の生物活性形態を放出することができる（“Ｇｅｎｏｍｉｃ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＬＩＧＨＴ  Ｒｅｖｅａｌｓ  Ｌｉｎｋａｇｅ  ｔｏ  ａｎ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｌｏｃｕｓ  ｏｎ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  １９ｐ１３．３  ａｎｄ  Ｄｉｓｔｉｎｃｔ  Ｉｓｏｆｏｒｍｓ  Ｇｅｎｅｒａｔｅｄ  ｂｙ  Ａｌｔｅｒｎａｔｅ  Ｓｐｌｉｃｉｎｇ  ｏｒ  Ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ”，Ｇｒａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１；１６７：５１２２−５１２８）。可溶性ＬＩＧＨＴはＨＶＥＭに高い親和性で結合するが、ＢＴＬＡとは競合せず、両方のリガンドが同時にＨＶＥＭを占めることを可能にする。実際には、可溶性ＬＩＧＨＴおよびＬＴαは、ＢＴＬＡのＨＶＥＭへの結合を向上し、三分子複合体の形成を示す（“Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｉｌｙ  ｄｉｖｅｒｇｅｎｔ  ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓｅｓ  ｍｏｄｕｌａｔｅ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ  ｅｎｔｒｙ  ｍｅｄｉａｔｏｒ  ｃｏｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｐａｔｈｗａｙ”，Ｃｈｅｕｎｇ  ＴＣ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．２００５；１０２：１３２１８−１３２２３）。著しい対照として、ＬＩＧＨＴの膜形態は、非競合メカニズム、おそらく膜の近接性のための立体障害によって、ＨＶＥＭ−ＢＴＬＡ結合に干渉する。
【００１５】
トランスシグナル伝達
いくつかのＴＮＦリガンド−受容体結晶構造において見られる保存に基づき、膜ＬＩＧＨＴの立体構造は、ＨＶＥＭに結合し、シグナル伝達を活性化するために（隣接する細胞膜おいて）トランスでなければならない。ＢＴＬＡは、フローサイトメトリーに基づくＦＲＥＴシステムによって明らかにされるように生存細胞の膜においてダイマーを形成する。ＢＴＬＡのダイマー構造は、ＨＶＥＭを凝集させるメカニズムを示し、このメカニズムは、ＢＴＬＡが膜タンパク質またはＩｇＧのＦｃを有する可溶性ダイマー融合タンパク質として操作されたもののいずれかとしてＨＶＥＭの活性化を誘導することを示す実験において確認された（“ＴＮＦ  ＳＵＰＥＲＦＡＭＩＬＹ  ＮＥＴＷＯＲＫＳ：Ｂｉｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ  Ｅｎｔｒｙ  Ｍｅｄｉａｔｏｒ（ＴＮＦＳＦ１４）”，Ｗａｒｅ  ＣＦ  ａｎｄ  Ｓｅｄｙ  Ｊ  Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１１，２３：６２７−６３１）。
【００１６】
ＨＶＥＭの反対側にある結合領域の位置にかかわらず、ＬＩＧＨＴおよびＢＴＬＡの両方は、ＴＲＡＦ２依存的メカニズムによって古典的ＮＦκＢ  ＲｅｌＡ経路を誘導し、シグナル伝達結果が両方のリガンドについて定性的に同じであることを示す（“Ｕｎｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ  ｌｉｇａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ  ｅｎｔｒｙ  ｍｅｄｉａｔｏｒ  ｓｉｇｎａｌｓ  ｃｅｌｌ  ｓｕｒｖｉｖａｌ”，Ｃｈｅｕｎｇ  ＴＣ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．２００９；１０６：６２４４−６２４９）。この結果は、両方のリガンドがＨＶＥＭに、ＮＦκＢを活性化するＴＲＡＦ２  Ｅ３リガーゼ経路を開始するのに十分な構造再組織化を提供することを示す。ＨＶＥＭは、ＬＴβＲなどの他のＴＮＦＲがするようにＴＲＡＦ３をそのシグナル伝達複合体に動員せず、よってＨＶＥＭのシグナル伝達活性は、活性化ＮＦκＢ  ＲｅｌＡに限定されている。
【００１７】
ＨＶＥＭのシスおよびトランス
Ｔ細胞におけるＨＶＥＭおよびＢＴＬＡの共発現は、ＨＶＥＭに接触してこれを活性化するＬＩＧＨＴおよび他のリガンドの能力に干渉する固有のメカニズムを作成する（“Ｔ  ｃｅｌｌ  ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ  ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｉｃ  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ＨＶＥＭ  ａｎｄ  ＢＴＬＡ  ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｉｖｉｔｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｓｕｒｒｏｕｎｄｉｎｇ  ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ”，Ｃｈｅｕｎｇ  ＴＣ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００９；１８３：７２８６−７２９６）。以前の研究は主として、ＬＩＧＨＴの可溶性形態の挙動がその膜結合形態を表すと仮定していた。この仮定は、実際には、上皮細胞において可溶性ＬＩＧＨＴがＬＴβＲまたはＨＶＥＭを活性化する場合である。しかしながら、可溶性および膜ＬＩＧＨＴの間の区別は、上皮細胞とは対照的に、ＨＶＥＭをその阻害受容体ＢＴＬＡと共発現する、Ｔ細胞の研究において出現した。ヒト血液およびナイーブマウス脾臓に由来するＴ細胞は、ＨＶＥＭおよびＢＴＬＡを構成的に共発現する。ＨＶＥＭおよびＢＴＬＡは、一方の遺伝子が遺伝的に欠損したマウスにおいて示されるように、互いとは無関係に発現する。共にＨＶＥＭ−ＢＴＬＡシス複合体は、安定であり、細胞表面で発現するが、シグナル伝達活性はＨＶＥＭと関連していない。シス複合体の形成は、ＢＴＬＡの細胞外ドメインに結合するＨＶＥＭおよびトランスにおいてＨＶＥＭに結合するＢＴＬＡに影響を及ぼす突然変異のみを必要とし、またシスにおける結合に影響し、ＨＶＥＭ−ＢＴＬＡシス複合体がトランスと同じ結合部位を占めることを示す。実際には、ＨＶＥＭおよびＢＴＬＡを共発現する細胞は、ＨＶＥＭまたはＢＴＬＡ−Ｆｃを結合することができず、これは、Ｔ細胞の細胞表面上でＨＶＥＭおよびＢＴＬＡを１：１の比でシス複合体における分子の＞８５％で定量化する方法を提供した。重要なことに、可溶性ＬＩＧＨＴまたはＬＴαの添加は、ＮＦκＢの誘導によって検出されるように、ＨＶＥＭを活性化することができなかったが、ＬＩＧＨＴの結合は、予想されるように、ＨＶＥＭを単独で発現する細胞において検出可能であり、これらのリガンドは完全に機能的であった。可溶性または膜位置のいずれかにおけるＢＴＬＡまたはＣＤ１６０はまた、シス複合体を発現する細胞においてＨＶＥＭを活性化することができなかった。よって、ＢＴＬＡは、ＨＶＥＭと共発現する場合、阻害剤として機能する（“ＴＮＦ  ＳＵＰＥＲＦＡＭＩＬＹ  ＮＥＴＷＯＲＫＳ：Ｂｉｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ  Ｅｎｔｒｙ  Ｍｅｄｉａｔｏｒ（ＴＮＦＳＦ１４）”，Ｗａｒｅ  ＣＦ  ａｎｄ  Ｓｅｄｙ  Ｊ  Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１１，２３：６２７−６３１）。
【００１８】
ＬＩＧＨＴの膜形態は、ＢＴＬＡとのシス複合体内でＨＶＥＭを活性化することができる唯一の細胞リガンドである。しかしながら、この活性化は、ＢＴＬＡの不在下でのＨＶＥＭの膜ＬＩＧＨＴ活性化と比較して低減する。シス複合体を破壊するＢＴＬＡに対する抗体の存在は、ＬＩＧＨＴと相乗作用してＨＶＥＭを活性化し、これはＢＴＬＡからのＨＶＥＭの解離がＨＶＥＭを活性化する膜ＬＩＧＨＴの能力の重要な生物物理学的特徴であることを示す。まとめると、これらの結果は、ＬＩＧＨＴが４つの異なるシグナル伝達機能：ＨＶＥＭの活性化、ＨＶＥＭ−ＢＴＬＡシス複合体の破壊、ＬＴβＲの活性化、ＨＶＥＭ−ＢＴＬＡ複合体形成を向上する可溶性形態であることを有することを示し、すなわち、可溶性ＬＩＧＨＴは抗炎症である（“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  ｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎ  ａｎｄ  ＬＩＧＨＴ  ｐａｔｈｗａｙｓ”，Ｗａｒｅ  ＣＦ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｖ．２００８；２２３：１８６−２０１）。
【発明の概要】
【００１９】
本発明者らは、ＬＩＧＨＴ、特に膜ＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子を同定した。本発明の抗原結合分子は、可溶性ＬＩＧＨＴよりも高い親和性で膜ＬＩＧＨＴに結合する。本発明の抗原結合分子はまた、１つの抗原結合分子に対して１つのＬＩＧＨＴトリマーの比でＬＩＧＨＴのトリマーに優先的に結合する。
【００２０】
本発明の第１の態様では、ＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域および／またはＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子またはその断片もしくはバリアントであって、抗原結合分子がＬＩＧＨＴに結合する、抗原結合分子またはその断片もしくはバリアントが提供される。
【００２１】
本発明の第２の態様では、各々３つのＣＤＲ領域を含む重鎖可変領域および／または軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子またはその断片もしくはバリアントであって、抗原結合分子がＬＩＧＨＴに結合する、抗原結合分子またはその断片もしくはバリアントが提供される。
【００２２】
本発明の第３の態様では、抗原結合分子であって、抗原結合分子が、ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体である、抗原結合分子が提供される。本発明はまた、その抗体から誘導される断片およびバリアントを提供する。
【００２３】
本発明の第４の態様では、ＬＩＧＨＴに結合し、ＬＩＧＨＴへの結合について本発明の第１、第２、または第３の態様の抗原結合分子と競合する、抗原結合分子またはその断片もしくはバリアントが提供される。
【００２４】
本発明の第５の態様では、本発明の第１、第２、または第３の態様の抗原結合分子によって結合したＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する、抗原結合分子が提供される。
【００２５】
本発明の第６の態様では、ＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子であって、エピトープがアミノ酸ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含む、抗原結合分子が提供される。
【００２６】
本発明の第７の態様では、１つの抗原結合分子に対して１つのＬＩＧＨＴトリマーの比でＬＩＧＨＴ分子のトリマーに特異的に結合する、抗原結合分子が提供される。
【００２７】
本発明の第８の態様では、ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、本発明の第１、第２、または第３の態様の抗原結合分子へのＬＩＧＨＴの結合を阻害する、抗原結合分子が提供される。
【００２８】
本発明の第９の態様では、本発明の第１、第２、または第３の態様の抗原結合分子からの１〜１０、１〜５、または１〜２個のアミノ酸置換を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子が提供される。本発明のさらなる態様では、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子が、本発明の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子のヒト化誘導体である、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子が提供される。
【００２９】
本発明のさらなる態様では、本発明の抗原結合分子または抗体の親和性成熟変異体が提供される。
【００３０】
本発明のまたさらなる態様では、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子またはその親和性成熟変異体が提供され、抗原結合分子または親和性成熟変異体は、約１ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴについてのＫＤ値および約１ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴについてのＫＤ値を有し、特に抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子またはその親和性成熟変異体は、約１ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴおよび約５ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴについてのＫＤ値を有し、好ましくは抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子またはその親和性成熟変異体は、約０．５ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴおよび約１０ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴについてのＫＤ値、または約０．１ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴおよび約１０ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴについてのＫＤ値を有する。
【００３１】
本発明の別の態様では、ＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの膜ＬＩＧＨＴの結合またはＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへのＬＩＧＨＴ発現細胞の結合を阻害し、任意にデコイ受容体３への膜ＬＩＧＨＴ、またはデコイ受容体３への膜ＬＩＧＨＴを発現する細胞の結合を部分的に阻害する、抗ＬＩＧＨＴ抗体が提供される。
【００３２】
本発明のさらなる態様では、本発明の抗原結合分子、またはその断片もしくはバリアントを含む、薬学的組成物が提供される。
【００３３】
本発明のまたさらなる態様では、医療における使用のための本発明の抗原結合分子または薬学的組成物が提供される。
【００３４】
別の態様では、炎症障害または疾患の予防および／または治療における使用のための本発明の抗原結合分子または薬学的組成物が提供される。
【００３５】
別の態様では、炎症障害または疾患の治療における使用のための医薬品の製造のための本発明の抗原結合分子または薬学的組成物の使用が提供される。
【００３６】
さらなる態様では、対象に治療有効量の本発明の抗原結合分子または薬学的組成物を投与することを含む、それを必要とする対象において炎症障害または疾患を治療または予防する方法が提供される。
【００３７】
本発明の抗原結合分子をコードする核酸、核酸を含むベクター、および宿主細胞、ならびにキット、ＬＩＧＨＴタンパク質のＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの結合またはＬＩＧＨＴ発現細胞のＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの結合を阻害する方法、その細胞を本発明のプラスミドまたはベクターでトランスフェクトすることを含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子を発現する細胞を産生する方法、および細胞内部でプラスミドまたはベクターのコード核酸配列を発現するための条件下で細胞培養培地において本発明の宿主細胞を培養することを含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子上での産生のための方法も提供される。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１Ａ】全ての７つのリード抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂｓの安定にトランスフェクトされたＬＩＧＨＴ  ＥＬ４細胞への結合を示す。各ｍＡｂのＥＣ５０が示され、２Ａ１１は抗ａｎｔｉ−ＨＥＬ  ｍＡｂの陰性対照である。
【図１Ｂ】ＨｅＬａ細胞ルシフェラーゼレポーター細胞アッセイにおける生理学的および疾患濃度で抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂｓの可溶性ＬＩＧＨＴへの結合の欠如を示す。ルシフェラーゼアッセイによって測定された可溶性ＬＩＧＨＴ媒介ＬＴｂＲ依存的ＮＦ−ｋＢ活性化に対する抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂｓ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２の効果の欠如。
【図２Ａ−２Ｂ】膜ＬＩＧＨＴ（ＨＥＫ２９３ＦＦヒトＬＩＧＨＴ細胞）に結合するビオチン化ＨＶＥＭ−Ｆｃ（図２Ａ）またはビオチン化ＬＴβＲ−Ｆｃ（図２Ｂ）に対する抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂｓ  ３Ｄ１２、３Ｂ０４、３Ｅ０９、２Ｂ１１、２Ｅ０８、３Ａ０７、および３Ｃ１０についての競合アッセイを示す。ＩＲＲは陰性対照抗ＨＥＬ  ｍＡｂである。
【図３】リード抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂｓによる安定にトランスフェクトされたＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞によって刺激されたＨＴ−２９細胞からのＩＬ−８分泌の阻害を示す。ＩＲＲは陰性対照抗ＨＥＬ  ｍＡｂである。
【図４】膜ＬＩＧＨＴ（ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ）細胞への結合についてのＤｃＲ３−Ｆｃに対する抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂｓ  ３Ｄ１２、３Ｂ０４、および２Ｂ１１の競合結合を示す。比較のためにＥＰ２２９２６６３からのｍＡｂ  Ｆ１９が含まれる。
【図５】刺激されたＣＤ８  Ｔ細胞上でＬＩＧＨＴに結合する７つのリード抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂｓ、３Ｄ１２、３Ｂ０４、３Ｅ０９、２Ｂ１１、２Ｅ０８、３Ａ０７、および３Ｃ１０（黒色の太い実線）のフローサイトメトリープロットを示す。点線は二次抗体単独であり、黒色の細い実線は対照抗ＨＥＬ  ｍＡｂ（０２Ａ１１）である。
【図６】３つのＬＩＧＨＴバリアントに結合する７つのリード抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂｓ（３Ｄ１２、３Ｂ０４、３Ｅ０９、２Ｂ１１、２Ｅ０８、３Ａ０７、および３Ｃ１０）のフローサイトメトリープロットを示す。実験を各ｍＡｂで３回繰り返した。無関係の抗ＨＥＬ  ｍＡｂを陰性対照として使用し、市販の抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂを陽性対照として使用した。
【図７】７つのマウスモノクローナル抗ＬＩＧＨＴ重鎖可変領域のアミノ酸配列を示す。各重鎖可変領域のＣＤＲ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３）が強調される。
【図８】７つのマウスモノクローナル抗ＬＩＧＨＴ抗体軽鎖可変領域のアミノ酸配列を示す。各軽鎖可変領域のＣＤＲ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３）が強調される。
【図９】３Ｂ０４親抗体から誘導される可変重および軽ヒト化および脱免疫化鎖のアミノ酸配列を示す。各重鎖および軽鎖可変領域のＣＤＲ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３）が強調される。
【図１０】３Ｄ１２親抗体から誘導される可変重および軽ヒト化および脱免疫化鎖のアミノ酸配列を示す。各重鎖および軽鎖可変領域のＣＤＲ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３）が強調される。
【図１１】他の抗ＬＩＧＨＴ（膜および可溶性）ｍＡｂｓと比較して抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂｓ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２の安定にトランスフェクトされたＬＩＧＨＴ  ＥＬ４細胞への結合を示す。比較のためにＥＰ２２９２６６３からのｍＡｂ  Ｆ１９およびｍＡｂ  Ｆ２３が含まれる。
【図１２】ｍＡｂｓ  ３Ｂ０４、３Ｄ１２、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｃ１０、２Ｂ１１、および３Ｅ０９のエピトープ位置（ａａ  １８８〜１９７）を示すＬＩＧＨＴの結晶構造の３Ｄ視覚化を示す。
【図１３】陰性（ＩｇＧ）および陽性（ヒュミラ、抗ＴＮＦ）対照と比較してｈｕ−ＮＯＧマウスでのＤＳＳ誘導性大腸炎のインビボモデルにおける抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ  ３Ｂ０４（バリアント１６）の効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
本明細書で使用されるとき、「抗原結合分子」は、互いに結合特異性を有する分子のペアのメンバーである。抗原結合ペアのメンバーは、天然由来または完全もしくは部分合成産生であり得る。分子のペアの一方のメンバーは、突起または空洞であり得る、その表面上の領域を有し、これは、分子のペアの他方のメンバーの特定の空間極性組織に特異的に結合し、したがって、これと相補的である。よって、ペアのメンバーは、互いに特異的に結合する特性を有する。抗原結合ペアのタイプの例は、抗原−抗体、ビオチン−アビジン、ホルモン−ホルモン受容体、受容体−リガンド、および酵素−基質である。本発明は、一般的には、抗原−抗体タイプ相互作用に関する。本発明で使用される抗原結合分子は、ＬＩＧＨＴ、ｈＬＩＧＨＴ、膜ＬＩＧＨＴ、ＬＩＧＨＴのエピトープ、またはｈＬＩＧＨＴのエピトープに対して他の分子より大きな親和性で結合し、すなわち、これはＬＩＧＨＴ、ｈＬＩＧＨＴ、膜ＬＩＧＨＴ、ＬＩＧＨＴのエピトープ、またはｈＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する。抗原結合分子のＬＩＧＨＴ、ｈＬＩＧＨＴ、膜ＬＩＧＨＴ、ＬＩＧＨＴのエピトープ、またはｈＬＩＧＨＴのエピトープに対する結合親和性は、解離定数（ＫＤ）を用いて測定することができる。抗原結合分子のＬＩＧＨＴ、ｈＬＩＧＨＴ、膜ＬＩＧＨＴ、ＬＩＧＨＴのエピトープ、またはｈＬＩＧＨＴのエピトープに対する結合親和性はまた、会合定数（Ｋａ）を用いて測定することができる。本明細書に記載のｈＬＩＧＨＴのエピトープに対する抗原結合分子のＫＤ値は、ＬＩＧＨＴの代替エピトープまたは非ＬＩＧＨＴエピトープに対する抗原結合分子のＫＤ値よりも低いであろう。
【００４０】
ＬＩＧＨＴ、ｈＬＩＧＨＴ、および／または膜ＬＩＧＨＴに結合する抗原結合分子は、抗ＬＩＧＨＴ抗体を含む。本発明で使用される抗原結合分子は、典型的には、抗体である。
【００４１】
本明細書で使用される「抗体」という用語は、免疫グロブリン分子および免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、すなわち、天然または部分もしくは完全合成産生にかかわらず、抗原に特異的に結合する抗原結合部位を含有する分子を指す。用語はまた、抗体結合ドメインであるか、またはこれと相同である結合ドメインを有する任意のポリペプチドまたはタンパク質をカバーする。抗体は、ポリクローナルまたはモノクローナルであり得る。これらは天然供給源由来とすることができ、またはそれらは部分もしくは完全合成産生であり得る。抗体は、典型的には２つの同一の重鎖および、重鎖よりも小さい、２つの同一の軽鎖を含有するポリペプチドである。哺乳動物には、ラムダ（λ）およびカッパ（κ）と呼ばれる、軽鎖の２つのタイプがある。重鎖の各々および軽鎖の各々は、可変領域および定常領域を含む。重鎖可変領域はＶＨ領域と称され、軽鎖可変領域はＶＬ領域と称される。カッパ軽鎖について、ＶＬ領域はＶＫ領域とも称することができる。重鎖および軽鎖の可変領域の各々は、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。これらはそれぞれＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、ＶＬＣＤＲ３、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３と呼ばれる。抗体の例は、免疫グロブリンアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、およびＩｇＡ）およびそれらのアイソタイプサブクラス、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄＡｂ、Ｆｄなどの、抗原結合ドメインを含む断片、ならびにダイアボディである。
【００４２】
抗体および抗原結合分子の断片
本発明の抗原結合分子は、抗体の断片、特に抗体の抗原結合断片であり得る。抗原結合断片は、１つ以上の抗原結合領域を含む。完全抗体の断片が結合抗原の機能を行うことができることが示されている。結合断片の例は、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、およびＣＨ１ドメインからなるＦａｂ断片、（ｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、（ｉｉｉ）単一抗体のＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｉｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ，Ｅ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６（１９８９））、（ｖ）単離ＣＤＲ領域、（ｖｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片、２つの結合Ｆａｂ断片を含む二価断片、（ｖｉｉ）２つのドメインが会合して抗原結合部位を形成することを可能にするペプチドリンカーによってＶＨドメインおよびＶＬドメインが結合した、単鎖Ｆｖ分子（ｓｃＦｖ）（Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６（１９８８）、Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３（１９８８））、（ｖｉｉｉ）二重特異性単鎖Ｆｖダイマー（ＰＣＴ／ＵＳ９２／０９９６５）、ならびに（ｉｘ）「ダイアボディ」、遺伝子融合によって構成された多価または多重特異性断片（ＷＯ９４／１３８０４、Ｐ．Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８（１９９３））である。典型的には、断片は、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、またはＦｖ断片もしくはｓｃＦｖ断片である。
【００４３】
ダイアボディは、ポリペプチドのマルチマーであり、各ポリペプチドは、免疫グロブリン軽鎖の結合領域を含む第１のドメインおよび免疫グロブリン重鎖の結合領域を含む第２のドメインを含み、２つのドメインは（例えば、ペプチドリンカーによって）結合しているが、互いに会合して抗原結合部位を形成することができず、抗原結合部位は、マルチマー内の１つのポリペプチドの第１のドメインのマルチマー内の別のポリペプチドの第２のドメインとの会合によって形成される（ＷＯ９４／１３８０４）。
【００４４】
二重特異性抗体が使用される場合、これらは、様々な方法（Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ＆  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．４：４４６−４４９（１９９３））で製造され得、例えば、化学的にまたはハイブリッドハイブリドーマから調製される、従来の二重特異性抗体であってもよく、または以下で言及される二重特異性抗体断片のいずれかであってもよい。完全抗体ではなくｓｃＦｖダイマーまたはダイアボディを使用することが好ましい場合がある。ダイアボディおよびｓｃＦｖは、Ｆｃ領域なしで、可変ドメインのみを用いて構成し、潜在的に抗イディオタイプ反応の効果を低減し得る。二重特異性抗体の他の形態は、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １０：３６５５−３６５９（１９９１）に記載の単鎖「ヤヌシン」を含む。
【００４５】
二重特異性ダイアボディはまた、二重特異性完全抗体とは反対に、Ｅ．ｃｏｌｉにおいて容易に構成および発現することができるので、有用であり得る。適切な結合特異性のダイアボディ（および抗体断片などの多くの他のポリペプチド）は、ライブラリーからファージディスプレイ（ＷＯ９４／１３８０４）を用いて容易に選択することができる。ダイアボディの一方のアームが、例えば、抗原Ｘに対する特異性で定常に保たれる場合、他方のアームが様々であり、適切な特異性の抗体が選択される、ライブラリーを作製することができる。
【００４６】
同一性および相同性
当該技術分野において知られる「同一性」とは、配列を比較することによって決定される、２つ以上のポリペプチド配列または２つ以上のポリヌクレオチド配列間の関係である。当該技術分野では、同一性はまた、そのような配列のストリング間の一致によって決定されるように、場合によって、ポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列間の配列関連性の程度を意味する。２つのポリペプチドまたは２つのポリヌクレオチド配列間の同一性を測定するための多数の方法が存在するが、同一性を決定するために一般的に利用される方法は、コンピュータプログラムにおいて体系化される。２つの配列間の同一性を決定するための好ましいコンピュータプログラムは、これらに限定されないが、ＧＣＧプログラムパッケージ（Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１２，３８７（１９８４））、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮ、およびＦＡＳＴＡ（Ａｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．２１５，４０３（１９９０））を含む。
【００４７】
アミノ酸配列を比較するためにＣＬＵＳＴＡＬプログラムなどのプログラムを使用することができる。このプログラムは、アミノ酸配列を比較し、適切な場合いずれかの配列にスペースを挿入することによって最適なアラインメントを見出す。最適なアラインメントのためのアミノ酸同一性または類似性（同一性およびアミノ酸タイプの保存）を計算することが可能である。ＢＬＡＳＴｘのようなプログラムは、類似配列の最長ストレッチを整列させ、値をフィットに割り当てる。よって、各々が異なるスコアを有するいくつかの類似性領域が見つかる場合、比較を得ることが可能である。本発明では、両方のタイプの同一性分析が考慮される。
【００４８】
２つのアミノ酸配列または２つの核酸配列の同一性パーセントは、最適比較目的で配列を整列させ（例えば、配列との最良アラインメントのために第１の配列にギャップを導入することができる）、対応する位置にあるアミノ酸残基またはヌクレオチドを比較することによって決定される。「最良アラインメント」とは、最高の同一性パーセントをもたらす２つの配列のアラインメントである。同一性パーセントは、比較される配列中のアミノ酸残基またはヌクレオチドの数によって決定される（すなわち、同一性％＝同一性位置の数／位置の総数ｘ１００）。一般的には、本明細書における同一性％への言及は、文脈で他に特定または示唆がない限り、分子の全長に沿った同一性％を指す。
【００４９】
２つの配列間の同一性パーセントの決定は、当業者に知られている数学的アルゴリズムを用いて達成することができる。２つの配列を比較するための数学的アルゴリズムの例は、Ｋａｒｌｉｎ  ａｎｄ  Ａｌｔｓｃｈｕｌ（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３−５８７７において改変された、Ｋａｒｌｉｎ  ａｎｄ  Ａｌｔｓｃｈｕｌ（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８７：２２６４−２２６８のアルゴリズムである。Ａｌｔｓｃｈｕｌ，ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０のＮＢＬＡＳＴおよびＸＢＬＡＳＴプログラムは、そのようなアルゴリズムを組み込んだ。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索は、ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、語長＝１２で行い、本発明の核酸分子と相同のヌクレオチド配列を得ることができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索は、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、語長＝３で行い、本発明のタンパク質分子と相同のアミノ酸配列を得ることができる。比較目的でギャップドアラインメントを得るために、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴをＡｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２に記載されるように利用することができる。あるいは、ＰＳＩ−Ｂｌａｓｔを用いて、分子間の距離関係を検出する反復検索を行うことができる（Ｉｄ．）。ＢＬＡＳＴ、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴ、およびＰＳＩ−Ｂｌａｓｔプログラムを使用する場合、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴおよびＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトパラメータを使用することができる。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖを参照されたい。配列の比較に利用される数学的アルゴリズムの別の例は、Ｍｙｅｒｓ  ａｎｄ  Ｍｉｌｌｅｒ，ＣＡＢＩＯＳ（１９８９）のアルゴリズムである。ＣＧＣ配列アラインメントソフトウェアパッケージの一部であるＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）は、そのようなアルゴリズムを組み込んでいる。当該技術分野において知られている配列分析の他のアルゴリズムは、Ｔｏｒｅｌｌｉｓ  ａｎｄ  Ｒｏｂｏｔｔｉ（１９９４）Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．，１０：３−５に記載されるＡＤＶＡＮＣＥおよびＡＤＡＭ、ならびにＰｅａｒｓｏｎ  ａｎｄ  Ｌｉｐｍａｎ（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：２４４４−８に記載されるＦＡＳＴＡを含む。ＦＡＳＴＡ内、ｋｔｕｐは感度および検索の速度を設定する制御オプションである。
【００５０】
典型的には、本発明で提供される抗原結合分子のＣＤＲのアミノ酸配列は、例えば、ＨＧＭＰ（Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｊｅｃｔ）によって提供されるＢＬＡＳＴコンピュータプログラム（Ａｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５，４０３−４１０（１９９０））のデフォルトパラメータを用いて、アミノ酸レベルで、以下に記載されるＣＤＲのアミノ酸配列に対して、少なくとも７０％の同一性を有する。より典型的には、ＣＤＲ配列は、アミノ酸レベルで、以下に示される配列に対して、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または少なくとも９９％の同一性を有する。典型的には、本発明に使用される抗原結合分子のＣＤＲ配列の各々は、以下に記載されるＣＤＲのアミノ酸配列に対して、このレベルの同一性を有する。あるいは、本発明に使用される抗原結合分子のＣＤＲのいずれか１つ、２つ、３つ、４つ、または５つは、以下に記載されるＣＤＲのアミノ酸配列に対して、このレベルの同一性を有する。
【００５１】
本発明で提供される抗原結合分子のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列は、例えば、ＨＧＭＰ（Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｊｅｃｔ）によって提供されるＢＬＡＳＴコンピュータプログラム（Ａｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５，４０３−４１０（１９９０））のデフォルトパラメータを用いて、アミノ酸レベルで、以下に記載されるＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列に対して、少なくとも７０％の同一性を有する。より典型的には、ＶＨおよびＶＬ領域は、アミノ酸レベルで、以下に示される配列に対して、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または少なくとも９９％の同一性を有する。典型的には、本発明に使用される抗原結合分子のＶＨおよびＶＬ領域の各々は、以下に記載されるＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列に対して、このレベルの同一性を有する。あるいは、本発明に使用される抗原結合分子のＶＨおよびＶＬ領域の１つのみが、以下に記載されるＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列に対して、このレベルの同一性を有する。
【００５２】
本明細書で使用される同一性は、「相同性」および「類似性」と互換可能に使用される。特定の同一性％への言及は、相同性％および類似性％に等しく当てはまる。相同性および同一性は、ＦＡＳＴＡ、ＢＬＡＳＴ、およびＧａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴなどの適切なアルゴリズムを用いて決定され得る。これらの分析を行うためのソフトウェアは、公的に入手可能である。
【００５３】
バリアント
本発明はまた、以下に言及されるペプチド配列のバリアントに及ぶ。本明細書で使用されるとき、「バリアント」という用語は、類似のアミノ酸配列を有するタンパク質および／または同じ機能を保持するタンパク質に関する。例えば、「バリアント」という用語は、１つ以上のアミノ酸付加、欠失、置換などを含むタンパク質またはポリペプチドを包含する。本発明のバリアントの例は、１つ以上のアミノ酸の１つ以上の他のアミノ酸での置換を除いて、以下に定義されるペプチドを含むタンパク質である。当業者は、様々なアミノ酸が類似の特性を有することを認識している。物質の１つ以上のそのようなアミノ酸は、多くの場合、その物質の所望の活性を除外することなく、１つ以上の他のそのようなアミノ酸によって置換することができる。
【００５４】
よってアミノ酸グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、およびイソロイシンは、多くの場合、互い（脂肪族側鎖を有するアミノ酸）について置換することができる。これらの可能な置換のうち、グリシンおよびアラニンは（それらが比較的短い側鎖を有するので）互いについて置換するのに使用され、バリン、ロイシン、およびイソロイシンは（それらが疎水性のより大きな脂肪族側鎖を有するので）互いについて置換するのに使用されることが好ましい。多くの場合、互いについて置換することができる他のアミノ酸は、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファン（芳香族側鎖を有するアミノ酸）、リジン、アルギニン、およびヒスチジン（塩基性側鎖を有するアミノ酸）、アスパルテートおよびグルタメート（酸性側鎖を有するアミノ酸）、アスパラギンおよびグルタミン（アミド側鎖を有するアミノ酸）、ならびにシステインおよびメチオニン（硫黄含有側鎖を有するアミノ酸）を含む。
【００５５】
この性質の置換は、「保存的」または「半保存的」アミノ酸置換と称されることが多い。
【００５６】
３文字および１文字のコードを使用して、アミノ酸は下記：グリシン（ＧまたはＧｌｙ）、アラニン（ＡまたはＡｌａ）、バリン（ＶまたはＶａｌ）、ロイシン（ＬまたはＬｅｕ）、イソロイシン（ＩまたはＩｌｅ）、プロリン（ＰまたはＰｒｏ）、フェニルアラニン（ＦまたはＰｈｅ）、チロシン（ＹまたはＴｙｒ）、トリプトファン（ＷまたはＴｒｐ）、リジン（ＫまたはＬｙｓ）、アルギニン（ＲまたはＡｒｇ）、ヒスチジン（ＨまたはＨｉｓ）、アスパラギン酸（ＤまたはＡｓｐ）、グルタミン酸（ＥまたはＧｌｕ）、アスパラギン（ＮまたはＡｓｎ）、グルタミン（ＱまたはＧｌｎ）、システイン（ＣまたはＣｙｓ）、メチオニン（ＭまたはＭｅｔ）、セリン（ＳまたはＳｅｒ）、およびトレオニン（ＴまたはＴｈｒ）のように称され得る。残基がアスパラギン酸またはアスパラギンであり得る場合、記号ＡｓｘまたはＢが使用され得る。残基がグルタミン酸またはグルタミンであり得る場合、記号ＧｌｘまたはＺが使用され得る。文脈で他に特定がない限り、アスパラギン酸への言及はアスパルテートを含み、グルタミン酸はグルタメートを含む。
【００５７】
アミノ酸欠失または挿入はまた、以下に言及される融合タンパク質のアミノ酸配列と相対的に行うことができる。よって、例えば、ポリペプチドの活性に対して実質的な効果を有さないか、または少なくともそのような活性を除外しないアミノ酸は、欠失することができる。そのような欠失は、活性を依然として保持しながらポリペプチドの全長および分子量を低減することができるので、有利であり得る。これは特定の目的に必要なポリペプチドの量を低減することを可能にすることができ、例えば、投与量レベルを低減することができる。
【００５８】
よってアミノ酸グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、およびイソロイシンは、多くの場合、互い（脂肪族側鎖を有するアミノ酸）について置換することができる。これらの可能な置換のうち、グリシンおよびアラニンは（それらが比較的短い側鎖を有するので）互いについて置換するのに使用され、バリン、ロイシン、およびイソロイシンは（それらが疎水性のより大きな脂肪族側鎖を有するので）互いについて置換するのに使用されることが好ましい。多くの場合、互いについて置換することができる他のアミノ酸は、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファン（芳香族側鎖を有するアミノ酸）、リジン、アルギニン、およびヒスチジン（塩基性側鎖を有するアミノ酸）、アスパルテートおよびグルタメート（酸性側鎖を有するアミノ酸）、アスパラギンおよびグルタミン（アミド側鎖を有するアミノ酸）、ならびにシステインおよびメチオニン（硫黄含有側鎖を有するアミノ酸）を含む。
【００５９】
いくつかの実施形態では、下記のアミノ酸は、保存的アミノ酸置換のために互いに交換することができる。
2020505465.tif 000002
【００６０】
以下に与えられる配列とは相対的なアミノ酸変化は、任意の適切な技法を使用して、例えば、部位特異的変異導入または固相合成を用いることによって行うことができる。
【００６１】
本発明の範囲内のアミノ酸置換または挿入は、自然発生または非自然発生アミノ酸を用いて行うことができることが理解されるべきである。天然または合成アミノ酸が使用されるか否かにかかわらず、Ｌ−アミノ酸のみが存在することが好ましい。
【００６２】
本発明の一実施形態では、抗体結合ドメインまたは抗原結合ドメインに１〜１０個、好ましくは１〜５個のアミノ酸置換を含む本発明の、抗原結合分子、またはその抗原結合断片が提供される。例えば、本発明の一実施形態では、抗ＬＩＧＨＴ抗体またはその抗原結合断片が提供され、抗ＬＩＧＨＴ抗体またはその抗原結合断片は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体の６つのＣＤＲ領域を含み、抗原結合分子は、そのＣＤＲ領域の全てにわたる１〜１０個のアミノ酸置換、好ましくは１〜５個のアミノ酸置換を有する。本発明のさらなる実施形態では、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子またはその抗原結合断片が提供され、抗ＬＩＧＨＴ抗体またはその抗原結合断片は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体のＶＨおよびＶＬ配列を含み、抗原結合分子は、そのＶＨおよびＶＬ配列にわたる１〜１０個のアミノ酸置換、好ましくは１〜５個のアミノ酸置換を有する。本発明のまたさらなる実施形態では、抗ＬＩＧＨＴ抗体が提供され、抗ＬＩＧＨＴ抗体は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体であり、抗体は、１〜１０個のアミノ酸置換、好ましくは１〜５個のアミノ酸置換を有する。
【００６３】
いくつかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は、ＣＤＲ領域（複数可）にある。他の実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は、フレームワーク領域にあり、すなわち、ＣＤＲ領域（複数可）ではなく可変重鎖および軽鎖にある。他の実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は、可変重および／または可変軽領域における任意の位置にあり得る。
【００６４】
本発明の範囲内である他のバリアントは、ＬＩＧＨＴ、好ましくは膜ＬＩＧＨＴに対する増加した親和性を有するように修飾されている本発明の抗原結合分子を含む。一実施形態では、本発明の抗原結合分子は、親和性成熟抗体である。一実施形態では、本発明の抗原結合分子は、ヒト化親和性成熟抗体である。
【００６５】
任意の既知の方法を使用して、本発明の抗原結合分子の親和性を増加させて、ＬＩＧＨＴ、好ましくは膜ＬＩＧＨＴに対する増加した親和性を有する親和性成熟抗体またはヒト化親和性成熟抗体を生成することができる。
【００６６】
したがって、本発明の抗原結合分子の親和性成熟変異体またはバリアントである、抗原結合分子が提供される。例えば、一実施形態では、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体の親和性成熟バリアントが提供される。一般的には、親和性成熟変異体は、親抗体（変異体が誘導される抗体）よりも高いＬＩＧＨＴ（特にヒトＬＩＧＨＴ）に対する親和性を有する。本発明によって、本発明の抗原結合分子または抗体の親和性成熟によって得ることができるか、または得られた抗原結合分子および抗体も提供される。
【００６７】
本発明の抗原結合分子は、典型的には抗体、より典型的にはモノクローナル抗体である。好ましい実施形態では、本発明のモノクローナル抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト定常領域が使用される、完全ヒトモノクローナル抗体である。
【００６８】
モノクローナル抗体の産生方法は、例えば、その内容が本明細書に参照により組み込まれる、Ｆｒｅｎｚｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ”，Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１３，４：２１７に記載されるように、当業者に周知である。
【００６９】
本発明のモノクローナル抗体は、抗体のアミノ酸配列を修飾することによってヒト化することができる。本発明の抗原結合分子の免疫原性を低減する方法は、例えば、部位特異的変異導入または他の一般的に用いられる分子生物学的技法による、適切な抗体フレームワークスキャフォールドへのＣＤＲグラフティングまたは可変表面残基リモデリングを含む（Ｒｏｇｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．９  ８９５−９０４（１９９６））。
【００７０】
適用可能な他の方法は、分子内の潜在的なＴ細胞エピトープの同定、および例えば、部位特異的変異導入（脱免疫化）による、これらのその後の除去を含むことができる。抗原結合分子のヒト化は、分子が治療剤として使用される場合に望ましくあり得る。ＣＤＲ領域のまたは周囲のフレームワーク配列のヒト化は、所望に応じて実施することができる。
【００７１】
モノクローナルおよび他の抗体を取り、組み換えＤＮＡ技術の技法を用いて、元の抗体の特異性を保持する他の抗体またはキメラ分子を産生することが可能である。そのような技法は、抗体の免疫グロブリン可変領域、または相補性決定領域（ＣＤＲ）をコードするＤＮＡを、異なる免疫グロブリンの定常領域、または定常領域およびフレームワーク領域に導入することを含み得る。抗体を産生するハイブリドーマまたは他の細胞は、遺伝子変異または他の変化に供してもよく、これは産生された抗体の結合特異性を改変してもしなくてもよい。
【００７２】
一実施形態では、重鎖可変領域および／または軽鎖可変領域は、少なくとも８５％ヒト化、少なくとも９０％ヒト化、少なくとも９５％ヒト化、少なくとも９６％ヒト化、少なくとも９７％ヒト化、少なくとも９８％ヒト化、または少なくとも９９％ヒト化される。いくつかの実施形態では、抗体は、例えば、より良好な抗原結合を保持するために、保存的にヒト化される。そのような保存的ヒト化抗体では、ヒト化抗体と比較して、より少ない抗体分局が作製され得る。
【００７３】
例えば、一実施形態では、軽可変領域は、ヒト化され得るが、Ａｒｇ３８、Ｇｌｎ４０、Ｇｌｎ４５、およびＳｅｒ５９を保持し得、重可変領域は、ヒト化され得るが、Ｉｌｅ４８、Ａｓｎ６１、Ｌｙｓ６５、およびＡｌａ６８を保持し得る。別の実施形態では、軽可変領域は、ヒト化され得るが、Ａｒｇ３８およびＧｌｎ４０を保持し得、重可変領域は、ヒト化され得るが、Ｉｌｅ４８およびＡｓｎ６１を保持し得る。
【００７４】
本発明の抗原結合分子は、いくつかの実施形態では、例えば、その内容が本明細書に参照により組み込まれる、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ”，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ，２００９，５２５：４０５−２３に記載の方法を用いて、脱免疫化される。脱免疫化は、組み合わされた免疫学的および分子生物学的技法を用いて、Ｔ細胞エピトープを配列から除去する。
【００７５】
本発明のいくつかの実施形態では、したがって、脱免疫化抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子またはその抗原結合断片が提供され、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子またはその抗原結合断片は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体の６つのＣＤＲ領域の脱免疫化バリアントを含む。本発明のさらなる実施形態では、脱免疫化抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子またはその抗原結合断片が提供され、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子またはその抗原結合断片は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体からのＶＨおよび／またはＶＬ領域の脱免疫化バリアントを含む。本発明のまたさらなる実施形態では、免疫化抗ＬＩＧＨＴ抗体が提供され、抗ＬＩＧＨＴ抗体は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体の脱免疫化バリアントである。
【００７６】
抗原結合分子およびその抗原結合断片は、７つの親抗体３Ｂ０４、３Ｄ１２、２Ｅ０８、３Ｃ１０、３Ａ０７、３Ｅ０９、および２Ｂ１１をベースとする。親抗体に加えて、本発明は特に、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６を含む、親抗体のヒト化および脱免疫化誘導体に関するが、残った５つの親抗体のヒト化および脱免疫化誘導体も提供される。本発明はまた、本発明の親またはヒト化／脱免疫化抗体からのもう１つの抗原結合ドメインを含む抗体−断片、ならびに１個以上の保存的アミノ酸置換（例えば、１〜１０個、または好ましくは１〜５個の置換）を含有する抗原結合ドメインなどのさらなるバリアントおよび本発明の抗原結合分子の親和性成熟バリアントをベースとする。本発明の抗原結合分子の全ては、ＬＩＧＨＴに特異的に結合する。
【００７７】
本発明の抗原結合分子、特に抗体は、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、およびＩｇＹを含む、任意の適切なタイプであり得るが、ＩｇＧが好ましい場合がある。ＩｇＧ４骨格が最も好ましい場合がある。関連する実施形態では、本発明の抗体の定常領域は、例えば、安定性を増加し、Ｆｃγ受容体相互作用を低減するために、有利な効果について修飾され得る。そのような修飾は、Ｆｃ領域においてＳ２４１ＰおよびＬ２４８Ｅ置換を含む。他の適切な修飾は、当業者に知られている。
【００７８】
本発明によって提供される抗体の要約を以下に提供する。その抗原結合バリアント、誘導体、および断片も本発明の一部として提供される：
【表１】
2020505465.tif 000003
【表２】
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【表３】
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【表４】
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【表５】
2020505465.tif 000007
【００７９】
本発明の様々な実施形態をここでより詳細に論じる。
【００８０】
ＶＨＣＤＲ３および／またはＶＬＣＤＲ３領域を含む抗原結合分子
３Ｂ０４
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号４）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００８１】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号４）を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗原結合分子は、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号４）である、抗体またはその断片もしくはバリアントである。
【００８２】
３Ｄ１２
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号４４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４８）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号４４）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００８３】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４８）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号４４）を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗原結合分子は、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４８）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号４４）である、抗体またはその断片もしくはバリアントである。
【００８４】
２Ｅ０８
一実施形態では、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号８８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ（配列番号８４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号８８）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ（配列番号１５）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００８５】
一実施形態では、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ（配列番号８４）を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗原結合分子は、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号８８）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ（配列番号８４）である、抗体またはその断片もしくはバリアントである。
【００８６】
３Ｃ１０
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号９６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号９２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号９６）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号９２）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００８７】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号９６）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号９２）を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗原結合分子は、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号９６）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号９２）である、抗体またはその断片もしくはバリアントである。
【００８８】
３Ａ０７
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１０４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号１００）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１０４）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号１００）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００８９】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１０４）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗原結合分子は、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１０４）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号１００）である、抗体またはその断片もしくはバリアントである。
【００９０】
３Ｅ０９
一実施形態では、アミノ酸配列ＧＴＧＤＧＦＡＹ（配列番号１１２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＹＴ（配列番号１０８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＧＴＧＤＧＦＡＹ（配列番号１１２）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＹＴ（配列番号１０８）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００９１】
一実施形態では、アミノ酸配列ＧＴＧＤＧＦＡＹ（配列番号１１２）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＹＴ（配列番号１０８）を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗原結合分子は、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＧＴＧＤＧＦＡＹ（配列番号１１２）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＱＮＮＥＤＰＹＴ（配列番号１０８）である、抗体またはその断片もしくはバリアントである。
【００９２】
２Ｂ１１
一実施形態では、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ配列（配列番号１２０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＹＴ（配列番号１１６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ配列（配列番号１２０）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＹＴ（配列番号１１６）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００９３】
一実施形態では、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ配列（配列番号１２０）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＹＴ（配列番号１１６）を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗原結合分子は、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ配列（配列番号１２０）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＱＳＮＥＤＰＹＴ（配列番号１１６）である、抗体またはその断片もしくはバリアントである。
【００９４】
３Ｂ０４バリアント
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、および／または軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９５】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）である、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００９６】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００９７】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）である、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００９８】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【００９９】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含む重鎖可変領域を含む、および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）である、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１００】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１０１】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）である、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１０２】
３Ｄ１２バリアント
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１０３】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）である、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１０４】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１０５】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）である、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１０６】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１０７】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）である、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１０８】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１８０）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１０９】
一実施形態では、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含む重鎖可変領域および／またはアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。特定の実施形態では、抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＨＣＤＲ３領域が、ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）である、および／または抗体またはその断片もしくはバリアントのＶＬＣＤＲ３領域が、ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）である、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１１０】
重鎖および／または軽鎖ＣＤＲ
３Ｂ０４
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１１１】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１１２】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号６）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号７）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号３）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１１３】
３Ｄ１２
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号４６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号４７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号４２）を含むＶＬＣＤＲ１に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号４３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号４４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１１４】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号４６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号４７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号４２）を含むＶＬＣＤＲ１に対して少なくとも９０％の同一性、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号４３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号４４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１１５】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号４６）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号４７）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４８）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号４２）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号４３）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号４４）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１１６】
２Ｅ０８
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＡＩＨ（配列番号８６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＳＴＹＹＧＤＡＳＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号８７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ配列（配列番号８８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＫＡＳＱＳＶＤＹＤＧＤＳＹＭＮ（配列番号８２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＡＳＮＬＥＳ（配列番号８３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ（配列番号８４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１１７】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＡＩＨ（配列番号８６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＳＴＹＹＧＤＡＳＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号８７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ配列（配列番号８８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＫＡＳＱＳＶＤＹＤＧＤＳＹＭＮ（配列番号８２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＡＳＮＬＥＳ（配列番号８３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ（配列番号８４）に対して少なくとも７９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１１８】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＡＩＨ（配列番号８６）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＳＴＹＹＧＤＡＳＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号８７）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号８８）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＫＡＳＱＳＶＤＹＤＧＤＳＹＭＮ（配列番号８２）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＡＳＮＬＥＳ（配列番号８３）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ（配列番号８４）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１１９】
３Ｃ１０
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号９４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号９５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号９６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（配列番号９０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＴＳＮＬＡＳ（配列番号９１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号９２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１２０】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号９４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号９５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号９６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（配列番号９０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＴＳＮＬＡＳ（配列番号９１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号９２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１２１】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号９４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号９５）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号９６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（配列番号９０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＴＳＮＬＡＳ（配列番号９１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号９２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１２２】
３Ａ０７
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号１０２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号１０３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１０４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（配列番号９８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＴＳＮＬＡＳ（配列番号９９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号１００）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１２３】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号１０２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号１０３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１０４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（配列番号９８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＴＳＮＬＡＳ（配列番号９９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号１００）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１２４】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号１０２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号１０３）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１０４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（配列番号９８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＴＳＮＬＡＳ（配列番号９９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号１００）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１２５】
３Ｅ０９
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＹＭＹ（配列番号１１０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＩＧＤＧＧＩＹＴＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１１１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＧＴＧＤＧＦＡＹ（配列番号１１２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号１０６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＬＥＳ（配列番号１０７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＹＴ（配列番号１０８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１２６】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＹＭＹ（配列番号１１０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＩＧＤＧＧＩＹＴＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１１１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＧＴＧＤＧＦＡＹ（配列番号１１２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号１０６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＬＥＳ（配列番号１０７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＹＴ（配列番号１０８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１２７】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＹＭＹ（配列番号１１０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＩＧＤＧＧＩＹＴＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１１１）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＧＴＧＤＧＦＡＹ（配列番号１１２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＬＥＳ（配列番号１０７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＹＴ（配列番号１０８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１２８】
２Ｂ１１
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＡＩＨ（配列番号１１８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＳＴＹＹＧＤＡＳＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号１１９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号１２０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号１１４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＲＡＳＮＬＥＳ（配列番号１１５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＹＴ（配列番号１１６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１２９】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＡＩＨ（配列番号１１８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＳＴＹＹＧＤＡＳＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号１１９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号１２０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号１１４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＲＡＳＮＬＥＳ（配列番号１１５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＹＴ（配列番号１１６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１３０】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＡＩＨ（配列番号１１８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＳＴＹＹＧＤＡＳＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号１１９）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号１２０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号１１４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＲＡＳＮＬＥＳ（配列番号１１５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＹＴ（配列番号１１６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１３１】
３ｂ０４＿ｖａｒ１
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１３２】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１３３】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１３４】
３ｂ０４＿ｖａｒ２
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１３５】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１３６】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１３７】
３ｂ０４＿ｖａｒ３
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１３８】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１３９】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１４０】
３ｂ０４＿ｖａｒ４
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１４１】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１４２】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１４３】
３ｂ０４＿ｖａｒ５
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１４４】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１４５】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１４６】
３ｂ０４＿ｖａｒ６
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１４７】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１４８】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１４９】
３ｂ０４＿ｖａｒ７
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１５０】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１５１】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１５２】
３ｂ０４＿ｖａｒ８
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１５３】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１５４】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１５５】
３ｂ０４＿ｖａｒ９
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１５６】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）に対して少なくとも９０％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１５７】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１５８】
３ｂ０４＿ｖａｒ１０
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１５９】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１６０】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１６１】
３ｂ０４＿ｖａｒ１１
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１６２】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１６３】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１６４】
３ｂ０４＿ｖａｒ１２
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１６５】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１６６】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１６７】
３ｂ０４＿ｖａｒ１３
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１６８】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１６９】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１７０】
３ｂ０４＿ｖａｒ１４
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１７１】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１７２】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１７３】
３ｂ０４＿ｖａｒ１５
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１７４】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１７５】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１７６】
３ｂ０４＿ｖａｒ１６
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１７７】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１７８】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１７９】
３ｄ１２＿ｖａｒ１
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１８０】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１８１】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１８２】
３ｄ１２重２、軽１ｖａｒ２
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１８３】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１８４】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１８５】
３ｄ１２重３、軽１、ｖａｒ３
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１８６】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１８７】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１８８】
３ｄ１２重４、軽１、ｖａｒ４
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１８９】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１９０】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１９１】
３ｄ１２、重１、軽２、ｖａｒ５
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１９２】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１９３】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１９４】
３ｄ１２重２、軽２、ｖａｒ６
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１９５】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１９６】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１９７】
３ｄ１２、重３、軽２、ｖａｒ７
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１９８】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０１９９】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２００】
３ｄ１２重４、軽２、ｖａｒ８
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２０１】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２０２】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２０３】
３ｄ１２、重１、軽３、ｖａｒ９
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２０４】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２０５】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２０６】
３ｄ１２重２、軽３ｖａｒ１０
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２０７】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２０８】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２０９】
３ｄ１２、重３、軽３、ｖａｒ１１
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２１０】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２１１】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２１２】
３ｄ１２重４、軽３、ｖａｒ１２
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２１３】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２１４】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２１５】
３ｄ１２、重１、軽４、ｖａｒ１３
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２１６】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２１７】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２１８】
３ｄ１２重２、軽４、ｖａｒ１４
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２１９】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２２０】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２２１】
３ｄ１２、重３、軽４、ｖａｒ１５
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２２２】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２２３】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２２４】
３ｄ１２重４、軽４、ｖａｒ１６
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２２５】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）に対して少なくとも９０％の同一性を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２２６】
一実施形態では、
アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体、その断片またはバリアントが提供される。
【０２２７】
重鎖および／または軽鎖可変領域
一実施形態では、本発明は、配列番号５、配列番号１３、配列番号２１、配列番号２９、配列番号３７、配列番号４５、配列番号５３、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５、配列番号９３、配列番号１０１、配列番号１０９、配列番号１１７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する重鎖可変領域、ならびに／または配列番号１、配列番号９、配列番号１７、配列番号２５、配列番号３３、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号６５、配列番号７３、配列番号８１、配列番号８９、配列番号９７、配列番号１０５、配列番号１１３からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む、抗原結合分子、特にＬＩＧＨＴに結合する抗体を提供する。
【０２２８】
一実施形態では、抗体は、ＬＩＧＨＴに結合し、配列番号５、配列番号４５、配列番号８５、配列番号９３、配列番号１０１、配列番号１０９、配列番号１１７からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および／または配列番号１、配列番号４１、配列番号８１、配列番号８９、配列番号９７、配列番号１０５、配列番号１１３から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【０２２９】
一実施形態では、抗原結合分子、例えば、抗体、そのバリアントまたは断片が提供され、抗原結合分子は、
（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号５および配列番号１と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｂ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４１のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号４５および配列番号４１と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｃ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号８１のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号８５および配列番号８１と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｄ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号９３および配列番号８９と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｄ）配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号１０１および配列番号９７と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｅ）配列番号１０９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号１０９および配列番号１０５と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｆ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号１１７および配列番号１１３と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｇ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号１３および配列番号９と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｈ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号２１および配列番号９と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号２９および配列番号９と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｊ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号３７および配列番号９と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｋ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号１３および配列番号１７と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｌ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号２１および配列番号１７と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｍ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号３７および配列番号１７と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｎ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２５のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号１３および配列番号２５と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｏ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２５のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号２１および配列番号２５と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｐ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２５のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号３７および配列番号２５と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｑ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２５のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号３７および配列番号２５と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｒ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号３３のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号１３および配列番号３３と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｓ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号３３のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号２１および配列番号３３と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｔ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号３３のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号２９および配列番号３３と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｕ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号３３のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号３７および配列番号３３と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｖ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号５３および配列番号４９と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｘ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号６１および配列番号４９と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｙ）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号６９および配列番号４９と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｚ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号７７および配列番号４９と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａａ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号５３および配列番号５７と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｂ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号６１および配列番号５７と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｃ）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号６９および配列番号５７と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｄ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号７７および配列番号５７と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｅ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号７７および配列番号５７と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｆ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号５３および配列番号６５と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｇ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号６１および配列番号６５と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｈ）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号６９および配列番号６５と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｉ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号７７および配列番号６５と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｊ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号５３および配列番号７３と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｋ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号６１および配列番号７３と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｌ）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号６９および配列番号７３と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ａｍ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号７７および配列番号７３と少なくとも９０％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、からなる群から選択される重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む。
【０２３０】
したがって、上で論じられるように、そのヒト化および親和性成熟バリアント、ならびに特定の配列（複数可）に対してより小さなまたは大きな同一性または相同性％、例えば、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性または相同性を有するバリアントを含む、バリアントも提供される。１つ以上のアミノ酸置換を有するバリアントも提供される。
【０２３１】
抗原結合分子をコードする核酸配列
本発明の一態様では、その断片およびバリアントを含む、本発明の抗原結合分子をコードする核酸配列が提供される。
【０２３２】
一実施形態では、配列番号５、配列番号１３、配列番号２１、配列番号２９、配列番号３７、配列番号４５、配列番号５３、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５、配列番号９３、配列番号１０１、配列番号１０９、および配列番号１１７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する重鎖可変領域、ならびに／または配列番号１、配列番号９、配列番号１７、配列番号２５、配列番号３３、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号６５、配列番号７３、配列番号８１、配列番号８９、配列番号９７、配列番号１０５、および配列番号１１３からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む、ＬＩＧＨＴに結合する抗原結合分子をコードする核酸分子が提供される。
【０２３３】
一実施形態では、配列番号５、配列番号１３、配列番号２１、配列番号２９、配列番号３７、配列番号４５、配列番号５３、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５、配列番号９３、配列番号１０１、配列番号１０９、および配列番号１１７からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、ならびに／または配列番号１、配列番号９、配列番号１７、配列番号２５、配列番号３３、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号６５、配列番号７３、配列番号８１、配列番号８９、配列番号９７、配列番号１０５、および配列番号１１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、ＬＩＧＨＴに結合する抗体をコードする核酸分子が提供される。
【０２３４】
本発明はまた、以下のＣＤＲＨおよびＣＤＲＬ配列を有する抗ｌｉｇｈｔ抗原結合分子を提供する：
2020505465.tif 000008
式中、Ｘ１〜Ｘ８の各々は、任意のアミノ酸、好ましくは任意の自然発生アミノ酸である。好ましい実施形態では、Ｘ１〜Ｘ８の各々は、Ｇ、Ｒ、Ｄ、Ｅ、Ｙ、Ｓ、Ｍ、Ｉ、Ａ、Ｎ、Ｋ、およびＱからなる群から選択される。より好ましい実施形態では：
Ｘ１は、ＧもしくはＲまたはその保存的アミノ酸置換であり、
Ｘ２は、ＤもしくはＥまたはその保存的アミノ酸置換であり、
Ｘ３は、ＹもしくはＳまたはその保存的アミノ酸置換であり、
Ｘ４は、ＭもしくはＩまたはその保存的アミノ酸置換であり、
Ｘ６は、ＤもしくはＧまたはその保存的アミノ酸置換であり、
Ｘ７は、Ｓ、Ａ、もしくはＮまたはその保存的アミノ酸置換であり、
Ｘ８は、ＫもしくはＱまたはその保存的アミノ酸置換である。
【０２３５】
配列番号１〜１２０のいずれか１つによるアミノ酸配列をコードする核酸分子も提供される
【０２３６】
本発明の抗原結合分子をコードする核酸配列を含むプラスミドおよびベクターも提供される。核酸は、特に真核発現系において、より具体的には哺乳動物細胞株において、発現のためにプラスミドまたはベクターに組み込まれ得る。したがって、ＮＳ０マウス骨髄腫細胞またはＣＨＯ細胞など、本発明のプラスミドまたはベクターでトランスフェクトされた宿主細胞も提供される。
【０２３７】
細胞内部でプラスミドまたはベクターのコード核酸配列を発現するための条件下で細胞培養培地において本発明の宿主細胞を培養することを含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子上での産生のための方法も提供される。方法は、細胞培養上清から抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子を得ることをさらに含み得る。さらに、その細胞を本発明のプラスミドまたはベクターでトランスフェクトすることを含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子を発現する細胞を産生する方法が提供される。その細胞は次いで、抗原結合分子の産生のために培養することができる。
【０２３８】
抗原
本発明の抗原結合分子は、ＬＩＧＨＴ、特にヒトＬＩＧＨＴ、またはｈＬＩＧＨＴに特異的に結合する。最も好ましくは、本発明の抗原結合分子は、膜結合ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する。
【０２３９】
本発明の抗原結合分子は、一般的には、マウスＬＩＧＨＴに結合しない。
【０２４０】
ＬＩＧＨＴは、腫瘍壊死因子スーパーファミリーメンバー１４（ＴＮＦＳＦ１４）、ＬＴｇ、ＣＤ２５８、およびＨＶＥＭＬとしても知られている。これはヘルペスウイルス侵入メディエーター（ＨＶＥＭまたはＴＮＦＲＳＦ１４）、ならびにＬＴβＲおよびデコイ受容体３によって認識される。本発明の抗原結合分子のいくつかは、したがって、ＬＩＧＨＴと、例えば、ＨＶＥＭおよびＬＴβＲとの間の相互作用を破壊することができる。本発明の抗原結合分子はまた、ＬＩＧＨＴ、特に膜ＬＩＧＨＴのデコイ受容体３への結合を部分的に阻害し得る。
【０２４１】
ＬＩＧＨＴタンパク質は、リンパ性細胞の活性化のための共刺激因子として、およびヘルペスウイルスによる感染への抑止として機能し得る。このタンパク質は、Ｔ細胞の増殖を刺激および様々な腫瘍細胞のアポトーシスを誘導することが示されている。このタンパク質は、初代肝細胞における腫瘍壊死因子アルファ媒介アポトーシスを防止することも報告される。
【０２４２】
異なるアイソフォームをコードする少なくとも２つの選択的スプライス転写バリアントが報告されている：２０４アミノ酸スプライスバリアント（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿１７２０１４．３／ＸＭ＿００５２５９６７０）および２４０アミノ酸スプライスバリアント（ＮＣＢＩ参照配列ＮＭ＿００３８０７．４）。２４０アミノ酸スプライスバリアントは、両方を認識し得るが、本発明の結合分子の抗原として好ましい。
【０２４３】
Ｅ２１４ＫおよびＳ３２Ｌを含む、ＬＩＧＨＴの多型バリアントも知られている。本発明の抗原結合分子は、一方または両方のバリアントに、ならびにＬＩＧＨＴの２１４Ｅおよび３２Ｓバリアントに結合し得る。
【０２４４】
本発明の抗原結合分子が結合する３つのヒトＬＩＧＨＴバリアントのアミノ酸配列を以下に提供する。
ヒトＬＩＧＨＴ−２１４Ｅ
アミノ酸配列（配列番号１２１）
2020505465.tif 000009
ヒトＬＩＧＨＴ−２１４Ｋ
アミノ酸配列（配列番号１２２）
2020505465.tif 000010
ヒトＬＩＧＨＴ−３２Ｌ（配列番号１２３）
2020505465.tif 000011
【０２４５】
インビボＬＩＧＨＴタンパク質は膜結合（すなわち、全長ＬＩＧＨＴ）であり得、またはこれは可溶性であり得る。本発明者らは、驚くべきことに、本発明の抗原結合分子が膜ＬＩＧＨＴ（すなわち、全長ＬＩＧＨＴ）に対して可溶性ＬＩＧＨＴよりも大きな親和性で結合することを見出した。抗原結合分子は、したがって、膜ＬＩＧＨＴを発現する細胞を認識し、標的とすることができる。
【０２４６】
膜ＬＩＧＨＴは、膜結合ＬＩＧＨＴタンパク質を指す。特に、本発明の抗原結合分子（特に３Ｂ０４および３Ｄ１２ならびにその抗体断片およびバリアント）は、膜ＬＩＧＨＴと比較して、可溶性ＬＩＧＨＴ（例えば、全長ＬＩＧＨＴのアミノ酸残基７４〜２４０および／または６４〜２４０）に対して１０倍未満、５０倍未満、または１００倍未満の交差反応性を有する。可溶性ＬＩＧＨＴは抗炎症効果を有すると考えられ、膜ＬＩＧＨＴはインビボで炎症誘発効果を有すると考えられるので、膜ＬＩＧＨＴ対可溶性ＬＩＧＨＴのこの相対的結合親和性は有意である。したがって、本発明の抗原結合分子は、潜在的な抗炎症剤として特に有用である。例えば、交差反応性または結合選好性の差は、ＨｅＬａ−ＮＦ−ｋＢレポーター細胞を用いるＮＦ−ｋＢルシフェラーゼレポーターアッセイにおいて本発明の抗原結合分子の５００ｐｇ／ｍｌの可溶性ＬＩＧＨＴへの結合を決定することによって測定することができる。より具体的には、アッセイは、５００ｐｇ／ｍｌの可溶性ＬＩＧＨＴを最大１ｕｇ／ｍｌの試験抗原結合分子と２０分間４℃でインキュベートし、その後１００μｌのＬＩＧＨＴ／抗体溶液の細胞との３７℃で２４時間のインキュベーションを行うステップを含み得る。
【０２４７】
膜ＬＩＧＨＴに結合する本発明の抗原結合分子は、したがって、ＬＩＧＨＴを発現する細胞にも結合するであろう。したがって、本発明は、式ＴＭ−Ｌｎ−ＡＭを有する結合分子も提供し、式中、ＴＭは標的化部分であり、本発明の抗原結合分子であり、Ｌはリンカーであり、ｎは０〜１の数字であり（よって、リンカーは存在してもしなくてもよい）、ＡＭは活性部分である。本発明の抗原結合分子は、活性部分を膜ＬＩＧＨＴを発現する細胞に標的化するのに使用することができる。適切なリンカーはヒドラジン基、ポリペプチド、ジスルフィド基、およびチオエーテル基を含み、リンカーは酵素作用によって切断可能であり得る。適切な活性部分は、抗炎症剤、免疫抑制剤、または本発明の抗原結合分子との組み合わせでの使用に適しているかもしくは望ましい他のそのような成分など、薬学的活性成分を含む。適切なそのような薬剤は他の場所でも論じられる。
【０２４８】
一実施形態では、本発明の抗原結合分子は、約５ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する。好ましい実施形態では、本発明の抗原結合分子は、約１ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する。より好ましい実施形態では、本発明の抗原結合分子は、約０．５ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する。ＫＤという用語は、当業者に周知であり、抗体と抗原との間の結合相互作用の強度を測定する平衡解離定数を指す。ＫＤは任意の適切な手段に従って測定することができる。例えば、適切なアッセイは、ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞を試験抗原結合分子と最大７０μｇ／ｍＬの濃度で３０〜４０分間４℃でインキュベートすることを含むフローサイトメトリーアッセイであり得る。
【０２４９】
本発明のいくつかの実施形態では、本発明の抗原結合分子は、約１ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する。より好ましい実施形態では、本発明の抗原結合分子は、約５ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する。より好ましい実施形態では、本発明の抗原結合分子は、約１０ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する。
【０２５０】
本発明の特定の実施形態では、抗原結合分子は、約１ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値および約１ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する。好ましい実施形態では、抗原結合分子は、約１ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値および約５ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する。最も好ましい実施形態では、抗原結合分子は、約０．５ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値および約１０ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値、または約０．１ｎＭの膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値および約１０ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する。
【０２５１】
本発明のいくつかの実施形態では、本発明者らは、抗原結合分子がＩＬ−８の分泌を減少させることを発見した。本発明のさらなる実施形態では、ＤｃＲ３（デコイ受容体３）のＬＩＧＨＴ、特に膜ｌｉｇｈｔへの結合は、本発明の抗原結合分子によって部分的に阻害される。特に、従来技術のいくつかの抗体（例えば、Ｆ１９）とは異なり、本発明の抗原結合分子は、ＬＩＧＨＴへのＤｃＲ３結合の完全な阻害を示さない。例えば、本発明の抗原結合分子は、ＤｃＲ３へのＬＩＧＨＴ（またはＤｃＲ３へのＬＩＧＨＴを発現する細胞）の結合を、例えば、ＤｃＲ３−Ｆｃを含む抗膜ＬＩＧＨＴ抗体の競合結合アッセイを用いて測定されるように、最大約６０％、または最大約４０％阻害する。そのような競合結合アッセイは、次のとおりであり得る：ＩｇＧ１のＦｃ部分と複合されたＤｃＲ３と最大１２８μｇ／ｍｌの濃度で４０分間４℃でコインキュベートされたＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞のフローサイトメトリー分析を使用して、対照としてのＦ１９抗体と比較して測定される、ＤｃＲ３へのＬＩＧＨＴ結合の阻害パーセント。
【０２５２】
あるいは、本発明の抗原結合分子は、ＤｃＲ３へのＬＩＧＨＴ（またはＤｃＲ３へのＬＩＧＨＴを発現する細胞）の結合を、Ｈｉｓタグ付きＤｃＲ３（ＤｃＲ３−Ｈｉｓ）を含む抗膜ＬＩＧＨＴ抗体の競合結合アッセイを用いて測定されるように、最大約４５％、または最大約３５％阻害する。そのような競合結合アッセイは、次のとおりであり得る：試験抗原結合分子と最大１００ｎＭの濃度で１５分間４℃でプレインキュベート、続いて１ｎＭのヒスチジンタグ付きＤｃＲ３と３０分間４℃でインキュベートされたＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞のフローサイトメトリー分析を使用して、対照としての抗鶏卵リゾチーム（ＨＥＬ）抗体と比較して測定される、ＤｃＲ３へのＬＩＧＨＴ結合の阻害パーセント。
【０２５３】
本発明者らは、本発明の抗原結合分子が膜ＬＩＧＨＴ発現細胞のＨＶＥＭおよび／またはＬＴβＲへの結合を阻害することも見出した。いくつかの実施形態では、本発明の抗原結合分子は、結合を少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、または好ましくは少なくとも約７５％阻害する。いくつかの実施形態では、結合は完全に阻害される。ＨＶＥＭへの結合の阻害についてのＩＣ５０は、例えば、ＥＬ４細胞において測定されるように、約５０ｎＭ未満、または約３０ｍＭ未満、または約０．１ｎＭ〜約３０ｎＭ、または約０．１ｎＭ〜５ｎＭであり得る。ＬＴβＲへの結合の阻害についてのＩＣ５０は、例えば、ＥＬ４細胞において測定されるように、約５０ｎＭ未満、または約０．１〜約４０ｎＭであり得る。ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞を用いてＩＣ５０を測定するのに適したアッセイは、次のとおりであり得る：対照としての抗ＨＥＬ−ｍＡｂと比較して、最大３００ｎＭの５０μｌの試験抗原結合分子を、ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞と３０分間４℃で、続いて５０μｌの標識試験リガンド（ＨＶＥＭまたはＬＴＢＲ）と、例えば、ＬＩＧＨＴへの試験リガンド結合のＥＣ５０の２倍の濃度で、９０分間４℃でインキュベートする。
【０２５４】
ＩＬ−８分泌の阻害のＩＣ５０は、例えば、ＥＬ４−ＮＣ−ＬＩＧＨＴ細胞において発現した膜ＬＩＧＨＴによって刺激されるＨＴ−２９細胞からのＩＬ−８分泌の阻害において測定されるように、約５０ｎＭ未満、または約０．０５ｎＭ〜約２．５ｎＭであり得る。例えば、適切なアッセイは、対照としてのＨＴ２９細胞単独と比較して、最大１００ｎＭ試験抗原結合分子のＥＬ４−ＮＣ−ＬＩＧＨＴ細胞との１５分間３７℃でのインキュベーション、続いてＨＴ−２９細胞との２時間３７℃および５％ＣＯ２でのインキュベーションであり得る。
【０２５５】
一態様では、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供され、抗原結合分子は、ＬＩＧＨＴへの結合について上記で定義される本発明の抗原結合分子と競合する。
【０２５６】
例えば、一実施形態では、本発明は、抗原結合分子（好ましくは抗体）を提供し、抗原結合分子は、ＬＩＧＨＴ、特に膜ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、（膜）ＬＩＧＨＴへの結合について２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体と競合する。膜ＬＩＧＨＴへの結合についてその断片およびバリアントと競合する抗原結合分子も提供される（例えば、上記抗体の６つのＣＤＲ領域またはＶＨおよびＶＬ配列、ならびに他のバリアントを含む抗原結合分子）。
【０２５７】
試験抗原結合分子が本発明の抗体によって結合したエピトープと同じエピトープとの結合について競合することができるかを決定するために、クロスブロッキングアッセイ、例えば、競合ＥＬＩＳＡアッセイを行うことができる。例示的な競合ＥＬＩＳＡアッセイでは、マイクロタイタープレートのＬＩＧＨＴ被覆ウェル、またはＬＩＧＨＴ被覆セファロースビーズが候補競合抗体ありまたはなしでプレインキュベートされ、次いで本発明のビオチン標識抗ＬＩＧＨＴ抗体が添加される。ウェルにおいてまたはビーズ上でＬＩＧＨＴ抗原に結合した標識抗ＬＩＧＨＴ抗体の量は、アビジンペルオキシダーゼ複合体および適切な基質を用いて測定することができる。
【０２５８】
あるいは、抗ＬＩＧＨＴ抗体は、例えば、放射性もしくは蛍光標識またはいくつかの他の検出可能かつ測定可能な標識で標識することができる。抗原に結合する標識抗ＬＩＧＨＴ抗体の量は、抗原上の同じエピトープへの結合について競合する候補競合抗体（試験抗原結合分子）の能力との逆相関を有し、すなわち、同じエピトープに対する試験抗原結合分子の親和性が大きいほど、抗原被覆ウェルに結合する標識抗ＬＩＧＨＴ抗体は少ないであろう。
【０２５９】
候補競合抗体が、候補競合抗体の不在下で並行して行われる（が既知の非競合抗体の存在下であり得る）対照と比較して、抗ＬＩＧＨＴ抗体の結合を少なくとも２０％、好ましくは少なくとも２０〜５０％、さらにより好ましくは、少なくとも５０％ブロックすることができる場合、候補競合抗体は、本発明の抗ＬＩＧＨＴ抗体と同じエピトープに実質的に結合するか、または同じエピトープへの結合について競合する抗体であると考えられる。このアッセイの変形を行って同じ定量値に到達することができることが理解されるであろう。
【０２６０】
本発明の一実施形態では、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子、例えば、抗体、その断片またはバリアントが提供され、抗原結合分子は、ＬＩＧＨＴへの結合について上記で定義される本発明の抗原結合分子と競合し、競合抗体は、競合ＥＬＩＳＡアッセイにおいて測定されるように、本発明の抗ＬＩＧＨＴ抗体の結合を少なくとも５０％ブロックすることができる。
【０２６１】
膜ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、本発明の抗原結合分子への膜ＬＩＧＨＴの結合を阻害する抗原結合分子も提供される。
【０２６２】
例えば、一実施形態では、抗原結合分子（好ましくは抗体）は、膜ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体への膜ＬＩＧＨＴの結合を阻害する。膜ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、その断片およびバリアントへの膜ＬＩＧＨＴへの結合を阻害する抗原結合分子も提供される（例えば、上記抗体の６つのＣＤＲ領域またはＶＨおよびＶＬ配列、ならびに他のバリアントを含む抗原結合分子）。
【０２６３】
本発明の抗原結合分子によって結合したＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子も提供される。
【０２６４】
例えば、一実施形態では、本発明は、抗原結合分子（好ましくは抗体）を提供し、抗原結合分子は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体によって結合したＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する。その断片およびバリアントによって結合したＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子も提供される（例えば、上記抗体の６つのＣＤＲ領域またはＶＨおよびＶＬ配列、ならびに他のバリアントを含む抗原結合分子）。
【０２６５】
一態様では、ＤｃＲ３結合領域とは異なるＬＩＧＨＴのエピトープ（すなわち、ヒトＬＩＧＨＴのアミノ酸１７０〜１７８）に特異的に結合する抗原結合分子も提供される。
【０２６６】
例えば、一実施形態では、本発明は、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子を提供し、エピトープは、アミノ酸ストレッチＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）に含まれる１つ以上のアミノ酸残基を含む。一実施形態では、本発明は、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子を提供し、エピトープは、アミノ酸配列ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含む。エピトープＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷは、ＬＩＧＨＴの膜形態（すなわち、そのトリマー形態のＬＩＧＨＴ）に優先的に結合する抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子に対して特定の関連性を有し得る。エピトープは、当該技術分野において知られる任意の適切な方法、例えば、アラニンスキャニング方法によって決定され得る。
【０２６７】
一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、エピトープは、配列番号１２１、１２２、または１２３（ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ）のアミノ酸１８８〜１９７のアミノ酸ストレッチに含まれる１つ以上のアミノ酸残基を含む。
【０２６８】
一実施形態では、本発明は、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子を提供し、エピトープは、アミノ酸ストレッチＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）に含まれる１つ以上のアミノ酸残基を含み、抗原結合分子は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６、またはその断片もしくはバリアントから選択される。
【０２６９】
一実施形態では、本発明は、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子を提供し、エピトープは、アミノ酸ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含み、抗原結合分子は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６、またはその断片もしくはバリアントから選択される。
【０２７０】
一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子によって結合したエピトープは、ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含み、抗原結合分子は、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、またはそのバリアントもしくは断片である。一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子によって結合したエピトープは、ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含み、抗原結合分子は、３Ｂ０４、またはそのバリアントもしくは断片である。一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子によって結合したエピトープは、ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含み、抗原結合分子は、３Ｄ１２、またはそのバリアントもしくは断片である。
【０２７１】
１つのネイティブＬＩＧＨＴトリマーに結合した３つの抗体の比（抗体分子対ＬＩＧＨＴトリマーの３：１比）でネイティブトリマーＬＩＧＨＴに結合し得るＬＩＧＨＴに対する既知の抗体と対照的に、本発明の抗原結合分子は、１：１の結合比を有し、すなわち、本発明の１つの抗原結合分子は、１つのネイティブＬＩＧＨＴトリマーに結合する。一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子のヒトＬＩＧＨＴトリマーへの結合の比は、１：１である。
【０２７２】
一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子は、ヒトＬＩＧＨＴのトリマーに１：１の比で結合し、抗原結合分子は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６、またはその断片もしくはバリアントから選択される。
【０２７３】
一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子は、ヒトＬＩＧＨＴのトリマーに１：１の比で結合し、抗原結合分子は、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、またはそのバリアントもしくは断片である。一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子は、ヒトＬＩＧＨＴのトリマーに１：１の比で結合し、抗原結合分子は、３Ｂ０４、またはそのバリアントもしくは断片である。一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子は、ヒトＬＩＧＨＴのトリマーに１：１の比で結合し、抗原結合分子は、３Ｄ１２、またはそのバリアントもしくは断片である。
【０２７４】
一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子は、ヒトＬＩＧＨＴのトリマーに１：１の比で結合し、抗原結合分子によって結合したエピトープは、ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含む。
【０２７５】
一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子は、可溶性ＬＩＧＨＴと比較して膜結合ＬＩＧＨＴに対してより高い親和性（例えば、膜ＬＩＧＨＴに対して少なくとも５０倍優先）を有し、抗原結合分子によって結合したエピトープは、ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含む。
【０２７６】
一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、抗原結合分子は、ヒトＬＩＧＨＴのトリマーに１：１の比で結合し、抗原結合分子は、可溶性ＬＩＧＨＴと比較して膜結合ＬＩＧＨＴに対してより高い親和性（例えば、膜ＬＩＧＨＴに対して少なくとも５０倍優先）を有する。
【０２７７】
一実施形態では、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子が提供され、
抗原結合分子は、ヒトＬＩＧＨＴのトリマーに１：１の比（例えば、膜ＬＩＧＨＴに対して少なくとも５０倍優先）で結合し、
抗原結合分子は、可溶性ＬＩＧＨＴと比較して膜結合ＬＩＧＨＴに対してより高い親和性を有し、
抗原結合分子によって結合したエピトープは、ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含む。
【０２７８】
組成物
本発明の一態様では、本発明の抗原結合分子を含む薬学的組成物が提供される。
【０２７９】
本発明の組成物は、任意の便利な経路による使用のために製剤化することができる。本発明の薬学的組成物は通常、本発明の抗原結合分子に加えて、薬学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤、補助剤、ビヒクル、バッファー、または安定剤を含むであろう。そのような担体は、これらに限定されないが、生理食塩水、緩衝食塩水、デキストロース、リポソーム、水、グリセロール、ポリエチレングリコール、エタノール、およびこれらの組み合わせを含む。
【０２８０】
薬学的組成物は、それを患者に投与する所望の方法に応じて、任意の適切な形態であり得る。
【０２８１】
本発明の薬学的組成物は、用量あたり所定量の各活性成分を含有する単位剤形で提供され得る。そのような単位は、５〜１００ｍｇ／日の化合物、好ましくは５〜１５ｍｇ／日、１０〜３０ｍｇ／日、２５〜５０ｍｇ／日、４０〜８０ｍｇ／日、または６０〜１００ｍｇ／日を提供するように適合され得る。式Ｉの化合物について、１００〜１０００ｍｇ／日、好ましくは１００〜４００ｍｇ／日、３００〜６００ｍｇ／日、または５００〜１０００ｍｇ／日のいずれかの範囲内の用量が提供される。そのような用量は、単一用量でまたは多数の個別用量として提供されることができる。最終的な用量は、もちろん治療される状態、投与経路、ならびに患者の年齢、体重、および状態に依存し、医師の裁量によるであろう。
【０２８２】
本発明の薬学的組成物は、任意の適切な経路による、例えば、経口（口腔内または舌下を含む）、直腸、鼻腔、局所（口腔内、舌下、または経皮）、膣内、または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、または皮内を含む）経路による投与に適合され得る。ＩＶ投与が好ましい場合がある。そのような製剤は、薬学の技術分野において知られている任意の方法によって、例えば、活性成分を担体（複数可）または賦形剤（複数可）と会合させることによって調製され得る。
【０２８３】
経口投与に適合した薬学的製剤は、カプセルもしくは錠剤、粉末もしくは顆粒、水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液、食用フォームもしくはホイップ、または水中油液体乳濁液もしくは油中水液体乳濁液などの個別の単位として提供され得る。
【０２８４】
経皮投与に適合した薬学的製剤は、長時間レシピエントの表皮と緊密に接触したままであることが意図された個別のパッチとして提供され得る。例えば、活性成分は、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，３（６），３１８（１９８６）に一般的に記載されるように、イオントフォレシスによりパッチから送達され得る。
【０２８５】
局所投与に適合した薬学的製剤は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾル、または油として製剤化され得る。
【０２８６】
目または他の外部組織、例えば、口および皮膚への適用について、製剤は、好ましくは局所軟膏またはクリームとして適用される。軟膏に製剤化される場合、活性成分は、パラフィン系または水混和性軟膏ベースのいずれかと使用され得る。あるいは、活性成分は、水中油クリームベースまたは油中水ベースとクリームに製剤化され得る。
【０２８７】
目への局所投与に適合した薬学的製剤は、活性成分が適切な担体、特に水性溶媒に溶解または懸濁した点眼剤を含む。
【０２８８】
口内での局所投与に適合した薬学的製剤は、ロゼンジ、パスティル、および洗口剤を含む。
【０２８９】
直腸投与に適合した薬学的製剤は、坐剤または浣腸剤として提供され得る。
【０２９０】
担体が固体である鼻腔投与に適合した薬学的製剤は、嗅ぎタバコを摂取する様式で、すなわち、鼻のすぐ近くに保持される粉末の容器から鼻腔を通した急速吸入によって投与される、例えば、２０〜５００ミクロンの範囲内の粒径を有する粗粉末を含む。鼻腔スプレーまたは点鼻剤としての投与のための、担体が液体である適切な製剤は、活性成分の水性または油性溶液を含む。
【０２９１】
吸入による投与に適合した薬学的製剤は、様々なタイプの定量加圧エアロゾル、ネブライザー、または吸入器の手段によって生成され得る微粒子ダストまたはミストを含む。
【０２９２】
膣内投与に適合した薬学的製剤は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、またはスプレー製剤として提供され得る。
【０２９３】
非経口投与に適合した薬学的製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、および製剤を意図されるレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る水性および非水性滅菌注射溶液、ならびに懸濁化剤および増粘剤を含み得る水性および非水性滅菌懸濁液を含む。製剤は、単位用量または複数用量容器、例えば、封止アンプルおよびバイアルで提供され得、使用直前の、滅菌液体担体、例えば、注射用の水の添加のみを必要とする凍結乾燥条件で保存され得る。即席注射溶液および懸濁液は、滅菌粉末、顆粒、および錠剤から調製され得る。
【０２９４】
本発明の薬学的組成物は、本発明の分子に加えて、１つ以上の他の治療活性薬剤も含有することができる。
【０２９５】
いくつかの実施形態では、活性薬物濃縮物の製剤は、薬学的に許容される等張化剤、緩衝剤、および薬学的に許容される界面活性剤を含むことができる。
【０２９６】
あるいは、製剤は、活性成分と一塩基リン酸ナトリウム、二塩基リン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ポリソルベート８０、またはポリソルベート２０（撹拌誘導性凝集のリスクを最小限にするための界面活性剤）、および水（ＵＳＰ／Ｐｈ．Ｅｕｒ）とを含み得、任意で約６．０〜７．０、例えば、約６．５に調節されたｐＨを有する。
【０２９７】
好ましい単位投与剤形は、本明細書において上記に列挙される一日用量もしくは部分用量、またはその適切な画分の活性成分を含有するものである。
【０２９８】
上記で特に言及された成分に加えて、製剤は問題の製剤のタイプを考慮して当該技術分野で慣用の他の薬剤も含み得、例えば、経口投与に適したものは着香剤を含み得ることが理解されるべきである。
【０２９９】
治療の方法
本発明の抗原結合分子は、ＬＩＧＨＴ媒介障害または疾患、特に炎症障害または疾患の予防および／または治療に有用である。したがって、本発明のこの態様は、対象に本発明の抗原結合分子を投与することを含む、対象におけるＬＩＧＨＴ媒介障害または疾患（例えば、炎症障害または疾患）の治療のための方法も含む。したがって、本発明は、ＬＩＧＨＴ媒介障害または疾患（例えば、炎症障害または疾患）の治療および／または予防における使用のための医薬品の製造における本発明の抗原結合分子の使用、ならびにそのような状態の予防および／または治療における本発明の抗原結合分子の使用にも及ぶ。
【０３００】
治療の方法はヒトまたは動物対象のものであり得、本発明はヒトおよび／または獣医学の両方における使用に等しく及ぶ。本発明の抗原結合分子は好ましくは、個体に「治療有効量」で投与され、これは個体への利益を示すのに十分である。本明細書で使用されるとき、「治療」とは、ヒトまたは非ヒト動物、好ましくは哺乳動物に利益をもたらすことができる任意のレジームを含む。治療は既存の状態に関するものであり得るか、または予防的（予防的治療）であり得る。
【０３０１】
一実施形態では、本発明の抗原結合分子は、炎症、自己免疫疾患を含む炎症障害における使用のためのものである。好ましい実施形態では、本発明の抗原結合分子は、炎症性腸疾患の治療における使用のためのものである。本明細書で使用されるとき、「炎症性腸疾患」（ＩＢＤ）は、結腸および小腸の炎症状態に関する。これらには、強直性脊椎炎、アトピー性皮膚炎、セリアック病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、関節リウマチ、乾癬、細気管支炎、歯肉炎、移植拒絶反応、同種移植片拒絶反応、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）、喘息、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性心不全、慢性閉塞性肺疾患、腎臓病、敗血症性ショック、潰瘍性大腸炎、線維症（すなわち、線維性疾患）、多発性硬化症、シェーグレン症候群、狼瘡、気道炎症、肝臓病、肝炎、セリアック病、皮膚炎、好酸球増多症、および原発性胆汁性胆管炎が含まれる。特に関心があることは、潰瘍性大腸炎およびクローン病などの炎症性腸疾患の治療である。
【０３０２】
治療される状態に応じて、本発明の抗原結合分子は、同時、別々、または連続の使用のために他の薬学的に許容される成分と組み合わせて使用され得る。例えば、炎症疾患または障害を治療する場合、本発明の抗原結合分子は、抗炎症剤と組み合わせて使用され得る。適切な抗炎症剤は、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）およびステロイドを含む。これらに限定されないが、サリチレート（アスピリン（アセチルサリチル酸）、ジフニサル、サリチル酸、サルサレートなど）、プロピオン酸誘導体（イブプロフェン、デキシブプロフェン、ナプロキセン）、酢酸誘導体（インドメタシン、ジクロフェナク）、エノール酸誘導体、アントラニル酸誘導体（フェナメート）、選択的ＣＯＸ−２阻害剤、およびスルホンアニリドを含む、ＮＳＡＩＤが好ましい場合がある。
【０３０３】
免疫媒介障害または疾患を治療する場合、免疫抑制剤、例えば、グルココルチコイド、細胞増殖抑制剤（例えば、アルキル化剤、代謝拮抗剤、メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリン、または細胞傷害性抗生物質）が使用され得る。ＧｖＨＤに対して特定の関連性があるものは、グルココルチコイド、例えば、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、およびアルドステロンである。
【０３０４】
本発明の抗原結合分子との組み合わせでの使用にとって望ましいさらなる追加の成分は、ＴＮＦ阻害剤、ＩＬ−１２阻害剤、ＩＬ−２３阻害剤、およびα４β７インテグリン阻害剤を含む。阻害剤は、それ自体が、抗体および好ましくはモノクローナル抗体などの抗原結合分子であり得る。
【０３０５】
適切なＴＮＦ阻害剤は、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ）、セルトリズマブペゴル（Ｃｉｍｚｉａ）、およびゴリムマブ（Ｓｉｍｐｏｎｉ）を含む。適切なＩＬ−１２およびＩＬ−２３阻害剤は、両方の阻害剤であるウステキヌマブ（Ｓｔｅｌａｒａ）を含む。適切なα４β７インテグリン阻害剤は、ベドリズマブ（Ｅｎｔｙｖｉｏ）を含む。
【０３０６】
本発明の薬学的組成物は、上記に挙げられるものなどの１つ以上の追加の薬学的活性成分を含むように製剤化され得る。本発明の抗原結合分子は、キットの一部として提供され得る。そのようなキットは、使用説明書および／または追加の薬学的活性成分を含み得る。抗原結合分子および追加の薬学的活性成分は、キット内に別々に配置され得るか、またはいくつかの実施形態では、抗原結合分子および追加の薬学的活性成分は共に製剤化され得る。
【０３０７】
本発明の一実施形態では、ＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗体、特にモノクローナル抗体が提供される。抗体は、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される。抗体は、ＩＢＤを含む、炎症疾患の治療における使用のものである。
【０３０８】
一実施形態では、本発明は、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子を提供し、抗原結合分子は、強直性脊椎炎、アトピー性皮膚炎、セリアック病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、関節リウマチ、乾癬、細気管支炎、歯肉炎、移植拒絶反応、同種移植片拒絶反応、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）、喘息、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性心不全、慢性閉塞性肺疾患、腎臓病、敗血症性ショック、潰瘍性大腸炎、線維症（すなわち、線維性疾患）、多発性硬化症、シェーグレン症候群、狼瘡、気道炎症、肝臓病、肝炎、セリアック病、皮膚炎、好酸球増多症、および原発性胆汁性胆管炎の治療における使用のための、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６、またはその断片もしくはバリアントから選択される。
【０３０９】
一実施形態では、本発明は、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子を提供し、抗原結合分子は、炎症性腸疾患の治療における使用のための、３Ｂ０４、３Ｄ１２、および３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、またはその断片もしくはバリアントから選択される。一実施形態では、抗原結合分子は、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６である。
【０３１０】
一実施形態では、本発明は、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子を提供し、抗原結合分子は、クローン病の治療における使用のための、３Ｂ０４、３Ｄ１２、および３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、またはその断片もしくはバリアントから選択される。一実施形態では、抗原結合分子は、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６である。
【０３１１】
一実施形態では、本発明は、ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子を提供し、抗原結合分子は、潰瘍性大腸炎の治療における使用のための、３Ｂ０４、３Ｄ１２、および３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、またはその断片もしくはバリアントから選択される。一実施形態では、抗原結合分子は、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６である。
【０３１２】
したがって、本発明のこの態様は、対象への本発明の抗原結合分子の投与を含む、炎症性腸障害の治療の方法にも及ぶ。一実施形態では、炎症性腸疾患は、クローン病であり得る。一実施形態では、炎症性腸疾患は、潰瘍性大腸炎であり得る。代替実施形態では、本発明は、炎症性腸障害の治療のための医薬品の調製における本発明の抗原結合分子の使用を提供するものと見られ得る。一実施形態では、炎症性腸疾患は、クローン病であり得る。一実施形態では、炎症性腸疾患は、潰瘍性大腸炎であり得る。
【０３１３】
本発明をここで、例証目的で提示され、本発明の範囲を限定するものと解釈されるものではない、多数の具体的な例を参照しながらさらに説明する。
【実施例】
【０３１４】
抗原調製、免疫化手順、ＲＮＡ抽出、およびＦａｂ生成
下記の例は、抗ヒト膜ＬＩＧＨＴ  Ｆａｂのパネルの生成および同定についての詳細な説明を提供する。免疫寛容化プロトコルを使用して、ヒト可溶性組み換えヒトＬＩＧＨＴ（アミノ酸７４〜２４０）、シクロホスファミド、およびＬＩＧＨＴを発現する組み換え細胞株の連続注射を含んだ改変された免疫化手順を用いて抗ヒト膜ＬＩＧＨＴ  Ｆａｂを生成した。このプロトコルは、膜ＬＩＧＨＴエピトープに対する反応性を有するクローンを効果的に増殖した。使用される方法は、Ｓａｌａｔａ  ＲＡ  ｅｔ  ａｌ．（Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎ  ｉｍｍｕｎｅ−ｔｏｌｅｒｉｚｉｎｇ  ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ  ｔｏ  ｇｅｎｅｒａｔｅ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｔｏ  ａｎ  ａｌｔｅｒｎａｔｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｓｏｆｏｒｍ  ｏｆ  ｂｏｖｉｎｅ  ｇｒｏｗｔｈ  ｈｏｒｍｏｎｅ．Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９２  Ｎｏｖ  １５；２０７（１）：１４２−９）およびＣｈｉｎ  ＮＷ  ｅｔ  ａｌ．（Ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｔｏ  ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ  １８  ｗｉｔｈ  ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｔｏｗａｒｄ  ｌｕｎｇ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ  ａｎｄ  ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｓ  ｏｆ  ｖａｒｉｏｕｓ  ｓｉｔｅｓ．Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ．１９９２  Ｍａｙ；１４０（５）：１０６１−９）に記載のプロトコルと同様である。
【０３１５】
組み換えヒトＬＩＧＨＴ（２１４Ｅ）およびカニクイザルＬＩＧＨＴのクローニングおよび発現
全長ヒトＬＩＧＨＴ（２１４Ｅ対立遺伝子）およびカニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）ＬＩＧＨＴタンパク質をコードするｃＤＮＡを、ＫｐｎＩ／ＮｏｔＩを介してｐＣＤＮＡ３．１（＋）発現ベクターにクローニングした。
【０３１６】
ＣＨＯ−Ｋ１細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＣＬ−６１ＴＭ）およびＨＥＫ２９３ＦＦ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｒ７９００７）の０．５−５．０＋０６細胞を、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００トランスフェクション試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１１６６８０１９）を製造業者の指示に従って用い、３０マイクログラムのヒトまたはカニクイザルＬＩＧＨＴ構築物でトランスフェクトした。２４時間後、トランスフェクトおよび非トランスフェクト細胞を、マウス抗ＬＩＧＨＴ抗体（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＭＡＢ６６４）、続いてヤギ抗マウスＡＰＣ複合抗体（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、５５０８２６）を用いるフローサイトメトリーアッセイによって、ヒトおよびカニクイザルＬＩＧＨＴの細胞表面発現についてアッセイした。結果は、ヒト構築物でトランスフェクトされたＣＨＯ−Ｋ１およびＨＥＫ２９３ＦＦ細胞のそれぞれ２６％および５０％がＬＩＧＨＴタンパク質の発現を示した。カニクイザル構築物でトランスフェクトされた細胞の場合、トランスフェクトされたＣＨＯ−Ｋ１およびＨＥＫ２９３ＦＦ細胞のそれぞれ３６％および５３％がＬＩＧＨＴタンパク質の発現を示した。非トランスフェクト細胞株のいずれにおいてもＬＩＧＨＴ発現は検出されなかった。
【０３１７】
免疫化手順
Ｂａｌｂ／ｃマウスを、Ｓｉｇｍａアジュバントシステム（ＳＡＦ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓ６３２２−１ＶＬ）における１０ｕｇの組み換えヒト可溶性ＬＩＧＨＴタンパク質（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、６６４−ＬＩ−０２５）で、２週間おきに合計３回の腹腔内注射で免疫化した。シクロホスファミド一水和物（Ｓｉｇｍａ  ｃａｔ．ｎｏ．Ｃ０７６８）を、０．１ｍｌ／マウス（ＰＢＳ中２０ｍｇ／ｍｌ）を、可溶性ＬＩＧＨＴ後１５分、１日および２日で腹腔内注射した。この手順を２週間おきに２回繰り返した。４２日目に、ＳＡＦにおける２００μｌのＣＨＯ−ＬＩＧＨＴ細胞（６ｘ１０６）を各マウスに腹腔内注射し、５６日目および７０日目に繰り返した。８７日目にＣＨＯ−ＬＩＧＨＴ細胞（６ｘ１０６）を静脈内注射し、脾臓を９１日目に採取した。
【０３１８】
ＨＥＫ２９３ＦＦヒトＬＩＧＨＴ細胞を用いるＦＡＣＳによる血清力価の決定
１００μｌのＦＡＣＳバッファー（１ｘＰＢＳ＋０．５％Ｈｉ−ＦＢＳ）中の２ｘ１０５個のＷＴ  ＨＥＫ２９３ＦＦ細胞、ＨＥＫ２９３ＦＦ−ヒトＬＩＧＨＴ細胞、またはＨＥＫ２９３ＦＦ−カニクイザルＬＩＧＨＴ細胞を、９６ウェルＵ底プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ）に分配し、参照抗体（Ｈｕｍａｎ  ＬＩＧＨＴ／ＴＮＦＳＦ１４  ＭＡｂ６６４、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）で染色し、または予め調製され、ＦＡＣＳバッファーで希釈されたマウス血清の滴定で６０分間４℃でインキュベートした。インキュベーション後、細胞および血清試料をＦＡＣＳバッファーで３回洗浄し、５０μｌの１：５００希釈の二次ヤギ抗マウスＡＰＣ複合抗体（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、５５０８２６）で３０分間４℃でインキュベートし、光から保護した。インキュベーション細胞をＦＡＣＳバッファーで３回洗浄した後、１００μｌのＦＡＣＳバッファーに再懸濁した。正ＡＰＣシグナル強度（幾何強度および結合パーセント）を、ＦＡＣＳ  Ａｃｃｕｒｉ  Ｃ６装置をＦＬ４チャネルで用いるフローサイトメトリーによって測定した。
【０３１９】
ＲＮＡ抽出、およびＦａｂ生成
各免疫化マウスについて、細胞懸濁液を、ＤＮＡｓｅ／ＲＮＡｓｅフリー組織粉砕機およびＴＲＩｚｏｌ試薬（ＡＭＢＩＯＮ、ｃａｔ．ｎｒ．１５５９６０２６）を用いる機械および熱処理によって、脾臓の半分から調製した。細胞懸濁液からのＲＮＡ抽出を、Ｄｉｒｅｃｔ−ｚｏｌ  ＲＮＡ  ＭｉｎｉＰｒｅｐ  Ｋｉｔ（Ｚｙｍｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、ｃａｔ．ｎｒ．Ｒ２０５０）を製造業者の仕様に従って用いて行った。抽出ＲＮＡの純度および完全性を、光学密度を２６０および２８０ｎｍで測定することによって、ならびに２８Ｓおよび１８Ｓ  ｒＲＮＡに対応するバンドの１％アガロース／ＴＡＥゲル中での視覚分析によって確認した。
【０３２０】
Ｆａｂライブラリー構築
免疫レパートリーからの抗体遺伝子の増幅。抽出ＲＮＡから、ｃＤＮＡを、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ  ＩＩＩ  Ｆｉｒｓｔ  Ｓｔｒａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ｃａｔ．ｎｒ．１８０８０−０５１）を用いるＲＴ−ＰＣＲによって合成した。重鎖（ＶＨ）の可変ドメイン、ＩｇＧ１重鎖の第１の定常ドメイン、およびヒンジの一部分（ＣＨ１−ヒンジ）、抗体カッパ軽鎖の可変ドメイン（Ｖκ）および定常ドメイン（Ｃκ）について体系化する遺伝子を、Ｅｘｐａｎｄ  Ｈｉｇｈ  Ｆｉｄｅｌｉｔｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｒｏｃｈｅ、ｃａｔ．ｎｒ．４７３８２６８００１）を用いてｃＤＮＡからＰＣＲ増幅した。これらのＰＣＲ反応に使用されるプライマーは、マウスヒンジおよびＣκ領域の３’ならびに異なるマウスＶ遺伝子の１つのフレームワーク領域の５’においてアニールするように設計された。ネステッドＰＣＲを、テンプレートとしての以前の増幅産物およびファージミドへのさらなるクローニングに必要な制限部位でタグ付けされた上記で使用されたものと同じプライマーを用いて行った。
【０３２１】
マウスにつき、ＶＨ１、ＣＨ１、およびヒンジの小部分について体系化する遺伝子ならびにＶκおよびＣκについて体系化する遺伝子を、ファージミドへと別々にクローニングし、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＴＧ１細胞に形質転換し、重鎖および軽鎖サブライブラリーをもたらした。
【０３２２】
重鎖サブライブラリーＤＮＡを、軽鎖サブライブラリーを含有するファージミドベクターに消化することによって得られたＶＨＣＨ１−ヒンジ挿入物をクローニングすることによって、およびＥ．ｃｏｌｉ  ＴＧ１細胞を形質転換することによって、最終Ｆａｂライブラリーを構築した。ファージ粒子がＣ−末端Ｈｉｓ６−ｃ−ｍｙｃタグとのおよび遺伝子−ＩＩＩタンパク質との融合タンパク質としてＦａｂを発現する、合計４つのＦａｂファージディスプレイライブラリーを、４．０Ｅ＋０８〜８．８Ｅ＋０９ｃｆｕの変動するサイズで生成した。
【０３２３】
ＨＥＫ２９３ＦＦヒトＬＩＧＨＴ細胞におけるペリプラズム抽出物スクリーニング
ペリプラズム抽出物（Ｐ．Ｅ．）をＦＡＣＳバッファー（１倍ＰＢＳ＋０．５％Ｈｉ−ＦＢＳ）で１：５に希釈し、マウス抗ｃ−ｍｙｃで１：１０００希釈（Ｇｅｎｔａｕｒ  ＣＭＹＣ−９Ｅ１０、０．５ｍｇ／ｍｌ）で１００μｌの最終体積で、３０分室温でプレートシェーカー上でインキュベートした。２，０Ｅ＋０５ＨＥＫ２９３ＦＦヒトＬＩＧＨＴトランスフェクト細胞を、１００μｌの混合Ｐ．Ｅ．およびマウス抗ｃ−ｍｙｃで６０分間４℃でプレートシェーカー上でインキュベートした。細胞を次いで３回ＦＡＣＳバッファーで洗浄し、５０μｌのヤギ抗マウスＡＰＣで１：５００希釈で３０分間４℃でプレートシェーカー上で染色した。最後に細胞を３回ＦＡＣＳバッファーで洗浄し、１００μｌのＦＡＣＳバッファーに再懸濁し、ＦＡＣＳ  Ａｃｃｕｒｉ  Ｃ６装置を用いるフローサイトメトリーによってＦＬ４チャネルで陽性バインダーを読み取った。
【０３２４】
ＨＥＫ２９３ＦＦヒトＬＩＧＨＴ細胞における特異的Ｆａｂクローンの選択のための競合アッセイ
８個の陽性スクリーンクローンの各々の精製Ｆａｂ（ＥＣ５０濃度）を、１μｇの可溶性ＬＩＧＨＴタンパク質ありおよびなしで３０分ＲＴでインキュベートした。インキュベーション後、Ｆａｂおよび可溶性ＬＩＧＨＴタンパク質の１００μｌ混合物を、２，０Ｅ＋０５ＨＥＫ２９３ＦＦヒトＬＩＧＨＴ細胞で６０分４℃でプレートシェーカー上でインキュベートした。細胞を３回ＦＡＣＳバッファーで洗浄し、５０μｌのヤギ抗マウスＡＰＣで１：５００希釈で３０分間４℃でプレートシェーカー上で染色した。最後に細胞を３回ＦＡＣＳバッファーで洗浄し、ＦＡＣＳ  Ａｃｃｕｒｉ  Ｃ６装置を用いるフローサイトメトリーによってＦＬ４チャネルで陽性バインダーを読み取った。
【０３２５】
ＬＩＧＨＴ特異的Ｆａｂの選択およびスクリーニング
ファージ発現Ｆａｂを、ＶＣＳＭ１３ヘルパーファージを用いる標準的なプロトコルに従って産生し、ＰＥＧ／ＮａＣｌに沈殿させ、ヒトＬＩＧＨＴを発現する細胞に対するパニングの２つの連続ラウンドで使用した。トランスフェクトＨＥＫ２９３ＦＦおよびＣＨＯ−Ｋ１細胞を、それぞれ第１および第２ラウンドで使用した。ファージを溶液中の細胞で１時間４℃でインキュベートし、次いで１０％ＦＢＳ／ＰＢＳで数回洗浄した。トリプシンを室温で使用して結合ファージを回収した。プロテアーゼ活性を、プロテアーゼ阻害剤ＡＥＢＳＦによって直ちに中和した。全てのファージ産物を対数的に増殖させたＥ．ｃｏｌｉ  ＴＧ１細胞に感染させ、個々のＥ．ｃｏｌｉ細胞における可溶性Ｆａｂの産生をイソプロピル１−チオ−β−Ｄ−ガラクトピラノシドによって誘導した。可溶性Ｆａｂを含有する細菌ペリプラズム抽出物（Ｐ．Ｅ．）を凍結／解凍サイクルによって抽出し、細菌をペレット化し、−２０℃で一晩にわたって凍結し、次いで室温で解凍し、ＰＢＳに再懸濁した。可溶性Ｆａｂを含有する上清（Ｐ．Ｅ．）を、室温での３０分の振盪および遠心分離後に収集した。可溶性Ｆａｂを含有する合計３８０個のＰ．Ｅ．を、ＦＡＣにおいてヒトＬＩＧＨＴトランスフェクトおよび非トランスフェクトＨＥＫ２９３ＦＦ細胞への結合について試験した。可溶性Ｆａｂの結合を、抗ｍｙｃ抗体（Ｇｅｎｔａｕｒ、ｃａｔ．ｎｒ．０４−ＣＭＹＣ−９Ｅ１０）およびヤギ抗マウスＡＰＣ複合抗体（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、ｃａｔ．ｎｒ．５５０８２６）を用いて会合ｃ−ｍｙｃタグを検出することによって評価した。フローサイトメーター（Ａｃｃｕｒｉ  Ｃ６、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）のＦＬ４−Ａチャネル検出器において陽性細胞のパーセンテージ（％）および平均強度蛍光レベル（ＭＦＩ）を見ることによって結果を分析した。合計７０個のクローンがトランスフェクト細胞への結合を示し、１個のクローンは非トランスフェクト細胞への結合も示した。
【０３２６】
ＨＥＫ２９３ＦＦヒトＬＩＧＨＴ細胞における特異的Ｐ．Ｅ．クローンの選択のための中和アッセイ
ＨＥＫ２９３ＦＦヒトＬＩＧＨＴトランスフェクト細胞を、１２０分４℃でプレートシェーカー上で、マウス抗ｃ−ｍｙｃ（１：１０００）で３０分ＲＴでプレートシェーカー上で予めインキュベートされた選択されたクローン（１：５）からの５０μｌのＰ．Ｅ．および５０μｌのＬＴβＲ−Ｆｃリガンド（１５ｎＭ−ＥＣ５０、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ｃａｔ．ｎｏ．３５６−ＨＶ−１００）または５０μｌのＨＶＥＭ−Ｆｃ（４５ｎＭ−ＥＣ５０、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ｃａｔ．ｎｏ．６２９−ＬＲ−１００）でインキュベートした。細胞を３回ＦＡＣＳバッファーで洗浄し、５０μｌのヤギ抗マウスＡＰＣで１：５００希釈で３０分間４℃でプレートシェーカー上で染色した。最後に細胞を３回ＦＡＣＳバッファーで洗浄し、ＦＡＣＳ  Ａｃｃｕｒｉ  Ｃ６装置を用いるフローサイトメトリーによってＦＬ４チャネルで陽性バインダーを読み取った。対照として、細胞を、リガンドのみでインキュベートし、５０μｌのヤギ抗ヒトＩｇＧ  ＦＩＴＣ（Ｓｉｇｍａ  Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｆ９５１２−２ＭＬ、１：１５００）（ＦＬ１チャネル）を用いて検出した。一次スクリーンにおける６９個の陽性バインダーから、ＨＥＫ２９３ＦＦ細胞上で発現したＬＩＧＨＴへのＬＴβＲ−ＦｃおよびＨＶＥＭ−Ｆｃ結合の両方を阻害した２４個の中和Ｆａｂが本発明者らによって選択された。
【０３２７】
可溶性ＬＩＧＨＴおよびカニクイザル交差反応性での競合アッセイ
ヒトＬＩＧＨＴ発現ＨＥＫ２９３ＦＦ細胞への特異的結合を示す６９個のクローンのＰ．Ｅ．を、可溶性ＬＩＧＨＴタンパク質（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ｃａｔ．ｎｏ．６６４−ＬＩ０２５２）の存在および不在下で同じ細胞への結合について再試験した。競合アッセイに使用される可溶性ＬＩＧＨＴの量（１０μｇ／ｍｌ）を、細胞への抗ＬＩＧＨＴ抗体（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ｃａｔ．ｎｏ．ＭＡＢ６６４）の結合をブロックし得る異なる量の可溶性ＬＩＧＨＴを試験することによって決定した。６９クローンからのＰ．Ｅ．を、１０μｇ／ｍｌのＬＩＧＨＴタンパク質の存在または不在下、マウス抗ｃ−ｍｙｃ抗体（Ｇｅｎｔａｕｒ、ｃａｔ．ｎｏ．０４−ＣＭＹＣ−９Ｅ１０）でプレインキュベートし、次いでヒトＬＩＧＨＴ  ＨＥＫ２９３ＦＦトランスフェクト細胞に添加した。特異的膜ＬＩＧＨＴバインダーの決定のために、可溶性ＬＩＧＨＴの存在または不在下でのＰ．Ｅの結合％およびＭＦＩ値の比を計算し、０．７０を上回る値を示すクローンを膜ＬＩＧＨＴ特異的バインダーとみなした。
【０３２８】
合計２４個の膜ＬＩＧＨＴ特異性バインダークローンを同定した。これらのクローンを、カニクイザルＬＩＧＨＴ構築物でトランスフェクトされたＨＥＫ２９３ＦＦ細胞への結合についても試験した。結果として、７つの抗ＬＩＧＨＴ  Ｆａｂをヒト／カニクイザル交差反応性として分類した。
【０３２９】
キメラｍＡｂの生成
７つの抗ＬＩＧＨＴマウスＦａｂのおよび無関係のＦａｂの可変ドメインについて体系化する合成遺伝子を、（ＩｇＧ４スイッチを防止する２１４位でのＳからＰへの変換および残留受容体結合活性を除去する２４８位でのＬからＥへの変換を含む）ヒトＩｇＧ４  ＨＣおよびヒトＣＬドメインを含む哺乳動物発現ベクターにリクローニングした。哺乳動物発現系においてベクターを含有する重鎖および軽鎖のコトランスフェクションを行い、続いてキメラＩｇＧのタンパク質Ａベースの精製、変性および非変性ＰＡＧＥでの定量化およびＱＣを行った。Ｎｕ−Ｐａｇｅ分析は、純度ならびに非還元条件についての１５０ＫＤａバンドおよび還元条件下の２つのバンド（５０および２５ＫＤａ）の存在を確認する。
【０３３０】
ＥＬ４細胞上のＬＩＧＨＴへの抗ＬＩＧＨＴ  ＩｇＧ４の平衡結合
安定に形質導入されたＬＩＧＨＴ発現ＥＬ４細胞（マウスリンパ腫細胞株、ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ、Ｃｈｅｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００９；１８３：７２８６−７２９６）を、フローサイトメトリーに基づく結合分析に使用した。ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞を、抗ＬＩＧＨＴ  ＩｇＧ４クローン（０．０１７ｎｇ／ｍｌ〜７０μｇ／ｍｌの勾配濃度）で４０分間４℃でインキュベートした。細胞を洗浄し、ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞に結合した抗ＬＩＧＨＴ  ＩｇＧを検出するためにＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７複合ヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｆａｂ）２断片特異性ポリクローナル抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｅｓｔ  Ｇｒｏｖｅ，ＵＳＡ）を使用した。
【０３３１】
抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂによるＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞へのＨＶＥＭおよびＬＴＢＲ結合の阻害
ビオチン−ＬＴβＲ−Ｆｃおよびビオチン−ＨＶＥＭ−Ｆｃを、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ（ＥＺ−Ｌｉｎｋ  ＮＨＳ−ＬＣ−Ｂｉｏｔｉｎ、ｃａｔ．ｎｏ．２１３３６）から購入されたキットを製造業者の指示に従って用いて調製した。ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞における抗膜ＬＩＧＨＴ抗体での結合競合アッセイは次のとおりであった：５０μｌ／ウェルの抗体３Ｄ１２、３Ｂ０４、３Ｅ０９、２Ｂ１１、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｃ１０（３倍希釈３００ｎＭ〜０，００５ｎＭ）を、ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞（０．２５ｘ１０６）に添加し、３０分間４℃でインキュベートし、次いで５０μｌ／ウェルの２倍ＥＣ５０濃度の各リガンド（ビオチン−ＬＴβＲ−Ｆｃまたはビオチン−ＨＶＥＭ−Ｆｃ）を、ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞単独または抗体を含むものに添加し、９０分間４℃でインキュベートした。使用された希釈剤はＦＡＣＳバッファーであった。細胞を３回ＦＡＣＳバッファーで洗浄し、細胞へのビオチン−ＬＴβＲ−Ｆｃおよびビオチン−ＨＶＥＭ−Ｆｃ結合検出をストレプトアビジン−ＡＰＣ（１：４００、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ  ｃａｔ．Ｎｏ．４０５２０７）で３０分間４℃で行い、蛍光をＲＬ−１チャネルで読み取った。抗ＨＥＬ  ｍＡｂ  ２Ａ１１をバックグラウンド対照として利用した。
【０３３２】
抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂによるＨＴ−２９細胞からのＩＬ−８分泌の阻害
ＣＨＯ  Ｋ１  ＬＩＧＨＴ細胞アッセイ
ＨＴ２９細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、ＡＴＣＣ＃ＨＴＢ−３８）をＭｃＣｏｙｓ  ５ａ培地（ＧＩＢＣＯ）＋１０体積／体積％ＦＢＳ（ＧＩＢＣＯ）に維持した。細胞を通常の培養のために１００％コンフルエンシーから１：４と１：１２とに分割した。１００μｌの０．０３ｘ１０６個の一時トランスフェクトＬＩＧＨＴ  ＣＨＯ  Ｋ１細胞を、抗膜ＬＩＧＨＴ抗体（または陰性対照抗ＨＥＬ、鶏卵リソソーム抗体）で３０分間３７℃で細胞培養培地においてインキュベートし、次いで１００μｌの１ｘ１０５個のＨＴ２９細胞に添加し、６時間３７℃でＣＯ２細胞インキュベーターチャンバーにおいてインキュベートした。上清を回収し、ヒトＩＬ−８  Ｄｕｏ−ｓｅｔ  ＥＬＩＳＡ  Ｋｉｔ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いてＩＬ−８レベルを決定した。ＨＴ−２９細胞およびＴＮＦα（１０ｎｇ／ｍｌ）またはＬＴα１β２（０．５μｇ／ｍｌ）の陽性対照だけでなくＨＴ２９細胞の陰性対照も含めた。
【０３３３】
ＥＬ４−ＮＣ−ＬＩＧＨＴ細胞アッセイ
ＨＴ２９細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、ＡＴＣＣ＃ＨＴＢ−３８）をＭｃＣｏｙｓ  ５ａ培地（ＧＩＢＣＯ）＋１０体積／体積％ＦＢＳ（ＧＩＢＣＯ）に維持した。細胞を通常の培養のために１００％コンフルエンシーから１：４と１：１２とに分割した。１００μｌの１ｘ１０５個のＨＴ−２９細胞を、一晩、加湿雰囲気チャンバーにおいて３７℃で５％ＣＯ２で培地においてインキュベートした。
【０３３４】
ＥＬ４−ＮＣ−ＬＩＧＨＴ細胞（ＬＩＧＨＴ切断を制限するように残基８１〜８４を含まない安定にトランスフェクトされたＬＩＧＨＴを使用したことを除いて、ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞として調製）を培養培地で遠心分離および洗浄し、次いで培養培地に２．５ｘ１０６細胞／ｍｌの最終濃度まで再懸濁し、１００μｌ（２．５ｘ１０５細胞／ウェル）を１００μｌ／ウェルの抗ＬＩＧＨＴ抗体で、丸底９６ウェルプレートにおいて、１５分間３７℃でプレインキュベートする。ＨＴ−２９播種細胞を含有する９６ウェルプレートからの培養培地を吸引し、抗ＬＩＧＨＴ抗体およびＥＬ４−ＮＣ−ＬＩＧＨＴ細胞（合計体積２００μｌ）をＨＴ２９細胞に添加し、２時間、細胞培養インキュベーターにおいて３７℃および５％ＣＯ２の加湿雰囲気でインキュベートする。上清を回収し、ヒトＩＬ−８  Ｄｕｏ−ｓｅｔ  ＥＬＩＳＡ  Ｋｉｔ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いてＩＬ−８レベルを決定する。ＨＴ−２９細胞およびＴＮＦα（１０ｎｇ／ｍｌ）またはＬＴα１β２（０．５μｇ／ｍｌ）の陽性対照だけでなくＨＴ２９細胞の陰性対照も含めた。
【０３３５】
ＤｃＲ３との抗膜ＬＩＧＨＴ抗体の競合結合
ＤｃＲ３（ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ）は、リガンド結合について受容体と競合するデコイ受容体である。ＤｃＲ３は、高い親和性でＬＩＧＨＴに、より低い親和性でＴＬ１ＡおよびＦａｓＬで結合し、中和することができる（Ｚｈａｎ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．２０１１，１９：１６２−７１“Ｄｅｃｏｙ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ：  ｔｈｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ＴＬ１Ａ：ＤｃＲ３  ｃｏｍｐｌｅｘ”）。安定に形質導入されたＬＩＧＨＴ発現ＥＬ４細胞（マウスリンパ腫細胞株、ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ）を、フローサイトメトリーに基づく競合結合分析に使用した。
【０３３６】
ＤｃＲ３−Ｆｃでのアッセイ
ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞を、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７複合ＤｃＲ３−Ｆｃ（ＤｃＲ３−Ｆｃ−ＡＦ６４７、０．８μｇ／ｍｌ）および勾配濃度（３１ｐｇ／ｍｌ〜１２８μｇ／ｍｌ）の抗膜ＬＩＧＨＴ抗体（３Ｂ０４、０３Ｄ１２、および０２Ｂ１１）で４０分間４℃でコインキュベートした。可溶性および膜ＬＩＧＨＴの両方に結合するｍＡｂの対照も含めた（ＥＰ２２９２６６３からのからのＦ１９）。試料を３回洗浄し、フローサイトメトリー分析を行った。ＥＬ４細胞上のＬＩＧＨＴへのＤｃＲ３−Ｆｃ−ＡＦ６４７の結合から得られた具体的な平均蛍光強度（ＭＦＩ）を使用して、競合結合のレベルを決定した。
【０３３７】
ＤｃＲ３−Ｈｉｓタグ付きでのアッセイ
ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞（０．２５ｘ１０６）を、抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ（０〜３００ｎＭ）で１５分間４℃でプレインキュベートし、続いてＤｃＲ３−Ｈｉｓタグ付き（１ｎＭ、Ｃｒｅａｔｉｖｅ  ＢｉｏＭａｒｔ、ｒｅｆ：ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ−５５２Ｈ、ロット：９６２５１２）で３０分間４℃でインキュベートした。試料を次いでマウス抗ｈｉｓタグ抗体（１：５００希釈、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、ｃａｔ．ｎｏ．６５２５０２）で３０分間４℃でインキュベートし、続いて抗マウスＡＰＣ（１：５００希釈、ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、ｃａｔ．ｎｏ．５５０８２６）で３０分間４℃でインキュベートした。検出抗体工程の各々の後チューブを３回洗浄し、フローサイトメトリー分析を行った。ＥＬ４細胞上のＬＩＧＨＴへのＤｃＲ３−Ｈｉｓの結合から得られた具体的な平均蛍光強度（ＭＦＩ）を使用して、競合結合のレベルを決定した。
【０３３８】
刺激されたＣＤ８細胞上のネイティブＬＩＧＨＴへの抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ結合の測定
４０ｍｌの血液を正常血液ドナーから収集し、２０ｍｌの血液（ＰＢＳ中１：１希釈）をＰｅｒｃｏｌｌ（１０ｍｌ）、Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｐｒｅｐ（１０ｍｌ）勾配に重ねることによって単離のために細胞を調製した。勾配を５００ｇで３０分間２５℃で最小限の加速およびブレーキなしで遠心分離した。単核細胞（ＭＮＣ）を血液とＰｅｒｃｏｌｌとの間の界面から５０ｍｌコニカルチューブに採取し、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）を５０ｍｌの合計体積まで添加し、細胞を１５００ｒｐｍで１０分間４℃で遠心分離した。上清をデカントし、細胞を５０ｍｌのＰＢＳに再懸濁し、再度１２００ｒｐｍで５分間４℃で遠心分離した。上清をデカントし、細胞を１ｘ１０６／ｍｌで１０％ＲＰＭＩに再懸濁した。１００ｕＬの細胞を、次いで１ｕｇ／ｍｌの抗ＣＤ３で予め被覆された平底９６ウェルプレートのウェルに添加し、次いで１００ｕＬの２ｕｇ／ｍｌの可溶性抗ＣＤ２８を次いで各ウェルに添加した。プレートを３７℃、５％ＣＯ２で５日間インキュベートし、次いで細胞をＵ底９６ウェルプレートに移し、１８００ｒｐｍで２分間遠心分離して細胞をペレットし、上清をデカントした。細胞を次いで１回ＦＡＣＳバッファー中１８００ｒｐｍで２分間遠心分離することによって洗浄し、次いで１：１００ヒトＦｃブロックでＦＡＣＳバッファー中３０分間室温でブロックした。
【０３３９】
下記の抗体のフローパネルを細胞の各ウェルに添加した：
ＴＣＲ−ＰＥ、ＣＤ１４−ｅＶｏｌｖｅ  ６０５、ＣＤ８−ＡＰＣｅ７８０、ＣＤ４−Ｖ４５０、ＣＤ１９−Ａｌｅｘａ  ７００、ＣＤ１６−ＢＶ７１１、ＣＤ１５−ＰｅｒＣＰｅ７１０、ＣＤ１１ｂ−ＰＥＣｙ７、ＣＤ４５−Ｖ５００、およびＡＰＣ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、各１ｕｇ）で標識された抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ。３０分間室温で暗室でのインキュベーション後、細胞を、１回ＦＡＣＳバッファーで１８００ｒｐｍで２分間洗浄し、次いで２％パラホルムアルデヒド中４℃で暗室で２０分間固定し、フローサイトメーターで読み取った。
【０３４０】
ＬＩＧＨＴ多型への抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ結合の測定
ＬＩＧＨＴ  ＳＮＰへのｍＡｂの特異性を決定するために、下記の細胞株を利用した：ＩＩ２３、ＩＩ２３−ＬＩＧＨＴ  ２１４Ｅ、ＩＩ２３−ＬＩＧＨＴ  ２１４Ｋ、およびＩＩ２３−ＬＩＧＨＴ  ３２Ｌ。細胞を１ｘ１０７細胞／ｍｌで懸濁し、１００ｕＬアリコートを９６ウェルプレートのウェルに配置し、細胞をＦＡＣＳバッファー中１８００ｒｐｍで２分間スピンダウンおよび洗浄した。細胞を抗ＣＤ１６／ＣＤ３２（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  ＵＳＡ）の１：１００希釈でＦＡＣＳバッファー中２０分間室温でブロックし、次いで１回ＦＡＣＳバッファー中１８００ｒｐｍで２分間洗浄した。細胞を、次いで１００ｕＬのＦＡＣＳバッファー＋４ｕｇの抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂまたは抗ＬＩＧＨＴ−ＰＥ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、ロット：Ｅ０１６２１−１６３２）中３０分間暗室で室温で再懸濁し、続いて１回ＦＡＣＳバッファー中１８００ｒｐｍで２分間洗浄し、次いで１００ｕＬのＦＡＣＳバッファーおよび１：１００ヤギ抗ヒトＦｃγ−ＰＥ二次抗体または二次抗体なしで４℃で暗室で３０分間再懸濁した。細胞を、再度１回ＦＡＣＳバッファー中１８００ｒｐｍで２分間洗浄し、２００ｕＬの２％パラホルムアルデヒド中で一晩４℃で固定し、フローサイトメーターで読み取った。
【０３４１】
可溶性および膜ＬＩＧＨＴに対する抗体親和性の測定
「表面プラズモン共鳴」という用語は、本明細書で使用されるとき、例えば、ＢＩＡｃｏｒｅシステム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いる、バイオセンサーマトリックス内でのタンパク質濃度の変化の検出によるリアルタイム生物特異性相互作用の分析を可能にする光学現象を指す。さらなる説明については、Ｊｏｎｓｓｏｎ，Ｕ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ａｎｎ．Ｂｉｏｌ．Ｃｌｉｎ．５１：１９−２６、Ｊｏｎｓｓｏｎ，Ｕ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １１：６２０−６２７、Ｊｏｈｎｓｓｏｎ，Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．８：１２５−１３１、およびＪｏｈｎｎｓｏｎ，Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９８：２６８−２７７を参照されたい。
【０３４２】
可溶性ＬＩＧＨＴ
ヤギ抗ヒトＦｃ  ＩｇＧを介してバイオセンサーマトリックス上で捕捉された捕捉抗体（キメラ抗膜ＬＩＧＨＴモノクローナル抗体）と組み換え可溶性ＬＩＧＨＴとの間のリアルタイム結合相互作用を、ＢＩＡｃｏｒｅシステム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を製造業者の指示および標準的な手順に従って用い、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって測定した。簡単に、可溶性ＬＩＧＨＴをＨＢＳ泳動バッファー（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）で希釈し、アリコートを固定化タンパク質マトリックスを通して３０ｕｌ／ｍｍの流量で注入した。ＢＩＡ評価ソフトウェアを使用して、会合速度（ｋａ）、解離速度（ｋｄ）、および親和性（ＫＤ）を計算した。
【０３４３】
可溶性ＬＩＧＨＴの交差反応性
（“Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ２−ａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｍｉｄａｚｏｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ａｓ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ＮＯＤ１  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”．Ｃｏｒｒｅａ  ＲＧ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２０１１，１８：８２５−８３２に記載されるように）ＮＦ−ｋＢルシフェラーゼレポーターを含有するレンチウイルスベクターで形質導入することによって、安定なＨｅＬａ−ＮＦ−ｋＢレポーター細胞を生成した。形質導入細胞を、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭにおいて３７℃で４８時間インキュベートした。細胞を次いで、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭにおいて５回洗浄し、９６ウェルプレートにおいて２０，０００細胞／ウェルの密度で１０％ＦＢＳを含む１００μｌのＤＭＥＭにおいて３〜４時間３７℃のＣＯ２インキュベーターで培養した。可溶性ＬＩＧＨＴ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、６６４−ＬＩ／ＣＦ、７４−２４０）をバッファーまたは抗体で２０分間４℃でインキュベートし、１００μｌのＬＩＧＨＴ／抗体を細胞に添加し、３７℃で２４時間インキュベートした。培地を除去し、細胞をＰＢＳで２回洗浄した。５０μｌの１倍受動的溶解バッファーを次いで各ウェルに添加し、穏やかに振盪しながら３０分間室温でインキュベートし、続いて５０μｌのルシフェラーゼ試薬を各ウェルに添加した（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｄｕａｌ−Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ  Ｒｅｐｏｒｔｅｒ  Ａｓｓａｙ、Ｅ１９６０）。発光を次いでプレートリーダーで読み取った。
【０３４４】
エピトープマッピング
ネイティブ質量分析方法
ＬＩＧＨＴタンパク質（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ６６４−ＬＩ−０２５）はＰＢＳバッファーに４μΜの最終濃度で可溶化し、ｍＡｂはＰＢＳ中２０μΜで維持した。試料を質量分析最適化の前に４０ｋＤａのカットオフでカラムを介して異なる濃度の酢酸アンモニウムｐＨ７．４にバッファー交換した。ＬＩＧＨＴタンパク質および抗体について最大６つの脱塩工程を行い、最適な酢酸アンモニウム濃度は２００ｍＭであることが見出された。試料を４℃で保存し、１週間以内に使用した。抗体をＭＳ分析の前に１μΜまで希釈した。複合体形成について、ＬＩＧＨＴタンパク質を氷上で１：５比で別々に各抗体でインキュベートし、ネイティブ質量測定をインキュベーション３０分後に行った。
【０３４５】
ナノエレクトロスプレーイオン化測定を、高ｍ／ｚイオンの透過および検出のために改変されたＱ  Ｅｘａｃｔｉｖｅハイブリッド四重極−Ｏｒｂｉｔｒａｐ質量分析計（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて行った。試料を金被覆キャピラリーから高コーンおよびキャピラリー電圧ならびに高温でエレクトロスプレーし、ネイティブオリゴマーの部分解離をもたらした。高圧を前の光学機器に印加し、質量スペクトルを最適化された衝突エネルギーで記録した。高分解能測定を３５０００の分解能で行い、低分解スペクトルを２０００の分解能で得た。データをＸｃａｌｉｂｅｒソフトウェアで分析し、手動でデコンボリュートした。
【０３４６】
水素−重水素交換（ＨＤＸ）質量分析
ＬＩＧＨＴタンパク質（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ６６４−ＬＩ−０２５）はＰＢＳバッファーに８μΜの最終濃度で可溶化し、抗体はＰＢＳ中２０μΜで維持した。複合体形成について、ＬＩＧＨＴタンパク質を氷上で１：５比で別々に各抗体でインキュベートし、ＨＤＸ測定をインキュベーション３０分後に行った。全てのデータを、ＨＤＸプラットフォームを備えたウォーターズＳｙｎａｐｔ  Ｇ２Ｓｉで記録した。試料を低温に維持するために各試料の装填を手動で行い、これはタンパク質安定性にとって重要であることが見出された。５μＬの試料を６５μＬの重水素化ＰＢＳバッファーに添加することによって重水素標識を行い、４つの時点、２０秒、６０秒、３００秒、および１８００秒で平衡させた。その後各試料を５０μＬの２Ｍ塩化グアニジウムでｐＨ２でクエンチした。試料をペプシンカラムに５分間通してタンパク質を消化し、逆相クロマトグラフィーを用いてペプチドを分離した。データをＤｙｎａｍＸソフトウェアで分析した。１５アミノ酸の最大長および５ｐｐｍの質量精度誤差を有するペプチドを選択した。これらのフィルター設定は、ＬＩＧＨＴタンパク質について４８個のユニークペプチドをもたらした。分析を各ｍＡｂについて３回繰り返した。
【０３４７】
膜ＬＩＧＨＴのアラニンスキャニング
抗体のエピトープであるＬＩＧＨＴ内の特定の残基または領域の同定のための有用な方法は、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ  ｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１−１０８５（１９８９）によって記載されるように「アラニンスキャニング変異導入」と呼ばれる。ここで、標的残基の残基または群を、中性アミノ酸（最も好ましくはアラニン）によって同定および置換して、アミノ酸と抗体との相互作用に影響を及ぼす。置換に対する機能感受性を示すそれらのアミノ酸位置を次いで同定する。
【０３４８】
全長ＬＩＧＨＴ遺伝子を、ＧｅｎｅＡｒｔ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって合成し、哺乳動物発現ベクターｐｃＤＮＡ  ３．１（＋）にクローニングした。下記のＡｌａ変異をＬＩＧＨＴ遺伝子に導入した：Ｆ５７Ａ〜Ｅ８６Ａへの３０個の単一アミノ酸アラニン置換、２個の単一アミノ酸アラニン置換、Ｇ１８８Ａ、Ｒ１８９Ａ、１個のセリン置換、Ａ１９０Ｓ、１７個の単一アミノ酸アラニン置換、Ｔ１９１Ａ〜Ｖ２０７Ａ、ならびに１０個の四アミノ酸アラニン置換、６０〜６３、６４〜６７、６８〜７１、７２〜７５、７６〜７９、８０〜８３、８４〜８７、８８〜９１、９２〜９５、および９６〜９９。構築物を、製造指示に従って、ＤＥＰＣ処理滅菌濾過水を用いて再構成した。形質転換受容性上位１０個のＥ．ｃｏｌｉ細胞を１００ｎｇの各構築物で形質転換し、各構築物からの単一コロニーを採取および使用して、１０ｍｌのＬＢ／ｃａｒｂ１００／ｇｌｕ２％培地に接種し、一晩３７℃、２００ｒｐｍで増殖させた。Ｑｉａｇｅｎ  ＱＩＡｐｒｅｐ  Ｓｐｉｎ  Ｍｉｎｉｐｒｅｐ  Ｋｉｔ（２５０）を用いてＤＮＡ構築物の抽出を行い、分光光度計で２６０ｎｍのＯ．Ｄ．を測定することによって濃度を決定した。
【０３４９】
ＨＥＫ２９３ＦＦ細胞を、２ｍＭのＬ−グルタミンが補充されたＦｒｅｅｓｔｙｌｅ（商標）２９３発現培地（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ｃａｔ．ｎｏ．１２３３８０１８）において培養した。トランスフェクションの日に細胞を２４ウェルプレートに０．６ｘ１０６細胞／ウェルに播種した。Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、３ｕｌを５０μｌのＯｐｔｉＭＥＭ培地（ＧＩＢＣＯ）と混合し、次いで３ｕｇのプラスミドＤＮＡを含有する５０μｌのＯｐｔｉ−ＭＥＭ培地に添加し、２０分間ＲＴでインキュベートしてＤＮＡ−Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００複合体を形成し、これを次いでＨＥＫ２９３ＦＦ細胞に添加し、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。各構築物について、デュプリケートにおいて、０．６０ｘ１０６細胞／ウェルを９６ウェル丸底プレートで使用した。細胞を３分間３００ｘｇで４℃で遠心分離し、上清を廃棄し、細胞を１５０μｌのＦＡＣＳバッファー（リン酸緩衝食塩水中０．５％ＦＢＳ）で洗浄した。このプロセスを３回繰り返した。各構築物について、１ｘ１０６細胞／ウェルを、ＥＣ５０濃度の抗ＬＩＧＨＴ抗体で、および抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ  ＭＡＢ６６４（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）の陽性対照、ｍＡｂ  Ｆ１９（ＥＰ２２９２６６３）、またはＬＴＢＲ−Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）で、振盪しながら、５０μｌ／ウェルの最終体積で３０分間４℃でインキュベートした。ウェルを上記のように３回洗浄し、５０μｌ／ウェルのヤギ抗ヒトＩｇＧ  ＦＩＴＣ（ＦＡＣＳバッファー、ＳＩＧＭＡ  Ｆ９５１２−２ＭＬでの１：１５００希釈）またはヤギ抗マウスＡＰＣ（ＦＡＣＳバッファー、ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ５５０８２６での１／５００希釈）を必要に応じてウェルに添加し、振盪しながら、３０分間４℃で光から保護してインキュベートした。細胞を次いで上記のように洗浄し、１００μｌのＦＡＣＳバッファーに再懸濁し、抗体の構築物への結合をフローサイトメトリーを用いて測定し、各試料について合計１０，０００個の細胞を取得した。バッファーおよび二次抗体のみの対照ならびにＨＥＫ２９３ＦＦ非トランスフェクト細胞も使用した。
【０３５０】
ヒト化マウスにおけるデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）誘導性急性大腸炎におけるｍＡｂ  ３Ｂ０４バリアント１６インビボ有効性の評価
実験を、Ｍａｎｆｒｏｉ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１７；７７：１０９７−１１０７）に記載されるように、ヒト臍帯血から単離されたＣＤ３４＋造血幹細胞が生着したＮＯＤ／Ｓｈｉ−ｓｃｉｄ／ＩＬ−２Ｒγヌル免疫不全マウス株（ＮＯＧ）で実施した。マウスにおけるヒト免疫系の再構成が少なくとも１４週間にわたって起こり、少なくとも２５％ヒトＣＤ４５＋／総ＣＤ４５細胞を有したｈｕ−マウスが使用された。雌ｈｕ−ＮＯＧマウスを、ヒト化速度およびＣＤ３４＋細胞ドナーを考慮して３つの群（ｎ＝１０）にランダム化した。この研究において記載される全ての動物研究は、地域倫理委員会（ＣＥＬＥＡＧ）によって検討および承認されている。マウスを実験の開始前の５日間にわたって実験環境に順応させた。ＤＳＳを２日目〜８日目まで７日間投与した。ＤＳＳ（３％）を飲用水（自由摂取）に添加し、２日おきに新しいものと取り替えた。
【０３５１】
全ての処理はＤＳＳ誘導性大腸炎の前に開始した。３Ｂ０４  ｖａｒ１６（５ｍｇ／ｋｇ）ならびにアイソタイプ対照および抗ＴＮＦ（Ｈｕｍｉｒａ）抗体（１０ｍｇ／ｋｇ）を、０、３、６、９日目に腹腔内投与した。実験は１２日目に終了した。下記のパラメータを１２日間毎日記録した：体重グラム（ｇ）、下痢および便の硬さ、出血および死亡率。グローバル臨床スコアを下記のとおり計算した：
2020505465.tif 000012
【０３５２】
最大累計グローバル臨床スコアは１５であり、体重減少が＞３５％である場合に動物を犠死させた。
【０３５３】
結果
ＬＩＧＨＴの膜形態に偏った免疫応答を生成するために、マウスをまず可溶性ＬＩＧＨＴに対する免疫化で寛容化した後、続いてＣＨＯ細胞上で発現したＬＩＧＨＴでの免疫化レジームを行った。４匹全てのマウスが、１／４０００〜１／３９０００のＦＡＣＳ分析によって測定されたヒトＬＩＧＨＴおよびカニクイザルＬＩＧＨＴ特異的ＩｇＧ力価の範囲で、抗ＬＩＧＨＴ特異的抗体を向上させた。Ｆａｂライブラリーを次いで全ての４つの脾臓から生成した。合計３８０個の可溶性Ｆａｂを、ＨＥＫ２９３細胞上で発現した膜ＬＩＧＨＴへの特異的結合について試験した。これらのうち、６９個のＦａｂを、ＨＶＥＭ−ＦｃおよびＬＴβＲでの中和アッセイにおいて試験するために選択した。ＨＥＫ２９３ＦＦ細胞上で発現したＬＩＧＨＴへの両方の受容体の結合を阻害した２４個の中和Ｆａｂを選択した。これらの２４個のクローンを、次いでカニクイザル膜ＬＩＧＨＴに対する交差反応性および可溶性ＬＩＧＨＴに対する反応性について試験した。膜ＬＩＧＨＴに対する選択性の望ましい特性を有し、膜ＬＩＧＨＴへのＨＶＥＭおよびＬＴＢＲ結合を中和し、カニクイザル膜ＬＩＧＨＴ交差反応性であった７つの抗膜Ｆａｂを単離した。これらのＦａｂをさらなる試験のためにキメラＩｇＧ４  ｍＡｂに変換した。
【０３５４】
ヒトおよびカニクイザルＬＩＧＨＴ両方へのｍＡｂの交差反応性を比較するために、一時的にトランスフェクトされたヒトおよびカニクイザルＬＩＧＨＴ−ＨＥＫ２９３ＦＦ細胞を利用し、細胞の約５０％がＬＩＧＨＴを発現し、結合ｍＡｂをヤギ抗ヒトＩｇＧ  ＦＩＴＣで検出した。各ｍＡｂのＥＣ５０を、非トランスフェクト細胞へのバックグラウンド結合についての補正後、表６に示す。（受容体占有率と応答との間の関係が線形である場合、ＥＣ５０はＫＤと等しいか、または実質的に等しいことに留意されたい。）
【表６】
2020505465.tif 000013
【０３５５】
７つの抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂは、親ＥＬ４細胞ではなく、安定なヒトＬＩＧＨＴ発現細胞株ＥＬ４−ＬＩＧＨＴに結合することが示された。７つのｍＡｂのＥＣ５０をＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞への結合から計算した（図１）。これらの抗ＬＩＧＨＴ抗体のうちの６つの結合が飽和に到達し、ＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞を標識するのに必要な抗体の量を滴定することによって、各抗体の機能的平衡結合親和性を決定した。非線形回帰分析を行って、各ｍＡｂの機能的結合親和測定またはＥＣ５０を決定した。様々な機能的親和性が観察された。
【表７】
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【０３５６】
生理学的および疾患濃度で可溶性ＬＩＧＨＴに結合する抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂの能力を図１Ｂに示す。ルシフェラーゼレポーターアッセイと組み合わせてＬＴＢＲを発現するＨｅＬａ細胞を使用して、可溶性ＬＩＧＨＴシグナル伝達の活性を測定した。可溶性ＬＩＧＨＴの生理学的濃度（２５または７５ｐｇ／ｍｌ）で、抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２は、可溶性ＬＩＧＨＴ活性を阻害しなかった。対照的に、可溶性ＬＩＧＨＴおよび膜ＬＩＧＨＴの両方に等しく良好に結合する抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ、Ｆ１９、（ＥＰ２２９２６６３からのＩｇＧ４  ｍＡｂ）は、可溶性ＬＩＧＨＴシグナル伝達を完全に阻害した。可溶性ＬＩＧＨＴの疾患濃度（１５０、３００、または５００ｐｇ／ｍｌ）で、０．５および１ｕｇ／ｍｌの抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２は、可溶性ＬＩＧＨＴシグナル伝達を阻害しなかった（５００ｐｇ／ｍｌの可溶性ＬＩＧＨＴのデータは図１Ｂに示す）。対照的に、可溶性ＬＩＧＨＴ反応性ｍＡｂ、Ｆ１９は、可溶性ＬＩＧＨＴ誘導性ルシフェラーゼを阻害した。加えて、ｍＡｂ（表６、３Ｂ０４および３Ｄ１２、およびＦ１９の２．５ｎＭ）のＥＣ５０よりも１７倍または３４倍高い、過剰なｍＡｂをアッセイに用い、抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２は、可溶性ＬＩＧＨＴシグナル伝達に対する効果を有さなかった。これらの結果は、本発明のｍＡｂ、３Ｂ０４および３Ｄ１２が、可溶性ＬＩＧＨＴの生理学的および疾患レベルで膜ＬＩＧＨＴに特異的であることを示す。
【０３５７】
可溶性ＬＩＧＨＴに対する２つのリード抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂの特異性を、ＢＩＡｃｏｒｅ分析によって決定し、表７におけるＥＣ５０値から計算されたＫＤと比較した（表９における結果）。簡単に、ｍＡｂ  ３Ｄ１２、３Ｂ０４を、可溶性および膜ＬＩＧＨＴ、Ｆ１９（ＥＰ２２９２６６３からのＦ１９  ＩｇＧ４  ｍＡｂ）の両方に結合するｍＡｂと比較した。無関係な抗ＨＥＬ  ｍＡｂ、２Ａ１１を、陰性対照として使用した。ｍＡｂを抗ヒトＦｃ  ｍＡｂ被覆チップ上で捕捉し、可溶性ＬＩＧＨＴを表面上に通し、ＢＩＡｃｏｒｅ  ３０００ソフトウェアを用いて動力学パラメータを計算した。使用された可溶性ＬＩＧＨＴ調製物は、アミノ酸７４〜２４０ＬＩＧＨＴ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、６６４−ＬＩ−０２５）および６４〜２４０ＬＩＧＨＴ（Ａｂｃａｍ、ａｂ８２１２３）であった。結果を表８に示す。
【表８】
2020505465.tif 000015
【０３５８】
表９からわかるように、Ｆ１９  ｍＡｂは、可溶性および膜ＬＩＧＨＴに等しい程度まで、（このｍＡｂを可溶性ＬＩＧＨＴでの免疫化によって向上させ）、２．３〜５．４ｎＭのＫＤで結合する。本発明のリードｍＡｂは、膜ＬＩＧＨＴに少なくとも５０〜１００倍の特異性で優先的に結合する。
【表９】
2020505465.tif 000016
【０３５９】
フローサイトメトリーに基づくアッセイを用いて細胞表面発現ＬＩＧＨＴへのビオチン−ＨＶＥＭ：Ｆｃおよびビオチン−ＬＴβＲ：Ｆｃ融合タンパク質をブロックする７つのキメラｍＡｂの能力をそれぞれ図２Ａおよび２Ｂに示す。これらの実験では、各抗体の勾配量を５０％飽和量の受容体融合タンパク質を含むＨＥＫ２９３ＦＦ細胞に添加した。示されるように、いずれのＦｃ−受容体結合にも影響を及ぼさなかった無関係な抗体対照にひきかえ、抗体の各々は、いずれの受容体融合タンパク質もＬＩＧＨＴに結合するのをブロックした。各実験では、全ての抗体が受容体結合を用量依存的にブロックし、非線形回帰による分析を可能にして、表１０Ａに示すＩＣ５０用量を決定した。
【表１０Ａ】
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【０３６０】
上記の実験をＥＬ４細胞上で安定に発現したＬＩＧＨＴを使用して繰り返し、結果を表１０Ｂに示す。
【表１０Ｂ】
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【０３６１】
ＬＩＧＨＴがＨＥＫ２９３ＦＦ細胞上で一時的に発現する場合、細胞の約５０％がＬＩＧＨＴを発現し、ＩＣ５０の計算における潜在的なばらつきおよび不正確さをもたらす。表１０Ｂは、安定に発現したＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞におけるＩＣ５０値を反映し、同じ細胞において計算されたＥＣ５０値（表７）と相関する。（競合細胞ベースのアッセイおよびＥＣ５０決定は４℃で行われるので、膜ＬＩＧＨＴは安定であり、可溶性ＬＩＧＨＴは内在性プロテアーゼからの切断によって放出されない）。
【０３６２】
本発明のアンタゴニスト抗膜ＬＩＧＨＴ抗体が膜ＬＩＧＨＴ媒介刺激をブロックすることを直接決定するために、膜ＬＩＧＨＴ媒介シグナル伝達をインビトロで測定するアッセイを構築した。ＬＴβＲおよびＨＶＥＭの両方を発現する細胞株ＨＴ２９を、ＬＩＧＨＴを発現する固定数のＣＨＯ  Ｋ１細胞で処理し、増殖培地を６時間の時間経過にわたる分泌ＩＬ−８の存在について分析した。ＴＮＦをＴＮＦ受容体によるＩＬ−８誘導についての陽性対照として使用し、リンホトキシンをＬＴβＲによるシグナル伝達についての陽性対照として使用した。細胞をＬＩＧＨＴと接触させることによって産生されたＩＬ−８のレベルは、ＴＮＦまたはリンホトキシンによって産生されたものと同等であった。図３からわかるように、１０ｎＭの単一濃度で試験された全てのｍＡｂがＩＬ−８分泌を阻害した。
【０３６３】
ＣＨＯ  Ｋ１−ＬＩＧＨＴ細胞は、３７℃での６時間の培養期間中、膜ＬＩＧＨＴの内在性酵素クリッピングによって可溶性ＬＩＧＨＴを産生することができることが発見された。この状況では、膜ＬＩＧＨＴおよび可溶性ＬＩＧＨＴの両方は、このアッセイにおいてＨＴ−２９細胞上に発現したＨＶＥＭおよびＬＴＢＲについて競合している。本発明のｍＡｂは膜ＬＩＧＨＴのみを選択的に阻害するので、図３において明らかなように、部分阻害のみが観察されるであろう。この制約を克服するために、膜ＬＩＧＨＴの内在性酵素切断により抵抗性があるＥＬ４−ＮＣ−ＬＩＧＨＴ細胞を調製した。３７℃でのＥＬ４−ＮＣ−ＬＩＧＨＴ細胞の２時間インキュベーションの利用は、可溶性ＬＩＧＨＴがこの期間中に検出されなかったことを明らかにした。したがって、ＥＬ４−ＮＣ−ＬＩＧＨＴ細胞およびＨＴ−２９細胞を本発明のｍＡｂの存在下で２時間３７℃でインキュベートすることは、ＬＩＧＨＴシグナル伝達の膜形態の阻害のみを検出することをもたらすであろう。ＥＬ４−ＮＣ−ＬＩＧＨＴ細胞を利用してｍＡｂのＩＣ５０を表１１に示す。
【表１１】
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【０３６４】
ＨＴ−２９細胞に存在するＨＶＥＭおよびＬＴＢＲシグナル伝達（ＩＬ−８放出）の膜ＬＩＧＨＴ刺激を阻害する本発明のｍＡｂについてのＩＣ５０値を、ＥＣ５０（表７）およびＥＬ４−ＬＩＧＨＴ細胞へのＬＴＢＲ／ＨＶＥＭ結合のＩＣ５０阻害（表１０Ｂ）と再度密接に相関させる。
【０３６５】
この細胞応答アッセイを用いて、膜ＬＩＧＨＴシグナル伝達を測定し、インビトロでＬＩＧＨＴ媒介シグナル伝達事象をブロックする本発明の抗体の能力を評価する。他の細胞上のその同種受容体への細胞表面ＬＩＧＨＴ結合によって開始されるシグナル伝達は、ＨＶＥＭ相互作用によって観察されたＴ細胞共刺激活性、または腸、脾臓、もしくはリンパ節における間質もしくは上皮由来の細胞上で発現したＬＴβＲによって増加したＩＬ−８産生を発揮するのに重要であり得ると考えられる。
【０３６６】
ヒトでは、ＬＩＧＨＴは、ＤｃＲ３、ＬＩＧＨＴ（可溶性および膜形態の両方）に密接に結合し、ＨＶＥＭおよびＬＴβＲとのその相互作用を阻害する、ＴＮＦＲスーパーファミリーのユニークな可溶性メンバーによって中和される。ＤｃＲ３中和についての主要な結合決定因子は、ＬＩＧＨＴ上の領域Ｔ１７０−Ｅ１７８である（Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２０１４：９；１２５２−１２６２）。（ＥＰ２２９２６６３からの）ｍＡｂ  Ｆ１９は、ＬＩＧＨＴへのＤｃＲ３結合を完全に阻害し（図４）、ｍＡｂ  Ｆ１９がＤｃＲ３と類似または重複するエピトープを有することを示す。ＥＬ４細胞上で安定に発現したＬＩＧＨＴに結合するＤｃＲ３と競合する抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂの能力を図４に示す。本発明の抗膜ｍＡｂ（３Ｄ１２、３Ｂ０４、および特に２Ｂ１１）は、膜ＬＩＧＨＴへのＤｃＲ３結合を部分的にのみ阻害する。可溶性ＬＩＧＨＴおよび膜ＬＩＧＨＴの両方に等しく良好に結合する抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ（ＥＰ２２９２６６３からのＦ１９）は、ＤｃＲ３を膜ＬＩＧＨＴへの結合から完全に転位させる。
【０３６７】
（ＤｃＲ３−Ｆｃ融合タンパク質の代わりに）タンパク質のよりネイティブな構成を表し得るＤｃＲ３−Ｈｉｓタグ付きバリアントを利用してこのアッセイを繰り返した（表１２）。本発明のｍＡｂ（３Ｂ０４、３Ｄ１２、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｃ１０、２Ｂ１１、および３Ｅ０９）は、ＬＩＧＨＴの天然可溶性阻害剤、ＤｃＲ３が膜ＬＩＧＨＴに最大１００ｎＭで結合するのを部分的にのみ阻害する。対照的に、可溶性ＬＩＧＨＴおよび膜ＬＩＧＨＴの両方に等しく良好に結合する（ＥＰ２２９２６６３からの）抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ  Ｆ１９は、ＤｃＲ３を膜ＬＩＧＨＴへの結合から完全に転位させ、可溶性ＬＩＧＨＴに対して提起またはスクリーニングされた本発明の抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂと他の抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂとの間の驚くべき重要な機能差を強調する。
【表１２】
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【０３６８】
この結果は２つの点を示唆する。第一に、本発明のｍＡｂは、膜ＬＩＧＨＴで、内在性ＬＩＧＨＴ阻害剤、ＤｃＲ３と部分的にのみ競合する。第二に、ＤｃＲ３は、ヘパラン硫酸プロテオグリカンと相互作用することによって細胞に結合する細胞接着タンパク質である（Ｙ−Ｃ  Ｃｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００６：１７６；１７３−１８０）。このメカニズムによって、ＤｃＲ３は、活性化免疫細胞からのプロテアーゼ切断によって放出される可溶性ＬＩＧＨＴのデポとなり得る。可溶性ＬＩＧＨＴに結合するｍＡｂまたは受容体融合体（ＬＴＢＲ−Ｉｇ）は、競合結合によって可溶性ＬＩＧＨＴをＤｃＲ３から転位させ得る。実際に、ＬＴＢＲ−Ｉｇ（Ｂｉｅｎｋｏｗｓｋａ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  ９：ｅ１１２５４５）または抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ（Ｚｈａｎｇ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．２０１７；６：２９２−３０１）で治療されたヒトにおける研究において可溶性ＬＩＧＨＴの増加したレベルが報告されている。可溶性ＬＩＧＨＴに結合および／または可溶性ＬＩＧＨＴについてＤｃＲ３と競合する薬剤での長期治療は有害であり得る。本発明のｍＡｂ（３Ｂ０４、３Ｄ１２、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｃ１０、２Ｂ１１、および３Ｅ０９）は、膜ＬＩＧＨＴがＤｃＲ３に結合するのを部分的にのみ阻害し、加えて、可溶性ＬＩＧＨＴに対する特異性が膜ＬＩＧＨＴよりも＞１００倍低く、したがって可溶性ＬＩＧＨＴをインビボでＤｃＲ３から転位させることは期待されないであろう。
【０３６９】
本発明のｍＡｂがドナー細胞上で発現したネイティブＬＩＧＨＴに結合することを決定するために、ＣＤ８  Ｔ細胞を抗ＣＤ３および抗ＣＤ８で刺激し、結合をフローサイトメトリーによって評価した（図５）。各ヒストグラムは、指示された抗体で染色された刺激細胞、無関係な抗体２Ａ１１で染色された刺激細胞、および指示された抗体で染色された非刺激細胞を表す。７つ全ての抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂがＣＤ８細胞に特異的に結合した。同じ実験では、刺激ＣＤ４細胞、好中球、単球、およびマクロファージにおいて７つ全ての抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂについての陽性結合も観察された。
【０３７０】
ＬＩＧＨＴの一塩基多型（ＳＮＰ）バリアントへの抗体結合
ヒトＬＩＧＨＴについて少なくとも３つの非同義一塩基多型（ＳＮＰ）バリアントが存在する。１つのＳＮＰバリアントはアミノ酸位置２１４にあるグルタミン酸（Ｅ）またはリジン（Ｋ）のいずれかをコードし、他のＳＮＰバリアントはアミノ酸位置３２にあるセリン（Ｓ）またはロイシン（Ｌ）のいずれかをコードする。様々な民族集団にわたる各ＳＮＰバリアントの対立遺伝子頻度は変動し、したがって、所与のＳＮＰバリアントに結合する抗膜ＬＩＧＨＴ抗体は、所与のＳＮＰバリアントのより高い発生率を有する民族集団におけるＬＩＧＨＴ媒介疾患またはその症状の治療または予防においてより有効であり得る。
【０３７１】
この例（図６）では、本明細書で提供される抗膜ＬＩＧＨＴ抗体が、ＬＩＧＨＴ細胞外および細胞質ドメインに存在する非同義ＬＩＧＨＴ  ＳＮＰバリアントに結合することが示された。実験を各ＬＩＧＨＴ  ＳＮＰバリアントについて各ｍＡｂで３回繰り返した。無関係の抗ＨＥＬ  ｍＡｂを陰性対照として使用し、市販の抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂを陽性対照として使用した。ｍＡｂ  ３Ｃ１０、３Ｂ０４、３Ａ０７、３Ｄ１２、および２Ｂ１１は、全てのＬＩＧＨＴ  ＳＮＰバリアントに等しく良好に結合した。ｍＡｂ  ２Ｅ０８および３Ｅ０９は、Ｅ２１４  ＳＮＰに対するより低い結合を示した。
【０３７２】
ヒト化３Ｂ０４および３Ｄ１２  ＩｇＧ４  ｍＡｂの分析
ｍＡｂ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２のヒト化および脱免疫化バリアントの配列を図９および１０に示す。３Ｂ０４および３Ｄ１２の１６個全てのバリアントを、ヒトＩｇＧ４（Ｓ２４１ＰおよびＬ２４８Ｅ、Ｋａｂａｔ）として調製し、２つのアッセイ、ＥＬ４細胞上で安定に発現したＬＩＧＨＴへのｍＡｂ結合のＥＣ５０分析および膜ＬＩＧＨＴ（ＥＬ４−ＮＣ−ＬＩＧＨＴ細胞）によって刺激されたＨＴ−２９細胞からのＩＬ−８分泌のｍＡｂ阻害についてのＩＣ５０計算において試験した。分析の結果を表１３に示す。
【表１３】
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【０３７３】
全ての３Ｂ０４バリアントおよび全ての３Ｄ１２バリアントは、膜ＬＩＧＨＴへのＥＣ５０結合およびＨＴ−２９細胞からの膜ＬＩＧＨＴ刺激ＩＬ−８放出の阻害についてのＩＣ５０に関して同様の活性を有する。加えて、全ての３Ｂ０４バリアントおよび全ての３Ｄ１２バリアントは、親キメラ抗体（表１３）と同等の活性を有する。膜ＬＩＧＨＴへのＬＴＢＲ−ＦｃまたはＨＶＥＭ−Ｆｃ結合についてのヒト化ｍＡｂでの競合アッセイも、３Ｂ０４および３Ｄ１２の全てのバリアントについて同様の阻害ならびに親キメラｍＡｂと同等の活性をもたらした。
【０３７４】
質量分析によるＬＩＧＨＴに結合したｍＡｂの結合比
ネイティブ質量分光測定を利用して、ネイティブトリマーＬＩＧＨＴに結合したｍＡｂの比を決定した。３Ｂ０４＿（ＩｇＧ４）の測定質量は１４７２５６±０．７Ｄａであり、Ｆ１９  抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ、（ＥＰ２２９２６６３からのＩｇＧ４  ｍＡｂ）は１４７３６４±６．６Ｄａであった。モノクローナル抗体とは異なり、ＬＩＧＨＴタンパク質は、翻訳後グリコシル化によって、予想どおり高度に異種性であった。Ｌｉｇｈｔタンパク質の２つの主要な集団を６８ｋＤａおよび７１ｋＤａの測定質量で記録した。これらのプロテオフォームの両方は、タンパク質の理論的なトリマー質量、６２８２７．３８Ｄａよりも質量が高い。付加された質量値は、それぞれモノマーあたり２０００Ｄａおよび３００２Ｄａであり、異なるグリカンによるものである。ＬＩＧＨＴを、１：５モル比（タンパク質：抗体）で、各抗体でインキュベートして、ＬＩＧＨＴ−抗体複合体を形成した。ＬＩＧＨＴのＦ１９  ｍＡｂでのインキュベーションは、１つのＬＩＧＨＴタンパク質の化学量論および３つのＦ１９抗体（５０４３７０±５７  Ｄａ）での大きな複合体の形成を引き起こし、（可溶性および膜ＬＩＧＨＴに等しく結合する）Ｆ１９  ｍＡｂがトリマー中のＬＩＧＨＴの１コピーに結合すること（すなわち、３：１比）を示した。３Ｂ０４でのＬＩＧＨＴ結合の場合、化学量論は、１つのＬＩＧＨＴタンパク質あたり１つの抗体に割り当てることができる（２１９６３０±２２１Ｄａおよび２１６９６０±３８０の質量が記録された）。
【０３７５】
フローサイトメトリーによる膜ＬＩＧＨＴに結合したｍＡｂの結合比
図１１は、ＥＬ４細胞上で安定に発現したＬＩＧＨＴに結合する抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ（３Ｂ０４および３Ｄ１２）のフローサイトメトリー分析を示す。膜ＬＩＧＨＴへのＩｇＧ４  ｍＡｂ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２結合の最大シグナルは、約４００００ＭＦＩである。対照的に、抗ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂｓ  Ｆ１９およびＦ２３（ＥＰ２２９２６６３からのＩｇＧ４  ｍＡｂ）は、約１２００００ＭＦＩの最大シグナルをもたらした。ｍＡｂ  Ｆ１９およびｍＡｂ  Ｆ２３の結合比は、抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２の約３倍である。このデータは、ｍＡｂ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２が膜ＬＩＧＨＴに１：１比で結合し、これがＬＩＧＨＴに３：１比で結合する膜および可溶性ＬＩＧＨＴの両方に結合する他の抗ＬＩＧＨＴと全く対照的であることを示す。本発明の他のｍＡｂ、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｃ１０、３Ｅ０９、および２Ｂ１１も、フローサイトメトリーによってｍＡｂ  Ｆ１９およびＦ２３と比較される場合、ＬＩＧＨＴに１：１比で結合する。
【０３７６】
水素重水素交換（ＨＤＸ）ＨＤＸ質量分析からのエピトープ同定
ＨＤＸを出発点として用い、ＬＩＧＨＴタンパク質に結合する抗体３Ｂ０４のエピトープを同定した。ＬＩＧＨＴタンパク質の６９．２％の配列カバレッジを達成し、観察されなかった領域はジサルフェート結合およびグリコシル化の存在によるものであった。ネイティブ状態のタンパク質の構造を保存するために、グリカンはＬＩＧＨＴから除去しなかった。ＬＩＧＨＴの消化は合計５０個のペプチドをもたらし、これらのペプチドのうちの４８個を（ＬＩＧＨＴの残基８４〜２３８をカバーする）分析に使用した。表１４におけるデータは、トリプリケートにおける４つの時点からのものであり、４８個のＬＩＧＨＴペプチドのうちの５個の結果ならびにｍＡｂ  ３Ｂ０４および対照ｍＡｂの存在下での重水素の取り込みを示す。ペプチド２０３〜２０９および２０３〜２１９は、３Ｂ０４と対照ｍＡｂとの間で取り込みに有意な差を示さないことが示される。他の４３個のペプチドも、重水素の存在または不在下でｍＡｂ  ３Ｂ０４の取り込みに差がないことを示した（データは示されない）。ＬＩＧＨＴおよび重水素化ＬＩＧＨＴへのｍＡｂ  ３Ｂ０４結合を比較することによって、３Ｂ０４が特にアミノ酸Ｒ１９５、Ｖ１９６、およびＷ１９７でより低い取り込みをもたらしたことが観察された。（３Ｂ０４と対照ｍＡｂとの間の取り込みの差、表１４、太字の値）。ＨＤＸによって定義されるｍＡｂ  ３Ｂ０４のエピトープは、可溶性ＬＩＧＨＴの残基１９５〜１９７に集中している。ＨＤＸ分析の結果をガイドとして用いて、アラニンスキャニングを用いてその後分析された関心領域を同定した。
【表１４】
2020505465.tif 000022
【０３７７】
アラニンスキャニング変異誘発およびフローサイトメトリーによるエピトープ同定
ＨＤＸ質量分析からの結果は、１９５〜１９７エピトープを含んだが、ＨＤＸによってカバーされないペプチド（例えば、ＬＩＧＨＴのアミノ酸１８８〜１９３）も含んだ、アラニンスキャニング変異誘発のためのペプチドを設計するのを補助した。加えて、この方法論は、ネイティブ膜ＬＩＧＨＴにおいてエピトープを定義するのに用いることができる。
【０３７８】
アラニン変異をＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクトされた全長ＬＩＧＨＴに導入することからの結果は、Ｆ５７Ａ〜Ｅ８６Ａまでの３０個の単一アミノ酸アラニン置換ならびに１０個の四アミノ酸アラニン置換、６０〜６３、６４〜６７、６８〜７１、７２〜７５、７６〜７９、８０〜８３、８４〜８７、８８〜９１、９２〜９５、および９６〜９９が、本発明のｍＡｂ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２とＷＴ  ＬＩＧＨＴ対照との間で結合の差をもたらさなかったことを明らかにした。加えて、ＬＴＢＲ−Ｆｃも、上記アラニン置換ＬＩＧＨＴ構築物とＷＴ  ＬＩＧＨＴとの間で結合の差を示さなかった。これは、ｍＡｂ  ３Ｂ０４および３Ｄ１２のエピトープがＬＩＧＨＴアミノ酸５７〜９９の領域内にはないことを示す。２個の単一アミノ酸アラニン置換Ｇ１８８Ａ、Ｒ１８９Ａ、１個のセリン置換、Ａ１９０Ｓ、および１７個の単一アミノ酸アラニン置換、Ｔ１９１Ａ〜Ｖ２０７Ａは、本発明のｍＡｂによって認識されるエピトープの同定をもたらし、結果を表１５に示す。残基Ｄ１９９Ａ〜Ｖ２０７Ａにおけるアラニン置換を利用してＷＴと比較して本発明のｍＡｂ間には結合の差はなく、これらの結果は示されていない。加えて、ＬＴＢＲ−Ｆｃは、ＷＴ  ＬＩＧＨＴと比較してアミノ酸置換Ｇ１８８Ａ〜Ｖ２０７Ａへの結合には差がないことを示し、アミノ酸置換がその受容体ＬＴＢＲへのＬＩＧＨＴ結合を損なわなかったことを示した。ＷＴ対照に対して結合の有意な減少を示した置換を表１５において太字で強調する。本発明のｍＡｂの全ては、それらのエピトープがＬＩＧＨＴのアミノ酸１８８〜１９７に位置するという点で類似するプロファイルを示す。ＬＩＧＨＴにおけるＡ１９０Ｓ、Ｓ１９２Ａ、およびＶ１９６Ａの保存的置換は、ＷＴ対照と比較してｍＡｂの結合の差を示さなかった。アラニンスキャニング変異誘発によって定義される本発明のｍＡｂのエピトープは、ＬＩＧＨＴの残基１８８〜１９７である。これは図１２においてＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ．（Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２２：１２５２−６２；２０１４）からのＬＩＧＨＴの結晶構造からのＬＩＧＨＴトリマーの３Ｄ視覚化を利用して視覚的に示される。これは、ＬＩＧＨＴトリマーの「先端」に結合し、１：１結合を説明するｍＡｂをもたらすであろう。このエピトープの影響は、例えば、可溶性および膜ＬＩＧＨＴの両方に等しく結合し、ＬＩＧＨＴに３：１比で結合する（ＥＰ２２９２６６３の）ｍＡｂ  Ｆ１９およびＦ２３と比較して、膜ＬＩＧＨＴを中和するのに必要なｍＡｂ  ３Ｂ０４の投与の３３．３％減少をもたらすであろう。
【表１５】
2020505465.tif 000023
【０３７９】
ｍＡｂ  ３Ｂ０４  ｖａｒ１６のインビボ有効性
抗膜ＬＩＧＨＴ  ｍＡｂ  ３Ｂ０４  ｖａｒ１６のインビボ有効性を、ｈｕ−ＮＯＧマウスにおけるＤＳＳ誘導性大腸炎モデルにおいて試験した（図１３）。このモデルでは、陽性対照、ヒュミラ（抗ＴＮＦ）は通常、グローバル臨床スコアの有意な低下をＩｇＧ対照と比較して９〜１１日目から誘導する。意外であったのは、ｍＡｂ  ３Ｂ０４  ｖａｒ１６が、ＩｇＧおよびヒュミラ対照に対してこのモデルにおいてグローバル臨床スコアの有意な（ｐ＜０．０５）減少を早くも２日目に誘導したことである。３Ｂ０４  ｖａｒ１６は、実験プロトコル全体を通して持続された疾患退行の速やかな早期発生を誘導した。３Ｂ０４  ｖａｒ１６の効果は、このモデルにおいても抗ＴＮＦ陽性対照に対して有意に優れていた（ｐ＜０．０５）。少なくとも３Ｂ０４、３Ｄ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６の投与は、ｈｕ−ＮＯＧマウスにおけるＤＳＳ誘導性大腸炎モデルにおいてグローバル臨床スコアの同様に有意な（ｐ＜０．０５）減少をもたらすことが期待される。
【０３８０】
項
本発明は、本発明の他の特徴および態様と組み合わされ得る、番号付けされた項として列挙される下記の実施形態をさらに提供する：
１．
配列番号８、１６、２４、３２、４０、４８、５６、６４、７２、８０、８８、９６、１０４、１１２、および１２０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＨＣＤＲ３、ならびに／または
配列番号４、１２、２０、２８、３６、４４、５２、６０、６８、７６、８４、９２、１００、１０８、および１１６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＬＣＤＲ３を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３８１】
２．
配列番号８、１６、２４、３２、４０、４８、５６、６４、７２、８０、８８、９６、１０４、１１２、および１２０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するＶＨＣＤＲ３、ならびに／または
配列番号４、１２、２０、２８、３６、４４、５２、６０、６８、７６、８４、９２、１００、１０８、および１１６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するＶＬＣＤＲ３を含む、項１の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３８２】
３．
配列番号８、１６、２４、３２、４０、４８、５６、６４、７２、８０、８８、９６、１０４、１１２、および１２０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３、ならびに／または
配列番号４、１２、２０、２８、３６、４４、５２、６０、６８、７６、８４、９２、１００、１０８、および１１６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む、項１の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３８３】
４．
配列番号６、１４、２２、３０、３８、４６、５４、６２、７０、７８、８６、９４、１０２、１１０、１１８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＨＣＤＲ１、
配列番号７、１５、２３、３１、３９、４７、５５、６３、７１、７９、８７、９５、１０３、１１１、１１９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＨＣＤＲ２、および
配列番号８、１６、２４、３２、４０、４８、５６、６４、７２、８０、８８、９６、１０４、１１２、および１２０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＨＣＤＲ３、
ならびに／または
配列番号２、１０、１８、２６、３４、４２、５０、５８、６６、７４、８２、９０、９８、１０６、１１４のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＬＣＤＲ１、
配列番号３、１１、１９、２７、３５、４３、５１、５９、６７、７５、８３、９１、９９、１０７、１１５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＬＣＤＲ２、および
配列番号４、１２、２０、２８、３６、４４、５２、６０、６８、７６、８４、９２、１００、１０８、および１１６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するＶＬＣＤＲ３を含む、項１〜３のいずれか１つの抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３８４】
５．
配列番号６、１４、２２、３０、３８、４６、５４、６２、７０、７８、８６、９４、１０２、１１０、１１８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するＶＨＣＤＲ１、
配列番号７、１５、２３、３１、３９、４７、５５、６３、７１、７９、８７、９５、１０３、１１１、１１９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するＶＨＣＤＲ２、および
配列番号８、１６、２４、３２、４０、４８、５６、６４、７２、８０、８８、９６、１０４、１１２、および１２０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するＶＨＣＤＲ３、
ならびに／または
配列番号２、１０、１８、２６、３４、４２、５０、５８、６６、７４、８２、９０、９８、１０６、１１４のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するＶＬＣＤＲ１、
配列番号３、１１、１９、２７、３５、４３、５１、５９、６７、７５、８３、９１、９９、１０７、１１５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するＶＬＣＤＲ２、および
配列番号４、１２、２０、２８、３６、４４、５２、６０、６８、７６、８４、９２、１００、１０８、および１１６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有するＶＬＣＤＲ３を含む、項１〜４のいずれか１つの抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３８５】
６．
配列番号６、１４、２２、３０、３８、４６、５４、６２、７０、７８、８６、９４、１０２、１１０、１１８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ１、
配列番号７、１５、２３、３１、３９、４７、５５、６３、７１、７９、８７、９５、１０３、１１１、１１９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ２、および
配列番号８、１６、２４、３２、４０、４８、５６、６４、７２、８０、８８、９６、１０４、１１２、および１２０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＨＣＤＲ３、
ならびに／または
配列番号２、１０、１８、２６、３４、４２、５０、５８、６６、７４、８２、９０、９８、１０６、１１４のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ１、
配列番号３、１１、１９、２７、３５、４３、５１、５９、６７、７５、８３、９１、９９、１０７、１１５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ２、および
配列番号４、１２、２０、２８、３６、４４、５２、６０、６８、７６、８４、９２、１００、１０８、および１１６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＶＬＣＤＲ３を含む、項１〜５のいずれか１つの抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３８６】
７．
配列番号５、配列番号１３、配列番号２１、配列番号２９、配列番号３７、配列番号４５、配列番号５３、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５、配列番号９３、配列番号１０１、配列番号１０９、配列番号１１７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する重鎖可変領域、
および／または
配列番号１、配列番号９、配列番号１７、配列番号２５、配列番号３３、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号６５、配列番号７３、配列番号８１、配列番号８９、配列番号９７、配列番号１０５、配列番号１１３からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む、項１〜６のいずれか１つの抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３８７】
８．
配列番号５、配列番号１３、配列番号２１、配列番号２９、配列番号３７、配列番号４５、配列番号５３、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５、配列番号９３、配列番号１０１、配列番号１０９、配列番号１１７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する重鎖可変領域、
および／または
配列番号１、配列番号９、配列番号１７、配列番号２５、配列番号３３、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号６５、配列番号７３、配列番号８１、配列番号８９、配列番号９７、配列番号１０５、配列番号１１３からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む、項１〜７のいずれか１つの抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３８８】
９．
配列番号５、配列番号１３、配列番号２１、配列番号２９、配列番号３７、配列番号４５、配列番号５３、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５、配列番号９３、配列番号１０１、配列番号１０９、配列番号１１７からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、
および／または
配列番号１、配列番号９、配列番号１７、配列番号２５、配列番号３３、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号６５、配列番号７３、配列番号８１、配列番号８９、配列番号９７、配列番号１０５、配列番号１１３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、項１〜８のいずれか１つの抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３８９】
１０．抗原結合分子が、
（ａ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号６）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号７）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号３）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｂ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号４６）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号４７）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４８）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号４２）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号４３）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号４４）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｃ）アミノ酸配列ＤＹＡＩＨ（配列番号８６）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＳＴＹＹＧＤＡＳＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号８７）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号８８）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＫＡＳＱＳＶＤＹＤＧＤＳＹＭＮ（配列番号８２）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＡＳＮＬＥＳ（配列番号８３）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＬＴ（配列番号８４）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｄ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号９４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号９５）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号９６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（配列番号９０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＴＳＮＬＡＳ（配列番号９１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号９２）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｅ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号１０２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号１０３）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１０４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（配列番号９８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＴＳＮＬＡＳ（配列番号９９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＷＳＳＹＰＬＴ（配列番号１００）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｆ）アミノ酸配列ＤＹＹＭＹ（配列番号１１０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＩＧＤＧＧＩＹＴＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号１１１）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＧＴＧＤＧＦＡＹ（配列番号１１２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＬＥＳ（配列番号１０７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＹＴ（配列番号１０８）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｇ）アミノ酸配列ＤＹＡＩＨ（配列番号１１８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＳＴＹＹＧＤＡＳＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号１１９）を含むＶＨＣＤＲ２、アミノ酸配列ＳＲＧＥＹＧＮＹＤＡＭＤＹ（配列番号１２０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号１１４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＲＡＳＮＬＥＳ（配列番号１１５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＱＳＮＥＤＰＹＴ（配列番号１１６）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、からなる群から選択される、いずれかの先行項の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３９０】
１１．抗原結合分子が、
（ａ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｂ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｃ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｄ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号１２）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｅ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｆ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｇ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
それらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｈ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号１８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号１９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２０）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｉ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｊ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｋ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｌ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号２６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号２７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号２８）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｍ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号１４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号１５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号１６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｎ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号２２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号２３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号２４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｏ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号３２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｐ）アミノ酸配列ＤＹＥＭＨ（配列番号３８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＱＧ（配列番号３９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号４０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号３４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号３５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＴＴＰＷＴ（配列番号３６）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、からなる群から選択される、いずれかの先行項の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３９１】
１２．抗原結合分子が、
（ａ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｂ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｃ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｄ）アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５０）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５１）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号５２）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｅ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号５６）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｆ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｇ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｈ）アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号５８）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号５９）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６０）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｉ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｊ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｋ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｌ）アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号６６）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＤ（配列番号６７）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号６８）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｍ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号５４）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＫＧ（配列番号５５）を含むＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｎ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号６２）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＮＱＫＦＱＧ（配列番号６３）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号６４）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｏ）アミノ酸配列ＤＳＥＩＨ（配列番号７０）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７１）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号７２）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含むか、
またはそれらと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨＣＤＲおよびＶＬＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、
（ｐ）アミノ酸配列ＤＳＥＭＨ（配列番号７８）を含むＶＨＣＤＲ１、アミノ酸配列ＥＩＤＰＥＴＧＧＴＡＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号７９）を含むＶＨＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＥＴＤＹＦＦＤＹ（配列番号８０）を含むＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
アミノ酸配列ＲＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮ（配列番号７４）を含むＶＬＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＴＮＬＡＥ（配列番号７５）を含むＶＬＣＤＲ２、およびアミノ酸配列ＱＮＶＬＳＴＰＷＴ（配列番号７６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子と、からなる群から選択される、いずれかの先行項の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３９２】
１３．抗原結合分子が、
（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号５および配列番号１と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｂ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４１のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号４５および配列番号４１と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｃ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号８１のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号８５および配列番号８１と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｄ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号８９のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号９３および配列番号８９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｄ）配列番号１０１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号９７のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号１０１および配列番号９７と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｅ）配列番号１０９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号１０９および配列番号１０５と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｆ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号１１７および配列番号１１３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、からなる群から選択される重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、いずれかの先行項の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３９３】
１４．抗原結合分子が、
（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号１３および配列番号９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｂ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号２１および配列番号９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｃ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号２９および配列番号９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号３７および配列番号９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｅ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＬ（またはそれぞれ配列番号１３および配列番号１７と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むもの）と、
（ｆ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号２１および配列番号１７と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｇ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号３７および配列番号１７と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｈ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２５のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号１３および配列番号２５と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｉ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２５のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号２１および配列番号２５と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｊ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２５のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号３７および配列番号２５と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｋ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号２５のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号３７および配列番号２５と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｌ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号３３のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号１３および配列番号３３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｍ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号３３のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号２１および配列番号３３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｎ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号３３のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号２９および配列番号３３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、
（ｏ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号３３のアミノ酸配列を含むＶＬ（それぞれ配列番号３７および配列番号３３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列を含むものと、からなる群から選択される重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、いずれかの先行項の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３９４】
１５．抗原結合分子が、
（ａ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号５３および配列番号４９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｂ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号６１および配列番号４９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｃ）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号６９および配列番号４９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｄ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号７７および配列番号４９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｅ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号５３および配列番号５７と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｆ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号６１および配列番号５７と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｇ）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号６９および配列番号５７と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｈ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号７７および配列番号５７と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｉ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号５３および配列番号６５と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｊ）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号６９および配列番号６５と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｋ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号７７および配列番号６５と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｌ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号５３および配列番号７３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｍ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号６１および配列番号７３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｎ）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号６９および配列番号７３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、
（ｏ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＶＨおよび配列番号７３のアミノ酸配列を含むＶＬ、またはそれぞれ配列番号７７および配列番号７３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬ配列と、からなる群から選択される重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、いずれかの先行項の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３９５】
１６．抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子が、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体である、いずれかの先行項の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３９６】
１７．抗体が、６つ全てのＣＤＲ領域にわたる１〜１０、１〜５、または１〜２個の保存的アミノ酸置換を含む、項１６の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３９７】
１８．抗体が、可変重および軽領域の一方または両方において１〜１０、１〜５、または１〜２個の保存的アミノ酸置換を含む、項１６の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３９８】
１９．抗体が、フレームワーク領域において１〜１０、１〜５、または１〜２個の保存的アミノ酸置換を含む、項１６の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０３９９】
２０．ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、項１〜１９のいずれか１つの抗原結合分子へのＬＩＧＨＴの結合を阻害する、抗原結合分子。
【０４００】
２１．抗原結合分子が、ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体へのＬＩＧＨＴの結合を阻害する、項２０の抗原結合分子。
【０４０１】
２２．項１〜１９のいずれか１つの抗原結合分子によって結合したＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する、抗原結合分子。
【０４０２】
２３．抗原結合分子が、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体によって結合したＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する、項２２の抗原結合分子。
【０４０３】
２４．ヒトＬＩＧＨＴのエピトープに特異的に結合する抗原結合分子であって、エピトープが、アミノ酸ＧＲＡＴＳＳＳＲＶＷ（配列番号１２４）を含む、抗原結合分子。
【０４０４】
２５．抗原結合分子が、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６、ならびにその断片およびバリアントからなる群から選択される、項２４の抗原結合分子。
【０４０５】
２６．抗原結合分子が、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６である、項２５の抗原結合分子。
【０４０６】
２７．ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する抗原結合分子であって、ヒトＬＩＧＨＴのトリマーに１：１の比で結合する、抗原結合分子。
【０４０７】
２８．抗原結合分子が、３Ｂ０４、３Ｄ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６、ならびにその断片およびバリアントからなる群から選択される、項２７の抗原結合分子。
【０４０８】
２９．抗原結合分子が、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６である、項３３の抗原結合分子。ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、項１〜１９のいずれか１つの抗原結合分子とＬＩＧＨＴへの結合について競合する、抗原結合分子。
【０４０９】
３０．抗原結合分子が、ＬＩＧＨＴに特異的に結合し、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体とＬＩＧＨＴへの結合について競合する、項２９の抗原結合分子。
【０４１０】
３１．特定配列（複数可）において１〜１０個のアミノ酸置換を含む、項１〜１６のいずれか１つによる抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４１１】
３２．特定配列（複数可）において１〜５個のアミノ酸置換を含む、項３１による抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４１２】
３３．特定配列（複数可）において１〜２個のアミノ酸置換を含む、項３１による抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４１３】
３４．１つ以上のアミノ酸置換が、抗原結合分子のＣＤＲ領域（複数可）にある、項３１〜３３のいずれか１つによる抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４１４】
３５．１つ以上のアミノ酸置換が、抗原結合分子の可変領域の一方または両方にある、項３１〜３３のいずれか１つによる抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４１５】
３６．１つ以上のアミノ酸置換が、抗原結合分子のフレームワーク領域にある、項３１〜３３のいずれか１つによる抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４１６】
３７．抗原結合分子が、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体から誘導されるバリアントである、項３１〜３３のいずれか１つによる抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４１７】
３８．アミノ酸置換が、保存的アミノ酸置換である、項１７〜１９または３１〜３３のいずれか１つによる抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４１８】
３９．抗原結合分子が、抗体またはその断片もしくは誘導体である、いずれかの先行項の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４１９】
４０．抗体断片または誘導体が、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄＡｂ、Ｆｄ、またはダイアボディである、項３９の抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４２０】
４１．抗体が、モノクローナル抗体である、項３９の抗ＬＩＧＨＴ抗体。
【０４２１】
４２．モノクローナル抗体が、ヒト化される、項４１の抗ＬＩＧＨＴ抗体。
【０４２２】
４３．モノクローナル抗体が、脱免疫化される、項４１の抗ＬＩＧＨＴ抗体。
【０４２３】
４４．抗体または抗体断片が、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、またはＩｇＹ抗体または抗体断片である、項３９〜４３のいずれか１つの抗ＬＩＧＨＴ抗体または抗体断片。
【０４２４】
４５．抗体が、ＩｇＧ抗体である、項３９〜４４のいずれか１つの抗ＬＩＧＨＴ抗体または抗体断片。
【０４２５】
４６．ＩｇＧ抗体または抗体断片が、ＩｇＧ４抗体または抗体断片である、項４５の抗ＬＩＧＨＴ抗体または抗体断片。
【０４２６】
４７．抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子が、項１〜１９のいずれか１つの抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子のヒト化または脱免疫化誘導体である、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４２７】
４８．抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子が、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、および２Ｂ１１からなる群から選択される抗体のヒト化または脱免疫化誘導体である、項４７による抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子。
【０４２８】
４９．項１〜１９のいずれか１つによる抗原結合分子または抗体の親和性成熟変異体。
【０４２９】
５０．親和性成熟変異体が、親抗体と比較してＬＩＧＨＴに対してより高い親和性を有する、項４９の親和性成熟変異体。
【０４３０】
５１．親和性成熟変異体が、２Ｅ０８、３Ａ０７、３Ｂ０４、３Ｃ１０、３Ｄ１２、３Ｅ０９、２Ｂ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１、３Ｂ０４＿ｖａｒ２、３Ｂ０４＿ｖａｒ３、３Ｂ０４＿ｖａｒ４、３Ｂ０４＿ｖａｒ５、３Ｂ０４＿ｖａｒ６、３Ｂ０４＿ｖａｒ７、３Ｂ０４＿ｖａｒ８、３Ｂ０４＿ｖａｒ９、３Ｂ０４＿ｖａｒ１０、３Ｂ０４＿ｖａｒ１１、３Ｂ０４＿ｖａｒ１２、３Ｂ０４＿ｖａｒ１３、３Ｂ０４＿ｖａｒ１４、３Ｂ０４＿ｖａｒ１５、３Ｂ０４＿ｖａｒ１６、３Ｄ１２＿ｖａｒ１、３Ｄ１２＿ｖａｒ２、３Ｄ１２＿ｖａｒ３、３Ｄ１２＿ｖａｒ４、３Ｄ１２＿ｖａｒ５、３Ｄ１２＿ｖａｒ６、３Ｄ１２＿ｖａｒ７、３Ｄ１２＿ｖａｒ８、３Ｄ１２＿ｖａｒ９、３Ｄ１２＿ｖａｒ１０、３Ｄ１２＿ｖａｒ１１、３Ｄ１２＿ｖａｒ１２、３Ｄ１２＿ｖａｒ１３、３Ｄ１２＿ｖａｒ１４、３Ｄ１２＿ｖａｒ１５、および３Ｄ１２＿ｖａｒ１６からなる群から選択される抗体から誘導される親和性成熟変異体である、項４９または項５０の親和性成熟変異体。
【０４３１】
５２．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４３２】
５３．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、膜結合ＬＩＧＨＴに特異的に結合する、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４３３】
５４．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、膜結合ヒトＬＩＧＨＴに特異的に結合する、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４３４】
５５．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、可溶性ＬＩＧＨＴと比較して膜結合ＬＩＧＨＴに対してより高い親和性を有する、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４３５】
５６．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、可溶性ＬＩＧＨＴと比較して膜結合ＬＩＧＨＴに対して少なくとも約１０倍高い親和性を有する、項５５の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４３６】
５７．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、可溶性ＬＩＧＨＴと比較して膜結合ＬＩＧＨＴに対して少なくとも約５０倍高い親和性を有する、項５５の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４３７】
５８．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、可溶性ＬＩＧＨＴと比較して膜結合ＬＩＧＨＴに対して少なくとも約１００倍高い親和性を有する、項５５の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４３８】
５９．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、約５ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４３９】
６０．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、約１ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する、項５９の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４４０】
６１．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、約０．５ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する、項５９の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４４１】
６２．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、約１ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４４２】
６３．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、約５ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４４３】
６４．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、約１０ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４４４】
６５．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、約１ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値および約１ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する、抗原結合分子またはその親和性成熟変異体。
【０４４５】
６６．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、約１ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値および約５ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する、抗原結合分子またはその親和性成熟変異体。
【０４４６】
６７．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、約０．５ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値および約１０ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値、または約０．１ｎＭ未満の膜ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値および約１０ｎＭ超の可溶性ＬＩＧＨＴに対するＫＤ値を有する、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子またはその親和性成熟変異体。
【０４４７】
６８．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、膜ＬＩＧＨＴのＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの結合またはＬＩＧＨＴ発現細胞のＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの結合を阻害する、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４４８】
６９．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、結合を少なくとも２５％、少なくとも５０％、または少なくとも７５％阻害する、項６８の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４４９】
７０．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、膜ＬＩＧＨＴのデコイ受容体３への、または膜ＬＩＧＨＴを発現する細胞のデコイ受容体３への結合を部分的に阻害する、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４５０】
７１．抗原結合分子または親和性成熟変異体が、インビボまたはインビトロ投与される場合ＩＬ−８の分泌を減少させる、いずれかの先行項の抗原結合分子または親和性成熟変異体。
【０４５１】
７２．項１〜７１のいずれか１つの抗原結合分子または項４９〜７１のいずれか１つの親和性成熟変異体を含む薬学的組成物。
【０４５２】
７３．別の治療活性剤をさらに含む、項７２の薬学的組成物であって、薬学的組成物が、別の治療活性剤との組み合わせでの使用のためである、薬学的組成物。
【０４５３】
７４．他の治療活性剤が、抗炎症剤である、項７３の薬学的組成物。
【０４５４】
７５．抗炎症剤が、ＮＳＡＩＤまたはステロイドである、項７４の薬学的組成物。
【０４５５】
７６．ＮＳＡＩＤが、サリチレート（アスピリン（アセチルサリチル酸）、ジフニサル、サリチル酸、サルサレートなど）、プロピオン酸誘導体（イブプロフェン、デキシブプロフェン、ナプロキセン）、酢酸誘導体（インドメタシン、ジクロフェナク）、エノール酸誘導体、アントラニル酸誘導体（フェナメート）、選択的ＣＯＸ−２阻害剤、およびスルホンアニリドからなる群から選択される、項７５の薬学的組成物。
【０４５６】
７７．他の治療活性剤が、免疫抑制剤である、項７３の薬学的組成物。
【０４５７】
７８．免疫抑制剤が、グルココルチコイドおよび細胞増殖抑制剤からなる群から選択される、項７７の薬学的組成物。
【０４５８】
７９．グルココルチコイドが、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、およびアルドステロンからなる群から選択される、項７８の薬学的組成物。
【０４５９】
８０．細胞増殖抑制剤が、アルキル化剤、代謝拮抗剤、メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリン、および細胞傷害性抗生物質からなる群から選択される、項７８の薬学的組成物。
【０４６０】
８１．他の薬学的活性剤が、阻害剤であり、阻害剤が、ＴＮＦ阻害剤、ＩＬ−１２阻害剤、ＩＬ−２３阻害剤、およびα４β７インテグリン阻害剤からなる群から選択される、項７３の薬学的組成物。
【０４６１】
８２．阻害剤が、モノクローナル抗体である、項８１の薬学的組成物。
【０４６２】
８３．阻害剤が、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ）、セルトリズマブペゴル（Ｃｉｍｚｉａ）、ならびにゴリムマブ（Ｓｉｍｐｏｎｉ）、ウステキヌマブ（Ｓｔｅｌａｒａ）およびベドリズマブ（Ｅｎｔｙｖｉｏ）からなる群から選択される、項８１の薬学的組成物。
【０４６３】
８４．項１〜６６のいずれか１つの抗原結合分子または項４９〜７１のいずれか１つの親和性成熟変異体または項７２〜８３のいずれか１つによる薬学的組成物を含み、追加の治療活性剤をさらに含む、キット。
【０４６４】
８５．使用説明書をさらに含む、項８４のキット。
【０４６５】
８６．薬学的成分が、キット中で別々に配置される、項８４または項８５のキット。
【０４６６】
８７．追加の治療活性剤が、抗炎症剤、免疫抑制剤、または阻害剤である、いずれかの先行項のキット。
【０４６７】
８８．抗炎症剤が、ＮＳＡＩＤまたはステロイドである、項８７のキット。
【０４６８】
８９．ＮＳＡＩＤが、サリチレート（アスピリン（アセチルサリチル酸）、ジフニサル、サリチル酸、サルサレートなど）、プロピオン酸誘導体（イブプロフェン、デキシブプロフェン、ナプロキセン）、酢酸誘導体（インドメタシン、ジクロフェナク）、エノール酸誘導体、アントラニル酸誘導体（フェナメート）、選択的ＣＯＸ−２阻害剤、およびスルホンアニリドからなる群から選択される、項８８のキット。
【０４６９】
９０．免疫抑制剤が、グルココルチコイドおよび細胞増殖抑制剤からなる群から選択される、項８７のキット。
【０４７０】
９１．グルココルチコイドが、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、およびアルドステロンからなる群から選択される、項９０のキット。
【０４７１】
９２．細胞増殖抑制剤が、アルキル化剤、代謝拮抗剤、メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリン、および細胞傷害性抗生物質からなる群から選択される、項９１のキット。
【０４７２】
９３．追加の治療活性剤が、ＴＮＦ阻害剤、ＩＬ−１２阻害剤、ＩＬ−２３阻害剤、およびα４β７インテグリン阻害剤からなる群から選択される阻害剤である、項８７のキット。
【０４７３】
９４．阻害剤が、モノクローナル抗体である、項８７または９３のキット。
【０４７４】
９５．阻害剤が、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ）、セルトリズマブペゴル（Ｃｉｍｚｉａ）、ならびにゴリムマブ（Ｓｉｍｐｏｎｉ）およびエタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ）、ウステキヌマブ（Ｓｔｅｌａｒａ）およびベドリズマブ（Ｅｎｔｙｖｉｏ）からなる群から選択される、項９４のキット。
【０４７５】
９６．抗原結合分子、親和性成熟変異体または薬学的組成物、および追加の治療活性剤が、別々、連続、または同時投与のためのものである、いずれかの先行項のキット。
【０４７６】
９７．医療における使用のための、項１〜７１のいずれか１つの抗原結合分子、項４９〜７１のいずれか１つの親和性成熟変異体、または項７２〜８３のいずれか１つの薬学的組成物。
【０４７７】
９８．炎症障害もしくは疾患または自己免疫障害もしくは疾患の治療または予防における使用のための、項１〜７１のいずれか１つの抗原結合分子、項４９〜７１のいずれか１つの親和性成熟変異体、または項７２〜８３のいずれか１つの薬学的組成物。
【０４７８】
９９．炎症または自己免疫障害または疾患が、強直性脊椎炎、アトピー性皮膚炎、セリアック病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、関節リウマチ、乾癬、細気管支炎、歯肉炎、移植拒絶反応、同種移植片拒絶反応、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）、喘息、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性心不全、慢性閉塞性肺疾患、腎臓病、敗血症性ショック、潰瘍性大腸炎、線維症、多発性硬化症、シェーグレン症候群、狼瘡、気道炎症、肝臓病、肝炎、セリアック病、皮膚炎、好酸球増多症、および原発性胆汁性胆管炎からなる群から選択される、項９８に記載の使用のための抗原結合分子、親和性成熟変異体、または薬学的組成物。
【０４７９】
１００．炎症疾患が、潰瘍性大腸炎である、項９９に記載の使用のための抗原結合分子、親和性成熟変異体、または薬学的組成物。
【０４８０】
１０１．炎症疾患が、クローン病である、項１００に記載の使用のための抗原結合分子、親和性成熟変異体、または薬学的組成物。
【０４８１】
１０２．炎症障害もしくは疾患または自己免疫障害もしくは疾患の治療における使用のための医薬品の製造における、項１〜６６のいずれか１つの抗原結合分子または項４４〜６６のいずれか１つの親和性成熟変異体の使用。
【０４８２】
１０３．炎症または自己免疫障害または疾患が、強直性脊椎炎、アトピー性皮膚炎、セリアック病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、関節リウマチ、乾癬、細気管支炎、歯肉炎、移植拒絶反応、同種移植片拒絶反応、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）、喘息、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性心不全、慢性閉塞性肺疾患、腎臓病、敗血症性ショック、潰瘍性大腸炎、線維症、多発性硬化症、シェーグレン症候群、狼瘡、気道炎症、肝臓病、肝炎、セリアック病、皮膚炎、好酸球増多症、および原発性胆汁性胆管炎からなる群から選択される、項１０２による抗原結合分子の使用。
【０４８３】
１０４．炎症疾患が、潰瘍性大腸炎である、項１０３による抗原結合分子の使用。
【０４８４】
１０５．炎症疾患が、クローン病である、項１０３による抗原結合分子の使用。
【０４８５】
１０６．対象に、項１〜７１のいずれか１つの抗原結合分子、または項４９〜７１のいずれか１つの親和性成熟変異体、、または請求項７２〜８３のいずれか１つの薬学的組成物を投与することを含む、ＬＩＧＨＴ媒介疾患または障害の治療または予防のための方法。
【０４８６】
１０７．ＬＩＧＨＴ媒介疾患または障害が、炎症疾患もしくは障害または自己免疫疾患もしくは障害である、項１０６の方法。
【０４８７】
１０８．炎症または自己免疫障害または疾患が、強直性脊椎炎、アトピー性皮膚炎、セリアック病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、関節リウマチ、乾癬、細気管支炎、歯肉炎、移植拒絶反応、同種移植片拒絶反応、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）、喘息、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性心不全、慢性閉塞性肺疾患、腎臓病、敗血症性ショック、潰瘍性大腸炎、線維症、多発性硬化症、シェーグレン症候群、狼瘡、気道炎症、肝臓病、肝炎、セリアック病、皮膚炎、好酸球増多症、および原発性胆汁性胆管炎からなる群から選択される、項１０７の治療の方法。
【０４８８】
１０９．炎症疾患が、潰瘍性大腸炎である、項１０８の治療の方法。
【０４８９】
１１０．炎症疾患が、クローン病である、項１０８の治療の方法。
【０４９０】
１１１．ＬＩＧＨＴタンパク質のＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの結合またはＬＩＧＨＴ発現細胞のＨＶＥＭおよび／もしくはＬＴβＲへの結合を阻害する方法であって、ＬＩＧＨＴタンパク質またはＬＩＧＨＴ発現細胞を、項１〜７１のいずれか１つによる抗原結合分子または項４９〜７１のいずれかによる親和性成熟変異体と接触させることを含む、方法。
【０４９１】
１１２．方法が、インビトロ方法である、項１１１の方法。
【０４９２】
１１３．方法が、インビボ方法である、項１１１の方法。
【０４９３】
１１４．項１〜７１のいずれか１つの抗原結合分子をコードする核酸。
【０４９４】
１１５．項１１４の核酸を含むプラスミド。
【０４９５】
１１６．項１１４の核酸を含むベクター。
【０４９６】
１１７．項１１５または項１１６によるベクターのプラスミドを含む宿主細胞。
【０４９７】
１１８．その細胞を項１１５または項１１６によるプラスミドまたはベクターでトランスフェクトすることを含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子を発現する細胞を産生する方法。
【０４９８】
１１９．細胞内部でプラスミドまたはベクターのコード核酸配列を発現するための条件下で細胞培養培地において項１１７による宿主細胞を培養することを含む、抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子上での産生のための方法。
【０４９９】
１２０．細胞培養上清から抗ＬＩＧＨＴ抗原結合分子を得ることをさらに含む、項１１９の方法。
【図１Ａ−１】
2020505465.tif 000024
【図１Ａ−２】
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【図１Ｂ】
2020505465.tif 000026
【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４】
2020505465.tif 000030
【図５】
2020505465.tif 000031
【図６】
2020505465.tif 000032
【図７】
2020505465.tif 000033
【図８】
2020505465.tif 000034
【図９】
2020505465.tif 000035
【図１０】
2020505465.tif 000036
【図１１】
2020505465.tif 000037
【図１２】
2020505465.tif 000038
【図１３】
2020505465.tif 000039
【配列表】
2020505465000001.app
【国際調査報告】
2020505465.tif 000040
2020505465.tif 000041
2020505465.tif 000042
2020505465.tif 000043
2020505465.tif 000044
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