(57)【要約】本発明は、プロテインキナーゼ関連障害の治療に有用なベンズイミダゾール化合物に関する。癌の１つ以上の症状、移植拒絶の治療または予防に有用な化合物もまた必要とされている。さらに、本明細書に提供される化合物を使用して、ＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６などのプロテインキナーゼの活性を調節する方法が必要とされている。2020504747.tif 000056【選択図】なし
2020504747.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、多形体、溶媒和物、薬学上許容される塩、もしくはそのプロドラッグ：
2020504747.tif 000051
（式中
環Ａは、アリ−ルまたはヘテロアリ−ルであり、
Ｚは、ＣＨ２、ＮＨ、ＯおよびＳからなる群から選択され、
Ｒ１は、水素、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＨ、ＮＨ２、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリ−ル、ヘテロアリ−ル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル−（ＣＨ２）ｍ−、アリ−ル−Ｃ１−６アルキル−、ヘテロアリ−ル−Ｃ１−６アルキル−、−ＮＲ１２Ｒ１３、−ＮＲ１２−Ｃ１−６アルキレン−ＮＲ１２Ｒ１３、およびヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−からなる群から独立して選択され、ここで、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリ−ル、ヘテロアリ−ル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル−（ＣＨ２）ｍ−、アリ−ル−Ｃ１−６アルキル−、ヘテロアリ−ル−Ｃ１−６アルキル−、またはヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−はそれぞれ、非置換であるか、またはハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、ヘテロシクリル、−ＮＲ１２Ｒ１３、または−（ＣＨ２）ｔ−ＯＨから選択される少なくとも１つの置換基で置換され、
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＮＨ２、ハロゲン、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリ−ル、ヘテロアリ−ル、ヘテロシクリルから選択され、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリ−ル、ヘテロアリ−ル、ヘテロシクリルは、それぞれ非置換であるか、またはハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、またはヘテロシクリルから選択される少なくとも１つの置換基で置換され、
Ｒ１２およびＲ１３は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、アリ−ル、ヘテロアリ−ル、ヘテロシクリル、Ｃ３−８シクロアルキルから選択され、Ｃ１−８アルキル、アリ−ル、ヘテロアリ−ル、ヘテロシクリル、またはＣ３−８シクロアルキルは、それぞれ非置換であるか、またはハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、またはヘテロシクリルから選択される少なくとも１つの置換基で置換され、
ｍは、０、１、２、３または４であり、
ｎは、０、１、２、３または４であり、
ｔは、０、１、２、３または４である）。
【請求項２】
Ｚは、ＣＨ２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｚは、Ｏである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
環Ａが、１個または２個のＮのヘテロ原子を含む６員ヘテロアリ−ルである、請求項１−３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
環Ａが、ピリジル、ピリミジニル、またはピリダジニルである、請求項１−４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
環Ａが、
2020504747.tif 000052
である、請求項１−５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１は、ヘテロシクリル−（ＣＨ２）ｍ−、またはＣ１−８アルキル、ＮＲ１２Ｒ１３、４−６員ヘテロシクリル、Ｃ３−６シクロアルキルもしくは（ＣＨ２）ｔ−ＯＨで置換されたヘテロシクリル−（ＣＨ２）ｍ−である、請求項１−６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１は、５−６員ヘテロシクリル−ＣＨ２−、またはＣ１−３アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ３、
2020504747.tif 000053
−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、またはＯＨで置換された５−６員ヘテロシクリル−ＣＨ２−である、請求項１−７のいずれか一項に記載の化合物。  
【請求項９】
Ｒ１は、６員ヘテロシクリル−ＣＨ２−、またはメチルもしくはエチルで置換された６員ヘテロシクリル−ＣＨ２−である、請求項１−８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１は、ヘテロシクリル、またはＣ１−８アルキル、ＮＲ１２Ｒ１３、４から６−ヘテロシクリル、Ｃ３−６シクロアルキル、もしくは（ＣＨ２）ｔ−ＯＨで置換されたヘテロシクリルである、請求項１−６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１は、５−６員ヘテロシクリル、またはＣ１−３アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ３、
2020504747.tif 000054
−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、もしくはＯＨで置換された５−６員ヘテロシクリルである、請求項１−６または１０のいずれか一項に記載の化合物。  
【請求項１２】
Ｒ１は、６員ヘテロシクリル、またはメチルもしくはエチルで置換された６員ヘテロシクリルである、請求項１−６、１０、または１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ１は、６員ヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−またはＣ１−３アルキルで置換された６員ヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−である、請求項１−６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１は、メチルで置換された６員ヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−である、請求項１−６または１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
ヘテロシクリルは、環原子として窒素または酸素の１個または２個のヘテロ原子を含む、請求項１−１４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
ヘテロシクリルは、環原子として窒素の１個または２個のヘテロ原子を含む、請求項１−１４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ１は、−ＮＲ１２−Ｃ１−３アルキレン−ＮＲ１２Ｒ１３である、請求項１−６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ１２およびＲ１３がそれぞれ独立してＨ、（ＣＨ２）ｔ−ＯＨまたはＣ１−３アルキルである、請求項１−１７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ１２およびＲ１３がそれぞれ独立して、ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、メチルまたはエチルである、請求項１−１８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ１は、
2020504747.tif 000055
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
ｍが１である、請求項１−２０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２】
ｎが１である、請求項１−２１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３】
ｔが０、１、または２である、請求項１−２２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、またはハロゲンで置換されたＣ１−６アルコキシである、請求項１−２３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３、ＯＣＨ３、またはＯＣＦ３である、請求項１−２４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｒ２およびＲ３は、両方ともＦである、請求項１−２５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２７】
化合物が、
１）４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−Ｎ−（５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
２）Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ）［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン、
３）５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−Ｎ−（５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
４）５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−Ｎ−（６−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−アミン、
５）５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−Ｎ−（５−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリミジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
６）Ｎ−（５−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリミジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン、
７）Ｎ−（５−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン、
８）Ｎ−（５−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン、
９）（２−（（５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）（４−メチルピペラジン−１−イル）メタノン、
１０）（６−（（５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）（４−メチルピペラジン−１−イル）メタノン、
１１）Ｎ５−（２−（ジエチルアミノ）エチル）−Ｎ２−（５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−イル）−Ｎ５−メチルピリジン−２，５−ジアミン、
１２）Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４，４ａ，５−ヘキサヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−アミン、
１３）Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４，４ａ，５−ヘキサヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−５−メチルピリミジン−２−アミン、
１４）５−クロロ−Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン、
１５）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
１６）Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
１７）Ｎ−（５−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
１８）Ｎ−（５−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
１９）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
２０）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（ピペラジン−１−イルメチル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
２１）Ｎ−（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリダジン−３−アミン、
２２）６−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）−Ｎ−（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）ピリダジン−３−アミン、
２３）（１−（６−（（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピロリジン−３−イル）メタノ−ル、
２４）（１−（（６−（（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）ピロリジン−３−イル）メタノ−ル、
２５）Ｎ−（５−（４−シクロプロピルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
２６）Ｎ−（５−（（４−シクロプロピルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
２７）２−（（１−（（６−（（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）（メチル）アミノ）エタン−１−オ−ル、
２８）１−（６−（（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）−３−メチルピロリジン−３−オ−ル、
２９）１−（（６−（（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）−３−メチルピロリジン−３−オ−ル、
３０）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
３１）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
３２）Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
３３）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（（４'−メチル−［１，１'−ビピペラジン］−４−イル）メチル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
３４）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（（４−（１−メチルピペリジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】
化合物が、化合物の（−）エナンチオマ−である、請求項１−２７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２９】
化合物が、化合物の（＋）エナンチオマ−である、請求項１−２７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３０】
治療有効量の請求項１−２９のいずれか一項に記載の化合物、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項３１】
該化合物が、該賦形剤に対して約０．００１−約１０の範囲内の重量比である、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
薬剤の調製のための、請求項３０または３１に記載の医薬組成物、または請求項１−２９のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項３３】
薬剤が、癌の治療または予防のために使用される、請求項３２に記載の使用。
【請求項３４】
癌が、結腸癌、直腸癌、マントル細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、乳癌、前立腺癌、膠芽腫、扁平上皮食道癌、脂肪肉腫、Ｔ細胞リンパ腫、黒色腫、膵臓癌、脳腫瘍または肺癌である、請求項３３に記載の使用。
【請求項３５】
薬剤が、ＣＤＫの阻害剤として使用される、請求項３２に記載の使用。
【請求項３６】
薬剤が、ＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６の阻害剤として使用される、請求項３５に記載の使用。
【請求項３７】
請求項１−２９のいずれか一項に記載の化合物または請求項３０もしくは３１に記載の医薬組成物を投与することを含む、対象においてＣＤＫによって媒介される疾患を治療する方法。
【請求項３８】
ＣＤＫが、ＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６を含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
ＣＤＫによって媒介される疾患が、癌である、請求項３７または３８に記載の方法。
【請求項４０】
癌が、大腸癌、直腸癌、マントル細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、乳癌、前立腺癌、膠芽腫、扁平上皮食道癌、脂肪肉腫、Ｔ細胞リンパ腫黒色腫、膵臓癌、脳腫瘍または肺癌である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
対象が、ヒトである、請求項３７から４０のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サイクリン依存性キナーゼを阻害するのに有用なベンズイミダゾール化合物に関する。より具体的には、本発明は、ＣＤＫ４／６阻害剤として使用される化合物およびその医薬組成物、ならびに癌などのＣＤＫ４／６によって媒介される疾患の治療方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）は、細胞周期の進行を媒介し、Ｇ１期からＳ期へ、およびＧ２期からＭ期への移行を調節する。ＣＤＫ活性は、転写後修飾ならびにサイクリンおよびＣＤＫ阻害剤の発現によって細胞周期を通して厳密に制御されている。４つの増殖性ＣＤＫがある：主にＧ２からＭ期への移行を調節するＣＤＫ１、およびＧ１からＳ期への移行を調節するＣＤＫ２／４／６。
【０００３】
細胞周期を介した進行は高度に調節された過程である。適切な増殖シグナルが存在しない場合、網膜芽細胞腫タンパク質（ｐＲｂ）を含むポケットタンパク質のファミリーは、細胞がＤＮＡ複製期（Ｓ期）に入るのを妨げる。分裂促進因子がシグナル伝達経路を誘発し、Ｄ−サイクリンの細胞レベルが上昇すると、複製サイクルが始まる。Ｄ−サイクリンは、次にサイクリン依存性キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）を活性化し、これはｐＲｂをリン酸化しそして不活性化する。
【０００４】
制御されていない細胞増殖は癌の顕著な特徴の１つであり、ｐＲｂ不活性化は、腫瘍細胞が未チェックの細胞周期を通して進行することを可能にする重要な事象である。いくつかの腫瘍はｐＲｂ遺伝子自体を削除するが、大部分は機能的なｐＲｂを維持して代わりにＣＤＫ４／６キナーゼ活性を活性化する。ＣＤＫ４／６キナーゼ活性の除去は、ＨＲ＋乳癌、マントル細胞リンパ腫、神経膠芽腫および扁平上皮肺癌などの多くの癌タイプにおいて完全な腫瘍増殖阻害をもたらした。さらに、正常な線維芽細胞は、ＣＤＫ１の欠如が許容されないところの、ＣＤＫ１による代償によってＣＤＫ４／６の欠如を克服することが示された。まとめると、この証拠は、ＣＤＫ４／６の選択的阻害剤が汎ＣＤＫ阻害剤よりも広い治療域を有し得ることを示唆している。
【０００５】
直接的な抗腫瘍効果に加えて、ＣＤＫ４／６阻害剤は炎症性疾患、骨疾患、代謝性疾患、神経疾患および神経変性疾患、心血管疾患、アレルギーおよび喘息、アルツハイマー病、そしてホルモン関連疾患を治療することがわかっている。従って、治療薬として有効であるＣＤＫ４／６阻害剤を見出すために医薬化学においてかなりの努力がなされてきた。ＣＤＫ１は有糸分裂進行の重要な決定因子であり、そしてそれは有糸分裂の開始を開始することができる唯一のＣＤＫである。マウスノックアウト実験により、ＣＤＫ１が哺乳動物細胞の増殖に必要であることが示されている［１］。ＣＤＫ１は細胞増殖にとって重要であるため、ＣＤＫ１の阻害によって引き起こされる毒性は治療レベルを達成する能力を制限することになり、したがってＣＤＫ１の選択性を再び薬物標的ＣＤＫ４／６に保つことが必要である。
【０００６】
ＣＤＫ２はＣＤＫ１と構造的および機能的に関連している。それは、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６よりもかなり広い基質プロファイルを有し、そして細胞周期進行（例えばｐ２７ＫＩＰ１およびＲＢ）、ＤＮＡ複製（例えば複製因子ＡおよびＣ）、ヒストン合成（例えば、ＮＰＡＴ）、中心体複製（例えば、ヌクレオホスミン（ＮＰＭ））などの過程に関与する多数のタンパク質をリン酸化する。ＣＤＫ４およびＣＤＫ６とは対照的に、ＣＤＫ２はＩＮＫ４タンパク質で調節されるのではなく、ＣＤＫ阻害剤のＣＤＫ相互作用タンパク質／キナーゼ阻害タンパク質（ＣＩＰ／ＫＩＰ）クラスによって調節され、そのＣＤＫ阻害剤は、ＣＤＫ２−サイクリン複合体に結合してそれらを不活性にする［１］。がんの治療薬としてＣＤＫ４／６阻害薬をデザインする場合は、ＣＤＫ２に対する選択性を維持するのがよい。
【０００７】
細胞周期の進行を直接促進するＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、ＣＤＫ２およびＣＤＫ１）に加えて、転写を調節するＣＤＫのさらなるファミリーが同定され、それらはＣＤＫ７、ＣＤＫ８およびＣＤＫ９を含む。ＣＤＫ７は転写の開始に寄与するＲＮＡポリメラーゼＩＩカルボキシ末端ドメインのリン酸化において一般的な役割を果たし、ＣＤＫ９もＲＮＡポリメラーゼＩＩをリン酸化し、それによって転写の伸長を促進する［１］。第一世代のＣＤＫ阻害剤は汎ＣＤＫ阻害剤であり、管理不能な毒性のために成功しなかった。例えば、フラボピリドールはこれまで最も広く研究されているＣＤＫ阻害剤である。フラボピリドールはＧ１期およびＧ２期で細胞周期停止を誘導することができるが、特定の状況では、おそらくＣＤＫ７およびＣＤＫ９阻害の結果として転写の抑制につながる細胞毒性応答も誘導する［２］。そのため、ＣＤＫ４／６を標的とする薬をデザインする場合はＣＤＫ７／９を避ける必要がある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
これまでに、様々なＣＤＫ阻害剤が前臨床的および臨床的に評価されてきた。上記の証拠を考慮して、多くの研究グループがＣＤＫ４／６選択的阻害剤の発見に着手し、Ｐａｌｂｏｃｉｃｌｉｂ（ＰＤ−０３３２９９１）、Ｒｉｂｏｃｉｃｌｉｂ（ＬＥＥ−０１１）およびＡｂｅｍａｃｉｃｌｉｂ（ＬＹ２８３５２１９）がよく文書化されている。しかしながら、癌のような細胞増殖性疾患の治療に使用することができる、より強力で選択的でより安全なＣＤＫ４／６阻害剤を提供する必要性が残っている。
【非特許文献１】Ｕｚｍａ  Ａｓｇｈａｒ、Ａｇｎｉｅｓｚｋａ  Ｋ．  Ｗｉｔｋｉｅｗｉｃｚ、Ｎｉｃｈｏｌａｓ  Ｃ．Ｔｕｒｎｅｒ、その他。Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  ２０１５年、１４（２）：１３０−１４６に記載されている。
【０００９】
【非特許文献２】Ｐｒｉｔｈｖｉｒａｊ  Ｂｏｓｅ、Ｇａｒｙ  Ｌ  Ｓｉｍｍｏｎｓ、Ｓｔｅｖｅｎ  Ｇｒａｎｔ。Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ．  ２０１３年、２２（６）：７２３−７３８。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、ＣＤＫ４／６阻害剤としておよびＣＤＫ４／６によって媒介される疾患の治療のために使用されるベンズイミダゾール化合物に関する。本発明の化合物は式Iのような一般構造を有する。
【００１１】
式Iの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、多形体、溶媒和物、製薬上許容される塩、もしくはそのプロドラッグであって、
2020504747.tif 000003
環Ａは、アリールまたはヘテロアリールであり、
Ｚは、ＣＨ２、ＮＨ、ＯおよびＳからなる群から選択され、
Ｒ１は、水素、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＨ、ＮＨ２、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル−（ＣＨ２）ｍ−、アリール−Ｃ１−６アルキル−、ヘテロアリール−Ｃ１−６アルキル−、−ＮＲ１２Ｒ１３、−ＮＲ１２−Ｃ１−６アルキレン−ＮＲ１２Ｒ１３、およびヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−からなる群から独立して選択され、ここで、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル−（ＣＨ２）ｍ−、アリール−Ｃ１−６アルキル−、ヘテロアリール−Ｃ１−６アルキル−、またはヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−はそれぞれ、非置換であるか、またはハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、ヘテロシクリル、−ＮＲ１２Ｒ１３、または−（ＣＨ２）ｔ−ＯＨから選択される少なくとも１つの置換基で置換され、
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＮＨ２、ハロゲン、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリルから選択され、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリルは、それぞれ非置換であるか、またはハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、またはヘテロシクリルから選択される少なくとも１つの置換基で置換され、
Ｒ１２およびＲ１３は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、Ｃ３−８シクロアルキルから選択され、Ｃ１−８アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＣ３−８シクロアルキルは、それぞれ非置換であるか、またはハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、またはヘテロシクリルから選択される少なくとも１つの置換基で置換され、
ｍは、０、１、２、３または４であり、
ｎは、０、１、２、３または４であり、
ｔは、０、１、２、３または４である、ことを特徴とする。
【００１２】
式Iのいくつかの実施の形態においては、Ｚは、ＣＨ２である。
【００１３】
式Iのいくつかの実施の形態においては、Ｚは、Ｏである。
【００１４】
式Iのいくつかの実施の形態においては、環Ａが、１個または２個のＮのヘテロ原子を含む６員ヘテロアリールであり、例えば、ピリジル、ピリミジニル、またはピリダジニルおよびそのようなものである。
【００１５】
式Iの他の実施の形態においては、環Ａは、
2020504747.tif 000004
である。
【００１６】
式Iのいくつかの実施の形態においては、Ｒ１は、ヘテロシクリル−（ＣＨ２）ｍ−、またはＣ１−８アルキル、ＮＲ１２Ｒ１３、４−６員ヘテロシクリル、Ｃ３−６シクロアルキルもしくは（ＣＨ２）ｔ−ＯＨで置換されたヘテロシクリル−（ＣＨ２）ｍ−である。
【００１７】
式Iの他の実施の形態においては、Ｒ１は、５−６員ヘテロシクリル−ＣＨ２−、またはＣ１−３アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ３、
2020504747.tif 000005
−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、または−ＯＨで置換された５−６員ヘテロシクリル−ＣＨ２−である。
【００１８】
式Iの他の実施の形態においては、Ｒ１は、６員ヘテロシクリル−ＣＨ２−、またはメチルもしくはエチルで置換された６員ヘテロシクリル−ＣＨ２−である。
【００１９】
式Iのいくつかの実施の形態においては、Ｒ１は、ヘテロシクリル、またはＣ１−８アルキル、ＮＲ１２Ｒ１３、４から６−ヘテロシクリル、Ｃ３−６シクロアルキル、もしくは（ＣＨ２）ｔ−ＯＨで置換されたヘテロシクリルである。
【００２０】
式Iの他の実施の形態においては、Ｒ１は、５−６員ヘテロシクリル、またはＣ１−３アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ３、
2020504747.tif 000006
−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、もしくはＯＨで置換された５−６員ヘテロシクリルである。
【００２１】
式Iの他の実施の形態においては、Ｒ１は、６員ヘテロシクリル、またはメチルもしくはエチルで置換された６員ヘテロシクリルである。
【００２２】
式Iのいくつかの実施の形態においては、Ｒ１は、６員ヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−またはＣ１−３アルキルで置換された６員ヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−である。
【００２３】
式Iの他の実施の形態においては、Ｒ１は、メチルで置換された６員ヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−である。
【００２４】
式Iのいくつかの実施の形態においては、ヘテロシクリルは、環原子として窒素または酸素の１個または２個のヘテロ原子を含む。
【００２５】
式Iのいくつかの実施の形態においては、ヘテロシクリルは、環原子として窒素の１個または２個のヘテロ原子を含む。
【００２６】
式Iのいくつかの実施の形態においては、Ｒ１は、−ＮＲ１２−Ｃ１−３アルキレン−ＮＲ１２Ｒ１３である。
【００２７】
式Iのいくつかの実施の形態においては、Ｒ１２およびＲ１３がそれぞれ独立してＨ、（ＣＨ２）ｔ−ＯＨまたはＣ１−３アルキルである。
【００２８】
Ｒ１２およびＲ１３がそれぞれ独立して、ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、メチルまたはエチルであることが望ましい。
【００２９】
式Iのいくつかの実施の形態においては、Ｒ１は、
2020504747.tif 000007
である。
【００３０】
式Iのいくつかの実施の形態においては、ｍは、１である。
【００３１】
式Iのいくつかの実施の形態においては、ｎは、１である。
【００３２】
式Iのいくつかの実施の形態においては、ｔは、０，１または２である。
【００３３】
式Iのいくつかの実施の形態においては、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、またはハロゲンで置換されたＣ１−６アルコキシである。
【００３４】
式Iの他の実施の形態においては、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立してＨ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＦ３、−ＯＣＨ３、または−ＯＣＦ３である。
【００３５】
式Iの他の実施の形態においては、Ｒ２およびＲ３は、両方ともＦである。
【００３６】
本発明はさらに、式Iの化合物に関するいくつかの好ましい技術的解決策を提供し、その化合物は以下の通りである。
【００３７】
１）４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−Ｎ−（５−（４−）メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
２）Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ）［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン、
３）５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−Ｎ−（５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
４）５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−Ｎ−（６）−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−アミン、
５）５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−Ｎ−（５−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリミジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
６）Ｎ−（５−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリミジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン、
７）Ｎ−（５−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン、
８）Ｎ−（５−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ）［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン、
９）（２−（（５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル））ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリミジン−５−イル）（４−メチルピペラジン−１−イル）メタノン、
１０）（６−（（５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）］）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）（４−メチルピペラジン−１−イル）メタノン、
１１）Ｎ５−（２−（ジエチルアミノ）エチル）−Ｎ２−（５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−イル）−Ｎ５−メチルピリジン−２，５−ジアミン、
１２）Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４，４ａ、５−ヘキサヒドロベンゾ）［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−アミン、
１３）Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４，４ａ，５−ヘキサヒドロベンゾ）［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）−５−メチルピリミジン−２−アミン、
１４）５−クロロ−Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン、
１５）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
１６）Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
１７）Ｎ−（５−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
１８）Ｎ−（５−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
１９）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
２０）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（ピペラジン−１−イルメチル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
２１）Ｎ−（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）−６−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリダジン−３−アミン、
２２）６−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）−Ｎ−（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］  ［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）ピリダジン−３−アミン、
２３）（１−（６−（（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ）［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピロリジン−３−イル）メタノール、
２４）（１−（（６−（（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）ピロリジン−３−イル）メタノール、
２５）Ｎ−（５−（４−シクロプロピルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
２６）Ｎ−（５−（（４−シクロプロピルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
２７）２−（（１−（（６−（（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）（メチル）アミノ）エタン−１−オール、
２８）１−（６−（（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）−３−メチルピロリジン−３−オール、
２９）１−（（６−（（５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）−３−メチルピロリジン−３−オール、
３０）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
３１）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
３２）Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−７−イル）ピリミジン−２−アミン、
３３）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（（４'−メチル−    ［１，１'−ビペペラジン］−４−イル）メチル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、
３４）５−フルオロ−４−（９−フルオロ−４−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［４，５］イミダゾ［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−７−イル）−Ｎ−（５−（（４−（１−メチルピペリジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−アミン。
【００３８】
驚くべきことに、式Iの化合物の高度に精製された（−）エナンチオマーは生物学的活性において（＋）エナンチオマーよりも有利である。例えば、化合物２の光学的に純粋な（−）エナンチオマー（Ｎ−（５−（（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−イル）−５−フルオロ−４−（６−フルオロ−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［４，５］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−８−イル）ピリミジン−２−アミン）は、その（＋）エナンチオマーよりも強力である。
【００３９】
特に明記しない限り、本発明において「（−）」は旋光度が負の値であることを意味する。「（＋）」は旋光度が正の値であることを意味する。本明細書に記載の本化合物は、化合物の（−）異性体および／または化合物の（＋）異性体であり得る。
【００４０】
本発明はまた、治療上有効量の式Iの化合物または治療上許容されるその塩、および薬学上許容される賦形剤を含む製剤組成物（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）を提供する。
【００４１】
いくつかの実施形態において、上記化合物は、上記賦形剤に対して約０．００１から約１０の範囲内の重量比である。
【００４２】
本発明はさらに、本発明の化合物と、薬学上許容されるその塩、または薬剤の調製のための上記の医薬組成物を提供する。
【００４３】
いくつかの実施形態において、その薬剤（ｔｈｅ  ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ）は、結腸癌、直腸癌、マントル細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、乳癌、前立腺癌、膠芽腫、扁平上皮食道癌、脂肪肉腫、Ｔ細胞リンパ腫、黒色腫、膵臓癌、脳腫瘍または肺癌などの癌の治療に使用される。
【００４４】
いくつかの実施形態では、本願薬剤（ｔｈｅ  ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ）はＣＤＫ、好ましくはＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６の阻害剤として使用される。
【００４５】
本発明は、治療有効量の本発明の化合物と、薬学上許容されるその塩、または上記の医薬組成物を、必要とする対象に投与することを含む、対象における癌の治療方法を提供する。特に、癌は、結腸癌、直腸癌、マントル細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、乳癌、前立腺癌、神経膠芽細胞腫、扁平上皮食道癌（ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ  ｃａｎｃｅｒ）、脂肪肉腫、Ｔ細胞リンパ腫、黒色腫、膵臓癌、脳腫瘍または肺癌からなる群から選択される。
【００４６】
本発明はさらに、本発明の化合物と、薬学的に許容されるその塩あるいは上述の医薬組成物を治療上有効量必要とする被験体に投与することを含む、被験体におけるＣＤＫ、例えばＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６によって媒介される疾患を治療する方法またはその医薬組成物を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００４７】
上記の式で使用される一般的な化学用語は、それらの通常の意味を持つ。例えば、本明細書で使用される「ハロゲン」という用語は、特に明記しない限り、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。好ましいハロゲングループは、Ｆ、ＣｌおよびＢｒを含む。
【００４８】
本明細書で使用されるように、他に示さない限り、アルキルは直鎖または分枝鎖部分を有する飽和一価炭化水素基を含む。例えば、アルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、３−（２−メチル）ブチル、２−ペンチル、２−メチルブチル、ネオペンチル  ｎ−ヘキシル、２−ヘキシル、２−メチルペンチルなどが挙げられる。同様に、Ｃ１−８アルキルにおけるようなＣ１−８は、その基が１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を直鎖状または分枝状配置で有する群を見分けるために定義される。
【００４９】
アルケニルおよびアルキニル基は、直鎖または分岐鎖アルケンおよびアルキンを含む。同様に、「Ｃ２−８アルケニル」および「Ｃ２−８アルキニル」は、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を直鎖状または分岐状に有するアルケニルまたはアルキニル基を意味する。
【００５０】
アルコキシは、前述の直鎖または分岐鎖アルキル基、すなわち、−Ｏ−アルキルから形成された酸素エーテルである。
【００５１】
本明細書で使用される場合には、「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」、「少なくとも１つ」、および「１つ以上」は互換的に使用される。したがって、例えば、「１つ」の薬学的に許容される賦形剤を含む組成物は、その組成物が「１種以上の」薬学的に許容される賦形剤を含むことを意味すると解釈することができる。
【００５２】
本明細書で使用される「アリール」という用語は、特に明記しない限り、炭素環原子を含有する非置換または置換の単環式または多環式環系を指す。好ましいアリールは、単環式または二環式の６−１０員芳香環系である。フェニルおよびナフチルが好ましいアリールである。最も好ましいアリールはフェニルである。
【００５３】
本明細書で使用される「ヘテロシクリル」という用語は、特に明記しない限り、炭素原子およびＮ、ＯまたはＳから選択される１−３個のヘテロ原子からなる非置換または置換の安定な３−８員単環式飽和環系を表す。ここで、窒素または硫黄ヘテロ原子は、任意に酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は任意に四級化されていてもよい。ヘテロシクリル基は、安定な構造の創出をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子に結合していてもよい。このようなヘテロシクリル基の例としては、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、オキソピペラジニル、オキソピペリジニル、テトラヒドロフラニル、ジオキソラニル、テトラヒドロイミダゾリル、テトラヒドロチアゾリル、テトラヒドロオキサゾリル、テトラヒドロピラニル、モルホリニル、チオモルフィロニル、チアモルフィロニルスルホキシド、チアモルフォニルスルホン、およびテトラヒドロオキサジアゾイルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５４】
本明細書で使用される「ヘテロアリール」という用語は、特に明記しない限り、非置換もしくは置換の安定な５もしくは６員単環式芳香環系、または非置換もしくは置換の９もしくは１０員ベンゾ縮合ヘテロ芳香環系、または、炭素原子と、Ｎ、ＯもしくはＳから選択される１―４個のヘテロ原子とからなる二環式ヘテロ芳香環系を表し、ここで窒素または硫黄ヘテロ原子は任意に酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は任意に四級化されていてもよい。ヘテロアリール基は、安定な構造の創出をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子に結合していてもよい。該ヘテロアリール基の例には、チエニル、フラニル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、ピラゾリル、ピロリル、チアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、インドリル、アザインドリル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾイソアゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンゾキサゾニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾトリアゾリルアデニニル、キノリニルまたはイソキノリニルが挙げられるが、これらに限定さない。
【００５５】
「シクロアルキル」の用語は、３−１２個の炭素原子を有する環状飽和アルキル鎖、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルを指す。
【００５６】
「置換された」の用語は、１個以上の水素原子がそれぞれ独立して同一または異なる置換基で置換された群にあること（ｉｎ  ａ  ｇｒｏｕｐ）を意味する。典型的な置換基としては、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ）、Ｃ１−８アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル、−ＯＲ１、ＳＲ１、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１、  −Ｃ（Ｓ）Ｒ１、＝ＮＲ１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ１、−ＮＲ１Ｒ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１Ｒ２、シアノ、ニトロ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１、−ＯＳ（Ｏ２）ＯＲ１  、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１）（ＯＲ２）が挙げられるが、これらに限定されない。ここで、Ｒ１およびＲ２は、−Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキルから独立して選択される。いくつかの実施形態では、置換基は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＯＨ、トリフルオロメトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、イソ−プロピルオキシ、ｎ−ブチルオキシ、イソブチルオキシ、ｔ−ブチルオキシ、−ＳＣＨ３、−ＳＣ２Ｈ５、ホルムアルデヒド基、−Ｃ（ＯＣＨ３）、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、アミノ、ジメチルアミノ、メチルチオ、スルホニルおよびアセチルからなる群から独立して選択される。
【００５７】
置換アルキル基の例としては、２−アミノエチル、２−ヒドロキシエチル、ペンタクロロエチル、トリフルオロメチル、メトキシメチル、ペンタフルオロエチルおよびピペラジニルメチルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
置換アルコキシ基の例としては、アミノメトキシ、トリフルオロメトキシ、２−ジエチルアミノエトキシ、２−エトキシカルボニルエトキシ、３−ヒドロキシプロポキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５９】
「薬学的に許容される塩」という用語は、薬学的に許容される無毒性の塩基または酸から調製された塩を指す。本発明の化合物が酸性である場合、その対応する塩は、無機塩基および有機塩基を含む薬学的に許容される無毒の塩基から都合よく調製することができる。
【００６０】
そのような無機塩基から誘導される塩は、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅（第二銅および第一銅）、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（高価および低価のマンガン）、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩を含む。アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウムおよびナトリウム塩が特に好ましい。薬学的に許容される有機非毒性塩基から誘導される塩には、一級、二級、および三級アミンの塩、ならびに環状アミンならびに置換アミン、例えば天然および合成置換アミンが含まれる。
【００６１】
塩を形成することができる他の薬学的に許容される有機非毒性塩基としては、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ'、Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロビルアミン、およびトロメタミンなどのイオン交換樹脂が挙げられる。
【００６２】
本発明の化合物が塩基性である場合、その対応する塩は、無機酸および有機酸を含む薬学的に許容される無毒の酸から都合よく調製することができる。そのような酸としては、例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが挙げられる。好ましいのは、クエン酸、臭化水素酸、ギ酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸および酒石酸であり、特に好ましいのはギ酸および塩酸である。式Iの化合物は医薬用途を意図しているので、それらは好ましくは実質的に純粋な形、例えば少なくとも６０％の純度、より適切には少なくとも７５％の純度、特に少なくとも９８％の純度で提供される。（％は重量ベースでの重量）。
【００６３】
本発明の化合物は、薬学的に許容される塩の形態でも存在し得る。医学における使用のために、本発明の化合物の塩は、無毒の「薬学上許容される塩」を意味する。薬学的に許容される塩の形態には、薬学的に許容される酸性／アニオン性または塩基性／カチオン性の塩が含まれる。薬学的に許容される酸性／アニオン性塩は、一般に、塩基性窒素が無機酸または有機酸でプロトン化されている形態をとる。代表的な有機酸または無機酸には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、過塩素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、シュウ酸、パモ酸、２−ナフタレンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクロヘキサンスルファミン酸、サリチル酸、サッカリン酸またはトリフルオロ酢酸が含まれる。薬学的に許容される塩基性／カチオン性塩は、アルミニウム、カルシウム、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛を含むがこれらに限定されない。
【００６４】
本発明はその範囲内に本発明の化合物のプロドラッグを含む。一般に、そのようなプロドラッグは、生体内で容易に求められる化合物に変換される本発明の化合物の機能的誘導体である。例えば、レシペントへの投与時に、本出願に係る化合物または薬学的に活性な代謝産物または残基を直接的または間接的に供給することができる、本出願の化合物の任意の薬学的に許容される塩、エステル、エステル塩または、本願の化合物の他の誘導体が例として挙げられる。特に好ましい誘導体またはプロドラッグは、患者に投与したときに本願の化合物の生物学的利用能を高めることができ（例えば、経口投与化合物をより容易に血液中に吸収させることができ）もしくは親化合物の送達を容易にすることができる化合物、または、生物体または作用部位（例えば、脳またはリンパ系）によって送達される化合物である。したがって、本発明に係る治療方法において、用語「投与すること」は、具体的に開示されている化合物または具体的に開示されていなくてもよいが、その対象者への投与後に生体内で特定の化合物に変換し、様々な障害を治療することが含まれる。適切なプロドラッグ誘導体の選択および調製のための従来の手順は、例えば、"  Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ"、ｅｄ，  Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、１９８５年に記載されている。
【００６５】
分子中の特定の位置における任意の置換基または変数の定義は、その分子の他の部分におけるその定義とは無関係であることが意図されている。本発明の化合物上の置換基および置換パターンは、化学的に安定であり、そして当技術分野において公知の技術ならびに本明細書に記載されたそれらの方法によって容易に合成され得る化合物を提供するために当業者によって選択され得る。
【００６６】
本発明は、本明細書中に記載される化合物が１つ以上の非対称中心を含み得、そしてそれ故にジアステレオマーおよび光学エナンチオマーを生じ得ることを含む。本発明は、そのようなすべての可能なジアステレオマー、ならびにそれらのラセミ混合物、それらの実質的に純粋な分割エナンチオマー、すべての可能な幾何学的エナンチオマー、およびそれらの薬学的に許容される塩を含む。
【００６７】
以上により、本化合物の光学的に純粋な（−）エナンチオマーが、より強力なＣＤＫ４／６阻害剤であることが発見された。本発明は、患者においてＣＤＫ４／６によって媒介される疾患を治療する方法を含み、かかる方法には、実質的にその（＋）エナンチオマーを含まないが、疾患を軽減するのに十分であるが前記有害作用を引き起こすのには不十分な量の（−）エナンチオマーまたはその薬学的に許容される塩を当該患者に投与する方法が含まれる。
【００６８】
本明細書で使用される「その（＋）エナンチオマーを実質的に含まない」という用語は、組成物が、（＋）エナンチオマーに対してより大きな割合またはパーセント（当該混合物の全体の量に基づくパーセント）の（−）エナンチオマーを含むことを意味する。一実施形態では、「その（＋）エナンチオマーを実質的に含まない」という用語は、組成物が少なくとも６０重量％の（−）エナンチオマー、および４０重量％以下の（＋）エナンチオマーを含むことを意味する。
【００６９】
好ましい実施形態では、「その（＋）エナンチオマーを実質的に含まない」という用語は、組成物が少なくとも７０重量％の（−）エナンチオマー、および３０重量％以下の（＋）エナンチオマーを含むことを意味する。別の実施形態では、「その（＋）エナンチオマーを実質的に含まない」という用語は、組成物が少なくとも８０重量％の（−）エナンチオマー、および２０重量％以下の（＋）エナンチオマーを含むことを意味する。さらに、「その（＋）エナンチオマーを実質的に含まない」という用語は、組成物が少なくとも９０重量％の（−）エナンチオマー、および１０重量％以下の（＋）エナンチオマーを含有することを意味する。なおさらに、「その（＋）エナンチオマーを実質的に含まない」という用語は、組成物が少なくとも９５重量％の（−）エナンチオマー、および５重量％以下の（＋）エナンチオマーを含むことを意味する。さらに、「その（＋）エナンチオマーを実質的に含まない」という用語は、組成物が少なくとも９９重量％の（−）エナンチオマー、および１重量％以下の（＋）エナンチオマーを含有することを意味する。
【００７０】
上記式Iは、特定の位置において明確な立体化学なしに示されている。本発明は、式Iの全ての立体異性体およびその薬学上許容される塩を含む。さらに、立体異性体の混合物ならびに単離された特定の立体異性体も含まれる。そのような化合物を調製するために使用される合成手順の間で、または当業者に知られているラセミ化またはエピマー化手順を使用する際に、そのような手順での生成物は立体異性体の混合物であり得る。
【００７１】
式Iの化合物の互変異性体が存在するとき、本発明は、他に具体的に述べられていない限り、あらゆる可能な互変異性体およびそれらの薬学的に許容される塩、ならびにそれらの混合物を含む。
【００７２】
式Iの化合物およびその医薬上許容される塩が溶媒和物または多形体の形態で存在するとき、本発明は任意の可能な溶媒和物および多形体を包含する。溶媒和物を形成する溶媒の種類は、溶媒が薬理学的に許容されるものであれば特に限定されない。例えば、水、エタノール、プロパノール、アセトン、あるいはその類似のものを用いることができる。
【００７３】
「組成物」という用語は、本明細書では、特定量の特定成分を含む製品、ならびに特定成分の特定の組み合わせから直接的または間接的に調製される任意の製品を含むことを意味する。したがって、本発明の化合物を有効成分として含有する医薬組成物および本発明の化合物を調製する方法もまた本発明の一部である。さらに、化合物の結晶形のいくつかは多形体として存在してもよく、そのような多形体は本発明に含まれる。さらに、いくつかの化合物は、水（すなわち、水和物）または一般的な有機溶媒と溶媒和物を形成してもよく、そのような溶媒和物もまた本発明の範囲内に含まれる。
【００７４】
本発明の医薬組成物は、活性成分としての式Iで表わされる化合物（または薬学上許容されるその塩）、薬学上許容される担体、および任意に他の治療成分または補助剤を含む。該組成物は、経口、直腸、局所、および非経口（皮下、筋肉内、および静脈内を含む）投与に適した組成物を含むが、いかなる場合でも最も適した経路は、有効成分が投与される特定の患者、ならびに症状の性質および重症度に依存する。医薬組成物は、単位剤形で簡便に提供され、そして薬学の分野で周知な何らかの方法によって調製され得る。
【００７５】
実際には、本発明の式Iで表される化合物もしくはそのプロドラッグもしくは代謝産物もしくは薬学的に許容されるその塩は、慣用の医薬配合技術に従って医薬担体と緊密に混合して活性成分として組み合わせることができる。担体は、投与に望ましい製剤の形態、例えば経口または非経口（静脈内を含む）に応じて多種多様な形態をとることができる。したがって、本発明の医薬組成物は、それぞれ所定の量の活性成分を含有するカプセル剤、カシェ剤または錠剤などの経口投与に適した個別の単位として提供することができる。さらに、組成物は、粉末として、顆粒として、溶液として、水性液体中の懸濁液として、非水性液体として、水中油型エマルジョンとして、または油中水型として提供され得る。上記の一般的な剤形に加えて、式Iで表わされる化合物または薬学上許容されるその塩はまた、制御放出手段および／または送達装置によって投与することができる。組成物は、任意の製薬方法によって調製することができる。一般に、そのような方法は、活性成分を、１つ以上の必要な成分を構成する担体と一緒にする工程を含む。一般に、組成物は、活性成分を、液体担体または微粉固体担体またはその両方と均一かつ密接に混合することによって調製される。次いで本製品を所望の提供に都合のよい形にすることができる。
【００７６】
したがって、本発明の医薬組成物は、薬学的に許容される担体、および式Iの化合物、立体異性体、互変異性体、多形体、溶媒和物、薬学的に許容されるその塩、またはプロドラッグを含み得る。式Iの化合物、もしくはそれらの許容される塩はまた、１つ以上の他の治療的に活性な化合物と組み合わせて医薬組成物に含まれ得る。
【００７７】
使用される医薬担体は、例えば、固体、液体、または気体であり得る。固体担体の例には、ラクトース、白土、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸などが含まれる。液体担体の例には、糖シロップ、落花生油、オリーブ油、および水などが含まれる。気体担体の例には、二酸化炭素および窒素などが含まれる。経口剤形用の組成物を調製する際には、任意の都合のよい医薬媒体を使用することができる。例えば、水、グリコール類、油類、アルコール類、着香料、保存料、着色料などを使用して、懸濁液、エリキシル剤および溶液などの経口液体製剤を形成することができる。一方、デンプン、糖、微結晶セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などのような担体を使用して、粉末、カプセルおよび錠剤などの経口固形製剤を形成することができる。それらの投与の容易さのために、錠剤およびカプセル剤が好ましい経口投与単位であり、それにより固体の製薬学的担体が使用される。場合により、錠剤は標準的な水性または非水性技術により被覆することができる。
【００７８】
本発明の組成物を含有する錠剤は、場合により１種以上の補助成分または補助剤と共に圧縮または成形することにより調製することができる。圧縮錠剤は、場合により結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、界面活性剤または分散剤と混合した、粉末または顆粒などの易流動性形態の活性成分を、適切な機械で圧縮することによって調製することができる。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を、適切な機械で成形することによって調製することができる。各錠剤は好ましくは約０．０５ｍｇ−約５ｇの活性成分を含み、各カシェ剤またはカプセル剤は好ましくは約０．０５ｍｇ−約５ｇの活性成分を含む。例えば、ヒトへの経口投与を目的とした製剤は、全組成物の約５から約９５パーセントまで変動し得る適切かつ都合の良い量の担体材料と配合した、約０．５ｍｇから約５ｇの活性剤を、含み得る。単位剤形は一般に、約１ｍｇから約２ｇの間、典型的には２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ、または１０００ｍｇの活性成分を含有するであろう。
【００７９】
非経口投与に適した本発明の医薬組成物は、水中の活性化合物の溶液または懸濁液として調製することができる。例えば、ヒドロキシプロピルセルロースなどの適切な界面活性剤を含めることができる。分散液もまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、およびそれらの油中混合物中で調製することができる。さらに、微生物の有害な増殖を防ぐために防腐剤を含めることができる。
【００８０】
注射用途に適した本発明の医薬組成物は無菌水溶液または分散液を含む。さらに、組成物は、そのような滅菌注射用溶液または分散液の即時調製用の滅菌粉末の形態であり得る。全ての場合において、最終注射形態は無菌でなければならず、そして容易な注射可能性のために効果的に流動性でなければならない。医薬組成物は製造および貯蔵の条件下で安定でなければならず、したがって、好ましくは細菌およびかびなどの微生物の汚染作用から保護されるべきである。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、植物油、およびそれらの適切な混合物を含む溶媒または分散媒体であり得る。
【００８１】
本発明の医薬組成物は、例えばエアゾール剤、クリーム剤、軟膏剤、ローション剤、散粉剤などのような局所使用に適した形態であり得る。さらに、組成物は、経皮装置における使用に適した形態であり得る。これらの製剤は、本発明の式Iで表される化合物またはその製薬上許容される塩を用いて、慣用の加工方法により調製することができる。一例として、クリームまたは軟膏は、親水性材料と水を、約５重量％から約１０重量％の化合物と混合して、所望の粘稠度を有するクリームまたは軟膏を製造するために調製される。
【００８２】
本発明の医薬組成物は、直腸投与に適した形態であり得て、ここでその担体が固体である混合物が単位用量坐剤を形成することが好ましい。適切な担体としては、カカオバターおよび当該分野で一般的に使用されている他の材料が挙げられる。坐剤は、最初に組成物を軟化または溶融した担体と混合し、続いて金型中で冷却および成形することによって都合よく形成することができる。
【００８３】
上記の担体成分に加えて、上記の医薬製剤は、必要に応じて、希釈剤、緩衝剤、香味剤、結合剤、界面活性剤、増粘剤、潤滑剤、保存剤（酸化防止剤を含む）などの１つ以上の追加の担体成分を含み得る。さらに、製剤を意図するレシピエントの血液と等張にするために、他のアジュバントを含めることができる。式Iで表される化合物またはその製薬上許容される塩を含有する組成物はまた、粉末または液体濃縮物の形態で調製することができる。
【００８４】
一般に、１日当たり約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１５０ｍｇ／ｋｇ体重のオーダー、あるいは１日当たり患者当たり約０．５ｍｇから約７ｇの投与量レベルが有用である。例えば、結腸癌、直腸癌、マントル細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、乳癌、前立腺癌、神経膠芽細胞腫、扁平上皮細胞食道癌、脂肪肉腫、Ｔ細胞リンパ腫黒色腫、膵臓癌、膠芽腫または肺癌は、１日当たり体重１キログラム当たり約０．０１−５０ｍｇの化合物、あるいは二者択一的に１日当たり患者当たり約０．５ｍｇ−約３．５ｇの化合物の投与により、効果的に治療され得る。
【００８５】
しかしながら、上に列挙したものよりも低いまたは高い用量が必要とされ得ることが理解される。任意の特定の対象に対する具体的な用量レベルおよび治療計画は、使用される具体的な化合物の活性、年齢、体重、一般的な健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄速度、薬物の組み合わせ、治療を受けている特定の疾患の重症度および経過、その疾患に対する対象の素因、および治療を行っている医師の判断を含む様々な要因によって決まる。
【００８６】
これらおよび他の側面は、以下に記載された本発明の説明から明らかになるであろう。
【実施例】
【００８７】
前述の一般的な記載および以下の詳細な記載は、例示的かつ説明的なものにすぎず、特許請求される主題を限定するものではないことを理解されたい。特に明記しない限り、すべての部およびパーセントは重量基準であり、すべての温度は摂氏温度である。本明細書に記載されている化合物は、商業的供給源から得ることができ、または商業的に入手可能な出発物質および試薬を使用して下記に示されるような従来の方法によって合成することができる。
【００８８】
本実施例では、次の略語が用いられる。
ＡＴＰ：アデノシン三リン酸
Ｂｏｃ２Ｏ：ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート
ｃｏｎ−Ｈ２ＳＯ４：濃硫酸
Ｃｒｋ：ＣＴ１０（チキン腫瘍レトロウイルス１０）
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＥＡ：ジエチルアミン
ＤＥＡＤ：ジエチルアゾジカルボキシラート
ＤＩＥＡ：Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＥＭ：ダルベッコ改変イーグル培地
ＤＭＦ：Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＡ：Ｎ、Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＡＰ：４−Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＴＴ：ＤＬ−ジチオトレイトール
ＥＡ：酢酸エチル
ＥＤＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド。
ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸
ＥｔＯＨ：エチルアルコール
ＦＢＳ：ウシ胎児血清
ＧＳＲ：グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ、Ｎ、Ｎ'、Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＥＰＥＳ：４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−エタンスルホン酸
Ｈｅｘ：ｎ−ヘキサン
ｈまたはｈｒ：時間
ＩＰＡ：イソプロパノール
ＫＯＡｃ：酢酸カリウム
ＫＴＢ：カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド
ＭｅＯＨ：メタノール
ｍｉｎ：分
ＭｓＣｌ：塩化メチルスルホニル
ＭＴＳ：３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム
ＮａＢＨ４：水素化ホウ素ナトリウム
ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３：ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド
Ｐ（Ｃｙ）３：トリシクロヘキシルホスフィン
Ｐｄ２（ｄｂａ）３：トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム
Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２：［１，１'−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム
Ｐｄ（ＯＡｃ）２：酢酸パラジウム
ＰＥ：石油エーテル
ＰＭＳ：フェナジンメトサルフェート
ＰＯＣｌ３：オキシ塩化リン
Ｐ／Ｓ：ペニシリン／ストレプトマイシン溶液
ＲＴまたはｒｔ：室温
ＳＤＳ：ドデシル硫酸ナトリウム
ＳＤＳ−ＰＡＧＥ：ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミド電気泳動ゲル
ＴＢＡＢ：テトラブチルアンモニウムブロミド
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
Ｔｏｌ：トルエン
【００８９】
調製例１：５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン（中間体Ｍ１）
2020504747.tif 000008
【００９０】
１−メチルピペラジン（１．１８０ｇ）およびＫ２ＣＯ３（２．７２０ｇ）をＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中の５−ブロモ−２−ニトロピリジン（２．０１０ｇ）の溶液に連続的に添加する。反応液を油浴中で８２℃で１５時間撹拌する。水（５０ｍＬ）を加え、ＤＣＭ（２０ｍＬ×８）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）で精製して１．９４０ｇの１−メチル−４−（６−ニトロピリジン−３−イル）ピペラジンを得た。
【００９１】
水素下、室温で２時間、ＴＨＦ（２５ｍＬ）中の１−メチル−４−（６−ニトロピリジン−３−イル）ピペラジン（１．９４０ｇ）の溶液にＰｄ／Ｃ（０．１９４ｇ）を添加する。濾液を濾取した後、濃縮し、５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン１．４８０ｇを得た。ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ＝１９３．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００９２】
対応するピペラジン誘導体を使用して、本質的に５−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−アミン（本明細書では中間体Ｍ１と呼ぶ）について記載したように、次の中間体（表１に示す）を調製する。
2020504747.tif 000009
【００９３】
調製例４：６−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−３−アミン（中間体Ｍ４）
2020504747.tif 000010
【００９４】
氷浴中０℃でＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中の５−ブロモピコリンアルデヒド（２．０１０ｇ）の溶液にＮａＢＨ４（１．２２０ｇ）を添加し、ＮａＢＨ４の添加が完了した後、氷浴を取り外し、室温に自然に温める。室温で２時間撹拌した後、反応混合物を０℃で水（５０ｍＬ）でクエンチした。ＥＡ（５０ｍＬ×２）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、１．９４０ｇの（５−ブロモピリジン−２−イル）メタノールを得た。
【００９５】
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の（５−ブロモピリジン−２−イル）メタノール（１．９４０ｇ）の溶液を氷浴中で０℃に冷却し、次いでその溶液に塩化メチルスルホニル（１．７８０ｇ）を滴下する。塩化メチルスルホニルの添加が完了した後、氷浴を取り外し、室温に自然に温める。室温で２時間撹拌した後、反応混合物を水（５０ｍＬ）でクエンチした。ＥＡ（５０ｍＬ×２）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して２．７５０ｇの粗生成物（５−ブロモピリジン−２−イル）メチルメタンスルホネートを得た。
【００９６】
Ｋ２ＣＯ３（２．８７０ｇ）および１−メチルピペラジン（１．５６０ｇ）をアセトニトリル（３０ｍＬ）中の（５−ブロモピリジン−２−イル）メチルメタンスルホネート（２．７５０ｇ）の溶液に連続して加え、油浴中で５０℃に加熱し、そして２時間にわたって反応させる。次いで、室温に冷却し、水を加え、ＥＡ（５０ｍＬ×３）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により精製して、２．０１０ｇの１−（（５−ブロモピリジン−２−イル）メチル）−４−メチルピペラジンを得た。
【００９７】
−７８℃のアンモニア下で１００ｍＬの封管にＭｅＯＨ（２０ｍＬ）を加え、次に溶液の容量が３０ｍＬに上昇するまで１−（（５−ブロモピリジン−２−イル）メチル）−４−メチルピペラジン（１．０００ｇ）と酸化第一銅（０．５３２ｇ）を順に加える。外浴を外し、自然に室温に温めた後、７０℃に加熱して１２時間反応させる。濾液を濾取し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１５／１）により精製して、０．７３０ｇの６−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−３−アミンを得た。ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ＝２０７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００９８】
対応するピペラジン誘導体を使用して、本質的に６−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリジン−３−アミン（本明細書では中間体Ｍ４と呼ぶ）について記載したように、次の中間体（表２に示す）を調製する。
2020504747.tif 000011
【００９９】
調製例７：５−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−アミン（中間体Ｍ７）
2020504747.tif 000012
【０１００】
氷浴中０℃でＴＨＦ（２０ｍＬ）中の２−ブロモ−５−ホルミルピリジン（２．０１０ｇ）の溶液にＮａＢＨ４（１．６４０ｇ）を添加し、ＮａＢＨ４の添加が完了した後、氷浴を取り外し、自然に室温まで温める。室温で２時間撹拌した後、反応混合物を水（５０ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（５０ｍＬ×２）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝５／１）で精製し、（６−ブロモピリジン−３−イル）メタノール１．９００ｇを得た。
【０１０１】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の（６−ブロモピリジン−３−イル）メタノール（１．０００ｇ）の溶液を氷浴中で０℃に冷却し、塩化チオニル（１．２６０ｇ）を敵か転嫁し、添加が完了した後、氷浴を取り外し、２時間撹拌しながら溶液を自然に室温に温め、次に直接濃縮して１．０５０ｇの２−ブロモ−５−（クロロメチル）ピリジンを得た。
【０１０２】
アセトニトリル（１０ｍＬ）中の２−ブロモ−５−（クロロメチル）ピリジン（０．８５３ｇ）の溶液に、Ｎ、Ｎ−ジメチルピペリジン−４−アミン（０．５８６ｇ）およびＫ２ＣＯ３（１．１６０ｇ）を添加する。水（３０ｍＬ）を加え、ＥＡ（５０ｍＬ×３）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により精製して０．７３０ｇの１−（（６−６）ブロモピリジン−３−イル）メチル）−Ｎ、Ｎ−ジメチルピペリジン−４−アミンを得た。
【０１０３】
−７８℃のアンモニア下で１００ｍＬの封管にＭｅＯＨ（２０ｍＬ）を加え、次に、溶液の容量が３０ｍＬに上がるまで１−（（６−ブロモピリジン−３−イル）メチル）−Ｎ、Ｎ−ジメチルピペリジン−４−アミン（０．３５  ｍｇ）と酸化第一銅（０．１６８ｇ）を連続して加える。外浴を外し、自然に室温に温めた後、７０℃に加熱して１２時間反応させる。濾液を濾取し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により精製して、０．２６０ｇの５−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−アミンを得た。
ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ＝２３５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１０４】
対応するピペリジン誘導体を使用して、本質的に５−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリジン−２−アミン（本明細書では中間体Ｍ７と呼ぶ）について記載したように、次の中間体（表３に示す）を調製する。
2020504747.tif 000013
【０１０５】
調製例１１：５−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリミジン−２−アミン塩酸塩（中間体Ｍ１１）
2020504747.tif 000014
【０１０６】
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の２−クロロピリミジン−５−カルバルデヒド（０．５００ｇ）の溶液に、１２時間撹拌しながら、アンモニア水（２５％）（１．２００ｇ）を添加する。水（８０ｍＬ）を加え、ＤＣＭ（８０ｍＬ×８）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して０．５４０ｇの粗生成物２−アミノピリミジン−５−カルバルデヒドを得た。
【０１０７】
２−アミノピリミジン−５−カルバルデヒド（０．５４０ｇ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）中溶液にＢｏｃ２Ｏ（２．８１７ｇ）、トリエチルアミン（１．３１０ｇ）およびＤＭＡＰ（０．０５４ｇ）を連続して２時間撹拌しながら加える。水を加え、ＥＡ（５０ｍＬ×２）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝５／１）により精製して０．５１４ｇの化合物ＭＨ２−１２を得た。
【０１０８】
化合物ＭＨ２−１２（０．２９０ｇ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、１−メチルピペラジン（０．１０９ｇ）および無水硫酸マグネシウム（０．２１６ｇ）を２時間撹拌しながら加え、次いでトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムを加えた後室温で３時間反応させる、反応混合物を水（２０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（２０ｍＬ×３）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）で精製し、０．３５０ｇの化合物ＭＨ２−１３を得た。
【０１０９】
ＤＣＭ中の化合物ＭＨ２−１３（０．３５０ｇ）の溶液を室温で塩酸ガス下で２時間反応させ、反応混合物を濃縮して５−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリミジン−２−アミン塩酸塩０．２１０ｇを得た。
ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ＝２４４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１１０】
ピペラジン誘導体の代わりに、対応するピペリジン誘導体を使用して、本質的に５−  （（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ピリミジン−２−アミン（本明細書では中間体Ｍ１１と称する）塩酸塩について記載したように、以下の中間体（表４に示す）を調製する。
2020504747.tif 000015
【０１１１】
調製例１３：（２−アミノピリミジン−５−イル）（４−メチルピペラジン−１−イル）メタノン（中間体Ｍ１３）
2020504747.tif 000016
【０１１２】
室温で２時間撹拌しながら、アセトン（１０ｍＬ）および水（３ｍＬ）中の化合物ＭＨ２−１２（０．３１５ｇ）の混合物にオキソン（１．８１０ｇ）を添加する。水（２０ｍＬ）を加え、ＤＣＭ（２５ｍＬ×３）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して０．２９０ｇの化合物ＭＨ８−０１を得た。
【０１１３】
室温で１時間撹拌しながら、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の化合物ＭＨ８−０１（０．２９０ｇ）の溶液にＨＡＴＵ（０．４８８ｇ）およびＤＩＥＡ（０．２２１ｇ）を連続して添加し、１−メチルピペラジン（０．１０５ｇ）を室温で添加した後、溶液を２時間反応させる。水（２０ｍＬ）を加え、ＤＣＭ（２０ｍＬ×３）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ  ４で乾燥し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝５０／１）により精製して０．２５０ｇの化合物ＭＨ８−０２を得た。
【０１１４】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の化合物ＭＨ８−０２（０．１５０ｇ）の溶液を室温で塩酸ガス下で２時間反応させ、水（１０ｍＬ）を加え、次いでＮａ２ＣＯ３でｐＨを８−９に調整し、得られた水溶液を混合溶媒（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）（２０ｍＬ×５）で抽出した。併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して０．０６０ｇの（２−アミノピリミジン−５−イル）（４−メチルピペラジン−１−イル）メタノンを得た。
ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ＝２２３．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１１５】
ピリミジン誘導体の代わりに対応するピリジン誘導体を用いて、本質的に（２−アミノピリミジン−５−イル）−（４−メチルピペラジン−１−イル）メタノン（本明細書では中間体Ｍ１３と呼ぶ）について記載したようにして以下の中間体（表５に示す）を調製する。
2020504747.tif 000017
【０１１６】
調製例１５：Ｎ５−（２−（ジエチルアミノ）エチル）−Ｎ５−メチルピリジン−２，５−ジアミン（中間体Ｍ１５）
2020504747.tif 000018
【０１１７】
アセトニトリル（１０ｍＬ）中の２−ニトロ−５−ブロモピリジン（０．５００ｇ）の溶液に、Ｎ、Ｎ−ジエチル−Ｎ'−メチルエチレンジアミン（０．３０５ｇ）およびＫ２ＣＯ３（０．６７９ｇ）を連続的に添加する。反応液を油浴中で８２℃で１５時間撹拌する。水（５０ｍＬ）を加え、ＤＣＭ（８０ｍＬ×３）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により精製して、０．４００ｇの１−メチル−４−（６−ニトロピリジン−３−イル）−ピペラジンを得た。
【０１１８】
水素ガス下、室温で２時間撹拌しながら、ＴＨＦ（１５ｍＬ）中の１−メチル−４−（６−ニトロピリジン−３−イル）ピペラジンの溶液にＰｄ／Ｃ（０．０４０ｇ）を添加する。濾液を濾取した後、濃縮し、Ｎ５−（２−（ジエチルアミノ）エチル）−Ｎ５−メチルピリジン−２，５−ジアミン０．３５０ｇを得た。ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ＝２２３．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１１９】
Ｎ、Ｎ−ジエチル−Ｎ'−メチルエチレンジアミンの代わりにＮ１、Ｎ１−ジエチル−Ｎ２，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミンを用いて、本質的にＮ５−（２−（ジエチルアミノ）エチル）−Ｎ５−メチルピリジン−２，５−ジアミン（本明細書では中間体Ｍ１５と呼ぶ）について記載したようにして以下の中間体（表６に示す）を調製する。
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【０１２０】
調製例１７：６−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリダジン−３−アミン（中間体Ｍ１７）
2020504747.tif 000020
【０１２１】
トリクロロイソシアヌル酸（０．１８９ｇ）をＣＨＣｌ３（１０ｍＬ）中の３−クロロ−６−メチルピリダジン（０．２０８ｇ）の溶液に加え、油浴中で１２時間６０℃に加熱する。室温に冷却し、濾液を濾過により集め、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１）により精製して０．２０１ｇの３−クロロ−６−（クロロメチル）ピリダジンを得た。
【０１２２】
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の３−クロロ−６−（クロロメチル）ピリダジン（０．３４０ｇ）の溶液にＫ２ＣＯ３（０．５７８ｇ）、ＫＩ（０．０７０ｇ）およびＮ、Ｎ−ジメチルピペリジン−４−アミン（０．３２２ｇ）を連続的に加える、油浴で５０℃で１時間加熱する。室温に冷却し、ＤＣＭ（５０ｍＬ）を添加し、併合した有機層を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）により精製し、０．３７０ｇの１−（（６−クロロピリダジン−３−イル）メチル）−Ｎ、Ｎ−ジメチルピペリジン−４−アミンを得た。
【０１２３】
−７８℃のアンモニア下で１００ｍＬの封管にＭｅＯＨ（２０ｍＬ）を加え、次に、溶液の容量が３０ｍＬに上がるまで、１−（（６−クロロピリダジン−３−イル）メチル）−Ｎ、Ｎ−ジメチルピペリジン−４−アミン（０．３７０ｇ）と酸化第一銅（０．５３２ｇ）を続けて加える。外浴を外し、自然に室温に温めた後、７０℃に加熱して１２時間反応させる。濾液を濾取し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１５／１）により精製して、０．２３０ｇの６−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリダジン−３−アミンを得た。  ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ＝２３６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１２４】
ピペリジン誘導体の代わりにピペラジン誘導体を使用して、本質的に６−（（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）メチル）ピリダジン−３−アミン（本明細書では中間体Ｍ１７と称する）について記載したように、次の中間体（表７に示す）を調製する。
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【０１２５】
実施例１：化合物１の合成
2020504747.tif 000022
【０１２６】
１．化合物１−０１
無水エタノール（７０ｍＬ）中の２−メチルシクロペンタノン（５．２００ｇ）、塩酸ヒドロキシルアミン（９．２００ｇ）およびトリエチルアミン（１６．０８０ｇ）の混合物を油浴中８５℃で一晩撹拌した。その後、反応液を濃縮し、残渣をＥＡで洗浄した。濾液を濾取した後、濃縮し、５．８２０ｇの粗化合物１−０１を得た。
【０１２７】
２．化合物１−０２
粗化合物１−０１（５．８２０ｇ）を硫酸溶液（ｃｏｎ−Ｈ２ＳＯ４：Ｈ２Ｏ＝２０ｍＬ：５ｍＬ）に溶解し、得られた混合物を油浴中９０℃で９０分間撹拌し、水（１０ｍＬ）を加えた。次いで、Ｎａ２ＣＯ３でｐＨを８−９に調整し、得られた水溶液をＤＣＭ（２０ｍＬ×５）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して４．１１０ｇの粗化合物１−０２を得た。
【０１２８】
３．化合物１−０３
メチルベンゼン（４０ｍＬ）中の粗化合物１−０２（４．１１０ｇ）および４−ブロモ−２，６−ジフルオロアニリン（３．７８０ｇ）の混合物にＰＯＣｌ３（４．１８０ｇ）を添加し、油浴で加熱し、温度を１１０℃に上げたときにＴＥＡ（２．７７０ｇ）を添加し、得られた混合物を１１０℃で２０分間反応させた。メチルベンゼンの一部を除去し、次いでＮａ２ＣＯ３でｐＨを８−９に調整し、ＥＡで抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して６．５５０ｇの粗化合物１−０３を得た。
【０１２９】
４．化合物１−０４
ＤＭＦ（６０ｍＬ）中の粗化合物１−０３（６．１００ｇ）およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（４．５２０ｇ）の混合物を油浴中１００℃で２０分間撹拌し、次いで３００ｍＬのＥＡで抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（１２０ｍＬ×３）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝１／５）で精製して、０．７０５ｇの化合物１−０４−Ａ、および１．５００ｇの粗化合物１−０４−Ｃを得た。
【０１３０】
５．化合物１−０５
ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中の粗化合物１−０４−Ｃ（０．９５７ｇ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（１．２９０ｇ）、トリシクロヘキシルホスフィン（０．０４７ｇ）、酢酸パラジウム（０．０３８ｇ）の混合物を油浴中９０℃で１時間窒素雰囲気下で撹拌した。得られた混合物をＥＡ（６０ｍＬ）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（３０ｍＬ×３）で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して２．２９０ｇの粗化合物１−０５を得た。
【０１３１】
６．化合物１−０６
１，４−ジオキサン（３０ｍＬ）および水（３ｍＬ）中の粗化合物１−０５（２．２９０ｇ）、２，４−ジクロロピリミジン（０．７５５ｇ）、Ｋ２ＣＯ３（１．４００ｇ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２−ＤＣＭ（０．１３８ｇ）の混合物を油浴中６０℃で２時間窒素下で撹拌した。得られた混合物をＥＡ（３０ｍＬ×２）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（３０ｍＬ×１）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝１／１）で精製し、化合物１−０６を０．９２７ｇ得た。
【０１３２】
７．化合物１
１，４−ジオキサン（１２ｍＬ）中の化合物１−０６（０．４００ｇ）、中間体Ｍ１（０．２９１ｇ）、Ｃｓ２ＣＯ３（０．８２２ｇ）、キサンホス（０．０１７ｇ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（０．０２７ｇ）の混合物を、油浴中１１０℃で窒素ガス下で１時間撹拌し、引き続き、１１０℃で０．５時間マイクロ波下で反応させ続けた。得られた混合物に水（１０ｍＬ）を加え、次いでＤＣＭ（２０ｍＬ×３）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（３０ｍＬ×１）で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）で精製し、固体をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１０ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（１０ｍＬ）で洗浄して、２９０ｍｇの化合物１を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ＝４７３．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３３】
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．４９８−８．５１１（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、８．３７３−８．３９６（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、８．１６７（ｓ、１Ｈ、ＣＨ）、８．０４０−８．０４７（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、７．９６３（ｓ、１Ｈ、ＣＨ）、７．６３１−７．６６０（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、７．３４６−７．６６０（ｄｄ、１Ｈ、ＣＨ）、７．１７７−７．１９０（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、４．６８７−４．７１９（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、３．１９０−３．１０（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２）、２．６５１−２．６７５（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２）、２．９９９−３．０２４（ｍ、１Ｈ、ＣＨ２）、２．４０３（ｓ、３Ｈ、ＣＨ３）、２．３３７−２．３５６（ｍ、１Ｈ、ＣＨ２）、２．２６７−２．３５７（ｍ、１Ｈ、ＣＨ２）、２．２１９−２．２４８（ｍ、１Ｈ、ＣＨ２）、２．０１０−２．０５６（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、１．６０２−１．６１８（ｄ、３Ｈ、ＣＨ３）。
【０１３４】
実施例１−１  化合物１−０６のキラル分離
異性体、例えばエナンチオマーの分離に有用な技術は当分野の技術の範囲内であり、そしてＥｌｉｅｌ，Ｅ．Ｌ；Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．Ｈ．；Ｍａｎｄｅｒ，Ｌ．Ｎ．有機化合物の立体化学、Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，ＮＹ，１９９４年に記載されている。例えば、化合物１、２または１５は、キラルカラムを使用する高速液体クロマトグラフィーによって、高い鏡像体過剰率（例えば、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％またはそれ以上）に分割することができる。いくつかの実施形態において、実施例１の粗化合物１−０６は、キラルカラムで直接精製されて、鏡像異性的に濃縮された化合物を提供する。
2020504747.tif 000023
【０１３５】
実施例１−２  化合物１ａおよび化合物１ｂの合成
粗化合物１−０６をキラルカラムで上記の条件下で精製して、化合物１−０６−Ａおよび化合物１−０６−Ｂを得る。
【０１３６】
本質的にそれぞれ化合物１−０６−Ａおよび化合物１−０６−Ｂを使用して実施例１の工程７について記載したようにして化合物１ａおよび化合物１ｂを調製する。また、旋光度は、下記に示す各化合物について、ルドルフ旋光計を用いて３回測定した。
2020504747.tif 000024
【０１３７】
実施例２：化合物２の合成
2020504747.tif 000025
【０１３８】
１．化合物１−０１
無水エタノール（７０ｍＬ）中の２−メチルシクロペンタノン（５．２００ｇ）、塩酸ヒドロキシルアミン（９．２００ｇ）およびトリエチルアミン（１６．０８０ｇ）の混合物を油浴中８５℃で一晩撹拌した。その後、反応液を濃縮し、残渣をＥＡで洗浄した。濾液を濾取した後、濃縮し、５．８２０ｇの粗化合物１−０１を得た。
【０１３９】
２．化合物１−０２
粗化合物１−０１（５．８２０ｇ）を硫酸溶液（ｃｏｎ−Ｈ２ＳＯ４：Ｈ２Ｏ＝２０ｍＬ：５ｍＬ）に溶解し、得られた混合物を油浴中９０℃で９０分間撹拌し、水（１０ｍＬ）を加えた。次いで、Ｎａ２ＣＯ３でｐＨを８−９に調整し、得られた水溶液をＤＣＭ（２０ｍＬ×５）で抽出し、併合した有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して４．１１０ｇの粗化合物１−０２を得た。
【０１４０】
３．化合物１−０３
メチルベンゼン（４０ｍＬ）中の粗化合物１−０２（４．１１０ｇ）および４−ブロモ−２，６−ジフルオロアニリン（３．７８０ｇ）の混合物にＰＯＣｌ３（４．１８０ｇ）を添加し、油浴で加熱し、温度を１１０℃に上げたときにＴＥＡ（２．７７０ｇ）を添加し、混合物を１１０℃で２０分間反応させた。メチルベンゼンの一部を除去し、次いでＮａ２ＣＯ３でｐＨを８−９に調整し、ＥＡで抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して６．５５０ｇの粗化合物１−０３を得た。
【０１４１】
４．化合物１−０４
ＤＭＦ（６０ｍＬ）中の粗化合物１−０３（６．１００ｇ）およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（４．５２０ｇ）の混合物を油浴中１００℃で２０分間撹拌し、次いで３００ｍＬのＥＡで抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（１２０ｍＬ×３）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝１／５）で精製して、０．７０５ｇの化合物１−０４−Ａ、および１．５００ｇの粗化合物１−０４−Ｃを得た。  
【０１４２】
５．化合物１−０５
ＤＭＳＯ（５ｍＬ）中の粗化合物１−０４−Ｃ（０．２００ｇ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（０．２７０ｇ）、トリシクロヘキシルホスフィン（０．０３９ｇ）、酢酸パラジウム（０．０３１ｇ）の混合物を湯浴中９０℃で窒素雰囲気下で１時間撹拌した。得られた混合物をＥＡ（５０ｍＬ）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（２０ｍＬ×３）で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、０．３９８ｇの粗化合物１−０５を得た。
【０１４３】
６．化合物２−０１
１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）および水（１ｍＬ）中の粗化合物１−０５（０．３９８ｇ）、２，４−ジクロロピリミジン（０．３０４ｇ）、Ｋ２ＣＯ３（０．５０２ｇ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＤＣＭ（０．０５０ｇ）の混合物を油浴中６０℃で８０分間窒素下で撹拌した。得られた混合物に水（１０ｍＬ）を加え、次いでＥＡ（２０ｍＬ×２）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（２０ｍＬ×１）で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝１／１）で精製して０．１６５ｇの化合物２−０１を得た。
【０１４４】
７．化合物２
１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中の化合物２−０１（０．０３０ｇ）、中間体Ｍ５（０．０２５ｇ）、Ｃｓ２ＣＯ３（０．０６７ｇ）、キサンホス（０．００５ｇ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（０．００５ｇ）の混合物は、油浴中、１１０℃で３．５時間窒素ガス下で撹拌した。得られた混合物に２０ｍＬの混合溶媒（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）を加え、次いで濾過し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝８／１）により精製し、固体を１，４−ジオキサン（５ｍＬ）で洗浄し、０．０２４ｇの化合物２を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ＝５１９．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４５】
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．５８７（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．４４８−８．４５７（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、８．３８３−８．４０５（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、８．２８０−８．２８６（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、８．００９−８．０１３（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、７．８０４−７．８３７（ｄｄ、１Ｈ、ＣＨ）、７．６８６−７．７１４（ｄｄ、１Ｈ、ＣＨ）、４．６８１−４．７２８（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、３．５３２（ｓ、２Ｈ、ＣＨ２）、３．１８９−３．２５６（ｍ、１Ｈ、ＣＨ２）、３．００８−３．０９１（ｍ、１Ｈ、ＣＨ２）、２．６５４（ｓ、８Ｈ、ＣＨ２）、２．５７１−２．６０８（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、２．２２６−２．２９９（ｍ、１Ｈ、ＣＨ２）、２．１１１−２．１５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ２）、２．０１２−２．０５３（ｍ、２Ｈ、ＣＨ２）、１．５９６−１．６１２（ｄ、３Ｈ、ＣＨ３）、１．１７４−１．２１０（ｔ、３Ｈ、ＣＨ３）。
【０１４６】
実施例２−１  化合物２−０１のキラル分離
この実施形態において、実施例２の粗化合物２−０１をキラルカラムで直接精製して、以下の条件下で化合物２−０１−Ａおよび化合物２−０１−Ｂを得る。
2020504747.tif 000026
【０１４７】
実施例２−２  化合物２ａおよび化合物２ｂの合成
粗化合物２−０１をキラルカラムで上記の条件下で精製して、化合物２−０１−Ａおよび化合物２−０１−Ｂを得た。化合物２−０１−Ａおよび化合物２−０１−Ｂをそれぞれ使用して、本質的に実施例２の工程７について記載したようにして、化合物２ａおよび化合物２ｂを調製する。また、旋光度は、下記に示す各化合物について、ルドルフ旋光計を用いて３回測定した。
2020504747.tif 000027
【０１４８】
対応する中間体を用いて、本質的に実施例２について記載したようにして（表８に示す）以下の化合物を調製する。各化合物の２つのエナンチオマーがキラルカラム上で分離されている場合は、次に本質的に実施例２−２に記載されているようにそれらの旋光度をそれぞれ試験する。
2020504747.tif 000028
2020504747.tif 000029
【０１４９】
実施例１５：化合物１５ｂの合成
2020504747.tif 000030
【０１５０】
１．化合物１５−０１
メチルベンゼン（２０ｍＬ）中の５−メチルモルホリン−３−オンの（−）エナンチオマー（０．２００ｇ）および４−ブロモ−２，６−ジフルオロアニリン（０．２１０ｇ）の混合物にＰＯＣｌ３（０．５１０ｇ）を添加し、油浴中で加熱し、温度が１１０℃に上昇したときＴＥＡ（０．２１０ｇ）を加え、得られた混合物を１１０℃で４０分間反応させた。メチルベンゼンの一部を除去し、水（１０ｍＬ）を加えた後にＮａ２ＣＯ３でｐＨを８−９に調整し、次いでＥＡ（２０ｍＬ×２）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ（２０ｍＬ×１）溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して０．２８０ｇの化合物１５−０１を得た。
【０１５１】
２．化合物１５−０２
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の化合物１５−０１（０．２７５ｇ）の混合物にカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．４８２ｇ）を添加し、次に油浴中７０℃で３０分間撹拌した。得られた混合物をＥＡ（２０ｍＬ×３）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（３０ｍＬ×４）で洗浄し、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝５／１）により精製し、０．２６０ｇの化合物１５−０２を得た。
【０１５２】
３．化合物１５−０３
ＤＭＳＯ（６ｍＬ）中の化合物１５−０２（０．２６０ｇ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（０．３２０ｇ）、トリシクロヘキシルホスフィン（０．０５０ｇ）、酢酸パラジウム（０．０４０ｇ）の混合物を油浴中、窒素雰囲気下９０℃で５０分間撹拌した。得られた混合物をＥＡ（２０ｍＬ×２）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（１０ｍＬ×３）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して０．２５８ｇの化合物１５−０３を得た。
【０１５３】
４．化合物１５−０４
１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）および水（１ｍＬ）中の化合物１５−０３（０．１２０ｇ）、２，４−ジクロロ−５−フルオロピリミジン（０．０６０ｇ）、Ｋ２ＣＯ３（０．０９９ｇ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＤＣＭ（０．０１２ｇ）の混合物を油浴中で６０℃で１時間窒素下で撹拌した。得られた混合物をＥＡ（２０ｍＬ×２）で抽出し、併合した有機相を飽和ＮａＣｌ溶液（２０ｍＬ×１）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝３０／１）で精製し、化合物１５−０４の（−）エナンチオマー０．０５２ｇを得た。
【０１５４】
５．化合物１５ｂ
１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中の化合物１５−０４の（−）エナンチオマー（２０ｍｇ）、中間体Ｍ１（０．０１７ｇ）、Ｃｓ２ＣＯ３（０．０５６ｇ）、キサンホス（０．００５ｇ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（０．００５ｇ）を、窒素気流下、１１０℃で１．５時間マイクロ波反応させた。得られた混合物に２０ｍＬの混合溶媒（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１）を加え、濾液を濾過により回収し、次いで濃縮し、分取ＨＰＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝２０／１）により精製し、得られた固体をｎ−ヘキサン（１０ｍＬ）で洗浄して０．０１４ｇの化合物１５ｂを得た。ＭＳ（ＥＳ＋）：ｍ／ｚ＝４９３．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５５】
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．４０９−８．４１８（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、８．２１１−８．２８８（ｍ、２Ｈ、ＣＨ）、８．０７０−８．０７７（ｄ、１Ｈ、ＣＨ）、８．０１９−８．０２３（ｄ、１Ｈ、  ＣＨ）、７．８３３−７．８６８（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、５．１１８−５．１５８（ｄ、１Ｈ、ＣＨ２）、４．９１２−５．００２（ｄ、１Ｈ、ＣＨ２）、４．５２２−４．５８４（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、４．１１１−４．１６８  （ｍ、１Ｈ、ＣＨ２）、４．０３９−４．０７５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ２）、３．２４９−３．２７５（ｍ、４Ｈ、ＣＨ  ２）、２．７２４−２．７４８（ｍ、４Ｈ、ＣＨ２）、２．４６２（ｓ、３Ｈ、ＣＨ３）、  １．６６２−１．６７８（ｄ、３Ｈ、ＣＨ３）。
【０１５６】
実施例１５−１  化合物１５ａおよび化合物１５の合成
【０１５７】
化合物１５ａおよび化合物１５ｂはエナンチオマーである。出発物質として５−メチルモルホリン−３−オンの（＋）エナンチオマーを使用して、本質的に実施例１５に記載の通りに化合物１５ａを調製する。
【０１５８】
他の実施形態では、粗５−メチルモルホリン−３−オンを出発材料として使用する。最終的に化合物１５ａおよび化合物１５ｂを含む粗化合物１５が得られるであろう。また、旋光度は、下記に示す各化合物について、ルドルフ旋光計を用いて３回測定した。
2020504747.tif 000031
【０１５９】
対応する中間体を使用し、出発物質として５−メチルモルホリン−３−オンの（＋）および／または（−）エナンチオマーを使用して、本質的に実施例１５について記載したようにして次の実施例の化合物（表９に示す）を調製する。それらの旋光度は、本質的に実施例１５−１について記載したように試験した。
2020504747.tif 000032
2020504747.tif 000033
2020504747.tif 000034
【０１６０】
比較例
対応する中間体または出発物質を使用して、本質的に実施例１、２または１５について記載されているように、以下の比較例を調製する。例えば、本質的に実施例２について記載したようにして、
2020504747.tif 000035
の代わりに
2020504747.tif 000036
を用いて以下の比較例８、９および１０（表１０に示す）を調製し、本質的に実施例１について記載したようにして、
2020504747.tif 000037
の代わりに
2020504747.tif 000038
を用いて以下の比較例７を調製する。
2020504747.tif 000039
【０１６１】
上の表では、比較例３ｂおよび４ｂは本質的に実施例１５に記載のとおりの合成であり、そして次に本質的に実施例１５−１に記載のとおりにそれらの旋光度をそれぞれ試験する。比較例３ｂおよび４ｂは、両方とも負の旋光度を示す。
【０１６２】
薬理学的テスト
以下のアッセイの結果は、本明細書に例示された化合物が特異的ＣＤＫ４／６阻害剤としておよび抗癌剤として有用であるという証拠を実証する。本明細書で使用されるように、「ＩＣ５０」は、薬剤に対して可能な最大阻害応答の５０％を生じる薬剤の濃度を指す。
説明の便宜上、以下の一般構造を以下に示す。驚くべきことに、我々は「Ｒ」が生物学的活性、選択性および安全性に重大な影響を及ぼすことを見出した。
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【０１６３】
試験１：細胞増殖アッセイによる異なる置換基の比較
試験管内増殖に対する試験化合物の効果をＭＴＳ細胞生存率アッセイにより測定した。
【０１６４】
細胞培養
ヒト結腸直腸癌細胞（ｃｏｌｏ−２０５）を培養で増殖させる（ｃｏｌｏ−２０５を１２％ＦＢＳ、１％Ｐ／Ｓ、および１％Ｌ−グルタミンを含むＤＭＥＭ培地中で増殖させる）。
【０１６５】
ＭＴＳ細胞生存率アッセイ：
１．９６ウェルプレートの１ウェルあたり４×１０３細胞の密度で細胞を播種し、２４時間育成させる；  
２．細胞に様々な濃度の試験化合物を加える；
３．７日間の暴露でインキュベートする；
４．細胞増殖アッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ）の指示に従って試薬を調製する；
５．最終容量１００μｌ／ウェルの無血清培地に交換する。バックグラウンドを差し引くためだけの培地でウェルのセットを準備する；
６．各ウェルにＰＭＳを含有する２０μｌのＭＴＳ溶液を添加する（ＭＴＳの最終濃度は０．３３ｍｇ／ｍＬとなる）；
７．加湿した５％ＣＯ２雰囲気中で３７℃で１−４時間インキュベートする；
８．ＶＩＣＴＯＲ（商標）Ｘ５プレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて４９０ｎｍで吸光度を記録する。
全ての実験点を３つのウェルに設定し、そして全ての実験を少なくとも３回繰り返した。ソフトウェア（Ｇｒａｐｈｐａｄ  ｐｒｉｓｍ  ６）を用いて用量反応曲線からＩＣ５０値を算出し、結果を表１１に示す。
【０１６６】
2020504747.tif 000041
【０１６７】
上記の例示化合物は、表１１に示すようにこのモデルにおいて抗腫瘍活性を示し、従って、本発明の例示化合物は、Ｒｂ＋腫瘍に対してより強力な体内活性を有することを実証している。既知の化合物ＬＹ２８３５２１９（Ａｂｅｍａｃｉｃｌｉｂ）と比較して、本発明の化合物、例えば実施例１または２の化合物はＲｂ＋腫瘍に対してより強力な阻害を有する。比較例１（以下、Ｃｏｍ．ＥＸ．１という。Ｒはスピロ）および比較例２（以下、Ｃｏｍ．ＥＸ．２という。ＲはＨ）と比較して、本発明の化合物、例えば、実施例１または２の化合物（Ｒはメチル）は、Ｒｂ＋腫瘍に対してはるかに強力な阻害を有する。
【０１６８】
上記の例示化合物はまた、ＲがＨまたはスピロではなくメチルであることがこのモデルにおいてはるかに強力な生物学的活性を有することを示している。以上の結果から、置換基の種類がＲｂ＋腫瘍の抑制に大きな影響を与えることがわかる。
【０１６９】
試験２：安全性試験による異なる置換基の比較
上記のようにして調製された選択化合物を、体重の変化および死亡が起こったかどうかに従って安全性をアッセイし、その手順を本明細書に記載した。試験化合物を適切なビヒクル中に調製し、経口胃管栄養法によりＢＡＬＢ／ｃマウス（２２−２３ｇ）に投与する。体重と死亡率は、毒性の一般的な尺度とみなされる。体重減少（％体重変化）は、治療期間中に治療群をビヒクル対照群と比較することによって週に２回計算される。化合物２および１６は、これらのモデルにおいて、２００ｍｇ／ｋｇ（ｑｄ）で投与された場合、ほとんど体重減少を示さない。同じ投与量で２週間の治療後、比較例３ｂ「および比較例４ｂは、はるかに多くの体重減少を引き起こし、各群（６匹のマウス）において４匹および５匹のマウスが死亡してさらに高い死亡率を引き起こしさえする。
【０１７０】
結果を表１２に示した。「＊」は「５％未満の体重減少」を表す。「＊＊」は「５％を超え１０％未満の体重減少」を表す。「＊＊＊」は「１０％超３０％未満の体重減少」を表す。「＊＊＊＊」は「３０％を超える減量」を表す。「＋」は「死亡が発生した」ことを表す。「−」は「死亡なし」を表す。
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【０１７１】
驚いたことに、比較例３ｂ（Ｒはイソプロピル）または比較例４ｂ（Ｒはエチル）はより多くの副作用と毒性を有することがわかった。しかしながら、本発明の例示化合物、例えば化合物２ｂまたは１６ｂ（Ｒはメチル）は、はるかに安全であり、従って置換基の種類が安全性に重大な影響を及ぼすことを証明している。
【０１７２】
試験３：ＣＤＫキナーゼアッセイによる置換基数の影響
化合物がＣＤＫキナーゼに対する親和性（ＣＤＫ２／ＣｙｃＡ２、ＣＤＫ４／ＣｙｃＤ３、ＣＤＫ６／ｃｙｃＤ３）を示すことを実証するために、ＣＤＫキナーゼアッセイを実施した。
【０１７３】
反応緩衝液を以下のように調製した：ＣＤＫ２，６用キナーゼ塩基性緩衝液（５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５；０．００１５％  Ｂｒｉｊ−３５；１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２；２ｍＭ  ＤＴＴ）；ＣＤＫ４用キナーゼ塩基性緩衝液（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５；  ０．０１％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００；  １０ｍＭ  ＭｇＣｌ２；２ｍＭ  ＤＴＴ）。停止緩衝液（１００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５；０．０１５％Ｂｒｉｊ−３５；０．２％コーティング試薬＃３；５０ｍＭ  ＥＤＴＡ）。
【０１７４】
酵素反応プロトコール：
１）１００％ＤＭＳＯで反応中の化合物を最終所望の最高濃度の５０倍に希釈する。９６ウェルプレートのウェルに１００μＬのこの化合物希釈液を移す。次に、次のウェルに３０μＬから６０μＬの１００％ＤＭＳＯを移して合計１０の濃度になるように化合物を段階的に希釈します。同じ９６ウェルプレートに化合物なしの対象および酵素なしの対象２つの空のウェルに１００μＬの１００％ＤＭＳＯを添加する。プレートにソースプレートとしてマークする。
２）ソースプレートから１０μＬの化合物を、中間プレートとして９０μＬのキナーゼ緩衝液を含む新しい９６ウェルプレートに移すことにより、中間プレートを調製する。
３）９６ウェルの中間プレートから３８４ウェルのプレートに５μＬの化合物を二重に移す。
４）３８４ウェルアッセイプレートの各ウェルに２．５μの酵素溶液１０μＬを加える。
５）室温で１０分間インキュベートする。
６）ＦＡＭ標識ペプチドとＡＴＰをキナーゼベースバッファーに加えた１０μＬの２．５ｘの基質溶液を加える。以下の表（表１３）としての酵素および基質に対する反応濃度を次の表に示す（表１３）。
2020504747.tif 000043
【０１７５】
７）２８℃で一定時間インキュベートする。
８）２５μＬの停止緩衝液を添加して反応を停止させる。
９）キャリパーにデータを収集し、次に変換値を抑制値に変換する。
阻害率＝（最大変換）／（最大最小）×１００。
本明細書において、「最大」はＤＭＳＯ対照を表し、「最小」は低対照を表す。
１０）ＸＬＦｉｔ  ＥＸＣＥＬアドインバージョン４．３．１においてパーセント阻害を使用してＩＣ５０値を得るための曲線フィッティング。使用される式は、Ｙ＝ボトム＋（トップ−ボトム）／（１＋（ＩＣ５０／Ｘ）＾  ＨｉｌｌＳｌｏｐｅ）である。Ｙは抑制率（％）である。Ｘは試験化合物の濃度である。
【０１７６】
結果をＩＣ５０値と表して表１４に示す。
2020504747.tif 000044
【０１７７】
上の表に示すように、メチルの数が選択性に非常に重要な影響を及ぼすことがわかる。  驚くべきことに、本発明の例示化合物は、表１４に示すように、上記ＣＤＫ２キナーゼ阻害アッセイにおいて＞０．３μＭのＩＣ５０および上記ＣＤＫ４／６キナーゼ阻害アッセイにおいて≦０．０４μＭのＩＣ５０を示す。本発明の化合物はＣＤＫ４／６キナーゼ活性のより選択的な阻害剤である。したがって、例示化合物（Ｒは１つのメチルのみを表す）が、既知化合物ＬＹ２８３５２１９および比較例、例えば比較例５または比較例６（Ｒは２個のメチルを表す）と比較して、ＣＤＫ４／６のより特異的な阻害剤であることが示される。
【０１７８】
試験４：置換基の効果
上記のように調製した選択化合物を、本明細書に記載の生物学的手順に従ってアッセイした。結果は以下の表の通りであった。
表１５
2020504747.tif 000045
【０１７９】
また、実施例２とその比較例８、９または１０との直接比較結果を次の表１６に示した。「＋＋＋＋」は「０．２μＭ未満のＩＣ５０値」を表す。「＋＋＋」は、「０．２μＭ超かつ１．０μＭ未満のＩＣ５０値」を表す。「＋＋」は「１．０μＭ超かつ２．０μＭ未満のＩＣ  ５０値」を表す。「＋」は「２．０μＭを超えるＩＣ５０値」を表す。
表１６
2020504747.tif 000046
【０１８０】
上記の表１５および１６に示すように、置換基部位も生物学的活性に重要な役割を果たすことがわかる。置換基の部位変化から生じる生物学的活性への影響は非常に予想外である。
【０１８１】
上に示された結果に示されるように、６員複素環の「Ｒ」が生物学的活性、選択性および安全性に重大な影響を及ぼすことを知ることができる。驚くべきことに、前記６員複素環中にメチルが１つしか存在しない場合、効果は少なくとも以下のように得られるであろう。
（１）生物活性の向上
（２）選択性が良い
（３）低副作用。
【０１８２】
テスト５：光学性の影響
上記のように調製された選択化合物を、試験３（ＣＤＫキナーゼアッセイ）として記載されている生物学的手順に従ってアッセイした。結果は以下の表の通りであった。
2020504747.tif 000047
【０１８３】
上記の表に示されるように、ＣＤＫ４／６を阻害することにおいて、化合物１ｂ、２ｂ、１５ｂ、１６ｂがそれぞれ化合物１ａ、２ａ、１５ａ、１６ａよりも強力であることがわかり、本化合物の（−）エナンチオマーが（＋）エナンチオマーに対して有利であることが実証されている。
【０１８４】
場合によっては、本明細書に開示されている化合物は、１つのエナンチオマー［例えば（−）エナンチオマーまたは（＋）エナンチオマー］が高いエナンチオマー過剰率で存在する場合に投与される。一例では、例えば−３５．３９４°（ｃ＝３．０ｍｇ／ｍＬ、ＥｔＯＨ）の負の旋光度を有する化合物１ｂのエナンチオマーは、正の旋光度＋３０．３２５°回転（ｃ＝３．０ｍｇ／ｍＬ、ＥｔＯＨ）を有するエナンチオマー（化合物１ａ）よりもＣＤＫ４／６酵素に対して高い活性を有する。別の例において、例えば、−３２．０３６°（ｃ＝４．０ｍｇ／ｍＬ、ＤＣＭ）の負の旋光度を有する化合物２ｂのエナンチオマーは、＋３８．０８８°（ｃ＝４．０ｍｇ／ｍＬ、ＤＣＭ）の正の旋光度を有するエナンチオマーよりもＣＤＫ４／６酵素に対する活性が高い。他の例において、例えば、−２８．９２９°（ｃ＝４．６ｍｇ／ｍＬ、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：１）の負の旋光度を有する化合物１５ｂのエナンチオマーは、＋３２．８２９°（ｃ＝４．６ｍｇ／ｍＬ、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１：１）の正の旋光度を有するエナンチオマーよりＣＤＫ４／６酵素に対して高い活性を有する。
【０１８５】
試験６：分子レベルでのＣＤＫキナーゼの他のサブタイプに対する阻害活性および選択性試験
本発明の代表的化合物２ｂを試験化合物として用い、陽性対照薬ＬＹ２８３５２１９（Ａｂｅｍａｃｉｃｌｉｂ）と比較してＣＤＫキナーゼ阻害活性と選択特異性を比較した。
【０１８６】
この方法のメカニズムは式（ＩＩ）に示される。キナーゼは、タンパク質基質のリン酸化を触媒して、３３Ｐ標識ＡＴＰ（γ−３３Ｐ−ＡＴＰ）上の３３Ｐを反応系内のタンパク質基質に標識する。反応系をＰ８１イオン交換膜上にスポットし、膜を０．７５％リン酸緩衝液で十分に洗浄した。放射性リン酸化基質は膜上に残り、キナーゼ活性は基質タンパク質放射性標識の強度を記録することによって反映された。
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【０１８７】
データはＰｒｉｓｍ４ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ）を用いて処理され、曲線適合式は以下の通りであった。
Ｙ  ＝ボトム＋（トップ−ボトム）／（１＋１０＾（（ＬｏｇＩＣ５０−Ｘ）＊ヒルスロープ））；  ここで、Ｙは抑制率（％）である。  Ｘは阻害剤の濃度の対数である。
【０１８８】
結果：様々なＣＤＫキナーゼのスクリーニングを通して、代表的な化合物２、２ａ、および２ｂは、ＣＤＫ１／２／７／９を阻害するために０．４μＭを超えるＩＣ５０を有し、これは、ＣＤＫ４／６のそれより１０倍から数千倍高いことが分かった。（表１８参照）
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【０１８９】
結論：分子レベルでは、本発明の代表的な化合物２および化合物２ｂは、ＣＤＫ４／６に対して強い阻害効果を示し、ＣＤＫ１／２／７／９に対して弱い阻害効果を示し、化合物２および化合物２ｂが優れた選択性を持つＣＤＫ４／６キナーゼ阻害剤であることを示す。化合物２ａは、ＣＤＫ４に対して強い阻害効果、ＣＤＫ６に対してわずかな阻害効果、およびＣＤＫ１／２／７／９に対して非常に弱い阻害効果を示し、化合物２ａが極端な選択性を有するＣＤＫ４キナーゼ阻害剤および良好な選択性を有するＣＤＫ６キナーゼ阻害剤であることを示す。さらに、ＣＤＫ１／２／９とＣＤＫ４／６との間の本発明の代表的化合物の選択性は、ＬＹ２８３５２１９（Ａｂｅｍａｃｉｃｌｉｂ）のそれよりもかなり高かった。
【０１９０】
テスト７：ＪｅＫｏ−１異種移植動物モデルに対する腫瘍退縮効果
ＪｅＫｏ−１細胞を、２０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地中で培養した。指数関数的に増殖するＪｅＫｏ−１細胞を回収し、ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの皮下腫瘍接種に適した濃度になるようにＰＢＳに再懸濁した。７０匹の雌マウスの右側に５×１０６個のＪｅＫｏ−１細胞を皮下接種し、ＰＢＳおよびマトリゲル（１：１）に再懸濁した。平均腫瘍体積が１３４ｍｍ３に達したとき、マウスを腫瘍の大きさに従って無作為にグループ分けして投与した。
【０１９１】
４８匹のマウスを実験群に分け、残りの２２匹のマウスは実験に使用しなかった。腫瘍体積は、長径×短径２／２として計算される。試料は、溶媒対照群、試験薬代表化合物２ｂ（１０ｍｇ／ｋｇ）、試験薬代表化合物２ｂ（２５ｍｇ／ｋｇ）、試験薬代表化合物２ｂ（５０ｍｇ／ｋｇ）、試験薬代表化合物２ｂ（１００ｍｇ／ｋｇ）に分けた。各グループにマウス８匹ずつで合計６グループに分け、１日１回強制経口投与した後、１９日間連続投与した。有効性は、ＴＧＩの相対的腫瘍増殖阻害率に従って評価される。
【０１９２】
計算式は以下の通りである：ＴＧＩ（％）＝（Ｃ−Ｔ）／Ｃ×１００％（ＣおよびＴはそれぞれ溶媒対照群の平均腫瘍重量および処置群の平均腫瘍重量）。ＴＧＩ（％）値が高いほど効力が優れていることを示し、ＴＧＩ（％）値が低いほど効力が劣ることを示す。
【０１９３】
結果：化合物２ｂは優れた抗腫瘍活性を示す。
表１９  ＪｅＫｏ−１異種移植モデルにおける代表的化合物２ｂの抗腫瘍有効性評価
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注意：
ａ：ｐ値は、処置群および溶媒対照群についての腫瘍体積の比較分析である。
【０１９４】
したがって、場合によっては、疾患を治療するために、高い鏡像体過剰率の負の旋光度を有する鏡像異性体を有する化合物１、２または１５を対象に投与することが有益である。意外にも、化合物１ｂ、２ｂまたは１５ｂを含むがこれらに限定されない本化合物の光学的に純粋な（−）エナンチオマーは、対象においてＣＤＫ４／６によって媒介される疾患を治療するためのより強力な薬物である。
【０１９５】
本発明の多数の実施形態を説明した。しかしながら、本発明の精神および範囲から逸脱することなく様々な修正を加えることができることが理解されよう。他の実施形態は特許請求の範囲に属する。
【国際調査報告】
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