(57)【要約】  式（Ｉ）に示される化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体、及び当該化合物のｃａｓｐａｓｅ阻害薬としての使用。    【化１】2020505388.tif 000049
2020505388.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）に示される化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体：
【化１】
2020505388.tif 000036
（式中、
環Ａは、５員ヘテロアリール基又は６員ヘテロアリール基から選ばれ、前記５員ヘテロアリール基又は６員ヘテロアリール基は、任意的にＲによって置換され、
環Ｂは、フェニル基又はＣ３−６シクロアルキル基から選ばれ、前記フェニル基又はＣ３−６シクロアルキル基は、任意的にＲによって置換され、
Ｒは、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つ又は３つのＲ１によって置換されたＣ１−３アルキル基から選ばれ、
Ｒ１は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨ（ＣＨ３）又はＮ（ＣＨ３）２から選ばれる）。
【請求項２】
環Ａのヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ又はＮから独立して選ばれ、環Ａのヘテロ原子の数は１、２又は３から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項３】
環Ａは、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、１，２，４−オキサジアゾリル基、１，３，４−オキサジアゾリル基又はピラゾリル基から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項４】
環Ａは、
【化２】
2020505388.tif 000037
から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項５】
環Ｂは、フェニル基又はシクロヘキシル基から選ばれ、前記フェニル基又はシクロヘキシル基は任意的にＲによって置換される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項６】
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つもしくは３つのＲ１によって置換されたＭｅもしくはＥｔから選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項７】
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２又はＣＦ３から選ばれる、請求項６に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項８】
環Ｂは、
【化３】
2020505388.tif 000038
から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項９】
【化４】
2020505388.tif 000039
は、
【化５】
2020505388.tif 000040
から選ばれ、前記環Ｂは任意的にＲによって置換される、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１０】
【化６】
2020505388.tif 000041
は、
【化７】
2020505388.tif 000042
から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１１】
【化８】
2020505388.tif 000043
は、
【化９】
2020505388.tif 000044
から選ばれる、請求項１０に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１２】
【化１０】
2020505388.tif 000045
は、
【化１１】
2020505388.tif 000046
から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１３】
【化１２】
2020505388.tif 000047
2020505388.tif 000048
に示される化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１４】
治療的有効量の請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体、及び薬学上許容される担体又は賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
カスパーゼ受容体に関連する疾患を治療する医薬品の製造のための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、その薬学上許容される塩もしくはその互変異性体又は請求項１４に記載の医薬組成物の使用。
【請求項１６】
治療を要する哺乳類に治療的有効量の請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物、その薬学上許容される塩もしくはその互変異性体又は請求項１４に記載の医薬組成物を投与することを含む、哺乳類のカスパーゼ受容体に関連する疾患を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
「関連出願の相互参照」
本発明は、２０１７年１月２３日に中国国家知識産権局に提出された中国特許出願第２０１７１００５９０６３．８号の優先権を主張し、その全ての内容は、援用される形で本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、カスパーゼ（Ｃａｓｐａｓｅ）阻害薬としての一連の新規化合物及びその薬学上許容される塩に関し、さらに、これらの化合物を含む医薬組成物及びかかる医薬組成物の使用方法にも関する。
【背景技術】
【０００３】
哺乳類における細胞数の制御は、ある程度で細胞増殖と細胞死の間のバランスにより決定される。細胞壊死は、細胞死の一種の形態で、外傷又は細胞損傷が引き起こす病理的な細胞死により細胞が死亡するのがその特徴である。細胞壊死は炎症を引き起こしたりするため組織にとって有害である。これに対し、もう一種の細胞死の生理的な形態は、管理・調節された形で行なわれる。こうした管理・調節された細胞死の形態は、アポトーシスと称される（Ｂａｒｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１２：４８７−４９７，１９９４；Ｓｔｅｌｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，２６７：１４４５−１４４９，１９９５）。アポトーシスというプログラムされた方式により、生物体においてその他の組織が損傷されることなく、余分な細胞（生存細胞及び不要に存在している細胞）が除去される。そのため、アポトーシスは、生物体の正常な成長・発達及びその動的平衡を維持する上で非常に重要な生理的なプロセスといえる。
【０００４】
アポトーシスを引き起こす要因は多くある。そのうち、最も重要な要因は、カスパーゼと称される一連のプロテアーゼである（英表記はｃｙｓｔｅｉｎｅ  ａｓｐａｒｔａｔｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｐｒｏｔｅａｓｅ、現在１４種類のカスパーゼプロテアーゼが知られている）。カスパーゼは一連のシステインプロテアーゼであり、細胞中の多くの重要なタンパク質はその作用基質である。アポトーシスのプロセスは、細胞がカスパーゼの作用により分解して生じた破片をその他の細胞により吸收される、又は炎症を引き起こすことなくマクロファージ等により除去されることを含む。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、式（Ｉ）に示される化合物、その薬学上許容される塩及びその互変異性体を提供し、
【化１】
2020505388.tif 000003
ただし、
環Ａは、５員ヘテロアリール基又は６員ヘテロアリール基から選ばれ、前記５員ヘテロアリール基又は６員ヘテロアリール基は、任意的にＲによって置換され、
環Ｂは、フェニル基又はＣ３−６シクロアルキル基から選ばれ、前記フェニル基又はＣ３−６シクロアルキル基は、任意的にＲによって置換され、
Ｒは、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つ又は３つのＲ１によって置換されたＣ１−３アルキル基から選ばれ、
Ｒ１は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨ（ＣＨ３）又はＮ（ＣＨ３）２から選ばれる。
【０００６】
本発明のいくつかの実施形態において、環Ａのヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ又はＮから独立して選ばれる。
【０００７】
本発明のいくつかの実施形態において、環Ａのヘテロ原子の数は、１、２又は３から選ばれる。
【０００８】
本発明のいくつかの実施形態において、上記環Ａは、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、１，２，４−オキサジアゾリル基、１，３，４−オキサジアゾリル基又はピラゾリル基から選ばれる。
【０００９】
本発明のいくつかの実施形態において、上記環Ａは、
【化２】
2020505388.tif 000004
から選ばれる。
【００１０】
本発明のいくつかの実施形態において、上記環Ｂは、フェニル基又はシクロヘキシル基から選ばれ、前記フェニル基又はシクロヘキシル基は、任意的にＲによって置換される。
【００１１】
本発明のいくつかの実施形態において、上記Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つもしくは３つのＲ１によって置換されたＭｅもしくはＥｔから選ばれる。本発明のいくつかの実施形態において、上記Ｒ１は、Ｆ、Ｃｌ又はＮＨ２から選ばれる。
【００１２】
本発明のいくつかの実施形態において、上記Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つもしくは３つのＦによって置換されたＭｅもしくはＥｔから選ばれる。
【００１３】
本発明のいくつかの実施形態において、上記Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２又はＣＦ３から選ばれる。
【００１４】
本発明のいくつかの実施形態において、上記環Ｂは、
【化３】
2020505388.tif 000005
から選ばれる。
【００１５】
本発明のいくつかの実施形態において、
【化４】
2020505388.tif 000006
は、
【化５】
2020505388.tif 000007
から選ばれ、前記環Ｂは任意的にＲによって置換される。
【００１６】
本発明のいくつかの実施形態において、
【化６】
2020505388.tif 000008
は、
【化７】
2020505388.tif 000009
から選ばれる。
【００１７】
本発明のいくつかの実施形態において、
【化８】
2020505388.tif 000010
は、
【化９】
2020505388.tif 000011
から選ばれる。
【００１８】
本発明のいくつかの実施形態において、
【化１０】
2020505388.tif 000012
は、
【化１１】
2020505388.tif 000013
から選ばれる。
【００１９】
いくつかの実施形態において、本発明に係る式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩ）に示される化合物から選ばれ、
【化１２】
2020505388.tif 000014
ただし、環Ａ、環Ｂは、上記定義のとおりである。
【００２０】
いくつかの実施形態において、本発明に係る式（Ｉ）の化合物は、
【化１３】
2020505388.tif 000015
2020505388.tif 000016
に示される化合物から選ばれる。
【００２１】
本発明のもう一つの目的は、治療的有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容される塩及び薬学上許容される担体を含む医薬組成物を提供することにある。
【００２２】
本発明のさらにもう一つの目的は、カスパーゼ受容体に関連する疾患を治療する医薬品の製造のための、式（Ｉ）の化合物もしくはその薬学上許容される塩又は上記医薬組成物の使用を提供することにある。
【００２３】
本発明のさらにもう一つの目的は、治療を要する哺乳類（好ましくはヒト）に治療的有効量の式（Ｉ）の化合物もしくはその薬学上許容される塩、又はその医薬組成物を投与することを含む、哺乳類のカスパーゼ受容体に関連する疾患を治療する方法を提供することにある。
【００２４】
本発明のまたさらにもう一つの目的は、カスパーゼ受容体に関連する疾患を予防又は治療する式（Ｉ）の化合物又はその薬学上許容される塩を提供することにある。
（定義及び説明）
【００２５】
別途説明がない限り、本明細書で用いられる下記用語及び連語は、以下記載の意味を有する。特定の用語又は連語は、特に定義がなされない場合、確定しなかったり明瞭でなかったりするものとして扱われるのではなく、通常の意味で理解されるべきである。本明細書に商品名が記載される場合、対応する製品又はその有効成分を指す。
【００２６】
用語「薬学上許容される」は、ヒト及び動物の組織に接触して使用されるのに適し、毒性と刺激性を持たず、アレルギー反応やその他の問題又は合併症を引き起こさないと医学的に判断され、合理的な利益／リスク比に見合う化合物、材料、組成物及び／又は剤形に対して用いられる。
【００２７】
用語「薬学上許容される塩」とは、本発明により発現された特定の置換基を有する化合物と相対的に毒性を示さない酸又は塩基で製造される、本発明に係る化合物の塩を指す。本発明に係る化合物に相対的に酸性を示す官能基が含まれる場合、純溶液又は適切な不活性溶媒において十分な量の塩基とかかる化合物の中性形態を接触させる方法により塩基付加塩を得ることができる。本発明に係る化合物に相対的に塩基性を示す官能基が含まれる場合、純溶液又は適切な不活性溶媒において十分な量の酸とかかる化合物の中性形態を接触させる方法により酸付加塩を得ることができる。本発明のいくつかの特定の化合物に塩基性及び酸性の官能基が含まれるため、任意の塩基付加塩又は酸付加塩に転化されることが可能である。
【００２８】
なお、通常方法により塩を塩基又は酸と接触させ、次に母体化合物を分離することにより、化合物の中性形態を再生させることが好ましい。
【００２９】
本発明に係る薬学上許容される塩は、酸性官能基又は塩基性官能基を含む母体化合物から通常の化学的方法により合成できる。一般的に、かかる塩の製造方法は、水もしくは有機溶媒又は両者の混合物において、遊離酸又は遊離塩基形態のこれらの化合物を化学量論的に適切な塩基又は酸と反応させることにより製造する。一般的に、前記有機溶媒はエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール又はアセトニトリル等非水媒体であることが好ましい。
【００３０】
塩の形態以外に、本発明に係る化合物は、プロドラッグの形態もあり得る。本明細書に記載の化合物のプロドラッグは、生理的な条件で化学変化を生じさせて本発明に係る化合物に転化されやすい。また、プロドラッグは、インビボ環境で化学又は生化学的方法により本発明に係る化合物に転化されることが可能である。
【００３１】
本発明に係るいくつかの化合物は、非溶媒和形態又は水和物形態を含む溶媒和形態で存在することが可能である。一般的には、溶媒和形態は非溶媒和形態と同等であり、いずれも本発明の範囲に含まれる。
【００３２】
本発明に係るいくつかの化合物は、不斉炭素原子（キラル中心）又は二重結合を有してもよい。ラセミ化合物、ジアステレオマー、幾何異性体及び個別の異性体はいずれも本発明の範囲に含まれる。
【００３３】
別途説明がない限り、楔形実線の結合と点線の結合
【化１４】
2020505388.tif 000017
で立体中心の絶対配置を表し、波線
【化１５】
2020505388.tif 000018
で楔形実線の結合又は点線の結合
【化１６】
2020505388.tif 000019
を表す。本明細書に記載の化合物に炭素−炭素二重結合又はその他幾何的不斉中心が含まれる場合、別途規定がない限り、Ｅ幾何異性体、Ｚ幾何異性体を含む。同様に、あらゆる互変異性体の形態は、本発明の範囲に含まれる。
【００３４】
本発明に係る化合物は、特定の幾何異性体形態又は立体異性体形態を有してもよい。本発明に記載のかかる化合物は、シス異性体とトランス異性体、（−）−エナンチオマーと（＋）−エナンチオマー、（Ｒ）−エナンチオマーと（Ｓ）−エナンチオマー、ジアステレオマー、（Ｄ）−異性体、（Ｌ）−異性体、及びラセミ混合物とその他の混合物、例えばエナンチオマー又はジアステレオマーを豊富に含む混合物を含み、これらの混合物は全て本発明の範囲に含まれる。アルキル基等置換基には、別の不斉炭素原子の存在が認められる。上記全ての異性体及びこれらの混合物は、いずれも本発明の範囲に含まれる。
【００３５】
不斉合成、不斉試薬又はその他の通常技術により光学活性を有する（Ｒ）−異性体と（Ｓ）−異性体及びＤ異性体とＬ異性体を製造できる。本発明に係る特定の化合物の１種のエナンチオマーを得るためには、不斉合成、又は不斉助剤の誘導作用を利用して製造することができ、なお得られたジアステレオマー混合物を分離し且つ補助基を脱去させるように、純粋な所望のエナンチオマーを得る。又は、分子に塩基性官能基（例えばアミノ基）又は酸性官能基（例えばカルボキシル基）が含まれる場合、前記分子から光学活性を有する適切な酸又は塩基とジアステレオマーの塩を形成し、次に、当分野で周知される通常方法によりジアステレオマーの分割を行い回収するというように、純粋なエナンチオマーを得る。また、エナンチオマーとジアステレオマーの分離は一般的にクロマトグラフィーにより行われ、前記クロマトグラフィーにおいてキラルな固定相を使用し、且つ任意的に化学誘導法と組み合わせてもよい（例えばアミンからカルバメートを生成する）。
【００３６】
本発明に係る化合物は、当該化合物を構成する１つ以上の原子に同原子の同位体が非天然的な割合で含まれてもよい。例えば、放射性同位体、例えば三重水素（３Ｈ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）又は炭素−１４（１４Ｃ）で化合物を標識することができる。本発明に係る化合物の同位体による変形は、放射性の有無に関らず、その全てが本発明の範囲に含まれる。
【００３７】
用語「薬学上許容される担体」とは、本発明における有効成分を有効量で輸送でき、有効成分の生理活性の発揮に干渉せず、宿主又は患者に対し毒性又は副作用を示さないあらゆる製剤又は担持媒体を指し、代表的な担体として、水、油、野菜及びミネラル、クリーム基剤、洗剤マトリックス、軟膏マトリックス等が挙げられる。これらのマトリックスは、懸濁剤、増粘剤、経皮吸収促進剤等を含む。これらの製剤は、化粧品分野又は薬物分野の従業者において周知されている。担体のその他の情報に関しては、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ  Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）を参照でき、当該文献の内容は、援用される形で本明細書に組み込まれる。
【００３８】
用語「賦形剤」は一般的に、有効な医薬組成物を調製するのに必要な担体、希釈剤及び／又は媒体を指す。
【００３９】
薬物又は薬理活性剤にとって、用語「有効量」又は「治療的有効量」とは、所望の効果を得られる毒性のない薬物又は薬剤の十分な用量を指す。本発明において、剤形が経口剤である場合、組成物における１種の有効成分の「有効量」とは、当該組成物におけるもう１種の有効成分と併用される場合に所望の効果を得るのに必要な用量を指す。有効量は、投与対象の年齢及び一般状況、有効成分の具体的な内容により決定され、個体によって異なる。場合によって適切な有効量は当業者が通常の試験を行って決定することができる。
【００４０】
用語「有効成分」、「治療剤」、「有効成分」又は「有効剤」とは、実際に存在する化学物質を指し、対象とする障害や異常、疾患又は状態を効果的に治療できる。
【００４１】
用語「任意的」又は「任意的に」とは、それに続いて説明される事象又は状況は生じてもよいが、必ずしも必須ではなく、当該説明は前記事象又は状況が生じる状況及び前記事象又は状況が生じない状況を含むことが意図される。
【００４２】
用語「置換された」とは、特定原子においていずれか１つ又は複数の水素原子が置換基によって置換され、ただし特定原子の原子価状態が正常であり且つ置換後に得た化合物が安定的なものでさえあれば、前記水素原子は重水素及び水素の変形形態を含むことができる。置換基がケトン基（すなわち＝Ｏ）である場合、２つの水素原子が置換されたこと指す。ケトン置換はアリール基において生じない。用語「任意的に置換された」とは、置換されても、置換されなくてもよいことを指し、別途規定がない限り、置換基の種類及びその数は化学的に実現可能でさえあれば、特に限定されない。
【００４３】
本明細書で用いられるＣｍ−ｎというのは、当該部分がｍ〜ｎ個の炭素原子を有することを指す。例えば、「Ｃ３−１０シクロアルキル基」は、当該シクロアルキル基が３〜１０個の炭素原子を有することを指す。本明細書に記載の数値範囲は、当該範囲内の各整数を指すものである。例えば「Ｃ１−１０」は、当該官能基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子、４個の炭素原子、５個の炭素原子、６個の炭素原子、７個の炭素原子、８個の炭素原子、９個の炭素原子又は１０個の炭素原子を有してもよいことを指す。
【００４４】
いずれかの変数（例えばＲ）が化合物の組成又は構造に１回以上出現している場合、それぞれの場合において独立して定義される。そのため、例えば、１つの官能基が０〜２個のＲによって置換された場合、前記官能基は任意的に最大２つのＲによって置換され、それぞれの場合においてＲは独立して選択される。また、置換基及び／又はその変形形態の組み合わせは、かかる組み合わせにより安定的な化合物が生成される場合にのみ許容される。
【００４５】
置換基が埋まらない場合、当該置換基が存在しないことを表し、例えばＡ−ＸにおいてＸが埋まらない場合、当該構造はＡであることを表す。
【００４６】
置換基が１つの環における１つの以上の原子に接続可能な場合、かかる置換基は前記環における任意の原子と結合できる。例えば、構造単位
【化１７】
2020505388.tif 000020
において、置換基Ｒはシクロヘキシル基又はシクロヘキサジエンにおける任意の位置で置換できる。記載された置換基に関し、どの原子を介して置換先官能基に接続されているかを明記していない場合、かかる置換基はその任意の原子を介して結合できる。例えば、置換基としてのピリジル基は、ピリジン環における任意の１つの炭素原子を介して置換先官能基に接続されることが可能である。記載された接続基に関し、その接続方向を明記していない場合、任意の方向で接続できる。例えば、
【化１８】
2020505388.tif 000021
において接続基Ｌが−Ｍ−Ｗ−である場合、−Ｍ−Ｗ−は左から右へ読む順と同一の方向で環Ａと環Ｂを接続させて
【化１９】
2020505388.tif 000022
を構成するか、又は左から右へ読む順とは逆の方向で環Ａと環Ｂを接続させて
【化２０】
2020505388.tif 000023
を構成してもよい。前記接続基、置換基及び／又はその変形形態の組み合わせは、かかる組み合わせにより安定的な化合物が生成される場合にのみ許容される。
【００４７】
別途規定がない限り、用語「ヘテロ」は、ヘテロ原子又はヘテロ原子団（すなわちヘテロ原子を含む原子団）を表し、炭素（Ｃ）と水素（Ｈ）以外の原子及び前記ヘテロ原子を含む原子団を含み、例えば、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、ケイ素（Ｓｉ）、ゲルマニウム（Ｇｅ）、アルミニウム（Ａｌ）、ホウ素（Ｂ）、−Ｏ−、−Ｓ−、＝Ｏ、＝Ｓ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、及び任意的に置換された−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）−、−Ｎ（Ｈ）−、−Ｃ（＝ＮＨ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｈ）−又は−Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）−を含む。
【００４８】
別途規定がない限り、用語「複素環」又は「複素環基」は、炭素原子と、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選ばれる１個、２個、３個又は４個の複素環原子とを含むように、ヘテロ原子又はヘテロ原子団を含む飽和、部分的に不飽和又は不飽和（芳香族）の安定的な単環、二環又は三環を指し、上記複素環はいずれもベンゼン環と縮合して二環を形成できる。窒素及び硫黄ヘテロ原子は任意的に酸化されてもよい（すなわちＮＯ及びＳ（Ｏ）ｐであり、ただしｐは１又は２である）。窒素原子は置換されても置換されなくてもよい（すなわちＮ又はＮＲであり、ただしＲはＨ又は本明細書で既に定義されているその他の置換基である）。当該複素環は、いかなるヘテロ原子又は炭素原子の側基においても、それに付着して安定的な構造を形成できる。生成された化合物が安定的なものであれば、本明細書に記載の複素環において、炭素位置又は窒素位置で置換されてもよい。複素環における窒素原子は任意的に四級化される。なお、複素環においてＳ原子及びＯ原子の総数が１を超えた場合、これらのヘテロ原子は互いに隣接しないことが好ましい。あるいは、複素環においてＳ原子及びＯ原子の総数が１を超えないことも好ましい。
【００４９】
用語「芳香族複素環基」又は「ヘテロアリール基」は炭素原子と、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選ばれる１個、２個、３個又は４個の複素環原子を含む安定的な５員、６員、７員の単環もしくは二環、又は７員、８員、９員もしくは１０員の二環複素環基からなる芳香環を指す。窒素原子は置換されても置換されなくてもよい（すなわちＮ又はＮＲであり、ただしＲはＨ又は本明細書で既に定義されているその他の置換基である）。窒素及び硫黄ヘテロ原子は任意的に酸化されてもよい（すなわちＮＯ及びＳ（Ｏ）ｐであり、ただしｐは１又は２である）。なお、芳香族複素環におけるＳ原子とＯ原子の総数は１を超えない。架橋縮合環も複素環の定義に含まれる。１つ又は複数の原子（すなわちＣ、Ｏ、Ｎ又はＳ）が２つの隣接しない炭素原子又は窒素原子を接続させた場合に架橋縮合環が形成される。なお、架橋縮合環は非限定的に１個の炭素原子、２個の炭素原子、１個の窒素原子、２個の窒素原子又は１つの炭素−窒素基を含むことが好ましい。なお、１つの架橋縮合により単環が三環に転化される。架橋縮合環において、環上の置換基が架橋部分に配置されてもよい。
【００５０】
別途規定がない限り、用語「炭化水素基」又はその下位概念（例えばアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基等）そのもの又は別の置換基の一部として、直鎖状、分枝状もしくは環状の炭化水素原子団又はこれらの組み合わせを表し、飽和形式（例えばアルキル基）か、又は１価又は多価の不飽和形式（例えばアルケニル基、アルキニル基、アリール基）であってもよく、単置換か又は多置換であってもよく、１価（例えばメチル基）、２価（例えばメチレン基）か、又は多価（例えばメチン基）であってもよく、２価又は多価の原子団を含むことができ、また所定数の炭素原子を有する（例えばＣ１〜Ｃ１２は１〜１２個の炭素原子を表し、Ｃ１−１２はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１及びＣ１２から選ばれ、Ｃ３−１２はＣ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１及びＣ１２から選ばれる）。「炭化水素基」は脂肪族炭化水素基及び芳香族炭化水素基を含み、ただしこれらに限定されない。前記脂肪族炭化水素基は、鎖状の炭化水素基及び環状の炭化水素基を含み、具体的には、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基を含み、ただしこれらに限定されず、前記芳香族炭化水素基は、６〜１２員の芳香族炭化水素基、例えばフェニル基、ナフチル基等を含み、ただしこれらに限定されない。いくつかの実施例において、用語「炭化水素基」は直鎖状もしくは分枝状の原子団又はこれらの組み合わせを表し、飽和形式、又は１価もしくは多価の不飽和形式であってもよく、２価又は多価の原子団を含んでもよい。飽和炭化水素原子団の例として、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔ−ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基、シクロヘキシル基、（シクロヘキシル）メチル基、シクロプロピルメチル基、及びｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基等原子団の同族体又は異性体が挙げられ、ただしこれらに限定されない。不飽和炭化水素基は１つ又は複数の二重結合又は三重結合を有し、その例としてエテニル基、２−プロペニル基、ブテニル基、クロチル基、２−イソペンテニル基、２−（ブタジエニル）基、２，４−ペンタジエニル基、３−（１，４−ペンタジエニル基）、エチニル基、１−プロピニル基と３−プロピニル基、３−ブチニル基、及びより高級の同族体と異性体が挙げられ、ただしこれらに限定されない。
【００５１】
別途規定がない限り、用語「アルキル基」は、直鎖状又は分枝状の飽和炭化水素基を表し、単置換（例えば−ＣＨ２Ｆ）か、又は多置換（例えば−ＣＦ３）であってもよく、１価（例えばメチル基）、２価（例えばメチレン基）か、又は多価（例えばメチン基）であってもよい。アルキル基の例としてメチル基（Ｍｅ）、エチル基（Ｅｔ）、プロピル基（例えば、ｎ−プロピル基及びイソプロピル基）、ブチル基（例えば、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基）、ペンチル基（例えば、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基）等が挙げられ、ただしこれらに限定されない。
【００５２】
別途規定がない限り、用語「シクロアルキル基」は、あらゆる安定的な環状炭化水素基又は多環炭化水素基を含み、ただしいずれの炭素原子も飽和であり、単置換又は多置換であってもよく、１価、２価か、又は多価であってもよい。前記シクロアルキル基の例としてシクロプロピル基、ノルボルニル基、ビシクロ［２．２．２］オクチル基、ビシクロ［４．４．０］デシル基等が挙げられ、ただしこれらに限定されない。
【００５３】
別途規定がない限り、用語「ハロゲン元素」又は「ハロゲン」は、そのもの又は別の置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素原子を表す。
【００５４】
本発明に係る化合物は、当業者が熟知している様々な合成方法により製造でき、以下記載される具体的な実施形態、その他の化学的合成方法と組み合わせて形成された実施形態及び当業者が熟知している等価な代替形態を含み、好ましい実施形態は、本発明の実施例を含み、ただし前記実施例に限定されない。
【００５５】
本発明で使用される溶媒は市販品として入手できる。本発明では、化学当量を意味するｅｑ、Ｎ−メチルモルホリンを意味するＮＭＭ、ジメチルスルホキシドを意味するＤＭＳＯ、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを意味するＨＯＢｔ、１−エチル−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩を意味するＥＤＣＩ、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン  １−オキシルを意味するＴＥＭＰＯ、プロピルホスホン酸無水物を意味するＴ３Ｐ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを意味するＤＩＰＥＡ等の略語が使用される。
【００５６】
化合物は人為的に命名されるか、又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）ソフトウェアによって命名され、市販品として入手される化合物は、供給業者が提供しているカタログ情報に記載の名称を使用する。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
以下、実施例を用いて本発明を詳細に説明し、ただし本発明に対しいかなる不利な限定も構成しない。本明細書では具体的な実施形態を示して本発明を詳細に説明しているが、本発明の主旨及び範囲から逸脱することなく本発明の具体的な実施形態に対し各種変更及び改良を行うことができるのは、当業者にとって自明なことである。
【００５８】
製造例１：化合物１−ａの製造
【００５９】
【化２１】
2020505388.tif 000024
【００６０】
ステップ１：化合物Ａ−３の合成
−１０℃の窒素ガス雰囲気において化合物Ａ−１（３０．００ｇ、９２．７８ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）及び４−メチルモルホリン（１５．０２ｇ、１４８．４５ｍｍｏｌ、１６．３３ｍＬ、１．６０ｅｑ）をテトラヒドロフラン（４６８ｍＬ）に溶解し、化合物Ａ−２（１９．０１ｇ、１３９．１７ｍｍｏｌ、１８．２８ｍＬ、１．５０ｅｑ）を徐々に滴下し、温度を−１０℃に保持して４０分間攪拌した。反応混合物を濾過し、テトラヒドロフラン（２００ｍＬ）で濾過ケーキを洗浄した。濾液を合わせて三口フラスコにデカントして温度を０℃に保持し、窒素ガス雰囲気においてＣＨ２Ｎ２−ジエチルエーテル溶液（３７０ｍＬ）を当該フラスコに加え、０℃で引き続き２０分間攪拌してから２０℃に昇温して２時間攪拌した。次に、引き続き反応混合物を０℃まで冷却し、ＨＢｒ（３０ｍＬ、３５％酢酸溶液）で処理し、当該混合物を０℃で１５分間攪拌し、２０℃に昇温して引き続き４５分間攪拌した。反応完了後に、酢酸エチル（５００ｍＬ）及び水（４００ｍＬ）で反応混合物に対し分液抽出を行った。次に、水（４００ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（４００ｍＬ）及び飽和食塩水（４００ｍＬ）で有機相を洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮させて粗生成物を得て、当該粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して無色の油状化合物Ａ−３を得た（３０．００ｇ、収率７６％）。
【００６１】
ステップ２：化合物Ａ−５の合成
化合物Ａ−３（２５．００ｇ、６２．４６ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）及びＡ−４（１２．４５ｇ、７４．９５ｍｍｏｌ、１．２０ｅｑ）をＤＭＦ（３５０．００ｍＬ）に溶解し、窒素ガス雰囲気においてＫＦ（１４．５２ｇ、２４９．８４ｍｍｏｌ、５．８５ｍＬ、４．００ｅｑ）を加え、２０℃で１５時間攪拌して反応させた。完全に反応した後、酢酸エチル５００ｍＬを加え、飽和炭酸水素ナトリウム（３５０ｍＬ）、水（３５０ｍＬ）及び飽和食塩水（３５０ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで有機相を乾燥し濃縮させて粗生成物を得て、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：０〜３：１）により精製して化合物Ａ−５を得た（１８．００ｇ、収率５６％）。
【００６２】
ステップ３：化合物Ａ−６の合成
化合物Ａ−５（９．５０ｇ、１９．５７ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）をメタノール（３０．００ｍＬ）とテトラヒドロフラン（３０．００ｍＬ）の混合溶媒に加え、温度を０℃に保持して水素化ホウ素ナトリウム（２．９６ｇ、７８．２８ｍｍｏｌ、４．００ｅｑ）を加え、次に反応混合物を２５℃で１時間攪拌した。反応完了後に、反応混合物を水（２００ｍＬ）に加え、ＮＨ４Ｃｌ（２００ｍＬ、ａｑ、１０％）を加え、次に酢酸エチル（５００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせて水（５００ｍＬ）、食塩水（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して無色の油状化合物Ａ−６（９．００ｇ、粗生成物）を得て、当該製品は精製を行わずにそのまま次のステップの反応に使用する。
【００６３】
ステップ４：化合物Ａ−７の合成
化合物Ａ−６（９．００ｇ、１８．４６ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）をメタノール（５００．００ｍＬ）に溶解し、Ｐｄ−Ｃ（１０％、２．５ｇ）を加えた。当該混合物を水素ガスで３回置換して圧力を１５ｐｓｉに保持し、温度を２５℃に保持して４時間攪拌した。完全に反応した後、濾過、濃縮して黄色の油状化合物Ａ（６．１０ｇ、粗生成物）を得て、当該製品は精製を行わずにそのまま次のステップの反応に使用する。
【００６４】
ステップ５：化合物Ａ−９の合成
化合物Ａ−７（６．１０ｇ、１７．２ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）及び化合物Ａ−８（３．８５ｇ、１７．２ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）を酢酸エチル溶液（１００ｍＬ）に溶解し、Ｔ３Ｐ（１６．４２ｇ、２５．８ｍｍｏｌ、１．５０ｅｑ、５０％酢酸エチル溶液）及びＤＩＰＥＡ（４．４４ｇ、３４．４ｍｍｏｌ、２．０ｅｑ）を順に加え、２５℃で４時間攪拌した。反応液に水（５０ｍＬ）を加えてクエンチし、分液した。飽和炭酸水素ナトリウム（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）、飽和食塩水（５０ｍＬ）でそれぞれ有機相を１回洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して粗製品を得た。粗製品をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：石油エーテル＝１：２０〜１：２）により分離して製品化合物Ａ−９を得て（３．５０ｇ、収率３６．５％）、ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝５８１．２［Ｍ＋Ｎａ］＋である。
【００６５】
ステップ６：化合物１−ａの合成
化合物Ａ−９（３．３０ｇ、５．９１ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）をメタノール（３３．０ｍＬ）とＴＨＦ（３３．０ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、Ｐｄ−Ｃ（１０％、３３０ｍｇ）を加えた。当該混合物を水素ガスで３回置換して圧力を１５ｐｓｉに保持し、温度を２５℃に保持して２時間攪拌した。完全に反応した後、濾過、濃縮して黄色の油状化合物Ａを得て（２．１８ｇ、４．５０ｍｍｏｌ、収率７６．２％）、当該製品は精製を行わずにそのまま次のステップの反応に使用し、ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４２５．２［Ｍ＋Ｈ］＋である。
【００６６】
製造例２：化合物１−ｅの製造（化合物１−ａの製造スキームを参照し、化合物Ａ−１の代わりにキラルなエナンチオマーを使用した）
【００６７】
【表１】
2020505388.tif 000025
【００６８】
実施例１：（Ｓ）−３−（（Ｓ）−２−（５−（２−クロロフェニル）イソオキサゾリル−３−ホルムアミド）アクリルアミド）−４−オキソ−５−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ペンタン酸（化合物１）
【００６９】
【化２２】
2020505388.tif 000026
【００７０】
ステップ１：化合物１−ｃの合成
化合物１−ｂ（１００．００ｍｇ、４４７．２１μｍｏｌ、１．００ｅｑ）をジクロロメタン（１０．００ｍＬ）に溶解し、化合物ＮＭＭ（１３５．７１ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ、１４７．５１μＬ、３．００ｅｑ）、ＨＯＢｔ（８２．７８ｍｇ、６１２．６７μｍｏｌ、１．３７ｅｑ）、ＥＤＣＩ（１１７．４５ｍｇ、６１２．６７μｍｏｌ、１．３７ｅｑ）及び化合物１−ａ（１８９．７９ｍｇ、４４７．２１μｍｏｌ、１．００ｅｑ）を加えた。２５℃で当該反応液を４時間攪拌した。完全に反応した後、反応液をそのまま濃縮して粗生成物を得て、高速シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）により粗生成物から無色の油状化合物１−ｃを得た。ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝６５２．３［Ｍ＋Ｎａ］＋である。
【００７１】
ステップ２：化合物１−ｄの合成
化合物１−ｃ（２２０．００ｍｇ、３４９．２２μｍｏｌ、１．００ｅｑ）をジクロロメタン（１０．００ｍＬ）に溶解し、ヨードベンゼンジアセタート（４３５．３１ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ、３．８７ｅｑ）及びＴＥＭＰＯ（５４．９２ｍｇ、３４９．２２μｍｏｌ、１．００ｅｑ）を加えた。２５℃で当該反応液を１５時間攪拌した。完全に反応した後、反応液にジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、水（２０ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）、食塩水（２０ｍＬ）でこの順に当該溶液を洗浄した。無水Ｎａ２ＳＯ４で有機相を乾燥し、濾過し、濃縮して粗生成物を得た。高速シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝７：３）により粗生成物から淡黄色の油状化合物１−ｄを得た。ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝６５０．１［Ｍ＋Ｎａ］＋である。
【００７２】
ステップ３：化合物１の合成
化合物１−ｄ（２１０．００ｍｇ、３３４．４１μｍｏｌ、１．００ｅｑ）をジクロロメタン（４．００ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１．００ｍＬ、４０．３９ｅｑ）を加えた。２５℃で当該反応液を３時間攪拌した。完全に反応した後、反応液を濃縮して粗生成物を得た。ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣ（トリフルオロ酢酸条件）により粗生成物を精製し、凍結乾燥して化合物１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．４７（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、９．０１（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、８．６７（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、７．９６（ｄｄ、Ｊ＝２．２６、７．２８Ｈｚ、１Ｈ）、７．７２（ｄ、Ｊ＝７．３９Ｈｚ、１Ｈ）、７．４８−７．６５（ｍ、３Ｈ）、７．３８（ｓ、１Ｈ）、５．０２−５．４２（ｍ、２Ｈ）、４．６２（ｄ、Ｊ＝６．０２Ｈｚ、１Ｈ）、４．４０−４．５４（ｍ、１Ｈ）、２．７３−２．８５（ｍ、１Ｈ）、２．５２−２．６５（ｍ、１Ｈ）、１．３７（ｄ、Ｊ＝７．０３Ｈｚ、３Ｈ）で、ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝５７２．１［Ｍ＋Ｈ］＋である。
【００７３】
実施例２〜１７：実施例１の合成スキームを参照し、化合物１−ｂの代わりに異なる酸中間体を使用して、実施例２〜１７の化合物を製造した。
【００７４】
【表２】
2020505388.tif 000027
2020505388.tif 000028
【００７５】
実施例１８：実施例１の合成スキームを参照し、化合物１−ａの代わりに中間体１−ｅを使用して実施例１８の化合物を製造した。
【００７６】
【表３】
2020505388.tif 000029
【００７７】
実施例２〜１３及び実施例１７〜１８の核磁気共鳴データ及び質量分析データは次のとおりである。
【００７８】
【表４】
2020505388.tif 000030
2020505388.tif 000031
2020505388.tif 000032
【００７９】
実験例１：化合物のインビトロにおけるカスパーゼ阻害活性の検出
【００８０】
実験目的：
本実験で、バイオビジョン社のカスパーゼ阻害薬スクリーニングキットを使用して被験化合物のカスパーゼに対する阻害活性を測定した。
【００８１】
実験材料：
１）キット：
カスパーゼ−１阻害薬スクリーニングキット（バイオビジョン社＃Ｋ１５１−１００）
カスパーゼ−３阻害薬スクリーニングキット（バイオビジョン社＃Ｋ１５３−１００）
カスパーゼ−８阻害薬スクリーニングキット（バイオビジョン社＃Ｋ１５８−１００）
注：カスパーゼ酵素学実験ごとに、対応するキット内の試薬を使用した。各酵素を対応する２×反応緩衝液５５０μＬに溶解して分注し−８０℃で保存した。
【００８２】
２）黒色の３８４ウェルのマイクロプレート（パーキンエルマー社＃６００７２７９）
３）器具：モレキュラーデバイス社の多機能マイクロプレートリーダー（型番ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ  Ｍ２ｅ）
【００８３】
実験方法：
１）ＤＭＳＯで化合物を２００×測定濃度に倍加希釈してから、ｄｄＨ２Ｏで２×測定濃度に希釈して１ウェル当たり１２．５μＬで３８４ウェルのマイクロプレートに加えた。測定化合物及び対照化合物は６つの濃度点を測定し、測定濃度範囲は１０００ｎＭ〜０．３２ｎＭとした。０％阻害対照ウェルには１％ＤＭＳＯを含むｄｄＨ２Ｏを加え、１００％阻害対照ウェルには高濃度の対照化合物（最終濃度は５μＭ）を加えた。
【００８４】
２）１０ｍＭのＤＴＴを含む２×反応緩衝液を調製した。１０ｍＭのＤＴＴを含む２×反応緩衝液でカスパーゼ保存液を５倍に希釈してから１ウェル当たり６．２５μＬで３８４ウェルのマイクロプレートに加えた。均一に混合した後、３７℃で酵素及び化合物を３０分間インキュベートした。
【００８５】
３）１０ｍＭのＤＴＴを含む２×反応緩衝液でカスパーゼの蛍光基質を５倍に希釈してから１ウェル当たり６．２５μＬで３８４ウェルのマイクロプレートに加えた。反応総体積は２５μＬとし、基質の最終濃度は５０μＭとし、ＤＭＳＯの最終濃度は０．５％とした。基質に加えた後、３７℃で３８４ウェルのマイクロプレートを３０分間インキュベートした。
【００８６】
４）多機能マイクロプレートリーダーを使用して蛍光強度を測定した（励起波長４００ｎｍ、発光波長５０５ｎｍ）。蛍光強度を用いて化合物のカスパーゼに対する阻害効果を算出した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを用いて化合物の阻害曲線の当てはめを行ってＩＣ５０値を算出した。
【００８７】
実験結果：
被験化合物の実験結果は表１に示されるとおりである。
【００８８】
【表５】
2020505388.tif 000033
【００８９】
実験結論：
表１から分かるように、本発明に係る化合物は、優れたカスパーゼ阻害活性を有する。
【００９０】
実験例２：マウスによる薬物動態学研究
【００９１】
実験目的：
本実験は、化合物を経口投与した後、雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの血漿及び肝臓における薬物動態状況を研究するものである。
【００９２】
実験方法：
１群当たり雄マウス３匹として、マウスを無作為に３群に分けた。化合物を所定の製剤として調製した。経口製剤は透明な液体か、又は均一な懸濁液であってもよい。動物に対し所定用量の製剤をそれぞれ胃内投与した。
【００９３】
動物に投与した後、３０分間、２時間及び６時間の３つの時点で頸静脈穿刺にて全血試料を採取し、各試料約２５μＬとし、且つ各時点で肝組織を採取した。
【００９４】
抗凝固剤を含む遠沈管に血漿試料を加え、４℃、３０００ｇで１５ｍｉｎ遠心し、上清から血漿を採取しドライアイスに置いて迅速に冷凍し、次に、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を行うまで、−７０±１０℃の冷蔵庫に保存した。
【００９５】
吸収紙を用いて肝組織に付着した血液を吸い取り、肝組織の重量を秤量し、次に、液体窒素に静置して冷凍した。１：５の比重量でＭｅＯＨ／１５ｍＭのＰＢＳ（１：２）を加え、１４０００ｒｐｍで２分間ホモジネートした。次に、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を行うまで、−７０±１０℃の冷蔵庫に保存した。
【００９６】
データ処理：
薬物動態学ソフトウェアＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）バージョン６．３．０（米カリフォルニア州マウンテンビュー・Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ社提供）を用いて、非コンパートメントモデルで化合物の血漿中薬物濃度データを処理した。最高血中濃度（Ｃｍａｘ）、最高血中濃度到達時間（Ｔｍａｘ）及び最終定量可能時点は、血中薬物濃度−時間曲線から直接読み取った。
【００９７】
対数台形公式法により、消失半減期（Ｔ１／２）、時点０から最終時点までの平均滞留時間（ＭＲＴ０−ｌａｓｔ）、時点０から無限大時間までの平均滞留時間（ＭＲＴ０−ｉｎｆ）、時点０から最終時点までの血漿濃度曲線下面積（ＡＵＣ０−ｌａｓｔ）、時点０から無限大時間までの血漿濃度曲線下面積（ＡＵＣ０−ｉｎｆ）といった薬物動態学パラメータを算出した。
【００９８】
定量限界未満（ＢＱＬ）の個体血漿濃度に関しては、Ｔｍａｘ前に認められれば０として取り扱い、Ｔｍａｘ後に認められれば破棄した。全てのパラメータ及び比値は３桁の有効数字の形式で報告した。
【００９９】
本実験では、同方法の理論的な採血時間及び理論的な投与濃度から薬物動態学パラメータを算出した。実際投与濃度の理論的な濃度との偏差は±２０％の範囲以内に収まった。実際採血時間の理論的な採血時間との偏差は、関連する標準業務手順書ＳＯＰ（投与後１時間以内の測定点は±１分間の範囲以内に収まり、その他はいずれも理論的な時間から５％以内に収まる）に合致した。
【０１００】
実験結果：
被験化合物の実験結果は表２に示されるとおりである。
【０１０１】
【表６】
2020505388.tif 000034
【０１０２】
実験結論：
表２から分かるように、対照化合物ＩＤＮ−６５５６の異なる時間帯における肝中曝露量が小さく、肝中薬物濃度−時間曲線下面積が小さい。実施例１に示される化合物の肝中曝露は、ＩＤＮ−６５５６より約その５倍と有意な改善が認められた。また、実施例１では相当の肝中／血漿中薬物濃度−時間曲線下面積比も保持している。肝疾患の治療に用いられる場合、肝中薬物曝露量が高いのは、投与量の低減につながると期待できる。
【０１０３】
実験例３：マウスによるインビボ薬力学研究
実験目的：
化合物ＩＤＮ−６５５６及び実施例１の化合物の、ＣＣｌ４誘導雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス慢性肝線維化モデルにおける治療効果を測定した。
【０１０４】
実験方法：
雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、モデル対照群（群１）、モデル群（群２、溶媒ｐ．ｏ．、ｑ．ｄ）、ＩＤＮ−６５５６（群３、３ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．、ｂｉｄ）、ＩＤＮ−６５５６（群４、１０ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．、ｂｉｄ）、実施例１（群５、３ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．、ｂｉｄ）、実施例１（群６、１０ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．、ｂｉｄ）及び実施例１（群７、２０ｍｇ／ｋｇ、ｐ．ｏ．、ｂｉｄ）と無作為に７群に分けた。用量に基づきＣＣｌ４にオリーブオイルを加えてＣＣｌ４−オリーブオイル混合溶液を調製し、週に３回経口投与してモデルを作成し、４週持続した。モデル対照群では同一体積のオリーブオイルを経口投与した。モデル作成の当日に化合物の経口投与を開始し、１日に２回として、合計で２８日投与し、モデル対照群及びモデル群は等体積の薬物溶媒を経口投与した。最終回投与後の翌日に、動物を６時間禁食させた後、安楽死を実施して肝組織を採取した。１０％ホルマリン溶液で肝組織を固定し、組織病理学的研究を行った。
【０１０５】
実験結果：
表３には肝組織の病理学的検出の得点が示されており、表３から分かるようにＩＮＤ−６５５６においても実施例１においても、異なる用量群ではいずれもＣＣｌ４が誘導した肝組織損傷の有意な改善が認められ、またモデル群と比べ実施例１では肝線維化の形成が有意に阻害された（ｐ＜０．０１）。
【０１０６】
【表７】
2020505388.tif 000035
【０１０７】
一元配置分散分析（Ｏｎｅ−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡ）において、＃＃＃は群１に対してｐ＜０．００１であること、＊は群２に対してｐ＜０．０５であること、＊＊＊は群２に対してｐ＜０．００１であることを表し、
ｔ検定（Ｔ−ｔｅｓｔ）において、＄は群２に対してｐ＜０．０５であること、＄＄は群２に対してｐ＜０．０１であることを表す。
【０１０８】
実験結論：
結果から分かるように、ＣＣｌ４経口投与によりＣ５７ＢＬ／６マウス肝線維化の誘導に成功した。異なる用量のＩＤＮ−６５５６では、１日２回で２８日経口投与することでＣＣｌ４が誘導した肝組織損傷、特に炎症細胞浸潤が有意に阻害される一方、明確な肝線維化阻害効果は認められない。異なる用量の実施例１では、１日２回で２８日経口投与することで、ＣＣｌ４が誘導した肝組織損傷、特に炎症細胞浸潤が有意に阻害されるとともに、有意な肝線維化阻害効果も認められる。全体的に、実施例１は当該モデルにおける薬効がＩＮＤ−６５５６より優れているといえる。
【手続補正書】
【提出日】令和1年7月25日(2019.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）に示される化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体：
【化１】
2020505388.tif 000050
（式中、
環Ａは、５員ヘテロアリール基又は６員ヘテロアリール基から選ばれ、前記５員ヘテロアリール基又は６員ヘテロアリール基は、任意的にＲによって置換され、
環Ｂは、フェニル基又はＣ３−６シクロアルキル基から選ばれ、前記フェニル基又はＣ３−６シクロアルキル基は、任意的にＲによって置換され、
Ｒは、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つ又は３つのＲ１によって置換されたＣ１−３アルキル基から選ばれ、
Ｒ１は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨ（ＣＨ３）又はＮ（ＣＨ３）２から選ばれる）。
【請求項２】
環Ａのヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ又はＮから独立して選ばれ、環Ａのヘテロ原子の数は１、２又は３から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項３】
環Ａは、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、１，２，４−オキサジアゾリル基、１，３，４−オキサジアゾリル基又はピラゾリル基から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項４】
環Ａは、
【化２】
2020505388.tif 000051
から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項５】
環Ｂは、フェニル基又はシクロヘキシル基から選ばれ、前記フェニル基又はシクロヘキシル基は任意的にＲによって置換される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項６】
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つもしくは３つのＲ１によって置換されたＭｅもしくはＥｔから選ばれる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項７】
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つもしくは３つのＲ１によって置換されたＭｅから選ばれ、Ｒ１は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩから選ばれる、請求項６に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項８】
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つもしくは３つのＦによって置換されたＭｅもしくはＥｔから選ばれる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項９】
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、又は任意的に１つ、２つもしくは３つのＦによって置換されたＭｅから選ばれる、請求項８に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１０】
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２又はＣＦ３から選ばれる、請求項６に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１１】
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、又はＣＦ３から選ばれる、請求項１０に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１２】
環Ｂは、
【化３】
2020505388.tif 000052
から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１３】
【化４】
2020505388.tif 000053
は、
【化５】
2020505388.tif 000054
から選ばれ、前記環Ｂは任意的にＲによって置換される、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１４】
【化６】
2020505388.tif 000055
は、
【化７】
2020505388.tif 000056
から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１５】
【化８】
2020505388.tif 000057
は、
【化９】
2020505388.tif 000058
から選ばれる、請求項１０に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１６】
【化１０】
2020505388.tif 000059
は、
【化１１】
2020505388.tif 000060
から選ばれる、請求項１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１７】
化合物が、式（ＩＩ）の化合物
【化１２】
2020505388.tif 000061
から選ばれる、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１８】
【化１３】
2020505388.tif 000062
2020505388.tif 000063
に示される化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【請求項１９】
治療的有効量の請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体、及び薬学上許容される担体又は賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項２０】
哺乳類のカスパーゼ受容体に関連する疾患を予防又は治療するのに用いるための、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０８】
実験結論：
結果から分かるように、ＣＣｌ４経口投与によりＣ５７ＢＬ／６マウス肝線維化の誘導に成功した。異なる用量のＩＤＮ−６５５６では、１日２回で２８日経口投与することでＣＣｌ４が誘導した肝組織損傷、特に炎症細胞浸潤が有意に阻害される一方、明確な肝線維化阻害効果は認められない。異なる用量の実施例１では、１日２回で２８日経口投与することで、ＣＣｌ４が誘導した肝組織損傷、特に炎症細胞浸潤が有意に阻害されるとともに、有意な肝線維化阻害効果も認められる。全体的に、実施例１は当該モデルにおける薬効がＩＮＤ−６５５６より優れているといえる。
（付記）
（付記１）
式（Ｉ）に示される化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体：
【化２３】
2020505388.tif 000064
（式中、
環Ａは、５員ヘテロアリール基又は６員ヘテロアリール基から選ばれ、前記５員ヘテロアリール基又は６員ヘテロアリール基は、任意的にＲによって置換され、
環Ｂは、フェニル基又はＣ３−６シクロアルキル基から選ばれ、前記フェニル基又はＣ３−６シクロアルキル基は、任意的にＲによって置換され、
Ｒは、ハロゲン、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つ又は３つのＲ１によって置換されたＣ１−３アルキル基から選ばれ、
Ｒ１は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨ（ＣＨ３）又はＮ（ＣＨ３）２から選ばれる）。
（付記２）
環Ａのヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ又はＮから独立して選ばれ、環Ａのヘテロ原子の数は１、２又は３から選ばれる、付記１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記３）
環Ａは、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、１，２，４−オキサジアゾリル基、１，３，４−オキサジアゾリル基又はピラゾリル基から選ばれる、付記１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記４）
環Ａは、
【化２４】
2020505388.tif 000065
から選ばれる、付記１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記５）
環Ｂは、フェニル基又はシクロヘキシル基から選ばれ、前記フェニル基又はシクロヘキシル基は任意的にＲによって置換される、付記１〜４のいずれか１つに記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記６）
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２、又は任意的に１つ、２つもしくは３つのＲ１によって置換されたＭｅもしくはＥｔから選ばれる、付記１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記７）
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ２又はＣＦ３から選ばれる、付記６に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記８）
環Ｂは、
【化２５】
2020505388.tif 000066
から選ばれる、付記１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記９）
【化２６】
2020505388.tif 000067
は、
【化２７】
2020505388.tif 000068
から選ばれ、前記環Ｂは任意的にＲによって置換される、付記１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記１０）
【化２８】
2020505388.tif 000069
は、
【化２９】
2020505388.tif 000070
から選ばれる、付記１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記１１）
【化３０】
2020505388.tif 000071
は、
【化３１】
2020505388.tif 000072
から選ばれる、付記１０に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記１２）
【化３２】
2020505388.tif 000073
は、
【化３３】
2020505388.tif 000074
から選ばれる、付記１に記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記１３）
【化３４】
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2020505388.tif 000076
に示される化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体。
（付記１４）
治療的有効量の付記１〜１３のいずれか１つに記載の化合物、その薬学上許容される塩又はその互変異性体、及び薬学上許容される担体又は賦形剤を含む、医薬組成物。
（付記１５）
カスパーゼ受容体に関連する疾患を治療する医薬品の製造のための、付記１〜１３のいずれか１つに記載の化合物、その薬学上許容される塩もしくはその互変異性体又は付記１４に記載の医薬組成物の使用。
（付記１６）
治療を要する哺乳類に治療的有効量の付記１〜１３のいずれか１つに記載の化合物、その薬学上許容される塩もしくはその互変異性体又は付記１４に記載の医薬組成物を投与することを含む、哺乳類のカスパーゼ受容体に関連する疾患を治療する方法。
【国際調査報告】
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