(57)【要約】本明細書は、ホモ接合型家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症、虚血性脳卒中、冠動脈疾患、急性冠症候群、末梢動脈疾患、又は腎動脈疾患、及びその合併症を含む脂質関連疾患を治療するためのシステム、装置、及び方法に関する。また、脱脂血漿を連続注入した後の１つ又は複数の脂質含有アテロームの面積及び体積における、ベースラインと比較した変化を評価する画像技術を用いて、アルツハイマー病の進行を治療するためのシステム、装置、及び方法に関する。【選択図】なし
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の心血管疾患の治療方法であり、
前記患者の１つ又は複数の血管における変化を監視すること；
前記監視に基づいて、脂質含有変性物質が前記１つ又は複数の血管に存在するかどうかを特定すること；
血液の酸素運搬の程度を監視すること；
前記脂質含有変性物質の特定及び血液の酸素運搬の程度に基づいて、前記心血管疾患の治療プロトコルを決定することであって、前記治療プロトコルは、患者にステントを設置すること、患者の血液画分と脂質除去剤とを混合して得られる組成物を患者に投与すること、又は患者の血液画分と脂質除去剤とを混合して得られる組成物を患者に投与すると共に患者にステントを設置することの少なくとも１つを含むこと
を含む、方法。
【請求項２】
前記組成物が、
前記患者から血液画分を得ること；
前記血液画分と前記脂質除去剤とを混合して変性高密度リポタンパク質を生成すること；
前記変性高密度リポタンパク質を分離すること；
前記変性高密度リポタンパク質を前記患者に送達すること
により得られる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記患者と採血用装置とを繋ぐこと；
前記患者から採血すること；及び
前記血液から血球を分離して高密度リポタンパク質及び低密度リポタンパク質を含む血液画分を生成すること
を更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記変性高密度リポタンパク質は、混合前の前記血液画分からの高密度リポタンパク質と比較してｐｒｅ−β高密度リポタンパク質の濃度が上昇している、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記血液の酸素運搬の程度を、前記患者の血流予備量比を測定することにより監視する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記患者の血流予備量比が第１の値の範囲内である場合、前記治療プロトコルが、前記患者に前記ステントを設置することに決定される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記第１の値の範囲が１％〜７９％である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記患者の血流予備量比が第２の値の範囲内である場合、及び前記脂質含有変性物質が、第３の値の範囲内である前記１つ又は複数の血管の断面積を占める場合、前記治療プロトコルが、前記患者の血液画分と前記脂質除去剤とを混合して得られる組成物を投与することに決定される、請求項５に記載の方法。
【請求項９】
前記第２の値の範囲が８０％〜１００％であり、前記第３の値の範囲が２０％〜７０％である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記心血管疾患が、ホモ接合型家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症、虚血性脳卒中、冠動脈疾患、急性冠症候群、又は末梢動脈疾患の少なくとも１つである、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
患者の脂質関連疾患の治療方法であり、
前記患者に１つ又は複数の血管を監視するように構成された診断手順を行うこと；
前記１つ又は複数の血管における脂質含有変性物質の存在を特定すること；
前記脂質含有変性物質の存在の程度を特定し、前記程度と所定の脂質含有変性物質の値の範囲とを比較すること；
血流予備量比（ＦＦＲ）のレベルを特定し、前記レベルと所定のＦＦＲの値の閾値範囲とを比較すること；
前記脂質含有変性物質の存在の程度が第１の範囲内であり、前記ＦＦＲのレベルが第２の範囲内である場合、第１の治療プロトコルを進めること；
前記ＦＦＲのレベルが、第２の範囲内のＦＦＲのレベルよりも低い第３の範囲内である場合、第２の治療プロトコルを進めること；
前記脂質含有変性物質の存在の程度が、第１の範囲よりも低い第４の範囲内であり、前記ＦＦＲのレベルが第１の範囲内である場合、第３の治療プロトコルを進めること；及び
前記脂質含有変性物質の存在の程度が、第１の範囲よりも高い第５の範囲内であり、前記ＦＦＲのレベルが第１の範囲内である場合、第４の治療プロトコルを進めること
を含み、
前記第１の治療プロトコル、第２の治療プロトコル、第３の治療プロトコル、及び第４の治療プロトコルは、それぞれ異なる、方法。
【請求項１２】
前記脂質含有変性物質の存在の程度が、第１の範囲の２０％〜７０％の範囲内である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＦＦＲのレベルが、第２の範囲の８０％〜１００％の範囲内である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＦＦＲのレベルが、第２の範囲の１％〜７９％の範囲内である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記脂質含有変性物質の存在の程度が、第４の範囲の１％〜１９％の範囲内である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記脂質含有変性物質の存在の程度が、第５の範囲の７１％〜１００％の範囲内である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
前記第１の治療プロトコルが、前記患者にステントを設置することなく、前記患者の血液画分と脂質除去剤とを混合して得られる組成物を患者に投与することである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記第２の治療プロトコルが、前記患者の血液画分と脂質除去剤とを混合して得られる組成物を患者に投与することなく、前記患者にステントを設置することである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１９】
前記第４の治療プロトコルが、前記第１の治療プロトコル又は前記第３の治療プロトコルから選択され、前記第３の治療プロトコルは無治療である、請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
前記組成物が、
前記患者から血液画分を得ること；
前記血液画分と前記脂質除去剤とを混合して変性高密度リポタンパク質を生成すること；
前記変性高密度リポタンパク質を分離すること；及び
前記変性高密度リポタンパク質を前記患者に送達すること
により得られる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
前記脂質関連疾患が、ホモ接合型家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症、虚血性脳卒中、冠動脈疾患、急性冠症候群、腎動脈狭窄、末梢動脈疾患、又はアテローム塞栓性腎疾患の少なくとも１つである、請求項１１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（相互参照）
本願は、優先権について、「家族性高コレステロール血症の治療方法」と題され、２０１７年１月２３日に出願された米国仮特許出願第６２／４４９，４１６号に依拠している。
また、本願は、優先権について、「家族性高コレステロール血症の治療方法」と題され、２０１７年３月１日に出願された米国仮特許出願第６２／４６５，２６２号に依拠している。
本願は、優先権について、「コレステロール関連疾患の治療方法」と題され、２０１７年６月６日に出願された米国仮特許出願第６２／５１６，１００号に依拠している。
上記出願は全て、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、概して、単一の溶媒又は複数の溶媒を用いた血漿の体外治療により、ＨＤＬ粒子から脂質を除去する一方、ＬＤＬ粒子は実質的に損傷のないままとするシステム、装置、及び方法に関する。本明細書の方法は、慢性心血管疾患及び急性腎疾患を治療するために、ＨＤＬから脂質を選択的に除去して変性ＨＤＬ粒子を生成する一方、ＬＤＬ粒子は実質的に損傷のないままとする順次繰り返しの治療手順を提供する。
【背景技術】
【０００３】
家族性高コレステロール血症（ＦＨ）は、ＬＤＬ受容体（ＬＤＬＲ）、アポリポタンパク質Ｂ−１００（ＡＰＯＢ）、又はプロタンパク質転換酵素サブツリシン／ケキシン９型（ＰＣＳＫ９）を含む「ＦＨ遺伝子」の変異に起因する低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）の顕著な増加、腱黄色腫、及び若年性冠動脈心疾患を特徴とする、継承遺伝的常染色体優性疾患である。ＦＨは、血漿中のＬＤＬの蓄積、腱及び皮膚でのコレステロール沈着による重篤な高コレステロール血症、及びほぼ例外なく冠動脈疾患（ＣＡＤ）として現れる高リスクアテローム性動脈硬化症からなる臨床的に認識可能な表現型を示す。ＦＨ患者は、この遺伝子変異により、肝臓が過剰な血漿ＬＤＬを効果的に代謝（又は除去）することができなくなり、ＬＤＬレベルの上昇をもたらす。
【０００４】
個人が片方の親から欠陥ＦＨ遺伝子を継承した場合、ＦＨの形態はヘテロ接合型ＦＨと呼ばれる。ヘテロ接合型ＦＨは、常染色体優性形式で継承され、ほとんどの国でおよそ１：５００人に起こる、よく見られる遺伝性障害である。個人が両方の親から欠陥ＦＨ遺伝子を継承した場合、ＦＨの形態はホモ接合型ＦＨと呼ばれる。ホモ接合型ＦＨは、非常に稀であり、世界中で約１６０，０００〜１，０００，０００人に１人に起こり、ＬＤＬレベルが７００ｍｇ／ｄＬ超、即ち、ＣＶＤ患者に望まれる理想値７０ｍｇ／ｄＬの１０倍超となる。高いＬＤＬレベルにより、ホモ接合型ＦＨの患者は、悪性アテローム性動脈硬化症（血管の狭窄及び閉塞）及び早期の心臓発作を起こす。この過程は、出生前から始まり、急速に進行する。それは、冠動脈、頸動脈、大動脈、及び大動脈弁に作用する可能性がある。
【０００５】
ヘテロ接合型ＦＨ（ＨｅＦＨ）は、通常、スタチン、胆汁酸封鎖剤、又はコレステロール値を低下させるその他の脂質異常症治療薬により、且つ／又は遺伝カウンセリングの提供により治療する。ホモ接合型ＦＨ（ＨｏＦＨ）は、多くの場合、薬物療法に十分に反応せず、ＬＤＬアフェレーシス（透析と同様の方法でＬＤＬを除去）、ＬＤＬレベルを劇的に低下させる空腸バイパス手術、及び場合によっては肝移植を含む、他の治療を必要とする。近年、いくつかの医薬がＨｏＦＨ対象者の使用のために承認されている。しかしながら、これらの医薬は、ＬＤＬを低下させるのみであり、アテローム性動脈硬化症の更なる進行を遅らせるのに多少寄与するが、進行を止めることはない。また、これらの医薬は、重大な副作用があることが知られている。
【０００６】
コレステロールは、肝臓で合成されるか、食事から摂取される。ＬＤＬは、肝臓から体内の種々の部位の筋肉へのコレステロール輸送に関与している。しかしながら、ＬＤＬが動脈壁に集まると、ＬＤＬは、身体の化学反応から遊離した酸素フリーラジカルによる酸化を受け、血漿と有害な相互作用を起こす。変性ＬＤＬは、免疫システムにおいて白血球を動脈壁に凝集させ、プラークと呼ばれる脂肪性物質を形成し、血管を補強する細胞層を損傷させる。また、酸化窒素は、血管を弛緩させ、それにより血液が自由に流れるようにすることに関与するものであるが、変性酸化ＬＤＬは、この酸化窒素のレベルを低下させる。このプロセスが続くと、動脈壁がゆっくりと収縮し、動脈硬化に繋がり、それにより血流が減少する。プラークが徐々に蓄積すると、冠状血管が閉塞し、最終的には心臓発作に至る可能性がある。また、プラークの蓄積は、脚等の末梢血管でも発生する可能性があり、この状態は末梢動脈疾患として知られている。
【０００７】
閉塞は、脳に血液を供給する血管にも現れ、虚血性脳卒中を引き起こす可能性がある。この種の閉塞の基礎症状は、血管壁を覆う脂肪沈着の発達である。米国では１８歳以上の男女の少なくとも２．７％が脳卒中の既往歴があることが知られている。脳卒中の有病率は、加齢とともに高くなることも知られている。老齢人口の増加に伴い、脳卒中生存者の有病率が、特に高齢女性の間で増加すると予測される。全脳卒中の相当な割合（少なくとも８７％）は、本質的に虚血性である。
【０００８】
更に、高コレステロール血症及び炎症は、アテローム性動脈硬化症の発症に関与する２つの主要なメカニズムであることが示されている。アルツハイマー病及びアテローム性動脈硬化症の血管リスク因子は、かなり重複している。炎症はアルツハイマー病の病因に関係しており、コレステロールの恒常性の異常にも関与することが示唆されている。更に、アテローム生成の多くの寄与因子もアルツハイマー病の一因となる。具体的には、細胞培養において、コレステロール値の増加及び減少は、それぞれ、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）からのベータアミロイド（Αβ）の形成を促進及び阻害する。従って、アテローム性動脈硬化症の過程に対して効果が証明されている治療法の使用は、アルツハイマー病の進行を治療するための方法の１つである可能性がある。
【０００９】
冠動脈内の弾性内層内のアテローム性動脈硬化症（動脈の硬化及び狭窄）の発症により生じる別の一般的な心血管疾患は、虚血性心疾患（ＩＨＤ）としても知られている冠動脈疾患（ＣＡＤ）である。２００９年から２０１２年に収集された統計データによれば、推定１，５５０万人の２０歳以上のアメリカ人がＣＡＤを患っている。米国におけるＣＡＤの総有病率は、２０歳以上の成人の６．２％である。
【００１０】
冠動脈の血流の精密な減少により、心筋の一部が適切に機能できなくなる可能性がある。この状態は、急性冠症候群（ＡＣＳ）として知られている。２０１０年のＡＣＳの退院数の控えめな推定値は６２５，０００である。
【００１１】
ＬＤＬとは対照的に、高い血漿ＨＤＬレベルは、過剰なコレステロールが組織部位からそれが除去される肝臓に移動する「逆コレステロール輸送」において主要な役割を果たすため、望ましい。最適な総コレステロール値は２００ｍｇ／ｄＬ以下であり、ＬＤＬコレステロール値は１６０ｍｇ／ｄＬ以下であり、ＨＤＬコレステロール値は男性で４５ｍｇ／ｄＬ、女性で５０ｍｇ／ｄＬである。コレステロールの上昇、アテローム性動脈硬化症、又は冠動脈疾患の既往歴のある人には、より低いＬＤＬレベルが推奨される。高レベルのＬＤＬは冠動脈の脂質含有量を増加させ、破裂しやすい脂質が充満したプラークの形成をもたらす。一方、ＨＤＬは、脂質が充満したプラークの脂質含有量を減少させ、破裂の可能性を減らすことが示されている。ここ数年の間に、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）低下薬の臨床試験により、ＬＤＬの低下が臨床的心血管疾患（ＣＶＤ）のイベントの３０〜４５％の減少に関連していることが明確に証明されている。ＣＶＤイベントには、ＨｏＦＨ、ＨｅＦＨ、及び末梢動脈疾患等の疾患で発生するイベントが含まれる。しかしながら、多くの患者は、ＬＤＬが低下しているにもかかわらず、心臓イベントを有し続けている。低レベルのＨＤＬは、ＣＶＤのリスクの高い被験者に見られることが多く、疫学的研究では、ＣＶＤリスクを調節する独立したリスク因子としてＨＤＬを特定している。疫学的研究に加え、他の証拠により、ＨＤＬを上昇させるとＣＶＤのリスクが低下することが示唆されている。ＨｏＦＨ、ＨｅＦＨ、虚血性脳卒中、ＣＡＤ、ＡＣＳ、及び末梢動脈疾患を含むＣＶＤの治療のための、及びアルツハイマー病の進行の治療のための潜在的な戦略として、食事、薬理学的又は遺伝子操作により血漿ＨＤＬレベルを変化させることに関心が高まっている。
【００１２】
アポリポタンパク質Ｂ（ＡｐｏＢ）として知られるＬＤＬのタンパク質成分とその製品は、アテローム生成要素を含む。血漿ＬＤＬレベルの上昇とＨＤＬレベルの低下は、冠動脈疾患の主な原因として認識されている。ＡｐｏＢは、ＬＤＬ粒子において最も高濃度であり、ＨＤＬ粒子には存在しない。アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ＡｐｏＡ−Ｉ）及びアポリポタンパク質Ａ−ＩＩ（ＡｐｏＡ−ＩＩ）は、ＨＤＬに見られる。ＡｐｏＣ及びそのサブタイプ（Ｃ−Ｉ、Ｃ−ＩＩ、及びＣ−ＩＩＩ）、ＡｐｏＤ、ＡｐｏＥ等の他のアポリポタンパク質もＨＤＬに含まれる。ＡｐｏＣとＡｐｏＥもＬＤＬ粒子で観察される。
【００１３】
ＨＤＬ２ｂ、ＨＤＬ２ａ、ＨＤＬ３ａ、ＨＤＬ３ｂ、及びＨＤＬ３を含む多数の主要なクラスのＨＤＬ粒子が報告されている。様々な形態のＨＤＬ粒子が、アガロースの電気泳動移動度に基づいて、２つの主要な群、α−ＨＤＬ移動度を有する主要画分とＶＬＤＬに似た移動を示す少数画分として説明されている。この後者の画分はｐｒｅ−βＨＤＬと呼ばれ、これらの粒子は細胞コレステロール流出を誘導するための最も効率的なＨＤＬ粒子サブクラスである。
【００１４】
ＨＤＬリポタンパク質粒子は、ＡｐｏＡ−Ｉ、リン脂質、及びコレステロールで構成されている。ｐｒｅ−βＨＤＬ粒子は、細胞の遊離コレステロールの最初の受容体と考えられており、最終的に遊離及びエステル化コレステロールをα−ＨＤＬに移動させるのに不可欠である。ｐｒｅ−βＨＤＬ粒子は、コレステロールをα−ＨＤＬに移動させるか、又はα−ＨＤＬに変換される。αＨＤＬは、コレステロールを、過剰なコレステロールを体から除去することができる肝臓へと移動させる。
【００１５】
ＨＤＬレベルは、アテローム性動脈硬化症及び冠動脈疾患と逆相関している。コレステロール担持α−ＨＤＬが肝臓に到達すると、α−ＨＤＬ粒子はコレステロールを分離し、遊離コレステロールを肝臓に移送する。その後、（コレステロールと分離した）α−ＨＤＬ粒子は、ｐｒｅ−βＨＤＬ粒子に変換されて肝臓から排出され、体内で更なるコレステロールを獲得するのに用いられ、α−ＨＤＬに戻り、当該サイクルを繰り返す。従って、これらの様々なＨＤＬ粒子、特にα−ＨＤＬ粒子を細胞からの更なるコレステロールの除去に使用できるように、それらの粒子からコレステロールを減少させるか又は除去する方法が必要である。
【００１６】
腎動脈狭窄とは、腎臓に血液を供給する動脈の閉塞を指し、ａ）平滑筋プラーク又はｂ）コレステロールが充満したプラークの２つの形態を特徴とする。一般に、腎動脈狭窄として知られるこの状態は、腎臓への血流を低下させ、高血圧を引き起こす可能性がある。腎動脈のプラークは、ＣＴ血管造影中に発見される可能性がある。場合によっては、腎動脈狭窄は、大動脈瘤のＣＴ血管造影を行っている間に発見される。従来、血圧は年齢とともに徐々に上昇する。しかしながら、高血圧の突然の発症は、腎閉塞又は腎動脈狭窄に関連している可能性もある。腎臓への血流の減少は、腎臓が過剰なサイトカインを産生し始めるため、血管収縮又は高血圧を引き起す。
【００１７】
更に、「コレステロール塞栓症」は、動脈内のコレステロールが放出され（通常アテローム動脈硬化性プラークから）、血流内の塞栓として移動し、更に遠くに位置する血管の閉塞（塞栓症）を引き起こすときに発症する可能性がある。一旦循環すると、コレステロール粒子は小さな血管又は細動脈で動かなくなる。それらは組織への血流を減少させ、腎臓を傷つける可能性がある炎症及び組織損傷を引き起こす可能性がある。コレステロール塞栓症は腎不全を引き起こす可能性があり、アテローム塞栓性腎疾患（ＡＥＲＤ）と呼ばれる病状である。ＡＥＲＤは、コレステロールが充満したプラークが原因で発生する可能性がある疾患の兆候の１つである。ＡＥＲＤの患者では、プラークが動脈で破裂し、プラーク内のコレステロールやその他の「屑（ｊｕｎｋ）」を血管に放出することがある。放出されたコレステロール及び屑は、動脈を移動し、動脈を遮断し、腎臓の一部及びその組織を傷つけ、それによりＡＥＲＤとなる可能性がある。大動脈のアテローム性動脈硬化症は、ＡＥＲＤの最も一般的な原因である。
【００１８】
現在、腎動脈狭窄、その兆候、例えば、ＡＥＲＤ等、及びその他の心血管疾患の治療には、ステントを動脈に挿入して血管を開くことが含まれる。この技術により、血圧が正常化することが多い。しかしながら、ステントの設置は、高血圧等の症状のみを治療する可能性が高い。患者において、血圧は正常であるが、ＡＥＲＤがある場合もある。従って、疾患の根本的な原因に対処し、高血圧症の症状と組み合わせて、又はそれとは独立して腎動脈狭窄を治療する必要がある。
【００１９】
脂質異常症（又は異常に高い血中脂質濃度）は、患者の食事を変えることで治療できる可能性がある。しかしながら、治療の主要な形態としての食事療法は、患者、医師、栄養士、食事療法士、及びその他の医療専門家の側で大きな努力を必要とし、従って、医療専門家の資質に不必要に負担をかける。この治療のもう一つのマイナス面は、その成功が食事だけにかかっている訳ではないということである。むしろ、食事療法の成功は、社会的、心理的、経済的、行動的要因の組み合わせに依存する。従って、患者の食事の範囲内で欠陥を修正することのみに基づく治療は、常に成功するとは限らない。
【００２０】
食事の改良に失敗した場合、補助療法として薬物療法が用いられてきた。そのような治療には、単独で又は他の治療と組み合わせて投与された市販の脂質低下薬を食事管理の補助として用いることが含まれている。スタチンと呼ばれるこれらの薬には、ロバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、及びセリバスタチンが含まれる。スタチンはＬＤＬレベルの低下に特に効果的であり、トリグリセリドの低下にも効果的であり、明らかにそれらのＬＤＬ低下効果に正比例する。スタチンはＨＤＬレベルを上昇させるが、他の抗コレステロール薬よりも程度は低い。スタチンは酸化窒素も増加させるが、これは、上記のように酸化ＬＤＬの存在下で減少する。
【００２１】
別の薬物療法である胆汁酸樹脂は、胆汁酸、即ち、主要な生産成分の１つとしてコレステロールを用いて肝臓で作られる物質と結合することにより作用する。当該薬物は消化管で胆汁酸と結合するため、体内に吸収されるのではなく、糞便とともに排泄される。結果として、肝臓は、胆汁酸の構築を継続するために血液循環からより多くのコレステロールを取り入れなければならず、その結果、ＬＤＬレベルが全体的に低下する。
【００２２】
ニコチン酸、又はビタミンＢ３としても知られるナイアシンは、トリグリセリドのレベルを下げ、ＨＤＬレベルを他の抗コレステロール薬よりも高くするのに効果的である。ニコチン酸はＬＤＬコレステロールも低下させる。
【００２３】
フィブラン酸誘導体又はフィブラートは、これらの目的で通常使用される他の薬物、例えば、ナイアシン等が効果的でない場合に、トリグリセリドレベルを低下させ、ＨＤＬを増加させるために用いられる。
【００２４】
プロブコールは、ＬＤＬコレステロールレベルを低下させるが、ＨＤＬレベルも低下させる。これは、一般に、高コレステロールレベルを引き起こす特定の遺伝的障害、又は他のコレステロール低下薬が無効であるか使用できない場合に使用される。
【００２５】
ＰＣＳＫ９は、肝臓に存在するＬＤＬ受容体の細胞レベルを増加させることにより、ＬＤＬコレステロールレベルを低下させる。
【００２６】
脂質低下薬は、血中脂質の減少に様々な程度で成功している。しかしながら、全てのタイプの脂質異常症をうまく治療できる脂質低下薬はない。いくつかの脂質低下薬はかなり成功しているが、医学界は脂質低下薬がアテローム性動脈硬化症の退行を引き起こすという決定的な証拠をあまり発見していない。更に、全ての脂質低下薬には望ましくない副作用がある。アテローム性動脈硬化症は、食事管理、薬物療法、及び他の治療法が成功しない結果として、世界の多くの地域での主要な死因のままである。
【００２７】
薬物療法及び食事療法が十分に有効ではなかった患者の脂質量を減らすために、新たな治療が用いられてきた。例えば、プラズマフェレーシス及びＬＤＬアフェレーシス等の体外処置が採用されており、ＬＤＬの低下に効果的であることが示されている。
【００２８】
プラズマフェレーシス療法又は血漿交換療法は、患者の血漿をドナー血漿又はより一般的には血漿タンパク質画分に交換することを含む。プラズマフェレーシスは、血漿を細胞分離器により血球から除去するプロセスである。分離器は、血液を高速で回転させて細胞を液体から分離するか、又は血液の液体成分のみが通過できるほど小さい細孔を有する膜に血液を通すことにより機能する。細胞は治療を受けている人に戻されるが、血漿は廃棄され、他の液体に置き換えられる。
【００２９】
この治療は、異種タンパク質の導入及び感染症の伝染による合併症をもたらした。また、プラズマフェレーシスには、ＶＬＤＬ、ＬＤＬ、及びＨＤＬ等の全ての血清リポタンパク質が非選択的に除去されるという欠点がある。更に、プラズマフェレーシスは、発熱、悪寒、発疹、場合によっては更にアナフィラキシーの形態でのアレルギー反応を含む、いくつかの副作用を引き起こす可能性がある。
【００３０】
上記のように、コレステロール及びリン脂質を含む新生の円盤状粒子として肝臓及び腸の両方から分泌されるＨＤＬを除去することは望ましくない。ＨＤＬは、コレステロールの逆輸送に関与していると考えられ、コレステロールの逆輸送は、過剰なコレステロールを組織から除去し、胆汁で再利用又は廃棄するために肝臓に輸送するプロセスである。
【００３１】
プラズマフェレーシスとは対照的に、ＬＤＬアフェレーシス法は、ＨＤＬを保持しながら、ＬＤＬ等のコレステロールを含むＡｐｏＢを選択的に除去する。
【００３２】
ＬＤＬアフェレーシスのいくつかの方法が開発されている。これらの技術には、ヘパリンアガロースビーズへのＬＤＬの吸収、固定化ＬＤＬ抗体の使用、硫酸デキストランを固定化するカスケードろ過吸収、及びヘパリンの存在下での低ｐＨでのＬＤＬ沈殿が含まれる。上記の各方法は、ＬＤＬの除去に効果的である。しかしながら、この治療プロセスには、ＨＤＬにプラスの影響を与えない、又はアテローム性動脈硬化症やその他の心血管疾患を助長することができる代謝シフトを引き起こす等の欠点がある。ＬＤＬアフェレーシスは、その名前が示すように、重度の脂質異常症患者のＬＤＬを治療するだけである。
【００３３】
ホモ接合型家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症、及び後天性脂質異常症患者の血漿コレステロールの低下を達成する更に別の方法は、コレステロールアフェレーシスと呼ばれる体外脂質除去プロセスである。コレステロールアフェレーシスでは、患者から採血し、血液から血漿を分離し、血漿を溶媒混合物と混合する。溶媒混合物は、血漿から脂質を抽出する。その後、脱脂血漿を患者の血球と再混合し、患者に戻す。しかしながら、この手順を用いると、ＬＤＬ粒子を変性させるため、変性ＬＤＬ粒子が心臓病の程度を悪化させる可能性がある。同時に、このプロセスは、ＨＤＬ粒子の更なる脱脂ももたらした。
【００３４】
しかしながら、従来の体外脱脂プロセスは、ＬＤＬ及びＨＤＬの同時脱脂に向けて行われる。このプロセスには、主に、脱脂ＬＤＬが凝集し、その後、心臓病の状態を軽減するよりもむしろ悪化させる傾向があるという点で、多くのデメリットがある。更に、体外システムは、多段階の溶媒暴露及び抽出ステップを可能な限り通じて、体液量を実質的な処理に供するように設計されている。
【００３５】
強力な多段階溶媒曝露及び抽出には、いくつかの欠点がある。脱脂血漿を患者に安全に戻すために脱脂血漿から十分な量の溶媒を除去することは、困難な場合がある。
【００３６】
従って、血漿成分の処置のための既存のアフェレーシス及び体外システムには、これらの性能が臨床応用で用いられるのを制限する多くの欠点がある。慢性心血管疾患の治療及び予防措置を提供するために、血液成分から脂質を除去することができる改善されたシステム、装置、及び方法が必要である。また、ＨＤＬ粒子から脂質を選択的に除去し、それによりコレステロールを受容する能力を高めた変性ＨＤＬ粒子を作り出す方法も提供されている。
【００３７】
ＨＤＬ粒子を選択的に脱脂する方法は上記の制限のいくつかを克服するが、慢性疾患において、ＨＤＬ粒子から脂質を選択的に除去し、それにより、ＬＤＬ粒子に実質的に影響を与えずにコレステロールを受容する能力を高めた変性ＨＤＬ粒子を作り出す方法も必要である。また、ＣＴ血管造影等の画像技術を用いて治療の進行を監視するために、コレステロールを受け入れる際の変性ＨＤＬ粒子の有効性を連続的に監視する方法も必要である。
【発明の概要】
【００３８】
以下の実施形態及びその態様は、典型的かつ例示的であって範囲を限定しないことが意図されるシステム、ツール、及び方法と併せて記載し説明する。
【００３９】
本明細書は、患者の心血管疾患の治療方法であり、前記患者の１つ又は複数の血管における変化を監視すること；前記監視に基づいて、脂質含有変性物質が前記１つ又は複数の血管に存在するかどうかを特定すること；血液の酸素運搬の程度を監視すること；前記脂質含有変性物質の特定及び血液の酸素運搬の程度に基づいて、前記心血管疾患の治療プロトコルを決定することであって、前記治療プロトコルは、患者にステントを設置すること、患者の血液画分と脂質除去剤とを混合して得られる組成物を患者に投与すること、又は患者の血液画分と脂質除去剤とを混合して得られる組成物を患者に投与すると共に患者にステントを設置することの少なくとも１つを含むことを含む、方法を開示する。
【００４０】
任意選択で、前記組成物は、前記患者から血液画分を得ること；前記血液画分と前記脂質除去剤とを混合して変性高密度リポタンパク質を生成すること；前記変性高密度リポタンパク質を分離すること；前記変性高密度リポタンパク質を前記患者に送達することにより得てもよい。
【００４１】
任意選択で、前記方法は、前記患者と採血用装置とを繋ぐこと；前記患者から採血すること；及び前記血液から血球を分離して高密度リポタンパク質及び低密度リポタンパク質を含む血液画分を生成することを含んでいてもよい。
【００４２】
任意選択で、前記変性高密度リポタンパク質は、混合前の前記血液画分からの高密度リポタンパク質と比較してｐｒｅ−β高密度リポタンパク質の濃度が上昇していてもよい。
【００４３】
任意選択で、前記血液の酸素運搬の程度は、前記患者の血流予備量比を測定することにより監視してもよい。前記患者の血流予備量比が第１の値の範囲内である場合、前記治療プロトコルは、前記患者に前記ステントを設置することに決定されてもよい。前記第１の値の範囲は１％〜７９％であってもよい。前記患者の血流予備量比が第２の値の範囲内である場合、及び前記脂質含有変性物質が、第３の値の範囲内である前記１つ又は複数の血管の断面積を占める場合、前記治療プロトコルは、前記患者の血液画分と前記脂質除去剤とを混合して得られる組成物を投与することに決定されてもよい。前記第２の値の範囲が８０％〜１００％であり、前記第３の値の範囲が２０％〜７０％であってもよい。
【００４４】
任意選択で、前記心血管疾患は、ホモ接合型家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症、虚血性脳卒中、冠動脈疾患、急性冠症候群、又は末梢動脈疾患の少なくとも１つであってもよい。
【００４５】
また、本明細書は、患者の脂質関連疾患の治療方法であり、前記患者に１つ又は複数の血管を監視するように構成された診断手順を行うこと；前記１つ又は複数の血管における脂質含有変性物質の存在を特定すること；前記脂質含有変性物質の存在の程度を特定し、前記程度と所定の脂質含有変性物質の値の範囲とを比較すること；血流予備量比（ＦＦＲ）のレベルを特定し、前記レベルと所定のＦＦＲの値の閾値範囲とを比較すること；前記脂質含有変性物質の存在の程度が第１の範囲内であり、前記ＦＦＲのレベルが第２の範囲内である場合、第１の治療プロトコルを進めること；前記ＦＦＲのレベルが、第２の範囲内のＦＦＲのレベルよりも低い第３の範囲内である場合、第２の治療プロトコルを進めること；前記脂質含有変性物質の存在の程度が、第１の範囲よりも低い第４の範囲内であり、前記ＦＦＲのレベルが第１の範囲内である場合、第３の治療プロトコルを進めること；及び前記脂質含有変性物質の存在の程度が、第１の範囲よりも高い第５の範囲内であり、前記ＦＦＲのレベルが第１の範囲内である場合、第４の治療プロトコルを進めることを含み、前記第１の治療プロトコル、第２の治療プロトコル、第３の治療プロトコル、及び第４の治療プロトコルは、それぞれ異なる、方法を開示する。
【００４６】
前記脂質含有変性物質の存在の程度は、第１の範囲の２０％〜７０％の範囲内であってもよい。前記ＦＦＲのレベルは、第２の範囲の８０％〜１００％の範囲内、又は第２の範囲の１％〜７９％の範囲内であってもよい。前記脂質含有変性物質の存在の程度は、第４の範囲の１％〜１９％の範囲内であってもよい。前記脂質含有変性物質の存在の程度は、第５の範囲の７１％〜１００％の範囲内であってもよい。
【００４７】
任意選択で、前記第１の治療プロトコルは、前記患者にステントを設置することなく、前記患者の血液画分と脂質除去剤とを混合して得られる組成物を患者に投与することであってもよい。
【００４８】
任意選択で、前記第２の治療プロトコルは、前記患者の血液画分と脂質除去剤とを混合して得られる組成物を患者に投与することなく、前記患者にステントを設置することであってもよい。
【００４９】
任意選択で、前記第４の治療プロトコルは、前記第１の治療プロトコル又は前記第３の治療プロトコルから選択され、前記第３の治療プロトコルは無治療であってもよい。
【００５０】
任意選択で、前記組成物は、前記患者から血液画分を得ること；前記血液画分と前記脂質除去剤とを混合して変性高密度リポタンパク質を生成すること；前記変性高密度リポタンパク質を分離すること；及び前記変性高密度リポタンパク質を前記患者に送達することにより得てもよい。
【００５１】
任意選択で、前記脂質関連疾患が、ホモ接合型家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症、虚血性脳卒中、冠動脈疾患、急性冠症候群、腎動脈狭窄、末梢動脈疾患、又はアテローム塞栓性腎疾患の少なくとも１つであってもよい。
【００５２】
また、本明細書は、患者の心血管疾患の治療方法であり、前記患者の１つ又は複数の脂質含有アテロームの面積（ａｒｅａ）及び体積（ｖｏｌｕｍｅ）の変化を定期的に監視すること；前記１つ又は複数の脂質含有アテロームの面積及び体積の監視に基づいて心血管疾患を治療することであり、前記治療は、前記患者から高密度リポタンパク質及び低密度リポタンパク質を含む血液画分を得ること、前記血液画分と、低密度リポタンパク質を実質的に変性させることなく高密度リポタンパク質に関連する脂質を除去する脂質除去剤とを混合して、脂質、前記脂質除去剤、変性高密度リポタンパク質、及び前記低密度リポタンパク質の混合物を生成することを含むこと；前記変性高密度リポタンパク質及び前記低密度リポタンパク質を、前記脂質及び前記脂質除去剤から分離すること；及び前記変性高密度リポタンパク質及び前記低密度リポタンパク質を患者に送達することを含む、方法を開示する。
【００５３】
任意選択で、前記心血管疾患の治療方法は、ホモ接合型家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症、虚血性脳卒中、冠動脈疾患、急性冠症候群、及び末梢動脈疾患の少なくとも１つの治療方法を含んでいてもよい。
【００５４】
任意選択で、前記１つ又は複数のアテロームの面積及び体積の監視に基づいた心血管疾患の治療は、蓄積した脂質含有変性物質が所定の閾値を超えていると前記監視により特定された場合、治療を含んでいてもよい。
【００５５】
任意選択で、前記１つ又は複数のアテロームの面積及び体積の監視に基づいた心血管疾患の治療は、蓄積した脂質含有変性物質が２０％〜７０％の範囲にあると前記監視により特定された場合、治療を含んでいてもよい。
【００５６】
任意選択で、前記変化を定期的に監視することは、３〜６か月の期間内の変化を監視することを含んでいてもよい。
【００５７】
任意選択で、前記血液画分と脂質除去剤との混合により、総タンパク質に対するｐｒｅ−β高密度リポタンパク質の濃度が上昇した変性高密度リポタンパク質を生成してもよい。
【００５８】
任意選択で、前記心血管疾患を治療することは、前記患者と採血用装置とを繋ぐこと；血球を含む血液を前記患者から採取すること；前記血液から前記血球を分離して、高密度リポタンパク質及び低密度リポタンパク質を含む血液画分を生成することを更に含んでいてもよい。
【００５９】
また、本明細書は、患者の心血管疾患の治療方法であり、前記患者に１つ又は複数のアテロームを監視するように構成された診断手順を行うこと；変性物質の存在を特定すること；変性物質の存在の程度を特定し、前記程度と所定の変性物質の閾値とを比較すること；血流予備量比（ＦＦＲ）のレベルを特定し、前記レベルと所定のＦＦＲの閾値とを比較すること；前記変性物質の存在の程度が前記所定の変性物質の閾値を上回り、前記ＦＦＲレベルが前記所定のＦＦＲの閾値を上回る場合、脱脂プロセスを進め、前記患者の冠動脈にステントを埋め込むこと；前記変性物質の存在の程度が前記所定の変性物質の閾値を上回り、前記ＦＦＲレベルが前記所定のＦＦＲの閾値を下回る場合、脱脂プロセスを進めること；前記変性物質の存在の程度が前記所定の変性物質の閾値を下回り、前記ＦＦＲレベルが前記所定のＦＦＲの閾値を上回る場合、前記患者の冠動脈にステントを埋め込むことを進めること；及び前記変性物質の存在の程度が前記所定の変性物質の閾値を下回り、前記ＦＦＲレベルが前記所定のＦＦＲの閾値を下回る場合、治療を提供しないことを含む方法を開示する。
【００６０】
任意選択で、前記所定のＦＦＲの閾値は８０％に等しくてもよい。
【００６１】
任意選択で、前記所定の変性物質の閾値は２０％に等しくてもよい。
【００６２】
任意選択で、前記脱脂プロセスは、血液画分を取得するステップ；前記血液画分と脂質除去剤と混合して、変性高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）を生成するステップ；前記変性ＨＤＬを分離するステップ；及び前記変性ＨＤＬを前記患者に送達するステップを含んでいてもよい。
【００６３】
また、本明細書は、患者の腎動脈狭窄（ＲＡＳ）の治療方法であり、前記患者の１つ又は複数の脂質含有アテロームの面積及び体積の変化を定期的に監視すること；前記１つ又は複数の脂質含有アテロームの面積及び体積の監視に基づいてＲＡＳを治療することであり、前記治療は、前記患者から高密度リポタンパク質及び低密度リポタンパク質を含む血液画分を得ること、前記血液画分と、低密度リポタンパク質を実質的に変性させることなく高密度リポタンパク質に関連する脂質を除去する脂質除去剤とを混合して、脂質、前記脂質除去剤、変性高密度リポタンパク質、及び前記低密度リポタンパク質の混合物を生成することを含むこと；前記変性高密度リポタンパク質及び前記低密度リポタンパク質を、前記脂質及び前記脂質除去剤から分離すること；及び前記変性高密度リポタンパク質及び前記低密度リポタンパク質を患者に送達することを含む方法を開示する。
【００６４】
任意選択で、前記１つ又は複数のアテロームの面積及び体積の監視に基づいたＲＡＳの治療は、蓄積した脂質含有変性物質が所定の閾値を超えていると前記監視により特定された場合、治療を含んでいてもよい。
【００６５】
任意選択で、前記１つ又は複数のアテロームの面積及び体積の監視に基づいたＲＡＳの治療は、蓄積した脂質含有変性物質が２０％〜７０％の範囲にあると前記監視により特定された場合、治療を含んでいてもよい。
【００６６】
任意選択で、前記変化を定期的に監視することは、３〜６か月の期間内の変化を監視することを含んでいてもよい。
【００６７】
任意選択で、前記血液画分と脂質除去剤との混合により、総タンパク質に対するｐｒｅ−β高密度リポタンパク質の濃度が上昇した変性高密度リポタンパク質を生成してもよい。
【００６８】
任意選択で、前記ＲＡＳを治療することは、前記患者と採血用装置とを繋ぐこと；血球を含む血液を前記患者から採取すること；前記血液から前記血球を分離して、高密度リポタンパク質及び低密度リポタンパク質を含む血液画分を生成することを更に含んでいてもよい。
【００６９】
本明細書の上述の及び他の実施形態は、以下に提供される図面及び詳細な説明においてより詳細に説明することとする。
【図面の簡単な説明】
【００７０】
本明細書のこれらの及び他の特徴及び利点は、添付の図面に関連して検討する際に以下の詳細な説明を参照することによりその理解が深まることから、理解されるであろう。
【図１Ａ】図１Ａは、本明細書の実施形態に従った治療システム及び方法を用いて心血管疾患を治療するステップを描いたフローチャートである。
【図１Ｂ】図１Ｂは、本明細書の実施形態に従った治療システム及び方法を用いてアテローム塞栓性腎疾患（ＡＥＲＤ）等のコレステロール関連疾患を治療するステップを描いた別のフローチャートである。
【図１Ｃ】図１Ｃは、本明細書の実施形態に従って分析から特定された変性物質の種々の構成に対して提供される治療の種類を示した表である。
【図２】図２は、本明細書に開示されるプロセスを達成するために本明細書のいくつかの実施形態に従って用いられる複数の構成要素の概略図である。
【図３】図３は、本明細書に開示されるプロセスを達成するために本明細書のいくつかの実施形態に従って用いられる複数の構成要素の構成の例示的な実施形態についての絵図である。
【発明を実施するための形態】
【００７１】
本明細書は、コレステロール関連疾患を治療するための方法及びシステムに関する。本明細書の実施形態は、患者の１つ又は複数のアテロームの面積及び体積の変化を一定期間にわたり定期的に監視する。アテロームの面積及び体積は、狭窄における脂質含有変性物質について、既知の画像技術を用いて監視する。
【００７２】
本明細書の実施形態に従って、監視結果に基づいて、蓄積した脂質含有変性物質が存在し、閾値を超えていると特定された場合、治療を提供する。治療を、アテロームの面積及び体積を所定の時間間隔で監視する度に繰り返し、蓄積した脂質含有変性物質が存在し、閾値を超えていることを特定する。
【００７３】
本明細書の実施形態は、主に患者の血漿に由来するα−高密度リポタンパク質（α−ＨＤＬ）粒子から脂質を除去し、それにより脂質含有量、特にコレステロール含有量が減少した変性ＨＤＬ粒子を生成するのに有用なシステム、装置、及び方法により症状を治療する。本明細書の実施形態は、ＬＤＬ粒子を実質的に変性することなく、脂質含有量が減少したこれらの変性ＨＤＬ粒子を生成する。本明細書の実施形態は、元のα-ＨＤＬ粒子を変性させて、元のＨＤＬと比較してｐｒｅ−βＨＤＬの濃度が上昇した変性ＨＤＬ粒子を生成する。
【００７４】
更に、ＨＤＬ粒子（変性ＨＤＬ）の新たに形成された誘導体を患者に投与して細胞コレステロール流出を促し、心血管疾患、及び／又はアテローム塞栓性腎疾患（ＡＥＲＤ）を含む他の脂質関連疾患を治療する。規則的で定期的な監視及び治療プロセスにより、本明細書の方法及びシステムは、ホモ接合型家族性高コレステロール血症（ＨｏＦＨ）、ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症（ＨｅＦＨ）、虚血性脳卒中、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、急性冠症候群（ＡＣＳ）、末梢動脈疾患（ＰＡＤ）、腎動脈狭窄（ＲＡＳ）を含む心血管疾患の治療において、及びアルツハイマー病の進行の治療に対してより効果的になる。
【００７５】
本明細書は、多数の実施形態に関する。以下の開示は、当業者が本発明を実施できるように提供される。本明細書で用いられる言語は、いずれかの特定の実施形態の一般的な否認として解釈されるべきではなく、本明細書で用いられる用語の意味を超えて特許請求の範囲を限定するために使用されるべきではない。本明細書で定義される一般的な原理は、本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、他の実施形態及び応用に適用され得る。また、使用される用語及び表現は、例示的な実施形態を説明するためのものであり、限定的なものと見なされるべきではない。従って、本発明は、開示された原理及び特徴に合致する多くの代替、変更、及び均等物を包む最も広い範囲が与えられるべきである。明確にするために、本発明に関連する技術分野で知られている技術的材料に関する詳細は、本発明を不必要に不明瞭にしないように詳細には記載していない。本出願の説明及び特許請求の範囲において、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、及び「有する（ｈａｖｅ）」の文言及びその形式は、それぞれ、必ずしもその文言が関連し得る列挙された構成要素に限定されない。
【００７６】
本明細書において、特定の実施形態に関連して説明されるあらゆる特徴又は構成要素は、特に明記しない限り、他の実施形態で使用及び実現され得ることに留意すべきである。
【００７７】
用語「液体」は、脂質又は脂質含有粒子を含む動物又はヒトからの液体、脂質を含有する培養組織及び細胞からの液体、及び脂質含有細胞と混合された液体と定義される。本発明の目的のために、液体中の脂質量の低減は、血漿及び血漿中に含まれる粒子（例えば、これらに限定されないが、ＨＤＬ粒子等）中の脂質を低減することを含む。液体としては、これらに限定されないが、生体液、例えば、血液、血漿、血清、リンパ液、脳脊髄液、腹水、胸水、心膜液、生殖器系の種々の液体等（例えば、これらに限定されないが、精液、射精液、卵胞液、及び羊水等）；細胞培養試薬、例えば、通常の血清、ウシ胎仔血清、或いは任意の動物又はヒト由来の血清等；並びに免疫学的試薬、例えば、培養組織及び細胞からの抗体及びサイトカインの種々の調製物、脂質含有細胞と混合される液体、及び脂質含有生物を含む液体、例えば、脂質含有生物を含む生理食塩水等が挙げられる。本発明の方法で処理される好ましい液体は、血漿である。
【００７８】
用語「脂質」は、ヒト又は動物において生じる脂肪又は脂肪様物質の群のうちの任意の１つ又は複数と定義される。脂肪又は脂肪様物質は、水中での不溶性及び有機溶媒中での可溶性を特徴とする。用語「脂質」は当業者に既知であり、これらに限定されないが、複合脂質、単純脂質、トリグリセリド類、脂肪酸、グリセロリン脂質（リン脂質）、真性脂肪（例えば、脂肪酸のエステル類等）、グリセロール、セレブロシド類、蝋、並びにステロール類（例えば、コレステロール及びエルゴステロール等）等が挙げられる。
【００７９】
用語「抽出溶媒」は、液体から、又は液体内の粒子から脂質を抽出するために用いられる１つ又は複数の溶媒と定義される。この溶媒は液体に入り込み、他のサブシステムにより除去されるまで液体中に留まる。適切な抽出溶媒としては、脂質を抽出又は溶解する溶媒、例えば、これらに限定されないが、フェノール類、炭化水素類、アミン類、エーテル類、エステル類、アルコール類、ハロ炭化水素類、ハロカーボン類及びそれらの組合せ等が挙げられる。好ましい抽出溶媒の例は、エーテル類、エステル類、アルコール類、ハロ炭化水素類、又はハロカーボン類であり、これらに限定されないが、ジイソプロピルエーテル（ＤＩＰＥ）（イソプロピルエーテルとも呼ばれる）、ジエチルエーテル（ＤＥＥ）（エチルエーテルとも呼ばれる）、低級アルコール類（例えば、ブタノール、特にｎ−ブタノール）、酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルム、イソフルラン、セボフルラン（１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロ−２−（フルオロメトキシ）プロパン−ｄ３）、パーフルオロシクロヘキサン類、トリフルオロエタン、シクロフルオロヘキサノール、及びそれらの組合せ等が挙げられる。
【００８０】
用語「患者」は、本発明の方法で処理される液体の供給源、又は、脂質含有量が低下したＨＤＬ粒子の誘導体及び／又は血漿のレシピエントであってもよい動物又はヒトを指す。
【００８１】
用語「ＨＤＬ粒子」は、種々の方法、例えば、電荷、密度、サイズ、及び免疫親和性を測定する方法、例えば、これらに限定されないが、電気泳動移動度、超遠心分離、免疫反応性、及び当業者に知られているその他の方法等に基づいて定義されるいくつかの種類の粒子を含む。このようなＨＤＬ粒子としては、これらに限定されないが、以下が挙げられる：α−ＨＤＬ、ｐｒｅ−βＨＤＬ（例えば、ｐｒｅ−β１ＨＤＬ、ｐｒｅ−β２ＨＤＬ、及びｐｒｅ−β３ＨＤＬ等）、ＨＤＬ２（例えば、ＨＤＬ２ａ及びＨＤＬ２ｂ等）、ＨＤＬ３、ＶＨＤＬ、ＬｐＡ−Ｉ、ＬｐＡ−ＩＩ、ＬｐＡ−Ｉ／ＬｐＡ−ＩＩ（Ｂａｒｒａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ  １３００；７３−８５，１９９６参照）。従って、本発明の方法の実施により、変性ＨＤＬ粒子が作製される。これらのＨＤＬ粒子の変性誘導体は、例えば、これらに限定されないが、代謝及び／又は物理化学的特性（Ｂａｒｒａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ  １３００；７３−８５，１９９６参照）；分子量（ｋＤａ）；電荷；直径；形状；密度；水和密度；浮力特性；コレステロール含有量；遊離コレステロール含有量；エステル化コレステロール含有量；遊離コレステロールのリン脂質に対するモル割合；免疫親和性；酵素又はタンパク質（ＡｐｏＡ−１、ＡｐｏＡ−２、ＡｐｏＤ、ＡｐｏＥ、ＡｐｏＪ、ＡｐｏＡ−ＩＶ、コレステロールエステル運搬タンパク質（ＣＥＴＰ）、レシチン；コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＬＣＡＴ））のうちの１つ又は複数の含有量、活性、又はらせん構造；コレステロール結合に関する能力及び／又は速度、コレステロール輸送に関する能力及び／又は速度のうちの１つ又は複数における変更を含む多くの方法で変性させることができる。
【００８２】
用語「血流予備量比」又は「ＦＦＲ」は、狭窄が心筋への酸素運搬を妨げる可能性を判定するための、冠動脈狭窄（通常はアテローム性動脈硬化症による狭窄）にわたる圧力差の測定値を指すために用いられる。血流予備量比は、狭窄前の圧力に対する狭窄後の（遠位の）圧力として定義され、絶対数として表される。０．７０のＦＦＲ値は、特定の狭窄により血圧が３０％低下することを意味する。従って、ＦＦＲは、狭窄が存在しないと仮定した場合の最大流量と比較して、狭窄が存在する場合の血管を流れる最大流量を表すために用いられる。ＦＦＲを用いて血圧の観点から測定される血流の減少は、血液を介した酸素運搬（血液の酸素運搬）の減少をもたらす。
【００８３】
用語「脂質の含有量に起因する閉塞」は、パーセンテージで測定され、動脈の物理的閉塞の程度を指すために用いられる。
【００８４】
心血管疾患
図１Ａは、本明細書のいくつかの実施形態に従って、心血管疾患、例えば、これらに限定されないが、ＨｏＦＨ、ＨｅＦＨ、虚血性脳卒中、ＣＡＤ、ＡＣＳ、末梢動脈疾患（ＰＡＤ）等を治療するための、及びアルツハイマー病の進行を治療するための例示的なプロセスを示すフローチャートである。ステップ１０２において、心血管疾患と診断された被験者又は患者について、診断手順を介して１つ又は複数のアテロームの面積及び／又は体積を監視する。１つの実施形態において、高度医用画像技術、例えば、これらに限定されないが、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）血管造影及び／又は血管内超音波（ＩＶＵＳ）等を用いて、脂質含有変性物質が蓄積している可能性がある動脈壁の内層内の領域を検出してもよい。蓄積した変性物質としては、脂質、カルシウム、及び種々の量の線維性結合組織を含む、主にマクロファージ細胞又は破片を含む脂肪性沈着物が挙げられる。また、画像技術による分析を用いて、動脈壁の内層内に蓄積した脂質含有変性物質の量を特定し、監視してもよい。脂質含有変性物質及び非脂質含有変性物質は、動脈壁で膨張し、それにより動脈管へと侵入し、動脈管を狭窄させ、その結果、血流を制限する可能性がある。
【００８５】
ステップ１０４において、診断技術による分析に基づいて、変性物質の存在及び種類を確認する。加えて、（脂質含有又は非脂質含有）変性物質に起因する閉塞の程度又はパーセンテージを、医師が診断画像技術を用いて特定する。ステップ１０４で変性物質が検出されない場合、又は変性物質のレベルが所定の値の範囲外である場合には、プロセスを中止する。１つの実施形態において、医師は、本明細書による治療法を実施するために、蓄積した脂質に起因する２０％〜７０％の閉塞を有する狭窄がある１つ又は複数の動脈を特定する。ステップ１０６において、血流予備量比（ＦＦＲ）測定を用いて、狭窄の存在下での酸素運搬の程度を特定する。１つの実施形態では、ＦＦＲを用いて冠動脈狭窄にわたって圧力差を測定し、狭窄が心筋への血液の酸素運搬を妨げる（虚血）可能性を判断する。
【００８６】
診断結果及び閾値に応じて、異なる種類の治療を提供する。この段階では、医師は、疾患が消退したか、存在しないか、十分でないか、又は治療されたために本明細書の実施形態による治療が必要ないか、或いは、別の形態の治療（例えば、物理的ステント等）が必要であるかを判断する。
【００８７】
図１Ｃは、本明細書のいくつかの実施形態に従って、図１Ａのフローチャートに記載される心血管疾患の診断により判定された変性物質の種々の構成に対して提供される治療の種類を示す表である。表では、血流予備量比（ＦＦＲ）のパーセンテージ（割合）として提供される、閉塞後の血流速度を示す（同様にして、血液の酸素運搬を示す）種々の範囲の血流予備量比４０２と、脂質の含有量に起因する閉塞のパーセンテージとして提供される、脂質の含有量に起因する種々の範囲の物理的閉塞４０４との組み合わせに対して施される異なる種類の治療を比較している。表を参照すると、各セル、例えば、セル４０６は、（ＦＦＲを示す）範囲４０２と（脂質の含有量に起因する閉塞のパーセンテージ又は程度を示す）範囲４０４との組み合わせに相当し、更に、この組み合わせに適した少なくとも１つの治療方法を示す。
【００８８】
実施形態では、異なる種類の治療をＡ、Ｂ、Ｃ、及びＤと符号化する。治療タイプ「Ａ」は、物理的介入によりステントを埋め込む侵襲的治療プロセスに該当する。治療タイプ「Ｂ」は、本明細書の実施形態に従って、ＨＤＬ粒子を選択的に変性させる治療方法の実施に該当する。１つの実施形態において、区分４０４で示されるように、血流予備量比（ＦＦＲ）が８０〜１００％の範囲であり、蓄積した脂質による閉塞が２０〜７０％の範囲である場合、ＨＤＬ粒子を選択的に変性させること（及びＨＤＬ注入を実施すること）が好ましい。本明細書中、実施形態において、１〜７９％のＦＦＲ測定値は虚血状態を表し、８０〜１００％のＦＦＲ測定値は非虚血状態を表すことに注意されたい。大部分の場合、治療タイプ「Ａ」及び／又は「Ｂ」は、上記状態に対処することができる。治療タイプ「Ｄ」は、上記の治療タイプ（Ａ及び／又はＢ）のどちらも要さない場合に該当する。いくつかのセル、例えば、セル４０８では、２つの治療の選択肢が示され、医師は適切な治療過程を決定する。
【００８９】
治療タイプ「Ｃ」は、（図１Ａの１１４ａに関して下記により詳細に記載されるように）ステントとＨＤＬ粒子の選択的変性との組み合わせが実施される場合に該当する。アテローム性動脈硬化症は全身性疾患であり、患者は、血管系全体にわたり多数の病変を有する可能性がある。そのため、本明細書において、本明細書の治療方法は、全般的な患者の健康状態に基づく治療戦略に基づいて実施されるのではなく、「病変／プラーク／領域（ａｒｅａ）／部位（ｒｅｇｉｏｎ）」に基づく治療戦略に基づいて実施されることに注意されたい。従って、少数例において、医師は、治療を組み合わせることを決定し、治療タイプ「Ｃ」を実施する可能性がある。ある特定の患者において、１つ又は複数の領域又は病変でＦＦＲが７９％以下（１％〜７９％の範囲）である場合、それらの領域にはステントが埋め込まれる。同じ患者が、２０〜７０％の範囲で脂質に基づく閉塞を示す更なる残りの病変を有し、更にＦＦＲが８０〜１００％である場合、当該患者は、続けて脱脂を受ける。よって、どちらの治療介入も、多数の病変を有し、各病変において異なるレベルの疾患を有する患者に用いる可能性がある。
【００９０】
再び図１Ａを参照すると、ステップ１０８ａにおいて、医師は、病変／プラーク／領域／部位に広がる蓄積した脂質含有変性物質の量が、脂質の含有量に起因する閉塞のパーセンテージとして測定した際に、所定の閾値を超えているか又は範囲内の値であるかを特定する。脂質含有物質の量又は体積がパーセンテージ閾値を超えるか又は範囲内の値であるアテローム病変を有する動脈が同定されない場合、ステップ１１０ｂにおいて、医師は、別の治療プロセス（無治療又は物理的介入を含んでいてもよい）を決定する。脂質閉塞の量又は体積が所定のパーセンテージ閾値を超えるか所定のパーセンテージ範囲内である、脂質含有アテロームの病変／プラーク／領域／部位を有する動脈が特定された場合、ステップ１１０ａにおいて、患者は脱脂プロセスを受ける。本明細書の脱脂プロセスは、以下により詳細に記載する。
【００９１】
ステップ１０８ｂにおいて、医師は、ＦＦＲの測定値に基づいて、血液の酸素運搬が妨げられて閾値未満であるか又は範囲内の値であるかどうか（狭窄がないと仮定した場合の最大流量と比較した、狭窄の存在下で血管を流れる血液の最大流量として表される）を特定する。血液の酸素運搬が閾値未満であるか又は所定の範囲内の値である場合、ステップ１１２ａにおいて、医師は、物理的介入、例えば、ステント等で治療する。血液の酸素運搬が妨げられず閾値未満でないか、又は所定の範囲内の値でないと特定された場合、ステップ１１２ｂにおいて、医師は、別の治療の選択肢（無治療又は本明細書の脱脂プロセスを含んでいてもよい）を検討する。１つの実施形態において、閾値は８０％である。１つの実施形態において、値の範囲は１％〜７９％である。
【００９２】
ステップ１０８ｃにおいて、医師は、病変／プラーク／領域／部位に広がる蓄積した脂質含有変性物質が、所定のパーセンテージ範囲内の量又は体積であるかどうか、及び血液の酸素運搬が、所定のパーセンテージ範囲で特定されるように妨げられているかどうかの両方を判断する。両方の状態が満たされている場合、ステップ１１４ａにおいて、医師は、虚血領域（ＦＦＲの測定値が１％〜７９％の範囲内、好ましくは８０％未満）と同定されたそれらの領域を、ステント移植法で治療し、続いて、残りの領域を本明細書の脱脂プロセスで治療する。両方の閾値状態が満たされていない場合、ステップ１１４ｂにおいて、医師は、これらの状態の一方が満たされているか、又は両方とも満たされていないかを判断し、上記で概説したように適切な治療過程を決定する。
【００９３】
画像からの分析により、ＦＦＲが１％〜７９％の範囲にあり、脂質に起因する閉塞が１〜１００％であると特定された事例では、医師は、ＦＦＲで測定される血流を改善し、それにより血液の酸素運搬を改善するために、物理的介入を決定する。１つの実施形態において、同定されたアテローム領域における血流速度を高めるために、ステントを外科的に埋め込むことにより物理的介入が行われる。
【００９４】
画像からの分析により、ＦＦＲが８０％〜１００％の範囲にあり、脂質に起因する閉塞が２０％〜７０％の範囲にあると特定された別の事例では、医師は、脂質を除去する又は減少させる治療方法を選択する。当該事例では、ＨＤＬ粒子の選択的変性を可能にする本明細書の実施形態が用いられる。
【００９５】
ＦＦＲが１％〜７９％の範囲内、好ましくは８０％未満であり、脂質に起因する閉塞が２０％〜７０％の範囲にあると特定された更に別の事例では、医師は、ステントを埋め込む外科的プロセスを進めることを選択する。閉塞のパーセンテージが、例えば、２０％〜７０％であると定められた場合、それは、血管の断面積が脂質含有物質で閉塞されていること、及び当該閉塞が血管の断面積の２０％〜７０％の範囲を占めることを意味することが理解されるべきである。
【００９６】
ステップ１１０ａにおいて、脂質含有アテローム病変／プラーク／領域／部位を有し、脂質閉塞の量又は体積が所定のパーセンテージ範囲内である動脈が同定された場合、次に、患者は、脱脂プロセスを受ける。この場合、ステップ１２０において、患者の血液画分を得る。血液画分処理のプロセスは、通常、ろ過、血液の遠心分離、吸引、又は当業者に既知の任意の他の方法により行われる。血液画分処理により、血液から血漿を分離する。１つの実施形態において、血液は、体重に基づいて約１２ｍＬ／ｋｇの血漿を生成するのに十分な量で患者から採取する。血液を、当業者に通常既知の方法、例えば、プラズマフェレーシスを用いて血漿と赤血球とに分離する。その後、赤血球を、適切な保存液に保存するか、又はプラズマフェレーシスの間に患者に戻す。赤血球をプラズマフェレーシスの間に患者に戻すことが好ましい。また、量を補うために、任意選択で生理食塩水を患者に投与してもよい。
【００９７】
血液画分処理は、当業者に既知であり、図１Ａに関連して記載された方法と離れて行われる。分画処理の際、任意選択で血液を抗凝固剤、例えば、クエン酸ナトリウムと混ぜ合わせ、重力の約２，０００倍の遠心力で遠心分離してもよい。その後、赤血球は、血漿から吸引される。分画処理の後、赤血球を患者に戻す。いくつかの別の実施形態では、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）も血漿から吸引する。分離したＬＤＬは、通常廃棄する。別の実施形態では、ＬＤＬを血漿中に残す。本明細書の実施形態に従って、１２０で得られる血液画分には、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）を含む血漿も含まれ、他のタンパク質粒子を含んでいても含んでいなくてもよい。実施形態において、患者から採取した自己血漿は、その後、承認されたプラズマフェレーシス装置により処理する。血漿は、連続又はバッチプロセスを用いて輸送してもよい。
【００９８】
ステップ１２２において、１２０で得られた血液画分を、１つ又は複数の溶媒、例えば、脂質除去剤と混合する。１つの実施形態において、使用される溶媒としては、有機溶媒のセボフルラン及びｎ−ブタノールのいずれか又は両方が挙げられる。実施形態において、血漿及び溶媒を、混合機、撹拌機、又は血漿と溶媒とを接触させる他の装置の少なくとも１つに導入する。実施形態において、ＨＤＬ粒子のみが処理されてその脂質レベルを減少させるが、ＬＤＬレベルは影響されないように、溶媒系を任意選択で設計してもよい。溶媒系には、使用する溶媒、混合方法、時間、及び温度等の変動要因を分析することが含まれる。当該ステップにおいて、溶媒の種類、割合、及び濃度は様々であってもよい。血漿に対する溶媒の許容される割合には、溶媒と血漿との任意の組み合わせが含まれる。いくつかの実施形態において、使用される割合は、溶媒１部に対して血漿２部、溶媒１部に対して血漿１部、又は溶媒２部に対して血漿１部である。１つの実施形態において、ｎ−ブタノール５部に対してセボフルラン９５部を含む溶媒を用いる場合、血漿１部あたり溶媒２部の割合を用いる。また、１つの実施形態において、ｎ−ブタノールを含む溶媒を用いる場合、本明細書では、溶媒／血漿の最終混合物においてｎ−ブタノールが少なくとも３％となるような、血漿に対する溶媒の割合を用いる。１つの実施形態において、溶媒／血漿の最終混合物におけるｎ−ブタノールの最終濃度は、３．３３％である。血漿及び溶媒を、混合機、撹拌機、又は血漿と溶媒とを接触させる他の装置の少なくとも１つに導入する。血漿は、連続又はバッチプロセスを用いて輸送してもよい。更に、種々の検出手段を、圧力、温度、流速、及び溶媒レベル等を監視するために含めてもよい。溶媒は、血漿からの脂質を溶解する。本明細書の実施形態において、溶媒により脂質を溶解し、脂質含有量が減少した変性ＨＤＬ粒子を含む処理血漿を生成する。当該プロセスは、血漿タンパク質を破壊せずに、又はＬＤＬ粒子に実質的に影響を与えずに、ＨＤＬ粒子を処理してその脂質レベルを減らし、変性ＨＤＬ粒子を生成するように設計する。
【００９９】
エネルギーは、種々の混合方法、時間、及び速度の形で系に導入する。１２４において、バルク溶媒を変性ＨＤＬ粒子から遠心分離により除去する。実施形態において、炭吸着、蒸発、又は中空糸コントラクタ（ＨＦＣ）パーベーパレーションにより、あらゆる残りの可溶性溶媒を除去する。クロマトグラフィー（ＧＣ）又は同様の手段を用いて、残りの溶媒について混合物を任意で試験してもよい。残りの溶媒に対する試験は、統計的検証に基づいて任意選択で除外してもよい。
【０１００】
１２６において、１２４で溶媒から分離された、脂質含有量が減少した変性ＨＤＬ粒子を含む処理血漿を、適切に処理した後、患者に戻す。変性ＨＤＬ粒子は、ｐｒｅ−βＨＤＬの濃度が上昇したＨＤＬ粒子である。ｐｒｅ−βＨＤＬの濃度は、溶媒で処理する前の血漿中に存在していた元のＨＤＬと比較して、変性ＨＤＬにおいて高い。得られた処理血漿は、脂質が減少しｐｒｅ−βＨＤＬ濃度が増加したＨＤＬ粒子を含んでおり、赤血球がプラズマフェレーシスの際に既に患者に戻され投与されていない場合には、任意選択で患者の赤血球と合わせてもよい。投与経路の一つは、血管系、好ましくは静脈内である。
【０１０１】
実施形態において、患者は、以前に監視されたアテロームの面積及び体積の変化について、特に脂質含有変性物質について再び監視される。そのため、プロセスは、上記のとおり、ステップ１０２から繰り返される。実施形態において、患者は、３〜６ヶ月の期間内に繰り返し監視される。また、治療サイクルは、監視により実質的或いは完全なコレステロール流出の改善が示唆されるまでこの頻度で繰り返される。１つの実施形態において、アテロームの面積及び体積が閾値未満と監視された場合、患者は治療されており、治療サイクルの更なる繰り返しは必要ないとみなされる。いくつかの実施形態において、治療頻度は、治療される体積及び患者の症状の重症度により異なる。
【０１０２】
アテローム塞栓性腎疾患
腎動脈狭窄（ＲＡＳ）は全身性疾患であり、患者は、血管系全体にわたり多数の病変を有する可能性がある。時には、動脈内のプラークが剥離し、腎臓に損傷を与え、その結果、アテローム塞栓性腎疾患（ＡＥＲＤ）となる可能性がある。そのため、本明細書中、本明細書の治療方法は、全般的な患者の健康状態に基づく治療戦略に基づいて実施されるのではなく、「病変／プラーク／領域／部位」に基づく治療戦略に基づいて実施されることに注意されたい。
【０１０３】
図１Ｂは、本明細書のいくつかの実施形態に従って、コレステロール関連疾患、例えば、これに限定されないが、アテローム塞栓性腎疾患（ＡＥＲＤ）を治療する別の例示的なプロセスを示すフローチャートである。全ての事例において、患者は、最初に、腎動脈狭窄−腎臓に血液を供給する動脈の閉塞−を示す。ステップ１３２において、患者の血圧（ＢＰ）が上昇しているか否かを測定する。高血圧症の最近の発症は、プラークの存在の臨床症状となり得る。患者が高血圧（ＨＢＰ）であると判定された場合、医師は、ステップ１３４でアテローム塞栓性腎疾患（ＡＥＲＤ）を探る。ＡＥＲＤは何の症状も引き起こさない可能性があるが、以下の症状のいくつかが徐々に現れ、時間が経つにつれて悪化する可能性がある：数ある症状の中で特に、尿中の血液、発熱、筋肉痛、頭痛、体重減少、足の痛み又は青趾、吐き気。ＡＥＲＤと同定されない場合には、次に、１３６において、患者にステントを設置し、ＨＢＰをもたらす可能性があるあらゆる閉塞を解消する。
【０１０４】
１３４において、ＢＰの上昇に加えてＡＥＲＤが同定された場合、次に、医師は、閉塞及びＢＰの上昇を解消するために、ステップ１３８でステントを設置する。更に、医師は、ステップ１４０で、ステントの設置処置が機能して、ＢＰレベルの上昇及びＡＥＲＤの両方に対処しているか否かを判断する。対処していない場合には、追加のステントを設置するか、又は、本明細書の実施形態に従って、図１Ａに関して説明されたように、脱脂プロセスを用いてもよい。治療の決定は、「病変／プラーク／領域／部位」の特定に基づく。
【０１０５】
ステップ１３２において、患者のＢＰが正常レベルであると判定された場合、医師は、それでもなおステップ１４２でＡＥＲＤの症状又は兆候を確認する。確認は、例えば、これらに限定されないが、数ある症状の中で特に、失明、尿中の血液、発熱、筋肉痛、頭痛、体重減少、足の痛み又は青趾、吐き気等の症状に基づいて行われる。１４２において、ＡＥＲＤが検出されない場合、次に、医師は、ステップ１４４において、症状及びその他のあらゆる診断に基づいて、適切な治療過程を決定する。腎狭窄（コレステロール含有プラークの存在）があり、ＨＢＰの上昇及びＡＥＲＤがどちらもない場合、次に、医師は、心血管疾患に関する図１Ａに関連して上記に概説した手順に従うことを選択してもよく、これは、結果としてステント及び／又は本明細書の脱脂プロセスのいずれか一つ又は両方となる。
【０１０６】
患者がＡＥＲＤと診断されたが、ＢＰが正常レベルである場合、次に、医師はステップ１４６に進み、被験者又は患者は、腎機能障害の原因及び腎動脈狭窄の程度を特定するために、診断手順により１つ又は複数のアテロームの面積及び／又は体積を監視する。１つの実施形態において、高度医用画像技術、例えば、これらに限定されないが、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）血管造影及び／又は血管内超音波（ＩＶＵＳ）及び／又は近赤外線分光法等を用いて、脂質含有変性物質が蓄積している可能性がある動脈壁の内層内の領域を検出してもよい。蓄積した変性物質としては、脂質、カルシウム、及び種々の量の線維性結合組織を含む、主にマクロファージ細胞又は破片を含む脂肪性沈着物が挙げられる。また、画像技術による分析を用いて、動脈壁の内層内に蓄積した脂質含有変性物質の量を特定し、監視してもよい。脂質含有変性物質及び非脂質含有変性物質は、動脈壁で膨張し、それにより動脈管へと侵入し、動脈管を狭窄させ、その結果、血流を制限し、腎臓異常を引き起こす可能性がある。
【０１０７】
診断技術による分析に基づいて、変性物質の存在及び種類を確認し、（脂質含有又は非脂質含有）変性物質の程度又はパーセンテージを特定し、血流予備量比（ＦＦＲ）に基づいて血液の酸素運搬の程度を特定する。変性物質が検出されない場合、又は変性物質のレベルが所定の閾値未満であるか所定の値の範囲外である場合には、プロセスを中止する。１つの実施形態において、医師は、本明細書による治療法を実施するために、蓄積した脂質に起因する２０％〜７０％の閉塞を有する狭窄がある１つ又は複数の腎動脈を特定する。１つの実施形態では、ＦＦＲを用いて冠動脈狭窄にわたって圧力差を測定し、狭窄が血流を妨げ、それにより腎臓への酸素運搬を妨げる（虚血）可能性を判断する。
【０１０８】
診断結果及び閾値に応じて、異なる種類の治療を提供する。この段階では、医師は、疾患が消退したか、存在しないか、十分でないか、又は治療されたために本明細書の実施形態による治療が必要ないか、或いは、別の形態の治療が必要であるかを判断する。
【０１０９】
図１Ｃに戻って参照すると、表では、血流予備量比（ＦＦＲ）のパーセンテージとして提供される、閉塞に関連した血流速度の変化を示す（それ故、血液の酸素運搬を示す）種々の範囲の血流予備量比４０２と、脂質の含有量に起因する閉塞のパーセンテージとして提供される、脂質の含有量に起因する種々の範囲の閉塞４０４との組み合わせに対して施される異なる種類の治療を比較している。表を参照すると、各セル、例えば、セル４０６は、（ＦＦＲを示す）範囲４０２と（脂質の含有量に起因する閉塞のパーセンテージ又は程度を示す）範囲４０４との組み合わせに相当し、更に、この組み合わせに適した少なくとも１つの治療方法を示す。
【０１１０】
実施形態では、異なる種類の治療をＡ、Ｂ、Ｃ、及びＤと符号化する。治療タイプ「Ａ」は、物理的介入によりステントを埋め込む侵襲的治療プロセスに該当する。治療タイプ「Ｂ」は、本明細書の実施形態に従って、ＨＤＬ粒子を選択的に変性させる治療方法の実施に該当する。１つの実施形態において、区分４０４で示されるように、血流予備量比（ＦＦＲ）が８０〜１００％の範囲であり、蓄積した脂質による閉塞が２０〜７０％の範囲である場合、ＨＤＬ粒子を選択的に変性させること（及びＨＤＬ注入を実施すること）が好ましい。本明細書中、実施形態において、１〜７９％のＦＦＲは虚血状態を表し、８０〜１００％のＦＦＲは非虚血状態を表すことに注意されたい。大部分の場合、治療タイプ「Ａ」及び／又は「Ｂ」は、上記症状に対処することができる。治療タイプ「Ｄ」は、上記の治療タイプ（Ａ、Ｂ、又はＣ）のいずれも要さない場合に該当する。いくつかのセル、例えば、セル４０８では、２つの治療の選択肢が示され、医師は適切な治療過程を決定する。
【０１１１】
治療タイプ「Ｃ」は、ステントとＨＤＬ粒子の選択的変性の両方の組み合わせが実施される場合に該当する。腎動脈狭窄（ＲＡＳ）は全身性疾患であり、患者は、血管系全体にわたり多数の病変を有する可能性がある。本明細書中、本明細書の治療方法は、全般的な患者の健康状態に基づく治療戦略に基づいて実施されるのではなく、「病変／プラーク／領域／部位」に基づく治療戦略に基づいて実施されることに注意されたい。従って、少数例において、医師は、治療を組み合わせることを決定し、治療タイプ「Ｃ」を実施する可能性がある。ある特定の患者において、１つ又は複数の領域又は病変でＦＦＲのパーセンテージが７９％以下と測定された場合、それらの領域にはステントが埋め込まれる。同じ患者が、２０〜７０％の範囲で脂質に基づく閉塞を示す更なる残りの病変を有し、更にＦＦＲが８０〜１００％である場合、当該患者は、続けて脱脂を受ける。よって、どちらの治療介入も、多数の病変を有し、各病変において異なるレベルの疾患を有する患者に用いる可能性がある。
【０１１２】
医師は、病変／プラーク／領域／部位に広がる蓄積した脂質含有変性物質の量が、脂質の含有量に起因する閉塞のパーセンテージとして測定した際に、所定のパーセンテージ閾値を超えているか、下回るか、又は所定のパーセンテージ範囲内であるかを特定する。パーセンテージ閾値を超えているか又は下回るか、或いは所定のパーセンテージ範囲内である量又は体積を有する脂質含有アテローム病変を有する動脈が特定されない場合、医師は、別の治療プロセス（無治療又は物理的介入を含んでいてもよい）を決定する。脂質閉塞の量又は体積が所定のパーセンテージ範囲内である脂質含有アテロームの病変／プラーク／領域／部位を有する動脈が特定された場合、患者は脱脂プロセスを受ける。本明細書の脱脂プロセスは、図１Ａに関してより詳細に記載する。
【０１１３】
医師は、ＦＦＲの測定値に基づいて、血液の酸素運搬が妨げられて閾値未満であるか、又は範囲内の値であるかどうか（狭窄がないと仮定した場合の最大流量と比較した、狭窄の存在下で血管を流れる血液の最大流量として表される）を特定する。血液の酸素運搬が妨げられて閾値未満であるか、又は範囲内の値である場合、医師は、物理的介入、例えば、ステント等で治療する。血液の酸素運搬が妨げられず閾値を超えていると特定された場合、医師は、別の治療の選択肢（無治療又は本明細書の脱脂プロセスを含んでいてもよい）を検討する。１つの実施形態において、閾値は８０％である。１つの実施形態において、値の範囲は１％〜７９％である。
【０１１４】
続けて、医師は、病変／プラーク／領域／部位に広がる蓄積した脂質含有変性物質が、所定のパーセンテージ範囲内の量又は体積であるかどうか、及び血液の酸素運搬が、妨げられて閾値を上回るか、又は所定の範囲内の値であるかどうかの両方を特定する。両方の閾値状態が満たされる場合、医師は、虚血領域（ＦＦＲが８０％未満か又は１％〜７９％の範囲内）と同定されたそれらの領域を、ステント移植法で治療し、続いて、残りの領域を本明細書の脱脂プロセスで治療する。両方の閾値状態が満たされていない場合、次に、医師は、これらの状態の一方が満たされているか、又は両方とも満たされていないかを特定し、上記で概説したように適切な治療過程を決定する。
【０１１５】
画像からの分析により、ＦＦＲが１％〜７９％の範囲にあり、脂質に起因する閉塞が１〜１００％であると特定された事例では、医師は、ＦＦＲで測定される血液の酸素運搬を改善するために、物理的介入を決定する。１つの実施形態において、同定されたアテローム領域における血流速度を高めるために、ステントを外科的に埋め込むことにより物理的介入が行われる。
【０１１６】
画像からの分析により、ＦＦＲが８０％〜１００％の範囲にあり、脂質に起因する閉塞が２０％〜７０％の範囲にあると特定された別の事例では、医師は、脂質を除去する又は減少させる治療方法を選択する。当該事例では、ＨＤＬ粒子の選択的変性を可能にする本明細書の実施形態が用いられる。
【０１１７】
ＦＦＲが８０％未満（１％〜７９％の範囲内）であり、脂質に起因する閉塞が２０％〜７０％の範囲にあると特定された更に別の事例では、医師は、ステントを埋め込む外科的プロセスを進めることを選択する。閉塞のパーセンテージが、例えば、２０％〜７０％であると定められた場合、それは、血管の断面積が脂質含有物質で閉塞されていること、及び当該閉塞が血管の断面積の２０％〜７０％の範囲を占めることを意味することが理解されるべきである。
【０１１８】
脂質含有アテロームの面積／体積が所定のパーセンテージ範囲内である動脈が同定された場合、次に、患者は、脱脂プロセスを受ける。この場合、患者の血液画分を得る。血液分画処理のプロセスは、通常、ろ過、血液の遠心分離、吸引、又は当業者に既知の任意の他の方法により行われる。血液分画処理により、血液から血漿を分離する。１つの実施形態において、血液は、体重に基づいて約１２ｍＬ／ｋｇの血漿を生成するのに十分な量で患者から採取する。血液を、当業者に通常既知の方法、例えば、プラズマフェレーシスを用いて血漿と赤血球とに分離する。その後、赤血球を、適切な保存液に保存するか、又はプラズマフェレーシスの間に患者に戻す。赤血球をプラズマフェレーシスの間に患者に戻すことが好ましい。また、量を補うために、任意選択で生理食塩水を患者に投与してもよい。
【０１１９】
血液分画処理は、当業者に既知であり、図１Ａに関連して記載された方法と離れて行われる。分画処理の際、任意選択で血液を抗凝固剤、例えば、クエン酸ナトリウムと混ぜ合わせ、重力の約２，０００倍の遠心力で遠心分離してもよい。その後、赤血球は、血漿から吸引される。分画処理の後、赤血球を患者に戻す。いくつかの別の実施形態では、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）も血漿から吸引する。分離したＬＤＬは、通常廃棄する。別の実施形態では、ＬＤＬを血漿中に残す。本明細書の実施形態に従って、得られる血液画分には、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）を含む血漿も含まれ、他のタンパク質粒子を含んでいても含んでいなくてもよい。実施形態において、患者から採取した自己血漿は、その後、承認されたプラズマフェレーシス装置により処理する。血漿は、連続又はバッチプロセスを用いて輸送してもよい。
【０１２０】
得られた血液画分を、１つ又は複数の溶媒、例えば、脂質除去剤と混合する。１つの実施形態において、使用される溶媒としては、有機溶媒のセボフルラン及びｎ−ブタノールのいずれか又は両方が挙げられる。実施形態において、血漿及び溶媒を、混合機、撹拌機、又は血漿と溶媒とを接触させる他の装置の少なくとも１つに導入する。実施形態において、ＨＤＬ粒子のみが処理されてその脂質レベルを減少させるが、ＬＤＬレベルは影響されないように、溶媒系を任意選択で設計してもよい。溶媒系には、使用する溶媒、混合方法、時間、及び温度等の変動要因を分析することが含まれる。当該ステップにおいて、溶媒の種類、割合、及び濃度は様々であってもよい。血漿に対する溶媒の許容される割合には、溶媒と血漿との任意の組み合わせが含まれる。いくつかの実施形態において、使用される割合は、溶媒１部に対して血漿２部、溶媒１部に対して血漿１部、又は溶媒２部に対して血漿１部である。１つの実施形態において、ｎ−ブタノール５部に対してセボフルラン９５部を含む溶媒を用いる場合、血漿１部あたり溶媒２部の割合を用いる。また、１つの実施形態において、ｎ−ブタノールを含む溶媒を用いる場合、本明細書では、溶媒／血漿の最終混合物においてｎ−ブタノールが少なくとも３％となるような、血漿に対する溶媒の割合を用いる。１つの実施形態において、溶媒／血漿の最終混合物におけるｎ−ブタノールの最終濃度は、３．３３％である。血漿及び溶媒を、混合機、撹拌機、又は血漿と溶媒とを接触させる他の装置の少なくとも１つに導入する。血漿は、連続又はバッチプロセスを用いて輸送してもよい。更に、種々の検出手段を、圧力、温度、流速、及び溶媒レベル等を監視するために含めてもよい。溶媒は、血漿からの脂質を溶解する。本明細書の実施形態において、溶媒により脂質を溶解し、脂質含有量が減少した、変性ＨＤＬ粒子を含む処理血漿を生成する。当該プロセスは、血漿タンパク質を破壊せずに、又はＬＤＬ粒子に実質的に影響を与えずに、ＨＤＬ粒子を処理してその脂質レベルを減らし、変性ＨＤＬ粒子を生成するように設計する。
【０１２１】
エネルギーは、種々の混合方法、時間、及び速度の形で系に導入する。バルク溶媒を変性ＨＤＬ粒子から遠心分離により除去する。実施形態において、炭吸着、蒸発、又は中空糸コントラクタ（ＨＦＣ）パーベーパレーションにより、あらゆる残りの可溶性溶媒を除去する。クロマトグラフィー（ＧＣ）又は同様の手段を用いて、残りの溶媒について混合物を任意で試験してもよい。残りの溶媒に対する試験は、統計的検証に基づいて任意選択で除外してもよい。
【０１２２】
溶媒から分離された、脂質含有量が減少した変性ＨＤＬ粒子を含む処理血漿を、適切に処理した後、患者に戻す。変性ＨＤＬ粒子は、ｐｒｅ−βＨＤＬの濃度が上昇したＨＤＬ粒子である。ｐｒｅ−βＨＤＬの濃度は、溶媒で処理する前の血漿中に存在していた元のＨＤＬと比較して、変性ＨＤＬにおいて高い。得られた処理血漿は、脂質が減少し、ｐｒｅ−βＨＤＬ濃度が増加したＨＤＬ粒子を含んでおり、赤血球がプラズマフェレーシスの際に既に患者に戻され投与されていない場合には、任意選択で患者の赤血球と合わせてもよい。投与経路の一つは、血管系、好ましくは静脈内である。
【０１２３】
実施形態において、患者は、以前に監視されたアテロームの面積及び体積の変化について、特に脂質含有変性物質について再び監視される。そのため、プロセスは、上記のとおり繰り返される。実施形態において、患者は、３〜６ヶ月の期間内に繰り返し監視される。また、治療サイクルは、監視により実質的或いは完全なコレステロール流出の改善が示唆されるまで、この頻度で繰り返される。１つの実施形態において、アテロームの面積及び体積が閾値未満と監視された場合、患者は、治療されており、治療サイクルの更なる繰り返しは必要ないとみなされる。いくつかの実施形態において、治療頻度は、治療される体積及び患者の症状の重症度により異なる。
【０１２４】
図２は、本明細書の方法を達成するために用いたシステム及びその構成要素の例示的な実施形態を示す。当該図面は、ＨＤＬ変性システム２００の要素を定義する、例示的な基本要素のフロー概略図を表す。システム２００の構成要素の実施形態は、患者又は別の個人（ドナー）からの血液画分を得た後に用いる。血液から分離された血漿は、更なる処理のため、無菌袋でシステム２００に運ぶ。血漿は、既知のプラズマフェレーシス装置を用いて血液から分離する。血漿は、標準的なアフェレーシス技術を用いて無菌袋へと患者から採取してもよい。次に、血漿は、更なる処理のため、システム２００へと液体投入部の形で運ぶ。実施形態において、システム２００は、常に患者に接続されている訳ではなく、脱脂された血漿用の個別のスタンドアロングシステムである。患者の血漿は、システム２００で処理し、患者のところに戻し、患者に再注入する。代替の実施形態では、システムは、プラズマフェレーシス及び脱脂が身体外（ｅｘｃｏｒｐｏｒｅａｌ）の並列システムで行われ、脱脂された血漿生成物が患者に戻される、患者に接続された連続フローシステムであってもよい。
【０１２５】
（血漿を含む）液体投入部２０５を提供し、チューブを通じてミキサー２２０に接続する。溶媒投入部２１０を提供し、同様にチューブを通じてミキサー２２０に接続する。実施形態において、弁２１５及び２１６を用いて、液体投入部２０５からの液体及び溶媒投入部２１０からの溶媒それぞれの流れを制御する。液体投入部２０５は、上記のとおり、ＬＤＬ粒子は含み又はＬＤＬ粒子は含まず、ＨＤＬ粒子を含む液体を含む点が理解されるべきである。更に、溶媒投入部２１０は、単一溶媒、溶媒の混合物、又は溶媒投入部２１０において混合される複数の異なる溶媒を含むことができる点が理解されるべきである。単一の溶媒容器として描かれているが、溶媒投入部２１０は複数の別個の溶媒容器を含むことができる。使用することができる溶媒の種類の実施形態は、上記のとおりである。
【０１２６】
ミキサー２２０は、液体投入部２０５からの液体及び溶媒投入部２１０からの溶媒を混合して、液体−溶媒混合物を生成する。実施形態において、ミキサー２２０は、複数のバッチ、例えば、１、２、３、又はそれ以上のバッチで、投入した液体及び投入した溶媒の振とう容器（ｓｈａｋｅｒ  ｂａｇ）混合法を用いることができる。ミキサーの一例は、Ｂａｒｎｓｔｅａｄ  Ｌａｂｌｉｎｅオービタル振とう盤である。代替の実施形態では、他の既知の混合方法を用いる。液体−溶媒混合物は、一旦生成さると、チューブを通じて、少なくとも１つの弁２１５ａにより制御されて、分離器２２５に送達される。１つの実施形態において、分離器２２５は、漏斗型容器（ｆｕｎｎｅｌ  ｓｈａｐｅｄ  ｂａｇ）中で重力分離により大量の溶媒分離を行うことができる。
【０１２７】
分離器２２５において、液体−溶媒混合物を第一層及び第二層に分離する。第一層は、溶媒と、ＨＤＬ粒子から除去された脂質との混合物を含む。第一層は、弁２１５ｂにより第一の廃棄容器２３５へと輸送される。第二層は、残りの溶媒と、変性ＨＤＬ粒子と、投入した液体のその他の要素の混合物を含む。第一層及び第二層の組成は、投入された液体の性質に基づいて異なることを当業者は理解するであろう。第一及び第二層が分離器２２５において一旦分離すると、第二層は、チューブを通じて溶媒抽出装置２４０に輸送される。１つの実施形態において、圧力センサー２２９及び弁２３０は、液体の流れ中に配置されて、溶媒抽出装置２４０への第二層の流れを制御する。
【０１２８】
投入容器２０５、２１０からの液体の流れを可能にするための弁２１５、２１６の開閉は、液体投入容器２０５、２１０及び分離器２２５の重量決定から得られる質量平衡計算を用いて時間調整される。例えば、分離器２２５と第一の廃棄容器２３５との間の弁２１５ｂ、及び分離器２２５と溶媒抽出装置２４０との間の弁２３０は、投入された質量（液体及び溶媒）が分離器２２５中の質量と実質的に平衡し、且つ第一及び第二層間の分離を可能にするに十分な時間が経過した後に開く。どのような溶媒を用いるかによって、従って、どの層が分離器２２５の底に沈殿するかに応じて、分離器２２５と第一の廃棄容器２３５との間の弁２１５ｂが開放されるか、又は分離器２２５と溶媒抽出装置との間の弁２３０が開放される。当業者は、開放のタイミングは、どれだけの量の液体が第一及び第二層中に存在するかに依存することを理解し、更に、第一層の全て及び第二層のいくらかを除去するのにちょうど十分な長さの時間、分離器２２５と第一の廃棄容器２３５との間の弁２１５ｂを開けたままにしておき、それにより溶媒抽出装置２４０に送られる液体からできるだけ多くの溶媒が除去されることを保証するのが好ましいことを理解するであろう。
【０１２９】
実施形態において、点滴等級液体（ＩＧＦ：ｉｎｆｕｓｉｏｎ  ｇｒａｄｅ  ｆｌｕｉｄ）を、分離器２２５から溶媒抽出装置２４０に繋がる流路２２１とプライミングのために流体接続している１つ又は複数の投入部２６０を通じて、用いてもよい。１つの実施形態において、生理食塩水を、少なくとも１つの投入部２６０で点滴等級プライミング液体として用いる。１つの実施形態において、０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）を用いる。他の実施形態では、投入部２６０のいずれか１つにおいて点滴等級プライミング液体としてグルコースを用いてもよい。
【０１３０】
また、複数の弁２１５ｃ及び２１５ｄを、グルコース投入部２５５及び生理食塩水投入部２６０それぞれから、分離器２２５から溶媒抽出装置２４０への流路２２１となっているチューブまでの流れ中に組み込む。生理食塩水及び／又はグルコース等のＩＧＦは、システムの操作前に溶媒抽出装置２４０をプライミングするために、本明細書の実施形態に組み込まれる。実施形態において、生理食塩水を用いて液体連結ラインの大部分及び溶媒抽出装置２４０をプライミングする。プライミングが必要ない場合、ＩＧＦ投入は使用しない。このようなプライミングが必要ない場合、グルコース及び生理食塩水の投入は必要ない。また、グルコース及び生理食塩水の投入は、溶媒抽出装置２４０がそれを要する場合には、他のプライミング剤（ｐｒｉｍｅｒ）と置き換えることができることを、当業者は理解するであろう。
【０１３１】
いくつかの実施形態において、溶媒抽出装置２４０は、溶媒投入部２１０に用いられる特定の溶媒を除去するよう意図された木炭カラムである。例示的な溶媒抽出装置２４０は、Ａｓａｈｉ  Ｈｅｍｏｓｏｒｂｅｒ木炭カラム、又はＢａｚｔｅｒ／Ｇａｍｂｒｏ  Ａｄｓｏｒｂａ  ３００Ｃ木炭カラム、又は血液ヘモグロビンかん流手順で用いられる他の木炭カラムである。ポンプ２５０を用いて、分離器２２５から溶媒抽出装置２４０を通じて生成物容器２４５に第二層を移動させる。実施形態において、ポンプ２５０は、回転蠕動ポンプ、例えば、Ｍａｓｔｅｒｆｌｅｘモデル７７２０１−６２である。
【０１３２】
第一層は、チューブ及び少なくとも１つの弁２１５ｂにより分離器２２５と流体接続される廃棄容器２３５に送達される。更に、他の廃液は、生成される場合、溶媒抽出装置２４０と生成物容器２４５とを連結する流路から第二の廃棄容器２５５に送達することができる。１つの実施形態において、任意で、弁２１５ｆを、溶媒抽出装置２４０から生成物容器２４５への流路中に含む。１つの実施形態において、任意で、弁２１５ｇを、溶媒抽出装置２４０から第二の廃棄容器２５５への流路中に含む。
【０１３３】
本明細書の１つの実施形態において、実用的な場所であれば、重力を用い、複数の構成要素の各々を通じて液体を移動する。例えば、重力を用いて、投入された血漿２０５及び投入された溶媒２１０をミキサー２２０に排液する。ミキサー２２０が振とう容器を含み、且つ分離器２２５が漏斗容器を含む場合、液体は振とう容器から漏斗容器に、次いで、適切な場合には重力を用いて廃棄容器２３５に移動する。
【０１３４】
図２に示されていない更なる実施形態において、生成物容器２４５中の生成した液体は、溶媒検出システム又は脂質除去剤検出システムに通され、任意の溶媒又は他の望ましくない構成成分が、生成した液体中に存在するか否かが特定される。実施形態では、連続フローシステムにおいて溶媒センサーのみを用いる。１つの実施形態において、生成した液体は、溶媒投入部で導入される溶媒、例えば、ｎ−ブタノール又はジイソプロピルエーテルの濃度を決定することが可能なセンサーに通される。生成した液体が患者の血流に戻され、この操作を安全に実行するためには溶媒濃度が所定のレベルを下回らなければならない。実施形態において、センサーは、このような濃度情報を、生成した液体又はヘッドスペース中の空気のサンプルを遠隔装置に物理的に輸送する必要なく、実時間ベースで提供することができる。次に、得られた分離された変性ＨＤＬ粒子を、患者の血流に導入する。
【０１３５】
１つの実施形態において、分子インプリントポリマー技術を用いて、表面音波センサーを作動させる。表面音波センサーは、その表面と周囲環境との相互作用により、入力を受信し、センサー基板の圧電性により生成される電気的応答を生じる。相互作用を可能にするために、分子インプリントポリマー技術を用いる。分子インプリントポリマーは、複雑な生体試料中の標的分子、例えば、薬剤、毒素、又は環境汚染物質を認識するようプログラムされたプラスチックである。分子インプリント技術は、認識されるべき標的分子、即ち、標的の溶媒と同様の構造を示す標的鋳型分子の存在下で、過剰量の架橋モノマーと１つ又は複数の機能性モノマーとを重合させることにより可能となる。
【０１３６】
表面音波センサーを使用可能にするための分子インプリントポリマー技術の使用は、標的化溶媒の濃度に対してより特異化され、且つ他の考え得る妨害物からこのような標的溶媒を区別することができる。その結果、標的溶媒と同様の構造及び／又は特性を有していてもよい許容可能な妨害物の存在は、存在するそれぞれの溶媒濃度をセンサーが正確に報告するのを妨げない。
【０１３７】
或いは、投入した溶媒がある種の溶媒、例えば、ｎ−ブタノールを含む場合、電気化学的酸化を用いて溶媒濃度を測定することができる。電気化学的測定は、いくつかの利点を有する。それらは、簡単で、精密で、迅速であり、且つ広いダイナミックレンジを有する。計測は簡単で、湿度の影響を受けない。１つの実施形態において、標的溶媒、例えば、ｎ−ブタノールは、サイクリック・ボルタンメトリーを用いてプラチナ電極上で酸化される。この技法は、電流を監視しながら、正逆両方向の作動電極で所定の走査速度で加電圧を変更することを基礎とする。１回の全サイクル、部分サイクル、又は一連のサイクルを実施することができる。プラチナは好ましい電極物質であるが、他の電極、例えば、金、銀、イリジウム、又は黒鉛等を用いることができる。サイクリック・ボルタンメトリー法が用いられるが、他のパルス技法、例えば、示差パルスボルタンメトリー又は矩形波ボルタンメトリーは、測定の速度及び感度を増大する。
【０１３８】
本明細書の実施形態は、生成した液体又は生成した液体より上のヘッドスペースを自動的にサンプリングし、測定し、検出し、分析する任意の及び全ての形態を明白に網羅する。例えば、このような自動検出は、生成物容器中の空気を自動的にサンプリングし、脱脂プロセスで用いられる特定の溶媒に関して最適化されたＧＣ装置にそれを送り、既知のＧＣ技法を用いて溶媒の存在について試料を分析するミニガスクロマトグラフィー（ＧＣ）測定装置を組み込むことにより達成することができる。
【０１３９】
図２に戻って参照すると、本明細書中に記載されるような装置構成要素のいずれにも用いられる適切な物質としては、体内液との接触を含む医学用途に関して認可され、Ｕ．Ｓ．ＰＶ１又はＩＳＯ  １０９９３基準に従った生物適合性の物質が挙げられる。更に、当該物質は、例えば、少なくとも一度の使用中に、本明細書で用いられる溶媒への曝露により実質的に分解されない。当該物質は、放射線又は酸化エチレン（ＥｔＯ）滅菌により、滅菌される。このような適切な物質は、慣用的手順、例えば、これらに限定されないが、押出成形、射出成形等を用いて、目的物に成形することができる。これらの要件を満たす物質としては、これらに限定されないが、ナイロン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、アクリル、ポリスルホン、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、フルオロエラストマー、例えば、ＶＩＴＯＮ（ＤｕＰｏｎｔ  Ｄｏｗ  Ｅｌａｓｔｏｍｅｒｓ  Ｌ．Ｌ．Ｃ．から入手可能）、熱可塑性エラストマー、例えば、ＳＡＮＴＯＰＲＥＮＥ（Ｍｏｎｓａｎｔｏから入手可能）、ポリウレタン、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、ポリフェニレンエーテル（ＰＦＥ）、パーフルオロアルコキシコポリマー（ＰＦＡ）（ＴＥＦＬＯＮ  ＰＦＡとしてＥ．Ｉ．ｄｕ  Ｐｏｎｔ  ｄｅ  Ｎｅｍｏｕｒｓ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙから入手可能）、及びそれらの組合せ等が挙げられる。
【０１４０】
各実施形態で用いられる弁２１５、２１５ａ、２１５ｂ、２１５ｃ、２１５ｄ、２１５ｅ、２１５ｆ、２１５ｇ、２１６、及び他の弁は、これらに限定されないが、ピンチ、グローブ、ボール、ゲート、又はその他の慣用的な弁で構成されていてもよい。いくつかの実施形態において、弁は、閉鎖弁、例えば、Ａｃｒｏ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓのモデル９５５弁である。しかしながら、本明細書は、特定の様式を有する弁に限定されない。更に、本明細書の実施形態に従って記載される各システムの構成要素は、物理的に結合されるか、可撓性又は剛性のパイプで構成される導管、チューブ、又は当業者に既知のその他のこのような器具を用いて結合される。
【０１４１】
図３は、本明細書に開示する手順を達成するために本明細書のいくつかの実施形態に従って使用されるシステムの例示的な構成を示す。図３を参照すると、ＨＤＬ変性システム３００の基本構成要素の配置が示されている。液体投入部３０５が提供され、チューブを介してミキサー３２０に接続される。溶媒投入部３１０が提供され、これもチューブを介してミキサー３２０に接続される。好ましくは、弁３１６を用いて、液体投入部３０５からの液体及び溶媒投入部３１０からの溶媒の流れを制御する。液体投入部３０５は、好ましくは、上記のように、ＨＤＬ粒子を含み、ＬＤＬ粒子を有するか又はＬＤＬ粒子を欠く血漿を含む任意の液体を含むことが理解されるべきである。溶媒投入部３１０は、単一溶媒、溶媒の混合物、又は溶媒投入部３１０において混合される複数の異なる溶媒を含むことができる点が更に理解されるべきである。単一の溶媒容器として描かれているが、溶媒投入部３１０は複数の別個の溶媒容器を含むことができる。用いられる好ましい溶媒の種類は、上記されている。
【０１４２】
ミキサー３２０は、液体投入部３０５からの液体及び溶媒投入部３１０からの溶媒を混合して、液体−溶媒混合物を生成する。好ましくは、ミキサー３２０は、複数のバッチ、例えば、１、２、３、又はそれ以上のバッチで、投入した液体と投入した溶媒の振とう容器混合法を用いることができる。液体−溶媒混合物は、一旦生成さると、チューブを通じて、少なくとも１つの弁３２１により制御されて、分離器３２５に送達される。好ましい実施形態では、分離器３２５は、漏斗型容器中で重力分離により大量の溶媒分離を行うことができる。
【０１４３】
分離器３２５において、液体−溶媒混合物を第一層及び第二層に分離する。第一層は、溶媒と、ＨＤＬ粒子から除去された脂質との混合物を含む。第二層は、残りの溶媒と、変性ＨＤＬ粒子と、投入した液体のその他の要素の混合物を含む。第一層及び第二層の組成は、投入された液体の性質に基づいて異なることを当業者は理解するであろう。第一及び第二層が分離器３２５において一旦分離すると、第二層は、チューブを通じて溶媒抽出装置３４０に輸送される。好ましくは、圧力センサー３２６及び弁３２７は、液体の流れ中に配置されて、溶媒抽出装置３４０への第二層の流れを制御する。
【０１４４】
好ましくは、グルコース投入部３３０及び生理食塩水投入部３５０は、分離器３２５から溶媒抽出装置３４０に繋がる流路と流体接続されている。複数の弁３３１も、好ましくは、グルコース投入部３３０及び生理食塩水投入部３５０から、分離器３２５から溶媒抽出装置３４０への流路となっているチューブまでの液体の流れ中に組み込む。システムの操作前に溶媒抽出装置３４０をプライミングするために、グルコース及び生理食塩水が本明細書に組み込まれる。このようなプライミングが必要ない場合、グルコース及び生理食塩水の投入は必要ない。また、グルコース及び生理食塩水投入は、溶媒抽出装置３４０がそれを要する場合には、他のプライミング剤と置き換えることができることを、当業者は理解するであろう。
【０１４５】
溶媒抽出装置３４０は、好ましくは、溶媒投入部３１０に用いられる特定の溶媒を除去するよう意図された木炭カラムである。例示的な溶媒抽出装置３４０は、Ａｓａｈｉ  Ｈｅｍｏｓｏｒｂｅｒ木炭カラムである。ポンプ３３５を用いて、分離器３２５から溶媒抽出装置３４０を通って生成物容器３１５に第二層を移動する。ポンプは、好ましくは、蠕動ポンプ、例えば、Ｍａｓｔｅｒｆｌｅｘモデル７７２０１−６２である。
【０１４６】
第一層は、チューブ及び少なくとも１つの弁３５６により分離器３２５と流体接続される廃棄容器３５５に送達される。更に、他の廃液は、生成される場合、溶媒抽出装置３４０と生成物容器３１５とを連結する流路から廃棄容器３５５に送達することができる。
【０１４７】
好ましくは、本明細書の実施形態は、実用的な場所であれば、重力を用い、複数の構成要素の各々を通じて液体を移動する。例えば、好ましくは、重力を用いて、投入された血漿３０５及び投入された溶媒３１０をミキサー３２０に排液する。ミキサー３２０が振とう容器を含み、且つ分離器３２５が漏斗容器を含む場合、液体は振とう容器から漏斗容器に、次いで、適切な場合には重力を用いて廃液容器３５５に移動する。
【０１４８】
一般に、本明細書は、好ましくは、全ての投入物、例えば、投入された血漿及び投入された溶媒、使い捨て要素、例えば、混合容器、分離器容器、廃棄容器、溶媒抽出装置、及び溶媒検出装置、並びに生成物容器等が、技術者により容易に利用可能な位置にあり、且つ容易に取り外され、取り替えることができる構成を含む。
【０１４９】
本明細書の上記の実施形態の操作を可能にするためには、本明細書の実施形態を実施するために必要とされる各構成要素を含むキットの形態で包装された構成要素のセットを、このような実施形態のユーザーに供給するのが好ましい。当該キットは、投入液体用容器（即ち、高密度リポタンパク質源用容器）、脂質除去剤供給用容器（即ち、溶媒容器）、ミキサーの使い捨て構成要素、例えば、バッグ（ｂａｇ）又はその他の容器、分離器の使い捨て構成要素、例えば、バッグ又はその他の容器、溶媒抽出装置（即ち、木炭カラム）の使い捨て構成要素、生成物容器、廃棄容器の使い捨て構成要素、例えば、バッグ又はその他の容器、溶媒検出装置、並びに、投入容器からの投入液体（高密度リポタンパク質）及び溶媒容器からの脂質除去剤（溶媒）のミキサーへの流れを制御するための、脂質除去剤、脂質、及び粒子誘導体の混合物の分離器への流れを制御するための、脂質及び脂質除去剤の廃棄容器への流れを制御するための、残存する脂質除去剤、残存する脂質、及び粒子誘導体の抽出装置への流れを制御するための、及び粒子誘導体の生成物容器への流れを制御するための、複数のチューブ及び複数の弁を含む。
【０１５０】
１つの実施形態において、キットは、ミキサーの使い捨て構成要素、例えば、バッグ又はその他の容器、分離器の使い捨て構成要素、例えば、バッグ又はその他の容器、廃棄容器の使い捨て構成要素、例えば、バッグ又はその他の容器、並びに、投入容器からの投入液体（高密度リポタンパク質）及び溶媒容器からの脂質除去剤（溶媒）のミキサーへの流れを制御するための、脂質除去剤、脂質、及び粒子誘導体の混合物の分離器への流れを制御するための、脂質及び脂質除去剤の廃棄容器への流れを制御するための、残存する脂質除去剤、残存する脂質、及び粒子誘導体の抽出装置への流れを制御するための、及び粒子誘導体の生成物容器への流れを制御するための、複数のチューブ及び複数の弁を有するプラスチック容器を含む。溶媒抽出装置（即ち木炭カラム）の使い捨て構成要素、投入する液体、投入する溶媒、及び溶媒抽出装置は、別々に提供される。
【０１５１】
上記の実施例は、本発明のシステムの多くの応用の例示に過ぎない。本明細書では本発明のごく僅かな実施形態について説明してきたが、本発明は、本発明の趣旨又は範囲から逸脱することなく、他の多くの特定の形態で具体化されるであろうことが理解されるべきである。従って、本実施例及び実施形態は例示であり、限定するものではないと見なされるべきであり、本発明は添付の請求項の範囲内で変更されてもよい。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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