(57)【要約】本発明は、収穫後の損傷又は腐敗を軽減するため、収穫農産物に適用することができる新たな収穫後処理の方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護するため、植物病原菌により引き起こされる収穫産物の収穫後腐敗を防止もしくは軽減するため、又は収穫産物上の植物病原菌を制御するために、無処理コントロールと比べて、植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護し、植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗を軽減し、又は貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延長するのに効果的な量のクロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与することを含む収穫後処理の方法。
【請求項２】
前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含む、請求項１に記載の収穫後処理の方法。
【請求項３】
前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与した後、前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵することをさらに含む、請求項１に記載の収穫後処理の方法。
【請求項４】
前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含む、請求項３に記載の収穫後処理の方法。
【請求項５】
前記クロノスタキス・ロゼアがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータである、請求項１から４のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項６】
前記クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６である、請求項５に記載の収穫後処理の方法。
【請求項７】
前記収穫産物が果実又は野菜である、請求項１から６のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項８】
前記収穫産物が果実である、請求項７に記載の収穫後処理の方法。
【請求項９】
前記果実が核果又は柑橘類果実である、請求項８に記載の収穫後処理の方法。
【請求項１０】
前記核果がモモ、ネクタリン、プラム、アンズ、又はサクランボである、請求項９に記載の収穫後処理の方法。
【請求項１１】
前記柑橘類果実がクレメンタイン、グレープフルーツ、レモン、ライム、マンダリン、オレンジ、又はタンジェリンである、請求項９に記載の収穫後処理の方法。
【請求項１２】
前記収穫産物の収穫後腐敗が、ペニシリウム属種、アルテルナリア属種、リゾプス属種、ボトリチス属種、モニリニア属種、又はそれらの組合せにより引き起こされる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項１３】
前記収穫産物の収穫後腐敗が、ペニシリウム属種又はモニリニア属種により引き起こされる、請求項１２に記載の収穫後処理の方法。
【請求項１４】
前記核果の収穫後腐敗が、モニリニア属種により引き起こされる、請求項１３に記載の収穫後処理の方法。
【請求項１５】
前記柑橘類果実の収穫後腐敗が、ペニシリウム属種により引き起こされる、請求項１３に記載の収穫後処理の方法。
【請求項１６】
前記柑橘類果実の収穫後腐敗が、ペニシリウム・ディギタータム又はペニシリウム・イタリカムにより引き起こされる、請求項１５に記載の収穫後処理の方法。
【請求項１７】
前記クロノスタキス・ロゼアの培養物、真菌胞子、又は配合物に、農業上許容されるキャリアが結合された、請求項１から１６のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項１８】
前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｍｌ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｍｌ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｍｌ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｍｌの濃度で施与される、請求項１から１７のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項１９】
前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は乾燥配合物であり、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｇ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｇ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｇ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｇの濃度で施与される、請求項１から１７のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項２０】
モニリニア属種により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護するため、モニリニア属種により引き起こされる収穫産物の収穫後腐敗を防止もしくは軽減するため、又は収穫産物上のモニリニア属種を制御するために、無処理コントロールと比べて、モニリニア属種により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護し、モニリニア属種により引き起こされる収穫後腐敗を軽減し、又は貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延長するのに効果的な量のクロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与することを含む収穫後処理の方法。
【請求項２１】
前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含む、請求項２０に記載の収穫後処理の方法。
【請求項２２】
前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与した後、前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵することをさらに含む、請求項２０に記載の収穫後処理の方法。
【請求項２３】
前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含む、請求項２２に記載の収穫後処理の方法。
【請求項２４】
前記クロノスタキス・ロゼアがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータである、請求項２０から２３のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項２５】
前記クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６である、請求項２４に記載した収穫後処理の方法。
【請求項２６】
前記収穫産物が果実又は野菜である、請求項２０から２５のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項２７】
前記収穫産物が果実である、請求項２５に記載の収穫後処理の方法。
【請求項２８】
前記果実が核果である、請求項２７に記載の収穫後処理の方法。
【請求項２９】
前記核果がモモ、ネクタリン、プラム、アンズ、又はサクランボである、請求項２８に記載した収穫後処理の方法。
【請求項３０】
前記クロノスタキス・ロゼアの培養物、真菌胞子、又は配合物に、農業上許容されるキャリアが結合された、請求項２０から２９のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項３１】
前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｍｌ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｍｌ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｍｌ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｍｌの濃度で施与される、請求項２０から３０のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項３２】
前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は乾燥配合物であり、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｇ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｇ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｇ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｇの濃度で施与される、請求項２０から３０のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項３３】
ペニシリウム属種により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護するため、ペニシリウム属種により引き起こされる収穫産物の収穫後腐敗を防止もしくは軽減するため、又は収穫産物上のペニシリウム属種を制御するために、無処理コントロールと比べて、ペニシリウム属種により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護し、ペニシリウム属種により引き起こされる収穫後腐敗を軽減し、又は貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延長するのに効果的な量のクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を、収穫産物に施与することを含む収穫後処理の方法。
【請求項３４】
前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を、収穫産物に施与した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含む、請求項３３に記載の収穫後処理の方法。
【請求項３５】
前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を、収穫産物に施与した後、前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵することをさらに含む、請求項３３に記載の収穫後処理の方法。
【請求項３６】
前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵した後、前記収穫産物を室温条件で貯蔵することをさらに含む、請求項３５に記載の収穫後処理の方法。
【請求項３７】
前記クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６である、請求項３３から３６のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項３８】
前記収穫産物が果実である、請求項３７に記載の収穫後処理の方法。
【請求項３９】
前記果実が柑橘類果実である、請求項３８に記載の収穫後処理の方法。
【請求項４０】
前記柑橘類果実がクレメンタイン、グレープフルーツ、レモン、ライム、マンダリン、オレンジ、又はタンジェリンである、請求項３９に記載の収穫後処理の方法。
【請求項４１】
前記クロノスタキス・ロゼアの培養物、真菌胞子、又は配合物に、農業上許容されるキャリアが結合された、請求項３３から４０のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項４２】
前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｍｌ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｍｌ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｍｌ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｍｌの濃度で施与される、請求項３３から４１のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項４３】
前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は乾燥配合物であり、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｇ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｇ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｇ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｇの濃度で施与される、請求項３３から４１のいずれか１項に記載の収穫後処理の方法。
【請求項４４】
無処理コントロールと比べて、植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護し、植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗を軽減し、又は貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延長するのに効果的な量のクロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物の使用。
【請求項４５】
前記クロノスタキス・ロゼアがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータである、請求項４４の使用。
【請求項４６】
前記クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６である、請求項４５の使用。
【請求項４７】
前記収穫産物が果実である、請求項４４から４６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４８】
前記果実が核果又は柑橘類果実である、請求項４７の使用。
【請求項４９】
前記核果がモモ、ネクタリン、プラム、アンズ、又はサクランボである、請求項４８の使用。
【請求項５０】
前記柑橘類果実がクレメンタイン、グレープフルーツ、レモン、ライム、マンダリン、オレンジ、又はタンジェリンである、請求項４９の使用。
【請求項５１】
前記収穫産物の収穫後腐敗が、ペニシリウム属種、アルテルナリア属種、リゾプス属種、ボトリチス属種、モニリニア属種、又はそれらの組合せにより引き起こされる、請求項４４から５０の使用。
【請求項５２】
前記収穫産物の収穫後腐敗が、ペニシリウム属種又はモニリニア属種により引き起こされる、請求項５１の使用。
【請求項５３】
前記核果の収穫後腐敗が、モニリニア属種により引き起こされる、請求項５１の使用。
【請求項５４】
前記柑橘類果実の収穫後腐敗が、ペニシリウム属種により引き起こされる、請求項５１の使用。
【請求項５５】
前記柑橘類果実の収穫後腐敗が、ペニシリウム・ディギタータム又はペニシリウム・イタリカムにより引き起こされる、請求項５４の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物病原菌から収穫産物を保護するため、収穫産物の収穫後の微生物腐敗を防止もしくは軽減するため、及び／又は収穫産物における生物学的侵襲を制御又は抑制するための収穫後処理の方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
植物病原菌は、作物収量に対して大きな制約となる。畑の農作物の生長を損なうことに加えて、いくつかの植物病原菌はまた、収穫産物上に持ち越し汚染をし、これは貯蔵中の産物の重大な損傷及び腐敗をもたらしうる。実際、収穫後の病原菌の大部分は、収穫中又はそれに続く処理中に生じる傷を通じて作物を汚染する。作物の貯蔵中の収穫後の損失は、例えば、水分の喪失、葉の老化、再生長及び腐敗によって引き起こされ、後者は真菌及び細菌の病原菌により引き起こされる。世界の作物の約２５％が収穫後の病害（例えば、微生物腐敗）により失われていると見積もられており、そのうち真菌による腐敗は圧倒的に最も重要な原因である。
【０００３】
いくつかの合成化学化合物は、収穫産物の収穫後の損害を防ぐために使用できることが知られている。しかしながら、既知のとおり、殺虫剤はヒト及び環境に対し危険な効果をもたらす。とりわけ殺虫剤の収穫後の使用に対しては、厳しい規制が課せられている。化学製品の使用は、それらのヒトの健康及び環境に対する有害効果により減少しているため、合成化学残留物がない果実の生産は、収穫後の損失を少なくするための代わりの収穫後処理を見出すための原動力になっている。
【０００４】
リンゴ、アンズ、サクランボ、柑橘類、ブドウ、ネクタリン、モモ、ナシ、トウガラシ、プラム、ジャガイモ、イチゴ、及びトマトを含む各種の貯蔵野菜及び果実に対し、枯草菌、シュードモナス・セパシア、シュードモナス・シリンガエ、シュードモナス・フルオレッセンス、エンテロバクター・アエロゲネス、エンテロバクター・クロアカ及びデバリオマイセス・ハンセニイのような微生物アンタゴニストによる収穫後の真菌病原菌の生物学的制御について記されている（Wilson & Wisniewski,  1989）。したがって、拮抗微生物の使用は、とりわけ収穫産物の主要な収穫後の腐敗を制御するため、有効で、危険ではない対策として提案されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
このように、貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延ばすために、収穫産物上の植物病原菌の成長を防止、遅延、抑制又は制御する新規で代替の生物学的収穫後処理の方法を開発する必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延ばす又は増やすために、真菌クロノスタキス・ロゼア（Clonostachys rosea）の使用に関する。本発明は、収穫後の損傷又は腐敗を減らすための収穫農産物に適用しうる収穫後処理の方法に関する。
【０００７】
第１の態様においては、本発明は、植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護するため、植物病原菌により引き起こされる収穫産物の収穫後腐敗を防止もしくは軽減するため、又は収穫産物上の植物病原菌を制御するために、無処理コントロールと比べて、植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護し、植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗を軽減し、又は貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延長するのに効果的な量のクロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与することを含む収穫後処理の方法である。１つの実施態様においては、前記収穫後処理の方法は、前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含むことができる。さらに他の実施態様においては、前記収穫後処理の方法は、前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与した後、前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵することをさらに含むことができる。さらに他の実施態様においては、前記収穫後処理の方法は、前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含むことができる。１つの実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータであり、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６でありうる。さらなる実施態様においては、前記収穫産物は果実又は野菜である。さらに他の実施態様においては、前記収穫産物は果実である。１つの実施態様においては、前記果実は核果又は柑橘類果実である。前記核果はモモ、ネクタリン、プラム、アンズ、又はサクランボでありうる。前記柑橘類果実はクレメンタイン、グレープフルーツ、レモン、ライム、マンダリン、オレンジ、又はタンジェリンでありうる。１つの実施態様においては、前記収穫産物の収穫後腐敗は、ペニシリウム属種、アルテルナリア属種、リゾプス属種、ボトリチス属種、モニリニア属種、又はそれらの組合せにより引き起こされる。さらに他の実施態様においては、前記収穫産物の収穫後腐敗はペニシリウム属種又はモニリニア属種により引き起こされる。さらに他の実施態様においては、前記核果の収穫後腐敗は、モニリニア属種により引き起こされ、前記柑橘類果実の収穫後腐敗は、ペニシリウム属種により引き起こされる。１つの実施態様においては、前記柑橘類果実の収穫後腐敗が、ペニシリウム・ディギタータム又はペニシリウム・イタリカムにより引き起こされる。さらなる実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物、真菌胞子、又は配合物に、農業上許容されるキャリアが結合されうる。さらに他の実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｍｌ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｍｌ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｍｌ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｍｌの濃度で施与されうる。さらに他の実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は乾燥配合物であり、収穫産物に約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｇ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｇ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｇ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｇの濃度で施与される。
【０００８】
第２の態様においては、本発明は、モニリニア属種により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護するため、モニリニア属種により引き起こされる収穫産物の収穫後腐敗を防止もしくは軽減するため、又は収穫産物上のモニリニア属種を制御するために、無処理コントロールと比べて、モニリニア属種により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護し、モニリニア属種により引き起こされる収穫後腐敗を軽減し、又は貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延長するのに効果的な量のクロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与することを含む収穫後処理の方法である。１つの実施態様においては、前記収穫後処理の方法は、前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含むことができる。さらに他の実施態様においては、前記収穫後処理の方法は、前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与した後、前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵することをさらに含むことができる。さらに他の実施態様においては、前記収穫後処理の方法は、前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含むことができる。１つの実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアはクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータであり、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６でありうる。さらなる実施態様においては、前記収穫産物は果実又は野菜である。さらに他の実施態様においては、前記収穫産物は果実である。１つの実施態様においては、前記果実は核果であり、モモ、ネクタリン、プラム、アンズ、又はサクランボでありうる。さらなる実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物、真菌胞子、又は配合物に、農業上許容されるキャリアが結合されうる。さらに他の実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｍｌ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｍｌ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｍｌ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｍｌの濃度で施与されうる。さらに他の実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は乾燥配合物であり、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｇ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｇ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｇ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｇの濃度で施与される。
【０００９】
本発明は、第３の態様は、ペニシリウム属種により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護するため、ペニシリウム属種により引き起こされる収穫産物の収穫後腐敗を防止もしくは軽減するため、又は収穫産物上のペニシリウム属種を制御するために、無処理コントロールと比べて、ペニシリウム属種により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護し、ペニシリウム属種により引き起こされる収穫後腐敗を軽減し、又は貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延長するのに効果的な量のクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を、収穫産物に施与することを含む収穫後処理の方法である。１つの実施態様においては、前記収穫後処理の方法は、前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含むことができる。さらに他の実施態様においては、前記収穫後処理の方法は、前記クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を収穫産物に施与した後、前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵することをさらに含むことができる。さらに他の実施態様においては、前記収穫後処理の方法は、前記収穫産物を５℃未満の温度で貯蔵した後、前記収穫産物を周囲条件の温度で貯蔵することをさらに含むことができる。１つの実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアはクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータであり、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６でありうる。さらなる実施態様においては、前記収穫産物は果実又は野菜である。さらに他の実施態様においては、前記収穫産物は果実である。さらに他の実施態様においては、前記果実は柑橘類果実であり、クレメンタイン、グレープフルーツ、レモン、ライム、マンダリン、オレンジ、又はタンジェリンでありうる。さらなる実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物、真菌胞子、又は配合物に、農業上許容されるキャリアが結合されうる。さらに他の実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｍｌ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｍｌ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｍｌ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｍｌの濃度で施与されうる。さらに他の実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は乾燥配合物であり、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｇ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｇ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｇ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｇの濃度で施与される。
【００１０】
本発明は、第４の態様は、無処理コントロールと比べて、植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護し、植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗を軽減し、又は貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延長するのに効果的な量のクロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物の使用である。１つの実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアはクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータであり、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６でありうる。さらなる実施態様においては、前記収穫産物は果実又は野菜である。さらに他の実施態様においては、前記収穫産物は果実である。１つの実施態様においては、前記果実は核果又は柑橘類果実である。前記核果はモモ、ネクタリン、プラム、アンズ、又はサクランボでありうる。前記柑橘類果実はクレメンタイン、グレープフルーツ、レモン、ライム、マンダリン、オレンジ、又はタンジェリンでありうる。１つの実施態様においては、前記収穫産物の収穫後腐敗は、ペニシリウム属種、アルテルナリア属種、リゾプス属種、ボトリチス属種、モニリニア属種、又はそれらの組合せにより引き起こされる。さらに他の実施態様においては、前記収穫産物の収穫後腐敗は、ペニシリウム属種又はモニリニア属種により引き起こされる。さらに他の実施態様においては、前記核果の収穫産物の収穫後腐敗は、モニリニア属種により引き起こされ、前記柑橘類果実の収穫後腐敗は、ペニシリウム属種により引き起こされる。１つの実施態様においては、前記柑橘類果実の収穫後腐敗は、ペニシリウム・ディギタータム又はペニシリウム・イタリカムにより引き起こされる。さらなる実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物、真菌胞子、又は配合物に、農業上許容されるキャリアが結合されうる。さらに他の実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｍｌ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｍｌ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｍｌ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｍｌの濃度で施与されうる。さらに他の実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアの培養物は乾燥配合物であり、収穫産物に、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｇ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｇ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｇ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｇの濃度で施与される。
【００１１】
１つの実施態様においては、本発明は、クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を果実に施与することを含む、モニリニア属種により引き起こされる収穫後腐敗から果実を保護するための方法を提供する。さらなる実施態様においては、本発明は、クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を果実に施与することを含む、モニリニア属種により引き起こされる収穫後の果実の損傷又は腐敗を軽減するための方法を提供する。さらなる実施態様においては、本発明は、クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を果実に施与することを含む、モニリニア属種が感染した果実の収穫後の貯蔵寿命を延長するための方法を提供する。さらなる実施態様においては、前記果実は核果であり、モモ、ネクタリン、プラム、アンズ、又はサクランボでありうる。１つの実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータであり、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６でありうる。
【００１２】
１つの実施態様においては、本発明は、クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を果実に施与することを含む、ペニシリウム属種により引き起こされる収穫後腐敗から果実を保護するための方法を提供する。さらなる実施態様においては、本発明は、クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を果実に施与することを含む、ペニシリウム属種により引き起こされる収穫後の果実の損傷又は腐敗を軽減するための方法を提供する。さらなる実施態様においては、本発明は、クロノスタキス・ロゼアの単離培養物、真菌胞子、又は配合物を果実に施与することを含む、ペニシリウム属種が感染した果実の収穫後の貯蔵寿命を延長するための方法を提供する。さらなる実施態様においては、前記果実は柑橘類果実であり、クレメンタイン、グレープフルーツ、レモン、ライム、マンダリン、オレンジ、又はタンジェリンでありうる。１つの実施態様においては、前記クロノスタキス・ロゼアがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータであり、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６でありうる。１つの実施態様においては、ペニシリウム属種は、ペニシリウム・ディギタータム及びペニシリウム・イタリカムでありうる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
こうして本発明について一般的に述べたが、添付図面が参照され、図示により好ましい実施態様を示す。
【００１４】
【図１】図１は、収穫後貯蔵中に腐敗したモモの品種「Sandine」の割合を示し、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータで処理したモモとコントロールを比較する。
【図２】図２は、収穫後貯蔵中に腐敗したモモの品種「Western Red」の割合を示し、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータで処理したモモとコントロールを比較する。
【図３】図３は、アッセイのため収穫された、収穫後処理（水、Ｊ１４４６及び無処理コントロール）の適用前のモモの品種「Sandine」の損傷の原因である真菌の属の分布を示す。
【図４】図４は、アッセイのため収穫された、収穫後処理（水、Ｊ１４４６及び無処理コントロール）の適用前のモモの品種「Western Red」の損傷の原因である真菌の属の分布を示す。
【図５】図５は、２０〜２２℃で貯蔵中の腐敗したネクタリン（収穫後処理後の冷蔵なし）の累積率に対する異なる収穫後処理の方法の効果を示す。
【図６】図６は、２０〜２２℃で貯蔵中の腐敗したネクタリン（収穫後処理後の冷蔵あり）の累積率に対する異なる収穫後処理の方法の効果を示す。
【図７】図７は、アッセイのため収穫された、収穫後処理（Ｍ１からＭ７）の適用前のネクタリンの損傷の原因である真菌の属の分布を示す。
【図８】図８は、腐敗したプラム（収穫後処理後の冷蔵なし）の累積率に対する異なる収穫後処理の方法の効果を示す。
【図９】図９は、腐敗したプラム（収穫後処理後の冷蔵あり）の累積率に対する異なる収穫後処理の方法の効果を示す。
【図１０】図１０は、ペニシリウム・ディギタータムにより引き起こされた陽性病害症状をもつ、接種された創傷部の割合を示す。
【図１１】図１１は、ペニシリウム・イタリカムにより引き起こされた陽性病害症状をもつ、接種された創傷部の割合を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明は、植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護するために効果的な量のクロノスタキス・ロゼアの培養物を収穫産物に施与することを含む収穫後処理の方法を提供する。クロノスタキス・ロゼアは、広範囲に分布する、土壌伝播性の腐生菌である。この真菌は、各種の土壌伝播性及び葉状の植物病原菌に対する生物学的制御剤として知られる。真菌クロノスタキス・ロゼアは、収穫産物上の植物病原菌を防止、妨害又は抑制する特性を有し、その結果、収穫植物の収穫後処理に使用しうることを発見した。クロノスタキス・ロゼアは、植物病原菌との競合阻害を通じて収穫後の損傷、腐敗又は腐朽を軽減するために、農産物に施与しうることを示した。また、本発明は、貯蔵農産物の収穫後の貯蔵寿命を延長又は増加させるための、クロノスタキス・ロゼアの使用に関する。
【００１６】
ここで使用される「効果的な量」とは、有益な又は所望する結果をもたらすのに十分な量をいう。
【００１７】
本明細書の文脈においては、前記生物学的制御剤は、真菌クロノスタキス・ロゼアである。あらゆる種又は株のクロノスタキス・ロゼアを本開示方法において使用することができる。実際、多くのクロノスタキス・ロゼアの単離物は数種の植物病原真菌に対する非常に効率的なアンタゴニストである。生物学的制御剤クロノスタキス・ロゼアは、土壌に広く存在するアンタゴニスティックな植物病原真菌であり、一連の抗菌性代謝物を産生することができる。さらなる実施態様においては、クロノスタキス・ロゼアは、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータである。さらなる実施態様においては、該真菌はクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６である。この株はブダペスト条約に従い１９９４年５月１９日にＤＳＭ寄託機関に寄託されており、受託番号ＤＳＭ９２１２である。クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６は、PRESTOP（登録商標、Lallemand(Verdera, Finland)）として商業的に入手可能である。
【００１８】
本開示における真菌クロノスタキス・ロゼアは、任意の適切な公知方法を従い、液体懸濁液又は乾燥粉末として配合される。生物学的に純粋な培養物、懸濁液又は配合物（限定されないが分生子、菌糸断片及び胞子を含む）は、収穫産物に約１０３〜１０１２ｃｆｕ（「コロニー形成単位」）／ｇ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｇ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｇ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｇの濃度で施与される。クロノスタキス・ロゼアは、収穫産物に、液体懸濁液において約１×１０４、約１×１０５、約１×１０６、約１×１０７、約１×１０８、約１×１０９、約１×１０１０、約１×１０１１、約１×１０１２、約１×１０１３ｃｆｕ／ｍｌ又は１×１０１３ｃｆｕ／ｍｌより多い濃度で施与される。また、クロノスタキス・ロゼアは、収穫産物に、乾燥配合物（限定されないが分生子、菌糸断片及び胞子を含む）において約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｇ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｇ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｇ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｇの濃度で施与することができる。また、クロノスタキス・ロゼアは、収穫産物に、乾燥配合物において約１×１０４、約１×１０５、約１×１０６、約１×１０７、約１×１０８、約１×１０９、約１×１０１０、約１×１０１１、約１×１０１２、約１×１０１３ｃｆｕ／ｍｌ又は１×１０１３ｃｆｕ／ｇより多い濃度で施与することができる。最適な量は、作物種及び植物病原菌に応じて変更することができ、当業者によって容易に決定することができる。
【００１９】
本開示に係る真菌の培養物、懸濁液又は配合物は、熟練した当業者に知られている任意の手段で収穫産物に接触させることにより施与することができる。ここに使用される用語「接触させる」とは、本開示に係る外因性の組成物の液体又は固体（粉末等）の形態と収穫産物を近接させることを意味する。このような方法の例には、限定されないが、ディッピング、浸漬、スプレー、噴霧（ミスティング）、フォギング、コーティング、ダスティング又はソーキングの施与方法が含まれる。施与の形態及び方法は、収穫産物上への生物学的制御剤の最良で均一な分布を確実にするため、意図する目的によって完全に決まる。水を含む施与形態は、乳剤、水添加したペースト又は水和剤から調製することができる。また生物学的制御剤、湿潤剤、粘着剤、分散剤又は乳化剤及び可能ならば溶剤及び油で構成される濃縮物を調製することも可能であり、このような濃縮物は水で希釈するのに適している。本開示に係る真菌の培養物、懸濁液又は配合物は、収穫産物に、単回又は複数回の暴露として、又は異なる時期の暴露として施与される。
【００２０】
本開示における真菌のアンタゴニストは、室温条件で貯蔵された（±２０℃）、収穫産物に対して、例えば、果実に対して効果的である。本開示の真菌のアンタゴニストは、５℃未満の温度で貯蔵された収穫産物に対しても使用することができる。真菌は理論的には収穫、格付け、出荷の工程の間、又は貯蔵の初期段階の間のいつでも施与することができる。もちろん、収穫した果実又は野菜は、傷が生じ、及び真菌病原体が存在するときは、より感染しやすい。それゆえ、損傷と真菌組成物での処理の間の遅延が長くなるほど、病原菌が収穫産物を感染する可能性が大きくなる。
【００２１】
真菌の培養物、懸濁液又は配合物は、収穫後、収穫産物の表面に、任意の公知の農業上許容されるアジュバント、キャリア又はバインダーの製剤とともに施与することができる。農業上許容されるアジュバント、キャリア又はバインダーは、商業的に入手可能であり、ヒトの消費に対し安全でなければならない。微生物も液体培養培地とともに懸濁液で施与することができる。また組成物は、微生物の有効性を高めるために、界面活性剤や湿潤剤等の慣用的な添加物を含むことができる。統合的なアプローチとして、収穫産物はまた、本開示の収穫後処理による収穫産物の処理前又は処理後に、当業者に一般に知られている他の抗真菌性及び／又は抗菌性の組成物と処理することができる。
【００２２】
本発明に係る収穫後処理は、果実（限定されないが、核果又はソフトフルーツ又は柑橘類果実等）、野菜、花又は堅果類等の各種の収穫産物上の真菌を制御するのに重要である。実際に、ここに使用される用語「収穫産物」は、果実、野菜、堅果類、切花等の植物に由来する全ての収穫物、作物を指す。さらなる実施態様においては、本発明の収穫後処理は、各種の収穫産物、例えば、限定されるものではないが、リンゴ、アンズ、バナナ、ブルーベリー、カンタロープ、ニンジン、クレメンタイン、サクランボ、クランベリー、キュウリ、エンダイブ、ガーリック、グレープフルーツ、カキ、キウイ、ブドウ、レモン、ライム、レタス、マンダリン、マンゴ、メロン、マッシュルーム、ナシ、ネクタリン、タマネギ、オレンジ、パパイヤ、モモ、セイヨウナシ、コショウ、パイナップル、プラム、プルーン、カボチャ、ラズベリー、イチゴ、タンジェリン、トマト又はスイカ等の植物病原菌を制御するのに特に重要である。１つの特定の実施態様においては、収穫産物は核果である。さらなる実施態様においては、核果はモモ、ネクタリン、プラム、アンズ、又はサクランボである。複数の態様においては、収穫産物は柑橘類果実であり、例えば、クレメンタイン、グレープフルーツ、レモン、ライム、マンダリン、オレンジ又はタンジェリンでありうる。
【００２３】
本発明の収穫後処理の方法は、植物病原菌を制御するのに適している。本発明の収穫後処理の方法は、真菌の植物病原菌を制御するのに適している。さらなる実施態様においては、本発明の収穫後処理の方法は、以下の真菌：コレトトリカム属種、フザリウム属種、アルテルナリア属種、ボトリチス属種、モニリニア属種（モニリア属種）、ラシオディプロディア属種、ホモプシス属種、ボトリオスフェリア属種、バーティシリウム属種、ゲオトリクム属種、フィトフトラ属種、セプトリア属種、ケカビ属種、ヴェンテュリア属種、リゾプス属種、グロメレラ属種、キンカクキン属種、セラトシスチス属種、ペニシリウム属種、グレオスポリウム属種、フィリクテナ属種、シリンドロカルポン属種、ステムフィリウム属種、ファシジオピクニス属種、チエラビオプシス属種、アスペルギルス属種、ネクトリア属種、又はそれらの組合せにより引き起こされる収穫後の損傷又は収穫後の腐敗を生物学的に制御又は軽減するのに適している。１つの特定の実施態様においては、本発明の収穫後処理の方法は、ペニシリウム属種、アルテルナリア属種、リゾプス属種、ボトリチス属種、モニリニア属種、又はそれらの組合せにより引き起こされる収穫後の損傷を制御、軽減又は減少するのに適している。さらなる実施態様においては、本発明の収穫後処理の方法は、モニリニア属種、より詳しくは、モニリニア・フルクチコラ又はモニリニア・ラクサにより引き起こされる収穫後の損傷又は収穫後の腐敗を制御、軽減又は減少するのに適している。より詳しくは、本発明の収穫後処理の方法は、モニリニア属種、例えば、モニリニア・フルクチコラ又はモニリニア・ラクサにより引き起こされる腐敗から核果を保護するために使用しうる。また本発明の収穫後処理の方法は、ペニシリウム属種、例えば、ペニシリウム・ディギタータム又はペニシリウム・イタリカムにより引き起こされる収穫後の損傷又は収穫後の腐敗を制御、軽減又は減少するのに使用しうる。１つの実施態様においては、本発明の収穫後処理の方法は、例えば、ペニシリウム・イタリカム又はペニシリウム・ディギタータムにより引き起こされる腐敗から柑橘類果実を保護するために使用しうる。
【００２４】
以下の実施例は、本発明についてさらに記載し、規定するのに役立つが、本発明をいかなる形でも限定するものではない。
【実施例】
【００２５】
実施例１：モモの収穫後の病害に対するクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータの有効性
この研究の目的は、収穫後のモモの病害の管理、収穫したモモの収穫後の腐敗防止、及び収穫したモモの収穫後の損失軽減に対する、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータの効果を評価することである。
【００２６】
果実：
モモ（「Sandine」及び「Western Red」）を商業果樹園（Integrated Fruit Production（IFP）を使用）から硬くて熟したステージで摘み取り、４℃で２日以内貯蔵した。
【００２７】
アンタゴニスト／生物学的制御剤：
ペトリ皿内のＰＤＡ（ポテト デキストロース 寒天）に、約１０６〜１０７ｃｆｕ／ｍｌ含む一滴の胞子懸濁液を各皿の培地に配置し、セルスプレッダーで該滴を寒天表面上に広げることにより、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６の胞子を接種した。分散した胞子は、２５℃で大量に胞子を形成するたくさんのコロニーを惹起し、通常８日後に胞子を採取した。
【００２８】
果実への接種：
モモはトレーに配置した（トレー当たり２２個のモモ）。トレー当たり各処理の１反復試験区を用いて、処理ごと及び種類ごとに４反復試験区の４４個のモモとした。無処理果実（すなわち、Integrated Fruit Productionを介した生産果実）及び水で処理した果実をネガティブコントロールとして使用した。
【００２９】
収穫後の処理のため、前記果実に約１０７ｃｆｕ／ｍｌのクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６の懸濁液を両面に流出するように（トレー当たり１５ｍｌ）スプレーした。モモは空気乾燥させ、２２℃でインキュベートした。果実感染の割合は４８時間ごとに３０日間測定した。
【００３０】
統計的解析：
データはStatBox Proを使用して統計的解析を行った。分散の分析は、一般線形モデル手法によりアークサイン平方根変換データに基づいて行った。平均離隔はStudent NewmanとKeuls testを用いて行った。
【００３１】
結果及び結論：
結果は、図１に示すように、収穫後のモモにクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６を接種した場合、コントロールに比べて、腐敗した収穫モモ「Sandine」の割合が有意に減少したことを明確に立証した。
【００３２】
図２に示した結果は、収穫モモの品種「Western Red」に対する腐敗発生率を表しており、このモモの品種は、品種「Sandine」よりも収穫後の腐敗を受けにくいことを示している。クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータＪ１４４６を用いた収穫後処理は、腐敗の兆候を遅延させるが、真菌処理は、コントロールに比べて、腐敗を有意に軽減しなかった。
【００３３】
解析後及び図３、４に示されているように、両方の品種のモモへの損傷は、収穫後処理の前では、以下の真菌：モニリニア属種、リゾプス属種、ペニシリウム属種、アルテルナリア属種、及びボトリチス属種により引き起こされた。収穫後処理を行ったとき、モニリニア属種が腐敗果実と関係する主な真菌であることが分かった。
【００３４】
これらの結果から、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６はモモにおいてモニリニア属種の感染の発生率及び進行速度を軽減できることが実証された。
【００３５】
要約すると、収穫後処理の方法としてクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６の使用は、貯蔵中のモモ品種「Sandine」及び「Western Red」の品質をそれらの物理的特性及び官能的特性で測定したように、保持した。これらの結果は、とりわけ、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータは、病原真菌を制御し、植物病原菌により引き起こされる貯蔵病害から収穫産物を保護し、モモの収穫後の品質を維持し、及び貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延長するのに役に立つ代替であることを実証した。
【００３６】
実施例２：クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータを使用するネクタリンの収穫後の真菌腐敗の生物学的制御
この研究の目的は、ネクタリンの収穫後の品質に関し、貯蔵状況の間に、各種の収穫後処理の方法（収穫後処理後の冷却貯蔵の有りと無しで、２つの異なる処方の生物学的制御剤）の効果を検討することであった。
【００３７】
果実：
ネクタリン（種類：Nectatop；植樹年：２０１１；植樹間の距離及び密度：６×３ｍ、すなわち、５５６本／ｈａ）は、硬い熟したステージで摘み取り、測定し、選択し（同一のサイズ、同一の成熟レベル、損傷なし）、トレー当たり２６０から２８０の果実を詰めた。それらは２〜４℃で２〜３日間貯蔵した。
【００３８】
収穫後処理：
ネクタリンをトレーに配置した（トレー当たり６０個のネクタリン）。処理当たり６０個のネクタリンの４反復試験区とした。無処理果実（すなわち、Integrated Fruit Productionを介した生産果実）及び水で処理した果実をネガティブコントロールとして使用した。前記トレーは、収穫後処理後の２〜４℃で５〜８日間の冷却貯蔵の有りと無しを、２０〜２２℃で１５〜２１日間、空調管理された部屋に貯蔵した。
【００３９】
９つの異なる処理方法を試験して比較した。それらは表１に規定されている。
【００４０】
[表１]
試験した処理方法
2020506173.tif 000002
2020506173.tif 000003
【００４１】
本研究で使用した処理方法のタイプは以下のとおりである。
-       果樹園での収穫前処理は、７５０ ｌ／ｈａの流量で全ての敷地に対して行った。使用した製品は、Kruga（３ｌ／ｈａ）及びSignum（０．７５ｋｇ／ｈａ）であった。収穫前処理の適用は、良好な状況下、２０１７年７月７日及び２１日に行った。それらは貯蔵病害の点において厳しい圧力を促すために、２つの介入に意図的に制限された。
-       以下に述べる方法に従い、Ｍ３、Ｍ４、及びＭ５の処理方法のために、ハンドスプレーを介した収穫後の適用を行った。
-       以下に述べる方法に従い、Ｍ６からＭ９の処理方法のために、ネブライザー（又は噴霧器又は霧吹き）を介した収穫後の適用を行った。
【００４２】
収穫後処理のため、Prestop（登録商標、Lallemand）の２つの異なる処方を試験した。Prestop WP（登録商標）及びPrestop WG（登録商標）は、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６を含む。Prestop WG（登録商標）（１×１０９ｃｆｕ／ｇ）は、Prestop WP（登録商標）（１×１０８ｃｆｕ／ｇ）よりも１０倍濃縮されている。
【００４３】
各処理に対するストック溶液は、滅菌蒸留水とクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６を用いて調製し、懸濁液の量は、Prestop WG（登録商標）及びPrestop WP（登録商標）のそれぞれに対して２ｇ／ｌ及び２０ｇ／ｌと同等で施与されるように計算した。Ｍ３、Ｍ４、及びＭ５の処理方法のために、スプレーボトルポンプを使用して懸濁液を施与した。８個のスプレーをトレーの１つの面に使用し、全体で７．５ｍｌとした。Ｍ６からＭ９の処理方法のために、ネブライザー（Atomist 1037, Hyprodis）を使用して懸濁液を施与した。果実は空気乾燥した。
【００４４】
接種ステップに続いて、Ｍ１、Ｍ３、Ｍ６及びＭ８の処理方法で処理した果実を、２０〜２２℃で１５〜２１日間の空調管理された部屋への移動前に、２〜４℃で５〜８日間、冷蔵した。Ｍ２、Ｍ４、Ｍ５、Ｍ７及びＭ９の処理方法で処理した果実は、前もって冷蔵することなく、直接、２０〜２２℃で１５〜２１日間、空調管理された部屋で貯蔵した。
【００４５】
病原菌の同定とともに果実感染の割合を４８時間ごとに最低でも１５〜２１日間測定した。
【００４６】
天候状況：
天候データはCIMELステーションから定常的に得た。それらは試験の間中、収集した。
【００４７】
試験は果樹園にて２０１７年７月７日から８月７日の間行った。該日付には第２の収穫を開始し、果実を貯蔵した。この期間は特に暖かく、一般には乾燥していた。
【００４８】
統計的解析：
データはStatBox Proを使用して統計的解析を行った。分散の分析は、一般線形モデル手法によりアークサイン平方根変換データに基づいて行った。平均離隔はStudent NewmanとKeuls testを用いて行った。
【００４９】
結果及び結論：
収穫は５回行った。敷地からの収率は、非常に高く（５９．６Ｔ／ｈａ）、主たるサイズはＡであった。収穫後処理及びモニタリングのための果実は第２の収穫の間に摘み取られた。
【００５０】
Ｍ２、Ｍ４、Ｍ５、Ｍ７及びＭ９の処理方法で処理した果実は、収穫後処理の後に、直接、２０〜２２℃で１５〜２１日間、空調管理された部屋で貯蔵した。図５に示すように、空調管理された部屋で貯蔵したコントロール（Ｍ２）の腐敗果実の出現は早かった。すなわち、冷蔵庫から取り出した後６日目であり、収穫後処理後、果実の２０％が影響を受け、１２日後はほぼ果実の５０％が腐敗した。気圧は試験を有効とするうえで十分であった。
【００５１】
図５に示すように、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６の２０〜２２℃で貯蔵された収穫ネクタリンへのミスト適用（Ｍ９）又はスプレー処理（Ｍ４及びＭ５）は、有意に果実における腐敗の発生率及び進行を抑制又は軽減した。スプレー処理（Ｍ４及びＭ５）は、ミスト適用（Ｍ９）を介した処理に比べて、腐敗速度の減少に関し、生物学的制御剤のより良好な結果を示した。スプレー処理（Ｍ４及びＭ５）は、果実への生物学的制御剤の効果的でより均一な分布を確実なものとするように思われる。
【００５２】
図６は、Ｍ１、Ｍ３、Ｍ６及びＭ８の処理方法で処理した腐敗ネクタリンの累積率の結果を示す。果実は、収穫後処理の後及び２０〜２２℃で１５〜２１日間空調管理された部屋で貯蔵する前に、２〜４℃で５〜８日間冷蔵した。収穫後処理の後及び空調管理された部屋で貯蔵する前に冷蔵するステップは、温度上昇及び濃縮による病原真菌のより大きな増殖を可能にした。クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６の収穫ネクタリンへのスプレー処理（Ｍ３）は、有意に腐敗果実の発生率及び進行速度を低減した。
【００５３】
試験の間、定期的に感染された果実に関係する真菌を単離、同定した。
【００５４】
図７に示した結果は、ネクタリンの収穫日に、果実から単離された病原真菌は、モニリニア属種、リゾプス属種、アルテルナリア属種、ペニシリウム属種、及び
ボトリチス属種であることを立証した。モニリニア属種は、腐敗果実と関係する主な真菌であることが分かった（収穫後処理を行う前）。
【００５５】
これらの結果から、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６は収穫ネクタリンにおけるモニリニア属種の感染の発生率及び進行速度を軽減できることが実証された。
【００５６】
実施例３：クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータを使用するプラムの収穫後の真菌腐敗の生物学的制御
この研究の目的は、プラムの収穫後の品質に関し、貯蔵状況の間に、各種の収穫後処理の方法の効果を検討することであった。
【００５７】
果実：プラム（種類：TC SUN；植樹年：２００８；植樹間の距離及び密度：４×１ｍ）は、硬い熟したステージで摘み取り、測定し、選択し（同一のサイズ、同一の成熟レベル、損傷なし）、詰めた。モニリニア属種は、腐敗果実と関係する主な真菌であることが分かった。
【００５８】
収穫後処理：
プラムをトレーに配置した（トレー当たり１００個のプラム）。処理方法当たり１００個のプラムの４反復試験区（トレー）とした。無処理果実（すなわち、Integrated Fruit Productionを介した生産果実）をネガティブコントロールとして使用した。前記トレーは、０〜０．５℃で４８時間貯蔵した。
【００５９】
６つの異なる処理方法を試験して比較した。それらは表３に規定されている。
【００６０】
[表３]
試験した処理方法
2020506173.tif 000004
【００６１】
収穫後処理のため、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６を含むPrestop WG（登録商標、Lallemand）を使用した。
【００６２】
Prestop WG（登録商標）のストック溶液は、滅菌蒸留水とクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６を用いて調製し、懸濁液の量は、２ｇ／ｌと同等で施与されるように計算した。スプレーボトルポンプを使用して懸濁液を施与した。８個のスプレーをトレーの１つの面に使用し、全体で７．５ｍｌとした。Ｔ４からＴ６の処理に対して、ネブライザー（Atomist 1037, Hyprodis）を使用して懸濁液を施与した。果実は空気乾燥した。
【００６３】
接種ステップに続いて、Ｔ４からＴ６の処理方法で処理したプラムは、本研究が終わるまで、１９℃で空調管理された部屋への移動前に、０〜０．５℃で４〜６週間冷蔵した。Ｔ１からＴ３の処理方法で処理した果実は、本研究が終わるまで、直接、１９℃で空調管理された部屋で貯蔵した。
【００６４】
病原菌の同定とともに果実感染の割合を４８〜７２時間ごとに５〜３０日間測定した。
【００６５】
統計的解析：
データはStatBox Proを使用して統計的解析を行った。分散の分析は、一般線形モデル手法によりアークサイン平方根変換データに基づいて行った。平均離隔はStudent NewmanとKeuls testを用いて行った。
【００６６】
結果及び結論：
図８及び９に示した結果は、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６は病原真菌により引き起こされる腐敗、例えばモニリニア属種により引き起こされる腐敗から収穫プラムを保護することを明確に実証した。
【００６７】
実施例４：柑橘類果実に対し、収穫後の腐敗病原菌ペニシリウム・ディギタータム及びペニシリウム・イタリカムに対するクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６の効果
この研究の目的は、ペニシリウム属種に非常に感染しやすいマンダリンに対し、収穫後腐敗病原菌ペニシリウム・ディギタータム及びペニシリウム・イタリカムに対するクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６の効果を評価することであった。
【００６８】
試験は水で洗い、乾かした衛生的なマンダリンに対して行った。該果実はマンダリン当たり２つの穿孔を設けた。
【００６９】
試験した２つの真菌種は、ペニシリウム・ディギタータム及びペニシリウム・イタリカムとし、同じ胞子懸濁液の滴定は、ＰＤＡ培地（ポテト、デキストロース及び寒天）に接種した若い５〜７日の培養を使用して行い、コロニーを滅菌蒸留水に入れることにより、２４℃の温度でインキュベートした。その後胞子の数をカウントし、ｃｆｕ／ｍｌで表される所望する濃度に設定した。
【００７０】
上述のようにして調製したマンダリンのバッチに、１％及び２％の濃度でPrestop懸濁液を接種した。クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６（Prestop）を接種後６、１８及び２４時間経て、選択した２つの種の滴定された病原菌懸濁液を１０５ｃｆｕ／ｍｌの濃度で果実に接種した。これと並行して、コントロール試験をセットし、そこではマンダリンは滴定された病原菌懸濁液と滅菌蒸留水だけを接種した。
【００７１】
全ての処理された果実は乾燥させ、プラスチックバッグに配置して高湿度を形成させた。それらは２０℃の周囲温度で３〜４日間インキュベートした。インキュベーションの期間はコントロールのマンダリンが大きな腐敗の直径を呈するのに必要な時間を基に設定した。上記インキュベーションに続いて、腐敗発生率（パーセンテージ）を評価し、設けた全ての穿孔の腐敗半径を測定し、及び胞子形成の存在／不在を調べることにより結果を読み取った。
【００７２】
図１０は、ペニシリウム・ディギタータムの生物学的制御、図１１はペニシリウム・イタリカムの生物学的制御の場合に得られた結果を示す。
【００７３】
図１０、１１に示した結果は、試験した２つの種の病原真菌の制御、従って、果実の腐敗の制御において、アンタゴニストであるクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６の高い有効性を実証した。
【００７４】
以下は開示された本発明の特定の実施態様である。
Ｅ１．植物病原菌により引き起こされる収穫後腐敗から収穫産物を保護するため、植物病原菌により引き起こされる収穫産物の収穫後微生物の腐敗を防止もしくは軽減するため、及び／又は収穫産物上の植物病原菌を制御するために効果的な量のクロノスタキス・ロゼアの培養物を収穫産物に施与することを含む収穫後処理の方法。
Ｅ２．クロノスタキス・ロゼアがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータである、Ｅ１の収穫後処理の方法。
Ｅ３．クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータＪ１４４６である、Ｅ２の収穫後処理の方法。
Ｅ４．収穫産物が果実又は野菜である、Ｅ１からＥ３のいずれか１つの収穫後処理の方法。
Ｅ５．果実が核果である、Ｅ４の収穫後処理の方法。
Ｅ６．核果がモモ、ネクタリン、プラム、アンズ又はサクランボである、Ｅ５の収穫後処理の方法。
Ｅ７．植物病原菌が真菌植物病原菌である、Ｅ１からＥ６のいずれか１つの収穫後処理の方法。
Ｅ８．植物病原菌が、ペニシリウム属種、アルテルナリア属種、リゾプス属種、ボトリチス属種、又はモニリニア属種である、Ｅ１からＥ７のいずれか１つの収穫後処理の方法。
Ｅ９．クロノスタキス・ロゼアの前記培養物は、農業上許容できるキャリアと組み合わされる、Ｅ１からＥ８のいずれか１つの収穫後処理の方法。
Ｅ１０．クロノスタキス・ロゼアの前記培養物は、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｍｌ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｍｌ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｍｌ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｍｌの濃度である、Ｅ１からＥ９のいずれか１つの収穫後処理の方法。
Ｅ１１．クロノスタキス・ロゼアの前記培養物は乾燥配合物であり、約１０３〜１０１２ｃｆｕ／ｇ、約１０４〜１０１１ｃｆｕ／ｇ、約１０５〜１０１０ｃｆｕ／ｇ、又は約１０６〜１０９ｃｆｕ／ｇの濃度である、Ｅ１からＥ９のいずれか１つの収穫後処理の方法。
Ｅ１２．貯蔵収穫産物の収穫後の貯蔵寿命を延長するためのクロノスタキス・ロゼアの使用。
Ｅ１３．クロノスタキス・ロゼアがクロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータである、Ｅ１２の使用。
Ｅ１４．クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータが、クロノスタキス・ロゼアｆ．カテヌラータ株Ｊ１４４６である、Ｅ１３の使用。
【００７５】
特定の実施態様と関連付けて本発明について述べたが、さらなる改変をすることができ、この適用は、あらゆる変更、使用をカバーし、あるいは、本発明の原理に一般に従い、本発明が関与する従来技術内であり、またここに記載した必須の特徴に適用し、公知又は慣習的プラクティスの範囲内にある本発明開示からの新しい試みを含む本発明の適合、したがって添付クレームの範囲内にあるものをカバーすることを意図している。
【００７６】
参照文献
Wilson, C.L., M., 1989. Biological control of postharvest disease of fruits and vegetables : an emerging technology. Annu. Rev. Phytopathol. 27, 425-441.
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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