(57)【要約】  本発明は、ＴＮＦαに対する組換えモノクローナル抗体の改善された水性薬学的組成物に、そして該組成物を産生するための方法に関する。本発明はまた、ＴＮＦα仲介性疾患を治療するための、ＴＮＦαに対する組換えモノクローナル抗体の改善された水性薬学的組成物の使用にも関する。提唱される発明は、溶液中のタンパク質の凝集物および断片の形成、あるいはタンパク質の修飾として現れる物理的−化学的不安定性の防止を可能にし、そしてまた凍結／融解、撹拌および振盪中の不安定性も防止する。
2020506955.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
静脈内または皮下投与のための水性薬学的組成物であって：
ａ）組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体；
ｂ）酢酸イオンに基づく緩衝剤（または緩衝系）；
ｃ）トレハロースおよび／またはプロリン、あるいは
トレハロースおよびアルギニン；
ｄ）ポリソルベート２０、ポリソルベート８０またはポロキサマー１８８、あるいはその組み合わせ
を含む、前記組成物。
【請求項２】
組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体がアダリムマブである、請求項１の組成物。
【請求項３】
モノクローナル抗体濃度が５０〜２００ｍｇ／ｍＬである、請求項１〜２の組成物。
【請求項４】
酢酸緩衝溶液濃度が１〜１００ｍＭである、請求項１の組成物。
【請求項５】
組成物のｐＨが４〜７である、請求項１の組成物。
【請求項６】
トレハロース濃度が２５〜１５０ｍｇ／ｍＬである、請求項１の組成物。
【請求項７】
プロリン濃度が５〜４０ｍｇ／ｍＬである、請求項１の組成物。
【請求項８】
トレハロース濃度が２５〜１５０ｍｇ／ｍＬであり、そしてアルギニン濃度が０．０５〜０．５ｍｇ／ｍＬである、請求項１の組成物。
【請求項９】
ポリソルベート２０濃度が０．０５ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬである、請求項１の組成物。
【請求項１０】
ポリソルベート８０濃度が０．０５ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬである、請求項１の組成物。
【請求項１１】
ポロキサマー１８８濃度が０．０５ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬである、請求項１の組成物。
【請求項１２】
ａ）５０〜２００ｍｇ／ｍＬの組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体；
ｂ）０．４〜１．２ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび／または５〜４０ｍｇ／ｍＬのプロリン、あるいは
２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび０．０５〜０．５ｍｇ／ｍＬのアルギニン；
ｄ）ｐＨ５．０〜６．０までの氷酢酸；
ｅ）０．１ｍｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０
を含む、請求項１の組成物。
【請求項１３】
組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体がアダリムマブである、請求項１２の組成物。
【請求項１４】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物；
ｄ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｅ）０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０
を含む、請求項１２の組成物。
【請求項１５】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物および０．１ｍｇ／ｍＬのアルギニン塩酸塩；
ｄ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｅ）０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０
を含む、請求項１２の組成物。
【請求項１６】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）２７ｍｇ／ｍＬのプロリン；
ｄ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｅ）０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０
を含む、請求項１２の組成物。
【請求項１７】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）４０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物；
ｄ）１３．５ｍｇ／ｍＬのプロリン；
ｅ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｆ）０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０
を含む、請求項１２の組成物。
【請求項１８】
ａ）５０〜２００ｍｇ／ｍＬの組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体；
ｂ）０．４〜１．２ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび／または５〜４０ｍｇ／ｍＬのプロリン、あるいは
２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび０．０５〜０．５ｍｇ／ｍＬのアルギニン；
ｄ）ｐＨ５．０〜６．０までの氷酢酸；
ｅ）０．１ｍｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０
を含む、請求項１の組成物。
【請求項１９】
組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体がアダリムマブである、請求項１８の組成物。
【請求項２０】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物；
ｄ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｅ）０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０
を含む、請求項１８の組成物。
【請求項２１】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物および０．１ｍｇ／ｍＬのアルギニン塩酸塩；
ｄ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｅ）０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０；
を含む、請求項１８の組成物。
【請求項２２】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）２７ｍｇ／ｍＬのプロリン；
ｄ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｅ）０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０
を含む、請求項１８の組成物。
【請求項２３】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）４０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物；
ｄ）１３．５ｍｇ／ｍＬのプロリン；
ｅ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｆ）０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０
を含む、請求項１８の組成物。
【請求項２４】
ａ）５０〜２００ｍｇ／ｍＬの組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体；
ｂ）０．４〜１．２ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび／または５〜４０ｍｇ／ｍＬのプロリン、あるいは
２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび０．０５〜０．５ｍｇ／ｍＬのアルギニン；
ｄ）ｐＨ５．０〜６．０までの氷酢酸；
ｅ）０．１ｍｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８
を含む、請求項１の組成物。
【請求項２５】
組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体がアダリムマブである、請求項２４の組成物。
【請求項２６】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物；
ｄ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｅ）１．０ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８
を含む、請求項２４の組成物。
【請求項２７】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物および０．１ｍｇ／ｍＬのアルギニン塩酸塩；
ｄ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｅ）１．０ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８
を含む、請求項２４の組成物。
【請求項２８】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）２７ｍｇ／ｍＬのプロリン；
ｄ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｅ）１．０ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８
を含む、請求項２４の組成物。
【請求項２９】
ａ）５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ；
ｂ）０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物；
ｃ）４０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物；
ｄ）１３．５ｍｇ／ｍＬのプロリン；
ｅ）ｐＨ５．５までの氷酢酸；
ｆ）１．０ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８
を含む、請求項２４の組成物。
【請求項３０】
請求項１〜２９の組成物の有効量を投与する工程を含む、ＴＮＦα仲介性疾患を治療するための方法。
【請求項３１】
ＴＮＦα仲介性疾患が：
ａ）活性（中程度から重度の）関節リウマチ、
ｂ）活性乾癬性関節炎、
ｃ）活性強直性脊椎炎、
ｄ）慢性（中程度から重度の）尋常性乾癬、
ｅ）（中程度から重度の）潰瘍性大腸炎、
ｆ）体軸性脊椎関節炎、
ｇ）活性化膿性汗腺炎、
ｈ）若年性特発性関節炎、
ｉ）（中程度から重度の）クローン病、
ｊ）ブドウ膜炎、
ｋ）活性腱付着部炎関連関節炎
の群より選択される、請求項３０の方法。
【請求項３２】
ＴＮＦα仲介性疾患を治療するための、請求項１〜２９の組成物の使用。
【請求項３３】
疾患が：
ａ）活性（中程度から重度の）関節リウマチ、
ｂ）活性乾癬性関節炎、
ｃ）活性強直性脊椎炎、
ｄ）慢性（中程度から重度の）尋常性乾癬、
ｅ）（中程度から重度の）潰瘍性大腸炎、
ｆ）体軸性脊椎関節炎、
ｇ）活性化膿性汗腺炎、
ｈ）若年性特発性関節炎、
ｉ）（中程度から重度の）クローン病、
ｊ）ブドウ膜炎、
ｋ）活性腱付着部炎関連関節炎
の群より選択される、請求項３２の使用。
【請求項３４】
請求項１〜２９のいずれか一項の組成物を産生するための方法であって、酢酸緩衝剤の水相への添加、その後、任意の順での以下の構成要素：
ａ）トレハロース、プロリン、アルギニンまたはその組み合わせの群より選択される、オスモライトおよび／または安定化剤；
ｂ）組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体；
ｃ）ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ポロキサマー１８８、またはその組み合わせの群より選択される、表面活性物質
の添加を含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医学薬理学に関し、そして特に、ＴＮＦαに特異的に結合するかまたはＴＮＦαを中和するヒト抗体の水性薬学的組成物、およびその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）は、内毒素または他の刺激に反応して、単球およびマクロファージを含む、多様なタイプの細胞によって産生される天然存在哺乳動物サイトカインである。ＴＮＦαは、炎症反応、免疫学的反応および病理生理学的反応の主要な仲介因子である（Ｇｒｅｌｌ，  Ｍ．ら（１９９５）  Ｃｅｌｌ，  ８３：  ７９３−８０２）。
【０００３】
可溶性ＴＮＦαは、前駆体膜貫通タンパク質の切断によって形成され（Ｋｒｉｅｇｌｅｒら（１９８８）  Ｃｅｌｌ  ５３：  ４５−５３）、そして１７キロダルトン（ｋＤａ）の分泌ポリペプチドが凝集して、可溶性ホモ三量体複合体を形成する（Ｓｍｉｔｈら（１９８７），  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２６２：  ６９５１−６９５４；  Ｂｕｔｌｅｒら（１９８６），  Ｎａｔｕｒｅ  ３２０：５８４；  Ｏｌｄ（１９８６），  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３０：  ６３０）。これらの複合体は、次いで、多様な細胞上に見られる受容体に結合する。結合は、いくつかの炎症促進性の効果を生じ、これには（ｉ）他の炎症促進性サイトカイン、例えばインターロイキン（ＩＬ）−６、ＩＬ−８、およびＩＬ−１の放出、（ｉｉ）マトリックスメタロプロテイナーゼの放出、および（ｉｉｉ）血管外組織内に白血球を誘引することによって、炎症カスケードおよび免疫カスケードをさらに増幅する、内皮接着分子発現の上方制御が含まれる。
【０００４】
ＴＮＦαレベル増加と関連する多くの障害がある。例えば、ＴＮＦα発現は、慢性疾患、例えば関節リウマチ（ＲＡ）、クローン病および潰瘍性大腸炎を含む炎症性腸障害、敗血症、うっ血性心不全、気管支喘息、ならびに多発性硬化症を含む、多くのヒト疾患において上方制御されていることが示されてきている。ＴＮＦαはまた、炎症促進性サイトカインとも称される。
【０００５】
生理学的には、ＴＮＦαはまた、特定の感染からの防御とも関連する（Ｃｅｒａｍｉら（１９８８），  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｔｏｄａｙ  ９：２８）。ＴＮＦαは、グラム陰性細菌のリポ多糖によって活性化されているマクロファージによって放出される。こうしたものとして、ＴＮＦαは、細菌性敗血症と関連する内毒素ショックの発展および病因形成に関与する、非常に重要な内因性仲介因子であるようである。
【０００６】
アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）、ＡｂｂＶｉｅ，  Ｉｎｃ．）は、ヒトＴＮＦに特異的なヒト組換えモノクローナルＩｇＧ１抗体である。この抗体はまた、Ｄ２Ｅ７としても知られる。アダリムマブは、１，３３０アミノ酸からなり、ＵＳ  ６０９０３８１（ＷＯ９７２９１３１）に記載され、そして特許され、アダリムマブの説明は、その全体が本明細書に援用される。アダリムマブは、典型的には、哺乳動物細胞発現系、例えばチャイニーズハムスター細胞において、組換えＤＮＡ技術によって産生される。アダリムマブは、ＴＮＦに特異的に結合し、そして細胞表面上のＴＮＦ受容体ｐ５５およびｐ７５との相互作用をブロッキングすることによって、ＴＮＦ生物学的機能を中和する。
【０００７】
多数のアダリムマブ配合物が当該技術分野に知られる（例えば、ＷＯ２００４０１６２８６およびＷＯ２０１２０６５０７２を参照されたい）。
ＷＯ２００４０１６２８６は、抗体、例えばアダリムマブ、緩衝系、ポリソルベートおよび溶液等張性剤、例えばマンニトールおよび塩化ナトリウムを含む、ＴＮＦα仲介性疾患を治療するために用いられる抗体の安定化のための液体組成物を記載する。該組成物は、クエン酸−リン酸緩衝剤を用いる（Ｈｕｍｉｒａ配合物１）。上記配合物は、いくつかの不都合な点を有する：１）高濃度での抗体の不十分なコロイド安定性、２）熱ストレス条件下での不十分な安定性、および３）長期保存中の凝集。
【０００８】
ＷＯ２０１２０６５０７２は、抗体、例えばアダリムマブ、ならびにマンニトール、ポリソルベート８０を含む、ＴＮＦα仲介性疾患を治療するために用いられる抗体の安定化のための液体組成物（Ｈｕｍｉｒａ配合物２）を記載する。上記配合物は、いくつかの不都合な点を有する：１）顕著な凍結および融解不安定性、および２）低い凝集温度。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】ＵＳ  ６０９０３８１（ＷＯ９７２９１３１）
【特許文献２】ＷＯ２００４０１６２８６
【特許文献３】ＷＯ２０１２０６５０７２
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｇｒｅｌｌ，  Ｍ．ら（１９９５）  Ｃｅｌｌ，  ８３：  ７９３−８０２
【非特許文献２】Ｋｒｉｅｇｌｅｒら（１９８８）  Ｃｅｌｌ  ５３：  ４５−５３
【非特許文献３】Ｓｍｉｔｈら（１９８７），  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２６２：  ６９５１−６９５４
【非特許文献４】Ｂｕｔｌｅｒら（１９８６），  Ｎａｔｕｒｅ  ３２０：５８４
【非特許文献５】Ｏｌｄ（１９８６），  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３０：  ６３０
【非特許文献６】Ｃｅｒａｍｉら（１９８８），  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｔｏｄａｙ  ９：２８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
したがって、ＴＮＦαに結合する抗体、例えばアダリムマブを含む新規医薬品を提供する必要性がある。
本発明は、長期保存を可能にし、そしてまた凍結融解および熱ストレスに対して優れた耐性を有するアダリムマブを含む安定水性組成物に関する。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
１つの側面において、本発明は、静脈内、皮下または筋内投与のための水性薬学的組成物であって、組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体、酢酸イオンに基づく緩衝剤（または緩衝系）、トレハロースまたはプロリン、またはその組み合わせ、あるいはトレハロースおよびアルギニン、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０またはポロキサマー１８８、あるいはその組み合わせを含む、前記組成物に関する。
【００１３】
組成物のいくつかの態様において、組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体はアダリムマブである。
組成物のいくつかの態様において、モノクローナル抗体濃度は５０〜２００ｍｇ／ｍＬである。
【００１４】
組成物のいくつかの態様において、酢酸緩衝溶液濃度は１〜１００ｍＭである。
組成物のいくつかの態様において、組成物のｐＨは４〜７である。
組成物のいくつかの態様において、トレハロース濃度は２５〜１５０ｍｇ／ｍＬである。
【００１５】
組成物のいくつかの態様において、プロリン濃度は５〜４０ｍｇ／ｍＬである。
組成物のいくつかの態様において、アルギニン濃度は０．０５〜１．０ｍｇ／ｍＬである。
【００１６】
組成物のいくつかの態様において、ポリソルベート２０濃度は０．０５ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬである。
組成物のいくつかの態様において、ポリソルベート８０濃度は０．０５ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬである。
【００１７】
組成物のいくつかの態様において、ポロキサマー１８８濃度は０．０５ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬである。
組成物のいくつかの態様において、組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体はアダリムマブである。
【００１８】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含む。
【００１９】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、０．１ｍｇ／ｍＬのアルギニン塩酸塩、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含む。
【００２０】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２７ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含む。
【００２１】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、４０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、１３．５ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含む。
【００２２】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜２００ｍｇ／ｍＬの組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体、０．４〜１．２ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび／または５〜４０ｍｇ／ｍＬのプロリンあるいは２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロース、および０．０５〜１．０ｍｇ／ｍＬのアルギニン、ｐＨ５．０〜６．０までの氷酢酸、０．１ｍｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含む。
【００２３】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜２００ｍｇ／ｍＬの組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体、０．４〜１．２ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび／または５〜４０ｍｇ／ｍＬのプロリンあるいは２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロース、および０．０５〜１．０ｍｇ／ｍＬのアルギニン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．１ｍｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０を含む。
【００２４】
組成物のいくつかの態様において、組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体はアダリムマブである。
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０を含む。
【００２５】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、０．１ｍｇ／ｍＬのアルギニン塩酸塩、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０を含む。
【００２６】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２７ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０を含む。
【００２７】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、４０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、１３．５ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０を含む。
【００２８】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜２００ｍｇ／ｍＬの組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体、０．４〜１．２ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび／または５〜４０ｍｇ／ｍＬのプロリンあるいは２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロース、および０．０５〜１．０ｍｇ／ｍＬのアルギニン、ｐＨ５．０〜６．０までの氷酢酸、０．１ｍｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８を含む。
【００２９】
組成物のいくつかの態様において、組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体はアダリムマブである。
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、ｐＨ５．５までの氷酢酸、１ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８を含む。
【００３０】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、０．１ｍｇ／ｍＬのアルギニン塩酸塩、ｐＨ５．５までの氷酢酸、１ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８を含む。
【００３１】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２７ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、１ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８を含む。
【００３２】
いくつかの態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、４０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、１３．５ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、１ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８を含む。
【００３３】
１つの側面において、本発明は、上述の組成物の有効量を投与する工程を含む、ＴＮＦα仲介性疾患を治療するための方法に関する。
治療するための方法のいくつかの態様において、ＴＮＦα仲介性疾患は、活性（中程度から重度の）関節リウマチ、活性乾癬性関節炎、活性強直性脊椎炎、慢性（中程度から重度の）尋常性乾癬、（中程度から重度の）潰瘍性大腸炎、体軸性脊椎関節炎、活性化膿性汗腺炎、若年性特発性関節炎、（中程度から重度の）クローン病、ブドウ膜炎、活性腱付着部炎関連関節炎の群より選択される。
【００３４】
１つの側面において、本発明は、ＴＮＦα仲介性疾患を治療するための、上記組成物の使用に関する。
使用のいくつかの態様において、疾患は、活性（中程度から重度の）関節リウマチ、活性乾癬性関節炎、活性強直性脊椎炎、慢性（中程度から重度の）尋常性乾癬、（中程度から重度の）潰瘍性大腸炎、体軸性脊椎関節炎、活性化膿性汗腺炎、若年性特発性関節炎、（中程度から重度の）クローン病、ブドウ膜炎、活性腱付着部炎関連関節炎より選択される。
【００３５】
１つの側面において、本発明は、上記組成物を産生するための方法であって、酢酸緩衝剤の水相への添加、その後、任意の順での以下の構成要素：トレハロース、プロリンまたはその組み合わせの群より選択される、オスモライトおよび／または安定化剤；組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体；ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ポロキサマー１８８、またはその組み合わせの群より選択される、表面活性物質の添加を含む、前記方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】調製後、ＰＥＧ６０００濃度に対する、４００ｎｍでの溶液中の光学密度の依存性。
【図２】調製後、ＰＥＧ６０００濃度に対する、４００ｎｍでの溶液中の光学密度の依存性。
【図３】調製後、ＰＥＧ６０００濃度に対する、４００ｎｍでの溶液中の光学密度の依存性。
【図４】酢酸緩衝溶液、ｐＨ５．０におけるアダリムマブ凝集点。Ｔａｇ７４．０℃。濃いグレー：Ｚ平均、ｎｍ、明るいグレー：強度、ｋｃｐｓ。
【図５】クエン酸緩衝溶液、ｐＨ５．０におけるアダリムマブ凝集点。Ｔａｇ６９．５℃。濃いグレー：Ｚ平均、ｎｍ、明るいグレー：強度、ｋｃｐｓ。
【図６】ヒスチジン緩衝溶液、ｐＨ５．０におけるアダリムマブ凝集点。Ｔａｇ６９．５℃。濃いグレー：Ｚ平均、ｎｍ、明るいグレー：強度、ｋｃｐｓ。
【図７】リン酸緩衝溶液、ｐＨ５．０におけるアダリムマブ凝集点。Ｔａｇ７１．０℃。濃いグレー：Ｚ平均、ｎｍ、明るいグレー：強度、ｋｃｐｓ。
【図８】Ｈｕｍｉｒａ配合物１、ｐＨ５．０におけるアダリムマブ凝集点。Ｔａｇ６９．５℃。濃いグレー：Ｚ平均、ｎｍ、明るいグレー：強度、ｋｃｐｓ。
【発明を実施するための形態】
【００３７】
定義および一般的な方法
本明細書で用いる用語は、一般的に、本発明の背景内で、そして各用語が用いられる特定の背景において、当該技術分野の一般的な意味を有する。本明細書の以下で、または別の箇所で、本発明を記載するために用いられる特定の用語は、実施者に、本発明を記載するためのさらなる指針を提供するために定義される。いくつかの用語の同義語を提供する。１つまたはそれより多い同義語の詳述は、他の同義語の使用を排除しない。本明細書に記載する任意の用語の例を含む、本明細書の任意の箇所での例の使用は、例示のためのみであり、そして本発明のまたは任意の例示する主題の範囲および意味を限定するよう意図されない。本発明は、本明細書に提供する多様な態様を限定しない。
【００３８】
別に定義しない限り、本明細書で用いるすべての技術的および科学的用語は、本発明が属する技術分野の一般の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾の場合は、定義を含めて、本文書が支配するであろう。
【００３９】
用語「アダリムマブ」は、Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）中の活性薬学的成分、ならびに生物学的に類似であるかまたは生物学的に改善されたその変異体とみなされるかまたはそのように意図されるタンパク質と同義である。アダリムマブは、ヒトＴＮＦに特異的なヒト組換えモノクローナルＩｇＧ１抗体である。アダリムマブはまた、Ｄ２Ｅ７としても知られる。アダリムマブは、各々およそ２４ｋＤａの分子量を有する２つの軽鎖および各々およそ４９ｋＤａの分子量を有する２つのＩｇＧ１重鎖を含む。各軽鎖は２１４アミノ酸残基からなり、そして各重鎖は４５１アミノ酸残基からなる。したがって、アダリムマブは１３３０アミノ酸からなる。用語、アダリムマブはまた、商業的に入手可能なＨｕｍｉｒａ（登録商標）で用いられるアダリムマブタンパク質のいわゆる生物学的に類似のまたは生物学的に改善されたタンパク質を含むよう意図される。例えば、商業的Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）の変異体は、該変異体が、Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）と同一ではないとしても類似でありうる特定の物理的特性、例えばグリコシル化プロファイルおよび酸−塩基プロファイルを示しうるが、商業的に入手可能なＨｕｍｉｒａ（登録商標）と本質的に同じ薬理学的効果を有する場合、ＦＤＡに許容可能でありうる。
【００４０】
本出願の目的のため、用語「アダリムマブ」にはまた、ポリペプチドの機能に重大には影響を及ぼさない、アミノ酸構造の重要でない修飾（アミノ酸の欠失、付加、および／または置換を含む）、またはグリコシル化特性および酸−塩基プロファイルの重要でない修飾を持つアダリムマブも含まれる。用語「アダリムマブ」には、Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）のすべての型および配合物も含まれ、これには限定されるわけではないが、濃縮配合物、注射可能なすぐに使用できる配合物；水、アルコールおよび／または他の成分で再構成された配合物、ならびにその他が含まれる。
【００４１】
用語「ヒトＴＮＦα」はまた、ｈＴＮＦαまたはｈＴＮＦ、またはＴＮＦαとしても知られ、１７ｋＤａの分泌型および２６ｋＤａの膜会合型、非共有結合した１７ｋＤａ分子の三量体で構成される生物学的活性型として存在するヒトサイトカインを指すよう意図される。ＴＮＦαの構造は、例えば、Ｐｅｎｎｉｃａ，  Ｄ．ら（１９８４）  Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：７２４−７２９；  Ｄａｖｉｓ，  Ｊ．  Ｍ．ら（１９８７）  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２６：１３２２−１３２６；およびＪｏｎｅｓ，  Ｅ．  Ｙ．ら（１９８９）  Ｎａｔｕｒｅ  ３３８：２２５−２２８にさらに記載される。用語、ヒトｒｈＴＮＦαは、標準的組換え発現法によって調製可能であるかまたは商業的に購入可能である（Ｒ  ＆  Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号２１０−ＴＡ、ミネソタ州ミネアポリス）、組換えヒトＴＮＦαを含むよう意図される。
【００４２】
本明細書において、用語「抗体」は、内部ジスルフィド結合によって相互連結される４つのポリペプチド鎖、２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖で構成される免疫グロブリン型分子を指す。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書において、ＨＣＶＲまたはＶＨと略される）および重鎖定常領域からなる。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３からなる。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書において、ＬＣＶＲまたはＶＬと略される）および軽鎖定常領域からなる。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬからなる。ＶＨおよびＶＬ領域は、さらに、より保存された、フレームワーク領域（ＦＲ）と称される領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域に細分されうる。各ＶＨおよびＶＬは、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲからなり、Ｎ末端からＣ末端に以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４で配置される。本発明の１つの態様において、配合物は、米国特許第６０９０３８２号；第６２５８５６２号、および第８２１６５８３号に記載されるものと類似のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を有する抗体を含む。
【００４３】
抗体またはその抗原結合部分は、抗体または抗体部分と１つまたはそれより多い他のタンパク質またはペプチドの共有または非共有会合によって形成される、より大きな免疫接着分子の一部であってもよい。こうした免疫接着分子の例には、四量体ｓｃＦｖ分子を作製するためのストレプトアビジンコア領域の使用（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，  Ｓ．  Ｍ．ら（１９９５）  Ｈｕｍａｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ６：９３−１０１）、ならびに二価およびビオチン化ｓｃＦｖ分子を作製するためのシステイン残基、マーカーペプチドおよびＣ末端ポリヒスチジンタグの使用（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，  Ｓ．  Ｍ．ら（１９９４）  Ｍｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ３１：１０４７−１０５８）が含まれる。慣用的方法、例えばそれぞれ、パパインまたはペプシン消化を用いて、全抗体から、抗体部分、例えば全抗体のＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２断片を調製してもよい。さらに、本明細書に記載するように、標準的組換えＤＮＡ技術を用いて、抗体、抗体部分、および免疫接着分子を得てもよい。
【００４４】
本明細書において、用語「単離抗体」は、異なる抗原特性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指す（例えば、ＴＮＦαに特異的に結合する単離抗体は、ＴＮＦα以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。しかし、ＴＮＦαに特異的に結合する単離抗体は、他の抗原、例えば他の種由来のＴＮＦα分子に交差反応性を有しうる。さらに、単離抗体は、他の細胞性物質および／または化学物質を実質的に含まないことも可能である。
【００４５】
用語「抗ＴＮＦα抗体」は、本明細書に記載するような、ならびに米国特許第６０９０３８２号；第６２５８５６２号；第６５０９１５号；第７２２３３９４号および第６５０９０１５号に記載されるような、ヒト抗ＴＮＦα抗体を指す。本発明で用いる用語、抗ＴＮＦα抗体は、抗ＴＮＦα抗体またはその断片であり、これには、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標）、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｊｏｈｎｓｏｎ、米国特許第５６５６２７２号に記載される）；ＣＤＰ５７１（ヒト化モノクローナル抗ＴＮＦアルファＩｇＧ４抗体）；ＣＤＰ８７０（ヒト化モノクローナル抗ＴＮＦアルファ抗体断片）；抗ＴＮＦ  ｄＡｂ（Ｐｅｐｔｅｃｈ）；ＣＮＴＯ１４８（ゴリムマブ；  Ｃｅｎｔｏｃｏｒ、ＷＯ  ０２／１２５０２、ならびにＵ．Ｓ．  ５２１，２０６およびＵ．Ｓ．  ７２５０１６５を参照されたい）；およびアダリムマブ（ＨＵＭＩＲＡ（登録商標）  Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ヒト抗ＴＮＦ  ｍＡｂ、ＵＳ  ６０９０３８２にＤ２Ｅ７として記載される）が含まれる。本発明で使用してもよいさらなる抗ＴＮＦ抗体は、米国特許第６５９３４５８号；第６４９８２３７号；第６４５１９８３号；および第６４４８３８０号に記載される。別の態様において、ＴＮＦα阻害剤は、ＴＮＦ融合タンパク質、例えばエタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ；ＷＯ  ９１／０３５５３およびＷＯ  ０９／４０６４７６に記載される）である。別の態様において、ＴＮＦα阻害剤は、組換えＴＮＦ結合タンパク質（ｒ−ＴＢＰ−Ｉ）（Ｓｅｒｏｎｏ）である。
【００４６】
用語「長期保存」または「長期安定性」は、薬学的組成物が３ヶ月またはそれより長く、６ヶ月またはそれより長く、そして好ましくは１年またはそれより長く、最も好ましくは少なくとも２年間の最低安定有効保存期間で保存可能であることを意味するよう理解される。一般的に、用語「長期保存」および「長期安定性」には、さらに、配合物を、意図される薬学的適用のために適さないものにするであろう安定性の喪失を伴わずに、アダリムマブの現在入手可能な商業的配合物に典型的に必要な安定有効保存期間と少なくとも匹敵する、またはそれよりも優れた、安定有効保存期間が含まれる。長期保存はまた、薬学的組成物が、液体として２〜８℃で、あるいは凍結して例えば−１８℃、またはそれより低い温度のいずれかで保存されることを意味するよう理解される。組成物が１回より多く凍結および融解されてもよいこともまた意図される。
【００４７】
用語「安定状態」は、長期保存に関して、薬学的組成物中に含有されるアダリムマブが、保存開始時の組成物の活性に比較して、その活性の２０％、またはより好ましくは１５％、またはさらにより好ましくは１０％、そして最も好ましくは５％より多くを失わないことを意味するよう理解される。
【００４８】
用語「賦形剤」または「添加剤」は、本明細書において、本発明において先に記載されるもの以外の任意の成分を記載するために用いられる。
用語「糖」は、単糖、二糖および多糖またはその混合物を指す。糖の例には、限定されるわけではないが、スクロース、トレハロース、グルコース、デキストロース、およびその他が含まれる。
【００４９】
用語「ポリオール」は、本明細書において、多数のヒドロキシル基を有する賦形剤を指し、そしてこれには糖アルコールおよび糖酸が含まれる。ポリオールの例には、限定されるわけではないが、マンニトール、ソルビトール、およびその他が含まれる。
【００５０】
用語「緩衝液」、「緩衝組成物」、「緩衝剤」は、本明細書において、典型的には、その酸−塩基コンジュゲート構成要素の作用によって、液体抗体配合物がｐＨ変化に抵抗することを可能にする、添加される組成物を指す。緩衝剤の濃度に言及する際、前記濃度が、緩衝剤の遊離酸または遊離塩基型の総モル濃度を指すことが意図される。当該技術分野に知られ、そして文献に見られうる緩衝剤の例には、限定されるわけではないが、ヒスチジン、クエン酸、コハク酸、酢酸、リン酸、リン酸緩衝生理食塩水、クエン酸リン酸緩衝剤、およびトロメタミンに基づく緩衝剤等、またはその適切な混合物が含まれる。
【００５１】
用語「等張化剤」または「等張剤（ｔｏｎｉｃｉｆｉｅｒ）」、ならびに「オスモライト」または「浸透圧調整剤」は、本明細書において、液体抗体調製物の浸透圧を調製可能な賦形剤を指す。特定の態様において、等張化剤は、抗体調製物が、被験体の体組織の細胞と生理学的に適合するように、液体抗体調製物の浸透圧を等張になるように調整することも可能である。さらに別の態様において、「等張化剤」は、本明細書記載の抗体の安定性の改善に寄与しうる。「等張な」調製物は、ヒトの血液と同等の浸透圧を有する調製物である。等張調製物は、一般的に、約２５０〜３５０ｍＯｓｍの浸透圧を有する。用語「低張な」は、ヒト血液のものより低い浸透圧を有する調製物を記載する。したがって、用語「高張な」は、ヒト血液のものより高い浸透圧を有する調製物を記載するよう用いられる。等張性は、例えば蒸気圧または氷凍結型浸透圧計を用いて測定可能である。等張性剤は、エナンチオマー（例えばＬ−またはＤ−エナンチオマー）またはラセミ型；アルファ、アルファ；もしくはベータ、ベータ；もしくはアルファ、ベータ；もしくはベータ、アルファを含む、アルファまたはベータなどの異性体型；遊離酸または遊離塩基型；塩型；水和物型（例えば一水和物）または無水型であってもよい。
【００５２】
用語「表面活性物質」（サーファクタントまたは界面活性剤、あるいはＳＡＳとしても知られる）は、本明細書において、液体抗体調製物の表面張力を改変しうる賦形剤を指す。特定の態様において、表面活性物質は、液体抗体調製物の表面張力を減少させる。他の態様において、「表面活性物質」は、調製物中の任意の抗体のコロイド安定性または可溶性の改善に寄与しうる。表面活性物質は、生じる抗体調製物の凝集を減少させ、そして／または調製物中の粒子の形成を最小限にし、そして／または吸着を減少させることも可能である。表面活性物質はまた、凍結／融解サイクル中およびサイクル後、ならびに振盪中の抗体の安定性も改善しうる。表面活性物質は、イオン性であってもまたは非イオン性であってもよい。本発明の配合物中に含まれてもよい、例示的な非イオン性表面活性物質には、例えばアルキルポリ（エチレンオキシド）、アルキルポリグルコシド（例えばオクチルグルコシドおよびデシルマルトシド）、脂肪アルコール、例えばセチルアルコールおよびオレイルアルコール、コカミドＭＥＡ、コカミドＤＥＡ、およびコカミドＴＥＡが含まれる。本発明の配合物中に含まれてもよい、特定の非イオン性表面活性物質には、例えば、ポリソルベート、例えばポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ  ２０）、ポリソルベート２８、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ  ８０）、ポリソルベート８１、およびポリソルベート８５；ポロキサマー、例えばポロキサマー１８８（Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ  Ｐ１８８）、ポロキサマー４０７；ポリエチレン−ポリプロピレングリコール；またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレンおよびプロピレングリコールコポリマー（例えばプルロニックＰＦ６８等）が含まれる。
【００５３】
用語「凍結乾燥された」は、本明細書において、調製物を凍結し、そして続いて凍結内容物から氷を除去する工程を伴う、フリーズドライとして当該技術分野に知られるプロセスを経た調製物を指す。
【００５４】
用語「アミノ酸」は、本明細書において、アミノ酸（遊離アミノ酸、すなわちペプチドまたはタンパク質配列中にないアミノ酸）を指す。アミノ酸は、本発明において、限定されるわけではないが、例えば、アルギニン、グリシン、リジン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、イソロイシン、ロイシン、アラニン、フェニルアラニン、トリプトファン、セリン、システイン、メチオニン、およびプロリンを含む。
【００５５】
「薬学的組成物」は、本発明の抗体、および薬学的に許容されうるそして薬理学的に適合する賦形剤、溶媒、希釈剤、キャリアー、添加剤、分配剤（ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、送達剤、例えば保存剤、安定化剤、乳化剤、懸濁剤、増粘剤、延長送達制御剤からなる群より選択される構成要素の少なくとも１つを含む組成物を意味し、その選択および比は、投与および投薬の性質および方法に応じる。例示的な懸濁剤には、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレン、ソルビトールおよびソルビトールエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド（ａｌｕｍｉｎｕｍ  ｍｅｔａｈｙｄｒｏｘｉｄｅ）、ベントナイト、寒天（ａｇａｒ−ａｇａｒ）およびトラガカント、ならびにその混合物が含まれる。微生物作用からの保護は、多数の抗細菌剤および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、ソルビン酸等で提供可能である。組成物はまた、等張剤、例えば糖、塩化ナトリウム等も含んでもよい。組成物作用の延長は、活性剤の吸収を遅延させる剤、例えばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンで提供可能である。例示的な適切なキャリアー、溶媒、希釈剤および送達剤には、水、エタノール、ポリアルコール、およびその混合物、植物油（例えばオリーブ油）、および注射可能有機エステル（例えばオレイン酸エチル）が含まれる。例示的な賦形剤には、ラクトース、乳糖、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム等が含まれる。単独の、または別の活性剤と組み合わせた、活性剤の経口、舌下、経皮、筋内、静脈内、皮下、局所または直腸投与のための薬学的組成物を、慣用的な薬学的キャリアーとの混合物として、単位投薬型で、動物およびヒトに投与してもよい。適切な単位投薬型には、非経口型、移植物および経皮系が含まれる。
【００５６】
「薬剤（調製物）」（ｄｒｕｇ（ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ））は、ヒトおよび動物において、生理学的機能を回復するか修正するかまたは改変し、そして疾患治療および防止、診断、麻酔、避妊、美容術およびその他を提供するよう意図される、錠剤、カプセル、粉末、凍結乾燥物、注射剤、注入剤、軟膏および他の完成した投薬型の形の物質（または薬学的組成物の型の物質混合物）である。
【００５７】
「治療する」、「治療すること」、および「治療」は、生物学的障害および／または少なくとも１つのその付随する症状を軽減するかまたは排除するための方法を指す。本明細書において、疾患、障害または状態を「軽減する」ことは、疾患、障害または状態の症状の重症度および／または頻度を減少させることを意味する。さらに、本明細書において、「治療」への言及には、根治療法、対症療法および予防療法への言及が含まれる。
【００５８】
１つの側面において、治療しようとする被験体または患者は、哺乳動物、好ましくはヒト被験体である。上記被験体は、任意の年齢の男性または女性であってもよい。
用語「障害」は、本発明にしたがった治療によって改善されうる任意の状態を指す。この用語の定義には、哺乳動物を前記障害に罹患しやすくする病理学的状態を含む、慢性および急性障害または疾患が含まれる。治療すべき疾患の限定されない例には、良性および悪性腫瘍；白血病およびリンパ悪性疾患、特に乳癌、卵巣癌、胃癌、子宮内膜癌、唾液腺癌、肺癌、腎臓癌、結腸癌、甲状腺癌、膵臓癌、前立腺癌または膀胱癌；神経、グリア、星状細胞、海馬および他の腺、マクロファージ、上皮、間質性および胞胚腔の障害；炎症性、血管形成性および免疫学的障害が含まれる。本発明にしたがって治療すべき好ましい障害は、自己免疫疾患である。
【００５９】
用語「免疫反応」、「自己免疫反応」、「自己免疫炎症」は、例えば、リンパ球、抗原提示細胞、食細胞、顆粒球、および上記細胞または肝臓細胞によって産生される可溶性巨大分子（侵襲性病原体、該病原体に感染した細胞または組織、癌細胞、あるいは自己免疫または病理学的炎症の場合は正常ヒト細胞または組織の、選択性損傷、破壊またはヒト体内からの排除から生じる、抗体、サイトカイン、および補体を含む）の作用を指す。
【００６０】
用語「自己免疫疾患」は、本明細書において、個体において発生し、そして自身の（自己）抗原および／または組織に対して向けられる非悪性疾患または障害を意味する。
この定義は、限定されるわけではないが、関節リウマチ、関節症、若年性慢性関節炎、敗血症関節炎、ライム関節症、乾癬性関節炎、反応性関節炎、脊椎関節症、全身性エリテマトーデス、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、糖尿病、甲状腺炎、喘息、アレルギー性疾患、乾癬、アトピー性皮膚炎、強皮症、移植片対宿主反応、移植拒絶、移植に関連する急性または慢性免疫疾患、サルコイドーシス、川崎病、グレーブス病、ネフローゼ症候群、慢性疲労症候群、ウェゲナーの肉芽腫症、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病,顕微鏡性腎血管炎、慢性活性肝炎、ブドウ膜炎（ｕｖｅｎｉｔａ）、敗血症ショック、毒性ショック症候群、敗血症症候群、悪液質、後天性免疫不全症候群、急性横断性脊髄炎、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、アルツハイマー病、脳卒中、原発性胆汁性肝硬変、溶血性貧血、成人（急性）呼吸促迫症候群、脱毛症、限局性脱毛症、血清陰性関節症、関節症、ライター病、乾癬性関節症、潰瘍性大腸炎と関連する関節症、アトピー性アレルギー、自己免疫水疱症、尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡、天疱瘡病、線形ＩｇＡ、自己免疫溶血性貧血、クームス陽性溶血性貧血、悪性貧血、若年性悪性貧血、関節炎、原発性硬化性肝炎Ａ、特発性自己免疫肝炎、肺線維性疾患、特発性線維性肺胞炎、炎症後間質性肺疾患、間質性肺炎、慢性好酸球性肺炎、感染後間質性肺疾患、痛風関節炎、自己免疫肝炎、１型自己免疫肝炎（古典的自己免疫肝炎またはリポイド）、２型自己免疫肝炎、変形性関節症、原発性硬化性胆管炎、１型乾癬、２型乾癬、特発性白血球減少症、自己免疫好中球減少症、腎ＮＯＳ疾患、糸球体腎炎、顕微鏡性腎血管炎、円板状エリテマトーデス、特発性または雄性ＮＯＳ受精能（精子に対する自己免疫）、多発性硬化症のすべてのサブタイプ、交感性眼炎、結合組織疾患に関連する続発性肺高血圧、グッドパスチャー症候群、結節性多発動脈炎の肺症状、急性リウマチ熱、リウマチ性脊椎炎、強直性脊椎炎、スティル病、全身性硬化症、シェーグレン症候群、高安病、自己免疫血小板減少症、本態性血小板血症、自己免疫甲状腺炎、甲状腺機能亢進症、橋本病、自己免疫萎縮性甲状腺機能低下症、原発性粘液水腫、水晶体起因性ブドウ膜炎、原発性血管炎、白斑、急性肝疾患、慢性肝疾患、アレルギー、喘息、精神障害（うつ症状および統合失調症を含む        ）、Ｔｈ２型およびＴｈ１型仲介性疾患、結膜炎、アレルギー性接触性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、アルファ−Ｉアンチトリプシン欠損症、筋委縮性側索硬化症、貧血、嚢胞性線維症、サイトカイン療法に関連する疾患、脱髄性疾患、皮膚炎、虹彩毛様体炎／ブドウ膜炎／眼科神経炎、虚血再灌流傷害、虚血性脳卒中、若年性関節リウマチ、自己免疫腸疾患、自己免疫難聴、自己免疫リンパ増殖性症候群、自己免疫心筋炎、自己免疫早期卵巣機能不全および眼瞼炎を含む。この抗体はまた、上に列挙する障害の任意の組み合わせを治療することも可能である。
【００６１】
本明細書において、用語「ＴＮＦα活性が有害である障害」には、該障害に罹患している被験体におけるＴＮＦαの存在が、障害の病態生理の原因であるかまたは障害の悪化に寄与する要因であるかいずれかであるか、あるいはそう推測されることが示されてきている疾患および他の障害が含まれる。したがって、ＴＮＦα活性が有害である障害は、ＴＮＦα活性の阻害が障害の症状および／または進行を軽減すると期待される障害である。こうした障害を、例えば、障害に罹患している被験体の生物学的液体におけるＴＮＦα濃度の増加（例えば被験体の血清、血漿、滑液等におけるＴＮＦα濃度の増加）によって検出してもよく、これを、例えば上述の抗ＴＮＦα抗体を用いて検出してもよい。ＴＮＦα活性が有害である障害には多くの例がある。特定の障害の治療において、障害に適した抗体および抗体断片の使用を以下にさらに論じる。
【００６２】
Ａ．敗血症
腫瘍壊死因子は、敗血症の病態生理に確立された役割を果たし、低血圧、心筋抑制、血管漏出症候群、臓器壊死、毒性二次的仲介因子の放出の刺激、および凝固カスケードの活性化を含む生物学的影響を伴う（例えばＭｏｅｌｌｅｒ  Ａ．ら（１９９０），  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ２：１６２−１６９；米国特許第５２３１０２４号  Ｍｏｅｌｌｅｒら；欧州特許第２６０６１０  Ｂ１号  Ｍｏｅｌｌｅｒ  Ａ．；  Ｔｒａｃｅｙ  Ｋ．Ｊ．およびＣｅｒａｍｉ  Ａ．  （１９９４）  Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｍｅｄ．  ４５：４９１−５０３；  Ｒｕｓｓｅｌ  Ｄ．およびＴｈｏｍｐｓｏｎ  Ｒ．Ｃ．  （１９９３）  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  ４：７１４−７２１を参照されたい）。それに応じて、敗血症ショック、内毒素ショック、グラム陰性細菌によって引き起こされる敗血症、および毒性ショック症候群を含む臨床徴候のいずれにおける敗血症を治療するために、本発明にしたがったヒト抗体および抗体断片を用いてもよい。
【００６３】
さらに、敗血症治療のため、本発明にしたがった抗ＴＮＦα抗体および抗体断片を、敗血症をさらに軽減しうる１つまたはそれより多い療法剤、例えばインターロイキン−１阻害剤（ＰＣＴ公報第ＷＯ  ９２／１６２２１号および第ＷＯ  ９２／１７５８３号に記載される）、サイトカイン、インターロイキン−６（例えばＰＣＴ公報第ＷＯ  ９３／１１７９３号を参照されたい）または血小板活性化因子アンタゴニスト（例えば欧州特許出願第ＥＰ  ３７４  ５１０号を参照されたい）と、同時投与してもよい。敗血症治療のための併用療法の他の方法を、以下のサブセクションＩＩＩに論じる。
【００６４】
さらに、好ましい態様において、本発明にしたがった抗ＴＮＦα抗体および抗体断片を、治療中に、５００ｐｇ／ｍＬ、そしてより好ましくは１０００ｐｇ／ｍＬより高いＩＬ−６血清または血漿濃度を有する敗血症患者のサブグループ由来のヒトに投与する（ＰＣＴ公報第ＷＯ  ９５／２０９７８号  Ｄａｕｍ，  Ｌ．らを参照されたい）。
【００６５】
Ｂ．自己免疫疾患
腫瘍壊死因子は、多様な自己免疫疾患の病態生理において役割を果たすことが示されてきている。例えば、ＴＮＦαはまた、組織炎症を活性化する際に関与し、そして関節リウマチにおける関節破壊を引き起こしている（例えば、Ｍｏｅｌｌｅｒ  Ａ．ら（１９９０），  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ２：１６２−１６９；米国特許第５２３１０２４号  Ｍｏｅｌｌｅｒら；欧州特許第２６０６１０  Ｂ１号  Ｍｏｅｌｌｅｒ  Ａ．；  Ｔｒａｃｅｙ  Ｋ．Ｊ．およびＣｅｒａｍｉ  Ａ．、上記；  ｅｎｄ  Ｗ．Ｐ．およびＤａｙｅｒ  Ｊ．Ｍ．（１９９５）  ａｔｈ．  Ｒｈｅｕｍ．  ３８：１５１−１６０；  Ｆａｖａ  Ｒ．Ａ．ら（１９９３）  Ｃｌｉｎ．  Ｅｘｐ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ９４：２６１−２６６を参照されたい）。ＴＮＦαはまた、糖尿病における膵島細胞の死の促進およびインスリン耐性の形成にも関与している（例えばＴｒａｃｅｙおよびＣｅｒａｍｉ、上記；  ＰＣＴ公報第ＷＯ  ９４／０８６０９号を参照されたい）。ＴＮＦαはまた、多発性硬化症におけるオリゴデンドロサイトに対する細胞傷害性の形成および炎症斑の誘導にも関与している（例えばＴｒａｃｅｙおよびＣｅｒａｍｉ、上記を参照されたい）。キメラおよびヒト化ネズミ抗ｈＴＮＦα抗体が、関節リウマチの治療のために臨床的に試験されてきている（例えば、Ｅｌｌｉｏｔ  Ｍ．Ｊ．ら（１９９４）；  Ｌａｎｃｅｔ  ３４４：１１２５−１１２７；  Ｅｌｌｉｏｔ  Ｍ．Ｊ．ら（１９９４）  Ｌａｎｃｅｔ  ３４４：１１０５−１１１０；  Ｒａｎｋｉｎ  Ｅ．Ｃ．ら（１９９５）  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．  ３４：３３４−３４２を参照されたい）。
【００６６】
本発明にしたがったヒト抗体および抗体断片を、自己免疫疾患、特に、関節リウマチ、リウマチ性脊椎炎、変形性関節症および痛風関節炎、アレルギー、多発性硬化症、自己免疫糖尿病、自己免疫ブドウ膜炎および腎症候群を含む、炎症と関連するものを治療するために用いてもよい。典型的には、抗体または抗体断片を全身投与するが、特定の障害に関しては、炎症部位での抗体または抗体断片の局所投与が有益でありうる（例えば、ＰＣＴ公報第ＷＯ  ９３／１９７５１号に記載されるような、単独の、またはシクロヘキサン−イリデン誘導体と組み合わせた、関節リウマチにおける関節内への局所投与または糖尿病性潰瘍への局所適用）。本発明にしたがった抗体および抗体断片をまた、サブセクションＩＩＩにさらに記載するように、自己免疫疾患の治療に用いられる１つまたはそれより多いさらなる療法剤とともに用いてもよい。
【００６７】
Ｃ．感染性疾患
腫瘍壊死因子は、多様な感染性疾患で観察される生物学的影響の産生に関与している。例えば、ＴＮＦαは、マラリアにおける脳炎症および毛細管血栓症および梗塞の発展に関与している。ＴＮＦαはまた、髄膜炎における脳炎症、血液脳関門破壊の誘導、敗血症ショック症候群の発展、および静脈梗塞の活性化にも関与している。ＴＮＦαはまた、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）における悪液質の誘導、ウイルス増殖の刺激および中枢神経系傷害の形成にも関与している。これに対応して、本発明にしたがった抗体および抗体断片を、細菌性髄膜炎（例えば欧州特許出願第ＥＰ  ５８５  ７０５号を参照されたい）、脳マラリア、ＡＩＤＳおよびＡＩＤＳ関連複合群（ｃｏｍｐｌｅｘ）（αＣ）（例えば、欧州特許出願第ＥＰ  ２３０  ５７４号を参照されたい）、ならびに移植に続発するサイトメガロウイルス感染（例えば、Ｆｉｅｔｚｅ，  Ｅ．ら（１９９４）  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ５８：６７５−６８０を参照されたい）を含む感染性疾患の治療に用いてもよい。本発明にしたがった抗体および抗体断片をまた、感染による発熱および筋肉痛（インフルエンザなど）および感染に続発する悪液質（例えばＡＩＤＳまたはαＣに続発するもの）を含む、感染性疾患に関連する症状を軽減するために用いてもよい。
【００６８】
Ｄ．移植
腫瘍壊死因子は、同種移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）において、そして腎移植の拒絶を阻害するために、Ｔ細胞受容体ＣＤ３複合体に対して向けられるラット抗体ＯＫＴ３を用いる際に観察される副作用の形成において、重要な仲介因子と見なされてきている（例えば、Ｅａｓｏｎ  Ｊ．Ｄ．ら（１９９５）  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ５９：３００−３０５；  Ｓｕｔｈａｎｔｈｉｒａｎ  Ｍ．およびＳｔｒｏｍ  Ｔ．  В．（１９９４）  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  ３３１：３６５−３７５を参照されたい）。これに対応して、本発明にしたがった抗体および抗体断片を、同種移植および異種移植拒絶を含む移植拒絶を阻害するために、そしてＧＶＨＤを阻害するために用いてもよい。抗体または抗体断片を、単独で用いてもよいが、より好ましくは、これらは、同種移植片に対する免疫反応を阻害するかＧＶＨＤを阻害する、１つまたはそれより多い他の剤と組み合わせて用いられる。例えば、１つの態様において、本発明の抗体または抗体断片は、免疫反応の制御に関与する他のターゲット、例えば細胞表面分子ＣＤ２５（インターロイキン−２受容体−β）、ＣＤ１１ａ（ＬＦＡ−１）、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ−１）、ＣＤ４、ＣＤ４５、ＣＤ２８／ＣＴＬＡ４、ＣＤ８０（Ｂ７−１）および／またはＣＤ８６（Ｂ７−２）に向けられる１つまたはそれより多い抗体と組み合わせて用いられる。さらに別の態様において、本発明にしたがった抗体または抗体断片は、１つまたはそれより多い一般的な免疫抑制剤、例えばシクロスポリンＡまたはＦＫ５０６と組み合わせて用いられる。
【００６９】
Ｅ．悪性腫瘍
腫瘍壊死因子は、悪性腫瘍における悪液質の誘導、腫瘍増殖の刺激、転移潜在能力の増進および細胞傷害性の発展に関与している。これに対応して、本発明にしたがった抗体および抗体断片は、腫瘍増殖または転移を阻害し、そして／または悪性腫瘍に続発する悪液質を軽減するため、悪性腫瘍の治療に用いられる。抗体または抗体断片を、全身性にまたは腫瘍部位に局所的に投与してもよい。
【００７０】
Ｆ．肺障害
腫瘍壊死因子は、内皮白血球活性化の刺激、肺細胞に対する細胞傷害性の方向付け、および血管漏出症候群の誘導を含む、成人呼吸促迫症候群（αＤＳ）の病態生理に関与している。これに対応して、本発明にしたがった抗体および抗体断片を、成人呼吸促迫症候群（例えばＰＣＴ公報第ＷＯ  ９１／０４０５４号を参照されたい）、ショック肺、慢性肺炎症性疾患、肺サルコイドーシス、肺線維症、および珪肺症を含む多様な肺障害を治療するために用いてもよい。本発明にしたがった抗体および抗体断片を、以下のサブセクションＩＩＩに記載するように、肺障害の治療に用いられる１つまたはそれより多くのさらなる療法剤とともに投与してもよい。
【００７１】
Ｇ．間質性障害
腫瘍壊死因子は、炎症性腸障害の病態生理に関与している（例えば、Ｔｒａｃｙ  Ｋ．Ｊ．ら（１９８６）  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３４：４７０−４７４；  Ｓｕｎ  Ｘ−Ｍ．ら（１９８８）  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ８１：１３２８−１３３１；  ＭａｃＤｏｎａｌｄ  Ｔ．Ｔ．ら（１９９０）  Ｃｌｉｎ．  Ｅｘｐ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ８１：  ３０１−３０５を参照されたい）。キメラネズミ抗ＴＮＦα抗体は、クローン病の治療に関して臨床的に試験されている（ｖａｎ  Ｄｕｌｌｅｍｅｎ  Ｈ．Ｍ．ら（１９９５）  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １０９：１２９−１３５）。本発明にしたがったヒト抗体または抗体断片をまた、間質性障害、例えば２つの症候群、クローン病および潰瘍性大腸炎を含む、特発性炎症性腸疾患を治療するために用いてもよい。本発明にしたがった抗体および抗体断片をまた、以下のサブセクションＩＩＩに記載するように、間質性障害の治療に用いる１つまたはそれより多いさらなる療法剤とともに投与してもよい。
【００７２】
Ｈ．心臓障害
本発明にしたがった抗体および抗体断片をまた、心臓虚血（例えば、欧州特許出願第ＥＰ  ４５３  ８９８号を参照されたい）および心不全（心筋衰弱症）（例えば、ＰＣＴ公報第ＷＯ  ９４／２０１３９号を参照されたい）を含む、多様な心臓障害を治療するために用いてもよい。
【００７３】
Ｉ．その他
本発明にしたがった抗体または抗体断片をまた、ＴＮＦα活性が有害である多様な障害を治療するために用いてもよい。ＴＮＦα活性が病態生理に関与し、そしてしたがって、本発明にしたがった抗体または抗体断片を用いて治療してもよい他の疾患および障害の例には、炎症性骨障害および骨吸収疾患（例えば、Ｂｅｒｔｏｌｉｎｉ  Ｄ．Ｒ．ら（１９８６）  Ｎａｔｕｒｅ  ３１９：５１６−５１８；  Ｋｏｎｉｇ  Ａ．ら（１９８８）  Ｊ．  Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．  Ｒｅｓ．  ３：６２１−６２７；  Ｌｅｒｎｅｒ  Ｕ．Ｈ．およびＯｈｉｉｎ  Ａ．（１９９３）  Ｊ．  Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．  Ｒｅｓ．  ８：１４７−１５５；ならびにＳｈａｎｋａ  Ｇ．およびＳｔｅｒｎ  Ｐ．Ｈ．（１９９３）  Ｂｏｎｅ  １４：８７１−８７６を参照されたい）、アルコール性肝炎を含む肝炎（例えば、ＭｃＣｌａｉｎ  Ｃ．Ｊ．およびＣｏｈｅｎ  Ｄ．Ａ．（１９８９）  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ９：３４９−３５１；  Ｆｅｌｖｅｒ  Ｍ．Ｅ．ら（１９９０）  Ａｌｃｏｈｏｌ  Ｃｌｉｎ．  Ｅｘｐ．  Ｒｅｓ．  １４：２５５−２５９；およびＨａｎｓｅｎら（１９９４）  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２０：４６１−４７４を参照されたい）、ウイルス性肝炎（Ｓｈｅｒｏｎ  Ｎ．ら（１９９１）  Ｊ．  Ｈｅｐａｔｏｌ．  １２：２４１−２４５；およびＨｕｓｓａｉｎ  Ｍ．Ｊ．ら（１９９４）  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｐａｔｈｏｌ．  ４７：１１１２−１１１５を参照されたい）、および劇症肝炎；凝固障害（例えば、ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｐｏｌｌ  Т．ら（１９９０）  Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  ３２２：１６２２−１６２７；  ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｐｏｌｌ  Т．ら（１９９１）  Ｐｒｏｇ．  Ｃｌｉｎ．  Ｂｉｏｌ．  Ｒｅｓ．  ３６７：５５−６０を参照されたい）；火傷（例えば、Ｇｉｒｏｉｒ  Ｂ．Ｐ．ら（１９９４）  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２６７：Ｈ１１８−１２４；  Ｌｉｕ  Ｘ．Ｓ．ら（１９９４）  Ｂｕｒｎｓ  ２０：４０−４４を参照されたい）、再灌流傷害（例えば、Ｓｃａｌｅｓ  Ｗ．Ｅ．ら（１９９４）  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２６：１１２２−１１２７；  Ｓｅｒｒｉｃｋ  С．ら（１９９４）  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ５８：１１５８−１１６２；  Ｙａｏ  Ｙ．Ｍ．ら（１９９５）  Ｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｉｏｎ  ２９：１５７−１６８を参照されたい）、ケロイド形成（例えば、ＭｃＣａｕｌｅｙ  Ｒ．  Ｌら（１９９２）  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １２：３００−３０８を参照されたい）、瘢痕組織形成；高熱；歯周病；肥満および放射線毒性が含まれる。
【００７４】
「療法的に有効な量」は、治療中の疾患の１つまたはそれより多い症状をある程度まで緩和するであろう、治療中に投与される療法剤の量と見なされる。
用語「長期に渡る（ｃｈｒｏｎｉｃ）」投与は、長期間に渡って、最初の療法効果（活性）を維持するための、急性（短期間）投与様式とは対照的な、剤（単数または複数）の連続（長期間）投与を指す。
【００７５】
「間欠性（ｉｎｔｅｒｍｉｔｔｅｎｔ）」投与は、中断なしに連続しては行われず、むしろ性質として周期性である治療を指す。
本明細書において、そして以下の請求項において、背景が別に必要としない限り、用語「有する（ｈａｖｅ）」、「含まれる（ｉｎｃｌｕｄｅ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」またはその変形、例えば「有する（ｈａｓ）」、「有すること（ｈａｖｉｎｇ）」、「含まれる（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「含まれること（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」または「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、言及する整数または整数群の包含と理解されるものとするが、任意の他の整数または整数群の排除とは理解されないものとする。
【００７６】
発明の詳細な説明
水性組成物
本発明は、適切な緩衝剤（単数または複数）中の適切な量の組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体、１つまたはそれより多い適切な安定化剤、ならびに適切な表面活性物質および等張性剤より選択される他の賦形剤を含み、場合によって凍結乾燥されていてもよい、新規の改善された水性組成物に関する。前記組成物は、タンパク質（抗体）凝集物の形成を防止し、そして望ましい期間に渡って、療法化合物の有効性および安定性を維持する。
【００７７】
アダリムマブおよびインフリキシマブは、組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体の例である。インフリキシマブはキメラ抗体の例である。アダリムマブはヒト抗体の例である。好ましい態様において、組成物中で用いる抗体はヒト抗体である。より好ましい態様において、組成物中で用いる抗体は、ヒト抗ヒトＴＮＦα抗体である。さらに別の態様において、組成物はＤ２Ｅ７およびＤ２Ｅ７と他の抗体の組み合わせを含む。Ｄ２Ｅ７抗体は、一般的にアダリムマブとして知られ、ＴＮＦαに対する結合に関する高いアフィニティ、低い解離動力学、および高い中和能を有することが知られる。アダリムマブは、商標名Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）のもとに、薬剤市場で入手可能である。本明細書全体で用いる名称、アダリムマブおよびＤ２Ｅ７は、同じヒトモノクローナル抗体を指す。好ましい態様において、モノクローナル抗体はアダリムマブまたはその抗原結合部分である。
【００７８】
いくつかの態様において、組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体またはその抗原結合部分は、一般的に、最大２００ｍｇ／ｍＬの療法量で存在する。好ましい態様において、療法量は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、療法量は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約１００ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、療法量は、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約１００ｍｇ／ｍＬである。さらにより好ましい態様において、療法量は、約１００ｍｇ／ｍＬである。
【００７９】
当該水性組成物は、薬学的調製物を安定化させる、他の薬学的に許容されうる賦形剤と組み合わせて、適切な緩衝溶液を含む。使用可能な適切な緩衝溶液は、当該技術分野に知られる群より選択され、そしてこれは文献中に見出されうる。１つの態様において、適切な緩衝溶液は、限定されるわけではないが、酢酸イオンに基づく緩衝剤（または緩衝系）を含む。好ましい態様において、適切な緩衝剤は、酢酸緩衝剤を含む。さらにより好ましい態様において、酢酸緩衝剤は、酢酸と組み合わせた、酢酸ナトリウム三水和物より選択される。
【００８０】
緩衝溶液は、一般的に、約１ｍＭ〜約１００ｍＭの濃度で用いられる。好ましい態様において、緩衝剤濃度は、約１ｍＭ〜約５０ｍＭである。より好ましい態様において、緩衝剤濃度は、約１ｍＭ〜約２０ｍＭである。さらにより好ましい態様において、緩衝剤濃度は、約５ｍＭである。
【００８１】
いくつかの態様において、酢酸ナトリウム三水和物は、最大１．２ｍｇ／ｍＬの量で存在する。好ましい態様において、酢酸ナトリウム三水和物の量は、約０．４ｍｇ／ｍＬ〜約１．２ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、酢酸ナトリウム三水和物の量は、約０．４ｍｇ／ｍＬ〜約０．５ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、酢酸ナトリウム三水和物の量は、０．４３６ｍｇ／ｍＬである。
【００８２】
１つの態様において、液体組成物は、用いるモノクローナル抗体に応じて、４．０〜約７．０の範囲のｐＨを維持する。好ましい態様において、用いる緩衝剤は、約４．５〜６．０の範囲の組成物のｐＨを維持する。より好ましい態様において、ｐＨは、約５．０〜６．０に維持される。より好ましい態様において、ｐＨは、約５．５に維持される。
【００８３】
前記水性組成物は、多様なストレス効果、例えば撹拌、剪断、高温、凍結等から、タンパク質組成物を保護するために用いられる、薬学的に許容されうる賦形剤である、適切な表面活性物質を含む。適切な表面活性物質には、限定されるわけではないが、ポリソルベートまたはポロキサマー、あるいはポリソルベートおよびポロキサマーの組み合わせが含まれる。好ましい態様において、適切な表面活性物質は、ポリソルベートである。好ましい態様において、適切な表面活性物質は、ポロキサマーである。好ましい態様において、適切な表面活性物質は、ポリソルベートおよびポロキサマーの組み合わせである。より好ましい態様において、ポリソルベートは、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０（商標Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０またはＴｗｅｅｎ（登録商標）８０としても流通している）である。より好ましい態様において、ポロキサマーはポロキサマー１８８（商標Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ  Ｐ１８８（登録商標）としても流通している）である。別の好ましい態様において、適切な表面活性物質は、ポリソルベート２０／ポリソルベート８０およびポロキサマー１８８の組み合わせである。
【００８４】
いくつかの態様において、ポリソルベート２０は、最大１０ｍｇ／ｍＬの量で存在する。好ましい態様において、ポリソルベート２０の量は、約０．０５ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、ポリソルベート２０の量は、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、ポリソルベート２０の量は、約０．５ｍｇ／ｍＬである。
【００８５】
いくつかの態様において、ポリソルベート８０は、最大１０ｍｇ／ｍＬの量で存在する。好ましい態様において、ポリソルベート８０の量は、約０．０５ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、ポリソルベート８０の量は、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、ポリソルベート８０の量は、約０．５ｍｇ／ｍＬである。
【００８６】
いくつかの態様において、ポロキサマー１８８は、最大１０ｍｇ／ｍＬの量で存在する。好ましい態様において、ポロキサマー１８８の量は、約０．０５ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、ポロキサマー１８８の量は、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、ポロキサマー１８８の量は、約０．５ｍｇ／ｍＬである。
【００８７】
いくつかの態様において、ポリソルベート２０／ポリソルベート８０およびポロキサマー１８８の組み合わせは、最大１０ｍｇ／ｍＬの量のポリソルベート８０および最大１０ｍｇ／ｍＬの量のポロキサマー１８８で存在する。好ましい態様において、ポロキサマー１８８の量は、約０．０５ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬであり、そしてポリソルベート２０／ポリソルベート８０の量は、約０．０５ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、ポロキサマー１８８の量は、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬであり、そしてポリソルベート２０／ポリソルベート８０の量は、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、ポリソルベート２０／ポリソルベート８０の量は、約０．５ｍｇ／ｍＬであり、そしてポロキサマー１８８の量は、約１．０ｍｇ／ｍＬである。
【００８８】
水性組成物は、薬学的に許容されうる賦形剤であり、そして製造、保存、および使用中に、化学的および／または物理的分解から薬学的活性成分を保護する、１つまたはそれより多い適切な安定化剤を含む。１つの態様において、安定化剤には、限定されるわけではないが、アミノ酸、オリゴ糖、あるいはその適切な誘導体または混合物が含まれる。別の好ましい態様において、適切な安定化剤はトレハロースである。別の好ましい態様において、適切な安定化剤はプロリンである。別の好ましい態様において、適切な安定化剤は、トレハロースおよびプロリンの組み合わせである。別の好ましい態様において、適切な安定化剤は、トレハロースおよびアルギニンの組み合わせである。
【００８９】
別の態様において、安定化剤としてまた使用してもよいオリゴ糖にはトレハロースが含まれる。
いくつかの態様において、トレハロースは、最大１５０ｍｇ／ｍＬの量で存在する。好ましい態様において、トレハロースの量は、約２５ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、トレハロースの量は、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約１００ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、トレハロース二水和物の量は、約８０ｍｇ／ｍＬである。
【００９０】
別の態様において、トレハロースおよびアルギニンの組み合わせが安定化剤として選択される。いくつかの態様において、トレハロースは最大１５０ｍｇ／ｍＬの量で存在し、そしてアルギニンは最大１．０ｍｇ／ｍＬの量で存在する。好ましい態様において、トレハロースの量は約２５ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬであり、そしてアルギニンの量は０．０５〜１．０ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、トレハロースの量は約５０ｍｇ／ｍＬ〜約１００ｍｇ／ｍＬであり、そしてアルギニンの量は、０．０５〜０．２ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、トレハロース二水和物の量は約８０ｍｇ／ｍＬであり、そしてアルギニン塩酸塩の量は約０．１ｍｇ／ｍＬである。
【００９１】
別のこうした態様において、安定化剤として用いてもよいアミノ酸はプロリンである。
いくつかの態様において、プロリンは、最大４０ｍｇ／ｍＬの量で存在する。好ましい態様において、プロリンの量は、約５ｍｇ／ｍＬ〜約４０ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、プロリンの量は、約２０ｍｇ／ｍＬ〜約３５ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、プロリンの量は、約２７ｍｇ／ｍＬである。
【００９２】
いくつかの態様において、トレハロースおよびプロリンの組み合わせは、最大１５０ｍｇ／ｍＬの量のトレハロース、および最大４０ｍｇ／ｍＬの量のプロリンである。好ましい態様において、トレハロースの量は約２５ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬであり、そしてプロリンの量は約５ｍｇ／ｍＬ〜約４０ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、トレハロースの量は約２０ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬであり、そしてプロリンの量は約１０ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬである。より好ましい態様において、トレハロース二水和物の量は約４０ｍｇ／ｍＬであり、そしてプロリンの量は約１３．５ｍｇ／ｍＬである。
【００９３】
いくつかの態様において、水性組成物は、５０〜２００ｍｇ／ｍＬの組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体、０．４〜１．２ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび／または５〜４０ｍｇ／ｍＬのプロリンあるいは２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロース、および０．０５〜０．５ｍｇ／ｍＬのアルギニン、ｐＨ５．０〜６．０までの氷酢酸、０．１ｍｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０を含む。水性組成物の好ましい態様において、組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体はアダリムマブである。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０を含む。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、０．１ｍｇ／ｍＬのアルギニン塩酸塩、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０を含む。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２７ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０を含む。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、４０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、１３．５ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０を含む。
【００９４】
いくつかの態様において、水性組成物は、５０〜２００ｍｇ／ｍＬの組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体、０．４〜１．２ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび／または５〜４０ｍｇ／ｍＬのプロリンあるいは２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロース、および０．０５〜０．５ｍｇ／ｍＬのアルギニン、ｐＨ５．０〜６．０までの氷酢酸、０．１ｍｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含む。水性組成物の好ましい態様において、組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体はアダリムマブである。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含む。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、０．１ｍｇ／ｍＬのアルギニン塩酸塩、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含む。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２７ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含む。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、４０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、１３．５ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含む。
【００９５】
いくつかの態様において、水性組成物は、５０〜２００ｍｇ／ｍＬの組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体、０．４〜１．２ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロースおよび／または５〜４０ｍｇ／ｍＬのプロリンあるいは２５〜１５０ｍｇ／ｍＬのトレハロース、および０．０５〜０．５ｍｇ／ｍＬのアルギニン、ｐＨ５．０〜６．０までの氷酢酸、０．１ｍｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８を含む。好ましい態様において、組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体はアダリムマブである。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、ｐＨ５．５までの氷酢酸、１ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８を含む。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、８０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、０．１ｍｇ／ｍＬのアルギニン塩酸塩、ｐＨ５．５までの氷酢酸、１ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８を含む。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、２７ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、１．０ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８を含む。より好ましい態様において、組成物は、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ、０．４３６ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物、４０ｍｇ／ｍＬのトレハロース二水和物、１３．５ｍｇ／ｍＬのプロリン、ｐＨ５．５までの氷酢酸、１．０ｍｇ／ｍＬのポロキサマー１８８を含む。
【００９６】
さらに、前記組成物は、当業者に周知の１つまたはそれより多い他の適切な賦形剤をさらに含んでもよい。
上記組成物は、静脈内、皮下または筋内投与に適している。
【００９７】
いくつかの態様において、液体組成物は、時間ゼロでの安定性の測定値に比較して、さらなるタンパク質凝集プロセスまたは修飾がないように保存安定性を維持する。
治療法および水性組成物の使用
別の態様において、本発明は、本発明の薬学的組成物の療法的有効量を哺乳動物に投与する工程を含む、哺乳動物を治療するための方法であって、哺乳動物がアダリムマブで有効に治療されうる疾患または障害を有していてもよい、前記方法に関する。
【００９８】
好ましい態様において、哺乳動物はヒトである。
提供する組成物で治療してもよい疾患または障害には、限定されない例として、活性（中程度から重度の）関節リウマチ、活性乾癬性関節炎、活性強直性脊椎炎、慢性（中程度から重度の）尋常性乾癬、（中程度から重度の）潰瘍性大腸炎、体軸性脊椎関節炎、活性化膿性汗腺炎、若年性特発性関節炎、（中程度から重度の）クローン病、ブドウ膜炎、活性腱付着部炎関連関節炎が含まれる。本発明の組成物で治療してもよい、さらなる疾患または障害には、米国特許第６０９０３８２号および第８２１６５８３号に記載されるものが含まれ、該文献の適切な部分は、本明細書に援用される。
【００９９】
提供する薬学的組成物を、全身注射によって、例えば静脈内もしくは皮下注射によって、または筋内注射によって；あるいは適切な部位への注射または適用によって、例えば部位が手術中に曝露された際に部位への直接注射または直接適用によって；または局所適用によって、治療が必要な被験体に投与してもよい。
【０１００】
１つの態様において、本発明は、関節リウマチを治療し、そして／または防止するための方法であって、治療の必要がある哺乳動物に、療法的に有効な量の提供するアダリムマブ組成物の１つを投与する工程を含む、前記方法に関する。
【０１０１】
提供する組成物中のアダリムマブの療法的有効量は、治療しようとする状態、状態の重症度、以前の療法、および患者の病歴、および療法剤に対する反応に応じる。直ちに、または多数回の投与に渡って、患者に投与してもよいように、主治医の判断にしたがって、適切な用量を調整してもよい。
【０１０２】
１つの態様において、成人用量あたりのアダリムマブの有効量は、約１〜５００ｍｇ／ｍ２、または約１〜２００ｍｇ／ｍ２、または約１〜４０ｍｇ／ｍ２、または約５〜２５ｍｇ／ｍ２である。
【０１０３】
あるいは、平坦な用量を投与してもよく、その量は、２〜５００ｍｇ／用量、２〜１００ｍｇ／用量または約１０〜８０ｍｇ／用量の範囲であってもよい。
用量を週１回より多く投与する場合、例示的な用量範囲は、前述の用量範囲と同じであるか、またはそれより低く、そして好ましくは、２５〜１００ｍｇ／用量の用量範囲で、週あたり２回または３回投与される。
【０１０４】
別の態様において、注射による投与のために許容されうる用量は、８０〜１００ｍｇ／用量を含むか、あるいは８０ｍｇ／用量を含む。
用量を毎週、１週おき、または数週（例えば２から８週）離して投与してもよい。
【０１０５】
１つの態様において、アダリムマブは、単一皮下（ＳＣ）注射によって、４０ｍｇ／ｍＬの用量で投与される。
いくつかの場合、患者の状態における改善は、少なくとも３週間の期間に渡って、週１〜３回、薬学的組成物の最大約１００ｍｇの用量を投与することによって達成されうる。望ましいレベルの改善を達成するため、より長い期間に渡る治療が必要である可能性もある。不治の慢性状態に関しては、治療措置を不確定に続けてもよい。小児科患者（４歳〜７歳）に関しては、適切な治療措置には、０．４ｍｇ／ｋｇ〜４ｍｇ／ｋｇのアダリムマブの用量を週１回またはそれより多く投与する工程を含んでもよい。
【０１０６】
別の態様において、本発明の薬学的組成物を、バルク配合中で調製してもよく、そしてこうしたものとして、薬学的組成物の構成要素は、投与に必要であろうよりも多い量で存在し、そして投与前に適切に希釈される。
【０１０７】
薬学的組成物を、単一療法剤として、または必要であるようにさらなる療法剤と組み合わせて投与してもよい。したがって、１つの態様において、治療し、そして／または防止するために提供する方法を、別の活性剤の療法的有効量の投与と組み合わせて用いる。他の活性剤を、本発明の薬学的組成物の投与前、投与中または投与後に投与してもよい。他の活性剤を、提供する組成物の一部として、あるいは別個の配合物として投与してもよい。
【０１０８】
提供する薬学的組成物の投与を、非経口、経口、頬、鼻、直腸、腹腔内、皮内、経皮、皮下、静脈内、動脈内、心内、脳室内、頭蓋内、気管内、クモ膜下腔内、筋内注射、硝子体内、および局所適用を含む、多様な方式で実行してもよい。
【０１０９】
本発明の薬学的組成物は、非経口投与、すなわち皮下、筋内、静脈内、腹腔内、髄内、関節内、滑膜内および／またはクモ膜下腔内投与に特に有用である。非経口投与をボーラス注射または連続注入によって行ってもよい。注射用の薬学的組成物は、単位投薬型であってもよく、例えば限定されるわけではないが、アンプル、バイアル、あらかじめ充填したシリンジ中であってもよいし、または保存剤が添加された多用量コンテナ中にあってもよい。さらに、最近、いくつかの薬剤送達アプローチが開発されてきており、そして本発明の薬学的組成物は、これらの新規方法、例えばＩｎｊｅｃｔ−ｅａｓｅ（登録商標）、Ｇｅｎｊｅｃｔ（登録商標）、ＧｅｎＰｅｎ（登録商標）などのインジェクター、ならびにＭｅｄｉＪｅｃｔｏｒ（登録商標）およびＢｉｏＪｅｃｔｏｒ（登録商標）などの無針デバイスによる投与に適している。本発明の薬学的組成物はまた、投与の未だに発見されていない様式にも適応しうる。Ｌａｎｇｅｒ，  １９９０，  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ２４９：１５２７−１５３３もまた参照されたい。
【０１１０】
また、提供する薬学的組成物をデポ調製物として配合してもよい。こうした長期作用配合物を、移植（例えば皮下または筋内）によって、または筋内注射によって投与してもよい。したがって、例えば、適切なポリマーまたは疎水性物質（例えば許容されうる油中のエマルジョンとして）、またはイオン交換樹脂を用いて、あるいは難溶性誘導体として、例えば難溶性塩として、配合物を修飾してもよい。
【０１１１】
薬学的組成物を、望ましい場合、バイアル、パッケージまたはディスペンサーデバイス中で提供してもよく、これらは活性成分を含む１つまたはそれより多い単位投薬型を含有してもよい。１つの態様において、ディスペンサーデバイスは、すぐに注射可能な液体配合物の単回用量を含むシリンジを含んでもよい。シリンジには、投与のための使用説明書が付随していてもよい。
【０１１２】
別の態様において、本発明は、本発明の水性薬学的組成物を含有するキットまたはコンテナを提供する。水性薬学的組成物中のポリペプチド濃度は、広い範囲で多様であってもよいが、一般的に、約１〜約２００ｍｇ／ｍＬの水性配合物の範囲内である。キットにはまた、使用のための使用説明書が付随していてもよい。
【０１１３】
産生のための方法
上記組成物を産生するための方法は、酢酸緩衝剤の水相への添加、その後、任意の順での以下の構成要素：トレハロース、プロリンまたはその組み合わせの群より選択されるオスモライトおよび／または安定化剤；組換えモノクローナル抗ＴＮＦα抗体；ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ポロキサマー１８８、またはその組み合わせの群より選択される表面活性物質の添加を含む。
【０１１４】
技術
１．試験試料中のタンパク質濃度決定。
ＵＶ分光測定プレートにおける２８０ｎｍの波長でのＵＶ分光測定を用いて、タンパク質濃度を決定した。
【０１１５】
各試料を適切なプラセボ溶液で、〜０．５ｍｇ／ｍＬの濃度まで希釈した。１５０μＬの希釈試料をＵＶ分光測定プレートのウェル内に入れた。２８０ｎｍの波長でプレート読み取り装置を用いて、プレート溶液の光学密度を測定した。適切なプラセボ溶液を参照溶液として用いた。
【０１１６】
ｍｇ／ｍＬでのタンパク質濃度（Ｃ）を以下の公式によって計算した：
【０１１７】
【化１】
2020506955.tif 000003
【０１１８】
Ａ２８０は２８０ｎｍの波長での光学密度値であり；
εは研究タンパク質に関する消光値であり；
ｂは試料の全体の希釈比であり；
ｌはプレートウェルあたりの層の厚さであり；１５０μＬに関しては、ｌ＝０．４２ｃｍである。
【０１１９】
２．緩衝剤置換および試料濃縮。
試料のダイアフィルトレーションおよび濃縮を、加圧下で、Ｓｔｉｒｒｅｄ  Ｃｅｌｌ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）濃縮セル中で行った。
【０１２０】
３．「ＰＥＧ凝集」。
ＰＥＧ  ６０００溶液の調製。
研究添加配合物中、２０〜２５％の質量濃度を有するＰＥＧ  ６０００溶液を調製した。生じた溶液を、０．４５μｍ  Ｄｕｒａｐｏｒｅフィルターを通じてろ過した。
【０１２１】
試料の計算量、添加溶液、および２０〜２５％  ＰＥＧ  ６０００溶液を、９６ウェルＵＶ分光測定プレート内にトランスファーし、ウェルあたりのＰＥＧ６０００濃度が０〜１８％であり、そしてウェルあたりのタンパク質濃度が１ｍｇ／ｍＬであるようにした。ウェル中の生じた溶液すべてを、ピペッティングによってよく混合した。
【０１２２】
次に、溶液の濁度（ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｄｅｇｒｅｅ  ｏｆ  ｔｕｒｂｉｄｉｔｙ）を視覚的に評価し、そして溶液の光学密度を４００ｎｍの波長で測定した。試料がより安定でなければ、より低いＰＥＧ  ６０００濃度が可視凝集物（オパール色）を形成するであろう。溶液の濁度を、溶液調製の１日後またはそれより後にもまた評価した。
【０１２３】
４．動的光散乱（ＤＬＳ）技術を用いた、タンパク質均一性および凝集点決定。
サイズ測定モードで、ＺｅｔａｓｉｚｅｒナノＺＳＰ上で、研究試料均一性決定を行った。この目的のため、溶液０．０５ｍＬを無塵使い捨てプラスチックキュベット内に入れた。
【０１２４】
・分析モデル：タンパク質分析。
・測定前にその温度で３０秒間保持。
・各点で、３つの複製で、平均１３回の測定。
【０１２５】
研究タンパク質凝集点の決定をＺｅｔａｓｉｚｅｒナノＺＳＰ上で行った。この目的のため、溶液を石英無塵キュベット内に入れ、温度トレンド測定モードで、散乱光強度を連続して測定しながら、装置中で次第に加熱した。
【０１２６】
・分析モデル：タンパク質分析。
・温度トレンド、モード（ｍｏｄ）：タンパク質凝集点。１．５℃の加熱工程で、５０〜８５℃。
【０１２７】
・測定前にその温度で３０秒間保持。
・各点で、１つの複製で、平均１５回の測定。
タンパク質凝集点を自動的に計算する装置ソフトウェアを用いて、温度トレンドをプロットした（凝集点）。
【０１２８】
５．「熱ストレス５０℃」技術による熱安定性決定。
試験試料を２つの部分に分け、そして別個のチューブに入れた：各配合物に関して１つのチューブを＋４℃の冷蔵庫で保存し、残りをインキュベーターに入れ、そして明記する時間、５０℃でインキュベーションした。ウォームアップ期間が完了したら、チューブをインキュベーターから取り出し、室温で約１５分間静置し、そして本明細書にしたがった分析に供した。
【０１２９】
６．「振盪試験」技術によるコロイド安定性決定
試験試料を各２００μＬの２つの部分に分け、そしてガラスバイアルに入れ、各配合物の１つのバイアルを＋４℃の冷蔵庫で保存し、残りを熱撹拌装置に入れ、そして明記する時間、２〜８℃、８００ｒｐｍで振盪した。ストレスが完了したら、チューブを熱振盪装置から取り出し、そして本明細書にしたがった分析に供した。
【０１３０】
７．凍結濃縮（ｃｒｙｏｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）技術によるコロイド安定性決定。
試験試料を２つの部分に分け、そしてポリマーチューブに入れた：各配合物に関して１つのチューブを＋４℃の冷蔵庫で保存し、残りを凍結チャンバーに入れ、そして明記する時間、マイナス１６〜２０℃で保存した。ストレスが完了したら、チューブを凍結チャンバーから取り出し、内容物が完全に融解するまで室温で静置し、ボルテックスを用いて溶液を混合し、そして本明細書にしたがった分析に供した。
【０１３１】
８．サイズ排除高性能液体クロマトグラフィ（ＳＥ−ＨＰＬＣ）技術による試料純度決定。
カラム：Ｔｏｓｏｈ  ＴＳＫ−ＧｅｌＧ３０００ＳＷＸＬ  ７．８ｍｍ  ＩＤｘ３０ｃｍ、カタログ番号０８５４１。
【０１３２】
カラム温度：２５℃。
移動相流速：０．７ｍＬ／分。
注入体積：２０μＬ。
【０１３３】
試料濃度：５ｍｇ／ｍＬ。
検出装置波長：２２０ｎｍ。
溶出時間：２３分間。
【０１３４】
移動相：無水リン酸水素二ナトリウム：７．１ｍｇ／ｍＬ。塩化ナトリウム：１７．５４ｍｇ／ｍＬ。
移動相のｐＨをオルトリン酸で７．０に調整した。
【０１３５】
９．Ｃａｌｉｐｅｒ  ＬａｂＣｈｉｐ  ＧＸ  ＩＩ装置を用いた試料酸−塩基プロファイル決定。
９．１．試料調製。
【０１３６】
試料を１ｍｇ／ｍＬの濃度に希釈した。５ｍｇ／ｍＬカルボキシペプチダーゼＢ（ｃｐＢ）溶液２μＬを、２００μＬの生じた溶液に添加した。これを撹拌し、そして３７℃で２時間インキュベーションした。Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ遠心管中、３回の水交換に対して試験試料を透析し、そして２ｍｇ／ｍＬに濃縮した。
【０１３７】
９．２．作業溶液調製。
ＨＴタンパク質チャージバリアント標識キットを用いて、製造者の方法にしたがって、作業溶液およびアッセイ試料を含むプレートを調製した。
【０１３８】
９．３．チップ調製。
タンパク質チャージバリアント緩衝剤キット由来の緩衝溶液を用いて、製造者の方法にしたがって、チップおよび緩衝剤を含むチューブの調製を行った。
【０１３９】
アッセイ開始は標準的操作である。タンパク質チャージバリアント６８ｓアッセイ。
１０．還元および非還元条件下での、Ｃａｌｉｐｅｒ  Ｌａｂｃｈｉｐ  ＧＸ  ＩＩ装置を用いた、試料純度決定。
【０１４０】
１０．１．アッセイ試料調製物。
還元条件下での緩衝剤のための２４．５μＬの１Ｍ  ＤＴＴおよび非還元条件下での緩衝剤のための２４．５μＬの１Ｍ  ＩＡＭを補った、７００μＬのＨＴタンパク質発現試料緩衝液を用いて、変性および還元溶液を調製した。試料を２ｍｇ／ｍＬの濃度に希釈した。２つのマイクロチューブを各試料に関して調製し、変性緩衝液３５μＬを一方に添加し、還元緩衝液３５μＬを他方に添加した。試料を１００℃で５分間変性させた。チューブをボルテックスし、次いで、７０μＬの水を各チューブに添加し、そして混合した。４４μＬの各試料を、分析のため、９６ウェルプレートにトランスファーした。
【０１４１】
１０．２．作業溶液調製およびチップ装填。
ＨＴタンパク質発現試薬キットを用いて、標準法にしたがって、作業溶液およびチップ調製を行った。アッセイ開始は標準的操作である。ＨＴタンパク質発現２００アッセイ。
【０１４２】
１１．イオン交換（ＩＥ）ＨＰＬＣを用いた、試料酸−塩基プロファイル。
カラム：ＤＩＯＮＥＸ  ＰｒｏＰａｃｋ  ＷＣＸ−１０  ４ｍｍｘ２５０ｍｍ（Ｔｏｓｏｈ  ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、日本）；
プレカラム：Ｄｉｏｎｅｘ  ＰｒｏＰａｃｋ  ＷＣＸ−１０Ｇ
移動相：溶出剤Ａ：０．０１Ｍ  ２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳＡ）、ｐＨ６．０
溶出剤Ｂ：０．０１Ｍ  ＭＥＳＡ、０．４Ｍ塩化ナトリウム、ｐＨ５．５；
注入体積：４０μＬ；
流速：０．５ｍＬ／分；
カラム温度：２５℃；
オートサンプラー温度；５℃；
検出波長：２８０ｎｍ。
【０１４３】
勾配：相Ａ９５−０−９５％。
１２．還元および非還元条件下でのポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）による純度決定。
【０１４４】
ガラスプレート中、ドデシル硫酸ナトリウムの存在下で、４％ＰＡＧＥの濃縮層および分離層：還元条件のための１２．５％ＰＡＧ、非還元条件のための８％ＰＡＧからなる、ＰＡＧを調製した。
【０１４５】
垂直電気泳動デバイスのための操作マニュアルにしたがって、電気泳動チャンバーを組み立て、そして設置した。試料を精製水で１ｍｇ／ｍＬの最終濃度に希釈することによって、標本を調製した。４０μｇに同等な体積を取り、そして試験試料の調製した標本を、３：１（ｖ／ｖ）の比で、２−メルカプトエタノールを含有する（還元条件）、および２−メルカプトエタノールを含有しない（非還元条件）、試料適用緩衝溶液と混合した。生じた溶液を、（９９±１）℃の温度で３分間（２−メルカプトエタノールを含有する試料）、および（９９±１）℃の温度で１分間（２−メルカプトエタノールを含有しない試料）、インキュベーションした。溶液を室温まで冷却し、混合し、そして泳動緩衝溶液の層の下で、ＰＡＧウェルにトランスファーした。
【０１４６】
水冷却系を用い、直流モードで、電気泳動を行った。電源パラメータを以下のように設定した：色素先端がスタッキングゲルを通過した際、電圧は１１０Ｖであった。色素先端が下部ランニングゲルに５〜７ｍｍ入ったら、電圧を１８０Ｖに増加させた。色素先端がゲルの下端に到達したら、電源を切った。
【０１４７】
電気泳動が終了したら、ゲルをガラスから分離し、そして固定溶液で、タンパク質を室温で１６〜１８時間固定した。さらに、ゲルを染色し（酸ブルー８３溶液）、そしてバンドが明確に見えるまで洗浄した。ゲルをスキャンした。ＧｅｌＰｒｏソフトウェアを用いて、試験試料中の純度および不純物を評価した。
【０１４８】
１３．比活性決定。
ＴＮＦαに特異的に結合し、そして中和する能力であって、次に、アクチノマイシンＤの存在下で、ＴＮＦαに対する感受性が増加している培養物の変異体である、ＷＥＨＩ−１３  ｖａｒ培養物（線維肉腫、マウス（Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ））に細胞傷害効果を有し、そしてその死を引き起こす前記能力によって、試料比活性を評価した。ＴｅｃａｎＥｖｏ  ２００ロボットステーションを用いて試料調製を行い、ＲＰＭＩ１６４０、２ｍＭ  Ｇｌｎ、１０％ＦＢＳ、２．５μｇ／ｍＬのアクチノマイシンＤ、５μｇ／ｍＬのゲンタマイシンをＱＭ（定量化培地）として用いた。
【０１４９】
試験抗体試料を、２０より多くない希釈工程で、５０μｇ／ｍＬに希釈し、そしてロボットステーションに入れた。ＴｅｃａｎＥｖｏ２００を用いて、１０，０００〜０．５ｎｇ／ｍＬの範囲で、ＲＳおよびＩＳの３つの独立の希釈を培養プレート中で調製し、５００ｐｇ／ｍＬのＴＮＦα溶液を調製した希釈物に添加した。生じた混合物を撹拌し、そして室温で１時間インキュベーションした。
【０１５０】
インキュベーション後、（０．５±０．１）ｘ１０６細胞／ｍＬのＷＥＨＩ−１３  ｖａｒ細胞懸濁物を添加した。プレートをＣＯ２インキュベーターに入れ、そして（３７±１）℃の温度、５％ＣＯ２、加湿空気中で、２０〜２４時間インキュベーションした。
【０１５１】
インキュベーション期間終了時、生存色素アラマーブルーを培養プレートに添加し、そしてプレートを同じ条件下で発色するまでインキュベーションした。Ｉｎｆｉｎｉｔｅ  Ｍ２００Ｐｒｏ読み取りデバイスを用いて、５４４／５９０ｎｍの励起／発光波長で、蛍光強度を評価した。Ｍａｇｅｌｌａｎ  ７．２ソフトウェアを用いて、蛍光強度対タンパク質濃度曲線をプロットした；生じた曲線の平行整列を評価した。パーセンテージとして表す、参照試料ＥＤ５０対試験試料ＥＤ５０比として、試験試料の相対比活性を決定した。
【０１５２】
本発明を最適に理解するために、以下の実施例を提供する。これらの例は、例示目的のためにのみ提供され、そして本発明の範囲をいかなる意味でも制限するとは見なされないものとする。
【０１５３】
本明細書に引用するすべての刊行物、特許および特許出願は、本明細書に含まれる。上記発明は、例示のため、そして明確にする目的のための例として、ある程度詳細に記載されているが、本明細書に開示する解説に基づいて、当業者が認識するであろうように、本発明の開示する態様の精神および範囲から逸脱することなく、特定の変化および修飾を行ってもよい。
【実施例】
【０１５４】
実施例１．緩衝溶液の性質の選択
研究配合物。
この研究のため、４つの緩衝溶液を選択し、そして元来のＨｕｍｉｒａ調製配合物（５０ｍｇ／ｍＬおよび１００ｍｇ／ｍＬのタンパク質含量を有する配合物に関するもの）を対照として用いた。
【０１５５】
【表１】
2020506955.tif 000004
【０１５６】
１．１．ＰＥＧ凝集によるコロイド安定性決定。
各試料に関して、３つ組で、「ＰＥＧ凝集」試験を行った。方法３にしたがって、分析を行った。溶液の平均光学密度に関するデータを表１に示す。結果はまた、図１にも示す。
【０１５７】
表１．調製後の溶液の平均光学密度。
【０１５８】
【表２】
2020506955.tif 000005
【０１５９】
１．２．動的光散乱（ＤＬＳ）技術を用いた、タンパク質凝集点による熱安定性決定。
方法４にしたがって分析を行った。結果を表２および図４〜８に示す。
１．３．熱ストレス５０℃法を用いた、長期曝露下での熱安定性決定。
【０１６０】
方法５にしたがって分析を行った。結果を表２に示す。
１．４．結果。
表２．緩衝溶液の性質の選択の要約。
【０１６１】
【表３】
2020506955.tif 000006
【０１６２】
１．５．実施例１からの結果。
この研究の結果に基づいて、推奨される保存配合物（さらなる添加物を排除する）は以下の通りである：
【０１６３】
【表４】
2020506955.tif 000007
【０１６４】
本配合物は、すべての試験試料の中で、最適の安定化特性：熱ストレス中の不純物の最低の増加（Ｈｕｍｉｒａ  ２配合物と同等の０．０２％）、１８％  ＰＥＧ  ６０００での凝集の非存在、および最高の凝集温度（７４℃）を示した。
【０１６５】
Ｈｕｍｉｒａ  １配合物を用いたアダリムマブは、推奨される配合物よりも低い熱安定性を有する。５．０のｐＨで、５ｍＭクエン酸緩衝溶液に基づく配合物に関して、最低のコロイドおよび熱安定性が注目された。
【０１６６】
実施例２．組成物ｐＨおよび緩衝能最適化。
研究の第一の部分の結果に基づいて、アダリムマブは、ｐＨ５．０の酢酸緩衝溶液中で最適に安定性を示した。先行技術にしたがって、アダリムマブを含む薬学的組成物に関する大部分の特許および特許出願は、４．０〜８．０のｐＨの溶液を保護する。したがって、本セクションの目的は、４未満のｐＨを持つ酢酸イオンを含む安定組成物を得る可能性を研究することであった。
【０１６７】
研究配合物。
【０１６８】
【表５】
2020506955.tif 000008
【０１６９】
２．１．ＰＥＧ凝集によるコロイド安定性決定。
各試料に関して、３つ組で、「ＰＥＧ凝集」試験を行った。方法３にしたがって分析を行った。溶液の平均光学密度に関するデータを表３に提示する。結果をまた、図２にも示す。
【０１７０】
表３．調製後の溶液の平均光学密度（４００ｎｍ）。
【０１７１】
【表６】
2020506955.tif 000009
【０１７２】
２．２．熱ストレス５０℃法を用いた長期曝露下での熱安定性決定。
方法５にしたがって分析を行った。
２．３．「振盪試験」技術によるコロイド安定性決定。
【０１７３】
方法６にしたがって分析を行った。
２．４．凍結濃縮技術によるコロイド安定性決定。
方法７にしたがって分析を行った。
【０１７４】
要約を表４に提供し、ここで熱ストレス、振盪試験および凍結濃縮の前および後の試料品質測定値を示す。
２．５．結果。
【０１７５】
表４．ストレス前および後の試料品質測定値の要約。
【０１７６】
【表７】
2020506955.tif 000010
【０１７７】
表５．
【０１７８】
【表８−１】
2020506955.tif 000011
【０１７９】
【表８−２】
2020506955.tif 000012
【０１８０】
２．６．実施例２からの結論。
・該研究は、プラセボの酸溶液中のアダリムマブの存在が、ｐＨレベルの有意な増加を導くことを示した。さらに、５．０未満のｐＨを有する組成物は、透析（還元条件下でＬａｂｃｈｉｐ  Ｃａｌｉｐｅｒで低純度）および熱ストレス（用いたすべてのアッセイ法でストレス後、低純度）中の劣った安定性を示した。
【０１８１】
・研究したすべてのうち、最も安定な試料は、５．０〜６．０のｐＨの５ｍＭ酢酸緩衝溶液中のアダリムマブである。これらは、ストレス中、純度および酸−塩基プロファイルにおいて、最低の変化を示した。しかし、アダリムマブ組成物を生成するため、より大きな緩衝能を持つ溶液を用いることが可能である。
【０１８２】
実施例３．浸透圧剤および安定化剤選択。
研究の第一の部分の結果に基づいて、アダリムマブは、ｐＨ５．０〜６．０の酢酸緩衝溶液中で最適に安定性を示した。ｐＨ５．５の配合物を、オスモライトおよび安定化剤選択の基礎として用いた。
【０１８３】
研究配合物。
【０１８４】
【表９−１】
2020506955.tif 000013
【０１８５】
【表９−２】
2020506955.tif 000014
【０１８６】
３．１．ＰＥＧ凝集によるコロイド安定性決定。
各試料に関して、３つ組で、「ＰＥＧ凝集」試験を行った。方法３にしたがって分析を行った。溶液の平均光学密度に関するデータを表６に提示する。結果をまた、図３にも示す。
【０１８７】
表６．調製後のアダリムマブ溶液の平均光学密度。
【０１８８】
【表１０】
2020506955.tif 000015
【０１８９】
３．２．動的光散乱（ＤＬＳ）技術を用いたタンパク質凝集点による熱安定性決定。
方法４にしたがって分析を行った。
３．３．熱ストレス５０℃法を用いた長期曝露下の熱安定性決定。
【０１９０】
方法５にしたがって分析を行った。
３．４．結果。
表７．ストレス前および後の試料品質測定値に関する要約。
【０１９１】
【表１１−１】
2020506955.tif 000016
【０１９２】
【表１１−２】
2020506955.tif 000017
【０１９３】
３．５．実施例３からの結論。
本研究の結果に基づいて、アダリムマブ組成物の有望な添加物は、トレハロース二水和物、グリシン、プロリン、メチオニン、およびアルギニン塩酸塩である。ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、ポロキサマー１８８を、最終薬学的組成物スクリーニングの表面活性物質として採用した。
【０１９４】
塩化ナトリウム、アルギニン、ＥＤＴＡ、リジン、グアニジンは、アダリムマブのコロイド安定性に不都合な影響を有する。
塩化ナトリウム、リジン、グアニジンは、アダリムマブの熱安定性に不都合な影響を有する。配合物中のシステイン含有は、抗体の完全断片化を導く。ＥＤＴＡ添加物を配合物に添加した際には、タンパク質酸−塩基プロファイルのシフトが注目された。
【０１９５】
実施例４．最終薬学的組成物選択。
研究の第三の部分の結果に基づいて、トレハロース二水和物、グリシン、プロリン、メチオニン、およびアルギニン塩酸塩を有望な添加物として選択した。ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、ポロキサマー１８８を、最終薬学的組成物スクリーニングの表面活性剤として採用した。
【０１９６】
研究配合物（ｍｇ／ｍＬ）。
【０１９７】
【表１２−１】
2020506955.tif 000018
【０１９８】
【表１２−２】
2020506955.tif 000019
【０１９９】
４．１．熱ストレス５０℃法を用いた長期曝露下の熱安定性決定。
方法５にしたがって分析を行った。
４．２．「振盪試験」技術によるコロイド安定性決定。
【０２００】
方法６にしたがって分析を行った。
４．３．凍結濃縮技術によるコロイド安定性決定。
方法７にしたがって分析を行った。要約を表８および９に提供し、ここで熱ストレス、振盪試験および凍結濃縮の前および後の試料品質測定値を示す。
【０２０１】
４．４．結果。
表８．ストレス前および後の試料のＳＥ−ＨＰＬＣおよびＵＶ分光測定に関する要約。
【０２０２】
【表１３−１】
2020506955.tif 000020
【０２０３】
【表１３−２】
2020506955.tif 000021
【０２０４】
【表１３−３】
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【０２０５】
表９．ストレス前および後のＬａｂＣｈｉｐ装置上の試料の酸−塩基プロファイルおよび動的光散乱を用いた均一性に関する要約
【０２０６】
【表１４−１】
2020506955.tif 000023
【０２０７】
【表１４−２】
2020506955.tif 000024
【０２０８】
【表１４−３】
2020506955.tif 000025
【０２０９】
４．４．実施例４からの結論。
該研究は、Ｈｕｍｉｒａ配合物１中のアダリムマブが、試験試料すべての中で最も熱不安定性であることを示した。５０℃１２０時間の熱ストレスは、ＳＥ−ＨＰＬＣ上で不純物の最大増加（１．２％）を、そして酸−塩基プロファイルの最大変化を導く（すべての分画の総絶対的変化はＬａｂｃｈｉｐ  Ｃａｌｉｐｅｒ装置上で３３％より大きい）。Ｈｕｍｉｒａ配合物１中の試料のコロイド安定性は代替配合物に匹敵する。
【０２１０】
Ｈｕｍｉｒａ配合物２は、代替配合物の１つに匹敵する熱安定性を有する（熱ストレス中の純度喪失は０．３８％）。しかし、本配合物中のアダリムマブの凍結融解に際して、タンパク質の顕著な凝集があり：サイズ排除ＨＰＬＣにおける凝集物の増加は７％より多く、これは偶発的な凍結があった場合に、調製物を使用不能にする。凍結後の不純物の顕著な増加はまた、ＤＬＳを用いても注目された。
【０２１１】
いくつかの添加物の添加を伴う、酢酸緩衝溶液に基づく代替配合物は、ストレス中、優れた熱およびコロイド安定性を示した。サイズ排除ＨＰＬＣは、本配合物中の不純物増加の相違を示さなかった。また、１５ｍｇ／ｍＬの濃度で、アダリムマブの安定性に対して、表面活性物質の有意な影響はなかった。
【０２１２】
ストレスを受けた試料のＤＬＳを用いた分析は、配合物中のアルギニン塩酸塩の存在が、振盪試験中、不純物の増加を減少させ、そしてメチオニンの存在が、振盪中の不純物集積を増加させることを示した。
【０２１３】
酸−塩基プロファイルの最小限の変化は、配合物１２〜２９（トレハロースおよびアルギニン塩酸塩を含有し、そしてまたＬ−プロリンも含有する配合物）に関して注目された。本研究の結果に基づいて、アダリムマブに関する有望な配合物は以下の通りである：
【０２１４】
【表１５】
2020506955.tif 000026
【０２１５】
実施例５．最終高濃縮アダリムマブ薬学的組成物確認。
推奨される薬学的組成物の安定性を確認するため、５０ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ、および１５０ｍｇ／ｍＬの濃度のアダリムマブを５０℃の熱ストレスに６日間曝露した。
【０２１６】
研究配合物。
【０２１７】
【表１６−１】
2020506955.tif 000027
【０２１８】
【表１６−２】
2020506955.tif 000028
【０２１９】
５．１．熱ストレス５０℃法を用いた長期曝露下の熱安定性決定。
方法５にしたがって分析を行った。
５．２．結果。
【０２２０】
表１０．ストレス前および後のｐＨ５．０での濃縮試料に関する要約。
【０２２１】
【表１７−１】
2020506955.tif 000029
【０２２２】
【表１７−２】
2020506955.tif 000030
【０２２３】
【表１７−３】
2020506955.tif 000031
【０２２４】
表１１．ストレス前および後のｐＨ６．０での濃縮試料に関する要約。
【０２２５】
【表１８−１】
2020506955.tif 000032
【０２２６】
【表１８−２】
2020506955.tif 000033
【０２２７】
【表１８−３】
2020506955.tif 000034
【０２２８】
一般的な結論
１．  安定アダリムマブ薬学的組成物に関するスクリーニングを、いくつかの段階で行った：緩衝溶液の性質の選択、溶液のｐＨおよび緩衝能の選択、オスモライトおよび安定化剤の選択、最終薬学的組成物の選択、ならびに最終高濃縮アダリムマブ薬学的組成物の確認。
【０２２９】
２．  研究中、以下の方法を用いて、９０を超える配合物におけるアダリムマブ熱安定性およびコロイド安定性を研究した：続く濁度（ＵＶ−分光測定）の分析を伴うＰＥＧ凝集、振盪試験、凍結融解、熱ストレス、純度（排除ＨＰＬＣ、動的光散乱および電気泳動、ＬａｂＣｈｉｐ、Ｃａｌｉｐｅｒ系の使用を含む）、および酸−塩基プロファイル（ＬａｂＣｈｉｐ、Ｃａｌｉｐｅｒおよびイオン交換ＨＰＬＣ）。
【０２３０】
３．  研究は、本発明の配合物に比較して、５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ濃度で商業的調製物中で用いられる、元来のＨｕｍｉｒａ調製配合物（Ｈｕｍｉｒａ１）の低い熱安定性を示した。
【０２３１】
４．  実験は、本発明の配合物に比較して、アダリムマブ１００ｍｇ／ｍＬの商業的調製物中で用いられる元来のＨｕｍｉｒａ調製配合物（Ｈｕｍｉｒａ２）におけるアダリムマブ凝集に対する凍結および融解プロセスの有意な影響を示した。
【０２３２】
５．  トレハロース二水和物、アルギニン塩酸塩、プロリン、ならびにポリソルベート２０、ポリソルベート８０およびポロキサマー１８８の群からの表面活性物質を補充した、ｐＨ５．０〜６．０を有する酢酸緩衝溶液に基づくアダリムマブ薬学的組成物は、元来の配合物に比較して、５０〜１５０ｍｇ／ｍＬの濃度で、より優れた熱およびコロイド安定性を示し、そして本発明の主題である。
【０２３３】
ｐＨ５．５を有する溶液に関して、アダリムマブの最適添加配合物を選択した。５．０〜６．０のｐＨ範囲の配合物におけるアダリムマブの安定性を、５０、１００および１５０ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度の試料に関して確認した。
【０２３４】
６．  １５０ｍｇ／ｍＬのアダリムマブ濃度を含む本発明の薬学的組成物の調製プロセスは、濃縮後、ＳＡＳ添加および限外ろ過デバイスの洗浄の際の続く希釈のためのタンパク質品質の喪失を伴わずに、２００ｍｇ／ｍＬまでの濃縮を可能にする。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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