(57)【要約】  本発明は、一般に免疫調節剤として有用な化合物に関する。ここで提供されるのは、化合物、当該化合物を含む組成物およびそれらを使用する方法である。本開示は、さらに癌および感染症を含む種々の疾患の処置に有用である、少なくとも一つの本発明の化合物を含む医薬組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)
【化１】
2020504766.tif 000097
〔式中、
ｍは０、１または２であり；
Ｚは−ＯＣＨ３および−Ｏ(ＣＨ２)ｎＡｒから選択され；ここで
ｎは１、２、３または４であり；
Ａｒはフェニルおよびピリジニルから選択され、ここで、各環はＣ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アミド、カルボキシ、シアノ、ホルミル、ハロ、ハロＣ１−Ｃ４アルキル、ハロＣ１−Ｃ４アルコキシおよびニトロから独立して選択される１個、２個、３個または４個の置換基で場合により置換されており；
Ａは−ＣＨ２Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−(ＣＨ２)２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−および−ＮＨＣ(Ｏ)−から選択され、ここで、各基は左側がＲ２に結合し、右側がフェニル環に結合するように記載されており；
Ｒ２は
【化２】
2020504766.tif 000098
から選択され；ここで
ＲｍおよびＲｎは独立して水素、Ｃ１−Ｃ３アルキルおよびハロから選択され；
Ｙは水素、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、シアノおよびハロから選択され；
Ｒ５は、場合により窒素および酸素から独立して選択される１個または２個のヘテロ原子を含み、かつ０個、１個、２個または３個の二重結合を含む、３〜１０員単環または二環であり、ここで、該環は、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、Ｃ１−Ｃ３アルコキシＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、ジ(Ｃ１−Ｃ４)アルキルアミノ、アミノ、アミノＣ１−Ｃ４アルキル、カルボキシ、カルボキシＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ３−Ｃ４シクロアルキルおよびフェニルから独立して選択される１個、２個または３個の基で場合により置換されており；
各Ｒ３はＣ１−Ｃ４アルキル、シアノ、ハロおよびハロＣ１−Ｃ４アルキルから独立して選択され；
Ｒ４は−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯおよび−(ＣＨ２)ｎＮＲｑＲ８から選択され；ここで
ｎは１、２、３または４であり；
Ｒｑは水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され；
Ｒ８は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、−(ＣＨ２)ｎＮ(ＣＨ３)２、
【化３】
2020504766.tif 000099
から選択され；
Ｒ９は水素およびＣ１アルキルから選択され；
各Ｒ９’は水素およびＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；そして
Ｒ１０は水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；または
Ｒ８およびＲｑは、それらが結合している窒素原子と一体となって、
【化４】
2020504766.tif 000100
である環を形成し；ここで
ｓは０、１または２であり；
ｚは１、２または３であり；そして
各Ｒ１４はＣ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ、ハロ、ヒドロキシおよびヒドロキシＣ１−Ｃ４アルキルから独立して選択される。〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
ｍが１であり、Ｒ３がハロである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｚが−ＯＣＨ２Ａｒであり、ここで、Ａｒがシアノ基で置換されているピリジニルである、請求項２に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ａが−ＣＨ２Ｏ−である、請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ２が
【化５】
2020504766.tif 000101
であり；
Ｙが水素およびＣ１アルキルから選択され；
Ｒｎが水素およびＣ１アルキルから選択され；そして
Ｒ５が１個の窒素原子および０個の二重結合を含む６〜８員単環または二環であり、ここで、環がＣ１アルキル、ジ(Ｃ１−Ｃ４)アルキルアミノ、アミノ、カルボキシＣ１−Ｃ４アルキルおよびＣ３−Ｃ４シクロアルキルから選択される１個の置換基で場合により置換されている、
請求項４に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ４が−(ＣＨ２)ＮＲｑＲ８であり；ここで
Ｒｑが水素およびＣ１アルキルから選択され；
Ｒ８が
【化６】
2020504766.tif 000102
から選択され；
Ｒ９が水素およびＣ１アルキルから選択され；
各Ｒ９’が水素およびＣ１アルキルから独立して選択され；そして
Ｒ１０が水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；または
Ｒ８およびＲｑが、それらが結合している窒素原子と一体となって、
【化７】
2020504766.tif 000103
である環を形成し；ここで
ｓが１であり；
ｚが３であり；そして
Ｒ１４がカルボキシである、
請求項５に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
ｍが１であり；
Ｚが−Ｏ(ＣＨ２)ｎＡｒであり；
ｎが１であり；
Ａｒが１個のシアノ基で置換されているピリジニルであり；
Ａが−ＣＨ２Ｏであり；
Ｒ２が
【化８】
2020504766.tif 000104
から選択され；ここで
ＲｍおよびＲｎが水素およびＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；
Ｙが水素およびＣ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ５が場合により窒素および酸素から独立して選択される１個または２個のヘテロ原子を含み、０個、１個、２個または３個の二重結合を含む５〜８員単環または二環であり、ここで、該環がＣ１−Ｃ４アルキル、ジ(Ｃ１−Ｃ４)アルキルアミノ、アミノ、カルボキシＣ１−Ｃ４アルキルおよびＣ３−Ｃ４シクロアルキルから選択される１個の基で場合により置換されている；
Ｒ３がハロであり；
Ｒ４が−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯおよび−(ＣＨ２)ｎＮＲｑＲ８から選択され；ここで
ｎが１であり；
Ｒｑが水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され；
Ｒ８が
【化９】
2020504766.tif 000105
から選択され；
Ｒ９が水素およびＣ１アルキルから選択され；
各Ｒ９’が水素およびＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；そして
Ｒ１０が水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；または
Ｒ８およびＲｑが、それらが結合している窒素原子と一体となって、
【化１０】
2020504766.tif 000106
である環を形成し；ここで
ｓが１であり；
ｚが１〜３であり；そして
Ｒ１４がカルボキシである、
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−６−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(２Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(ピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((３−(２−(１−シクロプロピルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(２Ｓ)−１−(４−((３−(２−(８−アザビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(ピリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(２Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピロリジン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(７−メチル−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(４−メチル−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((３−(２−(４−(ジエチルアミノ)シクロヘキシル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((３−(２−(１−イソプロピルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(２Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(８−メチル−８−アザビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(４−((３−(２−(３−アミノビシクロ[１.１.１]ペンタン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(４−((３−(２−(１−(カルボキシメチル)ピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(２Ｓ)−１−(４−((３−(２−(８−オキサビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
５−((４−クロロ−２−ホルミル−５−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル；
(Ｒ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)アミノ)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパン酸；
５−((４−クロロ−２−(ヒドロキシメチル)−５−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル；
５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシプロパン−２−イル)(メチル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−５−メチル−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−５−メチル−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
５−((５−((３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシプロパン−２−イル)アミノ)メチル)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル；
５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)(メチル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−５−メチル−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル；
(Ｓ)−１−(４−((３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
５−((５−((３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)アミノ)メチル)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシプロパン−２−イル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル；
５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル；
(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)−Ｌ−セリン；
(Ｓ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)アミノ)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパン酸；
(Ｓ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)アミノ)ペンタン酸；
(Ｓ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)アミノ)−３−メチルブタン酸；
５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシプロパン−２−イル)(メチル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル；
５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)(メチル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル；
Ｎ−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)−Ｎ−メチル−Ｌ−セリン；
(Ｓ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)(メチル)アミノ)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパン酸；
(Ｓ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)(メチル)アミノ)ペンタン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−フェニルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−メトキシ−４−((２−メチル−３−(２−(１−フェニルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((３−(２−(４−(メトキシカルボニル)シクロヘキシル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(４−((３−(２−(４−カルボキシシクロヘキシル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(３−(１,２,５,６−テトラ−ヒドロピリジン−３−イル)キノキサリン−６−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(２Ｓ)−１−(４−((３−(３−(８−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)ビシクロ[３.２.１]オクト−２−エン−３−イル)キノキサリン−６−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(２Ｓ)−１−(４−((３−(３−(８−アザビシクロ[３.２.１]オクト−２−エン−３−イル)キノキサリン−６−イル)−２−メチルベンジル)−オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(３−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イル)キノキサリン−６−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；および
(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(３−(４−メチルピペラジン−１−イル)キノキサリン−６−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸；
から選択される化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項１０】
対象における免疫応答を増強、刺激および／または増大させる方法であって、それを必要とする対象に治療有効量の請求項１に記載の化合物またはその治療上許容される塩を投与することを含む、方法。
【請求項１１】
処置を必要とする対象における癌細胞の成長、増殖または転移を阻止する方法であって、対象に治療有効量の請求項１に記載の化合物またはその治療上許容される塩を投与することを含む、方法。
【請求項１２】
処置を必要とする対象における感染性疾患を処置する方法であって、対象に治療有効量の請求項１に記載の化合物またはその治療上許容される塩を投与することを含む、方法。
【請求項１３】
感染性疾患がウイルスが原因である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
処置を必要とする対象における敗血症性ショックを処置する方法であって、対象に治療有効量の請求項１に記載の化合物またはその治療上許容される塩を投与することを含む、方法。
【請求項１５】
対象におけるＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１および／またはＣＤ８０の相互作用を遮断する方法であって、対象に治療有効量の請求項１に記載の化合物またはその治療上許容される塩を投与することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、引用により本明細書に包含させる、２０１６年１２月２０日出願の米国仮出願６２／４３６,６７４に基づく優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、一般にＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１タンパク質／タンパク質およびＣＤ８０／ＰＤ−Ｌ１タンパク質／タンパク質相互作用の阻害剤として有用な化合物に関する。ここで提供されるのは、化合物、当該化合物を含む組成物およびそれらを使用する方法である。本発明は、さらに、癌および感染症を含む種々の疾患の処置に有用な、少なくとも一つの本発明の化合物を含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
プログラム死−１(ＣＤ２７９)は、そのリガンドであるプログラム死−リガンド１(ＰＤ−Ｌ１、ＣＤ２７４、Ｂ７−Ｈ１)またはＰＤ−Ｌ２(ＣＤ２７３、Ｂ７−ＤＣ)により結合されたとき、Ｔ細胞受容体からの活性化シグナルを抑制することが示されている、Ｔ細胞上の受容体である(Sharpe et al., Nat. Imm. 2007)。ＰＤ−１発現Ｔ細胞が、そのリガンドを発現する細胞と接触したとき、増殖、サイトカイン分泌および細胞溶解活性を含む抗原刺激に対する応答における機能的活性が低減される。ＰＤ−１／ＰＤ−リガンド相互作用は、感染症または腫瘍の緩解中または自己寛容性の発展中に、免疫応答を下方制御する(Keir Me, Butte MJ, Freeman GJ, et al. Annu. Rev. Immunol. 2008; 26: Epub)。腫瘍疾患または慢性感染性疾患中に生じるような慢性的抗原刺激は、高レベルのＰＤ−１を発現し、慢性抗原に対する活性に関して機能障害的である、Ｔ細胞をもたらす(Kim and Ahmed, Curr Opin Imm, 2010にレビュー)。これは、“Ｔ細胞疲弊”と称される。Ｂ細胞もＰＤ−１／ＰＤ−リガンド抑制および“疲弊”を示す。
【０００４】
ＰＤ−Ｌ１はまたＣＤ８０と相互作用することが示されている(Butte MJ et al., Immunity 27:111-122 (2007))。発現免疫細胞上のＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８０相互作用は、阻害性のものであることが示されている。この相互作用の遮断は、この阻害性相互作用を抑制することが示されている(Paterson AM, et al., J Immunol., 187:1097-1105 (2011); Yang J, et al. J Immunol. Aug 1;187(3):1113-9 (2011))。
【０００５】
ＰＤ−Ｌ１に対する抗体を使用するＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の遮断は、多くの系においてＴ細胞活性化を回復および増強することが示されている。進行癌を有する患者は、ＰＤ−Ｌ１に対するモノクローナル抗体での治療から利益を受ける(Brahmer et al., New Engl J Med 2012)。腫瘍の前臨床動物モデルは、モノクローナル抗体によるＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路の遮断が免疫応答を増強でき、多数の組織学的に異なる腫瘍に対する免疫応答をもたらすことを示している(Dong H, Chen L. J Mol Med. 2003; 81(5):281-287; Dong H, Strome SE, Salamoa DR, et al. Nat Med. 2002; 8(8):793-800)。
【０００６】
ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の阻害はまた慢性感染症系におけるＴ細胞活性の増強も示している。マウスの慢性リンパ球性絨毛髄膜炎ウイルス感染症も、ＰＤ−Ｌ１の遮断でウイルス排除の改善および免疫の回復を示す(Barber DL, Wherry EJ, Masopust D, et al. Nature 2006; 439(7077):682-687)。ＨＩＶ−１に感染症したヒト化マウスは、ウイルス血症に対する保護の増強およびＣＤ４＋  Ｔ細胞のウイルスによる枯渇の減少を示す(Palmer et al., J. Immunol 2013)。ＰＤ−Ｌ１に対するモノクローナル抗体でのＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１遮断は、ＨＩＶ患者(Day, Nature 2006; Petrovas, J. Exp. Med. 2006; Trautman, Nature Med. 2006; D'Souza, J.Immunol. 2007; Zhang, Blood 2007; Kaufmann, Nature Imm. 2007; Kasu, J. Immunol. 2010; Porichis, Blood 2011)、ＨＣＶ患者[Golden-Mason, J. Virol. 2007; Jeung, J. Leuk. Biol. 2007; Urbani, J. Hepatol. 2008; Nakamoto, PLoS Path. 2009; Nakamoto, Gastroenterology 2008]またはＨＢＶ患者(Boni, ,J. Virol. 2007; Fisicaro, Gastro. 2010; Fisicaro et al., Gastroenterology, 2012; Boni et al., Gastro., 2012; Penna et al., J Hep, 2012; Raziorrough, Hepatology 2009; Liang, World J Gastro. 2010; Zhang, Gastro. 2008)からのＴ細胞に、インビトロで抗原特異的機能を回復させ得る。
【０００７】
ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８０相互作用の遮断は、免疫を刺激することも示されている(Yang J., et al., J Immunol. Aug 1;187(3):1113-9 (2011))。ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８０相互作用の遮断に起因する免疫刺激は、さらにＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ２相互作用の遮断との組み合わせにより増強されることが示されている。
【０００８】
免疫細胞表現型の変更が、敗血症性ショックにおける重要な因子であるとの仮説が提示されている(Hotchkiss, et al., Nat Rev Immunol (2013))。これらは、ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１ならびにＴ細胞アポトーシスのレベルの増加を含む(Guignant, et al, Crit. Care (2011))。ＰＤ−Ｌ１に対する抗体は、免疫細胞アポトーシスのレベルを低減できる(Zhang et al, Crit. Care (2011))。さらに、ＰＤ−１発現を欠くマウスは、野生型マウスよりも敗血症性ショック症状に抵抗性である(Yang J., et al.. J Immunol. Aug 1;187(3):1113-9 (2011))。抗体を使用するＰＤ−Ｌ１の相互作用の遮断が、不適切な免疫応答を抑制し、疾患症状を軽減することができることを示す複数の研究結果がある。
【０００９】
慢性抗原に対する免疫応答増強に加えて、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路の遮断はまた慢性感染症に対する治療的ワクチン使用を含む、ワクチン接種に対する応答を増強することも示されている(S. J. Ha, S. N. Mueller, E. J. Wherry et al., The Journal of Experimental Medicine, vol. 205, no. 3, pp. 543-555, 2008.; A. C. Finnefrock, A. Tang, F. Li et al., The Journal of Immunology, vol. 182, no. 2, pp.980-987, 2009; M. -Y. Song, S. -H. Park, H. J. Nam, D. -H. Choi, and Y.-C. Sung, The Journal of Immunotherapy, vol. 34, no. 3, pp. 297-306, 2011)。
【００１０】
ＰＤ−１経路は、慢性感染症および腫瘍疾患における慢性的抗原刺激に起因するＴ細胞疲弊における重要な阻害性分子である。ＰＤ−Ｌ１タンパク質を標的とすることによるＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の遮断は、腫瘍または慢性感染症の状況でのワクチン接種に対する応答増強を含む、インビトロおよびインビボでの抗原特異的Ｔ細胞の免疫機能を回復させることを示している。従って、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１またはＣＤ８０との相互作用を遮断する薬剤が望まれる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
出願人は、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１およびＣＤ８０との相互作用の阻害剤としての活性を有し、故に、治療的ワクチンを含む、癌または感染症における免疫増強のための治療的投与に有用であり得る、強力な化合物を発見した。これらの化合物は、そのドラッガビリティに重要である、望ましい安定性、バイオアベイラビリティ、治療指数および毒性値を備えた有用な医薬として提供される。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
第一の態様において、本発明は、式(Ｉ)
【化１】
2020504766.tif 000002
〔式中、
ｍは０、１または２であり；
Ｚは−ＯＣＨ３および−Ｏ(ＣＨ２)ｎＡｒから選択され；ここで
ｎは１、２、３または４であり；
Ａｒはフェニルおよびピリジニルから選択され、ここで、各環はＣ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アミド、カルボキシ、シアノ、ホルミル、ハロ、ハロＣ１−Ｃ４アルキル、ハロＣ１−Ｃ４アルコキシおよびニトロから独立して選択される１個、２個、３個または４個の置換基で場合により置換されており；
Ａは−ＣＨ２Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−(ＣＨ２)２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−および−ＮＨＣ(Ｏ)−から選択され、ここで、各基は左側がＲ２に結合し、右側がフェニル環に結合するように記載されており；
Ｒ２は
【化２】
2020504766.tif 000003
から選択され；ここで
ＲｍおよびＲｎは独立して水素、Ｃ１−Ｃ３アルキルおよびハロから選択され；
Ｙは水素、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、シアノおよびハロから選択され；
Ｒ５は、場合により窒素および酸素から独立して選択される１個または２個のヘテロ原子を含み、かつ０個、１個、２個または３個の二重結合を含む、３〜１０員単環または二環であり、ここで、該環は、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、Ｃ１−Ｃ３アルコキシＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、ジ(Ｃ１−Ｃ４)アルキルアミノ、アミノ、アミノＣ１−Ｃ４アルキル、カルボキシ、カルボキシＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ３−Ｃ４シクロアルキルおよびフェニルから独立して選択される１個、２個または３個の基で場合により置換されており；
各Ｒ３はＣ１−Ｃ４アルキル、シアノ、ハロおよびハロＣ１−Ｃ４アルキルから独立して選択され；
Ｒ４は−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯおよび−(ＣＨ２)ｎＮＲｑＲ８から選択され；ここで
ｎは１、２、３または４であり；
Ｒｑは水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され；
Ｒ８は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、−(ＣＨ２)ｎＮ(ＣＨ３)２、
【化３】
2020504766.tif 000004
から選択され；
Ｒ９は水素およびＣ１アルキルから選択され；
各Ｒ９’は水素およびＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；そして
Ｒ１０は水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；または
Ｒ８およびＲｑは、それらが結合している窒素原子と一体となって、
【化４】
2020504766.tif 000005
である環を形成し；ここで
ｓは０、１または２であり；
ｚは１、２または３であり；そして
各Ｒ１４はＣ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ、ハロ、ヒドロキシおよびヒドロキシＣ１−Ｃ４アルキルから独立して選択される。〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１３】
第一の態様の第一の実施態様において、本発明は、ｍが１であり、Ｒ３がハロである、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。第一の態様の第二の実施態様において、Ｚが−ＯＣＨ２Ａｒであり、ここで、Ａｒはシアノ基で置換されているピリジニルである。第三の実施態様において、Ａが−ＣＨ２Ｏ−である。
【００１４】
第一の態様の第四の実施態様において、本発明は、
式中、
ｍが１であり；
Ｒ３がハロであり；
ＺがＯＣＨ２Ａｒであり、ここで、Ａｒがシアノ基で置換されているピリジニルであり；
Ａが−ＣＨ２Ｏ−であり；
Ｒ２が
【化５】
2020504766.tif 000006
であり；
Ｙが水素およびＣ１アルキルから選択され；
Ｒｎが水素およびＣ１アルキルから選択され；そして
Ｒ５が１個の窒素原子および０個の二重結合を含む６〜８員単環または二環であり、ここで、環はＣ１アルキル、ジ(Ｃ１−Ｃ４)アルキルアミノ、アミノ、カルボキシＣ１−Ｃ４アルキルおよびＣ３−Ｃ４シクロアルキルから選択される１個の置換基で場合により置換されている、
式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１５】
第一の態様の第五の実施態様において、本発明は、
式中、
ｍが１であり；
Ｒ３がハロであり；
ＺがＯＣＨ２Ａｒであり、ここで、Ａｒがシアノ基で置換されているピリジニルであり；
Ａが−ＣＨ２Ｏ−であり；
Ｒ２が
【化６】
2020504766.tif 000007
であり；
Ｙは水素およびＣ１アルキルから選択され；
Ｒｎが水素およびＣ１アルキルから選択され；
Ｒ５が１個の窒素原子および０個の二重結合を含む６〜８員単環または二環であり、ここで、環はＣ１アルキル、ジ(Ｃ１−Ｃ４)アルキルアミノ、アミノ、カルボキシＣ１−Ｃ４アルキルおよびＣ３−Ｃ４シクロアルキルから選択される１個の置換基で場合により置換されており；そして
Ｒ４が−(ＣＨ２)ＮＲｑＲ８であり；ここで
Ｒｑが水素およびＣ１アルキルから選択され；
Ｒ８が
【化７】
2020504766.tif 000008
から選択され；
Ｒ９が水素およびＣ１アルキルから選択され；
各Ｒ９’が水素およびＣ１アルキルから独立して選択され；そして
Ｒ１０は水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；または
Ｒ８およびＲｑが、それらが結合している窒素原子と一体となって、
【化８】
2020504766.tif 000009
である環を形成し；ここで
ｓが１であり；
ｚが３であり；そして
Ｒ１４がカルボキシである
式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１６】
第一の態様の第六の実施態様において、本発明は、
式中、
ｍが１であり；
Ｚが−Ｏ(ＣＨ２)ｎＡｒであり；
ｎが１であり；
Ａｒが１個のシアノ基で置換されているピリジニルであり；
Ａが−ＣＨ２Ｏ−であり；
Ｒ２が
【化９】
2020504766.tif 000010
から選択され；ここで
ＲｍおよびＲｎが水素およびＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；
Ｙが水素およびＣ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ５が場合により窒素および酸素から独立して選択される１個または２個のヘテロ原子を含み、０個、１個、２個または３個の二重結合を含む５〜８員単環または二環であり、ここで、該環はＣ１−Ｃ４アルキル、ジ(Ｃ１−Ｃ４)アルキルアミノ、アミノ、カルボキシＣ１−Ｃ４アルキルおよびＣ３−Ｃ４シクロアルキルから選択される１個の基で場合により置換されていており；
Ｒ３がハロであり；
Ｒ４が−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯおよび−(ＣＨ２)ｎＮＲｑＲ８から選択され；ここで
ｎが１であり；
Ｒｑが水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され；
Ｒ８が
【化１０】
2020504766.tif 000011
から選択され；
Ｒ９が水素およびＣ１アルキルから選択され；
各Ｒ９’が水素およびＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；そして
Ｒ１０が水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；または
Ｒ８およびＲｑが、それらが結合している窒素原子と一体となって、
【化１１】
2020504766.tif 000012
である環を形成し；ここで
ｓが１であり；
ｚが３であり；そして
Ｒ１４がカルボキシである
式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００１７】
第二の態様において、本発明は、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
【００１８】
第三の態様において、本発明は、処置を必要とする対象における免疫応答を増強、刺激、調節および／または増大させる方法を提供し、該方法は、該対象に治療有効量の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。第三の態様の第一の実施態様において、本方法は、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の前、後または同時にさらなる薬剤を投与することをさらに含む。第二の実施態様において、さらなる薬剤は抗微生物剤、抗ウイルス剤、細胞毒性剤、遺伝子発現調節剤および／または免疫応答修飾剤である。
【００１９】
第四の態様において、本発明は、処置を必要とする対象における癌細胞の成長、増殖または転移を阻止する方法を提供し、該方法は、対象に治療有効量の式(Ｉ)の化合物または薬学的に許容される塩を投与することを含む。第一の実施態様において、癌は、黒色腫、腎細胞癌、扁平上皮非小細胞肺癌(ＮＳＣＬＣ)、非扁平上皮ＮＳＣＬＣ、結腸直腸癌、去勢抵抗性前立腺癌、卵巣癌、胃癌、肝細胞癌、膵臓癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、食道、消化管および乳房の癌ならびに造血器腫瘍から選択される。
【００２０】
第五の態様において、本発明は、処置を必要とする対象における感染性疾患を処置する方法を提供し、該方法は、該対象に治療有効量の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。第五の態様の第一の実施態様において、感染性疾患はウイルスが原因である。第二の実施態様において、ウイルスはＨＩＶ、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、ヘルペスウイルス、乳頭腫ウイルスおよびインフルエンザから選択される。
【００２１】
第六の態様において、本発明は処置を必要とする対象における敗血症性ショックを処置する方法を提供し、該方法は、該対象に治療有効量の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
【００２２】
第七の態様において、本発明は、医薬として使用するための式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００２３】
他の態様において、本発明は、式(II)
【化１２】
2020504766.tif 000013
〔式中、
ｍは０、１または２であり；
Ｚは−Ｏ(ＣＨ２)ｎＡｒであり；
ｎは１、２、３または４であり；
Ａｒはフェニルおよびピリジニルから選択され、ここで、各環はＣ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アミド、カルボキシ、シアノ、ホルミル、ハロ、ハロＣ１−Ｃ４アルキル、ハロＣ１−Ｃ４アルコキシおよびニトロから独立して選択される１個、２個、３個または４個の置換基で場合により置換されていており；
Ａは−ＣＨ２Ｏ−、−ＯＣＨ２−、−(ＣＨ２)２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ−および−ＮＨＣ(Ｏ)−から選択され、ここで、各基は左側がＲ２に結合し、右側がフェニル環に結合するように記載されており；
Ｒ２は
【化１３】
2020504766.tif 000014
から選択され；ここで
ＲｍおよびＲｎは独立して水素、Ｃ１−Ｃ３アルキルおよびハロから選択され；
Ｙは水素、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、シアノおよびハロから選択され；
Ｒ５は、場合により窒素および酸素から独立して選択される１個または２個のヘテロ原子を含み、かつ０個、１個、２個または３個の二重結合を含む、３〜１０員単環または二環であり、ここで、該環はＣ１−Ｃ３アルコキシ、Ｃ１−Ｃ３アルコキシＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、ジ(Ｃ１−Ｃ４)アルキルアミノ、アミノ、アミノＣ１−Ｃ４アルキル、カルボキシ、カルボキシＣ１−Ｃ４アルキルおよびＣ３−Ｃ４シクロアルキルから独立して選択される１個、２個または３個の基で場合により置換されており；
各Ｒ３はＣ１−Ｃ４アルキル、シアノ、ハロおよびハロＣ１−Ｃ４アルキルから独立して選択され；
Ｒ４は−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯおよび−(ＣＨ２)ｎＮＲｑＲ８から選択され；ここで
ｎは１、２、３または４であり；
Ｒｑは水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され；
Ｒ８は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、−(ＣＨ２)ｎＮ(ＣＨ３)２、
【化１４】
2020504766.tif 000015
から選択され；
Ｒ９は水素およびＣ１アルキルから選択され；
各Ｒ９’は水素およびＣ１−Ｃ３アルキルから独立して選択され；
Ｒ１０は水素およびＣ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；または
Ｒ８およびＲｑは、それらが結合している窒素原子と一体となって、
【化１５】
2020504766.tif 000016
である環を形成し；ここで
ｓは０、１または２であり；
ｚは１、２または３であり；そして
各Ｒ１４はＣ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ、ハロ、ヒドロキシおよびヒドロキシＣ１−Ｃ４アルキルから独立して選択される。〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００２４】
本明細書で特に断らない限り、単数表現は複数も含み得る。例えば、“ある”は１または１以上を意味し得る。
【００２５】
ここで使用する用語“化合物またはその薬学的に許容される塩”は、少なくとも一つの化合物、少なくとも一つの化合物の塩またはこれらの組み合わせをいう。例えば、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩は、１種の式(Ｉ)の化合物；２種の式(Ｉ)の化合物；１種の式(Ｉ)の化合物の塩；１種の式(Ｉ)の化合物および１以上の式(Ｉ)の化合物の塩；および２種以上の式(Ｉ)の化合物の塩を含む。
【００２６】
特に断らない限り、原子価が充足されていないあらゆる原子は、原子価を充足させるのに十分な水素原子を有すると推定される。
【００２７】
本明細書を通して、基およびその置換基は、安定な部分および化合物を提供するように当業者により選択され得る。
【００２８】
下に挙げるのは、本発明を説明するために使用する種々の用語の定義である。これらの定義は、個々にまたは大きな基の一部として、それらが本明細書を通して使用される限り(特定の例で谷限定されていない限り)適用される。ここに示す定義は、引用により本明細書に包含させるあらゆる特許、特許出願および／または特許出願公開において示される定義に優先する。
【００２９】
ここで使用する単数表現は、文脈に明らかに反しない限り、複数を含む。
【００３０】
本発明の二環は、単環または縮合環、スピロ環または架橋二環構造であり得る。
【００３１】
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルコキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合したＣ１−Ｃ３アルキル基をいう。
【００３２】
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルコキシＣ１−Ｃ４アルキル”は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基を介して親分子部分に結合したＣ１−Ｃ３アルコキシ基をいう。
【００３３】
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ４アルコキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合したＣ１−Ｃ４アルキル基をいう。
【００３４】
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル”は、カルボニル基を介して親分子基に結合したＣ１−Ｃ４アルコキシ基をいう。
【００３５】
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ３アルキル”は、１〜３個の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖飽和炭化水素に由来する基をいう。
【００３６】
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ４アルキル”は、１〜４個の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖飽和炭化水素に由来する基をいう。
【００３７】
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ６アルキル”は、１〜６個の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖飽和炭化水素に由来する基をいう。
【００３８】
ここで使用する用語“Ｃ１−Ｃ４アルキルアミノ”は、−ＮＨＲ(式中、ＲはＣ１−Ｃ４アルキル基である)をいう。
【００３９】
ここで使用する用語“アミド”は、−Ｃ(Ｏ)ＮＨ２をいう。
【００４０】
ここで使用する用語“アミノＣ１−Ｃ４アルキル”は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基を介して親分子部分に結合するアミノ基をいう。
【００４１】
ここで使用する用語“カルボニル”は、−Ｃ(Ｏ)−をいう。
【００４２】
ここで使用する用語“カルボキシ”は、−ＣＯ２Ｈをいう。
【００４３】
ここで使用する用語“カルボキシＣ１−Ｃ４アルキル”は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基を介して親分子部分に結合するカルボキシ基をいう。
【００４４】
ここで使用する用語“シアノ”は、−ＣＮをいう。
【００４５】
ここで使用する用語“Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル”は、３個または４個の炭素原子と０個のヘテロ原子を有する飽和単環炭化水素環系をいう。
【００４６】
ここで使用する用語“ジ(Ｃ１−Ｃ４アルキル)アミノ”は、−ＮＲ２(式中、各ＲはＣ１−Ｃ４アルキル基である)をいう。Ｒ基は同一でも異なってもよい。
【００４７】
ここで使用する用語“ホルミル”は、−Ｃ(Ｏ)Ｈをいう。
【００４８】
ここで使用する用語“ハロ”および“ハロゲン”は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩをいう。
【００４９】
ここで使用する用語“ハロＣ１−Ｃ４アルコキシ”は、酸素原子を介して親分子部分に結合するハロＣ１−Ｃ４アルキル基をいう。
【００５０】
ここで使用する用語“ハロＣ１−Ｃ４アルキル”は、１個、２個または３個のハロゲン原子で置換されているＣ１−Ｃ４アルキル基をいう。
【００５１】
ここで使用する用語“ヒドロキシ”は、−ＯＨをいう。
【００５２】
ここで使用する用語“ヒドロキシＣ１−Ｃ４アルキル”は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基を介して親分子部分に結合するヒドロキシ基をいう。
【００５３】
ここで使用する用語“ニトロ”は、−ＮＯ２をいう。
【００５４】
用語“薬学的に許容される”は、ここでは、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー性応答または他の問題もしくは合併症がなく、ヒトおよび動物の組織と接触させて使用するのに適し、合理的ベネフィット／リスク比を適える、化合物、物質、組成物および／または投与形態をいうために用いる。
【００５５】
式(Ｉ)の化合物は塩も形成でき、これもまた本開示の範囲内である。特に断らない限り、本発明化合物への言及は、１以上のその塩への言及を含むと理解される。用語“塩”は、無機および／または有機の酸および塩基と形成される酸性および／または塩基性塩を意味する。さらに、用語“塩”は、例えば、式(Ｉ)の化合物がアミンまたはピリジンまたはイミダゾール環などの塩基性部分およびカルボン酸などの酸性部分を含むとき、双性イオン(分子内塩)を含み得る。例えば、カチオンが塩の毒性または生物学的活性に顕著に影響しない、許容される金属およびアミン塩などの薬学的に許容される(すなわち、非毒性の、生理学的に許容される)塩が好ましい。しかしながら、他の塩は、例えば、製造中に用い得る単離または精製工程で有用であり得るので、本開示の範囲内で意図される。式(Ｉ)の化合物の塩は、例えば、式(Ｉ)の化合物と、当量のような一定量の酸または塩基を、塩が沈殿するような媒体中で反応させるかまたは水性媒体で反応させた後凍結乾燥することにより形成され得る。
【００５６】
酸付加塩の例は、酢酸塩(例えば酢酸またはトリハロ酢酸、例えば、トリフルオロ酢酸と形成されるもの)、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩(塩酸と形成)、臭化水素酸塩(臭化水素と形成)、ヨウ化水素酸塩、マレイン酸塩(マレイン酸と形成)、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩(メタンスルホン酸と形成)、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩(例えば硫酸と形成されるもの)、スルホン酸塩(例えばここに記載のもの)、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩などのトルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩などを含む。
【００５７】
塩基性塩の例は、アンモニウム塩、アルカリ金属塩、例えばナトリウム塩、リチウム塩およびカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウム塩およびマグネシウム塩；バリウム塩、亜鉛塩およびアルミニウム塩；有機塩基(例えば、有機アミン)、例えばトリエチルアミンなどのトリアルキルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−ベンジル−β−フェネチルアミン、１−エフェナミン、Ｎ,Ｎ’−ジベンジルエチレン−ジアミン、デヒドロアビエチルアミン、Ｎ−エチルピペリジン、ベンジルアミン、ジシクロヘキシルアミンまたは類似の薬学的に許容されるアミンとの塩およびアミノ酸、例えばアルギニン、リシンなどとの塩を含む。塩基性窒素含有基は、低級アルキルハライド(例えば、メチル、エチル、プロピルおよびブチルの塩化物、臭化物およびヨウ化物)、ジアルキル硫酸エステル(例えば、ジメチル、ジエチル、ジブチルおよびジアミル硫酸エステル)、長鎖ハライド(例えば、デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルの塩化物、臭化物およびヨウ化物)、アラルキルハライド(例えば、ベンジルおよびフェネチルの臭化物)などの薬剤で四級化し得る。好ましい塩は、一塩酸塩、重硫酸塩、メタンスルホン酸塩、リン酸塩または硝酸塩を含む。
【００５８】
種々の形態のプロドラッグが周知であり、
a) The Practice of Medicinal Chemistry, Camille G. Wermuth et al., Ch 31, (Academic Press, 1996);
b) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985);
c) A Textbook of Drug Design and Development, P. Krogsgaard-Larson and H. Bundgaard, eds. Ch 5, pgs 113 - 191 (Harwood Academic Publishers, 1991);および
d) Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism, Bernard Testa and Joachim M. Mayer, (Wiley-VCH, 2003)
に記載される。
【００５９】
さらに、式(Ｉ)の化合物は、その製造に続き、単離および精製して、重量で９９％以上の式(Ｉ)の化合物(“実質的に純粋”)を含む組成物を得ることができ、次いでこれをここに記載するとおり使用または製剤する。このような“実質的に純粋”な式(Ｉ)の化合物も本発明の一部として意図される。
【００６０】
“安定な化合物”および“安定な構造”は、反応混合物から有用な純度で単離され、有効な治療剤に製剤されるのに十分耐える化合物を示すことを意図する。本発明は、安定な化合物を具現化することを意図する。
【００６１】
“治療有効量”は、本発明の化合物単独の量または本発明化合物の組み合わせの量またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１のタンパク質／タンパク質間相互作用および／またはＣＤ８０／ＰＤ−Ｌ１のタンパク質／タンパク質間相互作用の阻害あるいは癌または敗血症性ショック、ＨＩＶまたはＢ型肝炎、Ｃ型肝炎およびＤ型肝炎などの感染性疾患の処置または予防に有効な他の活性成分と組み合わせた本発明の化合物の量を含むことを意図する。
【００６２】
ここで使用する、“処置する”または“処置”は、哺乳動物、特にヒトにおける疾患状態の処置を含み、(ａ)特に、哺乳動物が疾患状態の素因を有するが、まだそれを有すると診断されていないとき、該哺乳動物における該疾患状態の発症を予防する；(ｂ)疾患状態を阻止する、すなわち、その進展を阻止する；および／または(ｃ)疾患状態を軽減する、すなわち、疾患状態の退行を起こすことを含む。
【００６３】
本発明の化合物は、該化合物を構成する全ての原子の同位体を含むことを意図する。同位体は、同じ原子番号を有するが、質量数が異なる原子を含む。限定を意図しない一般的な例として、水素の同位体は重水素(Ｄ)およびトリチウム(Ｔ)を含む。炭素の同位体は１３Ｃおよび１４Ｃを含む。同位体標識した本発明の化合物は、一般に当業者に知られる慣用技法でまたはここに記載するものに準ずる方法で、適切な同位体標識した反応材を、通常用いる非標識反応材の代わりに用いて、製造できる。例えば、メチル(−ＣＨ３)はまた−ＣＤ３などの重水素化メチル基を含む。
【００６４】
式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩は、部位特異的処置または送達される式(Ｉ)の化合物の所要量に依存して、処置する状態に適する任意の手段で投与され得る。また、本発明に包含されるのは、式(Ｉ)の化合物および／またはその薬学的に許容される塩；および１以上の非毒性、薬学的に許容される担体および／または希釈剤および／またはアジュバント(ここでは包括的に“担体”物質と称する)および、所望により他の活性成分を含む、医薬組成物である。式(Ｉ)の化合物を、任意の適当な経路で、好ましくは該経路に適する医薬組成物の形でおよび意図する処置に有効な用量で投与し得る。本発明の化合物および組成物は、例えば、経口的に、経粘膜的に、経直腸的に、または血管内、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内および胸骨内を含む非経腸的に、慣用の薬学的に許容される担体、アジュバントおよび媒体を含む投与量単位製剤で投与し得る。例えば、医薬担体は、マンニトールまたはラクトースと微結晶セルロースの混合物を含み得る。該混合物は、例えばステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、およびクロスポビドンなどの崩壊剤などとして、さらなる成分を含み得る。担体混合物をゼラチンカプセルに充填するかまたは錠剤として圧縮し得る。医薬組成物を、例えば、経口剤形により、または注入により投与し得る。
【００６５】
経口投与のためには、医薬組成物は、例えば、錠剤、カプセル剤、液体カプセル剤、懸濁液剤または液剤の形であり得る。医薬組成物は、好ましくは特定の量の活性成分を含む投与量単位の形態に製造する。例えば、医薬組成物は、約０.１〜１０００mg、好ましくは約０.２５〜２５０mgおよびより好ましくは約０.５〜１００mgの範囲の量の活性成分を含む、錠剤またはカプセル剤として提供され得る。ヒトまたは他の哺乳動物のための適当な１日用量は、患者の状態および他の因子により広範に変わり得るが、常用手段により決定され得る。
【００６６】
意図される医薬組成物は、例えば、許容され、かつ適当な経口製剤で、経口的に送達され得る。経口製剤の例は、例えば、錠剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、水性および油性懸濁液剤、分散性粉末剤または顆粒剤、エマルジョン剤、硬および軟プセル剤、液体カプセル剤、シロップ剤およびエリキシル剤を含むが、これらに限定されない。経口投与が意図される医薬組成物は、経口投与が意図される医薬組成物の製造について当分野で知られる任意の方法により製造され得る。薬学的に服用しやすい製剤を提供するために、本発明の医薬組成物は、甘味剤、風味剤、着色剤、粘滑剤、抗酸化剤および防腐剤から選択される少なくとも一つの薬剤を含み得る。
【００６７】
錠剤は、例えば、少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物および／または少なくとも一つのその薬学的に許容される塩と、錠剤の製造に適する少なくとも一つの非毒性の薬学的に許容される添加物の混合により製造され得る。添加物の例は、例えば、不活性希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムおよびリン酸ナトリウムなど；造粒および崩壊剤、例えば、微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、トウモロコシデンプンおよびアルギン酸など；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチン、ポリビニル−ピロリドンおよびアカシアなど；および滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸およびタルクなどを含むが、これらに限定されない。さらに、錠剤は非被覆であるかまたは不快な味の薬物の悪い味のマスキングまたは消化管における活性成分の放出および吸収の遅延、それによる活性成分の効果の長期持続のための既知技法により被覆され得る。水可溶性味マスキング物質の例は、ヒドロキシプロピル−メチルセルロースおよびヒドロキシプロピル−セルロースを含むが、これらに限定されない。時間遅延物質の例は、エチルセルロースおよび酢酸酪酸セルロースを含むが、これらに限定されない。
【００６８】
硬ゼラチンカプセル剤は、例えば、少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物および／または少なくとも一つのその塩と、少なくとも一つの不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム；リン酸カルシウム；およびカオリンなどの混合により製造できる。
【００６９】
軟ゼラチンカプセル剤は、例えば、少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物および／または少なくとも一つのその薬学的に許容される塩と少なくとも一つの水可溶性担体、例えば、ポリエチレングリコールなど；および少なくとも一つの油媒体、例えば、ピーナツ油、液体パラフィンおよびオリーブ油などの混合により製造され得る。
【００７０】
水性懸濁液剤は、例えば、少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物および／または少なくとも一つのその薬学的に許容される塩と、水性懸濁液剤の製造に適する少なくとも一つの添加物の混合により製造され得る。水性懸濁液剤の製造に適する添加物は、例えば、懸濁化剤、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、ポリビニル−ピロリドン、トラガカントゴムおよびアカシアガムなど；分散または湿潤剤、例えば、天然に存在するフォスファチド、例えば、レシチンなど；アルキレンオキシドと脂肪酸の縮合生成物、例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレンなど；エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレン−オキシセタノールなど；エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール由来の部分エステルの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレアートなど；およびエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール由来の部分エステル無水物の縮合生成物、例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレアートなどを含むが、これらに限定されない。水性懸濁液剤はまた少なくとも一つの防腐剤、例えば、エチルおよびｎ−プロピルｐ−ヒドロキシベンゾエートなど；少なくとも一つの着色剤；少なくとも一つの風味剤；および／または、例えば、スクロース、サッカリンおよびアスパルテームを含むが、これらに限定されない少なくとも一つの甘味剤も含み得る。
【００７１】
油性懸濁液は、例えば、少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物および／または少なくとも一つのその薬学的に許容される塩を、植物油、例えば、落花生油；オリーブ油；ゴマ油；およびヤシ油など；または鉱油、例えば、液体パラフィンなどに懸濁させることにより製造され得る。油性懸濁液はまた少なくとも一つの濃化剤、例えば、蜜蝋；硬パラフィン；およびセチルアルコールなどを含み得る。のみやすい油性懸濁液を提供するために、すでに上に記載した甘味剤の少なくとも一つおよび／または少なくとも一つの風味剤を油性懸濁液に加えてよい。油性懸濁液は、さらに、例えば、抗酸化剤、例えば、ブチル化ヒドロキシアニソールおよびアルファ−トコフェロールなどを含むが、これらに限定されない少なくとも一つの防腐剤を含み得る。
【００７２】
分散性粉末剤および顆粒剤は、例えば、少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物および／または少なくとも一つのその薬学的に許容される塩と少なくとも一つの分散および／または湿潤剤；少なくとも一つの懸濁化剤；および／または少なくとも一つの防腐剤の混合により製造され得る。適当な分散剤、湿潤剤および懸濁化剤は既に上記したとおりである。防腐剤の例は、例えば、抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸を含むが、これに限定されない。さらに、分散性粉末剤および顆粒剤は、例えば、甘味剤；風味剤；および着色剤を含むが、これらに限定されない。少なくとも一つの添加物も含み得る。
【００７３】
少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物および／または少なくとも一つのその薬学的に許容される塩のエマルジョン剤は、例えば、水中油型エマルジョン剤として製造され得る。式(Ｉ)の化合物を含むエマルジョン剤の油性相は、既知方法で既知成分から構成され得る。油性相は、限定されないが、例えば、植物油、例えば、オリーブ油および落花生油など；鉱油、例えば、液体パラフィンなど；およびこれらの混合物により提供され得る。本相は一種の乳化剤のみを含んでもよいが、少なくとも一種の乳化剤と脂肪または油または脂肪と油両者との混合物を含み得る。適当な乳化剤は、例えば、天然に存在するフォスファチド、例えば、ダイズレシチン；脂肪酸およびヘキシトール無水物由来のエステルまたは部分エステル、例えば、ソルビタンモノオレアートなど；および部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアートなどを含むが、これらに限定されない。好ましくは、親水性乳化剤は、安定剤として作用する親油性乳化剤と共に含まれる。油および脂肪の両者を含むのがまた好ましい。まとめると、安定剤を伴うまたは伴わない乳化剤は、いわゆる乳化蝋を作り、該蝋は油および脂肪と一体となって、いわゆる乳化軟膏基剤を作り、これはクリーム製剤の油性分散相を形成する。エマルジョンはまた甘味剤、風味剤、防腐剤および／または抗酸化剤も含み得る。本発明の製剤において使用するのに適する乳化剤およびエマルジョン安定化剤は、Ｔｗｅｅｎ  ６０、Ｓｐａｎ  ８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル、ラウリル硫酸ナトリウム、単独または蝋と組み合わせたジステアリン酸グリセリルまたは当分野で周知の他の物質を含む。
【００７４】
式(Ｉ)の化合物および／または少なくとも一つのその薬学的に許容される塩は、任意の薬学的に許容されるおよび適当な注射用形態により、例えば、静脈内、皮下および／または筋肉内送達もされ得る。注射用形態の例は、例えば、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液などの許容される媒体および溶媒を含む、例えば、無菌水溶液；無菌水中油型マイクロエマルジョン；および水性または油性懸濁液を含むが、これらに限定されない。
【００７５】
非経腸投与用製剤は、水性または非水性等張無菌注射液または懸濁液の形であり得る。これらの溶液および懸濁液は、無菌粉末または顆粒から、経口投与用製剤について記載された担体または希釈剤の１以上を使用してまたは他の適当な分散または湿潤剤および懸濁化剤を使用して、製造され得る。化合物を、水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、トウモロコシ油、綿実油、ピーナツ油、ゴマ油、ベンジルアルコール、塩化ナトリウム、トラガカントゴムおよび／または種々の緩衝液に溶解し得る。他のアジュバントおよび投与方式は、医薬分野で十分にかつ広く知られている。活性成分はまた食塩水、デキストロースまたは水を含む適当な担体とのまたはシクロデキストリン(すなわちＣａｐｔｉｓｏｌ)、共溶媒可溶化(すなわちプロピレングリコール)またはミセル可溶化(すなわちＴｗｅｅｎ  ８０)との組成物として注射され得る。
【００７６】
無菌注射用製剤は、非毒性の非経腸的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌注射用溶液または懸濁液、例えば１,３−ブタンジオール中の溶液でもあり得る。使用し得る許容される媒体および溶媒は、とりわけ水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液であり得る。さらに、無菌、固定油は、溶媒または懸濁媒体として慣用的に用いられる。この目的のために、合成モノまたはジグリセリドを含む、あらゆる無刺激性固定油を用い得る。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の製造に有用である。
【００７７】
無菌注射用水中油型マイクロエマルジョンは、例えば、１)少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物を、例えば、ダイズ油とレシチンの混合物などの油性相に溶解し；２)式(Ｉ)含有油性相と水およびグリセロール混合物を合わせ；そして３)組み合わせを処理して、マイクロエマルジョンを形成させることにより、製造され得る。
【００７８】
無菌水性または油性懸濁液は、当分野で既に知られる方法により製造され得る。例えば、無菌水溶液または懸濁液は、非毒性の非経腸的に許容される希釈剤または溶媒、例えば、１,３−ブタンジオールなどを用いて製造でき；そして無菌油性懸濁液は、無菌非毒性許容される溶媒または懸濁媒体、例えば、無菌固定油、例えば、合成モノまたはジグリセリドなど；および脂肪酸、例えば、オレイン酸などを用いて製造できる。
【００７９】
本発明の医薬組成物に使用し得る薬学的に許容される担体、アジュバントおよび媒体は、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、自己乳化型薬物送達システム(ＳＥＤＤＳ)、例えばｄ−アルファ−トコフェロールポリエチレングリコール１０００スクシネート、医薬投与形態で使用される界面活性剤、例えばＴｗｅｅｎｓ、ポリエトキシル化ヒマシ油、例えばＣＲＥＭＯＰＨＯＲ界面活性剤(ＢＡＳＦ)または他の類似の高分子送達物質、血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えばリン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、蝋、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂を含むが、これらに限定されない。アルファ−、ベータ−およびガンマ−シクロデキストリンなどのシクロデキストリンまたは２−および３−ヒドロキシプロピル−シクロデキストリンなどのヒドロキシアルキルシクロデキストリンまたは他の可溶化誘導体を含む化学修飾誘導体も、ここに記載される式の化合物の送達を増強するために、有利に使用され得る。
【００８０】
本発明の薬学的活性化合物は、慣用の調剤法により処理して、ヒトおよび他の哺乳動物を含む患者への投与に適する薬剤を製造できる。医薬組成物は、安定化などの慣用の医薬操作に付してよく、および／または防腐剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝液などの慣用のアジュバントを含んでよい。錠剤および丸剤は、さらに腸溶コーティングを施してよい。該組成物はまた湿潤剤、甘未剤、風味剤および芳香剤などのアジュバントを含んでよい。
【００８１】
投与する化合物の量、および本発明の化合物および／または組成物で疾患状態を処置するための投与レジメンは、対象の年齢、体重、性別、医学的状態、疾患のタイプ、疾患の重症度、投与の経路および頻度および用いる特定の化合物を含む、多様な因子による。それ故に、投与レジメンは広範囲で変わり得るが、標準的手法を使用して、常套的に決定され得る。約０.００１〜１００mg／kg体重、好ましくは約０.００２５〜約５０mg／kg体重、最も好ましくは約０.００５〜１０mg／kg体重の１日用量が適切であり得る。１日用量を、１日１〜４回で投与し得る。他の投薬スケジュールは、週１回および２日に１回のサイクルを含む。
【００８２】
治療目的で、本発明の活性化合物は、通常、指示される投与経路に適する１以上のアジュバントと合わせる。経口で投与するならば、化合物をラクトース、スクロース、デンプン粉末、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウムおよびカルシウム塩、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドンおよび／またはポリビニルアルコールと混合し、次いで投与上の便宜のために打錠するかまたはカプセル充填し得る。該カプセル剤または錠剤は、活性化合物をヒドロキシプロピルメチルセルロース中に分散させて提供されるような制御放出製剤を含み得る。
【００８３】
本発明の医薬組成物は、少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物および／または少なくとも一つのその薬学的に許容される塩および所望により任意の薬学的に許容される担体、アジュバントおよび媒体から選択されるさらなる薬剤を含み得る。本発明の別の組成物は、ここに記載する式(Ｉ)の化合物またはそのプロドラッグおよび薬学的に許容される担体、アジュバントまたは媒体を含む。
【００８４】
本発明の化合物は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１タンパク質／タンパク質を阻害し、ＰＤ−Ｌ１遮断をもたらす。ＰＤ−Ｌ１の遮断は、ヒトを含む哺乳動物における、癌細胞および感染症に対する免疫応答を増強させ得る。
【００８５】
ある態様において、本発明は、癌性腫瘍の増殖が阻止されるように、式(Ｉ)の化合物またはその塩を使用する、対象のインビボでの処置に関する。式(Ｉ)の化合物またはその塩を、癌性腫瘍の増殖阻害のために、単独で使用し得る。あるいは、式(Ｉ)の化合物またはその塩を、下記のとおり、他の免疫原因子または標準癌処置と組み合わせて使用し得る。
【００８６】
ある実施態様において、本発明は、対象における腫瘍細胞の増殖を阻止する方法であって、該対象に治療有効量の式(Ｉ)の化合物またはその塩を投与することを含む、方法を提供する。
【００８７】
ある実施態様において、処置を必要とする患者に治療有効量の式(Ｉ)の化合物またはその塩を投与することを含む、癌を処置する方法が提供される。癌の例は、増殖が本発明の化合物を使用して阻止され得るものを含み、一般に免疫療法に応答する癌を含む。処置のための好ましい癌の非限定的例は、黒色腫(例えば、転移悪性黒色腫)、腎臓癌(例えば明細胞癌)、前立腺癌(例えばホルモン難治性前立腺腺癌)、乳癌、結腸癌および肺癌(例えば非小細胞肺癌)を含む。さらに、本開示は、増殖が本発明の化合物を使用して阻止され得る、難治性または再発性悪性腫瘍を含む。
【００８８】
本発明の方法を使用して処置し得る他の癌の例は、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚または眼内悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部癌、胃癌、精巣癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣癌、外陰癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道癌、小腸癌、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、急性骨髄白血病、慢性骨髄白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病を含む慢性または急性白血病、小児固形腫瘍、リンパ球性リンパ腫、膀胱癌、腎臓または尿道癌、腎盂癌、中枢神経系(ＣＮＳ)新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍における血管形成、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮細胞癌、Ｔ細胞リンパ腫、アスベスト誘発性を含む、環境誘発癌および該癌の組み合わせを含む。本発明はまた転移癌、特にＰＤ−Ｌ１を発現する転移癌の処置にも有用である(Iwai et al. (2005) Int. Immunol. 17:133-144)。
【００８９】
所望により、式(Ｉ)の化合物またはその塩を、他の免疫原因子、例えば、癌細胞、精製腫瘍抗原(組み換えタンパク質、ペプチドおよび炭水化物分子を含む)、細胞および免疫刺激サイトカインをコードする遺伝子でトランスフェクトされた細胞と組み合わせ得る(He et al (2004) J. Immunol. 173:4919-28)。使用し得る腫瘍ワクチンの非限定的例は、黒色腫抗原のペプチド、例えば、ｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原、Ｔｒｐ−２、ＭＡＲＴ１および／またはチロシナーゼのペプチドまたはサイトカインＧＭ−ＣＳＦを発現するようにトランスフェクトされた腫瘍細胞を含む。
【００９０】
ヒトにおいて、黒色腫など一部腫瘍は、免疫原性であることが示されている。ＰＤ−Ｌ１遮断によりＴ細胞活性化の閾値を上げることにより、腫瘍応答が宿主で活性化されると予測される。
【００９１】
ＰＤ−Ｌ１遮断をワクチン接種プロトコールと組み合わせ得る。腫瘍に対するワクチン接種についての多くの実験的戦略が考案されている(Rosenberg, S., 2000, Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62; Logothetis, C., 2000, ASCO Educational Book Spring: 300-302; Khayat, D. 2000, ASCO Educational Book Spring: 414-428; Foon, K. 2000, ASCO Educational Book Spring: 730-738; see also Restifo, N. and Sznol, M., Cancer Vaccines, Ch. 61, pp. 3023-3043 in DeVita, V. et al. (eds.), 1997, Cancer: Principles and Practice of Oncology. Fifth Edition参照)。これらのストラテジーの一つにおいて、ワクチンは、自己または同種異系腫瘍細胞を使用して調製される。これらの細胞性ワクチンは、腫瘍細胞がＧＭ−ＣＳＦを発現するように形質導入されているとき、最も有効であることが示されている。ＧＭ−ＣＳＦは、腫瘍ワクチン接種のための抗原提示の強力な活性化物質であることが示されている(Dranoff et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90: 3539-43)。
【００９２】
種々の腫瘍における遺伝子発現および大規模遺伝子発現パターンの研究は、いわゆる腫瘍特異的抗原の定義を導いている(Rosenberg, S A (1999) Immunity 10: 281-7)。多くの場合、これらの腫瘍特異的抗原は、腫瘍および腫瘍が由来する細胞において発現される分化抗原、例えばメラニン形成細胞抗原ｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原およびＴｒｐ−２である。より重要なことに、これらの抗原の多くは、宿主に見られる腫瘍特異的Ｔ細胞の標的であることが示され得る。ＰＤ−Ｌ１遮断は、腫瘍において発現される一連の組み換えタンパク質および／またはペプチドと関連して、これらのタンパク質に対する免疫応答を産生するために使用され得る。これらのタンパク質は、通常免疫系により自己抗原として見なされ、それ故にそれらに対して寛容である。腫瘍抗原はまた染色体のテロメアの合成に必要であり、ヒト癌の８５％超で発現され、限られた数の体細胞組織にしか発現されないタンパク質テロメラーゼを含み得る(Kim, N et al. (1994) Science 266: 2011-2013)。(これらの体細胞組織は、種々の手段により免疫攻撃から保護され得る)。腫瘍抗原はまたタンパク質配列を変えるまたは２つの無関係な配列間の融合タンパク質を形成する(すなわちフィラデルフィア染色体におけるｂｃｒ−ａｂｌ)体細胞変異のために癌細胞で発現される“ネオ抗原”またはＢ細胞腫瘍からのイディオタイプであり得る。
【００９３】
他の腫瘍ワクチンは、ヒト乳頭腫ウイルス(ＨＰＶ)、肝炎ウイルス(ＨＢＶ、ＨＤＶおよびＨＣＶ)およびカポジヘルペス肉腫ウイルス(ＫＨＳＶ)などのヒト癌と関係するウイルスからのタンパク質を含み得る。ＰＤ−Ｌ１遮断と組み合わせて使用し得る腫瘍特異的抗原の他の形態は、腫瘍組織自体から単離された精製ヒートショックタンパク質(ＨＳＰ)である。これらのヒートショックタンパク質は、腫瘍細胞からのタンパク質のフラグメントを含み、これらのＨＳＰは、抗原提示細胞への送達時、腫瘍免疫誘発のために高度に効率的である(Suot, R & Srivastava, P (1995) Science 269:1585-1588; Tamura, Y. et al. (1997) Science 278:117-120)。
【００９４】
樹状細胞(ＤＣ)は、抗原特異的応答の誘発に使用できる強力な抗原提示細胞である。ＤＣはエクスビボで産生でき、タンパク質およびペプチド抗原ならびに腫瘍細胞抽出物を負荷できる(Nestle, F. et al. (1998) Nature Medicine 4: 328-332)。ＤＣはまたこれらの腫瘍抗原を同様に発現するように遺伝的手段により形質導入もされ得る。ＤＣはまた免疫化の目的で腫瘍細胞と直接融合もされ得る(Kugler, A. et al. (2000) Nature Medicine 6:332-336)。ワクチン接種の方法として、ＤＣ免疫化をＰＤ−Ｌ１遮断と効果的に組み合わせて、より強力な抗腫瘍応答を活性化し得る。
【００９５】
ＰＤ−Ｌ１遮断をまた標準癌処置と組み合わせ得る。ＰＤ−Ｌ１遮断は、化学療法レジメと効果的に組み合わせ得る。この場合、投与される化学療法剤の用量を減らすことが可能であり得る(Mokyr, M. et al. (1998) Cancer Research 58: 5301-5304)。該組み合わせの例は、黒色腫の処置のための本発明の化合物とダカルバジンの組み合わせである。該組み合わせの他の例は、黒色腫の処置のための本発明の化合物とインターロイキン−２(ＩＬ−２)の組み合わせである。ＰＤ−Ｌ１遮断と化学療法の組み合わせ使用の背後にある科学的根拠は、大部分の化学療法化合物の細胞毒性作用の結果である細胞死が、抗原提示経路における腫瘍抗原レベルを増加させることである。細胞死を介してＰＤ−Ｌ１遮断と相乗効果をもたらし得る他の組み合わせ治療は、放射線、手術およびホルモン除去である。これらのプロトコールの各々は、宿主における腫瘍抗原の源を作る。血管形成阻害剤は、ＰＤ−Ｌ１遮断とも組み合わせ得る。血管形成阻害は、腫瘍抗原を宿主抗原提示経路に供給し得る腫瘍細胞死に至る。
【００９６】
本発明の化合物は、ＦｃアルファまたはＦｃガンマ受容体発現エフェクター細胞を腫瘍細胞に標的化させる、二特異的化合物と組み合わせても使用できる(例えば、米国特許５,９２２,８４５および５,８３７,２４３参照)。二特異的化合物は、２つの別々の抗原の標的化に使用できる。例えば抗Ｆｃ受容体／抗腫瘍抗原(例えば、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ)二特異的化合物は、腫瘍部位にマクロファージを標的化させるために使用されている。この標的化は、腫瘍特異的応答をより効果的に活性化し得る。これらの応答のＴ細胞アームは、ＰＤ−Ｌ１遮断の使用により増強され得る。あるいは、腫瘍抗原および樹状細胞特異的細胞表面マーカーに結合する二特異的化合物の使用により、抗原をＤＣに直接送達し得る。
【００９７】
腫瘍は、広範な機序により宿主免疫監視を避ける。これらの機序の多くは、腫瘍により発現され、免疫抑制性であるタンパク質を不活性化することにより突破され得る。これらは、数ある中で、ＴＧＦ−ベータ(Kehrl, J. et al. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050)、ＩＬ−１０(Howard, M. & O'Garra, A. (1992) Immunology Today 13: 198-200)およびＦａｓリガンド(Hahne, M. et al. (1996) Science 274: 1363-1365)を含む。これらの各々に結合し、遮断する阻害剤を、本発明の化合物と組み合わせて使用して、免疫抑制性因子の作用に対抗し、宿主による腫瘍免疫応答を支持し得る。
【００９８】
宿主免疫応答性を活性化する化合物を、ＰＤ−Ｌ１遮断と組み合わせて使用し得る。これらは、ＤＣ機能および抗原提示を活性化する、樹状細胞の表面上の分子を含む。抗ＣＤ４０化合物は、効果的にＴ細胞ヘルパー活性の代替となることができ(Ridge, J. et al. (1998) Nature 393: 474-478)、ＰＤ−Ｌ１遮断と組み合わせて使用し得る(Ito, N. et al. (2000) Immunobiology 201 (5) 527-40)。ＣＴＬＡ−４(例えば、米国特許５,８１１,０９７)、ＯＸ−４０(Weinberg, A. et al. (2000) Immunol 164: 2160-2169)、４−１ＢＢ(Melero, I. et al. (1997) Nature Medicine 3: 682-685 (1997))およびＩＣＯＳ(Hutloff, A. et al. (1999) Nature 397: 262-266)などのＴ細胞共刺激分子の活性化化合物も、Ｔ細胞活性化レベルの増加のために提供し得る。
【００９９】
骨髄移植は、造血起源の多様な腫瘍の処置に現在使用されている。移植片対宿主病はこの処置の結果であるが、移植片対腫瘍応答により治療効果が得ることができる。ＰＤ−Ｌ１遮断を、ドナー生着腫瘍特異的Ｔ細胞の有効性増加に使用し得る。
【０１００】
本発明の他の方法は、特定の毒素または病原体に曝されている患者の処置に使用される。従って、本発明の他の態様は、対象における感染性疾患を処置する方法であって、該対象に治療有効量の式(Ｉ)の化合物またはその塩を投与することを含む、方法を提供する。
【０１０１】
上記の腫瘍へのその適用と同様、式(Ｉ)の化合物またはその塩を単独でまたはアジュバントとして、ワクチンと組み合わせて使用して、病原体、毒素および自己抗原に対する免疫応答を刺激できる。この治療的アプローチが特に有用であり得る病原体の例は、現在有効なワクチンがない病原体または慣用のワクチンの効果が十分ではない病原体を含み得る。これらは、ＨＩＶ、肝炎(Ａ、Ｂ、ＣまたはＤ)、インフルエンザ、ヘルペス、ジアルジア、マラリア、リーシュマニア、黄色ブドウ球菌、緑膿菌を含むが、これらに限定されない。ＰＤ−Ｌ１遮断は、感染症の間に提示される抗原が変わるＨＩＶなどの因子による確立された感染症に対して特に有用である。これらの新規エピトープは、投与時に外来として認識され、それ故にＰＤ−１による負のシグナルにより弱められない強力なＴ細胞応答を誘発する。
【０１０２】
本発明の方法により処置可能な感染症を引き起こす病原性ウイルスの例の一部は、ＨＩＶ、肝炎(Ａ、Ｂ、ＣまたはＤ)、ヘルペスウイルス(例えば、ＶＺＶ、ＨＳＶ−１、ＨＡＶ−６、ＨＨｖ−７、ＨＨＶ−８、ＨＳＶ−２、ＣＭＶおよびエプスタイン・バールウイルス)、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、フラビウイルス、エコーウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、呼吸器多核体ウイルス、ムンプスウイルス、ロタウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクシニアウイルス、ＨＴＬＶウイルス、デングウイルス、乳頭腫ウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ＪＣウイルスおよびアルボウイルス系脳炎ウイルス(arboviral encephalitis virus)を含む。
【０１０３】
本発明の方法により処置可能な感染症を引き起こす病原性細菌の例の一部は、クラミジア、リケッチア細菌、マイコバクテリア、ブドウ球菌、連鎖球菌、肺炎球菌、髄膜炎菌および淋菌、クレブシエラ、プロテウス、セラチア、シュードモナス、レジオネラ、ジフテリア、サルモネラ、桿菌、コレラ、破傷風、ボツリヌス症、炭疽、ペスト、レプトスピラ症およびライム病細菌を含む。
【０１０４】
本発明の方法により処置可能な感染症を引き起こす病原性真菌の例の一部は、カンジダ(アルビカンス、クルーセイ、グラブラタ、トロピカリスなど)、クリプトコッカス・ネオフォルマンス、アスペルギルス(フミガーツス、ニガーなど)、ケカビ目(ムコール属、アブシディア属、リゾプス属)、スポロトリックス・シェンキイ、ブラストミセス・デルマチチジス、パラコクシジオイデス・ブラジリエンシス、コクシジオイデス・イミチスおよびヒストプラズマ・カプスラーツムを含む。
【０１０５】
本発明の方法により処置可能な感染症を引き起こす病原性寄生生物の例の一部は、赤痢アメーバ、大腸バランジウム、フォーラーネグレリア、アカントアメーバ科、ランブル鞭毛虫、クリプトスポリジウム属、ニューモシスチス・カリニ、三日熱マラリア原虫、ネズミバベシア、ブルセイトリパノソーマ、クルーズトリパノソーマ、ドノバンリーシュマニア、トキソプラズマ原虫およびブラジル鉤虫を含む。
【０１０６】
上記方法の全てにおいて、ＰＤ−Ｌ１遮断を、サイトカイン処置(例えば、インターフェロン、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＩＬ−２)または腫瘍抗原の増強された提示を提供する二重特異性抗体治療などの他の形態の免疫療法(Holliger (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448; Poljak (1994) Structure 2:1121-1123参照)、ワクチンまたは遺伝子発現を修飾する薬剤と組み合わせ得る。
【０１０７】
本発明の化合物は自己免疫性応答を誘発し、増強させ得る。実際、腫瘍細胞およびペプチドワクチンを使用する抗腫瘍応答の誘発は、多くの抗腫瘍応答が抗自己反応性に関与することを示している(van Elsas et al. supra における抗ＣＴＬＡ−４＋ＧＭ−ＣＳＦ修飾Ｂ１６黒色腫で観察される色素脱失；Ｔｒｐ−２ワクチン接種マウスにおける色素脱失(Overwijk, W. et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 96: 2982-2987)；ＴＲＡＭＰ腫瘍細胞ワクチンにより誘発される自己免疫性前立腺炎(Hurwitz, A. (2000) supra)、黒色腫ペプチド抗原ワクチン接種およびヒト臨床試験で観察される白斑(Rosenberg, S A and White, D E (1996) J. Immunother Emphasis Tumor Immunol 19 (1): 81-4))。
【０１０８】
それ故に、種々の自己タンパク質と組み合わせた抗ＰＤ−Ｌ１遮断の使用を、疾患処置のためにこれらの自己タンパク質に対する免疫応答を効率的に産生するためのワクチン接種プロトコールを作成するために考慮することが可能である。例えば、アルツハイマー病は、脳のアミロイド沈着物におけるＡ.ベータ.ペプチドの不適切な蓄積を含み、アミロイドに対する抗体応答が、これらのアミロイド沈着物を除去し得る(Schenk et al., (1999) Nature 400: 173-177)。
【０１０９】
アレルギーおよび喘息の処置のためのＩｇＥおよび関節リウマチのためのＴＮＦ.アルファ.などの他の自己タンパク質も標的として使用し得る。そして、種々のホルモンに対する抗体応答が式(Ｉ)の化合物またはその塩の使用により誘発され得る。生殖ホルモンに対する中和抗体応答は避妊に使用し得る。特定の腫瘍の増殖に必要なホルモンおよび他の可溶性因子に対する中和抗体応答は、可能性のあるワクチン接種標的として考慮され得る。
【０１１０】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体の使用についての上の記載と同様の方法を、アルツハイマー病におけるＡ.ベータ.を含むアミロイド沈着物、ＴＮＦアルファおよびＩｇＥなどのサイトカインなどの他の自己抗原の不適切な蓄積を有する患者の処置のための治療的自己免疫性応答の誘導のために使用し得る。
【０１１１】
本発明の化合物を、式(Ｉ)の化合物またはその塩と目的の抗原(例えば、ワクチン)の共投与により、抗原特異的免疫応答の刺激に使用し得る。従って、他の態様において、本発明は、対象におけるある抗原に対する免疫応答を増強する方法であって、該対象における該抗原に対する免疫応答が増強されるように、該対象に、(ｉ)該抗原；および(ii)式(Ｉ)の化合物またはその塩を投与することを含む、方法を提供する。抗原は、例えば、腫瘍抗原、ウイルス抗原、細菌抗原または病原体からの抗原であり得る。このような抗原の非限定的例は、上記腫瘍抗原(または腫瘍ワクチン)または上記ウイルス、細菌もしくは他の病原体由来の抗原など、上に記載したものを含む。
【０１１２】
先に記載のとおり、本発明の化合物を１以上の他の治療剤、例えば、細胞毒性剤、放射毒性剤または免疫抑制剤と共投与し得る。本発明の化合物を、他の治療剤の前、後または同時に投与してよく、または他の既知治療、例えば、抗癌治療、例えば、放射線と併用投与し得る。このような治療剤は、とりわけ、抗新生物剤、例えばドキソルビシン(アドリアマイシン)、シスプラチン、ブレオマイシン硫酸塩、カルムスチン、クロラムブシル、ダカルバジンおよびシクロホスファミドヒドロキシ尿素を含み、これらは、それ自体では、患者に毒性または準毒性であるレベルでしか有効ではない。シスプラチンは、４週毎に１００mg／回で静脈内投与し、アドリアマイシンは、２１日毎に６０〜７５mg／mL用量で静脈内投与する。式(Ｉ)の化合物またはその塩と化学療法剤の共投与は、ヒト腫瘍細胞に細胞毒性効果をもたらす異なる機序で機能する２種の抗癌剤を提供する。このような共投与は、腫瘍細胞を抗体に対して非反応性とする、薬物に対する耐性獲得または抗原性変化による問題を解決し得る。
【０１１３】
また本発明の範囲内であるのは、式(Ｉ)の化合物またはその塩および使用指示書を含むキットである。キットは、少なくとも一つの付加的薬剤をさらに含み得る。キットは、一般に該キットの内容物の意図される使用を指示するラベルを含む。用語ラベルは、キット上に、またはキットと共に提供される、または他の方法でキットに付随する、あらゆる文書または記憶媒体を含む。
【０１１４】
上記他の治療剤は、本発明の化合物と組み合わせて用いるとき、例えば、Physicians’ Desk Reference(ＰＤＲ)に示されるまたは他に当業者により決定される量で用いられ得る。本発明の方法において、このような他の治療剤は、本発明化合物の投与前に、同時にまたは後に投与し得る。
【０１１５】
ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１ホモジニアス時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)結合アッセイで測定して、２０μM以下、例えば、０.４８〜２０μMのＩＣ５０値でＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用を阻害する。
【実施例】
【０１１６】
本発明を、下記実施例によりさらに定義する。実施例は説明目的でのみ示されていることが理解されるべきである。以上の記載および実施例から、当業者は本発明の必須の特徴を確認し、その精神および範囲から逸脱することなく、種々の変更および修飾を行い、本発明を種々の用途および条件に適合させ得る。その結果、本発明は下記の説明的実施例に限定されず、むしろ添付する特許請求の範囲により定義される。
【０１１７】
本明細書において、次の用語は以下に示す意味を有する：ＴＨＦはテトラヒドロフラン、ＥｔＯＡｃは酢酸エチル、ＤＭＦはＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、ＤＣＥは１,２−ジクロロエタン、ＤＣＭはジクロロメタン、ｒｔまたはＲＴまたはＲｔは室温または保持時間(文脈で定まる)、ＥｔＯＨはエタノール、ｍｉｎは分、ｈまたはｈｒは時間そしてＤＭＳＯはジメチルスルホキシド。
【０１１８】
中間体：５−クロロ−２−ヒドロキシ−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンズアルデヒド
【化１６】
2020504766.tif 000017
ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(１.７９３ｇ、８.８７mmol)のＴＨＦ(５０mL)溶液を、(２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)フェニル)メタノール(２ｇ、８.０６mmol)、５−クロロ−２,４−ジヒドロキシベンズアルデヒド(１.３９１ｇ、８.０６mmol)およびトリフェニルホスフィン(２.３２６ｇ、８.８７mmol)のＴＨＦ(５０mL)溶液に０℃で滴下した。得られた黄色溶液を室温に温め、一夜撹拌した。溶媒を除去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(Biotage 40m、０〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン)で精製して、１.９５ｇ(５７.１％)の５−クロロ−２−ヒドロキシ−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンズアルデヒドを白色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の条件設定を使用する島津分析LC/Micromass Platform LC(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Phenomenex Luna  ３μm  Ｃ１８、２×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt(保持時間) = 2.147分, m/z 389.2 (M + H). 1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ ppm 11.45 (s, 1H), 9.72 (s, 1H), 7.83 - 7.79 (m, 1H), 7.57 - 7.53 (m, 2H), 7.28 - 7.23 (m, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 2.59 (s, 3H), 1.40 - 1.37 (m, 12H)
【０１１９】
中間体：５−((４−クロロ−２−ホルミル−５−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化１７】
2020504766.tif 000018
５−クロロ−２−ヒドロキシ−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンズアルデヒド(１.５ｇ、３.７３mmol)、５−(クロロメチル)ニコチノニトリル(０.７３９ｇ、４.８４mmol)および炭酸セシウム(１.７６０ｇ、５.４０mmol)のＤＭＦ(１５mL)懸濁液を、室温で一夜撹拌した。溶媒を除去し、残留物をジクロロメタンおよび水に分配した。水相をジクロロメタンで１回抽出した。有機抽出物を塩水で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を濾過により除去し、溶媒を減圧で除去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(Biotage 40m、０〜５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン)で精製して、１.４８ｇ(７７％)の５−((４−クロロ−２−ホルミル−５−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリルを白色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の条件設定を使用する島津分析LC/Micromass Platform LC(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Phenomenex Luna  ３μm  Ｃ１８、２×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 2.147分, m/z 505.3 (M+H). 1H NMR (500MHz, クロロホルム-d) δ ppm 10.29 (s, 1H), 8.93 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.91 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.81 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.25 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.25 (s, 2H), 5.19 (s, 2H), 2.61 (s, 3H), 1.40 (s, 12H)
【０１２０】
中間体：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化１８】
2020504766.tif 000019
バイアルに酢酸(５５μL、０.９６４mmol)、ＤＣＥ(１,２−ジクロロエタン、２.０mL)、エタノール(６.０mL)、ＴＨＦ(２.０mL)、２０mgのオーブン乾燥し、粉砕し、４Åモレキュラー・シーブした、(Ｓ)−ピペリジン−２−カルボン酸(１２４mg、０.９６４mmol)、５−((４−クロロ−２−ホルミル−５−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル(２５０mg、０.４８２mmol)およびナトリウムシアノボロハイドライド(６０.６mg、０.９６４mmol)を加えた。バイアルに蓋をして、混合物を一夜、室温で振盪した。揮発物を除去し、得られた混合物を６０mLのＤＣＭ(ジクロロメタン)で希釈し、水、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、３０１.０mgの粗製(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸を得た。
【０１２１】
精製のために、粗製物を最小のアセトニトリルに溶解し、Ｉｓｃｏ  １００ｇ  Ｃ１８金カラムに負荷し、アセトニトリル／水／１０mM  酢酸アンモニウムを用いるBiotage Horizonで精製し、ここで、１０〜１００％Ｂの勾配で、溶媒Ａは５％アセトニトリル／９５％水／１０mM  酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％アセトニトリル／１０mM  酢酸アンモニウムであった。５５〜６０％Ｂで溶出した生成物を取得した。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.185分, m/z 632.0 (M + H). 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.00 (m, 2H), 8.44 (m, 1H), 7.63 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.46 - 7.37 (m, 1H), 7.20 (m, 1H), 7.08 (m, 1H), 5.32 (br. s., 2H), 5.19 (m, 2H), 3.75 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.57 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.09 (m, 1H), 2.88 (m, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.24 (m, 1H), 1.83 - 1.67 (m, 2H), 1.48 (m, 3H), 1.36 (m, 1H), 1.32 (m, 12H)
【０１２２】
中間体：５−ブロモ−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化１９】
2020504766.tif 000020
封管中の２−アミノ−４−ブロモフェノール(２００mg、１.０６４mmol)および１−メチルピペリジン−４−カルボン酸(１５２mg、１.０６４mmol)に、ポリリン酸(５ｇ)を加えた。容器を密封し、混合物を３.５時間、１９０℃で加熱した。反応混合物を冷却した。混合物に、０℃で６mLの水、次いで１０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液をｐＨが約８に達するまで滴下した。この濃厚な紫色混合物に、３０mLの酢酸エチルを加えた。混合物をセライトで濾過し、抽出し、水、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、２４４.８mg(７４％収率)の５−ブロモ−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾールを黄褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７mm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt(保持時間) = 1.340分, m/z 295.05, 297.00 (M + H), 95%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.95 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 8.6, 1.9 Hz, 1H), 3.02 - 2.93 (m, 1H), 2.79 (m, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.10 - 2.01 (m, 4H), 1.87 - 1.77 (m, 2H)
【０１２３】
実施例１００１：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化２０】
2020504766.tif 000021
小型封管に、(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸(４０mg、０.０６３mmol)、５−ブロモ−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(１８.６８mg、０.０６３mmol)、ＴＨＦ(３mL)、水(１mL)、リン酸三カリウム(２６.９mg、０.１２７mmol)および最後に第二世代ＸＰｈｏｓプレ触媒(２.４９０mg、３.１６μmol)を加えた。封管中で、混合物を窒素により脱気／フラッシュし、次いで一夜、７０℃で加熱した。粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２０分間をかける１５〜５５％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４.８mg(３１％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６％であった。
【０１２４】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１.５５０分；ESI-MS(+) m/z = 720.0 (M + H)
分析条件２：保持時間＝１.３９４分；ESI-MS(+) m/z = 720.1 (M + H)
【０１２５】
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (s, 2H), 8.40 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 - 7.22 (m, 3H), 7.09 (s, 1H), 5.32 (m, 2H), 5.26 (s, 2H), 3.74 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.58 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.14 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 2.99 (m, 1H), 2.89 (m, 1H), 2.82 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.13 - 2.06 (m, 4H), 1.94 - 1.86 (m, 3H), 1.77 (m, 2H), 1.49 (m, 3H), 1.41 - 1.33 (m, 1H)
【０１２６】
次の中間体および実施例化合物を同様の方法で合成した。
【０１２７】
中間体：６−ブロモ−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化２１】
2020504766.tif 000022
１４４.８mg(３３％収率)の６−ブロモ−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾールを黄褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７mm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.005分, m/z 295.10, 297.10 (M + H), 75%純度. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.66 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 8.5, 1.7 Hz, 1H), 3.02 - 2.85 (m, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.24 - 2.14 (m, 4H), 2.11 - 1.97 (m, 2H)
【０１２８】
実施例１００２：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−６−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化２２】
2020504766.tif 000023
粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２５分間をかける３０〜７０％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。化合物をさらに次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で２２分間をかける１２〜５２％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１１.７mg(１７％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４％であった。
【０１２９】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１.４３２分；ESI-MS(+) m/z = 720.1 (M + H)
分析条件２：保持時間＝１.４６２分；ESI-MS(+) m/z = 720.0 (M + H)
【０１３０】
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (d, J = 1.8 Hz, 2H), 8.40 (s, 1H), 7.73 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.50 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 - 7.21 (m, 3H), 7.08 (s, 1H), 5.32 (s, 2H), 5.26 (s, 2H), 3.77 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.60 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.17 - 3.09 (m, 2H), 3.05 - 2.95 (m, 1H), 2.92 - 2.86 (m, 1H), 2.81 (m, 2H), 2.28 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.13 - 2.03 (m, 4H), 1.90 (m, 1H), 1.77 (m, 2H), 1.49 (m, 3H), 1.37 (m, 1H)
【０１３１】
中間体：(ｒａｃ)−５−ブロモ−２−(１−メチルピペリジン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化２３】
2020504766.tif 000024
２８９.４mg(５５％収率)の(ｒａｃ)−５−ブロモ−２−(１−メチルピペリジン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾールを、赤色油状物として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７mm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.032分, m/z 295.10, 297.10 (M + H), 70%純度. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.81 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 1.9, 8.7 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 3.23 (m, 2H), 2.82 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.25 - 2.17 (m, 1H), 2.07 (m, 2H), 1.90 - 1.82 (m, 1H), 1.79 - 1.63 (m, 3H)
【０１３２】
実施例１００３：(２Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化２４】
2020504766.tif 000025
粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２０分間をかける２０〜６０％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１４.３mg(２１％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.０％であった。
【０１３３】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１.６３６分；ESI-MS(+) m/z = 720.0 (M + H)
分析条件２：保持時間＝１.５００分；ESI-MS(+) m/z = 720.0 (M + H)
【０１３４】
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (s, 2H), 8.40 (s, 1H), 7.72 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 - 7.23 (m, 3H), 7.09 (s, 1H), 5.33 (d, J = 2.7 Hz, 2H), 5.27 (s, 2H), 3.77 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.60 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.17 - 3.11 (m, 2H), 3.06 (m, 1H), 2.93 - 2.86 (m, 1H), 2.67 (m, 1H), 2.37 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 2.27 (m, 1H), 2.24 (br. s., 6H), 2.14 - 2.01 (m, 2H), 1.78 (m, 3H), 1.69 - 1.59 (m, 2H), 1.49 (m, 3H), 1.38 (m, 1H)
【０１３５】
中間体：５−ブロモ−２−(ピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化２５】
2020504766.tif 000026
６９９.７mg(７０％収率)の５−ブロモ−２−(ピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾールを黄褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７mm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.027分, m/z 281.10, 283.10 (M + H), 90%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.95 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 8.7, 1.9 Hz, 1H), 3.09 (s, 1H), 2.99 (dt, J = 12.4, 3.6 Hz, 2H), 2.60 (td, J = 11.9, 2.5 Hz, 2H), 1.99 (dd, J = 12.7, 2.6 Hz, 2H), 1.75 - 1.61 (m, 2H)
【０１３６】
実施例１００４：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(ピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化２６】
2020504766.tif 000027
粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２０分間をかける１５〜５５％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１１.５mg(２０％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７.１％であった。
【０１３７】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１.３４８分；ESI-MS(+) m/z=706.1 (M + H)
分析条件２：保持時間＝１.４９４分；ESI-MS(+) m/z=706.0 (M + H)
【０１３８】
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.99 (m, 2H), 8.46 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.33 - 7.21 (m, 3H), 7.10 (s, 1H), 5.33 (s, 2H), 5.26 (s, 2H), 3.84 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 3.76 - 3.72 (m, 1H), 3.29 - 3.21 (m, 1H), 3.19 - 3.11 (m, 2H), 3.07 - 3.00 (m, 1H), 2.94 - 2.85 (m, 1H), 2.81 (m, 2H), 2.22 (m, 4H), 2.13 (m, 2H), 1.87 - 1.75 (m, 3H), 1.72 - 1.64 (m, 1H), 1.47 (m, 3H), 1.37 - 1.26 (m, 1H)
【０１３９】
中間体：５−ブロモ−２−(１−シクロプロピルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化２７】
2020504766.tif 000028
２８３.４mg(４６％収率)の５−ブロモ−２−(１−シクロプロピルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾールを黄褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７mm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.049分, m/z 321.15, 323.10 (M + H), 70%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.95 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.6 Hz 1H), 7.53 (dd, J = 8.6, 1.9 Hz, 1H), 3.08 - 2.93 (m, 3H), 2.34 (td, J = 11.5, 2.4 Hz, 2H), 2.11 - 2.04 (m, 2H), 1.80 - 1.59 (m, 3H), 0.47 - 0.38 (m, 2H), 0.35 - 0.28 (m, 2H)
【０１４０】
実施例１００５：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((３−(２−(１−シクロプロピルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化２８】
2020504766.tif 000029
粗製物を次の条件を使用する分取ＨＰＬＣで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、３０×１００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、３０mL／分の流速で、２５分間をかける３０〜５０％Ｂの勾配および１０分間の維持、次いで１０分間をかける５０〜１００％Ｂの勾配を用いた。所望の生成物を含むフラクションを蒸発させた。生成物の収量は２１.５mg(１８％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
【０１４１】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters XBridge  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１４.８３分；９９％純度。
分析条件２：保持時間＝６.０９分；９９％純度。
【０１４２】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により、２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.129分, m/z 746.20 & 748.20 (M + H)
【０１４３】
1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.96 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.67 (m, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.54 - 7.46 (m, 1H), 7.32 (m, 3H), 7.06 (s, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.34 (s, 2H), 4.51 - 4.40 (m, 1H), 4.40 - 4.23 (m, 1H), 3.59 - 3.45 (m, 1H), 3.28 - 3.10 (m, 3H), 3.03 - 2.85 (m, 1H), 2.64 - 2.44 (m, 2H), 2.28 (m, 6H), 1.98 (m, 2H), 1.92 - 1.76 (m, 4H), 1.76 - 1.62 (m, 1H), 1.62 - 1.44 (m, 1H), 1.39 - 1.23 (m, 1H), 0.51 (m, 4H)
【０１４４】
中間体：２−(８−アザビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)−５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化２９】
2020504766.tif 000030
１１０.７mgの２−(８−アザビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)−５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール(３８％収率)を黄褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.140分, m/z 307.10 & 309.10 (M + H), 100%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.96 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 8.7, 1.9 Hz, 1H), 3.96 (m, 2H), 3.55 (m, 1H), 2.20 - 2.04 (m, 4H), 2.02 - 1.90 (m, 4H)
【０１４５】
実施例１００６：(２Ｓ)−１−(４−((３−(２−(８−アザビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化３０】
2020504766.tif 000031
粗製物を次の条件を使用する分取ＨＰＬＣで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、３０×１００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、３０mL／分の流速で、２５分間をかける３０〜１００％Ｂの勾配および１０分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを蒸発させた。生成物の収量は２４mg(２１％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
【０１４６】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters XBridge  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１４.１１分；９８％純度。
分析条件２：保持時間＝６.０１分；９８％純度。
【０１４７】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.165分, m/z 732.20 & 734.20 (M + H)
【０１４８】
1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.96 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.42 - 8.37 (m, 1H), 7.67 (m, 2H), 7.57 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 6.8, 1.9 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 8.4, 1.7 Hz, 1H), 7.32 - 7.24 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.33 (s, 2H), 4.44 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.19 (m, 2H), 3.77 - 3.63 (m, 1H), 3.55 - 3.44 (m, 1H), 2.91 (m, 1H), 2.42 - 2.29 (m, 6H), 2.27 (s, 3H), 2.25 - 2.19 (m, 3H), 1.91 - 1.74 (m, 3H), 1.74 - 1.63 (m, 1H), 1.60 - 1.48 (m, 1H), 1.40 - 1.27 (m, 1H)
【０１４９】
中間体：５−ブロモ−２−(ピリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化３１】
2020504766.tif 000032
２３５mgの５−ブロモ−２−(ピリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(４２％収率)を桃色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.137分, m/z 275.05, 277.05 (M + H), 65%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.88 (m, 2H), 8.16 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.11 (m, 2H), 7.87 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 8.7, 1.9 Hz, 1H)
【０１５０】
実施例１００７：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(ピリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化３２】
2020504766.tif 000033
粗製物を次の条件を使用する分取ＨＰＬＣで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、３０×１００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、３０mL／分の流速で、２０分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および１０分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを蒸発させた。生成物の収量は１８mg(３１％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９５％であった。
【０１５１】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した：
注入１条件：Waters XBridge  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１４.２７分；９５％純度。
分析条件２：保持時間＝８.１８分；９５％純度。
【０１５２】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.400分, m/z 700.20 (M + H)
【０１５３】
1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.94 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.91 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.80 (m, 2H), 8.38 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 8.22 (m, 2H), 7.88 - 7.76 (m, 1H), 7.73 - 7.66 (m, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.46 - 7.37 (m, 1H), 7.29 (m, 2H), 7.04 (s, 1H), 5.37 (s, 2H), 5.32 (s, 2H), 4.44 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.50 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 3.33 (m, 1H), 2.98 - 2.87 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.25 - 2.16 (m, 1H), 1.90 - 1.73 (m, 3H), 1.68 (m, 1H), 1.52 (m, 1H)
【０１５４】
中間体：５−ブロモ−２−(１−メチルピロリジン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化３３】
2020504766.tif 000034
１７１mgの５−ブロモ−２−(１−メチルピロリジン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(４０％収率)を、赤色油状固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.092分, m/z 281.15および283.15 (M + H), 70%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.69 - 7.65 (d, J = 8.6 Hz,1H), 7.52 (dd, J = 8.6, 2.0 Hz, 1H), 3.71 (m, 1H), 2.89 (m, 1H), 2.81 (m, 1H), 2.58 (m, 2H), 2.32 - 2.17 (m, 5H)
【０１５５】
実施例１００８：(２Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピロリジン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化３４】
2020504766.tif 000035
粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２５分間をかける２０〜６０％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。物質をさらに次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、１５分間をかける２５〜６５％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２１.６mg(３５％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９１％であった。
【０１５６】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１.３１９分；ESI-MS(+) m/z=706.1 (M + H)
分析条件２：保持時間＝１.３７２分；ESI-MS(+) m/z=706.1 (M + H)
【０１５７】
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.89 (m, 2H), 8.35 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.53 (s, 2H), 7.39 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.32 - 7.17 (m, 3H), 6.99 (s, 1H), 5.34 (s, 2H), 5.24 (s, 2H), 3.98 (m, 1H), 3.89 (m, 1H), 3.77 (m, 1H), 3.51 (m, 1H), 2.98 (m, 1H), 2.84 (m, 1H), 2.75 (m, 1H), 2.47 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.28 (m, 1H), 2.23 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.01 (m, 2H), 1.60 (m, 3H), 1.38 (m, 1H)
【０１５８】
中間体：５−ブロモ−７−メチル−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化３５】
2020504766.tif 000036
１９６mgの５−ブロモ−７−メチル−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(４３％収率)を橙色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.167分, m/z 309.15, 311.11 (M + H), 85%純度. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.59 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 3.10 - 2.94 (m, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.29 (t, J = 11.1 Hz, 2H), 2.24 - 2.15 (m, 2H), 2.06 - 1.93 (m, 2H)
【０１５９】
実施例１００９：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(７−メチル−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化３６】
2020504766.tif 000037
粗製物を、アセトニトリル／水／酢酸アンモニウムを用いる島津分取ＨＰＬＣで精製し、ここで、溶媒Ａは５％アセトニトリル／９５％水／１０mM  酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％アセトニトリル／１０mM  酢酸アンモニウムであり、Waters XBridge  ５μm  ３０×１００mmカラムで、３０mL／分の流速で２０分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および１０分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は３８mg(６２％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４％であった。
【０１６０】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters XBridge  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１４.５７分；９４％純度。
分析条件２：保持時間＝７.６４分；９４％純度。
【０１６１】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.244分, m/z 734.25 & 735.25 (M + H)
【０１６２】
1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.94 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.92 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.37 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.47 (dd, J = 6.9, 2.1 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.31 - 7.22 (m, 2H), 7.11 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 5.37 (s, 2H), 5.30 (s, 2H), 4.42 (m, 1H), 4.28 (m, 1H), 3.50 (m, 1H), 3.31 (m, 4H), 2.97 - 2.78 (s, 3H), 2.65 (m, 3H), 2.56 (s, 3H), 2.46 - 2.34 (m, 2H), 2.31 - 2.16 (m, 5H), 1.92 - 1.75 (m, 4H), 1.70 (m, 1H), 1.52 (m, 1H)
【０１６３】
中間体：５−ブロモ−４−メチル−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化３７】
2020504766.tif 000038
１９７.９mgの５−ブロモ−４−メチル−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(４５％収率)を赤色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.105分, m/z 309.10 & 311.10 (M + H), 70%純度. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.45 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 2.99 - 2.90 (m, 3H), 2.63 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.20 - 1.99 (m, 6H)
【０１６４】
実施例１０１０：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(４−メチル−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化３８】
2020504766.tif 000039
粗製物を、アセトニトリル／水／酢酸アンモニウムを用いる島津分取ＨＰＬＣで精製し、ここで、溶媒Ａは５％アセトニトリル／９５％水／１０mM  酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％アセトニトリル／１０mM  酢酸アンモニウムであり、Waters XBridge  ５ｕ  Ｃ１８  ３０×１００mmカラムで、３０mL／分の流速で２０分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および１０分間の維持を用いた。生成物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで再精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、１５分間をかける１５〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７mg(２９％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
【０１６５】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters XBridge  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１４.４５分；９９％純度。
分析条件２：保持時間＝７.３９分；９９％純度。
【０１６６】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.149分, m/z 734.25 (M + H), 99%純度
【０１６７】
1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.88 (m, 1H), 8.82 (m, 1H), 8.31 (m, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.40 (m, 1H), 7.37 (m, 1H), 7.18 (m, 1H), 7.08 - 6.91 (m, 3H), 5.28 (s, 2H), 5.23 (s, 2H), 4.34 (m, 1H), 4.19 (m, 1H), 3.40 (m, 1H), 3.24 (m, 1H), 3.18 (m, 1H), 2.85 - 2.67 (m, 3H), 2.56 (m, 4H), 2.32 - 2.22 (m, 2H), 2.20 - 2.07 (m, 6H), 1.99 (s, 3H), 1.82 (m, 2H), 1.80 - 1.63 (m, 2H), 1.63 - 1.54 (m, 1H), 1.47 - 1.35 (m, 1H)
【０１６８】
中間体：５−ブロモ−２−(４−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化３９】
2020504766.tif 000040
２４３.２mgの５−ブロモ−２−(４−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(５６％収率)を、黄褐色油状固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.119分, m/z 295.10 & 297.10 (M + H), 90%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.97 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 8.5, 1.4 Hz, 1H), 2.83 (m, 2H), 2.58 (m, 2H), 2.19 (m, 2H), 1.60 (m, 2H), 1.36 (s, 3H) 
【０１６９】
実施例１０１１：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化４０】
2020504766.tif 000041
粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、１５分間をかける１５〜１００％Ｂの勾配および５分間維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６.４mg(１５％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
【０１７０】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で、２０分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および１００％Ｂの５分間維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters XBridge  ３.５μm  フェニル、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で、２０分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および１００％Ｂの５分間維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝７.４０分、９８％純度。
分析条件２：保持時間＝８.１７分、９８％純度。
【０１７１】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.152分, m/z 720.20 & 722.25 (M + H), 98%純度. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.93 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.96 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.39 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.61 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 6.9, 2.1 Hz, 1H), 7.36 (dd, J = 8.4, 1.7 Hz, 1H), 7.32 - 7.25 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.34 (s, 2H), 4.44 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.50 (dd, J = 10.6, 3.5 Hz, 1H), 3.42 - 3.35 (m, 2H), 3.32 - 3.12 (m, 2H), 3.01 - 2.85 (m, 1H), 2.65 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.26 - 2.16 (m, 1H), 2.03 (m, 2H), 1.96 - 1.91 (m, 1H), 1.90 - 1.68 (m, 4H), 1.59 - 1.45 (m, 4H)
【０１７２】
中間体：４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)−Ｎ,Ｎ−ジエチルシクロヘキサンアミン
【化４１】
2020504766.tif 000042
４０７.８mgの４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)−Ｎ,Ｎ−ジエチルシクロヘキサンアミン(７４％収率)を、赤色油状固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.182分, m/z 351.15 & 353.15 (M + H), 85%純度. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.80 (m, 1H), 7.42 (m, 1H), 7.35 (m, 1H), 3.08 - 2.84 (m, 6H), 2.45 - 2.32 (m, 2H), 2.25 (m, 2H), 1.96 - 1.60 (m, 4H), 1.30 (m, 6H)
【０１７３】
実施例１０１２：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((３−(２−(４−(ジエチルアミノ)シクロヘキシル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化４２】
2020504766.tif 000043
粗製物を、アセトニトリル／水／１０mM  酢酸アンモニウムを用いる島津分取ＨＰＬＣで精製し、ここで、溶媒Ａは５％アセトニトリル／９５％水／１０mM  酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％アセトニトリル／１０mM  酢酸アンモニウムであり、Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８  ＯＢＤ  ３０×１００mmカラムで、３０mL／分の流速で２０分間をかける５〜１００％Ｂの勾配および１０分間の維持を用いた。生成物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで再精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、３０分間をかける１０〜５０％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。生成物の収量は１２.５mg(２０％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
【０１７４】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で、２０分間をかける０〜１００％Ｂ勾配および１００％Ｂの５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters XBridge  ３.５μm  フェニル、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で、２０分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および１００％Ｂの５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝８.７８分、９８％純度。
分析条件２：保持時間＝１０.０９分、９８％純度。
【０１７５】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.092分, m/z 776.30 (M + H), 100%純度
【０１７６】
1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.96 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.93 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.40 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 7.68 - 7.65 (m, 2H), 7.57 (m, 1H), 7.49 (dd, J = 6.4, 2.4 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.30 - 7.26 (m, 2H), 7.06 (s, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.34 (s, 2H), 4.45 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.54 - 3.45 (m, 2H), 3.36 (m, 1H), 3.32 - 3.27 (m, 3H), 3.22 (m, 1H), 3.13 (m, 1H), 2.97 - 2.89 (m, 1H), 2.49 (m, 2H), 2.28 (m, 6H), 1.92 - 1.77 (m, 7H), 1.70 (m, 1H), 1.55 (m, 1H), 1.40 (t, J = 7.3 Hz, 6H)
【０１７７】
中間体：５−ブロモ−２−(１−イソプロピルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化４３】
2020504766.tif 000044
２６４mgの５−ブロモ−２−(１−イソプロピルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(７６％収率)を桃色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 0.972分, m/z 323.15 & 325.15 (M + H), 99%純度. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.82 (dd, J = 1.7, 0.5 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 0.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 3.12 - 3.00 (m, 3H), 2.82 (m, 1H), 2.45 (td, J = 11.7, 2.4 Hz, 2H), 2.27 - 2.17 (m, 2H), 2.06 - 1.94 (m, 2H), 1.18 - 1.09 (m, 6H)
【０１７８】
実施例１０１３：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((３−(２−(１−イソプロピルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化４４】
2020504766.tif 000045
粗製物を次の条件を使用する分取ＨＰＬＣで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、３０×１００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、３０mL／分の流速で、２５分間をかける０〜７５％Ｂの勾配および１０分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを蒸発させた。生成物の収量は１５.２mg(２５％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。
【０１７９】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters XBridge  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１４.７７分；９７％純度。
分析条件２：保持時間＝６.３５分；９９％純度。
【０１８０】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 0.890分, m/z 749.10 (M + H)
【０１８１】
1H NMR (500MHz, C D3OD) δ 8.96 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.92 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.66 (m, 2H), 7.54 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 6.9, 1.9 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.27 (m, 2H), 7.04 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 5.31 (s, 2H), 4.46 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.56 - 3.35 (m, 6H), 3.14 (t, J = 11.3 Hz, 2H), 2.92 (td, J = 12.0, 3.2 Hz, 1H), 2.48 (dd, J = 14.2, 3.0 Hz, 2H), 2.35 - 2.18 (m, 6H), 1.92 - 1.75 (m, 3H), 1.70 (m, 1H), 1.59 - 1.48 (m, 1H), 1.44 - 1.28 (m, 6H)
【０１８２】
中間体：５−ブロモ−２−(８−メチル−８−アザビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化４５】
2020504766.tif 000046
２−(８−アザビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)−５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール(７８.２mg、０.２５５mmol)のＤＣＥ(１,２−ジクロロエタン、３mL)とトリエチルアミン(０.１０６mL、０.７６４mmol)の溶液に、２.５当量の３７％ホルムアルデヒド水溶液(０.０４７mL、０.６３６mmol)を加えた。混合物を１時間、室温で撹拌した。反応混合物に、次いで純ナトリウムトリアセトキシボロハイドライド(２１６mg、１.０１８mmol)を加え、混合物を一夜、室温で撹拌した。反応混合物をさらに１０mLのＤＣＭ(ジクロロメタン)で希釈し、２mLの１.５Ｍ  リン酸カリウム水溶液、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、窒素下で蒸発させて、９６mgの赤色油状物を得た。粗製物を１０mLのメタノールに溶解し、Biotage  ５ｇ  ＳＣＸ−２イオン交換カートリッジを通した。カートリッジを３カラム体積(３０mL)のメタノールで流し、塩基性生成物が３０mLの２Ｍアンモニアのメタノール溶液で溶出した。４９.６mgの５−ブロモ−２−(８−メチル−８−アザビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(６０％収率)を、赤みがかった黄褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかけて０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配及び１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 0.925分, m/z 321.15 & 323.15 (M + H), 99%純度. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.79 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 8.5, 1.9 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.34 - 3.24 (m, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.22 - 2.10 (m, 4H), 1.93 - 1.84 (m, 2H), 1.74 - 1.66 (m, 2H)
【０１８３】
実施例１０１４：(２Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(８−メチル−８−アザビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化４６】
2020504766.tif 000047
粗製物を、アセトニトリル／水／酢酸アンモニウムを用いる島津分取ＨＰＬＣで精製し、ここで、溶媒Ａは５％アセトニトリル／９５％水／１０mM  酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％アセトニトリル／１０mM  酢酸アンモニウムであり、Xbridge  ５μm  ３０×１００mm  Ｃ１８カラムで、３０mL／分の流速で２５分間をかける３０〜１００％Ｂの勾配および１０分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを蒸発させた。生成物の収量は４６.５mg(３８％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
【０１８４】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters XBridge  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１４.１２分；９９％純度。
分析条件２：保持時間＝６.１５分；９８％純度。
【０１８５】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)で２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.159分, m/z 746.20 & 748.15 (M + H)
【０１８６】
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.96 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.71 - 7.62 (m, 2H), 7.54 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 8.3, 1.7 Hz, 1H), 7.31 - 7.24 (m, 2H), 7.04 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 5.32 (s, 2H), 4.45 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.96 (br. s., 2H), 3.73 - 3.62 (m, 1H), 3.55 - 3.46 (m, 1H), 2.99 - 2.87 (m, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.49 - 2.34 (m, 6H), 2.27 (s, 3H), 2.19 (d, J = 8.6 Hz, 3H), 1.80 (m, 3H), 1.73 - 1.64 (m, 1H), 1.61 - 1.46 (m, 1H), 1.31 (m, 1H)
【０１８７】
中間体：３−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)ビシクロ[１.１.１]ペンタン−１−アミン
【化４７】
2020504766.tif 000048
５４mgの３−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)ビシクロ[１.１.１]ペンタン−１−アミン(４３％収率)を黄褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 0.794分, m/z 278.85 & 280.90 (M + H), 90%純度. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.79 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 8.7, 1.9 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 2.35 (s, 6H)
【０１８８】
実施例１０１５：(Ｓ)−１−(４−((３−(２−(３−アミノビシクロ[１.１.１]ペンタン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化４８】
2020504766.tif 000049
粗製物を、アセトニトリル／水／酢酸アンモニウムを用いる島津分取ＨＰＬＣで精製し、ここで、溶媒Ａは５％アセトニトリル／９５％水／１０mM  酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％アセトニトリル／１０mM  酢酸アンモニウムであり、XTERRA  ５μm  Ｃ１８  ３０×１００mmカラムで、３０mL／分の流速で２５分間をかける３０〜１００％Ｂの勾配および１０分間の維持を用いた。生成物を、アセトニトリル／水／酢酸アンモニウムを用いる島津分取ＨＰＬＣで再精製し、ここで、溶媒Ａは５％アセトニトリル／９５％水／１０mM  酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％アセトニトリル／１０mM  酢酸アンモニウムであり、XTERRA  ５μm  Ｃ１８  ３０×１００mmカラムで、３０mL／分の流速で２５分間をかける３０〜５０％Ｂの勾配および５分間の維持、次いで１０分間をかける５０〜１００％Ｂの勾配を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、蒸発させた。生成物の収量は６mg(１１％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。
【０１８９】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters XBridge  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１３.１５分；１００％純度。
分析条件２：保持時間＝５.７６分；１００％純度。
【０１９０】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.090分, m/z 704.20 & 706.15 (M + H)
【０１９１】
1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.86 (d, J = 1.4 Hz, 2H), 8.21 (br.s., 1H), 7.60 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.52 (m, 2H), 7.41 (m, 1H), 7.29 - 7.22 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 5.29 - 5.23 (m, 1H), 5.22 - 5.15 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.33 (br. s., 2H), 3.54 - 3.41 (m, 2H), 2.68 (m, 1H), 2.39 (s, 6H), 2.22 (s, 3H), 1.95 - 1.71 (m, 5H), 1.49 - 1.32 (m, 1H)
【０１９２】
中間体：２−(４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)ピペリジン−１−イル)酢酸
【化４９】
2020504766.tif 000050
５−ブロモ−２−(ピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(２４５mg、０.８７１mmol)および炭酸セシウム(３１５mg、０.９６７mmol)のＤＭＦ(３mL)中の混合物に、０℃で、窒素下、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモアセテート(０.１３５mL、０.９１５mmol)を滴下した。氷浴を除去し、混合物を室温に温めた。２.５時間後、反応混合物を２mLの水および２０mLの酢酸エチルで抽出した。有機層を抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発させて、粗製物を得た。粗製物を３mLの水で希釈し、Waters  １ｇ  ＨＬＢ抽出カートリッジを通した。カートリッジをさらに１０mLの水で流し、生成物を３０mLのメタノールで溶出した。溶媒を除去して、０４mgのｔｅｒｔ−ブチル２−(４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)ピペリジン−１−イル)アセテートを橙色固体として得た(８８％収率)。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.224分, m/z 395.15, 397.10 (M + H), >90%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.96 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 8.7, 1.9 Hz, 1H), 3.14 (s, 2H), 3.05 - 2.97 (m, 1H), 2.89 (m, 2H), 2.38 (m, 2H), 2.12 - 2.00 (m, 2H), 1.83 (m, 2H), 1.42 (s, 9H)
【０１９３】
ｔｅｒｔ−ブチル２−(４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)ピペリジン−１−イル)アセテート(５０mg、０.１２６mmol)のＤＣＥ(２.５mL)に、室温で、窒素下、トリフルオロ酢酸(０.０７８mL、１.０１２mmol)を加えた。紫色混合物を１６時間撹拌した。揮発物を減圧下除去し(ロータリーエバポレーター)、１０mLのＤＣＭを加え、蒸発操作を反復して、５７.９mg(１００％収率)の２−(４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)ピペリジン−１−イル)酢酸、ＴＦＡを赤色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.024分, m/z 339.0 & 341.05 (M + H), 99%純度. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 9.32 (br. s., 1H), 7.88 (s, 1H), 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.49 - 7.38 (m, 1H), 3.97 (m, 2H), 3.74 (m, 1H), 3.42 (m, 2H), 3.22 (m, 2H), 2.48 (m, 2H), 1.50 (m, 2H)
【０１９４】
実施例１０１６：(Ｓ)−１−(４−((３−(２−(１−(カルボキシメチル)ピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化５０】
2020504766.tif 000051
粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２５分間をかける１０〜５０％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１９.１mg(２６％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４％であった。
【０１９５】
最終純度を決定するために、１回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。。
注入条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件：保持時間＝１.２６８分；ESI-MS(+) m/z = 764.1 (M + H)
【０１９６】
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (s, 2H), 8.41 (s, 1H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 - 7.22 (m, 3H), 7.10 (s, 1H), 5.33 (d, J = 2.6 Hz, 2H), 5.27 (s, 2H), 3.74 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.57 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.18 (s, 2H), 3.15 - 3.00 (m, 4H), 2.89 (m, 1H), 2.57 (m, 2H), 2.25 (m, 4H), 2.15 (m, 2H), 1.95 (m, 2H), 1.77 (m, 2H), 1.49 (m, 3H), 1.44 - 1.33 (m, 1H)
【０１９７】
中間体：５−ブロモ−２−(テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化５１】
2020504766.tif 000052
テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボン酸(０.６９０ｇ、５.３mmol)のＤＣＭ(１０mL)溶液に、窒素下、０℃で、ＤＭＦ(０.０４１mL、０.５３０mmol)を加え、塩化オキサリル(１.１８０mL、７.９mmol)を滴下した。氷浴を除去し、混合物を４５分間撹拌した。揮発物をロータリーエバポレーターで除去し、粗製物を１０mLのＤＣＭで希釈し、蒸発を反復した。
ＲＢＦ(丸底フラスコ)に、２−アミノ−４−ブロモフェノール(１０９７mg、５.８３mmol)のＤＣＭ(２０mL)溶液をピリジン(０.４２９mL、５.３０mmol)と共に加えた。混合物を窒素下、１５分間撹拌した。上記の新たに合成したテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボニルクロライド(７８８mg、５.３０mmol)を含む第二の丸底フラスコに、室温で、２mLのＤＣＭ、続いてＤＣＭ中に２−アミノ−４−ブロモフェノール／ピリジンを含む上記混合物を加えた。合わせた桃色不均一混合物を窒素下、一夜、室温で撹拌した。粗製物を水、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。単離粗製物を４：１氷冷ジエチルエーテル／ヘキサンで磨砕して、１.５１２ｇのＮ−(５−ブロモ−２−ヒドロキシフェニル)テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボキサミド(８８％収率)を桃色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.190分, m/z 300.15, 302.15 (M + H), 90%純度. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.37 (br. s., 1H), 7.58 (br. s., 1H), 7.39 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.20 (dd, J = 8.7, 2.4 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.47 (m, 2H), 2.62 (m, 1H), 1.98 - 1.77 (m, 4H)
【０１９８】
封管に、２mLのジオキサン、Ｎ−(５−ブロモ−２−ヒドロキシフェニル)テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボキサミド(２００mg、０.６６６mmol)および３当量のオキシ塩化リン(０.１８６mL、１.９９９mmol)を加えた。チューブを密封し、混合物を１１０℃で２時間加熱した。混合物を冷却し、ジオキサンを蒸発させて、粗製物を得た。粗製物を水で磨砕し、減圧下乾燥させて、１６０mg(５１％収率)の５−ブロモ−２−(テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾールを桃色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.427分, m/z 282.15, 284.10 (M + H), 65%純度. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.83 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 1.7, 8.7 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.08 (dt, J = 11.7, 3.5 Hz, 2H), 3.58 (td, J = 11.7, 3.5 Hz, 3H), 3.29 - 3.15 (m, 1H), 2.11 - 1.98 (m, 4H)
【０１９９】
実施例１０１７：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化５２】
2020504766.tif 000053
粗製物を、アセトニトリル／水／１０mM  酢酸アンモニウムを用いる島津分取ＨＰＬＣで精製し、ここで、溶媒Ａは５％アセトニトリル／９５％水／１０mM  酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％アセトニトリル／１０mM  酢酸アンモニウムであり、Waters XBridge  ５μm  C18 OBD  ３０×１００mmカラムで、３０mL／分の流速で２０分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および１０分間の維持を用いた。所望の物質を含むフラクションを蒸発させた。生成物の収量は２２mg(３９％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
【０２００】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で、２０分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および１００％Ｂの５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters XBridge  ３.５μm  フェニル、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で、２０分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および１００％Ｂの５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝７.１５分、９９％純度。
分析条件２：保持時間＝７.６６分、９９％純度。
【０２０１】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.360分, m/z 707.20 (M + H), 100%純度
【０２０２】
1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.96 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.92 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.39 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 7.65 (m, 2H), 7.56 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.31 (dd, J = 8.4, 1.7 Hz, 1H), 7.27 (m, 2H), 7.06 (s, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.32 (s, 2H), 4.46 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.06 (dt, J = 11.2, 3.6 Hz, 2H), 3.64 (td, J = 11.2, 3.6 Hz, 2H), 3.52 (dd, J = 10.5, 3.1 Hz, 1H), 3.39 - 3.35 (m, 2H), 2.93 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.24 (m, 1H), 2.14 (m, 2H), 2.08 - 2.00 (m, 2H), 1.93 - 1.75 (m, 3H), 1.70 (m, 1H), 1.59 - 1.49 (m, 1H)
【０２０３】
中間体：２−(８−オキサビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)−５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾールを、同様の方法で合成した。
【化５３】
2020504766.tif 000054
３７５mgのＮ−(５−ブロモ−２−ヒドロキシフェニル)−８−オキサビシクロ[３.２.１]オクタン−３−カルボキサミド(８１％収率)を黄褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.862分, m/z 381.20 & 383.15 (M + H), 90%純度. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 9.11 (br. s., 1H), 7.99 (m, 1H), 7.10 (dd, J = 8.6, 2.4 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.45 (m, 2H), 3.11 - 2.98 (m, 1H), 2.08 - 1.86 (m, 6H), 1.69 (m, 2H)
３１.４mgの２−(８−オキサビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)−５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール(２３％収率)を淡黄色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.502分, m/z 308.10 & 310.10 (M + H), 90%純度. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.79 (s, 1H), 7.40 (m, 1H), 7.34 (m, 1H), 4.52 (br. s., 2H), 3.48 - 3.33 (m, 1H), 2.17 (m, 2H), 2.07 (m, 2H), 1.99 - 1.77 (m, 4H)
【０２０４】
実施例１０１８：(２Ｓ)−１−(４−((３−(２−(８−オキサビシクロ[３.２.１]オクタン−３−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化５４】
2020504766.tif 000055
粗製物を次の条件を使用する分取ＨＰＬＣで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、３０×１００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、３０mL／分の流速で、３０％Ｂを用いる２５分間、５０％Ｂを用いる１０分間、最後に５０〜１００％を用いる５分間の複合勾配を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、蒸発させた。生成物の収量は１０.４mg(１８％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９８％であった。
【０２０５】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters XBridge  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配と５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用いて、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１４.０８分；９８％純度。
分析条件２：保持時間＝９.１３分；９９％純度。
【０２０６】
ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.485分, m/z 733.20 & 734.20 (M + H)
【０２０７】
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.94 (m, 2H), 8.39 (m, 1H), 7.66 (m, 2H), 7.55 (m, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.27 (m, 3H), 7.05 (m, 1H), 5.38 (s, 2H), 5.33 (s, 2H), 4.54 (m, 2H), 4.45 (m, 1H), 4.32 (m, 1H), 3.59 (m, 1H), 3.49 (m, 1H), 2.92 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.14 - 1.94 (m, 9H), 1.78 (m, 3H), 1.66 (m, 1H), 1.53 (m, 1H), 1.30 (m, 1H)
【０２０８】
実施例１０１９および実施例１０２０の化合物を、次のスキームに従い製造した。
【化５５】
2020504766.tif 000056
【０２０９】
実施例１０１９：５−((４−クロロ−２−ホルミル−５−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化５６】
2020504766.tif 000057
封管に、５−ブロモ−２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(８５mg、０.２８９mmol)、５−((４−クロロ−２−ホルミル−５−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル(１５０mg、０.２８９mmol)、ＴＨＦ(４.５mL)、水(１.５mL)、リン酸三カリウム(２４５mg、１.１５７mmol)および第二世代ＸＰｈｏｓプレ触媒(２２.７５mg、０.０２９mmol)。混合物を窒素で脱気／フラッシュし、次いで一夜、８０℃で加熱した。反応混合物を冷却し、溶媒蒸発させた。残留物を酢酸エチルに溶解し、水、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。得られた油状物を３：１冷ジエチルエーテル／ヘキサンで摩砕して、１４８.８mgの５−((４−クロロ−２−ホルミル−５−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル(８５％収率)を淡黄褐色粉末として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.437分, m/z 607.20, 609.20 (M + H), 93%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.24 (s, 1H), 9.04 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 8.56 (s, 1H), 7.74 (m, 2H), 7.63 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.40 - 7.20 (m, 4H), 5.50 (s, 2H), 5.44 (s, 2H), 3.43 (m, 1H), 3.04 - 2.96 (m, 1H), 2.81 (m, 2H), 2.67 - 2.58 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.14 - 2.03 (m, 3H), 1.86 (m, 1H)
【０２１０】
実施例１０２０：(Ｒ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)アミノ)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパン酸
【化５７】
2020504766.tif 000058
バイアルに、５−((４−クロロ−２−ホルミル−５−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル(２５mg、０.０４１mmol)のＤＭＦ(１mL)を酢酸(０.１００mL)および(Ｒ)−２−アミノ−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパン酸(１２.２６mg、０.１０３mmol)と共に加えた。バイアルを密封し、混合物を１時間、室温で撹拌した。反応混合物に、次いでボラン−２−ピコリンコンプレックス(５.２９mg、０.０４９mmol)を加え、混合物を一夜、室温で撹拌した。粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２５分間をかける１５〜８０％Ｂの勾配と５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物、(Ｒ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)アミノ)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパン酸の収量は４.３mg(１４％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４％であった。最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ実施を使用した。
注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配と０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１.３９４分；ESI-MS(+) m/z = 710.1 (M + H)
分析条件２：保持時間＝１.４３５分；ESI-MS(+) m/z = 710.0 (M + H)
【０２１１】
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.95 (m, 1H), 8.89 (m, 1H), 8.39 (m, 1H), 7.70 (m, 1H), 7.52 (m, 2H), 7.40 (m, 1H), 7.31 - 7.18 (m, 3H), 7.02 (m, 1H), 5.33 (m, 2H), 5.24 (m, 2H), 4.00 (m, 4H), 3.07 (m, 1H), 2.92 (m, 2H), 2.41 - 2.24 (m, 4H), 2.22 - 2.07 (m, 4H), 1.88 (m, 2H), 1.76 (m, 2H), 1.24 (s, 3H)
【０２１２】
実施例１０２１：５−((４−クロロ−２−(ヒドロキシメチル)−５−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化５８】
2020504766.tif 000059
実施例１０２１の化合物を、実施例１０２０の反応混合物から単離した。粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２５分間をかける１５〜８０％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物、５−((４−クロロ−２−(ヒドロキシメチル)−５−((２−メチル−３−(２−(１−メチルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリルの収量は２.６mg(１０％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９６.２％であった。
【０２１３】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１.９４４分；ESI-MS(+) m/z = 609.0 (M + H)
分析条件２：保持時間＝１.８８４分；ESI-MS(+) m/z = 609.0 (M + H)
【０２１４】
中間体：５−ブロモ−２−(１−フェニルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール
【化５９】
2020504766.tif 000060
２−アミノ−４−ブロモフェノール(３００mg、１.５９６mmol)および１−フェニルピペリジン−４−カルボン酸塩酸塩(３８６mg、１.５９６mmol)に、ポリリン酸(５ｇ)を加えた。混合物を３.５時間、１９０℃で加熱した。反応混合物に、０℃で、６mLの水を、手動撹拌しながら滴下した。反応混合物に、２Ｍ  ＮａＯＨ水溶液をｐＨが約７に達するまで滴下した。この濃厚な紫色混合物に３０mLの酢酸エチルを加え、生成物を抽出し、水、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、１５８.９mgの５−ブロモ−２−(１−フェニルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾールを赤色固体(２８％収率)として得て、ＬＣＭＳによるその純度は９５％であった。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.202分, m/z 357.15 & 359.15 (M + H), 95%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.96 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 1.9, 8.6 Hz, 1H), 7.27 - 7.19 (m, 2H), 6.99 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.78 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.74 (dt, J = 12.7, 3.4 Hz, 2H), 3.25 (m, 1H), 2.98 - 2.88 (m, 2H), 2.19 (dd, J = 13.3, 2.9 Hz, 2H), 1.98 - 1.88 (m, 2H)
【０２１５】
実施例１０２２：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(１−フェニルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化６０】
2020504766.tif 000061
封管に、５−ブロモ−２−(１−フェニルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(２８.３mg、０.０７９mmol)、ＴＨＦ(３mL)、(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸(５０mg、０.０７９mmol)、リン酸三カリウム(４２.０mg、０.１９８mmol)、水(１mL)および第二世代ＸＰｈｏｓプレ触媒(７.８０mg、９.９１μmol)を加えた。容器を密封し、混合物を窒素で脱気／フラッシュし、次いで７５℃で、一夜加熱した。粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２０分間をかける５０〜９０％Ｂ勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は１７.５mg(２８.１％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。
【０２１６】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝２.４９４分；ESI-MS(+) m/z = 782.0 (M + H)
分析条件２：保持時間＝１.８４６分；ESI-MS(+) m/z = 782.0 (M + H)
【０２１７】
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 9.02 (m, 2H), 8.47 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.53 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.36 - 7.20 (m, 5H), 7.14 (s, 1H), 7.01 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 6.79 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 5.35 (br. s., 2H), 5.29 (s, 2H), 3.85 - 3.73 (m, 4H), 3.62 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.13 (m, 1H), 2.94 (m, 4H), 2.33 - 2.15 (m, 5H), 1.97 (m, 2H), 1.80 (m, 1H), 1.73 (m, 1H), 1.49 (m, 3H), 1.37 (m, 1H)
【０２１８】
実施例１０２３：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−メトキシ−４−((２−メチル−３−(２−(１−フェニルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化６１】
2020504766.tif 000062
実施例１０２３の化合物を、上記スキームおよび下記方法に従い製造した：５−クロロ−２−ヒドロキシ−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンズアルデヒド(１.４１ｇ、３.５０mmol)のＤＭＦ(２３mL)溶液に、窒素雰囲気下、炭酸カリウム(１.１１３ｇ、８.０５mmol)およびヨードメタン(０.４３６ml、７.００mmol)を加えた。混合物を一夜、室温で撹拌した。粗製物を７５mLのＤＣＭで希釈し、水、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、１.４ｇ(８８％)の５−クロロ−２−メトキシ−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンズアルデヒドを淡黄褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７mm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 2.044分, m/z 417.25, 419.25 (M + H), 90%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.16 (s, 1H), 7.69 - 7.65 (m, 2H), 7.64 - 7.59 (m, 1H), 7.25 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.01 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 1.32 (s, 12H)
【０２１９】
丸底フラスコに、酢酸(２７.５μl、０.４８０mmol)、ＤＣＥ(１mL)、エタノール(３mL)、ＴＨＦ(１mL)、２０mgのオーブン乾燥し、粉砕した４Åシーブ、Ｌ−ピペコリン酸(６２.０mg、０.４８０mmol)および５−クロロ−２−メトキシ−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンズアルデヒド(１００mg、０.２４０mmol)を加えた。丸底フラスコを密封し、混合物を窒素雰囲気下に置き、室温で１時間撹拌した。小型バイアルに、ＴＨＦ(１ml)およびシアノトリヒドロホウ酸ナトリウム(３０.２mg、０.４８０mmol)を加えた。混合物を手短に音波処理して溶解させ、次いでシリンジにとった。得られた溶液を、４時間をかけて上記反応混合物に手動で滴下した。反応混合物を次いで窒素下で一夜撹拌した。粗製物を酢酸エチルで希釈し、１.５Ｍリン酸カリウム、水、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、１３４.７mgの(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−メトキシ−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸を白色固体として得た(８５％収率、８０％純度)。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７mm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間維持を用いた。LCMS Rt = 1.554分, m/z 530.35 (M + H), 80%純度. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.64 (m, 1H), 7.59 (m, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.28 - 7.21 (m, 1H), 6.95 (S, 1H), 5.23 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.77 - 3.71 (m, 1H), 3.69 - 3.62 (m, 1H), 3.13 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.32 (m, 1H), 1.82 (m, 1H), 1.76 - 1.68 (m, 1H), 1.52 (m, 3H), 1.41 - 1.36 (m, 1H), 1.32 (s, 12H)
【０２２０】
封管に、５−ブロモ−２−(１−フェニルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール(３５.４mg、０.０９９mmol)、ＴＨＦ(３mL)、(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−メトキシ−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸(６８.２５mg、０.１２９mmol)、リン酸三カリウム(５２.６mg、０.２４８mmol)、水(１mL)および第二世代ＸＰｈｏｓプレ触媒(７.８０mg、９.９１μmol)を加えた。混合物を窒素で脱気／フラッシュした後、容器を密封し、次いで一夜、７５℃で加熱した。粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２３分間をかける４７〜８７％Ｂの勾配と４分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。物質をさらに次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５  メタノール：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２５分間をかける５０〜９０％Ｂの勾配および５分間維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。実施例１０２３、(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−メトキシ−４−((２−メチル−３−(２−(１−フェニルピペリジン−４−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸の収量は１.１mg(２％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９２％であった。
【０２２１】
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配と０.７５分間１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。分析条件１：保持時間＝２.５６７分；ESI-MS(+) m/z = 680.0 (M + H)；分析条件２：保持時間＝１.８６６分；ESI-MS(+) m/z = 680.0 (M + H); 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.76 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.33 - 7.19 (m, 5H), 7.03 - 6.97 (m, 2H), 6.92 (s, 1H), 6.78 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 5.27 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.79 - 3.67 (m, 2H), 3.30 - 3.21 (m, 2H), 2.94 (t, J = 10.9 Hz, 3H), 2.84 (m, 1H), 2.65 (dd, J = 8.1, 3.9 Hz, 1H), 2.28 - 2.16 (m, 4H), 2.05 - 1.86 (m, 3H), 1.74 - 1.50 (m, 3H), 1.42 (m, 2H), 1.24 (m, 2H)
【０２２２】
中間体：メチル４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)シクロヘキサンカルボキシレートおよび４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)シクロヘキサンカルボン酸
【化６２】
2020504766.tif 000063
丸底フラスコに、０℃で、窒素下、４−(メトキシカルボニル)シクロヘキサンカルボン酸(０.４８４ｇ、２.６０mmol)、乾燥ＤＣＭ(１０mL)、乾燥ＤＭＦ(０.０４０mL、０.５２０mmol)および滴下により塩化オキサリル(０.８５４mL、５.７２mmol)を加えた。氷浴を除去し、混合物を４５分間、窒素下撹拌した。揮発物をロータリーエバポレーターで除去し、粗製物を乾燥ＤＣＭで希釈し、蒸発を反復して、粗製メチル４−(クロロカルボニル)シクロヘキサンカルボキシレートを得た。バイアルに、新たに合成したメチル４−(クロロカルボニル)シクロヘキサン−カルボキシレート(推定２.６０mmol)、ＰｈＣｌ(２mL)、５−ブロモベンゾオキサゾール(２５７mg、１.３mmol)および炭酸カリウム(２７.６mg、０.２００mmol)の水溶液(０.６６７mL)を加えた。バイアルを密封し、混合物を、一夜、１４０℃で撹拌した。混合物を冷却し、揮発物を除去した。粗製物を１：１酢酸エチル／ＤＣＭに溶解し、最小量の水、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。反応混合物を次いで６mLのアセトニトリル／ＤＭＦに溶解し、アセトニトリル／水／酢酸アンモニウムを用いる島津分取ＨＰＬＣで精製し、ここで、溶媒Ａは５％アセトニトリル／９５％水／１０mM  酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％アセトニトリル／１０mM  酢酸アンモニウムであり、Waters Sunfire  ５μm  Ｃ１８  ３０×１００mmカラムで、４０mL／分の流速で１５分間をかける２５〜１００％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。メチル４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)シクロヘキサンカルボキシレートを、ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ異性体の約１：１混合物(ＮＭＲ分析による)である桃色固体として得た(１００.８mg、２３％収率)。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラムで、２分にわたり、０.８mL／分の流速で１.５分間の勾配時間で２〜９８％Ｂ  (Ｂ＝１００％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.０５％トリフルオロ酢酸)、(Ａ＝１００％ＨＰＬＣグレード水／０.０５％トリフルオロ酢酸)の勾配を用いた。LCMS Rt = 1.334分, m/z 337.9 & 339.9 (M + H)
【０２２３】
バイアルに、メチル４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)シクロヘキサンカルボキシレート(２０mg、０.０５９mmol)のＴＨＦ(２mL)を水酸化リチウム(７.０８mg、０.２９６mmol)の水(０.４００mL)溶液と共に加えた。混合物を一夜、室温で撹拌した。揮発物を除去した、得られた白色残留物を酢酸エチルに溶解し、ＮＨ４Ｃｌ、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、１８.７mgの４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)シクロヘキサンカルボン酸を白色固体として得た。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７mm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 2.114分, m/z 324.15, 326.15 (M + H), 95%純度. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.82 (m, 1H), 7.54 (m, 1H), 7.51 (m, 1H), 3.20 (m, 1H), 3.02 (m, 1H), 2.61 (m, 1H), 2.33 (m, 1H), 2.30 (m, 1H), 2.16 (m, 1H), 2.03 (m, 2H), 1.81 (m, 1H), 1.75 - 1.59 (m, 1H)
【０２２４】
実施例１０２４：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((３−(２−(４−(メトキシカルボニル)シクロヘキシル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化６３】
2020504766.tif 000064
封管に、(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸(３０mg、０.０４７mmol)、ＴＨＦ(３mL)、水(１mL)、メチル４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)シクロヘキサンカルボキシレート(１６.０５mg、０.０４７mmol)、リン酸三カリウム(２５.２mg、０.１１９mmol)および第二世代ＸＰｈｏｓプレ触媒(３.７４mg、４.７５μmol)を加えた。混合物を窒素で脱気／フラッシュし、容器を密封し、次いで一夜、８０℃で加熱した。反応混合物を濃縮し、４mLのアセトニトリルに溶解し、アセトニトリル／水／酢酸アンモニウムを用いる島津分取ＨＰＬＣで精製し、ここで、溶媒Ａは５％アセトニトリル／９５％水／１０mM  酢酸アンモニウムであり、溶媒Ｂは５％水／９５％アセトニトリル／１０mM  酢酸アンモニウムであり、Phenomenex Axia C18  ３０×１００mm  １０μmカラムで、４０mL／分の流速で、１２分間をかける２０〜１００％Ｂの勾配および１０分間の維持を用いた。目的フラクションを集め、溶媒を窒素流下に除去して、８.０mg(２２％収率)の(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((３−(２−(４−(メトキシカルボニル)シクロヘキシル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸を白色固体として得て、その純度は９６％であった。ＬＣ／ＭＳデータを、次の設定を使用する島津分析ＬＣＭＳ(ＥＳＩ＋)により２２０nmで得た：Waters Aquity BEH  １.７mm  Ｃ１８、２.１×５０mmカラム、１mL／分の速度で、２分間をかける０〜１００％Ｂ(Ｂ＝９０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレード水)、(Ａ＝９０％ＨＰＬＣグレード水／０.１％トリフルオロ酢酸／１０％ＨＰＬＣグレードアセトニトリル)の勾配および１分間の維持を用いた。LCMS Rt = 1.234分, m/z 763.15, 764.10 (M + H)。最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。注入１条件：Waters XBridge  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂの勾配および５分間維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。注入２条件：Waters Sunfire  ３.５μm  Ｃ１８、３.０×１５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、０.５mL／分の流速で、１５分間をかける１０〜１００％Ｂおよび勾配と５分間の維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１４.６８分；９５％純度。
分析条件２：保持時間＝１１.３０分；９７％純度。
【０２２５】
1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.96 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.40 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 7.70 - 7.61 (m, 2H), 7.57 - 7.47 (m, 3H), 7.34 - 7.24 (m, 2H), 7.06 (s, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.30 (s, 2H), 4.44 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.73 - 3.68 (m, 3H), 3.51 (br d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.29 - 3.15 (m, 1H), 3.05 (m, 1H), 2.94 (br t, J = 11.0 Hz, 1H), 2.73 - 2.64 (m, 1H), 2.55 - 2.41 (m, 1H), 2.36 - 2.27 (m, 4H), 2.25 - 2.12 (m, 3H), 2.10 - 2.00 (m, 3H), 1.87 - 1.76 (m, 3H), 1.74 - 1.66 (m, 2H), 1.59 - 1.43 (m, 1H)
【０２２６】
実施例１０２５および実施例１０２６：(Ｓ)−１−(４−((３−(２−(４−カルボキシシクロヘキシル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化６４】
2020504766.tif 000065
封管に、(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸(４０mg、０.０６３mmol)、ＴＨＦ(３mL)、水(１mL)、４−(５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール−２−イル)シクロヘキサンカルボン酸(１７.１０mg、０.０５３mmol)、リン酸三カリウム(２８.０mg、０.１３２mmol)および第二世代ＸＰｈｏｓプレ触媒(４.１５mg、５.２７μmol)を加えた。混合物を窒素で脱気／フラッシュし、容器を密封し、次いで一夜、８０℃で加熱した。粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、２０mL／分の流速で、２０分間をかける１５〜５５％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。
【０２２７】
実施例１０２５(異性体−１、最初に溶出する異性体)：生成物の収量は１１.１mg(２８％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。
最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。
注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１.４７４分；ESI-MS(+) m/z = 749.2 (M + H)
分析条件２：保持時間＝１.８３９分；ESI-MS(+) m/z = 749.2 (M + H)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (dd, J = 3.2, 2.0 Hz, 2H), 8.41 (m, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.50 (m, 1H), 7.44 (m, 1H), 7.36 - 7.22 (m, 3H), 7.10 (m, 1H), 5.34 (s, 2H), 5.27 (s, 2H), 3.85 - 3.76 (m, 1H), 3.68 - 3.59 (m, 1H), 3.18 - 3.11 (m, 1H), 3.08 - 2.98 (m, 1H), 2.96 - 2.88 (m, 1H), 2.36 - 2.26 (m, 2H), 2.26 - 2.18 (m, 5H), 2.10 - 2.02 (m, 2H), 1.86 - 1.60 (m, 4H), 1.59 - 1.45 (m, 5H), 1.43 - 1.32 (m, 1H)
【０２２８】
実施例１０２６(異性体−２、２番目に溶出する異性体)：生成物の収量は６.３mg(１６％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９９％であった。最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂおよび勾配と０.７５分間１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。分析条件１：保持時間＝１.５９６分；ESI-MS(+) m/z = 749.2 (M + H)；分析条件２：保持時間＝１.９０６分；ESI-MS(+) m/z = 749.2 (M + H); 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (dd, J = 3.2, 2.0 Hz, 2H), 8.40 (m, 1H), 7.72 - 7.68 (m, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.52 - 7.48 (m, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.33 - 7.21 (m, 3H), 7.08 (s, 1H), 5.33 (s, 2H), 5.26 (s, 2H), 3.87 - 3.79 (m, 1H), 3.70 - 3.62 (m, 1H), 3.22 (m, 1H), 3.17 - 3.10 (m, 1H), 2.97 - 2.87 (m, 1H), 2.36 - 2.27 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.12 - 2.01 (m, 2H), 1.99 - 1.69 (m, 9H), 1.57 - 1.46 (m, 3H), 1.42 - 1.30 (m, 1H)
【０２２９】
次のスキームは、実施例１０２７〜実施例１０３１の合成を説明する。
【化６５】
2020504766.tif 000066
【０２３０】
中間体：ｔｅｒｔ−ブチル５−(７−ブロモキノキサリン−２−イル)−３,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート
【化６６】
2020504766.tif 000067
ＸＰｈｏｓ第二世代プレ触媒(４０.５mg、０.０５１mmol)を、７−ブロモ−２−クロロキノキサリン(２５０mg、１.０２７mmol)、ｔｅｒｔ−ブチル３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−５,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート(３１７mg、１.０２７mmol)およびリン酸カリウム(５４５mg、２.５７mmol)のＴＨＦ(５mL)および水(１mL)のアルゴン脱気溶液を含む、ねじ口壁厚チューブに加えた。チューブを密封し、混合物をｒｔで１６時間撹拌し、その後酢酸エチルおよび水で希釈した。水層を分離し、有機層を酢酸エチルでさらに２回抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、淡褐色残留物を得た。残留物を少量のジクロロメタンに溶解し、RediSepRf順相シリカゲルTeledyne ISCO  ４０ｇ使い捨てカラムに載せ、それを最初にヘキサンで１２０mL、続いて０〜５０％Ｂで１４００mL(ここで、溶媒Ｂ＝酢酸エチルおよび溶媒Ａ＝ヘキサン)で溶出した。溶離剤濃縮後、所望の生成物、ｔｅｒｔ−ブチル３−(７−ブロモキノキサリン−２−イル)−５,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート(５６.０mg、１４％収率)が淡黄色固体として単離された。ＬＣＭＳ：ｔＲ(保持時間)＝１.５１分；Ｃ１８Ｈ２１ＢｒＮ３Ｏ２のＬＣＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｚ計算値：３９０.０８、実測値：３８９.９５および３９１.９５[Ｍ＋Ｈ]＋。ＬＣＭＳ条件：注入量＝３μL；勾配＝２〜９８％Ｂ；勾配時間＝１.５分；流速＝０.８ml／分；波長＝２２０nm；移動相Ａ＝０：１００アセトニトリル：０.０５％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ＝１００：０アセトニトリル：０.０５％トリフルオロ酢酸含有水；カラム＝Waters Aquity BEH C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ(＝μm)；オーブン温度＝４０℃。1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 9.10 (s, 1H), 8.25 (br. s., 1H), 7.94 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 7.04 (br. s., 1H), 4.59 (br. s., 2H), 3.66 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.50 (br. s., 2H), 1.55 (s, 9H)
【０２３１】
中間体：７−ブロモ−２−(１,２,５,６−テトラヒドロピリジン−３−イル)キノキサリン
【化６７】
2020504766.tif 000068
トリフルオロ酢酸(０.４mL、５.１９mmol)を、ｔｅｒｔ−ブチル３−(７−ブロモキノキサリン−２−イル)−５,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート(５０mg、０.１２８mmol)の乾燥ＤＣＭ(２mL)溶液に、ｒｔで加えた。混合物をｒｔで２時間撹拌し、その後それを蒸発乾固した。残留物を１.０ｇ  ＳＣＸカートリッジ(ＭｅＯＨ：２Ｎ  ＮＨ３：ＭｅＯＨ)を使用して遊離塩基化して、７−ブロモ−２−(１,２,５,６−テトラヒドロピリジン−３−イル)キノキサリンをキャメル色油状物として得て、それを‘そのまま’使用して、直接次に進めた。ＬＣＭＳ：ｔＲ＝０.７７分；Ｃ１３Ｈ１３ＢｒＮ３のＬＣＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｚ計算値：２９０.０３、実測値：２８９.８５および２９１.８５[Ｍ＋Ｈ]＋。ＬＣＭＳ条件：注入量＝３μL；勾配＝２〜９８％Ｂ；勾配時間＝１.５分；流速＝０.８ml／分；波長＝２２０nm；移動相Ａ＝０：１００アセトニトリル：０.０５％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ＝１００：０アセトニトリル：０.０５％トリフルオロ酢酸含有水；カラム＝Waters Aquity BEH C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；オーブン温度＝４０℃。
【０２３２】
実施例１０２７：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(３−(１,２,５,６−テトラ−ヒドロピリジン−３−イル)キノキサリン−６−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化６８】
2020504766.tif 000069
ＸＰｈｏｓ第二世代プレ触媒(１０.０９mg、０.０１３mmol)を、７−ブロモ−２−(１,２,５,６−テトラヒドロピリジン−３−イル)キノキサリン(３７.２mg、０.１２８mmol)、(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)−ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸および(Ｓ)−１−(４−((３−ボロノ−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸の混合物(１：４)(７０.５mg、０.１２８mmol、ボロン酸に基づく、上記と同様の方法で調製)およびリン酸カリウム(６８.０mg、０.３２１mmol)のＴＨＦ(１mL)および水(０.５mL)のアルゴン脱気溶液を含む１ドラムバイアルに加えた。バイアルを密封し、混合物を８０℃で１６時間撹拌した。ｒｔに冷却後、有機層を分離し、ほぼ乾固するまで濃縮し、得られた残留物をＭｅＯＨ(１mL)およびＤＭＦ(１mL)に溶解し、次の条件の分取ＬＣＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：１９分間をかけて１４〜５４％Ｂ、次いで１００％Ｂで４分間維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２５.４mg(２７％)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析的ＬＣＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９８.３％；質量実測値：７１４.９７；保持時間：１.４４分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９６.７％；質量実測値：７１４.９８；保持時間：１.４６分。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.34 (s, 1H), 9.02 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 9.01 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.12 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 8.4, 1.8 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 6.2, 2.6 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.24 (br s, 1H), 7.12 (s, 1H), 5.34 (s, 2H), 5.31 (s, 2H), 3.87 (br s, 2H), 3.81 (br d, J = 13.6 Hz, 1H), 3.61 (br d, J = 13.6 Hz, 1H), 3.13 - 3.07 (m, 1H), 2.98 - 2.83 (2m, 3H), 2.37 (br s, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.29 - 2.24 (m, 1H), 1.83 - 1.78 (m, 1H), 1.75 - 1.68 (m, 1H), 1.55 - 1.45 (m, 3H), 1.41 - 1.30 (m, 1H)
【０２３３】
中間体：ｔｅｒｔ−ブチル３−(７−ブロモキノキサリン−２−イル)−８−アザビシクロ[３.２.１]オクト−２−エン−８−カルボキシレート
【化６９】
2020504766.tif 000070
ＸＰｈｏｓ第二世代プレ触媒(１１.７６mg、０.０１５mmol)を、７−ブロモ−２−クロロキノキサリン(７２.６mg、０.２９８mmol)、ｔｅｒｔ−ブチル３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−８−アザビシクロ[３.２.１]オクト−２−エン−８−カルボキシレート(１００mg、０.２９８mmol)およびリン酸カリウム(１５８mg、０.７４６mmol)のＴＨＦ(２mL)および水(１.０mL)のアルゴン脱気溶液を含む壁の厚い、ねじ口チューブに加えた。チューブを密封し、混合物をｒｔで１６時間撹拌し、その後酢酸エチルおよび水で希釈した。水層を分離し、水層を酢酸エチルでさらに２回抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、褐色残留物を得た。この残留物の３／４を少量のジクロロメタンに溶解し、RediSepRf順相シリカゲルTeledyne ISCO  ２４ｇ使い捨てカラムに載せ、これを最初にヘキサンで８０mL、続いて０〜５０％Ｂで２８０mL(ここで、溶媒Ｂ＝酢酸エチルおよび溶媒Ａ＝ヘキサン)で溶出した。溶離剤濃縮後、所望の生成物、ｔｅｒｔ−ブチル３−(７−ブロモキノキサリン−２−イル)−８−アザビシクロ−[３.２.１]オクト−２−エン−８−カルボキシレート(２１.２mg、１７％収率)が淡黄色薄膜として単離されたた。粗製物の残りの１／４を、特徴付け目的で次の条件の分取ＬＣＭＳ精製に付した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２２分間をかけて５０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６.２mg(５％)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は１００％であった。分析的ＬＣＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：１００.０％；質量実測値：４１６.０６；保持時間：２.５分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：１００.０％；質量実測値：４１６.０７；保持時間：２.５１分。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 9.32 (s, 1H), 8.24 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.04 - 7.99 (m, 1H), 7.93 (dd, J = 8.8, 1.8 Hz, 1H), 7.49 (br. s., 1H), 4.54 (br. s., 1H), 4.49 - 4.37 (m, 1H), 3.13 - 2.98 (m, 1H), 2.65 - 2.54 (m, 1H), 2.28 - 2.09 (m, 1H), 1.98 (br. s., 2H), 1.77 - 1.64 (m, 1H), 1.39 (s, 9H)
【０２３４】
２mmol規模での製造および順相シリカゲルTeledyne ISCOカラムを使用する精製を同様の方法で実施した：ＬＣＭＳ：ｔＲ＝１.５５分；Ｃ２０Ｈ２３ＢｒＮ３Ｏ２のＬＣＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｚ計算値：４１６.１０、実測値：４１５.９５および４１７.９５[Ｍ＋Ｈ]＋。ＬＣＭＳ条件：注入量＝３μL；勾配＝２〜９８％Ｂ；勾配時間＝１.５分；流速＝０.８ml／分；波長＝２２０nm；移動相Ａ＝０：１００アセトニトリル：０.０５％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ＝１００：０アセトニトリル：０.０５％トリフルオロ酢酸含有水；カラム＝Waters Aquity BEH C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；オーブン温度＝４０℃。
【０２３５】
実施例１０２８：(２Ｓ)−１−(４−((３−(３−(８−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)ビシクロ[３.２.１]オクト−２−エン−３−イル)キノキサリン−６−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化７０】
2020504766.tif 000071
実施例１０２８の化合物を、実施例１０２７に同様の方法で製造した。粗製物を次の条件の分取ＬＣＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２５分間をかける２０〜８５％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２.５mg(３.２％)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析的ＬＣＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：１００.０％；質量実測値：８４１.０５；保持時間：２.２１分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９６.６％；質量実測値：８４１.０６；保持時間：２.２６分. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.32 (s, 1H), 9.04 - 9.03 (m, 1H), 9.02 - 9.00 (m, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.13 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.77 (dd, J = 8.4, 1.8 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 5.9, 2.9 Hz, 1H), 7.48 (br s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.39 - 7.36 (m, 2H), 5.36 (br s, 2H), 5.32 (s, 2H), 4.55 (br s, 1H), 4.50 - 4.38 (m, 1H), 3.80 (br d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.63 (br d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.19 - 3.02 (2m, 2H), 2.95 - 2.83 (m, 1H), 2.74 - 2.59 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.31 - 2.26 (m, 1H), 2.26 - 2.08 (m, 1H), 2.03 - 1.96 (m, 2H), 1.86 - 1.77 (m, 1H), 1.76 - 1.65 (m, 2H), 1.49 (br s, 3H), 1.42 - 1.34 (m, 2H), 1.39 (s, 9H)
【０２３６】
中間体：２−(８−アザビシクロ[３.２.１]オクト−２−エン−３−イル)−７−ブロモキノキサリン
【化７１】
2020504766.tif 000072
トリフルオロ酢酸(２００μL、２.６０mmol)を、ｔｅｒｔ−ブチル３−(７−ブロモキノキサリン−２−イル)−８−アザビシクロ[３.２.１]オクト−２−エン−８−カルボキシレート(５０mg、０.１２mmol)の乾燥ジクロロメタン(１mL)溶液に、ｒｔで一度に加えた。混合物をｒｔで１.５時間撹拌し、その後窒素流下に濃縮し、高真空に１６時間静置した。得られた残留物を１ｇ  Varian Mega Bond Elut Flash SCXカートリッジ(ＭｅＯＨ、次いで２Ｍ  ＮＨ３のＭｅＯＨ溶液；各３カラム体積)を使用して遊離塩基化した。その後、所望の生成物、２−(８−アザビシクロ[３.２.１]オクト−２−エン−３−イル)−７−ブロモキノキサリン(３５.７mg、９４％収率)が淡褐色ガラス状物として単離され、それを直接次に利用した。ＬＣＭＳ：ｔＲ＝１.０６分；Ｃ１５Ｈ１５ＢｒＮ３のＬＣＭＳ(ＥＳＩ)ｍ／ｚ計算値：３１６.０５、実測値：３１６.１５および３１８.１５[Ｍ＋Ｈ]＋。ＬＣＭＳ条件：注入量＝１μL；勾配＝０〜１００％Ｂ；勾配時間＝２分；流速＝１ml／分；波長＝２２０nm；移動相Ａ＝１０：９０アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂ＝９０：１０アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；カラム＝Waters Aquity BEH C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；オーブン温度＝４０℃。
【０２３７】
実施例１０２９：(２Ｓ)−１−(４−((３−(３−(８−アザビシクロ[３.２.１]オクト−２−エン−３−イル)キノキサリン−６−イル)−２−メチルベンジル)−オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化７２】
2020504766.tif 000073
実施例１０２９の化合物を、実施例１０２７と様の方法で製造した。粗製物を次の条件の分取ＬＣＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２２分間をかけて１２〜５２％Ｂ、次いで１００％Ｂで４分間維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は２０.８mg(２５％)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９７％であった。分析的ＬＣＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９７.３％；質量実測値：７４１.０２；保持時間：１.４３分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１×５０mm、１.７Ｕ；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかけて０〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９７.３％；質量実測値：７４１.０５；保持時間：１.４１分。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.28 (s, 1H), 9.02 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 9.01 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.75 (dd, J = 8.6, 1.7 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 6.2, 1.8 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.41 (br d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.39 - 7.35 (m, 2H), 7.12 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 5.34 (br s, 2H), 5.31 (s, 2H), 3.94 - 3.90 (m, 1H), 3.89 - 3.85 (m, 1H), 3.80 (br d, J = 14.3 Hz, 1H), 3.61 (br d, J = 13.6 Hz, 1H), 3.13 - 3.05 (m, 1H), 2.99 - 2.96 (m, 1H), 2.95 -2.92 (m, 1H), 2.92 - 2.86 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.33 - 2.22 (m, 1H), 2.06 - 1.95 (m, 2H), 1.90 - 1.85 (m, 1H), 1.82 - 1.75 (m, 1H), 1.75 - 1.66 (m, 1H), 1.65 - 1.56 (m, 1H), 1.55 - 1.43 (m, 3H), 1.41 - 1.29 (m, 1H)
【０２３８】
実施例１０３０：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(３−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イル)キノキサリン−６−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化７３】
2020504766.tif 000074
実施例１０３０の化合物を、実施例１０２７と同様の方法で製造した。粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、２０mL／分の流速で、２０分間をかける１５〜５５％Ｂの勾配と５分間維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.３mg(９％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９４％であった。最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を使用した。注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配と０.７５分間１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配と０.７５分間１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。分析条件１：保持時間＝１.３２８分；ESI-MS(+) m/z = 715.0 (M + H)。分析条件２：保持時間＝１.２９８分；ESI-MS(+) m/z = 715.0 (M + H)。1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 9.36 (s, 1H), 9.06 - 8.95 (m, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.16 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 7.58 - 7.50 (m, 2H), 7.41 - 7.33 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.17 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.09 (m, 2H), 5.38 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 5.34 (s, 2H), 4.25 (m, 1H), 3.92 (m, 1H), 3.40 (m, 2H), 3.33 (m, 1H), 3.26 (m, 2H), 2.94 (m, 2H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 2.32 - 2.24 (m, 4H), 2.08 (m, 1H), 1.65 (m, 4H), 1.47 (m, 1H)
【０２３９】
実施例１０３１：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(３−(４−メチルピペラジン−１−イル)キノキサリン−６−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化７４】
2020504766.tif 000075
実施例１０３１の化合物を、７−ブロモ−２−(４−メチルピペラジン−１−イル)キノキサリンから実施例１０２７と同様の方法で製造した。粗製物を次の条件を使用する分取ＬＣ／ＭＳで精製した：Waters XBridge  ５μm  Ｃ１８、１９×２００mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％ＴＦＡ含有水および移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％ＴＦＡ含有水であり、２０mL／分の流速で、２０分間をかける１５〜５５％Ｂの勾配および５分間の維持を用いた。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は６.１mg(６％収率)であり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は９３％であった。最終純度を決定するために、２回の分析的ＬＣ／ＭＳ注入を実施した。注入１条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。注入２条件：Waters Acquity UPLC BEH  １.７μm  Ｃ１８、２.１×５０mmであり、ここで、移動相Ａは５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂは９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり、５０℃の温度で、１.０mL／分の流速で３分間をかける０〜１００％Ｂの勾配および０.７５分間の１００％Ｂの維持を用い、２２０nmのＵＶ波長を使用した。
分析条件１：保持時間＝１.３８７分；ESI-MS(+) m/z = 732.1 (M + H)
分析条件２：保持時間＝１.４３４分；ESI-MS(+) m/z = 732.1 (M + H)
【０２４０】
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 9.02 (m, 2H), 8.93 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.96 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.58 - 7.52 (m, 3H), 7.43 (m, 1H), 7.33 (m, 2H), 7.27 (br. s., 1H), 7.21 (s, 1H), 7.16 (br. s., 1H), 7.06 (br.s., 1H), 5.39 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 5.35 (s, 2H), 4.82 - 4.61 (m, 1H), 4.28 (m, 3H), 4.04 - 3.86 (m, 2H), 3.34 - 3.24 (m, 5H), 2.86 (m, 5H), 2.28 (s, 3H), 2.18 - 2.05 (m, 2H), 1.67 (m, 3H), 1.49 (m, 1H)
【０２４１】
実施例２００１〜２０１８の化合物を、実施例２００１に例示するおよび上記と同様の方法で製造した。
【０２４２】
実施例２００１：５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシプロパン−２−イル)(メチル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−５−メチル−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化７５】
2020504766.tif 000076
工程１：(１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタンジヒドロブロマイド(３００mg、１.１５４mmol)、５−ブロモ−２−クロロベンゾ[ｄ]オキサゾール(１７９mg、０.７６９mmol)のＤＭＦ(４mL)の混合物に、ヒューニッヒ塩基(０.４０３mL、２.３０８mmol)を加えた。反応溶液を２時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた後濃縮した。残留物を１０〜３０％ＭｅＯＨのＤＣＭ溶液で溶出するシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、６０mgの２−((１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)−５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾールを固体として得た。LC/MS (ESI) m/z 295.8 (M+1)+
【０２４３】
工程２：５−((４−クロロ−２−ホルミル−５−((２−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル(０.０８８ｇ、０.１７mmol)、２−((１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)−５−ブロモベンゾ[ｄ]オキサゾール(０.０５０ｇ、０.１７０mmol)および０.５Ｍ  Ｋ３ＰＯ４(１.０２０mL、０.５１０mmol)のＴＨＦ(６mL)および１,４−ジオキサン(１.２００mL)の混合物を、１５分間Ｎ２気流を吹き込みながら撹拌し、次いで第二世代ＸＰｈｏｓプレ触媒(６.６９mg、８.５０μmol)で処理した。混合物に１０分間Ｎ２気流を吹き込み、次いでＮ２気流下で１６時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水、塩水で洗浄し、乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗製物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して、８０mgの所望の生成物５−((５−((３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−４−クロロ−２−ホルミルフェノキシ)メチル)ニコチノニトリルを固体として得た。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：１００％；質量実測値：６０６.１；保持時間：１.８６分。
【０２４４】
工程３：５−((５−((３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−４−クロロ−２−ホルミルフェノキシ)メチル)ニコチノニトリル(１８.１８mg、０.０３mmol)、２−アミノプロパン−１,３−ジオール(１０.９３mg、０.１２０mmol)および酢酸(０.０１２mL、０.２１０mmol)のＤＣＥ(２mL)およびＥｔＯＨ(２mL)およびナトリウムシアノボロハイドライド(ＴＨＦ中１Ｍ)(０.１２０mL、０.１２０mmol)の混合物を、１６時間、ｒｔで撹拌した。反応混合物に、０.０２mLの３７％ホルムアルデヒド水溶液を加え、次いで１６時間撹拌した。溶媒除去後、粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかけて２０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。生成物の収量は７.０mgであり、ＬＣＭＳ分析によるその推定純度は８９％であった。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：８９.１％；質量実測値：７０９.０９；保持時間：１.６４分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかけて０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９０.３％；質量実測値：７０９.１２；保持時間：１.３２分。
【０２４５】
実施例２００２：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−５−メチル−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化７６】
2020504766.tif 000077
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかける１５〜５５％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：１００.０％；質量実測値：７３３.０５；保持時間：１.５１分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９７.０％；質量実測値：７３３.１；保持時間：１.３８分。
【０２４６】
実施例２００３：５−((５−((３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシプロパン−２−イル)アミノ)メチル)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化７７】
2020504766.tif 000078
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかける１５〜５５％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９９.２％；質量実測値：６８１；保持時間：１.３分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：１００.０％；質量実測値：６８１.０６；保持時間：１.４３分。
【０２４７】
実施例２００４：５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)(メチル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−５−メチル−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化７８】
2020504766.tif 000079
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかける２０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９５.０％；質量実測値：７２３.０８；保持時間：１.６３分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９４.６％；質量実測値：７２３.１２；保持時間：１.３５分。
【０２４８】
実施例２００５：(Ｓ)−１−(４−((３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化７９】
2020504766.tif 000080
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかける１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９６.６％；質量実測値：７１９.０２；保持時間：１.３８分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：１００.０％；質量実測値：７１９；保持時間：１.３９分。
【０２４９】
実施例２００６：５−((５−((３−(２−((１Ｓ,４Ｓ)−２,５−ジアザビシクロ[２.２.１]ヘプタン−２−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)−２−メチルベンジル)オキシ)−４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)アミノ)メチル)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化８０】
2020504766.tif 000081
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかける１５〜５５％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。物質をさらに次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；勾配：２０分間をかける１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。物質をさらに次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５  メタノール：  １０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５  メタノール：  １０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかける４５〜８５％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：１００.０％；質量実測値：６９５.１；保持時間：１.３３分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：１００.０％；質量実測値：６９５.０５；保持時間：１.４３分。
【０２５０】
実施例２００７：(Ｓ)−１−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)ピペリジン−２−カルボン酸
【化８１】
2020504766.tif 000082
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２３分間をかける２２〜６２％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：１００.０％；質量実測値：７２１.０４；保持時間：１.９分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：１００.０％；質量実測値：７２１.０２；保持時間：１.４７分。
【０２５１】
実施例２００８：５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシプロパン−２−イル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化８２】
2020504766.tif 000083
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２５分間をかけるて２６〜６６％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９８.９％；質量実測値：６８３.０１；保持時間：１.９５分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９９.２％；質量実測値：６８２.９９；保持時間：１.４分。
【０２５２】
実施例２００９：５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化８３】
2020504766.tif 000084
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；勾配：２５分間をかける１０〜５０％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９８.２％；質量実測値：６９７.０３；保持時間：１.９５分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９７.８％；質量実測値：６９７.０２；保持時間：１.４４分。
【０２５３】
実施例２０１０：(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)−Ｌ−セリン
【化８４】
2020504766.tif 000085
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２２分間をかける１５〜５５％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９３.０％；質量実測値：６９６.９３；保持時間：１.８分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９３.６％；質量実測値：６９６.９８；保持時間：１.４１分。
【０２５４】
実施例２０１１：(Ｓ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)アミノ)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパン酸
【化８５】
2020504766.tif 000086
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかける２０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９８.６％；質量実測値：７１０.９７；保持時間：１.８４分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９８.８％；質量実測値：７１０.９８；保持時間：１.４４分。
【０２５５】
実施例２０１２：(Ｓ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)アミノ)ペンタン酸
【化８６】
2020504766.tif 000087
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２２分間をかける２２〜６２％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：１００.０％；質量実測値：７０９.０５；保持時間：１.９１分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：１００.０％；質量実測値：７０９.０１；保持時間：１.５３分。
【０２５６】
実施例２０１３：(Ｓ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)アミノ)−３−メチルブタン酸
【化８７】
2020504766.tif 000088
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２２分間をかける２２〜６２％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：１００.０％；質量実測値：７０９.０１；保持時間：１.９分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：１００.０％；質量実測値：７０９；保持時間：１.５分。
【０２５７】
実施例２０１４：５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシプロパン−２−イル)(メチル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化８８】
2020504766.tif 000089
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかける３５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。
【０２５８】
注入１結果：純度：１００.０％；質量実測値：６９７.０１；保持時間：２.１１分。
注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９７.７％；質量実測値：６９６.９８；保持時間：１.４６分。
【０２５９】
実施例２０１５：５−((４−クロロ−２−(((１,３−ジヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル)(メチル)アミノ)メチル)−５−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)フェノキシ)メチル)ニコチノニトリル
【化８９】
2020504766.tif 000090
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：１９分間をかける３５〜７５％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９９.２％；質量実測値：７１１.０３；保持時間：２.０４分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９９.４％；質量実測値：７１１.０３；保持時間：１.４９分。
【０２６０】
実施例２０１６：Ｎ−(５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)−Ｎ−メチル−Ｌ−セリン
【化９０】
2020504766.tif 000091
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２２分間をかける２０〜６０％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９６.４％；質量実測値：７１１.０２；保持時間：１.８８分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９６.１％；質量実測値：７１０.９７；保持時間：１.４５分。
【０２６１】
実施例２０１７：(Ｓ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)(メチル)アミノ)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパン酸
【化９１】
2020504766.tif 000092
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかける２２〜６２％Ｂ、次いで１００％Ｂに４分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：１００.０％；質量実測値：７２５.２１；保持時間：１.４３分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：１００.０％；質量実測値：７２５.２２；保持時間：１.５７分。
【０２６２】
実施例２０１８：(Ｓ)−２−((５−クロロ−２−((５−シアノピリジン−３−イル)メトキシ)−４−((２−メチル−３−(２−(４−メチルピペラジン−１−イル)ベンゾ[ｄ]オキサゾール−５−イル)ベンジル)オキシ)ベンジル)(メチル)アミノ)ペンタン酸
【化９２】
2020504766.tif 000093
粗製物を次の条件の分取ＬＣ／ＭＳで精製した：カラム：XBridge C18、１９×２００mm、５μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；勾配：２０分間をかける２５〜６５％Ｂ、次いで１００％Ｂに５分間の維持；流速：２０mL／分。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、遠心蒸発により乾燥させた。分析的ＬＣ／ＭＳを使用して、最終純度を決定した。注入１条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水であり；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：１０mM  酢酸アンモニウム含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入１結果：純度：９４.７％；質量実測値：７２３.２５；保持時間：１.６８分。注入２条件：カラム：Waters XBridge C18、２.１mm×５０mm、１.７μm粒子；移動相Ａ：５：９５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；移動相Ｂ９５：５アセトニトリル：０.１％トリフルオロ酢酸含有水；温度：５０℃；勾配：３分間をかける０％Ｂ〜１００％Ｂ、次いで１００％Ｂに０.７５分間の維持；流速：１mL／分；検出：ＭＳおよびＵＶ(２２０nm)。注入２結果：純度：９６.４％；質量実測値：７２３.２３；保持時間：１.５２分。
【０２６３】
生物学的アッセイ
式(Ｉ)の化合物がＰＤ−Ｌ１に結合する能力を、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１ホモジナス時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)結合アッセイ(Homogenous Time-Resolved Fluorescence Binding Assay)を使用して調べた。
【０２６４】
ホモジナス時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)結合アッセイ。
ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１の相互作用を、これら２タンパク質の細胞外ドメインの可溶性、精製調製物を使用して評価できる。ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１タンパク質細胞外ドメインを、検出タグと共に融合タンパク質として発現させ、ＰＤ−１に関しては、タグは免疫グロブリンのＦｃ部分(ＰＤ−１−Ｉｇ)であり、ＰＤ−Ｌ１に関しては、タグは６ヒスチジンモチーフ(ＰＤ−Ｌ１−Ｈｉｓ)であった。全ての結合試験を、０.１％ウシ血清アルブミンおよび０.０５％(ｖ／ｖ)Ｔｗｅｅｎ−２０添加ｄＰＢＳからなるＨＴＲＦアッセイ緩衝液であった。ｈ／ＰＤ−Ｌ１−Ｈｉｓ結合アッセイについて、阻害剤を、ＰＤ−Ｌ１−Ｈｉｓ(１０nM最終)と、１５分間、４μlのアッセイ緩衝液とプレインキュベートし、続いて１μlのアッセイ緩衝液中のＰＤ−１−Ｉｇ(２０nM最終)を加え、さらに１５分間インキュベーションした。ＨＴＲＦ検出を、ユーロピウム・クリプテート標識抗Ｉｇ(１nM最終)およびアロフィコシアニン(ＡＰＣ)標識抗Ｈｉｓ(２０nM最終)を使用して達成した。抗体をＨＴＲＦ検出緩衝液で希釈し、５μlを結合反応液の上部に分配した。反応混合物を３０分間平衡化し、得られたシグナル(６６５nm／６２０nm比)をEnVision蛍光光度計で得た。さらなる結合アッセイを、ヒトタンパク質ＰＤ−１−Ｉｇ／ＰＤ−Ｌ２−Ｈｉｓ(各２０nMおよび５nM)およびＣＤ８０−Ｈｉｓ／ＰＤ−Ｌ１−Ｉｇ(各１００nMおよび１０nM)間で確立させた。
【０２６５】
組み換えタンパク質：免疫グロブリンＧ(Ｉｇ)エピトープタグのＣ末端ヒトＦｃドメインを伴うヒトＰＤ−１(２５−１６７)[ｈＰＤ−１(２５−１６７)−３Ｓ−ＩＧ]およびＣ末端Ｈｉｓエピトープタグを伴うヒトＰＤ−Ｌ１(１８−２３９)[ｈＰＤ−Ｌ１(１８−２３９)−ＴＶＭＶ−Ｈｉｓ]をＨＥＫ２９３Ｔ細胞で発現させ、プロテインＡ親和性クロマトグラフィーおよびサイズ排除クロマトグラフィーにより連続して精製した。ヒトＰＤ−Ｌ２−ＨｉｓおよびＣＤ８０−Ｈｉｓは、商業的供給源から得た。
【０２６６】
組み換えヒトＰＤ−１−Ｉｇの配列
【表１】
2020504766.tif 000094
(配列番号１)
【０２６７】
組み換えヒトＰＤ−Ｌ１−Ｈｉｓの配列
【表２】
2020504766.tif 000095
(配列番号２)
【０２６８】
下記表は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１ホモジナス時間分解蛍光(ＨＴＲＦ)結合アッセイで測定した本明細の代表実施例についてのＩＣ５０値を記載する。範囲は次のとおりである：Ａ＝０.１８nM〜０.９９nM；Ｂ＝１.０nM〜５.０nM；Ｃ＝５.０１nM〜１０.１nM；Ｄ＝１０.２nM〜２００nM；Ｅ＝２０１nM→１０μM
【表３】
2020504766.tif 000096
【０２６９】
式(Ｉ)の化合物は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の阻害剤としての活性を有し、それ故に、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用と関連する疾患または障害の処置に使用し得る。ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の阻害により、本発明の化合物は、ＨＩＶ、敗血症性ショック、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型またはＤ型肝炎などの感染症および癌の処置に用いられ得る。
【配列表】
2020504766000001.app
【国際調査報告】
2020504766.tif 000107
2020504766.tif 000108