(57)【要約】本発明は、ＪＡＫキナーゼ、特にＪＡＫ３の阻害剤である、式（Ｉ）：2020529987.tif 000271の化合物（式中、変数は明細書中に定義される）またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。本発明は、そのような化合物を含む結晶形態、薬学的組成物、胃腸炎症性疾患および他の炎症性疾患を処置するためにそのような化合物を使用する方法、ならびにそのような化合物の調製に有用なプロセスおよび中間体も提供する。
2020529987.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１５３】
2020529987.tif 000233
（Ｉ）
（式中、Ｘ１およびＸ２は、ＮおよびＣＨからそれぞれ独立して選択され；
Ｘ３は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ−ＣＨ３、Ｃ−ＣＦ３、Ｃ−ＣＨＦ２、Ｃ−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、Ｃ−ＳＭｅ、Ｃ−ＮＭｅ２、Ｃ−ＮＨ−ＣＨ３、Ｃ−Ｃｌ、Ｃ−ＣＮ、およびＣ−ＯＭｅからなる群から選択され；
【化１５４】
2020529987.tif 000234
は、
【化１５５】
2020529987.tif 000235
からなる群から選択され；
Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、およびＲｆは、ＨおよびＣ１−３アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、Ｒｈ、Ｒｉ、Ｒｊ、Ｒｌ、Ｒｍ、Ｒｎ、およびＲｏは、ＨおよびＣ１−３アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｃ１−３アルキル基は、１〜３個のハロゲンで必要に応じて置換されてよく；
必要に応じてＲｄおよびＲｅが結合して、シクロプロピル環を形成してよく；
Ａは、
（ａ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜１０員の複素単環基、および
（ｂ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む６〜１０員の複素多環基、
からなる群から選択され、
ここで、ＬはＡ内の炭素原子に結合しており、Ａは１〜３つのＲｋ基で必要に応じて置換され；
各Ｒｋは、Ｆ、ＣＮ、Ｃ１−３アルコキシ、シクロプロピル、およびＣ１−３アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、Ｃ１−３アルキル基は、ＯＨ、ＯＭｅ、または１〜３つのハロゲンで必要に応じて置換されてよく；
Ｒ１は、
【化１５６】
2020529987.tif 000236
からなる群から選択され、
ここで、ＲｐおよびＲｑは、Ｈ、Ｃ３−５シクロアルキル、およびＣ１−６アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｃ１−６アルキル基は、Ｃ１−３アルコキシおよび−Ｓ−Ｃ１−３アルキルからなる群から独立して選択される１〜３つの置換基で必要に応じて置換されてよく、
あるいは、ＲｐおよびＲｑは、１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜６員の複素単環基を形成し、ここで、４〜６員の複素単環基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、−Ｓ−Ｃ１−３アルキル、および−Ｃ１−３アルキル−Ｃ１−３アルコキシからなる群から独立して選択される１〜３つの置換基で必要に応じて置換され；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、ＯＭｅ、Ｍｅ、およびＦからなる群から選択され；
Ｒ３は、ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ４は、ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ５は、Ｈ、Ｍｅ、およびＦからなる群から選択される）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２】
Ｘ３がＣＨである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項３】
Ｒ１が、
【化１５７】
2020529987.tif 000237
からなる群から選択される、請求項１または２のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項４】
Ｒ１が、
【化１５８】
2020529987.tif 000238
である、請求項１または２のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項５】
Ａが、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、２−アザスピロ［３．３］ヘプタン、チオモルホリン、およびノルトロパンからなる群から選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項６】
【化１５９】
2020529987.tif 000239
が、
【化１６０】
2020529987.tif 000240
からなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項７】
【化１６１】
2020529987.tif 000241
が、以下：
【化１６２−１】
2020529987.tif 000242
【化１６２−２】
2020529987.tif 000243
【化１６２−３】
2020529987.tif 000244
からなる群から選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項８】
Ｘ１およびＸ２の両方がＣＨである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項９】
Ｘ１がＮであり、Ｘ２がＣＨである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１０】
Ｘ１およびＸ２の両方がＮである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１１】
Ｘ１がＣＨであり、かつＸ２がＮである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１２】
【化１６３】
2020529987.tif 000245
が、以下：
【化１６４】
2020529987.tif 000246
からなる群から選択される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１３】
【化１６５】
2020529987.tif 000247
が、以下：
【化１６６】
2020529987.tif 000248
からなる群から選択される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１４】
式（ＩＩ）：
【化１６７】
2020529987.tif 000249
（式中、Ｘ１およびＸ２の両方がＣＨであるか、あるいはＸ１およびＸ２の両方がＮであるか、あるいはＸ１がＮであり、かつＸ２がＣＨであり；
【化１６８】
2020529987.tif 000250
は、
【化１６９】
2020529987.tif 000251
からなる群から選択され；
Ｒｃ、Ｒｄ、およびＲｅは、Ｈおよびメチルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ａは、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、およびモルホリンからなる群から選択され；
ここで、ＬはＡ内の炭素原子に結合しており、Ａは１〜２つのＲｋ基で必要に応じて置換され；
各Ｒｋは、Ｆ、ＣＮ、メチル、エチル、およびＣ１−２ハロアルキルからなる群から独立して選択され；
Ｒ１は、または
【化１７０】
2020529987.tif 000252
であり；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、およびＦからなる群から選択される）を有する請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１５】
【化１７１】
2020529987.tif 000253
は、以下：
【化１７２】
2020529987.tif 000254
からなる群から選択される、請求項１４に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１６】
前記化合物が、
【化１７３】
2020529987.tif 000255
からなる群から選択される、請求項１４に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１７】
式（Ｂ）：
【化１７４】
2020529987.tif 000256
（式中、Ｘ１およびＸ２は、ＮおよびＣＨからそれぞれ独立して選択され；
ＲｄおよびＲｅは、ＨおよびＣ１−３アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；必要に応じてＲｄおよびＲｅが結合して、シクロプロピル環を形成してよく；
Ｒｋ１は、Ｈ、Ｆ、ＣＮ、ＯＭｅ、およびＣ１−３アルキルからなる群から選択され；
Ｒｋ２は、Ｈおよびメチルからなる群から選択され；
Ｒ１は、
【化１７５】
2020529987.tif 000257
であり；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、およびＦからなる群から選択される）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１８】
ＲｄおよびＲｅは、Ｈおよびメチルからなる群からそれぞれ独立して選択され；必要に応じてＲｄおよびＲｅが結合して、シクロプロピル環を形成してよく；
Ｒｋ１は、Ｈ、Ｆ、ＣＮ、ＯＭｅ、メチル、およびエチルからなる群から選択される、請求項１７に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１９】
式（Ｃ）：
【化１７６】
2020529987.tif 000258
（式中、Ｘ１およびＸ２の両方がＣＨであるか、あるいはＸ１およびＸ２の両方がＮであるか、あるいはＸ１がＮであり、かつＸ２がＣＨであり；
ＲｄおよびＲｅは、Ｈおよびメチルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ｒｋは、Ｈ、ＣＮ、メチル、およびエチルからなる群から選択され；
Ｒ１は、
【化１７７】
2020529987.tif 000259
であり；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、およびＦからなる群から選択される）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２０】
前記化合物が、
【化１７８】
2020529987.tif 000260
からなる群から選択される、請求項１９に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２１】
式：
【化１７９】
2020529987.tif 000261
の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２２】
式：
【化１８０】
2020529987.tif 000262
の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２３】
式：
【化１８１】
2020529987.tif 000263
の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２４】
式：
【化１８２】
2020529987.tif 000264
の化合物の結晶形態であって、ここで、前記結晶形態が、５．６５±０．２０、１４．２２±０．２０、１５．１６±０．２０、および１９．３１±０．２０の２θ値において回折ピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする、化合物の結晶形態。
【請求項２５】
前記粉末Ｘ線回折パターンが、７．１２±０．２０、１０．０２±０．２０、１１．１６±０．２０、１７．０６±０．２０、および２４．４３±０．２０の２θ値においてさらなる回折ピークを有することをさらに特徴とする、請求項２４に記載の結晶形態。
【請求項２６】
前記粉末Ｘ線回折パターンが、１３．１０±０．２０、１４．８２±０．２０、１６．５５±０．２０、２０．０８±０．２０、２１．０８±０．２０、２１．６５±０．２０、２２．５１±０．２０、２２．９８±０．２０、２５．０２±０．２０、２５．７２±０．２０、２６．８０±０．２０、２７．０６±０．２０、２８．３１±０．２０、３０．０８±０．２０、３０．３１±０．２０、および３２．０８±０．２０から選択される２θ値において２つまたはそれを超えるさらなる回折ピークを有することをさらに特徴とする、請求項２５に記載の結晶形態。
【請求項２７】
前記結晶形態が、ピーク位置が図１に示されているパターンのピーク位置と実質的に一致する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする、請求項２４に記載の結晶形態。
【請求項２８】
前記結晶形態が、１６２．９±３℃にピークを有する吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする、請求項２４に記載の結晶形態。
【請求項２９】
前記結晶形態が、図２に示されている示差走査熱量測定トレースと実質的に一致する示差走査熱量測定トレースを特徴とする、請求項２４に記載の結晶形態。
【請求項３０】
式：
【化１８３】
2020529987.tif 000265
の化合物の結晶形態であって、
ここで、前記結晶形態が、９．６７±０．２０、１１．６１±０．２０、１７．６１±０．２０、１８．８８±０．２０、および２３．３３±０．２０の２θ値において回折ピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする、結晶形態。
【請求項３１】
前記粉末Ｘ線回折パターンが、４．８２±０．２０、１５．６９±０．２０、および１６．１９±０．２０の２θ値においてさらなる回折ピークを有することをさらに特徴とする、請求項３０に記載の結晶形態。
【請求項３２】
前記粉末Ｘ線回折パターンが、１１．９２±０．２０、１２．９８±０．２０、１３．２３±０．２０、１６．４５±０．２０、１６．６７±０．２０、１９．３９±０．２０、１９．９６±０．２０、２０．１４±０．２０、２２．１４±０．２０、２３．８４±０．２０、２４．０６±０．２０、２４．２９±０．２０、２５．３１±０．２０、２５．６３±０．２０、２７．０６±０．２０、２７．３１±０．２０、３０．１０±０．２０、および３０．５３±０．２０から選択される２θ値において、２つまたはそれを超えるさらなる回折ピークを有することをさらに特徴とする、請求項３１に記載の結晶形態。
【請求項３３】
前記結晶形態が、ピーク位置が図９に示されているパターンのピーク位置と実質的に一致する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする、請求項３０に記載の結晶形態。
【請求項３４】
前記結晶形態が、２０１．３℃±２℃にピークを有する吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする、請求項３０に記載の結晶形態。
【請求項３５】
前記結晶形態が、１９８℃〜２０４℃の温度において吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする、請求項３０に記載の結晶形態。
【請求項３６】
前記結晶形態が、図１０に示されている示差走査熱量測定トレースと実質的に一致する示差走査熱量測定トレースを特徴とする、請求項３０に記載の結晶形態。
【請求項３７】
請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または請求項２４〜３６のいずれか１項に記載の結晶形態および薬学的に許容され得るキャリアを含む薬学的組成物。
【請求項３８】
胃腸炎症性疾患の処置に有用な１または複数の他の治療剤をさらに含む、請求項３７に記載の薬学的組成物。
【請求項３９】
哺乳動物の胃腸炎症性疾患の処置に有用な請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または請求項２４〜３６のいずれか１項に記載の結晶形態。
【請求項４０】
前記胃腸炎症性疾患が、免疫チェックポイント阻害剤によって誘発される大腸炎、ＣＴＬＡ−４阻害剤によって誘発される大腸炎、移植片対宿主病関連大腸炎、セリアック病、コラーゲン蓄積大腸炎、リンパ球性大腸炎、ベーチェット病、回腸炎、好酸球性食道炎、および感染性大腸炎からなる群から選択される、請求項３９に記載の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または請求項３９に記載の結晶形態。
【請求項４１】
前記胃腸炎症性疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項３９に記載の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または請求項３９に記載の結晶形態。
【請求項４２】
前記胃腸炎症性疾患がクローン病である、請求項３９に記載の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または請求項３９に記載の結晶形態。
【請求項４３】
胃腸炎症性疾患の処置に有用な１または複数の他の治療剤との併用において使用するための、請求項３９に記載の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または請求項３９に記載の結晶形態。
【請求項４４】
哺乳動物の胃腸炎症性疾患を処置するための薬を製造するための請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または請求項２４〜３６のいずれか１項に記載の結晶形態の使用。
【請求項４５】
前記胃腸炎症性疾患が、免疫チェックポイント阻害剤によって誘発される大腸炎、ＣＴＬＡ−４阻害剤によって誘発される大腸炎、移植片対宿主病関連大腸炎、セリアック病、コラーゲン蓄積大腸炎、リンパ球性大腸炎、ベーチェット病、回腸炎、好酸球性食道炎、および感染性大腸炎からなる群から選択される、請求項４４に記載の使用。
【請求項４６】
前記胃腸炎症性疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項４４に記載の使用。
【請求項４７】
前記胃腸炎症性疾患がクローン病である、請求項４４に記載の使用。
【請求項４８】
哺乳動物の炎症性皮膚疾患の処置において使用するための、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項４９】
皮膚Ｔ細胞リンパ腫の処置において使用するための、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項５０】
哺乳動物の炎症性皮膚疾患を処置するための薬を製造するための請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または請求項２４〜３６のいずれか１項に記載の結晶形態の使用。
【請求項５１】
皮膚Ｔ細胞リンパ腫を処置するための薬を製造するための請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または請求項２４〜３６のいずれか１項に記載の結晶形態の使用。
【請求項５２】
哺乳動物の胃腸炎症性疾患を処置する方法であって、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または請求項２４〜３６のいずれか１項に記載の結晶形態および薬学的に許容され得るキャリアを前記哺乳動物に投与する工程を含む、方法。
【請求項５３】
胃腸炎症性疾患の処置に有用な１または複数の他の治療剤を投与する工程をさらに含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記胃腸炎症性疾患が、免疫チェックポイント阻害剤によって誘発される大腸炎、ＣＴＬＡ−４阻害剤によって誘発される大腸炎、移植片対宿主病関連大腸炎、セリアック病、コラーゲン蓄積大腸炎、リンパ球性大腸炎、ベーチェット病、回腸炎、好酸球性食道炎、および感染性大腸炎からなる群から選択される、請求項５２に記載の方法。
【請求項５５】
前記胃腸炎症性疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５６】
前記胃腸炎症性疾患がクローン病である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５７】
哺乳動物の炎症性皮膚疾患を処置する方法であって、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を含む薬学的組成物を前記哺乳動物の皮膚に塗布する工程を含む、方法。
【請求項５８】
哺乳動物の皮膚Ｔ細胞リンパ腫を処置する方法であって、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を含む薬学的組成物を前記哺乳動物の皮膚に塗布する工程を含む、方法。
【請求項５９】
式（Ｉ）：
【化１８４】
2020529987.tif 000266
（式中、Ｘ１およびＸ２は、ＮおよびＣＨからそれぞれ独立して選択され；
Ｘ３は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ−ＣＨ３、Ｃ−ＣＦ３、Ｃ−ＣＨＦ２、Ｃ−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、Ｃ−ＳＭｅ、Ｃ−ＮＭｅ２、Ｃ−ＮＨ−ＣＨ３、Ｃ−Ｃｌ、Ｃ−ＣＮ、およびＣ−ＯＭｅからなる群から選択され；
【化１８５】
2020529987.tif 000267
は、
【化１８６】
2020529987.tif 000268
からなる群から選択され；
Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、およびＲｆは、ＨおよびＣ１−３アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、Ｒｈ、Ｒｉ、Ｒｊ、Ｒｌ、Ｒｍ、Ｒｎ、およびＲｏは、ＨおよびＣ１−３アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｃ１−３アルキル基は、１〜３個のハロゲンで必要に応じて置換されてよく；
必要に応じてＲｄおよびＲｅが結合して、シクロプロピル環を形成してよく；
Ａは、
（ａ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜１０員の複素単環基、および
（ｂ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む６〜１０員の複素多環基、
からなる群から選択され、
ここで、ＬはＡ内の炭素原子に結合しており、Ａは１〜３つのＲｋ基で必要に応じて置換され；
各Ｒｋは、Ｆ、ＣＮ、Ｃ１−３アルコキシ、シクロプロピル、およびＣ１−３アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、Ｃ１−３アルキル基は、ＯＨ、ＯＭｅ、または１〜３つのハロゲンで必要に応じて置換されてよく；
Ｒ１は、
【化１８７】
2020529987.tif 000269
からなる群から選択され、
ここで、ＲｐおよびＲｑは、Ｈ、Ｃ３−５シクロアルキル、およびＣ１−６アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｃ１−６アルキル基は、Ｃ１−３アルコキシおよび−Ｓ−Ｃ１−３アルキルからなる群から独立して選択される１〜３つの置換基で必要に応じて置換されてよく、
あるいは、ＲｐおよびＲｑは、１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜６員の複素単環基を形成し、ここで、４〜６員の複素単環基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、−Ｓ−Ｃ１−３アルキル、および−Ｃ１−３アルキル−Ｃ１−３アルコキシからなる群から独立して選択される１〜３つの置換基で必要に応じて置換され；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、ＯＭｅ、Ｍｅ、およびＦからなる群から選択され；
Ｒ３は、ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ４は、ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ５は、Ｈ、Ｍｅ、およびＦからなる群から選択される）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を調製するためのプロセスであって、
方法は、式（ＩＩＩ）
【化１８８】
2020529987.tif 000270
の化合物を
（ｉ）Ｃｌ−Ｒ１、または
（ｉｉ）ＨＯ−Ｒ１
と反応させる工程、
および必要に応じて薬学的に許容され得る塩を形成する工程
を含んで、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する、プロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
発明の分野
本発明は、ＪＡＫキナーゼ阻害剤として、より具体的には、ＪＡＫキナーゼファミリーの他のメンバー（ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＴＹＫ２など）よりもＪＡＫ３に選択性を示すＪＡＫ３阻害剤として有用なピラゾロおよびトリアゾロ二環式化合物に関する。本発明は、そのような化合物を含む、結晶形態、薬学的組成物、炎症性疾患を処置するためにそのような化合物を使用する方法、ならびにそのような化合物の調製に有用なプロセスおよび中間体にも関する。
【背景技術】
【０００２】
当該分野の状況
潰瘍性大腸炎は、結腸の慢性炎症性疾患である。この疾患は、直腸および大腸の粘膜層の炎症および潰瘍化を特徴とする。一般的な症候としては、下痢、血便および腹痛が挙げられる。臨床経過は、間欠性であり、悪化と緩解の期間を交互に繰り返すことによって特徴付けられる。発生率は、開発途上国よりも先進国においてより高いと見られる。主要な先進工業国の推定１２０万人が潰瘍性大腸炎に罹患しており、その数は、人口増加に伴って増加すると予想される。潰瘍性大腸炎を有する患者は、直腸結腸がんを発症するリスクが高い（例えば、Ｄａｎｅｓｅら、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ，２０１１，３６５，１７１３−１７２５）。患者の潰瘍性大腸炎（ＵＣ）の緩解を促し、維持する種々の治療法の選択肢が存在するが、いずれも理想的ではない。慢性の全身免疫抑制に起因する安全性の懸念なしに、中程度から重度のＵＣの緩解を促進し、維持するための有効な治療に対して未だ対処されていない医学的ニーズが残っている。
【０００３】
ＵＣの正確な病原論は、明らかになっていないが、炎症促進性サイトカインが、免疫学的応答において中心的役割を果たしていることは明らかである（Ｓｔｒｏｂｅｒら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１１，１４０，１７５６−１７６７）。ＵＣにおいて最も一般的に上昇する炎症促進性サイトカインの多く（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＦＮγおよびレプチン）は、シグナル伝達について、チロシンキナーゼのＪＡＫファミリー（すなわち、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴｙｋ２）に依存する。
【０００４】
ＪＡＫ３酵素を阻害すると、多くの重要な炎症促進性サイトカインのシグナル伝達が遮断される。したがって、ＪＡＫ３阻害剤は、潰瘍性大腸炎および他の胃腸炎症性疾患（例えば、クローン病、および免疫チェックポイント阻害剤によって誘発される大腸炎）の処置において有用である可能性がある。ＪＡＫ３阻害剤はまた、炎症性皮膚疾患（アトピー性皮膚炎など）および炎症性呼吸器障害（アレルギー性鼻炎、喘息、および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）など）の処置で有用である可能性がある。さらに、ＪＡＫ３阻害剤はまた、炎症が重要な役割を果たす多数の眼疾患（ブドウ膜炎、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、眼乾燥症、加齢性黄斑変性、網膜静脈閉塞（ＲＶＯ）、およびアトピー性角結膜炎など）の処置において有用であり得る。
【０００５】
ＪＡＫ３に対する選択性により、粘膜治癒に関与しているＩＬ−１０、粘液バリア保護および上皮再生に関与するＩＬ−２２、ならびに腸上皮細胞の増殖に関与するＩＬ−６などの潜在的に有益なサイトカインを節約可能であるというエビデンスが存在するので、ＪＡＫ１よりもＪＡＫ３に選択性を示すことは有益であると予測される。ＪＡＫ２よりもＪＡＫ３を選択することも、エリスロポエチン（ＥＰＯ）およびトロンボポエチン（ＴＰＯ）のシグナル伝達を節約可能である。したがって、ＪＡＫキナーゼファミリーの他のメンバー（ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＴＹＫ２など）よりもＪＡＫ３に選択性を示す阻害剤である新規化合物を提供することが望ましいであろう。
【０００６】
最後に、免疫系に対するＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路の調節作用に起因して、ＪＡＫ阻害剤への全身曝露は、有害な全身性の免疫抑制（ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｉｖｅ）作用を及ぼし得る。ゆえに、著しい全身作用を起こさずに作用部位において効果を生じる新しいＪＡＫ３阻害剤を提供することが望ましい。特に、潰瘍性大腸炎などの胃腸炎症性疾患の処置の場合、経口的に投与することができ、かつ最小の全身曝露で消化管において治療的に妥当な曝露を達成できる、新しいＪＡＫ３阻害剤を提供することが望ましい。皮膚疾患のために、最小の全身曝露で皮膚に局所投与できる新規のＪＡＫ３阻害剤を提供することが望ましいであろう。
したがって、ＪＡＫキナーゼファミリーの他のメンバー（ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＴＹＫ２など）よりもＪＡＫ３に選択性を示す阻害剤であり、かつ全身曝露が最小の新規の化合物を提供することが望ましいであろう。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｄａｎｅｓｅら、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ，２０１１，３６５，１７１３−１７２５
【非特許文献２】Ｓｔｒｏｂｅｒら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１１，１４０，１７５６−１７６７
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の要旨
１つの態様において、本発明は、ＪＡＫキナーゼ阻害剤としての、より具体的には、ＪＡＫ３阻害剤としての活性を有する新規化合物を提供する。
【０００９】
したがって、本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2020529987.tif 000003
（式中、Ｘ１およびＸ２は、ＮおよびＣＨからそれぞれ独立して選択され；
Ｘ３は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ−ＣＨ３、Ｃ−ＣＦ３、Ｃ−ＣＨＦ２、Ｃ−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、Ｃ−ＳＭｅ、Ｃ−ＮＭｅ２、Ｃ−ＮＨ−ＣＨ３、Ｃ−Ｃｌ、Ｃ−ＣＮ、およびＣ−ＯＭｅからなる群から選択され；
【化２】
2020529987.tif 000004
は、
【化３−１】
2020529987.tif 000005
【化３−２】
2020529987.tif 000006
からなる群から選択され；
Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、およびＲｆは、ＨおよびＣ１−３アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、Ｒｈ、Ｒｉ、Ｒｊ、Ｒｌ、Ｒｍ、Ｒｎ、およびＲｏは、ＨおよびＣ１−３アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｃ１−３アルキル基は、１〜３個のハロゲンで必要に応じて置換されてよく；
必要に応じてＲｄおよびＲｅが結合して、シクロプロピル環を形成してよく；
Ａは、
（ａ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜１０員の複素単環基、および
（ｂ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む６〜１０員の複素多環基、
からなる群から選択され、
ここで、ＬはＡ内の炭素原子に結合しており、Ａは１〜３つのＲｋ基で必要に応じて置換され；
各Ｒｋは、Ｆ、ＣＮ、Ｃ１−３アルコキシ、シクロプロピル、およびＣ１−３アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、Ｃ１−３アルキル基は、ＯＨ、ＯＭｅ、または１〜３つのハロゲンで必要に応じて置換されてよく；
Ｒ１は、
【化４】
2020529987.tif 000007
からなる群から選択され、
ここで、ＲｐおよびＲｑは、Ｈ、Ｃ３−５シクロアルキル、およびＣ１−６アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｃ１−６アルキル基は、Ｃ１−３アルコキシおよび−Ｓ−Ｃ１−３アルキルからなる群から独立して選択される１〜３つの置換基で必要に応じて置換されてよく、
あるいは、ＲｐおよびＲｑは、１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜６員の複素単環基を形成し、ここで、４〜６員の複素単環基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、−Ｓ−Ｃ１−３アルキル、および−Ｃ１−３アルキル−Ｃ１−３アルコキシからなる群から独立して選択される１〜３つの置換基で必要に応じて置換され；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、ＯＭｅ、Ｍｅ、およびＦからなる群から選択され；
Ｒ３は、ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ４は、ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ５は、Ｈ、Ｍｅ、およびＦからなる群から選択される）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００１０】
本開示はまた、一定の化合物のいくつかの結晶形態（形態１、形態２、形態２ｂ、形態３、および形態４）を提供する。
【００１１】
本発明はまた、本開示の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または本開示の結晶形態および薬学的に許容され得るキャリアを含む薬学的組成物を提供する。
【００１２】
本発明はまた、哺乳動物の胃腸炎症性疾患、特に潰瘍性大腸炎を処置する方法であって、本開示の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩、または本開示の結晶形態、または本開示の薬学的組成物を哺乳動物に投与する工程を含む、方法を提供する。
【００１３】
本発明はまた、哺乳動物の炎症性疾患または皮膚障害を処置する方法であって、本開示の化合物もしくはその薬学的に許容され得る塩または本開示の薬学的組成物を哺乳動物の皮膚に塗布する工程を含む、方法を提供する。
【００１４】
本発明はまた、哺乳動物の皮膚Ｔ細胞リンパ腫を処置する方法であって、本開示の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩を含む薬学的組成物を哺乳動物の皮膚に塗布する工程を含む、方法を提供する。
【００１５】
別の態様において、本発明はまた、本開示の化合物の調製に有用な本明細書中に記載のプロセスを提供する。
【００１６】
本発明はまた、本明細書中に記載のように医学的治療において使用するための本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩、ならびに哺乳動物の胃腸炎症性疾患、または皮膚の炎症性疾患を処置するための製剤または薬の製造における本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態の使用を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
本発明の様々な態様が、添付の図面を参照することにより例証される。
【００１８】
【図１】図１は、化合物３の結晶形態１（以後、形態１）の粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを示す。
【００１９】
【図２】図２は、結晶形態１の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを示す。
【００２０】
【図３】図３は、結晶形態１の熱重量分析（ＴＧＡ）プロットを示す。
【００２１】
【図４】図４は、約２５℃の温度において観測された結晶形態１の動的水分吸着（ｄｙｎａｍｉｃ  ｍｏｉｓｔｕｒｅ  ｓｏｒｐｔｉｏｎ）（ＤＭＳ）等温線を示す。
【００２２】
【図５】図５は、化合物３の結晶形態２（以後、形態２）の粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを示す。
【００２３】
【図６】図６は、結晶形態２の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを示す。
【００２４】
【図７】図７は、結晶形態２の熱重量分析（ＴＧＡ）プロットを示す。
【００２５】
【図８】図８は、約２５℃の温度において観測された結晶形態２の動的水分吸着（ｄｙｎａｍｉｃ  ｍｏｉｓｔｕｒｅ  ｓｏｒｐｔｉｏｎ）（ＤＭＳ）等温線を示す。
【００２６】
【図９】図９は、化合物１の結晶形態３（以後、形態３）の粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを示す。
【００２７】
【図１０】図１０は、結晶形態３の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを示す。
【００２８】
【図１１】図１１は、結晶形態３の熱重量分析（ＴＧＡ）プロットを示す。
【図１２】図１２は、約２５℃の温度において観測された結晶形態３の動的水分吸着（ｄｙｎａｍｉｃ  ｍｏｉｓｔｕｒｅ  ｓｏｒｐｔｉｏｎ）（ＤＭＳ）等温線を示す。
【００２９】
【図１３】図１３は、化合物１の結晶形態４（以後、形態４）の粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを示す。
【００３０】
【図１４】図１４は、結晶形態４の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムを示す。
【００３１】
【図１５】図１５は、結晶形態４の熱重量分析（ＴＧＡ）プロットを示す。
【００３２】
【図１６】図１６は、約２５℃の温度において観測された結晶形態４の動的水分吸着（ｄｙｎａｍｉｃ  ｍｏｉｓｔｕｒｅ  ｓｏｒｐｔｉｏｎ）（ＤＭＳ）等温線を示す。
【００３３】
【図１７】図１７は、化合物３の脱水結晶形態（以後、形態２ｂ）の粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを示す。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
発明の詳細な説明
他の態様の中でも、本発明は、ＪＡＫキナーゼファミリーの他のメンバー（ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＴＹＫ２など）よりもＪＡＫ３に選択性を示す式（Ｉ）のＪＡＫキナーゼ阻害剤、その薬学的に許容され得る塩、およびその調製のための中間体を提供する。
【００３５】
１つの態様において、本発明は、ＪＡＫキナーゼ阻害剤としての、特に、ＪＡＫ３キナーゼ阻害剤としての活性を有する新規化合物を提供する。
【００３６】
したがって、本発明は、式（Ｉ）：
【化５】
2020529987.tif 000008
（式中、Ｘ１およびＸ２は、ＮおよびＣＨからそれぞれ独立して選択され；
Ｘ３は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ−ＣＨ３、Ｃ−ＣＦ３、Ｃ−ＣＨＦ２、Ｃ−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、Ｃ−ＳＭｅ、Ｃ−ＮＭｅ２、Ｃ−ＮＨ−ＣＨ３、Ｃ−Ｃｌ、Ｃ−ＣＮ、およびＣ−ＯＭｅからなる群から選択され；
【化６】
2020529987.tif 000009
は、
【化７】
2020529987.tif 000010
からなる群から選択され；
Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、およびＲｆは、ＨおよびＣ１−３アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、Ｒｈ、Ｒｉ、Ｒｊ、Ｒｌ、Ｒｍ、Ｒｎ、およびＲｏは、ＨおよびＣ１−３アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｃ１−３アルキル基は、１〜３個のハロゲンで必要に応じて置換されてよく；
必要に応じてＲｄおよびＲｅが結合して、シクロプロピル環を形成してよく；
Ａは、
（ａ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜１０員の複素単環基、および
（ｂ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む６〜１０員の複素多環基、
からなる群から選択され、
ここで、ＬはＡ内の炭素原子に結合しており、Ａは１〜３つのＲｋ基で必要に応じて置換され；
各Ｒｋは、Ｆ、ＣＮ、Ｃ１−３アルコキシ、シクロプロピル、およびＣ１−３アルキルからなる群から独立して選択され、ここで、Ｃ１−３アルキル基は、ＯＨ、ＯＭｅ、または１〜３つのハロゲンで必要に応じて置換されてよく；
Ｒ１は、
【化８】
2020529987.tif 000011
からなる群から選択され、
ここで、ＲｐおよびＲｑは、Ｈ、Ｃ３−５シクロアルキル、およびＣ１−６アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｃ１−６アルキル基は、Ｃ１−３アルコキシおよび−Ｓ−Ｃ１−３アルキルからなる群から独立して選択される１〜３つの置換基で必要に応じて置換されてよく、
あるいは、ＲｐおよびＲｑは、１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜６員の複素単環基を形成し、ここで、４〜６員の複素単環基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、−Ｓ−Ｃ１−３アルキル、および−Ｃ１−３アルキル−Ｃ１−３アルコキシからなる群から独立して選択される１〜３つの置換基で必要に応じて置換され；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、ＯＭｅ、Ｍｅ、およびＦからなる群から選択され；
Ｒ３は、ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ４は、ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ５は、Ｈ、Ｍｅ、およびＦからなる群から選択される）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００３７】
いくつかの実施形態では、Ｘ３はＣＨである。
【００３８】
いくつかの実施形態では、ＲｐおよびＲｑは、Ｈ、シクロブチル、およびＣ１−４アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｃ１−４アルキル基は、Ｃ１−２アルコキシおよび−Ｓ−Ｃ１−２アルキルからなる群から独立して選択される１または２つの置換基で必要に応じて置換されてよく、あるいは、ＲｐおよびＲｑは、１つの窒素原子を含み、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜６員の複素単環基を形成し、ここで、４〜６員の複素単環基は、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、−Ｓ−Ｃ１−２アルキル、および−Ｃ１−３アルキル−Ｃ１−２アルコキシからなる群から独立して選択される１または２つの置換基で必要に応じて置換される。
【００３９】
いくつかの実施形態では、ＲｐおよびＲｑは、Ｈ、シクロブチル、およびＣ１−４アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、ここで、Ｃ１−４アルキル基は、ＯＭｅおよび−ＳＥｔからなる群から独立して選択される１または２つの置換基で必要に応じて置換されてよく、あるいは、ＲｐおよびＲｑは、１つの窒素原子を含み、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜６員の複素単環基を形成し、ここで、４〜６員の複素単環基は、Ｍｅ、ＯＭｅ、ＣＨ２ＯＭｅ、および−ＳＭｅからなる群から独立して選択される１または２つの置換基で必要に応じて置換される。
【００４０】
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、
【化９−１】
2020529987.tif 000012
【化９−２】
2020529987.tif 000013
からなる群から選択される。
【００４１】
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、
【化１０】
2020529987.tif 000014
である。
【００４２】
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、
【化１１】
2020529987.tif 000015
である。
【００４３】
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、
【化１２】
2020529987.tif 000016
である。
【００４４】
６〜１０員の複素多環基は、スピロ環基、縮合環基、および／または架橋環基であってよい。
【００４５】
いくつかの実施形態では、６〜１０員の複素多環基は複素スピロ環基である。いくつかの実施形態では、６〜１０員の複素多環基は縮合複素環基である。いくつかの実施形態では、６〜１０員の複素多環基は架橋複素環基である。
【００４６】
いくつかの実施形態では、Ａは、
（ａ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜８員の複素単環基、および
（ｂ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む６〜１０員の複素多環基
からなる群から選択され、
ここで、ＬはＡ内の炭素原子に結合しており、Ａは１〜３つのＲｋ基で必要に応じて置換される。
【００４７】
いくつかの実施形態では、Ａは、
（ａ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜６員の複素単環基、および
（ｂ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む６〜１０員の複素多環基
からなる群から選択され、
ここで、ＬはＡ内の炭素原子に結合しており、Ａは１〜３つのＲｋ基で必要に応じて置換される。
【００４８】
いくつかの実施形態では、Ａは、
（ａ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）２、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む４〜６員の複素単環基、および
（ｂ）１つの窒素原子を含み、Ｎ、Ｓ、およびＯから選択される１つのさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む７〜８員の複素多環基
からなる群から選択され、
ここで、ＬはＡ内の炭素原子に結合しており、Ａは１〜３つのＲｋ基で必要に応じて置換される。
【００４９】
いくつかの実施形態では、Ａは、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、２−アザスピロ［３．３］ヘプタン、チオモルホリン、およびノルトロパンからなる群から選択される。
【００５０】
いくつかの実施形態では、
【化１３】
2020529987.tif 000017
は、
【化１４】
2020529987.tif 000018
である。
【００５１】
いくつかの実施形態では、
【化１５】
2020529987.tif 000019
は、以下：
【化１６−１】
2020529987.tif 000020
【化１６−２】
2020529987.tif 000021
である。
【００５２】
いくつかの実施形態では、Ｘ１およびＸ２の両方がＣＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１がＮであり、Ｘ２がＣＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１およびＸ２の両方がＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＣＨであり、かつＸ２はＮである。
【００５３】
いくつかの実施形態では、Ｒ２はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ２はＦである。いくつかの実施形態では、Ｒ２はＣｌである。いくつかの実施形態では、Ｒ２はＯＭｅである。いくつかの実施形態では、Ｒ２はＭｅである。いくつかの実施形態では、Ｒ３はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ３はＦである。いくつかの実施形態では、Ｒ４はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ４はＦである。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＭｅである。
【００５４】
いくつかの実施形態では、
【化１７】
2020529987.tif 000022
は、以下：
【化１８】
2020529987.tif 000023
である。
【００５５】
いくつかの実施形態では、
【化１９】
2020529987.tif 000024
は、
【化２０】
2020529987.tif 000025
である。
【００５６】
本発明はまた、式（ＩＩ）：
【化２１】
2020529987.tif 000026
（式中、Ｘ１およびＸ２の両方がＣＨであるか、あるいはＸ１およびＸ２の両方がＮであるか、あるいはＸ１がＮであり、かつＸ２がＣＨであり；
【化２２】
2020529987.tif 000027
は、
【化２３】
2020529987.tif 000028
からなる群から選択され；
Ｒｃ、Ｒｄ、およびＲｅは、Ｈおよびメチルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ａは、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、およびモルホリンからなる群から選択され；
ここで、ＬはＡ内の炭素原子に結合しており、Ａは１〜２つのＲｋ基で必要に応じて置換され；
各Ｒｋは、Ｆ、ＣＮ、メチル、エチル、およびＣ１−２ハロアルキルからなる群から独立して選択され；
Ｒ１は、
【化２４】
2020529987.tif 000029
であり；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、およびＦからなる群から選択される）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００５７】
いくつかの実施形態では、
【化２５】
2020529987.tif 000030
は、
【化２６】
2020529987.tif 000031
である。
【００５８】
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、
【化２７】
2020529987.tif 000032
である。
【００５９】
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、
【化２８】
2020529987.tif 000033
である。
【００６０】
いくつかの実施形態では、化合物は、式：
【化２９】
2020529987.tif 000034
を有する。
【００６１】
いくつかの実施形態では、化合物は、式：
【化３０】
2020529987.tif 000035
を有する。
【００６２】
いくつかの実施形態では、
【化３１】
2020529987.tif 000036
は、以下：
【化３２】
2020529987.tif 000037
を有する。
【００６３】
いくつかの実施形態では、
【化３３】
2020529987.tif 000038
は、以下：
【化３４】
2020529987.tif 000039
を有する。
【００６４】
本開示はまた、式（Ｉａ）または（ＩＩａ）：
【化３５】
2020529987.tif 000040
（式中、変数は、上記の実施形態で定義されたとおりである）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００６５】
本開示はまた、式（Ｉｂ）または式（ＩＩｂ）：
【化３６】
2020529987.tif 000041
（式中、変数は、上記の実施形態で定義されたとおりである）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００６６】
本開示はまた、式（Ｉｃ）または式（ＩＩｃ）：
【化３７】
2020529987.tif 000042
（式中、変数は、上記の実施形態で定義されたとおりである）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００６７】
本開示はまた、式（Ｉｄ）または式（ＩＩｄ）：
【化３８】
2020529987.tif 000043
（式中、変数は、上記の実施形態で定義されたとおりである）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００６８】
本開示はまた、式（Ｉｅ）または（ＩＩｅ）：
【化３９】
2020529987.tif 000044
（式中、変数は、上記の実施形態で定義されたとおりである）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００６９】
本開示はまた、式（Ｉｆ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩＩｆ）、（ＩＶｆ）、（Ｖｆ）、（ＶＩｆ）、（ＶＩＩｆ）、または（ＶＩＩＩｆ）：
【化４０−１】
2020529987.tif 000045
【化４０−２】
2020529987.tif 000046
（式中、変数は、上記の実施形態で定義されたとおりである）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００７０】
本発明はまた、
【化４１】
2020529987.tif 000047
からなる群から選択される化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００７１】
本発明はまた、式（Ｂ）を有する化合物またはその薬学的に許容され得る塩
【化４２】
2020529987.tif 000048
（式中、Ｘ１およびＸ２は、ＮおよびＣＨからそれぞれ独立して選択され；
ＲｄおよびＲｅは、ＨおよびＣ１−３アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；必要に応じてＲｄおよびＲｅが結合して、シクロプロピル環を形成してよく；
Ｒｋ１は、Ｈ、Ｆ、ＣＮ、ＯＭｅ、およびＣ１−３アルキルからなる群から選択され；
Ｒｋ２は、Ｈおよびメチルからなる群から選択され；
Ｒ１は、
【化４３】
2020529987.tif 000049
であり；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、およびＦからなる群から選択される）またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００７２】
いくつかの実施形態では、ＲｄおよびＲｅは、Ｈおよびメチルからなる群からそれぞれ独立して選択され；必要に応じてＲｄおよびＲｅが結合して、シクロプロピル環を形成してよく；Ｒｋ１は、Ｈ、Ｆ、ＣＮ、ＯＭｅ、メチル、およびエチルからなる群から選択される。
【００７３】
本発明はまた、式（Ｃ）を有する化合物またはその薬学的に許容され得る塩：
【化４４】
2020529987.tif 000050
（式中、Ｘ１およびＸ２の両方がＣＨであるか、あるいはＸ１およびＸ２の両方がＮであるか、あるいはＸ１がＮであり、かつＸ２がＣＨである；
ＲｄおよびＲｅは、Ｈおよびメチルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ｒｋは、Ｈ、ＣＮ、メチル、およびエチルからなる群から選択され；
Ｒ１は、
【化４５】
2020529987.tif 000051
であり；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃｌ、およびＦからなる群から選択される）またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００７４】
いくつかの実施形態では、化合物またはその薬学的に許容され得る塩は、以下：
【化４６】
2020529987.tif 000052
を有する。
【００７５】
本発明はまた、式：
【化４７】
2020529987.tif 000053
を有する化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００７６】
本発明はまた、式：
【化４８】
2020529987.tif 000054
を有する化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００７７】
本発明はまた、以下：
【化４９】
2020529987.tif 000055
を有する化合物またはその薬学的に許容され得る塩を提供する。
【００７８】
本発明はまた、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態および薬学的に許容され得るキャリアを含む薬学的組成物を提供する。いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、１または複数の他の治療剤をさらに含む。いくつかの実施形態では、１または複数の他の治療剤は、胃腸炎症性疾患、皮膚の炎症性疾患、肺の炎症性疾患、または眼の炎症性疾患の処置に有用である。いくつかの実施形態では、１または複数の他の治療剤は、胃腸炎症性疾患の処置に有用である。いくつかの実施形態では、胃腸炎症性疾患は潰瘍性大腸炎である。いくつかの実施形態では、胃腸炎症性疾患はクローン病である。
【００７９】
さらに、いくつかの化合物は、時折、互変異性体で存在することがあってよい。構造は、ある特定の形態として示されているかまたは命名されているが、本発明は、それらの互変異性体も含むことが理解される。
【００８０】
本発明の化合物は、１つまたはそれを超えるキラル中心を含み得るので、そのような化合物（およびそれらの中間体）は、ラセミ混合物；純粋な立体異性体（すなわち、エナンチオマーまたはジアステレオマー）；立体異性体富化混合物などとして存在し得る。キラル中心に明確な立体化学なしに本明細書中に示されているまたは命名されているキラル化合物は、別段示されない限り、未確定の立体中心において存在し得る任意のまたはすべての立体異性体バリエーションを含むことを意図されている。特定の立体異性体の描写または呼称は、別段示されない限り、少量の他の立体異性体も存在し得ることの理解とともに、示されている立体中心が、指定の立体化学を有することを意味しているが、但し、描写されたまたは命名された化合物の有用性は、別の立体異性体の存在によって排除されない。
【００８１】
本発明は、同位体で標識された本開示の化合物、例えば、同位体で標識された式（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｂ）、（Ｃ）の化合物、化合物１、化合物３、化合物４、すなわち、原子が、同じ原子番号を有するが自然界で優勢である原子質量とは異なる原子質量を有する原子で置き換えられているかまたは富化されている本開示の化合物、および式（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｂ）、（Ｃ）の化合物、化合物１、化合物３、化合物４も含む。本開示の化合物、および式（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｂ）、（Ｃ）の化合物、化合物１、化合物３、化合物４に組み込まれ得る同位体の例としては、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、３５Ｓ、および１８Ｆが挙げられるが、これらに限定されない。トリチウムまたは炭素−１４に富化した本開示の化合物、および式（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｂ）、（Ｃ）の化合物、化合物１、化合物３、化合物４が特に興味深く、それらの化合物は、例えば、組織分布研究において使用され得る。また、特に代謝部位においてジュウテリウムに富化した本開示の化合物、および式（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｂ）、（Ｃ）の化合物、化合物１、化合物３、化合物４も特に興味深く、それらの化合物は、より高い代謝的安定性を有すると予想される。さらに、陽電子放出同位体（例えば、１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏおよび１３Ｎ）に富化した本開示の化合物、および式（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｂ）、（Ｃ）の化合物、化合物１、化合物３、化合物４も特に興味深く、それらの化合物は、例えば、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）研究において使用され得る。
【００８２】
定義
様々な態様および実施形態を含む本発明を説明する際、以下の用語は、別段示されない限り、以下の意味を有する。
【００８３】
用語「アルキル」は、直鎖もしくは分枝鎖またはそれらの組み合わせであり得る一価の飽和炭化水素基を意味する。別段定義されない限り、そのようなアルキル基は、代表的には、１〜１０個の炭素原子を含む。代表的なアルキル基の例としては、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、ｎ−プロピル（ｎ−Ｐｒ）または（ｎＰｒ）、イソプロピル（ｉ−Ｐｒ）または（ｉＰｒ）、ｎ−ブチル（ｎ−Ｂｕ）または（ｎＢｕ）、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔ−Ｂｕ）または（ｔＢｕ）、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、２，２−ジメチルプロピル、２−メチルブチル、３−メチルブチル、２−エチルブチル、２，２−ジメチルペンチル、２−プロピルペンチルなどが挙げられる。
【００８４】
用語「ハロアルキル」は、１または複数のハロゲンで置換された上記定義のアルキル基を指す（例えば、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリクロロメチル、２，２，２  トリフルオロエチル、１，２  ジフルオロエチル、３  ブロモ  ２  フルオロプロピル、および１，２  ジブロモエチルなど）。
【００８５】
具体的な数の炭素原子が、特定の用語に対して意図されているとき、炭素原子の数は、その用語の前に示される。例えば、用語「Ｃ１−３アルキル」は、１〜３個の炭素原子を有するアルキル基を意味し、ここで、それらの炭素原子は、直鎖または分枝鎖の配置を含む化学的に許容され得る任意の配置で存在する。
【００８６】
用語「アルコキシ」は、一価の基−Ｏ−アルキルを意味し、ここで、アルキルは、上記のように定義される。代表的なアルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシなどが挙げられる。
【００８７】
用語「シクロアルキル」は、単環式または多環式であり得る一価の飽和炭素環式基を意味する。別段定義されない限り、そのようなシクロアルキル基は、代表的には、３〜１０個の炭素原子を含む。代表的なシクロアルキル基の例としては、シクロプロピル（ｃＰｒ）、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、アダマンチルなどが挙げられる。
【００８８】
用語「複素環式」または「複素環式環」は、合計３〜１０個の環原子を有する飽和または部分不飽和の環式の非芳香族基を意味し、ここで、その環は、２〜９個の炭素環原子、ならびに窒素、酸素および硫黄から選択される１〜４個の環ヘテロ原子を含む。複素環式基は、単環式または多環式（すなわち、縮合、スピロまたは架橋）であり得る。複素環式基が多環式である場合、必ずしも全てではないが少なくとも１つの環式基がヘテロ原子を含む。代表的な複素環式基の例としては、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、イミダゾリジニル、モルホリニル、チオモルホリル、インドリン−３−イル、２−イミダゾリニル、テトラヒドロピラニル、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−２−イル、キヌクリジニル、７−アザノルボルナニル、ノルトロパニルなどが挙げられ、ここで、結合点は、任意の利用可能な炭素または窒素環原子に存在する。状況によって複素環式基の結合点が明らかである場合、そのような基は、代わりに、無価種、すなわち、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、イミダゾール、テトラヒドロピランなどと称され得る。
【００８９】
用語「治療有効量」は、処置を必要とする患者に投与されたとき、処置をもたらすのに十分な量を意味する。
【００９０】
用語「処置」は、本明細書中で使用されるとき、哺乳動物（特にヒト）などの患者における疾患、障害または病状（例えば、胃腸炎症性疾患）の処置を意味し、それには、以下のうちの１つまたはそれを超えるものが含まれる：
（ａ）疾患、障害または病状の発生を予防すること、すなわち、疾患もしくは病状の再発を予防すること、またはその疾患もしくは病状になりやすい患者の予防的処置；
（ｂ）疾患、障害または病状を回復させること、すなわち、患者の疾患、障害もしくは病状を排除するかまたはそれらを後退させること（他の治療剤の効果を相殺することを含む）；
（ｃ）疾患、障害または病状を抑制すること、すなわち、患者の疾患、障害または病状の発症を遅延させるかまたは停止させること；または
（ｄ）患者の疾患、障害または病状の症候を軽減すること。
【００９１】
用語「薬学的に許容され得る塩」は、患者または哺乳動物（例えば、ヒト）への投与が許容され得る塩（例えば、所与の投与レジメンについて許容され得る哺乳動物の安全性を有する塩）を意味する。代表的な薬学的に許容され得る塩としては、酢酸、アスコルビン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、エジシル酸（ｅｄｉｓｙｌｉｃ）、フマル酸、ゲンチシン酸、グルコン酸、グルクロン酸（ｇｌｕｃｏｒｏｎｉｃ）、グルタミン酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２，６−ジスルホン酸、ニコチン酸、硝酸、オロチン酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびキシナホ酸（ｘｉｎａｆｏｉｃ  ａｃｉｄ）などの塩が挙げられる。
【００９２】
用語「その塩」は、酸の水素がカチオン（例えば、金属カチオンまたは有機カチオンなど）によって置き換えられたときに形成される化合物を意味する。例えば、カチオンは、プロトン化型の式（Ｉ）の化合物、すなわち、１つまたはそれを超えるアミノ基が酸によってプロトン化されている形態であり得る。代表的には、塩は、薬学的に許容され得る塩であるが、これは、患者への投与が意図されていない中間体化合物の塩には求められない。
【００９３】
用語「アミノ保護基」は、アミノ窒素において望まれない反応を妨げるのに適した保護基を意味する。代表的なアミノ保護基としては、ホルミル；アシル基、例えば、アルカノイル基（例えば、アセチルおよびトリ−フルオロアセチル）；アルコキシカルボニル基（例えば、ｔｅｒｔブトキシカルボニル（Ｂｏｃ））；アリールメトキシカルボニル基（例えば、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）および９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ））；アリールメチル基（例えば、ベンジル（Ｂｎ）、トリチル（Ｔｒ）および１，１−ジ−（４’−メトキシフェニル）メチル）；シリル基（例えば、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳまたはＴＢＤＭＳ）、［２−（トリメチルシリル）エトキシ］メチル（ＳＥＭ））；などが挙げられるが、これらに限定されない。数多くの保護基ならびにそれらの導入および除去は、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋに記載されている。
【００９４】
一般的な合成手順
本開示の化合物およびそれらの中間体は、商業的に入手可能なまたは日常的に調製される出発物質および試薬を使用して、以下の一般的な方法および手順に従って調製され得る。以下のスキームにおいて使用される置換基および変数（例えば、Ａ、Ｘ１、Ｘ２、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒａ、Ｒｂなど）は、別段示されない限り、本明細書中の他の箇所に定義される意味と同じ意味を有する。さらに、酸性または塩基性の原子または官能基を有する化合物は、別段示されない限り、塩として使用され得るかまたは生成され得る（場合によっては、特定の反応において塩を使用するためには、その反応を行う前に、日常的な手順を使用して、その塩から非塩形態、例えば、遊離塩基に変換することが必要である）。
【００９５】
本発明の特定の実施形態が、以下の手順に示され得るかまたは記載され得るが、当業者は、本発明の他の実施形態または態様も、そのような手順を用いて、または当業者に公知の他の方法、試薬および出発物質を用いて、調製され得ることを認識する。特に、本開示の化合物は、反応体が異なる順序で混和されることにより最終生成物を生成する途中で異なる中間体が提供される種々のプロセス経路によって調製され得ることが認識される。
【００９６】
Ｌが以下：
【化５０】
2020529987.tif 000056
から選択される本開示の最終的な化合物を調製する一般的な方法を、スキーム１に示す。
【化５１】
2020529987.tif 000057
【００９７】
ＲｘおよびＲｙが同一または異なっていてよいハロゲンである出発物質Ｐ１を保護された基ＰＧ（テトラヒドロピランなど）で保護して、Ｐ２を得る。次いで、Ｐ２をＰ３と反応させてＰ４を得る。
Ｐ３は、以下：
【化５２】
2020529987.tif 000058
（式中、Ｒｚは第２の保護基（例えば、Ｂｏｃ）である）であり得る。この場合、Ｐ３を、ＮａＨなどの塩基を用いて脱プロトン化し、Ｐ２と反応させてＰ４を得る。
【００９８】
あるいは、Ｐ３は、以下：
【化５３】
2020529987.tif 000059
（式中、Ｒｚは第２の保護基（例えば、Ｂｏｃ）である）であり得る。この場合、Ｐ３を、Ｂｕｃｈｗａｌｄカップリング条件下で（Ｐｄ（０）および塩基の存在下など）Ｐ２と反応させてＰ４を得る。あるいは、Ｐ３をＤＩＰＥＡなどの塩基の存在下でＰ２と反応させてＰ４を得る。
【００９９】
あるいは、Ｐ３は、以下：
【化５４】
2020529987.tif 000060
（式中、Ｒｚは第２の保護基（例えば、Ｂｏｃ）である）であり得る。この場合、Ｐ３をＰｄ（０）、９−ＢＢＮ、および塩基の存在下でＰ２と反応させてＰ４を形成する。
【０１００】
Ｐ４を、Ｐｄ（０）および塩基の存在下でボロン酸Ｐ５（Ｓｕｚｕｋｉカップリング）とカップリングしてＰ６を得る。Ｐ６を脱保護してＰ７を得る（ＰＧがテトラヒドロピランであり、ＲｚがＢｏｃである場合、ＴＦＡまたはＨＣｌなどの強酸の存在下でアミンの同時脱保護が起こる）。最後に、アミドカップリング（ＨＡＴＵまたはヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）などのカップリング剤の存在下での酸と反応）またはＨｕｎｉｇ塩基などの塩基の存在下での塩化アシルとの反応によってＰ７をアミドに誘導する。
【０１０１】
この反応スキームでは、反応の順序を修正することができる。例えば、Ａ環を含む部分の導入前にＳｕｚｕｋｉカップリングを行うことができる。これは、例えば、ＢｕｃｈｗａｌｄカップリングによってＡ環を含む部分を導入する場合に当てはまり得る。
【０１０２】
この反応スキームでは、アミノ基の一方または両方の保護は任意である。アミノ基の一方または両方についてアミノ保護を用いずに同一の合成スキームを使用することができるが、収率は低くなり得る。
【０１０３】
対応するスルフィドの、例えば、オキソンおよび塩基性アルミナを用いた酸化によってスルホニルリンカーを得ることができる。
【０１０４】
したがって、１つの方法の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物
【化５５】
2020529987.tif 000061
またはその薬学的に許容され得る塩を調製する方法であって、
式（ＩＩＩ）：
【化５６】
2020529987.tif 000062
の化合物を、
（ｉ）Ｃｌ−Ｒ１、または
（ｉｉ）ＨＯ−Ｒ１
と反応させる工程であって、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ１、Ｘ２、Ｌ、およびＡは、上で定義されたとおりである、反応させる工程、および
必要に応じて薬学的に許容され得る塩を形成させて、
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を得る、形成させる工程
を含む、方法を提供する。
【０１０５】
別個の異なる態様では、本発明は、式（ＩＩＩ）の化合物（式中、変数は、上に記載された値のいずれかをとる）を提供する。
【０１０６】
結晶形態
１つの態様において、本発明は、式：
【化５７】
2020529987.tif 000063
の化合物の結晶形態を提供する。
【０１０７】
形態１
本発明の結晶形態１は、化合物３の結晶性無水遊離形態である。１つの態様において、形態１は、他のピークの中でも、５．６５±０．２０、１４．２２±０．２０、１５．１６±０．２０、および１９．３１±０．２０の２θ値において有意な回折ピークを有する粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを特徴とする。形態１は、７．１２±０．２０、１０．０２±０．２０、１１．１６±０．２０、１７．０６±０．２０、および２４．４３±０．２０の２θ値においてさらなる回折ピークを有するＰＸＲＤパターンをさらに特徴とし得る。形態１は、１３．１０±０．２０、１４．８２±０．２０、１６．５５±０．２０、２０．０８±０．２０、２１．０８±０．２０、２１．６５±０．２０、２２．５１±０．２０、２２．９８±０．２０、２５．０２±０．２０、２５．７２±０．２０、２６．８０±０．２０、２７．０６±０．２０、２８．３１±０．２０、３０．０８±０．２０、３０．３１±０．２０、および３２．０８±０．２０から選択される２θ値において、２つまたはそれを超えるさらなる回折ピーク（３つまたはそれを超えるおよび４つまたはそれを超えるさらなる回折ピークを含む）を有するＰＸＲＤパターンをさらに特徴とし得る。形態１は、５．６５±０．２０、７．１２±０．２０、１０．０２±０．２０、１１．１６±０．２０、１４．２２±０．２０、１５．１６±０．２０、１７．０６±０．２０、１９．３１±０．２０、および２４．４３±０．２０から選択される２θ値において３つ、４つ、５つ、または６つの回折ピークを有するＰＸＲＤパターンを特徴とする。
【０１０８】
粉末Ｘ線回折の分野で周知であるように、ＰＸＲＤパターンのピーク位置は、相対的ピーク高さよりも、比較的、実験の詳細（例えば、サンプル調製および装置のジオメトリの詳細）に感受性でない。したがって、１つの態様において、結晶形態１は、ピーク位置が、図１に示されるものと実質的に一致する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする。
【０１０９】
別の態様では、結晶形態１は、高温に曝露されたときの挙動によって特徴付けられる。図２に示されているように、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースは、約１５４．９℃の開始および約１６２．９℃のピークを有する融解転移として特定される、吸熱熱流のピークを示す。融解直後に分解した。
【０１１０】
結晶形態は、約１６２．９℃にピークを有する吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする。結晶形態は、１６２．９±３℃にピークを有する吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする。
【０１１１】
結晶形態は、約１５４．９℃〜約１７１℃、または１５８℃〜１６７℃の温度において吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする。
【０１１２】
形態１の結晶性遊離形態の代表的なＴＧＡトレースを図３に示す。熱重量分析（ＴＧＡ）トレースは、１００℃で約０．１４％のわずかな重量減少を示す。化合物は、約１７５℃の開始温度で分解する。
【０１１３】
形態１の結晶性遊離形態の代表的なＤＭＳトレースを図４に示す。形態１は、５％〜９０％の相対湿度の湿度範囲において約１．６２％の重量増加を示した。形態１は、わずかに吸湿性であると考えられる。
【０１１４】
形態１を、非晶形としての化合物３をエタノールに溶解し、その後に約２０℃〜約２５℃で撹拌し、その後に濾過および乾燥させて形態１を得ることによって調製することができる。必要に応じて、固体を乾燥前にエタノールで洗浄することができる。
【０１１５】
形態１を、非晶形の化合物にアセトンを加え、約２０℃〜約２５℃で撹拌し、その後にシードを添加することによって調製することができる。得られたスラリーを濾過し、乾燥させて形態１を得る。
【０１１６】
形態２
本発明の結晶形態２は、化合物３の結晶性水和遊離形態である。１つの態様において、形態２は、他のピークの中でも、６．９０±０．２０、９．１５±０．２０、１０．００±０．２０、および１８．３１±０．２０の２θ値において有意な回折ピークを有する粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを特徴とする。形態２は、１１．１８±０．２０、１５．５１±０．２０、および２０．９０±０．２０の２θ値においてさらなる回折ピークを有するＰＸＲＤパターンをさらに特徴とし得る。形態２は、１２．７６±０．２０、１３．３３±０．２０、１３．８２±０．２０、１４．４３±０．２０、１６．０４±０．２０、１７．００±０．２０、１７．９０±０．２０、２２．０６±０．２０、２２．５１±０．２０、２５．００±０．２０、２６．９２±０．２０、２７．２６±０．２０、２７．６１±０．２０、２９．３７±０．２０、３０．５３±０．２０、および３０．９２±０．２０から選択される２θ値において、２つまたはそれを超えるさらなる回折ピーク（３つまたはそれを超えるおよび４つまたはそれを超えるさらなる回折ピークを含む）を有するＰＸＲＤパターンをさらに特徴とし得る。形態２は、６．９０±０．２０、９．１５±０．２０、１０．００±０．２０、１１．１８±０．２０、１５．５１±０．２０、１８．３１±０．２０、および２０．９０±０．２０から選択される２θ値において３つ、４つ、５つ、または６つの回折ピークを有するＰＸＲＤパターンを特徴とする。
【０１１７】
粉末Ｘ線回折の分野で周知であるように、ＰＸＲＤパターンのピーク位置は、相対的ピーク高さよりも、比較的、実験の詳細（サンプル調製および装置のジオメトリの詳細など）に感受性でない。したがって、１つの態様において、結晶形態２は、ピーク位置が、図５に示されるものと実質的に一致する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする。
【０１１８】
別の態様において、結晶形態２は、高温に曝露されたときの挙動によって特徴付けられる。図６に示されているように、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースは、約５２．７℃での開始および約８４．４℃でのピークを有する脱溶媒和吸熱、ならびに約１６０．０℃での開始および約１６７．６℃でのピークを有する融解吸熱を示す。融解直後に分解した。
【０１１９】
本発明の形態２の結晶性遊離形態の代表的なＴＧＡトレースを図７に示す。図７の熱重量分析（ＴＧＡ）トレースは、７５℃で約６．７３％の重量減少を示す。化合物は、約２５℃の開始温度で脱溶媒和する。化合物は、約１８５℃の開始温度で分解する。
【０１２０】
本発明の形態２の結晶性遊離形態の代表的なＤＭＳトレースを図８に示す。形態２は、６５％を超えるＲＨで水和物（形態２ｂ）に変換される。１５％未満のＲＨで脱水が起こる。５％〜９０％ＲＨでの総吸湿は７．９９％である。
【０１２１】
形態２を、非晶形の化合物３をメタノールに溶解し、その後に水などの貧溶媒を約１：２のメタノール：水比で添加することによって調製することができる。必要に応じて、混合物を超音波処理する。次いで、混合物を、約２０℃〜約２５℃で約１２〜２４時間撹拌する。次いで、形態２を、濾過および乾燥によって単離する。必要に応じて、固体をメタノールで洗浄することができる。
【０１２２】
形態２を、約１０体積のアルコールに完全に溶解し、その後に約８〜１０体積の水を曇点までゆっくり添加することによってエタノールおよび水またはメタノールおよび水に溶解することによって調製することもできる。形態２のシードを加えて、経時的にゆっくりスラリーを形成する。さらなる水をゆっくり加えて（約１０体積）固体を得、これを濾過および乾燥させて形態２を得ることができる。
【０１２３】
形態２ｂ
本発明の結晶形態２ｂは、化合物３の結晶性脱水遊離形態である。１つの態様において、形態２ｂは、他のピークの中でも、７．６１±０．２０、１６．７６±０．２０、１７．９０±０．２０、および２０．６７±０．２０の２θ値において有意な回折ピークを有する粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを特徴とする。形態２ｂは、１０．３３±０．２０、１１．２５±０．２０、１２．７１±０．２０、１５．８８±０．２０の２θ値においてさらなる回折ピークを有するＰＸＲＤパターンをさらに特徴とし得る。形態２ｂは、１３．２３±０．２０、１３．６６±０．２０、１３．９０±０．２０、１５．０２±０．２０、１５．２７±０．２０、１６．３３±０．２０、１８．２６±０．２０、２１．３７±０．２０、２１．９２±０．２０、２２．３１±０．２０、２２．９０±０．２０、２３．２２±０．２０、２３．６１±０．２０、２４．７４±０．２０、２５．７８±０．２０、２６．２３±０．２０、２６．７３±０．２０、２７．５７±０．２０、２９．１０±０．２０、２９．３９±０．２０、３０．７２±０．２０、３０．９４±０．２０、３１．６９±０．２０、３２．０６±０．２０、３３．７６±０．２０、および３４．３５±０．２０から選択される２θ値において、２つまたはそれを超えるさらなる回折ピーク（３つまたはそれを超えるおよび４つまたはそれを超えるさらなる回折ピークを含む）を有するＰＸＲＤパターンをさらに特徴とし得る。形態２ｂは、７．６１±０．２０、１０．３３±０．２０、１１．２５±０．２０、１２．７１±０．２０、１５．８８±０．２０、１６．７６±０．２０、１７．９０±０．２０、および２０．６７±０．２０から選択される２θ値において３つ、４つ、５つ、または６つの回折ピークを有するＰＸＲＤパターンを特徴とする。
【０１２４】
粉末Ｘ線回折の分野で周知であるように、ＰＸＲＤパターンのピーク位置は、相対的ピーク高さよりも、比較的、実験の詳細（サンプル調製および装置のジオメトリの詳細など）に感受性でない。したがって、１つの態様において、結晶形態２ｂは、ピーク位置が図１７に示されているピーク位置と実質的に一致する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする。
【０１２５】
別の態様において、本発明は、式：
【化５８】
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の化合物の結晶形態を提供する。
【０１２６】
形態３
本発明の結晶形態３は、化合物１の結晶性無水遊離形態である。１つの態様において、形態３は、他のピークの中でも、９．６７±０．２０、１１．６１±０．２０、１７．６１±０．２０、１８．８８±０．２０、および２３．３３±０．２０の２θ値において有意な回折ピークを有する粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを特徴とする。形態３は、４．８２±０．２０、１５．６９±０．２０、および１６．１９±０．２０の２θ値においてさらなる回折ピークを有するＰＸＲＤパターンをさらに特徴とし得る。形態３は、１１．９２±０．２０、１２．９８±０．２０、１３．２３±０．２０、１６．４５±０．２０、１６．６７±０．２０、１９．３９±０．２０、１９．９６±０．２０、２０．１４±０．２０、２２．１４±０．２０、２３．８４±０．２０、２４．０６±０．２０、２４．２９±０．２０、２５．３１±０．２０、２５．６３±０．２０、２７．０６±０．２０、２７．３１±０．２０、３０．１０±０．２０、および３０．５３±０．２０から選択される２θ値において、２つまたはそれを超えるさらなる回折ピーク（３つまたはそれを超えるおよび４つまたはそれを超えるさらなる回折ピークを含む）を有するＰＸＲＤパターンをさらに特徴とし得る。形態３は、４．８２±０．２０、９．６７±０．２０、１１．６１±０．２０、１５．６９±０．２０、１６．１９±０．２０、１７．６１±０．２０、１８．８８±０．２０、および２３．３３±０．２０から選択される２θ値において３つ、４つ、５つ、または６つの回折ピークを有するＰＸＲＤパターンを特徴とする。
【０１２７】
粉末Ｘ線回折の分野で周知であるように、ＰＸＲＤパターンのピーク位置は、相対的ピーク高さよりも、比較的、実験の詳細（サンプル調製および装置のジオメトリの詳細など）に感受性でない。したがって、１つの態様において、結晶形態３は、ピーク位置が、図９に示されるものと実質的に一致する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする。
【０１２８】
別の態様において、結晶形態３は、高温に曝露されたときの挙動によって特徴付けられる。図１０に示されているように、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースは、融解転移として特定される、約１９７．７℃での開始および約２０１．３℃でのピークを有する吸熱熱流のピークを示す。融解直後に分解した。
【０１２９】
結晶形態は、２０１．３℃±２℃にピークを有する吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする。
【０１３０】
結晶形態は、１９８℃〜２０４℃の温度において吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする。
【０１３１】
本発明の形態３の結晶性遊離形態の代表的なＴＧＡトレースを図１１に示す。図１１の熱重量分析（ＴＧＡ）トレースは、約１９５℃の分解開始未満の温度で有意な重量減少は示さない。
【０１３２】
本発明の形態３の結晶性遊離形態の代表的なＤＭＳトレースを図１２に示す。形態３は、５％〜９０％の相対湿度の湿度範囲において約０．３３％の重量増加を示した。形態３は、非吸湿性であると考えられる。
【０１３３】
形態３を、アセトニトリルおよびイソプロパノールの１：１混合物に非晶形の化合物１を懸濁することによって調製することができる。得られた懸濁液を、約５０℃で約１日間撹拌し、濾過し、必要に応じてアセトニトリルおよびイソプロパノールの１：１混合物で洗浄し、数時間乾燥させて形態３を得る。
【０１３４】
形態３を、約２０℃〜約２５℃で非晶質遊離塩基としての化合物１をＩＰＡに溶解することによって調製することができる。等量のアセトニトリルを添加する。飽和溶液が形成されるまで、さらなる化合物を添加することができる。シードを加え、混合物を一晩撹拌する。形成された白色スラリーを濾過および乾燥させて、形態３を得る。
【０１３５】
形態４
本発明の結晶形態４は、化合物１の結晶性水和遊離形態である。１つの態様において、形態４は、他のピークの中でも、６．２６±０．２０、１６．５５±０．２０、１６．９４±０．２０、１８．３３±０．２０、２３．６１±０．２０、および２４．２４±０．２０の２θ値において有意な回折ピークを有する粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを特徴とする。形態４は、１１．８６±０．２０、１２．５１±０．２０、１３．１６±０．２０、および１４．９８±０．２０の２θ値においてさらなる回折ピークを有するＰＸＲＤパターンをさらに特徴とし得る。形態４は、１７．６１±０．２０、１８．７８±０．２０、１９．３９±０．２０、１９．５７±０．２０、１９．８４±０．２０、２１．４５±０．２０、２１．８２±０．２０、２２．５７±０．２０、２４．６７±０．２０、２５．１０±０．２０、２５．３９±０．２０、２７．１９±０．２０、２７．３９±０．２０、２８．５５±０．２０、および３１．５１±０．２０から選択される２θ値において、２つまたはそれを超えるさらなる回折ピーク（３つまたはそれを超えるおよび４つまたはそれを超えるさらなる回折ピークを含む）を有するＰＸＲＤパターンをさらに特徴とし得る。形態４は、６．２６±０．２０、１１．８６±０．２０、１２．５１±０．２０、１３．１６±０．２０、１４．９８±０．２０、１６．５５±０．２０、１６．９４±０．２０、１８．３３±０．２０、２３．６１±０．２０、および２４．２４±０．２０から選択される２θ値において３つ、４つ、５つ、または６つの回折ピークを有するＰＸＲＤパターンを特徴とする。
【０１３６】
粉末Ｘ線回折の分野で周知であるように、ＰＸＲＤパターンのピーク位置は、相対的ピーク高さよりも、比較的、実験の詳細（サンプル調製および装置のジオメトリの詳細など）に感受性でない。したがって、１つの態様において、結晶形態４は、ピーク位置が、図１３に示されるものと実質的に一致する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする。
【０１３７】
別の態様において、結晶形態４は、高温に曝露されたときの挙動によって特徴付けられる。図１４に示されているように、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースは、約６０．９℃での開始および約１０３．６℃でのピークを有する脱溶媒和吸熱、ならびに約１６７．３℃での開始を特徴とする融解吸熱を示す。化合物は融解時に分解され、融解吸熱および分解熱が重複する。
【０１３８】
本発明の形態４の結晶性遊離形態の代表的なＴＧＡトレースを図１５に示す。図１５の熱重量分析（ＴＧＡ）トレースは、１００℃で約３．５４％の重量減少を示す。化合物は、約５０℃の開始温度で脱溶媒和する。化合物は、約１６５℃の開始温度で分解する。
【０１３９】
本発明の形態４の結晶性遊離形態の代表的なＤＭＳトレースを図１６に示す。形態４は、５％〜９０％の相対湿度の湿度範囲において約５．０１％の重量増加を示した。形態４は、中程度に吸湿性と考えられる。
【０１４０】
形態４を、化合物１を水に懸濁することによって調製することができる。得られた懸濁液を、約５０℃で約１〜２日間撹拌し、濾過し、必要に応じて水で洗浄し、約２０℃〜約２５℃で約２〜６時間乾燥させて形態４を得る。
【０１４１】
あるいは、形態４を、約１０体積のアルコールに完全に溶解し、その後に約８〜１０体積の水を曇点までゆっくり添加することによってエタノールおよび水またはメタノールおよび水に化合物１を溶解することによって調製することができる。形態４のシードを加え、その結果、スラリーが経時的にゆっくり生じる。次いで、さらなる水をゆっくり加え（約１０体積）、固体を濾過および乾燥させて形態４を得る。
【０１４２】
薬学的組成物
本開示の化合物およびそれらの薬学的に許容され得る塩は、通常、薬学的組成物または製剤の形態で使用される。そのような薬学的組成物は、任意の許容され得る投与経路によって患者に投与されてよく、その投与経路としては、経口、局所（経皮を含む）直腸、経鼻、吸入、および非経口的な投与形式が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１４３】
したがって、上記組成物の態様の１つにおいて、本発明は、薬学的に許容され得るキャリアまたは賦形剤および式（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｂ）、（Ｃ）の化合物、化合物１、化合物３、または化合物４、またはその薬学的に許容され得る塩を含む薬学的組成物に関する。必要に応じて、そのような薬学的組成物は、所望であれば、他の治療剤および／または製剤化剤を含んでもよい。組成物およびその使用を論じる際、「本発明の化合物」または「本開示の化合物」は、本明細書中で「活性な作用物質」と称されることがある。本明細書中で使用されるとき、用語「本開示の化合物」は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｉａ）、（ＩＩａ）、（Ｉｂ）、（ＩＩｂ）、（Ｉｃ）、（ＩＩｃ）、（Ｉｄ）、（ＩＩｄ）、（Ｉｅ）、（ＩＩｅ）、（Ｉｆ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩＩｆ）、（ＩＶｆ）、（Ｖｆ）、（ＶＩｆ）、（ＶＩＩｆ）および（ＶＩＩＩｆ）によって包含されるすべての化合物ならびにそれらの薬学的に許容され得る塩を含むことを意図されている。
【０１４４】
本開示の薬学的組成物は、通常、治療有効量の本開示の化合物を含む。しかしながら、薬学的組成物は、治療有効量より多い、すなわち、大量の組成物または治療有効量より少ない、すなわち、治療有効量を達成するための複数回投与のためにデザインされた個別の単位用量を含むことがあることを当業者は認識する。
【０１４５】
代表的には、そのような薬学的組成物は、約０．１〜約９５重量％の活性な作用物質（約５〜約７０重量％の活性な作用物質を含む）を含む。
【０１４６】
任意の従来のキャリアまたは賦形剤を、本発明の薬学的組成物において使用してもよい。特定のキャリアもしくは賦形剤、またはキャリアもしくは賦形剤の組み合わせの選択は、特定の患者を処置するために用いられる投与様式、または病状もしくは疾患状態のタイプに依存する。この点において、特定の投与様式に対して好適な薬学的組成物の調製法は、十分に薬学分野の当業者の技術の範囲内である。さらに、本発明の薬学的組成物において使用されるキャリアまたは賦形剤は、商業的に入手可能である。さらなる例証として、従来の製剤化の手法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｈｉｔｅ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ（２０００）；およびＨ．Ｃ．Ａｎｓｅｌら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｈｉｔｅ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ（１９９９）に記載されている。
【０１４７】
薬学的に許容され得るキャリアとして機能し得る材料の代表例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：糖（例えば、ラクトース、グルコースおよびスクロース）；デンプン（例えば、トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプン）；セルロース（例えば、微結晶性セルロース）およびその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース）；トラガント末；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤（例えば、カカオバターおよび坐剤ろう）；油（例えば、落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびダイズ油）；グリコール（例えば、プロピレングリコール）；ポリオール（例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール）；エステル（例えば、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル）；寒天；緩衝剤（例えば、水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム）；アルギン酸；発熱物質非含有水；等張食塩水；リンガー溶液；エチルアルコール；リン酸緩衝液；および薬学的組成物において使用される他の無毒性の適合性物質。
【０１４８】
薬学的組成物は、代表的には、活性な作用物質を薬学的に許容され得るキャリアおよび１つまたはそれを超える必要に応じた成分と十分かつ完全に混合または混和することによって調製される。次いで、得られた均一に混和された混合物は、従来の手順および器具を用いて、錠剤、カプセル剤、丸剤などに成形または充填され得る。
【０１４９】
本開示の薬学的組成物は、好ましくは、単位剤形に包装される。用語「単位剤形」とは、患者への投与に適した物理的に別々の単位のことを指し、すなわち、各単位は、単独でまたは１つもしくはそれを超えるさらなる単位と組み合わさって所望の治療効果をもたらすように計算された所定の量の活性な作用物質を含む。例えば、そのような単位剤形は、カプセル剤、錠剤、丸剤など、または非経口投与に適した単位パッケージであり得る。
【０１５０】
１つの実施形態において、本開示の薬学的組成物は、経口投与に適している。経口投与に好適な薬学的組成物は、カプセル剤、錠剤、丸剤、舐剤、カシェ剤、糖衣錠、散剤、顆粒剤の形態であり得るか；または水性もしくは非水性液体における溶液または懸濁液として存在し得るか；または水中油型もしくは油中水型の液体エマルジョンとして存在し得るか；またはエリキシル剤もしくはシロップ剤などとして存在し得；それらの各々は、所定の量の本開示の化合物を活性成分として含んでいる。
【０１５１】
固形剤形（すなわち、カプセル剤、錠剤、丸剤など）での経口投与が意図されているとき、本開示の薬学的組成物は、通常、活性な作用物質および１つまたはそれを超える薬学的に許容され得るキャリアを含む。必要に応じて、そのような固形剤形は、充填剤または増量剤（例えば、デンプン、微結晶性セルロース、ラクトース、リン酸二カルシウム、スクロース、グルコース、マンニトールおよび／またはケイ酸）；結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアカシア）；保湿剤（例えば、グリセロール）；崩壊剤（例えば、クロスカルメロース（ｃｒｏｓｓｃａｒｍｅｌｌｏｓｅ）ナトリウム、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定のシリケートおよび／または炭酸ナトリウム）；溶解遅延剤（例えば、パラフィン）；吸収促進剤（例えば、四級アンモニウム化合物）；湿潤剤（例えば、セチルアルコールおよび／またはモノステアリン酸グリセロール）；吸収剤（例えば、カオリンおよび／またはベントナイト粘土）；滑沢剤（例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよび／またはそれらの混合物）；着色剤；および緩衝剤を含み得る。
【０１５２】
離型剤、湿潤剤、コーティング剤、甘味料、香味料および香料、保存剤ならびに酸化防止剤も、本開示の薬学的組成物に存在し得る。薬学的に許容され得る酸化防止剤の例としては、水溶性の酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど）；油溶性の酸化防止剤（例えば、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ−トコフェロールなど）；および金属キレート剤（例えば、クエン酸、エチレンジアミン四酢酸、ソルビトール、酒石酸、リン酸など）が挙げられる。錠剤、カプセル剤、丸剤などのためのコーティング剤としては、腸溶コーティングのために使用されるもの（例えば、セルロースアセテートフタレート、ポリビニルアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸、メタクリル酸エステル共重合体、セルロースアセテートトリメリテート、カルボキシメチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネートなど）が挙げられる。
【０１５３】
本開示の薬学的組成物はまた、例えば、様々な比率でヒドロキシプロピルメチルセルロース；または他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／もしくはミクロスフェアを用いて、活性な作用物質の持続放出または制御放出を提供するように製剤化され得る。さらに、本開示の薬学的組成物は、必要に応じて不透明化剤を含んでもよく、消化管のある特定の部分において、必要に応じて遅延様式で、活性成分だけを放出するようにまたは活性成分を優先的に放出するように製剤化され得る。使用され得る包埋組成物の例としては、ポリマー物質およびろうが挙げられる。活性な作用物質は、適切な場合、上に記載された賦形剤の１つまたはそれ超とともに、マイクロカプセル化された形態でも存在し得る。
【０１５４】
経口投与に好適な液体剤形としては、例証として、薬学的に許容され得るエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤が挙げられる。液体剤形は、代表的には、活性な作用物質および不活性な希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実油、落花生油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、オレイン酸、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物を含む。あるいは、ある特定の液体製剤は、例えば噴霧乾燥によって、粉末に変換され得、その粉末は、従来の手順によって固形剤形を調製するために使用される。
【０１５５】
懸濁剤は、活性成分に加えて、懸濁化剤、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガント、ならびにそれらの混合物を含み得る。
【０１５６】
本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩は、非経口的に（例えば、静脈内、皮下、筋肉内または腹腔内注射によって）も投与され得る。非経口投与の場合、活性な作用物質は、代表的には、非経口投与に好適なビヒクルと混合され、そのビヒクルの例としては、滅菌水溶液、食塩水、低分子量アルコール、例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、ゼラチン、脂肪酸エステル、例えば、オレイン酸エチルなどが挙げられる。非経口製剤は、１つまたはそれを超える酸化防止剤、可溶化剤、安定剤、保存剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝剤または分散剤も含み得る。これらの製剤は、滅菌された注射可能な媒質、滅菌剤の使用、濾過、照射または加熱によって、滅菌され得る。
【０１５７】
あるいは、本開示の薬学的組成物は、吸入による投与のために製剤化される。吸入による投与に好適な薬学的組成物は、代表的には、エアロゾルまたは粉末の形態であり得る。そのような組成物は、一般に、周知の送達デバイス（例えば、定量吸入器、乾燥粉末吸入器、噴霧器または同様の送達デバイス）を用いて投与される。
【０１５８】
加圧容器を用いて吸入によって投与されるとき、本開示の薬学的組成物は、代表的には、活性成分および好適な噴射剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の好適なガス）を含み得る。さらに、薬学的組成物は、本開示の化合物および粉末吸入器での使用に適した粉末を含むカプセルまたはカートリッジ（例えばゼラチンでできたもの）の形態であり得る。好適な粉末基剤の例としては、ラクトースまたはデンプンが挙げられる。
【０１５９】
本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩は、皮膚への局所投与のために軟膏またはクリームとしても製剤化され得る。軟膏製剤は、代表的には透明の油性または脂肪性の材料の基剤を有する半固体の調製物である。軟膏製剤において使用するめに適した油性材料としては、ペトロラタム（ペトロレアムゼリー）、蜜ろう、カカオバター、シアバターおよびセチルアルコールが挙げられる。軟膏は、所望であれば、必要に応じてさらに軟化薬および浸透促進剤を含んでもよい。
【０１６０】
クリーム製剤は、代表的には精製水を含む、油相および水相を含むエマルジョンとして調製され得る。クリーム製剤の構成要素としては、油性基剤（例えば、ペトロラタム（ｐｅｔｒｏｌａｔｒｕｍ）、鉱油、植物油および動物油ならびにトリグリセリド）；クリーム基剤（例えば、ラノリンアルコール、ステアリン酸およびセトステアリルアルコール）；ゲル基剤（例えば、ポリビニルアルコール）；溶媒（例えば、プロピレングリコールおよびポリエチレングリコール）；乳化剤（例えば、ポリソルベート、ステアレート（例えば、ステアリン酸グリセリル、ヒドロキシステアリン酸オクチル（ｏｃｔｙｌｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅａｒａｔｅ）、ステアリン酸ポリオキシル、ＰＥＧステアリルエーテル、パルミチン酸イソプロピルおよびモノステアリン酸ソルビタン））；安定剤（例えば、多糖および亜硫酸ナトリウム）；軟化薬（すなわち、保湿剤（例えば、中鎖トリグリセリド、ミリスチン酸イソプロピルおよびジメチコーン））；硬化剤（例えば、セチルアルコールおよびステアリルアルコール）；抗菌剤（例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン、フェノキシエタノール、ソルビン酸、ジアゾリジニル尿素およびブチル化ヒドロキシアニソール）；浸透促進剤（例えば、Ｎ−メチルピロリドン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールモノラウレートなど）；およびキレート剤（例えば、エデト酸二ナトリウム）が挙げられ得る。
【０１６１】
以下の非限定的な例は、本発明の代表的な薬学的組成物を例証する。
【０１６２】
錠剤経口固形剤形
本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩は、例えば、錠剤１つあたり５ｍｇ、２０ｍｇまたは４０ｍｇの活性な作用物質という単位投与量が提供されるように、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドンおよびクロスカルメロースナトリウムと４：５：１：１の比で乾式混合され、錠剤に圧縮される。
【０１６３】
カプセル経口固形剤形
本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩は、例えば、カプセル１つあたり５ｍｇ、２０ｍｇまたは４０ｍｇの活性な作用物質という単位投与量が提供されるように、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドンおよびクロスカルメロースナトリウムと４：５：１：１の比で湿式造粒によって混和され、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースのカプセルに充填される。
【０１６４】
液体製剤
本開示の化合物（０．１％）、水（９８．９％）およびアスコルビン酸（１．０％）を含む液体製剤が、本開示の化合物を水とアスコルビン酸との混合物に加えることによって形成される。
【０１６５】
腸溶コーティングされた経口剤形
本開示の化合物を、ポリビニルピロリドンを含む水溶液に溶解し、１：５ｗ／ｗという活性な作用物質：ビーズの比で微結晶性セルロース上または糖のビーズ上にスプレーコーティングし、次いで、アクリル共重合体、例えば、商品名Ｅｕｄｒａｇｉｔ−Ｌ（登録商標）およびＥｕｄｒａｇｉｔ−Ｓ（登録商標）として入手可能なアクリル共重合体の組み合わせまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネートを含む腸溶コーティングのおよそ５％重量増加を適用する。腸溶コーティングされたビーズを、例えば、カプセル１つあたり３０ｍｇの活性な作用物質という単位投与量が提供されるように、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースのカプセルの中に充填する。
【０１６６】
腸溶コーティングされた経口剤形
Ｅｕｄｒａｇｉｔ−Ｌ（登録商標）とＥｕｄｒａｇｉｔ−Ｓ（登録商標）との組み合わせまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネートを含む腸溶コーティングを、上に記載された錠剤経口剤形またはカプセル経口剤形に適用する。
【０１６７】
局所投与用の軟膏製剤
本開示の化合物は、重量基準で０．０５％〜５％の活性な作用物質を含む組成物が提供されるように、ペトロラタム、Ｃ８−Ｃ１０トリグリセリド、ヒドロキシステアリン酸オクチルおよびＮ−メチルピロリドンと、ある比で混和される。
【０１６８】
局所投与用の軟膏製剤
本開示の化合物は、重量基準で０．０５％〜５％の活性な作用物質を含む組成物が提供されるように、白色ワセリン、プロピレングリコール、モノ−およびジ−グリセリド、パラフィン、ブチル化ヒドロキシトルエンおよびエデト酸カルシウム二ナトリウムと、ある比で混和される。
【０１６９】
局所投与用の軟膏製剤
本開示の化合物は、重量基準で０．０５％〜５％の活性な作用物質を含む組成物が提供されるように、鉱油、パラフィン、炭酸プロピレン、白色ワセリンおよび白ろうと混和される。
【０１７０】
局所投与用のクリーム製剤
鉱油が、本開示の化合物、プロピレングリコール、パルミチン酸イソプロピル、ポリソルベート６０、セチルアルコール、モノステアリン酸ソルビタン、ステアリン酸ポリオキシル４０、ソルビン酸、メチルパラベンおよびプロピルパラベンと混和されて、油相が形成され、それが、重量基準で０．０５％〜５％の活性な作用物質を含む組成物が提供されるように、剪断混合（ｓｈｅａｒ  ｂｌｅｎｄｉｎｇ）によって精製水と混和される。
【０１７１】
局所投与用のクリーム製剤
本開示の化合物、ベンジルアルコール、セチルアルコール、無水クエン酸、モノグリセリドおよびジグリセリド、オレイルアルコール、プロピレングリコール、硫酸セトステアリルナトリウム、水酸化ナトリウム、ステアリルアルコール、トリグリセリドならびに水を含むクリーム製剤は、重量基準で０．０５％〜５％の活性な作用物質を含む。
【０１７２】
局所投与用のクリーム製剤
本開示の化合物、セトステアリルアルコール、ミリスチン酸イソプロピル、プロピレングリコール、セトマクロゴール１０００、ジメチコーン３６０、クエン酸、クエン酸ナトリウムおよび精製水を、保存剤としてイミド尿素、メチルパラベンおよびプロピルパラベンとともに含むクリーム製剤は、重量基準で０．０５％〜５％の活性な作用物質を含む。
【０１７３】
有用性
ＪＡＫ３が阻害されると、多くの重要な炎症促進性サイトカインのシグナル伝達が阻害される。したがって、本開示の化合物は、炎症性疾患の処置において有用であると予想される。
【０１７４】
本開示の化合物は、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＴＹＫ２よりもＪＡＫ３に選択性を示すように設計されている。ＪＡＫ３の選択により、粘膜治癒に関与しているＩＬ−１０、粘液バリア保護および上皮再生に関与するＩＬ−２２、ならびに腸上皮細胞の増殖に関与するＩＬ−６などの潜在的に有益なサイトカインを節約可能であるというエビデンスがいくつか存在するので、ＪＡＫ１よりもＪＡＫ３に選択性を示すことは有益であると予測される。ＪＡＫ２よりもＪＡＫ３を選択することにより、エリスロポエチン（ＥＰＯ）およびトロンボポエチン（ＴＰＯ）のシグナル伝達を節約可能である。
【０１７５】
この理論に制限されないが、本開示の化合物は、ＪＡＫ３中に存在するシステイン（Ｃｙｓ９０９）（他の３つのＪＡＫイソ型中においてセリンに置換される残基）と共有結合を形成し得る求電子性部分を保有する（Ｇｏｅｄｋｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．，２０１５，２９０，８，４５７３−８９）。かかるＪＡＫ３への共有結合は、有効性をより高くすることができる広範囲の標的結合が得られるので有益であり得る。実験の部に記載のように、ヒトＪＡＫ３に共有結合した化合物１、３、および４の共結晶構造が得られており、これらの各リガンドのＪＡＫ３への不可逆的結合性が確認されている。
【０１７６】
本開示のいくつかの化合物は、著しい全身作用を起こさずに作用部位に効果があり、それにより、潜在的に有害な全身性の免疫抑制作用が回避されるようにデザインされている。
【０１７７】
胃腸炎症性疾患
本開示のいくつかの化合物は、ＪＡＫ３の強力な阻害を提供することに加えて、全身曝露が最小となるようにあまり吸収されないようにデザインされている。これらの化合物は、作用部位、例えば、結腸において効果を及ぼすようにデザインされている。アッセイ６に記載されるように、一定の化合物は、約５×１０−６ｃｍ／秒未満のＫｐ値で透過性が低く、この値は全身曝露を最小にして結腸を標的にするのに好ましいと考えられる。一定の化合物は、Ｋｐ値は約１０×１０−６ｃｍ／秒未満であり、この値も、全身曝露を最小にして結腸を標的にするのに十分であり得る。下記のアッセイ７に記載されるように、化合物１、２、３、４、６、７、８、２１、および２２は、経口投与されたとき、約１２５０を超える、結腸における曝露と血漿における曝露との比を示した。化合物９、５、１９、および２０は、約２００を超える結腸対血漿比を示した。
【０１７８】
オキサゾロン誘発大腸炎は、ヒト潰瘍性大腸炎と組織学的類似点を有する実験モデルである。アッセイ８に記載されるように、化合物１、２、３、４、５、６、７、８、３〜１１、５〜１０、１９、１５〜１、３〜５５、３〜３４、１５〜３、２１、３〜８０、３〜８１、３〜７２、３〜５７、３〜１１３、および３〜７４は、マウスのオキサゾロン誘発大腸炎モデルにおいて活性を示した。さらに、アッセイ９（全身性の機能活性を探索するマウスの免疫抑制モデル）において試験されたとき、脾臓ＮＫ細胞数は、オキサゾロンモデルにおいて有効性を示すために必要とされた用量と同一またはより高い用量の化合物１、２、４、５、および８の影響を受けなかった。
【０１７９】
最後に、化合物１、２、３、４、５、６、７、および８は、胸腺におけるＩＬ−２誘発性ｐＳＴＡＴ５誘発のマウスモデルにおいて全身活性を欠くことを示した。
【０１８０】
したがって、これらの化合物は、前臨床モデルにおいて、全身作用を示さずに抗大腸炎（ａｎｔｉ−ｃｏｌｉｔｉｃ）活性を示した。
【０１８１】
高い結腸対血漿比は、全身性に引き起こされる関連の有害作用なしに、管腔に引き起こされる（ｌｕｍｉｎａｌｌｙ−ｄｒｉｖｅｎ）ロバストな抗炎症活性を提供することが予想される。このような化合物は、種々の胃腸炎症性適応症に有用であり得、それらの適応症としては、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎（直腸Ｓ状結腸炎、汎大腸炎、潰瘍性直腸炎および左側大腸炎）、クローン病、コラーゲン蓄積大腸炎、リンパ球性大腸炎、ベーチェット病、セリアック病、免疫チェックポイント阻害剤によって誘発される大腸炎、回腸炎、好酸球性食道炎、移植片対宿主病関連大腸炎および感染性大腸炎が挙げられるが、これらに限定されない。潰瘍性大腸炎（Ｒｅｉｍｕｎｄら、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１９９６，１６，１４４−１５０）、クローン病（Ｗｏｙｗｏｄｔら、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，１９９９，１１，２６７−２７６）、コラーゲン蓄積大腸炎（Ｋｕｍａｗａｔら、Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０１３，５５，３５５−３６４）、リンパ球性大腸炎（Ｋｕｍａｗａｔら、２０１３）、好酸球性食道炎（Ｗｅｉｎｂｒａｎｄ−Ｇｏｉｃｈｂｅｒｇら、Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｓ，２０１３，５６，２４９−２６０）、移植片対宿主病関連大腸炎（Ｃｏｇｈｉｌｌら、Ｂｌｏｏｄ，２００１，１１７，３２６８−３２７６）、感染性大腸炎（Ｓｔａｌｌｍａｃｈら、Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  Ｄｉｓ，２００４，１９，３０８−３１５）、ベーチェット病（Ｚｈｏｕら、Ａｕｔｏｉｍｍｕｎ  Ｒｅｖ，２０１２，１１，６９９−７０４）、セリアック病（ｄｅ  Ｎｉｔｔｏら、Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２００９，１５，４６０９−４６１４）、免疫チェックポイント阻害剤によって誘発される大腸炎（例えば、ＣＴＬＡ−４阻害剤によって誘発される大腸炎；（Ｙａｎｏら、Ｊ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ  Ｍｅｄ，２０１４，１２，１９１）ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１阻害剤によって誘発される大腸炎）および回腸炎（Ｙａｍａｍｏｔｏら、Ｄｉｇ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓ，２００８，４０，２５３−２５９）は、ある特定の炎症促進性サイトカインのレベルの上昇を特徴とする。多くの炎症促進性サイトカインが、ＪＡＫの活性化を介してシグナル伝達するので、本願に記載される化合物は、炎症を軽減することおよび症候の軽減を提供することができ得る。
【０１８２】
特に、本開示の化合物は、潰瘍性大腸炎の緩解の誘導および維持、ならびにクローン病、免疫チェックポイント阻害剤によって誘発される大腸炎および移植片対宿主病における胃腸の有害作用の処置に有用であり得る。
【０１８３】
ゆえに、１つの態様において、本発明は、哺乳動物（例えば、ヒト）の胃腸炎症性疾患を処置する方法であって、その方法が、本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩または薬学的に許容され得るキャリアおよび本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩を含む薬学的組成物をその哺乳動物に投与する工程を含む、方法を提供する。
【０１８４】
本発明はさらに、哺乳動物の潰瘍性大腸炎を処置する方法であって、その方法が、本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩または薬学的に許容され得るキャリアおよび本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩を含む薬学的組成物をその哺乳動物に投与する工程を含む、方法を提供する。
【０１８５】
本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩は、潰瘍性大腸炎を処置するために使用されるとき、通常、１日１回または１日あたり複数回で経口的に投与され得るが、他の投与形態を使用してもよい。１回に投与される活性な作用物質の量または１日あたりに投与される総量は、通常、処置される症状、選択される投与経路、投与される実際の化合物およびその相対的な活性、個別の患者の年齢、体重および反応、患者の症候の重症度などを含む関連する状況に照らして、医師によって決定される。
【０１８６】
潰瘍性大腸炎および他の胃腸炎症性障害の処置に好適な用量は、平均的な７０ｋｇのヒトの場合、約５〜約３００ｍｇ／日および約２０〜約７０ｍｇ／日という活性な作用物質を含む、約１〜約４００ｍｇ／日という活性な作用物質の範囲であると予想される。
【０１８７】
併用療法
本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩はまた、胃腸炎症性障害の処置をもたらすために、同じ機序または異なる機序によって作用する１つまたはそれを超える作用物質と併用して使用され得る。異なる作用物質を、逐次または同時に投与することができる（別個の組成物中または同一の組成物中）。併用療法に有用な作用物質のクラスとしては、アミノサリチレート、ステロイド、全身免疫抑制剤、抗ＴＮＦα抗体、ＴＮＦαリガンド阻害剤、ＴＮＦ結合剤、抗ＶＬＡ−４抗体、抗インテグリンα４β７抗体、抗菌薬、糖質コルチコイドアゴニスト、核性因子κＢ阻害剤、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、インテグリンα−４／β−７アンタゴニスト、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、ＩＬ−２３アンタゴニスト、ロイコトリエンＢＬＴレセプターアンタゴニスト、ＩＬ−６アンタゴニスト、ＩＬ−８アンタゴニスト、インテグリンアンタゴニスト、ニコチン性アセチルコリンレセプターアゴニスト、ＰＰＡＲγアゴニスト、スフィンゴシン−１−リン酸レセプター−１修飾薬、Ｂ−リンパ球抗原ＣＤ２０阻害剤、カルシニューリン阻害剤、ＣＤ３アンタゴニスト、細胞接着分子阻害剤、好酸球ペルオキシダーゼ阻害剤、ヘパリンアゴニスト、ＩＣＡＭ１遺伝子阻害剤、ＩＬ−１３アンタゴニスト、ＩＬ−２レセプターαサブユニット阻害剤、インスリン抵抗性改善薬、インターフェロンβリガンド、インターフェロンγレセプターアンタゴニスト、インターロイキン−１βリガンド修飾薬、ＭＡｄＣＡＭ阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、スフィンゴシン−１−リン酸レセプター−１アゴニスト、ＴＬＲ−９アゴニスト、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、ＡＣＴＨレセプターアゴニスト、アクチビンレセプターアンタゴニスト、ＣＣＲ５ケモカインアンタゴニスト、ＣＣＲ９ケモカインアンタゴニスト、および下痢止め薬が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８８】
本ＪＡＫ阻害剤化合物と併用して使用され得るアミノサリチレートとしては、メサラミン、オルサラジン（ｏｓａｌａｚｉｎｅ）およびスルファサラジンが挙げられるが、これらに限定されない。ステロイドの例としては、プレドニゾン、プレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、ブデソニド（ｂｕｄｅｓｏｎｉｄｅ）、ベクロメタゾンおよびフルチカゾンが挙げられるが、これらに限定されない。炎症性障害の処置に有用な全身免疫抑制剤としては、シクロスポリン、アザチオプリン、メトトレキサート、６−メルカプトプリンおよびタクロリムスが挙げられるが、これらに限定されない。さらに、インフリキシマブ、アダリムマブ、ゴリムマブ（ｇｏｌｉｍｕｍａｂ）およびセルトリズマブを含むがこれらに限定されない抗ＴＮＦα抗体も、併用療法において使用され得る。他の機序によって作用する有用な化合物としては、抗ＶＬＡ−４抗体（例えば、ナタリズマブ）、抗インテグリンα４β７抗体（例えば、ベドリズマブ）、抗菌薬（例えば、リファキシミン）および止痢薬（例えば、ロペラミド）が挙げられる。（Ｍｏｚａｆｆａｒｉら、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．２０１４，１４，５８３−６００；Ｄａｎｅｓｅ，Ｇｕｔ，２０１２，６１，９１８−９３２；Ｌａｍら、Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ，２０１４，６，９６３−９７１．）
【０１８９】
本ＪＡＫ阻害剤化合物と併用して使用され得る他の化合物としては、オパガニブ、アバタセプト、モンゲルセン、フィルゴチニブ、ＬＹＣ−３０９３７、ＢＩ−６５５１３０、ミリキズマブ、アダリムマブ、タクロリムス、リツキシマブ、ＧＳＫ−２９８２７７２、アンデカリキシマブ、ナルトレキソン、リサンキズマブ、ＱＢＥＣＯ、アリカホルセン、エトロリズマブ、ホラルマブ、オクレリズマブ、ベドリズマブ、アミセリモド、オザニモド、ドルカナチド、カトリデカコグ、ブデソニド、ＳＴＮＭ−０１、カンナビジオール、テロトリスタットエチプラート、ＳＨＰ−６４７、カロテグラストメチル、ペギロデカリン（ｐｅｇ−ｉｌｏｄｅｃａｋｉｎ）、ＴＯＰ−１２８８、イベロガストＮ、ＰＦ−０６４８０６０５、ペフィシチニブ、ベクロメタゾン、組換えインターフェロンβ−１ａ、インフリキシマブ、ゴリムマブ、トラロキヌマブ、ウステキヌマブ、セルトリズマブペゴール、サリドマイド、ウパダシチニブ、アプレミラスト、ナタリズマブ、インターフェロンβ−１ａ、リファキシミン、ＲＢＸ−２６６０、エトラシモド、ジロートン、フィンゴリモド、コビトリモド、ロピバカイン、ＡＢＸ−４６４、ＰＦ−０６７００８４１、プレドニゾロン、ＧＬＰＧ−０９７４、バルガンシクロビル、シクロスポリン、ＶＢ−２０１、ツリネルセプト、ＭＤＧＮ−００２、ＰＴＧ−１００、デキサメタゾン、ＧＥＤ−０５０７−３４−Ｌｅｖｏ、ベルチリムマブ、ブラジクマブ、ＫＨＫ−４０８３、ロシグリタゾン、モクラビモド、ソトラスタウリン、ＫＡＧ−３０８、ＰＵＲ−０１１０、Ｅ−６００７、バルサラジド、バシリキシマブ、ＬＰ−０２、ＡＳＰ−３２９１、豚鞭虫卵、Ｋ（Ｄ）ＰＴ、ミジスマーゼ、ＤＮＶＸ−０７８、バテリズマブ、アレクエル、低分子量ヘパリン、メテンケファリン、トリデカクチド、ＨＭＰＬ−００４、ＳＢ−０１２、オルサラジン、バルサラジド、プロピオニル−Ｌ−カルニチン、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ、ベクロメタゾン、およびアセマンナンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１９０】
ゆえに、別の態様では、本発明は、胃腸炎症性障害の処置において使用するための治療的組み合わせを提供し、その組み合わせは、本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩および上記で例示されているものなどの胃腸炎症性障害の処置に有用な１つまたはそれを超える他の治療剤を含む。例えば、本発明は、本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩、ならびにアミノサリチレート、ステロイド、全身免疫抑制剤、抗ＴＮＦα抗体、抗ＶＬＡ−４抗体、抗インテグリンα４β７抗体、抗菌薬および止痢薬から選択される１つまたはそれを超える作用物質を含む組み合わせを提供する。第２の作用物質（単数または複数）は、含められるとき、治療有効量で、すなわち、本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩と共投与されたときに治療的に有益な効果をもたらす任意の量で存在する。
【０１９１】
ゆえに、本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩、あるいはその結晶形態および胃腸炎症性障害の処置に有用な１つまたはそれを超える他の治療剤を含む薬学的組成物も提供される。
【０１９２】
さらに、方法の態様において、本発明は、胃腸炎症性障害を処置する方法であって、その方法が、本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩、あるいはその結晶形態および胃腸炎症性障害の処置に有用な１つまたはそれを超える他の治療剤を哺乳動物に投与する工程を含む、方法を提供する。
【０１９３】
それらの作用物質は、併用療法において使用されるとき、上に開示されたような単一の薬学的組成物として製剤化されてもよいし、それらの作用物質は、同時にまたは別々の時点において同じまたは異なる投与経路によって投与される別個の組成物として提供されてもよい。それらの作用物質は、別々に投与されるとき、所望の治療効果が提供されるように十分に近い時点において投与される。そのような組成物は、別々に包装されてもよいし、キットとして一緒に包装されてもよい。キットの中の２つまたはそれを超える治療剤は、同じ投与経路によって投与されてもよいし、異なる投与経路によって投与されてもよい。
【０１９４】
炎症性皮膚疾患
アトピー性皮膚炎及び他の炎症性皮膚疾患は、ＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路に依存する炎症促進性サイトカインの増加に関連している。したがって、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態は、いくつかの皮膚炎症性症状または皮膚そう痒性症状（アトピー性皮膚炎、円形脱毛症、白斑、乾癬、皮膚筋炎、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（Ｎｅｔｃｈｉｐｏｒｏｕｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ．２０１４；１３，３３３１−３３３５）およびサブタイプ（セザリー症候群、菌状息肉症、パジェット様細網症、肉芽腫様弛緩皮膚、リンパ腫様丘疹症、慢性苔癬状粃糠疹、急性苔癬状痘瘡状粃糠疹、ＣＤ３０＋皮膚Ｔ細胞リンパ腫、続発性皮膚ＣＤ３０陽性大細胞リンパ腫、非菌状息肉症ＣＤ３０陰性皮膚大Ｔ細胞リンパ腫、多形性Ｔ細胞リンパ腫、レナートリンパ腫、皮下Ｔ細胞リンパ腫、血管中心性リンパ腫、芽球型ＮＫ細胞リンパ腫）、結節性痒疹、扁平苔癬、原発性限局性皮膚アミロイドーシス、水疱性類天疱瘡、移植片対宿主病の皮膚発現、類天疱瘡、円板状狼瘡、環状肉芽腫、慢性単純性苔癬、外陰部／陰嚢／肛門周囲のそう痒、硬化性苔癬、帯状疱疹後神経痛かゆみ、毛孔性扁平苔癬、脱毛性毛包炎（ｆｏｌｉｃｕｌｉｔｉｓ  ｄｅｃａｌｖａｎｓ）が挙げられるが、これらに限定されない）において有益であり得る。特に、アトピー性皮膚炎（Ｂａｏら、ＪＡＫ−ＳＴＡＴ，２０１３，２，ｅ２４１３７）、円形脱毛症（Ｘｉｎｇら、Ｎａｔ  Ｍｅｄ．２０１４，２０，１０４３−１０４９）、白斑（Ｃｒａｉｇｌｏｗら、ＪＡＭＡ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２０１５，１５１，１１１０−１１１２）、結節性痒疹（Ｓｏｎｋｏｌｙら、Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００６，１１７，４１１−４１７）、扁平苔癬（Ｗｅｌｚ−Ｋｕｂｉａｋら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｓ．２０１５，ＩＤ：８５４７４７）、原発性限局性皮膚アミロイドーシス（Ｔａｎａｋａら、Ｂｒ  Ｊ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２００９，１６１，１２１７−１２２４）、水疱性類天疱瘡（Ｆｅｌｉｃｉａｎｉら、Ｉｎｔ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９９，１２，５５−６１）および移植片対宿主病の皮膚発現（Ｏｋｉｙａｍａら、Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２０１４，１３４，９９２−１０００）は、ＪＡＫの活性化を介してシグナル伝達するある特定のサイトカインの増加を特徴とする。したがって、本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩、あるいはその結晶形態は、これらのサイトカインによって引き起こされる関連する皮膚の炎症またはそう痒症を軽減することができ得る。特に、本開示の化合物または薬学的に許容され得るその塩、あるいはその結晶形態は、アトピー性皮膚炎および他の炎症性皮膚疾患の処置に有用であると予想され得る。
【０１９５】
したがって、１つの態様において、本発明は、哺乳動物（例えば、ヒト）の炎症性皮膚疾患を処置する方法であって、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態、および薬学的キャリアを含む薬学的組成物を哺乳動物の皮膚に塗布する工程を含む方法を提供する。１つの態様において、炎症性皮膚疾患は、アトピー性皮膚炎である。
【０１９６】
本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態は、炎症性皮膚疾患を処置するのに有用な１または複数の化合物と併用しても使用され得る。いくつかの実施形態では、１または複数の化合物は、ステロイド、ヒスタミンＨ１レセプターアンタゴニスト、カルシニューリン阻害剤、ＩＬ−１３アンタゴニスト、ＰＤＥ４阻害剤、Ｇタンパク質共役レセプター−４４アンタゴニスト、ＩＬ−４アンタゴニスト、５−ＨＴ１ａレセプターアンタゴニスト、５−ＨＴ２ｂレセプターアンタゴニスト、α２アドレノセプターアゴニスト、カンナビノイドＣＢ１レセプターアンタゴニスト、ＣＣＲ３ケモカインアンタゴニスト、コラゲナーゼ阻害剤、細胞質型ホスホリパーゼＡ２阻害剤、エオタキシンリガンド阻害剤、ＧＡＴＡ３転写因子阻害剤、ヒスタミンＨ４レセプターアンタゴニスト、ＩＬ−１０アンタゴニスト、ＩＬ−１２アンタゴニスト、ＩＬ−１７アンタゴニスト、ＩＬ−２アンタゴニスト、ＩＬ−２３アンタゴニスト、ＩＬ−４レセプター修飾薬、ＩＬ−５アンタゴニスト、免疫グロブリンＥアンタゴニスト、免疫グロブリンＥ修飾薬、インターフェロンγレセプターアンタゴニスト、インターロイキン３３リガンド阻害剤、インターロイキン−３１レセプターアンタゴニスト、ロイコトリエンアンタゴニスト、肝臓Ｘレセプターアゴニスト、肝臓Ｘレセプターβアゴニスト、核性因子κＢ阻害剤、ＯＸ−４０レセプターアンタゴニスト、ＰＧＤ２アンタゴニスト、ホスホリパーゼＡ２阻害剤、ＳＨ２ドメインイノシトールホスファターゼ１刺激物質、胸腺間質リンホプロテインリガンド阻害剤、ＴＬＲ修飾薬、ＴＮＦαリガンド修飾薬、またはバニロイドＶＲ１アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、１または複数の化合物は、グラム陽性菌抗生物質（ムピロシンまたはフシジン酸など）である。  いくつかの実施形態では、１または複数の化合物は、トラニラスト、タクロリムス、エピナスチン、ＳＢ−０１１、ＡＭ−１０３０、ＺＰＬ−５２１、ＭＭ−３６、ＦＢ−８２５、ＰＧ−１０２、ビロメド、ＧＢＲ−８３０、ＡＶＸ−００１、ＡＭＧ−０１０１、Ｅ−６００５、ＤＭＴ−２１０、ＡＸ−１６０２、ベルチリムマブ、酢酸ロシプター、Ｑ−３０１、ＡＮＢ−０２０、ＶＴＰ−３８５４３、ＺＰＬ−３８９、レブリキズマブ、テゼペルマブ、フェノキソフェナジン、ピメクロリムス、ベポタスチン、クリサボロール、トラロキヌマブ、フェビピプラント、ドキシサイクリン、デスロラタジン、ＡＬＸ−１０１、ネモリズマブ、アシバトレプ、シクロスポリン、メポリズマブ、デュピルマブ、セクキヌマブ、チマピプラント、またはウステキヌマブである。
【０１９７】
したがって、１つの態様において、本発明は、哺乳動物の炎症性皮膚疾患を処置する方法であって、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態、およびグラム陽性菌抗生物質を哺乳動物の皮膚に塗布する工程を含む方法を提供する。別の態様において、本発明は、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態、グラム陽性菌抗生物質、および薬学的に許容され得るキャリアを含む薬学的組成物を提供する。
【０１９８】
呼吸器疾患
ＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路を通じてシグナル伝達するサイトカイン、特に、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１３、ＩＬ−２３、ＩＬ−３１、ＩＬ−２７、胸腺間質リンホポエチン（ＴＳＬＰ）、インターフェロン−γ（ＩＦＮγ）、および顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）は、喘息性炎症および他の炎症性呼吸器疾患にも関与している。上記のように、本開示の化合物は、ＪＡＫ３の強力な阻害剤であることが示されており、細胞アッセイにおいてＩＬ−２炎症促進性サイトカインの強力な阻害も実証されている。
【０１９９】
喘息の前臨床モデルにおいて、ＪＡＫ阻害剤の抗炎症活性が確実に実証されている（Ｍａｌａｖｉｙａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１０，１０，８２９，−８３６；Ｍａｔｓｕｎａｇａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ，２０１１，４０４，２６１−２６７；Ｋｕｄｌａｃｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００８，５８２，１５４−１６１）。したがって、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態は、喘息などの炎症性呼吸器障害の処置に有用であり得る。肺の炎症および線維症は、喘息に加えて他の呼吸器疾患（慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、嚢胞性線維症（ＣＦ）、肺臓炎、間質性肺疾患（特発性肺線維症が含まれる）、急性肺損傷、急性呼吸窮迫症候群、気管支炎、気腫、および閉塞性細気管支炎など）に特徴的である。したがって、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩は、慢性閉塞性肺疾患、嚢胞性線維症、肺臓炎、間質性肺疾患（特発性肺線維症が含まれる）、急性肺損傷、急性呼吸窮迫症候群、気管支炎、気腫、閉塞性細気管支炎、閉塞性細気管支炎性器質化肺炎（ＣＯＳとも呼ばれる）、原発性移植片機能不全（ＰＧＤ）、器質化肺炎（ＯＰ）、急性拒絶（ＡＲ）、リンパ球性細気管支炎（ＬＢ）、慢性移植肺機能不全（ＣＬＡＤ）、拘束型ＣＬＡＤ（ｒＣＬＡＤまたはＲＡＳ）、好中球性同種移植片機能不全、およびサルコイドーシスの処置に有用であり得る。
【０２００】
したがって、１つの態様において、本開示は、哺乳動物（例えば、ヒト）の呼吸器疾患を処置する方法であって、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態を哺乳動物に投与する工程を含む、方法を提供する。
【０２０１】
１つの態様において、呼吸器疾患は、喘息、慢性閉塞性肺疾患、嚢胞性線維症、肺臓炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、嚢胞性線維症（ＣＦ）、肺臓炎、間質性肺疾患（特発性肺線維症が含まれる）、急性肺損傷、急性呼吸窮迫症候群、気管支炎、気腫、閉塞性細気管支炎、閉塞性細気管支炎性器質化肺炎（ＣＯＳとも呼ばれる）、原発性移植片機能不全（ＰＧＤ）、器質化肺炎（ＯＰ）、急性拒絶（ＡＲ）、リンパ球性細気管支炎（ＬＢ）、慢性移植肺機能不全（ＣＬＡＤ）、拘束型ＣＬＡＤ（ｒＣＬＡＤまたはＲＡＳ）、好中球性同種移植片機能不全、アレルギー性鼻炎、またはサルコイドーシスである。別の態様において、呼吸器疾患は、喘息または慢性閉塞性肺疾患である。
【０２０２】
１つのさらなる態様において、呼吸器疾患は、肺感染症、蠕虫感染症、肺動脈高血圧症、サルコイドーシス、リンパ管平滑筋腫、気管支拡張、または浸潤性肺疾患である。さらに別の態様において、呼吸器疾患は、薬剤誘起性肺臓炎、真菌誘起性肺臓炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、過敏性肺臓炎、好酸球性多発血管炎性肉芽腫症、特発性急性好酸球性肺炎、特発性慢性好酸球性肺炎、好酸球増加症候群、レフラー症候群、閉塞性細気管支炎性器質化肺炎、または免疫チェックポイント阻害剤誘起性肺臓炎である。
【０２０３】
本開示は、さらに、呼吸器疾患を処置する方法であって、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態および薬学的に許容され得るキャリアを含む薬学的組成物を哺乳動物に投与する工程を含む、方法を提供する。
【０２０４】
本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態はまた、呼吸器疾患に有用な１または複数の化合物と併用して使用され得る。
【０２０５】
眼疾患
多数の眼疾患が、ＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路に依存する炎症促進性サイトカインの上昇に関連することが示されている。
【０２０６】
したがって、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態は、いくつかの眼疾患（ブドウ膜炎、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、眼乾燥症、加齢性黄斑変性、網膜静脈閉塞（ＲＶＯ）、およびアトピー性角結膜炎が挙げられるが、これらに限定されない）の処置に有用であり得る。
【０２０７】
特に、ブドウ膜炎（Ｈｏｒａｉ  ａｎｄ  Ｃａｓｐｉ，Ｊ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ，２０１１，３１，７３３−７４４）、糖尿病性網膜症（Ａｂｃｏｕｗｅｒ，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１３，Ｓｕｐｐｌ  １，１−１２）、糖尿病性黄斑浮腫（Ｓｏｈｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｐｔｈａｍｏｌｏｇｙ，２０１１，１５２，６８６−６９４）、眼乾燥症（Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ａｒｃｈ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ，２０１２，１３０，９０−１００）、網膜静脈閉塞  （Ｓｈｃｈｕｋｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｉｎｄｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，２０１５，６３（１２），９０５−９１１）、および加齢性黄斑変性（Ｋｎｉｃｋｅｌｂｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｉｎｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｃｌｉｎ，２０１５，５５（３），６３−７８）は、ＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路を介してシグナル伝達する一定の炎症促進性サイトカインの上昇を特徴とする。したがって、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩は、関連する眼炎症を軽減し、疾患の進行を逆行させるか、症状を緩和することができ得る。
【０２０８】
したがって、１つの態様において、本開示は、哺乳動物の眼疾患を処置する方法であって、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態、および薬学的キャリアを含む薬学的組成物を哺乳動物の眼に投与する工程を含む、方法を提供する。１つの態様において、眼疾患は、ブドウ膜炎、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、眼乾燥症、加齢性黄斑変性、網膜静脈閉塞、またはアトピー性角結膜炎である。１つの態様において、本方法は、本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態を硝子体内注射によって投与する工程を含む。
【０２０９】
本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態はまた、眼疾患に有用な１または複数の化合物と併用して使用され得る。
【０２１０】
他の疾患
本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態はまた、他の炎症性疾患、自己免疫疾患、または癌などの他の疾患を処置するのに有用であり得る。
【０２１１】
本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくはその結晶形態は、関節炎、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、移植片拒絶、眼球乾燥、乾癬性関節炎、糖尿病、インスリン依存性糖尿病、運動ニューロン疾患、骨髄異形成症候群、疼痛、筋肉減少、悪液質、敗血症性ショック、全身性エリテマトーデス、白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、強直性脊椎炎、骨髄線維症、Ｂ細胞リンパ腫、肝細胞癌、ホジキン病、乳癌、多発性骨髄腫、黒色腫、非ホジキンリンパ腫、非小細胞肺癌、卵巣明細胞癌、卵巣腫瘍、膵臓腫瘍、真性赤血球増加症、シェーグレン症候群、軟部組織肉腫、肉腫、脾腫、Ｔ細胞リンパ腫、および重症型サラセミアのうちの１または複数の処置に有用であり得る。
【０２１２】
本開示の化合物は、以下の実施例に記載されるように、酵素結合アッセイにおいてＪＡＫ３酵素の強力な阻害剤であると実証され、ＪＡＫ３に対してＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＴＹＫ２を超える選択性を示し、細胞アッセイにおいてＪＡＫ３に強力な機能活性を有すると実証された。
【実施例】
【０２１３】
実施例
以下の合成および生物学の実施例は、本発明を例証するために提供されるのであって、決して本発明の範囲を限定すると解釈されるべきでない。下記の実施例では、以下の省略形は、別段示されない限り、以下の意味を有する。下記に定義されない省略形は、それらの一般に認められている意味を有する。
ＡＣＮ＝アセトニトリル
Ｃａｌｃｄ＝計算値
Ｂｏｃ＝ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ｄ＝日数
ＤＩＰＥＡ＝Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
ＥｔＯＨ＝エチルアルコール
ｈ＝時間
ＨＡＴＵ＝Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＩＰＡ＝イソプロピルアルコール
ＭｅＯＨ＝メタノール
ｍｉｎ＝分
ＲＴまたはｒｔ＝室温
ＳｉＧ＝シリカゲル
ＴＥＡ＝トリエチルアミン
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴＨＰ＝テトラヒドロピラン
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
【０２１４】
試薬および溶媒は、商業的供給業者（Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｆｌｕｋａ、Ｓｉｇｍａなど）から購入し、さらに精製せずに使用した。反応混合物の進行は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、分析用高速液体クロマトグラフィー（ａｎａｌ．ＨＰＬＣ）および質量分析法によってモニターした。反応混合物は、各反応において具体的に記載されるようにワークアップした；通常、それらは、抽出および他の精製方法（例えば、温度依存性および溶媒依存性の結晶化および沈殿）によって精製した。さらに、反応混合物は、代表的にはＣ１８またはＢＤＳカラムパッキングおよび従来の溶離剤を用いる、カラムクロマトグラフィーまたは分取ＨＰＬＣによって通例のように精製した。代表的な分取ＨＰＬＣ条件は、下記に記載される。
【０２１５】
反応生成物の特徴付けは、質量分析法および１Ｈ−ＮＭＲ分光法によって通例のように行った。ＮＭＲ解析の場合、サンプルを重水素化溶媒（例えば、ＣＤ３ＯＤ、ＣＤＣｌ３またはｄ６−ＤＭＳＯ）に溶解し、標準的な観測条件下でＶａｒｉａｎ  Ｇｅｍｉｎｉ  ２０００装置（４００ＭＨｚ）を用いて１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを取得した。化合物の質量分析同定は、自動精製システムに連結された、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）のモデルＡＰＩ  １５０  ＥＸ装置またはＷａｔｅｒｓ（Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）の３１００装置を用いるエレクトロスプレーイオン化法（ＥＳＭＳ）によって行った。
【０２１６】
別段示されない限り、以下の条件を分取ＨＰＬＣ精製のために使用した。
カラム：Ｃ１８、５μｍ  ２１．２×１５０ｍｍまたはＣ１８、５μｍ  ２１×２５０ｍｍまたはＣ１４  ５μｍ  ２１×１５０ｍｍ
カラム温度：室温
流速：２０．０ｍＬ／分
移動相：Ａ＝水＋０．０５％ＴＦＡ
Ｂ＝ＡＣＮ＋０．０５％ＴＦＡ、
注入体積：（１００〜１５００μＬ）
検出器の波長：２１４ｎｍ
【０２１７】
粗化合物を約５０ｍｇ／ｍＬで１：１水：酢酸に溶解した。４分間の分析スケールの試験ランを、２．１×５０ｍｍＣ１８カラムを用いて行った後、１５または２０分間の分取スケールのランを、分析スケールの試験ランの％Ｂ保持に基づくグラジエントを伴う１００μＬの注入を用いて行った。正確なグラジエントは、サンプル依存的であった。近くを流れる（ｃｌｏｓｅ  ｒｕｎｎｉｎｇ）不純物を含むサンプルは、最善の分離のために２１×２５０ｍｍ  Ｃ１８カラムおよび／または２１×１５０ｍｍ  Ｃ１４カラムを用いて調べた。所望の生成物を含む画分を質量分析によって特定した。
分析用ＨＰＬＣ条件
方法Ａ
カラム：ＬＵＮＡ  Ｃ１８（２）、１５０×４．６０ｍｍ、３μｍ
カラム温度：３７℃
流速：１．０ｍＬ／分
注入体積：５μＬ
サンプル調製：１：１ＡＣＮ：水に溶解
移動相：Ａ＝水：ＡＣＮ：ＴＦＡ（９８：２：０．０５）
Ｂ＝水：ＡＣＮ：ＴＦＡ（２：９８：０．０５）
検出器の波長：２５０ｎｍ
グラジエント：全３２分（時間（分）／％Ｂ）：０／２、１０／２０、２４／９０、２９／９０、３０／２、３２／２
方法Ｂ
カラム：ＬＵＮＡ  Ｃ１８（２）、１５０×４．６０ｍｍ、３μｍ
カラム温度：３７℃
流速：１．０ｍＬ／分
注入体積：１０μＬ
サンプル調製：１：１ＡＣＮ：水に溶解
移動相：Ａ＝水：ＡＣＮ：ＴＦＡ（９８：２：０．０５）
Ｂ＝水：ＡＣＮ：ＴＦＡ（１０：９０：０．０５）
検出器の波長：２５４ｎｍ
グラジエント：全３５分（時間（分）／％Ｂ）：０／２、２０／２５、２３／９０、２６／９０、２７／２、３５／２
【０２１８】
粉末Ｘ線回折パターンは、４５ｋＶの出力電圧および４０ｍＡの電流でＣｕ−Ｋα線（λ＝１．５４０５１Å）を使用するＢｒｕｋｅｒ  Ｄ８−Ａｄｖａｎｃｅ
Ｘ線回折計を用いて得た。この装置を、サンプルにおいて強度が最大となるように入射スリット、発散スリットおよび散乱スリットを設定したＢｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏジオメトリで作動した。計測のために、少量の粉末（５〜２５ｍｇ）をサンプルホルダー上に静かに押し込んで、滑らかな表面を形成させ、Ｘ線曝露に供した。サンプルを、２°から３５°（単位：２θ）まで０．０２°の刻み幅および１工程あたり０．３０°秒の走査速度での２θ−２θモードで走査した。データ取得を、Ｂｒｕｋｅｒ  ＤｉｆｆｒａｃＳｕｉｔｅ計測ソフトウェアによって制御し、Ｊａｄｅソフトウェア（バージョン７．５．１）によって解析した。上記装置は、コランダム標準を用いて±０．０２°２シータ角以内に較正した。
【０２１９】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を、Ｔｈｅｒｍａｌ  Ａｎａｌｙｓｔコントローラを備えたＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｍｏｄｅｌ  Ｑ−１００モジュールを用いて行った。データを収集し、ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｔｈｅｒｍａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェアを用いて解析した。各結晶形態のサンプルを、ふた付きのアルミニウムパンに正確に秤量した。５℃での５分間の等温平衡期間の後、サンプルを１０℃／分の線形加熱勾配で０℃から３００℃に加熱した。
【０２２０】
熱重量分析（ＴＧＡ）の計測は、高分解能を備えるＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｍｏｄｅｌ  Ｑ−５０モジュールを用いて行った。データを、ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｔｈｅｒｍａｌ  Ａｎａｌｙｓｔコントローラを用いて収集し、ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェアを用いて解析した。秤量したサンプルを白金パン上に置き、周囲温度から３００〜３５０℃まで１０℃の加熱速度で走査した。使用中、天秤および炉チャンバーに窒素流をパージした。
【０２２１】
動的水分吸着（ＤＭＳ）の計測を、ＶＴＩ大気微量天秤ＳＧＡ−１００システム（ＶＴＩ  Ｃｏｒｐ．，Ｈｉａｌｅａｈ，ＦＬ  ３３０１６）を使用して行った。秤量したサンプルを使用し、解析の開始時の湿度は、可能な限り最低の値（０％ＲＨに近い値）であった。ＤＭＳ解析は、１２０分間にわたる最初の乾燥工程（０％ＲＨ）の後、５％ＲＨ〜９０％ＲＨの湿度範囲にわたる５％ＲＨ／工程という走査速度での吸着および脱着の２サイクルからなった。ＤＭＳの実行は、２５℃の等温で行われた。
【０２２２】
調製法１：６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール
【化５９】
2020529987.tif 000065
６−ブロモ−４−フルオロ−１ｈ−インダゾール（５ｇ，２３．２５ｍｍｏｌ）、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（６．３８ｍｌ，６９．８ｍｍｏｌ）、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．４４２ｇ，２．３２５ｍｍｏｌ）を含むＤＣＭ（７６ｍｌ）の混合物を、ＲＴで一晩撹拌した。反応物を濃縮し、得られた残渣を、０−６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、所望の生成物を得た（６．０８ｇ，８７％収率）。
【０２２３】
調製法２：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化６０】
2020529987.tif 000066
水素化ナトリウム（１．００３ｇ，４１．８ｍｍｏｌ）を、１−Ｂｏｃ−アゼチジン−３−イル−メタノール（６．８９ｇ，３６．８ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（６０ｍＬ）の撹拌溶液に０℃のＮ２雰囲気下でゆっくり加え、反応物をＲＴに加温した。泡状の反応混合物をＲＴで３０分間撹拌した後、０℃に再度冷却した。６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（５．００ｇ，１６．７１ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（２０ｍＬ）の溶液をカニューラで反応混合物中にゆっくり移し、反応物をＲＴに加温し、ＲＴで２時間撹拌した。反応物を、Ｈ２Ｏ（１５０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）をゆっくり加えてクエンチし、５分間撹拌した。さらなる水（１００ｍＬ）を加え、二相混合物をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。次いで、合わせた有機画分を１：１のＨ２Ｏ：ブライン（３×１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。得られた透明のわずかに桃色の油状物を、０−１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、所望の生成物を無色透明の粘稠性油状物として得た（７．３４ｇ，１５．７４ｍｍｏｌ，９４％収率）。Ｃ２１Ｈ２８ＢｒＮ３Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４６６．１３、実測値４６６．１。
【０２２４】
調製法３：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化６１】
2020529987.tif 000067
ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン付加体（１．９３ｇ，２．３６ｍｍｏｌ）を、４−ヒドロキシベンゼンボロン酸（３．２６ｇ，２３．６１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（７．３４ｇ，１５．７４ｍｍｏｌ）、およびリン酸カリウム（１０．０２ｇ，４７．２ｍｍｏｌ）を含む１，４−ジオキサン（６３．０ｍｌ）および水（１５．７４ｍｌ）の溶液に加えた。反応混合物をＮ２で１０分間脱気し、次いで、１１０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で約５ｍＬの体積まで濃縮した。飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）を加え、混合物を塩化メチレン（３×２０ｍＬ）で抽出した。塩化メチレン抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、５０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（７．５５ｇ，１５．７４ｍｍｏｌ，１００％収率）。Ｃ２７Ｈ３３Ｎ３Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４８０．２４、実測値４８０．１。
【０２２５】
調製法４：４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール
【化６２】
2020529987.tif 000068
ＴＦＡ（１０．９０ｍｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（７．８４ｇ，１６．３５ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（２１．８０ｍｌ）の溶液にゆっくり加えた。透明溶液をＲＴで５時間撹拌した。反応物を真空中で濃縮して、４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールをＴＦＡ塩として得た（６．６９ｇ，１６．３５ｍｍｏｌ，１００％収率）。Ｃ１７Ｈ１７Ｎ３Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値２９６．１３、実測値２９６．１。
【０２２６】
実施例１Ａ：（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−イル）ブタ−２−エン−１−オン
【化６３】
2020529987.tif 000069
ＨＡＴＵ（２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、８１７ｍｇ，２．１５０ｍｍｏｌ）を、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン酸塩酸塩（４０５ｍｇ，２．４４ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（２．００ｍＬ）の溶液に加え、反応混合物をＲＴで５分間撹拌した。４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールＴＦＡ塩（８００ｍｇ，１．９５４ｍｍｏｌ）を加えた後、ＤＩＰＥＡ（１．７０７ｍｌ，９．７７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮して、黄色液体を得た。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む勾配２０−８０％のアセトニトリル水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−イル）ブタ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（２３５．０ｍｇ，０．５７８ｍｍｏｌ，２９．６％収率）。Ｃ２３Ｈ２６Ｎ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４０７．２０、実測値４０７．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １３．０７  （ｓ，  １Ｈ），  １０．３３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２１  （Ｓ，  １Ｈ），  ６．８６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．７９  （ｓ，  １Ｈ），  ６．６６−６．５８  （ｍ，  １Ｈ），  ６．４５  （ｄ，  Ｊ  ＝  １５．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．４５−４．３６  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．１７−４．０７  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．９１−３．８３  （ｍ，  ３Ｈ），  ３．２２−３．１０  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．７５  （ｓ，  ６Ｈ）．
【０２２７】
実施例１Ｂ：結晶性（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−イル）ブタ−２−エン−１−オン（形態４）
【化６４】
2020529987.tif 000070
工程１
６−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−インダゾール（２０．０ｇ，９３ｍｍｏｌ）を含む２００ｍｌのＤＣＭの懸濁液に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１．７６９ｇ，９．３０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物は懸濁液のままであった。次いで、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（１６．９７ｍｌ，１８６ｍｍｏｌ）を加えた。５分後に固体が完全に溶解した。反応混合物をＲＴで一晩撹拌して、暗色溶液を形成させた。２００ｍＬの炭酸水素塩水溶液を加え、相を分離し、有機層を２００ｍｌのブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶液をシリカプラグで濾過して暗色物質を除去し、シリカを３００ｍｌのＤＣＭで洗浄した。溶媒を蒸発させて、２５ｇの生成物をオフホワイトの固体として得た。
【０２２８】
工程２Ａ
５００ｍｌの丸底フラスコ中にｔｅｒｔ−ブチル３−（ヒドロキシメチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（２２．５３ｇ，１２０ｍｍｏｌ）および１００ｍｌのジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）を加えた。フラスコに窒素をパージした。炭酸セシウム（３９．２ｇ，１２０ｍｍｏｌ）を加えた。６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（２４ｇ，８０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を７０℃で２日間撹拌した。さらなる０．５当量のｔｅｒｔ−ブチル３−（ヒドロキシメチル）アゼチジン−１−カルボキシレートおよび炭酸セシウムを加え、反応物を７０℃で一晩加熱して、完全に反応させた。反応混合物をＲＴに冷却し、次いで、撹拌氷水（７００ｍｌ）にゆっくり注いだ。得られたスラリーを２０分間撹拌し、次いで濾過し、乾燥させて、３２ｇの生成物を得た。生成物を、水を貧溶媒として曇点までゆっくり加えることによってメタノール−水から結晶化させた。次第に白色スラリーが生じた。固体を濾過し、乾燥させて、２８ｇの純度９８％超の材料を得た。
【０２２９】
工程２Ｂ
あるいは、カリウムｔ−ブトキシドを、ｔｅｒｔ−ブチル３−（ヒドロキシメチル）アゼチジン−１−カルボキシレートを含むＤＭＡｃの溶液に０℃で加えた。６０分後、６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾールを０℃で加え、反応混合物を室温に加温して、６時間未満で完全に変換された。
【０２３０】
工程３
２５０ｍＬシュレンクフラスコ（Ｓｃｈｌｅｎｋ  ｆｌａｓｔ）中に、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（１０．０ｇ，２１．４４ｍｍｏｌ）および８０ｍｌのジオキサンを加えた。（４−ヒドロキシフェニル）ボロン酸（４．４４ｇ，３２．２ｍｍｏｌ）を加えた。三塩基性リン酸カリウム無水物（１３．６５ｇ，６４．３ｍｍｏｌ）を、２０ｍｌの水と共に加え、反応混合物に窒素をパージした。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加体（０．８７６ｇ，１．０７２ｍｍｏｌ）を加え、冷却管を備えたフラスコに窒素を３回再充填した。反応混合物を１１０℃で２時間３０分間加熱すると、ＨＰＬＣは完全な変換を示した。反応混合物をＲＴに冷却した後、ほとんどのジオキサンを除去した。１５０ｍｌの飽和塩化アンモニウムを加えた後、１５０ｍｌの酢酸エチルを加えた。１Ｍ  ＨＣｌ水溶液を用いてｐＨを中性に調整した。相を分離し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた後、溶媒を除去した。粗生成物を１５０ｍｌのＤＣＭに溶解し、３００ｇＳｉＧカラムにロードし、２０−５０％酢酸エチルのヘキサン溶液で溶離した。純粋な画分を合わせ、溶媒を蒸発させた。１００ｍｌのＭｅＴＨＦを加えた後、結晶シードを加えた。次第にスラリーが生じた。１００ｍｌのＤＩＩＰＥを加え、スラリーを一晩撹拌した。濾過および乾燥させて、７．９ｇの純粋な物質（９９％超）を得た。
【０２３１】
工程４
５０ｍＬの丸底フラスコ中にｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（８５ｇ，１７７ｍｍｏｌ）を含む４００ｍｌのメタノールを加えた。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１０１ｇ，５３２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで撹拌して、２日後に約９０％が変換された。反応混合物を、室温でさらに２４時間撹拌して、約９６％を変換させた。４００ｍｌのジイソプロピルエーテルを加え、得られたスラリーを室温で一晩撹拌し、一晩で結晶塩を形成させた。窒素下での濾過および乾燥により、１００ｇの９９％超の純粋な物質をビスＰＴＳＡ塩として得た。
【０２３２】
工程５
１００ｍＬの丸底フラスコ中に、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン酸、ＨＣｌ（１．８９９ｇ，１１．４６ｍｍｏｌ）および２０ｍｌのＤＭＦを加えた。ＨＣＴＵ  ｏ−（１ｈ−６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（４．９１ｇ，１１．４６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで２０分間撹拌した。個別のフラスコ中に、４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール、２ＴＦＡ（５．０ｇ，９．５５ｍｍｏｌ）、および２０ｍｌのＤＭＦを加えた。得られた溶液を０℃に冷却した後、ＤＩＰＥＡ（５ｍｌ，３８．２ｍｍｏｌ，３当量）をゆっくり加えた。上記の溶液を（５分間にわたって）予め活性化した酸反応混合物に加え、反応混合物を室温で１５分間撹拌した。さらなる１当量のＤＩＰＥＡを、滴下して加えた。室温で２０分後にＨＰＬＣによって完全な変換が認められた。反応混合物を２００ｍｌの撹拌水に注いだ。およそｐＨ７で粘着性固体が沈殿した。アンモニア水を用いて約ｐＨ８に慎重に調整した。溶液を１００ｍｌのＭｅＴＨＦで３回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた後、溶媒を除去した。粗遊離塩基生成物を、２５ｍｌの１０％メタノールのＤＣＭ溶液に溶解し、１２５ｇシリカゲルカラム上にロードし、０．５％アンモニア水を含む定組成の１０％メタノールのＤＣＭ溶液で溶離した。純粋な画分を合わせ、溶媒を蒸発させた。アセトンからの再結晶により、９８％超の純粋な物質を得た（５０％収率）。
【０２３３】
２５ｍｇの化合物１を、１ｍＬの水に懸濁した。得られた懸濁液を５０℃で２日間撹拌し、濾過し、２ｍＬの水で洗浄し、周囲条件下で数時間乾燥させて、形態４を得た。
【０２３４】
あるいは、化合物１を、１０体積のアルコールに完全に溶解し、その後におよそ８〜１０体積の水を曇点までゆっくり添加することによってエタノールおよび水またはメタノールおよび水に溶解した。形態４のシードを加え、スラリーが経時的にゆっくり生じた。次いで、さらなる水をゆっくり加え（約１０体積）、固体を濾過および乾燥させて、形態４を得た。
【０２３５】
実施例１Ｃ：結晶性（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−イル）ブタ−２−エン−１−オン（形態３）
形態３は、化合物１の無水遊離塩基結晶形態である。
【０２３６】
１５０ｍｇの化合物１を、２ｍＬのアセトニトリルとイソプロパノールとの１：１混合物に懸濁した。得られた懸濁液を５０℃で１日間撹拌し、濾過し、２ｍＬのアセトニトリルとイソプロパノールとの１：１混合物で洗浄し、周囲条件下で数時間乾燥させて形態３を得、これは結晶性無水遊離塩基であると判定された。
【０２３７】
あるいは、２００ｍｇの非晶質遊離塩基としての化合物１を、２ｍｌのＩＰＡにＲＴで溶解した。等量のアセトニトリルを加えた。飽和溶液が形成されるまで、さらなる化合物（総量０．５ｇ）を加えた。シードを加え、混合物を一晩撹拌した。次第に白色スラリーが生じた。濾過および乾燥させて形態３として４００ｍｇの生成物が得られ、これは無水遊離塩基であると判断された。
【０２３８】
実施例１Ｄ：形態３の特徴付け
形態３のサンプルを、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）、および動的水分吸着（ｄｙｎａｍｉｃ  ｍｏｉｓｔｕｒｅ  ｓｏｒｐｔｉｏｎ）（ＤＭＳ）によって解析した。
【０２３９】
粉末Ｘ線回折
形態３の粉末Ｘ線回折パターンを、図９に示す。
【０２４０】
観測されたＰＸＲＤの２θピーク位置およびｄ間隔を、以下に示す。
【表Ａ−１】
2020529987.tif 000071
【表Ａ−２】
2020529987.tif 000072
【０２４１】
熱分析
本発明の形態３の結晶性遊離形態の代表的なＤＳＣサーモグラムを図１０に示す。１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースは、融解転移として特定される、約１９７．７℃での開始および約２０１．３℃でのピークを有する吸熱熱流のピークを示す。融解直後に分解した。
【０２４２】
結晶形態は、約２０１．３℃にピークを有する吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする。
【０２４３】
結晶形態は、約１９７．７℃〜約２０４℃の温度において吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする。
【０２４４】
本発明の形態３の結晶性遊離形態の代表的なＴＧＡトレースを図１１に示す。図１１の熱重量分析（ＴＧＡ）トレースは、約１９５℃の分解開始未満の温度で有意な重量減少は示さない。
【０２４５】
動的水分吸着の評価
本発明の形態３の結晶性遊離形態の代表的なＤＭＳトレースを図１２に示す。
【０２４６】
形態３は、５％〜９０％の相対湿度の湿度範囲において約０．３３％の重量増加を示した。形態３は、非吸湿性であると考えられる。
【０２４７】
実施例１Ｅ：形態４の特徴付け
形態４のサンプルを、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）、および動的水分吸着（ｄｙｎａｍｉｃ  ｍｏｉｓｔｕｒｅ  ｓｏｒｐｔｉｏｎ）（ＤＭＳ）によって解析した。
【０２４８】
粉末Ｘ線回折
形態４の粉末Ｘ線回折パターンを、図１３に示す。
【０２４９】
観測されたＰＸＲＤの２θピーク位置およびｄ間隔を、以下に示す。
【表Ｂ−１】
2020529987.tif 000073
【表Ｂ−２】
2020529987.tif 000074
【０２５０】
熱分析
形態４の結晶性遊離形態の代表的なＤＳＣサーモグラムを図１４に示す。１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースは、約６０．９℃での開始および約１０３．６℃でのピークを有する脱溶媒和吸熱、ならびに約１６７．３℃での開始を特徴とする融解吸熱を示す。化合物は融解時に分解され、融解吸熱および分解熱が重複する。
【０２５１】
形態４の結晶性遊離形態の代表的なＴＧＡトレースを図１５に示す。図１５の熱重量分析（ＴＧＡ）トレースは、１００℃で約３．５４％の重量減少を示す。化合物は、約５０℃の開始温度で脱溶媒和する。化合物は、約１６５℃の開始温度で分解する。
【０２５２】
動的水分吸着の評価
形態４の結晶性遊離形態の代表的なＤＭＳトレースを図１６に示す。
【０２５３】
形態４は、５％〜９０％の相対湿度の湿度範囲において約５．０１％の重量増加を示した。形態４は、穏和に吸湿性であると考えられる。
【０２５４】
調製法５：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化６５】
2020529987.tif 000075
水素化ナトリウム（０．２０１ｇ，８．３６ｍｍｏｌ）を、（Ｓ）−Ｎ−ｂｏｃ−３−ピリジノール（１．２５ｇ，６．６９ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１２ｍｌ）の溶液に０℃のＮ２雰囲気下で加え、反応混合物をＲＴで２０分間撹拌した。６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（１．０ｇ，３．３４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１時間撹拌した。水（１ｍＬ）を加え、反応物を真空中で濃縮した。粗材料を、４０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−カルボキシレートを得た（１．４０ｇ，３．００ｍｍｏｌ，９０％収率）。Ｃ２１Ｈ２８ＢｒＮ３Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４６６．１３、実測値４６６．１。
【０２５５】
調製法６：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化６６】
2020529987.tif 000076
酢酸パラジウム（０．１３５ｇ，０．６００ｍｍｏｌ）を、３−クロロ−４−ヒドロキシフェニルボロン酸（０．７７６ｇ，４．５０ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−カルボキシレート（１．４０ｇ，３．００ｍｍｏｌ）、１，１’−ビス（ジ−ｔ−ブチルホスフィノ）フェロセン（０．２８５ｇ，０．６００ｍｍｏｌ）、およびリン酸カリウム（１．９１２ｇ，９．０１ｍｍｏｌ）を含む１，４−ジオキサン（１２ｍｌ）および水（３．００ｍｌ）の溶液に加えた。反応混合物を窒素で１０分間脱気し、次いで１１０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で約５ｍＬの体積まで濃縮した。飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）を加え、混合物を塩化メチレン（３×２０ｍＬ）で抽出した。塩化メチレン抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、５０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−カルボキシレート（１．３５ｇ，２．６３ｍｍｏｌ，８７％収率）を透明黄色液体として得た。Ｃ２７Ｈ３２ＣｌＮ３Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値５１４．２０、実測値５１４．２。
【０２５６】
調製法７：（Ｓ）−２−クロロ−４−（４−（ピロリジン−３−イルオキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール
【化６７】
2020529987.tif 000077
４．０Ｎ  ＨＣｌを含むジオキサン（１３．１３ｍｌ，５２．５ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−カルボキシレート（１．３５ｇ，２．６３ｍｍｏｌ）を含むジオキサン（６ｍｌ）の溶液に加え、反応混合物を６０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、（Ｓ）−２−クロロ−４−（４−（ピロリジン−３−イルオキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールをＨＣｌ塩として得た（０．９６２ｇ，２．６３ｍｍｏｌ，１００％収率）。Ｃ１７Ｈ１６ＣｌＮ３Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３３０．０９、実測値３３０．２。
【０２５７】
実施例２：（Ｓ）−１−（３−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化６８】
2020529987.tif 000078
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．５９ｍｌ，２６．３ｍｍｏｌ）を、（Ｓ）−２−クロロ−４−（４−（ピロリジン−３−イルオキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールＨＣｌ塩（０．９６２ｇ，２．６３ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１３．０ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、塩化アクリロイル（０．２７７ｍｌ，３．４１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、次いで約２ｍＬの体積に濃縮した。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む勾配２０−８０％のアセトニトリル水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｓ）−１−（３−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（３４４ｍｇ，０．６９１ｍｍｏｌ，２６．３％収率）。Ｃ２０Ｈ１８ＣｌＮ３Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３８４．１０、実測値３８４．１。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １３．０３  （ｓ，  １Ｈ），  １０．３３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７４−７．６７  （ｍ，  １Ｈ），  ７．５７−７．４９  （ｍ，  １Ｈ），  ７．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．０７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ０．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８０  （ｓ，  １Ｈ），  ６．６９−６．５６  （ｍ，  １Ｈ），  ６．１８−６．１１  （ｍ，  １Ｈ），  ５．７１−５．６２  （ｍ，  １Ｈ），
４．０１−３．６０（ｍ、５Ｈ）、２．３５−２．１４（ｍ、２Ｈ）。
【０２５８】
調製法８：ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化６９】
2020529987.tif 000079
Ｎ２をパージした乾燥シンチレーションバイアルに、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（３７４ｍｇ，１．７４ｍｍｏｌ）を加え、２．４ｍＬ  ＤＭＦに溶解し、溶液を０℃に冷却した。６０重量％の水素化ナトリウムを含む鉱油（１３４ｍｇ，３．３４ｍｍｏｌ）を撹拌溶液にゆっくり加え、添加後に反応物をＲＴに加温した。泡状反応物を３０分間撹拌後、０℃に再度冷却した。６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（４００ｍｇ，１．３４ｍｍｏｌ）を含む１ｍＬ  ＤＭＦの溶液を、有機ナトリウム溶液を含むシンチレーションバイアル中にゆっくり加えた。添加後、反応物をＲＴに加温し、２時間撹拌し、その際にＬＣＭＳは出発物質の所望の生成物への完全な変換を示した。反応物を、１ｍＬ  Ｈ２Ｏおよび１ｍＬ  ＥｔＯＡｃをゆっくり加えてクエンチし、５分間撹拌した。次いで、二相溶液を分液漏斗に移し、さらなる５ｍＬ  Ｈ２Ｏを加えた。混合物を、１０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出し、水層を破棄した。次いで、合わせた有機画分を３×１０ｍＬの１：１のＨ２Ｏ：ブラインで洗浄して、残存ＤＭＦを除去した。次いで、有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、薄黄色油状物を得た。次いで、油状物を、０−４０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を、純粋な無色透明の粘稠性油状物として単離した（２８８ｍｇ，４４％収率）。
【０２５９】
調製法９：ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化７０】
2020529987.tif 000080
酢酸パラジウム（２６．２ｍｇ，０．１１６ｍｍｏｌ）と１，１’−ビス（ジ−ｔ−ブチルホスフィノ）フェロセン（５５．３ｍｇ，０．１１６ｍｍｏｌ）との１：１混合物を、３−クロロ−４−ヒドロキシベンゼンボロン酸（１５１ｍｇ，０．８７４ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（２８８ｍｇ，０．５８２ｍｍｏｌ）、およびリン酸カリウム（３７１ｍｇ，１．７４７ｍｍｏｌ）を含む１，４−ジオキサン（２．０ｍｌ）および水（０．５０ｍｌ）の溶液に加えた。反応混合物を窒素で１０分間脱気し、次いで１１０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で約５ｍＬの体積まで濃縮した。飽和塩化アンモニウム水溶液（５ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２×５ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、４０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（２３０ｍｇ，０．４２４ｍｍｏｌ，７３％収率）。Ｃ２９Ｈ３６Ｎ３Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値５４２．２４、実測値５４２．３。
【０２６０】
調製法１０：４−（４−（（２−アゼチジン−３−イル）プロパン−２−イル）オキシ）−１−Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−クロロフェノール
【化７１】
2020529987.tif 000081
ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（２３０ｍｇ，０．４２４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ（１ｍｌ）をゆっくり加えた。透明溶液をＲＴで５時間撹拌し、その時点でＬＣＭＳの結果から所望の生成物の変換は良好であった。反応物を濃縮して、４−（４−（（２−アゼチジン−３−イル）プロパン−２−イル）オキシ）−１−Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−クロロフェノールをＴＦＡ塩として得た（１００％収率）。Ｃ１９Ｈ２０Ｎ３Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３５８．１３、実測値３５８．１。
【０２６１】
実施例３Ａ：（Ｅ）−１−（３−（２−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−イル）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン−１−オン
【化７２】
2020529987.tif 000082
ＨＡＴＵ（２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、１００ｍｇ，０．２６３ｍｍｏｌ）を、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン酸塩酸塩（３４ｍｇ，０．２６３ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１ｍＬ）の溶液に加えた。反応混合物をＲＴで５分間撹拌し、次いで、４−（４−（（２−アゼチジン−３−イル）プロパン−２−イル）オキシ）−１−Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−クロロフェノールＴＦＡ塩（１１８ｍｇ，０．２５１ｍｍｏｌ）を加えた後、ＤＩＰＥＡ（０．４３８ｍｌ，２．５０７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮して、黄色液体を得た。粗液体を、液体炭酸を含むメタノールを用いた分取スケールＳＦＣ（超臨界流体クロマトグラフィ）によって精製して、（Ｅ）−１−（３−（２−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−イル）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン−１−オンを得た（４１．３ｍｇ，０．０８４ｍｍｏｌ，３３％収率）。Ｃ２５Ｈ２９ＣｌＮ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４６９．２０、実測値４６９．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １３．０７  （ｓ，  １Ｈ），  １０．３３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．５，  ２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３４  （Ｓ，  １Ｈ），  ７．０４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８５  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．６３−６．５３  （ｍ，  １Ｈ），  ６．３９  （ｄ，  Ｊ  ＝  １５．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３７−４．２３  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．１１−３．９１  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．６９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．０２−２．９０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．６２  （ｓ，  ９Ｈ），  １．３２  （Ｓ，  ９Ｈ）．
【０２６２】
実施例３Ｂ：結晶性（Ｅ）−１−（３−（２−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−イル）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン−１−オン（形態１）
形態１は、化合物３の無水遊離塩基結晶形態である。
【０２６３】
８０ｍｇの非晶質遊離塩基としての化合物３を、０．５ｍＬのエタノールに溶解した。得られた混合物を室温で１日間撹拌し、沈殿物を得た。固体を濾過によって単離し、１ｍＬのエタノールで洗浄し、周囲条件下で数時間乾燥させて形態１を得た。
【０２６４】
あるいは、５０ｍＬの丸底フラスコ中に、ＳｉＧによって精製した化合物３（１．３ｇ，２．７７ｍｍｏｌ）を加えた。１０ｍｌのアセトンを加え、混合物をＲＴで撹拌した。結晶性遊離塩基形態１のシードを加えた。次第に濃厚な白色スラリーが生じた。濾過および乾燥させて、１ｇの純度９８％超の結晶性遊離塩基形態１を得た。
【０２６５】
実施例３Ｂ：結晶性（Ｅ）−１−（３−（２−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−イル）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン−１−オン（形態２）
形態２は、化合物３の遊離塩基水和結晶形態である。
【０２６６】
５５ｍｇの化合物３の非晶質遊離塩基を、０．２５ｍＬのメタノールに溶解した。この段階で、水を貧溶媒として約１：２メタノール：水の比で加えた。得られた混合物を室温で数分間超音波処理して、沈殿を得た。得られた懸濁液を室温で１日間撹拌し、濾過し、１ｍＬのメタノールで洗浄し、乾燥させて形態２を得た。
【０２６７】
あるいは、化合物３を、１０体積のアルコールに完全に溶解し、その後におよそ８〜１０体積の水を曇点までゆっくり添加することによってエタノールおよび水またはメタノールおよび水に溶解した。形態２のシードを加え、スラリーが経時的にゆっくり生じた。次いで、さらなる水をゆっくり加え（約１０体積）、得られた固体を濾過および乾燥させて、形態２を得た。
【０２６８】
実施例３Ｃ：形態１の特徴付け
形態１のサンプルを、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）、および動的水分吸着（ｄｙｎａｍｉｃ  ｍｏｉｓｔｕｒｅ  ｓｏｒｐｔｉｏｎ）（ＤＭＳ）によって解析した。
【０２６９】
粉末Ｘ線回折
形態１の粉末Ｘ線回折パターンを、図１に示す。
【０２７０】
観測されたＰＸＲＤの２θピーク位置およびｄ間隔を、以下に示す。
【表Ｃ−１】
2020529987.tif 000083
【表Ｃ−２】
2020529987.tif 000084
【０２７１】
熱分析
本発明の形態１の結晶性遊離形態の代表的なＤＳＣサーモグラムを図２に示す。１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースは、融解転移として特定される、約１５４．９℃での開始および約１６２．９℃でのピークを有する吸熱熱流のピークを示す。融解直後に分解した。
【０２７２】
結晶形態は、約１６２．９℃の温度において吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする。結晶形態は、１６２．９±３℃にピークを有する吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする。
【０２７３】
結晶形態は、約１５４．９℃〜約１７１℃の温度において吸熱熱流の最大値を示す、１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定トレースを特徴とする。
【０２７４】
形態１の結晶性遊離形態の代表的なＴＧＡトレースを図３に示す。図３の熱重量分析（ＴＧＡ）トレースは、１００℃で約０．１４％の僅かな重量減少を示す。化合物は、約１７５℃の開始温度で分解する。
【０２７５】
動的水分吸着の評価
形態１の結晶性遊離形態の代表的なＤＭＳトレースを図４に示す。
【０２７６】
形態１は、５％〜９０％の相対湿度の湿度範囲において約１．６２％の重量増加を示した。形態１は、わずかに吸湿性であると考えられる。
【０２７７】
実施例３Ｄ：形態２の特徴付け
形態２のサンプルを、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）、および動的水分吸着（ｄｙｎａｍｉｃ  ｍｏｉｓｔｕｒｅ  ｓｏｒｐｔｉｏｎ）（ＤＭＳ）によって解析した。
【０２７８】
粉末Ｘ線回折
形態２の粉末Ｘ線回折パターンを、図５に示す。
【０２７９】
観測されたＰＸＲＤの２θピーク位置およびｄ間隔を、以下に示す。
【表Ｄ−１】
2020529987.tif 000085
【表Ｄ−２】
2020529987.tif 000086
【０２８０】
熱分析
形態２の結晶性遊離形態の代表的なＤＳＣサーモグラムを図６に示す。１０℃／分の加熱速度で記録された示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースは、約５２．７℃での開始および約８４．４℃でのピークを有する脱溶媒和吸熱、ならびに約１６０．０℃での開始および約１６７．６℃でのピークを有する融解吸熱を示す。融解直後に分解した。
【０２８１】
本発明の形態２の結晶性遊離形態の代表的なＴＧＡトレースを図７に示す。図７の熱重量分析（ＴＧＡ）トレースは、７５℃で約６．７３％の重量減少を示す。化合物は、約２５℃の開始温度で脱溶媒和する。化合物は、約１８５℃の開始温度で分解する。
【０２８２】
動的水分吸着の評価
本発明の形態２の結晶性遊離形態の代表的なＤＭＳトレースを図８に示す。形態２は、６５％を超えるＲＨで水和物（形態２ｂ）に変換される。１５％未満のＲＨで脱水が起こる。５％〜９０％ＲＨでの総吸湿は７．９９％である。
【０２８３】
実施例３Ｅ：形態２ｂの特徴付け
形態２ｂのサンプルを、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）によって解析した。
【０２８４】
粉末Ｘ線回折
形態２ｂの粉末Ｘ線回折パターンを、図１７に示す。
【０２８５】
観測されたＰＸＲＤの２θピーク位置およびｄ間隔を、以下に示す。
【表Ｅ−１】
2020529987.tif 000087
【表Ｅ−２】
2020529987.tif 000088
【０２８６】
調製法１１：４，６−ジクロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン
【化７３】
2020529987.tif 000089
４，６−ジクロロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（２．５０ｇ，１３．２３ｍｍｏｌ）をフラスコに加え、１，４−ジオキサン（５２．９ｍｌ）に溶解した。次いで、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（ｐＴｓＯＨ，０．２５ｇ，１．３２ｍｍｏｌ）を透明な薄黄色溶液に加えた後、３，４−ジヒドロ−２ｈ−ピラン（１．８ｍｌ，１９．８４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を４０℃に加熱し、一晩撹拌した。次いで、得られた混合物を冷却し、真空中で濃縮した。粗物質を、０−１００％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、４，６−ジクロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジンを得た（２．６ｇ，９．５２ｍｍｏｌ，７２．０％収率）。Ｃ１０Ｈ１０Ｃｌ２Ｎ４Ｏの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値２７４．０、実測値１８８．９（ＴＨＰフラグメントの喪失）。
【０２８７】
調製法１２：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化７４】
2020529987.tif 000090
乾燥丸底フラスコに、１−ｂｏｃ−アゼチジン−３−イル−メタノール（１．９６ｇ，１０．４７ｍｍｏｌ）を加え、ＤＭＦ（２０．０ｍＬ）に溶解した。撹拌溶液を０℃に冷却し、次いで、水素化ナトリウム（０．７６２ｇ，１９．０４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温に加温し、３０分間撹拌し、薄桃色の泡状混合物を得た。混合物を０℃に冷却し、４，６−ジクロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（２．６ｇ，９．５２ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１０ｍＬ）の溶液を、カニューラを介して加えた。反応物を室温に加温し、３時間撹拌した。次いで、反応物を１２０ｍＬ  Ｈ２Ｏでクエンチし、３０ｍＬ  ＥｔＯＡｃで３回抽出した。次いで、有機溶液を、１００ｍＬブライン：Ｈ２Ｏ溶液（１：１）で３回洗浄した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、薄黄色油状物に濃縮した。粗物質を、０−５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（１．９５ｇ，４．６０ｍｍｏｌ，４８％収率）。
【０２８８】
調製法１３：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化７５】
2020529987.tif 000091
丸底フラスコ中で、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（１．９５ｇ，４．６０ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン（２３．０ｍｌ）に溶解した。４−ヒドロキシフェニルボロン酸（０．９５ｇ，６．９０ｍｍｏｌ）を加えた後、水（７．７ｍｌ）を加えた。ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（０．５６ｇ，０．６９ｍｍｏｌ）を加え、フラスコに還流冷却器を取り付け、窒素下に設置し、１１０℃に加熱し、一晩撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、有機溶媒を真空中で除去した。Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）を残渣に加え、ＤＣＭ（３０ｍＬ）で３回抽出した。有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、黒色油状物に濃縮した。粗物質を、０−１００％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（２．０３ｇ，４．２２ｍｍｏｌ，９２％収率）を黄／橙色油状物として得た。Ｃ２５Ｈ３１Ｎ５Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４８２．２、実測値４８２．２。
【０２８９】
調製法１４：４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）フェノール
【化７６】
2020529987.tif 000092
丸底フラスコ中で、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（２．０３ｇ，４．２２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０．０ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ（５．０ｍｌ）を室温でゆっくり加えた。反応物を１８時間撹拌して、橙／紫色溶液を得た。反応物を真空中で濃縮して、灰／橙色固体を得た。表題化合物を、ＴＦＡ塩として１００％収率で単離した（１．２５ｇ，４．２２ｍｍｏｌ）。Ｃ１５Ｈ１５Ｎ５Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値２９８．１、実測値２９８．３。
【０２９０】
実施例４：１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化７７】
2020529987.tif 000093
丸底フラスコ中で、４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）フェノールトリフルオロ酢酸（１．２５ｇ，４．２０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２１．０ｍｌ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（３．６７ｍｌ，２１．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を０℃に冷却し、５分間撹拌後、塩化アクリロイル（０．２７３ｍｌ，３．３６ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、次いで、０℃で１５分間撹拌した。反応物を室温に加温し、真空中で濃縮した。粗物質を１：１  ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏに溶解し、２０−８０％ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ勾配を用いた逆相分取ＨＰＬＣによって精製した。所望の画分を合わせ、凍結乾燥させて、表題化合物を得た（４３４ｍｇ，１．２３５ｍｍｏｌ，２９％収率）。Ｃ１８Ｈ１７Ｎ５Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３５２．１、実測値３５２．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．３２−８．２３  （ｄ  ａｐｐｔ，  ２Ｈ），  ８．０７  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８９−６．８１  （ｄ  ａｐｐｔ，  ２Ｈ），  ６．３０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．０，  １０．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．０７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．０，  ２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．６３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．３，  ２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．８１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．３６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．６，  ５．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．０６  （ｔ，  １Ｈ），  ３．８２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．２，  ５．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．２４−３．１０  （ｍ，  １Ｈ）．
【０２９１】
調製法１５：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化７８】
2020529987.tif 000094
１−Ｂｏｃ−アゼチジン−３−イル−メタノール（３．４４ｇ，１８．３９ｍｍｏｌ）を、オーブンで乾燥させたフラスコに加え、ＤＭＦ（４１．８ｍｌ）に溶解した。溶液を０℃に冷却し、１０分間撹拌後、水素化ナトリウム（０．５０ｇ，２０．８９ｍｍｏｌ）を加えた。泡状混合物を室温に加温し、３０分間撹拌した。次いで、反応物を０℃に冷却し、６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（２．５ｇ，８．３６ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１０ｍＬ）の溶液を、カニューラを介して加えた。反応物を室温に加温し、１．５時間撹拌した。反応物を１２０ｍＬ  Ｈ２Ｏの添加によってクエンチし、５０ｍＬ  ＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機相を合わせ、１００ｍＬブライン：Ｈ２Ｏ溶液（１：１）で３回洗浄した。次いで、有機相を回収し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、透明薄黄色油状物に濃縮した（３．９ｇ，８．３６ｍｍｏｌ）。粗生成物を、いかなるさらなる精製も行わずに使用した。Ｃ２１Ｈ２８ＢｒＮ３Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４６６．１４、実測値４６６．１。
【０２９２】
調製法１６：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化７９】
2020529987.tif 000095
ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（３．９ｇ，８．３６ｍｍｏｌ）をフラスコに加え、１，４−ジオキサン（４４．６ｍｌ）に溶解した。３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニルボロン酸（１．９６ｇ，１２．５４ｍｍｏｌ）を加えた後、水（１１．２ｍｌ）および三塩基性リン酸カリウム（５．３３ｇ，２５．０９ｍｍｏｌ）を加えた。ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（１．０２ｇ，１．２５ｍｍｏｌ）を加え、フラスコに還流冷却器を取り付け、窒素雰囲気下に置いた。反応物を１１０℃に加熱し、１８時間撹拌した。室温に冷却した時点で、有機溶媒を真空中で除去して黒色油状物を得た。この油状物に、１０ｍＬ  Ｈ２Ｏを加え、この溶液を４０ｍＬ  ＤＣＭで３回抽出した。有機物を回収し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、黒色油状物に濃縮した。この油状物を、０−１００％ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（２．５８ｇ，５．１９ｍｍｏｌ，６２％収率）を透明黄色油状物として得た。Ｃ２７Ｈ３２ＦＮ３Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４９８．２、実測値４９８．２。
【０２９３】
調製法１７：４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−フルオロフェノール
【化８０】
2020529987.tif 000096
５０ｍＬ丸底フラスコ中で、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（２．５８ｇ，５．１９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０．０ｍｌ）に溶解した。ＴＦＡ（５．００ｍｌ）を、透明黄色溶液に室温でゆっくり加えた。反応物を２４時間撹拌し、得られた暗黄／紫色溶液を真空中で濃縮して、４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−フルオロフェノールのＴＦＡ塩（３．４６ｇ）を、灰／黄色固体として得た（１００％収率）。Ｃ１７Ｈ１６ＦＮ３Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３１４．１、実測値３１４．２。
【０２９４】
実施例５：（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−イル）ブタ−２−エン−１−オン
【化８１】
2020529987.tif 000097
（２Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン酸（４６４ｍｇ，２．８０ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（９７６ｍｇ，２．５７ｍｍｏｌ）を丸底フラスコに加え、ＤＭＦ（５．５ｍＬ）に溶解し、１５分間撹拌した。次いで、４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−フルオロフェノール（１．０ｇ，２．３４ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（５．５ｍＬ）の溶液を、撹拌反応物にゆっくり加えた後、ジイソプロピルエチルアミン（２．０ｍｌ，１１．７０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を２４時間撹拌し、次いで、真空中で濃縮した。粗物質を１：１  ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏに溶解し、２０−８０％ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ勾配を用いた逆相分取ＨＰＬＣによって精製した。所望の画分を合わせ、凍結乾燥させて、表題化合物のＴＦＡ塩を得た（２７１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ，２１％収率）。Ｃ２３Ｈ２５ＦＮ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４２５．２、実測値４２５．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＭｅＯＤ−ｄ４）  δ  ７．９４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ０．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．５，  ２．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３５−７．２８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．２４  （ｔ，  Ｊ  ＝  １．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０３−６．９３  （ｍ，  １Ｈ），  ６．８０−６．６８  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．５３  （ｄｔ，  Ｊ  ＝  １５．２，  １．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．５３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．４７−４．３４  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．３５−４．２２  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．０９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．８，  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．２，  １．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．２７−３．１９  （ｍ，  １Ｈ），  ２．８８  （ｓ，  ６Ｈ）．
【０２９５】
調製法１８：６−ブロモ−４−ニトロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール
【化８２】
2020529987.tif 000098
６−ブロモ−４−ニトロ−１Ｈ−インダゾール（３．００ｇ，１２．４ｍｍｏｌ）、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン、９７％（３．４０ｍｌ，３７．２ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（ｐＴｓＯＨ、０．２３６ｇ，１．２４ｍｍｏｌ）を含むＤＣＭ（４１．３ｍｌ）の混合物を、ＲＴで一晩撹拌した。反応物をセライトのパッドで濾過し、濃縮した。反応物は、変換率１００％（４．０５ｇ）と考えられ、さらに精製せずに次の反応で使用した。
【０２９６】
調製法１９：６−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）フェニル）−４−ニトロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール
【化８３】
2020529987.tif 000099
６−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）フェニル）−４−ニトロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（１．００ｇ，３．０７ｍｍｏｌ）、４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）フェニルボロン酸（１．１６ｇ，４．６０ｍｍｏ）、および三塩基性リン酸カリウム（１．３０ｇ，６．１３ｍｍｏｌ）を含むジオキサン（１４．９ｍＬ）およびＨ２Ｏ（４．９８ｍＬ）の混合物に、Ｎ２を１０分間パージした。次いで、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィン）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（０．２２４ｇ，０．３０７ｍｍｏｌ）を加え、その後にフラスコをシールした。反応物を１１０℃に加熱し、１時間撹拌した。ＬＣＭＳによる所望の生成物への完全な変換の確認後、反応物を２０ｍＬ  Ｈ２Ｏおよび２０ｍＬ  ＥｔＯＡｃでクエンチした。両方の層をセライトのパッドで濾過し、分液漏斗に移した。混合物を２０ｍＬ  ＥｔＯＡｃで３回抽出し、水層を破棄した。合わせた有機画分を濃縮し、引き続いて０−１０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を純粋な薄黄色油状物として単離した（１．０３ｇ，７４．４％収率）。Ｃ２４Ｈ３１Ｎ３Ｏ４Ｓｉの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４５４．６１、実測値４５４．３。
【０２９７】
調製法２０：６−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）フェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−アミン
【化８４】
2020529987.tif 000100
６−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）フェニル）−４−ニトロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（０．９８０ｇ，２．１６ｍｍｏｌ）および１０％ｗｔ炭素担持パラジウム（湿式）（０．９８０ｇ）を、ＴＨＦ（２．８ｍＬ）およびイソプロピルアルコール（１１．２ｍＬ）に溶解した。反応容器をＮ２で５分間満たし直し、その後にシールし、水素雰囲気下に置いた。反応混合物を室温で３時間撹拌したままにした。ＬＣＭＳが所望の生成物の完全な変換を示した後、反応混合物を濾過した。次いで、濾紙をさらなるＴＨＦで洗浄した。濃縮および０−２５％ＥｔＯＡＣ：ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィ（４０ｇ）による精製後、生成物を単離した（０．５６２ｇ，６１．５％収率）。Ｃ２４Ｈ３３Ｎ３Ｏ２Ｓｉの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４２４．６３、実測値４２４．４。
【０２９８】
調製法２１：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ）−２−（（６−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）フェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）カルバモイル）モルホリン−４−カルボキシレート
【化８５】
2020529987.tif 000101
（Ｒ）−Ｎ−ｂｏｃ−２−モルホリンカルボン酸（０．８１９ｇ，３．５４ｍｍｏｌ）および１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、２．６９ｇ，７．０８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１１．８ｍＬ）に溶解し、室温で５分間撹拌したままにした。次いで、６−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）フェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−アミン（１．００ｇ，２．３６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２時間撹拌したままにした。ＬＣＭＳは、所望の生成物への完全な変換を示していた。反応物を、１０ｍＬ  Ｈ２Ｏおよび１０ｍＬ  ＤＣＭでクエンチした。分液漏斗に移した後、混合物を１０ｍＬ  ＤＣＭで３回抽出し、水層を破棄した。合わせた有機画分を濃縮し、引き続いて、０−４５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィ（４０ｇ）によって精製した。生成物を薄黄色油状物として単離した（１．０１ｇ，６７％収率）。Ｃ３４Ｈ４８Ｎ４Ｏ６Ｓｉの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値６３７．８７、実測値６３７．６。
ＨＨ
【０２９９】
調製法２２：（Ｒ）−Ｎ−（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）モルホリン−２−カルボキサミド
【化８６】
2020529987.tif 000102
ｔｅｒｔ−Ｂｕｙｌ（２Ｒ）−２−（（６−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）フェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）カルバモイル）モルホリン−４−カルボキシレート（１．００ｇ，１．５８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２．０ｍＬ）に溶解した。撹拌中に、ＨＣｌ溶液を含む４．０Ｍジオキサン（１２．１ｍＬ、４８．５ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。反応混合物を６０℃に加熱し、３０分間撹拌し、その後にＬＣＭＳは所望の生成物の完全な変換を示した。混合物を濃縮して、生成物を橙色油状物として得た。反応物は、変換率１００％（０．５３３ｇ）と考えられ、さらに精製せずに次の反応で使用した。
【０３００】
実施例６：（Ｒ）−４−アクリロイル−Ｎ−（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）モルホリン−２−カルボキサミド
【化８７】
2020529987.tif 000103
（Ｒ）−Ｎ−（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）モルホリン−２−カルボキサミド（０．５３３ｇ，１．５８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（７．９ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ、２．７５ｍＬ、１５．８ｍｍｏｌ）を加えた後、塩化アクリロイル（０．０９００ｍＬ、１．１０ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。反応物を室温で１０分間撹拌後、ＬＣＭＳによって変換をモニタリングした。ＬＣＭＳによって完全な変換が示された後、反応混合物を濃縮し、１０−５０％ＡＣＮ：Ｈ２Ｏ勾配を用いた逆相分取ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物の画分を回収し、凍結乾燥によって濃縮した。生成物を単離した（１３０ｍｇ，２１％収率）。Ｃ２１Ｈ２０Ｎ４Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３９３．４２、実測値３９３．４。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  Ｍｅｔｈａｎｏｌ−ｄ４）  δ  ８．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １６．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５１  （ｓ，  １Ｈ），  ６．９１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．７，  ２．９  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ６．３０  （ｄｔ，  Ｊ  ＝  １６．８，  ２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．８４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １０．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．４５−４．２５  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．２１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１２−４．０２  （ｍ，  １Ｈ），  ３．７８  （ｔ，  Ｊ  ＝  １１．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．５３  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２９−２．９９  （ｍ，  １Ｈ）．
【０３０１】
調製法２３：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化８８】
2020529987.tif 000104
水素化ナトリウム（０．０７２ｇ，３．０１ｍｍｏｌ）を、（Ｓｓ）−Ｎ−ｂｏｃ−ピロリジン−３−メタノール（０．４４４ｇ，２．２１ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（６ｍｌ）の溶液に０℃のＮ２雰囲気下で加え、反応混合物をＲＴで２０分間撹拌した。６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（０．６００ｇ，２．０１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１時間撹拌した。水（１ｍＬ）を加え、反応物を真空中で濃縮した。粗材料を、４０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートを得た（０．９６４ｇ，１．８７ｍｍｏｌ，９３％収率）。Ｃ２２Ｈ３０ＢｒＮ３Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４８０．１５、実測値４８０．１。
【０３０２】
調製法２４：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化８９】
2020529987.tif 000105
酢酸パラジウム（０．０８４ｇ，０．３７５ｍｍｏｌ）を、４−ヒドロキシフェニルボロン酸（０．３８８ｇ，２．８１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．９００ｇ，１．８７ｍｍｏｌ）、１，１’−ビス（ジ−ｔ−ブチルホスフィノ）フェロセン（０．１７８ｇ，０．３７５ｍｍｏｌ）、およびリン酸カリウム（１．１９３ｇ，５．６２ｍｍｏｌ）を含む１，４−ジオキサン（１２ｍｌ）および水（３．００ｍｌ）の溶液に加えた。反応混合物を窒素で１０分間脱気し、次いで１１０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で約５ｍＬの体積まで濃縮した。飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍＬ）を加え、混合物を塩化メチレン（３×１０ｍＬ）で抽出した。塩化メチレン抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、５０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．８００ｇ，１．６２ｍｍｏｌ，８７％収率）を透明黄色液体として得た。Ｃ２８Ｈ３５Ｎ３Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４９４．２７、実測値４９４．２。
【０３０３】
調製法２５：（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール
【化９０】
2020529987.tif 000106
４．０Ｎ  ＨＣｌを含むジオキサン（８．１０ｍｌ，３２．４ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（０．８００ｇ，１．６２ｍｍｏｌ）を含むジオキサン（６ｍｌ）の溶液に加え、反応混合物を６０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、（（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールをＨＣｌ塩として得た（０．５０１ｇ，１．６２ｍｍｏｌ，１００％収率）。Ｃ１８Ｈ１９Ｎ３Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３１０．１６、実測値３１０．３。
【０３０４】
実施例７：（Ｓ）−１−（３−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化９１】
2020529987.tif 000107
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．８３ｍｌ，１６．２ｍｍｏｌ）を、（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールＨＣｌ塩（０．５６０ｇ，１．６２ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（５ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、塩化アクリロイル（０．１７１ｍｌ，２．１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、次いで約２ｍＬの体積に濃縮した。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む３０−９０％勾配のアセトニトリル水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｓ）−１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（２２６ｍｇ，０．４７３ｍｍｏｌ，２９．２％収率）。Ｃ２１Ｈ２１Ｎ３Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３６４．１７、実測値３６４．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １３．００  （ｓ，  １Ｈ），  １０．３１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０４−７．９４  （ｍ，  １Ｈ），  ７．５９−７．４８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８９−６．７９  （ｍ，  １Ｈ），  ６．７６−６．７０  （ｍ，  １Ｈ），  ６．６５−６．５４  （ｍ，  １Ｈ），  ６．１３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １６．６，  １．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．６９−５．６２  （ｍ，  １Ｈ），  ４．２５−３．７８  （ｍ，  ４Ｈ），  ３．７６−３．２８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．８８−２．６３  （ｍ，  １Ｈ），  ２．２２−１．７２  （ｍ，  ２Ｈ）．
【０３０５】
調製法２６：ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化９２】
2020529987.tif 000108
Ｎ２をパージした乾燥シンチレーションバイアルに、ｔｅｒｔ−ブチル３−シアノ−３−（ヒドロキシメチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（８５１ｍｇ，４．０１ｍｍｏｌ）を加え、５ｍＬ  ＤＭＦに溶解し、溶液を０℃に冷却した。６０重量％の水素化ナトリウムを含む鉱油（２６７ｍｇ，６．６９ｍｍｏｌ）を撹拌溶液にゆっくり加え、添加後に反応物をＲＴに加温した。泡状反応物を３０分間撹拌後、０℃に再度冷却した。６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（８００ｍｇ，２．６７ｍｍｏｌ）を含む２ｍＬ  ＤＭＦの溶液を、有機ナトリウム溶液を含むシンチレーションバイアル中にゆっくり加えた。添加後、反応物をＲＴに加温し、２時間撹拌し、その際にＬＣＭＳは出発物質の所望の生成物への完全な変換を示した。反応物を、２ｍＬ  Ｈ２Ｏおよび２ｍＬ  ＥｔＯＡｃをゆっくり加えてクエンチし、５分間撹拌した。次いで、二相溶液を分液漏斗に移し、さらなる１０ｍＬ  Ｈ２Ｏを加えた。混合物を、２０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出し、水層を破棄した。次いで、合わせた有機画分を３×１０ｍＬの１：１のＨ２Ｏ：ブラインで洗浄して、残存ＤＭＦを除去した。次いで、有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、薄黄色油状物を得た。次いで、油状物を、０−４０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を、純粋な無色透明の粘稠性油状物として単離した（１．０９６ｇ，８３％収率）。Ｃ２２Ｈ２７ＢｒＮ４Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４９１．１３、実測値４９１．１。
【０３０６】
調製法２７：ｔｅｒｔ−ブチル３−シアノ−３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化９３】
2020529987.tif 000109
酢酸パラジウム（２５．１ｍｇ，０．１１２ｍｍｏｌ）と１，１’−ビス（ジ−ｔ−ブチルホスフィノ）フェロセン９８％（５３．１ｍｇ，０．１１２ｍｍｏｌ）との１：１混合物を、３−フルオロ−４−ヒドロキシベンゼンボロン酸（２６２ｍｇ，１．６７９ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（５５０ｍｇ，１．１１９ｍｍｏｌ）、およびリン酸カリウム（７１３ｍｇ，３．３６ｍｍｏｌ）を含む１，４−ジオキサン（４．５ｍｌ）および水（１ｍｌ）の溶液に加えた。反応混合物を窒素で１０分間脱気し、次いで１１０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。飽和塩化アンモニウム水溶液（５ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２×５ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、４０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−シアノ−３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（２６７ｍｇ，０．５１１ｍｍｏｌ，４６％収率）。Ｃ２８Ｈ３１ＦＮ４Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値５２３．２４、実測値５２３．４。
【０３０７】
調製法２８：３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−３−カルボニトリル
【化９４】
2020529987.tif 000110
ｔｅｒｔ−ブチル３−シアノ−３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（２６７ｍｇ，０．５１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ（１ｍｌ）をゆっくり加えた。透明溶液をＲＴで５時間撹拌し、その時点でＬＣＭＳの結果から所望の生成物の変換は良好であった。反応物を濃縮して、３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−３−カルボニトリルをＴＦＡ塩として得た（１００％収率）。Ｃ１８Ｈ１５ＦＮ４Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３３９．１３、実測値３３９．２。
【０３０８】
実施例８：（Ｅ）−１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）−３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈインダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−３−カルボニトリル
【化９５】
2020529987.tif 000111
ＨＡＴＵ（２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム、１２１ｍｇ，０．３１８ｍｍｏｌ）を、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン酸塩酸塩（４１．１ｍｇ，０．３１８ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（２ｍＬ）の溶液に加えた。反応混合物をＲＴで５分間撹拌し、次いで、３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−３−カルボニトリルＴＦＡ塩（１６０ｍｇ，０．３５４ｍｍｏｌ）を加えた後、ＤＩＰＥＡ（０．６１８ｍｌ，３．５４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮して、黄色液体を得た。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む１５−７５％アセトニトリル水溶液を用いた分取スケールＺｏｒｂａｘ  Ｂｏｎｕｓ−ＲＰ（２．１×３０ｍｍ，１．８ミクロン）カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）−３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈインダゾール−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−３−カルボニトリルを得た（５６．２ｍｇ，０．１２１ｍｍｏｌ，３４％収率）。Ｃ２４Ｈ２４ＦＮ５Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４５０．１９、実測値４５０．０。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．９４  （ｓ，  １Ｈ），  ９．７７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １２．８，  ２．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２２  （Ｓ，  １Ｈ），    ６．９９−６．９０  （ｍ，  １Ｈ），  ６．７８  （ｓ，  １Ｈ），  ６．５９−６．４８  （ｍ，  １Ｈ），  ６．３１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １５．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．６７−４．６０  （ｍ，  ３Ｈ），  ４．４０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．２７  （ｄ，  Ｊ  ＝  １０．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１２  （ｄ，  Ｊ  ＝  １０．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．７８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６６  （Ｓ，  ６Ｈ）．
【０３０９】
調製法２９：ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）−４−メチルピペリジン−１−カルボキシレート
【化９６】
2020529987.tif 000112
Ｎ２をパージした乾燥シンチレーションバイアルに、１−ｂｏｃ−４−メチルピペリジン−４−オール（５６７ｍｇ，２．６３ｍｍｏｌ）を加え、３ｍＬ  ＤＭＦに溶解し、溶液を０℃に冷却した。６０重量％の水素化ナトリウムを含む鉱油（１７５ｍｇ，４．３９ｍｍｏｌ）を撹拌溶液にゆっくり加え、添加後に反応物をＲＴに加温した。泡状反応物を３０分間撹拌後、０℃に再度冷却した。６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（５２５ｍｇ，１．７５５ｍｍｏｌ）を含む１ｍＬ  ＤＭＦの溶液を、有機ナトリウム溶液を含むシンチレーションバイアル中にゆっくり加えた。添加後、反応物をＲＴに加温し、２時間撹拌し、その際にＬＣＭＳは出発物質の所望の生成物への完全な変換を示した。反応物を、２ｍＬ  Ｈ２Ｏおよび２ｍＬ  ＥｔＯＡｃをゆっくり加えてクエンチし、５分間撹拌した。次いで、二相溶液を分液漏斗に移し、さらなる１０ｍＬ  Ｈ２Ｏを加えた。混合物を、２０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出し、水層を破棄した。次いで、合わせた有機画分を３×１０ｍＬの１：１のＨ２Ｏ：ブラインで洗浄して、残存ＤＭＦを除去した。次いで、有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、薄黄色油状物を得た。次いで、油状物を、０−４０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を、純粋な無色透明の粘稠性油状物として単離した（３８９ｍｇ，４５％収率）。Ｃ２３Ｈ３２ＢｒＮ３Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４９４．１７、実測値４９４．４。
【０３１０】
調製法３０：ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）−４−メチルピペリジン−１−カルボキシレート
【化９７】
2020529987.tif 000113
酢酸パラジウム（９．１ｍｇ，０．０４０ｍｍｏｌ）と１，１’−ビス（ジ−ｔ−ブチルホスフィノ）フェロセン９８％（１９．２ｍｇ，０．０４０ｍｍｏｌ）との１：１混合物を、４−ヒドロキシベンゼンボロン酸（４２ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）−４−メチルピペリジン−１−カルボキシレート（１００ｍｇ，０．２０２ｍｍｏｌ）、および三塩基性リン酸カリウム（９７％無水物）（１２９ｍｇ，０．６０７ｍｍｏｌ）を含む１，４−ジオキサン（２ｍｌ）および水（０．５ｍｌ）の溶液に加えた。反応混合物を窒素で１０分間脱気し、次いで１１０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。飽和塩化アンモニウム水溶液（５ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２×５ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、４０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたコンビフラッシュカラムクロマトグラフィ（１２ｇ）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）−４−メチルピペリジン−１−カルボキシレートを得た（９６ｍｇ，０．１８９ｍｍｏｌ，９４％収率）。Ｃ２９Ｈ３７Ｎ３Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値  ５０９８．２８、実測値５０８．３。
【０３１１】
調製法３１：４−（４−（（４−メチルピペリジン−４−イル）オキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール
【化９８】
2020529987.tif 000114
ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）−４−メチルピペリジン−１−カルボキシレート（９６ｍｇ，０．１８９ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（１ｍｌ）に溶解し、４Ｎ  ＨＣｌを含む１，４−ジオキサン（１．１８ｍｌ，４．７３ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。透明溶液をＲＴで５時間撹拌し、その時点でＬＣＭＳの結果から所望の生成物の変換は良好であった。反応物を濃縮して、４−（４−（（４−メチルピペリジン−４−イル）オキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールをＨＣｌ塩として得た（１００％収率）。Ｃ１９Ｈ２１Ｎ３Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値  ３２４．１７、実測値３２４．３。
【０３１２】
実施例９：（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（４−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）−４−メチルピペリジン−１−イル）ブタ−２−エン−１−オン
【化９９】
2020529987.tif 000115
ＨＡＴＵ（２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート，７２ｍｇ，０．１８９ｍｍｏｌ）を、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン酸塩酸塩（２４ｍｇ，０．１８６ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１ｍＬ）の溶液に加えた。反応混合物をＲＴで５分間撹拌し、次いで、４−（４−（（４−メチルピペリジン−４−イル）オキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールＨＣｌ塩（６８．０ｍｇ，０．１８９ｍｍｏｌ）を加えた後、ＤＩＰＥＡ（０．３３０ｍｌ，１．８９０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮して、黄色液体を得た。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む５−６５％アセトニトリル水溶液を用いた分取スケールＺｏｒｂａｘ  Ｂｏｎｕｓ−ＲＰ（２．１×３０ｍｍ，１．８ミクロン）カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（４−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）−４−メチルピペリジン−１−イル）ブタ−２−エン−１−オンを得た（３９．０ｍｇ，０．０６３ｍｍｏｌ，３４％収率）。Ｃ２５Ｈ３０ＦＮ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４３５．２４、実測値４３５．２。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １２．９９  （ｓ，  １Ｈ），  ９．６６  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ０．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５２−７．４４  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．２７  （ｓ，  １Ｈ），  ６．９０  （ｄ，  Ｊ  ＝  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８６−６．７８  （ｍ，  ３Ｈ），  ６．５８−６．４７  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９９−３．８６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．８３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．７８−３．５５  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．７４  （ｓ，  ６Ｈ），  １．４０  （ｓ，  ３Ｈ）．
【０３１３】
調製法３２：４，６−ジクロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン
【化１００】
2020529987.tif 000116
３，４−ジヒドロ−２ｈ−ピラン（２．０ｇ，２４．０７ｍｍｏｌ）を、４，６−ジクロロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（２．５０ｇ，１３．２３ｍｍｏｌ）を含む塩化メチレン（３０ｍＬ）の溶液に加えた後、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．２７５ｇ，１．６０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１時間撹拌した。水（５０ｍＬ）を加え、混合物を塩化メチレン（３×５０ｍＬ）で抽出した。塩化メチレン抽出物を合わせ、ブライン（１×５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、透明黄色液体を得た。粗液体を、１０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、４，６−ジクロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジンを得た（３．０ｇ，１１．１ｍｍｏｌ，６７％収率）。Ｃ１１Ｈ１１Ｃｌ２Ｎ３Ｏの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値２７２．０４、実測値２７２．２１。
【０３１４】
調製法３３：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化１０１】
2020529987.tif 000117
ＮａＨ（６０％鉱油分散物、１６０ｍｇ，４．０ｍｍｏｌ）を、１−ｂｏｃ−アゼチジン−３−イル−メタノール（７６０ｍｇ，４．０ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（５ｍＬ）およびジエチルエーテル（５ｍＬ）の溶液に０℃で加え、反応混合物を０℃で１５分間撹拌した。４，６−ジクロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（１．０ｇ，３．７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１時間撹拌した。水（１０ｍＬ）を加え、反応混合物を塩化メチレン（３×１０ｍＬ）で抽出した。塩化メチレン抽出物を合わせ、ブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、透明黄色液体を得た。粗液体を、３０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（１．１ｇ，２．６０ｍｍｏｌ，７０％収率）。Ｃ２０Ｈ２７ＣｌＮ４Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４２３．１８、実測値４２３．２５。
【０３１５】
調製法３４：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化１０２】
2020529987.tif 000118
炭酸ナトリウム（５００ｍｇ，４．７２ｍｍｏｌ）の水溶液（４ｍＬ）を、４−ヒドロキシフェニルボロン酸（３９２ｍｇ，２．８４ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（１．０ｇ，２．３６ｍｍｏｌ）を含むジオキサン（２０ｍＬ）に加え、反応混合物を窒素で１０分間脱気した。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）．ＤＣＭ（１９６ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに５分間脱気し、次いで１１０℃で４時間撹拌した。反応混合物をＲＴに冷却し、次いでセライトのベッドで濾過した。濾過した材料を塩化メチレンで洗浄し、濾液を合わせ、水（１×１０ｍＬ）、ブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、透明茶色液体を得た。粗液体を、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（１．０２ｇ，２．１２ｍｍｏｌ，７６％収率）。Ｃ２６Ｈ３２Ｎ４Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４８１．２５、実測値４８１．６５。
【０３１６】
調製法３５：４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）フェノール
【化１０３】
2020529987.tif 000119
ＴＦＡ（４．０ｍｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（５００ｍｇ，１．０４ｍｍｏｌ）を含む塩化メチレン（１０ｍＬ）の溶液に０℃でゆっくり加え、反応混合物をＲＴで３時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、得られた固体を５％メタノール：塩化メチレンでトリチュレートして、表題化合物をＴＦＡ塩として得た（３３０ｍｇ，０．８０４ｍｍｏｌ，７７％収率）。Ｃ１６Ｈ１６Ｎ４Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値２９７．１４、実測値２９７．１５。
【０３１７】
実施例１０：１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１０４】
2020529987.tif 000120
４−（４−（アゼチジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）フェノールＴＦＡ塩（３５．５ｍｇ，０．０８７ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１ｍＬ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．１５１ｍｌ，０．８６５ｍｍｏｌ）を加えた後、塩化アクリロイル（７．０ｕＬ，０．０８７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮して、黄色液体を得た。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む５−７５％アセトニトリル水溶液を用いた分取スケールＺｏｒｂａｘ  Ｂｏｎｕｓ−ＲＰ（２．１×３０ｍｍ，１．８ミクロン）カラムクロマトグラフィによって精製して、１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンを得た（１３．４ｍｇ，０．０２８ｍｍｏｌ，３３％収率）。Ｃ１９Ｈ２８Ｎ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３５１．１５、実測値３５１．１。１Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １３．０２  （ｓ，  １Ｈ），  ９．８０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．９  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ７．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．３２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．０，  １０．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．０９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １７．０，  ２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．６４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．３，  ２．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．５５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１５−４．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．８０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．０．    ５．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．２２−３．０７  （ｍ，  １Ｈ）．
【０３１８】
調製法３６：６−ブロモ−４−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール
【化１０５】
2020529987.tif 000121
３，４−ジヒドロ−２ｈ−ピラン（１９．７９ｍＬ、２１６．５ｍｍｏｌ）を、６−ブロモ−４−クロロ−１Ｈ−インダゾール（１０．０ｇ，４３．３ｍｍｏｌ）を含む酢酸エチル（２００ｍＬ）の溶液に０℃で加えた後、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１．６４ｇ，８．６６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で４時間撹拌した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、水（１×１００ｍＬ）、ブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、黄色固体を得た。粗液体をｎ−ペンタン中でのトリチュレーションによって精製して、６−ブロモ−４−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾールを得た（１３．０ｇ，４１．２ｍｍｏｌ，９５％収率）。Ｃ１２Ｈ１２ＢｒＣｌＮ２Ｏの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３１４．９９、実測値３１４．９３。
【０３１９】
調製法３７：４−（４−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール
【化１０６】
2020529987.tif 000122
炭酸ナトリウム（８．７７ｇ，８２．８ｍｍｏｌ）、４−ヒドロキシフェニルボロン酸（６．８５ｇ、４９．７ｍｍｏｌ）、および６−ブロモ−４−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（１３．０ｇ，４１．４ｍｍｏｌ）を含むジオキサン（２００ｍＬ）および水（５０ｍＬ）の溶液を、窒素で１５分間脱気した。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）．ＤＣＭ（３．３７ｇ，４．１４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに５分間脱気し、次いで１２５℃で２時間撹拌した。反応混合物をＲＴに冷却し、酢酸エチルを加え、反応混合物をセライトのベッドで濾過した。水を加え（１００ｍＬ）、混合物を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、透明茶色液体を得た。粗液体を、０−３０％勾配のＥｔＯＡｃのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、４−（４−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールを得た（７．５ｇ，２２．９ｍｍｏｌ，５５％収率）。Ｃ１８Ｈ１７ＣｌＮ２Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３２９．１１、実測値３２９．０８。
【０３２０】
調製法３８：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）（メチル）アミノ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化１０７】
2020529987.tif 000123
酢酸パラジウム（６８．３ｍｇ，０．３０４ｍｍｏｌ）と２−（ｄｉ−ｔ−ブチルホスフィノ）ビフェニル（１８２．０ｍｇ，０．６０８ｍｍｏｌ）との１：２混合物を、４−（４−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール（５００ｍｇ，１．５２１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（メチルアミノ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（４５７ｍｇ，２．２８１ｍｍｏｌ）、およびナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（９９．９％超）（７３１ｍｇ，７．６０ｍｍｏｌ）を含むトルエン（１５ｍｌ）の溶液に加えた。反応混合物を窒素で１０分間脱気し、次いで１１０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を真空中で約５ｍＬの体積まで濃縮した。飽和塩化アンモニウム水溶液（５ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２×５ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、５０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたコンビフラッシュカラムクロマトグラフィ（２４ｇ）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）（メチル）アミノ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（３６８ｍｇ，０．７４７ｍｍｏｌ，４９％収率）。Ｃ２８Ｈ３６Ｎ４Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４９３．２８、実測値４９３．４。
【０３２１】
調製法３９：４−（４−（（アゼチジン−３−イルメチル）（メチル）アミノ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール
【化１０８】
2020529987.tif 000124
ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）（メチル）アミノ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（３６８ｍｇ，０．７４７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１．５ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ（１．５ｍｌ）をゆっくり加えた。透明溶液をＲＴで５時間撹拌し、その時点でＬＣＭＳの結果から所望の生成物の変換は良好であった。反応物を濃縮して、４−（４−（（アゼチジン−３−イルメチル）（メチル）アミノ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールをＴＦＡ塩として得た（１００％収率）。Ｃ１８Ｈ２０Ｎ４Ｏの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３０９．１７、実測値３０９．２。
【０３２２】
実施例１１：（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）（メチル）アミノ）メチル）アゼチジン−１−イル）ブタ−２−エン−１−オン
【化１０９】
2020529987.tif 000125
ＨＡＴＵ（２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート，５９．５ｍｇ，０．１５７ｍｍｏｌ）を、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン酸塩酸塩（３４ｍｇ，０．２６３ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１ｍＬ）の溶液に加えた。反応混合物をＲＴで５分間撹拌し、次いで、４−（４−（（アゼチジン−３−イルメチル）（メチル）アミノ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールＴＦＡ塩（６３ｍｇ，０．１４９ｍｍｏｌ）を加えた後、ＤＩＰＥＡ（０．２６０ｍｌ，１．４９１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮して、黄色液体を得た。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む５−６５％アセトニトリル水溶液を用いた分取スケールＺｏｒｂａｘ  Ｂｏｎｕｓ−ＲＰ（２．１×３０ｍｍ，１．８ミクロン）カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）（メチル）アミノ）メチル）アゼチジン−１−イル）ブタ−２−エン−１−オンを得た（４７．６ｍｇ，０．０８６ｍｍｏｌ，９６％収率）。Ｃ２４Ｈ２９Ｎ５Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４２０．２４、実測値４２０．２。
【０３２３】
調製法４０：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）チオ）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化１１０】
2020529987.tif 000126
６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（６００ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−メルカプトピロリジン−１−カルボキシレート（４８８ｍｇ，２．２０ｍｍｏｌ）を含むＤＭＳＯ（５ｍＬ）の撹拌溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（１．３０ｍｇ，４．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１２０℃で１６時間撹拌した。水を加え、反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍｌ）で抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物を合わせ、水で洗浄した後にブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、粗中間体生成物を透明粘稠性液体として得た。
【０３２４】
粗中間体を含むジオキサン（２０ｍＬ）および水（４ｍｌ）の撹拌溶液に、４−ヒドロキシフェニルボロン酸（２４０ｍｇ，１．７４ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（４６１ｍｇ，４．３５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を窒素で１５分間脱気した。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＤＣＭ（１１８ｍｇ，０．０１４５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をさらに５分間脱気し、次いで１１０℃で４時間撹拌した。反応混合物をＲＴに冷却し、水を加え、反応混合物を酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、透明茶色液体を得た。粗液体を、３０−５０％勾配のＥｔＯＡｃのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）チオ）ピロリジン−１−カルボキシレートを得た（６００ｍｇ，１．２１ｍｍｏｌ，６１％）。Ｃ２７Ｈ３３ＣｌＮ３Ｏ４Ｓの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４９６．２３、実測値４９６．４２。
【０３２５】
調製法４１：（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルチオ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール
【化１１１】
2020529987.tif 000127
４．０Ｎ  ＨＣｌを含むジオキサン（１０．０ｍｌ，４０．０ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）チオ）ピロリジン−１−カルボキシレート（４００ｍｇ，０．８０８ｍｍｏｌ）を含むメタノール（６ｍｌ）の溶液に加え、反応混合物を４０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、得られた残渣を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む勾配２０−８０％のアセトニトリル水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルチオ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールをＴＦＡ塩として得た（１７５ｍｇ，０．４１１ｍｍｏｌ，５１％収率）。Ｃ１７Ｈ１７Ｎ３ＯＳの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３１２．１２、実測値３１２．２２。
【０３２６】
実施例１２：（Ｓ）−１−（３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）チオ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１１２】
2020529987.tif 000128
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０７９ｍｌ，０．４５０ｍｍｏｌ）を、（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルチオ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールＴＦＡ塩（３８．５ｍｇ，０．０９１ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（０．２ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、塩化アクリロイル（８．０μＬ，０．０９９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル勾配水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｓ）−１−（３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）チオ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（１７．１ｍｇ，０．０４６ｍｍｏｌ，５１％収率）。Ｃ２０Ｈ１９Ｎ３Ｏ２Ｓの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３６６．１３、実測値３６６．１。
【０３２７】
調製法４２：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）スルホニル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化１１３】
2020529987.tif 000129
塩基性アルミナ（２００ｍｇ）およびオキソン（７４４ｍｇ，２．４２ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）チオ）ピロリジン−１−カルボキシレート（４００ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ）を含むクロロホルム（５０ｍＬ）および水（１ｍＬ）の溶液に加え、反応混合物を６５℃で１２時間撹拌した。反応混合物をセライトのベッドで濾過し、濾過した材料をクロロホルムで洗浄した。濾液を合わせ、水を加え、混合物をクロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出した。クロロホルム抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗液体を、３０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）スルホニル）ピロリジン−１−カルボキシレートを得た（２００ｍｇ，０．３７９ｍｍｏｌ，４７％収率）。Ｃ２７Ｈ３３ＣｌＮ３Ｏ６の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値５２８．２２、実測値５２８．４８。
【０３２８】
調製法４３：（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルスルホニル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール
【化１１４】
2020529987.tif 000130
４．０Ｎ  ＨＣｌを含むジオキサン（１０．０ｍｌ，４０．０ｍｍｏｌ）を、（３Ｓ）−３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）スルホニル）ピロリジン−１−カルボキシレート（２００ｍｇ，０．３７９ｍｍｏｌ）を含むメタノール（２ｍｌ）の溶液に加え、反応混合物をＲＴで８時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、得られた残渣をジエチルエーテルでトリチュレートして、（（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルスルホニル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールをＨＣｌ塩として得た（１４０ｍｇ，０．３６９ｍｍｏｌ，９７％収率）。Ｃ１７Ｈ１７Ｎ３Ｏ３Ｓの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３４４．１１、実測値３４４．０４。
【０３２９】
実施例１３：（（Ｓ）−１−（３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）スルホニル）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１１５】
2020529987.tif 000131
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０７９ｍｌ，０．４５０ｍｍｏｌ）を、（（（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルスルホニル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールＨＣｌ塩（３１．０ｍｇ，０．０８２ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（０．２ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、塩化アクリロイル（８．０μＬ，０．０９９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１０分間撹拌し、粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル勾配水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（（Ｓ）−１−（３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）スルホニル）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（３．１ｍｇ，０．００６１ｍｍｏｌ，７％収率）。Ｃ２０Ｈ１９Ｎ３Ｏ４Ｓの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３９８．１２、実測値３９８．０。
【０３３０】
調製法４４：ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）メチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化１１６】
2020529987.tif 000132
０．５Ｍの９−ＢＢＮを含むＴＨＦ溶液（７．９２ｍＬ、３．９６ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル４−メチレンピペリジン−１−カルボキシレート（４６８ｍｇ，２．３７ｍｍｏｌ）に加え、反応混合物を８０℃で２時間撹拌した。反応混合物をＲＴに冷却し、次いで、予め形成させた４−ブロモ−６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（５００ｍｇ，１．５８ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５４８ｍｇ，３．９６ｍｍｏｌ）、およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＤＣＭ（１２９ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１０．０ｍｌ）およびＨ２Ｏ（２．０ｍｌ）の溶液中にカニューラで移した。反応混合物を８０℃で１６時間撹拌した。反応混合物をセライトのベッドで濾過し、濾過した材料を酢酸エチルで洗浄した。濾液を合わせ、水（１００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２×１５０ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル（ｃｅｔｈｙｌ  ａｃｅｔａｔｅ）抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗液体を、３０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）メチル）ピペリジン−１−カルボキシレートを得た（４６０ｍｇ，１．０６ｍｍｏｌ，６７％収率）。Ｃ２３Ｈ３２ＣｌＮ３Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４３４．２２、実測値４３４．４７。
【０３３１】
調製法４５：ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）メチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化１１７】
2020529987.tif 000133
４−ヒドロキシフェニルボロン酸（１９５ｍｇ，１．４１ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）メチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４１０ｍｇ，０．９４ｍｍｏｌ）を含むジオキサン（１０．０ｍＬ）および水（２．０ｍＬ）の懸濁液に加えた後、リン酸カリウム（４０１ｍｇ，１．８８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を窒素で１５分間脱気した。２’−（ジメチルアミノ）−２−ビフェニリル−パラジウム（ＩＩ）クロリドジノルボルニルホスフィン錯体（５２ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、マイクロ波照射下にて１００℃で１時間加熱した。反応混合物をＲＴに冷却し、次いでセライトのベッドで濾過した。水（１００ｍＬ）を濾液に加え、次いで、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗液体を、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）メチル）ピペリジン−１−カルボキシレートを得た（３００ｍｇ，０．６１０ｍｍｏｌ，６５％）。Ｃ２９Ｈ３７Ｎ３Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４９２．２９、実測値４９２．４６。
【０３３２】
調製法４６：４−（４−（ピペリジン−４−イルメチル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール
【化１１８】
2020529987.tif 000134
４．０Ｎ  ＨＣｌを含むジオキサン（１０．０ｍｌ，４０．０ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）メチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３００ｍｇ，０．６１０ｍｍｏｌ）を含むメタノール（２ｍｌ）の溶液に加え、反応混合物をＲＴで８時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、得られた残渣をジエチルエーテルでトリチュレートして、４−（４−（ピペリジン−４−イルメチル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールをＨＣｌ塩として得た（１９５ｍｇ，０．５６７ｍｍｏｌ，９３％収率）。Ｃ１９Ｈ２１Ｎ３Ｏの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３０８．１８、実測値３０８．１０。
【０３３３】
実施例１４：１−（４−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）メチル）ピペリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１１９】
2020529987.tif 000135
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０７９ｍｌ，０．４５０ｍｍｏｌ）を、４−（４−（ピペリジン−４−イルメチル）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールＨＣｌ塩（２７．５ｍｇ，０．０８０ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（０．２ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、塩化アクリロイル（８．０μＬ，０．０９９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１０分間撹拌し、粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル勾配水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、１−（４−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）メチル）ピペリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（７．２ｍｇ，０．０１５ｍｍｏｌ，１９％収率）。Ｃ２２Ｈ２３Ｎ３Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３６２．１９、実測値３６２．１。
【０３３４】
調製法４７：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ，Ｅ）−２−（３−エトキシ−３−オキソプロパ−１−エン−１−イル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化１２０】
2020529987.tif 000136
エチル３−（トリフェニルホスホラニリデン）プロパノアート（３．６４ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−２−ホルミルピロリジン−１−カルボキシレート（２．０ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）を含む塩化メチレン（４０ｍＬ）の溶液に０℃で加え、反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。水（２００ｍＬ）を加え、反応混合物を塩化メチレン（２×１００ｍＬ）で抽出した。塩化メチレン抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗液体を、５％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ，Ｅ）−２−（３−エトキシ−３−オキソプロパ−１−エン−１−イル）ピロリジン−１−カルボキシレートを得た（１．７０ｇ，６．３１ｍｍｏｌ，６３％収率）。
【０３３５】
調製法４８：エチル（Ｒ，Ｅ）−３−（１−メチルピロリジン−２−イル）アクリラート
【化１２１】
2020529987.tif 000137
４Ｍ  ＨＣｌを含むジオキサン（７．２０ｍＬ、２８．８ｍｍｏｌ）をＴＦＡ（１０．９０ｍｌ）の溶液に加え、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ，Ｅ）−２−（３−エトキシ−３−オキソプロパ−１−エン−１−イル）ピロリジン−１−カルボキシレート（１．７０ｇ，６．３１ｍｍｏｌ）を含むジオキサン（４０ｍＬ）の溶液にゆっくり加え、反応混合物をＲＴで２時間撹拌した。反応物を真空中で濃縮して、粗中間体を得た。３７％ホルムアルデヒドを含む水溶液（４．１９ｍＬ、４１．４ｍｍｏｌ）を、粗中間体を含む塩化メチレン（５０ｍＬ）の溶液に０℃で加えた後、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（５．２６ｇ，２４．８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１６時間撹拌した。氷水（２０ｍＬ）を加え、反応混合物を塩化メチレン（２×１００ｍＬ）で抽出した。塩化メチレン抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、エチル（Ｒ，Ｅ）−３−（１−メチルピロリジン−２−イル）アクリラートを得た（０．９００ｇ，４．９１５ｍｍｏｌ，７８％収率）。Ｃ１０Ｈ１７ＮＯ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値１８４．１４、実測値１８４．０。
【０３３６】
調製法４９：（Ｒ，Ｅ）−３−（１−メチルピロリジン−２−イル）アクリル酸
【化１２２】
2020529987.tif 000138
水酸化ナトリウム（２９４ｍｇ，７．３６ｍｍｏｌ）を、エチル（Ｒ，Ｅ）−３−（１−メチルピロリジン−２−イル）アクリラート（０．９００ｇ，４．９１５ｍｍｏｌ，７８％収率）を含む２：１  ＴＨＦ／水（１５ｍＬ）の溶液に加え、反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、エチル（Ｒ，Ｅ）−３−（１−メチルピロリジン−２−イル）アクリル酸を得た（６６８ｍｇ，４．３０ｍｍｏｌ，８８％収率）。Ｃ８Ｈ１３ＮＯ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値１５６．１０、実測値１５６．２６。
【０３３７】
実施例１５：（Ｅ）−１−（（Ｓ）−３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）−３−（（Ｒ）−１−メチルピロリジン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１２３】
2020529987.tif 000139
ＨＡＴＵ（０．０３１ｇ，０．０８３ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（０．１ｍＬ）の溶液を、エチル（Ｒ，Ｅ）−３−（１−メチルピロリジン−２−イル）アクリル酸（１４．０ｍｇ，０．０９０ｍｍｏｌ）に加えた後、（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルオキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール塩酸塩（０．０２５ｇ，０．０７５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０６５ｍｌ，０．３７５ｍｍｏｌ）の溶液を加え、反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル勾配水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（（Ｅ）−１−（（Ｓ）−３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）−３−（（Ｒ）−１−メチルピロリジン−２−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（７．８ｍｇ，０．０１４ｍｍｏｌ，１９％収率）。Ｃ２５Ｈ２８Ｎ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４３３．２３、実測値４３３．１。
【０３３８】
調製法５０：ｔｅｒｔ−ブチル２−（（ジメチルアミノ）メチル）アクリラート
【化１２４】
2020529987.tif 000140
パラホルムアルデヒド（１．２０ｇ，４３．２ｍｍｏｌ）を、マロン酸（２．０ｇ，１９．３ｍｍｏｌ）を含む１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）の溶液に加えた後、２Ｍジメチルアミンを含むＴＨＦの溶液（９．６０ｍＬ、１９．２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を７０℃で１時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、粗生成物を、ジエチルエーテルおよびアセトンを用いて再結晶化して、中間体を白色固体として得た。中間体白色固体をｔ−ＢｕＯＨ（１００ｍＬ）に溶解し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナート（４．６０ｍＬ、２０．７ｍｍｏｌ）を反応混合物に加えた後、４−ジメチルアミノピリジン（５１１ｍｇ，４．１８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。塩化メチレン（５００ｍＬ）を加え、反応混合物を水（２×５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣を、２％メタノールを含む塩化メチレンを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−（（ジメチルアミノ）メチル）アクリラートを得た（２２０ｍｇ，１．１９ｍｍｏｌ，６％収率）。
【０３３９】
調製法５１：２−（（ジメチルアミノ）メチル）アクリル酸
【化１２５】
2020529987.tif 000141
１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（５．０ｍＬ、５ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル２−（（ジメチルアミノ）メチル）アクリラート（２２０ｍｇ，１．１９ｍｍｏｌ）に加え、反応混合物を１００℃で１５分間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、得られた残渣をトルエンと共沸し、ジエチルエーテルとさらにトリチュレートして、２−（（ジメチルアミノ）メチル）アクリル酸をＨＣｌ塩として得た（１１９ｍｇ，０．７１９ｍｍｏｌ，６０％収率）。Ｃ６Ｈ１１ＮＯ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値１３０．０９、実測値１３０．２２。
【０３４０】
実施例１６：（Ｓ）−２−（（ジメチルアミノ）メチル）−１−（３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１２６】
2020529987.tif 000142
ＨＡＴＵ（０．０３１ｇ，０．０８３ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（０．１ｍＬ）の溶液を、２−（（ジメチルアミノ）メチル）アクリル酸塩酸塩（１４．９ｍｇ，０．０９０ｍｍｏｌ）に加えた後、（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルオキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール塩酸塩（０．０２５ｇ，０．０７５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０６５ｍｌ，０．３７５ｍｍｏｌ）の溶液を加え、反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル勾配水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｓ）−２−（（ジメチルアミノ）メチル）−１−（３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（２．６ｍｇ，０．００５ｍｍｏｌ，７％収率）。Ｃ２３Ｈ２６Ｎ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４０７．２１、実測値４０７．１。
【０３４１】
実施例１７：（Ｓ）−１−（３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−イン−１−オン
【化１２７】
2020529987.tif 000143
ＨＡＴＵ（０．０３１ｇ，０．０８３ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（０．１ｍＬ）の溶液を、プロピオル酸（６．０ｍｇ，０．０９０ｍｍｏｌ）に加えた後、（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルオキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール塩酸塩（０．０２５ｇ，０．０７５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０６５ｍｌ，０．３７５ｍｍｏｌ）の溶液を加え、反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル勾配水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｓ）−１−（３−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−イン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（２．４ｍｇ，０．００５ｍｍｏｌ，７％収率）。Ｃ２０Ｈ１７Ｎ３Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３４８．１４、実測値３４８．０。
【０３４２】
実施例１８：（Ｓ）−４−（４−（（１−（ビニルスルホニル）ピロリジン−３−イル）オキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール
【化１２８】
2020529987.tif 000144
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５２ｍｌ，０．３０１ｍｍｏｌ）を、（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルオキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノール塩酸塩（０．０２０ｇ，０．０６０ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（０．２ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、エテンスルホニルクロリド（８．４ｍＬ、０．０６６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１０分間撹拌し、粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル勾配水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｓ）−４−（４−（（１−（ビニルスルホニル）ピロリジン−３−イル）オキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールをＴＦＡ塩として得た（８．２ｍｇ，０．０１６ｍｍｏｌ，２７％収率）。Ｃ１９Ｈ１９Ｎ３Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３８６．１２、実測値３８６．３。
【０３４３】
調製法５２：ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化１２９】
2020529987.tif 000145
炭酸セシウム（６．３３ｇ，１９．４２ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（３．２０ｇ，６．４７ｍｍｏｌ）および３−フルオロ−４−ヒドロキシベンゼンボロン酸（１．５１４ｇ，９．７１ｍｍｏｌ）を含む１，４−ジオキサン（２０．７１ｍｌ）および水（５．１８ｍｌ）の溶液に加え、反応混合物を窒素で１０分間脱気した。
【０３４４】
ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（０．７９３ｇ，０．９７１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１１０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で約５ｍＬの体積まで濃縮した。飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）を加え、混合物を塩化メチレン（２×２０ｍＬ）で抽出した。塩化メチレン抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、５０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（２．３０ｇ，４．３８ｍｍｏｌ，６８％収率）。Ｃ２９Ｈ３７ＦＮ３Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値５２６．２７、実測値５２６．３。
【０３４５】
調製法５３：４−（４−（（２−アゼチジン−３−イル）プロパン−２−イル）オキシ）−１−Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−フルオロフェノール
【化１３０】
2020529987.tif 000146
ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（３．１０ｇ、５．９０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ（１０ｍｌ）をゆっくり加えた。透明溶液をＲＴで２時間撹拌し、その時点でＬＣＭＳの結果から所望の生成物の変換は良好であった。反応物を濃縮して、４−（４−（（２−アゼチジン−３−イル）プロパン−２−イル）オキシ）−１−Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−フルオロフェノールをＴＦＡ塩として得た（１００％収率）。Ｃ１９Ｈ２１ＦＮ３Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３４２．１６、実測値３４２．３。
【０３４６】
実施例１９：（Ｅ）−１−（３−（２−（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−イル）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン−１−オン
【化１３１】
2020529987.tif 000147
ＨＡＴＵ（２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート，２．９２ｇ，７．０７ｍｍｏｌ）を、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エン酸塩酸塩（１．０７ｇ，６．４８ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１０ｍＬ）の溶液に加えた。反応混合物をＲＴで１０分間撹拌し、次いで、４−（４−（（２−アゼチジン−３−イル）プロパン−２−イル）オキシ）−１−Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−フルオロフェノールＴＦＡ塩（２．０１ｇ，５．８９ｍｍｏｌ）を加えた後、ＤＩＰＥＡ（３．０８ｍｌ，１７．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮して、黄色液体を得た。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む勾配２０−８０％のアセトニトリル水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（３−（２−（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）シクロブチル）ブタ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（１．６５ｇ，３．６５ｍｍｏｌ，６１．９％収率）。Ｃ２５Ｈ３０ＦＮ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４５３．２３、実測値４５３．３。
【０３４７】
調製法５４：ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（２，６−ジクロロピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（ａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）
【化１３２】
2020529987.tif 000148
ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（６．５ｇ，３０．２１ｍｍｏｌ）を含むＤＭＳＯ（１０ｍＬ）の溶液を、６０重量％の水素化ナトリウムを含む鉱油（１．６５ｇ、４１．２０ｍｍｏｌ）を含むＤＭＳＯ（１５ｍＬ）の溶液に滴下して加え、反応混合物をＲＴで１０分間撹拌した。２，４，６−トリクロロピリジン（５．０ｇ  、２７．６２ｍｍｏｌ）を含むＤＭＳＯ（２５ｍＬ）の溶液を、得られた懸濁液に滴下して加え、反応混合物を６０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を、飽和塩化アンモニウム水溶液を用いてクエンチし、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、粗液体を得た。粗液体を、５％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（２，６−ジクロロピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（２．１０ｇ，５．８０ｍｍｏｌ，２１．１％収率）。Ｃ１６Ｈ２３Ｃｌ２Ｎ２Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３６１．１１、実測値３６１．１１。
【０３４８】
調製法５５：ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−クロロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化１３３】
2020529987.tif 000149
２ＭのｎＢｕＬｉを含むヘキサンの溶液（３．０５ｍＬ、６．１１ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（２，６−ジクロロピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（２．０ｇ，５．５５ｍｍｏｌ）を含むＴＨＦ（４０ｍＬ）の溶液に−７８℃で滴下して加えた。ＤＭＦ（０．６４ｍＬ、８．３３ｍｍｏｌ）を一度に加え、反応混合物を−７８℃で１０分間撹拌した。５％酢酸を含むジエチルエーテルを加え、混合物を水でさらに希釈した。水層を、酢酸エチル（３回）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、粗中間体ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（２，６−ジクロロ−３−ホルミルピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た。
【０３４９】
ヒドラジン水和物（１．０ｍＬ、２０．５６ｍｍｏｌ）を、粗ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（２，６−ジクロロ−３−ホルミルピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレートを含むＴＨＦ（４０ｍＬ）の溶液に０℃で滴下して加え、反応混合物をＲＴで２時間撹拌した。トリエチルアミン（１．４５ｍＬ、１０．２８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を６０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、得られた残渣を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、粗液体を得た。粗液体を、２０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−クロロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（１．２０ｇ，３．２７ｍｍｏｌ，５８．９％収率）。Ｃ１７Ｈ２３ＣｌＮ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３６７．１５、実測値３６７．００。
【０３５０】
調製法５６：ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化１３４】
2020529987.tif 000150
炭酸ナトリウム（６３６ｍｇ，６．００ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−クロロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（１．１ｇ，３．００ｍｍｏｌ）を含む４：１ジオキサン／水（１５ｍＬ）の溶液に加えた後、フェノールボロン酸（４９６ｍｇ，３．６０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をアルゴンで１０分間脱気した。ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン付加体（２４５ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をアルゴンで５分間さらに脱気し、反応混合物を、マイクロ波照射下にて１３０℃で１時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、粗液体を得た。粗液体を、５０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（６５０ｍｇ，１．５３ｍｍｏｌ，５１．０％収率）。Ｃ２３Ｈ２９Ｎ４Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４２５．２２、実測値４２５．２１。
【０３５１】
調製法５７：４−（４−（（２−（アゼチジン−３−イル）プロパン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）フェノール
【化１３５】
2020529987.tif 000151
ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−カルボキシレート（６３０ｍｇ，１．４８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ（６．３ｍｌ）をゆっくり加えた。透明溶液をＲＴで４時間撹拌し、その時点でＬＣＭＳの結果から所望の生成物の変換は良好であった。反応物を真空中で濃縮し、残渣をアセトニトリルおよびジエチルエーテルでトリチュレートして、４−（４−（（２−（アゼチジン−３−イル）プロパン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）フェノールをＴＦＡ塩として得た（１００％収率）。Ｃ１８Ｈ２１Ｎ４Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３２５．１７、実測値３２５．１３。
【０３５２】
実施例２０：１−（３−（２−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１３６】
2020529987.tif 000152
ジイソプロピルエチルアミン（０．２９８ｍｌ，１．７１１ｍｍｏｌ）を、４−（４−（（２−（アゼチジン−３−イル）プロパン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）フェノールＴＦＡ塩（１５０ｍｇ，０．３４２ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（３．００ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、塩化アクリロイル（０．０３１ｍｌ，０．３７６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１５分間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む１０−７０％勾配のアセトニトリルの水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、１−（３−（２−（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）プロパン−２−イル）アゼチジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（８０．５ｍｇ，０．１６３ｍｍｏｌ，４７．８％収率）。Ｃ２１Ｈ２３Ｎ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３７９．１８、実測値３７９．３。
【０３５３】
調製法５８：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−メチルアゼチジン−１−カルボキシレート
【化１３７】
2020529987.tif 000153
水素化ナトリウム（２１１ｍｇ，８．７９ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−（ヒドロキシメチル）−３−メチルアゼチジン−１−カルボキシレート（９７３ｍｇ，４．８３ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（４．４ｍＬ）の溶液に０℃で加え、反応混合物をＲＴで３０分間撹拌した。次いで、反応混合物を、４，６−ジクロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（１．２０ｇ，４．３９ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（４．４ｍＬ）の溶液に０℃で滴下して加え、反応混合物をＲＴで２時間撹拌した。反応物を、水（１ｍＬ）を加えてクエンチし、得られた混合物を真空中で濃縮して、薄茶色液体を得た。水（１０ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液（５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、茶色液体を得た。粗液体を、４０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−メチルアゼチジン−１−カルボキシレートを得た（１．０６ｇ，４．３９ｍｍｏｌ，５４．９％収率）。Ｃ２０Ｈ２９ＣｌＮ５Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４３８．１９、実測値４３８．６。
【０３５４】
調製法５９：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−メチルアゼチジン−１−カルボキシレート
【化１３８】
2020529987.tif 000154
三塩基性リン酸カリウム（２１８ｍｇ，１．０３ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−メチルアゼチジン−１−カルボキシレート（１５０ｍｇ，０．３４３ｍｍｏｌ）を含む４：１ジオキサン／水（１．７１ｍＬ）の溶液に加えた後、３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニルボロン酸（８０．０ｍｇ，０．５１４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を窒素で１０分間脱気した。酢酸パラジウム（１５．４ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ）および１，１’−ビス（ジ−ｔ−ブチルホスフィノ）フェロセン（３２．５ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１１０℃で一晩撹拌した。反応混合物を真空中で約５ｍＬの体積まで濃縮した。飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、４０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−メチルアゼチジン−１−カルボキシレートを得た（６５ｍｇ，０．３４３ｍｍｏｌ，３７．０％収率）。Ｃ２６Ｈ３３ＦＮ５Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値５１４．２５、実測値５１４．７。
【０３５５】
調製法６０：２−フルオロ−４−（４−（（３−メチルアゼチジン−３−イル）メトキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）フェノール
【化１３９】
2020529987.tif 000155
ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−メチルアゼチジン−１−カルボキシレート（６５ｍｇ，０．１２７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（０．５６ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ（０．５６ｍｌ）を加え、反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。反応物を真空中で濃縮して、２−フルオロ−４−（４−（（３−メチルアゼチジン−３−イル）メトキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）フェノールをＴＦＡ塩として得た（１００％収率）。Ｃ１６Ｈ１７ＦＮ５Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３３０．１４、実測値３３０．３。
【０３５６】
実施例２１：１−（３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−メチルアゼチジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１４０】
2020529987.tif 000156
ジイソプロピルエチルアミン（０．２１０ｍｌ，１．２０ｍｍｏｌ）を、２−フルオロ−４−（４−（（３−メチルアゼチジン−３−イル）メトキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）フェノールＴＦＡ塩（５３．２ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（０．６０ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、塩化アクリロイル（９．７５μｌ，０．１２０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１５分間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、粗液体を得た。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む１０−６０％勾配のアセトニトリルの水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、１−（３−（（（６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−メチルアゼチジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（１０．５ｍｇ，０．１２０ｍｍｏｌ，２１．７％収率）。Ｃ１９Ｈ１９ＦＮ５Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３８４．１５、実測値３８４．３。
【０３５７】
調製法６１：ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−エチルアゼチジン−１−カルボキシレート
【化１４１】
2020529987.tif 000157
６０重量％の水素化ナトリウムを含む鉱油（３５３ｍｇ，８．８２ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−エチル−３−（ヒドロキシメチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（１．１ｇ，４．８５ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１０ｍＬ）の溶液に０℃で加え、反応混合物をＲＴで４０分間撹拌した。０℃の４，６−ジクロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン（１．２０ｇ，４．４１ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（５ｍＬ）の溶液および反応混合物をＲＴで１時間撹拌した。反応物を、水を加えてクエンチし、混合物を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、水および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウムで乾燥させて、粗残渣を得た。粗残渣を、５％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−エチルアゼチジン−１−カルボキシレートを得た（９００ｍｇ，４．３９ｍｍｏｌ，４５．２％収率）。Ｃ２２Ｈ３２ＣｌＮ４Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４５１．２１、実測値４５１．１３。
【０３５８】
調製法６２：ｔｅｒｔ−ブチル３−エチル−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート
【化１４２】
2020529987.tif 000158
フェノールボロン酸（４１３ｍｇ，２．９９ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（４２１ｍｇ３．９８ｍｍｏｌ）を含む水溶液（２ｍＬ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（（６−クロロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）−３−エチルアゼチジン−１−カルボキシレート（９００ｍｇ，１．９９ｍｍｏｌ）を含むジオキサン（８ｍＬ）の溶液に加え、反応物をアルゴンで５分間脱気した。
【０３５９】
ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン付加体（１６２ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をアルゴンで５分間さらに脱気し、反応混合物を１１０℃で１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過した。水を加え、酢酸エチル層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、粗液体を得た。粗液体を、３０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−エチル−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレートを得た（８００ｍｇ，１．５７ｍｍｏｌ，７９．０％収率）。Ｃ２８Ｈ３７Ｎ４Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値５０９．２８、実測値５０９．２９。
【０３６０】
調製法６３：４−（４−（（３−エチルアゼチジン−３−イル）メトキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）フェノール
【化１４３】
2020529987.tif 000159
ｔｅｒｔ−ブチル３−エチル−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（８００ｍｇ，１．５７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解し、ＴＦＡ（１０ｍｌ）を０℃で加え、反応混合物をＲＴで３時間撹拌した。反応物を真空中で濃縮し、得られた残渣をジエチルエーテルでトリチュレートした。粗残渣を最少量のアセトニトリルに溶解し、ジエチルエーテルを用いて沈殿させて、４−（４−（（３−エチルアゼチジン−３−イル）メトキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）フェノールをＴＦＡ塩として得た（２８７ｍｇ，０．８８５ｍｍｏｌ，５６．３％収率）。Ｃ１８Ｈ２１Ｎ４Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３２５．１７、実測値３２５．０７。
【０３６１】
実施例２２：１−（３−エチル−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１４４】
2020529987.tif 000160
ジイソプロピルエチルアミン（０．２４６ｍｌ，１．４１ｍｍｏｌ）を、４−（４−（（３−エチルアゼチジン−３−イル）メトキシ）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）フェノールＴＦＡ塩（１２４ｍｇ，０．２８３ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（２．０ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、塩化アクリロイル（２５μｌ，０．３１１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１５分間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む勾配２０−８０％のアセトニトリル水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、１−（３−エチル−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）アゼチジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（４４．８ｍｇ，０．１１８ｍｍｏｌ，４１．９％収率）。Ｃ２１Ｈ２３Ｎ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３７９．１８、実測値３７９．３。
【０３６２】
調製法６４：６−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール
【化１４５】
2020529987.tif 000161
亜硝酸ナトリウム（１．８５ｇ，２６．８ｍｍｏｌ）を含む水溶液（５０ｍＬ）を、５−ブロモ−３−フルオロベンゼン−１，２−ジアミン（５．００ｇ，２４．４ｍｍｏｌ）を含む水（５０ｍＬ）および酢酸（１８．０ｍＬ）の溶液に加え、反応混合物をＲＴで１５分間、次いで８５℃で１時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、得られた残渣に水を加えた。混合物を酢酸エチル（２×３００ｍＬ）で抽出し、酢酸エチル抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、６−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾールを得た（５．０ｇ，２３．１ｍｍｏｌ，９４．０％収率）。Ｃ６Ｈ３ＢｒＦＮ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ−Ｈ］−計算値２１３．９４、実測値２１３．９４。
【０３６３】
調製法６５：６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール
【化１４６】
2020529987.tif 000162
ｐ−トルエンスルホン酸（７９６ｍｇ，４．６２ｍｍｏｌ）を、６−ブロモ−４−フルオロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール（５．０ｇ，２３．１ｍｍｏｌ）を含むテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）の溶液に加えた後、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（７．７ｇ，９２．６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、得られた残渣を、１０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾールを得た（３．８ｇ，１２．７ｍｍｏｌ，５５．４％収率）。Ｃ１１Ｈ１２ＢｒＦＮ３Ｏの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３００．０１、実測値３００．０９。
【０３６４】
調製法６６：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化１４７】
2020529987.tif 000163
炭酸セシウム（１．５０ｇ，４．６４ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（５６４ｍｇ，２．８０ｍｍｏｌ）を含むＤＭＳＯ（１５ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、６−ブロモ−４−フルオロ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール（７００ｍｇ，２．３４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８０℃で３時間撹拌した。水を加え、混合物を酢酸エチル（３×）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、水および塩化ナトリウムの水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、粗残渣を得た。粗残渣を、３０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートを得た（５００ｍｇ，１．０４ｍｍｏｌ，４５．６％収率）。Ｃ２１Ｈ３０ＢｒＮ４Ｏ４の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４８１．１５、実測値４８１．２。
【０３６５】
調製法６７：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化１４８】
2020529987.tif 000164
フェノールボロン酸（１９２ｍｇ，１．４０ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（４５０ｍｇ，０．９３ｍｍｏｌ）を含むジオキサン（１０ｍＬ）および水（２ｍＬ）の溶液に加えた後、リン酸カリウム（３９４ｍｇ，１．８６ｍｍｏｌ）を加え、反応物をアルゴンで１５分間脱気した。２’−（ジメチルアミノ）−２−ビフェニリル−パラジウム（ＩＩ）クロリドジノルボルニルホスフィン錯体（５２ｍｇ，０．０９３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をマイクロ波照射下にて１１０℃４０分間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過した。水を加え、混合物を酢酸エチル（３×）で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、粗残渣を得た。粗残渣を、３０％酢酸エチルのヘキサン溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートを得た（３００ｍｇ，０．６０７ｍｍｏｌ，６５．０％収率）。Ｃ２７Ｈ３５Ｎ４Ｏ５の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４９５．２６、実測値４９５．０６。
【０３６６】
調製法６８：（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−６−イル）フェノール
【化１４９】
2020529987.tif 000165
４Ｍ塩酸を含むジオキサン（１０．０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）を、（（３Ｓ）−３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（２３０ｍｇ，０．４６５ｍｍｏｌ）を含むメタノール（２．ｍＬ）の溶液に加え、反応混合物をＲＴで５時間撹拌した。反応物を真空中で濃縮し、得られた残渣をジエチルエーテルでトリチュレートして、（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−６−イル）フェノールを塩酸塩として得た（２２５ｍｇ，０．６４９ｍｍｏｌ，８５．０％収率）。Ｃ１７Ｈ１９Ｎ４Ｏ２の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３１１．１５、実測値３１１．０６。
【０３６７】
実施例２３：（Ｓ）−１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１５０】
2020529987.tif 000166
ジイソプロピルエチルアミン（０．０８３ｍｌ，０．４７５ｍｍｏｌ）を、（Ｓ）−４−（４−（ピロリジン−３−イルメトキシ）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−６−イル）フェノール塩酸塩（３２．９ｍｇ，０．０９５ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（０．４７５ｍｌ）の溶液に０℃で加えた後、塩化アクリロイル（７．７μｌ，０．０９５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで１５分間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、茶色液体を得た。粗液体を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む５−７５％勾配のアセトニトリルの水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｓ）−１−（３−（（（６−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−４−イル）オキシ）メチル）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（２．５ｍｇ，０．０６８ｍｍｏｌ，７．２％収率）。Ｃ２０Ｈ２１Ｎ４Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３６５．１６、実測値３６５．１。
【０３６８】
調製法６９：６−ブロモ−４−フルオロ−３−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール
【化１５１】
2020529987.tif 000167
ｐ−トルエンスルホン酸（２３６ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ）を、６−ブロモ−４−フルオロ−３−メチル−１Ｈ−インダゾール（２．８４ｇ，１２．４ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（４１ｍＬ）の溶液に加えた後、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（３．１３ｇ，３７．２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで３日間撹拌した。反応混合物をシリカゲルのパッドで濾過し、濾液を真空中で濃縮して、６−ブロモ−４−フルオロ−３−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾールを得た（３．３ｇ，１０．５ｍｍｏｌ，８５％収率）。Ｃ１３Ｈ１４ＢｒＦＮ２ＮａＯの（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｎａ］＋計算値３３５．０２、実測値３３５．４。
【０３６９】
実施例２４：（Ｓ）−１−（３−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オン
【化１５２】
2020529987.tif 000168
６０重量％の水素化ナトリウムを含む鉱油（３１９ｍｇ，７．９８ｍｍｏｌ）を、（Ｓ）−１−ｂｏｃ−３−ヒドロキシピロリジン（１．３ｇ，６．９４ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１６ｍＬ）の溶液に０℃で加え、反応混合物をＲＴで２０分間撹拌した。６−ブロモ−４−フルオロ−３−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（１．００ｇ，３．１９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をＲＴで一晩撹拌した。反応物を、水を加えてクエンチし、混合物を真空中で濃縮して、粗中間体ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−ブロモ−３−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−カルボキシレートを得た。
【０３７０】
３−クロロ−４−ヒドロキシフェニルボロン酸（０．４８４ｇ，２．８１ｍｍｏｌ）および三塩基性リン酸カリウム（１．１９ｇ，５．６２ｍｍｏｌ）を、粗ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−ブロモ−３−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−カルボキシレートを含む２：１ジオキサン／水（９．５ｍＬ）の溶液に加え、反応混合物を窒素で１０分間脱気した。（２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピル−１，１’−ビフェニル）［２−（２’−アミノ−１，１’−ビフェニル）］パラジウム（ＩＩ）メタンスルホナート、ＸＰｈｏｓ−Ｇ３−Ｐａｌｌａｄａｃｙｃｌｅ（９５ｍｇ，０．１１２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をマイクロ波照射下にて１１０℃で３時間撹拌した。水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせ、真空中で濃縮して、粗中間体ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−カルボキシレートを得た。
【０３７１】
４．０Ｎ  ＨＣｌを含むジオキサン（３．７５ｍｌ，１５．０ｍｍｏｌ）を、粗ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ）−３−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−カルボキシレートを含むメタノール（０．５ｍＬ）の溶液に加え、反応混合物を６０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、粗中間体（Ｓ）−２−クロロ−４−（３−メチル−４−（ピロリジン−３−イルオキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールを得た。
【０３７２】
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．５９ｍｌ，２６．３ｍｍｏｌ）を、粗中間体（Ｓ）−２−クロロ−４−（３−メチル−４−（ピロリジン−３−イルオキシ）−１Ｈ−インダゾール−６−イル）フェノールを含む塩化メチレン（３．７５ｍｌ）の溶液に加えた後、塩化アクリロイル（６０．９μＬ，０．７５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴで３０分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮して、粗残渣を得た。粗残渣を、０．０５％トリフルオロ酢酸を含む０−４０％勾配のアセトニトリルの水溶液を用いた分取スケールＣ１８カラムクロマトグラフィによって精製して、（Ｓ）−１−（３−（（６−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピロリジン−１−イル）プロパ−２−エン−１−オンをＴＦＡ塩として得た（７．６ｍｇ，０．０１５ｍｍｏｌ，０．９８％収率）。Ｃ２１Ｈ２１ＣｌＮ３Ｏ３の（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３９８．１３、実測値３９８．３。
【０３７３】
表１〜１２の化合物を、類似の合成方法を使用して調製した。
【表１−１】
2020529987.tif 000169
【表１−２】
2020529987.tif 000170
【表１−３】
2020529987.tif 000171
【表１−４】
2020529987.tif 000172
【表２−１】
2020529987.tif 000173
【表２−２】
2020529987.tif 000174
【表３−１】
2020529987.tif 000175
【表３−２】
2020529987.tif 000176
【表３−３】
2020529987.tif 000177
【表３−４】
2020529987.tif 000178
【表３−５】
2020529987.tif 000179
【表３−６】
2020529987.tif 000180
【表３−７】
2020529987.tif 000181
【表３−８】
2020529987.tif 000182
【表４−１】
2020529987.tif 000183
【表４−２】
2020529987.tif 000184
【表５−１】
2020529987.tif 000185
【表５−２】
2020529987.tif 000186
【表５−３】
2020529987.tif 000187
【表６−１】
2020529987.tif 000188
【表６−２】
2020529987.tif 000189
【表７−１】
2020529987.tif 000190
【表７−２】
2020529987.tif 000191
【表８−１】
2020529987.tif 000192
【表８−２】
2020529987.tif 000193
【表９】
2020529987.tif 000194
【表１０】
2020529987.tif 000195
【表１１】
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【表１２−１】
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【表１２−２】
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【表１２−３】
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【表１２−４】
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【表１２−５】
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【表１２−６】
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【表１２−７】
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【表１３−１】
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【表１３−２】
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【表１３−３】
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【表１４−１】
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【表１４−２】
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【表１５−１】
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【表１５−２】
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【表１６−１】
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【表１６−２】
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【表１７】
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【表１８−１】
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【表１８−２】
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【０３７４】
生物学的アッセイ
本開示の化合物を、以下の生物学的アッセイのうちの１つまたはそれを超えるアッセイにおいて特徴付けた。
【０３７５】
アッセイ１：生化学的ＪＡＫおよびＴｙｋ２キナーゼアッセイ
４つのＬａｎｔｈａＳｃｒｅｅｎ  ＪＡＫ生化学的アッセイのパネル（ＪＡＫ１、２、３およびＴｙｋ２）を、通常のキナーゼ反応緩衝液（５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．５、０．０１％Ｂｒｉｊ−３５、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２および１ｍＭ  ＥＧＴＡ）に含めた。組換えＧＳＴタグ化ＪＡＫ酵素およびＧＦＰタグ化ＳＴＡＴ１ペプチド基質をＬｉｆｅ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから入手した。
【０３７６】
段階希釈したまたは離散的に希釈した化合物を、それらの４つのＪＡＫ酵素の各々および基質とともに、白色３８４ウェルマイクロプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）において周囲温度で１時間プレインキュベートした。続いて、ＡＴＰを加えて、１％ＤＭＳＯを含む１０μＬの総体積でキナーゼ反応を開始した。ＪＡＫ１、２、３およびＴｙｋ２に対する最終的な酵素濃度は、それぞれ４．２ｎＭ、０．１ｎＭ、１ｎＭおよび０．２５ｎＭであり；使用された対応するＫｍ  ＡＴＰ濃度は、２５μＭ、３μＭ、１．６μＭおよび１０μＭであり；基質濃度は、４つすべてのアッセイについて２００ｎＭである。キナーゼ反応を周囲温度で１時間進めた後、ＴＲ−ＦＲＥＴ希釈緩衝液（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中のＥＤＴＡ（最終濃度１０ｍＭ）およびＴｂ−抗ｐＳＴＡＴ１（ｐＴｙｒ７０１）抗体（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，最終濃度２ｎＭ）の１０μＬ調製物を加えた。そのプレートを周囲温度で１時間インキュベートした後、ＥｎＶｉｓｉｏｎリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）において読み出した。発光シグナル比（Ｅｍｉｓｓｉｏｎ  ｒａｔｉｏ  ｓｉｇｎａｌｓ）（５２０ｎｍ／４９５ｎｍ）を記録し、それを用いて、ＤＭＳＯに基づくパーセント阻害値およびバックグラウンドコントロールを算出した。
【０３７７】
用量反応解析の場合、パーセント阻害のデータを化合物の濃度に対してプロットし、Ｐｒｉｓｍソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いて、４パラメータのロバストな適合モデルからＩＣ５０値を決定した。結果は、ｐＩＣ５０（ＩＣ５０の対数に負号をつけたもの）として表され、続いてＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を用いてｐＫｉ（解離定数Ｋｉの対数に負号をつけたもの）に変換した。
【０３７８】
アッセイ２：細胞ＪＡＫ３効力アッセイ：Ｔａｌｌ−１  Ｔ細胞におけるＩＬ−２刺激ｐＳＴＡＴ５の阻害
Ｔａｌｌ−１ヒトＴ細胞株（ＤＳＭＺ）におけるインターロイキン−２（ＩＬ−２）刺激ＳＴＡＴ５リン酸化の阻害に対する試験化合物の効力を、ＡｌｐｈａＬｉｓａを使用して測定した。ＩＬ−２はＪＡＫ３を介してシグナル伝達するので、このアッセイによりＪＡＫ３細胞効力の尺度を提供する。
【０３７９】
リン酸化ＳＴＡＴ５を、ＡｌｐｈａＬＩＳＡ  ＳｕｒｅＦｉｒｅ  Ｕｌｔｒａ  ｐＳＴＡＴ５（Ｔｙｒ６９４／６９９）キット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）によって測定した。
【０３８０】
Ｔａｌｌ−１細胞株由来のヒトＴ細胞を、３７℃、５％ＣＯ２加湿恒温器において、１５％熱失活ウシ胎児血清（ＦＢＳ，Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、２ｍＭ  Ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１×Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）が補充されたＲＰＭＩ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で培養した。化合物をＤＭＳＯで段階希釈し、空のウェルに音響学的に分注した。アッセイ培地（１０％ＦＢＳ（ＡＴＣＣ）が補充された無フェノールレッドＤＭＥＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ））を分注し（４μＬ／ウェル）、プレートを９００ｒｐｍで１０分間振盪した。細胞を、アッセイ培地（４μＬ／ウェル）中に４５，０００細胞／ウェルで播種し、３７℃、５％ＣＯ２で１時間インキュベートした後、予め加温したアッセイ培地（４μＬ）中にＩＬ−２（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；最終濃度３００ｎｇ／ｍｌ）を３０分間加えた。サイトカイン刺激の後、細胞を、１×ＰｈｏｓＳｔｏｐおよびＣｏｍｐｌｅｔｅ  ｔａｂｌｅｔ（Ｒｏｃｈｅ）を含む６ｕｌの３×ＡｌｐｈａＬｉｓａ溶解緩衝液（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で溶解した。ライセートを、室温（ＲＴ）にて９００ｒｐｍで１０分間振盪した。リン酸化ＳＴＡＴ５を、ｐＳＴＡＴ５  ＡｌｐｈａＬｉｓａキット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）によって計測した。新たに調製したアクセプタービーズ混合物を、緑色フィルタリングした１００ｌｕｘ未満の光の下でライセート（５μＬ）上に分注した。プレートを９００ｒｐｍで２分間振盪し、短時間遠沈し、ＲＴの暗所で２時間インキュベートした。ドナービーズを、緑色フィルタリングした１００ｌｕｘ未満の光の下で分注した（５μＬ）。プレートを９００ｒｐｍで２分間振盪し、短時間遠沈し、ＲＴの暗所で一晩インキュベートした。ルミネセンスを、ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて緑色フィルタリングした１００ｌｕｘ未満の光の下で６８９ｎｍでの励起および５７０ｎｍでの発光を使用して測定した。
【０３８１】
試験化合物のＩＬ−２に応答する阻害性効力を測定するために、ヒトＴ細胞株におけるｐＳＴＡＴ５に結合したビーズの平均発光強度を計測した。化合物濃度に対するシグナル強度の阻害曲線の解析から、ＩＣ５０値を決定した。データは、ｐＩＣ５０（負の常用対数ＩＣ５０）値（平均値±標準偏差）として表される。
【０３８２】
アッセイ３：マウス脾細胞から単離したＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＩＬ−２刺激ｐＳＴＡＴ５の阻害
インターロイキン−２（ＩＬ−２）刺激ＳＴＡＴ５リン酸化の阻害に対する試験化合物の効力を、ＡｌｐｈａＬｉｓａを用いてマウス脾細胞から単離したＣＤ４＋Ｔ細胞において計測した。ＩＬ−２はＪＡＫ３を介してシグナルを伝達するので、このアッセイは、マウスにおけるＪＡＫ３細胞効力の尺度を提供する。
【０３８３】
リン酸化ＳＴＡＴ５を、ＡｌｐｈａＬＩＳＡ  ＳｕｒｅＦｉｒｅ  Ｕｌｔｒａ  ｐＳＴＡＴ５（Ｔｙｒ６９４／６９９）キット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）によって計測した。
【０３８４】
ＣＤ４＋Ｔ細胞を、磁性カラム（Ｍｉｌｔｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）におけるネガティブ選択によってマウス脾細胞から単離し、１０％ＦＢＳ（ＡＴＣＣ））が補充されたアッセイ培地（無フェノールレッドＤＭＥＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に再懸濁した。細胞を、アッセイ培地（２μＬ／ウェル）中に５０，０００細胞／ウェルで播種した。化合物をＤＭＳＯで段階希釈し、アッセイ培地で２×最終濃度に希釈した。化合物を加え（４μｌ／ウェル）、細胞を３７℃、５％ＣＯ２で１時間インキュベートした後、予め加温したアッセイ培地（２μＬ）中にＩＬ−２（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；最終濃度７ｎｇ／ｍｌ）を３０分間加えた。サイトカイン刺激の後、細胞を、２μｌの５×ＡｌｐｈａＬｉｓａ溶解緩衝液（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で溶解した。ライセートを、室温（ＲＴ）にて９００ｒｐｍで１０分間振盪した。リン酸化ＳＴＡＴ５を、ｐＳＴＡＴ５  ＡｌｐｈａＬｉｓａキット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）によって計測した。新たに調製したアクセプタービーズ混合物を、緑色フィルタリングした１００ｌｕｘ未満の光の下でライセート（５ｕｌ）上に分注した。プレートを９００ｒｐｍで２分間振盪し、短時間遠沈し、ＲＴの暗所で２時間インキュベートした。ドナービーズを、緑色フィルタリングした１００ｌｕｘ未満の光の下で分注した（５μｌ）。プレートを９００ｒｐｍで２分間振盪し、短時間遠沈し、ＲＴの暗所で一晩インキュベートした。ルミネセンスを、ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて緑色フィルタリングした１００ｌｕｘ未満の光の下で６８９ｎｍでの励起および５７０ｎｍでの発光を使用して測定した。
【０３８５】
試験化合物のＩＬ−２に応答する阻害性効力を測定するために、マウス脾細胞から単離した初代ＣＤ４＋Ｔ細胞におけるｐＳＴＡＴ５に結合したビーズの平均発光強度を計測した。化合物濃度に対するシグナル強度の阻害曲線の解析から、ＩＣ５０値を決定した。データは、ｐＩＣ５０（負の常用対数ＩＣ５０）値（平均値±標準偏差）として表される。
【０３８６】
化合物１〜１０、１９、２０、２１、および２２は全て、このアッセイにおいて６．０を超えるｐＩＣ５０値を有していた。
【０３８７】
アッセイ４：ヒトＰＢＭＣ  ＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＩＬ−２刺激ｐＳＴＡＴ５の阻害
インターロイキン−２（ＩＬ−２）刺激ＳＴＡＴ５リン酸化の阻害に対する試験化合物の効力を、フローサイトメトリーを用いてヒト末梢血単核球（ＰＢＭＣ）ＣＤ４＋Ｔ細胞において計測した。ＩＬ−２はＪＡＫ３を介してシグナルを伝達するので、このアッセイは、ヒト初代細胞におけるＪＡＫ３細胞効力の尺度を提供する。
【０３８８】
リン酸化ＳＴＡＴ５を、フローサイトメトリーによってＣＤ４＋Ｔ細胞（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｓｃｋｉｎｓｏｎ、ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ６４７マウス抗ヒトＳＴＡＴ５（ｐＹ６９４）およびＰＥマウス抗ヒトＣＤ４）におけるｐＳＴＡＴ５応答を計測することによって計測する。
【０３８９】
ヒトＰＢＭＣを、フィコール勾配によってドナーから単離し、−８０℃で凍結した。凍結ＰＢＭＣを解凍し、３７℃、５％ＣＯ２加湿恒温器内において、１０％熱失活ウシ胎児血清（ＦＢＳ，Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、２ｍＭ  Ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１×Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）が補充されたＲＰＭＩ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で１時間培養した。細胞を、２ｍｌディープウェルプレート中に４ｅ６細胞／ｍｌ（５０μｌ／ウェル）で播種した。化合物をＤＭＳＯで段階希釈し、アッセイ培地で２×最終濃度に希釈した。化合物を加え（１００μｌ／ウェル）、細胞を３７℃、５％ＣＯ２で１時間インキュベートした後、予め加温したアッセイ培地（５０μＬ／ウェル）中にＩＬ−２（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；最終アッセイ濃度１００ｎｇ／ｍｌ）を３０分間加えた。サイトカイン刺激の後、細胞を、３７℃で１０分間固定した（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）。細胞を洗浄し、Ｄｕｌｂｅｃｃｏリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に再懸濁した。細胞を氷冷Ｐｅｒｍ  Ｂｕｆｆｅｒ  ＩＩＩ（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）で３０分間透過処理し、次いで、洗浄し、２％ウシ胎児血清を含むＤＰＢＳ（染色緩衝液、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に再懸濁した。細胞を、５０倍希釈のＣＤ４表面マーカー（ＰＥマウス抗ヒトＣＤ４）および５倍希釈のｐＳＴＡＴ５抗体（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｓｃｋｉｎｓｏｎ，ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ  ６４７マウス抗ヒトＳＴＡＴ５（ｐＹ６９４））を含む染色緩衝液で１時間染色した。細胞を洗浄し、染色緩衝液に再懸濁後、４℃で保存した。
【０３９０】
ＩＬ−２に応答する試験化合物の阻害性効力を測定するために、ヒトＰＢＭＣにおけるＣＤ４＋ゲート細胞におけるｐＳＴＡＴ５の蛍光強度の中央値を、ＦＣＳ  Ｅｘｐｒｅｓｓ６における解析を用いたＢＤ  ＬＳＲＩＩを用いて計測した。化合物濃度に対するシグナル強度の阻害曲線の解析から、ＩＣ５０値を決定した。データは、ｐＩＣ５０（負の常用対数ＩＣ５０）値（平均値±標準偏差）として表される。
【０３９１】
化合物１〜６、８、および９をこのアッセイで試験し、アッセイ２で得た値（Ｔａｌｌ−１  Ｔ細胞アッセイにおけるＩＬ−２刺激ｐＳＴＡＴ５）に非常に類似する値を示した。
【０３９２】
アッセイ５：ＪＡＫ細胞傷害性アッセイ
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ発光細胞生存能／細胞傷害性アッセイを、通常の生育条件下のＢＥＡＳ−２Ｂヒト肺上皮細胞（ＡＴＣＣ）において行った。
【０３９３】
細胞を、３７℃の５％ＣＯ２加湿恒温器内にて、１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）および２ｍＭ  ＧｌｕｔａＭＡＸ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）が補充された５０％ＤＭＥＭ／５０％Ｆ−１２培地（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で生育した。アッセイの１日目に、細胞を、２５μＬの培地が入った、白色３８４ウェル組織培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）に５００細胞／ウェルの密度で播種し、恒温器内で一晩接着させた。アッセイの２日目に、試験化合物の用量反応物を含む５μＬの培地を加え、３７℃で４８時間インキュベートした。その後、３０μｌのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ検出液（Ｐｒｏｍｅｇａ）を加え、オービタルシェーカー上で５分間混合し、さらに１０分間インキュベートした後、ＥｎＶｉｓｉｏｎリーダーにおいて読み出した。ルミネセンスシグナルを記録し、パーセントＤＭＳＯコントロール値を算出した。
【０３９４】
用量反応解析の場合、パーセントＤＭＳＯコントロールデータを化合物の濃度に対してプロットして、各データポイントをつなぐ線によって用量反応曲線を作成した。各曲線が１５％阻害閾値を横断する濃度をＣＣ１５と定義する。結果は、ＣＣ１５値の対数に負号をつけたものであるｐＣＣ１５として表した。
【０３９５】
このアッセイにおいてより低いｐＣＣ１５値を示す試験化合物は、細胞傷害性を引き起こす可能性がより低いと予想される。このアッセイにおいて試験された本開示の化合物は、代表的には、５から約６のｐＣＣ１５値を示した。
【０３９６】
アッセイ６：Ｃａｃｏ−２透過アッセイ
Ｃａｃｏ−２透過アッセイを、試験化合物が経口投与後に腸を通過して血流に入る能力をモデル化するために行った。ヒト小腸単層の密着結合を模倣するようにデザインされた細胞単層を溶液中の試験化合物が透過する速度を測定した。
【０３９７】
ＣａｃｏＲｅａｄｙ２４ウェルトランズウェルプレートを、ＡＤＭＥｃｅｌｌ（Ａｌａｍｅｄａ，ＣＡ）から入手した。化合物を、１０ｍＭ  ＤＭＳＯ保存溶液から５μＭの濃度で２連（ｎ＝２）にて評価した。試験した化合物の受動的透過性を、頂端−基底外側（Ａ−Ｂ）方向のＰ−ｇｐ輸送タンパク質を阻害するためにベラパミル（２５μＭ）と共にＣａｃｏ−２細胞単層を使用して評価した。３７℃、５％ＣＯ２恒温器内で実験を行った。Ｃａｃｏ−２培養培地は、標準的な濾過ＤＭＥＭ、ＦＣＳ１０％、Ｌ−グルタミン１％、およびＰｅｎＳｔｒｅｐ１％からなった。基底膜アッセイプレートを、７５０μＬの輸送緩衝液をＡ−Ｂウェルに加えることによって調製した。ＣａｃｏＲｅａｄｙ（商標）プレートを、頂端ウェルからＣａｃｏ−２培地を除去して新鮮な輸送培地と置換する（２００μＬにて全部で３回洗浄）ことによって調製した。次いで、ブランク培地（２００μＬ）を、Ａ−Ｂウェルのために希釈化合物と置換した。インキュベーションを開始するために、基底プレートを恒温器から取り出し、その上に頂端部を加えた。時間ゼロ（ｔ０）のために、頂端区分および基底区分からサンプル（４０μＬ）を回収した。１２０分後（ｔ１２０）に頂端区分および基底区分からサンプルを再度回収した。全サンプルを希釈し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによる生物分析のために調製した。ｃｍ／秒で示す透過係数（Ｋｐ、Ａ−Ｂ方向の平均＋ベラパミルの見かけ上の透過）を、ｄＱ（ｆｌｕｘ）／（ｄｔ×領域×濃度）として計算した。
【０３９８】
このアッセイにおいて、約５×１０−６ｃｍ／秒未満のＫｐ値は、全身曝露を最小にし、かつ結腸を標的にするのに好ましいと見なされる。約１０×１０−６ｃｍ／秒未満のＫｐ値も、全身曝露を最小にし、かつ結腸を標的にするのに十分であり得る。比較すると、全身に利用可能なＪＡＫ３阻害剤であるＰＦ−０６６５１６００（２−プロペン−１−オン，１−［（２Ｓ，５Ｒ）−２−メチル−５−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミノ）−１−ピペリジニル］）のＫｐ値は２５であった。
【０３９９】
インビトロアッセイの結果
実施例１〜１８および表１〜１２の化合物のすべてを、上に記載されたアッセイの１または複数において試験した。
【０４００】
以下の表１３において、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、およびＴＹＫ２酵素アッセイの場合、Ａは、≧１０のｐＫｉ値（≦０．１ｎＭのＫｉ）を表し、Ｂは、９〜１０のｐＫｉ値（１ｎＭ〜０．１ｎＭのＫｉ）を表し、Ｃは、８〜９のｐＫｉ値（１０ｎＭ〜１ｎＭのＫｉ）を表し、Ｄは、７〜８のｐＫｉ値（１００ｎＭ〜１０ｎＭのＫｉ）を表し、Ｅは、７またはそれ未満のｐＫｉ値（１００ｎＭまたはそれを超えるＫｉ）を表す。Ｔａｌｌ−１効力アッセイの場合、Ａは、≧７．５のｐＩＣ５０値（≦３２ｎＭのＩＣ５０）を表し、Ｂは、６．７（これを含む）〜７．５のｐＩＣ５０値（２００ｎＭ〜３２ｎＭのＩＣ５０）を表し、Ｃは、６〜６．７のｐＩＣ５０値（１μＭ〜２００ｎＭのＩＣ５０）を表す。ＪＡＫ３（ｐＫｉ）−ＪＡＫ１（ｐＫｉ）値の場合、Ａは、３またはそれを超える値を表し、Ｂは、２．３〜３の値を表し、Ｃは、１．８〜２．３の値を表す。Ｃａｃｏアッセイの場合、Ａは、５×１０−６ｃｍ／秒未満の値を表し、Ｂは、５×１０−６〜１０×１０−６ｃｍ／秒の値を表し、Ｃは、１０×１０−６〜２２×１０−６ｃｍ／秒の値を表す。
【表１３Ａ−１】
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【表１３Ａ−２】
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【表１３Ａ−３】
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【表１３Ａ−４】
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【表１３Ａ−５】
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【表１３Ａ−６】
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【表１３Ａ−７】
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【表１３Ａ−８】
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【表１３Ａ−９】
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【表１３Ａ−１０】
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【表１３Ａ−１１】
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【表１３Ａ−１２】
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【表１３Ａ−１３】
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【表１３Ａ−１４】
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【表１３Ａ−１５】
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【表１３Ａ−１６】
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【表１３Ａ−１７】
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【０４０１】
アッセイ７：マウスにおける結腸および血漿の薬物動態学
６匹の雄Ｂａｌｂ／ｃマウスに、１０ｍｇ／ｋｇの化合物を含む１％ＨＰＭＣ＋０．１％  Ｔｗｅｅｎ−８０をＰＯ投与によって投与した。投与０．５、２、および６時間後に、動物を麻酔し、心穿刺によって末期血液サンプルを回収した後、結腸内容物および結腸組織を回収した。
【０４０２】
血液サンプルをＫ２ＥＤＴＡに回収し、遠心分離（４℃で１２０００ｒｐｍ）によって血漿に処理されるまで氷上で保存した。血漿サンプルをクラスターチューブに移し、ドライアイス上に置いた後にフリーザーで保存した。各動物由来の結腸内容物を、各末期採血時点で回収した。結腸組織を、生理食塩水で流し、パッティングして乾燥させた。結腸内容物および結腸組織を、０．１％ギ酸を含む滅菌水を９：１（水：組織、ｖ／ｗ）で使用してホモジナイズした。ホモジナイズした組織および結腸内容物をクラスターチューブに移し、ドライアイス上に置いた後にフリーザーで保存した。全サンプルを、分析標準に対してＬＣ／ＭＳ／ＭＳを使用することによって分析した。
【０４０３】
化合物の複合薬物動態パラメータを、Ｐｈｏｅｎｉｘ  ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ６（Ｃｅｒｔａｒａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）および２動物／時点由来の平均値を使用したノンコンパートメント解析によって判定した。定量限界未満（ＢＱＬ）の血漿濃度について、測定可能な最低濃度またはＢＬＯＱ（定量下限未満）を使用した。
【０４０４】
結腸対血漿比を、結腸ＡＵＣの血漿ＡＵＣに対する比として測定した。化合物１、２、３、４、６、７、８、２１、および２２は、約１２５０を超える結腸対血漿比を示した。化合物９、５、１９、および２０は、約２００を超える結腸対血漿比を示した。
【０４０５】
対照的に、基準化合物（ＰＦ−０６６５１６００、全身に利用可能なＪＡＫ３阻害剤）２−プロペン−１−オン，１−［（２Ｓ，５Ｒ）−２−メチル−５−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミノ）−１−ピペリジニル］は、結腸対血漿比２．８を示した。
【０４０６】
アッセイ８：オキサゾロン誘発大腸炎のマウスモデル
オキサゾロン誘発大腸炎は、ヒト潰瘍性大腸炎と組織学的類似点を有する実験モデルである（Ｈｅｌｌｅｒら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００２，１７，６２９−６３８）。Ｈａｒｌａｎから入手した成体ＢＡＬＢ／Ｃマウスをこのアッセイにおいて使用した。１日目に、動物をイソフルランで軽く麻酔し、肩の間の毛を慎重に除去した後、オキサゾロン（４％、１５０μＬ、４：１アセトン：オリーブ油製剤）またはビヒクル溶液を、皮膚感作のためにゆっくり塗布した。皮膚感作の７日後に、マウスをおよそ６時間絶食させた後、ケタミン／キシラジン注射で麻酔し、オキサゾロン溶液で満たされた３．５−Ｆカテーテルが備え付けられた１ｍＬ注射器を慎重にマウスの結腸に約４ｃｍ挿入した。挿入後、５０μＬのオキサゾロン溶液（０．８％、１：１エタノール：水製剤）を結腸に非常にゆっくりと注入した（注射ポンプを用いて３０秒間にわたって）。オキサゾロンの直腸内（ＩＲ）チャレンジの前日から、薬物処置（ＰＯ、ＱＤ、ＢＩＤ、またはＴＩＤ）またはビヒクルを開始した。オキサゾロンの直腸内チャレンジの２日後に、各マウスについての処置に対して盲検化された実験者が、基準スコア：便の硬さスコア（０、正常；２、緩い；４、下痢）、総出血スコア（０、なし；２、血液混じり；４、あり）；複合便スコアエンドポイント＝便の硬さスコア＋便血液スコアに従って疾患を評価した。
【０４０７】
選択された化合物をこのアッセイにおいて試験した。このモデルにおける有効性は、ビヒクルで処置された動物のスコアと比べたときの複合便スコアエンドポイントの統計的に有意な減少によって証明される。
【０４０８】
化合物１、２、３、４、５、６、７、８、３〜１１、５〜１０、１９、１５〜１、３〜５５、３〜３４、１５〜３、２１、３〜８０、３〜８１、３〜７２、および３〜５７は、３ｍｇ／ｋｇ（ＰＯ、ＢＩＤ）の用量のオキサゾロンモデルにおいて、ビヒクルで処置された動物と比べて複合便スコアエンドポイントの統計学的に有意な減少を示した。化合物３〜１１３および３〜７４は、１および１０ｍｇ／ｋｇのみ（ＰＯ、ＢＩＤ）の用量のオキサゾロンモデルにおいて、ビヒクルで処置された動物と比べて複合便スコアエンドポイントの統計学的に有意な減少を示した。
【０４０９】
アッセイ９：マウス脾臓ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞における免疫抑制効果
マウス脾臓細胞の枯渇は、免疫抑制の実験モデルである（Ｋｕｄｌａｃｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．ｏｆ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，２００４，４，５１−５７）。選択された化合物を、オキサゾロン誘発大腸炎モデル（アッセイ８）において使用されたものと同じ処置パラダイムに従ってマウス脾臓細胞モデルにおいて評価した。
【０４１０】
Ｈａｒｌａｎから入手した成体雄Ｂａｌｂ／Ｃマウスをこの研究に使用した。試験化合物およびポジティブコントロールとしてのＪａｋ３共有結合性阻害剤標準２−プロペン−１−オン，１−［（２Ｓ，５Ｒ）−２−メチル−５−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミノ）−１−ピペリジニル］（３０ｍｇ／ｋｇ，ＢＩＤ）を３日間、ナイーブマウスに経口的に投与した。最後の投与の最大４時間後に脾臓を摘出し、細胞サブタイプ染色（ｃｅｌｌ  ｓｕｂｔｙｐｅ  ｓｔａｉｎｉｎｇ）のために直ちに破砕した。フローサイトメーターにおいて同時に複数のサブタイプの％解析を可能にするために、固定の前に、ＣＤ１９（ＦＩＴＣ；Ｂ細胞）、ＣＤ３ｅ（ＰＥ；汎Ｔ細胞）およびＣＤ４９ｅ（ＡＰＣ；ＮＫ細胞）に対するフルオロフォア標識抗体を、各動物由来の脾細胞サンプルとインキュベートした。各動物の総脾臓細胞数を、ＳｃｅｐｔｅｒＴＭ２．０手持ち型自動細胞計数器によって計測した。
【０４１１】
リンパ球のサブタイプ集団（例えば、脾臓のＢ、ＴおよびＮＫ細胞）の絶対数を、各動物の各サブタイプのパーセンテージに総脾臓細胞を掛けることによって算出した。１元配置ＡＮＯＶＡおよびＦｉｓｈｅｒのＬＳＤ事後検定を用いて、ビヒクル群および試験化合物群の脾臓リンパ球数を比較した。αレベルをｐ＜０．０５に設定した。データを、各群に対して、平均値±ＳＥＭとして示した。
【０４１２】
ポジティブコントロールであるＰＦ−０６６５１６００（全身に利用可能なＪＡＫ３阻害剤（２−プロペン−１−オン，１−［（２Ｓ，５Ｒ）−２−メチル−５−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミノ）−１−ピペリジニル］））（３０ｍｇ／ｋｇ  ＰＯ，ＢＩＤ）は、脾臓ＮＫ細胞数を有意に減少させた。脾臓ＮＫ細胞数は、３００ｍｇ／ｋｇ（試験された最高用量）に至るまで、（ＰＯ，ＢＩＤ）投与の化合物１によって影響されなかった。脾臓ＮＫ細胞数は、１００ｍｇ／ｋｇ（試験された最高用量）に至るまで、（ＰＯ，ＢＩＤ）投与の化合物４、６、および８によって影響されなかった。脾臓ＮＫ細胞数は、８５ｍｇ／ｋｇ（試験された最高用量）に至るまで、（ＰＯ，ＢＩＤ）投与の化合物３によって影響されなかった。脾臓ＮＫ細胞数は、３０ｍｇ／ｋｇ（試験された最高用量）に至るまで、（ＰＯ，ＢＩＤ）投与の化合物２によって影響されなかった。脾臓ＮＫ細胞数は、８０ｍｇ／ｋｇ（試験された最高用量）に至るまで、（ＰＯ，ＢＩＤ）投与の化合物５によって影響されなかった。いずれの試験化合物を用いた場合も、ＢおよびＴ細胞集団に対して処置の効果は観測されなかった。
【０４１３】
アッセイ１０：全身標的関与アッセイ：胸腺におけるＩＬ−２誘発性ｐＳＴＡＴ５誘発のマウスモデル
ＩＬ−２は、過敏性腸疾患（ＩＢＤ；Ｇｕａｎ  ａｎｄ  Ｚｈａｎｇ．Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  Ｉｎｆｌａｍｍ，２０１７；４８１０２５８）などの胃腸疾患の病態生理学の根底にある重要なサイトカインである。ＩＬ−２は、細胞表面レセプターに結合してヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）ファミリーのメンバー、特にＪＡＫ３を活性化し、次いで、ＳＴＡＴ５をリン酸化し、引き続いてさらなる転写経路を活性化する。このモデルでは、ある用量のＩＬ−２をマウスに全身送達させてＳＴＡＴ５のリン酸化（ｐＳＴＡＴ５）を誘導し、次いで、エンドポイントとして計測した。ビヒクル処置；ＩＬ−２チャレンジしたコントロール動物と比較してＩＬ−２誘発性ｐＳＴＡＴ５の有意な阻害を示さないこのアッセイで試験した化合物は、全身活性の欠如を示す。
【０４１４】
Ｈａｒｌａｎから入手した成体雄Ｂａｌｂ／Ｃマウスをこのアッセイで使用した。動物に、研究前日の午後、次いで研究日の午前中に試験化合物を経口胃管栄養法（ＰＯ、単回用量研究については１０または３０ｍｇ／ｋｇ；用量応答研究については１０〜６０ｍｇ／ｋｇ）によって投与する。第２のＰＯ用量の投与２時間後に、マウスに、１００μｌの適切な用量のＩＬ−２（ＩＬ−２バッチに応じて全部で１〜５μｇ／マウス；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を、腹腔内（ｉ．ｐ．）注射した。ＩＬ−２傷害の９０〜１２０分後、胸腺サンプルを採取した。胸腺中のリン酸化ＳＴＡＴ５（ｐＳＴＡＴ５）レベルを、ＡｌｐｈａＬＩＳＡ（ＡｌｐｈａＬＩＳＡ（登録商標）ＳｕｒｅＦｉｒｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ（商標）ｐ−ＳＴＡＴ５（Ｔｙｒ６９４／６９９）ＨＶ（高体積）を使用して測定した。このモデルにおける活性は、ＩＬ−２チャレンジの１．５〜２時間後の処置マウスの胸腺内のｐＳＴＡＴ５の存在レベルの有意な阻害を欠くことによって証明される。
【０４１５】
化合物６および７を１０ｍｇ／ｋｇで試験し、ビヒクル処置；ＩＬ−２チャレンジしたコントロール動物と比較してＩＬ−２誘発性ｐＳＴＡＴ５の有意な阻害を示さなかったので、全身活性の欠如が証明された。化合物１を１０、３０、６０、および１００ｍｇ／ｋｇで試験し、ビヒクルと比較してＩＬ−２誘発性ｐＳＴＡＴ５の有意な阻害を示さなかった。化合物２を１０、３０、および６０ｍｇ／ｋｇで試験し、ビヒクルと比較してＩＬ−２誘発性ｐＳＴＡＴ５の有意な阻害を示さなかった。化合物３を３０および１００ｍｇ／ｋｇで試験し、ビヒクルと比較してＩＬ−２誘発性ｐＳＴＡＴ５の有意な阻害を示さなかった。化合物８、５、および４を３０ｍｇ／ｋｇで試験し、ビヒクルと比較してＩＬ−２誘発性ｐＳＴＡＴ５の有意な阻害を示さなかった。
【０４１６】
対照的に、基準化合物（ＰＦ−０６６５１６００、全身に利用可能なＪＡＫ３阻害剤）２−プロペン−１−オン，１−［（２Ｓ，５Ｒ）−２−メチル−５−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イルアミノ）−１−ピペリジニル］は、１０、３０、および５０ｍｇ／ｋｇでの胸腺におけるｐＳＴＡＴ５誘発の有意な阻害を示し、それにより全身活性が証明された。
【０４１７】
結晶構造
ヒトＪＡＫ３にそれぞれ結合した化合物１、３、および４の共結晶構造を得た。化合物１、化合物３、および化合物４についての錯体構造の分解能は、それぞれ、２．７３Å、２．８０Å、および２．６４Åであった。いずれの場合にも、リガンドは、ＡＴＰ結合部位で結合することが認められた。３．５Å未満のドナー原子およびアクセプター原子の距離に基づいて、すなわち、Ｇｌｕ９０３、Ｌｅｕ９０５、およびＰｈｅ９６８の主鎖原子ならびにＧｌｕ８７１の側鎖原子への各リガンドの４つの特異的水素結合が同定された。化合物１においてＡｓｐ９１２の側鎖原子へのさらなる水素結合が同定された。特に注目すべきことは、ヒンジ領域のすぐ後ろに存在するＪＡＫ３のＣｙｓ９０９にリガンドがそれぞれ共有結合することである。システイン残基のＳ−Ｈ部分は、ミカエル付加反応が起きる。結晶構造における共有結合性の相互作用の結果が認められたことにより、ＪＡＫ３に対するこれらの各リガンドの不可逆な結合性が確認される。
【０４１８】
本発明は、その特定の態様または実施形態を参照して説明してきたが、本発明の真の趣旨および範囲から逸脱することなく、様々な変更が行われ得、等価物で置換され得ることが当業者によって理解される。さらに、適用される特許法および規則によって認められる限りにおいて、本明細書に引用されたすべての刊行物、特許および特許出願は、各文書が個別に参照により本明細書中に援用されるのと同程度に、その全体が参照により本明細書に援用される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【国際調査報告】
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