(57)【要約】  物品が提供される。物品は、グラフト化されたコポリマーを有する不織布基材と、基材に接着された乾燥コーティングと、を含む。コポリマーは、第四級アンモニウム含有配位子モノマーと、アミドモノマーと、オキシモノマーとの共重合モノマー単位を含む。コーティングは、複数の試験微生物を含む。任意選択的に、コーティングは、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤を更に含む。物品が内部に固定して配置された中空チャネルを有する本体を備える、工程試験用具もまた提供される。消毒プロセスの有効性を判定するための、物品又は工程試験用具を使用する方法もまた提供される。
2020506739.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
グラフト化されたコポリマーを有する不織布基材であって、前記コポリマーが、共重合した下記のモノマー単位：
第四級アンモニウム含有配位子モノマー及び／又はグアニジニル含有配位子モノマーから選択されるカチオン性窒素含有配位子モノマー、
アミドモノマー、及び
オキシモノマー、
を含む、不織布基材と、
前記基材に接着された乾燥コーティングであって、
任意選択的な水溶性又は水分散性ポリマー結合剤と、
複数の試験微生物と、を含む、乾燥コーティングと、
を含む、物品。
【請求項２】
前記グラフト化されたコポリマーが、
ａ．１０〜５０重量部の前記カチオン性窒素含有配位子モノマーと、
ｂ．１０〜８０重量部の前記アミドモノマーと、
ｃ．１０〜４０重量部の前記オキシモノマーと、
ｄ．０〜３０重量部のポリ（アルキレンオキシド）モノマーと、を含み、
ａ）〜ｄ）の合計は、１００重量部である、請求項１に記載の物品。
【請求項３】
前記乾燥コーティングが、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤を更に含む、請求項１又は２に記載の物品。
【請求項４】
前記複数の試験微生物の少なくとも一部分が、前記ポリマー結合剤中に分散されている、請求項３に記載の物品。
【請求項５】
前記不織布基材が、疎水性熱可塑性ポリオレフィンのメルトブローマイクロファイバーを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の物品。
【請求項６】
前記不織布基材が、不織布基材１平方メートル当たり１５〜５０ｍ２の表面積を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の物品。
【請求項７】
前記不織布基材が、２０％未満のソリディティを有する、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の物品。
【請求項８】
前記物品がコポリマー対不織布基材の重量比を有することができ、前記重量比が、１部の不織布基材に対して約０．５〜３部のコポリマーである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の物品。
【請求項９】
前記水溶性又は水分散性ポリマー結合剤が、アガロース、ポリビニルピロリドン、ポリ（アルキレンオキシド）、及び前述のポリマー結合剤のうちのいずれか２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の物品。
【請求項１０】
前記試験微生物が、芽胞を含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の物品。
【請求項１１】
前記芽胞が、糸状菌種の芽胞を含む、請求項１０に記載の物品。
【請求項１２】
前記芽胞が、アスペルギルス種の芽胞を含む、請求項１１に記載の物品。
【請求項１３】
前記芽胞が、アスペルギルス・ブラジリエンシス、アスペルギルス・オリゼ、アスペルギルス・ニガー、又はアスペルギルス・ニデュランスの芽胞を含む、請求項１２に記載の物品。
【請求項１４】
前記複数の生存試験微生物が、約１０個の試験微生物〜約１０８個の試験微生物からなる、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の物品。
【請求項１５】
前記水溶性又は水分散性ポリマー結合剤が、ポリ（アルキレンオキシド）を含み、前記ポリ（アルキレンオキシド）は、４００ダルトン、４，０００ダルトン、又は２０，０００ダルトンの重量平均分子量を有する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の物品。
【請求項１６】
前記コポリマーを製造するのに使用される前記第四級アンモニウム含有モノマーが、［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウムクロリドを含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の物品。
【請求項１７】
前記コポリマーを製造するのに使用される前記第四級アンモニウム含有モノマーが、［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウムクロリドを含み、前記コポリマーを製造するのに使用される前記オキシモノマーは、グリシジルメタクリレートを含み、前記コポリマーを製造するのに使用される前記アミドモノマーは、Ｎ−ビニルピロリドンを含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の物品。
【請求項１８】
第１の開口部と前記第１の開口部から間隔があいている第２の開口部とを有する中空チャネルを有する本体と、
前記中空チャネル内に固定的に配置された、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の物品と、を備える、工程試験用具。
【請求項１９】
検出培地を収容するリザーバを更に備え、前記リザーバが、前記物品と選択的に流体連通して配置されている、請求項１８に記載の工程試験用具。
【請求項２０】
前記検出培地が、前記試験微生物の発芽及び／又は増殖を促進する有効量の栄養素、試験微生物代謝活性の検出を促進する指示薬化合物、消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物、並びに前述の試薬のうちの任意の２つ以上の組み合わせからなる群から選択される試薬を含む、請求項１９に記載の工程試験用具。
【請求項２１】
前記栄養素が、セリン、プロリン、アルギニン、グルタメート、アスパラギン、アスパルテート、トレオニン、脂質、脂肪酸、バレイショ浸出液、酵母抽出物、麦芽抽出物、ペプトン、デキストロース、及び前述の栄養素のうちの任意の２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、請求項２０に記載の工程試験用具。
【請求項２２】
前記指示薬化合物が、発色性酵素基質、蛍光性酵素基質、ｐＨ指示薬、レドックス指示薬、化学発光酵素基質、染料、及び前述の指示薬化合物のうちの任意の２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、請求項２０又は２１に記載の工程試験用具。
【請求項２３】
前記中和剤化合物が、レシチン、グリシン、炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、ウマ血清、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、カタラーゼ、重亜硫酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、チオグリコール酸ナトリウム、及びチオ硫酸ナトリウムからなる群から選択される、請求項２０〜２２のいずれか一項に記載の工程試験用具。
【請求項２４】
前記物品が、前記第１の開口部から前記第２の開口部まで前記中空チャネルを通過する流体が前記物品と接触するように、前記中空チャネル内に配置されている、請求項１８〜２３のいずれか一項に記載の工程試験用具。
【請求項２５】
前記本体が、前記中空チャネルを形成する壁を含み、壁の一部分は、前記試験微生物又は前記試験微生物の代謝活性物の生成の光学的評価を可能にする、請求項１８〜２４のいずれか一項に記載の工程試験用具。
【請求項２６】
請求項２４に記載の工程試験用具の前記中空チャネルを通して消毒剤を流すことであって、前記工程試験用具が、前記検出培地を収容する前記リザーバを備え、前記検出培地は、前記有効量の前記栄養素及び前記指示薬化合物を含み、前記中空チャネルを通して前記消毒剤を流すことは、前記物品を前記消毒剤と接触させることを含む、流すことと、
前記中空チャネルを通して前記消毒剤を流している間、及び／又は前記中空チャネルを通して前記消毒剤を流した後に、前記物品を前記中空チャネル内の前記消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させることと、
前記物品を前記消毒剤と少なくとも前記所定の最小接触時間で接触させた後に、前記物品を前記消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させることと、
前記物品を前記中空チャネル内の前記検出培地と一定期間接触させることと、
前記物品を前記中空チャネル内の前記検出培地と一定期間接触させた後に、前記中空チャネル内の前記検出培地を分析して、前記指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定することと、を含む、方法。
【請求項２７】
前記工程試験用具の前記中空チャネルを通して前記消毒剤を流すことが、オルトフタルアルデヒド、グルタルアルデヒド、過酢酸、過酢酸及び過酸化水素を含む消毒用組成物、１２％（重量／重量）の２−プロパノール、２％（重量／重量）のグルタルアルデヒド及び１２％（重量／重量）の２−プロパノールを含む消毒用組成物、並びに過酸化水素からなる群から選択される消毒剤を流すことを含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記中空チャネル内の前記検出培地を分析して、前記指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定することが、前記指示薬化合物を視覚的に分析することを含む、請求項２６又は２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記中空チャネル内の前記検出培地を分析して、前記指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定することが、自動検出器を使用して前記指示薬化合物を分析することを含む、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
請求項１８〜２５のいずれか一項に記載の工程試験用具の前記中空チャネルを通して消毒剤を流すことであって、前記中空チャネルを通して前記消毒剤を流すことが、前記物品を前記消毒剤と最小接触時間で接触させることを含む、流すことと、
前記中空チャネルを通して前記消毒剤を流している間、及び／又は前記中空チャネルを通して前記消毒剤を流した後に、前記物品を前記中空チャネル内の前記消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させることと、
前記物品を前記消毒剤と少なくとも前記所定の最小接触時間で接触させた後に、前記物品を前記消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させることと、
前記物品を検出培地と一定期間接触させることと、
前記物品を前記検出培地と一定期間接触させた後に、前記検出培地を分析して、前記試験微生物の生物活性を検出することと、を含む、方法。
【請求項３１】
前記物品を前記検出培地と一定期間接触させる前に、前記工程試験用具から前記物品を取り外すことを更に含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の物品をフローストリーム中の消毒剤と少なくとも所定の最小接触時間で接触させることと、
前記物品を前記消毒剤と少なくとも前記最小接触時間で接触させた後に、前記物品を前記消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させることと、
前記物品を検出培地と一定期間接触させることと、
前記物品を前記検出培地と一定期間接触させた後に、前記検出培地を分析して、試験微生物の生物活性を検出することと、を含む、方法。
【請求項３３】
前記最小接触期間が、約３分〜約９０分である、請求項２６〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記物品を前記検出培地と一定期間接触させることが、前記物品を前記検出培地と約５分〜約４８時間接触させることを含む、請求項２６〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記検出培地を分析して、前記試験微生物の生物活性を検出することが、芽胞の発芽及び／又は成長に由来する栄養細胞を検出することを含む、請求項２６〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記検出培地を分析して、前記試験微生物の生物活性を検出することが、前記芽胞の酵素活性、並びに／又は芽胞の発芽及び／若しくは成長に由来する栄養細胞の酵素活性を検出することを含む、請求項２６〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
酵素活性を検出することが、ホスファターゼ（例えば、酸ホスファターゼ又はアルカリホスファターゼ）活性、ベータ−グルコシダーゼ活性、アルファ−グルコシダーゼ活性、セルラーゼ活性、キシラナーゼ活性、ベータ−グルクロニダーゼ活性、アルファ−グルクロニダーゼ活性、アルファ−ガラクトシダーゼ活性、ベータ−ガラクトシダーゼ活性、ラッカーゼ活性、プロテアーゼ活性、ペプチダーゼ活性、アミラーゼ活性、グルコースオキシダーゼ活性、リアーゼ活性、エステラーゼ活性、リパーゼ活性  オキシドレダクターゼ活性、及び前述の酵素活性のいずれか２つ以上の組み合わせからなるリストから選択される酵素活性を検出することを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記物品を前記検出培地と一定期間接触させることが、前記物品を前記検出培地と既定の温度で接触させることを含む、請求項２６〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記物品を前記有効量の前記中和剤化合物と接触させることが、前記物品を前記検出培地と接触させる前に、前記物品を前記有効量の前記中和剤化合物と接触させることを含む、請求項２６〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記物品を前記有効量の前記中和剤化合物と接触させることが、前記物品を、前記有効量の前記中和剤化合物を含む前記検出培地と接触させることを含む、請求項２６〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
内視鏡検査法は、疾病の予防、診断及び治療に有益な役割を果たす。内視鏡検査法は、複雑で再利用可能な可撓性機器を用いて実施され、この可撓性機器は、中空の体内に挿入されると、患者の生体材料、及び潜在的な病原体を含む微生物によって激しく汚染された状態になる可能性がある。患者間における可撓性内視鏡の注意深い再処理は、相互汚染、及び病原体の起こり得る伝染のリスクを低減するために極めて重要である。
【０００２】
可撓性内視鏡は、医療デバイス用のスポルディングの分類によればセミクリティカルとみなされ、したがって、こうしたデバイスを高水準消毒によって汚染除去することが必要である。したがって、内視鏡と再利用可能な付属品はどちらも、使用前、使用中及び使用後、並びに洗浄後及び高水準消毒前を含めた、それらの使用及び再生処理の過程で頻繁に目視検査することが推奨されている。しかしながら、目視に基づく検証方法を可撓性内視鏡に適用するときには厳しい制限があり、それは、こうしたデバイス内の複雑で狭い管腔を直接的に目視検査することができないためである。
【０００３】
可撓性内視鏡を、病原性微生物、及び内視鏡処置を受ける患者間での疾病の伝染を軽減する水準まで洗浄及び消毒するために、自動内視鏡洗浄装置（ＡＥＲ）（automated endoscope reprocessor）が用いられる。通常、使用者にとって入手可能な情報は、主に時間及び温度の情報からなる、ＡＥＲ装置自体によって提供されるパラメータ情報のみである。ＡＥＲは、消毒サイクルの有効性を確かめることが可能な化学的パラメータを監視しない。液体消毒剤を使用する消毒プロセスの有効性を監視するための改善された生物学的インジケータが必要とされている。
【発明の概要】
【０００４】
本開示は、概ね、消毒プロセスの有効性を検証する物品及び用具に関する。具体的には、本開示は、消毒する品目を液体消毒剤と接触させる、消毒プロセスの有効性を検証するための方法及び用具に関する。
【０００５】
一態様では、本開示は物品を提供する。物品は、不織布基材と、基材に接着された乾燥コーティングと、を含むことができる。不織布基材は、それにグラフト化されたコポリマーを有することができる。コポリマーは、共重合した下記のモノマー単位：第四級アンモニウム含有配位子モノマー及び／又はグアニジニル含有配位子モノマーから選択されるカチオン性窒素含有配位子モノマー、アミドモノマー、及びオキシモノマー、を含むことができる。乾燥コーティングは、複数の試験微生物を含むことができる。
【０００６】
上記実施形態のいずれかにおいて、グラフト化されたコポリマーは、ａ）１０〜５０重量部のカチオン性窒素含有配位子モノマーと、ｂ）１０〜８０重量部のアミドモノマーと、ｃ）１０〜４０重量部のオキシモノマーと、０〜３０重量部のポリ（アルキレンオキシド）モノマーと、を含むことができ、ａ）〜ｄ）の合計は、１００重量部である。物品の上記実施形態のいずれかにおいて、乾燥コーティングは、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤を更に含み得る。上記の実施形態のいずれかにおいて、不織布基材は、疎水性熱可塑性ポリオレフィンのメルトブローマイクロファイバーを含むことができる。上記の実施形態のいずれかにおいて、物品はコポリマー対不織布基材の重量比を有することができ、その重量比が、１部の不織布基材に対して約０．５〜３部のコポリマーであることができる。
【０００７】
上記の実施形態のいずれかにおいて、試験微生物は、芽胞を含む。上記の実施形態のいずれかにおいて、芽胞は、糸状菌の種の芽胞を含むことができる。上記実施形態のいずれかにおいて、芽胞は、アスペルギルス・ブラジリエンシス、アスペルギルス・オリゼ、アスペルギルス・ニガー、又はアスペルギルス・ニデュランスの芽胞を含むことができる。いくつかの実施形態では、試験微生物は、ゲオバチルス・ステアロサーモフィルス及びバチルス・アトロフェウス（以前から、バチルス・ズブチルスとして既知）を含むことができる。
【０００８】
上記の実施形態のいずれかにおいて、コポリマーを製造するのに使用される第四級アンモニウム含有モノマーは、［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウムクロリドを含み得る。上記の実施形態のいずれかにおいて、コポリマーを製造するのに使用される第四級アンモニウム含有モノマーは、［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウムクロリドを含み得、コポリマーを製造するのに使用されるオキシモノマーは、グリシジルメタクリレートを含み得、コポリマーを製造するのに使用されるアミドモノマーは、Ｎ−ビニルピロリドンを含み得る。
【０００９】
別の態様では、本開示は、工程試験用具を提供する。工程試験用具は、第１の開口部と第１の開口部から間隔があいている第２の開口部とを有する中空チャネルを有する本体と、中空チャネル内に固定的に配置された物品と、を備えることができる。物品は、不織布基材と、基材に接着された乾燥コーティングと、を含むことができる。不織布基材は、それにグラフト化されたコポリマーを有することができる。コポリマーは、共重合した下記のモノマー単位：第四級アンモニウム含有配位子モノマー及び／又はグアニジニル含有配位子モノマーから選択されるカチオン性窒素含有配位子モノマー、アミドモノマー、及びオキシモノマー、を含むことができる。乾燥コーティングは、複数の試験微生物と、任意選択的な水溶性又は水分散性ポリマー結合剤と、を含むことができる。
【００１０】
上記の実施形態のいずれかにおいて、工程試験用具は、検出培地を収容するリザーバを更に備え得る。リザーバは、物品と選択的に流体連通するように配置することができる。いくつかの実施形態では、検出培地は、試験微生物の発芽及び／又は増殖を促進する有効量の栄養素、試験微生物代謝活性の検出を促進する指示薬化合物、消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物、並びに前述の試薬のうちの任意の２つ以上の組み合わせからなる群から選択される試薬を含むことができる。
【００１１】
上記の実施形態のいずれかにおいて、工程試験用具の本体は、中空チャネルを形成する壁を含み、壁の一部分は、試験微生物又は試験微生物の代謝活性物の生成の光学的評価を可能にする。
【００１２】
更に別の態様では、本開示は、第１の方法を提供する。本方法は、工程試験用具の上記実施形態のいずれかの中空チャネルを通して消毒剤を流すことを含むことができ、工程試験用具は、検出培地を収容するリザーバを備え、検出培地は、有効量の栄養素及び指示薬化合物を含み、中空チャネルを通して消毒剤を流すことは、物品を消毒剤と接触させることを含む。第１の方法は、中空チャネルを通して消毒剤を流している間、及び／又は中空チャネルを通して消毒剤を流した後に、物品を中空チャネル内の消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させることと、物品を消毒剤と少なくとも所定の最小接触時間で接触させた後に、物品を、消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させることと、物品を中空チャネル内の検出培地と一定期間接触させることと、物品を中空チャネル内の検出培地と一定期間接触させた後に、中空チャネル内の検出培地を分析して、指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定することと、を更に含むことができる。
【００１３】
更に別の態様では、本開示は、第２の方法を提供する。本方法は、物品をフローストリーム中の消毒剤と少なくとも既定の最小接触時間で接触させることを含むことができる。物品は、不織布基材と、基材に接着された乾燥コーティングと、を含むことができる。不織布基材は、それにグラフト化されたコポリマーを有することができる。コポリマーは、共重合した下記のモノマー単位：第四級アンモニウム含有配位子モノマー及び／又はグアニジニル含有配位子モノマーから選択されるカチオン性窒素含有配位子モノマー、アミドモノマー、及びオキシモノマー、を含むことができる。乾燥コーティングは、複数の試験微生物と、任意選択的な水溶性又は水分散性ポリマー結合剤と、を含むことができる。第２の方法は、物品を消毒剤と少なくとも最小接触時間で接触させた後に、物品を消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させることと、物品を検出培地と一定期間接触させることと、物品を検出培地と一定期間接触させた後に、検出培地を分析して、試験微生物の生物活性を検出することと、を更に含むことができる。
【００１４】
第１の方法又は第２の方法の上記実施形態のいずれかにおいて、最小接触期間は、約３分〜約９０分であり得る。第１の方法又は第２の方法の上記実施形態のいずれかにおいて、物品を検出培地と一定期間接触させることは、物品を検出培地と約５分〜約４８時間接触させることを含む。
【００１５】
「好ましい」及び「好ましくは」という語は、ある特定の状況下である特定の利益をもたらし得る本発明の実施形態を指す。しかし、他の実施形態もまた、同じ又は他の状況において好ましい場合がある。更にまた、１つ以上の好ましい実施形態の記載は、他の実施形態が有用でないことを含意するものではなく、他の実施形態を本発明の範囲から排除することを意図するものでもない。
【００１６】
本明細書で用いる場合、「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」、「少なくとも１つの（at least one）」、及び「１つ以上の（one or more）」は、互換的に用いられる。したがって、例えば、「１つの」不織布基材は、「１つ以上の」不織布基材を意味するように、解釈され得る。
【００１７】
用語「及び／又は」は、列挙された要素のうちの１つ若しくは全て、又は列挙された要素のうちの任意の２つ以上の組み合わせを意味する。
【００１８】
本明細書で用いる場合、「ヒドロカルビル」は、アリール及びアルキルを含む。
【００１９】
本明細書で用いる場合、「（ヘテロ）ヒドロカルビル」は、ヒドロカルビルアルキル及びアリール基、並びにヘテロヒドロカルビルヘテロアルキル及びヘテロアリール基を含み、後者は、エーテル又はアミノ基などの１つ以上の懸垂型（鎖中）ヘテロ原子を含む。ヘテロヒドロカルビルは、任意選択的に、エステル官能基、アミド官能基、尿素官能基、ウレタン官能基、及びカーボネート官能基などの、１つ以上のカテナリー（鎖中）官能基を含有し得る。特に指示がない限り、非ポリマー（ヘテロ）ヒドロカルビル基は、典型的には、１〜６０個の炭素原子を含有する。本明細書で用いられるようなヘテロヒドロカルビルのいくつかの例としては、これらに限定されるものではないが、上記の「アルキル」、「ヘテロアルキル」、「アリール」、及び「ヘテロアリール」について記載されたものに加え、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、４−ジフェニルアミノブチル、２−（２’−フェノキシエトキシ）エチル、３，６−ジオキサヘプチル、３，６−ジオキサヘキシル−６−フェニルが挙げられる。
【００２０】
本明細書で用いる場合、「（ヘテロ）アリーレン」は、アリーレン及びヘテロアリーレンを含む。
【００２１】
本明細書で用いる場合、「成長」は、例えば、芽胞の発芽によって形成される栄養細胞を含む栄養細胞の増殖及び／又は繁殖の生物学的プロセスを指す。
【００２２】
また、本明細書において、端点による数値範囲の記載は、その範囲内に包含される全ての数を含む（例えば、１〜５は、１、１．５、２、２．７５、３、３．８０、４、５などを含む）。
【００２３】
本発明の特徴及び利点は、発明を実施するための形態、及び添付の特許請求の範囲を考慮することで理解される。本発明のこれら並びに他の特徴及び利点は、本発明の様々な例証となる実施形態との関連で後述され得る。
【００２４】
上記の本発明の概要は、本発明について開示される各実施形態又は全ての実施の記載を意図したものではない。以下の図面及び発明を実施するための形態は、実例となる実施形態をより具体的に例示するものである。他の特徴、目的及び利点は、説明及び図面から、かつ特許請求の範囲から明らかとなるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】本開示による物品の一実施形態の平面図である。
【００２６】
【図２】図１の物品の側面図である。
【００２７】
【図３】本開示による工程試験用具の一実施形態の斜視図である。
【００２８】
【図４】図３の工程試験用具の分解図である。
【００２９】
【図５】本開示による工程試験用具の代替実施形態の平面図である。
【００３０】
【図６】本開示による方法の一実施形態のブロック図である。
【００３１】
【図７】本開示による別の方法の一実施形態のブロック図である。
【００３２】
【図８】本開示による更に別の方法の一実施形態のブロック図である。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本開示のいずれかの実施形態の詳細な説明に先立ち、本発明はその適用において、以下の説明に記載又は以下の図面に例示の構成の詳細及び構成要素の配置に限定されるものではないことを理解されたい。本発明は、他の実施形態も可能であり、様々な方法で実践又は実行することが可能である。また、本明細書において使用される語法及び専門用語は説明を目的としたものであり、限定するものとみなしてはならないことを理解されたい。本明細書における「含む（including）」、「含む（comprising）」、又は「有する（having）」、及びこれらの変化形の使用は、その後に列記される項目及びこれらの同等物、並びに追加的な項目を包含することを意味する。別途特定又は限定されない限り、「接続される（connected）」及び「連結される（coupled）」という用語、並びにそれらの変化形は、広い意味で使用されるものであり、直接的及び間接的な接続及び連結の両方を包含する。更に、「接続される」及び「連結される」は、物理的又は機械的な接続又は連結に制限されない。本開示の範囲から逸脱することなく、他の実施形態を利用すること、及び構造的又は論理的な変更を行うことが可能であることを理解されたい。更に、「前」、「後」、「上」、「下」などの用語は、各要素の互いに対する関係を説明するためにのみ使用されるものであり、装置の特定の向きを示すこと、装置の必要若しくは必須な向きを指示若しくは示唆すること、又は本明細書に記載される発明が使用時にどのように使用、装着、表示、若しくは配置されるかを指定することを目的とするものでは決してない。
【００３４】
本開示は、概ね、消毒又は滅菌プロセスの有効性を検証するために使用され得る物品、用具、及び方法に関する。具体的には、本開示は、その上にコーティングされたポリマーマトリックス中に配置された微生物の組成物を有する不織布キャリアを含む物品に関する。有利には、物品は、物品から微生物を実質的に放出することなく、液体（例えば、物品によって、及び／又は物品を通って流れる流動性水性液体）に一定期間浸漬することができる。したがって、消毒剤の液体フローストリームを使用する消毒プロセス（例えば、内視鏡を洗浄及び消毒するためのプロセス）を確証するために、物品を使用することができる。
【００３５】
一態様では、本開示は物品を提供する。図１及び図２は、本開示による物品１００の一実施形態の様々な図を示す。物品１００は、基材１０と、基材に接着された乾燥コーティング２０と、を含む。任意の実施形態では、基材１０は、シート状材料であり得る。基材１０に好適なシート状材料の例は、例えば、メルトブロー繊維（例えば、疎水性熱可塑性オレフィンのメルトブロー繊維）を含む不織布などの不織布である。
【００３６】
基材が不織布基材である任意の実施形態では、不織布基材は、不織布基材１平方メートル当たり約１５〜５０ｍ２の表面積を有する。基材が不織布基材である任意の実施形態では、不織布基材は、２０％未満のソリディティを有する。
【００３７】
基材がメルトブローマイクロファイバーを含む不織布基材である任意の実施形態では、基材は、それにグラフト化されたコポリマー（図示せず）を有することができる。コポリマーは、共重合した下記のモノマー単位：第四級アンモニウム含有配位子モノマー及び／又はグアニジニル含有配位子モノマーから選択されるカチオン性窒素含有配位子モノマー、アミドモノマー、及びオキシモノマー、を含むことができる。グラフト化されたコポリマーを有する好適な不織布ポリマーは、「Ｎｏｎｗｏｖｅｎ  Ａｒｔｉｃｌｅ  Ｇａｆｔｅｒ  ｗｉｔｈ  Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ」と題された国際公開第２０１３／１６２６９５号に記載されており、これは、その全容が参照により本明細書に組み込まれる。本開示の物品を製造するのに使用されるグラフト化されたコポリマーを製造するための好適なモノマー単位も、国際公開第２０１３／１６２６９５号に記載されている。
【００３８】
任意の実施形態では、グラフト化されたコポリマーは、約１０〜５０重量部のカチオン性窒素含有配位子モノマーと、約１０〜８０重量部のアミドモノマーと、約１０〜４０重量部のオキシモノマーと、を含むことができる。任意選択的に、グラフト化されたコポリマーは、約０〜３０重量部のポリ（アルキレンオキシド）モノマーを含むことができる。上記モノマーの各々の部分の合計は、１００重量部である。任意の実施形態では、グラフト化ポリマーの重量は、不織布基材の重量の０．５〜５倍であり得る。ポリマーがポリ（アルキレンオキシド）を含む任意の実施形態では、ポリ（アルキレンオキシド）は、２０，０００ダルトンの重量平均分子量を有する。
【００３９】
ポリマーグラフト化された物品は、不織布基材と、グラフト化されたコポリマーと、を含み、コポリマーが、共重合した下記のモノマー単位：ａ）カチオン性窒素含有配位子モノマー、ｂ）アミドモノマー、及びｃ）「オキシ」モノマーを含む。カチオン性窒素含有配位子モノマーは、第四級アンモニウム含有配位子モノマー及びグアニジニル含有配位子モノマーを含む。「オキシ」モノマーは、エポキシモノマー及びＣ３〜Ｃ１０、好ましくはＣ４〜Ｃ６のモノエーテル含有モノマーを含む。より具体的には、グラフト化されたコポリマーは、共重合した下記のモノマー単位：
ａ．１０〜５０重量部のカチオン性窒素含有配位子モノマーと、
ｂ．１０〜８０重量部のアミドモノマーと、
ｃ．１０〜４０重量部のオキシモノマーと、を含み、
ａ〜ｃの合計は、１００重量部である。
【００４０】
カチオン性窒素含有配位子モノマーは、一般式：
【化１】
2020506739.tif 000003
［式中、Ｘ１は−Ｏ−又は−ＮＲ３−であり、Ｒ３はＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル−であり、Ｒ５は（ヘテロ）ヒドロカルビル基、好ましくはヒドロカルビル基、より好ましくはＣ１〜Ｃ８アルキレンであり、ＲＬｉｇは第四級アンモニウム配位子基又はグアニジニル含有配位子基である］のものである。
【００４１】
任意の実施形態では、カチオン性窒素含有配位子モノマーは、第四級アンモニウムモノマーであり、一般式：
【化２】
2020506739.tif 000004
［式中、Ｘ１は−Ｏ−又は−ＮＲ３−であり、各Ｒ３はＨ又はＣ１〜Ｃ４アルキル、好ましくはＨ又はメチルであり、Ｒ５はアルキレン（例えば、１〜１０個の炭素原子、１〜６個、又は１〜４個の炭素原子を有するアルキレン）であり、各Ｒ４は独立して、水素、アルキル、又はアリールである。）であり、ヒドロキシル基によって置換されてもよい］のものである。第四級アンモニウム塩の対イオンは、多くの場合、ハライド、サルフェート、ホスフェート、ナイトレートなどである。第四級アンモニウム基を有するこのようなモノマーを、好ましくは、（明細書に記載される追加コモノマーの存在下において）不織布基材の表面に直接グラフトしてもよく、又は、あまり好ましくないが、第一級、第二級又は第三級アミン基を有するアミノアルキル（メタ）アクリロイルモノマーをグラフトした後、アルキル化によって式ＩＩの第四級アンモニウム基に変換してもよい。
【００４２】
有用なアミノアルキル（メタ）アクリレート（すなわち、式ＩＩ中では、オキシ）としては、トリアルキルアミノアルキル（メタ）アクリレート、例えば、トリメチルアミノエチルメタクリレート、トリメチルアミノエチルアクリレート、トリエチルアミノエチルメタクリレート、トリエチルアミノエチルアクリレート、トリメチルアミノプロピルメタクリレート、トリメチルアミノプロピルアクリレート、ジメチルブチルアミノプロピルメタクリレート、ジエチルブチルアミノプロピルアクリレートなどが挙げられる。
【００４３】
例示的なアミノ（メタ）アクリルアミド（すなわち、式ＩＩ中のＸ１は−ＮＲ３−）としては、例えば、３−（トリメチルアミノ）プロピルメタクリルアミド、３−（トリエチルアミノ）プロピルメタクリルアミド、３−（エチルジメチルアミノ）プロピルメタクリルアミドが挙げられる。
【００４４】
式Ｉのアミノアルキル（メタ）アクリロイルモノマーの好適な第四級塩としては、これらに限定されるものではないが、（メタ）アクリルアミドアルキルトリメチルアンモニウム塩（例えば、３−メタクリルアミドプロピルトリメチルアンモニウムクロリド及び３−アクリルアミドプロピルトリメチルアンモニウムクリイド）及び（メタ）アクリルオキシアルキルトリメチルアンモニウム塩（例えば、２−アクリルオキシエチルトリメチルアンモニウムクロリド、２−メタクリルオキシエチルトリメチルアンモニウムクロリド、３−メタクリルオキシ−２−ヒドロキシプロピルトリメチルアンモニウムクロリド、３−アクリルオキシ−２−ヒドロキシプロピルトリメチルアンモニウムクロリド、及び２−アクリルオキシエチルトリメチルアンモニウムメチルサルフェート）が挙げられる。
【００４５】
グラフト化されたコポリマーは、１００重量部の全グラフトモノマーに対して、１０〜５０重量部、好ましくは２０〜４０重量部のこのような第四級アミンモノマー単位を含んでもよい。
【００４６】
いくつかの実施形態では、グラフト化されたコポリマーは、式ＩＩＩａ又はｂのカチオン性グアニジニル含有配位子モノマーを含む。このような化合物は、アグマチン含有配位子、グアニジン及びビグアニド含有配位子を含んでもよい。
【化３】
2020506739.tif 000005
【化４】
2020506739.tif 000006
［式中、
Ｒ２は（ヘテロ）ヒドロカルビル基、好ましくは１〜１０個の炭素原子を有する二価アルキレンであり、
各Ｒ３は独立して、Ｈ又はヒドロカルビル、好ましくはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｒ１４はＨ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又は−Ｎ（Ｒ３）２であり、
Ｒ１５はＨ又はヒドロカルビル、好ましくはＣ１〜Ｃ４アルキル又はアリールであり、
Ｘ１は−Ｏ−又は−ＮＲ３−であり、
ｏは０又は１であり、かつ
ｎは１又は２である］。
【００４７】
このような配位子モノマーは、アルケニル化合物又はアルケノイル化合物、典型的には（メタ）アクリロイルハライド、（メタ）アクリロイルイソシアネート、又はアルケニルアズラクトンと、式ＩＶａ又はＩＶｂ：
【化５】
2020506739.tif 000007
【化６】
2020506739.tif 000008
［式中、Ｘ１、及びＲ２、Ｒ３、Ｒ１４、Ｒ１５、及びｎは、上に定義したとおりである］の化合物との縮合により調製することができる。
【００４８】
他の配位子モノマーは、カルボニル含有モノマー、例えば、アクロレイン、ビニルメチルケトン、ジアセトンアクリルアミド又はアセトアセトキシエチルメタクリレートと、式ＩＶａ又はＩＶｂの化合物との縮合により調製することができる。
【００４９】
グラフト化されたコポリマーは、１００重量部の全グラフトモノマーに対して、１０〜５０重量部、好ましくは２０〜４０重量部のこのようなカチオン性グアニジニル含有配位子モノマー単位を含んでもよい。カチオン性窒素含有配位子モノマーは、式ＩＩの第四級アミンモノマー単位、式ＩＩＩａ又はｂのグアニジニル含有モノマー単位、又はそのようなモノマー単位の両方の混合物を含んでもよい。
【００５０】
グラフト化されたコポリマーは、エポキシ官能性モノマー単位及びアルキルエーテル官能性モノマー単位を含む「オキシモノマー」単位を更に含む。望ましくは、オキシモノマーは、１５〜２５ｇ／Ｌの水溶性を有する。このような「オキシモノマー」としては、エポキシ官能性及びモノエーテル官能性の、（メタ）アクリレート及び（メタ）アクリルアミドが挙げられ、並びに一般式：
【化７】
2020506739.tif 000009
［式中、
Ｒ３は−Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｘ１は−ＮＲ３−又はＯであり、
Ｒ１はエポキシ官能性又はエーテル官能性（ヘテロ）ヒドロカルビル基である］のものが挙げられる。より詳細には、エーテル官能基は、低級アルキレンオキシアルキル基である。好ましくは、Ｒ１基は、オキシラン（エポキシ）基を有する２〜３０個の炭素原子の直鎖、分枝鎖、環状又は多環式炭化水素に基づいている。より好ましくは、Ｒ８基は、グリシジルメタクリレート（ＧＭＡ）のように、３〜１０個の炭素を含む。
【００５１】
いくつかの好ましいエポキシモノマーは、式：
【化８】
2020506739.tif 000010
［式中、
Ｒ７は（ヘテロ）ヒドロカルビル基、好ましくはヒドロカルビル基、より好ましくはＣ１〜Ｃ６アルキレンであり、
Ｒ３は−Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｘ１は−ＮＲ３−又は−Ｏ−である］のものである。
【００５２】
代表的なエポキシモノマーとしては、グリシジル（メタ）アクリレート、チオグリシジル（メタ）アクリレート、３−（２，３−エポキシプロポキシ）フェニル（メタ）アクリレート、２−［４−（２，３−エポキシプロポキシ）フェニル］−２−（４−（メタ）アクリロイルオキシ−フェニル）プロパン、４−（２，３−エポキシプロポキシ）シクロヘキシル（メタ）アクリレート、２，３−エポキシシクロヘキシル（メタ）アクリレート、及び３，４−エポキシシクロヘキシル（メタ）アクリレートが挙げられる。
【００５３】
有用な一実施形態では、エポキシ官能性モノマーは、スキーム１：
【化９】
2020506739.tif 000011
［式中、Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキレンである］に示されるビニルジメチルアズラクトンとヒドロキシアルキルエポキシ化合物との反応から誘導される。
【００５４】
グラフト化されたコポリマー中のこれらのモノマーのエポキシ基は、加水分解的に開環して、コポリマー上に末端ペンダントジオール基を提供すると考えられる。したがって、元のグラフト化疎水性エポキシ基は、加水分解して、グラフト化されたコポリマーに親水性ジオール基を提供する。
【００５５】
あるいは、「オキシモノマー」は、低級アルキルエーテル官能性モノマーから選択されてもよい。このようなエーテル官能性モノマーは、以下の式：
【化１０】
2020506739.tif 000012
［式中、
Ｒ３は−Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｘ１は−ＮＲ３−又は−Ｏ−であり、
Ｒ１２は直鎖又は分枝鎖Ｃ２〜Ｃ４アルキレンであり、
Ｒ１３は直鎖又は分枝鎖Ｃ１〜Ｃ４アルキルである］の低級モノマーエーテルモノマーを含む。好ましくは、Ｒ１２基及びＲ１３基の炭素原子の合計は、３〜１０個、好ましくは３〜６個である。
【００５６】
グラフト化されたコポリマーは、１００重量部の全グラフトモノマーに対して、１０〜４０重量部、好ましくは１５〜３５重量部のこのようなオキシモノマー単位を含んでもよい。
【００５７】
グラフト化されたポリマーは、任意選択的に、他のエチレン性不飽和親水性アミドモノマー単位を含有する。本明細書で用いる場合、これらの「親水性モノマー」は、曇点に到達することなく、少なくとも１重量％、好ましくは少なくとも５重量％の水混和性（モノマー中の水）を有する重合性アミドモノマーである。親水性アミドモノマー単位は、一般式：
【化１１】
2020506739.tif 000013
［式中、
Ｒ３は−Ｈ又はＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
各Ｒ８はＨ、アルキル又はアリール基であり、
Ｒ９及びＲ１０はアルキル基であるか、又は一緒になって５若しくは６員環を形成し得る］の（メタ）アクリルアミド及びＮ−ビニルアミドを含む。
【００５８】
好適な親水性モノマーの例としては、Ｎ−ビニルカプロラクタム、Ｎ−ビニルアセトアミド、Ｎ−ビニルピロリドン、アクリルアミド、モノ−又はジ−Ｎ−アルキル置換アクリルアミド、及びこれらの組み合わせが挙げられる。好ましい極性モノマーとしては、Ｎ−ビニルピロリドン、Ｎ−ビニルアセトアミド、メチルアクリルアミド、及びこれらの混合物が挙げられる。
【００５９】
グラフト化されたコポリマーは、１００重量部の全グラフトモノマーに対して、１０〜８０重量部、好ましくは３０〜６０重量部のこのようなアミドモノマー単位を含んでもよい。
【００６０】
いくつかの好ましい実施形態では、コポリマーを製造するのに使用される第四級アンモニウム含有モノマーは、［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウムクロリド（ＭＡＰＴＡＣ）を含む。いくつかの好ましい実施形態では、コポリマーを製造するのに使用されるオキシモノマーは、グリシジルメタクリレートを含む。いくつかの好ましい実施形態では、コポリマーを製造するのに使用されるアミドモノマーは、Ｎ−ビニルピロリドンを含む。好ましい実施形態では、コポリマーを製造するのに使用される第四級アンモニウム含有モノマーは、［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウムクロリドを含み、コポリマーを製造するのに使用されるオキシモノマーは、グリシジルメタクリレートを含み、コポリマーを製造するのに使用されるアミドモノマーは、Ｎ−ビニルピロリドンを含む。
【００６１】
任意の実施形態では、コポリマーを製造するのに使用される第四級アンモニウム含有モノマー及びオキシモノマーはそれぞれ、アクリレートモノマー、メタクリレートモノマー、アクリルアミドモノマー、及びメタクリルアミドモノマーからなる群から選択されるモノマーを含む。これらの実施形態のいずれにおいても、アミドモノマーは、アクリルアミドモノマー、メタクリルアミドモノマー、及びＮ−ビニルアミドモノマーからなる群から選択される。
【００６２】
任意の実施形態では、コポリマーを製造するのに使用されるオキシモノマーは、エポキシ置換基を有する、アクリレートモノマー、メタクリレートモノマー、アクリルアミドモノマー、及びメタクリルアミドモノマーからなる群から選択されるモノマーを含む。
【００６３】
上記グラフトモノマーに関して、不織布基材の表面にグラフト化されるモノマーは、通常、電子ビームによるグラフト化のためにアクリレート又は他の非アクリレート重合性官能基のいずれかを有する。メタクリロイル基は、電子ビーム照射に暴露された不織布に対するこのようなメタクリロイルモノマーのより遅い、より均一な反応性及び耐久性のため、不織布基材表面へのモノマーのグラフト化に好ましい（本明細書に記載のプロセスを使用する）。
【００６４】
任意の実施形態では、カチオン性窒素含有配位子モノマーは、無機酸塩又は有機酸塩、例えば、塩酸塩、リン酸塩、硫酸塩、ヘミサルフェート塩、硝酸塩、酢酸塩、メシレート塩、トシレート塩、酒石酸塩、ヘミ酒石酸塩、又はベンゾエート塩などであり得る。
【００６５】
乾燥コーティング２０は、複数の試験微生物（例えば、細菌、芽胞）を含む。試験微生物（例えば、細菌、芽胞）は、検出可能な生物活性（例えば、酵素活性）を含み、及び／又は産生可能である。任意の実施形態では、検出可能な生物活性、又は試験微生物が検出可能な生物活性を産生する能力は、微生物を死滅させるのに有効な消毒プロセスに試験微生物を暴露する（例えば、接触させる）ことにより、消滅させることができる。試験微生物が芽胞である任意の実施形態では、乾燥コーティング２０内の芽胞は、生存芽胞であり得る（すなわち、発芽及び／又は二分裂（発芽後）などの生物活性が可能である）。
【００６６】
任意選択的に、基材１０に接着された乾燥コーティング２０は、（微生物用）結合剤として作用することができる水溶性又は水分散性ポリマーを更に含む。ポリマー結合剤は、消毒プロセス中の物品からの微生物の除去を最小限に抑える働きをする。好ましくは、ポリマー結合剤は、乾燥されると、水性緩衝液又は水性消毒溶液中で再溶解するのが遅い。溶解速度は、多数の要因によって制御することができる。例えば、ポリマー結合剤の分子量を増加させると、溶解速度が低下する。溶解速度を制御する好ましい方法は、ヒドロゲルを形成することができる親水性ポリマー結合剤を使用することである。ヒドロゲルは、例えば、温度変化によって、又は乾燥後に、ポリマー溶液から形成することができる。ヒドロゲルは、例えば、水素結合の形成の結果として、又は結晶化によって、又は他のポリマー−ポリマー相互作用によって生成される。
【００６７】
ポリマー結合剤に潜在的になり得るものの適性は、本明細書に示されるように、ポリマー結合剤の存在下で微生物の洗い流しを、ポリマー結合剤の非存在下での試験微生物の洗い流しと比較して測定することによって、容易に試験される。
【００６８】
結合剤として有用なポリマーの好適な例としては、天然及び合成、イオン性及びノニオン性のポリマー及びコポリマーが挙げられる。典型的なポリマーとしては、例えば、とりわけ、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、及びヒドロキシエチルセルロースをはじめとして、変性セルロース系ポリマーなどの医薬成分の調整放出又は制御放出のためのコーティング又は結合剤として使用されるものが挙げられる。他には、ポリビニルピロリドン、ポリエチレンオキシド、及びポリプロピレンオキシドが挙げられる。ヒドロゲルを形成することが知られている典型的なポリマーとしては、とりわけ、アガロース、メチルセルロース、ヒアルロン酸、ゼラチン、グアー、ポリビニルアルコール、及び中和又は部分的に中和されたポリアクリル酸が挙げられる。ヒアルロン酸、ポリアクリル酸及びコポリマー、ポリＡＭＰＳ、並びに硫酸デキストランなどのポリマーを含むアニオン性ポリマーは、グラフト化基材とのイオン相互作用ももたらし、これにより再溶解速度を低下させるため、有用な結合剤である。
【００６９】
本開示による物品を製造するとき、任意選択的な親水性ポリマーは、水性溶媒（例えば、水、水性緩衝液）で水和され得、試験微生物は、得られるヒドロゲル中に懸濁され得る（例えば、均一に懸濁され得る）。あるいは、試験微生物は、好適な懸濁液（例えば、水、緩衝水溶液）中に懸濁させることができる。懸濁液又はヒドロゲル中の試験微生物の濃度は、所定の体積のヒドロゲルを基材に適用することにより、所定の数の試験微生物を基材上に送達するように調整することができる。物品上の所定の数の生存試験微生物は、約１０個の試験微生物、約１００個の試験微生物、約１０３個の試験微生物、約１０４個の試験微生物、約１０５個の試験微生物、約１０６個の試験微生物、約１０７個の試験微生物、又は約１０８個の試験微生物であり得る。
【００７０】
懸濁液又はヒドロゲル中に試験微生物（例えば、芽胞）を懸濁させた後、所定量の懸濁液又はヒドロゲルを（例えば、ピペットで）基材上に堆積させることができ、液体コーティングを乾燥させて、本質的に水を含まない乾燥コーティングを製造することができる。乾燥する工程の前及び乾燥する工程中に、コーティングは、基材の表面内の空隙内に移動することができる。
【００７１】
液体コーティングは、室温条件下で、又は場合によっては穏やかな加熱を使用することによって乾燥させることができる。
【００７２】
有利には、乾燥したポリマー結合剤中に試験微生物を分散させることは、存在する場合、物品が液体消毒剤（例えば、水性消毒剤）内に配置されたときに試験微生物が捕捉されるマトリックスを提供する。したがって、液体消毒剤が流れる用具内に物品が固定的に配置されている場合、ポリマー結合剤マトリックスは、用具から消毒剤のバルク液体フローストリーム中への試験微生物の移動を最小化又は防止する。
【００７３】
試験微生物は、消毒プロセスの有効性を試験するための任意の好適な試験微生物であり得る。好適な試験微生物としては、当該技術分野において既知の細菌（例えば、マイコバクテリア属の種）、細菌芽胞及び真菌芽胞が挙げられる。試験微生物が芽胞である任意の実施形態では、コーティング２０に使用される芽胞は、糸状菌の種の芽胞又は細菌性細菌芽胞を含むことができる。任意の実施形態では、糸状菌の芽胞は、アスペルギルス種の芽胞を含むことができる。任意の実施形態では、アスペルギルス種の芽胞は、例えば、アスペルギルス・ブラジリエンシス、アスペルギルス・オリゼ、アスペルギルス・ニガー、又はアスペルギルス・ニデュランスの芽胞を含むことができる。任意の実施形態では、細菌性細菌芽胞は、ゲオバチルス種の芽胞を含むことができる。任意の実施形態では、ゲオバチルス種の芽胞は、ゲオバチルス・ステアロサーモフィルスの芽胞を含むことができる。
【００７４】
プロセス及び／又は装置が試験される。任意の実施形態では、基材１０は、例えば、消毒プロセス中に消毒剤が方向付けられる流路（例えば、内視鏡などの例えば中空管（図示せず））内に配置されるように寸法決めすることができる。あるいは、基材１０は、流路内に配置されるか、又は流路に接続される工程試験用具内に配置されるように寸法決めすることができる。基材１０は、本明細書で説明されるように、シート状材料を含み得る。任意の実施形態では、基材１０は、約４ｍｍ２〜約１６００ｍｍ２の表面積を有することができる。任意の実施形態では、基材１０は、例えば、円、楕円形、又は多角形（例えば、正方形、矩形、菱形、五角形、六角形、八角形）の形態に成形することができる。使用中、基材１０は、工程試験用具内に基材を配置する前に、及び／又は消毒剤のフローストリーム中に配置する前に、巻く又は折り畳むことができる。
【００７５】
別の態様では、本開示は、工程試験用具を提供する。図３及び図４は、本開示による工程試験用具２００の一実施形態の様々な図を示す。工程試験用具２００の図示された実施形態は、ＳＷＩＮＮＥＸ（登録商標）フィルタホルダに似せており、上記の物品１００は、その中に収容されている。工程試験用具２００は、第１の開口部３１と第１の開口部から間隔があいている第２の開口部３３とを有する本体３０と、本体を通って第１の開口部から第２の開口部に延びる中空チャネル３２と、を備える。工程試験用具２００は、本体の中空チャネル３２内に固定的に配置された物品１００を更に備える。物品１００は、基材と、ポリマー結合剤及び本開示による複数の試験微生物を含む乾燥コーティングと、を含む、物品の任意の実施形態である。
【００７６】
本明細書で用いる場合、「固定的に配置された」とは、物品（例えば、物品１００）が、中空チャネル（例えば、中空チャネル３２）内に取り付け手段（例えば、クランプ、接着剤）を介して、及び／又は例えば、中空チャネル内に物品を閉じ込めることによって保持されている状態を指す。物品は、中空チャネルを通過する流体（例えば、消毒剤）が中空チャネルから物品を排出することなく物品に接触及び／又はそれを通過するように、保持される。「固定的に配置された」とは、物品が中空チャネル内に恒久的に配置されていることを必ずしも意味しない。いくつかの実施形態では、中空チャネル内で物品が「固定」される手段により、流体（例えば、消毒剤）が物品と接触した後に中空チャネルから物品を取り外す。
【００７７】
図３及び図４の図示された用具２００では、本体３０は、本体３０を形成するために、ねじ付き連結部などの相補的部分によって一緒に接合される２つの部分（それぞれ、３０ａ及び３０ｂ）を備える。他の接合手段（例えば、接着剤、クランプ、摩擦嵌合）を使用して、本体の部分を一緒に接合して工程試験用具を形成することができることに、考えが及ぶ。組み立てられたとき、本体３０の２つの部分は、本体３０の中空チャネル３２内に第１のコンパートメント（図示せず）を形成する。第１のコンパートメントは、物品１００を本体３０内に受容及び保持するように寸法決めされる。任意選択的に、用具２００は、中空チャネル３２内の物品１００を支持及び／又は拘束するための多孔質基部３５を備える。多孔質基部３５は、用具２００の中空チャネル３２を通る液体の流れを可能にするように構成されている。任意選択的に、用具２００は、物品１００を中空チャネルの第１のコンパートメント内に固定するためのＯリング３７を更に備える。
【００７８】
本体３０は、当該技術分野において既知のプロセス（例えば、射出成形）を使用して様々な好適な材料で形成されてもよく、それにはポリマー材料（例えば、熱可塑性ポリマー）、金属、ガラス、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。透明及び／又は半透明の材料（例えば、ガラス、プラスチック）を使用して製造された用具は、消毒プロセス中及び／又は物品が消毒プロセスに暴露された後に分析されている間に、物品１００のｉｎ  ｓｉｔｕ検査をすることができる。
【００７９】
物品１００は、中空チャネル３２内に固定されている。任意の実施形態では、物品１００は、中空チャネル３２内に取り外し可能に固定され得る。物品は、接着剤（例えば、感圧性接着剤若しくはホットメルト接着剤（図示せず））の使用、クランプ（図示せず）の使用を含む様々な手法を使用して、並びに／又は物品が第１のコンパートメントに嵌合するが、例えば、中空チャネルを通過して本体３０の外に出るには大きすぎるように、物品１００、中空チャネル３２、及び第１のコンパートメント３８を寸法決めすることにより、中空チャネル３２内に固定され得る。物品１００は、例えば、２つの部分を分離するためにねじをゆるめて外すことにより本体３０の２つの部分（それぞれ、３０ａ及び３０ｂ）を分離することによって、中空チャネル３２から取り外すことができ、ひいては、第１のコンパートメント３８内で物品へのアクセスを提供し、ピンセットを使用して物品を取り外すことができる。
【００８０】
有利には、中空チャネル３２内に物品１００を固定することにより、液体（例えば、液体消毒剤が中空チャネルを通って流れたときに、物品及びそれに接着された試験微生物が用具２００から移動するのを防止する。有利には、中空チャネル３２内に物品１００を取り外し可能に固定することにより、それに接着された生存試験微生物（例えば、芽胞）の存在について物品を分析するためにオペレータによって物品を取り外すことを可能にする。
【００８１】
任意の実施形態では、本開示の工程試験用具は、用具を液体フローシステムに連結することを容易にする任意選択的な特徴点を含んでもよい。例えば、図２の図示された実施形態の用具２００は、中空チャネル３２の第１の開口部３１において、ルアタイプコネクタ４０（例えば、メス型ルアコネクタ又はオス型ルアコネクタ）を備える。用具２００は、任意選択的なルアタイプコネクタ（例えば、メス型ルアコネクタ又はオス型ルアコネクタ（図示せず））を中空チャネル３２の第２の開口部３３に更に備えることができる。任意の実施形態では、ルアタイプコネクタは、ルアスリップコネクタ、ルアロックコネクタ、又はルアスリップコネクタとルアロックコネクタとの組み合わせであってもよい。これらのコネクタ及び／又は当該技術分野において既知の他のコネクタを使用して、用具２００を、（例えば、管（図示せず）を介して）（例えば、自動内視鏡洗浄装置（ＡＥＲ）（図示せず）内の）液体フローシステムに取り付けることができる。
【００８２】
図５は、本開示による工程試験用具３００の別の実施形態を示す。用具３００は、実質的に平面であり、ＡＥＲに適合するように寸法決めされていてもよい。同様の平面工程試験用具は、国際公開第２０１６／１６４３２９（Ａ１）号に記載されており、その全容が参照により本明細書に組み込まれる。工程試験用具３００は、本体を通って第１の開口部３１から、第１の開口部から間隔があいている第２の開口部３３まで延びる中空チャネル３２を備える、本体３０を備える。中空チャネル３２は、物品１００が固定的に配置された第１のコンパートメント３８を備える。物品１００は、基材と、ポリマー結合剤及び本開示による複数の試験微生物を含む乾燥コーティングと、を含む、物品の任意の実施形態であり得る。物品１００は、本明細書に記載される実施形態のいずれかによって、中空チャネル３２内に固定することができる。
【００８３】
任意の実施形態では、第１のコンパートメント３８は、コンパートメントの内容物（例えば、本明細書に記載されるような物品１００及び／又は検出培地若しくは指示薬化合物）の光学的評価を可能にする壁３９を備えることができる。壁３９は、電磁放射線の可視波長を実質的に透過可能であってもよく、任意選択的に、電磁放射線の紫外線及び／又は赤外線波長を実質的に透過可能であってもよい。したがって、例えば、試験微生物（例えば、芽胞）の代謝活性に起因する第１のコンパートメント３８の内容物の色変化は、視覚的に、又は光学検出機器（例えば、分光計又は照度計）を使用することのいずれかによって第１のコンパートメント内で検出することができる。任意選択的に、第１のコンパートメントから離れた中空チャネル３２を形成する壁の一部分は、同様に光学的に透明又は半透明であってもよく、それによって、第１のコンパートメントから間隔をあけた位置において、中空チャネル内の検出培地又は指示薬化合物の光学的評価を可能にする。
【００８４】
中空チャネル３２は、第１の開口部３１と第１の開口部から間隔があいている第２の開口部３３と、を備える。使用中、第１の開口部から第２の開口部まで中空チャネルを通過する消毒剤（例えば、液体消毒剤）は、中空チャネル３２内に配置された物品１００と接触する（例えば、よけて通り過ぎる、及び／又は通過する）。第１の開口部３１と第２の開口部３３とは、用具３００を、自動内視鏡洗浄装置（ＡＥＲ（図示せず））などの液体フローシステムに取り付けるための接続ポートとして機能することができる。例えば、第１の開口部３１は、（例えば、好適なアダプタ又は管を介して）ＡＥＲに接続されて、ＡＥＲから用具３００内への液体フローの一部分を方向付けることができ、第２の開口部３３は、（例えば、２０１６年１０月１３日に出願された、「工程監視システムで使用するための微生物インジケータ用具（ＭＩＣＲＯＢＩＡＬ  ＩＮＤＩＣＡＴＯＲ  ＤＥＶＩＣＥ  ＦＯＲ  ＵＳＥ  ＷＩＴＨ  ＰＲＯＣＥＳＳ  ＭＯＮＩＴＯＲＩＮＧ  ＳＹＳＴＥＭＳ）」と題された米国特許出願第６２／４０７，７４９号（これは、その全容が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているアダプタなどの好適なアダプタを介して）ＡＥＲに接続されて、その部分をＡＥＲに戻すように方向付けることができる。
【００８５】
任意の実施形態では、中空チャネル３２は、蛇行（例えば、非直線状）液体流路を形成する。図５の図示された実施形態では、中空チャネル３２によって形成される液体流路は、例えば、可撓性内視鏡などの管腔医療デバイス内の屈曲部をシミュレートすることができる、複数の弓状屈曲部を備える。
【００８６】
任意選択的に、用具３００は、検出培地４２を収容するリザーバ４０を更に備える。任意の実施形態では、検出培地４２は、物品１００と選択的に流体連通して配置される。選択的な流体連通は、例えば、弁（図示せず）の使用によってなされ得る。あるいは、図５に図示された実施形態に示されるように、検出培地４２は、中空チャネル３２と流体連通する（例えば、導管４８を通じて）リザーバ４０内に配置された脆弱容器４４内に収容されている。脆弱容器４４は、例えば、ガラス、金属フィルム（例えば、ブリスターパック）、又はプラスチックから作製されてもよい。弁は、存在する場合、外部圧力（例えば、手動圧力）が第２のコンパートメントに適用されるときに破裂するプラスチックフィルムを含んでもよく、それによって、第２のコンパートメントからの検出培地の流れを可能にする。
【００８７】
使用中、検出培地４２は、リザーバ４０から物品１００まで中空チャネル３２を通って通過する。検出培地４２は、例えば、リザーバ４０にて本体３０に加えられる正圧によって、毛管作用によって、中空チャネルを通して液体及び／若しくは気体を流すことによって生成されるベンチュリ力によって、又は（例えば、真空源からの）陰圧を開口部（例えば、図５に示された第２の開口部３３）に適用することによって、を含む様々な力によって、中空チャネル３２を通って物品１００に押しやられ得、第１のコンパートメント３８は、リザーバと開口部との間の中空チャネル３２内に配置される。
【００８８】
検出培地４２は、１つ以上の試薬を含む。任意の実施形態では、試薬は、水性媒体（例えば、水、水性緩衝液）中に溶解又は懸濁され得る。任意の実施形態では、試薬は、試験微生物（例えば芽胞）の発芽及び／又は増殖を促進する有効量の栄養素であってもよい。好適な栄養素の非限定的な例としては、セリン、プロリン、アルギニン、グルタメート、アスパラギン、アスパルテート、トレオニン、脂質、脂肪酸、バレイショ浸出液、酵母抽出物、麦芽抽出物、ペプトン、デキストロース、及び前述の栄養素のうちの任意の２つ以上の組み合わせが挙げられる。あるいは、又はそれに加えて、試薬は、試験微生物（例えば、芽胞）の代謝活性の検出を促進する指示薬化合物であってもよい。任意の実施形態では、代謝活性は、酵素活性であり得る。指示薬化合物の非限定的な例としては、発色性酵素基質、蛍光性酵素基質、ｐＨ指示薬、レドックス指示薬、化学発光酵素基質、染料、及び前述の指示薬化合物のうちの任意の２つ以上の組み合わせが挙げられる。あるいは、又はそれに加えて、試薬は、消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物であってもよい。好適な中和剤化合物の非限定的な例としては、グリシン、レシチン、炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、ウマ血清、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、カタラーゼ、重亜硫酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、チオグリコール酸ナトリウム、及びチオ硫酸ナトリウムが挙げられる。いくつかの実施形態では、試薬は、芽胞の発芽及び／又は増殖を促進する栄養素、試験微生物（芽胞）の代謝活性の検出を促進する指示薬化合物、並びに消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物からなる群から選択される任意の２つ以上の試薬の組み合わせであり得る。いくつかの実施形態では、中和剤化合物には、レシチン、システイン、ヒスチジン、及びＴｗｅｅｎ  ８０からなる群から選択される添加剤を添加することができる。
【００８９】
任意選択的に、用具３００は、中空チャネル３２と選択的に流体連通する（例えば、バルブを（図示せず）介して）第２のコンパートメント５０を備えることができる。第２のコンパートメント５０は、本明細書に記載の有効量の中和剤化合物５２を含んでもよい。任意の実施形態では、中和剤化合物５２は、検出培地について記載したように、脆弱容器（図示せず）内に配置されてもよい。使用中、消毒剤が中空チャネル３２を通って流れ、物品１００が消毒剤と少なくとも最小接触時間（以下に記載される）と接触させられた後、中和剤化合物は、第２のコンパートメントから放出されて、用具内のあらゆる残留消毒剤を不活性化することができる。
【００９０】
任意の実施形態では、用具は、中空チャネルと流体連通して配置された化学的インジケータ（図示せず）を更に備える。化学的インジケータは、特定の消毒剤が中空チャネルを通過し、それによって化学的インジケータに接触したという情報を提供する。好適な化学的インジケータとしては、２０１６年５月５日に出願された、「医療デバイスの消毒方法（ＭＥＴＨＯＤ  ＯＦ  ＤＩＳＩＮＦＥＣＴＩＮＧ  Ａ  ＭＥＤＩＣＡＬ  ＤＥＶＩＣＥ）」と題された米国特許仮出願第６２／３３２，２４３号に記載されているものが挙げられ、その全容が参照により本明細書に組み込まれる。化学的インジケータは、中空チャネル（図示せず）又は中空チャネルと流体連通して配置された第３のコンパートメント（図示せず）内に保持されてもよい。
【００９１】
別の態様では、本開示は、第１の方法を提供する。第１の方法を使用して、消毒プロセス（例えば、液体消毒剤を使用する消毒プロセス）の有効性を検証することができる。図６は、本開示による第１の方法６００の一実施形態のブロック図である。第１の方法６００は、本開示による工程試験用具の任意の実施形態の中空チャネルを通して消毒剤を流す工程６０２を含み、工程試験用具は、検出培地を収容するリザーバを備え、検出培地は、有効量の栄養素及び指示薬化合物を含み、用具は、中空チャネルを形成する壁を備え、壁の一部分は、芽胞又は芽胞の代謝活性物の生成の光学的評価を可能にする。中空チャネルを通して消毒剤を流すことは、物品を消毒剤と接触させることを含む。任意の実施形態では、中空チャネルを通して消毒剤を流すことは、オルトフタルアルデヒド、グルタルアルデヒド、過酢酸、及び過酸化水素からなる群から選択される消毒剤を流すことを含む。
【００９２】
中空チャネルを通して消毒剤を流している間、及び／又は中空チャネルを通して消毒剤を流した後に、第１の方法６００は、物品を中空チャネル内の消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させる工程６０４を含む。消毒プロセスは、消毒される材料上及び／又は材料内に存在する微生物の不活性化を促進するために、既定の温度にて最小接触時間での消毒剤と消毒される材料（例えば、物品）との間の接触を必要とする。当業者であれば、最小接触時間は、消毒剤の組成及び／又は接触が生じる温度に依存し得ることを理解するであろう。一般に、より高温での材料と消毒剤との間の接触は、より低い温度での微生物の不活性化を達成するために、より短い接触時間を必要とする。
【００９３】
消毒剤と消毒される材料とを接触させるための既定の温度は、微生物の不活性化を促進するために消毒プロセスにおいて意図的に使用される温度である。典型的には、既定の温度は、（例えば、適切な温度制御装置を使用して）プロセス全体にわたって概ね一定の温度に維持される。液体消毒剤を用いるプロセスに好適な既定の温度は、約２０℃〜約６０℃の範囲内である。最小接触時間は、例えば、約３分〜約９０分であり得る。
【００９４】
物品を消毒剤と中空チャネル内において既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させた後に、第１の方法６００は、物品を、消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させる工程６０６を含む。消毒プロセスで使用される消毒剤の不活性化（「中和」）は、消毒プロセスの完了後、消毒剤が引き続き試験微生物を不活性化することを防止する。プロセスの最小接触時間の後に、物品上又は物品内に残る残留消毒剤は、中空チャネル内の物品を、第１の方法６００で使用された特定の消毒剤を中和するために当該技術分野において既知である適切な化学化合物と接触させることによって不活性化することができる。好適な中和剤化合物（消毒剤を不活性化するため）としては、例えば、レシチン（lethicin）、グリシン、炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、ウマ血清、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、カタラーゼ、重亜硫酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、チオグリコール酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、又は酵素（例えば、カタラーゼ）が挙げられる。
【００９５】
中和剤化合物は、いくつかの手段によって物品に提供され得る。いくつかの実施形態では、中和剤は、工程試験用具内の第２のリザーバに収容される。第２のリザーバは、本明細書に記載の第１のリザーバのように、物品と選択的に流体連通して配置される。したがって、物品を消毒剤と少なくとも最小接触時間で接触させた後に、有効量の中和剤化合物は、（例えば、第１のリザーバの内容物について本明細書に記載されるように）第２のリザーバから放出されて、中空チャネル内の内容物（例えば、物品）と接触し、ここで、中和化合物は、中空チャネル及び／又は物品内の残留消毒剤を不活性化する。これらの実施形態では、中和剤化合物は、消毒剤を不活性化するのに十分な期間、中空チャネル及び／又は物品内の残留消毒剤と反応することを可能にすることができる。続いて、あらゆる生存している試験微生物を検出するために、検出培地を物品と接触させることができる。
【００９６】
いくつかの実施形態では、有効量の中和剤化合物が検出培地内に提供され、これにより、検出培地が物品に接触すると、有効量の中和剤化合物も物品に接触し、消毒剤を不活性化する。
【００９７】
物品を有効量の中和剤化合物と接触させた後に、第１の方法６００は、物品を中空チャネル内の検出培地と一定期間接触させる工程６０８を含む。検出培地は、本明細書に開示される検出培地の任意の実施形態を含み得る。物品を検出培地と接触させることは、複数の試験微生物（例えば、芽胞）のいずれかが消毒剤との接触によって不活性化されなかったかどうかを検出する手段をオペレータに提供する。消毒剤との接触によって不活性化されなかった試験微生物の検出は、例えば、芽胞発芽の検出、微生物増殖の検出、微生物繁殖の検出、微生物代謝活性の検出（例えば、酵素活性、栄養素の発酵、酸化／還元反応）、及び前述の検出技術のうちのいずれか２つ以上の組み合わせを含む、当該技術分野において既知の様々な微生物検出技術のいずれかを使用して実施することができる。任意の実施形態では、物品を中空チャネル内の検出培地と一定期間接触させることは、試験微生物の代謝活性を促進する温度で、物品を検出培地と接触させることを含むことができる（例えば、用具は、試験微生物の増殖及び／又は酵素活性に好適な温度でインキュベートすることができる）。
【００９８】
したがって、物品を中空チャネル内の検出培地と一定期間接触させた後に、第１の方法６００は、中空チャネル内の検出培地を分析して、指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定する工程６０９を含む。検出培地は、ｉｎ  ｓｉｔｕで分析することができる（すなわち、中空チャネル内に配置されている間に分析することができる）か、又は検出培地の少なくとも一部分を中空チャネルから（例えば、第２の開口部の第１の開口部を通して）取り出し、中空チャネルの外で分析することができる。
【００９９】
検出培地を分析することは、第１の状態から第２の状態への可視的な変化について検出培地を目視観察することを含むことができる。あるいは、又はそれに加えて、検出培地を分析することは、（例えば、工程試験用具内の）検出培地を機器内に配置して、第１の状態から第２の状態への変化について検出培地を分析することを含むことができる。任意の実施形態では、検出培地を分析することは、消毒プロセスに供された工程試験用具の検出培地と標準（例えば、色比較チャート）とを比較すること、及び／又は消毒プロセスに供された工程試験用具の検出培地と「対照」（例えば、消毒プロセスに供されなかった第２の工程試験用具）とを比較することを含むことができる。
【０１００】
少なくとも１つの試験微生物が消毒剤との接触に耐え生存している場合、生存している試験微生物の代謝活性は、検出培地を第１の状態から第２の状態に変化させる。例えば、検出培地は、実質的に透明な第１の状態から曇り（混濁）又は実質的に不透明な第２の状態に変化し得る。検出培地中の濁りの表出は、消毒剤との接触後の試験微生物の発芽及び／又は増殖を明示することができ、複数の試験微生物のうちの少なくとも１つの生存を示し、恐らく消毒プロセスが有効ではなかったことを示す。あるいは、又はそれに加えて、検出培地は、（例えば、ｐＨ指示薬、レドックス指示薬、又は消毒プロセスに耐え生存していた試験微生物の代謝活性から生じる酵素基質の変換に起因して）第１の着色状態から第２の着色状態に変化し得る。いくつかの実施形態では、第１の着色状態は、相対的に着色されていない（又は無色）場合があり、第２の着色状態は、より着色されている場合がある。いくつかの実施形態では、第１の着色状態は、相対的により着色されている場合があり、第２の着色状態は、相対的に着色されていない（又は無色）場合がある。いくつかの実施形態では、第１の着色状態は、第１の色を有することができ、第２の着色状態は、第１の色とは異なる第２の色を有することができる。
【０１０１】
別の態様では、本開示は、第２の方法を提供する。第２の方法を使用して、消毒プロセス（例えば、液体消毒剤を使用する消毒プロセス）の有効性を検証することができる。図７は、本開示による第２の方法７００の一実施形態のブロック図である。第２の方法７００は、本開示による工程試験用具の任意の実施形態の中空チャネルを通して消毒剤を流す工程７０２を含む。中空チャネルを通して消毒剤を流すことは、物品を消毒剤と接触させることを含む。任意の実施形態では、中空チャネルを通して消毒剤を流すことは、オルトフタルアルデヒド、グルタルアルデヒド、過酢酸、及び過酸化水素からなる群から選択される消毒剤を流すことを含む。
【０１０２】
中空チャネルを通して消毒剤を流している間、及び／又は中空チャネルを通して消毒剤を流した後に、第２の方法７００は、物品を中空チャネル内の消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させる工程７０４を含む。消毒プロセスは、消毒される材料上及び／又は材料内に存在する微生物の不活性化を促進するために、既定の温度にて最小接触時間での消毒剤と消毒される材料（例えば、物品）との間の接触を必要とする。当業者であれば、最小接触時間は、消毒剤の組成及び／又は接触が生じる温度に依存し得ることを理解するであろう。一般に、より高温での材料と消毒剤との間の接触は、より低い温度での微生物の不活性化を達成するために、より短い接触時間を必要とする。
【０１０３】
消毒剤と消毒される材料とを接触させるための既定の温度は、微生物の不活性化を促進するために消毒プロセスにおいて意図的に使用される温度である。典型的には、既定の温度は、（例えば、適切な温度制御装置を使用して）プロセス全体にわたって概ね一定の温度に維持される。液体消毒剤を用いるプロセスに好適な既定の温度は、約２０℃〜約６０℃の範囲内である。
【０１０４】
物品を消毒剤と中空チャネル内において既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させた後に、第２の方法７００は、物品を、消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させる工程７０６を含む。消毒プロセスで使用される消毒剤の不活性化（「中和」）は、消毒プロセスの完了後、消毒剤が引き続き試験微生物を不活性化することを防止する。プロセスの最小接触時間の後に、物品上又は物品内に残る残留消毒剤は、物品を、第２の方法７００で使用された特定の消毒剤を中和するために当該技術分野において既知である適切な化学化合物と接触させることによって不活性化することができる。好適な中和剤化合物（消毒剤を不活性化するため）としては、例えば、レシチン、グリシン、炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、ウマ血清、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、カタラーゼ、重亜硫酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、チオグリコール酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、及び酵素（例えば、カタラーゼ）が挙げられる。
【０１０５】
中和剤化合物は、いくつかの手段によって物品に提供され得る。例えば、中和剤化合物は、物品が配置される中空チャネルに流入することができ、又は中和剤化合物を、物品が配置される反応管に添加することができる（例えばピペットによって）ことができる。これらの実施形態では、中和剤化合物は、消毒剤を不活性化するのに十分な期間、中空チャネル及び／又は物品内の残留消毒剤と反応することを可能にすることができる。続いて、生存している試験微生物を検出するために、検出培地を物品と接触させることができる。
【０１０６】
第２の方法７００のいくつかの実施形態では、有効量の中和剤化合物が検出培地に提供され、これにより、検出培地が物品に接触すると、有効量の中和剤化合物も物品に接触し、消毒剤を不活性化する。
【０１０７】
物品を中和剤化合物と接触させた後に、方法７００は、物品を検出培地と接触させる工程７０８を含む。検出培地は、本明細書に開示される検出培地の任意の実施形態を含み得る。物品を検出培地と接触させることは、複数の試験微生物（例えば、芽胞）のいずれかが消毒剤との接触によって不活性化されなかったかどうかを検出する手段をオペレータに提供する。消毒剤との接触によって不活性化されなかった試験微生物の検出は、例えば、芽胞発芽の検出、微生物増殖の検出、微生物繁殖の検出、微生物代謝活性の検出（例えば、酵素活性、栄養素の発酵、酸化／還元反応）、及び前述の検出技術のうちのいずれか２つ以上の組み合わせを含む、当該技術分野において既知の様々な微生物検出技術のいずれかを使用して実施することができる。任意の実施形態では、本明細書に記載されるように、物品を、工程試験用具の中空チャネル内で検出培地と接触させることを含む。任意の実施形態では、物品を検出培地と一定期間接触させることは、試験微生物の代謝活性を促進する温度で、物品を検出培地と接触させることを含むことができる（例えば、用具は、試験微生物の増殖及び／又は酵素活性に好適な温度でインキュベートすることができる）。
【０１０８】
したがって、物品を検出培地と一定期間接触させた後に、第２の方法７００は、検出培地を分析して、指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定する工程７０９を含む。検出培地は、ｉｎ  ｓｉｔｕで分析することができる（すなわち、中空チャネル内に配置されている間に分析することができる）か、又は検出培地の少なくとも一部分を中空チャネルから（例えば、第２の開口部の第１の開口部を通して）取り出し、中空チャネルの外で分析することができる。検出培地を分析することは、本明細書に記載される分析技術又はアプローチのいずれかによって実行することができる。
【０１０９】
少なくとも１つの試験微生物が消毒剤との接触に耐え生存している場合、生存している試験微生物の代謝活性は、検出培地を第１の状態から第２の状態に変化させる。第１の状態から第２の状態への変化は、上記の可能な変化のいずれかであり得る。生存している試験微生物の代謝活性に起因して生じる第１の状態から第２の状態への検出培地の変化は、消毒プロセスが有効性のあるものではなかったことを示し得る。
【０１１０】
第２の方法の任意の実施形態では、物品を検出培地と一定期間接触させる前に、第２の方法は、工程試験用具（図７には図示せず）から物品を取り外す工程を更に含んでもよい。物品は、例えば、物品へのアクセスを提供するために開かれるように適合された工程試験用具を使用することによって取り外すことができる。これらの実施形態では、工程試験用具を開くことができ、滅菌ピンセットを使用して物品を取り外すことができる。
【０１１１】
別の態様では、本開示は、第３の方法を提供する。第３の方法を使用して、消毒プロセス（例えば、液体消毒剤を使用する消毒プロセス）の有効性を検証することができる。図８は、本開示による第３の方法８００の一実施形態のブロック図である。第３の方法８００は、本開示による物品の任意の実施形態を、フローストリーム中の消毒剤と少なくとも既定の最小接触時間で接触させる工程８０１を含む。任意の実施形態では、消毒剤中に物品を浸漬することは、オルトフタルアルデヒド、グルタルアルデヒド、過酢酸、及び過酸化水素からなる群から選択される消毒剤中に物品を浸漬することを含む。フローストリームは、例えば、ＡＥＲ内の消毒剤のフローストリームであってもよい。物品は、任意の好適な保持手段（例えば、クランプ、ハーネス、クリップ、ハンガー、マニホールド）を使用して、フローストリーム中の特定の位置で保持されてもよい。
【０１１２】
物品を消毒剤と接触させることは、物品を消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させることを含む。消毒プロセスは、消毒される材料上及び／又は材料内に存在する微生物の不活性化を促進するために、最小接触時間で既定の温度にての消毒剤と消毒される材料（例えば、物品）との間の接触を必要とする。当業者であれば、最小接触時間は、消毒剤の組成及び／又は接触が生じる温度に依存し得ることを理解するであろう。一般に、より高温での材料と消毒剤との間の接触は、より低い温度での微生物の不活性化を達成するために、より短い接触時間を必要とする。
【０１１３】
消毒剤と消毒される材料とを接触させるための既定の温度は、微生物の不活性化を促進するために消毒プロセスにおいて意図的に使用される温度である。典型的には、既定の温度は、（例えば、適切な温度制御装置を使用して）プロセス全体にわたって概ね一定の温度に維持される。液体消毒剤を用いるプロセスに好適な既定の温度は、約２０℃〜約６０℃の範囲内である。
【０１１４】
物品を消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させた後に、第３の方法８００は、物品を、消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させる工程８０３を含む。消毒プロセスで使用される消毒剤の不活性化（「中和」）は、消毒プロセスの完了後、消毒剤が引き続き試験微生物を不活性化することを防止する。プロセスの最小接触時間の後に、物品上又は物品内に残る残留消毒剤は、物品を、第３の方法８００で使用された特定の消毒剤を中和するために当該技術分野において既知である適切な化学化合物と接触させることによって不活性化することができる。好適な中和剤化合物（消毒剤を不活性化するため）としては、例えば、レシチン、グリシン、炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、ウマ血清、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、カタラーゼ、重亜硫酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、チオグリコール酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、及び酵素（例えば、カタラーゼ）が挙げられる。
【０１１５】
中和剤化合物は、いくつかの手段によって物品に提供され得る。例えば、中和剤化合物は、物品が配置される中空チャネル内に流入することができ、又は中和剤化合物を、物品が配置される反応管内に添加する（例えばピペットによって）ことができる。これらの実施形態では、中和剤化合物を、消毒剤を不活性化するのに十分な期間、中空チャネル及び／又は物品内の残留消毒剤と反応することを可能にすることができる。続いて、生存している試験微生物を検出するために、検出培地を物品と接触させることができる。
【０１１６】
第３の方法８００のいくつかの実施形態では、有効量の中和剤化合物が検出培地に提供され、これにより、検出培地が物品に接触すると、有効量の中和剤化合物も物品に接触し、消毒剤を不活性化する。
【０１１７】
本方法の上記の実施形態のいずれにおいても、物品を有効量の中和剤化合物と接触させることの代替として、本方法は、試験微生物に近接する消毒剤の量（及び／又は濃度）を低減するために、物品をすすぎ溶媒ですすぐ工程を含むことができる。例えば、本開示の物品を収容する中空チャネルを通して消毒剤を流した後に、物品は、流れが中断された後であっても、有効量の消毒剤を保持することができる。保持された有効量の消毒剤は、有効量が本明細書に記載される中和剤化合物によって不活性化されるまで、及び／又は消毒剤が試験微生物を不活性化するのにもはや有効ではない濃度に（例えば、すすぎによって）希釈されるまで、試験微生物を不活性化（例えば、非生存化）し続けてもよい。
【０１１８】
同様に、（例えば、物品を消毒剤液中に浸漬することによって）本開示の物品を消毒剤と接触させた後に、物品は、物品が消毒剤から取り出された後であっても、有効量の消毒剤を保持することができる。保持された有効量の消毒剤は、有効量が本明細書に記載される中和剤化合物によって不活性化されるまで、及び／又は消毒剤が試験微生物を不活性化するのにもはや有効ではない濃度に（例えば、すすぎによって）希釈されるまで、試験微生物を不活性化（例えば、非生存化）し続けてもよい。
【０１１９】
いくつかの実施形態では（すなわち、物品が本明細書に開示されるような用具の中空チャネル内に配置される実施形態）、物品は、中空チャネルを通してすすぎ溶媒を流すことによってすすがれ、それによって、一般的に中空チャネル内に存在する消毒剤の量（及び／又は濃度）、並びに特に物品内の消毒剤の量を（例えば、希釈により）低減する。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、物品を、すすぎ溶媒を保持する容器内に物品を浸漬又は配置することによって、すすぎ溶媒と接触させる。物品を、試験微生物に近接する消毒剤の量（及び／又は濃度）を低減するのに十分な期間、すすぎ溶媒に接触させることができる。
【０１２１】
すすぎ溶媒は、本開示の物品に接触することができる任意の溶媒であってもよく、物品は、任意選択的に、物品上のコーティング中に配置された生存試験微生物の数を実質的に減少させることなく、用具の中空チャネル内に配置される。任意の実施形態では、すすぎ溶媒は、水性液体を含んでもよい。任意選択的に、すすぎ溶媒は、試験微生物の生存を支持するために好適な浸透圧及び／又はｐＨを維持するための溶質（例えば、無機塩、有機又は無機緩衝試薬、炭水化物）を含んでもよい。任意選択的に、すすぎ溶媒は、試験微生物の生存を実質的に低下させない界面活性剤（例えば、ＴＷＥＥＮ  ８０界面活性剤溶液）を含んでもよい。任意の実施形態では、すすぎ溶媒は、消毒剤が可溶性である液体を含み得る。好ましくは、すすぎ溶媒は、生存細菌、糸状菌、又はこれらの芽胞を実質的に含まない。より好ましくは、すすぎ溶媒は無菌である。
【０１２２】
好適なすすぎ溶媒の非限定的な例としては、水、リン酸緩衝生理食塩水、及び０．０５％のＴＷＥＥＮ  ８０界面活性剤を含む水溶液が挙げられる。
【０１２３】
物品を中和剤化合物と接触させた後に、第３の方法８００は、物品を検出培地と接触させる工程８０５を含む。検出培地は、本明細書に開示される検出培地の任意の実施形態を含み得る。物品は、任意の好適な容器（例えば、滅菌反応管）内で検出培地と接触させることができる。物品は、例えば、滅菌ピンセットを使用して検出培地内に移され得る。物品を検出培地と接触させることは、複数の試験微生物（例えば、芽胞）のいずれかが消毒剤との接触によって不活性化されなかったかどうかを検出する手段をオペレータに提供する。消毒剤との接触によって不活性化されなかった試験微生物の検出は、例えば、芽胞発芽の検出、微生物増殖の検出、微生物繁殖の検出、微生物代謝活性の検出（例えば、酵素活性、栄養素の発酵、酸化／還元反応）、及び前述の検出技術のうちのいずれか２つ以上の組み合わせを含む、当該技術分野において既知の様々な微生物検出技術のいずれかを使用して実施することができる。任意の実施形態では、物品を検出培地と接触させることは、試験微生物の代謝活性を促進する温度で、物品を検出培地と接触させることを含むことができる（例えば、用具は、試験微生物の増殖及び／又は酵素活性に好適な温度でインキュベートすることができる）。
【０１２４】
したがって、物品を検出培地と一定期間接触させた後に、第３の方法８００は、検出培地を分析して、指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定する工程８０７を含む。検出培地は、ｉｎ  ｓｉｔｕで分析することができる（すなわち、物品を収容している容器内に配置されている間に分析することができる）か、又は検出培地の少なくとも一部分を容器から取り出し、容器の外で分析することができる。検出培地を分析することは、本明細書に記載される分析技術又はアプローチのいずれかによって実行することができる。
【０１２５】
少なくとも１つの試験微生物が消毒剤との接触に耐え生存している場合、生存している試験微生物の代謝活性は、検出培地を第１の状態から第２の状態に変化させる。例えば、検出培地は、実質的に透明な第１の状態から曇り（混濁）又は実質的に不透明な第２の状態に変化し得る。検出培地中の濁りの表出は、消毒剤との接触後の試験微生物の発芽及び／又は増殖を明示することができ、複数の試験微生物のうちの少なくとも１つの生存を示し、恐らく消毒プロセスが有効ではなかったことを示す。あるいは、又はそれに加えて、検出培地は、（例えば、ｐＨ指示薬、レドックス指示薬、又は消毒プロセスに耐え生存していた試験微生物の代謝活性から生じる酵素基質の変換に起因して）第１の着色状態から第２の着色状態に変化し得る。いくつかの実施形態では、第１の着色状態は、相対的に着色されていない（又は無色）場合があり、第２の着色状態は、より着色されている場合がある。いくつかの実施形態では、第１の着色状態は、相対的により着色されている場合があり、第２の着色状態は、相対的に着色されていない（又は無色）場合がある。いくつかの実施形態では、第１の着色状態は、第１の色を有することができ、第２の着色状態は、第１の色とは異なる第２の色を有することができる。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、物品を検出培地と接触させる前に、第２の方法及び第３の方法は、任意選択的に、物品を、消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させる工程を含む。本明細書に記載されるように、中和剤化合物は、物品が配置される工程試験用具の中空チャネル内に流入することができ、又は中和剤化合物を、物品を含む反応管に配置することができる。あるいは、又はそれに加えて、中和剤化合物は、検出培地内に提供され得、それにより、検出培地が物品に接触すると、中和剤化合物も物品に接触する。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、物品を検出培地と接触させる前に、本方法は、任意選択的に、物品を有効量の滅菌剤と接触させる工程を含む。好適な滅菌剤としては、ガスプラズマ、気化過酸化水素、オゾン、二酸化塩素、過酢酸、エチレンオキシド、又はこれらに由来するイオンが挙げられるが、これらに限定されない。滅菌は、概ね、ウイルス及び芽胞などの構造を含む微生物などの生物活性の全ての生存供給源を完全に破壊するプロセスとして定義される。
【０１２８】
当業者は、物体（例えば、本開示の物品）の汚染除去又は滅菌のために、プロセスの有効性が、滅菌剤の量（例えば、滅菌剤の濃度）、物体が滅菌剤に暴露される時間の長さに依存するものであることと、例えば、付与材料の温度、相対湿度、並びに滅菌に使用された材料の量及び／又は種類（例えば、滅菌剤に対する吸収性）などの他の要因に依存し得ることとを認識する。以下の実施例は、典型的なプロセスの一般的な指針を提供するが、当業者に公知であるように、パラメータは、所望の結果によって変化させることができる。
【０１２９】
本開示の方法のいずれかの任意の実施形態では、最小接触時間は、約３分〜約９０分であり得る。本開示の方法のいずれかの任意の実施形態では、物品を検出培地と一定期間接触させることは、物品を検出培地と約５分〜約４８時間接触させることを含む。
【０１３０】
本開示の方法のいずれかの任意の実施形態では、試験微生物は、芽胞を含み、検出培地を分析して、試験微生物の生物活性を検出することは、芽胞の発芽及び／又は成長に由来する栄養細胞を検出することを含む。
【０１３１】
本開示の方法のいずれかの任意の実施形態では、試験微生物は、芽胞を含み、検出培地を分析して、試験微生物の生物活性を検出することは、芽胞の酵素活性、並びに／又は芽胞の発芽及び／若しくは成長に由来する栄養細胞の酵素活性を検出することを含む。任意の実施形態では、酵素活性を検出することは、ホスファターゼ（例えば、酸ホスファターゼ又はアルカリホスファターゼ）活性、ベータ−グルコシダーゼ活性、アルファ−グルコシダーゼ活性、セルラーゼ活性、キシラナーゼ活性、ベータ−グルクロニダーゼ活性、アルファ−グルクロニダーゼ活性、アルファ−ガラクトシダーゼ活性、ベータ−ガラクトシダーゼ活性、ラッカーゼ活性、プロテアーゼ活性、ペプチダーゼ活性、アミラーゼ活性、グルコースオキシダーゼ活性、リアーゼ活性、エステラーゼ活性、リパーゼ活性、オキシドレダクターゼ活性、及び前述の酵素活性のいずれか２つ以上の組み合わせからなるリストから選択される酵素活性を検出することを含む。
【０１３２】
本開示の方法のいずれかの任意の実施形態では、物品を検出培地と一定期間接触させることは、物品を検出培地と既定の温度で接触させることを含む。既定の温度は、試験微生物によって変更し得る。好適な既定の温度は、例えば、約２０℃〜約６５℃の範囲の温度を含み得る。
【０１３３】
本開示の方法のいずれかの任意の実施形態では、消毒剤中の物品を少なくとも所定の期間接触させた後に、試験微生物（例えば、芽胞）の５％未満を物品から洗い流した。
【０１３４】
本開示の方法のいずれかの任意の実施形態では、消毒剤中の物品を少なくとも所定の期間接触させた後に、試験微生物（例えば、芽胞）の２．５％未満を物品から洗い流した。
【０１３５】
本開示の方法のいずれかの任意の実施形態では、消毒剤中の物品を少なくとも所定の期間接触させた後に、試験微生物（例えば、芽胞）の２％未満を物品から洗い流した。
【０１３６】
本開示の方法のいずれかの好ましい実施形態では、消毒剤中の物品を少なくとも所定の期間接触させた後に、試験微生物（例えば、芽胞）の１％未満を物品から洗い流した。
【０１３７】
本開示の方法のいずれかのより好ましい実施形態では、消毒剤中の物品を少なくとも所定の期間接触させた後に、試験微生物（例えば、芽胞）の０．５％未満を物品から洗い流した。
【０１３８】
物品を消毒剤と接触させるための所定の期間は、少なくとも１分、又は少なくとも３分、又は少なくとも５分、又は少なくとも１５分、又は少なくとも３０分、又は場合によっては少なくとも６０分であり得る。
【０１３９】
例示的実施形態
実施形態Ａは、
グラフト化されたコポリマーを有する不織布基材であって、このコポリマーが、共重合した下記のモノマー単位：
第四級アンモニウム含有配位子モノマー及び／又はグアニジニル含有配位子モノマーから選択されるカチオン性窒素含有配位子モノマー、
アミドモノマー、及び
オキシモノマー、を含む、不織布基材と、
基材に接着された乾燥コーティングであって、複数の試験微生物を含む、乾燥コーティングと、
を含む、物品である。
【０１４０】
実施形態Ｂは、グラフト化されたコポリマーが、
ａ）１０〜５０重量部のカチオン性窒素含有配位子モノマーと、
ｂ）１０〜８０重量部のアミドモノマーと、
ｃ）１０〜４０重量部のオキシモノマーと、
ｄ）０〜３０重量部のポリ（アルキレンオキシド）モノマーと、を含み、
ａ）〜ｄ）の合計は、１００重量部である、実施形態Ａに記載の物品である。
【０１４１】
実施形態Ｃは、乾燥コーティングが、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤を更に含む、実施形態Ａ又は実施形態Ｂに記載の物品である。
【０１４２】
実施形態Ｄは、複数の試験微生物の少なくとも一部分が、ポリマー結合剤中に分散されている、実施形態Ｃに記載の物品である。
【０１４３】
実施形態Ｅは、不織布基材が、疎水性熱可塑性ポリオレフィンのメルトブローマイクロファイバーを含む、実施形態Ａ〜Ｄのいずれか１つに記載の物品である。
【０１４４】
実施形態Ｆは、不織布基材が、不織布基材１平方メートル当たり１５〜５０ｍ２の表面積を有する、実施形態Ａ〜Ｅのいずれか１つに記載の物品である。
【０１４５】
実施形態Ｇは、不織布基材が、２０％未満のソリディティを有する、実施形態Ａ〜Ｆのいずれか１つに記載の物品である。
【０１４６】
実施形態Ｈは、物品がコポリマー対不織布基材の重量比を有することができ、その重量比が、１部の不織布基材に対して約０．５〜３部のコポリマーである、実施形態Ａ〜Ｇのいずれか１つに記載の物品である。
【０１４７】
実施形態Ｉは、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤が、アガロース、ポリビニルピロリドン、ポリ（アルキレンオキシド）、及び前述のポリマー結合剤のうちのいずれか２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、実施形態Ａ〜Ｈのいずれか１つに記載の物品である。
【０１４８】
実施形態Ｊは、複数の試験微生物が、細菌を含む、実施形態Ａ〜Ｉのいずれか１つに記載の物品である。
【０１４９】
実施形態Ｋは、細菌が、マイコバクテリア種の細菌を含む、実施形態Ｊに記載の物品である。
【０１５０】
実施形態Ｌは、複数の試験微生物が、芽胞を含む、実施形態Ａ〜Ｊのいずれか１つに記載の物品である。
【０１５１】
実施形態Ｍは、実施形態Ｌに記載の物品であり、芽胞が、糸状菌種の芽胞を含む。
【０１５２】
実施形態Ｎは、芽胞が、アスペルギルス種の芽胞を含む、実施形態Ｍに記載の物品である。
【０１５３】
実施形態Ｏは、芽胞が、アスペルギルス・ブラジリエンシス、アスペルギルス・オリゼ、アスペルギルス・ニガー、又はアスペルギルス・ニデュランスの芽胞を含む、実施形態Ｎに記載の物品である。
【０１５４】
実施形態Ｐは、複数の生存試験微生物が、約１０個の試験微生物〜約１０８個の試験微生物からなる、実施形態Ａ〜Ｏのいずれか１つに記載の物品である。
【０１５５】
実施形態Ｑは、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤が、ポリ（アルキレンオキシド）を含み、ポリ（アルキレンオキシド）は、４００ダルトン、４，０００ダルトン、又は２０，０００ダルトンの重量平均分子量を有する、実施形態Ａ〜Ｐのいずれか１つに記載の物品である。
【０１５６】
実施形態Ｒは、コポリマーを製造するのに使用される第四級アンモニウム含有モノマーが、［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウムクロリドを含む、実施形態Ａ〜Ｑのいずれか１つに記載の物品である。
【０１５７】
実施形態Ｓは、コポリマーを製造するのに使用される第四級アンモニウム含有モノマーが、［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウムクロリドを含み、コポリマーを製造するのに使用されるオキシモノマーは、グリシジルメタクリレートを含み、コポリマーを製造するのに使用されるアミドモノマーは、Ｎ−ビニルピロリドンを含む、実施形態Ａ〜Ｒのいずれか１つに記載の物品である。
【０１５８】
実施形態Ｔは、
第１の開口部と第１の開口部から間隔があいている第２の開口部とを有する中空チャネルを有する本体と、
中空チャネル内に固定的に配置された、実施形態Ａ〜Ｓのいずれか１つに記載の物品と、を備える、工程試験用具である。
【０１５９】
実施形態Ｕは、検出培地を収容するリザーバを更に備え、リザーバが、物品と選択的に流体連通して配置されている、実施形態Ｔに記載の工程試験用具である。
【０１６０】
実施形態Ｖは、検出培地が、試験微生物の発芽及び／又は増殖を促進する栄養素、試験微生物代謝活性の検出を促進する指示薬化合物、消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物、並びに前述の試薬のうちの任意の２つ以上の組み合わせからなる群から選択される試薬を含む、実施形態Ｕに記載の工程試験用具である。
【０１６１】
実施形態Ｗは、栄養素が、セリン、プロリン、アルギニン、グルタメート、アスパラギン、アスパルテート、トレオニン、脂質、脂肪酸、バレイショ浸出液、酵母抽出物、麦芽抽出物、ペプトン、デキストロース、及び前述の栄養素のうちの任意の２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、実施形態Ｖに記載の工程試験用具である。
【０１６２】
実施形態Ｘは、指示薬化合物が、発色性酵素基質、蛍光性酵素基質、ｐＨ指示薬、レドックス指示薬、化学発光酵素基質、染料、及び前述の指示薬化合物のうちの任意の２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、実施形態Ｕ〜Ｗのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１６３】
実施形態Ｙは、中和剤化合物が、グリシン、炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、ウマ血清、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、カタラーゼ、重亜硫酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、チオグリコール酸ナトリウム、及びチオ硫酸ナトリウムからなる群から選択される、実施形態Ｕ〜Ｘのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１６４】
実施形態Ｚは、物品が、第１の開口部から第２の開口部まで中空チャネルを通過する流体が物品と接触するように、中空チャネル内に配置されている、実施形態Ｕ〜Ｙのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１６５】
実施形態ＡＡは、本体が、中空チャネルを形成する壁を含み、壁の一部分は、試験微生物又は試験微生物の代謝活性物の生成の光学的評価を可能にする、実施形態Ｕ〜Ｚのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１６６】
実施形態ＡＢは、
実施形態ＡＡに記載の工程試験用具の中空チャネルを通して有効量の消毒剤を流すことであって、工程試験用具が、検出培地を収容するリザーバを備え、検出培地は、有効量の栄養素及び指示薬化合物を含み、中空チャネルを通して消毒剤を流すことは、物品を消毒剤と接触させることを含む、流すことと、
中空チャネルを通して消毒剤を流している間、及び／又は中空チャネルを通して消毒剤を流した後に、物品を中空チャネル内の消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させることと、
物品を消毒剤と中空チャネル内において既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させた後に、物品を消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させることと、
物品を中空チャネル内の検出培地と一定期間接触させることと、
物品を中空チャネル内の検出培地と一定期間接触させた後に、中空チャネル内の検出培地を分析して、指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定することと、を含む、方法である。
【０１６７】
実施形態ＡＣは、工程試験用具の中空チャネルを通して消毒剤を流すことが、オルトフタルアルデヒド、グルタルアルデヒド、過酢酸、過酢酸及び過酸化水素を含む消毒用組成物、１２％（重量／重量）の２−プロパノール、２％（重量／重量）のグルタルアルデヒド及び１２％（重量／重量）の２−プロパノールを含む消毒用組成物、並びに過酸化水素からなる群から選択される消毒剤を流すことを含む、実施形態ＡＢに記載の方法である。
【０１６８】
実施形態ＡＤは、中空チャネル内の検出培地を分析して、指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定することが、指示薬化合物を視覚的に分析することを含む、実施形態ＡＢ又は実施形態ＡＣに記載の方法である。
【０１６９】
実施形態ＡＥは、中空チャネル内の検出培地を分析して、指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定することが、自動検出器を使用して指示薬化合物を分析することを含む、実施形態ＡＢ又は実施形態ＡＣに記載の方法である。
【０１７０】
実施形態ＡＦは、有効量の消毒剤が、全ての試験微生物を非生存化するのに十分な量の消毒剤である、実施形態ＡＢ〜ＡＥのいずれか１つに記載の方法である。
【０１７１】
実施形態ＡＧは、
実施形態ＡＡに記載の工程試験用具の中空チャネルを通して有効量の消毒剤を流すことであって、工程試験用具が、検出培地を収容するリザーバを備え、検出培地は、有効量の栄養素及び指示薬化合物を含み、中空チャネルを通して消毒剤を流すことは、物品を消毒剤と接触させることを含む、流すことと、
中空チャネルを通して消毒剤を流している間、及び／又は中空チャネルを通して消毒剤を流した後に、物品を中空チャネル内の消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させることと、
物品を消毒剤と中空チャネル内において既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させた後に、中空チャネルから多量の消毒剤を排除するために、中空チャネルを通してすすぎ溶媒を流すことと、
物品を中空チャネル内の検出培地と一定期間接触させることと、
物品を中空チャネル内の検出培地と一定期間接触させた後に、中空チャネル内の検出培地を分析して、指示薬化合物が第１の状態から第２の状態に変化したかどうかを判定することと、を含む、方法である。
【０１７２】
実施形態ＡＨは、有効量の消毒剤が、全ての試験微生物を非生存化するのに十分な量の消毒剤である、実施形態ＡＧに記載の方法である。
【０１７３】
実施形態ＡＩは、
実施形態Ｕ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具の中空チャネルを通して有効量の消毒剤を流すことであって、中空チャネルを通して消毒剤を流すことが、物品を消毒剤と接触させることを含む、流すことと、
中空チャネルを通して消毒剤を流している間、及び／又は中空チャネルを通して消毒剤を流した後に、物品を中空チャネル内の消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させることと、
物品を消毒剤と少なくとも最小接触時間で接触させた後に、物品を消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させることと、
物品を検出培地と一定期間接触させることと、
物品を検出培地と一定期間接触させた後に、検出培地を分析して、試験微生物の生物活性を検出することと、を含む、方法である。
【０１７４】
実施形態ＡＪは、物品を消毒剤と接触させた後、及び物品を検出培地と接触させる前に、工程試験用具から物品を取り外すことを更に含む、実施形態ＡＩに記載の方法である。
【０１７５】
実施形態ＡＫは、有効量の消毒剤が、全ての試験微生物を非生存化するのに十分な量の消毒剤である、実施形態ＡＩ又は実施形態ＡＪに記載の方法である。
【０１７６】
実施形態ＡＬは、
実施形態Ｕ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具の中空チャネルを通して有効量の消毒剤を流すことであって、中空チャネルを通して消毒剤を流すことが、物品を消毒剤と接触させることを含む、流すことと、
中空チャネルを通して消毒剤を流している間、及び／又は中空チャネルを通して消毒剤を流した後に、物品を中空チャネル内の消毒剤と既定の温度にて少なくとも所定の最小接触時間で接触させることと、
物品を消毒剤と少なくとも最小接触時間で接触させた後に、中空チャネルから多量の消毒剤を排除するために、中空チャネルを通してすすぎ溶媒を流すことと、
物品を検出培地と一定期間接触させることと、
物品を検出培地と一定期間接触させた後に、検出培地を分析して、試験微生物の生物活性を検出することと、を含む、方法である。
【０１７７】
実施形態ＡＭは、有効量の消毒剤が、全ての試験微生物を非生存化するのに十分な量の消毒剤である、実施形態ＡＬに記載の方法である。
【０１７８】
実施形態ＡＮは、
実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の物品をフローストリーム中の消毒剤と少なくとも既定の最小接触時間で接触させることと、
物品を消毒剤と最小接触時間で接触させた後に、物品を、消毒剤の抗菌活性を阻害する有効量の中和剤化合物と接触させることと、
物品を検出培地と一定期間接触させることと、
物品を検出培地と一定期間接触させた後に、検出培地を分析して、試験微生物の生物活性を検出することと、を含む、方法である。
【０１７９】
実施形態ＡＯは、
実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の物品をフローストリーム中の消毒剤と少なくとも既定の最小接触時間で接触させることと、
物品を消毒剤と最小接触時間で接触させた後に、物品を、消毒剤を含まないすすぎ溶媒と接触させることと、
物品をすすぎ溶媒と接触させた後に、物品を検出培地と一定期間接触させることと、
物品を検出培地と一定期間接触させた後に、検出培地を分析して、試験微生物の生物活性を検出することと、を含む、方法である。
【０１８０】
実施形態ＡＰは、有効量の消毒剤が、全ての試験微生物を非生存化するのに十分な量の消毒剤である、実施形態ＡＮ又は実施形態ＡＯに記載の方法である。
【０１８１】
実施形態ＡＱは、最小接触時間が、約３分〜約９０分である、実施形態ＡＢ〜ＡＰのいずれか１つに記載の方法である。
【０１８２】
実施形態ＡＲは、物品を検出培地と一定期間接触させることが、物品を検出培地と約５分〜約４８時間接触させることを含む、実施形態ＡＢ〜ＡＱのいずれか１つに記載の方法である。
【０１８３】
実施形態ＡＳは、検出培地を分析して、試験微生物の生物活性を検出することが、芽胞の発芽に由来する栄養細胞を検出することを含む、実施形態ＡＢ〜ＡＲのいずれか１つに記載の方法である。
【０１８４】
実施形態ＡＴは、検出培地を分析して、試験微生物の生物活性を検出することが、孔の酵素活性、並びに／又は芽胞の発芽に由来する栄養細胞の酵素活性を検出することを含む、実施形態ＡＢ〜ＡＳのいずれか１つに記載の方法である。
【０１８５】
実施形態ＡＵは、酵素活性を検出することが、ホスファターゼ（例えば、酸ホスファターゼ又はアルカリホスファターゼ）活性、ベータ−グルコシダーゼ活性、アルファ−グルコシダーゼ活性、セルラーゼ活性、キシラナーゼ活性、ベータ−グルクロニダーゼ活性、アルファ−グルクロニダーゼ活性、アルファ−ガラクトシダーゼ活性、ベータ−ガラクトシダーゼ活性、ラッカーゼ活性、プロテアーゼ活性、ペプチダーゼ活性、アミラーゼ活性、グルコースオキシダーゼ活性、リアーゼ活性、エステラーゼ活性、リパーゼ活性オキシドレダクターゼ活性、及び前述の酵素活性のいずれか２つ以上の組み合わせからなるリストから選択される酵素活性を検出することを含む、実施形態ＡＴに記載の方法である。
【０１８６】
実施形態ＡＶは、物品を検出培地と一定期間接触させることが、物品を検出培地と既定の温度で接触させることを含む、実施形態ＡＢ〜ＡＵのいずれか１つに記載の方法である。
【０１８７】
実施形態ＡＷは、物品を有効量の中和剤化合物と接触させることが、物品を検出培地と接触させる前に、物品を有効量の中和剤化合物と接触させることを含む、実施形態ＡＢ〜ＡＦ、実施形態ＡＩ〜ＡＫ、及び実施形態ＡＮのいずれか１つに記載の方法である。
【０１８８】
実施形態ＡＸは、物品を有効量の中和剤化合物と接触させることが、物品を、有効量の中和剤化合物を含む検出培地と接触させることを含む、実施形態ＡＢ〜ＡＦ、実施形態ＡＩ〜ＡＫ、及び実施形態ＡＮのいずれか１つに記載の方法である。
【０１８９】
実施形態ＡＹは、カチオン性窒素含有配位子モノマーが、式Ｉのものである、実施形態Ａ〜Ｑのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１９０】
実施形態ＡＺは、カチオン性窒素含有配位子モノマーが、式ＩＩ又は式ＩＩａのものである、実施形態Ａ〜Ｑのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１９１】
実施形態ＢＡは、コポリマーを製造するのに使用されるグアニジニル含有配位子モノマーが、２−（４−グアニジノブチルカルバモイルアミノ）エチル−２−メチルプロパ−２−エノエートを含む、実施形態Ａ〜Ｑのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１９２】
実施形態ＢＢは、コポリマーを製造するのに使用されるグアニジニル含有配位子モノマーが、２−（４−グアニジノブチルカルバモイルアミノ）エチル−２−メチルプロパ−２−エノエートヘミサルフェートを含む、実施形態Ａ〜Ｑのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１９３】
実施形態ＢＣは、コポリマーを製造するのに使用されるグアニジニル含有配位子モノマーが、２−（４−グアニジノブチルカルバモイルアミノ）エチル−２−メチルプロパ−２−エノエートヘミサルフェートを含み、コポリマーを製造するのに使用されるオキシモノマーは、グリシジルメタクリレートを含み、コポリマーを製造するのに使用されるアミドモノマーは、Ｎ−ビニルピロリドンを含む、実施形態Ａ〜Ｑのいずれか１つに記載の物品である。
【０１９４】
実施形態ＢＤは、第四級アンモニウム含有配位子モノマーが、式Ｉのものである、実施形態Ａ〜Ｑのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１９５】
実施形態ＢＥは、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤が、アガロース、ポリビニルピロリドン、ポリ（アルキレンオキシド）、ポリビニルアルコール、ポリ（２−アクリルアミド−２−メチル−１−プロパンスルホン酸）、ポリ（メタクリル酸）及び前述のポリマー結合剤のうちのいずれか２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、実施形態Ａ〜Ｈのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１９６】
実施形態ＢＦは、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤が、ポリビニルピロリドン又はポリビニルアルコールを含む、実施形態Ａ〜Ｈのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１９７】
実施形態ＢＧは、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤が、ポリビニルアルコールである、実施形態Ａ〜Ｈのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１９８】
実施形態ＢＨは、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤が、カルボン酸基又はスルホン酸基で置換されたアクリレートポリマー又はメタクリレートポリマーから選択される、実施形態Ａ〜Ｈのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０１９９】
実施形態ＢＩは、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤が、多糖類である、実施形態Ａ〜Ｈのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０２００】
実施形態ＢＪは、細菌が、ゲオバチルス種の細菌を含む、実施形態Ｊに記載の物品である。
【０２０１】
実施形態ＢＫは、細菌が、ゲオバチルス・ステアロサーモフィルスを含む、実施形態Ｊに記載の物品である。
【０２０２】
実施形態ＢＬは、細菌が、ゲオバチルス・ステアロサーモフィルス芽胞を含む、実施形態Ｊに記載の物品である。
【０２０３】
実施形態ＢＭは、複数の生存試験微生物が、約１０００個の試験微生物〜約２×１０５個の試験微生物からなる、実施形態Ａ〜Ｓのいずれか１つに記載の物品又は実施形態Ｔ〜ＡＡのいずれか１つに記載の工程試験用具である。
【０２０４】
実施形態ＢＮは、実施形態Ａ〜ＡＡのいずれか１つに記載の物品を滅菌剤と少なくとも規定の最小接触時間で接触させることを更に含む、実施形態ＡＢ〜ＡＸのいずれか１つに記載の方法である。
【０２０５】
実施形態ＢＯは、ａ）不織布基材を準備することと、ｂ）基材に電離放射線を照射して基材の表面上にフリーラジカルを提供することと、ｃ）照射された基材を、カチオン性窒素含有配位子モノマー、アミドモノマー、及びオキシモノマーを含む水性モノマー混合物に含浸し、グラフト化基材を形成することと、ｄ）任意選択的に、グラフト化基材を洗浄し、次いで、乾燥させることと、ｅ）グラフト化基材に複数の試験微生物を含む水性コーティングを適用して、コーティングされたグラフト化基材を形成することと、ｆ）コーティングを乾燥させることと、を含む、物品を調製する方法である。
【０２０６】
実施形態ＢＰは、不織布基材が、疎水性熱可塑性ポリオレフィンのメルトブローマイクロファイバーを含む、実施形態ＢＯに記載の方法である。
【０２０７】
実施形態ＢＱは、不織布基材が、電子ビーム照射を照射される、実施形態ＢＯ又はＢＰに記載の方法である。
【０２０８】
実施形態ＢＲは、カチオン性含有配位子モノマーが、式Ｉのものである、実施形態ＢＯ〜ＢＱのいずれか１つに記載の方法である。
【０２０９】
実施形態ＢＳは、カチオン性含有配位子モノマーが、式ＩＩのものである、実施形態ＢＯ〜ＢＱのいずれか１つに記載の方法である。
【０２１０】
実施形態ＢＴは、カチオン性含有配位子モノマーが、式ＩＩＩａ又は式ＩＩＩｂのものである、実施形態ＢＯ〜ＢＱのいずれか１つに記載の方法である。
【０２１１】
実施形態ＢＵは、カチオン性含有配位子モノマーが、第四級アンモニウム含有配位子モノマー及び／又はグアニジニル含有配位子モノマーから選択される、実施形態ＢＯ〜ＢＱのいずれか１つに記載の方法である。
【０２１２】
実施形態ＢＶは、乾燥コーティングが、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤を更に含む、実施形態ＢＯ〜ＢＵのいずれか１つに記載の方法である。
【０２１３】
実施形態ＢＷは、水溶性又は水分散性ポリマー結合剤が、アガロース、ポリビニルピロリドン、ポリ（アルキレンオキシド）、ポリビニルアルコール、ポリ（２−アクリルアミド−２−メチル−１−プロパンスルホン酸）、ポリ（メタクリル酸）及び前述のポリマー結合剤のうちのいずれか２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、実施形態ＢＶに記載の方法である。
【０２１４】
実施形態ＢＸは、複数の試験微生物が、細菌を含む、実施形態ＢＯ〜ＢＷのいずれか１つに記載の方法である。
【０２１５】
実施形態ＢＹは、複数の試験微生物が、芽胞を含む、実施形態ＢＯ〜ＢＷのいずれか１つに記載の方法である。
【０２１６】
実施形態ＢＺは、実施形態ＢＯ〜ＢＹのいずれか１つに記載の方法によって調製された、物品である。
【０２１７】
実施形態ＣＡは、滅菌剤が、ガスプラズマ、気化過酸化水素、オゾン、二酸化塩素、過酢酸、エチレンオキシド、又はこれらに由来するイオンを含む、実施形態ＡＢ〜ＡＸ及びＢＮのいずれか１つに記載の方法である。
【０２１８】
本開示の利点及び実施形態は、以下の実施例によって更に例示されるが、これらの実施例に記載される特定の材料及びその量、並びに他の条件及び詳細は、本開示を不当に限定するものと解釈されるべきではない。別途記載されるか又は明らかでない限り、全ての材料は、市販されているか又は当業者に既知である。特に指示がない限り、部は全て重量部である。
【実施例】
【０２１９】
材料
【０２２０】
［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウムクロリド（ＭＡＰＴＡＣ）、レザズリンナトリウム塩、Ｌ−セリン、及び麦芽抽出ブロスは、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から入手した。
【０２２１】
２−（ジエチルアミノ）エチルメタクリレート（ＤＥＡＥＭＡ）は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから入手した。
【０２２２】
Ｎ−ビニルピロリドン（ＮＶＰ）は、ＴＣＩ  Ａｍｅｒｉｃａｓ（Ｐｏｒｔｌａｎｄ，ＯＲ）から入手した。
【０２２３】
グリシジルメタクリレート（ＧＭＡ）は、Ｐｆａｌｔｚ  ａｎｄ  Ｂａｕｅｒ（Ｗａｔｅｒｂｕｒｙ，ＣＴ）から入手した。
【０２２４】
グリシン（ＵＳＰ）は、ＥＭＤ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ（Ｇｉｂｂｓｔｏｗｎ，ＮＪ）から入手した。
【０２２５】
４−［２−（メタクリロイルオキシ）エチルアミノカルボニルアミノ］ブチルグアニジニウムヘミサルフェート（ＩＥＭＡＧＭ）は、米国特許第９２７２２４６号の実施例１０１に記載の手順によって調製した。
【０２２６】
アスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液の調製。
【０２２７】
脱水されたポテトデキストロースアガー（ＰＤＡ）は、Ｂｅｃｔｏｎ，Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  Ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ）から入手した。ＰＤＡを調製し、製造業者の説明書によって滅菌し、酒石酸でｐＨ３．５まで酸性化した。複数のＰＤＡプレートに、芽胞の懸濁液（アスペルギルス・ブラジリエンシスＡＴＣＣ＃１６４０４）を接種した。接種したプレートを３０℃で１４日間インキュベートした。インキュベーション後、１０％（体積／体積）グリセロール／０．０５％ＴＷＥＥＮ−２０洗剤の溶液でプレートを浸し、滅菌スクレーパを使用して芽胞をアガーから溶液中にこそげ取った。各々のプレートからの懸濁液を単一の芽胞懸濁液にした。たくわえた懸濁液の部分標本（１ｍＬ）を滅菌チューブ内にピペットで移し、これを使用するまで−８０℃で保管した。各部分標本は、約４×１０８個の芽胞を含んでいた。
【０２２８】
コポリマーグラフト化不織布基材の調製
【０２２９】
コポリマーグラフト化不織布基材は、メルトブローポリプロピレンマイクロファイバー（ＰＰ）不織布基材（４．３マイクロメートルの有効繊維直径、１平方メートル当たり１０５グラムの坪量、及び１０％のソリディティを特徴とする）から、米国特許公開第２０１５／００９９４１３号（その全容が参照により本明細書に組み込まれる）の実施例１に報告されている一般的な手順によって調製した。具体的には、メルトブローポリプロピレンマイクロファイバー不織布基材の、１２．７ｃｍ×１２．７ｃｍの試料をグローブボックス内にて窒素雰囲気下でパージし、プラスチック袋に挿入し、密封した。次いで、密封した袋をグローブボックスから取り出し、ウェブ速度約５．５メートル／分及び加速電圧３００ｋＶでＥｎｅｒｇｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．の「Ｅｌｅｃｔｒｏｃｕｒｔａｉｎ」ＣＢ−３００電子ビーム中をワンパス操作で通過させることにより、線量レベル４０ｋＧｙで照射した。密封された袋を窒素雰囲気制御グローブボックスに戻し、ここで不織布材料を窒素パージした含浸溶液２３グラムに含浸し、ほとんどの窒素を排出した後に袋を再密閉した。この工程中、グローブボックス内の酸素レベルは、概して５０百万分率（ｐｐｍ）未満に維持した。試料を袋内で平坦に維持し、少なくとも１２時間均一に飽和させた。含浸溶液を、脱イオン水中に２６．６重量％の総混合モノマーＮＶＰ／ＧＭＡ／ＭＡＰＴＡＣにより調製した。個々のモノマー濃度は、１２．５％のＮＶＰ、４．１％のＧＭＡ、及び１０％のＭＡＰＴＡＣであった。
【０２３０】
得られたコポリマーグラフト化不織布基材を袋から取り出し、脱イオン水中で１時間煮沸した。基材を水浴から取り出し、室温で２４時間風乾した。基材材料を手順の前後に秤量して、基材にグラフト化されたコポリマー材料の量を求めた。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約２８０％であった。この基材（厚さ約１ｍｍのシート）を使用して、実施例に記載の物品（以下、「ディスク」）を調製した。
【０２３１】
実施例１：物品の調製．
【０２３２】
アガロースを滅菌脱イオン水に添加し、溶解するまでマイクロ波で加熱することにより、アガロース（６５℃未満の融解温度、カタログ番号Ａ２７９０、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の４％溶液を調製した。次いで、アガロース溶液を約４０℃まで冷却し、ピペットで等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（上述）を添加することによって希釈した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終アガロース含有量は、２％であり、芽胞濃度は、約２×１０８個／ｍＬであった。次いで、コポリマーグラフト化不織布基材（上述）から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０２３３】
実施例２．
【０２３４】
アガロースを滅菌脱イオン水に添加し、溶解するまでマイクロ波で加熱することにより、アガロース（６５℃未満の融解温度、カタログ番号Ａ２７９０、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の２％溶液を調製した。次いで、アガロース溶液を約４０℃まで冷却し、ピペットで等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（上述）を添加することによって希釈した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終アガロース含有量は、１％であり、芽胞濃度は、約２×１０８個／ｍＬであった。次いで、コポリマーグラフト化不織布基材（上述）の直径７ｍｍの円形ディスク又は１５．２ｃｍ×１５．２ｃｍのシートのいずれかの上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。スポットされたシートの場合、滅菌ハサミを使用して、ディスクの中心に位置決めした乾燥した芽胞コーティング部分を有する１ｃｍ×１ｃｍの正方形のディスクを切り取った。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０２３５】
実施例２ａ．
【０２３６】
ディスクは、実施例２の手順に従って調製したが、但し、アガロースは、基材を芽胞でスポットするために使用された溶液に含まれなかった。具体的には、実施例２ａでは、実施例１のコポリマーグラフト化不織布基材を、グリセロール（５％体積／体積）及びＴｗｅｅｎ２０洗剤（０．０２５体積／体積）を含有する１０マイクロリットルの水性懸濁液、並びに２×１０８個／ｍＬの濃度の芽胞をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。滅菌ハサミを使用して、ディスクの中心に位置決めした乾燥した芽胞コーティング部分を有する１ｃｍ×１ｃｍの正方形のディスクを切り取った。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０２３７】
実施例３．
【０２３８】
アガロースを滅菌脱イオン水に添加し、溶解するまでマイクロ波で加熱することにより、アガロース（６５℃未満の融解温度、カタログ番号Ａ２７９０、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の１％溶液を調製した。次いで、アガロース溶液を約４０℃まで冷却し、ピペットで等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（上述）を添加することによって希釈した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終アガロース含有量は、０．５％であり、芽胞濃度は、約２×１０８個／ｍＬであった。次いで、コポリマーグラフト化不織布基材（上述）から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０２３９】
実施例４．
【０２４０】
アガロースを滅菌脱イオン水に添加し、溶解するまでマイクロ波で加熱することにより、アガロース（６５℃未満の融解温度、カタログ番号Ａ２７９０、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の０．５％溶液を調製した。次いで、アガロース溶液を約４０℃まで冷却し、ピペットで等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（上述）を添加することによって希釈した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終アガロース含有量は、０．２５％であり、芽胞濃度は、約２×１０８個／ｍＬであった。次いで、コポリマーグラフト化不織布基材（上述）から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０２４１】
実施例５．
【０２４２】
滅菌脱イオン水中のＰＥＧ  ２０Ｋ（平均ＭＷ２０，０００のポリエチレングリコール、カタログ番号８１３００、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の４％溶液を、等量の上述のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＥＧ  ２０Ｋ含有量は、２％であり、芽胞濃度は、約２×１０８個／ｍＬであった。次いで、コポリマーグラフト化不織布基材（上述）から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０２４３】
実施例６．
【０２４４】
滅菌脱イオン水中のＰＥＧ  ２０Ｋ（平均ＭＷ２０，０００のポリエチレングリコール、カタログ番号８１３００、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の２％溶液を、等量の上述のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＥＧ  ２０Ｋ含有量は、１％であり、芽胞濃度は、約２×１０８個／ｍＬであった。次いで、コポリマーグラフト化不織布基材（上述）から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０２４５】
実施例７．
【０２４６】
滅菌脱イオン水中のＰＥＧ  ２０Ｋ（平均ＭＷ２０，０００のポリエチレングリコール、カタログ番号８１３００、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の１％溶液を、等量の上述のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＥＧ  ２０Ｋ含有量は、０．５％であり、芽胞濃度は、約２×１０８個／ｍＬであった。次いで、コポリマーグラフト化不織布基材（上述）から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０２４７】
実施例８．
【０２４８】
滅菌脱イオン水中のＰＥＧ  ２０Ｋ（平均ＭＷ２０，０００のポリエチレングリコール、カタログ番号８１３００、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の０．５％溶液を、等量の上述のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＥＧ  ２０Ｋ含有量は、０．２５％であり、芽胞濃度は、約２×１０８個／ｍＬであった。次いで、コポリマーグラフト化不織布基材（上述）から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０２４９】
実施例９．
実施例１からのディスクを、水浴中にて２５℃でインキュベートしたポリスチレン４８ウェル培養プレートのウェルに個々に配置した。ディスクを２０マイクロリットルの滅菌脱イオン水で予備湿潤させた。４００マイクロリットルのオルトフタルアルデヒド（ＯＰＡ）溶液（Ｒａｐｉｃｉｄｅ  ＯＰＡ２８高レベル消毒剤、Ｍｅｄｉｖａｔｏｒｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）から入手可能）を、最低有効濃度で（滅菌脱イオン水を使用して０．３５％ＯＰＡに希釈）、各ディスク上にピペットで移した。プレートを２５℃で５分間維持した後、６００マイクロリットルのグリシン（滅菌脱イオン水中６ｇ／Ｌ）を各ウェルに添加した。プレートを室温で更に１５分間インキュベートした。インキュベーション期間後、滅菌ピンセットを使用して、第２のポリスチレン４８ウェル培養プレート内の新しいウェルに各ディスクを移した。第２のプレートの各ウェルに、Ｌ−セリン（１ｍＭ）及びレザズリンナトリウム塩（０．０３ｍｇ／ｍＬ）を添加した麦芽抽出ブロス（６００マイクロリットル、ｐＨ７．５）を収容した。プレートをＰＡＲＡＦＩＬＭ（登録商標）Ｍプラスチックパラフィンフィルムで密封し、３７℃で２１日間インキュベートした。
【０２５０】
レザズリン指示薬の色変化及び溶液の濁りについてウェルを目視検査することによって、２、５、７、１４及び２１日目の成長についてウェルを確認した。濁りを有する透明又はピンク色の溶液は、成長について陽性であった。濁りを有さない紫色の溶液は、成長について陰性であった。ＯＰＡ溶液に暴露されていなかったディスクを使用して陽性対照ウェルを準備した。ウェルにディスクを添加しないことにより、陰性対照ウェルを準備した。結果を表１に報告する。
【０２５１】
実施例１０．
【０２５２】
実施例１のディスクの代わりに実施例２のディスクを使用して、実施例９について報告したものと同一の手順に従った。合計１０枚のディスクを評価し、結果を表１に報告する。
【０２５３】
実施例１１．
【０２５４】
実施例１のディスクの代わりに実施例３のディスクを使用して、実施例９について報告したものと同一の手順に従った。合計１０枚のディスクを評価し、結果を表１に報告する。
【０２５５】
実施例１２．
【０２５６】
実施例１のディスクの代わりに実施例４のディスクを使用して、実施例９について報告したものと同一の手順に従った。合計１０枚のディスクを評価し、結果を表１に報告する。
【０２５７】
実施例１３．
【０２５８】
実施例１のディスクの代わりに実施例５のディスクを使用して、実施例９について報告したものと同一の手順に従った。合計１０枚のディスクを評価し、結果を表２に報告する。
【０２５９】
実施例１４．
【０２６０】
実施例１のディスクの代わりに実施例６のディスクを使用して、実施例９について報告したものと同一の手順に従った。合計１０枚のディスクを評価し、結果を表２に報告する。
【０２６１】
実施例１５．
【０２６２】
実施例１のディスクの代わりに実施例７のディスクを使用して、実施例９について報告したものと同一の手順に従った。合計１０枚のディスクを評価し、結果を表２に報告する。
【０２６３】
実施例１６．
【０２６４】
実施例１のディスクの代わりに実施例８のディスクを使用して、実施例９について報告したものと同一の手順に従った。合計１０枚のディスクを評価し、結果を表２に報告する。
【０２６５】
【表１】
2020506739.tif 000014
【０２６６】
【表２】
2020506739.tif 000015
【０２６７】
実施例１７
【０２６８】
実施例２からの個々のディスクを、４５０ｍＬの最小有効濃度（すなわち、０．３５％）のオルトフタルアルデヒド（ＯＰＡ）溶液（Ｒａｐｉｃｉｄｅ  ＯＰＡ２８高レベル消毒剤、Ｍｅｄｉｖａｔｏｒｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）から入手可能）を収容するビーカーに、２５℃で可変暴露時間（２秒、３０秒、１分、２分、３分、４分、又は５分間のいずれか）で浸漬した。各暴露時間について、合計１０枚のディスクを評価した。暴露時間の直後に、ディスクをＯＰＡ溶液から取り出し、穏やかに振盪することによってディスクから余分な液体を除去し、ディスクを２５０ｍＬの中和溶液（滅菌脱イオン水中６％のグリシン）を収容するビーカーに移した。このディスクを中和溶液中に５分間維持した。次いで、各ディスクを、滅菌ピンセットを使用して、いずれもｐＨ７．５の３ｍＬの麦芽抽出ブロス中にレザズリン（０．０３ｍｇ／ｍＬ）を加えた溶液を収容した１５ｍＬのスクリューキャップコニカルチューブに移した。各チューブを３７℃で１４日間インキュベートした。レザズリン指示薬の色変化及び溶液の濁りについてチューブを目視検査することによって、２、５、７及び１４日目の成長についてチューブを確認した。濁りを有する透明又はピンク色の溶液は、成長について陽性であった。濁りを有さない紫色の溶液は、成長について陰性であった。ＯＰＡ溶液に暴露されていなかったディスクを使用して陽性対照チューブを準備した。チューブにディスクを添加しないことにより、陰性対照チューブを準備した。結果を表３に報告する。１日目に、ＯＰＡ溶液に最大３０秒間暴露された全てのディスクについて成長が観察されたが、その一方で、ＯＰＡに２分以上暴露されたディスクについては観察されなかった。１日目に観察された結果は、１分間の暴露時間を除いて、全ての暴露時間にわたって１４日目まで一定のままであった。
【０２６９】
【表３】
2020506739.tif 000016
【０２７０】
実施例１８．
【０２７１】
実施例１７で報告したものと同一の手順に従ったが、但し、２回の暴露時間（２秒及び５分）後にのみディスクを評価し、各時点で評価したディスクの数を１０ディスクから６０ディスクまで増加させた。ＯＰＡ溶液に２秒間暴露された６０ディスクの全ては、全ての試験日の成長に対して陽性であった。ＯＰＡ溶液に５分間暴露された６０ディスクの全ては、全ての試験日の芽胞増殖に対して陰性であった。
【０２７２】
実施例１９．
【０２７３】
実施例２からのディスクを、１ｍＬのバターフィールド緩衝液（３Ｍ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｐａｕｌ，ＭＮ）から入手可能）を収容している第１のエッペンチューブ（１．５ｍＬ）に添加した。以下の３工程手順を用いて、ディスクを緩衝液で洗浄し、各洗浄工程から洗浄緩衝液を回収した。第１のチューブを、Ｖｏｒｔｅｘ−Ｇｅｎｉｅ  ２ミキサー（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ（Ｂｏｈｅｍｉａ，ＮＹ）から入手可能）を用いて高速設定で１分間攪拌した。滅菌ピンセットを使用して、ディスクを第１のチューブの緩衝溶液から取り出し、新しいバターフィールド緩衝液を収容した第２のエッペンチューブ（１．５ｍＬ）に移した。第２のチューブを高速設定で１分間攪拌した。次いで、滅菌ピンセットを使用して、ディスクを第２のチューブの緩衝溶液から取り出し、新しいバターフィールド緩衝液を収容した第３のエッペンチューブ（１．５ｍＬ）に移した。第３のチューブを高速設定で１分間攪拌した後、滅菌ピンセットを使用してディスクを取り出した。第１、第２、及び第３のエッペンチューブから回収した緩衝溶液を、バターフィールド緩衝液で各々連続希釈し、ＰＥＴＲＩＦＩＬＭ（登録商標）Ｒａｐｉｄ  Ｙｅａｓｔ  ａｎｄ  Ｍｏｌｄ  Ｃｏｕｎｔ  Ｐｌａｔｅｓ（３Ｍ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｐａｕｌ，ＭＮ）から入手可能）で別々に平板培養した。プレートを３０℃で４８時間インキュベートし、コロニーを目視検査により計数した。
【０２７４】
実施例２ａのディスクを用いて手順を繰り返した。各ディスクタイプを、２回測定した。結果を表４に示し、値は、必要とされる希釈数に基づいて調整された。データは、コロニー数に基づいて、バターフィールド緩衝溶液を洗浄溶液として使用した場合に、実施例２ａのディスクよりも実施例２のディスクから、有意に少ない数の芽胞（約１００分の１倍の芽胞）が洗浄されたことを示している。実施例２の洗浄ディスクからの芽胞の平均損失割合は０．０１８％のみであったが、実施例２ａの洗浄ディスクからの芽胞の平均損失割合は１．４％であった。
【０２７５】
【表４】
2020506739.tif 000017
【０２７６】
実施例２０．
【０２７７】
最終グリシン濃度が８８ｍＭとなるように、滅菌脱イオン水中のグリシンを、十分な強度のＯＰＡ溶液（０．５７５％のＯＰＡ、Ｒａｐｉｃｉｄｅ  ＯＰＡ２８高レベル消毒剤（Ｍｅｄｉｖａｔｏｒｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ）として入手可能）に添加することにより、中和されたＯＰＡ溶液を調製した。中和されたＯＰＡ溶液を、洗浄溶液として供給した。
【０２７８】
実施例２からのディスクを、１ｍＬの洗浄溶液を収容している第１のエッペンチューブ（１．５ｍＬ）に添加した。以下の３工程手順を用いて、ディスクを中和されたＯＰＡ溶液で洗浄し、各洗浄工程から洗浄溶液を回収した。第１のチューブを、Ｖｏｒｔｅｘ−Ｇｅｎｉｅ  ２ミキサーを用いて高速設定で１分間攪拌した。滅菌ピンセットを使用して、ディスクを第１のチューブの洗浄溶液から取り出し、新しい洗浄溶液を収容した第２のエッペンチューブ（１．５ｍＬ）に移した。第２のチューブを高速設定で１分間攪拌した。次いで、滅菌ピンセットを使用して、ディスクを第２のチューブの洗浄溶液から取り出し、新しい洗浄溶液を収容した第３のエッペンチューブ（１．５ｍＬ）に移した。第３のチューブを高速設定で１分間攪拌した後、滅菌ピンセットを使用してディスクを取り出した。第１、第２、及び第３のエッペンチューブから回収した洗浄溶液を、バターフィールド緩衝液を使用して各々連続希釈し、ＰＥＴＲＩＦＩＬＭ（登録商標）Ｒａｐｉｄ  Ｙｅａｓｔ  ａｎｄ  Ｍｏｌｄ  Ｃｏｕｎｔ  Ｐｌａｔｅｓで別々に平板培養した。プレートを３０℃で４８時間インキュベートし、コロニーを目視検査により計数した。
【０２７９】
実施例２ａのディスクを用いて手順を繰り返した。各ディスクタイプを、２回測定した。結果を表５に示し、値は、必要とされる希釈数に基づいて調整された。データは、コロニー数に基づいて、中和されたＯＰＡ溶液を洗浄溶液として使用した場合に、実施例２ａのディスクよりも実施例２のディスクから、有意に少ない数の芽胞（約１００分の１倍の芽胞）が洗浄されたことを示している。実施例２の洗浄ディスクからの芽胞の平均損失割合は０．０３％のみであったが、実施例２ａの洗浄ディスクからの芽胞の平均損失割合は２．７％であった。
【０２８０】
【表５】
2020506739.tif 000018
【０２８１】
実施例２１．
【０２８２】
図５の用具３００と同様の工程試験用具（但し、リザーバ、脆弱容器、導管、又は第２のコンパートメントを含まない）を構築した。各用具は、長さ約６．０ｃｍ、幅５．１ｃｍ、厚さ１．５ｍｍの外形寸法を有する、概ね矩形に成形された成形半透明ＡＢＳ（アクリロニトリルブタジエンスチレン）プラスチックカードであった。マイクロ流体チャネルの全長は、約１２．７ｃｍであり、チャネル断面は、約１．０ｍｍ×約１．５ｍｍであった。
【０２８３】
実施例２からの直径７ｍｍのコーティングされたディスクを、チャネルの液体流路内に位置する円形空洞部内に配置した（少量の接着剤で固定した）。透明なＰＥＴフィルム（厚さ１０ｍｍ）を用具に接着積層して、チャネル上のトップカバーを封止した。
【０２８４】
工程試験用具は、Ｍｅｄｉｖａｔｏｒｓ  ＤＳＤ−２０１  Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｅｎｄｏｓｃｏｐｅ  Ｒｅｐｒｏｃｅｓｓｏｒ（ＡＥＲ）（Ｍｅｄｉｖａｔｏｒｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）から入手可能）の液体出口ポートを工程試験用具の入口ポートに接続し、及び工程試験用具の出口ポートをＡＥＲに取り付けられた内視鏡に接続する、マニホールドアセンブリに係合された。これにより、消毒サイクルの流体は、ディスクを含むマイクロ流体チャネルの全長を通じて循環することができた。消毒サイクルは、２５℃で、水で３０秒間の予備のすすぎ、５分間のＯＰＡ溶液の洗い流し及び液浸、２回の水すすぎサイクル、最後にパルス化イソプロピルアルコール／水の洗い流しである４つの順番の工程で構成された。
【０２８５】
消毒サイクルの完了時に、工程試験用具をＡＥＲ機器から分離し、工程試験用具の入口ポートを介して３２０マイクロリットルの滅菌検出培地を送達し、それが芽胞コーティングディスクに接触するようにした。検出培地は、グリシン（１５ｇ／Ｌ）、Ｌ−セリン（０．１ｇ／Ｌ）、及びレザズリンナトリウム塩（０．０３ｇ／Ｌ）を添加した麦芽抽出ブロス（１５ｇ／Ｌ、ｐＨ７．５）であった。次いで、この用具を３７℃で７日間インキュベートした。インキュベーション期間後、レザズリン指示薬の色変化及び濁りについて検出培地を目視検査することによって、成長について用具を確認した。濁りを有する透明又はピンク色の溶液は、成長について陽性であった。濁りを有さない紫色の溶液は、成長について陰性であった。消毒サイクルに暴露されていなかった新しい用具を使用することにより、陽性対照用具を準備した。合計４つの用具を消毒処置し、４つの用具の全ては、成長について陰性と試験された。
【０２８６】
実施例２２．
【０２８７】
厚さ約１ｍｍのメルトブローポリプロピレンマイクロファイバー不織布基材の、１０．２ｃｍ×１０．２ｃｍの試料（４．２マイクロメートルの有効繊維直径及び１平方メートル当たり１０５グラムの坪量を特徴とする）をグローブボックス内にて１０分間窒素雰囲気下でパージし、プラスチック袋に挿入し、密封した。次いで、密封した袋をグローブボックスから取り出し、ウェブ速度約５．５メートル／分及び加速電圧３００ｋＶでＥｎｅｒｇｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．の「Ｅｌｅｃｔｒｏｃｕｒｔａｉｎ」ＣＢ−３００電子ビーム中をワンパス操作で通過させ、線量レベル７０ｋＧｙで照射した。密封された袋を窒素雰囲気制御グローブボックスに戻し、ここで不織布材料を窒素パージした含浸溶液１３グラムに含浸し、ほとんどの窒素を排出した後に袋を再密封した。ローラーを使用して、含浸溶液を基材に均一に分配した。試料を袋内で平坦に維持し、２４時間均一に飽和させた。含浸溶液は、脱イオン水中に２１．５重量％の総混合モノマーＮＶＰ／ＧＭＡ／ＩＥＭＡＧＭにより調製した。個々のモノマー濃度は、１２．５％のＮＶＰ、４％のＧＭＡ、及び５％のＩＥＭＡＧＭであった。
【０２８８】
得られたコポリマーグラフト化不織布基材を袋から取り出し、８００ｍＬの生理食塩水溶液中で２０分間撹拌しながら洗浄した。生理食塩水洗浄工程に続いて、温かい蒸留水を用いて基材を３回洗浄した。各洗浄工程において、新しい水を使用した。最終洗浄は、温水を用いて２０分間実施した。洗浄した基材を一晩風乾した。基材材料を手順の前後に秤量して、基材にグラフト化されたコポリマー材料の量を求めた。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約２８９％であった。
【０２８９】
実施例２３．
【０２９０】
コポリマーグラフト化不織布基材を調製するための実施例２２に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、個々のモノマー濃度が１２．５％のＮＶＰ、４％のＧＭＡ、及び２．５％のＩＥＭＡＧＭであった。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約２８８％であった。
【０２９１】
実施例２４．
【０２９２】
コポリマーグラフト化不織布基材を調製するための実施例２２に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、含浸溶液は、脱イオン水中に２１．５重量％の総混合モノマーＮＶＰ／ＧＭＡ／２−（ジエチルアミノ）エチルメタクリレート（ＤＥＡＥＭＡ）により調製した。個々のモノマー濃度は、１２．５％のＮＶＰ、４％のＧＭＡ、及び５％のＤＥＡＥＭＡであった。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約３１６％であった。
【０２９３】
実施例２５．
【０２９４】
コポリマーグラフト化不織布基材を調製するための実施例２４に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、個々のモノマー濃度が１２．５％のＮＶＰ、４％ＧＭＡ、及び２．５％のＤＥＡＥＭＡであった。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約２７５％であった。
【０２９５】
実施例２６．
【０２９６】
滅菌脱イオン水中のポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）（平均ＭＷ９６，０００、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｈａｖｅｒｈｉｌｌ，ＭＡ）から入手可能）の２％溶液を、等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（１×１０８個／ｍＬ）に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＶＰ含有量は、１％であり、芽胞濃度は、約５×１０７個／ｍＬであった。次いで、実施例２２のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０２９７】
実施例２７．
【０２９８】
実施例２６に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例２３のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０２９９】
実施例２８．
【０３００】
実施例２６に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例２４のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３０１】
実施例２９．
【０３０２】
実施例２６に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例２５のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３０３】
実施例３０．
【０３０４】
滅菌脱イオン水中のポリビニルアルコール（ＰＶＡ）（平均ＭＷ９６，０００、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ  Ｃｏｍｐａｎｙから入手可能）の２％溶液を、等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（１×１０８個／ｍＬ）に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＶＡ含有量は、１％であり、芽胞濃度は、約５×１０７個／ｍＬであった。次いで、実施例２２のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた直径５ｍｍ又は７ｍｍのいずれかの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３０５】
実施例３１．
【０３０６】
実施例３０に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例２３のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３０７】
実施例３２．
【０３０８】
実施例３０に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例２４のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３０９】
実施例３３．
【０３１０】
実施例３０に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例２５のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３１１】
実施例３４．
【０３１２】
実施例２２のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた５ｍｍ又は７ｍｍのいずれかの円形ディスク上に、アスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞（５×１０７個／ｍＬ）の１０マイクロリットルの懸濁液を直接スポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３１３】
実施例３５．
【０３１４】
実施例３４に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例２３のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３１５】
実施例３６．
【０３１６】
実施例３４に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例２４のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３１７】
実施例３７．
【０３１８】
実施例３４に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例２５のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３１９】
実施例３８．
【０３２０】
コポリマーグラフト化不織布基材を調製するための実施例２２に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、含浸溶液は、脱イオン水中に２１．５重量％の総混合モノマーＮＶＰ／ＧＭＡ／ＭＡＰＴＡＣにより調製した。個々のモノマー濃度は、１２．５％のＮＶＰ、４％のＧＭＡ、及び５％のＭＡＰＴＡＣであった。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約３０９％であった。
【０３２１】
実施例３９．
【０３２２】
コポリマーグラフト化不織布基材を調製するための実施例２２に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、個々のモノマー濃度が１２．５％のＮＶＰ、４％のＧＭＡ、及び２．５％のＭＡＰＴＡＣであった。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約３０２％であった。
【０３２３】
実施例４０．
【０３２４】
滅菌脱イオン水中のポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）（平均ＭＷ９６，０００、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ  Ｃｏｍｐａｎｙから入手可能）の２％溶液を、等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（１×１０８個／ｍＬ）に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＶＰ含有量は、１％であり、芽胞濃度は、約５×１０７個／ｍＬであった。次いで、実施例３８のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３２５】
実施例４１．
実施例４０に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例３９のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３２６】
実施例４２．
滅菌脱イオン水中のポリビニルアルコール（ＰＶＡ）（平均ＭＷ９６，０００、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ  Ｃｏｍｐａｎｙから入手可能）の２％溶液を、等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（１×１０８個／ｍＬ）に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＶＡ含有量は、１％であり、芽胞濃度は、約５×１０７個／ｍＬであった。次いで、実施例３８のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた直径５ｍｍ又は７ｍｍのいずれかの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３２７】
実施例４３．
【０３２８】
実施例４２に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例３９のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３２９】
実施例４４．
【０３３０】
実施例３８のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた５ｍｍ又は７ｍｍのいずれかの円形ディスク上に、アスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞（５×１０７個／ｍＬ）の１０マイクロリットルの懸濁液を直接スポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３３１】
実施例４５．
【０３３２】
実施例４４に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、実施例３９のコポリマーグラフト化不織布基材からディスクを打ち抜いた。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３３３】
【０３３４】
実施例４６．
【０３３５】
実施例２６〜３７及び４０〜４５の手順を使用して調製したディスクを、９ｍＬのバターフィールド緩衝液を収容した別個のチューブに個々に配置した。各チューブを高速設定で１分間攪拌した。ディスクを取り出し、回収した緩衝溶液をバターフィールド緩衝液で連続希釈し、ＰＥＴＲＩＦＩＬＭ（登録商標）Ｒａｐｉｄ  Ｙｅａｓｔ  ａｎｄ  Ｍｏｌｄ  Ｃｏｕｎｔ  Ｐｌａｔｅｓ（３Ｍ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｐａｕｌ，ＭＮ）から入手可能）で平板培養した。プレートを３７℃で４８時間インキュベートし、コロニーを目視検査により計数した。各タイプの合計３枚のディスクを分析した。計数されたコロニー数に基づいて、各ディスクから洗浄された芽胞の割合を計算した。平均結果を表６に示し、値は、必要とされる希釈数に基づいて調整された。
【０３３６】
【表６】
2020506739.tif 000019
【０３３７】
実施例４７．
【０３３８】
滅菌脱イオン水中のポリ（２−アクリルアミド−２−メチル−１−プロパンスルホン酸）（ＰＡＭＰＳ）（平均ＭＷ９，５００、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の２％溶液を、等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（１×１０８個／ｍＬ）に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＶＰ含有量は、１％であり、芽胞濃度は、約５×１０７個／ｍＬであった。次いで、実施例３８のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３３９】
実施例４８．
【０３４０】
滅菌脱イオン水中のポリ（メタクリル酸、ナトリウム塩）（ＰＭＭＡ）（平均ＭＷ２，０００，０００、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の２％溶液を、等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（１×１０８個／ｍＬ）に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＶＰ含有量は、１％であり、芽胞濃度は、約５×１０７個／ｍＬであった。次いで、実施例３８のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３４１】
実施例４９．
【０３４２】
アガロースを滅菌脱イオン水に添加し、溶解するまでマイクロ波で加熱することにより、アガロース（６５℃未満の融解温度、カタログ番号Ａ２７９０、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の２％溶液を調製した。次いで、アガロース溶液を約４０℃まで冷却し、ピペットで等量のアスペルギルス・ブラジリエンシス芽胞懸濁液（１×１０８個／ｍＬ）を添加することによって希釈した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終アガロース含有量は、１％であり、芽胞濃度は、約５×１０７個／ｍＬであった。次いで、実施例３８のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約５×１０５個の芽胞を付与した。
【０３４３】
実施例５０．
【０３４４】
実施例４０、４２、４４、及び４７〜４９の手順を使用して調製したディスクを、９ｍＬのバターフィールド緩衝液を収容した別個のチューブに個々に配置した。各チューブを高速設定で１分間攪拌した。ディスクを取り出し、回収した緩衝溶液をバターフィールド緩衝液で連続希釈し、ＰＥＴＲＩＦＩＬＭ（登録商標）Ｒａｐｉｄ  Ｙｅａｓｔ  ａｎｄ  Ｍｏｌｄ  Ｃｏｕｎｔ  Ｐｌａｔｅｓで平板培養した。プレートを３７℃で４４時間インキュベートし、コロニーを目視検査により計数した。各タイプの合計３枚のディスクを分析した。計数されたコロニー数に基づいて、各ディスクから洗浄された芽胞の割合を計算した。平均結果を表７に示し、値は、必要とされる希釈数に基づいて調整された。
【０３４５】
【表７】
2020506739.tif 000020
【０３４６】
実施例５１．
【０３４７】
実施例３０〜３７、４２〜４３、及び４４〜４５からのディスクを、ポリスチレン４８ウェル培養プレートのウェルに個々に配置した（５ｍｍの円形ディスク５枚を各実施例から評価した）。２０マイクロリットルの滅菌脱イオン水を各ウェルに添加することによってディスクを予備湿潤し、次いでプレートを水浴中にて２５℃で１０分間インキュベートした。０．５５％のＯＰＡ濃度の４００マイクロリットルのオルトフタルアルデヒド（ＯＰＡ）溶液（Ｒａｐｉｃｉｄｅ  ＯＰＡ２８高レベル消毒剤、Ｍｅｄｉｖａｔｏｒｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）から入手可能）を、各ディスク上にピペットで移した。プレートを２５℃で５分間維持した後、６００マイクロリットルのグリシン（滅菌脱イオン水中８８ｍＭ）を各ウェルに添加した。プレートを室温で更に５分間インキュベートした。インキュベーション期間後、滅菌ピンセットを使用して、第２の組のポリスチレン４８ウェル培養プレート内の新しいウェルに各ディスクを移した。第２のプレート内の各ウェルは、０．０３ｍｇ／ｍＬのレザズリンナトリウム塩を添加した８００マイクロリットルの麦芽抽出ブロス（ｐＨ７．５、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能、カタログ番号Ｍ６４０９）を収容した。プレートをＰＡＲＡＦＩＬＭ（登録商標）Ｍプラスチックパラフィンフィルムで密封し、３７℃で７日間インキュベートした。
【０３４８】
レザズリン指示薬の色変化及び溶液の濁りについてウェルを目視検査することによって、１、５及び７日目の成長についてウェルを確認した。濁りを有する透明又はピンク色の溶液は、成長について陽性であった。濁りを有さない紫色の溶液は、成長について陰性であった。ＯＰＡ溶液に暴露されていなかったディスクを使用して陽性対照ウェルを準備した。ウェルにディスクを添加しないことにより、陰性対照ウェルを準備した。全ての陽性対照ウェルは、１、５及び７日目に成長を示した。陰性対照ウェルのいずれも、１、５及び７日目に成長を示さなかった。結果を表８に報告する。
【０３４９】
【表８】
2020506739.tif 000021
【０３５０】
実施例５２．
【０３５１】
ゲオバチルス・ステアロサーモフィルスの懸濁原液をバターフィールド緩衝液で希釈して、４×１０８個／ｍＬの芽胞濃度を得た。滅菌脱イオン水中のポリビニルアルコール（ＰＶＡ）（平均ＭＷ９６，０００、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ  Ｃｏｍｐａｎｙから入手可能）の２％溶液を、等量のゲオバチルス・ステアロサーモフィルス芽胞懸濁液に添加した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終ＰＶＡ含有量は、１％であり、芽胞濃度は、約２×１０８個／ｍＬであった。次いで、実施例３８のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた直径５ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０３５２】
実施例５３．
【０３５３】
実施例３８のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた５ｍｍの円形ディスク上に、ゲオバチルス・ステアロサーモフィルス芽胞（２×１０８個／ｍＬ）の１０マイクロリットルの懸濁液を直接スポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２×１０６個の芽胞を付与した。
【０３５４】
実施例５４．
【０３５５】
実施例５２及び５３からの個々のディスクを、５００ｍＬの過酢酸（ＰＡＡ）滅菌溶液を収容するビーカーに５０℃で６分間浸漬した。滅菌溶液は、ＰＡＡ濃度が１８３０ｐｐｍであり、Ｓｔｅｒｉｓ  Ｓ４０  Ｓｔｅｒｉｌａｎｔ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ（Ｓｔｅｒｉｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍｅｎｔｏｒ，ＯＨ）を使用して調製した。各実施例から、合計１０枚のディスクを評価した。暴露時間の直後に、ディスクを滅菌溶液から取り出し、穏やかに振盪することによってディスクから余分な液体を除去し、ディスクを２００ｍＬの中和溶液（滅菌脱イオン水中５重量％のチオ硫酸ナトリウム）を収容するビーカーに移した。このディスクを中和溶液中に５分間維持した。次いで、各ディスクを、滅菌ピンセットを使用して、３ｍＬの滅菌増殖培地を収容した１５ｍＬのスクリューキャップコニカルチューブに移した。増殖培地は、水中にＬ−アラニン、ペプトン、及びブロモクレゾールパープルを含有していた。各チューブを５８℃で７日間インキュベートした。色変化（紫色から黄色）及び溶液の濁りについてチューブを目視検査することによって、１、２及び７日目の成長についてチューブを確認した。濁りを有する黄色の溶液は、成長について陽性であった。濁りを有さない紫色の溶液は、成長について陰性であった。滅菌溶液に暴露されていなかったディスクを使用して陽性対照チューブを準備した。チューブにディスクを添加しないことにより、陰性対照チューブを準備した。結果を表９に報告する。全ての陽性対照については、１日目に成長が観察された。成長は、７日間の陰性対照のいずれでも観察されなかった。
【０３５６】
【表９】
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【０３５７】
実施例５５．
【０３５８】
コポリマーグラフト化不織布基材を調製するための実施例３９に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、メルトブローポリプロピレンマイクロファイバー不織布基材の有効繊維直径は９．９マイクロメートルであり、坪量は１平方メートル当たり１０２グラムであった。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約２２０％であった。
【０３５９】
実施例５６．
【０３６０】
コポリマーグラフト化不織布基材を調製するための実施例３９に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、メルトブローポリプロピレンマイクロファイバー不織布基材の有効繊維直径は８．０マイクロメートルであり、坪量は１平方メートル当たり１０２グラムであった。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約２６６％であった。
【０３６１】
実施例５７．
【０３６２】
コポリマーグラフト化不織布基材を調製するための実施例３９に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、メルトブローポリプロピレンマイクロファイバー不織布基材の有効繊維直径は６．１マイクロメートルであり、坪量は１平方メートル当たり９９グラムであった）。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約２６３％であった。
【０３６３】
実施例５８．
【０３６４】
コポリマーグラフト化不織布基材を調製するための実施例３９に記載したものと同一の手順に従ったが、但し、メルトブローポリプロピレンマイクロファイバー不織布基材の有効繊維直径は３．９マイクロメートルであり、坪量は１平方メートル当たり１００グラムであった。グラフト後の基材の重量増加は、基材の元の重量の約２７２％であった。
【０３６５】
実施例５９．
【０３６６】
アガロースを滅菌脱イオン水に添加し、溶解するまでマイクロ波で加熱することにより、アガロース（６５℃未満の融解温度、カタログ番号Ａ２７９０、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能）の２％溶液を調製した。次いで、アガロース溶液を約４０℃まで冷却し、ピペットで等量のゲオバチルス・ステアロサーモフィルス芽胞懸濁液（５．４×１０８個／ｍＬ）を添加することによって希釈した。希釈工程の後、得られたコーティング懸濁液の最終アガロース含有量は、１０％であり、芽胞濃度は、約２．７×１０８個／ｍＬであった。次いで、実施例５５〜５８のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液の個々の部分標本（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２．７×１０６個の芽胞を付与した。
【０３６７】
各ディスクを、９ｍＬのバターフィールドを収容したチューブに入れ、チューブを高速設定で１分間攪拌した。ディスクを取り出し、回収した緩衝溶液をバターフィールド緩衝液で連続希釈し、ＰＥＴＲＩＦＩＬＭ（登録商標）Ａｅｒｏｂｉｃ  Ｃｏｕｎｔ  Ｐｌａｔｅｓで平板培養した。プレートを５６℃で２４時間インキュベートし、コロニーを目視検査により計数した。各タイプの合計３枚のディスクを分析した。計数されたコロニー数に基づいて、各ディスクから洗浄された芽胞の割合を計算した。平均結果を表１０に示し、値は、必要とされる希釈数に基づいて調整された。
【０３６８】
実施例６０．
【０３６９】
ゲオバチルス・ステアロサーモフィルス芽胞（２．７×１０８個／ｍＬ）の１０マイクロリットルの懸濁液を調製した。次いで、実施例５５〜５８のコポリマーグラフト化不織布基材から打ち抜かれた直径７ｍｍの円形ディスク上にピペットを使用して、コーティング懸濁液の個々の部分標本（１０マイクロリットル）をスポットした。スポットされた基材を室温で一晩風乾した。各ディスクに約２．７×１０６個の芽胞を付与した。
【０３７０】
各ディスクを、９ｍＬのバターフィールド緩衝液を収容したチューブに入れ、チューブを高速設定で１分間攪拌した。ディスクを取り出し、回収した緩衝溶液をバターフィールド緩衝液で連続希釈し、ＰＥＴＲＩＦＩＬＭ（登録商標）Ａｅｒｏｂｉｃ  Ｃｏｕｎｔ  Ｐｌａｔｅｓで平板培養した。プレートを５６℃で２４時間インキュベートし、コロニーを目視検査により計数した。各タイプの合計３枚のディスクを分析した。計数されたコロニー数に基づいて、各ディスクから洗浄された芽胞の割合を計算した。平均結果を表１０に示し、値は、必要とされる希釈数に基づいて調整された。
【０３７１】
【表１０】
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【０３７２】
本明細書で言及した全ての特許、特許出願、及び公報、並びに電子的に入手可能な資料の全開示内容が、参照により組み込まれる。本出願の開示内容と参照により本明細書に組み込まれたいずれかの文書の開示内容との間に何らかの矛盾が存在する場合には、本出願の開示内容が優先するものとする。上記の詳細な説明及び実施例は、理解しやすいように示したものにすぎない。これによって不必要な限定がなされるものではない。本発明は図示及び記載された細部そのものに限定されず、当業者に明白な変形形態は、特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲内に含まれる。
【０３７３】
全ての見出しは読者の便宜のためのものであり、明記しない限り、見出しに続く文言の意味を限定するために用いられるものではない。
【０３７４】
本発明の趣旨及び範囲を逸脱することなく、様々な変更を行うことができる。これらの実施形態及び他の実施形態は、以下の特許請求の範囲に含まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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