(57)【要約】  本発明は、変形性関節症およびそれに関連する状態の予防または治療のための新規の方法、使用、および組成物に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象の１つ以上の関節における変形性関節症の予防または治療において使用するためのアネキシンＡ５タンパク質であって、
前記関節または各関節が、滑膜性連結、半関節連結、および不動結合連結からなる一覧から選択される、アネキシンＡ５タンパク質。
【請求項２】
前記アネキシンＡ５タンパク質が前記関節または各関節に投与される、請求項１に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項３】
対象の１つ以上の関節における変形性関節症の予防または治療において使用するためのアネキシンＡ５タンパク質であって、
前記アネキシンＡ５タンパク質が前記関節または各関節に投与される、アネキシンＡ５タンパク質。
【請求項４】
前記関節または各関節が、滑膜性連結、半関節連結、および不動結合連結からなる一覧から選択される、請求項３に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項５】
前記変形性関節症が、原発性変形性関節症または続発性変形性関節症である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項６】
前記原発性変形性関節症が全身性結節性変形性関節症またはびらん性変形性関節症である、請求項５に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項７】
対象の１つ以上の関節におけるびらん性変形性関節症の予防または治療において使用するためのアネキシンＡ５タンパク質であって、
任意選択で、前記アネキシンＡ５タンパク質が前記関節または各関節に投与され、
任意選択で、前記関節または各関節が、滑膜性連結、半関節連結、および不動結合連結からなる一覧から選択される、アネキシンＡ５タンパク質。
【請求項８】
前記対象が前記関節または各関節に変形性関節症を有する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の対象における変形性関節症の治療に使用するためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項９】
前記対象が変形性関節症と診断されており、
任意選択で、前記変形性関節症の診断が、治療される関節または各関節におけるものである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項１０】
前記滑膜性連結が、平面関節（例えば、肋椎関節、椎間関節、手根中央関節、手根中手指関節、中手間関節、仙腸関節、関節突起間関節、胸肋関節、距骨下関節（もしくは距踵関節）、または肩鎖関節）；球関節（例えば、脛骨足根骨関節、脛腓関節、肩関節、距踵舟関節、または股関節）；蝶番関節（例えば、足関節、肘関節、顎関節、指節間関節、後膝関節、または膝関節）；車軸関節（例えば、環軸関節、環軸関節、近位橈骨関節、飛節、足根間関節、距踵舟関節、踵立方関節、または遠位橈尺関節）；顆状関節（例えば、環椎後頭関節、橈骨手根関節、中足指節関節、手首関節、手根間関節、橈骨手根関節、または中手指節関節）；および鞍関節（例えば、母指手根中手関節、踵立方関節、または胸鎖関節）からなる一覧から選択される１つ以上の滑膜性連結である、請求項１、２、または４〜９のいずれか１項に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項１１】
前記対象が年少者ではなく、かつ／または身体的成長が完了している対象である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項１２】
前記対象がヒト、ウマ科（ウマを含む）、ウシ科、ラクダ、ブタ、ラマ、アルパカ、ヒツジ、ヤギ、イヌ科、ネコ科、ウサギ、またはげっ歯類などの哺乳類対象である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項１３】
前記対象がヒトである、請求項１２に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項１４】
前記対象が４５歳以上である、請求項１３に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項１５】
前記対象がウマである、請求項１２に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項１６】
前記対象が５歳以上である、請求項１５に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項１７】
前記アネキシンＡ５タンパク質が、少なくとも１μｇ／ｍｌの濃度で投与される、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項１８】
前記アネキシンＡ５タンパク質が、
ａ）ヒトアネキシンＡ５（任意選択で、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まない、配列番号１の配列からなるタンパク質）の配列を含む、本質的にそれからなる、またはそれからなるタンパク質、
ｂ）ヒトアネキシンＡ５の哺乳動物相同分子種、
ｃ）ａ）またはｂ）の対立遺伝子または遺伝的バリアント、
ｄ）Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まないヒトアネキシンＡ５、配列番号１と、５０％、６０％、７０％、７５％以上、例えば８０％、８５％、９０％超、またはさらにより好ましくは９５％もしくは９９％超同一であるタンパク質である、アネキシンの機能的類似体またはバリアント、
ｅ）ａ）、ｂ）、ｃ）、またはｄ）のいずれかの生物学的に活性な断片、
ｆ）ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、またはｅ）のいずれかからなる単量体、それらを含むかもしくはそれらからなる二量体、またはそれらを含む融合タンパク質、ならびに
ｇ）ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、ｅ）、またはｆ）のいずれかのＰＥＧ化バリアント、である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項１９】
前記アネキシンＡ５タンパク質が、薬学的に許容される組成物または獣医学的に許容される組成物などの組成物に製剤化されている、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項２０】
前記アネキシンＡ５タンパク質または組成物が１ｍｌ以上の体積で前記関節または各関節に投与され、
任意選択で、前記アネキシンＡ５タンパク質または組成物が１０ｍｌ以下の体積で前記関節または各関節に投与される、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項２１】
前記対象が、ライフスタイルの変更、投薬、および手術のうちの１つ以上から選択される１つ以上の追加の治療と別個に、同時に、または逐次的に、アネキシンＡ５タンパク質または組成物によって治療される、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の使用のためのアネキシンＡ５タンパク質。
【請求項２２】
本明細書および／または図面を参照して本明細書に実質的に記載されている、使用のためのアネキシンＡ５タンパク質もしくは組成物、または使用、または方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、変形性関節症およびそれに関連する状態の予防または治療のための新規の方法、使用、および組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
本明細書における明らかに先に公開された文献の列挙または考察は、必ずしもその文書が最新技術の一部であるか、または共通の一般的知識であることを認めるものとして解釈されるべきではない。
【０００３】
変形性関節症は、世界中の人々に蔓延している慢性の変性疾患であり、患者の関節に疼痛およびこわばりを引き起こす。この疾患の罹患率は、患者の治療費および個人の生産性の喪失のために、社会に大きな経済的負担をもたらす（Ｈｉｌｉｇｓｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｒｅｇｉｎｓｔｅｒ  ２０１３，Ｍｅｄｉｃｏｇｒａｐｈｉａ，３５：１９７−２０２）。
【０００４】
一般的に、変形性関節症は、関節の使用によって引き起こされる疾患であると考えられている（例えば、一般的な「消耗」）。このような変形性関節症の物理的因果関係は、なぜこの疾患が高齢者に一般的であるのかということ、およびなぜ一般的な危険因子が過体重であることおよび関節にストレスがかかる職業を持つことであるのかを説明している。しかしながら、いくつかの研究は、変形性関節症の発症と進行が炎症性の要素を有することを示している。これは、変形性関節症の病態生理学的原因が何であるかに関して医学の分野で継続的な論争を引き起こした（Ｕｃｈｏａ  ｄｅ  Ｒｅｚｅｎｄｅ  ａｎｄ  Ｃｏｎｓｔａｎｔｉｎｏ  ｄｅ  Ｃａｍｐｏｓ  ２０１３，Ｒｅｖ．Ｂｒａｓ．Ｏｒｔｏｐ．４８（６）：４７１−４７４）。
【０００５】
変形性関節症は、ヒト対象が罹患するだけでなく、動物も罹患する病気である。例えば、ウマでは、変形性関節症が跛行の約６０％の原因であると推定されている（Ｍｃｌｌｗｒａｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２  Ｂｏｎｅ  Ｊｏｉｎｔ  Ｒｅｓ．，１：２９７−３０９）。
【０００６】
現在、変形性関節症に対する治療法は、ヒトまたは動物のいずれにも存在しない。患者には、症状を管理するための薬（たとえば、パラセタモールなどの鎮痛剤）、および場合によっては罹患した関節を置き換えるための手術（たとえば股関節置換術）が提供される。
【０００７】
したがって、変形性関節症のための新規の予防的および治療的な処置に対する必要性がある。
【０００８】
アネキシンＡ５は、他の性質の中でもとりわけホスファチジルセリンに結合するタンパク質である。それは再狭窄およびアテローム性動脈硬化症のような循環器疾患を治療するために治療的に有益であると一般に考えられている（ＷＯ２００９／１０３９７７およびＷＯ２００５／０９９７４４）。
【０００９】
これまでに、アネキシンＡ５が、変形性関節症を悪化させるプロセスに関与していることが研究により示唆されていた。健康な関節および組織において、軟骨細胞（具体的には、関節軟骨細胞）は、細胞外マトリックスの無機質化および石灰化の調節を含む、関節軟骨の細胞外マトリックスの生成、維持、リモデリング、および修復のための役割を有する。石灰化が起こらない関節の領域は、「無機質化制限部位」と呼ばれる。その正常組織内では、無機質化のプロセスは、軟骨の奥深くの分化した関節軟骨細胞によって行われる。軟骨細胞の分化およびそれに続く細胞外無機質化は、アネキシンＡ５を発現し、無機質化コンピテント小胞を放出する軟骨細胞によって媒介される。ＩＩ型およびＸ型コラーゲンとの結合を介して、アネキシンＡ５は小胞を細胞外マトリックスに固定する。アネキシンＡ５はまた、小胞中にカルシウムイオン（Ｃａ２＋）チャネルを形成し、それらのイオンの急速な動きを可能にし、無機質化および石灰化のプロセスを開始する（Ｋｉｍ  ａｎｄ  Ｋｉｒｓｃｈ  ２００８，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２８３（１６）：１０３１０−１０３１７）。
【００１０】
変形性関節症の関節や組織では、細胞表面のアネキシンＡ５および細胞外小胞が媒介する軟骨細胞の分化および細胞外の無機質化が、軟骨の奥深くではなく、関節全体に起こることが、これまでに観察されていた。この異所性軟骨細胞の分化が、軟骨細胞の細胞死をもたらすと報告されている一方、軟骨細胞におけるアネキシンＡ５無機質化の上方制御された発現は、関節全体に不適切に生じる無機質沈着をもたらすと報告された。無機質化および石灰化は、その後の関節組織の炎症および破壊を引き起こし、それが変形性関節症の発症および進行への寄与に関与すると考えられている（Ｋｉｒｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｃａｒｔｉｌａｇｅ，８：２９４−３０２）。
【００１１】
したがって、アネキシンＡ５が変形性関節症と関連してこれまでに直接研究されていた限りにおいて、それは変形性関節症の進行に寄与すると考えられていた。
【００１２】
驚くべきことに、この背景に対して、本発明者らは、アネキシンＡ５タンパク質が変形性関節症、特に炎症によって引き起こされる変形性関節症の予防または治療に使用できることをここで確認した。この研究はあらゆる対象の変形性関節症に適用可能であるが、本発明者らはそれがヒトとウマの両方の変形性関節症に特に適用可能であることを示す。
【００１３】
したがって、本発明の目的は、変形性関節症およびそれに関連する状態の予防または治療のための治療薬を提供することである。
【発明の概要】
【００１４】
本発明は、アネキシンＡ５タンパク質が、変形性関節症およびそれに関連する１つ以上の状態の治療および予防に使用できるという本出願人の驚くべき発見に基づいている。
【００１５】
第１の態様では、本発明は、対象の１つ以上の関節における変形性関節症、またはそれに関連する状態の予防または治療において使用するためのアネキシンＡ５タンパク質であって、
関節または各関節は、滑膜性連結、半関節連結、および不動結合連結からなる一覧から選択される、アネキシンＡ５タンパク質を提供する。
【００１６】
第１の態様の代替的な実施形態において、本発明は、対象の１つ以上の関節における変形性関節症、またはそれに関連する状態の予防または治療のための方法であって、
関節または各関節は、滑膜性連結、半関節連結、および不動結合連結からなる一覧から選択され、
治療有効量のアネキシンＡ５タンパク質を対象に投与するステップを含む、方法を提供する。
【００１７】
第１の態様の別の代替的な実施形態では、本発明は、対象の１つ以上の関節における変形性関節症またはそれに関連する状態の予防または治療のための医薬の製造におけるアネキシンＡ５タンパク質の使用であって、
関節または各関節は、滑膜性連結、半関節連結、および不動結合連結からなる一覧から選択される、アネキシンＡ５タンパク質の使用を提供する。
【００１８】
第２の態様では、本発明は、対象における変形性関節症、またはそれに関連する状態の予防または治療において使用するためのアネキシンＡ５タンパク質を提供する。
【００１９】
第２の態様の代替的な実施形態において、本発明は、対象における変形性関節症、またはそれに関連する状態の予防または治療のための方法であって、
治療有効量のアネキシンＡ５タンパク質を対象に投与するステップを含む、方法を提供する。
【００２０】
第２の態様の別の代替的な実施形態では、本発明は、対象における変形性関節症またはそれに関連する状態の予防または治療のための医薬の製造におけるアネキシンＡ５タンパク質の使用を提供する。
【００２１】
第３の態様において、本発明は、対象の関節における変形性関節症、またはそれに関連する状態の予防または治療において使用するためのアネキシンＡ５タンパク質であって、
関節または各関節に投与されるアネキシンＡ５タンパク質を提供する。
【００２２】
第３の態様の代替的な実施形態において、本発明は、対象の関節における変形性関節症、またはそれに関連する状態の予防または治療のための方法であって、
アネキシンＡ５タンパク質が関節または各関節に投与され、
治療有効量のアネキシンＡ５タンパク質を対象に投与するステップを含む、方法を提供する。
【００２３】
第３の態様の別の代替的な実施形態では、本発明は、対象の関節における変形性関節症またはそれに関連する状態の予防または治療のための医薬の製造におけるアネキシンＡ５タンパク質の使用であって、
アネキシンＡ５タンパク質が関節または各関節に投与される、アネキシンＡ５タンパク質の使用を提供する。
【００２４】
第４の態様において、本発明は、対象の関節におけるびらん性変形性関節症、またはそれに関連する状態の予防または治療において使用するためのアネキシンＡ５タンパク質を提供する。
【００２５】
第４の態様の代替的な実施形態において、本発明は、対象の関節におけるびらん性変形性関節症、またはそれに関連する状態の予防または治療のための方法であって、
治療有効量のアネキシンＡ５タンパク質を対象に投与するステップを含む、方法を提供する。
【００２６】
第４の態様の別の代替的な実施形態では、本発明は、対象の関節におけるびらん性変形性関節症またはそれに関連する状態の予防または治療のための医薬の製造におけるアネキシンＡ５タンパク質の使用を提供する。
【００２７】
一実施形態では、本発明の第１、第２または第４の態様によれば、アネキシンＡ５タンパク質を、任意選択で関節または各関節に投与することができる。
【００２８】
一実施形態では、本発明の第２、第３、または第４の態様によれば、関節または各関節は、滑膜性連結、半関節連結、および不動結合連結からなる一覧から選択される。
【００２９】
一実施形態では、本発明の第１、第２、または第３の態様によれば、変形性関節症は任意選択で、原発性変形性関節症または続発性変形性関節症であり得る。
【００３０】
一実施形態では、本発明の第１、第２、または第３の態様によれば、原発性変形性関節症は任意選択で、全身性結節性変形性関節症またはびらん性変形性関節症であり得る。
【００３１】
一実施形態では、本発明の前述の態様のいずれかによれば、対象は、関節または各関節に変形性関節症を有し得る。
【００３２】
一実施形態では、本発明の前述の態様のいずれかによれば、対象は任意選択で、変形性関節症と診断され得、
任意選択で、変形性関節症の診断は、治療される関節または各関節におけるものである。
【００３３】
本発明の前述の態様のいずれかによれば、任意選択で、滑膜性連結は、平面関節（例えば、肋椎関節、椎間関節、手根中央関節、手根中手指関節、中手間関節、仙腸関節、関節突起間関節、胸肋関節、距骨下関節（もしくは距踵関節）、または肩鎖関節）；球関節（例えば、脛骨足根骨関節、脛腓関節、肩関節、距踵舟関節、または股関節）；蝶番関節（例えば、足関節、肘関節、顎関節、指節間関節、後膝関節、または膝関節）；車軸関節（例えば、環軸関節、環軸関節、近位橈骨関節、飛節、足根間関節、距踵舟関節、踵立方関節、または遠位橈尺関節）；顆状関節（例えば、環椎後頭関節、橈骨手根関節、中足指節関節、手首関節、手根間関節、橈骨手根関節、または中手指節関節）；および鞍関節（例えば、母指手根中手関節、踵立方関節、または胸鎖関節）からなる一覧から選択される１つ以上の滑膜性連結である。
【００３４】
一実施形態では、本発明の前述の態様のうちのいずれかによれば、対象は任意選択で、年少者でなくてもよく、かつ／または予防または治療の時点で身体的成長を完了しているであろう。
【００３５】
一実施形態では、本発明の前述の態様のいずれかによれば、対象は任意選択で、ヒト、ウマ科（ウマを含む）、ウシ科、ラクダ、ブタ、ラマ、アルパカ、ヒツジ、ヤギ、イヌ科、ネコ科、ウサギ、またはげっ歯類などからなる群から選択される哺乳動物などの哺乳類の対象であり得る。一つの好ましい選択肢において、対象はヒトである。別の好ましい選択肢において、対象はウマである。
【００３６】
一実施形態では、本発明の前述の態様のいずれかによれば、対象はヒトであり、対象は、本出願において、以下の「発明を実施するための形態」のセクションＤでさらに論じる年齢などの４５歳以上の年齢であり得る。
【００３７】
一実施形態では、本発明の前述の態様のいずれかによれば、対象はウマであり、対象は、本出願において、以下の「発明を実施するための形態」のセクションＤでさらに論じる年齢などの５歳以上の年齢であり得る。
【００３８】
一実施形態では、本発明の前述の態様のうちのいずれかによれば、アネキシンＡ５タンパク質は、少なくとも１μｇ／ｍｌの濃度で投与され得る。
【００３９】
一実施形態では、本発明の前述の態様のいずれかによれば、アネキシンＡ５タンパク質は、
ａ）ヒトアネキシンＡ５（任意選択で、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まない、配列番号１の配列からなるタンパク質）の配列を含む、本質的にそれからなる、またはそれからなるタンパク質、
ｂ）ヒトアネキシンＡ５の哺乳動物相同分子種、
ｃ）ａ）またはｂ）の対立遺伝子または遺伝的バリアント、
ｄ）Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まないヒトアネキシンＡ５、配列番号１と、５０％、６０％、７０％、７５％超、例えば８０％、８５％、９０％超、またはさらにより好ましくは９５％もしくは９９％超同一であるタンパク質である、アネキシンの機能的類似体またはバリアント、
ｅ）ａ）、ｂ）、ｃ）、またはｄ）のいずれかの生物学的に活性な断片、
ｆ）ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、またはｅ）のいずれかからなる単量体、それらを含むかもしくはそれらからなる二量体、またはそれらを含む融合タンパク質、ならびに
ｇ）ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、ｅ）、またはｆ）のいずれかのＰＥＧ化バリアント、であり得る。
【００４０】
一実施形態では、本発明の前述の態様のいずれかによれば、アネキシンＡ５タンパク質は、薬学的に許容される組成物または獣医学的に許容される組成物などの組成物に製剤化することができる。
【００４１】
一実施形態では、本発明の前述の態様のいずれかによれば、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、１ｍｌ以上の体積で関節または各関節に投与することができ、
任意選択で、アネキシンＡ５タンパク質または組成物を１０ｍｌ以下の体積で関節または各関節に投与することができる。
【００４２】
一実施形態では、本発明の前述の態様のいずれかによれば、対象は、ライフスタイルの変更、投薬、および手術のうちの１つ以上から選択される１つ以上の追加の治療と別個に、同時に、または逐次的に、アネキシンＡ５タンパク質または組成物によって治療され得る。
【００４３】
本発明のこれらおよび他の態様、ならびにそれに関連する実施形態および選択肢のさらなる詳細は、以下の発明を実施するための形態においてさらに論じられる。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】アネキシンＡ５タンパク質による治療で変形性関節症細胞の細胞生存率が増加することを示す。実験は、変形性関節症患者からの初代培養軟骨細胞培養物に対してフローサイトメトリーを使用して実施された。変形性関節症の関節の炎症は、ＴＮＦαの適用を通して細胞において模倣され、それは、ＴＮＦαが適用されなかった対照細胞（列１）と比較するとき、細胞生存率の減少をもたらした（列２）。ＴＮＦαに加えてアネキシンＡ５を適用すると細胞死が抑制され（列３）、対照に見られるレベルと同等の細胞生存率がもたらされる。
【図２】アネキシンＡ５による治療でＩＣＡＭ１の発現が減少することを示す。実験は、変形性関節症患者からの初代培養軟骨細胞培養物に対してフローサイトメトリーを使用して実施された。変形性関節症の関節の炎症は、ＴＮＦαの適用を通して細胞において模倣され、それは、ＴＮＦαが適用されなかった対照細胞（列１）と比較するとき、ＩＣＡＭ１の表面発現を増加させた（列２）。ＴＮＦαに加えてアネキシンＡ５を適用すると、ＩＣＡＭ１の表面発現が減少した（列３）。
【図３】アネキシンＡ５タンパク質による治療で変形性関節症細胞の細胞生存率が用量依存的に増加することを示す。実験は、変形性関節症患者からの初代培養軟骨細胞培養物に対してフローサイトメトリーを使用して実施された。変形性関節症の関節の炎症は、ＩＬ１−βの適用を通して細胞において模倣され、それは細胞生存率の低下をもたらした。これは、各実験についてＩＬ１−βのみが適用された試料（図に印を付けた）についてのフローサイトメトリー曲線がｙ軸から最も遠い曲線であるようにシフトしている一方で、ＩＬ１−βが適用されていない対照細胞はグラフの中央にあるものとして図に示される。これらの曲線のこの特定の配置は、ＩＬ１−βが適用されたときに細胞死がより高いレベルで起こることを示している。対照曲線と３つの投与量すべてについてのアネキシンＡ５タンパク質曲線とは同一の位置にあるので、３つの投与量全てでアネキシンＡ５タンパク質を単独で適用すると、対照試料と比較して細胞死の増加を引き起こさないこともまた示された。最後に、ＩＬ１−βに加えてアネキシンＡ５を適用すると、用量依存的に細胞死を阻害し、２０μｇおよび５μｇの投与量は、対照において観察されるのと同一のレベルの細胞生存率を示す。これは、２０μｇおよび５μｇ投与量のアネキシンＡ５についてのフローサイトメトリー曲線が、対照曲線およびアネキシンＡ５タンパク質単独曲線と一致して、グラフの中央にある（図に印を付けた）こととして示される。１００ｎｇ投与量はまた、細胞死を抑制するが、より少ない程度であり、これは１００ｎｇフローサイトメトリー曲線（図に印を付けた）がグラフの中央とＩＬ１−β単独曲線との間にあることから見ることができる。
【図４】変形性関節症のマーカーＲＡＮＫＬの発現が、アネキシンＡ５タンパク質による処理で用量依存的に減少することを示す。実験は、変形性関節症患者からの初代培養軟骨細胞培養物に対してフローサイトメトリーを使用して実施された。変形性関節症の関節の炎症は、ＩＬ１−βの適用を通して細胞において模倣され、それはＲＡＮＫＬ発現の増加をもたらした。これは、各実験についてＩＬ１−βのみが適用された試料（図に印を付けた）についてのフローサイトメトリー曲線がｙ軸から最も遠い曲線であるようにシフトしている一方で、ＩＬ１−βが適用されていない対照細胞はグラフの中央にあるものとして図に示される。これらの曲線のこの特定の配置は、ＩＬ１−βが適用されたときにＲＡＮＫＬがより高度に発現することを示している。対照曲線と３つの投与量すべてについてのアネキシンＡ５タンパク質曲線とは同一の位置にあるので、３つの投与量全てでアネキシンＡ５タンパク質を単独で適用すると、対照試料と比較してＲＡＮＫＬ発現の増加を引き起こさないこともまた示された。最後に、ＩＬ１−βに加えてアネキシンＡ５を適用すると、用量依存的にＲＡＮＫＬ発現が減少し、２０μｇおよび５μｇの投与量では、対照において観察されるのと同一のレベルにＲＡＮＫＬ発現が戻る。これは、２０μｇおよび５μｇ投与量のアネキシンＡ５についてのフローサイトメトリー曲線が、対照曲線およびアネキシンＡ５タンパク質単独曲線と一致して、グラフの中央にある（図に印を付けた）こととして示される。１００ｎｇ投与量はまた、ＲＡＮＫＬ発現を減少させるが、より少ない程度であり、これは１００ｎｇフローサイトメトリー曲線（図に印を付けた）がグラフの中央とＩＬ１−β単独曲線との間にあることから見ることができる。
【図５ａ】変形性関節症関連の炎症遺伝子であるＩＬ−６およびＣＯＸ−２の発現が、アネキシンＡ５による処理で用量依存的に減少することを示す。実験は、変形性関節症患者からの初代培養軟骨細胞培養物に対して二段階ｑＰＣＲによって実施された。変形性関節症の関節の炎症は、ＩＬ１−βの適用を通して細胞において模倣され、それは、ＩＬ１−βが適用されていない対照試料（図５Ａおよび５Ｂ、列１）と比較するとき、ＩＬ−６発現（図５Ａ、列５）およびＣＯＸ２発現（図５Ｂ、列５）の増加をもたらした。全ての投与量でアネキシンＡ５タンパク質を単独で適用しても、ＩＬ６またはＣＯＸ２のいずれの発現も増加しなかった（図５Ａおよび５Ｂ、第１〜４列）。ＩＬ１−βに加えてアネキシンＡ５を適用すると、ＩＬ−６およびＣＯＸ−２の遺伝子発現が用量依存的に減少する（図５Ａおよび５Ｂ、列５〜８）。
【図５ｂ】変形性関節症関連の炎症遺伝子であるＩＬ−６およびＣＯＸ−２の発現が、アネキシンＡ５による処理で用量依存的に減少することを示す。実験は、変形性関節症患者からの初代培養軟骨細胞培養物に対して二段階ｑＰＣＲによって実施された。変形性関節症の関節の炎症は、ＩＬ１−βの適用を通して細胞において模倣され、それは、ＩＬ１−βが適用されていない対照試料（図５Ａおよび５Ｂ、列１）と比較するとき、ＩＬ−６発現（図５Ａ、列５）およびＣＯＸ２発現（図５Ｂ、列５）の増加をもたらした。全ての投与量でアネキシンＡ５タンパク質を単独で適用しても、ＩＬ６またはＣＯＸ２のいずれの発現も増加しなかった（図５Ａおよび５Ｂ、第１〜４列）。ＩＬ１−βに加えてアネキシンＡ５を適用すると、ＩＬ−６およびＣＯＸ−２の遺伝子発現が用量依存的に減少する（図５Ａおよび５Ｂ、列５〜８）。
【００４５】
定義
本明細書で使用されるとき、「アネキシンＡ５タンパク質」という用語は、以下の発明を実施するための形態のセクションＣにおいてさらに定義される。それは任意選択で、アネキシンＡ５タンパク質を含む組成物の意味をさらに含む。上記組成物は、例えば、薬学的に許容される、または獣医学的に許容される組成物であり得る。
【００４６】
「薬学的に許容される」組成物は、静脈内、皮下、または筋肉内注射などの注射による、ヒト対象などの対象への投与に安全である組成物であり得る。特定の実施形態では、薬学的に許容される組成物は、例えば関節腔への注射および／または関節の滑液への注射による、ヒト対象などの対象の関節への投与に安全である組成物であり得る。例えば、任意選択の一実施形態では、組成物はヒアルロン酸を含む。アネキシンＡ５タンパク質は、関節に安全に注射される量で関節に予防的または治療的有効量のアネキシンＡ５を送達するのに適した量および濃度で、関節腔および／または関節の滑液へと注射するために製剤化された薬学的に許容される組成物中に存在し得る。適切な体積は、当業者によって容易に決定され得、そして例示的な体積は、本出願のセクションＥにおいて後述され、例えば、関節の種類および対象の性質（種、性別、年齢、サイズ、体重など）に応じて、０．１〜４０ｍＬの範囲であり得る。
【００４７】
「獣医学的に許容される」組成物は、注射、例えば静脈内、皮下、または筋肉内注射による、動物対象への投与に安全である組成物であり得る。特定の実施形態では、獣医学的に許容される組成物は、例えば関節腔への注射および／または関節の滑液への注射による、ウマ対象などの動物対象の関節への投与に安全である組成物であり得る。例えば、任意選択の一実施形態では、組成物はヒアルロン酸を含む。アネキシンＡ５タンパク質は、関節に安全に注射される量で関節に予防的または治療的有効量のアネキシンＡ５を送達するのに適した量および濃度で、関節腔および／または関節の滑液へと注射するために製剤化された獣医学的に許容される組成物中に存在し得る。適切な体積は、当業者によって容易に決定され得、そして例示的な体積は、本出願のセクションＥにおいて後述され、例えば、関節の種類および対象の性質（種、性別、年齢、サイズ、体重など）に応じて、０．１〜４０ｍＬの範囲であり得る。
【００４８】
したがって、本発明による薬学的組成物または獣医学的組成物は、意図する投与経路および標準的な薬務に関して典型的に選択されるであろう、薬学的または獣医学的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体と混合したアネキシンＡ５タンパク質を含み得る。組成物は、即時放出、遅延放出、または制御放出の適用の形態であり得る。製剤は、有効成分の１日用量もしくは単位、１日サブ用量もしくはその適切な割合を含む単位用量であり得る。
【００４９】
「薬学的に許容される」、「薬理学的に許容される」、および「獣医学的に許容される」という語句は、例えばヒトなどの動物に適切に投与したときに、有害、アレルギー、または他の不都合な反応を引き起こさない組成物を指す。そのような薬学的組成物の調製は、参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０によって例示されるように、本開示に照らして当業者に公知である。さらに、動物（例えばヒト）投与の場合、製剤は無菌性、発熱性、一般的な安全性、および純度の基準、例えばＦＤＡ  Ｏｆｆｉｃｅ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓによって要求されるものを満たすべきであることが理解されよう。
【００５０】
本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容される担体」および「獣医学的に許容される担体」には、当業者に公知であるように、ありとあらゆる溶媒、分散媒体、コーティング、界面活性剤、酸化防止剤、保存剤（例えば、抗菌剤、抗真菌剤）、等張剤、塩、保存剤、薬物、薬物安定剤、賦形剤、崩壊剤、類似の物質など、およびそれらの組み合わせ）を含む。任意の従来の担体が活性成分と適合しない場合を除いて、治療用組成物または薬学的組成物におけるその使用が企図される。
【００５１】
アネキシンＡ５タンパク質、またはアネキシンＡ５タンパク質を含む薬学的に許容される、もしくは獣医学的に許容される組成物は、例えば、非経口的に、例えば、静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、脳室内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、もしくは皮下に投与されるか、または注入技術によって投与することができる。関節腔および／または関節の滑液への注射は、本発明の実施にとって特に重要であり得るが、これらの選択肢に限定されない。それらは、他の物質、例えば、溶液を血液と等張にするのに十分な塩またはグルコースを含み得る滅菌水溶液の形態で使用され得る。水溶液は、必要に応じて好適に（好ましくはｐＨ３〜９に）緩衝されるべきである。滅菌条件下の好適な非経口用製剤の調製は、当業者には周知の標準的な薬学的技術によって容易に達成される。
【００５２】
非経口投与に適した製剤には、典型には、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤および製剤を意図する受容者の血液と等張にする溶質を含み得る水性および非水性の滅菌注射溶液、ならびに懸濁剤および増粘剤を含み得る水性および非水性の滅菌懸濁液が含まれる。製剤は、単位用量または複数用量容器、例えば、密封されたアンプルおよびバイアル内に提示されてもよく、使用直前に滅菌液体担体、例えば注射用水の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存されてもよい。即時注射液および懸濁液は、以前に記載した種類の滅菌散剤、顆粒剤、および錠剤から調製され得る。
【００５３】
一実施形態では、薬学的に許容される、または獣医学的に許容される組成物は、それがエンドトキシンを含まない、または実質的に含まない場合、注射に対して安全であると定義することができる。エンドトキシンは、グラム陰性菌の細胞外壁の主要な構成要素であり、リポ多糖という用語と同義でよく使用される。それは多糖（糖）鎖と、エンドトキシンで観察される毒性作用の原因であるリピドＡとして知られている脂質部分からなる。多糖鎖は、異なる細菌間で高度に可変であり、エンドトキシンの血清型を決定し、そして脂質成分はまた、単一のエンドトキシン試料が数十から数百の異なる分子種を含み得るように高度に可変である。エンドトキシンは約１０ｋＤａの大きさであるが、最大１０００ｋＤａの大きな凝集体を形成することができる。エンドトキシンは典型的には治療用組成物中で有害かつ発熱性であり、規制当局は薬学的組成物中のエンドトキシンの許容レベルに厳密な制限を課している。したがって、本発明の第二の態様による組成物中のエンドトキシンのレベルを最小限にするべきであり、用量当たり１００未満のエンドトキシン単位（ＥＵ）であり得、例えば９０、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０、１０、５、４、３、２、１未満、またはそれ以下のＥＵ／用量であり得る。本発明の第２の態様による組成物中のエンドトキシンの濃度は、２００ＥＵ／ｍ３未満、例えば、１５０、１００、９０、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０、１０、５、４、３、２、１未満、またはそれ以下のＥＵ／ｍ３であり得る。リムルスアメーバ細胞アッセイ（ＬＡＬ）法などのエンドトキシンレベルを測定するための方法は、当該技術分野において周知である。
【００５４】
アネキシンＡ５タンパク質を含む組成物は、唯一の活性剤としてアネキシンＡ５タンパク質を任意選択で含んでもよい。例えば、アネキシンＡ５が、追加の治療効果を提供することができる１つ以上のさらなるタンパク質または非タンパク質薬剤と共に製剤化されているか、それとコンジュゲートされているか、またはそれと共に融合タンパク質として発現されている組成物を、任意選択で除外し得る。上記追加の治療効果は、変形性関節症と関連するか、または変形性関節症治療に関連しない治療効果と関連するもののいずれかであり得る。
【００５５】
その他の定義
「治療」という用語は、医学の当業者によって理解されるだろう。本明細書で使用されるとき、「治療」という用語は、対象、特にヒトまたは他の哺乳動物（例えばウマなど）における状態（例えば、状態が変形性関節症である）の任意の治療を含むことができ、任意選択で、
（ｉ）状態（例えば、変形性関節症）を抑制すること、すなわち、状態の進行の緩徐化、軽減、または阻止をすること、
（ｉｉ）状態（例えば、変形性関節症）を軽減すること、すなわち、その状態を有する対象においてその状態の後退を引き起こすこと、
（ｉｉｉ）状態（例えば、変形性関節症）を治癒すること、すなわち、その状態を有する対象を、その状態がもはや検出されない健康状態に戻すこと、の１つ以上を含む。
【００５６】
「予防」という用語は、医学の当業者によって理解されるだろう。本明細書で使用されるとき、「予防」という用語は、対象、特にヒトまたは他の哺乳動物（例えばウマなど）における状態（例えば、状態が変形性関節症である）の任意の予防的治療を含むことができ、任意選択で、
（ｉ）状態（例えば、変形性関節症）が対象（例えば、その状態に罹患する素因があるか、または発症する危険性があるが、それを有するとまだ診断されていない対象）で生じることを防ぐこと、すなわち対象がその状態を発症することを停止させること、
（ｉｉ）対象における状態（例えば、変形性関節症）の発症を遅らせること、すなわち対象の人生の後期まで対象が状態を発症するのを遅らせること、
（ｉｉｉ）対象における状態（例えば、変形性関節症）の発症を制限すること、例えば、対象がその状態によって影響を受ける程度を軽減すること、または
（ｉｖ）対象における状態（例えば、変形性関節症）の１つ以上の症状を予防すること、すなわち対象が状態の１つ以上の症状を発症するのを停止させること、の１つ以上を含む。
【００５７】
「任意選択で」、「好ましくは」、「など」、「例えば」などの用語は、後に続く特徴、特性、事象、または状況が生じても生じなくてもよいこと、およびその説明が上記特徴、特性、事象、または状況が発生する場合とそれが発生しない場合とを含むことを意味する。誤解を避けるために、本発明のいくつかの実施形態では、「任意選択で」、「好ましくは」、「など」、「例えば」などの文脈で説明される任意の特徴、特性、事象、または状況などが、特許請求の範囲の記載から除外されることがある。
【００５８】
本明細書で使用されるとき、「対象」という用語は、本発明の治療が適用されるあらゆる生きているヒトまたは動物（ヒトおよびウマが特に重要である）の意味を含む。限定されないが、例示的な対象は、以下の発明を実施するための形態のセクションＤにおいてさらに定義される。
【００５９】
本明細書で使用されるとき、「上昇した」という用語は、比較すると、物質（例えば、ＴＮＦ−α（アルファ）またはＩＬ１−β（ベータ）などのタンパク質）が、変形性関節症のない対象に存在する量と比較するとき、変形性関節症を有する対象においてより多く存在することを意味する。
【００６０】
本明細書で使用されるとき、「遠位」という用語は、アネキシンＡ５タンパク質の投与が、変形性関節症と診断された関節または各関節においてではないという意味を含む。
【００６１】
「治療有効量」という用語は、変形性関節症および／またはそれに関連する状態の治療または予防に関連する臨床結果を含む有益なまたは所望の結果をもたらすのに十分な薬物、化合物、タンパク質（例えば、本明細書で定義されるアネキシンＡ５タンパク質）、または薬学的組成物の量を指す。有効量は１回以上の投与で投与することができる。本発明の目的のために、有効量の薬物、化合物、タンパク質（例えば、本明細書で定義されるアネキシンＡ５タンパク質）、薬学的組成物、または獣医学的組成物は、変形性関節症および／またはそれに関連する状態の治療、改善、強度の軽減、および／または予防に十分な量である。臨床の文脈で理解されるように、有効量の薬物、化合物、タンパク質（例えば、本明細書で定義されるアネキシンＡ５タンパク質）、または薬学的組成物は、本出願の他の箇所に記載されているものなどの別の薬物、化合物、タンパク質、または医薬品と組み合わせて（別個に、逐次的に、または同時になど）投与されるときに達成され得るまたはされ得ない。したがって、「有効量」は、１つ以上の治療薬を投与することの文脈において考慮され得、そして単一の薬剤は、１つ以上の他の薬剤と組み合わせて望ましい結果がもたらされ得るか、または達成される場合、有効量で与えられると考えられ得る。
【発明を実施するための形態】
【００６２】
本発明は、アネキシンＡ５タンパク質が、変形性関節症およびそれに関連する１つ以上の状態の予防および治療に使用できるという本出願人の驚くべき具現化に基づいている。
【００６３】
Ａ．変形性関節症
本発明は、変形性関節症およびそれに関連する１つ以上の状態の予防および治療に関する。
【００６４】
変形性関節症は、主に関節の退行性疾患であり、軟骨の喪失および他の関節組織への形態学的損傷による疼痛を引き起こす可能性がある。
【００６５】
したがって、一実施形態において、変形性関節症は、以下のうちの１つ以上によって特徴付けられ得る：関節における軟骨の喪失、関節の軟骨におけるコラーゲン線維の分解、関節の軟骨におけるコラーゲン線維の崩壊、関節の軟骨におけるプロテオグリカン含有量の減少、関節の含水量の増加、関節の滑膜の損傷、関節の滑膜の喪失、関節の滑膜の肥厚、関節の靭帯の損傷、関節の靭帯の肥厚、関節の半月板の損傷、関節の半月板の喪失、関節内の無機質化の増加、関節内の石灰化の増加、軟骨細胞（好ましくは関節軟骨細胞）の死、細胞死、関節の骨成長（または骨棘）、関節腔狭小化、軟骨下硬化症（関節周囲の骨形成の増加）、軟骨下嚢胞形成、関節の腫脹、および関節の炎症。
【００６６】
実施例のデータは、アネキシンＡ５タンパク質が、一般に変形性関節症の予防および治療に使用できることを実証しているが、それらのデータはアネキシンＡ５タンパク質が関節の炎症を特徴とする変形性関節症の治療および予防に特に有効であることを実証する。実施例において使用される変形性関節症表現型疾患モデルは、炎症誘発性サイトカインＩＬ１−βおよびＴＮＦ−αの添加によって促進される。
【００６７】
好ましくは、本発明は、関節の炎症を特徴とする変形性関節症の一形態の予防および治療に関する。
【００６８】
好ましくは、関節の炎症は、関節内の組織の炎症、関節の軟骨の炎症、および関節の滑膜の炎症から選択される１つ以上である。
【００６９】
好ましくは、軟骨は関節軟骨である。
【００７０】
好ましい一実施形態では、本発明は、軟骨細胞（好ましくは関節軟骨細胞）の細胞死などの細胞死を特徴とする変形性関節症の一形態の予防および治療に関する。
【００７１】
さらなる好ましい実施形態では、本発明は、軟骨細胞（好ましくは関節軟骨細胞）の細胞死などの関節の炎症および細胞死を特徴とする変形性関節症の一形態の予防および治療に関する。
【００７２】
変形性関節症は、２つの一般的なカテゴリー：原発性変形性関節症と続発性変形性関節症に分類することができる。これら２つのカテゴリーの主な違いは、変形性関節症の根本的な原因である。しかしながら、結果として生じる原発性変形性関節症と続発性変形性関節症の両方の病態は類似している可能性がある。前述のように、一実施形態では、本発明は、場合によっては原発性変形性関節症または続発性変形性関節症である変形性関節症の予防および治療を対象とし得る。好ましくは、変形性関節症は原発性関節炎である。
【００７３】
原発性変形性関節症（しばしば特発性変形性関節症とも呼ばれる）は、根本的な原因が明確に特定されていない変形性関節症であると一般に考えられている。それはしばしば付随する炎症を伴う、加齢および関節の「消耗」に起因して起こると考えられている。原発性変形性関節症の２つのサブセットは、全身性結節性変形性関節症またはびらん性変形性関節症である。前述のように、一実施形態では、本発明は、全身性結節性変形性関節症またはびらん性変形性関節症から任意選択で選択される原発性変形性関節症の予防および治療に関するものであり得る。
【００７４】
全身性結節性変形性関節症は、変形性関節症の最も一般的な形態である。一部の患者では、一部の対象が遺伝的にそのような変形性関節症を発症する素因があることを示す家族研究のため、全身性結節性変形性関節症が遺伝的要素を有すると考えられている。
【００７５】
びらん性変形性関節症は炎症性変形性関節症としても知られており、一般に、より攻撃的な形態の変形性関節症であると考えられている。
【００７６】
前述のように、実施例は、アネキシンＡ５タンパク質が、びらん性変形性関節症などの関節の炎症を特徴とする変形性関節症の治療および予防に有効であることを実証している。
【００７７】
好ましくは、本発明は、原発性びらん性変形性関節症の予防および治療に関する。
【００７８】
続発性変形性関節症は、特定の疾患または特定の傷害などの根本的な原因に、より直接的に起因し得る変形性関節症である。そのようなものとして、続発性変形性関節症は、原発性変形性関節症と比較するとき、より若い年齢の対象に罹患することが多い。
【００７９】
一実施形態では、本発明は、以下のうちの１つ以上によって引き起こされ得る続発性変形性関節症の予防および治療に関する：原因となる疾患、負傷、およびライフスタイル。
【００８０】
好ましくは、原因となる疾患は、糖尿病、エーラース・ダンロス症候群、ヘモクロマトーシス、原因となる炎症性疾患、マルファン症候群、および関節感染症からなる一覧から選択される１つ以上である。
【００８１】
最も好ましくは、原因となる疾患は炎症性疾患である。
【００８２】
好ましくは、原因となる炎症性疾患は、ペルテス病、ライム病、および変形性関節症ではない慢性関節炎（肋軟骨炎、痛風、関節リウマチ、または乾癬性関節炎など）からなる一覧から選択される１つ以上である。
【００８３】
好ましくは、損傷は、骨折、靭帯損傷、および先天性関節障害からなる一覧から選択される１つ以上である。
【００８４】
好ましくは、ライフスタイルは、体重超過、肥満、関節（単数または複数の関節）に大きな負担がかかる職業（アスリートなど）を持つことからなる一覧から選択される１つ以上である。
【００８５】
非ヒトの対象（ウマなど）では、変形性関節症は、しばしば跛行として現れる。いくつかの実施形態では、本発明は、跛行を特徴とする変形性関節症の予防および治療に関する。
【００８６】
より好ましくは、変形性関節症は急性症候性変形性関節症である。
【００８７】
急性症候性変形性関節症により、急性変形性関節症と症候性変形性関節症を含む。
【００８８】
実施例に記載のように、アネキシンＡ５は細胞死を減少させ、炎症を減少させることが示されている。したがって、本発明によれば、アネキシンＡ５タンパク質は、症状がこれら２つの事象によって引き起こされる変形性関節症、例えば急性症候性変形性関節症の治療に使用することができる。
【００８９】
例えば、本発明は、関節の炎症を特徴とする急性症候性変形性関節症の一形態の予防および治療に関し得る。
【００９０】
本発明は、軟骨細胞（好ましくは関節軟骨細胞）の細胞死などの細胞死を特徴とする急性症候性変形性関節症の一形態の予防および治療に関し得る。
【００９１】
本発明は、軟骨細胞（好ましくは関節軟骨細胞）の細胞死などの関節の炎症および細胞死を特徴とする急性症候性変形性関節症の一形態の予防および治療に関し得る。
【００９２】
本発明は、びらん性急性症候性変形性関節症の予防および治療に関し得る。
【００９３】
任意選択で、変形性関節症は外傷性変形性関節症である。
【００９４】
変形性関節症の上記のカテゴリーおよびサブカテゴリーの各々は、そのような変形性関節症の原因となるであろうものと同様に、ヒトの医学または獣医学の当業者に公知であろう。
【００９５】
変形性関節症は、臨床検査（硬組織の拡大および関節の腫脹など）および対象の病歴に基づいて診断することができる。典型的には、臨床検査は、罹患した関節の形態に基づく診断を確認するためにＸ線を使用することができる。
【００９６】
変形性関節症の診断方法は、医学の当業者に公知である。
【００９７】
診断の際、変形性関節症は、ＷＯＭＡＣ（Ｗｅｓｔｅｒｎ  Ｏｎｔａｒｉｏ  ａｎｄ  ＭｃＭａｓｔｅｒ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｉｎｄｅｘ）（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｗｏｍａｃ．ｏｒｇ／ｗｏｍａｃ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍ）スケールおよび放射線写真分類システムなどの国際的に認められているシステムを用いて等級付けすることができる。
【００９８】
一実施形態では、本発明は、ＷＯＭＡＣスケールおよび／または放射線写真分類システムを使用して特徴付けられる変形性関節症の予防および治療に関する。
【００９９】
ＷＯＭＡＣスケールは、多数の異なる種類の関節における変形性関節症を等級付けするために使用されるが、最も具体的には、膝関節および股関節における変形性関節症を等級付けするために使用される。スケールは、疼痛（５つの側面、それぞれ０〜２０の範囲で採点）、こわばり（２つの側面、それぞれ０〜８の範囲で採点）、および機能上の制限（階段使用、立ち、曲げのような日々の活動など−１７の側面、それぞれ０〜６８の範囲で採点）を考慮する。
【０１００】
放射線写真分類システムは関節を見るためにＸ線を使用し、分類の多数のサブカテゴリー−トンプソンの等級付け（特に椎間板変性または椎間関節変性について）、レーンの等級付け（特に椎間板変性または椎間関節変性について）、ケルグレンの等級付け（特に頸部椎間板変性、椎間関節変性、または頸椎椎間関節変性について）、パトリアの等級付け（特に腰椎椎間関節変性について）、Ｗｅｉｓｈａｕｐｔの等級付け（特に、腰椎椎間関節変性について）、Ｓａｍｉｌｓｏｎ−Ｐｒｉｅｔｏ分類（特に、肩関節について）、Ｋｅｌｌｇｒｅｎ−Ｌａｗｒｅｎｃｅの等級付け（特に、膝関節の変形性関節症）、およびＴｏｎｎｉｓ分類（特に、股関節変性について）が存在する。
【０１０１】
好ましくは、放射線写真分類システムは、トンプソンの等級付け、レーンの等級付けケルグレンの等級付け、パトリアの等級付け、Ｗｅｉｓｈａｕｐｔの等級付け、Ｓａｍｉｌｓｏｎ−Ｐｒｉｅｔｏ分類、Ｋｅｌｌｇｒｅｎ−Ｌａｗｒｅｎｃｅの等級付け、およびＴｏｎｎｉｓ分類からなる一覧から選択される１つ以上である。
【０１０２】
トンプソンの等級付けは、Ｉ〜Ｖ（Ｉはより広範囲ではない変形性関節症であり、Ｖはより広範囲の変形性関節症である）に付番され、組織の構造、軟骨、および骨棘の存在を考慮に入れる。任意選択で、本発明は、トンプソンの等級付けによる放射線写真分類システムの要件を満たす変形性関節症の予防および治療を対象とし、対象はＩ以上、例えばＩＩ、またはＩＩ以上、またはＩＩＩ、またはＩＩＩ以上、またはＩＶ、またはＩＶもしくはＶ、またはＶの等級付けを示す。
【０１０３】
レーンの等級付けは０〜３（０はより広範囲ではない変形性関節症であり、３はより広範囲の変形性関節症である）に付番され、関節腔狭小化、骨棘の存在、および硬化症の存在を考慮に入れる。任意選択で、本発明は、レーンの等級付けによる放射線写真分類システムの要件を満たす変形性関節症の予防および治療を対象とし、対象は０以上、例えば１、または１以上、または２、または２もしくは３、または３の等級付けを示す。
【０１０４】
ケルグレンの等級付けは、Ｉ〜ＩＶ（Ｉはより広範囲ではない変形性関節症であり、ＩＶはより広範囲の変形性関節症である）に付番され、関節腔狭小化、骨棘の存在、および硬化症の存在を考慮に入れる。任意選択で、本発明は、ケルグレンの等級付けによる放射線写真分類システムの要件を満たす変形性関節症の予防および治療を対象とし、対象はＩ以上、例えばＩＩ、またはＩＩ以上、またはＩＩＩ、またはＩＩＩもしくはＩＶ、またはＩＶの等級付けを示す。
【０１０５】
Ｓａｍｉｌｓｏｎ−Ｐｒｉｅｔｏ分類は「軽度」、「中等度」、および「重度」の等級付けで分類され、関節のサイズ、関節腔の狭小化、および硬化症の存在を考慮に入れる。任意選択で、本発明は、Ｓａｍｉｌｓｏｎ−Ｐｒｉｅｔｏ放射線写真分類システムの要件を満たす変形性関節症の予防および治療を対象とし、対象は軽度または中等度または重度の等級付けを示す。
【０１０６】
Ｋｅｌｌｇｒｅｎ−Ｌａｗｒｅｎｃｅの等級付けは０〜４（０はより広範囲ではない変形性関節症であり、４はより広範囲の変形性関節症である）に付番され、関節腔狭小化、骨棘の存在、および硬化症の存在を考慮に入れる。任意選択で、本発明は、Ｋｅｌｌｇｒｅｎ−Ｌａｗｒｅｎｃｅの等級付けによる放射線写真分類システムの要件を満たす変形性関節症の予防および治療を対象とし、対象は０以上、例えば１、または１以上、または２、または２以上、または３、または３もしくは４、または４の等級付けを示す。
【０１０７】
Ｔｏｎｎｉｓ分類は０〜３（０は変形性関節症がないものであり、１はより広範囲ではない変形性関節症であり、３はより広範囲の変形性関節症である）に付番され、関節腔狭小化、骨嚢胞の存在、および関節の形状を考慮に入れる。任意選択で、本発明は、レントゲン写真分類システムがＴｏｎｎｉｓ分類であるという要件を満たす変形性関節症の予防および治療を対象とし、対象は０以上、例えば１、または１以上、または２、または２もしくは３、または３の等級付けを示す。
【０１０８】
前述の分類および等級付けシステムが使用され解釈されるべきである方法は、医学の当業者に公知であろう。
【０１０９】
一実施形態では、変形性関節症は、関節内の上昇したＴＮＦ−α（アルファ）、または関節内の上昇したＩＬ１−β（ベータ）、または関節内の上昇したＴＮＦ−αおよび上昇したＩＬ１−βによって特徴付けられ得る。
【０１１０】
ＴＮＦ−αは、ＴＮＦ、カヘキシン（ｃａｃｈｅｘｉｎ）、およびカケクチンとしても知られる腫瘍壊死因子アルファである。ＴＮＦ−αは、炎症としばしば関連するサイトカインである。ＴＮＦ−αは、変形性関節症、特にヒトにおける変形性関節症を引き起こす可能性がある炎症性因子（Ｃｈａｒｌｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ，１７，２１４６）であり得ると考えられている。
【０１１１】
ＩＬ１−βはインターロイキン−１ファミリーβであり、それはＩＬ１受容体に結合する炎症誘発性サイトカインである。ＩＬ１−βは、変形性関節症、特にウマにおける変形性関節症を惹起し得る炎症性因子（Ｒｏｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｃａｒｔｉｌａｇｅ，２０：１５８３−１５９０）であり得ると考えられている。
【０１１２】
一実施形態では、本発明は、ＴＮＦ−α（アルファ）の上昇を特徴とする変形性関節症の予防および治療に関する。
【０１１３】
別の実施形態では、本発明は、ＩＬ１−β（ベータ）の上昇を特徴とする変形性関節症の予防および治療に関する。
【０１１４】
別の実施形態では、本発明は、ＴＮＦ−αの上昇およびＩＬ１−βの上昇を特徴とする変形性関節症の予防および治療に関する。
【０１１５】
好ましくは、変形性関節症は外傷性変形性関節症であり、外傷性変形性関節症はＩＬ１−βの上昇を特徴とする。
【０１１６】
一実施形態において、本発明は、以下のうちの１つ以上を特徴とし得る変形性関節症の予防および治療を対象とし得る：関節内の細胞からのＩＣＡＭ１発現の上昇、関節内の細胞からのＲＡＮＫＬ発現の上昇、関節内の細胞からのＩＬ６発現の上昇、関節内の細胞からのＣＯＸ２発現の上昇。
【０１１７】
ＩＣＡＭ１は細胞間接着分子１であり、表面抗原分類５４（ＣＤ５４）としても知られている。ＩＣＡＭ１は、疾患のマーカーとして、しばしば変形性関節症と関連している細胞表面糖タンパク質である。
【０１１８】
ＲＡＮＫＬは、核因子カッパーＢリガンドの受容体活性化因子であり、腫瘍壊死因子リガンドスーパーファミリーメンバー１１（ＴＮＦＳＦ１１）、ＴＮＦ関連活性化誘導サイトカイン（ＴＲＡＮＣＥ）、オステオプロテゲリンリガンド（ＯＰＧＬ）、および破骨細胞分化因子（ＯＤＦ）としても知られる。ＲＡＮＫＬは膜タンパク質であり、ＴＮＦスーパーファミリーのメンバーである。ＲＡＮＫＬは疾患のマーカーとして、しばしば変形性関節症と関連している（Ｋｏｍｏｒｉ  ２０１６，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．，１７）。
【０１１９】
ＩＬ６はインターロイキン６であり、それはしばしば変形性関節症と関連する炎症誘発性サイトカインである（Ｍａｂｅｙ  ａｎｄ  Ｈｏｎｓａｗｅｋ，２０１５，Ｗｏｒｌｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ，６（１）：９５−１０５）。
【０１２０】
ＣＯＸ２はシトクロムＣオキシダーゼサブユニット２であり、略語：ＣＯＸＩＩ、ＣＯＩＩ、およびＭＴ−ＣＯ２によっても知られている。ＣＯＸ２はチトクロームＣオキシダーゼ酵素の成分であり、関節炎のバイオマーカーとして変形性関節症と関連している。
【０１２１】
発現により、我々は、遺伝子に対応するＲＮＡ（リボ核酸）および／またはタンパク質の存在を含む。ＲＮＡ発現およびタンパク質発現をいかにして検出するかは分子生物学の当業者に公知であろう。
【０１２２】
一実施形態では、本発明は、関節内の細胞からのＩＣＡＭ１発現の上昇を特徴とする変形性関節症の予防および治療に関する。
【０１２３】
別の実施形態では、本発明は、関節内の細胞からのＲＡＮＫＬ発現の上昇を特徴とする変形性関節症の予防および治療に関する。
【０１２４】
別の実施形態では、本発明は、関節内の細胞からのＩＬ６発現の上昇を特徴とする変形性関節症の予防および治療に関する。
【０１２５】
別の実施形態では、本発明は、関節内の細胞からのＣＯＸ２発現の上昇を特徴とする変形性関節症の予防および治療に関する。
【０１２６】
好ましくは、ＩＣＡＭ１発現は細胞表面上のＩＣＡＭ１タンパク質の発現である。
【０１２７】
好ましくは、ＲＡＮＫＬ発現は細胞表面上のＲＡＮＫＬタンパク質の発現である。
【０１２８】
好ましくは、１つ以上の細胞は、軟骨細胞（最も好ましくは関節軟骨細胞）、軟骨芽細胞、および骨芽細胞からなる一覧から選択される１つ以上の細胞型である。
【０１２９】
分子生物学の当業者であれば、前述のタンパク質および発現をどのようにして測定できるかを理解するであろう。
【０１３０】
一実施形態では、本発明は、以下のうちの１つ以上を特徴とし得る変形性関節症の予防および治療に関するものであり得る：関節の軟骨の損傷の減少、関節の軟骨の損傷の抑制、関節の軟骨の損失の減少、関節の軟骨におけるコラーゲン線維の分解の減少、関節の軟骨におけるコラーゲン線維の崩壊の減少、関節の軟骨におけるプロテオグリカン含有量の増加、関節の含水量の減少、関節の滑膜の損傷の減少、関節の滑膜の喪失の減少、関節の軟骨の損傷の抑制、関節の軟骨の損傷の減少、関節の滑膜のサイズの減少、関節の靭帯の損傷の減少、関節の軟骨の損傷の抑制、関節内の靭帯のサイズの減少、関節の半月板の損傷の減少、関節の軟骨の損傷の抑制、関節の半月板の喪失の減少、関節内の無機質化の減少、関節内の無機質化の抑制、関節内の石灰化の減少、関節内の石灰化の抑制、軟骨細胞（好ましくは関節軟骨細胞）死の抑制、軟骨細胞（好ましくは関節軟骨細胞）細胞死の減少。細胞死の抑制関節の骨成長（または骨棘）の減少、細胞死の抑制、関節の骨成長（または骨棘）の減少、骨成長の抑制、関節腔の増大、軟骨下硬化症（関節周囲の骨形成の増加）の減少、軟骨下硬化症の抑制、軟骨下嚢胞形成の減少、軟骨下嚢胞形成の抑制、関節の腫脹の減少、関節の炎症の抑制、および関節の炎症の減少。
【０１３１】
好ましくは、変形性関節症の予防および治療は、軟骨細胞（好ましくは関節軟骨細胞）細胞死の抑制を特徴とし得る。
【０１３２】
好ましくは、変形性関節症の予防および治療は、軟骨細胞（好ましくは関節軟骨細胞）細胞死の減少を特徴とし得る。
【０１３３】
好ましくは、変形性関節症の予防および治療は、関節の炎症の抑制を特徴とし得る。
【０１３４】
好ましくは、変形性関節症の予防および治療は、関節の炎症の減少を特徴とし得る。
【０１３５】
Ｂ．関節
本発明は、対象の１つ以上の関節における変形性関節症の予防および治療に関する。医学の当業者に知られているように、関節は身体の骨の間の接続である。
【０１３６】
変形性関節症の予防および治療のために本発明を使用することができる関節は、例えば機能的分類、構造的分類、生物医学的分類、または解剖学的分類などのいくつかの方法で分類することができる。これらの分類は医学の当業者に公知であろう。
【０１３７】
関節の機能分類は、関節が許容する運動の種類および程度に関連し、３つの異なるカテゴリー：不動結合（可動性をほとんどまたは全く許容しない関節である−一般的には線維性連結）、半関節（わずかな動きを許容する関節である−一般的には軟骨性連結）、および滑膜性連結−可動関節としても知られる（自由に動く）に分類される。
【０１３８】
前述のように、一実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節または各関節は、滑膜性連結、半関節連結、および不動結合連結からなる一覧から選択することができる。
【０１３９】
本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる滑膜性連結の分類は、さらに以下の６つの群に分類することができる：平面関節（全動関節、滑走関節、または平面関節としても知られ、滑走運動を可能にする）、球関節（球関節とも呼ばれ、多数の軸の周りの移動を可能にする）、蝶番関節（蝶番関節としても知られ、１つの平面内のみでの移動を可能にする）、車軸関節（車軸関節、回転関節、または外側蝶番関節としても知られ、１つの平面内のみでの移動を可能にする）、顆状関節（顆状関節、楕円関節、または双顆関節としても知られ、２つの平面での移動を可能にする）、および鞍関節（鞍関節または相互関節による接合としても知られ、２つの平面での移動を可能にする）。滑膜性連結のこれら６つの群の全ては医学の当業者に公知であろう。
【０１４０】
好ましくは、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる滑膜性連結は、平面関節、球関節、蝶番関節、車軸関節、顆状関節、および鞍関節からなる一覧から選択される１つ以上の滑膜性連結である。
【０１４１】
好ましくは、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる平面関節は、例えば、肋椎関節、椎間関節、手根中央関節、手根中手指関節、中手間関節、仙腸関節、関節突起間関節、胸肋関節、距骨下関節（または距踵関節）、および肩鎖関節からなる一覧から選択される１つ以上の平面関節である。
【０１４２】
好ましくは、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる球関節は、脛骨足根骨関節、脛腓関節、肩関節（肩甲上腕関節としても知られる）、肩関節、距踵舟関節、および股関節（寛骨大腿関節としても知られる）からなる一覧から選択される１つ以上の球関節である。
【０１４３】
好ましくは、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる蝶番関節は、足関節、肘関節（腕橈関節としても知られる）、顎関節、指節間関節、後膝関節、または膝関節からなる一覧から選択される１つ以上の蝶番関節である。
【０１４４】
好ましくは、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる滑膜性連結は、環軸関節、環軸関節、近位橈骨関節、飛節、足根間関節、距踵舟関節、踵立方関節、および遠位橈尺関節からなる一覧から選択される１つ以上の滑膜性連結である。
【０１４５】
好ましくは、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる顆状関節は、環椎後頭関節、橈骨手根関節、中足指節関節、手首関節、手根間関節、橈骨手根関節、および中手指節関節（球節としても知られる）からなる一覧から選択される１つ以上の顆状関節である。
【０１４６】
好ましくは、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる鞍関節は、母指手根中手関節、踵立方関節、および胸鎖関節からなる一覧から選択される１つ以上の鞍関節である。
【０１４７】
より好ましくは、一実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に用いることができる関節は中手指節関節である。
【０１４８】
より好ましくは、別の実施形態では、本発明が変形性関節症の予防および治療に使用できる関節は手根関節である。
【０１４９】
より好ましくは、別の実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節は脛骨足根骨関節である。
【０１５０】
より好ましくは、別の実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節は、手根間関節である。
【０１５１】
より好ましくは、別の実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節は、橈骨手根関節である。
【０１５２】
より好ましくは、別の実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用できる関節は肩関節である。
【０１５３】
より好ましくは、別の実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用できる関節は膝関節である。
【０１５４】
より好ましくは、別の実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節は肘関節である。
【０１５５】
好ましくは、別の実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる両腕関節症の関節は、線維軟骨結合（例えば、椎間板間の関節、すなわち椎間関節）である。
【０１５６】
好ましくは、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる線維性連結は、縫合線、遠位脛腓関節、釘状関節、直線縫合、辺縁縫合、挟合、鋸歯状縫合、および鋸状縫合からなる一覧から選択される１つ以上の線維性連結である。
【０１５７】
医学の当業者に知られているように、関節の機能的分類に関して論じられた前述の関節はまた、構造的分類、生物医学的分類、または解剖学的分類に基づいて分類することができる。
【０１５８】
関節の構造的分類は、関節の骨をつなぐ結合組織の種類に関連し、３つの異なるカテゴリー：線維性連結（これは、大量のコラーゲン繊維を有する結合組織によって接合されている）、軟骨性連結（軟骨によって接合されている）、および滑膜性連結（滑膜腔を有し、結合組織および靭帯によって接合されている）に分類される。
【０１５９】
一実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節は、線維性連結、軟骨性連結、および滑膜性連結からなる一覧から選択される１つ以上である。
【０１６０】
関節の生物医学的分類は、関節の解剖学的構造および関節の生体力学的特性に関連しており、３つの異なるカテゴリー：単関節（２つの関節面を有する、例えば肩関節や股関節）、複雑関節（３つ以上の関節面有する−例えば、橈骨手根関節）、および複関節（２つ以上の関節面と１つの関節円板または半月板を有する、例えば膝関節）に分類される。
【０１６１】
一実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節は、単関節、複雑関節、および複関節からなる一覧から選択される１つ以上である。
【０１６２】
関節の解剖学的分類は、手の関節、肘関節、手首関節、腋窩関節、胸鎖関節、脊椎関節、顎関節、仙腸関節、股関節、膝関節、および、足の関節である１１の異なるカテゴリーに分類される。
【０１６３】
一実施形態では、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節は、手の関節、肘関節、手首関節、腋窩関節、胸鎖関節、脊椎関節、顎関節、仙腸関節、股関節、膝関節、および、足の関節からなる一覧から選択される１つ以上である。
【０１６４】
関節の構造、分類、および命名が、ヒト対象と非ヒト対象（ウマおよびセクションＤで説明される他の非ヒト対象など）とで異なることは、獣医学またはヒトの医学の当業者には公知であろう。したがって、ヒトの関節の非ヒト等価物が含まれる。たとえば、ヒトの手首関節は一部の非ヒト（ウマなど）の膝関節と同等であり、ヒトの膝関節は一部の非ヒト（ウマなど）の後膝関節と同等であり、ヒトの足根間関節は、一部の非ヒト（ウマなど）の飛節と同等である。
【０１６５】
ウマでは、手首関節は橈骨手根骨関節、手根中央関節、および手根中手関節から形成される。任意選択で、対象が非ヒト対象（例えばウマ）であるとき、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節は、橈骨手根骨関節、手根中央関節、および手根中手関節からなる一覧から選択される１つ以上である。
【０１６６】
馬では、後膝関節は大腿膝蓋関節、内側大腿脛骨関節、および外側大腿脛骨関節から形成される。任意選択で、対象が非ヒト対象（例えばウマ）である場合、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節は、内側大腿脛骨関節、および外側大腿脛骨関節からなる一覧から選択される１つ以上である。
【０１６７】
ウマでは、飛節は、仙椎間関節、近位足根間関節、遠位足根間関節、足根中足関節、および距踵関節から形成される。場合により、対象が非ヒト対象（例えばウマ）である場合、本発明を変形性関節症の予防および治療に使用することができる関節は、仙椎間関節、近位足根間関節、遠位足根間関節、足根中足関節、および距踵関節からなる一覧から選択される１つ以上である。
【０１６８】
一実施形態では、変形性関節症は、１つ以上の関節、例えば２つ以上の関節、または３つ以上の関節、または４つ以上の関節、または５つ以上の関節、または６つ以上の関節、または７つ以上の関節、または８つ以上の関節、または９以上の関節、または１０以上の関節、または１１以上の関節、または１２以上の関節、または１３以上の関節、または１４以上の関節、または１５以上の関節、または１６以上の関節、または１７以上の関節、または１８以上の関節、または１９以上の関節、または２０以上の関節、または２１以上の関節、または２２以上の関節、または２３以上の関節、または２４以上の関節、または２５以上の関節、または２６以上の関節、または２７以上の関節、または２８以上の関節、または２９以上の関節、または３０以上の関節、または３１以上の関節、または３２以上の関節、または３３以上の関節、または３４以上の関節、または３５以上の関節、または３６以上の関節、または３７以上の関節、または３８以上の関節、または３９以上の関節、または４０以上の関節に存在し得る。
【０１６９】
Ｃ．アネキシンＡ５
本発明の全ての態様において使用するためのアネキシンＡ５タンパク質は、ヒトアネキシンＡ５の配列などのアネキシンＡ５の配列からなるタンパク質を含み得る、本質的にそれからなる、またはそれからなり得る。好ましくは、ヒトアネキシンＡ５タンパク質は、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まない、以下に示されるような、配列番号１の配列からなるタンパク質である。好ましくは、アネキシンＡ５タンパク質は、組換えヒトアネキシンＡ５タンパク質、例えば、組換え大腸菌宿主などの組換え宿主細胞生物において配列番号１の配列を有するタンパク質をコードする遺伝子を組換え発現することによって作製されたタンパク質である。
【０１７０】
ヒトアネキシンＡ５遺伝子によってコードされるタンパク質の配列は、以下のような配列番号１によって定義される。
2020506206.tif 000003
2020506206.tif 000004
【０１７１】
別の実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、ヒトアネキシンＡ５（任意選択で、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まない、配列番号１の配列からなるタンパク質）の配列などのアネキシンＡ５の配列からなるタンパク質のバリアントまたは変異体を含み得る、本質的にそれからなる、またはそれからなり得る。例えば、バリアントまたは変異体の配列は、１以上の位置で、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、またはそれ以上の位置で、またはそれらまでの位置で、配列番号１（Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まないもののいずれか）の配列と異なり得る。
【０１７２】
別の実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、ヒトアネキシンＡ５（任意選択で、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まない、配列番号１の配列からなるタンパク質）、またはそのバリアントもしくは変異体などの成熟アネキシンＡ５の生物学的に活性な断片を含み得る、本質的にそれからなる、またはそれからなり得る。
【０１７３】
アネキシンＡ５の生物学的に活性な断片は、全長アネキシンＡ５と機能的または結合的性質を共有する。アネキシンＡ５のエピトープ断片は、全長アネキシンＡ５に結合するモノクローナル抗体に結合する。アネキシンＡ５の「活性」は、そのタンパク質によって行われる任意の結合機能を意味し、そのさらなる例は以下にさらに定義される。
【０１７４】
本発明で使用することができるアネキシンＡ５タンパク質の生物学的に活性な断片は、非限定的にヒトアネキシンＡ５タンパク質（任意選択で、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まない、配列番号１の配列からなるタンパク質）またはその修飾物を含む、アネキシンＡ５タンパク質の少なくとも約５０の連続アミノ酸、通常少なくとも約１００の連続アミノ酸、少なくとも約１５０の連続アミノ酸、少なくとも約２００の連続アミノ酸、少なくとも約２５０の連続アミノ酸、少なくとも約２６０の連続アミノ酸、少なくとも約２７０の連続アミノ酸、少なくとも約２８０の連続アミノ酸、少なくとも約２９０の連続アミノ酸、少なくとも約３００の連続アミノ酸、少なくとも約３１０の連続アミノ酸、および少なくとも約３２０までの連続アミノ酸を含み得、提供された配列に加えて、当該技術分野で公知の融合ポリペプチドをさらに含み得る。アネキシンＡ５配列は、任意の哺乳動物種または鳥類種、例えば霊長類種、特にヒト、マウス、ラット、ハムスターなどのげっ歯類、ウサギ、ウマ科、ウシ科、イヌ科、ネコ科など由来であり得る。特に重要であるのは、ヒトアネキシンＡ５タンパク質（任意選択で、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まない、配列番号１の配列からなるタンパク質）である。
【０１７５】
典型的には、アネキシンＡ５タンパク質は、単量体アネキシンＡ５であるが、代替的に、二量体、融合タンパク質、ＰＥＧ化バージョン、および他の修飾物を含み得る。別の実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は二量体、融合タンパク質、またはＰＥＧ化バージョンではなく、あるいは、組成物および／または製剤は、二量体、融合タンパク質、またはＰＥＧ化バージョンであるアネキシンＡ５タンパク質を含まない。二量体であるアネキシンＡ５タンパク質によって、我々は、共有結合を介して結合している２つの単量体アネキシンＡ５タンパク質の二量体を特に含む。
【０１７６】
アネキシンＡ５タンパク質は、以下のうちの１つ以上を含み得る：
ａ）ヒトアネキシンＡ５（任意選択で、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まない、配列番号１の配列からなるタンパク質）の配列を含む、本質的にそれからなる、またはそれからなるタンパク質、
ｂ）ヒトアネキシンＡ５の哺乳動物相同分子種、
ｃ）ａ）またはｂ）の対立遺伝子または遺伝的バリアント、
ｄ）Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まないヒトアネキシンＡ５、配列番号１と、５０％、６０％、７０％、７５％超、例えば８０％、８５％、９０％超、またはさらにより好ましくは９５％もしくは９９％超同一であるタンパク質である、アネキシンの機能的類似体またはバリアント、
ｅ）ａ）、ｂ）、ｃ）、またはｄ）のいずれかの生物学的に活性な断片、
ｆ）ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、またはｅ）のいずれかからなる単量体、それらを含むかもしくはそれらからなる二量体、またはそれらを含む融合タンパク質、ならびに
ｇ）ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、ｅ）、またはｆ）のいずれかのＰＥＧ化バリアント。
【０１７７】
さらなる実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、上述のようなアネキシンＡ５タンパク質（例えば、ヒトアネキシンＡ５（Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まないもののいずれかの配列番号１など）、またはバリアント、類似体、変異体、もしくはそれらの生物学的に活性な断片、または上述のような二量体）の配列を有するタンパク質（ａ）に融合している融合パートナーの配列を含む１つ以上のタンパク質配列、（ｂ）それを含む、それから本質的になる、またはそれからなる、１つ以上のタンパク質配列、を含む、本質的にそれからなる、またはそれからなる、融合タンパク質であってもよく、そうでなくてもよく、またはそうである。例えば、非限定的に、融合タンパク質は：
−２つのアミノ酸配列の融合の場合、例えば：Ｈ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、または
−３つのアミノ酸配列の融合の場合、例えば：Ｈ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、または
−４つのアミノ酸配列の融合の場合、例えば：Ｈ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、または
−５つのアミノ酸配列の融合の場合、例えば：またはＨ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−（ｂ）−ＣＯＯＨ、もしくはＨ２Ｎ−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−（ｂ）−（ａ）−ＣＯＯＨ、
から選択される一般構造を有し得、式中、（ａ）および（ｂ）は、この段落で上に定義した通りである。（ａ）によって定義されるように、複数の融合パートナータンパク質の場合、複数の融合パートナーは同一でも異なっていてもよい。対象の任意の融合パートナーを使用することができる。例えば、融合パートナーポリペプチド配列は、患者の循環系内で分子の半減期を延長すること、および／または追加の治療特性（例えば、抗凝固、細胞阻害および／または殺傷）を付加することなど、分子にさらなる機能性を付加することに適し得る。（ｂ）によって定義されるような、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まないもののいずれかのヒトアネキシンＡ５（配列番号１など）の配列を有する複数のタンパク質配列、またはそのバリアントもしくは変異体、または上述の二量体を含む融合タンパク質の場合、それらのタンパク質は同一でも異なっていてもよい。
【０１７８】
本発明の一態様では、本発明に従って使用されるアネキシンＡ５は、ヒトアネキシンＡ５、および／またはそのＰＥＧ化もしくは二量体形態からなる。すなわち、一実施形態では、アネキシンＡ５は、活性剤を含む他の任意の部分と結合、コンジュゲート、またはその他の方法で結合および／または製剤化されていない。アネキシンＡ５タンパク質は、放射性ヌクレオチド、例えばＴｉｎ−１１７ｍのような放射性部分と結合、コンジュゲート、またはその他の方法で結合および／または製剤化されていないことが好ましい。本発明によるアネキシンＡ５タンパク質、ならびにその製剤および／または組成物の治療的および予防的活性は、好ましくは主としてまたは排他的に、アネキシンＡ５部分の生物学的活性に依存する。したがって、本発明によるアネキシンＡ５タンパク質の定義は、最も好ましくは、ＷＯ２０１４／１９７６８１のＴｉｎ−１１７ｍアネキシンＶ分子を除外し得る。
【０１７９】
本発明の一態様によれば、アネキシンＡ５を上記の治療における唯一の活性剤として使用することができる。
【０１８０】
特定の実施形態では、本発明によるアネキシンＡ５の機能的類似体、変異体またはバリアントは、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まないヒトアネキシンＡ５、配列番号１と、５０％、６０％、７０％、７５％超、例えば８０％、８５％、９０％超、またはさらにより好ましくは９５％もしくは９９％超同一である。
【０１８１】
２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは以下のように決定される。最初に、アミノ酸配列は、ＢＬＡＳＴＮバージョン２．０．１４およびＢＬＡＳＴＰバージョン２．０．１４を含むＢＬＡＳＴＺのスタンドアローンバージョンからのＢＬＡＳＴ  ２  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ（Ｂｌ２ｓｅｑ）プログラムを使用して、例えば配列番号１と比較される。このスタンドアローン版のＢＬＡＳＴＺは、米国政府の国立生物工学情報センターのＷｅｂサイト（ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）から入手することができる。Ｂｌ２ｓｅｑプログラムの使用方法を説明する説明は、ＢＬＡＳＴＺに付属のｒｅａｄｍｅファイル見出し得る。Ｂｌ２Ｓｅｑは、ＢＬＡＳＴＰアルゴリズムを使用して２つのアミノ酸配列間の比較を行う。２つのアミノ酸配列を比較するために、Ｂｌ２ｓｅｑのオプションは次のように設定される：−ｉは、比較される最初のアミノ酸配列を含むファイルに設定され（例えば、Ｃ：￥ｓｅｑ１．ｔｘｔ）、−ｊは、比較される２番目のアミノ酸配列を含むファイルに設定され（例えば、Ｃ：￥ｓｅｑ２．ｔｘｔ）、−ｐはｂｌａｓｔｐに設定され、−ｏは任意の所望のファイル名（例えば、Ｃ：￥ｏｕｔｐｕｔ．ｔｘｔ）に設定され、他の全てのオプションはデフォルト設定のままにする。たとえば、次のコマンドを使用して、２つのアミノ酸配列間の比較を含む出力ファイルを生成することができる：Ｃ：￥Ｂｌ２ｓｅｑ−ｉ  ｃ：￥ｓｅｑ１．ｔｘｔ−ｊ  ｃ：￥ｓｅｑ２．ｔｘｔ−ｐ  ｂｌａｓｔｐ−ｏ  ｃ：￥ｏｕｔｐｕｔ．ｔｘｔ。２つの比較された配列が相同性を共有する場合、指定された出力ファイルはそれらの相同性の領域をアラインメントされた配列として提示するだろう。２つの比較された配列が相同性を共有しない場合、指定された出力ファイルはアラインメントされた配列を提示しないだろう。一旦アラインメントされると、一致の数は、同一のヌクレオチドまたはアミノ酸残基が両方の配列中に存在する位置の数を数えることによって決定される。
【０１８２】
同一性パーセントは、一致数を、同定された配列に示された配列の長さで割り、続いて得られた値に１００を掛けることによって決定される。例えば、ある配列が、配列番号１に示される配列（配列番号１に示される配列の長さが３２０である）と比較され、そして一致の数が２８８である場合、その配列は、配列番号１に示される配列に対して９０（すなわち、２８８÷３２０×１００＝９０）の同一性パーセントを有する。
【０１８３】
したがって、アネキシンＡ５の機能的類似体、変異体またはバリアントは、１以上の位置に、保存的または非保存的のいずれかで、アミノ酸挿入、欠失または置換があったタンパク質であり得るが、但し、そのような変化が、アネキシンＡ５と同等の様式で機能するための基本的性質は有意には変化していないタンパク質をもたらすという条件である。これに関連して「顕著に」とは、バリアントの性質がなお異なる可能性があるが、元のタンパク質の性質と比較して明白ではないと当業者が言うことを意味する。
【０１８４】
「保存的置換」とは、Ｇｌｙ、Ａｌａ；Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ；Ａｓｐ、Ｇｌｕ；Ａｓｎ、Ｇｌｎ；Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；Ｌｙｓ、Ａｒｇ；およびＰｈｅ、Ｔｙｒなどの組み合わせを意図する。
【０１８５】
そのようなバリアントおよび変異体は、当技術分野において周知のタンパク質工学および部位特異的変異導入の方法を使用して作製することができる。
【０１８６】
本発明によるアネキシンＡ５の機能的類似体、変異体またはバリアントは、アネキシンＡ５の二量体（例えば、ＤｉＡｎｎｅｘｉｎ）またはその機能的類似体またはバリアント、あるいはＰＥＧ化アネキシンＡ５またはその機能的類似体またはバリアントであり得る。ＤｉＡｎｎｅｘｉｎＡ５およびＰＥＧ化アネキシンＡ５は、ＷＯ０２／０６７８５７に開示されている。
【０１８７】
ＰＥＧ化は、ポリペプチドまたはペプチド模倣化合物（本発明の目的のためには、アネキシンＡ５または機能的類似体もしくはバリアント）が、１つ以上のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子が１以上のアミノ酸またはその誘導体の側鎖に共有結合しているように修飾される、当業者に周知の方法である。それは構造化学技術（ＭＡＳＣ）を変える最も重要な分子の１つである。他のＭＡＳＣ技術が使用されてもよく、そのような技術は、例えばインビボでのその半減期を延長するなど、分子の薬力学的特性を改善することができる。ＰＥＧ−タンパク質コンジュゲートは、それが本発明のタンパク質またはペプチド模倣化合物と反応し、それと結合するように、まずＰＥＧ部分を活性化することによって形成される。ＰＥＧ部分は分子量および立体配座がかなり異なり、初期部分（単官能性ＰＥＧ；ｍＰＥＧ）は１２ｋＤａ以下の分子量で線状であり、そして後部分は分子量が増加している。ＰＥＧ技術における最近の革新であるＰＥＧ２は、３０ｋＤａ（またはそれ以下）のｍＰＥＧのリジンアミノ酸へのカップリングを含み（ＰＥＧ化は他のアミノ酸へのＰＥＧの付加に拡張することができるが）、さらに、はるかに大きい分子量の線状ｍＰＥＧのように振舞う分岐構造を形成する（Ｋｏｚｌｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００１）。ＰＥＧ分子をポリペプチドに共有結合させるために使用され得る方法は、Ｒｏｂｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ，５４，４５９−４７６、Ｂｈａｄｒａ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ５７，５−２９、Ｋｏｚｌｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）  Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ７２，２１７−２２４、およびＶｅｒｏｎｅｓｅ（２００１）  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２２，４０５−４１７、ならびにその中で引用されている参考文献において、さらに記載されている。
【０１８８】
ＰＥＧ化の利点としては、腎クリアランスの減少が挙げられ、これは、いくつかの製品について、投与後により持続的な吸着および制限された分布をもたらし、おそらくは、より一定かつ持続的な血漿濃度、したがって臨床効果の増加をもたらす（Ｈａｒｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ  ４０，５３９−５５１）。さらなる利点としては、治療用化合物の免疫原性の低下（Ｒｅｄｄｙ（２００１）  Ａｎｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ，３４，９１５−９２３）、および低毒性（Ｋｏｚｌｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００１），Ｂｉｏｄｒｕｇｓ  １５，４１９−４２９）が挙げられ得る。
【０１８９】
アネキシンＡ５の機能的類似体、変異体またはバリアントは、アネキシンＡ５の配列またはそのバリアントまたは生物学的に活性な断片を含む融合タンパク質であり得る。したがって、例えば、アネキシンＡ５またはそのバリアントもしくは生物学的に活性なものは、患者の循環系内で分子の半減期を延長するためにおよび／または分子にさらなる機能性を付加するために１つ以上の融合パートナーポリペプチド配列に融合され得る。一実施形態では、アネキシンＡ５の融合タンパク質は本発明から除外される。
【０１９０】
アネキシンＡ５の「機能的」類似体、変異体、バリアントまたは生物学的に活性な断片は、生体膜上のホスファチジルセリンに、好ましくは、同一条件下でヒトアネキシンＡ５（配列番号１）によって示されるものの、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、または約１００％のレベルまで結合することができる。生体膜上のホスファチジルセリンへのアネキシンＡ５の結合を測定するための適切な方法は、当該技術分野において公知である（Ｖｅｒｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，１８４（１）：ｐ．３９−５１）。
【０１９１】
アネキシンＡ５の「機能的」類似体、変異体、バリアントまたは生物学的に活性な断片は、さらに、または代替的に、本発明による治療のために、同一（すなわちモル当量）用量で使用するとき、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％または約１００％の治療活性のヒトアネキシンＡ５（配列番号１など）を有し得る。これに関連して、アネキシンＡ５の「機能的」類似体、変異体、バリアントまたは生物学的に活性な断片の治療活性は、ヒトアネキシンＡ５（配列番号１など）のそれと比較して、モル当量のヒトアネキシンＡ５の機能的類似体またはバリアントとヒトアネキシンＡ５とを比較することによって、決定され得る。
【０１９２】
アネキシンＡ５の機能的類似体、変異体、バリアントまたは生物学的に活性な断片は、任意選択で、５０、４０、３０、２０、１０、５、４、３、２、もしくは１を超えない連続もしくは非連続の追加のアミノ酸、および／または５０、４０、３０、２０、１０、５、４、３、２、もしくは１を超えない連続的もしくは非連続的のアミノ酸欠失、および／または５０、４０、３０、２０、１０、５、４、３、２、もしくは１以下の連続的または非連続的のアミノ酸置換を有する、Ｎ末端メチオニンを含むかまたは含まないヒトアネキシンＡ５の配列（配列番号１など）からなり得る。
【０１９３】
Ｄ．治療の対象
本発明に従って治療される対象は、ヒト対象または非ヒト対象であり得る。
【０１９４】
一実施形態では、対象はヒト対象である。
【０１９５】
別の実施形態では、対象は非ヒト対象であり、ヒトではない哺乳類対象、鳥類、両生類、および爬虫類からなる群から選択され得る。
【０１９６】
好ましくは、ヒトではない哺乳類対象は、ウマ科、ウシ科、ラクダ、ブタ、ラマ、アルパカ、ヒツジ、ヤギ、イヌ科、ネコ科、ウサギ、またはげっ歯類からなる一覧から選択される１種以上である。
【０１９７】
好ましくは、ウマ科はウマまたはロバである。
【０１９８】
より好ましくは、対象はウマ、場合によりサラブレッドウマおよび／または競走馬である。
【０１９９】
最も好ましくは、対象はウマまたはヒトである。
【０２００】
いくつかの実施形態では、本発明は、跛行を特徴とし得る変形性関節症の予防および治療に使用することができ、対象は非ヒト対象であり得る。
【０２０１】
好ましい一実施形態では、変形性関節症は跛行を特徴とし、対象はウマである。
【０２０２】
前述のように、限定的ではないが、変形性関節症は一般に、部分的には「消耗」によって引き起こされる疾患であると考えられており、これはしばしば対象のライフスタイルによって引き起こされる。サラブレッドウマおよび競走馬が訓練されるという性質のために、そのような馬の対象は変形性関節症を発症する危険性が高いと一般に考えられている。したがって、アネキシンＡ５タンパク質は、そのようなウマ対象における変形性関節症の治療に特に有効であり得る。
【０２０３】
好ましくは、ウシ科は、ウシ、バッファロー、バイソン、およびヤクからなる一覧から選択される１種以上である。
【０２０４】
好ましくは、げっ歯類はマウス、ラット、チンチラ、モルモット、およびリスからなる一覧から選択される１種以上である。
【０２０５】
好ましくは、鳥類はニワトリ、ガチョウ、アヒル、シチメンチョウ、ウズラ、およびハトからなる一覧から選択される１種以上である。
【０２０６】
好ましくは、爬虫類は、ヘビ、トカゲ、クロコダイル、ワニ、カメ、およびカメからなる一覧から選択される１種以上である。
【０２０７】
好ましくは、両生類はカエルまたはサンショウウオである。
【０２０８】
一実施形態では、対象は年少者ではない可能性があり、かつ／または身体的成長が完了している可能性がある。
【０２０９】
対象が身体的成長を完了したかどうかは、ヒトの医学または獣医学の当業者には公知であろう。「完了した身体的成長」という用語には、対象が身体的に成熟していることおよび／または対象が成人対象とみなされることが含まれる。
【０２１０】
一実施形態では、対象は性的に成熟していてもよい。
【０２１１】
対象が性的に成熟しているかどうかは、ヒトの医学または獣医学の当業者には公知であろう。「性的に成熟した」という用語には、対象が子孫を妊娠することができ、および／または対象が思春期を完了していることが含まれる。
【０２１２】
一実施形態では、対象は高齢対象であり得る。対象が高齢者とみなされる正確な年齢は、特に種によって異なり得る。任意選択で、高齢者という用語は、対象の年齢が、対象が属する種の平均寿命（世界規模で判断されるか、またはその対象が在住する特定の国の中で判断される）の５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％を超えることを示す。
【０２１３】
対象が高齢者であるかどうかは、ヒトの医学または獣医学の当業者に公知であろう。
【０２１４】
一実施形態では、対象はヒト対象であり得、４５歳以上、例えば、４６歳以上、４７歳以上、４８歳以上、４９歳以上、５０歳以上、５１歳以上、５２歳以上、５３歳以上、５４歳以上、５５歳以上、５６歳以上、５７歳以上、５８歳以上、５９歳以上、６０歳以上、６１歳以上、６２歳以上、６３歳以上、６４歳以上、６５歳以上、６６歳以上、６７歳以上、６８歳以上、６９歳以上、７０歳以上、７５歳以上、８０歳以上、８５歳以上、９０歳以上、９５歳以上、または１００歳以上である。
【０２１５】
好ましい一実施形態では、対象はヒト対象であり得、５５歳以上である。
【０２１６】
別の好ましい実施形態では、対象はヒト対象であり得、６５歳以上である。
【０２１７】
別の好ましい実施形態では、対象はヒト対象であり得、７５歳以上である。
【０２１８】
一実施形態では、対象はウマ対象であり得、５歳以上、例えば、６歳以上、７歳以上、８歳以上、９歳以上、１０歳以上、１１歳以上、１２歳以上、１３歳以上、１４歳以上、１５歳以上、１６歳以上、１７歳以上、１８歳以上、１９歳以上、２０歳以上、２１歳以上、２２歳以上、２３歳以上、２４歳以上、２５歳以上、２６歳以上、２７歳以上、２８歳以上、２９歳以上、３０歳以上、３１歳以上、３２歳以上、３３歳以上、３４歳以上、３５歳以上、３６歳以上、３７歳以上、３８歳以上、３９歳以上、または４０歳以上である。
【０２１９】
１つの好ましい実施形態では、対象はウマ対象であり得、１５歳以上である。
【０２２０】
別の好ましい実施形態では、対象はウマ対象であり得、２５歳以上である。
【０２２１】
前述したように、排他的ではないが、変形性関節症は一般に高齢者に罹患する疾患であると考えられている。したがって、アネキシンＡ５タンパク質は、高齢者における変形性関節症の治療または予防において特に有効であり得る。
【０２２２】
Ｅ．投与計画
投与量およびタイミング：
【０２２３】
本発明の様々な実施形態に従って、アネキシンＡ５タンパク質、またはアネキシンＡ５タンパク質を含む薬学的にもしくは獣医学的に許容される組成物は、上述で定義された様式で対象を治療するために治療有効用量で投与され得る。
【０２２４】
一実施形態では、本発明の前述の態様のいずれかに従って、アネキシンＡ５タンパク質を関節または各関節に投与することができる。好ましくは、関節への投与は、関節包、軟骨（特に関節軟骨）、関節腔、および滑液のうちの１つ以上の中に対する。
【０２２５】
好ましい一実施形態では、関節への投与は、治療される関節または各関節の関節腔内へのアネキシンＡ５タンパク質の直接投与を含む。
【０２２６】
別の好ましい実施形態では、関節への投与は、治療される関節または各関節の滑液へのアネキシンＡ５タンパク質の直接投与を含む。
【０２２７】
別の好ましい実施形態では、アネキシンＡ５は治療される関節または各関節から遠位に投与することができる。例えば、アネキシンＡ５は、関節または各関節から遠位で、対象の血液中に投与することができる。一つの好ましい選択肢によれば、アネキシンＡ５は全身投与される。最も好ましくは、アネキシンＡ５は注射により全身投与される。
【０２２８】
別の好ましい実施形態では、アネキシンＡ５は治療される関節または各関節から遠位に投与されないであろう。
【０２２９】
当業者は、所望の治療効果を達成するために適切な投与量を容易に決定することができる。例えば、適切な投与量は、典型的には、変形性関節症、または関連する状態を治療または予防するために適切な量のアネキシンＡ５タンパク質を提供および維持するであろう。
【０２３０】
適切な投薬量は、血漿中のアネキシンＡ５の天然に存在する生理的レベルよりも高い、例えば１０００μｇ／ｍｌまで、例えば、５〜９００μｇ／ｍｌ、１０〜６００μｇ／ｍｌ、２０〜５００μｇ／ｍｌ、または３０〜４０μｇ／ｍｌの範囲内など、対象の血漿中のアネキシンＡ５タンパク質のレベルを達成および／または維持することを目的とし得る。約３２〜３８μｇ／ｍｌ、または約３４〜３６μｇ／ｍｌの血漿レベルが適切であり得る。
【０２３１】
適切な投与量は、関節または各関節においてアネキシンＡ５の天然に存在する生理的レベルよりも高いレベル、例えば、関節または各関節においてアネキシンＡ５の天然に存在する生理的レベルよりも、約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％高い、それらまで高い、またはそれらよりも高い、例えば、関節または各関節においてアネキシンＡ５の天然に存在する生理的レベルよりも約２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、１００倍またはそれ以上高い、それらまで高い、またはそれらよりも高い、対象の関節におけるアネキシンＡ５タンパク質のレベルを達成および／または維持することを目的とし得る。
【０２３２】
適切な投与量は、関節または各関節の滑液中のアネキシンＡ５の天然に存在する生理的レベルよりも高いレベル、例えば、関節または各関節の滑液中のアネキシンＡ５の天然に存在する生理的レベルよりも、約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％高い、それらまで高い、またはそれらよりも高い、例えば、関節または各関節の滑液中のアネキシンＡ５の天然に存在する生理的レベルよりも約２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、１００倍またはそれ以上高い、それらまで高い、またはそれらよりも高い、対象の関節の滑液中のアネキシンＡ５タンパク質のレベルを達成および／または維持することを目的とし得る。
【０２３３】
治療計画は、例えば、例えば対象の循環におけるタンパク質の半減期が少なくとも約３０分、少なくとも約１時間、少なくとも約１．５時間、少なくとも約２時間、少なくとも約２．５時間、少なくとも約３時間、またはそれ以上である場合に、対象におけるタンパク質の長期化した血液クリアランスを提供する様式でアネキシンＡ５タンパク質を投与することを含み得る。いくつかの実施形態では、投与の様式は、腹腔内注射または浸透圧ポンプである。他の実施形態では、投与経路は、長期間にわたる静脈内または関節内注射であり、例えば、上述のような１日投与量は、３０分まで、１時間まで、２時間まで、４時間まで、６時間まで、８時間まで、１２時間まで、１６時間まで、または２４時間までの期間にわたって送達される。
【０２３４】
治療計画は、例えば、対象におけるタンパク質の長期化した関節クリアランス、または長期化した滑液クリアランスを提供する様式でのアネキシンＡ５タンパク質の投与を含み得、例えば、タンパク質の半減期は、３０分まで、１時間まで、２時間まで、４時間まで、６時間まで、８時間まで、１２時間まで、１６時間まで、２４時間まで、２日間まで、３日間まで、４日間まで、５日間まで、６日間まで、７日まで、２週間まで、３週間まで、４週間まで、２ヶ月間まで、３ヶ月間まで、４ヶ月間まで、５ヶ月間まで、６ヶ月間まで、７ヶ月間まで、８ヶ月間まで、９ヶ月間まで、１０ヶ月間まで、１１ヶ月間まで、１２ヶ月間まで、２年間まで、３年間まで、４年間まで、５年間まで、６年間まで、７年間まで、８年間まで、９年間まで、または１０年間までである。
【０２３５】
好ましい一実施形態では、関節内のタンパク質の半減期は、約２４時間まで、または少なくとも約２４時間であり、および／または滑液中のタンパク質の半減期は、約２４時間まで、または少なくとも約２４時間である。
【０２３６】
治療計画は、例えば、対象におけるタンパク質の長期化した関節クリアランス、および／または長期化した滑液クリアランスを提供する様式でのアネキシンＡ５タンパク質の投与を含み得、例えば、タンパク質は、関節または滑液中に、３０分まで、１時間まで、２時間まで、４時間まで、６時間まで、８時間まで、１２時間まで、１６時間まで、２４時間まで、２日間まで、３日間まで、４日間まで、５日間まで、６日間まで、７日まで、２週間まで、３週間まで、４週間まで、２ヶ月間まで、３ヶ月間まで、４ヶ月間まで、５ヶ月間まで、６ヶ月間まで、７ヶ月間まで、８ヶ月間まで、９ヶ月間まで、１０ヶ月間まで、１１ヶ月間まで、１２ヶ月間まで、２年間まで、３年間まで、４年間まで、５年間まで、６年間まで、７年間まで、８年間まで、９年間まで、または１０年間まで、存在するかまたは検出可能である。
【０２３７】
例えば、一選択肢では、タンパク質は、関節に、約２４時間まで、または少なくとも約２４時間、および／または滑液中に、約２４時間まで、または少なくとも約２４時間存在するかまたは検出可能であり得る。
【０２３８】
治療有効用量のアネキシンＡ５タンパク質の投与は、いくつかの異なる方法で達成することができる。治療有効用量の適切な投与は、単回投与の投与を伴い得るか、または毎日、半週毎、毎週、２週間に１回、月１回、毎年などの投与の投与を伴い得る。
【０２３９】
治療計画は、例えば、対象へのアネキシンＡ５タンパク質の連続注入を含み得るか、または例えば１日１回、２回、３回、４回またはそれ以上の１回以上の投与を含み得る。例えば、１日２回のアネキシンＡ５タンパク質の投与は、１つの適切な投与計画であり得、そして各投与における投与量は、約０．１〜２５ｍｇ／患者の体重ｋｇ、例えば、約１〜２０ｍｇ／ｋｇ、約５〜２０ｍｇ／ｋｇ、約１０〜１５ｍｇ／ｋｇの範囲内であり得、例えば約１１ｍｇ／ｋｇ、約１２ｍｇ／ｋｇ、約１３ｍｇ／ｋｇ、または約１４ｍｇ／ｋｇが１つの適切な投与計画であり得る。
【０２４０】
一実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、少なくとも約１μｇ（マイクログラム）／ｍｌ、例えば、少なくとも約２μｇ／ｍｌ、少なくとも約３μｇ／ｍｌ、少なくとも約４μｇ／ｍｌ、少なくとも約５μｇ／ｍｌ、少なくとも約６μｇ／ｍｌ、少なくとも約７μｇ／ｍｌ、少なくとも約８μｇ／ｍｌ、少なくとも約９μｇ／ｍｌ、少なくとも約１０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１１μｇ／ｍｌ、少なくとも約１２μｇ／ｍｌ、少なくとも約１３μｇ／ｍｌ、少なくとも約１４μｇ／ｍｌ、少なくとも約１５μｇ／ｍｌ、少なくとも約１６μｇ／ｍｌ、少なくとも約１７μｇ／ｍｌ、少なくとも約１８μｇ／ｍｌ、少なくとも約１９μｇ／ｍｌ、少なくとも約２０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２１μｇ／ｍｌ、少なくとも約２２μｇ／ｍｌ、少なくとも約２３μｇ／ｍｌ、少なくとも約２４μｇ／ｍｌ、少なくとも約２５μｇ／ｍｌ、少なくとも約２６μｇ／ｍｌ、少なくとも約２７μｇ／ｍｌ、少なくとも約２８μｇ／ｍｌ、少なくとも約２９μｇ／ｍｌ、少なくとも約３０μｇ／ｍｌ、少なくとも約３１μｇ／ｍｌ、少なくとも約３２μｇ／ｍｌ、少なくとも約３３μｇ／ｍｌ、少なくとも約３４μｇ／ｍｌ、少なくとも約３５μｇ／ｍｌ、少なくとも約３６μｇ／ｍｌ、少なくとも約３７μｇ／ｍｌ、少なくとも約３８μｇ／ｍｌ、少なくとも約３９μｇ／ｍｌ、少なくとも約４０μｇ／ｍｌ、少なくとも約４１μｇ／ｍｌ、少なくとも約４２μｇ／ｍｌ、少なくとも約４３μｇ／ｍｌ、少なくとも約４４μｇ／ｍｌ、少なくとも約４５μｇ／ｍｌ、少なくとも約４６μｇ／ｍｌ、少なくとも約４７μｇ／ｍｌ、少なくとも約４８μｇ／ｍｌ、少なくとも約４９μｇ／ｍｌ、少なくとも約５０μｇ／ｍｌ、少なくとも約５５μｇ／ｍｌ、少なくとも約６０μｇ／ｍｌ、少なくとも約６５μｇ／ｍｌ、少なくとも約７０μｇ／ｍｌ、少なくとも約７５μｇ／ｍｌ、少なくとも約８０μｇ／ｍｌ、少なくとも約８５μｇ／ｍｌ、少なくとも約９０μｇ／ｍｌ、少なくとも約９５μｇ／ｍｌ、少なくとも約１００μｇ／ｍｌ、少なくとも約１１０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１２０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１３０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１４０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１５０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１６０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１７０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１８０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１９０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２００μｇ／ｍｌ、少なくとも約２１０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２２０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２３０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２４０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２５０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２６０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２７０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２８０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２９０μｇ／ｍｌ、少なくとも約３００μｇ／ｍｌ、少なくとも約３５０μｇ／ｍｌ、少なくとも約４００μｇ／ｍｌ、少なくとも約４５０μｇ／ｍｌ、または少なくとも約５００μｇ／ｍｌの濃度で投与され得る。
【０２４１】
一実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、少なくとも約１μｇ（マイクログラム）／ｍｌ、例えば、少なくとも約２μｇ／ｍｌ、少なくとも約３μｇ／ｍｌ、少なくとも約４μｇ／ｍｌ、少なくとも約５μｇ／ｍｌ、少なくとも約６μｇ／ｍｌ、少なくとも約７μｇ／ｍｌ、少なくとも約８μｇ／ｍｌ、少なくとも約９μｇ／ｍｌ、少なくとも約１０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１１μｇ／ｍｌ、少なくとも約１２μｇ／ｍｌ、少なくとも約１３μｇ／ｍｌ、少なくとも約１４μｇ／ｍｌ、少なくとも約１５μｇ／ｍｌ、少なくとも約１６μｇ／ｍｌ、少なくとも約１７μｇ／ｍｌ、少なくとも約１８μｇ／ｍｌ、少なくとも約１９μｇ／ｍｌ、少なくとも約２０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２１μｇ／ｍｌ、少なくとも約２２μｇ／ｍｌ、少なくとも約２３μｇ／ｍｌ、少なくとも約２４μｇ／ｍｌ、少なくとも約２５μｇ／ｍｌ、少なくとも約２６μｇ／ｍｌ、少なくとも約２７μｇ／ｍｌ、少なくとも約２８μｇ／ｍｌ、少なくとも約２９μｇ／ｍｌ、少なくとも約３０μｇ／ｍｌ、少なくとも約３１μｇ／ｍｌ、少なくとも約３２μｇ／ｍｌ、少なくとも約３３μｇ／ｍｌ、少なくとも約３４μｇ／ｍｌ、少なくとも約３５μｇ／ｍｌ、少なくとも約３６μｇ／ｍｌ、少なくとも約３７μｇ／ｍｌ、少なくとも約３８μｇ／ｍｌ、少なくとも約３９μｇ／ｍｌ、少なくとも約４０μｇ／ｍｌ、少なくとも約４１μｇ／ｍｌ、少なくとも約４２μｇ／ｍｌ、少なくとも約４３μｇ／ｍｌ、少なくとも約４４μｇ／ｍｌ、少なくとも約４５μｇ／ｍｌ、少なくとも約４６μｇ／ｍｌ、少なくとも約４７μｇ／ｍｌ、少なくとも約４８μｇ／ｍｌ、少なくとも約４９μｇ／ｍｌ、少なくとも約５０μｇ／ｍｌ、少なくとも約５５μｇ／ｍｌ、少なくとも約６０μｇ／ｍｌ、少なくとも約６５μｇ／ｍｌ、少なくとも約７０μｇ／ｍｌ、少なくとも約７５μｇ／ｍｌ、少なくとも約８０μｇ／ｍｌ、少なくとも約８５μｇ／ｍｌ、少なくとも約９０μｇ／ｍｌ、少なくとも約９５μｇ／ｍｌ、少なくとも約１００μｇ／ｍｌ、少なくとも約１１０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１２０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１３０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１４０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１５０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１６０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１７０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１８０μｇ／ｍｌ、少なくとも約１９０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２００μｇ／ｍｌ、少なくとも約２１０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２２０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２３０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２４０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２５０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２６０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２７０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２８０μｇ／ｍｌ、少なくとも約２９０μｇ／ｍｌ、少なくとも約３００μｇ／ｍｌ、少なくとも約３５０μｇ／ｍｌ、少なくとも約４００μｇ／ｍｌ、少なくとも約４５０μｇ／ｍｌ、または少なくとも約５００μｇ／ｍｌの濃度で、関節もしくは各関節および／または関節もしくは各関節の滑液中に、投与され得る。
【０２４２】
一実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質は、約１μｇ／ｍｌの濃度で、関節または各関節に投与される。
【０２４３】
別の実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質は、約５μｇ／ｍｌの濃度で、関節に投与される。
【０２４４】
別の実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質は、約１７μｇ／ｍｌの濃度で、関節に投与される。
【０２４５】
別の実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質は、約２０μｇ／ｍｌの濃度で、関節に投与される。
【０２４６】
別の実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質は、約１７４μｇ／ｍｌの濃度で、関節に投与される。
【０２４７】
別の実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質は、約２００μｇ／ｍｌの濃度で、関節に投与される。
【０２４８】
投与当たりのアネキシンＡ５の総用量は、例えば、０．０００１〜３ｇ、０．０００１〜１．７５ｇ、０．００１〜３ｇ、０．００１〜１．７５ｇ、０．０１〜３ｇ、０．０１〜１．７５ｇ、０．１〜３ｇ、または０．１〜１．７５ｇ、例えば０．２〜２ｇ、０．５〜１．５ｇ、０．８〜１．２ｇの範囲内の、または約１ｇのアネキシンＡ５であり得る。一実施形態では、全身投与当たりのアネキシンＡ５の総用量は、例えば、０．０１〜３ｇ、０．０１〜１．７５ｇ、０．１〜３ｇ、または０．１〜１．７５ｇ、例えば０．２〜２ｇ、０．５〜１．５ｇ、０．８〜１．２ｇの範囲内の、または約１ｇのアネキシンＡ５であり得る。一実施形態において、関節投与あたりのアネキシンＡ５の総用量は、例えば、０．０００１〜１ｇ、０．０００１〜０．５ｇ、０．００１〜１ｇ、または０．００１〜０．５ｇの範囲内の、例えば約０．０００１ｇ、約０．０００５ｇ、約０．００１ｇ、約０．００５ｇ、約０．０１ｇ、約０．０５ｇ、約０．１ｇ、約０．５ｇ、または約１ｇのアネキシンＡ５であり得る。
【０２４９】
一実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、関節体積の少なくとも約１％、例えば、関節または各関節の体積の少なくとも約２％、関節または各関節の体積の少なくとも約３％、関節または各関節の体積の少なくとも約４％、関節または各関節の体積の少なくとも約５％、関節または各関節の体積の少なくとも約６％、関節または各関節の体積の少なくとも約７％、関節または各関節の体積の少なくとも約８％、関節または各関節の体積の少なくとも約９％、関節または各関節の体積の少なくとも約１０％、関節または各関節の体積の少なくとも約１１％、関節または各関節の体積の少なくとも約１２％、関節または各関節の体積の少なくとも約１３％、関節または各関節の体積の少なくとも約１４％、関節または各関節の体積の少なくとも約１５％、関節または各関節の体積の少なくとも約１６％、関節または各関節の体積の少なくとも約１７％、関節または各関節の体積の少なくとも約１８％、関節または各関節の体積の少なくとも約１９％、関節または各関節の体積の少なくとも約２０％、関節または各関節の体積の少なくとも約２１％、関節または各関節の体積の少なくとも約２２％、関節または各関節の体積の少なくとも約２３％、関節または各関節の体積の少なくとも約２４％、関節または各関節の体積の少なくとも約２５％、関節または各関節の体積の少なくとも約２６％、関節または各関節の体積の少なくとも約２７％、関節または各関節の体積の少なくとも約２８％、関節または各関節の体積の少なくとも約２９％、関節または各関節の体積の少なくとも約３０％、関節または各関節の体積の少なくとも約３５％、関節または各関節の体積の少なくとも約４０％、関節または各関節の体積の少なくとも約４５％、関節または各関節の体積の少なくとも約５０％、関節または各関節の体積の少なくとも約５５％、関節または各関節の体積の少なくとも約６０％、関節または各関節の体積の少なくとも約６５％、関節または各関節の体積の少なくとも約７０％、関節または各関節の体積の少なくとも約７５％、関節または各関節の体積の少なくとも約８０％、関節または各関節の体積の少なくとも約８５％、関節または各関節の体積の少なくとも約９０％、関節または各関節の体積の少なくとも約９５％、または関節または各関節の体積の少なくとも約１００％の体積で、関節または各関節に投与され得る。
【０２５０】
好ましくは、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、約１７％、関節または各関節の体積の約１７．１％、関節または各関節の体積の約１７．２％、関節または各関節の体積の約１７．３％、関節または各関節の体積の約１７．４％、関節または各関節の体積の約１７．５％、関節または各関節の体積の約１７．６％、関節または各関節の体積の約１７．７％、関節または各関節の体積の約１７．８％、関節または各関節の体積の約１７．９％、または関節または各関節の体積の約１８％の体積で、関節または各関節に投与される。
【０２５１】
１つの好ましい実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、関節または各関節の体積の約１７．１％の体積で関節または各関節に投与される。
【０２５２】
別の好ましい実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、関節または各関節の体積の約１７．４％の体積で関節または各関節に投与される。
【０２５３】
別の好ましい実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、関節または各関節の体積の約１７．８％の体積で関節または各関節に投与される。
【０２５４】
一実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、関節または各関節の、滑液の体積の少なくとも約１％、例えば、滑液の体積の少なくとも約２％、滑液の体積の少なくとも約３％、滑液の体積の少なくとも約４％、滑液の体積の少なくとも約５％、滑液の体積の少なくとも約６％、滑液の体積の少なくとも約７％、滑液の体積の少なくとも約８％、滑液の体積の少なくとも約９％、滑液の体積の少なくとも約１０％、滑液の体積の少なくとも約１１％、滑液の体積の少なくとも約１２％、滑液の体積の少なくとも約１３％、滑液の体積の少なくとも約１４％、滑液の体積の少なくとも約１５％、滑液の体積の少なくとも約１６％、滑液の体積の少なくとも約１７％、滑液の体積の少なくとも約１８％、滑液の体積の少なくとも約１９％、滑液の体積の少なくとも約２０％、滑液の体積の少なくとも約２１％、滑液の体積の少なくとも約２２％、滑液の体積の少なくとも約２３％、滑液の体積の少なくとも約２４％、滑液の体積の少なくとも約２５％、滑液の体積の少なくとも約２６％、滑液の体積の少なくとも約２７％、滑液の体積の少なくとも約２８％、滑液の体積の少なくとも約２９％、滑液の体積の少なくとも約３０％、滑液の体積の少なくとも約３５％、滑液の体積の少なくとも約４０％、滑液の体積の少なくとも約４５％、滑液の体積の少なくとも約５０％、滑液の体積の少なくとも約５５％、滑液の体積の少なくとも約６０％、滑液の体積の少なくとも約６５％、滑液の体積の少なくとも約７０％、滑液の体積の少なくとも約７５％、滑液の体積の少なくとも約８０％、滑液の体積の少なくとも約８５％、滑液の体積の少なくとも約９０％、滑液の体積の少なくとも約９５％、または滑液の体積の少なくとも約１００％の体積で、関節または各関節に投与され得る。
【０２５５】
好ましくは、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、約１７％、関節または各関節の、滑液の体積の約１７．１％、滑液の体積の約１７．２％、滑液の体積の約１７．３％、滑液の体積の約１７．４％、滑液の体積の約１７．５％、滑液の体積の約１７．６％、滑液の体積の約１７．７％、滑液の体積の約１７．８％、滑液の体積の約１７．９％、または滑液の体積の約１８％の体積で、関節または各関節に投与される。
【０２５６】
１つの好ましい実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、関節または各関節の滑液の体積の約１７．１％の体積で関節または各関節に投与される。
【０２５７】
別の好ましい実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、関節または各関節の滑液の体積の約１７．４％の体積で関節または各関節に投与される。
【０２５８】
別の好ましい実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、関節または各関節の滑液の体積の約１７．８％の体積で関節または各関節に投与される。
【０２５９】
一実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、少なくとも約０．１ｍｌ、例えば、少なくとも約０．２ｍｌ、少なくとも約０．３ｍｌ、少なくとも約０．４ｍｌ、少なくとも約０．５ｍｌ、少なくとも約０．６ｍｌ、少なくとも約０．７ｍｌ、少なくとも約０．８ｍｌ、少なくとも約０．９ｍｌ、少なくとも約１ｍｌ、少なくとも約１．１ｍｌ、少なくとも約１．２ｍｌ、少なくとも約１．３ｍｌ、少なくとも約１．４ｍｌ、少なくとも約１．５ｍｌ、少なくとも約１．６ｍｌ、少なくとも約１．７ｍｌ、少なくとも約１．８ｍｌ、少なくとも約１．９ｍｌ、少なくとも約２ｍｌ、少なくとも約２．１ｍｌ、少なくとも約２．２ｍｌ、少なくとも約２．３ｍｌ、少なくとも約２．４ｍｌ、少なくとも約２．５ｍｌ、少なくとも約２．６ｍｌ、少なくとも約２．７ｍｌ、少なくとも約２．８ｍｌ、少なくとも約２．９ｍｌ、少なくとも約３ｍｌ、少なくとも約３．１ｍｌ、少なくとも約３．２ｍｌ、少なくとも約３．３ｍｌ、少なくとも約３．４ｍｌ、少なくとも約３．５ｍｌ、少なくとも約３．６ｍｌ、少なくとも約３．７ｍｌ、少なくとも約３．８ｍｌ、少なくとも約３．９ｍｌ、少なくとも約４ｍｌ、少なくとも約４．１ｍｌ、少なくとも約４．２ｍｌ、少なくとも約４．３ｍｌ、少なくとも約４．４ｍｌ、少なくとも約４．５ｍｌ、少なくとも約４．６ｍｌ、少なくとも約４．７ｍｌ、少なくとも約４．８ｍｌ、少なくとも約４．９ｍｌ、少なくとも約５ｍｌ、少なくとも約６ｍｌ、少なくとも約７ｍｌ、少なくとも約８ｍｌ、少なくとも約９ｍｌ、少なくとも約１０ｍｌ、少なくとも約１１ｍｌ、少なくとも約１２ｍｌ、少なくとも約１３ｍｌ、少なくとも約１４ｍｌ、少なくとも約１５ｍｌ、少なくとも約１６ｍｌ、少なくとも約１７ｍｌ、少なくとも約１８ｍｌ、少なくとも約１９ｍｌ、少なくとも約２０ｍｌ、少なくとも約２５ｍｌ、少なくとも約３０ｍｌ、少なくとも約３５ｍｌ、または少なくとも約４０ｍｌの体積で、関節または各関節に投与され得る。
【０２６０】
１つの好ましい実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、約１ｍｌの体積で、関節または各関節（好ましくは手の関節を含む指の関節、または足の関節を含む指の関節、最も好ましくはヒト対象）に投与される。
【０２６１】
別の好ましい実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、約２ｍｌの体積で、関節または各関節（好ましくは手首関節または母指関節、最も好ましくはヒト対象）に投与される。
【０２６２】
別の好ましい実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、約４ｍｌの体積で、関節または各関節に投与される。
【０２６３】
別の好ましい実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、約５ｍｌの体積で、関節または各関節（好ましくは肘関節または股関節、最も好ましくはヒト対象）に投与される。
【０２６４】
別の好ましい実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、約６ｍｌの体積で、関節または各関節に投与される。
【０２６５】
別の好ましい実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質または組成物は、約１０ｍｌの体積で、関節または各関節（好ましくは肩関節または膝関節、最も好ましくはヒト対象）に投与される。
【０２６６】
この文脈における「約」という用語は、記載の体積の±２ｍｌ、１．５ｍｌ、１ｍｌ、０．５ｍｌ、または０．１ｍｌの意味を含む。
【０２６７】
場合によっては、治療上有効用量は、２以上の用量の漸増濃度（すなわち漸増用量）として対象に投与され、（ｉ）全ての用量が治療上の用量であるか、または（ｉｉ）治療量以下の用量（または２回以上の治療量以下の用量）が最初に投与され、上記漸増によって治療量が達成される。漸増濃度（すなわち用量の増加）を説明するための１つの非限定的な例として、治療有効用量は、治療量以下の用量から始めて毎週投与することができ、その後の各用量は、治療用量に達するまで、特定の増分で（例えば０．５ｍｇ／ｋｇずつ）、または、可変の増分で増加し得、治療用量に達する時点で、投与を中止するかまたは継続することができる（例えば、継続的な治療用量）。いくつかの実施形態では、治療上有効用量の投与は持続注入であり得、用量は経時的に変化し得る（例えば、漸増する）。いくつかの実施形態では、併用療法も投与される。
【０２６８】
投与量および頻度は、対象におけるアネキシンＡ５タンパク質の半減期に応じて変動し得る。
【０２６９】
いずれにしても、医師は個々の患者に最も適した実際の投与量を決定し、それは特定の患者の年齢、体重、および反応によって変動するであろう。上述の投与量は平均的な場合の例示である。当然ながら、より高いかまたはより低い投与量範囲が妥当である個々の事例があり得、それらも本発明の範囲内に含まれる。
【０２７０】
獣医学的使用のために、アネキシンＡ５タンパク質は、通常の獣医学的診療に従って適宜許容される製剤として投与され、獣医師は、ある特定の動物にとって最も適切であろう投与計画および投与経路を決定する。
【０２７１】
治療期間：
治療計画は治療上有益な期間継続してもよい。
【０２７２】
変形性関節症は、一般に慢性疾患であると考えられているので、対象の余命の間治療を継続することが必要である可能性がある。変形性関節症もまた、先に論じたように、若い対象よりも高齢の対象に罹患する可能性が高い疾患である。
【０２７３】
一実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質は、対象が変形性関節症と診断されたときから対象の死まで対象に投与され得る。
【０２７４】
好ましくは、対象は高齢対象であり、アネキシンＡ５タンパク質は、対象が変形性関節症と診断されたときから対象の死まで対象に投与される。
【０２７５】
一実施形態において、アネキシンＡ５タンパク質は、対象が変形性関節症と診断されたときから対象がもはや変形性関節症と診断されなくなるまで対象に投与され得る。
【０２７６】
別の実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、例えば、高リスクのライフスタイルを送る対象（運動選手、競走馬など）、および／または、変形性関節症の家族歴を有する対象の場合に、変形性関節症との診断の前に、対象に投与され得る。
【０２７７】
一実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、１週間以上、例えば２週間以上、３週間以上、４週間以上、２か月以上、３か月以上、４か月以上、５か月以上、６か月以上、７か月以上、８か月以上、９か月以上、１０か月以上、１１か月以上、１２か月以上、１５か月以上、１８か月以上、２１か月以上、２４か月以上、３０か月以上、３年以上、４２か月以上、４年以上、５年以上、６年以上、７年以上、８年以上、９年以上、１０年以上、１１年以上、１２年以上、１３年以上、１４年以上、１５年以上、１６年以上、１７年以上、１８年以上、１９年以上、２０年以上、２５年以上、３０年以上、３５年年以上、４０年以上、または５０年以上の期間、投与される。
【０２７８】
一実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、１週間以上、例えば２週間以上、３週間以上、４週間以上、２か月以上、３か月以上、４か月以上、５か月以上、６か月以上、７か月以上、８か月以上、９か月以上、１０か月以上、１１か月以上、１２か月以上、１５か月以上、１８か月以上、２１か月以上、２４か月以上、３０か月以上、３年以上、４２か月以上、４年以上、５年以上、６年以上、７年以上、８年以上、９年以上、１０年以上、１１年以上、１２年以上、１３年以上、１４年以上、１５年以上、１６年以上、１７年以上、１８年以上、１９年以上、２０年以上、２５年以上、３０年以上、３５年年以上、４０年以上、または５０年以上の期間、週に１回投与される。
【０２７９】
一実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、１週間以上、例えば２週間以上、３週間以上、４週間以上、２か月以上、３か月以上、４か月以上、５か月以上、６か月以上、７か月以上、８か月以上、９か月以上、１０か月以上、１１か月以上、１２か月以上、１５か月以上、１８か月以上、２１か月以上、２４か月以上、３０か月以上、３年以上、４２か月以上、４年以上、５年以上、６年以上、７年以上、８年以上、９年以上、１０年以上、１１年以上、１２年以上、１３年以上、１４年以上、１５年以上、１６年以上、１７年以上、１８年以上、１９年以上、２０年以上、２５年以上、３０年以上、３５年年以上、４０年以上、または５０年以上の期間、週に２回投与される。
【０２８０】
一実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、１か月以上、例えば２か月以上、３か月以上、４か月以上、５か月以上、６か月以上、７か月以上、８か月以上、９か月以上、１０か月以上、１１か月以上、１２か月以上、１５か月以上、１８か月以上、２１か月以上、２４か月以上、３０か月以上、３年以上、４２か月以上、４年以上、５年以上、６年以上、７年以上、８年以上、９年以上、１０年以上、１１年以上、１２年以上、１３年以上、１４年以上、１５年以上、１６年以上、１７年以上、１８年以上、１９年以上、２０年以上、２５年以上、３０年以上、３５年年以上、４０年以上、または５０年以上の期間、月に１回投与される。
【０２８１】
一実施形態では、アネキシンＡ５タンパク質は、１か月以上、例えば２か月以上、３か月以上、４か月以上、５か月以上、６か月以上、７か月以上、８か月以上、９か月以上、１０か月以上、１１か月以上、１２か月以上、１５か月以上、１８か月以上、２１か月以上、２４か月以上、３０か月以上、３年以上、４２か月以上、４年以上、５年以上、６年以上、７年以上、８年以上、９年以上、１０年以上、１１年以上、１２年以上、１３年以上、１４年以上、１５年以上、１６年以上、１７年以上、１８年以上、１９年以上、２０年以上、２５年以上、３０年以上、３５年年以上、４０年以上、または５０年以上の期間、月に２回投与される。
【０２８２】
投与経路：
注射（静脈内、皮下、または筋肉内注射など）、注入（静脈内注入など）、および／または血液脳関門を回避するための髄腔内送達を含む非経口投与が特に適しているが、任意の適切な投与経路を使用することができる。
【０２８３】
場合によっては、アネキシンＡ５タンパク質は、非経口的に、静脈内に、髄腔内に、動脈内に、腹腔内に、関節内に、筋肉内に、もしくは皮下に、または局所的に投与することができる。
【０２８４】
最も好ましくは、アネキシンＡ５タンパク質は、上述のように、関節もしくは各関節内および／または関節もしくは各関節内の滑液中に直接投与される。
【０２８５】
併用療法：
本発明に従う治療のための対象は、全体的な治療効果を提供するための量および回数でアネキシンＡ５を投与され得る。アネキシンＡ５は、単独で（単独療法）または他の薬剤と組み合わせて（併用療法）、混合してまたは別個に、同時にもしくは逐次的に投与することができる。併用療法の場合、投与量および投与回数は、例えば相加的または相乗的な治療効果をもたらすものであり得る。さらに、アネキシンＡ５の投与（第二のまたはさらなる薬剤を伴うかまたは伴わない）は、一次の、例えば一次治療として、または例えば、それまでに投与された療法（すなわち、アネキシンＡ５を伴う療法以外の療法）に対して不十分な反応を有する対象に対する二次治療として使用することができる。
【０２８６】
したがって、一実施形態では、対象は、１つ以上の治療的または予防的介入に加えて、アネキシンＡ５タンパク質療法で治療されてもよい。対象は、１つ以上の他の治療的もしくは予防的介入、または１つ以上の追加の治療的もしくは予防的治療とは別に、それを含む別個の製剤と同時に、またはそれと逐次的に、同一の組成物でアネキシンＡ５タンパク質療法を投与され得る。
【０２８７】
好ましくは、１つ以上の追加の治療的または予防的治療は、ライフスタイルの変更、投薬、および手術のうちの１つ以上から選択され得る。
【０２８８】
好ましくは、ライフスタイルの変更は、体重減少または運動であり得る。
【０２８９】
好ましくは、薬物は、鎮痛薬（疼痛の症状を和らげる薬）、制酸薬、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、カプサイシン、およびヒアルロン酸のうちの１つ以上であり得る。
【０２９０】
好ましくは、鎮痛薬は、アセトアミノフェン、パラセタモール、イブプロフェン、アスピリン、オピオイド（トラマドールなど）、およびグルココルチコイド（ヒドロコルチゾンなど）のうちの１つ以上である。
【０２９１】
好ましくは、ＮＳＡＩＤは、ナプロキセン、ジクロフェナク、ＣＯＸ−２選択的阻害剤（セレコキシブなど）のうちの１つ以上である。
【０２９２】
好ましくは、手術は、関節置換術（股関節置換術および膝関節置換術など）、骨切り術、および関節鏡視下手術のうちの１つ以上である。
【０２９３】
治療のための装置とキット：
【０２９４】
アネキシンＡ５タンパク質を含む薬学的組成物および獣医学組成物は、医療機器と共に投与することができる。装置は、携帯性、室温での保管、使いやすさなどの特徴を備えて設計されているため、緊急事態において、医療施設やその他の医療機器から取り外して、例えば、訓練を受けていない対象や現場の緊急要員によって使用することができる。装置は、例えば、アネキシンＡ５タンパク質を含む薬学的製剤を保存するための１つ以上の筐体を含み得、そして１以上の単位用量のアネキシンＡ５タンパク質を送達するように構成され得る。装置は、アネキシンＡ５も含む単一の薬学的組成物として、または２つの別々の組成物として、第２の薬剤を投与するようにさらに構成することができる。
【０２９５】
薬学的組成物および獣医組成物は注射器で投与することができる。薬学的組成物または獣医学組成物は、米国特許第５，３９９，１６３号、米国特許第５，３８３，８５１号、米国特許第５，３１２，３３５号、米国特許第５，０６４，４１３号、米国特許第４，９４１，８８０号、米国特許第４，７９０，８２４号、または米国特許第４，５９６，５５６号に開示されている装置などの無針皮下注射装置を用いて投与することもできる。周知のインプラントおよびモジュールの例には、制御された速度で薬剤を分配するための埋め込み型微量注入ポンプを開示する米国特許第４，４８７，６０３号、皮膚を通して薬剤を投与するための治療装置を開示する米国特許第４，４８６，１９４号、正確な注入速度で薬剤を送達するための薬剤注入ポンプを開示する米国特許第４，４４７，２３３号、連続的な薬物送達のための可変流量植込み型注入装置を開示する米国特許第４，４４７，２２４号、マルチチャンバー区画を有する浸透圧薬物送達システムを開示する米国特許第４，４３９，１９６号、浸透圧薬物送達システムを開示する米国特許第４，４７５，１９６号が含まれる。他の多くの装置、インプラント、送達システム、およびモジュールもまた公知である。
【０２９６】
アネキシンＡ５タンパク質はキットで提供することができる。一実施形態では、キットは、（ａ）アネキシンＡ５タンパク質を含む組成物を含む容器、および任意選択での（ｂ）情報資料を含む。情報資料は、本明細書に記載の方法および／または治療的利益のための薬剤の使用に関連する記述的、説明的、マーケティング的または他の資料であり得る。
【０２９７】
一実施形態では、キットはまた、本明細書に記載される障害を治療するための第２の薬剤を含む。例えば、キットは、アネキシンＡ５タンパク質を含む組成物を含む第１の容器、および第２の薬剤を含む第２の容器を含む。
【０２９８】
キットの情報資料はその形態に限定されない。一実施形態では、情報資料は、化合物の製造、化合物の分子量、濃度、有効期限、バッチまたは製造場所の情報などに関する情報を含むことができる。一実施形態では、情報資料は、アネキシンＡ５タンパク質を、例えば適切な用量、剤形、または投与形態（例えば、本明細書に記載される用量、剤形、または投与形態）で投与して、本明細書に記載されるようなそれを必要とする対象を治療する方法に関する。情報は、印刷テキスト、コンピュータ可読資料、ビデオ記録、またはオーディオ記録、または実質的な資料、例えばインターネットへのリンクまたはアドレスを提供する情報を含む様々なフォーマットで提供することができる。
【０２９９】
アネキシンＡ５タンパク質に加えて、キット中の組成物は、溶媒もしくは緩衝剤、安定剤、または保存剤などの他の成分を含み得る。アネキシンＡ５タンパク質は、任意の形態、例えば液体、乾燥または凍結乾燥形態、好ましくは実質的に純粋および／または無菌の形態で提供することができる。アネキシンＡ５タンパク質が溶液中で提供されるとき、その溶液は好ましくは水溶液である。アネキシンＡ５タンパク質が乾燥形態として提供されるとき、再構成は一般に適切な溶媒の添加による。溶媒、例えば、滅菌水または緩衝液は、任意選択でキット中に提供され得る。
【０３００】
キットは、薬剤を含む単一または複数の組成物のための１つ以上の容器を含み得る。いくつかの実施形態では、キットは、組成物および情報資料のための別々の容器、仕切り、または区画を含む。例えば、組成物は瓶、バイアル、または注射器に入れることができ、情報資料はプラスチック製のスリーブまたはパケットに入れることができる。他の実施形態では、キットの別々の要素は単一の分割されていない容器内に収容されている。例えば、組成物は、ラベルの形態の情報資料を付着させた瓶、バイアルまたは注射器に入れられる。いくつかの実施形態では、キットは、それぞれが１つ以上の単位剤形（例えば、本明細書に記載される剤形）の薬剤を含む複数（例えば、パック）の個々の容器を含む。容器は、組み合わせ単位用量、例えば、アネキシンＡ５タンパク質と第２の薬剤の両方を、例えば所望の比率で含む単位を含むことができる。例えば、キットは、複数の注射器、アンプル、ホイルパケット、ブリスターパック、または医療用デバイスを含み、例えば、それぞれが単一の組み合わせ単位用量を含む。キットの容器は、気密性、防水性（例えば、水分または蒸発の変化に対して不透過性）、および／または遮光性であり得る。
【０３０１】
キットは、組成物の投与に適した装置、例えば注射器または他の適切な送達装置を任意選択で含む。装置は、一方または両方の薬剤が予め装填された状態で提供されてもよく、または空であるが装填に適していてもよい。
【０３０２】
Ｆ．関節の炎症の治療
これまで、多血小板血漿（ＰＲＰ）が関節の炎症の治療に使用されていた。しかし、それが機能するメカニズムは理解されていなかった。方法は、患者の血漿から血小板を濃縮し、次いでそれらの濃縮血小板を同一の患者に再導入して炎症を軽減することを含む。本出願人は、ＰＲＰが通常の血漿よりも実質的に高いアネキシンＡ５レベルを有することを見出した。アネキシンＡ５タンパク質はＰＲＰの活性成分であると仮定されているので、一般に関節炎を治療するための治療薬としてここに記載されている。
【０３０３】
第５の態様では、本発明は、対象における、１つ以上の関節の炎症の予防または治療に使用するためのアネキシンＡ５タンパク質を提供する。
【０３０４】
第５の態様の代替的な実施形態において、本発明は、対象の１つ以上の関節における炎症の予防または治療のための方法であって、
治療有効量のアネキシンＡ５タンパク質を対象に投与するステップを含む、方法を提供する。
【０３０５】
第５の態様の別の代替的な実施形態では、本発明は、対象の１つ以上の関節における炎症の予防または治療のための医薬の製造におけるアネキシンＡ５タンパク質の使用を提供する。
【０３０６】
一実施形態では、炎症は炎症性疾患によって引き起こされる。
【０３０７】
一実施形態では、炎症性疾患は、関節炎、エリテマトーデス、多発性筋炎、皮膚筋炎、シェーグレン症候群、強皮症、混合結合組織疾患、オスグッド−シュラッター病、ウイルス性肝炎、風疹、ベーチェット症候群、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、およびサルコイドーシスからなる一覧から選択される。
【０３０８】
好ましくは、関節炎は、関節リウマチ、変形性関節症、痛風、ループス、線維筋痛症、乾癬性関節炎、反応性関節炎、若年性関節炎、強直性脊椎炎、および敗血症性関節炎からなる一覧から選択される。
【０３０９】
最も好ましくは、関節炎は関節リウマチである。
【０３１０】
一実施形態では、炎症は身体的損傷によって引き起こされる。
【０３１１】
一実施形態では、身体的損傷は、腱炎、滑液包炎、損傷した（例えば、裂傷）靭帯、損傷した（例えば、裂傷）腱、半月板の損傷、軟骨損傷、捻挫、骨折、骨折、欠けた骨、骨の脱臼、および腱鞘炎からなる一覧から選択される１つ以上である。
【０３１２】
本発明の第５の態様のさらなる実施形態には、本発明の第１から第４の態様に関して上に開示された実施形態および好ましい特徴が含まれる。例えば、本発明の第５の態様で言及される関節または各関節は、セクションＢに開示されるように記載され得ることが含まれる。同様に、本発明の第５の態様に言及されるアネキシンＡ５タンパク質は、セクションＣに開示されるように記載され得、本発明の第５の態様に言及される対象は、セクションＤに開示されるように記載され得、および／または投与様式、投与量などは、セクションＥに開示されるように記載され得る。
＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊
【０３１３】
ここで本発明を、１つ以上の非限定的な実施例を参照しながら説明する。
【実施例】
【０３１４】
以下の実施例は、本発明の特定の実施形態を実証するために含まれる。以下の実施例に開示される技術は、本発明の実施において十分に機能することが本発明者によって発見された技術を表し、したがってその実施のための好ましい様式を構成すると考えることができることを当業者は理解されたい。しかしながら、当業者は、本開示に照らして、開示された特定の実施形態に多くの変更を加えることができ、それでも本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく同様または類似の結果を得ることができる。
【０３１５】
実施例１
方法：変形性関節症（ＯＡ）患者由来の軟骨細胞をＩＬ１β（１０ｎｇ／ｍＬ）またはＴＮＦα（１０ｎｇ／ｍＬ）と、アネキシンＡ５（ＡＮＸＡ５）を含んで（１００ｎｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ）または含まず、培養した。ＩＬ１βまたはＴＮＦαによる軟骨細胞の刺激は、炎症を起こした関節環境を模倣する。細胞を３、６、１２、および１８時間で回収した。ＩＣＡＭ‐１（細胞間接着分子１）、ＲＡＮＫＬ（核カッパ−βリガンドの受容体活性化剤）の表面発現およびヨウ化プロピジウム（ＰＩ）による細胞生存率を、フローサイトメトリーにより決定した。
【０３１６】
炎症関連遺伝子ＩＬ−６およびＣＯＸ−２の発現は、ＩＬ１β刺激ＯＡ軟骨細胞において測定した。ＯＡ軟骨細胞を１０ｎｇのＩＬ１βで刺激し、異なる濃度のＡＮＸＡ５（０．１μｇ、５μｇ、および２０μｇ／ｍＬ）のＡＮＸＡ５で６時間処理した。遺伝子の発現は、ＳＹＢＲグリーン反応キットを使用してｑＰＣＲにより測定した。遺伝子発現をＧＡＰＤＨに対して標準化し、そして遺伝子の相対的発現を２ΔΔＣｔを使用して測定した。
【０３１７】
結果：変形性関節症の表現型に寄与する要因は細胞死である。結果は、アネキシンＡ５による処理が、インビボ試験において変形性関節症関連細胞死を減少させることを示している。
【０３１８】
図１は、ヒトモデルにおいて、変形性関節症によって引き起こされる細胞死（ＴＮＦαの適用によって促進される）が、アネキシンＡ５によって阻害され、アネキシンＡ５処理細胞の生存率がＴＮＦα処理を伴わない対照と同様である。
【０３１９】
図３に示されるように、炎症のさらに別の誘因であるＩＬ１−βが、ウマの変形性関節症の発病機序と関連しているという同様の結果が見られる。用量依存的に、アネキシンＡ５が変形性関節症関連細胞死を阻害することが示されており、５μｇおよび２０μｇの用量での処理は、ＩＬ１−β処理を伴わない対照に匹敵する細胞生存率をもたらす。さらに、図３は、アネキシンＡ５タンパク質単独での処理は、ＩＬ１−β処理を伴わない対照と比較するとき、細胞生存率に影響を及ぼさないことを示している。
【０３２０】
変形性関節症に関連する細胞死を抑制するだけでなく、アネキシンＡ５による処理はまた、変形性関節症、および変形性関節症に関連する炎症のバイオマーカーを減少させる。
【０３２１】
ＩＣＡＭ１は、変形性関節症および軟骨細胞に関連する細胞活性化／炎症のマーカーである。図２に示すように、アネキシンＡ５による処理は、ＴＮＦαおよびＴＮＦαで処理されていない対照を使用して細胞死および炎症（両方とも変形性関節症の顕著な特徴）が促進される細胞と比較したとき、ＩＣＡＭ１の発現を減少させる。
【０３２２】
ＲＡＮＫＬは、変形性関節症および軟骨細胞に関連する、細胞活性化／炎症のさらなるマーカーである。図４に示すように、アネキシンＡ５による処理は、変形性関節症の炎症性関節モデルがＩＬ１−βを使用して促進された細胞およびＩＬ１−βで処理されていない対照と比較するとき、用量依存的にＲＡＮＫＬの発現を減少させる。５μｇおよび２０μｇの用量でのアネキシンＡ５タンパク質による処理は、ＩＬ１−β処理を伴わない対照に匹敵するＲＡＮＫＬ発現レベルをもたらす。さらに、図４は、アネキシンＡ５タンパク質単独による処理が、ＲＡＮＫＬ発現に影響を及ぼさないことを示す。
【０３２３】
ＩＬ−６は変形性関節症に関連する炎症誘発性バイオマーカーであり、ＣＯＸ−２は関節炎のバイオマーカーである。図５に示すように、アネキシンＡ５による処理は、変形性関節症状態がＩＬ１−βを使用して誘導された細胞およびＩＬ１−βで処理されていない対照と比較するとき、用量依存的にＩＬ６とＣＯＸ２との両方の発現を減少させる。さらに、図５は、アネキシンＡ５単独による処置がＩＬ６またはＣＯＸ２発現に影響を及ぼさないことを示す。
【０３２４】
結論：アネキシンＡ５による処理は、変形性関節症に関連する細胞死の減少、変形性関節症バイオマーカーの減少、および変形性関節症関連炎症のバイオマーカーの減少を示すことから、変形性関節症の３つの主な顕著な特徴に劇的な影響を及ぼすことを実証する。
【０３２５】
変形性関節症に関連する細胞死の場合、アネキシンＡ５による処理は表現型を完全に救済し、それはアネキシンＡ５が非常に有効な変形性関節症治療薬の特徴を示すことを示す。
【０３２６】
当技術分野で考えられていたこととは反対に、これらのデータは、変形性関節症関節におけるアネキシンＡ５タンパク質の存在が、疾患の病因の媒介物質としてよりもむしろ損傷を修復および／または軽減するように機能することを示す。その結論は、アネキシンＡ５タンパク質が、変形性関節症疾患の２つの重要な媒介因子である、細胞死および炎症の影響を軽減することができることを示すこれらの実験における実証から得られる。
【０３２７】
さらに、炎症の異なる誘因を有する変形性関節症モデルにおけるアネキシンＡ５の有効性は、アネキシンＡ５が広範囲の異なる対象にわたって治療的に有効である可能性が高いことを示す。
【０３２８】
机上の実験例２
以下は、変形性関節症を治療するために、アネキシンＡ５タンパク質をウマに投与することの机上の実験例である。
【０３２９】
使用されるアネキシンＡ５タンパク質は、２５ｍｇ／ｍＬの滅菌溶液として送達されるヒト組換えアネキシンＡ５タンパク質である。タンパク質溶液は輸送中、凍結を維持する。配達時にタンパク質溶液は冷蔵庫（２〜８℃）に保存するべきである。試料を希釈用に回収する前に、バイアル内のタンパク質原液を穏やかに回転させて均一にする。
【０３３０】
アネキシンＡ５タンパク質を希釈して「ビヒクル」を作り出す。ビヒクルは冷蔵庫に保管する必要がある。
【０３３１】
この試験では、３つの異なる関節ペアが使用される。橈骨手根関節と手根間関節がアネキシンＡ５の効果の評価に使用される一方で、チオバイオタル（ｔｉｏｂｉｏｔａｒｓａｌ）関節は潜在的なビヒクルの効果の評価に使用される。２つのタイプの関節について同一である滑液中の最終濃度を得るために、チオバイオタルサル関節はより大量の滑液を有するので、投与されるビヒクルの量は、橈骨手根関節／手根間関節に投与される体積と比較して２倍であろう。
【０３３２】
滑液中の２つの用量、２０μｇ／ｍＬ（橈骨手根関節）および２００μｇ／ｍＬ（手根間関節）のＡＮＸＡ５を試験する。
【表１】
2020506206.tif 000005
＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊
【０３３３】
本明細書に記載される任意の他の使用、方法または組成物に対して、本明細書に記載される任意の使用、方法または組成物を実施することができると考えられる。
【０３３４】
特許請求の範囲および／または本明細書において用語「含む」と合わせて使用される場合の「１つの（ａ）」または「１つの（ａｎ）」という用語の使用は、「１つ」を意味する場合もあるが、それはまた「１つ以上」、「少なくとも１つ」、および「１つまたは２つ以上」の意味とも一致する。
【０３３５】
特に明記しない限り、本明細書で使用されるとき、「約」という用語は、記載されている値の、±５０％、±４０％、±３０％、±２０％、±１０％、±５％、±４％、±３％、±２％、または±１％の範囲を意味する。
【０３３６】
しかしながら、上記の説明は、本発明の様々な実施形態およびその多数の具体的な詳細を示しているが、それは限定ではなく例示として示されていることを理解されたい。本発明の主旨から逸脱することなく、多くの置換、変更、追加、および／または再編が本発明の範囲内で行われてもよく、本発明は、全てのそのような置換、変更、追加、および／または再編を含む。
＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊  ＊
【０３３７】
本明細書に開示され請求される全ての組成物および／または方法は、本開示に照らして過度の実験をすることなく作製および実行することができる。本発明の組成物および方法を好ましい実施形態に関して説明してきたが、本発明の概念、趣旨および範囲から逸脱することなく、本明細書に記載される、組成物および／または方法、ならびに方法のステップまたはステップの順序に変更を加えてもよいことが当業者には明らかであろう。より具体的には、化学的にも生理学的にも関連するある種の薬剤を本明細書に記載される薬剤の代わりに使用しても、同一または同様の結果が達成されることは明らかであろう。当業者に明らかなそのような類似の置換および改変はすべて、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の趣旨、範囲および概念内にあるとみなされる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
2020506206.tif 000008
【図４】
2020506206.tif 000009
【図５ａ】
2020506206.tif 000010
【図５ｂ】
2020506206.tif 000011
【配列表】
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【国際調査報告】
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