(57)【要約】  本明細書に提供されるのは、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド及びそのタンパク質(例えば、抗体)薬物コンジュゲートを含む、肝臓X受容体と関連する疾患及び障害の治療のための化合物、組成物、及び方法である。【選択図】図１１
2020520926.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iの化合物又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態:
【化１】
2020520926.tif 000470
(式中、
Q1及びQ2の各々は、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、-C(OH)2-、-SO2-、-SO-、-PO(OR11)-、-PO(NR11NR12)-、-NR11-、又は-N=であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
R1は、独立に、-H、-OR6、-OH、-NH2、アルキル、又は-OP(O)(OR6)2であり;
R2は、独立に、-H、-OH、-OR11、ハライド、-SO2NR11R12、-CONR11R12、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5であり;
ここで、R1及びR2は、同時には、-Hではなく;
R3は、-N(R6)2であり;
R4は、-X-Y-Zであり;
Xは、-O-及び-N(H)-からなる群から選択され;
Yは、アルキレン、置換アルキレン(オキソ、すなわち、=O置換を含むことになる)、ヘテロアルキレン、及び置換ヘテロアルキレンからなる群から選択され;
Zは、-OH及び-NH2からなる群から選択され;
R5は、アルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各々のヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1つ、2つ、又は3つのヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OH及び-CH2OH、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
各々のR6は、各々の場合に、独立に、-H、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド、生分解性部分、又はアルキルであり;
各々のR7は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、及びO-PEGnであり、ここで、各々のnは、0〜3の整数であり;かつ
各々のR11及びR12は、独立に、-H、アルキル、及びアリールである)。
【請求項２】
式Iによる、請求項1記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態:
【化２】
2020520926.tif 000471
(式中、
Q1及びQ2の各々は、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、又は-C(OH)2-であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
R1は、独立に、-H、-OH、-NH2、アルキル、又は-OP(O)(OR6)2であり;
R2は、独立に、-H、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5であり;
ここで、R1及びR2は、同時には、-Hではなく;
R3は、-N(R6)2であり;
R4は、-X-Y-Zであり;
Xは、-O-及び-N(H)-からなる群から選択され;
Yは、アルキレン、置換アルキレン(オキソ、すなわち、=O置換を含むことになる)、ヘテロアルキレン、及び置換ヘテロアルキレンからなる群から選択され;
Zは、-OH及び-NH2からなる群から選択され;
R5は、アルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各々のヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1つ、2つ、又は3つのヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OH及び-CH2OH、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
各々のR6は、各々の場合に、独立に、-H、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルであり;かつ
各々のR7は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、及びO-PEGnであり、ここで、各々のnは、0〜3の整数である)。
【請求項３】
式Iaによる、請求項1記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態:
【化３】
2020520926.tif 000472
。
【請求項４】
Q1が-CH2-であり、Q2が-C(O)-である、請求項1〜3のいずれか記載の化合物。
【請求項５】
Q1が-C(H)(OH)-であり、Q2が-C(O)-である、請求項1〜4のいずれか記載の化合物。
【請求項６】
Q1が-C(O)-であり、Q2が-C(O)-である、請求項1〜5のいずれか記載の化合物。
【請求項７】
Q1が-C(O)-であり、Q2が-CH2-である、請求項1〜6のいずれか記載の化合物。
【請求項８】
Q1が-C(O)-であり、Q2が-C(H)(OH)-である、請求項1〜7のいずれか記載の化合物。
【請求項９】
Wが-CH2-である、請求項1〜8のいずれか記載の化合物。
【請求項１０】
Wが-O-である、請求項1〜9のいずれか記載の化合物。
【請求項１１】
Wが-NH-である、請求項1〜10のいずれか記載の化合物。
【請求項１２】
R1が-Hであり、R2が、R3、R4、R5、又は-O-R5である、請求項1〜11のいずれか記載の化合物。
【請求項１３】
R1が-OHであり、R2が、R3、R4、R5、又は-O-R5である、請求項1〜12のいずれか記載の化合物。
【請求項１４】
R1が-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2が-Hである、請求項1〜13のいずれか記載の化合物。
【請求項１５】
式Ibによる、請求項1記載の化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態:
【化４】
2020520926.tif 000473
。
【請求項１６】
R1が-OHである、請求項1〜15のいずれか記載の化合物。
【請求項１７】
R2が-O-(CH2)n-Zであり、nが1〜4の整数である、請求項1〜16のいずれか記載の化合物。
【請求項１８】
R2が-N(H)C(O)-(CH2)n-NH2であり、nが1〜4の整数である、請求項1〜17のいずれか記載の化合物。
【請求項１９】
R2が-N(H)C(O)-(CRR)n-NH2であり;各々のRが、-H、-OH、又は-CH2OHであり; nが1〜4の整数である、請求項1〜18のいずれか記載の化合物。
【請求項２０】
R2がN-ピペラジニルである、請求項1〜19のいずれか記載の化合物。
【請求項２１】
R2が-N(R6)2である、請求項1〜20のいずれか記載の化合物。
【請求項２２】
R2がN-セリニルである、請求項1〜21のいずれか記載の化合物。
【請求項２３】
R2がO-グリコシルである、請求項1〜22のいずれか記載の化合物。
【請求項２４】
R1が-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2が-NH2である、請求項1〜23のいずれか記載の化合物。
【請求項２５】
以下のものからなる群から選択される、請求項1記載の化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態：
【化５】
2020520926.tif 000474
。
【請求項２６】
リンカーに結合した請求項1〜25のいずれか記載の化合物を含むリンカー-ペイロード。
【請求項２７】
前記リンカーが請求項1〜26のいずれか記載の化合物の酸素又は一級もしくは二級窒素に結合している、請求項1〜26のいずれか記載のリンカー-ペイロード。
【請求項２８】
以下のものからなる群から選択される、請求項26又は27記載のリンカー-ペイロード
【化６】
2020520926.tif 000475
2020520926.tif 000476
2020520926.tif 000477
2020520926.tif 000478
2020520926.tif 000479
。
【請求項２９】
抗体又はその抗原結合断片に結合した請求項1〜28のいずれか記載の化合物又はリンカー-ペイロードを含む、抗体-薬物-コンジュゲート。
【請求項３０】
式Aの化合物又はその医薬として許容し得る塩もしくは立体異性形態:
【化７】
2020520926.tif 000480
(式中、
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Q1及びQ2の各々は、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、又は-C(OH)2-であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
Rは、独立に、-H、-OH、又は-OP(O)(OR6)(OH)であり;かつ
各々のR6は、各々の場合に、独立に、-H、アミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルであり;かつ
各々のR7は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、及びO-PEGnであり、ここで、各々のnは、0〜3の整数である)。
【請求項３１】
請求項1〜30のいずれか記載の化合物、リンカー-ペイロード、又は抗体-薬物-コンジュゲート及び医薬として許容し得る賦形剤、担体、又は希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項３２】
対象の脂質異常症、代謝性疾患、炎症、又は神経変性疾患の治療のための方法であって、該対象への請求項1〜31のいずれか記載の化合物又は医薬組成物の有効治療量の投与を含む、前記方法。
【請求項３３】
対象の脂質異常症の治療のための方法であって、該対象への請求項1〜32のいずれか記載の化合物又は医薬組成物の有効治療量の投与を含む、前記方法。
【請求項３４】
対象の代謝性疾患の治療のための方法であって、該対象への請求項1〜33のいずれか記載の化合物又は医薬組成物の有効治療量の投与を含む、前記方法。
【請求項３５】
対象の炎症の治療のための方法であって、該対象への請求項1〜34のいずれか記載の化合物又は医薬組成物の有効治療量の投与を含む、前記方法。
【請求項３６】
対象の神経変性疾患の治療のための方法であって、該対象への請求項1〜35のいずれか記載の化合物又は医薬組成物の有効治療量の投与を含む、前記方法。
【請求項３７】
式(B)の、請求項30記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体
【化８】
2020520926.tif 000481
(式中:
各々のSP1、SP2、及びSP3は、スペーサー基であり、ここで、SP3は、(AA)nの1つのAAに連結されており;
各々のAAは、アミノ酸であり;
nは、1〜10の整数であり;かつ
EGは、増強剤である)。
【請求項３８】
前記SP1スペーサーが:
【化９】
2020520926.tif 000482
であり、ここで、RG'が反応基RGと結合剤との反応後の反応基残基であり、
【化１０】
2020520926.tif 000483
が該結合剤との直接的又は間接的な結合であり、かつbが1〜4の整数であり;
前記(AA)n-SP2が-NH-リジン-バリン-アラニン-NH-であり、
前記SP3スペーサーが:
【化１１】
2020520926.tif 000484
であり、ここで、RG'が反応基RGと増強剤EGとの反応後の反応基残基であり;
【化１２】
2020520926.tif 000485
が該増強剤との結合であり;かつ
【化１３】
2020520926.tif 000486
が(AA)nとの結合である、
請求項37記載の化合物。
【請求項３９】
前記化合物が、
【化１４】
2020520926.tif 000487
からなる群から選択され;
ここで、各々の
【化１５】
2020520926.tif 000488
が該結合剤との直接的又は間接的な結合である、
請求項30又は37〜38のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４０】
前記化合物が、
【化１６】
2020520926.tif 000489
であり、ここで、
【化１７】
2020520926.tif 000490
が該結合剤との直接的又は間接的な結合である、
請求項39記載の化合物。
【請求項４１】
前記化合物が、
【化１８】
2020520926.tif 000491
であり、ここで、
【化１９】
2020520926.tif 000492
が該結合剤との直接的又は間接的な結合である、
請求項39記載の化合物。
【請求項４２】
前記化合物が、
【化２０】
2020520926.tif 000493
である、請求項37〜38のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４３】
前記化合物が、
【化２１】
2020520926.tif 000494
である、請求項37〜38のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４４】
前記化合物が、
【化２２】
2020520926.tif 000495
である、請求項37〜38のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４５】
BAが抗体又はその抗原結合断片である、請求項42記載の化合物。
【請求項４６】
kが1〜4の整数である、請求項42記載の化合物。
【請求項４７】
BAがHER2に結合する抗体又はその抗原結合断片である、請求項42記載の化合物。
【請求項４８】
BAがPRLRに結合する抗体又はその抗原結合断片である、請求項42記載の化合物。
【請求項４９】
BAが抗体又はその抗原結合断片であり、コンジュゲーションが少なくとも1つのQ295残基を介するものである、請求項42記載の化合物。
【請求項５０】
BAが抗体又はその抗原結合断片であり、コンジュゲーションが2つのQ295残基を介するものである、請求項42記載の化合物。
【請求項５１】
BAがN297Q抗体又はその抗原結合断片である、請求項42記載の化合物。
【請求項５２】
BAがN297Q抗体又はその抗原結合断片であり、コンジュゲーションが少なくとも1つのQ295及び少なくとも1つのQ297残基を介するものである、請求項42記載の化合物。
【請求項５３】
BAがN297Q抗体又はその抗原結合断片であり、コンジュゲーションが2つのQ295残基及び2つのQ297残基を介するものである、請求項42記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
(関連出願の相互参照)
本出願は、米国特許法第119条の下、その内容が引用により完全に本明細書中に組み込まれる、2017年5月18日に出願された米国仮出願第62/508,327号の恩典を主張するものである。
【０００２】
(分野)
本明細書に提供されるのは、新規のビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド及びそのタンパク質コンジュゲート、並びに該ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド及びそのタンパク質コンジュゲートを投与することを含む、種々の疾患、障害、及び疾病を治療する方法である。
【背景技術】
【０００３】
(背景)
抗体-薬物コンジュゲート(ADC)は、生体活性低分子薬物に付加され、したがって、抗体の標的化特異性を低分子薬物の作用様式及び効力と組み合わせている抗体である。ADCの治療的有用性は、癌治療において立証されており、主要な現在進行中の研究重点である。ADCETRIS(登録商標)(ベンツルキシマブ(bentruximab)ベドチン)及びKADCYLA(登録商標)(アド-トラスツズマブエムタンシン)は、特定の癌タイプの治療に承認されている2つのADCであり、少なくとも40種のADCが、現在、臨床開発中である。
【０００４】
肝臓X受容体(LXR)には、コレステロール、脂質、及びグルコース恒常性、炎症、並びに自然免疫に関与する遺伝子の発現を制御するリガンド依存的転写因子であるLXRα及びLXRβが含まれる。LXRαは、肝臓、腸、脂肪組織、及び分化したマクロファージで高度に発現されており; LXRβは広範に発現されている。LXRは、(i)コレステロール輸送体、例えば、ABCA1及びABCG1(これらは両方とも細胞性コレステロール流出を媒介する)の発現を刺激すること;並びに(ii)NF-kB活性化の抑制を介してマクロファージ炎症性遺伝子発現を負に調節することを含む、様々な生物学的機能を有する。LXRは、アテローム性動脈硬化症、増殖性障害、神経変性障害、及び炎症にも関係があるとされている。増殖性障害には、メラノーマ、肺癌、口腔扁平上皮癌、及び前立腺癌が含まれる(Penchevaらの文献、2004; Wuらの文献、2015; Kanekoらの文献、2015; Chuuらの文献、2006)。神経変性障害には、アルツハイマー病及びミエリン遺伝子発現が含まれる(Terwelらの文献、2011; Sandoval-Hernandezらの文献、2016; Meffreらの文献、2014)。炎症には、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、及び関節炎が含まれる(Andersonらの文献、2011; Huangらの文献、2015; Cuiらの文献、2012)。マクロファージLXRは、抗アテローム形成活性を含むことが知られている。LXRアゴニストは、(i)アテローム性動脈硬化症の開始を阻害し、その進行を遅延させ;(ii)アテローム性動脈硬化症を緩和し、確立されたアテローム性動脈硬化病変を安定化し;かつ(iii)アポトーシスにより病変マクロファージ含量を低下させることができると考えられている。
【０００５】
低分子LXRモジュレーターの治療効力は、例えば、非標的細胞での望ましくないLXRの調節及び/又は低バイオアベイラビリティによって制限される。非標的細胞でのLXRの調節は、望ましくない副作用をもたらすことがあり、低バイオアベイラビリティは、限定されないが、治療の不十分な治療域をさらに悪化させる低溶解度を含む、数多くの理由により現れ得る。LXRモジュレーターを含むADCが開発されれば、標的特異的なLXRの調節が可能になり、それにより、LXRのオフターゲット調節に起因する副作用が回避されるであろう。さらに、そのようなADCであれば、生物学的標的の調節の改善、バイオアベイラビリティの改善、及び治療域の改善をもたらすであろう。それゆえ、LXRモジュレーターの低分子ADCを用いる、例えば、代謝性疾患の効果的な治療が引き続き必要とされている。
【発明の概要】
【０００６】
(概要)
本明細書に提供されるのは、例えば、限定されないが、脂質異常症を含む、代謝性疾患の治療に有用な化合物である。また本明細書に提供されるのは、例えば、炎症又は神経変性疾患の治療に有用な化合物である。本明細書に提供される化合物は、式Iによるものである。
【０００７】
一実施態様において、本明細書に提供されるのは、式Iによる化合物又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
【化１】
2020520926.tif 000003
(式中、
Q1及びQ2の各々は、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、-C(OH)2-、-SO2-、-SO-、-PO(OR11)-、-PO(NR11NR12)-、-NR11-、又は-N=を含み;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-を含み;
R1は、-H、-OR6、-OH、-NH2、アルキル、又は-OP(O)(OR6)2を含み;
R2は、-H、-OH、-OR11、ハライド、-SO2NR11R12、-CONR11R12、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5を含み、ここで、R1及びR2は、同時には、-Hではなく;
R3は、-N(R6)2を含み;
R4は、-X-Y-Zを含み;
Xは、-O-及び-N(H)-からなる基を含み;
Yは、アルキレン、置換アルキレン(オキソ、すなわち、=Oを含む)、ヘテロアルキレン、及び置換ヘテロアルキレン(オキソ、すなわち、=Oを含む)からなる基を含み;
Zは、-OH及び-NH2からなる基を含み;
R5は、アルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルを含み、ここで、各々のヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1つ、2つ、又は3つのヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OHもしくは-CH2OH、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素を含み;
各々のR6は、各々の場合に、独立に、-H、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド、生分解性部分、又はアルキルを含み;
各々のR7は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、及びO-PEGnを含み、ここで、各々のnは、0〜3の整数であり;かつ
各々のR11及びR12は、独立に、-H、アルキル、及びアリールから選択される)。
【０００８】
一実施態様において、本明細書に提供されるのは、式Iによる化合物又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
【化２】
2020520926.tif 000004
(式中、
Q1及びQ2の各々は、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、又は-C(OH)2-を含み;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-を含み;
R1は、-H、-OH、-NH2、アルキル、又は-OP(O)(OR6)2を含み;
R2は、-H、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5を含み、ここで、R1及びR2は、同時には、-Hではなく;
R3は、-N(R6)2を含み;
R4は、-X-Y-Zを含み;
Xは、-O-及び-N(H)-からなる基を含み;
Yは、アルキレン、置換アルキレン(限定されないが、オキソ置換(すなわち、=O)を含む)、ヘテロアルキレン、及び置換ヘテロアルキレン(限定されないが、オキソ置換(すなわち、=O)を含む)からなる基を含み;
Zは、-OH及び-NH2からなる基を含み;
R5は、アルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルを含み、ここで、各々のヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1つ、2つ、又は3つのヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OHもしくは-CH2OH置換基、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素、例えば、O-グルコースを含み;
各々のR6は、各々の場合に、独立に、-H、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルを含み;かつ
各々のR7は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、及びO-PEGnを含み、ここで、各々のnは、0〜3の整数である)。
【０００９】
別の実施態様において、本明細書に示されるのは、上記の式Iによる化合物を有するリンカー-ペイロードである。
【００１０】
別の実施態様において、本明細書に示されるのは、抗体又はその抗原結合断片に結合した、上記の式Iの化合物又はリンカー-ペイロードを有する抗体-薬物コンジュゲートである。
【００１１】
別の実施態様において、本明細書に示されるのは、式Aによる化合物又はその医薬として許容し得る塩、もしくは立体異性形態である:
【化３】
2020520926.tif 000005
(式中、
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Q1及びQ2の各々は、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、又は-C(OH)2-であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
Rは、独立に、-H、-OH、又は-OP(O)(OR6)2であり;かつ
各々のR6は、各々の場合に、独立に、-H、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルであり;かつ
各々のR7は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、及びO-PEGnであり、ここで、各々のnは、0〜3の整数である)。
【００１２】
別の実施態様において、本明細書に示されるのは、本明細書に記載される化合物、リンカー-ペイロード、又は抗体-薬物コンジュゲート及び医薬として許容し得る賦形剤、担体、又は希釈剤を含む医薬組成物である。
【００１３】
別の実施態様において、本明細書に示されるのは、対象の脂質異常症、代謝性疾患、炎症、又は神経変性疾患の治療のための方法であって、該対象への本明細書に記載される化合物、リンカー-ペイロード、もしくは抗体-薬物コンジュゲート、又は医薬組成物の有効治療量の投与を含む、方法である。
【００１４】
別の実施態様において、本明細書に示されるのは、本明細書に記載される化合物、リンカー-ペイロード、又は抗体-薬物コンジュゲート、及び組成物を作製する方法である。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
(図面の簡単な説明)
【図１】図1の1a〜1iは、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、及びそのタンパク質コンジュゲートの合成化学スキームを示している。
【図２】図2は、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、及びそのタンパク質コンジュゲートの合成化学スキームを示している。
【図３】図3の3a〜3eは、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、及びそのタンパク質コンジュゲートの合成化学スキームを示している。
【図４】図4は、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、及びそのタンパク質コンジュゲートの合成化学スキームを示している。
【図５】図5は、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、及びそのタンパク質コンジュゲートの合成化学スキームを示している。
【図６】図6は、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、及びそのタンパク質コンジュゲートの合成化学スキームを示している。
【図７】図7は、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、及びそのタンパク質コンジュゲートの合成化学スキームを示している。
【図８】図8は、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、及びそのタンパク質コンジュゲートの合成化学スキームを示している。
【図９】図9は、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、及びそのタンパク質コンジュゲートの合成化学スキームを示している。
【図１０】図10は、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード、及びそのタンパク質コンジュゲートの合成化学スキームを示している。
【００１６】
【図１１】図11は、抗Her2抗体、抗Her2-PEG3-N3、及び抗Her2-LP8のクマシー染色SDS-PAGEゲルを示している。
【００１７】
【図１２】図12は、抗Her2 Ab、抗Her2-PEG3-N3、及び抗Her2-LP8のSECを示している。
【００１８】
【図１３】図13は、LXRアゴニストによるABCA1及びABCG1遺伝子の活性化を示している。
【００１９】
【図１４】図14は、10点用量応答曲線に対する4パラメータロジスティック曲線を用いたEC50値を示している。
【００２０】
【図１５】図15は、例示的なMSR1抗体-LXRコンジュゲート、そのコンジュゲートされていない対応物、アイソタイプ対照-LXRコンジュゲート、及び対応する遊離ペイロードについてのTHP-1マクロファージにおける用量依存的コレステロール流出のパーセンテージを示すグラフである。
【００２１】
【図１６】図16は、アテローム性動脈硬化症のマウスモデルにおける血清脂質レベルに対する例示的なMSR1抗体-LXRアゴニストコンジュゲート及びそのコンジュゲートされていない対応物の効果を示す一連の棒グラフを提供している。
【００２２】
【図１７】図17は、アテローム性動脈硬化症のマウスモデルにおける病変脂質面積及びマクロファージ(CD68)含量に対する例示的なMSR1抗体-LXRアゴニストコンジュゲート及びそのコンジュゲートされていない対応物の効果を示す一連の棒グラフを提供している。
【００２３】
【図１８】図18は、アテローム性動脈硬化症のマウスモデルにおける肝臓のトリグリセリド及びコレステロールレベルに対する例示的なMSR1抗体-LXRアゴニストコンジュゲート及びそのコンジュゲートされていない対応物の効果を示す一連の棒グラフを提供している。
【００２４】
【図１９】図19は、アテローム性動脈硬化症のマウスモデルにおけるデノボ脂質生成に対する例示的なMSR1抗体-LXRアゴニストコンジュゲート及びそのコンジュゲートされていない対応物の効果を示す一連の棒グラフを提供している。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
(例示的実施態様の説明)
本明細書に提供されるのは、対象の、例えば、脂質異常症、代謝性疾患、炎症、又は神経変性疾患を治療するのに有用な化合物、組成物、及び方法である。
【００２６】
(定義)
本明細書に提供される化合物に言及する場合、以下の用語は、別途示されない限り、以下の意味を有する。別途定義されない限り、本明細書で使用される技術的及び科学的用語は全て、当業者によって一般に理解されているのと同じ意味を有する。本明細書に提供される用語について複数の定義がある場合、別途明記されない限り、これらの定義が優先する。
【００２７】
本明細書で使用される場合、「アルキル」は、一価及び飽和炭化水素ラジカル部分を指す。アルキルは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状、すなわち、シクロアルキルであることができる。アルキルとしては、1〜20個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-20アルキル; 1〜12個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-12アルキル; 1〜8個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-8アルキル; 1〜6個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-6アルキル;及び1〜3個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-3アルキルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキル部分の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、s-ブチル、t-ブチル、i-ブチル、ペンチル部分、ヘキシル部分、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。ペンチル部分としては、n-ペンチル及びi-ペンチルが挙げられるが、これらに限定されない。ヘキシル部分としては、n-ヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２８】
本明細書で使用される場合、「アルキレン」は、二価アルキル基を指す。別途指定されない限り、アルキレンは、1〜20個の炭素原子を含むが、これらに限定されない。アルキレン基は、アルキルについて本明細書に記載されている通りに任意に置換されている。いくつかの実施態様において、アルキレンは、置換されていない。
【００２９】
本明細書で使用される場合、「O-アミノ酸」又は「HO-アミノ酸」という用語は、アミノ酸又はアミノ酸配列のN-末端の天然アミノ基が、それぞれ、酸素又はヒドロキシル基と置き換えられているアミノ酸を表す。例えば、「O-AAAA」又は「HO-AAAA」は、N-末端の天然アミノ基が、それぞれ、酸素又はヒドロキシル基と置き換えられているアミノ酸配列(AAAA)(例えば、
【化４】
2020520926.tif 000006
、ここで、各々のRは、アミノ酸側鎖である)を表すことが意図される。同様に、「O-アミノ酸残基」又は「HO-アミノ酸残基」という用語は、化学反応後に残る化合物内の化学的部分を指す。例えば、「O-アミノ酸残基」又は「HO-アミノ酸残基」は、O-アミノ酸又はHO-アミノ酸と好適なカップリングパートナーとのアミドカップリング又はペプチドカップリングの生成物を指し;ここで、例えば、水分子は、該O-アミノ酸又は該HO-アミノ酸のアミド又はペプチドカップリング後に追い出され、結果として、該O-アミノ酸残基又は該HO-アミノ酸残基がその中に取り込まれた生成物が生じる。
【００３０】
その立体化学を特定しないアミノ酸又はアミノ酸残基の表記は、L型のアミノ酸、D型のアミノ酸、又はこれらのラセミ混合物を包含することが意図される。
【００３１】
本明細書で使用される場合、「ハロアルキル」は、上で定義されているようなアルキルを指し、ここで、該アルキルは、ハロゲン、例えば、フッ素(F)、塩素(Cl)、臭素(Br)、又はヨウ素(I)から選択される少なくとも1つの置換基を含む。ハロアルキルの例としては、-CF3、-CH2CF3、-CCl2F、及び-CCl3が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３２】
本明細書で使用される場合、「アルケニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1以上の非芳香族炭素-炭素二重結合を含有する一価炭化水素ラジカル部分を指す。アルケニルは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状であることができる。アルケニルとしては、2〜20個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-20アルケニル; 2〜12個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-12アルケニル; 2〜8個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-8アルケニル; 2〜6個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-6アルケニル;及び2〜4個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-4アルケニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルケニル部分の例としては、ビニル、プロペニル、ブテニル、及びシクロヘキセニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３３】
本明細書で使用される場合、「アルキニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1以上の炭素-炭素三重結合を含有する一価炭化水素ラジカル部分を指す。アルキニルは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状であることができる。アルキニルとしては、2〜20個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-20アルキニル; 2〜12個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-12アルキニル; 2〜8個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-8アルキニル; 2〜6個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-6アルキニル;及び2〜4個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-4アルキニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキニル部分の例としては、エチニル、プロピニル、及びブチニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３４】
本明細書で使用される場合、「アルコキシ」は、一価及び飽和炭化水素ラジカル部分を指し、ここで、該炭化水素は酸素原子との単結合を含み、かつ該ラジカルは酸素原子上に位置し、例えば、エトキシの場合、CH3CH2-O・である。アルコキシ置換基は、それが該アルコキシ置換基のこの酸素原子を介して置換する化合物に結合する。アルコキシは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状、すなわち、シクロアルコキシであることができる。アルコキシとしては、1〜20個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-20アルコキシ; 1〜12個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-12アルコキシ; 1〜8個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-8アルコキシ; 1〜6個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-6アルコキシ;及び1〜3個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-3アルコキシが挙げられるが、これらに限定されない。アルコキシ部分の例としては、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、i-プロポキシ、n-ブトキシ、s-ブトキシ、t-ブトキシ、i-ブトキシ、ペントキシ部分、ヘキソキシ部分、シクロプロポキシ、シクロブトキシ、シクロペントキシ、及びシクロヘキソキシ(すなわち、それぞれ、
【化５】
2020520926.tif 000007
)が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３５】
本明細書で使用される場合、「ハロアルコキシ」は、上で定義されているようなアルコキシを指し、ここで、該アルコキシは、ハロゲン、例えば、F、Cl、Br、又はIから選択される少なくとも1つの置換基を含む。
【００３６】
本明細書で使用される場合、「アリール」は、環原子が炭素原子である芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す。アリールは、任意に置換されており、単環式又は多環式、例えば、二環式もしくは三環式であることができる。アリール部分の例としては、6〜20個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-20アリール; 6〜15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリール、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリールが挙げられるが、これらに限定されない。アリール部分の例としては、フェニル、ナフチル、フルオレニル、アズレニル、アントリル、フェナントリル、及びピレニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３７】
本明細書で使用される場合、「アリールアルキル」は、アルキル化合物のラジカルである一価部分を指し、ここで、該アルキル化合物は芳香族置換基で置換されている、すなわち、芳香族化合物はアルキル基との単結合を含み、かつ該ラジカルは該アルキル基上に位置する。アリールアルキル基は、アルキル基を介して、図示されている化学構造に結合する。アリールアルキルは、構造、例えば、
【化６】
2020520926.tif 000008
(ここで、Bは、芳香族部分、例えば、フェニルである)によって表すことができる。アリールアルキルは任意に置換されている、すなわち、アリール基及び/又はアルキル基は、本明細書に開示されているように置換されることができる。アリールアルキルの例としては、ベンジルが挙げられるが、これに限定されない。
【００３８】
本明細書で使用される場合、「アルキルアリール」は、アリール化合物のラジカルである一価部分を指し、ここで、該アリール化合物はアルキル置換基で置換されている、すなわち、アリール化合物はアルキル基との単結合を含み、かつ該ラジカルは該アリール基上に位置する。アルキルアリール基は、アリール基を介して、図示されている化学構造に結合する。アルキルアリールは、構造、例えば、
【化７】
2020520926.tif 000009
(ここで、Bは、芳香族部分、例えば、フェニルである)によって表すことができる。アルキルアリールは任意に置換されている、すなわち、アリール基及び/又はアルキル基は、本明細書に開示されているように置換されることができる。アルキルアリールの例としては、トルイルが挙げられるが、これに限定されない。
【００３９】
本明細書で使用される場合、「アリールオキシ」は、環原子が炭素原子であり、かつ該環が酸素ラジカルと置換されている芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す、すなわち、該芳香族化合物は酸素原子との単結合を含み、かつ該ラジカルは該酸素原子上に位置し、例えば、フェノキシの場合、
【化８】
2020520926.tif 000010
である。アリールオキシ置換基は、それがこの酸素原子を介して置換する化合物に結合する。アリールオキシは、任意に置換されている。アリールオキシとしては、6〜20個の環炭素原子を有するラジカル、すなわち、C6-20アリールオキシ; 6〜15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリールオキシ、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリールオキシが挙げられるが、これらに限定されない。アリールオキシ部分の例としては、フェノキシ、ナフトキシ、及びアントロキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４０】
本明細書で使用される場合、「RaRbN-アリールオキシ」は、環原子が炭素原子であり、かつ該環が少なくとも1つのRaRbN-置換基及び少なくとも1つの酸素ラジカルと置換されている芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す、すなわち、該芳香族化合物は、RaRbN-置換基との単結合及び酸素原子との単結合を含み、かつ該ラジカルは該酸素原子上に位置し、例えば、
【化９】
2020520926.tif 000011
である。RaRbN-アリールオキシ置換基は、それがこの酸素原子を介して置換する化合物に結合する。RaRbN-アリールオキシは、任意に置換されている。RaRbN-アリールオキシとしては、6〜20個の環炭素原子を有するもの、例えば、C6-20(RaRbN)n-アリールオキシ、6〜15個の環炭素原子を有するもの、例えば、C6-15(RaRbN)n-アリールオキシ、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、例えば、C6-10(RaRbN)n-アリールオキシ(ここで、nは、RaRbN-置換基の数を表す)が挙げられるが、これらに限定されない。RaRbN-アリールオキシ部分の例としては、4-(ジメチル-アミノ)-フェノキシ、
【化１０】
2020520926.tif 000012
が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４１】
本明細書で使用される場合、「アリーレン」は、環原子が炭素原子のみである芳香族化合物の二価部分を指す。アリーレンは、任意に置換されており、単環式又は多環式、例えば、二環式もしくは三環式であることができる。アリール部分の例としては、6〜20個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-20アリーレン; 6〜15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリーレン、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリーレンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４２】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアルキルを指す。本明細書で使用される場合、「ヘテロアルケニル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアルケニルを指す。本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキニル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアルケニルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアルキルは、任意に置換されている。ヘテロアルキル部分の例としては、アミノアルキル、スルホニルアルキル、及びスルフィニルアルキルが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアルキル部分の例としては、メチルアミノ、メチルスルホニル、及びメチルスルフィニルも挙げられるが、これらに限定されない。
【００４３】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」は、環原子が炭素原子及び少なくとも1つの酸素、硫黄、窒素、又はリン原子を含有する芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す。ヘテロアリール部分の例としては、5〜20個の環原子; 5〜15個の環原子;及び5〜10個の環原子を有するものが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアリールは、任意に置換されている。
【００４４】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリーレン」は、芳香環の1以上の環原子が酸素、硫黄、窒素、又はリン原子と置換されているアリーレンを指す。ヘテロアリーレンは、任意に置換されている。
【００４５】
本明細書で使用される場合、「ヘテロシクロアルキル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているシクロアルキルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキルは、任意に置換されている。ヘテロシクロアルキル部分の例としては、モルホリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、ジオキソラニル、ジチオラニル、オキサニル、又はチアニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４６】
本明細書で使用される場合、「ルイス酸」は、孤立電子対を受け取る分子又はイオンを指す。本明細書に記載される方法で使用されるルイス酸は、プロトン以外のものである。ルイス酸としては、非金属酸、金属酸、硬いルイス酸、及び軟らかいルイス酸が挙げられるが、これらに限定されない。ルイス酸としては、アルミニウム、ホウ素、鉄、スズ、チタン、マグネシウム、銅、アンチモン、リン、銀、イッテルビウム、スカンジウム、ニッケル、及び亜鉛のルイス酸が挙げられるが、これらに限定されない。例示的なルイス酸としては、AlBr3、AlCl3、BCl3、三塩化ホウ素硫化メチル、BF3、三フッ化ホウ素メチルエーテル、三フッ化ホウ素硫化メチル、三フッ化ホウ素テトラヒドロフラン、ジシクロヘキシルボロントリフルオロメタンスルホネート、鉄(III)臭化物、鉄(III)塩化物、スズ(IV)塩化物、チタン(IV)塩化物、チタン(IV)イソプロポキシド、Cu(OTf)2、CuCl2、CuBr2、塩化亜鉛、ハロゲン化アルキルアルミニウム(RnAlX3-n、ここで、Rはヒドロカルビルである)、Zn(OTf)2、ZnCl2、Yb(OTf)3、Sc(OTf)3、MgBr2、NiCl2、Sn(OTf)2、Ni(OTf)2、及びMg(OTf)2が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４７】
本明細書で使用される場合、「N-含有ヘテロシクロアルキル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されており、かつ少なくとも1つのヘテロ原子が窒素原子であるシクロアルキルを指す。窒素の他に好適なヘテロ原子としては、酸素及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。N-含有ヘテロシクロアルキルは、任意に置換されている。N-含有ヘテロシクロアルキル部分の例としては、モルホリニル、ピペリジニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、又はチアゾリジニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４８】
本明細書で使用される場合、ラジカル部分を説明するために使用されるときの「任意に置換された」、例えば、任意に置換されたアルキルは、そのような部分が1以上の置換基に任意に結合していることを意味する。そのような置換基の例としては、ハロ、シアノ、ニトロ、任意に置換されたハロアルキル、アジド、エポキシ、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、
【化１１】
2020520926.tif 000013
(ここで、RA、RB、及びRCは、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクロアルキルであるか、又はRA及びRBは、それらが結合している原子と一緒に、飽和もしくは不飽和炭素環を形成し、ここで、該環は、任意に置換されており、かつ1以上の環原子はヘテロ原子で任意に置換されている)が挙げられるが、これらに限定されない。ある実施態様において、ラジカル部分が、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和もしくは不飽和炭素環で任意に置換されているとき、該任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和もしくは不飽和炭素環上の置換基は、それらが置換されている場合、さらなる置換基でさらに任意に置換されている置換基で置換されていない。いくつかの実施態様において、本明細書に記載される基が任意に置換されているとき、該基に結合している置換基は、別途規定されない限り、置換されていない。
【００４９】
本明細書で使用される場合、「結合剤」は、所与の結合パートナー、例えば、抗原と特異性を伴って結合することができる任意の分子、例えば、タンパク質を指す。
【００５０】
本明細書で使用される場合、「リンカー」は、結合剤を、本明細書に記載される1以上の化合物、例えば、ペイロード化合物及び増強剤に共有結合させる二価、三価、又は多価部分を指す。
【００５１】
本明細書で使用される場合、「アミド合成条件」は、例えば、カルボン酸、活性化カルボン酸、又はアシルハライドとアミンとの反応によって、アミドの形成を達成するために好適な反応条件を指す。いくつかの例において、「アミド合成条件」は、カルボン酸とアミンの間のアミド結合の形成を達成するために好適な反応条件を指す。これらの例のいくつかにおいて、カルボン酸は、まず、活性化カルボン酸に変換され、その後、該活性化カルボン酸がアミンと反応して、アミドを形成する。アミドの形成を達成するための好適な条件としては、限定されないが、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、ジイソプロピルカルボジイミド(DIC)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(BOP)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBOP)、(7-アザベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyAOP)、ブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBrOP)、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HBTU)、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート(TBTU)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシドヘキサフルオロホスフェート(HATU)、N-エトキシカルボニル-2-エトキシ-1,2-ジヒドロキノリン(EEDQ)、N-エチル-N'-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDC)、2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリジニウムヘキサフルオロホスフェート(CIP)、2-クロロ-4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン(CDMT)、及びカルボニルジイミダゾール(CDI)を含む、カルボン酸とアミンの反応を達成するための試薬を利用するものが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの例において、カルボン酸を、まず、活性化カルボン酸エステルに変換し、その後、該活性化カルボン酸エステルをアミンで処理して、アミド結合を形成させる。ある実施態様において、カルボン酸を試薬で処理する。試薬は、カルボン酸を脱プロトン化し、その後、脱プロトン化されたカルボン酸によるプロトン化された試薬への求核攻撃の結果として、脱プロトン化されたカルボン酸との生成物複合体を形成させることにより、カルボン酸を活性化する。その後、特定のカルボン酸の活性化カルボン酸エステルは、カルボン酸が活性化される前よりも、アミンによる求核攻撃に対して感受性が高い。この結果として、アミド結合形成が生じる。したがって、カルボン酸は、活性化されたと記載されている。例示的な試薬としては、DCC及びDICが挙げられる。
【００５２】
本明細書で使用される場合、「位置異性体(単数)」、「位置異性体(複数)」、又は「位置異性体の混合物」は、好適なアルキンで処理された好適なアジド(例えば、-N3、又はPEG-N3誘導体化抗体)から誘導される1,3-付加環化又は歪み促進アルキン-アジド付加環化(SPAAC)−別名、クリック反応として知られる−の生成物を指す。ある実施態様において、例えば、位置異性体及び位置異性体の混合物は、下に示されるクリック反応生成物によって特徴付けられる:
【化１２】
2020520926.tif 000014
。ある実施態様において、複数の好適なアジド及び複数の好適なアルキンを生成物に向かう途中の合成スキームで利用することができ、この合成スキームにおいて、各々のアジド-アルキン対が1以上の独立したクリック反応に関与して、位置異性クリック反応生成物の混合物を生成させることができる。例えば、当業者は、生成物に向かう途中で、第一の好適なアジドが第一の好適なアルキンと独立に反応することができ、第二の好適なアジドが第二の好適なアルキンと独立に反応することができ、本明細書に記載されるADCの試料中で4つの可能なクリック反応位置異性体又は4つの可能なクリック反応位置異性体の混合物が結果として生成されることを認識しているであろう。さらなる例として、当業者は、生成物に向かう途中で、第一の好適なアジドが第一の好適なアルキンと独立に反応することができ、第二の好適なアジドが第二の好適なアルキンと独立に反応することができ、本明細書に記載されるLPの試料中で4つの可能なクリック反応位置異性体又は4つの可能なクリック反応位置異性体の混合物が結果として生成されることを認識しているであろう。
【００５３】
本明細書で使用される場合、「残基」という用語は、化学反応後に残る化合物内の化学的部分を指す。例えば、「アミノ酸残基」又は「N-アルキルアミノ酸残基」という用語は、アミノ酸又はN-アルキルアミノ酸と好適なカップリングパートナーとのアミドカップリング又はペプチドカップリングの生成物を指し;ここで、例えば、水分子は、該アミノ酸又は該N-アルキルアミノ酸のアミド又はペプチドカップリング後に追い出され、結果として、該アミノ酸残基又はN-アルキルアミノ酸残基がその中に取り込まれた生成物が生じる。
【００５４】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」は、疾患もしくは障害の治療もしくは管理における患者への治療的利益を提供するのに又は疾患もしくは障害と関連する1以上の症状を遅延もしくは最小化させるのに十分である(例えば、化合物の)量を指す。
【００５５】
特定の基、部分、置換基、及び原子は、該基、部分、置換基、原子が結合している原子を示すために、結合(単数)もしくは結合(複数)を交差する波線で示されている。例えば、以下のように示されるプロピル基:
【化１３】
2020520926.tif 000015
と置換されているフェニル基は、以下の構造:
【化１４】
2020520926.tif 000016
を有する。本明細書で使用される場合、環原子間の結合を介して環状基(例えば、芳香族、ヘテロ芳香族、縮合環、及び飽和もしくは不飽和シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル)に結合した置換基を示す図は、別途規定されない限り、該環状基が、本明細書に記載されるか又は本開示が関係する分野で公知である技法に従って、環状基中の任意の環位置で又は縮合環基中の任意の環上で、その置換基と置換され得ることを示すことが意図される。例えば、下付き文字qが0〜4の整数であり、かつ置換基R1の位置が一般的に記載されている、すなわち、結合線構造の任意の頂点、すなわち、特定の環炭素原子に直接結合していない基
【化１５】
2020520926.tif 000017
は、置換基R1が特定の環炭素原子に結合している以下の非限定的な例の基を含む:
【化１６】
2020520926.tif 000018
。
【００５６】
本明細書で使用される場合、「反応性リンカー」という語句又は「RL」という略語は、例えば、
【化１７】
2020520926.tif 000019
(ここで、RGは反応基であり、SPはスペーサー基である)として示される、反応基及びスペーサー基を含む一価基を指す。本明細書に記載される場合、反応性リンカーは、複数の反応基及び複数のスペーサー基を含むことができる。スペーサー基は、反応基を、別の基、例えば、ペイロードに架橋する任意の二価部分である。反応性リンカー(RL)は、それが結合しているペイロードと一緒に、本明細書に記載される抗体コンジュゲートの調製のための合成前駆体として有用な中間体(「リンカー-ペイロード」)を提供する。反応性リンカーは、別の基、例えば、抗体、修飾抗体、もしくはこれらの抗原結合断片、又は増強基の反応性部分と反応することができる官能基又は官能部分である反応基(「RG」)を含む。反応基と、連結基を併せ持つ抗体、修飾抗体、又はこれらの抗原結合断片との反応によって生じる部分には、本明細書に記載されるコンジュゲートの「結合剤リンカー」(「BL」)部分が含まれる。ある実施態様において、「反応基」は、抗体又はその抗原結合断片のシステイン又はリジン残基と反応する官能基又は官能部分(例えば、マレイミド又はN-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)エステル)である。ある実施態様において、「反応基」は、クリック化学反応を受けることができる官能基又は官能部分である(例えば、クリック化学、Huisgenの文献、Proc. Chem. Soc. 1961、Wangらの文献、J. Am. Chem. Soc. 2003、及びAgardらの文献、J. Am. Chem. Soc. 2004を参照)。該クリック化学反応のいくつかの実施態様において、反応基は、アジドとの1,3付加環化反応を受けることができるアルキンである。そのような好適な反応基としては、歪みアルキン、例えば、歪み促進アルキン-アジド付加環化(SPAAC)に好適なもの、シクロアルキン、例えば、シクロオクチン、ベンズ環化アルキン、及び銅触媒の非存在下でアルキンとの1,3付加環化反応を受けることができるアルキンが挙げられるが、これらに限定されない。好適なアルキンとしては、ジベンゾアザシクロオクチン又は
【化１８】
2020520926.tif 000020
、ジベンゾシクロオクチン又は
【化１９】
2020520926.tif 000021
、ビアリールアザシクロオクチノン又は
【化２０】
2020520926.tif 000022
、二フッ素化シクロオクチン又は
【化２１】
2020520926.tif 000023
、置換、例えば、フッ素化アルキン、アザ-シクロアルキン、ビシクル[6.1.0]ノニン又は
【化２２】
2020520926.tif 000024
(BCN、ここで、Rは、アルキル、アルコキシ、もしくはアシルである)、及びこれらの誘導体も挙げられるが、これらに限定されない。特に有用なアルキンとしては、
【化２３】
2020520926.tif 000025
が挙げられる。そのような反応基を含むリンカー-ペイロードは、アジド基で官能化されている抗体をコンジュゲートするのに有用である。そのような官能化抗体には、アジド-ポリエチレングリコール基で官能化された抗体が含まれる。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも1つのグルタミン残基、例えば、重鎖Gln295を有する抗体を、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、アミノ基及びアジド基を担持する化合物で処理することにより得られる。
【００５７】
いくつかの例において、反応基は、アルキン、例えば、
【化２４】
2020520926.tif 000026
であり、これは、クリック化学反応を介して、アジド、例えば、
【化２５】
2020520926.tif 000027
と反応して、クリック化学反応生成物、例えば、
【化２６】
2020520926.tif 000028
を形成することができる。いくつかの例において、該基は、修飾抗体又はその抗原結合断片上のアジドと反応する。いくつかの例において、反応基は、アルキン、例えば、
【化２７】
2020520926.tif 000029
であり、これは、クリック化学反応を介して、アジド、例えば、
【化２８】
2020520926.tif 000030
と反応して、クリック化学反応生成物、例えば、
【化２９】
2020520926.tif 000031
を形成することができる。いくつかの例において、反応基は、アルキン、例えば、
【化３０】
2020520926.tif 000032
であり、これは、クリック化学反応を介して、アジド、例えば、
【化３１】
2020520926.tif 000033
と反応して、クリック化学反応生成物、例えば、
【化３２】
2020520926.tif 000034
を形成することができる。いくつかの例において、反応基は、官能基、例えば、
【化３３】
2020520926.tif 000035
であり、これは、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン残基と反応して、それとの結合、例えば、
【化３４】
2020520926.tif 000036
(ここで、Abは、抗体又はその抗原結合断片を表し、Sは、それを介して該官能基が該Abに結合するシステイン残基上のS原子を表す)を形成する。いくつかの例において、反応基は、官能基、例えば、
【化３５】
2020520926.tif 000037
であり、これは、抗体又はその抗原結合断片上のリジン残基と反応して、それとの結合、例えば、
【化３６】
2020520926.tif 000038
(ここで、Abは、抗体又はその抗原結合断片を表し、NHは、それを介して該官能基が該Abに結合するリジン側鎖残基上のNH原子を表す)を形成する。
【００５８】
本明細書で使用される場合、「生分解性部分」という語句は、通常の生物学的プロセスによって身体から除去されることができる無毒な生体適合性成分にインビボで分解する部分を指す。いくつかの実施態様において、生分解性部分は、約90日以下、約60日以下、又は約30日以下かけて、インビボで完全に又は実質的に分解し、ここで、分解の程度は、該生分解性部分のパーセント質量損失に基づき、ここで、完全な分解は、100％質量損失に相当する。例示的な生分解性部分としては、脂肪族ポリエステル、例えば、ポリ(ε-カプロラクトン)(PCL)、ポリ(3-ヒドロキシブチレート)(PHB)、ポリ(グリコール酸)(PGA)、ポリ(乳酸)(PLA)、及びグリコール酸とのそのコポリマー(すなわち、ポリ(D,L-ラクチド-コグリコリド)(PLGA)が挙げられるが、これらに限定されない(その各々が引用により完全に本明細書中に組み込まれる、Vert M、Schwach G、Engel R、及びCoudane Jの文献(1998) J Control Release 53(1-3):85-92; Jain R Aの文献(2000) Biomaterials 21(23):2475-2490; Uhrich K E、Cannizzaro S M、Langer R S、及びShakesheff K Mの文献(1999) Chemical Reviews 99(11):3181-3198;並びにPark T Gの文献(1995) Biomaterials 16(15):1123-1130)。
【００５９】
本明細書で使用される場合、「有効量」、「生理的有効量」、又は「予防的有効量」という語句は、そのような治療を必要としている対象に投与されたとき、治療をもたらすのに十分である化合物の量を指す。活性物質の「生理的有効量」は、患者に対する外から観察可能な顕著な効果を有する活性物質の有効量を示す。したがって、生理的有効量は、効果を決定するための特別な装置を必要とせず、患者の特徴(例えば、表現型)のうちの1つ又は複数に影響を及ぼす。例えば、本明細書に開示される化合物の生理的有効量は、治療されている疾病の症状のうちの1つ又は複数を軽減することにより、患者の行動に対する外から観察可能な顕著な効果を有する。したがって、患者を観察することにより、及び活性物質が原因で該患者に変化が生じたかどうかを観察することにより、活性物質の有効量が投与されたかどうかを決定することができる。
【００６０】
本明細書で使用される場合、「結合剤リンカー」又は「BL」という語句は、結合剤(例えば、抗体又はその抗原結合断片)を、本明細書に示されるペイロード化合物(例えば、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド)と、及び任意に1以上の側鎖化合物と連結させ、接続させ、又は結合させる任意の二価、三価、又は多価基又は部分を指す。通常、本明細書に記載される抗体コンジュゲートのための好適な結合剤リンカーは、抗体の循環半減期を利用するのに十分に安定であり、同時に、該コンジュゲートの抗原媒介性内在化の後に、そのペイロードを放出することができるものである。リンカーは、切断性又は非切断性であることができる。切断性リンカーは、内在化後の細胞内代謝、例えば、加水分解、還元、又は酵素反応による切断によって切断されるリンカーである。非切断性リンカーは、結合したペイロードを、内在化後の抗体のリソソーム分解によって放出するリンカーである。好適なリンカーとしては、酸不安定性リンカー、加水分解不安定性リンカー、酵素切断性リンカー、還元不安定性リンカー、自壊性リンカー、及び非切断性リンカーが挙げられるが、これらに限定されない。好適なリンカーとしては、ペプチド、グルクロニド、スクシンイミド-チオエーテル、ポリエチレングリコール(PEG)単位、ヒドラゾン、マル-カプロイル単位、ジペプチド単位、バリン-シトルリン単位、及びパラ-アミノベンジル(PAB)単位であるか、又はこれらを含むものも挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、結合剤リンカー(BL)は、反応性リンカー(RL)の反応基(RG)と結合剤、例えば、抗体、修飾抗体、又はこれらの抗原結合断片の反応部分の反応によって形成される部分を含む。
【００６１】
いくつかの例において、BLは、以下の部分:
【化３７】
2020520926.tif 000039
又はトリアゾリル位置異性体を含み、ここで、
【化３８】
2020520926.tif 000040
は、結合剤との結合である。いくつかの例において、BLは、以下の部分:
【化３９】
2020520926.tif 000041
を含み、ここで、
【化４０】
2020520926.tif 000042
は、結合剤との結合である。いくつかの例において、BLは、以下の部分:
【化４１】
2020520926.tif 000043
又はトリアゾリル位置異性体を含み、ここで、
【化４２】
2020520926.tif 000044
は、結合剤との結合である。いくつかの例において、BLは、以下の部分:
【化４３】
2020520926.tif 000045
を含み、ここで、
【化４４】
2020520926.tif 000046
は、抗体又はその抗原結合断片のシステインとの結合である。いくつかの例において、BLは、以下の部分:
【化４５】
2020520926.tif 000047
を含み、ここで、
【化４６】
2020520926.tif 000048
は、抗体又はその抗原結合断片のリジンとの結合である。
【００６２】
(化合物及びペイロード)
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、式(I)の構造を有する化合物又は医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
【化４７】
2020520926.tif 000049
(式中、
Q1及びQ2の各々は、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、又は-C(OH)2-であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
R1は、-H、-OH、-NH2、アルキル、又は-OP(O)(OR6)2であり;
R2は、-H、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5であり、ここで、R1及びR2は、同時には、-Hではなく;
R3は、-N(R6)2であり;
R4は、-X-Y-Zであり;
Xは、-O-及び-N(H)-からなる群から選択され;
Yは、アルキレン、置換アルキレン(限定されないが、オキソ置換、すなわち、=Oを含む)、ヘテロアルキレン、及び置換ヘテロアルキレン(限定されないが、オキソ置換(すなわち、=O)を含む)からなる群から選択され;
Zは、-OH及び-NH2からなる群から選択され;
R5は、アルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各々のヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1つ、2つ、又は3つのヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OH及び-CH2OH置換基、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素、例えば、O-グルコースを含み;
各々のR6は、各々の場合に、-H、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルであり;かつ
各々のR7は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、及びO-PEGnであり、ここで、各々のnは、0〜3の整数である)。
【００６３】
式I中、ある実施態様において、R5は、ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルである。有益なヘテロシクロアルキル基としては、テトラヒドロピラニル、グリコシジル、及びピペラジニルが挙げられる。これらの基は置換されていても、置換されていなくてもよい。ある実施態様において、これらは置換されていない。ある実施態様において、これらは置換されている。例示的な置換基としては、少なくとも1つのヒドロキシル、少なくとも1つの一級窒素、又は少なくとも1つの二級窒素が挙げられる。
【００６４】
式Iのある実施態様において、R6は、各々の場合に、独立に、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、又はペプチドである。当業者は、アミノ酸残基が、アキラル又はキラル、例えば、L-アミノ酸又はD-アミノ酸であり得ることを認識しているであろう。アミノ酸は、通常、アミノ酸側鎖を含む。該側鎖は、当業者に公知の任意のアミノ酸の側鎖であることができる。ある実施態様において、該側鎖は、ヒスチジン、アラニン、イソロイシン、アルギニン、ロイシン、アスパラギン、リジン、アスパラギン酸、メチオニン、システイン、フェニルアラニン、グルタミン酸、トレオニン、グルタミン、トリプトファン、バリン、オルニチン、セレノシステイン、セリン、グリシン、ホモグリシン(例えば、β-ホモグリシン)、又はチロシンの側鎖である。当業者は、ペプチドが、例えば、ラセミ体DL-アミノ酸又は非ラセミ体D-もしくはL-アミノ酸及びこれらのジアステレオマー混合物を含む、アキラル又はキラルであり得ることを認識しているであろう。ペプチドの側鎖は、上記アミノ酸の文脈において記載した通りである。当業者は、N-アルキルアミノ酸残基が該アミノ酸残基の末端アミノ基又は該ペプチドの末端アミノ基に、本明細書に定義されているようなアルキル置換基を含むことを認識しているであろう。例としては、N-メチルアミノ酸及びN-エチルアミノ酸が挙げられる。
【００６５】
式I中、ある実施態様において、各々のR7は、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGnであり、ここで、各々のnは、0〜3の整数である。ある実施態様において、O-アミノ酸残基は、上で定義されているHO-アミノ酸残基を含む。一実施態様において、O-PEGnは、n＝0の場合のものである。別の実施態様において、O-PEGnは、n＝1の場合のものである。別の実施態様において、O-PEGnは、n＝2の場合のものである。別の実施態様において、O-PEGnは、n＝3の場合のものである。
【００６６】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、式(Ia)の構造を有する化合物又は医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
【化４８】
2020520926.tif 000050
(式中、
Q1及びQ2の各々は、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、又は-C(OH)2-であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
R1は、-H、-OH、-NH2、アルキル、又は-OP(O)(OR6)(OH)-OP(O)(OR6)2であり;
R2は、-H、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5であり、ここで、R1及びR2は、同時には、-Hではなく;
R3は、-N(R6)2であり;
R4は、-X-Y-Zであり;
Xは、-O-及び-N(H)-からなる群から選択され;
Yは、アルキレン、置換アルキレン(限定されないが、オキソ置換、すなわち、=Oを含む)、ヘテロアルキレン、及び置換ヘテロアルキレン(限定されないが、オキソ置換(すなわち、=O)を含む)からなる群から選択され;
Zは、-OH及び-NH2からなる群から選択され;
R5は、アルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各々のヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1つ、2つ、又は3つのヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OH及び-CH2OH置換基、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素、例えば、O-グルコースを含み;
各々のR6は、各々の場合に、-H、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルであり;かつ
各々のR7は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、及びO-PEGnであり、ここで、各々のnは、0〜3の整数である)。
【００６７】
式Ia中、ある実施態様において、R5は、ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルである。有益なヘテロシクロアルキル基としては、テトラヒドロピラニル、グリコシジル、及びピペラジニルが挙げられる。これらの基は置換されていても、置換されていなくてもよい。ある実施態様において、これらは置換されていない。ある実施態様において、これらは置換されている。例示的な置換基としては、少なくとも1つのヒドロキシル、少なくとも1つの一級窒素、又は少なくとも1つの二級窒素が挙げられる。
【００６８】
式Iaのある実施態様において、R6は、各々の場合に、独立に、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、又はペプチドである。当業者は、アミノ酸残基が、アキラル又はキラル、例えば、L-アミノ酸又はD-アミノ酸であり得ることを認識しているであろう。アミノ酸は、通常、アミノ酸側鎖を含む。該側鎖は、当業者に公知の任意のアミノ酸の側鎖であることができる。ある実施態様において、該側鎖は、ヒスチジン、アラニン、イソロイシン、アルギニン、ロイシン、アスパラギン、リジン、アスパラギン酸、メチオニン、システイン、フェニルアラニン、グルタミン酸、トレオニン、グルタミン、トリプトファン、バリン、オルニチン、セレノシステイン、セリン、グリシン、ホモグリシン(例えば、β-ホモグリシン)、又はチロシンの側鎖である。当業者は、ペプチドが、例えば、ラセミ体DL-アミノ酸又は非ラセミ体D-もしくL-アミノ酸及びこれらのジアステレオマー混合物を含む、アキラル又はキラルであり得ることを認識しているであろう。該ペプチドの側鎖は、上でアミノ酸との関連において記載されている通りである。当業者は、N-アルキルアミノ酸残基が、該アミノ酸の末端アミノ基又は該ペプチドの末端アミノ基に、本明細書に定義されるアルキル置換基を含むことを認識しているであろう。
【００６９】
式Ia中、ある実施態様において、R7は、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGnであり、ここで、各々のnは、0〜3の整数である。ある実施態様において、O-アミノ酸残基は、上で定義されているHO-アミノ酸残基を含む。一実施態様において、O-PEGnは、n＝0の場合のものである。別の実施態様において、O-PEGnは、n＝1の場合のものである。別の実施態様において、O-PEGnは、n＝2の場合のものである。また別の実施態様において、O-PEGnは、n＝3の場合のものである。
【００７０】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-である。また別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-である。さらにまた別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-である。
【００７１】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化４９】
2020520926.tif 000051
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化５０】
2020520926.tif 000052
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化５１】
2020520926.tif 000053
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化５２】
2020520926.tif 000054
からなる群から選択される。
【００７２】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００７３】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化５３】
2020520926.tif 000055
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化５４】
2020520926.tif 000056
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化５５】
2020520926.tif 000057
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化５６】
2020520926.tif 000058
からなる群から選択される。
【００７４】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００７５】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化５７】
2020520926.tif 000059
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化５８】
2020520926.tif 000060
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化５９】
2020520926.tif 000061
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化６０】
2020520926.tif 000062
からなる群から選択される。
【００７６】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００７７】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化６１】
2020520926.tif 000063
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化６２】
2020520926.tif 000064
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化６３】
2020520926.tif 000065
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化６４】
2020520926.tif 000066
からなる群から選択される。
【００７８】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００７９】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H,OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H,OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H,OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H,OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H,OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H,OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-CH2-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化６５】
2020520926.tif 000067
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化６６】
2020520926.tif 000068
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化６７】
2020520926.tif 000069
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化６８】
2020520926.tif 000070
からなる群から選択される。
【００８０】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００８１】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化６９】
2020520926.tif 000071
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化７０】
2020520926.tif 000072
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化７１】
2020520926.tif 000073
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化７２】
2020520926.tif 000074
からなる群から選択される。
【００８２】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(H)(OH)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００８３】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化７３】
2020520926.tif 000075
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化７４】
2020520926.tif 000076
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化７５】
2020520926.tif 000077
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化７６】
2020520926.tif 000078
からなる群から選択される。
【００８４】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００８５】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化７７】
2020520926.tif 000079
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化７８】
2020520926.tif 000080
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化７９】
2020520926.tif 000081
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化８０】
2020520926.tif 000082
からなる群から選択される。
【００８６】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００８７】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化８１】
2020520926.tif 000083
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化８２】
2020520926.tif 000084
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化８３】
2020520926.tif 000085
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化８４】
2020520926.tif 000086
からなる群から選択される。
【００８８】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(O)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００８９】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化８５】
2020520926.tif 000087
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化８６】
2020520926.tif 000088
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化８７】
2020520926.tif 000089
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化８８】
2020520926.tif 000090
からなる群から選択される。
【００９０】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００９１】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化８９】
2020520926.tif 000091
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化９０】
2020520926.tif 000092
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化９１】
2020520926.tif 000093
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化９２】
2020520926.tif 000094
からなる群から選択される。
【００９２】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００９３】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化９３】
2020520926.tif 000095
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化９４】
2020520926.tif 000096
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化９５】
2020520926.tif 000097
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化９６】
2020520926.tif 000098
からなる群から選択される。
【００９４】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-CH2-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００９５】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化９７】
2020520926.tif 000099
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化９８】
2020520926.tif 000100
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化９９】
2020520926.tif 000101
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化１００】
2020520926.tif 000102
からなる群から選択される。
【００９６】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-CH2-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００９７】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化１０１】
2020520926.tif 000103
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化１０２】
2020520926.tif 000104
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化１０３】
2020520926.tif 000105
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化１０４】
2020520926.tif 000106
からなる群から選択される。
【００９８】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-O-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【００９９】
式I又はIaの一実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-Hであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化１０５】
2020520926.tif 000107
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化１０６】
2020520926.tif 000108
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-NH2であり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化１０７】
2020520926.tif 000109
からなる群から選択される。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-OHである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-CH2NH2である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R3である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R4である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、-O-R5である。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、アルキルであり、R2は、アミノ、ジメチルアミノ、ヒドロキシル、
【化１０８】
2020520926.tif 000110
からなる群から選択される。
【０１００】
式I又はIaの別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OH又は-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OHであり、R2は、-Hである。別の実施態様において、Q1は、-C(O)-であり、Q2は、-C(H)(OH)-であり、Wは、-NH-であり、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-Hである。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、R6は、ヒドロキシル及びメチルからなる群から選択され得る。
【０１０１】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、式(Ib)の構造を有する化合物又は医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
【化１０９】
2020520926.tif 000111
(式中、
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
R1は、-H、-OH、-NH2、アルキル、又は-OP(O)(OR6)2であり;
R2は、-H、-OH、-CH2NH2、R3、R4、R5、又は-O-R5であり、ここで、R1及びR2は、同時には、-Hではなく;
R3は、-N(R6)2であり;
R4は、-X-Y-Zであり;
Xは、-O-及び-N(H)-からなる群から選択され;
Yは、アルキレン、置換アルキレン(限定されないが、オキソ置換(すなわち、=O)を含む)、ヘテロアルキレン、及び置換ヘテロアルキレン(限定されないが、オキソ置換(すなわち、=O)を含む)からなる群から選択され;
Zは、-OH及び-NH2からなる群から選択され;
R5は、アルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各々のヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1つ、2つ、又は3つのヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OH及び-CH2OH置換基、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素、例えば、O-グルコースを含み;
各々のR6は、各々の場合に、-H、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルであり;かつ
各々のR7は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、及びO-PEGnであり、ここで、各々のnは、0〜3の整数である)。
【０１０２】
式Ib中、ある実施態様において、R5は、ヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルである。有益なヘテロシクロアルキル基としては、テトラヒドロピラニル、グリコシジル、及びピペラジニルが挙げられる。これらの基は置換されていても、置換されていなくてもよい。ある実施態様において、これらは置換されていない。ある実施態様において、これらは置換されている。例示的な置換基としては、少なくとも1つのヒドロキシル、少なくとも1つの一級窒素、又は少なくとも1つの二級窒素が挙げられる。
【０１０３】
式Ibのある実施態様において、R6は、各々の場合に、独立に、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、又はペプチドである。当業者は、アミノ酸残基が、アキラル又はキラル、例えば、L-アミノ酸又はD-アミノ酸であり得ることを認識しているであろう。アミノ酸は、通常、アミノ酸側鎖を含む。該側鎖は、当業者に公知の任意のアミノ酸の側鎖であることができる。ある実施態様において、該側鎖は、ヒスチジン、アラニン、イソロイシン、アルギニン、ロイシン、アスパラギン、リジン、アスパラギン酸、メチオニン、システイン、フェニルアラニン、グルタミン酸、トレオニン、グルタミン、トリプトファン、バリン、オルニチン、セレノシステイン、セリン、グリシン、ホモグリシン(例えば、β-ホモグリシン)、又はチロシンの側鎖である。当業者は、ペプチドが、例えば、ラセミ体DL-アミノ酸又は非ラセミ体D-もしくL-アミノ酸及びこれらのジアステレオマー混合物を含む、アキラル又はキラルであり得ることを認識しているであろう。該ペプチドの側鎖は、上でアミノ酸との関連において記載されている通りである。当業者は、N-アルキルアミノ酸残基が、該アミノ酸の末端アミノ基又は該ペプチドの末端アミノ基に、本明細書に定義されるアルキル置換基を含むことを認識しているであろう。
【０１０４】
式Ib中、ある実施態様において、R7は、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、又はO-PEGnであり、ここで、各々のnは、0〜3の整数である。ある実施態様において、O-アミノ酸残基は、上で定義されているHO-アミノ酸残基を含む。一実施態様において、O-PEGnは、n＝0の場合のものである。別の実施態様において、O-PEGnは、n＝1の場合のものである。別の実施態様において、O-PEGnは、n＝2の場合のものである。また別の実施態様において、O-PEGnは、n＝3の場合のものである。
【０１０５】
式Ibの一実施態様において、R1は、-OHである。別の実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-O-(CH2)n-Zであり、ここで、nは、1〜4の整数である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-O-(CH2)n-Zであり、nは1である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-O-(CH2)n-Zであり、nは2である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-O-(CH2)n-Zであり、nは3である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-O-(CH2)n-Zであり、nは4である。
【０１０６】
式Ibの一実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-N(H)C(O)-(CH2)n-NH2であり、ここで、nは、1〜4の整数である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-N(H)C(O)-(CH2)n-NH2であり、nは1である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-N(H)C(O)-(CH2)n-NH2であり、nは2である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-N(H)C(O)-(CH2)n-NH2であり、nは3である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-N(H)C(O)-(CH2)n-NH2であり、nは4である。
【０１０７】
式Ibの一実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-N(H)C(O)-(CRR)n-NH2であり、ここで、各々のRは、-H, -OH, or -CH2OHであり、ここで、nは、1〜4の整数である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-N(H)C(O)-(CRR)n-NH2であり、各々のRは、-Hであり、nは、1〜4の整数である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-N(H)C(O)-(CRR)n-NH2であり、各々のRは、-OHであり、nは、1〜4の整数である。ある実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-N(H)C(O)-(CRR)n-NH2であり、各々のRは、-CH2OHであり、nは、1〜4の整数である。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、nは1である。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、nは2である。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、nは3である。この段落の前述の実施態様のいずれか1つにおいて、nは4である。
【０１０８】
式Ibの一実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、N-ピペラジニルである。別の実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、-N(R6)2である。別の実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、N-セリニルである。また別の実施態様において、R1は、-OHであり、R2は、O-グリコシルである。
【０１０９】
式Ibの一実施態様において、R1は、-OP(O)(OR6)(OH)であり、R2は、-NH2である。
【０１１０】
ある実施態様において、本明細書に提供されるのは:
【化１１０】
2020520926.tif 000112
からなる群から選択され得る式I、Ia、及びIbのいずれかによる化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である。
【０１１１】
(コンジュゲート/抗体薬物コンジュゲート(ADC))
本明細書に提供されるのは、式Aのコンジュゲート又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
【化１１１】
2020520926.tif 000113
(式中、
Lは、リンカー又はX-Y-Zであり、ここで、Xは、-NH-又は-O-であり; Yは、酵素切断性部分、自壊性基、酸不安定性部分、PEGn、糖部分、又は増強基であり;かつZは、結合剤リンカー(BL)であり、ここで、Zは、BAに共有結合しており;
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Q1及びQ2の各々は、独立に、-CH2-、-C(O)-、-C(H)(OH)-、又は-C(OH)2-であり;
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
Rは、-H、-OR6、-OH、-NH2、アルキル、又は-OP(O)(OR6)2であり;
各々のR6は、各々の場合に、独立に、-H、アミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルであり;かつ
ここで、R1、R2、R3、R4、及びR5は、式Iとの関連において記載されている通りである)。
例示的な酵素切断性部分としては、任意のジペプチド又はトリペプチド(例えば、本明細書中の別の場所に記載されているVC-PAB及びVA)が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な自壊性基は、本明細書中の別の場所に記載されている。例示的な酸不安定性部分としては、アルコキシアミン、ケトキシアミン、カルボネート、又はホスホネートが挙げられるが、これらに限定されない。例示的な増強基は、本明細書中の別の場所に記載されている。例示的な反応性部分は、本明細書中の別の場所に記載されている。ある実施態様において、Yは、PEGnを含まない。ある実施態様において、アミノ酸を用いて、本明細書中の別の場所に記載され、かつ明白であるように、ペイロード、増強基、及び抗体(各々本明細書中の別の場所に記載されている)を互いに接続することができる。当業者によって理解されるように、アミノ酸を介するペイロード、増強基、及び抗体の接続は、アミドカップリング反応、チオ-マイケル付加、又はフェノール-O-アルキル化によって実施することができる。例えば、該ペイロード、増強基、及び抗体を接続するアミノ酸は、リジンである。さらなる例として、一実施態様において、該ペイロード、増強基、及び抗体を接続するアミノ酸は、D-リジンである。さらなる例として、一実施態様において、該ペイロード、増強基、及び抗体を接続するアミノ酸は、アスパラギン酸である。さらなる例として、一実施態様において、該ペイロード、増強基、及び抗体を接続するアミノ酸は、グルタミン酸である。さらなる例として、一実施態様において、該ペイロード、増強基、及び抗体を接続するアミノ酸は、セリンである。さらなる例として、一実施態様において、該ペイロード、増強基、及び抗体を接続するアミノ酸は、システインである。さらなる例として、一実施態様において、該ペイロード、増強基、及び抗体を接続するアミノ酸は、チロシンである。
【０１１２】
本明細書に提供されるのは、式(A)のコンジュゲート又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態である:
【化１１２】
2020520926.tif 000114
（式中、
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、及びZは、式Iとの関連において記載されている通りである。ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１１３】
本明細書に提供されるのは、式(Aa)の化合物又はその医薬として許容し得る塩である:
【化１１３】
2020520926.tif 000115
(式中、
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、及びZは、との関連において記載されている通りである。式Ia. ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１１４】
本明細書に提供されるのは、式(Ab)の化合物又はその医薬として許容し得る塩である:
【化１１４】
2020520926.tif 000116
(式中、
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、及びZは、式Ibとの関連において記載されている通りである。ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１１５】
(結合剤)
本開示において提供されるコンジュゲートのうちのいずれかのための好適な結合剤としては、抗体、リンホカイン、ホルモン、成長因子、ウイルス受容体、インターロイキン、又は任意の他の細胞結合性もしくはペプチド結合性の分子もしくは物質が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１６】
いくつかの実施態様において、該結合剤は、抗体又はその抗原結合断片である。該抗体は、当業者に公知の任意の形態のものであることができる。本明細書で使用される「抗体」という用語は、特定の抗原に特異的に結合するか又はそれと特異的に相互作用する少なくとも1つの相補性決定領域(CDR)を含む任意の抗原結合分子又は分子複合体を指す。「抗体」という用語は、ジスルフィド結合によって相互に接続された、2本の重(H)鎖と2本の軽(L)鎖の4本のポリペプチド鎖を含む免疫グロブリン分子、及びその多量体(例えば、IgM)を含む。各々の重鎖は、重鎖可変領域(本明細書ではHCVR又はVHと略す)及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、3つのドメイン、CH1、CH2、及びCH3を含む。各々の軽鎖は、軽鎖可変領域(本明細書ではLCVR又はVLと略す)及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、1つのドメイン(CL1)を含む。VH及びVL領域は、フレームワーク領域(FR)と呼ばれるより保存された領域が散在する、相補性決定領域(CDR)と呼ばれる超可変領域にさらに細かく分けることができる。各々のVH及びVLは、3つのCDR及び4つのFRから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端にかけて、以下の順序: FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4で配置されている。本発明の様々な実施態様において、本明細書における化合物に好適な抗体(又はその抗原結合部分)のFRは、ヒト生殖系列配列と同一であってもよく、又は自然にもしくは人為的に修飾されていてもよい。アミノ酸コンセンサス配列は、2以上のCDRの対比分析に基づいて定義することができる。本明細書で使用される「抗体」という用語は、完全な抗体分子の抗原結合断片も含む。本明細書で使用される、抗体の「抗原結合部分」、抗体の「抗原結合断片」などの用語は、抗原に特異的に結合して複合体を形成する、任意の天然に存在する、酵素的に得られる、合成された、又は遺伝子改変されたポリペプチド又は糖タンパク質を含む。抗体の抗原結合断片は、任意の好適な標準的技法、例えば、タンパク分解的消化又は抗体可変ドメイン及び任意に定常ドメインをコードするDNAの操作及び発現を伴う組換え遺伝子工学技法を用いて完全な抗体分子から得ることができる。そのようなDNAは公知であり、及び/又は例えば、商業的な供給源、DNAライブラリー(例えば、ファージ-抗体ライブラリーを含む)から容易に入手可能であるか、又は合成することができる。DNAをシークエンシングし、化学的に又は分子生物学的技法を用いることにより操作して、例えば、1以上の可変及び/もしくは定常ドメインを好適な配置に配置すること、又はコドンを導入し、システイン残基を生成させ、アミノ酸を修飾し、付加し、もしくは欠失させること、などができる。抗原結合断片の非限定的な例としては:(i)Fab断片;(ii)F(ab')2断片;(iii)Fd断片;(iv)Fv断片;(v)単鎖Fv(scFv)分子;(vi)dAb断片;及び(vii)抗体の超可変領域を模倣するアミノ酸残基からなる最小認識単位(例えば、CDR3ペプチドなどの単離されたCDR)、又は拘束性FR3-CDR3-FR4ペプチドが挙げられる。他の改変分子、例えば、ドメイン特異的抗体、単一ドメイン抗体、ドメイン欠失抗体、キメラ抗体、CDR移植抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニボディ、ナノボディ(例えば、一価のナノボディ、二価のナノボディなど)、小モジュラー免疫医薬(SMIP)、及びサメ可変IgNARドメインも、本明細書で使用される「抗原結合断片」という表現に包含される。抗体の抗原結合断片は、通常、少なくとも1つの可変ドメインを含む。可変ドメインは、任意のサイズ又はアミノ酸組成であってもよく、通常、1以上のフレームワーク配列に隣接しているか、又はそれとインフレームになっている少なくとも1つのCDRを含む。VHドメインがVLドメインと会合している抗原結合断片において、VHドメインとVLドメインは、互いに対して任意の好適な配置にあってもよい。例えば、可変領域は二量体であり、かつVH-VH、VH-VL、又はVL-VL二量体を含有していてもよい。或いは、抗体の抗原結合断片は、単量体のVH又はVLドメインを含有していてもよい。ある実施態様において、抗体の抗原結合断片は、少なくとも1つの定常ドメインに共有結合した少なくとも1つの可変ドメインを含有していてもよい。本発明の抗体の抗原結合断片内に見出し得る可変及び定常ドメインの非限定的で例示的な配置としては:(i)VH-CH1;(ii)VH-CH2;(iii)VH-CH3;(iv)VH-CH1-CH2;(v)VH-CH1-CH2-CH3;(vi)VH-CH2-CH3;(vii)VH-CL;(viii)VL-CH1;(ix)VL-CH2;(x)VL-CH3;(xi)VL-CH1-CH2;(xii)VL-CH1-CH2-CH3;(xiii)VL-CH2-CH3;及び(xiv)VL-CLが挙げられる。上記の例示的な配置のいずれかを含む、可変ドメインと定常ドメインの任意の配置において、可変ドメインと定常ドメインは、互いに直接連結されていてもよく、又は完全なもしくは部分的なヒンジもしくはリンカー領域によって連結されていてもよい。ヒンジ領域は、単一ポリペプチド分子中の隣接する可変ドメイン及び/又は定常ドメイン間に柔軟な又は半ば柔軟な連結を生じさせる少なくとも2個(例えば、5個、10個、15個、20個、40個、60個、又はそれより多く)のアミノ酸からなっていてもよい。完全な抗体分子と同様、抗原結合断片は、単一特異性又は多重特異性(例えば、二重特異性)であってもよい。抗体の多重特異性抗原結合断片は、通常、少なくとも2つの異なる可変ドメインを含み、ここで、各々の可変ドメインは、別々の抗原に又は同じ抗原上の異なるエピトープに特異的に結合することができる。本明細書に開示される例示的な二重特異性抗体フォーマットを含む、任意の多重特異性抗体フォーマットは、当技術分野で利用可能なルーチンの技法を用いて、本発明の抗体の抗原結合断片と関連した使用に適合させることができる。本明細書に記載されるある実施態様において、本明細書に記載される抗体は、ヒト抗体である。本明細書で使用される「ヒト抗体」という用語は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変及び定常領域を有する抗体を含むことが意図される。本発明のヒト抗体は、例えば、CDR、特に、CDR3中に、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基(例えば、インビトロでのランダムなもしくは部位特異的な突然変異誘発によるか、又はインビボでの体細胞突然変異によって導入された突然変異)を含み得る。しかしながら、本明細書で使用される「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列に由来するCDR配列がヒトフレームワーク配列に移植されている抗体を含むことが意図されない。「ヒト抗体」という用語は、通常、修飾又はヒトの介入/操作なしで、天然に存在する未修飾の生物に存在する、天然に存在する分子を含まない。本発明の抗体は、いくつかの実施態様において、組換えヒト抗体であってもよい。本明細書で使用される「組換えヒト抗体」という用語は、組換え手段によって調製され、発現され、作出され、又は単離される全てのヒト抗体、例えば、宿主細胞にトランスフェクトされた組換え発現ベクターを用いて発現される抗体(以下でさらに記載する)、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離される抗体(以下でさらに記載する)、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックである動物(例えば、マウス)から単離される抗体(例えば、Taylorらの文献(1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295を参照)、又はヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のDNA配列へのスプライシングを伴う任意の他の手段によって調製され、発現され、作出され、もしくは単離される抗体を含むことが意図される。そのような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変及び定常領域を有する。しかしながら、ある実施態様において、そのような組換えヒト抗体は、インビトロでの突然変異誘発(又はヒトIg配列についてトランスジェニックな動物を使用する場合、インビボでの体細胞突然変異誘発)を受け、したがって、該組換え抗体のVH及びVL領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列VH及びVL配列に由来し、かつそれに関連するが、インビボでヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在しなくてもよい配列である。ヒト抗体は、ヒンジの不均一性と関連する2つの形態で存在することができる。ある形態では、免疫グロブリン分子は、二量体が鎖間重鎖ジスルフィド結合によって結合している、約150〜160kDaの安定な4鎖構築物を含む。第二の形態では、二量体が鎖間ジスルフィド結合によって連結されず、共有結合した軽鎖及び重鎖(半分の抗体)から構成された、約75〜80kDaの分子が形成される。これらの形態は、親和性精製後でさえも、分離するのが極めて難しい。様々なインタクトのIgGアイソタイプにおける第二の形態の出現頻度は、限定されないが、抗体のヒンジ領域アイソタイプと関連する構造上の違いによるものである。ヒトIgG4ヒンジのヒンジ領域における単一アミノ酸置換は、ヒトIgG1ヒンジを用いて通常観察されるレベルにまで第二の形態の出現を有意に低下させることができる(Angalらの文献(1993) Molecular Immunology 30:105)。本開示は、ヒンジ、CH2、又はCH3領域中に1以上の突然変異を有する抗体を包含し、該突然変異は、例えば、産生において、所望の抗体形態の収率を改善するために望ましい場合がある。本明細書に記載される抗体は、単離された抗体であってもよい。本明細書で使用される「単離された抗体」は、同定され、かつその天然環境の少なくとも1つの構成要素から分離及び/又は回収された抗体を指す。例えば、生物の少なくとも1つの構成要素から、又は抗体が天然に存在しもしくは天然に産生される組織もしくは細胞から分離又は除去された抗体は、本発明の目的のための「単離された抗体」である。単離された抗体は、組換え細胞内のインサイチュの抗体も含む。単離された抗体は、少なくとも1つの精製又は単離工程にかけられた抗体である。ある実施態様によれば、単離された抗体は、他の細胞物質及び/又は化学物質を実質的に含まないものであってもよい。本明細書で使用される抗体は、抗体が由来した対応する生殖系列配列と比較して、重鎖及び軽鎖可変ドメインの���レームワーク及び/又はCDR領域中に1以上のアミノ酸置換、挿入、及び/又は欠失を含むことができる。そのような突然変異は、本明細書に開示されるアミノ酸配列を、例えば、公的な抗体配列データベースから入手可能な生殖系列配列と比較することにより、すぐに確認することができる。本発明は、1以上のフレームワーク及び/又はCDR領域内の1以上のアミノ酸が、抗体が由来した生殖系列配列の対応する残基に、又は別のヒト生殖系列配列の対応する残基に、又は対応する生殖系列残基の保存的アミノ酸置換に突然変異させられている(そのような配列変化は、本明細書において、「生殖系列突然変異」と総称される)、本明細書に開示されるアミノ酸配列のいずれかに由来する抗体及びその抗原結合断片を含む。当業者は、本明細書に開示される重鎖及び軽鎖可変領域配列から出発して、1以上の個々の生殖系列突然変異又はその組合せを含む多くの抗体及び抗原結合断片を産生することができる。ある実施態様において、VH及び/又はVLドメイン内の全てのフレームワーク及び/又はCDR残基を突然変異させて、抗体が由来したもとの生殖系列配列中に見出される残基に戻す。他の実施態様において、特定の残基のみ、例えば、FR1の最初の8つのアミノ酸もしくはFR4の最後の8つのアミノ酸に見出される突然変異残基のみ、又はCDR1、
CDR2、もしくはCDR3に見出される突然変異残基のみを突然変異させて、もとの生殖系列配列に戻す。他の実施態様において、1以上の該フレームワーク及び/又はCDR残基を、異なる生殖系列配列(すなわち、抗体がもともと由来した生殖系列配列と異なる生殖系列配列)の対応する残基に突然変異させる。さらに、本開示の抗体は、例えば、特定の個々の残基が特定の生殖系列配列の対応する残基に突然変異させられている一方で、もとの生殖系列配列と異なる特定の他の残基が維持されているか又は異なる生殖系列配列の対応する残基に突然変異させられているフレームワーク及び/又はCDR領域内に2以上の生殖系列突然変異の任意の組合せを含有し得る。ひとたび得られれば、1以上の生殖系列突然変異を含有する抗体及び抗原結合断片を、例えば、改善された結合特異性、増大した結合親和性、改善又は増強された拮抗的又は作動的生体特性(場合による)、低下した免疫原性などの1以上の所望の特性について容易に試験することができる。この一般的な方法で得られる抗体及び抗原結合断片は、本開示の範囲内に包含される。本明細書中の化合物に有用な抗体には、1以上の保存的置換を有する本明細書に開示されるHCVR、LCVR、及び/又はCDRアミノ酸配列のいずれかの変異体を含む抗体も含まれる。「エピトープ」という用語は、パラトープとして知られる抗体分子の可変領域中の特異的抗原結合部位と相互作用する抗原性決定基を指す。単一の抗原は、複数のエピトープを有し得る。したがって、異なる抗体が抗原上の異なる部分に結合し得、かつ異なる生物学的効果を有し得る。エピトープは、立体構造的又は線状のいずれかであり得る。立体構造エピトープは、線状ポリペプチド鎖の異なるセグメント由来の空間的に並置されたアミノ酸により生じる。線状エピトープは、ポリペプチド鎖中の隣接するアミノ酸残基により生じるものである。ある状況において、エピトープは、抗原上のサッカリド、ホスホリル基、又はスルホニル基の部分を含み得る。
【０１１７】
ある実施態様において、該抗体は、軽鎖を含む。ある実施態様において、該軽鎖は、κ軽鎖である。ある実施態様において、該軽鎖は、λ軽鎖である。ある実施態様において、該抗体は、重鎖を含む。いくつかの態様において、該重鎖は、IgAである。いくつかの態様において、該重鎖は、IgDである。いくつかの態様において、該重鎖は、IgEである。いくつかの態様において、該重鎖は、IgGである。いくつかの態様において、該重鎖は、IgMである。いくつかの態様において、該重鎖は、IgG1である。いくつかの態様において、該重鎖は、IgG2である。いくつかの態様において、該重鎖は、IgG3である。いくつかの態様において、該重鎖は、IgG4である。いくつかの態様において、該重鎖は、IgA1である。いくつかの態様において、該重鎖は、IgA2である。
【０１１８】
いくつかの実施態様において、該抗体は、抗体断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、Fv断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、Fab断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、F(ab')2断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、Fab'断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、scFv(sFv)断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、scFv-Fc断片である。
【０１１９】
いくつかの実施態様において、該抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施態様において、該抗体は、ポリクローナル抗体である。
【０１２０】
いくつかの実施態様において、該抗体は、キメラ抗体である。いくつかの実施態様において、該抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施態様において、該抗体は、ヒト抗体である。
【０１２１】
該抗体は、当業者に好適であるとみなされる任意の抗原に対する結合特異性を有することができる。ある実施態様において、該抗原は、膜貫通分子(例えば、受容体)又は成長因子である。例示的な抗原としては、スカベンジャー受容体A(SR-A又はMSR1)、コラーゲン様構造を有するマクロファージ受容体(MARCO)、C-タイプレクチンを有するスカベンジャー受容体(SRCL)、及びスカベンジャー受容体A-5(SCARA5)、COLEC12を含むクラスAスカベンジャー受容体、CD36、LIMPII、SRBI、SRBIIを含むクラスBマクロファージスカベンジャー受容体、クラスDスカベンジャー受容体CD68、及びリソソーム膜糖タンパク質(LAMP)、レクチン様酸化低密度リポタンパク質受容体1 LOX-1及びデクチン-1を含むクラスEスカベンジャー受容体、内皮細胞によって発現されるスカベンジャー受容体-I(SREC-I)及びSREC-II並びに多重上皮成長因子(EGF)様ドメイン(MEGF)10を含むクラスFスカベンジャー受容体、クラスGスカベンジャー受容体CXCケモカインリガンド16(CXCL16)、ファシクリン、EGF様、ラミン型EGF様、及びリンクドメイン含有スカベンジャー受容体-1(FEEL-1)及び-2(FEEL-2)を含むクラスHスカベンジャー受容体、クラスIスカベンジャー受容体CD163、並びに終末糖化産物(RAGE)に対するクラスJスカベンジャー受容体、DEC205、CD206、デクチン-2、ミンクル、DC-SIGN、及びDNGR-1を含む他のC-タイプレクチンスーパーファミリーメンバー、並びにV-セット及びIgドメイン含有4(VSIG4)を含むB7ファミリー関連メンバー、コロニー刺激因子1受容体(CSF1R)、アシアロ糖タンパク質受容体(ASGPR)、並びにアミロイドβ前駆体様タンパク質2(APLP-2)などの他の膜タンパク質などの分子が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、該抗原は、PRLR又はHER2である。いくつかの実施態様において、該抗体は、抗PRLR又は抗HER2抗体である。
【０１２２】
結合剤リンカーは、抗体又は抗原結合分子内の特定のアミノ酸での結合を介して、結合剤、例えば、抗体又は抗原結合分子に結合させることができる。本開示のこの態様との関連において使用することができる例示的なアミノ酸結合としては、例えば、リジン(例えば、US 5,208,020号; US 2010/0129314号; Hollanderらの文献、Bioconjugate Chem., 2008, 19:358-361; WO 2005/089808号; US 5,714,586号; US 2013/0101546号;及びUS 2012/0585592号を参照)、システイン(例えば、US 2007/0258987号; WO 2013/055993号; WO 2013/055990号; WO 2013/053873号; WO 2013/053872号; WO 2011/130598号; US 2013/0101546号;及びUS 7,750,116号を参照)、セレノシステイン(例えば、WO 2008/122039号;及びHoferらの文献、Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2008, 105: 12451-12456を参照)、ホルミルグリジン(例えば、Carricoらの文献、Nat. Chem. Biol., 2007, 3:321-322; Agarwalらの文献、Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2013, 110:46-51、及びRabukaらの文献、Nat. Protocols, 2012, 10:1052-1067を参照)、非天然アミノ酸(例えば、WO 2013/068874号及びWO 2012/166559号を参照)、並びに酸性アミノ酸(例えば、WO 2012/05982号を参照)が挙げられる。リンカーは、炭水化物への結合を介して抗原結合タンパク質にコンジュゲートすることもできる(例えば、US 2008/0305497号、WO 2014/065661号、及びRyanらの文献、Food & Agriculture Immunol., 2001, 13: 127-130を参照)。
【０１２３】
いくつかの例において、該結合剤は、抗体又は抗原結合分子であり、該抗体は、リジン残基を介してリンカーに結合される。いくつかの実施態様において、該抗体又は抗原結合分子は、システイン残基を介してリンカーに結合される。
【０１２４】
リンカーは、トランスグルタミナーゼに基づく化学的酵素的コンジュゲーションを介して1以上のグルタミン残基にコンジュゲートすることもできる(例えば、Dennlerらの文献、Bioconjugate Chem. 2014, 25, 569-578及びWO 2017/147542号を参照)。例えば、トランスグルタミナーゼの存在下において、抗体の1以上のグルタミン残基を一級アミン化合物にカップリングさせることができる。簡潔に述べると、いくつかの実施態様において、グルタミン残基(例えば、Gln295残基)を有する抗体を、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、以下でより詳細に記載される一級アミン化合物で処理する。一級アミン化合物には、例えば、トランスグルタミナーゼ媒介カップリングを介して抗体薬物コンジュゲートを直接的に提供する、ペイロード又はリンカー-ペイロードが含まれる。一級アミン化合物には、抗体薬物コンジュゲートの合成に向けて後にさらなる化合物で処理することができる反応基で官能化されているリンカー及びスペーサーも含まれる。グルタミン残基を含む抗体は、天然源から単離するか又は1以上のグルタミン残基を含むように改変することができる。抗体ポリペプチド鎖中のグルタミン残基(グルタミニル修飾抗体又は抗原結合分子)を人為作製する技法は、当業者の能力の範囲内である。ある実施態様において、該抗体は、アグリコシル化される。
【０１２５】
ある実施態様において、該抗体又はグルタミニル修飾抗体もしくは抗原結合分子は、少なくとも1つのポリペプチド鎖配列中に、少なくとも1つのグルタミン残基を含む。ある実施態様において、該抗体又はグルタミニル修飾抗体もしくは抗原結合分子は、各々1つのGln295残基を有する2つの重鎖ポリペプチドを含む。さらなる実施態様において、該抗体又はグルタミニル修飾抗体もしくは抗原結合分子は、重鎖295以外の部位に1以上のグルタミン残基を含む。本明細書に含まれるのは、本明細書に記載されるAsn297Gln(N297Q)突然変異を担持するこの節の抗体である。本明細書に含まれるのは、Gln55(Q55)残基を担持するこの節の抗体である。
【０１２６】
(一級アミン化合物)
グルタミンを含む抗体(又は抗原結合化合物)のトランスグルタミナーゼ媒介カップリングに有用な一級アミン化合物は、当業者によって有用であるとみなされる任意の一級アミン化合物であることができる。通常、一級アミン化合物は、式H2N-Rを有し、式中、Rは、抗体及び反応条件と適合する任意の基であることができる。ある実施態様において、Rは、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、又は置換ヘテロアルキルである。
【０１２７】
いくつかの実施態様において、該一級アミン化合物は、反応基又は保護された反応基を含む。有用な反応基としては、アジド、アルキン、シクロアルキン、チオール、アルコール、ケトン、アルデヒド、酸、エステル、ヒドラジド、アニリン、及びアミンが挙げられる。ある実施態様において、該反応基は、アジド、アルキン、スルフヒドリル、シクロアルキン、アルデヒド、及びカルボキシルからなる群から選択される。
【０１２８】
ある実施態様において、該一級アミン化合物は、式H2N-LL-Xによるものであり、式中、LLは、二価スペーサーであり、Xは、反応基又は保護された反応基である。特定の実施態様において、LLは、二価ポリエチレングリコール(PEG)基である。ある実施態様において、Xは、-SH、-N3、アルキン、アルデヒド、及びテトラゾールからなる群から選択される。特定の実施態様において、Xは、-N3である。
【０１２９】
ある実施態様において、該一級アミン化合物は、以下の式のうちの1つによるものである:
H2N-(CH2)n-X;
H2N-(CH2CH2O)n-(CH2)p-X;
H2N-(CH2)n-N(H)C(O)-(CH2)m-X;
H2N-(CH2CH2O)n-N(H)C(O)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;
H2N-(CH2)n-C(O)N(H)-(CH2)m-X;
H2N-(CH2CH2O)n-C(O)N(H)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;
H2N-(CH2)n-N(H)C(O)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;
H2N-(CH2CH2O)n-N(H)C(O)-(CH2)m-X;
H2N-(CH2)n-C(O)N(H)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;及び
H2N-(CH2CH2O)n-C(O)N(H)-(CH2)m-X;
(式中、nは、1〜12から選択される整数であり;
mは、0〜12から選択される整数であり;
pは、0〜2から選択される整数であり;
かつXは、-SH、-N3、-C≡CH、-C(O)H、テトラゾール、及び
【化１１５】
2020520926.tif 000117
のいずれかからなる群から選択される)。
【０１３０】
上記において、該アルキル(すなわち、-CH2-)基のいずれかは、例えば、C1-8アルキル、メチルホルミル、又は-SO3Hで任意に置換されていてもよい。ある実施態様において、アルキル基は、置換されていない
【０１３１】
ある実施態様において、該一級アミン化合物は:
【化１１６】
2020520926.tif 000118
からなる群から選択される。
【０１３２】
特定の実施態様において、該一級アミン化合物は、
【化１１７】
2020520926.tif 000119
である。上記の反応のための例示的な条件は、下記の実施例に提供されている。
【０１３３】
(リンカー)
本明細書に記載されるコンジュゲートのリンカーL部分は、結合剤を本明細書に記載されるペイロード化合物に共有結合させる部分、例えば、二価部分である。他の例において、該リンカーLは、結合剤を本明細書に記載されるペイロード化合物に共有結合させる三価又は多価部分である。好適なリンカーは、例えば、各々の内容が引用により完全に本明細書中に組み込まれる、抗体-薬物コンジュゲート及び免疫毒素(Antibody-Drug Conjugates and Immunotoxins); Phillips, G. L.編; Springer Verlag: New York, 2013;抗体-薬物コンジュゲート(Antibody-Drug Conjugates); Ducry, L.編; Humana Press, 2013;抗体-薬物コンジュゲート(Antibody-Drug Conjugates); Wang, J.、Shen, W.-C.、及びZaro, J. L.編; Springer International Publishing, 2015に見出すことができる。ペイロード化合物には、上の式I、Ia、及びIbの化合物、及びリンカーLとの結合又はリンカーLによる組込み後のその残基が含まれる。当業者は、ペイロード部分の特定の官能基がリンカー及び/又は結合剤との連結に好都合であることを認識しているであろう。これらの基には、アミン、ヒドロキシル、ホスフェート、及び糖が含まれる。
【０１３４】
ある実施態様において、該リンカーは、生理的条件で安定である。ある実施態様において、該リンカーは切断性であり、例えば、酵素の存在下で又は特定のpH範囲もしくは値で、少なくともペイロード部分を放出することができる。いくつかの実施態様において、リンカーは、酵素切断性部分を含む。例示的な酵素切断性部分としては、ペプチド結合、エステル連結、ヒドラゾン、及びジスルフィド連結が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、該リンカーは、カテプシン切断性リンカーを含む。
【０１３５】
いくつかの実施態様において、該リンカーは、非切断性部分を含む。いくつかの実施態様において、該非切断性リンカーは、
【化１１８】
2020520926.tif 000120
又はその残基に由来する。いくつかの実施態様において、該非切断性リンカー-ペイロードは、
【化１１９】
2020520926.tif 000121
又はその位置異性体である。いくつかの実施態様において、該非切断性リンカーは、
【化１２０】
2020520926.tif 000122
又はその残基に由来する。いくつかの実施態様において、該非切断性リンカー-ペイロードは、
【化１２１】
2020520926.tif 000123
又はその位置異性体である。一実施態様において、該リンカーは、マレイミドシクロヘキサンカルボキシレート又は4-(N-マレイミドメチル)シクロヘキサンカルボン酸(MCC)である。該構造中、
【化１２２】
2020520926.tif 000124
は、結合剤とのを示す。該構造中、いくつかの例において、
【化１２３】
2020520926.tif 000125
は、例えば、結合剤とリンカーペイロードの反応によって得られるクリック化学残基を示す。
【０１３６】
いくつかの実施態様において、好適なリンカーとしては、単一の結合剤、例えば、抗体の2つのシステイン残基に化学的に結合しているものが挙げられるが、これらに限定されない。そのようなリンカーは、コンジュゲーションプロセスの結果として破壊される抗体のジスルフィド結合を模倣する働きをすることができる。
【０１３７】
いくつかの実施態様において、該リンカーは、1以上のアミノ酸を含む。好適なアミノ酸としては、天然、非天然、標準的、非標準的、タンパク質構成性、非タンパク質構成性、及びL-又はD-α-アミノ酸が挙げられる。いくつかの実施態様において、該リンカーは、アラニン、バリン、グリシン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリン、これらの誘導体、又はこれらの組合せを含む。ある実施態様において、該アミノ酸の1以上の側鎖は、下記の側鎖基に連結される。いくつかの実施態様において、該リンカーは、バリン及びシトルリンを含む。いくつかの実施態様において、該リンカーは、リジン、バリン、及びシトルリンを含む。いくつかの実施態様において、該リンカーは、リジン、バリン、及びアラニンを含む。いくつかの実施態様において、該リンカーは、バリン及びアラニンを含む。
【０１３８】
いくつかの実施態様において、該リンカーは、自壊基を含む。該自壊基は、当業者に公知の任意のそのような基であることができる。特定の実施態様において、該自壊基は、p-アミノベンジル(PAB)又はその誘導体である。有用な誘導体としては、p-アミノベンジルオキシカルボニル(PABC)が挙げられる。当業者は、自壊基がペイロードからリンカーの残りの原子を放出する化学反応を行うことができることを認識しているであろう。
【０１３９】
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１２４】
2020520926.tif 000126
であり、ここで:
SP1は、スペーサーであり;
SP2は、スペーサーであり;
【化１２５】
2020520926.tif 000127
は、結合剤との1以上の結合であり;
【化１２６】
2020520926.tif 000128
は、ペイロードとの1以上の結合であり;
各々のAAは、アミノ酸であり;かつ
nは、1〜10の整数である。
【０１４０】
SP1スペーサーは、(AA)n部分を結合剤(BA)に又はBAに結合している反応基残基に接続する部分である。好適なSP1スペーサーとしては、アルキレンもしくはポリエーテル、又はその両方を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。該スペーサーの末端、例えば、結合剤又はAAに結合したスペーサーの部分は、コンジュゲートの化学合成中に、抗体又はAAを該スペーサーにカップリングさせる目的のために使用される反応性部分に由来する部分であることができる。ある実施態様において、nは、1、2、3、又は4である。特定の実施態様において、nは2である。特定の実施態様において、nは3である。特定の実施態様において、nは4である。
【０１４１】
いくつかの実施態様において、SP1スペーサーは、アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、SP1スペーサーは、C5-7アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、SP1スペーサーは、ポリエーテルを含む。いくつかの実施態様において、SP1スペーサーは、エチレンオキシドのポリマー、例えば、ポリエチレングリコールを含む。
【０１４２】
いくつかの実施態様において、SP1スペーサーは:
【化１２７】
2020520926.tif 000129
であり、ここで:
RG'は、反応基RGと結合剤との反応後の反応基残基であり;
【化１２８】
2020520926.tif 000130
は、該結合剤との結合であり;
【化１２９】
2020520926.tif 000131
は、(AA)nとの結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１４３】
反応基RGは、結合剤との1以上の結合を形成することができることが当業者に知られている任意の反応基であることができる。反応基RGは、結合剤と反応して(例えば、抗体と、そのシステインもしくはリジン残基で、又はアジド部分で、例えば、PEG-N3官能化抗体と1以上のグルタミン残基で反応して)、式A、Aa、又はAbの化合物を形成することができる部分をその構造中に含む部分である。結合剤とのコンジュゲーションの後、反応基は、反応基(RG')になる。例示的な反応基としては、結合剤と反応することができるハロアセチル、イソチオシアネート、スクシンイミド、N-ヒドロキシスクシンイミド、又はマレイミド部分を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４４】
ある実施態様において、反応基としては、アルキンが挙げられるが、これに限定されない。ある実施態様において、該アルキンは、銅触媒の非存在下でアジドとの1,3-付加環化反応を受けることができるアルキン、例えば、歪みアルキンである。歪みアルキンは、歪み促進アルキン-アジド付加環化(SPAAC)、シクロアルキン、例えば、シクロオクチン、及びベンズ環化アルキンに好適である。好適なアルキンとしては、ジベンゾアザシクロオクチン又は
【化１３０】
2020520926.tif 000132
、ジベンゾシクロオクチン又は
【化１３１】
2020520926.tif 000133
、ビアリールアザシクロオクチノン又は
【化１３２】
2020520926.tif 000134
、二フッ素化シクロオクチン又は
【化１３３】
2020520926.tif 000135
、置換、例えば、フッ素化アルキン、アザ-シクロアルキン、ビシクル[6.1.0]ノニン又は
【化１３４】
2020520926.tif 000136
、及びこれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。特に有用なアルキンとしては、
【化１３５】
2020520926.tif 000137
が挙げられる。
【０１４５】
ある実施態様において、結合剤は、RG'に直接的に結合している。ある実施態様において、結合剤は、下のスペーサー、例えば、SP4を介してRG'に結合している。特定の実施態様において、結合剤は、PEGスペーサーを介してRG'に結合している。以下で詳細に論じられるように、ある実施態様において、結合剤は、1以上のアジド基を官能化することにより調製される。各々のアジド基は、RGと反応して、RG'を形成することができる。特定の実施態様において、結合剤は、グルタミン残基に連結された-PEG-N3で誘導体化される。例示的な-N3誘導体化結合剤、その調製方法、及びRGとの反応におけるその使用方法は、本明細書に提供されている。ある実施態様において、RGは、1,3-付加環化への関与に好適なアルキンであり、RG'は、RGとアジド官能化結合剤との反応から形成される1,2,3-トリアゾリル部分である。さらなる例として、ある実施態様において、RG'は、
【化１３６】
2020520926.tif 000138
又は各々の位置異性体の混合物中に示される結合剤に連結される。各々のR及びR'は、本明細書に記載されている通りである。
【０１４６】
SP2スペーサーは、(AA)n部分をペイロードに接続する部分である。好適なスペーサーとしては、SP1スペーサーとして上で記載されているものが挙げられるが、これらに限定されない。さらなる好適なSP2スペーサーとしては、アルキレンもしくはポリエーテル、又はその両方を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。SP2スペーサーの末端、例えば、ペイロード又はAAに直接的に結合したスペーサーの部分は、コンジュゲートの化学合成中に、ペイロード又はAAをSP2スペーサーにカップリングさせる目的のために使用される反応性部分に由来する部分であることができる。いくつかの例において、SP2スペーサーの末端、例えば、ペイロード又はAAに直接的に結合したSP2スペーサーの部分は、コンジュゲートの化学合成中に、ペイロード又はAAを該スペーサーにカップリングさせる目的のために使用される反応性部分の残基であることができる。
【０１４７】
いくつかの実施態様において、SP2スペーサーは、-O-、-N(R6)-、-R4'-、-R5'-、-OR5'-、及び-OP(O)(OR6)O-からなる群から選択され、ここで:
R4'は、-Z'-Y-X-であり;
Xは、-O-及び-N(H)-からなる群から選択され;
Yは、アルキレン、置換アルキレン(限定されないが、オキソ置換、すなわち、=Oを含む)、ヘテロアルキレン、及び置換ヘテロアルキレンからなる群から選択され;
Z'は、-O-及び-N(H)-からなる群から選択され;
R5'は、ヘテロシクロアルキレン又は置換ヘテロシクロアルキレンであり、ここで、各々のヘテロシクロアルキレン又は置換ヘテロシクロアルキレンは、分子の残りの部分との結合に有用な-O-、-N(H)-、及び
【化１３７】
2020520926.tif 000139
からなる群から選択される少なくとも2つの部分を含む、窒素及び酸素から選択される1つ、2つ、又は3つのヘテロ原子を含み;かつ
各々のR6は、-H、アミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルである)。
【０１４８】
ある実施態様において、SP2スペーサーは、-O-、-N(H)-、
【化１３８】
2020520926.tif 000140
からなる群から選択される。ある実施態様において、各々の
【化１３９】
2020520926.tif 000141
は、ペイロードとの結合であり、かつ各々の
【化１４０】
2020520926.tif 000142
は、(AA)nとの結合である。
【０１４９】
上記の式において、各々のAAは、アミノ酸又は任意に、p-アミノベンジルオキシカルボニル残基(PABC)である。PABCが存在する場合、好ましくは、ただ1つのPABCが存在する。好ましくは、PABC残基は、存在する場合、ペイロードの近位にある(AA)n基中の末端AAである。各々のAAの好適なアミノ酸としては、天然、非天然、標準的、非標準的、タンパク質構成性、非タンパク質構成性、及びL-又はD-α-アミノ酸が挙げられる。いくつかの実施態様において、該リンカーは、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリン、これらの誘導体、又はこれらの組合せを含む。ある実施態様において、該アミノ酸の1以上の側鎖は、下記の側鎖基に連結される。いくつかの実施態様において、nは2である。いくつかの実施態様において、(AA)nは、バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、シトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、アラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、バリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、グリシン-バリンである。いくつかの実施態様において、nは3である。いくつかの実施態様において、the(AA)nは、バリン-シトルリン-PABCである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、シトルリン-バリン-PABCである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、グルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、グルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、リジン-バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、リジン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、nは4である。いくつかの実施態様において、(AA)nは、グルタミン酸-バリン-シトルリン-PABである。いくつかの実施態様において、(AA)nは、グルタミン-バリン-シトルリン-PABCである。当業者は、PABCを、以下の構造:
【化１４１】
2020520926.tif 000143
を有するp-アミノベンジルオキシカルボニルの残基として認識しているであろう。PABC残基は、インビトロ及びインビボで特定のリンカーの切断を促進することが示されている。
【０１５０】
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１４２】
2020520926.tif 000144
であり、ここで:
各々の
【化１４３】
2020520926.tif 000145
は、結合剤との結合であり;
各々の
【化１４４】
2020520926.tif 000146
は、ペイロードとの結合であり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化１４５】
2020520926.tif 000147
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。
【０１５１】
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１４６】
2020520926.tif 000148
であり、ここで:
各々の
【化１４７】
2020520926.tif 000149
は、結合剤との結合であり;
各々の
【化１４８】
2020520926.tif 000150
は、ペイロードとの結合であり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化１４９】
2020520926.tif 000151
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。
【０１５２】
上記の実施態様のいずれかにおいて、(AA)n基は、1以上の増強基で修飾することができる。有利には、該増強基は、(AA)n中の任意のアミノ酸の側鎖に連結させることができる。該増強基を連結させるための有用なアミノ酸としては、リジン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、及びシトルリンが挙げられる。該増強基との連結は、アミノ酸側鎖との直接結合であることができ、又は該連結は、スペーサー及び/もしくは反応基を介する間接的なものであることができる。有用なスペーサー及び反応基としては、上記の任意のものが挙げられる。該増強基は、当業者によって有用であるとみなされる任意の基であることができる。例えば、該増強基は、限定されないが、生物学的効果、生化学的効果、合成効果、可溶化効果、画像化効果、検出効果、及び反応性効果などを含む、有益な効果を化合物、ペイロード、リンカーペイロード、又は抗体コンジュゲートに付与する任意の基であることができる。ある実施態様において、該増強基は、親水基である。ある実施態様において、該増強基は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、該増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、該増強基は、コンジュゲートの残りの部分の可溶性を向上させることができる。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、置換されているか又は置換されていない。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルス���ホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１５０】
2020520926.tif 000152
であり、ここで:
SP1は、スペーサーであり;
SP2は、スペーサーであり;
SP3は、(AA)nのうちの1つのAAに連結したスペーサーであり;
【化１５１】
2020520926.tif 000153
は、結合剤との1以上の結合であり;
【化１５２】
2020520926.tif 000154
は、ペイロードとの1以上の結合であり;
【化１５３】
2020520926.tif 000155
は、増強基EGとの1以上の結合であり;
各々のAAは、アミノ酸であり;かつ
nは、1〜10の整数である。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。
【０１５３】
SP1スペーサー基は、上記の通りである。SP2スペーサー基は、上記の通りである。各々の(AA)n基は、上記の通りである。
【０１５４】
SP3スペーサーは、(AA)n部分を増強基(EG)と接続する部分である。好適なSP3スペーサーとしては、アルキレンもしくはポリエーテル、又はその両方を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。SP3スペーサーの末端、すなわち、増強基又はAAに直接的に結合したSP3スペーサーの部分は、コンジュゲートの化学合成中に、増強基又はAAをSP3スペーサーにカップリングさせる目的のために使用される反応性部分に由来する部分であることができる。いくつかの例において、SP3スペーサーの末端、すなわち、増強基又はAAに直接的に結合したスペーサーの部分は、コンジュゲートの化学合成中に、増強基又はAAを該スペーサーにカップリングさせる目的のために使用される反応性部分の残基であることができる。ある実施態様において、SP3は、(AA)nのただ1つのAAに連結したスペーサーである。ある実施態様において、SP3スペーサーは、(AA)nのリジン残基の側鎖に連結される。
【０１５５】
に
いくつかの実施態様において、SP3スペーサーは:
【化１５４】
2020520926.tif 000156
であり、ここで:
RG'は、反応基RGと増強剤EGとの反応後の反応基残基であり;
【化１５５】
2020520926.tif 000157
は、該増強剤との結合であり;
【化１５６】
2020520926.tif 000158
は、(AA)nとの結合であり;かつ
aは、2〜8の整数である。
【０１５６】
反応基RGは、増強剤との1以上の結合を形成することができることが当業者に知られている任意の反応基であることができる。反応基RGは、結合剤と反応して(例えば、抗体と、そのシステインもしくはリジン残基で、又はアジド部分で反応して)、式A、Aa、又はAbの化合物を形成することができる部分をその構造中に含む部分である。結合剤とのコンジュゲーションの後、反応基は、反応基残基(RG')になる。反応基RGは、上記の任意の反応基であることができる。例示的な反応基としては、結合剤と反応することができるハロアセチル、イソチオシアネート、スクシンイミド、N-ヒドロキシスクシンイミド、又はマレイミド部分を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１５７】
ある実施態様において、反応基としては、アルキンが挙げられるが、これに限定されない。ある実施態様において、該アルキンは、銅触媒の非存在下でアジドとの1,3-付加環化反応を受けることができるアルキン、例えば、歪みアルキンである。歪みアルキンは、歪み促進アルキン-アジド付加環化(SPAAC)、シクロアルキン、例えば、シクロオクチン、及びベンズ環化アルキンに好適である。好適なアルキンとしては、ジベンゾアザシクロオクチン又は
【化１５７】
2020520926.tif 000159
、ジベンゾシクロオクチン又は
【化１５８】
2020520926.tif 000160
、ビアリールアザシクロオクチノン又は
【化１５９】
2020520926.tif 000161
、二フッ素化シクロオクチン又は
【化１６０】
2020520926.tif 000162
、置換、例えば、フッ素化アルキン、アザ-シクロアルキン、ビシクル[6.1.0]ノニン又は
【化１６１】
2020520926.tif 000163
、及びこれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。特に有用なアルキンとしては、
【化１６２】
2020520926.tif 000164
が挙げられる。
【０１５８】
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１６３】
2020520926.tif 000165
であり、ここで:
RG'は、反応基RGと結合剤との反応後の反応基残基であり;
PEGは、PEG3であり;
SP2は、スペーサーであり;
SP3は、(AA)nのうちの1つのAAに連結したスペーサーであり;
【化１６４】
2020520926.tif 000166
は、結合剤との1以上の結合であり;
【化１６５】
2020520926.tif 000167
は、ペイロードとの1以上の結合であり;
【化１６６】
2020520926.tif 000168
は、増強基EGとの1以上の結合であり;
各々のAAは、アミノ酸であり;かつ
nは、1〜10の整数である。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。
【０１５９】
ある実施態様において、該リンカーは:
【化１６７】
2020520926.tif 000169
或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物であり、ここで:
各々の
【化１６８】
2020520926.tif 000170
は、結合剤との結合であり;
各々の
【化１６９】
2020520926.tif 000171
は、ペイロードとの結合であり;
各々の
【化１７０】
2020520926.tif 000172
は、増強剤との結合であり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化１７１】
2020520926.tif 000173
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。ある実施態様において、1,3-付加環化もしくはSPAAC位置異性体、又は位置異性体の混合物は、好適なアルキンで処理されたPEG-N3誘導体化抗体に由来する。例えば、一実施態様において、該リンカーは:
【化１７２】
2020520926.tif 000174
或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物である。さらなる例として、該リンカーは:
【化１７３】
2020520926.tif 000175
或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物である。さらなる例として、一実施態様において、該リンカーは:
【化１７４】
2020520926.tif 000176
或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物である。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。
【０１６０】
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１７５】
2020520926.tif 000177
或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物であり、ここで:
各々の
【化１７６】
2020520926.tif 000178
は、結合剤との結合であり;
各々の
【化１７７】
2020520926.tif 000179
は、増強剤との結合であり;
各々の
【化１７８】
2020520926.tif 000180
は、ペイロードとの結合であり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化１７９】
2020520926.tif 000181
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。
【０１６１】
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１８０】
2020520926.tif 000182
2020520926.tif 000183
或いはこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物であり、ここで:
各々の
【化１８１】
2020520926.tif 000184
は、結合剤との結合であり;
各々の
【化１８２】
2020520926.tif 000185
は、ペイロードとの結合であり;
R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
Aは、-O-、-N(H)-、
【化１８３】
2020520926.tif 000186
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１８４】
2020520926.tif 000187
2020520926.tif 000188
或いはこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物であり、ここで:
各々の
【化１８５】
2020520926.tif 000189
は、結合剤との結合であり;
各々の
【化１８６】
2020520926.tif 000190
は、ペイロードとの結合であり;
R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
Aは、-O-、-N(H)-、
【化１８７】
2020520926.tif 000191
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。
【０１６２】
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１８８】
2020520926.tif 000192
或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物であり、ここで:
各々の
【化１８９】
2020520926.tif 000193
は、結合剤との結合であり;
各々の
【化１９０】
2020520926.tif 000194
は、ペイロードとの結合であり;
各々の
【化１９１】
2020520926.tif 000195
は、増強基との結合であり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化１９２】
2020520926.tif 000196
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。
【０１６３】
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１９３】
2020520926.tif 000197
或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物であり、ここで:
各々の
【化１９４】
2020520926.tif 000198
は、結合剤との結合であり;
各々の
【化１９５】
2020520926.tif 000199
は、ペイロードとの結合であり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化１９６】
2020520926.tif 000200
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。
【０１６４】
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化１９７】
2020520926.tif 000201
2020520926.tif 000202
或いはこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物であり、ここで:
各々の
【化１９８】
2020520926.tif 000203
は、結合剤との結合であり;
各々の
【化１９９】
2020520926.tif 000204
は、ペイロードとの結合であり;
R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
Aは、-O-、-N(H)-、
【化２００】
2020520926.tif 000205
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。
【０１６５】
いくつかの実施態様において、該リンカーは:
【化２０１】
2020520926.tif 000206
2020520926.tif 000207
或いはこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体、或いはこれらの位置異性体の混合物であり、ここで:
各々の
【化２０２】
2020520926.tif 000208
は、結合剤との結合であり;
各々の
【化２０３】
2020520926.tif 000209
は、ペイロードとの結合であり;
R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
Aは、-O-、-N(H)-、
【化２０４】
2020520926.tif 000210
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。
【０１６６】
上記のリンカーは、以下のコンジュゲートを提供するのに有用である。
【０１６７】
いくつかの実施態様において、該コンジュゲートは:
【化２０５】
2020520926.tif 000211
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
各々のSP1、SP2、及びSP3は、上記のスペーサー基であり、ここで、SP3は、(AA)nのうちの1つのAAに連結しており;
EGは、増強剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、各々の場合に、独立に、-O-、-N(H)-、
【化２０６】
2020520926.tif 000212
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１６８】
いくつかの実施態様において、該コンジュエート(conjuate)は:
【化２０７】
2020520926.tif 000213
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
各々のRG'は、本明細書に記載される反応基の残基であり;
EGは、増強剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２０８】
2020520926.tif 000214
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１６９】
いくつかの実施態様において、該コンジュエート(conjuate)は:
【化２０９】
2020520926.tif 000215
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
各々のRG'は、本明細書に記載される反応基の残基であり;
EGは、増強剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２１０】
2020520926.tif 000216
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
上で論じられているように、結合剤との結合は、直接的なもの、又はスペーサーを介するものあることができる。ある実施態様において、結合剤との結合は、該結合剤のグルタミン残基との、PEGスペーサーを介するものである。ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１７０】
いくつかの実施態様において、該コンジュエート(conjuate)は:
【化２１１】
2020520926.tif 000217
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々の
【化２１２】
2020520926.tif 000218
は、増強基との結合であり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２１３】
2020520926.tif 000219
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１７１】
いくつかの実施態様において、該コンジュゲートは:
【化２１４】
2020520926.tif 000220
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々の
【化２１５】
2020520926.tif 000221
は、増強基との結合であり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２１６】
2020520926.tif 000222
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１７２】
いくつかの実施態様において、該コンジュゲートは:
【化２１７】
2020520926.tif 000223
2020520926.tif 000224
又はこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２１８】
2020520926.tif 000225
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１７３】
いくつかの実施態様において、該コンジュゲートは:
【化２１９】
2020520926.tif 000226
2020520926.tif 000227
又はこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２２０】
2020520926.tif 000228
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１７４】
いくつかの実施態様において、該コンジュゲートは:
【化２２１】
2020520926.tif 000229
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々の
【化２２２】
2020520926.tif 000230
は、増強基との結合であり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２２３】
2020520926.tif 000231
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１７５】
いくつかの実施態様において、該コンジュゲートは:
【化２２４】
2020520926.tif 000232
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々の
【化２２５】
2020520926.tif 000233
は、増強基との結合であり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２２６】
2020520926.tif 000234
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、増強剤は、親水基である。ある実施態様において、増強剤は、シクロデキストリンである。ある実施態様において、増強基は、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸である。シクロデキストリンは、当業者に公知の任意のシクロデキストリンであることができる。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、もしくはγシクロデキストリン、又はこれらの混合物である。ある実施態様において、シクロデキストリンは、αシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、βシクロデキストリンである。ある実施態様において、シクロデキストリンは、γシクロデキストリンである。ある実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3H、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2、又は-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5であり、mは、1、2、3、4、又は5である。一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)1-5SO3Hである。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)NH-(CH2)1-5SO3Hであり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2)n-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、nは、1、2、3、4、又は5である。別の実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、アルキレニル、又はヘテロアルキレニルスルホン酸は、-(CH2CH2O)m-C(O)N((CH2)1-5C(O)NH(CH2)1-5SO3H)2であり、ここで、mは、1、2、3、4、又は5である。ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１７６】
いくつかの実施態様において、該コンジュゲートは:
【化２２７】
2020520926.tif 000235
2020520926.tif 000236
又はこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２２８】
2020520926.tif 000237
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１７７】
いくつかの実施態様において、該コンジュゲートは:
【化２２９】
2020520926.tif 000238
2020520926.tif 000239
又はこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
BAは、結合剤であり;
kは、1〜30の整数であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２３０】
2020520926.tif 000240
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１７８】
上記の実施態様の各々において、該コンジュゲートは、下の節に記載されているように、アジド基で官能化された結合剤、及びその残基から調製することができる。便宜のために、上記のいくつかの構造中のトリアゾール残基は、括弧内に示されている。当業者は、該トラゾール(trazole)をアジド誘導体化結合剤のアジド基及びリンカーペイロードL-Pのアルキンから形成させることができることを認識しているであろう。
【０１７９】
いくつかの実施態様において、該コンジュゲートは:
【化２３１】
2020520926.tif 000241
2020520926.tif 000242
2020520926.tif 000243
2020520926.tif 000244
2020520926.tif 000245
2020520926.tif 000246
又はこれらの位置異性体、又は立体異性形態、医薬として許容し得る塩、溶媒和物から選択される。上記の実施態様において、kは、1〜30の整数である。ある実施態様において、kは、1〜8の整数である。ある実施態様において、kは、1〜4の整数である。ある実施態様において、kは、8、7、6、5、4、3、2、又は1である。ある実施態様において、kは4である。ある実施態様において、kは3である。ある実施態様において、kは2である。ある実施態様において、kは1である。
【０１８０】
(反応性リンカー-ペイロード)
本明細書に提供されるコンジュゲートは、上記の反応基RGを有する反応性リンカー-ペイロードから調製することができる。該反応性リンカーペイロードは、下記の方法に従って、増強基及び/又は結合剤に連結させることができる。
【０１８１】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２３２】
2020520926.tif 000247
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
各々のRGは、上記の反応基であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２３３】
2020520926.tif 000248
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１８２】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２３４】
2020520926.tif 000249
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
各々のRGは、上記の反応基であり;
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２３５】
2020520926.tif 000250
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１８３】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２３６】
2020520926.tif 000251
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２３７】
2020520926.tif 000252
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１８４】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２３８】
2020520926.tif 000253
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２３９】
2020520926.tif 000254
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１８５】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２４０】
2020520926.tif 000255
2020520926.tif 000256
又はこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２４１】
2020520926.tif 000257
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１８６】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２４２】
2020520926.tif 000258
2020520926.tif 000259
又はこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２４３】
2020520926.tif 000260
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１８７】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２４４】
2020520926.tif 000261
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２４５】
2020520926.tif 000262
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１８８】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２４６】
2020520926.tif 000263
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２４７】
2020520926.tif 000264
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１８９】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２４８】
2020520926.tif 000265
又はこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２４９】
2020520926.tif 000266
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１９０】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２５０】
2020520926.tif 000267
又はこれらの医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性形態、又はこれらの位置異性体であり、ここで:
Rは、-H、R1、又はR2であり;かつ
Q1、Q2、W、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、Z、及びnは、式Iとの関連において記載されている通りであり;
各々のR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2であり;かつ
各々のAは、-O-、-N(H)-、
【化２５１】
2020520926.tif 000268
であり、ここで、ZZは、水素、又は本明細書中の別の場所で論じられているアミノ酸の側鎖である。例えば、一実施態様において、ZZは、C1-6アルキルである。さらなる例として、一実施態様において、ZZは、C1-6ヘテロアルキルである。
ある実施態様において、Rは、R1である。
【０１９１】
いくつかの実施態様において、該反応性リンカー-ペイロードは:
【化２５２】
2020520926.tif 000269
2020520926.tif 000270
2020520926.tif 000271
2020520926.tif 000272
2020520926.tif 000273
又はこれらの位置異性体、又は立体異性形態、医薬として許容し得る塩、溶媒和物から選択される。
【０１９２】
(化合物の調製方法)
本明細書に提供される化合物は、当業者に明白な任意の方法によって調製し、単離し、又は取得することができる。例示的な調製方法は、下記の実施例で詳細に記載されている。ある実施態様において、本明細書に提供される化合物は、スキームAに従って調製することができる。
【０１９３】
(スキームA．例示的な調製スキーム)
【化２５３】
2020520926.tif 000274
例示的な調製スキームにおいて、Q1、Q2、R1、R2、R7、W、及びnは、式(I)との関連において記載されている通りに定義される。最初のエステル化の後に、R1の保護及び/又はR1のアミノ化のいずれかが続いて、R2Pが生じる。R1の保護の後、例えば、カルボン酸部分の鹸化及び活性化により、Q1を有する第一のカップリングパートナーが提供される。アミノ化の後、例えば、カルボン酸部分の鹸化及びアミド化により、Q2を有する第二のカップリングパートナーが提供される。それぞれ、Q1及びQ2を有するカップリングパートナーを1つにまとめ、その後、それぞれ、R1及びR2を脱保護することにより、式Iの化合物が提供される。例示的な調製方法は、以下の実施例で詳細に記載されている。
【０１９４】
ある実施態様において、1以上の保護又は脱保護工程を、上のスキームAに記載されている調製方法に含めてもよい。
【０１９５】
本明細書に記載されるリンカー-ペイロードは、一連のカップリング工程によって合成することができる。
【化２５４】
2020520926.tif 000275
。例えば、右側のペイロードは、1以上の標準的なカップリング反応を介してSP2に連結させることができる。有利な実施態様において、本明細書に記載されるペイロード化合物は、本明細書に記載される、アミド合成条件によるカップリングに利用可能な遊離アミノ基を含む。(AA)nのアミノ酸を、アミド合成条件、例えば、ペプチド合成条件によって付加することができる。スペーサーSP2は、1以上の標準的なカップリング反応を介して(AA)nに連結させることができる。有利な実施態様において、本明細書に記載されるSP2及び(AA)n基は、本明細書に記載される、アミド合成条件によるカップリングに利用可能な遊離アミノ又はカルボキシル基を含む。存在する場合、スペーサーSP3は、1以上の標準的なカップリング反応を介して(AA)nに連結させることができる。有利な実施態様において、本明細書に記載されるSP3及び(AA)n基は、本明細書に記載される、アミド合成条件によるカップリングに利用可能な遊離アミノ又はカルボキシル基を含む。
【０１９６】
スペーサーSP3は、存在する場合、反応基RGで終わる。この反応基は、当業者に好適であるとみなされるカップリング条件を介して、増強剤EGに連結させることができる。ある実施態様において、スペーサーSP3は、アミド合成条件を介して増強剤EGに連結される。ある実施態様において、スペーサーSP3は、クリック化学を介して増強剤EGに連結される。これらの実施態様において、スペーサーSP3は、クリック反応に好適な反応基、例えば、アジド又はアルキンで終わり、増強剤EGは、クリック反応に好適な相補的反応基、例えば、アルキン又はアジドを含む。好ましい実施態様において、SP3は、歪みアルキンで終わり、EGは、アジドを含むか;又はSP3は、カルボン酸で終わり、EGは、アミンを含む。EGがシクロデキストリン部分である場合、該シクロデキストリンは、アジドを含むことができる。アジドシクロデキストリンは、合成により調製することができるか、又は市販の供給源から入手することができる。EGがスルホン酸部分である場合、該EGの一方の末端は、スルホン酸基で終わり、もう一方の末端は、一級又は二級アミンで終わる。
【０１９７】
本明細書に記載されるコンジュゲートは、本明細書に記載されるリンカー-ペイロードを、結合剤、例えば、抗体と、標準的なコンジュゲーション条件下でカップリングさせることにより合成することができる(例えば、引用により完全に本明細書中に組み込まれる、Doroninaらの文献、Nature Biotechnology 2003, 21, 7, 778を参照)。該結合剤が抗体である場合、該抗体は、該抗体の1以上のシステイン又はリジン残基を介して、リンカー-ペイロードにカップリングさせることができる。リンカー-ペイロードは、例えば、該抗体を、還元剤、例えば、ジチオテリトール(dithiotheritol)に供して、該抗体のジスルフィド結合を切断し、還元された抗体を、例えば、ゲル濾過によって精製し、その後、該抗体を、好適な反応部分、例えば、マレイミド基を含有するリンカー-ペイロードで処理することにより、システイン残基にカップリングさせることができる。好適な溶媒としては、水、DMA、DMF、及びDMSOが挙げられるが、これらに限定されない。反応基、例えば、活性化エステル又は酸ハライド基を含有するリンカー-ペイロードは、該抗体のリジン残基にカップリングさせることができる。好適なとしては、水、DMA、DMF、及びDMSOが挙げられるが、これらに限定されない。コンジュゲートは、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、透析、及び限外濾過/透析濾過を含む、公知のタンパク質技法を用いて精製することができる。
【０１９８】
結合剤、例えば、抗体は、クリック化学反応を介してコンジュゲートすることもできる。該クリック化学反応のいくつかの実施態様において、該リンカー-ペイロードは、アジドとの1,3-付加環化反応を受けることができる反応基、例えば、アルキンを含む。そのような好適な反応基は、上で記載されている。該抗体には、1以上のアジド基を含む抗体が含まれる。そのような抗体には、例えば、アジド-ポリエチレングリコール基で官能化された抗体が含まれる。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも1つのグルタミン残基、例えば、重鎖Gln295又はGln55を有する抗体を、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、一級アミン化合物で処理することにより誘導される。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも1つのグルタミン残基、例えば、重鎖Gln297を有する抗体を、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、一級アミン化合物で処理することにより誘導される。そのような抗体には、Asn297Gln(N297Q)突然変異体が含まれる。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも2つのグルタミン残基、例えば、重鎖Gln295及び重鎖Gln297を有する抗体を、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、一級アミン化合物で処理することにより誘導される。そのような抗体には、Asn297Gln(N297Q)突然変異体が含まれる。ある実施態様において、該抗体は、合計2つ又は合計4つのグルタミン残基に対して、この段落に記載されている2つの重鎖を有する。
【０１９９】
ある実施態様において、該抗体は、EU付番体系で295と付番された1以上の重鎖位置にグルタミン残基を含む。本開示において、この位置は、グルタミン295又はGln295又はQ295と呼ばれる。当業者は、これが多くの抗体の野生型配列中の保存されたグルタミン残基であることを認識しているであろう。他の有用な実施態様において、該抗体を、グルタミン残基を含むように改変することができる。グルタミン残基を含むように抗体配列を修飾する技法は、当業者の能力の範囲内である(例えば、Ausubelらの文献、Current Protoc. Mol. Biol.を参照)。
【０２００】
ある実施態様において、該抗体は、2つのグルタミン残基を各々の重鎖に1つで含む。特定の実施態様において、該抗体は、各々の重鎖にQ295残基を含む。さらなる実施態様において、該抗体は、1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、又はそれより多くのグルタミン残基を含む。これらのグルタミン残基は、重鎖、軽鎖、又は重鎖と軽鎖の両方にあることができる。例示的なグルタミン残基には、Q55が含まれる。これらのグルタミン残基は、野生型残基又は改変残基であることができる。該抗体は、標準的な技法に従って調製することができる。
【０２０１】
当業者は、抗体が重鎖配列中の残基Q295近くの残基N297でグリコシル化されていることが多いことを認識しているであろう。残基N297におけるグリコシル化は、残基Q295においてトランスグルタミナーゼを妨害することができる(Dennlerらの文献、上記)。したがって、有利な実施態様において、抗体は、グリコシル化されていない。ある実施態様において、該抗体は、脱グリコシル化又はアグリコシル化されている。特定の実施態様において、抗体重鎖は、N297突然変異を有する。別の言い方をすれば、該抗体は、位置297にアスパラギン残基をもはや有さないように突然変異させられている。特定の実施態様において、抗体重鎖は、N297Q突然変異を有する。そのような抗体は、グリコシル化配列を除去もしくは無効化する部位特異的突然変異誘発によるか、又は抗体の機能もしくは結合の無効化を生じさせない部位にグルタミン残基を挿入する部位特異的突然変異誘発によって調製することができる。いくつかの実施態様において、Q295残基及び/又はN297Q突然変異を有する抗体は、トランスグルタミナーゼが接近することができ、それゆえ、リンカー又はリンカー-ペイロードにコンジュゲートすることができる1以上のさらなる天然のグルタミン残基を、その可変領域に含有する。例示的な天然のグルタミン残基は、例えば、軽鎖のQ55に見出すことができる。そのような場合、トランスグルタミナーゼを介してコンジュゲートされた抗体は、予想よりも大きいDAR値(例えば、4よりも大きいDAR)を有することができる。任意のそのような抗体を天然源又は人工源から単離することができる
【０２０２】
次に、干渉するグリコシル化を有さない抗体を一級アミン化合物と反応させる。ある実施態様において、アグリコシル化抗体を一級アミン化合物と反応させて、グルタミニル修飾抗体を生じさせる。ある実施態様において、脱グリコシル化抗体を一級アミン化合物で処理して、グルタミニル修飾抗体を生じさせる。
【０２０３】
一級アミンは、トランスグルタミナーゼの存在下でグルタミン残基との共有結合を形成することができる任意の一級アミンであることができる。有用な一級アミンは、以下に記載されている。トランスグルタミナーゼは、当業者によって好適であるとみなされる任意のトランスグルタミナーゼであることができる。ある実施態様において、トランスグルタミナーゼは、一級アミン化合物上の遊離アミン基とグルタミン残基の側鎖上のアシル基の間でのイソペプチド結合の形成を触媒する酵素である。トランスグルタミナーゼは、タンパク質-グルタミン-γ-グルタミルトランスフェラーゼとしても知られる。特定の実施態様において、トランスグルタミナーゼは、EC 2.3.2.13に分類されている。トランスグルタミナーゼは、好適であるとみなされる任意の源に由来するものであることができる。ある実施態様において、トランスグルタミナーゼは、微生物のものである。有用なトランスグルタミナーゼは、ストレプトミセス・モバラエンス(Streptomyces mobaraense)、ストレプトミセス・シンナモネウム(Streptomyces cinnamoneum)、ストレプトミセス・グリセオ-カルネウム(Streptomyces griseo-carneum)、ストレプトミセス・ラベンデュラエ(Streptomyces lavendulae)、及び枯草菌(Bacillus subtilis)から単離されている。哺乳動物のトランスグルタミナーゼを含む、非微生物のトランスグルタミナーゼを使用することもできる。ある実施態様において、トランスグルタミナーゼは、任意の技法によって産生するか、又は当業者によって好適であるとみなされる任意の源から入手することができる。特定の実施態様において、トランスグルタミナーゼは、市販の供給源から入手される。
【０２０４】
特定の実施態様において、一級アミン化合物は、トランスグルタミネーション後のさらなる反応が可能な反応基を含む。これらの実施態様において、グルタミニル修飾抗体を反応性ペイロード化合物もしくは反応性リンカー-ペイロード化合物と反応させるか又はこれらで処理して、抗体-ペイロードコンジュゲートを形成させることができる。ある実施態様において、一級アミン化合物は、アジドを含む。
【０２０５】
ある実施態様において、グルタミニル修飾抗体を反応性リンカー-ペイロードと反応させるか又はこれで処理して、抗体-ペイロードコンジュゲートを形成させる。この反応は、当業者によって好適であるとみなされる条件下で進行することができる。ある実施態様において、グルタミニル修飾抗体を、該グルタミニル修飾抗体とリンカー-ペイロード化合物の間での結合を形成させるのに好適な条件下で反応性リンカー-ペイロード化合物と接触させる。好適な反応条件は、当業者に周知である。
【０２０６】
例示的な反応は、下記の実施例で提供されている。
【０２０７】
(医薬組成物及び治療方法)
本明細書に提供されるのは、疾患、疾病、又は障害を治療及び予防する方法であって、1以上の本明細書に開示される化合物、例えば、1以上の本明細書に提供される式の化合物の治療又は予防有効量を投与することを含む、方法である。該疾患、障害、及び/又は疾病には、限定されないが、本明細書に掲載されている抗原と関連するものが含まれる。
【０２０８】
本明細書に記載される化合物は、単独で又は1以上のさらなる治療剤と一緒に投与することができる。1以上のさらなる治療剤は、本明細書に記載される化合物の投与の直前に、その投与と同時に、又はその投与の直後に投与することができる。本開示は、本明細書に記載される化合物のいずれかを1以上のさらなる治療剤との組合せで含む医薬組成物、及びそのような組合せをそれを必要としている対象に投与することを含む治療方法も含む。
【０２０９】
好適なさらなる治療剤としては:第二のグルココルチコイド、自己免疫治療剤、ホルモン剤、生物製剤(biologic)、又はモノクローナル抗体が挙げられるが、これらに限定されない。好適な治療剤としては、本明細書に記載される化合物の任意の医薬として許容し得る塩、酸、又は誘導体も挙げられるが、これらに限定されない。
【０２１０】
本明細書に記載される方法のいくつかの実施態様において、複数用量の本明細書に記載される化合物(又は本明細書に記載される化合物と本明細書に言及されるさらなる治療剤のいずれかの組合せを含む医薬組成物)を規定の時間経過にわたって対象に投与することができる。本開示のこの態様による方法は、対象に、複数用量の本明細書に記載される化合物を順次投与することを含む。本明細書で使用される場合、「順次投与する」とは、各々の用量の該化合物が、異なる時点で、例えば、所定の間隔(例えば、時間、日、週、又は月)で区切られた異なる日に、対象に投与することを意味する。本開示は、患者に、単一の初回用量の本明細書に記載される化合物、その後、1以上の二次用量の該化合物、及び任意にその後、1以上の三次用量の該化合物を順次投与することを含む方法を含む。
【０２１１】
「初回用量」、「二次用量」、及び「三次用量」という用語は、本明細書に記載される化合物の投与の時系列を指す。したがって、「初回用量」は、治療レジメンの開始時に投与される用量(別名、「ベースライン用量」)であり;「二次用量」は、初回用量の後に投与される用量であり;「三次用量」は、二次用量の後に投与される用量である。初回用量、二次用量、及び三次用量は全て、同じ量の本明細書に記載される化合物を含有し得るが、通常、投与の頻度に関して互いに異なり得る。ある実施態様において、初回用量、二次用量、及び/又は三次用量に含まれる化合物の量は、治療経過中、互いに変化する(例えば、必要に応じて、上方調整又は下方調整される)。ある実施態様において、2以上の(例えば、2、3、4、又は5)用量が治療レジメンの開始時に「ローディング用量」として投与され、その後、より低い頻度で投与される後続の用量(例えば、「維持用量」)として投与される。
【０２１２】
本開示のある例示的な実施態様において、各々の二次及び/又は三次用量は、直前の用量から1〜26週間(例えば、1、11/2、2、21/2、3、31/2、4、41/2、5、51/2、6、61/2、7、71/2、8、81/2、9、91/2、10、101/2、11、111/2、12、121/2、13、131/2、14、141/2、15、151/2、16、161/2、17、171/2、18、181/2、19、191/2、20、201/2、21、211/2、22、221/2、23、231/2、24、241/2、25、251/2、26、261/2週間、又はそれより長い期間)後に投与される。本明細書で使用される「直前の用量」という語句は、一連の複数回の投与において、介入用量のない順序で、そのまさに次の用量の投与前に患者に投与される化合物の用量を意味する。
【０２１３】
本開示のこの態様による方法は、患者に、任意の数の二次及び/又は三次用量の化合物を投与することを含み得る。例えば、ある実施態様において、単一の二次用量のみが患者に投与される。他の実施態様において、2以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、又はそれより多く)の二次用量が患者に投与される。同様に、ある実施態様において、単一の三次用量のみが患者に投与される。他の実施態様において、2以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、又はそれより多く)の三次用量が患者に投与される。投与レジメンは、特定の対象の生涯にわたって無期限に、又はそのような治療がもはや治療的に必要でなくなるかもしくは有益でなくなるまで実施することができる。
【０２１４】
複数の二次用量を含む実施態様において、各々の二次用量は、他の二次用量と同じ頻度で投与されてもよい。例えば、各々の二次用量は、患者に、直前の用量から1〜2週間後又は1〜2カ月後に投与されてもよい。同様に、複数の三次用量を含む実施態様において、各々の三次用量は、他の三次用量と同じ頻度で投与されてもよい。例えば、各々の三次用量は、患者に、直前の用量から2〜12週間後に投与されてもよい。本開示のある実施態様において、二次及び/又は三次用量が患者に投与される頻度は、治療レジメンの経過にわたって変化し得る。投与の頻度はまた、臨床検査後の個々の患者の必要性に応じて、医師により、治療経過中に調整されてもよい。
【０２１５】
本開示は、2〜6のローディング用量が、第一の頻度(例えば、週に1回、2週間毎に1回、3週間毎に1回、月に1回、2カ月毎に1回など)で患者に投与され、その後、2以上の維持用量がより低い頻度で患者に投与される投与レジメンを含む。例えば、本開示のこの態様によれば、ローディング用量が月に1回の頻度で投与される場合、維持用量は、6週間毎に1回、2カ月毎に1回、3カ月毎に1回などで、患者に投与されてもよい。
【０２１６】
本開示は、本明細書に記載される化合物及び/又はコンジュゲート、例えば、式I、Ia、Ib、A、Aa、又はAbの化合物の医薬組成物、例えば、本明細書に記載される化合物、その塩、立体異性体、多形、並びに医薬として許容し得る担体、希釈剤、及び/又は賦形剤を含む組成物を含む。好適な担体、希釈剤、及び賦形剤の例としては:適切な組成物pHの維持のためのバッファー(例えば、クエン酸塩バッファー、コハク酸塩バッファー、酢酸塩バッファー、リン酸塩バッファー、乳酸塩バッファー、シュウ酸塩バッファーなど)、担体タンパク質(例えば、ヒト血清アルブミン)、食塩水、ポリオール(例えば、トレハロース、スクロース、キシリトール、ソルビトールなど)、界面活性剤(例えば、ポリソルベート20、ポリソルベート80、ポリオキソレートなど)、抗菌薬、及び抗酸化剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２１７】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、疾患、障害、又は疾病を治療する方法であって、該障害を有する患者に、式I、Ia、Ib、A、Aa、もしくはAbの化合物、又はその医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法である。
【０２１８】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、疾患、障害、又は疾病を予防する方法であって、該障害を有する患者に、式I、Ia、Ib、A、Aa、もしくはAbの化合物、又はその医薬組成物の予防有効量を投与することを含む、方法である。
【０２１９】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、LXRシグナル伝達の調節に応答性の任意の疾患、障害、又は疾病を治療又は予防する方法である。いくつかの例において、該疾患又は障害は、LXR機能、LXR多型、LXRアゴニスト活性、又はLXRアンタゴニスト活性と関連する。いくつかの例において、本明細書に示されるのは、増殖性障害、神経変性障害、免疫学的障害、自己免疫疾患、炎症性障害、皮膚疾患、代謝性疾患、心血管疾患、及び胃腸疾患からなる群から選択される疾患、障害、又は疾病を治療又は予防する方法である。
【０２２０】
増殖性障害は、当業者に公知の任意の増殖性障害であることができる。ある実施態様において、増殖性障害には、限定されないが、腫瘍学的障害(oncology disorder)が含まれ、ここで、該腫瘍学的障害は、当業者に公知の任意の癌障害であることができる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、メラノーマを治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、転移性メラノーマを治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、肺癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、EGFR-チロシンキナーゼインヒビター抵抗性肺癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、口腔癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、口腔扁平上皮細胞癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、前立腺癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、ホジキンリンパ腫を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、乳癌を治療又は予防する方法である。
【０２２１】
神経変性障害は、当業者に公知の任意の神経変性障害であることができる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、アルツハイマー病を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、パーキンソン病を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、ハンチントン病を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、筋萎縮性側索硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、ミエリン遺伝子発現を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、髄鞘形成及び髄鞘再生の疾病、疾患、又は障害を治療又は予防する方法である。
【０２２２】
免疫学的障害は、当業者に公知の任意の免疫学的障害であることができる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、潰瘍性大腸炎を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、クローン病を治療又は予防する方法である。
【０２２３】
炎症性障害は、当業者に公知の任意の炎症性障害であることができる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、関節炎を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、関節リウマチを治療又は予防する方法である。
【０２２４】
代謝性疾患は、当業者に公知の任意の代謝性疾患であることができる。ある実施態様において、代謝性疾患は、脂質異常症である。脂質異常症は、当業者に公知の任意の脂質異常症であることができる。ある実施態様において、脂質異常症は、高脂血症、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、高リポタンパク血症、HDL欠損症、ApoA-I欠損症、並びに心血管疾患、例えば、冠動脈疾患(例えば、狭心症、心筋梗塞、及び突然心臓死の治療及び予防を含む);アテローム性動脈硬化症(例えば、アテローム性動脈硬化症の治療及び予防を含む);並びに再狭窄(例えば、バルーン血管形成術などの医療処置の結果として生じるアテローム性動脈硬化性プラークの治療又は予防を含む)からなる群から選択される。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、糖尿病を治療又は予防する方法である。
【０２２５】
心血管疾患は、当業者に公知の任意の心血管疾患であることができる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、アテローム性動脈硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、異常なマクロファージプロセシングから生じるアテローム性動脈硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、マクロファージがoxLDLをプロセシングすることができない酸化低密度リポタンパク質(oxLDL)の形成から生じるアテローム性動脈硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、虚血性心疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、卒中を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、高血圧性心疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、大動脈瘤を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、心内膜炎を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、末梢動脈疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、この段落で提供されている疾患のいずれかの組合せを治療又は予防する方法である。
【０２２６】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、核内受容体の機能を調節する方法である。非限定的な例として、該機能は、炎症性メディエーター(例えば、サイトカイン、ケモカイン)の発現/分泌、コレステロール調節、コレステロール摂取、コレステロール流出、コレステロール酸化、遊走、走化性、アポトーシス及び壊死、炎症活性、脂質調節、アポトーシス、遊走、走化性、遺伝子転写、並びにタンパク質発現から選択され得る。
【実施例】
【０２２７】
(実施例)
本明細書に提供されるのは、新規のビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド、そのタンパク質コンジュゲート、並びに疾患、障害、及び疾病を治療する方法であって、該ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド及びコンジュゲートを投与することを含む、方法である。
【０２２８】
いくつかの例において、式(I)の化合物は、表1で特定されている化合物である。
表1．ペイロードのリスト
【表１】
2020520926.tif 000276
2020520926.tif 000277
2020520926.tif 000278
【０２２９】
参照:
化合物31の構造
【化２５５】
2020520926.tif 000279
GW3965の構造
【化２５６】
2020520926.tif 000280
T0901317の構造
【化２５７】
2020520926.tif 000281
【０２３０】
本開示のリンカー-ペイロードの例としては、下の表2に記載されているものが挙げられるが、これらに限定されない。
表2．リンカー-ペイロードのリスト
【表２】
2020520926.tif 000282
2020520926.tif 000283
2020520926.tif 000284
2020520926.tif 000285
2020520926.tif 000286
【０２３１】
本発明の特定の実施態様を以下の非限定的な実施例によって説明する。
【０２３２】
別途明示的に記述されない限り、試薬及び溶媒は、市販の供給源、例えば、Sinopharm Chemical Reagent Co.(SCRC)、Sigma-Aldrich、Alfa、又は他の供給業者から入手した。
【０２３３】
1H NMR及び他のNMRスペクトルをBruker AVIII 400又はBruker AVIII 500で記録した。データをNutsソフトウェア又はMestReNovaソフトウェアで処理し、プロトンシフトを内部標準のテトラメチルシラン(TMS)から低磁場方向に移動した百万分率(ppm)で測定した。
【０２３４】
HPLC-MS測定を、以下の条件を用いて、Agilent 1200 HPLC/6100 SQシステムで実行した。
【０２３５】
HPLC-MS測定のための方法Aには、移動相として: A:水(0.01％トリフルオロ酢酸(TFA))、B:アセトニトリル(0.01％TFA);勾配相: 5％のBを15分(min)以内に95％のBまで増大させた;流速: 1.0mL/分;カラム: SunFire C18、4.6×50mm、3.5μm;カラム温度: 50℃、検出器:アナログ・デジタル変換器(ADC)蒸発光散乱検出器(ELSD)、ダイオードアレイ検出器(DAD)(214nm及び254nm)、エレクトロスプレーイオン化-大気イオン化(ES-API)が含まれた。
【０２３６】
HPLC-MS測定のための方法Bには、移動相として: A:水(10mM NH4HCO3)、B:アセトニトリル;勾配相: 15分以内に5％から95％のB;流速: 1.0mL/分;カラム: XBridge C18、4.6×50mm、3.5μm;カラム温度: 50℃、検出器: ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、質量選択的検出器(MSD)(ES-API)が含まれた。
【０２３７】
LC-MS測定を、以下の条件を用いて、Agilent 1200 HPLC/6100 SQシステムで実行した:
【０２３８】
LC-MS測定のための方法Aには、装置として: WATERS 2767;カラム: 2つが直列に接続された、Shimadzu Shim-Pack、PRC-ODS、20×250mm、15μm;移動相: A:水(0.01％TFA)、B:アセトニトリル(0.01％TFA);勾配相: 5％のBを3分以内に95％のBまで増大させた;流速: 1.8〜2.3mL/分;カラム: SunFire C18、4.6×50mm、3.5μm;カラム温度: 50℃、検出器: ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、ES-APIが含まれた。
【０２３９】
LC-MS測定のための方法Bには、装置として: Gilson GX-281;カラム: Xbridge Prep C18 10um OBD、19×250mm;移動相: A:水(10mM NH4HCO3)、B:アセトニトリル;勾配相: 3分以内に5％から95％のB;流速: 1.8〜2.3mL/分;カラム: XBridge C18、4.6×50mm、3.5μm;カラム温度: 50℃。検出器: ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、MSD(ES-API)が含まれた。
【０２４０】
酸性又は塩基性溶媒系での分取高圧液体クロマトグラフィー(分取HPLC)をGilson GX-281装置で利用した。酸性溶媒系では、Waters SunFire 10μm C18カラム(100Å、250×19mm)が使用され、分取HPLC用の溶媒Aは、水/0.05％TFAであり、溶媒Bは、アセトニトリルであった。溶出条件は、30mL/分の流速での20分間にわたる5％から100％への溶媒Bの線形勾配増加であった。塩基性溶媒系には、Waters Xbridge 10μm C18カラム(100Å、250×19mm)が含まれ、分取HPLC用の溶媒Aは、水/10mM重炭酸アンモニウム(NH4HCO3)であり、溶媒Bは、アセトニトリルであった。溶出条件は、30mL/分の流速での20分間にわたる5％から100％への溶媒Bの線形勾配増加であった。
【０２４１】
フラッシュクロマトグラフィーは、Agelaフラッシュカラムシリカ-CSカートリッジを用いて、Biotage装置で実施し;逆相フラッシュクロマトグラフィーは、Boston ODS又はAgela C18カートリッジを用いて、Biotage装置で実施した。
【０２４２】
本明細書で使用される場合、これらのプロセス、スキーム、及び実施例で使用される記号及び慣例は、特定の略語が具体的に定義されているかどうかにかかわらず、現代の科学文献、例えば、the Journal of the American Chemical Society又はthe Journal of Biological Chemistryで使用されているものと一致している。具体的には、限定されないが、以下の略語を実施例及び本明細書の全体を通じて使用することができる:
【表３】
2020520926.tif 000287
2020520926.tif 000288
2020520926.tif 000289
2020520926.tif 000290
【０２４３】
(調製方法)
(実施例1)
本実施例は、上の表1のポドカルピン酸誘導体9a〜9r、9t、及び9uの一般的な合成方法を示している。本実施例は、図1で1から9a〜pまで付番された化合物に言及している。
【０２４４】
図1において、出発材料のポドカルピン酸1は、もともと、1873年に植物樹脂中で発見され、後に、マキ属(Podocarpus)のいくつかの種から報告された(例えば、J. Chem. Soc. 1938, 1006-1013を参照)。ポドカルピン酸1からの化合物4の合成は、以前に報告された(例えば、Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005, 15, 2824; Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005, 15, 4574を参照)。塩化アシル6aは、塩化チオニルによる4の処理から調製され;活性エステル6bは、5による4の処理から調製された。対称イミド8aは、酸塩化物6a又は活性化エステル6bによるアミド7aの処理から合成され、その後、水素化による脱ベンジル化に供すると、イミド9aが得られた。同様に、非対称イミド8b〜e及び8gは、アミド7b〜gと活性化エステル6b又は酸塩化物6aとのカップリング反応から合成された。6aからの非対称イミド8b〜e及び8gの収率は、対称イミド8aの収率と比較して低かったが、活性化エステル6bを用いた8b〜e及び8gの収率は、〜40％から50〜85％へと増加した。
【０２４５】
イミド9a〜eは、対応する保護基−それぞれ、8a中のBn、8b中のTBS、又は8c、8d、及び8e中のBocの脱保護により、8a〜eから得られた。N,N-ジメチル化類似体9fは、ベンジル基を除去しながら、同時にアニリン窒素をN,N-ジメチル化するメタノール中での8dの水素化から得られ; N-Boc類似体9gは、8dの脱ベンジル化から得られた。化合物9h〜oは、HATU及びDIPEAの存在下での9dとアミノ酸誘導体とのアミドカップリング反応と、その後のDCM中の10〜25％TFAによるBoc基の脱保護によるか、又は有機溶媒中の20％ピペリジンによるFmoc基の脱保護により得られた。それぞれ、9dとFmoc-Gly-OHとのアミドカップリング反応と、その後のFmocの脱保護により、9hが得られ; 9dとBoc-β-Ala-OHとのアミドカップリング反応と、その後のBocの脱保護により、9iが得られ; 9dとBoc-Ser-OHとのアミドカップリング反応と、その後のBocの脱保護により、9jが得られ; 9dとBoc-Sar-OHとのアミドカップリング反応と、その後のBocの脱保護により、9kが得られ; 9dとBoc-Lys(Boc)-OHとのアミドカップリング反応と、その後のBocの脱保護により、9lが得られ; 9dとBoc-His-OHとのアミドカップリング反応と、その後のBocの脱保護により、9mが得られ; 9dとBoc-Asp-OtBuとのアミドカップリング反応と、その後のBoc及び-OtBuの脱保護により、9nがワンポットで得られ; 9dとBoc-Glu-OtBuとのアミドカップリング反応と、その後のBoc及び-OtBuの脱保護により、9oがワンポットで得られた。化合物9pは、8gを形成させるLiHMDSの存在下での7gと6bとのアミドカップリング反応と、その後のニトリルからアミンへのラネーニッケル触媒還元及び三臭化ホウ素(BBr3)による脱ベンジル化から合成された。化合物9qは、9dとグルタル酸無水物とのアミドカップリング反応から得られた。化合物9rは、9dとBoc-イミノ二酢酸とのアミドカップリング反応と、その後のBoc脱保護から得られた。化合物9tは、7dとデヒドロアビエチン酸(Cas番号1740-19-8)の活性化エステルとのアミドカップリング反応と、その後のBoc脱保護から得られた。
【０２４６】
(実施例1a)
ペイロード9dの合成(図1a)
メチル(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(P1-2)
【化２５８】
2020520926.tif 000291
メタノール(200mL)及びトルエン(600mL)中のポドカルピン酸(P1-1、90g、0.33mol)の溶液に、(トリメチルシリル)ジアゾメタン(ヘキサン中2M、200mL)を添加した。反応混合物を室温で2時間撹拌した。その後、LCMSにより、ポドカルピン酸が完全に消費された。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を石油エーテル(2L)からトリチュレートすると、化合物P1-2(91g、96％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 289(M+H)+。
【化２５９】
2020520926.tif 000292
【０２４７】
メチル(1S,4aS,10aR)-1,4a-ジメチル-6-(トリフルオロメタンスルホニルオキシ)-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(P1-3)
【化２６０】
2020520926.tif 000293
化合物P1-2(10g、35mmol)の塩化メチレン(200mL)溶液に、ピリジン(3.3g、42mmol)及びDMAP(0.84g、6.9mmol)を窒素雰囲気下で添加した。混合物を-78℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物(12g、42mmol)に添加し、得られた混合物を25℃まで温めておき、25℃でさらに4時間撹拌した。反応混合物をDCM(500mL)で希釈し、水(100mL)、水性塩酸(1N、150mL)、及びブライン(100mL)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮すると、粗化合物P1-3(14g、97％粗収率)が粘性のある油状物として得られ、これは、次の工程のために十分純粋であった。粗化合物P1-3をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜10％酢酸エチル)により精製すると、純粋な生成物を粘性のある油状物として得ることができた。ESI m/z: 421.2(M+1)+。
【化２６１】
2020520926.tif 000294
【０２４８】
メチル(1S,4aS,10aR)-6-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(P1-4)
【化２６２】
2020520926.tif 000295
化合物P1-3(14g、34mmol)及びtert-ブチルカルバメート(BocNH2、7.9g、68mmol)のtert-ブタノール(100mL)溶液に、炭酸セシウム(22g、68mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(Pd2(dba)3、1.8g、2.0mmol)、及びX-Phos(1.8g、4.0mmol)を室温で順次添加した。混合物を脱気し、アルゴンで3回パージし、その後、TLCによりモニタリングして、化合物P1-3が完全に消費されるまで、アルゴン(バルーン)下、80℃で一晩撹拌した。室温に冷却した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、セライトに通して濾過した。固体を酢酸エチルで3回洗浄した。合わせた濾液を真空中で濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜6.25％酢酸エチル)により精製すると、化合物P1-4(11g、82％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 410(M+23)+。
【化２６３】
2020520926.tif 000296
【０２４９】
(1S,4aS,10aR)-6-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(P1-5)
【化２６４】
2020520926.tif 000297
化合物P1-4(4.9g、13mmol)のDMSO溶液に、カリウム tert-ブトキシド(15g、0.13mol)を室温で一度に添加した。LCMSにより反応が終了するまで、反応混合物を、アルゴン下、60℃で3時間撹拌した。室温に冷却した後、該反応混合物を氷に注ぎ入れ、水性塩酸(0.5M)でゆっくりとpH 5まで酸性化し、その間、温度は25℃を超えなかった。沈殿を濾過により回収し、水で数回洗浄した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜20％酢酸エチル)によりさらに精製すると、化合物P1-5(4.5g、93％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 318(M-55)+。
【化２６５】
2020520926.tif 000298
【０２５０】
tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-カルバモイル-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(P1-6)
【化２６６】
2020520926.tif 000299
P1-5(4.5g、12mmol)及びHATU(4.9g、13mmol)のDMF(50mL)溶液に、ジイソプロピルエチルアミン(20mL、0.12mol)を添加し、混合物を25℃で1時間撹拌した。その後、該混合物に、塩化アンモニウム(16g、0.30mol)を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。得られた混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜20％酢酸エチル)により精製すると、化合物P1-6(4.2g、94％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 373.3(M+1)+。
【化２６７】
2020520926.tif 000300
【０２５１】
メチル(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(P1-8)
【化２６８】
2020520926.tif 000301
DMF(100mL)中の化合物P1-2(12g、40mmol)及び炭酸セシウム(14g、44mmol)の混合物を20〜25℃で15分間撹拌した。該混合物に、臭化ベンジル(7.1mL、60mmol)を室温で添加した。室温で4時間撹拌した後、得られた混合物を冷水に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜10％酢酸エチル)により精製すると、表題化合物P1-8(13g、89％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 379(M+H)+。
【化２６９】
2020520926.tif 000302
【０２５２】
(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(P1-9)
【化２７０】
2020520926.tif 000303
LCMS及びTLCによりモニタリングして、メチル基が完全に除去されるまで、DMSO(0.19L)中の化合物P1-8(11g、29mmol)及びカリウム tert-ブトキシド(33g、0.29mol)の混合物を100℃で1時間撹拌した。25℃に冷却した後、該混合物を水性塩酸(1N)でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜24％酢酸エチル)により精製すると、化合物P1-9(7.5g、71％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 365(M+H)+。
【化２７１】
2020520926.tif 000304
【０２５３】
ペンタフルオロフェニル(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(P1-10)
【化２７２】
2020520926.tif 000305
P1-9(9.6g、26mmol)のDMF(100mL)溶液に、DIPEA(14mL、79mmol)及びパーフルオロフェニル 2,2,2-トリフルオロアセテート(15g、53mmol)を添加した。この混合物を室温で一晩撹拌し、LCMSによりモニタリングした。その後、反応混合物をエーテル(200mL)で希釈し、水(300mL)及びブライン(200mL)で洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜10％酢酸エチル)により精製すると、化合物P1-10(12g、88％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 531(M+H)+。
【化２７３】
2020520926.tif 000306
【０２５４】
tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(P1-11)
【化２７４】
2020520926.tif 000307
化合物P1-6(2.3g、6.2mmol)のTHF(20mL)溶液に、n-BuLi(ヘキサン中2.5M、5.5mL、14mmol)を-78℃で滴加した。反応液をこの温度で1時間撹拌した。混合物に、P1-10(3.0g、5.6mmol)のTHF(20mL)溶液を添加し、その後、LCMSによりモニタリングして、化合物P1-10が消費されるまで、得られた混合物を10〜20℃で一晩撹拌した。反応液を飽和水性塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜30％酢酸エチル)により精製すると、化合物P1-11(1.59g、51％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 719(M+1)+。
【０２５５】
tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(P1-12)
【化２７５】
2020520926.tif 000308
P1-11(2.0g、2.78mmol)の酢酸エチル(40mL)溶液に、湿潤パラジウム炭(10％Pd、0.9g)を窒素保護下で添加した。混合物を脱気し、水素でパージし、P1-11が完全に消費されるまで、水素バルーン下、室温で一晩撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。混合物をセライトに通して濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜55％酢酸エチル)により精製すると、P1-12(1.06g、61％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 629(M+H)+。
【化２７６】
2020520926.tif 000309
【０２５６】
1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9d)
【化２７７】
2020520926.tif 000310
化合物P1-12(0.17g、0.27mmol)のDCM(10mL)溶液に、TFA(3mL)を室温で滴加した。LCMSによりBocが除去されるまで、反応混合物を室温で1時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、9d(0.10g、70％収率)が白色の固体として得られた。
【０２５７】
ESI m/z: 529.3(M+1)+。
【０２５８】
【化２７８】
2020520926.tif 000311
【０２５９】
【化２７９】
2020520926.tif 000312
【０２６０】
【化２８０】
2020520926.tif 000313
【０２６１】
HPLC(方法B):保持時間: 8.92分、純度: 99.4％。キラルHPLC:＞99.9％(カラムAD、AS、OD、及びOJ中)。
【０２６２】
旋光度(α): +2.53°(1.7g/100mL THF、25℃)。
【０２６３】
(実施例1b)
LP8(図1b)
1S,4aS,10aR)-6-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(LP1-2)の合成
【化２８１】
2020520926.tif 000314
9d(53mg、0.10mmol)のDMF(1mL)溶液に、Fmoc-Val-Ala-OH(41mg、0.10mmol)、HATU(38mg、0.1mmol)、及びジイソプロピルエチルアミン(26mg、0.20mmol)を順次添加した。LCMSにより、9dが消費されるまで、25℃で24時間撹拌した後、混合物に、ピペリジン(0.1mL)を添加し、得られた溶液を25℃でさらに3時間撹拌した。濾過後、濾液を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、化合物LP1-2(45mg、64％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 699(M+1)+。
【化２８２】
2020520926.tif 000315
【０２６４】
1S,4aS,10aR)-6-((2S)-2-((2S)-2-((2R)-2-アミノ-6-(2-(シクロオクタ-2-イニルオキシ)アセトアミド)ヘキサンアミド)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(LP1-4)
【化２８３】
2020520926.tif 000316
化合物LP1-3(35mg、0.064mmol)のDMF(1mL)溶液に、HATU(24mg、0.064mmol)及び化合物LP1-2(45mg、0.064mmol)を室温で順次添加した。混合物が均一になるまで、該混合物を室温で数分間撹拌した。この混合物に、ジイソプロピルエチルアミン(41mg、0.32mmol)を室温でシリンジにより添加した。LCMSにより、LP1-2がほとんど消費されるまで、得られた混合物を室温で一晩(16時間)撹拌した。その後、この反応混合物に、ピペリジン(0.1mL、過剰)を室温で滴加し、LCMSによりモニタリングして、Fmocが除去されるまで、混合物をさらに3時間撹拌した。反応混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー又は分取HPLC(方法B、塩基性条件)によりそのまま精製すると、化合物LP1-4(30mg、47％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 991(M+1)+。
【化２８４】
2020520926.tif 000317
【０２６５】
1S,4aS,10aR)-N-{[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]プロパンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(LP1-5)
【化２８５】
2020520926.tif 000318
化合物LP1-4(30mg、30μmol)のDMF(0.5mL)溶液に、CD-N3(60mg、60μmol)のDMF(0.5mL)溶液を室温でシリンジにより添加した。混合物を20〜25℃で3日間撹拌した。LCMSにより、化合物LP1-4がほとんど消費された。反応混合物を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、化合物LP1-5(14mg、23％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 995(M/2+1)+。
【化２８６】
2020520926.tif 000319
【０２６６】
1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(LP8)
【化２８７】
2020520926.tif 000320
化合物LP1-5(14mg、7.4μmol)及びDIBAC-Suc-PEG4-OSu(6.5mg、10μmol)のDMF(1mL)溶液に、トリエチルアミン(2.0mg、20μmol)を添加し、混合物を20〜25℃で16時間撹拌した。揮発性物質の大部分を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、化合物LP8(5.0mg、27％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1261(M/2+1)+。
【化２８８】
2020520926.tif 000321
【０２６７】
(実施例1c)
LP32の合成(図1c)
1S,4aS,10aR)-N-{[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[41,42,43,44,45,46,47,48,49,50,51,52,53,54,55,56-ヘキサデカヒドロキシ-10,15,20,25,30,35,40-ヘプタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29,32,34,37,39-ヘキサデカオキサノナシクロ[36.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26.228,31.233,36]ヘキサペンタコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]プロパンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(LP2-5)
【化２８９】
2020520926.tif 000322
化合物LP1-4(30mg、0.030mmol)のDMF(2mL)溶液に、γCD-N3(0.12mg、0.091mmol)を添加した。混合物をRTで16時間撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。該混合物を膜に通して濾過し、その後、濾液を分取HPLC(方法A)により精製すると、化合物LP2-5(40mg、57％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1157.6(M/2+1)+。
【化２９０】
2020520926.tif 000323
【０２６８】
1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[41,42,43,44,45,46,47,48,49,50,51,52,53,54,55,56-ヘキサデカヒドロキシ-10,15,20,25,30,35,40-ヘプタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29,32,34,37,39-ヘキサデカオキサノナシクロ[36.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26.228,31.233,36]ヘキサペンタコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(LP32)
【化２９１】
2020520926.tif 000324
化合物LP2-6(4.3mg、7.8μmol)の無水DMF(1mL)溶液に、HATU(3.0mg、7.8μmol)を添加した。混合物を10℃で10分間撹拌した後、化合物LP2-5(15mg、6.5μmol)及びDIPEA(1.7mg、13μmol)を添加した。LCMSによりモニタリングして、LP2-5が完全に消費されるまで、混合物をRTで2時間撹拌した。該混合物を膜に通して濾過し、濾液を分取HPLC(方法B)により精製すると、化合物LP32(6.0mg、32％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1424.2(M/2+1)+。
【化２９２】
2020520926.tif 000325
溶解度: H2O 1mL当たり0.075mg。
【０２６９】
(実施例1d)
LP13の合成(図1d)
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(LP5-1)
【化２９３】
2020520926.tif 000326
化合物LP15(20mg、15μmol)のDMF(1mL)溶液に、アセトニトリル(2mL)及び水(2mL)中のCD-N3(46mg、45μmol)の溶液をRTで添加した。混合物を30℃で16時間撹拌した。LCMSにより、化合物LP15がほとんど消費された。反応混合物を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、化合物LP5-1(20mg、57％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1156.0(M/2+1)+。
【０２７０】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(LP13)
【化２９４】
2020520926.tif 000327
DIBAC-PEG4-酸LP5-2(4.3mg、7.8μmol)のDMF(1mL)溶液に、HATU(3.0mg、3.6μmol)及びDIPEA(1.7mg、13μmol)をRTで添加した。得られた混合物をRTで10分間撹拌した。その後、該混合物に、LP5-1(15mg、6.5μmol)を添加した。LCMSによりモニタリングして、反応が終了するまで、反応混合物を30℃で2時間撹拌した。該反応混合物を濾過し、分取HPLC(方法B)により精製すると、LP13(10mg、42％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1424.3(M/2+1)+。
【化２９５】
2020520926.tif 000328
【０２７１】
(実施例1e)
LP36の合成(図1e)
1-アジド-15-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-16-アザオクタデカン-18-スルホン酸(L6-2)
【化２９６】
2020520926.tif 000329
アジド-PEG4-NHS(L6-1、0.10g、0.26mmol)の無水DMF(4mL)溶液に、タウリン(39mg、0.31mmol)及びDIPEA(15mg、0.52mmol)を添加した。混合物を25℃で一晩撹拌した。該混合物を濾過し、濾液を分取HPLC(方法A)により精製すると、化合物LP6-2(80mg、78％収率)が無色の油状物として得られた。ESI m/z: 399.1(M+H)+。
【化２９７】
2020520926.tif 000330
【０２７２】
2-{1-[4-({[(5R)-5-アミノ-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-({4-[({[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバモイル}オキシ)メチル]フェニル}カルバモイル)-4-(カルバモイルアミノ)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]カルバモイル}メトキシ)-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}エタン-1-スルホン酸(LP6-3)
【化２９８】
2020520926.tif 000331
化合物LP6-2(20mg、50μmol)の水(1mL)溶液に、pH〜7まで飽和水性炭酸水素ナトリウム溶液を0℃で滴加した。その後、該撹拌溶液に、化合物LP15(28mg、21μmol)のアセトントリル(acetontrile)(1mL)溶液をシリンジにより添加した。混合物を25℃で一晩撹拌した。化合物LP15が完全に消費されるまで、反応混合物をLCMSによりモニタリングした。該反応混合物を濾過し、分取HPLC(方法A)により精製すると、化合物LP6-3(15mg、41％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 856.5(M/2+1)+。
【０２７３】
2-{1-[4-({[(5R)-5-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-({4-[({[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバモイル}オキシ)メチル]フェニル}カルバモイル)-4-(カルバモイルアミノ)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]カルバモイル}メトキシ)-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}エタン-1-スルホン酸(LP36)
【化２９９】
2020520926.tif 000332
化合物LP6-3(15mg、8.8μmol)及び市販のDIBAC-Suc-PEG4-OSu LP6-4(5.7mg、8.8μmol、CAS 1427004-19-0)のDMF(1mL)溶液に、DIPEA(2.3mg、18μmol)を添加し、混合物をRTで2時間撹拌した。揮発性物質の大部分を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、LP36(6.0mg、30％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1123.8(M/2+H)+、749.5(M/3+H)+。
【化３００】
2020520926.tif 000333
【０２７４】
(実施例1f)
LP18の合成(図1f)
1-アジド-15-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-16-アザオクタデカン-18-スルホン酸(L18-2)
【化３０１】
2020520926.tif 000334
アジド-PEG4-NHS(L18-1、0.10g、0.26mmol)の無水DMF(4mL)溶液に、タウリン(39mg、0.31mmol)及びDIPEA(15mg、0.52mmol)を添加した。混合物を25℃で一晩撹拌した。該混合物を濾過し、濾液を分取HPLC(方法A)により精製すると、化合物LP18-2(80mg、78％収率)が無色の油状物として得られた。ESI m/z: 399.1(M+H)+。
【化３０２】
2020520926.tif 000335
【０２７５】
1-(4-(2-((R)-5-アミノ-6-((S)-1-((S)-1-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イルアミノ)-3-メチル-1-オキソブタン-2-イルアミノ)-6-オキソヘキシルアミノ)-2-オキソエトキシ)-4,5,6,7,8,9-ヘキサヒドロ-1H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル)-15-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-16-アザオクタデカン-18-スルホン酸(LP18-3)
【化３０３】
2020520926.tif 000336
化合物LP1-4(40mg、40μmol)のDMF(1mL)溶液に、アジドLP18-2(40mg、0.10mmol)をRTで添加した。LCMSにより反応の終了が示されるまで、反応液をRTで16時間撹拌した。反応混合物を分取HPLCによりそのまま精製すると、化合物LP18-3(43mg、77％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 695.4(M/2+H)+。
【０２７６】
2-{1-[4-({[(5R)-5-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]カルバモイル}メトキシ)-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-1-イル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}エタン-1-スルホン酸(LP18)
【化３０４】
2020520926.tif 000337
化合物LP18-3(30mg、22μmol)のDMF(1mL)溶液に、DMF(1mL)及びDIPEA(4mg、32μmol)中のDIBAC-suc-PEG4-OSu(LP18-4、14mg、22μmol)の溶液をRTで順次添加した。反応混合物をRTで2時間撹拌した。該反応混合物を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、化合物LP18(15mg、37％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 642(M/3+H)+。
【化３０５】
2020520926.tif 000338
【０２７７】
(実施例1g)
ペイロード9j、ペイロード9o、及びペイロード9lの合成
【化３０６】
2020520926.tif 000339
【表４】
2020520926.tif 000340
ペイロード9j
(1S,4aS,10aR)-6-((S)-2-アミノ-3-ヒドロキシプロパンアミド)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9j)
【化３０７】
2020520926.tif 000341
Fmoc-Ser-OH(33mg、0.1mmol)のDMF(1mL)溶液に、HATU(38mg、0.1mmol)及びDIPEA(39mg、0.3mmol)を25℃で添加した。得られた混合物をこの温度で1時間撹拌した。その後、該混合物に、9d(30mg、0.06mmol)を添加した。反応混合物を25℃で16時間撹拌し、(LCMSによりモニタリングして)9dが完全に消費された後、ピペリジン(0.2mL)を該混合物中に添加し、これを室温でさらに30分間撹拌した。残渣を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、9j(18mg、51％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 616(M+1)+。
【化３０８】
2020520926.tif 000342
【０２７８】
ペイロード9o
(4S)-4-アミノ-4-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}ブタン酸;トリフルオロ酢酸塩(9o)
【化３０９】
2020520926.tif 000343
OtBu-N-Boc-Glu-OH(15mg、0.05mmol)のDMF(1mL)溶液に、HATU(19mg、0.05mmol)及びDIPEA(13mg、0.1mmol)を25℃で添加した。得られた混合物をこの温度で1時間撹拌した。その後、該混合物に、9d(14mg、0.026mmol)を添加した。25℃で16時間撹拌し、(LCMSによりモニタリングして)9dが完全に消費された後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をDCM(1mL)に溶解させ、該溶液に、TFA(0.1mL)を室温でゆっくりと添加した。混合物を室温で2時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法A)により精製すると、9o(8mg、46％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 658.3(M+1)+。
【化３１０】
2020520926.tif 000344
【０２７９】
ペイロード9l
(1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-[(2S)-2,6-ジアミノヘキサンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド;トリフルオロ酢酸塩(9l)
【化３１１】
2020520926.tif 000345
Boc-Lys-OH(15mg、0.05mmol)のDMF(1mL)溶液に、HATU(19mg、0.05mmol)及びDIPEA(13mg、0.1mmol)を25℃で添加した。得られた混合物をこの温度で1時間撹拌した。その後、該混合物に、9d(15mg、0.028mmol)を添加した。25℃で16時間撹拌し、(LCMSによりモニタリングして)9dが完全に消費された後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣(Boc-9l)をDCM(1mL)に溶解させ、該溶液に、TFA(0.1mL)を室温でゆっくりと添加した。混合物を室温で2時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法A)により精製すると、9l(9mg、49％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 657.5(M+1)+。
【化３１２】
2020520926.tif 000346
【０２８０】
(実施例1h)
LP15の合成(図1g)
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(LP4-2)
【化３１３】
2020520926.tif 000347
Fmoc-vc-PAB-PNP(LP4-1、58mg、76μmol)及び9j(36mg、58μmol)のDMF(3mL)溶液に、HOBt(7.9mg、58μmol)及びDIPEA(15mg、0.12mmol)を添加し、混合物を30℃で16時間撹拌した。その後、LCMSにより、化合物9jが完全に消費された。得られた混合物に、ジエチルアミン(0.1mL)を添加し、LCMSによりモニタリングして、Fmocが除去されるまで、反応液をRTで1時間撹拌した。反応液を濾過した後、濾液を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、化合物LP4-2(36mg、48％収率)が薄黄色の固体として得られた。ESI m/z: 1021(M+1)+。
【化３１４】
2020520926.tif 000348
【０２８１】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(LP15)
【化３１５】
2020520926.tif 000349
化合物LP4-3(24mg、44μmol)のDMF(2mL)溶液に、HATU(17mg、44μmol)及び化合物LP4-2(35mg、34μmol)をRTで順次添加した。混合物が均一になるまで、該混合物をRTで数分間撹拌した。この混合物に、DIPEA(8.8mg、68μmol)をRTでシリンジにより添加した。LCMSにより、LP4-2がほとんど消費されるまで、得られた混合物をRTで2時間撹拌した。その後、この反応混合物に、ジエチルアミン又はピペリジン(0.1mL、過剰)をRTで滴加しLCMSによりモニタリングして、Fmoc基が除去されるまで、混合物を1時間撹拌した(注:ジエチルアミンとピペリジンはどちらも効果的であった)。反応混合物を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、化合物LP15(15mg、33％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1313.6(M+H)+。
【化３１６】
2020520926.tif 000350
【０２８２】
(実施例1i)
LP311の合成(図1h)
tert-ブチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-5-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ペンチル]カルバメート(LP11-1)
【化３１７】
2020520926.tif 000351
N-Boc-N'-Fmoc-L-リジン(0.21g、0.45mmol)のDMF(2mL)溶液に、HATU(0.24g、0.64mmol)及びDIPEA(0.15g、1.1mmol)をRTで添加した。得られた混合物をRTで3分間撹拌した。その後、該混合物に、ペイロード9d(0.20g、0.38mmol)を添加した。LCMSによりモニタリングして、反応が終了するまで、反応混合物をRTで15分間撹拌した。反応混合物を濾過し、分取HPLC(方法B)により精製すると、化合物LP11-1(0.10g、27％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 979(M+1)+。
【０２８３】
9H-フルオレン-9-イルメチル N-[(5S)-5-アミノ-5-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}ペンチル]カルバメート(LP11-2)
【化３１８】
2020520926.tif 000352
化合物LP11-1(0.10g、0.10mmol)のDCM溶液に、TFA(2mL)をRTで添加した。LCMSにより、Bocが完全に除去されるまで、得られた混合物をRTで1時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去した。残渣を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水性重炭酸アンモニウム(10mM)中の0〜100％アセトニトリル)により精製すると、化合物LP11-2(77mg、86％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 879(M+1)+。
【化３１９】
2020520926.tif 000353
【０２８４】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-5-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ペンチル]カルバメート(LP11-3)
【化３２０】
2020520926.tif 000354
DMF(3mL)中の化合物LP11-2(57mg、65μmol)及び化合物LP9-5(0.10g、96μmol)の混合物に、HOBt(30mg、0.22mmol)及びDIPEA(0.11g、0.81mmol)を添加し、混合物をRTで1時間撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。反応混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水性重炭酸アンモニウム(10mM)中の0〜100％アセトニトリル)により精製すると、化合物LP11-3(97mg、81％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 909(M/2+1)+。
【０２８５】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-5-アミノ-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}ペンチル]カルバメート(LP311)
【化３２１】
2020520926.tif 000355
化合物LP11-3(97mg、53μmol)のDMF(3mL)溶液に、ジエチルアミン(45mg、0.62mmol)を添加した。LCMSにより、Fmocが除去されるまで、混合物をRTで2時間撹拌した。反応混合物を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、化合物LP311(40mg、47％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 798(M/2+1)+。
【化３２２】
2020520926.tif 000356
【０２８６】
(実施例1j)
LP39の合成(図1i)
1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-{[4-(ヒドロキシメチル)フェニル]カルバモイル}ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(LP9-3)
【化３２３】
2020520926.tif 000357
化合物LP9-2(0.30g、0.54mmol)のDMF(10mL)溶液に、HATU(0.31g、0.81mmol)及びDIPEA(0.14g、1.1mmol)を室温で順次添加した。混合物を室温で15分間撹拌した。反応溶液に、VC-PAB-OH(LP9-1、CAS: 159857-79-1、0.21g、0.54mmol)をRTで添加し、得られた混合物をRTで3時間撹拌し;反応の進行をLCMSによりモニタリングした。反応混合物を濾過膜に通して濾過し、濾液を逆フラッシュクロマトグラフィー(水(10mmol/Lの重炭酸アンモニウムを含む)中の0〜100％アセトニトリル)によりそのまま精製すると、化合物LP9-2(0.30g、60％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 617(M+H)+。
【０２８７】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル 4-ニトロフェニルカルボネート(LP9-5)
【化３２４】
2020520926.tif 000358
化合物LP9-3(0.15g、0.16mmol)のDMF(10mL)溶液に、ビス(4-ニトロフェニル)カルボネート(LP9-4、0.15g、0.49mmol)及びDIPEA(63mg、0.49mmol)を0℃で順次添加した。その後、LCMSによりモニタリングして、LP9-3がほとんど消費されるまで、混合物をRTで3時間撹拌した。反応混合物を濾過膜に通して濾過し、濾液を逆フラッシュクロマトグラフィー(水(10mmol/Lの重炭酸アンモニウムを含む)中の0〜100％アセトニトリル)によりそのまま精製すると、化合物LP9-5(50mg、28％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1079(M+H)+。
【０２８８】
(4S)-4-{[({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メトキシ)カルボニル]アミノ}-4-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}ブタン酸(LP39)
【化３２５】
2020520926.tif 000359
DMF(1mL)中の化合物9o(50mg、76μmol)及び化合物LP9-5(0.10g、96μmol)の混合物に、HOBt(16mg、0.12mmol)及びDIPEA(39mg、0.31mmol)を添加し、混合物をRTで1時間撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。反応混合物を分取HPLC(方法B)により精製すると、化合物LP39(40mg、33％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 799(M/2+1)+。
【化３２６】
2020520926.tif 000360
【０２８９】
(実施例2)
本実施例は、鍵中間体7b〜7fを作製するための一般的な方法を示している。7b〜7eを作製するための化学合成は、図2に示した。
【０２９０】
アミド7fは、HATUにより触媒される1とNH4Clとのアミドカップリング反応から調製された。中間体7b及び7cは、それぞれ、7fと10b及び10cとのフェノール-O-アルキル化から調製された。中間体7d及び7eは、フェノール2からトリフレート11への変換から始めて、その後、ブッフバルトカップリング条件に供して、12d及び12eのマスクされたアミノ官能基を導入し;その後、12d及び12eの酸性脱保護と、その後の、エステルから、それぞれ、酸13d及び13eに変換する塩基性加水分解;最後に、13d及び13eのBoc-保護により、それぞれ、14d及び14eが得られ、これらをさらに、それぞれ、7d及び7eを生じるアンモニウム塩とのアミドカップリング反応に持ち越すことから合成された。中間体7gは、7g-1を形成させる1と2,4-ジメトキシベンジルアミンとのアミドカップリング反応と、その後のトリフルオロメタンスルホン酸無水物によるトリフレート類似体7g-2への変換から調製された。シアノ類似体7g-3は、シアン化亜鉛を用いて、最終的な脱保護をTFAで達成して、2,4-ジメトキシ-ベンジル部分を除去して調製された。
【０２９１】
或いは、13dは、ポドカルピン酸1のBoc-保護から始めて、E2を形成させ、その後、トリフレートE3に変換することから調製された。中間体E3は、順相カラムクロマトグラフィーによる精製に安定であり、ブッフバルト条件下、ジフェニルメタンイミンでさらに処理すると、E4-1とE4-2とE4-3と13dの混合物が得られ、これを、THF中の水性HCl(v/v＝1:1)中、ワンポットで加水分解すると、13dが28％の全収率で得られた。
【０２９２】
(実施例3)
本実施例は、中間体7aを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０２９３】
(工程1:)
(1S,4aS,10aR)-メチル-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(2)の作製
【０２９４】
メタノール(1.4mL)及びトルエン(5.2mL)中のポドカルピン酸(1、0.20g、0.73mmol)の溶液に、(トリメチルシリル)ジアゾメタン(ヘキサン中2M、0.45mL)を添加した。反応混合物を10〜25℃で一晩撹拌した。LC-MSに基づいて、ポドカルピン酸が完全に消費された後、揮発性物質を真空中で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜35％酢酸エチル)により精製すると、化合物2(0.21g、98％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 289(M+H)+。
【化３２７】
2020520926.tif 000361
【０２９５】
(工程2:)
(1S,4aS,10aR)-メチル 6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(3)の作製
【０２９６】
化合物2(0.10g、0.35mmol)のDMF(1.2mL)溶液に、炭酸セシウム(0.12g、0.38mmol)を添加し、混合物を20〜25℃で15分間撹拌した。その後、該混合物に、臭化ベンジル(88mg、0.52mmol)をrtで添加し、得られた混合物をさらに4時間撹拌し、その後、水に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の10〜35％酢酸エチル)により精製すると、化合物3(0.13g、99％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 379(M+H)+。
【化３２８】
2020520926.tif 000362
【０２９７】
(工程3:)
(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(4)の作製
【０２９８】
DMSO(1.7mL)中の化合物3(0.10g、0.26mmol)の混合物に、カリウム tert-ブトキシド(0.30g、2.6mmol)を添加し、LC-MS及びTLCによりモニタリングして、反応が終了するまで、混合物を100℃で2時間撹拌した。反応液を25℃に冷却した後、混合物を水性塩酸塩(1N)でpH 2までクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の20〜35％酢酸エチル)により精製すると、化合物4(92mg、95％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 365(M+H)+。
【化３２９】
2020520926.tif 000363
【０２９９】
(工程4:)
(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルクロリド(6a)の作製
【０３００】
化合物4(0.10g、0.27mmol)の1,2-ジクロロエタン(DCE)(2mL)溶液に、塩化チオニル(0.20mL)を添加し、その後、反応液を90℃で3時間撹拌した。該反応液を室温に冷却した後、揮発性物質を真空中で除去し、粗生成物を、それ以上精製することなく、次の工程に使用した。
【０３０１】
(代替の工程4:)
(1S,4aS,10aR)-パーフルオロフェニル-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(6b)の作製
【０３０２】
4(0.50g、1.4mmol)のDMF(5mL)溶液に、DIPEA(0.51g、4.1mmol)、その後、パーフルオロフェニル 2,2,2-トリフルオロアセテート5(0.77g、2.7mmol)を添加した。この混合物を25℃で一晩撹拌し、その後、エーテル(80mL)で希釈した。有機混合物を水(10mL)及びブライン(10mL)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜15％酢酸エチル)により精製すると、エステル6b(0.46g、63％収率)が白色の固体として得られた。
【化３３０】
2020520926.tif 000364
【０３０３】
(工程5:)
(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(7a)の作製
【０３０４】
化合物4(50mg、0.14mmol)及びHATU(57mg、0.15mmol)のDMF溶液を25℃で15分間撹拌した。該溶液に、DIPEA(89mg、0.69mmol)及び塩化アンモニウム(25mg、0.48mmol)を25℃で添加し、その後、得られた混合物をさらに4時間撹拌し、水に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜35％酢酸エチル)により精製すると、7a(48mg、91％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 364(M+1)+。
【化３３１】
2020520926.tif 000365
【０３０５】
(実施例4)
本実施例は、中間体7b〜7gを作製するための方法を示している。本実施例は、図2で付番している化合物に言及している。
【０３０６】
(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(7f)
【０３０７】
ポドカルピン酸1(0.30g、1.1mmol)のDMF(4mL)溶液に、HATU(0.46g、1.2mmol)、DIPEA(0.57g、4.4mmol)、及び塩化アンモニウム(0.23g、4.4mmol)を添加し、該溶液を10〜25℃で16時間撹拌した。混合物を水に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜35％酢酸エチル)により精製すると、所望の化合物(0.77g、100％収率)が油状物として得られた。ESI m/z: 274.1(M+1)+。
【化３３２】
2020520926.tif 000366
【０３０８】
(1S,4aS,10aR)-6-(2-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)エトキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(7b)
【０３０９】
7f(0.33g、0.47mmol)のDMF(2.5mL)溶液に、炭酸セシウム(0.60g、1.8mmol)及び(2-ブロモエトキシ)(tert-ブチル)ジメチルシラン(10b、0.45g、2.1mmol)を添加した。反応液を窒素下で8時間撹拌した後、混合物を水(30mL)及び酢酸エチル(30mL)に注ぎ入れた。有機物を分離し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の20〜35％酢酸エチル)により精製すると、化合物7b(0.21g、87％収率)が得られた。ESI m/z: 432.2(M+1)+。
【化３３３】
2020520926.tif 000367
【０３１０】
tert-ブチル 2-((4bS,8S,8aR)-8-カルバモイル-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルオキシ)エチルカルバメート(7c)
【０３１１】
7bを作製するための手順の後に、白色の固体としての7c(60mg、40％収率)が10cで処理した7fから得られた。ESI m/z: 360.9(M-55)+、438.9(M+23)+。
【０３１２】
tert-ブチル-(4bS,8S,8aR)-8-カルバモイル-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルカルバメート(7d)
【０３１３】
(工程1:)
(1S,4aS,10aR)-メチル-1,4a-ジメチル-6-(トリフルオロメチルスルホニルオキシ)-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(11)の作製
【０３１４】
化合物2(0.33g、1.1mmol)のDCM(6mL)溶液に、2,6-ルチジン(0.15g、1.4mmol)及びDMAP(28mg、0.23mmol)を添加した。混合物を-78℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物(0.39g、1.4mmol)を添加した。得られた混合物を25℃に温めておき、25℃でさらに4時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル(50mL)で希釈し、有機物を、水(6mL)、水性塩酸塩(1N、10mL)、及びブライン(10mL)で洗浄し、その後、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜10％酢酸エチル)により精製すると、化合物11(0.43g、89％収率)が粘性のある油状物として得られた。ESI m/z: 421.2(M+1)+。
【化３３４】
2020520926.tif 000368
【０３１５】
(工程2:)
(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(13d)の作製
【０３１６】
アルゴン雰囲気下、tert-ブタノール(5mL)中の炭酸セシウム(0.62g、1.9mmol)、X-phos(50mg、0.11mmol)、及びPd2(dba)3(50mg、55μmol)の混合物に、化合物11(0.40g、0.95mmol)のtert-ブタノール(5mL)溶液、その後、ジフェニルメタンイミン(0.26g、1.4mmol)を添加した。反応液を、アルゴン下、100℃で30分間撹拌した後、反応混合物を室温に冷却し、DCMで希釈し、セライトに通して濾過して、不溶性残渣を除去した。濾液を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣(粗12d)に、メタノール中の塩酸塩(4N、2mL)を添加し、得られた溶液を25℃で5時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜20％酢酸エチル)により精製すると、12d'-メチルエステル(0.28g)が白色の固体のアニリン-エステルとして得られた。ESI m/z: 288(M+1)+
【化３３５】
2020520926.tif 000369
DMF(3mL)中の12d'-メチルエステル(0.12g、0.42mmol)の混合物に、ナトリウムエタンチオレート(0.37g、4.2mmol)を添加し、得られた混合物を60℃で16時間撹拌した。反応液を室温に冷却した後、得られた混合物を水で希釈し、水性塩酸塩(1N、20mL)で酸性化した。水性溶液を酢酸エチルで抽出し、有機物を分離し、真空中で濃縮すると、粗13d(0.14g)が得られ、これを、次の工程でそのまま使用した。ESI m/z: 274.2(M+1)+。
【０３１７】
E2、E3、及びE4を経由して13dを調製する別の方法は、次のように記載される:
【０３１８】
(工程1:)
(tert-ブチルカルボン酸)(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸無水物(E2)の作製
【０３１９】
t-BuOH(10mL)中のポドカルピン酸(1、0.40g、1.5mmol)及び炭酸ナトリウム(0.31g、2.9mmol)の混合物に、二炭酸ジ-tert-ブチル(0.35g、1.6mmol)を添加した。反応混合物を10〜25℃で16時間撹拌した。ポドカルピン酸が消費されるまで、反応をTLC及びLCMSによりモニタリングした。得られた混合物を酢酸エチル(100mL)に注ぎ入れ、有機物を水(20mL×2)及びブライン(50mL)で洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜20％酢酸エチル)により精製すると、表題化合物E2(0.41g、76％収率)が粘性のある油状物として得られた。ESI m/z: 319.2(M-55)+。
【化３３６】
2020520926.tif 000370
【０３２０】
(工程2:)
(tert-ブチルカルボン酸)(1S,4aS,10aR)-1,4a-ジメチル-6-(トリフルオロメチルスルホニルオキシ)-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸無水物(E3)の作製
【０３２１】
化合物E2(0.30g、0.80mmol)のDCM(16mL)溶液に、ピリジン(95mg、1.2mmol)及びDMAP(10mg、0.080mmol)を窒素雰囲気下で添加した。混合物を-20℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物(0.27g、0.96mmol)をシリンジにより添加した。得られた混合物を25℃に温めておき、25℃でさらに2時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル(50mL)で希釈し、有機物を、水(6mL)、水性塩酸塩(1N、10mL)、及びブライン(10mL)で洗浄し、その後、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜10％酢酸エチル)により精製すると、化合物E3(0.27g、66％収率)が粘性のある油状物として得られた。ESI m/z: 529.2(M+Na)+。
【化３３７】
2020520926.tif 000371
【０３２２】
(工程3:)
(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(13d)の作製
【０３２３】
化合物E3(0.20g、0.40mmol)及びジフェニルメタンイミン(0.086g、0.48mmol)のtert-ブタノール(10mL)撹拌溶液に、炭酸セシウム(0.33g、1.0mmol)、X-phos(38mg、80μmol)、及びPd2(dba)3(37mg、40μmol)をアルゴン雰囲気下で添加した。反応混合物を、アルゴン下、90℃で3時間撹拌し、LCMSによりモニタリングし、その時に、LCMSスペクトル中で、E4-1、E4-2、E4-3、及び13dが検出された。反応混合物を冷却し、DCM(30ml)で希釈し、セライトに通して濾過して、無機物を除去した。濾液を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をTHF(5mL)に溶解させ、水性HCl(2N、5mL)で酸性化した。その後、反応液25℃で撹拌し、LCMSによりモニタリングした。16時間後、LCMSにより、E4-1及びE4-2のほとんどが13dに変換されたことが示された。反応混合物を飽和水性炭酸水素ナトリウムでpH 8に中性化し、酢酸エチル(20mL×3)で抽出した。合わせた有機物を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜50％酢酸エチル)により精製すると、表題化合物13d(2工程で30mg、56％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 274.2(M+H)+。
【０３２４】
(工程4:)
(1S,4aS,10aR)-6-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(14d)の作製
【０３２５】
13d(0.12g)のtert-ブタノール(5mL)溶液に、炭酸ナトリウム(0.12g、1.1mmol)、二炭酸ジ-tert-ブチル(0.48g、2.2mmol)、及びDMAP(20mg、0.16mmol)を添加し、その後、混合物を60℃で16時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣をDCM(20mL)で希釈した。有機物を分離し、飽和水性クエン酸で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜35％酢酸エチル)により精製すると、化合物14d(11から3工程で0.11g、67％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 318.2(M-tBu+1)+。
【化３３８】
2020520926.tif 000372
【０３２６】
(工程5:)
tert-ブチル-(4bS,8S,8aR)-8-カルバモイル-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルカルバメート(7d)の作製
【０３２７】
14d(0.11g、0.30mmol)のDMF(2.4mL)溶液に、HATU(0.12g、0.32mmol)及びDIPEA(0.5mL、3.0mmol)を添加し、混合物を25℃で1時間撹拌した。その後、該混合物に、塩化アンモニウム(0.40g、7.5mmol)を添加し、混合物を15〜25℃でさらに16時間撹拌した。得られた混合物を酢酸エチル(40mL)で希釈し;有機物を分離し、水(10mL)及びブライン(10mL)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜20％酢酸エチル)により精製すると、化合物7d(84mg、75％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 373.3(M+1)+。
【化３３９】
2020520926.tif 000373
【０３２８】
tert-ブチル-4-((4bS,8S,8aR)-8-カルバモイル-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル)ピペラジン-1-カルボキシレート(7e)
【０３２９】
(工程1:)
(1S,4aS,10aR)-1,4a-ジメチル-6-(ピペラジン-1-イル)-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(14e)の作製
【０３３０】
アルゴン雰囲気下の化合物11(0.40g、0.95mmol)及びtert-ブチルピペラジン-1-カルボキシレート(0.29g、1.5mmol)のtert-ブタノール(5mL)溶液に、炭酸セシウム(0.62g、1.9mmol)、X-phos(50mg、0.11mmol)、及びPd2(dba)3(50mg、55μmol)を添加した。反応液を、アルゴン下、100℃で30分間撹拌した後、反応混合物を冷却し、DCMで希釈し、セライトに通して濾過して、無機物を除去した。濾液を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の20〜35％酢酸エチル)により精製すると、12e(0.42g)が黄色の固体として得られた。ESI m/z: 457.1(M+1)+。12e(0.23g、0.5mmol)のDMSO(5mL)溶液をカリウム tert-ブトキシド(0.25g、2.2mmol)で100℃で1時間処理した。反応液を室温に冷却した後、粗13eの混合物に、ジ-tertブチルジカルボネート(0.92g、4.3mmol)を20〜25℃で添加し、得られた混合物を25℃で4時間撹拌した。その後、反応混合物を酢酸エチル(100mL)で希釈し、有機物を水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜35％酢酸エチル)により精製すると、化合物14e(11から3工程で0.15g、79％収率)が黄色の固体として得られた。ESI m/z: 443(M+1)+。
【０３３１】
(工程2:)
tert-ブチル-4-((4bS,8S,8aR)-8-カルバモイル-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル)ピペラジン-1-カルボキシレート(7e)の作製
【０３３２】
14e(0.10g、0.30mmol)及びHATU(0.12g、0.32mmol)のDMF(2.4mL)溶液に、DIPEA(0.5mL、3.0mmol)を添加し、得られた溶液を25℃で1時間撹拌した。その後、混合物に、塩化アンモニウム(0.40g、7.5mmol)を添加し、得られた混合物を15〜25℃でさらに16時間撹拌した。得られた混合物を酢酸エチル(40mL)で希釈し、有機物を水(10mL)及びブライン(10mL)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜20％酢酸エチル)により精製すると、化合物7e(96mg、87％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 442(M+1)+。
【０３３３】
(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(7g)
【０３３４】
(工程1:)
(1S,4aS,10aR)-N-(2,4-ジメトキシベンジル)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(7g-1)の作製
【０３３５】
7fを作製するための手順の後に、化合物1と2,4-ジメトキシベンジルアミンとのカップリング反応により、7g-1(0.57g、93％収率)が薄黄色の固体として得られた。ESI m/z: 424.1(M+1)+。
【化３４０】
2020520926.tif 000374
【０３３６】
(工程2:)
(4bS,8S,8aR)-8-(2,4-ジメトキシベンジルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルトリフルオロメタンスルホネート(7g-2)の作製
【０３３７】
11を作製するための手順の後に、7g-2(0.59g、96％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 556.2(M+1)+。
【化３４１】
2020520926.tif 000375
【０３３８】
(工程3:)
(1S,4aS,10aR)-6-シアノ-N-(2,4-ジメトキシベンジル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(7g-3)の作製
【０３３９】
化合物7g-2(0.20g、0.36mmol)のDMF(3.6mL)溶液に、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(42mg、36μmol)及びシアン化亜鉛(84mg、0.72mmol)を窒素下で添加した。LCMSによりモニタリングして、反応が終了するまで、混合物を、窒素下、110℃で4時間撹拌した。反応液を室温に冷却した後、反応混合物を酢酸エチル(100mL)で希釈し、有機物を水(20mL)及びブライン(20mL)で洗浄した。有機物を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の10〜20％酢酸エチル)により精製すると、表題化合物7g-3(0.13g、82％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 433.2(M+1)+。
【化３４２】
2020520926.tif 000376
【０３４０】
(工程4:)
(1S,4aS,10aR)-6-シアノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(7g)の作製
【０３４１】
化合物7g-3(0.12g、0.28mmol)のDCM(3mL)溶液に、TFA(3mL)を0℃で滴加した。得られた混合物を温めておき、その後、25℃で48時間撹拌した。LCMSにより、所望の質量が主要なピークとして検出された。揮発性物質を真空中で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の20〜40％酢酸エチル)により精製すると、表題化合物7g(70mg、71％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 283.2(M+1)+。
【化３４３】
2020520926.tif 000377
【０３４２】
(実施例5)
本実施例は、中間体8a〜e及び8gを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３４３】
(化合物8a〜e及び8gについての一般的手順:)
THF(0.5〜2mL)中の中間体7a〜g(40〜100mg)のうちの1つの溶液を調製して、0.06〜0.28Mの濃度を作製した。該溶液に、リチウムビス(トリメチルシリル)アミド(LiHMDS)(ヘキサン中1M、1.2当量)を-78℃で滴加し、得られた混合物を-78℃で2時間撹拌した。該混合物に、6a(0.9〜2.2当量)又は6b(1.2当量)のTHF(1mL)溶液を添加し、その後、得られた混合物を10〜20℃で一晩撹拌した。LCMSによりモニタリングして、7a〜gが消費された後、反応液を飽和水性塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜35％酢酸エチル)により精製すると、8a〜e及び8gが白色の固体として得られた。
【０３４４】
(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-N-((1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(8a): 8aの合成手順は、Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005, 15, 2824-2828で報告されたものと同様であったが、LiHMDSをNaHMDSと置き換えた。8a(60mg、31％収率)は、6a(0.10g、0.26mmol)による7a(0.10g、0.28mmol)の処理から得られた。ESI m/z: 710(M+1)+。
【化３４４】
2020520926.tif 000378
【０３４５】
((1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-N-((1S,4aS,10aR)-6-(2-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)エトキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(8b):)
化合物8b(34mg、38％収率)は、6a(0.10g、0.26mmol)による7b(50mg、0.12mmol)の処理から得られた。ESI m/z: 779(M+1)+。
【０３４６】
(tert-ブチル 2-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルオキシ)エチルカルバメート(8c):)
化合物8c(0.11g、60％収率)は、6b(0.15g、0.29mmol)による7c(0.10g、0.24mmol)の処理から得られた。ESI m/z: 763(M+1)+。
【化３４５】
2020520926.tif 000379
【０３４７】
(tert-ブチル-(4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルカルバメート(8d):)
化合物8d(37mg、46％収率)は、6b(72mg、0.14mmol)による7d(42mg、0.11mmol)の処理から得られた。ESI m/z: 719(M+1)+。
【０３４８】
(tert-ブチル-4-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル)ピペラジン-1-カルボキシレート(8e):)
化合物8e(80mg、99％収率)は、6b(65mg、0.12mmol)による7e(45mg、0.10mmol)の処理から得られた。ESI m/z: 788.4(M+1)+。
【０３４９】
((1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-N-((1S,4aS,10aR)-6-シアノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(8g):)
化合物8g(83mg、67％収率)は、6b(0.16g、0.30mmol)による7g(56mg、0.20mmol)の処理から得られた。ESI m/z: 629.2(M+1)+。
【化３４６】
2020520926.tif 000380
【０３５０】
(実施例6)
本実施例は、上の表1の最終化合物9aを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３５１】
(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9a)は、Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005, 15, 2824-2828で報告された;その合成手順は報告されたものと同様であり、水素化を、45psiではなく、大気圧下で行った。8a(50mg、70μmol)の酢酸エチル(2mL)溶液に、湿潤Pd/C(10％、20mg)を窒素下で添加した。混合物を水素で3回パージし、水素雰囲気下、15〜25℃で16時間撹拌した。該混合物をセライトに通して濾過して、Pd/Cを除去し、濾液を真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜20％酢酸エチル)により精製すると、9a(10mg、27％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 530(M+1)+。
【化３４７】
2020520926.tif 000381
【０３５２】
(実施例7)
本実施例は、上の表1の最終化合物9bを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３５３】
(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-N-((1S,4aS,10aR)-6-(2-ヒドロキシエトキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9b)
【０３５４】
(工程1:)
8b(37mg、44μmol)のTHF(1.4mL)溶液に、TBAF(THF中1M、0.09mL)を添加し、混合物を25℃で2時間撹拌した。THFを真空中で除去すると、粗ヒドロキシル中間体が得られ、これを、それ以上精製することなく、次の工程で使用した。ESI m/z: 664(M+1)。
【化３４８】
2020520926.tif 000382
【０３５５】
(工程2:)
該粗ヒドロキシル中間体(20mg、30μmol)の酢酸エチル(2mL)溶液に、湿潤Pd/C(10％、20mg)を窒素下で添加した。この混合物を水素で3回パージし、水素雰囲気下、20〜25℃で16時間撹拌した。該混合物をセライトに通して濾過して、Pd/Cを除去し、濾液を真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜35％酢酸エチル)により精製すると、9b(4mg、23％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 574.2(M+1)+。
【化３４９】
2020520926.tif 000383
【０３５６】
(実施例8)
本実施例は、上の表1の最終化合物9cを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３５７】
(1S,4aS,10aR)-6-(2-アミノエトキシ)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9c)
【０３５８】
(方法1:)
8c(0.11g、0.16mmol)の酢酸エチル(5mL)溶液に、湿潤Pd/C(10％、30mg)を窒素下で添加した。混合物を水素で3回パージし、15〜25℃で16時間撹拌した。該混合物をセライトに通して濾過し、濾液を真空中で濃縮すると、脱ベンジル化中間体(94mg)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 673(M+1)+。
【化３５０】
2020520926.tif 000384
メタノール(0.5mL)中の該脱ベンジル化中間体(90mg)の混合物をジオキサン中のHCl(4M、0.5mL)で15〜25℃で16時間処理した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、9c(40mg、52％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 573.3(M+1)+。
【化３５１】
2020520926.tif 000385
【０３５９】
(方法2:)
9b(25mg、44μmol)のトルエン(1mL)溶液に、フタルイミド(10mg、65μmol)、トリフェニルホスフィン(23mg、88μmol)、及びアゾジカルボン酸ジイソプロピル(DIAD、18mg、88μmol)を添加した。反応液を20〜25℃で24時間撹拌した後、反応混合物を酢酸エチル(40mL)で希釈し、有機物を水(20mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。残渣をエタノール(5mL)に溶解させ、その後、該エタノール溶液をヒドラジン(0.3mL)で処理した。この混合物を90℃で3時間撹拌した。反応液を冷却した後、揮発性物質を真空中で除去し、残渣をアセトニトリル(10mL)でトリチュレートした。混合物を25℃で10分間撹拌し、濾過した。固体をアセトニトリル(10mL)で洗浄し、合わせた濾液を真空中で濃縮した。粗生成物を分取HPLC(方法B)により精製すると、9c(11mg、44％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 573.4(M+1)+。
【０３６０】
(実施例9)
本実施例は、上の表1の最終化合物9dを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３６１】
(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9d)
【０３６２】
(工程1:)
8d(0.84g、1.3mmol)の酢酸エチル(50mL)溶液に、湿潤Pd/C(10％、0.15g)を窒素下で添加した。混合物を水素でパージし、水素バルーン下、15〜25℃で16時間撹拌した。該混合物をセライトに通して濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中、0〜50％酢酸エチル)により精製すると、9g(0.66g、90％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 629(M+1)+。
【化３５２】
2020520926.tif 000386
【０３６３】
(工程2:)
9gのメタノール(0.5mL)溶液に、ジオキサン中のHCl(4M、0.5mL)を0℃で添加し、得られた溶液を15〜25℃で16時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、9d(1.3mg、44％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 529.3(M+1)+。
【０３６４】
9dのDMSO-d6(ppm)における500MHz NMRデータを、次のように表3にまとめた。
【化３５３】
2020520926.tif 000387
表3．
【表５】
2020520926.tif 000388
【０３６５】
【化３５４】
2020520926.tif 000389
【０３６６】
【化３５５】
2020520926.tif 000390
【０３６７】
【化３５６】
2020520926.tif 000391
【０３６８】
HPLC(方法B):保持時間(Rt): 8.92分、純度: 99.4％。キラルHPLC:＞99.9％(カラムAD、AS、OD、及びOJにおいて)、旋光度[α]25: +2.53°(1.7g/100mL THF)。
【０３６９】
(実施例10)
本実施例は、上の表1の最終化合物9eを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３７０】
(1S,4aS,10aR)-N-((1S,4aS,10aR)-1,4a-ジメチル-6-(ピペラジン-1-イル)-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9e)
【０３７１】
8e(61mg、77μmol)の酢酸エチル(1mL)溶液に、湿潤Pd/C(10％、5mg)を窒素下で添加した。混合物を水素で3回パージし、水素下、30℃で16時間撹拌した。該混合物をセライトに通して濾過し、濾液を真空中で濃縮すると、脱ベンジル化中間体(54mg、ESI m/z: 698(M+1)+)が得られ、これをメタノール(0.5mL)に溶解させ、ジオキサン(4M、0.5mL)中のHClで15〜25℃で16時間処理した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、9e(10mg、22％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 598(M+1)+。
【化３５７】
2020520926.tif 000392
【０３７２】
(実施例11)
本実施例は、上の表1の最終化合物9fを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３７３】
(1S,4aS,10aR)-6-(ジメチルアミノ)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9f)
【０３７４】
化合物8d(36mg、50μmol)のメタノール(0.5mL)溶液に、ジオキサン中のHCl(4N、0.5mL、2mmol)を0℃で添加し、得られた混合物を20〜25℃で16時間撹拌した。化合物8dが消費されるまで、反応液をLC-MSによりモニタリングした。揮発性物質を真空中で除去すると、27mgの遊離アミン中間体が得られ、これをメタノール(2mL)に溶解させ、その後、Pd/C(10％、5mg)を窒素下で添加した。反応混合物を水素でパージし、水素バルーン下、20〜25℃で16時間撹拌した。酸性条件下で、メタノールにより、N-メチル化が起こった。混合物をセライトに通して濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、9f(10mg、36％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 557(M+H)+。
【化３５８】
2020520926.tif 000393
【０３７５】
(実施例12)
本実施例は、上の表1の最終化合物9gを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３７６】
tert-ブチル(4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルカルバメート(9g)
【０３７７】
8d(0.84g、1.3mmol)の酢酸エチル(50mL)溶液に、湿潤Pd/C(10％、0.15g)を窒素下で添加した。混合物を水素でパージし、8dが完全に消費されるまで、水素バルーン下、15〜25℃で16時間撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。該混合物をセライトに通して濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中、0〜50％酢酸エチル)により精製すると、9g(0.66g、90％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 629(M+1)+。
【化３５９】
2020520926.tif 000394
【０３７８】
(実施例13)
本実施例は、上の表1の最終化合物9hを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３７９】
(1S,4aS,10aR)-6-(2-アミノアセトアミド)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9h)
【０３８０】
Fmoc-Gly-OH(30mg、0.1mmol)のDMF(1mL)溶液に、HATU(38mg、0.1mmol)及びDIPEA(39mg、0.3mmol)を25℃で添加した。得られた混合物をこの温度で1時間撹拌した。その後、該混合物に、9d(30mg、0.06mmol)を添加し、(LCMSによりモニタリングして)9dが完全に消費されるまで反応混合物を25℃で16時間撹拌した。該混合物に、ピペリジン(0.2mL)を添加し、得られた混合物をrtでさらに30分間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、9h(17mg、51％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 586(M+1)+。
【化３６０】
2020520926.tif 000395
【０３８１】
(実施例14)
本実施例は、上の表1の最終化合物9iを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３８２】
(1S,4aS,10aR)-6-(3-アミノプロパンアミド)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9i)
【０３８３】
Boc-β-Ala-OH(38mg、0.2mmol)のDMF(1mL)溶液に、HATU(76mg、0.2mmol)及びDIPEA(52mg、0.4mmol)を25℃で添加した。得られた溶液をこの温度で1時間撹拌した。その後、該溶液に、9d(53mg、0.1mmol)を添加し、(LCMSによりモニタリングして)9dが完全に消費されるまで、得られた混合物を25℃で16時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機物を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をDCM(2mL)に溶解させ、該溶液に、TFA(0.2mL)をrtでをゆっくりと添加した。混合物をrtで2時間撹拌し、揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、9i(30mg、50％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 600(M+1)+。
【化３６１】
2020520926.tif 000396
【０３８４】
(実施例15)
本実施例は、上の表1の最終化合物9jを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３８５】
(1S,4aS,10aR)-6-((S)-2-アミノ-3-ヒドロキシプロパンアミド)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9j)
【０３８６】
Fmoc-Gly-OHをFmoc-Ser-OHと置き換えることを除いて、9hを調製するための同じ手順を用いると、白色の固体としての9j(18mg、51％収率)が得られた。ESI m/z: 616(M+1)+。
【化３６２】
2020520926.tif 000397
【０３８７】
(実施例16)
本実施例は、上の表1の最終化合物9kを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３８８】
(1S,4aS,10aR)-N-((1S,4aS,10aR)-1,4a-ジメチル-6-(2-(メチルアミノ)アセトアミド)-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド;トリフルオロ酢酸塩(9k)
【０３８９】
Boc-β-Ala-OHをN-Boc-Sar-OHと置き換えることを除く、9iを調製するための手順の後に、分取HPLC(方法A)による精製の後、9k(27mg、28％収率、TFA塩)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 600.5(M+1)+。
【化３６３】
2020520926.tif 000398
【０３９０】
(実施例17)
本実施例は、上の表1の最終化合物9lを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３９１】
(1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-[(2S)-2,6-ジアミノヘキサンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド;トリフルオロ酢酸塩(9l)
【０３９２】
Boc-β-Ala-OHをBoc-Lys-OHと置き換えることを除く、9iを調製するための手順の後に、化合物9l(9mg、49％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 657.5(M+1)+。
【化３６４】
2020520926.tif 000399
【０３９３】
(実施例18)
本実施例は、上の表1の最終化合物9mを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３９４】
(1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-[(2S)-2-アミノ-3-(1H-イミダゾール-4-イル)プロパンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド;トリフルオロ酢酸塩(9m)
【０３９５】
Boc-β-Ala-OHをBoc-His-OHと置き換えることを除く、9iを調製するための手順の後に、9m(11mg、60％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 666.3(M+1)+。
【化３６５】
2020520926.tif 000400
【０３９６】
(実施例19)
本実施例は、上の表1の最終化合物9nを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０３９７】
(3S)-3-アミノ-3-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}プロパン酸(9n)
【０３９８】
Boc-β-Ala-OHをOtBu-N-Boc-Asp-OHと置き換えることを除く、9iを調製するための手順の後に、9n(11mg、62％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 644.3(M+1)+。
【化３６６】
2020520926.tif 000401
【０３９９】
(実施例20)
本実施例は、上の表1の最終化合物9oを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０４００】
(4S)-4-アミノ-4-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}ブタン酸;トリフルオロ酢酸塩(9o)
【０４０１】
Boc-β-Ala-OHをOtBu-N-Boc-Glu-OHと置き換えることを除く、9iを調製するための手順の後に、9o(8mg、46％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 658.3(M+1)+。
【化３６７】
2020520926.tif 000402
【０４０２】
(実施例21)
本実施例は、上の表1の最終化合物9pを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及しており、その合成は図3aに示した。
【０４０３】
(工程1:)
(1S,4aS,10aR)-6-(アミノメチル)-N-((1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド;トリフルオロ酢酸塩(9p')の作製
【０４０４】
窒素下の8g(70mg、0.11mmol)のエタノール(15mL)溶液に、ラネーNi(0.10g)を0℃で添加し、その後、濃縮水性アンモニア溶液(1.5mL)を添加した。得られた混合物を水素でパージし、バルーンによる水素雰囲気下で18時間撹拌した。LCMSにより、還元が終了しているとみなされた。該溶液をセライトに通して濾過し、濾液を真空中で濃縮すると、粗材料(67mg、95％収率)が白色の固体として得られ、そのうちの7mgを分取HPLC(方法A)により精製すると、NMR分析用の9p'(4mg、TFA塩)が得られた。ESI m/z: 633.4(M+1)+。
【化３６８】
2020520926.tif 000403
【０４０５】
(工程2:)
(1S,4aS,10aR)-6-(アミノメチル)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド;トリフルオロ酢酸塩(9p)の作製
【０４０６】
化合物9p'(60mg、95μmol)のDCM(5mL)溶液に、三臭化ホウ素(DCM中1M、1mL)を、アルゴン雰囲気下、-78℃で滴加した。LCMSにより、ベンジル基が完全に除去されるまで、得られた混合物を-78℃で1時間撹拌した。その後、該混合物を、メタノール(5mL)を滴下して、-78℃でクエンチし、反応液を室温に温めておいた。該溶液をDCM(50mL)で希釈し、飽和水性炭酸水素ナトリウム(20mL×2)で洗浄した。有機物を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣を分取HPLC(方法A)により精製すると、表題化合物9p(15mg、30％収率、TFA塩)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 543.2(M+1)+。
【化３６９】
2020520926.tif 000404
【０４０７】
(実施例22)
本実施例は、上の表1の最終化合物9qを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及している。
【０４０８】
4-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}ブタン酸(9q)
【０４０９】
4mL-スクリューキャップ式バイアルに、化合物9d(15mg、28μmol)及びグルタル酸無水物(5.0mg、43μmol)を添加した。混合された固体をTHF(0.2mL)に溶解した。LCMSによりモニタリングして、反応が終了するまで、混合物をrtで16時間撹拌した。該混合物をメタノール(2mL)で希釈した。該溶液を濾過し、濾液を分取HPLC(方法B)により精製すると、化合物9q(10mg、56％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 643.3(M+1)+。
【化３７０】
2020520926.tif 000405
【０４１０】
(実施例23)
本実施例は、上の表1の最終化合物9rを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及しており、その合成は図3bに示した。
【０４１１】
2-[({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)アミノ]酢酸;トリフルオロ酢酸塩(9r)
【０４１２】
Boc-イミノ二酢酸(30mg、0.13mmol)のDMF(0.5mL)溶液に、HATU(60mg、0.16mmol)及びDIPEA(72mg、0.56mmol)を25℃で添加した。得られた混合物をこの温度で1時間撹拌した。反応混合物を10〜15℃に冷却し、その後、該混合物に、9d(30mg、57μmol)を添加した。反応液を10〜15℃で3時間撹拌した後、(LCMSによりモニタリングして)9dが完全に消費された。反応混合物に、水性水酸化リチウム(1M、0.5mL)を添加した。その後、混合物を70℃で2時間撹拌した。反応液をrtに冷却し、シリンジフィルター膜に通して濾過した後、濾液を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水(0.1％TFAを含む)中の5〜90％アセトニトリルによりそのまま分離すると、白色の固体が得られた。該固体をDCM(0.4mL)に溶解させ、該溶液に、TFA(0.1mL)をrtでゆっくりと添加し、反応液をrtで2時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、9r(10mg、28％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 644.4(M+1)+。
【化３７１】
2020520926.tif 000406
【０４１３】
(実施例24)
本実施例は、上の表1の最終化合物9tを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及しており、その合成は図3cに示されている。
【０４１４】
(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-N-((1R,4aS,10aR)-7-イソプロピル-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9t)
【０４１５】
(工程1:)
(1R,4aS,10aR)-パーフルオロフェニル 7-イソプロピル-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(6d)の作製
【０４１６】
4を14f(デヒドロアビエチン酸、CAS番号1740-19-8、0.50g、1.7mmol)と置き換えることを除いて、6bを作製するための同じ手順を用いると、無色の油状物としての化合物6d(0.30g、39％収率)がフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中、5％酢酸エチル)の後に得られた。
【化３７２】
2020520926.tif 000407
【０４１７】
(工程2:)
tert-ブチル(4bS,8S,8aR)-8-((1R,4aS,10aR)-7-イソプロピル-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルカルバメート(8t)の作製
【０４１８】
8dを作製するための同じ手順を用いると、7d(40mg、0.11mmol)と6d(60mg、0.13mmol)とのアミドカップリング反応により、純粋な8t(10mg、14％収率)が得られた。ESI m/z: 655(M+1)+。
【０４１９】
(工程3:)
(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-N-((1R,4aS,10aR)-7-イソプロピル-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9t)の作製
【０４２０】
化合物8t(10mg、15μmol)のDCM(2mL)溶液に、TFA(0.2mL)を0℃で滴加した。Bocが除去されるまで、反応液を0℃で1時間撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。反応混合物をDCM(20mL)で希釈し、飽和水性炭酸水素ナトリウム、水、及びブラインで洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮すると、化合物9t(5mg、59％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 555.2(M+1)+。
【化３７３】
2020520926.tif 000408
【０４２１】
(実施例25)
本実施例は、上の表1の最終化合物9uを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及しており、その合成は図3dに示されている。
【０４２２】
(工程1:)
(4bS,8S,8aR)-8-(アミノメチル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-オール(7f')の作製
【０４２３】
化合物7f(0.10g、0.37mmol)のTHF(10mL)溶液に、ボラン-メチルスルフィド錯体(THF中2M、1.9mL、3.7mmol)をシリンジによりrtで添加した。その後、LC-MSによりモニタリングして、反応が終了するまで、混合物を70℃で48時間撹拌した。反応液を冷却した後、反応混合物を0〜5℃の冷メタノール(50mL)に注ぎ入れた。揮発性物質を真空中で除去した。残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、化合物7f'(45mg、47％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 260.2(M+1)+。
【０４２４】
(工程2:)
(1S,4aS,10aR)-N-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]メチル}-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9u)の作製
【０４２５】
ポドカルピン酸1(10mg、36μmol)のDMF(0.5mL)溶液に、HATU(21mg、55μmol)及びDIPEA(14mg、0.11mmol)を25℃で添加した。得られた混合物をこの温度で16時間撹拌した。その後、該混合物に、化合物7f'(10mg、39μmol)を添加した。反応液を25℃で40時間撹拌し、LCMSによりモニタリングした後、反応混合物を分取HPLC(方法A)によりそのまま精製すると、化合物9u(9mg、48％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 516.3(M+1)+。
【化３７４】
2020520926.tif 000409
【０４２６】
(実施例26)
本実施例は、上の表1の化合物15bを作製するための方法を示している。本実施例は、図1で付番している化合物に言及しており、その合成は図3eに示されている。
【０４２７】
グルコース類似体15bは、アセチルエステル15aの塩基性加水分解から得られ、ここで、15aは、ビス-フェノール9aをブロモ-グルコース16で処理することにより形成された。
【０４２８】
(1S,4aS,10aR)-N-((1S,4aS,10aR)-1,4a-ジメチル-6-((2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(15b)
【０４２９】
9a(10mg、19μmol)のアセトニトリル(0.2mL)溶液に、[(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-トリス(アセチルオキシ)-6-ブロモオキサン-2-イル]酢酸メチル(16、10mg、24μmol)及び酸化銀(I)(15mg、64μmol)を添加した。得られた混合物を10〜20℃で48時間撹拌した。該混合物をセライトに通して濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残渣(粗15a)をTHF/水(v/v＝4、1mL)に溶解させ、該溶液に、水酸化リチウム(0.50mg、0.021mmol)を添加した。反応液を18℃で2時間撹拌した後、混合物を濾過し、濾液を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、15b(2mg、15％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 692(M+1)+。
【化３７５】
2020520926.tif 000410
【０４３０】
(実施例27)
本実施例は、上の表1の化合物17b及び17cを作製するための方法を示している。本実施例は、図4で付番している化合物に言及している。
【０４３１】
リン酸類似体17aは、塩化ジホスホリル18によるフェノール9gの処理から得られた。化合物17b及び17cは、TFAによる17aの酸性脱保護から得られた。リン酸類似体17cは、塩基性及び中性条件下で水に溶解性であったが、pH 5で安定ではなく、これをメタノールの存在下でメトキシホスフェート17bに変換し;後者は、pH 5〜8で安定であることが分かった。
【０４３２】
(4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルメチル水素リン酸塩(17b);(4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル二水素リン酸塩(17c)
【０４３３】
-40℃の9g(10mg、16μmol)のTHF(0.1mL)撹拌溶液に、塩化ジホスホリル18(10mg、40μmol)及びTEA(16mg、0.16mmol)を添加した。反応液を-40℃で1時間撹拌した後、反応混合物を水でクエンチし、pHを飽和重炭酸ナトリウム水溶液溶液でpH 8に調整した。その後、該溶液を水性塩酸塩(1N)でpH 2に酸性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮すると、粗17aが得られた。塩化メチレン(1mL)中の約1％メタノール中の17a(11mg)の溶液に、TFA(0.1mL)を添加し、得られた混合物を25℃で1時間撹拌した。揮発性物質を除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、17b(3mg、31％収率)が白色の固体として、17c(2mg、20％収率)が白色の固体として得られた。
【０４３４】
17bについて: ESI m/z: 623(M+1)+。
【化３７６】
2020520926.tif 000411
【０４３５】
17cについて: ESI m/z: 609(M+1)+。
【化３７７】
2020520926.tif 000412
【０４３６】
(実施例28)
上記の化合物の構造、計算LogP値、MS、及びHPLCの結果を表4にまとめた。
表4．ペイロードの化学的-物理的特性
【化３７８】
2020520926.tif 000413
【表６】
2020520926.tif 000414
6＜+++＜9; 4＜++＜6; 2＜+＜4
【０４３７】
(実施例29)
本実施例は、化合物21c、21d、21h、及び21jによって表される、VA-ペイロード、VC-ペイロード、及びVC-PAB-ペイロードを作製するための一般的方法を示している。本実施例は、図5で付番している化合物に言及している。
【０４３８】
化合物21dは、9dとFmoc-VA-酸(20)とのアミドカップリング反応と、その後の標準的なFmoc脱保護条件から得られた。化合物21c、21d、21h、及び21jは、それぞれ、Fmoc-L-バリン-L-シトルリン-p-アミノベンジルアルコール p-ニトロフェニルカルボネート(Fmoc-VC-PAB-PNP、19)による9c、9d、9h、又は9jの処理と、その後の標準的なFmoc脱保護条件から得られた。
【０４３９】
4-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)-5-ウレイドペンタンアミド)ベンジル 2-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルオキシ)エチルカルバメート(21c)
【０４４０】
9c(18mg、31μmol)のDMF溶液に、Fmoc-VC-PAB-PNP 19(16mg、21μmol)及びDIPEA(20mg、0.16mmol)を添加し、混合物を20〜25℃で24時間撹拌した。得られた混合物に、ピペリジン(0.1mL)を添加し、LC-MSによりモニタリングして、Fmocが中間体から除去されるまで、混合物を25℃でさらに2時間撹拌した。該混合物を膜に通して濾過し、濾液を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、21c(14mg、50％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 978(M+1)+。
【化３７９】
2020520926.tif 000415
【０４４１】
(1S,4aS,10aR)-6-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(21d)
【０４４２】
9d(53mg、0.10mmol)のDMF(1mL)溶液に、Fmoc-Val-Ala-OH 20(41mg、0.10mmol)、HATU(38mg、0.1mmol)、及びDIPEA(26mg、0.20mmol)を添加した。反応液を25℃で24時間撹拌した後、LC-MSにより、9dが消費された。その後、混合物に、ピペリジン(0.1mL)を添加し、得られた溶液を25℃でさらに3時間撹拌した。該混合物を濾過し、濾液を真空中で濃縮し、残渣を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、化合物21d(45mg、64％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 699(M+1)+。
【化３８０】
2020520926.tif 000416
【０４４３】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル} メチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(21h)
【０４４４】
9hを9cの代わりに用いることを除いて、21cを作製するための同じ手順を用いると、21h(85mg、32％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 990(M+1)+。
【化３８１】
2020520926.tif 000417
【０４４５】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(21j)
【０４４６】
9jを9cの代わりに用いることを除いて、21cを作製するための同じ手順を用いると、21j(22mg、40％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1021(M+1)+。
【化３８２】
2020520926.tif 000418
【０４４７】
(実施例30)
本実施例は、リンカー-ペイロード22d1、22d2、及び22jを作製するための一般的方法を示している。本実施例は、図5で付番している化合物に言及している。
【０４４８】
リンカー-ペイロード22を作製するための一般的手順:化合物21(5〜30mg、1当量)のDMF(0.5mL)溶液に、市販のDIBAC-Suc-PEG4-COOSu又はDIBAC-Suc-PEG4-COOH又はBCN-PEG4-COOSu(1.2当量)のTHF(0.5mL)溶液、その後、TEA(2当量)をrtで添加した。LC-MSによりモニタリングして、21が消費されるまで、混合物をrtで撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を分取HPLCによりそのまま精製すると、22が白色の固体として得られた。
【０４４９】
(実施例31)
本実施例は、リンカー-ペイロード22d1を作製するための一般的方法を示している。本実施例は、図5で付番している化合物に言及している。
【０４５０】
1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(22d1)
【０４５１】
リンカー-ペイロード22を作製するための一般的手順を用いると、22d1(10mg、28％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1234(M+H)+。
【化３８３】
2020520926.tif 000419
【０４５２】
(実施例32)
本実施例は、リンカー-ペイロード22d2を作製するための一般的方法を示している。本実施例は、図5で付番している化合物に言及している。
【０４５３】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(22d2)
【０４５４】
リンカー-ペイロード22を作製するための一般的手順を用いると、22d2(7mg、44％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 735.0(M/2+H)+。
【化３８４】
2020520926.tif 000420
【０４５５】
(実施例33)
本実施例は、リンカー-ペイロード22jを作製するための一般的方法を示している。本実施例は、図5で付番している化合物に言及している。
【０４５６】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(22j)
【０４５７】
リンカー-ペイロード22を作製するための一般的手順を用いると、22j(8mg、26％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 778(M/2+H)+。
【化３８５】
2020520926.tif 000421
【０４５８】
(実施例34)
本実施例は、化合物24cによって表される、システインコンジュゲーションを介して抗体にコンジュゲートすることができるリンカー-ペイロードを作製するための一般的方法を示している。本実施例は、図6で付番している化合物に言及している。
【０４５９】
21cと置換Glu-酸(23c1)とのアミドカップリング反応により、23cが得られ、これをMC-PEG4-CO2Suエステル(23c2)で処理すると、リンカー-ペイロード24cが得られた。
【０４６０】
{4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-4-{[(2R,3S,4S,5S)-2,3,4,5,6-ペンタヒドロキシヘキシル]カルバモイル}ブタンアミド]-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(2-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]オキシ}エチル)カルバメート(24c)
【０４６１】
(工程1:)
23c1(15mg、25μmol)のDMF(1mL)溶液に、化合物21c(14mg、14μmol)、HATU(9.5mg、25μmoL)、及びNMM(4.9mg、49μmoL)を添加した。反応液を25℃で4時間撹拌した後、LC-MSにより、21cが消費された。得られた混合物をピペリジン(0.1mL)で処理し、2時間撹拌させておいた。該混合物を分取HPLCによりそのまま精製すると、23c(8.0mg、45％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 675(M/2+1)+。
【０４６２】
(工程2:)
23c(10mg、7.4μmol)のDMF(1mL)溶液に、23c2(7mg、22μmol)及びN-メチルモルホリン(2.0mg、20μmol)を添加し、得られた混合物を25℃で4時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去した後、次に、残渣をDCM(1mL)に溶解し、該溶液にTFA(0.1mL)を添加した。得られた混合物を25℃で2時間撹拌し、その後、真空中で濃縮し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、24c(4.0mg、30％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1598(M+1)+。
【化３８６】
2020520926.tif 000422
【０４６３】
(実施例35)
本実施例は、アジドとアルキンとのクリック反応を介して抗体にコンジュゲートすることができるリンカー-ペイロードを作製するための一般的方法を示している。該リンカーの中間体の合成は、図7に示されており、リンカー-ペイロードの合成は、図8に示されている。本実施例は、図7及び8で付番している化合物に言及している。
【０４６４】
図7は、COT-(PEG4)n-(N2-Fmoc)dLys 26a及び26bの合成を示している。N2-Fmoc-D-リジン25aと市販のエステル25cとのアミドカップリング反応により、26aが得られた。N2-Fmoc-D-リジン25aと市販のエステル25b1とのアミドカップリング反応と、その後のBoc脱保護により、25b2が得られ; 25b2と25cとのアミドカップリング反応により、26bが得られた。
【０４６５】
図8は、29c1、29c2、29d1、29d2、29d3、29d4、29h、及び29jなどの、リンカー-ペイロード29の一般的な合成を示している。リンカー-ペイロード29の合成は、独立に、26a又は26bと、21c、21d、21h、及び21jとのアミドカップリング反応から始まり、その後、Fmocが脱保護されて、独立に、27c、27d1、27d2、27h、及び27jが形成され、これらの各々が、それぞれ、シクロデキストリン-アジドによる2+3環化を受けて、28c、28d1、28d2、28h、及び28jが得られた。最終的に、28c、28d1、28d2、28h、及び28jと、市販のDIBAC-Suc-PEG4-NHSエステル又はBCN-カルバメート-PEG4-酸とのアミドカップリング反応により、それぞれ、29c1、29c2、29d1、29d2、29d3、29d4、29h、及び29jが得られた。
【０４６６】
(実施例36)
本実施例は、リンカー26a及び26bの中間体の合成のための一般的方法を示している。本実施例は、図7で付番している化合物に言及している。
【０４６７】
(2R)-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ヘキサン酸(26a)
【０４６８】
市販の25c(65mg、0.23mmol)及びFmoc-D-Lys-OH(85mg、0.23mmol)のDMF(2mL)溶液に、TEA(52mg、0.51mmol)を添加し、その後、混合物をrtで30分間撹拌した。その後、該混合物を真空中で濃縮し、残渣を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水(0.05％TFA)中の0〜100％アセトニトリル)によりそのまま精製すると、26a(85mg、収率70％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 533(M+H)+。
【化３８７】
2020520926.tif 000423
【０４６９】
(24R)-24-(((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニルアミノ)-1-(シクロオクタ-2-イニルオキシ)-2,18-ジオキソ-6,9,12,15-テトラオキサ-3,19-ジアザペンタコサン-25-オイック酸(26b)
【０４７０】
(工程1:)
DMF(10mL)中の化合物25b1(4.6g、10mmol)及びFmoc-(D)Lys-OH(25a、3.6g、10mmol)の混合物に、トリエチルアミン(2.0g、20mmol)を添加した。反応混合物を25℃で1時間撹拌し、その後、DCM(100mL)で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機物を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(塩化メチレン中、0〜5％メタノール)により精製すると、25b2'が無色の油状物(5.5g、77％収率)として得られた。ESI m/z: 716.2(M+H)+。
【化３８８】
2020520926.tif 000424
【０４７１】
(工程2:)
25b2'(0.60g、0.84mmol)のDCM(10mL)溶液に、TFA(2.0mL)を0℃で滴加した。反応混合物を温めておき、TLCにより、化合物25b2'が完全に消費されるまで、25℃で一晩撹拌した。揮発性物質を真空中で除去すると、残渣が得られた: ESI m/z: 616.3(M+H)+。
【０４７２】
(工程3:)
上記の残渣のDMF(10mL)溶液に、化合物25c(0.27g、0.98mmol)を添加した。少量の反応混合物を湿ったpH紙の上で検査し、TEA(約1.0mL)を添加して、該反応混合物のpHをpH 7から8に調整した。反応液を25℃で撹拌し、LCMSによりモニタリングし、30分で終了した。その後、反応混合物をDCM(100mL)及び水(100mL)で希釈した。得られた混合物を塩酸塩(2N)でpH 2に酸性化した。有機物を水(80mL)及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(塩化メチレン中、0〜5％メタノール)により精製すると、26bが無色の油状物(0.38g、49％収率)として得られた。ESI m/z: 780.3(M+H)+。
【化３８９】
2020520926.tif 000425
【０４７３】
(実施例37)
本実施例は、リンカー-ペイロード27c、27d1、27d2、27h、及び27jを作製するための方法を示している。本実施例は、図8で付番している化合物に言及している。
【０４７４】
中間体リンカー-ペイロード27を作製するための一般的手順:次に、化合物26a又は26b(1当量)のDMF(1mLのDMF当たり30〜50mgの26a又は26b)溶液に、HATU(1当量)及び−独立に−化合物21c、21d、21h、又は21j(1当量)をrtで添加した。混合物が均一になるまで、該混合物をrtで撹拌した。この混合物に、DIPEA(5当量)をrtでシリンジによりゆっくりと添加した。LC-MSにより、独立に、21c、21d、21h、又は21jが消費されるまで、得られた混合物をrtで一晩(16h)撹拌した。その後、反応混合物にピペリジン(0.1mL、過剰)をrtで滴加し、LC-MSによりモニタリングして、Fmoc基が除去されるまで、該混合物をさらに3時間撹拌した。反応混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー又は分取HPLC(方法B、塩基性条件)により−独立に−そのまま精製するとそれぞれ、化合物27c、27d1、27d2、27h、及び27jが白色の固体として得られた。
【０４７５】
(実施例38)
本実施例は、リンカー-ペイロード27cを作製するための方法を示している。本実施例は、図8で付番している化合物に言及している。
【０４７６】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{1-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(2-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]オキシ}エチル)カルバメート(27c)
【０４７７】
白色の固体としての化合物27c(40mg、30％収率)は、21c(85mg、87μmol)と26b(68mg、87μmol)とのアミドカップリング反応と、その後の27を作製するための一般的手順から得られた。ESI m/z: 759(M/2+1)+。
【化３９０】
2020520926.tif 000426
【０４７８】
(実施例39)
本実施例は、リンカー-ペイロード27d1を作製するための方法を示している。本実施例は、図8で付番している化合物に言及している。
【０４７９】
(1S,4aS,10aR)-6-((2S)-2-((2S)-2-((2R)-2-アミノ-6-(2-(シクロオクタ-2-イニルオキシ)アセトアミド)ヘキサンアミド)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(27d1)
【０４８０】
白色の固体としての化合物27d(30mg、47％収率)は、26a(35mg、0.064mmol)と21d1(45mg、0.064mmol)とのアミドカップリング反応と、その後の27を作製するための一般的手順から得られた。ESI m/z: 991(M+1)+。
【化３９１】
2020520926.tif 000427
【０４８１】
(実施例40)
本実施例は、リンカー-ペイロード27d2を作製するための方法を示している。本実施例は、図8で付番している化合物に言及している。
【０４８２】
N-[(5R)-5-アミノ-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]-1-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(27d2)
【０４８３】
白色の固体としての化合物27d2(54mg、50％収率)は、21d(60mg、0.086mmol)と26bとのアミドカップリング反応と、その後の27を作製するための一般的手順から得られた。ESI m/z: 620(M/2+1)+。
【化３９２】
2020520926.tif 000428
【０４８４】
(実施例41)
本実施例は、リンカー-ペイロード27hを作製するための方法を示している。本実施例は、図8で付番している化合物に言及している。
【０４８５】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(27h)
【０４８６】
白色の固体としての化合物27h(65mg、62％収率)は、27を作製するための一般的手順の後に、21h(80mg、64μmol)と26a(53mg、97μmol)とのアミドカップリング反応から得られた。ESI m/z: 1283(M+1)+。
【化３９３】
2020520926.tif 000429
【０４８７】
(実施例42)
本実施例は、リンカー-ペイロード27jを作製するための方法を示している。本実施例は、図8で付番している化合物に言及している。
【０４８８】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(27j)
【０４８９】
化合物27j(15mg、33％収率)は、27を作製するための一般的手順の後に、白色の固体として得られた。ESI m/z: 1313.6(M+H)+。
【化３９４】
2020520926.tif 000430
【０４９０】
(実施例43)
本実施例は、リンカー-ペイロード28c、28d1、28d2、28h、及び28jを作製するための方法を示している。本実施例は、図8で付番している化合物に言及している。
【０４９１】
中間体リンカー-ペイロード28を作製するための一般的手順:化合物27(30mg、1当量)のDMF(0.5mL)溶液に、α-シクロデキストリンアジド(CD-N3、ESI m/z: 1020(M+Na)+、2当量; Synthetic Communications, 2002, 32(21), 3367-3372を参照)のDMF(0.5mL)溶液をrtでシリンジにより添加した。混合物を20〜25℃で3日間撹拌した。LC-MS分析に基づいて、化合物27が消費された。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を分取HPLC(方法B)又は逆相フラッシュクロマトグラフィー(10％重炭酸アンモニウムを含む水中の0〜100％アセトニトリル)によりそのまま精製すると、化合物28が白色の固体として得られた。
【０４９２】
(実施例44)
本実施例は、リンカー-ペイロード28cを作製するための方法を示している。本実施例は、図8で付番している化合物に言及している。
【０４９３】
{4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-(1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38, 39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-9-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(2-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]オキシ}エチル)カルバメート(28c)
【０４９４】
白色の固体としての化合物28c(51mg、78％収率)は、28を作製するための一般的手順の後に、27c(40mg、26μmol)とCD-N3(52μmol)との(2+3)クリック反応から得られた。ESI m/z: 1258(M/2+1)+。
【化３９５】
2020520926.tif 000431
【０４９５】
(実施例45)
本実施例は、リンカー-ペイロード28d1を作製するための方法を示している。本実施例は、図8で付番している化合物に言及している。
【０４９６】
(1S,4aS,10aR)-N-{[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ [26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]プロパンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(28d1)
【化３９６】
2020520926.tif 000432
【０４９７】
白色の固体としての化合物28d1(14mg、23％収率)は、28を作製するための一般的手順の後に、27d1(30mg、30μmol)とCD-N3(60μmol)との(2+3)クリック反応から得られた。ESI m/z: 995(M/2+1)+。
【化３９７】
2020520926.tif 000433
【０４９８】
(実施例46)
本実施例は、リンカー-ペイロード28d2を作製するための方法を示している。本実施例は、図8で付番している化合物に言及している。
【０４９９】
N-[(5R)-5-アミノ-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]-1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-9-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣뎃苣螃苣뎃ㄭⴵ苣龃菣⢉㠲㉤਩䐼噉邀볯閼볯邼胣㲑䐯噉ਾ†駧늉臣몛뷤ꢁ臣ꚁ臣隌郥ꦉ㠲㉤㌨洰膀㈷볯躏軧⦇臣膀㠲苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁룤겈髧讉ꃩ꺁뻥ꮁ胣㊁搷⠲㌲杭胣ㆁ츹涼汯ꢁ䑃中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢㌨츸涼汯ꢁ臣⢮⬲⤳苣ꪃ菣꾂迥鲿臣覂뻥覂苣龁胣䖂䥓洠稯›ㄱ㠱䴨㈯ㄫ㰩畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰫猯灵芀戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯馼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㌴㰴愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㒋⤷戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣㊉核苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁雦閳苣몤臣ꚁ臣讂胣겜껥붖뻤꾁胣뎛ꞁ믤ꪕ臣ꚁ臣讂賥袐觧ꮁ꣨誏臣ꚁ臣讂胣ં䐼噉邀볯閼볯銼胣㲑䐯噉ਾ㑻嬭㈨⥓㈭嬭㈨⥓㈭嬭㈨⥒㈭ꊂ菣躃㘭笭ⴲ⡛ⴱ孻ㄳ㌬ⰲ㌳㌬ⰴ㔳㌬ⰶ㜳㌬ⰸ㤳㐬ⰰㄴ㐬ⴲ菣螃苣銃菣궃苣랂ㄭⰰ㔱㈬ⰰ㔲㌬ⴰ菣뎃苣궂苣⢹菣覃菣궂苣ꆃ菣ꮃ⴩ⰲⰴⰷⰹ㈱ㄬⰴ㜱ㄬⰹ㈲㈬ⰴ㜲㈬ⴹ菣螃苣ꪂ苣떂菣鞃苣랂苣궃㉛⸶⸲⸲㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰳ㰶猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰸㄱ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰳ㘱⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰸㄲ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㈾ⰳ㘲⼼畳㹰覃菣袃菣뎂菣뾂菣ⶳⴵ苣ꮃꆃ菣ꮃ⵽䠱㈬ⱈ䠳㐬ⱈ䠵㘬ⱈ䠷㠬ⱈ䠹랂苣궃苣꾂苣宿嵤ㅛ㈬㌬袃菣ꊂ苣벃菣ⶫⴴ苣ꮃꪂ苣랂ꊂ苣袃苣龃菣綉菣궂苣뎃苣龃菣嶉㌭ꆃ菣ꮃ菣뾂菣ꊂ菣覃ⵝⴵꮂ菣邃菣ꒂ菣ꊂ菣躃骃菣뾂菣ꊂ菣覃閃苣讃菣綫菣膃菣₫ⵎ笨⡛戴ⱓ匸㠬剡⴩ⴸ孻ㄨⱓ愴ⱓ〱剡⴩ⴶ菣覃菣궂苣⶷ⰱ愴뢂菣膃菣ⶫⰱⰲⰳⰴ愴㤬ㄬⰰ〱ⵡ苣꾂苣銃菣궃菣Ꞃ菣뎃菣것菣ⶳⴱ苣ꮃ菣讃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽戴㠬뢂菣膃菣ⶫ戴㔬㘬㜬㠬㠬ⱡⰹ〱ꪂ苣뾂菣覃菣閃苣誃菣袃菣뎃㌭ꒂ菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃꆃ菣ꮃꮂ菣邃菣벃菣⢈㠲⥨㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖 붙觨꺁鯥鎽臣鞁臣꺁賥袐觧㊩核㘨洷膀㘷볯躏軧⦇臣膀㠲苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁룤겈髧讉ꃩ꺁뻥ꮁ胣㊁样㘨洰膀㜴볎潭⥬臣䎨ⵄ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵⠾㐹볎潭⥬臣꺁㈨㌫꾂菣莃苣趏뿥讁苣鞾苣貂臣芀卅⁉⽭㩺ㄠ㐱⠱⽍⬲⤱猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰胣㲂牢ਾ��噉邀賥鎼볯馼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㔳⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯钼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㠴㰩牢ਾ†鳦龮雦设臣膀菣뎃苣벃骃苣궃菣覃㠲銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀鳦龮雦设臣膀鯥㢳臣颻闧鞁臣蒁苣隌郥ꦉ臣肨迥鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖笊ⴴ⡛匲⴩ⴲ⡛匲⴩ⴲ⡛刲⴩ⴲ苣龃菣ⶎⴶ㉻嬭ㄨ笭㍛ⰱ㈳㌬ⰳ㐳㌬ⰵ㘳㌬ⰷ㠳㌬ⰹ〴㐬ⰱ㈴覃菣ꮂ菣覃菣궂苣⶷〱ㄬⰵ〲㈬ⰵ〳骃菣뾂苣릂銃菣궃苣랂菣膃菣⦫㈭㐬㜬㤬ㄬⰲ㐱ㄬⰷ㤱㈬ⰲ㐲㈬ⰷ㤲覃菣ꮂ苣궂苣颃菣뾂苣꾂菣宭㘲㈮㈮㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾㘬⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㠾ㄬ㰱猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㌱ㄬ㰶猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㠱㈬㰱猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㌲㈬㰶猯灵崾菣蚃菣ꦃ苣뎃苣뎃㔭ꒂ菣嶫菣膃菣綫ㄭⱈ䠴㔬ⱈ䠶㜬ⱈ䠸㤬ⵈ苣꾂菣ꪂ苣뾂摛孝ⰱⰲ崳菣ꪃ苣뺂菣ꮃ㐭ꒂ菣⦫苣궂苣嶷苣뮂菣ꊂ菣覃颃苣떂菣ꊂ菣覃ⵝⴳ菣膃菣隃苣뎃苣龃菣嶉㔭⠭苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ苣龃菣⦎菣뎃苣뎃苣龃菣嶉菣Ꞃ菣ꮃꆃ菣ꮃ丠嬭ㄨ⥓ㄭ笭⡛戴ⱓ匸㠬剡⴩ⴸ笨⡛匱㐬卡ㄬ愰⥒㘭銃菣궃苣랂ㄭ㐬ⵡ苣ꆃ菣ꮃㄭ㈬㌬㐬㐬ⱡⰹ〱ㄬ愰ꪂ苣뾂菣覃菣閃苣誃菣袃菣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꮃ菣ꊂ菣覃ꮂ菣鲃菣ꮃ⴩戴㠬뢂菣膃菣ⶫ戴㔬㘬㜬㠬㠬ⱡⰹ〱ꪂ苣뾂菣覃菣閃苣誃菣袃菣뎃㌭ꒂ菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽ⴲ菣覃菣궂苣ꢂ菣ꮃꮂ菣邃菣벃菣⢈㠲⥪㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖 隌郥ꦉ㠲⡪〲杭胣㖁薼迥螎꾁胣㊁銂뷤붣臣讂臣膂臣肸裨蒚触蚠臣貾臣膀㜲ꢁ䑃中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢臣꺁㈨㌫꾂菣莃苣趏뿥讁苣붙觨꺁鯥鎽臣鞁臣鞾苣貂臣芀卅⁉⽭㩺ㄠ㔱⸶⠰⽍⬲⤱猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰胣㲂牢ਾ䐼噉邀賥钼볯邼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㘳⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯鞼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㤴㰩牢ਾ†鳦龮雦设臣膀菣뎃苣벃骃苣궃菣覃㤲ㅣ胣㊁挹膀㤲ㅤ胣㊁搹膀㤲㍤胣㊁搹膀㤲膀迥뎁㤲銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀鳦龮雦设臣膀鯥㢳臣颻闧鞁臣蒁苣隌郥ꦉ臣肨迥鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣㊉銂뷤붣臣讂臣膂臣肸裨蒚触蚠隌郥ꦉ㠲㔨胣㎜洰膀鎽蟩⦏臣䒮䙍〨㔮䱭뚺뛦ꮁ胣芸단꺁䥄䅂ⵃ畓ⵣ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰴猯扵ⴾ獏袏臣䊯乃倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㐾⼼畳㹢中午苣릂菣ꮃㄨ㈮뷥辇꺁䡔⡆⸰洵⥌뫦늶胣鶁臣貾胣咁䅅㈨뷥辇銂瑲臣뮷諥鞁臣芀䍌䴭ꮁ苣誂菣讃苣ꪃ菣낂臣ꚁ胣㊁貁뛦뮲臣貂苣뺁臣膀럦袐觧銂瑲臣릒详鞁臣芀迥鲿럦袐觧銂鳧목룤ꞁ뿦꺸臣膀껦ꎸ苣蚈迥䢖䱐ꮁ苣誂臣꺁臣뺁닧��臣讂臣膀㤲臣붙觨꺁鯥鎽臣鞁臣鞾苣貂臣芀㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㖋⤰戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣㊉挹銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀鳦龮雦设臣膀鯥㢳臣颻闧鞁臣蒁苣隌郥ꦉ臣肨迥鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯醼볯醀⼼䥄㹖笊ⴴ⡛匲⴩ⴲ⡛匲⴩ⴲ⡛刲⴩ⴲㅛ⠭ⴴ㉻ꊂ苣袃菣랂苣궃ㅛ⸰⸴⸰㰰畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰴ㰹猯灵崾菣궂苣螃苣ⶫ⠱㈱Ⱙ⠴⤹㔬㜬ㄬⰳ㔱颃苣떂苣뎃ㄭⴰ苣뎃㈭ꒂ菣綫㐭ꪂ苣붂菣뾂菣ꊂ菣覃⴩ⰳⰶⰹ㈱蚃菣ꦃ苣궂苣骃菣뾂菣ꮂ菣ⶳ㔱ꊂ菣覃ⵝⴶㄨ笭ⴲ⡛ⴱ孻ㄳ㌬ⰲ㌳㌬ⰴ㔳㌬ⰶ㜳㌬ⰸ㤳㐬ⰰㄴ㐬ⴲ菣螃苣銃菣궃苣랂ㄭⰰ㔱㈬ⰰ㔲㌬ⴰ菣뎃苣궂苣⢹菣覃菣궂苣ꆃ菣ꮃ⴩ⰲⰴⰷⰹ㈱ㄬⰴ㜱ㄬⰹ㈲㈬ⰴ㜲㈬ⴹ菣螃苣ꪂ苣떂菣鞃苣랂苣궃㉛⸶⸲⸲㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰳ㰶猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰸㄱ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰳ㘱⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰸㄲ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㈾ⰳ㘲⼼畳㹰覃菣袃菣뎂菣뾂菣ⶳⴵ苣ꮃꆃ菣ꮃ⵽䠱㐬ⱈ䠵㘬ⱈ䠷㠬ⱈ䠹랂苣궃苣꾂苣宿嵤ㅛ㈬㌬袃菣ꊂ苣벃菣ⶫⴹ苣ꮃꪂ苣랂ꊂ苣袃苣龃菣綉㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣뎃苣螃苣뎃ㄭⴵ苣龃菣⦉菣궂苣뎃苣龃菣嶉㌭ꆃ菣ꮃ菣뾂菣ꊂ菣覃ⵝⴵꮂ菣邃菣ꒂ菣ꊂ菣躃骃菣뾂菣ꊂ菣覃閃苣讃菣綫菣膃菣ⶫⵎ㈨笭⡛戴ⱓ匸㠬剡⴩ⴸ笨⡛匱㐬卡ㄬ愰⥒㘭銃菣궃苣랂ㄭ㐬ⵡ苣ꆃ菣ꮃㄭ㈬㌬㐬㐬ⱡⰹ〱ㄬ愰ꪂ苣뾂菣覃菣閃苣誃菣袃菣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꮃ菣ꊂ菣覃ꮂ菣鲃菣ꮃ⴩戴㠬뢂菣膃菣ⶫ戴㔬㘬㜬㠬㠬ⱡⰹ〱ꪂ苣뾂菣覃菣閃苣誃菣袃菣뎃㌭ꒂ菣嶫苣궂苣綷苣膃菣⦫苣ꮃ菣ꆃ菣袃㈨挹⤱戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯邼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㌴㰷愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯醼볯醀⼼䥄㹖 隌郥ꦉ㤲ㅣㄨ洲膀㤳볯躏軧⦇臣膀㤲苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁룤겈髧讉ꃩ꺁뻥ꮁ胣붙觨꺁鯥鎽臣鞁臣鞾苣貂臣芀㰊䥄㹖胣邼볯醼볯醀⼼䥄㹖䌊猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㠴⼼畳㹢㱈畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ㄲ㰳猯扵举猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㰵猯扵伾猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰳猯扵膀닧蚯돨辇›〳㠴㐮胣䖂䥓洠稯›〱㜱䴨㌯ㄫ㰩畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰫猯灵芀戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯邼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㌴㰸愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯醼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㖋⤱戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣㊉挹銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀鳦龮雦设臣膀鯥㢳臣颻闧鞁臣蒁苣隌郥ꦉ臣肨迥鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯醼볯醀⼼䥄㹖笊菣랂苣궃㙛ㄮ〮躃菣ⶊⴴ苣뎃㤭ꒂ菣綫菣膃菣₫ⵎㄨⴴ孻ㄨ⥒ㄭ笭⡛匱⴩ⴱ孻ㄨ⥓ㄭ笭㑛⠭孻㈨笭⡛��ⱓ匸㠬剡⴩ⴸ笨⡛匱㐬卡ㄬ愰⥒㘭銃菣궃苣랂ㄭ㐬ⵡ苣ꆃ菣ꮃㄭ㈬㌬㐬㐬ⱡⰹ〱ㄬ愰ꪂ苣뾂菣覃菣閃苣誃菣袃菣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꮃ菣ꊂ菣覃ꮂ菣鲃菣ꮃ⴩戴㠬뢂菣膃菣ⶫ戴㔬㘬㜬㠬㠬ⱡⰹ〱ꪂ苣뾂菣覃菣閃苣誃菣袃菣뎃㌭ꒂ菣嶫苣궂苣綷苣膃菣⦫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃꪂ苣랂ꆃ菣ꮃ閃苣讃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽ⴴꮂ菣邃菣ꒂ菣ꊂ菣躃隃菣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫㈭ꆃ菣ꮃ菣궃菣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫㔭⠭ⴱ㉻嬭ㄨ笭㍛ⰱ㈳㌬ⰳ㐳㌬ⰵ㘳㌬ⰷ㠳㌬ⰹ〴㐬ⰱ㈴覃菣ꮂ菣覃菣궂苣⶷〱ㄬⰵ〲㈬ⰵ〳骃菣뾂苣릂銃菣궃苣랂菣膃菣⦫㈭㐬㜬㤬ㄬⰲ㐱ㄬⰷ㤱㈬ⰲ㐲㈬ⰷ㤲覃菣ꮂ苣궂苣颃菣뾂苣꾂菣₭㉛⸶⸲⸲㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰳ㰶猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰸㄱ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰳ㘱⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰸㄲ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㈾ⰳ㘲⼼畳㹰覃菣袃菣뎂菣뾂菣ⶳⴵ苣ꮃꆃ菣ꮃ⵽䠱㐬ⱈ䠵㘬ⱈ䠷㠬ⱈ䠹랂苣궃苣꾂苣宿嵤ㅛ㈬㌬袃菣ꊂ苣벃菣ⶫⴹ苣ꮃꪂ苣랂ꊂ苣袃苣龃菣綉㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣뎃苣螃苣뎃ㄭⴵ苣龃菣⦉菣뎃菣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣袃菣螃苣뎃ㄭꒂ菣⦫苣ꮃ菣ꆃ菣袃㈨挹⤲戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯邼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㌴㰹愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯醼볯醀⼼䥄㹖 隌郥ꦉ㤲㉣㔨杭胣㊁薼迥螎꾁胣㊁銂뷤붣臣讂臣膂臣肸裨蒚触蚠臣貾臣膀駧늉臣몛뷤ꢁ臣ꚁ뻥覂苣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯隼胣㲑䐯噉ਾ㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㐱㰰猯扵䠾猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㈾㈱⼼畳㹢㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㐱⼼畳㹢㱏畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㌵⼼畳㹢胣뺲꿥ꪳ蟩㪏㈠㌹⸷芀卅⁉⽭㩺ㄠ㜴⠰⽍⬲⤱猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰胣㲂牢ਾ䐼噉邀賥钼볯钼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰〴⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯鞼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㈵㰩牢ਾ†鳦龮雦设臣膀菣뎃苣벃骃苣궃菣覃㤲ㅤ苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁雦閳苣몤臣ꚁ臣讂胣겜껥붖뻤꾁胣뎛ꞁ믤ꪕ臣ꚁ臣讂賥袐觧ꮁ꣨誏臣ꚁ臣讂胣ં䐼噉邀볯閼볯颼胣㲑䐯噉ਾⴱ㐨笭ⴲ苣뚂菣ꪃ苣꾂菣宭〱㐮〮〮ⰴ崹菣궂苣螃苣ⶫ⠱㈱Ⱙ⠴⤹㔬㜬ㄬⰳ㔱颃苣떂苣뎃ㄭⴰ苣뎃㈭ꒂ菣綫㐭ꪂ苣붂菣뾂菣ꊂ菣覃⴩ⵎ⡛刱⴩ⴱ孻ㄨ⥓ㄭ笭⡛匱⴩ⴱ孻㐨卢㠬ⱓ愸⥒㠭⠭孻ㄨⱓ愴ⱓ〱剡⴩ⴶ菣覃菣궂苣⶷ⰱ愴뢂菣膃菣ⶫⰱⰲⰳⰴ愴㤬ㄬⰰ〱ⵡ苣꾂苣銃菣궃菣Ꞃ菣뎃菣것菣ⶳⴱ苣ꮃ鮃菣ꂃ苣龃菣綉苣ꮃ菣讃菣⦫㐭Ɫⴸ苣ꆃ菣ꮃ㐭Ɫⰵⰶⰷⰸ愸㤬ㄬⴰ苣꾂苣銃菣궃菣Ꞃ菣뎃菣것菣ⶳⴳ苣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫苣膃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽ⴲ菣膃菣鞃菣钃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽ⴵ㉻嬭ㄨ笭㍛ⰱ㈳㌬ⰳ㐳㌬ⰵ㘳㌬ⰷ㠳㌬ⰹ〴��ⰱ㈴覃菣ꮂ菣覃菣궂苣⶷〱ㄬⰵ〲㈬ⰵ〳骃菣뾂苣릂銃菣궃苣랂菣膃菣⦫㈭㐬㜬㤬ㄬⰲ㐱ㄬⰷ㤱㈬ⰲ㐲㈬ⰷ㤲覃菣ꮂ苣궂苣颃菣뾂苣꾂菣宭㘲㈮㈮㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾㘬⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㠾ㄬ㰱猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㌱ㄬ㰶猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㠱㈬㰱猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㌲㈬㰶猯灵崾菣蚃菣ꦃ苣뎃苣뎃㔭ꒂ菣嶫菣膃菣綫ㄭⱈ䠴㔬ⱈ䠶㜬ⱈ䠸㤬ⵈ苣꾂菣ꪂ苣뾂摛孝ⰱⰲ崳菣ꪃ苣뺂菣ꮃ㐭ꒂ菣⦫苣궂苣嶷苣뮂菣ꊂ菣覃骃菣膃菣嶫㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣뎃苣螃苣뎃ㄭⴵ苣龃菣⢉㤲ㅤ㰩牢ਾ䐼噉邀賥钼볯閼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰ㄴ⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯馼胣㲑䐯噉ਾ†賥袐觧㊩搹⠱⸵洰膀㜲볯躏軧⦇臣膀㤲苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁룤겈髧讉ꃩ꺁뻥ꮁ胣붙觨꺁鯥鎽臣鞁臣鞾苣貂臣芀㰊䥄㹖胣邼볯銼볯醀⼼䥄㹖䌊猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㐲⼼畳㹢㱈畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㜱㰵猯扵举猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㰱猯扵伾猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㐾㰴猯扵膀닧蚯돨辇›㔲㈲㈮胣䖂䥓洠稯›㈱ㄶ䴨㈯ㄫ㰩畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰫猯灵芀戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯邼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㐴㰲愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯銼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㖋⤳戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣㊉搹銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀鳦龮雦设臣膀鯥㢳臣颻闧鞁臣蒁苣隌郥ꦉ臣肨迥鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯銼볯醀⼼䥄㹖笊菣랂苣궃㙛ㄮ〮躃菣ⶊⴴ苣뎃㤭ꒂ菣綫菣膃菣₫ⵎㄨⴴ孻ㄨ⥒ㄭ笭⡛匱⴩ⴱ孻ㄨ⥓ㄭ笭⡛戴ⱓ匸㠬剡⴩ⴸ孻ㄨⱓ愴ⱓ〱剡⴩ⴶ菣覃菣궂苣⶷ⰱ愴뢂菣膃菣ⶫⰱⰲⰳⰴ愴㤬ㄬⰰ〱ⵡ苣꾂苣銃菣궃菣Ꞃ菣뎃菣것菣ⶳⴱ苣ꮃ菣讃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽戴㠬뢂菣膃菣ⶫ戴㔬㘬㜬㠬㠬ⱡⰹ〱ꪂ苣뾂菣覃菣閃苣誃菣袃菣뎃㌭ꒂ菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃꢂ菣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫㈭ꆃ菣ꮃ菣궃菣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫㔭笭ⴲ⡛ⴱ孻ㄳ㌬ⰲ㌳㌬ⰴ㔳㌬ⰶ㜳㌬ⰸ㤳㐬ⰰㄴ㐬ⴲ菣螃苣銃菣궃苣랂ㄭⰰ㔱㈬ⰰ㔲㌬ⴰ菣뎃苣궂苣⢹菣覃菣궂苣ꆃ菣ꮃ⴩ⰲⰴⰷⰹ㈱ㄬⰴ㜱ㄬⰹ㈲㈬ⰴ㜲㈬ⴹ菣螃苣ꪂ苣떂菣鞃苣랂苣궃㉛⸶⸲⸲㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰳ㰶猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰸㄱ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰳ㘱⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰸㄲ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㈾ⰳ㘲⼼畳㹰覃菣袃菣뎂菣뾂菣ⶳⴵ苣ꮃꆃ菣ꮃ⵽䠱㐬ⱈ䠵㘬ⱈ䠷㠬ⱈ䠹랂苣궃苣꾂苣宿嵤ㅛ㈬㌬袃菣ꊂ苣벃菣ⶫⴴ苣ꮃꪂ苣랂ꊂ苣袃苣龃菣綉菣뎃菣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣袃菣螃苣뎃ㄭꒂ菣⦫苣ꮃ菣ꆃ菣袃㈨搹⤲戼㹲㰊䥄㹖��隌볯邼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㐴㰳愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯銼볯醀⼼䥄㹖 隌郥ꦉ㤲㉤ㄨ洶膀㌴볯躏軧⦇臣膀㤲苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁룤겈髧讉ꃩ꺁뻥ꮁ胣붙觨꺁鯥鎽臣鞁臣鞾苣貂臣芀㰊䥄㹖胣邼볯銼볯醀⼼䥄㹖䌊猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㘱⼼畳㹢㱈畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㜱㰴猯扵举猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㰰猯扵伾猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㐾㰴猯扵膀닧蚯돨辇›㐲ㄱ㈮胣䖂䥓洠稯›㈱㘰䴨㈯ㄫ㰩畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰫猯灵芀戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯邼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㐴㰴愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯銼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㖋⤴戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣㊉搹銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀鳦龮雦设臣膀鯥㢳臣颻闧鞁臣蒁苣隌郥ꦉ臣肨迥鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯銼볯醀⼼䥄㹖ㄊ⠭ⴴ㉻ꊂ苣袃菣랂苣궃ㅛ⸰⸴⸰㰰畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰴ㰹猯灵崾菣궂苣螃苣ⶫ⠱㈱Ⱙ⠴⤹㔬㜬ㄬⰳ㔱颃苣떂苣뎃ㄭⴰ苣뎃㈭ꒂ菣綫㐭ꪂ苣붂菣뾂菣ꊂ菣覃⴩ⵎ⡛刱⴩ⴱ孻ㄨ⥓ㄭ笭⡛匱⴩ⴱ孻㐨卢㠬ⱓ愸⥒㠭笭⡛匱㐬卡ㄬ愰⥒㘭銃菣궃苣랂ㄭ㐬ⵡ苣ꆃ菣ꮃㄭ㈬㌬㐬㐬ⱡⰹ〱ㄬ愰ꪂ苣뾂菣覃菣閃苣誃菣袃菣뎃ㄭꮂ菣鲃菣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫㐭Ɫⴸ苣ꆃ菣ꮃ㐭Ɫⰵⰶⰷⰸ愸㤬ㄬⴰ苣꾂苣銃菣궃菣Ꞃ菣뎃菣것菣ⶳⴳ苣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫苣膃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽ⴲ菣膃菣鞃菣钃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽ⴵㄨ笭ⴲ⡛ⴱ孻ㄳ㌬ⰲ㌳㌬ⰴ㔳㌬ⰶ㜳㌬ⰸ㤳㐬ⰰㄴ㐬ⴲ菣螃苣銃菣궃苣랂ㄭⰰ㔱㈬ⰰ㔲㌬ⴰ菣뎃苣궂苣⢹菣覃菣궂苣ꆃ菣ꮃ⴩ⰲⰴⰷⰹ㈱ㄬⰴ㜱ㄬⰹ㈲㈬ⰴ㜲㈬ⴹ菣螃苣ꪂ苣떂菣鞃苣랂苣궃㉛⸶⸲⸲㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰳ㰶猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰸㄱ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰳ㘱⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰸㄲ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㈾ⰳ㘲⼼畳㹰覃菣袃菣뎂菣뾂菣ⶳⴵ苣ꮃꆃ菣ꮃ⵽䠱㐬ⱈ䠵㘬ⱈ䠷㠬ⱈ䠹랂苣궃苣꾂苣宿嵤ㅛ㈬㌬袃菣ꊂ苣벃菣ⶫⴹ苣ꮃꪂ苣랂ꊂ苣袃苣龃菣綉㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣뎃苣螃苣뎃ㄭⴵ苣龃菣⦉菣뎃菣ꮃⵝⰳⰶⰹ㈱蚃菣ꦃ苣궂苣骃菣뾂菣ꮂ菣ⶳ㔱ꊂ菣覃㈨搹⤳戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯邼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㐴㰵愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯銼볯醀⼼䥄㹖 隌郥ꦉ㤲㍤臣膀㤲苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁룤겈髧讉ꃩ꺁뻥ꮁ胣붙觨꺁鯥鎽㠨杭胣㎁薼迥螎ꢁ臣ꚁ뻥覂苣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯颼胣㲑䐯噉ਾ㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㌱㰵猯扵䠾猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㘹⼼畳㹢㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㈱⼼畳㹢㱏畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㤴⼼畳㹢胣뺲꿥ꪳ蟩㪏㈠㘷⸹芀��⁉⽭㩺ㄠ㠳⸵⠹⽍⬲⤱猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰胣㲂牢ਾ䐼噉邀賥钼볯邼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㘴⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯馼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㔵㰩牢ਾ†鳦龮雦设臣膀菣뎃苣벃骃苣궃菣覃㤲㑤苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁雦閳苣몤臣ꚁ臣讂胣겜껥붖뻤꾁胣뎛ꞁ믤ꪕ臣ꚁ臣讂賥袐觧ꮁ꣨誏臣ꚁ臣讂胣ં䐼噉邀볯閼볯邼胣㲑䐯噉ਾ鎃苣꾂菣宭⸶⸱崰菣誃㐭ꒂ菣ⶳⴹ苣ꮃꆃ菣ꮃ丠⠭㐱笭⡛刱⴩ⴱ孻ㄨ⥓ㄭ笭⡛匱⴩ⴱ孻㐨卢㠬ⱓ愸⥒㠭笭⡛匱㐬卡ㄬ愰⥒㘭銃菣궃苣랂ㄭ㐬ⵡ苣ꆃ菣ꮃㄭ㈬㌬㐬㐬ⱡⰹ〱ㄬ愰ꪂ苣뾂菣覃菣閃苣誃菣袃菣뎃ㄭꮂ菣鲃菣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫㐭Ɫⴸ苣ꆃ菣ꮃ㐭Ɫⰵⰶⰷⰸ愸㤬ㄬⴰ苣꾂苣銃菣궃菣Ꞃ菣뎃菣것菣ⶳⴳ苣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫苣膃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽ⴲ菣膃菣鞃菣钃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽ⴵㄨ笭ⴲ⡛ⴱ孻ㄳ㌬ⰲ㌳㌬ⰴ㔳㌬ⰶ㜳㌬ⰸ㤳㐬ⰰㄴ㐬ⴲ菣螃苣銃菣궃苣랂ㄭⰰ㔱㈬ⰰ㔲㌬ⴰ菣뎃苣궂苣⢹菣覃菣궂苣ꆃ菣ꮃ⴩ⰲⰴⰷⰹ㈱ㄬⰴ㜱ㄬⰹ㈲㈬ⰴ㜲㈬ⴹ菣螃苣ꪂ苣떂菣鞃苣랂苣궃㉛⸶⸲⸲㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰳ㰶猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰸㄱ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰳ㘱⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰸㄲ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㈾ⰳ㘲⼼畳㹰覃菣袃菣뎂菣뾂菣ⶳⴵ苣ꮃꆃ菣ꮃ⵽䠱㐬ⱈ䠵㘬ⱈ䠷㠬ⱈ䠹랂苣궃苣꾂苣宿嵤ㅛ㈬㌬袃菣ꊂ苣벃菣ⶫⴹ苣ꮃꪂ苣랂ꊂ苣袃苣龃菣綉㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣뎃苣螃苣뎃ㄭⴵ苣龃菣⦉菣뎃菣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣袃菣螃苣뎃ㄭꒂ菣⦫苣ꮃ菣ꆃ菣袃㈨搹⤴戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯醼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㐴㰷愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯鎼볯醀⼼䥄㹖 隌郥ꦉ㤲㑤㈨杭胣ㆁ薼迥螎꾁胣㊁銂뷤붣臣讂臣膂臣肸裨蒚触蚠臣貾臣膀駧늉臣몛뷤ꢁ臣ꚁ뻥覂苣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯銼胣㲑䐯噉ਾ㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㐱㰸猯扵䠾猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㈾㌱⼼畳㹢㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㔱⼼畳㹢㱏畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㌵⼼畳㹢胣뺲꿥ꪳ蟩㪏㌠㐰⸸芀卅⁉⽭㩺ㄠ㄰⠷⽍⬳⤱猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰胣㲂牢ਾ䐼噉邀賥钼볯銼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㠴⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯鎼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㘵㰩牢ਾ†鳦龮雦设臣膀菣뎃苣벃骃苣궃菣覃㤲銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀鳦龮雦设臣膀鯥㢳臣颻闧鞁臣蒁苣隌郥ꦉ臣肨迥鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯鎼볯醀⼼䥄㹖ㄊ⠭ⴴ㉻ꊂ苣袃菣랂苣궃ㅛ⸰⸴⸰㰰畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰴ㰹猯灵崾菣궂苣螃苣ⶫ⠱㈱Ⱙ⠴⤹㔬㜬ㄬⰳ㔱颃苣떂苣뎃ㄭⴰ苣뎃㈭ꒂ菣綫㐭ꪂ苣��붂菣뾂菣ꊂ菣覃⴩ⵎ⡛刱⴩ⴱ孻ㄨ⥓ㄭ笭⡛匱⴩ⴱ孻㐨卢㠬ⱓ愸⥒㠭⠭孻ㄨⱓ愴ⱓ〱剡⴩ⴶ菣覃菣궂苣⶷ⰱ愴뢂菣膃菣ⶫⰱⰲⰳⰴ愴㤬ㄬⰰ〱ⵡ苣꾂苣銃菣궃菣Ꞃ菣뎃菣것菣ⶳⴱ苣ꮃ鮃菣ꂃ苣龃菣綉苣ꮃ菣讃菣⦫㐭Ɫⴸ苣ꆃ菣ꮃ㐭Ɫⰵⰶⰷⰸ愸㤬ㄬⴰ苣꾂苣銃菣궃菣Ꞃ菣뎃菣것菣ⶳⴳ苣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫苣膃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽ⴲ菣膃菣鞃菣钃菣嶫苣ꮃ菣ꊃ苣ꮃ⵽ⴵ㉻嬭ㄨ笭㍛ⰱ㈳㌬ⰳ㐳㌬ⰵ㘳㌬ⰷ㠳㌬ⰹ〴㐬ⰱ㈴覃菣ꮂ菣覃菣궂苣⶷〱ㄬⰵ〲㈬ⰵ〳骃菣뾂苣릂銃菣궃苣랂菣膃菣⦫㈭㐬㜬㤬ㄬⰲ㐱ㄬⰷ㤱㈬ⰲ㐲㈬ⰷ㤲覃菣ꮂ苣궂苣颃菣뾂苣꾂菣宭㘲㈮㈮㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾㘬⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㠾ㄬ㰱猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㌱ㄬ㰶猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㠱㈬㰱猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㌲㈬㰶猯灵崾菣蚃菣ꦃ苣뎃苣뎃㔭ꒂ菣嶫菣膃菣綫ㄭⱈ䠴㔬ⱈ䠶㜬ⱈ䠸㤬ⵈ苣꾂菣ꪂ苣뾂摛孝ⰱⰲ崳菣ꪃ苣뺂菣ꮃ㐭ꒂ菣⦫苣궂苣嶷苣뮂菣ꊂ菣覃骃菣膃菣嶫㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣뎃苣螃苣뎃ㄭⴵ苣龃菣⢉㤲⥨戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯醼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㐴㰹愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯鎼볯醀⼼䥄㹖 隌郥ꦉ㤲⡨㠲杭胣㎁薼迥螎꾁胣㊁銂뷤붣臣讂臣膂臣肸裨蒚触蚠臣貾臣膀駧늉臣몛뷤⢓菣ꪃ苣뺂菣ꮃ臣誁臣讂뷤꺽闧Ꞁ뷤꺁럦袐觧⦩臣鞁臣鞾苣貂臣芀㰊䥄㹖胣邼볯鎼볯醀⼼䥄㹖䌊猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㜳⼼畳㹢㱈畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㤱㰱猯扵举猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㰵猯扵伾猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㐾㰸猯扵膀닧蚯돨辇›㠲㐱㌮胣䖂䥓洠稯›㐱㤰䴨㈯ㄫ㰩畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰫猯灵芀戼㹲㰊䥄㹖胣隌볯醼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㔴㰰愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯鎼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㖋⤷戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣㊉樹苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁雦閳苣몤臣ꚁ臣讂胣겜껥붖뻤꾁胣뎛ꞁ믤ꪕ臣ꚁ臣讂賥袐觧ꮁ꣨誏臣ꚁ臣讂胣ં䐼噉邀볯閼볯颼胣㲑䐯噉ਾ㑻嬭㈨⥓㈭嬭㈨⥓㈭嬭㈨⥒㈭嬭ⴱ㐨笭ⴲ苣뚂菣ꪃ苣꾂菣宭〱㐮〮〮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㐾㤬⼼畳㹰颃苣떂菣ꮂㄭㄨ⤲㐬㤨Ⱙⰵⰷ㌱ㄬⴵ菣궂苣ꢂ菣ⶳ〱ꒂ菣ⶳⴲ苣ꮃ⵽ⴴ苣궂苣隃苣뎃苣龃菣⦉㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣뎃苣螃苣뎃ㄭⴵ苣龃菣嶉㘭笭ⴲ⡛ⴱ孻ㄳ㌬ⰲ㌳㌬ⰴ㔳㌬ⰶ㜳㌬ⰸ㤳㐬ⰰㄴ㐬ⴲ菣螃苣銃菣궃苣랂ㄭⰰ㔱㈬ⰰ㔲㌬ⴰ菣뎃苣궂苣⢹菣覃菣궂苣ꆃ菣ꮃ⴩ⰲⰴⰷⰹ㈱ㄬⰴ㜱ㄬⰹ㈲㈬ⰴ㜲㈬ⴹ菣螃苣ꪂ苣떂菣鞃苣랂苣궃㉛⸶⸲⸲㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰳ㰶猯灵⸾㰲畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ⰸㄱ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾⰳ㘱⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪��潧樮≰ㄾⰸㄲ⼼畳㹰㈮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㈾ⰳ㘲⼼畳㹰覃菣袃菣뎂菣뾂菣ⶳⴵ苣ꮃꆃ菣ꮃ⵽䠱㐬ⱈ䠵㘬ⱈ䠷㠬ⱈ䠹랂苣궃苣꾂苣宿嵤ㅛ㈬㌬袃菣ꊂ苣벃菣ⶫⴴ苣ꮃꪂ苣랂ꊂ苣袃苣龃菣綉菣궂苣뎃苣龃菣嶉㌭ꆃ菣ꮃ菣뾂菣ꊂ菣覃ⵝⴵꮂ菣邃菣ꒂ菣ꊂ菣躃骃菣뾂菣ꊂ菣覃閃苣讃菣綫菣膃菣₫ⵎ⡛匱⴩ⴱ孻㐨卢㠬ⱓ愸⥒㠭⠭孻ㄨⱓ愴ⱓ〱剡⴩ⴶ菣覃菣궂苣⶷ⰱ愴뢂菣膃菣ⶫⰱⰲⰳⰴ愴㤬ㄬⰰ〱ⵡ苣꾂苣銃菣궃菣Ꞃ菣뎃菣것菣ⶳⴱ苣ꮃ鮃菣ꂃ苣龃菣綉苣ꮃ菣讃菣⦫㐭Ɫⴸ苣ꆃ菣ꮃ㐭Ɫⰵⰶⰷⰸ愸㤬ㄬⴰ苣꾂苣銃菣궃菣Ꞃ菣뎃菣것菣ⶳⴳ苣ꮃꮂ菣邃菣ꒂ菣綫㈭銃菣궃苣랂苣膃菣嶫苣ꮃ菣ꆃ菣袃㈨樹㰩牢ਾ䐼噉邀賥钼볯閼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰ㄵ⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯馼胣㲑䐯噉ਾ†賥袐觧㊩樹ㄨ洰膀㈴볯躏軧⦇臣膀㤲苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁룤겈髧讉ꃩ꺁뻥ꮁ胣붙觨꺁鯥鎽袃菣ꊂ苣벃菣ꮁ臣醁苣趽뷧낕胦鎽臣랷郥ꦉꢁ臣ꚁ뻥覂苣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯邼胣㲑䐯噉ਾ㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㌱㰸猯扵䠾猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㌹⼼畳㹢㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㔱⼼畳㹢㱏畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㤴⼼畳㹢胣뺲꿥ꪳ蟩㪏㈠㐸⸴芀卅⁉⽭㩺ㄠ㈴⸴⠳⽍⬲⥈猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰胣㲂牢ਾ䐼噉邀賥钼볯隼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㈵⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯醼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㠵㰩牢ਾ†鳦龮雦设臣膀菣뎃苣벃骃苣궃菣覃㌳苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁雦閳苣몤臣ꚁ臣讂胣겜껥붖뻤꾁胣뎛ꞁ믤ꪕ臣ꚁ臣讂賥袐觧ꮁ꣨誏臣ꚁ臣讂胣ં䐼噉邀볯閼볯銼胣㲑䐯噉ਾ㑻嬭㈨⥓㈭嬭㈨⥓㈭嬭ⴱ㐨笭ⴲ苣뚂菣ꪃ苣꾂菣宭〱㐮〮〮猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⠾ⰴ⤹⼼畳㹰颃苣떂菣ꮂㄭㄨ⤲㐬㤨Ⱙⰵⰷ㌱ㄬⴵ菣궂苣ꢂ菣ⶳ〱ꒂ菣ⶳⴲ苣ꮃ⵽ⴴ苣궂苣隃苣뎃苣龃菣⦉㌭㘬㤬ㄬⴲ菣袃菣ꪂ苣떂菣뎃苣螃苣뎃ㄭⴵ苣龃菣嶉㌭ꆃ菣ꮃ菣뾂菣ꊂ菣覃ⵝⴵꮂ菣邃菣ꒂ菣ꊂ菣躃骃菣뾂菣ꊂ菣覃閃苣讃菣綫菣膃菣₫ⵎ㉻嬭ⵎ菣膃菣⢫ⴳ㍻嬭ⴳ苣膃菣ⶫⴸ袃菣閃菣ꪂ菣ꆃ菣ꮃ궂菣ꪃ菣ⶳⴴ苣ꮃ閃苣躃苣랂馃菣벂菣⦳苣ꮃ菣뎃苣龃菣嶉苣膃菣綫苣ꮃ菣ꆃ菣袃㌨⤳戼㹲 丠⠭ⴲ苣龃菣ꢂ菣ꮃ⴩ⴳ㌨⠭ⴳ苣膃菣ⶫⴸ袃菣閃菣ꪂ菣ꆃ菣ꮃ궂菣ꪃ菣ⶳⴴ苣ꮃ閃苣躃苣랂⴩ⵎ菣膃菣馃菣벂菣릂菣鮃菣ꊂ菣覃㌨⤱臣膀塌칒ꮁ꿥鞁臣ㆦ㔮䵮迥뎁塌칒ꮁ꿥鞁臣ㆦ渲꺁뗧袐ꛨ貒胦銂鳦馁苣랼諥ꪁ塌ꊂ苣讃苣袃臣鞁臣놠釥閁苣龁䈨潩潣橮杵䌠敨⹭㈠㄰‵㘲ㄨ⤱‬㈲㘱㈭銂迥ꞅ芀㰊䥄㹖胣邼볯钼볯醀⼼䥄㹖 ㈠臣꺁苣龃菣ꮂ菣鞃菣뎃苣趏뿥銂믤馁苣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣㎉꺁郥邈臣뎛ꮁꓧ閁苣ꚁ��讂胣䢂䉏ꮁ苣ꎁ臣ꚧꫥ閁苣讂ㄳ臣䚨潭ⵣ䍖倭䉁倭偎臣꺁곧肸臣ꊂ菣覃苣莃菣ꪃ菣낂迥鲿臣膀臣꺁뻥꺁ꇥ몟胦ꆝ믤许臣꺁浆捯蓨鶿귨ꮁ苣誂胣㎁貁뷥邈臣貂胣㎁ꢁ룥ꦲ臣䒮䉉䍁猭捵倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㐾⼼畳㹢뢅臣꺁곧貺臣ꊂ菣覃苣莃菣ꪃ菣낂迥鲿臣袂苣膀㌳臣ꊽ裦閁苣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯钼胣㲑䐯噉ਾꖷ꣧ㆋ⤺戼㹲 ꆬ臣膀䵄⡆洵⥌룤꺁ㄳ〨ㄮ朴胣め㈮洶潭⥬臣랷郥ꦉ臣膀浆捯瘭ⵣ䅐ⵂ乐⡐⸰㘲膀⸰㐳浭汯膀佈瑂㐨洶膀⸰㐳浭汯膀迥뎁䥄䕐⡁㤸杭胣め㘮洸潭⥬苣犒ꞁ럦ꂊ臣龁胣趏뿥늶苣㊒鲀㔲蓢ꞁ㐲駦鎖鋦貋臣龁뻥膀䍌䴭蚈黦ꮁ苣誂胣㎁貁껥ꢅ臣袶단閁苣龁胣趏뿥랷郥ꦉ臣膀瑅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㈾⼼畳㹢䡎〨㔮䱭銂럦ꂊ臣膀뻥覂苣龁럦袐觧銂㔲蓢ꞁ臣覂臣㊫駦鎖鋦貋臣龁胣䲂ⵃ卍臣袂苣膀浆捯鿥貁臣꺁駦ꮁ껥ꢅ臣꒙軥閁苣ꚁ臣讂臣ꢁ臣몤臣貂臣芀迦몙胦ꦉ돨銂鳧목룤ꞁ駩뮎臣膀껦ꎸ苣蚈迥䢖䱐⡃雦閳⥁臣袂苣뺲ꏨ馁苣ꢁ胣㎁⠲㔷杭胣㎁薼迥螎貁駧늉臣몛뷤ꢁ臣ꚁ뻥覂苣龁胣䖂䥓洠稯›㌹⠵⭍⥈猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰胣㲂牢ਾ䐼噉邀賥钼볯鞼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㌵⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯閼胣㲑䐯噉ਾꖷ꣧㊋⤺戼㹲 䐠䉉䍁猭捵倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㐾⼼畳㹢뢅㠨〮杭胣ㆁ츴涼汯꺁䵄⡆洱⥌뫦늶臣膀䅈啔㠨〮杭胣㊁츰涼汯銂瑲臣뮷諥鞁臣芀럦袐觧銂㔲蓢ꞁ芙雩릒详鞁胣鶁臣貾胣늩럦袐觧ꮁ胣㎁⠲㌱杭胣ㆁ츴涼汯誏臣咳䅅ㄨ洳膀㠲볎潭⥬苣뮷諥鞁臣芀럦袐觧銂㔲蓢ꞁ臣覂臣㊫駦鎖鋦貋臣龁胣㎂貁뛦뮲臣貂苣뺁臣膀迥鲿뛦銂䍌䴭ꮁ苣誂菣讃苣ꪃ菣낂臣龁胣꺏駧Ꞁ觧ꪳ苣龜ꧧ궸臣꒙軥鞁胣议룦銂裥随偈䍌릖돦䊕ꮁ苣誂닧붣臣讂臣膀㌳㜨〮杭胣㎁薼迥螎貁駧늉臣몛뷤ꢁ臣ꚁ뻥覂苣龁胣䖂䥓洠稯›㌷⠵⽍⬲⥈猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰胣㲂牢ਾ䐼噉邀賥钼볯颼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㐵⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯隼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㤵㰩牢ਾ†ꇨ㊨臣뺁臣膂苣貂臣蒁苣꺁臣膀菣뎃苣벃骃苣궃菣覃㈲胣㊁膀㜲胣㊁膀迥뎁㌳臣讧胩ꞁ臣讂胣ꢡꮁ臣ꢁ苣覂苣ꚁ臣讂臣꾁胣늩菣뎃苣벃骃苣궃菣覃臣蚈귥込胣蚈귥辇胣袨껧䲗杯ꒀ胣䶁膀迥뎁偈䍌臣邵黦ꞁ臣讂胣㲂牢ਾꇨ㖨볯ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣꺁賥ꚭ髧ⶄ觧蚐髧릉胦㲧牢ਾ䐼噉邀ꇨ鞼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㔵⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㘵⼼㹡⼼䥄㹖㤊볯⮜⬫※鲼⬫볯㦜※㈭볯⮜볯㊜㰊䥄㹖胣邼볯钼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㚋⤰戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣膃苣벃菣ⶫ菣것苣龃菣趏뿥銂铧蒁臣鞊뷤ꮁ鷩��ꢃ뷤릉闧蒚臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣겖觧銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯钼볯醀⼼䥄㹖 鞊뷤랂苣蚃苣뎃苣讻臣讂苣뎃苣ꖃ苣벃苣ꞃ菣銂胣䆁捤瑥楲⡳駧늌闥馨颧䑁銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦ꢁ郥颧臣릖돦銂铧蒁臣膀ꖷ꣧ꞁ껥붖臣龁䴨汯‮桐牡⹭㈠㄰ⰵㄠ⠲⤶‬㠱㌶㜭銂迥ꞅ芀㰊䥄㹖胣邼볯钼볯醀⼼䥄㹖 ꊃ菣꾂菣벃菣ꮃ諦鎽洨扁銂苣膃苣릂菣ꒂ菣벃菣袏臣咯䕃ꞁ苩莅臣讂胣늂菣뺿臩貾胣䒁卍뚺뛦궸臣㊮挴苣蒂藥閁苣龁諦鎽臣뮷諥鞁胣랷郥ꦉ苣ꦁ裥ꪁ䡰臣뾪闦馁苣芀迥鲿뛦銂鋦貋臣鮁臣誁臣芀뻥覂苣讂苣뎃苣ꖃ苣벃菣銂䕓ꮁ苣誂닧붣臣讂胣溂䅣䍄臣겸껥閁苣龁郥覅뫥ꚸ臣ꮁꧨ鞊뷤誏臣㊳挴臣鮸ꇨ芿闦銂铧蒁臣膀䅄⡒噕ꒀ苣몱껥馁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯閼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㚋⤱戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣ꢅ뷤ꢁ臣ꚁ胣骃苣궃菣覃臣鞊뷤袏臣鶁臣鞊軥邵郥궖觧뢁臣ꢃ뷤릉闧蒚苣뎃苣ꖃ苣벃苣ꞃ菣꺁雦閳苣몤臣ꚁ臣讂胣겜껥붖뻤꾁胣뎛〱臣肨迥鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯閼볯醀⼼䥄㹖 芁苣设臣誁臣ꚁ胣ꢃ뷤릉闧蒚苣뎃苣ꖃ苣벃菣銂胣꺾铧ꦉ菣ꦃ菣릂苣ꮃ苣龃菣벃苣⢼呍⁇䍅㈠㌮㈮ㄮ膀敚楤慲‬慄浲瑳摡ⱴ䜠牥慭祮ꮁ苣讂ꖻ뻥膀胣䶌䝔臣몟臣辁胣⦍丠㤲儷諦鎽臣㊮럥讨苣뎃苣ꖃ苣벃苣ꞃ菣ꮁ苣誂铧龔臣龁胣견룤꺁럥讨臣膀苣뢂菣ⶉ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ苣龃菣ꪁ臣꺁냥蚈귥꺁ꫧ뚄ꓥ낕諦鎽臣꺁呍ꮁ鿥ꖁ臣떅듧蒚뗧袐臣芁苣芀곧貺臣ꖷ꣧꾁胣宁⬲崳믤ꂊ鋧隌胣设臣낁胣ꊂ苣覃臣랂苣궃苣꾂菣뎃臣꺁雩ꞁ臣ㆮ㌬貏ꗦ邭믤ꂊ鋧隌ꖈ郥膀諩銂郥뺁臣蒁苣ꪃ菣꾂賥ꚭ銂믤馁苣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣꺁苣뢂菣颮菨隌諦鎽臣꺁뗧袐苣ꦈ铧鞁臣芀慂歳湩‬⹊䴠㬮倠敲捳敨Ⱳ䨠‮⹁※慌杵汨湩‬⹓吠㬮䄠慧摲‬⹎䨠㬮䌠慨杮‬⹐嘠㬮䴠汩敬Ⱳ䤠‮⹁※潌‬⹁※潃敤汬Ⱪ䨠‮⹁※敂瑲穯楺‬⹃删꺁雦꺌胣傁䅎⁓〲㜰‬〱⠴㌴Ⱙㄠ㜶㌹㜭苣芏藧閁苣龁臣芀鯥ㆳꮁꓧ閁苣ꚁ臣讂臣꾁胣宁⬲崳믤ꂊ鋧隌苣讻臣ꚁ苣뢂菣颮菨隌諦鎽臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣䒟䉉䍁菩蚈苣覜臣讂菣뎃苣벃骃苣궃菣覃臣设臣芁苣芀臣꺁菣궃苣릂臣袂苣膀菩趽觧낕髧讁臣隌귥辇ꯨ蒚苣뎃苣ꖃ苣벃菣貁듧㖄鲀〸볯꺁跥ꊛ迥螎臣邏뻤閁苣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯銼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㈶㰩牢ਾ†鳦龮雦设臣膀苣뢂菣颮菨隌諦鎽雨ꦉ苣뎃苣ꖃ苣벃菣銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯閼볯醀⼼䥄㹖 䈠灵⡈闥馨⠩䡰㘠㔮胣㢜〮궸臣ꊂ苣ꪃ苣랂菣隌菣袃諦鎽杉⡇杉ㅇ胣䦁䝧ꪁ臣⦩迥꾁菣袃杉ㅇ苣ꒂ苣뾂苣鞃苣꞉〲ꊃ菣鎽蟩꺁苣뢂菣ⶉ偤䝅猼扵砠汭獮樺��栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢ꊂ菣뎃䴨鶼ㄲ⸸㘲⽧潭⥬臣랷郥鞁臣芀뻥覂苣龁뫦늶苣袃菣뎃苣낂菣뾂菣誃菣벂㈨唵洯㭌諦鎽洱鎽臣誂唵䴠䝔胣媁摥物ⱡ䐠牡獭慴瑤‬敇浲湡붣迥꾁橁湩浯瑯Ɐ䨠灡湡ꏨ⦽臣랷郥馁苣ꢁ胣め㔮胣㖜杭洯꺁鳦芵뿦ꚺ臣鞊뷤貁뻥覂苣膀ꧨ뚺뛦銂䡰㘠㔮胣㢜〮臣궶賦鞁胣鶁臣貾胣辩苣讁臣꾌鯧閁臣ꪁ臣覂胣㎁莄臣㒧胣㊜芙雩ꒂ菣궂菣馃菣袃臣龁胣趏뿥銂卅ⵉ卍臣袂苣ꊃ菣뾂菣뎃苣鞁臣芀迥鲿臣芵뫤鞁臣ꢁ臣膀뷤蚈臣ꊂ菣뎃迥뎁呍銂䕓⡃鯥ㆳ銂迥ꞅ袏臣뢅胦邃菣閃苣벃臣뚺蟥鞁胣鶁臣貾胣袃菣릂菣莃菣ꆂ菣⢼䡰⤸臣궸鋥馁苣鞃菣蚃苣뎃ꮂ菣ꂃ臣袂苣꒙軥馁苣ꢁ胣ꊂ苣覃껥붃賥鞊뷤貁铧邈臣貂臣芀臣꺁铧邈觧銂䑓ⵓ䅐䕇뎛ㄱ苣芏藧⦧迥뎁卅ⵉ卍뎛㌱苣芏藧⦧臣袂苣ꎧ黦鞁臣芀ꧨ鞊뷤꺁ꒁ臣ꢃ뷤銈㉑㔹迥뎁㉑㜹裢ꮁ믤ꂊ臣貂臣ꊂ苣覃搭䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ苣龃菣꾁胣邵黦ꢁ臣ꚁ胣㒁䅄꺁苣낂菣뎂苣ꮃ賥鞊뷤ⶓ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ苣뢂菣뎂菣뢂菣늂菣袃臣ꒁ臣ꚁ胣㢁㐰慄臣鞢諥銂苣龁苣鞁臣芀苣뎃苣ꖃ苣벃苣ꞃ菣ꢃ뷤銂胣袃菣鞃苣뎃뛦隌臣貂臣趇軩꺁菣鞃菣覃藩鞈菣莃菣뎃苣ꮁ苣誂胣㒁䅄꺁苣뢂菣颮菨隌諦鎽臣ꒁ臣ꚁ胣䖁充猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰䰾湩敫㱲猯灵夾㱑畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢楌歮牥⼼畳㹰呓剙臣貐껥鞁胣몢ꫨ鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯閼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㚋⤳戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣꾂菣莃苣隌귥趏뿥銂铧蒁臣겖觧ꢁ諦鎽臣꺁菩趽觧낕髧뎂菣뢂菣늂菣袃苣鲽ꏨ馁苣龁苣꺁雦閳苣몤臣ꚁ臣讂胣ં䐼噉邀볯閼볯閼胣㲑䐯噉ਾ†ꇨ㚨臣亮㤲儷ꫧ뚄ꓥ낕䔨颻闧⦪苣ꮐ鳦馁苣銃菣䦈䝧䤨䝧膀杉㑇臣ꦁ銂鳦馁苣ꢃ뷤릉闧蒚苣낂菣뎂苣ꮃ賥鞊뷤겖觧뎂菣뢂菣늂菣袃苣膀苣ꮃ苣뎃郥覜菣뎃苣벃骃苣궃菣覃苣覜臣讂苣뢂菣颮菨隌諦鎽雩꺁㉛㌫꾂菣莃苣趏뿥ꮁ苣誂ꫨ붣臣龁胣ꢡꮁꓧ閁苣ꚁ臣讂苣蚁臣膀諦䢗牥ⴲ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵銂ꇨ㊨臣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣⢉偌㨩䰠㉐胣䲁㍐胣䲁㑐胣䲁㕐胣䲁㙐胣䲁㝐胣䲁㡐胣䲁ㅐ膀偌ㄱ胣䲁ㅐ膀偌㌱胣誏臣䲳ㅐꮁ苣뎃苣ꖃ苣벃菣鞁臣芀ꇨ㚨臣몤臣貂臣蒁苣袂臣ꮁ胣鞊剐剌倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢苣ꢡ꺁偌›偌膀偌膀偌膀偌膀偌〱胣䲁ㅐ膀偌㈱胣䲁ㅐ膀迥뎁偌㐱臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣龁胣ꢡꮁꓧ閁苣ꚁ臣讂苣蚁臣膀苣ꒂ苣뾂苣鞃뺯藧⶧䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵銂ꇨ㊨臣䲮㉐��䲁㍐胣䲁㑐胣䲁㕐胣䲁㙐胣䲁㝐胣䲁㡐胣䲁ㅐ膀偌ㄱ胣䲁ㅐ膀偌㌱胣誏臣䲳ㅐꮁ苣뎃苣ꖃ苣벃菣鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯閼볯醀⼼䥄㹖 뎂菣뢂菣늂菣랂菣뎃臣龁苣ꮁ胣ꊂ苣覃껥붃賥ꊂ苣ꪃ苣랂菣隌菣袃杉ㅇ諦鎽洨扁倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢誏臣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣⢉偌뎂菣뢂菣늂菣袃苣膀냦Ꞁꫥ鎽设臣낁胣傁卂胣㖁볯낂菣뮂菣벃菣銂郥覜臣讂䉐膀䉈⥓룤꺁䅭ⵢ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵⠾鲀洳⽧䱭銂胣䒁卍膀䵄膀迥꾁䵄ꪁ臣꺁ꗥꦁ臣覜ꧦ뚺ꫥꮁ뫦ꎧ臣龁觢㚧菣ꮃ뷥辇臣䲮ꢁ臣节臣㊫莄胣㎜莄臣㚧駦鎖臣辂臣ꎁ臣ꒂ菣궂菣馃菣袃臣讂臣ꢁ臣袂苣뾪ꏨ鞁臣⢟臣ꪁ苣ꆁ胣趏뿥랷郥ꦉ臣膀鲀〲볯꺁鳦龩뫦銪胣皁瘯苣ꮐ鳦馁苣⦋胣趏뿥꺁胩財苣䖒䥓䴭ꮁ苣誂菣讃苣ꪃ菣낂臣膀䅭ⵢ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵꺁곦芦臣膀苣뎃苣ꖃ苣벃苣ꞃ菣꺁뗧蚺苣몤臣龁胣馽裥ꪁ蟩꺁偌迥뎁鳦龩뫦銪苣膀䉐ꮁ苣讂뫦몇苣讻臣讂䕓ꮁ苣讂臣膀迥꾁藩Ꞁ菣莃菣ꆂ菣ꮁ苣讂뫦몇臣膀臣꺁뻥꺁菣ꪃ苣⢹䡰㠠〮ꮁ苣讂룤貒苣讻臣讂菣궃菣ꒂ菣䆳苣ꦃ菣ꮁ苣誂駩뮎臣龁胣뺲ꏨ閁苣龁苣뎃苣ꖃ苣벃菣銂胣厁䍅胣厁卄倭䝁膀迥뎁卅ⵉ卍臣袂苣ꎧ黦鞁臣芀ꇨ㚨臣몤臣貂臣蒁苣꺁臣膀꿥鲿臣讂偌铧ꖝ臣麝듧麃若뎮胦鞊뷤뎂菣뢂菣늂菣袃渨䅣䍄膀臣꺁裥邭蟩膀迥뎁卅ⵉ䅄ꒀ臣ꪃ苣袃臣芁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯閼볯醀⼼䥄㹖 ꢡꮁ臣ꢁ苣覂苣ꚁ臣讂臣꾁胣뢣臣鞊뷤⢓諦䢗牥鞊뷤膀諦傗䱒鞊뷤膀迥뎁苣ꒂ苣뾂苣鞃꿥ꞅ諦鎽膀苣뢂菣颮菨隌諦鎽鞊效㉲諦鎽倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢胣鞊剐剌諦鎽倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢胣誏臣ꊂ苣붂苣ꒂ菣뺯藧鞊뷤ⶓ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵膀룤뎁臣鎁苣覂臣鞊뷤겖觧뎂菣뢂菣늂菣袃臣芁苣芀ꇨ㚨臣誁臣ꚁ胣䆁꾁胣鞊뷤銂ꇨ鞁胣涁扁臣膀菣躃苣궃菣誃菣鞊뷤銂ꇨ鞁胣䆁ⵢ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵꾁胣ꊂ苣覃껥붃賥鞊뷤銂ꇨ鞁胣䆁ⵢ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵꾁胣傁䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢苣骃菣떂菣銂鳦馁苣ꊂ苣覃껥붃賥鞊뷤銂ꇨ鞁胣溁䅣䍄臣膀鷩내菨랂껥Ꞁ諦鎽雨ꦉ苣뎃苣ꖃ苣벃菣銂ꇨ馁胣뾾껥꺁臣膂臣膀諦䢗牥ⴲ偌堨誏臣鞊剐剌䰭⡐��铧麪뷤뮳裢ꢡ誏臣겜飦내鯦궸臣隻臣ꢡ룤꺁苣꺁裢⢒臣鎁臣膀꾁觧骮臣ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣⢉뻤袁臣膀偌袏臣䲯ㅐꪁ臣⦩苣몤臣⦙臣膀鳦躘듧뢛臣風볨閁苣ꚁ臣讂䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵릂菣벃苣벃设臣낁胣鞊效㉲諦鎽倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢迥꾁諦傗䱒鞊뷤ⶓ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵놔鷦꺁苣꺁꺁귥ꢜ苣薌郥馁苣芀戼㹲ꢡ躼諦鎽胣鞊뷤ⶓ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵膀迥뎁塌ꊂ苣讃苣袃渭䅣䍄臣ꪃ苣袃戼㹲㰊䥄㹖胣ꢡ볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㔴㰷愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯閼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㚋⤴戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣鞊뷤誏臣麝듧麃若뎮胦鞊뷤겖觧뎂菣뢂菣늂菣袃渨䅣䍄銂觧뒾꟨邞臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯閼볯醀⼼䥄㹖 鞊뷤誏臣溳䅣䍄苣膀䑓ⵓ䅐䕇胣厁䍅胣誏臣䶳⡓卅⥉臣袂苣릉뻥ꎧ黦鞁臣芀諦䢗牥鞊뷤讁苣鶁臣ꊂ苣覃껥붃賥鞊뷤⢓諦䢗牥ⴲ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵⤾苣貵铧鞁臣鲽ꏨ閁苣龁ꇨ㚨臣鞊效㉲䰭㡐苣뎃苣ꖃ苣벃菣銂胣麝苩莅鷦뚻迥뎁苩莅鷦뚻룤ꞁꇨ辂苣龁䑓ⵓ䅐䕇뎛ㄱ膀䕓⡃鯥ㆳ⤲胣ꚸ臣ꮁ卅ⵉ卍뎛㌱ꮁ苣誂觧뒾꟨邞臣膀据䑁ꊽ裦꺁뗧蚺苣몤臣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯邼胣㲑䐯噉ਾ†䑓ⵓ䅐䕇苣ꢔ臣ꚁ胣䆁䍄臣貮藥Ꞁ迥뎁듧ꚺ苣ꎧ黦鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯隼볯醀⼼䥄㹖 芁苣릖돦ꮁ臣蒁臣膀䑓ⵓ䅐䕇鷦뚻臣꾁胣⢁⸱洰썭㆗Ꚃ苣ꮃ꺁潎敶⁸ⴴ〲볯袃菣릂낂菣랂菣늂菣궸臣것菣뎃꿦ꮁ菣벃菣ꎂ菣낂臣貂胣ㆁ〸膀〳洰ꞁ〸裥鎖돦開臣貂苣麝苩莅ꧨ首迥뎁苩莅ꧨ首㈨胣㒜볎⥧臣䊌湥档慍歲菣것苣蚃苣뎃菣뾂菣醃苣ꪳ菣肃菣⢼湉楶牴杯湥胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥ㆷ㜰㠴〭〱※⍌ㄠ㜶㤱㈲⤮臣ꢁ苣ꮁ郥뺁苣龁胣ꎧ黦ꢔꧨ首苣互癯硥菣ꪃ苣ⶹ苣ꪃ苣뎃䑓邃菣閃苣벃㈨韃⠩湉楶牴杯湥胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥䲷㉃㜶⤶苣ꢔ臣ꚁꫨ붣臣膀苩莅ꧨ首苣㆒薼臣㊮ꆃ苣鞃菣ꢂ苣躃菣ꮃ洨捥灡潴瑥慨潮⥬苣ꮐ鳦馁苣压卄ꧨ首菣莃菣ꆂ菣⢼쌲⦗苣ꢔ臣ꚁꫨ붣臣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯銼胣㲑䐯噉ਾ†鯥ㆳꮁ臣膀鷩蒂藥ꆝ믤誏臣蒂藥ꆝ믤许臣財苣貂臣原卄倭䝁ꞁ臣鞊뷤誏臣溳䅣䍄臣蚈귥辇臣覤賥銂ꓧ馁믤ꢡ髧ꪁ苣ꮃ臣몤臣貂臣蒁苣芀蟩階臣ꪳ蟩꾁胣뢣臣鞊뷤讁苣溉䅣䍄苣뎃苣ꖃ苣벃菣뢁臣鞢諥鞁臣芀黦让臣貂臣ꦉ돨꾁胣鲤蟥閁苣ꪁ臣ꎁ臣芀㰊䥄㹖胣邼볯隼볯醀⼼䥄㹖 뎛ㄱ臣몤臣貂臣蒁苣袂臣ꮁ胣厁卄倭䝁것菣뎃臣꾁��ꢡ꺁믤许臣것菣뎃꣦颭臣몟臣蒁臣膀믤许臣꺨臣ꮐ臣貂臣芀戼㹲ꢡ躼戼㹲㰊䥄㹖胣ꢡ볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㔴㰸愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣邼볯隼볯醀⼼䥄㹖 䄠䍄苣钴뫥ꮁ臣蒁臣厦䍅臣袂苣ꎧ黦鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯隼볯醀⼼䥄㹖 鞊뷤겖觧뎂菣뢂菣늂菣袃臣钴뫥銂뇦骮臣讂臣膂臣膀䕓銂껥붖臣龁胣蚈黦蒚䕓龮꣩銂胣垁瑡牥⁳〶薣뷧銂铧蒁臣膀畓数摲硥㈠〰ㄨ〮韃〳浣䠩ꮂ菣ꂃ臣膀⸰〸䱭蚈臣膵胩ꞁ胣傁卂瀠⁈⸷銂铧蒁臣膀껥財臣膀慗整獲㈠㤹‸䑐銂铧蒁臣膀믎볯㊝〸浮臣ꊃ菣뾂菣뎃苣鞁臣芀裥邞铧ꚩ雦꾁胣㎁鲀〱츰䲼臣ꚩ꣩ꚩ雦銂郥肂〲츰䲼臣傮卂瀨⁈⸷⤴臣覂꟦邈臣貂臣蒁臣芀裥随䕓뺲ꏨ銂胣䞁⁅效污桴慣敲ꏨ꺁䭁䅔ꏨ꺽苣ꢔ臣ꚁ胣厁灵牥敤⁸〲‰䝐㈨㘮韃〶浣ꮂ菣ꂃ臣膀洲⽌裥꺁뗦龀臣膀䉐⁓䡰㜠㐮臣뚺蟥閁臣ꚁꇨ蒁胣캁鶼㠲渰ꞁ菣讃苣ꪃ菣낂臣龁胣뎛㈱臣厮䍅臣邵黦꾁胣颍蟩鎽䅭誏臣鶁臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣뢅黥蒚臣鶿賦芙雩銂ꓧ鞁臣誁苣膀蟥蚛苣蚈꟨节ꓦ몇臣貂臣讁臣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯隼胣㲑䐯噉ਾ†諦鎽迥뎁䑁銂䍌䔭䥓䴭ꮁ苣讂苣뎃苣꾂菣ꪳ蟩蚈黦ꮁ苣誂裥邞臣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯鞼胣㲑䐯噉ਾ†雨ꦉ骃苣궃菣覃裥莸菣궃菣ꆂ苣ꮃ苣몱껥馁苣龁苣ꮁ迥뎁苣뎃苣꾂菣ꪁ䑁ꊽ藦꺁맥螝䅄銂꣨鞮臣讂臣膂臣膀䍌䔭䥓䴭ꮁ苣讂据䑁ꚩ雦꺁苣뎃苣꾂菣ꪳ蟩꺁룦骮苣財臣龁胣蒐胣꺁ꧨ鎨ꧨ首㈨鲀〵杮胣㖁䱵銂捁畱瑩⁹偕䍌倠潲整湩䈠䡅䌠ꮂ菣ꂃㄨ䬰瀠楳胣㎁〰蓢膀⸱츷涼胣㞁층涼韃〱洰㭭苣뾂菣낂闧랏㠱〶㌰ㄸ⤰臣薅ꇥ鞁臣芀蚈雩꺁蓨ꦡ臣貾胣뾂菣醃苣ꪳ苣뚺蟥閁臣膀돨辇苣骃苣袃菣銂慗整獲匠湹灡⁴㉇匭ꪳ蟩蚈黦袨臣袂苣늍뻥鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯隼볯醀⼼䥄㹖 螃苣뎃菣ꪃ菣벃苣ꞃ菣ꚇ郧鞁臣ꪳ蟩릂菣꾂菣ꮃ臣膀㐱ㄵ㈳慄臣蚈귥辇苣覜臣讂苣낂菣뎂苣ꮃ賥鞊䕈㉒諦鎽臣뮸ꛨ钃菣꾂迥뎁㐱㤵〳慄臣蚈귥辇苣覜臣讂臣꺁苣뢂菣颮菨隌諦傗䱒鞊뷤꺁룤膦菣벃苣銂ꓧ鞁胣鶁臣ꊂ苣ꪃ苣랂菣隌ꛨ鞊뷤ꢁ꿦莼臣ꚁ胣㞁㠹慄臣⢮臣ꪁ苣ꆁ胣蒐胣꺁苣낂菣뎂苣ꮃ賥鞊뷤ꮁ꿥鞁臣㒦苣龃菣ⶎ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ苣뢂菣뎂菣뢂菣늂菣랂菣뎃臣뢛뷥馁苣⦋ꋥꂊ苣몤臣龁胣뺁臣膀諦䢗剅ⴲ偌뎂菣뢂菣늂菣袃臣뮸ꛨ钃菣꾂臣膀㔱〶㜴慄臣蚈귥辇苣覜臣膀臣꺁苣낂菣뎂苣ꮃ賥ꪦ諦鎽臣钯볨鞁臣膀〱㌹䐱꺁馁臣辂臣膀郥薀臣ꊂ苣ꪃ苣랂菣隌臣뺯臣ꚁ‴偌뎂菣뢂菣늂菣랂菣뎃臣뢛뷥馁苣⦋ꋥꂊ苣몤臣龁胣ꢡꮁ臣ꢁ苣覂苣ꚁ臣讂苣蚁臣膀臣꺁雦뢛룤꺁ꓥꢃ裥꺁菩趽觧낕髧䆄䍄臣膀䐴剁苣覜臣讂胣ં䐼噉��邀볯閼볯馼胣㲑䐯噉ਾ†鷩ꢃ뷤릉闧蒚諦鎽雨ꦉ苣뎃苣ꖃ苣벃菣ꒁ臣ꚁ臣膀卅⁉ⵑ佔ꪳ蟩蚈黦ꮁ鿥ꖁ臣ꚁ胣䒁剁胥銂뇦骮臣龁胣䖂䥓儠吭䙏돨辇苣骃苣袃菣銂胣䶁硡浩浵䔠瑮潲祰苣ꮃ苣ꪃ苣ꂃ䴨獡䱳湹⥸苣ꢔ臣ꚁ胣벂菣뮛跨ꪳ蟩릂菣꾂菣ꮃ臣ꢁ菣뎂菣鲃菣ꖃ菣랂菣뎃蟥蚐臣龁胣鞾苣貂臣ꪳ蟩릂菣꾂菣ꮃ臣膀郥薀臣겖觧뎂菣뢂菣늂菣袃諦鎽臣蚈룥銂ꓧ鞁臣芀菣벃苣꺁鷩趩菣벃苣뎃菣벃苣꾁胣릉껥꺁雨ꦉ菣벃菣鞊뷤꺨臣뢛꿥蚈룥銂ꇨ馁胣醃菣뮂菣蚃菣뢂菣벃苣ꊝꧧ꺁菦놠迥뎁諦鎽룤꺁雨ꦉ菣벃菣낕苣ꢔ臣ꚁ胣뎹鷥䒇剁苣袨껧鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯鞼볯醀⼼䥄㹖 麝菩趽觧낕髧鞊뷤겖觧뎂菣뢂菣늂菣袃臣蒁臣꾁胣䖁䥓儠吭䙏돨辇裥邞臣몟臣蒁臣膀䅄ꒀ苣몱껥鞁臣芀卅⁉ⵑ佔ꪳ蟩릂菣꾂菣ꮃ苣膀慍楸畭⁭湅牴灯ꊂ菣뒂菣몂菣⢠慍獳祌确銂铧蒁臣膀苣궃鯩랍돨辇苣骃苣袃菣뢁臣螃苣뎃菣ꪃ菣벃苣ꞃ菣ꚇ郧鞁臣芀뻥覂苣龁돨辇苣骃苣袃菣꾁胣蒐胣꺁雨ꦉ苣뎃苣ꖃ苣벃菣鞊뷤꺁裥莸苣몤臣龁胣钃菣꾂臣ꊝꧧ醃菣뮂菣蚃菣뢂臣膀觧骮臣겖觧궃菣覃諦鎽꣧꺁鯧뺯裥莸苣ꢡ臣芀菣벃苣뎃菣벃苣钃菣꾂鷩趩臣薃ꃥ誏臣鞊뷤誸臣겖觧궃菣覃闦銂铧蒁臣膀맥螝䅄銂꣨鞮臣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯醼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㔶㰩牢ਾ†鳦龮雦设臣膀慌瑮慨捓敲湥吠ⵒ剆呅䜠뚫郥邵郥ꊂ菣뮂苣꺁雦閳苣몤臣ꚁ臣讂胣ં䐼噉邀볯閼볯銼胣㲑䐯噉ਾ†塌칒誏臣캳鞏껥鎽臣邵郥馁苣낖ꛨ꺁塌ꊂ苣讃苣袃臣붃諥銂ꧨꆾ臣讂臣膂臣膀慌瑮慨捓敲湥吠ⵒ剆呅䰠剘뇎苣ꊂ苣膃菣벃苣벃苣莃苣ꒂ苣莃菣⢈桔牥潭楆桳牥胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥傷㑖㔶⤵迥뎁塌칒뎂苣꾂菣馃菣뾂菣ꊂ菣뮂苣궂菣袃吨敨浲䙯獩敨膀苣뾂菣낂闧랏噐㘴㠵銂铧蒁臣膀蓧내菨邵郥ꊂ菣뮂苣銂껥붖臣龁胣鎁臣ꊂ菣뮂苣銂ꏨꂀꗦ薀臣螌ꓧꮁ뻥ꎁ臣龮雦鞁臣芀냧钽臣낿臣讂臣膀塌ꊂ苣讃苣袃臣㎮胥ꎀ뛧貸蟩ꦉ苣膀〱츰䶼臣覂꟥膂臣⢦鳦芵臣ㆮ〰韃膀〱薼䵄体룤ꮁꫨ붣臣龁胣ꎀ뛧貸蟩ꦉ苣膀洵⁍呄銂郥肂ꃦ薆迥릮뷤邃菣閃苣벃ꞁ臣覂臣㖫趀룥袇臣膀㠳Ꚃ苣ꮃ苣莃苣ꒂ菣것菣袃臣뮧臣龁胣ꆬ臣膀菣ꮃ苣것苣ꒂ菣ⶳ㉄膀塌칒袏臣캯䲲䑂䜭呓胣誏臣咳鞊升鞊뷤銂㠳Ꚃ苣ꮃ苣莃苣ꒂ菣것菣袃臣蚠곦뮷諥鞁臣芀臣꺁뻥膀菣것菣袃苣膀臩覅臣ꪁ臣覂胣犁ꞁ⸲芙雩ꒂ菣궂菣馃菣袃臣龁胣鎁臣鞃菣벃菣銂胣㎁〴浮臣놊뗨뮂菣袃룤뎁臣㖫〲浮迥뎁㠴渶꺁铦몇菣ꎂ菣뾂菣銂若袁臣䖟癮獩潩麃菣膃菣馃菣鞃菣벃菣ꪃ菣肃菣⢼敐歲湩汅敭⥲臣ꎧ黦鞁臣芀剆呅꿦銂㈵渰⽭㠴渶ꢁ臣ꚁ꣨鞮臣龁胣䦂㱃畳⁢浸湬��灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥銂㈱苧鲿귧늛럧⢚片灡偨摡倠楲浳ꮁ꿥馁苣㒋菣ꦃ菣벃苣궃苣릂菣ꎂ菣꾂雦讨볥銂铧蒁臣몱껥鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯鞼볯醀⼼䥄㹖 ꢡꮁꓧ閁苣ꚁ臣讂苣蚁臣膀鳦몙飦꺁塌ꊂ苣讃苣袃臣膀塌ꊂ菣뮂苣ꮁ臣蒁臣膀渱ꪜ뫦鲀〱渰薶臣䦮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥ꞁ塌慒臣邵郥鞁胣ㆁ䵮鳦肺胣㆜〰䵮뛨꺁䍉猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣䲧剘ꮁ뗧袐臣龁胣芏藧隌郥ꦉ臣膀塌ꊂ菣뮂苣ꮁ臣蒁臣膀〱䵮믤许臣䦮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥ꞁ塌慒臣邵郥鞁胣ㆁ䵮胣㆜渰꺁䍉猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣䲧剘ꮁ뗧袐臣龁胣鎁苣覂臣ꊂ菣뮂苣ꆝ믤许臣膀鳦躘듧뢛臣邏뻤閁苣讂塌ꊂ苣讃苣袃臣蒁臣ꒁ臣꾁胣䲁剘臣꺁뗧袐臣ꒁ臣ꚁ胣芏藧隌郥ꦉ臣貐꟦꺁迥꾁臣貂苣誂觨붥臣䦪㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢苣몤臣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯钼胣㲑䐯噉ਾ†ꇨㆨ臣隌郥ꦉ臣ꆄ듧麃뗧袐迥뎁듧麃菣벃苣꺁ꧦ붃듦Ꞁ臣膀ꇨ㢨臣뺁臣膂苣貂臣蒁苣芀듧麃菣벃苣꺁苣莃苣ꒂ许臣龮雦设㠶臣風볨閁苣ꚁ臣讂ꮁ臣醁苣뮴胦隌胥螎苣誁鯩骃苣궃菣覃搹臣肜ꓥ뮴胦隌臣몟臣蒁臣骮뻧鞁臣芀臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣꺁㔷볯薶臣뮴胦隌苣몤臣龁賥袐觧銂胣貮藥ꪁ듦Ꞁ賥趀臣벑臣芀臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣꺁㔲볯肜ꓥ뮴胦隌胣㞜薼鳦Ꞥ듦Ꞁ賥銂ꓧ鞁臣隌郥ꦉ苣貀菩蚈髧ꪁ듦Ꞁ賥趀臣벑臣芀臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣꺁㔲볯ꪜ뫦꺁듦Ꞁ賥銂ꓧ鞁臣隌郥ꦉ苣貀듦Ꞁ賥ꪁ臣趀臣벑臣芀戼㹲ꢡ躼㠴駦鎖臣꺁蓧내菨邵郥誏臣내菨馃菣릂臣龩菨뮴胦㲧牢ਾ䐼噉邀ꇨ醼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㔴㰹愯㰾䐯噉ਾ䤊㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢›⬫⬫ꚉ渱㭍⬠⬫ꚉ〱䵮볯㆞䵮※⬫ꚉ〱渰麼〱䵮※㨫볯㆞〰䵮胣亂㩔ꧨ鎨臣骁胣㲂牢ਾ䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵㨾⬠⬫㨫觢ㆦ䵮※⬫㨫觢ㆦ渰麼渱㭍⬠㨫觢ㆦ〰䵮볯㆞渰㭍⬠麼〱渰芀呎ꚩ꣩鮁臣芀戼㹲⠊껥붖뻤㚋⤶戼㹲 䄠䍂ㅁ迥뎁䉁䝃몁볤邭苣뮴胦隌臣讂塌ꊂ苣讃苣袃臣붃諥銂뇦骮臣讂臣膂臣膀裥隌臣龁菣꾂菣閃苣벃苣ꮁ臣醁苣鎁苣覂ꒁ臣몁볤邭臣涮乒것菣ꮃ苣겸껥鞁臣芀臣꺁苣莃苣ꒂ臣龁苣ꮁ胣咁偈ㄭ菣袃듧麃ꃦ내菨銂胣㖁볯䎅㱏畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰲猯扵膀㜳蓢ꞁ胣ㆁ薼䉆⡓楇换膀苣뾂菣낂闧랏〱㌴㄰⤰胣ㆁ츰枼洯骃菣랂菣뎃릂菣것菣袃菣ꒂ苣뎃䜨扩潣胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥ㆷㄵ〴㈱⤲苣ꮐ鳦馁苣劋䵐⁉㘱〴鿥난䤨癲湩⁥捓敩瑮晩捩胣⎁㤠㘱⤰룤膀〵ⰰ〰내菨⾞苣Ꞃ菣ꞁ胣㒁Ꚃ苣ꮃ菣것菣袃臣궒꣧鞁臣芀룤風臣릟鳥ꮁ럦ꂊ臣貂苣ㆋ〰䵮菣ꮃ��벃菣ⶫ㈱菣ꪃ苣蚃菣袃㌱ꊂ苣蚃菣袃匨杩慭胣⎁倠ㄸ㤳ꮁ苣讂㈷駦鎖臣ꚇ郧ꮁ苣誂胣내菨銂菣꾂菣閃苣벃苣ꮁ裥隌臣鮁臣芀裥隌臣龁菣꾂菣閃苣벃苣銂胣㖁韃〱猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ㰷猯灵䴾胣㖜韃〱猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ⴾ㜱⼼畳㹰꺁뿦ꚺ꿧늛苣覜臣讂塌ꊂ苣讃苣袃賥袐觧誏臣芏藧隌郥ꦉ佔〹㌱㜱臣ꎀ뛧貸蟩ꦉ臣㊧芙雩ꚇ郧鞁臣芀듧麃铧ꖝ臣릟鳥銂郥閼臣膀⸰㔷䱭臣咮䥒潺ꚩ雨⢬湉楶牴杯湥胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥ㆷ㔵㘹㄰⤸苣뮷諥鞁臣膀ꧨ내菨銂뫦ꎧ臣鮁臣芀臣꺁뻥膀苣궃菣鮃菣ꂃ苣뢛裥ꊛ臣뾽铧鞁臣芀藥动䅎苣ꮐ鳦馁苣뒰胦뢛苣膀楍牣慯牲祡ꢅ乒颍鯩궂菣袃䄨扭潩膀苣뾂菣낂闧랏䵁㠱〳ꢔ臣䶮条䅍⡘闥馨⴩㘹苣ꢔ臣ꚁ닧붣臣膀ꏨꂀꗦ薀臣螌ꓧꮁ뻥ꎁ臣厦灵牥捓楲瑰뮙賩蚕꣦⦙嘠䱉⡏闥馨麃苣뾂菣龃菣꾂苣⢹湉楶牴杯湥胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥ㆷ㜱㔵㔰⤰苣ꢔ臣ꚁ䑣䅎臣ꢁ胩ꊻ蛥鞁臣芀臩鶼귥몙迧麃苣뾂菣龃菣꾂苣膀䉁⁉㤷〰呈藩鞈ꓦ몇苣릂菣ꂃ䄨灰楬摥䈠潩祳瑳浥⥳胣ꚸ臣ꮁ룤꺁ꇨ㦨臣몤臣貂臣蒁苣鞃菣ꒂ菣벃迥뎁菣궃菣隃苣ꢔ臣ꚁ胣咁煡慍⡮駧늌闥馨銂껥붖臣龁胣䞂偁䡄臩鶼귥銂蛥ꢃ꿥ꞅ臩鶼귥ꢁ臣ꚁ铧蒁臣膀믤辄臣掮乄ꒂ菣鞃菣袃臣閁臣銂꣦隺賥鞁臣芀戼㹲ꢡ躼慔浱湡菣궃菣隃迥뎁菣ꦃ苣麃菣㲼牢ਾ䐼噉邀ꇨ醼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㘴㰰愯㰾䐯噉ਾ ꢅ臣꺁賥袐觧꾁胣銃菣咈偈麃苣궃菣ꆂ菣뢂臣誁臣讂塌薆鳥Ꞁ苣閃苣꾂苣벃꣦蒚臩鶼귥䆐䍂ㅁ迥뎁䉁䝃꺁ꫨ躰苣몤臣龁뎛㐱芀賥袐觧㦩誏臣㦳꾁胣钃苣ꊃ菣莿뫥ꪜ뫦ꞁ臣讂䉁䅃颪냥䖎㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥誏臣钃苣ꊃ菣莿뫥ꪜ뫦ꞁ臣讂䉁䝃颪냥䖎㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥ꞁ胣肜苣Ꞥ臣蒁諥鮊苣몤臣龁胣隻臣ꮢ꣩隌郥ꦉ臣膀搹迥뎁根臣钯볨鞁臣膀郥颧臣것菣ꮃ臣䆮䍂ㅁ迥뎁䉁䝃몁볤邭듦Ꞁ賥銂ꓧ鞁臣貁胣鎁苣覂臣膀菣躃菣ꮃ뿦ꚺ臣䖮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥ꞁ듦Ꞁ賥鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯鞼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㚋⤷戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣䲁剘ꊂ苣讃苣袃迥뎁臣꺁諦鎽苣뎃苣ꖃ苣벃菣꺁ꧨꆾ臣龁苣꺁菣ꒂ苣ꊂ菣뮂苣내菨ꪠ臣鲽ꏨ銂ꓧ鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯鞼볯醀⼼䥄㹖 肜냥䎏噍菣궃菣벃苣벃迥뎁塌ꊻ蛥鲿귧ꢂ菣ꆃ菣袃臣뾂菣螃菣ꪃ菣벃菣꺁裥ꆾ룤ꮁ菣뾂菣ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂臩鶼귥銂郥覜臣讂룥ꦲ臣䲮剘菣鶃菣뾂菣⢼塌ⵒ界ꢁ釥낁苣讂銂铧蒁臣膀苣뒂菣릂菣袏臣溯䅣䍄臣내菨薆臣꺁蛥ꢜ賥誏臣뢠蛥鞏껥鎽臣芁苣䲋剘臣꺁뗧袐뻥꺁塌ꊂ苣讃苣袃臣뮴胦銂ꧨꆾ臣讂臣膂臣膀菣��ꒂ苣ꊂ菣뮂苣銂雩몙臣龁胣鎁臣ꊂ菣뮂苣꺁臣膂臣膀菣袃跥莐駧股韧ꪠ臣芁苣咋偈내菨ꪠ苣膀藥랕菣袃效㉲ꊂ苣뮂菣랂菣뎃闧랏偎た㐰㌴⸹꺁苣龃菣뢅ㅍ胣嚜㈱㔵苣몙迧馁苣⦋苣몙迧馁苣袂臣ꮁ铦覤臣龁胣鶁臣貾臣覮껥내菨ꪠ臣膀楃湧污䰠剘䰠捵菣鶃菣뾂菣⢼楑条湥胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥䎷卌㜭㐰䰱銂臣覂臣ꊽ돨躰藥鞁臣芀뻥覂苣龁껥骮듧麃ꃦ銂鳦躘듧뢛臣꾁䡔ㅐ䠯牥⼲塌ⵒ界ꢁ釥뚁胣咂偈⼱效㉲䰯剘䰭捵듧麃ꃦ誸臣꺁效㉲듧麃ꇨꊝ駧뺏苣䚒䍁ꮁ苣誂ꋧ趪臣龁螃菣뾂臣몤臣ꪁ臣⦄胣ં䐼噉邀볯閼볯鞼胣㲑䐯噉ਾ†臣覂臣膀效㉲苣뮷諥鞁臣蒁臣膀䡔ㅐ듧麃ꃦꮁ楃湧污䰠剘䰠捵菣鶃菣뾂菣⢼楑条湥胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥䎷卌㜭㐰䰱銂뷥ꪳ냥ꖅ臣龁胣鞾苣貂臣覮껥내菨ꪠ苣겜飦내鯦ꞁ臣咯偈⼱塌ⵒ界ꢁ釥뚁胣貾臣邃苣ꪂ苣莃苣ꒂ臣뾽铧閁苣龁藥ꚁ臣鞊뷤銂胣뾽铧閁苣龁菣ꒂ苣ꊂ菣뮂苣내菨ꪠ臣骃苣궃菣覃苣薆鳥隌臣膀臣貂苣뺔蟥馁苣鶁臣붃諥ꮁ臣蒁臣閩뻤鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯鞼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㚋⤸戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣겜飦내鯦ꮁ迦鮾臣貂苣䲋剘苣뒂菣릂菣膀迥ꞅ賥袐觧膀迥뎁諦䢗牥鞊뷤ⶓ塌⁒据䑁꺁塌銂듦Ꞁ賥馁苣붃諥銂ꧨꆾ臣龁胣ꚩ雦銂䡔ㅐ䰯剘䰭捵䠯牥邃苣ꪂ苣莃苣ꒂ臣ꚩ꣩鞁臣芀臣꺁苣莃苣ꒂ臣龁苣ꮁ胣咁偈⼱塌ⵒ界내菨袏臣咯偈⼱塌ⵒ界⽣效㉲듧麃臣蒁臣貂臣銂胣ㆁ薼䉆誏臣骃菣랂菣뎃瀨湥楣汬湩⼩苣袃菣鞃菣麃苣랂菣貁ꏨ薅臣貂臣功䵐銂郥肂鿥난貮藥릟鳥⦰룤膀〳〬〰듧麃Ꚃ苣ꮃ臣膀駧늉臣㦮Ꚃ苣ꮃ菣것菣袃臣궒꣧鞁臣芀臣꺁뻥膀諦鎽雨ꦉ苣뎃苣ꖃ苣벃菣膀苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣ꚁ臣ꪁ臣鞊뷤膀迥꾁臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣꺁趀胩骶룥袇觧銂〱渰鲀⸰㄰䵮臣蒯鯥꺁鳦芵뿦ꚺ臣내菨ꮁ럦ꂊ臣龁胣㒂芙雩袏臣㞯芙雩꺁苣뎃苣ꖃ菣벃苣ꞃ菣꺁뻥膀湏ⵥ汇⡯闥馨ꚩ雨⢬牐浯来膀苣뾂菣낂闧랏㙅㌱⤰苣蒐胣꺁苣Ꞃ菣꺁듧麃臣뮷諥鞁臣貾臣膀菣랂菣Ꞃ菣벃苣뮴胦銂뇦骮臣龁胣뢛꿥몙藥颍뷤⢍䱒⥕苣嚒捩潴ꮃ菣躃菣벃苣벃倨牥楫䕮浬牥ꞁ룦骮臣膀䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ苣㆒릂铧辇뿥钭鯦骷䜨慲桰慐⁤牐獩⥭臣뺯臣讂醃菣ꆃ菣뾂菣뢂苣蚃苣莃苣릖꣧込苣ꢔ臣ꚁ뇦骮臣龁뎛㔱芀鳦몙飦꺁塌ꊂ苣讃苣袃迥뎁迥ꞅ賥袐觧꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀ꇨ㎨臣몤臣貂臣蒁苣芀据䑁誏臣貐駦ꮁꧨ鎨臣貂臣䲟剘苣뒂菣릂菣꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀ꇨㆨꮁꓧ閁苣ꚁ臣讂胣뮴胦隌胥螎臣膀臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣㦉꺁鳦Ꞥ듦Ꞁ賥ꮁ鿥ꖁ臣ꚁ꣨鞮臣貂苣芀臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣㦉꺁㔷볯薶臣��胦隌苣몤臣龁ꋨ鎨裥邭苣貀껥ꢅ臣뮴胦隌胣ꢁ釥뚁胣誁鯩骃苣궃菣覃搹臣㊮薼鳦Ꞥ듦Ꞁ賥鲀㔷볯肜ꓥ뮴胦隌苣몤臣龁ꋨ鎨裥邭苣貀菩蚈髧ꪁ듦Ꞁ賥趀臣벑臣芀臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣㦉꺁㔲볯ꪜ뫦꺁듦Ꞁ賥銂ꓧ鞁臣ꮢ꣩蚈귥銂胣뮴胦隌臣鞁胣ꢁ釥뚁胣ં䐼噉邀볯閼볯馼胣㲑䐯噉ਾ†ꇨㆨꮁꓧ閁苣ꚁ臣讂苣蚁臣膀㠴駦鎖臣芙苧ꞁ胣誁鯩骃苣궃菣覃搹臣膀⸱渶꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀䡔ㅐ䰯剘䰭捵䠯牥내菨꺁껥ꢅ臣뮴胦隌苣颪냥鞁臣芀搹苣ꮐ鳦馁苣ꪃ菣ꮂ菣骃苣궃菣覃臣ꢃ뷤릉闧蒚臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣鞊效㉲諦鎽臣膀⸰ㄵ䵮胣゜㠮渳꺁꿧늛臣䖮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥ꞁ胣咁偈⼱塌ⵒ界⽣效㉲듧麃臣뮴胦隌苣몈뿦鞁臣⢟諦䢗牥ⴲ偌膀偌膀偌膀迥뎁偌⤸胣㦂銂郥覜臣讂菣뎃苣벃菣ꒂ菣벃菣ꢁ苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣龁駩Ꞁ苣ꒂ苣뾂苣鞃꿥ꞅ諦鎽臣膀鳦Ꞥꋨ鎨뿦ꚺ臣辂臣讁臣뮴胦隌苣몤臣䲙㉐苣覜臣讂꿥ꞅ苣꒙臣ꚁ胣閡釨ꪁ듦Ꞁ賥銂ꓧ閁臣讁臣龁胣誁鯩骃苣궃菣覃樹臣膀⸰㤳䵮臣䖮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥ꞁ胣咁偈⼱塌ⵒ界⽣效㉲듧麃臣貮藥ꪁ듦Ꞁ賥銂ꫨ躰臣龁胣㦂銂郥覜臣讂菣뎃苣벃菣ꒂ菣벃菣ꢁ菩趽觧낕髧ꮁ苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣龁諦䢗牥鞊뷤⢓諦䢗牥ⴲ偌⤴臣膀⸰〶䵮臣䖮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥ꞁ胣咁偈⼱塌ⵒ界⽣效㉲듧麃臣뮴胦隌苣몈뿦鞁臣芀樹苣ꮐ鳦馁苣ꪃ菣ꮂ菣骃苣궃菣覃臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣낙胦ꊂ苣붂苣ꒂ菣뺯藧鞊뷤꾁胣肜ꓥꮢ꣩莿뫥ꞁ苣骁臣ꪁ듦Ꞁ賥銂ꓧ鞁臣芀臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣㦉꾁胣め㔮渰꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀䡔ㅐ䰯剘䰭捵䠯牥내菨꺁껥ꢅ臣뮴胦隌苣颪냥鞁臣芀根苣ꮐ鳦馁苣ꪃ菣ꮂ菣骃苣궃菣覃臣ꢃ뷤릉闧蒚臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣鞊效㉲諦鎽鞊效㉲䰭ㅐ⤲臣膀⸰㜴䵮臣䖮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥ꞁ胣咁偈⼱塌ⵒ界⽣效㉲듧麃臣뮴胦隌苣몈뿦鞁臣芀根苣ꮐ鳦馁苣ꪃ菣ꮂ菣骃苣궃菣覃臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣낙胦ꊂ苣붂苣ꒂ菣뺯藧鞊뷤꾁胣肜ꓥꮢ꣩莿뫥ꞁ苣骁臣ꪁ듦Ꞁ賥銂ꓧ鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖 ꢡ〱臣몤臣貂臣蒁苣袂臣ꮁ胣㞁芙雩꺁駦릂臣膀臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣㦉꾁胣㊁㠮䵮臣䖮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥ꞁ胣咁偈⼱塌ⵒ界⽣效㉲듧麃臣貮藥ꪁ듦Ꞁ賥銂ꫨ躰臣龁胣㦂銂郥覜臣讂菣뎃苣벃菣ꒂ菣벃菣ꢁ菩趽觧낕髧ꮁ苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣龁諦䢗牥鞊뷤꾁胣め㐮渶鲀⸰〸䵮臣蒯鯥꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀䡔ㅐ䰯剘䰭捵䠯牥내菨꺁듦��賥銂裥肿臣龁鞊效㉲䰭㉐胣䲁㍐胣䲁㕐胣誏臣䲳㡐芀搹苣ꮐ鳦馁苣ꪃ菣ꮂ菣骃苣궃菣覃臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣낙胦ꊂ苣붂苣ꒂ菣뺯藧鞊뷤꾁胣肜ꓥꮢ꣩莿뫥ꞁ苣骁臣ꪁ듦Ꞁ賥銂ꓧ馁偌銂鳦馁苣뺯藧銂駩蒁臣膀ꇩ鞑臣뮴胦隌苣몤臣ꪁ臣ꎁ臣芀臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣㦉꾁胣め㐮瀷꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀䡔ㅐ䰯剘䰭捵䠯牥내菨꺁껥ꢅ臣뮴胦隌苣颪냥鞁臣芀樹苣ꮐ鳦馁苣ꪃ菣ꮂ菣骃苣궃菣覃臣ꢃ뷤릉闧蒚臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣鞊效㉲諦鎽鞊效㉲䰭㑐꾁胣め㔮瀵꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀䡔ㅐ䰯剘䰭捵䠯牥내菨꺁듦Ꞁ賥銂裥肿臣龁胣㦂銂郥覜臣讂菣뎃苣벃菣ꒂ菣벃菣ꢁ苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣龁駩Ꞁ苣ꒂ苣뾂苣鞃꿥ꞅ諦鎽臣膀鳦Ꞥꋨ鎨뿦ꚺ臣辂臣讁臣뮴胦隌苣몤臣龁胣誁鯩骃苣궃菣覃根臣膀⸰㔶䵮臣䖮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥ꞁ胣咁偈⼱塌ⵒ界⽣效㉲듧麃臣貮藥ꪁ듦Ꞁ賥銂ꫨ躰臣龁胣㦂銂郥覜臣讂菣뎃苣벃菣ꒂ菣벃菣ꢁ菩趽觧낕髧ꮁ苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣龁諦䢗牥鞊뷤⢓諦䢗牥ⴲ偌㈱꾁胣め㐮渵꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀䡔ㅐ䰯剘䰭捵䠯牥내菨꺁듦Ꞁ賥銂裥肿臣龁胣㦂銂郥覜臣讂菣뎃苣벃菣ꒂ菣벃菣ꢁ苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣龁駩Ꞁ苣ꒂ苣뾂苣鞃꿥ꞅ諦鎽臣膀鳦Ꞥꋨ鎨뿦ꚺ臣辂臣讁臣뮴胦隌苣몤臣龁胣㲂牢ਾꇨㆨ躼塌ꊂ苣讃苣袃迥뎁据䑁ꮁ苣讂䡔ㅐ䰯剘䰭捵䠯牥ꊂ菣뮂苣ꞁ臣뮴胦㲧牢ਾ䐼噉邀ꇨ醼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㘴㰱愯㰾䐯噉ਾ上㩁臩ꢔꓥખ䐼噉邀볯閼볯醼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㤶㰩牢ਾ䄨䍄苣뎃苣ꖃ苣벃苣ꞃ菣⦳戼㹲 겜껥붖뻤꾁胣ꢅ뷤ꢁ臣ꚁ胣骃苣궃菣覃臣鞊뷤袏臣鶁臣鞊軥邵郥궖觧뢁臣ꢃ뷤릉闧蒚苣뎃苣ꖃ苣벃苣ꞃ菣꺁臣膂臣ꖈ臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖 鲽ꏨ閁苣龁諦䶗剓鞊뷤銂ꫧ뚄ꓥ낕臣鮁臣⢦㉎㜹⥑胣뮲駧蒚菣ꒂ菣벃菣ꢁ臣뎂菣뢂菣늂菣랂菣뎃臣龁苣꺁菣ꦃ菣릂苣ꮃ苣龃菣벃苣ꢃ뷤銂뗧뾁뻨鎂臣芀㉎㜹膪蓧覤闧銂郥覜臣讂菩趽觧낕髧ꊂ苣ꪃ苣랂菣隌諦鎽苣ꊂ菣뎃倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣鮁臣膀諦䶗剓‱扁倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢苣ꮐ苣膀苣뢂菣颮菨隌諦鎽苣뎃苣ꖃ苣벃菣⢈䅭ⵢ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵⤾苣鲽ꏨ鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖 겜껥붖뻤꾁胣늩苣뎃苣ꖃ苣벃菣銂뷤붣臣讂臣膂臣릖돦銂ꓧ鞁臣蒁苣芀��䡰蚕꣦⦙瀨⁈鲀⤸룤꺁菣袃杉ㅇ苣ꒂ苣뾂苣鞃苣覜臣讂苣낂菣뎂苣ꮃ賥鞊뷤銂觢㊧〰菣ꮃ뷥辇臣ꊂ苣覃搭䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵ⴾ苣龃菣⢳坍‮ㄲ⸸㘲⽧潭⥬臣랷郥鞁臣芀뻥覂苣龁뫦늶苣袃菣뎃苣낂菣뾂菣誃菣벂㈨唵洯㭌ㄠ杭臣鞊뷤鎽臣誂唵䴠䝔ꢁ럦袐臣讂臣膀⸰鲀〱杭洯꺁鳦芵뿦ꚺ臣鞊뷤貁뻥覂苣膀臣꺁뻥膀ꧧ蒂臣ꮁ賦ꪛ臣鮁臣貁苣膀ꧨ뚺뛦銂㜳蓢ꞁ鲀㐲駦鎖苣뎃苣ꖃ菣벃菣鞁臣芀迥鲿苣厒卄倭䝁袏臣䖯䥓䴭ꮁ苣誂菣讃苣ꪃ菣낂臣龁胣芵뫤貾胣馽裥ꪁ苣龃菣誏臣䶳䝔苣떂苣몂軦꒙苣궃菣袃苣ꦃ菣ꎂ菣⢼䕓⥃臣袂苣꒙軥馁苣ꢁ胣ꊂ苣覃껥붃賥鞊뷤⢓䅭ⵢ㱎畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵⤾臣龔裦閁苣龁胣鎁臣龔裦ꦉ苣厒卄倭䝁誏臣䖳䥓䴭ꞁ꟨邞臣龁胣늩諦鎽臣㊮臣꺁菩趽裢冒㤲誏臣决㤲銈臣颻諥閁苣龁苣뢂菣ⶉ偤䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢ꊂ菣뎃臣膀뗧鲞臣鞁臣膀䐴剁臣ꊂ苣ꪃ苣랂菣隌諦鎽倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢ꊂ苣覃苣뎃苣ꖃ苣벃菣ꮁ臣蒁臣膀〸䐴꺁ꋥꂊ苣节臣覂臣龁胣뎂菣뢂菣늂菣랂菣뎃菩趽苣膀菣ꪃ菣랂菣袶賥閁苣龁蟩階臣骃菣膃菣超裥麃菣钃菣낂臣袂苣膀䐴剁臣ꊂ苣覃껥붃賥鞊뷤ꮁ臣蒁臣膀䕅㱑畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢楌歮牥⼼畳㹰兙猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰䰾湩敫㱲猯灵匾奔ꞁ郥骮臣膀ꋧ趪臣龁㰊䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖 丠㤲儷ꫧ뚄ꓥ낕苣ꮐ鳦馁苣銃菣䦈䝧袏臣䦯䝧銂鳦馁苣ꢃ뷤릉闧蒚苣낂菣뎂苣ꮃ賥鞊뷤겖觧뎂菣뢂菣늂菣袃䄨䍄銂胣ꊂ菣궂菣ꮐ鳦ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣⢉偌銂鳦馁苣ꊂ苣覃껥붃賥鞊뷤鎖臣宮⬲崳苣ꪃ菣꾂迥鲿臣袂苣뾪ꏨ鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖 ꪃ菣ꮂ菣ⶼ菣ꒂ菣벃菣⢉偌銂鳦馁苣ꢃ뷤릉闧蒚諦鎽苣뎃苣ꖃ苣벃菣銂胣뒰胦銪뷤⢓뻤袁臣膀䉐膀薼苣ꪃ苣궃菣ꮃ苣ꮐ鳦馁苣傋卂胣䢁卂궸臣涮扁倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢ㄨ胣㆜洲⽧䱭銂胣䒁卍膀䵄膀迥꾁䵄ꪁ臣꺁ꗥꦁ臣覜ꧦ뚺ꫥꮁ뫦ꎧ臣龁觢㚧菣ꮃ뷥辇臣䲮ꢁ臣节臣㊫莄胣㎜莄臣㎧蚈胣㊜芙雩ꒂ菣궂菣馃菣袃臣讂臣ꢁ臣袂苣뾪ꏨ鞁臣⢟臣ꪁ苣ꆁ胣趏뿥랷郥ꦉ臣膀鲀〲볯覜ꧦ뚺ꫥ膀⽶銂郥覜臣讂芀迥鲿臣늀ꇨ銂卅ⵉ卍臣袂苣ꊃ菣뾂菣뎃苣鞁胣涁扁倭䝅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢中猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢臣ꂬꛥ꾁胣뎂菣뢂菣늂菣랂菣뎃臣芵뫤銂ꓧ鞁臣芀뷤蚈臣辇臣䲮誏臣覜ꧦ뚺ꫥ銂胣傁卂臣袂苣뚺蟥銂믤馁苣压䍅臣袂苣讁胣袏臣뢅胦邃菣閃苣벃臣袂苣뚺蟥ꢁ胣鶁臣貾臣��菣릂瀨⁈⸸⤰臣袂苣궸鋥銂믤馁苣鞃菣蚃苣뎃ꮂ菣ꂃ苣궃菣袃苣ꦃ菣ꎂ菣ꮁ苣誂駩뮎臣龁胣뺲ꏨ閁苣龁苣뎃苣ꖃ苣벃菣銂胣厁䍅胣厁卄倭䝁膀迥뎁卅ⵉ卍臣袂苣ꎧ黦鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖 랅뷤蒚臣设臣誁臣ꚁ胣め㠮〰䱭臣傮卂⡧䉐膀薼苣ꪃ苣궃菣ꮃ胣炁⁈⸷⤴룤꺁苣뢂菣颮菨隌諦鎽ㄨ杭銂ꊃ菣鎽蟩꺁䥄䅂ⵃ䕐㱇畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰴猯扵ⴾⵄ祌⡳佃ⵔ裢⶝䑃⴩䍖倭䉁ⵃ菣ꒂ菣벃菣⢉뿦ꚺ胣䒁卍궸〱杭洯⥌臣犧ꞁ芙雩ꚇ郧鞁胣馽裥ꪁ菣뎃苣벃菣ꒂ菣벃菣⢉偌銂苣ꒂ苣銎駩꾂菣麃菣낂菣閃苣벃匨䍅胣厁灵牥敤⁸〲‰剈胣䞁⁅效污桴慣敲ꮁ苣誂駩뮎臣龁胣肜뗧龔裦ꦉ苣薶臩莿裥ꊛ臣袂苣莿룧鞁胣喁膀䕓膀䑓ⵓ䅐䕇胣誏臣䖳䥓䴭ꮁ苣誂觧뒾꟨邞臣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯鞼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设〷㰩牢ਾ䰨ⵃ卅ⵉ卍臣袂苣䆋䍄臣릉뻥ꎧ黦⦐戼㹲 겖觧ⶩ菣ꒂ菣벃菣蚈룥鞃菣閃苣ꒂ菣銂뇦骮臣讂臣膂臣誏臣뎹鷥䒇剁苣袨껧馁苣龁苣ꮁ胣䲁ⵃ卅ⵉ卍臣袂苣䆋䍄ꧨ首臣ꒂ菣뾂苣袃돨辇臣겸껥銂ꇨꎁ臣芀郥薀臣ꚩ꣩ꚩ雦⢙〲胣㖜渰膀电⥌苣䆒煣極祴唠䱐⁃牐瑯楥⁮䕂⁈㑃苣ꦃ菣⢠〱⁋獰膀〳ꮄ胣ㆁ㜮볎膀㔷볎썭㆗〰浭ꮂ苣궃苣ꪕ迥ㆷ㘸〰㠳〱ꮁ藥ꮡ臣龁胣㎂裥鎖臣놄ꇥ꺁뻥膀苣뎃菣꾂돨銂뫦몇臣鮁胣ꪳ蟩릂菣꾂菣ꮃ苣垒瑡牥⁳祓慮瑰䜠ⴲ楓돨辇裥邞꣨ꮁ苣誂跧鞾臣龁胣ꢡ㈱臣뺁臣膂苣貂臣蒁苣袂臣ꮁ胣뮁臣鎂臣꺁菩趽觧낕髧䆄䍄臣膀菩趽觧낕髧뎂菣뢂菣늂菣袃臣ꒁ臣ꚁ胣㎁㤮胣㒜䐠剁苣覜臣讂胣㲂牢ਾꇨㆨ躼菣뎃苣벃骃苣궃菣覃觧Ꞁ戼㹲㰊䥄㹖胣ꢡ볯鎼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㈶⼼㹡⼼䥄㹖ਊꇨㆨ躼䑁릉胦㲧牢ਾ䐼噉邀ꇨ醼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㘴㰳愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㘴㰴愯㰾䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㔶⼼㹡⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖⠊껥붖뻤㞋⤱戼㹲䈊慩潣敲ꇨꊝ菣ꦃ苣ꊃ菣놅돩讁苣鞾苣貂苣鞊卍ㅒ諦鎽겖觧뎂菣뢂菣늂菣袃臣邵郥趏뿥龀뫥㲦牢ਾ†鳦躘듧뢛臣讖ꓧ閁苣讂卍ㅒ諦鎽苣颧胣ꪁ苨鎇鞏껥鎽䰨剘骃苣궃菣覃臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣龁胣겜껥붖뻤꾁胣銃菣鞊卍ㅒ諦鎽겖觧뎂菣뢂菣늂菣袃迥뎁臣꺁꿥鲿臣讂苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣ꚁ臣ꪁ臣ꪦ諦鎽臣뺯臣讂菣袃卍ㅒꧨ겖뗧袐臣뎹ꇨꎧ鯩骮闦⢰㱋畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㱄猯扵⤾胥貁菣ꊂ菣뾂苣ꂃꇨꊝ菣ꦃ苣ꊃ菣놅돩馃菣릂臣䊮慩潣敲吠〲邃苣ꪂ苣뎃苣벃苣ꢔ臣ꚁ臣꺁苣蚁臣몱껥閁苣龁臣ꢁ臣蚁臣ꢁ苣風볨鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖 邵郥钠ꧧ꾁藥ꚁ胣ㆁ洰⁍䕈䕐膀〳洰⁍慎汃胣㎁䵭䔠呄膀迥��뎁⸰㔰볯皅瘯闧ꊝ듦Ꞁ觥咤敷湥㈭膀䡰㜠㐮䠨卂䔭⥔돦開菣莃菣ꆂ菣궸胣㊁莄臣龮雦鞁臣芀諦䶗剓ꊃ菣꾂菣벃菣ꮃ諦鎽苣閍跦馁苣龁苣ꮁ胣肜裥ꮁ胣䊁慩潣敲䌠㑍苣뎃苣벃菣莃菣ꢡ鷩銂菣꺂諦銃菣䚈칣릉闧蒚菣ꪃ苣궃菣誃菣鞊뷤⢓慊正潳⁮浉畭潮敒敳牡档䰠扡牯瑡牯敩膀苣뾂菣낂闧랏剂ㄭ〰ⴸ㤳ꢁ臣ꊂ菣뎃苣莃菣ꪃ菣낂臣袂苣颪냥鎽賥鞁臣芀뗧袐ꃧ뚩臣膀ⵎ鳦꾫菣誃菣릂菣뢂菣뾂苣颻臣ꞁ駧뺏臣貂苣銃菣䶈剓내菨隤菣ꆃ苣뎃䠨獩ⴹ䵨剓㬱删愦灭䐻匠獹整獭胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥㊷〷ⴸ卍ꮁ꿥鞁臣龮雦鞁臣芀鳦鶈臣膀꟦薀臣莿뫥꺁楈㥳栭卍ㅒㄨ〰䵮胣㎜㜮䵮迥꾁〳䵮胣㎜㌮渳㭍㌠胥ꎀ뛧貸蟩ꦉ銂䉈ⵓ呅돦開菣莃菣ꆂ菣궸臣뾪ꏨ鞁胣鞊菣袃捆돎跦覍諦䶗剓ꊃ菣꾂菣벃菣ꮃ諦鎽ꇨꊝ臣㖫츰䲼蚈臣膵胩ꞁ蚈雩ꢳ藥鞁胣鶁臣肸雦ꞁ胣ꊃ菣꾂菣벃菣ꮃ諦鎽臣邵郥鞁臣䶟剓ꚩ雨꺁꟨ꊛ苣䢒卂䔭뎳该邃菣閃苣벃룤ꞁ듧㢄胣㆜蚈雩ꊃ菣뾂菣뎃苣鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯馼볯醀⼼䥄㹖 匠牣扵敢⁲⸲挰苣벃菣閃苣莃菣ꎂ菣낂苣閃菣Ꚃ苣ꊂ苣ꢔ臣ꚁ胣ꪃ苣ꮃ苣ꒂ菣邵郥뮂菣떂菣낂菣ꂃ苣ꪳ蟩뮧该邙闧銂볤蚁㨱邵郥ꊃ菣ꮃ臣鎽臣꾁苣讂臣ꢁ臣袂苣膀볤袐胩ꚺ欨猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰愾⼼畳㹢誏臣ꎧ鯩龀뫥⢦㱫畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㱤猯扵⤾苣몱껥鞁臣芀뗧袐꟨ꊛ맥ꆡ껥낕䬨猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰䐾⼼畳㹢誏臣ꎧ鯩認룦龜琨猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ⼼畳㹰㰯畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰲猯扵⤾苣膀믤许臣袂臣ꪁ迥鲿胩ꚺ臣覂꣨鞮臣龁㰺牢ਾ䐼噉邀闦醼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㘶⼼㹡⼼䥄㹖ਊ胣ં䐼噉邀볯閼볯醼胣㲑䐯噉ਾ†㔲蓢ꞁ臣颧胣ꪁ諦䶗剓鞊뷤ⶓ塌⁒䑁誏臣鶁臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣蒁臣蒁ꛨ鞊뷤ꮁ꿥馁苣䢋獩ⴹ䵨剓邵郥꺁뗧袐迥鲿胩ꚺ菣ꦃ菣벃苣銂ꇨㆨꮁꓧ馁胣貀偌趀臣膀臣貂臣ꒁ臣ꚁ臣骃苣궃菣覃꟦ꂀ臣龮雦设ㄱ愱臣邏뻤閁苣ꚁ臣讂菣뎃苣벃骃苣궃菣覃苣ꢡ臣芀戼㹲ꢡ㌱볯㊎莄臣꺁卍ㅒ諦鎽䰭剘䄠䍄迥뎁꿥鲿臣讂苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣ꚁ臣ꪁ臣鞊뷤ꮁ꿥馁苣䢋獩栭卍ㅒ뗧袐臣邵郥趏뿥龀뫥㲦牢ਾ䐼噉邀ꇨ醼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㘴㰷愯㰾䐯噉ਾ㰊畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰪猯灵꾁胣뺏鳥꺁껥鎨鷦뚻룤ꞁ楈㥳栭卍ㅒ臣ꎧ鯩貁ꛨ龯臣貂臣膀菣벃苣銂菣ꎂ菣蚃苣뎃苣馁苣鎖胣殁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰搾⼼畳㹢胥貁触開臣ㆧ〮䔰〭ꮁ鯥骮臣貂臣鎁臣銂ꓧ鞁臣蒁苣芀戼㹲㰊畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰤猯灵꾁胣뺏鳥꺁껥鎨鷦뚻룤ꞁ뗧袐臣뎦꿥閁苣ꪁ臣ꎁ臣鎁臣銂ꓧ鞁臣蒁苣��芀㰊䥄㹖胣邼볯馼볯醀⼼䥄㹖 ꢡ㌱臣몤臣貂臣蒁苣袂臣ꮁ胣㊁莄臣膀꟦薀臣鞊卍ㅒ諦鎽䰭剘苣뎃苣ꖃ苣벃菣꾁胣め㘮䵰믤许胣㎜⸴游꺁꿧늛臣䮮猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰䐾⼼畳㹢胥ꞁ砹楈⵳䵨剓ꮁ뗧袐臣膀臣꺁룤릖胣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣蒁臣蒁ꛨ鞊뷤꾁胣め㘮䵰믤许胣㆜⸳渷꺁꿧늛臣䮮猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰䐾⼼畳㹢胥ꞁ砹楈⵳䵨剓ꮁ뗧袐臣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯鎼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㈷㰩牢ਾ鞊卍ㅒ諦鎽䰭剘苣뎃苣ꖃ苣벃菣꾁塌ⵒ菣랂菣Ꞃ菣벃苣것菣벃苣벃菣ꒂ苣ꊂ菣뮂苣ꞁ苣뒂菣릂菣邵郥銂듦Ꞁ賥馁苣⦋戼㹲 ꊂ菣뮂苣내菨ꪠ臣鲽ꏨ芀苣뎃菣袃菣ꞁ臣鞊卍ㅒ諦鎽䰭剘苣뎃苣ꖃ苣벃菣꺁諥鮊苣ꚩ꣩馁苣龁苣ꮁ胣내菨馃菣릂臣䲮剘뿥钭菣랂菣Ꞃ菣벃苣것菣벃苣벃苣莃苣ꒂ苣讖駧鞁臣芀苣莃苣ꒂ듧麃ꃦ銂뷤붣臣讂臣膂臣膀塌뾪꿧讞菣랂菣Ꞃ菣벃苣것菣벃苣벃臩鶼귥宐楃湧污菣뎃菣䲁剘菣鶃菣뾂菣⢼畬⥣苣莃菣⢈楑条湥胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥䎷卌〭㄰⥌銂䡔ㅐ듧麃臣ꊽ돨躰藥鞁胣내菨銂菣ꖃ菣궃菣ꒂ苣뎃룤ꞁ놀雩뢁諦鞁臣芀臣꺁菣뎃菣Ꚃ苣ꮃ苣꾁胣肜냥䎏噍菣궃菣벃苣벃迥뎁塌ꊻ蛥鲿귧ꢂ菣ꆃ菣袃臣뾂菣螃菣ꪃ菣벃菣꺁裥ꆾ룤ꞁ菣뾂菣ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂臩鶼귥銂駧뺏臣讂胣鞾苣貂苣내菨ꪠ苣咒偈⼱塌ⵒ界내菨ꢁ釥뚁胣ં䐼噉邀볯閼볯钼胣㲑䐯噉ਾ†苣莃苣ꒂ菣궃菣뎂菣芀䡔ㅐ䰯剘䰭捵듧麃苣膀〱볯䚅卂迥뎁菣뎃苣ꪃ菣⢳数据汩楬⥮릂菣것菣袃菣ꒂ苣뎃臣鲣藥閁苣龁偒䥍苣ꮐ鳦馁苣릟鳥궸胣㒁ⰰ〰내菨⾞苣Ꞃ菣ꞁ胣㦁Ꚃ苣ꮃ菣것菣袃臣궒꣧鞁胣鶁臣貾胣㊁〰䵮菣ꮃ菣벃菣龃菣릂菣벃菣ꊅ藩ꦡ倨䅍ꞁ胣㎁韦鎖裥隌臣鮁臣芀ꖗ雩꺁裥隌鳦鎖臣貾胣낖껩ꪁ鿥난룤꺁諦鎽雨ꦉ苣뎃苣ꖃ苣벃菣膀苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣ꚁ臣ꪁ臣鞊뷤膀迥꾁臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣꺁趀胩骶룥袇觧銂〱渰鲀⸰㄰䵮臣蒯鯥꺁鳦芵뿦ꚺ臣내菨ꮁ럦ꂊ臣龁胣릟鳥꺁臣꾁胣隃菣뎃苣뺯藧ꢁ臣ꚁ臣립觥銂黦龁臣龁胣㒂芙雩貾胣侁敮䜭潬蚕꣦⦙ꧨ겖倨潲敭慧胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥䖷ㄶ〳銂郥薀臣Ꚃ苣ꮃ臣뮷諥鞁臣貾臣膀菣랂菣Ꞃ菣벃苣뮴胦銂뇦骮臣龁胣뢛꿥몙藥颍뷤⢍䱒⥕苣嚒捩潴ꮃ菣躃菣벃苣벃倨牥楫䕮浬牥ꞁ룦骮臣膀䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ苣㆒릂铧辇뿥钭鯦骷䜨慲桰慐⁤牐獩⥭臣뺯臣讂醃菣ꆃ菣뾂菣뢂苣蚃苣莃苣릖꣧込苣ꢔ臣ꚁ뇦骮臣龁胣蒐胣꺁ꋨ鎨ꧨ겖臣䖮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥꾁胣ꢡ㐱臣몤臣貂臣蒁苣芀苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣ꚁ臣ꪁ臣鞊卍ㅒ諦鎽迥꾁臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣꺁郥薀臣ꒁ臣ꚁ胣馨뫦蒚臣节臣ㆮ臣��䱒⽕꣦隺髧ꪁ苣꺁ꒁ臣劮啌苣袨껧馁苣鎁臣ꮁ苣誂胣랂苣誃菣뺯菣ꒂ苣钯匨丯銂뇦骮臣龁胣貀偌趀臣膀臣貂臣ꒁ臣ꚁ臣뺯뿥馁苣讧胩貁鳦躘듧뢛룤꺁裥꺁ꃥ肉臣邏뻤閁苣ꚁ臣讂菣뎃苣벃骃苣궃菣覃苣ꢡ臣膀胣傌趀臣膀臣貂臣ꒁ臣ꚁ臣뺯뿥馁苣讧胩貁鳦躘듧뢛룤꺁裥꺁ꃥ肉臣邏뻤閁苣ꚁ臣讂菣ꒂ菣벃菣銂ꇨ馁胣㲂牢ਾꇨㆨ躼諦䶗剓鞊뷤ⶓ塌뎂菣뢂菣늂菣袃胣骃苣궃菣覃胣誏臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣蒁臣蒁諦鎽臣ꊂ苣讃苣袃듦Ꞁ戼㹲㰊䥄㹖胣ꢡ볯隼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㠶⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯閼胣㲑䐯噉ਾ†ꇨㆨꮁꓧ閁苣ꚁ臣讂苣蚁臣膀㠴駦鎖臣芙苧ꞁ胣䲁㡐臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣鞊卍ㅒ諦鎽臣ꢅ臣膀⸰渲鲀㐱⸰渵薶臣蒯鯥꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀⸷鲀㠳㘮臣蒯鯥꺁⽓ꒀ臣膀䡔ㅐ䰯捵듧麃臣몈뿦銂ꓧ鞁臣芀臣讂뻤몤髧ꪁ諦䶗剓鞊뷤ⶓ塌뎂菣뢂菣늂菣袃䠨䠱ㄲ㌲临中㤲儷䰭㡐꾁胣㎁㜮䵮臣䖮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥誏臣ㆳ⸸꺁⽓ꞁ胣咁偈⼱界내菨꺁裥肿苣몤臣龁胣誁鯩骃苣궃菣覃搹臣膀㔱㤮䵮臣뎹鷥䖇㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢臣膀䡔ㅐ䰯捵듧麃臣몈뿦銂ꓧ鞁臣芀偌ꢁ苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣龁苣ꒂ苣뾂苣鞃꿥ꞅ諦鎽ꊂ苣붂苣ꒂ菣뺯藧⶧偌⤸臣膀볯㚞渶꺁맥螝䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ迥뎁⸲꺁⽓銂鳦鞁臣蒁臣芀臣覂臣膀臣覂臣讂ꋨ鎨塌ꊂ苣讃苣袃菣뎃苣벃骃苣궃菣覃臣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣䢟䠱ㄲ㌲临中㤲儷䠨䠱ㄲ㌲临中㤲儷䰭ㅐ膀ㅈ㉈㈱㐳ⵎ㉎㜹ⵑ偌㌱胣䢁䠱ㄲ㌲临中㤲儷䰭㍐膀ㅈ㉈㈱㐳ⵎ㉎㜹ⵑ偌㤳胣䢁䠱ㄲ㌲临中㤲儷䰭㍐ㄱ胣誏臣䢳䠱ㄲ㌲临中㤲儷䰭㍐⤲臣膀⸰㌶䵮胣㞜渳薶臣蒯鯥꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ迥뎁⸱鲀〱臣蒯鯥꺁⽓ꞁ胣咁偈⼱界내菨꺁裥肿苣몤臣龁胣閁苣ꪁ苣ꮢ꣩䲓剘苣뒂菣릂菣骃苣궃菣覃㤨膀氹胣誏臣㦳⥯臣膀⸰㜳䵮胣㊜〮渹꺁꿧늛臣䖮㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〵⼼畳㹢胥誏臣㖳㜮胣㢜㤮臣蒯鯥꺁⽓ꞁ胣咁偈⼱界내菨꺁裥肿苣몤臣龁胣芁苣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣蒁臣蒁諦䶗剓鞊뷤⢓ㅈ㉈㈱㐳⥎跥겋臣꾁胣咁偈䰯捵듧麃臣몈뿦ꮁ뷤覂뷥뾟苣誏臣閁臣讁臣龁胣ં䐼噉邀볯閼볯隼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㌷㰩牢ਾ鞊卍ㅒ諦鎽䰭剘苣뎃苣ꖃ苣벃菣꾁䡔ⵐ내菨ꮁ臣醁苣뎂菣릂菣궃菣ꮃ뗦몇苣뮴胦隌臣讂㰩牢ਾ†菣袃菣꾂菣閃苣벃苣내菨ꪠ吨偈ㄭ※呁䍃苣뾂菣낂闧랏䥔ⵂ〲⤲臣誁臣ꚁ苣것苣蚃菣벃菣膵蟥銂듦Ꞁ賥馁苣鞊卍ㅒ諦鎽䰭剘苣뎃苣ꖃ苣벃菣꺁菨鮊苣膀鯨覅苣것苣蚃菣벃菣麡볤鎽苣ꢔ臣ꚁꧨꆾ臣龁胣ં䐼噉邀볯閼��鞼胣㲑䐯噉ਾ†냧钽臣낿臣讂臣膀䡔ⵐ내菨銂胣㦁Ꚃ苣ꮃ菣ꪃ菣뢂菣뎂菣袃菣것菣袃䌨牯楮杮胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥㎷㐵㐶⤰臣膀〱볯䚅卂䜨扩潣胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥ㆷ㐰〳〱膀〱볎⽧䱭菣讃苣ꪃ菣ⶳ苣袃菣鞃菣麃苣랂菣⢳楇换膀苣뾂菣낂闧랏㔱㐱㄰㈲銂郥覜臣讂偒䥍ㄠ㐶릟鳥⢰牉楶敮匠楣湥楴楦膀苣뾂菣낂闧랏ㄹ〶궸胣ㆁ〰〬〰듧麃Ꚃ苣ꮃ臣궒꣧鞁胣㖁볯䎅㱏畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰲猯扵膀㜳蓢ꞁ苣뎃苣ꖃ菣벃菣鞁臣芀〱渰鮃菣鲃菣ꮃㄭ龃菣릂菣벃菣₈㌱ꊂ苣蚃菣袃匨杩慭胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥傷ㄸ㤳銂鿥난臣뮷諥鞁臣膀듧麃苣麃苣궃菣ꆂ菣뢂臣蚈賥閁臣膀㘹駦鎖臣閁苣ꪁ苣ꒂ菣궂菣馃菣랂菣뎃臣鮾臣龁胣鶁臣貾胣蚈賥鞁臣麃苣궃菣ꆂ菣뢂苣膀㔲볎⁍佂䥄奐뎂菣릂菣궃菣ꮃ䄨慶瑮⁩潐慬⁲楌楰獤胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥㢷〱㔲倵膀⸰薼苣랂ꇨ薸苣ꮃ菣龃菣⢳卂㭁匠杩慭苣뾂菣낂闧랏㝁ㄲ⤱胣誏臣ㆳ츰枼洯骃菣랂菣뎃릂菣것菣袃菣ꒂ苣뎃苣ꮐ鳦馁苣閃苣躃菣ꮃ菣莃菣趸郥劫䵐⁉㘱〴鿥난䜨扩潣胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥㎷㐲㐰〭㐱궸臣㊧芙雩ꒂ菣궂菣馃菣袃臣膀臣꺁뻥膀⸰薼卂銂郥覜臣讂菣Ꞃ菣벃菣것菣覃룤ꮐ偒䥍ㄠ㐶릟鳥궸胣ㆁ韃〱猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㜾⼼畳㹰鲀쌵㆗㰰畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢ㄭ㰴猯灵䴾臣蒯鯥꺁臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣膀諦䶗剓鞊뷤ⶓ塌뎂菣뢂菣늂菣袃䠨䠱ㄲ㌲临中㤲儷䰭㡐膀苣ꒂ苣뾂苣鞃꿥ꞅ䰭剘苣뎃苣ꖃ苣벃菣⢈苣ꒂ苣뾂苣鞃꿥ꞅ中㤲儷䰭㡐膀迥뎁苣뎃苣ꖃ苣벃菣閁苣ꚁ臣ꪁ臣鞊卍ㅒ諦鎽䠨䠱ㄲ㌲临꺁臣骁苣讁臣ꎀ뛧貸蟩ꦉ臣㊧芙雩ꚇ郧鞁臣芀듧麃苣閃苣躃菣ꮃ룤ꮐ偒䥍ㄠ㐶릟鳥ꞁ듦蒵臣膀〵볎⽧䱭ꯩ蚯뫥ꪃ菣뾂菣醃苣ꪳ䴨汩楬潰敲苣뾂菣낂闧랏㌴㘷ㄴ膀〱볎⽧䱭苣鶃菣鶃菣궃菣ꒂ菣䆳⠱楍汬灩牯膀苣뾂菣낂闧랏䱁ㅐ⤰苣ꮐ鳦馁苣ㆋ〰볎꺁苣꾂苣鞃苣벃鿥난臣ꢁ苣ꮁ胣閃苣躃菣ꮃ룤ꮐ偒䥍ㄠ㐶릟鳥궸臣㖧駦鎖苣뎃苣ꖃ菣벃菣鞁胣鶁臣貾胣ꊂ苣뮂菣뾂菣릟鳥銂鯥躏臣膀껥ꦸ臣辩苣讁臣릒详鞁臣貁苣膀듧麃苣㆒〰볎꺁䥒䅐菣莃菣ꆂ菣⢼楍汬灩牯膀苣뾂菣낂闧랏〲ㄭ㠸궸臣㊧駦鎖뫦ꎧ臣鮁臣芀鯨覅苣膀灓捥牴䵡硡椠鞃菣벃菣ꪃ菣肃菣⢼潍敬畣慬⁲敄楶散⥳臣膀諥략㠴渲膀铦몇ㄵ渵ꞁ胣鎁苣覂臣뮔裥궸臣겸껥鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯馼볯醀⼼䥄㹖 ꖻ룤꺁볥㪏ꊂ苣뮂菣뾂菣릟鳥궸臣꺁鯨覅⠯苣꾂苣鞃苣벃鿥난룤ꞁ臣趛藥讼듧麃뫦ꎧ觧궸臣꺁鯨覅崩韃〱銂铧蒁臣膀佂䥄奐뎂菣릂菣궃菣ꮃ뗦몇臣醃菣뮂菣蚃菣뢂苣袨껧鞁臣芀ꇨㆨ꾁胣ꚩ꣩膓臣ꒁ臣ꚁ臣뮴胦隌苣것苣蚃菣벃菣膵蟥銂迦鮾臣膀鯥ㆳ꾁胣낂菣閃뷥込臣꺁菣벃苣銂ꓧ鞁臣蒁苣芀��㹲ꢡ㔱볯鞊뷤ⶓ塌뎂菣뢂菣늂菣袃迥뎁꿦莼鿥隺觧ꪳ臣袂苣뎂菣릂菣궃菣ꮃ뗦몇臣뮴胦隌戼㹲㰊䥄㹖胣ꢡ볯鞼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㤶⼼㹡⼼䥄㹖ਊ䐼噉邀볯閼볯馼胣㲑䐯噉ਾ†ꇨㆨꮁꓧ閁苣ꚁ臣讂苣蚁臣膀㐲駦鎖뻥膀ㅈ㉈㈱㐳ⵎ㉎㜹ⵑ偌뎂菣뢂菣늂菣袃臣膀㘳㘮볯꺁鳦Ꞥ뗦몇軧誏臣㖳瀰꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀鳦Ꞥ蟩꺁苣것苣蚃菣벃菣膵蟥銂ꓧ鞁臣芀臩ꊛ菣ꒂ菣벃菣㦉꾁胣㎁⸶薼臣肜ꓥ膵蟥螎迥뎁㔱瀰꺁䍅猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾㰰猯扵ꒀ臣膀ꪕ鯧ꮁꓥ趁臣辇臣뎂菣릂菣궃菣ꮃ뗦몇苣몤臣龁胣ꊂ苣붂苣ꒂ菣뺯藧⶧㉎㜹ⵑ偌뎂菣뢂菣늂菣袃臣膀〳㌮볯꺁鳦Ꞥ뗦몇軧ꞁ胣肜냥辇臣뎂菣릂菣궃菣ꮃ뗦몇苣몤臣龁胣뎂菣뢂菣늂菣袃臣貂臣蒁臣蒁諦鎽ㅈ㉈㈱㐳ⵎ㉎㜹꾁胣겸껥꾏菨ꪁ苣것苣蚃菣벃菣膵蟥銂ꓧ閁臣讁臣龁胣ં䐼噉邀볯隼볯邼胣㲑䐯噉ਾ龮雦设㐷㰩牢ਾ麃苣릂菣螃菣꺁苣蚃菣벃菣Ꞁ该袄ꇧ隌韧ꮁ꿥馁苣鞊卍ㅒ諦鎽䰭剘苣뎃苣ꖃ苣벃菣꺁苣뎃菣鲃諥鲞㰩牢ਾ†苣蚃菣벃菣Ꞁ该袄ꇧ隌韧꺁駧螗臣뺯臣讂諦䶗剓鞊뷤ⶓ塌ꊂ苣讃苣袃苣뎃苣ꖃ苣벃菣ꞁ臣讂ㅈ㉈㈱㐳ⵎ㉎㜹ⵑ偌꺁諥鲞苣膀菣Ꚃ苣䶹剓내菨隤菣ꆃ苣뎃臣ꎻ苣誂臣銃菣䶈剓내菨隤菣ꆃ苣뎃臣몙迧貁菣ꊃ軦袐臣膀臣ꒁ灡䕯臩鶼귥꺁곦놤臣鮃菣ꖎ郥꺁菣Ꚃ苣⢹鳦躘듧뢛臣꾁獍ㅲ猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰栾⽵畨⼼畳㹰䄠潰㱅畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢⼭㰭猯灵麃苣릂臣벑臣貂苣⦋臣膀苣뎃菣鲃臣閩뻤鞁臣芀㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖 龮꣩讖꟥꺁ꖗ觥ꮁ胣㒁駦鎖臣뚵ꏩ꺁뻥膀獍ㅲ猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰栾⽵畨⼼畳㹰䄠潰㱅畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢⼭㰭猯灵麃苣릂臣覂뫤馂軦股臣膀臣꺁뻥膀ꗨ讴黥ꊂ菣궃菣ꂃ铧邈ꏩ⢟敒敳牡档䐠敩獴胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥ㆷ㘰㔴⤲臣벣苨鞁臣芀臣貂苣꺁菣Ꚃ苣銂胣鶁臣馃菣릂菣ꒂ菣袃菣낂菣뮂菣覃吨⥇迥뎁뷤蚯뫥ꪃ菣뾂菣醃苣ꪳ苣것苣蚃菣벃菣⢫䑌ⵌ⥃胥ꮁ鿥ꖁ臣ꚁ胣꒾蒐胣膀鶼鲀릌ꮁ裥醁臣芀卍ㅒ諦鎽䠨䠱ㄲ㌲临中㤲儷袏臣䶯剓鞊뷤ⶓ塌ꊂ苣讃苣袃苣뎃苣ꖃ苣벃菣⢈ㅈ㉈㈱㐳ⵎ㉎㜹ⵑ偌⤸苣膀胩ㆱ鯥꺁髧许돦蒰臣袂苣膀㔲杭欯ꢔ蟩⢏諦鎽뿦ꚺ臣몟臣辁ꞁ胣め韦꺛臣覂꟥膂臣ㆦ놀雩閊룤鞁臣芀ꇨ薸苣膀ꃧ뚩膀膀迥뎁㘱胩ꞁ胣㒁駦鎖臣뚵ꏩ貾臣麛迥鞁胣䆁癤慩偘⁔桃浥獩牴⁹祓瑳浥匨敩敭獮銂铧蒁臣膀ꇨ薸蓨ꪳ苣閩뻤鞁臣芀맥螝ꇨ薸蓨ꪳ胥銂郥薀臣芙苧ꮁ臣蒁臣袨껧鞁臣芀뎹鷥슇厱䵅ꢁ臣ꚁꇨ閁苣龁뗧鲞臣뎛㘱臣몤臣貂臣蒁苣芀鯥ㆳ꾁胣䶁剓鞊뷤ⶓ塌ꊂ苣��苣袃苣뎃苣ꖃ苣벃菣䢈䠱ㄲ㌲临中㤲儷䰭㡐臣閊룤貁ꇨ薸蓨ꪳ菣馃菣ꮁ뷥뾟苣誏臣閁臣讁臣龁臣ꢁ苣몤臣ꚁ臣讂胣ં䐼噉邀볯隼볯銼胣㲑䐯噉ਾ†諦䶗剓鞊뷤袏臣䶯剓鞊뷤ⶓ塌ꊂ苣讃苣袃据䑁꺁鳦貾臣ꢳ냥讁苣㚉韦貾胣麝뗧龣鷦뚻臣꺁ꃧ뚩臣肜뻥ꮁ胣麃苣릂苣ꂱ껦鞁胣鶁臣莿蟨誏臣鶂蟨銂鯥躏臣龁胣莿蟨銂灏楴慭⁬畣瑴湩⁧整灭牥瑡牵뎂菣醃苣뎃菣⢉䍏⥔룤ꮁ賥讟臣膀뿥鎇蛥ꢃ臣覂꟥膂臣膀ꓥ開蓨鎼臣릖郥ꮁ胩膂臣膀ꓥ開蓨꺁믨ꢁ黥뒛臣螈觧銂뷤붣臣龁胣Ꞥ该袄볥隰臣몇迧ꮁ苣誂ꓥ開蓨몟菩貁ꋧ趪臣貂臣覂胣ꎀ뛧ꪨ雦ꊝㄨ츲涼軥⦚苣ꆎ迥鞁胣ꎀ뛧馁苣릂菣ꒂ菣⢉坖⁒湉整湲瑡潩慮膀苣뾂菣낂闧랏㘱〰ⴴ〴⤶룤ꞁ꣦겜賥鞁臣芀臣貂苣꺁裥螉苣膀菣麃菣궂苣ꪃ菣誏臣ꢂ苣랂菣鎟雦⢙♈浡㭰鎟雦⦙胣ꪂ苣ꮃ菣莃菣侉蓨ꪳ鿦首胣誏臣ꦃ菣袃諦䎗㙄鞊뷤⢓扁慣膀苣뾂菣낂闧랏扡〲㠱㐴ꞁ鿦늉臣ꚁ胣ꎧ黦ꢔ臣麃苣궃菣ꆂ菣뢂苣馨귨鞁臣芀灁牥潩䄠㉔苣ꦃ苣覃苣궂菣誃菣⢼敌捩⁡楂獯獹整獭‬汉楬潮獩銂铧蒁臣膀苣ꦃ苣覃苣릂苣ꎃ菣鞁胣뮔菥銂铧邈臣鮁臣芀郥薀臣麃苣릂臣ꒁ臣ꚁ胣䢁䱁붂菣袃苣Ꞃ苣⢢湉楤慣䰠扡ⱳ丠睥䴠硥捩⥯苣ꢔ臣ꚁ胣ꎀ뛧鞁臣龔臣讂ꒁ臣ꪨ雦ꊝ臣膀苣ꒂ菣것菣覃鎟觨ꮁ鿥ꖁ臣ꚁ蓨ꪳ鷩趩苣겸껥鞁胣鶁臣貾胣鎁苣覂臣겸껥銂铧蒁臣膀菣Ꚃ苣躯臣ꢅ韧覤蓨ꪳ鷩趩臣뎹鷥銂꣨鞮臣龁胣겸껥꾁藥ꚁ胣ꚇ뷧꒾苣ꖟ苣ꪁ臣蚈黦薀臣袂苣財苣貂臣芀뎹鷥슇厱䵅ꢁ臣ꚁꇨ閁苣龁뗧鲞臣뎛㜱ꮁꓧ閁苣ꚁ臣讂胣뎛㜱꾁胣䶁剓鞊뷤ⶓ塌ꊂ苣讃苣袃苣뎃苣ꖃ苣벃菣䢈䠱ㄲ㌲临中㤲儷䰭㡐臣閊룤貁苣蚃菣벃菣Ꞁ该袄ꇧ隌韧覤鷩趩臣躽룤銂苣龁苣鞁臣鎁臣銂ꓧ鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖 閁苣ꮁ胣䢁愦灭䔻鿦늉苣ꦃ苣覃苣ꢔ臣ꚁ胣鞃菣벃苣떂苣몂臣馨뫦隌胥銂ꇨ馁胣薆蛨⾜룤鲆꿦銂꣨鞮臣龁胣開蓨궸蛨誏臣開蓨钅臣薆볥Ꞁ蛨誏臣隤볥Ꞁ蛨꺁鷩趩苣膀♈浡㭰鎟觨螈觧銂铧蒁臣膀郥薀臣麃苣릂臣ꒁ臣ꚁ胣ꎀ뛧鞁臣龔臣讂ꒁ臣ꪨ雦ꊝ臣겸껥鞁胣뎹鷥ꒀ苣麃苣릂꿦ꮁ꣨鞮臣龁胣薆蛨⾜룤鲆꿦꾁胣ꖻ룤꺁雦讨볥銂铧蒁臣袨껧鞁臣㪟戼㹲薆蛨⾜룤鲆꿦鶼薆볥Ꞁ蛨ꊝꧧ銈藨ꊝꧧ⦍⠯ꓥ뺼胦鲆鷩趩裢薆볥Ꞁ蛨ꊝꧧ⦍戼㹲 ⠠맥螝뇂䕓⥍臣鞁臣ꢡ臣貂臣邵黦貁鯥ㆳ䈷臣몤臣貂臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖 螈觧궸臣麃苣궃菣ꆂ菣뢂郥辇苣膀菣莃菣鞊䑃㠶諦鎽臣鎟觨閁苣龁苣ꦃ苣覃苣ꢔ臣ꚁ룦骮臣龁胣蒐胣꺁菣Ꚃ苣ꮁ臣蒁臣膀菣꾂菣閃苣벃苣붙胦ꊝꧧ銂胣ꎀ뛧鞁臣龔臣讂냥ꪁ臣ꢁ苣㖂臣��꺁꣦궖鷩ꞁ䅈佌苣閃菣Ꚃ苣ꊂ苣ꢔ臣ꚁ룦骮臣膀臣貂苣꺁룦骮苣ꢔ臣ꚁ胣麃苣릂꿦꺁藥麃苣궃菣ꆂ菣뢂郥辇臣뎹鷥銂꣨鞮臣龁胣⢂맥螝뇂䕓⥍臣鞁臣ꢡ臣貂臣邵黦貁鯥ㆳ䌷臣몤臣貂臣蒁苣芀鯥ㆳ䌷臣膀卍ㅒ諦鎽䰭剘苣뒂菣릂菣뎂菣뢂菣늂菣袃ㅈ㉈㈱㐳ⵎ㉎㜹ⵑ偌꺁諦躸臣麃苣궃菣ꆂ菣뢂郥辇臣躽룤銂苣龁苣鞁臣鎁臣銂ꓧ鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖 ꂱ껦芙臣麛迥閁苣龁苨鎇苣熒呒倭剃迥뎁蓨ꪳ諦몇臣ꢔ臣龁胣蒐胣꺁菣Ꚃ苣놔鷦꺁ꒁ臣鶂蟨螉苣劒䅎諦몇铧ꮁ乒汁摡牥䤨癮瑩潲敧膀苣뾂菣낂闧랏䵁〷㌲궸臣ꖅ苣膀臣꺁뻥膀ꧨꆾ臣貂苣螃菣鲃蓨ꪳ铧邈臣뺯臣讂蓨ꪳ铧邈臩鶼귥⢐牓扥ㅦ胣䆁捣胣䚁獡⥮臣몙迧銂胣馨뫦蒚臣릖돦銂铧蒁苣熋呒倭剃臣袂苣閩뻤鞁臣芀뎹鷥슇厱䵅ꢁ臣ꚁꇨ閁苣龁뗧鲞臣뎛㠱臣몤臣貂臣蒁苣芀鯥ㆳ꾁胣䶁剓鞊뷤ⶓ塌ꊂ苣讃苣袃苣뎃苣ꖃ苣벃菣䢈䠱ㄲ㌲临中㤲儷䰭㡐臣閊룤貁苨鎇臣袃菣낂菣뮂菣覃迥꾁苣것苣蚃菣벃菣것菣ꮃ臣놽鿩銂迥벁臣ꪁ臣鎁臣銂ꓧ鞁臣蒁苣芀㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖 芄돨銂郥薀臣麃苣릂铧ꖝ臣견뫤꺁苨鎇觧讁苣䚉汯档臣릖돦ꮁ苣誂諦몇臣膀慃牲臣릖돦ꮁ苣誂迥뚺賥鞁臣芀䝔胣辷苣것苣蚃菣벃菣誏臣誁鯩뎂菣릂菣궃菣ꮃ臣것菣ꮃ苣膀ꓦ몇铧꺁藩ꂴ苣莃苣ꒂ吨捥⁯楄条潮瑳捩膀苣뾂菣낂闧랏㕔㈳㐭〸吨⥇※桔牥潭䘠獩敨⁲捓敩瑮晩捩胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥咷ㅒ㐳ㄲ辷苣것苣蚃菣벃菣⦫※慗潣䐠慩湧獯楴獣胣ꮂ苣궃苣ꪕ迥㦷㌹〭㔲㄰誁鯩뎂菣릂菣궃菣ꮃ⤩苣ꢔ臣ꚁ룦骮臣膀맦꒽뗧钹蟩辇臣뺯臣ꚁ꣦隺賥鞁臣芀뎹鷥슇厱䵅ꢁ臣ꚁꇨ閁苣龁뗧鲞臣뎛㤱臣몤臣貂臣蒁苣芀鯥ㆳ꾁胣䶁剓鞊뷤ⶓ塌ꊂ苣讃苣袃苣뎃苣ꖃ苣벃菣䢈䠱ㄲ㌲临中㤲儷䰭㡐臣閊룤貁苨鎇臣螃菣鲃蓨ꪳ铧邈臣놽鿩銂迥벁臣ꪁ臣鎁臣銂ꓧ鞁臣蒁苣芀㰊䐯噉ਾ⼼䥄㹖㰊䥄㹖䐼噉邀鯥醼胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㘹⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯膽胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㜹⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯芽胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㠹⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯莽胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㐰㤹⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯蒽胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰〰⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯薽胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰㄰⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯蚽胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰㈰⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯螽胣㲑䐯噉ਾ†��††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰㌰⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯袽胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰㐰⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯覽胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰㔰⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰〵㰶愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥鎼뷯銈뷯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰〵㰷愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥鎼뷯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰〵㰸愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥鎼뷯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰〵㰹愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥钼胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰〱⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰ㄵ㰱愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥隼胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰㈱⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰ㄵ㰳愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥颼胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰㐱⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰ㄵ㰵愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥醼볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰ㄵ㰶愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥醼볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰ㄵ㰷愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥醼볯ꆼ裢ꊼ胣㲑䐯噉ਾ††††††䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰㠱⼼㹡⼼䥄㹖 †††㰠䥄㹖胣뎛볯銼볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰ㄵ㰹愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥醼볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㈵㰰愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥醼볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㈵㰱愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥醼볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㈵㰲愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥醼볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㈵㰳愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥醼볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㈵㰴愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥醼볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㈵㰵愯㰾䐯噉ਾ††††䐼噉邀鯥醼볯醀⼼䥄㹖 †††††㰠䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㈵㰶愯㰾䐯噉ਾ††††⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣讉뛧鲣귦뢛胣㲑䐯噉ਾ䐼噉邀迦몇韦醀믤貒뒹袜㠱韦⢥〲〲㌮ㄮ⤸⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣讉뛧鲣귦醼胣��䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ꿥ꆱ鯦麡郥醀飦내鯦㲸䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ꿥ꆱꃩ꺛郥醀藩鞈ꇨ㲨䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ雦閳胣붿諥㲠䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ臣薆껥醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖䐼噉邀藩鞈ꇨ醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦⸢㈯㈰㔰〲㈹⼶䵁久〰〰⼱⸲㈰㔰〲㈹䔶〫㔱㈯㈰㔰〲㈹〶〰〰⸱灡≰㈾㈰㔰〲㈹〶〰〰⸱灡㱰愯㰾䐯噉ਾ⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣붛髩뾪鿦놠釥醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㈵㰷愯㰾䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰㠲⼼㹡⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㈰㔰〲㈹⸶楴≦㈾㈰㔰〲㈹⸶楴쉦゠〰㈵㰹愯㰾䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲〲㈵㤰㘲琮晩㸢〲〲㈵㤰㘲琮晩ꃂ〰㔰〳⼼㹡⼼䥄㹖㰊戯摯㹹㰊栯浴㹬