(57)【要約】  末梢動脈疾患およびその症状の治療のための組成物および方法が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における末梢動脈疾患を抑制または治療するための方法であって、前記方法は，ＴＲＰＶ１（ｔｒａｎｓｉｅｎｔ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｃａｔｉｏｎ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｓｕｂｆａｍｉｌｙ  Ｖ  ｍｅｍｂｅｒ  １（一過性受容体電位カチオンチャネルサブファミリーＶメンバー１）のアゴニストを、前記対象に投与する工程を含む、方法。
【請求項２】
前記ＴＲＰＶ１のアゴニストが、カプサイシン、Ｎ-オレオイルドパミン（ＯＬＤＡ）、オルバニル（Ｎ-９-Ｚ-オクタデセノイル-バニラミド）、およびレジニフェレジニフェラトキシンからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。  
【請求項３】
ＴＲＰＶ１の前期アゴニストがレジニフェラトキシンである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記方法が、前記末梢動脈疾患に関連する（間欠性）跛行（ｃｌａｕｄｉｃａｔｉｏｎ）を阻害または治療する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前期方法が、対象の運動能力の改善をする、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ＴＲＰＶ１の前記アゴニストが、髄腔内投与、硬膜外投与、または神経節内投与により投与される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。  
【請求項７】
前記ＴＲＰＶ１のアゴニストが、腰部後根神経節内の硬膜外注射を介して投与される、請求項６に記載の方法。   
【請求項８】
前記ＴＲＰＶ１のアゴニストが、腰部領域Ｌ１〜Ｌ５の１つ以上で硬膜外注射を介して投与される、請求項６に記載の方法。   
【請求項９】
前記ＴＲＰＶ１のアゴニストが、Ｌ４および／またはＬ５で、硬膜外注射を介して投与される、請求項６に記載の方法。   
【請求項１０】
末梢動脈疾患および／またはその症状の治療のための少なくとも１つの他の治療薬の投与をさらに含む、請求項１に記載の方法。  
【請求項１１】
前記他の治療が、抗血小板薬、コレステロール低下薬、高血圧薬、および抗不整脈剤からなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＴＲＰＶ１のアゴニストの投与の前に、対象の末梢動脈疾患を診断することをさらに含む、請求項１に記載の方法。   
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は、２０１７年２月９日に提出された米国仮特許出願第６２／４５６，７６３号に、３５  ＵＳＣ§１１９（ｅ）に基づく優先権を主張する。
前述の出願は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
発明の分野
この発明は、一般的に、アテローム性動脈硬化症の分野に関係する。
具体的には、本発明は、末梢動脈疾患の治療のための組成物および方法を提供する。
【０００３】
発明の背景
末梢動脈疾患（ＰＡＤ）は、米国で、約８００〜１２００万人に影響を与える全身アテローム性動脈硬化症の現れ（ｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎ）である。
ＰＡＤの症状には、骨格筋障害（ｓｋｅｌｅｔａｌ  ｍｙｏｐａｔｈｙ）および骨格筋感覚機能障害（ｓｋｅｌｅｔａｌ  ｍｕｓｃｌｅ  ｓｅｎｓｏｒｙ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ）のすべての結果である、（間欠性）跛行（ｃｌａｕｄｉｃａｔｉｏｎ）、安静時の痛み、および組織損失が含まれる。
運動昇圧反射（ＥＰＲ）は、骨格筋に由来する神経反射であり、身体活動（ｐｈｙｓｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ．）中の心血管系および呼吸器系の調節に寄与する。
この反射のセンサリー・アーム（ｓｅｎｓｏｒｙ  ａｒｍ）は、代謝的に敏感な（ｍｅｔａｂｏｌｉｃａｌｌｙ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ）（グループＩＶ）神経と機械的に敏感な（ｍｅｃｈａｎｉｃａｌｌｙ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ）（グループＩＩＩ）神経の両方で構成されている。
ヒトと動物の研究からの証拠は、この反射の活性化に応答した、心拍数（ＨＲ）、動脈圧（ＡＰ）および交感神経活動の増加が、ＰＡＤ患者および動物で強化されることを実証しており、ＰＡＤ状態に異常に発達した（ｅｘａｇｇｅｒａｔｅｄ）ＥＰＲが存在することを示す。
異常に発達した（ｅｘａｇｇｅｒａｔｅｄ） ＥＰＲは、強力な血管収縮を引き起こし、そして、運動する筋肉への血流を制限する可能性があり、これがＰＡＤ患者の運動不耐症の症状の一因となる。
ＰＡＤとそれに関連する症状を治療するための改善された治療法が必要である。
【０００４】
発明の概要
本発明によれば、末梢動脈疾患またはその関連する症状を、阻害、治療、および／または予防の方法が提供される。
特定の実施形態では、本方法は、末梢動脈疾患に伴う（間欠性）跛行（ｃｌａｕｄｉｃａｔｉｏｎ）を抑制、治療、および／または予防する。
特定の実施形態において、この方法は、対象の運動性能（ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ）を改善する。
これらの方法で使用するための組成物も提供される。
特定の実施形態では、本発明の方法によって治療される対象は、０．９未満、０．８未満、０．７未満、０．６未満、または０．５未満の足関節上腕血圧比（ａｎｋｌｅ−ｂｒａｃｈｉａｌ  ｉｎｄｅｘ  ｒａｔｉｏ）を有する。
特定の実施形態において、本方法は、特に、レジニフェラトキシンのようなＴＲＰＶ１（ｔｒａｎｓｉｅｎｔ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｃａｔｉｏｎ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｓｕｂｆａｍｉｌｙ  Ｖ  ｍｅｍｂｅｒ  １）のアンタゴニストまたはアゴニストを投与することを含む。
【０００５】
特定の実施形態では、この方法は、くも膜下腔内投与、硬膜外投与、または神経節内投与によって、ＴＲＰＶ１アゴニスト（またはアンタゴニスト）を投与することを含む。
特定の実施形態では、ＴＲＰＶ１のアゴニスト（またはアンタゴニスト）は、腰部後根神経節内の硬膜外注射を介して、特に１つ以上の腰部領域Ｌ１〜Ｌ５、特にＬ４および／またはＬ５で投与される。
本発明の方法は、末梢動脈疾患および／またはその症状の治療のために、少なくとも１つの他の治療薬を投与することをさらに含み得る。
本発明の方法は、治療の実施前に、対象の末梢動脈疾患を診断することをさらに含んでもよい。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】図１Ａ−１Ｄは、レジニフェラトキシン（ＲＴＸ）投与がＰＡＤラットの運動制限を軽減することを示すグラフを提供する。図１Ａは、健康なｓｈａｍ治療ラット、または、模擬治療（対照）またはＲＴＸで治療したＰＡＤラットによる、経時的な走行距離を示す。図１Ｂは、健康なｓｈａｍ治療ラット、または、模擬治療（対照）またはＲＴＸで治療したＰＡＤラットによる、経時最高走行速度を提供する。図１Ｃは、健康なｓｈａｍ治療ラット、または、模擬治療（対照）またはＲＴＸで治療したＰＡＤラットによる、３７メートル／分のタイムランを提供する。図１Ｄは、健康なｓｈａｍ治療ラット、または、模擬治療（対照）またはＲＴＸで治療したＰＡＤラットによる、パーセント最大強度でタイムランニングを提供する。平均値±標準誤差（ＳＥ）。ｓｈａｍおよびＰＡＤ＋対照ラットでは、ｎ＝７。ＰＡＤ＋ＲＴＸラットでは、ｎ＝６。＊Ｐ＜０．０５  対  Ｓｈａｍラット。†Ｐ＜０．０５  対  ＰＡＤ＋対照。
【図２】図２Ａ−２Ｄは、大腿動脈閉塞の４週間後にレジニフェラトキシン（ＲＴＸ）を投与すると、ＰＡＤラットの運動制限が軽減されることを示すグラフを提供する。図２Ａは、模擬治療（対照）またはＲＴＸを用いた治療前後で、ＰＡＤラットによる、最大速度を提供する。図２Ｂは、模擬治療（対照）またはＲＴＸを用いた治療前後で、ＰＡＤラットによる、走行距離を提供する。図２Ｃは、模擬治療（対照）を用いた前後で、ＰＡＤラットによる、３７メートル／分でのタイムランを提供する。図２Ｄは、ＲＴＸを用いた治療前後で、ＰＡＤラットによる、３７ｍ／ｍｉｎでのタイムランを示す。平均値±標準誤差ＳＥ。ＰＡＤ＋対照では、ｎ＝６。ＰＡＤ＋ＲＴＸでは、ｎ＝８である。＊Ｐ＜０．０５  対  以前
【０００７】
発明の詳細な説明
アテローム性動脈硬化症は、血管壁上のプラークの蓄積である。
アテローム性動脈硬化プラークの存在は、標的器官への血管の流れを著しく減少させ、罹患率と死亡率に導く。
末梢動脈疾患（ＰＡＤ）は、四肢、特に脚などの末梢動脈にアテローム硬化性プラークが発生したときに発生する。
ＰＡＤを有する患者は、運動性の低下、潰瘍、壊疽、心筋梗塞、脳血管発作、大動脈瘤破裂、および血管死のリスクが高い（Ｃｒｉｑｕｉら、（１９９７）Ｖａｓｃ．Ｍｅｄ．，２：２２１−６；Ｍｅｉｊｅｒら．（１９９８）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｅ  Ｂｉｏｌ．，１８：１８５−９２）。
ＰＡＤの症状の１つは（間欠性）跛行（ｃｌａｕｄｉｃａｔｉｏｎ）である。
（間欠性）跛行（ｃｌａｕｄｉｃａｔｉｏｎ） は、対象の手足、特に足への血流が少なすぎることによって引き起こされる痛みおよび／または痙攣（ｃｒａｍｐｉｎｇ）である。
痛みおよび／または痙攣（ｃｒａｍｐｉｎｇ）は、軽い運動または激しい運動または身体活動中だけでなく、対象が休息しているときにも起こり得る。
動的運動中に筋肉が収縮すると、多くの代謝物が放出され、そのほとんどが強力な血管拡張を引き起こし、収縮する筋肉への血流と酸素供給を増加させる。
【０００８】
対照的に、運動昇圧反射（ＥＰＲ）は、運動中に筋肉への交感神経の流出を増加させ、収縮する筋肉への血流と酸素供給を制限する。
理論に縛られることなく、ＰＡＤ対象の内皮機能障害は、代謝物によって誘発される血管拡張作用を大幅に鈍らせる。
さらに、ＰＡＤ対象における虚血誘発性求心性感作は、ＥＰＲ誘発性血管収縮を増加または発展する。
したがって、ＰＡＤ対象の運動中の正味の血流応答は、血管収縮方向にシフトし、それによって（間欠性）跛行（ｃｌａｕｄｉｃａｔｉｏｎ） を引き起こす。
【０００９】
本明細書では、骨格筋求心性神経の、阻害、脱感作、および／またはアブレーション（ａｂｌａｔｉｏｎ）が（例えば、レジニフェラトキシンの投与による）、ＰＡＤ対象のＥＰＲシグナル伝達を妨害し、それにより（間欠性）跛行（ｃｌａｕｄｉｃａｔｉｏｎ） を減らしながら、血流および運動能力を改善することが実証されている。
【００１０】
本発明は、末梢動脈疾患および／またはそれに関連する症状を、阻害、治療、および／または予防する方法を含む。
特定の実施形態では、その方法は、末梢動脈疾患に関連する（間欠性）跛行（ｃｌａｕｄｉｃａｔｉｏｎ）を、阻害、治療、および／または防ぐ。
特定の実施形態では、本方法は、筋肉の炎症および／または線維症を、阻害、治療、および／または予防する。
【００１１】
特定の実施形態では、本方法は、運動性能（例えば、特定の運動を行う対象の能力）を改善し、および／または対象の血行力学的機能障害を改善する（例えば、治療前の対象と比較して）。
方法は、骨格筋求心性神経（例えば、ＴＲＰＶ１の正の骨格筋求心性神経）を、阻害、脱感作、および／またはアブレーションする、少なくとも一つの薬剤または化合物を投与することを含むことができる
【００１２】
特定の実施形態において、本発明の方法は、ＴＲＰＶ１（一過性受容体電位カチオンチャネルサブファミリーＶメンバー１（カプサイシン受容体、Ｏｓｍ−９様ＴＲＰチャネル１（ＯＴＲＰＣ１）、およびバニロイド受容体１としても知られる。例えば、ＧｅｎＢａｎｋ  Ｇｅｎｅ  ＩＤ：７４４２を参照）の少なくとも１つのアゴニストまたはアンタゴニスト、特に、ＴＲＰＶ１アゴニストを対象に投与することを含む）。
【００１３】
特定の実施形態では、アゴニストまたはアンタゴニストは小分子である。
理論に拘束されることなく、カプサイシンなどのＴＲＰＶ１アゴニストは、ＴＲＰＶ１陽性感覚ニューロンへの過剰なカルシウム流入を引き起こし、そして、細胞死を誘発する。
ＲＴＸのような強力なアゴニスト低用量（例えば、＜６μｇ／ｍｌ）は、また、ＴＲＰＶ１陽性感覚ニューロンをアブリート（ａｂｌａｔｅ）し、そして、従って、運動昇圧反射を減少させる。
【００１４】
一方、ＴＲＰＶ１アンタゴニストは、また、ＴＲＰＶ１陽性の感覚求心性機能を少なくとも部分的に阻害し、そして、ＰＡＤ対象の運動昇圧反射を抑制することもできる。
したがって、ＴＲＰＶ１アゴニスト（例えば、神経細胞を破壊することによって）、またはＴＲＰＶ１アンタゴニスト（例えば、感覚ニューロンの機能の阻害によって）のいずれかによって、ＰＡＤ状態において、運動昇圧反射を阻止または抑制できる。
【００１５】
ＴＲＰＶ１アゴニストの例には、制限なく、カプサイシン（カプサイシンクリーム（例：Ｑｕｔｅｎｚａ(R)  ）を含む）、Ｎ−オレオイルドパミン（ＯＬＤＡ）、オルバニル（Ｎ−９−Ｚ−オクタデセノイル−バニラミド）、および、レジニフェラトキシン（ＲＴＸ；［（１Ｒ、６Ｒ、１３Ｒ、１５Ｒ、１７Ｒ）−１３−ベンジル−６−ヒドロキシ−４，１７−ジメチル−５−オキソ−１５−（プロプ−１−エン−２−イル）−１２，１４，１８−トリオキサペンタシクロ［１１．４．１．０１，１０．０２，６．０１１，１５］オクタデカ−３，８−ジエン−８−イル］メチル  ２−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）アセテート）を含む。
【００１６】
特定の実施形態において、ＴＲＰＶ１アゴニストは、ＲＴＸである。
ＴＲＰＶ１アンタゴニストの例には、制限なく、
−ＸＥＮ−０５０１（ＸＥＮ−Ｄ０５０１）（Ｂｅｌｖｉｓｉら、Ａｍ．Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．（２０１７）１９６（１０）：１２５５−１２６３；Ｒｏｕｎｄら，Ｂｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２０１１）７２（６）：９２１−３１），
−ＧＲＣ−６２１１（Ｃｈａｒｒｕａら、Ｊ．Ｕｒｏｌ．（２００９）１８１（１）：３７９−８６），
−ＪＹＬ−１４２１  （１−［（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）メチル］−３−［［３−フルオロ−４−（メタンスルホンアミド）フェニル］メチル］チオウレア），
−カプサゼピン（ｃａｐｓａｚｅｐｉｎｅ）（Ｎ−［２−（４−クロロフェニル）エチル］−１，３，４，５−テトラヒドロ−７，８−ジヒドロキシ−２Ｈ−２−ベンズアゼピン−２−カルボチオアミド），  
−ＳＢ−７０５４９８  （Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［（（Ｒ）−１−（５−トリフルオロメチル−２−ピリジル）ピロリジン−３−イル）］ウレア），
−ＳＢ−４５２５３３  Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［２−［エチル（３−メチルフェニル）アミノ］エチル］ウレア），
−ＳＢ−３６６７９１  （Ｎ−（３−メトキシフェニル）−４−クロロシンアミド），
−ＳＢ−７８２４４３  （６−（４−フルオロフェニル）−２−メチル−Ｎ−（２−メチルベンゾチアゾール−５−イル）ニコチンアミド），
−Ａ−４２５６１９（１−イソキノリン−５−イル−３−（４−トリフルオロメチル−ベンジル）−ウレア），
−Ａ−７８４１６８  （３，６−ジヒドロ−３’−トリフルオロメチル）−Ｎ−［４−［（トリフルオロメチル）スルホニル］フェニル］−［１（２Ｈ），２’−ビピリジン］−４−カルボキサアミド），
−Ａ−７９５６１４  （（Ｒ）−１−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−３−（５−（ピペリジン−１−イル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−ｙｌ）ウレア），  
−ＡＢＴ−１０２  （（Ｒ）−１−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル）−３−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）ウレア），
−ＡＭＧ９８１０  （２Ｅ−Ｎ−（２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾヂオキシン−６−イル）−３−［４−（１，１−ジメチルエチル）フェニル］−２−プロペンアミド），
−ＡＭＧ０３４７  （Ｎ−（７−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−１−イル）−３−［２−ピペリジン−１−イル−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］プロプ−２−エンアミド），
−ＡＭＧ５１７（Ｎ−（４−［６−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピリミジン−４−イルオキシ］−ベンゾチアゾール−２−イル）−アセトアミド  Ｉ），
−ＡＭＧ８１６３  （ｔｅｒｔ−ブチル−２−（６−（［２−（アセチルアミノ）−１，３−ベンゾチアゾール−４−イル］オキシ）ピリミジン−４−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニルカルバメート），
−ヨード−レジニフェラキシン（Ｉ−ＲＴＸ），
−Ｎ−（４−ｔｅｒｔ―ブチルフェニル）−４−（３−クロロピリジン−２−イル）テトラヒドロピラジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＢＣＴＣ），
−ＮＤ６８２４３，および
−ＡＺＤ１３８６  （５’−クロロ−７’−メチル−１’−［［３−（トリフルオロメチル）フェニル］メチル］スピロ［イミダゾリジン−５，３’−インドール］−２，２’，４−トリオン）。
【００１７】
本発明の方法は、末梢動脈疾患および／またはその症状の治療のために、少なくとも１つの他の治療薬の投与（連続的（例えば、前および／または後）および／または同時に）をさらに含み得る。
【００１８】
例えば、本方法は、アテローム性動脈硬化症を治療すること、および／またはアテローム性動脈硬化症を有する対象の心臓発作または脳卒中を予防することが知られている薬剤を投与することをさらに含み得る。  
【００１９】
本方法で投与され得る治療薬の例には、抗血小板薬、コレステロール低下薬（例えば、スタチン、選択的コレステロール吸収阻害剤、および樹脂）、高血圧薬（例えば、利尿薬、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、β―遮断薬、アンギオテンシン  ＩＩ受容体遮断薬、カルシウム  チャネル遮断薬、α―遮断薬、α−２受容体アゴニスト、中央アゴニスト（ｃｅｎｔｒａｌ  ａｇｏｎｉｓｔｓ）、末梢アドレナリン阻害剤、及び血管拡張剤）、および抗不整脈剤、が含まれるが、これらに限定されない。
【００２０】
本発明の方法は、本発明の治療薬の投与の前に、対象の末梢動脈疾患を診断することをさらに含み得る。
たとえば、ＰＡＤは足首上腕インデックスによって診断される場合がある。
簡単に説明すると、血圧は、上肢（例えば、腕）及び、下肢（例えば、足または足首）で採取され、そして、次いで上肢の場合と下肢における収縮期圧の比を算出する。
比率が０．９０未満の場合、ＰＡＤが診断される。
一般に、比率が低いほど、疾患はより重症になる。
たとえば、比率が約０．５０未満の場合、重度の動脈狭窄が診断される。
特定の実施形態では、本発明の方法によって治療される対象は、０．９未満、０．８未満、０．７未満、０．６未満、または０．５未満の足首上腕血圧比を有する。   
【００２１】
本発明は、特に末梢動脈疾患および／またはそれに関連する症状（例えば、（間欠性）跛行（ｃｌａｕｄｉｃａｔｉｏｎ））を阻害、治療、および／または予防するための組成物も包含する。
【００２２】
本組成物は、以下を含む：
ｉ）少なくとも一つの、骨格筋求心性神経（例えば、ＴＲＰＶ１正の骨格筋求心性神経）、特に少なくとも一つのＴＲＰＶ１  アゴニストまたはアンタゴニスト、もっと特に、ＲＴＸなどの少なくとも１つのＴＲＰＶ１アゴニストを、阻害、脱感作および／またはアブレートする薬剤または化合物、および、
ｉｉ）少なくとも１つの薬学的に許容される担体。
特定の実施形態では、組成物は、上述のように、末梢動脈疾患および／またはその症状の治療のための少なくとも１つの他の治療薬をさらに含む。
【００２３】
本発明の治療薬（例えば、ＴＲＰＶ１アゴニスト）は、例えば、注射（例えば、局所、直接、または全身投与）、経口、肺、局所、経鼻または他の投与様式などの任意の適切な経路により投与することができる。
治療薬は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む組成物に含まれていてもよい。
【００２４】
組成物は、例えば、注射または非経口、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、皮下、経口、局所、吸入、経皮、肺内、動脈内、直腸内、筋肉内、鼻腔内、くも膜下腔、硬膜外、神経節内、および脊髄内投与を含む、任意の適切な手段によって投与され得る
【００２５】
特定の実施形態では、組成物は、髄腔内投与、硬膜外投与、または神経節内投与によって投与される。
特定の実施形態において、組成物は、腰後根神経節（ＤＲＧ）内の硬膜外注射を介して投与する。
特定の実施形態では、腰部領域Ｌ１−Ｌ５の一つ以上で、硬膜外注射が行われる。
特定の実施形態において、硬膜外注射は、Ｌ４および／またはＬ５である。
【００２６】
一般に、組成物の薬学的に許容される担体は、希釈剤、防腐剤、可溶化剤、乳化剤、アジュバントおよび／または担体の群から選択される。
組成物は、様々な緩衝液含有量（例えば、Ｔｒｉｓ  ＨＣｌ、酢酸塩、リン酸塩）、ｐＨおよびイオン強度の希釈剤を含むことができる。
そして、洗剤および可溶化剤（例えば、ポリソルベート８０）、酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム）、防腐剤（例えば、チメロソール、ベンジルアルコール）および増量物質（例えば、乳糖、マンニトール）などの添加物を含むことができる。
【００２７】
一般的な担体には、水、油、緩衝生理食塩水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、洗剤、懸濁化剤、グルコース、乳糖、アカシアゴム、ゼラチン、マンニトール、澱粉ペースト、三ケイ酸マグネシウム、タルク、コーンスターチ、ケラチン、コロイダルシリカ、じゃがいも澱粉、尿素、中鎖長トリグリセリド、デキストラン、製剤の製造に使用するのに適した他の担体（固体、半固体、または液体フォーム、およびそれらの適切な混合物が含まれるが、これらに限定されない。
【００２８】
さらに、賦形剤および補助剤、安定剤、保存剤、増粘剤、香味剤、および着色剤が組成物に含まれていてもよい。
組成物は、ポリエステル、ポリアミノ酸、ヒドロゲル、ポリラクチド／グリコリド共重合体、エチレンビニル酢酸共重合体、ポリ乳酸、ポリグリコール酸などの高分子化合物の微粒子製剤、またはリポソームに組み込むこともできる。
そのような組成物は、本発明の医薬組成物の成分の、物理的状態、安定性、インビボ放出の速度、およびインビボのクリアランスの速度に影響を及ぼし得る（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙを参照）。
【００２９】
本発明の医薬組成物は、例えば、液体形態で調製することができ、または、乾燥粉末形態（例えば、後の再構成のために凍結乾燥）にすることができる。
本明細書に記載の治療薬は、一般に、医薬製剤として、対象／患者に投与される。
本明細書で使用される「患者」という用語は、ヒトまたは動物の対象を指す。
本発明の組成物は、医師の指導の下で、治療的または予防的に使用することができる。
本発明の薬剤を含む組成物は、任意の薬学的に許容される担体とともに投与するために便利に製剤化することができる。
選択された媒体中の薬剤の濃度は、変化し得、そして、媒体は、医薬製剤の所望の投与経路に基づいて選択され得る。
任意の従来の媒体または薬剤が、投与される薬剤と適合しない場合を除き、医薬製剤におけるその使用が考慮される。
【００３０】
特定の患者への投与に適した本発明による治療薬の用量および投与計画は、患者の年齢、性別、体重、一般的な医学的状態、および、治療または予防のために薬剤が投与される特定の状態およびその重症度、を考慮して、医師によって決定され得る。
医師は、投与経路、製薬上の担体、および薬剤の生物活性も考慮に入れることができる。
適切な医薬製剤の選択も、選択された投与様式に依存する。
【００３１】
本発明の薬学的調製物は、投与の容易さおよび投薬量の均一性のために投薬単位形態で処方され得る。
本明細書で使用される投薬単位形態は、治療または予防療法を受けている患者に適した医薬製剤の物理的に別個の単位を指す。
各投与量には、選択された医薬品担体に関連して望ましい効果をもたらすように計算された有効成分の量が含まれている必要がある。
適切な投与単位を決定する手順は、当業者に周知である。
投与単位は、患者の体重に基づいて比例して増減させることができる。
【００３２】
特定の状態の緩和または予防のための適切な濃度は、当技術分野で知られているように、用量濃度曲線の計算によって決定され得る。
治療薬を含む医薬製剤は、病理学的症状が軽減または緩和されるまで、適切な間隔で投与され、その後、投与量は維持レベルまで低減され得る。
特定の場合の適切な間隔は、通常、患者の状態に依存する。
【００３３】
本明細書に記載の特定の剤型の毒性および有効性（例えば、治療的、予防的）は、限定されないが、インビトロ、細胞培養、エクスビボ、または実験動物などの標準的な薬学的手順によって決定できる。
これらの研究から得られたデータは、ヒトで使用するための投与量の範囲を策定する際に使用できる。
投与量は、投与形態および投与経路によって異なる場合がある。
投与量および間隔は、治療的または予防的に有効な量を送達するのに十分な活性成分のレベルに、個別に、調整することができる。
【００３４】
定義
以下の定義は、本発明の理解を容易にするために提供される。
単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」には、文脈からそうでないことが明確に示されていない限り、複数の指示対象が含まれる。
「薬学的に許容される」とは、連邦政府または州政府の規制機関、または米国薬局方または動物、特にヒトで使用される他の一般に認められている局方にリストされている承認を示す。
「担体」とは、例えば、希釈剤、アジュバント、防腐剤（例えば、チメロサール、ベンジルアルコール）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム）、可溶化剤（例えば、ポリソルベート８０）、乳化剤、緩衝液（例えば、トリスＨＣｌ、酢酸塩、リン酸塩）、抗菌剤、増量物質（例えば、乳糖、マンニトール）、賦形剤、補助剤または本発明の活性物質と共に投与されるビヒクルを指す。
【００３５】
薬学的に許容される担体は、石油、動物、植物または合成起源のものを含む、水および油などの無菌液体であり得る。
水または生理食塩水ならびにデキストロースおよびグリセロール水溶液が、特に注射液用の担体として使用されることが好ましい。
【００３６】
適切な医薬品担体は、Ｅ．Ｗ．マーティン（ペンシルベニア州イーストンのマック出版社）による「レミントンの製薬科学」；
ジェンナロ、Ａ．  Ｒ，レミントン：薬局の科学と実践、（リピンコット、ウィリアムズ、ウィルキンス）；リバーマンら編、医薬品投与形態、マルセル  デッカー、ニューヨーク、ニューヨーク；およびＫｉｂｂｅら編、医薬品添加物ハンドブック、米国医薬品協会、ワシントン州、に記載されている。
【００３７】
本明細書で使用される、「治療する」という用語は、患者の状態の改善（例えば、１つまたは複数の症状）、状態の進行の遅延を含む、疾患に苦しむ患者に利益を与える任意のタイプの治療を指す。
本明細書で使用される場合、「予防」という用語は、状況または症状を発症する危険性のある対象の予防的治療を意味し、対象が、状態または症状を発症する確率の低下を齎す。
化合物または医薬組成物の「治療有効量」とは、特定の障害または疾患の症状を、予防、阻害、治療、または軽減するのに有効な量を指す。
【００３８】
本明細書における末梢動脈疾患の治療は、末梢動脈疾患、その症状、またはその素因（ｐｒｅｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ）を、治癒、緩和、および／または予防することを指し得る。
本明細書で使用される、「対象」という用語は、動物、特に哺乳動物、特にヒトを指す。
本明細書で使用する、「診断」とは、対象の疾患または障害を検出および識別することを指す。
この用語はまた、疾患または障害を有することが知られている患者の疾患または障害の状態（重症度、進行、退行、安定化、治療への反応など）の評価または評価も含み得る。
【００３９】
本明細書で使用される、「予後」という用語は、対象の将来の健康（例えば、予想される罹患率または死亡率）に対する疾患または障害の存在（例えば、本発明の診断方法により決定される）の影響に関する情報を提供することを指す）。
言い換えれば、「予後」という用語は、疾患／障害の可能性のある経過および結果の予測、または疾患／障害からの回復の可能性の提供を指す。
【００４０】
本明細書で使用される、「小分子」という用語は、比較的低い分子量（例えば、４，０００未満、２，０００未満、特に、１ｋＤａまたは８００Ｄａ未満）を有する物質または化合物を指す。
通常、小分子は有機物ですが、アミノ酸やジペプチドでもかまいませんが、タンパク質、ポリペプチド、または核酸ではない。
「運動能力」という用語は、一般的に、骨格筋の収縮に依存する身体的行為または運動を指す。
運動性能の例としては、制限なく、ランニング（例えば、スピードおよび／または耐久性）、ワォーキング（例えば、スピードおよび／または耐久性）、水泳（例えば、スピードおよび／または耐久性）、および、リフティング（は、  例えば（強度および／または持久力）。
以下の実施例は、本発明を実施する例示的な方法を開示し、そして、いかなる方法でも本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【００４１】
実施例
方法
ＰＡＤラットモデル
カテーテルベースの大腿動脈閉塞は、後腸の血液供給を中断するために、総腸骨動脈と左大腿動脈の間に、修正ＰＥ５０カテーテル（その空洞を固体アガロースで満たした）を配置することによって作成されました。
全体の手順は、遠隔測定インプラント手術に似ている。
一般的に、ラットは、２％−３％のイソフルラン酸素の混合物を使用して麻酔した。
温水ブランケットは、低体温症を防ぐために、術中に熱のサポートを提供するために使用する。
ラットは、腹臥位に置かれ、手術部位（すなわち、大腿骨領域）は、毛を剃られ、ヨウ素またはクロルヘキシジンを用いて調製され、そして大腿動脈は、暴露された。
小さな切開が作られた後に、修飾されたＰＥ５０カテーテルは、大腿動脈に入れ、そして、大動脈分岐部（ａｏｒｔｉｃ  ｂｉｆｕｒｃａｔｉｏｎ）腸骨動脈（ｉｌｉａｃ  ａｒｔｅｒｙ）に約３．５ｃｍ前進した。
大腿動脈の遠位端は、４−０  Ｄｅｘｏｎ縫合糸で結紮した。
皮膚は、外部の中断された（ｅｘｔｅｒｎａｌ  ｉｎｔｅｒｒｕｐｔｅｄ）４−０または３−０プロレン縫合糸で閉じ、手術後１０〜１４日で除去された。
【００４２】
運動不耐性テスト 
不耐性時間を決定するための運動試験は、車線の端に電気グリッドを備えた電動トレッドミルで実施された。
動物を最初に６分間低速（１３メートル／分、０％グレード）でのトレッドミル環境に順応させた。
次いで、データは、１３メートル／分のトレッドミルの速度で運動時間と距離（０％グレード）および、疲弊するまで（ｕｎｔｉｌ  ｅｘｈａｕｓｔｉｏｎ）、２分毎に、３ｍ／分増加させ、記録した。
「疲弊」は、軽度の電気刺激による励ましにもかかわらず、ラットが、１５秒以上、その走行速度を維持することができない、または拒絶した、時間として操作上定義された。
疲弊が発生したときの最大速度と走行距離を記録した。
２つの方法を使用して、ｓｈａｍ、ＰＡＤおよびＰＡＤ＋ＲＴＸラットの運動不耐性時間を測定した。
第一の方法を用いて、独自の最大速度の、９０％、７５％、５０％および２５％で、個々のラットが走らされた。 
個々のランニング強度に対応する運動不耐性時間を記録し、グループ間で比較した。
第２の方法を用いて、固定された走行速度（３７メートル／分）を使用して、グループ間の全てのラットを走らせて、彼らの運動不耐性の時間を取得した。
【００４３】
ＲＴＸの硬膜外送達
骨格筋求心性神経細胞体（ｓｋｅｌｅｔａｌ  ｍｕｓｃｌｅ  ａｆｆｅｒｅｎｔ  ｎｅｕｒｏｎ  ｓｏｍａ）（Ｌ４−Ｌ５  ＤＲＧ）を枯渇させるために、２％−３％のイソフルラン：酸素混合物を使用してラットに麻酔をかけた。
ラットを、腹臥位にし、そして、手術部位の毛を取り除き、ヨウ素またはクロルヘキシジンで準備した。
Ｔ１３−Ｌ１胸椎（ｔｈｏｒａｃｉｃ  ｖｅｒｔｅｂｒａｅ）の領域に小さな正中切開を行った。
表在性筋肉（ｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌ  ｍｕｓｃｌｅｓ）の解剖に続いて、Ｔ１３椎骨（同側）の左側に、小さな穴（約３ｍｍ＊３ｍｍ）が作られました。
ポリエチレン製カテーテル（ＰＥ−１０）を、左の穴から、くも膜下腔に挿入し、そして、左Ｌ５レベルまで約４．０ｃｍゆっくりと進めた。そこで、最初の注射（６μｇ／ｍｌ、１０μｌ）を非常に遅い速度で行ない、ＲＴＸの拡散を最小限に抑えた。 
ついで、カテーテルを左Ｌ４に引き戻し、別の注入を行った（各１０μｌ）。
次いで、カテーテルを１５分間保持して、そして、次いで引き抜いた。
その後、シリコンゲルを使用して、Ｔ１３椎骨の穴を密閉した。
筋肉の上にある皮膚は、３−０ポリプロピレン縫合糸で閉じられた。
シンプルな結節縫合（ｉｎｔｅｒｒｕｐｔｅｄ  ｓｕｔｕｒｅｓ）は、皮膚を閉じるために使用された。
皮膚の縫合糸は、手術後１０〜１４日に除去した。
創傷にベタジンを塗布し、そして、ラットを麻酔から回復させた。
【００４４】
結果
レジニフェラトキシンの治療効果を、末梢動脈疾患のラットのモデルで試験した。
上で説明したように、レジニフェラトキシンは、大腿動脈閉塞の時に、腰椎硬膜外投与によって、ＰＡＤラットに投与された。
レジニフェラトキシン（６μｇ／ｍｌで、神経節あたり１０μｌ）を、神経節あたり１０μｌの濃度で、同側のＬ４椎骨とＬ５椎骨の間の硬膜外腔に注入した。
【００４５】
Ｓｈａｍの治療を受けた健康なラットも、陽性対照として使用された。
図１に示すように、レジニフェラトキシンの投与により、ＰＡＤに関連する運動制限が軽減される。
実際、ＰＡＤラットでは、レジニフェラトキシンの投与により、走行距離の増加、最大走行速度の増加、３７ｍ／分での走行能力の向上、およびより高い比率での、より長い距離の走行能力の向上がもたらされた。
これらの統計的に有意な改善は、ＰＡＤ手術後数ヶ月間続いた。
【００４６】
大腿動脈閉塞の４週間後に投与されたとき、ＰＡＤに関連する運動制限を軽減するレジニフェラトキシン投与の能力も、また試験された。
図２に見られるように、ＰＡＤの発症後に投与された場合でさえも、ＰＡＤに関連する運動制限を、レジニフェラトキシン投与は、軽減した。
本発明の特定の好ましい実施形態が上記に記載され、具体的に例示されたが、本発明がそのような実施形態に限定されることは意図されていない。
添付の特許請求の範囲に記載されているように、本発明の範囲および精神から逸脱することなく、様々な修正をそれに加えることができる。
本発明が関係する技術水準をより完全に説明するために、いくつかの刊行物および特許文書が前述の明細書で引用されている。
これらの引用のそれぞれの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【図１】
2020506207.tif 000002
【図２】
2020506207.tif 000003
【国際調査報告】
2020506207.tif 000004