(57)【要約】  本開示は、がんを治療するための、ＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤との併用療法に関係する組成物および方法も提供する。本開示は、がんの治療における「低用量」ＨＳＰ９０阻害剤の、単独でおよび他の治療剤と組み合わせた使用に関係する組成物および方法も提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする対象におけるがんを治療するための方法であって、前記対象に、ある量のＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤を投与するステップを含み、場合により、前記ＨＳＰ９０阻害剤の量が、治療量以下の量である、方法。
【請求項２】
それを必要とする対象におけるがんを治療するための、ある量のＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む医薬組成物であって、場合により、前記ＨＳＰ９０阻害剤の量が、治療量以下の量である、医薬組成物。
【請求項３】
それを必要とする対象におけるがんを治療するための、ＢＣＬ−２経路阻害剤を含む第２の医薬組成物と組み合わせて使用するためのある量のＨＳＰ９０阻害剤を含む医薬組成物であって、場合により、前記ＨＳＰ９０阻害剤の量が、治療量以下の量である、医薬組成物。
【請求項４】
それを必要とする対象におけるがんを治療するための方法であって、前記がんの生物学的試料におけるＢＣＬ−２発現を決定するステップと、ある量のＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤を、前記がんの生物学的試料におけるＢＣＬ−２の発現に基づきＢＣＬ−２発現について陽性として特徴付けられるがんを有する対象に投与するステップとを含み、場合により、前記ＨＳＰ９０阻害剤および前記ＢＣＬ−２経路阻害剤が、同じ剤形でまたは異なる剤形で投与され、場合により、前記ＨＳＰ９０阻害剤の量が、治療量以下の量である、方法。
【請求項５】
前記がんが、前記がんの生物学的試料におけるＢＣＬ−２の発現に基づきＢＣＬ−２発現について陽性として特徴付けられる、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法または組成物。
【請求項６】
ＢＣＬ−２発現について陽性として特徴付けられる前記がんが、ＢＣＬ−２を、前記がん由来の生物学的試料が非癌性組織の参照試料におけるＢＣＬ−２発現と比較して少なくとも２倍高いレベルで発現するがんである、請求項４または５に記載の方法または組成物。
【請求項７】
前記ＢＣＬ−２発現が、タンパク質発現または遺伝子発現である、請求項６に記載の方法または組成物。
【請求項８】
前記ＨＳＰ９０阻害剤の治療量以下の量が、前記ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の、９０％未満、７５％未満、５０％未満、または２５％未満である、請求項１から７のいずれか一項に記載の方法または組成物。
【請求項９】
前記がんが、白血病、リンパ腫および骨髄腫から選択される造血器がんまたはリンパがんである、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記がんが、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）および急性単球性白血病から選択される白血病である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記がんが、ＡＭＬである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記がんが、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫から選択されるリンパ腫である、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記がんが、好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、バーキットリンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫およびマントル細胞リンパ腫から選択される非ホジキンＢ細胞リンパ腫であり、最も好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）およびマントル細胞リンパ腫から選択される非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記がんが、骨髄腫である、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＨＳＰ９０阻害剤が、プリン様阻害剤、レゾルシノール誘導体、ゲルダナマイシン誘導体、ピラゾロピリジン誘導体、ジヒドロインダゾロン誘導体およびトロパン誘導体から選択される、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＨＳＰ９０阻害剤が、ＭＰＣ−０７６７、ＡＴ−１３３８７、タネスピマイシン、ＴＡＳ−１１６、ＳＮＸ−５４２２およびＸＬ−８８８、ならびに薬学的に許容されるその塩から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＨＳＰ９０阻害剤が、ＭＰＣ−０７６７またはタネスピマイシン、および薬学的に許容されるその塩である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＨＳＰ９０阻害剤が、ＨＳＰ−９９０、ＣＮＦ−２０２４、ＰＦ０４９８４７３、タネスピマイシン、ＳＴＡ−９０９０、ＭＰＣ−３１００、ＣＵＤＣ−３０５、ＸＬ−８８８、ＴＡＳ−１１６および薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＨＳＰ９０阻害剤が、タネスピマイシン、アルベスピマイシン、ＩＰＩ−５０４、ＡＵＹ９２２、ＡＴ１３３８７、ガネテスピブ、ＫＷ−２４７８、ＣＮＦ２０２４、ＭＰＣ３１００、ＢＩＩＢ０２８、ＳＮＸ５４２２、ＰＵ−Ｈ７１、ＭＰＣ−０７６７および薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＢＣＬ−２経路阻害剤が、ＡＢＴ−７３７、ＡＴ−１０１（ゴシポール）、ＡＰＧ−１２５２、Ａ１１５５４６３、Ａ１２１０４７７、ナビトクラックス、オバトクラックス、サブトクラックス、ベネトクラックス、Ｓ５５７４６、ＷＥＨＩ−５３９、ＡＭＧ−１７６、ＭＩＫ６６５およびＳ６４１３１５から選択される、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＢＣＬ−２経路阻害剤が、ＢＣＬ２、ＢＣＬＸＬまたはＭＣＬ１の阻害剤である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＢＣＬ−２経路阻害剤が、ＡＭＧ−１７６、ＭＩＫ６６５およびＳ６４１３１５から選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記ＢＣＬ−２経路阻害剤が、ＡＢＴ−７３７、ナビトクラックスおよびベネトクラックスから選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＢＣＬ−２経路阻害剤が、ベネトクラックスである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
それを必要とする対象におけるＢＣＬ−２発現造血器がんまたはリンパがんを治療するための方法であって、前記対象に、ある量のＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤を投与するステップを含む、方法。
【請求項２６】
前記ＢＣＬ−２経路阻害剤が、ＡＢＴ−７３７、ＡＴ−１０１（ゴシポール）、ＡＰＧ−１２５２、Ａ１１５５４６３、Ａ１２１０４７７、ナビトクラックス、オバトクラックス、サブトクラックス、ベネトクラックス、Ｓ５５７４６、ＷＥＨＩ−５３９、ＡＭＧ−１７６、ＭＩＫ６６５およびＳ６４１３１５から選択される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記ＢＣＬ−２経路阻害剤が、ベネトクラックスである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ＨＳＰ９０阻害剤が、プリン様阻害剤、レゾルシノール誘導体、ゲルダナマイシン誘導体、ピラゾロピリジン誘導体、ジヒドロインダゾロン誘導体およびトロパン誘導体から選択される、請求項２５から２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＨＳＰ９０阻害剤が、ＭＰＣ−０７６７、ＡＴ−１３３８７、タネスピマイシン、ＴＡＳ−１１６、ＳＮＸ−５４２２およびＸＬ−８８８から選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＨＳＰ９０阻害剤が、ＭＰＣ−０７６７またはタネスピマイシンである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＨＳＰ９０阻害剤の量が、治療量以下の量である、請求項２９または３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記がんが、白血病、リンパ腫および骨髄腫から選択される、造血器がんまたはリンパがんである、請求項２５から３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記がんが、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）および急性単球性白血病から選択される白血病である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記がんが、ＡＭＬである、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記がんが、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫から選択されるリンパ腫である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
前記がんが、好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、バーキットリンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫およびマントル細胞リンパ腫から選択される非ホジキンＢ細胞リンパ腫であり、最も好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）およびマントル細胞リンパ腫から選択される非ホジキンＢ細胞リンパ腫である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記がんが、骨髄腫である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３８】
前記がんの生物学的試料において発現されたＢＣＬ−２の量を決定するステップをさらに含む、請求項２５から３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記対象が、ヒトである、請求項１または４から３８のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
[01]本発明は、がんの治療のために免疫系を変調するためのＨＳＰ９０阻害剤の使用、およびがんを治療するためのＢＣＬ−２の阻害剤と組み合わせたそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
[02]免疫系を利用して腫瘍細胞を有効に同定し、その後根絶させるためのアプローチが、１０年以上前に発見された。これは、チェックポイント抗体の最近の世代、特筆するとプログラム細胞死タンパク質（ＰＤ−１）／プログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）を標的とするものによってのみ、臨床的成功につながる可能性を有していた。ＰＤ−１は、活性化Ｂ細胞、Ｔ細胞および骨髄細胞において発現される細胞表面阻害分子である。１９９９年に、Ｂ７−Ｈ１（ＰＤ−Ｌ１）タンパク質が発見され（Ｄｏｎｇら、１９９９）、Ｔ細胞応答をインビトロで阻害することが分かった（Ｄｏｎｇら、２００２）。その後の研究は、ＰＤ−Ｌ１がＰＤ−１のためのリガンドであり、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用がＴ細胞応答を抑制する重大なメディエーターであることを示した（Ｆｒｅｅｍａｎら、２０００）。故に、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１のいずれかに対する治療抗体の使用は、Ｔ細胞応答を修復し（Ｆｒａｎｃｉｓｃｏら、２００９）、臨床転帰の改善をもたらす（Ｂｒａｈｍｅｒら、２０１０）。
【０００３】
[03]活性化Ｔ細胞は、それらの免疫調節機能の一部としてインターフェロン−γを分泌するが、腫瘍細胞は、多くの場合、ＰＤ−Ｌ１を上方調節し、細胞表面発現を増大させることによって、インターフェロン応答を利用する（coopt）ことができる（Ｄｏｎｇら、２００２）。発現増大したＰＤ−Ｌ１はＴ細胞上のＰＤ−１と結合し、それらの抗腫瘍（細胞溶解性）機能を抑制する。特筆すると、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用を有効に破壊するＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１のいずれかを標的とするモノクローナル抗体が、多数の適応症のために、食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認された。しかしながら、この相互作用にも作用する小分子阻害剤は承認されていない。
【０００４】
[04]熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）は、温度の上昇、外界からのストレスおよび栄養枯渇等の多様な細胞プロセスに関与する、シャペロンタンパク質のクラスである。シャペロンタンパク質としてのそれらの基本的役割は、そのようなストレス下でタンパク質を安定させることだけでなく、クライアントタンパク質の正しいフォールディングを容易にすることでもある。ＨＳＰ内には、ＨＳＰ２７、ＨＳＰ７０およびＨＳＰ９０を含むタンパク質のいくつかのメンバーがある。ＨＳＰ９０は、細胞内で最も豊富なファミリーメンバーの１つであり、ＢＣＲ−ＡＢＬ、ＢＲＡＦ、ＦＬＴ３、ＪＡＫ２およびその他を含む種々の発癌遺伝子を含むそのクライアントタンパク質により、がんに著しく関与する（Ｓｈｒｅｓｔｈａら、２０１６）。実際に、ＨＳＰ９０阻害剤は、多くの前臨床研究において、腫瘍細胞が異常な生存促進経路にいかに決定的に依存しているかおよびそれらの使用が腫瘍成長の阻害をいかにしてもたらすかを実証するために使用されてきた。この前臨床設定で、ＨＳＰ９０阻害剤は、胸部（breast）、結腸直腸、胃腸、白血病、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、卵巣、膵臓、前立腺および腎を含む多様ながんにおいて活性を示した。
【０００５】
[05]ＨＳＰ９０阻害剤は、胸部、結腸直腸、胃腸、白血病、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、卵巣、膵臓、前立腺および腎を含む種々のがんに関係する前臨床および初期臨床研究において試験されてきた。ＢＩＩＢ０２１、ＩＰＩ−４９３、ＭＰＣ−３１００、Ｄｅｂｉｏ０９３２、ＤＳ−２２４８、ＨＳＰ９９０、ＸＬ８８８、ＳＮＸ５４２２、ＴＡＳ−１１６、ＢＩＩＢ０２８、ＩＰＩ−５０４、ＫＷ−２４７８、アルベスピマイシン、タネスピマイシン、ＡＴ−１３３８７、ＡＵＹ９２２、ＰＵ−Ｈ７１およびガネテスピブを含む少なくとも１８のＨＳＰ９０阻害剤が、臨床試験において調査されてきた。Ｂｈａｔらによる総説、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ  ２０１４  ５７：８７１８〜８７２８；ＮｅｃｋｅｒｓおよびＷｏｒｋｍａｎ  Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１２、１８、６４を参照されたい。
【０００６】
[06]各薬物の化学的特性およびそれらがいかにして製剤化されたか（経口または静脈内）が異なることにより、設定された投薬量も投与のスケジュールもない。しかしながら、化学療法等の他の治療薬または標的剤に適用される一般的なパラダイムは、各薬物が第１相試験において漸増用量（用量増加）で試験され、安全性を確立および最終的には最大忍容用量を決定し、それにより、推奨される第２相用量（ＲＰ２Ｄ）を同定するものである。到達したら、次いで、薬物は、第２相試験において、患者のより大きなコホートに対して同定されたＲＰ２Ｄで試験されて、該薬物が効果的か否かを決定する。
【０００７】
[07]ＨＳＰ９０阻害剤が、確立されたＲＰ２Ｄと比べて低用量で有効となり得るか否かは、対処されていない。種々の第１、２および３相臨床試験において試みられたにもかかわらず、臨床使用のために承認されたＨＳＰ９０阻害剤はない。ＨＳＰ９０に依存するクライアントタンパク質の数およびこれらのタンパク質が調節する細胞プロセスの数を考慮すると、毒性の疑問の余地が残っている。故に、使用される臨床用量は、腫瘍細胞に直接影響を与える傾向を有するが、免疫系にも負の影響を及ぼし得る。これが今度は、任意の免疫介在性抗腫瘍活性を緩和し得る。ＨＳＰ９０抗腫瘍活性を保持するために十分な用量を使用しながら、免疫系に負の影響を及ぼし得るＨＳＰ９０阻害剤の用量を低減させるための努力が探究されるべきであり、本出願の基礎を形成する。
【０００８】
[08]新たな証拠が、ＨＳＰ９０は腫瘍免疫にも影響を与え得ることを示唆している。一部の非臨床研究は、高いＨＳＰ９０阻害剤用量が、腫瘍クリアランスのために重要となり得る免疫系の種々の成分を阻害し得ることを示唆した（Ｂａｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００７  １７８：７７３０；Ｂａｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１３  １９０：１３６０；Ｔｕｋａｊら、Ｊ．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ２０１４  １１：１０）。加えて、多くの腫瘍細胞は、それらの表面においてチェックポイント阻害剤タンパク質死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）を発現し、これは、局所細胞毒性Ｔ細胞活性を抑制することができる。例えば、ＰＤ−Ｌ１発現は、患者のＡＭＬ細胞において見られ、疾患進行とともにおよび再発中に増大し（Ｓａｌｉｈら、Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｔｏｌ．２００６  ３４：８８８；Ｃｈｅｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．２００８  ７：６２２；Ｂｅｒｔｈｏｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  ２０１０  ５９：１８３９）、より劣る全生存率に関連する（Ｂｒｏｄｓｋａら、Ｂｌｏｏｄ  ２０１６  １２８：５２２９）。ＡＭＬ腫瘍細胞におけるＰＤ−Ｌ１細胞表面発現は、免疫学的に活性な腫瘍微小環境において発現されることが公知であるＩＦＮ−γによって誘発され得る（Ｂｅｒｔｈｏｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  ２０１０  ５９：１８３９；Ｋｒｏｎｉｇら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｌ．２０１３  ９２：１９５）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
[09]現在の療法に対して不応性であるがんまたは治療後に再発したがんの治療を含む、がんを治療するための治療および薬物組合せの改善が継続して必要である。本発明は、ＨＳＰ９０阻害剤の、特にＢＣＬ−２経路の阻害剤と組み合わせた使用により、この必要性に対処する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
[10]本開示は、そのような治療を必要とする対象、好ましくはヒト対象におけるがんを治療するための、ＨＳＰ９０阻害剤の使用に関係する組成物および方法を提供する。方法は、概して、がんの治療のための、単独であるかまたは他の療法および／もしくは活性剤と組み合わせたかいずれかの、医薬組成物における低用量ＨＳＰ９０阻害剤の使用に関する。方法はさらに、概して、ＢＣＬ−２経路阻害剤と組み合わせたＨＳＰ９０阻害剤の使用に関する。下記でさらに詳細に記述する通り、本明細書において記述される組成物および方法は、ＨＳＰ９０阻害剤が、免疫応答を回避するための機序としての、多様な種類のがん細胞において活性化されるインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）シグナル伝達経路の有効な阻害剤であるという発見に部分的に基づく。ＨＳＰ９０のこの今までに報告されていない免疫調節活性は、比較的低い非細胞毒性用量で出現する。加えて、本明細書において記述される組成物および方法は、がんにおけるＨＳＰ９０阻害剤とＢＣＬ−２経路阻害剤との間の相乗活性の発見に部分的に基づく。
【００１１】
[11]本開示は、それを必要とする対象におけるがんを治療するための方法であって、対象に、ある量のＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤を投与するステップを含み、場合により、ＨＳＰ９０阻害剤の量が、治療量以下の量である、方法を提供する。本開示は、それを必要とする対象におけるがんを治療するための、ある量のＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む医薬組成物であって、場合により、ＨＳＰ９０阻害剤の量が、治療量以下の量である、医薬組成物；ならびに、それを必要とする対象におけるがんを治療するための、ＢＣＬ−２経路阻害剤を含む第２の医薬組成物と組み合わせて使用するためのある量のＨＳＰ９０阻害剤を含む医薬組成物であって、場合により、ＨＳＰ９０阻害剤の量が、治療量以下の量である、医薬組成物を含む、がんを治療する際に使用するための関連医薬組成物も提供する。
【００１２】
[12]実施形態において、本開示は、それを必要とする対象におけるがんを治療するための方法であって、がんの生物学的試料におけるＢＣＬ−２発現を決定するステップと、ある量のＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤を、がんの生物学的試料におけるＢＣＬ−２の発現に基づきＢＣＬ−２発現について陽性として特徴付けられるがんを有する対象に投与するステップとを含み、場合により、ＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤が、同じ剤形でまたは異なる剤形で投与され、場合により、ＨＳＰ９０阻害剤の量が、治療量以下の量である、方法も提供する。
【００１３】
[13]先述の方法および使用に従って、がんは、がんの生物学的試料におけるＢＣＬ−２の発現に基づき、ＢＣＬ−２発現について陽性としてさらに特徴付けられ得る。実施形態において、ＢＣＬ−２発現について陽性として特徴付けられたがんは、がん由来の生物学的試料が、参照試料、例えば非がん性細胞または組織の試料におけるＢＣＬ−２発現と比較して、少なくとも２倍高いレベルで、ＢＣＬ−２を発現するがんである。先述の方法に従って、ＢＣＬ−２発現は、タンパク質発現または遺伝子発現であってよい。
【００１４】
[14]先述の方法および使用の実施形態に従って、ＨＳＰ９０阻害剤の治療量以下の量は、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の、９０％未満、７５％未満、５０％未満、または２５％未満である。
【００１５】
[15]先述の方法および使用の実施形態に従って、がんは、白血病、リンパ腫および骨髄腫から選択される、造血器がんまたはリンパがんである。実施形態において、がんは、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）および急性単球性白血病から選択される、白血病である。実施形態において、がんは、ＡＭＬである。実施形態において、がんは、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫から選択されるリンパ腫である。実施形態において、がんは、好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、バーキットリンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫およびマントル細胞リンパ腫から選択される非ホジキンＢ細胞リンパ腫であり、最も好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）およびマントル細胞リンパ腫から選択される非ホジキンＢ細胞リンパ腫である。実施形態において、がんは、骨髄腫である。
【００１６】
[16]先述の方法および使用の実施形態に従って、ＨＳＰ９０阻害剤は、プリン様阻害剤、レゾルシノール誘導体、ゲルダナマイシン誘導体、ピラゾロピリジン誘導体、ジヒドロインダゾロン（ｄｉｈｙｄｒｏｉｎｄａｚｏｌｏｎｅ）誘導体およびトロパン誘導体から選択される。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、ＭＰＣ−０７６７、ＡＴ−１３３８７、タネスピマイシン、ＴＡＳ−１１６、ＳＮＸ−５４２２およびＸＬ−８８８、ならびに薬学的に許容されるその塩から選択される。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、ＭＰＣ−０７６７またはタネスピマイシン、および薬学的に許容されるその塩である。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、ＨＳＰ−９９０、ＣＮＦ−２０２４、ＰＦ０４９８４７３、タネスピマイシン、ＳＴＡ−９０９０、ＭＰＣ−３１００、ＣＵＤＣ−３０５、ＸＬ−８８８、ＴＡＳ−１１６および薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、タネスピマイシン、アルベスピマイシン、ＩＰＩ−５０４、ＡＵＹ９２２、ＡＴ−１３３８７、ガネテスピブ、ＫＷ−２４７８、ＣＮＦ２０２４、ＭＰＣ３１００、ＢＩＩＢ０２８、ＳＮＸ５４２２、ＰＵ−Ｈ７１、ＭＰＣ−０７６７および薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される。
【００１７】
[17]先述の方法および使用の実施形態に従って、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＡＢＴ−７３７、ＡＴ−１０１（ゴシポール）、ＡＰＧ−１２５２、Ａ１１５５４６３、Ａ１２１０４７７、ナビトクラックス、オバトクラックス、サブトクラックス（ｓａｂｕｔｏｃｌａｘ）、ベネトクラックス、Ｓ５５７４６、ＷＥＨＩ−５３９、ＡＭＧ−１７６、ＭＩＫ６６５およびＳ６４１３１５から選択される。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＢＣＬ２、ＢＣＬＸＬまたはＭＣＬ１の阻害剤である。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＡＭＧ−１７６、ＭＩＫ６６５およびＳ６４１３１５から選択される。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＡＢＴ−７３７、ナビトクラックスおよびベネトクラックスから選択される。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ベネトクラックスである。
【００１８】
[18]本開示は、それを必要とする対象におけるＢＣＬ−２発現造血器がんまたはリンパがんを治療するための方法であって、対象に、ある量のＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤を投与するステップを含む、方法も提供する。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＡＢＴ−７３７、ＡＴ−１０１（ゴシポール）、ＡＰＧ−１２５２、Ａ１１５５４６３、Ａ１２１０４７７、ナビトクラックス、オバトクラックス、サブトクラックス、ベネトクラックス、Ｓ５５７４６、ＷＥＨＩ−５３９、ＡＭＧ−１７６、ＭＩＫ６６５およびＳ６４１３１５から選択される。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ベネトクラックスである。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、プリン様阻害剤、レゾルシノール誘導体、ゲルダナマイシン誘導体、ピラゾロピリジン誘導体、ジヒドロインダゾロン誘導体およびトロパン誘導体から選択される。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、ＭＰＣ−０７６７、ＡＴ−１３３８７、タネスピマイシン、ＴＡＳ−１１６、ＳＮＸ−５４２２およびＸＬ−８８８から選択される。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、ＭＰＣ−０７６７またはタネスピマイシンである。
【００１９】
[19]ＢＣＬ−２発現造血器がんまたはリンパがんを治療するための方法のさらなる実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量である。
[20]ＢＣＬ−２発現造血器がんまたはリンパがんを治療するための方法のさらなる実施形態において、がんは、白血病、リンパ腫および骨髄腫から選択される、造血器がんまたはリンパがんである。実施形態において、がんは、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）および急性単球性白血病から選択される、白血病である。実施形態において、がんは、ＡＭＬである。実施形態において、がんは、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫から選択されるリンパ腫である。実施形態において、がんは、好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、バーキットリンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫およびマントル細胞リンパ腫から選択される非ホジキンＢ細胞リンパ腫であり、最も好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）およびマントル細胞リンパ腫から選択される非ホジキンＢ細胞リンパ腫である。実施形態において、がんは、骨髄腫である。
【００２０】
[21]ＢＣＬ−２発現造血器がんまたはリンパがんを治療するための方法のさらなる実施形態において、方法は、がんの生物学的試料において発現されたＢＣＬ−２の量を決定するステップを含む。
【００２１】
[22]先述の方法および使用のいずれかに従って、対象は、ヒトであってよい。
[23]さらなる実施形態において、本開示は、それを必要とする対象におけるがんを治療する際に使用するための、ＨＳＰ９０阻害剤と薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む医薬組成物であって、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の７５％未満である量のＨＳＰ９０阻害剤を含む、組成物を提供する。
【００２２】
[24]実施形態において、本開示は、それを必要とする対象におけるがんを治療するための方法であって、対象に、ある量のＨＳＰ９０阻害剤と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む医薬組成物を投与するステップを含み、ＨＳＰ９０阻害剤の量が、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の９０％未満または７５％未満である、方法を提供する。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の治療有効量は、対象のがん細胞におけるＩＦＮ−γシグナリングを阻害するために有効な量である。
【００２３】
[25]本明細書において記述される組成物および方法の実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の５０％未満または２５％未満である。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、ＨＳＰ−９９０、ＣＮＦ−２０２４、ＰＦ０４９８４７３、タネスピマイシン、ＳＴＡ−９０９０、ＭＰＣ−３１００、ＣＵＤＣ−３０５、ＸＬ−８８８、ＴＡＳ−１１６および薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、タネスピマイシン、アルベスピマイシン、ＩＰＩ−５０４、ＡＵＹ９２２、ＡＴ１３３８７、ガネテスピブ、ＫＷ−２４７８、ＣＮＦ２０２４、ＭＰＣ３１００、ＢＩＩＢ０２８、ＳＮＸ５４２２、ＰＵ−Ｈ７１、ＭＰＣ−０７６７および薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される。
【００２４】
[26]本明細書において記述される組成物および方法の実施形態において、医薬組成物は、第２の活性医薬品原料（ＡＰＩ）を含む。実施形態において、第２のＡＰＩは、ＨＤＡＣ阻害剤、ＩｍｉＤ、抗ＶＥＧＦＲ抗体、ＤＮＡメチル化阻害剤、ステロイドホルモン（アンタゴニスト）アゴニスト、代謝酵素阻害剤、プロテアソーム阻害剤、抗ＣＤ２０抗体、アデノシン受容体２Ａアンタゴニスト、ｔｏｌｌ受容体（アンタゴニスト（アゴニスト）および免疫賦活性サイトカインから選択される。実施形態において、第２のＡＰＩは、シスプラチン、ドセタキセル、ゲムシタビン、カルボプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、エトポシド、エピルビシン、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ｄｄＡＣ、エベロリムス、パノビノスタット、エキセメスタン、レトロゾール、デシタビン、エサーチニブ（ｅｓａｒｔｉｎｉｂ）、アベマシクリブ（ａｂｅｍａｃｉｃｉｂ）、メレスチニブ、ゲフィチニブ、モセチノスタット、アザシチジン、エンチノスタット（ｅｔｉｎｏｓｔａｔ）、モトリモッド（ｍｏｔｏｌｉｍｏｄ）、イブルチニブ、レナリドマイド、イデラリシブ、エンザルタミド、オラパリブ、プレドニゾン、デキサメタゾン、ビンフルニン、ボリノスタット、ガルニセルチブ、ベンダムスチン、オキサリプラチン、ロイコボリン、グアデシタビン、ダブラフェニブ、トラメチニブ、ベムラフェニブ、ダカルバジン、アパチニブ、ポマリドマイド、カーフィルゾミブ、ソラフェニブ、５−フルオロウラシル、ＣＢ−８３９、ＣＢ−１１５８、ＧＤＣ−０９１９、ＬＸＨ２５４、ＡＺＤ４６３５、ＡＺＤ９１５０、ＰＬＸ３３９７、ＬＣＬ１６１、ＰＢＦ−５０９、ベバシズマブ、Ｓｙｍ００４、ラムシルマブ、イピリムマブ、トラスツズマブ、トレメリムマブ、オビヌツズマブ、Ｂ−７０１、ウトミルマブ、リツキシマブ、ベバシズマブ、インターロイキン２、ＮＫＴＲ−２１４、デネニコキン、ＰＥＧインターフェロン２Ａ、ＲＯ７００９７８９、ＭＥＤＩ９４４７、ＭＫ−１２４８、ＬＹ２５１０９２４、ＡＲＲＹ−３８２、ＭＥＤＩ０５６２、ＬＡＧ５２５；ＮＩＳ７９３、リリルマブ、バルリルマブ、ＧＷＮ３２３；ＪＴＸ−２０１１；ガルニセルチブ；ＴＳＲ−０２２；ＢＭＳ−９８６０１６、ラムシルマブ、ウレルマブ、ＢＭＳ−９８６０１６、ＲＥＧＮ３７６７から選択される。
【００２５】
[27]本明細書において記述される組成物および方法の実施形態において、組成物中の第２のＡＰＩは、プロテインキナーゼ阻害剤、ＰＤ−１／ＰＤＬ−１阻害剤、チェックポイント阻害剤、白金ベースの抗新生物剤、トポイソメラーゼ阻害剤、ヌクレオシド代謝阻害剤、アルキル化剤、挿入剤、チューブリン結合剤、ＤＮＡ修復の阻害剤、およびそれらの組合せからなる群から選択される。実施形態において、組成物中の第２のＡＰＩは、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤である。実施形態において、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ＡＭＰ−５１４／ＭＥＤＩ−０６８０、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＢＭＳ９３６５５９、ＡＭＰ−２２４、ＢＧＢ−Ａ３１７、ＳＨＲ−１２１０およびＪＴＸ−４０１４からなる群から選択される。実施形態において、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤の量は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤の推奨される第２相用量の７５％未満である。
【００２６】
[28]本明細書において記述される組成物および方法の実施形態において、組成物中の第２のＡＰＩは、ＣＴＬＡ−４阻害剤である。実施形態において、ＣＴＬＡ−４阻害剤は、トレメリムマブ（ｔｒｅｍｌｉｍｕｍａｂ）およびイピリムマブから選択される。実施形態において、組成物中の第２のＡＰＩは、チェックポイント阻害剤である。実施形態において、チェックポイント阻害剤は、抗ＣＤ２７抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、抗ＫＩＲ抗体、抗ＬＡＧ−３抗体、抗ＴＩＭ３抗体、抗ＯＸ４０抗体、抗４−１ＢＢ／ＣＤ１３７抗体、抗ＣＤ４０抗体、抗ＴＲＸ５１８抗体、抗ＣＤ７３抗体および抗ＧＩＴＲ抗体からなる群から選択される。実施形態において、チェックポイント阻害剤は、バルリルマブ、ＭＧＡ２１７、リリルマブ、ＢＭＳ−９８６０１６、ウレルマブ、ＭＥＤＩ−０５６２、ＳＥＡ−ＣＤ４０、ＴＲＸ５１８およびＭＫ−４１６６からなる群から選択される。実施形態において、組成物中の第２のＡＰＩは、オラパリブ、ルカパリブ、ニラパリブ、タラゾパリブ、ベリパリブ、ＣＥＰ−９７２２およびＣＥＰ−８９８３からなる群から選択される、ＤＮＡ修復阻害剤である。
【００２７】
[29]本明細書において記述される組成物および方法の実施形態において、がんは、脳腫瘍、神経膠腫、肉腫、乳がん、肺がん、非小細胞性肺がん、中皮腫、虫垂がん、尿生殖器がん、腎細胞癌、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、陰茎がん、子宮頸がん、卵巣がん、頭頸部がん、胃腸がん、肝細胞癌、胆嚢がん、食道がん、胃がん、結腸直腸がん、膵臓がん、神経内分泌腫瘍、甲状腺腫瘍、下垂体腫瘍、副腎腫瘍、Ｔ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、白血病およびホジキンリンパ腫からなる群から選択される。実施形態において、がんは、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非小細胞性肺がん、膀胱がん、非ホジキンリンパ腫、白血病、Ｔ細胞リンパ腫および腎細胞癌からなる群から選択される。
【００２８】
[30]本明細書において記述される組成物および方法の実施形態において、がんは、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１療法に対して臨床感度を示したがんまたは宿主免疫系を回避するためにＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路を利用しているがんから選択される。実施形態において、がんは、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非小細胞性肺がん、膀胱がん、非ホジキンリンパ腫、白血病、Ｔ細胞リンパ腫および腎細胞癌からなる群から選択される。
【００２９】
[31]本明細書において記述される組成物および方法の実施形態において、医薬組成物は、対象のがん細胞におけるインターフェロン−γシグナル伝達を阻害するために有効な、ある量のＨＳＰ９０阻害剤を含む。
【００３０】
[32]実施形態において、対象は、ヒトである。
[33]実施形態において、医薬組成物は、経口または口腔内投与に適合される。実施形態において、医薬組成物は、非経口投与に適合される。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１Ａ】[34]図１は、元のスクリーニングにおいて試験されたＨＳＰ９０阻害剤の検証用量応答曲線を示す図である。図１Ａ：ＣＮＦ２０２４．ＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞を、ＩＦＮ−γでおよび異なる濃度の指示されたＨＳＰ９０阻害剤で処理した。細胞を、ＩＦＮ−γおよび／またはＨＳＰ９０阻害剤の処理４８時間後、細胞生存率（正方形、左軸上の％生存率）およびＰＤ−Ｌ１発現（円形、Ｚスコアの右軸）についてアッセイした。細胞生存率およびＰＤ−Ｌ１発現の決定には四連のウェルを使用した。平均値をプロットした。差し込み図は、ビヒクル、ビヒクル＋ＩＦＮ−γ、指示されたＨＳＰ９０阻害剤単独またはＩＦＮ−γ＋指示されたＨＳＰ９０阻害剤で処理した、ＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞からのウエスタンブロットデータを示す。溶解物を抗ＰＤ−Ｌ１抗体で探索した。
【図１Ｂ】図１は、元のスクリーニングにおいて試験されたＨＳＰ９０阻害剤の検証用量応答曲線を示す図である。図１Ｂ：ＰＦ０４９２８４７３。
【図１Ｃ】図１は、元のスクリーニングにおいて試験されたＨＳＰ９０阻害剤の検証用量応答曲線を示す図である。図１Ｃ：タネスピマイシン。
【図１Ｄ】図１は、元のスクリーニングにおいて試験されたＨＳＰ９０阻害剤の検証用量応答曲線を示す図である。図１Ｄ：ＨＳＰ−９９０。
【図２Ａ】[35]図２は、５つの追加のＨＳＰ９０阻害剤の用量応答曲線を示す図である。図２Ａ：ＳＴＡ−９０９０。ＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞を、ＩＦＮ−γ（５０ｎｇ／ｍｌ）でおよび異なる濃度の指示されたＨＳＰ９０阻害剤で処理した。細胞を、ＩＦＮ−γおよび／またはＨＳＰ阻害剤の処理４８時間後、細胞生存率（正方形、左軸上の％生存率）およびＰＤ−Ｌ１発現（円形、Ｚスコアの右軸）についてアッセイした。細胞生存率およびＰＤ−Ｌ１発現の決定には四連のウェルを使用した。平均値をプロットした。
【図２Ｂ】図２は、５つの追加のＨＳＰ９０阻害剤の用量応答曲線を示す図である。図２Ｂ：ＣＵＤＣ−３０５。
【図２Ｃ】図２は、５つの追加のＨＳＰ９０阻害剤の用量応答曲線を示す図である。図２Ｃ：ＭＰＣ−３１００。
【図２Ｄ】図２は、５つの追加のＨＳＰ９０阻害剤の用量応答曲線を示す図である。図２Ｄ：ＸＬ−８８８。
【図２Ｅ】図２は、５つの追加のＨＳＰ９０阻害剤の用量応答曲線を示す図である。図２Ｅ：ＴＡＳ−１１６。
【図３】[36]図３は、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１タンパク質発現に対するＨＳＰ９０阻害剤ＭＰＣ−３１００の効果を示す図である。ヒトＨＣＣ−３８細胞を、４８時間にわたってＩＦＮ−γ単独で処理またはルキソリチニブ（５０００ｎＭ）もしくはＭＰＣ−３１００（１０〜５０００ｎＭ）と共処理し、ウエスタンブロット分析によって分析して、ＰＤ−Ｌ１のタンパク質発現レベルを決定した。ルキソリチニブは、ＪＡＫ２を阻害するための陽性対照として役立った。β−アクチンをローディング対照として使用した。
【図４Ａ】[37]図４は、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１表面シグナルに対するＨＳＰ９０阻害剤ＭＰＣ−３１００の効果を示す図である。図４Ａ：ＳＫ−ＭＥＬ−２８およびＨＣＣ−３８（いずれもヒト株）を、ＩＦＮ−γ（５０ｎｇ／ｍｌ）、ＭＰＣ−３１００（５００ｎＭまたは１０００ｎＭ）または組合せで４８時間にわたって処理した。ＰＤ−Ｌ１細胞表面シグナルをフローサイトメトリーによって分析した。実験は、二連でおよび少なくとも２回の独立した時間で実施された。
【図４Ｂ】図４は、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１表面シグナルに対するＨＳＰ９０阻害剤ＭＰＣ−３１００の効果を示す図である。図４Ｂ：ＥＭＴ−６およびＢ１６−Ｆ１０（いずれもネズミ細胞株）も、ＩＦＮ−γ、ＭＰＣ−３１００または組合せで２４時間にわたって処理した。ＰＤ−Ｌ１細胞表面シグナルをフローサイトメトリーによって分析した。実験は、二連でおよび少なくとも２回の独立した時間で実施された。
【図５】[38]図５。ＩＦＮ−γ単独で処理またはルキソリチニブ（５０００ｎＭ）もしくはＭＰＣ−３１００（１０〜５０００ｎＭ）と共処理したＨＣＣ−３８細胞を、ウエスタンブロットによって分析して、ＨＳＰ７０およびｐＳＴＡＴ１のタンパク質発現レベルを決定した。β−アクチンをローディング対照として使用した。
【図６】[39]図６は、ＩＦＮ−γ誘発性ＩＤＯタンパク質レベルに対するＨＳＰ９０阻害剤ＭＰＣ−３１００の効果を示す図である。ヒトＨＣＣ−３８細胞を、４８時間にわたってＩＦＮ−γ単独で処理またはルキソリチニブ（５０００ｎＭ）もしくはＭＰＣ−３１００（１００、１０００または５０００ｎＭ）と共処理した。溶解物をウエスタンブロットによって分析して、ＩＤＯのタンパク質発現レベルを決定した。
【図７】[40]図７は、ＰＤ−Ｌ１タンパク質レベルに対するＨＳＰ９０阻害剤ＭＰＣ−３１００の効果を示す図である。Ｕ８７細胞を、ＭＰＣ−３１００（５００および１０００ｎＭ）で２４時間にわたって処理し、指示された抗体を用いるウエスタンブロッティングによって分析した。β−アクチンをローディング対照として使用した。
【図８】[41]図８は、ＨＳＰ９０阻害剤第Ｉ相試験全体にわたる用量コホート当たりの安定疾患率を示す図である。
【図９】[42]図９は、ＨＳＰ９０阻害剤第Ｉ相試験全体にわたる用量コホート当たりの応答率を示す図である。
【図１０】[43]図１０は、第Ｉ相試験において分析されたすべてのＨＳＰ９０薬物にわたって、異なる％ＲＰ２Ｄで処理された、安定疾患または臨床応答を持つ患者を示す図である。
【図１１Ａ】[44]図１１Ａ〜Ｆは、ベネトクラックスと、ＨＳＰ９０阻害剤、ＭＰＣ−０７６７との組合せで７２時間にわたって処理した、４つの異なる適応症：急性骨髄性白血病（ＭＶ−４−１１）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＯＣＩ−ＬＹ−１９）、マントル細胞リンパ腫（Ｚ１３８）および多発性骨髄腫（ＫＭＳ−２８）を表す細胞株のＥＣ７５における正規化されたアイソボログラムを示す図である。細胞生存率を、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏを使用して評価した。各データポイントは、各細胞株について２つの独立した実験の平均である。破線は、「相加性の線」を示し、この線を下回る薬物組合せは、相乗的相互作用を表す。
【図１１Ｂ】図１１Ａ〜Ｆは、ベネトクラックスと、ＨＳＰ９０阻害剤、ＡＴ１３３８７との組合せで７２時間にわたって処理した、４つの異なる適応症：急性骨髄性白血病（ＭＶ−４−１１）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＯＣＩ−ＬＹ−１９）、マントル細胞リンパ腫（Ｚ１３８）および多発性骨髄腫（ＫＭＳ−２８）を表す細胞株のＥＣ７５における正規化されたアイソボログラムを示す図である。
【図１１Ｃ】図１１Ａ〜Ｆは、ベネトクラックスと、ＨＳＰ９０阻害剤、タネスピマイシンとの組合せで７２時間にわたって処理した、４つの異なる適応症：急性骨髄性白血病（ＭＶ−４−１１）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＯＣＩ−ＬＹ−１９）、マントル細胞リンパ腫（Ｚ１３８）および多発性骨髄腫（ＫＭＳ−２８）を表す細胞株のＥＣ７５における正規化されたアイソボログラムを示す図である。
【図１１Ｄ】図１１Ａ〜Ｆは、ベネトクラックスと、ＨＳＰ９０阻害剤、ＳＮＸ５４２２との組合せで７２時間にわたって処理した、４つの異なる適応症：急性骨髄性白血病（ＭＶ−４−１１）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＯＣＩ−ＬＹ−１９）、マントル細胞リンパ腫（Ｚ１３８）および多発性骨髄腫（ＫＭＳ−２８）を表す細胞株のＥＣ７５における正規化されたアイソボログラムを示す図である。
【図１１Ｅ】図１１Ａ〜Ｆは、ベネトクラックスと、ＨＳＰ９０阻害剤、ＸＬ−８８８との組合せで７２時間にわたって処理した、４つの異なる適応症：急性骨髄性白血病（ＭＶ−４−１１）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＯＣＩ−ＬＹ−１９）、マントル細胞リンパ腫（Ｚ１３８）および多発性骨髄腫（ＫＭＳ−２８）を表す細胞株のＥＣ７５における正規化されたアイソボログラムを示す図である。
【図１１Ｆ】図１１Ａ〜Ｆは、ベネトクラックスと、ＨＳＰ９０阻害剤、ＴＡＳ−１１６との組合せで７２時間にわたって処理した、４つの異なる適応症：急性骨髄性白血病（ＭＶ−４−１１）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＯＣＩ−ＬＹ−１９）、マントル細胞リンパ腫（Ｚ１３８）および多発性骨髄腫（ＫＭＳ−２８）を表す細胞株のＥＣ７５における正規化されたアイソボログラムを示す図である。
【図１２】[45]図１２は、急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫およびマントル細胞リンパ腫を表す細胞株を、ＢＣＬ−２（Ｙ軸）の基礎存在度についてアッセイし、高／低閾値が破線によって示される図である。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏによって評価される通りの７２時間の治療後のベネトクラックスへの細胞株感受性（Ｘ軸）は、括弧内に示されるＥＣ５０値によって示される。ＭＰＣ−０７６７およびベネトクラックスの薬物組合せ治療後、相乗効果の決定が、棒グラフによって黒色（相乗効果が観察された）または灰色（相乗効果が観察されなかった）で示される。
【図１３Ａ】[46]図１３Ａ〜Ｄは、ＭＰＣ−０７６７が、ＡＭＬ細胞においてＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現をブロックすることを示す図である。Ａ）ＰＬ−２１細胞を、ＭＰＣ−０７６７（２μＭ）、ＩＦＮ−γ（５０ｎｇ／ｍｌ）またはＩＦＮ−γ＋ＭＰＣ−０７６７で２４時間にわたって処理した後、ＰＤ−Ｌ１細胞表面発現の評価のために細胞を収穫した。
【図１３Ｂ】図１３Ａ〜Ｄは、ＭＰＣ−０７６７が、ＡＭＬ細胞においてＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現をブロックすることを示す図である。Ｂ）ＴＵＲ細胞を、ＭＰＣ−０７６７（２μＭ）、ＩＦＮ−γ（５０ｎｇ／ｍｌ）またはＩＦＮ−γ＋ＭＰＣ−０７６７で２４時間にわたって処理した後、ＰＤ−Ｌ１細胞表面発現の評価のために細胞を収穫した。
【図１３Ｃ】図１３Ａ〜Ｄは、ＭＰＣ−０７６７が、ＡＭＬ細胞においてＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現をブロックすることを示す図である。Ｃ）ＭＯＬＭ−１４細胞を、ＭＰＣ−０７６７（２μＭ）、ＩＦＮ−γ（５０ｎｇ／ｍｌ）またはＩＦＮ−γ＋ＭＰＣ−０７６７で２４時間にわたって処理した後、ＰＤ−Ｌ１細胞表面発現の評価のために細胞を収穫した。
【図１３Ｄ】図１３Ａ〜Ｄは、ＭＰＣ−０７６７が、ＡＭＬ細胞においてＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現をブロックすることを示す図である。Ｄ）ＭＶ−４−１１細胞を、ＭＰＣ−０７６７（２μＭ）、ＩＦＮ−γ（５０ｎｇ／ｍｌ）またはＩＦＮ−γ＋ＭＰＣ−０７６７で２４時間にわたって処理した後、ＰＤ−Ｌ１細胞表面発現の評価のために細胞を収穫した。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
[47]免疫系を活用することは、若干数のがんにおいて臨床的効能を有することが証明された。Ｔ細胞と腫瘍細胞との間のＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１の阻害相互作用を解消することにより、チェックポイント抗体療法は、若干数のがんがいかにして治療されるかについてのパラダイムを変化させてきた。実施形態において、本開示は、それを必要とする対象におけるがんを治療するまたは予防するための組成物および方法を提供し、ここで、がんは、宿主免疫系を回避するためにＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路を利用している。方法は、対象に、有効量のＨＳＰ９０阻害剤を、単独でまたはチェックポイント阻害剤等の第２の活性医薬剤（ＡＰＩ）と組み合わせてのいずれかで、投与するステップを含む。本明細書において記述される組成物および方法は、ＨＳＰ９０阻害剤が、低い非細胞毒性用量で腫瘍細胞のインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）シグナル伝達応答をブロックするために有効であるという発見に部分的に基づく。腫瘍細胞は、ＩＦＮ−γシグナリングを利用して、宿主免疫応答の回避のための機序であるＰＤ−Ｌ１を誘導する。したがって、実施形態において、本明細書において記述される組成物および方法は、ＨＳＰ９０阻害剤のこの特性を活かして、がん療法のための新たな治療および治療レジメンを提供する。実施形態において、提供されるのは、そのような治療を必要とする対象、好ましくはヒト対象におけるがんを治療するためのＨＳＰ９０阻害剤の使用に関係する組成物および方法である。本開示は、概して、有効であると以前期待されていたされていたものよりも低い用量で、がんを治療するためのＨＳＰ９０阻害剤の使用に関する。例えば、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量（「ＲＰ２Ｄ」）の９０％未満、またはＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の７５％未満もしくは５０％未満もしくは２５％未満である用量である。本開示の文脈において、そのような用量は、ＨＳＰ９０阻害剤の「治療量以下の」用量と称されることもあり、なぜなら、それらは、ＨＳＰ９０阻害剤ががんの治療において単剤療法として投与される場合に治療的に有効であると以前の第２相研究から期待された用量を下回るからである。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の「治療量以下の用量」は、その阻害剤について、ＲＰ２Ｄの０〜２５％、２５〜５０％、５０〜７５％または７５〜９０％の範囲内である用量を指す。
【００３３】
[48]加えて、本開示は、ＨＳＰ９０阻害剤の、概してＢＣＬ−２シグナリング経路の阻害剤との相乗的な抗がん活性に関係する組成物および方法を提供する。以下でさらに詳細に記述する通り、６つの異なるクラスのＨＳＰ９０阻害剤（分子足場に従って定義される）は、ＢＣＬ−２阻害剤ベネトクラックスと相乗的に作用して、造血器がんおよびリンパがんにおける細胞生存率を阻害した。加えて、がん細胞におけるＢＣＬ−２発現のレベルは、組合せの抗がん活性と相関していた。したがって、本開示は、がん細胞のＢＣＬ−２発現を評価することにより、この併用療法から利益を得る可能性が高いがんを同定する方法を含む、これらの作用物質の相乗的な抗がん活性に基づくＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤との併用療法に関係する組成物および方法も提供する。
ＨＳＰ９０阻害剤
[49]本明細書において記述される方法および組成物に従って、ＨＳＰ９０阻害剤は、ＨＳＰ９０の任意の阻害剤、例えば、ＨＳＰ９０のＡＴＰａｓｅ活性を無効にする任意の阻害剤であってよい。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、ＭＰＣ−０７６７等のプリン様阻害剤、ＡＴ−１３３８７等のレゾルシノール誘導体、タネスピマイシン等のゲルダナマイシン誘導体、ＴＡＳ−１１６等のピラゾロピリジン誘導体、ＳＮＸ−５４２２等のジヒドロインダゾロン誘導体、およびＸＬ−８８８等のトロパン誘導体から選択される。以下の表１は、これらの構造クラスのＨＳＰ９０阻害剤のそれぞれの代表の化学構造を示す。
【００３４】
[50]したがって、実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、ＡＴ−１３３８７、ＡＵＹ９２２、ＢＩＩＢ０２８、ＣＮＦ−２０２４、ＣＵＤＣ−３０５、ガネテスピブ、ＨＳＰ−９９０、ＩＰＩ−５０４、ＫＷ−２４７８、ＭＰＣ−０７６７、ＭＰＣ−３１００、ＰＦ０４９８４７３、ＰＵ−Ｈ７１、ＳＴＡ−９０９０、ＳＮＸ−５４２２、ＴＡＳ−１１６、ＸＬ−８８８、タネスピマイシン、アルベスピマイシン、および薬学的に許容されるその塩から選択されてよい。
【００３５】
【表１−１】
2020505433.tif 000002
【００３６】
【表１−２】
2020505433.tif 000003
【００３７】
方法
[51]本開示は、ＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤を利用する併用療法に基づくがん治療への独自の治療的アプローチを提供する。本明細書において記述されるＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤との併用療法に関係する組成物および方法は、本明細書において記述される通り、これらの２つのクラスの治療剤の相乗的な抗がん活性を活かす。ＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤の組合せを用いる標的療法のために患者を同定することに関連する方法も提供される。実施形態において、方法は、患者由来のがん生検または生物学的試料またはがんにおけるＢＣＬ−２の発現を、測定する、決定するまたはアッセイすることを含む。ＢＣＬ−２発現は、タンパク質発現または遺伝子発現であってよく、当技術分野で公知の日常的方法に従って測定されてよい。例えば、遺伝子発現は、定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）を含む方法によって測定され得る。ＢＣＬ−２タンパク質発現は、例えば、免疫組織化学、免疫細胞化学、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）およびフローサイトメトリーを含むもの等の抗体ベースの検出方法を含む方法によって測定され得る。
【００３８】
[52]本開示は、「低用量」または「治療量以下の用量」のＨＳＰ９０阻害剤が、多様な種類のがんによって利用されるＩＮＦγシグナリング経路を阻害して宿主免疫応答を回避するために有効であるという本発明者らの発見に基づき、そのような量ののＨＳＰ９０阻害剤を用いてがんを治療する方法も提供する。したがって、実施形態において、本明細書において記述される方法に従って、「低用量」または「治療量以下の用量」のＨＳＰ９０阻害剤によって治療されるがんは、宿主免疫系を回避するための、そのＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路の利用によって特徴付けられる。そのようながんの非限定的な例は、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非小細胞性肺がん、膀胱がん、非ホジキンリンパ腫、白血病、Ｔ細胞リンパ腫および腎細胞癌を含む。
【００３９】
[53]加えて、本開示は、「低用量」または「治療量以下の用量」のＨＳＰ９０阻害剤および少なくとも１つの追加の治療剤を利用する併用療法に基づくがん治療への独自の治療的アプローチを提供する。実施形態において、本明細書において記述される併用療法は、治療量以下の用量のＨＳＰ９０阻害剤で達成され、がんの治療において他の治療剤と組み合わせた場合に相乗効果を提供することが期待される、本明細書において記述されるＨＳＰ９０阻害剤の独自の免疫調節活性を活かす。
【００４０】
[54]ＨＳＰ９０阻害剤を用いてがんを治療する単剤療法および併用療法の方法の両方が、本開示によって企図される。併用療法については、下記で記述される。単剤療法の文脈では、実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の約７５％未満である量のＨＳＰ９０阻害剤として特徴付けられる、「低用量」または「治療量以下の用量」で投与される。用語「低用量」および「治療量以下の用量」は、本明細書において記述される方法で使用するためのＨＳＰ９０阻害剤の量に関して、本明細書において交換可能に使用される。
【００４１】
[55]本明細書において記述される方法の実施形態において、治療を必要とする対象は、ＢＣＬ−２を発現するがん、好ましくは非がん細胞または組織を含む参照試料よりも少なくとも２倍高いＢＣＬ−２を発現するがんを有する対象であってよい。
【００４２】
[56]本明細書において記述される方法の実施形態において、治療を必要とする対象は、宿主免疫系を回避するためにＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１経路を利用するがんを有する対象であってよい。
【００４３】
[57]本明細書において記述される方法の実施形態において、治療を必要とする対象は、「標準ケア」もしくは第１選択治療剤を用いる治療に対して非応答性もしくは不応性であるか、その後に再発したがんを有する対象であってよい。この文脈において、用語「非応答性」および「不応性」は、交換可能に使用され、例えば、１つまたは複数の固形腫瘍のサイズを安定させるまたは低減させるため、腫瘍進行を減速させるため、新たな腫瘍転移の発生率を予防する、低減させるまたは減少させるため、あるいはがんに関連する１つまたは複数の症状を軽減させるために、臨床的に適正ではないような、療法に対する対象の応答を指す。特定の薬物療法に対して不応性であるがんは、薬剤抵抗性がんとして記述されることもある。がんのための標準療法において、不応性がんは、能動的治療にもかかわらず進行中の疾患を含むのに対し、「再発性」がんは、任意の現在の療法の非存在下であるが初期療法の成功後に進行するがんを含む。したがって、実施形態において、対象は、１つまたは複数の「標準ケア」治療剤を用いる療法の１つまたは複数の以前のレジメンを受けた対象である。そのような事例において、対象のがんは、不応性または再発性とみなされ得る。
【００４４】
[58]本明細書において記述される方法に従って、「対象」は、哺乳動物を含む。哺乳動物は、例えば、任意の哺乳動物、例えば、ヒト、霊長類、マウス、ラット、イヌ、ネコ、雌ウシ、ウマ、ヤギ、ラクダ、ヒツジまたはブタであることができる。好ましくは、対象は、ヒトである。用語「患者」は、ヒト対象を指す。
【００４５】
[59]実施形態において、本明細書において記述される方法に従って治療されるがんは、脳腫瘍、神経膠腫、肉腫、乳がん、肺がん、非小細胞性肺がん、中皮腫、虫垂がん、尿生殖器がん、腎細胞癌、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、陰茎がん、子宮頸がん、卵巣がん、頭頸部がん、胃腸がん、肝細胞癌、胆嚢がん、食道がん、胃がん、結腸直腸がん、膵臓がん、神経内分泌腫瘍、甲状腺腫瘍、下垂体腫瘍、副腎腫瘍、Ｔ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、白血病およびホジキンリンパ腫からなる群から選択される。
【００４６】
[60]実施形態において、がんは、ＢＣＬ−２を発現するがん、好ましくは参照非癌性組織と比較して少なくとも２倍高いＢＣＬ−２を発現するものから選択される。
[61]実施形態において、がんは、白血病、リンパ腫および骨髄腫から選択される、造血器がんまたはリンパがんである。実施形態において、がんは、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）および急性単球性白血病から選択される、白血病である。実施形態において、がんは、ＡＭＬである。実施形態において、がんは、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫から選択されるリンパ腫である。実施形態において、がんは、好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、バーキットリンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫およびマントル細胞リンパ腫から選択される非ホジキンＢ細胞リンパ腫であり、最も好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）およびマントル細胞リンパ腫から選択される非ホジキンＢ細胞リンパ腫である。実施形態において、がんは、骨髄腫である。
【００４７】
[62]本明細書において使用される場合、「併用療法」または「共同療法」は、ＨＳＰ９０阻害剤および少なくとも１つの追加の「活性医薬品原料」（「ＡＰＩ」）の共同作用からの有益な効果を提供するように意図された治療レジメンの一部として、治療有効量のＨＳＰ９０阻害剤の投与を含む。「併用療法」は、意図または予測されなかった有益な効果を偶然におよび恣意的にもたらす別個の単剤療法レジメンの一部として、２つ以上の治療用化合物の投与を包括するように意図されていない。
【００４８】
[63]好ましくは、ＢＣＬ−２経路阻害剤等の１つまたは複数の追加のＡＰＩと組み合わせたＨＳＰ９０阻害剤を含む組成物の投与は、本明細書において論じられる通り、治療されている対象において相乗的な応答を提供する。この文脈において、用語「相乗的な」は、いずれかの単一療法単独の相加効果よりもさらに有効である組合せの効能を指す。本開示に従う併用療法の相乗効果は、より低い投薬量、例えば、低用量の本明細書において記述されるＨＳＰ９０阻害剤、ならびに／または組合せ外のその用量および／もしくは頻度と比較した、組合せ内の少なくとも１つの作用物質の頻度の少ない投与の使用を可能にすることができる。組合せの追加の有益な効果は、単独で組み合わせたいずれかの療法（単剤療法とも称される）の使用に関連する有害なまたは望ましくない副作用の忌避または低減において現れることができる。
【００４９】
[64]併用療法の文脈において、ＨＳＰ９０阻害剤組成物の投与は、ＢＣＬ−２経路阻害剤等の１つまたは複数の追加の活性剤の投与と同時または連続であってよい。別の実施形態において、併用療法の異なる成分の投与は、異なる頻度であってよい。
【００５０】
[65]追加のＡＰＩは、ＨＳＰ９０阻害剤組成物との共投与のために、単一剤形で製剤化されることができる。追加のＡＰＩは、ＨＳＰ９０阻害剤を含む剤形とは別個に投与されることもできる。追加の活性剤がＨＳＰ９０阻害剤とは別個に投与される場合、これは、同じもしくは異なる投与ルートによって、および／または同じもしくは異なる時間であることができる。
【００５１】
[66]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＢＣＬ−２経路阻害剤、プロテインキナーゼ阻害剤、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤、チェックポイント阻害剤、白金ベースの抗新生物剤、トポイソメラーゼ阻害剤、ヌクレオシド代謝阻害剤、アルキル化剤、挿入剤、チューブリン結合剤、ＤＮＡ修復の阻害剤、およびそれらの組合せであってよい。実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＢＣＬ−２経路阻害剤またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤である。実施形態において、治療量以下の量のＨＳＰ９０阻害剤は、ＢＣＬ−２経路阻害剤またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤とともに投与される。
【００５２】
[67]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤である。実施形態において、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＡＭＰ−２２４、ＡＭＰ−５１４／ＭＥＤＩ−０６８０、アテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ）、アベルマブ（ＭＳＢ００１０７１８Ｃ）、ＢＧＢ−Ａ３１７、ＢＭＳ９３６５５９、セミプリマブ（ＲＥＧＮ２８１０）、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ−４７３６）、ＪＴＸ−４０１４、ニボルマブ（ＢＭＳ−９３６５５８）、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ、ＭＫ−３４７５）、ＧＬＳ−０１０およびＳＨＲ−１２１０から選択される。
【００５３】
[68]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＢＣＬ−２経路阻害剤である。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＡＢＴ−７３７、ＡＴ−１０１（ゴシポール）、ＡＰＧ−１２５２、Ａ１１５５４６３、Ａ１２１０４７７、ナビトクラックス、オバトクラックス、サブトクラックス、ベネトクラックス、Ｓ５５７４６およびＷＥＨＩ−５３９から選択される。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＢＣＬ２、ＢＣＬＸＬまたはＭＣＬ１の阻害剤である。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＡＭＧ−１７６、ＭＩＫ６６５およびＳ６４１３１５から選択される。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＡＢＴ−７３７、ナビトクラックスおよびベネトクラックスから選択される。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ベネトクラックスである。
【００５４】
[69]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＣＴＬＡ−４阻害剤である。実施形態において、ＣＴＬＡ−４阻害剤は、トレメリムマブおよびイピリムマブから選択される。
【００５５】
[70]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、チェックポイント阻害剤である。これらの化合物を用いる治療は、免疫応答に対するチェックおよびバランスとして役立つ分子を標的とすることによって動作する。これらの阻害分子をブロックすること、または代替として、刺激分子を活性化することにより、これらの治療は、既存の抗がん免疫応答を引き出すまたは強化するように設計される。実施形態において、チェックポイント阻害剤は、抗ＣＤ２７抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、抗ＫＩＲ抗体、抗ＬＡＧ−３抗体、抗４−１ＢＢ／ＣＤ１３７抗体、抗ＧＩＴＲ抗体（例えば、ＴＲＸ５１８、ＭＫ−４１６６）、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（商標）、ＰＤ−１抗体）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（ＰＤ−Ｌ１抗体）、バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７、抗ＣＤ２７抗体）、ＭＧＡ２１７（Ｂ７−Ｈ３を標的とする抗体）、リリルマブ（ＫＩＲ抗体）、ＢＭＳ−９８６０１６（ＬＡＧ−３抗体）、ウレルマブ（４−１ＢＢ／ＣＤ１３７抗体）、抗ＴＩＭ３抗体、ＭＥＤＩ−０５６２（ＯＸ４０抗体）、ＳＥＡ−ＣＤ４０（抗ＣＤ４０抗体）、トレメリムマブ（抗ＣＴＬＡ４抗体）、抗ＯＸ４０抗体および抗ＣＤ７３抗体等の抗体から選択されてよい。実施形態において、チェックポイント阻害剤は、ＣＤ７３の小分子阻害剤から選択される（例えば、Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｓ  ２０１６；４（１１  Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒａｃｔ  ｎｒ  ＰＲ１０において記述される通り）。実施形態において、チェックポイント阻害剤は、バルリルマブ、ＭＧＡ２１７、リリルマブ、ＢＭＳ−９８６０１６、ウレルマブ、ＭＥＤＩ−０５６２、ＳＥＡ−ＣＤ４０、ＴＲＸ５１８またはＭＫ−４１６６から選択される。実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＤＮＡ修復阻害剤である。実施形態において、ＤＮＡ修復阻害剤は、オラパリブ、ルカパリブ、ニラパリブ、タラゾパリブ、ベリパリブ、ＣＥＰ−９７２２およびＣＥＰ−８９８３からなる群から選択される。
【００５６】
[71]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、オラパリブ、ルカパリブ、ニラパリブ、タラゾパリブ、ベリパリブ、ＣＥＰ−９７２２およびＣＥＰ−８９８３から選択される、ＤＮＡ修復阻害剤である。
【００５７】
[72]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＶＥＧＦ阻害剤である。実施形態において、ＶＥＧＦ阻害剤は、スニチニブ、パゾパニブ、ベバシズマブ、ソラフェニブ、カボザンチニブ（ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｂ）およびアキシチニブから選択される。
【００５８】
[73]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ｄｄＡＣ、パノビノスタット、エキセメスタン、レトロゾール、エサーチニブ、メレスチニブ、モセチノスタット、エンチノスタット、モトリモッド、イブルチニブ、レナリドマイド、イデラリシブ、エンザルタミド、プレドニゾン、デキサメタゾン、ビンフルニン、ボリノスタット、ガルニセルチブ、ベンダムスチン、オキサリプラチン、ロイコボリン、グアデシタビン、トラメチニブ、ベムラフェニブ、ダカルバジン、アパチニブ、ポマリドマイド、カーフィルゾミブ、ソラフェニブ、５−フルオロウラシル、ＣＢ−８３９、ＣＢ−１１５８、ＧＤＣ−０９１９、ＬＸＨ２５４、ＡＺＤ４６３５、ＡＺＤ９１５０、ＰＬＸ３３９７、ＬＣＬ１６１、ＰＢＦ−５０９、Ｓｙｍ００４、トラスツズマブ、オビヌツズマブ、Ｂ−７０１、ウトミルマブ、リツキシマブ、ＮＫＴＲ−２１４、ＰＥＧインターフェロン２Ａ、ＲＯ７００９７８９、ＭＥＤＩ９４４７、ＭＫ−１２４８、ＬＹ２５１０９２４、ＡＲＲＹ−３８２、ＭＥＤＩ０５６２、ＬＡＧ５２５、ＮＩＳ７９３、ＧＷＮ３２３、ＪＴＸ−２０１１、ＴＳＲ−０２２およびＲＥＧＮ３７６７から選択される。
【００５９】
[74]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、治療が、がんの特異的遺伝子、タンパク質、またはがんの成長および生存に寄与する組織環境を標的とする、標的療法に向けられる。この種類の治療は、健康な細胞への損傷を限定しながら、がん細胞の成長および広がりをブロックする。実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、治療が、新たな血管を作製するプロセスである血管新生を停止することに焦点を当てる、抗血管新生療法に向けられる。腫瘍は、成長し広がるために血管によって送達される栄養素を必要とするため、抗血管新生療法の目標は、腫瘍を「飢えさせる」ことである。１つの抗血管新生薬、ベバシズマブ（アバスチン）は、転移性腎癌を持つ人々について腫瘍成長を減速させることが示された。インターフェロンと組み合わせたベバシズマブは、腫瘍成長および広がりを減速させる。
【００６０】
[75]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、がんと闘うための体の自然な防衛を引き上げるように設計される、生物学的療法とも呼ばれる免疫療法に向けられる。これは、免疫系機能を、改善させる、標的とするまたは修復するために、体によってまたは実験室でのいずれかで作製された材料を使用する。例えば、インターロイキン−２（ＩＬ−２）は、腎臓がんを治療するために使用された薬物、ならびにＡＭ００１０およびインターロイキン−１５である。これらは、白血球によって生成され、腫瘍細胞の破壊を含む免疫系機能において重要な、サイトカインと呼ばれる細胞ホルモンである。アルファ−インターフェロンは、広がった腎臓がんを治療するために使用される別の種類の免疫療法である。インターフェロンは、がん細胞の表面上のタンパク質を変化させ、それらの成長を減速させると思われる。進行性腎臓がんを持つ患者のための、化学療法と組み合わせたＩＬ−２およびアルファ−インターフェロンの多くの併用療法は、ＩＬ−２またはインターフェロン単独よりも有効である。
【００６１】
[76]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、腫瘍特異的または腫瘍関連抗原に対する免疫応答を導出して、これらの抗原を担持するがん細胞を免疫系が攻撃するのを促すように設計される、がんワクチンである。実施形態において、がんワクチンは、ＡＧＳ−００３、ＤＣＶａｘ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、または患者のがん細胞に由来する個別化ワクチンである。
【００６２】
[77]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、がん細胞を攻撃するように免疫系を活性化するために使用される、組換えタンパク質等の免疫刺激剤である。実施形態において、免疫刺激剤は、デネニコキン（組換えＩＬ−２１）である。
【００６３】
[78]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、がん細胞の排除を促すように免疫系を変調する小分子である。実施形態において、小分子は、エパカドスタットもしくはナボキシモド（いずれもＩＤＯ阻害剤）、またはＰＬＸ３３９７（ＣＳＦ−１Ｒの阻害剤）である。
【００６４】
[79]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、タキソール、ビンクリスチン、ドキソルビシン、イダルビシン、テムシロリムス、カルボプラチン、オファツムマブ、リツキシマブ、およびそれらの組合せから選択される。
【００６５】
[80]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、クロラムブシル、イホスファミド、ドキソルビシン、メサラジン、サリドマイド、レナリドマイド、テムシロリムス、エベロリムス、フルダラビン、シタラビン、ミトキサントロン、フォスタマチニブ、パクリタキセル、ドセタキセル、オファツムマブ、リツキシマブ、デキサメタゾン、プレドニゾン、ＣＡＬ−１０１、イブリツモマブ、トシツモマブ、ボルテゾミブ、ペントスタチン、エンドスタチン、またはそれらの組合せから選択される。
【００６６】
[81]実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、患者から取り出され、遺伝的に修飾または化学物質で処理されてその活性を強化し、次いで、免疫系の抗がん応答を改善させるという目標で患者に再導入された、患者自身の免疫細胞であってよい。
【００６７】
[82]「併用療法」は、非薬物療法（例えば、手術または放射線治療）とさらに組み合わせた、本明細書において記述される通りのＨＳＰ９０阻害剤の投与も内包する。併用療法が非薬物治療をさらに含む場合、非薬物治療は、治療用化合物および非薬物治療の組合せの共同作用からの有益な効果が達成される限り、任意の好適な時間に行われてよい。例えば、適切な事例において、有益な効果は、非薬物治療が治療用化合物の投与から一時的に、おそらく数日間またはさらには数週間、除去される場合、依然として達成される。
【００６８】
[83]非薬物治療は、化学療法、放射線療法、ホルモン療法、抗エストロゲン療法、遺伝子療法、手術（例えば、根治的腎摘出術、部分的腎摘出術、腹腔鏡およびロボット手術）、高周波アブレーションおよび冷凍アブレーションから選択され得る。例えば、非薬物療法は、卵巣の除去（例えば、体内のエストロゲンのレベルを低減させるため）、胸腔穿刺（例えば、胸部から流体を除去するため）、穿刺（例えば、腹部から流体を除去するため）、血管筋腫を除去するもしくは収縮させるための手術、肺移植（および場合により移植による感染症を予防するために抗生物質を用いる）、または酸素療法（例えば、両方の鼻孔に置かれた２つの小型プラスチックチューブもしくはプロングを含有する鼻カニューレを通して、鼻および口に被せて取り付けたフェイスマスクを通して、または経気管酸素療法とも呼ばれる首の前面を通って気管に挿入される小型チューブを通して）である。
【００６９】
[84]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、非小細胞性肺がん（ＮＳＣＬＣ）から選択され、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、シスプラチン／ドセタキセル、ベバシズマブ、ゲムシタビン、カルボプラチン、（ナブ−）パクリタキセル、ペメトレキセド、エトポシド、Ｓｙｍ００４（抗ＥＧＦＲ）、ゲフィチニブ、モセチノスタット、ＰＬＸ３３９７、エンチノスタット、ＡＺＤ４６３５（Ａ２ａＲアンタゴニスト）、トレメリムマブ、イピリムマブおよびＰＢＦ−５０９（Ａ２ＡＲアンタゴニスト）から選択される。
【００７０】
[85]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、固形腫瘍から選択され、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ラムシルマブ、アベマシクリブ、メレスチニブ、ＲＯ７００９７８９（抗ＣＤ４０）、ＭＥＤＩ９４４７（抗ＣＤ７３）、ＭＫ−１２４８（抗ＧＩＴＲ）、オラパリブ、セジラニブ、５ＦＵ、ロイコボリン、オキサリプラチン、イブルチニブ、ＬＹ２５１０９２４（ＣＸＣＲ４アンタゴニスト）、ＡＲＲＹ−３８２（ＣＳＦＲ１ｉ）、ＭＥＤＩ０５６２（抗ＯＸ４０）、ＬＡＧ５２５（抗ＬＡＧ３）、ＮＩＳ７９３、リリルマブ（抗ＫＩＲ）、ＮＫＴＲ−２１４（選択的ＩＬ−２）；バルリルマブ（抗ＣＤ２７）、ＩＬ−２１（デネニコキン）；ＧＷＮ３２３（抗ＧＩＴＲ）；ＪＴＸ−２０１１（抗ＩＣＯＳ）、ガルニセルチブ；ＴＳＲ−０２２（抗ＴＩＭ３）；ＢＭＳ−９８６０１６（抗ＬＡＧ３）、ＲＥＧＮ３７６７（抗ＬＡＧ３）；ＧＤＣ−０９１９（ＩＤＯ阻害剤）、ＣＢ−１１５８（アルギナーゼ阻害剤）およびＡＺＤ４６３５（Ａ２ａＲアンタゴニスト）から選択される。
【００７１】
[86]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、中皮腫、結腸直腸がん、尿路上皮がん、胃がんおよび肝臓がんから選択され、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、トレメリムマブおよびイピリムマブから選択される。
【００７２】
[87]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、乳がんから選択され、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ナブ−パクリタキセル、エピルビシン、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ｄｄＡＣ、エベロリムス、パノビノスタット、ＬＣＬ１６１（ＩＡＰ阻害剤）、抗エストロゲン療法（エキセメスタン）、レトロゾール、デシタビンおよびトラスツズマブから選択される。
【００７３】
[88]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、ＮＳＣＬＣのいくつかの形態を含むＡＬＫ陽性肺がん等のＡＬＫ陽性がんであり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、エサーチニブから選択される。
【００７４】
[89]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、尿路上皮がんであり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ゲムシタビン／カルボプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、ビンフルニン、Ｂ−７０１（抗ＦＧＦＲ３）およびボリノスタットから選択される。
【００７５】
[90]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、卵巣がんであり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、マルチエピトープ抗葉酸ワクチン、モトリモッド、カルボプラチンおよびパクリタキセルから選択される。
【００７６】
[91]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、腎細胞がん（ＲＣＣ）であり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、エンチノスタット、ベバシズマブ、ＩＬ−２、ボリノスタットおよびＣＢ−８３９（グルタミナーゼ阻害剤）から選択される。
【００７７】
[92]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、膵臓がんであり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ガルニセルチブである。
[93]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、胃がんであり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、トラスツズマブ、カペシタビン、シスプラチン、マルゲツキシマブおよびアパチニブから選択される。
【００７８】
[94]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、肝臓がんであり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、アパチニブおよびソラフェニブから選択される。
【００７９】
[95]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）であり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、アザシチジン、トレメリムマブおよびエンチノスタットから選択される。
【００８０】
[96]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）であり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、オビヌツズマブ、イブルチニブ、レナリドマイド、リツキシマブおよびベンダムスチンから選択される。
【００８１】
[97]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、転移性結腸直腸または前立腺がんであり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、シプリューセル−Ｔ、エンザルタミド、オラパリブ、ドセタキセル、プレドニゾンおよびデキサメタゾンから選択される。
【００８２】
[98]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）であり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＫＴＥ−１９、ＡＺＤ９１５０（ＳＴＡＴ３阻害剤）、ウトミルマブ、リツキシマブ、アザシチジン、ベンダムスチン、ゲムシタビン、オキサリプラチンおよびＲ−ＣＨＯＰから選択される。
【００８３】
[99]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、膠芽細胞腫であり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ウレルマブ（抗４−１ＢＢ）およびＢＭＳ９８６０１６（抗ＬＡＧ−３）から選択される。
【００８４】
[100]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、多発性骨髄腫（ＭＭ）であり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、レナリドマイド、デキサメタゾン、カーフィルゾミブ、ダラツムマブ（抗ＣＤ３８）およびポマリドマイドから選択される。
【００８５】
[101]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、胃腸または胸部がんであり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ラムシルマブ（抗ＶＥＧＦＲ２）である。
【００８６】
[102]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、頭頸部がんであり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、シスプラチン／カルボプラチン、５ＦＵ、セツキシマブおよびＳＤ−１０１（抗ＴＬＲ９）から選択される。
【００８７】
[103]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、急性骨髄白血病（ＡＭＬ）であり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、アザシチジン、クレノラニブ、シタラビン、ダウノルビシン、エトポシド、ギルテリチニブ、グアデシタビン、イダルビシン、ミドスタウリン、ミトキサントロン、キザルチニブ、ソラフェニブ、タンデュチニブおよびベネトクラックスから選択される。実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、クレノラニブ、シタラビン、ダウノルビシン、ギルテリチニブ、ソラフェニブおよびベネトクラックスから選択される。実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ベネトクラックスである。実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、ミトキサントロンおよびイダルビシン等のアントラサイクリン；シタラビン；ミドスタウリン、ソラフェニブ（ｓｏｒｅｆｅｎｉｂ）、クレノラニブ、キザルチニブ、タンデュチニブ、ギルテリチニブ、レスタウルチニブ、ドビチニブ、パクリチニブおよびＸＬ９９９等のチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）；エトポシド、フルダラビン、Ｇ−ＣＳＦ、アザシチジン、デシタビン、ベネトクラックス、ＡＢＴ−７３７、ナビトクラックス、オバトクラックス、サブトクラックス、Ｓ５５７４６、ＡＴ−１０１（ゴシポール）およびＡＰＧ−１２５２、ならびに先述のいずれかの組合せから選択される。実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、三酸化ヒ素（トリセノックス）、セルビジン（ダウノルビシン塩酸塩）、クラフェン（シクロホスファミド）、シクロホスファミド、シタラビン（タラビンＰＦＳ）、サイトサール−Ｕ（シタラビン）、サイトキサン（シクロホスファミド）、ダウノルビシン塩酸塩（ルビドマイシン）、ドキソルビシン塩酸塩、エナシデニブメシル酸塩、イダマイシン（イダルビシン塩酸塩）、イダルビシン塩酸塩ｉｄｈｉｆａ（エナシデニブメシル酸塩）、ミドスタウリン（Ｒｙｄａｐｔ）、ミトキサントロン塩酸塩、ネオサール（シクロホスファミド）、チオグアニン（タブロイド）、硫酸ビンクリスチン（ビンカサールＰＦＳ）、アザシチジンおよびデシタビン、ならびに先述のいずれかの組合せから選択される。実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＡＭＰ−２２４、ＡＭＰ−５１４／ＭＥＤＩ−０６８０、アテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ）、アベルマブ（ＭＳＢ００１０７１８Ｃ）、ＢＧＢ−Ａ３１７、ＢＭＳ９３６５５９、セミプリマブ（ＲＥＧＮ２８１０）、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ−４７３６）、ＪＴＸ−４０１４、ニボルマブ（ＢＭＳ−９３６５５８）、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ、ＭＫ−３４７５）、ＧＬＳ−０１０およびＳＨＲ−１２１０からなる群から選択される、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤である。実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＡＢＴ−７３７、ＡＴ−１０１（ゴシポール）、ＡＰＧ−１２５２、Ａ１１５５４６３、Ａ１２１０４７７、ナビトクラックス、オバトクラックス、サブトクラックス、ベネトクラックス、Ｓ５５７４６およびＷＥＨＩ−５３９からなる群から選択される、ＢＣＬ−２経路阻害剤である。実施形態に���いて、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＢＣＬ２、ＢＣＬＸＬまたはＭＣＬ１の阻害剤である。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＡＭＧ−１７６、ＭＩＫ６６５およびＳ６４１３１５から選択される。実施形態において、ＢＣＬ−２経路阻害剤は、ＡＢＴ−７３７、ナビトクラックスおよびベネトクラックスから選択される。
【００８８】
[104]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、黒色腫であり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ダブラフェニブ、トラメチニブ、ＰＬＸ３３９７（ＣＳＦ−Ｒ１阻害剤）、ベムラフェニブ、ＩＦＮα２Ｂ、ダカルバジン、カルボプラチン、パクリタキセルおよびＳＤ−１０１（抗ＴＬＲ９）から選択される。
【００８９】
[105]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、非ホジキンリンパ腫であり、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、ＪＣＡＲ０１４から選択される。
【００９０】
[106]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療量以下の量であり、がんは、腎がんであり、抗がん剤は、スニチニブ、パゾパニブ、ベバシズマブ、ソラフェニブ、カボザンチニブおよびアキシチニブ等のＶＥＧＦ阻害剤、またはエベロリムスもしくはテムシロリムス等のｍＴＯＲ阻害剤から選択されてよい。
【００９１】
[107]概して、２つの異なるＡＰＩが投与される場合、一方は主要剤とみなされ、他方は主要剤の補助である。本明細書において記述される方法の実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、治療レジメンにおいて主要または補助剤のいずれかであってよい。実施形態において、補助剤は、治療レジメンにおいて、主要剤の投与の前（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間または１２週間前）、それと同時に、またはその後（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間または１２週間後）に、投与される。
【００９２】
[108]本明細書において記述される方法の文脈において、対象に投与されるＨＳＰ９０阻害剤の量は、治療有効量である。用語「治療有効量」は、治療されている疾患もしくは障害を治療する、その症状を改善する、その重症度を低減させる、もしくはその持続期間を低減させるため、または別の療法の治療効果を強化するもしくは改善させるために十分な、あるいは対象において検出可能な治療効果を呈するために十分な量を指す。実施形態において、本明細書において記述される方法におけるＨＳＰ９０阻害剤の治療有効量は、「治療量以下の」またはＨＳＰ９０阻害剤の第２相臨床研究に基づき有効であると期待される用量を下回るとみなされるであろう用量である。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の治療量以下の用量は、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の７５％未満、またはＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の５０％未満もしくは２５％未満である用量である。一実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の治療有効量は、対象のがん細胞においてＩＦＮ−γシグナリングを阻害するために有効な量である。実施形態において、方法は、治療量以下の用量のＨＳＰ９０阻害剤を、単独でまたは１つもしくは複数の追加のＡＰＩと組み合わせて投与するステップを含む。
【００９３】
[109]本明細書において使用される場合、「治療」、「治療すること」または「治療する」は、疾患、状態または障害に対抗する目的のための患者の管理およびケアを記述し、疾患、状態または障害の症状または合併症を軽減するため、あるいは疾患、状態または障害を排除するための、単剤療法として単独での（例えば低用量ＨＳＰ９０を利用して）または本明細書において記述される通りの少なくとも１つの追加のＡＰＩと組み合わせた、ＨＳＰ９０阻害剤の投与を含む。
【００９４】
[110]ＨＳＰ９０阻害剤を用いる単剤療法および１つまたは複数の追加のＡＰＩとの併用療法の両方を含む実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の投与は、治療されているがんの症状または合併症の排除につながるが、がんの排除は要求されない。一実施形態において、症状の重症度は、減少する。がんの文脈において、そのような症状は、腫瘍が、成長因子を分泌する、細胞外マトリックスを分解する、血管新生される、並列する組織との接着を喪失するまたは転移する程度、ならびに転移の数、および腫瘍サイズおよび／または体積における低減を含む、重症度または進行の臨床マーカーを含んでよい。
【００９５】
[111]本明細書において記述される方法に従ってがんを治療することは、腫瘍のサイズにおける低減をもたらすことができる。腫瘍のサイズにおける低減は、「腫瘍退縮」とも称され得る。好ましくは、治療後、腫瘍サイズは、治療前のそのサイズと比べて、５％以上低減される；より好ましくは、腫瘍サイズは、１０％以上低減される；より好ましくは、２０％以上低減される；より好ましくは、３０％以上低減される；より好ましくは、４０％以上低減される；さらに一層好ましくは、５０％以上低減される；最も好ましくは、７５％以上を超えて低減される。腫瘍のサイズは、任意の再現可能な測定手段によって測定されてよい。腫瘍のサイズは、腫瘍の直径として測定されてよい。
【００９６】
[112]本明細書において記述される方法に従ってがんを治療することは、腫瘍体積における低減をもたらすことができる。好ましくは、治療後、腫瘍体積は、治療前のそのサイズと比べて、５％以上低減される；より好ましくは、腫瘍体積は、１０％以上低減される；より好ましくは、２０％以上低減される；より好ましくは、３０％以上低減される；より好ましくは、４０％以上低減される；さらに一層好ましくは、５０％以上低減される；最も好ましくは、７５％以上を超えて低減される。腫瘍体積は、任意の再現可能な測定手段によって測定されてよい。
【００９７】
[113]本明細書において記述される方法に従ってがんを治療することは、腫瘍の数における減少をもたらすことができる。好ましくは、治療後、腫瘍数は、治療前の数と比べて、５％以上低減される；より好ましくは、腫瘍数は、１０％以上低減される；より好ましくは、２０％以上低減される；より好ましくは、３０％以上低減される；より好ましくは、４０％以上低減される；さらに一層好ましくは、５０％以上低減される；最も好ましくは、７５％を超えて低減される。腫瘍の数は、任意の再現可能な測定手段によって測定されてよい。腫瘍の数は、肉眼でまたは指定倍率で見える腫瘍をカウントすることによって、測定されてよい。好ましくは、指定倍率は、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍または５０倍である。血液がんでは、カウントは、血液試料中のがんに関係する細胞（例えば、リンパ腫または白血病細胞）の数であってよい。
【００９８】
[114]本明細書において記述される方法に従ってがんを治療することは、原発腫瘍部位から遠い他の組織または臓器内の転移病変の数における減少をもたらすことができる。好ましくは、治療後、転移病変の数は、治療前の数と比べて、５％以上低減される；より好ましくは、転移病変の数は、１０％以上低減される；より好ましくは、２０％以上低減される；より好ましくは、３０％以上低減される；より好ましくは、４０％以上低減される；さらに一層好ましくは、５０％以上低減される；最も好ましくは、７５％を超えて低減される。転移病変の数は、任意の再現可能な測定手段によって測定されてよい。転移病変の数は、肉眼でまたは指定倍率で見える転移病変をカウントすることによって、測定されてよい。好ましくは、指定倍率は、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍または５０倍である。
【００９９】
[115]本明細書において記述される方法に従ってがんを治療することは、担体単独を受けている集団と比較した、治療された対象の集団の平均生存時間における増大をもたらすことができる。好ましくは、平均生存時間は、３０日を超えて；より好ましくは、６０日を超えて；より好ましくは、９０日を超えて；最も好ましくは、１２０日を超えて増大する。集団の平均生存時間における増大は、任意の再現可能な手段によって測定されてよい。集団の平均生存時間における増大は、例えば、集団について治療開始後の平均生存長さを算出することによって測定されてよい。集団の平均生存時間における増大は、例えば、集団について第１回治療の完了後の平均生存長さを算出することによって測定されてもよい。
【０１００】
[116]本明細書において記述される方法に従ってがんを治療することは、未治療対象の集団と比較した、治療された対象の集団の平均生存時間における増大をもたらすことができる。好ましくは、平均生存時間は、３０日を超えて；より好ましくは、６０日を超えて；より好ましくは、９０日を超えて；最も好ましくは、１２０日を超えて増大する。集団の平均生存時間における増大は、任意の再現可能な手段によって測定されてよい。集団の平均生存時間における増大は、例えば、集団について治療開始後の平均生存長さを算出することによって測定されてよい。集団の平均生存時間における増大は、例えば、集団について第１回治療の完了後の平均生存長さを算出することによって測定されてもよい。
【０１０１】
[117]本明細書において記述される方法に従ってがんを治療することは、ＨＳＰ９０阻害剤ではない薬物を用いる単剤療法を受けている集団と比較した、治療された対象の集団の平均生存時間における増大をもたらすことができる。好ましくは、平均生存時間は、３０日を超えて；より好ましくは、６０日を超えて；より好ましくは、９０日を超えて；最も好ましくは、１２０日を超えて増大する。集団の平均生存時間における増大は、任意の再現可能な手段によって測定されてよい。集団の平均生存時間における増大は、例えば、集団について治療開始後の平均生存長さを算出することによって測定されてよい。集団の平均生存時間における増大は、例えば、集団について第１回治療の完了後の平均生存長さを算出することによって測定されてもよい。
【０１０２】
[118]本明細書において記述される方法に従ってがんを治療することは、担体単独を受けている集団と比較した、治療された対象の集団の死亡率における減少をもたらすことができる。本明細書において記述される方法に従って障害、疾患または状態を治療することは、未治療集団と比較した、治療された対象の集団の死亡率における減少をもたらすことができる。本明細書において記述される方法に従って障害、疾患または状態を治療することは、ＨＳＰ９０阻害剤ではない薬物を用いる単剤療法を受けている集団と比較した、治療された対象の集団の死亡率における減少をもたらすことができる。好ましくは、死亡率は、２％を超えて；より好ましくは、５％を超えて；より好ましくは、１０％を超えて；最も好ましくは、２５％を超えて減少する。治療された対象の集団の死亡率における減少は、任意の再現可能な手段によって測定されてよい。集団の死亡率における減少は、例えば、集団について治療開始後の単位時間当たりの疾患関連死の平均数を算出することによって測定されてよい。集団の死亡率における減少は、例えば、集団について第１回治療の完了後の単位時間当たりの疾患関連死の平均数を算出することによって測定されてもよい。
【０１０３】
[119]本明細書において記述される方法に従ってがんを治療することは、腫瘍成長率における減少をもたらすことができる。好ましくは、治療後、腫瘍成長率は、治療前の数と比べて、少なくとも５％低減される；より好ましくは、腫瘍成長率は、少なくとも１０％低減される；より好ましくは、少なくとも２０％低減される；より好ましくは、少なくとも３０％低減される；より好ましくは、少なくとも４０％低減される；より好ましくは、少なくとも５０％低減される；さらに一層好ましくは、少なくとも５０％低減される；最も好ましくは、少なくとも７５％低減される。腫瘍成長率は、任意の再現可能な測定手段によって測定されてよい。腫瘍成長率は、単位時間当たりの腫瘍直径の変化に従って測定されることができる。一実施形態において、治療後、腫瘍成長率は、約ゼロであってよく、例えば、腫瘍が成長を停止した、同じサイズを維持することが決定される。
【０１０４】
[120]本明細書において記述される方法に従ってがんを治療することは、腫瘍再成長における減少をもたらすことができる。好ましくは、治療後、腫瘍再成長は、５％未満であり；より好ましくは、腫瘍再成長は、１０％未満；より好ましくは、２０％未満；より好ましくは、３０％未満；より好ましくは、４０％未満；より好ましくは、５０％未満；さらに一層好ましくは、５０％未満；最も好ましくは、７５％未満である。腫瘍再成長は、任意の再現可能な測定手段によって測定されてよい。腫瘍再成長は、例えば、治療に続く事前の腫瘍縮小後の腫瘍の直径における増大を測定することによって測定される。腫瘍再成長における減少は、治療が停止した後に腫瘍が再発に失敗することによって示される。
医薬組成物および製剤
[121]本開示は、ある量のＨＳＰ９０阻害剤を、単独でまたはＢＣＬ−２経路阻害剤等の少なくとも１つの追加のＡＰＩと組み合わせてのいずれかで含む、医薬組成物を提供する。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の７５％未満である。実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤の量は、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の７５％未満である。本明細書において記述される実施形態のいずれかに従って、医薬組成物は、経口、口腔内または非経口投与に適合されてよい。実施形態において、医薬組成物は、例えば吸入による経肺投与に適合されてよい。実施形態において、医薬組成物は、経口投与に適合される。実施形態において、医薬組成物は、非経口投与に適合される。
【０１０５】
[122]実施形態において、ＨＳＰ９０阻害剤は、少なくとも１つの追加のＡＰＩと、単一剤形で組み合わせられる。実施形態において、少なくとも１つの追加のＡＰＩは、併用療法を使用する治療の方法と関連付けて上記で記述した作用物質から選択される。
【０１０６】
[123]「医薬組成物」は、本明細書において記述される化合物を、対象への投与に好適な薬学的に許容される形態で含有する製剤である。本明細書において使用される場合、語句「薬学的に許容される」は、妥当な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症なしに、ヒトおよび動物の組織と接触しての使用に好適であり、合理的なベネフィット／リスク比に見合った、化合物、材料、組成物、担体および／または液体剤形を指す。
【０１０７】
[124]「薬学的に許容される賦形剤」は、概して安全、非毒性であり、生物学的にも別様にも望ましくないものではない医薬組成物を調製する際に有用である賦形剤を意味し、獣医学への使用およびヒトの薬学への使用に許容される賦形剤を含む。薬学的に許容される賦形剤の例は、限定されないが、滅菌液、水、緩衝生理食塩水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール等）、油、洗剤、懸濁化剤、炭水化物（例えば、グルコース、ラクトース、スクロースまたはデキストラン）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸またはグルタチオン）、キレート化剤、低分子量タンパク質、またはそれらの好適な混合物を含む。
【０１０８】
[125]医薬組成物は、バルクでまたは投薬量単位形態で提供されることができる。投与の容易さおよび投薬量の均一性のために、医薬組成物を投薬量単位形態で製剤化することがとりわけ有利である。用語「投薬量単位形態」は、本明細書において使用される場合、治療される対象への単位投薬量として適した物理的に不連続な単位を指し、各単位は、所要の医薬担体に関連して所望の治療効果を生成するように算出された、所定分量の活性化合物を含有する。本開示の投薬量単位形態についての仕様は、活性化合物の独自の特徴および達成される特定の治療効果によって決定付けられ、これらに直接的に依存する。投薬量単位形態は、アンプル、バイアル、坐剤、糖衣錠剤、錠剤、カプセル剤、点滴バッグ、またはエアゾール吸入器上の単一ポンプであることができる。
【０１０９】
[126]治療用途において、投薬量は、選択される投薬量に影響を与える他の要因の中でも、作用物質、レシピエント患者の年齢、体重および臨床状態、ならびに療法を施す臨床医または実務家の経験および判断に応じて変動する。概して、用量は、治療有効量であるべきである。投薬量は、ｍｇ／ｋｇ／日測定単位で提供されることができる（その用量は、患者の体重（ｋｇ）、体表面積（ｍ２）および年齢（歳）に応じて調整されてよい）。有効量の医薬組成物は、臨床医または他の有資格観察者によって指摘されている通りの客観的に同定可能な改善を提供するものである。例えば、障害、疾患または状態の症状を軽減することである。本明細書において使用される場合、用語「投薬量有効方式（ｄｏｓａｇｅ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｍａｎｎｅｒ）」は、対象または細胞において所望の生物学的効果を生成するための医薬組成物の量を指す。
【０１１０】
[127]例えば、投薬量単位形態は、１ナノグラムから２ミリグラム、または０．１ミリグラムから２グラム、または１０ミリグラムから１グラムまで、または５０ミリグラムから５００ミリグラムまで、または１マイクログラムから２０ミリグラムまで、または１マイクログラムから１０ミリグラムまで、または０．１ミリグラムから２ミリグラムまでを含むことができる。
【０１１１】
[128]医薬組成物は、任意の所望のルート（例えば、経肺、吸入、鼻腔内、経口、口腔内、舌下、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、胸膜内、くも膜下腔内、経皮、経粘膜、経直腸等）による投与のために、任意の好適な形態（例えば、液体、エアゾール剤、液剤、吸入剤、ミスト、スプレー剤；または固体、散剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、パッチ剤等）をとることができる。例えば、本開示の医薬組成物は、吸入または吹送（口または鼻のいずれかを経由する）によるエアゾール投与のための水溶液または散剤の形態、経口投与のための錠剤またはカプセル剤の形態；直接注射または静脈内注入のための滅菌注入液への添加のいずれかによる投与に好適な滅菌水溶液または分散液の形態；あるいは、経皮または経粘膜投与のための、ローション剤、クリーム剤、フォーム剤、パッチ剤、懸濁剤、液剤または坐剤の形態であってよい。
【０１１２】
[129]医薬組成物は、カプセル剤、錠剤、口腔内形態、トローチ剤、キャンディー剤、および乳剤、水性懸濁剤、分散液または液剤の形態の経口液体を含むがこれらに限定されない、経口的に許容される投薬の形態であることができる。カプセル剤は、本開示の化合物と、薬学的に許容されるデンプン（例えば、コーン、バレイショまたはタピオカデンプン）、砂糖、人工甘味剤、粉末セルロース、例えば結晶性および微結晶性セルロース、小麦粉、ゼラチン、ガム等の不活性充填剤および／または希釈剤との混合物を含有してよい。経口使用のための錠剤の事例において、一般的に使用される担体は、ラクトースおよびコーンスターチを含む。ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤が添加されてもよい。カプセル剤形態での経口投与のために、有用な希釈剤は、ラクトースおよび乾燥コーンスターチを含む。水性懸濁剤および／または乳剤が経口的に投与される場合、本開示の化合物は、乳化および／または懸濁化剤と組み合わせられた油性相に懸濁または溶解されてよい。所望ならば、ある特定の甘味および／または香味および／または着色剤が添加されてよい。
【０１１３】
[130]医薬組成物は、錠剤の形態であることができる。錠剤は、本開示の化合物の剤形を、砂糖または糖アルコール、例えばラクトース、スクロース、ソルビトールまたはマンニトール等の不活性希釈剤または担体と一緒に含むことができる。錠剤は、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、炭酸カルシウムまたはセルロースもしくはその誘導体、例えばメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびコーンスターチ等のデンプン等、非糖由来希釈剤をさらに含むことができる。錠剤は、ポリビニルピロリドン等の結合および造粒剤、崩壊剤（例えば、架橋カルボキシメチルセルロース等の膨潤性架橋ポリマー）、滑沢剤（例えば、ステアレート）、保存剤（例えば、パラベン）、抗酸化剤（例えば、ＢＨＴ）、緩衝剤（例えば、リン酸またはクエン酸緩衝液）、ならびにクエン酸塩／重炭酸塩混合物等の発泡剤をさらに含むことができる。
【０１１４】
[131]錠剤は、コーティング錠であることができる。コーティングは、保護フィルムコーティング（例えば、ワックスまたはワニス）、または活性剤の放出、例えば遅延放出（摂取してから所定の時間差の後の活性物の放出）もしくは胃腸管内の特定の場所での放出を制御するように設計されたコーティングであることができる。後者は、例えば、商標名Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）で販売されているもの等の腸溶性フィルムコーティングを使用して、達成され得る。
【０１１５】
[132]錠剤製剤は、従来の圧縮、湿式造粒または乾式造粒法によって作製されてよく、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ラウリル硫酸ナトリウム、微結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、アルギン酸、アカシアガム、キサンタンガム、クエン酸ナトリウム、複合ケイ酸塩、炭酸カルシウム、グリシン、デキストリン、スクロース、ソルビトール、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、ラクトース、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、タルク、乾燥デンプンおよび粉砂糖を含むがこれらに限定されない、薬学的に許容される希釈剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、表面変性剤（界面活性剤を含む）、懸濁化または安定化剤を利用してよい。好ましい表面変性剤は、非イオン性およびアニオン性表面変性剤を含む。表面変性剤の代表例は、ポロキサマー１８８、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、コロイド状二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウムおよびトリエタノールアミンを含むがこれらに限定されない。
【０１１６】
[133]医薬組成物は、硬または軟ゼラチンカプセル剤の形態であることができる。この製剤に従って、本開示の化合物は、固体、半固体または液体形態であってよい。
[134]医薬組成物は、非経口投与に好適な滅菌水溶液または分散液の形態であることができる。非経口という用語は、本明細書において使用される場合、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、動脈内、滑液嚢内、胸骨内、くも膜下腔内、病巣内および頭蓋内注射または注入技術を含む。
【０１１７】
[135]医薬組成物は、直接注射または静脈内注入のための滅菌注入液への添加のいずれかによる投与に好適な滅菌水溶液または分散液の形態であることができ、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、それらの好適な混合物、または１つもしくは複数の植物油を含有する、溶媒または分散媒を含む。本開示の化合物の溶液または懸濁液は、遊離塩基または薬理学的に許容される塩として、界面活性剤と好適に混合された水中で調製されることができる。好適な界面活性剤の例が以下で記載される。分散液は、例えば、グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびその油中混合物中で調製されることもできる。
【０１１８】
[136]本開示の方法において使用するための医薬組成物は、製剤中に存在する任意の担体または希釈剤（ラクトースまたはマンニトール等）に加えて、１つまたは複数の添加物をさらに含むことができる。１つまたは複数の添加物は、１つまたは複数の界面活性剤を含むまたはそれらからなることができる。界面活性剤は、典型的には、細胞の脂質構造にそれらを直接挿入させて、薬物浸透および吸収を強化する、脂肪酸等の１つまたは複数の長鎖脂肪族鎖を有する。界面活性剤の相対疎水性および疎水性を特徴付けるために一般的に使用される経験的パラメーターは、親水性親油性バランス（「ＨＬＢ」値）である。より低いＨＬＢ値を持つ界面活性剤ほど疎水性が高く、より大きい油への溶解度を有するのに対し、より高いＨＬＢ値を持つ界面活性剤ほど疎水性が高く、より大きい水溶液への溶解度を有する。故に、親水性界面活性剤は、概して、約１０より大きいＨＬＢ値を有する化合物であるとみなされ、疎水性界面活性剤は、概して、約１０未満のＨＬＢ値を有するものである。しかしながら、これらのＨＬＢ値は、多くの界面活性剤について、ＨＬＢ値を決定するために選択される経験的方法に応じてＨＬＢ値が約８ＨＬＢ単位ほども異なり得ることから、指針にすぎない。
【０１１９】
[137]中でも、本開示の組成物において使用するための界面活性剤は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）−脂肪酸およびＰＥＧ−脂肪酸モノおよびジエステル、ＰＥＧグリセロールエステル、アルコール−油エステル交換生成物、ポリグリセリル脂肪酸、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ステロールおよびステロール誘導体、ポリエチレングリコールソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコールアルキルエーテル、砂糖およびその誘導体、ポリエチレングリコールアルキルフェノール、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン（ＰＯＥ−ＰＯＰ）ブロックコポリマー、ソルビタン脂肪酸エステル、イオン性界面活性剤、脂溶性ビタミンおよびそれらの塩、水溶性ビタミンおよびそれらの両親媒性誘導体、アミノ酸およびそれらの塩、ならびに有機酸およびそれらのエステルおよび無水物である。
【０１２０】
[138]本開示は、本開示の方法において使用するための、医薬組成物を含む包装およびキットも提供する。キットは、ボトル、バイアル、アンプル、ブリスターパックおよびシリンジからなる群から選択される、１つまたは複数の容器を含むことができる。キットは、本開示の疾患、状態または障害を治療するおよび／または予防する際に使用するための指示書の１つまたは複数、１つまたは複数のシリンジ、１つまたは複数のアプリケーター、あるいは本開示の医薬組成物を再構成するために好適な滅菌溶液をさらに含むことができる。
【０１２１】
[139]本明細書において使用されるすべてのパーセンテージおよび比率は、別段の指示がない限り、重量によるものである。本開示の他の特色および利点は、異なる例から明らかである。提供される例は、本開示を実践する際に有用な異なる成分および方法論を例証する。例は、特許請求されている開示を限定しない。本開示に基づき、当業者は、本開示を実践するために有用な他の成分および方法論を同定し用いることができる。
【０１２２】
[140]実施形態において、本開示は、下記を提供する。
[141]１．それを必要とする対象におけるがんを治療する際に使用するための、ＨＳＰ９０阻害剤と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む医薬組成物であって、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の７５％未満である量のＨＳＰ９０阻害剤を含む、組成物。
【０１２３】
[142]２．それを必要とする対象におけるがんを治療するための方法であって、対象に、ある量のＨＳＰ９０阻害剤と、薬学的に許容される担体または賦形剤とを含む医薬組成物を投与するステップを含み、ＨＳＰ９０阻害剤の量が、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の７５％未満である、方法。
【０１２４】
[143]３．ＨＳＰ９０阻害剤の量が、ＨＳＰ９０阻害剤の推奨される第２相用量の５０％未満または２５％未満である、請求項１または２に記載の方法。
[144]４．ＨＳＰ９０阻害剤が、ＨＳＰ−９９０、ＣＮＦ−２０２４、ＰＦ０４９８４７３、タネスピマイシン、ＳＴＡ−９０９０、ＭＰＣ−３１００、ＣＵＤＣ−３０５、ＸＬ−８８８、ＴＡＳ−１１６および薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【０１２５】
[145]５．ＨＳＰ９０阻害剤が、タネスピマイシン、アルベスピマイシン、ＩＰＩ−５０４、ＡＵＹ９２２、ＡＴ１３３８７、ガネテスピブ、ＫＷ−２４７８、ＣＮＦ２０２４、ＭＰＣ３１００、ＢＩＩＢ０２８、ＳＮＸ５４２２、ＰＵ−Ｈ７１、ＭＰＣ−０７６７および薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【０１２６】
[146]６．医薬組成物が、第２の活性医薬品原料（ＡＰＩ）を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
[147]７．第２のＡＰＩが、ＨＤＡＣ阻害剤、ＩｍｉＤ、抗ＶＥＧＦＲ抗体、ＤＮＡメチル化阻害剤、ステロイドホルモン（アンタゴニスト）アゴニスト、代謝酵素阻害剤、プロテアソーム阻害剤、抗ＣＤ２０抗体、アデノシン受容体２Ａアンタゴニスト、ｔｏｌｌ受容体（アンタゴニスト（アゴニスト）、免疫賦活性サイトカイン、およびそれらの組合せから選択される、請求項６に記載の方法。
【０１２７】
[148]８．第２のＡＰＩが、シスプラチン、ドセタキセル（ｄｏｃｏｔａｘｅｌ）、ゲムシタビン、カルボプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、エトポシド、エピルビシン、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ｄｄＡＣ、エベロリムス、パノビノスタット、エキセメスタン、レトロゾール、デシタビン、エサーチニブ、アベマシクリブ、メレスチニブ、ゲフィチニブ、モセチノスタット、アザシチジン、エンチノスタット、モトリモッド、イブルチニブ、レナリドマイド、イデラリシブ、エンザルタミド、オラパリブ、プレドニゾン、デキサメタゾン、ビンフルニン、ボリノスタット、ガルニセルチブ、ベンダムスチン、オキサリプラチン、ロイコボリン、グアデシタビン、ダブラフェニブ、トラメチニブ、ベムラフェニブ、ダカルバジン、アパチニブ、ポマリドマイド、カーフィルゾミブ、ソラフェニブ、５−フルオロウラシル、ＣＢ−８３９、ＣＢ−１１５８、ＧＤＣ−０９１９、ＬＸＨ２５４、ＡＺＤ４６３５、ＡＺＤ９１５０、ＰＬＸ３３９７、ＬＣＬ１６１、ＰＢＦ−５０９、ベバシズマブ、Ｓｙｍ００４、ラムシルマブ、イピリムマブ、トラスツズマブ、トレメリムマブ、オビヌツズマブ、Ｂ−７０１、ウトミルマブ、リツキシマブ、ベバシズマブ、インターロイキン２、ＮＫＴＲ−２１４、デネニコキン、ＰＥＧインターフェロン２Ａ、ＲＯ７００９７８９、ＭＥＤＩ９４４７、ＭＫ−１２４８、ＬＹ２５１０９２４、ＡＲＲＹ−３８２、ＭＥＤＩ０５６２、ＬＡＧ５２５；ＮＩＳ７９３、リリルマブ、バルリルマブ、ＧＷＮ３２３；ＪＴＸ−２０１１；ガルニセルチブ；ＴＳＲ−０２２；ＢＭＳ−９８６０１６、ラムシルマブ、ウレルマブ、ＢＭＳ−９８６０１６およびＲＥＧＮ３７６７から選択される、請求項６に記載の方法。
【０１２８】
[149]９．組成物中の第２のＡＰＩが、プロテインキナーゼ阻害剤、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤、チェックポイント阻害剤、白金ベースの抗新生物剤、トポイソメラーゼ阻害剤、ヌクレオシド代謝阻害剤、アルキル化剤、挿入剤、チューブリン結合剤、ＤＮＡ修復の阻害剤、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項６に記載の方法。
【０１２９】
[150]１０．組成物中の第２のＡＰＩが、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤である、請求項９に記載の方法。
[151]１１．ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ＡＭＰ−５１４／ＭＥＤＩ−０６８０、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＢＭＳ９３６５５９、ＡＭＰ−２２４、ＢＧＢ−Ａ３１７、ＳＨＲ−１２１０およびＪＴＸ−４０１４からなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【０１３０】
[152]１２．ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤の量が、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤の推奨される第２相用量の７５％未満である、請求項１０または１１に記載の方法。
[153]１３．組成物中の第２のＡＰＩが、ＣＴＬＡ−４阻害剤である、請求項６に記載の方法。
【０１３１】
[154]１４．ＣＴＬＡ−４阻害剤が、トレメリムマブおよびイピリムマブから選択される、請求項１３に記載の方法。
[155]１５．組成物中の第２のＡＰＩが、チェックポイント阻害剤である、請求項９に記載の方法。
【０１３２】
[156]１６．チェックポイント阻害剤が、抗ＣＤ２７抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、抗ＫＩＲ抗体、抗ＬＡＧ−３抗体、抗ＴＩＭ３抗体、抗ＯＸ４０抗体、抗４−１ＢＢ／ＣＤ１３７抗体、抗ＣＤ４０抗体、抗ＴＲＸ５１８抗体、抗ＣＤ７３抗体および抗ＧＩＴＲ抗体からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【０１３３】
[157]１７．チェックポイント阻害剤が、バルリルマブ、ＭＧＡ２１７、リリルマブ、ＢＭＳ−９８６０１６、ウレルマブ、ＭＥＤＩ−０５６２、ＳＥＡ−ＣＤ４０、ＴＲＸ５１８およびＭＫ−４１６６からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【０１３４】
[158]１８．組成物中の第２のＡＰＩが、オラパリブ、ルカパリブ、ニラパリブ、タラゾパリブ、ベリパリブ、ＣＥＰ−９７２２およびＣＥＰ−８９８３からなる群から選択される、ＤＮＡ修復阻害剤である、請求項９に記載の方法。
【０１３５】
[159]１９．がんが、脳腫瘍、神経膠腫、肉腫、乳がん、肺がん、非小細胞性肺がん、中皮腫、虫垂がん、尿生殖器がん、腎細胞癌、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、陰茎がん、子宮頸がん、卵巣がん、頭頸部がん、胃腸がん、肝細胞癌、胆嚢がん、食道がん、胃がん、結腸直腸がん、膵臓がん、神経内分泌腫瘍、甲状腺腫瘍、下垂体腫瘍、副腎腫瘍、Ｔ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、白血病およびホジキンリンパ腫からなる群から選択される、請求項１から１８のいずれか一項に記載の方法。
【０１３６】
[160]２０．がんが、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非小細胞性肺がん、膀胱がん、非ホジキンリンパ腫、白血病、Ｔ細胞リンパ腫および腎細胞癌からなる群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【０１３７】
[161]２１．がんが、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非小細胞性肺がん、膀胱がん、非ホジキンリンパ腫、白血病、Ｔ細胞リンパ腫および腎細胞癌からなる群から選択される、請求項１０、１１または１２に記載の方法。
【０１３８】
[162]２２．医薬組成物が、対象のがん細胞におけるインターフェロン−γシグナル伝達を阻害するために有効な、ある量のＨＳＰ９０阻害剤を含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載の方法。
【０１３９】
[163]２３．対象が、ヒトである、請求項１から２２のいずれか一項に記載の方法。
[164]２４．医薬組成物が、経口または口腔内投与に適合される、請求項１から２３のいずれか一項に記載の方法。
【０１４０】
[165]２５．医薬組成物が、非経口投与に適合される、請求項１から２３のいずれか一項に記載の方法。
【実施例】
【０１４１】
実施例１−ＰＤ−Ｌ１細胞表面発現の小分子阻害剤を同定するためのスクリーニング
[166]ＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞（黒色腫細胞株；ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−７２（商標））を使用して、インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）（Ｓｈｅｎａｎｄｏａｈ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）誘発性ＰＤ−Ｌ１発現を低減させる小分子を同定するためのハイコンテントスクリーニングを行った。
【０１４２】
[167]細胞を、１０％ＦＢＳ（Ｓｉｇｍａ）および２ｍＭのＬ−グルタミンを含有するＭＥＭ（Ｃｏｒｎｉｎｇ）中で増やした（expanded）。細胞の凍結ストックを、ハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）アッセイにおける直接使用のために調製した。細胞を収穫し、ペレット化し、次いで、９５％ＦＢＳおよび５％ＤＭＳＯに濃度１×１０７細胞／ｍｌで再懸濁した。１ｍｌのアリコートを、−８０℃に毎分１度の速度で凍結させた。次いで、これらのストックを、長期貯蔵のために気相液体窒素に移した。
【０１４３】
[168]スクリーニングのために、凍結細胞バイアルを、３７℃の水浴中、連続撹拌しながら迅速に解凍し、次いで、アッセイ培地に室温で再懸濁し、１，０００ｒｐｍで５分間にわたって遠心分離した。得られたペレットを適切な体積で再懸濁し、自動細胞カウンターを使用してカウントし、適宜希釈した。
【０１４４】
[169]およそ２５００の個々の薬物（２０００の承認薬、５００の未承認薬）の手動でキュレーションされたライブラリーを使用して、ソースプレートから薬物を宛先プレート（３８４ウェルアッセイプレート−Ｃｏｒｎｉｎｇ  ３７１２番）にＥＣＨＯ５５０液体ハンドラー（Ｌａｂｃｙｔｅ）を使用して移した。ＩＦＮ−ｇ（５０ｎｇ／ｍｌ最終）で処理したＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞（３０μＬの培地中ウェル当たり１７５０細胞）を、これらのフォーマット済みプレートに、Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ（商標）コンビ試薬ディスペンサー（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ）を使用して添加した。薬物の最終濃度は、４０、４８０および５０００ｎＭであった。プレートの左側およびプレートの右側の外側２つのカラム（カラム１、２、２３、２４）は、陽性および陰性対照として役立ち、それぞれＩＦＮ−γありおよびなしで処理した。プレートを８００ｒｐｍで１分間にわたって遠心分離した後、５％ＣＯ２加湿インキュベーター内、３７℃でインキュベートした。
【０１４５】
[170]４４時間後、ａｌａｍａｒＢｌｕｅ（商標）細胞生存率試薬（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ）を製造業者のプロトコールに従って使用して、細胞生存率を決定した。簡潔に述べると、３μＬのａｌａｍａｒＢｌｕｅ（商標）試薬を各ウェルに添加し、プレートをさらに４時間にわたってインキュベートした。プレートをビクター３Ｖプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。各薬物についての生存率は、薬物処理細胞および未処理対照細胞を比較することにより、パーセンテージとして表現した（１００％に設定）。
【０１４６】
[171]生存率について評価後、次いで、プレートを免疫染色のために調製した。簡潔に述べると、１６％パラホルムアルデヒド（Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を各ウェルに、４％の最終濃度まで、室温で１０分間にわたって添加した。この時間の後、凝固物を吸引し、細胞をＰＢＳで３回洗浄した。細胞を、ブロッキング溶液（ＰＢＳ中１％ウシ血清アルブミン）を使用して３０分間にわたってブロックした。この時間の後、ブロッキング試薬を吸引し、免疫染色試薬を添加した。免疫染色試薬は、ブロッキング緩衝液中で希釈したビオチンコンジュゲートＰＤ−Ｌ１抗体（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）からなるものであった。プレートを密閉し、４℃で終夜保った。翌日、プレートをＰＢＳで３回洗浄し、続いて、ブロッキング緩衝液中で希釈したストレプトアビジン−ルシフェラーゼ融合タンパク質（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を、室温で１時間にわたって添加した。このステップの後、プレートをＰＢＳで３回洗浄した。最終洗浄の後、ＰＢＳを吸引し、ウェル当たり３０ｕＬのＱＵＡＮＴＩ−Ｌｕｃ（商標）（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を添加した。プレートをプレートリーダー（ビクター３Ｖプレートリーダー、０．１ｓ）で直ちに読み取り、ルシフェラーゼ活性を測定した。
【０１４７】
[172]薬物スクリーニングプレートに対応する未加工のＰＤ−Ｌ１強度（ルシフェラーゼ読み出し）を、ＩＦＮ−γ処理ウェルのみを含有するブランクプレートに対して正規化し、得られた比率をＺスコアの算出に使用した。
【０１４８】
[173]Ｚスコアを、各薬物について、各薬物プレートにおけるブランク補正ＰＤ−Ｌ１強度および対照＋ＩＦＮ−γ処理ウェルを考慮し、下記の方程式：
【０１４９】
【数１】
2020505433.tif 000004
【０１５０】
［式中、ＩＤｒｕｇは、各薬物についてのブランク補正ＰＤ−Ｌ１強度である］に従って算出した。したがって、Ｚスコア値は、ＩＦＮ−γ処理ウェルに関するＰＤ−Ｌ１レベルを減少させる薬物に対して陰性のものとなる。
【０１５１】
[174]異なるプレートにわたって試験された異なる薬物用量のＰＤ−Ｌ１効果を比較するために、本発明者らは、薬物ＺスコアおよびＩＦＮ−γ未処理対照ウェルに対応するＺスコアの分布を考慮に入れて、相対Ｚスコアを定義した。
【０１５２】
【数２】
2020505433.tif 000005
【０１５３】
[175]相対Ｚスコアは、ベースラインＰＤ−Ｌ１シグナルに関する薬物ＰＤ−Ｌ１レベル効果の尺度である。
[176]スクリーニングにおいて試験したすべての薬物およびすべての濃度について相対Ｚスコアを計算したら、本発明者らは、３つのフィルタリング基準を適用して薬物リストを絞り込み、高信頼度のヒットを次の通りに選択した：
＃１  試験した３つの濃度について、相対Ｚスコア＜＝−１＋ｓｄ（Ｚスコア−ＩＦＮ−γ）および７５％超の生存パーセントを持つ薬物を選択する。これにより、１０の薬物を４０ｎＭに、２７の薬物を４８０ｎＭに、および１９６の薬物を５０００ｎＭにした（合計４１２６の薬物のうち）。
＃２  ５０％超のヒットパーセントを示した５０００ｎＭの薬物を選択する。これは、５０００ｎＭの１１０の薬物をもたらした（＃１で取得された１９６のうち）。
＃３  用量応答性相対Ｚスコアを示した薬物を選択する。これは、４７の薬物をもたらした。
【０１５４】
[177]初回スクリーニングの結果をまとめると、４７の薬物がＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現を低減させた。特筆すると、これらは、ＰＤ−Ｌ１発現を無効にすることが以前に示されたＪＡＫ２の小分子阻害剤を含んだ（Ｇｒｅｅｎら、２０１０）。
【０１５５】
[178]初回スクリーニングにおいて同定された４７の薬物のうち、本発明者らは、ＨＳＰ９０阻害剤クラスの薬物に全力を注ぎ、なぜなら、約２５００の薬物の本発明者らのライブラリーには、ＨＳＰ９０を標的とする４つの個々の小分子阻害剤（ＨＳＰ−９９０、ＣＮＦ−２０２４、ＰＦ０４９８４７３およびタネスピマイシン）があり、４つすべてが初回スクリーニングにおいてヒットとして同定されたからである。
【０１５６】
[179]これらの４つのＨＳＰ９０阻害剤を、各薬物がここで被験薬物の濃度が９．８〜５０００ｎＭ（２倍連続希釈）である１０点用量応答アッセイにおいて試験される、元のアッセイ設計との唯一の例外を除いて、上記で用いたのと同じ実験プロトコール（３８４ウェルプレート中ＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞＋／−ＩＦＮ−γを使用する）を使用して検証した。細胞を播種し、四連で処理した。４つのＨＳＰ９０阻害剤の処理の４８時間後に生存率を評価した後、上述した通りに、ＰＤ−Ｌ１シグナルを試験するために細胞を収穫した。
【０１５７】
[180]この二次アッセイにおいて、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１シグナルがブロックされたことを確認することにより、４つすべてのＨＳＰ９０薬物（ＨＳＰ−９９０、ＣＮＦ−２０２４、ＰＦ０４９８４７３およびタネスピマイシン）を検証した（図１）。
[181]このように、これらの所見は、本発明者らがＨＳＰ９０の阻害とＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現を無効にすることとの間の機構的関連性を見出したことを実証するために役立つ。
【０１５８】
[182]以前の研究は、ＨＳＰ９０の阻害がＪＡＫ２レベルを低減させたことに留意し、ＪＡＫ２がＨＳＰ９０のクライアントタンパク質であり得ると示唆した（Ｍａｒｕｂａｙａｓｈｉら、２０１０）（Ｐｒｏｉａら、２０１１）。しかしながら、現在までのところ、ＨＳＰ９０阻害とＰＤ−Ｌ１発現との直接的関連性は作られていない。本明細書において報告される結果は、ＨＳＰ９０阻害剤が、免疫監視を回避するためにＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１軸が侵害される場合に対する免疫応答を変調することにより、治療効果を有することができると示唆する。この機序は、本明細書において記述される通りに、低用量ＨＳＰ９０阻害剤を単独でまたは他の活性剤と組み合わせて使用するがん治療への新たなアプローチを提供するために活かされることができる。
【０１５９】
[183]ＨＳＰ９０阻害剤がＰＤ−Ｌ１におけるそれらの免疫調節効果対それらの抗増殖効果を発揮した濃度を比較すると、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現の阻害に対するＨＳＰ９０阻害剤の効果は、抗増殖活性に要求されるよりもはるかに低い濃度で出現することが明白であった（図１を参照）。
【０１６０】
[184]したがって、本発明者らは、約２５００の薬物の我々のライブラリーに存在しない追加のＨＳＰ９０阻害剤を試験することによって、我々のヒットスクリーニングからの予備的な所見を拡張しようと試みた。ＳＴＡ−９０９０、ＭＰＣ−３１００、ＣＵＤＣ−３０５、ＸＬ−８８８およびＴＡＳ−１１６を、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現を阻害するそれらの能力について試験した。図２に示される通り、５つの追加で試験されたＨＳＰ９０阻害剤は、同じ傾向を示した−ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現を阻害するために要求される濃度（赤線）は、試験された最高濃度（１０００ｎＭ）で生存率が８０％よりも高いままであったことから、細胞増殖に影響を与えるために要求される濃度よりもはるかに低かった。
【０１６１】
[185]本発明者らの所見が他の細胞型に適用可能であることを確認するために、追加のヒト乳がん細胞株ＨＣＣ−３８を使用した。ＨＣＣ−３８細胞を、４８時間にわたって、ＩＦＮ−γ（５０ｎｇ／ｍｌ）で処理し、１０、１００、１０００および５０００ｎＭのＭＰＣ−３１００で共処理した。図３に示される通り、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現は、１００ｎＭのＭＰＣ−３１００で低減し、１０００ｎＭで完全に無効にされた。
【０１６２】
[186]推奨される第２相用量で投薬された患者の血漿中におけるＭＰＣ−３１００の最大濃度（Ｃｍａｘ、幾何平均）が約１３μＭであることを考慮して、ＭＰＣ−３１００がＰＤ−Ｌ１に対して免疫調節活性を導出した濃度は、少なくとも１０倍低い。
【０１６３】
[187]細胞表面発現の減少をもたらした総細胞内タンパク質を測定するウエスタンブロッティングによって検出される通り、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現を無効にする際のＭＰＣ−３１００の活性を立証するために、フローサイトメトリーを実施した。２つのヒト細胞株を使用し（ＳＫ−ＭＥＬ−２８およびＨＣＣ−３８細胞）、２つのネズミ細胞株を使用した（Ｂ１６−Ｆ１０、黒色腫細胞株およびＥＭＴ−６、乳がん細胞株）。すべての細胞株を、４８時間にわたって、ＩＦＮ−γ（５０ｎｇ／ｎｌ）で処理し、指示された濃度のＭＰＣ−３１００で共処理した。図４に示される通り、試験されたすべての細胞株は、ＭＰＣ−３１００が、ＰＤ−Ｌ１のＩＦＮ−γ誘発性細胞表面発現を有効に阻害したことを示した。
【０１６４】
[188]ＩＦＮ−γは、ＪＡＫ／ＳＴＡＴ−１シグナリングを介して媒介される、ＰＤ−Ｌ１等のその標的遺伝子の発現を刺激することから、ヒトＨＣＣ−３８細胞株を使用して、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現のための機序を探索した。図５に示される通り、ＭＰＣ−３１００はＩＦＮ誘発性ｐ−ＳＴＡＴ１をブロックし、これが、ＭＰＣ−３１００がどのようにＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現をブロックするかの機序であることを示唆する。ここでも、これが出現した濃度は、薬物の推奨される第２相用量におけるＣｍａｘよりも少なくとも１０倍低かった。
【０１６５】
[189]上記の所見と一致して、薬物ルキソリチニブ（ＪＡＫ２阻害剤）は、ｐ−ＳＴＡＴの阻害によって測定される通り、ＪＡＫ２に対するその阻害活性により、ＩＦＮ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現もブロックした。
【０１６６】
[190]多数の研究は、ＨＳＰ９０阻害剤に細胞を曝露することが、インビトロおよびインビボの両方で、ＨＳＰ７０発現における逆説的な増大をもたらすことを示した。図５に示される通り、ＭＰＣ−３１００で処理したＨＣＣ−３８細胞は、ＨＳＰ７０発現の増大も示す。
【０１６７】
[191]これらの所見に基づき、本発明者らは、免疫抑制に関与する別のＩＦＮ−γ誘発性タンパク質であるインドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）（Ｃｕｒｔｉら、２００９）が、ＨＳＰ９０阻害剤によってブロックされ得るか否かを試験した。期待通り、ＩＦＮ−γ単独で処理したＨＣＣ−３８細胞は、ＩＤＯの発現を誘導した。しかしながら、ＨＣＣ−３８細胞をＩＦＮ−γおよびＭＰＣ−３１００（１０００ｎＭまたは５０００ｎＭ）で共処理した場合、ＩＤＯ発現は阻害された（図６）。
【０１６８】
[192]まとめると、これらの所見は、ＨＳＰ９０阻害剤が、ＳＴＡＴ−１シグナリングをブロックすることにより、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１およびＩＤＯ発現を有効にブロックすることができることを確立する。ＨＳＰ９０阻害剤は抗増殖活性を表すが、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現を無効にする効果は、細胞毒性ではない濃度で出現する。この所見は、異なる細胞型に加えて異なる種でも実証されたことから、この現象は、広く解釈できるはずであることを示唆する。その上、これらの所見は、ＭＰＣ−３１００が、細胞生存率を低減させず、細胞毒性以下の濃度でもある濃度において、ＩＦＮ−γ媒介性シグナリングをブロックする際に生物活性を有することを示す。
【０１６９】
[193]ＩＦＮ−γによって誘導的方式で調節されているＰＤ−Ｌ１発現に加えて、いくつかの研究は、遺伝的摂動がＰＤ−Ｌ１の構成的発現につながり得ることを示した（Ｐａｒｓａら、２００７）。実際に、ＰＴＥＮに突然変異を持つ神経膠腫株は、Ａｋｔの過剰活性化を実証し、構成的ＰＤ−Ｌ１発現をもたらす。ＰＤ−Ｌ１のレベルは、野生型ＰＴＥＮを持つ神経膠腫細胞株と比較して、有意に高い（Ｐａｒｓａら、２００７）。
【０１７０】
[194]ＰＤ−Ｌ１の構成的発現を低減させる際にＨＳＰ９０阻害剤が有効であるか否かを試験するために、Ｕ８７細胞（ヒト神経膠腫）を、５００または１０００ｎＭのＭＰＣ−３１００で２４時間にわたって処理した。次いで、溶解物を調製し、ウエスタンブロット分析を使用してタンパク質発現についてクエリーを行った。図７に示される通り、Ｕ８７細胞は検出可能なｐ−ＳＴＡＴの欠如によって証明されるようにＪＡＫ−ＳＴＡＴ−１シグナリングの基礎活性化を有さない。しかしながら、これらの細胞は突然変異体ＰＴＥＮを抱えるため、ｐＡｋｔによって証明されるようにＡＫＴシグナリングの過剰活性化がある。その上、Ｐａｒｓａらの研究から期待される通り、ＰＤ−Ｌ１の高い基礎発現がある。しかしながら、ＭＰＣ−３１００で処理したＵ８７細胞においては、ｐＡｋｔにおける低減およびＰＤ−Ｌ１の減衰がある。これらのデータは、発癌遺伝子がＰＤ−Ｌ１の発現を誘導する条件下で、ＭＰＣ−３１００は、ＰＤ−Ｌ１発現をブロック阻害することができることを実証する。さらに、ＰＤ−Ｌ１発現の阻害は、治療用量よりも約１０倍低い濃度で出現する。
【０１７１】
[195]低用量のＨＳＰ９０阻害剤がＲＰ２Ｄよりも高いまたは小さい臨床的効能を呈したか否かを見るために、本発明者らは、２０の異なる試験にわたって１２の異なる阻害剤を含んだ第Ｉ相臨床試験に対してメタ分析を実施した（Ｓａｉｆら、２０１４；Ｂａｕｅｒら、２０１３；Ｓｉｅｇａｌら、２０１１；Ｐａｃｅｙら、２０１１；Ｙｏｎｇら、２０１６；Ｒｅｄｄｙら、２０１３；Ｉｓａｍｂｅｒｔら、２０１５；Ｄｏｉら、２０１４；Ｐａｄｍａｎａｂｈａｎら、２０１０；Ｍａｈａｄｅｖａｎら、２０１２；Ｍａｄｄｏｃｋｓら、２０１６；Ｌａｎｃｅｔら、２０１０；Ｈｏｎｇら、２０１３；Ｓｏｌｉｔら、２００７；Ｎｏｗａｋｏｗｓｋｉら、２００６；Ｇｏｌｄｍａｎら、２０１３；Ｋｕｍｍａｒら、２０１０；Ｃｈｏら、２０１１；Ｗａｇｎｅｒら、２０１３；ＬＡＭ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、部外秘）。少なくとも４つの治療サイクルにわたって安定な疾患または臨床応答を有する患者のみを分析した。異なる試験で試験された用量を、薬物当たりの推奨される第２相用量および適応症に関して正規化し、用量のパーセンテージ（％ＲＰ２Ｄ）を各用量コホートについて算出した。次いで、すべての試験にわたる用量コホート当たりの安定疾患のパーセント（％安定疾患）および応答のパーセント（％応答）を算出するために、すべての試験にわたって安定疾患または臨床応答を持つ患者を、彼らが治療された％ＲＰ２Ｄに従って群分けした。
【０１７２】
[196]結果は、安定疾患（図８）および臨床応答（図９）のより多くの出現が、推奨される第２相用量よりも低い用量のＨＳＰ９０阻害剤で達成されることを示す。これは、ＨＳＰ９０阻害剤がＲＰ２Ｄの０〜２５％である場合、ＨＳＰ９０阻害剤がＲＰ２Ｄの２５〜５０％である場合、およびＨＳＰ９０阻害剤がＲＰ２Ｄの５０〜７５％である場合である。この観察は、ＲＰ２Ｄの７５％より低いすべての用量を組み合わせた場合に統計的有意性（フィッシャー試験Ｐ−値＝０．００５）に到達する。固体腫瘍または造血器腫瘍およびリンパ系腫瘍のいずれについても同様の傾向が観察され（図１０）、これは、安定疾患または臨床応答を持つ患者が、その腫瘍型にかかわらず、より低用量で観察されるからである。その上、本発明者らの分析は、分析されたすべてのＨＳＰ９０阻害剤がＲＰ２Ｄよりも低い用量で効能を示す（図１０）ことから、観察された「低用量臨床的効能」がＨＳＰ９０薬物クラスの一般的な特色であることを示唆する。これは、本出願の前提が、診療所において使用されるＨＳＰ９０阻害剤のいずれにも当てはまるはずであることを示唆する。
【０１７３】
[197]これらの結果は、ＨＳＰ９０阻害剤が、より低い用量で投与された場合により高い臨床的効能を有するという仮説を裏付け、故に、この薬物クラスについてがん治療における免疫腫瘍学の役割を裏付ける。
【０１７４】
[198]故に、まとめると、ＲＰ２Ｄの０〜２５％、２５〜５０％、５０〜７５％または７５〜９０％の用量で臨床活性を示すＨＳＰ９０阻害剤について提示されるデータは、いずれかの単一剤として診療所に移動され得るか、またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１軸を標的とするチェックポイント抗体との併用療法のために要求される用量を低減させ得るかである。これは、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ＡＭＰ−２２４、ＢＧＢ−３１７（中国）、ＳＨＲ−１２１０、ＪＴＸ−４０１４、ＡＭＰ−５１４／ＭＥＤＩ−０６８０、ＧＬＳ−０１０等のＰＤ−１を標的とする抗体、またはアテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブおよびＢＭＳ９３６５５９（ＭＤＸ−１１０５）等のＰＤ−Ｌ１を標的とする抗体を含む。ＣＴＬＡ−４およびＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１免疫療法の間の相乗効果を考慮すると、より低用量のＨＳＰ９０阻害剤は、トレメリムマブおよびイピリムマブ等のＣＴＬＡ−４免疫療法と組み合わせた場合、同様に効果的となり得る。
【０１７５】
[199]黒色腫、ホジキンリンパ腫、ＮＳＣＬＣ、膀胱がん、腎細胞癌等、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤に対して感受性を示すことが臨床的に検証されたがんは、より低用量のＨＳＰ９０阻害剤に対して等しい感受性を示し得る。
【０１７６】
実施例２：異なる化学的クラス由来のＨＳＰ９０阻害剤は、それらの抗がん活性において、選択的ＢＣＬ−２阻害剤、ベネトクラックスとそれぞれ相乗作用する
[200]選択的ＢＣＬ−２阻害剤、ベネトクラックスと相乗的に作用するＨＳＰ９０阻害剤の能力を、６つの異なる化学的足場を表すＨＳＰ９０阻害剤を使用して検査した。これらは、プリン様阻害剤、ＭＰＣ−０７６７、レゾルシノール誘導体、ＡＴ−１３３８７、ゲルダナマイシン誘導体、タネスピマイシン、ピラゾロピリジン誘導体、ＴＡＳ−１１６、ジヒドロインダゾロン誘導体、ＳＮＸ−５４２２およびトロパン誘導体、ＸＬ８８８を含んでいた。そのような多様な化学的足場を持つ阻害剤を選択することは、為された任意の観察がオンターゲット活性、すなわち、ＨＳＰ９０の阻害によるものである可能性を増大させ、なぜなら、任意のオフターゲット効果が、異なる阻害剤分子間、とりわけ異なる化学的足場に基づく異なる阻害剤分子間で変動することが期待され得るからである。
【０１７７】
[201]本発明者らは、ＨＳＰ９０阻害剤が、異なるがん型において、ＢＣＬ−２阻害剤、ベネトクラックスと相乗的に作用するか否かを決定しようとも試みた。これをするために、本発明者らは、造血器がんおよびリンパがんの３つのクラス、白血病、リンパ腫および骨髄腫のそれぞれを表す４つの異なるがん細胞株を使用した。白血病については、本発明者らは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞株、ＭＶ−４−１１を使用し、リンパ腫については、本発明者らは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞株、ＯＣＩ−ＬＹ−１９およびマントル細胞リンパ腫細胞株、Ｚ１３８を使用し、ならびに骨髄腫については本発明者らは、多発性骨髄腫細胞株、ＫＭＳ−２８を使用した。
【０１７８】
[202]６つのＨＳＰ９０阻害剤のそれぞれと表２に示されている濃度で組み合わせたベネトクラックスで、細胞を処理した。
【０１７９】
【表２】
2020505433.tif 000006
【０１８０】
[203]指示された薬物組合せで７２時間処理後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏを使用して細胞生存率を評価した。アイソボログラム分析を実施して、相乗的相互作用を決定した。簡潔に述べると、正規化されたアイソボログラムを使用して、７５％の用量効果における異なる細胞株にわたって観察された薬物相互作用（ＥＣ７５）を描写した。各単一剤および薬物組合せについての絶対ＥＣ７５は、ＲパッケージＤＲＣを使用して算出した（Ｒｉｔｚら、Ｄｏｓｅ−Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｒ．ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ．２０１５．１０（１２）：ｅ０１４６０２１；Ｒ  Ｃｏｒｅ  Ｔｅａｍ、Ａ  ｌａｎｇｕａｇｅ  ａｎｄ  ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ．Ｒ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ、Ｖｉｅｎｎａ、Ａｕｓｔｒｉａ．２０１７）。次に、本発明者らは、対応する単一剤ＥＣ７５値に関して薬物組合せのＥＣ７５を正規化した。単一剤治療がＥＣ７５に到達しなかった事例においては、当てはめられた薬物応答曲線の予測値に基づき、相対ＥＣ７５を使用した。相対ＥＣ７５が試験された最大濃度よりも高い場合、本発明者らは、試験された最大濃度をデフォルト値として使用して、すべての薬物および条件にわたる分析を可能にした。
【０１８１】
[204]図１１に示される通り、ＨＳＰ９０阻害剤のそれぞれは、細胞株のすべてにおいてベネトクラックスとの相乗活性を実証した。これは、各プロットにおいて破線として示される、相加性の線を下回る各データポイントの場所によって図中で証明される。
【０１８２】
[205]これらの所見は、ＨＳＰ９０阻害剤が、概して、ベネトクラックスと相乗的に作用して、造血器がんおよびリンパがんにおける細胞生存率を阻害することができることを指示する。これらのデータは、相乗的な抗がん活性が、オフターゲット効果とは対照的に、ＨＳＰ９０のオンターゲット阻害によるものであることも指示する。
【０１８３】
実施例３：ＢＣＬ−２存在度は、複数のがんにおけるＭＰＣ−０７６７とベネトクラックスとの間の相乗効果の前兆となる
[206]ベネトクラックス感受性は、その分子標的、ＢＣＬ−２タンパク質の存在度と相関することが示された（Ｐａｎら、Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ＢＣＬ−２  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｂｙ  ＡＢＴ−１９９  ｃａｕｓｅｓ  ｏｎ−ｔａｒｇｅｔ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ａｃｕｔｅ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ．２０１４；４（３）：３６２〜７５）。
【０１８４】
[207]ＢＣＬ−２存在度が、本明細書において観察されるＨＳＰ９０阻害剤とベネトクラックスとの間の相乗効果の前兆となるか否かを試験するために、本発明者らは、急性骨髄性白血病（ＭＶ−４−１１、ＭＯＬＭ−１６、ＴＵＲおよびＵ９３７）、多発性骨髄腫（ＫＭＳ−２８）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＯＣＩ−ＬＹ−１９）およびマントル細胞リンパ腫（Ｚ１３８）を表している細胞株におけるＢＣＬ−２存在度を、基礎条件下、フローサイトメトリーを使用して分析した。
【０１８５】
[208]並行して、急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫およびマントル細胞リンパ腫を表している同じ細胞株を、ベネトクラックスで７２時間にわたって処理し、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏによって細胞生存率を決定した。ＥＣ５０値は、上述した通りに決定した。
【０１８６】
[209]これらのデータは、ＢＣＬ−２およびベネトクラックス感受性の基礎レベル間の傾向を示した（図１２）。本発明者らは、次に、観察されたＨＳＰ９０阻害剤およびベネトクラックス相乗効果が基礎ＢＣＬ−２レベルによって決まったか否かを決定した。各細胞株を、ＭＰＣ−０７６７およびベネトクラックスの組合せで処理し、７２時間後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏを使用して生存率をアッセイした。相乗効果は、上述した通りに決定された。図１２に示される通り、ＭＰＣ−０７６７およびベネトクラックスとの相乗効果は、高いＢＣＬ−２レベルを持つ４つの細胞株のうちの４つにおいて観察された。対照的に、低いＢＣＬ−２レベルを持つ３つの細胞株において、相乗効果は観察されなかった。これらの所見は、ＢＣＬ−２に依存するがんが、ＨＳＰ９０阻害剤およびＢＣＬ−２経路阻害剤の組合せを用いる治療にとりわけ感受性であり得ることを示唆する。
【０１８７】
実施例４：ＭＰＣ−０７６７はインターフェロン誘発性ＰＤ−Ｌ１発現をブロックする
[210]Ｔ細胞からのインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）の放出は、感染症に対する宿主免疫応答において主要な役割を果たす。しかし、この放出されたＩＦＮ−γは、腫瘍細胞が、プログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）の誘導によって免疫系を回避することができる機序も提供する。
【０１８８】
[211]ＭＰＣ−０７６７がＡＭＬ細胞においてＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現をブロックすることができるか否かを解明するために、ＷＴ  ＦＬＴ３（ｎ＝２）またはＦＬＴ３−ＩＴＤ（ｎ＝２）を抱える４つのＡＭＬ細胞株を、ヒトＩＦＮ−γ（５０ｎｇ／ｍｌ）単独、ＭＰＣ−０７６７（２μＭ）単独、または組合せで２４時間にわたって処理した。細胞を収穫して、フローサイトメトリーによってＰＤ−Ｌ１細胞表面発現を決定した。また、細胞を生細胞のゲートまで生存染色で染色し、いかなる死細胞も除外した。図１３Ａ〜Ｄに示される通り、すべての細胞株が、ＩＦＮ−γ処理に応答してＰＤ−Ｌ１細胞表面発現を誘導した（６〜２５倍）。ＭＰＣ−０７６７単独は基礎ＰＤ−Ｌ１細胞表面発現を有意に低減させなかったが、ＩＦＮ−γと組み合わせると、ＭＰＣ−０７６７は、すべての細胞株においてＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１細胞表面発現を低減させた（範囲：４３〜８３％低減）。
【０１８９】
[212]これらのデータは、ＭＰＣ−０７６７が、ＩＦＮ−γ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現をブロックすることにより、ＡＭＬ細胞において免疫調節活性を表すことを実証する。
【図１Ａ】
2020505433.tif 000007
【図１Ｂ】
2020505433.tif 000008
【図１Ｃ】
2020505433.tif 000009
【図１Ｄ】
2020505433.tif 000010
【図２Ａ】
2020505433.tif 000011
【図２Ｂ】
2020505433.tif 000012
【図２Ｃ】
2020505433.tif 000013
【図２Ｄ】
2020505433.tif 000014
【図２Ｅ】
2020505433.tif 000015
【図３】
2020505433.tif 000016
【図４Ａ】
2020505433.tif 000017
【図４Ｂ】
2020505433.tif 000018
【図５】
2020505433.tif 000019
【図６】
2020505433.tif 000020
【図７】
2020505433.tif 000021
【図８】
2020505433.tif 000022
【図９】
2020505433.tif 000023
【図１０】
2020505433.tif 000024
【図１１Ａ】
2020505433.tif 000025
【図１１Ｂ】
2020505433.tif 000026
【図１１Ｃ】
2020505433.tif 000027
【図１１Ｄ】
2020505433.tif 000028
【図１１Ｅ】
2020505433.tif 000029
【図１１Ｆ】
2020505433.tif 000030
【図１２】
2020505433.tif 000031
【図１３Ａ】
2020505433.tif 000032
【図１３Ｂ】
2020505433.tif 000033
【図１３Ｃ】
2020505433.tif 000034
【図１３Ｄ】
2020505433.tif 000035
【国際調査報告】
2020505433.tif 000036
2020505433.tif 000037
2020505433.tif 000038
2020505433.tif 000039
2020505433.tif 000040
2020505433.tif 000041
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