(57)【要約】  本開示は、本明細書で開示されるアルギナーゼ阻害剤および本明細書で開示される免疫細胞を含有する組成物を被験体に共同的に投与することによって、被験体における疾患を治療または予防する方法に関する。
2020502259.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体における疾患を治療または予防する方法であって、アルギナーゼ阻害剤および免疫細胞を含有する組成物を前記被験体に共同的に投与することを含む方法。
【請求項２】
前記免疫細胞が細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体を発現するＴ細胞を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記免疫細胞が、疾患関連ペプチドに特異的な受容体を発現するＴ細胞を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記免疫細胞がナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記ナチュラルキラー細胞が、ＮＫ−９２ナチュラルキラー細胞である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ナチュラルキラー細胞がキメラ抗原受容体を発現する、請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
前記免疫細胞が前記被験体に対して自己由来である、請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記免疫細胞が前記被験体に対して同種異系である、請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記免疫細胞が細胞バンクから得られる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記免疫細胞を、被験体への投与の前に疾患特異的ペプチドを提示する抗原提示細胞（ＡＰＣ）の存在下で拡大増殖する、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＡＰＣが２つ以上の疾患特異的ペプチドを提示する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＡＰＣがＢ細胞である、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＡＰＣが樹状細胞である、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＡＰＣが抗原提示Ｔ細胞である、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記人工抗原提示細胞がａＫ５６２細胞である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記免疫細胞がＴ細胞を含み、およびＴ細胞が濃縮されていない、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記免疫細胞および前記アルギナーゼ阻害剤を同時投与する、請求項１から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記免疫細胞および前記アルギナーゼ阻害剤を連続的に投与する、請求項１から１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
免疫細胞を含有する前記組成物がサイトカインも含む、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記サイトカインがＩＬ−２である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記サイトカインがＩＬ−１５である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
少なくとも１×１０６細胞／ｋｇの細胞を前記被験体に投与する、請求項１から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
少なくとも１×１０７細胞／ｋｇの細胞を前記被験体に投与する、請求項１から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
少なくとも１×１０８細胞／ｋｇの細胞を前記被験体に投与する、請求項１から２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
少なくとも１×１０９細胞／ｋｇの細胞を前記被験体に投与する、請求項１から２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記被験体に抗体を共同的に投与することをさらに含む、請求項１から２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記抗体が腫瘍抗原を標的とする、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項２７または２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記抗体がポリクローナル抗体である、請求項２７または２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記抗体がキメラ抗体である、請求項２７から２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
免疫細胞を含有する前記組成物がＮＫ細胞を含む、請求項２７から３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記抗体、免疫細胞を含有する前記組成物、および前記アルギナーゼ阻害剤を同時投与する、請求項２７から３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記抗体、免疫細胞を含有する前記組成物、および前記アルギナーゼ阻害剤を連続的に投与する、請求項２７から３２のいずれか一項記載の方法。
【請求項３５】
前記アルギナーゼ阻害剤が、式Ｉ：
【化１】
2020502259.tif 000073
［式中、
Ｒ１は、−ＯＨ、ＯＲａ、およびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、アリール、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、（ヘテロアリール）アルキル、およびアラルキルから選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、置換または非置換アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２（アリール）、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、および（ヘテロアリール）アルキルから選択され；
Ｒ２は、Ｈ、置換または非置換アルキル、および（アルキル）Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうち３つ以下が同時に結合を表すように、それぞれ独立して、結合、−Ｃ（Ｒ’）（Ｒ’”）−、−Ｃ（Ｒ’”）２−、−ＣＲ’”−、−ＮＲ’”−、−Ｎ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｓ−から選択され；ならびにＷ、Ｘ、Ｙ、およびＺの２つの隣接する成員が同時に−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ−、または−ＮＲ’”−であることはなく；
ｌ、ｍ、ｎおよびｐは、それぞれ独立して０、１または２、例えば１または２であり；
【化２】
2020502259.tif 000074
は１つ以上の二重結合を表してもよく；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、置換または非置換アルキル、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか、または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全に飽和しているかまたは部分的に飽和している５または６員環を形成し；
Ｄは、置換または非置換アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリーレン、およびシクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく（それによって縮合二環式系を形成する）；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’、Ｒ”およびＲ’”は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、アルキル、アリール、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、−Ｃ（Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）（アリール）、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（アリール）、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、Ｃ（Ｏ）（ヘテロシクロアルキル）、ヘテロアリール、アラルキル、−Ｃ（Ｏ）（アラルキル）、−Ｃ（Ｏ）（アリール）、（シクロアルキル）アルキル、（ヘテロアリール）アルキル−、および（ヘテロシクロアルキル）アルキルから選択され；
ここで、ＲｄおよびＲｅは、それぞれ独立して、Ｈ、置換または非置換アルキル、アラルキル、アリール、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリール、ＮＲ’Ｒ”Ｃ（Ｏ）−、および（アリール）シクロアルキレン−から選択され；
ここで、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、例えばハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよい］
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグである、請求項１から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記式中、Ｒ１が、−ＯＨ、ＯＲａ、およびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａが、水素、直鎖または分岐鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ＲｂおよびＲｃが、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−ＳＯ２−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
Ｒ２が、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺが、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうち３つ以下が同時に結合を表すように、それぞれ独立して、結合、−Ｃ（Ｒ’）（Ｒ’”）−、−Ｃ（Ｒ’”）２−、−ＣＲ’”−、−ＮＲ’”−、−Ｎ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｓ−から選択され；ならびにＷ、Ｘ、Ｙ、およびＺの２つの隣接する成員が同時に−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ−、または−ＮＲ’”−であることはなく；
ｌ、ｍ、ｎおよびｐが、それぞれ独立して０、１または２、例えば１または２であり；
【化３】
2020502259.tif 000075
が１つ以上の二重結合を表してもよく；
Ｒ３およびＲ４が、それぞれ独立して、水素、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか、または
Ｒ３およびＲ４が、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全に飽和しているかまたは部分的に飽和している５または６員環を形成し；
Ｄが、直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルケニレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルキニレン、（Ｃ３−Ｃ１４）アリーレン、および（Ｃ３−Ｃ１４）シクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基が、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基が、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄが、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’、Ｒ”およびＲ’”が、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）アリール、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｎ［（Ｃ１−Ｃ６）アルキル］２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）複素環−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ここで、任意のアルキル、アルキレン、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルが、ハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキルおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよく；
ここで、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、およびＲｈが、それぞれ独立して、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、Ｈ２Ｎ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、ＮＲ’Ｒ”Ｃ（Ｏ）−、および−（Ｃ３−Ｃ６）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレン−から選択される、
またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグである、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記式中、
Ｒ１が、−ＯＨ、ＯＲａ、およびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａが、水素、直鎖または分岐鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ＲｂおよびＲｃが、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−ＳＯ２−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
Ｒ２が、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺが、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうち３つ以下が同時に結合を表すように、それぞれ独立して、結合、−Ｃ（Ｒ’”）２−、−ＣＲ’”−、−ＮＲ’”−、−Ｎ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｓ−から選択され；ならびにＷ、Ｘ、Ｙ、およびＺの２つの隣接する成員が同時に−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ−、または−ＮＲ’”−であることはなく；
ｌ、ｍ、ｎおよびｐが、それぞれ独立して０、１または２、例えば１または２であり；
【化４】
2020502259.tif 000076
が１つ以上の二重結合を表してもよく；
Ｒ３およびＲ４が、それぞれ独立して、水素、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか、または
Ｒ３およびＲ４が、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全に飽和しているかまたは部分的に飽和している５または６員環を形成し；
Ｄが、直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルケニレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルキニレン、（Ｃ３−Ｃ１４）アリーレン、および（Ｃ３−Ｃ１４）シクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基が、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基が、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄが、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’、Ｒ”およびＲ’”が、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）アリール、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｎ［（Ｃ１−Ｃ６）アルキル］２、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）複素環−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ここで、任意のアルキル、アルキレン、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルが、ハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよく；
ここで、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、およびＲｈが、それぞれ独立して、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、Ｈ２Ｎ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、ＮＲ’Ｒ”Ｃ（Ｏ）−、および−（Ｃ３−Ｃ６）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレン−から選択される、
またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグである、請求項３５または３６に記載の方法。
【請求項３８】
Ｄが、
−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２、
−Ｌ１−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ２−、
−Ｌ１−ＣＨ２−Ｌ２−ＣＨ２−
−ＣＨ２−Ｌ１−ＣＨ２−Ｌ２−、
−Ｌ１−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ１−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ１−、
−Ｌ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ２−ＣＨ２−、および
−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ２−
［式中、Ｌ１およびＬ２が、独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択され；ならびに
Ｌ１とＬ２が互いに隣接している場合、Ｌ１とＬ２が同時にＯ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２であることはない］
から選択される、請求項３５から３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
Ｄが直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレンである、請求項３５から３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
Ｄがプロピレンである、請求項３５から３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
Ｒ１が−ＯＨである、請求項３５から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４のそれぞれが水素である、請求項３５から４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれが−Ｃ（Ｒ’”）２−である、請求項３５から４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
Ｒ’”がＨである、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
Ｒ’”の少なくとも１つの出現がＨではない、請求項３５から４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
ｌ＋ｍ＋ｎ＋ｐ＝３である、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
ｌ＋ｍ＋ｎ＋ｐ＝４である、請求項４３から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれが−ＣＲ’”−であり、および
【化５】
2020502259.tif 000077
が１つ以上の二重結合を表す、請求項４３から４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
Ｗ、Ｘ、Ｙ、またはＺの少なくとも１つが、−ＮＲ’”、−Ｎ−、−Ｏ−、および−Ｓ−から選択される、請求項３５から４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのいずれか１つが−ＮＨ−であり、および残りの３つの各存在が−Ｃ（Ｒ’”）２−である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
Ｒ’”がＨである、請求項４９または５０に記載の方法。
【請求項５２】
Ｒ’”の少なくとも１つの出現がＨではない、請求項４９または５０に記載の方法。
【請求項５３】
Ｘが−ＮＨ−である、請求項４９から５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのいずれか１つが−Ｎ−であり、ならびに残りの３つのそれぞれが−ＣＲ’”−であり、ならびに
【化６】
2020502259.tif 000078
が１つ以上の二重結合を表す、請求項４１に記載の方法。
【請求項５５】
Ｘが−Ｎ−である、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
Ｒ’”がＨである、請求項５４または５５に記載の方法。
【請求項５７】
Ｒ’”の少なくとも１つの出現がＨではない、請求項５４または５５に記載の方法。
【請求項５８】
ｌ＋ｍ＋ｎ＋ｐ＝４である、請求項５４または５５に記載の方法。
【請求項５９】
前記式Ｉの化合物が１−アミノ−２−（３−ボロノプロピル）シクロヘキサンカルボン酸ではない、請求項３５から５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
ｌ、ｍ、ｎ、およびｐの合計が３、４、５、または６である、請求項３５に記載の方法。
【請求項６１】
前記アルギナーゼ阻害剤が、以下の表：
【表１】
2020502259.tif 000079
またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、もしくはプロドラッグから選択される。
【請求項６２】
前記アルギナーゼ阻害剤が、以下の表：
【表２−１】
2020502259.tif 000080
【表２−２】
2020502259.tif 000081
【表２−３】
2020502259.tif 000082
【表２−４】
2020502259.tif 000083
またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、もしくはプロドラッグから選択される。
【請求項６３】
前記アルギナーゼ阻害剤が、式ＩＩ：
【化７】
2020502259.tif 000084
［式中：
Ｒ１は、−ＯＨ、ＯＲａ、およびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、置換または非置換アルキル、アリール、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリール、およびアラルキルから選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、置換または非置換アルキル、−Ｓ（Ｏ）２（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（アリール）、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、およびヘテロアラルキルから選択され；
（Ａ）Ｒ２は、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、（ヘテロアリール）ヘテロシクロアルキレン、（アリール）ヘテロシクロアルキレン、（アラルキル）ヘテロシクロアルキレン、（ヘテロアラルキル）ヘテロシクロアルキレン、（（ヘテロシクロアルキル）アルキル）ヘテロシクロアルキレン、および−（ＣＨ２）ｍ−（Ｘ）ｕ−（ＣＨ２）ｎ−（Ｙ）ｖ−Ｒｆから選択され；
ここで
ｕおよびｖは、それぞれ独立して０または１であり、およびｕ＋ｖ＝１であり；
ｍおよびｎは、それぞれ独立して０、１、２、３、４、５、または６であり、ここでｍ＋ｎ≧１であり；
ＸおよびＹは、独立して、−ＮＨ、−Ｏ−および−Ｓ−から選択され；
Ｒｆは、Ｈ、ヒドロキシル、置換または非置換アルキルおよびアリールから選択され；ならびに
Ｒ５は、置換または非置換アルキルまたはアルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択されるか；または
（Ｂ）Ｒ２は（ヘテロシクロアルキル）アルキルであり；ならびに
Ｒ５は、Ｈ、置換または非置換アルキル、およびアルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、置換または非置換アルキル、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか；
またはＲ３およびＲ４は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全にまたは部分的に飽和しており、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１〜３個の追加のヘテロ原子環員を含んでいてもよい５または６員環を形成し；
Ｄは、置換または非置換アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリーレン、およびシクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’およびＲ”は、それぞれ独立して、Ｈ、置換または非置換アルキル、およびアリールから選択され；
ここで、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、例えばハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよい］
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグである、請求項１から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
前記アルギナーゼ阻害剤が、式ＩＩ：
【化８】
2020502259.tif 000085
Ｒ１は、−ＯＨ、ＯＲａ、およびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、直鎖または分岐鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−Ｓ（Ｏ）２−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
（Ａ）Ｒ２は、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ３−Ｃ６）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）−アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、および−（ＣＨ２）ｍ−（Ｘ）ｕ−（ＣＨ２）ｎ−（Ｙ）ｖ−Ｒｆから選択され；
ここで、
ｕおよびｖは、それぞれ独立して０または１であり、およびｕ＋ｖ＝１であり；
ｍおよびｎは、それぞれ独立して０、１、２、３、４、５、または６であり、ここでｍ＋ｎ≧１であり；
ＸおよびＹは、独立して、−ＮＨ、−Ｏ−および−Ｓ−から選択され；
Ｒｆは、Ｈ、ヒドロキシル、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキルおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールから選択され；ならびに
Ｒ５は、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択されるか；または
（Ｂ）Ｒ２は（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ２）アルキレン−であり；ならびに
Ｒ５は、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか；または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全にまたは部分的に飽和しており、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１〜３個の追加のヘテロ原子環員を含んでいてもよい５または６員環を形成し；ならびに
Ｄは、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルケニレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルキニレン、（Ｃ３−Ｃ１４）アリーレン、および（Ｃ３−Ｃ１４）シクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；
ここで、任意のアルキル、アルキレン、アルケニル、アルケニレン、アルキニル、またはアルキニレンは、ハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよく；
ここで、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、およびＲｈは、それぞれ独立して、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、Ｈ２Ｎ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、ＮＲ’Ｒ”Ｃ（Ｏ）−、および（Ｃ３−Ｃ６）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレン−から選択され；ならびに
Ｒ’およびＲ”は、それぞれ独立して、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、および（Ｃ３−Ｃ６）アリールから選択され；ならびに
ここで、任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、ハロゲン、−ＯＨ、オキソ、−ＣＯＯＨ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｓ−、（Ｃ３−Ｃ１４）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ８）アルキニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキルから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよい］
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグである、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
Ｄが、
−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２、
−Ｌ１−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ２−、および
−Ｌ１−ＣＨ２−Ｌ２−ＣＨ２−
［式中、Ｌ１およびＬ２は、独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択される］
から選択される、請求項６３または６４に記載の方法。
【請求項６６】
Ｄが直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレンである、請求項６３から６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
Ｄがブチレンである、請求項６３から６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
Ｒ１が−ＯＨである、請求項６３から６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６９】
前記式中、
（Ａ）Ｒ２が、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ３−Ｃ６）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）−アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、
（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、および−（ＣＨ２）ｍ−（Ｘ）ｕ−（ＣＨ２）ｎ−（Ｙ）ｖ−Ｒｆから選択され；ならびに
Ｒ３およびＲ４のそれぞれが水素であるか、
または
（Ｂ）Ｒ２が（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ２）アルキレン−であり；ならびに
Ｒ３、ならびにＲ４およびＲ５のそれぞれが水素である、
請求項６３から６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７０】
前記式中、
Ｒ２が、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−および−（ＣＨ２）ｎ−（Ｘ）ｕ−（ＣＨ２）ｍ−（Ｙ）ｖ−Ｒｆから選択され、ならびに
Ｒ５が、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択される、
請求項６３から６９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７１】
Ｒ２が、ヒドロキシまたは−ＮＲｄＲｅで置換されていてもよいアルキルである、請求項６３から７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７２】
ＲｄおよびＲｅのそれぞれが、独立して、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、および置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルから選択される、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
ＲｄおよびＲｅのそれぞれが（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキルである、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
Ｒ２が−（ＣＨ２）ｎ−（Ｘ）ｕ−（ＣＨ２）ｍ−（Ｙ）ｖ−Ｒｆである、請求項６３から７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７５】
ＸおよびＹが、それぞれ独立して−ＮＨ−である、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
ｍが１であり、およびｎが２である、請求項７４に記載の方法。
【請求項７７】
ｕおよびｖのそれぞれが１である、請求項７４に記載の方法。
【請求項７８】
Ｒ２が、−（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および−ＯＨから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ２）アルキレンである、請求項６３から７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
Ｒ２が（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−である、請求項６３から７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８０】
前記式ＩＩの化合物が２−アミノ−４−ボロノ−２−メチルブタン酸ではない、請求項６３から７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８１】
前記アルギナーゼ阻害剤が、以下の表：
【表３−１】
2020502259.tif 000086
【表３−２】
2020502259.tif 000087
【表３−３】
2020502259.tif 000088
【表３−４】
2020502259.tif 000089
【表３−５】
2020502259.tif 000090
またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、もしくはプロドラッグから選択される。
【請求項８２】
前記アルギナーゼ阻害剤が、式ＩＩＩ：
【化９】
2020502259.tif 000091
［式中、
Ｒ６は、ＯＲａおよびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、アリール、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアラルキル、およびアラルキルから選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、置換または非置換アルキル、−Ｓ（Ｏ）２（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（アリール）、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、およびヘテロアラルキルから選択され；
Ｒ７は、Ｈ、置換または非置換アルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキルおよび（アルキル）Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｘは、シクロアルキレンおよびヘテロシクロアルキレンから選択され；
Ｙは、Ｈ、アルキル、−ＮＲ’Ｒ”、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、アリール、アラルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、（ヘテロアリール）ヘテロシクロアルキル、（アリール）ヘテロシクロアルキル、（アラルキル）ヘテロシクロアルキル、（ヘテロアラルキル）ヘテロシクロアルキル、および（（ヘテロシクロアルキル）アルキル）ヘテロシクロアルキルから選択され；
Ｍは、結合、アルキレン、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ’−、および−Ｃ＝ＮＲ”−から選択され；
Ｒ８およびＲ９は、独立して、水素、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、アリール、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか；
または、Ｒ８およびＲ９は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全に飽和または部分的に飽和しており、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１〜３個の追加のヘテロ原子環員を含んでいてもよい５または６員環を形成し；
ここで、環は、シクロアルキル、複素環式環または芳香環と縮合していてもよく；
Ｄは、置換または非置換アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリーレン、およびシクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよいか；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’およびＲ”は、独立して、Ｈ、置換または非置換アルキル、−Ｃ（Ｏ）（アルキル）、アリール、アラルキル、アミノアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリールから選択され；
ここで、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、例えばハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよい］
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグである、請求項１〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
前記アルギナーゼ阻害剤が、式ＩＩＩ：
【化１０】
2020502259.tif 000092
［式中：
Ｒ６は、ＯＲａおよびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、直鎖または分岐鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４））ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−Ｓ（Ｏ）２−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
Ｒ７は、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−および（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｘは、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレンおよび（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレンから選択され；
Ｙは、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ１４）アルキル、−ＮＲ’Ｒ”、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ３−Ｃ６）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）−アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−から選択され；
Ｍは、結合、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ’−、および−Ｃ＝ＮＲ”−から選択され；
Ｒ８およびＲ９は、独立して、水素、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか；
または、Ｒ８およびＲ９は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全に飽和または部分的に飽和しており、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１〜３個の追加のヘテロ原子環員を含んでいてもよい５または６員環を形成し；
ここで、環は、シクロアルキル、複素環式環または芳香環と縮合していてもよく；
Ｄは、直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルケニレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルキニレン、（Ｃ３−Ｃ１４）アリーレン、および（Ｃ３−Ｃ１４）シクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’およびＲ”は、独立して、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ１−Ｃ８）アルキレン、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）アリール、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリールから選択され；
ここで、任意のアルキル、アルキレン、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、ハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよく；
ここで、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、およびＲｈは、それぞれ独立して、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、Ｈ２Ｎ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、およびＮＲ’Ｒ”Ｃ（Ｏ）−から選択される］
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグである、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
Ｄが、
−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２、
−Ｌ１−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ２−、および
−Ｌ１−ＣＨ２−Ｌ２−ＣＨ２−
［式中、Ｌ１およびＬ２は、独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択される］
から選択される、請求項８２または８３に記載の方法。
【請求項８５】
Ｄが直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレンである、請求項８２から８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８６】
Ｄがブチレンである、請求項８２から８５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８７】
Ｒ１が−ＯＨである、請求項８２から８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８８】
Ｒ７、Ｒ８およびＲ９が水素である、請求項８２から８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８９】
前記式中、
Ｘが（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレンであり；
Ｍが、結合、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ’−、および−Ｃ＝ＮＲ”−から選択され；ならびに
Ｙが−ＮＲ’Ｒ”である、
請求項８２から８８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９０】
Ｍが結合であり、およびＹが−ＮＨ２である、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
前記式中、
Ｘが（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレンであり；
Ｍが、結合、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ’−、および−Ｃ＝ＮＲ”−から選択され；ならびに
Ｙが、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリールおよび（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンから選択される、
請求項８２から８８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９２】
前記アルギナーゼ阻害剤が、以下の表：
【表４−１】
2020502259.tif 000093
【表４−２】
2020502259.tif 000094
【表４−３】
2020502259.tif 000095
【表４−４】
2020502259.tif 000096
またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、もしくはプロドラッグから選択される、請求項１から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９３】
前記アルギナーゼ阻害剤が、式（ＶＩ）：
【化１１】
2020502259.tif 000097
［式中：
ＲａはＨであるか、または置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキルおよびヘテロアラルキルから選択され；
ＲｂはＨであるか、または置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、および−Ｃ（Ｏ）Ｏ（アリール）から選択され；
各Ｒｃは、独立してＨもしくはアルキルから選択されるか、または２つのＲｃの出現は介在する−Ｏ−Ｂ−Ｏ−原子と一緒になって、置換されていてもよいホウ素含有環を形成し；
ＸはＯまたはＳであり；
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、Ｈおよび置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキルおよびヘテロアラルキルから選択され；
Ｒ１およびＲ２は、介在原子と一緒になって、置換されていてもよい５〜７員環を形成し；ならびに
Ｒ３はＨまたは置換されていてもよいアルキルであるか；
またはＲ１およびＲ３は、介在原子と一緒になって、置換されていてもよい５〜７員環を形成する］
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグである、請求項１から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９４】
前記化合物が、式（ＶＩａ）：
【化１２】
2020502259.tif 000098
の構造を有する、請求項９３に記載の方法。
【請求項９５】
前記化合物が、式（ＶＩｂ）：
【化１３】
2020502259.tif 000099
の構造を有する、請求項９３に記載の方法。
【請求項９６】
前記化合物が、式（ＶＩｃ）：
【化１４】
2020502259.tif 000100
の構造を有する、請求項９３に記載の方法。
【請求項９７】
前記化合物が、式（ＶＩｄ）：
【化１５】
2020502259.tif 000101
の構造を有する、請求項９３に記載の方法。
【請求項９８】
前記化合物が、式（ＶＩｅ）：
【化１６】
2020502259.tif 000102
の構造を有する、請求項９３に記載の方法。
【請求項９９】
前記化合物が、式（ＶＩｆ）：
【化１７】
2020502259.tif 000103
の構造を有する、請求項９３に記載の方法。
【請求項１００】
前記化合物が、式（ＶＩｇ）：
【化１８】
2020502259.tif 000104
の構造を有する、請求項９３に記載の方法。
【請求項１０１】
前記化合物が、式（ＩＶｈ）：
【化１９】
2020502259.tif 000105
の構造を有する、請求項９３に記載の方法。
【請求項１０２】
Ｒ２がＨである、請求項９３から９５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０３】
Ｒａが、Ｈまたは置換されていてもよいアルキルである、請求項９３から１０２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０４】
ＲａがＨである、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
Ｒｂが、Ｈまたは置換されていてもよいアルキルもしくはアシルである、請求項９３から１０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０６】
ＲｂがＨである、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
各出現について、ＲｃがＨである、請求項９３から１０６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０８】
２つのＲｃの出現が、一緒になって、置換されていてもよいジオキサボロラン、ジオキサボロラノン、ジオキサボロランジオン、ジオキサボリナン、ジオキサボリナノン、またはジオキサボリナンジオンを形成する、請求項９３から１０６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０９】
ＸがＯである、請求項９３から１０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１０】
Ｒ１がＨである場合、Ｒ３はベンジルではない、請求項９３から１０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１１】
Ｒ１がＨである、請求項９３から１１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１２】
Ｒ１がベンジルである場合、Ｒ３はメチルではない、請求項９３から１１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１３】
Ｒ１が、置換されていてもよいアラルキル、ヘテロアラルキル、（シクロアルキル）アルキル、または（ヘテロシクロアルキル）アルキルである、請求項９３から１０９および１１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１４】
Ｒ１が、置換されていてもよいアラルキルまたはヘテロアラルキルである、請求項９３から１０９および１１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１５】
Ｒ１がベンジルである、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１６】
Ｒ１が、−ＣＦ３で置換されたベンジルではない、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１７】
Ｒ１が、−ＣＨ２−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）などのヘテロアラルキルである、請求項１１４に記載の方法。
【請求項１１８】
Ｒ１が、置換されていてもよいアルキル、アルケニル、またはアルキニルである、請求項９３から１０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１９】
Ｒ１が、ヒドロキシ、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ、−ＳＨ、−Ｓ−（アルキル）、−ＳｅＨ、−Ｓｅ−（アルキル）、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アミノ、カルボン酸、エステル、グアニジノ、およびアミドから独立して選択される１つ以上の置換基によって置換されていてもよいアルキルである、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２０】
Ｒ１が、ヒドロキシ、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ、−ＳＨ、−Ｓ−（アルキル）、−ＳｅＨ、−Ｓｅ−（アルキル）、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アミノ、カルボン酸、エステル、グアニジノ、およびアミドから独立して選択される１つ以上の置換基によって置換されていてもよいアルキルである、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
Ｒ１が、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルキル、および−Ｓ−（アルキル）から独立して選択される１つ以上の置換基によって置換されていてもよいアルキルである、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
Ｒ１が、置換されていてもよいシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択される、請求項９３から１０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２３】
Ｒ１が、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐのアミノ酸側鎖である、請求項９３から１０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２４】
Ｒ３がＨである、請求項９３から１２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２５】
Ｒ１およびＲ３が、介在原子と一緒になって置換された５員環を形成する、請求項９３から１０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２６】
Ｒ１およびＲ３が、介在原子と一緒になって、置換されていてもよい６または７員環を形成する、請求項９３から１０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２７】
Ｒ１およびＲ３が、介在原子と一緒になって、テトラヒドロイソキノリニル環を形成しない、請求項１２６に記載の方法。
【請求項１２８】
前記化合物が、以下から：
【表５−１】
2020502259.tif 000106
【表５−２】
2020502259.tif 000107
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグから選択される構造を有する。
【請求項１２９】
免疫チェックポイント阻害剤を前記被験体に投与することをさらに含む、請求項１から１２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３０】
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＶＩＳＴＡ、Ｂ７−Ｈ２、Ｂ７−Ｈ３、ＰＤ−Ｌ１、Ｂ７−Ｈ４、Ｂ７−Ｈ６、ＩＣＯＳ、ＨＶＥＭ、ＰＤ−Ｌ２、ＣＤ１６０、ｇｐ４９Ｂ、ＰＩＲ−Ｂ、ＫＩＲファミリー受容体、ＴＩＭ−１、ＴＩＭ−３、ＴＩＭ−４、ＬＡＧ−３、ＢＴＬＡ、ＳＩＲＰα（ＣＤ４７）、ＣＤ４８、２Ｂ４（ＣＤ２４４）、Ｂ７．１、Ｂ７  ２、ＩＬＴ−２、ＩＬＴ−４、ＴＩＧＩＴ、ＨＨＬＡ２、ブチロフィリン、Ａ２ａＲ、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項１２９に記載の方法。
【請求項１３１】
化学療法剤を前記被験体に投与することをさらに含む、請求項１から１３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３２】
前記１つ以上の追加の化学療法剤が、アミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、アスパラギナーゼ、ＡＺＤ５３６３、カルメット・ゲラン桿菌ワクチン（ｂｃｇ）、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブセレリン、ブスルファン、カンプトテシン、カペシタビン、カルボプラチン、カルフィルゾミブ、カルムスチン、クロラムブシル、クロロキン、シスプラチン、クラドリビン、クロドロナート、コビメチニブ、コルヒチン、シクロホスファミド、シプロテロン、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デメトキシビリジン、デキサメタゾン、ジクロロアセタート、ジエネストロール、ジエチルスチルベストロール、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エルロチニブ、エストラジオール、エストラムスチン、エトポシド、エベロリムス、エキセメスタン、フィルグラスチム、フルダラビン、フルドロコルチゾン、フルオロウラシル、フルオキシメステロン、フルタミド、ゲムシタビン、ゲニステイン、ゴセレリン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブ、インターフェロン、イリノテカン、レナリドミド、レトロゾール、ロイコボリン、ロイプロリド、レバミゾール、ロムスチン、ロニダミン、メクロレタミン、メドロキシプロゲステロン、メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、メスナ、メトホルミン、メトトレキサート、ミルテホシン、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、ＭＫ−２２０６、ニルタミド、ノコダゾール、オクトレオチド、オラパリブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロナート、パゾパニブ、ペントスタチン、ペリホシン、プリカマイシン、ポマリドミド、ポルフィマー、プロカルバジン、ラルチトレキセド、リツキシマブ、ルカパリブ、セルメチニブ、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、スニチニブ、スラミン、タラゾパリブ、タモキシフェン、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、テストステロン、サリドマイド、チオグアニン、チオテパ、チタノセンジクロリド、トポテカン、トラメチニブ、トラスツズマブ、トレチノイン、ベリパリブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、またはビノレルビンを含む、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３３】
前記１つ以上の追加の化学療法剤が、アバゴボマブ、アデカツムマブ、アフツズマブ、アナツモマブマフェナトクス、アポリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、ブリナツモマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、カツマキソマブ、デュルバルマブ、エパカドスタット、エプラツズマブ、インドキシモド、イノツズマブオゾガマイシン、インテツムマブ、イピリムマブ、イサツキシマブ、ラムブロリズマブ、ＭＥＤ１４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ニボルマブ、オカラツズマブ、オファツムマブ、オララツマブ、ペムブロリズマブ、ピジリズマブ、リツキシマブ、チシリムマブ、サマリズマブ、またはトレメリムマブを含む、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３４】
前記１つ以上の追加の化学療法剤が、アバゴボマブ、アデカツムマブ、アフツズマブ、アナツモマブマフェナトクス、アポリズマブ、ブリナツモマブ、カツマキソマブ、デュルバルマブ、エプラツズマブ、イノツズマブオゾガマイシン、インテツムマブ、イピリムマブ、イサツキシマブ、ラムブロリズマブ、ニボルマブ、オカラツズマブ、オララツマブ、ペムブロリズマブ、ピジリズマブ、チシリムマブ、サマリズマブ、またはトレメリムマブを含む、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３５】
前記疾患が癌である、請求項１から１３４に記載の方法。
【請求項１３６】
前記癌が、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、副腎皮質癌、肛門癌、虫垂癌、非定型奇形腫／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳腫瘍、星状細胞腫、脳脊髄腫瘍、脳幹神経膠腫、中枢神経系非定型奇形腫／ラブドイド腫瘍、中枢神経系胎児性腫瘍、乳癌、気管支腫瘍、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍、原発不明癌、中枢神経系癌、子宮頸癌、小児癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性骨髄増殖性疾患、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、上皮内腺管癌（ＤＣＩＳ）、胎児性腫瘍、子宮内膜癌、上衣芽腫、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、肝外胆管癌、眼の癌、骨の線維性組織球腫、胆嚢癌、胃癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、胚細胞腫瘍、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、卵巣胚細胞腫瘍、妊娠性絨毛性腫瘍、神経膠腫、有毛細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝細胞癌、組織球症、ランゲルハンス細胞癌、ホジキンリンパ腫、下咽頭癌、眼内黒色腫、膵島細胞腫瘍、カポジ肉腫、腎臓癌、ランゲルハンス細胞組織球症、喉頭癌、白血病、口唇および口腔癌、肝臓癌、上皮内小葉癌（ＬＣＩＳ）、肺癌、リンパ腫、エイズ関連リンパ腫、マクログロブリン血症、男性乳癌、髄芽腫、髄上皮腫、黒色腫、メルケル細胞癌、悪性中皮腫、原発不明転移性頸部扁平上皮癌、ＮＵＴ遺伝子を含む正中管癌、口腔癌、多発性内分泌腫瘍症候群、多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性腫瘍、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄腫、多発性骨髄腫、慢性骨髄増殖性疾患、鼻腔癌、副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、非小細胞肺癌、口腔の癌、口腔癌、口唇癌、中咽頭癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌、乳頭腫、傍神経節腫、副鼻腔癌、鼻腔癌、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、褐色細胞腫、中間型松果体実質腫瘍、松果体芽腫、下垂体腫瘍、形質細胞腫瘍、胸膜肺芽腫、乳癌、原発性中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌、腎盂癌、尿管癌、移行上皮癌、網膜芽腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、肉腫、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、扁平上皮癌、原発不明頸部扁平上皮癌、胃癌、テント上原始神経外胚葉性腫瘍、Ｔ細胞リンパ腫、精巣癌、咽頭癌、胸腺腫、胸腺癌、甲状腺癌、腎盂および尿管の移行上皮癌、妊娠性絨毛性腫瘍、小児期の原発不明希少癌、尿道癌、子宮癌、子宮肉腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、またはウィルムス腫瘍である、請求項１３５に記載の方法。
【請求項１３７】
投与が非経口投与を含む、請求項１から１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３８】
投与が経口投与を含む、請求項１から１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３９】
投与が、被験体中に存在する腫瘍への局所投与を含む、請求項１から１３６のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
免疫細胞の養子細胞移入、または養子免疫療法は、被験体からの免疫細胞の除去、免疫細胞のエクスビボ処理（すなわち活性化、精製および／または拡大増殖）、および得られた細胞をその後同じまたは異なる被験体に戻し注入することを含む細胞療法である。
【０００２】
養子免疫療法治療は予測不可能で散発的な効果を有することがあり、これらの治療の予測不可能で散発的な効果の原因は明確には理解されていない。さらに、養子免疫療法は、腫瘍微小環境における骨髄由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）の蓄積のために癌の治療における適用が限られていた。養子免疫療法の効果を阻害するＭＤＳＣの機構的根拠は決定されていない。ＭＤＳＣが腫瘍微小環境においてアルギナーゼを産生し、それによって腫瘍微小環境中のアルギニンの量を減少させることは公知であるが、養子免疫療法におけるアルギニンの役割は確立されていない。初期の試験は、アルギニンがいくつかの異なる機構を介して養子Ｔ細胞免疫療法を潜在的に阻害し得ることを示唆した（例えばＲａｂｅｒ  ｉ．，Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ，７，１７５６５−１７５７８；Ｌｏｒｖｉｋ  ｅｔ  ａｌ．２０１６，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，７６，６８６４−６８７６；Ｅｌｌｙａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．２０１０，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３３，４４３−４５２参照）。例えば、Ｌｏｒｖｉｋ  ｅｔ  ａｌ．およびＥｌｌｙａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．は、アルギナーゼが、特定のマクロファージが癌細胞に対して細胞傷害性であることを確実にするのに重要であり、したがってそれらの増殖を阻害すると主張した。
【０００３】
したがって、養子免疫療法治療の効率を改善することが必要とされている。
【発明の概要】
【０００４】
本出願は、アルギニンが養子免疫療法に有害な影響を及ぼし得ることを開示する。さらに、本出願は、腫瘍または腫瘍微小環境におけるアルギナーゼ阻害が養子免疫療法の有効性を増強し得ることを開示する。実際に、以下の例に示すように、本出願は、養子免疫療法がアルギナーゼ阻害と相乗作用し、それによって癌を治療する有効な方法を提供することを開示する。
【０００５】
したがって、本開示は、アルギナーゼ阻害剤と養子免疫療法とを被験体（例えばヒト）に同時投与することによって養子細胞移入の有効性を増強する方法を提供する。アルギナーゼ阻害剤は、養子免疫療法と共同的に投与する（例えば連続的にまたは同時に投与する）ことができる。例えば、アルギナーゼ阻害剤は、養子Ｔ細胞免疫療法または養子ＮＫ細胞免疫療法の有効性を増強するために養子Ｔ細胞免疫療法または養子ＮＫ細胞免疫療法と共同的に投与される。いくつかの実施形態では、養子Ｔ細胞免疫療法は、ＣＤ８＋Ｔ細胞などの細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）の被験体への移入を含む。いくつかの実施形態では、養子Ｔ細胞免疫療法は、両方のＣＤ４＋Ｔ細胞の被験体への移入を含む。いくつかの実施形態では、養子Ｔ細胞免疫療法は、ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞の両方を被験体に移入することを含む。いくつかの実施形態では、養子免疫療法は、Ｔ細胞およびＮＫ細胞の両方を被験体に移入することを含む。
【０００６】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は、癌を有する被験体（例えばヒト）に投与された場合、養子免疫療法の有効性を増強する。いくつかのそのような実施形態では、癌は黒色腫である。他の実施形態では、癌は多発性骨髄腫である。他の実施形態では、癌は肺癌である。他の実施形態では、癌は乳癌である。養子免疫療法およびアルギナーゼ阻害剤は、１つ以上のサイトカイン（例えばＩＬ−２またはＩＬ−５）と共に投与され得る。
【０００７】
被験体に併用療法を投与することによって被験体における疾患（例えば癌またはウイルス感染）を治療または予防することに関する組成物および方法が本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、併用療法は、アルギナーゼ阻害剤（例えば本明細書で開示される式のいずれか１つのアルギナーゼ阻害剤）および養子細胞移入を共同的に投与することを含む。いくつかの実施形態では、養子細胞移入は、免疫細胞（例えば細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）などのＴ細胞、またはＮＫ−９２細胞などのナチュラルキラー（ＮＫ）細胞）を、疾患（例えば癌またはウイルス感染）を有する被験体に移入することを含む。いくつかの実施形態では、免疫細胞はキメラ抗原受容体を発現する。いくつかの実施形態では、免疫細胞は疾患関連ペプチドに特異的な受容体を発現する。免疫細胞は、自己由来（すなわち被験体由来）または同種異系（すなわちドナー由来もしくは細胞バンク由来）であり得る。
【０００８】
そのような免疫細胞（例えばＣＴＬなどのＴ細胞）は、被験体への投与の前に１つ以上の疾患特異的ペプチド（１または複数）を提示する抗原提示細胞（ＡＰＣ）の存在下で拡大増殖され得る。ＡＰＣは、Ｂ細胞、樹状細胞、または人工抗原提示Ｔ細胞（ａＫ５６２  Ｔ細胞）であり得る。いくつかの実施形態では、免疫細胞は濃縮されていない。いくつかの実施形態では、免疫細胞を含有する組成物およびアルギナーゼ阻害剤は共同的に投与される（例えば連続的にまたは同時に投与される）。免疫細胞を含有する組成物は、１つ以上のサイトカイン（例えばＩＬ−２またはＩＬ−１５）をさらに含み得る。いくつかの実施形態では、約１×１０６細胞／ｋｇ〜約１×１０９細胞／ｋｇの細胞が被験体に投与される。
【０００９】
いくつかの実施形態では、併用療法は、アルギナーゼ阻害剤（例えば本明細書で開示される式を有するアルギナーゼ阻害剤）、免疫細胞を含有する組成物（例えば本明細書に記載の免疫細胞の組成物）、および抗体（例えば腫瘍細胞を標的とする抗体）を被験体に共同的に投与することを含む。抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはキメラ抗体であり得る。アルギナーゼ阻害剤、免疫細胞を含有する組成物、および抗体は、一緒にまたは異なる時点で（例えば連続的に）投与され得る。
【００１０】
養子免疫療法およびアルギナーゼ阻害剤は、他の化学療法剤と共に投与され得る。一実施形態では、養子免疫療法、アルギナーゼ阻害剤および標準治療化学療法剤の組み合わせが、養子免疫療法の治療活性を増強するために癌を有する被験体（例えばヒト患者）に投与される。１つのそのような実施形態では、標準治療化学療法剤はゲムシタビンである。別のそのような実施形態では、化学療法剤はシクロホスファミドである。別のそのような実施形態では、化学療法剤はフルダラビンである。化学療法剤（１または複数）は、養子免疫療法／アルギナーゼ阻害剤の前に、その後におよび／またはそれと同時に投与することができる。これらの実施形態のすべてにおいて、養子免疫療法およびアルギナーゼ阻害剤は、１つ以上のサイトカイン（例えばＩＬ−２またはＩＬ−５）と共に投与され得る。
【００１１】
養子免疫療法およびアルギナーゼ阻害剤は、１つ以上の免疫調節剤と共に投与され得る。例えば、養子免疫療法およびアルギナーゼ阻害剤は、養子免疫療法の有効性を増強するためにＰＤ−１阻害剤、ＰＤ−Ｌ１阻害剤またはＣＴＬＡ−４阻害剤などの免疫チェックポイント阻害剤と共に投与され得る。そのような実施形態では、チェックポイント阻害剤は、養子免疫療法／アルギナーゼ阻害剤の前に、その後におよび／またはそれと同時に投与することができる。これらの実施形態のすべてにおいて、養子免疫療法およびアルギナーゼ阻害剤は、１つ以上のサイトカイン（例えばＩＬ−２またはＩＬ−５）と共に投与され得る。
【００１２】
養子免疫療法およびアルギナーゼ阻害剤は、酵素ＩＤＯ−１の１つ以上の阻害剤と共に投与され得る。特定のそのような実施形態では、ＩＤＯ−１阻害剤はエパカドスタットである。
【００１３】
いくつかの実施形態では、養子免疫療法と共同的に被験体（例えばヒト患者）に投与されたアルギナーゼ阻害剤は、実質的に細胞内に浸透せず、むしろ優先的に血漿または腫瘍の周囲の微小環境または腫瘍自体に留まる。例えば、アルギナーゼ阻害剤は、細胞内アルギナーゼに対するよりも可溶性アルギナーゼに対してより大きな親和性を有し得る。そのようなアルギナーゼ阻害剤は、細胞におけるアルギニン補充にしばしば関連する毒性学的懸念を伴わずに養子免疫療法の有効性を改善し得る。いくつかの実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は、細胞溶解物中の可溶性アルギナーゼよりも少なくとも２桁、３桁または４桁高い、肝細胞株（例えばＨｅｐＧ２）またはＫ５６２細胞株における細胞内アルギナーゼのＩＣ５０値を有する。
【００１４】
いくつかの実施形態では、養子免疫療法と組み合わせて投与されるアルギナーゼ阻害剤は、以下に記載される式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶａ、ＩＶｂ、Ｖ、またはＶＩの構造を有する。いくつかの実施形態では、養子免疫療法と組み合わせて投与されるアルギナーゼ阻害剤は、以下に記載される式ＶＩａ、ＶＩｂ、ＶＩｃ、ＶＩｄ、ＶＩｅ、ＶＩｆ、ＶＩｇ、またはＶＩｈの構造を有する。
【００１５】
いくつかの実施形態では、養子免疫療法と組み合わせて投与されるアルギナーゼ阻害剤は、以下の構造：
【化１】
2020502259.tif 000003
を有するか、またはその薬学的に許容される塩である。
【００１６】
いくつかの実施形態では、養子免疫療法と組み合わせて投与されるアルギナーゼ阻害剤は、以下の構造：
【化２】
2020502259.tif 000004
を有するか、またはその薬学的に許容される塩である。
【００１７】
いくつかの実施形態では、養子免疫療法と組み合わせて投与されるアルギナーゼ阻害剤は、以下の構造：
【化３】
2020502259.tif 000005
を有するか、またはその薬学的に許容される塩である。
【００１８】
化合物およびその薬学的に許容される塩は、国際公開第２０１７／０７５３６３号に開示されている（化合物１０および１３参照）。
【００１９】
いくつかの実施形態では、養子免疫療法と組み合わせて投与されるアルギナーゼ阻害剤は、以下の構造：
【化４】
2020502259.tif 000006
を有するか、またはその薬学的に許容される塩である。
【００２０】
いくつかの実施形態では、養子免疫療法と組み合わせて投与されるアルギナーゼ阻害剤は、以下の構造：
【化５】
2020502259.tif 000007
を有するか、またはその薬学的に許容される塩である。
【００２１】
いくつかの実施形態では、養子免疫療法と組み合わせて投与されるアルギナーゼ阻害剤は、以下の構造：
【化６】
2020502259.tif 000008
を有するか、またはその薬学的に許容される塩である。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１Ａ】アルギナーゼ阻害剤が養子移入された抗原特異的Ｔ細胞と相乗作用して腫瘍増殖を阻害することを示す。
【図１Ｂ】アルギナーゼ阻害剤が養子移入された抗原特異的Ｔ細胞と相乗作用して腫瘍増殖を阻害することを示す。
【図１Ｃ】アルギナーゼ阻害剤が養子移入された抗原特異的Ｔ細胞と相乗作用して腫瘍増殖を阻害することを示す。
【００２３】
【図２Ａ】アルギナーゼの阻害がインビトロでのＴ細胞増殖の骨髄細胞媒介抑制を逆転させることを示す。
【図２Ｂ】アルギナーゼの阻害がインビトロでのＴ細胞増殖の骨髄細胞媒介抑制を逆転させることを示す。
【図２Ｃ】アルギナーゼの阻害がインビトロでのＴ細胞増殖の骨髄細胞媒介抑制を逆転させることを示す。
【図２Ｄ】アルギナーゼの阻害がインビトロでのＴ細胞増殖の骨髄細胞媒介抑制を逆転させることを示す。
【図２Ｅ】アルギナーゼの阻害がインビトロでのＴ細胞増殖の骨髄細胞媒介抑制を逆転させることを示す。
【図２Ｆ】アルギナーゼの阻害がインビトロでのＴ細胞増殖の骨髄細胞媒介抑制を逆転させることを示す。
【図２Ｇ】アルギナーゼの阻害がインビトロでのＴ細胞増殖の骨髄細胞媒介抑制を逆転させることを示す。（図２Ａ）Ｔ細胞（左）およびＮＫ細胞（右）は、増殖のために細胞外Ｌ−アルギニンを必要とする。Ｌ−アルギニンを含む培地または含まない培地中で、ＣＦＳＥ負荷Ｔ細胞またはＮＫ細胞をそれぞれ抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８またはＩＬ−２で刺激した。７２時間後にフローサイトメトリによって増殖を測定した。（図２Ｂ）単離されたヒト顆粒球は、培地からＬ−アルギニンを枯渇させ、これは４８時間後にＬＣ／ＭＳによって測定される。（図２Ｃ）ヒト末梢血Ｔ細胞は、同じ健常ドナーから単離された顆粒球との共培養によって増殖が抑制される。（図２Ｄ）左、アルギナーゼ阻害剤は、顆粒球による培地からのアルギニンの消費を用量依存的に阻害する；右、アルギナーゼ阻害剤は、Ｔ細胞増殖の顆粒球媒介抑制を用量依存的に阻害する。共培養物中の顆粒球対Ｔ細胞の比は０．２５対１であった。（図２Ｅ）アルギナーゼ阻害剤は、顆粒球ＭＤＳＣによってもたらされるＴ細胞抑制を逆転させる。肺癌患者の血液から精製された顆粒球−ＭＤＳＣによって馴化された培地はＴ細胞増殖を阻害し、Ｌ−アルギニンが枯渇しており、両方の作用がアルギナーゼ阻害剤によって用量依存的に逆転される。左、培地中のアルギニン量；右、Ｔ細胞増殖。ＭＤＳＣ馴化培地対Ｔ細胞の比は１：１であった。（図２Ｆ）頭頸部癌患者の血液から単離された精製顆粒球由来の馴化培地はＴ細胞増殖を阻害し、Ｌ−アルギニンが枯渇しており、両方の作用がアルギナーゼ阻害剤によって用量依存的に逆転される。左、Ｔ細胞増殖；右、培地中のアルギニン量。顆粒球馴化培地対Ｔ細胞の比は０．５：１であった（図２Ｇ）アルギナーゼ阻害剤は、癌患者の顆粒球によってもたらされるインターフェロンγおよびグランザイムＢの分泌の阻害を逆転させる。パネルからの培地（図２Ｆ）をサイトメトリビーズアレイによって分析した。
【００２４】
【図３Ａ】アルギナーゼ阻害剤が、インビボで毒性の明らかな徴候がない良好な薬物動態および薬力学特性を有することを示す。
【図３Ｂ】アルギナーゼ阻害剤が、インビボで毒性の明らかな徴候がない良好な薬物動態および薬力学特性を有することを示す。
【図３Ｃ】アルギナーゼ阻害剤が、インビボで毒性の明らかな徴候がない良好な薬物動態および薬力学特性を有することを示す。ＬＬＣ腫瘍担持マウス（１群当たりＮ＝５）に、アルギナーゼ阻害剤の単回用量（図３Ａ）または５回の１日２回用量（図３Ｂ）を投与し、最後の投与の２時間後に試料を採取した。血漿および腫瘍溶解物中のアルギナーゼ阻害剤（図３Ａおよび３Ｂ、上段）およびＬ−アルギニン（図３Ｃおよび３Ｂ、下段）をＬＣ／ＭＳによって測定した。（図３Ｃ）ＣＴ２６細胞を接種し、ビヒクルまたはアルギナーゼ阻害剤を１日２回２３日間投与したマウスの体重。（ビヒクルに対して＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；＊＊Ｐ＜０．０１）。
【００２５】
【図４Ａ】アルギナーゼ阻害がインビボで腫瘍増殖を減少させることを示す。
【図４Ｂ】アルギナーゼ阻害がインビボで腫瘍増殖を減少させることを示す。（図４Ａ）１００ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤで投与したアルギナーゼ阻害剤は、癌の複数の同系マウスモデル（１群当たりＮ＝１０）において単剤として腫瘍増殖を減少させた。（図４Ｂ）骨髄区画におけるＡｒｇ１遺伝子発現を欠くマウス（ＡＲＧ１ΔＭと称される）は、野生型Ａｒｇ１を含むマウス（ＡＲＧ１ＷＴ）よりも成長が小さく、アルギナーゼ阻害剤によるＡＲＧ１ΔＭマウスの処置は腫瘍増殖をさらに減少させず、アルギナーゼ阻害剤のオンターゲット活性を示す（１群当たりＮ＝１６）。（Ｔ検定：＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１；＊Ｐ＜０．０５）。
【００２６】
【図５Ａ】アルギナーゼ阻害剤が有効性のために無傷の免疫系を必要とすることを示す。
【図５Ｂ】アルギナーゼ阻害剤が有効性のために無傷の免疫系を必要とすることを示す。
【図５Ｃ】アルギナーゼ阻害剤が有効性のために無傷の免疫系を必要とすることを示す。
【図５Ｄ】アルギナーゼ阻害剤が有効性のために無傷の免疫系を必要とすることを示す。
【図５Ｅ】アルギナーゼ阻害剤が有効性のために無傷の免疫系を必要とすることを示す。（図５Ａ）ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏアッセイ（７２時間）を、用量漸増のアルギナーゼ阻害剤を用いて示されている細胞株に関して実施した。（図５Ｂ）Ｂ６．ＣＢ１７−Ｐｒｋｄｃ（ＳＣＩＤ）／ＳｚＪマウスにＬＬＣ細胞を移植し、アルギナーゼ阻害剤を１００ｍｇ／ｋｇ  ＰＯで１日２回投与した。（図５Ｃ〜５Ｅ）Ｂ１６（図５Ｃ）、ＣＴ２６（図５Ｄ）、およびＬＬＣ（図５Ｅ）モデルにおけるアルギナーゼ阻害剤による腫瘍増殖阻害は、ＣＤ８＋およびＮＫ細胞によって媒介される。担癌マウスを枯渇抗体で処置し、ビヒクルまたは１００ｍｇ／ｋｇのアルギナーゼ阻害剤を１日２回投与した。ＬＬＣ試験からの腫瘍を試験１３日目（ＣＤ８＋細胞枯渇）または試験１４日目（ＮＫ細胞枯渇）に分析した。（＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；＊＊Ｐ＜０．０１）。
【００２７】
【図６Ａ】アルギナーゼ阻害剤で処置した動物が腫瘍浸潤性細胞傷害性細胞の増加および骨髄細胞の減少を有することを示す。
【図６Ｂ】アルギナーゼ阻害剤で処置した動物が腫瘍浸潤性細胞傷害性細胞の増加および骨髄細胞の減少を有することを示す。
【図６Ｃ】アルギナーゼ阻害剤で処置した動物が腫瘍浸潤性細胞傷害性細胞の増加および骨髄細胞の減少を有することを示す。
【図６Ｄ】アルギナーゼ阻害剤で処置した動物が腫瘍浸潤性細胞傷害性細胞の増加および骨髄細胞の減少を有することを示す。
【図６Ｅ】アルギナーゼ阻害剤で処置した動物が腫瘍浸潤性細胞傷害性細胞の増加および骨髄細胞の減少を有することを示す。
【図６Ｆ】アルギナーゼ阻害剤で処置した動物が腫瘍浸潤性細胞傷害性細胞の増加および骨髄細胞の減少を有することを示す。（図６Ａ）アルギナーゼ阻害剤で処置した動物からのＣＴ２６腫瘍は、試験１４日目にビヒクル処置動物と比較して増加したＣＤ８＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞を有していた（１群当たりＮ＝１０）。（図６Ｂ）Ｂ１６Ｆ１０モデルでは、アルギナーゼ阻害剤処置は、試験９日目に観察されたＣＤ２５＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加をもたらした（１群当たりＮ＝１０）。（図６Ｃ）ＬＬＣモデルにおいて、アルギナーゼ阻害剤処置は、試験１４日目に観察された腫瘍浸潤ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加およびＣＤ６８＋骨髄細胞の減少をもたらした（１群当たりＮ＝１０）。（図６Ｄ）４Ｔ１モデルでは、アルギナーゼ阻害剤処置は、試験１０日目に観察されたＴ細胞およびＮＫ細胞の両方の増加および骨髄細胞の減少をもたらした（１群当たりＮ＝１０）。（図６Ｅ）アルギナーゼ阻害剤は、Ｔ細胞およびＮＫ細胞マーカーならびにインターフェロン応答遺伝子を増加させる。ビヒクルまたは１００ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤのアルギナーゼ阻害剤で処置したマウスからのＬＬＣ腫瘍中のｍＲＮＡ転写物をＮａｎｏｓｔｒｉｎｇによって測定した（１群当たりＮ＝６）。（図６Ｆ）ビヒクルまたは２００ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤのアルギナーゼ阻害剤で処置したマウスからのＬＬＣ腫瘍中のサイトカインおよびケモカインをＬｕｍｉｎｅｘによって測定した（１群当たりＮ＝５）。（Ｔ検定：＊＊Ｐ＜０．０１；＊Ｐ＜０．０５）。
【００２８】
【図７Ａ】アルギナーゼ阻害剤が免疫療法、化学療法、または細胞移入と組み合わせて腫瘍増殖を阻害することを示す。
【図７Ｂ】アルギナーゼ阻害剤が免疫療法、化学療法、または細胞移入と組み合わせて腫瘍増殖を阻害することを示す。
【図７Ｃ】アルギナーゼ阻害剤が免疫療法、化学療法、または細胞移入と組み合わせて腫瘍増殖を阻害することを示す。
【図７Ｄ】アルギナーゼ阻害剤が免疫療法、化学療法、または細胞移入と組み合わせて腫瘍増殖を阻害することを示す。（図７Ａ）ＰＤ−Ｌ−１遮断と組み合わせたアルギナーゼ阻害剤は、ＣＴ２６モデルにおいて腫瘍増殖を阻害した。増殖曲線（左および中央）および生存率曲線（右）を示す。１群当たりＮ＝１０。（図７Ｂ）ＣＴ２６モデル（左）またはＬＬＣモデル（右）におけるゲムシタビンと組み合わせたアルギナーゼ阻害剤は腫瘍増殖を阻害した。１群当たりＮ＝１０。（図７Ｃ）アルギナーゼ阻害剤および養子Ｔ細胞移入は、Ｂ１６−Ｆ１０モデルにおいて腫瘍増殖を阻害した。シクロホスファミド＋フルダラビン（Ｃ／Ｆ）の非骨髄破壊的化学療法レジメンをすべての群に投与し、Ｔ細胞を摂取する群にＩＬ−２を投与した。試験９日目に、Ｐｍｅｌ−１Ｔ細胞をＴ細胞群（ＡＣＴ）のマウスに移入した。１群当たりＮ＝１０。（図７Ｄ）アルギナーゼ阻害剤および養子ＮＫ細胞移入は、ＣＴ２６モデルにおいて肺転移を減少させた。Ｎ＝６  対照；Ｎ＝７  アルギナーゼ阻害剤；Ｎ＝５  ＮＫ細胞；Ｎ＝５  アルギナーゼ＋ＮＫ細胞（Ｔ検定：＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；＊＊Ｐ＜０．０１；＊Ｐ＜０．０５）。
【００２９】
【図８Ａ】アルギナーゼ１が複数の種類の癌において豊富であることを示す。
【図８Ｂ】アルギナーゼ１が複数の種類の癌において豊富であることを示す。
【図８Ｃ】アルギナーゼ１が複数の種類の癌において豊富であることを示す。
【図８Ｄ】アルギナーゼ１が複数の種類の癌において豊富であることを示す。
【図８Ｅ】アルギナーゼ１が複数の種類の癌において豊富であることを示す。
【図８Ｆ】アルギナーゼ１が複数の種類の癌において豊富であることを示す。
【図８Ｇ】アルギナーゼ１が複数の種類の癌において豊富であることを示す。
【図８Ｈ】アルギナーゼ１が複数の種類の癌において豊富であることを示す。（図８Ａ）抗アルギナーゼ１抗体で染色したヒト腫瘍組織マイクロアレイの免疫組織化学を、デジタル組織病理学によってアルギナーゼ１陽性の浸潤顆粒球について定量化した。（図８Ｂ〜８Ｄ）正常ヒト組織（Ｎ＝３３の組織を分析）およびヒト腫瘍組織（Ｎ＝１２の腫瘍組織型を分析）の切片におけるＡｒｇ１についての免疫組織化学染色。代表的な画像を示す。矢印はアルギナーゼ発現骨髄細胞を指し示す。（図８Ｅ）ＭｕｌｔｉＯｍｙｘ免疫蛍光法の定量によって測定された、腫瘍組織マイクロアレイ中の、顆粒球マーカーであるＣＤ１５、またはマクロファージマーカーであるＣＤ６８を共発現するアルギナーゼ１陽性細胞の割合。（図８Ｆ）頭頸部癌を有する患者からの腫瘍切片の免疫蛍光染色（ＭｕｌｔｉＯｍｙｘ）は、多数のアルギナーゼ１陽性顆粒球を示す。（図８Ｇ）癌患者（１３の異なる組織型からＮ＝７６）および健常志願者（Ｎ＝３１）からのＥＬＩＳＡによって測定した血漿アルギナーゼ１タンパク質。（図８Ｈ）癌患者（７つの異なる組織型からＮ＝２６）および健常志願者（Ｎ＝２０）からのＬＣ／ＭＳによって測定した血漿Ｌ−アルギニン（健常ドナーに対して＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
被験体にアルギナーゼ阻害剤（例えば本明細書で開示される式を有するアルギナーゼ阻害剤）および免疫細胞（例えば細胞傷害性Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含有する組成物を共同的に投与することによって、被験体における疾患（例えば癌またはウイルス感染）を治療または予防することに関する組成物および方法が本明細書で提供される。免疫細胞は同種異系または自己由来であり得る。いくつかの実施形態では、前記方法は、本明細書で開示される抗体を共同的に投与することをさらに含む。
【００３１】
４．１．定義
本明細書で使用される場合、以下の用語は以下の意味を有するものとする：
【００３２】
「アシル」という用語は当技術分野において認識されており、一般式ヒドロカルビルＣ（Ｏ）−、好ましくはアルキルＣ（Ｏ）−によって表される基を指す。
【００３３】
「アシルアミノ」という用語は当技術分野において認識されており、アシル基で置換されたアミノ基を指し、例えば式ヒドロカルビルＣ（Ｏ）ＮＨ−によって表され得る。
【００３４】
「アシルオキシ」という用語は当技術分野において認識されており、一般式ヒドロカルビルＣ（Ｏ）Ｏ−、好ましくはアルキルＣ（Ｏ）Ｏ−によって表される基を指す。
【００３５】
「アルコキシ」という用語は、それに結合した酸素を有するアルキル基、好ましくは低級アルキル基を指す。代表的なアルコキシ基としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ等が挙げられる。
【００３６】
「アルコキシアルキル」という用語は、アルコキシ基で置換されたアルキル基を指し、一般式アルキル−Ｏ−アルキルによって表され得る。
【００３７】
「アルケニル」という用語は、本明細書で使用される場合、少なくとも１つの二重結合を含む脂肪族基を指し、「非置換アルケニル」および「置換アルケニル」の両方を含むことが意図されており、後者は、アルケニル基の１個以上の炭素上の水素を置換する置換基を有するアルケニル部分を指す。そのような置換基は、１つ以上の二重結合に含まれるまたは含まれない１個以上の炭素上に存在し得る。さらに、そのような置換基は、安定性が法外なものである場合を除き、以下で論じるように、アルキル基について企図されるすべてのものを包含する。例えば、１つ以上のアルキル、カルボシクリル、アリール、ヘテロシクリル、またはヘテロアリール基によるアルケニル基の置換が企図される。
【００３８】
「アルキル」基または「アルカン」は、完全に飽和している直鎖または分岐非芳香族炭化水素である。典型的には、直鎖または分岐アルキル基は、特に定義されない限り、１〜約２０個の炭素原子、好ましくは１〜約１０個の炭素原子を有する。直鎖および分岐アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチルおよびオクチルが含まれる。Ｃ１−Ｃ６直鎖または分岐アルキル基は「低級アルキル」基とも称される。
【００３９】
さらに、本明細書、例および特許請求の範囲を通して使用される「アルキル」（または「低級アルキル」）という用語は、「非置換アルキル」および「置換アルキル」の両方を含むことが意図されており、後者は、炭化水素骨格の１個以上の炭素上の水素を置換する置換基を有するアルキル部分を指す。そのような置換基は、特に明記されない限り、例えばハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミル、またはアシルなど）、チオカルボニル（チオエステル、チオアセタート、またはチオホルマートなど）、アルコキシル、ホスホリル、ホスファート、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分を含み得る。炭化水素鎖上で置換される部分は、適切な場合は、それ自体置換されていてもよいことが当業者には理解されるであろう。例えば、置換アルキルの置換基は、アミノ、アジド、イミノ、アミド、ホスホリル（ホスホナートおよびホスフィナートを含む）、スルホニル（スルファート、スルホンアミド、スルファモイルおよびスルホナートを含む）、およびシリル基の置換および非置換形態、ならびにエーテル、アルキルチオ、カルボニル（ケトン、アルデヒド、カルボキシラートおよびエステルを含む）、−ＣＦ３、−ＣＮ等を含み得る。例示的な置換アルキルを以下に記載する。シクロアルキルは、アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルキルチオ、アミノアルキル、カルボニル置換アルキル、−ＣＦ３、−ＣＮ等でさらに置換することができる。
【００４０】
アシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはアルコキシなどの化学部分と共に使用される場合の「Ｃｘ−ｙ」という用語は、鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を含有する基を含むことが意図されている。例えば、「Ｃｘ−ｙアルキル」という用語は、トリフルオロメチルおよび２，２，２−トリフルオロエチル等のようなハロアルキル基を含む、鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を含有する直鎖アルキルおよび分岐鎖アルキル基を含む置換または非置換飽和炭化水素基を指す。Ｃ０アルキルは、その基が末端位置にある場合は水素を示し、内部にある場合は結合を示す。「Ｃ２−ｙアルケニル」および「Ｃ２−ｙアルキニル」という用語は、長さおよび可能な置換が上記のアルキルと類似するが、それぞれ少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む置換または非置換不飽和脂肪族基を指す。
【００４１】
「アルキルアミノ」という用語は、本明細書で使用される場合、少なくとも１個のアルキル基で置換されたアミノ基を指す。
【００４２】
「アルキルチオ」という用語は、本明細書で使用される場合、アルキル基で置換されたチオール基を指し、一般式アルキルＳ−によって表され得る。
【００４３】
「アルキニル」という用語は、本明細書で使用される場合、少なくとも１つの三重結合を含有する脂肪族基を指し、「非置換アルキニル」および「置換アルキニル」の両方を含むことが意図されており、後者は、アルキニル基の１個以上の炭素上の水素を置換する置換基を有するアルキニル部分を指す。そのような置換基は、１つ以上の三重結合に含まれるまたは含まれない１個以上の炭素上に存在し得る。さらに、そのような置換基は、安定性が法外なものである場合を除き、上記で論じたように、アルキル基について企図されるすべてのものを包含する。例えば、１つ以上のアルキル、カルボシクリル、アリール、ヘテロシクリル、またはヘテロアリール基によるアルキニル基の置換が企図される。
【００４４】
「アミド」という用語は、本明細書で使用される場合、基：
【化７】
2020502259.tif 000009
［式中、各々のＲ１０は、独立して水素もしくはヒドロカルビル基を表すか、または２つのＲ１０は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって環構造中に４〜８個の原子を有する複素環を完成する］
を指す。
【００４５】
「アミン」および「アミノ」という用語は当技術分野において認識されており、非置換アミンおよび置換アミンの両方ならびにその塩、例えば：
【化８】
2020502259.tif 000010
または
【化９】
2020502259.tif 000011
［式中、各々のＲ１０は、独立して水素もしくはヒドロカルビル基を表すか、または２つのＲ１０は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって環構造中に４〜８個の原子を有する複素環を完成する］
によって表すことができる部分を指す。
【００４６】
「アミノアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、アミノ基で置換されたアルキル基を指す。
【００４７】
本明細書で特に明記されない限り、「抗体（１および複数）」は、天然に存在する形態の抗体（例えばＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ）、ならびに一本鎖抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体および多重特異性抗体などの組換え抗体、ならびに少なくとも抗原結合部位を有する前記すべてのフラグメントおよび誘導体を広く包含する。抗体誘導体は、抗体に結合したタンパク質または化学部分を含み得る。
【００４８】
本明細書で使用される「抗体」という用語はまた、抗体の「抗原結合部分」（または単に「抗体部分」）も含む。「抗原結合部分」という用語は、本明細書で使用される場合、抗原（例えば癌抗原または腫瘍抗原）に特異的に結合する能力を保持する抗体の１つ以上のフラグメントを指す。抗体の抗原結合機能は、完全長抗体のフラグメントによって実行され得ることが示されている。抗体の「抗原結合部分」という用語に包含される結合フラグメントの例には、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインから成る一価フラグメントであるＦａｂフラグメント；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂフラグメントを含む二価フラグメントであるＦ（ａｂ’）２フラグメント；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；（ｉｖ）抗体の１本の腕のＶＬドメインとＶＨドメインからなるＦｖフラグメント；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂフラグメント（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が含まれる。二価ｍＡｂｓはまた、抗体が二価であるように、１つの特異性の２つのＩｇＶドメインおよび２つ目の特異性の１つのＩｇＶからなり得る（例えば２つのものに結合するが、１つの結合特異性の２コピーを有し得る）。そのような抗体は、抗体の一方の側に２つのＩｇＶを縦列に配置することによって構築することができる。さらに、Ｆｖフラグメントの２つのドメイン、ＶＬおよびＶＨは別々の遺伝子によってコードされるが、それらは、組換え法を用いて、ＶＬ領域とＶＨ領域が対合して一価ポリペプチドを形成する一本鎖タンパク質（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる；例えばＢｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；およびＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３；およびＯｓｂｏｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．１９９８，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １６：７７８参照）として作製されることを可能にする合成リンカーによって連結され得る。そのような一本鎖抗体も、抗体の「抗原結合部分」という用語に包含されることが意図されている。完全なＩｇＧポリペプチドまたは他のアイソタイプをコードする発現ベクターを作製するために、特定のｓｃＦｖの任意のＶＨおよびＶＬ配列をヒト免疫グロブリン定常領域ｃＤＮＡまたはゲノム配列に連結することができる。ＶＨおよびＶＬはまた、タンパク質化学または組換えＤＮＡ技術のいずれかを用いて、免疫グロブリンのＦａｂ、Ｆｖまたは他のフラグメントの作製において使用することができる。ダイアボディなどの他の形態の一本鎖抗体も包含される。ダイアボディは、ＶＨおよびＶＬドメインが１本のポリペプチド鎖上で発現されるが、同じ鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用し、それによって前記ドメインが別の鎖の相補的ドメインと対合することを余儀なくして、２つの抗原結合部位を作り出す、二価の二重特異性抗体である（例えばＨｏｌｌｉｇｅｒ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃ��．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８；Ｐｏｌｊａｋ，Ｒ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２：１１２１−１１２３参照）。
【００４９】
なおさらに、抗体またはその抗原結合部分は、抗体または抗体部分と１つ以上の他のタンパク質またはペプチドとの共有結合または非共有結合によって形成される、より大きな免疫接着ポリペプチドの一部であり得る。そのような免疫接着ポリペプチドの例は、四量体ｓｃＦｖポリペプチドを作製するためのストレプトアビジンコア領域の使用（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｈｕｍａｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ６：９３−１０１）ならびに二価およびビオチン化ｓｃＦｖペプチドを作製するためのシステイン残基、マーカーペプチドおよびＣ末端ポリヒスチジンタグの使用（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１０４７−１０５８）を含む。ＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２フラグメントなどの抗体部分は、それぞれ全抗体のパパイン消化またはペプシン消化などの従来技術を用いて全抗体から調製することができる。さらに、抗体、抗体部分および免疫接着ポリペプチドは、本明細書に記載される標準的な組換えＤＮＡ技術を用いて得ることができる。本明細書にさらに記載されるように、「抗体」という用語は、免疫グロブリンの遺伝子操作されたまたはさもなければ改変された形態、例えばイントラボディ、ペプチボディ、キメラ抗体、完全ヒト抗体、ヒト化抗体、およびヘテロコンジュゲート抗体（例えば二重特異性抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、タンデムジ−ｓｃＦｖ、タンデムトリ−ｓｃＦｖ）を含む。機能的抗体フラグメントという用語はまた、フラグメント抗原結合（Ｆａｂ）フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆｖフラグメント、組換えＩｇＧ（ｒＩｇＧ）フラグメント、一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）および単一ドメイン抗体（例えばｓｄＡｂ、ｓｄＦｖ、ナノボディ等）フラグメントを含むがこれらに限定されない、抗体の抗原結合フラグメントを含む。
【００５０】
抗体は、ポリクローナルもしくはモノクローナル；異種、同種異系もしくは同系；またはその改変形態（例えばヒト化、キメラ等）であり得る。抗体はまた、完全にヒトのものであってもよい。それらはまた、そのような抗原を密接に関連する抗原、例えば他のＢ７ファミリー成員から区別することができるように、そのような抗原に選択的であり得る。「モノクローナル抗体」および「モノクローナル抗体組成物」という用語は、本明細書で使用される場合、抗原の特定のエピトープと免疫反応することができる１種のみの抗原結合部位を含む抗体ポリペプチドの集団を指し、一方「ポリクローナル抗体」および「ポリクローナル抗体組成物」という用語は、特定の抗原と相互作用することができる複数種の抗原結合部位を含む抗体ポリペプチドの集団を指す。モノクローナル抗体組成物は、典型的にはそれが免疫反応する特定の抗原に対して単一の結合親和性を示す。
【００５１】
「アラルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、アリール基で置換されたアルキル基を指す。
【００５２】
本明細書で使用される「アリール」という用語は、環の各原子が炭素である置換または非置換単環芳香族基を含む。好ましくは、この環は５〜７員環、より好ましくは６員環である。「アリール」という用語はまた、２個以上の炭素が２つの隣接する環に共通である２つ以上の環式環を有し、それらの環の少なくとも１つが芳香族環であり、例えば他の環式環がシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、および／またはヘテロシクリルである、多環式環系を含む。アリール基には、ベンゼン、ナフタレン、フェナントレン、フェノール、アニリン等が含まれる。
【００５３】
「カルバメート」という用語は当技術分野において認識されており、基：
【化１０】
2020502259.tif 000012
［式中、Ｒ９およびＲ１０は、独立して水素もしくはアルキル基などのヒドロカルビル基を表すか、またはＲ９およびＲ１０は、介在原子（１または複数）と一緒になって環構造中に４〜８個の原子を有する複素環を完成する］
を指す。
【００５４】
「炭素環」および「炭素環式」という用語は、本明細書で使用される場合、環の各原子が炭素である飽和または不飽和環を指す。炭素環という用語は、芳香族炭素環および非芳香族炭素環の両方を含む。非芳香族炭素環は、すべての炭素原子が飽和しているシクロアルカン環、および少なくとも１つの二重結合を含むシクロアルケン環の両方を含む。「炭素環」は、５〜７員の単環式環および８〜１２員の二環式環を含む。二環式炭素環の各環は、飽和、不飽和および芳香環から選択され得る。炭素環は、１、２または３個以上の原子が２つの環の間で共有されている二環式分子を含む。「縮合炭素環」という用語は、環の各々が他の環と２個の隣接する原子を共有する二環式炭素環を指す。縮合炭素環の各環は、飽和、不飽和および芳香環から選択され得る。例示的な実施形態では、芳香環、例えばフェニルは、飽和または不飽和の環、例えばシクロヘキサン、シクロペンタン、またはシクロヘキセンに縮合され得る。原子価が許容する場合は、飽和、不飽和および芳香族二環式環の任意の組み合わせが炭素環式の定義に含まれる。例示的な「炭素環」としては、シクロペンタン、シクロヘキサン、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、１，５−シクロオクタジエン、１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン、ビシクロ［４．２．０］オクタ−３−エン、ナフタレンおよびアダマンタンが挙げられる。例示的な縮合炭素環としては、デカリン、ナフタレン、１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン、ビシクロ［４．２．０］オクタン、４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インデンおよびビシクロ［４．１．０］ヘプタ−３−エンが挙げられる。「炭素環」は、水素原子を担持することができる任意の１つ以上の位置で置換されていてもよい。
【００５５】
「シクロアルキル」基は、完全に飽和している環式炭化水素である。「シクロアルキル」は単環式および二環式環を含む。典型的には、単環式シクロアルキル基は、特に定義されない限り、３〜約１０個の炭素原子、より典型的には３〜８個の炭素原子を有する。二環式シクロアルキルの第二の環は、飽和、不飽和および芳香環から選択され得る。シクロアルキルは、１、２または３個以上の原子が２つの環の間で共有されている二環式分子を含む。「縮合シクロアルキル」という用語は、環の各々が他の環と２個の隣接する原子を共有する二環式シクロアルキルを指す。縮合二環式シクロアルキルの第二の環は、飽和、不飽和および芳香環から選択され得る。「シクロアルケニル」基は、１つ以上の二重結合を含む環式炭化水素である。
【００５６】
「カルボシクリルアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素環基で置換されたアルキル基を指す。
【００５７】
「カーボナート」という用語は当技術分野において認識されており、基−ＯＣＯ２−Ｒ１０［式中、Ｒ１０はヒドロカルビル基を表す］を指す。
【００５８】
「カルボキシ」という用語は、本明細書で使用される場合、式−ＣＯ２Ｈによって表される基を指す。
【００５９】
「エステル」という用語は、本明細書で使用される場合、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０［式中、Ｒ１０はヒドロカルビル基を表す］を指す。
【００６０】
「エーテル」という用語は、本明細書で使用される場合、酸素を介して別のヒドロカルビル基に連結されているヒドロカルビル基を指す。したがって、ヒドロカルビル基のエーテル置換基はヒドロカルビル−Ｏ−であり得る。エーテルは対称でも非対称でもよい。エーテルの例としては、複素環−Ｏ−複素環およびアリール−Ｏ−複素環が挙げられるが、これらに限定されない。エーテルは、一般式アルキル−Ｏ−アルキルによって表され得る「アルコキシアルキル」基を含む。
【００６１】
本明細書で使用される「ハロ」および「ハロゲン」という用語はハロゲンを意味し、クロロ、フルオロ、ブロモ、およびヨードを含む。
【００６２】
「ヘタラルキル」および「ヘテロアラルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、ヘタリール基で置換されたアルキル基を指す。
【００６３】
「ヘテロアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素原子および少なくとも１個のヘテロ原子の飽和または不飽和鎖を指し、ここで、２個のヘテロ原子は隣接していない。
【００６４】
「ヘテロアリール」および「ヘタリール」という用語は、置換または非置換芳香族単環構造、好ましくは５〜７員環、より好ましくは５〜６員環を含み、その環構造は少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは１〜４個のヘテロ原子、より好ましくは１または２個のヘテロ原子を含む。「ヘテロアリール」および「ヘタリール」という用語はまた、２個以上の炭素が２つの隣接する環に共通である２つ以上の環式環を有し、それらの環の少なくとも１つがヘテロ芳香族であり、例えば他の環式環がシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、および／またはヘテロシクリルである、多環式環系を含む。ヘテロアリール基には、例えばピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、およびピリミジン等が含まれる。
【００６５】
本明細書で使用される「ヘテロ原子」という用語は、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、窒素、酸素、および硫黄である。
【００６６】
「ヘテロシクリル」、「複素環」、および「複素環式」という用語は、置換または非置換非芳香族環構造、好ましくは３〜１０員環、より好ましくは３〜７員環を指し、その環構造は少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは１〜４個のヘテロ原子、より好ましくは１または２個のヘテロ原子を含む。「ヘテロシクリル」および「複素環式」という用語はまた、２個以上の炭素が２つの隣接する環に共通である２つ以上の環式環を有し、それらの環の少なくとも１つが複素環式であり、例えば他の環式環がシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、および／またはヘテロシクリルである、多環式環系を含む。ヘテロシクリル基には、例えばピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、モルホリン、ラクトン、ラクタム等が含まれる。
【００６７】
「ヘテロシクリルアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、複素環基で置換されたアルキル基を指す。
【００６８】
「ヒドロカルビル」という用語は、本明細書で使用される場合、＝Ｏまたは＝Ｓ置換基を有さない炭素原子を介して結合され、典型的には少なくとも１つの炭素−水素結合および主に炭素骨格を有するが、ヘテロ原子を含んでいてもよい基を指す。したがって、メチル、エトキシエチル、２−ピリジル、およびトリフルオロメチルのような基は、本出願の目的のためにヒドロカルビルであると見なされるが、アセチル（結合炭素上に＝Ｏ置換基を有する）およびエトキシ（炭素ではなく酸素を介して結合される）などの置換基はヒドロカルビルとは見なされない。ヒドロカルビル基としては、アリール、ヘテロアリール、炭素環、ヘテロシクリル、アルキル、アルケニル、アルキニル、およびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６９】
「ヒドロキシアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒドロキシ基で置換されたアルキル基を指す。
【００７０】
アシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはアルコキシなどの化学部分と共に使用される場合の「低級」という用語は、置換基中に１０個以下、好ましくは６個以下の非水素原子が存在する基を含むことが意図されている。「低級アルキル」は、例えば、１０個以下、好ましくは６個以下の炭素原子を含むアルキル基を指す。特定の実施形態では、本明細書で定義されるアシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはアルコキシ置換基は、単独でまたは、例えばヒドロキシアルキルおよびアラルキルについて列挙したような他の置換基と組み合わせて存在するかどうかにかかわらず、それぞれ低級アシル、低級アシルオキシ、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、または低級アルコキシである。（この場合、例えばアルキル置換基中の炭素原子を数えるときにアリール基内の原子は勘定に入れない）。
【００７１】
「ポリシクリル」、「多環」、および「多環式」という用語は、２個以上の原子が２つの隣接する環に共通である２つ以上の環（例えばシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、および／またはヘテロシクリル）を指し、例えば環は「縮合環」である。多環の各環は、置換または非置換であり得る。特定の実施形態では、多環の各環は、環内に３〜１０個の原子、好ましくは５〜７個の原子を含む。
【００７２】
「シリル」という用語は、それに結合した３つのヒドロカルビル部分を有するケイ素部分を指す。
【００７３】
「置換された」という用語は、骨格の１個以上の炭素上の水素を置換する置換基を有する部分を指す。「置換」または「で置換された」は、そのような置換が置換される原子および置換基の許容される原子価に従うこと、ならびにその置換が、例えば転位、環化、脱離等による変換を自発的に受けない安定な化合物をもたらすという暗黙の条件を含むことが理解されるであろう。本明細書で使用される場合、「置換された」という用語は、有機化合物のすべての許容される置換基を含むことが企図される。広い態様では、許容される置換基には、有機化合物の非環式および環式、分岐および非分岐、炭素環式および複素環式、芳香族および非芳香族置換基が含まれる。許容される置換基は、適切な有機化合物について１つ以上であり得、同じでも異なってもよい。本開示の目的のために、窒素などのヘテロ原子は、ヘテロ原子の原子価を満たす水素置換基および／または本明細書に記載の有機化合物の任意の許容される置換基を有し得る。置換基は、本明細書に記載の任意の置換基、例えばハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミル、またはアシルなど）、チオカルボニル（チオエステル、チオアセタート、またはチオホルマートなど）、アルコキシル、ホスホリル、ホスファート、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分を含み得る。適切な場合、置換基自体が置換され得ることは当業者には理解されるであろう。「非置換」として具体的に記述されていない限り、本明細書における化学部分への言及は、置換変異体を含むと理解される。例えば、「アリール」基または部分への言及は、置換および非置換の両方の変異体を暗黙のうちに含む。
【００７４】
「スルファート」という用語は当技術分野において認識されており、−ＯＳＯ３Ｈ基、またはその薬学的に許容される塩を指す。
【００７５】
「スルホンアミド」という用語は当技術分野において認識されており、一般式：
【化１１】
2020502259.tif 000013
［式中、Ｒ９およびＲ１０は、独立して水素もしくはアルキルなどのヒドロカルビルを表すか、またはＲ９およびＲ１０は、介在原子（１または複数）と一緒になって環構造中に４〜８個の原子を有する複素環を完成する］
によって表される基を指す。
【００７６】
「スルホキシド」という用語は当技術分野において認識されており、−Ｓ（Ｏ）−Ｒ１０基［式中、Ｒ１０はヒドロカルビルを表す］を指す。
【００７７】
「スルホナート」という用語は当技術分野において認識されており、ＳＯ３Ｈ基、またはその薬学的に許容される塩を指す。
【００７８】
「スルホン」という用語は当技術分野において認識されており、−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ１０基［式中、Ｒ１０はヒドロカルビルを表す］を指す。
【００７９】
「チオアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、チオール基で置換されたアルキル基を指す。「チオエステル」という用語は、本明細書で使用される場合、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ１０基または−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１０基［式中、Ｒ１０はヒドロカルビルを表す］を指す。
【００８０】
「チオエーテル」という用語は、本明細書で使用される場合、酸素が硫黄で置換されているエーテルと等価である。
【００８１】
「尿素」という用語は当技術分野において認識されており、一般式：
【化１２】
2020502259.tif 000014
［式中、Ｒ９およびＲ１０は、独立して水素もしくはアルキルなどのヒドロカルビルを表すか、またはＲ９のいずれかの出現は、Ｒ１０および介在原子（１または複数）と一緒になって、環構造中に４〜８個の原子を有する複素環を完成する］
によって表され得る。
【００８２】
「保護基」は、分子中の反応性官能基に結合した場合、その官能基の反応性をマスクする、低減するまたは妨げる原子の群を指す。典型的には、保護基は、合成の過程で所望に応じて選択的に除去し得る。保護基の例は、Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３ｒｄ  Ｅｄ．，１９９９，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹおよびＨａｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｖｏｌｓ．１−８，１９７１−１９９６，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ．に見出すことができる。代表的な窒素保護基としては、ホルミル、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（「ＣＢＺ」）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（「Ｂｏｃ」）、トリメチルシリル（「ＴＭＳ」）、２−トリメチルシリル−エタンスルホニル（「ＴＥＳ」）、トリチルおよび置換トリチル基、アリルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（「ＦＭＯＣ」）、ニトロベラトリルオキシカルボニル（「ＮＶＯＣ」）等が挙げられるが、これらに限定されない。代表的なヒドロキシル保護基としては、ヒドロキシル基がアシル化（エステル化）またはアルキル化されているもの、例えばベンジルおよびトリチルエーテル、ならびにアルキルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリルエーテル（例えばＴＭＳまたはＴＩＰＳ基）、グリコールエーテル、例えばエチレングリコールおよびプロピレングリコール誘導体、ならびにアリルエーテルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８３】
本明細書で使用される場合、障害または状態を「予防する」治療薬は、統計的試料において、未処置対照試料と比較して処置された試料における障害もしくは状態の発生を減少させる、または未処置対照試料と比較して障害もしくは状態の１つ以上の症状の発症を遅らせるもしくは重症度を低下させる化合物を指す。
【００８４】
「治療すること」という用語は、予防的および／または治療的処置を含む。「予防的または治療的」処置という用語は当技術分野において認識されており、対象組成物の１つ以上の宿主への投与を含む。望ましくない状態（例えば宿主動物の疾患または他の望ましくない状態）の臨床症状発現の前に投与される場合、その処置は予防的であり（すなわち、望ましくない状態の発症から宿主を保護する）、一方望ましくない状態の症状発現後に投与される場合、その処置は治療的である（すなわち、既存の望ましくない状態またはその副作用を軽減する、改善する、または安定化することを意図する）。
【００８５】
「プロドラッグ」という用語は、生理的条件下で本開示の治療活性剤に変換される化合物（例えば本明細書で提供される式を有する化合物）を包含することが意図されている。プロドラッグを作製するための一般的な方法は、生理的条件下で加水分解されて所望の分子を明らかにする１つ以上の選択された部分を含むことである。他の実施形態では、プロドラッグは宿主動物の酵素活性によって変換される。例えば、エステルまたはカーボナート（例えばアルコールまたはカルボン酸のエステルまたはカーボナート）は、本開示の好ましいプロドラッグである。特定の実施形態では、上記で表される製剤中の式Ｉの化合物のいくつかまたはすべては、対応する適切なプロドラッグ、例えば、親化合物中のヒドロキシルがエステルまたはカーボナートとして提示されるか、または化合物中に存在するカルボン酸がエステルとして提示されるプロドラッグで置き換えることができる。
【００８６】
４．２．詳細な説明
養子細胞移入
免疫細胞およびアルギナーゼ阻害剤を、それを必要とする被験体に共同的に投与することによる疾患の治療に関する方法が本明細書で開示される。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞（例えば細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ））またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞（例えばＮＫ−９２ナチュラルキラー）である。いくつかの実施形態では、免疫細胞はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現し得る。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、疾患関連ペプチドに特異的な受容体を発現するＴ細胞を含む。
【００８７】
いくつかの実施形態では、免疫細胞は自己由来（例えば組成物およびアルギナーゼ阻害剤を摂取している被験体に由来する細胞）である。他の実施形態では、免疫細胞は同種異系（例えば細胞バンクなどの被験体以外の供給源から、またはドナーから得られた免疫細胞）である。いくつかの実施形態では、バンクまたはドナーからの同種異系免疫細胞はレシピエントに適合したＨＬＡである。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、被験体への投与の前に細胞バンクに保存される。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、被験体への投与前に被験体との適合性について選択される（例えば細胞バンクから選択される）。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、それらが被験体と共有するＨＬＡ対立遺伝子を通して拘束される場合に選択される。いくつかの実施形態では、免疫細胞と被験体が少なくとも２つ（例えば少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、または少なくとも８）のＨＬＡ対立遺伝子を共有し、免疫細胞が共有するＨＬＡ対立遺伝子を通して拘束される場合、免疫細胞は選択される。
【００８８】
本明細書で開示される免疫細胞は、当技術分野において公知の任意の方法による投与のために調製され得る。いくつかの実施形態では、免疫細胞の調製は、被験体またはドナーから末梢血試料を得ること、ならびに単球および／またはＢ細胞を除去することによって試料を精製することを含む。
【００８９】
ａ．Ｔ細胞移入
いくつかの実施形態では、組成物はＴ細胞（例えば細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ））を含む。本明細書で開示されるＴ細胞（例えば細胞傷害性Ｔ細胞）は、当技術分野で公知の任意の技術によって刺激および拡大増殖され得る。例えば、Ｔ細胞は、抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８で被覆されたビーズと共にＴ細胞をインキュベートすることによって刺激され得る。Ｔ細胞の拡大増殖は、対象へのＴ細胞の注入の前に、Ｔ細胞を標的細胞または抗原（例えば腫瘍抗原もしくはウイルス抗原）に感作することを含み得る。Ｔ細胞の拡大増殖は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の存在下で行われ得る。例えば、Ｔ細胞の拡大増殖は、ＡＰＣ（例えば疾患特異的ペプチドを提示するＡＰＣ）の存在下で行われ得、次いでアルギナーゼ阻害剤と共同的に投与され得る。ＡＰＣは、Ｂ細胞、樹状細胞、または人工抗原提示細胞（例えばａＫ５６２細胞などの人工抗原提示細胞）であり得る。いくつかの実施形態では、適切なＡＰＣは、１つ以上のＴ細胞エピトープ（すなわち２つ以上、３つ以上、４つ以上、５つ以上、６つ以上、７つ以上、８つ以上、９つ以上、または１０以上）を提示する。ＡＰＣは、１つ以上（すなわち２つ以上、３つ以上、４つ以上、５つ以上、６つ以上、７つ以上、８つ以上、９つ以上、または１０以上）のＴ細胞エピトープを発現するようにベクターまたは組換えアデノウイルスでトランスフェクトされ得る。Ｔ細胞刺激および拡大増殖工程は、同時にまたは連続的に行うことができる。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は濃縮されていない（例えばＴ細胞は本明細書で開示されるＡＰＣの存在下で拡大増殖されない）。
【００９０】
いくつかの実施形態では、組成物はＣＤ８＋Ｔ細胞を含む。いくつかの実施形態では、組成物はＣＤ４＋Ｔ細胞を含む。いくつかの実施形態では、組成物はＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞の両方を含む。
【００９１】
いくつかの実施形態では、免疫細胞を含有する組成物は、サイトカイン（例えばＩＬ−２またはＩＬ−１５）も含有する。いくつかの実施形態では、免疫細胞を含有する組成物は、サイトカインと共同的に、例えば連続的にまたは同時に投与される。
【００９２】
いくつかの実施形態では、本開示は、例えば免疫不全被験体、または幹細胞移植（ＳＣＴ）を受けた被験体においてウイルス感染を治療することに関する。多くのＤＮＡウイルスは、感染した個体の組織内で生涯にわたる潜伏期を過ごす。被験体におけるＳＣＴ後、腸炎および肺炎を引き起こすサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、移植後リンパ増殖性傷害を引き起こすエプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）の再活性化、ならびに腸炎、肝炎、出血性膀胱炎、および肺炎を引き起こすアデノウイルス（Ａｄ）からの再活性化または新たな感染は、ＳＣＴに続く深刻な合併症のかなりの割合を占める。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は、アルギナーゼ阻害剤と組み合わせて本明細書で開示される免疫細胞を含有する組成物を被験体に投与することによって、ウイルス感染（例えばＥＢＶまたはＣＭＶ感染）を有する被験体を治療することに関する。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、１つ以上のウイルスペプチド（例えばＥＢＶまたはＣＭＶペプチド）を提示するＡＰＣの存在下で拡大増殖するＴ細胞を含む。ＡＰＣは、１つ以上の異なるウイルス由来の１つ以上のウイルスペプチドを提示し得る。ＡＰＣは、Ｂ細胞、樹状細胞、または人工抗原提示細胞（例えばａＫ５６２細胞などの人工抗原提示細胞）であり得る。
【００９３】
ｂ．養子ＮＫ細胞移入
いくつかの実施形態では、組成物はナチュラルキラー細胞を含有する。ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞は、事前の感作または主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）の産物についての拘束なしに特定の標的を溶解するリンパ球として定義される（Ｈｅｒｂｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｏｌｈｕｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｙｎｏｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．）。免疫細胞（例えばＮＫ−９２細胞などのＮＫ細胞）を含有する組成物および本明細書で開示されるアルギナーゼ阻害剤を被験体に共同的に投与する方法が本明細書で提供される。被験体に養子移入されるＮＫ細胞は、自己由来または同種異系であり得る。
【００９４】
ＮＫ細胞移入は、ＮＫ細胞の単離または精製、ＮＫ細胞の拡大増殖、および被験体へのＮＫ細胞の注入または移植を含む。いくつかの実施形態では、ＮＫ細胞は末梢血試料から精製され得る。ＮＫ細胞は高度に活性化され得る（すなわち１つ以上のサイトカインの存在下で拡大増殖され得る）。いくつかの実施形態では、ＮＫ細胞は、ＩＬ−２またはＩＬ−８などの１つ以上のサイトカインの存在下で拡大増殖またはインキュベートされる。ＮＫ細胞の拡大増殖は、サイトカインへの曝露、続いてＮＫ細胞がサイトカインとインキュベートされない「休止」期間の交互の期間を含み得る。特定の実施形態では、ＮＫ細胞は、照射フィーダ細胞の存在下で拡大増殖させることができる。いくつかの実施形態では、ＮＫ細胞は選択された標的細胞型に接着し、標的細胞を特異的に溶解する能力を有する。いくつかの実施形態では、ＮＫ細胞は標的細胞型（例えば腫瘍細胞型またはウイルス感染細胞）を溶解する能力を有する。ＮＫ細胞は、ナチュラルキラー細胞の調製物を得ること、その調製物を選択された標的細胞型と接触させること、選択された標的細胞型へのそれらの接着に基づいてナチュラルキラー細胞を選択すること、およびＮＫ細胞間の増殖を促進することによって選択されたナチュラルキラー細胞を培養することを含むがこれらに限定されない、当技術分野で公知の任意の方法によって被験体への投与用に調製され得る。いくつかの実施形態では、抗体は、養子ＮＫ細胞療法と共同的に投与され得る。
【００９５】
抗体療法
抗体、免疫細胞（例えば本明細書に記載のもの）を含有する組成物、および本明細書で開示されるアルギナーゼ阻害剤を被験体に共同的に投与することによって、被験体における疾患を治療する方法が本明細書で提供される。本開示のいくつかの態様は、その標的への結合時に誘発される生物学的活性を有する抗体に関する。この生物学的活性は、例えばＡＤＣＣ、細胞溶解、細胞死、および／または腫瘍サイズの縮小を含み得る。ＡＤＣＣは、インビトロで（その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｋｒｏｅｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１５６：４７−５４，  １９９２）または腫瘍内への免疫細胞の浸潤を定量化するための組織学的分析を使用することによってインビボで評価され得る。
【００９６】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は標的細胞（例えば腫瘍細胞）に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、患者に投与された免疫細胞による標的細胞の認識を容易にする。いくつかの実施形態では、抗体の投与は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）によって媒介される腫瘍抑制作用をもたらす。「抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）」は、免疫系のエフェクター細胞（例えばＮＫ細胞）が、抗体が結合している標的細胞を溶解する細胞媒介性免疫の機構である。例えば、疾患（すなわち癌）の治療は、ＮＫ細胞を含有する組成物、癌細胞または腫瘍細胞を標的とし、それに結合する抗体（したがって、ＮＫ細胞に癌または腫瘍細胞を認識し、中和するように指令する）、および本明細書で開示されるアルギナーゼ阻害剤を被験体に投与することを含み得る。他の実施形態では、被験体は、本明細書で開示されるアルギナーゼ阻害剤およびインビボでＮＫ細胞が癌または腫瘍細胞を攻撃することを誘発する抗体で治療される。
【００９７】
特に癌を治療するための方法のいくつかの実施形態では、抗体は癌抗原および／または腫瘍抗原に特異的な抗体である。
【００９８】
アルギナーゼ阻害剤
本開示は、免疫細胞を含有する組成物および本明細書で開示されるアルギナーゼ阻害剤を、それを必要とする被験体に共同的に投与することを含む、癌などの疾患を治療または予防する方法を提供する。いくつかの実施形態では、前記方法は、抗体を被験体に共同的に投与することをさらに含む。
【００９９】
特定の実施形態では、本開示の方法において使用されるアルギナーゼ阻害剤は、式Ｉ：
【化１３】
2020502259.tif 000015
［式中、
Ｒ１は、−ＯＨ、ＯＲａ、およびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、アリール、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、（ヘテロアリール）アルキル、およびアラルキルから選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、置換または非置換アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２（アリール）、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、および（ヘテロアリール）アルキルから選択され；
Ｒ２は、Ｈ、置換または非置換アルキル、および（アルキル）Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうち３つ以下が同時に結合を表すように、それぞれ独立して、結合、−Ｃ（Ｒ’）（Ｒ’”）−、−Ｃ（Ｒ’”）２−、−ＣＲ’”−、−ＮＲ’”−、−Ｎ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｓ−から選択され；ならびにＷ、Ｘ、Ｙ、およびＺの２つの隣接する成員が同時に−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ−、または−ＮＲ’”−であることはなく；
ｌ、ｍ、ｎおよびｐは、それぞれ独立して０、１または２、例えば１または２であり；
【化１４】
2020502259.tif 000016
は１つ以上の二重結合を表してもよく；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、置換または非置換アルキル、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか、または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全に飽和しているかまたは部分的に飽和している５または６員環を形成し；
Ｄは、置換または非置換アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリーレン、およびシクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく（それによって縮合二環式系を形成する）；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’、Ｒ”およびＲ’”は、それぞれ独立して、Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、アルキル、アリール、−ＮＨ（アルキル）、アルキル）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、−Ｃ（Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）（アリール）、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（アリール）、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル）、ヘテロアリール、アラルキル、Ｏ（シクロアルキル）アルキル、（ヘテロアリール）アルキル−、および（ヘテロシクロアルキル）アルキルから選択され；
ここで、ＲｄおよびＲｅは、それぞれ独立して、Ｈ、置換または非置換アルキル、アラルキル、アリール、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリール、ＮＲ’Ｒ”Ｃ（Ｏ）−、および（アリール）シクロアルキレン−から選択され；
ここで、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、例えばハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよい］
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグである。
【０１００】
式Ｉの化合物の特定の実施形態では、
Ｒ１は、−ＯＨ、ＯＲａ、およびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、直鎖または分岐鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−ＳＯ２−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
Ｒ２は、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうち３つ以下が同時に結合を表すように、それぞれ独立して、結合、−Ｃ（Ｒ’）（Ｒ’”）−、−Ｃ（Ｒ’”）２−、−ＣＲ’”−、−ＮＲ’”−、−Ｎ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｓ−から選択され；ならびにＷ、Ｘ、Ｙ、およびＺの２つの隣接する成員が同時に−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ−、または−ＮＲ’”−であることはなく；
ｌ、ｍ、ｎおよびｐは、それぞれ独立して０、１または２、例えば１または２であり；
【化１５】
2020502259.tif 000017
は１つ以上の二重結合を表してもよく；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか、または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全に飽和しているかまたは部分的に飽和している５または６員環を形成し；
Ｄは、直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルケニレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルキニレン、（Ｃ３−Ｃ１４）アリーレン、および（Ｃ３−Ｃ１４）シクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’、Ｒ”およびＲ’”は、それぞれ独立して、Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）アリール、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、Ｃ６）アルキル］２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、３Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、Ｏ３４（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）複素環−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ここで、任意のアルキル、アルキレン、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、ハロゲン、オキソ、−ＮＯ２、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキルおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよく；
ここで、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、およびＲｈは、それぞれ独立して、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、Ｈ２Ｎ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、ＮＲ’Ｒ”Ｃ（Ｏ）−、および−（Ｃ３−Ｃ６）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレン−から選択される。
【０１０１】
式Ｉの化合物のさらなる実施形態では、
Ｒ１は、−ＯＨ、ＯＲａ、およびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、直鎖または分岐鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−ＳＯ２−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
Ｒ２は、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺのうち３つ以下が同時に結合を表すように、それぞれ独立して、結合、−Ｃ（Ｒ’”）２−、−ＣＲ’”−、−ＮＲ’”−、−Ｎ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）、および−Ｓ−から選択され、ならびに
Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺの２つの隣接する成員が同時に−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ−、または−ＮＲ’”−であることはなく；
ｌ、ｍ、ｎおよびｐは、それぞれ独立して０、１または２、例えば１または２であり；
【化１６】
2020502259.tif 000018
は１つ以上の二重結合を表してもよく；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか、または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全に飽和しているかまたは部分的に飽和している５または６員環を形成し；
Ｄは、直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルケニレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルキニレン、（Ｃ３−Ｃ１４）アリーレン、および（Ｃ３−Ｃ１４）シクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’、Ｒ”およびＲ’”は、それぞれ独立して、Ｈ、ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）アリール、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｎ［（Ｃ１−Ｃ６）アルキル］２、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）複素環−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ここで、任意のアルキル、アルキレン、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、ハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよく；
ここで、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、およびＲｈは、それぞれ独立して、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、Ｈ２Ｎ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、ＮＲ’Ｒ”Ｃ（Ｏ）−、および−（Ｃ３−Ｃ６）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレン−から選択される。
【０１０２】
式Ｉの化合物の特定の実施形態では、Ｄは、
−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２、
−Ｌ１−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ２−、
−Ｌ１−ＣＨ２−Ｌ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ１−ＣＨ２−Ｌ２−、
−Ｌ１−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ１−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ１−、
−Ｌ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ２−ＣＨ２−、および
−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ２−
［式中、Ｌ１およびＬ２は、独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択され；ならびに
Ｌ１とＬ２が互いに隣接している場合、Ｌ１とＬ２は同時にＯ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、またはＳＯ２であることはない］
から選択される。
【０１０３】
特定の実施形態では、Ｄは直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレンである。特定の好ましい実施形態では、Ｄはプロピレンである。
【０１０４】
特定の実施形態では、Ｒ１は−ＯＨである。
【０１０５】
特定の実施形態では、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４のそれぞれは水素である。
【０１０６】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は炭素環式ベースの構造である。したがって、特定のそのような実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは−Ｃ（Ｒ’”）２−である。あるいは、特定のそのような実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺの少なくとも２つは−ＣＲ’”であり、ならびに
【化１７】
2020502259.tif 000019
は１つ以上の二重結合を表す。他の代替的な実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのそれぞれは−ＣＲ’”であり、ならびに
【化１８】
2020502259.tif 000020
は１つ以上の二重結合を表す。
【０１０７】
特定の実施形態では、Ｒ’”はＨである。代替的な実施形態では、Ｒ’”の出現の少なくとも１つはＨではない。
【０１０８】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は、３〜１０個、３〜８個、４〜８個、４〜７個、５〜７個、または５〜６個の環原子を有する炭素環式ベースの構造である。特定のそのような実施形態では、ｌ＋ｍ＋ｎ＋ｐ＝３である。他の実施形態では、ｌ＋ｍ＋ｎ＋ｐ＝４である。
【０１０９】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は複素環式ベースの構造である。したがって、特定のそのような実施形態では、Ｗ、Ｘ、Ｙ、またはＺの少なくとも１つは、−ＮＲ’”−、−Ｎ−、−Ｏ−、および−Ｓ−から選択される。
【０１１０】
特定の実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのいずれか１つは−ＮＨ−であり、残りの３つの各存在は−Ｃ（Ｒ’”）２−である。特定のそのような実施形態では、ＸはＮＨである。
【０１１１】
特定の実施形態では、Ｒ’”はＨである。代替的な実施形態では、Ｒ’”の出現の少なくとも１つはＨではない。
【０１１２】
複素環ベースの構造は、任意に不飽和を含んでいてもよい。特定の実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのいずれか１つは−Ｎ−であり、残りの３つのうちの少なくとも１つは−ＣＲ’”−であり、ならびに
【化１９】
2020502259.tif 000021
は１つ以上の二重結合を表す。特定の実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのいずれか１つは−Ｎ−であり、残りの３つのそれぞれは−ＣＲ’”−であり、ならびに
【化２０】
2020502259.tif 000022
は１つ以上の二重結合を表す。
【０１１３】
特定の実施形態では、Ｘは−Ｎ−である。
【０１１４】
特定の実施形態では、Ｒ’”はＨである。代替的な実施形態では、Ｒ’”の出現の少なくとも１つはＨではない。
【０１１５】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は、３〜１０個、３〜８個、４〜８個、４〜７個、５〜７個、または５〜６個の環原子を有する複素環式ベースの構造である。特定の実施形態では、ｌ、ｍ、ｎ、およびｐの合計は、３、４、５、または６である。特定の実施形態では、ｌ＋ｍ＋ｎ＋ｐ＝４である。
【０１１６】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は、１−アミノ−２−（３−ボロノプロピル）シクロヘキサンカルボン酸ではない。
【０１１７】
特定の実施形態では、本開示の方法と共に使用するためのアルギナーゼ阻害剤は、以下から：
【表１】
2020502259.tif 000023
またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、もしくはプロドラッグから選択される。
【０１１８】
特定の実施形態では、本開示の方法と共に使用するためのアルギナーゼ阻害剤は、以下から：
【表２−１】
2020502259.tif 000024
【表２−２】
2020502259.tif 000025
【表２−３】
2020502259.tif 000026
【表２−４】
2020502259.tif 000027
またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、もしくはプロドラッグから選択される。
【０１１９】
特定の実施形態では、本開示の方法において使用されるアルギナーゼ阻害剤は、式ＩＩ：
【化２１】
2020502259.tif 000028
ＩＩ
［式中：
Ｒ１は、−ＯＨ、ＯＲａ、およびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、置換または非置換アルキル、アリール、（ヘテロシクロアルキル）−アルキル、ヘテロアラルキル、およびアラルキルから選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、置換または非置換アルキル、−Ｓ（Ｏ）２（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（アリール）、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、およびヘテロアラルキルから選択され；
（Ａ）Ｒ２は、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、（ヘテロアリール）ヘテロシクロアルキレン、（アリール）ヘテロシクロアルキレン、（アラルキル）ヘテロシクロアルキレン、（ヘテロアラルキル）ヘテロシクロアルキレン、（（ヘテロシクロアルキル）アルキル）ヘテロシクロアルキレン、および−（ＣＨ２）ｍ−（Ｘ）ｕ−（ＣＨ２）ｎ−（Ｙ）ｖ−Ｒｆから選択され；
ここで
ｕおよびｖは、それぞれ独立して０または１であり、およびｕ＋ｖ＝１であり；
ｍおよびｎは、それぞれ独立して０、１、２、３、４、５、または６であり、ここでｍ＋ｎ≧１であり；
ＸおよびＹは、独立して、−ＮＨ、−Ｏ−および−Ｓ−から選択され；
Ｒｆは、Ｈ、ヒドロキシル、置換または非置換アルキルおよびアリールから選択され；ならびに
Ｒ５は、置換または非置換アルキルまたはアルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択されるか；または
（Ｂ）Ｒ２は（ヘテロシクロアルキル）アルキルであり；ならびに
Ｒ５は、Ｈ、置換または非置換アルキル、およびアルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、置換または非置換アルキル、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか；
またはＲ３およびＲ４は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全にまたは部分的に飽和しており、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１〜３個の追加のヘテロ原子環員を含んでいてもよい５または６員環を形成し；
Ｄは、置換または非置換アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリーレン、およびシクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’およびＲ”は、それぞれ独立して、Ｈ、置換または非置換アルキル、およびアリールから選択され；
ここで、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、例えばハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよい］
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグである。
【０１２０】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は式ＩＩの化合物の構造を有し、式中：
Ｒ１は、−ＯＨ、ＯＲａ、およびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、直鎖または分岐鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−Ｓ（Ｏ）２−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
（Ａ）Ｒ２は、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ３−Ｃ６）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）−アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、および−（ＣＨ２）ｍ−（Ｘ）ｕ−（ＣＨ２）ｎ−（Ｙ）ｖ−Ｒｆから選択され；
ここで、
ｕおよびｖは、それぞれ独立して０または１であり、およびｕ＋ｖ＝１であり；
ｍおよびｎは、それぞれ独立して０、１、２、３、４、５、または６であり、ここでｍ＋ｎ≧１であり；
ＸおよびＹは、独立して、−ＮＨ、−Ｏ−および−Ｓ−から選択され；
Ｒｆは、Ｈ、ヒドロキシル、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキルおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールから選択され；ならびに
Ｒ５は、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択されるか；または
（Ｂ）Ｒ２は（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ２）アルキレン−であり；ならびに
Ｒ５は、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか；または
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全にまたは部分的に飽和しており、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１〜３個の追加のヘテロ原子環員を含んでいてもよい５または６員環を形成し；ならびに
Ｄは、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルケニレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルキニレン、（Ｃ３−Ｃ１４）アリーレン、および（Ｃ３−Ｃ１４）シクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；
ここで、任意のアルキル、アルキレン、アルケニル、アルケニレン、アルキニル、またはアルキニレンは、ハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよく；
ここで、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、およびＲｈは、それぞれ独立して、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、Ｈ２Ｎ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、ＮＲ’Ｒ”Ｃ（Ｏ）−、および（Ｃ３−Ｃ６）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレン−から選択され；ならびに
Ｒ’およびＲ”は、それぞれ独立して、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、および（Ｃ３−Ｃ６）アリールから選択され；ならびに
ここで、任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、ハロゲン、−ＯＨ、オキソ、−ＣＯＯＨ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｓ−、（Ｃ３−Ｃ１４）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ８）アルキニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、および（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキルから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよい。Ｄは、
−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２、
−Ｌ１−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ２−、および
−Ｌ１−ＣＨ２−Ｌ２−ＣＨ２−
［式中、Ｌ１およびＬ２は、独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択される］
から選択される。
【０１２１】
特定の実施形態では、Ｄは直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレンである。特定の好ましい実施形態では、Ｄはブチレンである。
【０１２２】
特定の実施形態では、Ｒ１は−ＯＨである。
【０１２３】
特定の実施形態では、
（Ａ）Ｒ２は、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ３−Ｃ６）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）−アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、
（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、および−（ＣＨ２）ｍ−（Ｘ）ｕ−（ＣＨ２）ｎ−（Ｙ）ｖ−Ｒｆから選択され；ならびに
Ｒ３およびＲ４のそれぞれは水素であるか、
または
（Ｂ）Ｒ２は（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ２）アルキレン−であり；ならびに
Ｒ３、ならびにＲ４およびＲ５のそれぞれは水素である。
【０１２４】
特定の実施形態では、Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−および−（ＣＨ２）ｎ−（Ｘ）ｕ−（ＣＨ２）ｍ−（Ｙ）ｖ−Ｒｆから選択され、ならびにＲ５は、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択される。
【０１２５】
特定の実施形態では、Ｒ２は、ヒドロキシまたは−ＮＲｄＲｅで置換されていてもよいアルキルである。特定のそのような実施形態では、ＲｄおよびＲｅは、独立して、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、および置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルから選択される。特定の好ましい実施形態では、ＲｄおよびＲｅは（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキルである。
【０１２６】
特定の実施形態では、Ｒ２は−（ＣＨ２）ｎ−（Ｘ）ｕ−（ＣＨ２）ｍ−（Ｙ）ｖ−Ｒｆである。特定のそのような実施形態では、ＸおよびＹは、それぞれ独立して−ＮＨ−である。さらなる特定のそのような実施形態では、ｍは１であり、およびｎは２である。さらなる特定のそのような実施形態では、ｕおよびｖのそれぞれは１である。
【０１２７】
特定の実施形態では、Ｒ２は、−（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、および−ＯＨから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ２）アルキレンである。
【０１２８】
特定の実施形態では、Ｒ２は、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−である。
【０１２９】
特定の実施形態では、式ＩＩのアルギナーゼ阻害剤は、２−アミノ−４−ボロノ−２−メチルブタン酸ではない。
【０１３０】
特定の例示的な実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は以下の化合物から選択される：
【表３−１】
2020502259.tif 000029
【表３−２】
2020502259.tif 000030
【表３−３】
2020502259.tif 000031
【表３−４】
2020502259.tif 000032
【表３−５】
2020502259.tif 000033
【０１３１】
特定の実施形態では、本開示の方法において使用されるアルギナーゼ阻害剤は、式ＩＩＩ：
【化２２】
2020502259.tif 000034
［式中、
Ｒ６は、ＯＲａおよびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、アリール、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアラルキル、およびアラルキルから選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、置換または非置換アルキル、−Ｓ（Ｏ）２（アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（アリール）、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、およびヘテロアラルキルから選択され；
Ｒ７は、Ｈ、置換または非置換アルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキルおよび（アルキル）Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｘは、シクロアルキレンおよびヘテロシクロアルキレンから選択され；
Ｙは、Ｈ、アルキル、−ＮＲ’Ｒ”、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、アリール、アラルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、（ヘテロアリール）ヘテロシクロアルキル、（アリール）ヘテロシクロアルキル、（アラルキル）ヘテロシクロアルキル、（ヘテロアラルキル）ヘテロシクロアルキル、および（（ヘテロシクロアルキル）アルキル）ヘテロシクロアルキルから選択され；
Ｍは、結合、アルキレン、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ’−、および−Ｃ＝ＮＲ”−から選択され；
Ｒ８およびＲ９は、独立して、水素、置換または非置換アルキル、シクロアルキル、アリール、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか；
または、Ｒ８およびＲ９は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全に飽和または部分的に飽和しており、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１〜３個の追加のヘテロ原子環員を含んでいてもよい５または６員環を形成し；
ここで、環は、シクロアルキル、複素環式環または芳香環と縮合していてもよく；
Ｄは、置換または非置換アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アリーレン、およびシクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよいか；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’およびＲ”は、独立して、Ｈ、置換または非置換アルキル、−Ｃ（Ｏ）（アルキル）、アリール、アラルキル、アミノアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリールから選択され；
ここで、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、例えばハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよい］
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグである。
【０１３２】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は式ＩＩＩの化合物であり、式中：
Ｒ６は、ＯＲａおよびＮＲｂＲｃから選択され；
Ｒａは、水素、直鎖または分岐鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４））ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
ＲｂおよびＲｃは、それぞれ独立して、Ｈ、−ＯＨ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｓ（Ｏ）２−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−Ｓ（Ｏ）２−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−から選択され；
Ｒ７は、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−および（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−Ｃ（Ｏ）−から選択され；
Ｘは、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレンおよび（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレンから選択され；
Ｙは、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ１４）アルキル、−ＮＲ’Ｒ”、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ３−Ｃ６）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）−アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−、および（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレン−から選択され；
Ｍは、結合、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ’−、および−Ｃ＝ＮＲ”−から選択され；
Ｒ８およびＲ９は、独立して、水素、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ８）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、およびＣ（Ｏ）−Ｒ’から選択されるか；
または、Ｒ８およびＲ９は、それらが結合しているホウ素原子と一緒になって、完全に飽和または部分的に飽和しており、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１〜３個の追加のヘテロ原子環員を含んでいてもよい５または６員環を形成し；
ここで、環は、シクロアルキル、複素環式環または芳香環と縮合していてもよく；
Ｄは、直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルケニレン、直鎖または分岐（Ｃ２−Ｃ８）アルキニレン、（Ｃ３−Ｃ１４）アリーレン、および（Ｃ３−Ｃ１４）シクロアルキレンから選択され；
ここで、Ｄ中の１つ以上の−ＣＨ２−基は、任意におよび独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択されるＱ部分で置き換えられていてもよく；または
ここで、任意の２つの隣接する−ＣＨ２−基は、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレニル基の２つの成員によって置き換えられていてもよく；
ただし、Ｄは、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ２から選択される２つの隣接するＱ部分を含まず；ならびに
Ｒ’およびＲ”は、独立して、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ１−Ｃ８）アルキレン、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）アリール、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリールから選択され；
ここで、任意のアルキル、アルキレン、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクロアルキルは、ハロゲン、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＯＨ、−ＮＲｄＲｅ、−ＮＲｇＳ（Ｏ）２Ｒｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンおよび（Ｃ３−Ｃ１４）アリールオキシから選択される１つ以上の成員で置換されていてもよく；
ここで、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ、およびＲｈは、それぞれ独立して、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ１−Ｃ６）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アミノアルキル、Ｈ２Ｎ（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール、置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、およびＮＲ’Ｒ”Ｃ（Ｏ）−から選択される。
【０１３３】
式ＩＩＩの化合物の特定の実施形態では、Ｄは、
−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ１−Ｌ２、
−Ｌ１−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｌ２−、および
−Ｌ１−ＣＨ２−Ｌ２−ＣＨ２−
［式中、Ｌ１およびＬ２は、独立して、Ｏ、ＮＲ’、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、およびＣＲ’Ｒ”から選択される］
から選択される。
【０１３４】
特定の実施形態では、Ｄは、ブチレンなどの直鎖または分岐（Ｃ３−Ｃ５）アルキレンである。
【０１３５】
特定の実施形態では、Ｒ１は−ＯＨである。
【０１３６】
特定の実施形態では、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は水素である。
【０１３７】
特定の実施形態では、Ｘは（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキレンであり、Ｍは、結合、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ’−、および−Ｃ＝ＮＲ”−から選択され、ならびにＹは−ＮＲ’Ｒ”である。
【０１３８】
特定の実施形態では、Ｍは結合であり、およびＹは−ＮＨ２である。
【０１３９】
特定の実施形態では、Ｘは（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロシクロアルキレンであり；Ｍは、結合、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ’−、および−Ｃ＝ＮＲ”−から選択され；ならびにＹは、（Ｃ３−Ｃ１４）−シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール、（Ｃ３−Ｃ１４）アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレン、（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリールおよび（Ｃ３−Ｃ１４）ヘテロアリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキレンから選択される。
【０１４０】
特定の実施形態では、本開示の方法において使用されるアルギナーゼ阻害剤は、以下から：
【表４−１】
2020502259.tif 000035
【表４−２】
2020502259.tif 000036
【表４−３】
2020502259.tif 000037
【表４−４】
2020502259.tif 000038
またはその薬学的に許容される塩、立体異性体、もしくはプロドラッグから選択される。
【０１４１】
特定の実施形態では、本開示の方法において使用されるアルギナーゼ阻害剤は、
ＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−Ｙ１−Ｙ２−Ｙ３−Ｙ４−Ｂ（ＯＨ）２［式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、およびＹ４のそれぞれは、ＣＨ２、Ｓ、Ｏ、ＮＨ、およびＮ−アルキルから選択される］
である。
【０１４２】
特定の実施形態では、本開示の方法において使用されるアルギナーゼ阻害剤は、式ＩＶａまたはＩＶｂ：
【化２３】
2020502259.tif 000039
の化合物、またはその立体異性体、ラクトンプロドラッグ、もしくは薬学的に許容される塩であり、式中：
破線は存在してもよい二重結合を表し；
Ｚは、
【化２４】
2020502259.tif 000040
であり；
Ｘ１は−（ＣＨ２）−であるか、または前記二重結合がＸ１とＸ２との間に存在する場合、Ｘ１は−（ＣＨ）−であり；
Ｘ２は−（ＣＨ２）−または−（ＮＲ２）−であるか、または前記二重結合がＸ１とＸ２との間またはＸ２とＸ３との間に存在する場合、Ｘ２は−（ＣＨ）−またはＮであり；
Ｘ３は、−（ＣＨ２）−、−Ｓ−、−Ｏ−および−（ＮＲ２）−から選択されるヘテロ原子部分であるか、または前記二重結合がＸ２とＸ３との間またはＸ３とＸ４との間に存在する場合、Ｘ３は−（ＣＨ）−またはＮであり；
Ｘ４は−（ＣＨ２）−であるか、または前記二重結合がＸ３とＸ４との間に存在する場合、Ｘ４は−（ＣＨ）−であり、トランス配置にあり；
ただし、Ｘ２およびＸ３の１つ以下が、前記−（ＮＲ２）−または前記ヘテロ原子部分であり；
ただし、Ｚが
【化２５】
2020502259.tif 000041
である場合、Ｘ３は−（ＮＲ２）−であり；
ただし、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４の間には二重結合が２つ以下しか存在せず、および２つの二重結合が共通の炭素原子を共有することはなく；
Ｒ１は、Ｈ以外の一価部分であるか；またはＲ１と前記α−カルボキシラートが一緒になった場合、ラクトンを形成し；ならびに
Ｒ２は、独立してＨ、メチル、またはエチルである。
【０１４３】
特定の実施形態では、本開示の方法において使用されるアルギナーゼ阻害剤は、式Ｖ：
【化２６】
2020502259.tif 000042
［式中：
ｎは０、１、または２であり；
Ｘは、ＮＲ５、ＣＲ６Ｒ７、Ｏ、Ｓ、Ｓ（＝Ｏ）またはＳ（Ｏ）２であり；
Ｒ７は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ８、ＣＮまたはＮＲ８Ｒ９であり；ならびに
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ヘテロアリール（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）（アリール）、−Ｃ（＝Ｏ）（ヘテロアリール）、−ＳＯ２（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＳＯ２（アリール）、−ＳＯ２（ヘテロアリール）、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＣＯＮＨ（アリール）、または−ＣＯＮＨ（ヘテロアリール）である］
の化合物、またはその誘導体、またはその塩、例えばその薬学的に許容される塩である。
【０１４４】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は式（ＶＩ）：
【化２７】
2020502259.tif 000043
［式中：
ＲａはＨであるか、または置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキルおよびヘテロアラルキルから選択され；
ＲｂはＨであるか、または置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、および−Ｃ（Ｏ）Ｏ（アリール）から選択され；
各Ｒｃは、独立してＨもしくはアルキルから選択されるか、または２つのＲｃの出現は介在する−Ｏ−Ｂ−Ｏ−原子と一緒になって、置換されていてもよいホウ素含有環を形成し；
ＸはＯまたはＳであり；
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、Ｈおよび置換されていてもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキルおよびヘテロアラルキルから選択されるか；または
Ｒ１およびＲ２は、介在原子と一緒になって、置換されていてもよい５〜７員環を形成し；ならびに
Ｒ３はＨまたは置換されていてもよいアルキルであるか；
またはＲ１およびＲ３は、介在原子と一緒になって、置換されていてもよい５〜７員環を形成する］
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグの構造を有し、
ここで、化合物は、
【化２８】
2020502259.tif 000044
、
【化２９】
2020502259.tif 000045
、
【化３０】
2020502259.tif 000046
、
【化３１】
2020502259.tif 000047
、
【化３２】
2020502259.tif 000048
、または
【化３３】
2020502259.tif 000049
ではない。
【０１４５】
特定の実施形態では、式（ＶＩ）の化合物は、式（ＶＩａ）：
【化３４】
2020502259.tif 000050
の構造を有する。
【０１４６】
特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（ＶＩｂ）：
【化３５】
2020502259.tif 000051
の構造を有する。
【０１４７】
特定の実施形態では、式（ＶＩ）の化合物は、式（ＶＩｃ）：
【化３６】
2020502259.tif 000052
の構造を有する。
【０１４８】
特定の実施形態では、式（ＶＩ）の化合物は、式（ＶＩｄ）：
【化３７】
2020502259.tif 000053
の構造を有する。
【０１４９】
特定の実施形態では、式（ＶＩ）の化合物は、式（ＶＩｅ）：
【化３８】
2020502259.tif 000054
の構造を有する。
【０１５０】
特定の実施形態では、式（ＶＩ）の化合物は、式（ＶＩｆ）：
【化３９】
2020502259.tif 000055
の構造を有する。
【０１５１】
特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉｇ）：
【化４０】
2020502259.tif 000056
の構造を有する。
【０１５２】
特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（ＶＩｈ）：
【化４１】
2020502259.tif 000057
の構造を有する。
【０１５３】
式（ＶＩ）、（ＶＩａ）、および（ＶＩｂ）のいずれかの特定の実施形態では、Ｒ２はＨである。
【０１５４】
前記の式のいずれかの特定の実施形態では、Ｒａは、Ｈまたは置換されていてもよいアルキルである。特定の好ましい実施形態では、ＲａはＨである。
【０１５５】
前記の式のいずれかの特定の実施形態では、Ｒｂは、Ｈまたは置換されていてもよいアルキルもしくはアシルである。特定の好ましい実施形態では、ＲｂはＨである。
【０１５６】
前記の式のいずれかの特定の実施形態では、Ｒｃは各出現についてＨである。
【０１５７】
前記の式のいずれかの特定の実施形態では、２つのＲｃの出現は、一緒になって、置換されていてもよいジオキサボロラン、ジオキサボロラノン、ジオキサボロランジオン、ジオキサボリナン、ジオキサボリナノン、またはジオキサボリナンジオンを形成する。
【０１５８】
前記の式のいずれかの特定の実施形態では、ＸはＯである。
【０１５９】
前記の式のいずれかの特定の実施形態では、Ｒ１がＨである場合、Ｒ３はベンジルではない。
【０１６０】
前記の式のいずれかの特定の実施形態では、Ｒ１はＨである。
【０１６１】
前記の式のいずれかの特定の実施形態では、Ｒ１がベンジルである場合、Ｒ３はメチルではない。
【０１６２】
特定の実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいアラルキル、ヘテロアラルキル、（シクロアルキル）アルキル、または（ヘテロシクロアルキル）アルキルである。
【０１６３】
特定の実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいアラルキルまたはヘテロアラルキルである。
【０１６４】
式ＶＩｈの化合物の特定の実施形態では、Ｒ１は−ＣＦ３である。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯである。他のそのような実施形態では、ＸはＯであり、およびＲ３はＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、およびＲｃはＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、ならびにＲｃ、ＲａおよびＲｂはＨである。
【０１６５】
式ＶＩｈの化合物の特定の実施形態では、Ｒ１は−（ＣＨ２）３ＮＨ２である。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯである。他のそのような実施形態では、ＸはＯであり、およびＲ３はＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、およびＲｃはＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、ならびにＲｃ、ＲａおよびＲｂはＨである。
【０１６６】
式ＶＩｈの化合物の特定の実施形態では、Ｒ１はベンジルである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯである。他のそのような実施形態では、ＸはＯであり、およびＲ３はＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、およびＲｃはＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、ならびにＲｃ、ＲａおよびＲｂはＨである。
【０１６７】
式ＶＩｈの化合物の特定の実施形態では、Ｒ１は−ＣＨ３である。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯである。他のそのような実施形態では、ＸはＯであり、およびＲ３はＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、およびＲｃはＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、ならびにＲｃ、ＲａおよびＲｂはＨである。
【０１６８】
式ＶＩｈの化合物の特定の実施形態では、Ｒ１は−ＣＨ２ＯＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯである。他のそのような実施形態では、ＸはＯであり、およびＲ３はＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、およびＲｃはＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、ならびにＲｃ、ＲａおよびＲｂはＨである。
【０１６９】
式ＶＩｈの化合物の特定の実施形態では、Ｒ１はＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯである。他のそのような実施形態では、ＸはＯであり、およびＲ３はＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、およびＲｃはＨである。いくつかのそのような実施形態では、ＸはＯであり、Ｒ３はＨであり、ならびにＲｃ、ＲａおよびＲｂはＨである。
【０１７０】
特定の実施形態では、Ｒ１はベンジルである。
【０１７１】
他の特定のそのような実施形態では、Ｒ１は、−ＣＦ３によって置換されたベンジルではない。
【０１７２】
さらに他の特定のそのような実施形態では、Ｒ１は、−ＣＨ２−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）などのヘテロアラルキルである。
【０１７３】
前記の式のいずれかの特定の実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル、アルケニル、またはアルキニルである。
【０１７４】
特定のそのような実施形態では、Ｒ１は、ヒドロキシ、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ、−ＳＨ、−Ｓ−（アルキル）、−ＳｅＨ、−Ｓｅ−（アルキル）、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アミノ、カルボン酸、エステル、グアニジノ、およびアミドから独立して選択される１つ以上の置換基によって置換されていてもよいアルキルである。
【０１７５】
特定のそのような実施形態では、Ｒ１は、ヒドロキシ、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ、−ＳＨ、−Ｓ−（アルキル）、−ＳｅＨ、−Ｓｅ−（アルキル）、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アミノ、カルボン酸、エステル、グアニジノ、およびアミドから独立して選択される１つ以上の置換基によって置換されていてもよいアルキルである。
【０１７６】
特定のそのような実施形態では、Ｒ１は、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルキル、および−Ｓ−（アルキル）から独立して選択される１つ以上の置換基によって置換されていてもよいアルキルである。
【０１７７】
特定の実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択される。
【０１７８】
特定の実施形態では、Ｒ１は、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐのアミノ酸側鎖である。
【０１７９】
特定の実施形態では、Ｒ１およびＲ２は、介在原子と一緒になって、置換されていてもよい５〜７員環を形成する。
【０１８０】
特定の実施形態では、Ｒ１およびＲ２は、介在原子と一緒になって、３員環などの置換されていてもよい３〜７員環を形成する。
【０１８１】
特定の実施形態では、Ｒ３はＨである。
【０１８２】
特定の実施形態では、Ｒ１およびＲ３は、介在原子と一緒になって、置換された５員環を形成する。
【０１８３】
特定の実施形態では、Ｒ１およびＲ３は、介在原子と一緒になって、置換されていてもよい６または７員環を形成する。
【０１８４】
特定の実施形態では、Ｒ１およびＲ３は、介在原子と一緒になって、テトラヒドロイソキノリニル環、例えば
【化４２】
2020502259.tif 000058
を形成することはない。
【０１８５】
特定の実施形態では、式（ＶＩ）の化合物は、
【化４３】
2020502259.tif 000059
、
【化４４】
2020502259.tif 000060
、
【化４５】
2020502259.tif 000061
、
【化４６】
2020502259.tif 000062
、
【化４７】
2020502259.tif 000063
、または
【化４８】
2020502259.tif 000064
ではない。
【０１８６】
特定の実施形態では、本開示の化合物は、以下から：
【表５−１】
2020502259.tif 000065
【表５−２】
2020502259.tif 000066
またはその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグから選択される構造を有する。
【０１８７】
特定の実施形態では、化合物は、例えば親化合物中のヒドロキシルがエステルまたはカーボナートとして提示される、親化合物中に存在するカルボン酸がエステルとして提示される、またはアミノ基がアミドとして提示される、プロドラッグであってもよい。特定のそのような実施形態では、プロドラッグはインビボで活性な親化合物に代謝される（例えばエステルは対応するヒドロキシルまたはカルボン酸に加水分解される）。
【０１８８】
特定の実施形態では、ボロン酸は環状または線状無水物の形態で存在してもよい。特定の実施形態では、ボロン酸は６員環無水物の形態で存在し、ボロキシンとしても知られる。
【０１８９】
特定の実施形態では、本開示のアルギナーゼ阻害剤化合物はラセミ化合物であってもよい。特定の実施形態では、本開示のアルギナーゼ阻害剤化合物は、１種のエナンチオマーに富んでいてもよい。例えば、本開示の化合物は、３０％超のｅｅ、４０％超のｅｅ、５０％超のｅｅ、６０％超のｅｅ、７０％超のｅｅ、８０％超のｅｅ、９０％超のｅｅ、またはさらに９５％以上のｅｅを有し得る。
【０１９０】
本発明の化合物は２つ以上の立体中心を有する。したがって、本開示の化合物は、１種以上のジアステレオマーに富んでいてもよい。例えば、本開示の化合物は、３０％超のｄｅ、４０％超のｄｅ、５０％超のｄｅ、６０％超のｄｅ、７０％超のｄｅ、８０％超のｄｅ、９０％超のｄｅ、さらには９５％以上のｄｅを有し得る。特定の実施形態では、本開示の化合物は、１つ以上の立体中心に実質的に１つの異性体配置を有し、残りの立体中心に複数の異性体配置を有する。
【０１９１】
特定の実施形態では、Ｒ１を有する立体中心の鏡像体過剰率は、少なくとも４０％ｅｅ、５０％ｅｅ、６０％ｅｅ、７０％ｅｅ、８０％ｅｅ、９０％ｅｅ、９２％ｅｅ、９４％ｅｅ、９５％ｅｅ、９６％ｅｅ、９８％ｅｅまたはそれ以上のｅｅである。
【０１９２】
本明細書で使用される場合、立体化学なしで描画される単結合は、化合物の立体化学を示さない。式（ＶＩ）の化合物は、立体化学が示されていない化合物の一例を提供する。
【０１９３】
本明細書で使用される場合、破線または太い非くさび形結合は、相対的であるが絶対的ではない立体化学配置を示す（例えば所与のジアステレオマーのエナンチオマーを区別しない）。例えば、式（ＶＩａ）：
【化４９】
2020502259.tif 000067
において、太い非くさび形結合は、−ＣＯ２Ｒａ基と（ＣＨ２）３Ｂ（ＯＲｃ）２基が互いにシスであるように配置されていることを示すが、太い非くさび形結合は化合物の絶対（すなわちＲまたはＳ）配置を表さない。
【０１９４】
本明細書で使用される場合、破線または太いくさび形結合は絶対立体化学配置を示す。例えば、式（Ｉｃ）：
【化５０】
2020502259.tif 000068
において、太いくさび形結合は、それが結合している立体中心の絶対配置を示し、一方、太い非くさび形結合は、−ＣＯ２Ｒａ基と（ＣＨ２）３Ｂ（ＯＲｃ）２基が互いにシスであるように配置されていることを示すが、それらの立体中心の絶対配置を示すものではない。したがって、式（ＶＩｃ）の化合物は合計で２つの異性体：
【化５１】
2020502259.tif 000069
および
【化５２】
2020502259.tif 000070
を表す。
【０１９５】
本明細書に記載される開示の方法において使用し得る例示的なアルギナーゼ阻害剤には、本明細書と共に提出され、参照により本明細書に組み込まれる付属書Ａに記載の化合物が含まれる。
【０１９６】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤は、本明細書で開示される式のいずれかの化合物のプロドラッグ、例えば親化合物中のヒドロキシルがエステルまたはカーボナートとして提示され、または親化合物中に存在するカルボン酸がエステルとして提示されるプロドラッグであってもよい。特定のそのような実施形態では、プロドラッグはインビボで活性な親化合物に代謝される（例えばエステルは対応するヒドロキシルまたはカルボン酸に加水分解される）。
【０１９７】
特定の実施形態では、本開示のアルギナーゼ阻害剤化合物はラセミ化合物であってもよい。特定の実施形態では、本開示のアルギナーゼ阻害剤化合物は、１種のエナンチオマーに富んでいてもよい。例えば、本開示の化合物は、３０％超のｅｅ、４０％超のｅｅ、５０％超のｅｅ、６０％超のｅｅ、７０％超のｅｅ、８０％超のｅｅ、９０％超のｅｅ、またはさらに９５％以上のｅｅを有し得る。特定の実施形態では、本開示の化合物は、２つ以上の立体中心を有し得る。特定のそのような実施形態では、本開示の化合物は、１種以上のジアステレオマーに富んでいてもよい。例えば、本開示の化合物は、３０％超のｄｅ、４０％超のｄｅ、５０％超のｄｅ、６０％超のｄｅ、７０％超のｄｅ、８０％超のｄｅ、９０％超のｄｅ、さらには９５％以上のｄｅを有し得る。
【０１９８】
特定の実施形態では、アルギナーゼ阻害剤の治療用製剤は、化合物の（例えば本明細書に記載の式の）主に１種のエナンチオマーを提供するように濃縮され得る。鏡像異性的に濃縮された混合物は、例えば少なくとも６０モルパーセント、またはより好ましくは少なくとも７５、９０、９５、さらには９９モルパーセントの１種のエナンチオマーを含み得る。特定の実施形態では、一方のエナンチオマーが濃縮されたアルギナーゼ阻害化合物は他方のエナンチオマーを実質的に含まず、ここで、実質的に含まないとは、問題の物質が、例えば組成物または化合物混合物中の他のエナンチオマーの量と比較して、１０％未満、または５％未満、または４％未満、または３％未満、または２％未満、または１％未満を占めることを意味する。例えば、アルギナーゼ阻害剤組成物または化合物混合物が９８グラムの第一のエナンチオマーおよび２グラムの第二のエナンチオマーを含有する場合、これは、９８モルパーセントの第一のエナンチオマーおよび２％だけの第二のエナンチオマーを含有すると言われる。
【０１９９】
特定の実施形態では、治療用製剤は、アルギナーゼ阻害剤化合物（例えば本明細書で開示される式を有するアルギナーゼ阻害剤）の主に１種のジアステレオマーを提供するように濃縮され得る。ジアステレオ的に濃縮された混合物は、例えば少なくとも６０モルパーセント、またはより好ましくは少なくとも７５、９０、９５、さらには９９モルパーセントの１種のジアステレオマーを含み得る。
【０２００】
本開示は、本開示の同位体標識化合物をさらに含む。「同位体」または「放射性標識」化合物は、１つ以上の原子が、自然界で典型的に見出される（すなわち天然に存在する）原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられているまたは置換されている本開示の化合物である。本開示の化合物に組み込まれ得る適切な放射性核種には、２Ｈ（重水素の場合はＤとも記される）、３Ｈ（トリチウムの場合はＴとも記される）、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、１８Ｆ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、８２Ｂｒ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉおよび１３１Ｉが含まれるが、これらに限定されない。例えば、本開示の化合物中の１つ以上の軽水素（１Ｈ）原子は重水素原子によって置き換えることができる（例えば式（Ｉ）のＣ１−６アルキル基の１つ以上の水素原子は重水素原子で濃縮することができ、例えば−ＣＤ３はより一般的な−Ｃ（１Ｈ）３メチル基の代わりに使用される）。
【０２０１】
本明細書で提示される化合物の１つ以上の構成原子は、天然または非天然存在度の原子の同位体で置き換えるまたは置換することができる。いくつかの実施形態では、化合物は、重水素原子が濃縮された少なくとも１つの水素を含み、すなわち化合物は、地球上の重水素の天然存在度を超える重水素原子を含む。例えば、本明細書で提示される化合物中の１つ以上の水素原子は、重水素が濃縮され得る（例えばＣ１−６アルキル基の１つ以上の軽水素原子は、より一般的な−Ｃ（１Ｈ）３メチル基の代わりに使用される−ＣＤ３のような重水素原子によって置き換えられ得る）。いくつかの実施形態では、化合物は２つ以上の重水素原子が濃縮されている。いくつかの実施形態では、化合物は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４個の重水素原子を含む。いくつかの実施形態では、化合物中のすべての水素原子は、軽水素原子の代わりに重水素原子が濃縮され得る。
【０２０２】
同位体を有機化合物に含めるための合成方法は当技術分野において公知である（Ｄｅｕｔｅｒｉｕｍ  Ｌａｂｅｌｉｎｇ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｂｙ  Ａｌａｎ  Ｆ．  Ｔｈｏｍａｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，Ａｐｐｌｅｔｏｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ−Ｃｒｏｆｔｓ，１９７１；Ｔｈｅ  Ｒｅｎａｉｓｓａｎｃｅ  ｏｆ  Ｈ／Ｄ  Ｅｘｃｈａｎｇｅ  ｂｙ  Ｊｅｎｓ  Ａｔｚｒｏｄｔ，Ｖｏｌｋｅｒ  Ｄｅｒｄａｕ，Ｔｈｏｒｓｔｅｎ  Ｆｅｙ  ａｎｄ  Ｊｏｃｈｅｎ  Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００７，７７４４−７７６５；Ｔｈｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｉｓｏｔｏｐｉｃ  Ｌａｂｅｌｌｉｎｇ  ｂｙ  Ｊａｍｅｓ  Ｒ．Ｈａｎｓｏｎ，Ｒｏｙａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１）。同位体標識化合物は、ＮＭＲ分光法、代謝実験、および／またはアッセイなどの様々な試験において使用することができる。
【０２０３】
軽水素に対する重水素のようなより重い同位体による置換は、より大きな代謝安定性、例えばインビボ半減期の増加または必要用量の減少からもたらされる特定の治療上の利点を与える可能性があり、したがっていくつかの状況では好ましい可能性がある（例えばＡ．Ｋｅｒｅｋｅｓ  ｅｔ．ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１１，５４，２０１−２１０；Ｒ．Ｘｕ  ｅｔ．ａｌ．Ｊ．Ｌａｂｅｌ  Ｃｏｍｐｄ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２０１５，５８，３０８−３１２参照）。
【０２０４】
本放射性標識化合物に組み込まれる放射性核種は、その放射性標識化合物の特定の適用に依存する。例えば、インビトロのＰＩ３Ｋ標識および競合アッセイのためには、３Ｈ、１４Ｃ、８２Ｂｒ、１２５Ｉ、１３１Ｉまたは３５Ｓを組み込んでいる化合物が有用であり得る。ラジオイメージング適用には、１１Ｃ、１８Ｆ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、または７７Ｂｒが有用であり得る。
【０２０５】
「放射性標識」または「標識化合物」は、少なくとも１つの放射性核種を組み込んだ化合物であると理解される。いくつかの実施形態では、放射性核種は、３Ｈ、１４Ｃ、１２５Ｉ、３５Ｓおよび８２Ｂｒから選択される。
【０２０６】
本開示は、放射性同位元素を本開示の化合物に組み込むための合成方法をさらに含み得る。放射性同位元素を有機化合物に組み込むための合成方法は当技術分野において周知であり、当業者は本開示の化合物に適用可能な方法を容易に認識する。
【０２０７】
治療方法
いくつかの態様では、本明細書で開示されるアルギナーゼ阻害剤および本明細書で開示される免疫細胞を含有する組成物を被験体に投与することによって、被験体における疾患を治療または予防することに関する治療方法が本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、被験体に、１ｋｇ（体重）当たり約１×１０３細胞〜１ｋｇ（体重）当たり約１×１０２０細胞を投与する。いくつかの実施形態では、少なくとも１×１０３細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０４細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０６細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０７細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０８細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０９細胞／ｋｇ、少なくとも５０×１０１０細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０１１細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０１２細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０１３細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０１４細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０１５細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０１６細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０１７細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０１８細胞／ｋｇ、少なくとも１×１０１９細胞／ｋｇ、または少なくとも１×１０２０細胞／ｋｇを被験体に投与する。被験体に投与される免疫細胞の数は、免疫細胞療法に対する被験体の応答、被験体の病歴、被験体の体重、性別、および／または民族的背景を含むがこれらに限定されない様々な要因によって異なり得る。
【０２０８】
いくつかの実施形態では、疾患はウイルス感染である。いくつかの実施形態では、被験体は移植（例えば造血幹細胞移植（ＳＣＴ））を受けたばかりであってもよい。いくつかの実施形態では、被験体は免疫不全である。
【０２０９】
いくつかの実施形態では、疾患は癌である。特定の実施形態では、癌は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、副腎皮質癌、肛門癌、虫垂癌、非定型奇形腫／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳腫瘍、星状細胞腫、脳脊髄腫瘍、脳幹神経膠腫、中枢神経系非定型奇形腫／ラブドイド腫瘍、中枢神経系胎児性腫瘍、乳癌、気管支腫瘍、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍、原発不明癌、中枢神経系癌、子宮頸癌、小児癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性骨髄増殖性疾患、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、上皮内腺管癌（ＤＣＩＳ）、胎児性腫瘍、子宮内膜癌、上衣芽腫、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、肝外胆管癌、眼の癌、骨の線維性組織球腫、胆嚢癌、胃癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、胚細胞腫瘍、卵巣胚細胞腫瘍、妊娠性絨毛性腫瘍、神経膠腫、有毛細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝細胞癌、組織球症、ランゲルハンス細胞癌、ホジキンリンパ腫、下咽頭癌、眼内黒色腫、膵島細胞腫瘍、カポジ肉腫、腎臓癌、ランゲルハンス細胞組織球症、喉頭癌、白血病、口唇および口腔癌、肝臓癌、上皮内小葉癌（ＬＣＩＳ）、肺癌、リンパ腫、エイズ関連リンパ腫、マクログロブリン血症、男性乳癌、髄芽腫、髄上皮腫、黒色腫、メルケル細胞癌、悪性中皮腫、原発不明転移性頸部扁平上皮癌、ＮＵＴ遺伝子を含む正中管癌、口腔癌、多発性内分泌腫瘍症候群、多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍、菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性腫瘍、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄腫、多発性骨髄腫、慢性骨髄増殖性疾患、鼻腔癌、副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、非小細胞肺癌、口腔の癌、口腔癌、口唇癌、中咽頭癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌、乳頭腫、傍神経節腫、副鼻腔癌、鼻腔癌、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、褐色細胞腫、中間型松果体実質腫瘍、松果体芽腫、下垂体腫瘍、形質細胞腫瘍、胸膜肺芽腫、乳癌、原発性中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌、腎明細胞癌、腎盂癌、尿管癌、移行上皮癌、網膜芽腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、肉腫、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、扁平上皮癌、原発不明頸部扁平上皮癌、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、胃癌、テント上原始神経外胚葉性腫瘍、Ｔ細胞リンパ腫、精巣癌、咽頭癌、胸腺腫、胸腺癌、甲状腺癌、腎盂および尿管の移行上皮癌、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）、妊娠性絨毛性腫瘍、小児期の原発不明希少癌、尿道癌、子宮癌、子宮肉腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、またはウィルムス腫瘍である。
【０２１０】
特定の実施形態では、本開示の方法によって治療される癌は、様々な急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、乳癌、結腸直腸癌、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、食道癌、胃癌、肺癌、肺癌、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、膵臓癌、前立腺癌、または腎臓癌である。
【０２１１】
併用療法は、癌などの多くの疾患環境において重要な治療法である。最近の科学的進歩により、これらや他の複雑な疾患の根底にある病態生理学的過程についての我々の理解は増大した。この理解の増大は、治療応答を改善する、耐性の発現を最小限に抑える、または有害事象を最小限に抑えるために複数の治療標的を対象とする薬物の組み合わせを使用した新しい治療アプローチを開発する推進力を提供している。併用療法が重要な治療上の利点を提供する状況において、アルギナーゼ阻害剤などの新しい治験薬との組み合わせの開発への関心が高まりつつある。
【０２１２】
本明細書で開示される方法は、追加の薬剤（例えば化学療法剤または免疫チェックポイント阻害剤）を投与することをさらに含み得る。本開示の特定の実施形態では、追加の薬剤は、アルギナーゼ阻害剤および／または免疫細胞と同時に投与される。特定の実施形態では、追加の薬剤は、アルギナーゼ阻害剤および／または免疫細胞と連続的に投与される。
【０２１３】
いくつかの実施形態では、疾患（例えば癌）の治療または予防における併用療法のための方法は、１つ以上の追加の化学療法剤を投与することをさらに含む。化学療法剤は、アミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、アスパラギナーゼ、ＡＺＤ５３６３、カルメット・ゲラン桿菌ワクチン（ｂｃｇ）、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブセレリン、ブスルファン、カンプトテシン、カペシタビン、カルボプラチン、カルフィルゾミブ、カルムスチン、クロラムブシル、クロロキン、シスプラチン、クラドリビン、クロドロナート、コビメチニブ、コルヒチン、シクロホスファミド、シプロテロン、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デメトキシビリジン、デキサメタゾン、ジクロロアセタート、ジエネストロール、ジエチルスチルベストロール、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エルロチニブ、エストラジオール、エストラムスチン、エトポシド、エベロリムス、エキセメスタン、フィルグラスチム、フルダラビン、フルドロコルチゾン、フルオロウラシル、フルオキシメステロン、フルタミド、ゲムシタビン、ゲニステイン、ゴセレリン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブ、インターフェロン、イリノテカン、レナリドミド、レトロゾール、ロイコボリン、ロイプロリド、レバミゾール、ロムスチン、ロニダミン、メクロレタミン、メドロキシプロゲステロン、メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、メスナ、メトホルミン、メトトレキサート、ミルテホシン、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、ＭＫ−２２０６、ニルタミド、ノコダゾール、オクトレオチド、オラパリブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロナート、パゾパニブ、ペントスタチン、ペリホシン、プリカマイシン、ポマリドミド、ポルフィマー、プロカルバジン、ラルチトレキセド、リツキシマブ、ルカパリブ、セルメチニブ、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、スニチニブ、スラミン、タラゾパリブ、タモキシフェン、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、テストステロン、サリドマイド、チオグアニン、チオテパ、チタノセンジクロリド、トポテカン、トラメチニブ、トラスツズマブ、トレチノイン、ベリパリブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、またはビノレルビンであり得る。
【０２１４】
特定の実施形態では、化学療法剤は、アバゴボマブ、アデカツムマブ、アフツズマブ、アナツモマブマフェナトクス、アポリズマブ、ブリナツモマブ、カツマキソマブ、デュルバルマブ、エプラツズマブ、イノツズマブオゾガマイシン、インテツムマブ、イピリムマブ、イサツキシマブ、ラムブロリズマブ、ニボルマブ、オカラツズマブ、オララツマブ、ペムブロリズマブ、ピジリズマブ、チシリムマブ、サマリズマブ、またはトレメリムマブであり得る。
【０２１５】
特定の実施形態では、化学療法剤は、イピリムマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、またはピジリズマブである。
【０２１６】
特定の実施形態では、化学療法剤は、グルコース輸送体、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸キナーゼＭ２、乳酸デヒドロゲナーゼ１または２、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ、脂肪酸シンターゼおよびグルタミナーゼなどの代謝酵素阻害剤から選択される。いくつかの実施形態では、阻害剤は、乳酸デヒドロゲナーゼ１もしくは２、またはグルタミナーゼを阻害する。特定の実施形態では、阻害剤はＣＢ−８３９である。
【０２１７】
いくつかの実施形態では、共同的に投与される化学療法剤は、エパカドスタット（ｉｎｃｂ  ２４３６０）、ＣＴＬＡ−４、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ、および／またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１などの免疫腫瘍学治療薬である。特定の実施形態では、免疫腫瘍学薬剤は、アバゴボマブ、アデカツムマブ、アフツズマブ、アナツモマブマフェナトクス、アポリズマブ、ブリナツモマブ、カツマキソマブ、デュルバルマブ、エプラツズマブ、インドキシモド、イノツズマブオゾガマイシン、インテツムマブ、イピリムマブ、イサツキシマブ、ラムブロリズマブ、ニボルマブ、オカラツズマブ、オララツマブ、ペムブロリズマブ、ピジリズマブ、チシリムマブ、サマリズマブ、またはトレメリムマブである。いくつかの実施形態では、免疫腫瘍学薬剤は、インドキシモド、イピリムマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、またはピジリズマブである。特定の実施形態では、免疫腫瘍学薬剤はイピリムマブである。
【０２１８】
特定の実施形態では、癌を治療または予防する方法は、放射線療法、外科手術、温熱療法、焦点式超音波療法、凍結療法、または前記の組み合わせなどの、癌治療の１つ以上の非化学的方法を投与することをさらに含む。
【０２１９】
いくつかの実施形態では、被験体には免疫チェックポイント阻害剤も投与される。免疫チェックポイント阻害は、広くは、免疫応答を防止または下方調節するために癌細胞が産生することができるチェックポイントを阻害することを指す。免疫チェックポイントタンパク質の例としては、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＶＩＳＴＡ、Ｂ７−Ｈ２、Ｂ７−Ｈ３、ＰＤ−Ｌ１、Ｂ７−Ｈ４、Ｂ７−Ｈ６、ＩＣＯＳ、ＨＶＥＭ、ＰＤ−Ｌ２、ＣＤ１６０、ｇｐ４９Ｂ、ＰＩＲ−Ｂ、ＫＩＲファミリー受容体、ＴＩＭ−１、ＴＩＭ−３、ＴＩＭ−４、ＬＡＧ−３、ＢＴＬＡ、ＳＩＲＰα（ＣＤ４７）、ＣＤ４８、２Ｂ４（ＣＤ２４４）、Ｂ７．１、Ｂ７．２、ＩＬＴ−２、ＩＬＴ−４、ＴＩＧＩＴ、ＨＨＬＡ２、ブチロフィリン、Ａ２ａＲ、およびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイントタンパク質に結合してそれを阻害する抗体またはその抗原結合フラグメントであり得る。免疫チェックポイント阻害剤の例としては、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、ピジリズマブ、ＡＭＰ−２２４、ＡＭＰ−５１４、ＳＴＩ−Ａ１１１０、ＴＳＲ−０４２、ＲＧ−７４４６、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ−００２０７１８Ｃ、ＡＵＲ−０１２およびＳＴＩ−Ａ１０１０が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２０】
本明細書で開示される免疫細胞を含有する組成物、アルギナーゼ阻害剤、および抗体は、静脈内または非経口投与（例えば静脈内、皮下、もしくは筋肉内）、口腔投与、鼻腔内投与、直腸投与または経皮投与経路を含むがこれらに限定されない、当技術分野で公知の任意の投与経路を介して投与され得る。本明細書に記載のアルギナーゼ阻害剤、免疫細胞を含有する組成物、および抗体は、同時投与されてもよく、または異なる時間に投与されてもよい。免疫細胞を含有する組成物、アルギナーゼ阻害剤、および抗体は、局所的または全身的に投与され得る。いくつかの実施形態では、本明細書で開示される免疫細胞を含有する組成物、アルギナーゼ阻害剤、および抗体は、腫瘍内または腫瘍微小環境内に局所投与される。
【０２２１】
医薬組成物
いくつかの態様では、本開示は、アルギナーゼ阻害剤、例えば本明細書で開示される式を有する化合物またはその薬学的に許容される塩を、薬学的に許容される担体と共に含有する医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、免疫細胞を含有する組成物およびアルギナーゼ阻害剤、例えば本明細書に記載の式のいずれか１つの化合物、および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む、ヒト患者における使用に適した医薬製剤を提供する。いくつかの実施形態では、製剤は、本明細書で開示される抗体をさらに含み得る。特定の実施形態では、医薬製剤は、本明細書に記載の状態または疾患を治療または予防するのに使用するためのものであり得る。特定の実施形態では、医薬製剤は、ヒト患者における使用に適する十分に低い発熱物質活性を有する。
【０２２２】
本明細書で開示される組成物および方法は、それを必要とする個体を治療するために利用され得る。特定の実施形態では、個体は、ヒトなどの哺乳動物、または非ヒト哺乳動物である。ヒトなどの動物に投与する場合、組成物または化合物は、好ましくは、例えば本開示の化合物と薬学的に許容される担体とを含有する医薬組成物として投与される。薬学的に許容される担体は当技術分野において周知であり、例えば、水もしくは生理緩衝食塩水などの水溶液、またはグリコール、グリセロールなどの他の溶媒もしくはビヒクル、オリーブ油などの油、または注射用有機エステルが含まれる。いくつかの実施形態では、そのような医薬組成物がヒトへの投与、特に侵襲的投与経路（すなわち上皮障壁を通る輸送または拡散を回避する注射または移植などの経路）用である場合、水溶液はパイロジェンフリー、または実質的にパイロジェンフリーである。賦形剤は、例えば薬剤の遅延放出をもたらすため、または１つ以上の細胞、組織もしくは器官を選択的に標的とするために選択され得る。医薬組成物は、錠剤、カプセル剤（スプリンクルカプセル剤およびゼラチンカプセル剤を含む）、顆粒剤、再構成用の凍結乾燥製剤、散剤、液剤、シロップ剤、坐剤、注射剤等のような単位剤形であり得る。組成物はまた、経皮送達システム、例えば皮膚パッチ中に存在し得る。組成物はまた、点眼剤などの局所投与に適した溶液中に存在し得る。
【０２２３】
薬学的に許容される担体は、例えば本開示の化合物などの化合物を安定化する、化合物の溶解度を高めるまたは吸収を増大させるように作用する生理学的に許容される作用物質を含み得る。そのような生理学的に許容される作用物質には、例えばグルコース、スクロースもしくはデキストランなどの炭水化物、アスコルビン酸もしくはグルタチオンなどの抗酸化剤、キレート剤、低分子量タンパク質または他の安定剤もしくは賦形剤が含まれる。生理学的に許容される作用物質を含む薬学的に許容される担体の選択は、例えば組成物の投与経路に依存する。製剤または医薬組成物は、自己乳化型薬物送達システムまたは自己マイクロ乳化型薬物送達システムであり得る。医薬組成物（製剤）はまた、リポソームまたは他のポリマーマトリックスであってもよく、それらはその中に、例えば本開示の化合物を組み込んでいてもよい。例えば、リン脂質または他の脂質を含むリポソームは、作製および投与が比較的簡単な、非毒性の生理学的に許容される、代謝可能な担体である。
【０２２４】
「薬学的に許容される」という語句は、本明細書では、健全な医学的判断の範囲内で、妥当な利益／リスク比に見合う、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずにヒトおよび動物の組織と接触させて使用するのに適した化合物、材料、組成物、および／または剤形を指す。
【０２２５】
本明細書で使用される「薬学的に許容される担体」という語句は、液体または固体の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒または封入材料などの薬学的に許容される材料、組成物またはビヒクルを意味する。各担体は、製剤の他の成分と適合性であり、患者に有害ではないという意味で「許容され」なければならない。薬学的に許容される担体として機能し得る材料のいくつかの例としては、以下が挙げられる：（１）ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖；（２）トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプンなどのデンプン；（３）カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体；（４）粉末トラガカント；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）カカオバター、坐剤ワックスなどの賦形剤；（９）落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油などの油；（１０）プロピレングリコールなどのグリコール；（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール；（１２）オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル；（１３）寒天；（１４）水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；（１５）アルギン酸；（１６）パイロジェンフリー水；（１７）等張生理食塩水；（１８）リンガー液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝液；ならびに（２１）医薬製剤に用いられる他の非毒性の適合性物質。
【０２２６】
医薬組成物（製剤）は、例えば経口的（例えば水性もしくは非水性の液剤もしくは懸濁剤のような飲薬、錠剤、カプセル剤（スプリンクルカプセル剤およびゼラチンカプセル剤を含む）、ボーラス、散剤、顆粒剤、舌に塗布するためのペースト剤）；口腔粘膜を介した吸収（例えば舌下）；肛門、直腸または膣経路（例えばペッサリー、クリーム剤またはフォーム剤として）；非経口的（例えば滅菌溶液または懸濁液として、筋肉内、静脈内、皮下または髄腔内を含む）；経鼻的；腹腔内；皮下；経皮的（例えば皮膚に適用されるパッチとして）；ならびに局所的（例えば皮膚に適用されるクリーム剤、軟膏剤もしくはスプレー剤として、または点眼剤として）を含む、多数の投与経路のいずれかによって被験体に投与することができる。併用療法は、被験体中に存在する腫瘍に組成物および医薬組成物を直接投与することを含み得る。特定の実施形態では、化合物は単に滅菌水に溶解または懸濁させてもよい。適切な投与経路およびそれに適した組成物の詳細は、例えば米国特許第６，１１０，９７３号、同第５，７６３，４９３号、同第５，７３１，０００号、同第５，５４１，２３１号、同第５，４２７，７９８号、同第５，３５８，９７０号および同第４，１７２，８９６号、ならびにその中で引用されている特許において見出すことができる。
【０２２７】
製剤は、好都合には単位剤形で提供され得、薬学の分野で周知の任意の方法によって調製され得る。単一剤形を製造するために担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、治療されている宿主、特定の投与方法によって異なる。単一剤形を製造するために担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、一般に、治療効果を生じる化合物の量である。一般に、この量は、１００パーセントのうち、約１パーセント〜約９９パーセント、好ましくは約５パーセント〜約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセント〜約３０パーセントの活性成分の範囲である。
【０２２８】
これらの製剤または組成物を調製する方法は、本開示の化合物などの活性化合物を担体および、任意に、１つ以上の補助成分と一緒にする工程を含む。一般に、製剤は、本開示の化合物を液体担体、または微細に分割された固体担体、またはその両方と均一におよび密に一緒にして、次いで必要に応じて、生成物を成形することによって調製される。
【０２２９】
経口投与に適する本開示の製剤は、それぞれが本開示の化合物の所定量を活性成分として含有する、カプセル剤（スプリンクルカプセル剤およびゼラチンカプセル剤を含む）、カシェ剤、丸剤、錠剤、ロゼンジ剤（香味付けされた基剤、通常スクロースおよびアカシアまたはトラガカントを使用する）、凍結乾燥製剤、散剤、顆粒剤、または水性もしくは非水性液体中の液剤もしくは懸濁剤として、または水中油型もしくは油中水型の液体エマルジョンとして、またはエリキシルもしくはシロップとして、またはトローチ剤として（ゼラチンおよびグリセリン、もしくはスクロースおよびアラビアゴムなどの不活性塩基を使用する）、ならびに／または口内洗浄剤等としての形態であり得る。組成物または化合物はまた、ボーラス、舐剤またはペースト剤として投与されてもよい。
【０２３０】
経口投与用の固体剤形（カプセル剤（スプリンクルカプセル剤およびゼラチンカプセル剤を含む）、錠剤、丸剤、糖衣錠、散剤、顆粒剤等）を調製するために、活性成分をクエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなどの１つ以上の薬学的に許容される担体、および以下のいずれかと混合する：（１）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸などの充填剤または増量剤；（２）例えばカルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアラビアゴムなどの結合剤；（３）グリセロールなどの保湿剤；（４）寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のシリカート、および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；（５）パラフィンなどの溶解遅延剤；（６）第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；（７）例えばセチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールなどの湿潤剤；（８）カオリンおよびベントナイトクレイなどの吸収剤；（９）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびそれらの混合物などの潤滑剤；（１０）修飾および未修飾シクロデキストリンなどの錯化剤；ならびに（１１）着色剤。カプセル剤（スプリンクルカプセル剤およびゼラチンカプセル剤を含む）、錠剤および丸剤の場合、医薬組成物は緩衝剤も含み得る。同様の種類の固体組成物もまた、ラクトースまたは乳糖などの賦形剤、ならびに高分子量ポリエチレングリコール等を使用して、軟および硬ゼラチンカプセル剤の充填剤として使用し得る。
【０２３１】
錠剤は、任意に１つ以上の補助成分と共に圧縮または成形することによって製造されてもよい。圧縮錠剤は、結合剤（例えばゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えばデンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、界面活性剤または分散剤を用いて調製され得る。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を適切な機械で成形することによって製造され得る。
【０２３２】
錠剤、ならびに糖衣錠、カプセル剤（スプリンクルカプセル剤およびゼラチンカプセル剤を含む）、丸剤および顆粒剤などの医薬組成物の他の固体剤形は、任意に刻み目を入れてもよく、または腸溶コーティングおよび医薬品製剤化技術において周知の他のコーティングのようなコーティングおよびシェルを用いて調製してもよい。それらはまた、例えば所望の放出プロフィールを提供するための様々な割合のヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／またはミクロスフェアを使用して、その中の活性成分の徐放または制御放出を提供するように製剤化され得る。それらは、例えば細菌保持フィルタを通す濾過によって、または使用直前に滅菌水もしくは他の何らかの滅菌注射用媒体に溶解することができる滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことによって滅菌され得る。これらの組成物はまた、任意に乳白剤を含有してもよく、およびそれらが活性成分（１つまたは複数）を消化管の特定の部分においてのみ、またはこの部分において優先的に、任意に遅延方式で放出する組成物であってもよい。使用できる包埋組成物の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。活性成分はまた、適切な場合には、上記の賦形剤の１つ以上と共にマイクロカプセル化された形態であってもよい。
【０２３３】
経口投与のために有用な液体剤形には、薬学的に許容される乳剤、再構成用の凍結乾燥製剤、マイクロエマルジョン、液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。活性成分に加えて、液体剤形は、例えば水または他の溶媒、シクロデキストリンおよびその誘導体などの当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤、可溶化剤および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物を含有し得る。
【０２３４】
不活性希釈剤の他に、経口組成物はまた、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味剤、香味剤、着色剤、香料および防腐剤などの補助剤も含有し得る。
【０２３５】
懸濁剤は、活性化合物に加えて、例えばエトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガカント、ならびにそれらの混合物のような懸濁化剤を含有し得る。
【０２３６】
直腸投与、膣投与、または尿道投与用の医薬組成物の製剤は坐剤として提供されてもよく、これは、１つ以上の活性化合物を、例えばココアバター、ポリエチレングリコール、坐剤ワックスまたはサリシラートを含む１つ以上の適切な非刺激性賦形剤または担体と混合することによって調製することができ、およびこれは、室温では固体であるが、体温では液体であり、したがって直腸または膣腔内で融解して、活性化合物を放出する。
【０２３７】
口への投与用の医薬組成物の製剤は、口内洗浄剤、または経口スプレー剤、または経口軟膏剤として提供され得る。
【０２３８】
あるいはまたはさらに、組成物は、カテーテル、ステント、ワイヤ、または他の管腔内装置を介した送達用に製剤化することができる。そのような装置を介した送達は、膀胱、尿道、尿管、直腸、または腸への送達のために特に有用であり得る。
【０２３９】
膣内投与に適した製剤には、適切であることが当技術分野で公知の担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤またはスプレー製剤も含まれる。
【０２４０】
局所または経皮投与用の剤形には、散剤、スプレー剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、液剤、パッチおよび吸入剤が含まれる。活性化合物は、無菌条件下で、薬学的に許容される担体、および必要とされ得る任意の防腐剤、緩衝剤、または噴射剤と混合され得る。
【０２４１】
軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤およびゲル剤は、活性化合物に加えて、動物性および植物性の脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはそれらの混合物などの賦形剤を含有し得る。
【０２４２】
散剤およびスプレー剤は、活性化合物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物などの賦形剤を含有することができる。スプレー剤は、クロロフルオロ炭化水素などの慣用の噴射剤ならびにブタンおよびプロパンなどの揮発性の非置換炭化水素をさらに含有することができる。
【０２４３】
経皮パッチは、本開示の化合物の身体への制御送達を提供するというさらなる利点を有する。そのような剤形は、活性化合物を適切な媒体に溶解または分散させることによって製造することができる。吸収促進剤もまた、皮膚を横切る化合物の流動を増加させるために使用することができる。そのような流動の速度は、速度制御膜を提供するか、または化合物をポリマーマトリックスもしくはゲルに分散させることによって制御することができる。
【０２４４】
眼科用製剤、眼軟膏剤、散剤、液剤なども本開示の範囲内であることが企図されている。例示的な眼科用製剤は、米国特許出願公開第２００５／００８００５６号、同第２００５／００５９７４４号、同第２００５／００３１６９７号および同第２００５／００４０７４号ならびに米国特許第６，５８３，１２４号に記載されており、その内容は参照により本明細書に組み込まれる。所望する場合は、液体眼科用製剤は、涙液、房水または硝子体液と同様の特性を有するか、またはそのような液体と適合性がある。好ましい投与経路は局所投与（例えばインプラントによる投与）である。
【０２４５】
本明細書で使用される「非経口投与」および「非経口投与された」という語句は、通常は注射（例えば腫瘍内または腫瘍微小環境内への直接注射）による、経腸投与および局所投与以外の投与様式を意味し、限定されることなく、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内および胸骨内注射および注入が含まれる。
【０２４６】
非経口投与に適する医薬組成物は、１つ以上の活性化合物を、１つ以上の薬学的に許容される滅菌等張水溶液もしくは非水性溶液、分散液、懸濁液もしくは乳濁液、または使用直前に滅菌注射溶液もしくは分散液に再構成され得る滅菌粉末と組み合わせて含有し、これらは、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、製剤を意図されるレシピエントの血液と等張にする溶質、または懸濁化剤もしくは増粘剤を含み得る。
【０２４７】
本開示の医薬組成物に使用し得る適切な水性および非水性担体の例には、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、およびそれらの適切な混合物、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルが含まれる。適切な流動度は、例えばレシチンなどのコーティング材料の使用によって、分散液の場合は必要な粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって維持することができる。
【０２４８】
これらの組成物は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤などの補助剤も含有し得る。微生物の作用の防止は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などを含有することによって確実にし得る。糖類、塩化ナトリウム等のような等張剤を組成物に含めることも望ましい場合がある。さらに、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅らせる作用物質を含めることによって注射用剤形の長期吸収をもたらし得る。
【０２４９】
いくつかの場合には、薬物の効果を長引かせるために、皮下注射または筋肉内注射からの薬物の吸収を遅らせることが望ましい。これは、水溶解度の低い結晶性または非晶質材料の懸濁液を使用することによって達成され得る。その場合、薬物の吸収速度はその溶解速度に依存し、溶解速度は結晶サイズおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口投与された剤形の遅延吸収は、薬物を油性ビヒクルに溶解または懸濁させることによって達成される。
【０２５０】
注射用デポー形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中に対象化合物のマイクロカプセル化マトリックスを形成することによって作製される。薬物とポリマーとの比率、および使用される特定のポリマーの性質に応じて、薬物の放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が含まれる。デポー注射用製剤はまた、体組織と適合性のあるリポソームまたはマイクロエマルジョン中に薬物を封入することによって調製される。
【０２５１】
本開示の方法における使用のために、活性化合物は、それ自体で、または例えば０．１〜９９．５％（より好ましくは０．５〜９０％）の活性成分を薬学的に許容される担体と組み合わせて含有する医薬組成物として与えられてもよい。
【０２５２】
導入の方法はまた、再充填可能な装置または生分解性の装置によって提供され得る。近年、タンパク質性バイオ医薬品を含む薬物の制御送達のために、様々な徐放性ポリマー装置が開発され、インビボで試験されてきた。生分解性ポリマーと非分解性ポリマーの両方を含む様々な生体適合性ポリマー（ヒドロゲルを含む）を使用して、特定の標的部位での化合物の持続放出のためのインプラントを形成することができる。
【０２５３】
医薬組成物中の活性成分の実際の投与量レベルは、患者に対する毒性を伴わずに、特定の患者、組成物、および投与様式について所望の治療応答を達成するのに有効な活性成分の量が得られるように変化させ得る。
【０２５４】
選択される投与量レベルは、使用される特定の化合物もしくは化合物の組み合わせ、またはそのエステル、塩もしくはアミドの活性、投与経路、投与時間、使用される特定の化合物（１つまたは複数）の排出速度、治療期間、使用される特定の化合物（１つまたは複数）と組み合わせて使用される他の薬物、化合物および／または物質、治療される患者の年齢、性別、体重、状態、全般的健康状態および以前の病歴、ならびに医療分野において周知の同様の因子を含む様々な因子に依存する。
【０２５５】
当業者である医師または獣医は、必要とされる医薬組成物の治療有効量を容易に決定し、処方することができる。例えば、医師または獣医は、医薬組成物または化合物の用量を、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベルより低いレベルで開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加させることができる。「治療有効量」とは、所望の治療効果を引き出すのに十分な化合物の濃度を意味する。一般に、化合物の有効量は、被験体の体重、性別、年齢、および病歴によって異なることが理解されている。有効量に影響を与える他の因子としては、患者の状態の重症度、治療される障害、化合物の安定性、および、所望する場合は、本開示の化合物と共に投与される別の種類の治療薬が挙げられるが、これらに限定されない。より多い総用量は、薬剤の複数回投与によって送達することができる。有効性および投与量を決定する方法は当業者に公知である（参照により本明細書に組み込まれる、Ｉｓｓｅｌｂａｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １３  ｅｄ．，１８１４−１８８２）。
【０２５６】
一般に、本開示の組成物および方法において使用される活性化合物の適切な１日量は、治療効果を生じさせるのに有効な最も低い用量である化合物の量である。そのような有効量は、一般に上記の因子に依存する。
【０２５７】
所望する場合は、活性化合物の有効１日用量を、任意に単位剤形で、１、２、３、４、５、６またはそれ以上の分割用量として、１日を通して適切な間隔で別々に投与してもよい。本開示の特定の実施形態では、活性化合物は、１日に２回または３回投与され得る。好ましい実施形態では、活性化合物は１日１回投与される。
【０２５８】
この治療を受ける患者は、霊長動物、特にヒト、ならびにウマ、ウシ、ブタおよびヒツジなどの他の哺乳動物、ならびに家禽およびペット全般を含む、治療を必要とする任意の動物である。
【０２５９】
特定の実施形態では、本開示の化合物は、単独で使用されてもよく、または別の種類の治療薬と共同的に投与されてもよい。本明細書で使用される場合、「共同投与」の語句は、先に投与された治療薬が依然として体内で有効である間に第二の薬剤が投与されるような２つ以上の異なる治療薬の任意の投与形態を指す（例えばこの２つの薬剤は患者において同時に有効であり、これは２つの薬剤の相乗効果を含み得る）。例えば、異なる治療薬は、同じ製剤中または別々の製剤中で、同時にまたは連続的に投与することができる。特定の実施形態では、異なる治療薬は、互いに１時間以内、１２時間以内、２４時間以内、３６時間以内、４８時間以内、７２時間以内、または１週間以内に投与することができる  したがって、そのような治療を受ける個体は、異なる治療薬の複合効果から恩恵を受けることができる。
【０２６０】
特定の実施形態では、本開示の化合物と１つ以上の追加の治療薬（例えば１つ以上の追加の化学療法剤）との共同投与は、本開示の化合物（例えば式Ｉ、ＩＩ、もしくはＩＩＩの化合物）または１つ以上の追加の治療薬のそれぞれの個別の投与に比べて改善された効力を提供する。特定のそのような実施形態では、共同投与は相加効果を提供し、ここで、相加効果とは、本開示の化合物および１つ以上の追加の治療薬の個々の投与の効果のそれぞれの合計を指す。
【０２６１】
本開示は、本開示の組成物および方法における本開示の化合物の薬学的に許容される塩の使用を含む。本明細書で使用される「薬学的に許容される塩」という用語は、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、リン酸、ギ酸、酢酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、グリコール酸、サリチル酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、マロン酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、ナフタレン−２−スルホン酸、および他の酸を含む無機酸または有機酸から誘導される塩を含む。薬学的に許容される塩形態は、塩を構成する分子の比率が１：１ではない形態を含み得る。例えば、塩は、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物１分子当たり２つの塩酸分子のような、基剤１分子当たり２つ以上の無機酸または有機酸分子を含み得る。別の例として、塩は、酒石酸１分子当たり式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩの化合物２分子のような、基剤１分子当たり１つ未満の無機酸または有機酸分子を含み得る。
【０２６２】
さらなる実施形態では、本開示の企図される塩には、アルキル、ジアルキル、トリアルキルまたはテトラアルキルアンモニウム塩が含まれるが、これらに限定されない。特定の実施形態では、本開示の企図される塩としては、Ｌ−アルギニン、ベネタミン、ベンザチン、ベタイン、水酸化カルシウム、コリン、デアノール、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）エタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、リチウム、Ｌ−リジン、マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）モルホリン、ピペラジン、カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン、ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミン、および亜鉛塩が挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態では、本開示の企図される塩には、Ｎａ、Ｃａ、Ｋ、Ｍｇ、Ｚｎまたは他の金属塩が含まれるが、これらに限定されない。
【０２６３】
薬学的に許容される酸付加塩はまた、水、メタノール、エタノール、ジメチルホルムアミド等との様々な溶媒和物としても存在し得る。そのような溶媒和物の混合物も調製することができる。そのような溶媒和物の供給源は、結晶化の溶媒に由来し得るか、調製もしくは結晶化の溶媒に固有であり得るか、またはそのような溶媒に付随的であり得る。
【０２６４】
薬学的に許容される抗酸化剤の例としては、以下が挙げられる：（１）アスコルビン酸、システイン塩酸塩、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム等のような水溶性抗酸化剤；（２）パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロール等のような油溶性抗酸化剤；（３）クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸等のような金属キレート剤。
【０２６５】
５．例
例１：養子免疫療法とアルギナーゼ阻害剤の投与
癌の進行に対するアルギナーゼ阻害剤および養子免疫療法の効果を試験するために、マウスにＢ１６．Ｆ１０細胞を接種して腫瘍を発生させた。約１×１０６細胞をＣ５７．Ｂｌ／６マウスに移植した。次いで、マウスを非骨髄破壊的化学療法（シクロホスファミド２５０ｍｇ／ｋｇおよびフルダラビン５０ｍｇ／ｋｇ）で処置した。シクロホスファミドおよびフルダラビンを７日目に腹腔内注射によって投与した（図１Ａ、橙色の矢印）。Ｐｍｅｌ−１  ＣＤ８  Ｔ細胞（１ｘ１０６）を８日目に静脈内移入した（図１Ａ、青色の矢印）。養子免疫療法を受けているマウスに、８、９、１０日目に組換えヒトＩＬ−２（２００，０００ＵＩ）を１日２回、腹腔内注射によって投与した。アルギナーゼ阻害剤１００ｍｇ／ｋｇを１日２回投与した。図１Ｂは、養子Ｔ細胞療法のみを受けたマウスと比較した、Ｔ細胞療法とアルギナーゼ阻害剤の併用治療を受けたマウスにおける２５日間にわたる腫瘍体積を示す。単独で併用療法を受けたマウスの腫瘍体積は、経時的により緩やかな腫瘍進行を示した。生存曲線は図１Ｃに見られる。Ｐ値は０．０１３７であり、Ｍａｎｔｅｌ−Ｃｏｘ検定によって計算した。（１群当たりＮ＝９〜１０）。
【０２６６】
例２：アルギナーゼの阻害は腫瘍微小環境における骨髄細胞媒介免疫抑制を阻止する
腫瘍微小環境（ＴＭＥ）中の骨髄細胞は、肺癌、結腸直腸癌、および乳癌を含む複数の種類の癌にわたる予後不良に関連する。腫瘍浸潤骨髄細胞は、複数の機構を介して免疫抑制ＴＭＥに寄与し、抗腫瘍免疫を抑制し、免疫療法を妨げる。骨髄細胞媒介免疫抑制を阻止することを目指す薬剤が現在前臨床および臨床開発中であるが、腫瘍関連骨髄細胞を特異的に対象とする承認された療法は存在しない。
【０２６７】
腫瘍浸潤骨髄細胞の主要な集団には、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）、骨髄由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）、および顆粒球が含まれる。これらの免疫抑制細胞すべてに共通する特徴は、それらの酵素アルギナーゼ１（Ａｒｇ１）の発現である。Ａｒｇ１は、アミノ酸Ｌ−アルギニンの加水分解を触媒して尿素とＬ−オルニチンを生成し、それによって細胞外Ｌ−アルギニンを枯渇させる。Ｔ細胞は、Ｌ−アルギニンに対して栄養要求性であり、エフェクター細胞のＴ細胞抗原受容体（ＴＣＲ）依存性活性化に続く急速で連続的な増殖のためにこのアミノ酸を必要とする。いくつかの炎症状況では、骨髄媒介アルギニン枯渇は、過剰なＴ細胞増殖を抑制するために不可欠である。したがって、癌の状況でＡｒｇ１活性を遮断することは、Ｌ−アルギニン代謝のバランスをリンパ球増殖に有利になるようにシフトさせ得る。Ａｒｇ１の薬理学的阻害は、癌治療のための説得力のある治療戦略である。
【０２６８】
Ｔ細胞共培養物において、アルギナーゼ阻害は骨髄細胞媒介免疫抑制を逆転させ、Ｔ細胞増殖を回復させた。マウス同系腫瘍モデルにおいて、アルギナーゼ阻害剤は、腫瘍免疫ランドスケープを炎症誘発性ＴＭＥの方へシフトさせ、腫瘍増殖の阻害をもたらした。アルギナーゼ阻害剤は、ゲムシタビン、抗プログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）抗体、養子Ｔ細胞療法、および養子ＮＫ細胞療法を含む他の抗癌剤の効果を増大させて、腫瘍増殖を阻害した。Ａｒｇ１を標的とすることの治療的可能性は、腫瘍中の多数のＡｒｇ１発現骨髄細胞および血漿中の大量のＡｒｇ１を明らかにした、癌患者試料のスクリーニングでさらに裏付けられた。
【０２６９】
方法
化合物．アルギナーゼ阻害剤（参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０１７／０７５３６３号、化合物１３）をＣａｌｉｔｈｅｒａ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓにおいて合成し、生化学的アッセイ用には１００％ＤＭＳＯに、細胞アッセイおよびインビボ試験用にはＭｉｌｌｉ−Ｑ水（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）に溶解した。アルギナーゼ阻害剤調製物の内毒素汚染は観察されなかった。
【０２７０】
フローサイトメトリ抗体．以下の抗マウス抗体をフローサイトメトリに使用した：ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）からのＣＤ４５−Ｖ４５０（３０Ｆ１１）、ＣＤ４５−ＢＶ５１０（３０Ｆ１１）、ＣＤ４５−ＢＶ６０５（３０Ｆ１１）、ＣＤ８−ＢＶ５１０（５３−６．７）、ＣＤ２５−ＢＶ４２１（ＰＣ６１）、ＣＤ２５−ＢＶ６０５（ＰＣ６１）；ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）からのＣＤ３−ＰｅｒＣＰ−ｅＦｌｕｏｒ７１０（１７Ａ２）、ＣＤ４５−ＰＥ−Ｃｙ７（３０Ｆ１１）、ＮＫｐ４６−ｅＦｌｕｏｒ６６０（２９Ａ１．４）、ＣＤ１１ｂ−ＰＥ−Ｃｙ７（Ｍ１／７０）、ＣＤ６８−ＰＥ−Ｃｙ７（ＦＡ−１１）；ＣＤ３−ＰＥ（１７Ａ２）；ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）からのＣＤ６８−ＢＶ４２１（ＦＡ−１１）、ＣＤ２０６−ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ４８８（Ｃ０６８Ｃ２）、ＣＤ１１ｂ−ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５（Ｍ１／７０）、ＣＤ１１ｂ−ＢＶ６０５（Ｍ１／７０）；Ｓｔｅｍｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，Ｃａｎａｄａ）からのＣＤ１１ｂ−ＰＥ（Ｍ１／７０）；およびＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）からのＡｒｇ１−ＡＰＣ（ポリクローナル）。以下の抗ヒト抗体をフローサイトメトリに使用した：ＢＤ  ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓからのＣＤ６６ｂ−ＰＥ（Ｇ１０Ｆ５）、ＣＤ４−ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５（ＳＫ３）、ＣＤ８−ＡＰＣ（ＲＰＡ−Ｔ８）；およびｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅからのＣＤ１５−ｅＦ４５０（ＨＩ９８）。
【０２７１】
組換えアルギナーゼ活性アッセイ。組換え完全長ヒトＡｒｇ１は、Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｆａｒｍｉｎｇｄａｌｅ，ＮＹ）から購入した。アミノ酸２３〜２５４を含む組換えヒトアルギナーゼ２（Ａｒｇ２）は、ＵＳ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ（Ｓａｌｅｍ，ＭＡ）から購入した。２ｎＭ  Ａｒｇ１または４ｎＭ  Ａｒｇ２を使用する活性アッセイは、反応緩衝液（１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、２．７ｍＭ  ＫＣｌ、８ｍＭ  Ｎａ２ＨＰＯ４、２ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４、０．００５％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、０．５ｍＭ  ＤＴＴ、０．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．１ｍＭ  ＣａＣｌ２、および１６０μＭ  Ｌ−アルギニン、ｐＨ７．４）中３７℃で３０分間、用量漸増のアルギナーゼ阻害剤を用いて実施した。活性は、ＱｕａｎｔｉＣｈｒｏｍ尿素アッセイキット（ＢｉｏＡｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｈａｙｗａｒｄ，ＣＡ）を使用する分光光度アッセイ、またはＳＣＩＥＸ  ＡＰＩ４０００質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）を使用する１３Ｃ（６）−Ｌ−アルギニンからの１３Ｃ（５）−Ｌ−オルニチンの生成の定量化によって決定した。生成された尿素または１３Ｃ（５）−Ｌ−オルニチンピーク面積をプロットし、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェア（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して４パラメータ方程式に当てはめ、ＩＣ５０値を決定した。
【０２７２】
細胞溶解物中の天然アルギナーゼ活性。ヒト顆粒球または赤血球を、それぞれ汎顆粒球ネガティブ選択キット（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）またはＦｉｃｏｌｌ層での遠心分離を用いて健常ドナーの末梢血から精製した。凍結ヒト肝細胞はＸｅｎｏＴｅｃｈ（Ｋａｎｓａｓ  Ｃｉｔｙ，ＫＳ）から購入した。溶解物は、マイクロチップ超音波処理とそれに続く遠心分離による清澄化によって調製した。腎細胞癌（ＲＣＣ）患者由来の血漿試料は、Ｃｏｎｖｅｒｓａｎｔ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ（Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬ）から購入した全血のＦｉｃｏｌｌ遠心分離によって得た。顆粒球溶解物を、ビシンコニン酸／ＢＣＡタンパク質アッセイ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）によって決定されたように、反応緩衝液中０．０９４ｍｇ／ｍＬで検定した。赤血球または肝細胞溶解物を、３７℃で３０分間に１０〜１５％の１３Ｃ（６）−Ｌ−アルギニンを消費することが実験的に決定された濃度で検定した。アルギナーゼ活性は、用量漸増のアルギナーゼ阻害剤の存在下で１３Ｃ（６）−Ｌ−アルギニンからの１３Ｃ（５）−Ｌ−オルニチンの生成の定量化によって、溶解物および血漿中で決定した。
【０２７３】
無傷の細胞における天然アルギナーゼ活性。細胞内アルギナーゼ活性を、アルギナーゼ発現ＨｅｐＧ２およびＫ−５６２細胞株について以下のように決定した。９６ウェルプレートの２つ組のウェルに、ＨｅｐＧ２細胞をアルギナーゼ阻害剤での処理の１日前にウェル当たり１００，０００細胞で播種し、Ｋ−５６２細胞をアルギナーゼ阻害剤処理の当日にウェル当たり２００，０００細胞で播種した。細胞を、５％の熱不活性化および透析されたＦＢＳ、抗生物質／抗真菌剤、１０ｍＭ  Ｌ−アルギニン、０．２７ｍＭ  Ｌ−リジン、および２ｍＭ  Ｌ−グルタミンを含有するＳＩＬＡＣ  ＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ／Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中で、用量漸増のアルギナーゼ阻害剤で処理した。２４時間後に培地を回収し、生成された尿素をＱｕａｎｔｉＣｈｒｏｍ尿素アッセイキットで測定した。細胞を含有しない培地を含むウェルをバックグラウンド対照として使用した。初代肝細胞におけるＡｒｇ１へのアルギナーゼ阻害剤の作用を評価するために、凍結ヒト肝細胞（Ｘｅｎｏ  Ｔｅｃｈ）を解凍し、コラーゲン被覆ウェルに４時間接着させ、次いで１０ｍＭ  Ｌ−オルニチンを含有し、Ｌ−アルギニンを含まず、用量漸増のアルギナーゼ阻害剤を含有するＳＩＬＡＣ−ＲＰＭＩ中で４８時間インキュベートし、その時点で培地を尿素について分析した。
【０２７４】
一酸化窒素（ＮＯ）シンターゼ（ＮＯＳ）活性アッセイ。３つのＮＯＳアイソフォーム、組換えマウス誘導型ＮＯＳ、組換えウシ内皮型ＮＯＳ、および天然ラット小脳神経型ＮＯＳに対する５０μＭアルギナーゼ阻害剤の活性を、Ｅｕｒｏｆｉｎｓ／Ｃｅｒｅｐ  Ｐａｎｌａｂｓ（Ｔａｉｐｅｉ，Ｔａｉｗａｎ）で放射標識Ｌ−シトルリンの定量またはニトライトの分光光度測定のいずれかによって決定した。
【０２７５】
細胞培養。特に指示がない限り、すべての細胞培養試薬はＣｏｒｎｉｎｇ（Ｃｏｒｎｉｎｇ，ＮＹ）から購入した。ヒト細胞株、ＨｅｐＧ２およびＫ−５６２、ならびにマウス細胞株、ＬＬＣ１（ＬＬＣ）、Ｂ１６−Ｆ１０（Ｂ１６）、ＣＴ２６．ＷＴ（ＣＴ２６）、および４Ｔ１は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から入手した。ＨｅｐＧ２、Ｋ−５６２、ＣＴ２６、および４Ｔ１はＲＰＭＩ−１６４０（Ｃｏｒｎｉｎｇ）中で維持した。Ｂ１６はＤＭＥＭ（Ｃｏｒｎｉｎｇ）中で維持した。ＬＬＣはＤＭＥＭ（ＡＴＣＣ）中で維持した。すべての培地に、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、さらにペニシリン、ストレプトマイシン、およびアムホテリシンを添加した。細胞株を３７℃にて加湿５％ＣＯ２雰囲気中で増殖させた。
【０２７６】
細胞毒性アッセイ。細胞を、十分に補充されたＲＰＭＩ−１６４０培地に播種し、３つ組のウェルにおいて用量漸増のアルギナーゼ阻害剤で処理し、７２時間インキュベートした。細胞毒性は、製造者の説明書（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）に従ってＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ試薬を添加し、続いてＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓプレートリーダ（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）で蛍光定量化することによって検定した。
【０２７７】
Ｔ細胞およびＮＫ細胞増殖アッセイ。Ｔ細胞またはＮＫ細胞を、Ｓｔｅｍｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓからの適切な細胞型および種についてのネガティブ選択キットを使用して、健常ドナーのヒト血液またはマウス脾細胞から精製した。単離されたＴ細胞またはＮＫ細胞にカルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）を負荷し、最小５０ＭのＬ−アルギニン（ＮＫ細胞）または１００μＭのＬ−アルギニン（Ｔ細胞）のいずれかを含有する完全増殖培地中で７２〜９６時間刺激した。Ｔ細胞刺激のために、１０μｇ／ｍＬの抗ＣＤ３（ヒトクローンＵＣＨＴ１またはＯＫＴ３；マウスクローン１４５−２Ｃ１１）の溶液を使用して９６ウェルプレートのウェルを被覆し、次いでＴ細胞を２μｇ／ｍＬの可溶性抗ＣＤ２８（ヒトクローンＣＤ２８．２；マウスクローン３７．５１）の存在下に固定化抗ＣＤ３上で刺激した。ＮＫ細胞を組換えＩＬ−２で刺激した。増殖を、フローサイトメトリ（Ｇｕａｖａフローサイトメータ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ、またはＡｔｔｕｎｅ  ＮｘＴフローサイトメータ、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）によってＣＦＳＥ希釈を分析することによって定量化した。
【０２７８】
Ｔ細胞／骨髄細胞共培養アッセイ。汎顆粒球ネガティブ選択キット（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて健常ドナー末梢血から顆粒球を精製し、１０％活性炭除去ＦＢＳ、抗生物質／抗真菌剤、０．２７ｍＭ  Ｌ−リジン、２０μＭ  ＭｎＣｌ２、１００μＭ  Ｌ−アルギニン、ｐＨ７．４、および用量漸増のアルギナーゼ阻害剤を含有するＳＩＬＡＣ−ＲＰＭＩ中でインキュベートした。顆粒球を３７℃で４８時間インキュベートし、その時間中に、ＣＤ６６ｂの表面発現および散乱特性によって決定されるようにそれらは自発的に活性化する。汎Ｔ細胞単離キット（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて同じドナーから単離したＴ細胞にＣＦＳＥを負荷し、老化した顆粒球の存在下で固定化抗ＣＤ３および可溶性抗ＣＤ２８をプレーティングした。示されている顆粒球対Ｔ細胞のいくつかの比率で、または４Ｔ細胞対１顆粒球の固定比率で、細胞を共培養した。共培養物を３〜４日間インキュベートし、その時点で培地を質量分析によってＬ−アルギニンおよびＬ−オルニチンについて分析し、Ｔ細胞増殖をフローサイトメトリによって測定した。癌患者由来の顆粒球ＭＤＳＣ（Ｇ−ＭＤＳＣ）または顆粒球を、Ｃｏｎｖｅｒｓａｎｔ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓから購入した全血から単離した。Ｇ−ＭＤＳＣを、ＣＤ６６ｂ＋細胞についてのポジティブ選択によってフィコール勾配のＰＢＭＣ層から精製した。顆粒球を、Ｈｅｔａｓｅｐ（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いてフィコール勾配のＲＢＣ層から精製した。Ｇ−ＭＤＳＣまたは顆粒球を、１００μＭのＬ−アルギニンを含有する共培養培地中で４８時間インキュベートし、その時点で細胞を除去し、Ｇ−ＭＤＳＣまたは顆粒球馴化培地を、固定化抗ＣＤ３／可溶性抗ＣＤ２８上で健常ドナーＣＦＳＥ負荷Ｔ細胞を３〜４日間インキュベートするために使用した。製造者の指示（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に従ってＣｙｔｏｍｅｔｒｉｃ  Ｂｅａｄ  Ａｒｒａｙキットを使用して、Ｔ細胞共培養アッセイからの培地中でサイトカインを定量した。
【０２７９】
マウス腫瘍試験。雌性野生型Ｃ５７ＢＬ／６およびＢａｌｂ／ｃマウス（５〜６週齢）をＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｈｏｌｌｉｓｔｅｒ，ＣＡ）から購入した。重症複合免疫不全（ＳＣＩＤ、Ｂ６．ＣＢ１７−ＰｒｋｄｃＳＣＩＤ／ＳｚＪ）およびＰｍｅｌ−１  ＴＣＲトランスジェニック（Ｂ６．Ｃｇ−Ｔｈｙ１ａ／Ｃｙ  Ｔｇ（ＴｃｒａＴｃｒｂ）８Ｒｅｓｔ／Ｊ）マウス（５〜６週齢）をＴｈｅ  Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）から購入した。すべてのマウスを施設内動物管理使用委員会のガイドラインに従って収容し、処置した。４Ｔ１腫瘍モデルについては、１×１０５細胞を乳房脂肪体に同所性に注射した；他のすべての腫瘍モデルについては、１×１０６細胞を右側腹部に皮下（ｓ．ｃ．）注射した。すべての試験について、試験１日目（腫瘍移植の１日後）から開始して、アルギナーゼ阻害剤を１００ｍｇ／ｋｇで１日２回経口胃管栄養法によって投与した。対照群には胃管栄養法によって１日２回ビヒクル（水）を投与した。デジタルノギスによって測定した腫瘍体積（長さ×幅×幅／２）および体重を週に３回記録した。腫瘍が壊死したかまたは体積が２０００ｍｍ３に達したときに動物を安楽死させた。ＣＴ２６モデルについては、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（５ｍｇ／ｋｇ、クローン１０Ｆ．９Ｇ２、ＢｉｏＸＣｅｌｌ，Ｗｅｓｔ  Ｌｅｂａｎｏｎ，ＮＨ）を５、７、９、１１、１３および１５日目に腹腔内（ｉ．ｐ．）注射した。ゲムシタビン（Ｓｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍ，Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＴＸ）を、ＣＴ２６モデルでは１０日目と１６日目に５０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与し、ＬＬＣモデルでは６日目と１０日目に６０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与した。ＣＤ８＋細胞枯渇のために、−１、０、＋５、および＋１０日目に抗ＣＤ８抗体（２５ｍｇ／ｋｇ、クローン２．４３、ＢｉｏＸＣｅｌｌ）をマウスに腹腔内注射した。ＮＫ細胞枯渇のために、抗ＣＤ８と同じスケジュールで、ＬＬＣおよびＢ１６モデルでは抗ＮＫ１．１抗体（２５ｍｇ／ｋｇ、クローンＰＫ１３６、ＢｉｏＸＣｅｌｌ）、ＣＴ２６モデルでは抗Ａｓｉａｌｏ  ＧＭ１血清（２０μＬ、Ｗａｋｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＶＡ）をマウスに腹腔内注射した。
【０２８０】
条件付きＡｒｇ１欠失マウス。以前に記述されているように、Ａｒｇ１フロックスマウスをＴｉｅ２−Ｃｒｅ欠失系統（Ｔｈｅ  Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）と交配させた。実験用マウスは、Ａｒｇ１Ｆｌｏｘ／Ｆｌｏｘ；Ｔｉｅ２−Ｃｒｅ＋の雄性を、野生型対照としての役割を果たすＣｒｅ陰性同腹仔であるＡｒｇ１Ｆｌｏｘ／Ｆｌｏｘ；Ｔｉｅ２−Ｃｒｅ−の雌性と交配させることによって作製した。マウスは、Ｓｔ．Ｊｕｄｅ  Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’ｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｈｏｓｐｉｔａｌの施設内動物管理使用委員会によって承認されたプロトコルに従って収容し、使用した。ＬＬＣ細胞（マウス当たり１×１０６）を側腹部領域に皮下注射した。マウスに、１００ｍｇ／ｋｇのアルギナーゼ阻害剤または等容量のビヒクル対照（水）を１２時間ごとに１４日間、強制経口投与した。マウスを安楽死させ、腫瘍を切除し、体重を記録した。Ａｒｇ１の骨髄欠失は、すべての動物について、ＩＬ−４刺激骨髄由来マクロファージのウェスタンブロット法によって確認された。
【０２８１】
養子Ｔ細胞移入試験。活性化されたｇｐ１００特異的ＣＤ８＋（Ｐｍｅｌ−１）Ｔ細胞を、Ｙａ  ｅｔ  ａｌ．に記載されているように作製した。簡単に述べると、Ｐｍｅｌ−１  ＴＣＲトランスジェニックマウスからの脾細胞を単離し、１μＭのマウスｇｐ１００２５−３３（Ａｎａｓｐｅｃ，Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ）でパルスし、６０ＩＵ／ｍＬの組換えヒトＩＬ−２（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ，Ｒｏｃｋｙ  Ｈｉｌｌ，ＮＪ）の存在下で１週間拡大増殖させた。フローサイトメトリで測定すると、細胞は９０％超がＣＤ８＋Ｖβ１３＋Ｔ細胞であった。Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＢ１６腫瘍細胞を皮下接種した。アルギナーゼ阻害剤を、腫瘍移植の１日後から開始して、１００ｍｇ／ｋｇで１日２回経口胃管栄養法によって投与した。７日目に、２５０ｍｇ／ｋｇのシクロホスファミドおよび５０ｍｇ／ｋｇのフルダラビンの腹腔内投与の非骨髄破壊的化学療法レジメンによってリンパ球減少症を誘発した。化学療法レジメンをすべての群に投与した。９日目に、マウスに１×１０６個のＰｍｅｌ−１  Ｔ細胞を静脈内（ｉ．ｖ．）投与した。Ｐｍｅｌ−１  Ｔ細胞を投与したマウスに、Ｔ細胞移入の日から開始して３日間１日２回、組換えヒトＩＬ−２（２００，０００ＩＵ／投与）も腹腔内投与した。
【０２８２】
養子ＮＫ細胞移植試験。Ｂａｌｂ／ｃマウスに１×１０５個のＣＴ２６細胞を静脈内接種した。１×１０６個のＮＫ細胞（注射の前日にＢａｌｂ／ｃ脾臓から単離し、組換えＩＬ−２およびＩＬ−１５と共に１８時間インキュベートした）を腫瘍接種と同じ日に移入した。注入したＮＫ細胞は、フローサイトメトリによってＣＤ２５＋および８０〜９０％純粋であり、０．４％未満のＴ細胞であるとプロファイルされた。マウスをビヒクルまたはアルギナーゼ阻害剤で１４日間処置した後、肺をフェケテ溶液中に採取し、腫瘍結節を視覚的に数えた。
【０２８３】
腫瘍解離およびフローサイトメトリ。ビヒクルまたはアルギナーゼ阻害剤（１００ｍｇ／ｋｇ  ＢＩＤ）で処置した腫瘍担持マウスを、試験１４日目（ＣＴ２６およびＬＬＣ）、９日目（Ｂ１６）、または１０日目（４Ｔ１）にフローサイトメトリ分析のために犠死させた。摘出した腫瘍を、氷上で５％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ−１６４０に入れ、かみそりの刃で細かく刻み、製造者の指示に従ってＧｅｎｔｌｅＭＡＣＳ  Ｏｃｔｏ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｏｒ  Ｗｉｔｈ  Ｈｅａｔ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）で、マウス腫瘍解離酵素（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ，Ｂｅｒｇｉｓｃｈ  Ｇｌａｄｂａｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を添加したＲＰＭＩ−１６４０中で解離させた。解離した腫瘍を７０μｍのナイロンメッシュを通して濾し、２％ＦＢＳを含有する冷ＰＢＳで洗浄し、抗ＣＤ１６／ＣＤ３２（Ｆｃブロック抗体、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）でブロックし、細胞表面抗原について染色した。Ｂ１６および４Ｔ１腫瘍については、洗浄した解離腫瘍細胞をＤｅａｄ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｍｏｖａｌ  ＭｉｃｒｏＢｅａｄｓ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）と共にインキュベートし、染色の前に磁気カラムにかけた。細胞内染色のために、細胞を固定し、細胞質または核抗原についてそれぞれＲ＆Ｄ  ＳｙｓｔｅｍｓまたはｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅから購入した緩衝液を用いて透過処理した。すべての腫瘍フロー実験をＡｔｔｕｎｅ  ＮｘＴフローサイトメータで取得し、ゲーティングのための蛍光マイナス１コントロールおよび補正マトリックスを設定するための単染色ＯｎｅＣｏｍｐ  ｅＢｅａｄｓ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を用いて、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアバージョン１０（Ａｓｈｌａｎｄ，ＯＲ）で解析した。
【０２８４】
遺伝子発現分析．ビヒクルまたはアルギナーゼ阻害剤（１日２回１００ｍｇ／ｋｇ）で１３日間処置したマウス（１群当たりＮ＝６）からのＬＬＣ腫瘍を収集し、中性緩衝ホルマリン中に一晩入れ、７０％エタノール中に移し、パラフィン包埋のためにＣｏｒｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（Ｈａｙｗａｒｄ，ＣＡ）に輸送した。ＲＮＡを遺伝子発現分析のために抽出し、転写物をＮａｎｏＳｔｒｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡ）によって定量化した。
【０２８５】
サイトカイン分析．ビヒクルまたはアルギナーゼ阻害剤（１日２回２００ｍｇ／ｋｇ）で１４日間処置したマウス（１群当たりＮ＝５）からのＬＬＣ腫瘍を収集し、液体窒素中で急速冷凍した。腫瘍を２ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４およびプロテアーゼ阻害剤を含有する５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液中でホモジナイズした。ホモジネートを遠心分離し、上清を回収して再凍結した。上清中のサイトカインをＭｙｒｉａｄ  Ｒｕｌｅｓ  Ｂａｓｅｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ａｕｓｔｉｎ，ＴＸ）によって定量した。
【０２８６】
免疫組織化学（ＩＨＣ）．自動ＩＨＣを、ホルマリン固定し、パラフィン包埋した（ＦＦＰＥ）試料および腫瘍組織マイクロアレイ（ＴＭＡ）に関して、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＸＴ染色プラットフォーム（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ／Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）を用いてＩｎｄｉｖｕｍｅｄ（Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）によって実施した。Ａｂｃａｍ／Ｅｐｉｔｏｍｉｃｓ（Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＣＡ）からのウサギ抗ヒトＡｒｇ１モノクローナル抗体クローンＥＰＲ６６７２（Ｂ）を、肝細胞癌（ＨＣＣ）の８つの異なる症例および陽性対照組織として１つの正常肝組織を用いて検証した；正常扁桃組織およびアイソタイプ対照抗体を陰性対照として使用した。ＩＨＣを１１の異なる腫瘍組織型で実施した：非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ、扁平上皮癌および腺癌）、乳癌（トリプルネガティブおよび非トリプルネガティブ）、胃腺癌、結腸直腸癌（ＣＲＣ）、前立腺腺癌、膵臓癌、卵巣癌、膀胱癌、およびＲＣＣ。Ａｒｇ１＋細胞／ｍｍ２をデジタル組織病理学（Ｏｒａｃｌｅ  ＢＩＯ）によって定量した。
【０２８７】
マルチパラメータ免疫蛍光法。肺扁平上皮癌、ＣＲＣ、ＲＣＣ、食道癌、および頭頸部癌を有する患者からの試料を含む腫瘍ＴＭＡをＵＳ  ＢｉｏｍａｘまたはＵＳ  Ｂｉｏｌａｂｓ（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）から購入した。Ａｒｇ１、ＣＤ１５、およびＣＤ６８を含むマーカーについてＭｕｌｔｉＯｍｙｘプラットフォームを使用するマルチパラメータ免疫蛍光法を実施し、ＧＥ  Ｃｌａｒｉｅｎｔ／ＮｅｏＧｅｎｏｍｉｃｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ａｌｉｓｏ  Ｖｉｅｊｏ，ＣＡ）によって分析した。
【０２８８】
血漿Ａｒｇ１およびＬ−アルギニン。血漿Ａｒｇ１タンパク質を、健常志願者ならびに頭頸部癌（Ｎ＝５）、ＨＣＣ（Ｎ＝３）、中皮腫（Ｎ＝３）、ＣＲＣ（Ｎ＝３）、Ｔ細胞前リンパ球性白血病（Ｎ＝２）、黒色腫（Ｎ＝２）、膀胱癌（Ｎ＝４）、ＮＳＣＬＣ（Ｎ＝１１）、小細胞肺癌（Ｎ＝１７）、未定義の肺癌（Ｎ＝６）、急性骨髄性白血病（Ｎ＝９）、ＲＣＣ（Ｎ＝９）、および乳癌（Ｎ＝２）を有する患者からの試料における酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ、ＢｉｏＶｅｎｄｏｒ，Ａｓｈｅｖｉｌｌｅ，ＮＣ）によって測定した。血漿Ｌ−アルギニンを、中皮腫（Ｎ＝３）、ＣＲＣ（Ｎ＝３）、ＮＳＣＬＣ（Ｎ＝９）、小細胞肺癌（Ｎ＝３）、未定義の肺癌（Ｎ＝３）、頭頸部癌（Ｎ＝３）、およびＴ細胞前リンパ球性白血病（Ｎ＝２）を有する患者からの試料における質量分析によって測定した。すべての癌患者試料はＣｏｎｖｅｒｓａｎｔ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓから購入した。
【０２８９】
結果
アルギナーゼ阻害剤を、様々な供給源からのアルギナーゼ酵素を阻害する能力について生化学的アッセイおよび細胞アッセイにおいて試験した。アルギナーゼ阻害剤は、組換えヒトＡｒｇ１（ＩＣ５０＝９８ｎＭ）および関連酵素Ａｒｇ２（ＩＣ５０＝２７４ｎＭ）を阻害した（表１）。Ａｒｇ２は、同一の化学反応を触媒し、Ａｒｇ１と６０％の配列同一性を共有するが、その組織分布および細胞内局在が異なる。同じくＬ−アルギニンを代謝し、炎症に関与する第二の酵素クラスはＮＯＳであり、これはＬ−シトルリンおよび生物学的メディエータＮＯを生成する。アルギナーゼ阻害剤を、３つのＮＯＳアイソフォーム、内皮ＮＯＳ、ニューロンＮＯＳ、および誘導性ＮＯＳを阻害する能力について試験した。５０μＭアルギナーゼ阻害剤の存在下では、ＮＯＳ酵素の阻害は観察されなかった（表１）。これらの結果は、アルギナーゼ阻害剤が、ＮＯＳに対して活性を有さないアルギナーゼの強力な阻害剤であることを示す。次に、アルギナーゼ阻害剤を、ヒト顆粒球、末梢血赤血球、および初代肝細胞の溶解物中の天然Ａｒｇ１酵素を阻害する能力について試験した。アルギナーゼ阻害剤は、溶解物中の天然アルギナーゼを、組換えアルギナーゼについて観察されたものと同様の効力で阻害することが見出された（表１）。さらに、Ａｒｇ１タンパク質および活性は、健常ドナーと比較してＲＣＣ患者の血漿中で上昇することが報告されており、アルギナーゼ活性のアルギナーゼ阻害剤による阻害が、ＲＣＣ患者から単離された血漿中で観察された（表１）。
【０２９０】
【表６】
2020502259.tif 000071
【０２９１】
細胞溶解物または患者血漿中の精製組換えアルギナーゼまたは天然アルギナーゼのアルギナーゼ阻害剤活性についてのナノモルでの平均ＩＣ５０値。標準偏差を括弧内に示す。組換えＡｒｇ１アッセイ（Ｎ＝３）を、１６０μＭのＬ−アルギニンの存在下で２つ組のウェルにおいて実施した。組換えＡｒｇ２アッセイ（Ｎ＝２）を、２０ｍＭのＬ−アルギニンを用いて３つ組のウェルで実施した。ヒト顆粒球溶解物（Ｎ＝３）、ヒト赤血球溶解物（Ｎ＝１）、ヒト肝細胞溶解物（Ｎ＝４）、および癌患者血漿（Ｎ＝５）を使用したアルギナーゼ活性アッセイを、１６０μＭのＬ−アルギニンを用いて２つ組のウェルで実施した。精製ＮＯＳ酵素活性を５０μＭアルギナーゼ阻害剤の存在下で検定し、これは３つのＮＯＳアイソフォームに対して阻害活性を示さなかった。Ｎ／Ａ＝該当なし。
【０２９２】
顆粒球性Ａｒｇ１は、エキソサイトーシスされるまでは不活性であるが、活性型Ａｒｇ１は、肝細胞を含む他の細胞型の細胞質に局在する。次に、アルギナーゼ阻害剤を無傷の細胞中の内因性アルギナーゼを阻害する能力について試験した。アルギナーゼ阻害剤は、肝細胞癌（ＨＣＣ）細胞株ＨｅｐＧ２、慢性骨髄性白血病細胞株Ｋ−５６２、および初代ヒト肝細胞において細胞内アルギナーゼに対して低い効力を示した（表２）。無傷の細胞におけるアルギナーゼに対するアルギナーゼ阻害剤の低い効力は、細胞膜を横切るアルギナーゼ阻害剤の非効率的な浸透に起因する可能性が高い。これらの結果は、アルギナーゼ阻害剤が細胞外アルギナーゼの強力で特異的な阻害剤であることを示す。
【０２９３】
【表７】
2020502259.tif 000072
【０２９４】
無傷の細胞におけるアルギナーゼ活性のアルギナーゼ阻害剤による阻害についてのマイクロモルでの平均ＩＣ５０値。標準偏差を括弧内に示す。ＨｅｐＧ２（Ｎ＝３）およびＫ５６２（Ｎ＝２）細胞株を、１０ｍＭのＬ−アルギニンの存在下で２つ組のウェルにプレーティングした。初代ヒト肝細胞（Ｎ＝１）については、１０ｍＭのＬ−オルニチンを含み、Ｌ−アルギニンを含まない培地の存在下で、アルギナーゼ活性を２つ組のウェルで測定した。アルギナーゼ活性は、２４時間後の培地中の尿素産生として測定した。
【０２９５】
アルギナーゼ阻害剤が免疫抑制性アルギナーゼ発現骨髄細胞の背景でリンパ球増殖を回復させることができるかどうかを判定するために、リンパ球が増殖するために外因性Ｌ−アルギニンを必要とすることを最初に確認した。培地中のＬ−アルギニンの存在下または非存在下で、精製Ｔ細胞またはＮＫ細胞をそれぞれ抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８またはＩＬ−２で刺激した。ヒトおよびマウスのＴ細胞（図２Ａ、左）およびＮＫ細胞（図２Ａ、右）の増殖は、予想されたように、Ｌ−アルギニンを含有する培地中でのみ起こった。
【０２９６】
アルギナーゼ活性が骨髄細胞媒介のＴ細胞増殖抑制に必要であるかどうかを判定するために、アルギナーゼ阻害剤の存在下または非存在下で、Ｔ細胞増殖をヒト骨髄細胞との共培養において検定した。顆粒球は、末梢血から創傷治癒、感染、およびＴＭＥの部位に動員される豊富な骨髄細胞である。Ａｒｇ１は細胞質顆粒中に貯蔵され、インビトロで自発的に起こる活性化の際に、顆粒球は活性Ａｒｇ１を細胞外環境に放出する。健常ドナー由来の精製ヒト顆粒球は、培地からＬ−アルギニンを消費した（図２Ｂ）。活性化顆粒球を自己由来Ｔ細胞と共培養した場合、Ｔ細胞増殖が阻害された（図２Ｃ）。アルギナーゼ阻害剤の添加は、培地からのＬ−アルギニンの枯渇をブロックし（図２Ｄ、左）、Ｔ細胞増殖を、顆粒球なしでのＴ細胞について観察された増殖の９０％まで回復させた（図２Ｄ、右）。これらの結果は、Ａｒｇ１によるＬ−アルギニン枯渇がインビトロでのＴ細胞増殖の顆粒球媒介抑制に必要であること、およびアルギナーゼ阻害剤がこの免疫抑制を逆転させることを示す。
【０２９７】
次に、アルギナーゼ阻害剤が癌患者由来の骨髄細胞によって与えられるＴ細胞抑制をブロックできるかどうかを判定するために試験した。肺癌患者の末梢血から精製したＧ−ＭＤＳＣ、または頭頸部癌患者から精製した顆粒球を４８時間培養し、次いで馴化培地をＴ細胞増殖アッセイに使用した。個々の患者から入手可能な試料の量が限られているため、健常ドナーからのＴ細胞を癌患者のドナーのＴ細胞の代わりに使用した。癌患者由来のＧ−ＭＤＳＣまたは顆粒球は、培地中のＬ−アルギニンの量を減少させ、アルギニン枯渇はアルギナーゼ阻害剤によってブロックされた（図２Ｅ、左および図２Ｅ、左）。Ｔ細胞増殖は、Ｇ−ＭＤＳＣまたは顆粒球によって馴化した培地において阻害され、増殖は、アルギナーゼ阻害剤の添加によってそれぞれ対照レベルの９９％または７９％に回復した（図２Ｅ、右および図２Ｅ、右）。アルギナーゼ阻害剤はまた、Ｔ細胞炎症性サイトカインであるインターフェロンγおよびグランザイムＢの培地への分泌も回復させた（図２Ｇ）。合わせると、これらのデータは、アルギナーゼ阻害剤によるアルギナーゼの阻害が骨髄細胞媒介免疫抑制をブロックし、Ｔ細胞増殖およびサイトカイン分泌を救済することを実証する。
【０２９８】
アルギナーゼ阻害剤によるアルギナーゼ阻害を癌のマウスモデルにおける抗腫瘍効果について調べることができるかどうかを判定するために、薬物動態および薬力学試験を腫瘍担持マウスにおいて実施した。アルギナーゼ阻害剤の単回投与または５日間のＢＩＤ投与後に、用量依存的なアルギナーゼ阻害剤の曝露が腫瘍および血漿の両方で観察された（図３Ａおよび図３Ｂ、上段）。腫瘍担持マウスにおけるアルギナーゼ阻害剤の経口投与は、腫瘍および血漿中のＬ−アルギニンの量も上昇させ、アルギナーゼ阻害剤のオンターゲット薬力学的作用を示した（図３Ａおよび図３Ｂ、下段）。重要な点として、アルギナーゼ阻害剤は、２３日間１日２回１００ｍｇ／ｋｇの用量で十分に耐容され、有意な臨床所見または体重への影響を伴わなかった（図３Ｃ）。
【０２９９】
アルギナーゼ阻害剤を、癌の複数の同系マウスモデルにおいて試験した。アルギナーゼ阻害剤によるアルギナーゼの遮断は、ＣＴ２６、ＬＬＣ、Ｂ１６、および４Ｔ１腫瘍の増殖を有意に阻害した（図４Ａ）。多くの実験的免疫腫瘍学薬は単剤療法としてはほとんど効果がないので、アルギナーゼ阻害剤の単剤活性は注目に値する。アルギナーゼ阻害剤がインビボでＡｒｇ１を標的とすることの確認を、骨髄系統におけるＡｒｇ１の条件付き破壊を含む遺伝的に改変されたマウス系統を用いて評価した。Ａｒｇｆｌｏｘ／ｆｌｏｘ；Ｔｉｅ２−Ｃｒｅ＋マウス（図４Ｂ、ＡＲＧ１ΔＭとして示す）に注入したＬＬＣ細胞は、アルギナーゼ阻害剤で処置したＡｒｇｆｌｏｘ／ｆｌｏｘ；Ｔｉｅ２−Ｃｒｅ−マウス（図４Ｂ、ＡＲＧ１ＷＴとして示す）とサイズが類似するより小さな腫瘍を成長させ、Ａｒｇｆｌｏｘ／ｆｌｏｘ；Ｔｉｅ２−Ｃｒｅ＋動物のアルギナーゼ阻害剤処置は、アルギナーゼ阻害剤によるＡｒｇ１の特異的オンターゲット阻害と一致して、腫瘍増殖のさらなる減少をもたらさなかった（図４Ｂ）。合わせると、これらの結果は、Ａｒｇ１活性が腫瘍増殖を促進し、アルギナーゼ阻害剤による骨髄細胞Ａｒｇ１発現またはアルギナーゼの薬理学的遮断の排除がインビボでの腫瘍増殖を制限することの証拠を提供する。
【０３００】
アルギナーゼ阻害剤の作用のインビボ分子機構に取り組むために一連の実験を行った。アルギナーゼ阻害剤は、用量漸増のアルギナーゼ阻害剤の存在下でＣＴ２６、ＬＬＣ、Ｂ１６、および４Ｔ１細胞株の増殖を検定すると、マウス癌細胞株に対して直接細胞傷害性ではない。１ｍＭアルギナーゼ阻害剤の存在下では、マウス癌細胞株の増殖阻害は観察されなかった（図５Ａ）。アルギナーゼ阻害剤のインビボ効果の機構が免疫細胞媒介性であるかどうかを試験するために、ＬＬＣ腫瘍を担持するＳＣＩＤマウスにアルギナーゼ阻害剤を投与した。アルギナーゼ阻害剤の効果はＳＣＩＤバックグラウンドにおいて無効化され（図５Ｂ）、アルギナーゼ阻害剤が腫瘍増殖を阻害するために無傷の免疫系を必要とすることを示す。アルギナーゼ阻害剤の作用を媒介することに関与する免疫コンパートメントをさらに調べるために、特定の免疫細胞サブセットを欠くマウスにおいて腫瘍増殖を評価した。Ｂ１６（図５Ｃ）およびＣＴ２６（図５Ｄ）腫瘍モデルにおけるＣＤ８＋細胞またはＮＫ細胞のいずれかの枯渇はアルギナーゼ阻害剤の効果をブロックし、ＣＤ８＋細胞およびＮＫ細胞の両方がこれらのモデルにおけるアルギナーゼ阻害剤の完全な抗腫瘍効果に必要であることを示す。ＬＬＣ腫瘍モデルにおいて、ＮＫ細胞の枯渇は効果の喪失をもたらしたが、ＣＤ８＋細胞の枯渇の影響はより小さかった（図５Ｅ）。合わせると、これらの結果は、アルギナーゼ阻害剤の抗腫瘍効果が免疫系によって媒介され、細胞傷害性リンパ球を必要とすることを示す。
【０３０１】
アルギナーゼ阻害剤の免疫細胞を介した作用機序をさらに精査するために、ビヒクルまたはアルギナーゼ阻害剤で処置した動物からの腫瘍に関してフローサイトメトリを実施し、特定の免疫細胞集団の変化を定量化した。腫瘍増殖がアルギナーゼ阻害剤によって阻害された各モデルにおいて、ＴＭＥにおける炎症の増加を示す統計的に有意な変化が免疫細胞集団で観察された（図６Ａ）。ＣＴ２６（図６Ａ）およびＢ１６（図６Ｂ）モデルにおいて、アルギナーゼ阻害剤処置は、ビヒクル処置対照と比較して、腫瘍浸潤活性化ＣＤ２５＋ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞の増加をもたらした。ＬＬＣモデルでは、アルギナーゼ阻害剤処置は、ビヒクル処置対照と比較して、腫瘍中のＣＤ８＋Ｔ細胞の増加、ならびにＣＤ６８＋マクロファージの減少を生じさせた（図６Ｃ）。４Ｔ１モデルでは、アルギナーゼ阻害剤は腫瘍増殖に中程度の影響を及ぼしたが、それにもかかわらず、腫瘍における炎症の増加と一致する免疫細胞集団の変化が観察された：ビヒクル処置対照と比較して、アルギナーゼ阻害剤処置動物の腫瘍におけるＣＤ３＋Ｔ細胞の増加、ＮＫ細胞の増加、および骨髄細胞の減少（図６Ｄ）。ビヒクル対照と比較したアルギナーゼ阻害剤処置動物の腫瘍における炎症増加と一致して、アルギナーゼ阻害剤は、インターフェロン応答遺伝子の転写物の増加（図６Ｅ）および炎症性サイトカインの増加（図６Ｆ）に関連していた。合わせて考慮すると、このデータは、アルギナーゼ阻害剤による腫瘍増殖阻害の分子機構が免疫細胞媒介性であり、細胞傷害性リンパ球の増加および抑制性骨髄細胞の減少を含む腫瘍微小環境における炎症の増加から生じることを示す。
【０３０２】
成長中の腫瘍では、免疫チェックポイントタンパク質の発現およびＴＭＥからの必須栄養素の枯渇を含む２つ以上の抑制機構によって有効な免疫がブロックされ得る。アルギナーゼ阻害剤を他の免疫調節剤と組み合わせると、腫瘍増殖をさらに減少させる可能性があり、この着想を４つの異なる組み合わせで試験した。最初に、ＣＴ２６腫瘍担持マウスを、チェックポイント遮断療法の抗ＰＤ−Ｌ１と組み合わせてアルギナーゼ阻害剤で処置した。単剤療法としてのアルギナーゼ阻害剤または抗ＰＤ−Ｌ１で腫瘍増殖は減少したが、２つの薬剤を組み合わせることによって腫瘍増殖阻害が増強された（図７Ａ、左）。抗ＰＤ−Ｌ１単独で処置した１０匹のマウスのうち３匹で完全な腫瘍退縮が達成されたが、併用療法は６例の完全奏効をもたらし（図７Ａ、中央）、試験４６日目に、抗ＰＤ−Ｌ１単剤群についての３０％の生存率と比較して、併用群では９０％の生存率であった（図７Ａ、右）。免疫浸潤物を調節することがいくつかの標準治療化学療法剤で観察されている。ヌクレオシド類似体であるゲムシタビンの主な作用機序はＤＮＡ合成の阻害であると考えられているが、ＭＤＳＣを抑制することも観察されている。したがって、ゲムシタビンはアルギナーゼ阻害剤の活性を増強し得ると推論された。実際に、ゲムシタビンと組み合わせたアルギナーゼ阻害剤処置は、ＣＴ２６（図７Ｂ、左）およびＬＬＣ（図７Ｂ、右）腫瘍モデルの両方において腫瘍増殖阻害の有意な増加をもたらした。最後に、２つの異なる細胞療法をアルギナーゼ阻害剤と組み合わせて使用した。ＰＭＥＬ腫瘍抗原に特異的なＴ細胞と組み合わせてアルギナーゼ阻害剤で処置したＢ１６腫瘍担持マウスは、いずれかの単剤で処置したマウスと比較して有意に低い腫瘍増殖を示した（図７Ｃ）。注目すべきことに、アルギナーゼ阻害剤とＴ細胞との組み合わせで処置したマウスにおける有意な腫瘍増殖阻害は、骨髄ＡＲＧ１を欠失させたマウスでのＴ細胞療法について観察された著しい生存率恩恵と一致する。肺転移モデルではＮＫ細胞療法を使用した。ＮＫ細胞と組み合わせてアルギナーゼ阻害剤で処置したＣＴ２６腫瘍担持マウスは、対照群と比較して肺転移が有意に少なかった（図７Ｄ）。合わせて考慮すると、これらの結果は、アルギナーゼ阻害剤が複数の種類の抗癌両方との魅力的な併用剤であり得ることを示す。
【０３０３】
いずれの腫瘍型がアルギナーゼ阻害に応答する可能性がより高いかを調べるために、ヒト腫瘍マイクロアレイをＡｒｇ１タンパク質発現について免疫組織化学によって検討した。複数の腫瘍型において豊富なＡｒｇ１＋浸潤免疫細胞が見出され（図８Ａ〜８Ｄ）、肺、胃腸管、および膀胱の腫瘍で特に数が多かった。腫瘍細胞は、ＨＣＣを除き、Ａｒｇ１染色について概ね陰性であった（図８Ｃ）。腫瘍組織マイクロアレイをＡｒｇ１および他の免疫細胞マーカーについてのマルチパラメータ免疫蛍光法によっても染色し、Ａｒｇ１が、マクロファージマーカーであるＣＤ６８よりも顆粒球マーカーのＣＤ１５とより頻繁に関連していることが見出され（図８Ｅ）、いくつかの場合には、Ａｒｇ１とＣＤ１５との間の著明な共局在が観察された（図８Ｆ）。これらのデータは、複数の腫瘍型におけるＡｒｇ１発現を確認する。
【０３０４】
腫瘍発現に加えて、Ａｒｇ１タンパク質および活性は末梢血中で観察されており、健常志願者と比較してＲＣＣ患者の血漿中でより高いことが報告されている。Ａｒｇ１の量が健常ドナーよりも癌患者においてより多いかどうかを調べるために、Ａｒｇ１タンパク質を１２の異なる組織型にわたって３１名の健常ドナーおよび７６名の癌患者の血漿中で測定した（「方法」参照）。Ａｒｇ１は、健常志願者と比較して癌患者について有意に高かった（図８Ｇ）。末梢血Ｌ−アルギニンもＲＣＣ患者においてより低いことが報告されている。血漿Ｌ−アルギニンを７つの異なる組織型にわたって２０名の健常志願者および２６名の癌患者について測定した。Ｌ−アルギニンは、健常個人と比較して癌患者について有意に低かった（図８Ｈ）。これらの結果は、癌患者が、健常個人と比較してより高い循環Ａｒｇ１およびより低い量のＬ−アルギニンに関連する免疫抑制を経験し、アルギナーゼ阻害剤による循環Ａｒｇ１の抑制および血漿Ｌ−アルギニンの上昇が癌の状況で免疫恩恵をもたらし得ることを示唆する。
【０３０５】
以下の理由から、アルギニンレベルを上げることは癌の状況において免疫刺激性であると考えられる：第一に、細胞傷害性リンパ球はインビトロ刺激に応答した増殖のために外因性アルギニンを必要とする；第二に、多くの癌患者は免疫抑制されており、健常個人と比較して血漿アルギニンが低い；および最後に、活性化された免疫抑制性骨髄細胞はアルギニンを消費し、このアミノ酸に関してＴＭＥ中の細胞傷害性リンパ球のような他のアルギニン栄養要求体と競合する。したがって、癌患者におけるアルギニンの上昇は、免疫系が有効な抗腫瘍応答を開始するために重要であり得る。
【０３０６】
骨髄細胞によるアルギニン枯渇は、主に酵素Ａｒｇ１およびＮＯＳによって媒介される。骨髄細胞におけるＡｒｇ１活性は、免疫抑制性であり、腫瘍形成促進性であることが明らかに示されている。第一に、Ａｒｇ１を発現する骨髄細胞は培地からアルギニンを消費し、共培養中のＴ細胞活性を抑制し、および重要な点として、Ｔ細胞増殖がアルギニンを培地に補充するかまたはアルギナーゼ阻害剤を添加することによって回復でき、観察された免疫抑制にはアルギナーゼ活性が必要であることを示す（図２Ａ）。第二に、骨髄コンパートメントにおけるＡｒｇ１の遺伝的除去は炎症または腫瘍増殖を減少させることが示唆され、インビボでのＡｒｇ１の腫瘍形成促進性および免疫抑制的役割を示す。第三に、アルギナーゼ活性をｎｏｒ−ＮＯＨＡまたはアルギナーゼ阻害剤で薬理学的にブロックすると、腫瘍増殖が減少する。本試験はさらに、アルギナーゼ阻害剤によるＡｒｇ１阻害が腫瘍および血漿アルギニンを上昇させ、ＴＭＥにおける炎症を増加させることを実証する。合わせると、これらのデータは、アルギナーゼ活性が免疫抑制的であることの証拠となり、癌免疫療法薬の標的としてのアルギナーゼの検証を提供する。第二のアルギナーゼアイソフォーム、Ａｒｇ２は、多くの組織において低レベルで、ならびに腎臓および腸において高レベルで見出される、構成的に発現されるミトコンドリアマトリックスタンパク質である。Ａｒｇ２活性は血漿Ｌ−アルギニンレベルにも影響するので、Ａｒｇ２は免疫機能の調節因子となり得る。この概念の裏付けとして、Ａｒｇ２は母体−胎児間の免疫寛容を促進することが報告されている。
【０３０７】
薬理学的アルギナーゼ阻害は、ｎｏｒ−ＮＯＨＡを１０週間にわたって注射した高血圧のラットモデルを含む１つの試験、ならびにマウスをｎｏｒ−ＮＯＨＡで処置した複数日試験を含むいくつかの動物試験において十分に耐容されている。アルギナーゼ阻害剤の１日２回の経口投与は、少なくとも４０日間マウスにおいて十分に耐容されることが観察された。明らかな肝毒性がないことは、いくつかの所見によって説明され得る。第一に、アルギナーゼ阻害剤は細胞に容易に侵入せず、細胞溶解物中の可溶性アルギナーゼよりも２桁高い、ＨｅｐＧ２およびＫ５６２細胞株中の細胞内アルギナーゼについてのＩＣ５０値を示す（表１および２）。第二に、尿素サイクルＡｒｇ１の細胞内局在および調節は、薬理学的阻害からそれを保護し得る。肝細胞では、尿素サイクルＡｒｇ１は多酵素複合体のミトコンドリアで密接に関連しており、半透化処理した細胞および放射性標識基質を用いた試験は、尿素サイクルの連続する酵素：アルギノコハク酸シンターゼ、アルギニノコハク酸リアーゼ、およびアルギナーゼの間で生成物および基質のタイトなチャネリングが起こることを実証した。したがって、血漿、腫瘍、および炎症組織において、肝Ａｒｇ１は、細胞質または細胞外アルギナーゼと比較して、アルギナーゼ阻害剤にアクセスしにくい可能性がある。アルギナーゼ阻害剤を、無傷の初代肝細胞においてアルギナーゼを阻害する能力について試験し（表２）、オルニチンを含むがアルギニンを含まない培地を使用し、これらの条件下で生成される尿素は完全な尿素サイクルを必要とするはずである。したがって、このアッセイは、尿素サイクルと排他的に関連するＡｒｇ１活性の尺度であり得る。
【０３０８】
アルギニン補給は、癌患者に対する潜在的治療法として検討されており、臨床成績は、アルギニンレベルを上げることが有益であり得ることを示唆する。腫瘍切除を受けている１８名の結腸直腸癌患者の１つの試験において、生検の組織病理学的分析は、手術前のアルギニン補給が腫瘍に浸潤するＣＤ１６＋およびＣＤ５６＋ＮＫ細胞の増加をもたらすことを明らかにした。９６名の乳癌患者の別の試験では、プラセボと比較して、アルギニンを投与されている小さな腫瘍を有する患者において病理学的応答の有意な増加が観察された。これらのデータは、補足的アルギニンが癌患者において免疫刺激および抗腫瘍効果を有し得ることを示し、薬理学的アルギナーゼ阻害による全身アルギニンの上昇も同様に有益であることを示唆する。しかしながら、治療的経口アルギニン補給の主な制限としては、重度の胃腸障害および腸粘膜によるアルギニンの広範な代謝が挙げられる。アルギナーゼ阻害剤治療は、患者におけるアルギニンレベルを上昇させることおよび維持することの両方の可能性を有し、それによって食事性アルギニン補給に固有の胃腸障害およびアルギニン振動を回避する。
【０３０９】
Ｔ細胞チェックポイントタンパク質ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、およびＰＤ−Ｌ１に対する抗体は、一部の癌患者に対して持続的な臨床応答をもたらしたが、多くの患者は応答せず、抵抗性患者において抗腫瘍免疫を再活性化するためには他の免疫抑制機構を克服する必要があることを示唆する。チェックポイント遮断に対する抵抗性の細胞および分子基盤は、集中的に検討されている領域である。応答性患者と抵抗性患者を調べるバイオマーカー試験は、抵抗性を説明するための１つの可能性として抑制性ＴＭＥを指摘する。非応答性腫瘍（冷たい腫瘍）と比較して腫瘍に浸潤するＴ細胞（Ｔ細胞炎症性腫瘍）の基線レベルがより高い患者は、抗ＣＴＬＡ−４または抗ＰＤ−１療法に応答する可能性がより高く、抗ＰＤ−１療法に抵抗性の患者は、応答者と比較して腫瘍浸潤ＭＤＳＣのより高い基線レベルを有していた。さらに、前臨床試験は、グルコースおよびアミノ酸などのＴＭＥ中の必須の細胞外代謝産物の枯渇がＴ細胞のエフェクター機能をブロックし得ることを示した。合わせると、これらの結果は、免疫抑制骨髄細胞および必須代謝物の枯渇がチェックポイント遮断に抵抗性である冷たい腫瘍を生じさせ得ること、ならびに、したがって、チェックポイント抗体と組み合わせて、これらの骨髄細胞および代謝調節経路を標的とすることが炎症を回復させ、患者応答率を高め得ることを示唆する。この仮説の裏付けとして、酵素ＩＤＯ−１を阻害し、ＴＭＥからの必須アミノ酸トリプトファンの枯渇を防止するエパカドスタットは、黒色腫、肺癌、ＲＣＣ、または頭頸部癌を有する患者において抗ＰＤ−１療法と組み合わせて驚くべき結果を示しており、Ｔ細胞チェックポイントおよびＴＭＥによる免疫抑制を標的とすることが有効な組み合わせであると主張する。
参照による組み込み
【０３１０】
本出願において引用されるすべての刊行物、特許、特許出願および他の文書は、あたかも各個々の刊行物、特許、特許出願または他の文書があらゆる目的のために参照により組み込まれることが個別に示されているのと同じ程度に、あらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０３１１】
特に、本発明を実施するための適切な化合物は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２０１４／０３４３０１９号、同第２０１２／００８３４６９号、同第２０１４／０３７１１７５号、同第２０１２／０１２９８０６号、同第２０１５／００８０３４１号、ならびに国際公開第９９／１９２９５号、同第２０１０／０８５７９７号、および同第２０１２／０９１７５７号に記載されている。
【０３１２】
等価物
様々な特定の実施形態を例示し、説明してきたが、本発明（１つまたは複数）の精神および範囲から逸脱することなく様々な変更を加え得ることが理解されるであろう。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図２Ｅ】
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【図２Ｆ】
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【図２Ｇ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図５Ｅ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
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【図６Ｅ】
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【図６Ｆ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図８Ｅ】
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【図８Ｆ】
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【図８Ｇ】
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【図８Ｈ】
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【国際調査報告】
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