(57)【要約】多重特異性抗ＳＩＲＰα抗体を含む抗ＳＩＲＰα抗体を、関連する組成物及び方法と同様に、提供する。本開示の抗体は、ＳＩＲＰαに結合し、食細胞上のＳＩＲＰαと１つの細胞上のＣＤ４７との相互作用を遮断することができる。【選択図】図３
2020528752.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ヒトＳＩＲＰαに特異的に結合し、
（ｂ）ヒトＳＩＲＰα対立遺伝子Ｖ１及びＶ２のそれぞれに結合し、
（ｃ）ヒトＳＩＲＰγに特異的に結合せず、且つ
（ｄ）ヒトＦｃ受容体への結合を低減させる少なくとも１つの修飾を含むヒトＦｃ領域を任意に含む、
単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
【請求項２】
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３、または
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３
を含む、請求項１に記載の単離抗体。
【請求項３】
（ａ）請求項２（ａ）に記載の抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７に記載のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８に記載のＶＬ配列を含む、または
（ｂ）請求項２（ｂ）に記載の抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５に記載のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６に記載のＶＬ配列を含む、
先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項４】
（ａ）請求項３（ａ）に記載の抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７に記載の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８に記載の軽鎖を含む、または
（ｂ）請求項３（ｂ）に記載の抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９に記載の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０に記載の軽鎖を含む、
先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
【請求項６】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７に記載のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８に記載のＶＬ配列を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
【請求項７】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８の軽鎖を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
【請求項８】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
【請求項９】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５に記載のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６に記載のＶＬ配列を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
【請求項１０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０の軽鎖を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
【請求項１１】
ヒトＦｃ受容体への結合を低減させる少なくとも１つの修飾を任意に含む、Ｆｃ依存性機能（複数可）が低減したヒトＦｃ領域
を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項１２】
（ａ）ヒトＳＩＲＰαの結合について、１Ｈ９及び３Ｃ２から選択される抗体と競合するか、
（ｂ）ヒトＳＩＲＰαへの結合について、ＫＷａｒ抗体と競合しないか、
（ｃ）ヒトＳＩＲＰαへの結合について、ＫＷａｒ抗体と部分的に競合するか、
（ｄ）ヒトＳＩＲＰαへのヒトＣＤ４７の結合を阻害するか、
（ｅ）ヒトＳＩＲＰαへのヒトＳＰ−Ａの結合を阻害するか、
（ｆ）ヒトＳＩＲＰαへのヒトＳＰ−Ｄの結合を阻害するか、
（ｇ）アカゲザルＳＩＲＰαに結合するか、
（ｈ）カニクイザルＳＩＲＰαに結合するか、
（ｉ）対照と比較して貪食を増加させるか、
（ｊ）ヒトＳＩＲＰα対立遺伝子Ｖ１及びＶ２のそれぞれに結合するか、
（ｋ）ヒトＳＩＲＰα対立遺伝子Ｖ１、Ｖ２、及びＶ１／Ｖ５のそれぞれに結合するか、
（ｌ）ヒトＳＩＲＰα対立遺伝子Ｖ１に結合するか、
（ｍ）ヒトＳＩＲＰα対立遺伝子Ｖ２に結合するか、または
（ｎ）（ａ）〜（ｍ）の任意の組み合わせが可能である、
先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項１３】
ヒトＳＩＲＰαアイソタイプに汎特異的である、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項１４】
１つのヒトＳＩＲＰαアイソタイプに特異的である、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項１５】
ヒトＳＩＲＰαが、プロフェッショナル抗原提示細胞上で発現される、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項１６】
ヒトＳＩＲＰαが、マクロファージ上で発現される、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項１７】
１Ｈ９または３Ｃ２である、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項１８】
Ｆｃ領域を欠損している、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項１９】
前記ヒトＦｃ領域が、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４である、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項２０】
酵素的脱グリコシル化、細菌宿主での発現、またはグリコシル化に利用されるアミノ酸残基の修飾により、グリコシル化が低減している、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項２１】
前記修飾が、前記ヒトＦｃ領域のグリコシル化を低減させる、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項２２】
前記ヒトＦｃ領域の修飾が、ＥＵインデックス位置アスパラギン２９７に修飾を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項２３】
前記ヒトＦｃ領域の修飾が、ＥＵインデックス位置アスパラギン２９７にアミノ酸置換を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項２４】
前記ヒトＦｃ領域の修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでＮ２９７Ａアミノ酸置換を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項２５】
前記修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでＮ２９７Ａ；Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ；Ｃ２２０Ｓ／Ｃ２２６Ｓ／Ｃ２２９Ｓ／Ｐ２３８Ｓ；Ｃ２２６Ｓ／Ｃ２２９Ｓ／Ｅ３２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ；またはＬ２３４Ｆ／Ｌ２３５Ｅ／Ｐ３３１Ｓにおける１つ以上のアミノ酸置換を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項２６】
前記修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでＮ２９７；Ｌ２３４／Ｌ２３５；Ｃ２２０／Ｃ２２６／Ｃ２２９／Ｐ２３８；Ｃ２２６／Ｃ２２９／Ｅ３２３３／Ｌ２３４／Ｌ２３５；またはＬ２３４／Ｌ２３５／Ｐ３３１における１つ以上のアミノ酸置換を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項２７】
前記修飾が、前記ＣＨ２領域のＥＵインデックス位置２３４、２３５、及び／または２３７における１つ以上のアミノ酸置換を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項２８】
前記修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでアミノ酸置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａの一方または両方、及び任意に、Ｐ３３１Ｓ及び／またはＫ３２２Ａ及び／またはＧ２３７Ａを含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項２９】
前記修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでアミノ酸置換Ｋ３２２Ａを含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項３０】
前記修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６＋Ａ３２７Ｇ／Ａ３３０Ｓ／Ｐ３３１Ｓを含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項３１】
モノクローナル抗体である、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項３２】
多重特異性である、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項３３】
複数の抗原、または単一の抗原上の複数のエピトープに結合する、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項３４】
ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、及びＩｇＭから選択されるクラスの重鎖定常領域を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項３５】
前記ＩｇＧクラス、且つＩｇＧ１、ＩｇＧ４、ＩｇＧ２、及びＩｇＧ３から選択されるサブクラスの重鎖定常領域を含む、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項３６】
Ｂｉａｃｏｒｅアッセイで測定された約１、１〜６、１〜５、１〜４、１〜３、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０ｘ１０−９Ｍ以下のＫＤで、ヒトＳＩＲＰαに結合する、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項３７】
薬物として使用するための、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項３８】
がんまたは感染症の処置に使用するための、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項３９】
固形腫瘍及び血液腫瘍から選択されるがんの処置に使用するための、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項４０】
貪食の増加に使用するための、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項４１】
ヒトＳＩＲＰαとの結合について、先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体と競合する、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
【請求項４２】
先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体が結合するヒトＳＩＲＰαエピトープに結合する、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
【請求項４３】
先行請求項のいずれか一項に記載の単離抗体、そのＶＨ、そのＶＬ、その軽鎖、その重鎖、またはその抗原結合部位をコードする、単離ポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセット。
【請求項４４】
請求項４３に記載のポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットを含む、ベクターまたはベクターのセット。
【請求項４５】
請求項４３に記載のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドのセットまたは請求項４４に記載のベクターもしくはベクターのセットを含む、宿主細胞。
【請求項４６】
請求項４５に記載の宿主細胞で抗体を発現させること、及び前記発現された抗体を単離することを含む、抗体の産生方法。
【請求項４７】
請求項１〜４２のいずれか１項に記載の抗体及び薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項４８】
疾患または状態の処置または予防を必要とする対象における疾患または状態を処置または予防する方法であって、有効量の請求項１〜４２のいずれか１項に記載の抗体または請求項４７に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項４９】
前記疾患または状態が、
（ａ）がん、
（ｂ）感染症、
（ｃ）ウイルス感染症、
（ｄ）細菌感染症、
（ｅ）真菌感染症、
（ｆ）線維症、
（ｇ）アテローム性動脈硬化症；
（ｈ）寄生虫感染症、任意に、マラリア、及び
（ｉ）抗ＣＫＩＴ（ＣＤ１１７）抗体と任意に組み合わせて、造血幹細胞の移植のための、放射線及び／または化学療法を伴わないかまたはこれが低減されたコンディショニングを可能にする、内因性造血幹細胞の骨髄からの枯渇または低減
から選択される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記疾患または状態が、がんであり、前記がんが、固形腫瘍及び血液腫瘍から選択される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
貪食の増加を必要とする対象において貪食を増加させる方法であって、有効量の請求項１〜４２のいずれか１項に記載の抗体または請求項４７に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項５２】
免疫応答の調節を必要とする対象において免疫応答を調節する方法であって、有効量の請求項１〜４２のいずれか１項に記載の抗体または請求項４７に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項５３】
前記対象に１つ以上の追加の治療薬を投与することをさらに含む、請求項４８〜５２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
前記追加の治療薬が、抗体である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記追加の治療薬が、腫瘍細胞表面上のタンパク質（複数可）に結合する抗体である、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記追加の治療薬が、移植療法のために造血幹細胞を枯渇させるために
（ａ）ＨＥＲ２（ＥＲＢＢ２／ｎｅｕ）、ＣＤ５２、ＰＤ−Ｌ１、ＶＥＧＦ、ＣＤ３０、ＥＧＦＲ、ＣＤ３８、ＲＡＮＫＬ（ＣＤ２５４）、ＧＤ２（ガングリオシド）、ＳＬＡＭＦ７（ＣＤ３１９）、ＣＤ２０、ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲａ、ＶＥＧＦＲ２、ＣＤ３３、ＣＤ４４、ＣＤ９９、ＣＤ９６、ＣＤ９０、ＣＤ１３３、ＣＫＩＴ（ＣＫＩＴ陽性腫瘍に対するＣＤ１１７）、
（ｂ）ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＤ４０（アゴニスト）、ＬＡＧ３（ＣＤ２２３）、４１ＢＢ（ＣＤ１３７アゴニスト）、ＯＸ４０（ＣＤ１３４、アゴニスト）、及び／または
（ｃ）ＣＫＩＴ（ＣＤ１１７）
に結合する抗体である、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
前記抗体が、リツキシマブ、セツキシマブ、アレムツズマブ（ＣＤ５２）、アテゾリズマブ（ＰＤ−Ｌ１）、アベルマブ（ＰＤ−Ｌ１）、ベバシズマブ（ＶＥＧＦ）、ブレンツキシマブ（ＣＤ３０）、ダラツムマブ（ＣＤ３８）、デノスマブ（ＲＡＮＫＬ）、ジヌツキシマブ（ＧＤ２）、エロツズマブ（ＳＬＡＭＦ７）、イブリツモマブ（ＣＤ２０）、イピリムマブ（ＣＴＬＡ−４）、ネシツムマブ（ＥＧＦＲ）、ニボルマブ（ＰＤ−１）、オビヌツズマブ（ＣＤ２０）、オファツムマブ（ＣＤ２０）、オララツマブ（ＰＤＧＦＲａ）、パニツムマブ（ＥＧＦＲ）、ペンブロリズマブ（ＰＤ−１）、ペルツズマブ（ＨＥＲ２）、ラムシルマブ（ＶＥＧＦＲ２）、トシツモマブ（ＣＤ２０）、及びゲムツズマブ（ＣＤ３３）のうちの少なくとも１つである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５８】
前記追加の治療薬が、前記抗体と同じ医薬組成物に製剤化される、請求項５３〜５７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５９】
前記追加の治療薬が、前記抗体とは異なる医薬組成物に製剤化される、請求項５３〜５７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６０】
前記追加の治療薬が、前記抗体の投与の前に投与される、請求項５３〜５７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６１】
前記追加の治療薬が、前記抗体の投与後に投与される、請求項５３〜５７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６２】
前記追加の治療薬が、前記抗体と同時に投与される、請求項５３〜６１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６３】
請求項１〜４２のいずれか１項に記載の抗体または請求項４７に記載の医薬組成物及び使用説明書を含む、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１７年７月２６日に提出された米国仮出願第６２／５３７，２０７号の恩典を主張し、これは、あらゆる目的のために全体が参照により本明細書で組み込まれる。
【０００２】
配列表
本出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して送信されている配列表を含有し、全体が参照により本明細書で組み込まれる。２０ＸＸ年ＸＸ月に作成された該ＡＳＣＩＩコピーは、ＸＸＸＸＸＵＳ＿ｓｅｑｕｅｎｃｅｌｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔと名付けられ、サイズがＸ，ＸＸＸ，ＸＸＸバイトである。
【背景技術】
【０００３】
背景
細胞のターンオーバーは、アポトーシスプログラムの誘導または除去のためにそれらをマークする他の細胞変化、及び、その後の、マクロファージ、樹状細胞などを含む食細胞によるマーカーの認識から始まる。本プロセスは、望ましくない細胞の特定的且つ選択的な除去を必要とする。健康な細胞とは異なり、望ましくない／熟成した／瀕死の細胞は、食細胞上の受容体により順次認識され得る「ｅａｔ−ｍｅ」シグナル、すなわち、「自己改変」と呼ばれるマーカーまたはリガンドを提示する。健康な細胞は、貪食を積極的に阻害する「ｄｏｎ’ｔ  ｅａｔ−ｍｅ」シグナルを提示し得、これらのシグナルは、瀕死の細胞で下方制御されるか、変化したコンフォメーションで存在するか、または、それらに代わって、「ｅａｔ−ｍｅ」もしくは前貪食シグナルが上方制御される。健康な細胞上の細胞表面タンパク質ＣＤ４７及び食細胞受容体であるＳＩＲＰαの関与は、アポトーシス細胞のクリアランス及びＦｃＲ媒介貪食を含む複数のモダリティにより媒介される飲み込みを止め得る重要な「ｄｏｎ’ｔ  ｅａｔ−ｍｅ」シグナルを構成する。食細胞上のＳＩＲＰαのＣＤ４７媒介エンゲージメントを遮断することは、「ｅａｔ  ｍｅ」シグナルを有する生細胞の除去を引き起こし得る。
【０００４】
ＣＤ４７は、単一のＩｇ様ドメイン及び５つの膜貫通領域を有する広範に発現する膜貫通糖タンパク質であり、これは、ＳＩＲＰαのＮＨ２末端Ｖ様ドメインにより媒介される結合により、ＳＩＲＰαの細胞リガンドとして機能する。ＳＩＲＰαは、主に、マクロファージ、顆粒球、骨髄樹状細胞（ＤＣ）、肥満細胞、及び造血幹細胞を含むそれらの前駆細胞を含む骨髄細胞上に発現される。ＣＤ４７結合を媒介するＳＩＲＰα上の構造決定因子は、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７９：７７４１−７７５０（非特許文献１）；Ｈａｔｈｅｒｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｂ．Ｃ．２８２：１４５６７−７５（非特許文献２）により考察され、ＣＤ４７結合のＳＩＲＰαシス二量体化の役割は、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｊ．Ｂ．Ｃ．２８５：３７９５３−６３（非特許文献３）により考察されている。正常細胞の貪食を阻害するＣＤ４７の役割に合わせて、それが遊走段階直前及び遊走段階中に造血幹細胞（ＨＳＣ）及び前駆細胞上で一時的に上方制御されるという証拠、ならびに、それらがｉｎ  ｖｉｖｏで飲み込まれる確率を、これらの細胞上のＣＤ４７のレベルが決定するという証拠がある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７９：７７４１−７７５０
【非特許文献２】Ｈａｔｈｅｒｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｂ．Ｃ．２８２：１４５６７−７５
【非特許文献３】Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｊ．Ｂ．Ｃ．２８５：３７９５３−６３
【発明の概要】
【０００６】
概要
ヒトＳＩＲＰαに特異的に結合し；ヒトＳＩＲＰγに特異的に結合せず；任意に、ヒトＦｃ受容体への結合を低減する少なくとも１つの修飾を含むヒトＦｃ領域を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体が本明細書に開示される。
【０００７】
一部の態様では、抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３；または、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。
【０００８】
一部の態様では、抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７に記載のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８に記載のＶＬ配列；または、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５に記載のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６に記載のＶＬ配列を含む。
【０００９】
一部の態様では、抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７に記載の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８に記載の軽鎖；または、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９に記載の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０に記載の軽鎖を含む。
【００１０】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体もまた、本明細書で開示される。
【００１１】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のＶＬ配列を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体もまた、本明細書で開示される。
【００１２】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８の軽鎖を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体もまた、本明細書で開示される。
【００１３】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体もまた、本明細書で開示される。
【００１４】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のＶＬ配列を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体もまた、本明細書で開示される。
【００１５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０の軽鎖を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体もまた、本明細書で開示される。
【００１６】
一部の態様では、本明細書に開示の抗体は、ヒトＦｃ受容体への結合を低減させる少なくとも１つの修飾を含むヒトＦｃ領域を含む。
【００１７】
一部の態様では、本明細書に開示の抗体は、（ａ）ヒトＳＩＲＰαの結合について、１Ｈ９及び３Ｃ２から選択される抗体と競合するか、（ｂ）ヒトＳＩＲＰαの結合について、ＫＷａｒ抗体と競合しないか、（ｃ）ヒトＳＩＲＰαの結合について、ＫＷａｒ抗体と部分的に競合するか、（ｄ）ヒトＳＩＲＰαとのヒトＣＤ４７の結合を阻害するか、（ｅ）ヒトＳＩＲＰαとのヒトＳＰ−Ａの結合を阻害するか、（ｆ）ヒトＳＩＲＰαとのヒトＳＰ−Ｄの結合を阻害するか、（ｇ）アカゲザルＳＩＲＰαに結合するか、（ｈ）カニクイザルＳＩＲＰαに結合するか、（ｉ）対照と比較して貪食を増加させるか、または（ｊ）（ａ）〜（ｉ）の任意の組み合わせが可能である。
【００１８】
一部の態様では、本明細書に開示の抗体は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプに汎特異的である。１Ｈ９などの本明細書に開示の抗体は、Ｖ１、Ｖ２、及びＶ１／Ｖ５のうちの１つ以上を含む複数のヒトＳＩＲＰαアイソタイプに結合し得る。本明細書に開示の抗体は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ１及びＶ２のそれぞれに結合し得る。本明細書に開示の抗体は、ホモ接合型を含むヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ１に結合し得る。本明細書に開示の抗体は、ホモ接合型を含むヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ２に結合し得る。本明細書に開示の抗体は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ１／Ｖ５（ヘテロ接合型）に結合し得る。１Ｈ９などの本明細書に開示の抗体は、Ｖ１、Ｖ２、及びＶ１／Ｖ５のそれぞれを含む複数のヒトＳＩＲＰαアイソタイプに結合し得る。そのような抗体は、１Ｈ９及び３Ｃ２を含み得る。ヒトＳＩＲＰα変種への結合は、ＰＣＲ及び／またはフローサイトメトリーを含む当該技術分野で既知のアッセイを使用して測定することができる。例えば、所与の試料は、ＳＩＲＰの状態を決定するために遺伝子型を決定することができ、ＳＩＲＰへの結合は、フローサイトメトリーを使用して決定することができる。
【００１９】
一部の態様では、本明細書に開示の抗体は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプに特異的である。
【００２０】
一部の態様では、ヒトＳＩＲＰαは、プロフェッショナル抗原提示細胞上で発現される。一部の態様では、ヒトＳＩＲＰαは、マクロファージ上で発現される。
【００２１】
１Ｈ９などの本明細書に開示の抗体は、細胞表面上のヒトＳＩＲＰαに結合し得る。ＳＩＲＰαへの本明細書に開示の抗体の結合は、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２４時間超安定であり得る。本明細書に開示の抗体は、ＳＩＲＰαへの結合時に実質的な内在化を回避し得る。そのような抗体は、そのような抗体のヒト化及び／またはＦｃ操作バージョンを含む１Ｈ９及び３Ｃ２を含み得る。ヒトＳＩＲＰαへの結合は、フローサイトメトリー及び／またはＩＨＣを含む当該技術分野で既知のアッセイを使用して測定することができる。
【００２２】
一部の態様では、抗体は、１Ｈ９または３Ｃ２である。
【００２３】
一部の態様では、ヒトＦｃ領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４であり、任意に修飾で修飾されている。
【００２４】
一部の態様では、抗体のグリコシル化は、酵素的脱グリコシル化、細菌宿主での発現、またはグリコシル化に利用されるアミノ酸残基の修飾により、低減する。一部の態様では、本明細書に開示の修飾は、ヒトＦｃ領域のグリコシル化を低減する。一部の態様では、ヒトＦｃ領域の修飾は、ＥＵインデックス位置アスパラギン２９７に修飾を含む。一部の態様では、ヒトＦｃ領域の修飾は、ＥＵインデックス位置アスパラギン２９７にアミノ酸置換を含む。一部の態様では、ヒトＦｃ領域の修飾は、ＥＵインデックスによる番号付けでＮ２９７Ａアミノ酸置換を含む。一部の態様では、修飾は、ＥＵインデックスによる番号付けでＮ２９７Ａ；Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ；Ｃ２２０Ｓ／Ｃ２２６Ｓ／Ｃ２２９Ｓ／Ｐ２３８Ｓ；Ｃ２２６Ｓ／Ｃ２２９Ｓ／Ｅ３２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ；またはＬ２３４Ｆ／Ｌ２３５Ｅ／Ｐ３３１Ｓにおける１つ以上のアミノ酸置換を含む。一部の態様では、修飾は、ＥＵインデックスによる番号付けでＮ２９７；Ｌ２３４／Ｌ２３５；Ｃ２２０／Ｃ２２６／Ｃ２２９／Ｐ２３８；Ｃ２２６／Ｃ２２９／Ｅ３２３３／Ｌ２３４／Ｌ２３５；またはＬ２３４／Ｌ２３５／Ｐ３３１における１つ以上のアミノ酸置換を含む。一部の態様では、修飾は、ＣＨ２領域のＥＵインデックス位置２３４、２３５、及び／または２３７における１つ以上のアミノ酸置換を含む。一部の態様では、修飾は、ＥＵインデックスによる番号付けでアミノ酸置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａの一方または両方、任意に、Ｐ３３１Ｓ及び／またはＫ３２２Ａ及び／またはＧ２３７Ａを含む。一部の態様では、修飾は、ＥＵインデックスによる番号付けでアミノ酸置換Ｋ３２２Ａを含む。一部の態様では、修飾は、ＥＵインデックスによる番号付けでＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６＋Ａ３２７Ｇ／Ａ３３０Ｓ／Ｐ３３１Ｓを含む。
【００２５】
一部の態様では、抗体は、モノクローナル抗体である。
【００２６】
一部の態様では、抗体は、多重特異性である。一部の態様では、抗体は、複数の抗原、または単一の抗原上の複数のエピトープに結合する。
【００２７】
一部の態様では、抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、及びＩｇＭから選択されるクラスの重鎖定常領域を含む。一部の態様では、抗体は、ＩｇＧクラス、且つＩｇＧ１、ＩｇＧ４、ＩｇＧ２、及びＩｇＧ３から選択されるサブクラスの重鎖定常領域を含む。
【００２８】
一部の態様では、抗体は、Ｂｉａｃｏｒｅアッセイで測定された約１、１〜６、１〜５、１〜４、１〜３、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０ｘ１０−９Ｍ以下のＫＤで、ヒトＳＩＲＰαに結合する。
【００２９】
一部の態様では、本明細書に開示の抗体は、薬物として使用される。一部の態様では、本明細書に開示の抗体は、がんまたは感染症の処置に使用される。一部の態様では、本明細書に開示の抗体は、がんの処置に使用され、がんは、固形腫瘍及び血液腫瘍から選択される。一部の態様では、本明細書に開示の抗体は、貪食の増加に使用される。
【００３０】
ヒトＳＩＲＰαの結合について本明細書に開示の抗体と競合する、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体もまた、本明細書で開示される。
【００３１】
本明細書に開示の抗体が結合するヒトＳＩＲＰαエピトープに結合する、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体もまた、本明細書で開示される。
【００３２】
本明細書に開示の単離抗体、そのＶＨ、そのＶＬ、その軽鎖、その重鎖、またはその抗原結合部分をコードする単離ポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドのセットもまた、本明細書で開示される。
【００３３】
本明細書に開示のポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットを含むベクターまたはベクターのセットもまた、本明細書で開示される。
【００３４】
本明細書に開示のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドのセット、または本明細書に開示のベクターもしくはベクターのセットを含む宿主細胞もまた、本明細書で開示される。
【００３５】
本明細書に開示の宿主細胞で抗体を発現させること、及び発現された抗体を単離することを含む、抗体の産生方法もまた、本明細書で開示される。
【００３６】
本明細書に開示の抗体及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物もまた、本明細書で開示される。
【００３７】
有効量の本明細書に開示の抗体または本明細書に開示の医薬組成物を対象に投与することを含む、疾患または状態を処置または予防することを必要とする対象の疾患または状態を処置または予防する方法もまた、本明細書で開示される。
【００３８】
一部の態様では、疾患または状態は、がん；感染症；ウイルス感染症；細菌感染症；真菌感染症；線維症；アテローム性動脈硬化症；寄生虫感染症、任意に、マラリア；ならびに、任意に、抗ＣＫＩＴ（ＣＤ１１７）抗体と組み合わせて、造血幹細胞の移植のための、放射線及び／または化学療法を伴わないかまたはこれが低減されたコンディショニングを可能にする、内因性造血幹細胞の骨髄からの枯渇または低減である。
【００３９】
一部の態様では、疾患または状態は、がんであり、がんは、固形腫瘍及び血液腫瘍から選択される。
【００４０】
有効量の本明細書に開示の抗体または本明細書に開示の医薬組成物を対象に投与することを含む、貪食の増加を必要とする対象において貪食を増加させる方法もまた、本明細書で開示される。
【００４１】
有効量の本明細書に開示の抗体または本明細書に開示の医薬組成物を対象に投与することを含む、免疫応答の調節を必要とする対象において免疫応答を調節する方法もまた、本明細書で開示される。
【００４２】
一部の態様では、本明細書に開示の方法はさらに、１つ以上の追加の治療薬を対象に投与することを含む。
【００４３】
一部の態様では、追加の治療薬は、抗体である。一部の態様では、追加の治療薬は、腫瘍細胞表面上のタンパク質（複数可）に結合する抗体である。一部の態様では、追加の治療薬は、移植療法用に造血幹細胞を枯渇させるためにＨＥＲ２（ＥＲＢＢ２／ｎｅｕ）、ＣＤ５２、ＰＤ−Ｌ１、ＶＥＧＦ、ＣＤ３０、ＥＧＦＲ、ＣＤ３８、ＲＡＮＫＬ（ＣＤ２５４）、ＧＤ２（ガングリオシド）、ＳＬＡＭＦ７（ＣＤ３１９）、ＣＤ２０、ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲａ、ＶＥＧＦＲ２、ＣＤ３３、ＣＤ４４、ＣＤ９９、ＣＤ９６、ＣＤ９０、ＣＤ１３３、ＣＫＩＴ（ＣＫＩＴ陽性腫瘍のＣＤ１１７）；ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＤ４０（アゴニスト）、ＬＡＧ３（ＣＤ２２３）、４１ＢＢ（ＣＤ１３７アゴニスト）、ＯＸ４０（ＣＤ１３４、アゴニスト）；及び／またはＣＫＩＴ（ＣＤ１１７）に結合する抗体である。一部の態様では、追加の治療薬は、リツキシマブ、セツキシマブ、アレムツズマブ（ＣＤ５２）、アテゾリズマブ（ＰＤ−Ｌ１）、アベルマブ（ＰＤ−Ｌ１）、ベバシズマブ（ＶＥＧＦ）、ブレンツキシマブ（ＣＤ３０）、ダラツムマブ（ＣＤ３８）、デノスマブ（ＲＡＮＫＬ）、ジヌツキシマブ（ＧＤ２）、エロツズマブ（ＳＬＡＭＦ７）、イブリツモマブ（ＣＤ２０）、イピリムマブ（ＣＴＬＡ−４）、ネシツムマブ（ＥＧＦＲ）、ニボルマブ（ＰＤ−１）、オビヌツズマブ（ＣＤ２０）、オファツムマブ（ＣＤ２０）、オララツマブ（ＰＤＧＦＲａ）、パニツムマブ（ＥＧＦＲ）、ペンブロリズマブ（ＰＤ−１）、ペルツズマブ（ＨＥＲ２）、ラムシルマブ（ＶＥＧＦＲ２）、トシツモマブ（ＣＤ２０）、及びゲムツズマブ（ＣＤ３３）のうちの少なくとも１つである。
【００４４】
一部の態様では、追加の治療薬は、抗体と同じ医薬組成物に製剤化される。一部の態様では、追加の治療薬は、抗体とは異なる医薬組成物に製剤化される。
【００４５】
一部の態様では、追加の治療薬は、抗体を投与する前に投与される。一部の態様では、追加の治療薬は、抗体を投与した後に投与される。一部の態様では、追加の治療薬は、抗体と同時に投与される。
【００４６】
本明細書に開示の抗体または本明細書に開示の医薬組成物及び使用説明書を含むキットもまた、本明細書で開示される。
【００４７】
本発明のこれら及び他の特徴、態様、及び利点は、以下の説明及び添付の図面に関してよりよく理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】１Ｈ９の重鎖（Ａ）及び軽鎖（Ｂ）可変領域配列。ＣＤＲは、下線が引かれている。
【図２】３Ｃ２の重鎖（Ａ）及び軽鎖（Ｂ）可変領域配列。ＣＤＲは、下線が引かれている。
【図３】１Ｈ９及び３Ｃ２は、異なるエピトープを認識する。（Ａ）ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を９６ウェルプレートにコーティングし、５０倍または１００倍過剰量のマウスＫｗａｒの非存在下または存在下で、１Ｈ９または３Ｃ２と共にインキュベートした。（Ｂ）ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を９６ウェルプレートにコーティングし、５倍、１０倍、５０倍、及び１００倍過剰量の１Ｈ９または３Ｃ２の非存在下または存在下で、マウス１Ｈ９と共にインキュベートした。（Ｃ）ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を９６ウェルプレートにコーティングし、５倍、１０倍、５０倍、及び１００倍過剰量の３Ｃ２または１Ｈ９の非存在下または存在下で、マウス３Ｃ２と共にインキュベートした。
【図４】１Ｈ９及び３Ｃ２は、リツキシマブと相乗作用して、Ｒａｊｉ細胞のマクロファージ媒介貪食を促進する。マクロファージは、７日間ヒト血清の存在下で、ドナーＡ（Ａ）及びドナーＢ（Ｂ）の単球から分化した。Ｒａｊｉ細胞をＣＦＳＥで標識し、単独のまたは１０ｕｇ／ｍｌの１Ｈ９−Ｇ４、１Ｈ９−Ｇ１、３Ｃ２−Ｇ４、または３Ｃ２−Ｇ１と組み合わせた１０ｕｇ／ｍｌのリツキシマブの存在下で、マクロファージと共にインキュベートした。２時間後、ＧＦＰ＋マクロファージを確認するフローサイトメトリー分析により、貪食の割合を計算した。
【図５】ヒト化１Ｈ９の重鎖（Ａ）及び軽鎖（Ｂ）鎖可変領域配列。ＣＤＲは、下線が引かれている。
【図６】ヒト化３Ｃ２の重鎖（Ａ）及び軽鎖（Ｂ）鎖可変領域配列。ＣＤＲは、下線が引かれている。
【図７】ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２は、親抗体と同じ抗原結合特異性を有する。（Ａ）ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を、９６ウェルプレートにコーティングし、５倍、１０倍、５０倍、及び１００倍過剰量のヒト化１Ｈ９の非存在下または存在下で、マウス１Ｈ９と共にインキュベートした。（Ｂ）ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を、９６ウェルプレートにコーティングし、５倍、１０倍、５０倍、及び１００倍過剰量のヒト化３Ｃ２の非存在下または存在下で、マウス３Ｃ２とインキュベートした。
【図８】ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２のＢｉａｃｏｒｅ親和性測定。
【図９】ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２は、治療用抗体と相乗作用して、貪食を促進する。（Ａ）Ｒａｊｉ細胞をＣＦＳＥで標識し、単独のまたは１０ｕｇ／ｍｌのＨｕ１Ｈ９−Ｇ１もしくはＨｕ３Ｃ２−Ｇ１と組み合わせた１０ｕｇ／ｍｌのリツキシマブの存在下で、ヒト単球由来マクロファージと共にインキュベートした。（Ｂ）ＨＴ２９細胞をＣＦＳＥで標識し、単独のまたは０．５ｕｇ／ｍｌ、５ｕｇ／ｍｌ、及び１０ｕｇ／ｍｌのＨｕ１Ｈ９−Ｇ１もしくはＨｕ３Ｃ２の−Ｇ１と組み合わせた０．１ｕｇ／ｍｌのセツキシマブの存在下で、ヒト単球由来マクロファージと共にインキュベートした。２時間後、ＧＦＰ＋マクロファージを確認するフローサイトメトリー分析により、貪食の割合を計算した。
【図１０】ＳＩＲＰＢ及びＳＩＲＰＧに対する交差反応性。（Ａ）ヒトＳＩＲＰＢ−Ｈｉｓ融合タンパク質へのＫｗａｒ、１Ｈ９、及び３Ｃ２の結合をＥＬＩＳＡにより決定した。（Ｂ）ヒトＳＩＲＰＧ−Ｈｉｓ融合タンパク質へのＫｗａｒ、１Ｈ９、及び３Ｃ２の結合をＥＬＩＳＡにより決定した。
【図１１】９Ｂ１１及び７Ｅ１１は、リツキシマブと相乗作用して、Ｒａｊｉ細胞のマクロファージ媒介貪食を促進する。
【図１２】７Ｅ１１及び９Ｂ１１エピトープ結合。７Ｅ１１は、Ｋｗａｒ（３Ｃ２に類似している）と比較して重複するエピトープを認識し、９Ｂ１１は、Ｋｗａｒと比較して非常に類似または同一のエピトープを認識する。
【図１３】Ｈｕ１Ｈ９−Ｇ１は、細胞上のＳＩＲＰａのＶ１及びＶ２変種の両方に結合する。
【図１４】Ｈｕ１Ｈ９−Ｇ１は、異なるドナー由来の単球へのＣＤ４７の結合を遮断する。
【図１５】Ｈｕ１Ｈ９−Ｇ１は、セツキシマブと相乗作用して、異なるドナーにわたって貪食を促進する。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
詳細な説明
定義
別途定義のない限り、本明細書で使用される全ての技術用語、表記、及び他の科学用語は、当業者らにより一般に理解される意味を有することが意図される。一部の場合では、一般に理解される意味を有する用語は、明確にするために、及び／または容易な参照のために本明細書で定義されており、本明細書にそのような定義が含まれることは、当該技術分野で一般に理解されているものとの違いを表すと必ずしも解釈されるべきではない。本明細書に記載または参照される技術及び手順は、当業者らにより、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ４ｔｈ  ｅｄ．（２０１２）Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹに記載の広く利用されている分子クローニング方法論などの従来の方法論を使用して、一般によく理解され且つ一般に用いられる。必要に応じて、市販のキット及び試薬の使用を含む手順は一般に、別途明記のない限り、製造者が定義したプロトコール及び条件に従って実行される。
【００５０】
本明細書で使用される場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈が別途明示しない限り、複数の指示対象を含む。「含む」、「など」などの用語は、別途明記のない限り、限定なしの包含を伝えることが意図される。
【００５１】
本明細書で使用される時、「含む」という用語は、別途明記のない限り、列挙されている要素「からなる」及び「から本質的になる」実施形態も具体的に含む。例えば、「ダイアボディを含む」多重特異性抗体は、「ダイアボディからなる」多重特異性抗体及び「ダイアボディから本質的になる」多重特異性抗体を含む。
【００５２】
「約」という用語は、示された値及びその値の上下範囲を示し、包含する。特定の実施形態では、「約」という用語は、指定値±１０％、±５％、または±１％を示す。特定の実施形態では、適用可能な場合、「約」という用語は、指定値（複数可）±その値（複数可）の１標準偏差を示す。
【００５３】
ＳＩＲＰα１（ＰＴＰＮＳ１、ＳＨＰＳ１）は、主に骨髄細胞及び神経細胞に発現する膜貫通糖タンパク質である。ＳＩＲＰαは、広く分布している膜タンパク質ＣＤ４７と相互作用する。ＳＩＲＰαに加えて、ＳＩＲＰファミリーには、ＳＩＲＰβ及びＳＩＲＰγの２つの密接に関連するタンパク質がある。３つ全てが、細胞外領域に３つの免疫グロブリンスーパーファミリー（ＩｇＳＦ）ドメインを有する。ヒトにおいて、ＳＩＲＰαタンパク質は、２つの主要な形態で見出される。１つの形態である変種１またはＶ１形態は、ＮＣＢＩ  ＲｅｆＳｅｑ  ＮＰ＿５４２９７０．１として記載されるアミノ酸配列を有する（残基２７〜５０４は、成熟形態を構成する）。別の形態である変種２またはＶ２形態は、１３アミノ酸だけ異なり、ＧｅｎＢａｎｋでＣＡＡ７１４０３．１として記載されるアミノ酸配列を有する（残基３０〜５０４は、成熟形態を構成する）。ＳＩＲＰαのこれら２つの形態は、ヒトに存在するＳＩＲＰαの形態の約８０％を構成し、両方とも本明細書では「ヒトＳＩＲＰα」という用語に包含される。「ヒトＳＩＲＰα」という用語には、ヒトに対して内因性であり且つそれに結合した際にＣＤ４７を介したシグナル伝達を起動する同じ性質を有する、その少数形態も包含される。ヒトＳＩＲＰａ変種の配列は、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号：ｒｅｆ｜ＮＰ＿５４２９７０．１；ｇｂ｜ＥＡＸ１０６０６．１；ｒｅｆ｜ＸＰ＿００５２６０７２６．１；ｇｂ｜ＥＡＸ１０６０６．１；ＸＰ＿００５２６０７２６．１；ｇｂ｜ＥＡＸ１０６１１．１；ｇｂ｜ＥＡＸ１０６０９．１；ｄｂｊ｜ＢＡＡ１２９７４．１；ｇｂ｜ＡＡＨ２６６９２．１；ｒｅｆ｜ＸＰ＿０１１５２７４７５．１を含む公的なデータベース介してアクセスされてもよい。例えば、参照により本明細書に具体的に組み込まれるＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７９（１１）：７７４１−７７５０を参照のこと。
【００５４】
ヒトＳＩＲＰαに特異的に結合する抗体は、既知であり、当該技術分野で使用され、本明細書に開示の操作されたＦｃ領域の使用により調整されてもよい。例示的な抗体としては、国際特許出願ＷＯ２０１５／１３８６００、公開米国出願２０１４／０２４２０９５（大学保健ネットワーク（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｎｅｔｗｏｒｋｓ））、公開出願ＣＮ１０３６６５１６５（ＪＩＡＮＧＳＵ  ＫＵＡＮＧＹＡ  ＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬ  ＭＥＤＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＆  ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ；Ｚｈａｏ  ＸＷ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １０８：１８３４２−７（２０１１））（それぞれが参照により具体的に本明細書に組み込まれる）に記載されるものが挙げられる。抗ＳＩＲＰα抗体は、汎特異的、すなわち、２つ以上の異なるヒトＳＩＲＰαアイソフォームに結合しても、１つのアイソフォームに特異的であってもよい。例えば、上掲のＺｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．に記載の抗体１．２３Ａは、ＳＩＲＰα１変種に特異的であると報告される一方、１２Ｃ４抗体は、汎特異的である。抗ＳＩＲＰα抗体は、ＳＩＲＰαに特異的でもあり、ＳＩＲＰβ及び／またはＳＩＲＰγへの結合を欠損している可能性がある。抗ＳＩＲＰａ抗体は、ＳＩＲＰβ及び／またはＳＩＲＰγに関して汎特異的であり得る。
【００５５】
「免疫グロブリン」という用語は、一般に２対のポリペプチド鎖：１対の軽（Ｌ）鎖及び１対の重（Ｈ）鎖を含む構造的に関連したタンパク質のクラスを指す。「インタクト免疫グロブリン」では、これらの鎖の４つ全てが、ジスルフィド結合により相互に連結されている。免疫グロブリンの構造は、十分に特徴付けられている。例えば、Ｐａｕｌ，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ７ｔｈ  ｅｄ．，Ｃｈ．５（２０１３）Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡを参照のこと。要約すると、各重鎖は通常、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域（ＣＨ）を含む。重鎖定常領域は通常、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３と略記される３つのドメインを含む。各軽鎖は通常、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は通常、ＣＬと略記される１つのドメインを含む。
【００５６】
「抗体」という用語は、最も広い意味で本明細書で使用され、抗原またはエピトープに特異的に結合する１つ以上の抗原結合ドメインを含む特定タイプの免疫グロブリン分子を含む。抗体は具体的には、インタクト抗体（例えば、インタクト免疫グロブリン）、抗体フラグメント、及び多重特異性抗体を含む。一部の実施形態では、抗体は、代替骨格を含む。一部の実施形態では、抗体は、代替骨格からなる。一部の実施形態では、抗体は、代替骨格から本質的になる。一部の実施形態では、抗体は、抗体フラグメントを含む。一部の実施形態では、抗体は、抗体フラグメントからなる。一部の実施形態では、抗体は、抗体フラグメントから本質的になる。「ＳＩＲＰ−アルファ抗体」、「抗ＳＩＲＰ−アルファ抗体」、または「ＳＩＲＰ−アルファ特異的抗体」は、本明細書で提供されるように、抗原ＳＩＲＰ−アルファに特異的に結合する抗体である。一部の実施形態では、抗体は、ＳＩＲＰ−アルファの細胞外ドメインに結合する。特定の実施形態では、本明細書で提供されるＳＩＲＰ−アルファ抗体は、異なる種に由来するＳＩＲＰ−アルファタンパク質間で保存されているＳＩＲＰ−アルファのエピトープに結合する。
【００５７】
「代替骨格」という用語は、１つ以上の領域が多様化されて、抗原またはエピトープに特異的に結合する１つ以上の抗原結合ドメインを生成し得る分子を指す。一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、抗体のものと類似の特異性及び親和性で、抗原またはエピトープに結合する。例示的な代替骨格としては、フィブロネクチン（例えば、Ａｄｎｅｃｔｉｎｓ（商標））、βサンドイッチ（例えば、ｉＭａｂ）、リポカリン（例えば、Ａｎｔｉｃａｌｉｎｓ（登録商標））、ＥＥＴＩ−ＩＩ／ＡＧＲＰ、ＢＰＴＩ／ＬＡＣＩ−Ｄ１／ＩＴＩ−Ｄ２（例えば、Ｋｕｎｉｔｚドメイン）、チオレドキシンペプチドアプタマー、プロテインＡ（例えば、Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標））、アンキリンリピート（例えば、ＤＡＲＰｉｎｓ）、ガンマ−Ｂ−クリスタリン／ユビキチン（例えば、Ａｆｆｉｌｉｎｓ）、ＣＴＬＤ３（例えば、Ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎｓ）、Ｆｙｎｏｍｅｒｓ、及び（ＬＤＬＲ−Ａモジュール）（例えば、Ａｖｉｍｅｒｓ）から誘導されるようなものが挙げられる。代替骨格に関する追加情報は、Ｂｉｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２００５  ２３：１２５７−１２６８；Ｓｋｅｒｒａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００７  １８：２９５−３０４；及びＳｉｌａｃｃｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１４，２８９：１４３９２−１４３９８で提供され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。代替骨格は、１つのタイプの抗体である。
【００５８】
「抗原結合ドメイン」という用語は、抗原またはエピトープに特異的に結合することが可能な抗体の部分を意味する。抗原結合ドメインの一例は、抗体のＶＨ−ＶＬ二量体により形成される抗原結合ドメインである。抗原結合ドメインの別の例は、アドネクチンの１０番目のフィブロネクチンＩＩＩ型ドメインからの特定のループの多様化により形成される抗原結合ドメインである。抗原結合ドメインは、軽鎖由来のＣＤＲ１、２、及び３をその順序で、重鎖由来のＣＤＲ１、２、及び３をその順序で含み得る。
【００５９】
「全長抗体」、「インタクト抗体」、及び「全抗体」という用語は、天然に存在する抗体構造と実質的に類似する構造を有し且つＦｃ領域を含む重鎖を有する抗体を指すために、本明細書で互換的に使用される。例えば、ＩｇＧ分子を指すために使用される時、「全長抗体」は、２つの重鎖及び２つの軽鎖を含む抗体である。
【００６０】
「Ｆｃ領域」または「Ｆｃ」という用語は、天然に存在する抗体において、Ｆｃ受容体及び補体系の特定のタンパク質と相互作用する免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を意味する。種々の免疫グロブリンのＦｃ領域の構造、及びそこに含有されるグリコシル化部位は、当該技術分野で既知である。全体が参照により組み込まれるＳｃｈｒｏｅｄｅｒ  ａｎｄ  Ｃａｖａｃｉｎｉ，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０１０，１２５：Ｓ４１−５２を参照のこと。Ｆｃ領域は、天然に存在するＦｃ領域、または当該技術分野もしくは本開示の他の箇所に記載されるように修飾されるＦｃ領域であってよい。
【００６１】
ＶＨ及びＶＬ領域はさらに、より保存される領域が点在する、超可変性を有する領域（「超可変領域（ＨＶＲ）」；「相補性決定領域」（ＣＤＲ）とも呼ばれる）に細分化され得る。より保存される領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。各ＶＨ及びＶＬは一般に、以下の順序で（Ｎ末端からＣ末端に）配置された３つのＣＤＲ及び４つのＦＲを含む：ＦＲ１−ＣＤＲ１−ＦＲ２−ＣＤＲ２−ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４。ＣＤＲは、抗原結合に関与しており、抗体の抗原特異性及び結合親和性に影響を及ぼす。全体が参照により組み込まれるＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ  ５ｔｈ  ｅｄ．（１９９１）Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤを参照のこと。
【００６２】
任意の脊椎動物種由来の軽鎖は、その定常ドメインの配列に基づいて、カッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる２タイプのうちの１つに割り当てることができる。
【００６３】
任意の脊椎動物種由来の重鎖は、５つの異なるクラス（またはアイソタイプ）：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭのうちの１つに割り当てることができる。これらのクラスは、それぞれα、δ、ε、γ、及びμとも表記される。ＩｇＧ及びＩｇＡクラスはさらに、配列及び機能の差異に基づいてサブクラスに分けられる。ヒトは、以下のサブクラス：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２を発現する。
【００６４】
ＣＤＲのアミノ酸配列境界は、上掲のＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（“Ｋａｂａｔ”番号付けスキーム）；Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３：９２７−９４８（“Ｃｈｏｔｈｉａ”番号付けスキーム）；ＭａｃＣａｌｌｕｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２−７４５（“Ｃｏｎｔａｃｔ”番号付けスキーム）；Ｌｅｆｒａｎｃ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，２７：５５−７７（“ＩＭＧＴ”番号付けスキーム）；及びＨｏｎｅｇｇｅ  ａｎｄ  Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００１，３０９：６５７−７０（“ＡＨｏ”番号付けスキーム）を含む既知の番号付けスキームのいずれかを使用して、当業者が決定することができ、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【００６５】
表１に、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａスキームで特定されたＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、及びＣＤＲ−Ｈ３の位置を示す。ＣＤＲ−Ｈ１の場合、残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ番号付けスキームの両方を使用して提供される。
【００６６】
ＣＤＲは、例えば、ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆ．ｏｒｇ．ｕｋ／ａｂｓ／ａｂｎｕｍ／で入手可能の且つ全体が参照により組み込まれるＡｂｈｉｎａｎｄａｎ  ａｎｄ  Ｍａｒｔｉｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００８，４５：３８３２−３８３９に記載されるＡｂｎｕｍなどの抗体の番号付けソフトウエアを使用して、割り当てられてもよい。
【００６７】
（表１）Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの番号付けスキームによるＣＤＲの残基
2020528752.tif 000003
＊ＣＤＲ−Ｈ１のＣ末端は、Ｋａｂａｔ番号付け規則を使用して番号付けされる時、ＣＤＲの長さに応じてＨ３２及びＨ３４間で異なる。
【００６８】
「ＥＵ番号付けスキーム」は一般に、抗体重鎖定常領域内の残基を指す時に、（例えば、上掲のＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．で報告されているように）使用される。別途記載のない限り、ＥＵ番号付けスキームは、本明細書に記載の抗体重鎖定常領域の残基を指すために使用される。
【００６９】
「抗体フラグメント」は、インタクト抗体の抗原結合領域または可変領域などの、インタクト抗体の一部を含む。抗体フラグメントは、例えば、Ｆｖフラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、ｓｃＦｖ（ｓＦｖ）フラグメント、及びｓｃＦｖ−Ｆｃフラグメントを含む。
【００７０】
「Ｆｖ」フラグメントは、１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインの非共有結合した二量体を含む。
【００７１】
「Ｆａｂ」フラグメントは、重鎖及び軽鎖可変ドメインに加えて、軽鎖の定常ドメイン及び重鎖の最初の定常ドメイン（ＣＨ１）を含む。Ｆａｂフラグメントは、例えば、組み換え法により、または全長抗体のパパイン消化により生成されてもよい。
【００７２】
「Ｆ（ａｂ’）２」フラグメントは、ジスルフィド結合によりヒンジ領域付近で結合している２つのＦａｂ’フラグメントを含有する。Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは、例えば、組み換え法により、またはインタクト抗体のペプシン消化により生成されてもよい。Ｆ（ａｂ’）フラグメントは、例えば、β−メルカプトエタノールで処理することにより解離することができる。
【００７３】
「単鎖Ｆｖ」または「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体フラグメントは、単一のポリペプチド鎖にＶＨドメイン及びＶＬドメインを含む。ＶＨ及びＶＬは一般に、ペプチドリンカーにより連結されている。Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  Ａ．（１９９４）を参照のこと。任意の好適なリンカーが使用されてもよい。一部の実施形態では、リンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２７）である。一部の実施形態では、ｎ＝１、２、３、４、５、または６である。全体が参照により組み込まれるＲｏｓｅｎｂｅｒｇ  Ｍ．＆  Ｍｏｏｒｅ  Ｇ．Ｐ．（Ｅｄｓ．），Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｖｏｌ．１１３（ｐｐ．２６９−３１５）．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  ＹｏｒｋのＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ由来の抗体を参照のこと。
【００７４】
「ｓｃＦｖ−Ｆｃ」フラグメントは、Ｆｃドメインに結合しているｓｃＦｖを含む。例えば、Ｆｃドメインは、ｓｃＦｖのＣ末端に結合していてもよい。Ｆｃドメインは、ｓｃＦｖ内の可変ドメインの配向に応じて、ＶＨまたはＶＬに続いてもよい（すなわち、ＶＨ−ＶＬまたはＶＬ−ＶＨ）。当該技術分野で既知または本明細書に記載の任意の好適なＦｃドメインが使用されてもよい。一部の場合では、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ４  Ｆｃドメインを含む。
【００７５】
「単一ドメイン抗体」という用語は、抗体の１つの可変ドメインが他の可変ドメインの存在なしに抗原に特異的に結合する分子を指す。単一ドメイン抗体及びそのフラグメントは、Ａｒａｂｉ  Ｇｈａｈｒｏｕｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９８，４１４：５２１−５２６  ａｎｄ  Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｓｃｉ．，２００１，２６：２３０−２４５に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。単一ドメイン抗体は、ｓｄＡｂｓまたはナノボディとしても知られている。
【００７６】
「多重特異性抗体」は、２つ以上の異なるエピトープに集合的に特異的に結合する２つ以上の異なる抗原結合ドメインを含む抗体である。２つ以上の異なるエピトープは、同じ抗原（例えば、細胞により発現される単一のＳＩＲＰ−アルファ分子）、または、異なる抗原（例えば、同じ細胞により発現される異なるＳＩＲＰ−アルファ分子、もしくはＳＩＲＰ−アルファ分子及び非ＳＩＲＰ−アルファ分子）上のエピトープであってよい。一部の態様では、多重特異性抗体は、２つの異なるエピトープに結合する（すなわち、「二重特異性抗体」）。一部の態様では、多重特異性抗体は、３つの異なるエピトープに結合する（すなわち、「三重特異性抗体」）。
【００７７】
「単一特異性抗体」は、単一のエピトープに特異的に結合する１つ以上の結合部位を含む抗体である。単一特異性抗体の例は、二価である（すなわち、２つの抗原結合ドメインを有する）が、２つの抗原結合ドメインのそれぞれで同じエピトープを認識する天然に存在するＩｇＧ分子である。結合特異性は、任意の好適な結合価で存在し得る。
【００７８】
「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団由来の抗体を指す。実質的に均一な抗体の集団は、通常モノクローナル抗体の産生中に生じ得る変種を除いて、実質的に類似しており且つ同じエピトープ（複数可）に結合する抗体を含む。このような変種は一般に、ごく少量でしか存在しない。モノクローナル抗体は通常、複数の抗体から単一の抗体を選択することを含むプロセスにより得られる。例えば、選択プロセスは、ハイブリドーマクローン、ファージクローン、酵母クローン、細菌クローン、または他の組み換えＤＮＡクローンのプールなどの複数のクローン由来のユニークなクローンの選択とすることができる。選択された抗体はさらに、例えば、標的への親和性を改善するように（「親和性成熟」）、抗体をヒト化するように、細胞培養における産生を改善するように、及び／または対象において免疫原性を低減させるように改変することができる。
【００７９】
「キメラ抗体」という用語は、重鎖及び／または軽鎖の一部が特定の供給源または種に由来するが、重鎖及び／または軽鎖の残りが異なる供給源または種に由来する抗体を指す。
【００８０】
非ヒト抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト抗体に由来する最小配列を含有するキメラ抗体である。ヒト化抗体は一般に、１つ以上のＣＤＲの残基が非ヒト抗体（ドナー抗体）の１つ以上のＣＤＲの残基で置き換えられているヒト抗体（レシピエント抗体）である。ドナー抗体は、任意の好適な非ヒト抗体、例えば、マウス、ラット、ウサギ、ニワトリ、または、所望の特異性、親和性、もしくは生物学的影響を有する非ヒト霊長類抗体、とすることができる。一部の場合では、レシピエント抗体の選択されたフレームワーク領域残基は、ドナー抗体の対応するフレームワーク領域残基に置き換えられる。ヒト化抗体は、レシピエント抗体またはドナー抗体のいずれにも見出されない残基も含んでもよい。そのような改変は、抗体機能をさらに除去するように行われてもよい。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８６，３２１：５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８８，３３２：３２３−３２９；及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，１９９２，２：５９３−５９６（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）を参照のこと。
【００８１】
「ヒト抗体」は、ヒトもしくはヒト細胞により産生されるか、または、ヒト抗体レパートリーもしくはヒト抗体をコードする配列を利用する非ヒト供給源に由来する抗体に対応するアミノ酸配列を有するものである（例えば、ヒト供給源から得られるかもしくは最初から設計される）。ヒト抗体は特に、ヒト化抗体を除外する。
【００８２】
「親和性」は、分子の単一結合部位（例えば、抗体）及びその結合パートナー（例えば、抗原またはエピトープ）間の非共有結合相互作用の合計の強さを指す。別途指示のない限り、本明細書で使用される場合、「親和性」は、結合ペアのメンバー（例えば、抗体及び抗原またはエピトープ）間の１：１相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。パートナーＹに対する分子Ｘの親和性は、解離平衡定数（ＫＤ）で表すことができる。解離平衡定数に寄与する動力学的構成要素は、以下に、より詳細に記載される。親和性は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標））またはバイオレイヤー干渉法（例えば、ＦＯＲＴＥＢＩＯ（登録商標））などの本明細書に記載のものを含む、当該技術分野で既知の一般的な方法により測定することができる。
【００８３】
標的分子への抗体の結合に関して、特定の抗原（例えば、ポリペプチド標的）または特定の抗原上のエピトープに「結合する」、「特異的結合」、「特異的に結合する」、「特異的である」、「選択的に結合する」、及び「選択的である」という用語は、（例えば、非標的分子との）非特異的または非選択的相互作用とある程度異なる結合を意味する。特異的結合は、例えば、標的分子への結合を測定すること及びそれを非標的分子への結合と比較することにより測定することができる。特異的結合は、標的分子上で認識されるエピトープを模倣する対照分子との競合により決定することもできる。その場合、特異的結合は、標的分子への抗体の結合が対照分子により競合的に阻害される場合に示される。一部の態様では、非標的分子に対するＳＩＲＰ−アルファ抗体の親和性は、ＳＩＲＰ−アルファに対する親和性の約５０％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＳＩＲＰ−アルファ抗体の親和性は、ＳＩＲＰ−アルファに対する親和性の約４０％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＳＩＲＰ−アルファ抗体の親和性は、ＳＩＲＰ−アルファに対する親和性の約３０％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＳＩＲＰ−アルファ抗体の親和性は、ＳＩＲＰ−アルファに対する親和性の約２０％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＳＩＲＰ−アルファ抗体の親和性は、ＳＩＲＰ−アルファに対する親和性の約１０％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＳＩＲＰ−アルファ抗体の親和性は、ＳＩＲＰ−アルファに対する親和性の約１％未満である。一部の態様では、非標的分子に対するＳＩＲＰ−アルファ抗体の親和性は、ＳＩＲＰ−アルファに対する親和性の約０．１％未満である。
【００８４】
本明細書で使用される「ｋｄ」（秒−１）という用語は、特定の抗体−抗原相互作用の解離速度定数を指す。この値は、ｋｏｆｆ値とも呼ばれる。
【００８５】
本明細書で使用される「ｋａ」（Ｍ−１×秒−１）という用語は、特定の抗体−抗原相互作用の会合速度定数を指す。この値は、ｋｏｎ値とも呼ばれる。
【００８６】
本明細書で使用される「ＫＤ」（Ｍ）という用語は、特定の抗体−抗原相互作用の解離平衡定数を指す。ＫＤ＝ｋｄ／ｋａ。一部の実施形態では、抗体の親和性は、そのような抗体及びその抗原間の相互作用に対するＫＤの観点から説明される。明確にするために、当該技術分野で既知のように、より小さなＫＤ値は、より高い親和性相互作用を示すが、より大きなＫＤ値は、より低い親和性相互作用を示す。
【００８７】
本明細書で使用される「ＫＡ」（Ｍ−１）という用語は、特定の抗体−抗原相互作用の会合平衡定数を指す。ＫＡ＝ｋａ／ｋｄ。
【００８８】
「免疫複合体」は、治療薬（例えば、サイトカイン）または診断薬などの１つ以上の異種分子（複数可）にコンジュゲートされている抗体である。
【００８９】
「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域により媒介される生物学的活性を指し、この活性は、抗体のアイソタイプに応じて変動し得る。抗体エフェクター機能の例としては、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を活性化するＣ１ｑ結合、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を活性化するＦｃ受容体結合、及び抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）が挙げられる。
【００９０】
本明細書で２つ以上の抗体との関連で使用される時、「競合する」または「交差競合する」という用語は、２つ以上の抗体が抗原（例えば、ＳＩＲＰ−アルファ）への結合について競合することを示す。１つの例示的なアッセイでは、ＳＩＲＰ−アルファは、表面にコーティングされ、第１のＳＩＲＰ−アルファ抗体と接触させ、その後、第２のＳＩＲＰ−アルファ抗体が添加される。別の例示的なアッセイでは、第１のＳＩＲＰ−アルファ抗体は、表面にコーティングされ、ＳＩＲＰ−アルファと接触させ、次に、第２のＳＩＲＰ−アルファ抗体が添加される。いずれのアッセイでも、第１のＳＩＲＰ−アルファ抗体の存在が第２のＳＩＲＰ−アルファ抗体の結合を低減させる場合、抗体は、互いに競合する。「競合する」という用語は、ある抗体が別の抗体の結合を低減させるが、抗体が逆の順序で添加される時に、競合が観察されない抗体の組み合わせも含む。しかし、一部の実施形態では、第１及び第２の抗体は、それらが添加される順序に関係なく、互いの結合を阻害する。一部の実施形態では、ある抗体は、抗原への別の抗体の結合を少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させる。当業者は、ＳＩＲＰ−アルファに対する抗体の親和性及び抗体の原子価に基づいて、競合アッセイで使用される抗体の濃度を選択することができる。本定義に記載のアッセイは、例示であり、当業者は、抗体が互いに競合するかどうかを判定するために任意の好適なアッセイを利用することができる。好適なアッセイは、例えば、Ｃｏｘ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，”ｉｎ  Ａｓｓａｙ  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｍａｎｕａｌ［Ｉｎｔｅｒｎｅｔ］，Ｕｐｄａｔｅｄ  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２４，  ２０１４  （ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｂｏｏｋｓ／ＮＢＫ９２４３４／；ａｃｃｅｓｓｅｄ  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ２９，２０１５）；Ｓｉｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，２００１，４４：３０−３７；及びＦｉｎｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ａｎａｌ．，２０１１，５４：３５１−３５８に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【００９１】
「エピトープ」という用語は、抗体に特異的に結合する抗原の一部を意味する。エピトープは多くの場合、表面にアクセス可能なアミノ酸残基及び／または糖側鎖からなり、特定の３次元構造特性及び特定の電荷特性を有し得る。立体配座及び非立体配座のエピトープは、後者ではなく前者への結合が、変性溶媒の存在下で喪失され得るという点で区別される。エピトープは、結合に直接関与するアミノ酸残基、及び結合に直接関与しない他のアミノ酸残基を含んでもよい。抗体が結合するエピトープは、例えば、異なる点変異を有するＳＩＲＰ−アルファ変種またはキメラＳＩＲＰ−アルファ変種への抗体結合の試験などの、エピトープ決定のための既知の技術を使用して決定することができる。
【００９２】
ポリペプチド配列及び参照配列間のパーセント「同一性」は、必要に応じて、最大パーセント配列同一性を達成するために配列をアラインしてギャップを導入した後の、参照配列内のアミノ酸残基と同一であるポリペプチド配列内のアミノ酸残基の割合として定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定することを目的としたアラインメントは、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、ＭＥＧＡＬＩＧＮ（ＤＮＡＳＴＡＲ）、ＣＬＵＳＴＡＬＷ、ＣＬＵＳＴＡＬ  ＯＭＥＧＡ、またはＭＵＳＣＬＥソフトウエアなどの一般に公開されているコンピュータソフトウエアを使用して、当業者の範囲内にある種々の方法で達成することができる。当業者らは、比較される配列の全長にわたって最大のアラインメントを達成するために必要とされる任意のアルゴリズムを含む、配列をアラインするための適切なパラメーターを決定することができる。
【００９３】
「保存的置換」または「保存的アミノ酸置換」は、化学的または機能的に類似するアミノ酸によるアミノ酸の置換を指す。類似のアミノ酸を提供する保存的置換表は、当該技術分野で周知である。例として、表２〜４で提供されるアミノ酸のグループは、一部の実施形態では、互いに保存的置換と考えられている。
【００９４】
（表２）特定の実施形態の、互いに保存的置換と考えられるアミノ酸の選択されるグループ
2020528752.tif 000004
【００９５】
（表３）特定の実施形態の、互いに保存的置換と考えられるアミノ酸の追加の選択されるグループ
2020528752.tif 000005
【００９６】
（表４）特定の実施形態の、互いに保存的置換と考えられるアミノ酸のさらに選択されるグループ
2020528752.tif 000006
【００９７】
追加の保存的置換は、例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ２ｎｄ  ｅｄ．（１９９３）Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ＆  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹに見出され得る。親抗体のアミノ酸残基の１つ以上の保存的置換を行うことにより生成された抗体は、「保存的に改変されている変種」と呼ばれる。
【００９８】
「アミノ酸」という用語は、２０の一般的な天然に存在するアミノ酸を指す。天然に存在するアミノ酸は、アラニン（Ａｌａ；Ａ）、アルギニン（Ａｒｇ；Ｒ）、アスパラギン（Ａｓｎ；Ｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ；Ｄ）、システイン（Ｃｙｓ；Ｃ）；グルタミン酸（Ｇｌｕ；Ｅ）、グルタミン（Ｇｌｎ；Ｑ）、グリシン（Ｇｌｙ；Ｇ）；ヒスチジン（Ｈｉｓ；Ｈ）、イソロイシン（Ｉｌｅ；Ｉ）、ロイシン（Ｌｅｕ；Ｌ）、リジン（Ｌｙｓ；Ｋ）、メチオニン（Ｍｅｔ；Ｍ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ；Ｆ）、プロリン（Ｐｒｏ；Ｐ）、セリン（Ｓｅｒ；Ｓ）、スレオニン（Ｔｈｒ；Ｔ）、トリプトファン（Ｔｒｐ；Ｗ）、チロシン（Ｔｙｒ；Ｙ）、及びバリン（Ｖａｌ；Ｖ）を含む。
【００９９】
本明細書で使用される「ベクター」という用語は、それが連結されている別の核酸を増殖させることが可能な核酸分子を指す。本用語は、自己複製核酸構造としてのベクター及びそれが導入されている宿主細胞のゲノムに組み込まれるベクターを含む。特定のベクターは、それらが作動可能に連結されている核酸の発現を導くことが可能である。そのようなベクターは、本明細書では「発現ベクター」と呼ばれる。
【０１００】
「宿主細胞」、「宿主細胞株」、及び「宿主細胞培養物」という用語は、互換的に使用され、外因性核酸が導入されている細胞及びそのような細胞の子孫を指す。宿主細胞は、「形質転換体」（または「形質転換細胞」）及び「形質転換体」（または「トランスフェクト細胞」）が含まれ、それぞれ、１次形質転換またはトランスフェクト細胞及びそれに由来する子孫を含む。そのような子孫は、核酸含量が親細胞と完全に同一ではなくてもよく、変異を含有してもよい。
【０１０１】
「処置すること」（及びその変形形態、例えば、「処置する」または「処置」）という用語は、それを必要とする対象の疾患または状態の自然経過を変更しようとする臨床的介入を指す。処置は、予防及び臨床的病状の過程の両方で実施することができる。処置の望ましい効果は、疾患の発生または再発の予防、症状の緩和、疾患の任意の直接的または間接的な病理学的結果の低下、転移の予防、疾患の進行速度の減少、疾患状態の改善または緩和、及び寛解または改善された予後を含む。
【０１０２】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」または「有効量」という用語は、対象に投与された時に、疾患または障害を処置するのに有効な、本明細書で提供される抗体または医薬組成物の量を指す。
【０１０３】
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、哺乳動物対象を意味する。例示的な対象としては、ヒト、サル、イヌ、ネコ、マウス、ラット、ウシ、ウマ、ラクダ、ヤギ、ウサギ、及びヒツジが挙げられる。特定の実施形態では、対象は、ヒトである。一部の実施形態では、対象は、本明細書で提供される抗体で処置することができる疾患または状態を有する。一部の態様では、疾患または状態は、がんである。一部の態様では、疾患または状態は、ウイルス感染症である。
【０１０４】
「添付文書」という用語は、そのような治療または診断製品の使用に関する、適応症、使用法、投薬量、投与、併用療法、禁忌、及び／または警告についての情報を含有する治療または診断製品の市販パッケージ（例えば、キット）に通例含まれる使用説明書を指すために使用される。
【０１０５】
本明細書で使用される「細胞傷害薬」という用語は、細胞機能を阻害または防止し、及び／または細胞死もしくは破壊を引き起こす物質を指す。
【０１０６】
「化学療法薬」は、がんの処置に有用な化合物を指す。化学療法薬は、がんの成長を促進することができるホルモンの影響を制御、低減、遮断、または阻害するように作用する「抗ホルモン薬」または「内分泌治療薬」を含む。
【０１０７】
「細胞増殖抑制薬」という用語は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏのいずれかで細胞の成長を停止させる化合物または組成物を指す。一部の実施形態では、細胞増殖抑制薬は、Ｓ期の細胞の割合を低減させる薬剤である。一部の実施形態では、細胞増殖抑制薬は、Ｓ期の細胞の割合を少なくとも約２０％、少なくとも約４０％、少なくとも約６０％、または少なくとも約８０％低減させる。
【０１０８】
「腫瘍」という用語は、悪性または良性に関わらず、全ての腫瘍性細胞成長及び増殖、ならびに全ての前がん性及びがん性細胞及び組織を指す。「がん」、「がん性」、「細胞増殖性障害」、「増殖性障害」、及び「腫瘍」という用語は、本明細書で言及されるように相互に排他的ではない。「細胞増殖性障害」及び「増殖性障害」という用語は、ある程度の異常な細胞増殖に関連する障害を指す。一部の実施形態では、細胞増殖性障害は、がんである。一部の態様では、腫瘍は、固形腫瘍である。一部の態様では、腫瘍は、血液悪性腫瘍である。
【０１０９】
「医薬組成物」という用語は、それに含有される活性成分の生物学的活性が対象の処置に有効であるような形態であり且つ医薬組成物で提供される量で対象に許容できないほどの有毒性がある追加の構成成分を含有しない調製物を指す。
【０１１０】
「同時投与」、「同時投与する」、及び「組み合わせて」という用語は、特定の時間制限なしで同時に、同時的に、または連続して２つ以上の治療薬を投与することを含む。一実施形態では、薬剤は、細胞内にもしくは対象の体内に同時に存在するか、または、それらの生物学的もしくは治療効果を同時に発揮する。一実施形態では、治療薬は、同じ組成物または単位剤形である。他の実施形態では、治療薬は、別々の組成物または単位剤形である。特定の実施形態では、第１の薬剤は、第２の治療薬の投与前（例えば、数分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、もしくは１２週間前）に、第２の治療薬と付随して、または第２の治療薬の投与後（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、もしくは１２週間後）に投与することができる。
【０１１１】
「調節する」及び「調節」という用語は、列挙されている可変要素を低減もしくは阻害すること、または活性化もしくは増加させることを指す。
【０１１２】
「増加」及び「活性化」という用語は、列挙されている可変要素の１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、またはそれ以上の増加を指す。
【０１１３】
「低減させる」及び「阻害する」という用語は、列挙されている可変要素の１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、２分の１倍、３分の１倍、４分の１倍、５分の１倍、１０分の１倍、２０分の１倍、５０分の１倍、１００分の１倍、またはそれ以下の減少を指す。
【０１１４】
「作動する」という用語は、受容体の活性化に関連する生物学的応答を誘発する受容体シグナル伝達の活性化を指す。「アゴニスト」は、受容体に結合し且つそれを作動する実体である。
【０１１５】
「拮抗する」という用語は、受容体の活性化に関連する生物学的応答を阻害する受容体シグナル伝達の阻害を指す。「アンタゴニスト」は、受容体に結合し且つ拮抗する実体である。
【０１１６】
ＳＩＲＰ−アルファ抗体
ＳＩＲＰ−アルファに特異的に結合する抗体が、本明細書で提供される。一部の態様では、ＳＩＲＰ−アルファは、ヒトＳＩＲＰ−アルファである。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＩＲＰ−アルファの細胞外ドメインに特異的に結合する。ＳＩＲＰ−アルファは、任意の好適な標的細胞の表面に発現し得る。一部の実施形態では、標的細胞は、プロフェッショナル抗原提示細胞である。一部の実施形態では、標的細胞は、マクロファージである。抗体は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプに汎特異的であり得る。抗体は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプに特異的であり得る。
【０１１７】
特定の実施形態では、抗体は、１Ｈ９である。特定の実施形態では、抗体は、３Ｃ２である。
【０１１８】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、軽鎖を含む。一部の態様では、軽鎖は、カッパ軽鎖である。一部の態様では、軽鎖は、ラムダ軽鎖である。
【０１１９】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、重鎖を含む。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＡである。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＤである。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＥである。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＧである。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＭである。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＧ１である。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＧ２である。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＧ３である。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＧ４である。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＡ１である。一部の態様では、重鎖は、ＩｇＡ２である。
【０１２０】
一部の実施形態では、抗体は、Ｂｉａｃｏｒｅアッセイで測定された約１、１〜６、１〜５、１〜４、１〜３、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０ｘ１０−９Ｍ以下のＫＤで、ヒトＳＩＲＰαに結合する。
【０１２１】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、抗体フラグメントを含む。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、抗体フラグメントからなる。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、抗体フラグメントから本質的になる。一部の態様では、抗体フラグメントは、Ｆｖフラグメントである。一部の態様では、抗体フラグメントは、Ｆａｂフラグメントである。一部の態様では、抗体フラグメントは、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントである。一部の態様では、抗体フラグメントは、Ｆａｂ’ フラグメントである。一部の態様では、抗体フラグメントは、ｓｃＦｖ（ｓＦｖ）フラグメントである。一部の態様では、抗体フラグメントは、ｓｃＦｖ−Ｆｃフラグメントである。一部の態様では、抗体フラグメントは、単一ドメイン抗体のフラグメントである。
【０１２２】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体フラグメントは、本明細書で提供される例示的な抗体に由来する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体フラグメントは、本明細書で提供される例示的な抗体に由来せず、例えば、抗体フラグメントを得るために本明細書で提供される方法に従ってｄｅ  ｎｏｖｏで単離されてもよい。
【０１２３】
一部の実施形態では、本明細書に提供される抗体フラグメントは、本明細書に記載の１つ以上のアッセイまたは生物学的効果により測定されるＳＩＲＰ−アルファに拮抗する能力を保持する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体フラグメントは、本明細書に記載されるように、ＳＩＲＰ−アルファがそのリガンドのうちの１つ以上と相互作用するのを防ぐ能力を保持する。
【０１２４】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体フラグメントは、ＳＩＲＰ−アルファへの結合について１Ｈ９及び／または３Ｃ２と競合する。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のフラグメントは、そのような抗体と同じＳＩＲＰ−アルファのエピトープに結合する。
【０１２５】
Ｆｃγ受容体への親和性が低減したヒトＦｃ領域を含む抗体の使用の代替物として、抗体は、例えば、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントなどの抗体フラグメントを産生することにより、Ｆｃ配列を欠損しているように操作することができる。Ｆ（ａｂ）２フラグメントを生成するために、製造者の指示に従って、精製抗体は、安定したレジンに固定されたＰｉｅｒｃｅ  Ｆ（ａｂ’）２調製ペプシンで懸濁される。ペプシン消化は通常、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント（非還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥにより約１１０ｋＤａ）及びＦｃ部分の多数の小さなペプチドを生じる。得られたＦ（ａｂ’）２フラグメントは、２つのジスルフィド結合で連結されている１対のＦａｂ’ユニットで構成されている。Ｆｃフラグメントは、広範囲で分解され、透析、ゲル濾過、またはイオン交換クロマトグラフィーにより、Ｆ（ａｂ’）２から分離される。
【０１２６】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ポリクローナル抗体である。
【０１２７】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、キメラ抗体を含む。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、キメラ抗体からなる。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、キメラ抗体から本質的になる。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ヒト化抗体を含む。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ヒト化抗体からなる。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ヒト化抗体から本質的になる。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ヒト抗体を含む。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ヒト抗体からなる。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ヒト抗体から本質的になる。
【０１２８】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、代替骨格を含む。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、代替骨格からなる。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、代替骨格から本質的になる。任意の好適な代替骨格が使用されてもよい。一部の態様では、代替骨格は、Ａｄｎｅｃｔｉｎ（商標）、ｉＭａｂ、Ａｎｔｉｃａｌｉｎ（登録商標）、ＥＥＴＩ−ＩＩ／ＡＧＲＰ、Ｋｕｎｉｔｚドメイン、チオレドキシンペプチドアプタマー、Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）、ＤＡＲＰｉｎ、Ａｆｆｉｌｉｎ、Ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎ、Ｆｙｎｏｍｅｒ、及びＡｖｉｍｅｒから選択される。
【０１２９】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＩＲＰ−アルファの１つ以上のリガンドへのＳＩＲＰ−アルファの結合を阻害する。
【０１３０】
特定の態様では、抗体は、ＳＩＲＰ−ガンマに結合しない。特定の態様では、抗体は、ＳＩＲＰ−ガンマに実質的に結合しない。
【０１３１】
一部の態様では、本明細書に開示の抗体は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプに汎特異的である。１Ｈ９などの本明細書に開示の抗体は、Ｖ１、Ｖ２、及びＶ１／Ｖ５のうちの１つ以上を含む複数のヒトＳＩＲＰαアイソタイプに結合し得る。ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４８に示される例示的なＶ１配列。ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９に示される例示的なＶ２配列。Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  Ｓｉｒｐａ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｅｎｇｒａｆｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８；１３１３，２００７も参照のこと。本明細書に開示の抗体は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ１及びＶ２のそれぞれに結合し得る。本明細書に開示の抗体は、ホモ接合型を含むヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ１に結合し得る。本明細書に開示の抗体は、ホモ接合型を含むヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ２に結合し得る。本明細書に開示の抗体は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ１／Ｖ５（ヘテロ接合型）に結合し得る。１Ｈ９などの本明細書に開示の抗体は、Ｖ１、Ｖ２、及びＶ１／Ｖ５のそれぞれを含む複数のヒトＳＩＲＰαアイソタイプに結合し得る。そのような抗体は、そのような抗体のヒト化及び／またはＦｃ操作バージョンを含む１Ｈ９及び３Ｃ２を含み得る。１Ｈ９は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ１及びＶ２のそれぞれに結合し得る。１Ｈ９は、ホモ接合型を含むヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ１に結合し得る。１Ｈ９は、ホモ接合型を含むヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ２に結合し得る。１Ｈ９は、ヒトＳＩＲＰαアイソタイプＶ１／Ｖ５（ヘテロ接合型）に結合し得る。１Ｈ９は、Ｖ１、Ｖ２、及びＶ１／Ｖ５のそれぞれを含む複数のヒトＳＩＲＰαアイソタイプに結合し得る。ヒトＳＩＲＰα変種への結合は、ＰＣＲ及び／またはフローサイトメトリーを含む当該技術分野で既知のアッセイを使用して測定することができる。例えば、所与の試料は、ＳＩＲＰの状態を決定するために遺伝子型を決定することができ、ＳＩＲＰへの結合は、フローサイトメトリーを使用して決定することができる。
【０１３２】
特定の態様では、抗体は、ヒトＳＩＲＰαへの結合について１Ｈ９及び３Ｃ２から選択される抗体と競合する。特定の態様では、抗体は、１Ｈ９または３Ｃ２が結合するのと同じヒトＳＩＲＰαエピトープに結合する。特定の態様では、抗体は、１Ｈ９または３Ｃ２が結合するのと重複するヒトＳＩＲＰαエピトープに結合する。特定の態様では、抗体は、１Ｈ９または３Ｃ２が結合するのと異なるヒトＳＩＲＰαエピトープに結合する。
【０１３３】
特定の態様では、抗体は、ヒトＳＩＲＰαへの結合についてＫＷａｒ抗体と競合しない。
【０１３４】
特定の態様では、抗体は、ヒトＳＩＲＰαへの結合についてＫＷａｒ抗体と部分的に競合する。
【０１３５】
特定の態様では、抗体は、ヒトＳＩＲＰαへのヒトＣＤ４７の結合を阻害する。
【０１３６】
特定の態様では、抗体は、ヒトＳＩＲＰαへのヒトＳＰ−Ａの結合を阻害する。
【０１３７】
特定の態様では、抗体は、ヒトＳＩＲＰαへのヒトＳＰ−Ｄの結合を阻害する。
【０１３８】
特定の態様では、抗体は、アカゲザルＳＩＲＰαに結合する。
【０１３９】
特定の態様では、抗体は、カニクイザルＳＩＲＰαに結合する。
【０１４０】
特定の態様では、抗体は、対照と比較して貪食を増加させる。
【０１４１】
ヒトＳＩＲＰαの結合について本明細書に開示の抗体と競合する、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体もまた、本明細書で開示される。
【０１４２】
本明細書に開示の抗体が結合するヒトＳＩＲＰαエピトープに結合する、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体もまた、本明細書で開示される。
【０１４３】
特定の態様では、抗体は、ヒトＦｃ受容体への結合を低減させる少なくとも１つの修飾を含むヒトＦｃ領域を含む。
【０１４４】
一部の実施形態では、抗体は、本明細書で提供される例示的な抗体、例えば、１Ｈ９及び／または３Ｃ２と競合する抗体である。一部の態様では、本明細書で提供される例示的な抗体と競合する抗体は、本明細書で提供される例示的な抗体と同じエピトープに結合する。
【０１４５】
抗体が細胞内で発現される時、抗体が翻訳後に修飾されることが知られている。翻訳後修飾の例としては、カルボキシペプチダーゼによる重鎖のＣ末端でのリジンの切断；ピログルタミル化による、ピログルタミン酸への重鎖及び軽鎖のＮ末端でのグルタミンまたはグルタミン酸の修飾；グリコシル化；酸化；脱アミド化；及び糖化が挙げられ、そのような翻訳後修飾が種々の抗体で起こることが知られている（全体が参照により組み込まれるＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００８，Ｖｏｌ．９７，ｐ．２４２６−２４４７を参照のこと）。一部の実施形態では、抗体は、翻訳後修飾を受けている抗体またはその抗原結合フラグメントである。翻訳後修飾を受けている抗体またはその抗原結合フラグメントの例としては、重鎖可変領域のＮ末端でのピログルタミル化及び／または重鎖のＣ末端でのリジンの欠失を受けている抗体またはその抗原結合フラグメントが挙げられる。Ｎ末端でのピログルタミル化及びＣ末端でのリジンの欠失によるそのような翻訳後修飾が、抗体またはそのフラグメントの活性にいかなる影響を有さないことが、当該技術分野で既知である（全体が参照により組み込まれるＡｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００６，Ｖｏｌ．３４８，ｐ．２４−３９）。
【０１４６】
ＳＩＲＰ−アルファ抗体の配列
抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含み得る。
【０１４７】
抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のＶＬ配列を含み得る。
【０１４８】
抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８の軽鎖を含み得る。
【０１４９】
抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含み得る。
【０１５０】
抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のＶＬ配列を含み得る。
【０１５１】
抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０の軽鎖を含み得る。
【０１５２】
抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含み得る。
【０１５３】
抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のＶＬ配列を含み得る。
【０１５４】
抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ２；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ３；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ１；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ２；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含み得る。
【０１５５】
抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６のＶＬ配列を含み得る。
【０１５６】
特定の態様では、抗体は、１Ｈ９の１つ以上のＣＤＲを含み得る。特定の態様では、抗体は、１Ｈ９の全てのＣＤＲを含み得る。特定の態様では、抗体は、１Ｈ９の１つ以上の可変配列を含み得る。特定の態様では、抗体は、１Ｈ９の各可変配列を含み得る。特定の態様では、抗体は、１Ｈ９の重鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、１Ｈ９の軽鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、１Ｈ９の重鎖及び軽鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、１Ｈ９である。
【０１５７】
特定の態様では、抗体は、３Ｃ２の１つ以上のＣＤＲを含み得る。特定の態様では、抗体は、３Ｃ２の全てのＣＤＲを含み得る。特定の態様では、抗体は、３Ｃ２の１つ以上の可変配列を含み得る。特定の態様では、抗体は、３Ｃ２の各可変配列を含み得る。特定の態様では、抗体は、３Ｃ２の重鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、３Ｃ２の軽鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、３Ｃ２の重鎖及び軽鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、３Ｃ２である。
【０１５８】
特定の態様では、抗体は、９Ｂ１１の１つ以上のＣＤＲを含み得る。特定の態様では、抗体は、９Ｂ１１の全てのＣＤＲを含み得る。特定の態様では、抗体は、９Ｂ１１の１つ以上の可変配列を含み得る。特定の態様では、抗体は、９Ｂ１１の各可変配列を含み得る。特定の態様では、抗体は、９Ｂ１１の重鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、９Ｂ１１の軽鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、９Ｂ１１の重鎖及び軽鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、９Ｂ１１である。
【０１５９】
特定の態様では、抗体は、７Ｅ１１の１つ以上のＣＤＲを含み得る。特定の態様では、抗体は、７Ｅ１１の全てのＣＤＲを含み得る。特定の態様では、抗体は、７Ｅ１１の１つ以上の可変配列を含み得る。特定の態様では、抗体は、７Ｅ１１の各可変配列を含み得る。特定の態様では、抗体は、７Ｅ１１の重鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、７Ｅ１１の軽鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、７Ｅ１１の重鎖及び軽鎖を含み得る。特定の態様では、抗体は、７Ｅ１１である。
【０１６０】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１〜３６で提供される例示的な配列と少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５のアミノ酸置換を有するＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１〜３６で提供される配列を含む。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、本パラグラフに記載の抗体は、本明細書では「変種」と呼ばれる。一部の実施形態では、そのような変種は、例えば、親和性成熟、部位特異的変異導入、ランダム変異導入、または当該分野で既知もしくは本明細書に記載の他の任意の方法による、本明細書で提供される配列に由来する。一部の実施形態では、そのような変種は、本明細書で提供される配列に由来しておらず、例えば、抗体を得るための本明細書で提供される方法に従ってｄｅ  ｎｏｖｏで単離されてもよい。
【０１６１】
単一特異性及び多重特異性ＳＩＲＰ−アルファ抗体
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、単一特異性抗体である。
【０１６２】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、多重特異性抗体である。
【０１６３】
一部の実施形態では、本明細書で提供される多重特異性抗体は、複数の抗原に結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体は、２つの抗原に結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体は、３つの抗原に結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体は、４つの抗原に結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体は、５つの抗原に結合する。
【０１６４】
一部の実施形態では、本明細書で提供される多重特異性抗体は、ＳＩＲＰ−アルファ抗原上の複数のエピトープに結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体は、ＳＩＲＰ−アルファ抗原上の２つのエピトープに結合する。一部の実施形態では、多重特異性抗体は、ＳＩＲＰ−アルファ抗原上の３つのエピトープに結合する。
【０１６５】
多くの多重特異性抗体構築物は、当該技術分野で既知であり、本明細書で提供される抗体は、任意の好適な多重特異性の好適な構築物の形態で提供されてもよい。
【０１６６】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、一般的な軽鎖可変領域と対になる少なくとも２つの異なる重鎖可変領域を含む免疫グロブリンを含む（すなわち、「一般的な軽鎖抗体」）。一般的な軽鎖可変領域は、２つの異なる重鎖可変領域のそれぞれと異なる抗原結合ドメインを形成する。全体が参照により組み込まれるＭｅｒｃｈａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９８，１６：６７７−６８１を参照のこと。
【０１６７】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、そのような免疫グロブリンの重鎖または軽鎖の１つ以上のＮ末端またはＣ末端に結合している抗体またはそのフラグメントを含む免疫グロブリンを含む。全体が参照により組み込まれるＣｏｌｏｍａ  ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９７，１５：１５９−１６３を参照のこと。一部の態様では、そのような抗体は、四価の二重特異性抗体を含む。
【０１６８】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる重鎖可変領域及び少なくとも２つの異なる軽鎖可変領域を含むハイブリッド免疫グロブリンを含む。Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ，１９８３，３０５：５３７−５４０；及びＳｔａｅｒｚ  ａｎｄ  Ｂｅｖａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８６，８３：１４５３−１４５７（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）を参照のこと。
【０１６９】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、多重特異性を有さない副産物の形成を低減する改変を伴う免疫グロブリン鎖を含む。一部の態様では、抗体は、全体が参照により組み込まれる米国特許第５，７３１，１６８号に記載される１つ以上の「ｋｎｏｂｓ−ｉｎｔｏ−ｈｏｌｅｓ」修飾を含む。
【０１７０】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、Ｆｃヘテロ多量体のアセンブリを促進する１つ以上の静電的修飾を伴う免疫グロブリン鎖を含む。全体が参照により組み込まれるＷＯ２００９／０８９００４を参照のこと。
【０１７１】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、二重特異性単鎖分子を含む。全体が参照により組み込まれるＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１９９１，１０：３６５５−３６５９；及びＧｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９４，１５２：５３６８−５３７４を参照のこと。
【０１７２】
一部の実施形態では、多重特異性抗体は、ポリペプチドリンカーにより連結されている重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含み、リンカーの長さは、所望の多重特異性を有する多重特異性抗体のアセンブリを促進するように選択される。例えば、単一特異性ｓｃＦｖは一般に、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインが１２アミノ酸残基を超えるポリペプチドリンカーにより連結されている時に形成される。米国特許第４，９４６，７７８号及び同第５，１３２，４０５号（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）を参照のこと。一部の実施形態では、ポリペプチドリンカーの長さを１２アミノ酸残基未満に短縮すると、同じポリペプチド鎖上の重鎖及び軽鎖可変ドメインのペアリングが妨げられ、それにより、別の鎖上の相補ドメインとの１つの鎖由来の重鎖及び軽鎖可変ドメインのペアリングが可能になる。それ故、得られる抗体は、多重特異性を有し、各結合部位の特異性は、複数のポリペプチド鎖によりもたらされる。３〜１２アミノ酸残基のリンカーにより結合している重鎖及び軽鎖可変ドメインを含むポリペプチド鎖は、主に二量体（ダイアボディと称される）を形成する。０〜２アミノ酸残基のリンカーを用いる、三量体（トリアボディと称される）及び四量体（テトラボディと称される）が好まれる。しかし、正確なタイプのオリゴマー化は、リンカーの長さに加えて、アミノ酸残基の組成及び各ポリペプチド鎖の可変ドメインの順序（例えば、ＶＨ−リンカー−ＶＬ対ＶＬ−リンカー−ＶＨ）に依存するようである。当業者は、所望の多重特異性に基づいて適切なリンカー長を選択することができる。
【０１７３】
グリコシル化及び関連変種
本明細書で提供される抗体は、それがグリコシル化される程度を増加、減少、または除去するように改変され得る。ポリペプチドのグリコシル化は通常、「Ｎ結合型」または「Ｏ結合型」のいずれかである。一部の態様では、抗体のグリコシル化は、酵素的脱グリコシル化、細菌宿主での発現、またはグリコシル化に利用されるアミノ酸残基の修飾により、低減する。変異などの修飾は、グリコシル化を変更するために使用することができる。
【０１７４】
「Ｎ結合型」グリコシル化は、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の結合を指す。トリペプチド配列アスパラギン−Ｘ−セリン及びアスパラギン−Ｘ−スレオニン（式中、Ｘは、プロリンを除く任意のアミノ酸である）は、アスパラギン側鎖への炭水化物部分の酵素的結合のための認識配列である。従って、ポリペプチドにおけるこれらのトリペプチド配列のいずれかの存在は、潜在的なグリコシル化部位を作成する。
【０１７５】
「Ｏ結合型」グリコシル化は、ヒドロキシアミノ酸、最も一般には、セリンまたはスレオニンへの、糖Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのうちの１つの結合を指す。但し、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンもまた使用されてもよい。
【０１７６】
本明細書で提供される抗体へのＮ結合型グリコシル化部位の付加または抗体からのＮ結合型グリコシル化部位の欠失は、上記のトリペプチド配列のうちの１つ以上が作成または除去されるようにアミノ酸配列を改変することにより達成され得る。Ｏ結合型グリコシル化部位の付加または欠失は、抗体の配列内のまたは（場合によっては）配列への、１つ以上のセリンまたはスレオニン残基の付加、欠失、または置換により達成され得る。
【０１７７】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、天然に存在する抗体とは異なるグリコシル化モチーフを含む。任意の好適な天然に存在するグリコシル化モチーフは、本明細書で提供される抗体で修飾することができる。例えば、免疫グロブリンの構造及びグリコシル化特性は、当該技術分野で既知であり、例えば、全体が参照により組み込まれるＳｃｈｒｏｅｄｅｒ  ａｎｄ  Ｃａｖａｃｉｎｉ，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０１０，１２５：Ｓ４１−５２にまとめられている。
【０１７８】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、アスパラギン２９７（Ａｓｎ２９７）に結合しているオリゴ糖への修飾を伴うＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む。哺乳動物細胞により産生される天然に存在するＩｇＧ１抗体は通常、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７へのＮ結合により一般に結合している分岐状二分岐オリゴ糖を含む。全体が参照により組み込まれるＷｒｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．，ＴＩＢＴＥＣＨ，１９９７，１５：２６−３２を参照のこと。Ａｓｎ２９７に結合しているオリゴ糖は、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、及びシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「ステム」でＧｌｃＮＡｃに結合しているフコースなどの種々の炭化水素を含んでもよい。
【０１７９】
一部の実施形態では、Ａｓｎ２９７に結合しているオリゴ糖は、改変ＡＤＣＣを有する抗体を生成するように修飾されている。一部の実施形態では、オリゴ糖は、ＡＤＣＣを改善するように改変される。一部の実施形態では、オリゴ糖は、ＡＤＣＣを低減させるように改変される。
【０１８０】
一部の態様では、本明細書で提供される抗体は、天然に存在するＩｇＧ１ドメインと比較して、Ａｓｎ２９７の位置に、フコース含量が低減したＩｇＧ１ドメインを含む。そのようなＦｃドメインは、ＡＤＣＣが改善されていることが知られている。全体が参照により組み込まれるＳｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００２，２７７：２６７３３−２６７４０を参照のこと。一部の態様では、そのような抗体は、Ａｓｎ２９７位に任意のフコースを含まない。フコースの量は、例えば、全体が参照により組み込まれるＷＯ２００８／０７７５４６に記載される任意の好適な方法を使用して決定されてもよい。
【０１８１】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＧｌｃＮＡｃにより二分される抗体のＦｃ領域に結合している二分岐オリゴ糖などのバイセクト型オリゴ糖を含む。そのような抗体変種は、フコシル化の低減及び／またはＡＤＣＣ機能の改善を有し得る。そのような抗体変種の例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８；米国特許第６，６０２，６８４号；及び米国特許公開第２００５／０１２３５４６号に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【０１８２】
本明細書で提供される抗体に組み込まれ得る他の例示的なグリコシル化変種は、例えば、米国特許公開第２００３／０１５７１０８号、同第２００４／００９３６２１号、同第２００３／０１５７１０８号、同第２００３／０１１５６１４号、同第２００２／０１６４３２８号、同第２００４／００９３６２１号、同第２００４／０１３２１４０号、同第２００４／０１１０７０４号、同第２００４／０１１０２８２号、同第２００４／０１０９８６５；国際公開特許第２０００／６１７３９号、同第２００１／２９２４６号、同第２００３／０８５１１９号、同第２００３／０８４５７０号、同第２００５／０３５５８６号、同第２００５／０３５７７８号；同第２００５／０５３７４２号、同第２００２／０３１１４０号；Ｏｋａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００４，３３６：１２３９−１２４９；及びＹａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．，２００４，８７：６１４−６２２に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【０１８３】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｆｃ領域に結合しているオリゴ糖中の少なくとも１つのガラクトース残基を有するＦｃ領域を含む。そのような抗体変種は、ＣＤＣ機能の改善を有し得る。そのような抗体変種の例は、例えば、ＷＯ１９９７／３００８７；ＷＯ１９９８／５８９６４；及びＷＯ１９９９／２２７６４に記載され；これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【０１８４】
脱フコシル化抗体を産生することが可能な細胞株の例としては、Ｌｅｃ１３  ＣＨＯ細胞が挙げられ、これらは、タンパク質のフコシル化（Ｒｉｐｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，１９８６，２４９：５３３−５４５；米国特許公開第２００３／０１５７１０８号；ＷＯ２００４／０５６３１２（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）を参照のこと）、ならびに、α−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子またはＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞などのノックアウト細胞株（Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．，２００４，８７：６１４−６２２；Ｋａｎｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，２００６，９４：６８０−６８８；及びＷＯ２００３／０８５１０７（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）を参照のこと）が欠損している。
【０１８５】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、非グリコシル化抗体である。非グリコシル化抗体は、当該技術分野で既知または本明細書に記載の任意の方法を使用して生成することができる。一部の態様では、非グリコシル化抗体は、抗体を修飾して全てのグリコシル化部位を除去することにより生成される。一部の態様では、グリコシル化部位は、抗体のＦｃ領域からのみ除去される。一部の態様では、非グリコシル化抗体は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）などのグリコシル化が不可能な生物で抗体を発現させることにより、または無細胞反応混合物で抗体を発現させることにより産生される。
【０１８６】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、天然ＩｇＧ１抗体と比較してエフェクター機能が低減した定常領域を有する。一部の実施形態では、Ｆｃ受容体に対する本明細書で提供される抗体のＦｃ領域の定常領域の親和性は、そのようなＦｃ受容体に対する天然ＩｇＧ１定常領域の親和性よりも低い。
【０１８７】
Ｆｃ領域及び変種
特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｆｃ領域を含む。特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、天然に存在するＦｃ領域と比較して１つ以上のアミノ酸置換、挿入、または欠失を有するＦｃ領域を含む。一部の態様では、そのような置換、挿入、または欠失は、安定性、グリコシル化、またはその他の特性が変更された抗体を生じる。一部の態様では、そのような置換、挿入、または欠失は、非グリコシル化抗体を生じる。
【０１８８】
「多様性Ｆｃ領域」または「操作Ｆｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾、好ましくは、１つ以上のアミノ酸置換（複数可）により天然配列Ｆｃ領域とは異なるアミノ酸配列を含む。好ましくは、多様性Ｆｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して、少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域において、約１〜約１０のアミノ酸置換、好ましくは、約１〜約５つのアミノ酸置換、を有する。本明細書の多様性Ｆｃ領域は、好ましくは、天然配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の相同性、最も好ましくは、少なくとも約９０％の相同性、より好ましくは、少なくとも約９５％の相同性を有する。
【０１８９】
「デッドＦｃ」の多様性Ｆｃ配列は、ＥＵインデックス位置２３４、２３５、及び２３７においてＦｃγＲＩ結合を低減させるために、ＣＨ２領域に３つのアミノ酸置換を含み得る（Ｄｕｎｃａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：５６３を参照のこと）。ＥＵインデックス位置３３０及び３３１の補体Ｃ１ｑ結合部位の２つのアミノ酸置換は、補体結合を低減させる（Ｔａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７８：６６１（１９９３）及びＣａｎｆｉｅｌｄ  ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７３：１４８３（１９９１）を参照のこと）。２３３〜２３６位のＩｇＧ２残基ならびに３２７、３３０、及び３３１位のＩｇＧ４残基のヒトＩｇＧ１の置換は、ＡＤＣＣ及びＣＤＣを大幅に低減させる（例えば、Ａｒｍｏｕｒ  ＫＬ．ｅｔ  ａｌ．，１９９９  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９（８）：２６１３−２４；及びＳｈｉｅｌｄｓ  ＲＬ．ｅｔ  ａｌ．，２００１．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７６（９）：６５９１−６０４を参照のこと）。
【０１９０】
ＦｃγＲまたはＣ１ｑへのＩｇＧの結合は、ヒンジ領域及びＣＨ２ドメインに位置する残基に依存する。ＣＨ２ドメインの２つの領域は、ＦｃγＲ及びＣ１ｑ結合に重要であり、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４に特有の配列を有するであろう。２３３〜２３６位のヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ２残基ならびに３２７、３３０、及び３３１位のＩｇＧ４残基への置換は、ＡＤＣＣ及びＣＤＣを大幅に低減させることが示されている。ヒトＩｇＧ１のＣＨ２ドメインにおいて、多くの変異が生じている。
【０１９１】
３つのアミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＧ２３７Ａは、ＦｃγＲ及び補体エフェクター機能を大幅に除去する（例えば、ＵＳ２０１００２６６５０５を参照のこと）。
【０１９２】
一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、発現宿主の選択、アミノ酸置換が天然タンパク質と比較してグリコシル化及びＦｃγＲへの結合を低減させる酵素処理により修飾されている。ＦｃγＲへの結合を低減させる変異は、最適なＦｃＲ相互作用に必要とされることが知られているＦｃドメインのアスパラギン２９７上のグリコシル化の修飾を含むが、これらに限定されない。例えば、既知のアミノ酸置換は、Ｎ２９７ＡまたはＮ２９７Ｇを含み、これにより、タンパク質上のグリコシル化部位の喪失がもたらされる。酵素的に脱グリコシル化されたＦｃドメイン、グリコシル化阻害剤の存在下で組み換え発現された抗体、及び細菌におけるＦｃドメインの発現は、類似のグリコシル化の喪失及びそれに伴うＦｃγＲへの結合を有する。
【０１９３】
ＬＡＬＡ変種であるＬ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａはまた、ＦｃγＲ結合を大幅に低減させており、Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６＋Ａ３２７Ｇ／Ａ３３０Ｓ／Ｐ３３１Ｓも同様である。例えば、Ａｒｍｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９（８）：２６１３−２４を参照のこと。変異のセット：Ｋ３２２Ａ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａは、ＦｃγＲ及びＣ１ｑ結合をほぼ完全に消滅させるのに十分である。３つの変異のセット、Ｌ２３４Ｆ／Ｌ２３５Ｅ／Ｐ３３１Ｓ（ＴＭと呼ばれる）は、非常によく似た効果がある。
【０１９４】
限定されないが、ジスルフィド結合を形成可能な領域が欠失しているもの、または特定のアミノ酸残基が天然Ｆｃ形態もしくはメチオニン残基のＮ末端で除去されるものを含む他のＦｃ変種が可能である。
【０１９５】
Ｆｃは、天然糖鎖を有する形態、天然形態と比較した糖鎖の増加または天然形態と比較した糖鎖の減少を有しても、非グリコシル化または脱グリコシル化形態であってもよい。糖鎖の増加、減少、除去、または他の修飾は、化学的方法、酵素的方法などの当該技術分野における一般的な方法により、または遺伝子操作された産生細胞系でそれを発現させることにより達成されてもよい。そのような細胞株は、天然にグリコシル化酵素を発現する微生物、例えば、Ｐｉｃｈｉａ  Ｐａｓｔｏｒｉｓ、及び哺乳動物細胞株、例えば、ＣＨＯ細胞、を含み得る。さらに、微生物または細胞は、グリコシル化酵素を発現するように操作することができるか、またはグリコシル化酵素を発現することができないようにすることができる（例えば、Ｈａｍｉｌｔｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，３１３：１４４１（２００６）；Ｋａｎｄａ，ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１３０：３００（２００７）；Ｋｉｔａｇａｗａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６９（２７）：１７８７２（１９９４）；Ｕｊｉｔａ−Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６４（２３）：１３８４８（１９８９）；Ｉｍａｉ−Ｎｉｓｈｉｙａ，ｅｔ  ａｌ，ＢＭＣ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ７：８４（２００７）；及びＷＯ０７／０５５９１６を参照のこと）。シアリル化活性が変化するように操作された細胞の一例として、α−２，６−シアリルトランスフェラーゼ１遺伝子がチャイニーズハムスター卵巣細胞及びｓｆ９細胞に操作されている。従って、これらの操作された細胞により発現される抗体は、外因性遺伝子産物によりシアリル化される。複数の天然分子と比較して改変された量の糖残基を有するＦｃ分子を得るためのさらなる方法は、例えば、レクチンアフィニティークロマトグラフィーを使用して、該複数の分子をグリコシル化及び非グリコシル化画分に分離することを含む（例えば、ＷＯ０７／１１７５０５を参照のこと）。特定のグリコシル化部分の存在は、免疫グロブリンの機能を変更することが示されている。例えば、Ｆｃ分子から糖鎖を除去すると、第１の補体成分Ｃ１のＣ１ｑ部分への結合親和性の急激な減少、及び、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の減少または喪失がもたらされ、それにより、ｉｎ  ｖｉｖｏで不必要な免疫応答を誘導しない。追加の重要な修飾は、シアリル化及びフコシル化を含み：ＩｇＧのシアル酸の存在は、抗炎症活性と相関しており（例えば、Ｋａｎｅｋｏ，ｅｔ  ａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３１３：７６０（２００６）を参照のこと）、一方、ＩｇＧからのフコースの除去は、ＡＤＣＣ活性の増強をもたらす（例えば、Ｓｈｏｊ−Ｈｏｓａｋａ，ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１４０：７７７（２００６）を参照のこと）。
【０１９６】
「Ｆｃ領域含有抗体」という用語は、Ｆｃ領域を含む抗体を指す。Ｆｃ領域のＣ末端リジン（ＥＵ番号付けシステムによる残基４４７）は、例えば、抗体の精製中に、または抗体をコードする核酸の組み換え工学により除去されてもよい。従って、Ｆｃ領域を有する抗体は、Ｋ４４７を含むかまたは含まない抗体を含み得る。
【０１９７】
一部の態様では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域を修飾して、Ｆｃ受容体に対する親和性が変更された抗体、または免疫学的により不活性な抗体を得る。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体変種は、全てではないが一部のエフェクター機能を有する。そのような抗体は、例えば、抗体の半減期がｉｎ  ｖｉｖｏで重要であるが、特定のエフェクター機能（例えば、補体活性化及びＡＤＣＣ）が不要または有害である時に有用であり得る。
【０１９８】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、ヒンジ安定化変異Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ｅのうちの１つ以上を含むヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域である。全体が参照により組み込まれるＡａｌｂｅｒｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００２，１０５：９−１９を参照のこと。一部の実施形態では、ＩｇＧ４  Ｆｃ領域は、以下の変異：Ｅ２３３Ｐ、Ｆ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａのうちの１つ以上を含む。全体が参照により組み込まれるＡｒｍｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，４０：５８５−５９３を参照のこと。一部の実施形態では、ＩｇＧ４  Ｆｃ領域は、位置Ｇ２３６に欠失を含む。
【０１９９】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、Ｆｃ受容体結合を低減する１つ以上の変異を含むヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である。一部の態様では、１つ以上の変異は、Ｓ２２８（例えば、Ｓ２２８Ａ）、Ｌ２３４（例えば、Ｌ２３４Ａ）、Ｌ２３５（例えば、Ｌ２３５Ａ）、Ｄ２６５（例えば、Ｄ２６５Ａ）、及びＮ２９７（例えば、Ｎ２９７Ａ）から選択される残基に存在する。一部の態様では、抗体は、ＰＶＡ２３６変異を含む。ＰＶＡ２３６は、ＩｇＧ１のアミノ酸位置２３３〜２３６であるアミノ酸配列ＥＬＬＧまたはＩｇＧ４のＥＦＬＧが、ＰＶＡにより置き換えられていることを意味する。全体が参照により組み込まれる米国特許第９，１５０，６４１号を参照のこと。
【０２００】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、Ａｒｍｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９９，２９：２６１３−２６２４；ＷＯ１９９９／０５８５７２；及び／または英国特許出願第９８０９９５１８号（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）に記載されるように修飾されている。
【０２０１】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、変異Ａ３３０Ｓ及びＰ３３１Ｓのうちの１つ以上を含むヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域である。
【０２０２】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７、及び３２９から選択される１つ以上の位置でアミノ酸置換を有する。全体が参照により組み込まれる米国特許第６，７３７，０５６号を参照のこと。このようなＦｃ変異体は、残基２６５及び２９７をアラニンで置換した、いわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体を含む、アミノ酸位置２６５、２６９、２７０、２９７、及び３２７のうちの２つ以上での置換を有するＦｃ変異体を含む。全体が参照により組み込まれる米国特許第７，３３２，５８１号を参照のこと。一部の実施形態では、抗体は、アミノ酸位置２６５にアラニンを含む。一部の実施形態では、抗体は、アミノ酸位置２９７にアラニンを含む。
【０２０３】
特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｆｃ領域の位置２９８、３３３、及び３３４のうちの１つ以上での置換など、ＡＤＣＣを改善する１つ以上のアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含む。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、全体が参照により組み込まれるＬａｚａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２００６，１０３：４００５−４０１０に記載されるように、２３９、３３２、及び３３０位における１つ以上のアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含む。
【０２０４】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｃ１ｑ結合及び／またはＣＤＣを改善するかまたは減少させる１つ以上の改変を含む。米国特許第６，１９４，５５１号；ＷＯ９９／５１６４２；及びＩｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０００，１６４：４１７８−４１８４（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）を参照のこと。
【０２０５】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、半減期を増加させる１つ以上の改変を含む。半減期が増加し且つ新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合が改善された抗体は、例えば、Ｈｉｎｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００６，１７６：３４６−３５６；及び米国特許公開第２００５／００１４９３４号（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）に記載される。そのようなＦｃ変種としては、ＩｇＧのＦｃ領域残基：２３８、２５０、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１４、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、４２８、及び４３４のうちの１つ以上に置換を有するものが挙げられる。
【０２０６】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、米国特許第７，３７１，８２６号、同第５，６４８，２６０号、及び同第５，６２４，８２１号；Ｄｕｎｃａｎ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ，１９８８，３２２：７３８−７４０；ならびにＷＯ９４／２９３５１に記載される１つ以上のＦｃ領域変種を含み、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【０２０７】
ヌクレオチド、ベクター、宿主細胞、及び関連方法
ＳＩＲＰ−アルファ抗体をコードする単離核酸、核酸を含むベクター、ならびにベクター及び核酸を含む宿主細胞、ならびに、抗体の産生のための組み換え技術もまた提供される。
【０２０８】
一部の実施形態では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１〜３６で提供される例示的な配列と少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％の同一性を有する配列をコードする核酸配列が提供される。一部の実施形態は、最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５のアミノ酸置換を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１〜３６に提供される配列をコードする核酸配列が提供される。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７〜４４で提供される例示的な配列と少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％の同一性を有する配列を含む。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５の変異を有する、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７〜４４で提供される配列を含む。一部の態様では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換である。一部の実施形態では、本パラグラフに記載の抗体は、本明細書では「変種」と呼ばれる。一部の実施形態では、そのような変種は、例えば、親和性成熟、部位特異的変異導入、ランダム変異導入、または当該分野で既知もしくは本明細書に記載の他の任意の方法による、本明細書で提供される配列に由来する。一部の実施形態では、そのような変種は、本明細書で提供される配列に由来しておらず、例えば、抗体を得るための本明細書で提供される方法に従ってｄｅ  ｎｏｖｏで単離されてもよい。
【０２０９】
抗体の組み換え産生のために、それをコードする核酸（複数可）を単離し、さらなるクローニング（すなわち、ＤＮＡの増幅）または発現のために複製可能なベクターに挿入されてもよい。一部の態様では、核酸は、例えば、全体が参照により組み込まれる米国特許第５，２０４，２４４号に記載されるように、相同組み換えにより産生されてもよい。
【０２１０】
多くの異なるベクターは、当該技術分野で既知である。ベクター構成要素は一般に、例えば、全体が参照により組み込まれる米国特許第５，５３４，６１５号に記載されるように、以下の：シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサー要素、プロモーター、及び転写終結配列のうちの１つ以上を含む。
【０２１１】
好適な宿主細胞の実例が以下に提供される。これらの宿主細胞は、限定するものではなく、任意の好適な宿主細胞は、本明細書で提供される抗体を産生するように使用されてもよい。
【０２１２】
好適な宿主細胞としては、原核生物（例えば、細菌）、下等真核生物（例えば、酵母）、または高等真核生物（例えば、哺乳動物）細胞が挙げられる。好適な原核生物としては、真正細菌、例えば、グラム陰性またはグラム陽性生物、例えば、腸内細菌、例えば、エシェルキア属（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）（大腸菌）、エンテロバクター属（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）、エルウィニア属（Ｅｒｗｉｎｉａ）、クレブシエラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、プロテウス属（Ｐｒｏｔｅｕｓ）、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）（Ｓ．ティフィムリウム（Ｓ．ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ））、セラチア属（Ｓｅｒｒａｔｉａ）（Ｓ．マルセッセンス（Ｓ．ｍａｒｃｅｓｃａｎｓ））シゲラ属（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）、桿菌（Ｂａｃｉｌｌｉ）（枯草菌（Ｂ．Ｓｕｂｔｉｌｉｓ）及びＢ．リケニフォルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ））、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）（緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ））、ならびにストラプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）が挙げられる。１つの有用な大腸菌クローニング宿主は、大腸菌２９４であるが、大腸菌Ｂ、大腸菌Ｘ１７７６、及び大腸菌Ｗ３１１０などの他の株もまた適する。
【０２１３】
原核生物に加えて、糸状菌または酵母などの真核微生物もまた、ＳＩＲＰ−アルファ抗体をコードするベクターの好適なクローニングまたは発現宿主である。サッカロミケス・セレヴィシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、または一般的なパン酵母は、一般に使用される下等真核生物宿主微生物である。しかし、他の多数の属、種、及び株、例えば、シゾサッカロミケス・ポンベ（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｂｅ）、クルイヴェロミケス属（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）（Ｋ．ラクティス（Ｋ．ｌａｃｔｉｓ）、Ｋ．フラジリス（Ｋ．ｆｒａｇｉｌｉｓ）、Ｋ．ブルガリクス（Ｋ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）、Ｋ．ウィッカーハミー（Ｋ．ｗｉｃｋｅｈａｍｉｉ）、Ｋ．ワルティー（Ｋ．ｗａｌｔｉｉ）、Ｋ．ドロソフィラルム（Ｋ．ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｒｕｍ）、Ｋ．サーモトレランス（Ｋ．ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ）、及びＫ．マルキシアヌス（Ｋ．ｍａｒｘｉａｎｕｓ））、ヤロウィア属（Ｙａｒｒｏｗｉａ）、ピキア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓ）、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）（Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ））、トリコデルマ・レーセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｉａ）、アカパンカビ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ  ｃｒａｓｓａ）、シュワンニオミケス属（Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ）（Ｓ．オシデンタリス（Ｓ．ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ））、ならびに、糸状菌、例えば、ペニシリウム属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、トリポクラジウム属（Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ）、及びアスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）（Ａ．ニデュランス（Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓ）及びＡ．ニガー（Ａ．ｎｉｇｅｒ））が利用可能であり且つ有用である。
【０２１４】
有用な哺乳動物宿主細胞としては、ＣＯＳ−７細胞、ＨＥＫ２９３細胞；ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞；チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）；マウスセルトリ細胞；アフリカミドリザル腎細胞（ＶＥＲＯ−７６）などが挙げられる。
【０２１５】
ＳＩＲＰ−アルファ抗体を産生するために使用される宿主細胞は、種々の培地において培養されてもよい。例えば、ハムＦ１０、最小必須培地（ＭＥＭ）、ＲＰＭＩ−１６４０、及びダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）などの市販の培地は、宿主細胞の培養に適する。さらに、Ｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．，１９７９，５８：４４；Ｂａｒｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８０，１０２：２５５；ならびに米国特許第４，７６７，７０４号、同第４，６５７，８６６号、同第４，９２７，７６２号、同第４，５６０，６５５号、及び同第５，１２２，４６９号；またはＷＯ９０／０３４３０及びＷＯ８７／００１９５に記載の培地のいずれかが使用されてもよい。上述の参考文献のそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【０２１６】
これらの培地のいずれかは、必要に応じて、ホルモン及び／または他の成長因子（例えば、インスリン、トランスフェリン、または上皮成長因子）、塩（例えば、塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びリン酸塩）、緩衝液（例えば、ＨＥＰＥＳ）、ヌクレオチド（例えば、アデノシン及びチミジン）、抗生物質、微量元素（マイクロモルの最終濃度で通常存在する無機化合物として定義される）、ならびに、グルコースまたは同等のエネルギー供給源が補充されてもよい。他の任意の必要な補充物はまた、当業者らに既知の適切な濃度で含まれてもよい。
【０２１７】
温度、ｐＨなどの培養条件は、発現のために選択される宿主細胞と共に以前に使用されたものであり、当業者には明らかであろう。
【０２１８】
組み換え技術を使用する時、抗体は、細胞内、ペリプラズム内に産生させるか、または培地に直接分泌させることができる。抗体が細胞内で産生される場合、最初のステップとして、例えば、遠心分離または限外濾過により、宿主細胞または溶解フラグメントのいずれかの粒子状の破片を除去する。例えば、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（全体が参照により組み込まれるＢｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９２，１０：１６３−１６７）は、大腸菌のペリプラズムに分泌される抗体を単離する手順を記載している。要約すると、細胞ペーストは、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、及びフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）の存在下で約３０分かけて解凍される。細胞破片は、遠心分離により除去することができる。
【０２１９】
一部の実施形態では、抗体は、無細胞系で産生される。一部の態様では、無細胞系は、全体が参照により組み込まれるＹｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１２，４：２１７−２２５に記載されるｉｎ  ｖｉｔｒｏ転写及び翻訳系である。一部の態様では、無細胞系は、真核細胞または原核細胞からの無細胞抽出物を利用する。一部の態様では、原核細胞は、Ｅ．ｃｏｌｉである。抗体の無細胞発現は、例えば、抗体が不溶性凝集体として細胞内に蓄積する場合、またはペリプラズム発現からの収量が低い場合に有用であり得る。
【０２２０】
抗体が培地中に分泌される場合、そのような発現系からの上清は一般に、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、Ａｍｉｃｏｎ（登録商標）またはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ（登録商標）Ｐｅｌｌｃｏｎ（登録商標）限外濾過ユニットを使用して、まず濃縮される。タンパク質分解を阻害するＰＭＳＦなどのプロテアーゼ阻害剤が上述のステップのいずれかに含まれてもよく、偶発性の汚染物質の成長を妨げる抗生物質が含まれてもよい。
【０２２１】
細胞から調製される抗体組成物は、例えば、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、及びアフィニティークロマトグラフィーを使用して精製することができ、アフィニティークロマトグラフィーが特に有用な精製技術である。親和性リガンドとしてのプロテインＡの適合性は、抗体に存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種及びアイソタイプに依存する。プロテインＡは、ヒトγ１、γ２、またはγ４重鎖を含む抗体を精製するために使用することができる（全体が参照により組み込まれるＬｉｎｄｍａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，１９８３，６２：１−１３）。プロテインＧは、全てのマウスアイソタイプ及びヒトγ３に有用である（全体が参照により組み込まれるＧｕｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１９８６，５：１５６７−１５７５）。
【０２２２】
親和性リガンドが結合しているマトリックスは多くの場合、アガロースであるが、他のマトリックスが利用可能である。制御された細孔ガラスまたはポリ（スチレンジビニル）ベンゼンなどの機械的に安定したマトリックスは、アガロースで達成することができるよりも早い流速及び短い処理時間を可能にする。抗体が、ＣＨ３ドメインを含む場合、Ｂａｋｅｒｂｏｎｄ  ＡＢＸ（登録商標）樹脂が精製に有用である。
【０２２３】
イオン交換カラムの分画、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカ上のクロマトグラフィー、ヘパリンセファロース（登録商標）上のクロマトグラフィー、クロマトフォーカシング、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、及び硫酸アンモニウム沈殿などのタンパク質精製のための他の技術もまた利用可能であり、当業者が適用することができる。
【０２２４】
任意の予備的精製ステップ（複数可）の後に、目的の抗体及び汚染物質を含む混合物は、低塩濃度（例えば、約０〜約２．５Ｍの塩）で一般的に実施される、ｐＨ約２．５〜約４．５の溶出緩衝液を使用した低ｐＨの疎水性相互作用クロマトグラフィーにかけられてもよい。
【０２２５】
ＳＩＲＰ−アルファ抗体の作製方法
ＳＩＲＰ−アルファ抗原の調製
本明細書で提供される抗体の単離または作製に使用されるＳＩＲＰ−アルファ抗原は、インタクトなＳＩＲＰ−アルファまたはＳＩＲＰ−アルファのフラグメントであってよい。ＳＩＲＰ−アルファ抗原は、例えば、単離タンパク質または細胞の表面に発現されるタンパク質の形態であってよい。
【０２２６】
一部の実施形態では、ＳＩＲＰ−アルファ抗原は、ＳＩＲＰ−アルファの天然では存在しない変種、例えば、天然に存在しないアミノ酸配列または翻訳後修飾を有するＳＩＲＰ−アルファタンパク質、である。
【０２２７】
一部の実施形態では、ＳＩＲＰ−アルファ抗原は、例えば、細胞内もしくは膜貫通配列、またはシグナル配列の除去により切断される。一部の実施形態では、ＳＩＲＰ−アルファ抗原は、そのＣ末端で、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはポリヒスチジンタグに融合する。
【０２２８】
モノクローナル抗体の作製方法
モノクローナル抗体は、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９７５，２５６：４９５−４９７（全体が参照により組み込まれる）により最初に記載されるハイブリドーマ法を使用して且つ／または組み換えＤＮＡ法（例えば、全体が参照により組み込まれる米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）により得られ得る。モノクローナル抗体はまた、例えば、ファージまたは酵母ベースのライブラリーを使用して得られ得る。例えば、米国特許第８，２５８，０８２号及び同第８，６９１，７３０号（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）を参照のこと。
【０２２９】
ハイブリドーマ法では、マウスまたは他の適切な宿主動物が、免疫に使用されるタンパク質に特異的に結合する抗体を産生するか、または産生することが可能なリンパ球を誘発するように免疫される。あるいは、リンパ球は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで免疫化されてもよい。次に、リンパ球は、ハイブリドーマ細胞を形成するために、ポリエチレングリコールなどの好適な融合剤を使用して骨髄腫細胞と融合される。全体が参照により組み込まれるＧｏｄｉｎｇ  Ｊ．Ｗ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ３ｒｄ  ｅｄ．（１９８６）Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡを参照のこと。
【０２３０】
ハイブリドーマ細胞は、融合していない親骨髄腫細胞の成長または生存を阻害する１つ以上の物質を含有する好適な培地に播種され、成長する。例えば、親骨髄腫細胞が、酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠損している場合、ハイブリドーマの培地は通常、ヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジン（ＨＡＴ培地）を含むことになり、この物質は、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の成長を妨げる。
【０２３１】
有用な骨髄腫細胞は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞により抗体の安定で高レベルの産生をサポートし、且つＨＡＴ培地の有無などの敏感な培地条件であるものである。これらのうち、好ましい骨髄腫細胞株は、ＭＯＰ−２１及びＭＣ−１１マウス腫瘍（Ｓａｌｋ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒ、カリフォルニア州サンディエゴから入手可能）、ならびに、ＳＰ−２またはＸ６３−Ａｇ８−６５３細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、メリーランド州ロックビルから入手可能）に由来するようなマウス骨髄腫株である。ヒト骨髄腫及びマウス−ヒトヘテロミエローマ細胞株もまた、ヒトモノクローナル抗体の産生について報告されている。例えば、全体が参照により組み込まれるＫｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９８４，１３３：３００１を参照のこと。
【０２３２】
所望の特異性、親和性、及び／または生物学的活性の抗体を産生するハイブリドーマ細胞の同定後、選択されるクローンは、限界希釈法によりサブクローニングされ、標準的な方法で成長させてもよい。上掲のＧｏｄｉｎｇを参照のこと。この目的に適する培地は、例えば、Ｄ−ＭＥＭまたはＲＰＭＩ−１６４０培地を含む。さらに、ハイブリドーマ細胞は、動物の腹水腫瘍としてｉｎ  ｖｉｖｏで成長させてもよい。
【０２３３】
モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を使用して（例えば、モノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合可能なオリゴヌクレオチドプローブを使用することにより）容易に単離及び配列決定され得る。従って、ハイブリドーマ細胞は、所望の特性を有する抗体をコードするＤＮＡの有用な供給源として機能し得る。単離されると、ＤＮＡは、モノクローナル抗体を産生させるために、発現ベクターに入れられ、次に、これらは、宿主細胞、例えば、他の方法で抗体を産生しない細菌（例えば、大腸菌）、酵母（例えば、サッカロミケスもしくはピキア種）、ＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）、または骨髄腫細胞にトランスフェクトされてもよい。
【０２３４】
キメラ抗体の作製方法
キメラ抗体を作製する例示的な方法は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８４，８１：６８５１−６８５５（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）に記載される。一部の実施形態では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、またはサルなどの非ヒト霊長類に由来する可変領域）をヒト定常領域と組み合わせる組み換え技術を使用することにより作製される。
【０２３５】
ヒト化抗体の作製方法
ヒト化抗体は、非ヒトモノクローナル抗体の構造部分の大部分または全てを対応するヒト抗体配列で置き換えることにより生成され得る。従って、抗原特異的可変要素またはＣＤＲのみが非ヒト配列で構成されるハイブリッド分子が生成される。ヒト化抗体を得る方法は、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，１９９１，３４９：２９３−２９９；Ｒａｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９８，９５：８９１０−８９１５；Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０００，２７５：３６０７３−３６０７８；Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９８９，８６：１００２９−１００３３；ならびに、米国特許第５，５８５，０８９号、同第５，６９３，７６１号、同第５，６９３，７６２号、及び同第６，１８０，３７０号に記載されるものを含み、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【０２３６】
ヒト抗体の作製方法
ヒト抗体は、例えば、トランスジェニック動物（例えば、ヒト化マウス）を使用することにより、当該技術分野で既知の様々な技術により生成することができる。例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９３，９０：２５５１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９９３，３６２：２５５−２５８；Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏ．，１９９３，７：３３；ならびに米国特許第５，５９１，６６９号、同第５，５８９，３６９号、及び同第５，５４５，８０７号（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）を参照のこと。ヒト抗体はまた、ファージディスプレイライブラリーに由来し得る（例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，２２７：３８１−３８８；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，２２２：５８１−５９７；ならびに米国特許第５，５６５，３３２号及び同第５，５７３，９０５号（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）を参照のこと）。ヒト抗体はまた、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで活性化されたＢ細胞により生成され得る（例えば、米国特許第５，５６７，６１０号及び同第５，２２９，２７５号（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）を参照のこと）。ヒト抗体はまた、酵母ベースのライブラリーに由来してもよい（例えば、全体が参照により組み込まれる米国特許第８，６９１，７３０号を参照のこと）。
【０２３７】
抗体フラグメントの作製方法
本明細書で提供される抗体フラグメントは、本明細書に記載の例示的な方法または当該技術分野で既知のものを含む、任意の好適な方法により作製されてもよい。好適な方法は、組み換え技術及び抗体全体のタンパク質分解消化を含む。抗体フラグメントを作製する例示的な方法は、例えば、全体が参照により組み込まれるＨｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，２００３，９：１２９−１３４に記載される。ｓｃＦｖ抗体の作製方法は、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）；ＷＯ９３／１６１８５；ならびに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【０２３８】
代替骨格の作製方法
本明細書で提供される代替骨格は、本明細書に記載の例示的な方法または当該技術分野で既知のものを含む、任意の好適な方法により作製されてもよい。例えば、Ａｄｎｅｃｔｉｎｓ（商標）の調製方法は、全体が参照により組み込まれるＥｍａｎｕｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１１，３：３８−４８に記載される。ｉＭａｂを調製する方法は、全体が参照により組み込まれる米国特許公開第２００３／０２１５９１４号に記載される。Ａｎｔｉｃａｌｉｎｓ（登録商標）の調製方法は、全体が参照により組み込まれるＶｏｇｔ  ａｎｄ  Ｓｋｅｒｒａ，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２００４，５：１９１−１９９に記載される。Ｋｕｎｉｔｚドメインの調製方法は、全体が参照により組み込まれるＷａｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．＆  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．，１９９２，１８６：１１８−１１４５に記載される。チオレドキシンペプチドアプタマーの調製方法は、全体が参照により組み込まれるＧｅｙｅｒ  ａｎｄ  Ｂｒｅｎｔ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，２０００，３２８：１７１−２０８で提供される。アフィボディの調製方法は、全体が参照により組み込まれるＦｅｒｎａｎｄｅｚ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００４，１５：３６４−３７３で提供される。ＤＡＲＰｉｎの調製方法は、全体が参照により組み込まれるＺａｈｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００７，３６９：１０１５−１０２８で提供される。Ａｆｆｉｌｉｎｓの調製方法は、全体が参照により組み込まれるＥｂｅｒｓｂａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００７，３７２：１７２−１８５で提供される。テトラネクチンの調製方法は、全体が参照により組み込まれるＧｒａｖｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０００，２７５：３７３９０−３７３９６で提供される。アビマーの調製方法は、全体が参照により組み込まれるＳｉｌｖｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００５，２３：１５５６−１５６１で提供される。Ｆｙｎｏｍｅｒの調製方法は、全体が参照により組み込まれるＳｉｌａｃｃｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１４，２８９：１４３９２−１４３９８で提供される。代替骨格に関するさらなる情報は、Ｂｉｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２００５  ２３：１２５７−１２６８；及びＳｋｅｒｒａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００７  １８：２９５−３０４で提供され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【０２３９】
多重特異性抗体の作製方法
本明細書で提供される多重特異性抗体は、本明細書に記載の例示的方法または当該技術分野で既知のものを含む、任意の好適な方法により作製されてもよい。一般的な軽鎖抗体の作製方法は、全体が参照により組み込まれるＭｅｒｃｈａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９８，１６：６７７−６８１に記載される。四価の二重特異性抗体の作製方法は、全体が参照により組み込まれるＣｏｌｏｍａ  ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９７，１５：１５９−１６３に記載される。ハイブリッド免疫グロブリンの作製方法は、Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ，１９８３，３０５：５３７−５４０；及びＳｔａｅｒｚ  ａｎｄ  Ｂｅｖａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８６，８３：１４５３−１４５７に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。ｋｎｏｂｓ−ｉｎｔｏ−ｈｏｌｅｓ修飾を有する免疫グロブリンの作製方法は、全体が参照により組み込まれる米国特許第５，７３１，１６８号に記載される。静電的修飾を伴う免疫グロブリンの作製方法は、全体が参照により組み込まれるＷＯ２００９／０８９００４で提供される。二重特異性単鎖抗体の作製方法は、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１９９１，１０：３６５５−３６５９；及びＧｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９４，１５２：５３６８−５３７４に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。リンカーの長さが変動し得る単鎖抗体の作製方法は、米国特許第４，９４６，７７８号及び同第５，１３２，４０５号に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。ダイアボディの作製方法は、全体が参照により組み込まれるＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９３，９０：６４４４−６４４８に記載される。トリアボディ及びテトラボディの作製方法は、全体が参照により組み込まれるＴｏｄｏｒｏｖｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００１，２４８：４７−６６に記載される。三重特異性Ｆ（ａｂ’）３誘導体の作製方法は、全体が参照により組み込まれるＴｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９１，１４７：６０−６９に記載される。架橋抗体の作製方法は、米国特許第４，６７６，９８０号；Ｂｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８５，２２９：８１−８３；Ｓｔａｅｒｚ，ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，１９８５，３１４：６２８−６３１；及びＥＰ０４５３０８２に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。ロイシンジッパーにより組み立てられた抗原結合ドメインの作製方法は、全体が参照により組み込まれるＫｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９２，１４８：１５４７−１５５３に記載される。ＤＮＬアプローチを介する抗体の作製方法は、米国特許第７，５２１，０５６号；同第７，５５０，１４３号；同第７，５３４，８６６号；及び同第７，５２７，７８７号に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。抗体及び非抗体分子��ハイブリッドの作製方法は、そのような抗体の例については、全体が参照により組み込まれるＷＯ９３／０８８２９に記載される。ＤＡＦ抗体の作製方法は、全体が参照により組み込まれる米国特許公開第２００８／００６９８２０号に記載される。還元及び酸化を介する抗体の作製方法は、全体が参照により組み込まれるＣａｒｌｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ，２０１１，６：ｅ２２５３３に記載される。ＤＶＤ−Ｉｇ（商標）の作製方法は、全体が参照により組み込まれる米国特許第７，６１２，１８１号に記載される。ＤＡＲＴ（商標）の作製方法は、全体が参照により組み込まれるＭｏｏｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１１，１１７：４５４−４５１に記載される。ＤｕｏＢｏｄｙ（登録商標）の作製方法は、Ｌａｂｒｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２０１３，１１０：５１４５−５１５０；Ｇｒａｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１３，５：９６２−９７２；及びＬａｂｒｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，２０１４，９：２４５０−２４６３に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。ＩｇＧ由来のＣＨ３のＣ末端に融合しているｓｃＦｖを含む抗体の作製方法は、全体が参照により組み込まれるＣｏｌｏｍａ  ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９７，１５：１５９−１６３に記載される。Ｆａｂ分子が免疫グロブリンの定常領域に結合している抗体の作製方法は、全体が参照により組み込まれるＭｉｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，１７０：４８５４−４８６１に記載される。ＣｏｖＸ−Ｂｏｄｙの作製方法は、全体が参照により組み込まれるＤｏｐｐａｌａｐｕｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２０１０，１０７：２２６１１−２２６１６に記載される。Ｆｃａｂ抗体の作製方法は、全体が参照により組み込まれるＷｏｚｎｉａｋ−Ｋｎｏｐｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．，２０１０，２３：２８９−２９７に記載される。ＴａｎｄＡｂ（登録商標）抗体の作製方法は、Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９９，２９３：４１−５６及びＺｈｕｋｏｖｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１３，１２２：５１１６に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。タンデムＦａｂの作製方法は、全体が参照により組み込まれるＷＯ２０１５／１０３０７２に記載される。Ｚｙｂｏｄｉｅｓ（商標）の作製方法は、全体が参照により組み込まれるＬａＦｌｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１３，５：２０８−２１８に記載される。
【０２４０】
変種の作製方法
エラープローンＰＣＲ、鎖シャッフリング、及びトリヌクレオチド特異的変異導入（ＴＲＩＭ）などのオリゴヌクレオチド特異的変異導入を含む、任意の好適な方法は、抗体をコードするポリヌクレオチド配列（複数可）に可変性を導入するために使用することができる。一部の態様では、いくつかのＣＤＲ残基（例えば、一度に４〜６残基）がランダム化される。抗原結合に関与するＣＤＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異導入またはモデリングを使用して特異的に同定されてもよい。特に、ＣＤＲ−Ｈ３及びＣＤＲ−Ｌ３は多くの場合、変異の標的とされる。
【０２４１】
可変領域及び／またはＣＤＲへの多様性の導入は、２次ライブラリーの作成に使用することができる。次に、２次ライブラリーをスクリーニングして、親和性が改善された抗体変種を特定する。２次ライブラリーの構築及び再選択による親和性成熟は、例えば、全体が参照により組み込まれるＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，１７８：１−３７に記載されている。
【０２４２】
アッセイ
当該分野で既知の様々なアッセイは、本明細書で提供されるＳＩＲＰ−アルファ抗体を同定及び特性決定するために使用されてもよい。
【０２４３】
結合、競合、及びエピトープマッピングアッセイ
本明細書で提供される抗体の特異的抗原結合活性は、本開示の他の箇所で説明されるように、ＳＰＲ、ＢＬＩ、ＲＩＡ、及びＭＳＤ−ＳＥＴの使用を含む任意の好適な方法により評価されてもよい。さらに、抗原結合活性は、ＥＬＩＳＡアッセイ及びウェスタンブロットアッセイにより評価されてもよい。
【０２４４】
２つの抗体間の競合または抗体及び別の分子（例えば、ＳＩＲＰ−アルファの１つ以上のリガンド）間の競合を測定するためのアッセイは、本開示の他の箇所、及び例えば、全体が参照により組み込まれるＨａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ｃｈ．１４，１９８８，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙに記載される。
【０２４５】
本明細書で提供される抗体が結合するエピトープをマッピングするためのアッセイは、例えば、全体が参照により組み込まれるＭｏｒｒｉｓ  “Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，”ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｖｏｌ．６６，１９９６，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．に記載される。一部の実施形態では、エピトープは、ペプチド競合により決定される。一部の実施形態では、エピトープは、質量分析法により決定される。一部の実施形態では、エピトープは、結晶学により決定される。
【０２４６】
エフェクター機能のアッセイ
本明細書で提供される抗体による処置後のエフェクター機能は、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９１，９：４５７−４９２；米国特許第５，５００，３６２号、同第５，８２１，３３７号；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８６，８３：７０５９−７０６３；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８５，８２：１４９９−１５０２；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９８７，１６６：１３５１−１３６１；Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９８，９５：６５２−６５６；ＷＯ２００６／０２９８７９；ＷＯ２００５／１００４０２；Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９９６，２０２：１６３−１７１；Ｃｒａｇｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００３，１０１：１０４５−１０５２；Ｃｒａｇｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ，２００４，１０３：２７３８−２７４３；及びＰｅｔｋｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００６，１８：１７５９−１７６９（これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる）に記載されるものを含む、当該技術分野で既知の様々なｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏアッセイを使用して評価されてもよい。
【０２４７】
医薬組成物
本明細書で提供される抗体は、任意の適切な医薬組成物に製剤化し且つ任意の好適な投与経路により投与することができる。好適な投与経路としては、動脈内、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、経鼻、非経口、経肺、及び皮下経路が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４８】
医薬組成物は、１つ以上の医薬賦形剤を含んでもよい。任意の好適な医薬賦形剤が使用されてもよく、当業者は、好適な医薬賦形剤を選択することができる。従って、以下で提供される医薬賦形剤は、例示的であるが、限定的ではないことが意図されている。さらなる医薬賦形剤としては、例えば、全体が参照により組み込まれるＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．（Ｅｄｓ．）６ｔｈ  Ｅｄ．（２００９）に記載されるものが挙げられる。
【０２４９】
一部の実施形態では、医薬組成物は、消泡剤を含む。任意の好適な消泡剤が使用されてもよい。一部の態様では、消泡剤は、アルコール、エーテル、油、ワックス、シリコーン、界面活性剤、及びそれらの組み合わせから選択される。一部の態様では、消泡剤は、鉱油、植物油、エチレンビスステアラミド、パラフィンワックス、エステルワックス、脂肪アルコールワックス、長鎖脂肪アルコール、脂肪酸石鹸、脂肪酸エステル、シリコングリコール、フルオロシリコーン、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールコポリマー、ポリジメチルシロキサン−二酸化ケイ素、エーテル、オクチルアルコール、カプリルアルコール、ソルビタントリオレアート、エチルアルコール、２−エチルヘキサノール、ジメチコン、オレイルアルコール、シメチコン、及びその組み合わせから選択される。
【０２５０】
一部の実施形態では、医薬組成物は、共溶媒を含む。共溶媒の実例としては、エタノール、ポリ（エチレン）グリコール、ブチレングリコール、ジメチルアセトアミド、グリセリン、プロピレングリコール、及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【０２５１】
一部の実施形態では、医薬組成物は、緩衝液を含む。緩衝液の実例としては、酢酸塩、ホウ酸塩、炭酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、水酸化物、ジエタノールアミン、モノエタノールアミン、グリシン、メチオニン、グアーガム、グルタミン酸ナトリウム、及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【０２５２】
一部の実施形態では、医薬組成物は、担体または充填剤を含む。担体または充填剤の実例としては、ラクトース、マルトデキストリン、マンニトール、ソルビトール、キトサン、ステアリン酸、キサンタンガム、グアーガム、及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【０２５３】
一部の実施形態では、医薬組成物は、界面活性剤を含む。界面活性剤の実例としては、ｄ−アルファトコフェロール、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、ドキュセートナトリウム、ベヘン酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル、ラウリン酸、マクロゴール１５ヒドロキシステアラート、ミリスチルアルコール、リン脂質、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンステアラート、ポリオキシルグリセリド、ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタンエステル、ビタミンＥポリエチレン（グリコール）コハク酸塩、及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【０２５４】
一部の実施形態では、医薬組成物は、固化防止剤を含む。固化防止剤の実例としては、リン酸カルシウム（三塩基性）、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、酸化マグネシウム、及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【０２５５】
医薬組成物と共に使用され得る他の賦形剤としては、例えば、アルブミン、抗酸化剤、抗菌剤、抗真菌剤、生体吸収性ポリマー、キレート剤、制御放出剤、希釈剤、分散剤、溶解促進剤、乳化剤、ゲル化剤、軟膏基剤、浸透促進剤、防腐剤、可溶化剤、溶媒、安定化剤、糖、及びそれらの組み合わせが挙げられる。これらの薬剤のそれぞれの具体例は、例えば、全体が参照により組み込まれるＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．（Ｅｄｓ．）６ｔｈ  Ｅｄ．（２００９），Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓに記載される。
【０２５６】
一部の実施形態では、医薬組成物は、溶媒を含む。一部の態様では、溶媒は、滅菌等張食塩水またはデキストロース溶液などの食塩水である。一部の態様では、溶媒は、注射用水である。
【０２５７】
一部の実施形態では、医薬組成物は、微粒子またはナノ粒子などの粒子形態である。微粒子及びナノ粒子は、ポリマーまたは脂質などの任意の好適な材料から形成されてもよい。一部の態様では、微粒子またはナノ粒子は、ミセル、リポソーム、またはポリマーソームである。
【０２５８】
水が一部の抗体の分解を促進し得るので、抗体を含む無水医薬組成物及び剤形がさらに本明細書で提供される。
【０２５９】
本明細書で提供される無水医薬組成物及び剤形は、無水または低水分含有成分及び低水分または低湿度条件を使用して調製することができる。製造、包装、及び／または貯蔵中に水分及び／または湿度との実質的な接触が予想される場合、ラクトース及び１級または２級アミンを含む少なくとも１つの活性成分を含む医薬組成物及び剤形は、無水であり得る。
【０２６０】
無水の医薬組成物は、無水の性質が維持されるように調製及び保存されるべきである。従って、無水組成物は、水への曝露を防ぐことが知られている材料を使用して包装することができ、その結果、好適な製剤化キットに含まれ得る。好適な包装の例としては、密封ホイル、プラスチック、単位用量容器（例えば、バイアル）、ブリスターパック、及びストリップパックが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２６１】
特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、非経口剤形として製剤化される。非経口剤形は、限定されないが、皮下、静脈内（注入及びボーラス注射を含む）、筋肉内、ならびに動脈内を含む種々の経路により対象に投与することができる。それらの投与は通常、汚染物質に対する対象の自然防御を回避するので、非経口剤形は通常、滅菌されているか、または対象への投与前に滅菌することが可能である。非経口剤形の例としては、注射用溶液、注射用の薬学的に許容されるビヒクルに溶解または懸濁する準備ができている乾燥（例えば、凍結乾燥）製品、注射用懸濁液、及びエマルションが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２６２】
非経口剤形を提供するために使用することができる好適なビヒクルは、当業者らに周知である。例としては、注射用水ＵＳＰ；限定されないが、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロース及び塩化ナトリウム注射液、ならびに乳酸リンゲル注射液などの水性ビヒクル；限定されないが、エチルアルコール、ポリエチレングリコール、及びポリプロピレングリコールなどの水混和性ビヒクル；ならびに、限定されないが、トウモロコシ油、綿実油、落花生油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、及び安息香酸ベンジルなどの非水性ビヒクルが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２６３】
本明細書に開示の抗体のうちの１つ以上の溶解度を増加させる賦形剤は、非経口剤形に組み込むこともできる。
【０２６４】
一部の実施形態では、非経口剤形は、凍結乾燥されている。例示的な凍結乾燥製剤は、例えば、米国特許第６，２６７，９５８号及び同第６，１７１，５８６号；ならびにＷＯ２００６／０４４９０８に記載され、これらのそれぞれは、全体が参照により組み込まれる。
【０２６５】
ヒトの治療では、医師は、予防的または治療的処置、ならびに、年齢、体重、状態、及び処置されるべき対象に固有の他の因子に応じて、最も適切と考えられる薬量を決定するであろう。
【０２６６】
特定の実施形態では、本明細書で提供される組成物は、医薬組成物または単一単位剤形である。本明細書で提供される医薬組成物及び単一単位剤形は、１つ以上の予防的または治療的抗体を予防的または治療的有効量含む。
【０２６７】
障害またはその１つ以上の症状の予防または処置に有効となる抗体または組成物の量は、疾患または状態の性質及び重症度、及び抗体が投与される経路により変動するであろう。頻度及び投薬量はまた、投与される特定の治療法（例えば、治療薬または予防薬）、障害、疾患、または状態の重症度、投与経路、ならびに対象の年齢、体重、応答、及び過去の病歴に応じた各対象に固有の因子に従って変動するであろう。有効用量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたは動物モデルの試験システムから得られる用量反応曲線から外挿されてもよい。
【０２６８】
当業者らにより容易に知られるように、異なる疾患及び状態について異なる治療的有効量が適用可能であり得る。同様に、そのような障害を予防、管理、処置、または改善するのに十分であるが、本明細書で提供される抗体に関連する有害な影響を引き起こすのに不十分な、または低減するのに十分な量もまた、本明細書で提供される投薬量及び投与頻度スケジュールに包含される。さらに、対象に本明細書で提供される組成物の複数の投薬量が投与される時、投薬量の全てが同じである必要はない。例えば、対象に投与される投薬量は、組成物の予防または治療効果を改善するように増加させても、特定の対象が経験している１つ以上の副作用を低減させるように減少させてもよい。
【０２６９】
特定の実施形態では、処置または予防は、本明細書で提供される抗体または組成物の１つ以上の負荷用量で開始することができ、１つ以上の維持用量が続く。
【０２７０】
特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体または組成物の用量は、対象の血液または血清中の抗体の定常状態濃度を達成するために投与することができる。定常状態の濃度は、当業者らが利用可能な技術による測定により決定することができるか、または身長、体重、及び年齢などの対象の身体的特徴に基づくことができる。
【０２７１】
本開示の他の箇所でより詳細に考察される場合、本明細書で提供される抗体は任意に、疾患または障害を予防または処置するのに有用な１つ以上の追加の薬剤と共に投与されてもよい。そのような追加の薬剤の有効量は、製剤中に存在する抗体の量、障害または処置の種類、及び当該技術分野で既知または本明細書に記載の他の因子に依存し得る。
【０２７２】
治療用途
治療用途の場合、抗体は、当該技術分野で既知のもの及び上述したものなどの薬学的に許容される剤形で、哺乳動物、一般には、ヒトに投与される。例えば、抗体は、ヒトに、ボーラスとして静脈内に、または筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、髄腔内、または腫瘍内経路による一定期間の連続注入により投与されてもよい。抗体はまた、局所的及び全身的治療効果を発揮するために、腫瘍周囲、病巣内、または病変部近傍経路により適切に投与される。腹腔内経路は、例えば、卵巣腫瘍の処置において特に有用であり得る。
【０２７３】
本明細書で提供される抗体は、ＳＩＲＰ−アルファが関与する任意の疾患または状態の処置に有用であり得る。一部の実施形態では、疾患または状態は、抗ＳＩＲＰ−アルファ抗体を用いる処置から恩恵を受け得る疾患または状態である。一部の実施形態では、疾患または状態は、腫瘍である。一部の実施形態では、疾患または状態は、細胞増殖性障害である。一部の実施形態では、疾患または状態は、がんである。一部の実施形態では、疾患または状態は、感染症である。
【０２７４】
主題の抗ＳＩＲＰα抗体で処置することができる症状、病気、及び／または疾患の例としては、がん（限定されないががん、軟部組織腫瘍、肉腫、奇形腫、メラノーマ、白血病、リンパ腫、脳腫瘍、固形腫瘍、中皮腫（ＭＳＴＯ）などを含む任意の形態のがん）；感染症（例えば、慢性感染症）；及び免疫疾患または障害（例えば、炎症性疾患）（例えば、多発性硬化症、関節炎など、例えば、免疫抑制療法用）が挙げられるが、これらに限定されない。主題の抗ＳＩＲＰα抗体は、（例えば、悪性細胞を破壊し、患者の身体がドナーの細胞／幹細胞を拒絶するのを防ぐための免疫抑制を提供するなどの）移植条件付け（例えば、幹細胞移植、骨髄移植など）に使用することもできる。例えば、一部の場合では、主題の抗体の組み合わせまたは二重特異性抗体（例えば、抗ＣＤ１１７と組み合わせた抗ＳＩＲＰα）は、移植条件付けの用途を見つける。例えば、主題の抗体の組み合わせまたは二重特異性抗体（例えば、抗ＣＤ１１７と組み合わせた抗ＳＩＲＰα）は、骨髄移植条件付けに使用することができる。一部の場合では、主題の抗ＳＩＲＰα抗体（例えば、抗体の組み合わせ）は、免疫抑制療法に使用することができる。
【０２７５】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、薬物として使用するために提供される。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、薬物の製造または調製での使用のために提供される。一部の実施形態では、薬剤は、抗ＳＩＲＰ−アルファ抗体から恩恵を受け得る疾患または状態の処置のためのものである。一部の実施形態では、疾患または状態は、腫瘍である。一部の実施形態では、疾患または状態は、細胞増殖性障害である。一部の実施形態では、疾患または状態は、がんである。一部の実施形態では、疾患または状態は、感染症である。疾患または状態は、がん；感染症；ウイルス感染症；細菌感染症；真菌感染症；線維症；アテローム性動脈硬化症；寄生虫感染症、任意に、マラリア；及び／または、任意に、抗ＣＫＩＴ（ＣＤ１１７）抗体と組み合わせて、造血幹細胞の移植のための、放射線及び／もしくは化学療法を伴わないかもしくはこれが低減されたコンディショニングを可能にする、内因性造血幹細胞の骨髄からの枯渇もしくは低減とすることができる。
【０２７６】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、疾患または状態の処置を必要とする対象の疾患または状態を処置する方法が本明細書で提供される。一部の態様では、疾患または状態は、がんである。一部の態様では、疾患または状態は、感染症である。
【０２７７】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、疾患または状態の処置を必要とする対象の疾患または状態を処置する方法が本明細書で提供され、疾患または状態は、がんであり、がんは、固形腫瘍及び血液腫瘍から選択される。
【０２７８】
一部の実施形態では、有効量の本明細書に開示の抗体または医薬組成物を対象に投与することを含む、貪食の増加を必要とする対象において貪食を増加させる方法が、本明細書で提供される。
【０２７９】
一部の実施形態では、有効量の本明細書に開示の抗体または医薬組成物を対象に投与することを含む、免疫応答の調節を必要とする対象において免疫応答を調節する方法が、本明細書で提供される。
【０２８０】
任意の好適ながんは、本明細書で提供される抗体で処置されてもよい。
【０２８１】
例えば、がん細胞が非がん細胞と比較してＣＤ４７の発現の増加を示すがんは、主題の方法及び組成物により処置されるのに適するがんである。本明細書で使用される場合、「がん」は、限定されないが、固形腫瘍がん（例えば、肺、前立腺、乳房、膀胱、結腸、卵巣、膵臓、腎臓、肝臓、膠芽腫、髄芽腫、平滑筋肉腫、頭頸部扁平上皮細胞癌、メラノーマ、神経内分泌系など）及び液性がん（例えば、血液がん）；癌腫；軟部組織腫瘍；肉腫；奇形腫；メラノーマ；白血病；リンパ腫；ならびに微小残存病変を含み且つ原発性腫瘍及び転移性腫瘍の両方を含む脳腫瘍を含む任意の形態のがんを含む。がん細胞がＣＤ４７を発現する任意のがん（例えば、一部の場合では、がん細胞は、非がん細胞と比較してＣＤ４７の発現の増加を示す）は、主題の方法及び組成物（例えば、主題の抗ＳＩＲＰα抗体）で処置されるのに適するがんである。
【０２８２】
癌腫は、上皮組織から生じる悪性腫瘍である。上皮細胞は、身体の外表面を覆い、内部空洞を覆い、腺組織の内壁を形成する。癌腫の例としては、腺癌（腺（分泌）細胞で生じるがん）が挙げられるが、これらに限定されず、例えば、乳房、膵臓、肺、前立腺、及び結腸のがんは、腺癌；副腎皮質癌；肝細胞癌；腎細胞癌；卵巣癌；上皮内癌；腺管癌；乳癌；基底細胞癌；扁平上皮細胞癌；移行上皮癌；結腸癌；上咽頭癌；多房性嚢胞性腎細胞癌；燕麦細胞癌；大細胞肺癌；小細胞肺癌；非小細胞肺癌などとすることができる。癌腫は、前立腺、膵臓、結腸、脳（通常、２次転移として）、肺、乳房、皮膚などに見出され得る。
【０２８３】
軟部組織腫瘍は、結合組織に由来するまれな腫瘍の非常に多様なグループである。軟部組織腫瘍の例としては、肺胞軟部肉腫；血管腫様線維性組織球腫；軟骨粘液線維腫；骨格軟骨肉腫；骨外粘液性軟骨肉腫；明細胞肉腫；線維形成性小円形細胞腫瘍；隆起性皮膚線維肉腫；子宮内膜間質腫瘍；ユーイング肉腫；線維腫症（デスモイド）；乳児型線維肉腫；消化管間質腫瘍；骨巨細胞腫；腱滑膜巨細胞腫；炎症性筋線維芽細胞腫瘍；子宮平滑筋腫；平滑筋肉腫；脂肪芽細胞腫；典型的な脂肪腫；紡錘細胞または多形性脂肪腫；非定型脂肪腫；軟骨脂肪腫；高分化型脂肪肉腫；粘液／円形細胞型脂肪肉腫；多形型脂肪肉腫；粘液悪性線維性組織球腫；高悪性線維性組織球腫；粘液線維肉腫；悪性末梢神経鞘腫瘍；中皮腫；神経芽腫；骨軟骨腫；骨肉腫；原発性神経外胚葉性腫瘍；胞巣型横紋筋肉腫；胎児性横紋筋肉腫；良性または悪性神経鞘腫；滑膜肉腫；エバン腫瘍；結節性筋膜炎；デスモイド型線維腫症；孤立性線維性腫瘍；隆起性皮膚線維肉腫（ＤＦＳＰ）；血管肉腫；類上皮血管内皮腫；腱滑膜巨細胞腫（ＴＧＣＴ）；色素性絨毛結節性滑膜炎（ＰＶＮＳ）；線維性骨異形成；粘液線維肉腫；線維肉腫；滑膜肉腫；悪性末梢神経鞘腫瘍；神経線維腫；及び軟部組織の多形性腺腫；ならびに線維芽細胞、筋線維芽細胞、組織球、血管細胞／内皮細胞、及び神経鞘細胞に由来する腫瘍形成が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２８４】
肉腫は、間葉起源の細胞、例えば、骨、あるいは軟骨、脂肪、筋肉、血管、線維組織、または他の結合もしくは支持組織を含む身体の軟部組織に、発生するまれなタイプのがんである。異なるタイプの肉腫は、がんが形成される場所に基づいている。例えば、骨肉腫が骨で形成され、脂肪肉腫が脂肪で形成され、横紋筋肉腫が筋肉で形成される。肉腫の例としては、アスキン腫瘍；肉腫ボトリノイド；軟骨肉腫；ユーイング肉腫；悪性血管内皮腫；悪性神経鞘腫；骨肉腫；及び軟組織肉腫（例えば、肺胞軟部肉腫；血管肉腫；膀胱肉腫；隆起性皮膚線維肉腫（ＤＦＳＰ）；デスモイド腫瘍；線維形成性小細胞腫瘍；類上皮肉腫；骨格外粘液性軟骨肉腫；骨外性骨肉腫；線維肉腫；消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）；血管周囲細胞腫；血管肉腫（より一般には、「血管肉腫」と呼ばれる）；カポジ肉腫；平滑筋肉腫；脂肪肉腫；リンパ管肉腫；悪性末梢神経鞘腫瘍（ＭＰＮＳＴ）；神経線維肉腫；滑膜肉腫；未分化多形肉腫など）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２８５】
奇形腫は、例えば、毛髪、筋肉、及び骨を含む、いくつかの異なるタイプの組織（例えば、３つの胚葉：内胚葉、中胚葉、及び外胚葉のいずれか及び／または全てに由来する組織を含み得る）を含有し得る胚細胞腫瘍の１つのタイプである。奇形腫は、ほとんどの場合、女性の卵巣、男性の睾丸、及び子供の尾骨に発生する。
【０２８６】
メラノーマは、メラノサイト（色素メラニンを生成する細胞）で生じるがんの一種である。それは、ほくろ（皮膚メラノーマ）で生じ得るが、さらに眼内または腸内などの他の着色組織で生じ得る。
【０２８７】
白血病は、骨髄などの造血組織に生じるがんであり且つ多数の異常な血液細胞が産生されて、血流に入るがんである。例えば、白血病は、通常は血流で成熟する骨髄由来細胞から生じ得る。白血病は、疾患の発症及び進行の速さ（例えば、急性対慢性）及び影響を受ける白血球のタイプ（例えば、骨髄性対リンパ性）にちなんで命名されている。骨髄性白血病は、骨髄性または骨髄芽球性白血病とも呼ばれる。リンパ性白血病は、リンパ芽球性またはリンパ球性白血病とも呼ばれる。リンパ性白血病細胞は、リンパ節に集まり得、これは、腫大し得る。白血病の例としては、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、及び慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２８８】
リンパ腫は、免疫系の細胞で生じるがんである。例えば、リンパ腫は、通常リンパ系で成熟する骨髄由来細胞から生じ得る。２つの基本的カテゴリーのリンパ腫がある。１つの種類は、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）であり、これは、Ｒｅｅｄ−Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ細胞と呼ばれる１つのタイプの細胞の存在を特徴とする。現時点では、認められた６タイプのＨＬがある。ホジキンリンパ腫の例としては、結節硬化型古典的ホジキンリンパ腫（ＣＨＬ）、混合細胞型ＣＨＬ、リンパ球枯渇ＣＨＬ、リンパ球豊富型ＣＨＬ、及び結節性リンパ球優位型ＨＬが挙げられる。
【０２８９】
リンパ腫の他のカテゴリーは、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）であり、これは、免疫系細胞のがんの多様な大グループを含む。非ホジキンリンパ腫はさらに、低悪性度の（成長の遅い）進行及び中悪性度の（成長の速い）進行を有するがんに分けることができる。現時点では、認められた６１タイプのＮＨＬがある。非ホジキンリンパ腫の例としては、エイズ関連リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、血管免疫芽球性リンパ腫、芽球性ＮＫ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、バーキット様リンパ腫（小非分割細胞性リンパ腫）、慢性リンパ性白血病／小リンパ球性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、腸管症型Ｔ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、肝脾ガンマデルタＴ細胞リンパ腫、Ｔ細胞白血病、リンパ芽球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、鼻Ｔ細胞リンパ腫、小児リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、形質転換リンパ腫、処置関連Ｔ細胞リンパ腫、及びワルデンシュトレームマクログロブリン血症が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２９０】
脳腫瘍は、脳組織の任意のがんを含む。脳腫瘍の例としては、神経膠腫（例えば、神経膠芽腫、星状細胞腫、乏突起膠腫、上衣腫など）、髄膜腫、下垂体腺腫、前庭神経鞘腫、原始神経外胚葉性腫瘍（髄芽腫）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２９１】
本明細書で使用される場合、「感染症」という用語は、生物（すなわち、対象）の少なくとも１つの細胞が感染性因子に感染している任意の状態を指す（例えば、対象は、細胞内病原体感染症、例えば、慢性細胞内病原体感染症を有する）。本明細書で使用される場合、「感染性因子」という用語は、感染生物の少なくとも１つの細胞においてＣＤ４７発現（例えば、ＣＤ４７発現の増加）を誘導する外来生物学的実体（すなわち、病原体）を指す。例えば、感染性因子は、細菌、ウイルス、原生動物、及び真菌を含むが、これらに限定されない。細胞内病原体は特に、興味深い。感染症は、感染性因子により引き起こされる障害である。一部の感染性因子は、特定の条件下では認識可能な症状または疾患を引き起こさないが、変化した条件下で症状または疾患を引き起こす可能性がある。主題の方法は、例えば、限定されないが、ウイルス感染症、例えば、レトロウイルス、レンチウイルス、ヘパドナウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、ヒトパピローマウイルスなどを含む慢性病原体感染症；細胞内細菌感染症、例えば、マイコバクテリウム属（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、クラミドフィラ属（Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ）、エーリキア属（Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ）、リケッチア属（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ）、ブルセラ属（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）、レジオネラ属（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）、フランシセラ属（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ）、リステリア属（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）、コクシエラ属（Ｃｏｘｉｅｌｌａ）、ナイセリア属（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、エルシニア種（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｓｐ）、ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ）など；及び細胞内原虫病原体、例えば、プラスモジウム種（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｓｐ．）、トリパノソーマ種（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｓｐ．）、ジアルジア種（Ｇｉａｒｄｉａ  ｓｐ．）、トキソプラズマ種（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｓｐ．）、レーシュマニア種（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｓｐ．）などの処置に使用することができる。
【０２９２】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、それを必要とする対象の標的細胞においてＳＩＲＰ−アルファを拮抗する方法が本明細書で提供される。
【０２９３】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、免疫応答の増強を必要とする対象において免疫応答を増強する方法が本明細書で提供される。
【０２９４】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、腫瘍の発症の遅延を必要とする対象において腫瘍の発症を遅延させる方法が本明細書で提供される。
【０２９５】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、腫瘍の再発または発症の予防を必要とする対象において腫瘍の再発または発症を予防する方法が本明細書で提供される。
【０２９６】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、がんの発症の遅延を必要とする対象においてがんの発症を遅延させる方法が本明細書で提供される。
【０２９７】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、がんの再発または発症の予防を必要とする対象においてがんの再発または発症を予防する方法が本明細書で提供される。
【０２９８】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、腫瘍のサイズの低減を必要とする対象において腫瘍のサイズを低減する方法が本明細書で提供される。
【０２９９】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、転移の数の低減を必要とする対象において転移の数を低減させる方法が本明細書で提供される。
【０３００】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、感染症の発症の遅延を必要とする対象において感染症の発症を遅延させる方法が本明細書で提供される。
【０３０１】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、感染症の再発または発症の予防を必要とする対象において感染症の再発または発症を予防する方法が本明細書で提供される。
【０３０２】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、ウイルス力価の低減を必要とする対象においてウイルス力価を低減させる方法が本明細書で提供される。
【０３０３】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、ウイルスの除去を必要とする対象からウイルスを除去する方法が本明細書で提供される。
【０３０４】
一部の実施形態では、有効量の本明細書で提供される抗体を対象に投与することにより、全生存期間、生存期間中央値、または無増悪生存期間の延長を必要とする対象において全生存期間、生存期間中央値、または無増悪生存期間を延長するための方法が本明細書で提供される。
【０３０５】
併用療法
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、少なくとも１つの追加の治療薬と共に投与される。任意の好適な追加の治療薬は、本明細書で提供される抗体と共に投与されてもよい。一部の態様では、追加の治療薬は、放射線、細胞障害薬、化学療法薬、細胞増殖抑制薬、抗ホルモン薬、ＥＧＦＲ阻害薬、免疫刺激薬、抗血管新生薬、及びそれらの組み合わせから選択される。
【０３０６】
一部の実施形態では、追加の治療薬は、免疫賦活薬を含む。
【０３０７】
一部の実施形態では、追加の治療薬は、抗体である。
【０３０８】
抗ＳＩＲＰα抗体は、標的細胞に選択的に結合する２次抗体または薬剤と組み合わせて治療的に使用されてもよい。「標的細胞」という用語は、構成に応じて様々な方法で使用することができる。通常は、「標的細胞」は、食細胞（例えば、食細胞）により貪食される細胞であり、主題の抗ＳＩＲＰα抗体を投与した結果として貪食が増強される。従って、「標的細胞」という用語は、主題の抗ＳＩＲＰα抗体が、ＣＤ４７発現細胞及びＳＩＲＰα発現食細胞間の相互作用を阻害することによりＣＤ４７発現細胞の貪食を促進するので、ＣＤ４７発現細胞を指し得る。
【０３０９】
しかし、一部の場合では、標的細胞は、主題の多重特異性抗体が標的細胞の貪食を誘導するために、高レベルのＣＤ４７を発現する必要はない（一部の場合では、ＣＤ４７をまったく発現する必要はない）。例えば、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体との関連で、主題の多重特異性（例えば、二重特異性）抗体のＳＩＲＰα結合領域（第１の結合領域）は、食細胞（例えば、マクロファージ）上のＳＩＲＰαに結合し、これは、多重特異性抗体が、多重特異性抗体の第２の結合領域（例えば、二重特異性抗体の第２の結合領域）により認識される（特異的に結合される）抗原（例えば、がん細胞のマーカー）を発現する細胞の近傍に食細胞を導くテザーとして機能することを可能にする。それ故、多重特異性抗体との関連で、標的細胞は、高レベルのＣＤ４７を発現しない細胞とすることができる（ＣＤ４７を発現しない細胞とすることもできる）。一部の実施形態では、標的細胞は、哺乳動物細胞、例えば、ヒト細胞である。標的細胞は、以下に記載される任意の個体（例えば、患者、対象など）に由来し得る。
【０３１０】
一部の場合では、標的細胞は、「罹患」細胞（例えば、「罹患」個体に由来する細胞）であり、「罹患」という用語は、主題の抗ＳＩＲＰα抗体で処置され得る症状、病気、または疾患を有する対象を指すために本明細書で使用される。「罹患」対象は、がんを有し得、感染症（例えば、慢性感染症）を保有し得、及び／または例えば、硬化症、線維症及び同類のものなどの他の過剰増殖状態を有し得る。「罹患細胞」は、症状、病気、または疾患を引き起こす細胞とすることができる。非限定例として、罹患した患者の罹患した細胞は、ＣＤ４７を発現するがん細胞、感染細胞、炎症細胞、免疫細胞などとすることができる。病気または疾患が主題の抗ＳＩＲＰα抗体で処置することができる１つの適応症は、関与する細胞（すなわち、罹患細胞、例えば、がん細胞、感染細胞、炎症細胞、免疫細胞など）が、ＣＤ４７を発現する（例えば、一部の場合では、同じ細胞型の正常細胞と比較してＣＤ４７のレベルが増加する）ことである。
【０３１１】
一部の実施形態では、追加の治療薬は、腫瘍細胞表面上のタンパク質（複数可）に結合する抗体である。
【０３１２】
がんの処置のために、抗ＳＩＲＰα抗体は、腫瘍抗原に特異的な１つ以上の抗体と組み合わされてもよい。これらのうち、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）は、腫瘍細胞に比較的制限されているが、腫瘍特異的抗原（ＴＳＡ）は、腫瘍細胞に特有である。ＴＳＡ及びＴＡＡは通常、主要組織適合性複合体の一部として細胞表面に発現される細胞内分子の部分である。
【０３１３】
組織特異的分化抗原は、腫瘍細胞及びその正常細胞の対応物に存在する分子である。治療用ｍＡｂにより認識されることが知られている腫瘍関連抗原は、いくつかの異なるカテゴリーに分類される。造血分化抗原は、通常は分化抗原（ＣＤ）群と関連し且つＣＤ２０、ＣＤ３０、ＣＤ３３、及びＣＤ５２を含む糖タンパク質である。細胞表面分化抗原は、正常細胞及び腫瘍細胞の両方の表面に見出される糖タンパク質及び炭水化物の多様なグループである。成長及び分化のシグナル伝達に関与する抗原は多くの場合、成長因子及び成長因子受容体である。がん患者の抗体を標的とする成長因子は、ＣＥＡ、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ；ＥＲＢＢ１としても知られている）、ＥＲＢＢ２、（ＨＥＲ２としても知られている）、ＥＲＢＢ３、ＭＥＴ（ＨＧＦＲとしても知られている）、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ１Ｒ）、エフリン受容体Ａ３（ＥＰＨＡ３）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）関連アポトーシス誘導リガンド受容体１（ＴＲＡＩＬＲ１；ＴＮＦＲＳＦ１０Ａとしても知られている）、ＴＲＡＩＬＲ２（ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂとしても知られている）、及び核因子κＢリガンド受容体アクチベーター（ＲＡＮＫＬ；ＴＮＦＳＦ１１としても知られている）を含む。血管新生に関与する抗原は通常、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、ＶＥＧＦ受容体（ＶＥＧＦＲ）、インテグリンαＶβ３、及びインテグリンα５β１を含む、新しい微小血管系の形成をサポートするタンパク質または成長因子である。腫瘍間質及び細胞外マトリックスは、腫瘍に不可欠な支持構造である。治療標的である間質及び細胞外マトリックス抗原は、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）及びテネイシンを含む。
【０３１４】
二重特異性構成にまたは併用療法として有用な治療用抗体の例としては、リツキシマブ；イブリツモマブ；チウキセタン；トシツモマブ；ブレンツキシマブ；ベドチン；ゲムツズマブ；オゾガマイシン；アレムツズマブ；ＩＧＮ１０１；アデカツムマブ；ラベツズマブ；ｈｕＡ３３；ペムツモマブ；オレゴボマブ；ＣＣ４９（ミンレツモマブ）；ｃＧ２５０；Ｊ５９１；ＭＯｖ１８；ＭＯＲＡｂ−００３（ファルレツズマブ）；３Ｆ８，ｃｈ１４．１８；ＫＷ−２８７１；ｈｕ３Ｓ１９３；ＩｇＮ３１１；ベバシズマブ；ＩＭ−２Ｃ６；ＣＤＰ７９１；エタラシズマブ；ボロシキシマブ；セツキシマブ：パニツムマブ；ニモツズマブ；８０６；トラスツズマブ；ペルツズマブ；ＭＭ−１２１；ＡＭＧ  １０２、ＭＥＴＭＡＢ；ＳＣＨ  ９００１０５；ＡＶＥ１６４２、ＩＭＣ−Ａ１２、ＭＫ−０６４６、Ｒ１５０７；ＣＰ  ７５１８７１；ＫＢ００４；ＩＩＩＡ４；マパツムマブ（ＨＧＳ−ＥＴＲ１）；ＨＧＳ−ＥＴＲ２；ＣＳ−１００８；デノスマブ；シブロツズマブ；Ｆ１９；及び８１Ｃ６が挙げられるが、これらに限定されない。二重特異性抗体は、Ｆｃγ受容体を活性化するＦｃ領域を使用してもよい。
【０３１５】
がんの処置のために、抗ＳＩＲＰα抗体は、免疫チェックポイントタンパク質を阻害する１つ以上の抗体と組み合わされてもよい。特に興味深いのは、腫瘍細胞の表面に提示される免疫チェックポイントタンパク質である。臨床がん免疫療法、細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４（ＣＴＬＡ４；ＣＤ１５２としても知られている）及びプログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ１；ＣＤ２７９としても知られている）の関連で最も活発に研究されている免疫チェックポイント受容体はともに、阻害性受容体である。これらの受容体のうちのいずれかを遮断する抗体の臨床活性は、抗腫瘍免疫を複数のレベルで増強することができること、ならびに、機序的考察及び前臨床モデルにより誘導されるコンビナトリアル方策をうまく設計することができることを意味する。
【０３１６】
ＰＤ１に対する２つのリガンドが、ＰＤ１リガンド１（ＰＤＬ１；Ｂ７−Ｈ１及びＣＤ２７４としても知られている）ならびにＰＤＬ２（Ｂ７−ＤＣ及びＣＤ２７３としても知られている）である。ＰＤＬ１は、がん細胞上に発現され、Ｔ細胞上の受容体ＰＤ１への結合により、Ｔ細胞の活性化／機能を阻害する。例えば、治療用抗体としてのアベルマブを参照のこと。
【０３１７】
免疫共刺激分子を作動する薬剤はまた、本明細書に開示の方法に有用である。そのような薬剤は、アゴニストまたはＣＤ４０及びＯＸ４０を含む。ＣＤ４０は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）で見出される共刺激タンパク質であり、活性化のために必要とされる。これらのＡＰＣは、食細胞（マクロファージ及び樹状細胞）ならびにＢ細胞を含む。ＣＤ４０は、ＴＮＦ受容体ファミリーの一部である。ＣＤ４０の主要な活性化シグナル伝達分子は、ＩＦＮγ及びＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）である。ＣＤ４０を介した刺激は、マクロファージを活性化する。
【０３１８】
目的の抗ＣＣＲ４（ＣＤ１９４）抗体は、潜在的な抗炎症及び抗腫瘍活性を有するＣ−Ｃケモカイン受容体４（ＣＣＲ４）に対するヒト化モノクローナル抗体を含む。
【０３１９】
一部の実施形態では、追加の治療薬は、移植療法のために造血幹細胞を枯渇させるためにＨＥＲ２（ＥＲＢＢ２／ｎｅｕ）、ＣＤ５２、ＰＤ−Ｌ１、ＶＥＧＦ、ＣＤ３０、ＥＧＦＲ、ＣＤ３８、ＲＡＮＫＬ（ＣＤ２５４）、ＧＤ２（ガングリオシド）、ＳＬＡＭＦ７（ＣＤ３１９）、ＣＤ２０、ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲａ、ＶＥＧＦＲ２、ＣＤ３３、ＣＤ４４、ＣＤ９９、ＣＤ９６、ＣＤ９０、ＣＤ１３３、ＣＫＩＴ（ＣＫＩＴ陽性腫瘍のＣＤ１１７）；ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＤ４０（アゴニスト）、ＬＡＧ３（ＣＤ２２３）、４１ＢＢ（ＣＤ１３７アゴニスト）、ＯＸ４０（ＣＤ１３４、アゴニスト）；及び／またはＣＫＩＴ（ＣＤ１１７）に結合する抗体である。
【０３２０】
一部の実施形態では、追加の治療薬は、リツキシマブ、セツキシマブ、アレムツズマブ（ＣＤ５２）、アテゾリズマブ（ＰＤ−Ｌ１）、アベルマブ（ＰＤ−Ｌ１）、ベバシズマブ（ＶＥＧＦ）、ブレンツキシマブ（ＣＤ３０）、ダラツムマブ（ＣＤ３８）、デノスマブ（ＲＡＮＫＬ）、ジヌツキシマブ（ＧＤ２）、エロツズマブ（ＳＬＡＭＦ７）、イブリツモマブ（ＣＤ２０）、イピリムマブ（ＣＴＬＡ−４）、ネシツムマブ（ＥＧＦＲ）、ニボルマブ（ＰＤ−１）、オビヌツズマブ（ＣＤ２０）、オファツムマブ（ＣＤ２０）、オララツマブ（ＰＤＧＦＲａ）、パニツムマブ（ＥＧＦＲ）、ペンブロリズマブ（ＰＤ−１）、ペルツズマブ（ＨＥＲ２）、ラムシルマブ（ＶＥＧＦＲ２）、トシツモマブ（ＣＤ２０）、及びゲムツズマブ（ＣＤ３３）のうちの少なくとも１つである。
【０３２１】
追加の治療薬は、任意の好適な手段により投与することができる。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体及び追加の治療薬は、同じ医薬組成物に含まれる。一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体及び追加の治療薬は、異なる医薬組成物に含まれる。
【０３２２】
本明細書で提供される抗体及び追加の治療薬が異なる医薬組成物中に含まれる実施形態では、抗体の投与は、追加の治療薬の投与前に、投与と同時に、及び／または投与後に行うことができる。一部の態様では、本明細書で提供される抗体及び追加の治療薬の投与は、互いに約１ヶ月以内に行われる。一部の態様では、本明細書で提供される抗体及び追加の治療薬の投与は、互いに約１週間以内に行われる。一部の態様では、本明細書で提供される抗体及び追加の治療薬の投与は、互いに約１日以内に行われる。一部の態様では、本明細書で提供される抗体及び追加の治療薬の投与は、互いに約１２時間以内に行われる。一部の態様では、本明細書で提供される抗体及び追加の治療薬の投与は、互いに約１時間以内に行われる。
【０３２３】
診断方法
対象由来の細胞上のＳＩＲＰ−アルファの存在を検出するための方法も提供される。そのような方法は、例えば、本明細書で提供される抗体を用いる処置の応答性を予測及び評価するために使用されてもよい。
【０３２４】
一部の実施形態では、血液試料は、対象から得られ、ＳＩＲＰ−アルファを発現する細胞の割合が決定される。一部の態様では、そのような細胞により発現されるＳＩＲＰ−アルファの相対量が決定される。ＳＩＲＰ−アルファを発現する細胞の割合及びそのような細胞により発現されるＳＩＲＰ−アルファの相対量は、任意の好適な方法により決定することができる。一部の実施形態では、フローサイトメトリーが、そのような測定を行うために使用される。一部の実施形態では、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）が、そのような測定を行うために使用される。末梢血におけるＳＩＲＰ−アルファの発現を評価する方法については、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ，２００３，２１：８３−９２を参照のこと。
【０３２５】
キット
本明細書で提供される抗体を含むキットもまた提供される。キットは、本明細書に記載されるように、疾患または障害の処置、予防、及び／または診断に使用されてもよい。
【０３２６】
一部の実施形態では、キットは、容器、及び、容器上のまたは容器に付随するラベルまたは添付文書を含む。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、注射器、及びＩＶ溶液バッグが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成されてもよい。容器は、単独の、または疾患もしくは障害の処置、予防、及び／または診断に有効な別の組成物と組み合わせた時の組成物を保持する。容器は、滅菌アクセスポートを有してもよい。例えば、容器は、静脈内輸液バッグまたはバイアルの場合、針が貫通することができるポートを有してもよい。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、本明細書で提供される抗体である。ラベルまたは添付文書は、組成物が選択される状態の処置に使用されることを示す。
【０３２７】
一部の実施形態では、キットは、（ａ）第１の組成物が含有される第１の容器（第１の組成物が本明細書で提供される抗体を含む）；及び（ｂ）第２の組成物が含有される第２の容器（第２組成物がさらなる治療薬を含む）を含む。本実施形態のキットはさらに、組成物が特定の状態を処置するために使用することができることを示す添付文書を含み得る。
【０３２８】
代替的または追加的に、キットはさらに、薬学的に許容される賦形剤を含む第２（または第３）容器を含んでもよい。一部の態様では、賦形剤は、緩衝液である。キットはさらに、フィルター、針、及びシリンジを含む、商業的な且つユーザーの観点から望ましい他の材料を含んでもよい。
【実施例】
【０３２９】
以下は、本発明を実施するための特定の実施形態の例である。実施例は、例示目的のみで提供され、決して、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。使用された数値（例えば、量、温度など）に関して正確さを確保するための取り組みがなされているが、当然、一部の実験誤差及び偏差は許容されるべきである。
【０３３０】
本発明の実施は、別途指示のない限り、当業者の技能範囲内のタンパク質化学、生化学、組み換えＤＮＡ技術、及び薬理学の従来の方法を用いるであろう。そのような技術は、文献で完全に説明される。例えば、Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ（Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９３）；Ａ．Ｌ．Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｗｏｒｔｈ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．，ｃｕｒｒｅｎｔ  ａｄｄｉｔｉｏｎ）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９８９）；Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ｓ．Ｃｏｌｏｗｉｃｋ  ａｎｄ  Ｎ．Ｋａｐｌａｎ  ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ：Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０）；Ｃａｒｅｙ  ａｎｄ  Ｓｕｎｄｂｅｒｇ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３ｒｄ  Ｅｄ．（Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ）Ｖｏｌｓ  Ａ  ａｎｄ  Ｂ（１９９２）を参照のこと。
【０３３１】
材料及び方法
抗体の生成。細胞外ドメインをコードするヒトＳＩＲＰａのｃＤＮＡフラグメントを合成し、マウスＦｃに融合させて、ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を生成し、これを使用して、マウスを免疫して、モノクローナルマウス抗ヒトＣＤ４７抗体を産生した。標準プロトコールを使用して、ハイブリドーマを生成した。簡単に言うと、４〜６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスを、精製組み換えＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質で週に２回、合計４週間免疫した。その後、力価を評価し、脾臓細胞をＳＰ２／０細胞と融合させた。ハイブリドーマを選択し、得られたクローン由来の上清を、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）によりスクリーニングした。
【０３３２】
抗体Ｖのクローニング及び配列決定。本明細書で使用されるクローニング方策は、ハイブリドーマ細胞（Ｑｉａｇｅｎ）の初期ＲＮＡ分離を含んでいた。５’ＲＡＣＥ−ＰＣＲ技術（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を使用して、１Ｈ９及び３Ｃ２モノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖可変領域をコードするｃＤＮＡ配列を得、標準のＤＮＡ配列決定技術を使用して、これを配列決定した。
【０３３３】
分子モデリング及び抗体のヒト化。ヒト生殖系列フレームワーク（ＦＲ）にマウス抗体由来のＣＤＲ残基を組み込むことにより、１Ｈ９及び３Ｃ２のヒト化を実施した。要約すると、マウス１Ｈ９及び３Ｃ２を、対応するＣＤＲ残基の慎重な動員によりヒト化した。ＣＤＲの立体構造上の起こり得る影響を調査するために、マウス１Ｈ９及び３Ｃ２とヒトＦＲ残基との差異を個別にモデル化した。
【０３３４】
細胞トランスフェクション。２９３Ｆ細胞をＦｒｅｅＳｔｙｌｅ（商標）２９３発現培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で培養した。製造者の使用説明書に従い、２９３ｆｅｃｔｉｎトランスフェクション試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする発現ベクターの同時トランスフェクションにより、一時的なトランスフェクションを実施した。４〜５日後、トランスフェクトされた細胞由来の上清を採取し、ＥＬＩＳＡで抗体分泌について試験した。要約すると、９６ウェルプレート（Ｎｕｎｃ、デンマーク・ロスキレ）を、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中の１μｇ／ｍｌのヤギ抗ヒトＦｃガンマ抗体で、４℃で１６時間コーティングした。室温でＰＢＳ中の０．４％のＢＳＡで１時間ブロッキングした後、１／３連続希釈した単離された上清を添加し、室温で１時間インキュベートした。その後、プレートを３回洗浄し、ＨＲＰコンジュゲートヤギ抗ヒトカッパ特異的抗体と共に室温で１時間インキュベートした。洗浄後、プレートをＴＭＢで現像した。反応を２ＭのＨ２ＳＯ４で停止させ、ＯＤを４５０ｎＭで測定した。
【０３３５】
抗体の精製及び特徴付け。培養上清をプロテインＡセファロースカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に適用した。カラムをＰＢＳで洗浄し、次に、タンパク質を溶出緩衝液（０．１Ｍのクエン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ３．０）で溶出させた。収集された画分を、１Ｍのトリス  ｐＨ９．０で中和した。最終的に、精製試料をＰＢＳに対して透析した。還元または非還元条件下、１０％のゲル上で、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）により、溶出された抗体画分の純度を分析した。バンドをクーマシーブリリアントブルー染色により視覚化した。
【０３３６】
抗体親和性測定。ＨｉｓタグにヒトＳＩＲＰａの細胞外ドメインを融合させることにより、ヒトＳＩＲＰａ−Ｈｉｓ融合タンパク質を作製し、１Ｈ９及び３Ｃ２への単量体の結合親和性を測定するために使用した。結合実験をＢｉａｃｏｒｅ  ３０００上、２５℃で実施した。ＣＭ５チップのフローセル２、３、及び４上で、ＥＤＣ／ＮＨＳカップリング化学を使用する直接の固定化により、ヤギ抗ヒト捕捉抗体をチップの表面上に（表に示されるように）固定化した。占有されていない部位を１Ｍのエタノールアミンでブロックした。フローセル１は、未処理であり、チップ表面へのＡｇのあらゆる非特異的結合を差し引くための参照として使用された。示されたＲＵのフローセル２、３、及び４上で、試験Ａｂを補足した。単一の検体濃度で、チップ上に抗原を流した。リガンドへの抗原の結合をリアルタイムで監視して、オン（ｋａ）及びオフ（ｋｄ）の速度を得た。観察されたｋａ及びｋｄから、平衡定数（ＫＤ）を計算した。高速オフ速度の相互作用の場合、定常状態の動態解析によりＫＤを決定した。
【０３３７】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ貪食アッセイ。Ｒａｊｉ及びＨＴ２９がん細胞を洗浄し、計数し、次に、１ｘ１０５の細胞を含有する２５μＬの無血清ＩＭＤＭを各ウェルに添加した。最終濃度１０μｇ／ｍＬの１Ｈ９、３Ｃ２（別途図に示される）、リツキシマブ、または０．１μｇ／ｍＬのセツキシマブを用いた抗体処理物（２５μＬ中）を、ウェルに添加し、３７℃で３０分間インキュベートした。３０分で、以前にＴｒｙｐＬＥで収集されているマクロファージを計数し、５０μＬの無血清ＩＭＤＭ中の５ｘ１０４の細胞をプレーティングした。プレートを３７℃で２時間インキュベートした（エフェクター：ターゲット＝１：２）。ＧＦＰ＋マクロファージを探すフローサイトメトリー分析により、貪食の割合を計算した。
【０３３８】
ＳＩＲＰａ変種の遺伝子型決定。ＱＩＡａｍｐ  ＤＮＡ単離キット（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して、ヒトドナー血液試料からゲノムＤＮＡを分離した。単離ゲノムＤＮＡ、ならびに、
2020528752.tif 000007
及び
2020528752.tif 000008
のプライマーを使用することにより、ＰＣＲを実施した。ＰＣＲフラグメントを精製し、配列決定した。異なるＳＩＲＰａ変種をＳＩＲＰａ参照配列に従って分析及び同定した（Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  Ｓｉｒｐａ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｅｎｇｒａｆｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８；１３１３，２００７）。
【０３３９】
ヒトドナーから単離された単球へのヒトＣＤ４７の結合の遮断。Ｆｉｃｏｌｌを使用して、ヒト血液からヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を単離した。漸増濃度のｈＨｕ１Ｈ９−Ｇ１の非存在下または存在下で、１ｕｇ／ｍｌのＡＦ４８８コンジュゲートヒトＣＤ４７−Ｆｃ融合タンパク質と共に、５ｘ１０５の細胞をインキュベートした。細胞上のＣＤ４７の結合を測定し、フローサイトメトリーで分析した。
【０３４０】
Ｈｕ１Ｈ９−Ｇ１の内在化。正常なヒト血液から分化したマクロファージ細胞と共に、１０ｕｇ／ｍｌの抗体を３７℃でインキュベートすることにより、ヒト化１Ｈ９の内在化を試験した。次に、細胞を固定し、各時点（０、２０分、１時間、２時間、４時間、６時間、及び２４時間）で透過処理した。ＰＥ標識抗ヒトＩｇＧ１抗体を使用して、１Ｈ９を検出した。ＤＡＰＩを使用して、核を染色した。１Ｈ９の表面染色のための対照として、４℃でのインキュベーションを使用した。
【０３４１】
実施例１：抗ＳＩＲＰａモノクローナル抗体の生成及びエピトープマッピング
細胞外ドメインをコードするヒトＳＩＲＰａのｃＤＮＡフラグメントをマウスＦｃに融合させて、ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４５）を生成し、これを使用してマウスを免疫して、モノクローナルマウス抗ヒトＳＩＲＰａ抗体を産生した。ヒトＳＩＲＰａへのＥＬＩＳＡ結合により、選択されたハイブリドーマクローンの特異性を試験した。２つの陽性クローンを得、１Ｈ９及び３Ｃ２と表記した。重鎖及び軽鎖の可変領域をクローニングし、配列決定し、１Ｈ９（図１）及び３Ｃ２（図２）のＶＨ及びＶＬの配列を決定した。
【０３４２】
１Ｈ９及び３Ｃ２により認識されるエピトープを決定するために、ヒトＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を９６ウェルプレートにコーティングした。漸増濃度の抗ＳＩＲＰａ抗体ＫＷａｒの非存在下または存在下で、１Ｈ９及び３Ｃ２とのＳＩＲＰａの結合を測定した（本明細書に参照により具体的に組み込まれる国際出願ＷＯ２０１５／１３８６００に開示され、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４６〜４７に示されるＶｈ及びＶｌ配列）。図３Ａに示されるように、Ｋｗａｒは、ＳＩＲＰａ結合について１Ｈ９と競合しなかった。このことは、１Ｈ９がＫＷａｒとは異なるエピトープを認識することを示す。対照的に、Ｋｗａｒは、ＳＩＲＰａ結合について３Ｃ２と競合したが、１００倍過剰量のＫＷａｒを使用した時でも、ＳＩＲＰａへの３Ｃ２の結合を部分的にしか遮断しなかった。これは、３Ｃ２がＫＷａｒと比較して、重複するが同一ではないエピトープを認識する可能性があることを示している（図３Ａ）。１Ｈ９及び３Ｃ２間の競合結合も実施し、ＳＩＲＰａとの１Ｈ９の結合が、３Ｃ２でなく、１Ｈ９単独と用量依存的に競合したことが示された（図３Ｂ）。同様に、３Ｃ２は、１Ｈ９とではなく、それ自体と用量依存的に競合した（図３Ｃ）。そのようなものであるから、１Ｈ９及び３Ｃ２は、ＳＩＲＰ−アルファの異なるエピトープを認識する。
【０３４３】
実施例２：１Ｈ９及び３Ｃ２の抗体アイソタイプ選択
軽鎖及び重鎖の可変ドメインを、ＦｃｇＲとの相互作用を無効にするＮ２９７Ａ変異を有するヒトカッパ、ヒトＩｇＧ４、またはヒトＩｇＧ１の定常領域に融合させることにより、キメラ１Ｈ９及び３Ｃ２を構築した。次に、得られた抗体を、リツキシマブ（Ｒｘ）と組み合わせたｉｎ  ｖｉｔｒｏ貪食アッセイで試験した。ドナーの変動の影響を観察した。１Ｈ９はリツキシマブと相乗作用し、一部のドナーの単球から分化したマクロファージを使用して、ヒトＩｇＧ４（１Ｈ９−Ｇ４）及びＩｇＧ１  Ｎ２９７Ａ（１Ｈ９−Ｇ１）フォーマットで貪食を同等に促進した（図４Ａ）。一方、異なるドナーの単球から分化したマクロファージを使用すると、１Ｈ９−Ｇ１は、１Ｈ９−Ｇ４よりもリツキシマブとの相乗効果を起動した（図４Ｂ）。同様の結果が、３Ｃ２でも見られた（図４Ａ〜Ｂ）。マクロファージ上に発現されたＦｃｇＲにおける異なる対立遺伝子の変動は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ貪食アッセイで観察された変動を引き起こし得ることが可能である。これらの結果は、応答性の変動を低減する、すなわち、細胞標的抗体と組み合わせた時の貪食の増強において非応答者である個体の数を低減させることにおける、抗ＳＩＲＰα抗体のデッドＦｃ構築物の一般的な利点を示している。
【０３４４】
実施例３：１Ｈ９及び３Ｃ２のヒト化
１Ｈ９及び３Ｃ２のヒト化を、ＣＤＲ移植により行い、１Ｈ９及び３Ｃ２のＶＨ及びＶＬのヒト化配列は、それぞれ、図５及び図６に示される。全長配列は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７〜４０に示される。
【０３４５】
ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２の抗原結合特異性を評価するために、ヒト化及び親マウス１Ｈ９または３Ｃ２間の競合結合をＥＬＩＳＡにより行った。それは、ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２が、それぞれ、ＳＩＲＰａ結合についてマウス１Ｈ９及び３Ｃ２と用量依存的に競合することを示した（図７）。従って、ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２は、それらの親抗体と同じ抗原結合特異性を保有する。次に、表面プラズモン共鳴を使用して、ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２の抗原結合親和性を測定した。ヒト化１Ｈ９は、１．１５ｘ１０−９ＭのＫＤで単量体ヒトＳＩＲＰａ抗原に結合し、ヒト化３Ｃ２は、５．５３ｘ１０−９ＭのＫＤで単量体ヒトＳＩＲＰａに結合した（図８）。
【０３４６】
実施例４：ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ３は、治療用抗体と相乗作用して、マクロファージ媒介貪食を促進する
次に、ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２が、治療抗体と組み合わせて、ヒト末梢血由来マクロファージによるヒトがん細胞の貪食を可能にする能力を調査した。ヒト化１Ｈ９または３Ｃ２単独では、貪食を実質的に誘導しなかった。しかし、リツキシマブ（Ｒｘ）と組み合わされた時、両方の抗体が、リツキシマブ単独よりもＲａｊｉ細胞の貪食活性を誘導した（図９Ａ）。加えて、ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２は、セツキシマブ（Ｃｘ）と相乗作用して、ヒト結腸直腸腺癌細胞株ＨＴ−２９の貪食を誘導し、試験されたヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２の濃度の範囲にわたって、相乗活性が観察された（図９Ｂ）。
【０３４７】
実施例５：ＳＩＲＰファミリーメンバーに対する１Ｈ９及び３Ｃ２の交差反応性
ＳＩＲＰアルファに加えて、ＳＩＲＰファミリーには２つの密接に関連するタンパク質、すなわち、（ＳＩＲＰＢ、アクセッション番号ＮＭ＿００１０８３９１０．３）及びＳＩＲＰガンマ（ＳＩＲＰＧ、アクセッション番号ＮＭ＿００１０３９５０８．１）がある。ＳＩＲＰＢは、ＳＩＲＰａと密接に関連しているが、ＣＤ４７に結合しないようであり、細胞質ＩＴＩＭまたはシグナル伝達のための他の任意の認識可能な細胞質モチーフを欠損している。その代わりに、ＳＩＲＰＢは、ＩＴＡＭを運ぶアダプタータンパク質であるＤＡＰ１２との結合を媒介する正荷電リジン残基を有する膜貫通領域を含有する。ＤＡＰ１２  ＩＴＡＭのリン酸化は、プロテインチロシンキナーゼＳｙｋの動員、及び、それに伴う、種々の機能を制御するＭＡＰＫ経路の活性化を媒介する。例えば、ＤＡＰ１２とも複合化するマウスＳＩＲＰＢ受容体の起動は、マクロファージの貪食を促進する。ヒトＳＩＲＰファミリーの第３のメンバーであるＳＩＲＰＧは、Ｔ細胞及び活性化ＮＫ細胞に発現される。それは、ＳＩＲＰａと比較して１０倍低い親和性でＣＤ４７に結合し得る。さらに、ＳＩＲＰｇ−ＣＤ４７相互作用は、細胞−細胞接着を媒介し、ＡＰＣ−Ｔ細胞接触をサポートして、抗原提示、それに伴うＴ細胞増殖、及びサイトカイン分泌を増強する。ＳＩＲＰＧは、既知のシグナル伝達モチーフがないため、単独で細胞内シグナル伝達を生じる可能性が低い。その代わりに、ＳＩＲＰＧは、ＡＰＣにおけるＣＤ４７のシグナル伝達を起動し得る。
【０３４８】
ＳＩＲＰＢ及びＳＩＲＰＧ  Ｈｉｓ融合タンパク質を生成し、ＳＩＲＰＢ及びＳＩＲＰＧへの１Ｈ９及び３Ｃ２の結合を試験した。図１０に示されるように、１Ｈ９及び３Ｃ２は、Ｋｗａｒと比較してＳＩＲＰＢに結合した（図１０Ａ）。Ｋｗａｒとは異なり、ＳＩＲＰＧへの１Ｈ９または３Ｃ２の結合を検出した（図１０Ｂ）。１Ｈ９及び３Ｃ２によるＳＩＲＰＧ結合の欠損は、最新の抗ＳＩＲＰＡ抗体と比較して、これらの抗体に以下の潜在的な利点をもたらす：（１）ＳＩＲＰＡは、オフターゲット効果のリスクを減少させるＳＩＲＰＧと比較して、発現がより制限され、（２）例えば、ＳＩＲＰＡに対する特異性の増加を考えると、毒性のリスクの減少があり、（３）抗体が対象に投与される時に、「抗原シンク」現象が発生するリスクの減少があり、（４）抗体によるＴ細胞及び／またはＢ細胞機能の干渉のリスクの減少がある。
【０３４９】
実施例６：追加の抗ＳＩＲＰアルファ抗体の生成及び試験
上で概説したようにマウスを免疫することにより、ヒトＳＩＲＰａに対する追加の抗体を生じさせた。２つのモノクローナル抗体クローンを、それぞれ、９Ｂ１１及び７Ｅ１１を表記した。ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１〜３６及び４１〜４４を参照のこと。キメラとしてヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域（７Ｅ１１−Ｇ４もしくは９Ｂ１１−Ｇ４として表記される）に、または、ヒトＦｃγＲとの相互作用を無効にするＮ２９７Ａ変異を含むヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域（７Ｅ１１−Ｇ１もしくは９Ｂ１１−Ｇ１として表記される）に、マウス可変領域を結合させた。
【０３５０】
１Ｈ９及び３Ｃ２と共に見出された場合、９Ｂ１１及び７Ｅ１１抗体は、リツキシマブと組み合わせた時、がん細胞の貪食の増強において相乗的応答を示した。図１１に示されるように、マクロファージは、７日間ヒト血清の存在下で、ドナーＡ（Ａ）及びドナーＢ（Ｂ）の単球から分化した。Ｒａｊｉ細胞をＣＦＳＥで標識し、単独のまたは１０μｇ／ｍｌの９Ｂ１１−Ｇ４、９Ｂ１１−Ｇ１、７Ｅ１１−Ｇ４、または７Ｅ１１−Ｇ１と組み合わせた１０μｇ／ｍｌのリツキシマブ（Ｒｘ）の存在下で、マクロファージと共にインキュベートした。２時間後、ＧＦＰ＋マクロファージを確認するフローサイトメトリー分析により、貪食の割合を計算した。
【０３５１】
データは、ＩｇＧ４フォーマット抗体及び変異性ＩｇＧ１フォーマット抗体の両方が、相乗的応答を提供し得るが、変異性ＩｇＧ１フォーマットは、ドナー全体でよりばらつきの少ない応答を提供した。
【０３５２】
９Ｂ１１及び７Ｅ１１により認識されるエピトープを決定するために、ヒトＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を９６ウェルプレートにコーティングした。漸増濃度の抗ＳＩＲＰａ抗体ＫＷａｒ（本明細書に参照により具体的に組み込まれる国際出願ＷＯ２０１５／１３８６００に開示される）の非存在下または存在下で、９Ｂ１１及び７Ｅ１１とのＳＩＲＰａの結合を測定した。図１２に示されるように、７Ｅ１１は、Ｋｗａｒ（３Ｃ２と類似する）と比較して重複するエピトープを認識し、９Ｂ１１は、Ｋｗａｒと比較して非常に類似または同一のエピトープを認識する。
【０３５３】
実施例７：初代ヒト細胞上の異なるＳＩＲＰアルファ変種へのＨｕ１Ｈ９−Ｇ１の結合
ヒトＳＩＲＰ−αは、ＩｇＶドメインで高度に多型であるが、変種の大部分は、変種１（Ｖ１）及び変種２（Ｖ２）である。
【０３５４】
２２人の正常なヒトドナーをスクリーニングして、遺伝子型を決定し、ＳＩＰＲ−アルファのＶ１ホモ接合型、Ｖ２ホモ接合型、及びＶ１／Ｖ５ヘテロ接合型状態のドナーを特定した（Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  Ｓｉｒｐａ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｅｎｇｒａｆｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８；１３１３，２００７；参考までに：ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４８に示されるＶ１配列；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４９に示されるＶ２配列）。ヒト化１Ｈ９は、ドナーの単球及びマクロファージを使用して、試験され、Ｖ１、Ｖ２、及びＶ１／Ｖ５対立遺伝子のそれぞれに結合することが判明した（図１３）。本データは、初代ヒトドナー細胞上の複数の異なるＳＩＲＰ−アルファ変種に結合する能力を考えると、ヒト化１Ｈ９が広範囲のヒトで使用することができることを示す。
【０３５５】
実施例８：Ｈｕ１Ｈ９−Ｇ１は、異なるドナー由来の単球へのＣＤ４７の結合を遮断する
次に、ヒト化１Ｈ９−Ｇ１を試験して、異なる変種として発現するＣＤ４７及びＳＩＲＰ−アルファの相互作用を遮断することができるかどうかを判定した。Ｖ１、Ｖ２、及びＶ１／Ｖ５を発現するドナーから単球を単離し、漸増濃度のヒト化１Ｈ９の非存在下または存在下のいずれかで、ＣＤ４７−Ｆｃ融合タンパク質と共にインキュベートした（図１４）。データは、ヒト化１Ｈ９が、用量依存的なＣＤ４７及びＳＩＲＰ−アルファの相互作用を防ぎ、遮断活性は、試験された異なるＳＩＲＰ−アルファ変種間で同等であることを示す。
【０３５６】
実施例９：Ｈｕ１Ｈ９−Ｇ１は、セツキシマブと相乗作用して、異なるドナーにわたって貪食を促進する
異なるドナーから分化したマクロファージを使用したｉｎ  ｖｉｔｒｏでの貪食を実施した。ヒト化１Ｈ９−Ｇ１は、セツキシマブと相乗作用して、Ｖ１、Ｖ２、及びＶ１／Ｖ５変種を有するドナー全体で貪食を促進した（図１５）。
【０３５７】
実施例１０：Ｈｕ１Ｈ９−Ｇ１の内在化
１０μｇ／ｍｌの抗体を３７Ｃで正常なヒト血液から分化したマクロファージ細胞と共にインキュベートすることにより、ヒト化１Ｈ９の内在化を試験した。次に、細胞を固定し、各時点（０、２０分、１時間、２時間、４時間、６時間、及び２４時間）で透過処理した。ＰＥ標識抗ヒトＩｇＧ１抗体を使用して、１Ｈ９を検出した。ＤＡＰＩを使用して、核を染色した。１Ｈ９の表面染色ための対照として、４Ｃでのインキュベーションを使用した。
【０３５８】
データは、ヒト化１Ｈ９が細胞に内在化せず且つ１Ｈ９の表面染色が２４時間を含む各時点で検出可能であった（データは示さず）ことを示す。このデータは、ヒト化１Ｈ９が細胞表面で安定していることを示しており、これは、より大きなｉｎ  ｖｉｖｏ治療有効性を示し得る。
【０３５９】
本発明は特に、好ましい実施形態及び種々の代替の実施形態に関して示され、記載されているが、形態及び詳細の種々の変更が、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく本明細書では行うことができることを、当業者らは理解するであろう。
【０３６０】
本明細書の本文内で引用された全ての参考文献、発行された特許、及び特許出願は、あらゆる目的のために、全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０３６１】
（表Ａ）配列
2020528752.tif 000009
2020528752.tif 000010
2020528752.tif 000011
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2020528752.tif 000015
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【図１】
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【図２】
2020528752.tif 000018
【図３】
2020528752.tif 000019
【図４】
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【図５】
2020528752.tif 000021
【図６】
2020528752.tif 000022
【図７】
2020528752.tif 000023
【図８】
2020528752.tif 000024
【図９】
2020528752.tif 000025
【図１０】
2020528752.tif 000026
【図１１】
2020528752.tif 000027
【図１２】
2020528752.tif 000028
【図１３】
2020528752.tif 000029
【図１４】
2020528752.tif 000030
【図１５】
2020528752.tif 000031
【手続補正書】
【提出日】令和2年3月25日(2020.3.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
[本発明1001]
（ａ）ヒトＳＩＲＰαに特異的に結合し、
（ｂ）ヒトＳＩＲＰα対立遺伝子Ｖ1及びＶ2のそれぞれに結合し、
（ｃ）ヒトＳＩＲＰγに特異的に結合せず、且つ
（ｄ）ヒトＦｃ受容体への結合を低減させる少なくとも1つの修飾を含むヒトＦｃ領域を任意に含む、
単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
[本発明1002]
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ1；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：2に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ2；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：3に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ3；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：4に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ1；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：5に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ2；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：6に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ3、または
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：9に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ1；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：10に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ2；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：11に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ3；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：12に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ1；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：13に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ2；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：14に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ3
を含む、本発明1001の単離抗体。
[本発明1003]
（ａ）本発明1002（ａ）に記載の抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：7に記載のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：8に記載のＶＬ配列を含む、または
（ｂ）本発明1002（ｂ）に記載の抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：15に記載のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：16に記載のＶＬ配列を含む、
先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1004]
（ａ）本発明1003（ａ）に記載の抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：17に記載の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：18に記載の軽鎖を含む、または
（ｂ）本発明1003（ｂ）に記載の抗体が、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：19に記載の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：20に記載の軽鎖を含む、
先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1005]
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：1に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ1；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：2に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ2；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：3に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ3；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：4に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ1；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：5に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ2；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：6に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ3を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
[本発明1006]
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：7に記載のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：8に記載のＶＬ配列を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
[本発明1007]
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：17の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：18の軽鎖を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
[本発明1008]
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：9に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ1；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：10に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ2；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：11に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｈ3；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：12に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ1；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：13に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ2；及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：14に記載の配列を含むＣＤＲ−Ｌ3を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
[本発明1009]
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：15に記載のＶＨ配列及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：16に記載のＶＬ配列を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
[本発明1010]
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：19の重鎖及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：20の軽鎖を含む、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
[本発明1011]
ヒトＦｃ受容体への結合を低減させる少なくとも1つの修飾を任意に含む、Ｆｃ依存性機能（複数可）が低減したヒトＦｃ領域
を含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1012]
（ａ）ヒトＳＩＲＰαの結合について、1Ｈ9及び3Ｃ2から選択される抗体と競合するか、
（ｂ）ヒトＳＩＲＰαへの結合について、ＫＷａｒ抗体と競合しないか、
（ｃ）ヒトＳＩＲＰαへの結合について、ＫＷａｒ抗体と部分的に競合するか、
（ｄ）ヒトＳＩＲＰαへのヒトＣＤ47の結合を阻害するか、
（ｅ）ヒトＳＩＲＰαへのヒトＳＰ−Ａの結合を阻害するか、
（ｆ）ヒトＳＩＲＰαへのヒトＳＰ−Ｄの結合を阻害するか、
（ｇ）アカゲザルＳＩＲＰαに結合するか、
（ｈ）カニクイザルＳＩＲＰαに結合するか、
（ｉ）対照と比較して貪食を増加させるか、
（ｊ）ヒトＳＩＲＰα対立遺伝子Ｖ1及びＶ2のそれぞれに結合するか、
（ｋ）ヒトＳＩＲＰα対立遺伝子Ｖ1、Ｖ2、及びＶ1／Ｖ5のそれぞれに結合するか、
（ｌ）ヒトＳＩＲＰα対立遺伝子Ｖ1に結合するか、
（ｍ）ヒトＳＩＲＰα対立遺伝子Ｖ2に結合するか、または
（ｎ）（ａ）〜（ｍ）の任意の組み合わせが可能である、
先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1013]
ヒトＳＩＲＰαアイソタイプに汎特異的である、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1014]
1つのヒトＳＩＲＰαアイソタイプに特異的である、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1015]
ヒトＳＩＲＰαが、プロフェッショナル抗原提示細胞上で発現される、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1016]
ヒトＳＩＲＰαが、マクロファージ上で発現される、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1017]
1Ｈ9または3Ｃ2である、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1018]
Ｆｃ領域を欠損している、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1019]
前記ヒトＦｃ領域が、ＩｇＧ1またはＩｇＧ4である、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1020]
酵素的脱グリコシル化、細菌宿主での発現、またはグリコシル化に利用されるアミノ酸残基の修飾により、グリコシル化が低減している、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1021]
前記修飾が、前記ヒトＦｃ領域のグリコシル化を低減させる、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1022]
前記ヒトＦｃ領域の修飾が、ＥＵインデックス位置アスパラギン297に修飾を含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1023]
前記ヒトＦｃ領域の修飾が、ＥＵインデックス位置アスパラギン297にアミノ酸置換を含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1024]
前記ヒトＦｃ領域の修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでＮ297Ａアミノ酸置換を含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1025]
前記修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでＮ297Ａ；Ｌ234Ａ／Ｌ235Ａ；Ｃ220Ｓ／Ｃ226Ｓ／Ｃ229Ｓ／Ｐ238Ｓ；Ｃ226Ｓ／Ｃ229Ｓ／Ｅ3233Ｐ／Ｌ234Ｖ／Ｌ235Ａ；またはＬ234Ｆ／Ｌ235Ｅ／Ｐ331Ｓにおける1つ以上のアミノ酸置換を含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1026]
前記修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでＮ297；Ｌ234／Ｌ235；Ｃ220／Ｃ226／Ｃ229／Ｐ238；Ｃ226／Ｃ229／Ｅ3233／Ｌ234／Ｌ235；またはＬ234／Ｌ235／Ｐ331における1つ以上のアミノ酸置換を含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1027]
前記修飾が、前記ＣＨ2領域のＥＵインデックス位置234、235、及び／または237における1つ以上のアミノ酸置換を含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1028]
前記修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでアミノ酸置換Ｌ234Ａ及びＬ235Ａの一方または両方、及び任意に、Ｐ331Ｓ及び／またはＫ322Ａ及び／またはＧ237Ａを含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1029]
前記修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでアミノ酸置換Ｋ322Ａを含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1030]
前記修飾が、ＥＵインデックスによる番号付けでＥ233Ｐ／Ｌ234Ｖ／Ｌ235Ａ／Ｇ236＋Ａ327Ｇ／Ａ330Ｓ／Ｐ331Ｓを含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1031]
モノクローナル抗体である、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1032]
多重特異性である、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1033]
複数の抗原、または単一の抗原上の複数のエピトープに結合する、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1034]
ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、及びＩｇＭから選択されるクラスの重鎖定常領域を含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1035]
前記ＩｇＧクラス、且つＩｇＧ1、ＩｇＧ4、ＩｇＧ2、及びＩｇＧ3から選択されるサブクラスの重鎖定常領域を含む、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1036]
Ｂｉａｃｏｒｅアッセイで測定された約1、1〜6、1〜5、1〜4、1〜3、2、3、4、5、6、7、8、9、または10ｘ10−9Ｍ以下のＫＤで、ヒトＳＩＲＰαに結合する、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1037]
薬物として使用するための、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1038]
がんまたは感染症の処置に使用するための、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1039]
固形腫瘍及び血液腫瘍から選択されるがんの処置に使用するための、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1040]
貪食の増加に使用するための、先行本発明のいずれかの単離抗体。
[本発明1041]
ヒトＳＩＲＰαとの結合について、先行本発明のいずれかの単離抗体と競合する、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
[本発明1042]
先行本発明のいずれかの単離抗体が結合するヒトＳＩＲＰαエピトープに結合する、単離ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体。
[本発明1043]
先行本発明のいずれかの単離抗体、そのＶＨ、そのＶＬ、その軽鎖、その重鎖、またはその抗原結合部位をコードする、単離ポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセット。
[本発明1044]
本発明1043のポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットを含む、ベクターまたはベクターのセット。
[本発明1045]
本発明1043のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドのセットまたは本発明1044のベクターもしくはベクターのセットを含む、宿主細胞。
[本発明1046]
本発明1045の宿主細胞で抗体を発現させること、及び前記発現された抗体を単離することを含む、抗体の産生方法。
[本発明1047]
本発明1001〜1042のいずれかの抗体及び薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
[本発明1048]
疾患または状態の処置または予防を必要とする対象における疾患または状態を処置または予防する方法であって、有効量の本発明1001〜1042のいずれかの抗体または本発明1047の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
[本発明1049]
前記疾患または状態が、
（ａ）がん、
（ｂ）感染症、
（ｃ）ウイルス感染症、
（ｄ）細菌感染症、
（ｅ）真菌感染症、
（ｆ）線維症、
（ｇ）アテローム性動脈硬化症；
（ｈ）寄生虫感染症、任意に、マラリア、及び
（ｉ）抗ＣＫＩＴ（ＣＤ117）抗体と任意に組み合わせて、造血幹細胞の移植のための、放射線及び／または化学療法を伴わないかまたはこれが低減されたコンディショニングを可能にする、内因性造血幹細胞の骨髄からの枯渇または低減
から選択される、本発明1048の方法。
[本発明1050]
前記疾患または状態が、がんであり、前記がんが、固形腫瘍及び血液腫瘍から選択される、本発明1049の方法。
[本発明1051]
貪食の増加を必要とする対象において貪食を増加させる方法であって、有効量の本発明1001〜1042のいずれかの抗体または本発明1047の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
[本発明1052]
免疫応答の調節を必要とする対象において免疫応答を調節する方法であって、有効量の本発明1001〜1042のいずれかの抗体または本発明1047の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
[本発明1053]
前記対象に1つ以上の追加の治療薬を投与することをさらに含む、本発明1048〜1052のいずれかの方法。
[本発明1054]
前記追加の治療薬が、抗体である、本発明1053の方法。
[本発明1055]
前記追加の治療薬が、腫瘍細胞表面上のタンパク質（複数可）に結合する抗体である、本発明1054の方法。
[本発明1056]
前記追加の治療薬が、移植療法のために造血幹細胞を枯渇させるために
（ａ）ＨＥＲ2（ＥＲＢＢ2／ｎｅｕ）、ＣＤ52、ＰＤ−Ｌ1、ＶＥＧＦ、ＣＤ30、ＥＧＦＲ、ＣＤ38、ＲＡＮＫＬ（ＣＤ254）、ＧＤ2（ガングリオシド）、ＳＬＡＭＦ7（ＣＤ319）、ＣＤ20、ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲａ、ＶＥＧＦＲ2、ＣＤ33、ＣＤ44、ＣＤ99、ＣＤ96、ＣＤ90、ＣＤ133、ＣＫＩＴ（ＣＫＩＴ陽性腫瘍に対するＣＤ117）、
（ｂ）ＣＴＬＡ−4、ＰＤ−1、ＰＤ−Ｌ1、ＣＤ40（アゴニスト）、ＬＡＧ3（ＣＤ223）、41ＢＢ（ＣＤ137アゴニスト）、ＯＸ40（ＣＤ134、アゴニスト）、及び／または
（ｃ）ＣＫＩＴ（ＣＤ117）
に結合する抗体である、本発明1054の方法。
[本発明1057]
前記抗体が、リツキシマブ、セツキシマブ、アレムツズマブ（ＣＤ52）、アテゾリズマブ（ＰＤ−Ｌ1）、アベルマブ（ＰＤ−Ｌ1）、ベバシズマブ（ＶＥＧＦ）、ブレンツキシマブ（ＣＤ30）、ダラツムマブ（ＣＤ38）、デノスマブ（ＲＡＮＫＬ）、ジヌツキシマブ（ＧＤ2）、エロツズマブ（ＳＬＡＭＦ7）、イブリツモマブ（ＣＤ20）、イピリムマブ（ＣＴＬＡ−4）、ネシツムマブ（ＥＧＦＲ）、ニボルマブ（ＰＤ−1）、オビヌツズマブ（ＣＤ20）、オファツムマブ（ＣＤ20）、オララツマブ（ＰＤＧＦＲａ）、パニツムマブ（ＥＧＦＲ）、ペンブロリズマブ（ＰＤ−1）、ペルツズマブ（ＨＥＲ2）、ラムシルマブ（ＶＥＧＦＲ2）、トシツモマブ（ＣＤ20）、及びゲムツズマブ（ＣＤ33）のうちの少なくとも1つである、本発明1054の方法。
[本発明1058]
前記追加の治療薬が、前記抗体と同じ医薬組成物に製剤化される、本発明1053〜1057のいずれかの方法。
[本発明1059]
前記追加の治療薬が、前記抗体とは異なる医薬組成物に製剤化される、本発明1053〜1057のいずれかの方法。
[本発明1060]
前記追加の治療薬が、前記抗体の投与の前に投与される、本発明1053〜1057のいずれかの方法。
[本発明1061]
前記追加の治療薬が、前記抗体の投与後に投与される、本発明1053〜1057のいずれかの方法。
[本発明1062]
前記追加の治療薬が、前記抗体と同時に投与される、本発明1053〜1061のいずれかの方法。
[本発明1063]
本発明1001〜1042のいずれかの抗体または本発明1047の医薬組成物及び使用説明書を含む、キット。
本発明のこれら及び他の特徴、態様、及び利点は、以下の説明及び添付の図面に関してよりよく理解されるであろう。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４８】
【図１】１Ｈ９の重鎖（Ａ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５５）及び軽鎖（Ｂ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５６）可変領域配列。ＣＤＲは、下線が引かれている。
【図２】３Ｃ２の重鎖（Ａ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５７）及び軽鎖（Ｂ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５８）可変領域配列。ＣＤＲは、下線が引かれている。
【図３】１Ｈ９及び３Ｃ２は、異なるエピトープを認識する。（Ａ）ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を９６ウェルプレートにコーティングし、５０倍または１００倍過剰量のマウスＫｗａｒの非存在下または存在下で、１Ｈ９または３Ｃ２と共にインキュベートした。（Ｂ）ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を９６ウェルプレートにコーティングし、５倍、１０倍、５０倍、及び１００倍過剰量の１Ｈ９または３Ｃ２の非存在下または存在下で、マウス１Ｈ９と共にインキュベートした。（Ｃ）ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を９６ウェルプレートにコーティングし、５倍、１０倍、５０倍、及び１００倍過剰量の３Ｃ２または１Ｈ９の非存在下または存在下で、マウス３Ｃ２と共にインキュベートした。
【図４】１Ｈ９及び３Ｃ２は、リツキシマブと相乗作用して、Ｒａｊｉ細胞のマクロファージ媒介貪食を促進する。マクロファージは、７日間ヒト血清の存在下で、ドナーＡ（Ａ）及びドナーＢ（Ｂ）の単球から分化した。Ｒａｊｉ細胞をＣＦＳＥで標識し、単独のまたは１０ｕｇ／ｍｌの１Ｈ９−Ｇ４、１Ｈ９−Ｇ１、３Ｃ２−Ｇ４、または３Ｃ２−Ｇ１と組み合わせた１０ｕｇ／ｍｌのリツキシマブの存在下で、マクロファージと共にインキュベートした。２時間後、ＧＦＰ＋マクロファージを確認するフローサイトメトリー分析により、貪食の割合を計算した。
【図５】ヒト化１Ｈ９の重鎖（Ａ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）及び軽鎖（Ｂ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）可変領域配列。ＣＤＲは、下線が引かれている。
【図６】ヒト化３Ｃ２の重鎖（Ａ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）及び軽鎖（Ｂ）（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）可変領域配列。ＣＤＲは、下線が引かれている。
【図７】ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２は、親抗体と同じ抗原結合特異性を有する。（Ａ）ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を、９６ウェルプレートにコーティングし、５倍、１０倍、５０倍、及び１００倍過剰量のヒト化１Ｈ９の非存在下または存在下で、マウス１Ｈ９と共にインキュベートした。（Ｂ）ＳＩＲＰａ−Ｆｃ融合タンパク質を、９６ウェルプレートにコーティングし、５倍、１０倍、５０倍、及び１００倍過剰量のヒト化３Ｃ２の非存在下または存在下で、マウス３Ｃ２とインキュベートした。
【図８】ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２のＢｉａｃｏｒｅ親和性測定。
【図９】ヒト化１Ｈ９及び３Ｃ２は、治療用抗体と相乗作用して、貪食を促進する。（Ａ）Ｒａｊｉ細胞をＣＦＳＥで標識し、単独のまたは１０ｕｇ／ｍｌのＨｕ１Ｈ９−Ｇ１もしくはＨｕ３Ｃ２−Ｇ１と組み合わせた１０ｕｇ／ｍｌのリツキシマブの存在下で、ヒト単球由来マクロファージと共にインキュベートした。（Ｂ）ＨＴ２９細胞をＣＦＳＥで標識し、単独のまたは０．５ｕｇ／ｍｌ、５ｕｇ／ｍｌ、及び１０ｕｇ／ｍｌのＨｕ１Ｈ９−Ｇ１もしくはＨｕ３Ｃ２の−Ｇ１と組み合わせた０．１ｕｇ／ｍｌのセツキシマブの存在下で、ヒト単球由来マクロファージと共にインキュベートした。２時間後、ＧＦＰ＋マクロファージを確認するフローサイトメトリー分析により、貪食の割合を計算した。
【図１０】ＳＩＲＰＢ及びＳＩＲＰＧに対する交差反応性。（Ａ）ヒトＳＩＲＰＢ−Ｈｉｓ融合タンパク質へのＫｗａｒ、１Ｈ９、及び３Ｃ２の結合をＥＬＩＳＡにより決定した。（Ｂ）ヒトＳＩＲＰＧ−Ｈｉｓ融合タンパク質へのＫｗａｒ、１Ｈ９、及び３Ｃ２の結合をＥＬＩＳＡにより決定した。
【図１１】９Ｂ１１及び７Ｅ１１は、リツキシマブと相乗作用して、Ｒａｊｉ細胞のマクロファージ媒介貪食を促進する。
【図１２】７Ｅ１１及び９Ｂ１１エピトープ結合。７Ｅ１１は、Ｋｗａｒ（３Ｃ２に類似している）と比較して重複するエピトープを認識し、９Ｂ１１は、Ｋｗａｒと比較して非常に類似または同一のエピトープを認識する。
【図１３】Ｈｕ１Ｈ９−Ｇ１は、細胞上のＳＩＲＰａのＶ１及びＶ２変種の両方に結合する。
【図１４】Ｈｕ１Ｈ９−Ｇ１は、異なるドナー由来の単球へのＣＤ４７の結合を遮断する。
【図１５】Ｈｕ１Ｈ９−Ｇ１は、セツキシマブと相乗作用して、異なるドナーにわたって貪食を促進する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７３】
「単鎖Ｆｖ」または「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体フラグメントは、単一のポリペプチド鎖にＶＨドメイン及びＶＬドメインを含む。ＶＨ及びＶＬは一般に、ペプチドリンカーにより連結されている。Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  Ａ．（１９９４）を参照のこと。任意の好適なリンカーが使用されてもよい。一部の実施形態では、リンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５０）である。一部の実施形態では、ｎ＝１、２、３、４、５、または６である。全体が参照により組み込まれるＲｏｓｅｎｂｅｒｇ  Ｍ．＆  Ｍｏｏｒｅ  Ｇ．Ｐ．（Ｅｄｓ．），Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｖｏｌ．１１３（ｐｐ．２６９−３１５）．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  ＹｏｒｋのＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ由来の抗体を参照のこと。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９９】
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域は、Ｆｃ受容体結合を低減する１つ以上の変異を含むヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である。一部の態様では、１つ以上の変異は、Ｓ２２８（例えば、Ｓ２２８Ａ）、Ｌ２３４（例えば、Ｌ２３４Ａ）、Ｌ２３５（例えば、Ｌ２３５Ａ）、Ｄ２６５（例えば、Ｄ２６５Ａ）、及びＮ２９７（例えば、Ｎ２９７Ａ）から選択される残基に存在する。一部の態様では、抗体は、ＰＶＡ２３６変異を含む。ＰＶＡ２３６は、ＩｇＧ１のアミノ酸位置２３３〜２３６であるアミノ酸配列ＥＬＬＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５１）またはＩｇＧ４のＥＦＬＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５２）が、ＰＶＡにより置き換えられていることを意味する。全体が参照により組み込まれる米国特許第９，１５０，６４１号を参照のこと。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３３８】
ＳＩＲＰａ変種の遺伝子型決定。ＱＩＡａｍｐ  ＤＮＡ単離キット（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して、ヒトドナー血液試料からゲノムＤＮＡを分離した。単離ゲノムＤＮＡ、ならびに、
2020528752.tif 000032
（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５３）及び
2020528752.tif 000033
（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５４）のプライマーを使用することにより、ＰＣＲを実施した。ＰＣＲフラグメントを精製し、配列決定した。異なるＳＩＲＰａ変種をＳＩＲＰａ参照配列に従って分析及び同定した（Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  Ｓｉｒｐａ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｅｎｇｒａｆｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８；１３１３，２００７）。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2020528752000001.app
【国際調査報告】
2020528752.tif 000034
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