(57)【要約】  魚油とセレンとを含む栄養サプリメントは腫瘍の放射線療法を相乗的に増強することが確認された。かかるサプリメントと放射線療法とを用いる併用療法は、放射線療法単独と比べて動物モデルの腫瘍容積において実質的に改善された低減をもたらし、体重の減少、炎症、および胃腸管への損傷などの一般的な副作用を低減する。そのような併用療法はまた、前記最初の移植部位からの転移の前記発生率を低減し、腫瘍細胞におけるアポトーシスと関連する遺伝子発現を調節することが判明した。耐性良好であり、かつ口当たりの良い、そのようなサプリメントの処方も提供される。
2020523374.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍を処置する方法であって、
処置を必要とする患者に対して放射線療法プロトコルを適用することと、
腫瘍容積または重量を減少させる際に相乗効果を提供する量で魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを前記患者に対して提供すること、を含む、方法。
【請求項２】
前記放射線療法の開始前に前記栄養サプリメントが前記患者に対して提供される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記サプリメントが表１に記載されるような三つ以上の成分を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
放射線療法の副作用を低減する方法であって、
処置を必要とする患者に対して放射線療法プロトコルを適用することと、
魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを、前記患者に対して前記放射線療法プロトコルの副作用を低減する量で提供すること、を含む、方法。
【請求項６】
前記栄養サプリメントが前記患者に対して前記放射線療法の開始前に提供される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように、前記栄養サプリメントを処方する、請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項５または６に記載の方法。
【請求項９】
腫瘍における遺伝子発現を調節する方法であって、
腫瘍または腫瘍を有する動物に栄養サプリメントを提供することを含み、前記栄養サプリメントが魚油とセレンとを含み、前記栄養サプリメントが、前記腫瘍の遺伝子発現を調節する量で提供される、方法。
【請求項１０】
前記栄養サプリメントが前記患者に対して前記放射線療法の開始前に提供される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記栄養サプリメントが前記患者に対して放射線療法の前記適用中に提供される、請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記栄養サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように、前記栄養サプリメントを処方する、請求項９〜１１のうち一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項９〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記遺伝子が血管新生因子をコードする、請求項９〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記遺伝子がアポトーシス因子をコードする、請求項９〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
腫瘍からの転移を低減する方法であって、
転移性腫瘍を有する患者に魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを提供することと、
放射線療法プロトコルを前記患者に適用すること、を含み、
前記栄養サプリメントが前記腫瘍の転移活性を低減する量で提供される、方法。
【請求項１７】
前記栄養サプリメントが前記放射線療法プロトコルと同時に提供される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記栄養サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項２０】
腫瘍における血管新生を低減する方法であって、
腫瘍を有する患者に対して魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを提供することと、
放射線療法プロトコルを前記患者に適用すること、を含み、
前記栄養サプリメントが、前記腫瘍の血管新生活性を低減する量で提供される、方法。
【請求項２１】
前記栄養サプリメントが放射線療法と同時に提供される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記栄養サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２４】
腫瘍の癌幹細胞を減少させる方法であって、
腫瘍を有する患者に魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを提供することと、
放射線療法プロトコルを適用すること、を含み、
前記栄養サプリメントが、前記腫瘍における癌幹細胞の発生を低減するのに有効な量で提供される、方法。
【請求項２５】
前記栄養サプリメントが前記放射線療法プロトコルと同時に提供される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記栄養サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項２４または２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記栄養サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項２４または２５に記載の方法。
【請求項２８】
放射線療法プロトコルを癌細胞に適用することを含む、前記癌細胞におけるＰＤＬ−１発現を低減する方法。
【請求項２９】
前記癌細胞を、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントと接触させるステップをさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記栄養サプリメントが前記放射線療法の開始前に提供される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
癌細胞におけるＰＤＬ−１発現を低減する方法であって、前記癌細胞を、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントと接触させることを含む、方法。
【請求項３４】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記栄養サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
個体において抗腫瘍免疫療法を増強する方法であって、
抗腫瘍免疫療法プロトコルを前記患者に対して適用することと、
放射線療法プロトコルを前記患者に対して適用すること、を含む、方法。
【請求項３７】
魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを前記患者に対して投与するステップをさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記放射線療法の開始前に前記栄養サプリメントが提供される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項３７または３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項３７または３８に記載の方法。
【請求項４１】
個体において抗腫瘍免疫療法を増強する方法であって、
抗腫瘍免疫療法プロトコルを前記患者に対して適用することと、
前記患者に魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを提供すること、を含む、方法。
【請求項４２】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記栄養サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
癌細胞におけるＥＧＦＲ発現を低減する方法であって、放射線療法プロトコルを前記癌細胞に対して適用することを含む、方法。
【請求項４５】
前記癌細胞を、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントと接触させるステップをさらに含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記栄養サプリメントが、前記放射線療法の開始前に提供される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように、前記栄養サプリメントを処方する、請求項４５または４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項４５または４６に記載の方法。
【請求項４６】
癌細胞におけるＥＧＦＲ発現を低減する方法であって、前記癌細胞を、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントと接触させることを含む、方法。
【請求項４７】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように、前記栄養サプリメントを処方する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記栄養サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
癌を有する個体における抗ＥＧＦＲ療法を増強する方法であって、
抗ＥＧＦＲ療法プロトコルを前記患者に対して適用することと、
放射線療法プロトコルを前記患者に対して適用すること、を含む、方法。
【請求項５０】
魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを前記患者に対して投与するステップをさらに含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記栄養サプリメントが前記放射線療法の開始前に提供される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項５０または５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項５０または５１に記載の方法。
【請求項５４】
癌を有する個体において抗ＥＧＦＲ療法を増強する方法であって、
抗ＥＧＦＲ療法ｙプロトコルを前記患者に対して適用することと、
前記患者に魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを提供すること、を含む、方法。
【請求項５５】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記栄養サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
癌を有する個体において放射線療法を改善する薬剤を製造するための、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用であって、魚油とセレンとが、放射線療法プロトコルと組み合わせて使用される場合に腫瘍容積または重量を減少させる際に相乗効果を提供する量で提供される、使用。
【請求項５８】
前記栄養サプリメントが、前記放射線療法の開始前に前記患者に対して提供するために処方される、請求項５７に記載の使用。
【請求項５９】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項５７または５８に記載の使用。
【請求項６０】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項５７または５８に記載の使用。
【請求項６１】
癌の放射線療法を受けている個体において放射線療法に関連する副作用を軽減する薬剤を製造するための、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用であって、魚油およびセレンが、放射線療法プロトコルの副作用を低減する際に相乗効果を提供する量で提供される、使用。
【請求項６２】
前記患者に対して放射線療法の開始前に投与した場合に有効であるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項６１に記載の使用。
【請求項６３】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項６１または６２に記載の使用。
【請求項６４】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項６１または６２に記載の使用。
【請求項６５】
放射線療法を受けている患者の腫瘍における遺伝子発現を調節する薬剤を製造するための、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用であって、前記栄養サプリメントが、前記腫瘍の遺伝子発現を調節する量で提供される、使用。
【請求項６６】
前記栄養サプリメントを、前記患者に対して放射線療法の開始前に提供されるように処方する、請求項６５に記載の使用。
【請求項６７】
前記栄養サプリメントを、前記患者に対して放射線療法の適用中に提供されるように処方する、請求項６５に記載の使用。
【請求項６８】
前記栄養サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項６５〜６７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６９】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項６５〜６７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７０】
前記遺伝子が血管新生因子をコードする、請求項６５〜６９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７１】
前記遺伝子がアポトーシス因子をコードする、請求項６５〜６９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７２】
放射線療法を受けている患者の腫瘍からの転移を低減する薬剤を製造するための、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用であって、前記栄養サプリメントが前記腫瘍の転移活性を低減する量で提供される、使用。
【請求項７３】
前記栄養サプリメントを、放射線療法プロトコルと同時に提供されるように処方する、請求項７２に記載の使用。
【請求項７４】
前記栄養サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項７２または７３に記載の使用。
【請求項７５】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項７２または７３に記載の使用。
【請求項７６】
放射線療法を受けている患者の腫瘍における血管新生を低減する薬剤を製造するための、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用であって、前記栄養サプリメントが、前記腫瘍の血管新生活性を低減する量で提供される、使用。
【請求項７７】
前記栄養サプリメントが放射線療法と同時に提供される、請求項７６に記載の使用。
【請求項７８】
前記栄養サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項７６または７７に記載の使用。
【請求項７９】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項７６または７７に記載の使用。
【請求項８０】
放射線療法を受けている患者の腫瘍の癌幹細胞含有量を減少させる薬剤を製造するための、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用であって、前記栄養サプリメントが、前記腫瘍における癌幹細胞の発生を低減するために有効な量で提供される、使用。
【請求項８１】
放射線療法プロトコルと同時に提供されるように前記栄養サプリメントを提供する、請求項８０に記載の使用。
【請求項８２】
前記栄養サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように、前記栄養サプリメントを処方する、請求項８０または８１に記載の使用。
【請求項８３】
前記栄養サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項８０または８１に記載の使用。
【請求項８４】
放射線療法を受けている癌細胞においてＰＤＬ−１発現を低減する薬剤を製造するための、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用であって、前記栄養サプリメントが前記癌細胞のＰＤＬ−１を低減するために有効な量で提供される、使用。
【請求項８５】
前記栄養サプリメントを、前記放射線療法の開始前に提供されるように処方する、請求項８４に記載の使用。
【請求項８６】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項８４または８５に記載の使用。
【請求項８７】
前記栄養サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項８４または８５に記載の使用。
【請求項８８】
前記癌細胞が放射線療法に曝露される、請求項８４〜８７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８９】
癌の免疫療法を受けている個人において免疫療法を増強する薬剤の製造のための、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用であって、前記栄養サプリメントが前記癌細胞のＰＤＬ−１を低減するために有効な量で提供される、使用。
【請求項９０】
前記栄養サプリメントが放射線療法の開始前に提供される、請求項８９に記載の使用。
【請求項９１】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項８９または９０に記載の使用。
【請求項９２】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項８９または９０に記載の使用。
【請求項９３】
癌細胞におけるＥＧＦＲ発現を低減する薬剤を製造するための、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用であって、前記栄養サプリメントが前記癌細胞のＥＧＦＲを低減するために有効な量で提供される、使用。
【請求項９４】
前記癌細胞を放射線療法に供する、請求項９３に記載の使用。
【請求項９５】
前記栄養サプリメントを放射線療法の開始前に提供されるように処方する、請求項９４に記載の使用。
【請求項９６】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項９３〜９５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９６】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項９３〜９５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９７】
癌を有する個体における抗ＥＧＦＲ療法を増強する薬剤を製造するための、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用であって、癌細胞のＥＧＦＲを低減するために有効な量で前記栄養サプリメントが提供される、使用。
【請求項９８】
前記個体が放射線療法を受けている、請求項９７に記載の使用。
【請求項９９】
放射線療法の開始前に提供されるように前記栄養サプリメントを処方する、請求項９４に記載の使用。
【請求項１００】
前記サプリメントの複数の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントが処方される、請求項９７〜９９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０１】
前記サプリメントが表１に記載するような三つ以上の成分を含む、請求項９７〜９７のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２０１７年６月１３日出願の米国特許仮出願第６２／５１９，０８７号の恩恵を主張する。これらや他の全ての引用する外部の資料は、その全体が参照により本明細書中に組み込まれる。参照により組み込まれる引例の用語の定義または使用が本明細書中で提供する用語の定義とが一致しないかまたは反対である場合、本明細書中で提示する用語の定義が優先するものとする。
【０００２】
（技術分野）
本発明の分野は癌の放射線療法である。
【背景技術】
【０００３】
背景の説明は、本発明を理解する上で有用であり得る情報を含む。本明細書中で提供する情報のいずれもが、先行技術もしくはここで請求する発明と関連すること、または具体的もしくは暗黙的に言及する任意の刊行物が先行技術であることを認めるものではない。
【０００４】
癌の処置において利用される放射線療法プロトコルおよび化学療法プロトコルは、明らかに患者に恩恵を与え得るが、一部の癌では効果がないかまたは低い可能性がある。さらに、放射線療法および化学療法はどちらも、吐き気、体重の減少、脱毛、胃腸管への損傷、および皮膚炎をはじめとする重大な副作用と関連する。
【０００５】
放射線療法の有効性を増強する試みがなされてきた。例えば、放射線療法を増強するために、腫瘍細胞を標的とするように修飾された金ナノ粒子が使用されてきた（Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ，ＡＣＳ  Ｎａｎｏ，２０１４，８（９）：８９９２−９００２（非特許文献１））。本明細書中の全ての刊行物は、それぞれの刊行物または特許出願が参照により組み込まれるように具体的かつ個別に表示されているのと同じ程度に参照により組み込まれる。組み込まれる引例中の用語の定義または使用が本明細書中で提供される用語の定義と一致しないかまたは反対である場合、本明細書中で提供される用語の定義が適用され、引例中の当該用語の定義は適用されない。同様に、放射線の効果に対して腫瘍細胞を選択的に感応性とするためにＣＯＸ−２阻害剤が使用されてきた（Ｃｈｏｙ  ａｎｄ  Ｍｉｌａｓ，Ｊ．Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ（２００３）９５（１９）：１１４０−１４５２（非特許文献２））。しかしながら、そのようなアプローチは選択性に問題があり得、全ての腫瘍タイプに対して有効であるわけではない可能性がある。今日まで、放射線療法の副作用を低減する試みは、主に、総放射線量を複数のより少ない放射線量（回復を可能にするために間に時間をあけて）に分割し、遮蔽、腫瘍の境界の特定および放射線療法の当該部位への局在化を使用して腫瘍を標的化することを被験体としている。残念なことに、そのようなアプローチでは腫瘍細胞のすべてを適切に処置することはできない。
【０００６】
化学療法の効果を増強する試みもなされてきた。魚油の摂取で化学療法の成果を改善することができることを示唆している研究もあれば、魚油が阻害し得ることを示唆する研究もある（Ｄａｅｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ，  ＪＡＭＡ  Ｏｎｃｏｌ  （２０１５）ｌ（３）：３５０−３５８（非特許文献３））。ナノ粒子としての化学療法剤の処方も試みられてきた（Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｏｌｌ．Ｓｕｒｆ．Ｂ：Ｂｉｏｉｎｔｅｒｆａｃｅｓ（２００６）４８（ｌ）：５０−５７（非特許文献４））。しかしながら、全ての化学療法薬がそのような再配合に好適か否かは明らかではない。多剤耐性を妨げるように設計されたｓｉＲＮＡとの化学療法薬の同時送達（ｃｏｄｅｌｉｖｅｒｙ）も研究されてきた。しかしながら、そのようなｓｉＲＮＡは配列特異的であり、一部の腫瘍には適さない可能性がある。
【０００７】
化学療法の副作用の軽減は、概して、症状軽減をもたらすこと被験体とする。例えば、制吐薬は、食生活の改善およびある特定の食品を避けて少量の食事を頻繁に食べることとあわせて、吐き気を軽減するために使用することができる。残念ながら、そのようなアプローチは必ずしも有効とは限らない。一部の例では、化学療法剤は、副作用を軽減するために毒性が低減されるように選択されるが、そのような薬剤は腫瘍細胞に対する有効性も低減している可能性がある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ，ＡＣＳ  Ｎａｎｏ，２０１４，８（９）：８９９２−９００２
【非特許文献２】Ｃｈｏｙ  ａｎｄ  Ｍｉｌａｓ，Ｊ．Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ（２００３）９５（１９）：１１４０−１４５２
【非特許文献３】Ｄａｅｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ，  ＪＡＭＡ  Ｏｎｃｏｌ  （２０１５）ｌ（３）：３５０−３５８
【非特許文献４】Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｏｌｌ．Ｓｕｒｆ．Ｂ：Ｂｉｏｉｎｔｅｒｆａｃｅｓ（２００６）４８（ｌ）：５０−５７
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
したがって、有効性を増強する、ならびに／または癌の放射線療法および／もしくは化学療法の副作用を低減する、安全かつ有効な組成物および方法が依然として必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
（発明の概要）
発明の主題は、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用により、相乗的に、腫瘍の放射線療法を増強し改善する組成物および方法を提供する。
【００１１】
発明概念の一つの実施形態は、処置を必要とする患者に対して放射線療法プロトコルを適用する一方で、魚油とセレンとを含む栄養サプリメント（例えば、表１に示す通り）を患者に、腫瘍容積または重量の低減において相乗効果を提供する量で提供することによって腫瘍を処置する方法である。いくつかの実施形態において、栄養サプリメントは、患者に対して、放射線療法の開始前に提供される。そのような栄養サプリメントは、サプリメントの二つ以上の成分が表１に記載された量で提供されるように処方することができる。
【００１２】
発明の概念の別の実施形態は、魚油とセレン（例えば、表１のとおり）とを、放射線療法プロトコルの副作用を低減する量で含むように処方された栄養サプリメントを患者に提供しつつ、副作用を低減する方法である。いくつかの実施形態では、栄養サプリメントは、放射線療法の開始前に患者に提供される。そのような栄養サプリメントは、サプリメントの二つ以上の成分が表１に記載された量で提供されるように処方することができる。
【００１３】
発明の概念の別の実施形態は、腫瘍または腫瘍を有する動物に対して栄養サプリメントを提供することによって、腫瘍における遺伝子（例えば、血管新生関連遺伝子、アポトーシス関連遺伝子など）発現を調節する方法であって、栄養サプリメントは魚油とセレン（例えば、表１のとおり）とを含み、前記栄養サプリメントは、前記腫瘍の遺伝子発現を調節する量で提供される。いくつかの実施形態では、前記栄養サプリメントは、放射線療法の開始前、および放射線療法中に患者に提供され、他の実施形態では、そのようなサプリメントは放射線療法の適用中または適用の開始前に提供される。好ましい実施形態において、前記栄養サプリメントは、サプリメントの二つ以上の成分が表１に記載された量で提供されるように処方される。
【００１４】
発明の概念の別の実施形態は、転移性腫瘍を有する患者に魚油とセレンとを含む栄養サプリメント（例えば、表１）を提供することによって、腫瘍からの転移を低減する方法であって、前記栄養サプリメントが前記腫瘍の転移活性を低減する量で提供される方法である。いくつかの実施形態において、そのような栄養サプリメントは、放射線療法の開始前または開始時のいずれかに提供され、放射線療法の過程を通じて提供することができる。好ましい実施形態において、前記栄養サプリメントは、サプリメントの二つ以上の成分が表１に記載された量で提供されるように処方される。
【００１５】
発明の概念の別の実施形態は、前記腫瘍を有する患者に放射線療法と組み合わせて魚油とセレンとを含む栄養サプリメント（例えば、表１のとおり）を提供することを含む、腫瘍における血管新生を低減する方法であって、前記栄養サプリメントが、前記腫瘍の血管新生活性を低減する量で提供される方法である。いくつかの実施形態において、そのような栄養サプリメントは放射線療法の開始と同時に提供され、放射線療法の適用中に患者に対して提供することができる。好ましい実施形態において、前記栄養サプリメントは、サプリメントの二つ以上の成分が表１に記載された量で提供されるように処方される。
【００１６】
発明の概念の別の実施形態は、腫瘍を有する患者に魚油とセレンとを含む栄養サプリメント（表１においてなど）を提供することによって、腫瘍における癌幹細胞の発生率を減少させる方法であって、前記栄養サプリメントが前記腫瘍における幹細胞の発生率を減少させる量で提供される方法である。好ましい実施形態において、前記栄養サプリメントは放射線療法の適用と同時に提供される。サプリメントの二つ以上の成分が表１に記載された量で提供されるように前記栄養サプリメントを処方することができる。
【００１７】
発明の主題の様々な目的、特徴、態様および利益は、添付の図面とあわせて、好ましい実施形態の以下の詳細な説明からより明らかになり、図中、同じ数字は同じ成分を表す。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、放射線療法の実施の７日前または腫瘍細胞移植と同時のいずれかで開始して栄養サプリメント補給が提供される処置プロトコルを示す。マウスを腫瘍細胞移植後２１日で処分した。
【図２Ａ】図２Ａは様々な処置群について体重の経時変化を示す。ただし、体重は原発腫瘍塊の除去後に報告される。
【図２Ｂ】図２Ｂは研究の過程にわたる様々な処置群における体重の変化を示す。ただし、体重は原発腫瘍塊の除去後に報告される。
【図３Ａ】図３Ａ〜３Ｄは、放射線療法および魚油とセレンとを含むサプリメントを用いる併用療法の、腫瘍容積および重量に対する典型的な相乗効果を示す。図３Ａは様々な処置群について腫瘍容積の経時変化を示す。
【図３Ｂ】図３Ａ〜３Ｄは、放射線療法および魚油とセレンとを含むサプリメントを用いる併用療法の、腫瘍容積および重量に対する典型的な相乗効果を示す。図３Ｂは、図３Ａに示されるような処置の最初の１１日の詳細図を提供する。
【図３Ｃ】図３Ａ〜３Ｄは、放射線療法および魚油とセレンとを含むサプリメントを用いる併用療法の、腫瘍容積および重量に対する典型的な相乗効果を示す。図３Ｃは、様々な処置群についての腫瘍重量の柱状グラフを提供する。
【図３Ｄ】図３Ａ〜３Ｄは、放射線療法および魚油とセレンとを含むサプリメントを用いる併用療法の、腫瘍容積および重量に対する典型的な相乗効果を示す。図３Ｄは、様々な処置群からの例示的腫瘍の写真を提供する。
【図４Ａ】図４Ａ：放射線療法、魚油とセレンとを含むサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の腓腹筋の筋肉量に対する効果。
【図４Ｂ】図４Ｂ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日のヒラメ筋の筋肉量に対する効果。
【図４Ｃ】図４Ｃ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の肺（転移性腫瘍を含む）重量に対する効果。
【図４Ｄ】図４Ｄ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の肝臓（転移性腫瘍を含む）重量に対する効果。
【図４Ｅ】図４Ｅ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の脾臓（転移性腫瘍を含む）重量に対する効果。
【図４Ｆ】図４Ｆは、魚油とセレンとを含むサプリメントおよび／または放射線療法で処置した動物被験体における肺転移の定量的研究結果を提供する。
【図４Ｇ】図４Ｇは、魚油とセレンとを含むサプリメントおよび／または放射線療法で処置した動物被験体における原発腫瘍部位および転移部位でのＫｉ−６７発現の研究結果を示す。
【図５Ａ】図５Ａ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の血小板数に対する効果。
【図５Ｂ】図５Ｂ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の白血球数に対する効果。
【図５Ｃ】図５Ｃ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日のリンパ球数に対する効果。
【図５Ｄ】図５Ｄ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の顆粒球数に対する効果。
【図５Ｅ】図５Ｅ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の好中球／リンパ球百分率に対する効果。
【図６Ａ】図６Ａ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の血清アルブミンに対する効果。
【図６Ｂ】図６Ｂ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の血清クレアチニンに対する効果。
【図７Ａ】図７Ａ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の血清ＩＬ−６に対する効果。
【図７Ｂ】図７Ｂ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の血清ＩＬ−Ιβに対する効果。
【図８Ａ】図８Ａ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の移植された腫瘍におけるＶＥＧＦ遺伝子発現に対する効果。
【図８Ｂ】図８Ｂ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の移植された腫瘍におけるＢＡＸ遺伝子発現に対する効果。
【図８Ｃ】図８Ｃ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の移植された腫瘍におけるＢｃｌ−２遺伝子発現に対する効果。
【図８Ｄ】図８Ｄ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の移植された腫瘍におけるカスパーゼ３遺伝子発現に対する効果。
【図８Ｅ】図８Ｅ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の肺におけるＢＡＸ遺伝子発現に対する効果。
【図８Ｆ】図８Ｆ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の肺におけるＢｃｌ−２遺伝子発現に対する効果。
【図８Ｇ】図８Ｇ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の肺におけるカスパーゼ３遺伝子発現に対する効果。
【図９Ａ】図９Ａは、マウスが、放射線療法の開始とともに栄養サプリメント補給を開始して、８、１０、および１２日で放射線療法を受ける試験プロトコルを示す。マウスは、腫瘍細胞の移植後１４日または２４日に処分する。
【図９Ｂ】図９Ｂ：図９Ａにおいて示すプロトコルから誘導した処置群。
【図１０Ａ】図１０Ａ：図９Ａで示すように処置したマウスにおいて腫瘍細胞移植後１４日および２４日での血清アルブミン濃度。
【図１０Ｂ】図１０Ｂ：図９Ａで示すように処置したマウスにおける腫瘍細胞移植後１４日および２４日でのリンパ球数を示す。
【図１０Ｃ】図１０Ｃは、図９Ａで示すように処置したマウスにおける腫瘍細胞移植後１４日および２４日でのＮ／Ｌ比。
【図１１Ａ】図１１Ａ：図９Ａに示すように処置したマウスにおける腫瘍細胞移植後２４日の腫瘍塊内のＶＥＧＦ発現。ＦＩＴＣは、ＶＥＧＦ特異的染色を表す。
【図１１Ｂ】図１１Ｂ：図９Ａに示すように処置したマウスにおける腫瘍細胞移植後２４日の肺（転移）内のＶＥＧＦ発現を示す。ＦＩＴＣは、ＶＥＧＦ特異的染色を表す。
【図１１Ｃ】図１１Ｃ：図９Ａに示すように処置したマウスにおける腫瘍細胞移植後２４日の肺（転移）内のＥＧＦＲ発現。ＦＩＴＣはＥＧＦＲ特異的染色を表す。
【図１１Ｄ】図１１Ｄ：図９Ａに示すように処置したマウスにおける腫瘍細胞移植後２４日の腫瘍塊内のＥＧＦＲ発現。ＦＩＴＣはＥＧＦＲ特異的染色を表す。
【図１２】図９Ａに示すように処置したマウスにおける腫瘍細胞移植後２４日の腫瘍塊内および肺組織（転移）中でのＣＤ３１（癌幹細胞マーカー）発現。ＦＩＴＣはＣＤ３１特異的染色を表す。
【図１３Ａ】図１３Ａは、図９Ａに示すように処置したマウスにおける腫瘍細胞移植後２４日の腫瘍塊内および肺組織（転移）中のＨ１Ｆ１−α（低酸素マーカー）タンパク質の存在を示す。ＦＩＴＣはＨ１Ｆ１−α特異的染色を表す。
【図１３Ｂ】図１３Ｂは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントおよび／または放射線療法で処置した被験体からの腫瘍サンプルの遺伝子発現研究の結果を示す。
【図１４】図９Ａに示すように処置したマウスにおける腫瘍細胞移植後２４日のアポトーシスマーカーの発現。
【図１５Ａ】図１５Ａは、魚油とセレンとを含むサプリメントおよび／または放射線療法で処置したヒトの疾患の動物モデルにおける原発性および転移性腫瘍部位でのＰＤＬ−１遺伝子発現を特徴づける研究の結果を示す。
【図１５Ｂ】図１５Ｂは、魚油とセレンとを含むサプリメントおよび／または放射線療法で処置したヒトの疾患の動物モデルにおける原発性および転移性腫瘍部位でのＰＤ−１遺伝子発現を特徴づける研究の結果を示す。
【図１６Ａ】図１６Ａは、マウスが、腫瘍細胞移植前、腫瘍細胞移植の時点、または放射線療法の開始時に提供される栄養サプリメント補給とともに、８、１０、および１２日に放射線療法を受ける、試験プロトコルを示す。マウスを腫瘍細胞の移植後２１日に処分する。
【図１６Ｂ】図１６Ｂ：図１６Ａにおいて示すプロトコルから誘導した処置群。
【図１７】図１６Ａで記載するプロトコルによって処置したマウスの腸の横断面の顕微鏡写真。
【図１８Ａ】図１８Ａ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日のＶＥＧＦ遺伝子発現に対する効果。
【図１８Ｂ】図１８Ｂ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日のＢＡＸ遺伝子発現に対する効果。
【図１８Ｃ】図１８Ｃ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日のＢｃｌ−２遺伝子発現に対する効果。
【図１８Ｄ】図１８Ｄ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日のカスパーゼ３遺伝子発現に対する効果。
【図１８Ｅ】図１８Ｅ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の肺（すなわち、転移）でのＢｃｌ−２遺伝子発現に対する効果。
【図１８Ｆ】図１８Ｆ：放射線療法、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント、および併用療法を使用する処置の、腫瘍細胞注入後２１日の肺（すなわち、転移）におけるカスパーゼ３遺伝子発現に対する効果。
【図１９Ａ】図１９Ａ、腫瘍細胞移植前に７日間栄養サプリメント補給を提供して、８日、１０日、および１２日にマウスに放射線療法を受けさせる試験プロトコルを示す。マウスは腫瘍細胞の移植後２４日で処分する。
【図１９Ｂ】図１９Ｂ：図１９Ａに示すプロトコル由来の処置群。
【図２０Ａ】図２０Ａ：図１９Ａに示すプロトコルを用いた、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの、腫瘍細胞移植後に反復放射線療法を受けたマウスの体重に対する効果。
【図２０Ｂ】図２０Ｂ：図１９Ａに示すプロトコルを用いた、放射線療法、魚油とセレンとを含む栄養サプリメント、および併用療法を用いた処置の、腫瘍細胞注入後２１日の腓腹筋の筋肉量に対する効果。
【図２１Ａ】図２１Ａは、腫瘍移植前の７日間、腫瘍細胞移植当日、または腫瘍細胞移植の８日後に栄養サプリメント補給を提供して、８日、１０日、および１２日に放射線療法を受ける試験プロトコルマウスを示す。マウスを腫瘍細胞の移植後２１日に処分する。
【図２１Ｂ】図２１Ｂ：図２１Ａに示すプロトコルから誘導される処置群。
【図２２】：図２１Ａに示すプロトコルを用いて腫瘍細胞移植後に反復放射線療法を受けるマウスの体重に対するＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント補給の効果
【図２３】図２１Ａに示すようにプロトコルにおけるように処置したマウスにおける、ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメントと組み合わせた反復放射線療法に際しての腫瘍容積の経時変化。
【図２４Ａ】図２４Ａ：ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメントと組み合わせた反復放射線療法、および併用療法を使用する処置の、図２１Ａに示すプロトコルを用いて処置したマウスにおいて腫瘍細胞注入後２１日の血清ＴＮＦ−αに対する効果。
【図２４Ｂ】図２４Ｂ：ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメントと組み合わせた反復放射線療法、および併用療法を使用する処置の、図２１Ａに示すプロトコルを用いて処置したマウスにおける腫瘍細胞注入後２１日の血清ＩＬ−６に対する効果。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
（詳細な説明）
以下の説明は、本発明を理解する上で有用であり得る情報を含む。本明細書中で提示する情報のいずれもが先行技術であるか若しくは本発明に関連すること、または具体的もしくは暗黙的に引用するいずれの刊行物もが先行技術であることを認めるものではない。
【００２０】
発明の主題は、魚油とセレンとを含む栄養サプリメント（例えば、魚油、セレン酵母由来のセレン、ならびにある特定のビタミン類、ミネラル、アミノ酸、および糖類を含むサプリメント、例えば「ＮｕｔｒａＷｅｌｌ」）を放射線療法と組み合わせて使用する、組成物および方法を提供する。放射線およびそのようなサプリメントを使用する併用療法は、驚くほどに、腫瘍サイズの減少において有意な相乗効果を提供する。加えて、放射線療法の副作用（例えば、好中球減少、体重の減少、筋肉量の減少、胃腸管アシル細胞（ａｃｙｌ  ｃｅｌｌ）に対する損傷など）は、そのようなサプリメントを使用しない放射線療法の適用と比べて低減および／または軽減される。意外にも、血管新生およびアポトーシスに関連する遺伝子発現はまた、魚油とセレンとを含むサプリメントの使用に際して放射線療法の適用を伴う場合と伴わない場合の両方で腫瘍細胞において調節されることが判明した。加えて、転移が防止され、癌幹細胞の成長および拡散が低減されることが判明した。
【００２１】
開示された技術は、癌の処置で使用される現行の放射線処置プロトコルの有効性を増強する一方で、これらのアプローチに関連する副作用を低減することをはじめとする多くの有益な技術的効果を提供することを理解されたい。
【００２２】
以下の考察は、発明の主題の多くの実施形態例を提供する。各実施形態は発明の要素の単一の組み合わせを表すが、発明の主題は開示された要素のあらゆる可能な組み合わせを含むと考えられる。したがって、一実施形態が要素Ａ、Ｂ、およびＣを含み、第二の実施形態が要素ＢおよびＤを含む場合、発明の主題はまた、明確に開示されていなくてもＡ、Ｂ、Ｃ、またはＤの他の残りの組み合わせも含むと考えられる。
【００２３】
いくつかの実施形態において、発明のある特定の実施形態を記載し請求するために使用される、構成要素の量、濃度などの特性、反応条件を表す数は、いくつかの例では、「約」という語によって修飾されると理解されるべきである。したがって、いくつかの実施形態において、明細書および添付の特許請求の範囲に記載される数値パラメータは、特定の実施形態によって得ることが求められる所望の特性に応じて変わり得る近似値である。いくつかの実施形態において、数値パラメータは、報告された有効数字の数値に照らして、そして通常の丸め技術を適用することによって構築すべきである。発明のいくつかの実施形態の広い範囲を記載する数値範囲及びパラメータは近似値であるが、具体例に記載される数値は実施可能なように正確に報告されている。発明のいくつかの実施形態において提示する数値は、それらの各試験測定で見られる標準偏差から必然的に生じるある誤差を含み得る。
【００２４】
発明の概念の一実施形態において、表１に示す栄養サプリメント組成物（「Ｎｕｔｒａｗｅｌｌ」）は放射線療法の結果を改善するために提供される。
【００２５】
【表１−１】
2020523374.tif 000003
【００２６】
【表１−２】
2020523374.tif 000004
【００２７】
【表１−３】
2020523374.tif 000005
【００２８】
表１に示す組成物は、抗炎症活性、血糖値の低下、コレステロールの低下、および抗腫瘍活性をはじめとする、様々な生理学的および生化学的効果を有する成分を含む。他の成分は、高レベルで必要なビタミン、ミネラル、およびアミノ酸のサプリメント補給を提供する。他の成分（たとえば、酵素、レシチン）は、摂取された場合、前記組成物の成分の消化および吸収を助ける働きをする。これらの補体活性の前記組み合わせは、個々の成分の前記単純な相加効果を越える相乗効果を提供する。表１に示す組成物はまた、食味および受容性を改善する働きをするある特定の香味剤（ｆｌａｖｏｒａｎｔ）（例えば、ブラウンシュガー、ハチミツ、バニラフレーバーおよびマスキング剤）も含むことが理解されるべきである。ある特定の成分（例えば、ハチミツ、ブラウンシュガー、乳、コメタンパク質、カゼイン）は、フレーバーおよびカロリーエネルギーの両方を提供できる。発明者は、前記香味剤の前記組み合わせが、有効量での前記栄養サプリメントの摂取の順守の提供において有効であることを見出した。いくつかの実施形態において、そのような香味剤は、前記栄養サプリメントの前記有効性にマイナスの影響を及ぼすことなく除外することができる。
【００２９】
表１に示す成分は、単一製剤として（例えば、丸薬、錠剤、カプセル、粉末、液体、懸濁液などとして）提供することができるか、または異なる処方（例えば、丸薬、錠剤、カプセル、粉末、液体、懸濁液またはその組み合わせとして）に分割することができる。表１に示す量は例示的であり、正常身長およびそれ以外普通の健康状態である成人に提供される典型的な一日投与量である。これらの量は、体重、性別、医学的状態等の相違を構成するように調節することができる。例えば、体重４０キロ以下の比較的小柄な患者は、提供される前記範囲の前記下限以下で提供される投与量により恩恵を受ける可能性がある一方で、体重１００キログラム以上の比較的大柄な患者は、表示された前記範囲の前記上限（またはそれ以上）で提供される投与量を必要とし得る。いくつかの実施形態において、そのような一日量は前記一日を通して複数の用量として分配することができる。そのような実施形態の一部では、そのような分配された用量の各々の前記組成は、同一であり得る。他の実施形態では、そのような分配された用量の前記組成は異なり得るが、ただし、そのような用量の前記合計が前記必要とされるサプリメント補給を提供するものとする。
【００３０】
例示的実施形態では、ヒト腫瘍細胞（ヌードマウスに移植後）を１グラム／日の前記栄養サプリメント、放射線療法、または１グラム／日の前記栄養サプリメントおよび化学療法で処置する。前記マウスを処置の間、計量して、吐き気および食欲不振などの副作用を特徴づける。数週間後、前記マウスを処分し、前記腫瘍を特徴づける。腫瘍容積を測定し、臓器および筋肉容積に対する療法の影響を判定する。好中球減少の程度も特徴づける。典型的なプロトコルを表２に示す。
【００３１】
【表２】
2020523374.tif 000006
【００３２】
体重／消耗
典型的な処置計画を図１で概略的に示す。ある被験体は腫瘍細胞移植前に魚油とセレンとを含むサプリメントでの処置を受け（ＰＴＮ、ＰＴＲＮ）、これらの一部（ＰＴＲＮ）は放射線療法を受ける。他の被験体は、腫瘍細胞移植時にそのようなサプリメントでの処置を開始し（ＴＮ、ＴＲＮ）、これらの一部（ＴＲＮ）は放射線療法を受ける。対照被験体（Ｃ）および腫瘍細胞を移植しそれ以外は未処置の被験体（Ｔ）と比較する体重研究の結果を図２Ａおよび２Ｂに示す。図示するように、放射線療法と、魚油とセレンとを含むサプリメントとの両方を受けているマウスは、放射線療法のみを受けているマウスよりも有意に高い割合で体重が増加し、この処置様式に関連する通常の副作用の低減を意味する。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを用いた処置は、特に顕著な効果を有していた。
【００３３】
腫瘍サイズ
図３Ａ〜３Ｄは、ヒト癌のネズミモデルにおける同様の処置群について、放射線療法と、魚油とセレンとを含むサプリメントを使用する併用療法の、腫瘍容積および重量に対する典型的な相乗効果を示す。図３Ａは、３週間の過程にわたる、腫瘍容積に対する様々な処置プロトコルの効果を示し、図３Ｂは、最初の１１日にわたる効果の拡大図を提示する。図示するように、魚油とセレンとを含むサプリメント単独を用いる処置は、腫瘍容積の約６０％の減少を提供する。放射線単独を用いる処置は、腫瘍容積の同様の減少を提供する。したがって、相乗効果がなければ、未処置腫瘍の腫瘍容積の約２５％までの腫瘍容積の減少が予想される。意外にも、観察されるものは、前記未処置腫瘍の約７％に対して、腫瘍容積における９０％を超える減少であり、有意な相乗効果を示す。図３Ｃは、腫瘍重量を特徴づけると同様の効果が見いだされることを示す。図３Ｄは、処置後に試験動物から切除した腫瘍の典型例の写真を示し、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントと放射線療法を用いる併用療法の効果は、目視検査で容易に明らかである。したがって、魚油とセレンとを含むサプリメントと放射線療法とを用いる併用療法が腫瘍容積および／または質量を減少させるのに相乗効果をもたらし得ることは明らかである。
【００３４】
筋肉消耗
放射線療法の副作用は、食欲不振および体重の減少を超えて、内部臓器への損傷、筋肉量の減少、貧血、好中球減少、腎臓機能の低下などが含まれ得る。筋肉量および臓器に対するそのような副作用に関して魚油とセレンとを含むサプリメントを用いた併用療法の保護効果を判定するために、処置したマウスの体重も処置後に特徴づけした。結果を図４Ａ〜４Ｅに示す。図４Ａおよび４Ｂは、前述された試験群に関する、魚油とセレンとを含むサプリメント、放射線療法、およびそのようなサプリメントを使用する放射線療法との併用療法（サプリメント前処置を伴うかまたは伴わない）を使用する処置の、腓腹筋およびヒラメ筋（それぞれ）の重量に対する効果を示す。図示するように、そのようなサプリメントおよび放射線療法を使用する併用療法は、筋肉重量のほぼ完全な保持を提供する。
【００３５】
転移
図４Ｃ、４Ｄ、および４Ｅは、任意の転移性腫瘍を含む肺（図４Ｃ）、任意の転移性腫瘍を含む肝臓（図４Ｄ）、および任意の転移性腫瘍を含む脾臓（図４Ｅ）の重量に対する前述されたような処置の効果を示す。図示するように、少なくとも一つには転移性腫瘍の存在に起因して、処置をしないと重量の増加に至る。この増加は、放射線療法単独（ＴＲ）によって完全に軽減されないが、魚油とセレンとを含むサプリメントでの処置を受けている被験体は、放射線療法との併用療法の有無の両方で対照の臓器重量と類似した臓器重量を有していた。
【００３６】
同様に、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントおよび／または放射線療法で処置されたヒトの疾患の動物モデルの肺内の転移部位の定量化。典型的な転移部位を図４Ｆの左のパネルの写真に示し、右のパネルの柱状グラフに記載する。図示するように、そのようなサプリメント（ＴＮ）または放射線療法（ＴＲ）のいずれかを用いた処置は、転移部位の数をある程度まで減少させたが、サプリメントおよび放射線療法（ＴＲＮ）の両方を用いた処置の結果、ほとんどの被験体において明確な転移部分は完全になくなった。
【００３７】
理論によって拘束されることを望まないが、発明者らは、転移に対するこの効果（および、前述のように、腫瘍サイズおよび質量に対しても）は、放射線療法と組み合わせた魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの使用によってもたらされる、腫瘍細胞増殖に対する相乗効果のためであり得ると考える。図４Ｇに示すように、増殖マーカーＫｉ−６７の発現は、魚油とセレンとを含むサプリメントのいずれかでの処置（ＴＮ）、放射線療法での処置（ＴＲ）、または両様式を用いた処置（ＴＲＮ）に際して原発腫瘍部位において抑制される。転移部位（右のパネル）は栄養サプリメントまたは放射線療法単独での処置と関連した傾向を示し、この増殖マーカーの発現の中程度の減少をもたらしたが、驚くべきことに、転移部位においてＫｉ−６７の発現を減少させるのに相乗効果を示した。これは、魚油とセレンとを含むサプリメントの使用が、放射線療法によって防止されない転移を含む腫瘍転移を低減することができ、相乗的にできることを意味する。
【００３８】
好中球減少／貧血
貧血および好中球減少は、少なくとも一つには骨髄活性の抑制のために、癌において、また放射線療法の副作用としてしばしばみられる。魚油とセレンとを含むサプリメントでの併用療法の、様々な血液細胞集団に対する効果を図５Ａ〜５Ｅに示す。図５Ｂは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメント、放射線療法、およびそのようなサプリメントと放射線療法との併用療法の、図５Ｂに示すような白血球に対する効果、および図５Ｃに示すようなリンパ球に対する効果を示す。これは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントが、腫瘍の存在およびそのような腫瘍の処置に利用される放射線療法に起因する赤血球、顆粒球、白血球、および／またはリンパ球抑制を改善するために有用であり得ることを意味する。
【００３９】
図５Ａに示すように、血小板は腫瘍を有する未処置動物（Ｔ）において上昇することが判明した。血小板濃度は、魚油とセレンとを含むサプリメントまたは放射線療法のいずれかを用いた処置によって減少したが、そのようなサプリメントおよび放射線療法を用いた併用療法を受けている動物において最も顕著であった。この効果は、魚油とセレンとを含むサプリメントを用いた前処置を受けている被験体において特に顕著であり、対照動物について見られた値まで血小板濃度を減少させた。顆粒球濃度は、未処置腫瘍を有する動物において同様に上昇し（図５Ｄに示すとおり）、放射線療法のみを受けているそのような動物においてさらに上昇した。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントおよび放射線療法を使用する併用療法は、この効果を低減することが判明した。図５Ｅに示すように、腫瘍を有する動物は対照動物と比べて上昇した好中球／リンパ球比（ＮＬＲ）を示し、これは、放射線療法のみを受けている同様の被験体においてなお一層上昇する。魚油とセレンとを含むサプリメントを使用する処置は、単独療法として、および放射線療法を使用する併用療法の一部としての両方で、この比をより正常な値にシフトさせるのに有効であることが判明した。このことは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントが、腫瘍の存在のため、そしてそのような腫瘍を処置するために使用される放射線療法のために上昇する血小板濃度、顆粒球濃度、および／または好中球／リンパ球比を減少させるのに有用であり得ることを意味する。
【００４０】
血清タンパク質
腎臓機能、肝臓機能、および／または栄養状態に関する情報を提供する様々な血清生化学マーカーに対する魚油とセレンとを含むサプリメントを用いた併用療法の効果を図６Ａおよび６Ｂに示す。図６Ａは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメント、放射線療法、およびそのようなサプリメントと放射線療法とを用いる併用療法の、動物腫瘍モデルに対する効果を示す。図示するように、血清アルブミン濃度（栄養状態のインジケータ）は未処置の腫瘍を有する動物において低下し、放射線療法単独ではごくわずかだけ改善される。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置は、単独療法としてまたは放射線療法との併用療法としてのいずれかで、特にそのようなサプリメントが前処置として提供される場合に血清アルブミン濃度を改善する。これは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントとの併用療法によって改善される。このことは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置が、単独療法としてまたは放射線療法との併用療法としてのいずれかで、腫瘍を有する被験体の栄養状態を改善することができることを意味する。
【００４１】
図６Ｂは、血清クレアチニン（腎臓機能の尺度）が特徴づけられる同様の研究の結果を示す。図示するように、未処置の腫瘍を有する被験体は、腎臓障害を表す上昇したクレアチニン濃度を示す。これは、放射線療法単独によってわずかに改善される。しかしながら、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントおよび放射線療法を使用する併用療法は、血清クレアチニン濃度を低下させる際に、特にそのような栄養サプリメントが前処置として提供される場合に相乗効果を示す。
【００４２】
サイトカイン
腫瘍の成長および拡散は、放射線療法の適用と同様に、炎症と関連する。意外にも、発明者らは、魚油とセレンとを含むサプリメントとの併用療法が、炎症誘発性サイトカインの濃度を低下させる際に有効であることを見出し、これはそのような併用処置が、腫瘍と、および腫瘍の放射線療法と関連する炎症を低減する際に有効であることを示唆する。ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメントの、炎症誘発性サイトカインの血清濃度に対する効果を図７Ａおよび７Ｂに示す。図７Ａは、対照動物、未処置の腫瘍を有する動物、ならびに魚油とセレンとを含む栄養サプリメント、放射線療法、または、そのようなサプリメントおよび放射線療法の組み合わせで処置された腫瘍を有する動物における、ＩＬ−６の濃度を示す。図示するように、未処置の腫瘍を有する動物は血清ＩＬ−６濃度の大幅な増加を示す。これは、放射線療法によって少しだけ減少する。魚油とセレンとを含む栄養サプリメント、単独療法としてまたは放射線療法との併用療法としてのいずれかの使用は、腫瘍を有する動物において血清ＩＬ−６濃度を低下させることが判明した。図７Ｂは、ＩＬ−Ιβの同様の研究の結果を示す。ＩＬ−Ιβでの結果は、ＩＬ−６について見いだされるものと類似している。このことは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントが、単独療法としてまたは放射線療法との併用療法としてのいずれかで、腫瘍を有する被験体において炎症関連サイトカインの血清濃度を低下させるのに有効であり得ることを意味する。発明者は、そのような低下が、そのような動物における炎症の低減を伴うと考える。
【００４３】
腫瘍遺伝子発現
意外にも、発明者らは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置がインビボで腫瘍細胞における遺伝子発現を修飾でき、放射線療法に起因する遺伝子発現におけるそのような変化に対して相乗効果を提供できることも見出した。いくつかの実施形態において、前記遺伝子は、サイトカインに関連する、および／またはアポトーシスに関連する。放射線療法、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置、および放射線療法との併用療法の、インビボでの移植された腫瘍細胞における遺伝子発現に対する前記効果の例を図８Ａ〜８Ｇに示す。図８Ａは、そのような処置の、腫瘍細胞におけるＶＥＧＦの前記発現に対する結果を示す。図示するように、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントおよび放射線療法を用いる単独療法は、ＶＥＧＦ発現を低減した。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントおよび放射線療法を用いる併用療法は、ＶＥＧＦの発現を劇的に低減した。
【００４４】
図８Ｂおよび８Ｄは、それぞれ、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置、放射線療法、ならびにそのようなサプリメントおよび放射線療法を使用する併用療法の、腫瘍ＢＡＸ発現および転移性（肺）腫瘍ＢＡＸ発現に対する前記効果を示す。ＢＡＸはアポトーシスのマーカーとみなされる。図示するように、未処置腫瘍におけるＢＡＸ発現は低く、放射線療法による影響を受けない。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する単独療法はＢＡＸ発現の劇的な増加をもたらし、また、放射線療法を用いた併用療法として使用した（特に前記サプリメントを前処置として提供）場合は、ＢＡＸ発現を上昇させた。図８Ｃおよび８Ｅで示すように、Ｂｃｌ−２発現は、腫瘍細胞および転移性（肺）腫瘍細胞において（それぞれ）上昇し、単独療法としての魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置または放射線療法のいずれかによって低下することが判明した。そのようなサプリメントおよび放射線療法を併用療法として使用した場合に、Ｂｃｌ−２発現におけるさら大幅な低下が見られた。カスパーゼ３（アポトーシスに関連する）の発現は、放射線療法または魚油とセレンとを含む栄養サプリメント単独で処置された腫瘍（図８Ｄ）において上昇し、そのようなサプリメントを放射線療法として用いる併用療法（特に、前記サプリメントを前処置として提供する場合）によっても上昇する。図８Ｆに示すように、カスパーゼ３の発現は、対照の肺組織と比べて、転移性（肺）腫瘍において低減された。図示するように、そのような腫瘍におけるカスパーゼ３発現は、放射線療法または魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置、ならびに併用療法によって増加する。
【００４５】
反復放射線療法
変更された処置プロトコルを使用して同様の研究を実施した。ヒト放射線療法で典型的なように、複数回の放射線療を利用する一つの修飾された処置プロトコルを図９Ａおよび９Ｂに示す。
【００４６】
ＮｕｔｒａＷｅｌｌを用いる処置、放射線療法、ならびに図９Ａに示すプロトコルを用いる、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントおよび放射線療法を使用する併用療法の後の血清アルブミンおよび血球特徴づけから得られる結果を図１０Ａ〜１０Ｃに示す。図１０Ａに示すように、血清アルブミン濃度は、腫瘍を有する動物において、特に後の時点で低下する。これは、単独療法としての魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置または放射線療法によって、および併用療法によって改善される。図１０Ｂに示すように、腫瘍を有する動物は対照と比べて、特に後の時点で抑制されたリンパ球数を示した。これは、放射線療法単独ではごくわずかしか改善されなかったが、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置（単独療法として、または放射線療法との組み合わせのいずれか）は、リンパ球濃度を増加させるのに、特に後の時点で有効であった。図１０Ｃは、前記好中球／リンパ球比（ＮＬＲ）を特徴づける同様の研究の結果を示す。図示するように、腫瘍を有する動物は、後の時点でこの値において劇的な上昇を示す。これは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置、放射線療法、ならびにそのようなサプリメントおよび放射線療法を使用する併用療法によって低下する。
【００４７】
意外にも、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置、放射線療法、ならびに図９Ａに示すプロトコルを使用する、そのようなサプリメントおよび放射線療法を用いる併用療法も、腫瘍細胞マーカーの発現および腫瘍細胞転移の両方に対して影響を及ぼす。以下の研究において、移植のために選択された前記腫瘍細胞は、肺腫瘍由来であり、前記移植部位から前記肺へ転移する強力な傾向を有する。図１１Ａ〜１１Ｄは、図９Ａに示すプロトコルで処置されたマウスからの様々な組織の免疫細胞化学研究の結果を示す。ＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント補給単独で転移が低減または消失することは注目に値する。
【００４８】
図１１Ａに示すように、未処置マウスの前記腫瘍内のＶＥＧＦ発現（左のパネル、ＦＩＴＣ染色）は明らかである。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置または放射線療法単独のいずれかは、併用療法と同様に、ＶＥＧＦ発現を劇的に低減させた。数値結果を図１１Ａの前記右のパネルに提示する。同様の結果が、図１１Ｂに示すように、前記肺に転移した腫瘍で見られる。図示するように、ＶＥＧＦ発現は未処置の転移性腫瘍で明らかであり（左のパネル、ＦＩＴＣ染色）、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置、放射線療法、または両方を受けた動物で明確に低下した。これらの研究の数値結果を図１１Ｂの前記右のパネルに提示する。
【００４９】
同様の結果がＥＧＦＲの前記発現に関してみられ、その過剰発現は腫瘍と関連する。図１１Ｃに示すように、ＥＧＦＲの発現の上昇（左のパネル、ＦＩＴＣ染色）は未処置の腫瘍で明らかであり、魚油とセレンとを含む栄養サプリメント、放射線療法、またはそのようなサプリメントおよび放射線療法を用いる併用療法で処置した被験体で減少する。数値結果を図１１Ｃの前記右のパネルに示す。同様の結果が図１１Ｄに示すように、前記肺に転移した腫瘍のＥＧＦＲ発現についてみられる。図示するように、ＥＧＦＲ発現の上昇（左のパネル、ＦＩＴＣ染色）は未処置の転移部位で明らかであり、単独療法としての魚油とセレンとを含む栄養サプリメントまたは放射線療法、そのようなサプリメントと放射線療法とを用いた併用療法で処置された被験体において低下する。このことは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメント、放射線療法、および／またはそのようなサプリメントを用いた処置と放射線療法との組み合わせの使用が、癌の処置を受けている個体においてＥＧＦＲ指向性処置プロトコルを増強するのに有効であり得ることを示唆する。
【００５０】
意外にも、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置、放射線療法、およびそのようなサプリメントと図９Ａに示すプロトコルを用いた放射線療法での併用療法も、腫瘍幹細胞に対して影響を及ぼす。そのような幹細胞は、転移および様々な癌療法に対する耐性の前記発生に関連する。以下の研究では、移植のために選択された前記腫瘍細胞は、肺腫瘍由来であり、前記移植部位から前記肺へ転移する強力な傾向を有する。図１２は、図９Ａに示すプロトコルで処置されたマウスからの様々な組織の免疫細胞化学研究の結果を示す。図１２の前記左のパネルは腫瘍細胞におけるＣＤ３１（ＦＩＴＣ染色）、幹細胞マーカーの染色の結果を示す。前記右のパネルは前記肺における転移性細胞についての同様の結果を示す。未処置の被験体は、ＣＤ３１の発現が上昇した多くの細胞を示す。意外にも、放射線療法の前記非存在下での魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置は、前記腫瘍移植部位および前記肺転移部位の両方での前記癌幹細胞の発生を低減または除去する。
【００５１】
魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置、放射線療法、ならびに図９Ａに示すプロトコルを使用した、組み合わせたＮｕｔｒａＷｅｌｌサプリメント補給および放射線療法も、腫瘍細胞中または腫瘍細胞間でしばしばみられる低酸素に対して影響を及ぼす。ＨＩＦ１−αは、低酸素症に関連するマーカーである。以下の研究において、移植のために選択された前記腫瘍細胞は、肺腫瘍由来であり、前記移植部位から前記肺へ転移する強力な傾向を有している。図１３Ａは、図９Ａに示すプロトコルで処置したマウスからの様々な組織の免疫細胞化学研究の結果を示す。前記左のパネルは、腫瘍細胞におけるＨＩＦ１−αの免疫細胞化学染色（ＦＩＴＣ染色）の結果を示し、一方、前記右のパネルは、肺転移部位での同様の染色の結果を示す。未処置被験体はＨＩＦ１−αのレベルが上昇した多くの細胞を示す。意外にも、放射線療法の前記非存在下での魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置は、前記腫瘍移植部位および前記肺転移部位の両方でそのような低酸素症マーカーの前記発生を低減または除去する。図１３Ｂは、腫瘍サンプル中の遺伝子発現を特徴づけした同様の研究からの典型的な数値結果を示す。図示するように、魚油とセレンとを含むサプリメント（ＴＮ）を使用する処置と、魚油とセレンとを含む栄養サプリメント（ＰＴＮ）で１週間の前処置との両方で、放射線療法（ＴＲ）と同様にＨＩＦ１−αの腫瘍発現が減少する。放射線療法およびそのような栄養サプリメントを組み合わせて使用する場合（ＰＴＲＮ、ＴＲＮ）、腫瘍ＨＩＦ１−α発現の劇的な減少は、特に前処置した被験体（ＰＴＲＮ）（相乗効果を示す）において顕著である。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの放射線療法と組み合わせての使用は、腫瘍部位におけるＨＩＦ１−αタンパク質含有量および遺伝子発現の両方を低減することができ、それらをさらに低酸素状態になりやすくすることは明らかである。
【００５２】
魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置、放射線療法、ならびに図９Ａに示すプロトコルを用いた、組み合わせたサプリメント補給および放射線療法も、腫瘍細胞におけるアポトーシス活性に対して影響を及ぼす。マウスにおける腫瘍細胞移植から２４日での様々なアポトーシスマーカー（Ｂａｘ、Ｂｃｌ−２、およびカスパーゼ３）の発現についてのｑＰＣＲ研究の結果を図１４に示す。図示するように、前記Ｂａｘ／Ｂｃｌ−２発現比は腫瘍細胞では低く、放射線療法によってわずかだけ改善する。意外にも、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置単独でこの比の有意な増加がもたらされた。加えて、顕著な相乗効果がそのようなサプリメントおよび放射線療法を用いた併用療法で見られた。カスパーゼ３発現は放射線療法単独によって実際には幾分抑制されたが、単独療法として、および放射線療法との併用療法としての両方で、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置によって劇的に増加した。
【００５３】
放射線療法と組み合わせた魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置はまた、ヒトの疾患の動物モデルにおいて原発腫瘍部位および転移性（肺）腫瘍部位でＰＤＬ−１およびＰＤ−１の発現を調節することが判明した。図１５Ａに示すように、原発性（左のパネル）および転移性（右のパネル）腫瘍細胞はどちらも高レベルのＰＤＬ−１発現（Ｔ）を示す。意外にも、これらは、前処置（ＰＴＮ）および移植時（ＴＮ）に処置した場合の両方で、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置によって著しく低下する。したがって、発明者は、そのようなサプリメントを使用して、癌処置に対する免疫処置アプローチを増強することができると考える。放射線療法（ＴＲ）での処置も、原発部位および転移部位の両方でＰＤ−Ｌ１遺伝子発現の減少を示し、放射線療法単独を使用して癌処置に対する免疫処置アプローチを増強できることを示唆する。そのような栄養サプリメントおよび放射線療法を用いた併用療法は、前記サプリメントが移植前（ＰＴＲＮ）に提供されるか、または移植時（ＴＲＮ）に提供されるかにかかわらず、原発腫瘍部位および転移部位の両方でＰＤＬ−１発現の低減に有効である。意外にも、前記効果は、転移部位においてよりも前記原発腫瘍部位においてより顕著である。このことは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを放射線療法と組み合わせて用いる併用療法が、原発部位および転移部位の両方における腫瘍細胞を、前記患者の免疫系に対してより感受性にすることができる、および／または癌処置に対する免疫処置アプローチの前記効果を増強することができることを示唆する。
【００５４】
同様の研究をＰＤ−１発現に関して実施した。図１５Ｂに示すように、ＰＤ−１発現は放射線療法（ＴＲ）で処置された原発部位腫瘍細胞で低減され、移植前（ＰＴＮ）または移植直後（ＴＮ）のいずれかで、魚油とセレンとを含むサプリメントで処置された動物において原発部位腫瘍細胞（左のパネル）で増強された。前記栄養サプリメントおよび放射線療法での併用療法は、前記サプリメントが移植前（ＰＴＲＮ）に提供されるか、または移植時（ＴＲＮ）に提供されるかに応じて異なる結果（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｒｅｓｕｌｔ）を提供する。図１５Ｂの前記右のパネルに示すように、転移部位での腫瘍細胞は、対照動物から採取したサンプルと比べて低減されたＰＤ−１発現を示した。意外にも、放射線療法は、移植前または前記移植時のいずれかに魚油とセレンとを含むサプリメントで処置を行った場合、転移部位においてＰＤ−１発現の増加をもたらした（右のパネル）。放射線療法およびそのようなサプリメントを用いた併用療法は、単独療法で観察されるものよりも高いレベルのＰＤ−１発現をもたらした。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置は、特に放射線療法との組み合わせで、腫瘍を有する被験体において、特に転移部位で見られる低下した発現レベルからＰＤ−１発現をシフトさせ得ることは明らかである。
【００５５】
移植前、放射線療法前、および反復放射線療法を伴う放射線療法サプリメント補給の開始
魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの前処置および臨床適用に典型的な複数回の放射線療法の両方を組み合わせた別の処置プロトコルを図１６Ａおよび１６Ｂに示す。このプロトコルにおいて、前記サプリメントを用いた処置は、腫瘍細胞移植の前、前記腫瘍細胞移植時、および放射線療法の前記開始時で開始した。
【００５６】
腸管吸収の喪失および結果としての栄養不良は、放射線療法、特に反復放射線療法の周知の副作用である。図１７は、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを使用する処置の、放射線療法中の前記腸の前記細胞構造に対する前記効果を示す顕微鏡写真を示す。前記腸の細胞構造を、未処置の対照（上の左のパネル）、複数回の放射線療法で処置された、腫瘍を移植された被験体（右のパネル）、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントで前処置し、その後放射線療法を施された、腫瘍を移植された被験体（下の左のパネル）、および放射線療法の前記開始時に魚油とセレンとを含む栄養サプリメントで処置された、腫瘍を移植された被験体（下の右のパネル）について示す。図示するように、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置は、放射線療法中に前記消化管刷子縁を維持することができ、前記消化管刷子縁を明らかに増強する。これは、そのようなサプリメントでの処置、特に前処置が、放射線療法の副作用に効果的に対処できることを示す。
【００５７】
そのような処置プロトコルは、インビボで腫瘍細胞におけるある特定の遺伝子発現を修飾することが判明している。図１６Ａに示すプロトコルによって処置されたマウスからの腫瘍細胞における遺伝子発現（例えば、血管新生因子関連、アポトーシス関連など）のｑＰＣＲ研究結果を図１８Ａ〜１８Ｆに示す。図１８Ａに示すように、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置は、反復放射線療法と同様に、腫瘍細胞におけるＶＥＧＦ発現を低減する。そのようなサプリメントと放射線療法とを用いる併用療法によって、特に、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントが放射線療法の開始前に提供される場合にＶＥＧＦ発現の低減が増強される。
【００５８】
図１８Ｂは、腫瘍細胞におけるＢＡＸ発現が魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置によって増加し、反復放射線療法単独では比較的影響を受けないことを示す。そのようなサプリメントを反復放射線療法と組み合わせて用いる前処置も、ＢＡＸ発現を増大させた。図１８Ｄに示すように、別のアポトーシス関連遺伝子（カスパーゼ３）の発現についても同様の結果が見られる。転移性（肺）腫瘍におけるカスパーゼ３発現研究の結果を図１８Ｆに示す。図示するように、そのような転移性腫瘍におけるカスパーゼ３の発現は、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置によって、および反復放射線療法によって上昇し、前記サプリメントを放射線療法の開始前に併用療法として提供する場合の対照細胞と類似している。
【００５９】
腫瘍細胞における別のアポトーシス関連遺伝子であるＢｃｌ−２の発現は、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置および反復放射線療法単独によって減少する（図１８Ｃを参照）。このＢｃｌ−２発現における減少は、そのようなサプリメントおよび反復放射線療法と用いる併用療法に対して、特に前記サプリメントが放射線療法の開始前に提供される場合にさらに顕著である。図１８Ｅは、転移性（肺）腫瘍に関して実施される類似の研究の結果を示す。図示するように、Ｂｃｌ−２発現における前記減少は、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントおよび反復放射線療法を用いる併用療法に関して、特に前記サプリメントが放射線療法の開始前に提供される場合に、相乗的に減少する。
【００６０】
移植前サプリメント補給および反復放射線療法
図１９Ａおよび１９Ｂは、処置プロトコルと、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントが腫瘍細胞の移植７日前に提供される関連する試験群（それぞれの）とを示し、放射線療法は移植後８、１０、および１２日に行った。マウスを移植後２４日に処分した。
【００６１】
癌および反復放射線療法の両方のよく知られている副作用は体重の減少である。これは、疾患および放射線療法の副作用に関連する衰弱のためであり得る。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置の、反復放射線療法後の体重および筋肉量の減少に対する前記効果を図２０Ａおよび２０Ｂに示す。体重は前記腫瘍塊の除去後に特徴づけしたと理解されたい。図２０Ａに示すように、腫瘍塊を除去すると、対照と比べて残りの体重の有意な減少は明らかである。これは、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置および単独療法としての放射線療法によって改善される。意外にも、体重の増加は、そのようなサプリメントおよび反復放射線療法を組み合わせて使用する場合に被験体のものを上回る。図２０Ｂは、前記様々な試験群における腓腹筋の前記重量を示す。筋肉量の減少は未処置の腫瘍を有する動物では明らかである。これは、反復放射線療法単独によってわずかに改善される。意外にも、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置は、筋肉量の顕著な保持を提供する。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントおよび反復放射線療法での併用療法は、未処置の腫瘍を有する被験体と比べて筋肉量の相乗的改善をもたらす。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを用いた前処置は、前記腫瘍の前記存在および反復放射線療法の両方に起因して前記体重減少（対照と比べて）および筋肉量を効果的に逆転することは明らかである。
【００６２】
移植前サプリメント補給および反復放射線療法
処置群に関連する別の処置プロトコルを図２１Ａおよび２１Ｂに示し、これは図１６Ａおよび１６Ｂに示すプロトコルと類似している。このプロトコルでは、放射線療法は腫瘍細胞の移植後８、１０、および１２日に提供される。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置は、移植前７日、前記移植当日、または放射線療法の前記開始時のいずれかで提供される。マウスを腫瘍細胞移植後２１日に処分した。
【００６３】
癌および放射線療法の両方のよく知られた副作用は体重の減少である。反復前記放射線療法の開始前に提供された場合および反復放射線療法の前記開始と同時に提供された場合の体重および筋肉量の減少に対する魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置の前記効果を図２２に示す。体重は前記腫瘍塊の除去後に特徴づけされたと理解されたい。図示するように、未処置の腫瘍を有する被験体（前記腫瘍の切除後）の経時的体重増加は、対照と比較して劇的に減少する。同様の減少は、単独で使用した場合の反復放射線療法に関して顕著である。意外にも、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置は、単独療法として、および反復放射線療法と組み合わせて使用した場合の両方で、著しく改善された経時的体重増加を提供する。これは、そのようなサプリメントが前処置として使用される場合に特に明白である。
【００６４】
発明者らは、図２３で示すように、魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを用いた前処置が反復放射線療法に対してみられる腫瘍容積の前記減少を増強することも見出した。図示するように、反復放射線療法および魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置はどちらも、未処置の腫瘍を有する動物の腫瘍と比べて腫瘍容積を減少させるのに中程度の効果がある。意外にも、腫瘍容積は、反復放射線療法および魚油とセレンとを含む栄養サプリメントを併用療法として使用した場合、ほとんど経時的変化を示さず、相乗効果を意味する。
【００６５】
腫瘍の前記存在および反復放射線療法も炎症の前記発生をもたらす可能性があり、これは、血清中の炎症誘発性サイトカインの前記存在によって特徴づけできる。図２４Ａおよび２４Ｂは、図２１Ａに示すように前記プロトコルにおけるように処置したマウスにおける炎症誘発性サイトカインの濃度に対する魚油とセレンとを含む栄養サプリメントの投与と反復放射線療法の前記効果を示す。図２４Ａは血清ＴＮＦ−αの値を示す。未処置腫瘍を有する動物が非常に高濃度のＴＮＦ−αを示すことは明らかであり、これは反復放射線療法によってある程度まで減少する。魚油とセレンとを含む栄養サプリメントでの処置によっても、特に、そのようなサプリメントを反復放射線療法との併用療法で使用した場合に、血清ＴＮＦ−αの減少がもたらされた。図２４Ｂは、ＩＬ−６の前記血清濃度を特徴づける同様の研究の結果を示し、これは同様の結果を示す。
【００６６】
すでに記載したもののほかに、本明細書中の発明の概念から逸脱することなくさらに多くの修飾が可能であることは当業者には明らかである。発明の主題は、したがって、前記添付の特許請求の範囲の前記趣旨を除いて限定されるものではない。さらに、前記明細書および前記特許請求の範囲の両方の解釈において、すべての用語は、前記文脈と一致する可能な限り最も広義の方法で解釈されるべきである。特に、前記用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓおよびｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、包括的な方法で要素、成分、またはステップを指すと解釈されるべきであり、前記参照される要素、成分、もしくはステップが、明確に参照されていない他の用途、成分、もしくはステップとともに存在し得る、または利用し得る、または組み合わせられ得ることを意味する。前記明細書特許請求範囲がＡ、Ｂ、Ｃ．．．．およびＮからなる前記群から選択されるもののうちの少なくとも一つを指す場合、前記文脈は、Ａ＋Ｎ、またはＢ＋Ｎなどでない前記群からの一つの要素だけを必要とすると解釈すべきである。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図４Ｅ】
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【図４Ｆ】
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【図４Ｇ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図５Ｅ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図８Ｅ】
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【図８Ｆ】
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【図８Ｇ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１１Ｄ】
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【図１２】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１４】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１７】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１８Ｃ】
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【図１８Ｄ】
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【図１８Ｅ】
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【図１８Ｆ】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４Ａ】
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【図２４Ｂ】
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【国際調査報告】
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