(57)【要約】  本発明は、新規な種類の一般式（Ｉａ）のプロドラッグ又は複合体［式中、Ｌａ、ｎ、Ｒ、及びＤは、明細書中で示した意味を有する。］であって、還元されてレグマインなどの腫瘍関連プロテアーゼの開裂部位としてのアスパラギン誘導体となる構造パターンを有し、レグマイン開裂によってキネシン紡錘体タンパク質阻害剤などの細胞毒性活性剤が放出されるプロドラッグ又は複合体に関するものである。本発明はさらに、疾患を治療及び／又は予防するための前記プロドラッグ又は複合体の使用、及び疾患、特には過剰増殖性及び／又は血管新生疾患、例えばがん疾患の治療及び／又は予防のための薬剤を製造するための前記プロドラッグ又は複合体の使用に関するものである。レグマイン開裂性基質ペプチド配列を還元して構造パターンとしてのアスパラギン誘導体とすることで、健常臓器のリソソームにおける安定性向上が、高抗腫瘍活性とともに達成される。    【化１】2020502201.tif 000309
2020502201.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉａ）の化合物。
【化１】
2020502201.tif 000263
［式中、
Ｌａは、自壊性リンカーであり、
ｎは、０又は１であり；
Ｄは、−Ｄ１−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
Ｄ１は細胞毒性薬であり、
ＬＩＧは、腫瘍細胞の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂは、リンカーであり、
ｏ及びｐはそれぞれ独立に、０又は１であり、
Ｒは、ＬＩＧ−（Ｌｃ）ｅ−であり、
ＬＩＧは、腫瘍細胞上の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｃは、リンカーであり、
ｅは０又は１であり、
又は
Ｒは、Ｚ１−（Ｃ＝Ｏ）ｑ−であり、
ｑは０又は１であり、
Ｚ１は、Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ５−１０−アリール、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ３−１０−ヘテロアルキル、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール、Ｃ５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ１−１０−アルコキシ、Ｃ６−１０−アリールオキシ、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ、Ｃ５−１０−ヘテロアルコキシ、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリールオキシ−、Ｃ５−１０−複素環アルコキシ基［それらは−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）３−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（アルキル）２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）２又は−ＯＨによって同一に又は異なってモノ置換又は多置換されていても良い。］であり、
又は−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−１−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１若しくは−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１基であり、
ｘは０又は１であり、
ｖは、１〜２０の数字であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−アルキル、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、又は−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２である。］
【請求項２】
下記一般式（ＩＩＩ′）の化合物。
【化２】
2020502201.tif 000264
［式中、ｎ、ｅ、ＬＩＧ、Ｌａ、Ｌｃ、及びＤ１は、一般式（Ｉａ）で提供の定義を有する。］
【請求項３】
下記一般式（ＩＶ′）の化合物。
【化３】
2020502201.tif 000265
［式中、ｎ、ｏ、ＬＩＧ、Ｌａ、Ｌｂ及びＤ１は一般式（Ｉａ）で提供の定義を有し、
ＲはＺ１−（Ｃ＝Ｏ）ｑ−であり、
ｑは０又は１であり、
Ｚ１はＣ１−１０−アルキル−、Ｃ５−１０−アリール−、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルキル−、Ｃ３−１０−ヘテロアルキル−、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール−、Ｃ５−１０−複素環アルキル−、ヘテロアリール−、Ｃ５−１０−ヘテロアリール−Ｃ１−６−アルキル−、Ｃ５−１０−ヘテロアリール−アルコキシ−、Ｃ１−１０−アルコキシ−、Ｃ６−１０−アリールオキシ−、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ−、Ｃ５−１０−ヘテロアルコキシ−、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリールオキシ−、Ｃ５−１０−複素環アルコキシ基［それらは、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）３−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（アルキル）２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）２又は−ＯＨによって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良い。］であり、又は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−１−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１若しくは−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１基であり、
ｘは０又は１であり、
ｖは、１〜２０の数字であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−アルキル、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、又は−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２である。］
【請求項４】
Ｌａが、自壊性リンカーであり、
ｎが、０又は１であり；
Ｄが、−Ｄ１−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ｏ及びｐが０であり、
Ｄ１が、細胞毒性薬であり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
Ｒが、ＬＩＧ−（Ｌｃ）ｅ−であり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞上の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｃが、リンカーであり、
ｅが、０又は１である、請求項１に記載の一般式（Ｉａ）の化合物。
【請求項５】
Ｌａが、自壊性リンカーであり、
ｎが、０又は１であり；
Ｄが、−Ｄ１−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ｏが、０又は１であり、
ｐが、１であり、
Ｄ１が、細胞毒性薬であり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
Ｒが、Ｚ１−（Ｃ＝Ｏ）ｑ−であり、
ｑが、０又は１であり、
Ｚ１が、
Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ５−１０−アリール、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ３−１０−ヘテロアルキル、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール、Ｃ５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、Ｃ５−１０−ヘテロアリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ１−１０−アルコキシ、Ｃ６−１０−アリールオキシ、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ、Ｃ５−１０−ヘテロアルコキシ、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリールオキシ、Ｃ５−１０−複素環アルコキシ基［これらは、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）３−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（アルキル）２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）２又は−ＯＨによって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良い。］であり、
又は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−１−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１若しくは−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１基であり、
ｘが、０又は１であり
ｖが、０〜２０の数字であり、
Ｒ１が、−Ｈ、−アルキル、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、又は−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２である、請求項１に記載の一般式（Ｉａ）の化合物。
【請求項６】
ｑが１である、請求項１及び５に記載の一般式（Ｉａ）の化合物。
【請求項７】
Ｚ１が、Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ−又はＣ５−１０−ヘテロアリールアルコキシ基であり、それらが−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）３−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（アルキル）２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）２又は−ＯＨによって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良い、請求項１及び５に記載の一般式（Ｉａ）の化合物。
【請求項８】
Ｚ１がＣ１−３−アルキル、Ｃ６−７−アリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ５−６−ヘテロアリール−Ｃ１−３−アルキル、又はＣ６−７−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ基であり、それらが、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＯＨによって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良い、請求項１及び５に記載の一般式（Ｉａ）の化合物。
【請求項９】
前記リンカー−Ｌｂ−又は−Ｌｃ−が、バインダー中のシステイン側鎖又はシステイン残基に結合しており、一般基本構造（ｉ）及び（ｉｉ）：
（ｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−（Ｌ１）ｎ−（Ｌ２）ｎ−
及び
（ｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ２
を有し、
ｍ及びｎが、独立に０又は１であり、
ＳＧが、イン・ビボで化学的又は酵素的に開裂可能な基（特には、ジスルフィド、ヒドラゾン、アセタール及びアミナール；又はレグマイン−、カテプシン−若しくはプラスミン−開裂性２〜８オリゴペプチド基）であり、
Ｌ２が、単結合であるか、下記の基：
【化４】
2020502201.tif 000266
であり、
＃１が、バインダー中の硫黄原子への結合部位を示し、
＃２が、Ｌ１基への結合部位を示し、
Ｌ１が、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は−（ＣＨ２）０−３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｎが、０又は１であり、
ｏが、０又は１であり、
Ｇ２が、結合又は直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２）、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、Ｎ、Ｏ及びＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨ−ＣＮＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、又は、下記の基：
【化５】
2020502201.tif 000267
のうちの一つを表し、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルである、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項１０】
前記リンカー−Ｌｂ−又は−Ｌｃ−がバインダー中のリジン側鎖又はリジン残基に結合しており、一般基本構造（ｉ）及び（ｉｉ）：
（ｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−（Ｌ１）ｎ−（Ｌ４）ｎ−（Ｃ＝Ｏ）−§§
及び
（ｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ４−（Ｃ＝Ｏ）−§§
を有し、
式中、
ｍ及びｎが独立に、０又は１であり、
ＳＧが、イン・ビボで化学的又は酵素的に開裂可能な基（特には、ジスルフィド、ヒドラゾン、アセタール及びアミナール；又はレグマイン−、カテプシン−若しくはプラスミン−開裂性２〜８オリゴペプチド基）であり、
Ｌ１が、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は−（ＣＨ２）０−３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｎが、０又は１であり、
ｏが、０又は１であり、
Ｇ２が、結合又は直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２）、−ＮＭｅ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、Ｎ、Ｏ及びＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨ−ＣＮＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、又は、下記の基：
【化６】
2020502201.tif 000268
のうちの一つを表し、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
Ｌ４が、単結合又は下記の基：
−（Ｃ＝Ｏ）ｙ−Ｇ４−
であり、
ｙが、０又は１であり、
Ｇ４が、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−及びＮ、Ｏ及びＳ、Ｓ（＝Ｏ）若しくはＳ（＝Ｏ）２から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ−ＣＮ−、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
§§が、バインダー中のリジン残基の窒素原子への結合部位である、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｌ１が、下記の表で挙げた基であり、ｒが０〜２０、好ましくは０〜１５、特別に好ましくは０〜１０の数字である、前記請求項のうちの１以上に記載の一般式（Ｉａ）の化合物。
【表１】
2020502201.tif 000269
2020502201.tif 000270
2020502201.tif 000271
2020502201.tif 000272
2020502201.tif 000273
2020502201.tif 000274
2020502201.tif 000275
2020502201.tif 000276
2020502201.tif 000277
2020502201.tif 000278
2020502201.tif 000279
2020502201.tif 000280
2020502201.tif 000281
2020502201.tif 000282
2020502201.tif 000283
2020502201.tif 000284
2020502201.tif 000285
【請求項１２】
Ｌ２が下記構造：
【化７】
2020502201.tif 000286
を有し、
＃１が、抗体の硫黄原子への結合部位を示し、
＃２が、Ｌ１基への結合部位を示し、
Ｒ２２が、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＲ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＲ又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ）２であり、
Ｒが、Ｃ１−３−アルキル−である、前記請求項のうちの１以上に記載の一般式（Ｉａ）の化合物。
【請求項１３】
前記自壊性リンカーＬａが、下記の基のうちの一つ：
【化８】
2020502201.tif 000287
であり、
＃１が、式（Ｉａ）中のカルボニル基への結合であり、
＃２が、細胞毒性剤中のＤ１のヒドロキシル又はアミン基への結合である、前記請求項のうちの１以上に記載の一般式（Ｉａ）の化合物。
【請求項１４】
前記細胞毒性剤Ｄ１がマイトマイシン、ドキソルビシン、アミノプテリン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、９−アミノカンプトセシン、ｎ８−アセチルスペルミジン、１−（２−クロロエチル）−１，２−ジメタンスルホニルヒドラジド、タリソマイシン、シタラビン、エトポシド、カンプトセシン、タキソール、エスペラミシン、ポドフィロトキシン、アングイジン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、モルホリン−ドキソルビシン、ｎ−（５，５−ジアセトキシペンチル）ドキソルビシン、デュオカルマイシン、オーリスタチン、モノメチルオーリスタチン、ドラスタチン、チューブリシン、メイタンシノイド、クリプトフィシン、アマニチン、インドリノベンゾジアゼピン、ピロロベンゾジアゼピン誘導体、カリケアマイシン、ダウノルビシン、カンプトテシンＤＸ８９５１（エキサテカン）又はキネシン紡錘体タンパク質阻害剤（ＫＳＰ阻害剤）から選択される薬物であり、当該薬物がそれのヒドロキシル若しくはアミノ基を介して式（Ｉａ）のＬａ（ｎ＝１の場合）又はカルボニル基（ｎ＝０の場合）に結合している、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項１５】
薬剤としての前記細胞毒性剤Ｄ１がＫＳＰ阻害剤である、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項１６】
前記ＫＳＰ阻害剤が下記式（ＩＩａ）の化合物である、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物並びに該化合物の塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩。
【化９】
2020502201.tif 000288
［式中、
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＮＨであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）、−Ｓ（＝Ｏ）２−、又は−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、−ＮＨＹ３、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）０−３−（ＣＨ２）０−３Ｚ′又は−ＣＨ（ＣＨ２Ｗ）Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）ＣＯＯＨ又は−（Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４）１−３ＣＯＯＨであり、
Ｗは、−Ｈ又は−ＯＨであり、
Ｙ４は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２によって置換されていても良い直鎖若しくは分岐のＣ１−６アルキルであり、又は、−ＮＨ２によって置換されていても良いアリール若しくはベンジルであり、
Ｒ２は、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ４−ＮＨＹ５又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｙ４は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−ＮＨ２によって置換されていても良い直鎖若しくは分岐のＣ１−６アルキル−であり、又は、−ＮＨ２によって置換されていても良いアリール若しくはベンジルであり、
Ｙ５は、−Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ６−ＮＨ２であり、
Ｙ６は、直鎖若しくは分岐のＣ１−６−アルキルであり、
Ｒ３は、−ＭＯＤ、−Ｌ−＃１、又は置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基であり、それらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１−３−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良く、
ｎは、０、１又は２であり、
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ４は、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基であり、
Ｒ５は、−Ｈ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、ハロゲン、−ＣＮ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｆ、−ＳＨ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル、Ｃ２−１０−アルキニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル、ヒドロキシル、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ又はハロゲンであり、
Ｒ８は、直鎖若しくは分岐のＣ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル、Ｃ２−１０−アルキニル又はフルオロ−Ｃ２−１０−アルキニルであり、又はＣ４−１０−シクロアルキル、フルオロ−Ｃ４−１０−シクロアルキル又は−（ＣＨ２）０−２−（ＨＺ２）であり、
ＨＺ２は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される２個以下のヘテロ原子を有する４〜７員複素環であり、それは、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ２又は−Ｌ−＃１によって置換されていても良く、
Ｒ９は、−Ｈ、−Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ又は−ＣＨＦ２であり、
−Ｌ−＃１は、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧは、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂは、リンカーであり、
ｏ及びｐは、独立に０又は１であり、
−ＭＯＤは、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３であり、
Ｒ１０は、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は
【化１０】
2020502201.tif 000289
であり、
ｎは、０又は１であり；
ｏは、０又は１であり、
Ｇ２は、直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは１〜１０個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｙは、−Ｈ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル又はＣ２−Ｃ１０−アルキニルであり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
Ｇ３は、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
−ＭＯＤは、少なくとも１個、好ましくは２個の−ＣＯＯＨ基を有し、−ＭＯＤ中の１個のアミノ基が、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基によってアシル化されていることができる。］
【請求項１７】
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ１が、−Ｌ−＃１、−Ｈ、又は−ＭＯＤであり、
−Ｌ−＃１が、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
ｏ及びｐが、独立に０又は１であり、
−ＭＯＤが、基：−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキル−であり、
ｎが、０又は１であり、
Ｇ１が、−ＮＨ−Ｃ−（＝Ｏ）−又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏが、０又は１であり、
Ｇ２が、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙが、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それらがそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−であり、
Ｇ３が、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ２が、−Ｈであり、
Ｒ３が、−ＭＯＤ、−Ｌ−＃１、又は置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基であり、それらが、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ−基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１−３−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良く、
ｎが、０、１又は２であり、
Ｚが、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり、
Ｒ４が、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基であり、
Ｒ５が、−Ｈであり、
Ｒ６及びＲ７がフッ素であり、
Ｒ８が、ｔ−ブチルであり、
Ｒ９が、−Ｈであり、
−Ｌ−＃１が、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
ｏ及びｐが、独立に０又は１である、請求項１６に記載の一般式（ＩＩａ）の化合物並びに該化合物の塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩。
【請求項１８】
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ１が、−Ｌ−＃１、−Ｈ、又は−ＭＯＤであり
−Ｌ−＃１が、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
ｏ及びｐが、独立に０又は１であり、
−ＭＯＤが、基：−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキル−であり、
ｎが０であり、
Ｇ１が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏが、１であり、
Ｇ２が、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲｙ−又は−Ｃ（＝Ｏ）−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨによって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙが、−Ｈ又はＣ１−Ｃ１０−アルキル−であり、それは、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２によって置換されていても良く、
Ｇ３が、−ＣＯＯＨであり、
Ｒ２が、−Ｈであり、
Ｒ３が、−Ｌ−＃１であり、
Ｒ４が、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基であり、
Ｒ５が、−Ｈであり、
Ｒ６及びＲ７が、フッ素であり、
Ｒ８が、ｔ−ブチルであり、
Ｒ９が、−Ｈであり、
−Ｌ−＃１が、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
ｏ及びｐが、独立に０又は１である、請求項１６及び１７に記載の一般式（ＩＩａ）の化合物並びに該化合物の塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩。
【請求項１９】
下記一般式（ＩＩａ′）の化合物並びに該化合物の塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩。
【化１１】
2020502201.tif 000290
［式中、
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＮＨであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
Ａは、基：＊−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）ｘ−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−＊＊であり、
ｘは、１又は２であり、
＊は、薬剤分子への結合であり、
＊＊は、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基への結合であり、
Ｒ１は、−ＭＯＤであり、
−ＭＯＤは、基：−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３であり、
Ｒ１０は、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキル−であり、
ｎは、０であり、
Ｇ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏは、１であり、
Ｇ２は、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙは、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−であり、
Ｇ３は、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ２は、−Ｈであり、
Ｒ３は、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基であり、
Ｒ４は、−Ｈであり、
Ｒ５は、−Ｈ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、ハロゲン、−ＣＮ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｆ、−ＳＨ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル−、Ｃ２−１０−アルキニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル−、ヒドロキシル−、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ又はハロゲンであり、
Ｒ８は、直鎖若しくは分岐のＣ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル−、Ｃ２−１０−アルキニル−又はフルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル−であり、又はＣ４−１０−シクロアルキル−又はフルオロ−Ｃ４−１０−シクロアルキル−であり、
Ｒ９は、−Ｈ、−Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ又は−ＣＨＦ２である。］
【請求項２０】
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
Ａが、基：＊−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）ｘ−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−＊＊であり、
ｘが、１又は２であり、
＊が、薬剤分子への結合であり、
＊＊が、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基への結合であり、
Ｒ１が、−ＭＯＤであり、
−ＭＯＤが、基：−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキル−であり、
ｎが、０であり、
Ｇ１が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏが、１であり、
Ｇ２が、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙが、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それらがそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−であり、
Ｇ３が、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ２が、−Ｈであり、
Ｒ３が、式（Ｉａ）のレグマイン開裂性基であり、
Ｒ４が、−Ｈであり、
Ｒ５が、−Ｈであり、
Ｒ６及びＲ７がフッ素であり、
Ｒ８が、ｔ−ブチルであり、
Ｒ９が、−Ｈである、請求項１９に記載の一般式（ＩＩａ′）の化合物並びに該化合物の塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩。
【請求項２１】
下記一般式（ＩＩａ″）の化合物並びに該化合物の塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩。
【化１２】
2020502201.tif 000291
［式中、
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＮＨであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）、−Ｓ（＝Ｏ）２−、又は−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−であり、
Ｒ１は、基：＊−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−ＮＨ−＊＊であり、
＊は、薬剤分子（細胞毒性剤）への結合部位であり、
＊＊は、式Ｉａ′のレグマイン開裂性基への結合であり、
Ｇ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏは、１であり、
Ｇ２は、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙは、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−であり、
Ｒ２は、−Ｈであり、
Ｒ３は、置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基であり、それらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ−基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル−基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１−３−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良く、
ｎは、０、１又は２であり、
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ４は、−Ｈであり、
Ｒ５は、−Ｈ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、ハロゲン、−ＣＮ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｆ、−ＳＨ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル−、Ｃ２−１０−アルキニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル−、ヒドロキシル−、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ又はハロゲンであり、
Ｒ８は、直鎖若しくは分岐のＣ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル−、Ｃ２−１０−アルキニル−又はフルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル−であり、又はＣ４−１０−シクロアルキル−又はフルオロ−Ｃ４−１０−シクロアルキル−であり、
Ｒ９は、−Ｈ、−Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ又は−ＣＨＦ２である。］
【請求項２２】
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ１が、基：＊−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−ＮＨ−＊＊であり、
＊が、薬剤分子（細胞毒性剤）への結合部位であり、
＊＊が、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基への結合であり、
Ｇ１が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏが、１であり、
Ｇ２が、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙが、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それらがそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−であり、
Ｒ２が、−Ｈであり、
Ｒ３が、−ＣＨ２−ＯＨであり、
Ｒ４が、−Ｈであり、
Ｒ５が、−Ｈであり、
Ｒ６及びＲ７がフッ素であり、
Ｒ８が、ｔ−ブチルであり、
Ｒ９が、−Ｈである、請求項２１に記載の一般式（ＩＩ″）の化合物並びに該化合物の塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩。
【請求項２３】
前記リンカーＬｂ又はＬｃが、バインダー中のシステイン側鎖又はシステイン残基に結合しており、下記式：
§−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−Ｌ１−（Ｌ２）ｎ−§§
を有し、
ｍが、０又は１であり、
ｎが、０又は１であり、
§が、薬剤分子又は式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基への結合であり、
§§が、バインダーへの結合であり、
−Ｌ２が、下記の基：
【化１３】
2020502201.tif 000292
であり、又は結合であり、
＃１が、バインダーの硫黄原子への結合部位を示し、
＃２が、Ｌ１基への結合部位を示し、
Ｌ１が、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は−（ＣＨ２）０−３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｎが、０又は１であり、
ｏが、０又は１であり、
Ｇ２が、結合又は直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２）、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、Ｎ、Ｏ及びＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨ−ＣＮＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、又は、下記の基のうちの一つ：
【化１４】
2020502201.tif 000293
を表し、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルである、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項２４】
前記リンカーＬｂ及び／又はＬｃが、バインダー中のリジン側鎖又はリジン残基に結合しており、下記式：
§−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−Ｌ１−（Ｌ４）ｎ−Ｃ＝Ｏ−§§
を有し、
ｍが、０又は１であり、
ｎが、０又は１であり、
§が、薬剤分子又は式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基への結合であり、
§§が、バインダー中の窒素原子への結合を表し、
Ｌ１が、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は−（ＣＨ２）０−３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｎが、０又は１であり、
ｏが、０又は１であり、
Ｇ２が、結合又は直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２）、−ＮＭｅ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、Ｎ、Ｏ及びＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ−ＣＮＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、又は、下記の基のうちの一つ：
【化１５】
2020502201.tif 000294
を表し、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
Ｌ４が、単結合又は下記の基：
−（Ｃ＝Ｏ）ｙ−Ｇ４−
であり、
ｙが、０又は１であり、
Ｇ４が、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、及びＮ、Ｏ及びＳ、Ｓ（＝Ｏ）若しくはＳ（＝Ｏ）２から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ−ＣＮ−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良い、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｌ２が、下記式のうちの一つ又は両方：
【化１６】
2020502201.tif 000295
であり、
＃１が、バインダー中の硫黄原子への結合部位であり、
＃２が、Ｌ１基への結合部位であり、
Ｒ２２が、−ＣＯＯＨであり、
前記バインダー中の硫黄原子への結合が、８０％強（バインダーへのリンカーの結合の総数に基づいて）の程度まで、これら二つの式のうちの一つに存在する、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項２６】
前記バインダーが抗体又は抗原結合性抗体断片であり、前記抗体又は前記抗体断片がシステイン残基（ＡＫ１）、リジン残基（ＡＫ２）又はグルタミン残基（ＡＫ３）を介して結合している、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項２７】
下記構造の、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【化１７】
2020502201.tif 000296
2020502201.tif 000297
2020502201.tif 000298
2020502201.tif 000299
2020502201.tif 000300
2020502201.tif 000301
2020502201.tif 000302
2020502201.tif 000303
2020502201.tif 000304
2020502201.tif 000305
2020502201.tif 000306
2020502201.tif 000307
2020502201.tif 000308
［式中、
ＡＫ１及びＡＫ２は、抗体又は抗原結合性抗体断片であり、
ｎは、１〜５０、好ましくは１〜２０、より好ましくは２〜８、特別には２〜６の数字である。］
【請求項２８】
前記抗体又は前記抗原結合性抗体断片が細胞外がん標的分子に結合する、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物又は複合体。
【請求項２９】
前記抗体又は前記抗原結合性抗体断片が、標的細胞上のそれの細胞外標的分子に結合した後、その結合を介して標的細胞に取り込まれる、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物又は複合体。
【請求項３０】
前記抗体が、抗ＨＥＲ２抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体、又はこれらの抗原結合性抗体断片である、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物又は複合体。
【請求項３１】
前記抗ＴＷＥＡＫＲ抗体が、ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７からなる群から選択され、前記抗Ｂ７Ｈ３抗体が、ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７からなる群から選択され、前記抗ＥＧＦＲ抗体がセツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）であり、前記抗ＨＥＲ２抗体が、トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５からなる群から選択される、請求項３０に記載の化合物又は複合体。
【請求項３２】
前記抗体（ＡＫ、ＡＫ１、ＡＫ２、ＡＫ３）が、
（ｉ）配列番号２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＥＧＦＲ抗体であり、
（ｉｉ）配列番号１２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＨＥＲ２抗体であり、
（ｉｉｉ）配列番号２２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号２３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号２４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号２６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号２７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号２８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｉｖ）配列番号３２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号３３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号３４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号３６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号３７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号３８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖ）配列番号４２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号４３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号４４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号４６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号４７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号４８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖｉ）配列番号５２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号５３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号５４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号５６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号５７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号５８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖｉｉ）配列番号６２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号６３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号６４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号６６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号６７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号６８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖｉｉｉ）配列番号７２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号７３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号７４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号７６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号７７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号７８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＨＥＲ２抗体であり、
（ｉｘ）配列番号８２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号８３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号８４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号８６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号８７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号８８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＨＥＲ２抗体であり、
（ｘ）配列番号９２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号９３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号９４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号９６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号９７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号９８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体であり、
（ｘｉ）配列番号１０２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１０３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１０４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１０６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１０７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１０８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体であり、
（ｘｉｉ）配列番号１１２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１１３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１１４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１１６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１１７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１１８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｘｉｉｉ）配列番号１２２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１２３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１２４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１２６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１２７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１２８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｘｉｖ）配列番号１３２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１３３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１３４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１３６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１３７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１３８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｘｖ）配列番号１４２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１４３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１４４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１４６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１４７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１４８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
若しくは
（ｘｖｉ）配列番号１５２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１５３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１５４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１５６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１５７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１５８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
又は
これらの抗体の抗原結合性断片である、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物又は複合体。
【請求項３３】
前記抗体（ＡＫ、ＡＫ１、ＡＫ２、ＡＫ３）が、
（ｉ）配列番号１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＥＧＦＲ抗体であり、
（ｉｉ）配列番号１１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号１５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＨＥＲ２抗体であり、
（ｉｉｉ）配列番号２１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号２５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｉｖ）配列番号３１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号３５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖ）配列番号４１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号４５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖｉ）配列番号５１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号５５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖｉｉ）配列番号６１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号６５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖｉｉｉ）配列番号７１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号７５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＨＥＲ２抗体であり、
（ｉｘ）配列番号８１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号８５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＨＥＲ２抗体であり、
（ｘ）配列番号９１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号９５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体であり、
（ｘｉ）配列番号１０１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号１０５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体であり、
（ｘｉｉ）配列番号１１１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号１１５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｘｉｉｉ）配列番号１２１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号１２５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｘｉｖ）配列番号１３１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号１３５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｘｖ）配列番号１４１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号１４５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、若しくは
（ｘｖｉ）配列番号１５１によって示される重鎖の可変領域（ＶＨ）及び配列番号１５５によって示される軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、又は
これらの抗体の抗原結合性断片である、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物又は複合体。
【請求項３４】
抗体（ＡＫ、ＡＫ１、ＡＫ２、ＡＫ３）が、
（ｉ）配列番号９によって示される重鎖の領域及び配列番号１０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＥＧＦＲ抗体であり、
（ｉｉ）配列番号１９によって示される重鎖の領域及び配列番号２０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＨＥＲ２抗体であり、
（ｉｉｉ）配列番号２９によって示される重鎖の領域及び配列番号３０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｉｖ）配列番号３９によって示される重鎖の領域及び配列番号４０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖ）配列番号４９によって示される重鎖の領域及び配列番号５０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖｉ）配列番号５９によって示される重鎖の領域及び配列番号６０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖｉｉ）配列番号６９によって示される重鎖の領域及び配列番号７０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｖｉｉｉ）配列番号７９によって示される重鎖の領域及び配列番号８０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＨＥＲ２抗体であり、
（ｉｘ）配列番号８９によって示される重鎖の領域及びに配列番号９０相当する軽鎖の領域を含む抗ＨＥＲ２抗体であり、
（ｘ）配列番号９９によって示される重鎖の領域及び配列番号１００によって示される軽鎖の領域を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体であり、
（ｘｉ）配列番号１０９によって示される重鎖の領域及び配列番号１１０によって示される軽鎖の領域を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体であり、
（ｘｉｉ）配列番号１１９によって示される重鎖の領域及び配列番号１２０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｘｉｉｉ）配列番号１２９によって示される重鎖の領域及び配列番号１３０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｘｉｖ）配列番号１３９によって示される重鎖の領域及び配列番号１４０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、
（ｘｖ）配列番号１４９によって示される重鎖の領域及び配列番号１５０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、若しくは
（ｘｖｉ）配列番号１５９によって示される重鎖の領域及び配列番号１６０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、又は
これらの抗体の抗原結合性断片である、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物又は複合体。
【請求項３５】
不活性の無毒で薬学的に好適な賦形剤と組み合わせて前記請求項のうちの１以上に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項３６】
疾患の治療及び／又は予防方法で使用される前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項３７】
過剰増殖性障害及び／又は血管新生障害の治療方法で使用される前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項３８】
がん及び腫瘍の治療方法で使用される、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【請求項３９】
がん免疫療法のための１以上の治療アプローチと組み合わせた、又はがん免疫療法からの分子標的に向かう１以上の薬剤と組み合わせた、がん及び腫瘍の治療方法で使用される、前記請求項のうちの１以上に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
緒言及び最新技術
本発明は、細胞毒性薬、例えばキネシン紡錘体タンパク質阻害剤が腫瘍関連プロテアーゼによって選択的に開裂することで薬剤を放出する基に結合している新規なプロドラッグ、並びに疾患の治療及び／又は予防のためのこれらのプロドラッグ又は複合体の使用、並びに疾患、特には過剰増殖性及び／又は血管新生性障害、例えばがんの治療及び／又は予防のための医薬の製造におけるこれらプロドラッグの使用に関するものである。そのような治療は、単独療法として、又は他の医薬若しくは別の治療手段と組み合わせて行うことができる。
【背景技術】
【０００２】
がん細胞は非常の多くの場合、特定のプロテアーゼを正常細胞より高度に発現する。それが、有効成分放出の結果として、そのようなプロテアーゼによって脱離する基に薬剤が結合している、がん細胞に対する細胞毒性薬の選択性を高める手法につながった。
【０００３】
そのような腫瘍関連プロテアーゼはレグマインである。レグマインは、アスパラギニルエンドペプチダーゼであり（Ｓ．  Ｉｓｈｉｉ，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  １９９４，  ２４４，  ６０４；  Ｊ．  Ｍ．  Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  １９９７，  ２７２，  ８０９０）であり、細胞毒性小分子、例えば特にドキソルビシン及びエトポシド誘導体のプロドラッグの処理に利用されてきた（Ｗ．  Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ２００６，  ６６，  ９７０；  Ｌ．  Ｓｔｅｒｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  ２００９，  ２０，  ５００；Ｋ．  Ｍ．  Ｂａｊｊｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．  ＣｈｅｍＭｅｄＣｈｅｍ  ２０１１，  ６，  ５４）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｓ．  Ｉｓｈｉｉ，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  １９９４，  ２４４，  ６０４
【非特許文献２】Ｊ．  Ｍ．  Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  １９９７，  ２７２，  ８０９０
【非特許文献３】Ｗ．  Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ２００６，  ６６，  ９７０
【非特許文献４】Ｌ．  Ｓｔｅｒｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  ２００９，  ２０，  ５００
【非特許文献５】Ｋ．  Ｍ．  Ｂａｊｊｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．  ＣｈｅｍＭｅｄＣｈｅｍ  ２０１１，  ６，  ５４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ＵＳ２０１５−０３４３０８３Ａ１には、式Ｒ−Ｙ−Ｚ−Ａｓｎ−リンカー−Ｄのレグマイン開裂性ペプチド−有効成分複合体（リンカーはｐ−アミノベンジルカルバモイル又はｐ−アミノベンジルカーボネートであり、Ｒは各種化学基から選択される残基であり、Ｄは細胞毒性薬であり、Ａｓｎはアミノ酸であるアスパラギンであり、ＹはＡｌａ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ａｒｇ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｔｙｒ及びＰｈｅから選択されるアミノ酸であり、ＺはＡｌａ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ及びＰｒｏから選択されるアミノ酸であり、これらのアミノ酸は常に天然のＬ配置である。）が記載されている。
【０００６】
今日までに報告されている全てのレグマイン開裂性プロドラッグは、レグマイン基質としてオリゴペプチド配列を含む。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の目的は、細胞毒性薬の腫瘍選択性をさらに改善することにある。この問題を解決するため、本発明は、細胞毒性薬分子のプロドラッグを提供する。この文脈では、有効成分分子は、酵素レグマインによって開裂可能な基に結合しており、有効成分及びレグマイン開裂性基が、共有結合を介して直接、又は自壊性リンカーを介して連結されている。これらのプロドラッグは好ましくは、腫瘍細胞の受容体に結合した後、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で（好ましくはリソソームで）処理されるバインダーを含む。このバインダーは、両方の基（レグマイン開裂性基及びバインダー）が活性代謝物の形成のためには独立に処理しなければならないように、適宜にリンカーを介してレグマイン開裂性基で修飾された有効成分分子に結合していることができるか、又は当該バインダーが、適宜にリンカーを介して酵素レグマインによって開裂可能な基に結合していることができる（レグマイン開裂性基の開裂後に、有効成分がバインダー又はそれの誘導体から離れて存在するように）。好ましい有効成分分子は、キネシン紡錘体タンパク質阻害剤（ＫＳＰ阻害剤）である。腫瘍細胞上の受容体に結合した後に取り込まれ、細胞内で（好ましくはリソソームで）処理される好ましいバインダーは抗体である。特に好ましいものは、抗体及び有効成分がレグマイン開裂性基を有するリンカーを介して互いに連結されている抗体−有効成分複合体（ＡＤＣ類）である。さらに、好ましいものは、抗体がリンカーを介して抗体のプロドラッグに結合しており、有効成分の作用がレグマイン開裂性基によってマスクされているプロドラッグの抗体との複合体（ＡＰＤＣ類）である。
【０００８】
本発明に従って使用される有効成分に結合したレグマイン開裂性基は、還元されてアミノ酸であるアスパラギンとなる構造モチーフを有する。この還元により、レグマインによる遅延開裂の結果として、健常臓器のリソソーム中での安定性が高くなるが、高い抗腫瘍効果が損なわれることはない（下記の第Ｃ−１ｃ章参照）。レグマイン開裂性基としてトリペプチドを含む好適な参考例との代表的な比較によって示されているように（下記の第Ｃ−１ａ章参照）、リンカー中の酵素開裂部位としてただ一つのアミノ酸（アスパラギン）を有する本発明によるＡＤＣ及びＡＰＤＣは、驚くべきことに、リンカー中の従来のトリペプチド基質（３種類のアミノ酸）を有する類縁体とほとんど遜色ない高い抗腫瘍効果を有する（参考例Ｒ１及びＲ６）（第Ｃ−１ａ章参照）。従って、そのプロテアーゼ開裂性リンカー配列は、還元されてただ一つのアミノ酸単位（１個のアミノ酸）となり得る。アスパラギンではなくグルタミン又はロイシンなどのアミノ酸を有する非常に近縁の複合体についてでさえ（下記のモデル化合物Ｃ  ＲＭ−Ｃ参照）、酵素アッセイでレグマインによる開裂は全く示すことができなかった。同様に、ペイロード（ｐａｙｌｏａｄ）のプロドラッグ残基中にアスパラギン残基ではなくグルタミンを有する実施例１に関連するＡＤＣは、細胞毒性効果を全く示さなかった。リンカー中にアスパラギンに代えてロイシン残基を有する実施例６と類似のＡＤＣにも同じことが当てはまり；それらも、実施例６におけるＡＤＣとは対照的に、実質的に全く細胞毒性効果を示さない。オリゴペプチドリンカーは各種プロテアーゼによっても開裂され得るが、本発明によるＡＤＣは、レグマインなどの腫瘍関連のアスパラギン開裂性プロテアーゼによる開裂に高い優先性を示す。
【０００９】
本発明のプロドラッグは、下記一般式（Ｉａ）を有する。
【化１】
2020502201.tif 000003
【００１０】
式中、
Ｌａは、自壊性リンカーであり、
ｎは、０又は１であり；
Ｄは、−Ｄ１−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
Ｄ１は細胞毒性薬であり、
ＬＩＧは、腫瘍細胞の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂは、リンカーであり、
ｏ及びｐはそれぞれ独立に、０又は１であり、
Ｒは、ＬＩＧ−（Ｌｃ）ｅ−であり、
ＬＩＧは、腫瘍細胞上の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｃは、リンカーであり、
ｅは０又は１であり、
又は
Ｒは、Ｚ１−（Ｃ＝Ｏ）ｑ−であり、
ｑは０又は１であり、
Ｚ１は、Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ５−１０−アリール、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ３−１０−ヘテロアルキル、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール、Ｃ５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ１−１０−アルコキシ、Ｃ６−１０−アリールオキシ、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ、Ｃ５−１０−ヘテロアルコキシ、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリールオキシ−、Ｃ５−１０−複素環アルコキシ基［それらは−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）３−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（アルキル）２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）２又は−ＯＨによって同一に又は異なってモノ置換又は多置換されていても良い。］であり、
又は−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−１−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１若しくは−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１基であり、
ｘは０又は１であり、
ｖは、１〜２０の数字であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−アルキル、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、又は−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２である。
【００１１】
この文脈において、アルキルと定義される場合のＲ１は、好ましくはＣ１−１２−アルキルである。
【００１２】
好ましくは、バインダー（ＬＩＧ）は、抗体又はそれの抗原結合性断片である。その抗体は好ましくは、ヒト、ヒト化若しくはキメラモノクローナル抗体又はそれの抗原結合性断片、特別には抗ＴＷＥＡＫＲ抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体若しくは抗ＨＥＲ２抗体又はそれの抗原結合性断片である。特に好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７、抗ＥＧＦＲ−抗体セツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）及び抗ＨＥＲ２−抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５、又はこれらの抗原結合性断片である。
【００１３】
本発明によるプロドラッグは好ましくは、腫瘍細胞の受容体に結合することができ、受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーを含む。
【００１４】
ここで、好ましくは、二つの可能な実施形態がある。
【００１５】
バインダーは、レグマイン開裂性基の開裂後に、有効成分がバインダー又はそれの誘導体から離れて存在するように、任意にリンカーを介して、レグマイン酵素によって開裂可能な基に結合することができる。従って、実施形態Ａの化合物は好ましくは、下記一般式ＩＩＩ′を有する。
【化２】
2020502201.tif 000004
【００１６】
式中、ｎ、ｅ、ＬＩＧ、Ｌａ、Ｌｃ、及びＤ１は、一般式（Ｉａ）で提供の定義を有する。
【００１７】
この場合、一般式（Ｉａ）における−Ｄは−Ｄ１を表し、一般式（Ｉａ）における−ＲはＬＩＧ−（Ｌｃ）ｅ−を表す（実施形態Ａ）。
【００１８】
従って、本発明は好ましくは、
Ｌａが自壊性リンカーであり、
ｎが０又は１であり；
Ｄが−Ｄ１−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ｏ及びｐが０であり、
Ｄ１が細胞毒性薬であり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂがリンカーであり、
ＲがＬＩＧ−（Ｌｃ）ｅ−であり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞上の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｃがリンカーであり、
ｅが０又は１である、一般式（Ｉａ）の化合物に関するものである。
【００１９】
或いは、バインダーは、レグマイン開裂性基の開裂後、薬剤がバインダー又はそれの誘導体と一緒に存在しているように、任意にリンカーを介して、薬剤分子に結合していても良い。
【００２０】
この場合、一般式（Ｉａ）中の−Ｄは−Ｄ１−（Ｌｂ）ｏ−ＬＩＧを表し、一般式（Ｉａ）中のＲ−はＺ１−（Ｃ（＝Ｏ））ｑ−を表す（実施形態Ｂ）。
【００２１】
従って、実施形態Ｂの化合物は好ましくは、下記一般式（ＩＶ′）を有する。
【化３】
2020502201.tif 000005
【００２２】
式中、ｎ、ｏ、ＬＩＧ、Ｌａ、Ｌｂ及びＤ１は一般式（Ｉａ）で提供の定義を有し、ＲはＺ１−（Ｃ＝Ｏ）ｑ−であり、ｑは０又は１であり、Ｚ１はＣ１−１０−アルキル−、Ｃ５−１０−アリール−、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルキル−、Ｃ３−１０−ヘテロアルキル−、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール−、Ｃ５−１０−複素環アルキル−、ヘテロアリール−、Ｃ５−１０−ヘテロアリール−Ｃ１−６−アルキル−、Ｃ５−１０−ヘテロアリール−アルコキシ−、Ｃ１−１０−アルコキシ−、Ｃ６−１０−アリールオキシ−、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ−、Ｃ５−１０−ヘテロアルコキシ−、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリールオキシ−、Ｃ５−１０−複素環アルコキシ基［それらは、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）３−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（アルキル）２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）２又は−ＯＨによって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良い。］であり、
又は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−１−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１若しくは−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１基であり、
ｘは０又は１であり、
ｖは、１〜２０の数字であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−アルキル、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、又は−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２である。
【００２３】
従って、本発明は好ましくは、
Ｌａが自壊性リンカーであり、
ｎが０又は１であり；
Ｄが−Ｄ１−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ｏが０又は１であり、
ｐが１であり、
Ｄ１が細胞毒性薬であり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂがリンカーであり、
ＲがＺ１−（Ｃ＝Ｏ）ｑ−であり、
ｑが０又は１であり、
Ｚ１が、
Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ５−１０−アリール、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ３−１０−ヘテロアルキル、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール、Ｃ５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、Ｃ５−１０−ヘテロアリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ１−１０−アルコキシ、Ｃ６−１０−アリールオキシ、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ、Ｃ５−１０−ヘテロアルコキシ、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリールオキシ、Ｃ５−１０−複素環アルコキシ基［それらは、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）３−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（アルキル）２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）２又は−ＯＨによって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良い。］であり、
又は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−１−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１若しくは−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１基であり、
ｘが０又は１であり、
ｖが０〜２０の数字であり、
Ｒ１が、−Ｈ、−アルキル、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、又は−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２である、一般式（Ｉａ）の化合物に関するものである。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】非グリコシル化抗体のトランスグルタミナーゼ触媒結合部位特異的官能化の戦略を示す図である。
【図２】バインダー−薬物複合体に好ましい抗体の注釈付き配列を示す図である［示されているものは、ＩｇＧの重鎖及び軽鎖、並びにこれらの抗体のＶＨ及びＶＬ領域のタンパク質配列である。配列の下に、重要な領域について注釈を付けてある（ＩｇＧにおけるＶＨ及びＶＬ領域、並びにＣＤＲ領域（Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２、Ｈ−ＣＤＲ３、Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２、Ｌ−ＣＤＲ３））。］
【図３】バインダー−薬物複合体に好ましい抗体の配列及び標的タンパク質の配列の配列表である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
最初に、下記で、本発明に従って使用可能なレグマイン開裂性基、並びに自壊性リンカーを介して互いに連結されていても良い細胞毒性薬Ｄについて説明する。その次に、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で（好ましくはリソソームで）処理される、本発明によって好ましいバインダーＬＩＧについて説明する。本発明による化合物の各種要素は、制限なくあらゆる所望の組み合わせで用いることができる。特に、各場合で好ましい又は特に好ましいと記載されている薬物Ｄを、各場合で好ましい又は特に好ましいと記載されているバインダーＬＩＧと組み合わせて、適宜に各場合で好ましい又は特に好ましいと記載されているリンカーと組み合わせて用いることができる。
【００２６】
レグマイン開裂性基
本発明の一般式（Ｉａ）の化合物は、下記式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基を有する。
【化４】
2020502201.tif 000006
【００２７】
式中、
Ｌａは、自壊性リンカーであり、
ｎは、０又は１であり、
＃１は、細胞毒性薬（細胞毒性剤）への結合を表し、
Ｒは、ＬＩＧ−（Ｌｃ）ｅ−であり、
ＬＩＧは、腫瘍細胞の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｃは、リンカーであり、
ｅは０又は１であり、
又は
Ｒは、Ｚ１−（Ｃ＝Ｏ）ｑ−であり、
ｑは、０又は１であり、
Ｚ１は、
Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ５−１０−アリール、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ３−１０−ヘテロアルキル、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール、Ｃ５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、Ｃ５−１０−ヘテロアリール−Ｃ１−６−アルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ１−１０−アルコキシ、Ｃ６−１０−アリールオキシ、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ、Ｃ５−１０−ヘテロアルコキシ、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリールオキシ、Ｃ５−１０−複素環アルコキシ基．ｌそれらは、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）３−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（アルキル）２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）２又は−ＯＨによって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良い。］であり、
又は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−１−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１若しくは−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１基であり、
ｘは０又は１であり、
ｖは０〜２０の数字であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−アルキル、−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ、又は−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２である。
【００２８】
この文脈において、アルキルと定義される場合のＲ１は、好ましくはＣ１−１２−アルキルである。
【００２９】
ＲがＬＩＧ−（Ｌｃ）ｅ−である場合、式Ｉａ′のレグマイン開裂性基は、レグマイン開裂性リンカーとも称される（実施形態Ａ）。
【００３０】
ＲがＺ１−（Ｃ（＝Ｏ））ｑ−である場合、式Ｉａ′のレグマイン開裂性基は、レグマイン開裂性保護基とも称される（実施形態Ｂ）。
【００３１】
式Ｉａ′のレグマイン開裂性基がレグマイン開裂性保護基である場合、ｑは好ましくは１である。
【００３２】
Ｚ１は好ましくは、Ｃ１−１０−アルキル−、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルキル−、Ｃ５−１０−ヘテロアリール−Ｃ１−６−アルキル−、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ−又はＣ５−１０−ヘテロアリールアルコキシ基を表し、それらは、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）３−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（アルキル）２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）２又は−ＯＨによって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良い。
【００３３】
Ｚ１はより好ましくは、Ｃ１−３−アルキル−、Ｃ６−７−アリール−Ｃ１−６−アルキル−、Ｃ５−６−ヘテロアリール−Ｃ１−３−アルキル−、又はＣ６−７−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ基であり、それらは、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＯＨによって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良い。
【００３４】
自壊性リンカーＬａ
遊離薬物の効率的放出を確実に行うため、酵素的開裂部位と薬物との間に自壊性リンカー要素（Ｌａ）と呼ばれるものを組み込んでも良い（Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ２００８，  ８，  ６１８−６３７）。薬物は、各種機序によって放出され得るもので、例えば最初に求核基を酵素的に放出してから、次に電子カスケードを介した脱離によって（Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  １９９９，  ７，  １５９７；  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００２，  ４５，  ９３７；  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００２，  １０，  ７１）、又は相当するリンカー要素の環化によって（Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００３，  １１，  ２２７７；  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００７，  １５，  ４９７３；  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．，  ２００７，  １７，  ２２４１）、又はそれら二つの組み合わせによって（Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔｅｒ．  Ｅｄ．，  ２００５，  ４４，  ４３７８）放出される。そのようなリンカー要素の例を下記の図に示している。
【化５】
2020502201.tif 000007
【００３５】
本明細書において一般式（Ｉａ）及び（Ｉａ′）でＬａ下に挙げた自壊性リンカーは、例えば、下記の基のうちの一つを表す。
【化６】
2020502201.tif 000008
【００３６】
式中、＃１はカルボニル基への結合を表し、＃２はＤ１のヒドロキシル若しくはアミノ基への結合を表す。
【００３７】
細胞毒性薬
式Ｉａの本発明の化合物において、Ｄは、−Ｄ１−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐ基であり、
Ｄ１は、細胞毒性薬（細胞毒性剤）であり、
ＬＩＧは、腫瘍細胞の受容体への結合後に、好ましくは腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーを表し、
Ｌｂは、リンカーを表し、
ｏ及びｐは、独立に０又は１である。
【００３８】
使用される細胞毒性薬は、好ましくはマイトマイシン、ドキソルビシン、アミノプテリン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、９−アミノカンプトセシン、ｎ８−アセチルスペルミジン、１−（２−クロロエチル）−１，２−ジメタンスルホニルヒドラジド、タリソマイシン、シタラビン、エトポシド、カンプトセシン、タキソール、エスペラミシン、ポドフィロトキシン、アングイジン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、モルホリン−ドキソルビシン、ｎ−（５，５−ジアセトキシペンチル）ドキソルビシン、デュオカルマイシン、オーリスタチン、モノメチルオーリスタチン、ドラスタチン、チューブリシン、メイタンシノイド、クリプトフィシン、アマニチン、ピロロベンゾジアゼピン誘導体、インドリノベンゾジアゼピン、カリケアマイシン、ダウノルビシン、カンプトテシンＤＸ８９５１（エキサテカン）又はキネシン紡錘体タンパク質阻害剤（ＫＳＰ阻害剤）であり、その薬物は、一般式（Ｉａ）に従ってそれのヒドロキシル又はアミノ基を介してＬａ（ｎ＝１の場合）又はカルボニル基（ｎ＝０の場合）に結合している。これら薬物の相当する誘導体化は、公知の方法に基づくものであることができる（例えば、デュオカルマイシンに関してはＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，  １９９９，  １５０５、カンプトセシンに関してはＮａｔ．  Ｓｔｒｕｃｔ．  Ｂｉｏｌ．，  ２００２，  ９，  ３３７，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２０１０，  ５３（３），  １０４３、オーリスタチンに関してはＣｈｅｍＭｅｄＣｈｅｍ，．  ２０１１，  ６（１），  ５４、ドキソルビシンに関してはＭｏｌ．  Ｃａｎｃｅｒ．  Ｔｈｅｒ．，  ２００５，  ４，  ７５１、及びピロロベンゾジアゼピン誘導体（ＰＢＤ誘導体）に関してはＪ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ，  ２００８，  ２８３，  ９３１８を参照し；さらに、Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ  ２０１３，  ５６，  ７５６４及び緒言におけるさらなる参考文献、Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００１，  ４４，  １３４１、Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ２０１１，  ２６，  ６２９も参照する。）。
【００３９】
特に、Ａ．  Ｂｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ．  （Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ；  ２０１７，  １６，  ３１５）による総覧にまとめられているように、ＡＤＣペイロードとして既に確立されている薬剤クラスは、本明細書に記載のリンカー化学を介して抗体に連結されていることもできる。好ましくは、記載されているＡＤＣ中の開裂性リンカーは、本明細書に記載のリンカーによって置き換えることができる。
【００４０】
特に好ましいものは、効力に必須である遊離ヒドロキシル若しくはアミノ基を有する細胞毒性薬、特別には、効力に必須である遊離アミノ基を有するものである。そのような基へのレグマイン開裂性基のカップリングは、細胞毒性薬の効力をマスクすることができる。この薬物の群には、例えば、下記式を有するドキソルビシンなどがある。
【化７】
2020502201.tif 000009
【００４１】
ドキソルビシンの遊離アミノ基へのレグマイン開裂性基の結合によって、それの効力をマスクすることができる。
【００４２】
特別に好ましい細胞毒性薬（細胞毒性剤）は、例えば国際特許出願ＷＯ２０１５／０９６９８２に開示されているキネシン紡錘体タンパク質阻害剤である。
【００４３】
本発明において好ましい細胞毒性薬は、特別には、下記式（ＩＩ）のキネシン紡錘体タンパク質阻害剤並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩である。
【化８】
2020502201.tif 000010
【００４４】
式中、
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＮＨであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃである。
【００４５】
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、又は−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、−ＮＨＹ３、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）０−３−（ＣＨ２）０−３Ｚ′又は−ＣＨ（ＣＨ２Ｗ）Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）ＣＯＯＨ又は−（Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４）１−３ＣＯＯＨであり、
Ｗは、−Ｈ又は−ＯＨであり、
Ｙ４は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２によって置換されていても良い直鎖若しくは分岐のＣ１−６アルキル−であり、又は−ＮＨ２によって置換されていても良いアリール若しくはベンジルであり、
Ｒ２は、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ４−ＮＨＹ５又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｙ４は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−ＮＨ２によって置換されていても良い直鎖若しくは分岐のＣ１−６アルキル−であり、又は−ＮＨ２によって置換されていても良いアリール若しくはベンジルであり、
Ｙ５は、−Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ６−ＮＨ２であり、
Ｙ６は、直鎖若しくは分岐のＣ１−６−アルキルであり、
Ｒ３は、−ＭＯＤ、−Ｌ−＃１、又は置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基［それらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１−３−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良い。］であり、
ｎは、０、１又は２であり、
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨＣ（＝ＯＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ５は、−Ｈ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｆ、−ＳＨ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル、Ｃ２−１０−アルキニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル、ヒドロキシル、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ又はハロゲンであり、
Ｒ８は、直鎖若しくは分岐のＣ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル、Ｃ２−１０−アルキニル又はフルオロ−Ｃ２−１０−アルキニルであり、又はＣ４−１０−シクロアルキル、フルオロ−Ｃ４−１０−シクロアルキル又は−（ＣＨ２）０−２−（ＨＺ２）であり、
ＨＺ２は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される２個以下のヘテロ原子を有する４〜７員複素環であり、それは−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ２又は−Ｌ−＃１によって置換されていても良く、
Ｒ９は、−Ｈ、−Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ又は−ＣＨＦ２であり、
−Ｌ−＃１は、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧは、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂは、リンカーであり、
ｏ及びｐは独立に０又は１であり、
−ＭＯＤは、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３を表し、
Ｒ１０は、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は
【化９】
2020502201.tif 000011
【００４６】
であり、
ｎは、０又は１であり；
ｏは、０又は１であり、
Ｇ２は、直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは１〜１０個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって１回又は複数回中断されていても良く、当該直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｙは、−Ｈ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル又はＣ２−Ｃ１０−アルキニルであり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
Ｇ３は、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
−ＭＯＤは、少なくとも１個の−ＣＯＯＨ基、好ましくは２個の−ＣＯＯＨ基を有し、−ＭＯＤ中の１個のアミノ基が式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基によってアシル化されていても良い。
【００４７】
ここで、好ましいものは、
Ｒ３が、−Ｌ−＃１、又はＣ１−１０−アルキル、Ｃ６−１０−アリール又はＣ６−１０−アラルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール又はＣ５−１０−複素環アルキル基［これらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１−３−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良い。］であり、
ｎが、０、１又は２であり、
Ｚが、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨである化合物である。
【００４８】
好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎである、一般式（ＩＩ）の化合物である。
【００４９】
式ＩＩの化合物の遊離アミノ基へのレグマイン開裂性基の結合によって、それの効力をマスクすることができる。
【００５０】
本発明に従って使用されるこれらのキネシン紡錘体タンパク質阻害剤は、その効果に必須であるアミノ基を有する。このアミノ基をペプチド誘導体又はアスパラギン誘導体で修飾することで、キネシン紡錘体タンパク質に関する効果が遮断されることにより、細胞毒性効果の発達も阻害される。しかしながら、このペプチド残基がレグマインなどの腫瘍関連酵素によって放出することができる場合、腫瘍組織において制御された形で、その効果を再生することができる。
【００５１】
定義
「置換された」という用語は、指定の原子若しくは指定の基上の１以上の水素が、言及されている基からの選択によって置き換わっていることを意味するが、ただし、所定の状況下で、対象の原子の通常の価数を超えるものではない。置換基及び／又は可変要素の組み合わせが許容される。
【００５２】
「置換されていても良い」という用語は、置換基の数がゼロに等しいかゼロ以外であることができることを意味する。別段の断りがない限り、置換されていても良い基は、いずれか利用可能な炭素若しくは窒素若しくは硫黄原子で水素原子に代えて非水素置換基とすることで収容できるだけの数の適宜の置換基によって置換されていても良い。通常、適宜の置換基（存在する場合）の数は、１、２、３、４又は５、特別には１、２又は３であることができる。
【００５３】
本明細書で使用される場合、「モノ−又は多−」という表現は、例えば本発明の一般式の化合物の置換基の定義において「１、２、３、４又は５、好ましくは１、２、３又は４、より好ましくは１、２又は３、最も好ましくは１又は２」を意味する。
【００５４】
本発明による化合物における基が置換されている場合、その基は、別段の断りがない限り、モノ置換又は多置換されていることができる。本発明の保護の範囲内において、複数ある全ての基の定義は、互いに独立である。１個、２個若しくは３個の同一若しくは異なる置換基による置換が好ましい。１個の置換基による置換が特に好ましい。
【００５５】
アルキル
アルキルは、１から１０個の炭素原子（Ｃ１−Ｃ１０−アルキル）、通常は１から６（Ｃ１−Ｃ６−アルキル）、好ましくは１から４（Ｃ１−Ｃ４−アルキル）及びより好ましくは１から３個の炭素原子（Ｃ１−Ｃ３−アルキル）を有する直鎖若しくは分岐の飽和１価炭化水素基である。
【００５６】
好ましい例には、メチル−、エチル−、プロピル−、ブチル−、ペンチル−、ヘキシル−、イソプロピル−、イソブチル−、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル−、イソペンチル−、２−メチルブチル−、１−メチルブチル−、１−エチルプロピル−、１，２−ジメチルプロピル−、ネオペンチル−、１，１−ジメチルプロピル−、４−メチルペンチル−、３−メチルペンチル−、２−メチルペンチル−、１−メチルペンチル−、２−エチルブチル−、１−エチルブチル−、３，３−ジメチルブチル−、２，２−ジメチルブチル−、１，１−ジメチルブチル−、２，３−ジメチルブチル−、１，３−ジメチルブチル−、１，２−ジメチルブチル−などがある。
【００５７】
特に好ましいものは、メチル−、エチル−、プロピル−、イソプロピル−又はｔｅｒｔ−ブチル基である。
【００５８】
ヘテロアルキル
ヘテロアルキルは、１から１０個の炭素原子を有する直鎖及び／又は分岐の炭化水素鎖であって、基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−のうちの１以上によって１回又は複数回中断されていても良く、側鎖を含む前記炭化水素鎖（分岐炭化水素鎖）がある場合、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＮＨ２）−、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良い炭化水素鎖である。
【００５９】
この文脈で、Ｒｙは各場合で、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それは、次に、各場合で、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＮＨ２）−、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良い。
【００６０】
この文脈で、Ｒｘは−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−である。
【００６１】
アルケニル
アルケニルは、１個若しくは２個の二重結合及び２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の炭素原子（Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル）、特別には２若しくは３個の炭素原子（Ｃ２−Ｃ３−アルケニル）を有する直鎖若しくは分岐の１価炭化水素鎖であり、明らかなように、アルケニル基が複数の二重結合を含む場合、それらの二重結合は、互いに離れているか、互いに共役していることができる。アルケニル基は、例えば、エテニル（又はビニル）、プロパ−２−エン−１−イル（又は「アリル」）、プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−３−エニル、ブタ−２−エニル、ブタ−１−エニル、ペンタ−４−エニル、ペンタ−３−エニル、ペンタ−２−エニル、ペンタ−１−エニル、ヘキサ−５−エニル、ヘキサ−４−エニル、ヘキサ−３−エニル、ヘキサ−２−エニル、ヘキサ−１−エニル、プロパ−１−エン−２−イル（又は「イソプロペニル」）、２−メチルプロパ−２−エニル、１−メチルプロパ−２−エニル、２−メチルプロパ−１−エニル、１−メチルプロパ−１−エニル、３−メチルブタ−３−エニル、２−メチルブタ−３−エニル、１−メチルブタ−３−エニル、３−メチルブタ−２−エニル、２−メチルブタ−２−エニル、１−メチルブタ−２−エニル、３−メチルブタ−１−エニル、２−メチルブタ−１−エニル、１−メチルブタ−１−エニル、１，１−ジメチルプロパ−２−エニル、１−エチルプロパ−１−エニル、１−プロピルビニル、１−イソプロピルビニル、４−メチルペンタ−４−エニル、３−メチルペンタ−４−エニル、２−メチルペンタ−４−エニル、１−メチルペンタ−４−エニル、４−メチルペンタ−３−エニル、３−メチルペンタ−３−エニル、２−メチルペンタ−３−エニル、１−メチルペンタ−３−エニル、４−メチルペンタ−２−エニル、３−メチルペンタ−２−エニル、２−メチルペンタ−２−エニル、１−メチルペンタ−２−エニル、４−メチルペンタ−１−エニル、３−メチルペンタ−１−エニル、２−メチルペンタ−１−エニル、１−メチルペンタ−１−エニル、３−エチルブタ−３−エニル、２−エチルブタ−３−エニル、１−エチルブタ−３−エニル、３−エチルブタ−２−エニル、２−エチルブタ−２−エニル、１−エチルブタ−２−エニル、３−エチルブタ−１−エニル、２−エチルブタ−１−エニル、１−エチルブタ−１−エニル、２−プロピルプロパ−２−エニル、１−プロピルプロパ−２−エニル、２−イソプロピルプロパ−２−エニル、１−イソプロピルプロパ−２−エニル、２−プロピルプロパ−１−エニル、１−プロピルプロパ−１−エニル、２−イソプロピルプロパ−１−エニル、１−イソプロピルプロパ−１−エニル、３，３−ジメチルプロパ−１−エニル、１−（１，１−ジメチルエチル）エテニル、ブタ−１，３−ジエニル、ペンタ−１，４−ジエニル又はヘキサ−１−５−ジエニル基である。詳細には、その基はビニル又はアリルである。
【００６２】
アルキニル
アルキニルは１個の三重結合を有し、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の炭素原子（Ｃ２−Ｃ１０−アルキニル）、特別には２若しくは３個の炭素原子（Ｃ２−Ｃ３−アルキニル）を有する直鎖若しくは分岐の１価炭化水素鎖である。Ｃ２−Ｃ６−アルキニル基は、例えば、エチニル、プロパ−１−イニル、プロパ−２−イニル（又はプロパルギル）、ブタ−１−イニル、ブタ−２−イニル、ブタ−３−イニル、ペンタ−１−イニル、ペンタ−２−イニル、ペンタ−３−イニル、ペンタ−４−イニル、ヘキサ−１−イニル、ヘキサ−２−イニル、ヘキサ−３−イニル、ヘキサ−４−イニル、ヘキサ−５−イニル、１−メチルプロパ−２−イニル、２−メチルブタ−３−イニル、１−メチルブタ−３−イニル、１−メチルブタ−２−イニル、３−メチルブタ−１−イニル、１−エチルプロパ−２−イニル、３−メチルペンタ−４−イニル、２−メチルペンタ−４−イニル、１−メチルペンタ−４−イニル、２−メチルペンタ−３−イニル、１−メチルペンタ−３−イニル、４−メチルペンタ−２−イニル、１−メチルペンタ−２−イニル、４−メチルペンタ−１−イニル、３−メチルペンタ−１−イニル、２−エチルブタ−３−イニル、１−エチルブタ−３−イニル、１−エチルブタ−２−イニル、１−プロピルプロパ−２−イニル、１−イソプロピルプロパ−２−イニル、２，２−ジメチルブタ−３−イニル、１，１−ジメチルブタ−３−イニル、１，１−ジメチルブタ−２−イニル−又は３，３−ジメチルブタ−１−イニル基である。詳細には、アルキル基はエチニル、プロパ−１−イニル又はプロパ−２−イニルである。
【００６３】
シクロアルキル
シクロアルキルは、３〜１２個の炭素原子を有する飽和の１価単環式若しくは二環式ヒドロカルビル基（Ｃ３−Ｃ１２−シクロアルキル）である。
【００６４】
この文脈において、単環式ヒドロカルビル基は、通常は３〜１０個（Ｃ３−Ｃ１０−シクロアルキル）、好ましくは３〜８個（Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル）、より好ましくは３〜７個（Ｃ３−Ｃ７−シクロアルキル）の炭素原子を有する１価ヒドロカルビル基である。
【００６５】
単環式ヒドロカルビル基の好ましい例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルなどがある。
【００６６】
特に好ましいものは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルである。
【００６７】
この文脈において、二環式ヒドロカルビル基は、２個の直接隣接する原子を一緒に共有する二つの飽和環系の縮合を意味するものと理解されるべき、通常は３から１２個の炭素原子を有するヒドロカルビル基（Ｃ３−Ｃ１２−シクロアルキル）である。二環式ヒドロカルビル基の好ましい例には、ビシクロ［２．２．０］ヘキシル、ビシクロ［３．３．０］オクチル、ビシクロ［４．４．０］デシル、ビシクロ［５．４．０］ウンデシル、ビシクロ［３．２．０］ヘプチル、ビシクロ［４．２．０］オクチル、ビシクロ［５．２．０］ノニル、ビシクロ［６．２．０］デシル、ビシクロ［４．３．０］ノニル、ビシクロ［５．３．０］デシル、ビシクロ［６．３．０］ウンデシル及びビシクロ［５．４．０］ウンデシルなどがある。
【００６８】
複素環アルキル
複素環アルキルは、同一であるか異なっていることができる１個、２個、３個若しくは４個のヘテロ原子を有する非芳香族単環式若しくは二環式環系である。そのヘテロ原子は、窒素原子、酸素原子又は硫黄原子であることができる。
【００６９】
本発明による単環式環系は、３〜８個、好ましくは４〜７個、より好ましくは５個若しくは６個の環原子を有することができる。
【００７０】
３個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、アジリジニルなどがある。
【００７１】
４個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、アゼチジニル、オキセタニルなどがある。
【００７２】
５個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、ピロリニル、ジオキソラニル及びテトラヒドロフラニルなどがある。
【００７３】
６個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホニル、ジオキサニル、テトラヒドロピラニル及びチオモルホニルなどがある。
【００７４】
７個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、アゼパニル、オキセパニル、１，３−ジアゼパニル、１，４−ジアゼパニルなどがある。
【００７５】
８個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、オキソカニル、アゾカニルなどがある。
【００７６】
単環式複素環アルキルの中で、好ましいものは、Ｏ、Ｎ及びＳの群からの２個以下のヘテロ原子を有する４〜７員の飽和複素環基である。
【００７７】
特に好ましいものは、モルホニル、ピペリジニル、ピロリジニル及びテトラヒドロフラニルである。
【００７８】
同一であっても異なっていても良い１個、２個、３個若しくは４個のヘテロ原子を有する二環式環系は、本発明によれば、６〜１２個、好ましくは６〜１０個の環原子を有することができ、１個、２個、３個若しくは４個の炭素原子がＯ、Ｎ及びＳの群からの同一若しくは異なるヘテロ原子によって置き換わっていることができる。
【００７９】
好ましい例としては、アザビシクロ［３．３．０］オクチル、アザビシクロ［４．３．０］ノニル、ジアザビシクロ［４．３．０］ノニル、オキサザビシクロ［４．３．０］ノニル、チアザビシクロ［４．３．０］ノニル又はアザビシクロ［４．４．０］デシル、そして定義によるさらなる可能な組み合わせから誘導される基などがある。
【００８０】
特に好ましいものは、パーヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロリル、パーヒドロフロ［３，２−ｃ］ピリジニル、パーヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジニル、パーヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピロリル及び３，４−メチレンジオキシフェニルである。
【００８１】
複素環アルコキシ
複素環アルコキシは、分子の残りの部分に−Ｏ−基を介して結合した複素環アルキルである。
【００８２】
アルコキシ
アルコキシは、通常１〜６個（Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ）、好ましくは１〜４個（Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ）、より好ましくは１〜３個（Ｃ１−Ｃ３−アルコキシ）の炭素原子を有する式−Ｏ−アルキルの直鎖若しくは分岐の飽和アルキルエーテル基である。
【００８３】
好ましい例には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペンチルオキシ及びｎ−ヘキシルオキシなどがある。
【００８４】
アリール
アリールは、炭素原子からなる１価単環式若しくは二環式芳香族環系である。例としては、ナフチル及びフェニルがあり、好ましいものはフェニル又はフェニル基である。
【００８５】
Ｃ６−Ｃ１０−アラルキル又はアリールアルキル
Ｃ６−Ｃ１０−アラルキル又はアリールアルキルは、上記定義によるアリール基が結合している、１〜１０個の炭素原子を有する（Ｃ１−Ｃ１０−アルキル）直鎖若しくは分岐の飽和一価炭化水素基を意味すると理解される。これらは、例えば、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルキル又はベンジル基を含むものと理解される。
【００８６】
ヘテロアリール
ヘテロアリールは、５、６、８、９、１０、１１、１２、１３又は１４個の環原子（「５から１４員ヘテロアリール」基）、特別には５、６、９又は１０個の環原子を有し、少なくとも１個の環ヘテロ原子及び適宜に１個、２個若しくは３個のＮ、Ｏ及びＳの群からのさらなる環ヘテロ原子を含み、環炭素原子を介して又は適宜に（価数が許す場合）環窒素原子を介して結合している１価の単環式、二環式若しくは三環式芳香族環系である。
【００８７】
ヘテロアリール基は、５員ヘテロアリール基、例えば、チエニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル又はテトラゾリル；又は６員ヘテロアリール基、例えば、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル又はトリアジニル；又は三環式ヘテロアリール基、例えばカルバゾリル、アクリジニル若しくはフェナジニル；又は９員ヘテロアリール基、例えばベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、インダゾリル、インドリル、イソインドリル、インドリジニル若しくはプリニル；又は１０員ヘテロアリール基、例えばキノリニル、キナゾリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キノキサリニル又はプテリジニルであることができる。
【００８８】
概して、そして別段の断りがなければ、ヘテロアリール基は、全ての可能な異性体型、例えば互変異体及び分子の残りの部分への結合箇所に関しての位置異性体を含む。従って、例示的な非限定的例として、ピリジニルという用語は、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル及びピリジン−４−イルを包含し、又はチエニルという用語はチエン−２−イル及びチエン−３−イルを包含する。
【００８９】
Ｃ５−Ｃ１０−ヘテロアリール
本発明の文脈でのＣ５−１０−ヘテロアリールは、同一であっても異なっていても良い１個、２個、３個若しくは４個のヘテロ原子を有する単環式若しくは二環式芳香族環系である。あり得るヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｓ（＝Ｏ）及び／又はＳ（＝Ｏ）２である。結合価は、いずれの芳香族炭素原子又は窒素原子にあっても良い。
【００９０】
本発明による単環式ヘテロアリール基は、５又は６個の環原子を有する。好ましいものは、１個若しくは２個のヘテロ原子を有するヘテロアリール基である。特に好ましいのは、この場合、１個若しくは２個の窒素原子である。
【００９１】
５個の環原子を有するヘテロアリール基には、例えば、次の環：チエニル、チアゾリル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル及びチアジアゾリルなどがある。
【００９２】
６個の環原子を有するヘテロアリール基には、例えば、次の環：ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル及びトリアジニルなどがある。
【００９３】
本発明による二環式ヘテロアリール基は、９又は１０個の環原子を有する。
【００９４】
９個の環原子を有するヘテロアリール基には、例えば、次の環：フタリジル、チオフタリジル、インドリル、イソインドリル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、アゾシニル、インドリジニル、プリニル、インドリニルなどがある。
【００９５】
１０個の環原子を有するヘテロアリール基には、例えば、次の環：イソキノリニル、キノリニル、キノリジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、シンノリニル、フタラジニル、１，７−及び１，８−ナフチリジニル、プテリジニル、クロマニルなどがある。
【００９６】
ヘテロアリールアルキル
ヘテロアリールアルキルは、上記の定義によるヘテロアリール基が結合している、１〜１０個の炭素原子を有する（Ｃ１−Ｃ１０−アルキル）直鎖若しくは分岐の飽和一価ヒドロカルビル基を意味するものと理解される。これは、例えば、Ｃ５−１０−ヘテロアリール−Ｃ１−６−アルキル基を含むものと理解される。
【００９７】
アラルコキシ又はアリールアルコキシ
アラルコキシ又はアリールアルコキシは、上記の定義によるアリール基が結合している、１〜１０個の炭素原子を有する（Ｃ１−Ｃ１０−アルキル）直鎖若しくは分岐の飽和一価ヒドロカルビル基を意味するものと理解される。これは、例えばＣ６−１０−アリール−Ｃ１−６−アルコキシ基を含むものと理解される。
【００９８】
アリールオキシ
アリールオキシは、式アリール−Ｏ−のアリール基である。
【００９９】
好ましい例には、フェノキシ及びナフチルオキシなどがある。
【０１００】
ヘテロアルコキシ
ヘテロアルコキシは、１から１０個の炭素原子を有する直鎖及び／又は分岐のヒドロカルビル鎖であって、−Ｏ−を介して分子の残り部分に結合しており、さらに基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−の１以上によってさらに１回若しくは複数回中断されていても良く、側鎖が存在する場合にそれを含む炭化水素鎖（分岐炭化水素鎖）が−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＮＨ２）−、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良い炭化水素鎖である。
【０１０１】
本文脈において、Ｒｙは各場合で、−Ｈ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル又はＣ２−Ｃ１０−アルキニルであり、それらは次に、各場合で、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＮＨ２）−、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良い。
【０１０２】
この文脈において、Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルである。
【０１０３】
本発明の文脈におけるハロゲン又はハロゲン原子はフッ素（−Ｆ）、塩素（−Ｃｌ）、臭素（−Ｂｒ）又はヨウ素（−Ｉ）である。
【０１０４】
好ましいものは、フッ素（−Ｆ）、塩素（−Ｃｌ）及び臭素（−Ｂｒ）である。
【０１０５】
本発明によるキネシン紡錘体タンパク質阻害剤（細胞毒性剤）は好ましくは、下記式（ＩＩａ）を有するものであり、並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩である。
【化１０】
2020502201.tif 000012
【０１０６】
式中、
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＮＨであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃである。
【０１０７】
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、又は−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、−ＮＨＹ３、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）０−３−（ＣＨ２）０−３Ｚ′又は−ＣＨ（ＣＨ２Ｗ）Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）ＣＯＯＨ又は−（Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４）１−３ＣＯＯＨであり、
Ｗは、−Ｈ又は−ＯＨであり、
Ｙ４は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２によって置換されていても良い直鎖若しくは分岐のＣ１−６アルキルであり、又は−ＮＨ２によって置換されていても良いアリール又はベンジルであり、
Ｒ２は、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ４−ＮＨＹ５又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｙ４は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２によって置換されていても良い直鎖若しくは分岐のＣ１−６アルキルであり、又は−ＮＨ２によって置換されていても良いアリール若しくはベンジルであり、
Ｙ５は、−Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ６−ＮＨ２であり、
Ｙ６は、直鎖若しくは分岐のＣ１−６−アルキルであり、
Ｒ３は、−ＭＯＤ、−Ｌ−＃１、又は置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基［これらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１−３−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良い。］であり、
ｎは、０、１又は２であり、
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり、
Ｒ４は、式Ｉａ′のレグマイン開裂性基であり、
Ｒ５は、−Ｈ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、ハロゲン、−ＣＮ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｆ、−ＳＨ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル、Ｃ２−１０−アルキニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル、ヒドロキシル、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ又はハロゲンであり、
Ｒ８は、直鎖若しくは分岐のＣ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル、Ｃ２−１０−アルキニル又はフルオロ−Ｃ２−１０−アルキニルであり、又はＣ４−１０−シクロアルキル、フルオロ−Ｃ４−１０−シクロアルキル又は−（ＣＨ２）０−２−（ＨＺ２）であり、
ＨＺ２は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される２個以下のヘテロ原子を有する４〜７員複素環であり、それは−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ２又は−Ｌ−＃１によって置換されていても良く、
Ｒ９は、−Ｈ、−Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ又は−ＣＨＦ２であり、
−Ｌ−＃１は、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧは、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂは、リンカーであり、
ｏ及びｐは、独立に０又は１であり、
−ＭＯＤは、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３を表し、
Ｒ１０は、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は
【化１１】
2020502201.tif 000013
【０１０８】
であり、
ｎは、０又は１であり；
ｏは、０又は１であり、
Ｇ２は、直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは１〜１０個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏによって１回又は複数回中断されていても良く、当該直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｙは、−Ｈ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル又はＣ２−Ｃ１０−アルキニルであり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
Ｇ３は、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
−ＭＯＤは、少なくとも１個の−ＣＯＯＨ基、好ましくは２個の−ＣＯＯＨ基を有しており、−ＭＯＤ中の１個のアミノ基は、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基によってアシル化されていても良い。
【０１０９】
ここで好ましいものは、
Ｒ３が、−Ｌ−＃１又はＣ１−１０−アルキル、Ｃ６−１０−アリール又はＣ６−１０−アラルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール又はＣ５−１０−複素環アルキル基［これらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１−３−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良く、ｎ及びＺは上記で提供の定義を有する。］である化合物である。
【０１１０】
−（Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４）１−３−ＣＯＯＨ基は、１個の−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４−ＣＯＯＨ基が存在すること、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４−ＣＯＯＨにより、２個の−（Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４）基が互いに一緒になることができること、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４−ＣＯＯＨにより、３個の基が互いに一緒になることができることを意味する。
【０１１１】
特に好ましいものは、
Ｘ１が、Ｎであり、
Ｘ２が、Ｎであり、
Ｘ３が、Ｃであり、
又は
Ｘ１が、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
又は
Ｘ１が、ＮＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｃであり、
又は
Ｘ１が、Ｈであり、
Ｘ２が、Ｎであり、
Ｘ３が、Ｃである、一般式（ＩＩａ）の化合物である。
【０１１２】
特別に好ましいものは、
Ｘ１が、Ｎであり、
Ｘ２が、Ｎであり、
Ｘ３が、Ｃであり、
又は
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎである、一般式（ＩＩａ）の化合物である。
【０１１３】
非常に特に好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎである、一般式（ＩＩａ）の化合物である。
【０１１４】
好ましいものは、Ａが−Ｃ（＝Ｏ）−である、一般式（ＩＩａ）の化合物である。
【０１１５】
さらに好ましいものは、
Ｒ１が、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ、−Ｈ、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＮＨ２、−（ＣＨ２）１−３ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＺ″（ＣＨ２）１−３ＮＨ２及び−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＺ″ＣＨ２ＣＯＯＨであり、
Ｚ″が、−Ｈ又は−ＮＨ２である、一般式（ＩＩａ）の化合物である。
【０１１６】
一般式（ＩＩａ）において、Ｒ４が−Ｌ−＃１である場合、Ｒ１は好ましくは−ＭＯＤである。
【０１１７】
詳細には、一般式（ＩＩａ）において、Ｒ４は−Ｌ−＃１であり、Ｒ３が−ＭＯＤでない場合、Ｒ１は−ＭＯＤである。
【０１１８】
一般式（ＩＩａ）において、Ｒ２は好ましくは−Ｈである。
【０１１９】
一般式（ＩＩａ）において、Ｒ３は好ましくは−Ｌ−＃１若しくは−ＭＯＤであり、又はＣ１−１０−アルキル［それは、−ＯＨ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、−Ｓ−アルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、又は−ＮＨ２によって置換されていても良い。］である。
【０１２０】
ここで、アルキルは好ましくはＣ１−３アルキル−である。
【０１２１】
一般式（ＩＩａ）において、Ｒ５は好ましくは−Ｈ又は−Ｆである。
【０１２２】
一般式（ＩＩａ）において、Ｒ６及びＲ７は、好ましくは独立に−Ｈ、Ｃ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル、Ｃ２−１０−アルキニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル、ヒドロキシル又はハロゲンである。
【０１２３】
一般式（ＩＩａ）において、Ｒ８は好ましくは、分岐Ｃ１−５−アルキル基、特別には−Ｃ（ＣＨ３）２−（ＣＨ２）０−２−Ｒｙ基であり、Ｒｙは−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）２Ｈ、又は−ＮＨ２である。
【０１２４】
より好ましくは、Ｒ８は−Ｃ（ＣＨ３）２−（ＣＨ２）−Ｒｙ基であり、Ｒｙは−Ｈである。
【０１２５】
一般式（ＩＩａ）において、Ｒ９は好ましくは−Ｈ又は−Ｆである。
【０１２６】
一般式（ＩＩａ）において、−ＭＯＤは、好ましくは、基：ＱＯＣ−（ＣＨＸ）ｘ−ＡＭ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
ｘは、２〜６の数字であり、
Ｑは、−ＯＨ又は−ＮＨ２であり、
Ｗは、−（ＣＨＸ）ｘ−基において、独立に−Ｈ、−ＮＨ２、ＣＯＯＨ又は−ＣＯＮＨ２であり、
ＡＭは、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−である。
【０１２７】
一般式（ＩＩａ）において、−ＭＯＤは、より好ましくは、基：ＱＯＣ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＯＱ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、ＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、及びＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−（ＣＨ２）４−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｑは、−ＯＨ又は−ＮＨ２である。
【０１２８】
好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ１が、−Ｌ−＃１、−Ｈ、又は−ＭＯＤであり、
−Ｌ−＃１が、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧは、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
ｏ及びｐが、独立に０又は１であり、
−ＭＯＤが、基：−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキル−であり、
ｎが、０又は１であり、
Ｇ１が、−ＮＨ−Ｃ−（＝Ｏ）−又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏが、０又は１であり、
Ｇ２が、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、当該直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙが、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−であり、
Ｇ３が、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ２が、−Ｈであり、
Ｒ３が、−ＭＯＤ、−Ｌ−＃１、又は置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基［これらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ−基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル−基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良い。］であり、
ｎが、０、１又は２であり、
Ｚが、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり、
Ｒ４が、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基であり、
Ｒ５が、−Ｈであり、
Ｒ６及びＲ７がフッ素であり、
Ｒ８が、ｔ−ブチルであり、
Ｒ９が、−Ｈであり、
−Ｌ−＃１が、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
ｏ及びｐが、独立に０又は１である、一般式（ＩＩａ）の化合物並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩である。
【０１２９】
ここで、特に好ましいものは、Ｃ１−３−アルキルである。
【０１３０】
さらに、好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ１が、−Ｌ−＃１、−Ｈ、又は−ＭＯＤであり、
−Ｌ−＃１が、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
ｏ及びｐが、独立に０又は１であり、
−ＭＯＤが、基：−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキル−であり、
ｎが０であり、
Ｇ１が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏが、１であり、
Ｇ２が、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲｙ−又は−Ｃ（＝Ｏ）−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、当該直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨによってモノ置換又は多置換されていても良く、
Ｒｙが、−Ｈ又はＣ１−Ｃ１０−アルキル−であり、それは、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２によって置換されていても良く、
Ｇ３が、−ＣＯＯＨであり、
Ｒ２が、−Ｈであり、
Ｒ３が、−Ｌ−＃１であり、
Ｒ４が、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基であり、
Ｒ５が、−Ｈであり、
Ｒ６及びＲ７がフッ素であり、
Ｒ８が、ｔ−ブチルであり、
Ｒ９が、−Ｈであり、
−Ｌ−＃１が、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐであり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
ｏ及びｐが、独立に０又は１である、一般式（ＩＩａ）の化合物並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩である。
【０１３１】
やはり好ましいものは、下記一般式（ＩＩａ′）の化合物並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩である。
【化１２】
2020502201.tif 000014
【０１３２】
式中、
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＮＨであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃである。
【０１３３】
Ａは、基：＊−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）ｘ−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−＊＊であり、
ｘは、１又は２であり、
＊は、薬剤分子への結合であり、
＊＊は、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基への結合であり、
Ｒ１は、−ＭＯＤであり、
−ＭＯＤは、基：−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３であり、
Ｒ１０は、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキル−であり、
ｎは、０であり、
Ｇ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏは、１であり、
Ｇ２は、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、当該直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙは、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−であり、
Ｇ３は、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ２は、−Ｈであり、
Ｒ３は、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基であり、
Ｒ４は、−Ｈであり、
Ｒ５は、−Ｈ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、ハロゲン、−ＣＮ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｆ、−ＳＨ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル−、Ｃ２−１０−アルキニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル−、ヒドロキシル−、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ又はハロゲンであり、
Ｒ８は、直鎖若しくは分岐のＣ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル−、Ｃ２−１０−アルキニル−又はフルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル−であり、又はＣ４−１０−シクロアルキル−又はフルオロ−Ｃ４−１０−シクロアルキル−であり、
Ｒ９は、−Ｈ、−Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ又は−ＣＨＦ２である。
【０１３４】
これらの中で、特に好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
Ａが、基：＊−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）ｘ−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−＊＊であり、
ｘが、１又は２であり、
＊が、薬剤分子への結合であり、
＊＊が、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基への結合であり、
Ｒ１が、−ＭＯＤであり、
−ＭＯＤが、基：−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキル−であり、
ｎが、０であり、
Ｇ１が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏが、１であり、
Ｇ２が、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、当該直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙが、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−であり、
Ｇ３が、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ２が、−Ｈであり、
Ｒ３が、式（Ｉａ）のレグマイン開裂性基であり、
Ｒ４が、−Ｈであり、
Ｒ５が、−Ｈであり、
Ｒ６及びＲ７がフッ素であり、
Ｒ８が、ｔ−ブチルであり、
Ｒ９が、−Ｈである、一般式（ＩＩａ′）の化合物並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩である。
【０１３５】
さらに、好ましいものは、下記一般式（ＩＩａ″）の化合物並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩である。
【化１３】
2020502201.tif 000015
【０１３６】
式中、
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｎであり、
又は
Ｘ１は、ＮＨであり、
Ｘ２は、Ｃであり、
Ｘ３は、Ｃであり、
又は
Ｘ１は、ＣＨであり、
Ｘ２は、Ｎであり、
Ｘ３は、Ｃである。
【０１３７】
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）、−Ｓ（＝Ｏ）２−、又は−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−であり、
Ｒ１は、基：＊−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−ＮＨ−＊＊であり、
＊は、薬剤分子（細胞毒性剤）への結合部位であり、
＊＊は、式Ｉａ′のレグマイン開裂性基への結合であり、
Ｇ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏは、１であり、
Ｇ２は、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、当該直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙは、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−であり、
Ｒ２は、−Ｈであり、
Ｒ３は、置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基［これらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ−基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル−基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１−３−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良い。］であり、
ｎは、０、１又は２であり、
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ４は、−Ｈであり、
Ｒ５は、−Ｈ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、ハロゲン、−ＣＮ、ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｆ、−ＳＨ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚは、−Ｈ、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２は独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３は、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′は、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル−、Ｃ２−１０−アルキニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル−、ヒドロキシル−、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ又はハロゲンであり、
Ｒ８は、直鎖若しくは分岐のＣ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル−、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル−、Ｃ２−１０−アルキニル−又はフルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル−であり、又はＣ４−１０−シクロアルキル−又はフルオロ−Ｃ４−１０−シクロアルキル−であり、
Ｒ９は、−Ｈ、−Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ又は−ＣＨＦ２である。
【０１３８】
これらの中で、特に好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ１が、基：＊−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−ＮＨ−＊＊であり、
＊が、薬剤分子（細胞毒性剤）への結合部位であり、
＊＊が、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基への結合であり、
Ｇ１が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｏが、１であり、
Ｇ２が、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、当該直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって同一に若しくは異なってモノ置換若しくは多置換されていても良く、
Ｒｙが、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−又はＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−又はフェニル−であり、
Ｒ２が、−Ｈであり、
Ｒ３が、−ＣＨ２−ＯＨであり、
Ｒ４が、−Ｈであり、
Ｒ５が、−Ｈであり、
Ｒ６及びＲ７がフッ素であり、
Ｒ８が、ｔ−ブチルであり、
Ｒ９が、−Ｈである、一般式（ＩＩ″）の化合物並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩である。
【０１３９】
さらに、好ましいものは、
Ｒ１が、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＣＯＯＨ、ＱＯＣ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＯＱ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−；ＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−又はＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−（ＣＨ２）４−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ２が、−Ｈであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｑが、−ＯＨ又は−ＮＨ２であり、
Ｒ３が、−（ＣＨ２）ＯＨ、−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２ＣＨ−（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３、フェニル基［１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のアミノ基、１〜３個のアルキル基又は１〜３個のハロアルキル基によって置換されていても良い］、ＨＯＯＣ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−；ＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−；ＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−（ＣＨ２）４−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−Ｓｘ−（ＣＨ２）０−４−ＣＨＹ５−ＣＯＯＨであり、
ｘが、０又は１であり、
Ｙ５が、−Ｈ又は−ＮＨＹ６であり、
Ｙ６が、−Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３又は−Ｌ−＃１であり、
Ｒ５が、−Ｈであり、
Ｒ６及びＲ７が独立に−Ｈ、Ｃ１−３−アルキル又はハロゲンであり、
Ｒ８が、Ｃ１−４−アルキルであり、
Ｒ９が、−Ｈである、一般式（ＩＩａ）の化合物である。
【０１４０】
ここで、特別に好ましいものは、
Ｒ６及びＲ７が独立に水素又はフッ素であり、
Ｒ８が、ｔｅｒｔ−ブチルである化合物である。
【０１４１】
さらに、好ましいものは、
Ｒ１が、−Ｈ、−ＣＯＯＨ、ＱＯＣ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＯＱ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、ＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−又はＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−（ＣＨ２）４−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ２が、−Ｈであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ３が、−（ＣＨ２）ＯＨ、−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２ＣＨ（ＣＯＯＨ）ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３、ＨＯＯＣ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、ＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、ＨＯＯＣ−ＣＨ（ＮＨ２）−（ＣＨ２）４−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｓｘ−（ＣＨ２）０−４−ＣＨＹ５−ＣＯＯＨ又はフェニル基［１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のアミノ基、１〜３個のアルキル基又は１〜３個のハロアルキル基によって置換されていても良い。］であり、
ｘが、０又は１であり、
Ｙ５が、−Ｈ又は−ＮＨＹ６であり、
Ｙ６が、−Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３又は−Ｌ−＃１であり、
Ｒ５が、−Ｈであり、
Ｒ６及びＲ７が独立に−Ｈ、Ｃ１−３−アルキル又はハロゲンであり、
Ｒ８が、Ｃ１−４−アルキルであり、
Ｒ９が、−Ｈであり、
置換基Ｒ１及びＲ３のうちの一つが−Ｌ−＃１である化合物である。
【０１４２】
ここで、特別に好ましいものは、
Ｒ６及びＲ７が−Ｆであり、
Ｒ８が、ｔｅｒｔ−ブチルである化合物である。
【０１４３】
さらに、好ましいものは、下記一般式（ＩＩｂ）の化合物である。
【化１４】
2020502201.tif 000016
【０１４４】
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、一般式（ＩＩａ）で提供された定義を有し、
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｂは、単結合、−Ｏ−ＣＨ２−又は−ＣＨ２−Ｏ−であり、
Ｒ２０は、−ＮＨ２、−Ｆ、−ＣＦ３、又は−ＣＨ３であり、
ｎは、０、１又は２である。
【０１４５】
ここで好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎである、一般式（ＩＩｂ）の化合物である。
【０１４６】
やはり好ましいものは、下記一般式（ＩＩｃ）の化合物である。
【化１５】
2020502201.tif 000017
【０１４７】
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３Ａ、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、一般式（ＩＩａ）で提供された定義を有する。
【０１４８】
ここで好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ３が、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ又は−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３である、一般式（ＩＩｃ）の化合物である。
【０１４９】
さらにやはり好ましいものは、一般式（ＩＩｄ）の化合物である。
【化１６】
2020502201.tif 000018
【０１５０】
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ａ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、一般式（ＩＩａ）で提供された定義を有する。
【０１５１】
ここで好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ３が、−ＣＨ２−Ｓｘ−（ＣＨ２）０−４−ＣＨＹ５−ＣＯＯＨであり、
ｘが０又は１であり、
Ｙ５が、−Ｈ又は−ＮＨＹ６であり、
Ｙ６が、−Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３である、一般式（ＩＩｄ）の化合物である。
【０１５２】
さらに、好ましいものは、
・Ｚが、−Ｃｌ又は−Ｂｒであり；
・Ｒ１が、−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚが、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２であり、
Ｙ１が、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）０−３−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり；
Ｙ２が、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）０−３−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり；
・Ｙ１が、−Ｈであり、
Ｙ２が、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）３−ＣＨ２ＣＨ２Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり；
・Ｙ１が、−Ｈであり、
Ｙ２が、−ＣＨ２ＣＨ２Ｚ′であり、
Ｚ′が、−（Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨＹ４）２−ＣＯＯＨであり、
Ｙ４が、一般式（ＩＩａ）で提供された定義を有し；
・Ｙ１が、−Ｈであり、
Ｙ２が、−ＣＨ２ＣＨ２Ｚ′であり、
Ｚ′が、−（Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＣＨＹ４）２−ＣＯＯＨであり、
Ｙ４が、ｉ−プロピル又は−（ＣＨ２）３−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２であり；
・Ｙ１が、−Ｈであり、
Ｙ２が、−ＣＨ２ＣＨ２Ｚ′であり、
Ｚ′が、−（Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＣＨＹ４）２−ＣＯＯＨであり、
Ｙ４が、−ＣＨ３又は−（ＣＨ２）３−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２であり；
・Ｙ４が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２によって置換されていても良い直鎖若しくは分岐のＣ１−６アルキルであり；
・Ｙ４が、ｉ−プロピル又は−ＣＨ３であり；
・Ｙ１が、−Ｈであり、
Ｙ２が、−ＣＨ２ＣＨ２Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＣＨＹ４−ＣＯＯＨであり、
Ｙ４が、−ＮＨ２置換されていても良いアリール又はベンジルであり；
・Ｙ４が、アミノベンジルであり；
・Ｒ２が、−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚが、−ＳＹ３であり、
Ｙ３が上記で提供の定義を有し；
・Ｒ４が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ４−ＮＨＹ５であり、
Ｙ４が上記で提供の定義を有し、
Ｙ５が、−Ｈであり；
・Ｒ４が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ４−ＮＨＹ５であり、
Ｙ５が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ６−ＮＨ２であり、
Ｙ４及びＹ６が上記で提供の定義を有し；
・Ｙ４が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２によって置換されていても良い直鎖若しくは分岐のＣ１−６アルキルである、一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｄ）の化合物である。
【０１５３】
さらに、好ましいものは、Ｒ１、Ｒ２又はＲ３が−ＭＯＤである、一般式（ＩＩａ）の化合物である。
【０１５４】
特に好ましいものは、
Ｒ３が−ＭＯＤであり、Ｒ１が−Ｌ−＃１であり、
−ＭＯＤが、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり；
Ｇ１が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は
【化１７】
2020502201.tif 000019
【０１５５】
であり、
ｎが、０又は１であり、
ｏが、０又は１であり、
Ｇ２が、直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは１〜２０個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙ、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一に又は異なって、１回又は複数回中断されていても良く、
前記直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｙが、−Ｈ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル又はＣ２−Ｃ１０−アルキニルであり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘが−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
Ｇ３が、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
前記−ＭＯＤ基が好ましくは、少なくとも１個の−ＣＯＯＨ基を有し、又は好ましくは２個の−ＣＯＯＨ基を有しており、−ＭＯＤ中の１個のアミノ基が、式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基によってアシル化されていても良い化合物である。
【０１５６】
より好ましくは、基−ＭＯＤは、例えばベタイン基において、少なくとも１個の−ＣＯＯＨ基を有する。
【０１５７】
好ましくは、この−ＣＯＯＨ基は、末端位置にある。
【０１５８】
さらに、より好ましくは、−ＭＯＤ基は、基：−ＣＨ２−Ｓｘ−（ＣＨ２）０−４−ＣＨＹ５−ＣＯＯＨであり、
ｘは０又は１であり、
Ｙ５は、−Ｈ又は−ＮＨＹ６であり、
Ｙ６は、−Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３である。
【０１５９】
さらに、
Ｘ１が、Ｎであり、
Ｘ２が、Ｎであり、
Ｘ３が、Ｃであり、
又は
Ｘ１が、Ｎであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
又は
Ｘ１が、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
又は
Ｘ１が、ＮＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｃであり、
又は
Ｘ１が、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２が、Ｎであり、
Ｘ３が、Ｃであり、
Ｒ１が、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚが、−Ｈ、−ＮＨＹ３、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）０−３−（ＣＨ２）０−３Ｚ′又は−ＣＨ（ＣＨ２Ｗ）Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＯＯＨ又は−（Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４）１−３ＣＯＯＨであり、
Ｗが、−Ｈ又は−ＯＨであり、
Ｙ４が、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−ＮＨ２によって置換されていても良い直鎖若しくは分岐のＣ１−６アルキルであり、又は−ＮＨ２によって置換されていても良いアリール又はベンジルであり、
Ｒ２が、−Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ４−ＮＨＹ５又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚが、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり；
Ｙ４が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２によって置換されていても良い直鎖若しくは分岐のＣ１−６アルキルであり、又は−ＮＨ２によって置換されていても良いアリール又はベンジルであり、
Ｙ５が、−Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ６−ＮＨ２であり、
Ｙ６が、直鎖若しくは分岐のＣ１−６−アルキルであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−又は−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−であり、
Ｒ３が、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ、又はアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基［これらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個の−ＮＨ（（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１−２０Ｈ）−基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ−基によって置換されていても良い。］であり、
Ｚが、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ５が、−Ｈ、−ＭＯＤ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｆ、−ＳＨ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚが、−Ｈ、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり、
Ｒ６及びＲ７が独立に、−Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル、Ｃ２−１０−アルキニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルキニル、ヒドロキシル、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ又はハロゲンであり、
Ｒ８が、直鎖若しくは分岐のＣ１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−１０−アルケニル、Ｃ２−１０−アルキニル若しくはフルオロ−Ｃ２−１０−アルキニルであり、又はＣ４−１０−シクロアルキル若しくはフルオロ−Ｃ４−１０−シクロアルキルであり、
Ｒ９が、−Ｈ、−Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ又は−ＣＨＦ２であり、
−ＭＯＤが、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｇ３基であり、
Ｒ１０が、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は
【化１８】
2020502201.tif 000020
【０１６０】
であり、
ｎが、０又は１であり、
ｏが、０又は１であり、
Ｇ２が、直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは１〜１０個の炭素原子を有しており、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−によって１回又は複数回中断されていても良く、当該直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖が、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｙが、−Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−であり、又は、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２−、−ＣＯＯＨ−、−ＯＨ−、−ＮＨ２−、スルホンアミド−、スルホン−、スルホキシド−又はスルホン酸−置換されていても良いフェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル又はＣ２−Ｃ１０−アルキニルであり、
Ｒｘが、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
Ｇ３が、−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
−ＭＯＤ基が好ましくは、少なくとも１個の−ＣＯＯＨ基を有し、
Ｒ１及びＲ３が両方とも−Ｌ−＃１であることはない、一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｄ）の化合物並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩である。
【０１６１】
ここで、特に好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎである、一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｄ）の化合物である。
【０１６２】
ここで、さらに特に好ましいものは、
Ｒ３が、Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ６−１０−アリール、Ｃ６−１０−アラルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール又はＣ５−１０−複素環アルキル基［これらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個の−ＮＨ（（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１−２０Ｈ）基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良い。］であり、
Ｚが、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨである、一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｄ）の化合物である。
【０１６３】
一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｄ）のさらに好ましい化合物は、
Ｘ１が、Ｎであり、
Ｘ２が、Ｎであり、
Ｘ３が、Ｃであり、
又は
Ｘ１が、Ｎであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
又は
Ｘ１が、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎであり、
又は
Ｘ１が、ＮＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｃであり、
又は
Ｘ１が、ＣＨ又はＣＦであり、
Ｘ２が、Ｎであり、
Ｘ３が、Ｃであり、
Ｒ１が、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚが、−Ｈ、−ＮＨＹ３、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）０−３−（ＣＨ２）０−３Ｚ′又は−ＣＨ（ＣＨ２Ｗ）Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＮＨ２）−ＣＯＯＨ又は−（Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ４）１−３ＣＯＯＨであり、
Ｗが、−Ｈ又は−ＯＨであり、
Ｙ４が、直鎖若しくは分岐の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２−置換されていても良いＣ１−６アルキル又は−ＮＨ２−置換されていても良いアリール若しくはベンジルであり、
Ｒ２が、−Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ４−ＮＨＹ５又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚが、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｙ４が、直鎖若しくは分岐の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２−置換されていても良いＣ１−６アルキル又は−ＮＨ２−置換されていても良いアリール若しくはベンジルであり、
Ｙ５が、−Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ６−ＮＨ２であり、
Ｙ６が、直鎖若しくは分岐のＣ１−６−アルキルであり、
Ａが、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−又は−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−であり、
Ｒ３が、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤ又はアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基［これらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個の−ＮＨ（（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１−２０Ｈ）−基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ−基によって置換されていても良い。］であり、
Ｚが、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ５が、−Ｈ、−ＭＯＤ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｆ、ＳＨ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚであり、
Ｚが、−Ｈ、−ＯＹ３、−ＳＹ３、ハロゲン、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ６及びＲ７が独立に、−Ｈ又はハロゲンであり、
Ｒ８が、直鎖若しくは分岐のＣ１−１０−アルキル又はフルオロ−Ｃ１−１０−アルキルであり、
Ｒ９が、−Ｈ、−Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２Ｆ又は−ＣＨＦ２であり、
−Ｌ−＃１が、−（Ｌｂ）ｏ−（ＬＩＧ）ｐ基であり、
ＬＩＧが、腫瘍細胞の受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ、細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーであり、
Ｌｂが、リンカーであり、
ｏ及びｐがそれぞれ独立に０又は１であり、
−ＭＯＤが、−ＣＨ２−Ｓｘ−（ＣＨ２）０−４−ＣＨＹ５−ＣＯＯＨであり、
ｘが、０又は１であり、
Ｙ５が、−Ｈ又は−ＮＨＹ６であり、
Ｙ６が、−Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３であり、
Ｒ１及びＲ３が両方とも−Ｌ−＃１であることはないもの並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩である。
【０１６４】
ここで好ましいものは、
Ｘ１が、ＣＨであり、
Ｘ２が、Ｃであり、
Ｘ３が、Ｎである、一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｄ）の化合物である。
【０１６５】
ここで、さらに好ましいものは、
Ｒ３が、Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ６−１０−アリール又はＣ６−１０−アラルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール又はＣ５−１０−複素環アルキル基［これらは、１〜３個のＯＨ基、１〜３個のハロゲン原子、１〜３個のモノ、ジ若しくはトリハロゲン化されたアルキル基、１〜３個の−Ｏ−アルキル基、１〜３個の−ＳＨ基、１〜３個の−Ｓ−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１〜３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル基、１〜３個の−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル基、１−３−ＮＨ−アルキル基、１〜３個の−Ｎ（アルキル）２基、１〜３個のＮＨ２基、又は１〜３個の−（ＣＨ２）０−３Ｚ基によって置換されていても良い。］であり、
Ｚが、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ３、−ＳＹ３、−ＮＨＹ３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ１Ｙ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ３であり、
Ｙ１及びＹ２が独立に、−Ｈ、−ＮＨ２、又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｙ３が、−Ｈ、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３）Ｚ′、−（ＣＨ２）０−３−ＣＨ（ＮＨ２）Ｚ′又は−（ＣＨ２）０−３Ｚ′であり、
Ｚ′が、−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）３Ｈ、−ＮＨ２又は−ＣＯＯＨである、一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）及び（ＩＩｄ）の化合物である。
【０１６６】
「アルキル」という用語が別の意味で定義されていない場合、アルキルは好ましくはＣ１−Ｃ１０−アルキルである。
【０１６７】
「ハロゲン」という用語が別の意味で定義されていない場合、ハロゲンはフッ素（−Ｆ）、塩素（−Ｃｌ）及び臭素（−Ｂｒ）である。
【０１６８】
特に好ましいものは、下記一般式（Ｖ）、（ＶＩ）及び（ＶＩＩ）の化合物（Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、一般式（ＩＩａ）で提供の定義を有する。）である。
【化１９】
2020502201.tif 000021
2020502201.tif 000022
【０１６９】
特に好ましいものは、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ５が−Ｈであり、Ｒ４が一般式（ＩＩａ）で提供の定義を有する、一般式（Ｖ）、（ＶＩ）及び（ＶＩＩ）の化合物である。
【０１７０】
ここで、特別に好ましいものは、一般式（ＶＩ）の化合物である。
【０１７１】
腫瘍細胞の受容体に結合するバインダー
最も広い意味で、「バインダー」という用語は、バインダー−薬物複合体によって対処されるある種の標的細胞群に存在する標的分子に結合する分子を意味すると考えられる。バインダーという用語は、それの最も広い意味で理解されるべきものであり、例えば、レクチン類、ある種の糖鎖に結合する能力を有するタンパク質及びリン脂質結合タンパク質も含む。そのようなバインダーには、例えば、高分子量タンパク質（結合タンパク質）、ポリペプチド累類又はペプチド類（結合ペプチド）、非ペプチド性（例えば、Ｋｅｅｆｅ  ＡＤ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．  Ｒｅｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  ２０１０；９：５３７−５５０に総覧のあるアプタマー（ＵＳ５，２７０，１６３））、又はビタミン類）及び他の全ての細胞結合性の分子若しくは物質などがある。結合タンパク質は、例えば、抗体及び抗体断片又は抗体模倣体、例えばアフィボディ類、アドネクチン類、アンチカリン類、ＤＡＲＰｉｎ類、アビマー類、ナノボディ類である（Ｇｅｂａｕｅｒ  Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  ２００９；１３：２４５−２５５；Ｎｕｔｔａｌｌ  Ｓ．Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２００８；８：６０８−６１７による総覧）。結合ペプチドは、例えば、リガンド／受容体ペアのリガンド、例えば、リガンド／受容体ペアＶＥＧＦ／ＫＤＲのＶＥＧＦ、例えばリガンド／受容体ペアトランスフェリン／トランスフェリン受容体又はサイトカイン／サイトカイン受容体のトランスフェリン、例えばリガンド／受容体ペアＴＮＦα／ＴＮＦα受容体のＴＮＦαである。
【０１７２】
本発明によるプロドラッグは好ましくは、腫瘍細胞の受容体に結合することができ、通常は、受容体への結合後に、腫瘍細胞によって取り込まれ及び細胞内で、好ましくはリソソームで処理されるバインダーを含む。このバインダーを連結することができる一つの方法は、適宜にリンカーを介して酵素レグマインによって開裂可能な基によるものであり、レグマイン開裂性基の開裂後に、有効成分がバインダー又はそれの誘導体から別個に存在するようにするものである。この場合、一般式（Ｉａ）における−Ｄは−Ｄ１を表し、一般式（Ｉａ）における−Ｒは（Ｌｃ）ｒ−ＬＩＧを表す（実施形態Ａ）。さらに、バインダーを、適宜にリンカーを介して薬物分子に連結させて、レグマイン開裂性基の開裂後に、有効成分がバインダー又はそれの誘導体と一緒に存在するようにすることができる。この場合、一般式（Ｉａ）における−Ｄは−Ｄ１−（Ｌｂ）ｏ−ＬＩＧを表し、一般式（Ｉａ）におけるＲ−はＺ１−（Ｃ（＝Ｏ））ｑ−を表す（実施形態Ｂ）。
【０１７３】
実施形態Ａの化合物は好ましくは下記の一般式（ＩＩＩ′）を有する。
【化２０】
2020502201.tif 000023
【０１７４】
式中、ｎ、ｒ、ＬＩＧ、Ｌａ、Ｌｃ、及びＤ１は、一般式（Ｉａ）で提供の定義を有する。
【０１７５】
実施形態Ｂの化合物は好ましくは下記の一般式（ＩＶ′）を有する。
【化２１】
2020502201.tif 000024
【０１７６】
式中、ｎ、ｏ、Ｒ、ＬＩＧ、Ｌａ、Ｌｂ及びＤ１は、一般式（Ｉａ）で提供の定義を有する。
【０１７７】
バインダーＬＩＧは通常は、ペプチド、タンパク質又はそれらの誘導体である。相当するペプチドは、文献から公知である（総覧が、Ｄ．  Ｂｏｅｈｍｅ  ａｎｄ  Ａ．  Ｂｅｃｋ−Ｓｉｃｋｉｎｇｅｒ，  Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｓｃｉ．  ２０１５−２１．１８６にある。Ｂ．  Ｆｏｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｍａｇａｚｉｎｅ，  Ｍａｙ  ２０１２；Ｖ．  Ａｈｒｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｆｕｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１２，  ４，  １５６７；Ｗ．  Ｔａｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ２０１１，  ８，  ９０１；Ｒ．  Ｓｏｕｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１３，  ５６，  ７５６４及びＲ．  Ｓｏｕｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍ．  Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２００１，  ４４，  １３４１による緒言でのさらなる参考文献；Ｃ．  Ｇｒｕｅｎｄｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ２０１１，  ２６，  ６２９も参照する。）。ペプチド又はそれの誘導体は好ましくは、オクトレオチド、ＧｎＲＨ−ＩＩＩ、［Ｄ−Ｔｙｒ６、β−Ａｌａ１１、Ｐｈｅ１３、Ｎｌｅ１４］ＢＮ（６−１４）、ＮＴ（８−１３）、ｃ（ＲＧＤｆＫ）、ＨＳＤＡＶＦＴＤＮＹＴＲＬＲＫＱＭＡＶＫＫＹＬＮＳＩＬＮ−ＮＨ２（配列番号１６１）、ＮＡＰアミド、［Ｐｈｅ７、Ｐｒｏ３４］ＮＰＹ、ＨＥＲ２標的ペプチド、ＡＴＥＰＲＫＱＹＡＴＰＲＶＦＷＴＤＡＰＧ（配列番号１６２）又はＬＱＷＲＲＤＤＮＶＨＮＦＧＶＷＡＲＹＲＬ（配列番号１６３）［この場合、これらのペプチド配列は、アミノ酸についての標準的な１文字コードで表される。］から選択される。Ｕｍｌａｕｆ  ｅｔ  ａｌ，  Ｂｉｏｃｏｎｊ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１４，  Ｏｃｔ．  １５；２５（１０）：１８２９−３７に記載のスクリーニング法を用いて、さらなるペプチド配列を確認することが可能である。
【０１７８】
実施形態Ａの場合、ペプチドをペプチド結合により、レグマイン開裂性基のＮ末端に直接（例えば、それのＣ末端によって）結合させることができる。リンカーＬｃを介してレグマイン開裂性基のＮ末端にペプチドを結合させることも可能であり、その場合リンカーは好ましくは、ペプチドのＣ若しくはＮ末端に、又はペプチドのリジン若しくはシステイン側鎖に結合している。
【０１７９】
実施形態Ｂの場合、ペプチドは、薬物分子に直接結合していることができる。しかしながら、ペプチドがリンカーＬｂを介して薬物分子に結合していることが好ましく、その場合、リンカーは好ましくは、ペプチドのＣ若しくはＮ末端に、又はペプチドのリジン又はシステイン側鎖に結合している。Ｌｂ又はペプチドの結合は概して、薬物分子における水素原子の置換によって行われる。
【０１８０】
例えば、一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（Ｖ）、（ＶＩ）又は（ＶＩＩ）の化合物の場合、当業界において平均的技術を有する者に公知の方法でＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５又はＲ８における水素原子の置換によって複合体を得ることができる（置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５又はＲ８のうちの一つが−（Ｌｂ）ｏ−ＬＩＧを表す。）
特に好ましいバインダーＬＩＧは、腫瘍細胞の細胞外標的分子に結合する抗体若しくは抗原結合性断片又はそれの誘導体である。より好ましくは、ＬＩＧは、１以上の細胞毒性薬分子が結合している抗体又はそれの断片である。従って、実施形態Ａの場合、本発明による化合物は、下記の一般式（ＩＩＩａ′）の抗体−薬物複合体（ＡＤＣ）である。
【化２２】
2020502201.tif 000025
【０１８１】
式中、ｎ、ｒ、Ｌａ、Ｌｃ及びＤ１は一般式（Ｉａ）で提供の定義を有し、ＡＢは抗体を表し、ｓは１〜２０の数字、好ましくは２〜８、より好ましくは２〜６、例えば４を表す。この文脈において、Ｄ１は好ましくは、一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（Ｖ）、（ＶＩ）又は（ＶＩＩ）の化合物であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ８から選択される１個の置換基が一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（Ｖ）、（ＶＩ）及び（ＶＩＩ）下で上記で提供の定義を持たず、Ｌａ、即ち自壊性リンカーへの結合若しくはカルボニル基への結合を表す。
【０１８２】
実施形態Ｂの場合、本発明による化合物は、下記の一般式（Ｉｖａ′）の抗体−プロドラッグ複合体（ＡＰＤＣ）である。
【化２３】
2020502201.tif 000026
【０１８３】
式中、ｎ、ｏ、Ｒ、Ｌａ及びＬｂは一般式（Ｉａ）で提供の定義を有し、ＡＢは抗体を表し、ｓは１〜２０の数字、好ましくは２〜８、より好ましくは２〜６、例えば４を表す。この文脈において、Ｄ１は好ましくは、一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（Ｖ）、（ＶＩ）又は（ＶＩＩ）の化合物であり、一つの置換基Ｒ４が一般式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（Ｖ）、（ＶＩ）及び（ＶＩＩ）下で上記で提供の定義を持たず、Ｌａ若しくはカルボニル基への結合を表す。
【０１８４】
抗体（例えば上記の一般式（ＩＩＩａ）及び（ＩＶａ）におけるＡＢ）は、好ましくはヒト、ヒト化若しくはキメラモノクローナル抗体又はそれの抗原結合性断片、特別には抗ＴＷＥＡＫＲ抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体若しくは抗ＨＥＲ２抗体又はこれらの抗原結合性断片である。特に好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７、抗ＥＧＦＲ−抗体セツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）及び抗ＨＥＲ２−抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５、又はこれらの抗原結合性断片である。
【０１８５】
文献には、有機分子の抗体への共有結合（結合）の各種オプションも開示されている。本発明に従って好ましいのは、抗体のシステイン残基の１以上の硫黄原子を介した、及び／又は抗体のリジン残基の１以上のＮＨ基を介した抗体への結合である。しかしながら、抗体の遊離カルボキシル基を介して、又は糖残基を介して有機分子に結合することも可能である。
【０１８６】
その抗体は、腫瘍細胞の細胞外標的分子に結合する。最も広い意味での「標的分子」は、標的細胞群に存在し、タンパク質（例えば増殖因子の受容体）若しくは非ペプチド分子（例えば糖又はリン脂質）であることができる分子を意味するものと理解される。それは好ましくは、受容体又は抗原である。
【０１８７】
「細胞外」標的分子という用語は、細胞の外部上にある細胞に結合した標的分子、又は細胞の外部上にある標的分子の一部を説明するものであり、すなわち、抗体は無傷の細胞におけるそれの細胞外標的分子に結合することができる。細胞外標的分子は、細胞膜に固定されていることができるか、細胞膜の構成要素であることができる。当業者には、細胞外標的分子を同定する方法は明らかである。タンパク質については、これは、膜貫通ドメイン及び膜におけるタンパク質の配向を求めることで行うことができる。これらのデータは通常、タンパク質データベースに寄託されている（例えば、ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ）。
【０１８８】
「がん標的分子」という用語は、同じ組織型の非がん細胞上と比較して１以上のがん細胞種上により豊富に存在する標的分子を説明するものである。好ましくは、がん標的分子は、同じ組織型の非がん細胞と比較して１以上のがん細胞種上に選択的に存在し、その場合の選択的には、同じ組織型の非がん細胞と比較してがん細胞上に少なくとも２倍豊富であることを説明するものである（「選択的がん標的分子」）。がん標的分子の使用によって、本発明による複合体を用いるがん細胞の選択的療法が可能となる。
【０１８９】
本発明による「バインダー」という用語は、バインダーペプチド、バインダーペプチドの誘導体、バインダータンパク質又はバインダータンパク質の誘導体を意味するものと理解される。バインダーは、結合を介してリンカーに連結される。バインダーは、バインダーのヘテロ原子によって連結されていることができる。連結に用いることができるバインダーの本発明でのヘテロ原子は、
バインダーのスルフヒドリル基を介した硫黄、
バインダーのカルボン酸基又はヒドロキシル基を介した酸素、及び
１級若しくは２級アミン基を介した窒素
である。
【０１９０】
詳細には、本発明によれば、「バインダー」という用語は、抗体を意味するものと理解される。
【０１９１】
上記で挙げたヘテロ原子は、天然抗体中に存在することができるか、化学的方法若しくは分子生物学の方法によって導入される。本発明によれば、式（Ｉ）の有機遊離基への抗体の結合は、標的分子に関する抗体の結合活性に対してはごくわずかな効果しか持たない。
【０１９２】
好ましい実施形態において、前記連結は、標的分子に関するバインダーの結合活性に対する効果を持たない。
【０１９３】
本発明によれば、「抗体」という用語は、それの最も広い意味で理解すべきであり、免疫グロブリン分子、例えば無傷若しくは修飾モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体又は多特異的抗体（例えば二重特異抗体）を含む。免疫グロブリン分子は好ましくは、代表的にはジスルフィド架橋によって連結される四つのポリペプチド鎖、二つの重鎖（Ｈ鎖）及び二つの軽鎖（Ｌ鎖）を有する分子を含む。各重鎖は、重鎖の可変ドメイン（略称ＶＨ）及び重鎖の定常ドメインを含む。重鎖の定常ドメインは、例えば、三つのドメインＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含むことができる。各軽鎖は、可変ドメイン（略称ＶＬ）及び定常ドメインを含む。軽鎖の定常ドメインは、ドメイン（略称ＣＬ）を含む。ＶＨ及びＶＬドメインは、超可変性を有する領域［相補性決定領域（略称ＣＤＲ）とも称される］及び低い配列可変性を有する領域（フレームワーク領域、略称ＦＲ）にさらに細分することができる。代表的には、各ＶＨ及びＶＬ領域は、三つのＣＤＲ及び四つ以下のＦＲからなる。例えば、アミノ末端からカルボキシ末端に次の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４である。抗体は、いずれか好適な生物種、例えばウサギ、ラマ、ラクダ、マウス又はラットから得ることができる。１実施形態において、抗体は、ヒト又はマウス起源のものである。抗体は、例えばヒト、ヒト化又はキメラであることができる。
【０１９４】
「モノクローナル」抗体という用語は、実質的に均一な抗体の群から得られる抗体を指し、すなわち、その群の個々の抗体は、数が少ない可能性がある自然突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は、高い特異性を有する単一抗原性結合部位を認識する。モノクローナル抗体という用語は、特定の製造プロセスを指さない。
【０１９５】
「無傷」抗体という用語は、軽鎖及び重鎖の抗原結合ドメイン及び定常ドメインの両方を含む抗体を指す。定常ドメインは、多くの修飾アミノ酸位置を有する天然ドメイン又はそれの変異体であることができる。
【０１９６】
「修飾無傷」抗体という用語は、抗体起源ではないさらなるポリペプチド若しくはタンパク質との共有結合（例えば、ペプチド結合）によってアミノ末端又はカルボキシ末端を介して融合した無傷抗体を指す。さらに、抗体を修飾して、定義の位置で、反応性システインを導入して、担毒体へのカップリングを促進するようにすることができる（Ｊｕｎｕｔｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２００８，  ２６（８）９２５−３２参照）。
【０１９７】
「ヒト」抗体という用語は、ヒトから得ることができるか、合成ヒト抗体である抗体を指す。「合成」ヒト抗体は、ヒト抗体配列の分析に基づいて合成配列からイン・シリコで部分的又は完全に得ることができる抗体である。ヒト抗体は、例えば、ヒト起源の抗体配列のライブラリから単離された核酸によってコードされ得る。そのような抗体の例が、Ｓｏｄｅｒｌｉｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  ２０００，  １８：８５３−８５６にある。
【０１９８】
「ヒト化」又は「キメラ」抗体という用語は、配列の非ヒト及びヒト部分からなる抗体を説明するものである。これらの抗体において、ヒト免疫グロブリン（受容体）の配列の一部が、非ヒト免疫グロブリン（供与体）の配列部分によって置き換わっている。多くの場合で、供与体はマウス免疫グロブリンである。ヒト化抗体の場合、受容体のＣＤＲのアミノ酸が、供与体のアミノ酸によって置き換わっている。場合により、フレームワークのアミノ酸も、供与体の相当するアミノ酸によって置き換わっている。場合により、ヒト化抗体は、抗体の至適化時に導入された、受容体にも供与体にも存在しないアミノ酸を含む。キメラ抗体の場合、供与体免疫グロブリンの可変ドメインが、ヒト抗体の定常領域と融合している。
【０１９９】
本明細書で使用される相補性決定領域（ＣＤＲ）という用語は、抗原への結合に必要な可変抗体ドメインのアミノ酸を指す。代表的には、各可変領域は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と称される三つのＣＤＲ領域を有する。各ＣＤＲ領域は、カバットの定義によるアミノ酸及び／又はコチアに従って定義される超可変ループのアミノ酸を包含することができる。カバットによる定義は、例えば、可変軽鎖のほぼアミノ酸位置２４〜３４（ＣＤＲ１）、５０〜５６（ＣＤＲ２）及び８９〜９７（ＣＤＲ３）、そして可変重鎖の３１〜３５（ＣＤＲ１）、５０〜６５（ＣＤＲ２）及び９５〜１０２（ＣＤＲ３）からの領域を含む（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，  ５ｔｈ  Ｅｄ．  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，  Ｂｅｔｈｅｓｄａ，  ＭＤ．（１９９１））。コチアによる定義は、例えば、可変軽鎖のほぼアミノ酸位置２６〜３２（ＣＤＲ１）、５０〜５２（ＣＤＲ２）及び９１〜９６（ＣＤＲ３）そして可変重鎖の２６〜３２（ＣＤＲ１）、５３〜５５（ＣＤＲ２）及び９６〜１０１（ＣＤＲ３）の領域を含む（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ；  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  １９６：９０１−９１７（１９８７））。場合により、ＣＤＲは、カバット及びコチアに従って定義されるＣＤＲ領域からのアミノ酸を含むことができる。
【０２００】
重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、抗体は異なる群に分けることができる。無傷抗体の主要な５群：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭがあり、これらのうちのいくつかは、さらなる下位群（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２に分けることができる。異なる群に相当する重鎖の定常ドメインは、［アルファ／α］、［デルタ／δ］、［イプシロン／ε］、［ガンマ／γ］及び［ミュー（ｍｙ）／μ］と称される。抗体の三次元構造及びサブユニット構造の両方が公知である。
【０２０１】
抗体／免疫グロブリンの「機能性断片」又は「抗原結合性抗体断片」という用語は、やはり抗体／免疫グロブリンの抗原結合性ドメインを含む抗体／免疫グロブリンの断片（例えば、ＩｇＧの可変ドメイン）と定義される。抗体の「抗原結合性ドメイン」は代表的には、抗体の１以上の超可変領域、例えばＣＤＲ、ＣＤＲ２及び／又はＣＤＲ３領域を含む。しかしながら、抗体の「フレームワーク」又は「骨格」領域は、抗原に対する抗体の結合時に関与し得る。そのフレームワーク領域は、ＣＤＲの骨格を形成する。好ましくは、抗原結合性ドメインは、少なくとも可変軽鎖のアミノ酸４〜１０３及び可変重鎖のアミノ酸５〜１０９、より好ましくは可変軽鎖のアミノ酸３〜１０７及び可変重鎖の４〜１１１、特別に好ましくは完全な可変軽及び重鎖、すなわちＶＬのアミノ酸１〜１０９及びＶＨの１〜１１３（ＷＯ９７／０８３２０による番号付け）を含む。
【０２０２】
本発明の「機能性断片」又は「抗原結合性抗体断片」は、Ｆａｂ、Ｆａｂ′、Ｆ（ａｂ′）２及びＦｖ断片、二重特異抗体、単一ドメイン抗体（ＤＡｂｓ）、線状抗体、抗体の個々の鎖（単鎖Ｆｖ、略称ｓｃＦｖ）；及び多特異的抗体、例えば二重特異抗体及び三重特異抗体、例えば抗体断片から形成されるものを包含するが、これらに限定されるものではない（Ｃ．  Ａ．  Ｋ  Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ，  ｅｄｉｔｏｒ  （１９９５）  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  （Ｂｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ），  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ；  Ｒ．  Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ＆Ｓ．  Ｄｕｅｂｅｌ，  ｅｄｉｔｏｒｓ  （２００１）  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ），  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ）。「多特異的」又は「多機能性」抗体以外の抗体は、同一の結合部位を有するものである。多特異的抗体は、抗原の異なるエピトープに特異的であることができるか、複数の抗原のエピトープに特異的であることができる（例えば、ＷＯ９３／１７７１５；ＷＯ９２／０８８０２；ＷＯ９１／００３６０；ＷＯ９２／０５７９３；Ｔｕｔｔ，  ｅｔ  ａｌ．，  １９９１，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １４７６０  ６９；米国特許第４，４７４，８９３号；同４，７１４，６８１号；同４，９２５，６４８号；同５，５７３，９２０号；同５，６０１，８１９号；又はＫｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １４８：１５４７１５５３参照）。Ｆ（ａｂ′）２又はＦａｂ分子は、Ｃｈ１ドメインとＣＬドメインの間で起こる分子間ジスルフィド相互作用の作用を低減又は完全に防止することができるように構築することができる。
【０２０３】
「エピトープ」は、免疫グロブリン又はＴ細胞受容体に特異的に結合する能力を有するタンパク質決定基を指す。エピトープ決定基は通常、アミノ酸若しくは糖側鎖又はそれらの組み合わせなどの分子の化学的に活性な表面基からなり、通常は特異な三次元構造特性を有し、特異な電荷特性も有する。
【０２０４】
「機能性断片」又は「抗原結合性抗体断片」は、それのアミノ末端又はカルボキシル末端を介して、共有結合（例えばペプチド連結）によって、抗体を起源としない別のポリペプチド又はタンパク質と融合していることができる。さらに、抗体及び抗原結合性断片を、規定の場所で反応性システインを導入することで修飾して、担毒体へのカップリングを促進することができる（Ｊｕｎｕｔｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２００８  Ａｕｇ；２６（８）９２５−３２参照）。
【０２０５】
ポリクローナル抗体は、当業者に公知の方法によって作ることができる。モノクローナル抗体は、当業者に公知の方法によって作ることができる（Ｋｏｅｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ,  Ｎａｔｕｒｅ,  ２５６,  ４９５−４９７,  １９７５）。ヒト及びヒト化モノクローナル抗体は、当業者に公知の方法によって作ることができる（Ｏｌｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．,  Ｍｅｔｈ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  ９２,  ３−１６又はＣａｂｉｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ  ＵＳ  ４，８１６，５６７又はＢｏｓｓ  ｅｔ  ａｌ  ＵＳ４，８１６，３９７）。
【０２０６】
当業者は、例えば、トランスジェニックマウス（Ｎ  Ｌｏｎｂｅｒｇ  ａｎｄ  Ｄ  Ｈｕｓｚａｒ，  Ｉｎｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １９９５；  １３（１）６５−９３）又はファージ提示技術（Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ．  １９９１  Ａｕｇ  １５；３５２（６３３６）６２４−８）によってヒト抗体及びそれの断片を作る多様な方法を知っている。本発明の抗体は、例えば非常に多数の健常志願者から集めた非常に多数の抗体のアミノ酸配列からなる組換え抗体ライブラリーから得ることができる。抗体は、公知の組換えＤＮＡ技術によって作ることも可能である。抗体の核酸配列は、通常の配列決定によって得ることができるか、公開でアクセス可能なデータベースから入手することができる。
【０２０７】
「単離」抗体又はバインダーは、精製されて細胞の他の構成要素が除去されたものである。診断的使用又は治療的使用を妨害し得る細胞の汚染構成要素は、例えば、酵素類、ホルモン類、又は細胞の他のペプチド若しくは非ペプチド構成要素である。好ましい抗体又はバインダーは、抗体又はバインダーに対して９５重量％強の範囲（例えばローリー法、ＵＶ−Ｖｉｓスペクトル分析又はＳＤＳキャピラリーゲル電気泳動によって測定）まで精製されているものである。さらに、アミノ末端若しくは内部アミノ酸配列の少なくとも１５個のアミノ酸を決定することができる程度まで精製されている抗体、又は均一となるまで精製された（均一性は還元条件若しくは非還元条件下のＳＤＳ−ＰＡＧＥによって決定される（検出は、クマシー・ブルー（Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ  Ｂｌａｕ）染色又は好ましくは銀着色によって決定することができる。）。）抗体である。しかしながら、抗体は通常は、１以上の精製段階によって得られる。
【０２０８】
「特異的結合」又は「特異的に結合する」という用語は、所定の抗原／標的分子に結合する抗体又はバインダーを指す。抗体又はバインダーの特異的結合は代表的には、少なくとも１０−７Ｍのアフィニティを有する抗体又はバインダーを説明するものであり（Ｋｄ値として；すなわち好ましくは１０−７Ｍより小さいＫｄ値を有するもの）、その抗体又はバインダーは所定の抗原／標的分子でも非常に関連の深い抗原／標的分子でもない非特異的抗原／標的分子（例えばウシ血清アルブミン又はカゼイン）に対してより、所定の抗原／標的分子に対して少なくとも２倍高いアフィニティを有する。抗体又はバインダーの特異的結合は、その抗体又はバインダーが複数の抗原／標的分子（例えば、異なる生物種からの相同分子種）に結合できないことを意味するわけではない。その抗体は好ましくは、少なくとも１０−７Ｍ（Ｋｄ値として；すなわち、好ましくは１０−７Ｍより小さいＫｄ値を有するもの）、好ましくは少なくとも１０−８Ｍ、より好ましくは１０−９Ｍから１０−１１Ｍの範囲のアフィニティを有する。Ｋｄ値は、例えば表面プラズモン共鳴分光法によって測定することができる。
【０２０９】
本発明の抗体−薬物複合体は同様に、これらの範囲のアフィニティを示す。そのアフィニティは、好ましくは薬物の結合によってほとんど影響を受けない（概して、そのアフィニティは一桁未満低下し、すなわち、例えば、多くとも１０−８Ｍから１０−７Ｍである。）。
【０２１０】
本発明に従って使用される抗体は、好ましくは高い選択性についても注目すべきものである。高い選択性が存在するのは、本発明の抗体が、独立の他の抗原、例えばヒト血清アルブミンに対してより少なくとも２倍、好ましくは５倍、又はより好ましくは１０倍良好な標的タンパク質に対するアフィニティを示す場合である（アフィニティは、例えば表面プラズモン共鳴分光法によって測定することができる。）。
【０２１１】
さらに、使用される本発明の抗体は、好ましくは交差反応性である。前臨床試験、例えば毒性試験又は活性試験（例えば、異種移植マウスでの試験）を容易にし、より良好に解釈できるようにするために、本発明に従って使用される抗体がヒト標的タンパク質に結合するだけでなく、試験に用いられる生物における生物標的タンパク質にも結合する場合が有利である。１実施形態において、本発明に従って使用される抗体は、ヒト標的タンパク質に加えて、少なくとも一つの別の生物種の標的タンパク質に対して交差反応性である。毒性試験及び活性試験に関しては、齧歯類、イヌ及び非ヒト霊長類の科の生物を用いることが好ましい。好ましい齧歯類種は、マウス及びラットである。好ましい非ヒト霊長類は、アカゲザル、チンパンジー及びカニクイザルである。
【０２１２】
１実施形態において、本発明に従って用いられる抗体は、ヒト標的タンパク質に加えて、マウス、ラット及びカニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）からなる生物種の群から選択される少なくとも一つの別の生物種の標的タンパク質に対して交差反応性である。特別に好ましいものは、ヒト標的タンパク質に加えて、少なくともマウス標的タンパク質に対して交差反応性である本発明に従って用いられる抗体である。好ましいものは、前記別の非ヒト生物種の標的タンパク質に対するアフィニティがヒト標的タンパク質に対するアフィニティと５０倍まで、詳細には１０倍まで異なる交差反応性抗体である。
【０２１３】
がん標的分子に対する抗体
バインダー、例えば抗体又はそれの抗原結合性断片が向かう標的分子は、好ましくはがん標的分子である。「がん標的分子」という用語は、同じ組織型の非がん細胞上より１以上のがん細胞種上で豊富に存在する標的分子を説明するものである。好ましくは、がん標的分子は、同じ組織型の非がん細胞と比較して１以上のがん細胞種上に選択的に存在し、「選択的に」とは、同じ組織型の非がん細胞と比較してがん細胞上で少なくとも２倍豊富であることを説明するものである（「選択的がん標的分子」）。がん標的分子を用いることで、本発明による複合体を用いるがん細胞の選択的療法が可能となる。
【０２１４】
抗原、例えばがん細胞抗原に対して特異的である抗体は、当業者が熟知している方法（例えば、組み換え発現）、又は市販の方法（例えば、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ，  Ｇｅｒｍａｎｙから）によって、当業者が製造することができる。がん療法における公知の市販抗体の例には、Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）（セツキシマブ、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ）、Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ、Ｒｏｃｈｅ）及びＨｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）（トラスツズマブ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）である。トラスツズマブは、細胞に基づくアッセイで（Ｋｄ＝５ｎＭ）、ヒト表皮成受容体の細胞外ドメインに高アフィニティで結合するＩｇＧ１κ型の組み換えヒト化モノクローナル抗体である。その抗体は、ＣＨＯ細胞で組み換え的に産生される。
【０２１５】
好ましい実施形態において、標的分子は選択的がん標的分子である。
【０２１６】
特に好ましい実施形態において、標的分子はタンパク質である。
【０２１７】
１実施形態において、標的分子は細胞外標的分子である。好ましい実施形態において、細胞外標的分子はタンパク質である。
【０２１８】
がん標的分子は当業者には公知である。これらの例を以下に列記する。
【０２１９】
がん標的分子の例は次のものである。
【０２２０】
（１）ＥＧＦＲ（ＥＧＦ受容体、ＮＣＢＩ参照配列ＮＰ＿００５２１９．２、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１９５６）
（２）メソテリン（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ参照番号Ｑ１３４２１−３）、メソテリンはアミノ酸２９６〜５９８によってコードされる。アミノ酸３７〜２８６は、巨核球強化因子をコードしている。メソテリンは、ＧＰＩアンカーを介して細胞膜に固定されており、細胞外で局在している。
【０２２１】
（３）炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡ９、ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ参照番号Ｑ１６７９０）、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：７６８）
（４）Ｃ４．４ａ（ＮＣＢＩ参照配列ＮＰ＿０５５２１５．２；同義語ＬＹＰＤ３、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：２７０７６）
（５）ＣＤ５２（ＮＣＢＩ参照配列ＮＰ_００１７９４．２）
（６）ＨＥＲ２（ＥＲＢＢ２；ＮＣＢＩ参照配列ＮＰ_００４４３９．２；ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：２０６４）
（７）ＣＤ２０（ＮＣＢＩ参照配列ＮＰ_０６８７６９．２）
（８）リンパ球活性化抗原ＣＤ３０（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ  Ｐ２８９０８）
（９）リンパ球接着分子ＣＤ２２（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ  Ｐ２０２７３；ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：９３３）
（１０）骨髄（ｍｙｌｏｉｄ）細胞表面抗原ＣＤ３３（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ  Ｐ２０１３８；ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：９４５）
（１１）膜貫通糖タンパク質ＮＭＢ（ＧＰＮＭＢ、ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ  Ｑ１４９５６、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１０４５７）
（１２）接着分子ＣＤ５６（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ  Ｐ１３５９１）
（１３）表面分子ＣＤ７０（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ  Ｐ３２９７０、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：９７０）
（１４）表面分子ＣＤ７４（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ  Ｐ０４２３３、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：９７２）
（１５）Ｂ−リンパ球抗原ＣＤ１９（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ  Ｐ１５３９１、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：９３０）
（１６）表面タンパク質ムチン−１（ＭＵＣ１、ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ  Ｐ１５９４１、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：４５８２）
（１７）表面タンパク質ＣＤ１３８（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ  Ｐ１８８２７）
（１８）インテグリンαＶ（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ_００２２０１．１、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：３６８５）
（１９）奇形癌由来増殖因子１タンパク質ＴＤＧＦ１（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ_００３２０３．１、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：６９９７）
（２０）前立腺特異的膜抗原ＰＳＭＡ（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ：Ｑ０４６０９；ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：２３４６）
（２１）チロシンタンパク質キナーゼＥＰＨＡ２（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  ＩＤ：Ｐ２９３１７、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１９６９）
（２２）表面タンパク質ＳＬＣ４４Ａ４（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ_００１１７１５１５．１、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：８０７３６）
（２３）表面タンパク質ＢＭＰＲ１Ｂ（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｏ００２３８）
（２４）輸送タンパク質ＳＬＣ７Ａ５（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ０１６５０）
（２５）表皮前立腺抗原ＳＴＥＡＰ１（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ９ＵＨＥ８、遺伝子ＩＤ：２６８７２）
（２６）卵巣癌抗原ＭＵＣ１６（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ８ＷＸＩ７、遺伝子ＩＤ：９４０２５）
（２７）輸送タンパク質ＳＬＣ３４Ａ２（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｏ９５４３６、遺伝子ＩＤ：１０５６８）
（２８）表面タンパク質ＳＥＭＡ５ｂ（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ９Ｐ２８３）
（２９）表面タンパク質ＬＹＰＤ１（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ８Ｎ２Ｇ４）
（３０）エンドセリン受容体Ｂ型ＥＤＮＲＢ（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ２４５３０、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１９１０）
（３１）薬指タンパク質ＲＮＦ４３（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ６８ＤＶ７）
（３２）前立腺癌関連タンパク質ＳＴＥＡＰ２（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ８ＮＦＴ２）
（３３）カチオンチャンネルＴＲＰＭ４（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ８ＴＤ４３）
（３４）補体受容体ＣＤ２１（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ２００２３）
（３５）Ｂ細胞抗原受容体複合体関連タンパク質ＣＤ７９ｂ（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ４０２５９、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：９７４）
（３６）細胞接着抗原ＣＥＡＣＡＭ６（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ４０１９９）
（３７）ジペプチダーゼＤＰＥＰ１（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ１６４４４）
（３８）インターロイキン受容体ＩＬ２０Ｒα（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ９ＵＨＦ４、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：３５５９）
（３９）プロテオグリカンＢＣＡＮ（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ９６ＧＷ７）
（４０）エフリン受容体ＥＰＨＢ２（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ２９３２３）
（４１）前立腺幹細胞関連タンパク質ＰＳＣＡ（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ_００５６６３．２）
（４２）表面タンパク質ＬＨＦＰＬ３（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ８６ＵＰ９）
（４３）受容体タンパク質ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ９６ＲＪ３）
（４４）Ｂ細胞抗原受容体複合体関連タンパク質ＣＤ７９ａ（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ１１９１２）
（４５）受容体タンパク質ＣＸＣＲ５（ＣＤ１８５；ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ３２３０２；ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ６４３、ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ_００１７０７．１）
（４６）イオンチャンネルＰ２Ｘ５（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ９３０８６）
（４７）リンパ球抗原ＣＤ１８０（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ９９４６７）
（４８）受容体タンパク質ＦＣＲＬ１（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ９６ＬＡ６）
（４９）受容体タンパク質ＦＣＲＬ５（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ９６ＲＤ９）
（５０）ＭＨＣクラスＩＩ分子Ｉａ抗原ＨＬＡ−ＤＯＢ（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ_００２１１１．１）
（５１）Ｔ細胞タンパク質ＶＴＣＮ１（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ７Ｄ３）
（５２）ＴＷＥＡＫＲ（ＦＮ１４、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ_０５７７２３．１、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：５１３３０）
（５３）リンパ球抗原ＣＤ３７（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ１１０４９、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：９５１）
（５４）ＦＧＦ受容体２；ＦＧＦＲ２（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：２２６３；公式記号：ＦＧＦＲ２）。ＦＧＦＲ２受容体は、各種スプライス変異体（α、β、ＩＩＩｂ、ＩＩＩｃ）で生じる。全てのスプライス変異体が標的分子として働き得る。
【０２２２】
（５５）膜貫通糖タンパク質Ｂ７Ｈ３（ＣＤ２７６；ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：８０３８１ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ_００１０１９９０７．１、ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｑ５ＺＰＲ３−１）
（５６）Ｂ細胞受容体ＢＡＦＦＲ（ＣＤ２６８；ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１１５６５０）
（５７）受容体タンパク質ＲＯＲ１（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：４９１９）
（５８）表面受容体ＣＤ１２３（ＩＬ３ＲＡ；ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：３５６３；ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ_００２１７４．１；Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ：Ｐ２６９５１）
（５９）受容体タンパク質シンシチン（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ３０８１６）
（６０）アスパラギン酸β−ヒドロキシラーゼ（ＡＳＰＨ；ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ４４４）
（６１）細胞表面糖タンパク質ＣＤ４４（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：９６０）
（６２）ＣＤＨ１５（カドヘリン１５、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１０１３）
（６３）細胞表面糖タンパク質ＣＥＡＣＡＭ５（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１０４８）
（６４）細胞接着分子Ｌ１様（ＣＨＬ１、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１０７５２）
（６５）受容体チロシンキナーゼｃ−Ｍｅｔ（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：４２３３）
（６６）ノッチリガンドＤＬＬ３（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１０６８３）
（６７）エフリンＡ４（ＥＦＮＡ４、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１９４５）
（６８）エクトヌクレオチドピロホスファターゼ／ホスホジエステラーゼ３（ＥＮＰＰ３、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：５１６９）
（６９）凝固因子ＩＩＩ（Ｆ３、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：２１５２）
（７０）ＦＧＦ受容体３（ＦＧＦＲ３、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：２２６１）
（７１）葉酸ヒドロラーゼＦＯＬＨ１（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：２３４６）
（７２）葉酸受容体１（ＦＯＬＲ１；ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：２３４８）
（７３）グアニル酸シクラーゼ２Ｃ（ＧＵＣＹ２Ｃ、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：２９８４）
（７４）ＫＩＴプロトオンコジーン受容体チロシンキナーゼ（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：３８１５）
（７５）リソソーム膜タンパク質１（ＬＡＭＰ１、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：３９１６）
（７６）リンパ球抗原６複合体、座Ｅ（ＬＹ６Ｅ、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：４０６１）
（７７）タンパク質ＮＯＴＣＨ３（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：４８５４）
（７８）タンパク質チロシンキナーゼ７（ＰＴＫ７、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：５７５４）
（７９）ネクチン細胞接着分子４（ＰＶＲＬ４、ＮＥＣＴＩＮ４、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：８１６０７）
（８０）膜貫通タンパク質シンデカン１（ＳＤＣ１、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：６３８２）
（８１）ＳＬＡＭファミリーメンバー７（ＳＬＡＭＦ７、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：５７８２３）
（８２）輸送タンパク質ＳＬＣ３９Ａ６（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：２５８００）
（８３）ＳＬＩＴ−及びＮＴＲＫ−様ファミリーメンバー６（ＳＬＩＴＲＫ６、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：８４１８９）
（８４）細胞表面受容体ＴＡＣＳＴＤ２（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：４０７０）
（８５）受容体タンパク質ＴＮＦＲＳＦ８（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：９４３）
（８６）受容体タンパク質ＴＮＦＳＦ１３Ｂ（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１０６７３）
（８７）糖タンパク質ＴＰＢＧ（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：７１６２）
（８８）細胞表面受容体ＴＲＯＰ２（ＴＡＣＳＴＤ２、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：４０７０）
（８９）ガラニン様Ｇタンパク質共役型受容体ＫＩＳＳ１Ｒ（ＧＰＲ５４、ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：８４６３４）
（９０）輸送タンパク質ＳＬＡＭＦ６（ＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ：１１４８３６）。
【０２２３】
本発明の好ましい主題において、がん標的分子は、がん標的分子（１）〜（９０）、特にはＴＷＥＡＫＲ、Ｂ７Ｈ３、ＥＧＦＲ及びＨＥＲ２からなる群から選択される。
【０２２４】
本発明のさらなる特に好ましい主題において、バインダーは、がん標的分子（１）〜（９０）、特にはＴＷＥＡＫＲ、Ｂ７Ｈ３、ＥＧＦＲ及びＨＥＲ２からなる群から選択される細胞外がん標的分子に結合する。
【０２２５】
本発明のさらなる特に好ましい主題において、バインダーは、がん標的分子（１）〜（９０）、特にはＴＷＥＡＫＲ、Ｂ７Ｈ３、ＥＧＦＲ及びＨＥＲ２からなる群から選択される細胞外がん標的分子に特異的に結合する。好ましい実施形態において、バインダーは、標的細胞上のそれの細胞外標的分子への結合後に、その結合によって標的細胞によって取り込まれる。これによって、免疫複合体又はＡＤＣであることができるバインダー−薬物複合体が、標的細胞によって取り込まれることになる。次に、バインダーが、好ましくは細胞内で、好ましくはリソソームで処理される。
【０２２６】
１実施形態において、バインダーは、結合タンパク質である。好ましい実施形態において、バインダーは、抗体、抗原結合抗体断片、多特異的抗体又は抗体模倣体である。
【０２２７】
好ましい抗体模倣体は、アフィボディ類、アドネクチン類、アンチカリン類、ＤＡＲＰｉｎ類、アビメール類、又はナノボディ類である。好ましい多特異的抗体は、二重特異性及び三重特異性抗体である。
【０２２８】
好ましい実施形態において、バインダーは、抗体又は抗原結合抗体断片、より好ましくは単離抗体又は単離抗原結合抗体断片である。
【０２２９】
好ましい抗原結合抗体断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ′、Ｆ（ａｂ′）２及びＦｖ断片、二重特異性抗体、ＤＡｂｓ、直鎖抗体及びｓｃＦｖである。特に好ましいのは、Ｆａｂ、二重特異性抗体及びｓｃＦｖである。
【０２３０】
特に好ましい実施形態において、バインダーは抗体である。特に好ましいのは、モノクローナル抗体又はそれの抗原結合抗体断片である。さらなる特に好ましいものは、ヒト、ヒト化若しくはキメラ抗体又はそれの抗原結合抗体断片である。
【０２３１】
がん標的分子に結合する抗体又は抗原結合抗体断片は、例えば化学合成又は組換え発現などの公知の方法を用いて当業者が作ることができる。がん標的分子についてのバインダーは、商業的に入手できるか、例えば化学合成又は組換え発現などの公知の方法を用いて当業者が作ることができる。抗体又は抗原結合性抗体断片を作るさらなる方法については、ＷＯ２００７／０７０５３８に記載されている（２２頁「抗体」参照）。当業者であれば、ファージ提示ライブラリー（例えばＭｏｒｐｈｏｓｙｓ  ＨｕＣＡＬ  Ｇｏｌｄ）などのプロセスを収集及び使用して抗体又は抗原結合性抗体断片を発見する方法については知っている（ＷＯ２００７／０７０５３８、２４頁以降及び７０頁のＡＫ実施例１、７２頁のＡＫ実施例２参照）。Ｂ細胞からのＤＮＡライブラリーを用いるさらなる抗体取得方法が、例えば２６頁（ＷＯ２００７／０７０５３８）に記載されている。ヒト化抗体についてのプロセスは、ＷＯ２００７０７０５３８の３０−３２頁に記載されており、Ｑｕｅｅｎ、ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｓ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８６：１００２９−１００３３，  １９８９又はＷＯ９０／０７８６に詳細に記載されている。さらに、タンパク質一般及び特に抗体の組換え発現方法は当業者には公知である（例えば、Ｂｅｒｇｅｒ  ａｎｄ  Ｋｉｍｒｎｅｌ  （Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，  Ｖｏ１．  １５２，  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ,  Ｉｎｃ）：Ｓａｍｂｒｏｏｋ,  ｅｔ  ａｌ．，  （Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  （Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ；  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，  Ｎ．Ｙ．；  １９８９）  Ｖｏｌ．  １−３）；  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  （Ｆ．  Ｍ．  Ａｕｓａｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．  ［Ｅｄｓ．］，  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，  Ｇｒｅｅｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，  Ｉｎｃ．  ／  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃ．）；  Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，  （Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ  （１９８８１，  Ｐａｕｌ  ［Ｅｄ．］）；  Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  （Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  （１９９８））；  ａｎｄ  Ｈａｒｌｏｗ，  ｅｔ  ａｌ．，  （Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ  （１９９８）参照）。当業者であれば、タンパク質／抗体の発現に必要な相当するベクター、プロモーター及びシグナルペプチドは知っている。通常プロセスが、ＷＯ２００７／０７０５３８の４１−４５頁にも記載されている。ＩｇＧ１抗体の取得方法が、例えばＷＯ２００７／０７０５３８の７４頁以降の実施例６に記載されている。抗原への結合後の抗体の取り込みの決定を可能とするプロセスが当業者には公知であり、例えばＷＯ２００７／０７０５３８の８０頁に記載されている。当業者は、異なる標的分子特異性を有する抗体の作製と同様にして炭酸脱水酵素ＩＸ（Ｍｎ）抗体を作るのに用いられているＷＯ２００７／０７０５３８に記載の方法を用いることができる。
【０２３２】
細菌発現
当業者は、細菌発現を用いて抗体、それの抗原結合性断片又はそれの変異体を産生可能な方法については承知している。
【０２３３】
所望のタンパク質の細菌発現の好適な発現ベクターは、好適な翻訳開始及び翻訳終止シグナル並びに機能性プロモーターとともに機能性リーディングフレーム内に所望のタンパク質をコードするＤＮＡ結合効率を低下配列の挿入によって構築される。そのベクターは、１以上の表現型的に選択可能なマーカー並びにベクターの保持及び所望に応じて宿主内でのそれの増幅を可能とするための複製起点を含む。形質転換のための好適な原核宿主には、大腸菌（Ｅ．  ｃｏｌｉ）、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）並びにシュードモナス属、ストレプトミセス属及びブドウ球菌属からの各種菌種などがあるが、これらに限定されるものではない。細菌ベクターは、例えば、バクテリオファージ、プラスミド又はファージミドに基づくものであることができる。これらのベクターは、市販のプラスミド由来である選択可能マーカー及び細菌複製起点を含むことができる。代表的には、多くの市販のプラスミドが公知のクローニングベクターｐＢＲ３２２（ＡＴＣＣ３７０１７）の要素を含む。細菌系において、多くの有利な発現ベクターは、発現されるべきタンパク質の所期の使用に基づいて選択することができる。
【０２３４】
好適な宿主株の形質転換及び適切な細胞密度までの当該宿主株の増殖後、選択されたプロモーターを好適な手段（例えば、温度変化又は化学的誘発）によって脱再プライミング（ｄｅ−ｒｅｐｒｉｍｅｄ）／誘発し、細胞をさらなる期間にわたって培養する。細胞は代表的には遠心によって回収され、必要に応じて物理的に又は化学的手段で消化され、得られる生抽出液をさらなる精製のために保持する。
【０２３５】
従って、本発明のさらなる実施形態は、本発明の新規な抗体をコードする核酸を含む発現ベクターである。
【０２３６】
本発明の抗体又はそれの抗原結合性断片には、天然精製産物、化学合成起源である産物、及び原核宿主、例えば大腸菌（Ｅ．  ｃｏｌｉ）、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）並びにシュードモナス属、ストレプトミセス属及びブドウ球菌属からの各種菌種、好ましくは大腸菌（Ｅ．  ｃｏｌｉ）における組み換え技術によって産生される産物などがある。
【０２３７】
哺乳動物細胞発現
当業者には、哺乳動物細胞発現を用いて抗体、それの抗原結合性断片又はそれの変異体を産生可能な方法については承知している。
【０２３８】
哺乳動物細胞宿主での発現に好ましい調節配列には、哺乳動物細胞での高発現に至るウィルス要素、例えばサイトメガロウィルス（ＣＭＶ）由来のプロモーター及び／又は発現増幅因子（例えば、ＣＭＶプロモーター／エンハンサー）、シミアン・ウイルス４０（ＳＶ４０）（例えば、ＳＶ４０プロモーター／エンハンサー）、アデノウィルスからのもの（例えば、アデノウィルスの主要後期プロモーター（ＡｄＭＬＰ））及びポリオーマからのものなどがある。抗体の発現は、構成的であるか、調節されていることができる（例えば、Ｔｅｔシステムと組み合わせたテトラサイクリンなどの小分子感応物質の付加又は除去によって誘発される）。
【０２３９】
ウィルス調節要素及びそれの配列のさらなる説明については、例えば、Ｓｔｉｎｓｋｉによる米国特許第５，１６８，０６２号、Ｂｅｌｌらによる米国特許第４，５１０，２４５号、及びＳｃｈａｆｆｎｅｒらによる米国特許第４，９６８，６１５号を参照する。その組み換え発現ベクターにも同様に、複製起点及び選択可能マーカーなどがあり得る（例えば、米国特許第４，３９９，２１６号、同４，６３４，６６５号及び同５，１７９，０１７号参照）。好適な選択可能マーカーには、Ｇ４１８、ピューロマイシン、ハイグロマイシン、ブラストサイジン、ゼオシン／ブレオマイシン若しくはメトトレキセートなどの物質に対する抵抗性を賦与する遺伝子、又はベクターが細胞に導入されている場合にはグルタミン合成酵素などの宿主細胞の栄養要求性を生じさせる選択可能マーカーなどがある（Ｂｅｂｂｉｎｇｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  （Ｎ  Ｙ）．  １９９２  Ｆｅｂ；１０（２）：１６９−７５）。
【０２４０】
例えば、ジヒドロ葉酸レダクターゼ（ＤＨＦＲ）遺伝子はメトトレキセートに対する耐性を賦与し、ｎｅｏ遺伝子はＧ４１８に対する耐性を賦与し、アスペルギルス・テレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｔｅｒｒｅｕｓ）からのｂｓｄ遺伝子はブラストサイジンに対する耐性を賦与し、ピューロマイシンＮ−アセチルトランスフェラーゼはピューロマイシンに対する耐性を賦与し、Ｓｈ  ｂｌｅ遺伝子産物はゼオシンに対する耐性を賦与し、ハイグロマイシンに対する耐性が大腸菌（Ｅ．  ｃｏｌｉ）ハイグロマイシン耐性遺伝子（ｈｙｇ又はｈｐｈ）によって賦与される。ＤＨＦＲ又はグルタミン合成酵素などの選択可能マーカーも、ＭＴＸ及びＭＳＸと組み合わせて増幅技術に役立つ。
【０２４１】
発現ベクターの宿主細胞へのトランスフェクションを、エレクトロポレーション、ヌクレオフェクション、リン酸カルシウム沈殿、リポフェクション、ポリカチオンに基づくトランスフェクション、例えばポリエチレンイミン（ＰＥＩ）に基づくトランスフェクション及びＤＥＡＥ−デキストラントランスフェクションなどの標準的技術を用いて行うことができる。
【０２４２】
抗体、それの抗原結合性断片又はそれの変異体の発現に好適な哺乳動物宿主細胞には、ＣＨＯ−Ｋ１、ＣＨＯ−Ｓ、ＣＨＯ−Ｋ１ＳＶなどのチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞［Ｒ．  Ｊ．  Ｋａｕｆｍａｎ  ａｎｄ  Ｐ．  Ａ．  Ｓｈａｒｐ  （１９８２）  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  １５９：６０１−６２１に記載のＤＨＦＲ選択可能マーカーとともに使用されるＵｒｌａｕｂ  ａｎｄ  Ｃｈａｓｉｎ，  （１９８０）  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ７７：４２１６−４２２０及びＵｒｌａｕｂ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ．  １９８３  Ｊｕｎ；３３（２）：４０５−１２に記載のＤＨＦＲ−ＣＨＯ細胞、並びにＦａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｂｉｏｅｎｇ．  ２０１２  Ａｐｒ；１０９（４）：１００７−１５に詳細に記載の他のノックアウト細胞など）、ＮＳ０骨髄腫細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＨＫＢ１１細胞、ＢＨＫ２１細胞、ＣＡＰ細胞、ＥＢ６６細胞、及びＳＰ２細胞などがある。
【０２４３】
抗体、それの抗原結合性断片又はそれの変異体の発現は、ＨＥＫ２９３、ＨＥＫ２９３Ｔ、ＨＥＫ２９３−ＥＢＮＡ、ＨＥＫ２９３Ｅ、ＨＥＫ２９３−６Ｅ、ＨＥＫ２９３  Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ、ＨＫＢ１１、Ｅｘｐｉ２９３Ｆ、２９３ＥＢＮＡＬＴ７５、ＣＨＯ  Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ、ＣＨＯ−Ｓ、ＣＨＯ−Ｋ１、ＣＨＯ−Ｋ１ＳＶ、ＣＨＯＥＢＮＡＬＴ８５、ＣＨＯＳ−ＸＥ、ＣＨＯ−３Ｅ７又はＣＡＰ−Ｔ細胞などの発現系で、一時的又は半安定的に行うことができる（例えば、Ｄｕｒｏｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  ２００２  Ｊａｎ  １５；３０（２）：Ｅ９のように）
一部の実施形態において、発現ベクターは、発現されるタンパク質が宿主細胞が増殖している細胞培地中に分泌されるような形で構築される。抗体、それの抗原結合性断片又はそれの変異体は、当業者に公知のタンパク質精製法を用いて細胞培地から得ることができる。
【０２４４】
精製
抗体、それの抗原結合性断片又はそれらの変異体は、公知の方法を用いて組み換え細胞培養物から取得及び精製することができ、その例には、硫酸アンモニウム又はエタノール沈殿、酸抽出、タンパク質Ａクロマトグラフィー、タンパク質Ｇクロマトグラフィー、アニオン若しくはカチオン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）、アフィニティクロマトグラフィー、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー及びレクチンクロマトグラフィーなどがある。高速液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）も同様に、精製に用いることができる。例えば、Ｃｏｌｌｉｇａｎ，  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  ｏｒ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  ＮＹ，  Ｎ．Ｙ．，  （１９９７−２００１）、例えば第１、４、６、８、９、１０章を参照する。
【０２４５】
本発明の抗体若しくはそれの抗原結合性断片、又はそれらの変異体には、天然精製産物、化学合成法からの産物、及び原核若しくは真核宿主における組み換え技術を用いて産生される産物などがある。真核宿主には、例えば、酵母細胞、高度植物細胞、昆虫細胞及び哺乳動物細胞などがある。組み換え発現のために選択される宿主細胞に応じて、発現されるタンパク質は、グリコシル化型又は非グリコシル化型であることができる。
【０２４６】
好ましい実施形態において、その抗体は、（１）例えば、ローリー法による、ＵＶ−可視分光法による、又はＳＤＳキャピラリーゲル電気泳動による（例えば、Ｃａｌｉｐｅｒ  ＬａｂＣｈｉｐ  ＧＸＩＩ、ＧＸ  ９０又はＢｉｏｒａｄ  Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ装置を用いて）測定で９５重量％強まで、及びより好ましい実施形態において９９重量％強まで、（２）Ｎ−末端又は内部アミノ酸配列の少なくとも１５個の残基の決定に好適な程度まで、又は（３）クマシー・ブルー若しくは好ましくは銀染色を用いて還元条件下若しくは非還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥによって測定される均一性まで精製される。
【０２４７】
通常、単離抗体は、少なくとも一つのタンパク質精製段階を用いて得られる。
【０２４８】
好ましいものは、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ断片又はＦ（ａｂ）２断片である、前記実施形態のいずれかによる抗原結合性断片又は前記実施形態のいずれかによる抗体の抗原結合性断片である。
【０２４９】
好ましいものは、モノクローナル抗体又はそれの抗原結合性断片である、前記実施形態のいずれかによる抗体又は抗原結合性断片である。
【０２５０】
好ましいものは、ヒト、ヒト化若しくはキメラ抗体又は抗原結合性断片である、前記実施形態のいずれかによる抗体又は抗原結合性断片である。
【０２５１】
抗ＴＷＥＡＫＲ抗体
本発明によれば、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体を用いることが可能である。
【０２５２】
「抗ＴＷＥＡＫＲ抗体」又は「ＴＷＥＡＫＲに特異的に結合する抗体」という表現は、好ましくは診断及び／又は治療用途に十分なアフィニティを有して、がん標的分子ＴＷＥＡＫＲ（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿０５７７２３．１、配列番号１６４）に結合する抗体に関するものである。特定の実施形態において、その抗体は、解離定数（ＫＤ）≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭでＴＷＥＡＫＲに結合する。
【０２５３】
ＴＷＥＡＫＲに結合する抗体の例が、例えばＷＯ２００９／０２０９３３（Ａ２）、ＷＯ２００９／１４０１７７（Ａ２）、ＷＯ２０１４／１９８８１７（Ａ１）及びＷＯ２０１５／１８９１４３（Ａ１）に開示されている。これらの抗体及び抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２５４】
ＩＴＥＭ−４は、Ｎａｋａｙａｍａら（Ｎａｋａｙａｍａ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３，  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍ，  ３０６：８１９−８２５）によって報告された抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。ＣＤＲ移植に基づくこの抗体のヒト化変異体は、Ｚｈｏｕらにより（Ｚｈｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３，  Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  １３３（４）：１０５２−６２）、そしてＷＯ２００９／０２０９３３に記載されている。ＩＴＥＭ−４のヒト化変異体は、ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７、ＴＰＰ−１０３３４、ＴＰＰ−１０３３５、ＴＰＰ−１０３３６及びＴＰＰ−１０３３７である。これらの抗体及び抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２５５】
本発明の文脈で、好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−２０９０、ＴＰＰ−２６５８、ＴＰＰ−５４４２、ＴＰＰ−８８２５、ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７、ＴＰＰ−１０３３４、ＴＰＰ−１０３３５、ＴＰＰ−１０３３６及びＴＰＰ−１０３３７である。より好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７、ＴＰＰ−１０３３４、ＴＰＰ−１０３３５、ＴＰＰ−１０３３６及びＴＰＰ−１０３３７である。特に好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７である。
【０２５６】
抗Ｂ７Ｈ３抗体
本発明によれば、抗Ｂ７Ｈ３抗体を用いることが可能である。
【０２５７】
「抗Ｂ７Ｈ３抗体」又は「Ｂ７Ｈ３に特異的に結合する抗体」という表現は、好ましくは診断及び／又は治療用途に十分なアフィニティを有して、がん標的分子Ｂ７Ｈ３（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００１０１９９０７．１、配列番号１６５）に結合する抗体に関するものである。特定の実施形態において、その抗体は、解離定数（ＫＤ）≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭでＢ７Ｈ３に結合する。
【０２５８】
Ｂ７Ｈ３に結合する抗体及び抗原結合性断片の例は、当業者には公知であり、例えば、ＷＯ２０１１０９４００、ＥＰ１７７３８８４及びＷＯ２０１４０６１２７７に記載されている。ＥＰ２１２１００８には、抗Ｂ７Ｈ３抗体８Ｈ９及びそれのＣＤＲ配列が記載されている。
【０２５９】
これらの抗体及び抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２６０】
抗Ｂ７Ｈ３抗体の好ましい実施形態は、組み換えマウスＢ７Ｈ３（マウスＣＤ２７６；遺伝子ＩＤ：１０２６５７）及びヒトＢ７Ｈ３（ヒトＣＤ２７６；遺伝子ＩＤ：８０３８１）を発現する細胞について抗体ファージディスプレイライブラリをスクリーニングすることで得た。得られた抗体を、ヒトＩｇＧ１フォーマットに変換した。抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２が好ましい例である。
【０２６１】
本発明の文脈において、好ましいものは、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７である。
【０２６２】
抗ＨＥＲ２抗体：
本発明によれば、抗ＨＥＲ２抗体を用いることが可能である。
【０２６３】
「抗ＨＥＲ２抗体」又は「ＨＥＲ２に特異的に結合する抗体」という表現は、好ましくは診断及び／又は治療用途に十分なアフィニティを有して、がん標的分子ＨＥＲ２（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００４４３９．２、配列番号１６６）に結合する抗体に関するものである。特定の実施形態において、その抗体は、解離定数（ＫＤ）≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭでＨＥＲ２に結合する。
【０２６４】
がん標的分子ＨＥＲ２に結合する抗体の例は、トラスツズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）である。トラスツズマブは、特に乳がん治療に用いられるヒト化抗体である。特に好ましい実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体はＴＰＰ−１０１５（トラスツズマブ類縁体）である。
【０２６５】
ＨＥＲ２に結合する抗体のさらなる例は、トラスツズマブ（ＩＮＮ７６３７、ＣＡＳ番号：ＲＮ：１８０２８８−６９−１）及びペルツズマブ（ＣＡＳ番号：３８０６１０−２７−５）に加えて、ＷＯ２００９／１２３８９４−Ａ２、ＷＯ２００／８１４０６０３−Ａ２、又はＷＯ２０１１／０４４３６８−Ａ２に開示の抗体でもある。抗ＨＥＲ２複合体の１例は、トラスツズマブ−エムタンシン（ＩＮＮ−番号９２９５）である。これらの抗体及び抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２６６】
本発明の文脈において、特に好ましいものは、抗ＨＥＲ２抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５である。
【０２６７】
抗ＥＧＦＲ抗体
本発明によれば、抗ＥＧＦＲ抗体を用いることが可能である。
【０２６８】
「抗ＥＧＦＲ抗体」又は「ＥＧＦＲに特異的に結合する抗体」という表現は、好ましくは診断及び／又は治療用途に十分なアフィニティを有して、がん標的分子ＥＧＦＲ（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００５２１９．２、配列番号１６７）に結合する抗体に関するものである。特定の実施形態において、その抗体は、解離定数（ＫＤ）≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭでＥＧＦＲに結合する。
【０２６９】
ある好ましい実施形態において、抗ＥＧＦＲ抗体は、ＴＰＰ−９８１（セツキシマブ）、パニツムマブ、ニモツズマブからなる群から選択される。特に好ましい実施形態において、抗ＥＧＦＲ抗体はＴＰＰ−９８１（セツキシマブ）である。
【０２７０】
ＥＧＦＲ抗体のさらなる実施形態は次の通りである。
【０２７１】
・ザルツムマブ／２Ｆ８／ＨｕＭａｘ−ＥＧＦｒ、Ｇｅｎｍａｂ  Ａ／Ｓから（ＷＯ０２／１００３４８、ＷＯ２００４／０５６８４７、ＩＮＮ番号８６０５）
・ネシツムマブ／１１Ｆ８、ＩｍＣｌｏｎｅ／ＩＭＣ−１１Ｆ８、ＩｍＣｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．［Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ＆  Ｃｏ］から（ＷＯ２００５／０９０４０７（ＥＰ０１７３５３４８−Ａ１、ＵＳ２００７／０２６４２５３−Ａ１、ＵＳ７，５９８，３５０、ＷＯ２００５／０９０４０７−Ａ１）、ＩＮＮ番号９０８３）
・マツズマブ／抗ＥＧＦＲＭＡｂ、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／抗ＥＧＦＲ  ＭＡｂ、Ｔａｋｅｄａ／ＥＭＤ７２０００／ＥＭＤ−６２００／ＥＭＤ−７２０００及びＥＭＤ−５５９００／ＭＡｂ４２５／モノクローナル抗体４２５、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｔａｋｅｄａから（ＷＯ９２／１５６８３、ＩＮＮ番号８１０３（マツズマブ））
・ＲＧ−７１６０／ＧＡ−２０１／ＧＡ２０１／Ｒ−７１６０／Ｒ７１６０／ＲＧ７１６０／ＲＯ−４８５８６９６／ＲＯ−５０８３９４５／ＲＯ４８５８６９６／ＲＯ５０８３９４５、Ｇｌｙｃａｒｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＡＧ（Ｒｏｃｈｅ  Ｈｏｌｄｉｎｇ  ＡＧ）から（ＷＯ２０１０／１１２４１３−Ａ１、ＷＯ２０１０／１１５５５４）
・ＧＴ−ＭＡＢ５．２−ＧＥＸ／ＣｅｔｕＧＥＸ、Ｇｌｙｃｏｔｏｐｅ  ＧＭＢＨ（ＷＯ２００８／０２８６８６−Ａ２から（ＥＰ０１９００７５０−Ａ１、ＥＰ０１９１１７６６−Ａ１、ＥＰ０２０７３８４２−Ａ２、ＵＳ２０１０／００２８９４７−Ａ１）
・ＩＳＵ−１０１、Ｉｓｕ  Ａｂｘｉｓ  Ｉｎｃ（ＩＳＵ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ  Ｌｔｄ）／Ｓｃａｎｃｅｌｌから（ＷＯ２００８／００４８３４−Ａ１）
・ＡＢＴ−８０６／ｍＡｂ−８０６／ｃｈ−８０６／抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体８０６、Ｌｕｄｗｉｇ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ／Ａｂｂｏｔｔ／Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから（ＷＯ０２／０９２７７１、ＷＯ２００５／０８１８５４及びＷＯ２００９／０２３２６５）
・ＳＹＭ−００４（二つのキメラＩｇＧ１抗体（９９２及び１０２４）からなる）、Ｓｙｍｐｈｏｇｅｎ  Ａ／Ｓから（ＷＯ２０１０／０２２７３６−Ａ２）
・ＭＲ１−１／ＭＲ１−１ＫＤＥＬ、ＩＶＡＸ  Ｃｏｒｐ（Ｔｅｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ  Ｌｔｄ）から（Ｄｕｋｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、（特許：ＷＯ２００１／０６２９３１−Ａ２）
・欠失変異体に対する抗体、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、Ａｍｇｅｎ／Ａｂｇｅｎｉｘから（ＷＯ２００５／０１０１５１、ＵＳ７，６２８，９８６）
・ＳＣ−１００、Ｓｃａｎｃｅｌｌ  Ｌｔｄから（ＷＯ０１／０８８１３８−Ａ１）
・ＭＤＸ−４４７／ＥＭＤ８２６３３／ＢＡＢ−４４７／Ｈ４４７／ＭＡｂ、ＥＧＦＲ、Ｍｅｄａｒｅｘ／Ｍｅｒｃｋ  ＫｇａＡ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ（ＵＳ）／Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ（ＤＥ）／Ｔａｋｅｄａ（ＪＰ）から、（ＷＯ９１／０５８７１、ＷＯ９２／１５６８３）
・抗ＥＧＦＲ−Ｍａｂ、Ｘｅｎｃｏｒから（ＷＯ２００５／０５６６０６）
・ＤＸＬ−１２１８／抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体（癌）、ＩｎＮｅｘｕｓ、ＩｎＮｅｘｕｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃから、Ｐｈａｒｍａｐｒｏｊｅｃｔｓ  ＰＨ０４８６３８。
【０２７２】
抗炭酸脱水酵素ＩＸ抗体
がん標的分子炭酸脱水酵素ＩＸに結合する抗体の例が、ＷＯ２００７／０７０５３８−Ａ２（例えば、請求項１〜１６）に記載されている。
【０２７３】
抗ＣＤ１２３抗体
「抗ＣＤ１２３抗体」又は「ＣＤ１２３に特異的に結合する抗体」という表現は、好ましくは診断及び／又は治療用途に十分なアフィニティを有して、がん標的分子ＣＤ１２３（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００２１７４．１；Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ：Ｐ２６９５１）に結合する抗体に関するものである。特定の実施形態において、その抗体は、解離定数（ＫＤ）≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭでＣＤ１２３に結合する。
【０２７４】
Ｓｕｎら（Ｓｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６，  Ｂｌｏｏｄ  ８７（１）８３−９２）は、ＩＬ−３Ｒα、ＣＤ１２３のＮ末端ドメインに結合するモノクローナル抗体７Ｇ３の形成及び特性について記載している。米国特許第６，１７７，０７８号（Ｌｏｐｅｚ）は、抗ＣＤ１２３抗体７Ｇ３に関するものである。この抗体のキメラ変異体（ＣＳＬ３６０）は、ＷＯ２００９／０７０８４４に記載されており、ヒト化版（ＣＳＬ３６２）がＷＯ２０１２／０２１９３４に記載されている。７Ｇ３抗体の配列がＥＰ２４２６１４８に開示されている。この配列は、ＣＤＲ移植によって得られるヒト化抗体の開始点を構成する。
【０２７５】
細胞表面抗原結合後に、特に良好に取り込まれる抗体は、Ｋｕｏら（Ｋｕｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００９，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ．  ２０（１０）：１９７５−８２）によって開示の抗ＣＤ１２３抗体１２Ｆ１である。抗体１２Ｆ１は、抗体７Ｇ３より高いＣＤ１２３に対するアフィニティで結合し、細胞表面抗原結合後に、７Ｇ３より顕著に早く取り込まれる。１２Ｆ１に基づく二重特異的ｓｃＦｖ免疫融合タンパク質が、ＷＯ２０１３／１７３８２０に開示されている。抗体ＴＰＰ−６０１３は、１２Ｆ１のキメラ変異体である。
【０２７６】
これらのマウス抗体のヒト化変異体が、生殖系列配列におけるＣＲＤ移植及び至適化に基づいて形成された。
【０２７７】
抗ＣＸＣＲ５抗体
「抗ＣＸＣＲ５抗体」又は「ＣＸＣＲ５に特異的に結合する抗体」という表現は、好ましくは診断及び／又は治療用途に十分なアフィニティを有して、がん標的分子ＣＸＣＲ５（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００１７０７．１）に結合する抗体に関するものである。特定の実施形態において、その抗体は、解離定数（ＫＤ）≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭでＣＸＣＲ５に結合する。
【０２７８】
ＣＸＣＲ５に結合する抗体及び抗原結合性断片の例は当業者には公知であり、例えばＥＰ２１９５０２３に記載されている。
【０２７９】
ラット抗体ＲＦ８Ｂ２（ＡＣＣ２１５３）についてのハイブリドーマ細胞をＤＳＭＺから購入し、その抗体の配列を標準法によって確認した。この配列は、ＣＤＲ移植によって得られるヒト化抗体についての開始点を構成する。
【０２８０】
この抗体のヒト化変異体を、生殖系列配列へのＣＤＲ移植に基づいて形成する。
【０２８１】
抗Ｃ４．４ａ抗体：
Ｃ４．４ａ抗体及び抗原結合性断片の例が、ＷＯ２０１２／１４３４９９Ａ２に記載されている。その抗体の配列は、ＷＯ２０１２／１４３４９９Ａ２の表１に提供されており、その表において、各行は、列１に列記された抗体の可変軽鎖又は可変重鎖の個々のＣＤＲアミノ酸配列を示す。
【０２８２】
抗ＣＤ２０抗体：
がん標的分子ＣＤ２０に結合する抗体の１例は、リツキシマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）である。リツキシマブ（ＣＡＳ番号：１７４７２２−３１−７）は、非ホジキンリンパ腫の治療に用いられるキメラ抗体である。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２８３】
抗ＣＤ５２抗体：
がん標的分子ＣＤ５２に結合する抗体の１例は、アレムツズマブ（Ｇ酵素）である。アレムツズマブ（ＣＡＳ番号：２１６５０３−５７−０）は、慢性リンパ性白血病の治療に用いられるヒト化抗体である。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２８４】
抗メソテリン抗体：
抗メソテリン抗体の例が、例えばＷＯ２００９／０６８２０４に記載されている。ＷＯ２００９／０６８２０４に開示の全ての抗体及び抗原結合性断片を、本明細書で開示の本発明の文脈で用いることができる。より好ましくは、ＷＯ２００９／０６８２０４に開示の抗体はＭＦ−Ｔである。
【０２８５】
抗ＣＤ３０抗体
がん標的分子ＣＤ３０に結合し、がん、例えばホジキンリンパ腫の治療に使用可能な抗体の例には、ブレンツキシマブ、イラツムマブ及びＷＯ２００８／０９２１１７、ＷＯ２００８／０３６６８８又はＷＯ２００６／０８９２３２に開示の抗体がある。抗ＣＤ３０複合体の１例は、ブレンツキシマブベドチン（ＩＮＮ番号９１４４）である。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２８６】
抗ＣＤ２２抗体
がん標的分子ＣＤ２２に結合し、がん、例えばリンパ腫の治療に使用可能な抗体の例は、イノツズマブ及びエプラツズマブである。抗ＣＤ２２複合体の例は、イノツズマブオゾガマイシン（ＩＮＮ番号８５７４）又は抗ＣＤ２２−ＭＭＡＥ及び抗ＣＤ２２−ＭＣ−ＭＭＡＥ（ＣＡＳ登録番号：それぞれ１３９５０４−５０−０及び４７４６４５−２７−７）である。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２８７】
抗ＣＤ３３抗体
がん標的分子ＣＤ３３に結合し、がん、例えば白血病の治療に用いることができる抗体の例は、ゲムツズマブ及びリンツズマブ（ＩＮＮ７５８０）である。抗ＣＤ３３複合体の１例は、ゲムツズマブ−オゾガマイシンである。これらの抗体及び抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２８８】
抗ＮＭＢ抗体
がん標的分子ＮＭＢに結合し、がん、例えばメラノーマ又は乳がんの治療に用いることができる抗体の例は、グレンバツムマブ（ＩＮＮ９１９９）である。抗ＮＭＢ複合体の例は、グレンバツムマブベドチン（ＣＡＳ登録番号：４７４６４５−２７−７）である。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２８９】
抗ＣＤ５６抗体
がん標的分子ＣＤ５６に結合し、がん、例えば多発性骨髄腫、小細胞肺癌、ＭＣＣ又は卵巣癌の治療に用いることができる抗体の例は、ロルボツズマブである。抗ＣＤ５７複合体の例は、ロルボツズマブメルタンシン（ＣＡＳ登録番号：１３９５０４−５０−０）である。これらの抗体及び抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２９０】
抗ＣＤ７０抗体
がん標的分子ＣＤ７０に結合し、がん、例えば非ホジキンリンパ腫又は腎細胞がんの治療に用いることができる抗体の例が、ＷＯ２００７／０３８６３７−Ａ２及びＷＯ２００８／０７０５９３−Ａ２に開示されている。抗ＣＤ７０複合体の１例は、ＳＧＮ−７５（ＣＤ７０ＭＭＡＦ）である。これらの抗体及び抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２９１】
抗ＣＤ７４抗体
がん標的分子ＣＤ７４に結合し、がん、例えば多発性骨髄腫の治療に用いることができる抗体の例はミラツズマブである。抗ＣＤ７４複合体の１例はミラツズマブ−ドキソルビシン（ＣＡＳ登録番号：２３２１４−９２−８）である。これらの抗体及び抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２９２】
抗ＣＤ１９抗体
がん標的分子ＣＤ１９に結合し、がん、例えば非ホジキンリンパ腫の治療に用いることができる抗体の例が、ＷＯ２００８／０３１０５６−Ａ２に開示されている。さらなる抗体及び抗ＣＤ１９複合体の例（ＳＡＲ３４１９）が、ＷＯ２００８／０４７２４２−Ａ２に開示されている。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２９３】
抗ムチン抗体
がん標的分子ムチン−１に結合し、がん、例えば非ホジキンリンパ腫の治療に用いることができる抗体の例は、クリバツズマブ及びＷＯ２００３／１０６４９５−Ａ２、ＷＯ２００８／０２８６８６−Ａ２に開示の抗体である。抗ムチン複合体の例が、ＷＯ２００５／００９３６９−Ａ２に開示されている。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２９４】
抗ＣＤ１３８抗体
がん標的分子ＣＤ１３８及びそれの複合体に結合し、がん、例えば多発性骨髄腫の治療に用いることができる抗体の例が、ＷＯ２００９／０８０８２９−Ａ１、ＷＯ２００９／０８０８３０−Ａ１に開示されている。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２９５】
抗インテグリン−αＶ抗体
がん標的分子インテグリンαＶに結合し、がん、例えばメラノーマ、肉腫又は癌腫の治療に用いることができる抗体の例は、インテツムマブ（ＣＡＳ登録番号：７２５７３５−２８−４）、アブシキシマブ（ＣＡＳ登録番号：１４３６５３−５３−６）、エタラジズマブ（ＣＡＳ登録番号：８９２５５３−４２−３）及びＵＳ７，４６５，４４９、ＥＰ７１９８５９−Ａ１、ＷＯ２００２／０１２５０１−Ａ１及びＷＯ２００６／０６２７７９−Ａ２に開示の抗体である。抗インテグリンαＶ複合体の例は、インテツムマブ−ＤＭ４及びＷＯ２００７／０２４５３６−Ａ２に開示の他のＡＤＣ類である。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２９６】
抗ＴＤＧＦ１抗体
がん標的分子ＴＤＧＦ１に結合し、がんの治療に用いることができる抗体の例は、ＷＯ０２／０７７０３３−Ａ１、ＵＳ７，３１８，９２４、ＷＯ２００３／０８３０４１−Ａ２及びＷＯ２００２／０８８１７０−Ａ２に開示の抗体である。抗ＴＤＧＦ１複合体の例が、ＷＯ２００２／０８８１７０−Ａ２に開示されている。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２９７】
抗ＰＳＭＡ抗体
がん標的分子ＰＳＭＡに結合し、がん、例えば前立腺癌の治療に用いることができる抗体の例は、ＷＯ９７／３５６１６−Ａ１、ＷＯ９９／４７５５４−Ａ１、ＷＯ０１／００９１９２−Ａ１及びＷＯ２００３／０３４９０３に開示の抗体である。抗ＰＳＭＡ複合体の例がＷＯ２００９／０２６２７４−Ａ１及びＷＯ２００７／００２２２２に開示されている。これらの抗体及び抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２９８】
抗ＥＰＨＡ２抗体
がん標的分子ＥＰＨＡ２に結合し、複合体の製造、がんの治療に用いることができる抗体の例が、ＷＯ２００４／０９１３７５−Ａ２に開示されている。これらの抗体及び抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０２９９】
抗ＳＬＣ４４Ａ４抗体
がん標的分子ＳＬＣ４４Ａ４に結合し、複合体の製造に、そしてがん、例えば膵臓癌又は前立腺癌の治療に使用可能な抗体の例がＷＯ２００９／０３３０９４−Ａ２及びＵＳ２００９／０１７５７９６−Ａ１に開示されている。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０３００】
抗ＨＬＡ−ＤＯＢ抗体
がん標的分子ＨＬＡ−ＤＯＢに結合する抗体の例は、がん、例えば非ホジキンリンパ腫の治療に用いることができる抗体Ｌｙｍ−１（ＣＡＳ登録番号：３０１３４４−９９−０）である。抗ＨＬＡ−ＤＯＢ複合体の例が、例えばＷＯ２００５／０８１７１１−Ａ２に開示されている。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０３０１】
抗ＶＴＣＮ１抗体
がん標的分子ＶＴＣＮ１に結合し、複合体の製造に、そしてがん、例えば卵巣癌、膵臓がん、肺がん又は乳がんの治療に用いることができる抗体の例が、ＷＯ２００６／０７４４１８−Ａ２に開示されている。これらの抗体及びそれの抗原結合性断片は、本発明の文脈で用いることができる。
【０３０２】
抗ＦＧＦＲ２抗体
抗ＦＧＦＲ２抗体及び抗原結合性断片の例がＷＯ２０１３０７６１８６に記載されている。その抗体の配列がＷＯ２０１３０７６１８６の表９及び表１０に示してある。好ましいものは、Ｍ０４８−Ｄ０１及びＭ０４７−Ｄ０８と称される抗体由来の抗体、抗原結合性断片及び抗体の変異体である。
【０３０３】
本発明によるバインダー−薬物複合体に好ましい抗体及び抗原結合性抗体断片
本願において、バインダー−薬物複合体の文脈で、下記の表に示した下記の好ましい抗体：ＴＰＰ−２０９０、ＴＰＰ−２６５８、ＴＰＰ−５４４２、ＴＰＰ−８８２５、ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７、ＴＰＰ−１０３３４、ＴＰＰ−１０３３５、ＴＰＰ−１０３３６、ＴＰＰ−１０３３７、ＴＰＰ−１０１５、ＴＰＰ−７５１０、ＴＰＰ−７５１１、ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７が挙げられる。
【０３０４】
表：抗体のタンパク質配列：
【表１】
2020502201.tif 000027
2020502201.tif 000028
【０３０５】
ＴＰＰ−２０９０、ＴＰＰ−２６５８、ＴＰＰ−５４４２、ＴＰＰ−８８２５、ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７、ＴＰＰ−１０３３４、ＴＰＰ−１０３３５、ＴＰＰ−１０３３６、ＴＰＰ−１０３３７、ＴＰＰ−１０１５、ＴＰＰ−７５１０、ＴＰＰ−７５１１、ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７は、重鎖（ＶＨ）の可変領域又は軽鎖（ＶＬ）の可変領域における上記の表で指定のＣＤＲ配列（Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２、Ｈ−ＣＤＲ３、Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２、Ｌ−ＣＤＲ３）の１以上を含む抗体である。好ましくは、当該抗体は、重鎖（ＶＨ）の指定の可変領域及び／又は軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む。好ましくは、当該抗体は、重鎖（ＩｇＧ重鎖）の指定の領域及び／又は軽鎖（ＩｇＧ軽鎖）の指定の領域を含む。
【０３０６】
ＴＰＰ−９８１は、配列番号２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＥＧＦＲ抗体である。
【０３０７】
ＴＰＰ−１０１５は、配列番号１２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＨＥＲ２抗体である。
【０３０８】
ＴＰＰ−２０９０は、配列番号２２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号２３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号２４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号２６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号２７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号２８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３０９】
ＴＰＰ−２６５８は、配列番号３２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号３３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号３４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号３６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号３７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号３８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３１０】
ＴＰＰ−５４４２は、配列番号４２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号４３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号４４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号４６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号４７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号４８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３１１】
ＴＰＰ−７００６は、配列番号５２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号５３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号５４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号５６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号５７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号５８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３１２】
ＴＰＰ−７００７は、配列番号６２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号６３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号６４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号６６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号６７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号６８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３１３】
ＴＰＰ−７５１０は、配列番号７２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号７３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号７４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号７６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号７７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号７８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＨＥＲ２抗体である。
【０３１４】
ＴＰＰ−７５１１は、配列番号８２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号８３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号８４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号８６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号８７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号８８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＨＥＲ２抗体である。
【０３１５】
ＴＰＰ−８３８２は、配列番号９２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号９３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号９４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号９６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号９７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号９８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体である。
【０３１６】
ＴＰＰ−８５６７は、配列番号１０２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１０３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１０４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１０６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１０７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１０８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体である。
【０３１７】
ＴＰＰ−８８２５は、配列番号１１２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１１３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１１４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１１６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１１７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１１８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３１８】
ＴＰＰ−１０３３４は、配列番号１２２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１２３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１２４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１２６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１２７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１２８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３１９】
ＴＰＰ−１０３３５は、配列番号１３２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１３３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１３４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１３６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１３７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１３８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３２０】
ＴＰＰ−１０３３６は、配列番号１４２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１４３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１４４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１４６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１４７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１４８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３２１】
ＴＰＰ−１０３３７は、配列番号１５２によって示される重鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｈ−ＣＤＲ１）、配列番号１５３によって示される重鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｈ−ＣＤＲ２）及び配列番号１５４によって示される重鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｈ−ＣＤＲ３）を含む重鎖の可変領域（ＶＨ）、並びに配列番号１５６によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ１配列（Ｌ−ＣＤＲ１）、配列番号１５７によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ２配列（Ｌ−ＣＤＲ２）及び配列番号１５８によって示される軽鎖の可変ＣＤＲ３配列（Ｌ−ＣＤＲ３）を含む軽鎖の可変領域（ＶＬ）を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３２２】
ＴＰＰ−９８１は、好ましくは配列番号１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＥＧＦＲ抗体である。
【０３２３】
ＴＰＰ−１０１５は、好ましくは配列番号１１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号１５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＨＥＲ２抗体である。
【０３２４】
ＴＰＰ−２０９０は、好ましくは配列番号２１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号２５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３２５】
ＴＰＰ−２６５８は、好ましくは配列番号３１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号３５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３２６】
ＴＰＰ−５４４２は、好ましくは配列番号４１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号４５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３２７】
ＴＰＰ−７００６は、好ましくは配列番号５１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号５５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３２８】
ＴＰＰ−７００７は、好ましくは配列番号６１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号６５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３２９】
ＴＰＰ−７５１０は、好ましくは配列番号７１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号７５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＨＥＲ２抗体である。
【０３３０】
ＴＰＰ−７５１１は、好ましくは配列番号８１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号８５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＨＥＲ２抗体である。
【０３３１】
ＴＰＰ−８３８２は、好ましくは配列番号９１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号９５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体である。
【０３３２】
ＴＰＰ−８５６７は、好ましくは配列番号１０１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号１０５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体である。
【０３３３】
ＴＰＰ−８８２５は、好ましくは配列番号１１１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号１１５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３３４】
ＴＰＰ−１０３３４は、好ましくは配列番号１２１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号１２５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３３５】
ＴＰＰ−１０３３５は、好ましくは配列番号１３１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号１３５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３３６】
ＴＰＰ−１０３３６は、好ましくは配列番号１４１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号１４５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３３７】
ＴＰＰ−１０３３７は、好ましくは配列番号１５１によって示される重鎖（ＶＨ）の可変領域及び配列番号１５５によって示される軽鎖（ＶＬ）の可変領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３３８】
ＴＰＰ−９８１は、好ましくは配列番号９によって示される重鎖の領域及び配列番号１０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＥＧＦＲ抗体である。
【０３３９】
ＴＰＰ−１０１５は、好ましくは配列番号１９によって示される重鎖の領域及び配列番号２０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＨＥＲ２抗体である。
【０３４０】
ＴＰＰ−２０９０は、好ましくは配列番号２９によって示される重鎖の領域及び配列番号３０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３４１】
ＴＰＰ−２６５８は、好ましくは配列番号３９によって示される重鎖の領域及び配列番号４０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３４２】
ＴＰＰ−５４４２は、好ましくは配列番号４９によって示される重鎖の領域及び配列番号５０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３４３】
ＴＰＰ−７００６は、好ましくは配列番号５９によって示される重鎖の領域及び配列番号６０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３４４】
ＴＰＰ−７００７は、好ましくは配列番号６９によって示される重鎖の領域及び配列番号７０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３４５】
ＴＰＰ−７５１０は、好ましくは配列番号７９によって示される重鎖の領域及び配列番号８０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＨＥＲ２抗体である。
【０３４６】
ＴＰＰ−７５１１は、好ましくは配列番号８９によって示される重鎖の領域及び配列番号９０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＨＥＲ２抗体である。
【０３４７】
ＴＰＰ−８３８２は、好ましくは配列番号９９によって示される重鎖の領域及び配列番号１００によって示される軽鎖の領域を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体である。
【０３４８】
ＴＰＰ−８５６７は、好ましくは配列番号１０９によって示される重鎖の領域及び配列番号１１０によって示される軽鎖の領域を含む抗Ｂ７Ｈ３抗体である。
【０３４９】
ＴＰＰ−８８２５は、好ましくは配列番号１１９によって示される重鎖の領域及び配列番号１２０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３５０】
ＴＰＰ−１０３３４は、好ましくは配列番号１２９によって示される重鎖の領域及び配列番号１３０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３５１】
ＴＰＰ−１０３３５は、好ましくは配列番号１３９によって示される重鎖の領域及び配列番号１４０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３５２】
ＴＰＰ−１０３３６は、好ましくは配列番号１４９によって示される重鎖の領域及び配列番号１５０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３５３】
ＴＰＰ−１０３３７は、好ましくは配列番号１５９によって示される重鎖の領域及び配列番号１６０によって示される軽鎖の領域を含む抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。
【０３５４】
ＬＩＧバインダーのリンカー（Ｌｂ及びＬｃ）
文献に、抗体などのペプチド若しくはタンパク質への有機分子の共有結合的カップリング（結合）のための多様な選択肢が開示されている（例えば、Ｋ．  Ｌａｎｇ  ａｎｄ  Ｊ．  Ｗ．  Ｃｈｉｎ．  Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｖ．  ２０１４，  １１４，  ４７６４−４８０６，  Ｍ．  Ｒａｓｈｉｄｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  ２０１３，  ２４，  １２７７−１２９４参照）。本発明に従って好ましいものは、遊離チオールとして既に存在しているか、ジスルフィド架橋の還元によって発生する抗体のシステイン残基の１以上の硫黄原子を介した、及び／又は抗体のリジン残基の１以上のＮＨ基を介した、有機基の抗体への結合である。しかしながら、チロシン残基を介して、グルタミン残基を介して、非天然アミノ酸の残基を介して、遊離カルボキシル基を介して、又は抗体の糖残基を介して、ＫＳＰ阻害剤又はプロドラッグを抗体に結合させることも可能である。
【０３５５】
本発明によれば、バインダーの特異的結合部位に薬物分子を結合させて、産生物均一性を高めることも可能である。文献には、各種の結合部位特異的結合方法が記載されている（Ａｇａｒｗａｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．  Ｃｈｅｍ．  ２６，  １７６−１９２（２０１５）；Ｃａｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  Ｅｎｇｌ．  ５３，  １０５８５−１０５８７（２０１４）；Ｂｅｈｒｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ＭＡｂｓ  ６，  ４６−５３（２０１４）；Ｐａｎｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ＭＡｂｓ  ６，  ３４−４５（２０１４）。これらの方法には、特には、例えばトランスグルタミナーゼ類（ＴＧａｓｅ類）、グリシルトランスフェラーゼ類又はホルミルグリシン発生酵素を用いる酵素複合体化法などもある（Ｓｏｃｈａｊ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ａｄｖａｎｃｅｓ，  ３３，  ７７５−７８４，  （２０１５））。
【０３５６】
本発明によれば、キネシン紡錘体タンパク質阻害剤がバインダーのグルタミン側鎖に結合しているキネシン紡錘体タンパク質阻害剤の結合部位特異的バインダー複合体を提供することが可能である。
【０３５７】
バインダーが抗体である場合、それは、好ましくは定常領域にアクセプターグルタミを含む。そのようなアクセプターグルタミンは、好適な位置のグルタミンへの突然変異（例えば、重鎖の突然変異Ｎ２９７Ｑ、Ｋａｂａｔ  ＥＵナンバリング）を介して、又は脱グリコシル又は脱グリコシル化抗体の形成を介して（例えば、ＰＮＧａｓｅＦによる酵素的脱グリコシルを介して、又は重鎖の突然変異Ｎ２９７Ｘを介して、Ｋａｂａｔ  ＥＵナンバリング（この場合、ＸはＮ以外のアミノ酸であることができる。））導入することができる。脱グリコシル若しくは脱グリコシル化抗体のその後者の場合、重鎖のグルタミン残基Ｑ２９５（Ｋａｂａｔ  ＥＵナンバリング）はアクセプターグルタミンとなる。特に好ましいものは、Ｎ２９７Ａ又はＮ２９７Ｑ突然変異（Ｋａｂａｔ  ＥＵナンバリング）を含む抗体である。従って、本発明で記載の全ての抗体が同様に、ＰＮＧａｓｅ  Ｆによる脱グリコシルによって、又は重鎖のＮ２９７（Ｋａｂａｔ  ＥＵナンバリング）（抗体のＫａｂａｔナンバリングシステム、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｌｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，  ５ｔｈ  Ｅｄ．  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，  Ｂｅｔｈｅｓｄａ，  ＭＤ．（１９９１）参照）のＮ以外のいずれかの他のアミノ酸への突然変異によって作られるこれら抗体の脱グリコシル化変異体を含む。さらに、本明細書に記載の全ての抗体は、同様に、操作により、トランスグルタミナーゼ触媒反応のために１以上のアクセプターグルタミン残基を含む記載の抗体の変異体を含む。
【０３５８】
そのような結合部位特異的結合の一つの方法は、トランスグルタミナーゼによる結合体の結合部位特異的結合に関する文献記載のアプローチである。細菌トランスグルタミナーゼ（ＢＴＧ）（ＥＣ２．３．２．１３）も含むトランスグルタミナーゼ（ＴＧａｓｅ）は、グルタミン類のγ−カルボニルアミド基とリジン類の一級アミン基の間の共有結合の形成を触媒する酵素のファミリーである。そのようなトランスグルタミナーゼはアミン供与体としてリジン以外の基質も受容することから、それらを用いて、好適なアクセプターグルタミン類で抗体を含むタンパク質が修飾されている（Ｊｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  Ｅｎｇｌ  ４９，  ９９９５−９９９７  （２０１０）；  Ｊｏｓｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４０，  ４７−５４  （２０００）；  Ｍｉｎｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  １９，  ２７１−２７８  （２００８）；  Ｄｅｎｎｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ｉｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕａｇｔｅｓ  （Ｄｕｃｒｙ，  Ｌ．，  Ｅｄ．），  ｐｐ  ２０５−２１５，  Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ．  （２０１３））。一方で、遺伝子工学によって抗体に導入されたアクセプターグルタミン残基である人工のグルタミン標識を含む抗体に薬物を結合させるのに、トランスグルタミナーゼが用いられている（Ｓｔｒｏｐ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  ２０，  １６１−１６７（２０１３））。他方で、抗体の重鎖の定常領域の保存グルタミン残基Ｑ２９５（Ｋａｂａｔ  ＥＵナンバリング）は、脱グリコシル化ＩｇＧ１分子の骨格における細菌トランスグルタミナーゼ（ＥＣ２．３．２．１３）に対する唯一のγ−カルボニルアミド供与体であることから、アクセプターグルタミンであるが、抗体が重鎖の位置Ｎ２９７（Ｋａｂａｔ  ＥＵナンバリング）でグリコシル化されている場合に、ＩｇＧ１の骨格にアクセプターグルタミンは全く存在しないことが報告されている（Ｊｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  Ｅｎｇｌ  ４９，  ９９９５−９９９７（２０１０））。要約すると、細菌トランスグルタミナーゼを、抗体のアクセプターグルタミン残基でのアミン−薬物基質、例えば薬物−リンカー構築物の結合に用いることができる。そのようなアクセプターグルタミンは、突然変異による抗体の操作によって、又は脱グリコシル化抗体の形成によって導入することができる。そのような脱グリコシル化抗体は、Ｎ−グリコシダーゼＦ（ＰＮＧａｓｅＦ）を用いる脱グリコシルによって、又は重鎖のグリコシル化部位のＮ２９７（Ｋａｂａｔ  ＥＵナンバリング）のＮ以外の他のいずれかのアミノ酸への突然変異によって導入することができる。細菌トランスグルタミナーゼを用いるそのような脱グリコシル化抗体の酵素的結合が、突然変異Ｎ２９７Ｄ、Ｎ２９７Ｑ（Ｊｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  Ｅｎｇｌ  ４９，  ９９９５−９９９７（２０１０））、又はＮ２９７Ｓ（特許出願ＷＯ２０１３０９２９９８Ａ１及びＷＯ２０１３０９２９８３Ａ２を参照する。）を含む脱グリコシル��抗体変異体について記載されている。トランスグルタミナーゼによるそのような脱グリコシル化抗体の酵素的結合によって、両方の重鎖が位置Ｑ２９５（Ｋａｂａｔ  ＥＵナンバリング）で特異的に官能化されている、２のＤＡＲを有するＡＤＣが提供される。重鎖の突然変異Ｎ２９７Ｑのみが、重鎖当たりもう一つ別の結合部位を提供する。そのような変異体の結合により、両方の重鎖が位置Ｑ２９５及びＱ２９７で特異的に官能化されている、４のＤＡＲを有するＡＤＣが生じる。
【０３５９】
重鎖が突然変異Ｑ２９５Ｎ及びＮ２９７Ｑを有する抗体変異体は、位置Ｑ２９７に一つのみのアクセプターグルタミン残基を有する（Ｓｉｍｏｎｅ  Ｊｅｇｅｒ，  Ｓｉｔｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｕｍｏｕｒ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｕｓｉｎｇ  ｔｒａｎｓｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ，  Ｔｈｅｓｉｓ  ａｔ  ＥＴＨ  Ｚｕｒｉｃｈ  （２００９））。細菌トランスグルタミナーゼを用いる脱グリコシル化抗体の結合部位特異的結合について記載した文献にいくつかの例がある（例えばＤｅｎｎｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９，  ５６９−５７８  （２０１４）；  Ｌｈｏｓｐｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  １２，  １８６３−１８７１  （２０１５））。脱グリコシル化抗体のトランスグルタミナーゼ触媒結合部位特異的官能化の戦略が、図１にまとめてある。
【０３６０】
カップリング（結合部位特異的及び結合部位非特異的の両方で）が、リンカーと称されるものを用いて行われる。リンカーは、イン・ビボで開裂可能なリンカーの群及びイン・ビボで安定なリンカーの群に分類することができる（Ｌ．  Ｄｕｃｒｙ  ａｎｄ  Ｂ．  Ｓｔｕｍｐ，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  ２１，  ５−１３（２０１０）参照）。イン・ビボで開裂可能なリンカーは、イン・ビボで開裂可能な基を有し、そこで、イン・ビボで化学的に開裂可能な基とイン・ビボで酵素的に開裂可能な基の間で区別することが可能である。「イン・ビボで化学的に開裂可能な」及び「イン・ビボで酵素的に開裂可能な」は、リンカー又は基が循環中では安定であり、標的細胞で若しくは標的細胞内でのみ、そこでの化学的若しくは酵素的に異なる環境（比較的低いｐＨ；高いグルタチオン濃度；カテプシン若しくはプラスチンなどのリソソーム酵素、又は例えば、β−グルクロニダーゼ類などのグリオシダーゼ類（ｇｌｙｏｓｉｄａｓｅｓ）の存在）によって開裂することで、低分子量ＫＳＰ阻害剤又はそれの誘導体を放出することを意味する。イン・ビボで化学的に開裂可能な基は、特にはジスルフィド、ヒドラゾン、アセタール及びアミナールであり；酵素的にイン・ビボで開裂可能な基は、特に２−８−オリゴペプチド基、特別にはジペプチド基又はグリコシドである。ペプチド開裂部位は、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  ２００２，  １３，  ８５５−８６９及びＢｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ８  （１９９８）  ３３４１−３３４６、さらにはＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  １９９８，  ９，  ６１８−６２６に開示されている。これらには、例えば、アラニン−アラニン−アスパラギン、バリン−アラニン、バリン−リジン、バリン−シトルリン、アラニン−リジン及びフェニルアラニン−リジン（適宜に、さらなるアミド基を有する）などがある。
【０３６１】
遊離薬物の効率的放出を確保するため、酵素的開裂部位と薬物の間に自壊性リンカー要素（ＳＩＧ）と称されるものを組み込んでも良い（Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ２００８，  ８，  ６１８−６３７）。薬物は、各種機構で、例えば最初に求核基を酵素的に放出し、次に電子カスケードを介して脱離させることで（Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  １９９９，  ７，  １５９７；  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００２，  ４５，  ９３７；Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００２，  １０，  ７１）、又は相当するリンカー要素の環化によって（Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００３，  １１，  ２２７７；Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００７，  １５，  ４９７３；Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．，  ２００７，  １７，  ２２４１）、又はその二つの組み合わせによって（Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔｅｒ．  Ｅｄ．，  ２００５，  ４４，  ４３７８）放出させることができる。そのようなリンカー要素の例を下記の図に示す。
【化２４】
2020502201.tif 000029
【０３６２】
例えばヒストンデアセチラーゼ及びカテプシンＬによる薬物放出のための連続酵素段階の例が、Ｎａｔ．  Ｃｏｍｍｕｎ．，  ２０１３，  ４，  ２７３５に記載されており、図２に描かれている。
【０３６３】
イン・ビボで安定なリンカーは、高い安定性（血漿中２４時間後に５％未満の代謝物）によって区別され、上記のようなイン・ビボで化学的又は酵素的に開裂可能基を持たない。
【０３６４】
リンカー−Ｌｂ−又は−Ｌｃ−は好ましくは、
次の基本構造（ｉ）及び（ｉｉ）：
（ｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−（Ｌ１）ｎ−（Ｌ２）ｎ−
（ｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ２−
のうちの一つを有し、
ｍ及びｎは０又は１であり；
ＳＧは、（化学的に又は酵素的に）イン・ビボで開裂可能な基（特に、ジスルフィド、ヒドラゾン、アセタール及びアミナール；又はレグマイン、カテプシン又はプラスミンによって開裂可能な２から８オリゴペプチド基）であり、Ｌ１は、イン・ビボで安定な有機基を表し、Ｌ２は、バインダーに対するカップリング基又は単結合を表す。
【０３６５】
ここで、カップリングは好ましくは、抗体のシステイン残基又はリジン残基に対するものである。或いは、カップリングは、抗体のチロシン残基、グルタミン残基又は非天然アミノ酸に対するものであることができる。非天然アミノ酸は、例えば、アルデヒド又はケト基（例えば、例えばホルミルグリシン）又はアジド若しくはアルキン基（Ｌａｎ  ＆  Ｃｈｉｎ，  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｕｎｎａｔｕｒａｌ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  Ｌａｂｅｌｉｎｇ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，  Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｖ．  ２０１４，  １１４，  ４７６４−４８０６参照）を含むことができる。
【０３６６】
本発明に従って特に好ましいものは、基本的リンカー構造（ｉ）である。代謝により、基本的リンカー構造（ｉ）を有する実施形態Ｂの本発明による複合体の投与及び抗体のシステイン又はリジン残基へのリンカーのカップリングによって、下記式のシステイン又はリジン誘導体が生じる。
【化２５】
2020502201.tif 000030
【０３６７】
式中、Ｌ１は、各場合で、細胞毒性薬、例えば低分子量ＫＳＰ阻害剤、例えば式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（Ｖ）、（ＶＩ）又は（ＶＩＩ）の化合物に結合している。
【０３６８】
実施形態Ａにおけるリンカー基本構造（ｉ）を有する本発明による複合体の投与により、代謝後に、好ましくは一般式（ＩＩａ）、（ＩＩａ′）、（ＩＩａ″）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（Ｖ）、（ＶＩ）又は（ＶＩＩ）の化合物の構造を有するＫＳＰ阻害剤が生じる。
【０３６９】
本発明に従って好ましいものは、特には式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）又は（Ｖ）の化合物における位置Ｒ１への結合の場合の、特にはＬ１が下記構造のうちの一つを有する場合のリンカー基本構造（ｉｉ）でもある。
【０３７０】
（ａ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０−４−（ＣＨＣＨ３）０−４−ＣＨＹ５−Ｃ（＝Ｏ）−Ｙ７［式中、
Ｙ５は、−Ｈ又は−ＮＨＹ６であり、
Ｙ６は、−Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３であり、
Ｙ７は、単結合又は−ＮＨ−（ＣＨ２）０−４−ＣＨＮＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−であることで、
実施形態Ｂの開裂後に、相当する構造
−ＮＨ−（ＣＨ２）０−４−（ＣＨＣＨ３）０−４−ＣＨＹ５−ＣＯＯＨ又は
−ＮＨ−（ＣＨ２）０−４−（ＣＨＣＨ３）０−４−ＣＨＹ５−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０−４−ＣＨＮＨ２−ＣＯＯＨが得られる。］
（ｂ）−ＣＨ２−Ｓｘ−（ＣＨ２）０−４−ＣＨＹ５−Ｃ（＝Ｏ）−［式中、
ｘは、０又は１であり、
Ｙ５は、−Ｈ又は−ＮＨＹ６であり、
Ｙ６は、−Ｈ又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３であることで、
実施形態Ｂの開裂後に、相当する構造
−ＣＨ２−Ｓｘ−（ＣＨ２）０−４−ＣＨＹ５−ＣＯＯＨが得られる。］
実施形態Ａにおけるリンカー基本構造（ｉｉ）を有する本発明による複合体の投与により、代謝後に、好ましくは一般式（ＩＩ）の構造を有するＫＳＰ阻害剤が生じる。
【０３７１】
リンカーがシステイン側鎖又はシステイン残基に結合している場合、Ｌ２は好ましくは、システインのスルフヒドリル基と反応する基から誘導される。これらには、ハロアセチル類、マレイミド類、アジリジン類、アクリロイル類、アリール化化合物、ビニルスルホン類、ピリジルジスルフィド類、ＴＮＢチオール類及びジスルフィド還元剤などがある。これらの基は一般に、スルフヒドリル結合と求電子的に反応して、スルフィド（例えばチオエーテル）又はジスルフィド架橋を形成する。好ましいものは、安定なスルフィド架橋である。
【０３７２】
Ｌ２は好ましくは、下記の構造を有する。
【化２６】
2020502201.tif 000031
【０３７３】
式中、
＃１は、抗体の硫黄原子への連結部位であり、
＃２は、Ｌ１基への連結部位であり、
Ｒ２２は−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＲ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＲ又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ）２であり、
Ｒは、Ｃ１−３−アルキルである。
【０３７４】
この場合、Ｒ２２が−ＣＯＯＨである場合が好ましい。
【０３７５】
特に好ましいものは、Ｌ２が下記の式Ａ３及びＡ４を有する本発明の化合物である。
【化２７】
2020502201.tif 000032
【０３７６】
式中、
＃１は、抗体の硫黄原子への連結部位であり、
＃２は、薬物分子への連結部位であり、
ｘは、１又は２であり、
Ｒ２２は、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＲ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＲ又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２であり、
ＲはＣ１−３−アルキルである。
【０３７７】
この文脈において好ましくは、Ｒ２２は−ＣＯＯＨであり、この文脈において特には、ｘが１である場合、Ｒ２２は−ＣＯＯＨである。
【０３７８】
本発明による化合物において、リンカーＬｂ又はＬｃは、バインダーにおけるシステイン側鎖又はシステイン残基に結合していることができ、その場合、下記式を有する。
【０３７９】
（ｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−（Ｌ１）ｎ−（Ｌ２）ｎ−
及び
（ｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ２
式中、
ｍ及びｎは独立に０又は１であり、
ＳＧは、イン・ビボで化学的又は酵素的に開裂可能な基（特には、ジスルフィド、ヒドラゾン、アセタール及びアミナール；又はレグマイン−、カテプシン−又はプラスミン−開裂性２〜８−オリゴペプチド基）であり、
Ｌ２は、単結合又は下記の基：
【化２８】
2020502201.tif 000033
【０３８０】
であり、
＃１は、バインダー中の硫黄原子への結合部位を示し、
＃２は、Ｌ１基への結合部位を示し、
Ｌ１は、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−であり、
Ｒ１０は、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は−（ＣＨ２）０−３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｎは、０又は１であり、
ｏは、０又は１であり、
Ｇ２は、結合又は直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２）、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、Ｎ、Ｏ及びＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨ−ＣＮＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、又は、下記の基：
【化２９】
2020502201.tif 000034
【０３８１】
のうちの一つを表し、
Ｒｘは−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルである。
【０３８２】
好ましくは、本発明は、リンカーＬｂ又はＬｃがバインダーのシステイン側鎖又はシステイン残基に結合しており、下記式を有する化合物に関するものである。
【０３８３】
§−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−Ｌ１−（Ｌ２）ｎ−§§
式中、
ｍは、０又は１であり、
ｎは、０又は１であり、
§は、薬剤分子又は式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基への結合であり、
§§は、バインダーへの結合であり、
−Ｌ２は、下記の基：
【化３０】
2020502201.tif 000035
【０３８４】
であり、
又は、結合であり、
＃１は、バインダーの硫黄原子への結合部位を示し、
＃２は、Ｌ１基への結合部位を示し、
Ｌ１は、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−であり、
Ｒ１０は、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は−（ＣＨ２）０−３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｎは、０又は１であり、
ｏは、０又は１であり、
Ｇ２は、結合又は直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２）、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、Ｎ、Ｏ及びＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨ−ＣＮＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、又は、下記の基：
【化３１】
2020502201.tif 000036
【０３８５】
のうちの一つを表し、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルである。
【０３８６】
本発明による化合物において、リンカーＬｂ又はＬｃは、バインダーのリジン側鎖又はリジン残基にも結合していても良く、その場合、一般基本構造（ｉ）及び（ｉｉ）を有する。
【０３８７】
（ｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−（Ｌ１）ｎ−（Ｌ４）ｎ−（Ｃ＝Ｏ）−§§
及び
（ｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ４−（Ｃ＝Ｏ）−§§
式中、
ｍ及びｎは独立に、０又は１であり、
ＳＧは、イン・ビボで化学的又は酵素的に開裂可能な基（特別には、ジスルフィド、ヒドラゾン、アセタール及びアミナール；又はレグマイン−、カテプシン−若しくはプラスミン−開裂性２〜８オリゴペプチド基）であり、
Ｌ１は、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−であり、
Ｒ１０は、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は−（ＣＨ２）０−３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｎは、０又は１であり、
ｏは、０又は１であり、
Ｇ２は、結合又は直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２）、−ＮＭｅ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、Ｎ、Ｏ及びＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ−ＣＮＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、又は、下記の基：
【化３２】
2020502201.tif 000037
【０３８８】
のうちの一つを表し、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
Ｌ４は、単結合又は下記の基：
−（Ｃ＝Ｏ）ｙ−Ｇ４−
であり、
ｙは、０又は１であり、
Ｇ４は、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、及びＮ、Ｏ及びＳ、Ｓ（＝Ｏ）−若しくはＳ（＝Ｏ）２から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ−ＣＮ−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、
§§は、バインダー中のリジン残基の窒素原子への結合部位である。
【０３８９】
好ましくは、本発明は、リンカーＬｂ又はＬｃがバインダーのリジン側鎖又はリジン残基にも結合していることができる化合物に関するものであり、その場合、下記式を有する。
【０３９０】
§−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−Ｌ１−（Ｌ４）ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−§§
式中、
ｍは、０又は１であり、
ｎは、０又は１であり、
§は、薬剤分子又は式（Ｉａ′）のレグマイン開裂性基への結合であり、
§§は、バインダー中の窒素原子への結合を表し、
Ｌ１は、−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−であり、
Ｒ１０は、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は−（ＣＨ２）０−３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−であり、
ｎは、０又は１であり、
ｏは、０又は１であり、
Ｇ２は、結合又は直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２）、−ＮＭｅ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、Ｎ、Ｏ及びＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ−ＣＮＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良く、又は、下記の基：
【化３３】
2020502201.tif 000038
【０３９１】
のうちの一つを表し、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
Ｌ４は、単結合又は下記の基：
−（Ｃ＝Ｏ）ｙ−Ｇ４−
であり、
ｙは、０又は１であり、
Ｇ４は、直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは１〜１００個の炭素原子を有し、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、及びＮ、Ｏ及びＳ、Ｓ（＝Ｏ）−若しくはＳ（＝Ｏ）２から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって同一に又は異なって１回又は複数回中断されていても良く、分岐炭素鎖がある場合、それの側鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ−ＣＮ−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良い。
【０３９２】
より好ましくは、リンカーＬ２は、下記式のうちの一方又は両方を有する。
【化３４】
2020502201.tif 000039
【０３９３】
式中、
＃１は、バインダー中の硫黄原子への結合部位であり、
＃２は、Ｌ１基への結合部位であり、
Ｒ２２は、−ＣＯＯＨであり、
バインダー中の硫黄原子への結合は、これら二つの式のうちの一方で、８０％強（バインダーへのリンカーの総結合数に基づいて）の範囲までである。
【０３９４】
本発明による複合体又は本発明による複合体の混合物において、抗体のシステイン残基への結合が、好ましくは８０％強、より好ましくは９０％強（各場合、抗体へのリンカーの結合の総数に基づいて）の程度まで、より好ましくは式Ａ３又はＡ４の二つの構造のうちの一つとして存在する。ここで、式Ａ３又はＡ４の構造は通常は一緒に存在し、好ましくは抗体への結合の数に基づいて６０：４０から４０：６０の比率で存在する。そして、残りの結合は、下記構造として存在する。
【化３５】
2020502201.tif 000040
【０３９５】
式中、
＃１は、抗体の硫黄原子への連結部位であり、
＃２は、薬物分子へのＬ１への連結部位である。
【０３９６】
Ｌ４は好ましくは、下記構造を有する。
【０３９７】
＃１−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）２−２０−Ｃ（＝Ｏ）−＃２
式中、鎖は、１〜４個の酸素原子によって中断されていても良く、
＃１は、抗体におけるリジン中の窒素原子への結合部位であり、
＃２は、薬剤分子を有するＬ１への結合部位である。
【０３９８】
本発明によれば、Ｌ１は好ましくは、下記式によって表される。
【０３９９】
＃１−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２ｗ′−＃２
式中、
＃１は、抗体の硫黄原子への連結部位であり、
＃２は、薬物分子又はレグマイン開裂性基への連結部位であり、
Ｒ１０は、−Ｈ、−ＮＨ２又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
ｎは０又は１であり、
ｏは０又は１であり、
ｗ′は０又は１であり、
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は
【化３６】
2020502201.tif 000041
【０４００】
であり、
Ｇ２は、アリーレン基及び／又は直鎖及び／又は分岐及び／又は環状のアルキレン基からなる１〜１００個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは、基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＲｙ−、ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−及び／又はＮ、Ｏ及びＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する３〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環の１以上によって１回又は複数回中断されていても良く、その直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によってさらに置換されていても良く、
Ｒｙは、−Ｈ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル又はＣ２−Ｃ１０−アルキニルであり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によってさらに置換されていても良く、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルである。
【０４０１】
この文脈において、Ｇ１は好ましくは
【化３７】
2020502201.tif 000042
【０４０２】
であり、Ｒ１０は好ましくは、Ｇ１が−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−や
【化３８】
2020502201.tif 000043
【０４０３】
でない場合は−ＮＨ２ではない。
【０４０４】
好ましくは、Ｇ２は、アリーレン基及び／又は直鎖及び／又は分岐及び／又は環状のアルキレン基からなる１〜１００個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは、基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、及びＮ、Ｏ及びＳ若しくは−Ｓ（＝Ｏ）−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環の１以上によって１回又は複数回中断されていても良い。
【０４０５】
より好ましくは、Ｇ１は
【化３９】
2020502201.tif 000044
【０４０６】
であり、その直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２によってさらに置換されていても良い。
【０４０７】
Ｇ２はさらに好ましくは、アリーレン基及び／又は直鎖及び／又は分岐及び／又は環状のアルキレン基からなる１〜１００個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐のヒドロカルビル鎖であり、それは、基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２）、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−  −Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−及び／又はＮ、Ｏ及びＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する３〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環の１以上によって１回又は複数回中断されていても良く、その直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によってさらに置換されていても良く、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルである。
【０４０８】
この文脈において、Ｇ２は好ましくは
【化４０】
2020502201.tif 000045
【０４０９】
である。
【０４１０】
好ましくは、Ｇ２は、下記構造の中断基を表す。
【化４１】
2020502201.tif 000046
【０４１１】
式中、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
＃１は、ＫＳＰ阻害剤又はプロドラッグへの結合であり、
＃２は、抗体のカップリング基（例えばＬ２）への結合である。
【０４１２】
アリーレン基及び／又は直鎖及び／又は分岐及び／又は環状アルキレン基の直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は通常、言及される個々の数の炭素原子を有するα，ω−二価アルキル基を含む。好ましい例には、メチレン、エタン−１，２−ジイル（１，２−エチレン）、プロパン−１，３−ジイル（１，３−プロピレン）、ブタン−１，４−ジイル（１，４−ブチレン）、ペンタン−１，５−ジイル（１，５−ペンチレン）、ヘキサン−１，６−ジイル（１，６−ヘキシレン）、ヘプタン−１，７−ジイル（１，７−ヘキシレン）、オクタン−１，８−ジイル（１，８−オクチレン）、ノナン−１，９−ジイル（１，９−ノニレン）、デカン−１，１０−ジイル（１，１０−デシレン）などがある。
【０４１３】
分岐炭化水素鎖は、直鎖炭化水素鎖又は直鎖アルキレン基における１以上の水素原子が、Ｃ１−１０−アルキル基によって置換されていることで、分岐の炭化水素又は側鎖（分岐炭化水素鎖）を形成していることを意味する。
【０４１４】
炭化水素鎖はさらに、環状アルキレン基（シクロアルカンジイル）、例えば１，４−シクロヘキサンジイル又は１，３−シクロペンタンジイルを含んでいても良い。これらの環状基は不飽和であっても良い。特に、その炭化水素鎖には、芳香族基（アリーレン基）、例えばフェニレンが存在しても良い。そして、環状アルキレン基及びアリーレン基における１以上の水素原子がＣ１−１０−アルキル基によって置換されていることも可能である。このようにして、分岐していても良い炭化水素鎖が形成される。この炭化水素鎖は、合計０から１００個の炭素原子、好ましくは１から５０個、特に好ましくは２から２５個の炭素原子を有する。
【０４１５】
分岐の炭化水素又は側鎖（分岐炭化水素鎖）は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良い。
【０４１６】
炭化水素鎖は、基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−、−ＣＨ（ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２）、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、及び＝Ｎ−、−Ｏ−及び−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環の１以上によって１回又は複数回中断されていても良い。
【０４１７】
ここで、好ましいものは、基：
【化４２】
2020502201.tif 000047
【０４１８】
である。
【０４１９】
Ｇ２におけるさらなる中断基は、好ましくは、
【化４３】
2020502201.tif 000048
【０４２０】
である。
【０４２１】
より好ましくは、そして上記の定義を参照すると、Ｌ１は、下記の簡略化された式に相当する。
【０４２２】
−ＮＲ１１Ｂ−
式中、
Ｒ１１は、−Ｈ又は−ＮＨ２であり、
Ｂは、−［（ＣＨ２）ｘ−（Ｘ４）ｙ］ｗ−（ＣＨ２）ｚ−基であり、
ｗは、０〜２０であり、
ｘは、０〜５であり、
ｙは、０又は１であり、
ｚは、０〜５であり、
Ｘ４は、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−，−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−又は
【化４４】
2020502201.tif 000049
【０４２３】
である。
【０４２４】
好ましくは、リンカーＬは下記式を有する。
【化４５】
2020502201.tif 000050
【０４２５】
式中、
＃３は、薬物分子又はプロドラッグへの結合であり、
＃４は、バインダーペプチド又はタンパク質への結合であり、
Ｒ１１は、−Ｈ又は−ＮＨ２であり、
Ｂは、−［（ＣＨ２）ｘ−（Ｘ４）ｙ］ｗ−（ＣＨ２）ｚ−基であり、
ｗは、０〜２０であり、
ｘは、０〜５であり、
ｙは、０又は１であり、
ｚは、１〜５であり、
Ｘ４は、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−又は
【化４６】
2020502201.tif 000051
【０４２６】
である。
【０４２７】
上記のリンカーは、リンカーが水素原子の置換によってＲ１にカップリングする、即ち、Ｒ１が−Ｌ−＃１である（＃１は抗体への結合である。）である式（ＩＩａ）の複合体で特に好ましい。
【０４２８】
本発明による複合体において、又は本発明による複合体の混合物において、抗体のシステイン残基への結合が、好ましくは８０％強、より好ましくは９０％強（各場合で、抗体へのリンカーの結合の総数に基づいて）の程度まで存在する。
【０４２９】
ここで、特に好ましいものは、下記一般式（Ａ５）及び（Ａ６）の二つの構造である。
【化４７】
2020502201.tif 000052
【０４３０】
式中、
＃１は、抗体の硫黄原子への連結部位であり、
＃２は、Ｌ１基への連結部位であり、
Ｒ２２は、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＲ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ２又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＲであり、
Ｒは、Ｃ１−３−アルキルである。
【０４３１】
より好ましくは、Ｒ２２は−ＣＯＯＨである。
【０４３２】
ここで、一般式Ａ５又はＡ６の構造は通常は一緒に存在し、好ましくは抗体への結合数に基づいて６０：４０〜４０：６０の比率である。残りの結合は、下記構造で存在する。
【化４８】
2020502201.tif 000053
【０４３３】
式中、
＃１及び＃２は、上記で提供の定義を有する。
【０４３４】
上記式§−（Ｃ（＝Ｏ））ｍ−（Ｌ１）ｎ−Ｌ２−§§における好ましい基Ｌ１は、下記の表中で挙げたものであり、式中、ｒは０〜２０、好ましくは０〜１５、特別に好ましくは０〜１０の数字である。
【表２】
2020502201.tif 000054
2020502201.tif 000055
2020502201.tif 000056
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2020502201.tif 000060
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2020502201.tif 000068
2020502201.tif 000069
【０４３５】
より好ましくは、ＡＫ１は抗体又はそれの抗原結合性断片である。その抗体は、好ましくはヒト、ヒト化若しくはキメラモノクローナル抗体又はそれの抗原結合性断片、特別には抗ＴＷＥＡＫＲ抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体又は抗ＨＥＲ２抗体又はこれらの抗原結合性断片である。特に好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７、抗ＥＧＦＲ−抗体セツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）及び抗ＨＥＲ２−抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５、又はこれらの抗原結合性断片である。
【０４３６】
さらに、リンカーの基本構造（ｉｉ）が好ましい。
【０４３７】
（ｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−（Ｌ１）ｎ−ＳＧ−Ｌ２
上記において、ＳＧは、プロテアーゼ、例えばカテプシンによって開裂可能な基を表し、ｍ、ｎ、ＳＧ、Ｌ１及びＬ２は上記で提供の定義を有する。特に好ましいものは、下記の基である。
【０４３８】
−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（アラニンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂を生じる）
−ＮＨ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（リジンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）
−ＮＨ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（シトルリンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）
−ＮＨ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（リジンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）
−ＮＨ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（リジンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）
−ＮＨ−Ａｌａ−Ｃｉｔ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（シトルリンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）。
【０４３９】
この文脈において、ＳＧは好ましくは下記のものである。
【化４９】
2020502201.tif 000070
2020502201.tif 000071
【０４４０】
式中、
Ｘは、−Ｈ又はＣ１−１０−アルキル基（−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、又はスルホン酸によって置換されていても良い）である。
【０４４１】
トランスグルタミナーゼ触媒結合の場合、文献には、結合部位特異的な形での、有機分子のバインダー、例えば抗体への共有結合（結合）の各種オプションが開示されている（例えばＳｏｃｈａｊ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ａｄｖａｎｃｅｓ，  ３３，  ７７５−７８４，  （２０１５）、Ｐａｎｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ＭＡｂｓ  ６，  ３４−４５（２０１４）を参照する。）。本発明に従って好ましいのは、トランスグルタミナーゼを用いる抗体のアクセプターグルタミン残基を介した抗体へのＫＳＰ阻害剤又はプロドラッグの結合である。そのようなアクセプターグルタミン残基は、抗体に対する操作によって、又は非グリコシル化抗体を生じる突然変異によって形成することができる。抗体中のこれらアクセプターグルタミンの数は、好ましくは２又は４である。好適なリンカーをカップリング（結合）に用いる。好適なリンカー構造は、トランスグルタミナーゼに好適な基質を構成する遊離アミン供与体官能基を有するものである。そのリンカーは、多様な形態で抗体に連結することができる。
【０４４２】
好ましくは、トランスグルタミナーゼ触媒結合の場合、リンカーは、既に上記で挙げた基本構造（ｉ）及び（ｉｉ）のうちの一つを有する。
【０４４３】
（ｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−（Ｌ１）ｎ−Ｌ２−
（ｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）ｍ−（Ｌ１）ｎ−ＳＧ−Ｌ２
式中、
Ｌ１、ＳＧ、ＳＧ１及びｍは、上記で提供の定義を有し、
Ｌ２は、しかしながら好ましくは、下記の基のうちの一つ：
【化５０】
2020502201.tif 000072
【０４４４】
を表し、
Ｒｙは、−Ｈ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキルであり、
＃１は、Ｌ１への連結点であり、
＃２は、バインダーのグルタミン残基への連結点である。
【０４４５】
好ましくはこの文脈において、Ｒｙは−Ｈ又は−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３である。
【０４４６】
相当する複合体の例は下記の構造であり、ＭＯＤ及びＬ１は上記で提供の定義を有し、ＡＫ３は好ましくは抗体であるバインダーであり、ｎは好ましくは２又は４である。
【化５１】
2020502201.tif 000073
2020502201.tif 000074
【０４４７】
特に好ましい阻害剤複合体
本発明によれば、特に好ましいものは、
ＡＫ（ＡＫ１；ＡＫ２；ＡＫ３）がバインダー、好ましくは抗体又は抗原結合性断片であり、
ｎが１〜５０、好ましくは１〜２０、より好ましくは２〜８、特別には２〜６の数字である。
【０４４８】
ＡＫ１が、好ましくはシステイン残基を介してＫＳＰ阻害剤に結合した抗体であり、
ＡＫ２が、好ましくはリジン残基を介してＫＳＰ阻害剤に結合した抗体であり、
ＡＫ３が、好ましくはグルタミン残基を介してＫＳＰ阻害剤に結合した抗体である、下記のＫＳＰ−阻害剤複合体である。
【０４４９】
ここで使用されるバインダー又は抗体は好ましくは、説明において好ましいと記載されているバインダー及び抗体である。
【０４５０】
特別に好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７、抗ＥＧＦＲ−抗体セツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）及び抗ＨＥＲ２−抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５、又はこれらの抗原結合性断片である。
【０４５１】
特に好ましい複合体は、以下のものである。
【化５２】
2020502201.tif 000075
2020502201.tif 000076
2020502201.tif 000077
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2020502201.tif 000080
2020502201.tif 000081
2020502201.tif 000082
2020502201.tif 000083
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2020502201.tif 000085
2020502201.tif 000086
【０４５２】
式中、
ＡＫ１及びＡＫ２は、抗体又は抗原結合性抗体断片であり、
ｎは、１〜５０、好ましくは１〜２０、より好ましくは２〜８、特別には２〜６の数字である。
【０４５３】
ＫＳＰ阻害剤−リンカー中間体又はプロドラッグ−リンカー中間体及び複合体の製造
本発明による複合体は、最初に低分子量ＫＳＰ阻害剤又はそれのプロドラッグにリンカーを提供することによって製造される。次に、このようにして得られた中間体をバインダー（好ましくは抗体）と反応させる。
【０４５４】
好ましくは、システイン残基へのカップリングのために、下記化合物のうちの一つを、システイン含有バインダー、例えばこの目的のために部分還元されていても良い抗体と反応させる。
【化５３】
2020502201.tif 000087
2020502201.tif 000088
2020502201.tif 000089
2020502201.tif 000090
2020502201.tif 000091
【０４５５】
式中、
Ｘ１はＣＨであり、
Ｘ２はＣであり、
Ｘ３はＮであり、
Ｒは−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
Ｋは、直鎖若しくは分岐のＣ１−Ｃ６アルコキシ−又は−ＯＨ−置換されていても良いＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ＳＧ１、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３及びＬ４は上記で提供の定義を有する。
【０４５６】
上記式において、さらには下記の反応図式及び構造式において、式ＩＩａによる位置Ｒ４における、すなわち−ＮＨ２基における水素原子は、本発明に従って使用される式Ｉａのレグマイン開裂性基によって置き換わっていても良い。
【０４５７】
上記化合物のそれぞれにおいて、そして下記化合物において、ｔｅｒｔ−ブチル基は、シクロヘキシルによって置き換わっていても良い。
【０４５８】
当該化合物は、例えば、それのトリフルオロ酢酸塩の形態で用いることができる。バインダーとの反応、例えば抗体との反応については、当該化合物は好ましくは、バインダーに関して２〜１２倍モル過剰で用いる。
【０４５９】
好ましくは、リジン残基へのカップリングに関しては、下記の化合物のうちの一つを、抗体などのリジン含有バインダーと反応させる。
【化５４】
2020502201.tif 000092
【０４６０】
式中、
Ｘ１はＣＨであり、
Ｘ２はＣであり、
Ｘ３はＮであり、
Ｌ４はＬ１と同じ定義を有し、Ｌ１は、上記で記載のものと同じ定義を有する。
【０４６１】
システイン残基にカップリングする中間体については、その反応は、下記のように描くことができる。
【化５５】
2020502201.tif 000093
【０４６２】
他の中間体及び他の抗体を同様に反応させることができる。
【０４６３】
リジン残基にカップリングする中間体の場合、その反応は下記のように描くことができる。
【化５６】
2020502201.tif 000094
【０４６４】
本発明によれば、これによって、下記の複合体が得られる。
【化５７】
2020502201.tif 000095
【０４６５】
この反応（開環）は、ｐＨ７．５〜９で、好ましくはｐＨ８で、２５℃〜３７℃の温度で、例えば撹拌することで行うことができる。好ましい撹拌時間は８〜３０時間である。
【０４６６】
上記式において、Ｘ１はＣＨを表し、Ｘ２はＣを表し、Ｘ３はＮを表し、ＳＧ１及びＬ１は上記と同じ定義を有し、Ｌ２、Ｌ３及びＬ４はＬ１と同じ定義を有し；Ｒ及びＫは上記と同じ定義を有する。
【０４６７】
ＡＫ１は、システイン残基、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体若しくは抗ＨＥＲ２抗体又はこれらの抗原結合性断片を介してカップリングした抗ＴＷＥＡＫＲ抗体であり、ＡＫ２は、リジン残基、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体若しくは抗ＨＥＲ２抗体又はこれらの抗原結合性断片を介してカップリングした抗ＴＷＥＡＫＲ抗体である。より好ましくは、ＡＫ１及びＡＫ２は、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７、抗ＥＧＦＲ−抗体セツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）及び抗ＨＥＲ２−抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５、又はこれらの抗原結合性断片である。
【０４６８】
さらなる定義
「ＴＧａｓｅ」又は「ＴＧ」としても互換的に用いられる「トランスグルタミナーゼ」という表現は、ペプチド結合グルタミンのγ−カルボキサミド基とリジン若しくは構造的に関連のある１級アミン、例えばアミノペンチル基、又は例えばペプチド結合リジンのε−アミノ基との間のアシル転位反応を介してタンパク質を連結して、８−（γ−グルタミル）リジンイソペプチド結合を生じさせる能力を有する酵素を意味するものと理解される。ＴＧａｓｅ類には、細菌トランスグルタミナーゼ（ＢＴＧ）、例えばＥＣ参照番号２．３．２．１３を有する酵素（タンパク質−グルタミン−γ−グルタミルトランスフェラーゼ）などがある。
【０４６９】
抗体のアミノ酸残基を指す場合の「アクセプターグルタミン」という表現は、好適な条件下でトランスグルタミナーゼによって認識され、この特異的グルタミンとリジン若しくは構造的に関連する１級アミン、例えばアミノペンチル基との間の反応によりトランスグルタミナーゼ触媒作用下にそれと連結することができるグルタミン残基を意味する。アクセプターグルタミンは、表面露出グルタミンであることができる。
【０４７０】
本明細書において「アミノ酸修飾」又は「突然変異」は、ポリペプチド配列におけるアミノ酸置換、挿入及び／又は欠失を意味する。本明細書における好ましいアミノ酸修飾は置換である。本明細書における「アミノ酸置換」又は「置換」は、タンパク質配列における所定位置での別のアミノ酸によるアミノ酸の置き換えを意味する。例えば、置換Ｙ５０Ｗは、位置５０でのチロシンがトリプトファンによって置き換わっている親ポリペプチドの変異体を説明するものである。ポリペプチドの「変異体」は、基準ポリペプチド、代表的には天然若しくは「親」ポリペプチドと実質的に同一であるアミノ酸配列を有するポリペプチドを説明するものである。ポリペプチド変異体は、天然アミノ酸配列での特定の位置での１以上のアミノ酸交換、欠失及び／又は挿入を有することができる。
【０４７１】
「結合部位特異的複合体」という表現は、バインダー、好ましくは抗体、及び残基の複合体、好ましくはリンカー−薬物残基を説明するものであり、そのバインダーは、１以上の所定の位置、好ましくはグルタミン残基で官能化されている。細菌トランスグルタミナーゼ（ＢＴＧ）（ＥＣ２．３．２．１３）などのトランスグルタミナーゼ類（ＴＧａｓｅ）は、グルタミン−タンパク質基質の認識において強い特異性を示し、「結合部位特異的複合体化」を触媒することができる。
【０４７２】
「均一複合体」又は「均一ＡＤＣ」という表現は、バインダーの少なくとも６０％、７０％、８０％又は９０％がバインダー当たり同数の複合体化残基を有する結合部位特異的複合体の混合物を説明するものである。抗体の場合、この数は、偶数、好ましくは２又は４であるべきである。
【０４７３】
同位体、塩、溶媒和物、同位体変異体
本発明はまた、本発明による化合物の全ての好適な同位体形態を包含する。本発明の化合物の同位体形態は本明細書において、本発明の化合物内の少なくとも一つの原子が同じ原子番号であるが、自然界において通常若しくは支配的にある原子質量とは異なる原子質量を有する別の原子に交換されている化合物を意味するものと理解される。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素の同位体があり、例えば２Ｈ（重水素）、３Ｈ（三重水素）、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３２Ｐ、３３Ｐ、３３Ｓ、３４Ｓ、３５Ｓ、３６Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌ、８２Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２９Ｉ及び１３１Ｉである。本発明による化合物の特定の同位体型、特別には１以上の放射性同位体が組み込まれているものは、例えば、作用機序又は身体中での有効成分分布の試験に有用となり得る。製造及び検出が比較的容易であることから、特には、３Ｈ又は１４Ｃ同位体で標識された化合物がその目的には好適である。さらに、同位体、例えば重水素を組み込むことにより、化合物の代謝安定性が高くなることで特に治療上有益となり得るものであり、例えば身体中での半減期が長くなり、又は必要な活性成分用量が減る。従って、本発明による化合物のそのような修飾も、場合により、本発明の好ましい実施形態を構成し得る。本発明による化合物の同位体型は、当業者に公知の方法によって、例えばさらに下記に記載の方法及び実施例に記載の手順によって、個々の試薬及び／又は出発化合物の相当する同位体修飾を用いることで製造することができる。
【０４７４】
本発明の文脈において好ましい塩は、本発明による化合物の生理的に許容される塩である。自体は医薬用途には適さないが、例えば本発明による化合物の単離又は精製には用いることができる塩も包含される。
【０４７５】
本発明による化合物の生理的に許容される塩には、鉱酸、カルボン酸及びスルホン酸の酸付加塩、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸及び安息香酸の塩などがある。
【０４７６】
本発明による化合物の生理的に許容される塩にはさらに、通常の塩基の塩、例えば好ましくは、アルカリ金属塩（例えばナトリウム及びカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えばカルシウム及びマグネシウム塩）及びアンモニア若しくは１から１６個の炭素原子を有する有機アミン、例えば好ましくはエチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、アルギニン、リジン及び１,２−エチレンジアミンから誘導されるアンモニウム塩などがある。
【０４７７】
本発明の文脈での溶媒和物は、溶媒分子による配位によって固体又は液体での錯体を形成している本発明による化合物の形態として説明される。水和物は、配位が水によるものである溶媒和物の特定の形態である。本発明の文脈で好ましい溶媒和物は水和物である。
【０４７８】
本発明はさらに、本発明による化合物のプロドラッグも包含する。この文脈での「プロドラッグ」という用語は、自体は生理的に活性又は不活性であり得るが、身体に存在中に反応して（例えば、代謝的又は加水分解的に）、本発明による化合物を与える化合物を指す。
【０４７９】
特定の実施形態
下記の実施形態が特に好ましい。
【０４８０】
実施形態Ａ′：
式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′のＡＰＤＣ［式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′におけるＤ１は、下記式（ＩＩｅ）の化合物である。］。
【化５８】
2020502201.tif 000096
【０４８１】
式中、
Ｘ１はＮであり、
Ｘ２はＮであり、
Ｘ３はＣであり、
又は
Ｘ１はＣＨであり、
Ｘ２はＣであり、
Ｘ３はＮであり、
又は
Ｘ１はＮＨであり、
Ｘ２はＣであり、
Ｘ３はＣであり、
又は
Ｘ１はＣＨであり、
Ｘ２はＮであり、
Ｘ３はＣであり、
Ａは−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ１は、−Ｌ−＃１、−Ｈ、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ２、−（ＣＨ２）１−３ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＺ″（ＣＨ２）１−３ＮＨ２及び−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＺ″ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり、
Ｚ″は、−Ｈ又は−ＮＨ２であり、
Ｒ２は−Ｈであり、
Ｒ４は、式（Ｉａ）の基であり、
Ｒ３は、−Ｌ−＃１又はＣ１−１０−アルキル基であり、それは−ＯＨ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、−Ｓ−アルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、又は−ＮＨ２によって置換されていても良く、
Ｒ５は−Ｈ又は−Ｆであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、Ｃ１−３−アルキル、フルオロ−Ｃ１−３−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−４−アルケニル、Ｃ２−４−アルキニル、フルオロ−Ｃ２−４−アルキニル、ヒドロキシル又はハロゲンであり、
Ｒ８は、分岐のＣ１−５−アルキル基又はシクロヘキシル基であり、
Ｒ９は−Ｈ又は−Ｆであり、
−Ｌ−＃１は、リンカー基：
§−（Ｃ（＝Ｏ））ｍ−（Ｌ１）ｎ−Ｌ２−§§
であり、
ｍ及びｎは独立に０又は１であり、
§は、ＫＳＰ阻害剤への結合を表し、
§§は、抗体への結合を表し、
Ｌ２は、下記の基：
【化５９】
2020502201.tif 000097
【０４８２】
のうちの一つであり、
＃１は、抗体の硫黄原子への連結部位であり、
＃２は、Ｌ１基への連結部位であり、
Ｌ１は、基：
＃１−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−＃２
であり、
Ｒ１０は、−Ｈ、−ＮＨ２又はＣ１−３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−又は
【化６０】
2020502201.tif 000098
【０４８３】
であり、
ｎは０又は１であり、
ｏは０又は１であり、
Ｇ２は、アリーレン基及び／又は直鎖及び／又は分岐及び／又は環状のアルキレン基からなる１〜１００個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは、同一若しくは異なって、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、及び＝Ｎ−、−Ｏ−及び−Ｓ−、若しくは−Ｓ（＝Ｏ）−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する３〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
＃１は、ＫＳＰ阻害剤への結合であり、
＃２は、抗体へのＬ２への結合であり、
置換基Ｒ１及びＲ３のうちの一方がリンカー基−Ｌ−＃１、並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩であり、式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′で言及の抗体は、ヒト、ヒト化若しくはキメラモノクローナル抗体又はそれの抗原結合性断片であり、式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′におけるｎは１〜１０の数字である。
【０４８４】
好ましくは、この場合の抗体は、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体又は抗ＨＥＲ２抗体又はこれらの抗原結合性断片である。
【０４８５】
特に好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７、抗ＥＧＦＲ−抗体セツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）及び抗ＨＥＲ２−抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５、又はこれらの抗原結合性断片である。
【０４８６】
ここで、好ましいものは、Ｒ３がアルキル、好ましくはＣ１−３アルキルと定義される式（ＩＩｅ）の化合物である。
【０４８７】
この文脈において、Ｇ２は好ましくは
【化６１】
2020502201.tif 000099
【０４８８】
である。
【０４８９】
或いは、リンカー−Ｌ−＃１は、リジン側鎖又はリジン残基に結合していても良い。その場合、それは好ましくは、下記式を有する。
【０４９０】
−§−（ＳＧ）ｘ−Ｌ４−Ｃ（＝Ｏ）−§§
式中、
§は、ＫＳＰ阻害剤への結合を表し、
§§は、抗体への結合を表し、
ｘは０又は１であり、
ＳＧは開裂性基であり、
Ｌ４は、単結合又は基：
−（Ｃ（＝Ｏ））ｙ−Ｇ４−
であり、
ｙは０又は１であり、
Ｇ４は、アリーレン基及び／又は直鎖及び／又は分岐及び／又は環状のアルキレン基からなる１〜１００個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは、同一若しくは異なって、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、及び＝Ｎ−、−Ｏ−及び−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド又はスルホン酸によって置換されていても良い。
【０４９１】
この文脈において、ＳＧは好ましくは、２〜８オリゴペプチド、より好ましくはジペプチドである。
【０４９２】
好ましくは、Ｇ４の直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、
【化６２】
2020502201.tif 000100
【０４９３】
によって中断されていても良い。
【０４９４】
実施形態Ｂ′：
式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′のＡＰＤＣ（式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′におけるＤ１は式（ＩＩｆ）の化合物である。）：
【化６３】
2020502201.tif 000101
【０４９５】
［式中、
Ｘ１はＮであり、
Ｘ２はＮであり、
Ｘ３はＣであり、
又は
Ｘ１はＣＨであり、
Ｘ２はＣであり、
Ｘ３はＮであり、
又は
Ｘ１はＮＨであり、
Ｘ２はＣであり、
Ｘ３はＣであり、
又は
Ｘ１はＣＨであり、
Ｘ２はＮであり、
Ｘ３はＣであり、
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ１は、−Ｌ−＃１、−Ｈ、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ２、−（ＣＨ２）１−３ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＺ″（ＣＨ２）１−３ＮＨ２及び−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＺ″ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨであり、
Ｚ″は、−Ｈ又は−ＮＨ２であり、
Ｒ２は−Ｈであり、
Ｒ４は、式（Ｉａ）の基であり
Ｒ３は、−Ｌ−＃１又はＣ１−１０−アルキル基であり、それは−ＯＨ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、−Ｓ−アルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２及び−ＮＨ２によって置換されていても良く、
Ｒ５は−Ｈ又は−Ｆであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、Ｃ１−３−アルキル、フルオロ−Ｃ１−３−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−４−アルケニル、Ｃ２−４−アルキニル、フルオロ−Ｃ２−４−アルキニル、ヒドロキシル又はハロゲンであり、
Ｒ８は、分岐のＣ１−５−アルキル基であり、
Ｒ９は−Ｈ又は−Ｆであり、
−Ｌ−＃１は、下記の基：
§−（Ｃ（＝Ｏ））ｍ−（Ｌ１）ｎ−Ｌ２−§§
であり、
ｍは０又は１であり；
§は、ＫＳＰ阻害剤への結合を表し、
§§は、抗体への結合を表し、
Ｌ２は、下記の基：
【化６４】
2020502201.tif 000102
【０４９６】
であり、
＃１は、抗体の硫黄原子への連結部位であり、
＃２は、Ｌ１基への連結部位であり、
Ｌ１は、下記の基：
＃１−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−＃２
であり、
Ｒ１０は、−Ｈ、−ＮＨ２又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−又は
【化６５】
2020502201.tif 000103
【０４９７】
であり、
ｎは０又は１であり、
ｏは０又は１であり、
Ｇ２は、アリーレン基及び／又は直鎖及び／又は分岐及び／又は環状のアルキレン基からなる１〜１００個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは、同一若しくは異なって、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２．−、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、及び＝Ｎ−、−Ｏ−及び−Ｓ−、若しくは−Ｓ（＝Ｏ）−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する３〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
＃１は、ＫＳＰ阻害剤への結合であり、
＃２は、抗体へのＬ２への結合であり、
置換基Ｒ１及びＲ３のうちの一方がリンカー基−Ｌ−＃１である。］並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩（式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′で言及された抗体はヒト、ヒト化若しくはキメラモノクローナル抗体又はそれの抗原結合性断片であり、式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′におけるｎは１〜１０の数字である。）。
【０４９８】
好ましくは、この場合の抗体は、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体又は抗ＨＥＲ２抗体又はこれらの抗原結合性断片である。
【０４９９】
特に好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７、抗ＥＧＦＲ−抗体セツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）及び抗ＨＥＲ２−抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５、又はこれらの抗原結合性断片である。
【０５００】
ここで好ましいものは、Ｒ３がアルキルと、好ましくはＣ１−３アルキルと定義される式（ＩＩｆ）の化合物である。
【０５０１】
この文脈において、Ｇ２は好ましくは、
【化６６】
2020502201.tif 000104
【０５０２】
である。
【０５０３】
或いは、リンカー−Ｌ−＃１は、リジン側鎖又はリジン残基に結合していても良い。その場合、それは好ましくは、下記式を有する。
【０５０４】
−§−（ＳＧ）ｘ−Ｌ４−Ｃ（＝Ｏ）−§§
式中、
§は、ＫＳＰ阻害剤への結合を表し、
§§は、抗体への結合を表し、
ｘは０又は１であり、
ＳＧは開裂性基であり、
Ｌ４は、単結合又は基：
−（Ｃ＝Ｏ）ｙ−Ｇ４−
であり、
ｙは０又は１であり、
Ｇ４は、アリーレン基及び／又は直鎖及び／又は分岐及び／又は環状のアルキレン基からなる１〜１００個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは、同一若しくは異なって、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、及び＝Ｎ−、−Ｏ−及び−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−若しくは−Ｓ（＝Ｏ）２−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良い。
【０５０５】
この文脈において、ＳＧは好ましくは２〜８オリゴペプチド、より好ましくはジペプチドである。
【０５０６】
好ましくは、Ｇ４の直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、
【化６７】
2020502201.tif 000105
【０５０７】
によって中断されていても良い。
【０５０８】
実施形態Ｃ′：
式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′のＡＰＤＣ（式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′におけるＤ１は、下記式（ＩＩｇ）の化合物である。）：
【化６８】
2020502201.tif 000106
【０５０９】
［式中、
Ｘ１はＮであり、
Ｘ２はＮであり、
Ｘ３はＣであり、
又は
Ｘ１はＣＨであり、
Ｘ２はＣであり、
Ｘ３はＮであり、
又は
Ｘ１はＮＨであり、
Ｘ２はＣであり、
Ｘ３はＣであり、
又は
Ｘ１はＣＨであり、
Ｘ２はＮであり、
Ｘ３はＣであり、
Ａは−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ１は−Ｌ−＃１であり、
Ｒ２は−Ｈであり、
Ｒ４は式（Ｉａ）の基であり、
Ｒ３はＣ１−１０−アルキル基（−ＯＨ、−Ｏ−アルキル、−ＳＨ、−Ｓ−アルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）ｎ−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ−アルキル、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２又は−ＮＨ２によって置換されていても良い。）であるか、−ＭＯＤであり、
−ＭＯＤは、下記の基：
−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−Ｈ
であり、
Ｒ１０は、−Ｈ又はＣ１−Ｃ３−アルキルであり；
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−又は
【化６９】
2020502201.tif 000107
【０５１０】
であり、
ｎは０又は１であり、
ｏは０又は１であり、
Ｇ２は、直鎖及び／又は分岐の炭化水素鎖であり、それは１〜１０個の炭素原子を有し、同一若しくは異なって、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−によって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル又はフェニルであり、
Ｒｙは、−Ｈ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル又はＣ２−Ｃ１０−アルキニルであり、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によってさらに置換されていても良く、
Ｒ５は−Ｈ又は−Ｆであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、Ｃ１−３−アルキル、フルオロ−Ｃ１−３−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−４−アルケニル、Ｃ２−４−アルキニル、フルオロ−Ｃ２−４−アルキニル、ヒドロキシル又はハロゲンであり、
Ｒ８は分岐のＣ１−５−アルキル基であり、
Ｒ９は−Ｈ又は−Ｆであり、
−Ｌ−＃１はリンカー基：
§−（Ｃ（＝Ｏ））ｍ−（Ｌ１）ｎ−Ｌ２−§§
であり、
ｍ及びｎは独立に０又は１であり、
§は、ＫＳＰ阻害剤への結合を表し、
§§は抗体への結合を表し、
Ｌ２は、下記の基：
【化７０】
2020502201.tif 000108
【０５１１】
のうちの一つであり、
＃１は、抗体の硫黄原子への連結部位であり、
＃２は、Ｌ１基への連結部位であり、
Ｌ１は、基：
＃１−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−＃２
であり、
Ｒ１０は、−Ｈ、−ＮＨ２又はＣ１−３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−又は
【化７１】
2020502201.tif 000109
【０５１２】
であり、
ｎは０又は１であり、
ｏは０又は１であり、
Ｇ２は、アリーレン基及び／又は直鎖及び／又は分岐及び／又は環状のアルキレン基からなる１〜１００個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは、同一若しくは異なって、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、及び＝Ｎ−、−Ｏ−及び−Ｓ−、若しくは−Ｓ（＝Ｏ）−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する３〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
＃１は、ＫＳＰ阻害剤への結合であり，
＃２は、抗体へのＬ２への結合である。］
並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩（式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′で言及の抗体は、ヒト、ヒト化若しくはキメラモノクローナル抗体又はそれの抗原結合性断片であり、式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′におけるｎは１〜１０の数字である。）。
【０５１３】
好ましくは、この場合の抗体は、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体又は抗ＨＥＲ２抗体又はこれらの抗原結合性断片である。
【０５１４】
特に好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７、抗ＥＧＦＲ−抗体セツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）及び抗ＨＥＲ２−抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５、又はこれらの抗原結合性断片である。
【０５１５】
ここで、好ましいものは、Ｒ３がアルキルと、好ましくはＣ１−３アルキルと定義される式（ＩＩｇ）の化合物である。
【０５１６】
この場合、−ＭＯＤは好ましくは、少なくとも１個のＣＯＯＨ基を有する。
【０５１７】
実施形態Ｄ′：
式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′のＡＰＤＣ（式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′におけるＤ１は、式（ＩＩｈ）の化合物である。）：
【化７２】
2020502201.tif 000110
【０５１８】
［式中、
Ｘ１はＮであり、
Ｘ２はＮであり、
Ｘ３はＣであり、
又は
Ｘ１はＣＨであり、
Ｘ２はＣであり、
Ｘ３はＮであり、
又は
Ｘ１はＮＨであり、
Ｘ２はＣであり、
Ｘ３はＣであり、
又は
Ｘ１はＣＨであり、
Ｘ２はＮであり、
Ｘ３はＣであり、
Ａは−Ｃ（＝Ｏ）−であり、
Ｒ１は−Ｈ又は−ＣＯＯＨであり、
Ｒ２は−Ｈであり、
Ｒ４は式Ｉａの基であり、
Ｒ３は−Ｌ−＃１であり、
Ｒ５は−Ｈ又は−Ｆであり、
Ｒ６及びＲ７は独立に、−Ｈ、Ｃ１−３−アルキル、フルオロ−Ｃ１−３−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、フルオロ−Ｃ２−４−アルケニル、Ｃ２−４−アルキニル、フルオロ−Ｃ２−４−アルキニル、ヒドロキシル又はハロゲンであり、
Ｒ８は分岐のＣ１−５−アルキル基であり、
Ｒ９は−Ｈ又は−Ｆであり、
−Ｌ−＃１は、リンカー基：
§−（Ｃ（＝Ｏ））ｍ−（Ｌ１）ｎ−Ｌ２−§§
であり、
ｍ及びｎは独立に０又は１であり、
§は、ＫＳＰ阻害剤への結合を表し、
§§は、抗体への結合を表し、
Ｌ２は、下記の基：
【化７３】
2020502201.tif 000111
【０５１９】
のうちの一つであり、
＃１は、抗体の硫黄原子への連結部位であり、
＃２は、Ｌ１基への連結部位であり、
Ｌ１は、下記の基：
＃１−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−＃２
であり、
Ｒ１０は、−Ｈ、−ＮＨ２又はＣ１−３−アルキルであり、
Ｇ１は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−又は
【化７４】
2020502201.tif 000112
【０５２０】
であり、
ｎは０又は１であり、
ｏは０又は１であり、
Ｇ２は、アリーレン基及び／又は直鎖及び／又は分岐及び／又は環状のアルキレン基からなる１〜１００個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖であり、それは、同一若しくは異なって、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−、及び＝Ｎ−、−Ｏ−及び−Ｓ−、若しくは−Ｓ（＝Ｏ）−から選択される４個以下のヘテロ原子を有する３〜１０員の芳香族若しくは非芳香族複素環によって１回又は複数回中断されていても良く、前記直鎖若しくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシド、又はスルホン酸によって置換されていても良く、
＃１は、ＫＳＰ阻害剤への結合であり、
＃２は、抗体へのＬ２への結合である。］並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩（式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′で言及の抗体はヒト、ヒト化若しくはキメラモノクローナル抗体又はそれの抗原結合性断片であり、式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′におけるｎは１〜１０の数字である。）。
【０５２１】
好ましくは、この場合の抗体は、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体又は抗ＨＥＲ２抗体又はこれらの抗原結合性断片である。
【０５２２】
特に好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７、抗ＥＧＦＲ−抗体セツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）及び抗ＨＥＲ２−抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５、又はこれらの抗原結合性断片である。
【０５２３】
この文脈において、Ｇ２は好ましくは
【化７５】
2020502201.tif 000113
【０５２４】
である。
【０５２５】
実施形態Ｅ′：
式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′のＡＰＤＣ（式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′におけるＤ１は、式（ＩＩｉ）の化合物である。）：
【化７６】
2020502201.tif 000114
【０５２６】
［式中、
Ｒ１は−Ｌ−＃１であり、
−Ｌ−＃１は、下記リンカー基：
§−（Ｃ（＝Ｏ））ｍ−（Ｌ１）ｎ−Ｌ２−§§
であり、
ｍ及びｎは独立に０又は１であり、
§は、ＫＳＰ阻害剤への結合を表し、
§§は、抗体への結合を表し、
Ｌ２は、下記の基：
【化７７】
2020502201.tif 000115
【０５２７】
であり、
Ｒ２２は、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−３−アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ１−３−アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１−３−アルキル又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ２であり、
＃１は、抗体の硫黄原子への連結部位であり、
＃２はＬ１への結合であり、
Ｌ１は、下記の基：
＃１−（ＮＲ１０）ｎ−（Ｇ１）ｏ−Ｇ２−＃２
であり、
Ｒ１０は−Ｈであり，
Ｇ１は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−又は
【化７８】
2020502201.tif 000116
【０５２８】
であり、
ｎは０又は１であり、
ｏは０又は１であり、
Ｇ２はＣ１−３−アルキルであり、
＃１はＫＳＰ阻害剤への結合であり、
＃２は、抗体へのＬ２への結合であり、
Ｒ２及びＲ５は−Ｈであり、
Ｒ３は−ＣＨ２ＯＨであり、
Ｒ４は式（Ｉａ）の基である。］並びにそれの塩、溶媒和物及び溶媒和物の塩（式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′で言及の抗体はヒト、ヒト化若しくはキメラモノクローナル抗体又はそれの抗原結合性断片であり、式ＩＶａ′又はＩＶａ″又はＩＶａ″′におけるｎは１〜１０の数字である。）。
【０５２９】
好ましいものは、Ｒ２２が−ＣＯＯＨである式（ＩＩｉ）の化合物である。
【０５３０】
本発明による複合体において、又は本発明による複合体の混合物において、各場合で抗体へのリンカーの総数に基づく抗体のシステイン残基への結合は、好ましくは８０％強の範囲程度まで、より好ましくは９０％強の程度まで存在する。
【０５３１】
特に好ましいものは、この場合、本発明によれば、Ｌ２として下記の基：
【化７９】
2020502201.tif 000117
【０５３２】
（Ｒ２２は上記で提供の定義を有する。）を有する複合体である。
【０５３３】
概して、両方の種類のＬ２基を有する複合体が、好ましくは抗体への結合の数に基づいて６０：４０〜４０：６０の比率で存在する。
【０５３４】
次に、残りの結合は、下記構造で存在する。
【化８０】
2020502201.tif 000118
【０５３５】
式中、＃１及び＃２は上記で提供の定義を有する。
【０５３６】
好ましくは、この場合の抗体は、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗Ｂ７Ｈ３抗体又は抗ＨＥＲ２抗体又はこれらの抗原結合性断片である。
【０５３７】
特に好ましいものは、抗ＴＷＥＡＫＲ抗体ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７及びＴＰＰ−１０３３７、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７、抗ＥＧＦＲ−抗体セツキシマブ（ＴＰＰ−９８１）及び抗ＨＥＲ２−抗体トラスツズマブ及びＴＰＰ−１０１５、又はこれらの抗原結合性断片である。
【０５３８】
治療用途
治療するのに本発明による化合物を用いることができる過増殖性疾患には、特にはがん及び腫瘍疾患の群などがある。本発明の文脈において、これらは、特には次の疾患（ただし、これらに限定されるものではない）：乳癌及び乳房腫瘍（腺管型及び小葉型などの乳癌、イン・サイツも）、気道の腫瘍（小細胞肺癌及び非小細胞癌、気管支癌）、脳腫瘍（例えば、脳幹の腫瘍及び視床下部の腫瘍、星細胞腫、上衣細胞腫、神経膠芽腫、神経膠腫、髄芽腫、髄膜腫並びに神経外胚葉性（ｎｅｕｒｏ−ｅｃｔｏｒｍａｌ）腫瘍及び松果体腫瘍）、消化器の腫瘍（食道、胃、胆嚢、小腸、大腸、直腸及び肛門の癌）、肝臓腫瘍（特に、肝細胞癌、胆管癌及び混合型肝細胞胆管癌）、頭部及び頸部領域の腫瘍（喉頭、下咽頭、鼻咽頭、口咽頭癌、口唇及び口腔癌、口腔メラノーマ）、皮膚腫瘍（基底細胞腫、棘細胞癌、扁平上皮癌、カポジ肉腫、悪性メラノーマ、非メラノーマ皮膚がん、メルケル細胞皮膚がん、肥満細胞腫瘍）、軟組織の腫瘍（特に、軟組織の肉腫、骨肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、線維肉腫、血管肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンパ肉腫及び横紋筋肉腫）、眼球の腫瘍（特に、眼球内メラノーマ及び網膜芽細胞腫）、内分泌腺及び外分泌腺の腫瘍（例えば甲状腺及び副甲状腺、膵臓及び唾液腺の癌、腺癌）、尿路の腫瘍（膀胱、陰茎、腎臓、腎盂及び尿管の腫瘍）及び生殖器の腫瘍（女性における子宮内膜、子宮頸部、卵巣、膣、外陰部及び子宮の癌、及び男性における前立腺及び睾丸の癌）を意味するものと理解される。これらには、固形型又は循環細胞としての血液、リンパ系及び脊髄の増殖性疾患などもあり、例えば白血病、リンパ腫及び骨髄増殖性疾患、例えば急性骨髄性、急性リンパ芽球性、慢性リンパ性、慢性骨髄性及びヘアリー細胞性の白血病、及びＡＩＤＳ関連リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫及び中枢神経系でのリンパ腫である。
【０５３９】
ヒトでのこれらの十分に特徴付けられている疾患は、他の哺乳動物でも同等の病因によって生じ得るものであり、本発明の化合物によって同様に治療可能である。
【０５４０】
本発明による化合物による上記で言及のがん疾患の治療は、固体腫瘍の治療及びそれの転移型及び循環型の治療の両方を含むものである。
【０５４１】
本発明の文脈において、「治療」又は「治療する」という用語は、従来の意味で用いられ、疾患又は健康上の異常と戦い、軽減し、弱化し、又は改善すること、並びに例えばがんの場合でのように、この疾患によって障害される生活条件を改善することを目的として、患者の世話を行い、ケアを行い、看病することを意味する。
【０５４２】
従って、本発明はさらに、障害の、特別には上記障害の治療及び／又は予防のための本発明による化合物の使用を提供する。
【０５４３】
本発明はさらに、障害の、特別には上記障害の治療及び／又は予防のための医薬品を製造するための本発明の化合物の使用を提供する。
【０５４４】
本発明はさらに、障害の、特別には上記障害の治療及び／又は予防方法での本発明の化合物の使用を提供する。
【０５４５】
本発明はさらに、有効量の少なくとも１種類の本発明の化合物を用いて、障害、特別には上記障害を治療及び／又は予防する方法を提供する。
【０５４６】
本発明の化合物は、単独で、又は必要に応じて、１以上の他の薬理活性物質と組み合わせて用いることができ、ただしその組み合わせは望ましくない及び許容できない副作用を生じるものではない。従って、本発明はさらに、特別には上記障害の治療及び／又は予防のための、少なくとも１種類の本発明の化合物及び１以上のさらなる薬物を含む医薬品を提供する。
【０５４７】
例えば、本発明の化合物は、がん疾患治療のための既知の抗過剰増殖性、細胞増殖抑制性、細胞毒性又は免疫療法物質と組み合わせることができる。好適な組み合わせ薬物の例には、下記のものなどがある。
【０５４８】
１３１Ｉ−ｃｈＴＮＴ、アバレリックス、アビラテロン、アクラルビシン、アドゥ−トラスツズマブエムタンシン、アファチニブ、アフリベルセプト、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アレンドロン酸、アリトレチノイン、アルトレタミン、アミホスチン、アミノグルテチミド、ヘキシル５−アミノレブリネート、アムルビシン、アムサクリン、アナストロゾール、アンセスチム、アネトールジチオレチオン、アネツマブラブタンシン、アンギオテンシンＩＩ、アンチトロンビンＩＩＩ、アプレピタント、アルシツモマブ、アルグラビン、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アテゾリズマブ、アベルマブ、アキシチニブ、アザシチジン、ベロテカン、ベンダムスチン、ベシレソマブ、ベリノスタット、ベバシズマブ、ベキサロテン、ビカルタミド、ビサントレン、ブレオマイシン、ブリナツモマブ、ボルテゾミブ、ブセレリン、ボスチニブ、ブレンツキシマブ・ベドチン、ブスルファン、カバジタキセル、カボザンチニブ、カルシトニン、カルシウムホリナート、カルシウムレボホリナート、カペシタビン、カプロマブ、カルバマゼピン、カルボプラチン、カルボコン、カルフィルゾミブ、カルモフール、カルムスチン、カツマキソマブ、セレコキシブ、セルモロイキン、セリチニブ、セツキシマブ、クロラムブシル、クロルマジノン、クロルメチン、シドフォビル、シナカルセト、シスプラチン、クラドリビン、クロドロン酸、クロファラビン、コビメチニブ、コパンリシブ、クリサンタスパーゼ、クリゾチニブ、シクロホスファミド、シプロテロン、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダラツムマブ、ダブラフェニブ、ダロルタミド、ダサチニブ、ダウノルビシン、デシタビン、デガレリクス、デニロイキンジフチトクス、デノスマブ、デプレオチド、デスロレリン、デクスラゾキサン、塩化ジブロスピジウム、ジアンヒドロガラクチトール、ジクロフェナク、ジヌツキシマブ、ドセタキセル、ドラセトロン、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、ドキソルビシン＋エストロン、ドロナビノール、デュルバルマブ、エドレコロマブ、酢酸エリプチニウム、エンドスタチン、エノシタビン、エンザルタミド、エパカドスタット、エピルビシン、エピチオスタノール、エポエチンアルファ、エポエチンベータ、エポエチンゼータ、エプタプラチン、エリブリン、エルロチニブ、エソメプラゾール、エストラムスチン、エトポシド、エチニルエストラジオール、エベロリムス、エキセメスタン、ファドロゾール、フェンタニル、フルオキシメステロン、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルタミド、フォリン酸、フォルメスタン、ホスアプレピタント、フォテムスチン、フルベストラント、ガドブトロール、ガドテリドール、ガドテル酸メグルミン塩、ガドベルセタミド、ガドキセト酸・２ナトリウム塩（Ｇｄ−ｅＯＢ−ＤＴＰＡ・２ナトリウム塩）、硝酸ガリウム、ガニレリクス、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブ、グルカルピダーゼ、グルトキシム（ｇｌｕｔｏｘｉｍ）、ゴセレリン、グラニセトロン、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＳＣＦ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、ヒスタミン二塩酸塩、ヒストレリン、ヒドロキシカルバミド、Ｉ−１２５シード、イバンドロン酸、イブリツモマブ  チウキセタン、イブルチニブ、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブ、イミキモド、インプロスルファン、インジセトロン、インカドロン酸、インゲノールメブテート、インターフェロンアルファ、インターフェロンベータ、インターフェロンガンマ、イオビトリドール、イオベングアン（１２３Ｉ）、イオメプロール、イピリムマブ、イリノテカン、イトラコナゾール、イキサベピロン、イキサゾミブ、ランレオチド、ランソプラゾール、ラパチニブ、ラソコリン、レナリドマイド、レンバチニブ、レノグラスチム、レンチナン、レトロゾール、リュープロレリン、レバミソール、レボノルゲストレル、レボチロキシンナトリウム、リペグフィルグラスチム、リスリド、ロバプラチン、ロムスチン、ロニダミン、マソプロコール、メドロキシプロゲステロン、メゲストロール、メラルソプロール、メルファラン、メピチオスタン、メルカプトプリン、メスナ、メタドン、メトトレキサート、メトキサレン、アミノレブリン酸メチル、メチルプレドニゾロン、メチルテストステロン、メチロシン、ミファムルチド、ミルテホシン、ミリプラチン、ミトブロニトール、ミトグアゾン、ミトラクトール、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、モガムリズマブ、モルグラモスチム、モピダモール、モルヒネ塩酸塩、モルヒネ硫酸塩、ナビロン、ナビキシモルス、ナファレリン、ナロキソン＋ペンタゾシン、ナルトレキソン、ナルトグラスチム、ネシツムマブ、ネダプラチン、ネララビン、ネリドロン酸、ネツピタント／パロノセトロン、ニボルマブペンテトレオチド（ｎｉｖｏｌｕｍａｂｐｅｎｔｅｔｒｅｏｔｉｄｅ）、ニロチニブ、ニルタミド、ニモラゾール、ニモツズマブ、ニムスチン、ニンテダニブ、ニトラクリン、ニボルマブ、ニボルマブ、オビヌツズマブ、オクトレオチド、オファツムマブ、オラパリブ、オララツマブ、オマセタキシン−メペサクシネート、オメプラゾール、オンダンセトロン、オルゴテイン、オリロチモド、オシメルチニブ、オキサリプラチン、オキシコドン、オキシメトロン、オゾガマイシン、ｐ５３遺伝子治療、パクリタキセル、パルボシクリブ、パリフェルミン、パラジウム−１０３シード、パロノセトロン、パミドロン酸、パニツムマブ、パノビノスタット、パントプラゾール、パゾパニブ、ペグアスパルガーゼ、ペンブロリズマブ、ｐｅｇ−インターフェロンアルファ−２ｂ、ペンブロリズマブ、ペメトレキセド、ペントスタチン、ペプロマイシン、ペルフルブタン、ペルホスファミド、ペルツズマブ、ピシバニール、ピロカルピン、ピラルビシン、ピクサントロン、プレリキサホル、プリカマイシン、ポリグルサム、リン酸ポリエストラジオール、ポリビニルピロリドン＋ヒアルロン酸ナトリウム、ポリサッカライド−Ｋ、ポマリドミド、ポナチニブ、ポルフィマーナトリウム、プララトレキセート、プレドニムスチン、プレドニゾン、プロカルバジン、プロコダゾール、プロプラノロール、キナゴリド、ラベプラゾール、ラコツモマブ、塩化ラジウム−２２３、ラドチニブ、ラロキシフェン、ラルチトレキセド、ラモセトロン、ラムシルマブ、ラニムスチン、ラスブリカーゼ、ラゾキサン、レファメチニブ、レゴラフェニブ、リセドロン���、エチドロン酸レニウム−１８６、リツキシマブ、ロガラチニブ（ｒｏｇａｒａｔｉｎｉｂ）、ロラピタント、ロミデプシン、ロムルチド、ロニシクリブ、サマリウム（１５３Ｓｍ）レキシドロナム、サツモマブ、セクレチン、シルツキシマブ、シプロイセル−ｔ、シゾフィラン、ソブゾキサン、グリシジダゾールナトリウム、ソニデジブ、ソラフェニブ、スタノゾロール、ストレプトゾシン、スニチニブ、タラポルフィン、タリモジーン・ラハーパレプベック、タミバロテン、タモキシフェン、タペンタドール、タソネルミン、テセロイキン、テクネチウム（９９ｍＴｃ）ノフェツモマブ（ｎｏｆｅｔｕｍｏｍａｂ）メルペンタン、９９ｍＴｃ−ＨＹＮＩＣ−［Ｔｙｒ３］−オクトレオチド、テガフール、テガフール＋ギメラシル＋オテラシル、テモポルフィン、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、テストステロン、テトロホスミン、サリドマイド、チオテパ、チマルファシン、チオグアニン、トシリズマブ、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラベクテジン、トラメチニブ、トラマドール、トラスツズマブ、トレオスルファン、トレチノイン、トリフルリジン＋チピラシル、トラメチニブ、トリロスタン、トリプトレリン、トロホスファミド、トロンボポエチン、ウベニメクス、バルルビシン、バンデタニブ、バプレオチド、ヴァラチニブ、ベムラフェニブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンフルニン、ビノレルビン、ビスモデギブ、ボリノスタット、イットリウム−９０ガラス微小ビーズ、ジノスタチン、ジノスタチンスチマラマー、ゾレドロン酸、ゾルビシン。
【０５４９】
さらに、抗体は、ＭＰＳ１阻害剤又は標的：ＯＸ−４０、ＣＤ１３７／４−１ＢＢ、ＤＲ３、ＩＤＯ１／ＩＤＯ２、ＬＡＧ−３及びＣＤ４０に対する抗体の群から選択することができる。
【０５５０】
本発明はさらに、がん及び腫瘍の治療で使用される本発明によるバインダー−薬剤複合体（ＡＤＣ）のがん免疫療法との組み合わせを提供する。細胞毒性バインダー−薬剤複合体の固有の作用機序には、腫瘍細胞の細胞死の直接誘発、従って、免疫応答を刺激し得る腫瘍抗原の放出などがある。さらに、ＫＳＰ阻害剤担毒体類がイン・ビトロで免疫原性細胞死（ＩＣＤ）と呼ばれるもののマーカーを誘発するという示唆がある。従って、本発明のバインダー−薬剤複合体（ＡＤＣ）のがん免疫療法のための１以上の治療アプローチとの、又はがん免疫療法からの分子標的に向かう１以上の薬剤、好ましくは抗体との組み合わせは、がん及び腫瘍の好ましい治療方法を構成する。ｉ）がん免疫療法のための治療アプローチの例には、がん免疫療法、ワクチン、ＣＡＲ  Ｔ細胞、二重特異性Ｔ細胞動員抗体、腫瘍崩壊ウィルス、細胞によるワクチン接種アプローチからの標的に向かう免疫調節モノクローナル抗体及び低分子量物質などがある。ｉｉ）免疫調節モノクローナル抗体に好適ながん免疫療法からの選択される標的の例には、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１／ＰＤＬ−１、ＯＸ−４０、ＣＤ１３７、ＤＲ３、ＩＤＯ１、ＩＤＯ２、ＴＤＯ２、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ／ＩＣＯＳＬ、ＴＩＧＩＴ；ＧＩＴＲ／ＧＩＴＲＬ、ＶＩＳＴＡ、ＣＤ７０、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ／ＢＴＬＡ、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＥＡＣＡＭ６、ＩＬＤＲ２、ＣＤ７３、ＣＤ４７、Ｂ７Ｈ３、ＴＬＲ類などがある。従って、本発明によるバインダー−薬剤複合体（ＡＤＣ）のがん免疫療法との組み合わせは、第１に、免疫原性が弱い腫瘍をより高免疫原性とし、がん免疫療法の有効性を高め、長期治療効果も示すことができると考えられる。
【０５５１】
さらに、本発明による化合物は、放射線療法及び／又は外科的介入と組み合わせて用いることもできる。
【０５５２】
概して、本発明の化合物と他の細胞増殖抑制的に、細胞毒性的に、又は免疫療法的に活性な薬剤との組み合わせで、次の目的を追求することができる。
【０５５３】
・個々の有効成分による治療と比較して、腫瘍増殖の遅延、それの大きさの低減、又はさらにそれの完全な除去における効力の改善；
・単独療法の場合より低い用量で使用される化学療法剤使用の可能性；
・個々の投与と比較して副作用少なく、より耐容性のある治療法の可能性；
・より広いスペクトラムの腫瘍性疾患の治療の可能性；
・療法に対するより高い応答速度の達成；
・現代の標準療法と比較して長い患者の生存時間。
【０５５４】
さらに、本発明の化合物は、放射線療法及び／又は外科的介入と組み合わせて用いることもできる。
【０５５５】
本発明はさらに、代表的には１以上の不活性で無毒性の医薬として好適な賦形剤とともに少なくとも一つの本発明による化合物を含む医薬、及び上記目的のためのそれの使用を提供する。
【０５５６】
本発明による化合物は、全身的及び／又は局所的に作用し得る。これに関して、それは好適な形で、例えば非経口的に、可能な場合に吸入によって、又はインプラント若しくはステントとして投与することができる。
【０５５７】
本発明による化合物は、全身的及び／又は局所的に作用し得る。これに関して、それは好適な形で、例えば経口、非経口、肺、鼻、舌下、舌、口腔、直腸、膣、皮膚、経皮、結膜若しくは耳経路によって、又はインプラント若しくはステントとして投与することができる。
【０５５８】
本発明による化合物は、これらの投与経路に好適な投与形態で投与することができる。
【０５５９】
経口投与に好適な投与形態は、先行技術に従って機能し、本発明の化合物を迅速及び／又は改変された様式で送達し、本発明の化合物を結晶形及び／又は非晶質及び／又は溶解形で含有する投与形態、例えば、錠剤（非コート又はコート錠、例えば、腸溶性コーティング、又は不溶であるか、遅れて溶解し、本発明による化合物の放出を制御するコーティングを有するもの）、口中で迅速に崩壊する錠剤、又は、フィルム／ウェハ、フィルム／凍結乾燥物、カプセル（例えば、硬又は軟ゼラチンカプセル）、糖衣錠、粒剤、ペレット、粉剤、乳濁液、懸濁液、エアロゾル又は液剤である。
【０５６０】
非経口投与は、吸収段階（例えば、静脈、動脈、心臓内、髄腔内又は腰椎内で）を回避することができ、又は吸収（例えば、筋肉、皮下、皮内、経皮又は腹腔内で）を含むことができる。非経口投与の好適な投与形態には、液剤、懸濁液、乳濁液、凍結乾燥物又は無菌粉剤の形態での注射及び注入用製剤などがある。
【０５６１】
他の投与経路に好適な投与形態は、例えば、吸入用の医薬形態（粉末吸入剤、噴霧器など）、点鼻剤、液剤又は噴霧剤；舌、舌下若しくは口腔投与用の錠剤、フィルム／ウェハ又はカプセル、坐剤、点眼剤、眼軟膏剤、洗眼剤、眼球挿入物、点耳剤、噴霧剤、粉剤、洗浄剤若しくはタンポン、膣カプセル、水系懸濁液（ローション、振盪混合物）、親油性懸濁液、乳濁液、マイクロエマルション、軟膏、クリーム、経皮治療系（例えば貼付剤）、乳液、ペースト、泡剤、粉剤、インプラント又はステントである。
【０５６２】
好ましいものは、非経口投与、特別には静脈投与である。
【０５６３】
本発明による化合物は、言及した投与形態に変換することができる。これは、自体公知の方法で、薬学的に好適な賦形剤と混和することで行うことができる。これらの賦形剤には、下記のものなどがある。
【０５６４】
・充填剤及び担体（例えばセルロース、微結晶セルロース、例えばＡｖｉｃｅｌ（登録商標）、乳糖、マンイトール、デンプン、リン酸カルシウム、例えばＤｉ−ｃａｆｏｓ（登録商標））、
・軟膏基剤（例えばワセリン、パラフィン類、トリグリセリド類、ロウ類、羊毛脂、羊毛脂アルコール類、ラノリン、親水性軟膏、ポリエチレングリコール類）、
・坐剤基剤（例えばポリエチレングリコール類、ココアバター、固い脂肪）、
・溶媒（例えば水、エタノール、イソプロパノール、グリセロール、プロピレングリコール、脂肪油の中鎖トリグリセリド、液体ポリエチレングリコール類、パラフィン類）、
・界面活性剤、乳濁液、分散剤又は湿展剤（例えばドデシル硫酸ナトリウム、レシチン、リン脂質、脂肪アルコール、例えばＬａｎｅｔｔｅ（登録商標）、ソルビタン脂肪酸エステル類、例えばＳｐａｎ（登録商標）、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、例えばＴｗｅｅｎ（登録商標）、ポリオキシエチレン脂肪酸グリセリド類、例えばＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル類、グリセロール脂肪酸エステル類、ポロキサマー類、例えばＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標））、
・緩衝物質、さらには酸及び塩基（例えばリン酸塩、炭酸塩、クエン酸、酢酸、塩酸、水酸化ナトリウム、炭酸アンモニウム、トロメタモール、トリエタノールアミン），
・等張化剤（例えばグルコース、塩化ナトリウム）、
・吸着剤（例えば微粉砕シリカ類）、
・増粘剤、ゲル形成剤、濃厚剤又は結合剤（例えばポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース−ナトリウム、デンプン、カルボマー類、ポリアクリル酸類、例えばＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）、アルギン酸類、ゼラチン類）、
・崩壊剤（例えば加工でんぷん、カルボキシメチルセルロース−ナトリウム、でんぷんグリコール酸ナトリウム、例えばＥｘｐｌｏｔａｂ（登録商標）、架橋ポリビニルピロリドン、クロスカルメロース−ナトリウム、例えばＡｃＤｉＳｏｌ（登録商標））、
・流動調節剤、潤滑剤、流動促進剤及び離型剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、微粉砕シリカ類、例えばＡｅｒｏｓｉｌ（登録商標））、
・溶解を急速化又は変えたフィルム若しくは拡散膜用のコーティング剤（例えば、糖、シェラック）及びフィルム形成剤（例えば、ポリビニルピロリドン類、例えばＫｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、酢酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、ポリアクリレート類、ポリメタクリレート類、例えばＥｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）によって）、
・カプセル材料（例えばゼラチン類、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、
・合成ポリマー（例えばポリ乳酸類、ポリグリコリド類、ポリアクリレート類、ポリメタクリレート類、例えばＥｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）、ポリビニルピロリドン類、例えばＫｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）、ポリビニルアルコール類、ポリ酢酸ビニル、ポリエチレンオキサイド類、ポリエチレングリコール類並びにそれらのコポリマー及びブロックコポリマー）、
・可塑剤（例えばポリエチレングリコール類、プロピレングリコール、グリセロール、トリアセチン、クエン酸トリアセチル、フタル酸ジブチル）、
・浸透促進剤、
・安定剤（例えば、酸化防止剤、例えばアスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、アスコルビン酸ナトリウム、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル）、
・保存剤（例えば、パラベン類、ソルビン酸、チオマーサル、塩化ベンザルコニウム、酢酸クロルヘキシジン、安息香酸ナトリウム）、
・色素（例えば、無機顔料、例えば酸化鉄類、二酸化チタン）、
・芳香剤、甘味剤、香味剤及び／又は臭気矯正剤。
【０５６５】
本発明はさらに、代表的には１以上の薬学的に好適な賦形剤とともに少なくとも一つの本発明による化合物を含む医薬組成物、並びに上記目的のためのそれの使用を提供する。
【０５６６】
概して、非経口投与の場合、約０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．３〜７ｍｇ／ｋｇの量を投与して、効果的な結果を得ることが有利であることが認められている。
【０５６７】
そうではあっても、場合により、具体的に体重、投与経路、有効成分に対する個体の応答、製剤の種類、及び投与を行う時刻若しくは間隔に応じて、指定量から逸脱する必要であることもあり得る。従って、場合により、上記最小量より少ない量で管理するのが十分である可能性があるが、他の場合には、言及した上限を超えなければならない。より大きい量の投与の場合、それらを１日かけて、いくつかの個々の用量に分けることが得策である可能性がある。
【０５６８】
本発明による化合物は、同位体型の形態も取り得る。従って本発明は、本発明による化合物の１以上の同位体型、特別には重水素含有化合物を包含する。
【０５６９】
化合物又は試薬の「同位体型」という用語は、そのような化合物が構築される１以上の同位体の割合が自然ではない化合物と定義される。
【０５７０】
「本発明による化合物の同位型」という用語は、そのような化合物が構築される１以上の同位体の割合が自然ではない本発明による化合物と定義される。
【０５７１】
「不自然な割合」という表現は、それの自然な頻度より高いそのような同位体の割合を意味するものと理解される。この関連で用いられる同位体の自然頻度は、″Ｉｓｏｔｏｐｉｃ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  １９９７″，  Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ７０（１），  ２１７−２３５，  １９９８にある。
【０５７２】
そのような同位体の例は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素の安定な放射性同位体、例えば２Ｈ（重水素）、３Ｈ（三重水素）、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３２Ｐ、３３Ｐ、３３Ｓ、３４Ｓ、３５Ｓ、３６Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌ、８２Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１２９Ｉ及び１３１Ｉである。
【０５７３】
本明細書で特定された障害の治療及び／又は予防に関して、本発明による化合物の同位体型は好ましくは、重水素を含む（「本発明による重水素含有化合物」）。３Ｈ又は１４Ｃなどの１以上の放射性同位体が組み込まれた本発明による化合物の同位体型は、例えば、医療及び／又は基質組織分布試験で有用である。取り込み及び検出が容易であることから、これらの同位体が特に好ましい。１８Ｆ又は１１Ｃなどの陽電子放出同位体を本発明による化合物に組み込むことが可能である。本発明による化合物のこれらの同位体型は、イン・ビボ撮像用途での使用に好適である。本発明による重水素含有及び１３Ｃ含有化合物を、質量スペクトル分析での前臨床又は臨床試験内で用いることができる。
【０５７４】
本発明による化合物の同位体型は、通常、試薬を同位体型の試薬、好ましくは重水素含有試薬に代えることで、本明細書に記載の図式及び／又は実施例に記載の当業者に公知の方法によって製造することができる。所望の重水素化部位に従って、一部の場合で、Ｄ２Ｏからの重水素を、そのような化合物の合成に用いることができる化合物又は試薬に直接組み込むことができる。分子への重水素の組み込みに有用な別の試薬は、重水素ガスである。重水素の組み込みの迅速な経路は、オレフィン系結合及びアセチレン系結合の触媒重水素化である。官能基を含む炭化水素での水素の重水素への直接交換のために、重水素ガス存在下に、金属触媒（すなわち、Ｐｄ、Ｐｔ及びＲｈ）を用いることもできる。各種の重水素化試薬及び合成単位は、例えば、Ｃ／Ｄ／Ｎ  Ｉｓｏｔｏｐｅｓ，  Ｑｕｅｂｅｃ，  Ｃａｎａｄａ；Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．，  Ａｎｄｏｖｅｒ，  ＭＡ，  ＵＳＡ；及びＣｏｍｂｉＰｈｏｓ  Ｃａｔａｌｙｓｔｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，  ＮＪ，  ＵＳＡのような会社から市販されている。
【０５７５】
「重水素含有化合物」という用語は、１以上の水素原子が１以上の重水素原子によって置き換わっており、一般式（Ｉ）の化合物における各重水素化位置での重水素の頻度が約０．０１５％である重水素の天然頻度より高い本発明による化合物と定義される。詳細には、本発明による重水素含有化合物において、一般式（Ｉ）の化合物における全ての重水素化位置での重水素の頻度は、この位置又はこれらの位置で、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％又は８０％より高く、好ましくは９０％、９５％、９６％又は９７％より高く、さらに好ましくは９８％又は９９％より高い。全ての重水素化位置での重水素の頻度は、他の重水素化位置における重水素の頻度から独立であることは明らかであろう。
【０５７６】
本発明による化合物への１以上の重水素原子の選択的取り込みによって、分子の物理化学特性（例えば酸性度［Ｃ．  Ｌ．  Ｐｅｒｒｉｎ、ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．，  ２００７，  １２９，  ４４９０］、塩基性度［Ｃ．  Ｌ．  Ｐｅｒｒｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．，  ２００５，  １２７，  ９６４１］、親油性［Ｂ．  Ｔｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．，  １９８４，  １９（３），  ２７１］）及び／又は代謝プロファイルを変えることができ、親化合物／代謝物の比率又は形成される代謝物の例における変化を引き起こすことができる。そのような変化は特定の治療上の利点を生じ得ることから、特定の環境下で好ましい可能性がある。代謝及び代謝物の比率が変わる代謝切り換えの速度低下が報告されている（Ａ．  Ｅ．  Ｍｕｔｌｉｂ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｏｘｉｃｏｌ．  Ａｐｐｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ２０００，  １６９，  １０２）。親薬剤及び代謝物への曝露におけるこれらの変化は、本発明による重水素含有化合物の薬力学、耐容性及び効力に関して重要な結果を有し得る。場合により、重水素置換によって、望ましくない又は有毒な代謝物の形成が低下又は排除され、所望の代謝物の形成が促進される（例えばＮｅｖｉｒａｐｉｎｅ：  Ａ．  Ｍ．  Ｓｈａｒｍａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｓ．  Ｔｏｘｉｃｏｌ．，  ２０１３，  ２６，  ４１０；Ｅｆａｖｉｒｅｎｚ：  Ａ．  Ｅ．  Ｍｕｔｌｉｂ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｏｘｉｃｏｌ．  Ａｐｐｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ２０００，  １６９，  １０２）。他の場合、重水素化の重要な効果は、全身クリアランスの速度を低下させることである。結果的に、化合物の生物学的半減期が大きくなる。可能な臨床的効果には、ピークレベル低下及びトラフレベル上昇を伴って同様の全身曝露を維持スル能力などがあると考えられる。これによって、特定の化合物の薬物動態／薬力学関係に応じて、副作用低下及び効力強化が生じると考えられる。この重水素効果の例は、ＭＬ−３３７（Ｃ．  Ｊ．  Ｗｅｎｔｈｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２０１３，  ５６，  ５２０８）及びオダナカティブ（Ｋ．  Ｋａｓｓａｈｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ＷＯ２０１２／１１２３６３）である。代謝速度低下によって、全身クリアランス速度に変化を生じることなく薬物の曝露を増加させるさらに他の場合が報告されている（例えば、Ｒｏｆｅｃｏｘｉｂ：  Ｆ．  Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｒｚｎｅｉｍ．  Ｆｏｒｓｃｈ．  Ｄｒｕｇ．  Ｒｅｓ．，  ２００６，  ５６，  ２９５；Ｔｅｌａｐｒｅｖｉｒ：  Ｆ．  Ｍａｌｔａｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００９，  ５２，  ７９９３）。この効果を示す重水素化薬剤は、用量要件低下（例えば、所望の効果を達成するための投与回数低減又は用量軽減）を有し得るか、及び／又は代謝物負荷量低下を生じ得る。
【０５７７】
本発明による化合物は、２以上の可能な代謝攻撃部位を有し得る。物理化学特性及び代謝プロファイルに対する上記効果を至適化するため、１以上の重水素−水素交換の一定パターンを有する本発明による重水素含有化合物を選択することができる。詳細には、本発明による重水素含有化合物の重水素原子は、炭素原子に結合し、及び／又は代謝酵素、例えばシトクロムＰ４５０の攻撃部位である本発明による化合物における位置にある。
【０５７８】
［実施例］
下記の実施例は、本発明の実行可能性を説明するものであり、本発明はこれら実施例にのみ限定されるものではない。
【０５７９】
別段の断りがない限り、下記の試験及び実施例におけるパーセントは重量パーセントであり、部は重量部である。液体／液体溶液における溶媒比、希釈比及び濃度データは、各場合で体積基準である。
合成経路：
作業例の例として、下記の図式に、例示的合成経路を示している。
【０５８０】
これらの図式において、式ＩＩａによれば、アミノ基−ＮＨＲ４上のＲ４置換基は、Ｚ１−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）基であることができる。
【０５８１】
この文脈において、
Ｚ１は、
Ｃ１−１０−アルキル、Ｃ５−１０−アリール又はＣ６−１０−アラルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリール、Ｃ５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、Ｃ５−１０−ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ１−１０−アルコキシ、Ｃ６−１０−アリールオキシ、Ｃ６−１０−アリール−Ｃ１−１０−アルキルオキシ又はＣ６−１０−アラルコキシ、Ｃ５−１０−ヘテロアルコキシ、Ｃ１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ６−１０−アリールオキシ−又はＣ５−１０−複素環アルコキシ基［これらは、−ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）３−Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｎ（アルキル）２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）２又は−ＯＨによってモノ置換又は多置換されていても良い。］であり、
又は、−Ｈ若しくは−（ＣＨ２）０−１−Ｏｘ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｖ−Ｒ１基であり、
ｘは、０又は１であり、
ｖは、０〜２０の数字であり、
Ｒ１は、式（ＩＩ）で提供の定義を有する。
【０５８２】
図式１：システイン連結ＡＤＣ類の合成
【化８１】
2020502201.tif 000119
【０５８３】
図式２：システイン連結ＡＤＣ類の合成
【化８２】
2020502201.tif 000120
【０５８４】
図式３：リジン連結ＡＤＣ類の合成
【化８３】
2020502201.tif 000121
【０５８５】
図式４：加水分解されたコハク酸アミドを介したシステイン連結ＡＤＣ類の合成
この方法は、特には、Ｌ１＝＃１−ＣＨ２−＃２を有するＡＤＣについて用いて、これらのＡＤＣを開環連結型に変換した。
【化８４】
2020502201.tif 000122
【０５８６】
図式５：ＡＤＣ前駆体分子の合成
【化８５】
2020502201.tif 000123
【０５８７】
［ａ）：ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ；ｂ）塩化亜鉛、トリフルオロエタノール、５０℃、ＥＤＴＡ．］
図式６：中間体及びＡＤＣ前駆体の一般合成方法
【化８６】
2020502201.tif 000124
【０５８８】
［ａ）：ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ又はＥＤＣＩ、ＨＯＢＴ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ；ｂ）Ｈ２、１０％Ｐｄ−Ｃ、ＭｅＯＨ、ＲＴ；ｃ）Ｚ１−ＣＯＯＨ、ＥＤＣＩ、ＨＯＢＴ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ又はＺ１−ＣＯＯＨ、ＨＡＴＵ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ又はＺ１−ＣＯＯＳｕ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ］
図式７：レグマイン開裂性リンカーを有するＡＤＣ前駆体分子の合成
【化８７】
2020502201.tif 000125
【０５８９】
［ａ）：ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ又はＥＤＣＩ、ＨＯＢＴ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ；ｂ）Ｈ２、１０％Ｐｄ−Ｃ、ＭｅＯＨ、ＲＴ；ｃ）１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ］
図式８：レグマイン開裂性リンカーを有するＡＤＣ前駆体分子の合成
【化８８】
2020502201.tif 000126
【０５９０】
［ａ）：ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ又はＥＤＣＩ、ＨＯＢＴ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ；ｂ）Ｈ２、１０％Ｐｄ−Ｃ、ＭｅＯＨ、ＲＴ；ｃ）１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ］
さらに、図式６、７及び８による他の中間体は、レグマイン開裂性ＡＤＣ及びＡＰＤＣ前駆体に変換することができる。
【０５９１】
図式６〜８に示したベンジルオキシカルボニル基に代わるものとして、ペプチド化学で確立された他の保護基を用い、同様に公知である相当する方法によってそれらを取り外すことができる。保護基戦略の選択は、その分子にある他の構造要素との適合性に関して当業者には公知の要件に従って行う。保護基がまだ存在する場合には、分子中のさらなる保護基を最終段階で除去することができる。その合成は、それらの順序に関して並べ変えても良い。
【０５９２】
図式９：レグマイン開裂性ヘッド基を有するシステイン結合したＡＤＣの合成レ
【化８９】
2020502201.tif 000127
【０５９３】
［ａ）：ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ；ｂ）２〜５当量ＴＣＥＰ、ＰＢＳ  ｐＨ７．２、ＲＴで３０分間攪拌；ｃ）アルゴン下にＲＴで９０分間攪拌、次にＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）によってｐＨ８に再緩衝、そしてアルゴン下にＲＴで終夜攪拌、次に超遠心による濃縮、そしてｐＨ７．２のＰＢＳによる所望の濃度の設定）］
図式１０：レグマイン開裂性リンカーを有するリジン結合したＡＤＣの合成
【化９０】
2020502201.tif 000128
【０５９４】
［ａ）：ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ；ｂ）Ｈ２、１０％Ｐｄ−Ｃ、メタノール１．５時間、ＲＴ；ｃ）１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴで終夜攪拌；ｄ）ＰＢＳ中のＡＫ２、ＤＭＳＯに溶かした５当量の活性エステルの添加、ＲＴでアルゴン下に６０分間攪拌、ＤＭＳＯに溶かした追加の５当量の活性エステルの添加、ＲＴでアルゴン下に６０分間攪拌、次にＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）を用いて平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）による精製、次に超遠心による濃縮、そしてＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）による所望の濃度の設定）］
図式１１：レグマイン開裂性ヘッド基を有するＡＤＣ前駆体の合成
【化９１】
2020502201.tif 000129
【０５９５】
［ａ）：ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３、ＨＯＡｃ、ジクロロメタン、ＲＴ；ｂ）クロロアセチルクロライド、ＮＥｔ３、ＤＣＭ、ＲＴ；ｃ）Ｌ−システイン、ＮａＨＣＯ３、ＤＢＵ、イソプロパノール／水、５０℃；ｄ）ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ；ｅ）塩化亜鉛、トリフルオロエタノール、５０℃；ｆ）ｄ）ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ］
図式１２：トランスグルタミナーゼカップリングを介したＡＤＣの合成
【化９２】
2020502201.tif 000130
【０５９６】
［ａ：５ｍｇ  ＡＫ３／ＤＰＢＳ  ｐＨ７．４（ｃ：約１０ｍｇ／ｍＬ）、６当量の担毒体−リンカー前駆体；組み換え細菌トランスグルタミナーゼ溶液１２．５μＬ（１．２５Ｕ）の水溶液（１００Ｕ／ｍＬ）５０μＬ及びＤＰＢＳ  ｐＨ７．４  ３７．５μＬを加え、３７℃で２４時間インキュベートする。］
Ａ．実施例
略称及び頭字語：
ＡＢＣＢ１：ＡＴＰ結合カセットサブファミリーＢメンバー１（Ｐ−ｇｐ及びＭＤＲ１と同義語）
ａｂｓ．：純粋
Ａｃ：アセチル
ＡＣＮ：アセトニトリル
ａｑ．：水系、水溶液
ＡＴＰ：アデノシン三リン酸
ＢＣＲＰ：乳癌耐性タンパク質、排出輸送体
ＢＥＰ：２−ブロモ−１−エチルピリジニウムテトラフルオロボレート
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ｂｒ．：広い（ＮＭＲで）
Ｅｘ．：実施例
ＢｘＰＣ３：ヒト腫瘍細胞系
ｃａ．：約
ＣＩ：化学イオン化（ＭＳで）
Ｄ：二重線（ＮＭＲで）
Ｄ：日
ＤＡＲ：薬剤抗体比（抗体の負荷量）
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＤＣＩ：直接化学イオン化（ＭＳで）
ＤＣＭ：ジクロロメタン
Ｄｄ：二重線の二重線（ＮＭＲで）
ＤＭＡＰ：４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＥ：１，２−ジメトキシエタン
ＤＭＥＭ：ダルベッコ改変イーグル培地（細胞培養のための標準培養液）
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＰＢＳ、Ｄ−ＰＢＳ：ダルベッコのリン酸緩衝塩溶液
Ｄ／Ｐ：色素（蛍光色素）／タンパク質比
ＰＢＳ：ＰＢＳ＝ＤＰＢＳ＝Ｄ−ＰＢＳ、ｐＨ７．４、Ｓｉｇｍａから、Ｎｏ  Ｄ８５３７
組成：
ＫＣｌ  ０．２ｇ
ＫＨ２ＰＯ４（無水物）０．２ｇ
ＮａＣｌ  ８．０ｇ
Ｎａ２ＨＰＯ４（無水物）１．１５ｇ
Ｈ２Ｏで１リットルとする
Ｄｔ：三重線の二重線（ＮＭＲで）
ＤＴＴ：ＤＬ−ジチオスレイトール
ＥＤＣ：Ｎ′−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥＧＦＲ：上皮増殖因子受容体
ＥＩ：電子衝撃イオン化（ＭＳで）
ＥＬＩＳＡ：酵素結合免疫吸着検定法
ｅｑ．：当量
ＥＳＩ：電気スプレーイオン化（ＭＳで）
ＥＳＩ−ＭｉｃｒｏＴｏｆｑ：ＥＳＩ−ＭｉｃｒｏＴｏｆｑ（Ｔｏｆ＝飛行時間及びｑ＝四重極を用いる質量分析装置の名称）
ＦＣＳ：ウシ胎仔血清
Ｆｍｏｃ：（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル
ｓａｔ．：飽和
ＧＴＰ：グアノシン５′三リン酸
Ｈ：時間
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＥＰＥＳ：４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−エタンスルホン酸
ＨＯＡｃ：酢酸
ＨＯＡｔ：１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物
ＨＯＳｕ：Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド
ＨＰＬＣ：高圧高速液体クロマトグラフィー
ＩＣ５０：半最大阻害濃度
ｉ．ｍ．：筋肉的に、筋肉への投与
ｉ．ｖ．：静脈的に、静脈への投与
ｃｏｎｃ．：濃
ＫＰＬ−４：ヒト腫瘍細胞系
ＫＵ−１９−１９：ヒト腫瘍細胞系
ＬＣ−ＭＳ：液体クロマトグラフィー結合質量分析
ＬＬＣ−ＰＫ１細胞：ルイス肺癌ブタ（ｐｏｒｋ）腎臓細胞系
Ｌ−ＭＤＲ：ヒトＭＤＲ１トランスフェクトＬＬＣ−ＰＫ１細胞
ＬｏＶｏ：ヒト腫瘍細胞系
Ｍ：多重線（ＮＭＲで）
ＭＤＲ１：多剤耐性タンパク質１
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
Ｍｉｎ：分
ＭＳ：質量分析
ＭＴＴ：３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロマイド
ＮＣＩ−Ｈ２９２：ヒト腫瘍細胞系
−Ｎｍｅ−：窒素原子に結合したメチル基
ＮＣＩ−Ｈ５２０：ヒト腫瘍細胞系
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
ＮＭＰ：Ｎ−メチル−２−ピロリジノン
ＮＭＲ：核磁気共鳴スペクトル測定
ＮＭＲＩ：Ｎａｖａｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＮＭＲＩ）由来のマウス系統
Ｎｕｄｅマウス：実験動物
ＮＳＣＬＣ：非小細胞肺癌
ＰＢＳ：リン酸緩衝塩溶液
Ｐｄ／Ｃ：パラジウム／活性炭
Ｐ−ｐｇ：Ｐ−糖タンパク質、輸送体タンパク質
ＰＮＧａｓｅＦ：糖を開裂させる酵素
ｑｕａｎｔ．：定量的（収率で）
Ｑｕａｒｔ：四重線（ＮＭＲで）
Ｑｕｉｎｔ：五重線（ＮＭＲで）
Ｒｆ：保持指数（ＴＬＣで）
ＲＴ：室温
Ｒｔ：保持時間（ＨＰＬＣで）
ｓ：一重線（ＮＭＲで）
ｓ．ｃ．：皮下的に、皮下への投与
ＳＣＩＤマウス：重度の複合免疫不全を有する試験マウス
ＳＫ−ＨＥＰ−１：ヒト腫瘍細胞系
ｔ：三重線（ＮＭＲで）
ＴＢＡＦ：フッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム
ＴＣＥＰ：トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン
ＴＥＭＰＯ：（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−イル）オキシル
Ｔｅｏｃ：トリメチルシリルエトキシカルボニル
ｔｅｒｔ：ターシャリー
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
Ｔ３Ｐ（登録商標）：２，４，６−トリプロピル−１，３，５，２，４，６−トリオキサトリホスフィナン２，４，６−トリオキサイド
Ｕ２５１：ヒト腫瘍細胞系
ＵＶ：紫外線スペクトル測定
ｖ／ｖ：体積比（溶液のもの）
Ｚ：ベンジルオキシカルボニル
アミノ酸略称
Ａｌａ＝アラニン
Ａｒｇ＝アルギニン
Ａｓｎ＝アスパラギン
Ａｓｐ＝アスパラギン酸
Ｃｙｓ＝システイン
Ｇｌｕ＝グルタミン酸
Ｇｌｎ＝グルタミン
Ｇｌｙ＝グリシン
Ｈｉｓ＝ヒスチジン
Ｉｌｅ＝イソロイシン
Ｌｅｕ＝ロイシン
Ｌｙｓ＝リジン
Ｍｅｔ＝メチオニン
Ｎｖａ＝ノルバリン
Ｐｈｅ＝フェニルアラニン
Ｐｒｏ＝プロリン
Ｓｅｒ＝セリン
Ｔｈｒ＝トレオニン
Ｔｒｐ＝トリプトファン
Ｔｙｒ＝チロシン
Ｖａｌ＝バリン。
【０５９７】
ＨＰＬＣ及びＬＣ−ＭＳ法：
方法１（ＬＣ−ＭＳ）：
装置：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＳＱＤ  ＵＰＬＣシステム；カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｔ３  １．８μ  ５０×１ｍｍ；溶離液Ａ：水１リットル＋９９％ギ酸０．２５ｍＬ、溶離液Ｂ：アセトニトリル１リットル＋９９％ギ酸０．２５ｍＬ；勾配：０．０分９０％Ａ→１．２分５％Ａ→２．０分５％Ａオーブン：５０℃；流量：０．４０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２０８−４００ｎｍ。
【０５９８】
方法２（ＬＣ−ＭＳ）：
ＭＳ装置型：Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｎａｐｔ  Ｇ２Ｓ；ＵＰＬＣ装置型：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｉ−ＣＬＡＳＳ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＢＥＨ３００、２．１×１５０ｍｍ、Ｃ１８  １．７μｍ；溶離液Ａ：水１リットル＋０．０１％ギ酸；溶離液Ｂ：アセトニトリル１リットル＋０．０１％ギ酸；勾配：０．０分２％Ｂ→１．５分２％Ｂ→８．５分９５％Ｂ→１０．０分９５％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：０．５０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２２０ｎｍ。
【０５９９】
方法３（ＬＣ−ＭＳ）：
ＭＳ装置：Ｗａｔｅｒｓ  （Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）ＱＭ；ＨＰＬＣ装置：Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００シリーズ；カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ  ＺＯＲＢＡＸ  Ｅｘｔｅｎｄ−Ｃ１８  ３．０×５０ｍｍ  ３．５ミクロン；溶離液Ａ：水１リットル＋０．０１ｍｏｌの炭酸アンモニウム、溶離液Ｂ：アセトニトリル１リットル；勾配：０．０分９８％Ａ→０．２分９８％Ａ→３．０分５％Ａ→４．５分５％Ａ；オーブン：４０℃；流量：１．７５ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０６００】
方法４（ＬＣ−ＭＳ）：
ＭＳ装置型：Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｎａｐｔ  Ｇ２Ｓ；ＵＰＬＣ装置型：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｉ−ＣＬＡＳＳ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＳＳＴ３、２．１×５０ｍｍ、Ｃ１８  １．８μｍ；溶離液Ａ：水１リットル＋０．０１％ギ酸；溶離液Ｂ：アセトニトリル１リットル＋０．０１％ギ酸；勾配：０．０分１０％Ｂ→０．３分１０％Ｂ→１．７分９５％Ｂ→２．５分９５％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：１．２０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０６０１】
方法５（ＬＣ−ＭＳ）：
装置：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＳＱＤ  ＵＰＬＣシステム；カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｔ３  １．８μ  ５０×１ｍｍ；溶離液Ａ：水１リットル＋９９％ギ酸０．２５ｍＬ、溶離液Ｂ：アセトニトリル１リットル＋９９％ギ酸０．２５ｍＬ；勾配：０．０分９５％Ａ→６．０分５％Ａ→７．５分５％Ａオーブン：５０℃；流量：０．３５ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０−４００ｎｍ。
【０６０２】
方法６（ＬＣ−ＭＳ）：
装置：Ｗａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣ  Ａｃｑｕｉｔｙ搭載Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｑｕａｔｔｒｏ  Ｐｒｅｍｉｅｒ；カラム：Ｔｈｅｒｍｏ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  ＧＯＬＤ１．９μ５０×１ｍｍ；溶離液Ａ：水１リットル＋５０％ギ酸０．５ｍＬ、溶離液Ｂ：アセトニトリル１リットル＋５０％ギ酸０．５ｍＬ；勾配：０．０分９７％Ａ→０．５分９７％Ａ→３．２分５％Ａ→４．０分５％Ａオーブン：５０℃；流量：０．３ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０６０３】
方法７（ＬＣ−ＭＳ）：
装置：Ａｇｉｌｅｎｔ  ＭＳ  Ｑｕａｄ  ６１５０；ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ  １２９０；カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｔ３  １．８μ  ５０×２．１ｍｍ；溶離液Ａ：水１リットル＋９９％ギ酸０．２５ｍＬ、溶離液Ｂ：アセトニトリル１リットル＋９９％ギ酸０．２５ｍＬ；勾配：０．０分９０％Ａ→０．３分９０％Ａ→１．７分５％Ａ→３．０分５％Ａオーブン：５０℃；流量：１．２０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２０５−３０５ｎｍ。
【０６０４】
方法８（ＬＣ−ＭＳ）：
ＭＳ装置型：Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｎａｐｔ  Ｇ２Ｓ；ＵＰＬＣ装置型：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｉ−ＣＬＡＳＳ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＳＳＴ３、２．１×５０ｍｍ、Ｃ１８  １．８μｍ；溶離液Ａ：水１リットル＋０．０１％ギ酸；溶離液Ｂ：アセトニトリル１リットル＋０．０１％ギ酸；勾配：０．０分２％Ｂ→２．０分２％Ｂ→１３．０分９０％Ｂ→１５．０分９０％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：１．２０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０６０５】
方法９：実施例１８１から１９１についてのＬＣ−ＭＳ−Ｐｒｅｐ精製法（方法ＬＩＮＤ−ＬＣ−ＭＳ−Ｐｒｅｐ）
ＭＳ装置：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＰＬＣ装置：Ｗａｔｅｒｓ；Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム、１９ｍｍ×５０ｍｍ、５μｍ、溶離液Ａ：水＋０．０５％アンモニア、溶離液Ｂ：アセトニトリル（ＵＬＣ）、勾配；流量：４０ｍＬ／分；ＵＶ検出：ＤＡＤ；２１０−４００ｎｍ。
【０６０６】
又は
ＭＳ装置：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＰＬＣ装置：Ｗａｔｅｒｓ；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）１００Ａカラム、ＡＸＩＡ  Ｔｅｃｈ．  ５０×２１．２ｍｍ、溶離液Ａ：水＋０．０５％ギ酸、溶離液Ｂ：アセトニトリル（ＵＬＣ）勾配；流量：４０ｍＬ／分；ＵＶ検出：ＤＡＤ；２１０−４００ｎｍ。
【０６０７】
方法１０：実施例１８１から１９１についてのＬＣ−ＭＳ分析法（ＬＩＮＤ＿ＳＱＤ＿ＳＢ＿ＡＱ）
装置ＭＳ：Ｗａｔｅｒｓ  ＳＱＤ；装置ＨＰＬＣ：Ｗａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣ；カラム：Ｚｏｒｔｅｘ  ＳＢ−Ａｑ（Ａｇｉｌｅｎｔ）、５０ｍｍ×２．１ｍｍ、１．８μｍ；溶離液Ａ：水＋０．０２５％ギ酸、溶離液Ｂ：アセトニトリル（ＵＬＣ）＋０．０２５％ギ酸；勾配：０．０分９８％Ａ−０．９分２５％Ａ−１．０分５％Ａ−１．４分５％Ａ−１．４１分９８％Ａ−１．５分９８％Ａ；オーブン：４０℃；流量：０．６００ｍＬ／分；ＵＶ検出：ＤＡＤ；２１０ｎｍ。
【０６０８】
方法１１（ＨＰＬＣ）：
装置：ＨＰ１１００シリーズ
カラム：Ｍｅｒｃｋ  Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  ＳｐｅｅｄＲＯＤ  ＲＰ−１８ｅ、５０−４．６ｍｍ、カタログ番号１．５１４５０．０００１、Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  Ｇｕａｒｄカートリッジキットプレカラム、ＲＰ−１８ｅ、５−４．６ｍｍ、カタログ番号１．５１４７０．０００１
勾配：流量５ｍＬ／分
注入容量５μＬ
溶媒Ａ：ＨＣｌＯ４（７０％）／水（４ｍＬ／Ｌ）
溶媒Ｂ：アセトニトリル
開始２０％Ｂ
０．５０分２０％Ｂ
３．００分９０％Ｂ
３．５０分９０％Ｂ
３．５１分２０％Ｂ
４．００分２０％Ｂ
カラム温度：４０℃
波長：２１０ｎｍ。
【０６０９】
方法１２：（ＬＣ−ＭＳ）：
ＭＳ装置型：Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＦＴ−ＭＳ；ＵＨＰＬＣ＋装置型Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＵｌｔｉＭａｔｅ  ３０００；カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＳＳＴ３、２．１×７５ｍｍ、Ｃ１８  １．８μｍ；溶離液Ａ：水１リットル＋０．０１％ギ酸；溶離液Ｂ：アセトニトリル１リットル＋０．０１％ギ酸；勾配：０．０分１０％Ｂ→２．５分９５％Ｂ→３．５分９５％Ｂ；オーブン５０℃；流量０．９０ｍＬ／分；ＵＶ検出２１０ｎｍ／最適積分経路２１０−３００ｎｍ。
【０６１０】
方法１３：（ＬＣ−ＭＳ）
ＭＳ装置：Ｗａｔｅｒｓ  （Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）  Ｑｕａｔｔｒｏ  Ｍｉｃｒｏ；装置Ｗａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣ  Ａｃｑｕｉｔｙ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＢＥＨＣ１８  １．７μ  ５０×２．１ｍｍ；溶離液Ａ：水１リットル＋０．０１ｍｏｌギ酸アンモニウム、溶離液Ｂ：アセトニトリル１；勾配：０．０分９５％Ａ→０．１分９５％Ａ→２．０分１５％Ａ→２．５分１５％Ａ→２．５１分１０％Ａ→３．０分１０％Ａ；オーブン：４０℃；流量：０．５ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０６１１】
以下において製造が明瞭に記載されていない全ての反応物又は試薬は、一般に利用可能な提供元から商業的に購入したものである。製造が同様に以下において記載されておらず、商業的に入手できなかったか、通常は使えない供給元から得た他の全ての反応物又は試薬については、それらの製造が記載されている刊行文献を挙げてある。
【０６１２】
方法１４：（ＬＣ−ＭＳ）（ＭＣＷ−ＬＴＱ−ＰＯＲＯＳＨＥＬＬ−ＴＦＡ９８−１０分）
ＭＳ装置型：ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＬＴＱ−Ｏｒｂｉｔｒａｐ−ＸＬ；ＨＰＬＣ装置型：Ａｇｉｌｅｎｔ  １２００ＳＬ；カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ、ＰＯＲＯＳＨＥＬＬ  １２０、３×１５０ｍｍ、ＳＢ−Ｃ１８  ２．７μｍ；溶離液Ａ：水＋０．１％トリフルオロ酢酸１リットル；溶離液Ｂ：アセトニトリル＋０．１％トリフルオロ酢酸１リットル；勾配：０．０分２％Ｂ→０．３分２％Ｂ→５．０分９５％Ｂ→１０．０分９５％Ｂ；オーブン：４０℃；流量：０．７５ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０６１３】
原料化合物及び中間体：
本発明による化合物の製造及び好適な中間体の製造に好適な原料化合物については、ＷＯ２０１５／９６９８２Ａ１及びＷＯ２０１６／９６６１０Ａ１で既報である。
【０６１４】
ＷＯ２０１５／９６９８２Ａ１による中間体Ｃ１〜Ｃ７３、Ｌ１〜Ｌ７３、Ｆ１〜Ｆ５８及びＦ８２〜Ｆ９１、Ｆ１０３〜Ｆ１２９、Ｆ１４２〜Ｆ１５６、Ｆ１６３〜Ｆ１８０、Ｆ１９２〜Ｆ１９６、Ｆ２０４〜Ｆ２０７、Ｆ２０９〜Ｆ２１８、Ｆ２３５、Ｆ２３６、Ｆ２３８、Ｆ２４１〜Ｆ２４５、Ｆ２４７、Ｆ２４８及びＦ２５４は、本願の開示の一部を形成している。ＷＯ２０１６／９６６１０Ａ１に記載されているさらなる中間体も同様に、本源の開示の一部を形成する。以降、特定の番号を有する化合物への言及がある場合（例えば中間体Ｃ１、Ｌ１又はＦ１）、それは、ＷＯ２０１５／９６９８２Ａ１によるこれらの番号を有する化合物を意味する。以下、さらなる原料化合物及び中間体について説明する。
【０６１５】
中間体Ｃ１０２
（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝ブタン酸
【化９３】
2020502201.tif 000131
【０６１６】
最初に、中間体Ｃ２と同様にして、中間体Ｃ５２について、ベンジル（２Ｓ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４−オキソブタノエートによって還元的アルキル化した。次に、２級アミノ基を２−クロロ−２−オキソ酢酸エチルでアシル化し、最後に、二つのエステル基を２Ｍ水酸化リチウム／メタノール溶液で加水分解した。
【０６１７】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．３１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６４６（Ｍ−Ｈ）−。
【０６１８】
中間体Ｃ１０９
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｌ−グルタメート
【化９４】
2020502201.tif 000132
【０６１９】
最初に、ペプチド化学の従来の方法により、ＨＡＴＵの存在下での市販のＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−β−アラニン及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルＬ−グルタメート塩酸塩（１：１）のカップリング及び次にＺ保護基の水素分解的脱離によって、ジペプチド誘導体ジ−ｔｅｒｔ−ブチルβ−アラニル−Ｌ−グルタメート製造した。次に、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下でのこの中間体と中間体Ｃ１０２とのカップリングと、次に室温で標準水素圧下での４５分間にわたるメタノール中１０％パラジウム／活性体での水素化によるＺ保護基の脱離によって標題化合物を製造した。
【０６２０】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８２６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６２１】
中間体Ｃ１１１
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｄ−グルタメート
【化９５】
2020502201.tif 000133
【０６２２】
中間体Ｃ１０９と同様にして標題化合物を合成した。
【０６２３】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８２６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６２４】
中間体Ｃ１１６
トリフルオロ酢酸／Ｎ１−｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−［（２−｛［−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）アミノ］−１−オキソブタン−２−イル｝−Ｌ−アスパルタミド
【化９６】
2020502201.tif 000134
【０６２５】
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）ブタンアミド（１：１）（８１．０ｍｇ、１００μｍｏｌ）（中間体Ｆ１０４）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパラギネート（４３．０ｍｇ、１３１μｍｏｌ）をＤＭＦ  ５．０ｍＬに溶かした。反応混合物をＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６１μＬ、３５０μｍｏｌ）とともに室温でさらに１時間撹拌し、次に分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ  １２５×３０；１０μ、流量：７５ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。減圧下に溶媒留去し、残留物を凍結乾燥した。これによって、化合物ｔｅｒｔ−ブチル［（２Ｓ）−４−アミノ−１−（｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−［（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）アミノ］−１−オキソブタン−２−イル｝アミノ）−１，４−ジオキソブタン−２−イル］カーバメート８４ｍｇ（理論値の８８％）を得た。
【０６２６】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９０７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６２７】
ｔｅｒｔ−ブチル［（２Ｓ）−４−アミノ−１−（｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−［（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）アミノ］−１−オキソブタン−２−イル｝アミノ）−１，４−ジオキソブタン−２−イル］カーバメート（８３．０ｍｇ、９１．５μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール５．０ｍＬに溶かした。反応混合物に塩化亜鉛（７４．８ｍｇ、５４９μｍｏｌ）を混合し、５０℃で１５分間撹拌した。反応混合物にエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸（１６０ｍｇ、５４９μｍｏｌ）を混合し、アセトニトリル／水５．０ｍＬで希釈し、ＴＦＡ（２０μＬ）を加え、混合物をさらに１０分間撹拌した。混合物をシリンジフィルターで濾過し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ  １２５×３０；１０μ、流量：７５ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。減圧下に溶媒留去し、残留物を高真空乾燥した。これによって、標題化合物５０ｍｇ（理論値の５８％）を得た。
【０６２８】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８０７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６２９】
中間体Ｃ１１８
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（８Ｓ）−８−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］エチル｝−２，２−ジメチル−６，９−ジオキソ−５−オキサ−７，１０−ジアザ−２−シラドデカン−１２−イル］−Ｄ−α−グルタミネート
【化９７】
2020502201.tif 000135
【０６３０】
ペプチド化学の従来法によって、ＨＡＴＵの存在下に中間体Ｌ１１９及び中間体Ｃ５８をカップリングさせ、次にＺ保護基の水素分解的脱離を行うことで、標題化合物を製造した。
【０６３１】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８８５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０６３２】
中間体Ｃ１１９
ｔｅｒｔ−ブチルグリシルＮ−［（８Ｓ）−８−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］エチル｝−２，２−ジメチル−６，９−ジオキソ−５−オキサ−７，１０−ジアザ−２−シラドデカン−１２−イル］−Ｄ−α−グルタミネート
【化９８】
2020502201.tif 000136
【０６３３】
ペプチド化学の従来法によって、ＨＡＴＵの存在下での２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシネート及び中間体Ｃ１１８のカップリング、次にＺ保護基の脱離、ＲＴで標準水素圧下でのメタノール／ジクロロメタン中の１０％パラジウム／活性炭での水素化により、中間体Ｃ１１９を製造した。
【０６３４】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９４２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０６３５】
中間体Ｃ１２１
ジベンジルＮ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｄ−グルタメート
【化９９】
2020502201.tif 000137
【０６３６】
ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にジベンジルＤ−グルタメート（酢酸エチルと５％炭酸水素ナトリウム溶液との間で分配することでそれのｐ−トルエンスルホン酸エンから事前に放出させておいたもの）と中間体Ｃ６１とカップリングさせ、次に、塩化亜鉛／トリフルオロエタノールでＴｅｏｃ保護基を外すことで標題化合物を製造した。
【０６３７】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８９４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６３８】
中間体Ｃ１２２
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α−グルタミネート
【化１００】
2020502201.tif 000138
【０６３９】
ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にｔｅｒｔ−ブチルＮ−（２−アミノエチル）−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−α−グルタミネート・トリフルオロアセテートを中間体Ｃ１０２とカップリングさせ、次に、Ｚ保護基を水素分解的に外すことで、標題化合物を製造した。
【０６４０】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８４１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６４１】
中間体Ｃ１２３
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−（｛（２Ｓ）−２−（Ｌ−アスパラギニルアミノ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−α−グルタミネート
【化１０１】
2020502201.tif 000139
【０６４２】
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中で４−ニトロフェニルＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパラギネートを中間体Ｃ１２２にカップリングさせ、次に、標準水素圧下に室温でのＤＣＭ／メタノール１：１中の１０％パラジウム活性炭での水素化によってＺ保護基を外すことで、標題化合物を製造した。
【０６４３】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９５５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６４４】
中間体Ｃ１３０
９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］プロピル｝カーバメート
【化１０２】
2020502201.tif 000140
【０６４５】
最初に、９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）プロピル］カーバメート（２．５０ｇ、３．９４ｍｍｏｌ）（中間体Ｃ６７）及びトリエチルアミン（１．６ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２００ｍＬ）に入れた。クロロアセチルクロライド（２．２３ｇ、１９．７ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で５時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機相を１０％クエン酸溶液、水、飽和炭酸水素ナトリウム溶液及び飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残留物を、それ以上精製せずにさらに用いた。標題化合物１．７ｇを得た。
【０６４６】
中間体Ｃ１３１
ｔｅｒｔ−ブチルＳ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイネート
【化１０３】
2020502201.tif 000141
【０６４７】
最初にジ−ｔｅｒｔ−ブチルＬ−シスチネート・２塩酸塩（１３５ｍｇ、３１７μｍｏｌ）を水（６．０ｍＬ）及びイソ−プロパノール（７．５ｍＬ）に入れ、それにアルゴン下で、ＴＣＥＰ（３０３ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌した。次に、９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］プロピル｝カーバメート（３００ｍｇ、４２２μｍｏｌ）及び１，８−ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ−７−エン（７６０μＬ、５．１ｍｍｏｌ）のイソ−プロパノール（１．５ｍＬ）中溶液を加え、反応混合物を５０℃で１時間攪拌した。それを酢酸エチルで希釈し、有機相を水及び飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。標題化合物３６０ｍｇを得た。
【０６４８】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．１７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８５１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６４９】
中間体Ｃ１３２
ｔｅｒｔ−ブチルＳ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−（２，２−ジメチル−４，２０−ジオキソ−３，８，１１，１４，１７−ペンタオキサ−５−アザイコサン−２０−イル）−Ｌ−システイネート
【化１０４】
2020502201.tif 000142
【０６５０】
ｔｅｒｔ−ブチルＳ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイネート（３６１ｍｇ、４２４μｍｏｌ）を純粋ＤＭＦ（３ｍＬ）に溶かし、２，２−ジメチル−４−オキソ−３，８，１１，１４，１７−ペンタオキサ−５−アザイコサン−２０−酸（１８６ｍｇ、５０９μｍｏｌ）に加えた。その混合物に、ＨＡＴＵ（１９３ｍｇ、５０９μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３００μＬ、１．７ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で５分間攪拌した。混合物を水１ｍＬ＋０．１％ＴＦＡで反応停止し、分取ＨＰＬＣ（溶離液：ＡＣＮ／水＋０．１％ＴＦＡ、勾配）によって直接精製した。標的化合物１６７ｍｇを得た。
【０６５１】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．５６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１９８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６５２】
中間体Ｃ１３３
ｔｅｒｔ−ブチルＳ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−（２，２−ジメチル−４，２０−ジオキソ−３，８，１１，１４，１７−ペンタオキサ−５−アザイコサン−２０−イル）−Ｌ−システイネート
【化１０５】
2020502201.tif 000143
【０６５３】
ｔｅｒｔ−ブチルＳ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−（２，２−ジメチル−４，２０−ジオキソ−３，８，１１，１４，１７−ペンタオキサ−５−アザイコサン−２０−イル）−Ｌ−システイネート（２１４ｍｇ、１７８μｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中溶液に、モルホリン（１６０μＬ、１．８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で５時間攪拌した。混合物を水＋０．１％ＴＦＡで反応停止し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水＋０．１％ＴＦＡ勾配）によって直接精製した。標的化合物１１１ｍｇを得た。
【０６５４】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９７６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６５５】
中間体Ｃ１３４
ｔｅｒｔ−ブチルＳ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパラギニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−（２，２−ジメチル−４，２０−ジオキソ−３，８，１１，１４，１７−ペンタオキサ−５−アザイコサン−２０−イル）−Ｌ−システイネート
【化１０６】
2020502201.tif 000144
【０６５６】
ｔｅｒｔ−ブチルＳ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−（２，２−ジメチル−４，２０−ジオキソ−３，８，１１，１４，１７−ペンタオキサ−５−アザイコサン−２０−イル）−Ｌ−システイネート（２７．２ｍｇ、２７．９μｍｏｌ）及びＮ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパラギン（８．４０ｍｇ、３３．４μｍｏｌ、中間体Ｌ１３６）を純粋ＤＭＦ（３ｍＬ）に溶かし、ＨＡＴＵ（１２．７ｍｇ、３３．４μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１５μＬ、８４μｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１０分間攪拌した。混合物を水１ｍＬ＋０．１％ＴＦＡで反応停止し、分取ＨＰＬＣ（溶離液：ＡＣＮ／水＋０．１％ＴＦＡ、勾配）によって直接精製した。標的化合物２３ｍｇを得た。
【０６５７】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝２．１２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１２０９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６５８】
中間体Ｃ１３５
Ｎ−（１５−アミノ−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル）−Ｓ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパラギニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイン・トリフルオロ酢酸塩
【化１０７】
2020502201.tif 000145
【０６５９】
ｔｅｒｔ−ブチルＳ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパラギニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−（２，２−ジメチル−４，２０−ジオキソ−３，８，１１，１４，１７−ペンタオキサ−５−アザイコサン−２０−イル）−Ｌ−システイネート（６３．６ｍｇ、５２．６μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール（３．０ｍＬ、４１ｍｍｏｌ）に溶かし、塩化亜鉛（４３．０ｍｇ、３１６μｍｏｌ）を加えた。反応液を５０℃で２時間２０分攪拌した。追加の６当量のＺｎＣｌ２を加え、混合物を５０℃で１時間攪拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸（１８４ｍｇ、６３１μｍｏｌ）を混合物に加え、それを放冷して室温とした。水（＋０．１％ＴＦＡ）を反応混合物に加え、それを濾過し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を凍結乾燥した。標題化合物４０ｍｇを得た。
【０６６０】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．７５分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝１０５１［Ｍ−Ｈ］−。
【０６６１】
中間体Ｃ１３６
ベンジル［２−（｛（２Ｓ）−２−（Ｌ−アスパラギニルアミノ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］カーバメートトリフルオロアセテート
【化１０８】
2020502201.tif 000146
【０６６２】
最初に、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、中間体Ｃ５８をベンジル２−アミノエチルカーバメート塩酸塩（１：１）にカップリングさせた。次に、５０℃でトリフルオロエタノール中、８当量の塩化亜鉛とともに２時間攪拌することでＴｅｏｃ保護基を外した。得られた中間体を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせた。最終段階で、５０℃でトリフルオロエタノール中、６当量の塩化亜鉛とともに１時間攪拌することでＢｏｃ保護基を外して、標的化合物を得た。
【０６６３】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８０４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６６４】
中間体Ｃ１３７
ベンジルＮ−（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］スルホニル｝エチル）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｄ−α−グルタミネートトリフルオロアセテート
【化１０９】
2020502201.tif 000147
【０６６５】
中間体Ｌ８１から出発して、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に中間体Ｃ５８にカップリングさせることで、標題化合物を製造した。次の段階で、室温で標準水素圧下に３０分間にわたり、ＤＣＭ／メタノール１：１中１０％パラジウム／活性炭で水素化することでＺ保護基を除去した。２当量のＨＡＴＵ及び３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に（２Ｒ）−５−（ベンジルオキシ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸にカップリングさせ、最後に６当量の塩化亜鉛によって脱保護することで（トリフルオロエタノール中５０℃で１時間攪拌）、脱保護中間体を標題化合物に変換した。
【０６６６】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝１．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１００１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０６６７】
中間体Ｃ１３８
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（８Ｓ）−８−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］エチル｝−２，２−ジメチル−１３，１３−ジオキシド−６，９−ジオキソ−５−オキサ−１３λ６−チア−７，１０−ジアザ−２−シラペンタデカン−１５−イル］−Ｄ−α−グルタミネート
【化１１０】
2020502201.tif 000148
【０６６８】
中間体Ｃ５８から出発してＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に中間体Ｌ８１にカップリングさせることで、標題化合物を製造した。次の段階で、室温で標準水素圧下に１時間にわたるＤＣＭ／メタノール１：１中１０％パラジウム／活性炭での水素化によって、Ｚ保護基を除去した。ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に（２Ｒ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−５−ｔｅｒｔ−ブトキシ−５−オキソペンタン酸にカップリングさせ、最後に、室温で標準水素圧下に２時間にわたりＤＣＭ／メタノール１：１中１０％パラジウム／活性炭で水素化することでＺ保護基を外すことで、脱保護中間体を標題化合物に変換した。
【０６６９】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．１４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９７７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０６７０】
中間体Ｃ１３９
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛（２Ｓ）−２−（Ｌ−アスパラギニルアミノ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｄ−グルタメート
【化１１１】
2020502201.tif 000149
【０６７１】
３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中、中間体Ｃ１１１を１．５当量の４−ニトロフェニルＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせ、次に、標準水素圧下に室温で２時間にわたるＤＣＭ／メタノール１：１中の１０％パラジウム／活性炭での水素化によってＺ保護基を外すことで、標題化合物を合成した。
【０６７２】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９４０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６７３】
中間体Ｃ１４０
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｎ１，Ｎ５−ジベンジル−Ｄ−グルタミドトリフルオロアセテート
【化１１２】
2020502201.tif 000150
【０６７４】
最初に、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−グルタミン酸をベンジルアミンにカップリングさせ、次にＴＦＡによってＢｏｃ保護基を外すことで、Ｎ１，Ｎ５−ジベンジル−Ｄ−グルタミドトリフルオロアセテートを製造した。この中間体を、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＢｏｃ−β−アラニンにカップリングさせ、次に、Ｂｏｃ保護基をＴＦＡ／ＤＣＭで除去した。得られた化合物を、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に中間体Ｃ５８にカップリングさせ、最後に、塩化亜鉛／トリフルオロエタノールによってＴｅｏｃ保護基を外すことで、標題化合物を製造した。
【０６７５】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８９２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６７６】
中間体Ｃ１４１
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｌ−アスパラギントリフルオロアセテート
【化１１３】
2020502201.tif 000151
【０６７７】
最初に、１．５当量のＨＡＴＵ及び３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、中間体Ｃ６１をｔｅｒｔ−ブチルＬ−アスパルテートにカップリングさせた。次に、６当量の塩化亜鉛／トリフルオロエタノールとともに５０℃で攪拌することで、Ｔｅｏｃ保護基及びｔｅｒｔ−ブチルエステルを除去し、それによって標題化合物を得た。
【０６７８】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８９２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６７９】
中間体Ｃ１４２
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタメート
【化１１４】
2020502201.tif 000152
【０６８０】
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニン（７４５ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ、中間体Ｃ６１）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＤ−グルタメート塩酸塩（３６３ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（５０５ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５３０μＬ、３．１ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で１０分間攪拌した。反応混合物を酢酸エチルと混合し、水及び飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮し、残留物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（勾配、ＭｅＣＮ／水＋０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下で乾燥させた。
【０６８１】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．５８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９７０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６８２】
中間体Ｃ１４３
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−４−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［（メチルスルホニル）オキシ］アセチル｝アミノ）−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタメート
【化１１５】
2020502201.tif 000153
【０６８３】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタメート（中間体Ｃ１４２  ２５７ｍｇ、２６４μｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中溶液に、０℃で、メタンスルホニルクロライド（４９μＬ、６３０μｍｏｌ）及びトリエチルアミン（９２μＬ、６６０μｍｏｌ）を加え、反応液を０℃で１時間攪拌した。それをジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３回）及び飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮し、残留物を、それ以上精製せずにさらに変換した。
【０６８４】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．５２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０４８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６８５】
中間体Ｃ１４４
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−４−［（｛［（２Ｒ）−２−アミノ−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−３−オキソプロピル］スルファニル｝アセチル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−（｛［２−（トリメチル−シリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタメート・トリフルオロアセテート
【化１１６】
2020502201.tif 000154
【０６８６】
最初にジ−ｔｅｒｔ−ブチルＬ−シスチネート・２塩酸塩（３０６ｍｇ、７１９μｍｏｌ）を水２５ｍＬ及びイソ−プロパノール５０ｍＬに入れ、それにアルゴン下に、ＴＣＥＰ（６８７ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌した。次に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−４−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［（メチル−スルホニル）オキシ］アセチル｝アミノ）−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタメート（中間体Ｃ１４３  １．００ｇ、９５８μｍｏｌ）及び１，８−ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ−７−エン（１．７ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）のイソ−プロパノール（３５ｍＬ）中溶液を加え、反応混合物を５０℃で１４時間攪拌した。それを酢酸エチルで希釈し、有機相を水及び飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（勾配、ＭｅＣＮ／水＋０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下で乾燥させた。標題化合物９２３ｍｇを得た。
【０６８７】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝２．４６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１２９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６８８】
中間体Ｃ１４５
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（｛［（２Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−（｛Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパラギニル｝アミノ）−３−オキソプロピル］スルファニル｝アセチル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）−エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタメート
【化１１７】
2020502201.tif 000155
【０６８９】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−４−［（｛［（２Ｒ）−２−アミノ−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−３−オキソプロピル］スルファニル｝アセチル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタメートトリフルオロアセテート（中間体Ｃ１４４  ６０．０ｍｇ、４８．２μｍｏｌ）及びＮ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパラギン（２０．５ｍｇ、５７．９μｍｏｌ）のＤＭＦ（３．０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（２２．０ｍｇ、５７．９μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５μＬ、１４０μｍｏｌ）を加え、反応液を室温で１０分間攪拌した。水＋０．１％ＴＦＡ  １ｍＬを混合物に加え、それを分取ＨＰＬＣ（溶離液：ＡＣＮ／水＋０．１％ＴＦＡ、勾配）によって直接精製した。標的化合物７１ｍｇを得た。
【０６９０】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝３．１５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１４６６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６９１】
中間体Ｃ１４６
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−４−［（｛［（２Ｒ）−２−（Ｌ−アスパラギニルアミノ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−３−オキソプロピル］スルファニル｝−アセチル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタメートトリフルオロアセテート
【化１１８】
2020502201.tif 000156
【０６９２】
最初に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（｛［（２Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−（｛Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパラギニル｝アミノ）−３−オキソプロピル］スルファニル｝アセチル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］−カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタメート（６３．５ｍｇ、４３．３μｍｏｌ、中間体Ｃ１４５）をＤＭＦ（３ｍＬ）に入れ、モルホリン（３８μＬ、４３０μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１８時間攪拌した。水＋０．１％ＴＦＡ  １ｍＬを混合物に加え、それを分取ＨＰＬＣ（溶離液：ＡＣＮ／水＋０．１％ＴＦＡ、勾配）によって直接精製した。標的化合物３８ｍｇを得た。
【０６９３】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．２５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１２４３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０６９４】
中間体Ｌ８１
トリフルオロ酢酸／ベンジル｛２−［（２−アミノエチル）スルホニル］エチル｝カーバメート
【化１１９】
2020502201.tif 000157
【０６９５】
ＤＭＦ中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、２，２′−スルホニルジエタンアミン２５０ｍｇ（１．１１ｍｍｏｌ）を１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン９２．３ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）にカップリングさせた。次に、ＨＰＬＣによる精製を行って、標題化合物７０ｍｇ（理論値の４７％）を得た。
【０６９６】
Ｃ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝０．６４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５７．１１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０６９７】
中間体Ｌ１０３
Ｎ−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アスパラギントリフルオロアセテート
【化１２０】
2020502201.tif 000158
【０６９８】
ペプチド化学の従来の方法により、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に４−ピリジン酢酸の市販のｔｅｒｔ−ブチルＬ−アラニル−Ｌ−アラニネートとのカップリングから始め、次にトリフルオロ酢酸による脱保護、ｔｅｒｔ−ブチルＬ−アスパラギネートへのカップリング、次にトリフルオロ酢酸によるカルボキシル基の脱保護によって、標題化合物を製造した。
【０６９９】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．１５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３９４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０７００】
中間体Ｌ１１９
トリフルオロ酢酸ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（２−アミノエチル）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｄ−α−グルタミネート塩
【化１２１】
2020502201.tif 000159
【０７０１】
ペプチド化学の従来法により、ＨＡＴＵの存在下に市販の（２Ｒ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−５−ｔｅｒｔ−ブトキシ−５−オキソペンタン酸（１．００ｇ、２．９６ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチル（２−アミノエチル）カーバメート（５６０μＬ、３．６ｍｍｏｌ）をカップリングさせ、次にＴＦＡ／ジクロロメタンによってＢｏｃ保護基を酸性で外すことで、中間体Ｌ１１９を製造した。
【０７０２】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．６２分；ＭＳ（ＥＳＩ−ｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３８０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０７０３】
中間体Ｌ１３６
Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパラギン
【化１２２】
2020502201.tif 000160
【０７０４】
ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にピリジン−４−イル酢酸塩酸塩をｔｅｒｔ−ブチルＬ−アスパルテートにカップリングさせ、次にトリフルオロ酢酸／ジクロロメタンによってｔ−ブチル保護基を外すことで、標題化合物を製造した。
【０７０５】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝０．６５分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝２５０［Ｍ−Ｈ］−。
【０７０６】
中間体Ｌ１３７
Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−グルタミン
【化１２３】
2020502201.tif 000161
【０７０７】
ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にピリジン−４−イル酢酸塩酸塩（１：１）をｔｅｒｔ−ブチルＬ−グルタミネートにカップリングさせ、次にトリフルオロ酢酸／ジクロロメタンによってｔ−ブチル保護基を外すことで、標題化合物を製造した。
【０７０８】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝０．５９分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝２６４［Ｍ−Ｈ］−。
【０７０９】
中間体Ｌ１３８
１−ブロモ−２−オキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−酸
【化１２４】
2020502201.tif 000162
【０７１０】
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に１−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−酸を無水ブロモ酢酸にカップリングさせることで、標題化合物を製造した。
【０７１１】
ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒｔ＝１．０５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３８６及び３８８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０７１２】
中間体Ｆ１０４
トリフルオロ酢酸（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−アミノ｝エチル）ブタンアミド
【化１２５】
2020502201.tif 000163
【０７１３】
中間体Ｃ５８から出発して標題化合物を製造した。最初に、中間体Ｃ５８  １５ｍｇ（０．０２３ｍｍｏｌ）を、ＨＡＴＵ  １３ｍｇ（０．０３４ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１０μＬの存在下に、中間体Ｌ１  １１ｍｇ（０．０３６ｍｍｏｌ）と反応させた。室温で６０分間攪拌した後、混合物を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。保護された中間体１２．３ｍｇ（理論値の６３％）を得た。
【０７１４】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．３分ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７１５】
第２段階で、この中間体を２，２，２−トリフルオロエタノール３ｍＬに溶かした。塩化亜鉛１２ｍｇ（０．０８８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５０℃で２時間攪拌した。次に、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２６ｍｇ（０．０８８ｍｍｏｌ）及び０．１％トリフルオロ酢酸水溶液２ｍＬを加えた。混合物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮及びアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥後に、標題化合物８．１ｍｇ（理論値の６８％）を得た。
【０７１６】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６９３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０７１７】
ＡＰＤＣ又はＡＤＣ前駆体（中間体シリーズＳ）の一般的合成方法
先行技術の開示ＷＯ２０１５／９６９８２Ａ１及びＷＯ２０１６／０９６６１０Ａ１で既報のＦシリーズ（Ｆ１〜Ｆ３０５）の中間体を、任意に合成経路又は保護基戦略の調整後に、ＡＰＤＣ前駆体Ｓに変換することができる。例えば図式１ａ及び図式１ｂに示したように、ＡＰＤＣ前駆体分子中のレグマイン開裂性アスパラギンのＮ末端アミノ基の放出の場合、これを、最終段階で、各種構造の置換されたアシル基又はアルキル基によって修飾して、特性のプロファイルを向上させることができる。タンパク質反応性基（例えばマレイミド又は活性エステル）は、任意に、後段で合成に導入することができる。
【０７１８】
例示的方法について、ここで説明する。
【０７１９】
中間体Ｆ１〜Ｆｘ  ０．０３７ｍｍｏｌを、好適な溶媒、例えばＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ＤＣＭ、クロロホルム、トルエン、ＴＨＦ、メタノール又はそれの混合物１から２０ｍＬ、好ましくは５から１０ｍＬに取り、０．０３９ｍｍｏｌのＮ末端修飾アスパラギン酸誘導体、例えば中間体Ｌ１３６を加え、０．０４１ｍｍｏｌの標準的カップリング試薬、例えばＨＡＴＵ、ＥＤＣＩ／ＨＯＢＴ、ＢＥＰなど、及び０．１１ｍｍｏｌの標準的塩基、例えばＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、４−メチルモルホリンなども加える。室温で５分間撹拌後、混合物をトリフルオロ酢酸２滴で酸性とし、濃縮する。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製する。適切な分画を減圧下に濃縮し、残留物をアセトニトリル／水から凍結乾燥する。
【０７２０】
結合したトリペプチド誘導体の前記Ｎ末端修飾が保護基である場合、それはその後に、公知の方法によって除去することができ、例えば好ましくは水素化分解によるＺ保護基、酸加水分解によるＢｏｃ保護基、塩基加水分解によるＦｍｏｃ保護基、又はフッ化物による若しくは塩化亜鉛を用いるＴｅｏｃ基である。
【０７２１】
最後に、そうして放出されたアミノ基を、例えば、活性エステル、酸塩化物、イソシアネートなどのアミン反応性基により、又は標準的カップリング試薬、例えばＨＡＴＵ、ＥＤＣＩ／ＨＯＢＴ、ＢＥＰなど、及び標準的塩基、例えばＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、４−メチルモルホリンなどの存在下でのカルボン酸誘導体へのカップリングによってアシル化又はアルキル化して、特性のプロファイルを改善することができる。分子中にさらなる保護基がなお存在する場合、それは最後の段階で除去することができる。
【０７２２】
図式１ａ：
【化１２６】
2020502201.tif 000164
【０７２３】
［ａ）：ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ又はＥＤＣＩ、ＨＯＢＴ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ；ｂ）Ｈ２、１０％Ｐｄ−Ｃ、ＭｅＯＨ、ＲＴ；ｃ）Ｚ１−ＣＯＯＨ、ＥＤＣＩ、ＨＯＢＴ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ又はＺ１−ＣＯＯＨ、ＨＡＴＵ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ又はＺ１−ＣＯＯＳｕ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ］
図式１ｂ：
【化１２７】
2020502201.tif 000165
【０７２４】
［ａ）：２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパルテート、ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ；ｂ）ＺｎＣｌ２、トリフルオロエタノール、５０℃；ｃ）Ｚ１−ＣＯＯＨ、ＥＤＣＩ、ＨＯＢＴ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ又はＺ１−ＣＯＯＨ、ＨＡＴＵ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ又はＺ１−ＣＯＯＳｕ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ］
さらに、図式２ａ及び３ａに従って、他の中間体を、レグマイン開裂性ＡＤＣ前駆体に変換することができる。
【０７２５】
図式２ａ：
【化１２８】
2020502201.tif 000166
【０７２６】
［ａ）：ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ又はＥＤＣＩ、ＨＯＢＴ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ；或いは、そのアシル化は、例えば、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン／ＤＭＦの存在下に、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパルテートを用いて行うこともできる；ｂ）Ｈ２、１０％Ｐｄ−Ｃ、ＭｅＯＨ、ＲＴ；ｃ）１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ］
図式３ａ：
【化１２９】
2020502201.tif 000167
【０７２７】
［ａ）：ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ又はＥＤＣＩ、ＨＯＢＴ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ；或いは、そのアシル化は、例えば、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン／ＤＭＦの存在下に、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパルテート；ｂ）Ｈ２、１０％Ｐｄ−Ｃ、ＭｅＯＨ、ＲＴを用いて行うこともできる；ｃ）１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ、ＲＴ］
図式１〜３に示したベンジルオキシカルボニル基に代わるものとして、ペプチド化学で確立された他の保護基を用い、同様に公知である相当する方法によってそれらを除去させることが可能である。保護基戦略の選択を、分子に生じる他の構造要素との適合性に関連する当業者に公知の要件に応じて行う。分子中のさらなる保護基がなお存在する場合、それは最終段階で除去することができる。
【０７２８】
それらの合成は、順序に関して並べ変えても良い。
【０７２９】
さらに、リンカー構造Ｌ１〜Ｌ２の文脈でのタンパク質反応性基は、特許請求の範囲内で変えることができる。
【０７３０】
中間体Ｓ１
Ｎ１−｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−［（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）アミノ］−１−オキソブタン−２−イル｝−Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパルタミド
【化１３０】
2020502201.tif 000168
【０７３１】
中間体Ｆ１０４  ５ｍｇ（０．００６２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ  ２ｍＬに溶かし、ＨＡＴＵ  ３．５ｍｇ（０．００９３ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン３μＬの存在下に、中間体Ｌ１３６  １．９ｍｇ（０．００７４ｍｍｏｌ）にカップリングさせた。室温で１６時間攪拌及び分取ＨＰＬＣによる精製後、標題化合物２．８ｍｇ（理論値の４９％）を得た。
【０７３２】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９２６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０７３３】
中間体Ｓ２
Ｎ２−アセチル−Ｎ１−｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−［（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）アミノ］−１−オキソブタン−２−イル｝−Ｌ−アスパルタミド
【化１３１】
2020502201.tif 000169
【０７３４】
ＤＭＦ  ２ｍＬ中の中間体Ｃ１１６  ６ｍｇ（０．００６５ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン３μＬの存在下に１−アセトキシピロリジン−２，５−ジオン２ｍｇ（０．０１３ｍｍｏｌ）にカップリングさせた。分取ＨＰＬＣによる精製後、標題化合物５ｍｇ（理論値の９０％）を得た。
【０７３５】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８４９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０７３６】
中間体Ｓ３
ベンジル［（２Ｓ）−４−アミノ−１−（｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−［（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−アミノ｝エチル）アミノ］−１−オキソブタン−２−イル｝アミノ）−１，４−ジオキソブタン−２−イル］カーバメート
【化１３２】
2020502201.tif 000170
【０７３７】
ＤＭＦ中の中間体Ｆ１０４  １０ｍｇ（０．０１２４ｍｍｏｌ）を、ＨＡＴＵ  ５．７ｍｇ（０．０１４９ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン９μＬの存在下にＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパラギン３．６ｍｇ（０．０１３６ｍｍｏｌ）にカップリングさせた。室温で３０分間攪拌及び分取ＨＰＬＣによる精製後、標題化合物６ｍｇ（理論値の５１％）を得た。
【０７３８】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝２．０６分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝９３９（Ｍ−Ｈ）−。
【０７３９】
中間体Ｓ４
Ｎ−［２−（｛（２Ｓ）−２−［（Ｎ２−アセチル−Ｌ−アスパラギニル）アミノ］−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−Ｎ２−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｄ−α−グルタミン
【化１３３】
2020502201.tif 000171
【０７４０】
ＤＭＦ  ３ｍＬ中の中間体Ｃ１２３  １５ｍｇ（０．０１６ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン８μＬの存在下に１−アセトキシピロリジン−２，５−ジオン７．４ｍｇ（０．０４７ｍｍｏｌ）にカップリングさせた。分取ＨＰＬＣによる精製後、保護された中間体１０ｍｇ（理論値の６４％）を得た。次に、６当量の塩化亜鉛／トリフルオロエタノールとともに５０℃で３時間攪拌することで、ｔｅｒｔ−ブチルエステル及びＢｏｃ保護基を外した。最終段階で、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン３μＬの存在下にＤＭＦ中１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン１．９ｍｇ（０．００８ｍｍｏｌ）にカップリングさせることで、得られた中間体６ｍｇ（０．００６ｍｍｏｌ）を標題化合物に変換した。分取ＨＰＬＣによる精製後に、標題化合物３ｍｇ（理論値の４９％）を得た。
【０７４１】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９７８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０７４２】
中間体Ｓ５
Ｎ−（２−｛［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−｛［Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパラギニル］アミノ｝ブタノイル］−アミノ｝エチル）−Ｎ２−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｄ−α−グルタミン
【化１３４】
2020502201.tif 000172
【０７４３】
ＤＭＦ（５．６ｍＬ）中の中間体Ｃ１２３  １５ｍｇ（０．０１６ｍｍｏｌ）を、ＨＡＴＵ  ７．２ｍｇ（０．０１９ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１４μＬの存在下にピリジン−４−イル酢酸塩酸塩（１：１）３．３ｍｇ（０．０１９ｍｍｏｌ）にカップリングさせた。分取ＨＰＬＣによる精製後、保護された中間体１１ｍｇ（理論値の６３％）を得た。次に、６当量の塩化亜鉛／トリフルオロエタノールとともに５０℃で３時間攪拌することで、当該ｔｅｒｔ−ブチルエステル及びＢｏｃ保護基を外した。最終段階で、得られた中間体６．５ｍｇ（０．００６ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン３．３μＬの存在下にＤＭＦ  ２ｍＬ中１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン１．２ｍｇ（０．００８ｍｍｏｌ）にカップリングさせることで、標題化合物に変換した。分取ＨＰＬＣによる精製後、標題化合物３ｍｇ（理論値の４９％）を得た。
【０７４４】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０５５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０７４５】
中間体Ｓ６
Ｎ−｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−［（Ｎ２−｛５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−５−オキソペンタノイル｝−Ｌ−アスパラギニル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸
【化１３５】
2020502201.tif 000173
【０７４６】
最初にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中で２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせることによって、化合物Ｃ１２１から出発して標題化合物を製造した。次に、トリフルオロエタノール中６当量の塩化亜鉛とともに５０℃で１時間攪拌することで、Ｂｏｃ保護基を外した。
【０７４７】
次の段階で、標準水素圧下に室温でエタノール中１０％パラジウム／活性炭での水素化によってベンジルエステルを除去し、脱保護した中間体を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン／ＤＭＦの存在下に１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオンと反応させることで標題化合物に変換した。
【０７４８】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０３９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７４９】
中間体Ｓ７
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛Ｎ２−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−アスパラギニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸
【化１３６】
2020502201.tif 000174
【０７５０】
最初にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせることで、化合物Ｃ１２１から出発して標題化合物を製造した。次に、トリフルオロエタノール中５０℃で１時間にわたり６当量の塩化亜鉛とともに攪拌することで、Ｂｏｃ保護基を外した。
【０７５１】
次の段階で、標準水素圧下に室温でエタノール中１０％パラジウム／活性炭で水素化することで、ベンジルエステルを除去し、脱保護した中間体を、３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン／ＤＭＦの存在下に１．５当量の１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンとの反応によって標題化合物に変換した。
【０７５２】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝１．８１分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝１０１９［Ｍ−Ｈ］−。
【０７５３】
中間体Ｓ８
Ｎ１−｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］プロピル｝−Ｎ２−｛５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−５−オキソペンタノイル｝−Ｌ−アスパルタミド
【化１３７】
2020502201.tif 000175
【０７５４】
ＷＯ２０１５０９６９８２に記載の実施例９８から出発して、標題化合物を製造した。
【０７５５】
第一に、実施例９８からの化合物を２当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中で１．８当量の４−ニトロフェニルＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせた。次に、標準水素圧下に室温でのエタノール中での１０％パラジウム／活性炭での水素化によってＺ保護基を外した。最終段階で、ＤＭＦ中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオンと反応させることで、標題化合物を製造した。
【０７５６】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７９５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７５７】
中間体Ｓ９
（８Ｓ，１１Ｓ）−１１−（２−アミノ−２−オキソエチル）−８−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］エチル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，７，１０，１３−テトラオキソ−３，６，９，１２−テトラアザヘキサデカン−１６−酸
【化１３８】
2020502201.tif 000176
【０７５８】
第一に、３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、中間体Ｃ１３６を１．４当量のジヒドロフラン−２，５−ジオンにカップリングさせた。次の段階で、標準水素圧下に室温でエタノール−ＤＣＭ中、１０％パラジウム／活性炭での水素化によって、ベンジルエステル及びＺ保護基を除去した。最終段階で、３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンとの反応によって、標題化合物を得た。
【０７５９】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９０７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７６０】
中間体Ｓ１０
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛Ｎ２−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−アスパラギニル｝−アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸
【化１３９】
2020502201.tif 000177
【０７６１】
最終段階で、１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオンに代えて、３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、カップリングを、１．５当量の１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンと行った以外は、中間体Ｓ６と同様にして、標題化合物を製造した。
【０７６２】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９６５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７６３】
中間体Ｓ１１
Ｎ−（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−［（Ｎ２−アセチル−Ｌ−アスパラギニル）アミノ］−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］スルホニル｝エチル）−Ｎ２−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｄ−α−グルタミン
【化１４０】
2020502201.tif 000178
【０７６４】
第一に、３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、中間体Ｃ１３７を１．３当量の２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせた。次に、５０℃で３時間にわたり、トリフルオロエタノール中で６当量の塩化亜鉛とともに攪拌することで、Ｂｏｃ基を外した。３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、反応生成物を２当量の１−アセトキシピロリジン−２，５−ジオンにカップリングさせた。次に、標準水素圧下に室温でエタノール中１０％パラジウム／活性炭での水素化によって、Ｚ保護基を除去した。最終段階で、最後に、３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンとの反応によって、標題化合物を得た。
【０７６５】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝１．６６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０７０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７６６】
中間体Ｓ１２
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−｛［Ｎ２−（ブロモアセチル）−Ｌ−アスパラギニル］アミノ｝ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸
【化１４１】
2020502201.tif 000179
【０７６７】
最終段階で、２当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンではなく３当量の１−（２−ブロモアセトキシ）ピロリジン−２，５−ジオンと反応させた以外、中間体Ｓ１０と同様にして、標題化合物を製造した。
【０７６８】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９４８及び９５０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７６９】
中間体Ｓ１３
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛Ｎ２−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１８−ジオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−イル］−Ｌ−アスパラギニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸
【化１４２】
2020502201.tif 000180
【０７７０】
化合物Ｃ１２１から出発して、最初に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中で２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせることで、標題化合物を製造した。次に、トリフルオロエタノール中、５０℃で１時間にわたり６当量の塩化亜鉛とともに攪拌することで、Ｂｏｃ保護基を外した。
【０７７１】
次の段階で、ＤＭＦ中、１．２当量のＨＡＴＵ及び３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、得られた中間体を３−オキソ−１−フェニル−２，７，１０，１３，１６−ペンタオキサ−４−アザノナデカン−１９−酸にカップリングさせた。次に、標準水素圧下に室温でメタノール／ＤＣＭ１：１中、１０％パラジウム／活性炭で水素化することで、ベンジルエステル及びＺ保護基を除去し、脱保護した中間体を、ＤＭＦ中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンと反応させることで、標題化合物に変換した。
【０７７２】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１２１２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７７３】
中間体Ｓ１４
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛Ｎ２−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−６，２２−ジオキソ−３，１０，１３，１６，１９−ペンタオキサ−７−アザドコサン−２２−イル］−Ｌ−アスパラギニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸
【化１４３】
2020502201.tif 000181
【０７７４】
最終段階で、３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンに代えて３当量の１−（２−｛３−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−３−オキソプロポキシ｝エチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンと反応させた以外は、中間体Ｓ１３と同様にして、標題化合物を製造した。
【０７７５】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１２７０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７７６】
中間体Ｓ１５
Ｎ２−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−アスパラギニル−Ｎ−（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］スルホニル｝エチル）−Ｄ−α−グルタミントリフルオロアセテート
【化１４４】
2020502201.tif 000182
【０７７７】
最初に２当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、ＤＭＦ中、中間体Ｃ１３８を４−ニトロフェニルＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせることで、標題化合物の合成を開始した。次に、標準水素圧下に室温で２時間にわたりＤＣＭ／メタノール１：１中で１０％パラジウム／活性炭での水素化を行ってＺ保護基を外した。次に、ＤＭＦ中、３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に１．２当量の１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンとの反応を行った。最終段階で、トリフルオロエタノール中２時間にわたり、５０℃で６当量の塩化亜鉛と攪拌することで、標題化合物を得た。
【０７７８】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．７９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７７９】
中間体Ｓ１６
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−｛［Ｎ２−（１８−ブロモ−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザオクタデカン−１−オイル）−Ｌ−アスパラギニル］アミノ｝ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸
【化１４５】
2020502201.tif 000183
【０７８０】
最初に、１．２当量のＨＡＴＵ及び３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中、中間体Ｃ１３９を中間体Ｌ１３８にカップリングさせることで、標題化合物を合成した。次に、トリフルオロエタノール中１時間にわたり５０℃で１８当量の塩化亜鉛とともに攪拌することで、ｔｅｒｔ−ブチルエステル基を外した。
【０７８１】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９１分；ＭＳ（ＥＳＩ−ｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝１１９３及び１１９５［Ｍ−Ｈ］−。
【０７８２】
中間体Ｓ１７
Ｓ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパラギニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１８−ジオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−イル］−Ｌ−システイン
【化１４６】
2020502201.tif 000184
【０７８３】
Ｎ−（１５−アミノ−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル）−Ｓ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパラギニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイントリフルオロ酢酸塩（１０．０ｍｇ、８．５７μｍｏｌ）及び１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（２．３８ｍｇ、９．４２μｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）中溶液に、４−メチルモルホリン（２．８μＬ、２６μｍｏｌ）を加え、反応液を室温で１８時間攪拌した。酢酸１滴を反応混合物に加え、それを、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を凍結乾燥した。これによって、標題化合物２．２ｍｇを得た。
【０７８４】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝１．６２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１９０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７８５】
中間体Ｓ１８
Ｓ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパラギニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−｛２１−［（２，５−ジオキソ−ピロリジン−１−イル）オキシ］−１７，２１−ジオキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザヘンイコサン−１−オイル｝−Ｌ−システイン
【化１４７】
2020502201.tif 000185
【０７８６】
Ｎ−（１５−アミノ−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル）−Ｓ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（３−｛［Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパラギニル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイントリフルオロ酢酸塩（１０．６ｍｇ、９．０８μｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）中溶液に、１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオン（７．４１ｍｇ、２２．７μｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６．３μＬ、３６μｍｏｌ）を加え、反応が完了するまで、反応混合物を室温で攪拌した。混合物を水＋０．１％ＴＦＡと混合し、濾過し、分取ＨＰＬＣ（溶離液：ＡＣＮ／水＋０．１％ＴＦＡ、勾配）によって直接精製した。標的化合物１．２ｍｇを得た。
【０７８７】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１２６３［Ｍ−Ｈ］＋。
【０７８８】
中間体Ｓ１９
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（｛［（２Ｒ）−２−カルボキシ−２−（｛Ｎ２−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−アスパラギニル｝アミノ）エチル］スルファニル｝アセチル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸トリフルオロアセテート
【化１４８】
2020502201.tif 000186
【０７８９】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（２Ｓ）−４−［（｛［（２Ｒ）−２−（Ｌ−アスパラギニルアミノ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−３−オキソプロピル］スルファニル｝アセチル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｄ−グルタメートトリフルオロアセテート（１２．０ｍｇ、８．８４μｍｏｌ、中間体Ｃ１４６）及び１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（２．４５ｍｇ、９．７２μｍｏｌ）のＤＭＦ（１．０ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６．２μＬ、３５μｍｏｌ）を加え、反応液を室温で２時間攪拌した。次に、１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（２．４５ｍｇ、９．７２μｍｏｌ）を加え、混合物を室温でさらに２時間攪拌した。混合物を水＋０．１％ＴＦＡ  １ｍＬと混合し、分取ＨＰＬＣ（溶離液：ＡＣＮ／水＋０．１％ＴＦＡ、勾配）によって直接精製した。次に、トリフルオロエタノール中５０℃で４時間にわたり、１２当量の塩化亜鉛とともに攪拌することで、保護基を外した。
【０７９０】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０６８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７９１】
中間体Ｓ２０
Ｎ−｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−（グリコロイル）アミノ］−２−［（Ｎ２−｛５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−５−オキソペンタノイル｝−Ｌ−アスパラギニル）−アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｌ−アスパラギン
【化１４９】
2020502201.tif 000187
【０７９２】
第一に、中間体Ｃ１４１を、１２当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、ＤＭＦ中、１．８当量の４−ニトロフェニルＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせた。次に、標準水素圧下に室温で、ＤＣＭ／メタノール１：１中、１０％パラジウム／活性炭で水素化することで、Ｚ保護基を外した。最終段階で、ＤＭＦ中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオンと反応させることで、標題化合物を製造した。
【０７９３】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７９４】
中間体Ｓ２１
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−（グリコロイル）アミノ］−２−（｛Ｎ２−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−アスパラギニル｝−アミノ）ブタノイル］−β−アラニル−Ｌ−アスパラギン
【化１５０】
2020502201.tif 000188
【０７９５】
第一に、１２当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、ＤＭＦ中、中間体Ｃ１４１を１．８当量の４−ニトロフェニルＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせた。次に、標準水素圧下に室温でＤＣＭ／メタノール１：１中、１０％パラジウム／活性炭で水素化することで、Ｚ保護基を外した。最終段階で、ＤＭＦ中、４当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に２．５当量の１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンと反応させることで、標題化合物を製造した。
【０７９６】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９５０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０７９７】
中間体Ｓ２２
Ｎ−｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−［（Ｎ２−｛１６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−１６−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−ヘキサデカン−１−オイル｝−Ｌ−アスパラギニル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸
【化１５１】
2020502201.tif 000189
【０７９８】
最初に、化合物Ｃ１２１から出発して、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、ＤＭＦ中、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせることで、標題化合物を製造した。次に、５０℃で１時間にわたり、トリフルオロエタノール中、６当量の塩化亜鉛とともに攪拌することで、Ｂｏｃ保護基を外した。次の段階で、標準水素圧下に室温で、ＤＣＭ／メタノール１：１中、１０％パラジウム／活性炭で水素化することでベンジルエステルを除去し、脱保護した中間体を、ＤＭＦ中、３当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に３当量の１，１′−［（１，１９−ジオキソ−４，７，１０，１３，１６−ペンタオキサノナデカン−１，１９−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオンと反応させることで標題化合物に変換した。
【０７９９】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１２４５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０８００】
Ｂ：抗体／薬物複合体（ＡＤＣ）の製造
Ｂ−１．抗体形成の一般的方法
使用した抗体、例えばＴＰＰ−２０９０、ＴＰＰ−２６５８、ＴＰＰ−５４４２、ＴＰＰ−８８２５、ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７、ＴＰＰ−１０３３４、ＴＰＰ−１０３３５、ＴＰＰ−１０３３６、ＴＰＰ−１０３３７、ＴＰＰ−１０１５、ＴＰＰ−７５１０、ＴＰＰ−７５１１、ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７のタンパク質配列（アミノ酸配列）を、当業者には公知の方法によってタンパク質をコードするＤＮＡ配列に変換し、一過性哺乳動物細胞培養に適した発現ベクターに挿入した（Ｔｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｘｐｒｅｓｓ：  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｒ．  Ｄｙｓｏｎ  ａｎｄ  Ｙｖｅｓ  Ｄｕｒｏｃｈｅｒ編、Ｓｃｉｏｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｌｔｄ，  ２００７の第１２章に記載）。
【０８０１】
Ｂ−２．哺乳動物細胞で抗体を発現する一般的方法
Ｔｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈａｐｔｅｒ  １２  ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｘｐｒｅｓｓ：Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｒ．  Ｄｙｓｏｎ  ａｎｄ  Ｙｖｅｓ  Ｄｕｒｏｃｈｅｒ，  Ｓｃｉｏｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｌｔｄ,  ２００７によって記載の方法に従って、抗体、例えば例えばＴＰＰ−２０９０、ＴＰＰ−２６５８、ＴＰＰ−５４４２、ＴＰＰ−８８２５、ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７、ＴＰＰ−１０３３４、ＴＰＰ−１０３３５、ＴＰＰ−１０３３６、ＴＰＰ−１０３３７、ＴＰＰ−１０１５、ＴＰＰ−７５１０、ＴＰＰ−７５１１、ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７を、一過性哺乳動物細胞培養で製造した。
【０８０２】
Ｂ−３．細胞上清からの抗体の一般的精製方法
抗体、例えばＴＰＰ−２０９０、ＴＰＰ−２６５８、ＴＰＰ−５４４２、ＴＰＰ−８８２５、ＴＰＰ−７００６、ＴＰＰ−７００７、ＴＰＰ−１０３３４、ＴＰＰ−１０３３５、ＴＰＰ−１０３３６、ＴＰＰ−１０３３７、ＴＰＰ−１０１５、ＴＰＰ−７５１０、ＴＰＰ−７５１１、ＴＰＰ−８３８２及びＴＰＰ−８５６７を、細胞培養上清から得た。細胞を遠心することで、細胞上清を清澄化した。次に、細胞上清を、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ  Ｓｕｒｅ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）クロマトグラフィーカラムでのアフィニティクロマトグラフィーによって精製した。このために、カラムをＤＰＢＳ  ｐＨ７．４（Ｓｉｇｍａ／Ａｌｄｒｉｃｈ）中で平衡状態とし、細胞上清を加え、カラムを約１０カラム体積のＤＰＢＳ  ｐＨ７．４＋５００ｍＭ塩化ナトリウムで洗浄した。抗体を５０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ３．５＋５００ｍＭ塩化ナトリウムで溶離し、次にＤＰＢＳ  ｐＨ７．４でのＳｕｐｅｒｄｅｘ  ２００カラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）におけるゲル濾過クロマトグラフィーによってさらに精製した。
【０８０３】
市販の抗体を、標準的なクロマトグラフィー法（タンパク質Ａクロマトグラフィー、分取ゲル濾過クロマトグラフィー（ＳＥＣ−サイズ排除クロマトグラフィー））により精製した。
【０８０４】
Ｂ−４．システイン側鎖へのカップリングの一般的方法
次の抗体を、当該カップリング反応で用いた。
【０８０５】
実施例ａ系：セツキシマブ（抗ＥＧＦＲ  ＡＫ）
実施例ｅ系：ＴＰＰ−１０１５（抗Ｈｅｒ２  ＡＫ）
実施例ｋ系：抗ＴＷＥＡＫＲ  ＡＫ（ＴＰＰ−７００７）
実施例ｋ系：抗ＴＷＥＡＫＲ  ＡＫ（ＴＰＰ−２６５８）
カップリング反応は通常、アルゴン下で行った。
【０８０６】
ＰＢＳ緩衝液に溶かした２から５当量のトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）を、１ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬの濃度範囲、好ましくは約１０ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬの範囲での適切な抗体のＰＢＳ緩衝液中溶液に加え、混合物を室温で３０分〜１時間撹拌した。これに関しては、使用した個々の抗体の溶液は、作業例で記載の濃度で用いることができるか、指定の出発濃度の約１／２までＰＢＳ緩衝液で希釈して、好ましい濃度範囲とすることもできる。次に、所期の負荷量に応じて、２〜２０当量、好ましくは約５〜１０当量のカップリング対象のマレイミド前駆体化合物又はハライド前駆体化合物をＤＭＳＯ中溶液として加えた。より高いＤＡＲを達成するため、１５〜２０当量を用いることも可能である。この場合、ＤＭＳＯの量は総体積の１０％を超えるものであってはならない。混合物を、マレイミド前駆体の場合には室温で６０〜２４０分間、ハライド前駆体の場合には室温で８から２４時間撹拌し、次にＰＢＳ平衡化ＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に負荷し、ＰＢＳ緩衝液で溶離した。通常、別段の断りがない限り、ＰＢＳ緩衝液中の対象抗体５ｍｇを、還元及びその後のカップリングに用いた。そうして、ＰＤ１０カラムでの精製により、各場合で、個々のＡＤＣのＰＢＳ緩衝液（３．５ｍＬ）中溶液を得た。サンプルを超遠心によって濃縮し、適宜にＰＢＳ緩衝液で再希釈した。必要な場合、低分子量成分をより良好に除去するため、ＰＢＳ緩衝液による再希釈後に、超遠心による濃縮を繰り返した。生物試験のため、必要な場合、最終ＡＤＣサンプルの濃度を、適宜に、再希釈によって０．５〜１５ｍｇ／ｍＬの範囲に調節した。作業例で記載のＡＤＣ溶液の個々のタンパク質濃度を求めた。さらに、Ｂ−７下に記載の方法を用いて、抗体負荷量（薬物／ｍＡｂ比）を求めた。
【０８０７】
リンカーに応じて、実施例で示されているＡＤＣは、多少、抗体に連結した加水分解された開鎖コハク酸アミドの形態で存在していても良い。
【０８０８】
特に、リンカー下位構造：
【化１５２】
2020502201.tif 000190
【０８０９】
を介して抗体のチオール基に連結しているＫＳＰ−Ｉ−ＡＤを、開鎖コハク酸アミドを介して連結したＡＤＣを介して、図式４及び９に従って、カップリング後の再緩衝化及びｐＨ８での約２０〜２４時間の撹拌によって、選択的に製造することもできる。
【０８１０】
＃１は抗体への硫黄架橋を表し、＃２は修飾ＫＳＰ阻害剤への結合点を表す。
【０８１１】
リンカーが加水分解された開鎖コハク酸アミドを介して抗体に結合しているそのようなＡＤＣは、下記の例示的方法により、選択的に製造することもできる。
【０８１２】
小規模カップリング：
ＰＢＳ緩衝液に溶かした２〜５当量のトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）を、１ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬの濃度範囲で、好ましくは約５ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬの範囲で適切な抗体２〜５ｍｇのＰＢＳ緩衝液中溶液に加え、混合物を室温で３０分〜１時間攪拌した。次に、所期の負荷量に応じて、２〜２０当量、好ましくは約５〜１０当量のカップリング対象のマレイミド前駆体を、ＤＭＳＯ中溶液として加えた。より高いＤＡＲを達成するため、１５〜２０当量を用いることも可能である。ここで、ＤＭＳＯの量は、総体積の１０％を超えてはならない。混合物を室温で６０〜２４０分間攪拌し、事前にｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で体積２．５〜７．５ｍＬに希釈し、そしてＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、その溶液を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【０８１３】
中規模カップリング：
アルゴン下に、２〜５当量、好ましくは３当量のＴＣＥＰのＰＢＳ緩衝液中溶液（濃度約０．２〜０．８ｍｇ／ｍＬ、好ましくは０．５ｍｇ／ｍＬ）を、ＰＢＳ緩衝液中の対象抗体２０〜２００ｍｇ（濃度約５〜１５ｍｇ／ｍＬ）に加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、そしてＤＭＳＯに溶かした２〜２０、好ましくは５〜１０当量のマレイミド前駆体化合物を加えた。より高いＤＡＲを達成するため、１５〜２０当量を用いることも可能である。室温でさらに１．５時間〜２時間攪拌後、混合物を、事前にｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈した。
【０８１４】
この溶液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡化しておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に負荷し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で希釈して濃度１〜７ｍｇ／ｍＬとした。この溶液を室温でアルゴン下に終夜撹拌した。必要な場合、その溶液を再緩衝化してｐＨ７．２とした。そのＡＤＣ溶液を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈し、適宜に再度濃縮して濃度約１０ｍｇ／ｍＬとした。
【０８１５】
作業例での他の加水分解感受性であり得る抗体へのチアニルコハク酸イミド架橋は、次のリンカー下位構造を含み、＃１は抗体へのチオエーテル連結を表し、＃１は修飾ＫＳＰ阻害剤への連結部位を表す。
【化１５３】
2020502201.tif 000191
【０８１６】
これらのリンカー下位構造は、抗体への連結ユニットを表し、（さらなるリンカー組成物に加えて）腫瘍細胞で生成される代謝物の構造及びプロファイルに対して大きい効果を有する。
【０８１７】
示された構造式において、ＡＫ１は次の意味を有する。
【０８１８】
実施例ａ系：セツキシマブ（部分還元）−Ｓ§１
実施例ｅ系：抗ＨＥＲ２ＡＫ（ＴＰＰ−１０１５部分還元）−Ｓ§１
実施例ｋ系：抗ＴＷＥＡＫＲ  ＡＫ（ＴＰＰ−７００７部分還元）−Ｓ§１
実施例ｋ系：抗ＴＷＥＡＫＲ  ＡＫ（ＴＰＰ−２６５８部分還元）−Ｓ§１
式中、
§１は、コハク酸イミド基への又はいずれかの異性体の加水分解された開鎖コハク酸アミド又はそれから生じるアルキレン基への連結を表し、
Ｓは、部分還元抗体のシステイン残基の硫黄原子を表す。
【０８１９】
Ｂ−５．リジン側鎖へのカップリングの一般的方法
次の抗体を、当該カップリング反応に用いた。
【０８２０】
実施例ａ系：セツキシマブ（抗ＥＧＦＲ  ＡＫ）
実施例ｅ系：ＴＰＰ−１０１５（抗Ｈｅｒ２  ＡＫ）
実施例ｋ系：抗ＴＷＥＡＫＲ抗体（ＴＰＰ−７００７）
実施例ｋ系：抗ＴＷＥＡＫＲ抗体（ＴＰＰ−２６５８）
カップリング反応は通常、アルゴン下で行った。
【０８２１】
２〜１０当量のカップリング対象の前駆体化合物を、ＤＭＳＯ中溶液として、所期の負荷量に応じて１ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬ濃度範囲の、好ましくは約１０ｍｇ／ｍＬの対象抗体のＰＢＳ緩衝液中溶液に加えた。室温で３０分〜６時間撹拌後、ＤＭＳＯ中の同量の前駆体化合物を再度加えた。この場合、ＤＭＳＯの量は総体積の１０％を超えてはならない。室温でさらに３０分〜６時間撹拌後、混合物をＰＢＳで平衡化したＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に負荷し、ＰＢＳ緩衝液で溶離した。通常、別段の断りがない限り、ＰＢＳ緩衝液中の対象抗体５ｍｇを、カップリングに用いた。従って、ＰＤ１０カラムでの精製によって各場合で、個々のＡＤＣのＰＢＳ緩衝液（３．５ｍＬ）中溶液を得た。サンプルを超遠心によって濃縮し、適宜にＰＢＳ緩衝液で再希釈した。必要であれば、低分子量成分の除去をより良好に行うため、限外濾過による濃縮を、ＰＢＳ緩衝液による再希釈後に繰り返した。生物試験のため、必要な場合、最終ＡＤＣサンプルの濃度を、適宜に、再希釈によって０．５〜１５ｍｇ／ｍＬの範囲に調節した。
【０８２２】
作業例で記載のＡＤＣ溶液の個々のタンパク質濃度を求めた。さらに、Ｂ−７下に記載の方法を用いて、抗体負荷量（薬物／ｍＡｂ比）を求めた。
【０８２３】
示した構造式において、ＡＫ２は次の意味：
実施例ａ系：セツキシマブ−ＮＨ§２
実施例ｅ系：抗ＨＥＲ２ＡＫ（ＴＰＰ−１０１５）−ＮＨ§２
実施例ｋ系：抗ＴＷＥＡＫＲ抗体（ＴＰＰ−７００７）−ＮＨ§２
実施例ｋ系：抗ＴＷＥＡＫＲ抗体（ＴＰＰ−２６５８）−ＮＨ§２
を有し、
式中、
§２は、カルボニル基への連結を表し、
ＮＨは、抗体のリジン残留物の側鎖アミノ基を表す。
【０８２４】
Ｂ−５ａ．細菌トランスグルタミナーゼによる一般的ＡＤＣ合成方法
細菌トランスグルタミナーゼを用いるカップリング反応において、下記の抗体を用いることができる（下記の抗体−ＨＣ−Ｎ２９７Ｚの名称は、両方の重鎖でアミノ酸Ｚに代わってアミノ酸Ｎ２９７（Ｋａｂａｔナンバリング）となっている抗体を意味し、ＴＰＰ−ｘｘｘｘ−ＨＣ−Ｑ２９５Ｎ−ＨＣ−Ｎ２９７Ｑの名称は、アミノ酸Ｎに代えてアミノ酸Ｑ２９５（Ｋａｂａｔナンバリング）となっており、両方の重鎖でアミノ酸Ｑに代えてアミノ酸Ｎ２９７（Ｋａｂａｔナンバリング）となっているＴＰＰ−ＸＸＸＸを有する抗体を意味する。元の抗体の抗体名は、その名称（例えばトラスツズマブ）として、又はＴＰＰ−ＸＸＸＸ（ＴＰＰ名ＸＸＸＸを有する抗体）として報告することができる。）
ＡＫ３ａ：抗ＴＷＥＡＫＲ抗体（ＴＰＰ−２６５８）（ＴＰＰ−２０９０−ＨＣ−Ｎ２９７Ａに相当）
ＡＫ３ｂ：抗ＴＷＥＡＫＲ抗体（ＴＰＰ−５４４２）（ＴＰＰ−２０９０−ＨＣ−Ｎ２９７Ｑに相当）
ＡＫ３ｃ：抗ＴＷＥＡＫＲ抗体（ＴＰＰ−８２２５）（ＴＰＰ−２０９０−ＨＣ−Ｑ２９５Ｎ−ＨＣ−Ｎ２９７Ｑに相当）
ＡＫ３ｄ：抗ＨＥＲ２抗体（ＴＰＰ−７５１０）（ＴＰＰ−１０１５−ＨＣ−Ｎ２９７Ａに相当）
ＡＫ３ｅ：抗ＨＥＲ２抗体（ＴＰＰ−７５１１）（ＴＰＰ−１０１５−ＨＣ−Ｎ２９７Ｑに相当）。
【０８２５】
最大ＤＡＲ２を得るための一般的手順：
相当する脱グリコシル（ａｇｌｙｃｏ）抗体変異体（ＨＣ−Ｎ２９７Ａ）５ｍｇのＤＰＢＳ（ｐＨ７．４）中溶液（濃度約５〜１５ｍｇ／ｍＬ）に、好適な担毒体リンカー前駆体の溶液（例えば中間体Ｒ５０及びＲ５１；１０ｍＭ  ＤＭＳＯ中溶液）２０μＬ（６当量）を加えた。３７℃で５分間インキュベーション後、組み換え細菌トランスグルタミナーゼの水溶液（製品番号Ｔ００１、Ｚｅｄｉｒａ  ＧｍｂＨ，  Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）（２５Ｕ／ｍＬ）５０μＬを加え、インキュベーションを３７℃でさらに２４時間続けた。次に、反応混合物をＤＰＢＳ  ｐＨ７．４で希釈して総量２．５ｍＬとし、ゲル濾過によってＤＰＢＳ平衡ＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ｐＨ７．４のＤＰＢＳ緩衝液で溶離した。次に、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｌ−３０Ｋ遠心（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）によってＡＤＣ溶液を濃縮し、それをＤＰＢＳで再希釈して体積約２．５ｍＬとした。最後に、ＤＰＢＳ  １２．５μＬ中のｂ−トランスグルタミナーゼ遮断剤Ｚｅｄｉｒａ  Ｃ１０００．００６２５μｍｏｌを、その溶液に加えた。ＡＤＣ溶液の作業例で言及した個々のタンパク質濃度を求めた。さらに、Ｂ−７下に記載の方法を用いて、抗体負荷量（薬物／ｍＡｂ比）を求めた。
【０８２６】
最大ＤＡＲ４を得るための一般的手順：
相当する脱グリコシル（ａｇｌｙｃｏ）抗体変異体（ＨＣ−Ｎ２９７Ｑ）５ｍｇのＤＰＢＳ（ｐＨ７．４）中溶液（濃度約５〜１５ｍｇ／ｍＬ）に、好適な担毒体リンカー前駆体の溶液（例えば中間体Ｒ５０及びＲ５１；１０ｍＭ  ＤＭＳＯ中溶液）１６〜２０当量を加えた。３７℃で５分間インキュベーション後、組み換え細菌トランスグルタミナーゼの水溶液（製品番号Ｔ００１、Ｚｅｄｉｒａ  ＧｍｂＨ，  Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）（２５Ｕ／ｍＬ）４００μＬ（１０Ｕ）を加え、インキュベーションを３７℃でさらに２４時間続けた。次に、反応混合物をＤＰＢＳ  ｐＨ７．４で希釈して総量２．５ｍＬとし、ゲル濾過によってＤＰＢＳ平衡ＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ｐＨ７．４のＤＰＢＳ緩衝液で溶離した。次に、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｌ−３０Ｋ  Ｚｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）によってＡＤＣ溶液を濃縮し、それをＤＰＢＳで再希釈して体積約２．５ｍＬとした。最後に、ＤＰＢＳ  ２００μＬ中のｂ−トランスグルタミナーゼ遮断剤Ｚｅｄｉｒａ  Ｃ１０００．１μｍｏｌを、その溶液に加えた。ＡＤＣ溶液の作業例で言及した個々のタンパク質濃度を求めた。さらに、Ｂ−７下に記載の方法を用いて、抗体負荷量（薬物／ｍＡｂ比）を求めた。
【０８２７】
最大ＤＡＲ２を得るための、より大きい規模でのトランスグルタミナーゼ介在カップリングの一般手順：
特定の抗体の脱グリコシル化変異体（ＨＣ−Ｎ２９７Ａ）３０ｍｇのＤＰＢＳ  ｐＨ７．４中溶液（濃度約５から１５ｍｇ／ｍＬ）に、６当量の適切な担毒体リンカー前駆体の溶液（１０ｍＭ  ＤＭＳＯ中溶液）を加えた。３７℃で５分間インキュベーション後、組み換え細菌トランスグルタミナーゼの水溶液（製品番号Ｔ００１、Ｚｅｄｉｒａ  ＧｍｂＨ，  Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）（２５Ｕ／ｍＬ）２００μＬ（７．５Ｕ）を加え、インキュベーションを３７℃でさらに２４時間続けた。反応混合物を、ＤＰＢＳ  ｐＨ７．４のＳｕｐｅｒｄｅｘ２００カラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）でのゲル濾過クロマトグラフィーによって精製して、小分子及びトランスグルタミナーゼをＡＤＣから分離した。次に、ＡＤＣ溶液をＡｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｌ−３０Ｋ遠心管（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて濃縮して、最終濃度５〜２５ｍｇ／ｍＬとした。次に、その溶液を無菌濾過した。
【０８２８】
作業例で報告のＡＤＣ溶液の個々の濃度を求めた。チャプターＢ７に記載の方法によって、負荷量を求めた。作業例で示した方法に従って、ＡＤＣバッチの特性を決定した。
【０８２９】
最大ＤＡＲ４を得るための、より大きい規模でのトランスグルタミナーゼ介在カップリングの一般手順：
特定の抗体の脱グリコシル化変異体（ＨＣ−Ｎ２９７Ｑ）３０ｍｇのＤＰＢＳ  ｐＨ７．４中溶液（濃度約５〜１５ｍｇ／ｍＬ）に、１６〜２４当量の適切な担毒体リンカー前駆体の溶液（１０ｍＭ  ＤＭＳＯ中溶液）を加えた。３７℃で５分間インキュベーション後、組み換え細菌トランスグルタミナーゼの水溶液（製品番号Ｔ００１、Ｚｅｄｉｒａ  ＧｍｂＨ，  Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）（２５Ｕ／ｍＬ）２４００μＬ（６０Ｕ）を加え、インキュベーションを３７℃でさらに２４時間続けた。反応混合物を、ＤＰＢＳ  ｐＨ７．４のＳｕｐｅｒｄｅｘ２００カラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）でのゲル濾過クロマトグラフィーによって精製して、小分子及びトランスグルタミナーゼをＡＤＣから分離した。次に、ＡＤＣ溶液をＡｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｌ−３０Ｋ遠心管（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて濃縮して、最終濃度５〜２５ｍｇ／ｍＬとした。次に、その溶液を無菌濾過した。
【０８３０】
作業例で報告のＡＤＣ溶液の個々の濃度を求めた。チャプターＢ７に記載の方法によって、負荷量を求めた。作業例で示した方法に従って、ＡＤＣバッチの特性を決定した。
【０８３１】
ＡＫ３は各場合で下記の意味：
ＡＫ３ａ：抗ＴＷＥＡＫＲ抗体（ＴＰＰ−２６５８）（ＴＰＰ−２０９０−ＨＣ−Ｎ２９７Ａに相当）−ＣＯ−§２
ＡＫ３ｂ：抗ＴＷＥＡＫＲ抗体（ＴＰＰ−５４４２）（ＴＰＰ−２０９０−ＨＣ−Ｎ２９７Ｑに相当）−ＣＯ−§２
ＡＫ３ｃ：抗ＴＷＥＡＫＲ抗体（ＴＰＰ−８８２５）（ＴＰＰ−２０９０−ＨＣ−Ｑ２９５Ｎ−ＨＣ−Ｎ２９７Ｑ）−ＣＯ−§２
ＡＫ３ｄ：抗ＨＥＲ２抗体（ＴＰＰ−７５１０）（ＴＰＰ−１０１５−ＨＣ−Ｎ２９７Ａに相当）−ＣＯ−§２
ＡＫ３ｅ：抗ＨＥＲ２抗体（ＴＰＰ−７５１１）（ＴＰＰ−１０１５−ＨＣ−Ｎ２９７Ｑに相当）−ＣＯ−§２
を有し、
§２は担毒体リンカー前駆体のアミノ基への連結を示し、
ＣＯは抗体のグルタミン残基の側鎖カルボニル基を表す。
【０８３２】
その使用のために、細菌トランスグルタミナーゼに好適である可能性がある基質は、下記のものである。
【化１５４】
2020502201.tif 000192
2020502201.tif 000193
2020502201.tif 000194
【０８３３】
Ｂ−６ａ．閉鎖コハク酸イミド−システイン付加物の一般的製造方法
例示的実施形態において、１０μｍｏｌの上記マレイミド前駆体化合物をＤＭＦ  ３から５ｍＬに取り、Ｌ−システイン２．１ｍｇ（２０μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間から２４時間撹拌し、次に減圧下に濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製した。
【０８３４】
Ｂ−６ａａ．異性体開鎖コハク酸アミド−システイン付加物の一般的製造方法：
例示的実施形態において、上記マレイミド前駆体化合物６８μｍｏｌを、ＤＭＦ  １５ｍＬに取り、Ｎ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイン３６ｍｇ（１３６μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で約２０時間撹拌し、次に減圧下に濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、減圧下に溶媒留去し、次に、残留物をＴＨＦ／水１：１  １５ｍＬに溶かした。２Ｍ水酸化リチウム水溶液１３１μＬを加え、混合物を室温で１時間撹拌した。次に、反応液を１Ｍ塩酸で中和し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、理論値の約５０％の位置異性体保護中間体を無色泡状物として得た。
【０８３５】
最後の段階で、０．０２３ｍｍｏｌのこれらの位置異性体加水分解生成物を２，２，２−トリフルオロエタノール３ｍＬに溶かした。塩化亜鉛１２．５ｍｇ（０．０９２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で４時間撹拌した。次に、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２７ｍｇ（０．０９２ｍｍｏｌ）を加え、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮及びアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、加水分解開鎖スルファニルコハク酸アミドを位置異性体混合物として得た。
【０８３６】
本発明による複合体のさらなる精製及び特性決定
反応後、場合により、反応混合物を、例えば限外濾過によって濃縮し、脱塩し、例えばＳｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５カラムを用いるクロマトグラフィーによって精製した。例えば、ホスフェート緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で、溶離を行った。次に、溶液を無菌濾過し、冷凍した。或いは、複合体を凍結乾燥することができる。
【０８３７】
Ｂ−７．抗体、担毒体負荷量及び開鎖システイン付加物の割合の測定
脱グリコシル化及び／又は変性後の分子量測定に加えてタンパク質同定のため、トリプシン消化を行い、それは、変性、還元及び誘導体化後に、トリプシンペプチドを介してタンパク質のアイデンティティーを確認するものである。
【０８３８】
作業例に記載の複合体の得られたＰＢＳ緩衝液溶液の担毒体負荷量を、下記のように求めた。
【０８３９】
リジン連結ＡＤＣの担毒体負荷量の測定を、個々の複合体種の分子量の質量分析測定によって行った。ここで、抗体複合体を最初に、ＰＮＧａｓｅＦで脱グリコシル化し、サンプルを酸性とし、ＨＰＬＣ分離／脱塩後に、ＥＳＩ−ＭｉｃｒｏＴｏｆＱ（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄａｌｔｏｎｉｋ）を用いる質量分析によって分析した。ＴＩＣ（全イオンクロマトグラム）におけるシグナルでの全てのスペクトラムを加え、異なる複合体種の分子量をＭａｘＥｎｔデコンボリューションに基づいて計算した。次に、異なる種のシグナル積分後に、ＤＡＲ（＝薬物／抗体比）を計算した。これに関しては、担毒体カウントによって加重された全ての化学種についての積分結果の総合計を、全ての化学種についての単純加重積分結果の総合計によって割った。
【０８４０】
還元及び変性ＡＤＣの逆相クロマトグラフィーによって、システイン連結複合体の担毒体負荷量を求めた。グアニジニウム塩酸塩（ＧｕＨＣｌ）（２８．６ｍｇ）及びＤＬ−ジチオスレイトール（ＤＴＴ）の溶液（５００ｍＭ、３μＬ）をＡＤＣ溶液（１ｍｇ／ｍＬ、５０μＬ）に加えた。混合物を５５℃で１時間インキュベートし、ＨＰＬＣによって分析した。
【０８４１】
ＨＰＬＣ分析を、２２０ｎｍで検出を行うＡｇｉｌｅｎｔ  １２６０ＨＰＬＣシステムで行った。Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  ＰＬＲＰ−Ｓポリマー逆相カラム（カタログ番号ＰＬ１９１２−３８０２）（２．１×１５０ｍｍ、粒径８μｍ、１０００Å）を、次の勾配：０分、２５％Ｂ；３分、２５％Ｂ；２８分、５０％Ｂで流量１ｍＬ／分で用いた。溶離液Ａは、０．０５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／水からなり、溶離液Ｂは０．０５％トリフルオロ酢酸／アセトニトリルからなるものであった。
【０８４２】
非複合体化抗体の軽鎖（Ｌ０）及び重鎖（Ｈ０）との保持時間比較によって、検出されたピークの割り当てを行った。専ら複合体化サンプルで検出されたピークを、１個の担毒体（Ｌ１）を有する軽鎖及び１個、２個及び３個の担毒体（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）を有する重鎖に割り当てた。
【０８４３】
担毒体を有する抗体の平均負荷量を、ＨＣ負荷量及びＬＣ負荷量の合計の倍としての積分によって求めたピーク面積から計算したが、ＬＣ負荷量は全ＬＣピークの単一加重積分結果の合計で割った全ＬＣピークの担毒体数平均加重積分結果の合計から計算され、ＨＣ負荷量は全ＨＣピークの単一加重積分結果の合計で割った全ＨＣピークの担毒体数平均加重積分結果の合計から計算される。個々の場合で、いくつかのピークの共溶出のために、正確に担毒体負荷を求めることができなかった可能性があった。
【０８４４】
軽鎖及び重鎖をＨＰＬＣによって十分に分離できなかった場合、システイン連結複合体の担毒体負荷量の測定は、軽鎖及び重鎖での個々の複合体種の分子量の質量分析測定によって行った。
【０８４５】
それに関して、グアニジニウム塩酸塩（ＧｕＨＣｌ）（２８．６ｍｇ）及びＤＬ−ジチオスレイトール（ＤＴＴ）の溶液（５００ｍＭ、３μＬ）をＡＤＣ溶液（１ｍｇ／ｍＬ、５０μＬ）に加えた。混合物を５５℃で１時間インキュベートし、ＥＳＩ−ＭｉｃｒｏＴｏｆＱ（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄａｌｔｏｎｉｋ）を用いるオンライン脱塩後に質量分析によって分析した。
【０８４６】
ＤＡＲ測定のため、全てのスペクトラムを、ＴＩＣ（全イオンクロマトグラム）におけるシグナルに加え、軽鎖及び重鎖での異なる複合体種の分子量をＭａｘＥｎｔデコンボリューションに基づいて求めた。担毒体を有する抗体の平均負荷量を、ＨＣ負荷量及びＬＣ負荷量の合計の倍としての積分によって求めたピーク面積から求めた。この文脈では、ＬＣ負荷量は、全ＬＣピークについての単純加重積分結果の合計で割った、担毒体カウントによって加重された全ＬＣピークについての積分結果の合計から計算され、ＨＣ負荷量は、全ＨＣピークについての単純加重積分結果の合計で割った、担毒体カウントによって加重された全ＨＣピークについての積分結果の合計から計算される。
【０８４７】
開鎖構築物の場合、開鎖システイン付加物の割合を求めるため、全ての単一複合体化軽鎖及び重鎖変異体の閉鎖：開鎖システイン付加物（分子量Δ１８ダルトン）の分子量面積比を求めた。全ての変異体の平均によって、開鎖システイン付加物の割合を得た。
【０８４８】
グルタミン連結複合体の担毒体負荷量を、還元及び変性ＡＤＣの逆相クロマトグラフィーによって求めた。グアニジニウム塩酸塩（ＧｕＨＣｌ）（２８．６ｍｇ）及びＤＬ−ジチオトレイトール（ＤＴＴ）の溶液（５００ｍＭ、３μＬ）をＡＤＣ溶液（１ｍｇ／ｍＬ、５０μＬ）に加えた。混合物を５５℃で１時間インキュベートし、ＨＰＬＣによって分析した。
【０８４９】
２２０ｎｍで検出を行うＡｇｉｌｅｎｔ１２６０ＨＰＬＣシステムで、ＨＰＬＣ分析を行った。Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  ＰＬＲＰ−Ｓポリマー逆相カラム（カタログ番号ＰＬ１９１２−３８０２）（２．１×１５０ｍｍ、粒径８μｍ、１０００Å）を、流量１ｍＬ／分で、次の勾配：０分、３１％Ｂ；１分、３１％Ｂ；１４分、３８％Ｂ、１６分、９５％Ｂによって用いた。溶離液Ａは０．０５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）水溶液からなり、溶離液Ｂは０．０５％トリフルオロ酢酸／アセトニトリルからなるものであった。
【０８５０】
非複合体化抗体の軽鎖（Ｌ０）及び重鎖（Ｈ０）との保持時間比較によって、検出ピークを割り当てた。専ら複合体化サンプルで検出されたピークを、１個及び２個の担毒体を有する重鎖（Ｈ１、Ｈ２）に割り当てた。
【０８５１】
担毒体を有する抗体の平均負荷量を、ＨＣ負荷量及びＬＣ負荷量の合計の倍としての積分によって求めたピーク面積から計算したが、ＬＣ負荷量は全ＬＣピークの単一加重積分結果の合計で割った全ＬＣピークの担毒体数平均加重積分結果の合計から計算され、ＨＣ負荷量は全ＨＣピークの単一加重積分結果の合計で割った全ＨＣピークの担毒体数平均加重積分結果の合計から計算される。
【０８５２】
或いは、グルタミン連結ＡＤＣの担毒体負荷量を、個々の複合体種の分子量の質量分析測定によって測定した。この場合、サンプルを酸性とし、ＨＰＬＣ分離／脱塩後に、ＥＳＩ−ＭｉｃｒｏＴｏｆＱ  （Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄａｌｔｏｎｉｋ）を用いる質量分析によって分析した。ＴＩＣ（総イオンクロマトグラフィー）でのシグナルにおける全てのスペクトラムを加え、各種複合体種の分子量をＭａｘＥｎｔ逆重畳積分に基づいて計算した。次に、各種複合体種のシグナル積分後に、ＤＡＲ（＝薬物／抗体比）を計算した。これに関しては、担毒体カウントで加重した全ての化学種についての積分結果の合計を、全ての化学種についての単純加重積分の合計によって割った。
【０８５３】
或いは、担毒体負荷量を、結合部位とは独立に、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）時のＵＶ吸収（以後、ＳＥＣ−ＵＶと略する）によって求めた。このために、ＡＤＣ溶液５０μＬを、ＳＥＣによって分析した。その分析は、２８０ｎｍでの検出及び２６０ｎｍでの検出を行うＡｇｉｌｅｎｔ  １２６０  ＨＰＬＣシステムで実施した。ＧＥ  ＨｅａｌｔｈｃａｒｅからのＳｕｐｅｒｄｅｘ  ２００  １０／３００  ＧＬカラム（ロット番号：１０１９４０３７）（１０×３１０ｍｍ、粒径１μｍ）を、定組成条件下、流量１ｍＬ／分で用いた。移動相は、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）からなるものであった。ＨＰＬＣクロマトグラムから薬剤負荷量を求めるため、２６０ｎｍ及び２８０ｎｍでのモノマーピークのピーク面積の比Ｒを求めた。この比を用いて、次のように、薬剤負荷量（ＤＡＲ）を確認した。
【数１】
2020502201.tif 000195
【０８５４】
この式において、εは、抗体（Ａｂ）及び薬剤（Ｄ）のモル減衰係数である。λ薬剤は、波長２６０ｎｍを表し、２８０は２８０ｎｍを表す。２８０ｎｍ及び２６０ｎｍでの抗体の減衰係数を、実験的に求めた。各種抗体についてのこれら測定値からの平均値を、ＤＡＲ計算に用いた。ＫＳＰ担毒体についても、２８０ｎｍ及び２６０ｎｍでのモル減衰係数を実験的に求めた。下記の波長及び減衰係数を、ＤＡＲ計算に用いた。
【表３】
2020502201.tif 000196
【０８５５】
ＡＤＣの濃度を、２８０ｎｍでのＵＶ吸収の測定によって求めた。その濃度は、個々の抗体のモル吸収係数を用いて求めた。同様に２８０ｎｍでの担毒体の吸収を考慮するため、２８０ｎｍで測定した濃度を、下記式を用いて補正した。
【０８５６】
濃度＝予備濃度／（１＋ＤＡＲＵＶ＊（□担毒体２８０ｎｍ／□抗体２８０ｎｍ））
この式中、「予備濃度」は、抗体のみの吸収係数を用いて計算した濃度を表し、ＤＡＲＵＶは、ＳＥＣ−ＵＶによって求めた個々のＡＤＣのＤＡＲであり、□担毒体２８０ｎｍ／□抗体２８０ｎｍは、２８０ｎｍでの担毒体及び抗体の個々の減衰係数である。
【０８５７】
Ｂ−８．ＡＤＣ類の抗原結合の検証
バインダーの標的分子への結合能力を、カップリングが起こった後に調べた。当業者であれば、この目的に用いられる各種方法については熟知しており、例えば、複合体のアフィニティは、ＥＬＩＳＡ技術又は表面プラズモン共鳴分析（ＢＩＡｃｏｒｅ（商標名）測定）を用いて調べることができる。複合体濃度は、例えばタンパク質による抗体複合体についての一般的な方法を用いて当業者が測定することができる（Ｄｏｒｏｎｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．；  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ２００３；２１：７７８−７８４及びＰｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｌｏｏｄ  ２００７；１１０２：６１６−６２３も参照）。
【０８５８】
ＡＰＤＣ類及びＡＤＣ類の作業例
マレイミド基を介して抗体のシステイン側鎖にカップリングさせた作業例の構造式に示したＡＰＤＣ及びＡＤＣは、リンカー及びカップリング手順に応じて、主として各場合で示した開環型又は閉環型で存在する。しかしながら、その製造物は、小さい割合で個々の他の形態を含むことができる。
【０８５９】
カップリング反応はアルゴン下で行った。
【０８６０】
実施例１
【化１５５】
2020502201.tif 000197
【０８６１】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を、ＰＢＳ  ０．４ｍＬ中の適切な抗体５ｍｇ（ｃ＝１２．５ｍｇ／ｍＬ）に加えた。混合物を室温で３０分間撹拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ１  ０．２２ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、混合物を予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で２．５ｍＬに希釈し、次に、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。次に、溶出液を室温でアルゴン下に終夜撹拌した。次に、超遠心による濃縮及びＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）での再希釈を行った。
【表４】
2020502201.tif 000198
【０８６２】
実施例２
【化１５６】
2020502201.tif 000199
【０８６３】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を、ＰＢＳ  ０．４ｍＬ中の適切な抗体５ｍｇ（ｃ＝１２．５ｍｇ／ｍＬ）に加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ２  ０．２ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、反応混合物を事前にｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して体積２．５ｍＬとし、次に、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に投入し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【０８６４】
手順例Ｂ：
アルゴン下に、ＴＣＥＰ  ０．１７２ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．２ｍＬ）中溶液を、ＰＢＳ  ２．５２ｍＬ中の適切な抗体３０ｍｇ（ｃ＝１１．９ｍｇ／ｍＬ）に加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ２００μＬに溶かした中間体Ｓ２  １．２ｍｇ（０．００１４ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、反応混合物を事前にｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して体積５ｍＬとし、次に、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に投入し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をｐＨ８のＰＢＳ緩衝液で希釈して体積７．５ｍＬとし、室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表５】
2020502201.tif 000200
【０８６５】
実施例２ｋ＊−７００７に関しては、開環型のパーセントは、質量分析によって８７．４％と決定した。
【０８６６】
実施例３
【化１５７】
2020502201.tif 000201
【０８６７】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を、ＰＢＳ  ０．５ｍＬ中の相当する抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ３  ０．２２ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、混合物を事前にｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して体積２．５ｍＬとし、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表６】
2020502201.tif 000202
【０８６８】
実施例４
【化１５８】
2020502201.tif 000203
【０８６９】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を、ＰＢＳ  ０．５ｍＬ中の適切な抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ４  ０．２３ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、混合物を、事前にｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して体積２．５ｍＬとし、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表７】
2020502201.tif 000204
【０８７０】
実施例５
【化１５９】
2020502201.tif 000205
【０８７１】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を、ＰＢＳ  ０．５ｍＬ中の適切な抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ５  ０．２３ｍｇ（０．０００１９ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、反応混合物を事前にｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して体積２．５ｍＬとし、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に投入し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜攪拌した。次に、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表８】
2020502201.tif 000206
【０８７２】
実施例６
【化１６０】
2020502201.tif 000207
【０８７３】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした５当量（０．１８ｍｇ）の中間体Ｓ６を、ＰＢＳ  ０．４ｍＬ中の個々の抗体５ｍｇ（ｃ＝１２．５ｍｇ／ｍＬ）に加えた。室温で１時間攪拌後、同量を再度加え、混合物を室温でさらに１時間攪拌した。次に、反応混合物をＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で希釈して２．５ｍＬとし、Ｓｅｐｈａｄｅｘカラムで精製し、次に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【０８７４】
手順例Ｂ：
ＰＢＳ  ５．５８ｍＬ中の対象の抗体８０ｍｇ（ｃ＝１４．３ｍｇ／ｍＬ；濃度は、３〜２０ｍｇ／ｍＬであることもできる。）に、アルゴン下、ＤＭＳＯ  ５００μＬに溶かした５当量（２．８ｍｇ）の中間体Ｓ６を加えた。室温で１時間攪拌後、同量を再度加え、混合物を室温でさらに１時間攪拌した。次に、混合物をＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で希釈して７．５ｍＬとし、Ｓｅｐｈａｄｅｘカラムによって精製し、次に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表９】
2020502201.tif 000208
2020502201.tif 000209
【０８７５】
実施例７
【化１６１】
2020502201.tif 000210
【０８７６】
手順例Ａ：
ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）０．４ｍＬ中の対象の抗体５ｍｇ（ｃ＝１２．５ｍｇ／ｍＬ）に、アルゴン下、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、次に、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ７  ０．２４ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、混合物をＰＢＳ緩衝液で希釈して、総体積２．５ｍＬとした。次に、この溶液を、ＰＢＳ緩衝液で平衡とした（ｐＨ７．２）ＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で溶離した。次に、混合物を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表１０】
2020502201.tif 000211
2020502201.tif 000212
【０８７７】
実施例８
【化１６２】
2020502201.tif 000213
【０８７８】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした５当量（０．１４ｍｇ）の中間体Ｓ８に、ＰＢＳ  ０．４ｍＬ中の個々の抗体５ｍｇ（ｃ＝１２．５ｍｇ／ｍＬ）を加えた。室温で１時間攪拌後、同量を再度加え、混合物を室温でさらに１時間攪拌した。次に、反応液をＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で希釈して２．５ｍＬとし、Ｓｅｐｈａｄｅｘカラムで精製し、次に、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表１１】
2020502201.tif 000214
2020502201.tif 000215
【０８７９】
実施例９
【化１６３】
2020502201.tif 000216
【０８８０】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を、ＰＢＳ  ０．５ｍＬ中の適切な抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ９  ０．２２ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、反応混合物を、予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して体積２．５ｍＬとし、次に、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に負荷し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜攪拌した。次に、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）によって再希釈した。
【表１２】
2020502201.tif 000217
【０８８１】
実施例１０
【化１６４】
2020502201.tif 000218
【０８８２】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）０．４ｍＬ中の相当する抗体５ｍｇ（ｃ＝１２．５ｍｇ／ｍＬ）に加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、次に、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ１０  ０．２３ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、混合物をＰＢＳ緩衝液で希釈して総体積２．５ｍＬとし、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に負荷し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）によって再希釈した。
【表１３】
2020502201.tif 000219
【０８８３】
実施例１１
【化１６５】
2020502201.tif 000220
【０８８４】
手順例Ａ：
ＰＢＳ  ０．４ｍＬ中の適切な抗体５ｍｇ（ｃ＝１２．５ｍｇ／ｍＬ）に、アルゴン下、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、次に、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ１１  ０．２３ｍｇ（０．０００２３中溶液ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、混合物を、ｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して体積２．５ｍＬとし、次に、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、混合物を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表１４】
2020502201.tif 000221
【０８８５】
実施例１２
【化１６６】
2020502201.tif 000222
【０８８６】
手順例Ａ：
ＰＢＳ緩衝液０．４ｍＬ（ｐＨ７．２）中の対象の抗体５ｍｇ（ｃ＝１２．５ｍｇ／ｍＬ）に、アルゴン下、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ１２  ０．２２ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜攪拌した。次に、混合物をＰＢＳ緩衝液で希釈して総体積２．５ｍＬとした。この溶液を、ＰＢＳ緩衝液で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液で溶離した。次に、混合物を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表１５】
2020502201.tif 000223
【０８８７】
実施例１３
【化１６７】
2020502201.tif 000224
【０８８８】
手順例Ａ：
ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）０．５ｍＬ中の対象の抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に、アルゴン下、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ１３  ０．２８ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、混合物をＰＢＳ緩衝液で希釈して総体積２．５ｍＬとし、次に、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、混合物を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表１６】
2020502201.tif 000225
【０８８９】
実施例１４
【化１６８】
2020502201.tif 000226
【０８９０】
手順例Ａ：
ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）０．５ｍＬ中の対象の抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に、アルゴン下、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ１４  ０．３ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、混合物を、ｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して総体積２．５ｍＬとした。この溶液を、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ８）で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ８）で溶離し、室温で終夜攪拌した。次に、混合物を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表１７】
2020502201.tif 000227
【０８９１】
これらの条件下に、このリンカーを用いて製造していた実施例１４からのＡＤＣの場合、開環が不完全であった。それらはなお、抗体への連結が閉環コハク酸イミド型を介したものである分画（実施例７参照）を比較的多量に（５０％超）含んでいた。
【０８９２】
実施例１５
【化１６９】
2020502201.tif 000228
【０８９３】
手順例Ａ：
ＰＢＳ  ０．５ｍＬ中の適切な抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に、アルゴン下、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ１５  ０．２７ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温でさらに９０分間攪拌した。次に、その溶液をｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して２．５ｍＬとし、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、混合物を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表１８】
2020502201.tif 000229
【０８９４】
実施例１６
【化１７０】
2020502201.tif 000230
【０８９５】
手順例Ａ（より高いＤＡＲを得るため）：
ＰＢＳ  ０．５ｍＬ中の適切な抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に、アルゴン下、ＴＣＥＰ  ０．０６７ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ１６  ０．６８ｍｇ（０．０００５７ｍｍｏｌ）を加えた。アルゴン下に室温で終夜にわたりさらに攪拌した後、混合物を、ＰＢＳ緩衝液で希釈して体積２．５ｍＬとした。この溶液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ７．２で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ７．２で溶離を行った。次に、混合物を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表１９】
2020502201.tif 000231
【０８９６】
実施例１７
【化１７１】
2020502201.tif 000232
【０８９７】
手順例Ａ：
ＰＢＳ  ０．４５ｍＬ中の適切な抗体５ｍｇ（ｃ＝１１ｍｇ／ｍＬ）に、アルゴン下、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、次に、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ１７  ０．３０ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温でさらに９０分間攪拌した。その溶液を、ｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して２．５ｍＬとし、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、混合物を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表２０】
2020502201.tif 000233
【０８９８】
実施例１８
【化１７２】
2020502201.tif 000234
【０８９９】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＤＭＳＯ  ３０μＬに溶かした５当量（０．１２ｍｇ）の中間体Ｓ１８を、ＰＢＳ  ０．３ｍＬ中の個々の抗体３ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に加えた。室温で１時間攪拌後、同量を再度加え、混合物を室温でさらに１時間攪拌した。次に、反応混合物をＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で希釈して２．５ｍＬとし、Ｓｅｐｈａｄｅｘカラムで精製し、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表２１】
2020502201.tif 000235
【０９００】
実施例１９
【化１７３】
2020502201.tif 000236
【０９０１】
手順例Ａ：
ＰＢＳ  ０．４５ｍＬ中の適切な抗体５ｍｇ（ｃ＝１１ｍｇ／ｍＬ）に、アルゴン下、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ１９  ０．２８ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温でさらに９０分間攪拌した。その溶液をｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液で希釈して２．５ｍＬとし、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、混合物を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表２２】
2020502201.tif 000237
【０９０２】
実施例２０
【化１７４】
2020502201.tif 000238
【０９０３】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした５当量（０．１７ｍｇ）の中間体Ｓ２０を、ＰＢＳ  ０．５ｍＬ中の個々の抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に加えた。室温で１時間攪拌後、同量を再度加え、混合物を室温でさらに１時間攪拌した。次に、混合物をＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で希釈して２．５ｍＬとし、Ｓｅｐｈａｄｅｘカラムで精製し、次に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表２３】
2020502201.tif 000239
【０９０４】
実施例２１
【化１７５】
2020502201.tif 000240
【０９０５】
手順例Ａ：
アルゴン下に、ＴＣＥＰ  ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．０５ｍＬ）中溶液を、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）０．５ｍＬ中の関連抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）に加えた。混合物を室温で３０分間攪拌し、次に、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ２１  ０．２２ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間攪拌後、反応混合物をＰＢＳ緩衝液で希釈して総体積２．５ｍＬとし、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に負荷し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液を室温でアルゴン下に終夜攪拌した。次に、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）によって再希釈した。
【表２４】
2020502201.tif 000241
【０９０６】
実施例２２
【化１７６】
2020502201.tif 000242
【０９０７】
手順例Ａ：
ＰＢＳ  ０．５ｍＬ中の個々の抗体５ｍｇ（ｃ＝１０ｍｇ／ｍＬ）を、アルゴン下に、ＤＭＳＯ  ５０μＬに溶かした中間体Ｓ２２  ５当量（０．２２ｍｇ）と混合した。室温で１時間攪拌後、同量を再度加え、混合物を室温でさらに１時間攪拌した。次に、反応混合物をＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で希釈して２．５ｍＬとし、Ｓｅｐｈａｄｅｘカラムで精製し、次に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）で再希釈した。
【表２５】
2020502201.tif 000243
【０９０８】
代謝物の作業例
各種実施形態において本発明によるＡＤＣからの腫瘍中で形成された代謝物を製造し、比較を目的として特性決定した。それらの一部については、他のＡＤＣ類の以前の開示に既に記載されている。
【０９０９】
例えば、実施例２、３及び９から形成することができる代謝物
【化１７７】
2020502201.tif 000244
【０９１０】
実施例１、２、３、９から形成することができる４種類の異性体システイン代謝物の合成がＷＯ２０１６／０９６６１０に記載されており、それらは、実施例Ｍ１３、Ｍ１４、Ｍ１５及びＭ１６として特性決定された。
【０９１１】
例えば、実施例４及び５から形成することができる代謝物Ｍ１及びＭ２
【化１７８】
2020502201.tif 000245
【０９１２】
実施例Ｍ１
Ｎ−（３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−３−カルボキシプロパノイル）グリシル−Ｎ−［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−Ｄ−α−グルタミントリフルオロ酢酸塩
位置異性体１、エピマー混合物
【化１７９】
2020502201.tif 000246
【０９１３】
メチルＬ−システイネート塩酸塩（１：１）（５．００ｇ、２９．１ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２００ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（１０ｍＬ、７３ｍｍｏｌ）を加え、次に１−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］−カルボニル｝オキシ）ピロリジン−２，５−ジオン（８．３１ｇ、３２．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で２０時間攪拌した。次に、固体を濾去し、濾液を高真空下に濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。
【０９１４】
得られたメチルＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイネート（１３０ｍｇ、４６５μｍｏｌ）及び３−ブロモ−４−メトキシ−４−オキソブタン酸（３９３ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６．５ｍＬ）中溶液に、１，８−ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ−７−エン２１０μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で１０分間攪拌した。次に、混合物を減圧下に濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下で乾燥させた。
【０９１５】
この得られた中間体を、ペプチド化学の従来法によって、ＨＡＴＵの存在下に中間体Ｃ１１９にカップリングさせ．次に、メチルエステルを、水酸化リチウムのＴＨＦ／水（１：１）中溶液で処理することで加水分解した。
【０９１６】
最終段階で、得られた中間体２２ｍｇを、２，２，２−トリフルオロエタノール１０ｍＬに溶かした。塩化亜鉛３４ｍｇ（０．２５２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５０℃で１時間攪拌した。次に、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸７４ｍｇ（０．２５２ｍｍｏｌ）、水１０ｍＬ及びＴＦＡ  ５００μＬを加えた。混合物を濾過し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮及び残留物のアセトニトリル／水からの凍結乾燥後に、標題化合物１３ｍｇ（理論値の７２％）を得た。
【０９１７】
ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒｔ＝２．４４分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝９５９［Ｍ−Ｈ］−。
【０９１８】
実施例Ｍ２
Ｎ−（２−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−３−カルボキシプロパノイル）グリシル−Ｎ−［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−Ｄ−α−グルタミントリフルオロ酢酸塩
位置異性体２、エピマー混合物
【化１８０】
2020502201.tif 000247
【０９１９】
実施例Ｍ１と同様にして、標題化合物Ｍ２をエピマー混合物として製造した。
【０９２０】
メチルＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイネート（１０００ｍｇ、３．５８ｍｍｏｌ）及び２−ブロモ−４−エトキシ−４−オキソブタン酸（９２６ｍｇ、４．１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４０ｍＬ）中溶液に、１，８−ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ−７−エン８０１μＬ（５．４ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で２時間攪拌した。次に、混合物を減圧下に濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。
【０９２１】
得られた中間体を、ペプチド化学の従来法によって、ＨＡＴＵ及びメチルモルホリンの存在下に、中間体Ｃ１１９とカップリングさせた。次に、メチルエステル及びエチルエステルを、水酸化リチウムのＴＨＦ／水（１：１）中溶液で処理することで加水分解した。
【０９２２】
最終段階で、この中間体４８ｍｇを２，２，２−トリフルオロエタノール５ｍＬに溶かした。塩化亜鉛７５ｍｇ（０．５５０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５０℃で３時間攪拌した。次に、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１６０ｍｇ（０．５５０ｍｍｏｌ）、水２ｍＬ及びＴＦＡ  ２０μＬを加えた。溶媒を減圧下に濃縮し、残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮及び残留物のアセトニトリル／水からの凍結乾燥後に、標題化合物１４ｍｇ（理論値の３９％）を得た。
【０９２３】
ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒｔ＝２．４１分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝９５９［Ｍ−Ｈ］−。
【０９２４】
例えば、実施例６、７、１０、１２、１３、１４、１６及び２２から形成することができる代謝物Ｍ３
実施例Ｍ３
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸
【化１８１】
2020502201.tif 000248
【０９２５】
中間体Ｃ１２１を、標準水素圧下に室温で１時間にわたり、エタノール中１０％パラジウム／活性炭での水素化によって、標題化合物に変換した。
【０９２６】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．７８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７１４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０９２７】
例えば実施例８から形成することができる代謝物Ｍ４
代謝物Ｍ４の実施例：
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２−ヒドロキシアセトアミド
【化１８２】
2020502201.tif 000249
【０９２８】
この代謝物Ｍ４の製造及び特性決定については、ＷＯ２０１６／０９６６１０に、代謝物Ｍ９として記載されている。実施例８における本発明によるＡＤＣから形成されるこの代謝物は、輸送体基質特性及び細胞毒性に関して、他の代謝物Ｍ１、Ｍ２及びＭ３とは異なるプロファイルを示す。
【０９２９】
参考例：ＡＰＤＣ類及び小分子
第一に、比較のため、ＡＰＤＣ  Ｒ１ｅ及びＡＤＣ  Ｒ６ｋをそれぞれ、トリペプチド配列をレグマイン基質として用いて製造した。
【０９３０】
さらに、レグマイン介在開裂を調べるため、比較を目的として、小分子ＲＭ−Ａ及びＲＭ−Ｂのレグマイン開裂性プロドラッグを製造した。
【０９３１】
ＴＰＰ１０１５を有する参考例Ｒ１ｅ
【化１８３】
2020502201.tif 000250
【０９３２】
ＴＰＰ１０１５を有するＡＤＣの製造を、実施例１と同様にして行った。
【０９３３】
タンパク質濃度：１．７ｍｇ／ｍＬ
薬剤／ｍＡｂ比：３．３。
【０９３４】
ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、中間体Ｆ１０４を中間体Ｌ１０３とカップリングさせることで、中間体Ｓ１と同様にして、前駆体を製造した。
【０９３５】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０６８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０９３６】
ＴＰＰ７００７を有する参考例Ｒ６ｋ
【化１８４】
2020502201.tif 000251
【０９３７】
ＴＰＰ７００７を有するＡＤＣを、実施例６と同様にして製造した。
【０９３８】
タンパク質濃度：２．１１ｍｇ／ｍＬ
薬剤／ｍＡｂ比：５．３。
【０９３９】
最初に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アスパルテートにカップリングさせることで、化合物Ｃ１２１から出発して中間体Ｓ６と同様にして、前駆体を製造した。次に、トリフルオロエタノール中、５０℃で１時間にわたり６当量の塩化亜鉛とともに攪拌することで、Ｂｏｃ保護基を外した。次の段階で、得られた中間体を、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、ＤＭＦ中、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニンにカップリングさせた。次に、トリフルオロエタノール中、５０℃で２時間にわたり６当量の塩化亜鉛とともに攪拌することで、Ｂｏｃ保護基を再度外した。次の段階で、標準水素圧下に室温でエタノール中、１０％パラジウム／活性炭で水素化することで、ベンジルエステルを除去し、脱保護した中間体を、ＤＭＦ中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオンと反応させることで、標題化合物に変換した。
【０９４０】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１８１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０９４１】
ＲＭ−Ａ（モデル化合物Ａ）
Ｎ−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニル−Ｎ１−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−（メチルアミノ）−１−オキソブタン−２−イル］−Ｌ−アスパルタミド
【化１８５】
2020502201.tif 000252
【０９４２】
最初に、トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−メチルブタンアミド（１：１）を、ＷＯ２０１５０９６９８２Ａ１（実施例９９）に記載の方法に従って製造した。次に、この中間体を用いて、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中、中間体Ｌ１０３にカップリングさせることで標題化合物を製造した。
【０９４３】
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９０２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０９４４】
ＲＭ−Ｂ（モデル化合物Ｂ）
Ｎ１−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−（メチルアミノ）−１−オキソブタン−２−イル］−Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−アスパルタミド
【化１８６】
2020502201.tif 000253
【０９４５】
最初に、トリフルオロ酢酸（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−メチルブタンアミド（１：１）を、ＷＯ２０１５０９６９８２Ａ１（実施例９９）に記載の方法に従って製造した。次に、この中間体を用いて、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中、中間体Ｌ１３６にカップリングさせることで標題化合物を製造した。
【０９４６】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝１．５７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７６０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０９４７】
ＲＭ−Ｃ（モデル化合物Ｃ）
Ｎ１−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−（メチルアミノ）−１−オキソブタン−２−イル］−Ｎ２−（ピリジン−４−イルアセチル）−Ｌ−グルタミド
【化１８７】
2020502201.tif 000254
【０９４８】
最初に、トリフルオロ酢酸（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−メチルブタンアミド（１：１）を、ＷＯ２０１５０９６９８２Ａ１（実施例９９）に記載の方法に従って製造した。次に、この中間体を用いて、ＨＡＴＵ及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中、中間体Ｌ１３７にカップリングさせることで標題化合物を製造した。
【０９４９】
ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝１．５６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７７４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０９５０】
Ｃ：生物学的効力の評価
本発明による化合物の生理活性を、下記の評価で示すことができる。
【０９５１】
Ｃ−１ａ：ＡＤＣの細胞毒性効果の測定
ＡＤＣの細胞毒性効果の分析を、各種細胞系を用いて行った。
【０９５２】
ＮＣＩ−Ｈ２９２：ヒト粘液性類表皮肺癌細胞、ＡＴＣＣ−ＣＲＬ−１８４８、標準培地：ＲＰＭＩ１６４０（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃ＦＧ１２１５、安定グルタミン）＋１０％ＦＣＳ（Ｓｉｇｍａ；＃Ｆ２４４２）、ＴＷＥＡＫＲ−陽性；ＥＧＦＲ−陽性。
【０９５３】
ＢｘＰＣ３：ヒト膵臓癌細胞、ＡＴＣＣ−ＣＲＬ−１６８７、標準培地：ＲＰＭＩ１６４０（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃ＦＧ１２１５、安定グルタミン）＋１０％ＦＣＳ（Ｓｉｇｍａ；＃Ｆ２４４２）、ＴＷＥＡＫＲ−陽性。
【０９５４】
ＬｏＶｏヒト結腸直腸がん細胞、ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ−２２９、ＭＴＴアッセイ用に培養：標準培地：カイン（Ｋａｉｇｈｎ′ｓ）＋Ｌ−グルタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ２１１２７）＋１０％熱失活ＦＣＳ（Ｇｉｂｃｏから、Ｎｏ．１０５００−０６４）。ＣＴＧアッセイ用の培養：ＲＰＭＩ１６４０（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃ＦＧ１２１５、安定グルタミン）＋１０％ＦＣＳ（Ｓｉｇｍａ＃Ｆ２４４２）。ＴＷＥＡＫＲ−陽性。
【０９５５】
ＫＰＬ４：ヒト乳がん細胞系、Ｂａｙｅｒ  Ｐｈａｒｍａ  ＡＧ（ＤＳＭＺで２０１２年７月１９日に同一性をチェック及び確認）、標準培地：ＲＰＭＩ１６４０（Ｇｉｂｃｏから；＃２１８７５−０５９、安定化Ｌ−グルタミン）＋１０％熱失活ＦＣＳ（Ｇｉｂｃｏから、Ｎｏ．１０５００−０６４）；ＨＥＲ２−陽性。
【０９５６】
ＳＫ−ＨＥＰ−１：ヒト肝臓がん細胞系、ＡＴＣＣ番号ＨＴＢ−５２、標準培地：アール塩＋Ｇｌｕｔａｍａｘ  Ｉ含有ＭＥＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ４１０９０）＋１０％熱失活ＦＣＳ（Ｇｉｂｃｏから、Ｎｏ．１０５００−０６４）；ＥＧＦＲ−陽性、ＴＷＥＡＫＲ−陽性。
【０９５７】
ＫＵ−１９−１９：ヒト膀胱癌細胞、ＤＭＳＺ、標準培地：ＲＰＭＩ  １６４０（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃ＦＧ１２１５、安定化グルタミン）＋１０％ＦＣＳ（Ｓｉｇｍａ；＃Ｆ２４４２）、ＴＷＥＡＫＲ−陽性。
【０９５８】
Ｕ２５１：ヒト神経膠芽腫細胞、標準培地：ＲＰＭＩ  １６４０（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃ＦＧ１２１５、安定化グルタミン）＋１０％ＦＣＳ（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃Ｓ０４１５）；Ｂ７Ｈ３−陽性。
【０９５９】
対象の細胞系についてＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）、又はＬｅｉｂｎｉｚ−Ｉｎｓｔｉｔｕｔ  ＤＳＭＺ−Ｄｅｕｔｓｃｈｅ  Ｓａｍｍｌｕｎｇ  ｖｏｎ  Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ  ｕｎｄ  Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ  ＧｍｂＨ（ＤＳＭＺ）によって記載された標準的方法によって、細胞を培養した。
【０９６０】
ＣＴＧアッセイ
Ｃ−１ａ下に挙げた増殖培地を用い、標準的な方法によって細胞を培養した。試験は、トリプシン（０．０５％）及びＥＤＴＡ（０．０２％）のＰＢＳ中溶液（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ  ＡＧ  ＃Ｌ２１４３）による細胞の分離、ペレット化、培地での再懸濁、カウンティング及び白色底の９６ウェル培養プレート（Ｃｏｓｔａｒ＃３６１０）への細胞播種（７５μＬ／ウェルで、次の細胞数はウェル当たりである。ＮＣＩ−Ｈ２９２：２５００細胞／ウェル、ＢｘＰＣ３：２５００細胞／ウェル、ＬｏＶｏ３０００細胞／ウェル）によって行い、インキュベータにおいて３７℃及び５％二酸化炭素でインキュベートした。２４時間後、培地２５μＬ中の抗体薬物複合体（４倍濃縮）を、細胞に加えて、その細胞での最終抗体薬物複合体濃度が３×１０−７Ｍから３×１０−１１Ｍを得た（３連）。次に、細胞をインキュベータにおいて３７℃及び５％二酸化炭素でインキュベートした。並行したプレートで、薬物処理開始時（第０日）での細胞活性を、Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏｗ（ＣＴＧ）発光細胞生存率アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ＃Ｇ７５７３及び＃Ｇ７５７１）を用いて求めた。このために、基質１００μＬを各細胞バッチに加え、次に、プレートをアルミニウムホイルで覆い、プレート振盪器上１８０ｒｐｍで２分間振盪し、実験台上に８分間置き、照度計（Ｖｉｃｔｏｒ  Ｘ２、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を用いて測定した。その基質により、生存細胞におけるＡＴＰ含有量を検出し、その際に、発光シグナルが発生し、その強度は細胞の生存率に正比例する。抗体薬物複合体とともに７２時間インキュベートした後、これらの細胞の生存率も、上記の方法に従って、Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏｗ発光細胞生存率アッセイを用いて求めた。その測定データから、ＤＲＣ（用量応答曲線）解析スプレッドシート及び４パラメータ適合を用い、第０日との比較で増殖阻害のＩＣ５０を計算した。ＤＲＣ解析スプレッドシートは、ＩＤＢＳ  Ｅ−ＷｏｒｋＢｏｏｋ  Ｓｕｉｔｅプラットフォーム（ＩＤＢＳ：ＩＤ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ  Ｌｔｄ．，  Ｇｕｉｌｄｆｏｒｄ，  ＵＫ）に基づいてＢａｙｅｒ  Ｐｈａｒｍａ  ＡＧ及びＢａｙｅｒ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓが開発したｂｉｏｂｏｏｋスプレッドシートである。
【０９６１】
ＭＴＴアッセイ
Ｃ−１ａ下に特定された増殖培地を用いる標準法によって、細胞を培養した。本試験は、ＡｃｃｕｔａｓｅのＰＢＳ中溶液（ＢｉｏｃｈｒｏｍＡＧ＃Ｌ２１４３）による細胞の分離、ペレット化、培地での再懸濁、カウンティング及び白色底の９６ウェル培養プレート（Ｃｏｓｔａｒ＃３６１０から）への細胞播種（ＮＣＩ  Ｈ２９２：２５００細胞／ウェル；ＳＫ−ＨＥＰ−１：１０００細胞／ウェル；ＫＰＬ４：１２００細胞／ウェル、総体積１００μＬ中）によって行う。次に、細胞を、インキュベータにおいて３７℃及び５％二酸化炭素でインキュベートした。４８時間後、培地を交換した。次に、濃度１０−５Ｍから１０−１３Ｍでの培地１０μＬ中の抗体薬物複合体をピペットで細胞に加え（三連で）、アッセイ液をインキュベータにおいて３７℃及び５％二酸化炭素でインキュベートした。９６時間後、ＭＴＴアッセイ（ＡＴＣＣ、Ｍａｎａｓｓａｓ，  Ｖｉｒｇｉｎｉａ，  ＵＳＡ、カタログ番号３０−１０１０Ｋ）を用いて細胞増殖を検出した。このために、ＭＴＴ試薬を細胞とともに４時間インキュベートし、次に界面活性剤を加えることで、細胞を終夜溶解させた。生成した色素を、５７０ｎｍで検出した（Ｉｎｆｉｎｉｔｅ  Ｍ１０００ｐｒｏ，  Ｔｅｃａｎ）。測定データを用いて、ＤＲＣ（用量応答曲線）を使用して増殖阻害のＩＣ５０を計算した。試験物質で処理しなかったが、それ以外は同様に処理した細胞の増殖を、１００％数値と定義した。
【０９６２】
下記の表に、これらのアッセイからの代表的作業例のＩＣ５０値を挙げてある。
【０９６３】
表１ａ
【表２６】
2020502201.tif 000255
2020502201.tif 000256
2020502201.tif 000257
2020502201.tif 000258
【０９６４】
下記の表１ｂに、これらのアッセイからの参考例のＩＣ５０値を挙げてある。
【０９６５】
表１ｂ
【表２７】
2020502201.tif 000259
【０９６６】
報告の活性データは、本実験セクションに記載の作業例に関するものであり、薬物／ｍＡＢ比が示されている。それらの値は、異なる薬物／ｍＡＢ比に関して逸脱している可能性がある。ＩＣ５０値は、いくつかの独立の実験又は個々の値の平均である。抗体薬物複合体の作用は、個々のリンカー及び担毒体を含む個々のアイソタイプ対照に対して選択的であった。
【０９６７】
Ｃ−１ｂ：選択された実施例から形成された活性代謝物によるキネシンスピンドルタンパク質ＫＳＰ／Ｅｇ５の阻害の測定
ヒトキネシンスピンドルタンパク質ＫＳＰ／Ｅｇ５（ｔｅｂｕ−ｂｉｏ／Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ  Ｉｎｃ,  Ｎｏ．０２７ＥＧ０１−ＸＬ）のモータードメインを、１５ｍＭ  ＰＩＰＥＳ、ｐＨ６．８（５ｍＭ  ＭｇＣｌ２及び１０ｍＭ  ＤＴＴ、Ｓｉｇｍａ）中室温で５分間、５０μｇ／ｍＬタキソール（Ｓｉｇｍａ  Ｎｏ．Ｔ７１９１−５ＭＧ）で安定化した微小管（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｉ）（ウシ又はブタ、ｔｅｂｕ−ｂｉｏ／Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ  Ｉｎｃ）とともに濃度１０ｎＭでインキュベートした。調製したばかりの混合物を３８４ＭＴＰ（Ｃｏｒｎｉｎｇから）に小分けした。濃度１．０×１０−６Ｍから１．０×１０−１３Ｍの調べる阻害剤及びＡＴＰ（最終濃度５００μＭ、Ｓｉｇｍａ）を加えた。インキュベーションは室温で２時間であった。マラカイトグリーン（Ｂｉｏｍｏｌ）を用いて形成された無機ホスフェートを検出することで、ＡＴＰａｓｅ活性を検出した。試薬を加えた後、アッセイ液を室温で５０分間インキュベートしてから、波長６２０ｎｍでの吸収を検出した。使用した陽性対照は、モナストロール（Ｓｉｇｍａ、Ｍ８５１５−１ｍｇ）及びイスピネシブ（ＡｄｏｏＱ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ａ１０４８６）であった。用量−活性曲線の個々のデータは、８倍測定である。ＩＣ５０値は、二つの独立の実験の平均である。１００％対照は、阻害剤で処理されなかったサンプルであった。
【０９６８】
下記の表２に、記載のアッセイからの代表的作業例から形成された活性代謝物のＩＣ５０値を列記し、相当する細胞毒性データをまとめている（ＭＴＴアッセイ）。
【０９６９】
表２
【表２８】
2020502201.tif 000260
【０９７０】
報告された活性データは、本実験セクションに記載の作業例に関するものである。
【０９７１】
Ｃ−１ｃ：酵素アッセイ及び安定性試験
最初に、小分子プロドラッグであるＲＭ−Ａ及びＲＭ−Ｂの開裂を、各種条件下で調べた。
【化１８８】
2020502201.tif 000261
【０９７２】
ａ：レグマインアッセイ
組み換えヒト酵素でレグマインアッセイを行った。レグマイン酵素溶液（カタログ番号２１９９−ＣＹ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を、５０ｍＭ酢酸Ｎａ緩衝液／１００ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ４．０で希釈して所望の濃度とし、３７℃で２時間前インキュベートした。次に、ｒｈレグマインを５０ｍＭ  ＭＥＳ緩衝液、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ５．０で１ｎｇ／μＬの最終濃度に調節した。試験対象のあらゆるレグマイン開裂性プロドラッグについて、ミクロ反応容器（０．５ｍＬ、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆから）で混合物を作った。そのために、基質溶液を、５０ｍＭ  ＭＥＳ緩衝液、２５０ｍＭＮａＣｌ、ｐＨ５．０で所望の濃度（２倍濃度）に調節した。酵素反応の速度論的測定のため、最初にレグマイン溶液２５０μＬを入れ、基質溶液２５０μＬ（最終濃度：単一濃度）を加えることで酵素反応を開始した。異なる時点で、サンプル５０μＬを取った。このサンプルを直ちに氷冷メタノール１００μＬと混合して、酵素反応を停止してから、−２０℃で冷凍した。サンプリングに選択した時間点は、０．５時間後、１時間後、３時間後及び２４時間後とした。次に、ＲＰ−ＨＰＬＣ分析により、そしてＬＣ−ＭＳ分析によってサンプルを分析した。放出された担毒体の測定によって、酵素反応の半減期ｔ１／２の測定が可能となった（図１）。
【０９７３】
モデル化合物Ａ（ＲＭ−Ａ）は、レグマインアッセイの上記条件下で開裂して標的化合物となり、半減期は０．２時間であった。
【０９７４】
モデル化合物Ｂ（ＲＭ−Ｂ）は、レグマインアッセイの上記条件下で開裂して標的化合物となり、半減期は約１０時間であった。
【０９７５】
モデル化合物Ｃ（ＲＭ−Ｃ）は、レグマインアッセイの上記条件下では、開裂して標的化合物にはならなかった。
【０９７６】
ｂ：ラット血漿における安定性測定のためのアッセイ
化合物Ａ及びＢの安定性を調べるため、各場合で１．５ｍＬエッペンドルフ管中のラット血漿１ｍＬを、エッペンドルフ振盪器上で３７℃に平衡化した。化合物Ａ及び化合物Ｂの濃度が１００μｇ／ｍＬである原液（９アセトニトリル／１ＤＭＳＯ）を調製した。原液の各場合１０μＬずつを平衡化ラット血漿１ｍＬにピペットで入れて、濃度１μｇ／ｍＬとした。
【０９７７】
サンプルを、２４時間にわたり４５０ｒｐｍ及び３７℃に維持した。０時間、０．２５時間、０．５時間、１時間、２時間、４時間、６時間及び２４時間の各サンプリング時点で、５０μＬを採取し、メタノール１５０μＬにピペットで入れた。最初に入っていたメタノール中に内部標準が０．０５μｇ／ｍＬの濃度で含まれていた。短時間の渦攪拌後、１０ｍＭ酢酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ６．８）３００μＬを加え、１８８１ｇで１０分間遠心した。次に、ＲＰ−ＨＰＬＣ分析及びＬＣ−ＭＳ分析によってサンプルの分析を行った。
【０９７８】
ｃ：ラット肝臓リソソームでの安定性測定のためのアッセイ
化合物ＲＭ−Ａ及びＲＭ−Ｂのリソソーム安定性を求めるため、リソソーム酵素を、ラット肝臓細胞から単離した。化合物Ａ及びＢをそれぞれ、このリソソーム抽出液に加えて、リソソーム条件下での安定性を調べた。タンパク質分解酵素レグマインは、ラット肝臓リソソームにおいて、あっても非常に少量でのみ発現される（Ｃｈｅｎ，  Ｊ−Ｍ．  ｅｔ  ａｌ  １９９７）。リソソーム酵素の酵素活性をモニタリングするため、カテプシン特異的基質を加えた。
【０９７９】
最初に、新鮮なラット肝臓を摘出し、秤量し、均質化培地中で氷上に直接乗せた（０．２５Ｍショ糖、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７）。肝臓を粉砕し、培地の変更を行った。ラット肝臓を、Ｐｏｔｔｅｒ（Ｂ．  Ｂｒａｕｎ）において７５０ｒｐｍで、４倍量のラット肝臓重量で均質化した。ホモジネートを１０００ｇで１０分間遠心し、上清を濾過した。次の段階で、超遠心機を用いて、「軽ミトコンドリア画分」（ＬＭＦ）を、２６５００ｇで２０分間かけて上清から遠心した。ミトコンドリアは別として、ペレット中にはリソソームも存在する。上清を廃棄し、ペレットを、０．８ｍＬ／ｇの均質化培地で再懸濁させた。
【０９８０】
リソソーム画分をＬＭＦの他の細胞構成要素から分離するため、６種類のＯｐｔｉｐｒｅｐ密度勾配を、Ｏｐｔｉｐｒｅｐ緩衝液（１００ｍＭ  ＭＯＰＳ、２０ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．５％ＥｔＯＨ、ｐＨ７．６）中８％、１２％、１６％、１９％、２２．５％及び２７％のショ糖含有量で準備した。ショ糖は、特定のパーセントの２．３Ｍ原液から加えた。単離ＬＭＦ  ２．５ｍＬを、ショ糖含有量１９％の密度段階にさらに加えた。次に、密度段階を、１０ｍＬ遠心管中で、あるものを別のものの頂部に乗せて層化し、４８５００ｇで１７時間遠心した。画分１〜８が勾配の上側５．６ｍＬ中にあり、廃棄した。画分９及び１０は、その下の１．６ｍＬにあり、その勾配から取り出し、氷上で５分間にわたり、溶解緩衝液（２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ１００、ｐＨ５）１．６ｍＬで溶解させた。リソソームは、画分９及び１０中に存在している。溶解をモニタリングするため、溶解リソソーム画分のタンパク質含有量を、ＢＣＡアッセイ（Ｐｉｅｒｃｅ  ＢＣＡタンパク質アッセイキット）を用いてモニタリングした。
【０９８１】
化合物ＲＭ−Ａ及びＲＭ−Ｂのリソソーム安定性を調べるため、１００μｇ／ｍＬの原液（９アセトニトリル／１ＤＭＳＯ）６μＬを、９０ｍＭクエン酸緩衝液２９０μＬ及びリソソーム抽出液３００μＬに加え、エッペンドルフ振盪器上で３７℃でインキュベートした。０時間、１時間、２時間、６時間、２４時間及び４８時間後に、インキュベーション溶液から各回５０μＬを取り、ＭｅＯＨ  １５０μＬにピペットで注入した。内部標準を、０．０５μｇ／ｍＬで初期充填液に含ませた。ＲＰ−ＨＰＬＣ  ＬＣＭＳ分析のため、サンプルを１０ｍＭ酢酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ６．８）３００μＬで希釈し、分析した。
【０９８２】
リソソーム安定性アッセイの条件下では、化合物Ａ（参考例ＲＭ−Ａ）は、２４時間以内に約６時間の半減期で約８０％まで開裂したが、化合物Ｂ（参考例ＲＭ−Ｂ）は、同じ期間で、１３％までしか開裂しない。従って、ＲＭ−Ｂは、リソソーム安定性アッセイにおいてＲＭ−Ａより顕著に安定であり、それは、健常肝臓での活性代謝物の形成程度が低いと仮定することができることを意味する。
【０９８３】
Ｃ−２：取り込みアッセイ
取り込みは、抗体薬物複合体（ＡＤＣ）を介した抗原発現性癌細胞における細胞毒性ペイロードの特異的かつ効率的提供を可能とする重要なプロセスである。このプロセスは、特異的抗体及びアイソタイプ対照抗体の蛍光標識を介してモニタリングされる。最初に、蛍光色素を抗体のリジンに結合させた。結合は、ｐＨ８．３の２倍モル過剰のＣｙｐＨｅｒ  ５ＥモノＮＨＳエステル（バッチ３５７３９２,  ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて行った。カップリング後、反応混合物をゲルクロマトグラフィー（Ｚｅｂａ  Ｓｐｉｎ  Ｄｅｓａｌｔｉｎｇ  Ｃｏｌｕｍｎｓ、４０Ｋ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｎｏ．８７７６８；溶離緩衝液：ダルベッコＰＢＳ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｎｏ．Ｄ８５３７）によって精製して、過剰の色素を除去し、ｐＨを調節した。得られたタンパク質溶液を、ＶＩＶＡＳＰＩＮ５００カラム（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  ｓｔｅｄｉｍ  ｂｉｏｔｅｃ）を用いて濃縮する。抗体の色素負荷量を、分光光度分析（ＮａｎｏＤｒｏｐ）及び次に計算：（Ｄ：Ｐ＝Ａｄｙｅεｐｒｏｔｅｉｎ：（Ａ２８０−０．１６Ａｄｙｅ）εｄｙｅ）によって求めた。
【０９８４】
ここで調べた抗体及びアイソタイプ対照の色素負荷量は、同等の次数のものであった。細胞結合アッセイにおいて、前記カップリングが抗体のアフィニティにおける変化をもたらさないことが確認された。
【０９８５】
その標識抗体を、取り込みアッセイに用いた。処置開始前に、細胞（２×１０４／ウェル）を、９６ウェルＭＴＰ（肉厚、黒色、透明底Ｎｏ４３０８７７６、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓから）における培地１００μＬに播いた。３７℃／５％ＣＯ２で１８時間インキュベートした後、培地を代え、標識抗体を各種濃度で加えた（１０、５、２．５、１、０．１μｇ／ｍＬ）。標識されたアイソタイプ対照（陰性対照）について、同じ処理プロトコールを用いた。選択されたインキュベーション時間は、０時間、０．２５時間、０．５時間、１時間、１．５時間、２時間、３時間、６時間及び２４時間であった。ＩｎＣｅｌｌＡｎａｌｙｚｅｒ  １０００（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅから）を用いて、蛍光測定を行った。次に、パラメータである顆粒カウント／細胞及び総顆粒強度／細胞の測定を介して、動力学的評価を行った。
【０９８６】
受容体への結合後、Ｂ７Ｈ３抗体について、それの取り込み能力を調べた。このために、異なる受容体発現レベルを有する細胞を選択した。標的介在特異的取り込みが、本発明の関連で記載の抗体で観察されたが、アイソタイプ対照は取り込みを全く示さなかった。
【０９８７】
Ｃ−３：細胞透過性を求めるためのイン・ビトロ試験
Ｃａｃｏ−２細胞を用いるフラックスアッセイでのイン・ビトロ試験によって、基質の細胞透過性を調べることができる［Ｍ．  Ｄ．  Ｔｒｏｕｔｍａｎ  ａｎｄ  Ｄ．  Ｒ．  Ｔｈａｋｋｅｒ,  Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．  ２０  （８）,  １２１０−１２２４（２００３）］。これに関して、２４ウェルフィルタープレート上で、細胞１５から１６日間培養した。透過を求めるため、個々の試験物質を、ＨＥＰＥＳ緩衝液溶液で、頂部で（ａｐｉｃａｌｌｙ）（Ａ）又は基底部で（ｂａｓａｌｌｙ）（Ｂ）細胞に付与し、２時間インキュベートした。０時間後及び２時間後に、シス及びトランスコンパートメントからサンプルを取った。それらのサンプルを、逆相カラムを用いるＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  １２００、Ｂｏｅｂｌｉｎｇｅｎ,  Ｇｅｒｍａｎｙ）によって分離した。ＨＰＬＣシステムを、Ｔｕｒｂｏ  Ｉｏｎ  Ｓｐｒａｙ  Ｉｎｔｅｒｆａｃｅを介して三連四重極質量分析計ＡＰＩ４０００（ＡＢ  ＳＣＩＥＸ  Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ  ＧＭＢＨ,  Ｄａｒｍｓｔａｄｔ,  Ｇｅｒｍａｎｙ）に連結した。Ｓｃｈｗａｂらが公開した式を用いて計算されたＰａｐｐ値に基づいて透過性を評価した［Ｄ．  Ｓｃｈｗａｂ  ｅｔ  ａｌ．,  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ４６,  １７１６−１７２５（２００３）］。Ｐａｐｐ（Ｂ−Ａ）／Ｐａｐｐ（Ａ−Ｂ）の比（排出比）が＞２又は＜０．５であった場合に、物質は能動的に輸送されると分類された。
【０９８８】
細胞内で放出される担毒体について非常に重要なものは、ＢからＡへの透過性［Ｐａｐｐ（Ｂ−Ａ）］及びＰａｐｐ（Ｂ−Ａ）：Ｐａｐｐ（Ａ−Ｂ）の比（排出比）であり、この浸透率が低いほど、Ｃａｃｏ−２細胞の単層を通る物質の能動輸送及び受動輸送が遅くなる。さらに、排出比が能動輸送を示さない場合、その物質は、細胞内放出後に、細胞内でより長く留まることができる。従って、生化学的標的（この場合、キネシンスピンドルタンパク質、ＫＳＰ／Ｅｇ５）との相互作用に使える時間も長くなる。
【０９８９】
下記の表４には、このアッセイからの代表的作業例についての浸透率データを示してある。
【０９９０】
表４
【表２９】
2020502201.tif 000262
【０９９１】
各種実施例からの本発明によるＡＤＣから形成された代謝物Ｍ１、Ｍ２及びＭ３は、細胞からの非常に低レベルの輸送及び低い流出比の両方を示す。例として、代謝物Ｍ４は、異なるプロファイルを示す。
【０９９２】
Ｃ−４：Ｐ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）についての基質特性を求めるためのイン・ビトロ試験
多くの腫瘍細胞が、薬物のための輸送タンパク質を発現し、これは非常に多くの場合、細胞増殖抑制剤に対する抵抗性の発達を伴う。従って、そのような輸送タンパク質、例えばＰ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）又はＢＣＲＰの基質ではない物質は、例えば、改善された活性プロファイルを示し得ると考えられる。
【０９９３】
Ｐ−ｇｐ（ＡＢＣＢ１）用の物質の基質特性を、Ｐ−ｇｐを過剰発現するＬＬＣ−ＰＫ１細胞（Ｌ−ＭＤＲ１細胞）を用いるフラックスアッセイによって求めた［Ａ．Ｈ．  Ｓｃｈｉｎｋｅｌ  ｅｔ  ａｌ．,  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ９６,  １６９８−１７０５  （１９９５）］。このために、ＬＬＣ−ＰＫ１細胞又はＬ−ＭＤＲ１細胞を、３から４日間、９６ウェルフィルタープレートで培養した。透過性を測定するため、個々の試験物質を、単独で又は阻害剤（例えば、イベルメクチン又はベラパミル）の存在下に、ＨＥＰＥＳ緩衝液溶液で、頂部で（ａｐｉｃａｌｌｙ）（Ａ）又は基底部で（ｂａｓａｌｌｙ）（Ｂ）細胞に付与し、２時間インキュベートした。０時間後及び２時間後に、シス及びトランスコンパートメントからサンプルを取った。それらのサンプルを、逆相カラムを用いるＨＰＬＣによって分離した。ＨＰＬＣシステムを、Ｔｕｒｂｏ  Ｉｏｎ  Ｓｐｒａｙ  Ｉｎｔｅｒｆａｃｅを介してＡＰＩ４０００三連四重極質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  Ａｐｐｌｅｒａ,  Ｄａｒｍｓｔａｄｔ,  Ｇｅｒｍａｎｙ）に連結した。Ｓｃｈｗａｂらが公開した式を用いて計算されたＰａｐｐ値に基づいて透過性を評価した［Ｄ．  Ｓｃｈｗａｂ  ｅｔ  ａｌ．,  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ４６,  １７１６−１７２５（２００３）］。Ｐａｐｐ（Ｂ−Ａ）／Ｐａｐｐ（Ａ−Ｂ）の排出比が＞２であった場合に、物質はＰ−ｇｐ基質であると分類された。
【０９９４】
Ｐ−ｇｐ基質特性の評価のためのさらなる基準として、Ｌ−ＭＤＲ１細胞及びＬＬＣ−ＰＫ１細胞における排出比又は阻害剤存在下若しくは非存在下での排出比を比較することができる。これらの値が２より大きい係数だけ異なる場合、対象の物質はＰ−ｇｐ基質である。
【０９９５】
Ｃ−５：薬物動態
Ｃ５ａ：イン・ビトロでの取り込み後のＡＤＣ代謝物の確認
方法の説明：
免疫複合体を用いる取り込み試験を行って、細胞内的に形成された代謝物を分析する。このために、ヒト肺腫瘍細胞ＮＣＩ  Ｈ２９２（３×１０５／ウェル）を６ウェルプレートに播き、終夜インキュベートする（３７℃、５％ＣＯ２）。その細胞を１０μｇ／ｍＬ（６６ｎＭ）の被験ＡＤＣで処理する。取り込みを、３７℃及び５％ＣＯ２で行った。各種時間点で（０、４、２４、４８、７２時間）、さらなる分析用に細胞サンプルと取る。最初に、上清（約５ｍＬ）を回収し、遠心（２分、室温、１０００ｒｐｍ  Ｈｅｒａｅｕｓ  Ｖａｒｉｏｆｕｇｅ  ３．０Ｒ）後に、−８０℃で保存する。細胞をＰＢＳで洗浄し、Ａｃｃｕｔａｓｅを用いて分離し、細胞数を測定する。さらに洗浄した後、所定数の細胞（２×１０５）を溶解緩衝液（哺乳動物細胞溶解キット（Ｓｉｇｍａ  ＭＣＬ１）１００ｍＬで処理し、Ｐｒｏｔｅｉｎ  ＬｏＢｉｎｄ管（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆカタログ番号００３０１０８．１１６）中、連続振盪しながら（Ｔｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ、１５分、４℃、６５０ｒｐｍ）インキュベートする。インキュベーション後、溶解物を遠心し（１０分、４℃、１２０００ｇ、ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  ５４１５Ｒ）、上清を回収する。得られた上清を−８０℃で保存する。そして、全てのサンプルを下記のように分析する。
【０９９６】
培養上清又は細胞溶解物中の化合物の測定を、メタノール又はアセトニトリルでタンパク質を沈殿させた後に、三連四重極質量分析計（ＭＳ）に連結された高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって行う。
【０９９７】
培養上清／細胞溶解物５０μＬの後処理のため、沈殿試薬（メタノール）１５０μＬを加え、混合物を１０秒間振盪する。沈殿試薬は、好適な濃度で（通常は、２０〜１００μｇ／Ｌの範囲）内部標準（ＩＳＴＤ）を含んでいる。１８８１ｇで１０分間遠心した後、上清をオートサンプラーバイアルに移し、溶離液に適した緩衝液３００μＬを加え、再度振盪し、１８８１ｇで１０分間遠心する。
【０９９８】
最後に、細胞溶解物及び上清サンプルを、ＡＢ  ＳＣＩＥＸ  Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ  ＧｍｂＨからのＨＰＬＣ連結ＡＰＩ４５００三連四重極質量分析計を用いて分析した。
【０９９９】
較正のため、ブランク溶解物又はブランク上清を、適切な濃縮液と混合する（０．１〜１０００μｇ／Ｌ）。検出限界（ＬＬＯＱ）は、約０．２μｇ／Ｌである。
【１０００】
妥当性を調べるための品質対照は、４及び４０μｇ／Ｌを含む。
【１００１】
Ｃ５ｂ：イン・ビボでのＡＤＣ代謝物の確認
異種移植マウスで１０ｍｇ／ｋｇの本発明による各種複合体を静脈注射した後、これら複合体の投与から２４時間後、抗体及び可能な代謝物の血漿、腫瘍、肝臓及び腎臓濃度を測定することができる。Ｃ−６下に、異種移植モデルに関して、その方法のより具体的な説明がある。ここで扱うものはいずれも、本発明による複合体の代謝物濃縮液である。言及の基質における代謝物の測定によってさらに、腫瘍での負荷量と比較した、血漿、腎臓及び肝臓での代謝物負荷量に関するデータが得られる。
【１００２】
可能な代謝物の定量のための分析
血漿、腫瘍、肝臓及び腎臓中の化合物の分析を、三連四重極質量分析計（ＭＳ）に連結された高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により、通常はメタノールでタンパク質を沈殿させた後に行う。
【１００３】
血漿５０μＬの後処理のため、沈殿試薬（メタノール）１５０μＬを加え、混合物を１０秒間振盪する。沈殿試薬は、好適な濃度で（通常は、２０〜１００μｇ／Ｌの範囲）内部標準（ＩＳＴＤ）を含んでいる。１８８１ｇで１０分間遠心した後、上清をオートサンプラーバイアルに移し、溶離液に適した緩衝液３００μＬを加え、再度振盪する。
【１００４】
腫瘍又は臓器材料の後処理においては、特定の材料を３〜２０倍量の抽出緩衝液と混合する。抽出緩衝液は、Ｔｉｓｓｕｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｉｅｒｃｅ，  Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，  ＩＬ）５０ｍＬ、Ｃｏｍｐｌｅｔｅ−Ｐｒｏｔｅａｓｅ−Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ−Ｃｏｃｋｔａｉｌ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ，  Ｍａｎｎｈｅｉｍ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）の２個のペレット及び最終濃度１ｍＭでのフェニルメチルスルホニルフルオリド（Ｓｉｇｍａ，  Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯ）を含む。組織の種類（硬：腫瘍；軟：肝臓、腎臓）に従って、Ｐｒｅｓｃｅｌｌｙｓ  ２４溶解及び均質化システム（Ｂｅｒｔｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）の溶解及び均質化プログラムを選択する（ｗｗｗ．ｐｒｅｓｃｅｌｌｙｓ．ｃｏｍ）。均質化サンプルを４℃で終夜静置した。ホモジネート（ｈｏｍｏｇｅｎｉｚａｔｅ）５０μＬをオートサンプラーバイアルに移し、ＩＳＴＤを含むメタノール１５０μＬを加え、１０秒間撹拌し、５分間静置する。酢酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ６．８）３００μＬを加え、短時間攪拌した後、サンプルを１８８１ｇで１０分間遠心する。
【１００５】
較正のため、血漿サンプルについての血漿及び組織サンプルについての相当するブランク基質を、濃度０．６〜１０００μｇ／Ｌで混合する。サンプルの種類又は組織の種類に従って、検出限界（ＬＯＱ）は１〜２０μｇ／Ｌである。
【１００６】
最後に、血漿及び基質サンプルを、ＡＢ  ＳＣＩＥＸ  Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ  ＧｍｂＨからのＨＰＬＣ連結ＡＰＩ６５００三連四重極質量分析計を用いて分析する。
【１００７】
妥当性を調べるための品質対照は、４、４０及び４００μｇ／Ｌを含む。
【１００８】
Ｃ−６：イン・ビボ活性試験
本発明による複合体の活性を、例えば異種移植モデルを用いて調べた。当業者であれば、本発明による化合物の活性を調べることができる先行技術の方法については熟知している（例えば、ＷＯ２００５／０８１７１１；Ｐｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．,  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ２００９  Ｍａｒ  １５；６９（６）：２３５８−６４参照）。このために、例えば、バインダーの標的分子を発現する腫瘍細胞系を、齧歯類（例えばマウス）に移植した。次に、本発明による複合体、アイソタイプ抗体対照複合体、対照抗体又は等張性生理食塩水を移植動物に投与した。投与は、１回又は複数回行った。数日のインキュベーション時間後、複合体処理動物及び対照群を比較することで、腫瘍の大きさを測定した。複合体処理動物は、相対的に小さい腫瘍サイズを示した。
【１００９】
Ｃ−６ａ．マウスでの増殖阻害／実験腫瘍の退行
抗体薬物複合体に対する抗原を発現するヒト腫瘍細胞を、免疫抑制マウス、例えばＮＭＲｉヌード又はＳＣＩＤマウスの側部に皮下接種する。１００から１０００万個の細胞を細胞培養液から除去し、遠心し、培地又は培地／マトリゲルに再懸濁させる。細胞懸濁液をマウスの皮下に注射する。
【１０１０】
数日以内に腫瘍が増殖する。腫瘍サイズ約４０ｍｍ２で腫瘍が確立された後に、処置を開始する。比較的大きい腫瘍に対する効果を調べるため、腫瘍サイズが５０から１００ｍｍ２でのみ処置を開始することも可能である。
【１０１１】
ＡＰＤＣ及びＡＤＣによる処置は、マウスの尾静脈に静脈（ｉ．ｖ．）経路で行う。ＡＤＣは５ｍＬ／ｋｇの体積で投与する。
【１０１２】
処置プロトコールは、抗体の薬物動態によって決まる。標準として、処置は、第４日ごとに連続３回行う。増殖が遅い腫瘍の場合は、週１回処置を選択しても良い。本発明による複合体を用いると、処置は、標準として２週間若しくは３週間にわたり週１回行う。迅速な評価のために、単回処置を行うプロトコールを用いることができる。しかしながら、治療をさらに続けることも可能であるか、後の時点で、３処置日の第２サイクルを行うことができる。
【１０１３】
標準として、処置群当たり動物８匹を用いる。活性物質を投与される群に加えて、同じプロトコールに従って、一つの群を緩衝液のみで対照群として処理する。
【１０１４】
実験中、腫瘍面積を、定期的にカリパスを用いて２次元（長さ／幅）で測定する。その腫瘍面積は、長さ×幅として求める。処置群の対照群との平均腫瘍面積の比を、Ｔ／Ｃ面積と記述する。
【１０１５】
処置終了後、実験の全ての群を同時に屠殺する場合、腫瘍を摘出し、秤量することができる。処置群の対照群との平均腫瘍重量の比を、Ｔ／Ｃ重量と記述する。
【１０１６】
Ｃ−６ｂ．各種異種移植モデルにおける抗ＴＷＥＡＫＲ  ＡＰＤＣ類の効力
腫瘍細胞（例えばＫＵ−１９−１９、ＮＣＩ−Ｈ２９２、ＳＣＣ４）を、雌ＮＭＲＩ−ヌード又はＮＯＤ．ＳＣＩＤマウス（Ｊａｎｖｉｅｒ）の脇腹に皮下接種する。腫瘍サイズ約４０ｍｍ２で、抗体−薬物複合体で静脈処理を行う。処理後、適宜に、腫瘍増殖のモニタリングを継続する。
【図１】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【図２−３】
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【図２−４】
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【図２−５】
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【図２−６】
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【図２−７】
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【図２−８】
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【図２−９】
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【図２−１０】
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【図２−１１】
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【図２−１２】
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【図２−１３】
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【図２−１４】
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【図２−１５】
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【図２−１６】
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【図２−１７】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図３−３】
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【図３−４】
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【図３−５】
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【図３−６】
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【図３−７】
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【図３−８】
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【図３−９】
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【図３−１０】
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【図３−１１】
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【図３−１２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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