(57)【要約】  本発明は、バイオマスの価値決定（ｖａｌｏｒｉｚａｔｉｏｎ）、特に藻類バイオマスの分野に関し、より具体的には、本発明は、真核または原核微細藻類（シアノバクテリア）の抽出物を含む、好ましくは６ヶ月を超える長い保存寿命を有し、酸性ｐＨを有し、好ましくは果汁からなる食品飲料を得る方法、ならびに、本方法によって得られる安定化された食品飲料に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類および／または真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された精製水溶性化合物を含み、周囲温度で好ましくは６ヶ月を超える長い保存寿命を有し、酸性ｐＨを有し、好ましくは果汁から製造される食品飲料を得る方法であって、少なくとも、
ａ．前記抽出物および／または水溶性化合物を、熱処理に敏感な飲料の成分と混合する１つの工程であって、前記混合物が７を超えるｐＨで維持される、工程と、
ｂ．熱処理に敏感ではない飲料の成分を、酸性ｐＨを有する１または複数の成分、好ましくは果汁と混合する１つの任意工程と、
ｃ．工程ａ）で得られた混合物を精密ろ過により滅菌する１つの工程と、
ｄ．工程ｂ）で得られた混合物または酸性ｐＨを有する成分、好ましくは果汁を、精密ろ過または熱処理により滅菌する１つの工程、
ｅ．工程ｃ）およびｄ）で得られた滅菌混合物を均質化する１つの工程であって、工程ｃ）で得られた前記滅菌混合物が、工程ｄ）で得られた前記滅菌混合物の前に添加されることが好ましい、工程と、
ｆ．真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類の抽出物および／または真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された精製水溶性化合物の抽出物を含む、長い保存寿命および酸性ｐＨを有する飲料を取得する１つの工程と、
を含む方法。
【請求項２】
前記飲料が果汁から製造され、前記酸性成分が天然果汁または濃縮果汁である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抽出された水溶性化合物が、タンパク質およびペプチド、水溶性ビタミン、好ましくはＢ群のビタミン、ミネラル、好ましくはナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウムおよび鉄、Ｃ−フィコシアニン、ならびにクロロフィルの中から選択され、好ましくはフィコシアニンである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記真核微細藻類が、クロレラ、ナンノクロロプシス、ドゥナリエラおよびユーグレナの中から選択され、前記シアノバクテリアが、スピルリナ（アルスロスピラ・プラテンシスまたはスピルリナ・マキシマ）およびＡＦＡ（アファニゾメノン・フロス・アクエ）の中から選択され、好ましくはスピルリナである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記得られた飲料を無菌条件下で充填する追加工程を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類の抽出物および／または真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された精製水溶性化合物の抽出物が、前記飲料の０．０１〜１重量％、好ましくは前記飲料の０．０１〜０．５重量％、好ましくは前記飲料の０．０１〜０．０２重量％を占める、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記得られた飲料を暗所で２４時間〜７日間保存する工程ｇ）を更に含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類の抽出物および／または真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された精製水溶性化合物の抽出物を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法によって得られるような、周囲温度で好ましくは６ヶ月を超える長い保存寿命を有し、酸性ｐＨを有し、好ましくは果汁から製造される食品飲料。
【請求項９】
非発泡性である、請求項８に記載の飲料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バイオマスの価値決定（ｖａｌｏｒｉｓａｔｉｏｎ）、特に藻類バイオマスの分野に関し、より具体的には、本発明は、真核または原核（シアノバクテリア）微細藻類の抽出物を含む、好ましくは６ヶ月を超える長い保存寿命を有し、酸性ｐＨを有し、好ましくは果汁からなる食品飲料を得る方法、および、本方法によって得られる安定化された食品飲料に関する。
【背景技術】
【０００２】
世界的な食料需要の増加に対処するため、多くの製造業者は微細藻類などの代替資源に頼っている。これらの微生物は生物多様性に優れており、ユニークなバイオマス源である。その生産は、面積効率が非常に高いため、耕地で栽培された園芸植物および穀物の生産とは異なる。
【０００３】
微細藻類は、本格的な（ｆｕｌｌｙ−ｆｌｅｄｇｅｄ）食品材料であり、過去３０年間成長してきた。人間および動物の栄養には、２つの価値決定アプローチがある。１つ目は微細藻類全体の消費に関するものであり、２つ目は微細藻類由来の生物活性分子の抽出、形質転換およびパッケージングに関するものである。フランスでは、形質転換せずに人間が消費することが認められているのは３種の微細藻類、すなわち、スピルリナまたはアルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ  ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）、微小緑藻類クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）、および珪藻オドンテラ・アウリタ（Ｏｄｏｎｔｅｌｌａ  ａｕｒｉｔａ）のみであり、これらは優れた栄養特性を保持している。これらの微生物は、そのユニークなタンパク質含有量とその生産による環境への影響が少ない（水やエネルギーの消費が少ない）ことから、世界の食料供給が直面する課題を克服する主要な要素であると言われている。
【０００４】
過去数年にわたり、特にスピルリナは研究者や製造業者から多くの注目を集めている。食品サプリメントとしての使用を意図されている、その乾燥および非形質転換形態には巨大な市場がある。
【０００５】
スピルリナには付加価値が高い興味深い化合物が大量に含まれているため、多くの研究者や製造業者はこのシアノバクテリアからこれらの化合物を抽出することに興味を抱いている。通常、スピルリナから抽出される生体分子は、抗酸化活性を有する青色色素タンパク質であるフィコシアニン（ＰＣ）であり、乾燥状態でその重量の２０％を占めている（Ｖｏｎｓｈａｋ，１９９７）。フィコシアニンに対する関心の高まりは、特にその着色効果によって説明される。現在、パテントブルーＶおよびシャイニーブルーといったフランスで使用されている食品着色料は合成である。それらは菓子類および飲料などの成分にしばしば含有されている。パテントブルーＶは、子供の多動性の増大を引き起こすと言われ、潜在的なアレルゲンとなる可能性があるため、最近米国、カナダおよびオーストラリアで禁止されている。したがって、天然着色料、特にフィコシアニンの使用が注目を集めている。
【０００６】
特にこの安定な飲料の保存期間が最短の６ヶ月の場合、微細藻類およびシアノバクテリアから抽出された水溶性化合物、特にフィコシアニンは、果汁などの酸性ｐＨを有する飲料にそれらを組み込むという点で大きな制約がある。「安定な」という用語は、以下の事項を説明するために使用される：
ある期間にわたって粘度および色を保持する、配合物の物理的および化学的安定性、
特に改変フローラの発生を防ぐことによる、配合物の感覚受容（ｏｒｇａｎｏｌｅｐｔｉｃ）特性の安定性、
人間に対して病原性であるフローラの発生を防ぐことによる、健康に関係する配合物の安定性。
【０００７】
飲料製造業者が現在利用できる主な技術は、熱処理システムまたは０．２マイクロメートルのろ過システムを用いるものである。
【０００８】
微細藻類およびシアノバクテリアから抽出された水溶性化合物は、特にフィコシアニンであり、これは大きな制約がある分子である：
フィコシアニンは、４５℃を超える温度で劣化する。
フィコシアニンは、３．８未満のｐＨで劣化する。
溶液のｐＨが低下するほど、フィコシアニンは熱に敏感になる。
溶液のｐＨが低下するほど、フィコシアニンは４マイクロメートル未満の気孔率のフィルタをより速く詰まらせる。
【０００９】
したがって、飲食品業界の現状によれば、飲料に対して標準的な低温殺菌またはろ過プロセスを実施することは不可能である。
【００１０】
したがって、現在市販されているフィコシアニンを含む飲料は、１２か月間の安定性を達成することができず、細菌の発生により、消費またはフィコシアニンの分解にとって急速に不適切なものになり、その色が大幅に変化する。
【００１１】
フィコシアニンを含むその飲料の安定性を高めるために、飲食品産業の製造業者は、飲料の安定性を強化するがそれを発泡させる二酸化炭素および食品保存料を飲料に添加することを含む方法を開発したが、これは多くの消費者が好むものではない。したがって、フィコシアニンを含み、特に周囲温度での保存寿命が長く、発泡していない、酸性ｐＨの飲料を得ることができる方法は現在のところ存在しない。
【発明の概要】
【００１２】
出願人は、フィコシアニンなどの真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類および／または真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された精製水溶性化合物を含む、周囲温度で好ましくは６ヶ月を超える、好ましくは１２ヶ月を超える長い保存寿命を有し、酸性ｐＨを有し、好ましくは果汁から製造される食品飲料を得るための新規方法を開発した。食品保存料や二酸化炭素を食品飲料に添加する必要がないため、得られる飲料は非発泡性である。
【００１３】
したがって、本発明の第１の目的は、真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類および／または真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された精製水溶性化合物を含む、周囲温度で好ましくは６ヶ月を超える、好ましくは１２ヶ月を超える長い保存寿命を有し、酸性ｐＨを有し、好ましくは果汁から製造される食品飲料を得る方法であって、少なくとも、
ａ）前記抽出物および／または水溶性化合物を、熱処理に敏感な飲料の成分と混合する１つの工程であって、前記混合物は７を超えるｐＨで維持される、工程と、
ｂ）熱処理に敏感ではない飲料の成分を、酸性ｐＨを有する１または複数の成分と、好ましくは果汁と、混合する１つの任意工程と、
ｃ）工程ａ）で得られた混合物を精密ろ過により滅菌する１つの工程と、
ｄ）工程ｂ）で得られた混合物または酸性ｐＨを有する成分、好ましくは果汁を精密ろ過または熱処理により滅菌する１つの工程、
ｅ）工程ｃ）およびｄ）で得られた滅菌混合物を均質化する１つの工程であって、工程ｃ）で得られた前記滅菌混合物が、工程ｄ）で得られた前記滅菌混合物の前に添加されるのが好ましい、工程と、
ｆ）真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類の抽出物および／または真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された精製水溶性化合物の抽出物を含む、長い保存寿命および酸性ｐＨを有する飲料を取得する１つの工程と、
を含む方法に関する。
【００１４】
好ましい態様では、ｐＨに敏感な混合物ｃ）を、酸性溶液である混合物ｄ）に直接浸さないようにするために、工程ｅ）において、工程ｄ）で得られた滅菌混合物よりも前に工程ｃ）の混合物が添加される。これにより、真核または原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された水溶性化合物が沈殿する可能性がある。
【００１５】
特に好ましい態様では、真核または原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された水溶性化合物が沈殿するリスクがもはやないため、工程ｅ）において、工程ｄ）で得られた滅菌混合物のｐＨが最終飲料のｐＨに近い場合、工程ｄ）で得られたこの滅菌混合物を、工程ｃ）の混合物の前または後に添加することができる。
【００１６】
本発明において、「微細藻類」という用語は、細胞壁および核を特徴とする真核微細藻類を説明するために使用され、緑藻類、黄金色藻類および炎色植物（ｐｙｒｒｏｐｈｙｔａ）を含み、前記真核微細藻類は一般に「微細藻類」と呼ばれ、原核微細藻類は核も細胞壁も持たず、藍藻類を含み、以下では特に「シアノバクテリア」と呼ばれる。
【００１７】
本発明による好ましい態様では、真核微細藻類は、緑藻類、好ましくはクロレラ、ナンノクロロプシス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓ）、ドゥナリエラ（Ｄｕｎａｌｉｅｌｌａ）およびユーグレナ（Ｅｕｇｌｅｎａ）の中から選択される。
【００１８】
本発明による好ましい態様では、シアノバクテリアは、スピルリナ（アルスロスピラ・プラテンシス（Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ  ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）またはスピルリナ・マキシマ（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ  ｍａｘｉｍａ））およびＡＦＡ（アファニゾメノン・フロス・アクエ（Ａｐｈａｎｉｚｏｍｅｎｏｎ  Ｆｌｏｓ−ａｑｕａｅ））から選択される。
【００１９】
本発明による好ましい態様では、微細藻類はシアノバクテリア、特にスピルリナである。
【００２０】
本発明によれば、「水溶性化合物」という用語は、タンパク質およびペプチド、水溶性ビタミン、好ましくはビタミンＢ群（特に、チアミン（Ｂ１）、リボフラビン（Ｂ２）、ナイアシン（Ｂ３）、パントテン酸（Ｂ５）、ピリドキシン（Ｂ６）、ビオチン（Ｂ８）、葉酸（Ｂ９）、コバラミン（Ｂ１２））、ミネラル、好ましくはナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウムおよび鉄、Ｃ−フィコシアニン（またはフィコシアニン）、ならびにクロロフィルの中から好ましくは選択される、水溶性であり、微細藻類に含まれる化合物を説明するために使用される。
【００２１】
本発明による好ましい態様では、本発明による水溶性化合物はフィコシアニンである。
【００２２】
「長い保存寿命」という用語は、本発明において、６ヶ月を超える、好ましくは１２ヶ月を超える保存寿命を説明するために使用される。
【００２３】
本発明で使用される「周囲温度」という用語は、２５℃の温度のことを言う。
【００２４】
「酸性ｐＨ」という用語は、７未満のｐＨを説明するために使用される。好ましくは、飲料の最終ｐＨは３〜５、好ましくは３．５〜４．５、更により好ましくは３．８〜４．２である。
【００２５】
本発明による「果汁」という用語は、天然果汁または濃縮果汁であり、好ましくは水で再構成される。果物は、オレンジ、リンゴ、ブドウ、パイナップル、マンゴー、梨、桃、アプリコット、グアバ、イチゴ、レッドフルーツ、バナナ、ラズベリー、クランベリー、キウイなど、人間が消費するために使用できるすべての果物の中から選択することができ、好ましくはオレンジである。
【００２６】
本発明による「熱処理に敏感な飲料の成分」という用語は、アロマまたはビタミンなどの食品材料に従来から組み込まれているとして当業者に知られている成分を説明するために使用される。これらの成分、ならびに真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類の抽出物および／または真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された精製水溶性化合物の抽出物は、混合工程中に水で希釈される粉末の形態であってもよく、または高度に濃縮され安定化された液体の形態であってもよい。
【００２７】
本発明による「精密ろ過による滅菌」という用語は、例えば、有利にはメッシュ厚さが０．５ミクロン未満のポリアミド、特にナイロンからなる食品フィルタで、前面または接線方向に行われるろ過を説明するために使用される。予備ろ過工程は、２〜５０ミクロン、好ましくは２５ミクロン未満のフィルタで実行することができる。好ましくは、ろ過工程は、一定の流量で、好ましくは最終飲料の体積の７５％未満、より好ましくは２５％未満、更により好ましくは５％未満、更により好ましくは２％未満で行われる。
【００２８】
本発明による混合物は、浸漬ミキサ、食品ミキサ、均質化タンクまたは空気圧ポンプを使用して、混合バット内で達成されることが好ましい。
【００２９】
本発明による好ましい態様では、本方法は、得られた飲料を充填する追加工程を含む。好ましい態様では、充填工程は無菌条件下で行われている。
【００３０】
本発明による好ましい態様では、真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類の抽出物および／または真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された精製水溶性化合物の抽出物は、飲料の０．０１〜１０重量％、好ましくは飲料の０．０１〜１重量％、好ましくは飲料の０．０１〜０．０２重量％を占める。
【００３１】
本発明による好ましい態様では、本方法は更に、得られた飲料を、暗所で、２４時間〜７日間、好ましくは４８時間保存する工程ｇ）を含む。
【００３２】
用語「暗所」は、得られた飲料の保存が光の非存在下で行われるという事実を説明するために使用される。暗所でのこの保存はフィコシアニンの保存を改善し、その１つの指標は６２０ｎｍでの吸着スペクトルの持続性である。好ましくは、暗所での保存は周囲温度で行われる。
【００３３】
本発明による好ましい態様では、暗所での飲料の保存工程は、その充填の７日後、フィコシアニンの６２０ｎｍの吸着スペクトルの５０％、好ましくは７５％、更により好ましくは９０％を維持することを可能にする（暗所および周囲温度で保存）。
【００３４】
第２の態様によれば、本発明は、真核または原核（シアノバクテリア）微細藻類の抽出物および／または真核もしくは原核（シアノバクテリア）微細藻類から抽出された精製水溶性化合物の抽出物を含む、先行する請求項のいずれか一項に記載の方法によって得られるような、周囲温度で好ましくは６ヶ月を超える長い貯蔵寿命を有し、酸性ｐＨを有し、好ましくは果汁から製造される食品飲料に関する。
【００３５】
本発明による好ましい態様では、本発明による飲料は非発泡性である。「非発泡性」という用語は、飲料が発泡していないという事実を説明するものである。
【００３６】
本発明による好ましい態様では、本発明による方法で得られた飲料は安定な飲料である。本発明で使用される「安定な飲料」という用語は、非病原性改変フローラの微生物学的レベルが依然として目標閾値未満である飲料を説明するために使用される：
生産出力時
総中温性フローラ：＜１０ＵＦＣ／ｍｌ
総嫌気性フローラ：＜１０ＵＦＣ／ｍｌ
乳酸菌：＜１０ＵＦＣ／ｍｌ
酵母／カビ：＜１０ＵＦＣ／ｍｌ
保存寿命の終了時
総中温性フローラ：＜２００ＵＦＣ／ｍｌ
嫌気性フローラ：＜２００ＵＦＣ／ｍｌ
乳酸菌：＜２００ＵＦＣ／ｍｌ
酵母／カビ：＜２００ＵＦＣ／ｍｌ
【発明を実施するための形態】
【００３７】
ここで、本発明の実施形態を非限定的な例として説明する。
【００３８】
実施例
飲料の組成：
【００３９】
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【００４０】
2020523001.tif 000003
【００４１】
２  機器
２．１  混合物を調製するための機器
オレンジ果汁から製造される混合物ｂ）については、濃縮オレンジ果汁を希釈することによって調製した。この目的のために、１ｍ３のタンクで浸漬ミキサを直接使用した。
【００４２】
微細藻類抽出物を含む混合物ａ）を調製するために、粉末の混合と粉末の水への溶解が必要である。この目的のために、１ｍ３タンクを含む工程の前に、浸漬ミキサ、２０Ｌ食品ミキサ、均質化タンク（１００Ｌ）、調製タンクの閉回路における空気圧ポンプなど、様々な機器を使用することができる。
【００４３】
２．２  前面ろ過アセンブリ
アセンブリは、ろ過される混合物を含むタンク（１ｍ３）、ポンプおよびフィルタハウジング（そのろ過カートリッジ付き）で構成されている。試験中に（空圧ポンプを使用して別のタンクから移すことにより）タンクは補充される。ハウジングの上流のバルブを使用して、ろ過率を調整する（一定に保つ）ことができる。窒素ボンベは、完全性試験に使用される。
【００４４】
２．３  ハウジングおよびろ過カートリッジ
ＦＢＴシリーズのサニタリーポールハウジングで使用され、１０インチのカートリッジが取り付けられたハウジング。使用するカートリッジは、Ｆｕｅｎｔｅ ＩＩ カートリッジ、照会番号ＡＢ１ＦＦＮ７ＷＨ４であり、これらのカートリッジは、プリーツ付きポリエーテルスルホン（Ｕｌｔｉｐｌｅａｔ（登録商標）、二重層プリーツ）からなり、滅菌グレードのろ過閾値は０．２μｍである。それらは、食品材料との接触が認められている。１０インチの各カートリッジは、１．０４ｍ２のろ過表面を有する。
【００４５】
３  方法
３．１  混合物ｂ）＝オレンジ果汁から製造される
オレンジ果汁から製造される混合物ｂ）を調製するために、３／４まで水で満たしたタンクにオレンジ果汁４７ｋｇを注いだ。次に、タンクに水を満たし、１０００ｋｇの質量を達成した。最後に、混合物を浸漬ミキサで均質化した。次に、混合物を空気圧ポンプによって調製タンクからアセンブリ供給タンクに移した。
【００４６】
３．２．混合物ａ）＝微細藻類抽出物を含有する
３つの最初の粉末製品の混合を、フードミキサを使用して乾燥状態で行った。
【００４７】
次に、この粉末混合物の一部（４００〜５００ｇ）を、５〜６Ｌの水を入れたトレイの渦にゆっくりと注いだ。（浸漬ミキサによる）攪拌を約１５分間行った。次に、この濃縮混合物を、４分の３まで水で満たした１ｍ３のタンクに注ぎ、タンクの内容物を再び浸漬ミキサで攪拌した。他の粉末製品は、濃縮形態にて（渦内で）最初に水と混合し、１ｍ３タンクに添加した。液体製品を１ｍ３タンクに直接添加した。すべての製品を添加した後、浸漬ミキサを使用して、ポンプによる閉回路循環により、１ｍ３タンクの内容物を均質化した。
【００４８】
３．３  混合物の精密ろ過による滅菌
各混合物ａ）その後ｂ）を精密ろ過（各混合物に対して新しいカートリッジを使用）に供し、次の結果が得られた。
【００４９】
2020523001.tif 000004
【００５０】
３．４：混合物ａ）およびｂ）の均質化
工程３．３で滅菌した混合物ａ）およびｂ）を、傾斜ブレード攪拌システムを使用して２ｍ２タンクで混合し、均質化する。
【００５１】
混合物ａ）を最初に均質化タンクに添加する。
【国際調査報告】
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