(57)【要約】  本開示は、調整した抽出培地を用いて、植物源から例えばカンナビジオール（ＣＢＤ）などのカンナビノイドを選択的に抽出する方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物源からのカンナビノイドの抽出方法において：  
（ａ）第１の量のカンナビノイド含有植物源と第１の量の抽出培地を含む第１の混合物を得るステップであって、前記抽出培地が少なくとも１つの油と、少なくとも１つの親水性界面活性剤と、少なくとも共界面活性剤を含むステップと；
（ｂ）前記第一の混合物を均質化するステップと；  
（ｃ）前記均質化した第一の混合物をバイオマススラリーとカンナビノイド添加培地とに分離するステップと；
を具えることを特徴とする方法。
【請求項２】
前記カンナビノイドがカンナビジオール（ＣＢＤ）であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記植物源が少なくともＣＢＤと、テトラヒドロカンナビノール（ＴＨＣ）を含むことを特徴とする請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
使用済みバイオマスがＴＨＣに富んでおり、前記ＣＢＤ添加培地が最大で３重量％のＴＨＣを含み；選択的に、最大２重量％のＴＨＣ、最大１重量％のＴＨＣ、最大０．８重量％のＴＨＣ、最大０．６重量％のＴＨＣ、最大０．５重量％のＴＨＣ、または最大０．１重量％のＴＨＣ、を含むことを特徴とする方法。
【請求項５】
前記カンナビノイド添加培地が約０．１乃至１２重量％のＣＢＤを含むことを特徴とする、請求項１乃至４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記植物源が大麻属由来の植物であることを特徴とする、請求項１乃至５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記植物源が、大麻サティバ、大麻インディカ、大麻ルデラリス、およびこれらの任意の混合物から選択されることを特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記植物源が、大麻の花、花序、芽、果実、果皮、種子、葉、茎（ｓｔｅｍ）、柄（ｓｔａｌｋ）、根、およびこれらの任意の混合物から選択されることを特徴とする、請求項６または７に記載の方法。  
【請求項９】
前記植物源が、粉末、顆粒、ペレット、錠剤、または植物部分の形態で提供されることを特徴とする、請求項１乃至８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ステップ（ｂ）の均質化が、約１分乃至６０分の間にわたって行われ；選択的に約１分乃至６０分の間、約１分乃至４５分の間  、約１分乃至３０分の間、または約１分乃至２０分の間行われることを特徴とする、請求項１乃至９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ステップ（ｂ）の均質化が約５００乃至５０００ｐｓｉの間の圧力で行われることを特徴とする、請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ステップ（ｂ）の均質化が、約５−７０℃の温度で行われることを特徴とする、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記混合物を分離するステップが遠心分離によって行われることを特徴とする、請求項１乃至１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記混合物を分離するステップが、遠心分離とそれに続く濾過によって行われることを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ステップ（ａ）の前に、前記植物源を加熱するステップをさらに具えることを特徴とする、請求項１乃至１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記植物源が約９０乃至１８０℃の温度に加熱されることを特徴とする請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記植物源が、約５乃至２４０分の間加熱されることを特徴とする、請求項１５または１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記植物源と前記第１の量の抽出培地との重量比（ｗｔ／ｗｔ）が１：５乃至１：１００であることを特徴とする、請求項１乃至１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１乃至１８のいずれか１項に記載の方法がさらに：
（ｄ）バイオマススラリーを前記第２の量の抽出培地と混合して第２の混合物を得るステップと；  
（ｅ）前記第２の混合物を均質化するステップと；
（ｆ）前記第２の混合物を、バイオマススラリーとカンナビノイド添加培地に分離するステップと；
を具えることを特徴とする方法。
【請求項２０】
前記ステップシーケンス（ｄ）乃至（ｆ）を１乃至７回繰り返すことを特徴とする、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
請求項１乃至１８のいずれか１項に記載の方法がさらに：
（ｄ’）前記カンナビノイド添加培地を第２の量の植物源と混合して第２の混合物を得るステップと；  
（ｅ’）前記第２の混合物を均質化するステップと；
（ｆ’）前記第２の混合物をバイオマススラリーと高ＣＢＤカンナビノイド添加培地とに分離するステップと；
を具えることを特徴とする方法。
【請求項２２】
前記ステップシーケンス（ｄ’）−（ｆ’）を１乃至７回繰り返すことを特徴とする、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記少なくとも１つの油が、精油、Ｄ−リモネン、鉱油、パラフィン系油、リン脂質、極性脂質、スクアレン、スピンゴメリン、ワックス、植物油、グリセリド、トリグリセリド、脂肪酸および脂肪酸エステル、ならびに液体炭化水素から選択され；選択的に、前記少なくとも１つの油が、約０．５乃至２０重量  ％の間の量で抽出培地中に存在する、ことを特徴とする請求項１乃至２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記少なくとも１つの親水性界面活性剤が、ソルトールＨＳ１５、ポリオキシエチレン、ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミテート、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、および飽和および不飽和ヒマシ油のポリオキシエチレンエステル、パルミトステアリン酸、エトキシル化モングリセロールエステル、エトキシル化脂肪酸、短鎖、中鎖および長鎖エトキシル化脂肪酸、から選択され：選択的に、前記少なくとも１つの親水性界面活性剤が、約３０乃至８５重量％の量で抽出培地中に存在することを特徴とする請求項１乃至２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記少なくとも１つの共界面活性剤が、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、キシリトール、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４００およびＰＥＧ６００から選択され、選択的に、前記少なくとも１つの共界面活性剤が、抽出培地中に約１乃至５０重量％の量で存在する、ことを特徴とする請求項１乃至２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記抽出培地がさらに少なくとも１つのリン脂質を含み、選択的に前記抽出培地が約１乃至１０重量％のリン脂質を含むことを特徴とする、請求項１乃至２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記抽出培地がさらに、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、酢酸、および乳酸から任意に選択される少なくとも１つの溶媒を含み、選択的に、前記抽出培地が約０．１乃至２５重量％の前記溶媒を含むことを特徴とする、請求項１乃至２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記均質化した混合物が油滴を含み、当該油滴内に（または油滴の界面に）前記カンナビノイドが幾何学的および物理的に一体化されていることを特徴とする、請求項１乃至２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
カンナビノイド含有植物源からカンナビノイドを選択的に抽出するための抽出培地において、少なくとも１つの油、少なくとも１つの親水性界面活性剤、および少なくとも１つの共界面活性剤を含み、前記抽出培地が選択的に、少なくとも一つのリン脂質、少なくとも１つの溶媒、および／または、少なくとも１つの共溶媒をさらに含むことを特徴とする抽出培地。
【請求項３０】
カンナビノイドがカンナビジオール（ＣＢＤ）であることを特徴とする、請求項２９に記載の抽出培地。
【請求項３１】
請求項１乃至２８のいずれか１項に記載の方法によって得られるカンナビノイド添加培地。
【請求項３２】
前記少なくとも１つの油が、精油、Ｄ−リモネン、オレイン酸、トリアセチン、鉱油、パラフィン油、リン脂質、極性脂質、スクアレン、スピンゴメリン、ワックス、植物性油、グリセリド、トリグリセリド、脂肪酸および脂肪酸エステル、ならびに液体炭化水素から選択され、選択的に、前記少なくとも１つの油が、前記培地中に約０．５乃至２０重量％の量で存在することを特徴とする、請求項３１に記載のカンナビノイド添加培地。
【請求項３３】
前記少なくとも１つの親水性界面活性剤が、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミテート、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、および飽和および不飽和ヒマシ油のポリオキシエチレンエステル、エトキシル化モノグリセロールエステル、グリセロール、短鎖、中鎖、長鎖脂肪酸のエトキシル化脂肪酸から選択され、選択的に、前記少なくとも１つの親水性界面活性剤が前記培地中に約３０乃至８５重量％の量で存在する、ことを特徴とする請求項３１または３２に記載のカンナビノイド添加培地。
【請求項３４】
前記少なくとも１つの共界面活性剤が、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、キシリトール、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４００およびＰＥＧ６００から選択され、選択的に、前記少なくとも１つの溶媒が、培地中に約１乃至５０重量％の量で存在することを特徴とする請求項３１乃至３３のいずれか１項に記載のカンナビノイド添加培地。
【請求項３５】
前記培地が、約１乃至１０重量％のリン脂質を含むことを特徴とする、請求項３１乃至３４のいずれか１項に記載のカンナビノイド添加培地。
【請求項３６】
エタノール、プロパノール、イソプロパノール、酢酸、および乳酸から選択される少なくとも１つの溶媒をさらに含み、選択的に前記培地が約０．１乃至２５重量％の前記溶媒を含むことを特徴とする請求項３１乃至３５のいずれか１項に記載のカンナビノイド添加培地。
【請求項３７】
前記カンナビノイドがカンナビジオール（ＣＢＤ）であることを特徴とする、請求項３１乃至３６のいずれか１項に記載のカンナビノイド添加培地。
【請求項３８】
約１乃至１２重量％の間のＣＢＤを含むことを特徴とする、請求項３７に記載のカンナビノイド添加培地。
【請求項３９】
最大で３重量％のＴＨＣを含むことを特徴とする、請求項３７または３８に記載のカンナビノイド添加培地。
【請求項４０】
前記カンナビノイドが、幾何学的および物理的に前記油と一体化されていることを特徴とする、請求項３１乃至３９のいずれか１項に記載のカンナビノイド添加培地。
【請求項４１】
少なくとも０．１重量％のＣＢＤ、少なくとも１つの油、少なくとも１つの親水性界面活性剤、および少なくとも１つの共界面活性剤を含み、選択的に少なくとも１つのリン脂質、少なくとも１つの溶媒、および少なくとも１つの共溶媒を含むことを特徴とするＣＢＤ添加培地。
【請求項４２】
請求項３１乃至４０のいずれか１項に記載のカンナビノイド添加培地または請求項４１に記載のＣＢＤ添加培地を含むことを特徴とする、食品、栄養補助食品、または栄養補助食品組成物。
【請求項４３】
請求項３１乃至４０のいずれか１項に記載のカンナビノイド添加培地または請求項４１に記載のＣＢＤ添加培地を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項４４】
ゲル、ローション、油、石鹸、スプレー、エマルジョン、クリーム、軟膏、カプセル、ソフトゲルカプセル、パッチ、または溶液から選択される形態であることを特徴とする、請求項４３に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
カンナビノイドを局所的に、経口的に、吸入により、経鼻的に、経皮的に、眼内に、または非経口的に対象の循環系に送達するように構成したことを特徴とする、請求項４３または４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
少なくとも１つの希釈剤を含むことを特徴とする、請求項４２乃至４５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
前記カンナビノイド添加培地が前記希釈剤によって希釈され、それによって希釈剤マトリックス内に油滴を形成することを特徴とする、請求項４６に記載の組成物。  
【請求項４８】
前記カンナビノイドが、前記油滴のオイルコア内に、または前記油滴と希釈剤マトリックスとの界面と、幾何学的および物理的に一体化されていることを特徴とする、請求項４７に記載の医薬組成物。  
【請求項４９】
痛み関連障害、炎症性の障害および症状、アパタイトの抑制または刺激、嘔吐および悪心の症状、腸およびボウルの障害、不安神経症に関連する障害および症状、精神病に関連する障害および症状、発作および／または痙攣に関連する障害および症状、睡眠障害および症状、免疫抑制による治療を必要とする疾患、障害および症状、血糖値の上昇に関連する疾患および症状、神経系の悪化に関連する障害および症状、炎症性皮膚の障害および症状、動脈閉塞に関連する障害および症状、細菌感染に関連する障害および症状、真菌感染に関連する障害および症状、増殖性の障害および症状、外傷後の障害、および骨成長の抑制に関連する障害および症状、から選択される状態の治療に使用する、請求項３１乃至４０のいずれか１項に記載のカンナビノイド添加培地、請求項４１に記載のＣＢＤ添加培地、または請求項４３乃至４８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
ある症状または障害を患っている対象を治療する方法において、請求項３１乃至４０のいずれか１項に記載のカンナビノイド添加培地、請求項４１に記載のＣＢＤ添加培地、または、請求項４３乃至４８のいずれか１項に記載の医薬組成物培地を対象に投与するステップを具えることを特徴とする方法。
【請求項５１】
前記症状または障害が、痛み関連障害、炎症性の障害および症状、アパタイトの抑制または刺激、嘔吐および悪心の症状、腸およびボウルの障害、不安神経症に関連する障害および症状、精神病に関連する障害および症状、発作および／または痙攣に関連する障害および症状、睡眠障害および症状、免疫抑制による治療を必要とする疾患、障害および症状、血糖値の上昇に関連する疾患および症状、神経系の悪化に関連する障害および症状、炎症性皮膚の障害および症状、動脈閉塞に関連する障害および症状、細菌感染に関連する障害および症状、真菌感染に関連する障害および症状、増殖性の障害および症状、外傷後の障害、および骨成長の抑制に関連する障害および症状、から選択されることを特徴とする、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
植物源からＣＢＤを抽出する方法において：
（ａ）第１の量のＣＢＤ含有植物源と、第１の量の抽出培地とを含む第１の混合物を得るステップであって、前記抽出培地が少なくとも１つの油、少なくとも１つの親水性界面活性剤および少なくとも１つの共界面活性剤を含むステップと；  
（ｂ）前記第１の混合物を均質化するステップと；
（ｃ）前記均質化された第１の混合物をバイオマススラリーとＣＢＤ添加培地とに分離するステップと；
を具えることを特徴とする方法。
【請求項５３】
ＣＢＤ含有植物源からカンナビジオール（ＣＢＤ）を選択的に抽出する抽出培地において、少なくとも１つの油、少なくとも１つの親水性界面活性剤、および少なくとも１つの共界面活性剤を含み、前記抽出培地が、選択的に、少なくとも１つのリン脂質、少なくとも１つの溶媒、および／または、少なくとも１つの共溶媒をさらに含むことを特徴とする抽出培地。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、調整された抽出培地を使用して、植物源からカンナビノイド、例えばカンナビジオール（ＣＢＤ）を選択的に抽出する方法を提供する。
【０００２】
〔先行技術文献〕
ここに開示されている主題の背景として関連があると考えられる参考文献を以下に列挙する。
［１］ＷＯ２００８／０５８３６６
［２］Ａ．Ｓｐｅｒｎａｔｈ，Ａ．Ａｓｅｒｉｎ，コロイドと界面科学の進歩２００６，１２８
［３］Ａ．Ｓｐｅｒｎａｔｈ，Ａ．Ａｓｅｒｉｎ，Ｎ．Ｇａｒｔｉ，コロイドおよび界面科学ジャーナル２００６，２９９，９００乃至９０９
［４］Ａ．Ｓｐｅｒｎａｔｈ、Ａ．Ａｓｅｒｉｎ，Ｎ．Ｇａｒｔｉ，熱分析と熱量ジャーナル２００６，８３
［５］Ｎ．Ｇａｒｔｉ，Ａ  Ｓｐｅｒｎａｔｈ，Ａ．Ａｓｅｒｉｎ，Ｒ．Ｌｕｔｚ，ソフトマター  ２００５，１
［６］Ａ．Ｓｐｅｒｎａｔｈ，Ａ．Ａｓｅｒｉｎ，Ｌ  Ｚｉｓｅｒｍａｎ，Ｄ．Ｄａｎｉｎｏ，Ｎ．Ｇａｒｔｉ，制御リリースジャーナル  １１９
［７］Ｓ．Ｆｉｓｈｅｒ，Ｅ．Ｊ．Ｗａｃｈｔｅｌ，Ａ．Ａｓｅｒｉｎ，Ｎ．Ｇａｒｔｉ，コロイドと表面Ｂ：Ｂｉｏｉｎｔｅｒｆａｃｅｓ２０１３，１０７，３５−４２
［８］Ｒ．Ｄｅｕｔｃｈ−Ｋｏｌｖｚｏｎ，Ａ．ＡｓｅｒｉｎおよびＮ．Ｇａｒｔｉ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ  ｏｆ  Ｌｉｐｉｄｓ，２０１１，１６４（７）６５４  
［９］Ｏ．Ａｍｓａｌｅｍ，Ａ．Ａｓｅｒｉｎ，Ｎ．Ｇａｒｔｉ，コロイドと表面，Ｂ：  Ｂｉｏｉｎｔｅｒｆａｃｅｓ，２０１０，８１（２）４２２−４２９。
【０００３】
上記の参考文献の承認は、これらの文献がここに開示されている主題の特許性に何らかの形で関連することを意味すると解釈するべきではない。  
【背景技術】
【０００４】
カンナビノイドは、とりわけ痛みおよび炎症関連症候群、痙攣、喘息、睡眠障害、鬱病、食欲不振およびその他の病状の緩和に長年使用されてきた。カンナビノイドは、主に大麻植物の樹脂産生雌しべ花序に見られる活性化合物群である。これまでに様々なカンナビノイド化合物が文献で同定されてきたが、特に２つの化合物、すなわちテトラヒドロカンナビノール（ＴＨＣ）およびカンナビジオール（ＣＢＤ）が、医薬用途で主に注目されている。
【０００５】
ＴＨＣは使用者に有害な長期的影響を与える向精神性化合物であるが、ＣＢＤは向精神薬とは見なされず、さまざまな投与経路で安全に摂取できると考えられている。両化合物は、典型的には、植物源中に様々な濃度範囲の混合物として見られる。医薬組成物に製剤化するために、カンナビノイドはしばしば様々な方法によって植物源から抽出される。
【０００６】
一般的に使用されている方法の１つは担体油による抽出であり、植物源からのカンナビノイド種抽出用の溶媒として担体油が使用される。油で満たされた花序の毛状突起は脂溶性であるので、天然植物油は植物のカンナビノイド含有樹脂とその他の部分からカンナビノイド種の混合物を抽出する有効な方法である。
【０００７】
その他にしばしば使用される方法は、カンナビノイドを溶かす有機溶媒による抽出である。このような抽出は、効果的に抽出するためには溶媒を調整することが必要であり、しばしば低収率の抽出となる。さらに、最終生成物から微量の溶媒を除去することが困難であり、得られる抽出物の純度および安全性が低下する。これらの抽出のほとんどは不十分であることがわかっており、望ましくない溶媒の痕跡を残すことが多い（特に石油エーテルを使用する場合）。
【０００８】
様々な植物源からの様々な化合物の抽出に使用されるさらなる方法は、超臨界ＣＯ２抽出である。ＣＯ２抽出プロセスでは、カンナビノイド種の抽出に超臨界条件（すなわち高温および高圧）でＣＯ２が使用される。植物源から様々な化合物を抽出するのに比較的効果的であるが、この技術は液体抽出と比較してより複雑で、時間がかかりそして非常に高価である。さらに、この技術は特定のカンナボイドに対する選択性からはほど遠いものであり、同時に様々なエッセンシャルオイルも抽出する可能性がある。
【０００９】
カンナビノイドの抽出には様々な方法が存在するが、これらは全て、低抽出収率および低い（または全くない）選択性という共通の欠点がある。すなわち、今日までに知られている抽出方法は、植物源から様々な種類のカンナビノイドを抽出し、しばしば様々な濃度および比率のＣＢＤおよびＴＨＣの混合物ができてしまい、その後の製剤および医薬組成物におけるＣＢＤの使用を妨げるものである。
【００１０】
従って、カンナビノイド含有植物源の混合物から、ＣＢＤなどの高負荷の特定のカンナビノイドを得る高度に選択的な抽出方法が必要とされている。
【発明の概要】
【００１１】
本開示では、調整された抽出培地を利用した独自のワンポット抽出プロセスの使用によって、ＣＢＤなどの特定のカンナビノイドに対する高い選択性が提供されている。本明細書でさらに詳述するように、本開示の方法は、低レベルのその他のカンナビノイド、特にＴＨＣと共に所望のカンナビノイド（例えばＣＢＤ）を高負荷で含む製品を提供する。さらに、本開示は、所望のカンナビノイドを選択的に抽出できる抽出培地の配合、ならびにそれを含む様々な医薬組成物および投与形態を提供する。
【００１２】
一態様において、本開示は、植物源からのカンナビノイド、例えばカンナビジオール（ＣＢＤ）の抽出方法を提供し、その方法は以下のステップを具える：
（ａ）第１の量のカンナビノイド含有（例えば、ＣＢＤ含有）植物源と、第１の量の抽出培地とを含む第１の混合物を得るステップであって、この抽出培地が、少なくとも１つの油と、少なくとも１つの共界面活性剤と、選択的に少なくとも１つの共溶媒を含む、ステップと；
（ｂ）第１の混合物を均質化するステップと；
（ｃ）均質化した混合物をバイオマススラリーとカンナビノイド（例えば、ＣＢＤ）添加培地とに分離するステップ。
【００１３】
本発明の方法は、カンナビノイドの抽出培地としてマイクロエマルジョンを利用し、植物源から所望のカンナビノイドを選択的に抽出するように調整することができる。後述するように、抽出培地は、例えば、主にＣＢＤ、主にＴＨＣ、または植物源に存在する他のカンナビノイドを抽出するように調整することができる。マイクロエマルション（ＭＥ）は、それらの自発的構造、高い可溶化能力、低粘度、透明性、ニュートン挙動および物理的熱力学的安定性のために、薬物送達用のよく知られた培地である［１］。特定の種類のマイクロエマルジョンは、ナノサイズの自己集合液体であり、これは以前に研究されており、その不溶性薬物と栄養補助物質を可溶化する能力が実証されている［２−７］。抽出培地は、界面活性剤と油を含む、ナノ液滴の自己組織化マイクロエマルジョンシステムである。本開示の抽出培地は、本明細書でさらに説明されるように、少なくとも１つの油、少なくとも１つの親水性界面活性剤および少なくとも１つの溶媒を含み、さらに例えば共界面活性剤、共溶媒およびリン脂質などの補助成分を含む。本開示において、マイクロエマルジョンという用語は、他に定義されない限り、抽出培地を指す。用語「マイクロエマルジョン」と「抽出培地」は互換的に使用されている。
【００１４】
抽出培地は無水濃縮物の形態であり、水相で完全かつ徐々に希釈して膨潤ミセル系または水中油型マイクロエマルジョンを形成することができる。この希釈マイクロエマルジョン（希釈培地）は、ナノサイズの均一（単分散）構造であり、油相と水相との間にゼロ界面張力を示し、ニュートン流体のような挙動をする。界面活性剤と油を混合すると培地は自己組織化して、水を含まない逆ミセルを形成する。水または水溶液で希釈すると、水膨潤ミセルまたは油中水型ナノ液滴が形成され、水などの水相の存在下で共連続中間相に転化できる。さらに希釈すると、水中油滴に反転（傘型）する。
【００１５】
理論に縛られることを望むものではないが、これらの系は油溶媒和クラスターまたは界面活性剤の短ドメインによって構成されるが、古典的な逆ミセルとは異なる。少量の水性培地と混合すると水和および溶媒和界面活性剤が形成され、水相でさらに希釈すると、水中油型（Ｏ／Ｗ）ナノ液滴に容易に変形され、抽出されたカンナビノイド分子をそのコアに閉じ込める。このＯ／Ｗマイクロエマルジョンへの変形は自発的であり、すなわち剪断力、機械的力または過度の加熱条件を用いる必要がない。ＣＢＤおよび／またはその他の抽出されたカンナビノイドは逆ミセルのコアに閉じ込められ、そして共連続領域で希釈すると油相と水相との間の界面に留まる。その後、一旦Ｏ／Ｗマイクロエマルジョンが形成されると、カンナビノイド分子は液滴の中心に位置する。ＣＢＤと界面活性剤（使用される場合は補助界面活性剤も）との間の相互作用（物理的複合体形成）により、逆ミセルの共連続領域へおよび最終的にＯ／Ｗマイクロエマルジョンへの構造変形を介して、抽出されたカンナビノイドを油コア内に維持することが可能になる。したがって、製剤が安定し、投与に先立つ（すなわち、保存中の）オイルコアからのカンナビノイドの望ましくない放出が防止される。
【００１６】
これらの抽出培地は熱力学的に安定であり、ナノサイズの液滴を有し、クリーミング、凝集、合体または相分離することなく、長期間安全に保管することができる。本開示の方法によって調製されたカンナビノイド添加培地はまた、実質的に均一で安定な液滴サイズ、典型的にはナノメートルスケールで狭いサイズ分布によって特徴付けられる。液滴サイズの安定性は、マイクロエマルジョンが投与されると液滴サイズの変化が液滴内の捕捉（可溶化）抽出分子の放出を損なうことがあるので重要である。さらに、添加培地は、希釈された形態でない場合、水を含まず、したがって微生物の増殖を支援しない（または最小限にする）。さらに、高い安定性と液滴サイズが小さいために、これらの系は、加熱滅菌、０．２２μｍフィルターによる濾過、ＵＶおよびこの技術分野で公知の他の方法などの様々な方法で自己汚染の危険なしに、また培地の有益な構造を損なうことなく滅菌することができる。
【００１７】
本開示では、システムを、植物源から特定の所望のカンナビノイド（ＣＢＤ、ＣＢＤＡ、ＴＨＣなど）を抽出するように（すなわち、界面活性剤、油および共界面活性剤の組成を選択することによって）設計して、カンナビノイド添加培地が実質的に水を含まない（すなわち、最大１０重量％の水を含む）ようにするとともに、オンデマンドで、及び任意の種類の水溶液（緩衝剤、注射用の水、生理食塩水、等張混合物、など）を伴う適用または投与経路に従って、容易に希釈またはさらに処方できるようにしている。
【００１８】
カンナビノイドは、細胞内のカンナビノイド受容体に作用して脳内の神経伝達物質の放出を抑制する一群の精神活性化合物と非精神活性化合物である。この用語は、天然源から得られるカンナビノイドを包含することを意味している。カンナビノイドは、カンナビゲロール酸（ＣＢＧＡ）、カンナビゲロール酸モノメチルエーテル（ＣＢＧＡＭ）、カンナビゲロール（ＣＢＧ）、カンナビゲロールモノメチルエーテル（ＣＢＧＭ）、カンナビゲロバリン酸（ＣＢＧＶＡ）、カンナビゲロバリン（ＣＢＧＶ）、カンナビクロメニック酸（ＣＢＣＡ）、カンナビクロメン（ＣＢＣ）、カンナビクロメバリニック酸（ＣＢＣＶＡ）、カンナビクロメバリン（ＣＢＣＶ）、カンナビジオリック酸（ＣＢＤＡ）、カンナビジオール（ＣＤＢ）、カンナビジオールモノメチルエチル（ＣＢＤＭ）、カンナビジオール−Ｃ４（ＣＢＤ−Ｃ４）、カンナビジバリニック酸（ＣＢＤＶＡ）、カンナビジオルコール（ＣＢＤ−ＣＩ）、デルタ−９−テトラヒドロカンナビノリック酸Ａ（ＴＨＣＡ−Ａ）、デルタ−９−テトラヒドロカンナビノリック酸Ｂ（ＴＨＣＡ−Ｂ）、デルタ９−テトラヒドロカンナビノール（ＴＨＣ）、デルタ−９−テトラヒドロカンナビノール酸−Ｃ４（ＴＨＣＡ−Ｃ４）、デルタ−９−テトラヒドロカンナビノール−Ｃ４（ＴＨＣＡ−Ｃ４）、デルタ−９−テトラヒドロカンナビバリン酸（ＴＨＣＶＡ）、デルタ−９−テトラヒドロカンナビバリン（ＴＨＣＶ）、デルタ−９−テトラヒドロカンナビオルコール酸（ＴＨＣＡ−Ｃ１）、デルタ−９−テトラヒドロカンナビオールコール（ＴＨＣ−Ｃ１）、デルタ−７−シス−イソ−テトラヒドロカンナビバリン、デルタ−８−テトラヒドロカンナビノリン酸Ａ（Δ８−ＴＨＣＡ）、デルタ−８−テトラヒドロカンナビノール（Δ８−ＴＨＣ）、カンナビシクロリック酸（ＣＢＬＡ）、カンナビシクロール（ＣＢＬ）、カンナビシクロバリン（ＣＢＬＶ）、カンナビエルソン酸Ａ（ＣＢＥＡ−Ａ）、カンナビエルソン酸Ｂ（ＣＢＥＡ−Ｂ）、カンナビエルソン（ＣＢＥ）、カンナビノール酸（ＣＢＮＡ）、カンナビノール（ＣＢＮ）、カンナビノールメチルエーテル（ＣＢＮＭ）、カンナビノール−Ｃ４（ＣＢＮ−Ｃ４）、カンナビバリン（ＣＢＶ）、カンナビノール−Ｃ２（ＣＢＮ−Ｃ２）、カンナビオルコール（ＣＢＮ−Ｃ１）、カンナビノジオール（ＣＢＮＤ）、カンナビノジバリン（ＣＢＶＤ）、カンナビトリオール（ＣＢＴ）、１０−エトキシ−９−ヒドロキシ−デルタ−６Ａ−テトラヒドロカンナビノール、８，９−ジヒドロキシ−デルタ−６Ａ−テトラヒドロカンナビノール、カンナビトリオールバリン（ＣＢＴＶ）、エトキシ  カンナビトリオールバリン（ＣＢＴＶＥ）、デヒドロカンナビフラン（ＤＣＢＦ）、カンナビフラン（ＣＢＦ）、カンナビクロマノン（ＣＢＣＮ）、カンナビシトラン（ＣＢＴ）、１０−オキソ−デルタ−６Ａ−テトラヒドロカンナビノール（ＯＴＨＣ）、デルタ−９−シス−テトラヒドロカンナビノール（ｃｉｓ−ＴＨＣ）、３，４，５，６−テトラヒドロ−７−ヒドロキシ−α−α−２−トリメチル−９−ｎ−プロピル−２，６−メタノ−２Ｈ−ベンゾオキソシン−５−メタノール（ＯＨ−ｉｓｏ−ＨＨＣＶ）、カンナビリプソール（Ｃ��Ｒ）、トリヒドロキシ−デルタ−９−テトラヒドロキシカンナビノール（トリＯＨ−ＴＨＣ）、および他の任意のカンナビノイド、のうちの一又はそれ以上から選択される。
【００１９】
いくつかの実施形態では、望ましいカンナビノイドがＣＢＤまたはＣＢＤＡである。
【００２０】
いくつかの実施形態では、ＣＢＤが様々なカンナビノイドの混合物を含む植物源から選択的に抽出されたものである。
【００２１】
カンナビジオール（ＣＢＤ）は、本明細書では、ＣＢ１およびＣＢ２受容体に対して親和性がほとんどない非精神活性カンナビノイドのクラスを指し、分子式Ｃ２１Ｈ３０Ｏ２および式Ｉの一般構造を有する。
2020502040.tif 000002
【００２２】
テトラヒドロカンナビノール（ＴＨＣ）は、本明細書では、ＣＢ１およびＣＢ２受容体に対して高い親和性があることを特徴とする精神活性カンナビノイドのクラスを指し、分子式Ｃ２１Ｈ３０Ｏおよび式ＩＩの一般構造を有する。
2020502040.tif 000003
【００２３】
本開示の文脈において、用語ＣＢＤおよびＴＨＣは、（−）−トランス−Δ９−テトラヒドロカンナビノール（Δ９−ＴＨＣ）、Δ８−ＴＨＣ、およびΔ９−ＣＢＤ、といったこれらの分子の異性体、誘導体、または前駆体、また、それぞれの２−カルボン酸（２−ＣＯＯＨ）、ＣＢＤＡおよびＴＨＣＡからそれぞれ取り出したＣＢＤやＴＨＣにも及ぶことを意味する。
【００２４】
上述したように、本開示の方法は、いくつかの実施形態において、主にＣＢＤおよびＴＨＣを含む植物源からのＣＢＤなどのカンナビノイドの選択的かつ定量的抽出を可能にする。選択的または選択的抽出という用語は、そのプロセスが、望ましくないカンナビノイドがほとんどまたはまったく存在せず、所望のカンナビノイドが非常に豊富である抽出生成物を得るようにすることを意味する。
【００２５】
いくつかの実施形態では、プロセスおよび抽出培地が、ＣＢＤを選択的に抽出するように調整して、ＣＢＤ充填培地が３重量％を超えないＴＨＣを含有するようにしている。その他の実施形態では、プロセスおよび抽出培地が、ＣＢＤを選択的に抽出するように調整して、ＣＢＤ充填培地が１重量％を超えないＴＨＣを含むようにしている。すなわち、本開示の方法の生成物は、いくつかの実施形態では、ＴＨＣが豊富な（すなわち、抽出の結果）使用済みバイオマスと、最大３重量％、最大２．５重量％、最大２重量％、最大１．５重量％、最大１重量％ＴＨＣ、最大０．８重量ＴＨＣ、最大０．６重量％ＴＨＣ、最大０．５重量％ＴＨＣ、さらには最大０．１重量％ＴＨＣを含むＣＢＤ添加培地、である。なお、重量％ＴＨＣとは、抽出されたカンナビノイドのうちの（植物源中のＴＨＣ含有量からではない）ＴＨＣの重量百分率を意味する。
【００２６】
他の実施形態によれば、培地の選択性により、ＣＢＤとＴＨＣの比が約１０：１から約４０：１の間であるＣＢＤ添加培地を得ることができる。
【００２７】
いくつかの実施形態において、カンナビノイド添加培地は、約０．１乃至１２重量％の間のＣＢＤを含む。他の実施形態では、カンナビノイド添加培地は、約０．１乃至１０重量％のＣＢＤ、０．１乃至９重量％のＣＢＤ、または約０．１乃至８重量％のＣＢＤを含む。いくつかの他の実施形態では、カンナビノイド添加培地は、約０．５乃至１２重量％のＣＢＤ、約１乃至１２重量％のＣＢＤ、を含むことができる。さらなる実施形態では、カンナビノイド添加培地は、約０．５乃至１１重量％のＣＢＤ、約１乃至１０重量％のＣＢＤ、１．５乃至９重量％のＣＢＤ、または約２乃至８重量％のＣＢＤを含む。
【００２８】
植物源に言及する場合、所望のカンナビノイドが抽出される原料は大麻属からの植物であると解するべきである。いくつかの実施形態では、この植物源は、大麻サティバ、大麻インディカ、大麻ルデラリス、およびこれらの任意の混合物から選択される。植物源は、大麻属に分類される任意の天然株、任意の園芸変種、栽培株または操作株である。
【００２９】
本開示のプロセスは、所望のカンナビノイドを含む植物源の任意の部分を利用して実施することができる。すなわち、いくつかの実施形態では、植物源は、大麻の花、花序、芽、果実、果皮、種子、葉、茎、柄、根、およびこれらの任意の混合物から選択される。
【００３０】
植物源は、例えば粉末、顆粒、ペレット、錠剤、フレーク、シュレッディング、または植物部分（例えば、無傷の葉、種子、無傷の花序など）  として、任意の所望の形態で提供できる。植物源は、新鮮な、半乾燥状態または乾燥状態、凍結状態、凍結乾燥状態、その他で提供される。
【００３１】
上記のように、本開示の方法において抽出に使用する抽出培地は、少なくとも１つの油と、少なくとも１つの親水性界面活性剤と、少なくとも１つの共界面活性剤と、選択的に少なくとも１つの溶媒および／または共溶媒を含む。
【００３２】
本開示の文脈において、油という用語は所望のカンナビノイドが可溶化される天然油または合成油を意味する。本開示の抽出培地に使用される油は、被験体へ投与することが認可されたものである。いくつかの実施形態では、この油は、精油（Ｒ−リモネン、Ｄ−リモネン、テルペンまたはテルペンレスなど）、鉱油、パラフィン系油、リン脂質、極性脂質（スクアレン、スピンゴメリン）、ワックス、植物油、トリグリセリド、グリセリド、脂肪酸および脂肪酸のエステル、液体炭化水素など、ならびにそれらの任意の混合物を含むものから選択される。
【００３３】
いくつかの実施形態によれば、この油は、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、オリーブ油、大豆油、キャノーラ油、綿油、パームオレイン、ヒマワリ油、コーン油、イソプロピルミリステート、オレイルラクテート、ココカプリカプリレート、ヘキシルラウレート、オレイルアミン、オレイン酸、オレイルアルコール、リノール酸、リノレイルアルコール、オレイン酸エチル、ヘキサン、ヘプタン、ノナン、デカン、ドデカン、Ｄ−リモネン、トリアセチン、ニーム油、ラベンダー油、ハッカ油、アニス油、メントール、カプサイシン、ブドウ種子油、ザクロ油、アボカド油、ゴマ油、魚油、オメガ油およびオメガ脂肪酸、ならびに同様の精油およびこれらの混合物、から選択することができる。
【００３４】
その他の実施形態によれば、この油は、少なくとも１つの中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、ヒマシ油、Ｒ−（＋）−リモネン、グリセロール、オレイン酸、トリアセチン、イソプロピルミリステート、エチルラウレート、オリーブ油、ベンジルアルコール、ラウリルアセテート、ラウリルラクテート、オレイルラクテート、セチルアルコール、エチルヘキシルラウレート、エチルヘキシルオレエートなど、から選択することができる。  
【００３５】
この油は、いくつかの実施形態によれば、約０．５乃至２０重量％の量で抽出培地中に存在している。
【００３６】
抽出培地は少なくとも１つの親水性界面活性剤を含む。親水性界面活性剤という用語は、親水性のあるイオン性または非イオン性界面活性剤、すなわち水に対して親和性がある界面活性剤を意味する。例示的な界面活性剤は、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミテート、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、および飽和および不飽和ヒマシ油のポリオキシエチレンエステル、パルミトステアレート、エトキシル化モノグリセリンエステル、エトキシル化脂肪酸、短鎖および中鎖および長鎖脂肪酸のエトキシル化脂肪酸などである。
【００３７】
いくつかの実施形態において、少なくとも１つの親水性界面活性剤は、Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ１５（ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート）、ポリオキシエチレン、エトキシル化（２０ＥＯ）ソルビタンモノラウレート（Ｔ２０）、エトキシル化（２０ＥＯ）ソルビタンモノステアレート／パルミテート（Ｔ６０）、エトキシル化（２０ＥＯ）ソルビタンモノオレエート／リノレート（Ｔ８０）、エトキシル化（２０ＥＯ）ソルビタントリオレエート（Ｔ８５）、エトキシル化（２０ＥＯ−４０ＥＯ）ヒマシ油；エトキシル化（２０−４０ＥＯ）水素化ヒマシ油、エトキシル化（５−４０ＥＯ）モノグリセリドステアレート／プラチマート、ポリオキシル３５および４０ＥＯヒマシ油、から選択される。その他の実施形態によれば、親水性界面活性剤は、グリセロール、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポリソルベート４０（ツイーン４０）、ポリソルベート６０（ツイーン６０）、ポリソルベート８０（ツイーン８０）、ＭｉｒｊＳ４０、オレオイルマクロゴールグリセリド、ポリグリセリル−３ジオレエート、エトキシル化ヒドロキシステアリン酸（ソルトールＨＳ１５）、糖エステル（ショ糖モノオレイン酸エステル、ショ糖モノステアレート）、ポリグリセロールエステル（１０グリセロールモノオレエート、６グリセロールモノラウレート、又はモノオレイン酸）；および、短鎖および中鎖の飽和および不飽和脂肪酸（例えば、ラウリン酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウム、リノール酸ナトリウム、リノレン酸ナトリウムなど）の  ナトリウム−、カリウム−、アンモニウム−、エタノールアミン−、などの石鹸、およびそれらの任意の組み合わせから選択できる。抽出培地は、いくつかの実施形態では、約３０乃至８５重量％の上述の親水性界面活性剤を含む。
【００３８】
共界面活性剤という用語は、親水性界面活性剤とは異なる任意の薬剤を包含すると解すべきであり、（親水性界面活性剤と共に）油相と水相との間の界面張力をほぼゼロ（またはゼロ）に低下させることができ、培地が水性液体と混合すると、均質混合物を形成し、ならびにナノ構造体の界面または油性コアへ抽出したカンナビノイドを幾何学的および物理的に統合できる。いくつかの実施形態によれば、共界面活性剤は、ポリオール、ジグリセリド、ポリオキシエチレンなどから選択される。
【００３９】
共界面活性剤は、少なくとも１つのポリオールであり、すなわち少なくとも２つのヒドロキシル基を含有するアルコール、例えばエチレングリコール、グリセロール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ソルビトール、マンニトール、ラクチトール、キシリトールなどである。
【００４０】
いくつかの実施形態において、共界面活性剤は、グリセロール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、キシリトール、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ４００およびＰＥＧ６００から選択される。いくつかの実施形態において、共界面活性剤は抽出培地中に約１乃至５０重量％の量で存在する。
【００４１】
いくつかの実施形態において、抽出培地は更に少なくとも１つの溶媒を含んでいてもよい。溶媒という用語は、油と混和性であり、油と一緒にＣＢＤを溶解し安定化させる均質な油相を形成する、油とは異なる有機化合物を指す。溶媒は、いくつかの実施形態によれば、液体炭化水素、アルコールなどから選択される。いくつかの実施形態によれば、溶媒は、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、酢酸、乳酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、コハク酸などから選択される。いくつかの実施形態において、溶媒は、約０．１乃至２５重量％の量で抽出培地中に存在する。
【００４２】
共溶媒は、プロピレングリコール、グリセロール、キシリトールなどのポリオール、またはエタノール、プロパノール、イソプロパノールなどの短鎖アルコールである。
【００４３】
いくつかの実施形態では、抽出培地がさらに少なくとも１つのリン脂質を含む。大豆レシチン、菜種レシチン、トウモロコシ又はヒマワリレシチン、卵レシチン、ヒドロキシル化リン脂質、リソリン脂質、リン酸塩リン脂質、水素化リン脂質、Ｅｐｉｃｏｒｎ２００、Ｐｈｏｓａｌ５０ＰＧ、ジオレイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、オレイルパルミトイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、および対応するセリン類、エタノールアミン類、グリセロールなどのリン脂質を使用することができる。そのような実施形態によれば、抽出培地は、約１乃至１０重量％のリン脂質を含む。
【００４４】
当業者には自明であるが、培地の成分間の比率は、抽出培地に特定の特性（例えば、所望のカンナビノイド（例えば、ＣＢＤ）の添加、液滴サイズ、粘度、電荷など）を与えるように調整することができる。
【００４５】
いくつかの実施形態では、抽出培地は、（ｉ）中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、Ｒ−（＋）−リモネン、トリアセチン、およびオレイン酸から選択される少なくとも１つの油と、（ｉｉ）ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０）、ポリオキシル３５ヒマシ油（クレモフォアヒマシ油）、パルミトステアレート（ラブラソル）、スクロースモノ／ジラウレート、およびグリセロールから選択される少なくとも１つの親水性界面活性剤と、（ｉｉｉ）共界面活性剤としてポリプロピレングリコール（ＰＧ）と、選択的に、少なくとも１つのリン脂質および／またはエタノールおよびイソプロピルアルコールから選択される少なくとも１つの溶媒、を含む。
【００４６】
他の実施形態では、抽出培地は以下の抽出培地配合組成から選択される：
−  中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０）、ポリオキシル３５ヒマシ油（クレモフォアヒマシ油）、ポリプロピレングリコール（ＰＧ）、および少なくとも１つのリン脂質；または  
−Ｒ−（＋）−リモネン、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０）、ポリプロピレングリコール（ＰＧ）、および  エタノールおよびイソプロピルアルコールから選択される少なくとも１つの溶媒；または  
−  トリアセチン、ポリオキシル３５ヒマシ油（クレモフォアヒマシ油）、パルミトステアレート（ラブラソール）、少なくとも１つのリン脂質、及びエタノールおよびイソプロピルアルコールから選択される少なくとも１つの溶媒；または  
−  中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、スクロースモノ−／ジ−ラウレート、ポリプロピレングリコール（ＰＧ）、少なくとも１つのリン脂質、及びエタノールおよびイソプロピルアルコールから選択される少なくとも１つの溶媒；または  
−  中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、オレイン酸、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０）、ポリオキシル３５ヒマシ油（クレモフォアヒマシ油）、グリセロール、ポリプロピレングリコール（ＰＧ）、少なくとも１つのリン脂質、およびエタノールおよびイソプロピルアルコールから選択される少なくとも１つの溶媒。
【００４７】
本開示の植物源は、抽出培地を利用することによって抽出される。用語「抽出」またはその言語的変形は、植物源から抽出培地の可溶化油相への所望のカンナビノイドの移動を意味する。本開示の方法は、例えば混合することによって、植物源と抽出培地との第一の混合物を得るステップを具える。混合は、剪断混合を含まない任意の適切な既知の方法、例えば手動混合、磁気撹拌、ペダルによる混合などによって実施することができる。
【００４８】
いくつかの実施形態では、植物源の第１の量の抽出培地の第１の量に対する重量比（ｗｔ／ｗｔ）が、１：５乃至１：１００である。その他の実施形態では、植物源の第１の量の抽出培地の第１の量に対する重量比（ｗｔ／ｗｔ）が、１：７乃至１：９０、１：１０乃至１：８０、１：１２乃至１：７０、または１：１５乃至１：６０の間でさえある。
【００４９】
次の段階で、第一混合物を均質化する。均質化、またはその言語的変形は、植物源と抽出培地の両方を砕いて（すなわち、植物源のサイズを小さくする）、それらの混合物にせん断力を加えて密接に接触させ、植物源から所望のカンナビノイドを抽出できるようにするプロセスを指す。均質化は、限定するものではないが、ホモジナイザーや高速の機械的攪拌を含む適切な手段によって、任意の方法で実施することができる。本開示のプロセスで使用される培地はナノメートルサイズの構造を有するので、均質化プロセスは抽出培地のミセルサイズおよび／または構造にほとんど影響を及ぼさないことに留意されたい。
【００５０】
いくつかの実施形態では、均質化（すなわち、ステップ（ｂ）の）は、約１乃至約１２０分の期間にわたって行われる。他の実施形態では、均質化は、約１乃至６０分の間、約１乃至４５分の間、約１乃至３０分の間、さらには約１乃至２０分の間で行われる。いくつかの他の実施形態において、均質化は約５乃至約１２０分の間、約１０乃至約１２０分の間  、約１５乃至約１２０分の間、または約２０乃至約１２０分の間、行われる。  
【００５１】
いくつかの実施形態によれば、均質化は、約５００乃至６０００ｐｓｉの圧力で実行される。
【００５２】
いくつかの実施形態では、均質化は、約５乃至約７０℃の温度で実施される。他の実施形態では、均質化は、約１０乃至約７０℃、約１５乃至約７０℃、約２０乃至約７０℃、約２５乃至約７０℃、あるいは約３０乃至約７０℃の温度で実施される。いくつかの他の実施形態では、均質化は、約１０乃至約６５℃、約１０乃至約６０℃、約１０乃至約５５℃、約１０乃至約５０℃、約１０乃至約４５℃、さらには約１０乃至約４０℃の温度で実施することができる。さらなる実施形態では、均質化は、約５乃至約６０℃、約２０乃至約５０℃、または約２５乃至約４５℃の温度で実施することができる。
【００５３】
均質化は、任意の適切な種類のホモジナイザー、例えば、Ｓｉｌｖｅｒｓｔｏｎｅ社のホモジナイザー、超トルクホモジナイザー、コロイドミル、超音波処理、ボールミル粉砕、マイクロフルイダイザー、およびその他の高剪断力および高機械力または圧力を用いた、均質化、乳化または分散法を用いて行うことができる。
【００５４】
混合物が均質化されると、その混合物は、植物源を含む使用済みバイオマススラリーとカンナビノイド添加培地（例えば、ＣＢＤ添加培地）とに分離される。分離は、任意の適切な方法によって、例えばフィルターを通した濾過、または遠心分離、デカンテーションもしくは抽出相の吸引によって行うことができる。いくつかの実施形態では、混合物の分離を遠心分離によって行い、次いで濾過してもよく、ろ過しなくてもよい。
【００５５】
カンナビノイドの少なくとも一部は植物中にカルボキシル化された形態でみられることが多いことは注目に値する。例えば、大部分のＣＢＤはＣＢＤＡとして植物にみられる。従って、例えばＣＢＤＡをＣＢＤに変換するといった、カルボキシル化した形態を、薬理学的活性を有することが知られている非カルボキシル化形態に変換することが望ましい。ここに開示されている方法では、このような変換は、抽出前に植物源を加熱し、それによってカンナビノイドを脱カルボキシル化すること（例えば、ＣＢＤＡからＣＢＤへ）によって行われる。したがって、いくつかの実施形態では、この方法は、工程（ａ）の前に、さらに植物源を加熱するステップを具えていてもよい。
【００５６】
いくつかの他の場合では、加熱はそれより後の段階で行うことができ、この場合は加熱はＣＢＤＡ添加培地に（すなわち抽出後に）行われる。
【００５７】
いくつかの実施形態によれば、植物源は、約９０乃至約１８０℃の温度に加熱される。他の実施形態では、植物源は、約９０乃至約１７５℃、約９０乃至約１７０℃、約９０乃至約１６５℃、または約９０乃至約１６０℃の温度に加熱するようにしてもよい。その他のいくつかの実施形態では、植物源は、約１２５乃至約１８０℃、約１３０乃至約１８０℃、約１３５乃至約１８０℃、または約１４０乃至約１８０℃の温度に加熱することができる。その他の実施形態では、植物源は、約１２５乃至約１７０℃、約１３０乃至約１６５℃、さらには約１３５乃至約１６０℃の温度に加熱するようにしてもよい。
【００５８】
主に植物源を燃やしてしまう危険を避けるために、より低い温度での加熱も考えられる。しかしながら、より低い温度で加熱する場合には、より長い加熱期間とするべきである。また、加熱は二段階で行ってもよい。植物から水を乾燥させる第一段階（最長１２０分間、５０乃至７０℃で）と、脱炭酸のための７０乃至１６０℃での第二段階である。
【００５９】
いくつかの実施形態において、加熱は窒素（好ましくは無酸素）雰囲気下で行うようにしてもよい。
【００６０】
いくつかの実施形態において、植物源は、約５乃至２４０分間加熱するようにしてもよい。他の実施形態において、植物源は、約１０乃至１００分間、約１５乃至８０分間、または２０乃至６０分間加熱してもよい。
【００６１】
バイオマススラリーからのカンナビノイドの追加抽出は、追加の抽出サイクルを使用することによって行うことができ、これによって所与の量の植物源から得られる収量が最大になる。すなわち、植物源からの所望のカンナビノイドの抽出を最大にするために、新しいバッチの抽出培地を使用して、同じ植物試料にいくつかの連続抽出サイクルを行うことができる。したがって、いくつかの実施形態では、この方法はさらに以下のステップを具えていてもよい：  
（ｄ）バイオマススラリーを第２の量の抽出培地と混合して第２の混合物を得るステップと；  
（ｅ）第二混合物を均質化するステップと；
（ｆ）第２の混合物をバイオマススラリーと高カンナビノイド添加培地に分離するステップ。
【００６２】
いくつかの実施形態では、ステップシーケンス（ｄ）乃至（ｆ）を１乃至７回繰り返す。
【００６３】
培地中により高い抽出負荷を得るために、カンナビノイド添加培地を用いて（以前はなかった）新しい植物源サンプルから、さらなる量の同じカンナビノイドを抽出することにより、いくつかの抽出サイクルでこのプロセスを実施することができる。したがって、いくつかの実施形態では、この方法はさらに以下のステップを具えていてもよい。
（ｄ’）カンナビノイド添加培地を第２の量の植物源と混合して第２の混合物を得るステップと；  
（ｅ’）第二混合物を均質化するステップと；
（ｆ’）第２の混合物をバイオマススラリーと高カンナビノイド添加培地に分離するステップ。
【００６４】
いくつかの実施形態では、ステップシーケンス（ｄ’）乃至（ｆ’）を１乃至７回繰り返す。
【００６５】
ステップ（ｄ）−（ｆ）または（ｄ’）−（ｆ’）の混合、均質化および分離パラメータは、工程（ａ）−（ｃ）に関して上述したものと同じであってもよく、異なっていてもよい。  
【００６６】
本明細書に記載されている両方のプロセスシーケンスにおいては、いくつかの実施形態により、新鮮な抽出培地およびカンナビノイド添加培地を異なるサイクルのプロセスで使用することが意図されている。すなわち、このサイクルのいくつかは新鮮な抽出培地で行われ、同じプロセスシーケンスの他のサイクルはカンナビノイド添加培地を用いて行うことができる。
【００６７】
使用済みバイオマスは、ＴＨＣ、精油、テルペンおよびこの植物源のその他の活性成分など、さらなる成分を抽出するための任意の望ましい方法でさらに処理することができる。  
【００６８】
異なる抽出バッチからのカンナビノイド添加培地の割り当てを混合して、最終製品中に所望の濃度のカンナビノイドを得ることができる。このような混合は、任意の適切な混合方法によって実施できる。カンナビノイド添加培地は、そのまま使用することができるが、他の成分（抗酸化剤、防腐剤）を加えて、液体ゲルカプセル剤、クリーム剤、ゲル剤、パッチ剤などに添加する、あるいは以下にさらに述べるように希釈することによってさらに製剤化することができる。
【００６９】
本開示の別の態様では、少なくとも１つの油、少なくとも１つの親水性界面活性剤、および少なくとも１つの溶媒を含むカンナビノイド含有植物源から所望のカンナビノイド（例えばカンナビジオール）を選択的に抽出する抽出培地が提供されており、この抽出培地は、さらに選択的に、少なくとも１つのリン脂質および／または少なくとも１つの共溶媒を含む。
【００７０】
さらなる態様では、本開示は、本明細書に記載の方法によって得られるカンナビノイド添加培地（例えばＣＢＤ）を提供している。
【００７１】
本開示のさらなる態様は、少なくとも０．１重量％のＣＢＤ、少なくとも１つの油、少なくとも１つの親水性界面活性剤、および少なくとも１つの共界面活性剤を含むＣＢＤ添加培地を提供しており、この培地は選択的に、少なくとも１つの溶媒、少なくとも１つの共溶媒、および／または少なくとも１つのリン脂質をさらに含む。
【００７２】
いくつかの実施形態において、このＣＢＤ添加培地は、約１乃至１２重量％のＣＢＤを含む。他の実施形態では、ＣＢＤ添加培地は、最大で１重量％のＴＨＣを含む。
【００７３】
油、親水性界面活性剤、溶媒およびリン脂質は上述したものから選択される。
【００７４】
さらなる実施形態では、本明細書に記載の各抽出培地が、抗酸化剤（例えばトコフェロール）、酸素捕捉剤、抗菌防腐剤、膜貫通剤（ペプチド）、膜貫通浸透エンハンサー（例えば、トランスクトール、イソソルビド、オレイン酸、プロピレングリコール、マルトデキストリン、シクロデキストリン、など）、香味剤および／または芳香剤から選択される少なくとも一つの添加剤をさらに含んでいてもよい。
【００７５】
カンナビノイド添加培地は、そのまま、すなわち他の成分を添加することなく、医薬組成物として使用することができる。代替的に、本開示のカンナビノイド添加培地は、様々な水性液体で希釈することによって、または様々な他の担体に組み込むことによって、様々な製剤に配合することができる。本開示の濃縮ならびに希釈形態は、経時的に製剤の安定性を大幅に向上させ、汚染の危険性を低減し、その適用範囲を多種多様な濃度（様々な用量）と希釈形態に広げる一方で、医療専門家は、使用前にどのように、いつ、どの濃度（希釈）を準備するかを決定させることができる。
【００７６】
濃縮物という用語は、実質的に水を含まない油ベースの構造化脂質／界面活性剤系を意味し、ここで界面活性剤の尾部はＣＢＤによって可溶化され、この油は任意に希釈水相によって完全な希釈を促進して（希釈可能）、投与のための希釈されたカンナビノイド添加培地を形成する。言い換えれば、濃縮物は、以下に説明するように、希釈マイクロエマルジョンを形成する、適切な希釈剤、通常は水や水溶液（例えば、砂糖水、甘味料溶液、および水−アルコール混合物）中で迅速かつ完全に希釈するように設計される。適切な希釈剤で希釈すると、本発明の濃縮物は自発的にマイクロエマルジョンを形成し、最初は「界面活性剤の溶媒和ドメイン（またはクラスター）」中間相であり、わずかに希釈すると（約１０−３０重量％）油中水ナノ液滴を形成する。さらに希釈すると、両連続中間相と水中油型（Ｏ／Ｗ）ナノ液滴に変換されて、希釈剤は連続相を形成する一方で、油相はナノメートルサイズの分散液滴の形（すなわち、希釈マイクロエマルション）となる。上述したように、希釈カンナビノイド添加培地は、濃縮物から自発的に、すなわち剪断、キャビテーションまたは均質化プロセスを適用する必要なく、形成される。
【００７７】
カンナビノイドのプロファイル投与量の処方およびより良好な制御に柔軟性を提供することに加えて、本明細書に記載の方法によって製造される濃縮物は実質的に水を含まない、すなわち水分を欠いている。抽出培地に水が存在しなくなると、濃縮物は、微生物（例えば、真菌または細菌）の増殖を持続させる環境を欠くことになり、汚染の危険性なしに（または最小限の危険性で）より長期間の貯蔵が可能になる。理論に束縛されることを望まないが、そのような濃縮物について細菌汚染がほとんど観察されない理由の１つは、非結合水の不在であり、これによって微生物の増殖が制限され、カンナビノイド添加培地の有効期間が実質的に長くなる。
【００７８】
いくつかの実施形態では、カンナビノイド添加培地（すなわち濃縮物）は完全に水を含まない。
【００７９】
濃縮物と希釈剤との間の比率は、抽出培地中のカンナビノイドの所望の最終濃度に依存する。いくつかの実施形態によれば、希釈したカンナビノイド添加培地は、約６０乃至９８重量％の希釈剤を含む。
【００８０】
別の態様では、本開示は、本明細書に記載のカンナビノイド添加培地を含む医薬組成物または栄養補助食品組成物を提供する。
【００８１】
いくつかの実施形態において、この医薬組成物は少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含み得る。本明細書に記載の「薬学的に許容される担体」、例えば、ビヒクル、アジュバント、賦形剤、または希釈剤は当業者にはよく知られており、一般に容易に入手可能である。薬学的に許容される担体は、活性化合物に対して化学的に不活性であるもの、および使用条件下で有害な副作用または毒性を有さないものであることが好ましい。
【００８２】
担体の選択は、部分的には活性剤（すなわちカンナビノイドプロフィール）、ならびに組成物の投与に使用される特定の方法によって決定される。したがって、本発明の医薬組成物の多種多様な適切な製剤がある。
【００８３】
上述したように水性液体で希釈した場合、自発水中油型（Ｏ／Ｗ）ナノ−ミセルが形成され、希釈剤は連続相を形成する一方で、油相はナノメートルサイズの分散液滴の形態である。いくつかの実施形態において、希釈培地の油滴の平均液滴径は、最大で１００ナノメートル（好ましくは＜５０ｎｍ）である。
【００８４】
いくつかの他の実施形態では、液滴サイズが約１０乃至５０ｎｍ（ナノメートル）である。液滴サイズは、測定された液滴の直径の算術平均を意味し、この直径は平均値から±１５％の範囲である。
【００８５】
さらに、本開示の希釈培地は、油滴の単分散サイズ分布を特徴とする。すなわち、油滴の粒度分布は狭く、平均粒度値から有意に逸脱していない。いくつかの実施形態では、油滴の分布の多分散指数（ＰＤＩ）が約０．０３乃至０．１である。
【００８６】
水性希釈剤は、水、着香水、注射用水、食塩水、デキストロース溶液、またはｐＨ３乃至９の緩衝液から選択することができる。着香料および／または芳香剤は、希釈を行う間または希釈後に添加できる。
【００８７】
医薬組成物は、投与経路および／または所望の製剤の特性に応じて、水性および非水性希釈剤、等張滅菌注射液、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、ゲル化剤、皮膚軟化剤、保湿剤、安定剤、防腐剤、緩衝剤、着色剤、芳香剤、吸収剤、フィルター、電解質、タンパク質、キレート剤などの様々な追加の成分を含んでいてもよい。
【００８８】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、ゲル、ローション、油、石鹸、スプレー、エマルジョン、クリーム、軟膏、カプセル、ソフトゲルカプセル、チューインガム、局所パッチ、頬または舌下フィルム、点眼薬または溶液から選択される形態である。
【００８９】
その他の実施形態では、組成物は、局所、経口、直腸、膣、口腔、経鼻、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、鼻腔内、吸入による、眼へのまたは非経口での、対象の循環系への種々の投与経路でのカンナビノイドの送達に適合させることができる（静脈内（ｉｖ）、筋肉内（ｉｍ）、および皮下（ｓｃ））。
【００９０】
経口投与に適した製剤は、（ａ）水、食塩水、風味付けした水、またはジュース（例えばオレンジジュース）などの希釈剤に溶解させた有効量の化合物、またはそれを含む組成物などの液体溶液；（ｂ）所定量の有効成分を固形または顆粒で含有するカプセル剤、サシェ剤、錠剤、ロゼンジ剤およびトローチ剤；（ｃ）粉末；（ｄ）適切な液体中の懸濁；（ｅ）濃縮物または希釈システム；（ｆ）経口、鼻腔内、舌下または口腔内スプレー；（ｇ）吸入スプレー；からなる。液体製剤は、薬学的に許容される界面活性剤、懸濁剤、または乳化剤を添加したまたは添加していない、水およびアルコール、例えばエタノール、ベンジルアルコール、およびポリエチレンアルコールなどの希釈剤を含んでいてもよい。カプセル形態は、例えば界面活性剤、潤滑剤、および例えばラクトース、スクロース、リン酸カルシウム、およびコーンスターチなどの不活性充填剤を含有する通常の硬質または軟質ゼラチン型のものである。錠剤形態は、ラクトース、スクロース、マンニトール、コーンスターチ、ポテトスターチ、アルギン酸、微結晶セルロース、アラビアゴム、ゼラチン、グアーガム、コロイド状二酸化ケイ素、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、及びその他の賦形剤、着色剤、希釈剤、緩衝剤、崩壊剤、湿潤剤、保存剤、香味剤、および薬理学的に適合する担体のうちの一又はそれ以上を含んでいてもよい。ロゼンジ形態は、香味料、通常はスクロースおよびアカシアゴムまたはトラガカンタゴム中に活性成分を含んでいてもよい。また、ドロップ形態は、当技術分野で公知の担体である活性製剤に加えて、ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアなどの不活性基剤中に活性製剤を含んでいてもよい。
【００９１】
本発明の別の態様は、痛み関連障害（鎮痛剤として）、炎症性障害および症状（抗炎症剤として）、アパタイト抑制または刺激（食欲抑制剤または刺激剤として）、嘔吐および吐き気の症状（制吐剤として）、腸疾患、不安に関連する障害および症状（抗不安薬として）、精神病に関連する障害および症状（抗精神病薬として）、発作および／または痙攣に関連する障害及び症状（抗てんかん薬または鎮痙薬として）、睡眠障害および症状（抗不眠症として）、免疫抑制による治療を必要とする障害および症状、血糖値の上昇に関連する疾患および症状（抗糖尿病薬として）、神経系の悪化に関連する疾患および症状（神経保護剤として）、炎症性皮膚疾患および症状（乾癬など）、動脈の閉鎖に関連する疾患および症状（抗虚血剤として）、細菌感染症に関連する障害および症状、真菌感染症に関連する障害および症状、増殖性障害および症状、骨成長の阻害に関連する障害および症状、外傷後障害などから選択された症状の治療用の本開示の抽出培地または医薬組成物を提供する。
【００９２】
さらなる態様は、ある症状に罹患している対象を治療する方法を提供しており、この方法は本開示の有効量の抽出培地または医薬組成物を対象に投与するステップを具える。
【００９３】
いくつかの実施形態では、この症状が上記のものから選択される。
【００９４】
本明細書に記載の方法によって製造された抽出培地を使用して、少なくとも１つの効果、例えば治療効果を誘発することができ、または、少なくとも１つの薬剤、例えば。対象の望ましくない症状または疾患の治療または予防によって、少なくとも１つの効果を誘発、増強、停止または減少させることができる治療剤と組み合わせることができる。少なくとも１つの薬剤（物質、分子、元素、化合物、実体、またはそれらの組み合わせ）は、治療薬、すなわち治療的に有効量で投与したときに治療効果を誘発または調節することができる薬剤、および非治療薬、すなわち、それ自体では治療効果を誘発または調節はしないが、選択された所望の特性を医薬組成物に与え得る薬剤から選択することができる。
【００９５】
本開示の医薬組成物は、任意の病状または症状を治療、予防または改善するように選択することができる。本明細書で使用されているように、治療という用語またはその任意の言語的変形は、濃縮抽出培地の形態または希釈形態のいずれであっても、本明細書に記載の組成物またはシステムの投与を意味し、これは疾病に関連する望ましくない症状の改善する、そのような症状が現れる前にその発現を防止する、疾病の進行を遅らせる、症状の悪化を遅らせる、寛解期間の開始を強化する、疾病の進行性慢性病期に生じる不可逆的なダメージを遅らせる、進行性病期の発症を遅らせる、重症度を軽減するまたは疾患を治療する、生存率を改善するまたはより早く回復させる、または疾患の発生を防止する、または上記の二またはそれ以上の組み合わせに、有効である。  
【００９６】
知られているように、本発明の目的における有効量は、当技術分野において知られている考察によって決定される。有効量は通常適切に設計された臨床試験（用量範囲試験）で決定され、有効量を決定する試験を適切に実施する方法は当業者には公知である。一般的に知られているように、有効量は、体内の分布プロファイル、体内での半減期のような種々の薬理学的パラメータ、あれば望ましくない副作用、年齢や性別などを含む様々な要因に依存する。
【００９７】
「対象」という用語は、哺乳動物、ヒト、または非ヒトを指す。
【００９８】
第１の表示数と第２の表示数との間の「範囲」および第１の表示数から第２の表示数までの「範囲」は本明細書では互換的に使用されており、第１および第２の表示数と、その間にあるすべての小数桁と整数の数字を含むことを意味する。様々な実施形態が所与の範囲を使用して説明されている場合、その範囲は単に便宜上および簡潔さのためにそのように表示されており、本発明の範囲に対する柔軟性のない限定として解釈されるべきではない。したがって、範囲の説明は、その範囲内の個々の数値だけでなくすべての可能なサブ範囲を具体的に開示していると見なすべきである。
【００９９】
本明細書で使用されているように、用語「約」は、温度、圧力、濃度などのパラメータの具体的に言及された値から±１０％の偏差を含むことを意味する。
【図面の簡単な説明】
【０１００】
本明細書に開示されている主題をよりよく理解し、それが実際にどのように実行されるのかを例示するために、添付の図面を参照しながら、非限定的な例として実施形態を説明する。
【図１】図１は、ＨＰＬＣ分析で得られた、ＣＢＤＡをＣＢＤに変換する様々な温度で加熱された植物サンプルについての加熱温度に対するＣＢＤピーク面積を示す。
【図２】図２は、ＨＰＬＣ分析で得られたＣＢＤ／ＣＢＤＡピーク面積比を、種々の加熱温度での加熱時間に対してプロットした図である。
【図３】図３は、抽出培地中および４０％の水希釈抽出培地中のＣＢＤ濃度を示す。
【図４】図４は、抽出時間に対するＡＸ−１抽出培地中のＣＢＤ濃度を示す。
【図５】図５は、抽出時間に対する、ＡＸ−１抽出培地を用いた植物からのＣＢＤ抽出の収率を示す。
【図６】図６は、様々な抽出時間についての、植物試料（ＣＢＤＡ、ＴＨＣおよびＣＢＮ）中のＣＢＤピーク面積とその他のカンナビノイドのピーク面積との間の比を示す。
【図７】図７は、植物対培地比に対するＡＸ−１抽出培地中のＣＢＤ濃度を示す。
【図８】図８は、植物対マイクロエマルジョン比に対する、ＡＸ−１抽出培地を用いた植物からのＣＢＤ抽出の収率を示す。
【図９】図９は、種々の植物対培地比についての、植物試料（ＣＢＤＡ、ＴＨＣおよびＣＢＮ）中のＣＢＤピーク面積とその他のカンナビノイドのピーク面積との間の比を示す。
【図１０】図１０は、抽出サイクル数に対するＡＸ−１抽出培地中のＣＢＤ濃度を示す。
【図１１】図１１は、抽出サイクル数に対する、ＡＸ−１抽出培地を用いた植物からのＣＢＤ抽出の収率を示す。
【図１２】図１２は、抽出サイクル数に対する、抽出培地サンプル中のＣＢＤ、ＣＢＤＡ、ＴＨＣおよびＣＢＮのピーク面積を示す。
【図１３】図１３は、エタノールを用いたＣＢＤおよびその他のカンナビノイドの抽出濃度および収率を示す図である。
【図１４】図１４は、石油エーテルを用いたＣＢＤおよびその他のカンナビノイドの抽出濃度および収率を示す図である。
【図１５Ａ】図１５Ａは、それぞれ、ＣＢＤ添加ＡＸ−１および５ＣＳ濃縮物について行われた７０日間の安定性試験結果を示す。
【図１５Ｂ】図１５Ｂは、それぞれ、ＣＢＤ添加ＡＸ−１および５ＣＳ濃縮物について行われた７０日間の安定性試験結果を示す。
【図１６】図１６は、ラットから採取した試料中の、ＣＢＤ添加ＡＸ−１、ＣＢＤ添加５ＣＳ、およびオリーブ油（対照）製剤中に可溶化させた結晶性ＣＢＤの投与から０．５及び２時間後の血漿中ＣＢＤレベルを示す。
【図１７】図１７は、体重１ｋｇに対する５、２５及び５０ｍｇの植物源の用量で、「５ＣＳ抽出培地」または「エタノール抽出」で経口処置を行った２４時間後に採取した血液試料中で測定した、足に急性の炎症を誘発したマウスからのＴＮＦ−血漿レベルを示す。
【図１８】図１８は、処置の６時間後に測定した、オリーブ油に溶解させたエタノールによる抽出と比較した、「５ＣＳ抽出培地」培地で処置したマウスの炎症を起こした足の厚さを示す。
【図１９】図１９は、ＤＨＴ誘発ラットの耳厚測定値を示す。
【図２０】図２０Ａ乃至Ｄは、ＤＨＴ試験におけるラットの耳の写真であり：２４ｍｇ／ｋｇＢＷの５ＣＳ製剤（図２０Ａ）、４８ｍｇ／ｋｇＢＷの５ＣＳ製剤（図２０Ｂ）、未処理のＤＨＴ誘発（図２０Ｃ）、およびナイーブラット（図２０Ｄ）の写真である。
【発明を実施するための形態】
【０１０１】
植物の予熱の効果
上述したように、ＣＢＤの少なくとも一部はＣＢＤＡの形で植物中に見られる。ＣＢＤＡの脱カルボキシル化は、制御された条件下で植物を加熱することによって実施でき、所望のＣＢＤを得ることができる。以下の実施例で使用した植物は、大麻サティバと大麻インディカの様々な雑種である。
【０１０２】
抽出収量に対する抽出工程前の植物源の加熱の影響を評価するために、乾燥カンナビス植物の様々な株におけるカンナビノイド種の含有量を、ＨＰＬＣによって加熱前にプロファイルした。  
【０１０３】
植物サンプル（花、葉および茎の混合物を使用した）を大まかに刻み、空気雰囲気中で９０乃至１７０℃の温度で１０乃至１２０分間加熱した。次いで、この試料を、３０乃至３５℃で撹拌しながら、３０分間エタノール（植物１００ｍｇ当たり１０ｍｌ）で抽出した。ＨＰＬＣで決められているように、ＣＢＤＡからＣＢＤへの変換に関する溶媒としてエタノールを使用した。次に脱脂綿を通してサンプルを濾過して抽出物を得、これをＨＰＬＣで分析した。
【０１０４】
ＨＰＬＣ分析は以下の条件で行った：Ｃ１８カラム、移動相−メタノール／水（６９／３１ｖ／ｖ％）から１００％メタノールの勾配、流速０．３ｍｌ／分。
【０１０５】
ＣＢＤピーク面積を加熱温度に対してプロットした（図１）。図２は、種々の加熱温度における加熱時間に対するＣＢＤとＣＢＤＡのピーク面積の間の比を示す。
【０１０６】
結果から明らかなように、加熱は植物試料中のＣＢＤの濃度を著しく増加させ、それにより試料中の所望の抽出可能なカンナビノイド種の含有量が増加する。試料をより低い温度範囲（１４０℃）で加熱した場合、６０−９０分の加熱後にＣＢＤＡからＣＢＤへの最大の変換が観察された。より高い温度（１６０℃）では、サンプル中に所望のレベルのＣＢＤを得るのに１０−２５分の加熱で十分であった。
【０１０７】
１４０℃での長時間加熱（６０乃至９０分間）または１６０℃での短時間加熱（１０乃至２５分間）は、ＣＢＤＡからＣＢＤへの高い変換率と同様に、植物中の最大量のＣＢＤに達するのに適している。１７０℃を超えると、１０分後にはすでにＣＢＤＡは確認されなかったが、初期段階で分解生成物が現れる。
【０１０８】
したがって、以下の抽出はすべて、これらの結果に基づいて、１６０℃で１５分間加熱した植物で行った。
【０１０９】
抽出培地および調製
上述したように、抽出プロセスに使用される抽出培地は、自発的に形成される自己組織化システムである。したがって、抽出培地のいくつかの組成物は、２５乃至７０℃で成分を単純に混合することによって調製した。抽出培地を調製する例示的な方法は、油、界面活性剤および共界面活性剤（および該当する場合は、溶媒、共溶媒および／またはリン脂質も）を、均質でクリア（透明）な混合物が得られるまで共に混合するステップを具える。界面活性剤または油が室温で固体である場合は、混合しながら加熱して完全に溶解させ、空の抽出培地を形成することができる。  
【０１１０】
次いで、予熱して細かく刻んだ植物に抽出培地をゆっくりと添加して適切に湿潤させ、混合して均質化する。この方法のもう一つの変形例は、均一なスラリーが得られるまで、空の（充填されていない）抽出培地に段階的に固体植物部分（例えば葉または芽）を添加するステップを具える。
【０１１１】
加熱下で、不活性雰囲気であるいは不活性雰囲気なしで抽出を行い、これによって抽出培地中にＣＢＤを可溶化させた。濾過および／または遠心分離を行う前に、混合物を混合容器の底に沈降させた。  
【０１１２】
表１は、本開示の方法において使用される例示的な配合物の詳細を示す。
【０１１３】
2020502040.tif 000004
【０１１４】
通常、乳化剤の存在下で形成された２つの不混和性液体の分散液である、一般に知られているエマルジョンの形成は、２相間の界面張力の減少に基づいており、分散した液滴が乳化剤の層によって覆われて凝集、軟凝集、合体および相分離を遅らせる。乳化剤は界面張力をゼロにまで減少させず、被覆率が完全ではないので、エマルジョンの調製時に液滴サイズを減少させるために多段ホモジナイザーの比較的高い剪断力を適用する必要がある。結果として生じる不均一な液滴は、合体するおよび／または相分離をもたらす傾向が強く、それによってシステムをエネルギー的に安定化させる。従って、エマルジョンは比較的不均一で大きな液滴サイズを示し、これは長期間にわたって不安定である（すなわち、合体のために液滴サイズが増大するか、または相分離をもたらすことがある）。さらに、典型的なエマルジョンでは、液滴サイズは均一であることからかけ離れており、乳白色で、白い不透明な外観となる。エマルジョン培地による抽出は、非常に速い相分離と、非常に限られた量の抽出負荷となる。
【０１１５】
既知のエマルジョンとは逆に、本明細書に開示した方法で使用される抽出培地は界面張力がゼロであり、したがって小さく均一な液滴サイズを特徴とするエネルギー的にバランスのとれた系として自発的に形成され、透明な系となる。これらのエネルギーバランスのために、この方法で使用される抽出培地（およびその結果としてカンナビノイド添加培地）も長期間安定であり、水性液体で希釈してもそれらの液滴サイズおよびサイズ均一性を維持し、それらを様々な医薬組成物に製剤化し、様々な投与経路および形態での投与に適切なものにする。
【０１１６】
さらなる例示的な配合物が表２に詳述されている。
【０１１７】
2020502040.tif 000005
【０１１８】
ＭＣＴの代わりにオリーブ油を含む配合物（配合物５ＣＳの抽出培地中の油成分として）の能力、ならびに希釈培地（４０重量％水）が植物源からＣＢＤを抽出する能力も評価した。図３に見られるように、オリーブ油も抽出培地中の油成分として適している。さらに、希釈培地も、植物材料からＣＢＤを抽出する能力を示し、濃縮製剤と比較してわずかに高いＣＢＤ濃度さえ示す。  
【０１１９】
抽出培地による植物試料からのＣＢＤの抽出
植物サンプルのカンナビノイドプロファイル
本開示の抽出プロセスにおいて、様々なカンナビノイド株を試験した。エタノール抽出（上述の通り）およびＨＰＬＣ分析によって、抽出培地での抽出の前に植物の試料をカンナビノイドプロファイルについて評価した。様々な株のカンナビノイドプロファイルを表３に示す。
【０１２０】
2020502040.tif 000006
【０１２１】
本明細書に記載されている抽出培地プロセスはすべて、１６０℃で１５分間加熱した植物サンプルに対して行った。以下の実験はすべてＭ（１）−１株で行った。
【０１２２】
抽出期間の影響
植物サンプル（加熱後）をＡＸ−１抽出培地と１：４０の重量比で混合した。次いで、ラボシルバーソンのホモジナイザーＬ５Ｍ−Ａを混合物を使用して、３０分間、室温で均質化した。均質化の後、各サンプルを４０００ｒｐｍで２０分間遠心分離するか、または綿毛を通して濾過した。試料は３つ調製した。  
【０１２３】
抽出物中のカンナビノイド含有量の分析は、検量線に対するＨＰＬＣで行った。図４および５は、抽出時間に対する、抽出物中のＣＢＤ濃度および抽出収率をそれぞれ示す。植物試料中のＣＢＤピーク面積とその他のカンナビノイドのピーク面積（ＣＢＤＡ、ＴＨＣおよびＣＢＮ）との比を図６に示す。
【０１２４】
この結果から明らかなように、抽出培地はＣＢＤに対して非常に選択的である。１回の抽出後、培地はＴＨＣと比較して少なくとも３５倍のＣＢＤを含み、抽出時間が増加するにつれて選択性は低下する。ＣＢＤとＣＢＤＡの比率は２７：１から始まり、ＣＢＤＡと比較して少なくとも１４倍のＣＢＤに低下する。これは、本明細書に記載した抽出培地による植物源の抽出を用いて、他の市販の製品と比較して著しくＴＨＣ濃度が低いＣＢＤを豊富に含む製品を得ることができることを示唆している。  
【０１２５】
図４から観察されるように、２０分の抽出後にプラトーに達する。２０分を超えると、ＣＢＤ濃度または抽出収率の有意な増加は達成されない。さらに、図５から分かるように、単一の抽出工程で植物源から５５乃至７５％のＣＢＤが抽出された。これらの理由で、以下の抽出について、３０分という期間が選ばれた。  
【０１２６】
図６に見られるように、その他のカンナビノイドに対するＣＢＤの比率を調べることは、抽出時間が長いほど比率が低いことを示し、これは余分な時間にＣＢＤに比べて他のカンナビノイドをより早く抽出できることを意味する。
【０１２７】
植物対マイクロエマルジョン比の影響  
抽出効率に関する植物対培地の比率の影響は、抽出培地に対する植物源の比率が変化する混合物を分析することによって評価した。  
【０１２８】
植物試料（加熱後）をＡＸ−１抽出培地と、１：１５乃至１：６０（植物：培地）の重量比で混合した。次いで混合物をＳｉｌｖｅｒｓｏｎ社のホモジナイザーを用いて室温で３０分間均質化した。均質化した後、各サンプルを４０００ｒｐｍで２０分間遠心分離するか、または綿毛を通して濾過した。試料は三つ調製した。
【０１２９】
抽出物中のＣＢＤ含有量の分析は検量線に対してＨＰＬＣにより行った。図７および８は、植物−培地比に対する抽出物中のＣＢＤ濃度および抽出収率をそれぞれ示す。植物試料中のＣＢＤピーク面積と他のカンナビノイド（ＣＢＤＡ、ＴＨＣおよびＣＢＮ）のピーク面積との比率を図９に示す。
【０１３０】
抽出収率は、植物：培地比を増加させると減少するが、全ての重量比において抽出の選択性は明らかである。この選択性はＣＢＤ分子の優先度によって制御され、ＴＨＣ分子と比較して界面活性剤尾部およびシステムコアと相互作用する。主な要因は分子の極性と構造である。これは、様々なカンナビノイドの選択的抽出が、抽出培地の極性を変えることによって調整できることを示唆している。  
【０１３１】
多重抽出法
多重抽出法によって抽出培地中のＣＢＤ濃度を増加させた。多重抽出法の場合、いくつかの抽出サイクルについて同じ量の抽出培地を使用して多数の抽出サイクルを実施し、各サイクルにおいて以下の手順に従って新鮮な植物試料を抽出する。
【０１３２】
加熱した植物サンプルを１：１５の重量比でＡＸ−１抽出培地と混合した。次いで混合物をシルバーソン社のホモジナイザーを用いて室温で３０分間均質化した。均質化の後、サンプルを４０００ｒｐｍで２０分間遠心分離する、および／または、脱脂綿を通して濾過した。使用済みバイオマスからＣＢＤ添加培地を分離した後、ＣＢＤ添加培地を秤量し、新しい植物サンプルを１：１５の重量比（植物：培地  ）で添加した。新しい混合物について均質化と分離を行った。このような抽出サイクルをさらに２回追加して実行し、合計４回の抽出サイクルとした。合計３回の多重抽出プロセスを実施した。
【０１３３】
サイクル間に培地の試料を採取して、培地のカンナビノイドプロファイルおよびＣＢＤ添加に対するサイクル数の影響を評価した。
【０１３４】
ＣＢＤ含有量の分析は上記の説明に従って行った。図１０および１１は、それぞれ、抽出サイクル数に対する抽出物中のＣＢＤ濃度と抽出収率を示す。試料中の様々なカンナビノイドの含有量を図１２に示す。  
【０１３５】
結果から明らかなように、抽出培地中のＣＢＤ含有量は、多重抽出プロセスの結果として少なくとも２倍増加する。しかしながら、抽出培地にＣＢＤが添加されるにつれて、抽出培地の抽出効率は、ＣＢＤ含有量が抽出培地の最大添加容量に近いため、抽出の第１サイクルにおける抽出効率と比較して低下する。この減少にもかかわらず、抽出の選択性はプロセスサイクルを通して維持されている。
【０１３６】
参照抽出培地  
特定のカンナビノイド、特にＣＢＤの抽出に対する本明細書に記載されている抽出培地の選択性を実証するために、植物試料をエタノールまたは石油エーテルでも抽出した。両溶媒も公知であり、カンナビノイドの抽出に使用されている。抽出のプロセスは、上述したように、本開示の抽出培地を用いて行ったものと同じであった。  
【０１３７】
結果は、図１３および１４に示されており。これは、ＨＰＬＣによって測定したＣＢＤと他の抽出カンナビノイドとの間の量比である。
【０１３８】
明らかに分かるように、エタノールと石油エーテルの両方で行った抽出は最大で２２：１のＣＢＤ：ＴＨＣ比を示したが、抽出培地での抽出は〜３５：１のＣＢＤ：ＴＨＣ比を示した。すなわち、本明細書に記載の方法は、他のカンナビノイドよりもＣＢＤの抽出に対して高い選択性を提供し、ＴＨＣのレベルが極めて低い抽出生成物を得ることが可能になる。  
【０１３９】
さらに、表４に見られるように、抽出培地中のＣＢＤの添加量は、エタノールまたは石油エーテルのいずれかについて得られたものよりも著しく高く、抽出培地が植物源からＣＢＤを定量的に抽出する能力を証明している。
【０１４０】
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【０１４１】
製剤の安定性  
５ＣＳおよびＡＸ２抽出培地（表５−１参照）に５重量％のＣＢＤを添加し、異なる条件下（保護なしで、６００ｐｐｍの酢酸トコフェロールを添加して、窒素雰囲気下で）、３つの異なる温度（４、２５および４０℃）でインキュベートした。この濃縮物と希釈マイクロエマルジョン（水８０％）の両方を試験した。
【０１４２】
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【０１４３】
３０日間のインキュベーション後に、試料の視覚的外観を記録した。結果を表５−２に示す。
【０１４４】
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【０１４５】
明らかに見られるように、ＣＢＤ添加培地は多種多様な条件にわたって安定であり、試験されたサンプルのほとんどは相分離または沈殿の兆候なしに透明のままであった。
【０１４６】
長期安定性  
５ＣＳおよびＡＸ１抽出培地（上記表１参照）を用いて、以下の手順に従って植物源からＣＢＤを抽出した。１：１５ｗ／ｗ比の植物：ＭＥ、２００℃で均質化下させて、抽出時間３０分。抽出サイクルを２回実施し、各サイクルについて試料を収集した。試料を３つの異なる温度（４、２５および４０℃）で７０日間インキュベートした。試料は希釈しなかった（すなわち、濃縮試料について試験を行った）。
【０１４７】
図１５Ａおよび図１５Ｂに明らかに示すように、濃縮形態のＣＢＤ添加培地は、長期間にわたって安定であり、色の変化や相分離または沈殿は観察されなかった。
【０１４８】
ＰＫ試験
薬物動態（ＰＫ）プロファイルは、ＡＸ−１および５ＣＳのＣＢＤ添加製剤を経口投与した後に血漿中のＣＢＤ濃度を、オリーブ油に可溶化させたＣＢＤと比較して測定することによって評価した。  
【０１４９】
雄ラット（平均２５０ｇ）を使用して、このＰＫ試験を２段階で行った。第１段階ではオリーブ油に可溶化させた結晶性ＣＢＤをラットに経口投与し、第２段階ではＡＸ−１または５ＣＳ  ＣＢＤ添加製剤を強制経口投与した。様々な時点で血液サンプルをヘパリン化ＥＤＴＡ−Ｋ３チューブに集め、氷上で保存した。血漿を、３０００ｒｐｍでの予冷却遠心分離によって各サンプルから分離し、清潔な滅菌試験管中に−８０±１０℃で保存した。投与から２４日後にラットを屠殺した。
【０１５０】
図１６は、異なる用量で製剤を投与した後０．５時間および２時間経過後における血漿中のＣＢＤレベルを示す。ＡＸ−１と５ＣＳ製剤の両方について、血漿中で測定したＣＢＤ濃度は、オリーブ油中に可溶化されたＣＢＤと比較して、０．５時間後に高かった。投与から２時間後は、ＡＸ−１とオリーブ油ではＣＢＤ血漿レベルは同程度であったが、５ＣＳシステムでＣＢＤ濃度の有意な増加を示した。  
【０１５１】
したがって、本開示の製剤は、オリーブ油の溶液と比較して、Ｔｍａｘ０．５時間対約４時間で、急速なバイオアベイラビリティーと血漿中のＣＢＤレベルの増加を示した。
【０１５２】
生体内試験  
痛みへの反応  
本開示の抽出大麻植物源（ＣＢＤ添加）培地の、マウスにおける痛みに対する反応および抗炎症活性を、５ＣＳ抽出培地を用いて大麻植物からの抽出物の経口投与によって、伝統的なエタノール抽出と比較して評価した。
【０１５３】
５ＣＳ抽出培地およびエタノール抽出を、以下のプロトコルに従って、体重１ｋｇ当たり５、１０、２５および５０ｍｇの植物材料に相当する４つの異なる濃度で別々に調製した。
【０１５４】
試験開始前に、８週齢の３匹の雌ＳａｂｒａマウスをＳＰＦ装置内で７日間飼育した。  ０．９％生理食塩水に懸濁させた１．５％（ｗ／ｖ）ザイモサンＡ（シグマ）４０μｌを各マウスの右後足の足底下部面に注射した。導入直後に、大麻植物源からの抽出物を炎症誘発マウスに経口投与した。抽出は伝統的なエタノール抽出または「５ＣＳ抽出培地」によって行った。陽性対照として、３匹の誘導マウスは未処置のままにした。「抽出培地」で処置したマウスに、添加５ＣＳを直接経口投与し、一方「エタノール抽出」では、エタノールを最初に蒸発させて、沈殿した物質をオリーブ油に再懸濁させた。
【０１５５】
治療効果は、体重１ｋｇあたり１０、２５および５０ｍｇの抽出植物源を含む抽出物質の様々な投与量で評価した。処置から６時間後、カリパスを使用して炎症を起こした足の腫脹を測定した。さらに、２４時間の治療後、製造業者の指示に従ってＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄシステム）を用いてＴＮＦ−α（腫瘍壊死因子）レベルを測定した。
【０１５６】
ＴＮＦ−αは、経口治療の２４時間後に採取した血漿サンプルのＥＬＩＳＡキットによって評価した。図１７は、エタノールによる抽出およびオリーブ油中での分散と比較した、５ＣＳ抽出培地についてのＴＮＦ−αレベルを示す。図１８は、オリーブ油中に分散させたエタノールによる抽出と比較した、抽出培地５ＣＳで処置したマウスにおける炎症を起こした足の足厚を示す。
【０１５７】
エタノール抽出処理マウスの方が膨張の減少がはるかに少なかったのに比べて、「５ＣＳ抽出培地」を投与すると、所定の全投与量（５、２５および５０ｍｇ／ｋｇ）内で足の腫脹が（対照未処理マウスと比較して）有意に減少した。これらの結果は、エタノールによる抽出と比較して、「抽出培地」を使用することによって炎症がより効率的に減少することを示している。試験した全ての投与量で、エタノールで抽出したものと比較して、「５ＣＳ抽出培地」で処理したマウスでは、ＴＮＦ−α血漿レベルがかなり低かった。
【０１５８】
５ＣＳ抽出培地を使用したＴＮＦ−αレベルの減少（対照未処置マウスの３５０ｐｇと比較して２５０ｐｇ）は、比較的低用量（５ｍｇ／ｋｇ）を使用した場合も見られた。一方、同じ用量でエタノール抽出を使用しても、ＴＮＦ−αに影響を与えなかった。これは、未処置マウスで測定されたものとほぼ同様のレベルであった（それぞれ、３２０対３５０ｐｇ）。
【０１５９】
図１８からわかるように、試験した全ての投与量において、本開示のＣＢＤ添加培体を投与したマウスは、投与から２４時間後に低いＴＮＦ−αレベルを示し、エタノールで抽出したＣＢＤの炎症と比較して炎症が減少した。これは、抽出培地の抽出、放出および浸透（性能）の改善を証明している。
【０１６０】
さらに、図１７に見られるように、本開示の抽出培地を投与されたマウスは、エタノール中に抽出されオリーブ油に溶解された同一投与量のＣＢＤと比較して、試験した全ての投与量において足の厚さにより有意な減少を示した。すなわち、本開示の配合は、標準的なエタノールＣＢＤ抽出と比較して改善された抗炎症活性を有する。
【０１６１】
遅延型過敏症（ＤＴＨ）
ＣＢＤは炎症反応を減少させ、炎症反応により痛みを受けることが示された。理論に縛られることを望まないが、炎症の減少は、ＣＢ１受容体、アデノシン受容体およびその他のＧＰＣＲへのアゴニストおよびアンタゴニスト結合を含む様々なメカニズムによって達成される。これは、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＭＣＰ−１などの炎症性サイトカインやケモカインレベルの減少を含む。
【０１６２】
抗炎症剤としての本開示のＣＢＤ装填製剤の経口投与の治療効果。ラットの炎症モデル  −遅延型過敏症（ＤＨＴ）モデルを用いてＣＢＤ効果を評価した。この試験では、治療後に炎症誘発後の耳の腫脹の減少を測定した。
【０１６３】
雄ラット（平均体重２５０ｇ）の腹部を剃毛し、２％のオキサゾロン５００μｌ（１６ｍｌのアセトンと４ｍｌの鉱油に溶解させた４００ｍｇのオキサゾロン）で１０回攻撃した。翌日（本明細書では１日目という）、５００μｌのＣＢＤ製剤経口治療を強制経口投与により行った。６日目に、カリパスを用いてラットの耳の厚さを測定した。
【０１６４】
ラットを別の用量である５０μｌの０．５％オキサゾリンで攻撃し、攻撃の２時間後に５００μｌのＣＢＤ製剤で２回目の経口治療を施した。攻撃の１２時間後と２４時間後に耳の厚さを再び測定し、血清調製用に血液サンプルを採取した。
【０１６５】
サンプル組成：２４ｍｇ／ｋｇＢＷと、４８ｍｇ／ＫｇＢＷ（ＢＷ＝体重）の２つの用量で、５ＣＳ中で抽出したＣＢＤを投与し、ナイーブラットと、何ら治療をしていないＤＴＨ誘発ラットの対照と比較した。
【０１６６】
図１９および２０Ａ−Ｄにみられるように、治療を行わなかったＤＴＨ誘発ラットと比較して、５ＣＳで抽出したＣＢＤでの治療の結果、耳の厚さおよび炎症性外観（発赤および浮腫）の有意な減少が見られた。５ＣＳで抽出されたＣＢＤの抗炎症効果は、両投与計画でのエタノール抽出について見られたものよりも有意である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２０Ｃ】
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【図２０Ｄ】
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【国際調査報告】
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