(57)【要約】本開示は、ＩＬ−１５タンパク質複合体およびクエン酸緩衝液を含む医薬組成物に関する。更に、前記医薬組成物は、糖類および非イオン性界面活性剤も含み得る。本開示の医薬組成物は、２〜８℃で数ヶ月間保存された後でも、高度の安定性を示す。【選択図】なし
2020528424.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＬ−１５タンパク質複合体および緩衝液を含む医薬組成物であって、
前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、ＩＬ−１５と、以下からなる群から選択されるいずれか１つとからなり：
ＩＬ−１５受容体、
ＩＬ−１５受容体の細胞外領域を含む断片、および
ＩＬ−１５受容体の細胞外領域を含む融合タンパク質；
前記緩衝液は、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液およびヒスチジン緩衝液からなる群から選択され、好ましくはクエン酸緩衝液であり、より好ましくはクエン酸-クエン酸ナトリウム緩衝液であり；
前記医薬組成物中の前記ＩＬ−１５タンパク質複合体の濃度は、約１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌである、医薬組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の医薬組成物であって、前記医薬組成物中の前記ＩＬ−１５タンパク質複合体の濃度は、約１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約０．９ｍｇ／ｍｌ〜１．１ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは１ｍｇ／ｍｌである、医薬組成物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の医薬組成物であって、前記医薬組成物のｐＨは約５．０〜６．０、好ましくは約５．０〜５．５、より好ましくは約５．１５〜５．２５、最も好ましくは５．２である、医薬組成物。
【請求項４】
前記緩衝液の濃度は、約５ｍＭ〜３０ｍＭ、好ましくは約５ｍＭ〜２０ｍＭ、より好ましくは約１０±２ｍＭ、最も好ましくは１０ｍＭである、請求項１〜３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記緩衝液のｐＨは、約５．０〜６．０、好ましくは約５．０〜５．５、より好ましくは約５．１５〜５．２５、最も好ましくは５．２である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
二糖類を更に含み、前記二糖類が好ましくはトレハロースおよびスクロースからなる群から選択され、より好ましくはトレハロースである、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記二糖類の濃度は、約６０ｍｇ／ｍｌ〜９０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約７５ｍｇ／ｍｌ±５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは７５ｍｇ／ｍｌである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
界面活性剤を更に含み、前記界面活性剤は好ましくはポリソルベート、より好ましくはポリソルベート２０である、請求項１〜７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記界面活性剤の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは０．５ｍｇ／ｍｌである、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
以下を含む、請求項１〜９のいずれかに記載の医薬組成物：
（ａ）１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体、
（ｂ）５ｍＭ〜３０ｍＭのクエン酸緩衝液、
（ｃ）６０ｍｇ／ｍｌ〜９０ｍｇ／ｍｌのトレハロース、および
（ｄ）０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０、
前記医薬組成物のｐＨは約５．０〜６．０であって；
好ましくは、前記医薬組成物は以下を含む：
（ａ）１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体、
（ｂ）１０ｍＭ±２ｍＭのクエン酸緩衝液、
（ｃ）７５ｍｇ／ｍｌ±５ｍｇ／ｍｌのトレハロース、および
（ｄ）０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０、
前記医薬組成物のｐＨは約５．１５〜５．２５である。
【請求項１１】
前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、配列番号１のポリペプチドに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＩＬ−１５と、配列番号２のポリペプチドに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＩＬ−１５受容体の融合タンパク質とからなり、
好ましくは、前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、配列番号１のＩＬ−１５と、配列番号２のＩＬ−１５受容体の融合タンパク質とからなる、請求項１〜１０のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物を調製する方法であって、前記方法は、前記ＩＬ−１５タンパク質複合体を前記緩衝液と混合する工程を含み、
前記医薬組成物中の前記ＩＬ−１５タンパク質複合体の濃度は、約１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは約０．９ｍｇ／ｍｌ〜１．１ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは１ｍｇ／ｍｌである、方法。
【請求項１３】
前記緩衝液はクエン酸緩衝液であり、
前記緩衝液の濃度は、好ましくは約５ｍＭ〜３０ｍＭ、より好ましくは約１０ｍＭ〜２０ｍＭであり、
前記緩衝液のｐＨは、約５．０〜６．０、好ましくは約５．０〜５．５、より好ましくは約５．１５〜５．２５、最も好ましくは５．２である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、ＩＬ−１５と、以下からなる群から選択されるいずれか１つとからなる、請求項１２に記載の方法：
ＩＬ−１５受容体、
ＩＬ−１５受容体の細胞外領域を含む断片、および
ＩＬ−１５受容体の細胞外領域を含む融合タンパク質。
【請求項１５】
前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、配列番号１のポリペプチドに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＩＬ−１５と、配列番号２のポリペプチドに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＩＬ−１５受容体の融合タンパク質とからなり、
好ましくは、前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、配列番号１のＩＬ−１５と、配列番号２のＩＬ−１５受容体の融合タンパク質とからなる、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
トレハロースおよびポリソルベート２０を添加する工程を更に含み、
前記トレハロースの濃度は、約６０ｍｇ／ｍｌ〜９０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約７５ｍｇ／ｍｌ±５ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは７５ｍｇ／ｍｌであり、
前記ポリソルベート２０の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは約０．５ｍｇ／ｍｌである、請求項１２〜１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物を形成するように再構成されることを特徴とする、凍結乾燥製剤。
【請求項１８】
ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む凍結乾燥製剤を調製する方法であって、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物を凍結乾燥する工程を含む、方法。
【請求項１９】
前記凍結乾燥の工程が、予備凍結、一次乾燥および二次乾燥の工程を連続的に含む、請求項１８に記載のＩＬ−１５タンパク質複合体を含む凍結乾燥製剤を調製する方法。
【請求項２０】
請求項１８または１９に記載の方法により調製される、ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む凍結乾燥製剤。
【請求項２１】
ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む再構成溶液を調製する方法であって、前記方法は請求項２０に記載の凍結乾燥製剤を再構成する工程を含み、前記再構成に使用される溶媒が好ましくは注射用水である、方法。
【請求項２２】
請求項２１に記載の方法により調製される、ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む、再構成溶液。
【請求項２３】
前記ＩＬ−１５タンパク質複合体の濃度は、約０．９ｍｇ／ｍｌ〜１．１ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約１ｍｇ／ｍｌである、請求項２２に記載の再構成溶液。
【請求項２４】
請求項２２に記載の再構成溶液であって、前記再構成溶液のｐＨは約５．０〜６．０、好ましくは約５．０〜５．５、より好ましくは約５．１５〜５．２５、最も好ましくは５．２である、再構成溶液。
【請求項２５】
クエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液を含み、前記緩衝液の濃度が約５ｍＭ〜３０ｍＭ、好ましくは約１０ｍＭ〜２０ｍＭ、より好ましくは１０ｍＭである、請求項２２に記載の再構成溶液。
【請求項２６】
二糖類を更に含み、前記二糖類が好ましくはトレハロースおよびスクロースからなる群から選択され、より好ましくはトレハロースである、請求項２２に記載の再構成溶液。
【請求項２７】
前記二糖類の濃度は、約６０ｍｇ／ｍｌ〜９０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約７５ｍｇ／ｍｌ±５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは７５ｍｇ／ｍｌである、請求項２６に記載の再構成溶液。
【請求項２８】
界面活性剤を更に含み、前記界面活性剤が好ましくはポリソルベート、より好ましくはポリソルベート２０である、請求項２２に記載の再構成溶液。
【請求項２９】
前記界面活性剤の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは０．５ｍｇ／ｍｌである、請求項２８に記載の再構成溶液。
【請求項３０】
ＩＬ−１５関連の疾患または状態の治療用の医薬品の製造における、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物、または請求項１７もしくは２０に記載の凍結乾燥製剤、または請求項２２〜２９のいずれかに記載の再構成溶液の使用。
【請求項３１】
前記ＩＬ−１５関連の疾患または状態は、感染症、癌、血液疾患、炎症性疾患、および自己免疫疾患からなる群から選択され、
前記癌は、好ましくは、メラノーマ、結腸直腸癌、皮膚癌、リンパ腫、腎細胞癌、肝臓癌、肺癌、胃癌、および乳癌からなる群から選択され;
前記感染症は、好ましくは、天然痘ウイルス（ｖａｒｉｏｌａ  ｖｉｒｕｓ）感染症、ＨＩＶ感染症、細菌感染症、真菌感染症およびＨＢＶ感染症からなる群から選択され；
前記血液疾患は、好ましくは、貧血、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群およびＴ細胞大顆粒リンパ球性白血病からなる群から選択され；
前記自己免疫疾患は、好ましくは、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、胃炎および粘膜炎からなる群から選択される、請求項３０に記載の使用。
【請求項３２】
前記医薬組成物または前記凍結乾燥製剤または前記再構成溶液が、低分子阻害剤または抗体薬と組み合わせて投与され；
前記低分子阻害剤は、好ましくはターゲティング化学療法薬または放射線治療薬、より好ましくはアルキル化剤であり；
前記抗体薬は、好ましくはモノクローナル抗体薬、より好ましくは抗ＣＤ２０抗体、抗ＰＤ１抗体、抗ＰＤＬ１抗体、抗Ｈｅｒ２抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗ｃ−ＭＥＴ抗体である、請求項３０または３１に記載の使用。
【請求項３３】
細胞免疫療法用の医薬品の調製における、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物、または請求項１７もしくは２０に記載の凍結乾燥製剤、または請求項２２〜２９のいずれかに記載の再構成溶液の使用であって、前記細胞免疫療法は、樹状細胞免疫療法（Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、サイトカイン誘導キラー細胞免疫療法（Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｋｉｌｌｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、樹状細胞−サイトカイン誘導キラー細胞免疫療法（Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｅｌｌ−Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｋｉｌｌｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、強化型サイトカイン誘導キラー細胞免疫療法（Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｋｉｌｌｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、ナチュラルキラー細胞免疫療法（Ｎａｔｕｒａｌ  Ｋｉｌｌｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、複合抗原刺激Ｔ細胞免疫療法（Ｃｏｍｂｉｎｅｄ  Ａｎｔｉｇｅｎ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｔ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、二重特異性抗原結合Ｔ細胞免疫療法（Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、Ｔ細胞受容体改変Ｔ細胞免疫療法（Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）およびキメラ抗原受容体Ｔ細胞免疫療法（Ｃｈｉｍｅｒｉｃ  Ａｎｔｉｇｅｎ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）からなる群から選択される腫瘍細胞の免疫療法である、使用。
【請求項３４】
容器を含む製品であって、前記容器は、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物、または請求項１７もしくは２０に記載の凍結乾燥製剤、または請求項２２〜２９のいずれかに記載の再構成溶液を含む、製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医薬製剤の分野に属し、特に、本発明はＩＬ−１５タンパク質複合体を含む医薬組成物および医薬品としてのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
インターロイキン−１５（ＩＬ−１５）は、１９９４年にＧｒａｂｓｔｅｉｎらによって発見された約１２〜１４ｋＤのサイトカインである。ＩＬ−１５は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、およびナチュラルキラー細胞（ＮＫ）の増殖を促進するなど、ｉｎ  ｖｉｖｏでの正常な免疫応答において役割を果たすことができる。
【０００３】
ＩＬ−１５は、短い４本のα−ヘリックスのバンドルからなるサイトカインファミリー（Ｓｍａｌｌ  Ｆｏｕｒ  α−ｈｅｌｉｘ  Ｂｕｎｄｌｅ  Ｆａｍｉｌｙ  ｏｆ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ）のメンバーである。ＩＬ−１５は、その受容体に結合することで生物学的活性を発揮する。ＩＬ−１５受容体は、３つの受容体サブユニットからなる：ＩＬ−１５受容体α（ＩＬ−１５Ｒα）、ＩＬ−２受容体β（ＩＬ−２Ｒβ、ＩＬ−１５ＲβまたはＣＤ１２２とも呼ばれる）、およびγｃ（ＣＤ１３２とも呼ばれる）。ＩＬ−１５ＲαはＳｕｓｈｉドメインを含み、当該ＳｕｓｈｉドメインはＩＬ−１５に結合することができ、結合したＩＬ−１５の生物学的機能に不可欠である。
【０００４】
近年、ＩＬ−１５がその受容体ＩＬ−１５Ｒαに結合して複合体を形成すると、ＩＬ−１５の生物学的活性が著しく向上することが明らかになっている。記憶ＣＤ８＋Ｔリンパ球（ｍｅｍｏｒｙ  ＣＤ８＋Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ）およびＮＴ／ＮＫＴ細胞の増殖を刺激することにおいて、ＩＬ−１５とその可溶性受容体ＩＬ−１５Ｒαとによって形成される複合体はＩＬ−１５単独よりも著しく優れていることが研究により示されている。ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα複合体は、抗原によって刺激されたＣＤ４４ｈｉｇｈＣＤ８＋記憶Ｔ細胞を含むＣＤ１２ｈｉｇｈ細胞の増殖を有意に増幅および誘導する。ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα複合体が増殖を刺激し、メモリーＣＤ８＋Ｔ細胞の生存を維持する能力は、ＩＬ−１５単独の場合の１０倍であり、そのメカニズムは、トランスプレゼンテーション（ｔｒａｎｓ−ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ）の効果に関連している可能性がある。
【０００５】
腫瘍免疫療法の分野でのＩＬ−１５の良い期待のため、米国国立衛生研究所（ＮＩＨ）は最初にＩＬ−１５を用いた腫瘍の治療に関する研究を実施し、臨床第Ｉ相試験に向けて研究を進めることを試みた。しかしながら、ＩＬ−１５にはいくつかの問題があり、例えば低分子量およびｉｎ  ｖｉｖｏでの短い半減期のため、ＩＬ−１５の繰り返し投与量を制御することは難しく、全身的な免疫学的副作用を引き起こすことは容易である。したがって、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＩＬ−１５の半減期を改善し、ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるその生物学的活性を促進または増強する緊急の必要性がある。多くの国内外の企業または研究機関がＩＬ−１５免疫療法についての研究に従事し、例えば、特許ＣＮ１００３３４１１２Ｃ（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｈａｉｘｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．、Ｌｔｄ．）は、微生物感染の治療における使用のためのＩＬ−１５−ｈＩｇＧ４Ｆｃホモ二量体タンパク質に関する。本出願の複合分子（ｃｏｍｐｌｅｘ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ）へのＩＬ−１５およびＩＬ−１５Ｒαの間のジスルフィド結合の導入は、分子安定性および生物学的活性を向上させることができ、その調製プロセスを簡略化することもできる。
【０００６】
しかしながら、高分子タンパク質薬剤は、その高分子量および複雑な構造のため、分解、重合、または不所望の化学修飾を受けやすいなど、安定ではない。タンパク質薬剤を投与に適したものにするため、保管、輸送、およびその後の使用中の安定性を維持するため、ならびにより良い効果を発揮させるために、タンパク質薬剤の安定な製剤に関する研究が特に重要である。
【０００７】
現在、多くの企業が、例えばＣＮ１０３３７０３３９Ａ、ＣＮ１００３３４１１２、ＣＮ１０１７３５９８２、ＷＯ２００７００１６７７、ＵＳ２００７０１６０５７８、ＷＯ２０１６／０９５６４２などのＩＬ−１５タンパク質複合体を開発している。しかしながら、新規構造を有するＩＬ−１５タンパク質複合体については、投与により適した当該ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む医薬組成物（製剤）を開発する必要が依然として存在する。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、ＩＬ−１５タンパク質複合体および緩衝液を含む医薬組成物を提供し、前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、ＩＬ−１５と、以下からなる群から選択されるいずれか１つとからなる：
ＩＬ−１５受容体、
ＩＬ−１５受容体の細胞外領域を含む断片、および
ＩＬ−１５受容体の細胞外領域を含む融合タンパク質。
【０００９】
前記緩衝液は、ヒスチジン緩衝液、コハク酸緩衝液、リン酸緩衝液およびクエン酸緩衝液からなる群から選択され、好ましくはクエン酸緩衝液、より好ましくはクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液である。
【００１０】
別の実施形態では、前記医薬組成物中の前記ＩＬ−１５タンパク質複合体の濃度（即ち、前記緩衝液に配合された前記ＩＬ−１５タンパク質複合体の濃度）は、約１ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約１ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌである。非限定的な例として、１ｍｇ／ｍｌ、２ｍｇ／ｍｌ、３ｍｇ／ｍｌ、４ｍｇ／ｍｌ、５ｍｇ／ｍｌ、６ｍｇ／ｍｌ、７ｍｇ／ｍｌ、８ｍｇ／ｍｌ、９ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌが含まれる。
【００１１】
別の実施形態では、前記医薬組成物中の前記ＩＬ−１５タンパク質複合体の濃度は、約０．９ｍｇ／ｍｌ〜１．１ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約１ｍｇ／ｍｌの少量の形態である。
【００１２】
別の実施形態では、前記緩衝液の濃度は、約５ｍＭ〜３０ｍＭ、好ましくは約１０ｍＭ〜２０ｍＭであり、非限定的な例として１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、２０ｍＭを含み、より好ましくは約１０ｍＭ±２ｍＭを含み、最も好ましくは１０ｍＭを含む。
【００１３】
別の実施形態では、前記医薬組成物中の前記緩衝液のｐＨは、約５．０〜６．０、好ましくは約５．０〜５．５であり、非限定的な例として約５．０、約５．１、約５．１５、約５．２、約５．２５、約５．３、約５．３５、約５．４、約５．４５、約５．５を含み、より好ましくは約５．１５〜５．２５を含み、最も好ましくは約５．２を含む。
【００１４】
更に、別の実施形態では、前記医薬組成物は糖類を更に含む。本開示における「糖類」は、グルコース、スクロース、トレハロース、ラクトース、フルクトース、マルトース、デキストラン、グリセロール、エリスリトール、グリセロール、アラビトール、キシリトール、ソルビトール、マンニトール、メリビオース、メレチトース（ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ）、メリトリオース、マンノトリオース、スタキオース、マルトース、ラクツロース（ｌａｃｔｕｌｏｓｅ）、マルツロース（ｍａｌｔｕｌｏｓｅ）、ソルビトール、マルチトール、ラクチトール、イソマルトキソース（ｉｓｏ−ｍａｌｔｏｘｏｓｅ）などからなる群から選択され得る、単糖類、二糖類、三糖類、多糖類、糖アルコール、還元糖、非還元糖などを含む、従来の組成物（ＣＨ２Ｏ）ｎおよびその誘導体を含む。好ましい糖類は非還元二糖類であり、より好ましくはトレハロースまたはスクロースである。本開示において、「トレハロース」は好ましくはα、α-トレハロース二水和物である。
【００１５】
別の実施形態では、前記医薬組成物中の前記糖類の濃度は、約６０ｍｇ／ｍｌ〜約９０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは７５ｍｇ／ｍｌ±５ｍｇ／ｍｌであり、非限定的な例は７０ｍｇ／ｍｌ、７１ｍｇ／ｍｌ、７２ｍｇ／ｍｌ、７３ｍｇ／ｍｌ、７３ｍｇ／ｍｌ、７４ｍｇ／ｍｌ、７５ｍｇ／ｍｌ、７６ｍｇ／ｍｌ、７７ｍｇ／ｍｌ、７８ｍｇ／ｍｌ、７９ｍｇ／ｍｌ、８０ｍｇ／ｍｌを含み、最も好ましくは７５ｍｇ／ｍｌを含む。
【００１６】
別の実施形態では、前記医薬組成物は界面活性剤を更に含む。前記界面活性剤は、ポリソルベート２０（ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ２０）、ポリソルベート８０（ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０）、ポロキサマー（ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）、トリトン（Ｔｒｉｔｏｎ）、ドデシルスルホン酸ナトリウム、ラウリルスルホン酸ナトリウム、オクチルグリコシドナトリウム、ラウリルスルホベタイン、ミリスチルスルホベタイン、リノレイルスルホベタイン、ステアリルスルホベタイン、ラウリルサルコシン、ミリスチルサルコシン、リノレイルサルコシン、ステアリルサルコシン、リノレイルベタイン（ｌｉｎｏｌｅｙｌ−ｂｅｔａｉｎｅ）、ミリスチルベタイン（ｍｙｒｉｓｔｙｌ−ｂｅｔａｉｎｅ）、セチルベタイン（ｃｅｔｙｌ−ｂｅｔａｉｎｅ）、ラウラミドプロピルベタイン（ｌａｕｒａｍｉｄｏ  ｐｒｏｐｙｌ−ｂｅｔａｉｎｅ）、コカラミドプロピルベタイン（ｃｏｃａｒａｍｉｄｅ  ｐｒｏｐｙｌ−ｂｅｔａｉｎｅ）、オレアミドプロピルベタイン（ｏｌｅｙａｍｉｄｅ  ｐｒｏｐｙｌ−ｂｅｔａｉｎｅ）、ミリスチルアミドプロピルベタイン（ｍｙｒｉｓｔｙｌａｍｉｄｅ  ｐｒｏｐｙｌ−ｂｅｔａｉｎｅ）、パルミタミドプロピルベタイン（ｐａｌｍｉｔａｍｉｄｅ  ｐｒｏｐｙｌ−ｂｅｔａｉｎｅ）、イソステアリン酸アミドプロピルベタイン（ｉｓｏｓｔｅａｒａｍｉｄｅ  ｐｒｏｐｙｌ−ｂｅｔａｉｎｅ）、ミリスチルアミドプロピルジメチルアミン（ｍｙｒｉｓｔｙｌａｍｉｄｅ  ｐｒｏｐｙｌ−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）、パルミタミドプロピルジメチルアミン（ｐａｌｍｉｔａｍｉｄｅ  ｐｒｏｐｙｌ−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）、イソステアリン酸アミドプロピルジメチルアミン（ｉｓｏｓｔｅａｒａｍｉｄｅ  ｐｒｏｐｙｌ−ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）、ナトリウムメチルココイル（ｓｏｄｉｕｍ  ｍｅｔｈｙｌ  ｃｏｃｏｙｌ）、ナトリウムメチルオレイルタウレート（ｓｏｄｉｕｍ  ｍｅｔｈｙｌ  ｏｌｅｙｌ  ｔａｕｒａｔｅ）、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、エチレンおよびプロピレングリコールの共重合体などからなる群から選択され得る。界面活性剤は、好ましくはポリソルベート８０またはポリソルベート２０、より好ましくはポリソルベート２０である。
【００１７】
別の実施形態では、前記医薬組成物中の前記界面活性剤の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌであり、非限定的な例は０．４ｍｇ／ｍｌ、０．４２ｍｇ／ｍｌ、０．４４ｍｇ／ｍｌ、０．４６ｍｇ／ｍｌ、０．４８ｍｇ／ｍｌ、０．５ｍｇ／ｍｌ、０．５２ｍｇ／ｍｌ、０．５４ｍｇ／ｍｌ、０．５６ｍｇ／ｍｌ、０．５８ｍｇ／ｍｌ、０．６ｍｇ／ｍｌを含み、最も好ましくは０．５ｍｇ／ｍｌを含む。
【００１８】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、
（ａ）１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体、
（ｂ）５ｍＭ〜３０ｍＭのクエン酸緩衝液、
（ｃ）６０ｍｇ／ｍｌ〜９０ｍｇ／ｍｌのトレハロース、および
（ｄ）０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０
を含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．０〜６．０である。
【００１９】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、（ａ）１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体、（ｂ）１０〜２０ｍＭのクエン酸緩衝液、（ｃ）６０ｍｇ／ｍｌ〜９０ｍｇ／ｍｌのトレハロース、および（ｄ）０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０を含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．０〜５．５である。
【００２０】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、
（ａ）１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体、
（ｂ）１０ｍＭ±２ｍＭのクエン酸緩衝液、
（ｃ）７５ｍｇ／ｍｌ±５ｍｇ／ｍｌのトレハロース、および
（ｄ）０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０
を含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．１５〜５．２５である。
【００２１】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、
（ａ）１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体、
（ｂ）１０ｍＭのクエン酸緩衝液、
（ｃ）７５ｍｇ／ｍｌのトレハロース、および
（ｄ）０．５ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０
を含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．１５〜５．２５、好ましくはｐＨ５．２である。
【００２２】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、（ａ）１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、および（ｂ）１０ｍＭのクエン酸緩衝液を含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．０〜５．５である。
【００２３】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、（ａ）１〜５ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、（ｂ）１０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、（ｃ）６０ｍｇ／ｍｌのスクロース、および（ｄ）０．４ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０を含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．５である。
【００２４】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、（ａ）１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、（ｂ）１０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、および（ｃ）６０ｍｇ／ｍｌのトレハロースを含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．５である。
【００２５】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、（ａ）１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、（ｂ）１０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、および（ｃ）９０ｍｇ／ｍｌのトレハロースを含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．５である。
【００２６】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、（ａ）１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、（ｂ）１０ｍＭ±２ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、（ｃ）７５ｍｇ／ｍｌ±５ｍｇ／ｍｌのトレハロース、および（ｄ）０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０を含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．１５〜５．２５である。
【００２７】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、（ａ）１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、（ｂ）１０ｍＭ±２ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、（ｃ）７５ｍｇ／ｍｌ±５ｍｇ／ｍｌのトレハロース、および（ｄ）０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０を含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．１５〜５．２５である。
【００２８】
別の実施形態では、前記医薬組成物は、（ａ）１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体、（ｂ）１０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、（ｃ）７５ｍｇ／ｍｌのトレハロース、および（ｄ）０．５ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０を含み、前記医薬組成物のｐＨは約５．２である。
【００２９】
別の実施形態では、前記医薬組成物に含まれる前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、配列番号１のポリペプチドに対して少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性を有するＩＬ−１５と、配列番号２のポリペプチドに対して少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性を有するＩＬ−１５受容体の融合タンパク質とからなる。
【００３０】
好ましい実施形態では、前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、配列番号１のＩＬ−１５と、配列番号２のＩＬ−１５受容体の融合タンパク質とからなる。
【００３１】
いくつかの実施形態では、前記医薬組成物は、少なくとも３か月間、少なくとも６か月間、少なくとも１２か月間、少なくとも１８か月間、または少なくとも２４か月間、２〜８℃で安定である。いくつかの実施形態では、前記医薬組成物は、少なくとも７日間、少なくとも１４日間、または少なくとも２８日間、４０℃で安定である。
【００３２】
本発明はまた、上記の医薬組成物を調製する方法を提供し、前記方法は、ＩＬ−１５タンパク質複合体および緩衝液を用いて前記医薬組成物を調製することを含む。前記医薬組成物において、前記ＩＬ−１５タンパク質複合体の濃度は、約１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは約０．９ｍｇ／ｍｌ〜１．１ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは１ｍｇ／ｍｌである。
【００３３】
前記緩衝液は好ましくはクエン酸緩衝液であり、前記緩衝液の濃度は好ましくは約５ｍＭ〜３０ｍＭ、より好ましくは約５ｍＭ〜２０ｍＭ、最も好ましくは約１０ｍＭ±２ｍＭであり、前記緩衝液のｐＨは約５．０〜６．０であり、前記ｐＨは好ましくは約５．０〜５．５、最も好ましくは約５．１５〜５．２５である。本開示において医薬組成物の調製に用いられる緩衝液のｐＨは、前記医薬組成物の最終ｐＨと実質的に同じである。
【００３４】
前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、ＩＬ−１５と、以下からなる群から選択されるいずれか１つとからなる：
ＩＬ−１５受容体、
ＩＬ−１５受容体の細胞外領域を含む断片、および
ＩＬ−１５受容体の細胞外領域を含む融合タンパク質。
【００３５】
具体的には、前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、配列番号１のポリペプチドに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＩＬ−１５と、配列番号２のポリペプチドに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＩＬ−１５受容体の融合タンパク質とからなる。
【００３６】
好ましくは、前記ＩＬ−１５タンパク質複合体は、配列番号１のＩＬ−１５と、配列番号２のＩＬ−１５受容体の融合タンパク質とからなる。
【００３７】
別の実施形態では、上記の医薬組成物を調製する方法は、トレハロースおよびポリソルベート２０を添加する工程を更に含み、好ましくは前記トレハロースの濃度は、約６０ｍｇ／ｍｌ〜９０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは７５±５ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは７５ｍｇ／ｍｌであり、前記ポリソルベート２０の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは約０．５ｍｇ／ｍｌである。
【００３８】
本発明はまた、ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む凍結乾燥製剤を調製する方法であって、上記の医薬組成物を凍結乾燥する工程を含む、方法を提供する。
【００３９】
別の実施形態では、前記ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む凍結乾燥製剤を調製する方法に含まれる前記凍結乾燥の工程が、予備凍結、一次乾燥および二次乾燥の工程を連続的に含む。前記凍結乾燥の工程は、前記製剤を凍結し、その後、一次乾燥に適した温度で水を昇華することにより実施される。そのような条件下では、製品の温度は、前記製剤の共晶点または分解温度よりも低い。典型的には約５０〜２５０ｍＴｏｒｒの範囲の適切な圧力下で、一次乾燥の温度範囲は、典型的には約−３０〜２５℃である（一次乾燥中、製品が凍結したままであると仮定）。乾燥に必要な時間は、製剤のサイズおよび種類、サンプルを含む容器（ガラスバイアルなど）、ならびに液体の量に依存する。当該時間は、数時間から数日間の範囲であり得る（例えば、４０〜６０時間）。二次乾燥は約０〜４０℃で実施され得るが、主に容器の種類およびサイズと、使用するタンパク質の種類とに依存する。二次乾燥の時間は、製品中の所望の残留水分レベルによって決定され、典型的には少なくとも約５時間が必要とされる。典型的には、低圧下で凍結乾燥された製剤は、約５％未満、好ましくは約３％未満の含水量を有する。圧力は、一次乾燥の工程で加えられる圧力と同じであってもよい。好ましくは、二次乾燥中に印加される圧力は、一次乾燥中に印加される圧力よりも低い。凍結乾燥の条件は、製剤およびバイアルのサイズによって異なる場合がある。本開示の予備凍結は、真空度に関係なく、５℃〜−４０℃または５℃〜−５０℃の凍結を意味し、好ましくは−４５℃の凍結を意味する。一次乾燥の温度は、好ましくは−２５℃である；真空度は０．０１ｍＢａｒ〜０．２ｍＢａｒであり、最も好ましくは０．０８ｍＢａｒである。二次乾燥の温度は２０℃〜３０℃、最も好ましくは２５℃であり、真空度は０．０１ｍＢａｒ〜０．２ｍＢａｒ、最も好ましくは０．０８ｍＢａｒであり、真空度は０．００５ｍＢａｒ〜０．０２ｍＢａｒ、最も好ましくは０．０１ｍＢａｒに低下される。
【００４０】
本開示はまた、上記のＩＬ−１５タンパク質複合体を含む凍結乾燥製剤を調製する方法により調製される、ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む凍結乾燥製剤を提供する。
【００４１】
本開示はまた、上記の医薬組成物を含む凍結乾燥製剤の再構成溶液を調製する方法であって、前記方法は上記の凍結乾燥製剤を再構成する工程を含み、前記再構成に使用される溶媒が好ましくは注射用水である、方法を提供する。
【００４２】
本開示はまた、上記の再構成溶液を調製する方法により調製される、ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む再構成溶液を提供する。
【００４３】
別の実施形態では、前記再構成溶液ににおいて、前記ＩＬ−１５タンパク質複合体の濃度は、約０．９ｍｇ／ｍｌ〜１．１ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約１ｍｇ／ｍｌである。
【００４４】
別の実施形態では、前記再構成溶液において、前記医薬組成物は、約５．０〜６．０、好ましくは約５．０〜５．５、より好ましくは約５．１５〜５．２５、最も好ましくは５．２のｐＨを有する。
【００４５】
別の実施形態では、前記再構成溶液はクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液を含み、前記緩衝液の濃度が約５ｍＭ〜３０ｍＭ、好ましくは約１０ｍＭ〜２０ｍＭ、より好ましくは１０ｍＭである。
【００４６】
別の実施形態では、前記再構成溶液は二糖類を更に含み、前記二糖類が好ましくはトレハロースおよびスクロースからなる群から選択され、最も好ましくはトレハロースである。
【００４７】
別の実施形態では、前記再構成溶液において、前記糖類の濃度は、約６０ｍｇ／ｍｌ〜９０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約７５±５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは７５ｍｇ／ｍｌである。
【００４８】
別の実施形態では、前記再構成溶液は界面活性剤を更に含み、前記界面活性剤は好ましくはポリソルベート、より好ましくはポリソルベート２０である。
【００４９】
別の実施形態では、前記再構成溶液において、前記界面活性剤の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約０．４ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌ、最も好ましくは０．５ｍｇ／ｍｌである。
【００５０】
本開示はまた、ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む凍結乾燥製剤に関し、前記凍結乾燥製剤は上記の医薬組成物を形成するように再構成される。
【００５１】
本開示は、容器を含む製品またはキットを更に提供し、前記容器は、本明細書に記載のいずれかの医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、ガラスバイアルは、中性ホウケイ酸ガラス製の注射用バイアルである。
【００５２】
本開示は、ＩＬ−１５関連の疾患または状態の治療用の医薬品の製造における、上記の医薬組成物または凍結乾燥製剤または前記凍結乾燥製剤の再構成溶液の使用を更に提供する。
【００５３】
別の実施形態では、上記の使用において記載される疾患または状態は、感染症、癌、血液疾患、炎症性疾患、および自己免疫疾患からなる群から選択され；前記癌は、好ましくは、メラノーマ、結腸直腸癌、皮膚癌、リンパ腫、腎細胞癌、肝臓癌、肺癌、胃癌、および乳癌からなる群から選択され;前記感染症は、好ましくは、天然痘ウイルス（ｖａｒｉｏｌａ  ｖｉｒｕｓ）感染症、ＨＩＶ感染症、細菌感染症、真菌感染症およびＨＢＶ感染症からなる群から選択され；前記血液疾患は、好ましくは、貧血、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群およびＴ細胞大顆粒リンパ球性白血病からなる群から選択され；前記自己免疫疾患は、好ましくは、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、胃炎および粘膜炎からなる群から選択される。
【００５４】
別の実施形態では、上記の使用にしたがって、医薬組成物または凍結乾燥製剤または前記凍結乾燥製剤の再構成溶液が、低分子阻害剤または抗体薬（ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｄｒｕｇ）と組み合わせて投与され；前記低分子阻害剤は、好ましくはターゲティング化学療法薬（ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｄｒｕｇ）または放射線治療薬、より好ましくはアルキル化剤（ａｌｋｙｌａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）であり；前記抗体薬は、好ましくはモノクローナル抗体薬、より好ましくは抗ＣＤ２０抗体、抗ＰＤ１抗体、抗ＰＤＬ１抗体、抗Ｈｅｒ２抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗ｃ−ＭＥＴ抗体である。
【００５５】
本開示はまた、細胞免疫療法用の医薬品の調製における、上記の医薬組成物または凍結乾燥製剤または前記凍結乾燥製剤の再構成溶液の使用を提供し、特に、前記細胞免疫療法は、ＤＣ（樹状細胞免疫療法、Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、ＣＩＫ（サイトカイン誘導キラー細胞免疫療法、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｋｉｌｌｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、ＤＣ−ＣＩＫ（樹状細胞−サイトカイン誘導キラー細胞免疫療法、Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｅｌｌ−Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｋｉｌｌｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、ＥＣＩＫ（強化型サイトカイン誘導キラー細胞免疫療法、Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｋｉｌｌｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、ＮＫ（ナチュラルキラー細胞免疫療法、Ｎａｔｕｒａｌ  Ｋｉｌｌｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、ＣＡＳ−Ｔ（複合抗原刺激Ｔ細胞免疫療法、Ｃｏｍｂｉｎｅｄ  Ａｎｔｉｇｅｎ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｔ  Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、ＢｉＡｂ−Ｔ（二重特異性抗原結合Ｔ細胞免疫療法、Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）、ＴＣＲ−Ｔ（Ｔ細胞受容体改変Ｔ細胞免疫療法、Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）およびＣＡＲ−Ｔ（キメラ抗原受容体Ｔ細胞免疫療法、Ｃｈｉｍｅｒｉｃ  Ａｎｔｉｇｅｎ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）などの腫瘍細胞の免疫療法である。
【００５６】
本開示は、上記の医薬組成物または凍結乾燥製剤または前記凍結乾燥製剤の再構成溶液を対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）に投与する工程を含む、ＩＬ−１５関連の疾患または状態を治療する方法を更に提供する。
【００５７】
別の実施形態では、上記のＩＬ−１５関連の疾患または状態を治療する方法において、前記疾患または状態は、感染症、癌、血液疾患、炎症性疾患、および自己免疫疾患からなる群から選択される。
【００５８】
前記癌は、好ましくは、メラノーマ、結腸直腸癌、皮膚癌、リンパ腫、腎細胞癌、肝臓癌、肺癌、胃癌、および乳癌からなる群から選択され；前記感染症は、好ましくは、天然痘ウイルス（ｖａｒｉｏｌａ  ｖｉｒｕｓ）感染症、ＨＩＶ感染症、細菌感染症、真菌感染症およびＨＢＶ感染症からなる群から選択され；前記血液疾患は、好ましくは、貧血、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群およびＴ細胞大顆粒リンパ球性白血病からなる群から選択され；前記自己免疫疾患は、好ましくは、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、胃炎および粘膜炎からなる群から選択される。
【００５９】
別の実施形態では、前述のＩＬ−１５関連の疾患または状態を治療する方法において、医薬組成物または凍結乾燥製剤または前記凍結乾燥製剤の再構成溶液が、低分子阻害剤または抗体薬（ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｄｒｕｇ）と組み合わせて投与され；前記低分子阻害剤は、好ましくはターゲティング化学療法薬（ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｄｒｕｇ）または放射線治療薬、より好ましくはアルキル化剤（ａｌｋｙｌａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）であり；前記抗体薬は、好ましくはモノクローナル抗体薬、より好ましくは抗ＣＤ２０抗体、抗ＰＤ１抗体、抗ＰＤＬ１抗体、抗Ｈｅｒ２抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗ｃ−ＭＥＴ抗体である。
【００６０】
本明細書に記載の様々な実施形態の特徴の１つ、いくつか、またはすべてを組み合わせて、本開示の他の実施形態を形成し得ることを理解されたい。本開示のこれらおよび他の態様は、当業者には明らかであろう。本開示のこれらおよび他の実施形態は、以下の詳細な説明によって更に説明される。
【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】Ｄ０と比較したときの、振盪後のＳＥＣの純度値の差を示すフィッティングカーブチャートである。
【図２】Ｄ０と比較したときの、非還元ＣＥ−ＳＤＳの使用による、振盪後の純度値の差を示すフィッティングカーブチャートである。
【図３】振盪後のＳＥＣおよび非還元ＣＥ−ＳＤＳの値の差を示す等高線図である。
【発明を実施するための形態】
【００６２】
Ｉ．用語
本開示をより容易に理解するために、特定の技術用語および科学用語を以下で具体的に定義する。本明細書で使用される他のすべての技術用語および科学用語は、本明細書で明示的に別の定義がされていない限り、本開示が属する分野の当業者によって一般に理解される意味を有する。
【００６３】
「緩衝液」とは、その酸−塩基コンジュゲート成分の作用により、ｐＨ変化に耐性がある緩衝液を指す。ｐＨを適切な範囲内に制御する緩衝液の例は、酢酸緩衝液、コハク酸緩衝液、グルコン酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、シュウ酸緩衝液、乳酸緩衝液、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、酒石酸緩衝液、フマル酸緩衝液、グリシルグリシン緩衝液および他の有機酸の緩衝液を含む。
【００６４】
「ヒスチジン緩衝液」は、ヒスチジンイオンを含む緩衝液である。ヒスチジン緩衝液の例は、ヒスチジン−塩酸（ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ−ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）緩衝液、ヒスチジン−酢酸（ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ−ａｃｅｔａｔｅ）緩衝液、ヒスチジン−リン酸（ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）緩衝液、ヒスチジン−硫酸（ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ−ｓｕｌｆａｔｅ）緩衝液などを含み、ヒスチジン−塩酸（ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ−ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）緩衝液が好ましい。ヒスチジン−塩酸緩衝液は、ヒスチジンおよび塩酸によって、またはヒスチジンおよび塩酸ヒスチジンによって調製される。「クエン酸緩衝液」は、クエン酸イオンを含む緩衝液である。クエン酸緩衝液の例は、クエン酸-クエン酸ナトリウム、クエン酸-ヒスチジン、クエン酸-クエン酸カリウム、クエン酸-クエン酸カルシウム、クエン酸-クエン酸マグネシウムなどを含む。好ましいクエン酸緩衝液は、クエン酸-クエン酸ナトリウム緩衝液である。
【００６５】
「コハク酸緩衝液」は、コハク酸イオンを含む緩衝液である。コハク酸緩衝液の例は、コハク酸-コハク酸ナトリウム、コハク酸ヒスチジン、コハク酸-コハク酸カリウム、コハク酸-コハク酸カルシウムなどを含む。好ましいコハク酸緩衝液は、コハク酸-コハク酸ナトリウム緩衝液である。
【００６６】
「リン酸緩衝液」は、リン酸イオンを含む緩衝液である。リン酸緩衝液の例は、リン酸水素二ナトリウム−リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム−リン酸二水素カリウムなどを含む。好ましいリン酸緩衝液は、リン酸水素二ナトリウム-リン酸二水素ナトリウム緩衝液である。
【００６７】
「酢酸緩衝液」は、酢酸イオンを含む緩衝液である。酢酸緩衝液の例は、酢酸-酢酸ナトリウム、酢酸ヒスチジン、酢酸-酢酸カリウム、酢酸-酢酸カルシウム、酢酸-酢酸マグネシウムなどを含む。好ましい酢酸緩衝液は、酢酸-酢酸ナトリウム緩衝液である。
【００６８】
「トレハロース」は「α、α-トレハロース二水和物」としても知られている。
【００６９】
「医薬組成物」は、本明細書に記載のＩＬ−１５タンパク質複合体の１つ以上と、生理学的／薬学的に許容される担体および賦形剤などの他の化学成分とを含む混合物を意味する。医薬組成物の目的は、活性成分の吸収および生物学的活性を促進するために、安定した保管、輸送を容易にし、生物への投与を促進することである。本明細書で使用される場合、「医薬組成物」および「製剤」は相互に排他的ではない。
【００７０】
本開示によれば、別段の指定がない限り、医薬組成物の溶液形態の溶媒は水である。
【００７１】
「凍結乾燥製剤」は、液体または溶液形態の医薬組成物または製剤の真空凍結乾燥により得られる製剤または医薬組成物を意味する。
【００７２】
本開示の医薬組成物は、安定した効果を達成することができる：医薬組成物に含まれるタンパク質複合体は、保管中にその物理的安定性および／または化学的安定性および／または生物活性を実質的に保持する。好ましくは、当該医薬組成物は、保管中にその物理的安定性および化学的安定性ならびに生物学的活性を実質的に保持する。保管の長さは一般に、医薬組成物の所定の貯蔵寿命に基づいて選択される。現在、タンパク質の安定性を測定するための多くの分析手法があり、選択された温度で選択された期間保管された後の安定性を測定するために当該分析手法を使用することができる。
【００７３】
安定なタンパク質医薬製剤は、以下の条件下で有意な変化が観察されない製剤である：少なくとも３か月間、好ましくは６か月間、より好ましくは１年間、更により好ましくは最長で２年間、低温（２〜８°Ｃ）にて保管。さらに、安定した液体製剤は、２５℃〜４０℃の温度で１か月、３か月、または６か月間保管された後に所望の特性を示すものを含む。通常、安定性の許容基準は以下の通りである：ＳＥＣ−ＨＰＬＣで測定した場合、通常、タンパク質複合体モノマーの約１０％以下、好ましくは約５％以下しか分解されない；目視検査で、医薬製剤は無色または透明からわずかに乳白色である；製剤の濃度、ｐＨ、および浸透圧に±１０％以下の変動しか生じない；一般に、約１０％以下、好ましくは約５％以下のトランケーション（ｔｒｕｎｃａｔｉｏｎ）しか観察されない；一般に、約１０％以下、好ましくは約５％以下の凝集体（ａｇｇｒｅｇａｔｅ）しか形成されない。
【００７４】
タンパク質複合体は、当該タンパク質複合体が、色および／もしくは透明度の目視検査により、またはＵＶ光散乱、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）および動的光散乱（ＤＬＳ）による測定により、凝集、沈殿および／または変性の有意な増加を示さない場合、医薬製剤中において「その物理的安定性を保持する」とみなされる。タンパク質の立体構造の変化は、タンパク質の三次構造を決定する蛍光分光法と、タンパク質の二次構造を決定するＦＴＩＲ分光法によって評価することができる。
【００７５】
タンパク質複合体は、当該タンパク質複合体が有意な化学修飾を示さない場合、医薬製剤中において「その化学的安定性を保持する」とみなされる。化学的安定性は、タンパク質の化学的に変化した形態を検出および定量化することにより評価することができる。タンパク質の化学構造をしばしば変化させる分解プロセスは、加水分解またはトランケーション（サイズ排除クロマトグラフィーやＳＤＳ−ＰＡＧＥなどの方法で評価される）、酸化（質量分析またはＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ／ＭＳと組み合わせたペプチド分光法などの方法で評価される）、脱アミド化（イオン交換クロマトグラフィー、キャピラリー等電点電気泳動、ペプチド分光法、イソアスパラギン酸測定などの方法で評価される）、および異性化（例えばイソアスパラギン酸の含有量の測定、ペプチド分光法により評価される）を含む。
【００７６】
所定時間でのタンパク質複合体の生物活性が、医薬製剤が最初に調製された時点で示された生物活性から所定の範囲内に依然としてある場合、タンパク質複合体は医薬製剤中において「その生物活性を保持する」とみなされる。タンパク質複合体の生物活性は、例えば、抗原結合アッセイにより決定することができる。
【００７７】
本開示で使用されるアミノ酸の３文字コードおよび１文字コードは、Ｊ．ｂｉｏｌ．ｃｈｅｍ、２４３、３５５８頁（１９６８年）に記載されている。
【００７８】
「ＩＬ−１５タンパク質複合体」は、ＩＬ−１５タンパク質とＩＬ−１５受容体（およびＩＬ−１５受容体の機能断片を含むタンパク質）とによって形成されるタンパク質複合体であり、ＩＬ−１５受容体の機能断片には、ＩＬ−１５受容体の細胞外領域を含む断片、またはＩＬ−１５受容体の細胞外領域を含む融合タンパク質が含まれる。「ＩＬ−１５タンパク質複合体３」は、ＷＯ２０１６／０９５６４２に記載されているタンパク質複合体３を指し、当該タンパク質複合体３はＩＬ−１５Ｒα−Ｓｕｓｈｉ＋（Ｓ４０Ｃ）−Ｆｃに結合した変異ＩＬ−１５（Ｌ５２Ｃ）によって形成されるタンパク質複合体であり、ここで、ＩＬ−１５はＬ５２Ｃ変異を有し、ＩＬ−１５Ｒαの細胞外領域はＳ４０Ｃ変異を有し（ＩＬ−１５Ｒα−Ｓｕｓｈｉ）、ＩＬ−１５Ｒα−Ｓｕｓｈｉ＋（Ｓ４０Ｃ）はＦｃに融合されている。
【００７９】
ＩＬ−１５（Ｌ５２Ｃ）（配列番号１）：
【化１】
2020528424.tif 000003
ＩＬ−１５Ｒα−Ｓｕｓｈｉ＋（Ｓ４０Ｃ）−Ｆｃ（配列番号２）：
【化２】
2020528424.tif 000004
【００８０】
タンパク質を生産および精製する方法は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍａｎｕａｌ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、第５〜８章および第１５章などのように、当技術分野で周知である。
【００８１】
本開示の改変タンパク質複合体（ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｍｐｌｅｘ）は、従来の方法によって調製および精製することができる。例えば、ＩＬ−１５およびＩＬ−１５受容体をコードするｃＤＮＡ配列をクローン化し、ＧＳ発現ベクターに組み込むことができる。組換えタンパク質発現ベクターは、ＣＨＯ細胞に安定的にトランスフェクトすることができる。推奨される先行技術として、哺乳動物発現系は、タンパク質のグリコシル化、特にＦｃ領域の高度に保存されたＮ末端部位におけるグリコシル化をもたらし得る。安定なクローンは、ヒトＩＬ−１５に特異的に結合するタンパク質を発現させることにより得ることができる場合がある。タンパク質複合体を生産するために、陽性クローンはバイオリアクター内の無血清培地中で増殖させられる（ｅｘｐａｎｄｅｄ）。タンパク質が分泌される培地は、従来技術により精製することができる。例えば、調整された緩衝液を含むＡまたはＧセファロースＦＦカラムを使用して精製が行われる。非特異的に結合した成分は洗い流される。結合したタンパク質複合体はｐＨグラジエントによって溶出され、タンパク質画分がＳＤＳ−ＰＡＧＥによって検出され、収集される。タンパク質複合体は、従来の方法を用いたろ過により濃縮することができる。可溶性の混合物および多量体（ｍｕｌｔｉｍｅｒｓ）は、モレキュラーシーブ（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｓｉｅｖｅｓ）、イオン交換などの従来の方法で除去することができる。得られた産物は、−７０℃などで直ちに凍結するか、または凍結乾燥する必要がある。
【００８２】
アミノ酸配列の「同一性」は、２つのタンパク質またはポリペプチドの間の配列類似性を指す。比較対象の２つの配列中の位置が同じアミノ酸残基で占められている場合、例えば２つのポリペプチド中の位置が同じアミノ酸残基で占められている場合、分子はその位置で同一であると見なされる。パーセント配列同一性およびパーセント配列類似性を決定するのに適したアルゴリズムの例は、ＢＬＡＳＴおよびＢＬＡＳＴ２．０アルゴリズムであり、それぞれ、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９０年）  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．  ２１５：４０３−４１０頁およびＡｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．  （１９７７年）  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  ２５：３３８９−３４０２頁に記載されている。ＢＬＡＳＴ解析を実行するためのソフトウェアは、国立生物工学情報センター（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）で公開されている。
【００８３】
「投与」および「治療」は、動物、ヒト、実験対象、細胞、組織、器官または生物学的流体に適用される場合、外因性薬物、治療薬、診断薬または組成物を、当該動物、ヒト、対象、細胞、組織、器官または生物学的流体と接触させることを指す。「投与」および「治療」は、例えば、治療上の、薬物動態学的、診断上の研究および実験方法を指し得る。細胞の治療は、試薬を細胞と接触させること、および試薬を流体と接触させることを含み、当該流体は細胞と接触している。「投与」および「治療」は、例えば、試薬、診断薬、結合組成物、または別の細胞を用いて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｅｘ  ｖｉｖｏで細胞を治療することも意味する。「治療」は、ヒト、獣医学的対象、または研究対象に適用される場合、治療的処置、予防的または予防的措置（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ  ｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ  ｍｅａｓｕｒｅｓ）、研究および診断への応用を指す。
【００８４】
「治療」は、内用または外用のための患者への治療薬の投与、例えば、本開示の結合化合物のいずれかを含む組成物の投与を意味し、当該患者は疾患の１つ以上の症状を有しており、当該治療薬はこれらの症状に対して治療効果を有することが知られている。一般に、任意の臨床的に測定可能な程度で、症状の退化（ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）またはそのような症状の進行の阻害を誘発するように、治療薬は、疾患の１つ以上の症状を効果的に緩和する量で治療される対象または集団に投与される。特定の疾患の症状を効果的に緩和する治療薬の量（「治療有効量」とも呼ばれる）は、患者の病状、年齢および体重、ならびに患者に所望の効果をもたらす薬剤の能力などの様々な要因によって異なり得る。状態の重症度または進行を評価するために医師または他の専門医療提供者によって一般的に用いられる任意の臨床検査法を使用して、疾患の症状が緩和されたかどうかを評価することができる。本開示の実施形態（例えば、治療方法または製品）は、単一の標的疾患の症状を改善するのに効果的ではないかもしれないが、スチューデントのｔ検定、カイ２乗検定、マン・ホイットニーのＵ検定、クラスカル・ウォリス検定（Ｈ検定）、ヨンクヒール−タプストラ検定、およびウィルコクソン検定などの当技術分野で知られている任意の統計的試験に従って、統計的に有意な数の患者において、標的疾患の症状を緩和するべきである。
【００８５】
「有効量」は、医学的疾患の症状または状態を改善または予防するのに十分な量を含む。有効量はまた、診断を可能にするか、または診断を促進するのに十分な量を意味する。特定の患者または獣医学的対象（ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  ｓｕｂｊｅｃｔ）の有効量は、治療される状態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ  ｔｏ  ｂｅ  ｔｒｅａｔｅｄ）、患者の全体的な健康状態、投与の方法、経路および量、ならびに副作用の重症度などの因子に応じて異なり得る。有効量は、重大な副作用または毒性作用を回避する最大の用量または投与レジメンであり得る。
【実施例】
【００８６】
ＩＩ．実施例および試験例
本開示は、以下の実施例で更に説明される。ただし、これらの実施例は、本開示の範囲を限定することを意図したものではない。
【００８７】
本開示の実施例または試験例において特定の条件が具体的に示されていない実験方法は、一般的に、従来の条件または製造業者が推奨する条件に従って実施された。Ｊ．Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｌｏｎｉｎｇ：  ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍａｎｕａｌ．  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ  Ｍ．  Ａｕｓｕｂｅｌ，  Ｔｈｅ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｍｅｔｈｏｄ，  Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｒｅｓｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎを参照。ソースが特に示されていない試薬は、市場からルーチン的に購入された。
【００８８】
ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む医薬組成物（製剤）の調製プロセス
実施例
ＩＬ−１５タンパク質複合体を含む医薬組成物（製剤）の調製プロセスは、以下の通りである（各製剤の成分および組成は、タンパク質複合体の安定性に基づいて選択および調整することができる）。
【００８９】
第１工程：ＩＬ−１５タンパク質複合体３（ＩＬ−１５タンパク質複合体３の調製、発現、および精製については、参照によりその全体が本明細書に援用される、２０１５年１１月１７日に出願された特許出願ＷＯ２０１６／０９５６４２（出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０１５／０９４７８０）を参照）および安定剤成分を含むストック溶液を調製し、ろ過してから無菌性試験用の溶液をサンプリングする。ストック溶液を０．２２μｍのＰＶＤＦフィルターに通し、ろ液を回収した。
【００９０】
ＩＬ−１５タンパク質複合体３は、以下のポリペプチドからなる：
ＩＬ−１５（Ｌ５２Ｃ）（配列番号１）：
【化３】
2020528424.tif 000005
ＩＬ−１５Ｒα−Ｓｕｓｈｉ＋（Ｓ４０Ｃ）−Ｆｃ（配列番号２）：
【化４】
2020528424.tif 000006
【００９１】
第２工程：ローディング量を１．１ｍｌに調整し、ストッパーが不完全に差し込まれた状態で、ろ液を２ｍｌバイアルに充填した。ローディングの違いを監視するために、充填の最初、中間、および最後にそれぞれサンプリングが実行される。
【００９２】
第３工程：液体溶液をスットパーとともに凍結乾燥チャンバーに充填し、凍結乾燥した。凍結乾燥は、事前凍結、一次乾燥、および二次乾燥の工程を連続して含む。凍結乾燥の手順が終了したら、ストッパーは真空下で完全に差し込まれる。
【００９３】
第４工程：キャッピングマシンを使用して、アルミニウムキャップでキャッピングする。
【００９４】
第５工程：コラプス（ｃｏｌｌａｐｓｅ）のない製品、ローディング量の正確性、およびその他の欠陥を確認するために、目視検査が実施された。バイアルのラベルが印刷され、バイアルに貼り付けられた。バイアルはペーパートレイ中に置かれ、ラベルを印刷してペーパートレイに貼り付けた。
【００９５】
（実施例１）
濃度１ｍｇ／ｍＬのＩＬ−１５タンパク質複合体３の製剤が、ｐＨ５．０〜８．５の一連の緩衝液中で調製された。各製剤をろ過し、２ｍＬバイアルに１ｍＬ／バイアルにて充填し、ストッパーで栓をして、キャップをして密封した。サンプルは、例えば４０℃の高温に置くこと、凍結融解の繰り返しおよび振盪によって、強制劣化試験にかけられた。外観およびＳＥＣが評価指標として使用された。結果は、各緩衝液系におけるＳＥＣモノマーの純度が、４０℃での強制劣化試験後に著しく低下することを示した。しかしながら、クエン酸系における低下が最も少なかった。振盪、凍結融解後、各緩衝液系（リン酸系を除く）におけるＳＥＣは、Ｄ０のＳＥＣと比較して有意な変化を示さなかった。したがって、クエン酸が緩衝液系として選択された。クエン酸系の場合、ｐＨ６．０では、凍結融解後の外観および４０℃でのＳＥＣはわずかに悪化した。したがって、ｐＨ５．０〜５．５での条件の方が優れていた。
【００９６】
【表１−１】
2020528424.tif 000007
【表１−２】
2020528424.tif 000008
【００９７】
（実施例２）
濃度１ｍｇ／ｍＬのＩＬ−１５タンパク質複合体３、１０ｍＭクエン酸−クエン酸ナトリウム、６０ｍｇ／ｍＬスクロース、ｐＨ５．５を含む製剤は、以下のような様々な濃度の界面活性剤を含む緩衝液中で調製された：
１）０．２ｍｇ／ｍＬポリソルベート２０
２）０．４ｍｇ／ｍＬポリソルベート２０
３）０．２ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０
４）０．４ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０
【００９８】
各製剤をろ過し、２ｍＬバイアルに１ｍＬ／バイアルにて充填し、ストッパーで栓をして、キャップをして密封した。サンプルは、例えば４０℃の高温に置くこと、および凍結融解の繰り返しによって、強制劣化試験にかけられた。安定性の結果は、異なる製剤間で外観およびＳＥＣにおいて有意な差がないことを示した。４０℃の高温および凍結融解の条件下で得られた非還元ＣＥ−ＳＤＳの結果は、０．４ｍｇ／ｍＬポリソルベート２０グループにおける安定性がより優れていることを示した。
【００９９】
【表２】
2020528424.tif 000009
【０１００】
（実施例３）
濃度１ｍｇ／ｍＬのＩＬ−１５タンパク質複合体３、１０ｍＭクエン酸−クエン酸ナトリウムを含む医薬製剤が、α、α−トレハロース二水和物およびスクロースをそれぞれ含む緩衝液（ｐＨ５．５）中で調製された。各製剤をろ過し、２ｍＬバイアルに１ｍＬ／バイアルにて充填し、ストッパーで栓をして、キャップをして密封した。サンプルは、例えば４０℃の高温に置くこと、および凍結融解の繰り返しによって、強制劣化試験にかけられた。結果は、トレハロース系におけるＩＬ−１５タンパク質複合体３の安定性が、スクロース系におけるＩＬ−１５タンパク質複合体３の安定性よりも優れていることを示した。
【０１０１】
【表３】
2020528424.tif 000010
【０１０２】
（実施例４）
製剤の最適化
トレハロースおよびポリソルベート２０の濃度、イオン強度、ならびにｐＨを更に最適化するために、ＤＯＥ実験がＪＭＰソフトウェアを使用して設計され、タンパク質濃度が１ｍｇ／ｍＬであるＲＳＭモデルを使用して、一連の製剤が得られた。溶液は、ＳＥＣおよび非還元ＣＥ−ＳＤＳを評価指標として使用した強制劣化法に供され、結果が最小二乗検定により統計的に分析された。ＤＯＥパラメーターを表４に示した。試験製剤および結果を表５および表６に示した。統計分析結果を図１〜３に示した。
【０１０３】
【表４】
2020528424.tif 000011
【０１０４】
【表５】
2020528424.tif 000012
【０１０５】
【表６】
2020528424.tif 000013
【０１０６】
強制劣化から得られたデータをフィッティングし、結果は以下の通りであった：Ｄ０およびＤ１５（振盪後）の間のＳＥＣモノマー純度の値の差がフィッティングされ（当該差の値が負の場合は０とみなす）、Ｒ２＞０．９９、Ｐ＜０．０５で、モデルは妥当であった。結果を図１に示した。
【０１０７】
非還元ＣＥ−ＳＤＳを使用することで、Ｄ０およびＤ１５（振盪後）の間の純度の値の差がフィッティングされ、Ｒ２＞０．９８、Ｐ＜０．０５で、モデルは妥当であった。結果を図２に示した。
【０１０８】
他のデータについては、フィッティングが無効であった。
【０１０９】
凍結乾燥製剤の良好な圧縮性および適切な浸透圧を確保するために、トレハロースの濃度は７．５±０．５％（７５±５ｍｇ／ｍｌ）に設定された。１０±２ｍＭのイオン強度は十分な緩衝能力を有することが明らかになった。
【０１１０】
トレハロースの濃度は７．５％（７５ｍｇ／ｍｌ）に設定され、イオン強度は１０ｍＭに設定され、ｐＨは横軸にプロットされ、ポリソルベートの濃度は縦軸にプロットされ、振盪後のＳＥＣおよび非還元ＣＥ−ＳＤＳの値の差を示すために、等高線図がプロットされた。結果を図３に示した。タンパク質複合体の等電点と組み合わせた図に示された結果に基づいて、製剤の好ましいｐＨ範囲がｐＨ５．１５〜ｐＨ５．２５であり、ポリソルベートの濃度は０．４〜０．６ｍｇ／ｍｌであることがわかる。
【０１１１】
（実施例５）
ＩＬ−１５タンパク質複合体３は、１０ｍＭクエン酸−クエン酸ナトリウム（ｐＨ５．２）、７５ｍｇ／ｍＬのα、α−トレハロース二水和物、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０、ｐＨ５．２中にて、１．０ｍｇ／ｍＬで製剤された。該タンパク質を２ｍＬバイアルに１．１ｍＬ／バイアルにて充填し、それぞれ−２５℃、−２０℃、および−１５℃の一次乾燥温度で凍結乾燥し、試験用に凍結乾燥されたゴムストッパーで密封した。結果は、様々な温度でのすべての再構成溶液の外観が要件を満たし、−２５℃で凍結乾燥された製剤の外観がより優れており、粉末固形物（ｐｏｗｄｅｒ  ｃａｋｅ）はコラプス（ｃｏｌｌａｐｓｅ）がなく完全（ｆｕｌｌ）であることを示した。
【０１１２】
【表７】
2020528424.tif 000014
【０１１３】
（実施例６）
ＩＬ−１５タンパク質複合体３は、１０ｍＭクエン酸−クエン酸ナトリウム（ｐＨ５．２）、７５ｍｇ／ｍＬのα、α−トレハロース二水和物、０．５ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０、ｐＨ５．２中にて、１．０ｍｇ／ｍＬで製剤された。該製剤は、ガラスバイアル、液体保存バッグ、３１６Ｌステンレススチールタンクにそれぞれ充填され、２〜８℃および２５℃でそれぞれ２４時間放置された。外観、ｐＨ、タンパク質含有量および純度の分析は、ＩＬ−１５タンパク質複合体３が２４時間以内は安定であることを示した。該製剤は、ガラスバイアル、ステンレススチールタンク、液体保存バッグと適合性があった。
【０１１４】
【表８】
2020528424.tif 000015
【０１１５】
（実施例７）
他の代替的な医薬組成物（製剤）または再構成溶液
更に提供される安定な医薬製剤は以下を含む：
（１）５ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、７５ｍｇ／ｍｌのトレハロース、０．５ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０、および１０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、最終ｐＨ５．２；
（２）１０ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、７５ｍｇ／ｍｌのトレハロース、０．５ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０、および１０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、最終ｐＨ５．２；
（３）１０ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、７５ｍｇ／ｍｌのスクロース、０．５ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０、および１０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、最終ｐＨ５．２５；
（４）０．９ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、６０ｍｇ／ｍｌのトレハロース、０．１ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０、および２０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．０）；
（５）１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、７５ｍｇ／ｍｌのトレハロース、０．５ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０、および１０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．２）；
（６）１．１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、９０ｍｇ／ｍｌのトレハロース、０．６ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０、および３０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．５）；
（７）０．９ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、６０ｍｇ／ｍｌのトレハロース、０．１ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０、および２０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、最終ｐＨ５．０；
（８）１．１ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、９０ｍｇ／ｍｌのトレハロース、０．６ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０、および３０ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液、最終ｐＨ５．５；
（９）０．５ｍｇ／ｍｌのＩＬ−１５タンパク質複合体３、６５ｍｇ／ｍｌのトレハロース、０．３ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０（ｐＨ５．３）、および１５ｍＭのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝液。
【図１】
2020528424.tif 000016
【図２】
2020528424.tif 000017
【図３】
2020528424.tif 000018
【国際調査報告】
2020528424.tif 000019
2020528424.tif 000020
2020528424.tif 000021
2020528424.tif 000022
2020528424.tif 000023
2020528424.tif 000024
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