(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩［式中、「ｍ」、「ｎ」、「ｐ」および「ｑ」は、整数を表し、０および１から選択され、「ｒ」は、１から１０までで構成される］；式（Ｉ）のペプチド配列における「ｉ」位に位置するアミノ酸のアルファ炭素原子を、式（Ｉ）のペプチド配列における「ｉ＋４」または「ｉ＋７」位に位置するアミノ酸のアルファ炭素原子と連結している式（ＩＩ）のリンカービラジカル；−Ｃ（Ｏ）Ｒ４に対応するＣ末端；および−ＮＨＲ５に対応するＮ末端を提供する。本発明のペプチドは、抗がん活性ならびに適切な半減期および安定性を示す。式（Ｉ）。2020528458.tif 000064
2020528458.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩：
【化１】
2020528458.tif 000052
［式中、
「ｍ」、「ｎ」、「ｐ」および「ｑ」は、整数を表し、０および１から選択され、
「ｒ」は、１から１０までで構成され、
前記ペプチドは、
−  式（Ｉ）のペプチド配列における「ｉ」位に位置するアミノ酸のアルファ炭素原子を、式（Ｉ）のペプチド配列における「ｉ＋４」または「ｉ＋７」位に位置するアミノ酸のアルファ炭素原子と連結している、式（ＩＩ）のリンカービラジカル「Ｌ」
−［（Ｒ１）ａ−（Ｒ２）−（Ｒ３）ｂ］ｃ−（ＩＩ）、
−  −Ｃ（Ｏ）Ｒ４に対応するＣ末端、および
−  −ＮＨＲ５に対応するＮ末端
を含み、ここで、
「ａ」および「ｂ」は、同じであるかまたは異なっており、０または１であり、
「ｃ」は、１から１０までで構成され、
Ｒ１およびＲ３は、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル；ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、−ＯＲ６、−ＮＲ７Ｒ８、−ＳＲ９、−ＳＯＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１１および−ＣＯ２Ｒ１２からなる群から選択される１個または複数のラジカルによって置換されている（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル；（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル；ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、−ＯＲ６、−ＮＲ７Ｒ８、−ＳＲ９、−ＳＯＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１１および−ＣＯ２Ｒ１２からなる群から選択される１個または複数のラジカルによって置換されている（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル；（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル；ならびに、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、−ＯＲ６、−ＮＲ７Ｒ８、−ＳＲ９、−ＳＯＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１１および−ＣＯ２Ｒ１２からなる群から選択される１個または複数のラジカルによって置換されている（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から独立して選択されるビラジカルであり、
Ｒ２は、−Ｏ−、Ｃ（＝Ｏ）、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１３、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｓ（＝Ｏ）、Ｓ（＝Ｏ）２、ＮＲ１４、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル、−ＮＲ１５−ＮＲ１６−、−Ｎ＝Ｎ−、−Ｓ−Ｓ−、および１から３個までの環を含む、３から１４員までを含む公知の環系からなる群から選択されるビラジカルであり、ここで、
前記環の各１個は、飽和、部分不飽和または芳香族であり、
前記環は、単離されているか、部分的にまたは完全に縮合しており、
前記公知の環系を形成する員の各１個は、−ＣＨ−、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−Ｎ−、−ＳＨ−、−Ｓ−および−Ｏ−からなる群から選択され、
前記環系は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＯ２、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ１０）ハロアルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル−Ｏ−からなる群から独立して選択される１個または複数のラジカルによって置換されていてもよく、
Ｒ４は、−ＯＨおよび−ＮＲ１７Ｒ１８からなる群から選択されるラジカルであり、
Ｒ５は、−Ｈおよび（Ｃ１〜Ｃ２０）アルキルからなる群から選択されるラジカルであり、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７およびＲ１８は、−Ｈおよび（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルからなる群から独立して選択されるラジカルであり、
前記リンカーによって連結されている前記アミノ酸は、式（ＩＩＩ）
【化２】
2020528458.tif 000053
｛式中、
Ｒ１９は、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル、および１から３個までの環を含む、３から１４員までを含む公知の環系からなる群から選択されるモノラジカルであり、ここで、
前記環の各１個は、飽和、部分不飽和または芳香族であり、
前記環は、単離されているか、部分的にまたは完全に縮合しており、
前記公知の環系を形成する員の各１個は、−ＣＨ−、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−Ｎ−、−ＳＨ−、−Ｓ−および−Ｏ−からなる群から選択される｝
のものである］、
または、代替として、配列番号１８の配列のペプチドと少なくとも８５％の同一性を有するペプチドまたは薬学的な許容されるその塩
【化３】
2020528458.tif 000054
［式中、
Ｌは、上記で定義されている式（ＩＩ）のリンカービラジカルであり、
Ｘは、上記で定義されている式（ＩＩＩ）のアミノ酸である］。
【請求項２】
式（Ｉ）のものである、請求項１に記載のペプチドまたはその薬学的塩：
【化４】
2020528458.tif 000055
［式中、
「ｍ」、「ｎ」、「ｐ」、「ｑ」および「ｒ」は、請求項１で定義されている通りであり、
前記ペプチドは、請求項１で定義されている式（ＩＩ）のリンカービラジカル、Ｃ末端およびＮ末端を含む］。
【請求項３】
「ｒ」、「ａ」、「ｂ」および「ｃ」が、１である、請求項１または２に記載のペプチドまたはその薬学的塩。
【請求項４】
Ｒ１およびＲ３が、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルおよび（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から独立して選択されるビラジカルである、請求項１から３のいずれか一項に記載のペプチドまたはその薬学的塩。
【請求項５】
Ｒ２が、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルおよび（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から選択されるビラジカルである、請求項１から４のいずれか一項に記載のペプチドまたはその薬学的塩。
【請求項６】
Ｒ１９が、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルおよび（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から選択されるモノラジカルである、請求項１から５のいずれか一項に記載のペプチドまたはその薬学的塩。
【請求項７】
Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルであり、Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり、「ｍ」および「ｎ」が、同じであり、「ｐ」および「ｑ」が、同じである、請求項１から６のいずれか一項に記載のペプチドまたはその薬学的塩。
【請求項８】
Ｃ末端が、−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２に対応し、Ｎ末端が、−ＮＨ２に対応する、請求項１から７のいずれか一項に記載のペプチドまたはその薬学的塩。
【請求項９】
式（Ｉａ）または（Ｉｂ）：
Ｉａ：
【化５】
2020528458.tif 000056
Ｉｂ：
【化６】
2020528458.tif 000057
［式中、「ｍ」、「ｎ」、「ｐ」、「ｑ」、ＬおよびＲ１９は、請求項１から８のいずれかで定義されている通りである］
のものである、請求項１から８のいずれか一項に記載のペプチドまたはその薬学的塩。
【請求項１０】
配列番号１８の配列のペプチドと少なくとも８５％の同一性を有するペプチドまたは薬学的な許容されるその塩であり、（ｉｂｉｓ１）、（ｉｂｉｓ２）、（ｉｂｉｓ３）、（ｉｂｉｓ４）、（ｉｂｉｓ５）および（ｉｂｉｓ６）：
（Ｉｂｉｓ１）：
【化７】
2020528458.tif 000058
［式中、ＡＡ３は、Ｔｈｒ以外のアミノ酸であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記で定義されている通りである］、
（Ｉｂｉｓ２）：
【化８】
2020528458.tif 000059
［式中、ＡＡ４は、Ｇｌｕ以外のアミノ酸であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記で定義されている通りである］、
（Ｉｂｉｓ３）：
【化９】
2020528458.tif 000060
［式中、ＡＡ５は、Ｐｒｏ以外のアミノ酸であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記で定義されている通りである］、
（Ｉｂｉｓ４）：
【化１０】
2020528458.tif 000061
［式中、ＡＡ２は、Ａｌａ以外のアミノ酸であり、ＡＡ３は、Ｔｈｒ以外のアミノ酸であり、ＡＡ４は、Ｇｌｕ以外のアミノ酸であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記で定義されている通りである］、
（Ｉｂｉｓ５）：
【化１１】
2020528458.tif 000062
［式中、ＡＡ１は、Ａｓｎ以外のアミノ酸であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記で定義されている通りである］、
（Ｉｂｉｓ６）：
【化１２】
2020528458.tif 000063
［式中、ＡＡ２は、Ａｌａ以外のアミノ酸であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記で定義されている通りである］
からなる群から選択される、請求項１から９のいずれか一項に記載のペプチドまたはその薬学的塩。
【請求項１１】
配列番号２から１４からなる群から選択される、請求項１から１０のいずれか一項に記載のペプチド。
【請求項１２】
標識と、薬物と、または、代替として、安定化部分とコンジュゲートされた、請求項１から１１のいずれか一項に記載のペプチド。
【請求項１３】
配列番号１６の配列のものである、請求項１２に記載のペプチド。
【請求項１４】
請求項１から１３のいずれか一項に記載のペプチドまたは薬学的な許容されるその塩、および、場合により、細胞透過性ペプチドを含む、融合タンパク質。
【請求項１５】
配列番号１７の配列のものである、請求項１４に記載の融合タンパク質。
【請求項１６】
治療有効量の、請求項１から１３のいずれか一項に記載のペプチドもしくはその薬学的塩または請求項１４から１５のいずれか一項に記載の融合タンパク質を、許容される医薬賦形剤および／または担体と一緒に含む、医薬組成物。
【請求項１７】
医薬としての使用のための、請求項１から１３のいずれか一項に記載のペプチドもしくはその薬学的塩または請求項１４から１５のいずれか一項に記載の融合タンパク質。
【請求項１８】
がんの治療における使用のための、請求項１から１３のいずれか一項に記載のペプチドもしくはその薬学的塩または請求項１４から１５のいずれか一項に記載の融合タンパク質または請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
がんが、白血病、乳がん、膠芽腫および肺がんからなる群から選択される、請求項１８に記載の使用のための、ペプチドまたはその薬学的塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１７年７月２５日に出願された、欧州特許出願第ＥＰ１７３８２４９４．７号の優先権を主張するものである。
本発明は、抗新生物化合物の分野全体に、より詳細には、抗がん活性が改善されたペプチドの設計および合成に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞内で作用するタンパク質およびペプチドの治療的使用は、がんおよび他の疾患の治療に非常に有望である。
がんは、複数の要因の発生の結果である。突然変異は、細胞増殖を増大させる癌原遺伝子において、発生し得る。突然変異は、その正常機能が細胞増殖を調節することである腫瘍抑制因子においても発生し得る。ＤＮＡ修復酵素における突然変異は、増殖する前に損傷を修復する細胞の能力を損なう。
【０００３】
腫瘍抑制遺伝子は、その非存在（喪失または不活化）ががんにつながり得る正常遺伝子である。腫瘍抑制遺伝子は、細胞成長および分裂を減速させるタンパク質をコードする。腫瘍抑制遺伝子の野生型対立遺伝子は、異常な細胞増殖を抑制するタンパク質を発現する。腫瘍抑制タンパク質のための遺伝子コード化が突然変異するまたは欠失する場合、得られる変異タンパク質または腫瘍抑制タンパク質発現の完全な欠如は、細胞増殖を正しく調節することに失敗する場合があり、異常な細胞増殖は、特に細胞調節機構に対する既存の損傷が既にある場合に起こり得る。若干数のよく研究されたヒト腫瘍および腫瘍細胞株は、欠けているまたは非機能性腫瘍抑制遺伝子を有することが示されている。
【０００４】
現在、多くの一般的ながんの種類の治療のための有効な選択肢はほとんどない。所与の個体のための治療過程は、診断、疾患が発症した段階、ならびに患者の年齢、性別および全体的健康等の要因によって決まる。がん治療の最も慣例的な選択肢は、手術、放射線療法および化学療法である。これらの療法は、それぞれ、様々な副作用を伴い、様々な有効性の程度を有する。これらの副作用は、伝統的な化学療法について既に開示された多剤耐性と一緒に、新規抗がん薬または治療的アプローチに対する緊急の必要性を促してきた。
【０００５】
抗がんペプチドは、それらの独自の機序およびいくつかの並外れた特性により、新規抗がん剤のための有望な分子となっている。しかしながら、先行技術において既に開示されたペプチドによって示された特異性および感度等の特性は、さらなる改善を必要とする。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、なされた努力にもかかわらず、適切な抗がんプロファイルを有するさらなるポリペプチドを開発する必要性が依然としてある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、配列番号１の配列が、がん細胞増殖を阻害する際に有効ではないことを見出した。驚くべきことに、前記配列番号１の配列が、側鎖架橋（ステープル化）の包含によってまたは細胞透過性ペプチドとのコンジュゲーションによって修飾された場合、ペプチド配列は、がん細胞増殖を阻害する際に著しく活性になった（以下の表５〜６を参照）。本発明のペプチドによって示された効率は、所望の効果を実現するために少量しか必要とされないようにする。
【０００８】
技術水準において、肝毒性は、抗がん化合物の投与に関連する副作用であることが公知である。以下の表７に示されるように、本発明のペプチドは、ヒト肝細胞において毒性を生じさせることなく、そのような抗がん効果を示す。
【０００９】
したがって、第一の態様において、本発明は、式（Ｉ）の抗がんペプチドまたはその薬学的塩：
【００１０】
【化１】
2020528458.tif 000003
【００１１】
［式中、
「ｍ」、「ｎ」、「ｐ」および「ｑ」は、整数を表し、０および１から選択され、
「ｒ」は、１から１０までで構成され、
ペプチドは、
−  式（Ｉ）のペプチドにおける「ｉ」位に位置するアミノ酸のアルファ炭素原子を、式（Ｉ）のペプチドにおける「ｉ＋４」または「ｉ＋７」位に位置するアミノ酸のアルファ炭素原子と連結している、式（ＩＩ）のリンカービラジカル「Ｌ」
−［（Ｒ１）ａ−（Ｒ２）−（Ｒ３）ｂ］ｃ−（ＩＩ）、
−  −Ｃ（Ｏ）Ｒ４に対応するＣ末端、および
−  −ＮＨＲ５に対応するＮ末端
を含み、ここで、
「ａ」および「ｂ」は、同じであるかまたは異なっており、０または１であり、
「ｃ」は、１から１０までで構成され、
Ｒ１およびＲ３は、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル；ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、−ＯＲ６、−ＮＲ７Ｒ８、−ＳＲ９、−ＳＯＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１１および−ＣＯ２Ｒ１２からなる群から選択される１個または複数のラジカルによって置換されている（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル；（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル；ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、−ＯＲ６、−ＮＲ７Ｒ８、−ＳＲ９、−ＳＯＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１１および−ＣＯ２Ｒ１２からなる群から選択される１個または複数のラジカルによって置換されている（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル；（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル；ならびに、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、−ＯＲ６、−ＮＲ７Ｒ８、−ＳＲ９、−ＳＯＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１１および−ＣＯ２Ｒ１２からなる群から選択される１個または複数のラジカルによって置換されている（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル（ａｌｋｉｎｙｌ）からなる群から独立して選択されるビラジカルであり、
Ｒ２は、−Ｏ−、Ｃ（＝Ｏ）、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１３、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｓ（＝Ｏ）、Ｓ（＝Ｏ）２、ＮＲ１４、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル、−ＮＲ１５−ＮＲ１６−、−Ｎ＝Ｎ−、−Ｓ−Ｓ−、および１から３個までの環を含む、３から１４員までを含む公知の環系からなる群から選択されるビラジカルであり、ここで、
環の各１個は、飽和、部分不飽和または芳香族であり、
環は、単離されているか、部分的にまたは完全に縮合しており、
公知の環系を形成する員の各１個は、−ＣＨ−、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−Ｎ−、−ＳＨ−、−Ｓ−および−Ｏ−からなる群から選択され、
環系は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＯ２、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ１０）ハロアルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル−Ｏ−からなる群から独立して選択される１個または複数のラジカルによって置換されていてもよく、
Ｒ４は、−ＯＨおよび−ＮＲ１７Ｒ１８からなる群から選択されるラジカルであり、
Ｒ５は、−Ｈおよび（Ｃ１〜Ｃ２０）アルキルからなる群から選択されるラジカルであり、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２  Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７およびＲ１８は、−Ｈおよび（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルからなる群から独立して選択されるラジカルであり、
リンカーによって連結されているアミノ酸は、式（ＩＩＩ）
【００１２】
【化２】
2020528458.tif 000004
【００１３】
｛式中、
Ｒ１９は、−Ｈ、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル、および１から３個までの環を含む、３から１４員までを含む公知の環系からなる群から選択されるモノラジカルであり、ここで、
環の各１個は、飽和、部分不飽和または芳香族であり、
環は、単離されているか、部分的にまたは完全に縮合しており、
公知の環系を形成する員の各１個は、−ＣＨ−、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−Ｎ−、−ＳＨ−、−Ｓ−および−Ｏ−からなる群から選択される｝
のものである］、
または、代替として、配列番号１８の配列のペプチドと少なくとも８５％の同一性を有するペプチドまたは薬学的な許容される（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ）その塩
【００１４】
【化３】
2020528458.tif 000005
【００１５】
［式中、
Ｌは、上記で定義されている式（ＩＩ）のリンカービラジカルであり、
Ｘは、上記で定義されている式（ＩＩＩ）のアミノ酸である］
を提供する。
【００１６】
そのようながん細胞増殖阻害により、本発明のペプチドは、有望な抗がんペプチドである。
第二の態様において、本発明は、細胞透過性ペプチドとコンジュゲートされた、配列番号１の配列に関して少なくとも８５％の同一性を有するペプチドまたはその薬学的塩を提供する。
【００１７】
上記に加えて、以下で提供されるように、本発明のペプチドは、血漿中における適切な半減期および安定性を示し、ペプチドの量（および効果）は、ヒト血漿中におけるそのインキュベーション後約２４時間にわたって持続される（表８、以下）。
【００１８】
これらのデータは、本発明のペプチドが抗がん治療薬として好適であると結論付けることを可能にする。
第三の態様において、本発明は、本発明の第一または第二の態様で定義されているペプチドを含む、融合タンパク質を提供する。
【００１９】
第四の態様において、本発明は、治療有効量の、本発明のペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様で定義されている融合タンパク質を、許容される医薬賦形剤および／または担体と一緒に含む、医薬組成物を提供する。
【００２０】
第五の態様において、本発明は、医薬としての使用のための、本発明の第一もしくは第二の態様で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様で定義されている融合タンパク質を提供する。この態様は、代替として、疾患の治療のための医薬の製造における、本発明の第一もしくは第二の態様で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様で定義されている融合タンパク質の使用として案出され得る。この態様は、代替として、疾患の治療のための方法であって、有効治療量の、本発明の第一もしくは第二の態様で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様の融合タンパク質を、それを必要とする対象に投与するステップを含む、方法としても案出され得る。
【００２１】
第六の態様において、本発明は、がんの治療における使用のための、本発明の第一もしくは第二の態様で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様で定義されている融合タンパク質または本発明の第四の態様で定義されている医薬組成物を提供する。この態様は、代替として、がんの治療のための医薬の製造における、本発明の第一もしくは第二の態様で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様で定義されている融合タンパク質または本発明の第四の態様で定義されている医薬組成物の使用として案出され得る。この態様は、代替として、がんの治療のための方法であって、有効治療量の、本発明の第一もしくは第二の態様で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様で定義されている融合タンパク質または本発明の第四の態様で定義されている医薬組成物を、それを必要とする対象に投与するステップを含む、方法としても案出され得る。
【００２２】
さらなる態様において、本発明は、（ａ）本発明の第一もしくは第二の態様で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様で定義されている融合タンパク質または本発明の第四の態様の医薬組成物と、治療剤、特に抗がん剤とを含む、組合せ；（ｂ）医薬としての使用のための、より詳細には、がんの治療における使用のための、本発明の第一もしくは第二の態様で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様の融合ペプチドまたは本発明の第四の態様の医薬組成物と、治療剤、特に抗がん剤とを含む、組合せ；（ｃ）がんの予防または治療のための併用療法であって、抗がん剤と同時に、順次にまたは別個に対象へのその投与を含む療法における使用のための、本発明の第一もしくは第二の態様で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様で定義されている融合タンパク質または本発明の第四の態様で定義されている医薬組成物；ならびに（ｄ）本発明の第一もしくは第二の態様で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または本発明の第三の態様で定義されている融合タンパク質または本発明の第四の態様で定義されている医薬組成物との併用療法における使用であって、がんの予防または治療を含む使用のための、抗がん剤を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】本発明のＨ１４ペプチドの投与によって誘導された切断Ｐａｒｐタンパク質の量のウェスタンブロット解析の図である。
【図２】本発明のＨ１４ペプチドの投与によって誘導されたカスパーゼ３の量のウェスタンブロット解析の図である。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本明細書において使用される場合、本出願におけるすべての用語は、別段の記載がない限り、当該技術分野において公知であるそれらの普通の意味で理解されるものとする。本出願において使用されるある特定の用語について他のより具体的な定義は、以下に明記される通りであり、別段明確に提示される定義がより広義の定義を提供しない限り、明細書および請求項の全体を通して一様に当てはまることが意図される。
【００２５】
本発明の目的のために、記載される任意の範囲は、範囲の下位および上位の終点両方を含む。
本発明は、上記で記載したように、式（Ｉ）の、または代替として、配列番号１８のペプチドと少なくとも８５％の同一性を有する配列を含むペプチドを提供する。
【００２６】
本明細書において使用される場合、用語「薬学的な許容される塩」は、妥当な医学的判断の範囲内で、必要以上の毒性、刺激、アレルギー応答等なしに、ヒトおよび下等動物の組織と接触させて使用するのに好適であり、合理的なベネフィット／リスク比に見合った、塩を指す。薬学的な許容される塩は、当該技術分野において周知である。薬学的に許容される非毒性酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸等の無機酸と、または酢酸、トリフルオロ酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸もしくはマロン酸等の有機酸と、あるいはイオン交換等の当該技術分野において使用される他の方法を使用して、形成されるアミノ基の塩である。他の薬学的な許容される塩は、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチネート（ｐｅｃｔｉｎａｔｅ）、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩等を含む。適切な塩基に由来する塩は、アルカリ金属、アルカリ土類金属およびアンモニウムを含む。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩は、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等を含む。さらなる薬学的な許容される塩は、適切な場合、ハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、低級アルキルスルホネートおよびアリールスルホネート等の対イオンを使用して形成される、非毒性アンモニウム、第四級アンモニウムおよびアミンカチオンを含む。
【００２７】
用語（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルは、１から１０個までの炭素原子を有する飽和直鎖状または分枝鎖状アルキル鎖を指す。例証的な非限定的例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ネオ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルである。
【００２８】
用語（Ｃ１〜Ｃ２０）アルキルは、１から２０個までの炭素原子を有する飽和直鎖状または分枝鎖状アルキル鎖を指す。
用語（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルは、２から１０個までの炭素原子を含有し、１つまたは複数の二重結合も含有する、飽和直鎖状または分枝鎖状アルキル鎖を指す。例証的な非限定的例は、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イル等である。
【００２９】
用語（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルは、２から２０個までの炭素原子を含有し、１つまたは複数の三重結合も含有する、飽和直鎖状または分枝鎖状アルキル鎖を指す。例は、数ある中でも、エチニル、１−プロピニル、２−ブチニル、１，３−ブタジニル、４−ペンチニルおよび１−ヘキシニルを含む。
【００３０】
用語「ハロゲン」は、周期表における、５つの化学的に関連する元素：フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、ヨウ素（Ｉ）およびアスタチン（Ａｔ）からなる群を指す。
【００３１】
用語（Ｃ１〜Ｃ１０）ハロアルキルは、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル基からの１個または複数の水素原子の、同じであっても異なっていてもよい、１個または複数、好ましくは１から６個までのハロゲン原子による置きかえから生じる基を指す。例は、数ある中でも、トリフルオロメチル、フルオロメチル、１−クロロエチル、２−クロロエチル、１−フルオロエチル、２−フルオロエチル、２−ブロモエチル、２−ヨードエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、ペンタフルオロエチル、３−フルオロプロピル、３−クロロプロピル、２，２，３，３−テトラフルオロプロピル、２，２，３，３，３−ペンタフルオロプロピル、ヘプタフルオロプロピル、４−フルオロブチルおよびノナフルオロブチルを含む。
【００３２】
用語「公知の」環系は、本明細書において使用される場合、化学的に実現可能であり、当該技術分野において公知である環系を指し、そのため、化学的に可能ではない環系を除外することを意図する。
【００３３】
本発明によれば、環系が「単離された」環によって形成される場合、環系が、２、３または４個の環によって形成され、前記環が、１個の環の原子から他の環の原子との結合を介して結合していることを意味する。用語「単離された」は、環系が１個の環のみを有する実施形態も内包する。１個の環からなる公知の環系の例証的な非限定的例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクルヘキシル（ｃｙｃｌｈｅｘｙｌ）、シクロヘプチル、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、フェニルおよびシクロヘプテニルに由来するものである。
【００３４】
本発明によれば、環系が「完全に縮合した」環を有する場合、環系が、２個以上の原子が２個の隣接する環に共通である２、３または４個の環によって形成されることを意味する。例証的な非限定的例は、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル、１−ナフチル、２−ナフチル、アントリルまたはフェナントリルである。
【００３５】
本発明によれば、環系が「部分的に縮合した」ものである場合、環系が、前記完全に縮合した環の少なくとも２つ（すなわち、２個以上の原子が２個の隣接する環に共通である）であり、残りの環は１個の環の原子から縮合環の１つの原子との結合を介して結合している、３または４個の環によって形成されることを意味する。
【００３６】
用語「ビラジカル」は、本出願において使用される場合、互いに独立して作用する２つのフリーラジカル中心を有する偶数電子の化学化合物を意味する（ＩＵＰＡＣ  Ｇｏｌｄ  Ｂｏｏｋ、ウェブページ：ｈｔｔｐ：／／ｇｏｌｄｂｏｏｋ．ｉｕｐａｃ．ｏｒｇ、またはＩＵＰＡＣ  ｂｏｏｋ、第２．３．３版、２０１４−０２−２４、１６８頁）。
【００３７】
別段の記載がない限り、本発明のペプチドを形成するアミノ酸は、Ｌ−またはＤ−配置を有することができる。
本発明のペプチドの構築において使用されるアミノ酸は、有機合成によって調製されてもよいし、または、例えば、天然源の分解もしくはそこからの単離等の他のルートによって取得されてもよい。
【００３８】
以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の一実施形態において、ペプチドが式（Ｉ）のものである場合、ｒは、１から３までである。以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドが式（Ｉ）のものである場合、ｒは、１である。したがって、本発明の第一の態様のペプチドは、式（Ｉ）のアミノ酸配列からなる。
【００３９】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ａ＝１である。以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ｂ＝１である。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ｃ＝１である。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ａ＝ｂ＝ｃ＝１である。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ａ＝ｂ＝ｃ＝ｒ＝１である。
【００４０】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ１およびＲ３は、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルおよび（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から独立して選択されるビラジカルである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ１およびＲ３は、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表す。
【００４１】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ２は、−Ｏ−、Ｃ（＝Ｏ）、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１３、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｓ（＝Ｏ）、Ｓ（＝Ｏ）２、ＮＲ１４、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル、−ＮＲ１５−ＮＲ１６−、−Ｎ＝Ｎ−、−Ｓ−Ｓ−、および３から６員までの１個の環からなる公知の環系からなる群から選択されるビラジカルであり、環は、
飽和、部分不飽和または芳香族であり、
公知の環系を形成する員の各１個は、−ＣＨ−、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−Ｎ−、−ＳＨ−、−Ｓ−および−Ｏ−からなる群から選択され、
環系は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＯ２、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ１０）ハロアルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル−Ｏ−からなる群から独立して選択される１個または複数のラジカルによって場合により置換されている。
【００４２】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ２は、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルおよび（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から選択されるビラジカルである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ２は、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである。
【００４３】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ１およびＲ３は、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２は、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである。
【００４４】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ１およびＲ３は、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２は、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ａ＝ｂ＝ｃ＝１である。
【００４５】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ１およびＲ３は、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２は、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ｒ＝ａ＝ｂ＝ｃ＝１である。
【００４６】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ１９は、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルおよび（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から選択される。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ１９は、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルモノラジカルである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９は、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２は、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである。
【００４７】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ４は、−ＯＨである（すなわち、Ｃ末端は、−Ｃ（Ｏ）ＯＨである）。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ４は、−ＮＲ１７Ｒ１８であり、Ｒ１７およびＲ１８は、同じ意味を有する。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｒ４は、−ＮＨ２である（すなわち、Ｃ末端は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である）。
【００４８】
以上または以下で提供される実施形態のいずれか（ａｎｔｙ）と場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、Ｎ末端は、−ＮＨ２に対応する。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、本発明のペプチドのＣ末端およびＮ末端は、それぞれ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨおよび−ＮＨ２である。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、本発明のペプチドのＣ末端およびＮ末端は、それぞれ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２および−ＮＨ２である。
【００４９】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、「ｍ」および「ｎ」は、同じものを意味する（すなわち、いずれも０または１である）。
【００５０】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、「ｐ」および「ｑ」は、同じものを意味する（すなわち、いずれも０または１である）。
【００５１】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の一実施形態において、ペプチドまたは薬学的塩は、式（Ｉ）：
【００５２】
【化４】
2020528458.tif 000006
【００５３】
［式中、
「ｍ」、「ｎ」、「ｐ」、「ｑ」および「ｒ」は、上記で定義されている通りである］
のものに対応し、
ペプチドは、以上で提供された実施形態のいずれかにおいて定義されている、式（ＩＩ）のリンカービラジカル、Ｃ末端およびＮ末端を含む。
【００５４】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩は、式（Ｉａ）または（Ｉｂ）：
Ｉａ：
【００５５】
【化５】
2020528458.tif 000007
【００５６】
Ｉｂ：
【００５７】
【化６】
2020528458.tif 000008
【００５８】
［式中、「ｍ」、「ｎ」、「ｐ」、「ｑ」、ＬおよびＲ１９は、上記で定義されている通りである］
のものである。
【００５９】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の一実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、式（Ｉａ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、同じである、式（Ｉａ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、１である、式（Ｉａ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｐ」および「ｑ」が、０である、式（Ｉａ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉａ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、１であり、「ｐ」および「ｑ」が、０であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉａ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、１であり、「ｐ」および「ｑ」が、０であり、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉａ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、１であり、「ｐ」および「ｑ」が、０であり、ｒ＝ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉａ）のものである。
【００６０】
以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、式（Ｉｂ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、同じである、式（Ｉｂ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｐ」および「ｑ」が、同じである、式（Ｉｂ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、１であり、「ｐ」および「ｑ」が、０であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉａ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、０であり、「ｐ」および「ｑ」が、１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、１であり、「ｐ」および「ｑ」が、０であり、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、０であり、「ｐ」および「ｑ」が、１であり、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂ）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」が、０であり、「ｐ」および「ｑ」が、１であり、ｒ＝ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂ）のものである。
【００６１】
代替として、以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、配列番号１８の配列と少なくとも８５％の同一性を有するものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドは、配列番号１８の配列に関して、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９または１００％の同一性を有する。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、配列番号１８の配列と少なくとも８５％の同一性を有するペプチドまたはその薬学的塩は、（Ｉｂｉｓ１）、（Ｉｂｉｓ２）、（Ｉｂｉｓ３）（Ｉｂｉｓ４）、（Ｉｂｉｓ５）および（Ｉｂｉｓ６）：
（Ｉｂｉｓ１）：
【００６２】
【化７】
2020528458.tif 000009
【００６３】
［ＡＡ３は、Ｔｈｒ以外のアミノ酸であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記の実施形態のいずれかで定義されている通りである］、
（Ｉｂｉｓ２）：
【００６４】
【化８】
2020528458.tif 000010
【００６５】
［ＡＡ４は、Ｇｌｕ以外であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記の実施形態のいずれかで定義されている通りである］、
（Ｉｂｉｓ３）：
【００６６】
【化９】
2020528458.tif 000011
【００６７】
［ＡＡ５は、Ｐｒｏ以外であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記の実施形態のいずれかで定義されている通りである］
（Ｉｂｉｓ４）：
【００６８】
【化１０】
2020528458.tif 000012
【００６９】
［ＡＡ２は、Ａｌａ以外であり、ＡＡ３は、Ｔｈｒ以外であり、ＡＡ４は、Ｇｌｕ以外であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記の実施形態のいずれかで定義されている通りである］
（Ｉｂｉｓ５）：
【００７０】
【化１１】
2020528458.tif 000013
【００７１】
［ＡＡ１は、Ａｓｎ以外であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記の実施形態のいずれかで定義されている通りである］
（Ｉｂｉｓ６）：
【００７２】
【化１２】
2020528458.tif 000014
【００７３】
［ＡＡ２は、Ａｌａ以外であり、「Ｘ」および「Ｌ」は、上記の実施形態のいずれかで定義されている通りである］
からなる群から選択される。
【００７４】
本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたは薬学的塩は、式（Ｉｂｉｓ１）のものに対応する。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ１）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１である、式（Ｉｂｉｓ１）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ１）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ３が、非極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ１）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ３が、Ａｌａである、式（Ｉｂｉｓ１）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ３が、非極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ１）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ３が、非極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ１）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ３が、Ａｌａである、式（Ｉｂｉｓ１）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、「ｍ」および「ｎ」ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ３が、Ａｌａである、式（Ｉｂｉｓ１）のものである。
【００７５】
本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたは薬学的塩は、式（Ｉｂｉｓ２）のものに対応する。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ２）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１である、式（Ｉｂｉｓ２）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ２）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ４が、非極性アミノ酸または極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ２）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ４が、Ａｌａ、ＧｌｎまたはＰｈｅである、式（Ｉｂｉｓ２）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ４が、非極性アミノ酸または極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ２）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ４が、非極性アミノ酸または極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ２）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ４が、Ａｌａ、ＰｈｅまたはＧｌｎである、式（Ｉｂｉｓ２）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ４が、Ａｌａ、ＰｈｅまたはＧｌｎである、式（Ｉｂｉｓ２）のものである。
【００７６】
本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたは薬学的塩は、式（Ｉｂｉｓ３）のものに対応する。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ３）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１である、式（Ｉｂｉｓ３）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ３）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ５が、極性アミノ酸またはＰｈｅである、式（Ｉｂｉｓ３）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ５が、Ｓｅｒ、ＧｌｎまたはＰｈｅである、式（Ｉｂｉｓ３）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ５が、極性アミノ酸またはＰｈｅである、式（Ｉｂｉｓ３）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ５が、極性アミノ酸またはＰｈｅである、式（Ｉｂｉｓ３）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ５が、Ｓｅｒ、ＧｌｎまたはＰｈｅである、式（Ｉｂｉｓ３）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ５が、Ｓｅｒ、ＧｌｎまたはＰｈｅである、式（Ｉｂｉｓ３）のものである。
【００７７】
本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたは薬学的塩は、式（Ｉｂｉｓ４）のものに対応する。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１である、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ２が、極性アミノ酸であり、ＡＡ３が、非極性アミノ酸であり、ＡＡ４が、極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ２が、Ｇｌｎである、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ３が、Ａｌａである、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ４が、Ｇｌｎである、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ２が、極性アミノ酸であり、ＡＡ３が、非極性アミノ酸であり、ＡＡ４が、極性アミノ（ｐｏｌａｒ  ａｍｉｎｏ）である、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ２が、極性アミノ酸であり、ＡＡ３が、非極性アミノ酸であり、ＡＡ４が、極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペ���チドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ２が、Ｇｌｎであり；ＡＡ３が、Ａｌａであり；ＡＡ４が、Ｇｌｎである、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ２が、Ｇｌｎであり；ＡＡ３が、Ａｌａであり；ＡＡ４が、Ｇｌｎである、式（Ｉｂｉｓ４）のものである。
【００７８】
本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたは薬学的塩は、式（Ｉｂｉｓ５）のものに対応する。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ５）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１である、式（Ｉｂｉｓ５）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ５）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ１が、Ａｓｎ以外の極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ５）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ１が、Ｇｌｎである、式（Ｉｂｉｓ５）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ１が、Ａｓｎ以外の極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ５）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ１が、Ｇｌｎである、式（Ｉｂｉｓ５）のものである。
【００７９】
本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたは薬学的塩は、式（Ｉｂｉｓ６）のものに対応する。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ６）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１である、式（Ｉｂｉｓ６）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルである、式（Ｉｂｉｓ６）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ＡＡ２が、極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ６）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ２が、極性アミノ酸である、式（Ｉｂｉｓ６）のものである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第一の態様の別の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的塩は、ａ＝ｂ＝ｃ＝１であり、Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルを表し；Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり；ＡＡ２が、Ｇｌｎである、式（Ｉｂｉｓ６）のものである。
【００８０】
本発明において、「非極性アミノ酸」は、疎水性の性質を有する任意のアミノ酸であると理解される（ｕｎｄｅｒｔｏｏｄ）。非極性アミノ酸は、炭化水素アルキル基（アルカン分枝）または芳香族（ベンゼン環）またはヘテロ芳香族（例えば、インドール環）である側鎖を有する。一般的な非極性アミノ酸の例証的な非限定的例は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、Ｇｌｙ、ＰｈｅおよびＭｅｔである。
【００８１】
本発明において、「極性アミノ酸」は、側鎖において中性ｐＨの極性であるが非荷電基を有する（ヒドロキシル、アミドまたはチオール基等）、任意の極性中性アミノ酸と理解される。極性中性アミノ酸の例証的な非限定的例は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｔｙｒ、ＡｓｎおよびＧｌｎである。
【００８２】
本発明の別の実施形態において、ペプチドは、配列番号２から１４のペプチド配列のいずれかと、少なくとも８５％の配列同一性を有する配列からなる群から選択される。本発明の別の実施形態において、ペプチドは、配列番号２から１４のペプチド配列のいずれかと、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性を有する配列からなる群から選択される。本発明の別の実施形態において、ペプチドは、配列番号２から１４の配列からなる群から選択される。本発明の別の実施形態において、ペプチドは、配列番号２から４の配列からなる群から選択される。
配列番号２（以後「Ｈ０２」とも称される）
【００８３】
【化１３】
2020528458.tif 000015
【００８４】
配列番号３（以後「Ｈ０４」とも称される）
【００８５】
【化１４】
2020528458.tif 000016
【００８６】
配列番号４（以後「Ｈ１４」とも称される）
【００８７】
【化１５】
2020528458.tif 000017
【００８８】
配列番号５（以後Ｈ１４−０９とも称される）
【００８９】
【化１６】
2020528458.tif 000018
【００９０】
配列番号６（以後Ｈ１４−Ａ１２とも称される）
【００９１】
【化１７】
2020528458.tif 000019
【００９２】
配列番号７（以後Ｈ１４−Ｆ１２とも称される）
【００９３】
【化１８】
2020528458.tif 000020
【００９４】
配列番号８（以後Ｈ１４−Ｆ１４とも称される）
【００９５】
【化１９】
2020528458.tif 000021
【００９６】
配列番号９（以後Ｈ１４−ｈ２−０１とも称される）
【００９７】
【化２０】
2020528458.tif 000022
【００９８】
配列番号１０（以後Ｈ１４−Ｑ０６とも称される）
【００９９】
【化２１】
2020528458.tif 000023
【０１００】
配列番号１１（以後Ｈ１４−Ｑ０９とも称される）
【０１０１】
【化２２】
2020528458.tif 000024
【０１０２】
配列番号１２（以後Ｈ１４−Ｑ１３とも称される）
【０１０３】
【化２３】
2020528458.tif 000025
【０１０４】
配列番号１３（以後Ｈ１４−Ｑ１５とも称される）
【０１０５】
【化２４】
2020528458.tif 000026
【０１０６】
配列番号１４（以後Ｈ１４−Ｓ１５とも称される）
【０１０７】
【化２５】
2020528458.tif 000027
【０１０８】
第二の態様において、本発明は、細胞透過性ペプチドとコンジュゲートされた、配列番号１の配列に関して少なくとも８５％の配列の同一性を少なくとも有するペプチドまたはその薬学的塩を提供する。
【０１０９】
本発明の第二の態様の一実施形態において、ペプチドは、配列番号１の配列に関して、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９または１００％の同一性を有する。
【０１１０】
本発明において、用語「同一性」は、配列が最適にアラインされた場合、２つの配列において同一である残基または塩基のパーセンテージを指す。最適アラインメントにおいて、第一の配列におけるある位置が、第二の配列における対応する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドによって占有される場合、配列は、その位置に関して同一性を呈する。２つの配列間の同一性のレベル（または「配列同一性パーセント」）は、配列のサイズに関して配列によって共有される同一の位置の数の比として測定される（すなわち、配列同一性パーセント＝（同一の位置の数／位置の総数）×１００）。一実施形態において、配列番号１８の配列のペプチドに関して同一性が計算される場合、リンカーによって連結されている２個のアミノ酸残基は、同一の位置を決定するためにアラインメントを実施する場合、考慮されない。
【０１１１】
最適アラインメントを迅速に取得し、２つ以上の配列間の同一性を計算するための若干数の数学的アルゴリズムは、公知であり、若干数の利用可能なソフトウェアプログラムに組み込まれる。そのようなプログラムの例は、数ある中でも、アミノ酸配列解析のためのＭＡＴＣＨ−ＢＯＸ、ＭＵＬＴＡＩＮ、ＧＣＧ、ＦＡＳＴＡおよびＲＯＢＵＳＴプログラムを含む。好ましいソフトウェア解析プログラムは、ＡＬＩＧＮ、ＣＬＵＳＴＡＬ  ＷおよびＢＬＡＳＴプログラム（例えば、ＢＬＡＳＴ２．１、ＢＬ２ＳＥＱ、およびそれ以降のバージョン）を含む。
【０１１２】
アミノ酸配列解析では、ＢＬＯＳＵＭ行列（例えば、ＢＬＯＳＵＭ４５、ＢＬＯＳＵＭ５０、ＢＬＯＳＵＭ６２およびＢＬＯＳＵＭ８０行列）、Ｇｏｎｎｅｔ行列またはＰＡＭ行列（例えば、ＰＡＭ３０、ＰＡＭ７０、ＰＡＭ１２０、ＰＡＭ１６０、ＰＡＭ２５０およびＰＡＭ３５０行列）等の重み行列が、同一性を決定する際に使用される。
【０１１３】
ＢＬＡＳＴプログラムは、データベース（例えば、ＧｅｎＳｅｑ）中の多重配列に対して選択された配列をアラインすることによって、または、２つの選択された配列間のＢＬ２ＳＥＱを用いて、少なくとも２つのアミノ酸配列の解析を提供する。ＢＬＡＳＴプログラムは、好ましくは、ＢＬＡＳＴプログラム動作に好ましくは統合されるＤＵＳＴまたはＳＥＧプログラム等のプログラムを低複雑度フィルタリングすることによって修正される。ギャップ存在コスト（またはギャップスコア）が使用される場合、ギャップ存在コストは、好ましくは、約−５から−１５の間に設定される。同様のギャップパラメーターが、適宜、他のプログラムとともに使用され得る。ＢＬＡＳＴプログラムおよびそれらの根底にある原理は、例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌら、「Ｂａｓｉｃ  ｌｏｃａｌ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  ｓｅａｒｃｈ  ｔｏｏｌ」、１９９０、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ、第２１５版、４０３〜４１０頁においてさらに記載される。
【０１１４】
多重配列解析には、ＣＬＵＳＴＡＬ  Ｗプログラムが使用され得る。ＣＬＵＳＴＡＬ  Ｗプログラムは、望ましくは、「動的」（「高速」に対して）設定を使用して実行される。アミノ酸配列は、配列間の同一性のレベルに応じて、ＢＬＯＳＵＭ行列の変数セットを使用して評価される。ＣＬＵＳＴＡＬ  Ｗプログラムおよび根底にある操作原理は、例えば、Ｈｉｇｇｉｎｓら、「ＣＬＵＳＴＡＬ  Ｖ：ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｆｏｒ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔ」、１９９２、ＣＡＢＩＯＳ、８（２）、１８９〜１９１頁においてさらに記載される。
【０１１５】
本発明において、用語「細胞透過性ペプチド」（「ＣＰＰ」）は、種々の分子カーゴ（ナノサイズ粒子から小化学分子およびＤＮＡの大フラグメントまで）の細胞取り込みを容易にする、短ペプチドを指す。「カーゴ」は、Ｃ（ｔ）またはＮ（ｔ）端を介し、共有結合を介する化学結合を経由してまたは非共有相互作用を経由して、ペプチドと会合される。ＣＰＰの機能は、カーゴを細胞に送達すること、研究および医学における使用のための送達ベクターに送達されたカーゴによるエンドサイトーシスを介して一般的に発生するプロセスである。現在の使用は、ＣＰＰ媒介性カーゴ送達における細胞特異性の欠如およびそれらの取り込みのモードの不十分な理解によって限定される。ＣＰＰは、典型的には、リジンもしくはアルギニン等の高い比存在度の正に荷電しているアミノ酸を含有するか、または、極性／荷電アミノ酸および非極性疎水性アミノ酸の交互パターンを含有する配列を有するかのいずれかである、アミノ酸組成物を有する。これらの２種類の構造は、それぞれ、ポリカチオン性または両親媒性と称される。ＣＰＰの第三のクラスは、無極性残基のみを含有し、低い実効電荷であるか、または細胞取り込みに重大である疎水性アミノ酸基を有する、疎水性ペプチドである。本発明において提供されるペプチドとのＣＰＰのコンジュゲーションは、固相合成または溶液選択性キャッピング等の周知のルーチンプロトコルに準拠して実施され得る（Ｃｏｐｏｌｏｖｉｃｉ  Ｄ．Ｍ．ら、「Ｃｅｌｌ−Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ｄｅｓｉｇｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」、２０１４、ＡＣＳ  Ｎａｎｏ、２０１４、８（３）、１９７２〜１９９４頁を参照）。
【０１１６】
本発明の第二の態様の別の実施形態において、ペプチドは、配列番号１からなる。
以上または以下で提供される本発明の第二の態様の別の実施形態において、細胞透過性ペプチドは、ポリカチオン性ＣＰＰである。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の第二の態様の別の実施形態において、細胞透過性ペプチドは、ポリＡｒｇである。
【０１１７】
本発明の第二の態様の別の実施形態において、ペプチドは、配列番号１５の配列（以後「ＬＨ０２」とも称される）：
【０１１８】
【化２６】
2020528458.tif 000028
【０１１９】
のものである。
別の実施形態において、第一または第二の態様のペプチドは、標識とコンジュゲートされる。一実施形態において、標識は、ペプチドのＮ末端とコンジュゲートされる。
【０１２０】
「標識」は、本明細書において使用される場合、蛍光、電気伝導率、放射能、サイズ等を含む様々な方法によって検出され得る、分子または化合物である。標識は、例えば、特定の波長の光を放射する蛍光標識等のシグナルを、別のより低い、特徴的な波長による光の励起後に、本質的に放射することができる場合がある。代替として、標識は、シグナルを本質的に放射することができない場合があるが、シグナルを放射する別の化合物によって結合され得る場合がある。この後者の状況の例は、それ自体はシグナルを放射しないが標識されたアビジンまたはストレプトアビジン分子と結合した場合に検出され得るビオチン等の標識である。この後者の種類の標識の他の例は、特定の受容体と特異的に結合するリガンドである。検出可能に標識された受容体は、そのようなマーカーを視覚化するために、リガンド標識された単位特異的マーカーと結合することが許されている。
【０１２１】
本発明に従って使用され得る標識は、電子スピン共鳴分子、蛍光分子、化学発光分子、放射性同位体、酵素基質、酵素、ビオチン分子、アビジン分子、電荷移動分子、半導体ナノ結晶、半導体ナノ粒子、コロイド金ナノ結晶、リガンド、マイクロビーズ、磁気ビーズ、常磁性分子、量子ドット、発色基質、親和性分子、タンパク質、ペプチド、核酸、炭水化物、ハプテン、抗原、抗体、抗体フラグメントおよび脂質を含むがこれらに限定されない。
【０１２２】
放射性同位体は、フィルムまたは電荷結合素子（ＣＣＤ）で検出されることができ、リガンドは、蛍光、化学発光または酵素タグを有する受容体の結合によって検出されることができ、マイクロビーズは、電子または原子間力顕微鏡を使用して検出され得る。
【０１２３】
標識のペプチドとのコンジュゲーションは、当業者に周知のルーチンプロトコルに準拠して実施され得る。
別の実施形態において、第一または第二の態様のペプチドは、薬物とコンジュゲートされる。一実施形態において、薬物は、ペプチドのＮ末端とコンジュゲートされる。
【０１２４】
代替として、本発明のペプチドは、ペプチドの生物学的特性を、例えばその安定性、溶解度、バイオアベイリビティ（ｂｉｏａｖａｉｌｉｂｉｔｙ）および／または親和性を改善することによって増強する、安定化部分とコンジュゲートされ得る。以上で提供された実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、別の実施形態において、安定化部分は、単または二官能性ポリ（エチレングリコール）（「ＰＥＧ」）、ポリ（ビニルアルコール）（「ＰＶＡ」）；ポリプロピレングリコール）（「ＰＰＧ」）等の他のポリ（アルキレンオキシド）；ならびに、ポリ（オキシエチル化グリセロール）、ポリ（オキシエチル化ソルビトール）およびポリ（オキシエチル化グルコース）等のポリ（オキシエチル化ポリオール）等から選択される。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の別の実施形態において、本発明のペプチドは、ポリ（エチレングリコール）とコンジュゲートされる。以上または以下で提供される実施形態のいずれかと場合により組み合わせた、本発明の別の実施形態において、本発明のペプチドは、−（ＣＨ２−Ｏ）４−（以後「ＰＥＧ４」とも称される）とコンジュゲートされる。
【０１２５】
別の実施形態において、ペプチドは、配列番号１６の配列（以後「Ｈ１４−ＰＥＧ４」とも称される）：
【０１２６】
【化２７】
2020528458.tif 000029
【０１２７】
のものである。
本発明の第一の態様に従うペプチドの調製のためのプロセスは、次のものを含む：
（１．ａ）ペプチドの対応するアミノ酸の、「ｉ」および「ｉ＋４」または「ｉ＋７」と称されるアミノ酸に対応する式（ＩＶ）の化合物および式（Ｖ）の化合物との、縮合によるカップリング。化合物（ＩＶ）および（Ｖ）は、その後の環化ステップを経て「Ｌ」ビラジカル」：
【０１２８】
【化２８】
2020528458.tif 000030
【０１２９】
［式中、Ｒ１９は、上記で定義されている通りであり、Ｚ１およびＺ２は、同じであるかまたは異なっており、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルを表す］
を生成するものとなる；ならびに、
（１．ｂ）グラブス（ＩまたはＩＩ生成）触媒を加えた溶液中で実施される、Ｚ１およびＺ２の閉環メタセシス（Ｋｉｍ  Ｙｏｕｎｇ−Ｗｏｏら、「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ａｌｌ−ｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎ  ｓｔａｐｌｅｄ  ａ−ｈｅｌｉｃａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｂｙ  ｒｉｎｇ−ｃｌｏｓｉｎｇ  ｏｌｅｆｉｎ  ｍｅｔａｔｈｅｓｉｓ」、Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、２０１１、６（６）、７６１〜７７１頁；Ｓｃｏｔｔ  Ｊ．Ｍ．ら、「Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒｉｎｇ−Ｃｌｏｓｉｎｇ  Ｍｅｔａｔｈｅｓｉｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｒｉｇｉｄｉｆｉｅｄ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１９９６、第１１８巻（４０）、９６０６〜９６１４頁を参照）を含む環化ステップ；あるいは、代替として、
（２ａ）「ｉ」および「ｉ＋４」または「ｉ＋７」と称されるアミノ酸に対応する式（ＶＩ）の化合物および式（ＶＩＩ）の化合物を含む、必要とされるアミノ酸の、縮合によるカップリング。化合物（ＶＩ）および（ＶＩＩ）は、その後の環化ステップを経て、「Ｌ」ビラジカル」：
【０１３０】
【化２９】
2020528458.tif 000031
【０１３１】
［式中、Ｒ１９は、上記で定義されている通りであり、Ｚ３およびＺ４は、同じであるかまたは異なっており、ハロゲン−ＳＨ、−ＮＨＲ２０、−ＯＨ、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキル−ＳＨ、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル−ＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル−ＮＨＲ２１、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ１０）Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ２２、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルＣ（＝Ｏ）ＮＨＲ２３、ＯＲ２４、Ｃ（＝Ｏ）−ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）−ＯＲ２５、Ｓ（＝Ｏ）−ハロゲン、Ｓ（＝Ｏ）−ＯＲ２６、Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ２７からなる群から選択され、ここで、Ｒ２０、Ｒ２１  Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５  Ｒ２６およびＲ２７は、水素、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル、および（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から選択されるモノラジカル；１から３個までの環を含む、３から１４個までの炭素原子を含む公知の環系であり、ここで、
環の各１個は、飽和、部分不飽和または芳香族であり、
環は、単離されているか、部分的にまたは完全に縮合しており、
公知の環系を形成する員の各１個は、−ＣＨ−、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−Ｎ−、−ＳＨ−、−Ｓ−および−Ｏ−からなる群から選択され、
環系は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、Ｃ（＝Ｏ）−ハロゲン（Ｃ１〜Ｃ１０）ハロアルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル−Ｏ−からなる群から独立して選択される１個または複数のラジカルによって場合により置換されている］
を生成するものとなる；ならびに、
（２ｂ）Ｚ３およびＺ４ラジカルの間のカップリング反応を含む環化ステップ；あるいは、代替として、
（３ａ）ペプチドの対応するアミノ酸の、「ｉ」および「ｉ＋４」または「ｉ＋７」と称されるアミノ酸に対応する式（ＶＩＩＩ）の化合物および式（ＩＸ）の化合物との、縮合によるカップリング。化合物（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）は、その後の環化ステップを経て、「Ｌ」ビラジカル」：
【０１３２】
【化３０】
2020528458.tif 000032
【０１３３】
［式中、Ｒ１９は、上記で定義されている通りであり、Ｚ５およびＺ６の一方は、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルであり、他方は、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキルＮ３である］
を生成するものとなる；ならびに、
（３．ｂ）Ｃｕ（Ｉ）媒介性ヒュスゲン１，３−双極子環化付加反応（別名「クリック」反応）等の周知のプロトコルによる、１，４−置換１，２，３−トリアゾール架橋を生成するための、Ｚ５およびＺ６ラジカルの縮合を含む、環化ステップ（Ｋｏｌｂ  Ｈ．Ｃ．ら、「Ｔｈｅ  ｇｒｏｗｉｎｇ  ｉｍｐａｃｔ  ｏｆ  ｃｌｉｃｋ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｎ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ」、２００３、Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  Ｔｏｄａｙ、８（２４）：１１２８〜１１３７を参照）。
【０１３４】
本発明の第二の態様によるペプチドの調製のためのプロセスは、１個のアミノ酸のカルボン酸基またはＣ末端の、別のアミノ酸のアミノ基またはＮ末端との、縮合によるカップリングを含み、このカップリング反応は、所望のペプチドが取得されるまで、必要な回数繰り返される。代替として、配列番号１の配列と同一性を有するペプチドは、必要とされるアミノ酸をカップリングすることによって調製され、第二段階において、ペプチドは、先行技術において公知であるプロトコル（そのうちの一部は先に言及された）のいずれかに準拠して、細胞透過性ペプチドと縮合される。
【０１３５】
式（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）の化合物は、市販されており、ペプチド配列の既に形成された部分との縮合によってカップリングされる。これらの化合物は、ペプチドの適切な固相合成のためのビーズ、およびカルボキシ、アミノまたは側鎖の保護基を担持することができる。化合物の例証的な非限定的例は、数ある中でも、２−（２’−プロペニル）アラニン、２−（３’−ブテニル）グリシン、２−（４’−ペンテニル）アラニン、２−（６’−ヘプテニル）アラニン、２−（７’−オクテニル）アラニン、およびアリル−グリシン、５−アジド−ノルバリン、アルファ−プロパルギル−アラニンである。
【０１３６】
「カップリング」ステップは、プロトコル「脱保護−洗浄−カップリング−洗浄」に準拠し、１個のアミノ酸のカルボン酸基の、別のアミノ酸残基のアミノ基との、上記で定義されているアミノ酸および式（ＩＶ）から（ＩＸ）のアルファ−アルファ二置換アミノ酸を使用する、所望のペプチドを関心の高い順に取得するための縮合によって、固相で実施され得る。
【０１３７】
固相ペプチド合成の一般的原理は、脱保護−洗浄−カップリング−洗浄のサイクルを繰り返すことである。固相結合ペプチドの遊離Ｎ末端アミンは、単一のＮ−保護アミノ酸単位とカップリングされる。次いで、この単位が脱保護されて、さらなるアミノ酸が結合され得る新たなＮ末端アミンを明らかにする。アミノ酸は、ＮおよびＣ末端に反応性部分を有し、これらは、合成中のアミノ酸カップリングを容易にする。多くのアミノ酸は、反応性側鎖官能基も有し、これは、合成およびペプチド伸長中に遊離端または他の側鎖基と相互作用し、収率および純度に悪影響を及ぼし得る。最小の側鎖反応性で適正なアミノ酸合成を容易にするために、特異的アミノ酸官能基と結合し、官能基を非特異的反応からブロックするまたは保護するための化学基が開発されてきた。これらの保護基は、実際には膨大であるが、次の通りに３つの群に分離され得る：Ｎ末端保護基、Ｃ末端保護基（大部分は液相合成において使用される）および側鎖保護基。
【０１３８】
ペプチドをカップリングするために、カルボキシル基は通常、活性化される。これは、反応を加速するために重要である。２種類の主な活性化基：カルボジイミドおよびトリアゾロールがある。しかしながら、ペンタフルオロフェニルエステル（ＦＤＰＰ、ＰＦＰＯＨ］）およびＢＯＰ−Ｃｌの使用は、ペプチドを環化するために有用である。
【０１３９】
精製された個々のアミノ酸を、合成の前にこれらの保護基と反応させ、次いで、ペプチド合成の具体的なステップ中に選択的に除去する。
本発明によって用いられ得る例示的な樹脂は、（１）アルケニル樹脂（例えば、ＲＥＭ樹脂、ビニルスルホンポリマー結合樹脂、ビニル−ポリスチレン樹脂）；（２）アミン官能化樹脂（例えば、アミジン樹脂、Ｎ−（４−ベンジルオキシベンジル）ヒドロキシルアミンポリマー結合、（アミノメチル）ポリスチレン、ポリマー結合（Ｒ）−（＋）−ａ−メチルベンジルアミン、２−クロロトリチルクノール樹脂、２−Ｎ−Ｆｍｏｃ−アミノ−ジベンゾシクロヘプタ−１，４−ジエン、ポリマー結合樹脂、４−［４−（１−Ｆｍｏｃ−アミノエチル）−２−メトキシ−５−ニトロフェノキシ］ブチラミドメチル−ポリスチレン樹脂、４−ベンジルオキシベンジルアミン、ポリマー結合、４−カルボキシベンゼンスルホンアミド、ポリマー結合、ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）チオプソイド尿素、ポリマー結合、ジメチルアミノメチル−ポリスチレン、Ｆｍｏｃ−３−アミノ−３−（２−ニトロフェニル）プロピオン酸、ポリマー結合、Ｎ−メチルアミノメチル化ポリスチレン、ＰＡＬ樹脂、シーバーアミド樹脂、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（２−メルカプトエチル）カルバメート、ポリマー結合、トリフェニルクロロメタン−４−カルボキサミドポリマー結合）；（３）ベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）樹脂（例えば、２−クロロベンズヒドリルクロリド、ポリマー結合、ＨＭＰＢ−ベンズヒドリルアミンポリマー結合、４−メチルベンズヒドロール、ポリマー結合、ベンズヒドリルクロリド、ポリマー結合、ベンズヒドリルアミンポリマー結合）；（４）Ｂｒ−官能化樹脂（例えば、４−（ベンジルオキシ）ベンジルブロミドポリマー結合、４−ブロモポリスチレン、臭素化ＰＰＯＡ樹脂、臭素化ワング樹脂、ブロモアセタール、ポリマー結合、ブロモポリスチレン、ＨｙｐｏＧｅｌ（登録商標）２００Ｂｒ、ペプチド合成のためのポリスチレンＡ−Ｂｒ、臭化セレン、ポリマー結合、テンタゲルＨＬ−Ｂｒ、テンタゲルＭＢ−Ｂｒ、テンタゲルＳ−Ｂｒ、テンタゲルＳ−Ｂｒ）；（５）クロロメチル樹脂（例えば、５−［４−（クロロメチル）フェニル］ペンチル］スチレン、ポリマー結合、４−（ベンジルオキシ）ベンジルクロリドポリマー結合、４−メトキシベンズヒドリルクロリド、ポリマー結合）；（６）ＣＨＯ−官能化樹脂（例えば、（４−ホルミル−３−メトキシフェノキシメチル）ポリスチレン、（４−ホルミル−３−メトキシフェノキシメチル）ポリスチレン、３−ベンジルオキシベンズアルデヒド、ポリマー結合、４−ベンジルオキシ−２，６−ジメトキシベンズアルデヒド、ポリマー結合、ホルミルポリスチレン、ＨｙｐｏＧｅｌ（登録商標）２００ＣＨＯ、インドール樹脂、ポリスチレンＡ−ＣＨ（ＯＥｔ）２、テンタゲルＨＬ−ＣＨ（ＯＥｔ）２）；（７）Ｃｌ−官能化樹脂（例えば、塩化ベンゾイルポリマー結合、（クロロメチル）ポリスチレン、メリフィールド樹脂）；Ｎ（８）ＣＯ２Ｈ官能化樹脂（例えば、カルボキシエチルポリスチレン、ＨｙｐｏＧｅｌ（登録商標）２００ＣＯＯＨ、ポリスチレンＡＭ−ＣＯＯＨ、テンタゲルＨＬ−ＣＯＯＨ、テンタゲルＭＢ−ＣＯＯＨ、テンタゲルＳ−ＣＯＯＨ）；（９）Ｈｙｐｏ−Ｇｅｌ樹脂（例えば、ＨｙｐｏＧｅｌ（登録商標）２００ＦＭＰ、ＨｙｐｏＧｅｌ（登録商標）２００ＰＨＢ、ＨｙｐｏＧｅｌ（登録商標）２００Ｔｒｔ−ＯＨ、ＨｙｐｏＧｅｌ（登録商標）２００ＨＭＢ）；（１０）Ｉ−官能化樹脂（例えば、４−ヨードフェノール、ポリマー結合、ヨードポリスチレン）；Ｊａｎｄａ−Ｊｅｌｓ（商標）（ＪａｎｄａＪｅｌ＜ａ＞−リンクアミド、ＪａｎｄａＪｅｌ−ＮＨ２、ＪａｎｄａＪｅｌ−Ｃｌ、ＪａｎｄａＪｅｌ−４−メルカプトフェノール、ＪａｎｄａＪｅｌ−ＯＨ、ＪａｎｄａＪｅｌ−１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド、ＪａｎｄａＪｅｌ−１，３，４，６，７，８−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピリミド−［１，２−ａ］ピリミジン、ＪａｎｄａＪｅｌ−モルホリン、ＪａｎｄａＪｅｌ−ポリピリジン、ＪａｎｄａＪｅｌ−トリフェニルホスフィン、ＪａｎｄａＪｅｌ−ワング）；（１１）ＭＢＨＡ樹脂（３［４’−（ヒドロキシメチル）フェノキシ］プロピオン酸−４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂、ＭＢＨＡ樹脂との４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ酢酸ポリマー結合、ＨＭＢＡ−４−メチルベンズヒドリルアミンポリマー結合、４−メチルベンズヒドリルアミン塩酸塩ポリマー結合能（アミン））；（１２）ＮＨ２官能化樹脂（（アミノメチル）ポリスチレン、（アミノメチル）ポリスチレン、ＨｙｐｏＧｅｌ（登録商標）２００ＮＨ２、ポリスチレンＡＭ−ＮＨ２、ポリスチレンミクロスフェア２−アミノエチル化、ポリスチロールミクロスフェア２−ブロモエチル化、ポリスチロールミクロスフェア２−ヒドロキシエチル化、テンタゲルＨＬ−ＮＨ２、テンタゲルＭ  Ｂｒ、テンタゲルＭ  ＮＨ２、テンタゲルＭ  ＯＨ、テンタゲルＭＢ−ＮＨ２、テンタゲルＳ−ＮＨ２、テンタゲルＳ−ＮＨ２）；（１３）ＯＨ−官能化樹脂（例えば、４−ヒドロキシメチル安息香酸、ポリマー結合、ヒドロキシメチル樹脂、ＯＨ−官能化ワング樹脂）；（１４）オキシム樹脂（例えば、４−クロロベンゾフェノンオキシムポリマー結合、ベンゾフェノンオキシムポリマー結合、４−メトキシベンゾフェノンオキシムポリマー結合）；（１５）ＰＥＧ樹脂（例えば、エチレングリコールポリマー結合）；（１６）Ｂｏｃ−／Ｂｌｚペプチド合成樹脂（例えば、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ［Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）］−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−ｂ−Ａｌａ−Ｏ−ＰＡＭ樹脂、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｌｙｓ［Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）］−ｂ−Ａｌａ−Ｏ−Ｐａｍ樹脂、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ［Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）］−Ｌｙｓ｛Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ［Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）］｝−ｂ−Ａｌａ−Ｏ−ＰＡＭ樹脂、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｌｙｓ［Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）］−Ｌｙｓ［Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｌｙｓ｛Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）］｝−ｂ−Ａｌａ−Ｏ−ＰＡＭ樹脂、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ［Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）］−Ｌｙｓ｛Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ［Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）］｝−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−ｂ−Ａｌａ−Ｏ−ＰＡＭ樹脂、予めロードしたＰＡＭ樹脂）；（１７）Ｆｍｏｃ−／ｔ−Ｂｕペプチド合成樹脂（例えば、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｌｙｓ［Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）］−ｂ−Ａｌａ−Ｏ−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｌｙｓ［Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）］−Ｌｙｓ｛Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−Ｌｙｓ［Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）］｝−ｂ−Ａｌａ−Ｏ−ワング樹脂、予めロードしたＴｅｎｔａＧｅｌ（登録商標）Ｓトリチル樹脂、予めロードしたＴｅｎｔａＧｅｌ（登録商標）樹脂、予めロードしたトリチル樹脂、予めロードしたワング樹脂、アミノアルコールを予めロードしたトリチル樹脂）；（１９）チオール−官能化樹脂（例えば、ＨｙｐｏＧｅｌ（登録商標）２００Ｓ−Ｔｒｔ、ポリスチレンＡＭ−Ｓ−トリチル、テンタゲルＨＬ−Ｓ−トリチル、テンタゲルＭＢ−Ｓ−トリチル、テンタゲルＳ−Ｓ−トリチル）；および（２０）ワング樹脂（例えば、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（ＳｔＢｕ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｍｅｔ−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（Ｔｒｔ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ワング樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ワング樹脂）を含むがこれらに限定されない。
【０１４０】
「保護基」（ＰＧ）は、分子マスクにおける反応性基と結合した場合に、その反応性を低減させるまたは防止する原子のグルーピングを指す。
好適なアミノ保護基は、メチルカルバメート、エチルカルバマンテ（ｅｔｈｙｌ  ｃａｒｂａｍａｎｔｅ）、９−フルオレニルメチルカルバメート（Ｆｍｏｃ）、９−（２−スルホ）フルオレニルメチルカルバメート、９−（２，７−ジブロモ）フルオロエニルメチルカルバメート、２，７−ジ−ｔ−ブチル−［９−（１０，１０−ジオキソ−１０，１０，１０，１０−テトラヒドロチオキサンチル）］メチルカルバメート（ＤＢＤ−Ｔｍｏｃ）、４−メトキシフェナシルカルバメート（Ｐｈｅｎｏｃ）、２，２，２−トリクロロエチルカルバメート（Ｔｒｏｃ）、２−トリメチルシリルエチルカルバメート（Ｔｅｏｃ）、２−フェニルエチルカルバメート（ｈＺ）、１−（１−アダマンチル）−１−メチルエチルカルバメート（Ａｄｐｏｃ）、１，１−ジメチル−２−ハロエチルカルバメート、１，１−ジメチル−２，２−ジブロモエチルカルバメート（ＤＢ−ｔ−ＢＯＣ）、１，１−ジメチル−２，２，２−トリクロロエチルカルバメート（ＴＣＢＯＣ）、１−メチル−１−（４−ビフェニリル）エチルカルバメート（Ｂｐｏｃ）、１−（３，５−ジ−ｔ−ブチルフェニル）−１−メチルエチルカルバメート（ｔ−Ｂｕｍｅｏｃ）、２−（２’−および４’−ピリジル）エチルカルバメート（Ｐｙｏｃ）、２−（Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボキサミド）エチルカルバメート、ｔ−ブチルカルバメート（ＢＯＣ）、１−アダマンチルカルバメート（Ａｄｏｃ）、ビニルカルバメート（Ｖｏｃ）、アリルカルバメート（Ａｌｌｏｃ）、１−イソプロピルアリルカルバメート（Ｉｐａｏｃ）、シンナミルカルバメート（Ｃｏｃ）、４−ニトロシンナミルカルバメート（Ｎｏｃ）、８−キノリルカルバメート、Ｎ−ヒドロキシピペリジニルカルバメート、アルキルジチオカルバメート、ベンジルカルバメート（Ｃｂｚ）、ｐ−メトキシベンジルカルバメート（Ｍｏｚ）、ｐ−ニトベンジル（ｎｉｔｏｂｅｎｚｙｌ）カルバメート、ｐ−ブロモベンジルカルバメート、ｐ−クロロベンジルカルバメート、２，４−ジクロロベンジルカルバメート、４−メチルスルフィニルベンジルカルバメート（Ｍｓｚ）、９−アントリルメチルカルバメート、ジフェニルメチルカルバメート、２−メチルチオエチルカルバメート、２−メチルスルホニルエチルカルバメート、２−（ｐ−トルエンスルホニル）エチルカルバメート、［２−（１，３−ジチアニル）］メチルカルバメート（Ｄｍｏｃ）、４−メチルチオフェニルカルバメート（Ｍｔｐｃ）、２，４−ジメチルチオフェニルカルバメート（Ｂｍｐｃ）、２−ホスホニオエチルカルバメート（Ｐｅｏｃ）、２−トリフェニルホスホニオイソプロピルカルバメート（Ｐｐｏｃ）、１，１−ジメチル−２−シアノエチルカルバメート、ｍ−クロロ−ｐ−アシルオキシベンジルカルバメート、ｐ−（ジヒドロキシボリル）ベンジルカルバメート、５−ベンズイソオキサゾリルメチルカルバメート、２−（トリフルオロメチル）−６−クロモニルメチルカルバメート（Ｔｃｒｏｃ）、ｍ−ニトロフェニルカルバメート、３，５−ジメトキシベンジルカルバメート、ｏ−ニトロベンジルカルバメート、３，４−ジメトキシ−６−ニトロベンジルカルバメート、フェニル（ｏ−ニトロフェニル）メチルカルバ���ート、フェノチアジニル−（１０）−カルボニル誘導体、Ｎ’−ｐ−トルエンスルホニルアミノカルボニル誘導体、Ｎ’−フェニルアミノチオカルボニル誘導体、ｔ−アミルカルバメート、Ｓ−ベンジルチオカルバメート、ｐ−シアノベンジルカルバメート、シクロブチルカルバメート、シクロヘキシルカルバメート、シクロペンチルカルバメート、シクロプロピルメチルカルバメート、ｐ−デシルオキシベンジルカルバメート、２，２−ジメトキシカルボニルビニルカルバメート、ｏ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボキサミド）ベンジルカルバメート、１，１−ジメチル−３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボキサミド）プロピルカルバメート、１，１−ジメチルプロピニルカルバメート、ジ（２−ピリジル）メチルカルバメート、２−フラニルメチルカルバメート、２−ヨードエチルカルバメート、イソボルニルカルバメート、イソブチルカルバメート、イソニコチニルカルバメート、ｐ−（ｐ’−メトキシフェニルアゾ）ベンジルカルバメート、１−メチルシクロブチルカルバメート、１−メチルシクロヘキシルカルバメート、１−メチル−１−シクロプロピルメチルカルバメート、１−メチル−１−（３，５−ジメトキシフェニル）エチルカルバメート、１−メチル−１−（ｐ−フェニルアゾフェニル）エチルカルバメート、１−メチル−１−フェニルエチルカルバメート、１−メチル−１−（４−ピリジル）エチルカルバメート、フェニルカルバメート、ｐ−（フェニルアゾ）ベンジルカルバメート、２，４，６−トリ−ｔ−ブチルフェニルカルバメート、４−（トリメチルアンモニウム）ベンジルカルバメート、２，４，６−トリメチルベンジルカルバメート、ホルムアミド、アセトアミド、クロロアセトアミド、トリクロロアセトアミド、トリフルオロアセトアミド、フェニルアセトアミド、３−フェニルプロパンアミド、ピコリンアミド、３−ピリジルカルボキサミド、Ｎ−ベンゾイルフェニルアラニル誘導体、ベンズアミド、ｐ−フェニルベンズアミド、ｏ−ニトロフェニルアセトアミド、ｏ−ニトロフェノキシアセトアミド、アセトアセトアミド、（Ｎ’−ジチオベンジルオキシカルボニルアミノ）アセトアミド、３−（ｐ−ヒドロキシフェニル）プロパンアミド、３−（ｏ−ニトロフェニル）プロパンアミド、２−メチル−２−（ｏ−ニトロフェノキシ）プロパンアミド、２−メチル−２−（ｏ−フェニルアゾフェノキシ）プロパンアミド、４−クロロブタンアミド、３−メチル−３−ニトロブタンアミド、ｏ−ニトロシンナミド、Ｎ−アセチルメチオニン誘導体、ｏ−ニトロベンズアミド、ｏ−（ベンゾイルオキシメチル）ベンズアミド、４，５−ジフェニル−３−オキサゾリン−２−オン、Ｎ−フタルイミド、Ｎ−ジチアスクシンイミド（Ｄｔｓ）、Ｎ−２，３−ジフェニルマレイミド、Ｎ−２，５−ジメチルピロール、Ｎ−１，１，４，４−テトラメチルジシリルアザシクロペンタン付加体（ＳＴＡＢＡＳＥ）、５−置換１，３−ジメチル−１，３，５−トリアザシクロヘキサン−２−オン、５−置換１，３−ジベンジル−１，３，５−トリアザシクロヘキサン−２−オン、１−置換３，５−ジニトロ−４−ピリドン、Ｎ−メチルアミン、Ｎ−アリルアミン、Ｎ−［２−トリメチルシリル）エトキシ］メチルアミ���（ＳＥＭ）、Ｎ−３−アセトキシプロピルアミン、Ｎ−（１−イソプロピル−４−ニトロ−２−オキソ−３−ピローリン（ｐｙｒｏｏｌｉｎ）−３−イル）アミン、第四級アンモニウム塩、Ｎ−ベンジルアミン、Ｎ−ジ（４−メトキシフェニル）メチルアミン、Ｎ−５−ジベンゾスベリルアミン、Ｎトリフェニルメチルアミン（Ｔｒ）、Ｎ−［（４−メトキシフェニル）ジフェニルメチル］アミン（ＭＭＴｒ）、Ｎ−９−フェニルフルオレニルアミン（ＰｈＦ）、Ｎ−２，７−ジクロロ−９−フルオレニルメチレンアミン、Ｎ−フェロセニルメチルアミノ（Ｆｃｍ）、Ｎ−２−ピコリルアミノＮ’−オキシド、Ｎ−１，１−ジメチルチオメチレンアミン、Ｎ−ベンジリデンアミン、Ｎ−ｐ−メトキシベンジリデンアミン、Ｎ−ジフェニルメチレンアミン、Ｎ−［（２−ピリジル）メシチル］メチレンアミン、Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノメチレン）アミン、Ｎ，Ｎ’−イソプロピリデンジアミン、Ｎ−ｐ−ニトロベンジリデンアミン、Ｎ−サリチリデンアミン、Ｎ−５−クロロサリチリデンアミン、Ｎ−（５−クロロ−２−ヒドロキシフェニル）フェニルメチレンアミン、Ｎ−シクロヘキシリデンアミン、Ｎ−（５，５−ジメチル−３−オキソ−１−シクロヘキセニル）アミン、Ｎ−ボラン誘導体、Ｎ−ジフェニルボリン酸誘導体、Ｎ−［フェニル（ペンタカルボニルクロム−またはタングステン）カルボニル］アミン、Ｎ−銅キレート、Ｎ−亜鉛キレート、Ｎ−ニトロアミン、Ｎ−ニトロソアミン、アミンＮ−オキシド、ジフェニルホスフィンアミド（Ｄｐｐ）、ジメチルチオホスフィンアミド（Ｍｐｔ）、ジフェニルチオホスフィンアミド（Ｐｐｔ）、ジアルキルホスホルアミデート、ジベンジルホスホルアミデート、ジフェニルホスホルアミデート、ベンゼンスルフェンアミド、ｏ−ニトロベンゼンスルフェンアミド（Ｎｐｓ）、２，４−ジニトロベンゼンスルフェンアミド、ペンタクロロベンゼンスルフェンアミド、２−ニトロ−４−メトキシベンゼンスルフェンアミド、トリフェニルメチルスルフェンアミド、３−ニトロピリジンスルフェンアミド（Ｎｐｙｓ）、ｐ−トルエンスルホンアミド（Ｔｓ）、ベンゼンスルホンアミド、２，３，６，−トリメチル−４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｒ）、２，４，６−トリメトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｂ）、２，６−ジメチル−４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｐｍｅ）、２，３，５，６−テトラメチル−４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｅ）、４−メトキシベンゼンスルホンアミド（Ｍｂｓ）、２，４，６−トリメチルベンゼンスルホンアミド（Ｍｔｓ）、２，６−ジメトキシ−４−メチルベンゼンスルホンアミド（ｉＭｄｓ）、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホンアミド（Ｐｍｃ）、メタンスルホンアミド（Ｍｓ）、β−トリメチルシリルエタンスルホンアミド（ＳＥＳ）、９−アントラセンスルホンアミド、４−（４’，８’−ジメトキシナフチルメチル）ベンゼンスルホンアミド（ＤＮＭＢＳ）、ベンジルスルホンアミド、トリフルオロメチルスルホンアミドおよびフェナシルスルホンアミドを含む。
【０１４１】
好適に保護されたカルボン酸の例は、シリル−、アルキル−、アルケニル−、アリール−、およびアリールアルキル保護されたカルボン酸をさらに含むがこれらに限定されない。好適なシリル基の例は、トリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、トリイソプロピルシリル等を含む。好適なアルキル基の例は、メチル、ベンジル、ｐ−メトキシベンジル、３，４−ジメトキシベンジル、トリチル、ｔ−ブチル、テトラヒドロピラン−２−イルを含む。好適なアルケニル基の例は、アリルを含む。好適なアリール基の例は、場合により置換されているフェニル、ビフェニルまたはナフチルを含む。好適なアリールアルキル基の例は、場合により置換されているベンジル（例えば、ｐ−メトキシベンジル（ＭＰＭ）、３，４−ジメトキシベンジル、Ｏ−ニトロベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−ハロベンジル、２，６−ジクロロベンジル、ｐ−シアノベンジル）、ならびに２−および４−ピコリルを含む。
【０１４２】
第三の態様において、本発明は、本発明の第一の態様または以上で提供された実施形態のいずれかで定義されているペプチドを含む、融合ペプチドを提供する。
本発明の第三の態様の一実施形態において、融合ペプチドは、本発明の第一の態様でまたは本発明の第一の態様の実施形態のいずれかで定義されているペプチドと、細胞透過性ペプチドとを含む。
【０１４３】
本発明の第三の態様の別の実施形態において、融合ペプチドは、配列番号１７の配列：
【０１４４】
【化３１】
2020528458.tif 000033
【０１４５】
のものである。
第四の態様において、本発明は、医薬組成物を提供する。
表現「治療有効量」は、本明細書において使用される場合、投与された場合に、対処される疾患の症状の１つまたは複数の発症を予防する、またはそれをある程度まで軽減するために十分である、化合物の量を指す。本発明に従って投与されるペプチドの特定の用量は、当然ながら、投与される化合物、投与ルート、治療されている特定の状態および同様の考慮事項を含む、症例を取り巻く特定の状況によって決定されることになる。
【０１４６】
表現「薬学的に許容される賦形剤または担体」は、薬学的に許容される材料、組成物またはビヒクルを指す。各構成成分は、医薬組成物の他の成分に適合するという意味で、薬学的に許容されるものでなくてはならない。これは、合理的なベネフィット／リスク比に見合った、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、免疫原性も他の問題または合併症もなしに、ヒトおよび非ヒト動物の組織または臓器と接触させて使用するのにも好適なものでなくてはならない。好適な薬学的に許容される賦形剤の例は、溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散もしくは懸濁助剤、表面活性剤、等張剤、増粘または乳化剤、保存剤、固体結合剤、滑沢剤等である。任意の望ましくない生物学的効果を生成することまたは医薬組成物の任意の他の構成成分と有害な様式で別様に相互作用することによって等、任意の従来の賦形剤媒質が物質またはその誘導体と不適合である場合を除いて、その使用は、本発明の範囲内であることが企図される。
【０１４７】
本明細書において記載される医薬組成物の製剤は、薬理学分野において公知のまたは以後開発される任意の方法によって調製され得る。概して、そのような調製方法は、活性成分を賦形剤および／または１つもしくは複数の他の副成分と会合させ、次いで、必要および／または望ましいならば、生成物を所望の単回または複数回用量単位に成形するおよび／または包装するステップを含む。
【０１４８】
本発明の医薬組成物は、バルクで、単回単位用量として、および／または複数の単回単位用量として、調製、包装および／または販売されてよい。本明細書において使用される場合、「単位用量」は、所定量の活性成分を含む医薬組成物の不連続な量である。活性成分の量は、対象に投与されるであろう活性成分の投薬量および／または、例えばそのような投薬量の２分の１もしくは３分の１等、そのような投薬量の便利な割合とほぼ等しい。
【０１４９】
本発明の医薬組成物における、活性成分（先の態様および実施形態のいずれかで定義されているペプチド）、薬学的に許容される賦形剤および／または任意の追加の成分の相対量は、治療されている対象の同一性、サイズおよび／または状態に応じて、ならびに組成物が投与されるルートにさらに応じて変動することになる。
【０１５０】
医薬組成物の製造において使用される薬学的に許容される賦形剤は、不活性希釈剤、分散および／もしくは造粒剤、表面活性剤および／もしくは乳化剤、崩壊剤、結合剤、保存剤、緩衝剤、滑沢剤、ならびに／または油を含むがこれらに限定されない。そのような賦形剤は、場合により、本発明の製剤に含まれてよい。ココアバターおよび坐剤ワックス、着色剤、コーティング剤、甘味、香味および着香剤等の賦形剤が、調合者の判断に従って、組成物中に存在し得る。
【０１５１】
例示的な希釈剤は、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウムラクトース、スクロース、セルロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、コーンスターチ、粉砂糖、およびそれらの組合せを含むがこれらに限定されない。
【０１５２】
例示的な造粒および／または分散剤は、バレイショデンプン、コーンスターチ、タピオカデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、粘土、アルギン酸、グアーガム、柑橘類パルプ、寒天、ベントナイト、セルロースおよび木材製品、天然海綿、カチオン交換樹脂、炭酸カルシウム、ケイ酸塩、炭酸ナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン）（クロスポビドン）、カルボキシメチルデンプンナトリウム（デンプングリコール酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカルメロース）、メチルセルロース、アルファ化デンプン（デンプン１５００）、微結晶性デンプン、水不溶性デンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム（ビーガム）、ラウリル硫酸ナトリウム、第四級アンモニウム化合物、ならびにそれらの組合せを含むがこれらに限定されない。
【０１５３】
例示的な表面活性剤および／または乳化剤は、天然乳化剤（例えば、アカシア、寒天、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、トラガカント、コンドラックス（ｃｈｏｎｄｒｕｘ）、コレステロール、キサンタン、ペクチン、ゼラチン、卵黄、カゼイン、羊毛脂、コレステロール、ワックスおよびレシチン）、コロイド粘土（例えば、ベントナイト［ケイ酸アルミニウム］およびビーガム［ケイ酸アルミニウムマグネシウム］）、長鎖アミノ酸誘導体、高分子量アルコール（例えば、ステアリルアルコール、セチルアルコール、オレイルアルコール、トリアセチンモノステアレート、エチレングリコールジステアレート、モノステアリン酸グリセリルおよびモノステアリン酸プロピレングリコール、ポリビニルアルコール）、カルボマー（例えば、カルボキシポリメチレン、ポリアクリル酸、アクリル酸ポリマーおよびカルボキシビニルポリマー）、カラギーナン、セルロース系誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、粉末セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース）、ソルビタン脂肪酸エステル｛例えば、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン［Ｔｗｅｅｎ２０］、ポリオキシエチレンソルビタン［Ｔｗｅｅｎ６０］、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン［Ｔｗｅｅｎ８０］、ソルビタンモノパルミテート［スパン４０］、ソルビタンモノステアレート［スパン６０］、ソルビタントリステアレート［スパン６５］、モノオレイン酸グリセリル、ソルビタンモノステアレート［スパン８０］）、ポリオキシエチレンエステル（例えば、ポリオキシエチレンモノステアレート［Ｍｙｒｊ４５］、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリエトキシル化ヒマシ油、ポリオキシメチレンステアレートおよびソルトール）、ショ糖脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル（例えば、クレモフォール）、ポリオキシエチレンエーテル（例えば、ポリオキシエチレンラウリルエーテル［Ｂｒｉｊ３０］）、ポリ（ビニル−ピロリドン）、モノラウリン酸ジエチレングリコール、オレイン酸トリエタノールアミン、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸カリウム、オレイン酸エチル、オレイン酸、ラウリン酸エチル、ラウリル硫酸ナトリウム、プルロニックＦ６８、ポロキサマー１８８、臭化セトリモニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、ドクサートナトリウム等、ならびに／またはそれらの組合せを含むがこれらに限定されない。
【０１５４】
例示的な結合剤は、デンプン（例えば、コーンスターチおよびデンプン糊）；ゼラチン；糖（例えば、スクロース、グルコース、デキストロース、デキストリン、糖蜜、ラクトース、ラクチトール、マンニトール）；天然および合成ガム（例えば、アカシア、アルギン酸ナトリウム、アイリッシュ・モスの抽出物、パンワールガム、ガッティガム、イサポル殻（ｉｓａｐｏｌ  ｈｕｓｋ）の粘液、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、酢酸セルロース、ポリビニルピロリドン）、ケイ酸アルミニウムマグネシウム（ビーガム）およびカラマツアラボガラクタン）；アルギン酸塩；ポリエチレンオキシド；ポリエチレングリコール；無機カルシウム塩；ケイ酸；ポリメタクリレート；ワックス；水；アルコールならびにそれらの組合せを含むがこれらに限定されない。
【０１５５】
例示的な保存剤は、抗酸化剤、キレート化剤、抗菌性保存剤、抗真菌性保存剤、アルコール保存剤、酸性保存剤および他の保存剤を含み得る。例示的な抗酸化剤は、アルファトコフェロール、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、モノチオグリセロール、メタ重亜硫酸カリウム、プロピオン酸、没食子酸プロピル、アスコルビン酸ナトリウム、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウムおよび亜硫酸ナトリウムを含むがこれらに限定されない。例示的なキレート化剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸一水和物、エデト酸二ナトリウム、エデト酸二カリウム、エデト酸、フマル酸、リンゴ酸、リン酸、エデト酸ナトリウム、酒石酸およびエデト酸三ナトリウムを含む。例示的な抗菌性保存剤は、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、ブロノポール、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クロロキシレノール、クレゾール、エチルアルコール、グリセリン、ヘキセチジン、イミド尿素、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、プロピレングリコールおよびチメロサールを含むがこれらに限定されない。例示的な抗真菌性保存剤は、ブチルパラベン、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、安息香酸カリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウムおよびソルビン酸を含むがこれらに限定されない。例示的なアルコール保存剤は、エタノール、ポリエチレングリコール、フェノール、フェノール化合物、ビスフェノール、クロロブタノール、ヒドロキシベンゾエートおよびフェニルエチルアルコールを含むがこれらに限定されない。例示的な酸性保存剤は、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ベータカロテン、クエン酸、酢酸、デヒドロ酢酸、アスコルビン酸、ソルビン酸およびフィチン酸を含むがこれらに限定されない。他の保存剤は、トコフェロール、酢酸トコフェロール、メシル酸デテロキシム、セトリミド、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン化（ｈｙｄｒｏｘｙｔｏｌｕｅｎｅｄ）（ＢＨＴ）、エチレンジアミン、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、メタ重亜硫酸カリウム、グリダントプラス、フェノニップ、メチルパラベン、ジェルマール１１５、ゲルマベンＩＩ、ネオロン、ケーソンおよびユーキシル（Ｅｕｘｙｌ）を含むがこれらに限定されない。ある特定の実施形態において、保存剤は、抗酸化剤である。他の実施形態において、保存剤は、キレート化剤である。
【０１５６】
例示的な緩衝剤は、クエン酸緩衝溶液、酢酸緩衝溶液、リン酸緩衝溶液、塩化アンモニウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルビオン酸カルシウム、グルセプト酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、Ｄ−グルコン酸、グリセロリン酸カルシウム、乳酸カルシウム、プロパン酸、レブリン酸カルシウム、ペンタン酸、第二リン酸カルシウム、リン酸、第三リン酸カルシウム、水酸化リン酸カルシウム、酢酸カリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、カリウム混合物、リン酸水素二カリウム、リン酸二水素カリウム、リン酸カリウム混合物、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸ナトリウム混合物、トロメタミン、水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウム、アルギン酸、パイロジェンフリー水、等張生理食塩水、リンゲル液、エチルアルコール、およびそれらの組合せを含むがこれらに限定されない。
【０１５７】
例示的な滑沢剤は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、シリカ、タルク、麦芽、グリセリルベハネート（ｇｌｙｃｅｒｙｌ  ｂｅｈａｎａｔｅ）、水素化植物油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、ラウリル硫酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、およびそれらの組合せを含むがこれらに限定されない。
【０１５８】
例示的な油は、アーモンド、杏仁、アボカド、ババス、ベルガモット、ブラックカレント（ｂｌａｃｋ  ｃｕｒｒｅｎｔ）種子、ルリジサ、ビャクシン属の木、カモミール、キャノーラ、キャラウェー、カルナバ、ヒマシ、シナモン、ココアバター、ココナツ、タラ肝、コーヒー、コーン、綿実、エミュー、ユーカリ、月見草、魚、アマニ、ゲラニオール、ヒョウタン、ブドウ種子、ヘーゼルナッツ、ヒソップ、ミリスチン酸イソプロピル、ホホバ、ククイナッツ、ラバンジン、ラベンダー、レモン、アオモジ、マカデミア（ｍａｃａｄｅｍｉａ）ナッツ、ゼニアオイ、マンゴー種子、メドウフォーム種子、ミンク、ナツメグ、オリーブ、オレンジ、オレンジラフィー、パーム、パーム核、桃仁、ピーナッツ、ポピー種子、カボチャ種子、菜種、米ぬか、ローズマリー、サフラワー、白檀、サザンカ、セイボリー、シーバックソーン、ゴマ、シアバター、シリコーン、大豆、ヒマワリ、ティーツリー、アザミ、ツバキ、ベチバー、クルミおよび小麦胚芽油を含むがこれらに限定されない。例示的な油は、ステアリン酸ブチル、カプリル酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーン油、およびそれらの組合せを含むがこれらに限定されない。
【０１５９】
経口および非経口投与のための液体剤形は、薬学的に許容されるリポソーム乳剤、マイクロ乳剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤を含むがこれらに限定されない。活性成分に加えて、液体剤形は、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例を挙げると、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実、ラッカセイ、コーン、胚芽、オリーブ、ヒマシおよびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物等、当該技術分野において一般的に使用される不活性希釈剤を含んでよい。不活性希釈剤のほかに、経口組成物は、湿潤剤、乳化および懸濁化剤、甘味、香味および着香剤等のアジュバントを含むことができる。非経口投与のためのある特定の実施形態において、本発明のコンジュゲートは、ポリエトキシル化ヒマシ油（例えば、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標））、アルコール、油、変性油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー、およびそれらの組合せ等の可溶化剤と混合される。
【０１６０】
注射用調製物、例えば、無菌注射用水性または油脂性懸濁液は、公知の技術に従い、好適な分散または湿潤剤および懸濁化剤を使用して製剤化されてよい。無菌注射用調製物は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌注射用溶液、懸濁液または乳剤、例えば、１，３−ブタンジオール中溶液としてのものであってよい。許容されるビヒクルおよび溶媒の中でも、用いられ得るのは、水、リンゲル液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．および等張塩化ナトリウム溶液である。加えて、無菌固定油が、溶媒または懸濁媒として慣例的に用いられる。この目的のために、合成モノ−またはジグリセリドを含む任意の無刺激性固定油が用いられ得る。加えて、オレイン酸等の脂肪酸が、注射液の調製において使用される。代替として、調製物は、リポソームの形態であることができる。
【０１６１】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターに通す濾過によって、または、滅菌剤を、使用前に滅菌水または他の滅菌注射用媒質に溶解または分散され得る滅菌固体組成物の形態で組み込むことによって、滅菌され得る。
【０１６２】
薬物の効果を持続させるために、皮下または筋肉内注射からの薬物の吸収を減速させることが、多くの場合、望ましい。これは、水溶性の乏しい結晶性または非晶質材料の液体懸濁液の使用によって、遂行され得る。次いで、薬物の吸収速度は、その溶解速度によって決まり、これが今度は、結晶サイズおよび結晶形態によって決まり得る。代替として、非経口的に投与される薬物形態の遅延吸収は、薬物を油ビヒクルに溶解するまたは懸濁することによって遂行される。
【０１６３】
経口投与のための固体剤形は、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤および顆粒剤を含む。そのような固体剤形において、活性成分は、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウム等の少なくとも１つの不活性な薬学的に許容される賦形剤、ならびに／または、ａ）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸等の充填剤もしくは増量剤、ｂ）例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｏｎｅ）、スクロースおよびアカシア等の結合剤、ｃ）グリセロール等の保湿剤、ｄ）寒天、炭酸カルシウム、バレイショもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定のケイ酸塩および炭酸ナトリウム等の崩壊剤、ｅ）パラフィン等の溶液遅延剤、ｆ）第四級アンモニウム化合物等の吸収加速剤、ｇ）例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール等の湿潤剤、ｈ）カオリンおよびベントナイト粘土等の吸収剤、ならびにｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびそれらの混合物等の滑沢剤と混合される。カプセル剤、錠剤および丸剤の事例において、剤形は、緩衝剤を含んでよい。
【０１６４】
同様の種類の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖および高分子量ポリエチレングリコール等の賦形剤を使用して、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル剤における充填剤として用いられてよい。錠剤、糖衣錠剤、カプセル剤、丸剤および顆粒剤の固体剤形は、腸溶コーティングおよび医薬製剤分野において周知である他のコーティング等のコーティングおよび外殻を用いて調製され得る。それらは、乳白剤を場合により含んでよく、活性成分のみを、または優先的に、消化管のある特定の部分において、場合により、遅延方式で放出する組成のものであることができる。使用され得る包埋組成物の例は、ポリマー性物質およびワックスを含む。同様の種類の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖および高分子量ポリエチレングリコール等の賦形剤を使用して、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル剤における充填剤として用いられてよい。
【０１６５】
本発明のペプチドは、上記で注記した１つまたは複数の賦形剤を加えた、マイクロカプセル形態であることができる。一実施形態において、本発明のペプチドは、リポソームで製剤化される。錠剤、糖衣錠剤、カプセル剤、丸剤および顆粒剤の固体剤形は、腸溶コーティング、放出制御コーティングおよび医薬製剤分野において周知である他のコーティング等、コーティングおよび外殻を用いて調製され得る。そのような固体剤形において、活性成分は、スクロース、ラクトースまたはデンプン等の少なくとも１つの不活性希釈剤と混和されてよい。そのような剤形は、通常の慣行のように、不活性希釈剤以外の追加物質、例えば、錠剤化滑沢剤ならびにステアリン酸マグネシウムおよび微結晶性セルロース等の他の錠剤化助剤を含んでよい。カプセル剤、錠剤および丸剤の事例において、剤形は、緩衝剤を含んでよい。それらは、乳白剤を場合により含んでよく、活性成分のみを、または優先的に、消化管のある特定の部分において、場合により、遅延方式で放出する組成のものであることができる。使用され得る包埋組成物の例は、ポリマー性物質およびワックスを含む。
【０１６６】
本発明のペプチドおよび医薬組成物は、併用療法において用いられ得ることが分かるであろう。併用レジメンにおいて用いるための療法（治療薬または手順）の特定の組合せは、所望の治療薬および／または手順の適合性ならびに実現されるべき所望の治療効果を考慮に入れるであろう。用いられる療法は、同じ目的のための所望の効果（例えば、腫瘍を検出するために有用な本発明のコンジュゲートは、腫瘍を検出するために有用な別の作用物質と同時発生的に投与されてよい）を実現し得、またはそれらは異なる効果（例えば、あらゆる有害作用の制御）を実現し得ることが分かるであろう。
【０１６７】
本発明の医薬組成物は、単独で、または１つもしくは複数の他の治療剤と組み合わせて投与されてよい。「と組み合わせて」は、作用物質が同時に投与および／または一緒に送達するために製剤化されなくてはならないことを示唆するように意図されないが、これらの送達方法は本発明の範囲内である。組成物は、１つまたは複数の他の所望の治療薬または医学的手順と同時発生的に、その前に、またはその後に、投与され得る。概して、各作用物質は、その作用物質について決定された用量でおよび／またはタイムスケジュールで投与されることになる。加えて、本発明は、それらのバイオアベイラビリティを改善し、それらの代謝を低減させおよび／もしくは修正し、それらの排出を阻害し、ならびに／または体内でのそれらの分布を修正し得る作用物質と組み合わせた、ペプチドまたは医薬組成物の、送達を包括する。
【０１６８】
併用レジメンにおいて用いるための療法の特定の組合せは、所望の治療薬および／もしくは手順の適合性ならびに／または実現されるべき所望の治療効果を考慮に入れるであろう。用いられる療法は、同じ障害のための所望の効果（例えば、本発明のポリペプチドは、同じ障害を治療するために使用される別の生物学的活性剤と同時発生的に投与されてよい）を実現し得、かつ／またはそれらは異なる効果（例えば、あらゆる有害作用の制御）を実現し得ることが分かるであろう。この組合せで利用される生物学的活性剤は、単一の組成物で一緒に投与されてもよいし、または異なる組成物で別個に投与されてもよいことがさらに分かるであろう。
【０１６９】
表現「と組み合わせて」は、本発明のペプチドを、数ある中でも治療剤またはペプチドのプロファイル（バイオアベイラビリティ等）を改善するための作用物質であることができる、以上および以下で言及されるさらなる作用物質のいずれかと（化学物理相互作用によって）コンジュゲートする可能性も包括する。
【０１７０】
一実施形態において、本発明のペプチドは、１つまたは複数の抗がん剤と組み合わせて投与される。抗がん剤は、例えば、メトトレキサート、ビンクリスチン、アドリアマイシン、シスプラチン、糖を含有しないクロロエチルニトロソ尿素、５−フルオロウラシル、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダカルバジン、タキソール、フラジリン（ｆｒａｇｙｌｉｎｅ）、メグラミン（Ｍｅｇｌａｍｉｎｅ）ＧＬＡ、バルルビシン、カルムスタイン（ｃａｒｍｕｓｔａｉｎｅ）およびポリフェルポサン（ｐｏｌｉｆｅｒｐｏｓａｎ）、ＭＭＩ２７０、ＢＡＹ１２−９５６６、ＲＡＳファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ＭＭＰ、ＭＴＡ／ＬＹ２３１５１４、ＬＹ２６４６１８／ロメテキソール（Ｌｏｍｅｔｅｘｏｌ）、グラモレック、ＣＩ−９９４、ＴＮＰ−４７０、ハイカムチン／トポテカン、ＰＫＣ４１２、バルスポダール／ＰＳＣ８３３、ノバントロン／ミトロキサントロン（Ｍｉｔｒｏｘａｎｔｒｏｎｅ）、メタレット／スラミン、バチマスタット、Ｅ７０７０、ＢＣＨ−４５５６、ＣＳ−６８２、９−ＡＣ、ＡＧ３３４０、ＡＧ３４３３、インセル／ＶＸ−７１０、ＶＸ−８５３、ＺＤ０１０１、ＩＳＩ６４１、ＯＤＮ６９８、ＴＡ２５１６／マルミスタット（Ｍａｒｍｉｓｔａｔ）、ＢＢ２５１６／マルミスタット、ＣＤＰ８４５、Ｄ２１６３、ＰＤ１８３８０５、ＤＸ８９５ｉｆ、レモナールＤＰ２２０２、ＦＫ３１７、ピシバニール／ＯＫ−４３２、ＡＤ３２／バルルビシン、メタストロン／ストロンチウム誘導体、テモダール／テモゾロミド、エバセト／リポソーマルドキソルビシン、ヨータキサン（Ｙｅｗｔａｘａｎ）／パクリタキセル、タキソール／パクリタキセル、ゼロード（Ｘｅｌｏａｄ）／カペシタビン、フルツロン／ドキシフルリジン、シクロパクス（Ｃｙｃｌｏｐａｘ）／経口パクリタキセル、経口タキソイド、ＳＰＵ−０７７／シスプラチン、ＨＭＲ１２７５／フラボピリドール、ＣＰ−３５８（７７４）／ＥＧＦＲ、ＣＰ−６０９（７５４）／ＲＡＳ発癌遺伝子阻害剤、ＢＭＳ−１８２７５１／経口プラチナ、ＵＦＴ（テガフール／ウラシル）、エルガミソール／レバミゾール、エニルウラシル／７７６Ｃ８５／５ＦＵエンハンサー、カンプト／レバミゾール、カンプトサー／イリノテカン、ツモデックス（Ｔｕｍｏｄｅｘ）／ラリトレキセド（Ｒａｌｉｔｒｅｘｅｄ）、ロイスタチン／クラドリビン、パクセクス（Ｐａｘｅｘ）／パクリタキセル、ドキシル／リポソーマルドキソルビシン、カエリクス／リポソーマルドキソルビシン、フルダラ／フルダラビン、ファルマルビシン／エピルビシン、ＤｅｐｏＣｙｔ、ＺＤ１８３９、ＬＵ７９５５３／ビス−ナフタルイミド（Ｎａｐｈｔａｌｉｍｉｄｅ）、ＬＵ１０３７９３／ドラスタイン（Ｄｏｌａｓｔａｉｎ）、カエチクス（Ｃａｅｔｙｘ）／リポソーマルドキソルビシン、ジェムザール／ゲムシタビン、ＺＤ０４７３／アノルメド（Ａｎｏｒｍｅｄ）、ＹＭ１１６、ヨウ素種、ＣＤＫ４およびＣＤＫ２阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤、Ｄ４８０９／デキシフォサミド、イフェス（Ｉｆｅｓ）／メスネクス（Ｍｅｓｎｅｘ）／イホサミド（Ｉｆｏｓａｍｉｄｅ）、ブモン／テニポシド、パラプラチン／カルボプラチン、プランチノール（Ｐｌａｎｔｉｎｏｌ）／シスプラチン、ベペシド／エトポシド、ＺＤ９３３１、タキソテール／ドセタキセル、グアニンアラビノシドのプロドラッグ、タキサン類似体、ニトロソ尿素、メルフェラン（ｍｅｌｐｈｅｌａｎ）およびシクロホスファミド等のアルキル化剤、アミノグルテチミド、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、クロロムブシル（Ｃｈｌｏｒｏｍｂｕｃｉｌ）、シタラビンＨＣｌ、ダクチノマイシン、ダウノルビシンＨＣｌ、エストラムスチンリン酸ナトリウム、エトポシド（ＶＰ１６−２１３）、フロクスウリジン、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、フルタミド、ヒドロキシ尿素（ヒドロキシカルバミド）、イホスファミド、インターフェロンアルファ−２ａ、アルファ−２ｂ、酢酸ロイプロリド（ＬＨＲＨ放出因子類似体）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、メクロレタミンＨＣｌ（ナイトロジェンマスタード）、メルカプトプリン、メスナ、ミトタン（ｏ．ｐ−ＤＤＤ）、ミトキサントロンＨＣｌ、オクトレオチド、プリカマイシン、プロカルバジンＨＣｌ、ストレプトゾシン、クエン酸タモキシフェン、チオグアニン、チオテパ、硫酸ビンブラスチン、アムサクリン（ｍ−ＡＭＳＡ）、アザシチジン、エルスロポイエチン（Ｅｒｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ）、ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）、インターロイキン２、ミトグアゾン（メチル−ＧＡＧ；メチルグリオキサールビス−グアニルヒドラゾン；ＭＧＢＧ）、ペントスタチン（２’−デオキシコホルマイシン）、セムスチン（メチル−ＣＣＮＵ）、テニポシド（ＶＭ−２６）または硫酸ビンデシン、シグナル伝達阻害剤（ＭＥＫ、ＢＲＡＦ、ＡＫＴ、ｈｅｒ２、ｍＴＯＲおよびＰＩ３Ｋ阻害剤等）であってよいが、そのように限定されない。
【０１７１】
以下で例証するように、本発明のペプチドは、白血病、乳がん、膠芽腫および肺がんからなる群から選択されるがんの治療において有用である。
明細書および請求項の全体を通して、語「を含む」および該語の変化形は、他の技術的特色、添加物、構成成分またはステップを除外するように意図されない。さらに、語「を含む」は、「からなる」の事例を包括する。本発明の追加の目的、利点および特色は、本明細書の検査時に当業者に明らかとなるであろうし、または、本発明の実践によって学習されてよい。下記の例は、例証として提供され、本発明の限定としては意図されない。さらに、本発明は、本明細書において記載される特定のおよび好ましい実施形態のすべての可能な組合せを網羅する。
【実施例】
【０１７２】
合成一般手順
化合物ＬＨ１およびＬＨ２
材料は、次の通りに購入した：Ｆｍｏｃ保護されたα−アミノ酸；リンクアミドＭＢＨＡ樹脂（Ｔｉａｎｊｉｎ  Ｎａｎｋａｉ  ＨＥＣＨＥＮＧ  Ｓ＆Ｔ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ）；ＨＢＴＵ（（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＧＬ  Ｂｉｏｃｈｅｍ）；Ｎ−メチルモルホリン（Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）；無水コハク酸（Ａｌａｄｄｉｎ）；アセトニトリル（Ｘｉｎｇｋｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）；ニンヒドリン（Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）；ピペリジン（Ｖｅｒｔｅｌｌｕｓ）；ジメチルホルムアミド、ＤＭＦ（Ｚｈｅｊｉａｎｇ  ｊｉａｎｇｓｈａｎ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｏ．，Ｌｔｄ）；トリフルオロ酢酸、ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸、Ｓｏｌｖａｙ）、ＴＩＳ（チオアニソール、Ｓｏｌｖａｙ）
簡潔に述べると、線状ポリペプチドは、支持体としてのリンクアミドＭＢＨＡ樹脂上、ＦｍｏｃベースのＳＰＰＳを使用して手動で合成した（固相ペプチド合成）。
【０１７３】
下記のプロトコルを使用した：
１．Ｆｍｏｃ保護基を、ＤＭＦ中２０％ピペリジンで除去した。
２．樹脂をＤＭＦで５回洗浄した。
３．その後のＦｍｏｃ保護されたアミノ酸を、Ｆｍｏｃ−ＡＡ（３当量）、ＨＢＴＵ（３当量）およびＮ−メチルモルホリン（６当量）を使用して、４５分間にわたってカップリングした。
４．樹脂をＤＭＦで５回洗浄した。ニンヒドリン試験によってカップリングを確認した。
５．ステップ１から繰り返す。
６．Ｎ末端を、無水コハク酸（１０当量）およびＮ−メチルモルホリン（１０当量）と反応させることによって、キャップした。
【０１７４】
ペプチドを樹脂から切断し、溶液Ｆ（９５％ＴＦＡ、２，５％水、２．５％ＴＩＳ）への曝露によって脱保護し、凍結乾燥した。
凍結乾燥したペプチドを、Ｃ１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣによって精製した（詳細については化合物特徴付けを参照）。ペプチドをＬＣ−ＭＳ−ＥＳＩによって同定した。すべての化合物についてのすべての質量スペクトルデータは、表１において以下で示される。
【０１７５】
化合物Ｈ０２、Ｈ０４、Ｈ１４、Ｈ１４−Ａ０９、Ｈ１４−Ａ１２、Ｈ１４−Ｆ１２、Ｈ１４−Ｆ１４、Ｈ１４−ｈ２−０１、Ｈ１４−Ｑ０６、Ｈ１４−Ｑ０９、Ｈ１４−Ｑ１３、Ｈ１４−Ｑ１５、Ｈ１４−Ｓ１５、Ｈ１４−ＣＰＰ１およびＨ１４−ＰＥＧ４。
【０１７６】
材料は、次の通りに購入した：Ｆｍｏｃ保護されたα−アミノ酸、Ｆｍｏｃ保護されたオレフィン系アミノ酸：Ｆｍｏｃ−［（Ｓ）−２−（４ペンテニル）アラニン］ＯＨ、Ｆｍｏｃ−［（Ｒ）−２−（４ペンテニル）アラニン］ＯＨ、Ｆｍｏｃ−［（Ｓ）−２−（７オクテニル）アラニン］ＯＨ、Ｆｍｏｃ−［（Ｒ）−２−（４ペンテニル）アラニン］ＯＨ、ＦＭｏｃ−ＰＥＧ４−ＣＯＯＨおよびＢｏｃ−ＰＥＧ４−ＣＯＯＨ、２−（６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェート（ＴＢＴＵ）、樹脂、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ）、グラブスＲｕ（ＩＶ）触媒およびピペリジンは、異なる供給業者から購入した。
【０１７７】
簡潔に述べると、線状ポリペプチドは、自動合成装置を用い、Ｆｍｏｃ固相ペプチド化学を使用して合成した。Ｎ末端ＦＭｏｃ−ＰＥＧ４またはＢｏｃ−ＰＥＧ４を、通常のアミノ酸として配列に追加した。前項において開示された通り、反応容器から樹脂を除去した後、オレフィン系アミノ酸とのカップリングのみを手動で実施した。
【０１７８】
閉環メタセシス反応は、Ｓｃｏｔｔ  Ｊ．Ｍ．および同僚ら（Ｓｃｏｔｔ  Ｊ．Ｍ．ら、「Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒｉｎｇ−Ｃｌｏｓｉｎｇ  Ｍｅｔａｔｈｅｓｉｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｒｉｇｉｄｉｆｉｅｄ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」、１９９６、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１９９６、１１８（４０）、９６０６〜９６１４頁）によって開示された通り、樹脂から線状ペプチドを切断した後、第一世代グラブス触媒を加えた溶液中で実施した。
【０１７９】
脱保護されたペプチドを、４℃でメチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテルとともに沈殿させ、凍結乾燥した。
凍結乾燥したペプチドを、Ｃ１８カラムを使用する逆相ＨＰＬＣによって精製した（詳細については化合物特徴付けを参照）。ペプチドをＬＣ−ＭＳ−ＥＳＩによって同定した。すべての化合物についてのすべての質量スペクトルデータは、表１において以下で示される。
【０１８０】
ＨＰＬＣ条件：
ＬＨ０１．化合物を、２０分で２９％〜３９％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝９，９７）。ＨＰＬＣによる純度等級９５，７０％；
ＬＨ０２．化合物を、２０分で２７％〜３７％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝１０，９２）。ＨＰＬＣによる純度等級９８，１７％；
Ｈ０２．化合物を、１１分で５％〜６０％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝６，７２）。ＨＰＬＣによる純度等級９６，９８％；
Ｈ０４．化合物を、１５分で５％〜６０％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝７，４７）。ＨＰＬＣによる純度等級９０，９０％；
Ｈ１４．化合物を、８分で１０％〜１００％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝５，９７）。ＨＰＬＣによる純度等級９５，００％。
【０１８１】
Ｈ１４−Ａ０９：化合物を、２０分で５２％〜６２％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝７，２６〜９，１５）。ＨＰＬＣによる純度等級９５，０７％；
Ｈ１４−Ａ１２．化合物を、２０分で６０％〜７０％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝８，８０）。ＨＰＬＣによる純度等級９１，０４％；
Ｈ１４−Ｆ１２．化合物を、２０分で５８％〜７８％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝１２，３３）。ＨＰＬＣによる純度等級９６，８４％；
Ｈ１４−Ｆ１４．化合物を、２０分で６２％〜７２％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝１３，８２〜１５，４３）。ＨＰＬＣによる純度等級９８，４３％；
Ｈ１４−ｈ２−０１．化合物を、２０分で５６％〜７６％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝９，４９ｙ１１，６９）。ＨＰＬＣによる純度等級９６，４０％；
Ｈ１４−Ｑ６．化合物を、２０分で４２％〜６２％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝１４，７５）。ＨＰＬＣによる純度等級９０，００％；
Ｈ１４−Ｑ０９．化合物を、２０分で６０％〜８０％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝６，７７〜７，９９）。ＨＰＬＣによる純度等級９５，３５％；
Ｈ１４−Ｑ１３．化合物を、２０分で４８％〜６８％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝７，２〜９，１４）。ＨＰＬＣによる純度等級９５，００％；
Ｈ１４−Ｑ１５．化合物を、２０分で５８％〜７８％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝９，８６）。ＨＰＬＣによる純度等級９５，００％；および
Ｈ１４−Ｓ１５．化合物を、２０分で６５％〜８５％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝６，８９）。ＨＰＬＣによる純度等級９５，９７％。
【０１８２】
Ｈ１４−ＣＰＰ１．化合物を、２０分で４８％〜６８％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝１２．３５）。ＨＰＬＣによる純度等級９５，０４％；
Ｈ１４−ＰＥＧ４．化合物を、２０分で５８％〜７８％のＢの線形勾配を使用するＨＰＬＣ−ＲＰ（Ｃ−１８カラム；ポンプＡ：０，１％ＴＦＡを加えたＨ２Ｏ；ポンプＢ  ０，１％ＴＦＡを加えたアセトニトリル）によって精製した（保持時間＝９，４４〜１０，９１）。ＨＰＬＣによる純度等級９３，０７％；
【０１８３】
【表１−１】
2020528458.tif 000034
【０１８４】
【表１−２】
2020528458.tif 000035
【０１８５】
Ｘビラジカルは、
【０１８６】
【化３２】
2020528458.tif 000036
【０１８７】
を意味し、Ｌビラジカルは、−（ＣＨ２）３−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）３−（ペプチドＨ０２について）または−（ＣＨ２）６−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ２）３−（ペプチドＨ０４、Ｈ１４、Ｈ１４−Ａ１２、Ｈ１４−Ｆ１２、Ｈ１４−Ｆ１４、Ｈ１４−ｈ２−０１、Ｈ１４−Ｑ０６、Ｈ１４−Ｑ０９、Ｈ１４−Ｑ１３、Ｈ１４−Ｑ１５およびＨ１４−Ｓ１５について）を意味する。
【０１８８】
細胞株：
Ｈ５Ｂ、ＧＥＭＭ（ｐ５３−／−ｙＲｂ−／−）マウスのＳＣＬＣ腫瘍から抽出された上皮小細胞肺がん（スタンフォード大学によって提供されたもの）；
ＨＬ−６０、前骨髄芽球（急性骨髄性白血病、ＡＭＬ）、ＥＣＡＣＣ：９８０７０１０６；
ＭＣＦ−７、上皮（乳がん）、ＥＣＡＣＣ：８６０１２８０３；
ＧＭＢ−１８、上皮（膠芽腫、ＧＭＢ）、患者の手術標本由来；
ＧＭＢ−２７、上皮（膠芽腫、ＧＭＢ）、患者の手術標本由来；
ＮＣＩ−Ｈ５２４、肺（小細胞肺がん、ＳＣＬＣ）、ＡＴＣＣ−ＣＲＬ−５８３１；
ＮＣＩ−Ｈ５２６、上皮（小細胞肺がん、ＳＣＬＣ）、ＡＴＣＣ−ＣＲＬ−５８１１；
ＮＣＩ−６９、（小細胞肺がん、ＳＣＬＣ）、ＡＴＣＣ−ＨＴＢ−１１９；
ＮＣＩ−Ｈ８２、上皮（小細胞肺がん、ＳＣＬＣ）、ＡＴＣＣ−ＣＲＬ−５８１１；
ＮＣＩ−Ｈ１８７、上皮（小細胞肺がん、ＳＣＬＣ）、ＡＴＣＣ−ＣＲＬ−５８０４；
ＮＣＩ−５１０Ａ、上皮（小細胞肺がん、ＳＣＬＣ）、ＡＴＣＣ−ＨＢＴ−１２４；および
女性ドナーの肝細胞（正常肝臓）が、Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  ＤＴＩ−Ｄｏｎａｔｉｏｎ＆Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅによって、手術廃棄物からおよび移植に好適でない臓器から提供された。
【０１８９】
細胞培養
細胞株ＭＣＦ−７を、インキュベーター内、不活化された１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ  １０１０６−１６９）を加えたＤＭＥＭ高グルコース（ダルベッコ変法イーグル溶液、Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ  ３１９６６−２１）培地中、ＣＯ２（６％）下、３７℃で培養した。細胞株ＨＬ−６０、ＮＣＩ−Ｈ５２４、ＮＣＩ−Ｈ５２６、ＮＣＩ−Ｈ６９、ＮＣＩ−Ｈ８２、ＮＣＩ−Ｈ１８７およびＨ５Ｂを、インキュベーター内、不活化された１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）および２ｍＭグルタミン（Ｓｉｇｍａ  Ｇ７５１３）を加えたＲＰＭＩ−１６４０（Ｓｉｇｍａ  Ｒ８７５８）培地中、３７℃で培養した。細胞株ＮＣＩ−Ｈ５１０Ａを、インキュベーター内、不活化された１０％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を加えたＦ１２Ｋ培地中で培養した。細胞株ＧＢＭ−１８およびＧＢＭ−２７を、インキュベーター内、完全培地（ニューロベーサル＋Ｂ２７＋グルタマックス＋成長因子）中、ＣＯ２（６％）下、３７℃で培養した。
【０１９０】
増幅ステップおよびアッセイ中に、接着細胞をＤＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水、Ｓｉｇｍａ  Ｄ１２８３）で３回すすぎ、その後で、ＤＰＢＳの溶液中のトリプシン（［０，５ｇ／ｍｌ］／ＥＤＴＡ［０，２ｇ／ｍｌ］）（Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ、１５４０００５４）により３７℃で５分間にわたって処理し、剥離されたら、培養培地に移した。非接着細胞を遠心分離し、培養培地に移した。細胞を、トリパンブルー（Ｔｒｉｐａｎ−Ｂｌｕｅ）で標識した後、ノイバウエルチャンバーにおいてカウントした。各アッセイは、生存率が９０％よりも優れていた場合のみ実施した。
【０１９１】
女性ドナーのヒト肝臓を、２ステップ組織微小灌流技術を使用することにより、肝細胞単離に供し、肝細胞が酸素レベルに対して感度の高い細胞であることから、カニューレ挿入前の無酸素症を回避するために最大限の注意を払った。初期の無酸素状態は、細胞の低い生存率をもたらし得、後に、培養中におけるそれらの代謝能に影響を及ぼすことになる。簡潔に述べると、直径１ｍｍの針付きのアクセス可能な容器を使用することによって、肝臓組織にカニューレを挿入した。１８〜２０ｍｌ／分の流速に調整された蠕動ポンプを使用することにより、平衡塩類溶液を注射して臓器を清浄化した。洗浄した後、コラゲナーゼを含有する溶液を肝臓崩壊のために添加した。このプロセスを使用して取得された細胞懸濁液を濾過し、遠心分離し、コラゲナーゼを除去するために数回洗浄後、細胞を、２ｍＭグルタミン、１７０μｇ／ｍｌ亜セレン酸ナトリウム、２％ウシ新生仔血清、５０ｍＵ／ｍｌペニシリン、５０μｇ／ｍｌストレプトマイシン、０．１％ウシ血清アルブミン、１．６８ｍＭ  ＮＡＭＥ、２６ｍＭ重炭酸ナトリウム、２５μｇ／ｍｌトランスフェリン、６５．５μＭエタノールアミン、７．２μＭリノール酸、１７．５ｍＭグルコース、６．１４ｍＭアスコルビン酸および１０ｎＭインスリンを補充した培養培地ハムＦ１２／ウィリアム（１：１）培地に再懸濁した。
【０１９２】
再懸濁後、細胞アリコートを除去し、トリパンブルー排除法を使用する細胞計数によって生存率を決定した。トリパンブルー取り込みは、細胞膜変化の結果であり、およびその帰結として、細胞死となる。したがって、細胞生存率を定量化するために、生理食塩水中０．４％トリパンブルーを細胞に添加し、これらを直ちにノイバウエルチャンバーにロードした。生存細胞を、５つの異なる領域において、光学顕微鏡下、非青細胞としてカウントした。
【０１９３】
生存率％＝非青細胞の数×１００／総細胞数
生存率および肝毒性（ｈｅｐａｔｏｘｉｃｉｔｙ）アッセイ
９６ウェルプレート内の１００μｌの培地中、ＭＣＦ−７、ＮＣＩ−Ｈ１８７、ＮＣＩ−Ｈ６９、ＮＣＩ−Ｈ５２６およびＨ５Ｂ細胞を、５０００細胞／ウェルの密度で播種し、ＮＣＩ−Ｈ５２４およびＮＣＩ−Ｈ８２を、２５００細胞／ウェルの密度で播種し、ＨＬ−６０およびＮＣＩ−Ｈ５１０Ａを、１００００細胞／ウェルで播種した。２４時間後、試験される化合物を添加して、連続希釈（１：１）した１００μＭの出発濃度での用量／応答曲線を計算した。対照は未処置細胞であった。各実験を、三連で実施した。
【０１９４】
細胞を、インキュベーター内、ＣＯ２雰囲気下、３７℃で７２時間の間インキュベートした。ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド）アッセイ、Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ（登録商標）（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ  ＤＡＬ１１００）およびヘキソサミニダーゼ活性試験を連続的に、製造業者の説明書に準拠して利用して、細胞生存率を測定した。
【０１９５】
アッセイ進行は、以下に準拠する：
ＭＴＴ：１．ＭＴＴ（４７５９８９  Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）のストック溶液は、ＰＢＳ１倍中５ｍｇ／ｍｌであった。陰性対照（実験ノイズ）として、３ウェルを、２０μｌ／ウェルのＨ２Ｏ中ＳＤＳ１０％の溶液で処理した。同じ対照をアラマーブルー／ヘキソサミニダーゼに使用した。１０μｌ／ウェルのＭＴＴ溶液を添加し、プレートを３〜４時間にわたってインキュベートした。培地を廃棄し、１００μｌの抽出緩衝液（ＰＢＳ１倍、１５％ＳＤＳ、５０％Ｎａ  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ｐＨ４，７）を各ウェルに添加した。プレートを、軌道振とうしながら、室温で１６時間にわたってインキュベートした。５７０ｎｍにおける吸光度を最後に測定した。
【０１９６】
アラマーブルー：１０μｌのアラマーブルー溶液を各ウェルに添加し、プレートを、インキュベーター内、４時間にわたってインキュベートした。５３５／５９０（励起／発光）における蛍光比を、サイトフルオル（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）蛍光光度計において測定した。アラマーブルー溶液を添加する直前に、２％濃度のトリトンＸ１００による未処置細胞の溶解によってブランク対照を決定した。
【０１９７】
ヘキソサミニダーゼ活性試験：アラマーブルーレクチャー後に、培地を廃棄し、プレートをＰＢＳで１回すすいだ。６０μｌのヘキソサミニダーゼ基質（ｐ−ニトロフェノール−Ｎ−アセチル−ベータ−Ｄ−グルコサミド７．５ｍＭ［Ｓｉｇｍａ  Ｎ−９３７６］、クエン酸ナトリウム０．１Ｍ、ｐＨ５．０、０．２５％トリトンＸ−１００）を各ウェルに添加し、プレートを、細胞型に従い（ヘキソサミニダーゼ活性は細胞型に従って変化する）、３７℃で２〜５時間にわたってインキュベートした。インキュベーション時間後、９０μｌの顕示溶液（ｒｅｖｅａｌｉｎｇ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）（グリシン５０ｍＭ、ｐＨ１０．４；ＥＤＴＡ５ｍＭ）を各ウェルに添加し、４１０ｎＭにおける吸光度を測定した。ブランク対照は前述したものと同じであった。
【０１９８】
前述した通りに単離および再懸濁したヒト肝細胞を、化合物の細胞毒性を評価するために、９６コラーゲンコーティングプレートに１００，０００生存細胞／ウェルで播種した。培養液中で１時間後、培地を新しくして、細胞残屑を排除した。培養したヒト肝細胞を培養液中で２４時間にわたって静置させた後、実験を実施した。２４時間後、試験される化合物を添加して、連続希釈した４００μＭの出発濃度での用量／応答曲線を計算した。各実験を、三連で実施した。細胞を、インキュベーター内、ＣＯ２雰囲気下、３７℃で２４時間の間インキュベートした。
【０１９９】
トリパンブルー排除法を使用する細胞計数によって生存率を決定した。
生存率％＝非青細胞の数×１００／総細胞数
統計
データ解析は、正規化した細胞生存率の、１００％と等しいとみなされた陰性対照の値に対するパーセンテージを計算して実施した。シグモイド方程式用量応答（可変スロープ）を介して用量／応答曲線を当てはめ、ＥＣ５０値を次の通りに計算した：
Ｙ＝底部＋（頂部−底部）／（１＋１０＾｛［（ＬｏｇＥＣ５０−Ｘ）×斜面］｝，
［式中、Ｘは、化合物濃度（対数目盛）であり、Ｙは、応答である］。
【０２００】
計算およびグラフは、ＧｒａｐｈＰａｄプリズム（ウィンドウズ（登録商標）用プリズム６）を使用して行った。
作用機序−ウェスタンブロット  活性化カスパーゼ３、Ｐａｒｐおよびｃ−Ｐａｒｐ
細胞を、Ｈ１４の濃度範囲（１μＭおよび１０μＭ）で、インキュベーター内、ＣＯ２雰囲気下、３７℃で６時間および１２時間の間インキュベートした。
【０２０１】
培養された細胞株ＮＣＩ−Ｈ１８７およびＮＣＩ−Ｈ５１０Ａの溶解物から抽出された等量のタンパク質を含有する試料（対応する一次抗体の仕様に応じて５〜５０ｕｇ、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、ＣＡ）に、ＳＤＳ−ＰＡＧＥで電気泳動を受けさせ、二フッ化ポリビニリデン膜に移した。膜を、３％ＢＳＡ−ＰＢＳ−０．１％Ｔｗｅｅｎ中、室温で１時間にわたってブロックし、ブロットを一次抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、ＣＡ）により４℃で終夜プローブして、目的のタンパク質を検出した。インキュベーション後、膜を、洗浄（ｗｒｅａｓｈｉｎｇ）緩衝液（０．１％Ｔｗｅｅｎを含有するＰＢＳ）で５分間にわたって３回洗浄した。次いで、膜を、１：１０，０００に希釈した二次抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、ＣＡ）とともに室温で１時間にわたってインキュベートした。洗浄した後、Ｇ−ボックス（Ｓｙｎｇｅｎｅ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫ）を使用して、特異的タンパク質を検出した。
【０２０２】
安定性試験
化学物質
・  水、ピュアラボウルトラアイオニック(Purelab Ultra Ionic)（Ｅｌｇａ  Ｂｅｒｋｅｆｅｌｄ  ＧｍｂＨ、Ｃｅｌｌｅ、Ｇｅｒｍａｎｙ）
・  ＨＰＬＣ用メタノール、９９．９％以上（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＧｍｂＨ、Ｂｕｃｈｓ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）
・  ＨＰＬＣ用アセトニトリル、９９．９％以上（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＧｍｂＨ、Ｂｕｃｈｓ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）
・  ＨＰＬＣ用２プロパノール、９９．９％以上（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＧｍｂＨ、Ｂｕｃｈｓ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）
・  ＨＰＬＣ用エタノール、９９．８％以上（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＧｍｂＨ、Ｂｕｃｈｓ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）
・  ギ酸、分析純度（ｐｕｒｉｓｓ．  ｐ．ａ．）、９８％以上（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  ＧｍｂＨ、Ｂｕｃｈｓ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）
ブランクマトリックス
・  抗凝固剤としてＫ３  ＥＤＴＡを加えたヒト血漿（Ｂｌｕｔｓｐｅｎｄｅｚｅｎｔｒｕｍ  ＳＲＫ  ｂｅｉｄｅｒ  Ｂａｓｅｌ、Ｂａｓｅｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）
装置
・  遠心分離、アレグラ(Allegra)６４Ｒ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＳＡ、Ｎｙｏｎ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）
・  遠心分離、バイオフュージストラトス(Biofuge Stratos)（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｏｓｔｅｒｏｄｅ、Ｇｅｒｍａｎｙ）
・  冷凍庫、リープヘルコンフォート(Liebherr Comfort) Ｌｉｅｂｈｅｒｒ、Ｂｉｂｅｒａｃｈ  ａｎ  ｄｅｒ  Ｒｉｓｓ、Ｇｅｒｍａｎｙ）
・  急速冷凍庫、ＭＤＦ  Ｕ５３Ｖ（三洋電機株式会社、東京、日本）
・  超音波浴、ＳＷ６Ｈ（Ｓｏｎｏｓｗｉｓｓ  ＡＧ、Ｒａｍｓｅｎ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）
・  ピペット、参照、研究（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  ＡＧ、Ｈａｍｂｕｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）
・  ボルテクサー(Vortexer)、ジーニアス(Genius)３（ＩＫＡ  Ｌａｂｏｒｔｅｃｈｎｉｋ、Ｓｔａｕｆｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）
・  ボルテクサー、ジーニー(Genie)２（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＵＳＡ）
・  微量てんびん、ＭＴ５（Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  ＧｍｂＨ、Ｇｉｅｓｓｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）
・  精密てんびん、ＰＢ５０３Ｓ／ＦＡＣＴ（Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  ＧｍｂＨ、Ｇｉｅｓｓｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）
・  サーモミキサーコンフォート(Thermomixer comfort)（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  ＡＧ、Ｈａｍｂｕｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）
設備
・  ＨＰＬＣポンプ、１２００シリーズポンプ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ、Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ、ＣＡ、ＵＳＡ）
・  オートサンプラー、ＨＴＣ  ｘｔ  ＰＡＬ（ＣＴＣ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  ＡＧ、Ｚｗｉｎｇｅｎ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）
・  質量分析計、ＴＳＱバンテージ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）
分析方法
ａ．較正試料および品質管理試料の調製
ストック溶液の調製のために、Ｈ１４を、０．１％ギ酸を含有する水／アセトニトリル（９５／５、ｖ／ｖ）に、１．００ｍｇ／ｍＬの濃度まで溶解した。さらなる連続希釈を血漿中で行った。濃度を、純度を考慮して計算した。
【０２０３】
血漿試料の調製のために、ヒトブランク血漿を、ストック溶液により１：１００の比を使用して強化して、１０．０μｇ／ｍＬの試料を取得し、これをその後、ヒトブランク血漿中で連続希釈した。
【０２０４】
血漿中の試料の濃度は、下記であった：
【０２０５】
【表２】
2020528458.tif 000037
【０２０６】
ｂ．内部標準溶液の調製
内部標準ストック溶液の調製のために、内部標準を、０．１％ギ酸を含有する水／アセトニトリル（９５／５、ｖ／ｖ）に、１．００ｍｇ／ｍＬの濃度まで溶解した。血漿試料の分析のために、最終作業希釈液を、１％ギ酸を含有するアセトニトリル中１０００ｎｇ／ｍＬの濃度に調製した。
【０２０７】
ｃ．試料調製
２つのペプチド濃度（１００ｎｇ／ｍＬおよび１０００ｎｇ／ｍＬ）について、３００μＬの体積のヒト血漿試料を、空の９６ディープウェルプレートに移した。プレートを、サーモミキサー内、３７℃で、およそ７００ｒｐｍにてインキュベートした。０時間、１時間、２時間、４時間、６時間および２４時間の選択されたインキュベーション時点において、血漿のアリコートを、内部標準を含有するアセトニトリルで沈殿させた。２０μＬのヒト血漿試料のアリコートに、１％ギ酸および内部標準を含有する４０μＬのアセトニトリルを添加した。数秒間にわたってボルテックス混合した後、試料をおよそ５００００ｇで約１０分間にわたって遠心分離した。遠心分離の温度は８℃に設定した。３０μＬの上清のアリコートを、ＬＣ  ＭＳ／ＭＳを使用する分析のためにオートサンプラーバイアルに移した。
【０２０８】
ｃ．ＨＰＬＣ  ＭＳ／ＭＳ条件
Ｈ１４の定量化は、逆相クロマトグラフィーによるカラム分離、続いて、選択された反応モニタリングモードでの三段四重極ＭＳ／ＭＳによる検出によって実施した。ＨＰＬＣについて、条件は下記であった：
注入体積  ３μＬ（３μＬのループ中に５μＬ）
移動相：
相Ａ  ０．５％ギ酸を含有する水
相Ｂ  ０．５％ギ酸を含有する２プロパノール
カラム：
ハイパーシルゴールド、２．１×５０ｍｍ、３μｍ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｃ．、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ、ＵＳＡ）
カラム温度：室温
勾配：
【０２０９】
【表３】
2020528458.tif 000038
【０２１０】
質量分析
イオン源  ＨＥＳＩ
極性  正
電圧［Ｖ］  ３５００
スイープガス［ａｕ］  ０．０
シースガス［ａｕ］  ６０．０
補助ガス［ａｕ］  ５．０
気化器［℃］  ３００
衝突ガス圧［ｍＴｏｒｒ］  １．５
選択された反応モニタリング：
【０２１１】
【表４】
2020528458.tif 000039
【０２１２】
インビボ研究
−  動物：
６〜７週齢のＦｏｘｎ１ｎｕ免疫抑制マウスを病原体フリーゾーン（ナバーラ大学ＣＩＭＡ）に収容し、扱った。すべての実験を、ナバーラ大学の施設内で行った。
【０２１３】
−  研究した群：
対照：培地（ＰＢＳ）を毎日２４時間ごとに腹腔内投与した。
ＩＤＰ−Ｈ１４  ２０ｍｇ／ｋｇを毎日２４時間ごとに腹腔内投与した。
【０２１４】
−  研究の方法および追跡：
皮下異種移植モデル：マウスの左右の脇腹を剃毛し、吸入によって麻酔をかけてその可動性を減少させ、５０μｌのＲＰＭＩ−１６４０培地および５０μｌのＣｏｒｎｉｎｇ（登録商標）Ｍａｔｒｉｇｅｌ（登録商標）基底膜マトリックス中のＨ５１０Ａ細胞を皮下に接種した。腫瘍が触診可能になったら、マウスを腫瘍体積に従って異なる群（対照群に８匹のマウスおよび処置群に８匹のマウス）に無作為化した。これは、２つの腫瘍直径のキャリパーを用いる測定および下記のスフェロイドの式：
Ｖ＝（ａ・ｂ＾２・π）／６
［式中、ａおよびｂは、それぞれ最長および最短直径に対応する］を使用することによって推定した。腫瘍体積を週に３回モニターした。
【０２１５】
生存評価：マウスを、それらの腫瘍直径が１０００ｍｍ３の体積に到達したら屠殺した。終点基準に到達するまでの時間は、処置開始日から推定された。統計的差異は、ログランク検定によりカプランマイヤー曲線を使用して評価された。統計的分析は、ＳＰＳＳ−１７．０プログラムを使用して実施した。
【０２１６】
２．結果
２．１  有効性結果
本発明のペプチドは、異なる肺がん細胞の増殖を阻害する際に非常に効率的であることが分かった。実験データは以下の表５にまとめられる。
【０２１７】
【表５】
2020528458.tif 000040
【０２１８】
本発明のペプチドＨ１４を、乳房、白血病細胞および膠芽腫株等の他のがん細胞株におけるその抗増殖作用を確認するためにも試験した。以下の表６で提供される通り、驚くべきことに、ペプチドは活性であることが分かった。
【０２１９】
【表６】
2020528458.tif 000041
【０２２０】
加えて、Ｈ１４突然変異体ペプチド（すなわち、ペプチドＨ１４−０９、Ｈ１４−Ａ１２、Ｈ１４−Ｆ１２、Ｈ１４−Ｆ１４、Ｈ１４−ｈ２−０１、Ｈ１４−Ｑ０６、Ｈ１４−Ｑ０９、Ｈ１４−Ｑ１３、Ｈ１４−Ｑ１５およびＨ１４−Ｓ１５）も、表７および８に示されるように、いくつかのがん細胞株に対して活性であることが分かった。
【０２２１】
【表７】
2020528458.tif 000042
【０２２２】
【表８】
2020528458.tif 000043
【０２２３】
驚くべきことに、時間的変異に伴い、得られたペプチドは、Ｈ１４に対して有効性の改善を示した。
ペプチドＨ１４がＣＰＰとコンジュゲートされた場合も、表９に示されるように、有効性は実質的に改善された。
【０２２４】
【表９】
2020528458.tif 000044
【０２２５】
２．２  肝毒性
実験データは以下の表１０にまとめられる。
【０２２６】
【表１０】
2020528458.tif 000045
【０２２７】
４および１４μＭの用量（治療的に有効と確認された用量）において、ペプチドＨ１４は、正常な肝細胞に対して非毒性である。
２．３  ウェスタンブロット結果
ＮＣＩ−Ｈ１８７細胞を、１μＭおよび１０μＭの濃度のペプチドＨ１４とともにインキュベートした。
【０２２８】
応答を２つのインキュベーション時間（６時間および１２時間）において測定した。Ｈ１４は、両方のインキュベーション時間において試験された細胞株中でアポトーシスを誘導し、切断されるＰａｒｐタンパク質の量は、濃度と一致して増大することが分かった（図１参照）。
【０２２９】
ＮＣＩ−Ｈ５１０Ａ細胞を、１μＭおよび１０μＭの濃度のペプチド−Ｈ１４とともにインキュベートした。
応答を６時間のインキュベーション時間後に測定した。Ｈ１４は、試験された細胞株中でアポトーシスを誘導し、活性化カスパーゼ−３の量をペプチドの濃度と一致して増大させることが分かった（図２参照）。
【０２３０】
２．４．  安定性試験
実験データは以下の表１１にまとめられる。
【０２３１】
【表１１】
2020528458.tif 000046
上記のデータから、本発明のペプチドは、ヒト血漿中において高い半減期および安定性を有すると結論付けることができる。
【０２３２】
２．５  インビボでの有効性結果
腫瘍成長
表１２に見られるように、Ｈ１４は、対照と比べて腫瘍成長を有意に低減させた。特に、終了時間（対照が屠殺された際）において、腫瘍低減は７０％に相当する。
【０２３３】
【表１２】
2020528458.tif 000047
これらの結果から導かれるように、Ｈ１４ペプチドの投与は、がん進行を減速させる。したがって、Ｈ１４は、単独で、またはさらには化学もしくは放射線療法と組み合わせて、抗がん薬として使用され得ると結論付けることができる。
【０２３４】
以上で提供された結果を考慮して、インビトロで試験され、活性である他のペプチドは、Ｈ１４と同じ手法で働くことが期待される。
完全性を理由として、本発明の種々の態様が、下記の番号付けされた条項に提示される。
条項１．式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩：
【０２３５】
【化３３】
2020528458.tif 000048
【０２３６】
［式中、
「ｍ」、「ｎ」、「ｐ」および「ｑ」は、整数を表し、０および１から選択され、
「ｒ」は、１から１０までで構成され、
ペプチドは、
−  式（Ｉ）のペプチド配列における「ｉ」位に位置するアミノ酸のアルファ炭素原子を、式（Ｉ）のペプチド配列における「ｉ＋３」または「ｉ＋７」位に位置するアミノ酸のアルファ炭素原子と連結している、式（ＩＩ）のリンカービルラジカル（ｂｉｒｒａｄｉｃａｌ）
−［（Ｒ１）ａ−（Ｒ２）−（Ｒ３）ｂ］ｃ−（ＩＩ）、
−  −Ｃ（Ｏ）Ｒ４に対応するＣ末端、および
−  −ＮＨＲ５に対応するＮ末端
を含み、ここで、
「ａ」および「ｂ」は、同じであるかまたは異なっており、０または１であり、
「ｃ」は、１から１０までで構成され、
Ｒ１およびＲ３は、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル；ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、−ＯＲ６、−ＮＲ７Ｒ８、−ＳＲ９、−ＳＯＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１１および−ＣＯ２Ｒ１２からなる群から選択される１個または複数のラジカルによって置換されている（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル；（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル；ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、−ＯＲ６、−ＮＲ７Ｒ８、−ＳＲ９、−ＳＯＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１１および−ＣＯ２Ｒ１２からなる群から選択される１個または複数のラジカルによって置換されている（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル；（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル；ならびに、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、−ＯＲ６、−ＮＲ７Ｒ８、−ＳＲ９、−ＳＯＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１１および−ＣＯ２Ｒ１２からなる群から選択される１個または複数のラジカルによって置換されている（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から独立して選択されるビルラジカルであり、
Ｒ２は、−Ｏ−、Ｃ（＝Ｏ）、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１３、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｓ（＝Ｏ）、Ｓ（＝Ｏ）２、ＮＲ１４、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル、−ＮＲ１５−ＮＲ１６−、−Ｎ＝Ｎ−、−Ｓ−Ｓ−、および１から３個までの環を含む、３から１４員までを含む公知の環系からなる群から選択されるビルラジカルであり、ここで、
環の各１個は、飽和、部分不飽和または芳香族であり、
環は、単離されているか、部分的にまたは完全に縮合しており、
公知の環系を形成する員の各１個は、−ＣＨ−、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−Ｎ−、−ＳＨ−、−Ｓ−および−Ｏ−からなる群から選択され、
環系は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＯ２、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ１０）ハロアルキルおよび（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル−Ｏ−からなる群から独立して選択される１個または複数のラジカルによって置換されていてもよく、
Ｒ４は、−ＯＨおよび−ＮＲ１７Ｒ１８からなる群から選択されるラジカルであり、
Ｒ５は、−Ｈおよび（Ｃ１〜Ｃ２０）アルキルからなる群から選択されるラジカルであり、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７およびＲ１８は、−Ｈおよび（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルからなる群から独立して選択されるラジカルであり、
リンカーによって連結されているアミノ酸は、式（ＩＩＩ）
【０２３７】
【化３４】
2020528458.tif 000049
【０２３８】
｛式中、
Ｒ１９は、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニル、および１から３個までの環を含む、３から１４員までを含む公知の環系からなる群から選択されるモノラジカルであり、ここで、
環の各１個は、飽和、部分不飽和または芳香族であり、
環は、単離されているか、部分的にまたは完全に縮合しており、
公知の環系を形成する員の各１個は、−ＣＨ−、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−Ｎ−、−ＳＨ−、−Ｓ−および−Ｏ−からなる群から選択される｝
のものである］。
【０２３９】
条項２．「ｒ」、「ａ」、「ｂ」および「ｃ」が、１である、条項１に従う式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩。
条項３．Ｒ１およびＲ３が、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルおよび（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から独立して選択されるビルラジカルである、条項１または２に従う式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩。
【０２４０】
条項４．Ｒ２が、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルおよび（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から選択されるビルラジカルである、条項１から３のいずれか一項に従う式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩。
【０２４１】
条項５．Ｒ１９が、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルおよび（Ｃ２〜Ｃ１０）アルキニルからなる群から選択されるモノラジカルである、条項１から４のいずれか一項に従う式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩。
【０２４２】
条項６．Ｒ１、Ｒ３およびＲ１９が、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキルであり、Ｒ２が、（Ｃ２〜Ｃ１０）アルケニルであり、「ｍ」および「ｎ」が、同じであり、「ｐ」および「ｑ」が、同じである、条項１から５のいずれか一項に従う式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩。
【０２４３】
条項７．Ｃ末端が、−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２に対応し、Ｎ末端が、−ＮＨ２に対応する、条項１から６のいずれか一項に従う式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩。
【０２４４】
条項８．式（Ｉａ）または（Ｉｂ）：
Ｉａ：
【０２４５】
【化３５】
2020528458.tif 000050
【０２４６】
Ｉｂ：
【０２４７】
【化３６】
2020528458.tif 000051
［式中、「ｍ」、「ｎ」、「ｐ」、「ｑ」、ＬおよびＲ１９は、上記で定義されている通りである］
のものである、条項１から７のいずれか一項に従う式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩。
【０２４８】
条項９．配列番号２、３および４からなる群から選択される、条項１から８のいずれか一項に従う式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩。
条項１０．標識または薬物とコンジュゲートされた、条項１から９のいずれか一項に従う式（Ｉ）のペプチドまたはその薬学的塩。
【０２４９】
条項１１．条項１から１０のいずれか一項で定義されているペプチド、および、場合により、細胞透過性ペプチドを含む、融合タンパク質。
条項１２．治療有効量の、条項１〜１０のいずれか一項で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または条項１１で定義されている融合タンパク質を、許容される医薬賦形剤および／または担体と一緒に含む、医薬組成物。
【０２５０】
条項１３．医薬としての使用のための、条項１〜１０のいずれか一項で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または条項１１で定義されている融合タンパク質。
条項１４．がんの治療における使用のための、条項１〜１０のいずれか一項で定義されているペプチドもしくはその薬学的塩または条項１１で定義されている融合タンパク質。
【０２５１】
条項１５．がんが、白血病、乳がん、膠芽腫および肺がんからなる群から選択される、条項１４に従う使用のための、ペプチドまたはその薬学的塩。
引用一覧
Altschul et al., "Basic local alignment search tool", 1990, J. Mol. Biol, v. 215, pages 403-410;
Copolovici D. M. et al., "Cell-Penetrating Peptides: Design, Synthesis, and Applications", 2014, ACS Nano, 2014, 8 (3), pp 1972-1994;
Higgins et al., "CLUSTAL V: improved software for multiple sequence alignment", 1992, CABIOS, 8(2), pages 189-191; 
Kim Young-Woo et al., "Synthesis of all-hydrocarbon stapled a-helical peptides by ring-closing olefin metathesis", Nature Protocols, 2011, 6(6), p. 761-771; 
Kolb H.C. et al., "The growing impact of click chemistry on drug discovery", 2003, Drug Discov Today, 8(24):1128-1137); and
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【図１】
2020528458.tif 000065
【図２】
2020528458.tif 000066
【国際調査報告】
2020528458.tif 000067
2020528458.tif 000068
2020528458.tif 000069