(57)【要約】本出願は、ＣＤ８０（Ｂ７−１）細胞外ドメイン（ＥＣＤ）ポリペプチド及びＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の使用ならびにセントラルメモリーＴ細胞の数を増やす方法またはがんの治療方法またはがんワクチン組成物での使用方法におけるそれらの使用に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象にてＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）融合分子の活性を決定する方法であって、
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を前記対象に投与した後、前記対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定すること及び／またはセントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することを含み、
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子がヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドとヒトＩｇＧ１のＦｃドメインとを含む、前記方法。
【請求項２】
対象にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度及び／または増殖を検出する方法であって、
（ａ）ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を前記対象に投与した後、前記対象から試料を得ることと、
（ｂ）前記試料にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定し、及び／またはセントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することとを含み、
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子がヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドとヒトＩｇＧ１のＦｃドメインとを含む、前記方法。
【請求項３】
前記試料にてセントラルメモリーＴ細胞の前記頻度を決定し、及び／またはセントラルメモリーＴ細胞の前記増殖を検出した後、前記対象にＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を投与することをさらに含む請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記対象ががんを有する請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
対象にてがんを治療する方法であって、
（ａ）ヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドとヒトＩｇＧ１のＦｃドメインとを含むＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を前記対象に投与することと、
（ｂ）投与の後、前記対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定し、及び／またはセントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することとを含む、前記方法。
【請求項６】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与に先立って、前記対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の前記頻度を決定すること、またはセントラルメモリーＴ細胞の前記増殖を検出することをさらに含む請求項５に記載の方法。
【請求項７】
セントラルメモリーＴ細胞の前記頻度を決定することを含むが、セントラルメモリーＴ細胞の前記増殖を検出することを含まない請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
セントラルメモリーＴ細胞の前記増殖を検出することを含むが、セントラルメモリーＴ細胞の前記頻度を決定することを含まない請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
セントラルメモリーＴ細胞の前記頻度を決定することと、セントラルメモリーＴ細胞の前記増殖を検出することとを含む請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記頻度がフローサイトメトリーを用いて決定される請求項１〜７及び９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記増殖がフローサイトメトリーを用いて検出される請求項１〜６、８及び９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記増殖がＫｉ６７の発現を測定することによって検出される請求項１〜６、８、９及び１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与の少なくとも７日後に得られる試料にて前記増殖が検出される請求項１〜６、８、９、１１及び１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
対象にてがんを治療する方法であって、
ヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドとヒトＩｇＧ１のＦｃドメインとを含むＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を前記対象に投与することを含み、
（ａ）前記投与に先立って前記対象から得られる試料にてメモリーＴ細胞の前記頻度が決定されている、及び／または
（ｂ）前記投与に先立って前記対象から得られる試料にてメモリーＴ細胞の前記増殖が検出されている、前記方法。
【請求項１５】
メモリーＴ細胞の前記頻度が決定されているが、メモリーＴ細胞の前記増殖が検出されていない請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
メモリーＴ細胞の前記増殖が検出されているが、メモリーＴ細胞の前記頻度が決定されていない請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
メモリーＴ細胞の前記頻度が決定されている、且つメモリーＴ細胞の前記増殖が検出されている請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記頻度がフローサイトメトリーを用いて決定されている請求項１４、１５及び１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記増殖がフローサイトメトリーを用いて検出されている請求項１４、１６及び１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記増殖がＫｉ６７の発現を測定することによって決定されている請求項１４、１６１７及び１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与の少なくとも７日後に得られる試料にて前記増殖が検出されている請求項１４、１６、１７、１９及び２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記試料が血液試料である請求項１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記試料が血漿試料である請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記セントラルメモリーＴ細胞がＣＤ９５＋及びＣＤ２８＋細胞である請求項１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記セントラルメモリーＴ細胞がＣＤ４＋セントラルメモリーＴ細胞である請求項１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記セントラルメモリーＴ細胞がＣＤ８＋セントラルメモリーＴ細胞である請求項１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記セントラルメモリーＴ細胞がＣＤ４＋及びＣＤ８＋セントラルメモリーＴ細胞である請求項１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与後に得られる前記試料が前記投与の少なくとも１週間後に得られる請求項１〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与後に得られる前記試料が前記投与の少なくとも２週間後に得られる請求項１〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与後に得られる前記試料が前記投与の少なくとも１ヵ月後に得られる請求項１〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記ヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドが配列番号５のアミノ酸配列を含む請求項１〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記ヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドが配列番号３のアミノ酸配列を含む請求項１〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記ヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドが配列番号４のアミノ酸配列を含む請求項１〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインが配列番号１４のアミノ酸配列を含む請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が配列番号２０のアミノ酸配列を含む請求項１〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が配列番号２１のアミノ酸配列を含む請求項１〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が１０〜６０分子のシアル酸（ＳＡ）を含む請求項１〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が１５〜４０分子のＳＡを含む請求項１〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が１５〜２５分子のＳＡを含む請求項１〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が１５〜３０分子のＳＡを含む請求項１〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
前記がんが固形腫瘍である請求項４〜４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
前記がんが、結腸直腸癌、乳癌、胃癌、非小細胞肺癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌、卵巣癌、膵臓癌、腎細胞癌、肝細胞癌、膀胱癌及び子宮内膜癌から成る群から選択される請求項４〜４１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
前記がんが、外科手術、化学療法、放射線療法、及びそれらの組み合わせから成る群から選択される治療法ののち再発性または進行性である請求項４〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が、プログラム細胞死１（ＰＤ−１）／プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）阻害剤との併用で投与される請求項１〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
前記ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤が抗体である請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤が抗ＰＤ−１抗体である請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記抗ＰＤ−１抗体が、ニボルマブ、ピジリズマブ、またはペムブロリズマブの重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含む請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記抗ＰＤ−１抗体が、ニボルマブ、ピジリズマブ、またはペムブロリズマブの前記重鎖及び軽鎖の可変領域を含む請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記抗ＰＤ−１抗体が、ニボルマブ、ピジリズマブ、またはペムブロリズマブである請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記抗ＰＤ−１抗体が抗ＰＤ−Ｌ１抗体である請求項４５に記載の方法。
【請求項５１】
前記ＰＤ−Ｌ１抗体がアベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９の重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含む請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記抗ＰＤ−Ｌ１抗体がアベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９の前記重鎖及び軽鎖の可変領域を含む請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記抗ＰＤ−Ｌ１抗体がアベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９である請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤がＰＤ−１融合分子である請求項４４に記載の方法。
【請求項５５】
前記融合分子がＡＭＰ−２２４である請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤がＡＵＲ−０１２である請求項４４に記載の方法。
【請求項５７】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子ががんワクチンとの併用で投与される請求項１〜５６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５８】
前記がんワクチンが個別化がんワクチンである請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子及び前記がんワクチンが同時にまたは順に投与される請求項５７または５８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出されている、且つ全体として参照によって本明細書に組み入れられる配列表を含有する。２０１８年４月２６日に作られた配列表の前記ＡＳＣＩＩコピーは３９８６．００７ＰＣ０１＿ＳｅｑｕｅｎｃｅＬｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５.ｔｘｔと名付けられ、６０，２９６バイトのサイズである。
【０００２】
分野
本出願は、ＣＤ８０（Ｂ７−１）細胞外ドメイン（ＥＣＤ）ポリペプチドと、ＣＤ８０−ＥＣＤ融合分子と、セントラルメモリーＴ細胞を増やすこと及びたとえば、がんを治療する方法のような治療方法におけるそれらの使用とに関する。
【背景技術】
【０００３】
Ｂ７−１としても知られるＣＤ８０は、そのリガンド結合活性を介して共刺激性または共抑制性の反応を送達することによって免疫調節に関与する膜結合タンパク質のＢ７ファミリーの１つである。Ｂ７ファミリーのタンパク質の他のメンバーには、ＣＤ８６（Ｂ７−２）、誘導性共刺激因子リガンド（ＩＣＯＳ−Ｌ）、プログラム死−１リガンド（ＰＤ−Ｌ１、Ｂ７−Ｈ１）、プログラム死−２リガンド（ＰＤ−Ｌ２、Ｂ７−Ｈ２）、
Ｂ７−Ｈ３、及びＢ７−Ｈ４が挙げられる。ＣＤ８０はＴ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞及び単球の表面上で発現される膜貫通タンパク質であり、受容体ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４（ＣＤ１５２）及びＰＤ−Ｌ１に結合する（たとえば、Ｍ．Ｃｏｌｌｉｎｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｅ  Ｂｉｏｌ．６：２２３  ｄｏｉ：１０．１１８６／ｂｇ−２００５−６−６−２２３（２００５）を参照のこと）。ＣＤ８０及びＣＤ８６及びそれらの受容体ＣＴＬＡ４及びＣＤ２８は共刺激・共抑制系として作動し、たとえば、Ｔ細胞の活性化、増加、分化及び生存を制御する。ＣＤ８０及びＣＤ８６のＣＤ２８との相互作用は、たとえば、Ｔ細胞応答の活性化をもたらす共刺激性シグナルを生じる。次にＣＤ８０はＣＴＬＡ４の上方調節を刺激し、ＣＴＬＡ４はＣＤ８０に結合する際、ＣＤ８０／ＣＤ２８の相互作用によって予め誘発されたＴ細胞応答を抑制するように作用する。このフィードバックループは免疫応答の微調整を可能にする（たとえば、Ｒ．Ｐｅａｃｈ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０（３６）：２１１８１−８７（１９９５）を参照のこと）。
【０００４】
ＣＤ８０はまた、ＣＤ２８との類似の親和性で別のＢ７ファミリーメンバーであるＰＤ−Ｌ１と相互作用することも示されている一方で、ＣＤ８６はＰＤ−Ｌ１と相互作用しない（たとえば、Ｐ．Ｇｒｅａｖｅｓ及びＪ．Ｇ．Ｇｒｉｂｂｏｎ，Ｂｌｏｏｄ，１２１（５）：７３４−４４（２０１３）を参照のこと）。ＰＤ−Ｌ１は、Ｔ細胞の調節にも関与するプログラム死−１（ＰＤ−１）タンパク質の２つのリガンドのうちの１つである。具体的には、Ｔ細胞上でのＰＤ−１の発現はＴ細胞が活性化された後に誘導されてもよく、ＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１の結合はＴ細胞の不活化を促進することによってＴ細胞の活性を下方調節する（たとえば、Ｓ．Ｏｓｔｒａｎｄ−Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９３：３８３５−４１（２０１４）を参照のこと）。多数の腫瘍細胞はその表面にＰＤ−Ｌ１を発現させており、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１の相互作用及び腫瘍に対するＴ細胞応答の阻害をもたらす可能性がある。この所見は、患者にて腫瘍に対する自然免疫応答を刺激するように考案されるがん治療剤としてのＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の阻害剤の開発につながっている（同文献を参照のこと）。ＣＤ８０のＰＤ−Ｌ１への結合は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１の相互作用を阻止し、腫瘍の部位でのＴ細胞応答の抑制を阻む代替メカニズムとして役立ってもよい（３８３９での同文献を参照のこと）。しかしながら、同時に、高いレベルのＣＤ８０はＣＤ２８に結合するのに及びＣＴＬＡ４を誘導するのに利用できてもよく、従ってＴ細胞応答を誘導するまたは阻害する。ＣＤ８０の一部の可溶性形態は内在性ＣＤ８０の活性を遮断することによってＣＴＬＡ４の活性化を阻止するように機能してもよい（同文献を参照のこと）。
本発明者らは、ＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）融合ポリペプチドのカニクイザルへの投与が用量依存性にＣＤ４＋及びＣＤ８＋セントラルメモリーＴ細胞の増加及び増殖を誘導したことを示している。メモリーＴ細胞は、これまでの特定の抗原と遭遇によりそれらの抗原に向けられるＴ細胞のサブセットである。メモリーＴ細胞の存在は、それが今後再び遭遇すると抗原に対するさらに強力でさらに素早い免疫応答を可能にすることができる。セントラルメモリーＴ細胞（Ｔｃｍ）は一部の幹細胞様の特性を保持してもよいメモリーＴ細胞のサブセットである（Ｙ．Ｄ．Ｍａｈｎｋｅ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４３：２７９７−２８０９（２０１３）を参照のこと）。Ｔｃｍの特定のサブセットは、マウスの試験にて、たとえば、マウスがこれまでに遭遇した腫瘍抗原を再び提示されると活発な腫瘍抗原リコール応答を開始する、特定のがんに対して活性があることが示されている（Ｋｌｅｂａｎｏｆｆ，ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ，１０２（２７：９５７１−７６（２００５）を参照のこと）。抗ＣＴＬＡ４抗体であるイピリムマブに関する臨床試験は、抗体治療に応答性である患者におけるＴ細胞集団での変化も示している（Ｊ．Ｆｅｌｉｘ，ｅｔ  ａｌ．，Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，５（７）：ｅ１１３６０４５（２０１６）；Ｊ．Ｓ．Ｗｅｂｅｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３５（１）：８９−９７（２０１２））。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｐ．Ｇｒｅａｖｅｓ及びＪ．Ｇ．Ｇｒｉｂｂｏｎ，Ｂｌｏｏｄ，１２１（５）：７３４−４４（２０１３）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本明細書で提供されるのは、ＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）融合分子を対象に投与した後、対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定すること及び／またはセントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することを含む、対象にてＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の活性を決定する方法であり、その際、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドとヒトＩｇＧ１のＦｃドメインとを含む。
【０００７】
本明細書で提供されるのはまた、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を対象に投与した後に、対象から得た試料にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定すること及び／またはセントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することを含む、対象にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度または増殖を検出する方法であり、その際、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドとヒトＩｇＧ１のＦｃドメインとを含む。
【０００８】
本明細書で提供されるのはまた、（ａ）ＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）融合分子を対象に投与した後、対象から試料を得ることと、（ｂ）試料にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定すること及び／または試料にてセントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することとを含む、対象にてＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の活性を決定する方法であり、その際、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドとヒトＩｇＧ１のＦｃドメインとを含む。
【０００９】
本明細書で提供されるのはまた、（ａ）ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を対象に投与した後、対象から試料を得ることと、（ｂ）試料にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定すること及び／またはセントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することとを含む、対象にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度または増殖を検出する方法であり、その際、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドとヒトＩｇＧ１のＦｃドメインとを含む。
【００１０】
場合によっては、方法はさらに、試料にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定し、及び／またはセントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出した後、対象にＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を投与することを含む。場合によっては、対象はがんを有する。
【００１１】
本明細書で提供されるのはまた、（ａ）ヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドとヒトＩｇＧ１のＦｃドメインとを含むＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を対象に投与することと、（ｂ）投与後、対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定すること及び／またはセントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することを含む、対象にてがんを治療する方法である。
【００１２】
場合によっては、方法はさらに、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与に先立って対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定すること、またはセントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することを含む。
【００１３】
場合によっては、方法は、セントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定することを含むが、セントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することを含まない。場合によっては、方法は、セントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することを含むが、セントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定することを含まない。場合によっては、方法は、セントラルメモリーＴ細胞の頻度を決定することと、セントラルメモリーＴ細胞の増殖を検出することとを含む。
【００１４】
場合によっては、頻度はフローサイトメトリーを用いて決定される。
【００１５】
場合によっては、増殖はフローサイトメトリーを用いて検出される。場合によっては、増殖はＫｉ６７の発現を測定することによって検出される。場合によっては、増殖は、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与の少なくとも７日後に得られる試料で検出される。
【００１６】
本明細書で提供されるのはまた、ヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドとヒトＩｇＧ１のＦｃドメインとを含むＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を対象に投与することを含む、対象にてがんを治療する方法であり、その際、（ａ）メモリーＴ細胞の頻度は投与に先立って対象から得られた試料にて測定されており、及び／または（ｂ）メモリーＴ細胞の増殖は投与に先立って対象から得られた試料にて検出されている。
【００１７】
場合によっては、メモリーＴ細胞の頻度は決定されているが、メモリーＴ細胞の増殖は検出されていない。場合によっては、メモリーＴ細胞の増殖は検出されているが、メモリーＴ細胞の頻度は決定されていない。場合によっては、メモリーＴ細胞の頻度は決定されており、且つメモリーＴ細胞の増殖は検出されている。
【００１８】
場合によっては、頻度はフローサイトメトリーを用いて決定されている。
【００１９】
場合によっては、増殖はフローサイトメトリーを用いて検出されている。場合によっては、増殖はＫｉ６７の発現を測定することによって決定されている。場合によっては、増殖は、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与の少なくとも７日後に得られた試料で検出されている。
【００２０】
場合によっては、試料は血液試料である。場合によっては、試料は血漿試料である。
【００２１】
場合によっては、セントラルメモリーＴ細胞はＣＤ９５＋及びＣＤ２８＋細胞である。場合によっては、セントラルメモリーＴ細胞はＣＤ４＋セントラルメモリーＴ細胞である。場合によっては、セントラルメモリーＴ細胞はＣＤ８＋セントラルメモリーＴ細胞である。場合によっては、セントラルメモリーＴ細胞はＣＤ４＋及びＣＤ８＋セントラルメモリーＴ細胞である。
【００２２】
場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与後に得られる試料は投与の少なくとも１週間後に得られる。場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与後に得られる試料は投与の少なくとも２週間後に得られる。場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与後に得られる試料は投与の少なくとも１ヵ月後に得られる。
【００２３】
場合によっては、ヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドは配列番号５のアミノ酸配列を含む。場合によっては、ヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドは配列番号３のアミノ酸配列を含む。場合によっては、ヒトＣＤ８０  ＥＣＤポリペプチドは配列番号４のアミノ酸配列を含む。
【００２４】
場合によっては、ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインは配列番号１４のアミノ酸配列を含む。
【００２５】
場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は配列番号２０のアミノ酸配列を含む。場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は配列番号２１のアミノ酸配列を含む。
【００２６】
場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は１０〜６０分子のシアル酸（ＳＡ）を含む。場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は１５〜４０分子のＳＡを含む。場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は１５〜２５分子のＳＡを含む。場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は１５〜３０分子のＳＡを含む。
【００２７】
場合によっては、がんは固形腫瘍である。場合によっては、がんは、結腸直腸癌、乳癌、胃癌、非小細胞肺癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌、卵巣癌、膵臓癌、腎細胞癌、肝細胞癌、膀胱癌、及び子宮内膜癌から成る群から選択される。場合によっては、がんは、外科手術、化学療法、放射線療法、及びそれらの組み合わせから成る群から選択される治療法の後、再発性または進行性である。
【００２８】
場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、プログラム細胞死１（ＰＤ−１）／プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）阻害剤との併用で投与される。場合によっては、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は抗体である。場合によっては、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は抗ＰＤ−１抗体である。場合によっては、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブ、ピジリズマブまたはペムブロリズマブの重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含む。場合によっては、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブ、ピジリズマブまたはペムブロリズマブの重鎖及び軽鎖の可変領域を含む。場合によっては、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブ、ピジリズマブまたはペムブロリズマブである。場合によっては、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。場合によっては、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９の重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含む。場合によっては、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９の重鎖及び軽鎖の可変領域を含む。場合によっては、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９である。場合によっては、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤はＰＤ−１融合分子である。場合によっては、融合分子はＡＭＰ−２２４である。場合によっては、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤はＡＵＲ−０１２である。
【００２９】
場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はがんワクチンとの併用で投与される。場合によっては、がんワクチンは個別化がんワクチンである。場合によっては、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子及びがんワクチンは同時にまたは順に投与される。
【００３０】
本開示は、ＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）またはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を投与することを含む、それを必要とする対象にてがんを治療する方法を包含し、その際、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は対象にてセントラルメモリーＴ細胞の数を増やすのに有効な量で投与される。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞の数は少なくとも１週間、少なくとも２週間、または少なくとも１ヵ月増加する。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞の数は対象の血液試料または血漿試料で決定される。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞はＣＤ９５＋及びＣＤ２８＋細胞である。本開示はまた、（ａ）ＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）またはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を対象に投与することと、（ｂ）ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与後、対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の濃度を決定することとを含む、それを必要とする対象にてがんを治療する方法も包含する。一部の実施形態では、方法はさらに、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与に先立って対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の濃度を決定することを含む。一部の実施形態では、方法はさらに、投与後に得られる試料におけるセントラルメモリーＴ細胞の濃度が投与に先立って得られる試料におけるセントラルメモリーＴ細胞の濃度よりも高くなければ、対象に投与されるＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の用量または頻度を増やすことを含む。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞の濃度を決定するための試料は血液試料または血漿試料である。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞はＣＤ９５＋及びＣＤ２８＋細胞である。
【００３１】
本開示はまた、ＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）またはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を投与することを含む、それを必要とする対象にてセントラルメモリーＴ細胞の数を増やす方法も包含し、その際、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は対象にてセントラルメモリーＴ細胞の数を増やすのに有効な量で投与される。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞の数は少なくとも１週間、少なくとも２週間、または少なくとも１ヵ月増加する。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞の数は対象の血液試料または血漿試料で決定される。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞はＣＤ９５＋及びＣＤ２８＋細胞である。
【００３２】
本開示はまた、（ａ）ＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）またはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を対象に投与することと、（ｂ）ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与後、対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の濃度を決定することとを含む、それを必要とする対象にてセントラルメモリーＴ細胞の数を増やす方法も包含する。一部の実施形態では、方法はさらに、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与に先立って対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の濃度を決定することを含む。一部の実施形態では、方法はさらに、投与後に得られる試料におけるセントラルメモリーＴ細胞の濃度が投与に先立って得られる試料におけるセントラルメモリーＴ細胞の濃度よりも高くなければ、対象に投与されるＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の用量または頻度を増やすことを含む。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞の濃度を決定するための試料は血液試料または血漿試料である。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞はＣＤ９５＋及びＣＤ２８＋細胞である。
【００３３】
本開示はまた、対象、たとえば、がんの対象にてセントラルメモリーＴ細胞を検出する方法も包含し、該方法は、たとえば、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を対象に投与した後、対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の濃度を決定することを含む。
【００３４】
上記方法の一部では、ＣＤ８０  ＥＣＤが投与される。他の方法では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が投与される。どちらにせよ、一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたは融合分子のＣＤ８０  ＥＣＤ部分は（ａ）配列番号１のアミノ酸３５〜末端、（ｂ）配列番号３、（ｃ）配列番号４及び（ｄ）配列番号５から選択されるアミノ酸配列を含む。
【００３５】
一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が投与される場合、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はＦｃドメインを含む融合相手を含む。一部の実施形態では、ＦｃドメインはヒトＩｇＧ１のＦｃドメインである。一部の実施形態では、Ｆｃドメインは配列番号１４のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は配列番号２０または配列番号２１の配列を含む。
【００３６】
上記方法の一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤはタンパク質の１モルに対して１０〜６０モルのシアル酸（ＳＡ）、タンパク質の１モルに対して１５〜４０モルのＳＡ、タンパク質の１モルに対して１５〜２５モルのＳＡ、またはタンパク質の１モルに対して１５〜３０モルのＳＡを含む。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はタンパク質の１モルに対して１０〜６０モルのシアル酸（ＳＡ）、タンパク質の１モルに対して１５〜４０モルのＳＡ、タンパク質の１モルに対して１５〜２５モルのＳＡ、またはタンパク質の１モルに対して１５〜３０モルのＳＡを含む。
【００３７】
本明細書の方法において、一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、プログラム細胞死１（ＰＤ−１）／プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）阻害剤との併用で投与される。一部の実施形態では、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は抗体である。一部の実施形態では、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は抗ＰＤ−１抗体である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブ、ピジリズマブ、またはペムブロリズマブの重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブ、ピジリズマブ、またはペムブロリズマブの重鎖及び軽鎖の可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブ、ピジリズマブ、またはペムブロリズマブである。一部の実施形態では、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９の重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９の重鎖及び軽鎖の可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９である。一部の実施形態では、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤はＰＤ−１融合分子である。一部の実施形態では、融合分子はＡＭＰ−２２４である。一部の実施形態では、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤はＡＵＲ−０１２である。
【００３８】
本明細書の方法の一部の実施形態では、対象はがんを有し、対象のがんは固形腫瘍である。一部の実施形態では、がんは、結腸直腸癌、乳癌、胃癌、非小細胞肺癌、黒色腫、頭頚部の扁平上皮癌、卵巣癌、膵臓癌、腎細胞癌、肝細胞癌、膀胱癌、及び子宮内膜癌から選択される。一部の実施形態では、がんは、外科手術、化学療法、放射線療法、及びそれらの組み合わせから選択される治療法の後、再発性または進行性である。
【００３９】
上記方法の一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はがんワクチンと併用で投与される。一部の実施形態では、がんワクチンは個別化がんワクチンである。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子及びがんワクチンは同時にまたは順に投与される。
【００４０】
本開示はまた、少なくとも１つの腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原と、ＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）またはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子とを含むがんワクチン組成物も包含する。一部の実施形態では、ワクチン組成物はさらに、ワクチンで治療される対象に由来する自己免疫細胞を含む。一部のそのような実施形態では、自己免疫細胞は抗原提示細胞を含む。
【００４１】
前述の一般的な説明及び以下の詳細な説明は双方とも例示及び説明のみであって、特許請求の範囲の制約ではないことが理解されるべきである。本明細書で使用されているセクションの見出しは構成する目的のみのためのものであって、記載されている主題を限定すると解釈されるべきではない。特許出願及び出版物を含む、本明細書で引用されている参考文献はすべて目的に応じて全体として参照によって本明細書に組み入れられる。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】１０ｍｇ／ｋｇ及び５０ｍｇ／ｋｇ用量のヒトＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃ（ｈＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃ）による処理後のカニクイザルにおけるセントラルメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞（ＣＤ４＋Ｔｃｍ）の頻度に上昇があるが、１ｍｇ／ｋｇ用量または溶媒対照による処理後には上昇はないことを示す図である。データはセントラルメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞の投与前頻度の比率（％）として提示する。縦の点線はｈＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃが投与されたタイミングを表す。
【図２】１、１０または５０ｍｇ／ｋｇのｈＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃまたは溶媒対照による処理後のカニクイザルにおけるセントラルメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞（ＣＤ８＋Ｔｃｍ）の頻度の変化を示す図である。データはセントラルメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞の投与前頻度の比率（％）として提示する。縦の点線はｈＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃが投与されたタイミングを表す。
【図３】１、１０または５０ｍｇ／ｋｇのｈＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃまたは溶媒対照による処理後の増殖している（Ｋｉ６７＋）セントラルメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞の変化を示す図である。データはセントラルメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞の投与前平均頻度の比率（％）として提示する。縦の点線はｈＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃが投与されたタイミングを表す。Ｋｉ６７＋ＣＤ４＋Ｔｃｍの最大頻度は第１の投与の７日後に生じた。
【図４】１、１０または５０ｍｇ／ｋｇのｈＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃまたは溶媒対照による処理後の増殖している（Ｋｉ６７＋）セントラルメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞の変化を示す図である。データはセントラルメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞の投与前平均頻度の比率（％）として提示し、平均値＋／−標準偏差として表す。縦の点線はｈＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃが投与されたタイミングを表す。Ｋｉ６７＋ＣＤ８＋Ｔｃｍの最大頻度は第２の投与の７日後に生じた。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
定義
特に定義されない限り、本発明と併せて使用される科学用語及び専門用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有するものとする。さらに、文脈によって特に要求されない限り、単数用語は複数を含むものとし、複数用語は単数を含むものとする。
【００４４】
本出願では、特に言及されない限り、「または」の使用は「及び／または」を意味する。複数の従属クレームの文脈では、「または」の使用は、選択的にのみ１を超える先行する独立クレームまたは従属クレームに戻って参照する。また、「要素」または「成分」のような用語は、具体的に言及されない限り、１を超えるサブユニットを含む１つの単位及び要素及び成分を含む要素及び成分の双方を包含する。
【００４５】
本開示に従って利用されるとき、以下の用語は、特に指示されない限り、以下の意味を有するように理解されるべきである。
【００４６】
用語「ポリペプチド」及び「タンパク質」はアミノ酸残基のポリマーを指すのに相互交換可能に使用され、最小の長さに限定されない。アミノ酸残基のそのようなポリマーは、天然のまたは非天然のアミノ酸残基を含有してもよく、それには、ペプチド、オリゴペプチド、アミノ酸残基の二量体、三量体及び多量体が挙げられるが、これらに限定されない。完全長のタンパク質及びその断片の双方が定義によって包含される。用語にはまた、ポリペプチドの発現後修飾、たとえば、グリコシル化、シアル化、アセチル化、リン酸化、等も含まれる。さらに、本発明の目的では、「ポリペプチド」は、タンパク質が所望の活性を維持する限り、ネイティブの配列に対する欠失、付加及び置換（一般に自然界で保存的な）のような修飾を含むタンパク質を指す。これらの修飾は、部位特異的変異誘発を介するように意図的であってもよいし、またはタンパク質を産生する宿主の突然変異もしくはＰＣＲ増幅によるエラーを介するように偶然であってもよい。
【００４７】
「融合分子」は本明細書で使用されるとき、共有結合または非共有結合して新しい分子を形成する自然界では一緒に存在しない２以上の異なる分子で構成される分子を指す。たとえば、融合分子は、ポリペプチドとＰＥＧのようなポリマーとで、または２つの異なるポリペプチドで構成されてもよい。「融合タンパク質」は自然界では単一分子で存在しない２以上のポリペプチドで構成される融合分子を指す。
【００４８】
「ＣＤ８０細胞外ドメイン」または「ＣＤ８０  ＥＣＤ」はその天然の変異体及び操作された変異体を含む、ヒトＣＤ８０の細胞外ドメインポリペプチドを指す。「ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子」はＣＤ８０  ＥＣＤと、たとえば、Ｆｃドメイン、アルブミン、またはＰＥＧのような融合相手とを含む分子を指す。融合相手は、たとえば、ＣＤ８０  ＥＣＤのＮ末端またはＣ末端に、または内部の位置で共有結合してもよい。
【００４９】
本明細書で使用されるとき、「セントラルメモリーＴ細胞」または「Ｔｃｍ」はＣＤ９５＋及びＣＤ２８＋、ＣＤ９５＋及びＣＤ２７＋として、またはＣＤ９５＋、ＣＤ２８＋、及びＣＤ２７＋として同定されるＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋Ｔ細胞を含むＴ細胞を指す。
【００５０】
用語「プログラム細胞死タンパク質１」及び略語「ＰＤ−１」及び「ＰＤ１」はＣＤ２８ファミリーに属する免疫抑制性受容体である完全長成熟ヒトＰＤ−１タンパク質を指す。
【００５１】
用語「プログラム細胞死１リガンド１」及び「ＰＤ−Ｌ１」（ＰＤ−Ｌ１；Ｂ７ホモログ-１；Ｂ７−Ｈ１；またはＣＤ２７４）及び「プログラム細胞死リガンド２」（ＰＤ−Ｌ２；Ｂ７−ＤＣまたはＣＤ２７３）は、ＰＤ−１に結合する際、Ｔ細胞の活性化及びサイトカイン分泌を下方調節するＰＤ−１のための２つの細胞表面糖タンパク質リガンドである。用語「ＰＤ−Ｌ１」は本明細書で使用されるとき、具体的に言及されない限り、完全長の成熟ヒトＰＤ−Ｌ１を指す。
【００５２】
用語「免疫刺激剤」は本明細書で使用されるとき、共刺激分子を含む免疫刺激分子のアゴニストとして作用すること、または共抑制分子を含む免疫抑制分子のアンタゴニストとして作用することによって免疫系を刺激する分子を指す。免疫刺激剤は、生物製剤、たとえば、抗体または抗体断片、他のタンパク質、もしくはワクチンであってもよく、または小分子薬剤であってもよい。「免疫刺激分子」には、免疫応答を高める、刺激する、誘導するまたはさもなければ「作動させる」ように作用する受容体またはリガンドが含まれる。本明細書で定義されているような免疫刺激分子には共刺激分子が挙げられる。「免疫抑制分子」には、免疫応答を減らす、抑制する、抑えるまたはさもなければ「止める」ように作用する受容体またはリガンドが含まれる。本明細書で定義されているような免疫抑制分子には共抑制分子が挙げられる。そのような免疫刺激分子及び免疫抑制分子は、たとえば、Ｔ細胞のような免疫細胞で見いだされる、またはＮＫ細胞のような自然免疫に関与する細胞で見いだされる受容体またはリガンドであってもよい。
【００５３】
用語「ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤」はＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１のシグナル伝達経路を破壊する部分を指す。一部の実施形態では、阻害剤はＰＤ−１及び／またはＰＤ−Ｌ１に結合することによってＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１のシグナル伝達経路を阻害する。一部の実施形態では、阻害剤はＰＤ−Ｌ２にも結合する。一部の実施形態では、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤はＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２への結合を阻止する。非限定の例となるＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤には、ＰＤ−１に結合する抗体、ＰＤ−Ｌ１に結合する抗体、たとえば、ＡＭＰ−２２４のような融合タンパク質、及びＡＵＲ−０１２のようなポリペプチドが挙げられる。
【００５４】
用語「ＰＤ−１を阻害する抗体」はＰＤ−１に結合し、またはＰＤ−Ｌ１に結合し、それによってＰＤ−１及び／またはＰＤ−Ｌ１のシグナル伝達経路を阻害する抗体を指す。一部の実施形態では、ＰＤ−1を阻害する抗体はＰＤ−１に結合し、ＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻止する。一部の実施形態では、ＰＤ−1を阻害する抗体はＰＤ−Ｌ１に結合し、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１への結合を阻止する。ＰＤ−Ｌ１に結合するＰＤ−１を阻害する抗体は抗ＰＤ−Ｌ１抗体と呼ばれてもよい。ＰＤ−１に結合するＰＤ−１を阻害する抗体は抗ＰＤ−１抗体と呼ばれてもよい。
【００５５】
ＣＤ８０  ＥＣＤ及びＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を参照して、用語、リガンド「の結合を阻止する」及びその文法的変形はＣＤ８０と、たとえば、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４またはＰＤ−Ｌ１のようなＣＤ８０リガンドとの間の相互作用を阻害する能力を指す。そのような阻害は、ＣＤ８０リガンドとの結合について競合するＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子によることを含むメカニズムを介して発生してもよい。
【００５６】
抗ＰＤ−１抗体及びＰＤ−１融合分子またはペプチドを参照して、用語、ＰＤ−Ｌ１のようなリガンド「の結合を阻止する」またはその文法的変形を用いてＰＤ−１とたとえば、ＰＤ−Ｌ１のようなＰＤ−１リガンドとの間での相互作用を阻害する能力を指す。そのような阻害は、たとえば、ＰＤ−１上の重複する結合部位のせいでのリガンド結合の直接妨害、及び／またはリガンドの親和性を変化させる抗体によって誘導されるＰＤ−１における立体構造の変化、またはＰＤ−１融合分子もしくはペプチドの場合、ＰＤ−１リガンドとの結合について競合することによることを含む任意のメカニズムを介して発生してもよい。
【００５７】
「親和性」または「結合親和性」は、分子（たとえば、ポリペプチド）の単一の結合部位とその結合相手（たとえば、リガンド）との間での非共有結合性相互作用の総計の強さを指す。一部の実施形態では、「結合親和性」は結合ペア（たとえば、ポリペプチドとリガンド）のメンバー間での１：１の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子Ｘのその相手Ｙに対する親和性は一般に解離定数（Ｋｄ）によって表される。
【００５８】
用語「抗体」は本明細書で使用されるとき、重鎖の少なくとも相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ならびに軽鎖の少なくともＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む分子を指し、その際、分子は抗原に結合することができる。用語、抗体には、抗原を結合することができる断片、たとえば、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、Ｆａｂ’及びＦ（ａｂ’）２が含まれるが、これらに限定されない。用語、抗体には、キメラ抗体、ヒト化抗体、及びマウス、ヒト、カニクイザル、等のような種々の種の抗体も含まれるが、これらに限定されない。
【００５９】
一部の実施形態では、抗体は重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態では、抗体は、重鎖可変領域を含む少なくとも１本の重鎖と、重鎖定常領域の少なくとも一部と、軽鎖可変領域を含む少なくとも１本の軽鎖と、軽鎖定常領域の少なくとも一部とを含む。一部の実施形態では、抗体は２本の重鎖を含み、その際、各重鎖は重鎖可変領域と重鎖定常領域の少なくとも一部とを含み、且つ２本の軽鎖を含み、その際、各軽鎖は軽鎖可変領域と軽鎖定常領域の少なくとも一部とを含む。本明細書で使用されるとき、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）または、たとえば、６つのＣＤＲすべて（３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲ）を含む単一ポリペプチド鎖を含む他の抗体は、重鎖及び軽鎖を有すると見なされる。そのような一部の実施形態では、重鎖は３つの重鎖ＣＤＲを含む抗体の領域であり、軽鎖は３つの軽鎖ＣＤＲを含む抗体の領域内である。
【００６０】
用語「重鎖可変領域」は、重鎖のＨＶＲ１、フレームワーク（ＦＲ）２、ＨＶＲ２、ＦＲ３、及びＨＶＲ３を含む領域を指す。一部の実施形態では、重鎖可変領域はまたＦＲ１の少なくとも一部及び／またはＦＲ４の少なくとも一部も含む。
【００６１】
用語「重鎖定常領域」は少なくとも３つの重鎖定常ドメインＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含む領域を指す。非限定の例となる重鎖定常領域はγ、δ及びαを含む。非限定の例となる重鎖定常領域はε及びμも含む。各重鎖定常領域は抗体のアイソタイプに対応する。たとえば、γ定常領域を含む抗体はＩｇＧ抗体であり、δ定常領域を含む抗体はＩｇＤ抗体であり、α定常領域を含む抗体はＩｇＡ抗体である。さらに、μ定常領域を含む抗体はＩｇＭ抗体であり、ε定常領域を含む抗体はＩｇＥ抗体である。特定のアイソタイプはさらにサブクラスに細分することができる。たとえば、ＩｇＧ抗体には、ＩｇＧ１（γ１定常領域を含む）、ＩｇＧ２（γ２定常領域を含む）、ＩｇＧ３（γ３定常領域を含む）、及びＩｇＧ４（γ４定常領域を含む）抗体が含まれるが、これらに限定されず、ＩｇＡ抗体にはＩｇＡ１（α１定常領域を含む）及びＩｇＡ２（α２定常領域を含む）抗体が含まれるが、これらに限定されず、ＩｇＭ抗体にはＩｇＭ１及びＩｇＭ２が含まれるが、これらに限定されない。
【００６２】
用語「重鎖」はリーダー配列の有無にかかわらず、少なくとも重鎖可変領域を含むポリペプチドを指す。一部の実施形態では、重鎖は重鎖定常領域の少なくとも一部を含む。用語「完全長重鎖」はリーダー配列の有無にかかわらず、重鎖可変領域と重鎖定常領域とを含むポリペプチドを指す。
【００６３】
用語「軽鎖可変領域」は軽鎖のＨＶＲ１と、フレームワーク（ＦＲ）２と、ＨＶＲ２と、ＦＲ３とＨＶＲ３とを含む領域を指す。一部の実施形態では、軽鎖可変領域はＦＲ１及び／またはＦＲ４も含む。
【００６４】
用語「軽鎖定常領域」は軽鎖定常ドメインＣＬを含む領域を指す。非限定の例となる軽鎖定常領域にはλ及びκが含まれる。
【００６５】
用語「軽鎖」はリーダー配列の有無にかかわらず、少なくとも軽鎖可変領域を含むポリペプチドを指す。一部の実施形態では、軽鎖は軽鎖定常領域の少なくとも一部を含む。用語「完全長軽鎖」はリーダー配列の有無にかかわらず、軽鎖可変領域と軽鎖定常領域とを含むポリペプチドを指す。
【００６６】
用語「超可変領域」または「ＨＶＲ」は、配列にて超可変であり、及び／または構造的に定義されたループ（「超可変ループ」）を形成する抗体可変ドメインの領域のそれぞれを指す。一般に、ネイティブの４本鎖の抗体は６つのＨＶＲ；ＶＨにおける３つ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）及びＶＬにおける３つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）を含む。ＨＶＲは一般に超可変ループに由来する及び／または「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）に由来するアミノ酸残基を含み、後者は最高の配列可変性であり、及び／または抗原認識に関与する。例となる超可変ループはアミノ酸残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）、９１〜９６（Ｌ３）、２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）、及び９６〜１０１（Ｈ３）に存在する（Ｃｈｏｔｈｉａ及びＬｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））。例となるＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、及びＣＤＲ−Ｈ３）はＬ１の２４〜３４、Ｌ２の５０〜５６、Ｌ３の８９〜９７、Ｈ１の３１〜３５Ｂ、Ｈ２の５０〜６５、及びＨ３の９５〜１０２のアミノ酸残基に存在する（Ｋａｂａｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１））。用語、超可変領域（ＨＶＲ）及び相補性決定領域（ＣＤＲ）は双方とも、抗原結合領域を形成する可変領域の一部を指す。
【００６７】
「キメラ抗体」は本明細書で使用されるとき、第１の種（たとえば、マウス、ラット、カニクイザル、等）に由来する少なくとも１つの可変領域と、第２の種（たとえば、ヒト、カニクイザル、等）に由来する少なくとも１つの定常領域とを含む抗体を指す。一部の実施形態では、キメラ抗体は少なくとも１つのマウス可変領域と少なくとも１つのヒト定常領域とを含む。一部の実施形態では、キメラ抗体は少なくとも１つのカニクイザル可変領域と少なくとも１つのヒト定常領域とを含む。一部の実施形態では、キメラ抗体は少なくとも１つのラット可変領域と少なくとも１つのマウス定常領域とを含む。一部の実施形態では、キメラ抗体の可変領域のすべては第１の種に由来し、キメラ抗体の定常領域のすべては第２の種に由来する。
【００６８】
「ヒト化抗体」は本明細書で使用されるとき、非ヒト可変領域のフレームワーク領域における少なくとも１つのアミノ酸がヒト可変領域に由来する対応するアミノ酸で置き換えられている抗体を指す。一部の実施形態では、ヒト化抗体は少なくとも１つのヒト定常領域またはその断片を含む。一部の実施形態では、ヒト化抗体はＦａｂ、ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２、等である。
【００６９】
「ヒト抗体」は本明細書で使用されるとき、ヒトで産生される抗体、たとえば、ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）のようなヒト免疫グロブリン遺伝子を含む非ヒト動物で産生される抗体、及びたとえば、ファージディスプレイのような試験管内の方法を用いて選択される抗体を指し、その際、抗体のレパートリーはヒト免疫グロブリンの配列に基づく。
【００７０】
用語「リーダー配列」は、哺乳類細胞からのポリペプチドの分泌を促すポリペプチドのＮ末端に位置するアミノ酸残基の配列を指す。リーダー配列は哺乳類細胞からのポリペプチドの排出の際に切断されてもよく、成熟タンパク質を形成する。リーダー配列は天然であっても、または合成であってもよく、それらはそれらが連結されるタンパク質に対して異種または同種であってもよい。非限定の例となるリーダー配列には、異種タンパク質に由来するリーダー配列も含まれる。一部の実施形態では、抗体はリーダー配列を欠く。一部の実施形態では、抗体は少なくとも１つのリーダー配列を含み、それはネイティブの抗体リーダー配列及び異種のリーダー配列から選択されてもよい。
【００７１】
用語「単離される」は本明細書で使用されるとき、それが通常自然界で一緒に見いだされる成分の少なくとも一部から分離されている分子を指す。たとえば、ポリペプチドが産生された細胞の成分の少なくとも一部からポリペプチドが分離される場合、ポリペプチドは「単離される」と言われる。ポリペプチドが発現の後、細胞によって分泌される場合、それを産生した細胞からポリペプチドを含有する上清を物理的に分離することはポリペプチドを「単離すること」であると見なされる。同様に、ポリヌクレオチドが通常自然界で見いだされるさらに大きなポリヌクレオチド（たとえば、ＤＮＡポリヌクレオチドの場合、ゲノムＤＮＡまたはミトコンドリアＤＮＡ）の一部ではない場合、または、たとえば、ＲＮＡポリヌクレオチドの場合、ポリヌクレオチドが産生された細胞の成分の少なくとも一部からポリヌクレオチドが分離される場合、ポリヌクレオチドは「単離される」と言われる。従って、宿主細胞内でベクターに含有されるＤＮＡポリヌクレオチドは、そのポリヌクレオチドが自然界でそのベクターにて見いだされない限り、「単離された」と見なされてもよい。
【００７２】
用語「減らす（ｒｅｄｕｃｅ）」または「減らす（ｒｅｄｕｃｅｓ）」は、たとえば、腫瘍体積のようなパラメーターに適用される場合、観察でき、測定できる方法でそのパラメーターのレベルを下げることを意味する。一部の実施形態では、減少は代替処理または対照と比べて統計的に有意であってもよい。
【００７３】
用語「高める」または「増やす」は、たとえば、Ｔ細胞の種類のような細胞の種類のようなパラメーターに適用される場合、濃度で高めること（すなわち、たとえば、腫瘍試料の範囲内または血液もしくは血漿の体積の範囲内のような特定の領域の範囲内での数で増やすまたは増殖させること）を意味する。一部の実施形態では、増加は代替処理または対照と比べて統計的に有意であってもよい。
【００７４】
用語「対象」及び「患者」はヒトを指すのに本明細書では相互交換可能に使用される。一部の実施形態では、齧歯類、サル類、ネコ、イヌ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、実験用哺乳動物、産業用哺乳動物、スポーツ用哺乳動物、及び哺乳類ペットを含むが、これらに限定されない他の哺乳類を治療する方法も提供される。
【００７５】
用語「耐性の」または「非応答性の」は治療剤による治療の文脈で使用されるとき、過去での治療剤の標準用量に対する対象の応答に比べて、または治療剤の標準用量に対する類似の疾病の類似の対象の予想される応答に比べて対象が治療剤の標準用量に対する低下した応答または応答の欠如を示すことを意味する。従って、一部の実施形態では、対象は以前治療剤を与えられていないが、対象は治療剤に対して耐性であってもよいし、または対象は１以上の以前の機会に治療剤に応答した後、治療剤に対する耐性を発生させてもよい。
【００７６】
用語「試料」は本明細書で使用されるとき、たとえば、物理的な、生化学的な、化学的な及び／または生理的な特徴に基づいて特徴付けられる、定量される及び／または同定されるべきである細胞実体及び／または他の分子実体を含有する対象から得られるまたは対象に由来する組成物を指す。例となる試料は組織試料である。
【００７７】
用語「組織試料」は対象の組織から得られる類似の細胞の回収を指す。組織試料の供給源は、新鮮な、凍結した及び／または保存した臓器試料もしくは組織試料または生検もしくは吸引物に由来するような固形組織；血液または血液構成成分；たとえば、脳脊髄液、羊水、腹水、滑液、または間質液のような体液；対象の妊娠または発生の任意の時期での細胞であってもよい。一部の実施形態では、組織試料は滑膜生検の組織試料及び／または滑液試料である。一部の実施形態では、組織試料は滑液試料である。組織試料はまた初代細胞または培養細胞または細胞株であってもよい。任意で、組織試料は疾患の組織／臓器から得られる。組織試料は、たとえば、保存剤、抗凝固剤、緩衝液、定着剤、栄養素、抗生剤、等のような自然界で組織と自然に混ざることはない特定の化合物を含有してもよい。「対照試料」または「対照組織」は本明細書で使用されるとき、対象が治療される疾患で苦しめられないことが知られる、またはそう考えられる供給源から得られる試料、細胞または組織を指す。
【００７８】
本明細書の目的で、組織試料の「切片」は組織試料の一部または小片、たとえば、固形組織試料から切り出された組織または細胞の薄い薄片を意味する。
【００７９】
用語「がん」は異常に高いレベルの増殖及び成長を示す細胞の群を指すのに本明細書で使用される。がんは、良性（良性腫瘍とも呼ばれる）、前悪性、または悪性であってもよい。がん細胞は固形がん細胞（すなわち、固形腫瘍）であってもよいし、または血液系（たとえば、白血病またはリンパ腫）がん細胞であってもよい。用語「がん成長」はがんのサイズ及び程度にて相当する増大をもたらすがんを構成する細胞（複数可）による増殖または成長を指すのに本明細書で使用される。
【００８０】
がんの例には、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病が挙げられるが、これらに限定されない。そのようながんのさらに詳しい非限定例には、扁平上皮癌、小細胞肺癌、下垂体癌、食道癌、星状細胞腫、軟組織肉腫、非小細胞肺癌（扁平上皮非小細胞肺癌を含む）、肺の腺腫、肺の扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、消化器癌、膵臓癌、膠芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝癌、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、腎細胞癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、脳腫瘍、子宮内膜癌、精巣癌、胆管癌、胆嚢癌、胃癌、黒色腫、及び種々の頭頚部癌（頭頚部の扁平上皮癌を含む）が挙げられる。
【００８１】
「治療」は本明細書で使用されるとき、たとえば、目的が標的とされる病状または疾病の重症度を軽減する、もしくはその進行を遅らせることである、と同様に目的が病状または疾病の再発を抑制することである治療上の処置を指す。特定の実施形態では、用語「治療」は、患者における疾患の治療剤の投与または適用を対象とし、疾患もしくは疾患の進行を抑制するもしくは減速すること；たとえば、退行を引き起こすことによって疾患を部分的にもしくは完全に緩和すること；または失った、失くしたもしくは欠陥のある機能を回復するもしくは修復すること；効率的でないプロセスを刺激すること；または重症度が軽減した疾患の安定期をもたらすことを含む。用語「治療」はまた、表現型の特徴の重症度を軽減すること、及び／またはその特徴の発生、程度または可能性を低下させることも含む。治療を必要とする者には、すでに疾病を持つ者と同様に疾病の再発のリスクがある者、または疾病の再発が予防されるもしくは減速されるべきである者が挙げられる。
【００８２】
用語「有効性」は本明細書で使用されるとき、たとえば、生存または、たとえば、１年、５年もしくは１０年の期間にわたる無病期間のような１以上のパラメーター、と同様にたとえば、対象における１以上の腫瘍の成長の低下のようなパラメーターから決定されてもよい。たとえば、生体利用効率のような薬物動態パラメーター及びクリアランス速度のような基本的なパラメーターも有効性に影響を与えてもよい。従って、「向上した有効性」（すなわち、有効性における改善）は、改善された薬物動態パラメーターと同様に改善された効能によるものであってもよく、試験動物またはヒト対象にてクリアランス速度及び腫瘍成長を比較するとともに、たとえば、生存、再発率または無病期間のようなパラメーターを比較することによって測定されてもよい。
【００８３】
用語「有効量」または「治療上有効な量」は対象にて疾患または疾病を治療するのに有効である薬剤の量を指す。特定の実施形態では、有効量は所望の治療成績または予防成績を達成するのに必要な投与量及び期間で有効な量を指す。ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の治療上有効な量は、個体の病状、年齢、性別及び体重、ならびに個体にて所望の応答を引き出す薬剤の能力のような因子に従って変化してもよい。治療上有効な量は、治療上有益な効果が薬剤の毒性効果または有害作用を上回る量を包含する。一部の実施形態では、表現「有効量」は、がんを治療するのに有効である薬剤の量を指す。
【００８４】
たとえば、免疫刺激剤またはがんワクチンのような１以上のさらなる治療剤「との併用での」投与には、任意の順での同時（付随した）または連続的な（逐次の）投与が含まれる。
【００８５】
「薬学上許容できるキャリア」は、対象への投与のために「医薬組成物」を一緒に含む治療剤と共に使用するための当該技術で従来型である非毒性の固体、半固体または液体の充填剤、希釈剤、被包材料、製剤補助剤またはキャリアを指す。薬学上許容できるキャリアは採用される投与量及び濃度でレシピエントにとって非毒性であり、製剤の他の成分と相溶性である。薬学上許容できるキャリアは採用される製剤に適する。たとえば、治療剤が経口で投与されるべきであるならば、キャリアはゲルカプセルであってもよい。治療剤が皮下で投与されるべきであるならば、キャリアは理想的には皮膚に刺激性ではなく、注入部位反応を引き起こさない。
【００８６】
用語「抗原」は抗体によって特異的に認識されるポリペプチドのような化合物を意味するのに使用される。本明細書で使用されるとき、「腫瘍特異抗原」は腫瘍細胞によって顕著な量で発現される抗原のみ、たとえば、腫瘍細胞にて変異しているタンパク質に相当する変異体ポリペプチド抗原を指す。本明細書で使用されるとき、「腫瘍関連抗原」は腫瘍細胞によって過剰に発現され、且つ同じまたは異なる組織の正常細胞によっても発現されてもよいポリペプチドに相当する抗原を指す。
【００８７】
用語「がんワクチン」は本明細書で使用されるとき、腫瘍抗原に対する特異的な免疫応答を促進するために投与される治療組成物を指す。一部の実施形態では、がんワクチンは、それらの抗原に対する免疫応答を促進するために腫瘍特異抗原及び／または腫瘍関連抗原または腫瘍特異抗原及び／または腫瘍関連抗原を提示する細胞を含んでもよい。そのようなワクチン組成物はまた、たとえば、免疫刺激剤のような免疫応答を促進する他の作用物質も含んでもよい。
【００８８】
用語「個別化がんワクチン」または「個別化ワクチン」は、治療される患者から採取され、患者への再導入に先立って生体外にて任意で増やし、または増幅させる細胞または抗原を含むがんワクチンを指す。たとえば、個別化がんワクチンは、患者に由来する腫瘍特異抗原を含んでもよいし、または患者から採取され、生体外で増殖させている免疫細胞または他の造血系細胞を含んでもよい。
【００８９】
例となるＣＤ８０細胞外ドメイン及び細胞外ドメイン融合分子
ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を含むがんワクチンと同じように、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子によるがん治療の方法が本明細書で提供されている。ＣＤ８０  ＥＣＤは、たとえば、ヒトＣＤ８０アイソフォーム１、アイソフォーム２及びアイソフォーム３のＥＣＤ（たとえば、配列番号１〜３）を含んでもよい。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤは配列番号５のアミノ酸配列を含んでもよい。
【００９０】
ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、たとえば、ポリマー、ポリペプチド、脂溶性部分及びスクシニル基のような融合相手を含んでもよい。例となるポリペプチド融合相手には血清アルブミン及びＩｇＧのＦｃドメインが挙げられるが、これらに限定されない。さらなる例となるポリマー融合相手には、分岐鎖及び／または直鎖を有するポリエチレングリコールを含むポリエチレングリコールが挙げられるが、これらに限定されない。特定の例となるＦｃドメインのアミノ酸配列は本明細書では配列番号９〜１６に示されている。
【００９１】
特定の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はシグナルペプチドを欠いている。特定の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、ネイティブＣＤ８０のシグナルペプチド（配列番号７または配列番号１のアミノ酸１〜３４）及び／または異種シグナルペプチドから選択されてもよい少なくとも１つのシグナルペプチドを含む。
【００９２】
ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の場合、融合相手はポリペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかに連結されてもよい。特定の実施形態では、ポリペプチド及び融合相手は共有結合される。融合相手もポリペプチドである場合（「融合相手ポリペプチド」）、ポリペプチド及び融合相手ポリペプチドは連続するアミノ酸配列の一部であってもよい。そのような場合、ポリペプチド及び融合相手ポリペプチドは、ポリペプチド及び融合相手ポリペプチドの双方をコードするコーディング配列から単一のポリペプチドとして翻訳されてもよい。一部のそのような場合、２つのポリペプチドは、一方のポリペプチドのＮ末端が、介在するアミノ酸を挟まずに他方のポリペプチドのＣ末端に直ちに続くような配列で直接連結される。他の場合では、たとえば、ＧＳリンカー配列のようなリンカーペプチド配列が２つのポリペプチドの間に挿入される。特定の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ及び融合相手は他の手段、たとえば、ペプチド結合以外の化学結合を介して共有結合される。特定の実施形態では、ポリペプチド及び融合相手は非共有結合性に連結される。特定のそのような実施形態では、それらは、たとえば、結合ペアを用いて連結されてもよい。例となる結合ペアには、ビオチンとアビジンまたはストレプトアビジン、抗体とその抗原、等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９３】
一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は配列番号２０または２１の配列を含む。
【００９４】
ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、それらがどのように作製されるかに応じて、異なるレベルの特定のグリコシル化修飾を有してもよい。たとえば、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はＣＤ８０  ＥＣＤタンパク質の濃度に関連して異なる濃度のシアル酸残基を有してもよい。一部の実施形態では、さらに高いシアル酸含量が体内でさらに長いクリアランス時間を有してもよいので、高い全体的な生体利用効率を有してもよい。
【００９５】
種々のレベルのシアル化を伴うＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を作製するために、細胞培養から調製されたＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を、たとえば、アニオン交換クロマトグラフィーを用いて分画してもよい。幾つかの場合では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は分画に先立って１以上の初期の精製工程に供されてもよい。シアル酸含量を決定するために４,５−メチレンジオキシ−１,２−フェニレンジアミンジヒドロクロリド（ＤＭＢ）高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に基づくシアル酸アッセイを用いて、プールした画分をさらに分析してもよい。
【００９６】
一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子のシアル酸含量はタンパク質の１モルに対して１０〜６０モルのシアル酸（ＳＡ）である。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子のシアル酸含量はタンパク質の１モルに対して１５〜６０モルのＳＡである。たとえば、一部の実施形態では、ＳＡ含量は、１０〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、１５〜３０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、１５〜２５モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、２０〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、２０〜３０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、３０〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、１０、１５、２０、２５、３０、３５、または４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質である。一部の実施形態では、ＳＡ含量は、少なくとも１５モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、少なくとも２０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、少なくとも２５モルのＳＡ／１モルのタンパク質、少なくとも３０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、少なくとも３５モルのＳＡ／１モルのタンパク質、または少なくとも４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質である。一部のそのような実施形態では、融合相手は、Ｆｃドメイン、たとえば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４のＦｃドメインである。
【００９７】
一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子のＳＡ含量は、現在のＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子と比べて相対的に高いレベルで高められるまたは維持される。一部の実施形態では、たとえば、ＣＤ８０  ＥＣＤタンパク質の１モルに対して５、１０、１５、２０、３０、４０または５０モルのＳＡのようなＳＡ含量の増加は、少なくとも１つのマウス同系または異種の腫瘍モデルにて高い有効性をもたらしてもよい。たとえば、一部の実施形態では、マウス腫瘍モデルにおける腫瘍成長は、たとえば、ＣＤ８０  ＥＣＤタンパク質の１モルに対して５、１０、１５、２０、３０、４０または５０モルのＳＡのようなＳＡ含量の増加がある場合、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９８％さらに減らされてもよい。
【００９８】
たとえば、一部の実施形態では、１０〜６０モルの間のＳＡ／タンパク質の１モルを含むＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃ融合分子、たとえば、ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインを含む融合分子は、腫瘍細胞の播種に続く少なくとも１０日間または少なくとも２週間または少なくとも３週間、たとえば、１０日間〜２週間または２〜３週間の期間にわたって少なくとも１つのマウスの同系または異種のがんモデルにて少なくとも８０％、たとえば、少なくとも９０％、たとえば、少なくとも９５％、たとえば、少なくとも９８％の腫瘍細胞の成長阻害が可能である。一部のそのような実施形態では、分子は少なくとも１５モルのＳＡ／タンパク質の１モル、たとえば、少なくとも２０モルのＳＡ／タンパク質の１モル、または１５〜３０、１５〜２５もしくは２０〜３０モルのＳＡ／タンパク質の１モルの範囲を含む。一部の実施形態では、マウスモデルはＣＴ２６、ＭＣ３８またはＢ１６のマウス腫瘍モデルである。一部の実施形態では、腫瘍がいったん最小体積に達すると、マウスはたとえば、１週間の期間にわたって０．３〜３．０ｍｇ／ｋｇ、たとえば、０．３〜０．６ｍｇ／ｋｇの分子の１〜３回用量を与えられる。一部の実施形態では、Ｆｃドメインは配列番号１４のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は配列番号２０または２１の配列を含む。
【００９９】
一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃ融合分子は、同一アミノ酸配列を持つが、タンパク質の１モル当たりのＳＡのレベルが低いＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃ融合分子よりも大きな程度で、播種後、少なくとも１０日間または少なくとも２週間または少なくとも３週間、たとえば、１０日間〜２週間または２〜３週間の期間にわたってマウスにてＣＴ２６腫瘍細胞の成長を低下させる。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃ融合分子は、抗ＣＴＬＡ４抗体、たとえば、抗ＣＴＬＡ４抗体クローン９Ｄ９よりも大きな程度で、播種後、少なくとも１０日間または少なくとも２週間、たとえば、１０日間〜２週間または２〜３週間の期間にわたってマウスにてＣＴ２６腫瘍細胞の成長を低下させる。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃ融合分子は０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇまたは３．０ｍｇ／ｋｇで１〜３回投与される一方で、抗ＣＴＬＡ４抗体は１．５または１０ｍｇ／ｋｇで同じ回数投与される。一部の実施形態では、モデルはＣＴ２６，ＭＣ３８またはＢ１６のマウス腫瘍モデルである。
【０１００】
例となるＦｃドメイン融合相手
一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は融合相手としてＦｃドメインを有する。一部の実施形態では、ＦｃドメインはヒトのＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４に由来する。一部の実施形態では、Ｆｃドメインは野生型配列、たとえば、野生型ヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ２（たとえば、ＩｇＧ２ａ）の配列を有する。他の実施形態では、Ｆｃドメインは、天然の変異体であり、または操作された変異体である。一部の実施形態では、１以上のＦｃガンマ受容体とのＦｃの相互作用を変化させているＦｃドメインが選択される。一部の実施形態では、１以上の補体因子とのＦｃの相互作用を変化させているＦｃドメインが選択される。一部の実施形態では、１以上のＦｃガンマ受容体とのＦｃの相互作用を変化させている、且つ１以上の補体因子との相互作用を変化させているＦｃドメインが選択される。
【０１０１】
一部の実施形態では、ＦｃドメインはＷＯ２０１４／１４４９６０にて記載されたような少なくとも１つの点突然変異を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインは、位置Ｅ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｐ２３８、Ｄ２６５、Ｎ２９７、Ａ３２７、Ｐ３２９、またはＰ３３１（これらの位置の番号付けはＫａｂａｔのようなＥＵ指標に従う）の１以上での置換を伴うヒトＦｃドメインである。一部の実施形態では、ＦｃドメインはＬ２３４、Ｌ２３５及び／またはＰ３３１での突然変異を伴うヒトＦｃドメインである。一部の実施形態では、Ｆｃドメインは置換Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓを伴うヒトＦｃドメインである（たとえば、配列番号１２を参照のこと）。一部の実施形態では、ＦｃドメインはＮ２９７位でアミノ酸置換を有する（たとえば、配列番号１３を参照のこと）。一部の実施形態では、ＦｃドメインはＣ２３７Ｓ突然変異を含む（たとえば、配列番号９を参照のこと）。
【０１０２】
一部の実施形態では、変異したＦｃ融合相手は、Ｆｃドメインの突然変異を除いて同じアミノ酸配列を持つＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子のそれと比べてＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃ融合分子が１以上のＦｃガンマ受容体との変化した相互作用を有するようにする。一部の実施形態では、Ｆｃは、野生型Ｆｃドメインと比べて、たとえば、ＦｃＲＮ、ＲＩ、ＲＩＩＡ、ＲＩＩＢ及びＲＩＩＩの１以上のようなＦｃガンマ受容体に対する低下した親和性を有する。一部の実施形態では、Ｆｃは野生型Ｆｃドメインと比べて、ＦｃＲＮ、ＲＩ、ＲＩＩＡ、ＲＩＩＢ及びＲＩＩＩのすべてに対して低下した親和性を有する。
【０１０３】
一部の実施形態では、変異したＦｃ融合相手は、ＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃ融合分子が、たとえば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４のような１以上の補体成分、及びたとえば、Ｃ４ａ、Ｃ４ｂ、Ｃ２ａ、Ｃ２ｂ、Ｃ３ａ及びＣ３ｂのようなそれらの切断産物との変化した相互作用を有するようにする。一部の実施形態では、変異したＦｃ融合相手は、ＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃ融合分子が、Ｆｃドメインの突然変異を除いて同じアミノ酸配列を持つＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子のそれと比べてＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃ融合分子が１以上の補体成分との変化した相互作用を有するようにする。
【０１０４】
一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ及び融合相手、たとえば、Ｆｃ融合相手は、ＦｃのＮ末端またはＣ末端のアミノ酸がＣＤ８０  ＥＣＤ配列（たとえば、配列番号２０及び２１を参照のこと）のＮ末端またはＣ末端のアミノ酸の直前に先行するまたは直後に続くように直接連結される。他の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ及び融合相手は、リンカー分子によって、たとえば、リンカーペプチド配列によって、たとえば、ＧＳリンカー配列によって連結される。
【０１０５】
ＣＤ８０  ＥＣＤ及びＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はまた、たとえば、全体として参照によって本明細書に組み入れられる２０１６年１１月１日に出願された米国特許出願番号１５／３４０，２３８に記載されたＣＤ８０及びＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子も含んでもよい。
【０１０６】
セントラルメモリーＴ細胞及びＴ細胞サブセット
幾つかの異なる種類またはサブセットのＴ細胞が体内で見いだされてもよい。特定のエピトープ特異性を有するナイーブＴ細胞（Ｔｎ）は胸腺で産生される。ナイーブＴ細胞が適当な抗原に遭遇した後、それらはエフェクター細胞に増殖、分化し、エフェクター細胞は炎症の部位に移動することができる。感染またはワクチン接種に続いて、大部分のエフェクターＴ細胞はアポトーシスによって死ぬ一方で、小さな画分は様々な種類のメモリーＴ細胞に発達し、それらは体組織に残ることができ、抗原による再感染に対して見張るのに役立つことができる。複数の種類またはサブセットのメモリーＴ細胞が体内で存続してもよい。これらは表面タンパク質マーカーの様々な組み合わせによってある程度同定されている。前に言及されたように、「セントラルメモリーＴ細胞」または「Ｔｃｍ」はＣＤ４＋またはＣＤ８＋のＴ細胞を含むＴ細胞であり、ＣＤ９５＋及びＣＤ２８＋、ＣＤ９５＋及びＣＤ２７＋、またはＣＤ９５＋、ＣＤ２８＋及びＣＤ２７＋として同定される。そのような細胞は少なくとも３つのさらなるメモリーＴ細胞の亜型を包含する。第１に、本明細書で定義されるようなＴｃｍは幹セントラルメモリーＴ細胞（Ｔｓｃｍ）と呼ばれるナイーブＴ細胞（Ｔｎ細胞）からの分化の初期に出現してもよい種類のメモリーＴ細胞を包含する。ＴｓｃｍはＣＤ９５を過剰発現し、ＣＤ４５ＲＯ−、ＣＣＲ７＋及びＣＤ２８＋でもある。第２に、Ｔｃｍは、ＴｃｍまたはＴｃｍの成分とどこか他で呼ばれてもよい、ＣＤ４５ＲＯ＋、ＣＣＲ７＋、ＣＤ９５＋及びＣＤ２８＋である細胞を含む。第３にＴｃｍはＣＤ４５ＲＯ＋、ＣＣＲ７−、ＣＤ９５＋及びＣＤ２８＋である移行メモリーＴ細胞（Ｔｔｍ）と呼ばれるメモリーＴ細胞のサブセットを含む。これらＴｓｃｍ、Ｔｃｍ及びＴｔｍ細胞はすべてＣＤ９５＋／ＣＤ２８＋であるので、本明細書で使用されるようなＴｃｍの範囲内である。さらに、一部の実施形態では、ＴｃｍはＣＤ６２Ｌも発現してもよい。
【０１０７】
Ｔｓｃｍ細胞は、他のＴｃｍ、Ｔｔｍと同様にエフェクターメモリーＴ細胞（Ｔｅｍ）及びターミナルエフェクターメモリー細胞（Ｔｔｅ）を含むメモリーＴ細胞の他の種類の一部または全部の前駆体であってもよい。ＴｅｍはＣＤ４５ＲＯ＋、ＣＣＲ７−、ＣＤ２８−及びＣＤ９５＋であり、ＴｒｅはＣＤ４５ＲＯ−、ＣＣＲ７−、ＣＤ２８−及びＣＤ９５＋である。さらに、ＴｅｍはＣＤ６２Ｌを発現しない。
【０１０８】
Ｔｃｍは、たとえば、リンパ節、脾臓及び血液のような組織で見いだされてもよい一方で、対照的にＴｅｍは当初、肺、肝臓及び腸管のような末梢非リンパ系組織で見いだされてもよいが、リンパ節のような他の組織に移動することができる。
【０１０９】
一部の実施形態では、Ｔｃｍの数または濃度は、たとえば、患者へのＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与に先立って、または投与に続いて決定される。
【０１１０】
治療用組成物及び治療方法
セントラルメモリーＴ細胞を増やす方法及びがんを治療する方法
本開示は、たとえば、ヒトＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）またはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を投与することを含む、それを必要とする患者にてセントラルメモリーＴ細胞（Ｔｃｍ）の数を増やす方法を提供し、その際、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は患者にてＴｃｍの数を増やすのに有効な量で投与される。一部の実施形態では、患者におけるＴｃｍの数は、患者に由来する血液試料もしくは血漿試料、または患者に由来する罹患組織の試料、たとえば、腫瘍試料にてＴｃｍの数または濃度を分析することによって決定される。そのような実施形態では、患者におけるＴｃｍの数の増加または減少は、調べた試料におけるＴｃｍの数または濃度が異なる時点で、たとえば、投与に先立って採取された試料のそれに比べて増えているかどうか、または減っているかどうかに基づく。一部の実施形態では、患者におけるセントラルメモリーＴ細胞の数は投与の後、少なくとも１週間、たとえば、投与の後、少なくとも２週間、または投与の後、少なくとも１ヵ月間増加する。
【０１１１】
本開示はまた、患者にヒトＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）またはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を投与することと、投与の後、患者に由来する試料にてセントラルメモリーＴ細胞の濃度を決定することとを含む、それを必要とする患者にてＴｃｍ細胞の数を増やす方法も提供する。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞の濃度は投与に先立って得られる試料でも決定される。一部の実施形態では、投与前と投与後の試料におけるＴｃｍの濃度を比較してＴｃｍの濃度が投与後上昇しているかどうかを判定する。一部の実施形態では、Ｔｃｍの濃度が上昇していなければ、さらに多くのＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が投与される。一部の実施形態では、Ｔｃｍの濃度は血液試料または血漿試料で測定される一方で、他の実施形態では、それは、罹患組織の試料、たとえば、腫瘍試料で測定される。一部の実施形態では、患者に由来する試料におけるセントラルメモリーＴ細胞の濃度は、投与前のレベルに比べて、投与の後少なくとも１週間、たとえば、投与の後、少なくとも２週間または少なくとも１ヵ月間上昇したままである。
【０１１２】
本開示は、たとえば、ヒトＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）またはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を投与することを含む、それを必要とする患者にてがんを治療する方法を提供し、その際、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は患者にてセントラルメモリーＴ細胞（Ｔｃｍ）の数を増やすのに有効な量で投与される。一部の実施形態では、患者におけるＴｃｍの数は患者に由来する血液試料もしくは血漿試料または患者に由来する腫瘍試料にてＴｃｍの数または濃度を分析することによって決定される。そのような実施形態では、患者におけるＴｃｍの数の増加または減少は、調べた試料におけるＴｃｍの数または濃度が異なる時点で、たとえば、投与に先立って採取された試料のそれに比べて増えているかどうか、または減っているかどうかに基づく。一部の実施形態では、患者におけるセントラルメモリーＴ細胞の数は投与の後、少なくとも１週間、たとえば、投与の後、少なくとも２週間、または投与の後、少なくとも１ヵ月間増加する。
【０１１３】
本開示はまた、対象にヒトＣＤ８０細胞外ドメイン（ＥＣＤ）またはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を投与することと、投与の後、試料にてセントラルメモリーＴ細胞の濃度を決定することを含む、それを必要とする患者にてがんを治療する方法も提供する。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞の濃度は投与に先立って得られる試料でも決定される。本開示はまた、対象、たとえば、がんの対象にてセントラルメモリーＴ細胞を検出する方法を包含し、該方法は、たとえば、対象へのＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与の前に及び／または後で対象から得られる試料にてセントラルメモリーＴ細胞の濃度を決定することを含む。一部の実施形態では、投与前の試料と投与後の試料におけるＴｃｍの濃度を比較してＴｃｍの濃度が投与後上昇しているのかどうかを決定する。一部の実施形態では、Ｔｃｍの濃度が上昇していなければ、さらに多くのＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が投与される。一部の実施形態では、Ｔｃｍの濃度は血液試料または血漿試料で測定する一方で、他の実施形態では、それは腫瘍試料で測定される。一部の実施形態では、患者に由来する試料におけるセントラルメモリーＴ細胞の濃度は、投与前のレベルと比べて、投与後少なくとも１週間、たとえば、投与後少なくとも２週間、または少なくとも１ヵ月間上昇したままである。
【０１１４】
一部の実施形態では、がんは良性（良性腫瘍とも呼ばれる）、前悪性、または悪性であってもよい。一部の実施形態では、がんはがんの非血液性の形態または「固形腫瘍」の形態であってもよく、または代わりに、がんは血液性（たとえば、リンパ腫または白血病）のがん細胞を含んでもよい。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、ヒトまたは動物対象にて、または治療されるがんについてのマウスの同系もしくは異種のモデルにてがんの成長を減少させるのに効果的である。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、たとえば、治療されるがんについてのマウスの同系または異種のモデルにて腫瘍体積を減らすのに効果的である。腫瘍体積における変化は、たとえば、動物にて原発腫瘍のサイズ（たとえば、直径）及び任意で形状をモニターすることによって測定されてもよい。腫瘍成長は、たとえば、腫瘍体積の経時的な変化として測定されてもよい。
【０１１５】
治療されてもよい特定のがんの例には、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病が挙げられるが、これらに限定されない。そのようながんのさらに詳しい非限定例には、扁平上皮癌、小細胞肺癌、下垂体癌、食道癌、星状細胞腫、軟組織肉腫、非小細胞肺癌（扁平上皮非小細胞肺癌を含む）、肺の腺腫、肺の扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、消化器癌、膵臓癌、膠芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝癌、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、腎細胞癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、脳腫瘍、子宮内膜癌、精巣癌、胆管癌、胆嚢癌、胃癌、黒色腫、及び種々の頭頚部癌（頭頚部の扁平上皮癌を含む）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１６】
上記方法の実施形態のいずれかでは、対象に投与されるＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、マウスの同系または異種のがんモデルにて１週間、１０日間、２週間または３週間にわたって腫瘍の成長を、たとえば、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９８％抑制してもよい。一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子はＣＴ２６マウス異種腫瘍モデルにて播種後２週間または３週間で腫瘍の成長を少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９８％抑制してもよい。一部のそのような場合では、融合分子は０．３〜３ｍｇ／ｋｇ、たとえば、０．３〜０．６ｍｇ／ｋｇで１〜３回投与されてもよい。上記方法の実施形態のいずれかでは、対象に投与されるＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の投与は、たとえば、１ヵ月、２ヵ月、３ヵ月、６ヵ月、または１年の期間にわたってヒトまたは動物対象における少なくとも１つの腫瘍の体積を少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９８％減らしてもよい。幾つかの場合では、ＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃ融合分子は、たとえば、調べたマウスの顕著な部分、たとえば、マウスの少なくとも４０％または少なくとも５０％にてＣＴ２６モデルのようなマウス腫瘍モデルにおいて完全な腫瘍の退行を生じることが可能であってもよい。
【０１１７】
これらの方法のいずれかでは、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、ＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃタンパク質の１モルに対して１０〜６０モルのＳＡ、たとえば、１５〜６０モルのＳＡ／１モルのタンパク質を含むＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃであってもよい。一部の実施形態では、含量は、１０〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、１５〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、２０〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、２０〜３０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、１５〜２５モルのＳＡ／１モルのタンパク質、タンパク質の１モルに対して１５〜３０モルのＳＡ、または３０〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質である。一部の実施形態では、ＳＡ含量は、少なくとも１５、たとえば、少なくとも２０、少なくとも２５、少なくとも３０、少なくとも３５または少なくとも４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質である。一部の実施形態では、ＳＡ含量は、１５、２０、２５、３０、３５、または４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質である。一部の実施形態では、ＦｃドメインはヒトのＩｇＧ１、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４のＦｃドメインである。一部の実施形態では、Ｆｃドメインは配列番号１４のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、融合分子は、配列番号２０または２１のアミノ酸配列を含む。そのようなＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、たとえば、全体として参照によって本明細書に組み入れられる２０１６年１１月１日に出願された米国特許出願番号１５／３４０，２３８に記載されている。
【０１１８】
ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤を含む免疫刺激剤との併用治療
一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、有効量の少なくとも１つの免疫刺激剤との併用で本明細書の方法にて投与される。免疫刺激剤には、たとえば、小分子薬剤または生物製剤が挙げられてもよい。生物免疫刺激剤の例には、抗体、抗体断片、受容体の断片、または、たとえば、受容体・リガンドの結合を阻止するリガンドポリペプチド、ワクチン及びサイトカインが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１９】
一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は共刺激分子を含む免疫刺激分子のアゴニストを含む一方で、一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は共抑制分子を含む免疫抑制分子のアンタゴニストを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、免疫細胞、たとえば、Ｔ細胞に見いだされる共刺激分子を含む免疫刺激分子のアゴニストを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、免疫細胞、たとえば、Ｔ細胞に見いだされる共抑制分子を含む免疫抑制分子のアンタゴニストを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、自然免疫に関与する細胞、たとえば、ＮＫ細胞に見いだされる共刺激分子を含む免疫刺激分子のアゴニストを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、自然免疫に関与する細胞、たとえば、ＮＫ細胞に見いだされる共抑制分子を含む免疫抑制分子のアンタゴニストを含む。一部の実施形態では、併用は治療される対象にて抗原特異的なＴ細胞応答を増強し、及び／または対象にて自然免疫応答を増強する。一部の実施形態では、併用はＣＤ８０  ＥＣＤもしくはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子、または免疫刺激剤いずれかの単独での投与と比べて、動物のがんモデル、たとえば、同系または異種のモデルにて改善された抗腫瘍応答を生じる。一部の実施形態では、併用は、ＣＤ８０  ＥＣＤもしくはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子、または免疫刺激剤いずれかの単独での投与と比べて、動物のがんモデル、たとえば、同系または異種のモデルにて相乗反応を生じる。
【０１２０】
上記併用治療法の実施形態のいずれかでは、対象に投与される、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の免疫刺激剤、たとえば、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤との併用は、マウスの同系または異種のがんモデルにて１週間、１０日間、２週間または３週間の期間にわたって、腫瘍の成長を、たとえば、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９８％抑制してもよい。上記併用治療法の実施形態のいずれかでは、対象に投与される、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子の免疫刺激剤、たとえば、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤との併用は、対象にてまたは動物モデルにて、たとえば、１ヵ月、２ヵ月、３ヵ月、６ヵ月または１年の期間にわたって少なくとも１つの腫瘍の体積を少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％減らしてもよい。
【０１２１】
併用治療法のいずれかでは、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、ＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃタンパク質の１モルに対して１０〜６０モルのＳＡ、たとえば、１５〜６０モルのＳＡ／１モルのタンパク質を含むＣＤ８０  ＥＣＤ  Ｆｃであってもよい。一部の実施形態では、含量は、１０〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、１５〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、たとえば、２０〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、２０〜３０モルのＳＡ／１モルのタンパク質、１５〜２５モルのＳＡ／１モルのタンパク質、タンパク質の１モルに対して１５〜３０モルのＳＡ、または３０〜４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質である。一部の実施形態では、ＳＡ含量は、少なくとも１５、たとえば、少なくとも２０、少なくとも２５、少なくとも３０、少なくとも３５または少なくとも４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質である。一部の実施形態では、ＳＡ含量は、１５、２０、２５、３０、３５、または４０モルのＳＡ／１モルのタンパク質である。一部の実施形態では、ＦｃドメインはヒトのＩｇＧ１、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４のＦｃドメインである。一部の実施形態では、Ｆｃドメインは配列番号１４のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、融合分子は、配列番号２０または２１のアミノ酸配列を含む。本明細書の併用治療の実施形態のいずれかでは、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、たとえば、２０１６年１１月１日に出願された米国特許出願番号１５，３４０，２３８に記載された分子であってもよい。
【０１２２】
特定の実施形態では、免疫刺激剤は免疫グロブリンスーパーファミリー（ＩｇＳＦ）のメンバーである刺激性分子または抑制性分子を標的とする。たとえば、免疫刺激剤は、ポリペプチドのＢ７ファミリーの別のメンバーを標的とする（またはそれに特異的に結合する）作用物質であってもよい。免疫刺激剤は、膜結合リガンドのＴＮＦファミリーのメンバーを標的とする作用物質またはＴＮＦファミリーのメンバーに特異的に結合する共刺激受容体もしくは共抑制受容体であってもよい。免疫刺激剤が標的としてもよい例となるＴＮＦ及びＴＮＦＲファミリーのメンバーには、ＣＤ４０及びＣＤ４０Ｌ、ＯＸ−４０、ＯＸ−４０Ｌ、ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲＬ、ＣＤ７０、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ３０、ＣＤ３０Ｌ、４−１ＢＢＬ、ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）、ＴＲＡＩＬ／Ａｐｏ２−Ｌ、ＴＲＡＩＬＲ１／ＤＲ４、ＴＲＡＩＬＲ２／ＤＲ５、ＴＲＡＩＬＲ３、ＴＲＡＩＬＲ４、ＯＰＧ、ＲＡＮＫ、ＲＡＮＫＬ、ＴＷＥＡＫＲ／Ｆｎ１４、ＴＷＥＡＫ、ＢＡＦＦＲ、ＥＤＡＲ、ＸＥＤＡＲ、ＴＡＣＩ、ＡＰＲＩＬ、ＢＣＭＡ、ＬＴβＲ、ＬＩＧＨＴ、ＤｃＲ３、ＨＶＥＭ、ＶＥＧＩ／ＴＬ１Ａ、ＴＲＡＭＰ／ＤＲ３、ＥＤＡＲ、ＥＤＡ１、ＸＥＤＡＲ、ＥＤＡ２、ＴＮＦＲ１、リンホトキシンα／ＴＮＦβ、ＴＮＦＲ２、ＴＮＦα、ＬＴβＲ、リンホトキシンα１β２、ＦＡＳ、ＦＡＳＬ、ＲＥＬＴ、ＤＲ６、ＴＲＯＹ及びＮＧＦＲが挙げられる。
【０１２３】
一部の実施形態では、免疫刺激剤は、（ｉ）Ｔ細胞の活性化を阻害するタンパク質のアンタゴニスト（たとえば、免疫チェックポイント阻害剤）、たとえば、ＣＴＬＡ４、（たとえば、抗ＣＴＬＡ４抗体、たとえば、ＹＥＲＶＯＹ（イピリムマブ）またはトレメリムマブ）、ＬＡＧ−３のアンタゴニスト（たとえば、抗ＬＡＧ−３抗体、たとえば、ＢＭＳ−９８６０１６（ＷＯ１０／１９５７０、ＷＯ１４／０８２１８）、またはＩＭＰ−７３１もしくはＩＭＰ−３２１（ＷＯ０８／１３２６０１、ＷＯ０９／４４２７３）、ＴＩＭ３、ガレクチン９、ＣＥＡＣＡＭ−１、ＢＴＬＡ、ＣＤ６９、ガレクチン−１、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１１３、ＧＰＲ５６、ＶＩＳＴＡ、Ｂ７−Ｈ３（たとえば、ＭＧＡ２７１（ＷＯ１１／１０９４００））、Ｂ７−Ｈ４、２Ｂ４、ＣＤ４８、ＧＡＲＰ、ＰＤ１Ｈ、ＬＡＩＲ１、ＴＩＭ−１、ＴＩＭ−４、及びＩＬＴ４のアンタゴニストを含んでもよく、及び／または（ｉｉ）Ｔ細胞の活性化を刺激するタンパク質のアゴニスト、たとえば、Ｂ７−２、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）（たとえば、ＣＤ１３７アゴニスト抗体、たとえば、ウレルマブまたはＰＦ−０５０８２５６６（ＷＯ１２／３２４３３））、４−１ＢＢＬ、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳ−Ｌ、ＯＸ４０（たとえば、ＯＸ４０アゴニスト抗体、たとえば、ＭＥＤＩ−６３８３、ＭＥＤＩ−６４６９またはＭＯＸＲ０９１６（ＲＧ７８８８；ＷＯ０６／０２９８７９））、ＯＸ４０Ｌ、ＧＩＴＲＬ、ＣＤ７０、ＣＤ２７（たとえば、アゴニストＣＤ２７抗体、たとえば、バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７））、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＤＲ３、及びＣＤ２８Ｈのアゴニストを含んでもよい。一部の実施形態では、Ｔ細胞活性化を刺激するタンパク質のアゴニストは抗体である。
【０１２４】
一部の実施形態では、免疫刺激剤は、Ｔ細胞活性化を阻害するサイトカイン（たとえば、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、ＶＥＧＦ及び他の免疫抑制性サイトカイン）を阻害するまたはそのアンタゴニストである作用物質を含んでもよく、一部の実施形態では、免疫刺激剤は、Ｔ細胞活性化を刺激する、たとえば、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１及びＩＦＮα（たとえば、サイトカイン自体）のようなサイトカインのアゴニストである作用物質を含んでもよい。ＴＧＦ−β阻害剤には、たとえば、ＧＣ１００８、ＬＹ２１５７２９９、ＴＥＷ７１９７及びＩＭＣ−ＴＲ１が挙げられる。一部の実施形態では、免疫刺激剤は、ケモカイン、たとえば、ＣＸＣＲ２（たとえば、ＭＫ−７１２３）、ＣＸＣＲ４（たとえば、ＡＭＤ３１００）、ＣＣＲ２、またはＣＣＲ４（モガムリズマブ）のアンタゴニストを含んでもよい。
【０１２５】
一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、少なくとも１つの免疫刺激剤は、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト、たとえば、ＴＬＲ２／４（たとえば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  Ｃａｌｍｅｔｔｅ−Ｇｕｅｒｉｎ）；ＴＬＲ７アゴニスト（たとえば、ＨｉｌｔｏｎｏｌまたはＩｍｉｑｕｉｍｏｄ）；ＴＬＲ７／８アゴニスト（たとえば、Ｒｅｓｉｑｕｉｍｏｄ）；またはＴＬＲ９アゴニスト（たとえば、ＣｐＧ７９０９）を含む。
【０１２６】
一部の実施形態では、免疫刺激剤には、ＮＫ細胞上の抑制性受容体のアンタゴニストまたはＮＫ細胞上の活性化受容体のアゴニストが挙げられてもよい。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤はＫＩＲのアンタゴニスト、たとえば、抗体リリルマブである。
【０１２７】
一部の実施形態では、免疫刺激剤は、ＷＯ２０１５／０３１６６７にて開示されたＴＲＸ−５１８（ＷＯ０６／１０５０２１、ＷＯ０９／００９１１６）、ＭＫ−４１６６（ＷＯ１１／０２８６８３）またはＧＩＴＲ抗体のような抗ＧＩＴＲアゴニスト抗体を含んでもよい。
【０１２８】
免疫刺激剤にはまた、腫瘍の抗原提示を高める作用物質、たとえば、樹状細胞ワクチン、ＧＭ−ＣＳＦ分泌細胞性ワクチン、ＣｐＧオリゴヌクレオチド、及びイミキモド、または腫瘍細胞の免疫原性を高める治療法（たとえば、アントラサイクリン）も挙げられてもよい。
【０１２９】
免疫刺激剤には、たとえば、メソテリンを標的とするワクチン、または弱毒化リステリアがんワクチン、たとえば、ＣＲＳ−２０７のような特定のワクチンも挙げられてもよい。
【０１３０】
免疫刺激剤はまた、たとえば、ＣＤ２５に特異的に結合する作用物質のようなＴｒｅｇ細胞を枯渇させるまたは遮断する作用物質も含んでもよい。
【０１３１】
免疫刺激剤はまた、たとえば、インドールアミンジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、ジオキシゲナーゼ、アルギナーゼ、または酸化窒素合成酵素のような代謝系酵素を阻害する作用物質も含んでもよい。ＩＤＯアンタゴニストには、たとえば、ＩＮＣＢ−０２４３６０（ＷＯ２００６／１２２１５０、ＷＯ０７／７５５９８、ＷＯ０８／３６６５３、ＷＯ０８／３６６４２）、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９（ＷＯ０９／７３６２０、ＷＯ０９／１１５６６５２、ＷＯ１１／５６６５２、ＷＯ１２／１４２２３７）及びＦ００１２８７が挙げられる。
【０１３２】
免疫刺激剤はまた、アデノシンの形成を阻害する、またはアデノシンＡ２Ａ受容体を阻害する作用物質も含んでもよい。
【０１３３】
免疫刺激剤はまた、Ｔ細胞のアネルギーまたは疲弊を元に戻す／防ぐ作用物質及び腫瘍部位で自然免疫の活性化及び／または炎症を引き起こす作用物質も含んでもよい。
【０１３４】
治療の併用は、たとえば、以下：腫瘍の抗原提示を高める少なくとも１つの作用物質（たとえば、樹状細胞ワクチン、ＧＭ−ＣＳＦ分泌細胞性ワクチン、ＣｐＧオリゴヌクレオチド、イミキモド）；たとえば、ＣＴＬＡ４経路を阻害すること及び／またはＴｒｅｇまたは他の免疫抑制性細胞を枯渇させるまたは遮断することによって負の免疫調節を阻害する少なくとも１つの作用物質；たとえば、ＣＤ−１３７及び／またはＯＸ−４０の経路を刺激する及び／またはＴ細胞のエフェクター機能を刺激するアゴニストによって正の免疫調節を刺激する治療法；抗腫瘍Ｔ細胞の頻度を全身性に高める少なくとも１つの作用物質；たとえば、ＣＤ２５のアンタゴニスト（たとえば、ダクリズマブ）を用いてまたは生体外の抗ＣＤ２５ビーズ枯渇によって腫瘍におけるＴｒｅｇのようなＴｒｅｇを枯渇させるまたは阻害する治療法；腫瘍におけるサプレッサー骨髄細胞の機能に影響を及ぼす少なくとも１つの作用物質；腫瘍細胞の免疫原性を高める治療法（たとえば、アントラサイクリン）；遺伝子操作された細胞、たとえば、キメラ抗原受容体によって修飾された細胞を含むＴ細胞またはＮＫ細胞の養子移入（ＣＡＲ−Ｔ療法）；たとえば、インドールアミンジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、ジオキシゲナーゼ、アルギナーゼまたは酸化窒素合成酵素のような代謝系酵素を阻害する少なくとも１つの作用物質；Ｔ細胞のアネルギーまたは疲弊を元に戻す／防ぐ少なくとも１つの作用物質；腫瘍部位で自然免疫の活性化及び／または炎症を引き起こす治療法；免疫刺激性サイトカインの投与または免疫抑制性サイトカインの遮断の１以上のような免疫経路の複数の要素を標的とする組み合わせ方法にてさらに組み合わせることもできる。
【０１３５】
たとえば、少なくとも１つの免疫刺激剤は、正の共刺激受容体を結合する１以上のアゴニスト作用物質；抑制性受容体を介してシグナル伝達を減衰させる１以上のアンタゴニスト（遮断剤）、たとえば、腫瘍微小環境内での異なる免疫抑制性経路を克服するアンタゴニスト；抗腫瘍免疫細胞、たとえば、Ｔ細胞の頻度を全身性に高める、Ｔｒｅｇを枯渇させるまたは抑制する（たとえば、ＣＤ２５を阻害することによって）１以上の作用物質；ＩＤＯのような代謝系酵素を阻害する１以上の作用物質；Ｔ細胞のアネルギーまたは疲弊を元に戻す／防ぐ１以上の作用物質；及び腫瘍部位で自然免疫の活性化及び／または炎症を引き起こす１以上の作用物質を含んでもよい。
【０１３６】
一部の実施形態では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、有効量のＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤との併用で投与される。
【０１３７】
ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤
ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤には、抗体、融合タンパク質及びペプチドが挙げられる。ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤である非限定の例となる融合タンパク質はＡＭＰ−２２４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ，ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）である。ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤である非限定の例となるポリペプチドはＡＵＲ−０１２である。他の例となるＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤には、ＰＤ−１を阻害する抗体、たとえば、抗ＰＤ−１抗体及び抗ＰＤ−Ｌ１抗体が挙げられる。そのような抗体はヒト化抗体、キメラ抗体、マウス抗体及びヒト抗体であってもよい。
【０１３８】
一部の実施形態では、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は抗ＰＤ−Ｌ１抗体、たとえば、アテゾリズマブ（Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ（登録商標））、デュルバルマブ、アベルマブ、またはＢＭＳ−９３６５５９である。
【０１３９】
一部の実施形態では、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は抗ＰＤ−１抗体である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブである。ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）としても知られる、以前５Ｃ４、ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ−１１０６、またはＯＮＯ−４５３８と呼ばれた）は、ＰＤ−１リガンド（ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２）との相互作用を選択的に阻み、それによって抗腫瘍Ｔ細胞機能の下方調節を阻止する完全にヒトＩｇＧ４（Ｓ２２８Ｐ）のＰＤ−１免疫チェックポイント阻害剤抗体である（米国特許第８，００８，４４９号、Ｗａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，２０１４，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｓ．２（９）：８４６−５６）。一部の実施形態では、ニボルマブは３ｍｇ／ｋｇの用量で２週間ごとに、または２４０ｍｇのフラット用量で２週間ごとに投与される。別の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体はペムブロリズマブである。ペムブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）、以前のラムブロリズマブ及びＭＫ−３４７５）はヒト化モノクローナルＩｇＧ４抗ＰＤ−１抗体である。ペムブロリズマブは、たとえば、米国特許第８，９００，５８７号に記載されており、ｗｗｗ.ｃａｎｃｅ.ｇｏｖ／ｄｒｕｇｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ？ｃｄｒｉｄ＝６９５７８９（最終アクセス：２０１７年３月２７日）も参照のこと。ペムブロリズマブは、再発したまたは難治性の黒色腫の治療についてＦＤＡによって認可されている。たとえば、抗ＰＤ−１抗体ペムブロリズマブのフラット用量は２００ｍｇであることができる。一部の実施形態では、ペムブロリズマブは２００ｍｇで３週間ごとに投与されてもよい。他の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体はＭＥＤＩ０６０８（以前のＡＭＰ−５１４）である。ＭＥＤＩ０６０８は、たとえば、米国特許第８，６０９，０８９号またはｗｗｗ.ｃａｎｃｅｒ.ｇｏｖ／ｄｒｕｇｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ？ｃｄｒｉｄ＝７５６０４７（最終アクセス：２０１７年３月２７日）に記載されている。一部の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ヒト化モノクローナル抗体であるピジリズマブ（ＣＴ−０１１）である。ピジリズマブは米国特許第８，６８６，１１９Ｂ２またはＷＯ２０１３／０１４６６８Ａ１に記載されている。
【０１４０】
追加の併用療法
ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、他の方式の治療、たとえば、外科手術、化学療法、放射線療法、または別の生物製剤の投与の前に、実質的に同時にまたはその後で提供されてもよい。
【０１４１】
たとえば、がんの治療のために、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子は、１以上の追加の抗がん剤、たとえば、化学療法剤、成長阻害剤、血管新生阻害剤、及び／または抗腫瘍組成物との併用で投与されてもよい。本発明の抗体と併用して使用することができる化学療法剤、成長阻害剤、血管新生阻害剤、抗がん剤及び抗腫瘍組成物の非限定例は以下の定義で提供される。
【０１４２】
「化学療法剤」はがんの治療に有用な化合物である。化学療法剤の例には、たとえば、チオテパ及びＣｙｔｏｘａｎ（登録商標）サイクロホスファミドのようなアルキル化剤；たとえば、ブスルファン、イムプロスルファン及びピポスルファンのようなスルホン酸アルキル；たとえば、ベンゾドパ、カルボクオン、メツレドパ及びウレドパのようなアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド及びトリメチロールメラミンを含むエチレンイミン及びメチルメラミン；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エレウテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン；スポンギスタチン；たとえば、クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イフォスファミド、メクロレタミン、酸化メクロレタミン塩酸塩、メルファラン、ノベムビシン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタードのようなナイトロジェンマスタード；たとえば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムスチンのようなニトロソウレア；たとえば、エネジン抗生剤（たとえば、カリケアミシン、特にカリケアミシンガンマ１Ｉ及びカリケアミシンオメガＩ１（たとえば、Ａｇｎｅｗ，Ｃｈｅｍ  Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．、３３：１８３−１８６（１９９４）を参照のこと）のような抗生剤；ダイネミシンＡを含むダイネミシン；たとえば、クロドロネートのようなビスホスフォネート；エスペラミシン；と同様にネオカルジノスタチンクロモフォア及び関連するクロモプロテインエネジン抗生剤クロモフォア）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アウトラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモミシニス、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、アドリアマイシン（登録商標）、ドキソルビシン（モルフォリノ−ドキソルビシン、シアノモルフォリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、たとえば、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、プロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；たとえば、メソトレキセート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）のような代謝拮抗物質；たとえば、デノプテリン、メソトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセートのような葉酸類似体；たとえば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チア���プリン、チオグアニンのようなプリン類似体；たとえば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンのようなピリミジン類似体；たとえば、カルステロン、ドロモスタノロンプロピオン酸塩、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンのようなアンドロゲン；たとえば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンのような抗副腎剤；たとえば、フォリン酸のような葉酸補充薬；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジクオン；エルフォルニチン；エリプチニウム酢酸塩；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダイニン；たとえば、メイタンシン及びアンサミトシンのようなメイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメト；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲ）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特にＴ−２トキシン、ベラクリンＡ、ロリジンＡ及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（“Ａｒａ−Ｃ”）；サイクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、たとえば、タキソール（登録商標）、パクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、Ｎ．Ｊ．）、アブラキサン（登録商標）、パクリタキセルのクレモフォアを含まない、アルブミン操作したナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ、Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ、Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、及びタキソテレ（登録商標）、ドキセタキセル（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ、Ａｎｔｏｎｙ、Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ジェムザール（登録商標）、ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メソトレキセート；たとえば、シスプラチン、オキサリプラチン及びカルボプラチンのような白金類似体；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イフォスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ナベルビン（登録商標）、ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセロダ；イバンドロネート；イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ、ＣＰＴ−１１）（５−ＦＵ及びロイコボリンを伴ったイリノテカンの治療計画を含む）；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；たとえば、レチノイン酸のようなレチノイド；カペシタビン；コンブレタスタチン；ロイコボリン（ＬＶ）；オキサリプラチン治療計画（ＦＯＬＦＯＸ）を含むオキサリプラチン；細胞増殖を減らすＰＫＣ−アルファ、Ｒａｆ、Ｈ−Ｒａｓ、ＥＧＦＲの阻害剤（たとえば、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）））及びＶＥＧＦ−Ａの阻害剤、ならびに上記のいずれかの薬学上許容できる塩、酸または誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４３】
さらなる非限定の例となる化学療法剤には、がんに対するホルモン作用を調節するまたは阻害するように作用する抗ホルモン剤、たとえば、タモキシフェン（Ｎｏｌｖａｄｅｘ（登録商標）タモキシフェンを含む）、ラノキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン及びＦａｒｅｓｔｏｎ（登録商標）トレミフェンを含む抗エストロゲン及び選択性エストロゲン受容体調節剤（ＳＥＲＭ）；副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、たとえば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、Ｍｅｇａｓｅ（登録商標）メゲストロール酢酸塩、Ａｒｏｍａｓｉｎ（登録商標）エキセメスタン、フォルメスタニー、ファドロゾール、Ｒｉｖｉｓｏｒ（登録商標）ボロゾール、Ｆｅｍａｒａ（登録商標）レトロゾール、及びＡｒｉｍｉｄｅｘ（登録商標）アナストロゾール；ならびに、たとえば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリンのような抗アンドロゲン；と同様に、トロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、異常な細胞増殖に関与するシグナル伝達経路における遺伝子、たとえば、ＰＫＣ−アルファ、Ｒａｌｆ及びＨ−Ｒａｓの発現を阻害するもの；たとえば、ＶＥＧＦ発現阻害剤（たとえば、Ａｎｇｉｏｚｙｍｅ（登録商標）リボザイム）及びＨＥＲ２発現阻害剤のようなリボザイム；たとえば、遺伝子療法ワクチンのようなワクチン、たとえば、Ａｌｌｏｖｅｃｔｉｎ（登録商標）ワクチン、Ｌｅｕｖｅｃｔｉｎ（登録商標）ワクチン、及びＶａｘｉｄ（登録商標）ワクチン；Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ｒＩＬ−２；Ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ（登録商標）トポイソメラーゼ１阻害剤；Ａｂａｒｅｌｉｘ（登録商標）ｒｍＲＨ；ならびに上記のいずれかの薬学上許容できる塩、酸、または誘導体が挙げられる。
【０１４４】
「抗血管新生剤」または「血管新生阻害剤」は、血管新生、脈管形成、または望ましくない血管透過性を直接または間接的に阻害する小分子量物質、ポリヌクレオチド（抑制性ＲＮＡ（ＲＮＡｉまたはｓｉＲＮＡ）を含む）、ポリペプチド、単離されたタンパク質、組換えタンパク質、抗体、またはそれらのコンジュゲートまたは融合タンパク質を指す。抗血管新生剤には、血管新生因子またはその受容体に結合するまたはその活性を阻止するものが含まれることが理解されるべきである。たとえば、抗血管新生剤は、血管新生剤に対する抗体または他のアンタゴニスト、たとえば、ＶＥＧＦ−Ａに対する抗体（たとえば、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）））またはＶＥＧＦ−Ａ受容体（たとえば、ＫＤＲ受容体またはＦｌｔ−１受容体）に対する抗体、たとえば、Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）（イマチニブメシル酸塩）のような抗ＰＤＧＦＲ阻害剤、ＶＥＧＦ受容体シグナル伝達を遮断する小分子（たとえば、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２８４、ＳＵ６６６８、Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標）／ＳＵ１１２４８（スニチニブリンゴ酸塩）、ＡＭＧ７０６、または、たとえば、国際特許出願ＷＯ２００４／１１３３０４に記載されたもの）である。抗血管新生剤にはまた、ネイティブの血管新生阻害剤、たとえば、アンギオスタチン、エンドスタチン、等も挙げられる。たとえば、Ｋｌａｇｓｂｒｕｎ及びＤ’Ａｍｏｒｅ，（１９９１），Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．５３：２１７−３９；Ｓｔｒｅｉｔ及びＤｅｔｍａｒ，（２００３），Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２２：３１７２−３１７９（たとえば、悪性黒色腫での抗血管新生療法をリストにしている表３）；Ｆｅｒｒａｒａ及びＡｌｉｔａｌｏ，（１９９９），Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，５（１２）：１３５９−１３６４；Ｔｏｎｉｎｉ，ｅｔ  ａｌ．（２００３），Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２２：６５４９−６５５６（たとえば、既知の抗血管新生因子をリストにしている表２）；ならびに、Ｓａｔｏ，（２００３），Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．８：２００−２０６（たとえば、臨床試験で使用された抗血管新生剤をリストにしている表１）を参照のこと。
【０１４５】
「成長阻害剤」は本明細書で使用されるとき、試験管内または生体内のいずれかで細胞（たとえば、ＶＥＧＦを発現している細胞）の成長を阻害する化合物または組成物を指す。従って、成長阻害剤はＳ期での細胞（たとえば、ＶＥＧＦを発現している細胞）の比率を顕著に減らすものであってもよい。成長阻害剤の例には、細胞周期の進行（Ｓ期以外のところで）を阻止する作用物質、たとえば、Ｇ１停止及びＭ期停止を誘導する作用物質が挙げられるが、これらに限定されない。従来のＭ期遮断剤にはビンカス（ビンクリスチン及びビンブラスチン）、タキサン、及び、たとえば、ドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシド及びブレオマイシンのようなトポイソメラーゼＩＩ阻害剤が挙げられる。Ｇ１を停止するそれら作用物質、たとえば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メソトレキセート、５−フルオロウラシル及びａｒａ−ＣのようなＤＮＡアルキル化剤はＳ期停止に波及する。さらなる情報は、Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎ及びＩｓｒａｅｌ，ｅｄｓ．，Ｔｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ，  Ｃｈａｐｔｅｒ  １，ｅｎｔｉｔｌｅｄ  “Ｃｅｌｌ  ｃｙｃｌｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，  ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ，ａｎｄ  ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ”  ｂｙ  Ｍｕｒａｋａｍｉ，ｅｔ  ａｌ．（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，１９９５），たとえば、ｐ．１３にて見いだすことができる。タキサン（パクリタキセル及びドセタキセル）は双方ともイチイに由来する抗がん薬である。ヨーロッパイチイに由来するドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標），Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ）はパクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標），Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）の半合成類似体である。パクリタキセル及びドセタキセルは、チューブリン二量体に由来する微小管の構築を促進し、脱重合を妨げることによって微小管を安定化し、結果として細胞の有糸分裂の阻害を生じる。
【０１４６】
用語「抗腫瘍組成物」は、少なくとも１つの活性がある治療剤を含むがんを治療するのに有用な組成物を指す。治療剤の例には、たとえば、化学療法剤、成長阻害剤、細胞傷害剤、放射線療法で使用される作用物質、抗血管新生剤、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤、アポトーシス剤、抗チューブリン剤に加えて他のがん免疫治療剤、及びがんを治療するための他の作用物質、たとえば、抗ＨＥＲ−２抗体、抗ＣＤ２０抗体、表皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）アンタゴニスト（たとえば、チロシンキナーゼ阻害剤）、ＨＥＲ１／ＥＧＦＲ阻害剤（たとえば、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））、血小板由来増殖因子阻害剤（たとえば、Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）（イマチニブメシル酸塩））、ＣＯＸ−２阻害剤（たとえば、セレコキシブ）、インターフェロン、ＣＴＬＡ−４阻害剤（たとえば、抗ＣＴＬＡ抗体イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ（登録商標）））、ＰＤ−Ｌ２阻害剤（たとえば、抗ＰＤ−Ｌ２抗体）、ＴＩＭ３阻害剤（たとえば、抗ＴＩＭ３抗体）、サイトカイン、以下の標的：ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４、ＰＤＧＦＲ−ベータ、ＢｌｙＳ、ＡＰＲＩＬ、ＢＣＭＡ、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ−４、ＴＩＭ３、またはＶＥＧＦ受容体（複数可）、ＴＲＡＩＬ／Ａｐｏ２の１以上に結合するアンタゴニスト（たとえば、中和抗体）、及び他の生物活性剤及び有機化学剤、等が挙げられるが、これらに限定されない。それらの組み合わせも本発明に含まれる。
【０１４７】
投与の経路及びキャリア
種々の実施形態では、ポリペプチド及び融合分子は、経口、動脈内、非経口、鼻内、静脈内、筋肉内、心臓内、脳室内、気管内、頬内、直腸、腹腔内、皮内、局所、経皮、及び髄腔内を含むが、これらに限定されない種々の経路によって、またはさもなければ移植もしくは吸入によって生体内で投与されてもよい。主題の組成物は、錠剤、カプセル剤、粉剤、顆粒剤、軟膏、溶液、座薬、浣腸、注射、吸入剤及び噴霧剤を含むが、これらに限定されない固形、半固形、液体または気体の形態での製剤に製剤化されてもよい。ポリペプチドをコードする核酸分子は金微粒子上にコーティングされてもよく、文献（たとえば、Ｔａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５６：１５２−１５４，（１９９２）を参照のこと）に記載されたように粒子衝撃装置、または「遺伝子銃」によって皮内に送達されてもよい。適当な製剤及び投与の経路は意図される適用に従って選択されてもよい。
【０１４８】
種々の実施形態では、ポリペプチドを含む組成物が多種多様な薬学上許容できるキャリアを伴った製剤にて提供される（たとえば、Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ｗｉｔｈ  Ｆａｃｔｓ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ：Ｄｒｕｇｆａｃｔｓ  Ｐｌｕｓ，２０ｔｈ  ｅｄ．（２００３）；Ａｎｓｅｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ及びＷｉｌｋｉｎｓ（２００４）；Ｋｉｂｂｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，３ｒｄ  ｅｄ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ（２０００）を参照のこと）。溶媒、補助剤及び希釈剤を含む種々の薬学上許容できるキャリアが利用できる。さらに、薬学上許容できる種々の補助物質、たとえば、ｐＨ調整剤及び緩衝剤、浸透圧調整剤、安定剤、湿潤剤、等も利用できる。非限定の例となるキャリアには、生理食塩水、緩衝化生理食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノール、及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【０１４９】
種々の実施形態では、ポリペプチド及び融合分子を含む組成物は、たとえば、植物油または他の油、合成脂肪族酸グリセリド、高級脂肪族酸のエステル、またはプロピレングリコールのような水性または非水性の溶媒にて、所望であれば、たとえば、可溶化剤、等張剤、懸濁剤、乳化剤、安定剤及び保存剤のような従来の添加剤と共にそれらを溶解する、懸濁する、または乳化することによって皮下投与を含む注射用に製剤化されてもよい。種々の実施形態では、組成物は、たとえば、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素、等のような加圧した許容できる高圧ガスを用いて吸入用に製剤化されてもよい。組成物はまた、種々の実施形態では、たとえば、生分解性または非生分解性のポリマーと共に持続放出マイクロカプセルに製剤化されてもよい。非限定の例となる生分解性製剤にはポリ乳酸・グリコール酸ポリマーが含まれる。非限定の例となる非生分解性製剤にはポリグリセリン脂肪酸エステルが含まれる。そのような製剤を作製する特定の方法は、たとえば、ＥＰ１１２５５８４Ａ１に記載されている。
【０１５０】
１以上の容器を含み、それぞれ１以上の用量のポリペプチドまたはポリペプチドの組み合わせを含有する医薬パック及び医薬キットも提供される。一部の実施形態では、単位投与量が提供され、その際、単位投与量は、１以上の追加の物質の有無にかかわらず、ポリペプチドまたはポリペプチドの組み合わせを含む所定の量の組成物を含有する。一部の実施形態では、そのような単位投与量は注射用の単回使用の予め充填された注射器にて供給される。種々の実施形態では、単位投与量に含有される組成物は生理食塩水、スクロース、等；たとえば、リン酸塩のような緩衝液、等を含んでもよく；及び／または安定で有効なｐＨの範囲内で製剤化されてもよい。或いは、一部の実施形態では、組成物は、適当な液体、たとえば、無菌水の添加の際、再構成されてもよい凍結乾燥粉末として提供されてもよい。一部の実施形態では、組成物は、スクロース及びアルギニンを含むが、これらに限定されない、タンパク質の凝集を阻害する１以上の物質を含む。一部の実施形態では、本発明の組成物はヘパリン及び／またはプロテオグリカンを含む。
【０１５１】
医薬組成物は特定の適応の治療または予防に有効な量で投与される。治療上有効な量は通常、治療される対象の体重、彼または彼女の身体的または健康上の状態、治療される状態の広範さ、または治療される対象の年齢に左右される。
【０１５２】
がんワクチンとの併用でのまたはがんワクチンの成分としてのＣＤ８０  ＥＣＤ及びＥＣＤ融合分子
本開示はまた、少なくとも１つの腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原を含むがんワクチン組成物との併用でＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子を投与する方法も含む。本開示はまた、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子と少なくとも１つの腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原とを含むがんワクチン組成物も提供する。いずれの状況（ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合分子が別々に投与されるかどうか、またはがんワクチンの成分であるかどうか）でも、がんワクチンは個別化がんワクチンであってもよい。
【０１５３】
一部の実施形態では、腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原は腫瘍と関連して一般に見いだされる抗原であってもよい。一部の実施形態では、腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原は、特定の患者の腫瘍で見いだされ、たとえば、生体外で産生されまたは増幅され、次いでワクチンとして再導入される抗原であってもよい。一部の実施形態では、抗原は、たとえば、抗原提示細胞のような免疫細胞の表面上で提供され、次いで患者に投与されてもよい。
【０１５４】
本開示はまた、がんワクチン組成物の成分としてＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合タンパク質も提供する。たとえば、がんワクチン組成物は、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合タンパク質と組み合わせて腫瘍特異抗原または腫瘍関連抗原を含んでもよい。
【０１５５】
そのようなワクチン組成物及び方法では、ＣＤ８０  ＥＣＤまたはＣＤ８０  ＥＣＤ融合タンパク質はワクチンを投与された患者にてメモリーＴ細胞のサブセットを変化させることができてもよい。
【０１５６】
以下で議論する実施例は本発明の純粋に例示を意図するものであって、本発明を限定するとは決して見なされるべきではない。実施例は、以下の実験が実施された実験のすべてである、または実施された実験のみであることを表すようには意図されない。使用された数（たとえば、量、温度、等）に関して精度を確保するように努力してきたが、一部の実験的な誤差及び偏差は説明されるべきである。特に指示されない限り、部分は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏度であり、圧力は大気圧またはほぼ大気圧である。
【実施例】
【０１５７】
実施例１：カニクイザルにおけるＣＤ４＋及びＣＤ８＋セントラルメモリーＴ細胞に対するＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃ投与の効果
試験は、野生型ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインに連結されたヒトＣＤ８０の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）から成るヒトＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃを用いてサル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）である実験に使用されたことがないカニクイザルにて実施した。４週間毎週投与した１ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ及び５０ｍｇ／ｋｇにてヒトＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃを調べた。
【０１５８】
１６匹のサルに１、８、１５及び２２日目にて溶媒またはヒトＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃを投与した。各実験群は４匹の動物、メス２匹及びオス２匹で構成された。各投与群の各性別の動物１匹を２６日目に安楽死させた。残りの動物は保持し、６週間の投与後回復期間について観察した。
【０１５９】
以下の時点：少なくとも１週間離して２回の投与前試料、２日目の第１の投与の２４時間後、４日目、８日目の投与前、１５日目の投与前、及び予定された剖検日、２６日目と６４日目にて静脈全血試料を採取した。
【０１６０】
全血試料にてフローサイトメトリー解析を行い、Ｔ細胞（ＣＤ８＋Ｔ細胞及びＣＤ４＋Ｔ細胞）、調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、ＮＫ細胞及びメモリーＴ細胞のサブセットレパートリー（ナイーブ、セントラルメモリー、エフェクターメモリー）の頻度、活性化及び増殖を評価した。
【０１６１】
ヒトＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃによる処理はカニクイザルの末梢血にて主要リンパ球（ＮＫ細胞、Ｂ細胞、全ＣＤ４＋またはＣＤ８＋Ｔ細胞、またはＴｒｅｇ）の頻度に明白な変化を誘導しなかった。ヒトＣＤ８０  ＥＣＤ−ＦｃはセントラルメモリーＴ細胞のサブセット（Ｔｃｍ）の用量依存性の増加及び増殖を誘導した。ＣＤ９５及びＣＤ２８を発現しているセントラルメモリーＣＤ４＋及びＣＤ８Ｔ細胞の増加は１０ｍｇ／ｋｇ及び５０ｍｇ／ｋｇを投与した群で観察されたが、１ｍｇ／ｋｇを投与した群では観察されなかった。セントラルメモリーＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の集団はヒトＣＤ８０  ＥＣＤ−Ｆｃの各投与の後、頻度で増加し続け、その後、試験の終了までに低下した（図１及び２）。Ｋｉ６７の発現によって測定したときのセントラルメモリーＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖も１０ｍｇ／ｋｇ及び５０ｍｇ／ｋｇで処理した群にて増加した。Ｋｉ６７の発現は第１の投与の７日後ＣＤ４＋Ｔｃｍにて及び第２の投与の７日後ＣＤ８＋Ｔｃｍにて最高となった；Ｋｉ６７の発現は試験の終了までにベースラインのレベルに戻った（図３及び４）。
配列表
以下の表は本明細書で参照された特定の配列のリストを提供する。
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【表４】
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【表５】
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【表６】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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