(57)【要約】  ４−１ＢＢアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、グルココルチコイド誘導性ＴＮＦ受容体関連アゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＨＶＥＭアゴニスト、又はＣＤ９５アゴニストなどの腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを使用して腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を拡大培養する方法、及び癌などの疾患の治療におけるかかる拡大培養したＴＩＬの使用が本明細書に開示される。加えて、一部の実施形態において、癌などの疾患の治療において有用なＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの治療的併用が、その組成物、使用、及び投与レジメンを含め、本明細書に開示される。
2020514289.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）前記腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で前記第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、前記第２のＴＩＬ集団が前記第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、前記第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び前記初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で前記第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、前記迅速拡大培養の開始から７日後に前記第３のＴＩＬ集団が前記第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；前記第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択で前記ＴＮＦＲＳＦアゴニスト及び第２のＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び前記迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）前記第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）前記患者に治療上有効な分量の前記第３のＴＩＬ集団を投与するステップ
を含む方法。
【請求項２】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＨＶＥＭアゴニスト、ＣＤ９５アゴニスト、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが４−１ＢＢアゴニストであり、前記４−１ＢＢアゴニストが、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、融合タンパク質、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが、ＯＸ４０アゴニスト、又はその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
前記４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質が、（ｉ）第１の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性４−１ＢＢ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び前記追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＯＸ４０アゴニストであり、及び前記ＯＸ４０アゴニストが、タボリキシズマブ、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ６３８３、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、CreativeBiolabs  ＭＯＭ−１８４５５、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項７】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＯＸ４０アゴニストであり、前記ＯＸ４０アゴニストがＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項８】
前記ＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質が、（ｉ）第１の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＯＸ４０結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び前記追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＣＤ２７アゴニストであり、前記ＣＤ２７アゴニストがバルリルマブ、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＣＤ２７アゴニストであり、前記ＣＤ２７アゴニストがＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質が、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ２７結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＧＩＴＲアゴニストであり、前記ＧＩＴＲアゴニストが、ＴＲＸ５１８、６Ｃ８、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、３１Ｈ６、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、１７１８、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、９Ｈ６、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＧＩＴＲアゴニストであり、前記ＧＩＴＲアゴニストがＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質が、（ｉ）第１の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び前記追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＨＶＥＭアゴニストである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＨＶＥＭアゴニストがＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質が、（ｉ）第１の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び前記追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＣＤ９５アゴニストである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＣＤ９５アゴニストであり、前記ＣＤ９５アゴニストがＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＣＤ９５アゴニストが、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ９５結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ９５結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ９５結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含む融合タンパク質であり、及び前記追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日から開始して前記患者を前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストで治療するステップを更に含み、前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で４週間毎に最大８サイクルにわたって静脈内投与される、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記患者から腫瘍を切除する前記ステップの前に前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストで前記患者を治療するステップを更に含み、前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で４週間毎に最大８サイクルにわたって静脈内投与される、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、タボリキシズマブ、Creative Biolabs  ＭＯＭ−１８４５５、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記第１の細胞培養培地が第２のＴＮＦＲＳＦアゴニストを含む、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが４−１ＢＢアゴニストであり、及び前記第２のＴＮＦＲＳＦアゴニストがＯＸ４０アゴニストである、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが、前記初期拡大培養中に、毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎、及び２週間毎からなる群から選択される間隔で前記第１の細胞培養培地に加えられる、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが、前記迅速拡大培養中に、毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎、及び２週間毎からなる群から選択される間隔で前記第２の細胞培養培地に加えられる、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが前記細胞培養培地中で０．１μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で加えられる、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが前記細胞培養培地中で２０μｇ／ｍＬ〜４０μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で加えられる、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
ＩＬ−２が前記第１の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
ＩＬ−２が前記第１の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３２】
ＩＬ−２が前記第１の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
ＩＬ−２が前記第１の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３４】
ＩＬ−２が前記第２の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
ＩＬ−２が前記第２の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３６】
ＩＬ−２が前記第２の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
ＩＬ−２が前記第２の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
前記第１の細胞培養培地中にＩＬ−１５が存在する、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記第１の細胞培養培地中にＩＬ−１５が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記第２の細胞培養培地中にＩＬ−１５が存在する、請求項１〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記第２の細胞培養培地中にＩＬ−１５が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記第１の細胞培養物培地中にＩＬ−２１が存在する、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記第１の細胞培養培地中にＩＬ−２１が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記第２の細胞培養培地中にＩＬ−２１が存在する、請求項１〜４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
前記第２の細胞培養培地中にＩＬ−２１が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
ＯＫＴ−３抗体が前記第２の細胞培養培地中に約１０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項１〜４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
ＯＫＴ−３抗体が前記第２の細胞培養培地中に約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記初期拡大培養がガス透過性容器を使用して行われる、請求項１〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
前記迅速拡大培養がガス透過性容器を使用して行われる、請求項１〜４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与前に前記患者を骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンで治療するステップを更に含む、請求項１〜４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンが、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間のシクロホスファミドの投与ステップと、それに続く２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間のフルダラビンの投与ステップを含む、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日から開始して前記患者を漸減ＩＬ−２レジメンで治療するステップを更に含み、前記漸減ＩＬ−２レジメンが、１日目に１８，０００，０００ＩＵ／ｍ２、２日目に９，０００，０００ＩＵ／ｍ２、並びに３及び４日目に４，５００，０００ＩＵ／ｍ２の用量で静脈内投与されるアルデスロイキンを含む、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記第３のＴＩＬ集団を０．１０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日の用量で前記患者に投与した後に前記患者をペグ化ＩＬ−２で治療するステップを更に含む、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日から開始して前記患者を高用量ＩＬ−２レジメンで治療するステップを更に含む、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記高用量ＩＬ−２レジメンが、忍容量まで８時間毎に１５分ボーラス静脈内注入として投与される６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇのアルデスロイキン、又はそのバイオシミラー若しくは変異体を含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記癌が、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌、及び肉腫からなる群から選択される、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記癌が、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫、及びぶどう膜（眼）黒色腫からなる群から選択される、請求項１〜５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
前記患者から前記腫瘍を切除する前に前記患者をＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬で治療するステップを更に含む、請求項１〜５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
前記ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記患者から前記腫瘍を切除した後に前記患者をＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬で治療するステップを更に含む、請求項１〜５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
前記ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与後に前記患者をＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬で治療するステップを更に含む、請求項１〜６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
前記ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記第１の細胞培養培地が、ＩＬ−４、ＩＬ−７、又はこれらの組み合わせを更に含む、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６５】
前記第２の細胞培養培地が、ＩＬ−４、ＩＬ−７、又はこれらの組み合わせを更に含む、請求項１〜６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
前記初期拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われる、請求項１〜６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
前記迅速拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われる、請求項１〜６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団の調製プロセスであって、
（ｂ）第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で前記第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、前記第２のＴＩＬ集団が前記第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、前記第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び前記初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で前記第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、前記迅速拡大培養の開始から７日後に前記第３のＴＩＬ集団が前記第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；前記第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択で前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び前記迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；及び
（ｅ）前記第３のＴＩＬ集団を回収するステップ
を含むプロセス。
【請求項６９】
前記第１のＴＩＬ集団が腫瘍から入手され、腫瘍は患者から切除されたものである、請求項６８に記載のプロセス。
【請求項７０】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＨＶＥＭアゴニスト、ＣＤ９５アゴニスト、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項６８又は６９に記載のプロセス。
【請求項７１】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが４−１ＢＢアゴニストである、請求項６８〜７０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７２】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが４−１ＢＢアゴニストであり、前記４−１ＢＢアゴニストが、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項６８〜７１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７３】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが４−１ＢＢアゴニストであり、前記４−１ＢＢアゴニストが４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質である、請求項６８〜７２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７４】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質であり、前記４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質が、（ｉ）第１の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性４−１ＢＢ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び前記追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項６８〜７３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７５】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＯＸ４０アゴニストである、請求項６８〜７４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７６】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＯＸ４０アゴニストであり、前記ＯＸ４０アゴニストが、タボリキシズマブ、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ６３８３、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、Creative Biolabs  ＭＯＭ−１８４５５、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項６８〜７５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７７】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＯＸ４０アゴニストであり、前記ＯＸ４０アゴニストがＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質である、請求項６８〜７６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７８】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質であり、前記ＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質が、（ｉ）第１の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＯＸ４０結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び前記追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項６８〜７７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７９】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＣＤ２７アゴニストである、請求項６８〜７８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８０】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＣＤ２７アゴニストであり、前記ＣＤ２７アゴニストが、バルリルマブ、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである、請求項６８〜７９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８１】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＣＤ２７アゴニストであり、前記ＣＤ２７アゴニストがＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質である、請求項６８〜８０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８２】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＣＤ２７アゴニストであり、前記ＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質が、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ２７結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び前記追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項６８〜８１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８３】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＧＩＴＲアゴニストである、請求項６８〜８２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８４】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＧＩＴＲアゴニストであり、前記ＧＩＴＲアゴニストが、ＴＲＸ５１８、６Ｃ８、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、３１Ｈ６、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、１７１８、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、９Ｈ６、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項６８〜８３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８５】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＧＩＴＲアゴニストであり、前記ＧＩＴＲアゴニストがＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質である、請求項６８〜８４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８６】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質であり、前記ＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質が、（ｉ）第１の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び前記追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項６８〜８５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８７】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＨＶＥＭアゴニストである、請求項６８〜８６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８８】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＨＶＥＭアゴニストであり、前記ＨＶＥＭアゴニストがＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質である、請求項６８〜８７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８９】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質であり、前記ＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質が、（ｉ）第１の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び前記追加のドメインがＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び前記融合タンパク質が構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である、請求項６８〜８８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９０】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、タボリキシズマブ、CreativeBiolabs  ＭＯＭ−１８４５５、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項６８〜８９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９１】
前記第１の細胞培養培地が第２のＴＮＦＲＳＦアゴニストを含む、請求項６８〜９０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９２】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが前記初期拡大培養中に、毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎、及び２週間毎からなる群から選択される間隔で前記第１の細胞培養培地に加えられる、請求項６８〜９１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９３】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが前記迅速拡大培養中に、毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎、及び２週間毎からなる群から選択される間隔で前記第２の細胞培養培地に加えられる、請求項６８〜９２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９４】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが前記細胞培養培地中で０．１μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で加えられる、請求項６８〜９３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９５】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが前記細胞培養培地中で２０μｇ／ｍＬ〜４０μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で加えられる、請求項６８〜９４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９６】
ＩＬ−２が第１の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜９５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９７】
ＩＬ−２が前記第１の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜９６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９８】
ＩＬ−２が前記第１の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜９７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９９】
ＩＬ−２が前記第１の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜９８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１００】
ＩＬ−２が第２の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜９９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０１】
ＩＬ−２が前記第２の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜１００のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０２】
ＩＬ−２が前記第２の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜１０１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０３】
ＩＬ−２が前記第２の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜１０２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０４】
前記第１の細胞培養培地中にＩＬ−１５が存在する、請求項６８〜１０３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０５】
前記第１の細胞培養培地中にＩＬ−１５が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜１０４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０６】
前記第２の細胞培養培地中にＩＬ−１５が存在する、請求項６８〜１０５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０７】
前記第２の細胞培養培地中にＩＬ−１５が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜１０６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０８】
前記第１の細胞培養培地中にＩＬ−２１が存在する、請求項６８〜１０７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０９】
前記第１の細胞培養培地中にＩＬ−２１が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜１０８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１１０】
前記第２の細胞培養培地中にＩＬ−２１が存在する、請求項６８〜１０９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１１１】
前記第２の細胞培養培地中にＩＬ−２１が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜１１０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１１２】
ＯＫＴ−３抗体が前記第２の細胞培養培地中に約１０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜１１１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１１３】
ＯＫＴ−３抗体が前記第２の細胞培養培地中に約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する、請求項６８〜１１２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１１４】
前記初期拡大培養がガス透過性容器を使用して行われる、請求項６８〜１１３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１１５】
前記迅速拡大培養がガス透過性容器を使用して行われる、請求項６８〜１１４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１１６】
請求項６８〜１１５のいずれか一項に記載のプロセスから入手可能な腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団。
【請求項１１７】
癌の治療における使用のための腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を含む医薬組成物であって、前記腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団が請求項６８〜１１５のいずれか一項に記載のプロセスによって入手可能であり、任意選択で前記医薬組成物が前記第３のＴＩＬ集団を含む、医薬組成物。
【請求項１１８】
ＴＮＦＲＳＦアゴニストとの併用における使用のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１１９】
前記医薬組成物がＴＮＦＲＳＦアゴニストとの併用における使用のためのものであり、前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが、前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与翌日における投与のためのものであり、及び前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で４週間毎に最大８サイクルにわたって静脈内投与される、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１２０】
前記医薬組成物がＴＮＦＲＳＦアゴニストとの併用における使用のためのものであり、前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが、前記患者から腫瘍を切除する前記ステップの前における投与のためのものであり、及び前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で４週間毎に最大８サイクルにわたる静脈内投与のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１２１】
骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンとの併用における使用のための、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１２２】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与前の骨髄破壊的リンパ球枯渇レジメンとの併用における使用のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１２３】
前記医薬組成物が骨髄破壊的リンパ球枯渇レジメンとの併用における使用のためのものであり、前記骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンが、前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与前における投与のためのものであり、及び前記骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンが、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間のシクロホスファミドの投与ステップと、それに続く２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間のフルダラビンの投与ステップを含む、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１２４】
漸減ＩＬ−２レジメンとの併用における使用のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１２５】
前記医薬組成物が、前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日から開始する漸減ＩＬ−２レジメンとの併用における使用のためのものであり、前記漸減ＩＬ−２レジメンが、１日目に１８，０００，０００ＩＵ／ｍ２、２日目に９，０００，０００ＩＵ／ｍ２、並びに３及び４日目に４，５００，０００ＩＵ／ｍ２の用量で静脈内投与されるアルデスロイキンを含む、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１２６】
ペグ化ＩＬ−２との併用における使用のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１２７】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与後に０．１０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日の用量で投与されるペグ化ＩＬ−２との併用における使用のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１２８】
高用量ＩＬ−２レジメンとの併用における使用のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１２９】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日から開始する高用量ＩＬ−２レジメンとの併用における使用のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１３０】
前記医薬組成物が、前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与の翌日から開始する高用量ＩＬ−２レジメンとの併用における使用のためのものであり、前記高用量ＩＬ−２レジメンが、忍容量まで８時間毎に１５分ボーラス静脈内注入として投与される６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇのアルデスロイキン、又はそのバイオシミラー若しくは変異体を含む、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１３１】
ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬との併用における使用のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１３２】
前記医薬組成物がＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬との併用における使用のためのものであり、前記ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１３３】
前記医薬組成物がＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬との併用における使用のためのものであり、前記ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬が、前記患者から前記腫瘍を切除する前に投与される、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１３４】
前記医薬組成物が、前記患者から前記腫瘍を切除する前のＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬との併用における使用のためのものであり、前記ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１３５】
前記患者から腫瘍を切除した後のＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬との併用における使用のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１３６】
前記医薬組成物が、前記患者から前記腫瘍を切除した後のＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬との併用における使用のためのものであり、前記ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１３７】
前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与後における投与のためのものであるＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬との併用における使用のためのものである、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１３８】
前記医薬組成物が、前記患者への前記第３のＴＩＬ集団の投与後における投与のためのものであるＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬との併用における使用のためのものであり、前記ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１１７に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１３９】
前記癌が、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌、及び肉腫からなる群から選択される、請求項１１７〜１３８のいずれか一項に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１４０】
前記癌が、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫、及びぶどう膜（眼）黒色腫からなる群から選択される、請求項１１７〜１３８のいずれか一項に記載の癌の治療における使用のための医薬組成物。
【請求項１４１】
腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法であって、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）前記腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養物培地中で前記第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、前記第２のＴＩＬ集団が前記第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、前記第１の細胞培養培地がＩＬ−２を含み、及び前記初期拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養物培地中で前記第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、前記迅速拡大培養の開始から７日後に前記第３のＴＩＬ集団が前記第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；前記第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び前記迅速拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）前記第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）前記患者に治療上有効な分量の前記第３のＴＩＬ集団を投与するステップ
を含む方法。
【請求項１４２】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１４１に記載の方法。
【請求項１４３】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストが４−１ＢＢアゴニストであり、前記４−１ＢＢアゴニストが、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、融合タンパク質、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１４２に記載の方法。
【請求項１４４】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがＯＸ４０アゴニストであり、前記ＯＸ４０アゴニストが、タボリキシズマブ、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ６３８３、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、CreativeBiolabs  ＭＯＭ−１８４５５、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される、請求項１４２に記載の方法。
【請求項１４５】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがステップ（ｄ）の開始時に１μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１４１〜１４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４６】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがステップ（ｄ）の開始時に５μｇ／ｍＬ〜２０μｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１４５に記載の方法。
【請求項１４７】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがステップ（ｄ）の開始時に約１０μｇ／ｍＬの濃度で存在する、請求項１４６に記載の方法。
【請求項１４８】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがステップ（ｄ）全体を通じて１μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬの濃度に維持される、請求項１４１〜１４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４９】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがステップ（ｄ）全体を通じて５μｇ／ｍＬ〜２０μｇ／ｍＬの濃度に維持される、請求項１４５に記載の方法。
【請求項１５０】
前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストがステップ（ｄ）全体を通じて約１０μｇ／ｍＬの濃度に維持される、請求項１４６に記載の方法。
【請求項１５１】
前記第３のＴＩＬ集団が、前記第２のＴＩＬ集団における参照ＣＤ８＋ＴＩＬ対ＣＤ４＋ＴＩＬ比と比較して増加したＣＤ８＋ＴＩＬ対ＣＤ４＋ＴＩＬ比を呈する、請求項１４１〜１５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５２】
前記増加した比が前記参照比と比べて少なくとも５％高い、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１５３】
前記増加した比が前記参照比と比べて少なくとも１０％高い、請求項１５２に記載の方法。
【請求項１５４】
前記増加した比が前記参照比と比べて少なくとも２０％高い、請求項１５３に記載の方法。
【請求項１５５】
前記増加した比が前記参照比と比べて少なくとも３５％高い、請求項１５４に記載の方法。
【請求項１５６】
前記増加した比が前記参照比と比べて少なくとも５０％高い、請求項１５５に記載の方法。
【請求項１５７】
前記癌が、黒色腫、ぶどう膜（眼）黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌（頭頸部扁平上皮癌）、腎細胞癌、結腸直腸癌、膵癌、膠芽腫、胆管癌、及び肉腫からなる群から選択される、請求項１４１〜１５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５８】
前記癌が、皮膚黒色腫、ぶどう膜（眼）黒色腫、白金耐性卵巣癌、膵管腺癌、骨肉腫、トリプルネガティブ乳癌、及び非小細胞肺癌からなる群から選択される、請求項１４１〜１５６のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
[0001]  本国際出願は、２０１７年１月６日に出願された米国仮特許出願第６２／４４３，５５６号、２０１７年２月１７日に出願された米国仮特許出願第６２／４６０，４７７号、２０１７年７月１４日に出願された米国仮特許出願第６２／５３２，８０７号、及び２０１７年１０月２日に出願された米国仮特許出願第６２／５６７，１５１号に対する優先権の利益を主張するものであり、これらは全体が参照により本明細書に援用される。
【０００２】
発明の分野
[0002]  ４−１ＢＢアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、グルココルチコイド誘導性ＴＮＦ受容体関連アゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＨＶＥＭアゴニスト、又はＣＤ９５アゴニストなどの腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを使用して腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を拡大培養する方法、及び癌などの疾患の治療における拡大培養したＴＩＬの使用が本明細書に開示される。加えて、癌などの疾患の治療におけるＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの治療的併用が、その組成物及び使用を含め、本明細書に開示される。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
[0003]  腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の自家養子移入を用いた大型難治性癌の治療は、予後不良の患者に対する強力な治療手法に相当する。Gattinoni, et al., Nat. Rev. Immunol. 2006, 6, 383-393。ＴＩＬはＴ細胞が優勢であり、ＩＬ−２ベースのＴＩＬ拡大培養と、それに続く「迅速拡大培養法」（rapid expansion process：ＲＥＰ）が、その速さ及び効率から、ＴＩＬ拡大培養に好ましい方法となっている。Dudley, et al., Science 2002, 298, 850-54；Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2005,23, 2346-57；Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2008, 26,5233-39；Riddell, et al., Science 1992, 257, 238-41；Dudley, et al., J. Immunother. 2003, 26, 332-42。黒色腫におけるＴＩＬ療法に対する臨床応答を改善し、ＴＩＬ療法を他の腫瘍型に拡大する幾つもの手法が研究されているが、成功は限られており、この領域は依然として難題である。Goff, et al., J. Clin. Oncol. 2016, 34,2389-97；Dudley, et al., J.Clin. Oncol. 2008, 26, 5233-39；Rosenberg, et al., Clin.Cancer Res. 2011, 17, 4550-57。多くの関心が、特定のサブセット（ＣＤ８＋Ｔ細胞など）を選択するための、或いは突然変異ＥＲＢＢ２ＩＰエピトープなどのドライバー突然変異又はＫＲＡＳ癌遺伝子におけるドライバー突然変異を標的化するための、拡大培養中のＴＩＬの選択に向けられてきた。Tran, et al., N. Engl. J. Med. 2016, 375, 2255-62；Tran,et al., Science 2014, 344, 641-45。しかしながら、かかる選択手法は、大規模臨床試験で有効性を示すまでに開発することができたとしても、ＴＩＬ療法の実施にかかる所要時間、複雑性、及びコストが著しく増大し、異なる種類の癌におけるＴＩＬ療法の普及可能性を制限する。
【０００４】
[0004]  ４−１ＢＢ（別名ＣＤ１３７及びＴＮＦＲＳＦ９）は、初めは活性化Ｔ細胞に発現する誘導性共刺激受容体として同定されたもので、ＴＮＦＲＳＦの膜貫通糖タンパク質メンバーである。Watts, Annu. Rev. Immunol. 2005, 23, 23-68。４−１ＢＢは、活性化Ｔリンパ球に、及びＣＤ４＋よりもＣＤ８＋Ｔ細胞に一層多く発現する２型膜貫通糖タンパク質である。４−１ＢＢはまた、樹状細胞、濾胞樹状細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、顆粒球、炎症部位の血管壁細胞、腫瘍血管系、及びアテローム硬化型内皮にも発現する。４−１ＢＢを刺激するリガンド（４−１ＢＢＬ）は、活性化抗原提示細胞（ＡＰＣ）、骨髄系前駆細胞及び造血幹細胞に発現する。４−１ＢＢは活性化誘導性Ｔ細胞共刺激分子である。４−１ＢＢを通じたシグナル伝達はＴ細胞において生存遺伝子を上方制御し、細胞分裂を亢進させ、サイトカイン産生を誘導し、及び活性化誘導細胞死（sell death）を防止する。４−１ＢＢに関する現時点での理解からは、発現が概して活性化依存的であり、活性化ＮＫ及びＮＫ  Ｔ細胞（ＮＫＴ細胞）；調節性Ｔ細胞；濾胞ＤＣを含めた樹状細胞（ＤＣ）；刺激を受けたマスト細胞、分化骨髄系細胞、単球、好中球、好酸球、及び活性化Ｂ細胞を含めた広範囲の免疫細胞サブセットを包含することが指摘される。４−１ＢＢはＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖及びエフェクター機能を強力に亢進させる。４−１ＢＢの架橋結合は、Ｔ細胞増殖、ＩＬ−２分泌、生存及び細胞溶解活性を亢進させる。加えて、抗４−１ＢＢモノクローナル抗体は強力な抗腫瘍特性を有し、ひいてはこれが、ＣＤ８＋  Ｔ細胞を活性化し、ＩＦＮ−ｇを産生し、及び細胞溶解マーカーを誘導するその強力な能力の結果となる。Vinay and Kwon, Mol. Cancer Therapeutics 2012, 11, 1062-70；Lee, et al., PLoS One, 2013, 8, e69677, 1-11。
【０００５】
[0005]  活性化正常ヒトＢ細胞上の４−１ＢＢとそのリガンドとのＢ細胞受容体会合時の相互作用は増殖を刺激し、生存を亢進させる。Ｂ細胞リンパ腫における４−１ＢＢ会合の潜在的影響が、少なくとも２つの既発表の研究で調査されている。幾つか種類のヒト原発性ＮＨＬ試料の評価では、４−１ＢＢがリンパ腫細胞よりむしろ浸潤Ｔ細胞に主に発現することが示された。Houot, et al., Blood, 2009, 114, 3431-38。Ｂリンパ腫細胞のインビトロ培養物に４−１ＢＢアゴニストをリツキシマブ及びＮＫ細胞と共に加えると、リンパ腫死滅が増加した。Kohrt, et al., Blood, 2011,117, 2423-32。加えて、２つの実験でカニクイザルにおいて０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇの用量でＰＦ−０５０８２５６６を使用してＢ細胞免疫表現型タイピングが行われた；国際公開第２０１５／１１９９２３号に記載されるとおり、これらの実験では末梢血Ｂ細胞数は変化しないか、又は減少したかのいずれかであった。
【０００６】
[0006]  ４−１ＢＢはナイーブＴ細胞の表面上に検出不能であるが、活性化時に発現が増加する。４−１ＢＢが活性化すると、ＴＮＦＲ関連因子（ＴＲＡＦ）ファミリーの２つの生存促進メンバー、ＴＲＡＦ１及びＴＲＡＦ２が４−１ＢＢ細胞質テールに動員されることにより、ＮＦｋＢ並びにＥｒｋ、Ｊｎｋ、及びｐ３８ＭＡＰキナーゼを含めたマイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼカスケードの下流活性化が起こる。ＮＦｋＢ活性化は、Ｂｃｌ−２ファミリーの生存促進メンバーであるＢｆｌ−１及びＢｅｌ−ＸＬの上方制御につながる。アポトーシス促進タンパク質ＢｉｍはＴＲＡＦ１及びＥｒｋ依存的に下方制御される。Sabbagh, et al., J. Immunol. 2008, 180, 8093-8101。報告によれば、４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体（ｍＡｂ）は共刺激分子発現を増加させ、細胞溶解性Ｔリンパ球応答を著しく亢進させるため、様々なモデルにおいて抗腫瘍有効性を生じることが示されている。４−１ＢＢアゴニストｍＡｂは、予防的及び治療的セッティング並びに単剤療法及び併用療法の両方の腫瘍モデルで有効性を実証しており、耐久性のある抗腫瘍防御性Ｔ細胞メモリー応答を確立している。Lynch, et al., Immunol Rev., 2008, 222, 277-286。４−１ＢＢアゴニストはまた、種々の自己免疫モデルで自己免疫反応も抑制する。Vinay, et al., J. Mol. Med. 2006, 84, 726-36。
【０００７】
[0007]  ＯＸ４０受容体（ＯＸ４０）（別名ＴＮＦＲＳＦ４、ＣＤ１３４、ＡＣＴ−４、及びＡＣＴ３５）は、活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞に発現するＴＮＦ受容体ファミリーのメンバーである（国際公開第９５／１２６７３号を参照）。活性化Ｂ細胞及び樹状細胞上に存在する、ＯＸ４０Ｌ、ｇｐ３４又はＡＣＴ−４リガンドと称されるＯＸ４０リガンドによってこの受容体が惹起されると、免疫応答時のＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖が亢進し、ＣＤ４＋メモリーＴ細胞の形成が影響を受ける。更に、ＯＸ４０−ＯＸ４０Ｌ系は内皮細胞への活性化Ｔ細胞の接着を媒介し、ひいては活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞を炎症部位に導く。
【０００８】
[0008]  ＯＸ４０＋Ｔ細胞は、腫瘍浸潤リンパ球を含む腫瘍病変内及び腫瘍細胞陽性流入領域リンパ節に存在することが示されている。Weinberg, et al., J. Immunol., 2000, 164, 2160-2169。マウスにおける幾つかの腫瘍モデルで、対照治療マウスと比較したときインビボでの腫瘍プライミング時のＯＸ４０受容体会合が腫瘍の出現を有意に遅延させ、防止したことが示された。Weinberg, et al., J. Immunol., 2000, 164, 2160-2169。従って、ＯＸ４０受容体結合剤を投与することにより、ＯＸ４０受容体会合によって抗原に対する哺乳類の免疫応答を亢進させることが企図されている（国際公開第１９９９／０４２５８５号；Weinberg, et al., J. Immunol., 2000, 164, 2160-2169）。前臨床試験において、抗ＯＸ４０モノクローナル抗体及びＯＸ４０Ｌ−Ｆｃ融合タンパク質の両方を含めたＯＸ４０アゴニストによる腫瘍担持宿主の治療が幾つかの前臨床モデルで腫瘍退縮をもたらしたことが実証された。Linch, et al., Front. Oncol. 2015, 34, 1-14。
【０００９】
[0009]  ＣＤ２７、別名ＴＮＦＲＳＦ７は、ＣＤ４０、４−１ＢＢ、及びＯＸ４０を含めた他のＴＮＦＲＳＦメンバーと重複する活性を有する。ＣＤ２７は、Ｔ細胞生存、活性化、及びエフェクター機能において決定的な役割を果たし、またＮＫ細胞の増殖活性及び細胞傷害活性においても役割を果たす。ＣＤ２７は、ナイーブＴ細胞を含めた大多数のＴ細胞で構成的に発現する。ＣＤ２７のリガンドはＣＤ７０であり、これはＴ細胞、Ｂ細胞、及び樹状細胞に見られる。Oshima, et al., Int. Immunol. 1998, 10, 517-26。ＣＤ２７は、ＣＤ２８の後にＴエフェクター細胞生存を持続させる働きをしてＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の拡大をドライブし、一次応答よりも二次応答に一層影響する。しかしながら、ＣＤ２７活性化はまた、調節性Ｔ細胞の免疫抑制効果の亢進を通じた腫瘍成長とも関連付けられている。Claus, et al., Cancer Res. 2012, 72, 3664-76。他のデータでは、ＣＤ２７の免疫刺激効果がこの腫瘍促進効果に優り得ることが指摘されている。Aulwurm, et al., Int. J. Cancer 2006, 118, 1728-35。マウスモデルでは、アゴニストＣＤ２７モノクローナル抗体が抗腫瘍有効性（antitumor efficiacy）及び腫瘍免疫の誘導を示した。He, etal., J. Immunol. 2013, 191, 4174-83。
【００１０】
[0010]  グルココルチコイド誘導性ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）は、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１８（ＴＮＦＲＳＦ１８）、活性化誘導性ＴＮＦＲファミリー受容体（ＡＩＴＲ）、及びＣＤ３５７としても知られる共刺激チェックポイント分子である。ＧＩＴＲは、調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）及びエフェクターＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、及び抗原提示細胞を含め、幾つかの細胞型に発現する。Nocentini and Riccardi, Eur. J. Immunol. 2005, 35, 1016-1022。ＧＩＴＲは、そのコンジュゲートＧＩＴＲリガンド（ＧＩＴＲＬ）によって活性化される。ＧＩＴＲは免疫応答の刺激において役割を果たし、ＧＩＴＲに対する抗原結合タンパク質は、免疫応答を増加させることが望ましい種々のＧＩＴＲ関連疾患又は障害の治療において有用性がある。Ko, et al., J. Exp. Med. 2005, 202, 885-91；Shimizu, et al., Nature Immunology2002, 3, 135-142；Cohen, et al., Cancer Res. 2006, 66,4904-12；Azuma, Crit. Rev. Immunol. 2010, 30, 547-57。例えば、ＧＩＴＲを通じたＴ細胞刺激はＴｒｅｇ媒介抑制を減弱させ、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞による腫瘍死滅を亢進させる。ＧＩＴＲはＴｒｅｇ（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋又はＣＤ８＋ＣＤ２５＋細胞など）で高度に構成的に発現し、加えてこれらの細胞の活性化時に上方制御される。Nocentini and Riccardi, Eur. J. Immunol. 2005, 35, 1016-1022。ＧＩＴＲは、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋の両方のナイーブＴ細胞に対する共活性化シグナルであり、特にＴ細胞受容体（ＴＣＲ）刺激が最適に満たない状況で増殖及びエフェクター機能を誘導し、亢進させる。Schaer, et al., Curr. Opin. Immunol. 2012, 24, 217-224。融合タンパク質及び抗ＧＩＴＲ抗体（アゴニスト抗体を含む）などの抗原結合ＧＩＴＲタンパク質によって引き起こされる免疫応答の亢進は、癌、自己免疫疾患、炎症性疾患、又は感染症の治療など、種々の免疫療法適用において有益である。
【００１１】
[0011]  ヘルペスウイルス侵入メディエーター（ＨＶＥＭ）、別名ＴＮＦＲＳＦ１４及びＣＤ２７０は、当初は単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）の受容体として単離された。Montgomery, et al., Cell 1996, 87, 427-36。ＨＶＥＭは、ＴＮＦファミリーリガンドのＬＩＧＨＴ及びリンホトキシンαホモ三量体（Ｌｔα３）に結合する。Mauri, et al., Immunity 1998, 8, 21-30。ＨＶＥＭ−ＬＩＧＨＴ相互作用を通じてＴ細胞活性が起こることができ、この相互作用は、ＣＤ２８シグナル伝達とは独立した共刺激シグナルをＴ細胞に提供し、準最適レベルのＣＤ３抗体（ＯＫＴ−３）の存在下で観察することができる。Tamada, et al., J. Immunol. 2000, 165,4397-404；Harrop, et al., J.Biol. Chem. 1998, 273, 27548-56；Tamada, et al., Nat. Med.2000, 6, 283-89；Yu, et al., Nat. Immunol. 2004, 5, 141-49。ＨＶＥＭは４つのシステインリッチドメイン（ＣＲＤ）を含む。del Rio, et al., J. Leukoc. Biol. 2010, 87, 223-35。ＣＲＤ２及びＣＲＤ３はＴＮＦＲＳＦリガンドＬＩＧＨＴとのＨＶＥＭ三量化に必要であり、ＬＩＧＨＴはＨＶＥＭを通じてＴ細胞に共刺激シグナルを送る。対照的に、ＣＲＤ１及びＣＲＤ２は共抑制性Ｂリンパ球及びＴリンパ球アテニュエーター（ＢＴＬＡ）受容体及びＣＤ１６０に単量体様式で結合し、Ｔ細胞に抑制シグナルを提供する。ＨＶＥＭ−ＬＩＧＨＴ相互作用の研究からは、それが主としてＣＤ８＋  Ｔ細胞に対してＣＤ２８非依存的共刺激効果を有するが、ＣＤ４＋  Ｔ細胞にもまた影響を及ぼすことが示唆される。Liu, et al., Int. Immunol. 2003, 75,861-70；Scheu, et al., J. Exp. Med. 2002, 195, 1613-24。
【００１２】
[0012]  ＣＤ９５、別名Ｆａｓ、ＡＰＯ−１、及びＴＮＦＲＳＦ６は、４５ｋＤａ  Ｉ型膜貫通タンパク質であり、これは、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、及びＨＶＥＭと異なり、デスドメインを含む。Kischkel, et al., EMBO J. 1995, 14, 5579-88；Krammer,Nature 2000, 407, 789-95。誘導性ＣＤ９５リガンド（ＣＤ９５Ｌ）が活性化Ｔ細胞上のＣＤ９５に結合するとアポトーシス細胞死につながり、従って通常、これが４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、及びＨＶＥＭと同じ共刺激機能と関連付けらることはない。Strauss, et al., J. Exp. Med. 2009, 206, 1379-93。しかしながら、ＣＤ９５はまた、ある種の条件下でＴ細胞に対する抗アポトーシス効果及び共刺激効果を提供する二重機能受容体としても挙動する。Paulsen, et al., Cell Death Differ. 2011, 18, 619-31。ＣＤ９５の会合は、ＴＣＲのドライブによるシグナル惹起を用量依存的に調節し、高用量のＣＤ９５アゴニスト又は細胞ＣＤ９５ＬがＴ細胞をサイレンシングする一方、低用量のこれらのアゴニストは、ＴＣＲのドライブによるＴ細胞活性化及び増殖を強力に亢進させる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
[0013]  本発明は、４−１ＢＢアゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＨＶＥＭアゴニスト、又はＣＤ９５アゴニストなどのＴＮＦＲＳＦアゴニストが、ＴＩＬの入手及びＴＩＬによる治療が困難であることが知られる腫瘍からのＴＩＬの拡大培養に有用であり、更にＴＩＬ療法と併用した患者の治療に有用であるという予期せぬ発見を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
発明の概要
[0014]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含む。
【００１５】
[0015]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＨＶＥＭアゴニスト、ＣＤ９５アゴニスト、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００１６】
[0016]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢアゴニストであり、及び４−１ＢＢアゴニストは、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【００１７】
[0017]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢアゴニストであり、及び４−１ＢＢアゴニストは４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質である。
【００１８】
[0018]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質であり、及び４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性４−１ＢＢ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインはＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び融合タンパク質は構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である。
【００１９】
[0019]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＯＸ４０アゴニストであり、及びＯＸ４０アゴニストは、タボリキシズマブ（tavolixizumab）、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ６３８３、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、CreativeBiolabs  ＭＯＭ−１８４５５、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【００２０】
[0020]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＯＸ４０アゴニストであり、及びＯＸ４０アゴニストはＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質である。
【００２１】
[0021]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質であり、及びＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＯＸ４０結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインはＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び融合タンパク質は構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である。
【００２２】
[0022]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＣＤ２７アゴニストであり、及びＣＤ２７アゴニストは、バルリルマブ、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。
【００２３】
[0023]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＣＤ２７アゴニストであり、及びＣＤ２７アゴニストはＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質である。
【００２４】
[0024]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＣＤ２７アゴニストであり、及びＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ２７結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインはＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び融合タンパク質は構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である。
【００２５】
[0025]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＧＩＴＲアゴニストであり、及びＧＩＴＲアゴニストは、ＴＲＸ５１８、６Ｃ８、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、３１Ｈ６、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、１７１８、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、９Ｈ６、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【００２６】
[0026]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＧＩＴＲアゴニストであり、及びＧＩＴＲアゴニストはＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質である。
【００２７】
[0027]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質であり、及びＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインはＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び融合タンパク質は構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である。
【００２８】
[0028]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＨＶＥＭアゴニストである。
【００２９】
[0029]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＨＶＥＭアゴニストであり、及びＨＶＥＭアゴニストはＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質である。
【００３０】
[0030]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質であり、及びＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインはＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び融合タンパク質は構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である。
【００３１】
[0031]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者への第３のＴＩＬ集団の投与の翌日から開始して患者をＴＮＦＲＳＦアゴニストで治療するステップを更に含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で４週間毎に最大８サイクルにわたって静脈内投与される。
【００３２】
[0032]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者から腫瘍を切除するステップの前にＴＮＦＲＳＦアゴニストで患者を治療するステップを更に含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で４週間毎に最大８サイクルにわたって静脈内投与される。
【００３３】
[0033]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、タボリキシズマブ、Creative Biolabs  ＭＯＭ−１８４５５、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【００３４】
[0034]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで第１の細胞培養培地は第２のＴＮＦＲＳＦアゴニストを含む。
【００３５】
[0035]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは初期拡大培養中に、毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎、及び２週間毎からなる群から選択される間隔で第１の細胞培養培地に加えられる。
【００３６】
[0036]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは迅速拡大培養中に、毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎、及び２週間毎からなる群から選択される間隔で第２の細胞培養培地に加えられる。
【００３７】
[0037]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは細胞培養培地中で０．１μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で加えられる。
【００３８】
[0038]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは細胞培養培地中で２０μｇ／ｍＬ〜４０μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で加えられる。
【００３９】
[0039]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＩＬ−２は第１の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００４０】
[0040]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＩＬ−２は第１の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００４１】
[0041]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、請求項３１に記載の方法、ここでＩＬ−２は第１の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００４２】
[0042]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＩＬ−２は第１の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００４３】
[0043]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＩＬ−２は第２の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００４４】
[0044]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＩＬ−２は第２の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００４５】
[0045]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＩＬ−２は第２の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００４６】
[0046]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＩＬ−２は第２の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００４７】
[0047]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで第１の細胞培養培地中にはＩＬ−１５が存在する。
【００４８】
[0048]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで第１の細胞培養培地中にはＩＬ−１５が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００４９】
[0049]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで第２の細胞培養培地中にはＩＬ−１５が存在する。
【００５０】
[0050]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで第２の細胞培養培地中にはＩＬ−１５が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００５１】
[0051]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで第１の細胞培養培地中にはＩＬ−２１が存在する。
【００５２】
[0052]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで第１の細胞培養培地中にはＩＬ−２１が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００５３】
[0053]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで第２の細胞培養培地中にはＩＬ−２１が存在する。
【００５４】
[0054]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで第２の細胞培養培地中にはＩＬ−２１が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００５５】
[0055]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＯＫＴ−３抗体は第２の細胞培養培地中に約１０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００５６】
[0056]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここでＯＫＴ−３抗体は第２の細胞培養培地中に約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【００５７】
[0057]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで初期拡大培養はガス透過性容器を使用して行われる。
【００５８】
[0058]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで迅速拡大培養はガス透過性容器を使用して行われる。
【００５９】
[0059]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者への第３のＴＩＬ集団の投与前に患者を骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンで治療するステップを更に含む。
【００６０】
[0060]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者への第３のＴＩＬ集団の投与前に患者を骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンで治療するステップを更に含み、ここで骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンは、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間のシクロホスファミドの投与ステップと、それに続く２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間のフルダラビンの投与ステップを含む。
【００６１】
[0061]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者への第３のＴＩＬ集団の投与の翌日から開始して患者を漸減ＩＬ−２レジメンで治療するステップを更に含み、ここで漸減ＩＬ−２レジメンは、１日目に１８，０００，０００ＩＵ／ｍ２、２日目に９，０００，０００ＩＵ／ｍ２、並びに３及び４日目に４，５００，０００ＩＵ／ｍ２の用量で静脈内投与されるアルデスロイキンを含む。
【００６２】
[0062]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者への第３のＴＩＬ集団の投与後に０．１０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日の用量のペグ化ＩＬ−２で患者を治療するステップを更に含む。
【００６３】
[0063]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者への第３のＴＩＬ集団の投与の翌日から開始して患者を高用量ＩＬ−２レジメンで治療するステップを更に含む。
【００６４】
[0064]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者への第３のＴＩＬ集団の投与の翌日から開始して患者を高用量ＩＬ−２レジメンで治療するステップを更に含み、ここで高用量ＩＬ−２レジメンは、忍容量まで８時間毎に１５分ボーラス静脈内注入として投与される６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇのアルデスロイキン、又はそのバイオシミラー若しくは変異体を含む。
【００６５】
[0065]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌、及び肉腫からなる群から選択される。
【００６６】
[0066]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、ここで癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性（double-refractory）黒色腫、及びぶどう膜（眼）黒色腫からなる群から選択される。
【００６７】
[0067]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者から腫瘍を切除する前に患者をＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬で治療するステップを更に含む。
【００６８】
[0068]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者から腫瘍を切除する前に患者をＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬で治療するステップを更に含み、ここでＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【００６９】
[0069]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者から腫瘍を切除した後に患者をＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬で治療するステップを更に含む。
【００７０】
[0070]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者から腫瘍を切除した後に患者をＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬で治療するステップを更に含み、ここでＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【００７１】
[0071]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者への第３のＴＩＬ集団の投与後に患者をＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬で治療するステップを更に含む。
【００７２】
[0072]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、患者への第３のＴＩＬ集団の投与後に患者をＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬で治療するステップを更に含み、ここでＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【００７３】
[0073]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団の調製プロセスを提供し、このプロセスは、
（ｂ）第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；及び
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップを含む。
【００７４】
[0074]  ある実施形態において、本発明は、
（ｂ）第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；及び
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ
を含むプロセスから入手可能な腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を提供する。
【００７５】
[0075]  ある実施形態において、本発明は、癌の治療（treatement）における使用のためのＴＩＬ集団を提供する。ある実施形態において、本発明は、癌の治療における使用のための腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を含む医薬組成物を提供し、ここで腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団は、
（ｂ）第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；及び
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ
を含むプロセスによって入手可能である。
【００７６】
[0076]  ある実施形態において、第１のＴＩＬ集団は腫瘍から入手される。ある実施形態において、腫瘍は初めに患者から切除される。ある実施形態において、第１のＴＩＬ集団は、患者から切除された腫瘍から入手される。ある実施形態において、ＴＩＬ集団は、癌を有する患者に治療有効量で投与（adminsitration）するためのものである。
【００７７】
[0077]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２を含み、及び初期拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）任意選択で、第３のＴＩＬ集団をジメチルスルホキシド含有培地中で凍結保存するステップを含む。
【００７８】
[0078]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２を含み、及び初期拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含む。
【００７９】
[0079]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２を含み、及び初期拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、
ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００８０】
[0080]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２を含み、及び初期拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、
ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、及びこれらの組み合わせからなる群から選択され、及び
ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢアゴニストであり、及び４−１ＢＢアゴニストは、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、融合タンパク質、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【００８１】
[0081]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２を含み、及び初期拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３）抗体、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及びＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップを含み、
ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、及びこれらの組み合わせからなる群から選択され、及び
ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはＯＸ４０アゴニストであり、及びＯＸ４０アゴニストは、タボリキシズマブ、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ６３８３、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、Creative Biolabs  ＭＯＭ−１８４５５、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択され、
ここでＯＸ４アゴニストはステップ（ｄ）の開始時に１μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。
【００８２】
[0082]  ある実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはステップ（ｄ）の開始時に５μｇ／ｍＬ〜２０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。
【００８３】
[0083]  ある実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはステップ（ｄ）の開始時に約１０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。
【００８４】
[0084]  ある実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはステップ（ｄ）全体を通じて１μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬの濃度に維持される。
【００８５】
[0085]  ある実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはステップ（ｄ）全体を通じて５μｇ／ｍＬ〜２０μｇ／ｍＬの濃度に維持される。
【００８６】
[0086]  ある実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストはステップ（ｄ）全体を通じて約１０μｇ／ｍＬの濃度に維持される。
【００８７】
[0087]  ある実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで第３のＴＩＬ集団は第２のＴＩＬ集団中の参照ＣＤ８＋ＴＩＬ対ＣＤ４＋ＴＩＬ比と比較して増加したＣＤ８＋ＴＩＬ対ＣＤ４＋ＴＩＬ比を呈する。ある実施形態において、増加した比は、参照比と比べて少なくとも１％高い、参照比と比べて少なくとも２％高い、参照比と比べて少なくとも５％高い、参照比と比べて少なくとも１０％高い、参照比と比べて少なくとも１５％高い、参照比と比べて少なくとも２０％高い、参照比と比べて少なくとも２５％高い、参照比と比べて少なくとも３０％高い、参照比と比べて少なくとも３５％高い、参照比と比べて少なくとも４０％高い、参照比と比べて少なくとも４５％高い、及び参照比と比べて少なくとも５０％高い、からなる群から選択される。ある実施形態において、増加した比は参照比と比べて５％〜８０％高い。ある実施形態において、増加した比は参照比と比べて１０％〜７０％高い。ある実施形態において、増加した比は参照比と比べて１５％〜６０％高い。前述の実施形態のいずれにおいても、参照比は、ＴＮＦＲＳＦアゴニストに対して奏効例である第３のＴＩＬ集団から入手される。
【００８８】
[0088]  ある実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで癌は、黒色腫、ぶどう膜（眼）黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌（頭頸部扁平上皮癌）、腎細胞癌、結腸直腸癌、膵癌、膠芽腫、胆管癌、及び肉腫からなる群から選択される。ある実施形態において、本発明は、前述の実施形態のいずれかの方法を提供し、ここで癌は、皮膚黒色腫、ぶどう膜（眼）黒色腫、白金耐性卵巣癌、膵管腺癌、骨肉腫、トリプルネガティブ乳癌、及び非小細胞肺癌からなる群から選択される。
【００８９】
[0089]  ある実施形態において、前述の実施形態のいずれかを以下の実施形態のいずれかと組み合わせてもよい。
【００９０】
[0090]  ある実施形態において、本プロセスはインビトロ又はエキソビボプロセスである。
【００９１】
[0091]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＨＶＥＭアゴニスト、ＣＤ９５アゴニスト、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００９２】
[0092]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢアゴニストである。
【００９３】
[0093]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢアゴニストであり、及び４−１ＢＢアゴニストは、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【００９４】
[0094]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢアゴニストであり、及び４−１ＢＢアゴニストは４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質である。
【００９５】
[0095]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質であり、及び４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性４−１ＢＢ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインはＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び融合タンパク質は構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である。
【００９６】
[0096]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＯＸ４０アゴニストである。
【００９７】
[0097]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＯＸ４０アゴニストであり、及びＯＸ４０アゴニストは、タボリキシズマブ、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ６３８３、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、Creative Biolabs  ＭＯＭ−１８４５５、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【００９８】
[0098]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＯＸ４０アゴニストであり、及びＯＸ４０アゴニストはＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質である。
【００９９】
[0099]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質であり、及びＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＯＸ４０結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインはＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び融合タンパク質は構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である。
【０１００】
[00100]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＣＤ２７アゴニストである。
【０１０１】
[00101]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＣＤ２７アゴニストであり、及びＣＤ２７アゴニストは、バルリルマブ、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。
【０１０２】
[00102]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＣＤ２７アゴニストであり、及びＣＤ２７アゴニストはＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質である。
【０１０３】
[00103]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＣＤ２７アゴニストであり、及びＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ２７結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインはＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び融合タンパク質は構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である。
【０１０４】
[00104]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＧＩＴＲアゴニストである。
【０１０５】
[00105]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＧＩＴＲアゴニストであり、及びＧＩＴＲアゴニストは、ＴＲＸ５１８、６Ｃ８、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、３１Ｈ６、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、１７１８、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、９Ｈ６、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【０１０６】
[00106]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＧＩＴＲアゴニストであり、及びＧＩＴＲアゴニストはＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質である。
【０１０７】
[00107]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質であり、及びＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインはＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び融合タンパク質は構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である。
【０１０８】
[00108]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＨＶＥＭアゴニストである。
【０１０９】
[00109]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＨＶＥＭアゴニストであり、及びＨＶＥＭアゴニストはＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質である。
【０１１０】
[00110]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質であり、及びＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、（ｉ）第１の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインはＦｃ断片ドメイン及びヒンジドメインを含み、及び融合タンパク質は構造Ｉ−Ａ又は構造Ｉ−Ｂに係る二量体構造である。
【０１１１】
[00111]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ウレルマブ、ウトミルマブ、ＥＵ−１０１、タボリキシズマブ、Creative Biolabs  ＭＯＭ−１８４５５、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【０１１２】
[00112]  ある実施形態において、第１の細胞培養培地は第２のＴＮＦＲＳＦアゴニストを含む。
【０１１３】
[00113]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは初期拡大培養中に、毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎、及び２週間毎からなる群から選択される間隔で第１の細胞培養培地に加えられる。
【０１１４】
[00114]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは迅速拡大培養中に、毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎、及び２週間毎からなる群から選択される間隔で第２の細胞培養培地に加えられる。
【０１１５】
[00115]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは細胞培養培地中で０．１μｇ／ｍＬ〜１００μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で加えられる。
【０１１６】
[00116]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは細胞培養培地中で２０μｇ／ｍＬ〜４０μｇ／ｍＬの濃度を達成するのに十分な濃度で加えられる。
【０１１７】
[00117]  ＴＮＦＲＳＦアゴニストの更なる詳細は本明細書に提供される。
【０１１８】
[00118]  ある実施形態において、ＩＬ−２は第１の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１１９】
[00119]  ある実施形態において、ＩＬ−２は第１の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１２０】
[00120]  ある実施形態において、ＩＬ−２は第１の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１２１】
[00121]  ある実施形態において、ＩＬ−２は第１の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１２２】
[00122]  ある実施形態において、ＩＬ−２は第２の細胞培養培地中に約１０〜約６０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１２３】
[00123]  ある実施形態において、ＩＬ−２は第２の細胞培養培地中に約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１２４】
[00124]  ある実施形態において、ＩＬ−２は第２の細胞培養培地中に約８００〜約１１００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１２５】
[00125]  ある実施形態において、ＩＬ−２は第２の細胞培養培地中に約１０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１２６】
[00126]  ある実施形態において、第１の細胞培養培地中にはＩＬ−１５が存在する。
【０１２７】
[00127]  ある実施形態において、第１の細胞培養培地中にはＩＬ−１５が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１２８】
[00128]  ある実施形態において、第２の細胞培養培地中にはＩＬ−１５が存在する。
【０１２９】
[00129]  ある実施形態において、第２の細胞培養培地中にはＩＬ−１５が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１３０】
[00130]  ある実施形態において、第１の細胞培養培地中にはＩＬ−２１が存在する。
【０１３１】
[00131]  ある実施形態において、第１の細胞培養培地中にはＩＬ−２１が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１３２】
[00132]  ある実施形態において、第２の細胞培養培地中にはＩＬ−２１が存在する。
【０１３３】
[00133]  ある実施形態において、第２の細胞培養培地中にはＩＬ−２１が約５ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１３４】
[00134]  ある実施形態において、ＯＫＴ−３抗体は第２の細胞培養培地中に約１０ｎｇ／ｍＬ〜約６０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１３５】
[00135]  ある実施形態において、ＯＫＴ−３抗体は第２の細胞培養培地中に約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度で存在する。
【０１３６】
[00136]  ある実施形態において、初期拡大培養はガス透過性容器を使用して行われる。
【０１３７】
[00137]  ある実施形態において、迅速拡大培養はガス透過性容器を使用して行われる。
【０１３８】
[00138]  ある実施形態において、本発明は、癌の治療における使用のための腫瘍浸潤性リンパ球（ＴＩＬ）集団を提供し、ここで腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団は、本明細書に記載されるとおりの本発明のプロセスによって入手可能である。
【０１３９】
[00139]  ある実施形態において、本発明は、癌の治療方法における使用のための腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を含む医薬組成物を提供し、ここで腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団は、本明細書に記載されるとおりの本発明のプロセスによって入手可能である。
【０１４０】
[00140]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＴＮＦＲＳＦと併用した癌の治療における使用のためのものである。
【０１４１】
[00141]  ある実施形態において、本発明は、癌の治療における使用のための本明細書に記載されるとおりの本発明のプロセスによって入手可能なＴＩＬ集団とＴＮＦＲＳＦとの併用を提供する。
【０１４２】
[00142]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＴＮＦＲＳＦアゴニストと併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは、患者への第３のＴＩＬ集団の投与翌日における投与のためのものであり、及びＴＮＦＲＳＦアゴニストは０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で４週間毎に最大８サイクルにわたって静脈内投与される。
【０１４３】
[00143]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＴＮＦＲＳＦアゴニストと併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここでＴＮＦＲＳＦアゴニストは、患者から腫瘍を切除するステップの前における投与のためのものであり、及びＴＮＦＲＳＦアゴニストは０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で４週間毎に最大８サイクルにわたる静脈内投与のためのものである。
【０１４４】
[00144]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンと併用した癌の治療における使用のためのものである。
【０１４５】
[00145]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者への第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物の投与前の骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンと併用した癌の治療における使用のためのものである。
【０１４６】
[00146]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者への第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物の投与前の骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンと併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここで骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンは、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間のシクロホスファミドの投与ステップと、それに続く２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間のフルダラビンの投与ステップを含む。骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンの更なる詳細については、本明細書において例えば見出し「化学療法による骨髄非破壊的リンパ球枯渇」の下に提供される。
【０１４７】
[00147]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＩＬ−２レジメンと併用した癌の治療における使用のためのものである。
【０１４８】
[00148]  ある実施形態において、ＩＬ−２レジメンは漸減ＩＬ−２レジメンである。
【０１４９】
[00149]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者への第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物の投与翌日から開始する漸減ＩＬ−２レジメンと併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここで漸減ＩＬ−２レジメンは、１日目に１８，０００，０００ＩＵ／ｍ２、２日目に９，０００，０００ＩＵ／ｍ２、並びに３及び４日目に４，５００，０００ＩＵ／ｍ２の用量で静脈内投与されるアルデスロイキンを含む。
【０１５０】
[00150]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ペグ化ＩＬ−２と併用した癌の治療における使用のためのものである。
【０１５１】
[00151]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者への第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物の投与後に０．１０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日の用量で投与されるペグ化ＩＬ−２と併用した癌の治療方法における使用のためのものである。
【０１５２】
[00152]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、高用量ＩＬ−２レジメンと併用した癌の治療方法における使用のためのものである。
【０１５３】
[00153]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者への第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物の投与翌日から開始する高用量ＩＬ−２レジメンと併用した癌の治療方法における使用のためのものである。
【０１５４】
[00154]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者への第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物の投与翌日から開始する高用量ＩＬ−２レジメンと併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここで高用量ＩＬ−２レジメンは、忍容量まで８時間毎に１５分ボーラス静脈内注入として投与される６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇのアルデスロイキン、又はそのバイオシミラー若しくは変異体を含む。
【０１５５】
[00155]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、癌の治療における使用のためのものであり、ここで癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌、及び肉腫からなる群から選択される。
【０１５６】
[00156]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、癌の治療における使用のためのものであり、ここで癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、トリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫、及びぶどう膜（眼）黒色腫からなる群から選択される。
【０１５７】
[00157]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬と併用した癌の治療おける使用のためのものである。
【０１５８】
[00158]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬と併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここでＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【０１５９】
[00159]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬と併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここでＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬は、患者から腫瘍を切除する前における投与のためのものである。
【０１６０】
[00160]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者から腫瘍を切除する前のＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬と併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここでＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【０１６１】
[00161]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬と併用した癌の治療方法における使用のためのものである。
【０１６２】
[00162]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬と併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここでＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【０１６３】
[00163]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者から腫瘍を切除した後のＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬と併用した癌の治療方法における使用のためのものである。
【０１６４】
[00164]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者から腫瘍を切除した後のＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬と併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここでＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。
【０１６５】
[00165]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、ＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬と併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここでＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１阻害薬は、患者への第３のＴＩＬ集団及び／又は第３のＴＩＬ集団を含む医薬組成物の投与後における投与のためのものである。
【０１６６】
[00166]  ある実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又は医薬組成物は、患者への第３のＴＩＬ集団の投与後における投与のためのＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬と併用した癌の治療における使用のためのものであり、ここでＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせからなる群から選択される。ＰＤ−１阻害薬及びＰＤ−Ｌ１阻害薬の更なる詳細は、本明細書において例えば見出し「ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１阻害薬との併用」の下に記載される。一部の実施形態において、ＴＩＬ集団及び／又はＴＩＬ集団を含む医薬組成物は、本明細書において例えば見出し「ＴＩＬの医薬組成物、投薬量、及び投与レジメン」及び「ＴＮＦＲＳＦアゴニストの医薬組成物、投薬量、及び投与レジメン」の下に記載されるとおりの１つ以上の特徴を更に含む。
【０１６７】
図面の簡単な説明
[00167]  前述の概要、並びに以下の発明の詳細な説明は、添付の図面を併せて読むと、より良く理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【０１６８】
【図１】[00168]ＴＩＬ拡大培養及び治療プロセスを示す。本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストはプレＲＥＰ段階（図の上半分）又はＲＥＰ段階（図の下半分）の両方で使用されてもよく、各細胞培養物にＩＬ−２を加えるときに加え得る。ステップ１は、４つの腫瘍断片を１０個のG-Rex 10フラスコに加えることを指す。ステップ２では、約４０×１０６個又はそれ以上のＴＩＬが入手される。ステップ３では、ＲＥＰのため３６個のG-Rex 100フラスコへの分割が行われる。ステップ４でＴＩＬを遠心によって回収する。約４３日の総処理時間の後にステップ５で新鮮ＴＩＬ製剤が得られ、この時点でＴＩＬを患者に注入することができる。
【図２】[00169]本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストで拡大培養したＴＩＬで使用するための治療プロトコルを示す。初めに手術（及び腫瘍切除）が行われ、及びリンパ球枯渇化学療法は、本明細書の他の部分に記載されるとおりの化学療法による骨髄非破壊的リンパ球枯渇を指す。本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストはまた、ＴＩＬ投与後の本明細書に記載されるとおりの療法の間にも使用され得る。
【図３】[00170]４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマ４Ｂ５がＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化するかどうかを緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）レポーターを使用して決定するアッセイの結果を示す。「二次」は二次抗体の活性化を指す。
【図４】[00171]４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマ１Ｃ４がＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化するかどうかをＧＦＰレポーターを使用して決定するアッセイの結果を示す。「二次」は二次抗体の活性化を指す。
【図５】[00172]４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマ９Ｂ４がＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化するかどうかをＧＦＰレポーターを使用して決定するアッセイの結果を示す。「二次」は二次抗体の活性化を指す。
【図６】[00173]４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマ１Ｄ７がＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化するかどうかをＧＦＰレポーターを使用して決定するアッセイの結果を示す。「二次」は二次抗体の活性化を指す。
【図７】[00174]４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマ１Ｄ１０がＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化するかどうかをＧＦＰレポーターを使用して決定するアッセイの結果を示す。「二次」は二次抗体の活性化を指す。
【図８】[00175]４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマ３Ｃ２がＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化するかどうかをＧＦＰレポーターを使用して決定するアッセイの結果を示す。「二次」は二次抗体の活性化を指す。
【図９】[00176]４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマ１０Ｄ１２がＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化するかどうかをＧＦＰレポーターを使用して決定するアッセイの結果を示す。「二次」は二次抗体の活性化を指す。
【図１０】[00177]４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマ８Ｄ２がＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化するかどうかをＧＦＰレポーターを使用して決定するアッセイの結果を示す。「二次」は二次抗体の活性化を指す。
【図１１】[00178]４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマ４Ｇ６がＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化するかどうかをＧＦＰレポーターを使用して決定するアッセイの結果を示す。「二次」は二次抗体の活性化を指す。
【図１２】[00179]４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマ８Ｅ３がＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化するかどうかをＧＦＰレポーターを使用して決定するアッセイの結果を示す。「二次」は二次抗体の活性化を指す。
【図１３】[00180]例示的ＴＩＬ拡大培養及び製造プロトコル（プロセス２Ａ）を示す。
【図１４】[00181]プロセス２Ａで行われる例示的方法ステップを示す。
【図１５】[00182]例示的ＴＩＬ拡大培養プロトコルを示す。
【図１６】[00183]フローサイトメトリーにより４−１ＢＢ＋細胞のパーセンテージによって評価したときのCreative Biolabs（ＣＢ）及びBPS Biosciences（ＢＰＳ）の４−１ＢＢアゴニスト抗体の結合親和性を示す。ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニストが最も高い結合親和性を呈した。
【図１７】[00184]平均蛍光強度（ＭＦＩ）によって評価したときのCreative Biolabs（ＣＢ）及びBPS Biosciences（ＢＰＳ）の４−１ＢＢアゴニスト抗体の結合親和性を示す。ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニストが最も高い結合親和性を呈した。
【図１８】[00185]抗４−１ＢＢアゴニスト抗体のＮＦ−κＢ経路活性化の評価結果を示す。
【図１９】[00186]フローサイトメトリーによりＯＸ４０＋細胞のパーセンテージによって評価したときのCreative BiolabsのＯＸ４０アゴニスト抗体の結合親和性を示す。
【図２０】[00187]平均蛍光強度（ＭＦＩ）によって評価したときのCreative BiolabsのＯＸ４０アゴニスト抗体の結合親和性を示す。
【図２１】[00188]Creative Biolabs抗ＯＸ４０アゴニスト抗体（図示の５濃度）と市販の抗ＯＸ４０（クローンBer-ACT35）アゴニストとの間の同等な結合親和性を示す。各腫瘍名の最初の文字は、組織学：Ｃ＝子宮頸部；Ｈ＝頭頸部（頭頸部扁平上皮癌）；Ｌ＝肺；及びＭ＝黒色腫を意味する。
【図２２】[00189]抗ＯＸ４０アゴニスト抗体のＮＦ−κＢ経路活性化の評価結果を示す。ＯＸ４０レポーター細胞を１、２、４、８、及び１６μｇ／ｍＬの濃度の抗ＯＸ４０単独又はアイソタイプ対照のいずれかでＰＢＭＣフィーダー細胞有り又は無しで２４時間処理した。One-Stepルシフェラーゼ試薬を使用して細胞を溶解し、ルシフェラーゼ活性をルミノメーターによって測定した。
【図２３】[00190]プレＲＥＰの間の４−１ＢＢ及びＯＸ４０アゴニスト実験の実験計画を示す。
【図２４】[00191]図２３の実験デザインに使用される腫瘍組織学を示す。
【図２５】[00192]プレＲＥＰ中に使用される４−１ＢＢ及び抗ＯＸ４０アゴニストがＴＩＬ性能及び特性に及ぼす影響の評価に用いられるデータ解析戦略を示す。
【図２６】[00193]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト（Ｎ＝３）を使用した細胞拡大培養の総細胞数結果を示す。ＮＴ＝未試験（対照）。ｐ値は＞０．９９であった。
【図２７】[00194]ＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト（Ｎ＝５）を使用した細胞拡大培養の総細胞数結果を示す。ＮＴ＝未試験（対照）。ｐ値は０．０６であった。
【図２８】[00195]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＯＸ−４０アゴニスト（Ｎ＝２）を使用した細胞拡大培養の総細胞数結果を示す。ＮＴ＝未試験（対照）。
【図２９】[00196]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト（Ｎ＝３）を使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋細胞数結果を示す。ｐ値は０．５であった。
【図３０】[00197]ＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト（Ｎ＝５）を使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋細胞数結果を示す。ｐ値は０．０３であった。
【図３１】[00198]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＯＸ−４０アゴニスト（Ｎ＝２）を使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋細胞数結果を示す。ＮＴ＝未試験（対照）。
【図３２】[00199]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト（Ｎ＝３）を使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋／ＣＤ４＋細胞数比結果を示す。ｐ値は０．２であった。
【図３３】[00200]ＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト（Ｎ＝５）を使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋／ＣＤ４＋細胞数比結果を示す。ｐ値は０．１２であった。
【図３４】[00201]ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＯＸ−４０アゴニスト（Ｎ＝２）を使用した細胞拡大培養の総ＣＤ８＋／ＣＤ４＋細胞数比結果を示す。ＮＴ＝未試験（対照）。
【図３５】[00202]４−１ＢＢ又はＯＸ４０アゴニストの存在下で拡大培養したプレＲＥＰ  ＴＩＬのＲＥＰ増殖の実験スキームを示す。
【図３６】[00203]プレＲＥＰで処理していないＴＩＬ（ＮＴ）と比べた、ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニストの存在下で拡大培養したプレＲＥＰ  ＴＩＬからのＲＥＰで拡大培養したＴＩＬの拡大倍数を示す。
【図３７】[00204]プレＲＥＰで処理していないＴＩＬ（ＮＴ）と比べた、ＣＢ  ＯＸ４０アゴニストの存在下で拡大培養したプレＲＥＰ  ＴＩＬからのＲＥＰで拡大培養したＴＩＬの拡大倍数を示す。
【図３８】[00205]プレＲＥＰで処理していないＴＩＬ（ＮＴ）と比べた、ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＣＢ  ＯＸ４０アゴニストの存在下で拡大培養したプレＲＥＰ  ＴＩＬからのＲＥＰで拡大培養したＴＩＬの拡大倍数を示す。
【図３９】[00206]ＲＥＰ段階におけるＣＢ  ＯＸ４０アゴニストの評価に使用した２１個のＴＩＬ株の組織学を示す。
【図４０】[00207]ＲＥＰ段階におけるＣＢ  ＯＸ４０アゴニストの評価用実験スキームを示す。
【図４１】[00208]ＯＸ４０アゴニスト抗体の存在により、ＲＥＰにおいてＣＤ８＋ＴＩＬが優先的に拡大することを示す（ＣＤ３＋ＣＤ４＋細胞のパーセンテージとして示される）。
【図４２】[00209]ＯＸ４０アゴニスト抗体の存在により、ＲＥＰにおいてＣＤ８＋ＴＩＬが優先的に拡大することを示す（ＣＤ３＋ＣＤ８＋細胞のパーセンテージとして示される）。
【図４３】[00210]非奏効例ＴＩＬ株では、抗ＯＸ４０処理後にＣＤ４＋サブセットにおいてＯＸ４０の下方調節は認められなかったことを示す。
【図４４】[00211]非奏効例及び奏効例ＴＩＬ株におけるＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト用量タイトレーションのための実験詳細を示す。
【図４５】[00212]奏効例ＴＩＬ株におけるＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト用量タイトレーションの結果を示す。
【図４６】[00213]非奏効例ＴＩＬ株におけるＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト用量タイトレーションの結果を示す。
【図４７】[00214]奏効例Ｌ４００５についての同等のＴＣＲｖｂレパートリープロファイルを示す。
【図４８】[00215]奏効例Ｈ３００５についての同等のＴＣＲｖｂレパートリープロファイルを示す。
【図４９】[00216]奏効例Ｍ１０２２についての同等のＴＣＲｖｂレパートリープロファイルを示す。
【発明を実施するための形態】
【０１６９】
配列表の簡単な説明
[00217]  配列番号１はムロモナブの重鎖のアミノ酸配列である。
【０１７０】
[00218]  配列番号２はムロモナブの軽鎖のアミノ酸配列である。
【０１７１】
[00219]  配列番号３は組換えヒトＩＬ−２タンパク質のアミノ酸配列である。
【０１７２】
[00220]  配列番号４はアルデスロイキンのアミノ酸配列である。
【０１７３】
[00221]  配列番号５は組換えヒトＩＬ−４タンパク質のアミノ酸配列である。
【０１７４】
[00222]  配列番号６は組換えヒトＩＬ−７タンパク質のアミノ酸配列である。
【０１７５】
[00223]  配列番号７は組換えヒトＩＬ−１５タンパク質のアミノ酸配列である。
【０１７６】
[00224]  配列番号８は組換えヒトＩＬ−２１タンパク質のアミノ酸配列である。
【０１７７】
[00225]  配列番号９はヒト４−１ＢＢのアミノ酸配列である。
【０１７８】
[00226]  配列番号１０はマウス４−１ＢＢのアミノ酸配列である。
【０１７９】
[00227]  配列番号１１は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の重鎖である。
【０１８０】
[00228]  配列番号１２は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の軽鎖である。
【０１８１】
[00229]  配列番号１３は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０１８２】
[00230]  配列番号１４は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０１８３】
[00231]  配列番号１５は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の重鎖ＣＤＲ１である。
【０１８４】
[00232]  配列番号１６は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の重鎖ＣＤＲ２である。
【０１８５】
[00233]  配列番号１７は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の重鎖ＣＤＲ３である。
【０１８６】
[00234]  配列番号１８は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の軽鎖ＣＤＲ１である。
【０１８７】
[00235]  配列番号１９は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の軽鎖ＣＤＲ２である。
【０１８８】
[00236]  配列番号２０は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６）の軽鎖ＣＤＲ３である。
【０１８９】
[00237]  配列番号２１は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の重鎖である。
【０１９０】
[00238]  配列番号２２は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の軽鎖である。
【０１９１】
[00239]  配列番号２３は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０１９２】
[00240]  配列番号２４は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０１９３】
[00241]  配列番号２５は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の重鎖ＣＤＲ１である。
【０１９４】
[00242]  配列番号２６は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の重鎖ＣＤＲ２である。
【０１９５】
[00243]  配列番号２７は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の重鎖ＣＤＲ３である。
【０１９６】
[00244]  配列番号２８は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の軽鎖ＣＤＲ１である。
【０１９７】
[00245]  配列番号２９は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の軽鎖ＣＤＲ２である。
【０１９８】
[00246]  配列番号３０は４−１ＢＢアゴニストモノクローナル抗体ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）の軽鎖ＣＤＲ３である。
【０１９９】
[00247]  配列番号３１はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のＦｃドメインである。
【０２００】
[00248]  配列番号３２はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２０１】
[00249]  配列番号３３はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２０２】
[00250]  配列番号３４はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２０３】
[00251]  配列番号３５はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２０４】
[00252]  配列番号３６はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２０５】
[00253]  配列番号３７はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２０６】
[00254]  配列番号３８はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２０７】
[00255]  配列番号３９はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２０８】
[00256]  配列番号４０はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２０９】
[00257]  配列番号４１はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２１０】
[00258]  配列番号４２はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のＦｃドメインである。
【０２１１】
[00259]  配列番号４３はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２１２】
[00260]  配列番号４４はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２１３】
[00261]  配列番号４５はＴＮＦＲＳＦアゴニスト融合タンパク質のリンカーである。
【０２１４】
[00262]  配列番号４６は４−１ＢＢリガンド（４−１ＢＢＬ）アミノ酸配列である。
【０２１５】
[00263]  配列番号４７は４−１ＢＢＬポリペプチドの可溶性部分である。
【０２１６】
[00264]  配列番号４８は４−１ＢＢアゴニスト抗体４Ｂ４−１−１バージョン１の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２１７】
[00265]  配列番号４９は４−１ＢＢアゴニスト抗体４Ｂ４−１−１バージョン１の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２１８】
[00266]  配列番号５０は４−１ＢＢアゴニスト抗体４Ｂ４−１−１バージョン２の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２１９】
[00267]  配列番号５１は４−１ＢＢアゴニスト抗体４Ｂ４−１−１バージョン２の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２２０】
[00268]  配列番号５２は４−１ＢＢアゴニスト抗体Ｈ３９Ｅ３−２の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２２１】
[00269]  配列番号５３は４−１ＢＢアゴニスト抗体Ｈ３９Ｅ３−２の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２２２】
[00270]  配列番号５４はヒトＯＸ４０のアミノ酸配列である。
【０２２３】
[00271]  配列番号５５はマウスＯＸ４０のアミノ酸配列である。
【０２２４】
[00272]  配列番号５６はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の重鎖である。
【０２２５】
[00273]  配列番号５７はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の軽鎖である。
【０２２６】
[00274]  配列番号５８はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２２７】
[00275]  配列番号５９はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２２８】
[00276]  配列番号６０はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の重鎖ＣＤＲ１である。
【０２２９】
[00277]  配列番号６１はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の重鎖ＣＤＲ２である。
【０２３０】
[00278]  配列番号６２はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の重鎖ＣＤＲ３である。
【０２３１】
[00279]  配列番号６３はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の軽鎖ＣＤＲ１である。
【０２３２】
[00280]  配列番号６４はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の軽鎖ＣＤＲ２である。
【０２３３】
[00281]  配列番号６５はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体タボリキシズマブ（ＭＥＤＩ−０５６２）の軽鎖ＣＤＲ３である。
【０２３４】
[00282]  配列番号６６はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の重鎖である。
【０２３５】
[00283]  配列番号６７はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の軽鎖である。
【０２３６】
[00284]  配列番号６８はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２３７】
[00285]  配列番号６９はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２３８】
[00286]  配列番号７０はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の重鎖ＣＤＲ１である。
【０２３９】
[00287]  配列番号７１はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の重鎖ＣＤＲ２である。
【０２４０】
[00288]  配列番号７２はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の重鎖ＣＤＲ３である。
【０２４１】
[00289]  配列番号７３はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の軽鎖ＣＤＲ１である。
【０２４２】
[00290]  配列番号７４はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の軽鎖ＣＤＲ２である。
【０２４３】
[00291]  配列番号７５はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１１Ｄ４の軽鎖ＣＤＲ３である。
【０２４４】
[00292]  配列番号７６はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の重鎖である。
【０２４５】
[00293]  配列番号７７はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の軽鎖である。
【０２４６】
[00294]  配列番号７８はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２４７】
[00295]  配列番号７９はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２４８】
[00296]  配列番号８０はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の重鎖ＣＤＲ１である。
【０２４９】
[00297]  配列番号８１はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の重鎖ＣＤＲ２である。
【０２５０】
[00298]  配列番号８２はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の重鎖ＣＤＲ３である。
【０２５１】
[00299]  配列番号８３はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の軽鎖ＣＤＲ１である。
【０２５２】
[00300]  配列番号８４はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の軽鎖ＣＤＲ２である。
【０２５３】
[00301]  配列番号８５はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体１８Ｄ８の軽鎖ＣＤＲ３である。
【０２５４】
[00302]  配列番号８６はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２５５】
[00303]  配列番号８７はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２５６】
[00304]  配列番号８８はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の重鎖ＣＤＲ１である。
【０２５７】
[00305]  配列番号８９はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の重鎖ＣＤＲ２である。
【０２５８】
[00306]  配列番号９０はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の重鎖ＣＤＲ３である。
【０２５９】
[00307]  配列番号９１はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の軽鎖ＣＤＲ１である。
【０２６０】
[00308]  配列番号９２はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の軽鎖ＣＤＲ２である。
【０２６１】
[00309]  配列番号９３はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１１９−１２２の軽鎖ＣＤＲ３である。
【０２６２】
[00310]  配列番号９４はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２６３】
[00311]  配列番号９５はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２６４】
[00312]  配列番号９６はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の重鎖ＣＤＲ１である。
【０２６５】
[00313]  配列番号９７はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の重鎖ＣＤＲ２である。
【０２６６】
[00314]  配列番号９８はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の重鎖ＣＤＲ３である。
【０２６７】
[00315]  配列番号９９はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の軽鎖ＣＤＲ１である。
【０２６８】
[00316]  配列番号１００はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の軽鎖ＣＤＲ２である。
【０２６９】
[00317]  配列番号１０１はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体Ｈｕ１０６−２２２の軽鎖ＣＤＲ３である。
【０２７０】
[00318]  配列番号１０２はＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）アミノ酸配列である。
【０２７１】
[00319]  配列番号１０３はＯＸ４０Ｌポリペプチドの可溶性部分である。
【０２７２】
[00320]  配列番号１０４はＯＸ４０Ｌポリペプチドの代替的可溶性部分である。
【０２７３】
[00321]  配列番号１０５はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体００８の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２７４】
[00322]  配列番号１０６はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体００８の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２７５】
[00323]  配列番号１０７はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０１１の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２７６】
[00324]  配列番号１０８はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０１１の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２７７】
[00325]  配列番号１０９はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０２１の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２７８】
[00326]  配列番号１１０はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０２１の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２７９】
[00327]  配列番号１１１はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０２３の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２８０】
[00328]  配列番号１１２はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体０２３の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２８１】
[00329]  配列番号１１３はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２８２】
[00330]  配列番号１１４はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２８３】
[00331]  配列番号１１５はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２８４】
[00332]  配列番号１１６はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２８５】
[00333]  配列番号１１７はヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２８６】
[00334]  配列番号１１８はヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２８７】
[00335]  配列番号１１９はヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２８８】
[00336]  配列番号１２０はヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２８９】
[00337]  配列番号１２１はヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２９０】
[00338]  配列番号１２２はヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２９１】
[00339]  配列番号１２３はヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２９２】
[00340]  配列番号１２４はヒト化ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２９３】
[00341]  配列番号１２５はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０２９４】
[00342]  配列番号１２６はＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０２９５】
[00343]  配列番号１２７はヒトＣＤ２７のアミノ酸配列である。
【０２９６】
[00344]  配列番号１２８はマカクＣＤ２７のアミノ酸配列である。
【０２９７】
[00345]  配列番号１２９はＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）の重鎖である。
【０２９８】
[00346]  配列番号１３０はＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）の軽鎖である。
【０２９９】
[00347]  配列番号１３１はＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０３００】
[00348]  配列番号１３２はＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０３０１】
[00349]  配列番号１３３はＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）の重鎖ＣＤＲ１である。
【０３０２】
[00350]  配列番号１３４はＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）の重鎖ＣＤＲ２である。
【０３０３】
[00351]  配列番号１３５はＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）の重鎖ＣＤＲ３である。
【０３０４】
[00352]  配列番号１３６はＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）の軽鎖ＣＤＲ１である。
【０３０５】
[00353]  配列番号１３７はＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）の軽鎖ＣＤＲ２である。
【０３０６】
[00354]  配列番号１３８はＣＤ２７アゴニストモノクローナル抗体バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）の軽鎖ＣＤＲ３である。
【０３０７】
[00355]  配列番号１３９はＣＤ２７リガンド（ＣＤ７０）アミノ酸配列である。
【０３０８】
[00356]  配列番号１４０はＣＤ７０ポリペプチドの可溶性部分である。
【０３０９】
[00357]  配列番号１４１はＣＤ７０ポリペプチドの代替的可溶性部分である。
【０３１０】
[00358]  配列番号１４２はヒトＧＩＴＲ（ヒト腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１８（ＴＮＦＲＳＦ１８）タンパク質）のアミノ酸配列である。
【０３１１】
[00359]  配列番号１４３はマウスＧＩＴＲ（マウス腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１８（ＴＮＦＲＳＦ１８）タンパク質）のアミノ酸配列である。
【０３１２】
[00360]  配列番号１４４は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６０に対応する、ＣＤＲ２にＮ（アスパラギン）を有する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＮ６Ｃ８（グリコシル化）のアミノ酸配列である。
【０３１３】
[00361]  配列番号１４５は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６１に対応する、ＣＤＲ２にＮ（アスパラギン）を有する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＮ６Ｃ８（非グリコシル化）のアミノ酸配列である。
【０３１４】
[00362]  配列番号１４６は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６２に対応する、ＣＤＲ２にＱ（グルタミン）を有する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＱ６Ｃ８（グリコシル化）のアミノ酸配列である。
【０３１５】
[00363]  配列番号１４７は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６３に対応する、ＣＤＲ２にＱ（グルタミン）を有する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＱ６Ｃ８（非グリコシル化）のアミノ酸配列である。
【０３１６】
[00364]  配列番号１４８は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号５８に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３１７】
[00365]  配列番号１４９は、ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体に配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６、又は配列番号１４７のアミノ酸配列と共に任意選択で含まれ得るリーダー配列のアミノ酸配列である。
【０３１８】
[00366]  配列番号１５０は、ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体に配列番号１４８のアミノ酸配列と共に任意選択で含まれ得るリーダー配列のアミノ酸配列である。
【０３１９】
[00367]  配列番号１５１は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号１に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３２０】
[00368]  配列番号１５２は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６６に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３２１】
[00369]  配列番号１５３は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号２に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３２２】
[00370]  配列番号１５４は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号３に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ１領域のアミノ酸配列である。
【０３２３】
[00371]  配列番号１５５は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号４に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ２領域のアミノ酸配列である。
【０３２４】
[00372]  配列番号１５６は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号１９に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ２領域のアミノ酸配列である。
【０３２５】
[00373]  配列番号１５７は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号５に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ３領域のアミノ酸配列である。
【０３２６】
[00374]  配列番号１５８は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号６に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ１領域のアミノ酸配列である。
【０３２７】
[00375]  配列番号１５９は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号７に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ２領域のアミノ酸配列である。
【０３２８】
[00376]  配列番号１６０は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号８に対応する、６Ｃ８ヒト化ＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖ＣＤＲ３領域のアミノ酸配列である。
【０３２９】
[00377]  配列番号１６１は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号２３に対応する、ＣＤＲ２にＮ（アスパラギン）を有する、６Ｃ８キメラＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体重鎖変異体ＨｕＮ６Ｃ８（グリコシル化）のアミノ酸配列である。
【０３３０】
[00378]  配列番号１６２は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号２４に対応する、ＣＤＲ２にＱ（グルタミン）を有する、６Ｃ８キメラＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の重鎖変異体ＨｕＱ６Ｃ８（非グリコシル化）のアミノ酸配列である。
【０３３１】
[00379]  配列番号１６３は、米国特許第７，８１２，１３５号の配列番号２２に対応する、６Ｃ８キメラＧＩＴＲアゴニストモノクローナル抗体の軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３３２】
[00380]  配列番号１６４は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト３６Ｅ５重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３３３】
[00381]  配列番号１６５は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト３６Ｅ５軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３３４】
[00382]  配列番号１６６は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト３Ｄ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３３５】
[00383]  配列番号１６７は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト３Ｄ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３３６】
[00384]  配列番号１６８は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト６１Ｇ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３３７】
[00385]  配列番号１６９は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト６１Ｇ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３３８】
[00386]  配列番号１７０は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト６Ｈ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３３９】
[00387]  配列番号１７１は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト６Ｈ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３４０】
[00388]  配列番号１７２は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト６１Ｆ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３４１】
[00389]  配列番号１７３は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト６１Ｆ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３４２】
[00390]  配列番号１７４は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ８重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３４３】
[00391]  配列番号１７５は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ８軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３４４】
[00392]  配列番号１７６は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト１７Ｆ１０重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３４５】
[00393]  配列番号１７７は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト１７Ｆ１０軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３４６】
[00394]  配列番号１７８は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｄ８重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３４７】
[00395]  配列番号１７９は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｄ８軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３４８】
[00396]  配列番号１８０は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ａ１重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３４９】
[00397]  配列番号１８１は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ａ１軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３５０】
[00398]  配列番号１８２は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｅ５重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３５１】
[00399]  配列番号１８３は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｅ５軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３５２】
[00400]  配列番号１８４は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト３１Ｈ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３５３】
[00401]  配列番号１８５は、米国特許第８，７０９，４２４号からのＧＩＴＲアゴニスト３１Ｈ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３５４】
[00402]  配列番号１８６は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３６Ｅ５重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３５５】
[00403]  配列番号１８７は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３６Ｅ５軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３５６】
[00404]  配列番号１８８は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３Ｄ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３５７】
[00405]  配列番号１８９は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３Ｄ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３５８】
[00406]  配列番号１９０は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６１Ｇ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３５９】
[00407]  配列番号１９１は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６１Ｇ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３６０】
[00408]  配列番号１９２は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６Ｈ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３６１】
[00409]  配列番号１９３は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６Ｈ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３６２】
[00410]  配列番号１９４は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６１Ｆ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３６３】
[00411]  配列番号１９５は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト６１Ｆ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３６４】
[00412]  配列番号１９６は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ８重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３６５】
[00413]  配列番号１９７は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ８軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３６６】
[00414]  配列番号１９８は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト１７Ｆ１０重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３６７】
[00415]  配列番号１９９は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト１７Ｆ１０軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３６８】
[00416]  配列番号２００は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３５Ｄ８重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３６９】
[00417]  配列番号２０１は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３５Ｄ８軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３７０】
[00418]  配列番号２０２は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト４９Ａ１重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３７１】
[00419]  配列番号２０３は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト４９Ａ１軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３７２】
[00420]  配列番号２０４は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト９Ｅ５重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３７３】
[00421]  配列番号２０５は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト９Ｅ５軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３７４】
[00422]  配列番号２０６は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３１Ｈ６重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３７５】
[00423]  配列番号２０７は、米国特許第８，７０９，４２４号からのヒト化ＧＩＴＲアゴニスト３１Ｈ６軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
【０３７６】
[00424]  配列番号２０８は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０３７７】
[00425]  配列番号２０９は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３７８】
[00426]  配列番号２１０は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５ヒト化（ＨＣ１）重鎖のアミノ酸配列である。
【０３７９】
[00427]  配列番号２１１は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５ヒト化（ＨＣ２）重鎖のアミノ酸配列である。
【０３８０】
[00428]  配列番号２１２は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５ヒト化（ＨＣ３ａ）重鎖のアミノ酸配列である。
【０３８１】
[00429]  配列番号２１３は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのヒト化（ＨＣ３ｂ）ＧＩＴＲアゴニスト重鎖のアミノ酸配列である。
【０３８２】
[00430]  配列番号２１４は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのヒト化（ＨＣ４）ＧＩＴＲアゴニスト重鎖のアミノ酸配列である。
【０３８３】
[00431]  配列番号２１５は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からの２１５５ヒト化（ＬＣ１）ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３８４】
[00432]  配列番号２１６は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からの２１５５ヒト化（ＬＣ２ａ）ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３８５】
[00433]  配列番号２１７は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からの２１５５ヒト化（ＬＣ２ｂ）ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３８６】
[00434]  配列番号２１８は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からの２１５５ヒト化（ＬＣ３）ＧＩＴＲアゴニスト軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３８７】
[00435]  配列番号２１９は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト６９８可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０３８８】
[00436]  配列番号２２０は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト６９８可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３８９】
[00437]  配列番号２２１は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７０６可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０３９０】
[00438]  配列番号２２２は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７０６可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３９１】
[00439]  配列番号２２３は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト８２７可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０３９２】
[00440]  配列番号２２４は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト８２７可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３９３】
[00441]  配列番号２２５は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１７１８可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０３９４】
[00442]  配列番号２２６は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１７１８可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０３９５】
[00443]  配列番号２２７は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０３９６】
[00444]  配列番号２２８は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０３９７】
[00445]  配列番号２２９は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０３９８】
[00446]  配列番号２３０は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０３９９】
[00447]  配列番号２３１は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４００】
[00448]  配列番号２３２は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト２１５５軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４０１】
[00449]  配列番号２３３は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト６９８及び７０６重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４０２】
[00450]  配列番号２３４は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト６９８及び７０６重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４０３】
[00451]  配列番号２３５は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト６９８及び７０６重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４０４】
[00452]  配列番号２３６は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト６９８軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４０５】
[00453]  配列番号２３７は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト６９８、７０６、８２７、及び１６４９軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４０６】
[00454]  配列番号２３８は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト６９８、７０６、８２７、及び１６４９軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４０７】
[00455]  配列番号２３９は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７０６、８２７、及び１６４９軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４０８】
[00456]  配列番号２４０は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト８２７及び１６４９重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４０９】
[00457]  配列番号２４１は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト８２７重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４１０】
[00458]  配列番号２４２は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１６４９重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４１１】
[00459]  配列番号２４３は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１７１８重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４１２】
[00460]  配列番号２４４は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１７１８重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４１３】
[00461]  配列番号２４５は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１７１８重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４１４】
[00462]  配列番号２４６は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１７１８軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４１５】
[00463]  配列番号２４７は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１７１８軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４１６】
[00464]  配列番号２４８は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１７１８軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４１７】
[00465]  配列番号２４９は、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト８２７及び１６４９重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４１８】
[00466]  配列番号２５０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７重鎖のアミノ酸配列である。
【０４１９】
[00467]  配列番号２５１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４２０】
[00468]  配列番号２５２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０４２１】
[00469]  配列番号２５３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４２２】
[00470]  配列番号２５４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４２３】
[00471]  配列番号２５５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４２４】
[00472]  配列番号２５６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４２５】
[00473]  配列番号２５７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４２６】
[00474]  配列番号２５８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４２７】
[00475]  配列番号２５９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト１Ｄ７軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４２８】
[00476]  配列番号２６０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９重鎖のアミノ酸配列である。
【０４２９】
[00477]  配列番号２６１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４３０】
[00478]  配列番号２６２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０４３１】
[00479]  配列番号２６３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４３２】
[00480]  配列番号２６４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４３３】
[00481]  配列番号２６５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４３４】
[00482]  配列番号２６６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４３５】
[00483]  配列番号２６７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４３６】
[00484]  配列番号２６８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４３７】
[00485]  配列番号２６９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｃ９軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４３８】
[00486]  配列番号２７０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６重鎖のアミノ酸配列である。
【０４３９】
[00487]  配列番号２７１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４４０】
[00488]  配列番号２７２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０４４１】
[00489]  配列番号２７３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４４２】
[00490]  配列番号２７４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４４３】
[00491]  配列番号２７５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４４４】
[00492]  配列番号２７６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４４５】
[00493]  配列番号２７７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４４６】
[00494]  配列番号２７８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４４７】
[00495]  配列番号２７９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３３Ｆ６軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４４８】
[00496]  配列番号２８０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４重鎖のアミノ酸配列である。
【０４４９】
[00497]  配列番号２８１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４５０】
[00498]  配列番号２８２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０４５１】
[00499]  配列番号２８３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４５２】
[00500]  配列番号２８４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４５３】
[00501]  配列番号２８５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４５４】
[00502]  配列番号２８６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４５５】
[00503]  配列番号２８７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４５６】
[00504]  配列番号２８８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４５７】
[00505]  配列番号２８９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３４Ｇ４軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４５８】
[00506]  配列番号２９０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０重鎖のアミノ酸配列である。
【０４５９】
[00507]  配列番号２９１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４６０】
[00508]  配列番号２９２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０４６１】
[00509]  配列番号２９３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４６２】
[00510]  配列番号２９４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４６３】
[00511]  配列番号２９５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４６４】
[00512]  配列番号２９６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４６５】
[00513]  配列番号２９７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４６６】
[00514]  配列番号２９８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４６７】
[00515]  配列番号２９９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト３５Ｂ１０軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４６８】
[00516]  配列番号３００は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１重鎖のアミノ酸配列である。
【０４６９】
[00517]  配列番号３０１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４７０】
[00518]  配列番号３０２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０４７１】
[00519]  配列番号３０３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４７２】
[00520]  配列番号３０４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４７３】
[00521]  配列番号３０５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４７４】
[00522]  配列番号３０６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４７５】
[00523]  配列番号３０７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４７６】
[00524]  配列番号３０８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４７７】
[00525]  配列番号３０９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４７８】
[00526]  配列番号３１０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５重鎖のアミノ酸配列である。
【０４７９】
[00527]  配列番号３１１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４８０】
[00528]  配列番号３１２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０４８１】
[00529]  配列番号３１３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４８２】
[00530]  配列番号３１４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４８３】
[00531]  配列番号３１５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４８４】
[00532]  配列番号３１６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４８５】
[00533]  配列番号３１７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４８６】
[00534]  配列番号３１８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４８７】
[00535]  配列番号３１９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４１Ｇ５軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４８８】
[00536]  配列番号３２０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１重鎖のアミノ酸配列である。
【０４８９】
[00537]  配列番号３２１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４９０】
[00538]  配列番号３２２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０４９１】
[00539]  配列番号３２３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０４９２】
[00540]  配列番号３２４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４９３】
[00541]  配列番号３２５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４９４】
[00542]  配列番号３２６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４９５】
[00543]  配列番号３２７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０４９６】
[00544]  配列番号３２８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０４９７】
[00545]  配列番号３２９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４２Ａ１１軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０４９８】
[00546]  配列番号３３０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１重鎖のアミノ酸配列である。
【０４９９】
[00547]  配列番号３３１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５００】
[00548]  配列番号３３２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０５０１】
[00549]  配列番号３３３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５０２】
[00550]  配列番号３３４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５０３】
[00551]  配列番号３３５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５０４】
[00552]  配列番号３３６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５０５】
[00553]  配列番号３３７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５０６】
[00554]  配列番号３３８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５０７】
[00555]  配列番号３３９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４４Ｃ１軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５０８】
[00556]  配列番号３４０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８重鎖のアミノ酸配列である。
【０５０９】
[00557]  配列番号３４１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５１０】
[00558]  配列番号３４２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０５１１】
[00559]  配列番号３４３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５１２】
[00560]  配列番号３４４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５１３】
[00561]  配列番号３４５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５１４】
[00562]  配列番号３４６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５１５】
[00563]  配列番号３４７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５１６】
[00564]  配列番号３４８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５１７】
[00565]  配列番号３４９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４５Ａ８軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５１８】
[00566]  配列番号３５０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１重鎖のアミノ酸配列である。
【０５１９】
[00567]  配列番号３５１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５２０】
[00568]  配列番号３５２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０５２１】
[00569]  配列番号３５３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５２２】
[00570]  配列番号３５４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５２３】
[00571]  配列番号３５５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５２４】
[00572]  配列番号３５６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５２５】
[00573]  配列番号３５７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５２６】
[00574]  配列番号３５８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５２７】
[00575]  配列番号３５９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４６Ｅ１１軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５２８】
[00576]  配列番号３６０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２重鎖のアミノ酸配列である。
【０５２９】
[00577]  配列番号３６１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５３０】
[00578]  配列番号３６２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０５３１】
[00579]  配列番号３６３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５３２】
[00580]  配列番号３６４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５３３】
[00581]  配列番号３６５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５３４】
[00582]  配列番号３６６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５３５】
[00583]  配列番号３６７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５３６】
[00584]  配列番号３６８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５３７】
[00585]  配列番号３６９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ１２軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５３８】
[00586]  配列番号３７０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７重鎖のアミノ酸配列である。
【０５３９】
[00587]  配列番号３７１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５４０】
[00588]  配列番号３７２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０５４１】
[00589]  配列番号３７３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５４２】
[00590]  配列番号３７４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５４３】
[00591]  配列番号３７５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５４４】
[00592]  配列番号３７６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５４５】
[00593]  配列番号３７７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５４６】
[00594]  配列番号３７８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５４７】
[00595]  配列番号３７９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ｈ７軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５４８】
[00596]  配列番号３８０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９重鎖のアミノ酸配列である。
【０５４９】
[00597]  配列番号３８１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５５０】
[00598]  配列番号３８２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０５５１】
[00599]  配列番号３８３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５５２】
[00600]  配列番号３８４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５５３】
[00601]  配列番号３８５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５５４】
[00602]  配列番号３８６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５５５】
[00603]  配列番号３８７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５５６】
[00604]  配列番号３８８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５５７】
[00605]  配列番号３８９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｄ９軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５５８】
[00606]  配列番号３９０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２重鎖のアミノ酸配列である。
【０５５９】
[00607]  配列番号３９１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５６０】
[00608]  配列番号３９２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０５６１】
[00609]  配列番号３９３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５６２】
[00610]  配列番号３９４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５６３】
[00611]  配列番号３９５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５６４】
[00612]  配列番号３９６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５６５】
[00613]  配列番号３９７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５６６】
[00614]  配列番号３９８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５６７】
[00615]  配列番号３９９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４９Ｅ２軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５６８】
[00616]  配列番号４００は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９重鎖のアミノ酸配列である。
【０５６９】
[00617]  配列番号４０１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５７０】
[00618]  配列番号４０２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０５７１】
[00619]  配列番号４０３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５７２】
[00620]  配列番号４０４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５７３】
[00621]  配列番号４０５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５７４】
[00622]  配列番号４０６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５７５】
[00623]  配列番号４０７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５７６】
[00624]  配列番号４０８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５７７】
[00625]  配列番号４０９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト４８Ａ９軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５７８】
[00626]  配列番号４１０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７重鎖のアミノ酸配列である。
【０５７９】
[00627]  配列番号４１１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５８０】
[00628]  配列番号４１２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０５８１】
[00629]  配列番号４１３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５８２】
[00630]  配列番号４１４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５８３】
[00631]  配列番号４１５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５８４】
[00632]  配列番号４１６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５８５】
[00633]  配列番号４１７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５８６】
[00634]  配列番号４１８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５８７】
[00635]  配列番号４１９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト５Ｈ７軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５８８】
[00636]  配列番号４２０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０重鎖のアミノ酸配列である。
【０５８９】
[00637]  配列番号４２１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５９０】
[00638]  配列番号４２２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０５９１】
[00639]  配列番号４２３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０５９２】
[00640]  配列番号４２４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５９３】
[00641]  配列番号４２５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５９４】
[00642]  配列番号４２６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５９５】
[00643]  配列番号４２７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０５９６】
[00644]  配列番号４２８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０５９７】
[00645]  配列番号４２９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト７Ａ１０軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０５９８】
[00646]  配列番号４３０は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６重鎖のアミノ酸配列である。
【０５９９】
[00647]  配列番号４３１は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６軽鎖のアミノ酸配列である。
【０６００】
[00648]  配列番号４３２は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６可変重鎖のアミノ酸配列である。
【０６０１】
[00649]  配列番号４３３は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６可変軽鎖のアミノ酸配列である。
【０６０２】
[00650]  配列番号４３４は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０６０３】
[00651]  配列番号４３５は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０６０４】
[00652]  配列番号４３６は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０６０５】
[00653]  配列番号４３７は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列である。
【０６０６】
[00654]  配列番号４３８は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列である。
【０６０７】
[00655]  配列番号４３９は、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号からのＧＩＴＲアゴニスト９Ｈ６軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列である。
【０６０８】
[00656]  配列番号４４０はＧＩＴＲリガンド（ＧＩＴＲＬ）アミノ酸配列である。
【０６０９】
[00657]  配列番号４４１はＧＩＴＲＬポリペプチドの可溶性部分である。
【０６１０】
[00658]  配列番号４４２はヒトＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）のアミノ酸配列である。
【０６１１】
[00659]  配列番号４４３はＨＶＥＭリガンド（ＬＩＧＨＴ）アミノ酸配列である。
【０６１２】
[00660]  配列番号４４４はＬＩＧＨＴポリペプチドの可溶性部分である。
【０６１３】
[00661]  配列番号４４５はＬＩＧＨＴポリペプチドの代替的可溶性部分である。
【０６１４】
[00662]  配列番号４４６はＬＩＧＨＴポリペプチドの代替的可溶性部分である。
【０６１５】
[00663]  配列番号４４７はヒトＣＤ９５アイソフォーム１のアミノ酸配列である。
【０６１６】
[00664]  配列番号４４８はヒトＣＤ９５アイソフォーム２のアミノ酸配列である。
【０６１７】
[00665]  配列番号４４９はヒトＣＤ９５アイソフォーム３のアミノ酸配列である。
【０６１８】
[00666]  配列番号４５０はヒトＣＤ９５アイソフォーム４のアミノ酸配列である。
【０６１９】
[00667]  配列番号４５１はＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の重鎖可変領域（ＶＨ）である。
【０６２０】
[00668]  配列番号４５２はＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の軽鎖可変領域（ＶＬ）である。
【０６２１】
[00669]  配列番号４５３はＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の重鎖ＣＤＲ１である。
【０６２２】
[00670]  配列番号４５４はＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の重鎖ＣＤＲ２である。
【０６２３】
[00671]  配列番号４５５はＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の重鎖ＣＤＲ３である。
【０６２４】
[00672]  配列番号４５６はＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の軽鎖ＣＤＲ１である。
【０６２５】
[00673]  配列番号４５７はＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の軽鎖ＣＤＲ２である。
【０６２６】
[00674]  配列番号４５８はＣＤ９５アゴニストモノクローナル抗体Ｅ０９の軽鎖ＣＤＲ３である。
【０６２７】
[00675]  配列番号４５９はＣＤ９５リガンド（ＣＤ９５Ｌ）アミノ酸配列である。
【０６２８】
[00676]  配列番号４６０はＣＤ９５Ｌポリペプチドの可溶性部分である。
【０６２９】
[00677]  配列番号４６１はＣＤ９５Ｌポリペプチドの代替的可溶性部分である。
【０６３０】
[00678]  配列番号４６２はＣＤ９５Ｌポリペプチドの代替的可溶性部分である。
【０６３１】
[00679]  配列番号４６３はＰＤ−１阻害薬ニボルマブの重鎖アミノ酸配列である。
【０６３２】
[00680]  配列番号４６４はＰＤ−１阻害薬ニボルマブの軽鎖アミノ酸配列である。
【０６３３】
[00681]  配列番号４６５はＰＤ−１阻害薬ニボルマブの重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列である。
【０６３４】
[00682]  配列番号４６６はＰＤ−１阻害薬ニボルマブの軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列である。
【０６３５】
[00683]  配列番号４６７はＰＤ−１阻害薬ニボルマブの重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０６３６】
[00684]  配列番号４６８はＰＤ−１阻害薬ニボルマブの重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
【０６３７】
[00685]  配列番号４６９はＰＤ−１阻害薬ニボルマブの重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０６３８】
[00686]  配列番号４７０はＰＤ−１阻害薬ニボルマブの軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０６３９】
[00687]  配列番号４７１はＰＤ−１阻害薬ニボルマブの軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
【０６４０】
[00688]  配列番号４７２はＰＤ−１阻害薬ニボルマブの軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０６４１】
[00689]  配列番号４７３はＰＤ−１阻害薬ペンブロリズマブの重鎖アミノ酸配列である。
【０６４２】
[00690]  配列番号４７４はＰＤ−１阻害薬ペンブロリズマブの軽鎖アミノ酸配列である。
【０６４３】
[00691]  配列番号４７５はＰＤ−１阻害薬ペンブロリズマブの重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列である。
【０６４４】
[00692]  配列番号４７６はＰＤ−１阻害薬ペンブロリズマブの軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列である。
【０６４５】
[00693]  配列番号４７７はＰＤ−１阻害薬ペンブロリズマブの重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０６４６】
[00694]  配列番号４７８はＰＤ−１阻害薬ペンブロリズマブの重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
【０６４７】
[00695]  配列番号４７９はＰＤ−１阻害薬ペンブロリズマブの重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０６４８】
[00696]  配列番号４８０はＰＤ−１阻害薬ペンブロリズマブの軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０６４９】
[00697]  配列番号４８１はＰＤ−１阻害薬ペンブロリズマブの軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
【０６５０】
[00698]  配列番号４８２はＰＤ−１阻害薬ペンブロリズマブの軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０６５１】
[00699]  配列番号４８３はＰＤ−Ｌ１阻害薬デュルバルマブの重鎖アミノ酸配列である。
【０６５２】
[00700]  配列番号４８４はＰＤ−Ｌ１阻害薬デュルバルマブの軽鎖アミノ酸配列である。
【０６５３】
[00701]  配列番号４８５はＰＤ−Ｌ１阻害薬デュルバルマブの重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列である。
【０６５４】
[00702]  配列番号４８６はＰＤ−Ｌ１阻害薬デュルバルマブの軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列である。
【０６５５】
[00703]  配列番号４８７はＰＤ−Ｌ１阻害薬デュルバルマブの重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０６５６】
[00704]  配列番号４８８はＰＤ−Ｌ１阻害薬デュルバルマブの重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
【０６５７】
[00705]  配列番号４８９はＰＤ−Ｌ１阻害薬デュルバルマブの重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０６５８】
[00706]  配列番号４９０はＰＤ−Ｌ１阻害薬デュルバルマブの軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０６５９】
[00707]  配列番号４９１はＰＤ−Ｌ１阻害薬デュルバルマブの軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
【０６６０】
[00708]  配列番号４９２はＰＤ−Ｌ１阻害薬デュルバルマブの軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０６６１】
[00709]  配列番号４９３はＰＤ−Ｌ１阻害薬アベルマブの重鎖アミノ酸配列である。
【０６６２】
[00710]  配列番号４９４はＰＤ−Ｌ１阻害薬アベルマブの軽鎖アミノ酸配列である。
【０６６３】
[00711]  配列番号４９５はＰＤ−Ｌ１阻害薬アベルマブの重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列である。
【０６６４】
[00712]  配列番号４９６はＰＤ−Ｌ１阻害薬アベルマブの軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列である。
【０６６５】
[00713]  配列番号４９７はＰＤ−Ｌ１阻害薬アベルマブの重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０６６６】
[00714]  配列番号４９８はＰＤ−Ｌ１阻害薬アベルマブの重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
【０６６７】
[00715]  配列番号４９９はＰＤ−Ｌ１阻害薬アベルマブの重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０６６８】
[00716]  配列番号５００はＰＤ−Ｌ１阻害薬アベルマブの軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０６６９】
[00717]  配列番号５０１はＰＤ−Ｌ１阻害薬アベルマブの軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
【０６７０】
[00718]  配列番号５０２はＰＤ−Ｌ１阻害薬アベルマブの軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０６７１】
[00719]  配列番号５０３はＰＤ−Ｌ１阻害薬アテゾリズマブの重鎖アミノ酸配列である。
【０６７２】
[00720]  配列番号５０４はＰＤ−Ｌ１阻害薬アテゾリズマブの軽鎖アミノ酸配列である。
【０６７３】
[00721]  配列番号５０５はＰＤ−Ｌ１阻害薬アテゾリズマブの重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列である。
【０６７４】
[00722]  配列番号５０６はＰＤ−Ｌ１阻害薬アテゾリズマブの軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列である。
【０６７５】
[00723]  配列番号５０７はＰＤ−Ｌ１阻害薬アテゾリズマブの重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０６７６】
[00724]  配列番号５０８はＰＤ−Ｌ１阻害薬アテゾリズマブの重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
【０６７７】
[00725]  配列番号５０９はＰＤ−Ｌ１阻害薬アテゾリズマブの重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０６７８】
[00726]  配列番号５１０はＰＤ−Ｌ１阻害薬アテゾリズマブの軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０６７９】
[00727]  配列番号５１１はＰＤ−Ｌ１阻害薬アテゾリズマブの軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列である。
【０６８０】
[00728]  配列番号５１２はＰＤ−Ｌ１阻害薬アテゾリズマブの軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列である。
【０６８１】
発明の詳細な説明
[00729]  特に定義されない限り、本明細書で使用される全ての科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般的に理解するのと同じ意味を有する。本明細書において言及される全ての特許及び刊行物は、全体として参照により援用される。
【０６８２】
定義
[00730]  用語「共投与」、「共投与する」、「〜と併用して投与される」、「〜と併用して投与する」、「同時の」、及び「並行した」は、本明細書で使用されるとき、両方の医薬品有効成分及び／又はその代謝産物が対象に同じ時点で存在するような対象への２つ以上の医薬品有効成分（本発明の好ましい実施形態では、例えば、少なくとも１つのＴＮＦＲＳＦアゴニスト及び複数のＴＩＬ）の投与を包含する。共投与には、別個の組成物での同時投与、別個の組成物での異なる時点における投与、又は２つ以上の医薬品有効成分が存在する組成物での投与が含まれる。別個の組成物での同時投与及び両方の薬剤が存在する組成物での投与が好ましい。
【０６８３】
[00731]  用語「迅速拡大培養」は、１週間の期間で少なくとも約３倍（又は４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、又は９倍）、より好ましくは１週間の期間で少なくとも約１０倍（又は２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、又は９０倍）、又は最も好ましくは１週間の期間で少なくとも約１００倍の抗原特異的ＴＩＬ数の増加を意味する。幾つもの迅速拡大培養プロトコルが本明細書に記載される。
【０６８４】
[00732]  本明細書において「腫瘍浸潤リンパ球」又は「ＴＩＬ」とは、対象の血流を離れて腫瘍中に遊走した、当初白血球細胞として入手される細胞の集団が意味される。ＴＩＬとしては、限定はされないが、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞（リンパ球）、Ｔｈ１及びＴｈ１７  ＣＤ４＋Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、樹状細胞及びＭ１マクロファージが挙げられる。ＴＩＬには、初代ＴＩＬ及び二次ＴＩＬの両方が含まれる。「初代ＴＩＬ」は、本明細書に概説されるとおり患者組織試料から入手されるものであり（「新鮮に採取された」と称されることもある）、及び「二次ＴＩＬ」は、限定はされないが、バルクＴＩＬ及び拡大培養ＴＩＬ（「ＲＥＰ  ＴＩＬ」又は「ＲＥＰ後ＴＩＬ」）を含め、本明細書で考察するとおり拡大培養された又は増殖した任意のＴＩＬ細胞集団である。
【０６８５】
[00733]  本明細書において「細胞集団」（ＴＩＬを含む）は、共通の形質を共有する多数の細胞を意味する。一般に、集団は、概して数が１×１０６〜１×１０１０個の範囲であり、異なるＴＩＬ集団は異なる数を含む。例えば、ＩＬ−２の存在下での初代ＴＩＬの初期成長は、およそ１×１０８個の細胞のバルクＴＩＬ集団をもたらす。ＲＥＰ拡大培養は、概して、１．５×１０９〜１．５×１０１０個の注入用細胞の集団が提供されるように行われる。
【０６８６】
[00734]  用語「セントラルメモリーＴ細胞」は、ヒトではＣＤ４５Ｒ０＋であり、且つＣＣＲ７（ＣＣＲ７ｈｉ）及びＣＤ６２Ｌ（ＣＤ６２ｈｉ）を構成的に発現するＴ細胞のサブセットを指す。セントラルメモリーＴ細胞の表面表現型にはまた、ＴＣＲ、ＣＤ３、ＣＤ１２７（ＩＬ−７Ｒ）、及びＩＬ−１５Ｒも含まれる。セントラルメモリーＴ細胞の転写因子には、ＢＣＬ−６、ＢＣＬ−６Ｂ、ＭＢＤ２、及びＢＭＩ１が含まれる。セントラルメモリーＴ細胞はＴＣＲ惹起後にエフェクター分子としてＩＬ−２及びＣＤ４０Ｌを主に分泌する。セントラルメモリーＴ細胞は血中のＣＤ４コンパートメントにおいて優勢であり、ヒトではリンパ節及び扁桃腺に比例的に高濃度化する。
【０６８７】
[00735]  用語「抗ＣＤ３抗体」は、成熟Ｔ細胞のＴ細胞抗原受容体におけるＣＤ３受容体に対する抗体又はその変異体、例えばモノクローナル抗体及びヒト、ヒト化、キメラ又はマウス抗体を含めたものを指す。抗ＣＤ３抗体には、ムロモナブとしても知られるＯＫＴ−３が含まれる。抗ＣＤ３抗体にはまた、Ｔ３及びＣＤ３εとしても知られるＵＨＣＴ１クローンも含まれる。他の抗ＣＤ３抗体には、例えば、オテリキシズマブ、テプリズマブ、及びビジリズマブが含まれる。
【０６８８】
[00736]  用語「ＯＫＴ−３」（本明細書では「ＯＫＴ３」とも称される）は、成熟Ｔ細胞のＴ細胞抗原受容体におけるＣＤ３受容体に対するモノクローナル抗体又はヒト、ヒト化、キメラ、若しくはマウス抗体を含めたそのバイオシミラー若しくは変異体を指し、ＯＫＴ−３（３０ｎｇ／ｍＬ、MACS GMP CD3 pure、Miltenyi Biotech, Inc.、San Diego, CA, USA）及びムロモナブ又はその変異体、保存的アミノ酸置換、グリコフォーム、若しくはバイオシミラーなど、市販されている形態を含む。ムロモナブの重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を表１に提供する（配列番号１及び配列番号２）。
【０６８９】
【表１】
2020514289.tif 000003
【０６９０】
[00737]  用語「ＩＬ−２」（本明細書では「ＩＬ２」とも称される）は、インターロイキン−２として知られるＴ細胞成長因子を指し、そのヒト及び哺乳類形態、保存的アミノ酸置換、グリコフォーム、バイオシミラー、及び変異体を含め、あらゆる形態のＩＬ−２が含まれる。ＩＬ−２については、例えば、Nelson, J. Immunol. 2004, 172, 3983-88及びMalek,Annu. Rev. Immunol. 2008, 26, 453-79（これらの開示は参照により本明細書に援用される）に記載される。本発明での使用に好適な組換えヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を表２に提供する（配列番号３）。例えば、用語ＩＬ−２には、ヒトの組換え形態のＩＬ−２、例えばアルデスロイキン（PROLEUKIN、使い捨てバイアル当たり２２００万ＩＵで複数の供給業者から市販されている）、並びにCellGenix, Inc.、Portsmouth, NH, USA（CELLGRO GMP）又はProSpec-Tany TechnoGene Ltd.、East Brunswick, NJ, USA（カタログ番号CYT-209-b）によって商業的に供給されている組換えＩＬ−２の形態及び他の販売業者からの他の市販の均等物が包含される。アルデスロイキン（ｄｅｓ−アラニル−１，セリン−１２５ヒトＩＬ−２）は、分子量が約１５ｋＤａの非グリコシル化ヒト組換え形態のＩＬ−２である。本発明での使用に好適なアルデスロイキンのアミノ酸配列を表２に提供する（配列番号４）。用語ＩＬ−２にはまた、Nektar Therapeutics、South San Francisco, CA,USAから入手可能なペグ化ＩＬ２プロドラッグＮＫＴＲ−２１４を含め、本明細書に記載されるとおりの、ペグ化形態のＩＬ−２も包含される。本発明での使用に好適なＮＫＴＲ−２１４及びペグ化ＩＬ−２が米国特許出願公開第２０１４／０３２８７９１  Ａ１号及び国際公開第２０１２／０６５０８６  Ａ１号（これらの開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。本発明での使用に好適な別の形態のコンジュゲート型ＩＬ−２が、米国特許第４，７６６，１０６号、同第５，２０６，３４４号、同第５，０８９，２６１号及び同第４９０２，５０２号（これらの開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。本発明での使用に好適なＩＬ−２の製剤が米国特許第６，７０６，２８９号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。
【０６９１】
【表２】
2020514289.tif 000004
【０６９２】
[00738]  用語「ＩＬ−４」（本明細書では「ＩＬ４」とも称される）は、インターロイキン４として知られるサイトカインを指し、これはＴｈ２  Ｔ細胞によって産生され、並びに好酸球、好塩基球、及びマスト細胞によって産生される。ＩＬ−４は、ナイーブヘルパーＴ細胞（Ｔｈ０細胞）のＴｈ２  Ｔ細胞への分化を調節する。Steinke and Borish, Respir. Res. 2001, 2, 66-70。ＩＬ−４によって活性化されると、続いてＴｈ２  Ｔ細胞はポジティブフィードバックループで更なるＩＬ−４を産生する。ＩＬ−４はまた、Ｂ細胞増殖及びクラスＩＩ  ＭＨＣ発現も刺激し、Ｂ細胞からのＩｇＥ及びＩｇＧ１発現へのクラススイッチも誘導する。本発明での使用に好適な組換えヒトＩＬ−４は、ProSpec-Tany TechnoGene Ltd.、East Brunswick,NJ, USA（カタログ番号CYT-211）及びThermoFisherScientific, Inc.、Waltham, MA, USA（ヒトＩＬ−１５組換えタンパク質、カタログ番号Gibco CTP0043）を含め、複数の供給業者から市販されている。本発明での使用に好適な組換えヒトＩＬ−４のアミノ酸配列を表２に提供する（配列番号５）。
【０６９３】
[00739]  用語「ＩＬ−７」（本明細書では「ＩＬ７」とも称される）は、インターロイキン７として知られるグリコシル化組織由来サイトカインを指し、これは間質及び上皮細胞、並びに樹状細胞から入手し得る。Fry and Mackall, Blood 2002, 99, 3892-904。ＩＬ−７はＴ細胞の発達を刺激することができる。ＩＬ−７は、ＩＬ−７受容体αと共通γ鎖受容体とからなるヘテロ二量体のＩＬ−７受容体に結合し、それが胸腺内でのＴ細胞発達及び末梢内での生存にとって重要な一連のシグナルとなる。本発明での使用に好適な組換えヒトＩＬ−７は、ProSpec-Tany TechnoGene Ltd.、East Brunswick,NJ, USA（カタログ番号CYT-254）及びThermoFisherScientific, Inc.、Waltham, MA, USA（ヒトＩＬ−７組換えタンパク質、カタログ番号Gibco PHC0071）を含め、複数の供給業者から市販されている。本発明での使用に好適な組換えヒトＩＬ−７のアミノ酸配列を表２に提供する（配列番号６）。
【０６９４】
[00740]  用語「ＩＬ−１５」（本明細書では「ＩＬ１５」とも称される）は、インターロイキン−１５として知られるＴ細胞成長因子を指し、そのヒト及び哺乳類形態、保存的アミノ酸置換、グリコフォーム、バイオシミラー、及び変異体を含め、あらゆる形態のＩＬ−１５が含まれる。ＩＬ−１５については、例えば、Fehniger and Caligiuri, Blood 2001, 97, 14-32（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。ＩＬ−１５はβ及びγシグナル伝達受容体サブユニットをＩＬ−２と共有している。組換えヒトＩＬ−１５は、分子質量が１２．８ｋＤａの、１１４アミノ酸（及びＮ末端メチオニン）を含む単一の非グリコシル化ポリペプチド鎖である。組換えヒトＩＬ−１５は、ProSpec-Tany TechnoGene Ltd.、East Brunswick,NJ, USA（カタログ番号CYT-230-b）及びThermoFisherScientific, Inc.、Waltham, MA, USA（ヒトＩＬ−１５組換えタンパク質、カタログ番号34-8159-82）を含め、複数の供給業者から市販されている。本発明での使用に好適な組換えヒトＩＬ−１５のアミノ酸配列を表２に提供する（配列番号７）。
【０６９５】
[00741]  用語「ＩＬ−２１」（本明細書では「ＩＬ２１」とも称される）は、インターロイキン−２１として知られるプレイオトロピックサイトカインタンパク質を指し、そのヒト及び哺乳類形態、保存的アミノ酸置換、グリコフォーム、バイオシミラー、及び変異体を含め、あらゆる形態のＩＬ−２１が含まれる。ＩＬ−２１については、例えば、Spolski and Leonard, Nat. Rev. Drug. Disc. 2014, 13, 379-95（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。ＩＬ−２１は、主としてナチュラルキラーＴ細胞及び活性化ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞によって産生される。組換えヒトＩＬ−２１は、分子質量が１５．４ｋＤａの、１３２アミノ酸を含む単一の非グリコシル化ポリペプチド鎖である。組換えヒトＩＬ−２１は、ProSpec-Tany TechnoGene Ltd.、East Brunswick,NJ, USA（カタログ番号CYT-408-b）及びThermoFisherScientific, Inc.、Waltham, MA, USA（ヒトＩＬ−２１組換えタンパク質、カタログ番号14-8219-80）を含め、複数の供給業者から市販されている。本発明での使用に好適な組換えヒトＩＬ−２１のアミノ酸配列を表２に提供する（配列番号８）。
【０６９６】
[00742]  用語「インビボ」は、哺乳類対象の体内で起こる事象を指す。
【０６９７】
[00743]  用語「エキソビボ」は、哺乳類対象の体外で、人工環境下に起こる事象を指す。
【０６９８】
[00744]  用語「インビトロ」は、試験系で起こる事象を指す。インビトロアッセイは、生細胞又は死細胞を利用し得る細胞ベースのアッセイを包含し、また、インタクトな細胞を利用しない無細胞アッセイも包含し得る。
【０６９９】
[00745]  用語「有効量」又は「治療有効量」は、限定はされないが疾患治療を含めた、意図した適用を達成するのに十分な本明細書に記載されるとおりの化合物又は化合物の組み合わせの量を指す。治療有効量は、意図した適用（インビトロ又はインビボ）、又は治療下の対象及び疾患病態（例えば、対象の体重、年齢及び性別）、疾患病態の重症度、又は投与方法に応じて異なり得る。この用語はまた、標的細胞において特定の応答（例えば、血小板粘着及び／又は細胞遊走の低減）を生じさせるであろう用量にも適用される。具体的な用量は、選択した詳細な化合物、従うべき投与レジメン、化合物が他の化合物と併用して投与されるかどうか、投与タイミング、その投与先の組織、及び化合物を運ぶ物理的デリバリーシステムに応じて異なることになる。
【０７００】
[00746]  「治療効果」は、本明細書において当該の用語が使用されるとき、治療利益及び／又は予防利益を包含する。予防効果としては、疾患又は病態の出現を遅延させる又は消失させること、疾患又は病態の症状の発生を遅延させる又は消失させること、疾患又は病態の進行を減速させる、止める、又は逆転させること、又はこれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【０７０１】
[00747]  用語「ＱＤ」、「ｑｄ」、又は「ｑ．ｄ．」は、quaque die、１日１回、又は毎日１回を意味する。用語「ＢＩＤ」、「ｂｉｄ」、又は「ｂ．ｉ．ｄ．」は、bis in die、１日２回、又は毎日２回を意味する。用語「ＴＩＤ」、「ｔｉｄ」、又は「ｔ．ｉ．ｄ．」は、ter in die、１日３回、又は毎日３回を意味する。用語「ＱＩＤ」、「ｑｉｄ」、又は「ｑ．ｉ．ｄ．」は、quater in die、１日４回、又は毎日４回を意味する。
【０７０２】
[00748]  用語「薬学的に許容可能な塩」は、当該技術分野において公知の種々の有機及び無機対イオンから誘導される塩を指す。薬学的に許容可能な酸付加塩は無機酸及び有機酸で形成され得る。塩を誘導し得る好ましい無機酸としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸及びリン酸が挙げられる。塩を誘導し得る好ましい有機酸としては、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸及びサリチル酸が挙げられる。薬学的に許容可能な塩基付加塩は無機塩基及び有機塩基で形成され得る。塩を誘導し得る無機塩基としては、例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン及びアルミニウムが挙げられる。塩を誘導し得る有機塩基としては、例えば、第一級、第二級、及び第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含めた置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂が挙げられる。具体的な例としては、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、及びエタノールアミンが挙げられる。一部の実施形態において、薬学的に許容可能な塩基付加塩は、アンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、及びマグネシウム塩から選択される。用語「共結晶」は、当該技術分野において公知の幾つもの共結晶形成体から誘導される分子錯体を指す。塩と異なり、共結晶は、典型的には共結晶と薬物との間の水素移動を伴わず、代わりに結晶構造における共結晶形成体と薬物との間の水素結合、芳香環スタッキング、又は分散力（dispersive force）などの分子間相互作用を伴う。
【０７０３】
[00749]  用語「薬学的に許容可能な担体」又は「薬学的に許容可能な賦形剤」は、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤、及び不活性成分を含むことが意図される。医薬品有効成分に対するかかる薬学的に許容可能な担体又は薬学的に許容可能な賦形剤の使用は当該技術分野において周知である。任意の従来の薬学的に許容可能な担体又は薬学的に許容可能な賦形剤が医薬品有効成分と適合しない場合を除き、本発明の治療用組成物中におけるその使用が企図される。他の薬物など、追加的な医薬品有効成分もまた、記載される組成物、プロセス及び方法に取り入れることができる。
【０７０４】
[00750]  用語「抗原」は、免疫応答を誘導する物質を指す。一部の実施形態において、抗原は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子によって提示された場合に抗体又はＴ細胞受容体（ＴＣＲ）による結合を受ける能力を有する分子である。用語「抗原」は、本明細書で使用されるとき、Ｔ細胞エピトープもまた包含する。抗原は、加えて、免疫系（immune sytem）により認識される能力を有する。一部の実施形態において、抗原は、Ｂリンパ球及び／又はＴリンパ球（T lynphocyte）の活性化につながる体液性免疫応答又は細胞性免疫応答を誘導する能力を有する。ある場合には、そのために抗原がＴｈ細胞エピトープを含むか又はそれに連結されていることが必要であり得る。抗原はまた、１つ以上のエピトープ（例えば、Ｂ−及びＴ−エピトープ）も有し得る。一部の実施形態において、抗原は、好ましくは、その対応する抗体又はＴＣＲと典型的には高度に特異的且つ選択的に反応し、他の（ther）抗原によって誘導され得る他の多数の抗体又はＴＣＲとは反応しないであろう。
【０７０５】
[00751]  用語「抗体（antibody）」及びその複数形「抗体（antibodies）」は、全免疫グロブリン及びその任意の抗原結合断片（「抗原結合部分」）又は単鎖を指す。「抗体」は更に、ジスルフィド結合によって相互に連結された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質、又はその抗原結合部分を指す。各重鎖は重鎖可変領域（本明細書ではＶＨと省略する）及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含む。各軽鎖は軽鎖可変領域（本明細書ではＶＬと省略する）及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は１つのドメイン、ＣＬを含む。抗体のＶＨ及びＶＬ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）又は超可変領域（ＨＶＲ）と称される、且つフレームワーク領域（ＦＲ）と称される一層高度に保存された領域が散在し得る超可変性領域に更に細分し得る。各ＶＨ及びＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４で並んだ３つのＣＤＲ及び４つのＦＲを含む。重鎖及び軽鎖の可変領域は、１つ又は複数の抗原エピトープと相互作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、免疫系の種々の細胞（例えばエフェクター細胞）及び古典的補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）を含め、宿主組織又は因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。
【０７０６】
[00752]  用語「モノクローナル抗体」、「ｍＡｂ」、「モノクローナル抗体組成物」、又はこれらの複数形は、単一分子組成の抗体分子の製剤を指す。モノクローナル抗体組成物は特定のエピトープに対する単一の結合特異性及び親和性を示す。ＴＮＦＲＳＦ受容体に特異的なモノクローナル抗体は、試験対象に好適な抗原を注入し、次に所望の配列又は機能的特性を有する抗体を発現するハイブリドーマを単離する当該技術分野における知識及び技能を用いて作製し得る。モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは従来手順を用いて（例えば、そのモノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合する能力を有するオリゴヌクレオチドプローブを使用することにより）容易に単離され、シーケンシングされる。ハイブリドーマ細胞は、かかるＤＮＡの好ましい供給源として働く。単離後、ＤＮＡは発現ベクターに置かれてもよく、次にそれが、本来免疫グロブリンタンパク質を発現しない大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、又は骨髄腫細胞などの宿主細胞にトランスフェクトされ、組換え宿主細胞におけるモノクローナル抗体の合成が達成される。抗体の組換え産生については、以下に更に詳細に記載する。
【０７０７】
[00753]  抗体の「抗原結合部分」又は「抗原結合断片」（又は単に「抗体部分」又は「断片」）という用語は、本明細書で使用されるとき、抗原に特異的に結合する能力を保持している抗体の１つ以上の断片を指す。完全長抗体の断片によって抗体の抗原結合機能が果たされ得ることが示されている。抗体の「抗原結合部分」という用語の範囲内に含まれる結合断片の例としては、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一のアームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨ又はＶＬドメインからなり得るドメイン抗体（ｄＡｂ）断片（Ward, et al., Nature, 1989, 341, 544-546）；及び（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。更に、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬ及びＶＨは別個の遺伝子によってコードされるが、それらを組換え方法を用いて合成リンカーによってつなぎ合わせて、ＶＬ及びＶＨ領域が対を成して単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる一価分子を形成する単一のタンパク質鎖として作られることを可能にできる；例えば、Bird, et al., Science 1988, 242, 423-426；及びHuston,et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1988, 85, 5879-5883を参照のこと）。かかるｓｃＦｖ抗体もまた、抗体の「抗原結合部分」又は「抗原結合断片」という用語の範囲内に包含されることが意図される。これらの抗体断片は当業者に公知の従来技術を用いて得られ、断片はインタクトな抗体と同様に有用性に関してスクリーニングされる。
【０７０８】
[00754]  用語「ヒト抗体」は、本明細書で使用されるとき、フレームワーク及びＣＤＲの両方の領域がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する抗体を含むことが意図される。更に、抗体が定常領域を含む場合、その定常領域もまたヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する。本発明のヒト抗体は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えばインビトロでランダム若しくは部位特異的突然変異誘発によるか、又はインビボで体細胞突然変異により導入される突然変異）を含んでもよい。用語「ヒト抗体」には、明細書で使用されるとき、マウスなどの別の哺乳類種の生殖細胞系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列にグラフトされた抗体は含まれないことが意図される。
【０７０９】
[00755]  用語「ヒトモノクローナル抗体」は、フレームワーク及びＣＤＲの両方の領域がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する単一結合特異性を呈する抗体を指す。ある実施形態において、ヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞に融合したヒト重鎖トランス遺伝子及び軽鎖トランス遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック非ヒト動物、例えばトランスジェニックマウスから得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。
【０７１０】
[00756]  用語「組換えヒト抗体」は、本明細書で使用されるとき、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子に関してトランスジェニック又はトランス染色体の動物（マウスなど）又はそれから調製されたハイブリドーマ（以下に更に記載する）から単離された抗体、（ｂ）ヒト抗体を発現するように形質転換された宿主細胞、例えばトランスフェクトーマから単離された抗体、（ｃ）組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離された抗体、及び（ｄ）他のＤＮＡ配列へのヒト免疫グロブリン遺伝子配列のスプライシングが関わる任意の他の手段によって調製され、発現し、作成され、又は単離された抗体など、組換え手段によって調製され、発現し、作成され、又は単離されるあらゆるヒト抗体を含む。かかる組換えヒト抗体は、フレームワーク及びＣＤＲ領域がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。特定の実施形態において、しかしながら、かかる組換えヒト抗体は、インビトロ突然変異誘発（又は、ヒトＩｇ配列に関してトランスジェニックの動物が使用される場合、インビボ体細胞突然変異誘発）に供することができ、従って組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系列ＶＨ及びＶＬ配列に由来し且つそれに関係しながらも、天然にはインビボのヒト抗体生殖細胞系列レパートリー中に存在しないこともある配列である。
【０７１１】
[00757]  本明細書で使用されるとき、「アイソタイプ」は、重鎖定常領域遺伝子によってコードされる抗体クラス（例えば、ＩｇＭ又はＩｇＧ１）を指す。
【０７１２】
[00758]  語句「抗原を認識する抗体」及び「抗原に特異的な抗体」は、本明細書では用語「抗原に特異的に結合する抗体」と同義的に使用される。
【０７１３】
[00759]  用語「ヒト抗体誘導体」は、その抗体と別の医薬品有効成分又は抗体とのコンジュゲートを含め、任意の修飾された形態のヒト抗体を指す。用語「コンジュゲート」、「抗体−薬物コンジュゲート」、「ＡＤＣ」、又は「イムノコンジュゲート」は、当該技術分野で利用可能な方法を用いて本明細書に記載される抗体にコンジュゲートすることのできる別の治療用部分にコンジュゲートした抗体、又はその断片を指す。
【０７１４】
[00760]  用語「ヒト化抗体（humanized antibody）」、「ヒト化抗体（humanizedantibodies）」、及び「ヒト化」は、マウスなどの別の哺乳類種の生殖細胞系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列にグラフトされた抗体を指すことが意図される。ヒトフレームワーク配列内には更なるフレームワーク領域修飾が行われてもよい。ヒト化形態の非ヒト（例えばマウス）抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含むキメラ抗体である。ほとんどの場合、ヒト化抗体は、所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、ウサギ又は非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）の１５超可変領域からの残基によってレシピエントの超可変領域からの残基が置き換えられているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の例では、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、対応する非ヒト残基に置き換えられる。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体又はドナー抗体に見られない残基を含み得る。これらの修飾は、抗体性能を更に精緻化するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、超可変ループの全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、且つＦＲ領域の全て又は実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のものである少なくとも１つの、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含むことになる。ヒト化抗体は、任意選択でまた、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンのＦｃの少なくとも一部分も含むことになる。更なる詳細については、Jones, et al., Nature 1986, 321, 522-525；Riechmann,et al., Nature 1988, 332, 323-329；及びPresta, Curr. Op.Struct. Biol. 1992, 2, 593-596を参照のこと。本明細書に記載されるＴＮＦＲＳＦアゴニストはまた、エフェクター機能及び／又はＦｃＲ結合の改善（例えば、低下）を付与することが公知の任意のＦｃ変異体を利用するように修飾されてもよい。Ｆｃ変異体としては、例えば、国際公開第１９８８／０７０８９  Ａ１号、同第１９９６／１４３３９  Ａ１号、同第１９９８／０５７８７  Ａ１号、同第１９９８／２３２８９  Ａ１号、同第１９９９／５１６４２  Ａ１号、同第９９／５８５７２  Ａ１号、同第２０００／０９５６０  Ａ２号、同第２０００／３２７６７  Ａ１号、同第２０００／４２０７２  Ａ２号、同第２００２／４４２１５  Ａ２号、同第２００２／０６０９１９  Ａ２号、同第２００３／０７４５６９  Ａ２号、同第２００４／０１６７５０  Ａ２号、同第２００４／０２９２０７  Ａ２号、同第２００４／０３５７５２  Ａ２号、同第２００４／０６３３５１  Ａ２号、同第２００４／０７４４５５  Ａ２号、同第２００４／０９９２４９  Ａ２号、同第２００５／０４０２１７  Ａ２号、同第２００５／０７０９６３  Ａ１号、同第２００５／０７７９８１  Ａ２号、同第２００５／０９２９２５  Ａ２号、同第２００５／１２３７８０  Ａ２号、同第２００６／０１９４４７  Ａ１号、同第２００６／０４７３５０  Ａ２号、及び同第２００６／０８５９６７  Ａ２号；及び米国特許第５，６４８，２６０号；同第５，７３９，２７７号；同第５，８３４，２５０号；同第５，８６９，０４６号；同第６，０９６，８７１号；同第６，１２１，０２２号；同第６，１９４，５５１号；同第６，２４２，１９５号；同第６，２７７，３７５号；同第６，５２８，６２４号；同第６，５３８，１２４号；同第６，７３７，０５６号；同第６，８２１，５０５号；同第６，９９８，２５３号；及び同第７，０８３，７８４号に開示されるアミノ酸置換のいずれか１つを挙げることができ；これらの開示は本明細書に参照により援用される。
【０７１５】
[00761]  用語「キメラ抗体」は、可変領域配列がマウス抗体に由来し、且つ定常領域配列がヒト抗体に由来する抗体など、可変領域配列が一つの種に由来し、且つ定常領域配列が別の種に由来する抗体を指すことが意図される。
【０７１６】
[00762]  「ダイアボディ」は、２つの抗原結合部位を有する小さい抗体断片である。こうした断片は、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）が軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に同じポリペプチド鎖で接続したもの（ＶＨ−ＶＬ又はＶＬ−ＶＨ）を含む。同じ鎖上の２つのドメイン間での対合を許容しないほど短いリンカーを使用することにより、ドメインは強制的に別の鎖の相補ドメインと対合して２つの抗原結合部位を作り出す。ダイアボディについては、例えば、欧州特許第４０４，０９７号、国際公開第９３／１１１６１号；及びBolliger, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1993, 90, 6444-6448に更に詳しく記載されている。
【０７１７】
[00763]  用語「グリコシル化」は、抗体の修飾誘導体を指す。非グリコシル化（aglycoslated）抗体はグリコシル化を欠いている。グリコシル化は、例えば抗原に対する抗体の親和性が増加するように改変することができる。かかる炭水化物修飾は、例えば抗体配列内の１つ以上のグリコシル化部位を改変することにより達成し得る。例えば、１つ以上の可変領域フレームワークグリコシル化部位の除去をもたらし、それにより当該部位におけるグリコシル化を除去する１つ以上のアミノ酸置換を設けることができる。非グリコシル化は、米国特許第５，７１４，３５０号及び同第６，３５０，８６１号に記載されるとおり、抗原に対する抗体の親和性を増加させ得る。それに加えて又は代えて、フコシル残基の量が少ない低フコシル化抗体又は二分ＧｌｃＮａｃ構造が増加した抗体など、改変されたタイプのグリコシル化を有する抗体を作製することができる。かかる改変グリコシル化パターンは抗体の能力を増加させることが実証されている。かかる炭水化物修飾は、例えば改変グリコシル化機構を有する宿主細胞において抗体を発現させることにより達成し得る。改変グリコシル化機構を有する細胞は当該技術分野において記載されており、本発明の組換え抗体を発現して、それにより改変グリコシル化を有する抗体を産生する宿主細胞として使用することができる。例えば、細胞株Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、及びＭｓ７０９は、フコシルトランスフェラーゼ遺伝子ＦＵＴ８（α（１，６）フコシルトランスフェラーゼ）を欠き、従ってＭｓ７０４、Ｍｓ７０５、及びＭｓ７０９細胞株で発現する抗体はその炭水化物上にフコースを欠く。Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、及びＭｓ７０９  ＦＵＴ８−／−細胞株は、２つの置換ベクターを使用したＣＨＯ／ＤＧ４４細胞におけるＦＵＴ８遺伝子の標的破壊により作成された（例えば、米国特許出願公開第２００４／０１１０７０４号又はYamane-Ohnuki, et al., Biotechnol. Bioeng., 2004, 87, 614-622を参照のこと）。別の例として、欧州特許第１，１７６，１９５号は、フコシルトランスフェラーゼをコードするＦＵＴ８遺伝子の機能が破壊された細胞株であって、そこで発現する抗体がα１，６結合関連酵素の減少又は消失によって低フコシル化を呈する細胞株について記載しており、また、抗体のＦｃ領域に結合するＮ−アセチルグルコサミンへのフコースの付加に関して低酵素活性であるか、又はその酵素活性を有しない細胞株、例えばラット骨髄腫細胞株ＹＢ２／０（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６６２）についても記載している。国際公開第０３／０３５８３５号は、フコースをＡｓｎ（２９７）結合炭水化物に結合させる能力が低下しているため、同様に当該宿主細胞で発現する抗体の低フコシル化をもたらす変異ＣＨＯ細胞株のＬｅｃ  １３細胞について記載している（Shields, et al., J. Biol. Chem. 2002, 277, 26733-26740もまた参照のこと。国際公開第９９／５４３４２号は、糖タンパク質修飾グリコシルトランスフェラーゼ（例えば、β（１，４）−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ））を発現するように操作された細胞株であって、そこで発現する抗体が二分ＧｌｃＮａｃ構造の増加を呈し、それが抗体のＡＤＣＣ活性の増加をもたらす操作された細胞株について記載している（Umana, et al., Nat. Biotech. 1999, 17, 176-180もまた参照のこと）。或いは、抗体のフコース残基がフコシダーゼ酵素を使用した切断により除かれてもよい。例えば、Tarentino, et al., Biochem. 1975, 14, 5516-5523に記載されるとおり、フコシダーゼα−Ｌ−フコシダーゼは抗体からフコシル残基を取り除く。
【０７１８】
[00764]  「ペグ化」は、１つ以上のＰＥＧ基が抗体又は抗体断片に結合するようになる条件下でポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、例えばＰＥＧの反応性エステル又はアルデヒド誘導体などと典型的に反応する修飾された抗体又は融合タンパク質、又はその断片を指す。ペグ化により、例えば、抗体の生物学的（例えば血清）半減期が増加し得る。好ましくは、ペグ化は、反応性ＰＥＧ分子（又は類似の反応性水溶性ポリマー）とのアシル化反応又はアルキル化反応で行われる。本明細書で使用されるとき、用語「ポリエチレングリコール」は、モノ（Ｃ１〜Ｃ１０）アルコキシ−若しくはアリールオキシ−ポリエチレングリコール又はポリエチレングリコール−マレイミドなど、他のタンパク質の誘導体化に用いられている形態のＰＥＧのいずれかを包含することが意図される。ペグ化されるタンパク質又は抗体は非グリコシル化タンパク質又は抗体であってもよい。ペグ化方法は、例えば欧州特許第０１５４３１６号及び同第０４０１３８４号並びに米国特許第５，８２４，７７８号（これらの各々の開示は本明細書に参照により援用される）に記載されるとおり、当該技術分野において公知であり、本発明の抗体に適用することができる。
【０７１９】
[00765]  用語「融合タンパク質」又は「融合ポリペプチド」は、２つ以上の個別のタンパク質の特性を組み合わせるタンパク質を指す。かかるタンパク質は、直接か、或いはアミノ酸リンカーを介して共有結合的に連結された少なくとも２つの異種ポリペプチドを有する。融合タンパク質を形成するポリペプチドは、典型的にはＣ末端がＮ末端に連結されるが、また、Ｃ末端がＣ末端に、Ｎ末端がＮ末端に、又はＮ末端がＣ末端に連結されてもよい。融合タンパク質のポリペプチドは任意の順序であってよく、構成ポリペプチドのいずれか一方又は両方の２つ以上を含み得る。この用語には、融合タンパク質を構成する抗原の保存的に修飾された変異体、多型変異体、対立遺伝子、突然変異体、部分配列、種間相同体、及び免疫原性断片が包含される。本開示の融合タンパク質はまた、構成成分抗原又はその免疫原性断片の追加的なコピーも含み得る。融合タンパク質は、一体に連結された１つ以上の結合ドメインを含有し、ＩｇＧ  ＦｃドメインなどのＦｃドメインに更に連結されてもよい。融合タンパク質が更に一体に連結されることによりモノクローナル抗体を模倣し、６つ以上の結合ドメインを提供してもよい。融合タンパク質は、当該技術分野において公知のとおりの組換え方法によって作製され得る。融合タンパク質の調製は当該技術分野において公知であり、例えば、国際公開第１９９５／０２７７３５  Ａ１号、同第２００５／１０３０７７  Ａ１号、同第２００８／０２５５１６  Ａ１号、同第２００９／００７１２０  Ａ１号、同第２０１０／００３７６６  Ａ１号、同第２０１０／０１００５１  Ａ１号、同第２０１０／０７８９６６  Ａ１号、米国特許出願公開第２０１５／０１２５４１９  Ａ１号及び同第２０１６／０２７２６９５  Ａ１号、及び米国特許第８，９２１，５１９号（これらの各々の開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。
【０７２０】
[00766]  用語「異種」は、核酸又はタンパク質の一部分に関連して使用されるとき、その核酸又はタンパク質が、自然中では互いに同じ関係で見出されない２つ以上の部分配列を含むことを示す。例えば、核酸は、典型的には組換え産生されて、新規の機能性核酸を作り出すように編成された無関係の遺伝子からの２つ以上の配列、例えば、ある供給源からのプロモーターと別の供給源からのコード領域、又は異なる供給源からのコード領域を有する。同様に、異種タンパク質とは、そのタンパク質が、自然中では互いに同じ関係で見出されない２つ以上の部分配列（例えば、融合タンパク質）を含むことを示す。
【０７２１】
[00767]  用語「保存的アミノ酸置換」は、抗体又は融合タンパク質の抗原への結合を無効にしないアミノ酸配列修飾を意味する。保存的アミノ酸置換としては、あるクラスのアミノ酸における同じクラスのアミノ酸による置換が挙げられ、ここでクラスは、共通の物理化学的アミノ酸側鎖特性及び例えば標準デイホフ（Dayhoff）頻度交換行列又はBLOSUM行列によって決定されるとおりの、天然に見られる相同タンパク質における高い置換頻度によって定義される。６つの一般的なアミノ酸側鎖クラスが分類されており、クラスＩ（Ｃｙｓ）；クラスＩＩ（Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、Ｇｌｙ）；クラスＩＩＩ（Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ）；クラスＩＶ（Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ）；クラスＶ（Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ）；及びクラスＶＩ（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ）が含まれる。例えば、ＡｓｐをＡｓｎ、Ｇｌｎ、又はＧｌｕなどの別のクラスＩＩＩ残基に代える置換は保存的置換である。従って、抗体中の予測非必須アミノ酸残基が好ましくは同じクラスの別のアミノ酸残基に置き換えられる。抗原結合を消失させることのないアミノ酸保存的置換を同定する方法は当該技術分野において周知である（例えば、Brummell, et al., Biochemistry 1993, 32, 1180-1187；Kobayashi, et al., Protein Eng. 1999, 12, 879-884 (1999)；及びBurks, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94, 412-417を参照のこと）。
【０７２２】
[00768]  ２つ以上の核酸又はポリペプチドの文脈で用語「配列同一性」、「パーセント同一性」、及び「配列パーセント同一性」（又はこれらの同義語、例えば「９９％同一」）は、いかなる保存的アミノ酸置換も配列同一性の一部として考慮せず、対応が最大となるように比較及びアラインメント（必要に応じてギャップを導入する）したときに同じである、又は同じであるヌクレオチド若しくはアミノ酸残基を特定の割合だけ有する２つ以上の配列又は部分配列を指す。パーセント同一性は、配列比較ソフトウェア又はアルゴリズムを用いるか、又は目視検査によって測定することができる。アミノ酸又はヌクレオチド配列のアラインメントを達成するために使用し得る様々なアルゴリズム及びソフトウェアが当該技術分野において公知である。パーセント配列同一性の決定に好適なプログラムとしては、例えば、米国政府の国立バイオテクノロジー情報センター（National Center for Biotechnology Information）BLASTウェブサイトから利用可能なBLASTプログラムスイートが挙げられる。２つの配列間の比較は、BLASTN又はBLASTPのいずれかのアルゴリズムを使用して行うことができる。BLASTNは核酸配列の比較に使用され、一方、BLASTPはアミノ酸配列の比較に使用される。ALIGN、ALIGN-2（Genentech、South San Francisco, California）又はDNASTARから利用可能なMegAlignが、配列のアラインメントに使用し得る更なる公的に利用可能なソフトウェアプログラムである。当業者は、特定のアラインメントソフトウェアによるアラインメントを最大化するための適切なパラメータを決定することができる。特定の実施形態では、アラインメントソフトウェアのデフォルトパラメータが使用される。
【０７２３】
[00769]  本発明の特定の実施形態は、抗体又は融合タンパク質の変異体を含む。本明細書で使用されるとき、用語「変異体」は、限定はされないが、参照抗体のアミノ酸配列の範囲内の又はそれに隣接する特定の位置における１つ以上の置換、欠失及び／又は付加の点で参照抗体のアミノ酸配列と異なるアミノ酸配列を含む抗体又は融合タンパク質を包含する。変異体は、参照抗体のアミノ酸配列と比較して、そのアミノ酸配列に１つ以上の保存的置換を含み得る。保存的置換には、例えば、同様の荷電又は非荷電アミノ酸の置換が関わり得る。変異体は、参照抗体の抗原に特異的に結合する能力を保持している。
【０７２４】
[00770]  核酸配列は、黙示的に、その保存的に修飾された変異体（例えば、縮重コドン置換）及び相補配列を、明示的に指示される配列と同様に包含する。具体的には、縮重コドン置換は、１つ以上の選択された（又は全ての）コドンの３番目の位置が混合塩基及び／又はデオキシイノシン残基で置換された配列を生成することにより実現され得る。Batzer, et al., Nucleic Acid Res. 1991, 19,5081；Ohtsuka, et al., J.Biol. Chem. 1985, 260, 2605-2608；Rossolini, et al., Mol.Cell. Probes 1994, 8, 91-98。核酸という用語は、ｃＤＮＡ、ｍＲＮＡ、オリゴヌクレオチド、及びポリヌクレオチドと同義的に用いられる。
【０７２５】
[00771]  用語「バイオシミラー」は、臨床的に不活性な成分に軽微な違いがあるにも関わらず、米国で許可されている先発バイオ製剤と高度に類似した、且つそれに関して製剤の安全性、純度、及び効力の点でそのバイオ製剤と先発製剤との間に臨床的に有意味な違いがない、モノクローナル抗体又は融合タンパク質を含めたバイオ製剤を意味する。更に、後発バイオ医薬品又は「バイオシミラー」医薬品は、欧州医薬品庁（European Medicines Agency）によって使用が既に認可されている別のバイオ医薬品に類似したバイオ医薬品である。用語「バイオシミラー」はまた、他の国及び地域の規制機関によっても同義的に使用される。バイオ製剤又はバイオ医薬品は、細菌又は酵母などの生物学的供給源によって作られる又はそれに由来する医薬品である。これはヒトインスリン又はエリスロポエチンなどの比較的小さい分子、又はモノクローナル抗体などの複合的な分子からなり得る。例えば、先発モノクローナル抗体がリツキシマブである場合、リツキシマブに準じて医薬品規制当局により承認されたバイオシミラーモノクローナル抗体は、リツキシマブと「バイオシミラー」であり、又はリツキシマブの「そのバイオシミラー」である。欧州では、後発バイオ医薬品又は「バイオシミラー」医薬品は、欧州医薬品庁（European Medicines Agency：ＥＭＡ）によって使用が既に認可されている別のバイオ医薬品に類似したバイオ医薬品である。欧州における後発バイオ適用についての関連する法的根拠は、規則（ＥＣ）第７２６／２００４号の第６条及び指令２００１／８３／ＥＣの第１０条（４）（その後の改正を含む）であり、従って欧州では、バイオシミラーは、規則（ＥＣ）第７２６／２００４号の第６条及び指令２００１／８３／ＥＣの第１０条（４）に基づき認可を受け、認可が承認され、又は認可申請の対象となり得る。既に認可を受けている元のバイオ医薬品製剤は、欧州では「先発医薬品製剤」と称され得る。ある製剤がバイオシミラーと見なされるための要件の一部が、後発バイオ医薬品製剤に関するＣＨＭＰガイドライン（CHMP Guideline on Similar Biological Medicinal Products）に概説されている。加えて、モノクローナル抗体バイオシミラーに関するガイドラインを含め、製剤固有のガイドラインがＥＭＡによって製剤毎に提供されており、そのウェブサイトに公開されている。本明細書に記載されるとおりのバイオシミラーは、品質特性、生物学的活性、作用機序、安全性プロファイル及び／又は有効性の点で先発医薬品製剤に類似したものであり得る。加えて、バイオシミラーは先発医薬品製剤と同じ病態の治療に使用される又はそれへの使用が意図されるものであり得る。従って、本明細書に記載されるとおりのバイオシミラーは、先発医薬品製剤に類似した又は高度に類似した品質特性を有すると見なされ得る。或いは、又は加えて、本明細書に記載されるとおりのバイオシミラーは、先発医薬品製剤に類似した又は高度に類似した生物学的活性を有すると見なされ得る。或いは、又は加えて、本明細書に記載されるとおりのバイオシミラーは、先発医薬品製剤に類似した又は高度に類似した安全性プロファイルを有すると見なされ得る。或いは、又は加えて、本明細書に記載されるとおりのバイオシミラーは、先発医薬品製剤に類似した又は高度に類似した有効性を有すると見なされ得る。本明細書に記載されるとおり、欧州におけるバイオシミラーは、ＥＭＡによって認可済みの先発医薬品製剤と比較される。しかしながら、一部の例では、バイオシミラーは、欧州経済地域外においてある種の試験で認可を受けたバイオ医薬品製剤（非ＥＥＡ認可「対照薬」）と比較されてもよい。かかる試験には、例えば、ある種の臨床試験及びインビボ非臨床試験が含まれる。本明細書で使用されるとき、用語「バイオシミラー」はまた、非ＥＥＡ認可対照薬と比較済みの又はそれと比較され得るバイオ医薬品製剤にも関する。ある種のバイオシミラーは、抗体、抗体断片（例えば抗原結合部分）及び融合タンパク質などのタンパク質である。タンパク質バイオシミラーは、ポリペプチドの機能に有意な影響を及ぼさない軽微なアミノ酸構造の修飾（例えばアミノ酸の欠失、付加、及び／又は置換を含む）を有するアミノ酸配列を有し得る。バイオシミラーは、その先発医薬品製剤のアミノ酸配列と９７％以上、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。バイオシミラーは、先発医薬品製剤の翻訳後修飾と異なる１つ以上の翻訳後修飾、例えば、限定はされないが、グリコシル化、酸化、アミド分解、及び／又はトランケーションを含んでもよく、但しその差異が医薬品製剤の安全性及び／又は有効性に変化をもたらさないものとする。バイオシミラーは先発医薬品製剤と同一の又は異なるグリコシル化パターンを有し得る。特に、限定的ではないが、バイオシミラーは、先発医薬品製剤に関連する安全性についての懸念がその差異によって対処される又は対処されるように意図される場合、異なるグリコシル化パターンを有し得る。加えて、バイオシミラーは、例えばその強度、医薬品形態、製剤化、賦形剤及び／又は体裁の点で先発医薬品製剤から逸脱してもよく、但し医薬品製剤の安全性及び有効性が損なわれないものとする。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なる。バイオシミラーは、例えば薬物動態学的（ＰＫ）及び／又は薬力学的（ＰＤ）プロファイルの点で先発医薬品製剤と比較して差異を含み得るが、なおも認可を受ける又は認可に好適であると考えるのに十分に先発医薬品製剤に類似していると見なされる。ある種の状況では、バイオシミラーは先発医薬品製剤と比較して異なる結合特性を呈し、ここでこの異なる結合特性は、ＥＭＡなどの規制当局により後発バイオ製剤としての認可を妨げるものではないと見なされる。用語「バイオシミラー」はまた、他の国及び地域の規制機関によっても同義的に使用される。
【０７２６】
[00772]  本明細書で使用されるとき、用語「４−１ＢＢアゴニスト」は、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）抗原に特異的に結合する任意の抗体又はタンパク質を指し得る。「特異的に結合する」とは、その結合分子が本質的に非４−１ＢＢ分子へのバックグラウンド結合を呈することを意味する。４−１ＢＢアゴニストは、当該技術分野において公知の任意の４−１ＢＢアゴニストであってよい。詳細には、それは本明細書に更に詳細に記載される４−１ＢＢアゴニストのうちの一つである。しかしながら、４−１ＢＢに特異的に結合する単離結合分子は、他の種からの４−１ＢＢ分子と交差反応性を有し得る。４−１ＢＢアゴニスト抗体及びタンパク質はまた、例えば、Ｔ細胞上のヒト４−１ＢＢ（ｈ４−１ＢＢ又はｈＣＤ１３７）にも特異的に結合し得る。
【０７２７】
[00773]  本明細書で使用されるとき、用語「ＯＸ４０アゴニスト」は、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）抗原に特異的に結合する任意の抗体又はタンパク質を指し得る。「特異的に結合する」とは、その結合分子が本質的に非ＯＸ４０分子へのバックグラウンド結合を呈することを意味する。ＯＸ４０アゴニストは、当該技術分野において公知の任意のＯＸ４０アゴニストであってよい。詳細には、それは本明細書に更に詳細に記載されるＯＸ４０アゴニストのうちの一つである。しかしながら、ＯＸ４０に特異的に結合する単離結合分子は、他の種からのＯＸ４０分子と交差反応性を有し得る。ＯＸ４０アゴニスト抗体及びタンパク質はまた、例えば、Ｔ細胞上のヒトＯＸ４０（ｈＯＸ４０又はｈＣＤ１３４）にも特異的に結合し得る。
【０７２８】
[00774]  本明細書で使用されるとき、用語「ＣＤ２７アゴニスト」は、ＣＤ２７抗原に特異的に結合する任意の抗体又はタンパク質を指し得る。「特異的に結合する」とは、その結合分子が本質的に非ＣＤ２７分子へのバックグラウンド結合を呈することを意味する。ＣＤ２７アゴニストは、当該技術分野において公知の任意のＣＤ２７アゴニストであってよい。詳細には、それは本明細書に更に詳細に記載されるＣＤ２７アゴニストのうちの一つである。しかしながら、ＣＤ２７に特異的に結合する単離結合分子は、他の種からのＣＤ２７分子と交差反応性を有し得る。ＣＤ２７アゴニスト抗体及びタンパク質はまた、例えば、Ｔ細胞上のヒトＣＤ２７（ｈＣＤ２７）にも特異的に結合し得る。
【０７２９】
[00775]  本明細書で使用されるとき、用語「ＧＩＴＲアゴニスト」には、ＧＩＴＲ（ＣＤ３５７）に特異的に結合する少なくとも１つの抗原結合部位を含む分子が含まれる。「特異的に結合する」とは、その結合分子が本質的に非ＧＩＴＲ分子へのバックグラウンド結合を呈することを意味する。ＧＩＴＲアゴニストは、当該技術分野において公知の任意のＧＩＴＲアゴニストであってよい。詳細には、それは本明細書に更に詳細に記載されるＧＩＴＲアゴニストのうちの一つである。しかしながら、ＧＩＴＲに特異的に結合する単離結合分子は、他の種からのＧＩＴＲ分子と交差反応性を有し得る。ＧＩＴＲアゴニスト抗体及びタンパク質はまた、例えば、Ｔ細胞及び樹状細胞上のヒトＧＩＴＲ（ｈＧＩＴＲ）にも特異的に結合し得る。
【０７３０】
[00776]  本明細書で使用されるとき、用語「ＨＶＥＭアゴニスト」には、ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）に特異的に結合する少なくとも１つの抗原結合部位を含む分子が含まれる。「特異的に結合する」とは、その結合分子が本質的に非ＨＶＥＭ分子へのバックグラウンド結合を呈することを意味する。ＨＶＥＭアゴニストは、当該技術分野において公知の任意のＨＶＥＭアゴニストであってよい。詳細には、それは本明細書に更に詳細に記載されるＨＶＥＭアゴニストのうちの一つである。しかしながら、ＨＶＥＭに特異的に結合する単離結合分子は、他の種からのＨＶＥＭ分子と交差反応性を有し得る。ＨＶＥＭアゴニスト抗体及びタンパク質はまた、例えば、Ｔ細胞上のヒトＨＶＥＭ（ｈＨＶＥＭ）にも特異的に結合し得る。
【０７３１】
[00777]  用語「血液学的悪性腫瘍」は、限定はされないが、血液、骨髄、リンパ節、及びリンパ系の組織を含め、哺乳類における造血及びリンパ系組織の癌及び腫瘍を指す。血液学的悪性腫瘍は「液性腫瘍」とも称される。血液学的悪性腫瘍としては、限定はされないが、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性リンパ腫（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄球性白血病（ＣＭＬ）、急性単球性白血病（ＡＭｏＬ）、ホジキンリンパ腫、及び非ホジキンリンパ腫が挙げられる。用語「Ｂ細胞血液学的悪性腫瘍」は、Ｂ細胞を冒す血液学的悪性腫瘍を指す。
【０７３２】
[00778]  用語「固形腫瘍」は、通常嚢胞又は液体範囲を含まない異常な組織塊を指す。固形腫瘍は良性又は悪性であり得る。用語「固形腫瘍癌」は、悪性、新生物性、又は癌性の固形腫瘍を指す。固形腫瘍癌としては、限定はされないが、肺癌、乳癌、前立腺癌、結腸癌、直腸癌、及び膀胱癌など、肉腫、癌腫、及びリンパ腫が挙げられる。固形腫瘍の組織構造は、実質（癌細胞）と、癌細胞が分散するところであって支持微小環境をもたらし得る支持間質細胞とを含む相互依存的組織コンパートメントを含む。
【０７３３】
[00779]  用語「微小環境」は、本明細書で使用されるとき、固形腫瘍又は血液学的腫瘍の微小環境全体又は微小環境内の個々の細胞サブセットを指し得る。腫瘍微小環境は、本明細書で使用されるとき、Swartz, et al., Cancer Res., 2012, 72, 2473に記載されるとおり、「新生物形質転換を促進し、腫瘍成長及び浸潤を支援し、腫瘍を宿主免疫から保護し、治療抵抗性を助長し、及び顕性転移が発育するためのニッチを提供する細胞、可溶性因子、シグナル伝達分子、細胞外マトリックス、及び機械的キュー」の複合混合物を指す。腫瘍は、Ｔ細胞によって認識されるはずの抗原を発現するが、微小環境による免疫抑制のため、免疫系による腫瘍クリアランスはまれである。
【０７３４】
[00780]  誤解を避けるために言えば、本明細書では、本発明の詳細な態様、実施形態又は例と併せて記載される詳細な特徴（例えば、整数、特性、値、使用、疾患、式、化合物又は基）は、それと適合しない場合を除き、本明細書に記載される任意の他の態様、実施形態又は例に適用可能であるものと理解されるべきであることが意図される。従って、かかる特徴が、適切な場合には、本明細書に定義される定義、クレーム又は実施形態のいずれかと併せて使用されてもよい。本明細書（任意の添付の特許請求の範囲、要約及び図面を含む）に開示される全ての特徴、及び／又はそのように開示される任意の方法又はプロセスの全てのステップが、特徴及び／又はステップの少なくとも一部が相互排他的である組み合わせを除き、任意の組み合わせで組み合わされてもよい。本発明は、いかなる開示される実施形態のいかなる詳細にも限定されない。本発明は、本明細書（任意の添付の特許請求の範囲、要約及び図面を含む）に開示される特徴のうちの任意の新規の１つ、又は新規の組み合わせ、又はそのように開示される任意の方法又はプロセスのステップのうちの任意の新規の１つ、又は任意の新規の組み合わせにまで及ぶ。
【０７３５】
[00781]  用語「約」及び「近似的に」は、ある値の統計的に意味のある範囲内にあることを意味する。かかる範囲は、所与の値又は範囲のあるオーダー内、好ましくは５０％以内、より好ましくは２０％以内、より好ましくはなおも１０％以内、及び更により好ましくは５％以内であり得る。用語「約」又は「近似的に」に包含される許容可能な変動は研究下の詳細な系に依存し、当業者は容易に理解することができる。更に、本明細書で使用されるとき、用語「約」及び「近似的に」は、寸法、サイズ、配合、パラメータ、形状並びに他の数量及び特性が正確にそのものでなく、及び正確にそのものでなくてもよく、必要に応じて、公差、変換係数、丸め、測定誤差など、及び当業者に公知の他の要因を反映して、近似的であってもよく、及び／又はより大きくても若しくは小さくてもよいことを意味する。一般に、寸法、サイズ、配合、パラメータ、形状又は他の数量若しくは特性は、そのように明示されるか否かに関わらず、「約」又は「近似的」である。極めて異なるサイズ、形状及び寸法の実施形態は記載される構成を用い得ることが注記される。
【０７３６】
[00782]  移行句「〜を含む（comprising）」、「〜から本質的になる（consistingessentially of）」、及び「〜からなる（consisting of）」は、出願当初及び補正後の形態の添付の特許請求の範囲において使用されるとき、存在する場合に、どのような記載されていない追加のクレーム要素又はステップが特許請求の範囲から除外されるかに関して特許請求の範囲を定義する。用語「〜を含む」は包含的又はオープンエンドであることが意図され、いかなる記載されていない追加の要素、方法、ステップ又は材料も除外しない。用語「〜からなる」は、クレームに指定されるもの以外のいかなる要素、ステップ又は材料も除外し、後者の材料の例では、指定される材料に通常付随する不純物も除外する。用語「〜から本質的になる」は、特許請求の範囲を指定の要素、ステップ又は材料及び特許請求される発明の基本的な新規の特徴に実質的に影響しないものに限定する。本発明を具体化する本明細書に記載される全ての組成物、方法、及びキットが、代替的実施形態では、移行句「〜を含む」、「〜から本質的になる」、及び「〜からなる」のいずれかによってより具体的に定義され得る。
【０７３７】
４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）アゴニスト
[00783]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）アゴニストである。４−１ＢＢアゴニストは、当該技術分野において公知の任意の４−１ＢＢ結合分子であってよい。４−１ＢＢ結合分子は、ヒト又は哺乳類４−１ＢＢへの結合能を有するモノクローナル抗体又は融合タンパク質であってよい。４−１ＢＢアゴニスト又は４−１ＢＢ結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。４−１ＢＢアゴニスト又は４−１ＢＢ結合分子は重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用されるとき、用語の結合分子にはまた、４−１ＢＢに結合する抗体（完全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体、及び抗体断片、例えば、上記のいずれかのＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリによって作製される断片、エピトープ結合断片、及び操作された形態の抗体、例えばｓｃＦｖ分子も含まれる。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物に使用される４−１ＢＢアゴニストとしては、抗４−１ＢＢ抗体、ヒト抗４−１ＢＢ抗体、マウス抗４−１ＢＢ抗体、哺乳類抗４−１ＢＢ抗体、モノクローナル抗４−１ＢＢ抗体、ポリクローナル抗４−１ＢＢ抗体、キメラ抗４−１ＢＢ抗体、抗４−１ＢＢアドネクチン、抗４−１ＢＢドメイン抗体、単鎖抗４−１ＢＢ断片、重鎖抗４−１ＢＢ断片、軽鎖抗４−１ＢＢ断片、抗４−１ＢＢ融合タンパク質、及びその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、又はバイオシミラーが挙げられる。アゴニスト抗４−１ＢＢ抗体は強力な免疫応答を誘導することが公知である。Lee, et al., PLOS One 2013, 8, e69677。好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、アゴニスト抗４−１ＢＢヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち、単一細胞株に由来する抗体）である。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ＥＵ−１０１（Eutilex Co. Ltd.）、ウトミルマブ、又はウレルマブ、又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、若しくはバイオシミラーである。好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ウトミルマブ又はウレルマブ、又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、若しくはバイオシミラーである。
【０７３８】
[00784]  好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニスト又は４−１ＢＢ結合分子はまた、融合タンパク質であってもよい。好ましい実施形態において、多量体４−１ＢＢアゴニスト、例えば三量体又は六量体４−１ＢＢアゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）は、典型的には２つのリガンド結合ドメインを持つアゴニストモノクローナル抗体と比較して、優れた受容体（４−１ＢＢＬ）クラスター化及び細胞内シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含む三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれ以上の融合タンパク質及び任意選択でこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結することが、例えば、Gieffers, et al.,Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載されている。
【０７３９】
[00785]  アゴニスト４−１ＢＢ抗体及び融合タンパク質は強力な免疫応答を誘導することが公知である。好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、毒性を低下させるのに十分な方法で４−１ＢＢ抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を無効にするアゴニスト４−１ＢＢモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を無効にするアゴニスト４−１ＢＢモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を無効にするアゴニスト４−１ＢＢモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、Ｆｃ領域機能を無効にするアゴニスト４−１ＢＢモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。
【０７４０】
[00786]  一部の実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ヒト４−１ＢＢ（配列番号９）への高親和性での結合及びアゴニスト活性によって特徴付けられる。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ヒト４−１ＢＢ（配列番号９）に結合する結合分子である。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、マウス４−１ＢＢ（配列番号１０）に結合する結合分子である。４−１ＢＢアゴニスト又は結合分子が結合する４−１ＢＢ抗原のアミノ酸配列を表３に要約する。
【０７４１】
【表３】
2020514289.tif 000005
【０７４２】
[00787]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウス４−１ＢＢと約１００ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢと約９０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢと約８０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢと約７０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢと約６０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢと約５０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢと約４０ｐＭ以下のＫＤで結合する、又はヒト又はマウス４−１ＢＢと約３０ｐＭ以下のＫＤで結合する４−１ＢＢアゴニストを含む。
【０７４３】
[00788]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約８×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約９×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウス４−１ＢＢに約１×１０６  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する４−１ＢＢアゴニストを含む。
【０７４４】
[00789]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約２．１×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約２．２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約２．３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約２．４×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約２．５×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約２．６×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する又はヒト又はマウス４−１ＢＢに約２．７×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約２．８×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約２．９×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウス４−１ＢＢに約３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する４−１ＢＢアゴニストを含む。
【０７４５】
[00790]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約１０ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約９ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約８ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約７ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約６ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約５ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約４ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約３ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウス４−１ＢＢに約２ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、又はヒト又はマウス４−１ＢＢに約１ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する４−１ＢＢアゴニストを含む。
【０７４６】
[00791]  好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ＰＦ−０５０８２５６６又はＭＯＲ−７４８０としても知られるウトミルマブ、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。ウトミルマブはPfizer, Inc.から入手可能である。ウトミルマブは、免疫グロブリンＧ２−λ、抗［ヒト（Homo sapiens）ＴＮＦＲＳＦ９（腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーメンバー９、４−１ＢＢ、Ｔ細胞抗原ＩＬＡ、ＣＤ１３７）］、ヒト（Homo sapiens）（完全ヒト）モノクローナル抗体である。ウトミルマブのアミノ酸配列は表４に示す。ウトミルマブは、Ａｓｎ５９及びＡｓｎ２９２にグリコシル化部位；位置２２〜９６（ＶＨ−ＶＬ）、１４３〜１９９（ＣＨ１−ＣＬ）、２５６〜３１６（ＣＨ２）及び３６２〜４２０（ＣＨ３）に重鎖鎖内ジスルフィド架橋；位置２２’〜８７’（ＶＨ−ＶＬ）及び１３６’〜１９５’（ＣＨ１−ＣＬ）に軽鎖鎖内ジスルフィド架橋；ＩｇＧ２Ａアイソフォーム位置２１８〜２１８、２１９〜２１９、２２２〜２２２、及び２２５〜２２５、ＩｇＧ２Ａ／Ｂアイソフォーム位置２１８〜１３０、２１９〜２１９、２２２〜２２２、及び２２５〜２２５、及びＩｇＧ２Ｂアイソフォーム位置２１９〜１３０（２）、２２２〜２２２、及び２２５〜２２５に鎖間重鎖−重鎖ジスルフィド架橋；及びＩｇＧ２Ａアイソフォーム位置１３０〜２１３’（２）、ＩｇＧ２Ａ／Ｂアイソフォーム位置２１８〜２１３’及び１３０〜２１３’、及びＩｇＧ２Ｂアイソフォーム位置２１８〜２１３’（２）に鎖間重鎖−軽鎖ジスルフィド架橋を含む。ウトミルマブ並びにその変異体及び断片の調製及び特性については、米国特許第８，８２１，８６７号；同第８，３３７，８５０号；及び同第９，４６８，６７８号、及び国際公開第２０１２／０３２４３３  Ａ１号（これらの各々の開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。ウトミルマブの前臨床的特徴については、Fisher, et al., Cancer Immunolog. & Immunother. 2012, 61,1721-33に記載されている。現在行われている種々の血液腫瘍及び固形腫瘍適応疾患におけるウトミルマブの臨床試験としては、米国国立衛生研究所（U.S. National Institutes ofHealth）clinicaltrials.gov識別番号ＮＣＴ０２４４４７９３、ＮＣＴ０１３０７２６７、ＮＣＴ０２３１５０６６、及びＮＣＴ０２５５４８１２が挙げられる。
【０７４７】
[00792]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは配列番号１１によって提供される重鎖と配列番号１２によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１１及び配列番号１２に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０７４８】
[00793]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストはウトミルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号１３に示される配列を含み、及び４−１ＢＢアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号１４に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号１３及び配列番号１４に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖ抗体を含む。
【０７４９】
[00794]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号１５、配列番号１６、及び配列番号１７に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号１８、配列番号１９、及び配列番号２０に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０７５０】
[00795]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ウトミルマブに準じて医薬品規制当局の承認を受けた４−１ＢＢアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はウトミルマブである）を含む４−１ＢＢ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されている４−１ＢＢアゴニスト抗体であり、この４−１ＢＢアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はウトミルマブである。４−１ＢＢアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はウトミルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はウトミルマブである。
【０７５１】
【表４】
2020514289.tif 000006
【０７５２】
[00796]  好ましい実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ＢＭＳ−６６３５１３及び２０Ｈ４．９．ｈ４ａとしても知られるモノクローナル抗体ウレルマブ、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。ウレルマブは、Bristol-Myers Squibb, Inc.、及びCreativeBiolabs, Inc.から入手可能である。ウレルマブは、免疫グロブリンＧ４−κ、抗［ヒト（Homo sapiens）ＴＮＦＲＳＦ９（腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー９、４−１ＢＢ、Ｔ細胞抗原ＩＬＡ、ＣＤ１３７）］、ヒト（Homo sapiens）（完全ヒト）モノクローナル抗体である。ウレルマブのアミノ酸配列は表５に示す。ウレルマブは、位置２９８（及び２９８’’）にＮ−グリコシル化部位；位置２２〜９５（ＶＨ−ＶＬ）、１４８〜２０４（ＣＨ１−ＣＬ）、２６２〜３２２（ＣＨ２）及び３６８〜４２６（ＣＨ３）に（及び位置２２’’〜９５’’、１４８’’〜２０４’’、２６２’’〜３２２’’、及び３６８’’〜４２６’’に）重鎖鎖内ジスルフィド架橋；位置２３’〜８８’（ＶＨ−ＶＬ）及び１３６’〜１９６’（ＣＨ１−ＣＬ）に（及び位置２３’’’〜８８’’’及び１３６’’’〜１９６’’’に）軽鎖鎖内ジスルフィド架橋；位置２２７〜２２７’’及び２３０〜２３０’’に鎖間重鎖−重鎖ジスルフィド架橋；及び１３５〜２１６’及び１３５’’〜２１６’’’に鎖間重鎖−軽鎖ジスルフィド架橋を含む。ウレルマブ並びにその変異体及び断片の調製及び特性については、米国特許第７，２８８，６３８号及び同第８，９６２，８０４号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。ウレルマブの前臨床的及び臨床的特徴については、http:/dx.doi.org/ 10.1158/1078- 0432.CCR-16-1272で入手可能なSegal, et al., Clin. Cancer Res. 2016に記載されている。現在行われている種々の血液腫瘍及び固形腫瘍適応疾患におけるウレルマブの臨床試験としては、米国国立衛生研究所（U.S. National Institutes of Health）clinicaltrials.gov識別番号ＮＣＴ０１７７５６３１、ＮＣＴ０２１１００８２、ＮＣＴ０２２５３９９２、及びＮＣＴ０１４７１２１０が挙げられる。
【０７５３】
[00797]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは配列番号２１によって提供される重鎖と配列番号２２によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２１及び配列番号２２に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０７５４】
[00798]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストはウレルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２３に示される配列を含み、及び４−１ＢＢアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２４に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、配列番号２３及び配列番号２４に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖ抗体を含む。
【０７５５】
[00799]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、それぞれ配列番号２５、配列番号２６、及び配列番号２７に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号２８、配列番号２９、及び配列番号３０に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０７５６】
[00800]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、ウレルマブに準じて医薬品規制当局の承認を受けた４−１ＢＢアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はウレルマブである）を含む４−１ＢＢ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されている４−１ＢＢアゴニスト抗体であり、この４−１ＢＢアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はウレルマブである。４−１ＢＢアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はウレルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はウレルマブである。
【０７５７】
【表５】
2020514289.tif 000007
【０７５８】
[00801]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、１Ｄ８、３Ｅｌｏｒ、４Ｂ４（BioLegend  ３０９８０９）、Ｈ４−１ＢＢ−Ｍ１２７（BD Pharmingen  ５５２５３２）、ＢＢＫ２（Thermo Fisher  ＭＳ６２１ＰＡＢＸ）、１４５５０１（Leinco Technologies  Ｂ５９１）、ＡＴＣＣ番号ＨＢ−１１２４８として寄託されている細胞株によって産生される、及び米国特許第６，９７４，８６３号に開示される抗体、５Ｆ４（BioLegend  ３１  １５０３）、Ｃ６５−４８５（BD Pharmingen  ５５９４４６）、米国特許出願公開第２００５／００９５２４４号に開示される抗体、米国特許第７，２８８，６３８号に開示される抗体（２０Ｈ４．９−ＩｇＧ１（ＢＭＳ−６６３０３１）など）、米国特許第６，８８７，６７３号に開示される抗体（４Ｅ９又はＢＭＳ−５５４２７１など）、米国特許第７，２１４，４９３号に開示される抗体、米国特許第６，３０３，１２１号に開示される抗体、米国特許第６，５６９，９９７号に開示される抗体、米国特許第６，９０５，６８５号に開示される抗体（４Ｅ９又はＢＭＳ−５５４２７１など）、米国特許第６，３６２，３２５号に開示される抗体（１Ｄ８又はＢＭＳ−４６９４９２；３Ｈ３又はＢＭＳ−４６９４９７；又は３Ｅ１など）、米国特許第６，９７４，８６３号に開示される抗体（５３Ａ２など）；米国特許第６，２１０，６６９号に開示される抗体（１Ｄ８、３Ｂ８、又は３Ｅ１など）、米国特許第５，９２８，８９３号に記載される抗体、米国特許第６，３０３，１２１号に開示される抗体、米国特許第６，５６９，９９７号に開示される抗体、国際公開第２０１２／１７７７８８号、同第２０１５／１１９９２３号、及び同第２０１０／０４２４３３号に開示される抗体、及びその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、又はバイオシミラー（前述の特許又は特許出願公開の各々の開示は本明細書において参照によって援用される）からなる群から選択される。
【０７５９】
[00802]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、国際公開第２００８／０２５５１６  Ａ１号、同第２００９／００７１２０  Ａ１号、同第２０１０／００３７６６  Ａ１号、同第２０１０／０１００５１  Ａ１号、及び同第２０１０／０７８９６６  Ａ１号；米国特許出願公開第２０１１／００２７２１８  Ａ１号、同第２０１５／０１２６７０９  Ａ１号、同第２０１１／０１１１４９４  Ａ１号、同第２０１５／０１１０７３４  Ａ１号、及び同第２０１５／０１２６７１０  Ａ１号；及び米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号、及び同第８，４５０，４６０号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載される４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質である。
【０７６０】
[00803]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるとおりの４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質、又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、若しくはバイオシミラーである：
【化１】
2020514289.tif 000008
構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂにおいて、円柱は個々のポリペプチド結合ドメインを指す。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂは、例えば４−１ＢＢＬ又は４−１ＢＢに結合する抗体に由来する３つの線状に連結されたＴＮＦＲＳＦ結合ドメインを含み、それらが折り畳まれて三価タンパク質を形成し、次にはそれがＩｇＧ１−Ｆｃ（ＣＨ３及びＣＨ２ドメインを含む）によって第２の三価（triavelent）タンパク質に連結され、次にはＩｇＧ１−Ｆｃを用いて三価タンパク質のうちの２つがジスルフィド結合（小さい細長い楕円形）を介して一体に連結されることにより、構造体が安定化し、６つの受容体及びシグナル伝達タンパク質の細胞内シグナル伝達ドメインを一体にまとめてシグナル伝達複合体を形成させる能力を有するアゴニストが提供される。円柱として表されるＴＮＦＲＳＦ結合ドメインは、例えば、親水性残基及び可動性のためのＧｌｙ及びＳｅｒ配列、並びに溶解性のためのＧｌｕ及びＬｙｓを含み得るリンカーによって接続されたＶＨ及びＶＬ鎖を含むｓｃＦｖドメインであってもよい。de Marco, Microbial Cell Factories, 2011, 10,44；Ahmad, et al., Clin. & Dev. Immunol. 2012, 980250；Monnier, et al., Antibodies, 2013,2, 193-208；又は本明細書の他の部分に援用される参考文献に記載されるものなど、任意のｓｃＦｖドメイン設計を用いることができる。この形態の融合タンパク質構造については、米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号、及び同第８，４５０，４６０号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。
【０７６１】
[00804]  構造Ｉ−Ａの他のポリペプチドドメインのアミノ酸配列は表６に提供する。Ｆｃドメインは好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部分（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するのに好ましいリンカーは、追加的なポリペプチドの融合に好適なリンカーを含め、配列番号３２〜配列番号４１に提供される実施形態から選択されてもよい。
【０７６２】
【表６】
2020514289.tif 000009
【０７６３】
[00805]  構造Ｉ−Ｂの他のポリペプチドドメインのアミノ酸配列は表７に提供する。構造Ｉ−ＢにあるとおりＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合する場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、及びリンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【０７６４】
【表７】
2020514289.tif 000010
【０７６５】
[00806]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係る４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、ウトミルマブの可変重鎖及び可変軽鎖、ウレルマブの可変重鎖及び可変軽鎖、ウトミルマブの可変重鎖及び可変軽鎖、表８に記載される可変重鎖及び可変軽鎖から選択される可変重鎖及び可変軽鎖、前述の可変重鎖及び可変軽鎖の任意の組み合わせ、並びにその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、及びバイオシミラーからなる群から選択される１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含む。
【０７６６】
[00807]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係る４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、４−１ＢＢＬ配列を含む１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係る４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４６に係る配列を含む１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係る４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、可溶性４−１ＢＢＬ配列を含む１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係る４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４７に係る配列を含む１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含む。
【０７６７】
[00808]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係る４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号１３及び配列番号１４に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係る４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号２３及び配列番号２４に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係る４−１ＢＢアゴニスト融合タンパク質は、表８に提供されるＶＨ及びＶＬ配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上の４−１ＢＢ結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【０７６８】
【表８】
2020514289.tif 000011
【０７６９】
[00809]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性４−１ＢＢ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインである４−１ＢＢアゴニスト単鎖融合ポリペプチドである。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性４−１ＢＢ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性４−１ＢＢ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインである４−１ＢＢアゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性４−１ＢＢドメインの各々はストーク領域（三量化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、４−１ＢＢ結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有する。
【０７７０】
[00810]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含む４−１ＢＢアゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインの各々はストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有し、及び各ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインは４−１ＢＢ結合ドメインである。
【０７７１】
[00811]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストは、前述のＶＬドメインのいずれかに連結した前述のＶＨドメインのいずれかを含む４−１ＢＢアゴニストｓｃＦｖ抗体である。
【０７７２】
[00812]  ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストアゴニストは、BPS Bioscience、San Diego, CA, USAから市販されているBPS Bioscienceの４−１ＢＢアゴニスト抗体、カタログ番号７９０９７−２である。ある実施形態において、４−１ＢＢアゴニストアゴニストは、Creative Biolabs、Shirley, NY, USAから市販されているCreative Biolabsの４−１ＢＢアゴニスト抗体、カタログ番号ＭＯＭ−１８１７９である。
【０７７３】
ＯＸ４０（ＣＤ１３４）アゴニスト
[00813]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＯＸ４０（ＣＤ１３４）アゴニストである。ＯＸ４０アゴニストは、当該技術分野において公知の任意のＯＸ４０結合分子であってよい。ＯＸ４０結合分子は、ヒト又は哺乳類ＯＸ４０への結合能を有するモノクローナル抗体又は融合タンパク質であってよい。ＯＸ４０アゴニスト又はＯＸ４０結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。ＯＸ４０アゴニスト又はＯＸ４０結合分子は重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用されるとき、用語の結合分子にはまた、ＯＸ４０に結合する抗体（完全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体、及び抗体断片、例えば、上記のいずれかのＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリによって作製される断片、エピトープ結合断片、及び操作された形態の抗体、例えばｓｃＦｖ分子も含まれる。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物に使用されるＯＸ４０アゴニストとしては、抗ＯＸ４０抗体、ヒト抗ＯＸ４０抗体、マウス抗ＯＸ４０抗体、哺乳類抗ＯＸ４０抗体、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体、ポリクローナル抗ＯＸ４０抗体、キメラ抗ＯＸ４０抗体、抗ＯＸ４０アドネクチン、抗ＯＸ４０ドメイン抗体、単鎖抗ＯＸ４０断片、重鎖抗ＯＸ４０断片、軽鎖抗ＯＸ４０断片、抗ＯＸ４０融合タンパク質、及びその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、又はバイオシミラーが挙げられる。好ましい実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、アゴニスト抗ＯＸ４０ヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち、単一細胞株に由来する抗体）である。
【０７７４】
[00814]  好ましい実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト又はＯＸ４０結合分子はまた、融合タンパク質であってもよい。ＯＸ４０Ｌに融合したＦｃドメインを含むＯＸ４０融合タンパク質が、例えば、Sadun, et al., J. Immunother. 2009, 182, 1481-89に記載されている。好ましい実施形態において、多量体ＯＸ４０アゴニスト、例えば三量体又は六量体ＯＸ４０アゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）は、典型的には２つのリガンド結合ドメインを持つアゴニストモノクローナル抗体と比較して、優れた受容体（ＯＸ４０Ｌ）クラスター化及び細胞内シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含む三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれ以上の融合タンパク質及び任意選択でこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結することが、例えば、Gieffers, et al., Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載されている。
【０７７５】
[00815]  アゴニストＯＸ４０抗体及び融合タンパク質は強力な免疫応答を誘導することが公知である。Curti, et al., Cancer Res. 2013, 73, 7189-98。好ましい実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、毒性を低下させるのに十分な方法でＯＸ４０抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を無効にするアゴニストＯＸ４０モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を無効にするアゴニストＯＸ４０モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を無効にするアゴニストＯＸ４０モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Ｆｃ領域機能を無効にするアゴニストＯＸ４０モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。
【０７７６】
[00816]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、ヒトＯＸ４０（配列番号５４）への高親和性での結合及びアゴニスト活性によって特徴付けられる。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、ヒトＯＸ４０（配列番号５４）に結合する結合分子である。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、マウスＯＸ４０（配列番号５５）に結合する結合分子である。ＯＸ４０アゴニスト又は結合分子が結合するＯＸ４０抗原のアミノ酸配列を表９に要約する。
【０７７７】
【表９】
2020514289.tif 000012
【０７７８】
[00817]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＯＸ４０と約１００ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０と約９０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０と約８０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０と約７０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０と約６０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０と約５０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０と約４０ｐＭ以下のＫＤで結合する、又はヒト又はマウスＯＸ４０と約３０ｐＭ以下のＫＤで結合するＯＸ４０アゴニストを含む。
【０７７９】
[00818]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＯＸ４０に約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約８×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約９×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウスＯＸ４０に約１×１０６  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合するＯＸ４０アゴニストを含む。
【０７８０】
[00819]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＯＸ４０に約２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約２．１×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約２．２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約２．３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約２．４×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約２．５×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約２．６×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する又はヒト又はマウスＯＸ４０に約２．７×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約２．８×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約２．９×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウスＯＸ４０に約３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合するＯＸ４０アゴニストを含む。
【０７８１】
[00820]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＯＸ４０に約１０ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約９ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約８ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約７ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約６ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約５ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約４ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約３ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＯＸ４０に約２ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、又はヒト又はマウスＯＸ４０に約１ｎＭ以下のＩＣ５０で結合するＯＸ４０アゴニストを含む。
【０７８２】
[00821]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、ＭＥＤＩ０５６２又はＭＥＤＩ−０５６２としても知られるタボリキシズマブである。タボリキシズマブはAstraZeneca, Inc.の子会社MedImmuneから入手可能である。タボリキシズマブは、免疫グロブリンＧ１−κ、抗［ヒト（Homo sapiens）ＴＮＦＲＳＦ４（腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーメンバー４、ＯＸ４０、ＣＤ１３４）］、ヒト化及びキメラモノクローナル抗体である。タボリキシズマブのアミノ酸配列は表１０に示す。タボリキシズマブは、フコシル化複合バイアンテナリーＣＨＯ型グリカンと共に、位置３０１及び３０１’’にＮ−グリコシル化部位；位置２２〜９５（ＶＨ−ＶＬ）、１４８〜２０４（ＣＨ１−ＣＬ）、２６５〜３２５（ＣＨ２）及び３７１〜４２９（ＣＨ３）に（及び位置２２’’〜９５’’、１４８’’〜２０４’’、２６５’’〜３２５’’、及び３７１’’〜４２９’’に）重鎖鎖内ジスルフィド架橋；位置２３’〜８８’（ＶＨ−ＶＬ）及び１３４’〜１９４’（ＣＨ１−ＣＬ）に（及び位置２３’’’〜８８’’’及び１３４’’’〜１９４’’’に）軽鎖鎖内ジスルフィド架橋；位置２３０〜２３０’’及び２３３〜２３３’’に鎖間重鎖−重鎖ジスルフィド架橋；及び２２４〜２１４’及び２２４’’〜２１４’’’に鎖間重鎖−軽鎖ジスルフィド架橋を含む。現在行われている種々の固形腫瘍適応疾患におけるタボリキシズマブの臨床試験としては、米国国立衛生研究所（U.S. National Institutes of Health）clinicaltrials.gov識別番号ＮＣＴ０２３１８３９４及びＮＣＴ０２７０５４８２が挙げられる。
【０７８３】
[00822]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは配列番号５６によって提供される重鎖と配列番号５７によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０７８４】
[00823]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはタボリキシズマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号５８に示される配列を含み、及びＯＸ４０アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号５９に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、配列番号５８及び配列番号５９に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖ抗体を含む。
【０７８５】
[00824]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６０、配列番号６１、及び配列番号６２に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号６３、配列番号６４、及び配列番号６５に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０７８６】
[00825]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、タボリキシズマブに準じて医薬品規制当局の承認を受けたＯＸ４０アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はタボリキシズマブである）を含むＯＸ４０抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＯＸ４０アゴニスト抗体であり、このＯＸ４０アゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はタボリキシズマブである。ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はタボリキシズマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はタボリキシズマブである。
【０７８７】
【表１０】
2020514289.tif 000013
【０７８８】
[00826]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは１１Ｄ４であり、これはPfizer, Inc.から入手可能な完全ヒト抗体である。１１Ｄ４の調製及び特性については、米国特許第７，９６０，５１５号；同第８，２３６，９３０号；及び同第９，０２８，８２４号（これらの開示は本明細書において参照により援用される）に記載されている。１１Ｄ４のアミノ酸配列は表１１に示す。
【０７８９】
[00827]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは配列番号６６によって提供される重鎖と配列番号６７によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０７９０】
[00828]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは１１Ｄ４の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号６８に示される配列を含み、及びＯＸ４０アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号６９に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０７９１】
[00829]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７０、配列番号７１、及び配列番号７２に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号７３、配列番号７４、及び配列番号７５に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０７９２】
[00830]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、１１Ｄ４に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＯＸ４０アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１１Ｄ４である）を含むＯＸ４０抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＯＸ４０アゴニスト抗体であり、このＯＸ４０アゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１１Ｄ４である。ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１１Ｄ４である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１１Ｄ４である。
【０７９３】
【表１１】
2020514289.tif 000014
【０７９４】
[00831]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは１８Ｄ８であり、これはPfizer, Inc.から入手可能な完全ヒト抗体である。１８Ｄ８の調製及び特性については、米国特許第７，９６０，５１５号；同第８，２３６，９３０号；及び同第９，０２８，８２４号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。１８Ｄ８のアミノ酸配列は表１２に示す。
【０７９５】
[00832]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは配列番号７６によって提供される重鎖と配列番号７７によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０７９６】
[00833]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは１８Ｄ８の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号７８に示される配列を含み、及びＯＸ４０アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号７９に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０７９７】
[00834]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８０、配列番号８１、及び配列番号８２に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号８３、配列番号８４、及び配列番号８５に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０７９８】
[00835]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、１８Ｄ８に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＯＸ４０アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１８Ｄ８である）を含むＯＸ４０抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＯＸ４０アゴニスト抗体であり、このＯＸ４０アゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１８Ｄ８である。ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１８Ｄ８である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１８Ｄ８である。
【０７９９】
【表１２】
2020514289.tif 000015
【０８００】
[00836]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＨｕ１１９−１２２であり、これはGlaxoSmithKline plcから入手可能なヒト化抗体である。Ｈｕ１１９−１２２の調製及び特性については、米国特許第９，００６，３９９号及び同第９，１６３，０８５号、及び国際公開第２０１２／０２７３２８号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。Ｈｕ１１９−１２２のアミノ酸配列は表１３に示す。
【０８０１】
[00837]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＨｕ１１９−１２２の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号８６に示される配列を含み、及びＯＸ４０アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号８７に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８０２】
[00838]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号８８、配列番号８９、及び配列番号９０に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号９１、配列番号９２、及び配列番号９３に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０８０３】
[00839]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Ｈｕ１１９−１２２に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＯＸ４０アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＨｕ１１９−１２２である）を含むＯＸ４０抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＯＸ４０アゴニスト抗体であり、このＯＸ４０アゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＨｕ１１９−１２２である。ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＨｕ１１９−１２２である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＨｕ１１９−１２２である。
【０８０４】
【表１３】
2020514289.tif 000016
【０８０５】
[00840]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＨｕ１０６−２２２であり、これはGlaxoSmithKline plcから入手可能なヒト化抗体である。Ｈｕ１０６−２２２の調製及び特性については、米国特許第９，００６，３９９号及び同第９，１６３，０８５号、及び国際公開第２０１２／０２７３２８号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。Ｈｕ１０６−２２２のアミノ酸配列は表１４に示す。
【０８０６】
[00841]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＨｕ１０６−２２２の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号９４に示される配列を含み、及びＯＸ４０アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号９５に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８０７】
[00842]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、それぞれ配列番号９６、配列番号９７、及び配列番号９８に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号９９、配列番号１００、及び配列番号１０１に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０８０８】
[00843]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Ｈｕ１０６−２２２に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＯＸ４０アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＨｕ１０６−２２２である）を含むＯＸ４０抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＯＸ４０アゴニスト抗体であり、このＯＸ４０アゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＨｕ１０６−２２２である。ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＨｕ１０６−２２２である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＨｕ１０６−２２２である。
【０８０９】
【表１４】
2020514289.tif 000017
【０８１０】
[00844]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニスト抗体はＭＥＤＩ６４６９（９Ｂ１２とも称される）である。ＭＥＤＩ６４６９はマウスモノクローナル抗体である。Weinberg, et al., J. Immunother. 2006, 29, 575-585。一部の実施形態においてＯＸ４０アゴニストは、Weinberg, et al., J. Immunother. 2006, 29, 575-585（この開示は全体として本明細書によって参照により援用される）に記載されるとおりの、Biovest Inc.（Malvern, MA, USA）に寄託された、９Ｂ１２ハイブリドーマによって産生される抗体である。一部の実施形態において、この抗体はＭＥＤＩ６４６９のＣＤＲ配列を含む。一部の実施形態において、この抗体はＭＥＤＩ６４６９の重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列を含む。
【０８１１】
[00845]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＬ１０６  ＢＤ（Pharmingen製品番号３４０４２０）である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは抗体Ｌ１０６（BD Pharmingen製品番号３４０４２０）のＣＤＲを含む。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは抗体Ｌ１０６（BD Pharmingen製品番号３４０４２０）の重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＡＣＴ３５（Santa Cruz Biotechnology、カタログ番号２００７３）である。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは抗体ＡＣＴ３５（Santa Cruz Biotechnology、カタログ番号２００７３）のＣＤＲを含む。一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは抗体ＡＣＴ３５（Santa Cruz Biotechnology、カタログ番号２００７３）の重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列を含む。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、InVivoMAb、BioXcell Inc、West Lebanon, NHから市販されているマウスモノクローナル抗体、抗ｍＣＤ１３４／ｍＯＸ４０（クローンＯＸ８６）である。
【０８１２】
[00846]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、国際公開第９５／１２６７３号、同第９５／２１９２５号、同第２００６／１２１８１０号、同第２０１２／０２７３２８号、同第２０１３／０２８２３１号、同第２０１３／０３８１９１号、及び同第２０１４／１４８８９５号；欧州特許出願第０６７２１４１号；米国特許出願公開第２０１０／１３６０３０号、同第２０１４／３７７２８４号、同第２０１５／１９０５０６号、及び同第２０１５／１３２２８８号（クローン２０Ｅ５及び１２Ｈ３を含む）；及び米国特許第７，５０４，１０１号、同第７，５５０，１４０号、同第７，６２２，４４４号、同第７，６９６，１７５号、同第７，９６０，５１５号、同第７，９６１，５１５号、同第８，１３３，９８３号、同第９，００６，３９９号、及び同第９，１６３，０８５号（これらの各々の開示は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるＯＸ４０アゴニストから選択される。
【０８１３】
[00847]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるとおりのＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質、又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、若しくはバイオシミラーである。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの特性は、上記及び米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号、及び同第８，４５０，４６０号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載される。構造Ｉ−Ａのポリペプチドドメインのアミノ酸配列は表６に提供する。Ｆｃドメインは好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部分（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するのに好ましいリンカーは、追加的なポリペプチドの融合に好適なリンカーを含め、配列番号３２〜配列番号４１に提供される実施形態から選択されてもよい。同様に、構造Ｉ−Ｂのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に提供する。構造Ｉ−ＢにあるとおりＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合する場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、及びリンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【０８１４】
[00848]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、タボリキシズマブの可変重鎖及び可変軽鎖、１１Ｄ４の可変重鎖及び可変軽鎖、１８Ｄ８の可変重鎖及び可変軽鎖、Ｈｕ１１９−１２２の可変重鎖及び可変軽鎖、Ｈｕ１０６−２２２の可変重鎖及び可変軽鎖、表１５に記載される可変重鎖及び可変軽鎖から選択される可変重鎖及び可変軽鎖、前述の可変重鎖及び可変軽鎖の任意の組み合わせ、並びにその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、及びバイオシミラーからなる群から選択される１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。
【０８１５】
[00849]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、ＯＸ４０Ｌ配列を含む１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１０２に係る配列を含む１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、可溶性ＯＸ４０Ｌ配列を含む１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１０３に係る配列を含む１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１０４に係る配列を含む１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含む。
【０８１６】
[00850]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質は、表１５に提供されるＶＨ及びＶＬ配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＯＸ４０結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【０８１７】
【表１５】
2020514289.tif 000018
【０８１８】
【表１６】
2020514289.tif 000019
【０８１９】
[00851]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＯＸ４０結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインであるＯＸ４０アゴニスト単鎖融合ポリペプチドである。ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＯＸ４０結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＯＸ４０結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインであるＯＸ４０アゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＯＸ４０結合ドメインの各々はストーク領域（三量化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、ＯＸ４０結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有する。
【０８２０】
[00852]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含むＯＸ４０アゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインの各々はストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有し、及びＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインはＯＸ４０結合ドメインである。
【０８２１】
[00853]  一部の実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはＭＥＤＩ６３８３である。ＭＥＤＩ６３８３はＯＸ４０アゴニスト融合タンパク質であり、米国特許第６，３１２，７００号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるとおり調製することができる。
【０８２２】
[00854]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、前述のＶＬドメインのいずれかに連結した前述のＶＨドメインのいずれかを含むＯＸ４０アゴニストｓｃＦｖ抗体である。
【０８２３】
[00855]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、Creative Biolabs, Inc.、Shirley, NY, USAから市販されている、Creative BiolabsのＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体ＭＯＭ−１８４５５である。
【０８２４】
[00856]  ある実施形態において、ＯＸ４０アゴニストは、BioLegend, Inc.、San Diego, CA, USAから市販されているＯＸ４０アゴニスト抗体クローンＢｅｒ−ＡＣＴ３５である。
【０８２５】
ＣＤ２７アゴニスト
[00857]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＣＤ２７アゴニストである。ＣＤ２７アゴニストは、当該技術分野において公知の任意のＣＤ２７結合分子であってよい。ＣＤ２７結合分子は、ヒト又は哺乳類ＣＤ２７への結合能を有するモノクローナル抗体又は融合タンパク質であってよい。ＣＤ２７アゴニスト又はＣＤ２７結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。ＣＤ２７アゴニスト又はＣＤ２７結合分子は重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用されるとき、用語の結合分子にはまた、ＣＤ２７に結合する抗体（完全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体、及び抗体断片、例えば、上記のいずれかのＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリによって作製される断片、エピトープ結合断片、及び操作された形態の抗体、例えばｓｃＦｖ分子も含まれる。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物に使用されるＣＤ２７アゴニストとしては、抗ＣＤ２７抗体、ヒト抗ＣＤ２７抗体、マウス抗ＣＤ２７抗体、哺乳類抗ＣＤ２７抗体、モノクローナル抗ＣＤ２７抗体、ポリクローナル抗ＣＤ２７抗体、キメラ抗ＣＤ２７抗体、抗ＣＤ２７アドネクチン、抗ＣＤ２７ドメイン抗体、単鎖抗ＣＤ２７断片、重鎖抗ＣＤ２７断片、軽鎖抗ＣＤ２７断片、抗ＣＤ２７融合タンパク質、及びその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、又はバイオシミラーが挙げられる。好ましい実施形態において、ＣＤ２７アゴニストはアゴニスト抗ＣＤ２７ヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち、単一細胞株に由来する抗体）である。好ましい実施形態において、ＣＤ２７アゴニストはバルリルマブ、又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、若しくはバイオシミラーである。
【０８２６】
[00858]  好ましい実施形態において、ＣＤ２７アゴニスト又はＣＤ２７結合分子はまた、融合タンパク質であってもよい。好ましい実施形態において、多量体ＣＤ２７アゴニスト、例えば三量体又は六量体ＣＤ２７アゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）は、典型的には２つのリガンド結合ドメインを持つアゴニストモノクローナル抗体と比較して、優れた受容体（ＣＤ２７Ｌ）クラスター化及び細胞内シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含む三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれ以上の融合タンパク質及び任意選択でこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結することが、例えば、Gieffers, et al.,Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載されている。
【０８２７】
[00859]  アゴニストＣＤ２７抗体及び融合タンパク質は強力な免疫応答を誘導することが公知である。好ましい実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、毒性を低下させるのに十分な方法でＣＤ２７抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を無効にするアゴニストＣＤ２７モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を無効にするアゴニストＣＤ２７モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を無効にするアゴニストＣＤ２７モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、Ｆｃ領域機能を無効にするアゴニストＣＤ２７モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。
【０８２８】
[00860]  一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、ヒトＣＤ２７（配列番号１２７）への高親和性での結合及びアゴニスト活性によって特徴付けられる。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、ヒトＣＤ２７（配列番号１２７）に結合する結合分子である。一部の実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、マカクＣＤ２７（配列番号１２８）への高親和性での結合及びアゴニスト活性によって特徴付けられる。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、マカクＣＤ２７（配列番号１２８）に結合する結合分子である。ＣＤ２７アゴニスト又は結合分子が結合するＣＤ２７抗原のアミノ酸配列を表１６に要約する。
【０８２９】
【表１７】
2020514289.tif 000020
【０８３０】
[00861]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＣＤ２７と約１００ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７と約９０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７と約８０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７と約７０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７と約６０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７と約５０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７と約４０ｐＭ以下のＫＤで結合する、又はヒト又はマウスＣＤ２７と約３０ｐＭ以下のＫＤで結合するＣＤ２７アゴニストを含む。
【０８３１】
[00862]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＣＤ２７に約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約８×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約９×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウスＣＤ２７に約１×１０６  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合するＣＤ２７アゴニストを含む。
【０８３２】
[00863]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＣＤ２７に約２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約２．１×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約２．２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約２．３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約２．４×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約２．５×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約２．６×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する又はヒト又はマウスＣＤ２７に約２．７×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約２．８×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約２．９×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウスＣＤ２７に約３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合するＣＤ２７アゴニストを含む。
【０８３３】
[00864]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＣＤ２７に約１０ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約９ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約８ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約７ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約６ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約５ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約４ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約３ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ２７に約２ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、又はヒト又はマウスＣＤ２７に約１ｎＭ以下のＩＣ５０で結合するＣＤ２７アゴニストを含む。
【０８３４】
[00865]  好ましい実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、ＣＤＸ−１１２７又は１Ｆ５としても知られるモノクローナル抗体バルリルマブ、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。バルリルマブはCelldex Therapeutics, Inc.から入手可能である。バルリルマブは、免疫グロブリンＧ１−κ、抗［ヒト（Homo sapiens）抗ＣＤ２７（ＴＮＦＲＳＦ７、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー７）］、ヒト（Homosapiens）モノクローナル抗体である。バルリルマブのアミノ酸配列は表１７に示す。バルリルマブは、位置２９９及び２９９’’にＮ−グリコシル化部位；位置２２〜９６（ＶＨ−ＶＬ）、１４６〜２０２（ＣＨ１−ＣＬ）、２６３〜３２３（ＣＨ２）及び３６９〜４２７（ＣＨ３）に（及び位置２２’’〜９６’’、１４６’’〜２０２’’、２６３’’〜３２３’’、及び３６９’’〜４２７’’に）重鎖鎖内ジスルフィド架橋；位置２３’〜８８’（ＶＨ−ＶＬ）及び１３４’〜１９４’（ＣＨ１−ＣＬ）に（及び位置２３’’’〜８８’’’及び１３４’’’〜１９４’’’に）軽鎖鎖内ジスルフィド架橋；位置２２８〜２２８’’及び２３１〜２３１’’に鎖間重鎖−重鎖ジスルフィド架橋；及び２２２〜２１４’及び２２２’’〜２１４’’’に鎖間重鎖−軽鎖ジスルフィド架橋を含む。バルリルマブの調製及び特性については、国際公開第２０１６／１４５０８５  Ａ２号及び米国特許出願公開第２０１１／０２７４６８５  Ａ１号及び同第２０１２／０２１３７７１  Ａ１号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。バルリルマブを使用した臨床及び前臨床試験は当該技術分野において公知であり、例えば、Thomas, et al., OncoImmunology 2014, 3, e27255；Vitale, et al., Clin. Cancer Res. 2012, 18, 3812-21；及びHe, et al., J. Immunol. 2013, 191, 4174-83に記載されている。現在行われている種々の血液腫瘍及び固形腫瘍適応疾患におけるバルリルマブの臨床試験としては、米国国立衛生研究所（U.S. National Institutes of Health）clinicaltrials.gov識別番号ＮＣＴ０１４６０１３４、ＮＣＴ０２５４３６４５、ＮＣＴ０２４１３８２７、ＮＣＴ０２３８６１１１、及びＮＣＴ０２３３５９１８が挙げられる。
【０８３５】
[00866]  ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは配列番号１２９によって提供される重鎖と配列番号１３０によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１２９及び配列番号１３０に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０８３６】
[00867]  ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストはバルリルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号１３１に示される配列を含み、及びＣＤ２７アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号１３２に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８３７】
[00868]  ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、それぞれ配列番号１３３、配列番号１３４、及び配列番号１３５に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号１３６、配列番号１３７、及び配列番号１３８に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０８３８】
[00869]  ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、バルリルマブに準じて医薬品規制当局の承認を受けたＣＤ２７アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はバルリルマブである）を含むＣＤ２７抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＣＤ２７アゴニスト抗体であり、このＣＤ２７アゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はバルリルマブである。ＣＤ２７アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はバルリルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はバルリルマブである。
【０８３９】
【表１８】
2020514289.tif 000021
【０８４０】
[00870]  ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるとおりのＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質、又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、若しくはバイオシミラーである。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの特性は、上記及び米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号、及び同第８，４５０，４６０号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載される。構造Ｉ−Ａのポリペプチドドメインのアミノ酸配列は表６に提供する。Ｆｃドメインは好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部分（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するのに好ましいリンカーは、追加的なポリペプチドの融合に好適なリンカーを含め、配列番号３２〜配列番号４１に提供される実施形態から選択されてもよい。同様に、構造Ｉ−Ｂのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に提供する。構造Ｉ−ＢにあるとおりＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合する場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、及びリンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【０８４１】
[00871]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、バルリルマブの可変重鎖及び可変軽鎖、並びにその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、及びバイオシミラーからなる群から選択される１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。
【０８４２】
[00872]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、ＣＤ７０（ＣＤ２７Ｌ）配列（表１８）を含む１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１３９に係る配列を含む１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、可溶性ＣＤ７０配列を含む１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１４０に係る配列を含む１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、配列番号１４１に係る配列を含む１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含む。
【０８４３】
[00873]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ２７アゴニスト融合タンパク質は、それぞれ配列番号１３１及び配列番号１３２に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＣＤ２７結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【０８４４】
【表１９】
2020514289.tif 000022
【０８４５】
[00874]  ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ２７結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインであるＣＤ２７アゴニスト単鎖融合ポリペプチドである。ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ２７結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ２７結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインであるＣＤ２７アゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＣＤ２７結合ドメインの各々はストーク領域（三量化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、ＣＤ２７結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有する。
【０８４６】
[00875]  ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含むＣＤ２７アゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインの各々はストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有し、及びＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインはＣＤ２７結合ドメインである。
【０８４７】
[00876]  ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、米国特許出願公開第２０１４／０１１２９４２  Ａ１号、同第２０１１／０２７４６８５  Ａ１号、又は同第２０１２／０２１３７７１  Ａ１号、又は国際公開第２０１２／００４３６７  Ａ１号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されるＣＤ２７アゴニストである。
【０８４８】
[00877]  ある実施形態において、ＣＤ２７アゴニストは、前述のＶＬドメインのいずれかに連結した前述のＶＨドメインのいずれかを含むＣＤ２７アゴニストｓｃＦｖ抗体である。
【０８４９】
ＧＩＴＲ（ＣＤ３５７）アゴニスト
[00878]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＧＩＴＲアゴニストである。ＧＩＴＲアゴニストは、当該技術分野において公知の任意のＧＩＴＲ結合分子であってよい。ＧＩＴＲ結合分子は、ヒト又は哺乳類ＧＩＴＲへの結合能を有するモノクローナル抗体又は融合タンパク質であってよい。ＧＩＴＲアゴニスト又はＧＩＴＲ結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。ＧＩＴＲアゴニスト又はＧＩＴＲ結合分子は重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用されるとき、用語の結合分子にはまた、ＯＸ４０に結合する抗体（完全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体、及び抗体断片、例えば、上記のいずれかのＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリによって作製される断片、エピトープ結合断片、及び操作された形態の抗体、例えばｓｃＦｖ分子も含まれる。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物に使用されるＧＩＴＲアゴニストとしては、抗ＧＩＴＲ抗体、ヒト抗ＧＩＴＲ抗体、マウス抗ＯＸ４０抗体、哺乳類抗ＧＩＴＲ抗体、モノクローナル抗ＯＸ４０抗体、ポリクローナル抗ＯＸ４０抗体、キメラ抗ＯＸ４０抗体、抗ＯＸ４０アドネクチン、抗ＯＸ４０ドメイン抗体、単鎖抗ＯＸ４０断片、重鎖抗ＯＸ４０断片、軽鎖抗ＯＸ４０断片、抗ＯＸ４０融合タンパク質、及びその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、又はバイオシミラーが挙げられる。好ましい実施形態において、ＯＸ４０アゴニストはアゴニスト抗ＯＸ４０ヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち、単一細胞株に由来する抗体）である。
【０８５０】
[00879]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト又はＧＩＴＲ結合分子はまた、融合タンパク質であってもよい。好ましい実施形態において、多量体ＧＩＴＲアゴニスト、例えば三量体又は六量体ＧＩＴＲアゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）は、典型的には２つのリガンド結合ドメインを持つアゴニストモノクローナル抗体と比較して、優れたＧＩＴＲ受容体クラスター化及び細胞内シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含む三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれ以上の融合タンパク質及び任意選択でこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結することが、例えば、Gieffers, et al.,Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載されている。
【０８５１】
[00880]  一部の実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体は、刺激剤、例えばＣＤ３抗体（ムロモナブ又はＯＫＴ３）の存在下におけるｈＧＩＴＲ（配列番号１４２）への高親和性での結合によって特徴付けられ、及びアゴニスト性であり、及びＴｒｅｇ細胞によるＴエフェクター細胞の抑制を無効にする。ある実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子はヒトＧＩＴＲ（配列番号１４２）に結合する。ある実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子はマウスＧＩＴＲ（配列番号１４３）に結合する。ＧＩＴＲ結合分子が結合するＧＩＴＲ抗原のアミノ酸配列を表１９に要約する。
【０８５２】
【表２０】
2020514289.tif 000023
【０８５３】
[00881]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ヒトＧＩＴＲの活性をアゴナイズする抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は、完全ヒトＩｇＧ１抗体である抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、Ｆｃγ受容体（ＦｃγＲ）に結合する能力を有する抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、抗原結合タンパク質のクラスターが形成されるようにＦｃγ受容体（ＦｃγＲ）に結合する能力を有する抗原結合タンパク質である。
【０８５４】
[00882]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＧＩＴＲと約１００ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲと約９０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲと約８０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲと約７０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲと約６０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲと約５０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲと約４０ｐＭ以下のＫＤで結合する、又はヒト又はマウスＧＩＴＲと約３０ｐＭ以下のＫＤで結合するＧＩＴＲアゴニストを含む。
【０８５５】
[00883]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約８×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約９×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウスＧＩＴＲに約１×１０６  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合するＧＩＴＲアゴニストを含む。
【０８５６】
[00884]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約２．１×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約２．２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約２．３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約２．４×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約２．５×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約２．６×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する又はヒト又はマウスＧＩＴＲに約２．７×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約２．８×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約２．９×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウスＧＩＴＲに約３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合するＧＩＴＲアゴニストを含む。
【０８５７】
[00885]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約１０ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約９ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約８ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約７ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約６ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約５ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約４ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約３ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＧＩＴＲに約２ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、又はヒト又はマウスＧＩＴＲに約１ｎＭ以下のＩＣ５０で結合するＧＩＴＲアゴニストを含む。
【０８５８】
[00886]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストはアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体（即ち、単一細胞株に由来する抗体）である。アゴニスト抗ＧＩＴＲ抗体は強力な免疫応答を誘導することが公知である。Cohen, et al., Cancer Res. 2006, 66, 4904-12；Schaer, et al., Curr. Opin. Investig.Drugs 2010, 11, 1378-1386。好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ＧＩＴＲ抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストはＧＩＴＲ受容体遮断薬である。一部の実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を無効にするアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。一部の実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を無効にするアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。一部の実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を無効にするアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。
【０８５９】
[00887]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、６Ｃ８及びＣｈ−６Ｃ８−Ａｇｌｙとしても知られるアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体ＴＲＸ５１８（TolerRx, Inc.）である。ＴＲＸ５１８は、重鎖アスパラギン２９７がアラニンに置換されて、ＡＤＣＣ及びＣＤＣを含めたＦｃ領域機能を無効にするＮ−結合型グリコシル化がなくなった完全ヒト化ＩｇＧ１抗ヒトＧＩＴＲモノクローナル抗体である。Rosenzweig, et al., J. Clin. Oncol. 2010, 28(supplement; abstract e13028)；Jung, et al., Cur. Opin. Biotechnology 2011, 22, 858-867。ＴＲＸ５１８のアミノ酸配列は表２０に示す。一部の実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は抗ヒトＧＩＴＲモノクローナル抗体６Ｃ８、又はその変異体である。６Ｃ８抗体は、免疫細胞、例えばヒトＴ細胞及び樹状細胞上のヒトＧＩＴＲに高親和性で結合する抗ＧＩＴＲ抗体である。好ましくは、かかる結合分子はＴｒｅｇ細胞によるＴエフェクター細胞の抑制を無効にし、インビトロでＣＤ３などの刺激剤の存在下、部分的に活性化した免疫細胞に対してアゴニスト性である。一部の実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は抗マウスＧＩＴＲモノクローナル抗体２Ｆ８、又はその変異体である。６Ｃ８及び２Ｆ８抗体、及びその変異体の調製、特性、及び使用については、米国特許第７，８１２，１３５号；同第８，３８８，９６７号；及び同第９，０２８，８２３号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。
【０８６０】
[00888]  ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６、及び配列番号１４７からなる群から選択される重鎖と、配列番号１４８を含む軽鎖とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６、及び配列番号１４７からなる群から選択される配列と９９％より高い配列同一性を有する重鎖と、配列番号１４８と９９％より高い配列同一性を有する軽鎖とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６、及び配列番号１４７からなる群から選択される配列と９８％より高い配列同一性を有する重鎖と、配列番号１４８と９８％より高い配列同一性を有する軽鎖とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６、及び配列番号１４７からなる群から選択される配列と９５％より高い配列同一性を有する重鎖と、配列番号１４８と９５％より高い配列同一性を有する軽鎖とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６、及び配列番号１４７からなる群から選択される配列と９０％より高い配列同一性を有する重鎖と、配列番号１４８と９０％より高い配列同一性を有する軽鎖とを含む。
【０８６１】
[00889]  ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４９のリーダー配列を含み、且つ配列番号１４４、配列番号１４５、配列番号１４６及び配列番号１４７からなる群から選択される配列を更に含む重鎖を含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１４８のリーダー配列を含み、且つ配列番号１５０を含む配列を更に含む軽鎖を含む。
【０８６２】
[00890]  ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体（ＴＲＸ５１８など）は、配列番号１５１及び配列番号１５２からなる群から選択される可変重鎖領域（ＶＨ）と、配列番号１５３を含む可変軽鎖領域（ＶＬ）とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５１のアミノ酸残基２０〜１３８及び配列番号１５２のアミノ酸残基２０〜１３８からなる群から選択される可変重鎖領域と、配列番号１５３のアミノ酸残基２０〜１３８を含む可変軽鎖領域とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５１のアミノ酸残基２０〜１３８及び配列番号１５２のアミノ酸残基２０〜１３８からなる群から選択される配列と９９％より高い配列同一性を有する可変重鎖領域と、配列番号１５３のアミノ酸残基２０〜１３８を含む配列と９９％より高い配列同一性を有する可変軽鎖領域とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５１のアミノ酸残基２０〜１３８及び配列番号１５２のアミノ酸残基２０〜１３８からなる群から選択される配列と９８％より高い配列同一性を有する可変重鎖領域と、配列番号１５３のアミノ酸残基２０〜１３８を含む配列と９８％より高い配列同一性を有する可変軽鎖領域とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５１のアミノ酸残基２０〜１３８及び配列番号１５２のアミノ酸残基２０〜１３８からなる群から選択される配列と９５％より高い配列同一性を有する可変重鎖領域と、配列番号１５３のアミノ酸残基２０〜１３８を含む配列と９５％より高い配列同一性を有する可変軽鎖領域とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５１のアミノ酸残基２０〜１３８及び配列番号１５２のアミノ酸残基２０〜１３８からなる群から選択される配列と９０％より高い配列同一性を有する可変重鎖領域と、配列番号１５３のアミノ酸残基２０〜１３８を含む配列と９０％より高い配列同一性を有する可変軽鎖領域とを含む。
【０８６３】
[00891]  ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４のアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ１領域と；配列番号１５５及び配列番号１５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ２領域と；配列番号１５７のアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ３領域とを含むＶＨ領域；及び配列番号１５８のアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ１領域と；配列番号１５９のアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ２領域と；配列番号１６０のアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲ３領域を含むＶＬ領域を含む。ある実施形態において、本発明は、６Ｃ８  ＣＤＲを含む、例えば、配列番号１５４、配列番号１５５、配列番号１５６、配列番号１５７、配列番号１５８、配列番号１５９、及び配列番号１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチド配列をコードする単離核酸分子を提供する。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５６、配列番号１５７、配列番号１５８、配列番号１５９、及び配列番号１６０のアミノ酸配列によって表される６つのＣＤＲを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲに特異的に結合するＧＩＴＲ結合分子は、配列番号１５４、配列番号１５５、配列番号１５７、配列番号１５８、配列番号１５９、及び配列番号１６０のアミノ酸配列によって表される６つのＣＤＲを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５８、配列番号１５９、及び配列番号１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５８、配列番号１５９、及び配列番号１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも２つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５８、配列番号１５９、及び配列番号１６０のアミノ酸配列を含むＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５５、及び配列番号１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５５、及び配列番号１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも２つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５５、及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５６、及び配列番号１５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５６、及び配列番号１５７からなる群���ら選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも２つのＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４、配列番号１５６、及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＣＤＲドメインを有するＶＬを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５４（ＣＤＲ１）に示されるＣＤＲを含むＶＨドメインを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５５（ＣＤＲ２、「Ｎ」変異体）に示されるＣＤＲを含むＶＨドメインを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５６（ＣＤＲ３、「Ｑ」変異体）に示されるＣＤＲを含むＶＨドメインを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５７（ＣＤＲ３）に示されるＣＤＲを含むＶＨドメインを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５８（ＣＤＲ１）に示されるＣＤＲを含むＶＬドメインを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１５９（ＣＤＲ２）に示されるＣＤＲを含むＶＬドメインを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６０（ＣＤＲ３）に示されるＣＤＲを含むＶＬドメインを含む。
【０８６４】
[00892]  ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、キメラ６Ｃ８モノクローナル抗体、又はその抗原結合断片、誘導体、コンジュゲート、若しくは変異体である。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６２及び配列番号１６３からなる群から選択される重鎖と、配列番号１６１を含む軽鎖とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６２及び配列番号１６３からなる群から選択される配列と９９％より高い配列同一性を有する重鎖と、配列番号１６１と９９％より高い配列同一性を有する軽鎖とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６２及び配列番号１６３からなる群から選択される配列と９８％より高い配列同一性を有する重鎖と、配列番号１６１と９８％より高い配列同一性を有する軽鎖とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６２及び配列番号１６３からなる群から選択される配列と９５％より高い配列同一性を有する重鎖と、配列番号１６１と９５％より高い配列同一性を有する軽鎖とを含む。ある実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６２及び配列番号１６３からなる群から選択される配列と９０％より高い配列同一性を有する重鎖と、配列番号１６１と９０％より高い配列同一性を有する軽鎖とを含む。
【０８６５】
[00893]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ＴＲＸ５１８又は６Ｃ８に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＴＲＸ５１８又は６Ｃ８である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＴＲＸ５１８又は６Ｃ８である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＴＲＸ５１８又は６Ｃ８である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＴＲＸ５１８又は６Ｃ８である。
【０８６６】
【表２１】
2020514289.tif 000024
【０８６７】
【表２２】
2020514289.tif 000025
【０８６８】
【表２３】
2020514289.tif 000026
【０８６９】
[00894]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、米国特許第８，７０９，４２４号；米国特許出願公開第２０１２／０１８９６３９  Ａ１号及び同第２０１４／０３４８８４１  Ａ１号、及び国際公開第２０１１／０２８６８３  Ａ１号（Merck Sharp & Dohme Corp.）（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されるアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、及び３１Ｈ６からなる群から選択されるアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体、及びその断片、変異体、誘導体、又はバイオシミラーである。これらの抗体の構造、特性、及び調製については、米国特許第８，７０９，４２４号；米国特許出願公開第２０１２／０１８９６３９  Ａ１号及び同第２０１４／０３４８８４１  Ａ１号（これらの開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。
【０８７０】
[00895]  一部の実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は、配列番号１６４、配列番号１６６、配列番号１６８、配列番号１７０、配列番号１７２、配列番号１７４、配列番号１７６、配列番号１７８、配列番号１８０、配列番号１８２、配列番号１８４、配列番号１８６、配列番号１８８、配列番号１９０、配列番号１９２、配列番号１９４、配列番号１９６、配列番号１９８、配列番号２００、配列番号２０２、配列番号２０４、配列番号２０６からなる群から選択される配列を含むヒト化重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、又はその変異体、断片、若しくはバイオシミラーと、配列番号１６５、配列番号１６７、配列番号１６９、配列番号１７１、配列番号１７３、配列番号１７５、配列番号１７７、配列番号１７９、配列番号１８１、配列番号１８３、配列番号１８５、配列番号１８７、配列番号１８９、配列番号１９１、配列番号１９３、配列番号１９５、配列番号１９７、配列番号１９９、配列番号２０１、配列番号２０３、配列番号２０５、配列番号２０７からなる群から選択される配列を含むヒト化重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、又はその変異体、断片、若しくはバイオシミラーを含む（表２１）。一部の実施形態において、アゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体は重鎖定常領域を更に含み、ここで重鎖定常領域はγ１、γ２、γ３、又はγ４ヒト重鎖定常領域又はその変異体を含む。一部の実施形態において、軽鎖定常領域はλ又はκヒト軽鎖定常領域を含む。
【０８７１】
[00896]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、及び３１Ｈ６に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、及び３１Ｈ６である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、及び３１Ｈ６である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、及び３１Ｈ６である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、及び３１Ｈ６である。
【０８７２】
【表２４】
2020514289.tif 000027
【０８７３】
【表２５】
2020514289.tif 000028
【０８７４】
【表２６】
2020514289.tif 000029
【０８７５】
【表２７】
2020514289.tif 000030
【０８７６】
[00897]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号（Sanofi SA）及び国際公開第２０１１／０２８６８３  Ａ１号（Sanofi SA）（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されるアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。ある実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は、配列番号２０８、配列番号２１０、配列番号２１１、配列番号２１２、配列番号２１３、配列番号２１４、配列番号２１９、配列番号２２１、配列番号２２３、及び配列番号２２５からなる群から選択される重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と、配列番号２０９、配列番号２１５、配列番号２１６、配列番号２１７、配列番号２１８、配列番号２２０、配列番号２２２、配列番号２２４、及び配列番号２２６からなる群から選択される軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）とを含む（表２２）、ヒトＧＩＴＲに結合するモノクローナル抗体、並びにヒト化及びキメラ組換え抗体を含めたその変異体及び断片を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲ結合分子は、（ａ）配列番号２２７、配列番号２２８、配列番号２２９、配列番号２３３、配列番号２３４、配列番号２３５、配列番号２４０、配列番号２４１、配列番号２４２、配列番号２４３、配列番号２４４、配列番号２４５、配列番号２４９からなる群から選択される１、２、又は３つの重鎖ＣＤＲ、及びその保存的アミノ酸置換、及び（ｂ）配列番号２３０、配列番号２３１、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２３７、配列番号２３８、配列番号２３９、配列番号２４６、配列番号２４７、配列番号２４８からなる群から選択される１、２、又は３つの軽鎖ＣＤＲ、及びその保存的アミノ酸置換（表２２）を含むアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、及び１７１８からなる群から選択されるアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体、並びにその断片、誘導体、変異体、バイオシミラー、及び組み合わせである。
【０８７７】
[00898]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、及び１７１８に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、及び１７１８である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、及び１７１８である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、及び１７１８である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、及び１７１８である。
【０８７８】
【表２８】
2020514289.tif 000031
【０８７９】
【表２９】
2020514289.tif 000032
【０８８０】
【表３０】
2020514289.tif 000033
【０８８１】
[00899]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体１Ｄ７、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。１Ｄ７はAmgen, Inc.から入手可能である。１Ｄ７の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。１Ｄ７のアミノ酸配列は表２３に示す。
【０８８２】
[00900]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号２５０によって提供される重鎖と配列番号２５１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５０及び配列番号２５１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０８８３】
[00901]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは１Ｄ７の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２５２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２５３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５２及び配列番号２５３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５２及び配列番号２５３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５２及び配列番号２５３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５２及び配列番号２５３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５２及び配列番号２５３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８８４】
[00902]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２５４、配列番号２５５、及び配列番号２５６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号２５７、配列番号２５８、及び配列番号２５９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０８８５】
[00903]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、１Ｄ７に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１Ｄ７である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１Ｄ７である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１Ｄ７である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は１Ｄ７である。
【０８８６】
【表３１】
2020514289.tif 000034
【０８８７】
[00904]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体３３Ｃ９、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。３３Ｃ９はAmgen, Inc.から入手可能である。３３Ｃ９の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。３３Ｃ９のアミノ酸配列は表２４に示す。
【０８８８】
[00905]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号２６０によって提供される重鎖と配列番号２６１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６０及び配列番号２６１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０８８９】
[00906]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは１Ｄ７の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２６２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２６３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６２及び配列番号２６３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６２及び配列番号２６３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６２及び配列番号２６３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６２及び配列番号２６３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６２及び配列番号２６３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８９０】
[00907]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２６４、配列番号２６５、及び配列番号２６６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号２６７、配列番号２６８、及び配列番号２６９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０８９１】
[00908]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３３Ｃ９に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３３Ｃ９である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３３Ｃ９である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３３Ｃ９である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３３Ｃ９である。
【０８９２】
【表３２】
2020514289.tif 000035
【０８９３】
[00909]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体３３Ｆ６、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。３３Ｆ６はAmgen, Inc.から入手可能である。３３Ｆ６の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。３３Ｆ６のアミノ酸配列は表２５に示す。
【０８９４】
[00910]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号２７０によって提供される重鎖と配列番号２７１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７０及び配列番号２７１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０８９５】
[00911]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは３３Ｆ６の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２７２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２７３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７２及び配列番号２７３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７２及び配列番号２７３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７２及び配列番号２７３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７２及び配列番号２７３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７２及び配列番号２７３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０８９６】
[00912]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２７４、配列番号２７５、及び配列番号２７６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号２７７、配列番号２７８、及び配列番号２７９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０８９７】
[00913]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３３Ｆ６に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３３Ｆ６である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３３Ｆ６である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３３Ｆ６である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３３Ｆ６である。
【０８９８】
【表３３】
2020514289.tif 000036
【０８９９】
[00914]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体３４Ｇ４、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。３４Ｇ４はAmgen, Inc.から入手可能である。３４Ｇ４の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。３４Ｇ４のアミノ酸配列は表２６に示す。
【０９００】
[00915]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号２８０によって提供される重鎖と配列番号２８１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９０１】
[00916]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは３４Ｇ４の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２８２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２８３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８２及び配列番号２８３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８２及び配列番号２８３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８２及び配列番号２８３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８２及び配列番号２８３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８２及び配列番号２８３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９０２】
[00917]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２８４、配列番号２８５、及び配列番号２８６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号２８７、配列番号２８８、及び配列番号２８９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９０３】
[00918]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３４Ｇ４に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３４Ｇ４である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３４Ｇ４である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３４Ｇ４である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３４Ｇ４である。
【０９０４】
【表３４】
2020514289.tif 000037
【０９０５】
[00919]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体３５Ｂ１０、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。３５Ｂ１０はAmgen, Inc.から入手可能である。３５Ｂ１０の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。３５Ｂ１０のアミノ酸配列は表２７に示す。
【０９０６】
[00920]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号２９０によって提供される重鎖と配列番号２９１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９０７】
[00921]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは３５Ｂ１０の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号２９２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号２９３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９２及び配列番号２９３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９２及び配列番号２９３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９２及び配列番号２９３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９２及び配列番号２９３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９２及び配列番号２９３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９０８】
[00922]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号２９４、配列番号２９５、及び配列番号２９６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号２９７、配列番号２９８、及び配列番号２９９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９０９】
[00923]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、３５Ｂ１０に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３５Ｂ１０である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３５Ｂ１０である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３５Ｂ１０である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は３５Ｂ１０である。
【０９１０】
【表３５】
2020514289.tif 000038
【０９１１】
[00924]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４１Ｅ１１、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４１Ｅ１１はAmgen, Inc.から入手可能である。４１Ｅ１１の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４１Ｅ１１のアミノ酸配列は表２８に示す。
【０９１２】
[00925]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、配列番号３００によって提供される重鎖と、配列番号３０１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９１３】
[00926]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４１Ｅ１１の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３０２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３０３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０２及び配列番号３０３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０２及び配列番号３０３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０２及び配列番号３０３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０２及び配列番号３０３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０２及び配列番号３０３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９１４】
[00927]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３０４、配列番号３０５、及び配列番号３０６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号３０７、配列番号３０８、及び配列番号３０９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９１５】
[00928]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４１Ｅ１１に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４１Ｅ１１である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４１Ｅ１１である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４１Ｅ１１である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４１Ｅ１１である。
【０９１６】
【表３６】
2020514289.tif 000039
【０９１７】
[00929]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４１Ｇ５、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４１Ｇ５はAmgen, Inc.から入手可能である。４１Ｇ５の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４１Ｇ５のアミノ酸配列は表２９に示す。
【０９１８】
[00930]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号３１０によって提供される重鎖と配列番号３１１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９１９】
[00931]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４１Ｇ５の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３１２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３１３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１２及び配列番号３１３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１２及び配列番号３１３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１２及び配列番号３１３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１２及び配列番号３１３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１２及び配列番号３１３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９２０】
[00932]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３１４、配列番号３１５、及び配列番号３１６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号３１７、配列番号３１８、及び配列番号３１９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９２１】
[00933]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４１Ｇ５に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４１Ｇ５である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４１Ｇ５である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４１Ｇ５である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４１Ｇ５である。
【０９２２】
【表３７】
2020514289.tif 000040
【０９２３】
[00934]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４２Ａ１１、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４２Ａ１１はAmgen, Inc.から入手可能である。４２Ａ１１の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４２Ａ１１のアミノ酸配列は表３０に示す。
【０９２４】
[00935]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号３２０によって提供される重鎖と配列番号３２１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９２５】
[00936]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４２Ａ１１の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３２２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３２３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２２及び配列番号３２３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２２及び配列番号３２３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２２及び配列番号３２３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２２及び配列番号３２３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２２及び配列番号３２３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９２６】
[00937]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３２４、配列番号３２５、及び配列番号３２６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号３２７、配列番号３２８、及び配列番号３２９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９２７】
[00938]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４２Ａ１１に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４２Ａ１１である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４２Ａ１１である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４２Ａ１１である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４２Ａ１１である。
【０９２８】
【表３８】
2020514289.tif 000041
【０９２９】
[00939]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４４Ｃ１、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４４Ｃ１はAmgen, Inc.から入手可能である。４４Ｃ１の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４４Ｃ１のアミノ酸配列は表３１に示す。
【０９３０】
[00940]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号３３０によって提供される重鎖と配列番号３３１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９３１】
[00941]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４４Ｃ１の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３３２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３３３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３２及び配列番号３３３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３２及び配列番号３３３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３２及び配列番号３３３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３２及び配列番号３３３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３２及び配列番号３３３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９３２】
[00942]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３３４、配列番号３３５、及び配列番号３３６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号３３７、配列番号３３８、及び配列番号３３９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９３３】
[00943]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４４Ｃ１に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４４Ｃ１である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４４Ｃ１である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４４Ｃ１である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４４Ｃ１である。
【０９３４】
【表３９】
2020514289.tif 000042
【０９３５】
[00944]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４５Ａ８、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４５Ａ８はAmgen, Inc.から入手可能である。４５Ａ８の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４５Ａ８のアミノ酸配列は表３２に示す。
【０９３６】
[00945]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号３４０によって提供される重鎖と配列番号３４１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９３７】
[00946]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４５Ａ８の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３４２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３４３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４２及び配列番号３４３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４２及び配列番号３４３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４２及び配列番号３４３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４２及び配列番号３４３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４２及び配列番号３４３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９３８】
[00947]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３４４、配列番号３４５、及び配列番号３４６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号３４７、配列番号３４８、及び配列番号３４９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９３９】
[00948]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４５Ａ８に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４５Ａ８である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４５Ａ８である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４５Ａ８である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４５Ａ８である。
【０９４０】
【表４０】
2020514289.tif 000043
【０９４１】
[00949]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４６Ｅ１１、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４６Ｅ１１はAmgen, Inc.から入手可能である。４６Ｅ１１の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４６Ｅ１１のアミノ酸配列は表３３に示す。
【０９４２】
[00950]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号３５０によって提供される重鎖と配列番号３５１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５０及び配列番号３５１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９４３】
[00951]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４６Ｅ１１の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３５２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３５３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５２及び配列番号３５３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５２及び配列番号３５３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５２及び配列番号３５３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５２及び配列番号３５３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５２及び配列番号３５３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９４４】
[00952]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３５４、配列番号３５５、及び配列番号３５６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号３５７、配列番号３５８、及び配列番号３５９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９４５】
[00953]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４６Ｅ１１に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４６Ｅ１１である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４６Ｅ１１である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４６Ｅ１１である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４６Ｅ１１である。
【０９４６】
【表４１】
2020514289.tif 000044
【０９４７】
[00954]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４８Ｈ１２、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４８Ｈ１２はAmgen, Inc.から入手可能である。４８Ｈ１２の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４８Ｈ１２のアミノ酸配列は表３４に示す。
【０９４８】
[00955]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号３６０によって提供される重鎖と配列番号３６１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６０及び配列番号３６１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９４９】
[00956]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４８Ｈ１２の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３６２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３６３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６２及び配列番号３６３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６２及び配列番号３６３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６２及び配列番号３６３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６２及び配列番号３６３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６２及び配列番号３６３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９５０】
[00957]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３６４、配列番号３６５、及び配列番号３６６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号３６７、配列番号３６８、及び配列番号３６９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９５１】
[00958]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４８Ｈ１２に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ｈ１２である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ｈ１２である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ｈ１２である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ｈ１２である。
【０９５２】
【表４２】
2020514289.tif 000045
【０９５３】
[00959]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４８Ｈ７、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４８Ｈ７はAmgen, Inc.から入手可能である。４８Ｈ７の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４８Ｈ７のアミノ酸配列は表３５に示す。
【０９５４】
[00960]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号３７０によって提供される重鎖と配列番号３７１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７０及び配列番号３７１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９５５】
[00961]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４８Ｈ７の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３７２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３７３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７２及び配列番号３７３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７２及び配列番号３７３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７２及び配列番号３７３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７２及び配列番号３７３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７２及び配列番号３７３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９５６】
[00962]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３７４、配列番号３７５、及び配列番号３７６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号３７７、配列番号３７８、及び配列番号３７９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９５７】
[00963]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４８Ｈ７に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ｈ７である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ｈ７である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ｈ７である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ｈ７である。
【０９５８】
【表４３】
2020514289.tif 000046
【０９５９】
[00964]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４９Ｄ９、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４９Ｄ９はAmgen, Inc.から入手可能である。４９Ｄ９の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４９Ｄ９のアミノ酸配列は表３６に示す。
【０９６０】
[00965]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号３８０によって提供される重鎖と配列番号３８１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８０及び配列番号３８１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９６１】
[00966]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４９Ｄ９の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３８２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３８３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８２及び配列番号３８３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８２及び配列番号３８３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８２及び配列番号３８３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８２及び配列番号３８３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８２及び配列番号３８３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９６２】
[00967]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３８４、配列番号３８５、及び配列番号３８６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号３８７、配列番号３８８、及び配列番号３８９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９６３】
[00968]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４９Ｄ９に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４９Ｄ９である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４９Ｄ９である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４９Ｄ９である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４９Ｄ９である。
【０９６４】
【表４４】
2020514289.tif 000047
【０９６５】
[00969]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４９Ｅ２、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４９Ｅ２はAmgen, Inc.から入手可能である。４９Ｅ２の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４９Ｅ２のアミノ酸配列は表３７に示す。
【０９６６】
[00970]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号３９０によって提供される重鎖と配列番号３９１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９０及び配列番号３９１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９６７】
[00971]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４９Ｅ２の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号３９２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号３９３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９２及び配列番号３９３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９２及び配列番号３９３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９２及び配列番号３９３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９２及び配列番号３９３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９２及び配列番号３９３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９６８】
[00972]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号３９４、配列番号３９５、及び配列番号３９６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号３９７、配列番号３９８、及び配列番号３９９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９６９】
[00973]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４９Ｅ２に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４９Ｅ２である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４９Ｅ２である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４９Ｅ２である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４９Ｅ２である。
【０９７０】
【表４５】
2020514289.tif 000048
【０９７１】
[00974]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体４８Ａ９、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。４８Ａ９はAmgen, Inc.から入手可能である。４８Ａ９の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。４８Ａ９のアミノ酸配列は表３８に示す。
【０９７２】
[00975]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号４００によって提供される重鎖と配列番号４０１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４００及び配列番号４０１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９７３】
[00976]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは４８Ａ９の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４０２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４０３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０２及び配列番号４０３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０２及び配列番号４０３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０２及び配列番号４０３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０２及び配列番号４０３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０２及び配列番号４０３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９７４】
[00977]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４０４、配列番号４０５、及び配列番号４０６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号４０７、配列番号４０８、及び配列番号４０９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９７５】
[00978]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、４８Ａ９に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ａ９である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ａ９である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ａ９である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は４８Ａ９である。
【０９７６】
【表４６】
2020514289.tif 000049
【０９７７】
[00979]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体５Ｈ７、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。５Ｈ７はAmgen, Inc.から入手可能である。５Ｈ７の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。５Ｈ７のアミノ酸配列は表３９に示す。
【０９７８】
[00980]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号４１０によって提供される重鎖と配列番号４１１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１０及び配列番号４１１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９７９】
[00981]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは５Ｈ７の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４１２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４１３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１２及び配列番号４１３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１２及び配列番号４１３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１２及び配列番号４１３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１２及び配列番号４１３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１２及び配列番号４１３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９８０】
[00982]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４１４、配列番号４１５、及び配列番号４１６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号４１７、配列番号４１８、及び配列番号４１９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９８１】
[00983]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、５Ｈ７に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラー抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は５Ｈ７である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は５Ｈ７である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は５Ｈ７である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は５Ｈ７である。
【０９８２】
【表４７】
2020514289.tif 000050
【０９８３】
[00984]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体７Ａ１０、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。７Ａ１０はAmgen, Inc.から入手可能である。７Ａ１０の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。７Ａ１０のアミノ酸配列は表４０に示す。
【０９８４】
[00985]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号４２０によって提供される重鎖と配列番号４２１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２０及び配列番号４２１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９８５】
[00986]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは７Ａ１０の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４２２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４２３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２２及び配列番号４２３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２２及び配列番号４２３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２２及び配列番号４２３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２２及び配列番号４２３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２２及び配列番号４２３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９８６】
[00987]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４２４、配列番号４２５、及び配列番号４２６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号４２７、配列番号４２８、及び配列番号４２９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９８７】
[00988]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、７Ａ１０に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は７Ａ１０である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は７Ａ１０である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は７Ａ１０である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は７Ａ１０である。
【０９８８】
【表４８】
2020514289.tif 000051
【０９８９】
[00989]  好ましい実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、モノクローナル抗体９Ｈ６、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。９Ｈ６はAmgen, Inc.から入手可能である。９Ｈ６の調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。９Ｈ６のアミノ酸配列は表４１に示す。
【０９９０】
[00990]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは配列番号４３０によって提供される重鎖と配列番号４３１によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３０及び配列番号４３１に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【０９９１】
[00991]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは９Ｈ６の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４３２に示される配列を含み、及びＧＩＴＲアゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４３３に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３２及び配列番号４３３に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３２及び配列番号４３３に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３２及び配列番号４３３に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３２及び配列番号４３３に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３２及び配列番号４３３に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【０９９２】
[00992]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、それぞれ配列番号４３４、配列番号４３５、及び配列番号４３６に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号４３７、配列番号４３８、及び配列番号４３９に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【０９９３】
[00993]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、９Ｈ６に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＧＩＴＲアゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は９Ｈ６である）を含むＧＩＴＲ抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＧＩＴＲアゴニスト抗体であり、このＧＩＴＲアゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は９Ｈ６である。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は９Ｈ６である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤は９Ｈ６である。
【０９９４】
【表４９】
2020514289.tif 000052
【０９９５】
[00994]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、国際公開第２０１３／０３９９５４  Ａ１号及び同第２０１１／０２８６８３  Ａ１号；米国特許出願公開第２０１３／０１０８６４１  Ａ１号、同第２０１２／０１８９６３９  Ａ１号、及び同第２０１４／０３４８８４１  Ａ１号；及び米国特許第７，８１２，１３５号；同第８，３８８，９６７号；及び同第９，０２８，８２３号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されるＧＩＴＲアゴニストである。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、構造及び調製が米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４号及び国際公開第２０１５／０３１６６７  Ａ１号（Amgen, Inc.）（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されるアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、及び９Ｈ６からなる群から選択される完全ヒトアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、及び９Ｈ６からなる群から選択される抗体の配列と９９％より高いアミノ酸配列同一性を有する完全ヒトアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、及び９Ｈ６からなる群から選択される抗体の配列と９８％より高いアミノ酸配列同一性を有する完全ヒトアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるとおりの、９Ｈ６ｖ３、５Ｈ７ｖ２、３３Ｃ９ｖ２、４１Ｇ５ｖ２、及び７Ａ１０ｖ１からなる群から選択される完全ヒトアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、米国特許出願公開第２０１５／００６４２０４  Ａ１号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるとおりの、４４Ｃ１ｖ１、４５Ａ８ｖ１、４９Ｄ９ｖ１、４９Ｅ２ｖ１、４８Ａ９ｖ１、５Ｈ７ｖ１、５Ｈ７ｖ２、５Ｈ７ｖ３、５Ｈ７ｖ５、５Ｈ７ｖ７、５Ｈ７ｖ９、５Ｈ７ｖ１０、５Ｈ７ｖ１１、５Ｈ７ｖ１３、５Ｈ７ｖ１４、５Ｈ７ｖ１７、５Ｈ７ｖ１８、５Ｈ７ｖ１９、５Ｈ７ｖ２２、７Ａ１０ｖ１、７Ａ１０ｖ２、７Ａ１０ｖ３、７Ａ１０ｖ４、７Ａ１０ｖ５、９Ｈ６ｖ１、９Ｈ６ｖ２、９Ｈ６ｖ３、９Ｈ６ｖ４、９Ｈ６ｖ５、９Ｈ６ｖ６、３３Ｃ９ｖ１、３３Ｃ９ｖ２、３３Ｃ９ｖ３、３３Ｃ９ｖ４、３３Ｃ９ｖ５、４１Ｇ５ｖ１、４１Ｇ５ｖ２、４１Ｇ５ｖ３、４１Ｇ５ｖ４、及び４１Ｇ５ｖ５からなる群から選択される完全ヒトアゴニスト抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。
【０９９６】
[00995]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるとおりのＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質、又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、若しくはバイオシミラーである。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの特性は、上記及び米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号、及び同第８，４５０，４６０号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載される。構造Ｉ−Ａのポリペプチドドメインのアミノ酸配列は表６に提供する。Ｆｃドメインは好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部分（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するのに好ましいリンカーは、追加的なポリペプチドの融合に好適なリンカーを含め、配列番号３２〜配列番号４１に提供される実施形態から選択されてもよい。同様に、構造Ｉ−Ｂのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に提供する。構造Ｉ−ＢにあるとおりＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合する場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、及びリンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【０９９７】
[00996]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、ＴＲＸ５１８、６Ｃ８、３６Ｅ５、３Ｄ６、６１Ｇ６、６Ｈ６、６１Ｆ６、１Ｄ８、１７Ｆ１０、３５Ｄ８、４９Ａ１、９Ｅ５、３１Ｈ６、２１５５、６９８、７０６、８２７、１６４９、１７１８、１Ｄ７、３３Ｃ９、３３Ｆ６、３４Ｇ４、３５Ｂ１０、４１Ｅ１１、４１Ｇ５、４２Ａ１１、４４Ｃ１、４５Ａ８、４６Ｅ１１、４８Ｈ１２、４８Ｈ７、４９Ｄ９、４９Ｅ２、４８Ａ９、５Ｈ７、７Ａ１０、９Ｈ６の可変重鎖及び可変軽鎖、並びにその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、及びバイオシミラーからなる群から選択される１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む。
【０９９８】
[00997]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、ＧＩＴＲＬ配列を含む１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む（表４２）。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４０に係る配列を含む１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、可溶性ＧＩＴＲＬ配列を含む１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４１に係る配列を含む１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む。
【０９９９】
[00998]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＧＩＴＲアゴニスト融合タンパク質は、上記の表１８〜表３９に示されるＶＨ及びＶＬ  ＧＩＴＲ配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【１０００】
【表５０】
2020514289.tif 000053
【１００１】
[00999]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインであるＧＩＴＲアゴニスト単鎖融合ポリペプチドである。ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインであるＧＩＴＲアゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＧＩＴＲ結合ドメインの各々はストーク領域（三量化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、ＧＩＴＲ結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有する。
【１００２】
[001000]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含むＧＩＴＲアゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインの各々はストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有し、及びＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインはＧＩＴＲ結合ドメインである。
【１００３】
[001001]  ある実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、前述のＶＬドメインのいずれかに連結した前述のＶＨドメインのいずれかを含むＧＩＴＲアゴニストｓｃＦｖ抗体である。
【１００４】
ＨＶＥＭ（ＣＤ２７０）アゴニスト
[001002]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはＨＶＥＭアゴニストである。ＨＶＥＭはＣＤ２７０及びＴＮＦＲＳＦ１４としても知られる。当該技術分野において公知の任意のＨＶＥＭアゴニストを使用することができる。ＨＶＥＭ結合分子は、ヒト又は哺乳類ＨＶＥＭへの結合能を有するモノクローナル抗体又は融合タンパク質であってよい。ＨＶＥＭアゴニスト又はＨＶＥＭ結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。ＨＶＥＭアゴニスト又はＨＶＥＭ結合分子は重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用されるとき、用語の結合分子にはまた、ＨＶＥＭに結合する抗体（完全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体、及び抗体断片、例えば、上記のいずれかのＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリによって作製される断片、エピトープ結合断片、及び操作された形態の抗体、例えばｓｃＦｖ分子も含まれる。ある実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物に使用されるＨＶＥＭアゴニストとしては、抗ＨＶＥＭ抗体、ヒト抗ＨＶＥＭ抗体、マウス抗ＨＶＥＭ抗体、哺乳類抗ＨＶＥＭ抗体、モノクローナル抗ＨＶＥＭ抗体、ポリクローナル抗ＨＶＥＭ抗体、キメラ抗ＨＶＥＭ抗体、抗ＨＶＥＭアドネクチン、抗ＨＶＥＭドメイン抗体、単鎖抗ＨＶＥＭ断片、重鎖抗ＨＶＥＭ断片、軽鎖抗ＨＶＥＭ断片、抗ＨＶＥＭ融合タンパク質、及びその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、又はバイオシミラーが挙げられる。好ましい実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、アゴニスト抗ＨＶＥＭヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち、単一細胞株に由来する抗体）である。
【１００５】
[001003]  好ましい実施形態において、ＨＶＥＭアゴニスト又はＨＶＥＭ結合分子はまた、融合タンパク質であってもよい。好ましい実施形態において、多量体ＨＶＥＭアゴニスト、例えば三量体又は六量体ＨＶＥＭアゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）は、典型的には２つのリガンド結合ドメインを持つアゴニストモノクローナル抗体と比較して、優れた受容体（ＨＶＥＭＬ）クラスター化及び細胞内シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含む三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれ以上の融合タンパク質及び任意選択でこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結することが、例えば、Gieffers, et al.,Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載されている。
【１００６】
[001004]  アゴニストＨＶＥＭ抗体及び融合タンパク質は強力な免疫応答を誘導することが公知である。好ましい実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、毒性を低下させるのに十分な方法でＨＶＥＭ抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を無効にするアゴニストＨＶＥＭモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を無効にするアゴニストＨＶＥＭモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を無効にするアゴニストＨＶＥＭモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、Ｆｃ領域機能を無効にするアゴニストＨＶＥＭモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。
【１００７】
[001005]  一部の実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、ヒトＨＶＥＭ（配列番号４４２）への高親和性での結合及びアゴニスト活性によって特徴付けられる。ある実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、ヒトＨＶＥＭ（配列番号４４２）に結合する結合分子である。ＨＶＥＭアゴニスト又は結合分子が結合し得るＨＶＥＭ抗原のアミノ酸配列を表４３に要約する。
【１００８】
【表５１】
2020514289.tif 000054
【１００９】
[001006]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＨＶＥＭと約１００ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭと約９０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭと約８０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭと約７０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭと約６０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭと約５０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭと約４０ｐＭ以下のＫＤで結合する、又はヒト又はマウスＨＶＥＭと約３０ｐＭ以下のＫＤで結合するＨＶＥＭアゴニストを含む。
【１０１０】
[001007]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約８×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約９×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウスＨＶＥＭに約１×１０６  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合するＨＶＥＭアゴニストを含む。
【１０１１】
[001008]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約２．１×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約２．２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約２．３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約２．４×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約２．５×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約２．６×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する又はヒト又はマウスＨＶＥＭに約２．７×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約２．８×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約２．９×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウスＨＶＥＭに約３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合するＨＶＥＭアゴニストを含む。
【１０１２】
[001009]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約１０ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約９ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約８ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約７ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約６ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約５ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約４ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約３ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＨＶＥＭに約２ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、又はヒト又はマウスＨＶＥＭに約１ｎＭ以下のＩＣ５０で結合するＨＶＥＭアゴニストを含む。
【１０１３】
[001010]  ある実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、国際公開第２００９／００７１２０  Ａ２号及び米国特許出願公開第２０１６／０１７６９４１  Ａ１号（その各々の開示が参照により本明細書に援用される）に記載されるＨＶＥＭアゴニストである。
【１０１４】
[001011]  ある実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストはＨＶＥＭアゴニストクローンＲＥＡ２４７であり、これはMiltenyi Biotech, Inc.（San Diego, CA 92121）から市販されている。
【１０１５】
[001012]  ある実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるとおりのＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質、又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、若しくはバイオシミラーである。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの特性は、上記及び米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号、及び同第８，４５０，４６０号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載される。構造Ｉ−Ａのポリペプチドドメインのアミノ酸配列は表６に提供する。Ｆｃドメインは好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部分（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するのに好ましいリンカーは、追加的なポリペプチドの融合に好適なリンカーを含め、配列番号３２〜配列番号４１に提供される実施形態から選択されてもよい。同様に、構造Ｉ−Ｂのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に提供する。構造Ｉ−ＢにあるとおりＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合する場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、及びリンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【１０１６】
[001013]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、ＬＩＧＨＴ（ＨＶＥＭリガンド）配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む（表４４）。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４３に係る配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、可溶性ＬＩＧＨＴ配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４４に係る配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４５に係る配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、配列番号４４６に係る配列を含む１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含む。
【１０１７】
[001014]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＨＶＥＭアゴニスト融合タンパク質は、ＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＨＶＥＭ結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【１０１８】
【表５２】
2020514289.tif 000055
【１０１９】
[001015]  ある実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインであるＨＶＥＭアゴニスト単鎖融合ポリペプチドである。ある実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインであるＨＶＥＭアゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＨＶＥＭ結合ドメインの各々はストーク領域（三量化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、ＨＶＥＭ結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有する。
【１０２０】
[001016]  ある実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含むＨＶＥＭアゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインの各々はストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有し、及びＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインはＨＶＥＭ結合ドメインである。
【１０２１】
[001017]  ある実施形態において、ＨＶＥＭアゴニストは、米国特許第７，１１８，７４２号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるＨＶＥＭアゴニストである。
【１０２２】
ＣＤ９５アゴニスト
[001018]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＣＤ９５アゴニスト又はＣＤ９５結合分子である。ＣＤ９５は、ＴＮＦＲＳＦ６、Ｆａｓ受容体（ＦａｓＲ）、及びＡＰＯ−１としても知られる。当該技術分野において公知の任意のＣＤ９５アゴニスト又は結合分子を使用することができる。ＣＤ９５結合分子は、ヒト又は哺乳類ＣＤ９５への結合能を有するモノクローナル抗体又は融合タンパク質であってよく、本明細書の他の部分に記載されるとおり、Ｔ細胞アポトーシス活性よりむしろＴ細胞アゴニスト活性に適切な濃度で使用され得る。ＣＤ９５アゴニスト又はＣＤ９５結合分子は、免疫グロブリン分子の任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスの免疫グロブリン重鎖を含み得る。ＣＤ９５アゴニスト又はＣＤ９５結合分子は重鎖及び軽鎖の両方を有し得る。本明細書で使用されるとき、用語の結合分子にはまた、ＣＤ９５に結合する抗体（完全長抗体を含む）、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、ヒト、ヒト化又はキメラ抗体、及び抗体断片、例えば、上記のいずれかのＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆａｂ発現ライブラリによって作製される断片、エピトープ結合断片、及び操作された形態の抗体、例えばｓｃＦｖ分子も含まれる。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、完全ヒト抗体である抗原結合タンパク質である。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒト化抗体である抗原結合タンパク質である。一部の実施形態において、本開示の方法及び組成物に使用されるＣＤ９５アゴニストとしては、抗ＣＤ９５抗体、ヒト抗ＣＤ９５抗体、マウス抗ＣＤ９５抗体、哺乳類抗ＣＤ９５抗体、モノクローナル抗ＣＤ９５抗体、ポリクローナル抗ＣＤ９５抗体、キメラ抗ＣＤ９５抗体、抗ＣＤ９５アドネクチン、抗ＣＤ９５ドメイン抗体、単鎖抗ＣＤ９５断片、重鎖抗ＣＤ９５断片、軽鎖抗ＣＤ９５断片、抗ＣＤ９５融合タンパク質、及びその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、又はバイオシミラーが挙げられる。好ましい実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、アゴニスト抗ＣＤ９５ヒト化又は完全ヒトモノクローナル抗体（即ち、単一細胞株に由来する抗体）である。
【１０２３】
[001019]  好ましい実施形態において、ＣＤ９５アゴニスト又はＣＤ９５結合分子はまた、融合タンパク質であってもよい。好ましい実施形態において、多量体ＣＤ９５アゴニスト、例えば三量体又は六量体ＣＤ９５アゴニスト（３つ又は６つのリガンド結合ドメインを有する）は、典型的には２つのリガンド結合ドメインを持つアゴニストモノクローナル抗体と比較して、優れた受容体（ＣＤ９５Ｌ）クラスター化及び細胞内シグナル伝達複合体形成を誘導し得る。３つのＴＮＦＲＳＦ結合ドメイン及びＩｇＧ１−Ｆｃを含む三量体（三価）又は六量体（又は六価）又はそれ以上の融合タンパク質及び任意選択でこれらの融合タンパク質の２つ以上を更に連結することが、例えば、Gieffers, et al.,Mol. Cancer Therapeutics 2013, 12, 2735-47に記載されている。
【１０２４】
[001020]  アゴニストＣＤ９５抗体及び融合タンパク質は強力な免疫応答を誘導することが公知である。好ましい実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、毒性を低下させるのに十分な方法でＣＤ９５抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）、例えばＮＫ細胞の細胞傷害性を無効にするアゴニストＣＤ９５モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を無効にするアゴニストＣＤ９５モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を無効にするアゴニストＣＤ９５モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、Ｆｃ領域機能を無効にするアゴニストＣＤ９５モノクローナル抗体又は融合タンパク質である。
【１０２５】
[001021]  一部の実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒトＣＤ９５（配列番号４４７）への高親和性での結合及びアゴニスト活性によって特徴付けられる。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒトＣＤ９５（配列番号４４７）に結合する結合分子である。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒトＣＤ９５（配列番号４４８）に結合する結合分子である。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒトＣＤ９５（配列番号４４９）に結合する結合分子である。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、ヒトＣＤ９５（配列番号４５０）に結合する結合分子である。ＣＤ９５アゴニスト又は結合分子が結合し得るＣＤ９５抗原のアミノ酸配列を表４５に要約する。
【１０２６】
【表５３】
2020514289.tif 000056
【１０２７】
[001022]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＣＤ９５と約１００ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５と約９０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５と約８０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５と約７０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５と約６０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５と約５０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５と約４０ｐＭ以下のＫＤで結合する、又はヒト又はマウスＣＤ９５と約３０ｐＭ以下のＫＤで結合するＣＤ９５アゴニストを含む。
【１０２８】
[001023]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＣＤ９５に約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約８×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約９×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウスＣＤ９５に約１×１０６  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合するＣＤ９５アゴニストを含む。
【１０２９】
[001024]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＣＤ９５に約２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、約２．１×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃでヒト又はマウスＣＤ９５に結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約２．２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約２．３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約２．４×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約２．５×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約２．６×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する又はヒト又はマウスＣＤ９５に約２．７×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約２．８×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約２．９×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、又はヒト又はマウスＣＤ９５に約３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合するＣＤ９５アゴニストを含む。
【１０３０】
[001025]  一部の実施形態において、記載される組成物、プロセス及び方法は、ヒト又はマウスＣＤ９５に約１０ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約９ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約８ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約７ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約６ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約５ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約４ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約３ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、ヒト又はマウスＣＤ９５に約２ｎＭ以下のＩＣ５０で結合する、又はヒト又はマウスＣＤ９５に約１ｎＭ以下のＩＣ５０で結合するＣＤ９５アゴニストを含む。
【１０３１】
[001026]  好ましい実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、モノクローナル抗体Ｅ０９、又はその断片、誘導体、変異体、若しくはバイオシミラーである。Ｅ０９の調製及び特性については、Chodorge, et al., Cell Death & Differ. 2012, 19, 1187-95に記載されている。Ｅ０９のアミノ酸配列は表４６に示す。
【１０３２】
[001027]  ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストはＥ０９の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニスト重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４５１に示される配列を含み、及びＣＤ９５アゴニスト軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４５２に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５１及び配列番号４５２に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５１及び配列番号４５２に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５１及び配列番号４５２に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５１及び配列番号４５２に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５１及び配列番号４５２に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【１０３３】
[001028]  ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、それぞれ配列番号４５３、配列番号４５４、及び配列番号４５５に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号４５６、配列番号４５７、及び配列番号４５８に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。
【１０３４】
[001029]  ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、Ｅ０９に準じて医薬品規制当局の承認を受けたＣＤ９５アゴニストバイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーモノクローナル抗体は、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＥ０９である）を含むＣＤ９５抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されているＣＤ９５アゴニスト抗体であり、このＣＤ９５アゴニスト抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＥ０９である。ＣＤ９５アゴニスト抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＥ０９である。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はＥ０９である。
【１０３５】
【表５４】
2020514289.tif 000057
【１０３６】
[001030]  ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、国際公開第２００９／００７１２０  Ａ２号及び米国特許出願公開第２０１６／０１７６９４１  Ａ１号（これらの各々の開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるＣＤ９５アゴニストである。
【１０３７】
[001031]  ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、構造Ｉ−Ａ（Ｃ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）又は構造Ｉ−Ｂ（Ｎ末端Ｆｃ抗体断片融合タンパク質）に示されるとおりのＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質、又はその断片、誘導体、コンジュゲート、変異体、若しくはバイオシミラーである。構造Ｉ−Ａ及びＩ−Ｂの特性は、上記及び米国特許第９，３５９，４２０号、同第９，３４０，５９９号、同第８，９２１，５１９号、及び同第８，４５０，４６０号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載される。構造Ｉ−Ａのポリペプチドドメインのアミノ酸配列は表６に提供する。Ｆｃドメインは好ましくは、完全定常ドメイン（配列番号３１のアミノ酸１７〜２３０）、完全ヒンジドメイン（配列番号３１のアミノ酸１〜１６）又はヒンジドメインの一部分（例えば、配列番号３１のアミノ酸４〜１６）を含む。Ｃ末端Ｆｃ抗体を接続するのに好ましいリンカーは、追加的なポリペプチドの融合に好適なリンカーを含め、配列番号３３〜配列番号４１に提供される実施形態から選択されてもよい。同様に、構造Ｉ−Ｂのポリペプチドドメインのアミノ酸配列を表７に提供する。構造Ｉ−ＢにあるとおりＦｃ抗体断片がＴＮＲＦＳＦ融合タンパク質のＮ末端に融合する場合、Ｆｃモジュールの配列は好ましくは配列番号４２に示されるものであり、及びリンカー配列は好ましくは配列番号４３〜配列番号４５に示される実施形態から選択される。
【１０３８】
[001032]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、ＣＤ９５リガンド配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む（表４７）。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、配列番号４５９に係る配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、可溶性ＬＩＧＨＴ配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、配列番号４６０に係る配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、配列番号４６１に係る配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、配列番号４６２に係る配列を含む１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含む。
【１０３９】
[001033]  ある実施形態において、構造Ｉ−Ａ又はＩ−Ｂに係るＣＤ９５アゴニスト融合タンパク質は、ＶＨ及びＶＬ領域を含むｓｃＦｖドメインである１つ以上のＣＤ９５結合ドメインを含み、ここでＶＨ及びＶＬドメインはリンカーによって接続されている。
【１０４０】
【表５５】
2020514289.tif 000058
【１０４１】
[001034]  ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ９５結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ９５結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ９５結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、及び追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインであるＣＤ９５アゴニスト単鎖融合ポリペプチドである。ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性ＣＤ９５結合ドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＣＤ９５結合ドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＣＤ９５結合ドメインを含み、Ｎ端側及び／又はＣ端側末端に追加のドメインを更に含み、追加のドメインがＦａｂ又はＦｃ断片ドメインであるＣＤ９５アゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＣＤ９５結合ドメインの各々はストーク領域（三量化に寄与し、細胞膜まで一定の距離を提供するが、ＣＤ９５結合ドメインの一部ではない）を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有する。
【１０４２】
[001035]  ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、（ｉ）第１の可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｉ）第１のペプチドリンカー、（ｉｉｉ）第２の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメイン、（ｉｖ）第２のペプチドリンカー、及び（ｖ）第３の可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインを含むＣＤ９５アゴニスト単鎖融合ポリペプチドであり、ここで可溶性ＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインの各々はストーク領域を欠き、第１及び第２のペプチドリンカーは独立に３〜８アミノ酸の長さを有し、及びＴＮＦスーパーファミリーサイトカインドメインはＣＤ９５結合ドメインである。
【１０４３】
[001036]  ある実施形態において、ＣＤ９５アゴニストは、前述のＶＬドメインのいずれかに連結した前述のＶＨドメインのいずれかを含むＣＤ９５アゴニストｓｃＦｖ抗体である。
【１０４４】
腫瘍浸潤（infilitrating）リンパ球の拡大培養方法
[001037]  ある実施形態において、本発明は、本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストのいずれかを使用してＴＩＬ集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、Jin, et al., J. Immunotherapy 2012, 35, 283-292（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるとおりのステップを含む。例えば、腫瘍を酵素培地に置き、約１分間機械的に解離し得る。次にこの混合物を３７℃５％ＣＯ２で３０分間インキュベートし、次に再び約１分間機械的に破壊し得る。３７℃５％ＣＯ２で３０分間インキュベートした後、腫瘍を３度目に約１分間機械的に破壊し得る。３度目の機械的破壊後に大型の組織片が存在する場合、３７℃５％ＣＯ２での更に３０分間のインキュベーションを伴い又は伴わず、１回又は２回の更なる機械的解離を試料に適用してもよい。最終回のインキュベーションの終了時、細胞懸濁液が多数の赤血球又は死細胞を含有する場合、Ficollを使用した密度勾配分離を実施して、そうした細胞を除去してもよい。ＴＩＬ培養は２４ウェルプレート（Costar２４ウェル細胞培養クラスター、平底；Corning Incorporated、Corning, NY）で開始した。各ウェルには、ＩＬ−２（６０００ＩＵ／ｍＬ；ChironCorp.、Emeryville, CA）を含む２ｍＬの完全培地（ＣＭ）中１×１０６個の腫瘍消化物細胞又は約１〜８ｍｍ３のサイズの腫瘍断片１個を播種し得る。ＣＭは、１０％ヒトＡＢ血清、２５ｍＭヘペス、及び１０ｍｇ／ｍＬゲンタマイシンを補足したGlutaMAX含有ロズウェルパーク記念研究所（Roswell ParkMemorial Institute：ＲＰＭＩ）１６４０緩衝液を含む。培養は、１０ｃｍ２ガス透過性シリコン底を有する４０ｍＬ容量のガス透過性フラスコ（G-Rex 10；Wilson Wolf Manufacturing、New Brightonで開始してもよく、各フラスコには、１０〜４０ｍＬのＩＬ−２含有ＣＭ中１０〜４０×１０６個の腫瘍消化物生細胞又は５〜３０個の腫瘍断片をロードし得る。G-Rex 10及び２４ウェルプレートを加湿インキュベーターにおいて３７℃５％ＣＯ２でインキュベートしてもよく、培養開始から５日後、培地の半分を取り出して新鮮なＣＭ及びＩＬ−２を補充してもよく、５日目以降、２〜３日毎に培地の半分を交換し得る。ＴＩＬの迅速拡大培養プロトコル（ＲＥＰ）は、本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用して、本明細書の他の部分に記載されるとおり、Ｔ−１７５フラスコ及びガス透過性バッグ又はガス透過性G-Rexフラスコを使用して実施し得る。Ｔ−１７５フラスコにおけるＲＥＰについては、各フラスコ内の１５０ｍＬの培地中に１×１０６個のＴＩＬを懸濁し得る。３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍＬの抗ＣＤ３抗体（ＯＫＴ−３）を補足したＣＭ及びAIM-V培地の１対１混合物（５０／５０培地）中において、ＴＩＬを本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストと本明細書に記載される比で培養し得る。Ｔ−１７５フラスコは３７℃５％ＣＯ２でインキュベートし得る。５日目に、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する５０／５０培地を使用して培地の半分を交換し得る。７日目、２つのＴ−１７５フラスコからの細胞を３Ｌバッグに合わせてもよく、その３００ｍＬのＴＩＬ懸濁液に５％ヒトＡＢ血清及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する３００ｍＬのAIM-Vを加え得る。毎日又は２日毎に各バッグの細胞数をカウントしてもよく、新鮮培地を加えて細胞数を０．５〜２．０×１０６細胞／ｍＬに保ち得る。１００ｃｍ２ガス透過性シリコン底を有する５００ｍＬ容量フラスコ（例えば、G-Rex 100、Wilson Wolf Manufacturing、本明細書の他の部分に記載されるとおり）におけるＲＥＰについては、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍＬの抗ＣＤ３抗体（ＯＫＴ−３）を補足した４００ｍＬの５０／５０培地中において、５×１０６又は１０×１０６個のＴＩＬをＴＮＦＲＳＦアゴニストと本明細書に記載される比（例えば１対１００）で培養し得る。G-Rex100フラスコは３７℃５％ＣＯ２でインキュベートし得る。５日目、２５０ｍＬの上清を取り出して遠心ボトルに入れ、１５００ｒｐｍ（４９１ｇ）で１０分間遠心し得る。得られたＴＩＬペレットは、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する１５０ｍＬの新鮮５０／５０培地に再懸濁し、G-Rex 100フラスコに戻し加え得る。G-Rex 100フラスコ内でＴＩＬを連続的に拡大培養する場合、７日目に各フラスコ中に存在する３００ｍＬの培地に各G-Rex 100のＴＩＬを懸濁してもよく、この細胞懸濁液は、３つのG-Rex100フラスコの播種に使用し得る３つの１００ｍＬアリコートに分割し得る。次に５％ヒトＡＢ血清及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する約１５０ｍＬのAIM-Vを各フラスコに加え得る。次にG-Rex100フラスコを３７℃５％ＣＯ２でインキュベートしてもよく、４日後、各G-Rex100フラスコに３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する１５０ｍＬのAIM-Vを加え得る。この後、培養１４日目に細胞を回収することによりＲＥＰを完了し得る。
【１０４５】
[001038]  ある実施形態において、拡大培養又は癌治療の方法又はプロセスは、患者腫瘍試料からＴＩＬを入手するステップを含む。患者腫瘍試料は当該技術分野において公知の方法を用いて入手されてもよい。例えば、ＴＩＬは、酵素的腫瘍消化物及び鋭的剥離からの腫瘍断片（約１〜約８ｍｍ３のサイズ）から培養されてもよい。かかる腫瘍消化物は、酵素培地（例えば、ロズウェルパーク記念研究所（Roswell Park Memorial Institute：ＲＰＭＩ）１６４０緩衝液、２ｍＭグルタミン酸塩、１０ｍｃｇ／ｍＬゲンタマイシン、３０単位／ｍＬのＤＮアーゼ及び１．０ｍｇ／ｍＬのコラゲナーゼ）中でのインキュベーションと、それに続く機械的解離（例えば、組織解離装置を用いる）によって作製されてもよい。腫瘍消化物は、腫瘍を酵素培地中に置き、腫瘍を約１分間機械的に解離した後、続いて３７℃５％ＣＯ２で３０分間インキュベートし、続いてごく小さい組織片しか存在しなくなるまで前述の条件下で機械的解離及びインキュベーションのサイクルを繰り返すことにより作製されてもよい。このプロセスの終了時、細胞懸濁液が多数の赤血球又は死細胞を含有する場合、FICOLL分枝状親水性多糖を使用した密度勾配分離を実施して、そうした細胞を除去してもよい。米国特許出願公開第２０１２／０２４４１３３  Ａ１号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるものなど、当該技術分野において公知の代替的な方法を用いてもよい。前述の方法のいずれも、ＴＩＬの拡大培養方法若しくはプロセス又は癌の治療方法に関して本明細書に記載される任意の実施形態において用いることができる。
【１０４６】
[001039]  ある実施形態において、ＴＩＬの迅速拡大培養プロセスは、先述のとおりＴ−１７５フラスコ及びガス透過性バッグ（Tran, et al., J. Immunother. 2008, 31, 742-51；Dudley, et al., J. Immunother. 2003, 26, 332-42）又はガス透過性培養ウェア（G-Rexフラスコ、Wilson Wolf ManufacturingCorporation、New Brighton, MN, USAから市販されている）を使用して実施し得る。Ｔ−１７５フラスコ内でのＴＩＬ迅速拡大培養については、１５０ｍＬの培地に懸濁された１×１０６個のＴＩＬを各Ｔ−１７５フラスコに加え得る。ＴＩＬはＴＮＦＲＳＦアゴニストと１  ＴＩＬ対１００  ＴＮＦＲＳＦアゴニストの比で培養してもよく、及び細胞は、３０００ＩＵ（国際単位）／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍｌの抗ＣＤ３抗体（例えばＯＫＴ−３）を補足したＣＭとAIM-V培地との１対１混合物中で培養した。Ｔ−１７５フラスコは３７℃５％ＣＯ２でインキュベートし得る。５日目に、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する５０／５０培地を使用して培地の半分を交換し得る。７日目に２つのＴ−１７５フラスコからの細胞を３Ｌバッグに合わせてもよく、その３００ｍｌのＴＩＬ懸濁液に５％ヒトＡＢ血清及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する３００ｍＬのAIM Vを加えた。各バッグの細胞数を毎日又は２日毎にカウントし、新鮮培地を加えて細胞数を０．５〜２．０×１０６細胞／ｍＬに保った。
【１０４７】
[001040]  ある実施形態において、１００ｃｍ２ガス透過性シリコン底の５００ｍＬ容量ガス透過性フラスコ（G-Rex 100、Wilson Wolf Manufacturing Corporation、NewBrighton, MN, USAから市販されている）におけるＴＩＬ迅速拡大培養については、５％ヒトＡＢ血清、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍＬの抗ＣＤ３（ＯＫＴ−３）を補足した４００ｍＬの５０／５０培地中で５×１０６又は１０×１０６個のＴＩＬをＴＮＦＲＳＦアゴニスト培養し得る。G-Rex 100フラスコは３７℃５％ＣＯ２でインキュベートし得る。５日目、２５０ｍＬの上清を取り出して遠心ボトルに入れ、１５００ｒｐｍ（毎分回転数；４９１×ｇ）で１０分間遠心し得る。５％ヒトＡＢ血清、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する１５０ｍＬの新鮮培地にこのＴＩＬペレットを再懸濁し、元のG-Rex 100フラスコに戻し加え得る。G-Rex 100フラスコ内でＴＩＬを連続的に拡大培養する場合、７日目に各フラスコ中に存在する３００ｍＬの培地に各G-Rex 100のＴＩＬを懸濁してもよく、この細胞懸濁液は、３つのG-Rex 100フラスコの播種に使用し得る３つの１００ｍＬアリコートに分割し得る。次に、５％ヒトＡＢ血清及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する１５０ｍＬのAIM-Vを各フラスコに加え得る。G-Rex 100フラスコは３７℃５％ＣＯ２でインキュベートしてもよく、４日後、各G-Rex 100フラスコに３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する１５０ｍＬのAIM-Vを加え得る。培養１４日目に細胞を回収し得る。
【１０４８】
[001041]  ある実施形態において、ＴＩＬは以下のとおり調製し得る。２ｍＭグルタミン（Mediatech,Inc.  Manassas, VA）、１００Ｕ／ｍＬペニシリン（Invitrogen Life Technologies）、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン（Invitrogen Life Technologies）、５％熱失活ヒトＡＢ血清（ValleyBiomedical, Inc.  Winchester, VA）及び６００ＩＵ／ｍＬ  ｒｈＩＬ−２（Chiron、Emeryville, CA）を補足したAIM-V培地（Invitrogen Life Technologies、Carlsbad, CA）を含む完全培地（ＣＭ）中で２ｍｍ３腫瘍断片を培養する。固形腫瘍の酵素消化のため、腫瘍標本をＲＰＭＩ−１６４０中にダイシングし、洗浄し、１５〜２２℃において８００ｒｐｍで５分間遠心し、酵素消化緩衝液（ＲＰＭＩ−１６４０中０．２ｍｇ／ｍＬコラゲナーゼ及び３０単位／ｍｌのＤＮアーゼ）に再懸濁した後、続いて室温で一晩回転させる。断片から樹立したＴＩＬはＣＭ中で３〜４週間成長させて、新鮮に拡大培養してもよく、又は１０％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含有する熱失活ＨＡＢ血清中に凍結保存して、試験時まで−１８０℃で保管してもよい。採取腹水から得られた腫瘍関連リンパ球（tumor associated lymphocyte：ＴＡＬ）を３×１０６細胞／ウェルで２４ウェルプレートのＣＭ中に播種した。ほぼ隔日で、低倍率倒立顕微鏡を使用してＴＩＬ成長を調べた。
【１０４９】
[001042]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を拡大培養する方法を含み、この方法は、少なくとも１つのＴＩＬを含むＴＩＬ集団を本明細書に記載されるＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させることを含み、ここで前記ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ＴＩＬの細胞表面上に発現する共刺激分子に特異的に結合する少なくとも１つの共刺激リガンドを含み、前記共刺激分子が前記共刺激リガンドに結合するとＴＩＬの増殖が誘導され、それによりＴＩＬが特異的に拡大する。
【１０５０】
[001043]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含む。
【１０５１】
[001044]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ここで細胞培養培地中の１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストの濃度は、独立に、５０ｎｇ／ｍＬ、１００ｎｇ／ｍＬ、５００ｎｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、３０μｇ／ｍＬ、４０μｇ／ｍＬ、５０μｇ／ｍＬ、６０μｇ／ｍＬ、７０μｇ／ｍＬ、８０μｇ／ｍＬ、９０μｇ／ｍＬ、及び１００μｇ／ｍＬからなる群から選択される。
【１０５２】
[001045]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ここで細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度のＩＬ−２と約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度のＯＫＴ−３抗体とを更に含む。
【１０５３】
[001046]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ここで細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度のＩＬ−２と約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度のＯＫＴ−３抗体とを更に含み、及び１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢアゴニストを含む。
【１０５４】
[001047]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ここで細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度のＩＬ−２と約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度のＯＫＴ−３抗体とを更に含み、及び１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストはＯＸ４０アゴニストを含む。
【１０５５】
[001048]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ここで細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度のＩＬ−２と約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度のＯＫＴ−３抗体とを更に含み、及び１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストは４−１ＢＢ及びＯＸ４０アゴニストを含む。
【１０５６】
[001049]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ここで細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度のＩＬ−２と約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度のＯＫＴ−３抗体とを更に含み、及び１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストはＣＤ２７アゴニストを含む。
【１０５７】
[001050]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ここで細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度のＩＬ−２と約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度のＯＫＴ−３抗体とを更に含み、及び１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストはＧＩＴＲアゴニストを含む。
【１０５８】
[001051]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ここで細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度のＩＬ−２と約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度のＯＫＴ−３抗体とを更に含み、及び１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストはＨＶＥＭアゴニストを含む。
【１０５９】
[001052]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、ここで細胞培養培地は、約３０００ＩＵ／ｍＬの初期濃度のＩＬ−２と約３０ｎｇ／ｍＬの初期濃度のＯＫＴ−３抗体とを更に含み、及び１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストはＣＤ９５アゴニストを含む。
【１０６０】
[001053]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地において７日の期間で少なくとも５０倍のＴＩＬ集団。
【１０６１】
[001054]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団を拡大培養する方法を提供し、この方法は、細胞培養培地中でＴＩＬ集団を１つ以上のＴＮＦＲＳＦアゴニストと接触させるステップを含み、細胞培養培地において７日の期間で少なくとも５０倍のＴＩＬ集団、及び拡大培養はガス透過性容器を使用して行われる。
【１０６２】
[001055]  ある実施形態において、ＲＥＰは、任意の好適な方法によって本開示のＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用してガス透過性容器内で行うことができる。例えば、ＴＩＬは、インターロイキン−２（ＩＬ−２）又はインターロイキン−１５（ＩＬ−１５）の存在下で非特異的Ｔ細胞受容体刺激を用いて迅速に拡大培養することができる。非特異的Ｔ細胞受容体刺激としては、例えば、抗ＣＤ３抗体、例えば約３０ｎｇ／ｍＬの、モノクローナル抗ＣＤ３抗体であるＯＫＴ−３（Ortho-McNeil、Raritan, NJ又はMiltenyi Biotech、Auburn, CAから市販されている）又はＵＨＣＴ−１（BioLegend、San Diego, CA, USAから市販されている）を挙げることができる。ＴＩＬは、任意選択で３００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ−２又はＩＬ−１５などのＴ細胞成長因子の存在下で、ヒト白血球抗原Ａ２（ＨＬＡ−Ａ２）結合ペプチド、例えば、０．３μＭ  ＭＡＲＴ−１：２６−３５（２７Ｌ）又はｇｐ１００：２０９−２１７（２１０Ｍ）など、任意選択でベクターから発現させることのできる、１つ又は複数のエピトープなど、その抗原性部分を含めた癌の１つ以上の抗原によってインビトロでＴＩＬを更に刺激することにより迅速に拡大培養し得る。他の好適な抗原としては、例えば、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、チロシナーゼ癌抗原、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＳＳＸ−２、及びＶＥＧＦＲ２、又はその抗原性部分を挙げることができる。ＴＩＬはまた、ＨＬＡ−Ａ２発現抗原提示細胞にパルスした癌の同じ１つ又は複数の抗原による再刺激によっても迅速に拡大培養し得る。或いは、ＴＩＬは、例えば照射自己リンパ球によるか、又は照射ＨＬＡ−Ａ２＋同種異系リンパ球及びＩＬ−２によって更に再刺激することができる。
【１０６３】
[001056]  ある実施形態において、ＴＩＬの拡大培養方法は、約５０００ｍＬ〜約２５０００ｍＬの細胞培養培地、約５０００ｍＬ〜約１００００ｍＬの細胞培養培地、又は約５８００ｍＬ〜約８７００ｍＬの細胞培養培地を使用することを含み得る。ある実施形態において、ＴＩＬの拡大培養方法は、約１０００ｍＬ〜約２０００ｍＬの細胞培地、約２０００ｍＬ〜約３０００ｍＬの細胞培養培地、約３０００ｍＬ〜約４０００ｍＬの細胞培養培地、約４０００ｍＬ〜約５０００ｍＬの細胞培養培地、約５０００ｍＬ〜約６０００ｍＬの細胞培養培地、約６０００ｍＬ〜約７０００ｍＬの細胞培養培地、約７０００ｍＬ〜約８０００ｍＬの細胞培養培地、約８０００ｍＬ〜約９０００ｍＬの細胞培養培地、約９０００ｍＬ〜約１００００ｍＬの細胞培養培地、約１００００ｍＬ〜約１５０００ｍＬの細胞培養培地、約１５０００ｍＬ〜約２００００ｍＬの細胞培養培地、又は約２００００ｍＬ〜約２５０００ｍＬの細胞培養培地を使用することを含み得る。ある実施形態において、ＴＩＬ数の拡大には１種類以下の細胞培養培地が使用される。任意の好適な細胞培養培地、例えば、AIM-V細胞培地（Ｌ−グルタミン、５０μＭ硫酸ストレプトマイシン、及び１０μＭ硫酸ゲンタマイシン）細胞培養培地（Invitrogen、Carlsbad CA）を使用し得る。この点に関して、本発明の方法では有利には、ＴＩＬ数の拡大に必要な培地の量及び培地の種類の数が減少する。ある実施形態において、ＴＩＬ数の拡大は、２日又は３日おき以下の頻度で細胞をフィードすることを含み得る。ガス透過性容器内で細胞の数を拡大すると、細胞の拡大培養に必要なフィーディング頻度が減少することにより細胞の数の拡大に必要な手順が簡便になる。
【１０６４】
[001057]  ある実施形態において、迅速拡大培養はガス透過性容器を使用して行われる。かかる実施形態は、細胞集団を約５×１０５細胞／ｃｍ２から１０×１０６〜３０×１０６細胞／ｃｍ２へと拡大培養することを可能にする。ある実施形態において、この拡大培養はフィーディングなしに行われる。ある実施形態において、この拡大培養は、培地がガス透過性フラスコ内に約１０ｃｍの高さで存在する限りフィーディングなしに行われる。ある実施形態において、これにはフィーディングはないが、１つ以上のサイトカインの添加はある。ある実施形態において、サイトカインは、サイトカインを培地と混合する必要は一切なしにボーラスとして添加することができる。かかる容器、装置、及び方法は当該技術分野において公知で、ＴＩＬの拡大培養に用いられており、米国特許出願公開第２０１４／０３７７７３９  Ａ１号、国際公開第２０１４／２１００３６  Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３／０１１５６１７  Ａ１号、国際公開第２０１３／１８８４２７  Ａ１号、米国特許出願公開第２０１１／０１３６２２８  Ａ１号、米国特許第８，８０９，０５０号、国際公開第２０１１／０７２０８８  Ａ２号、米国特許出願公開第２０１６／０２０８２１６  Ａ１号、米国特許出願公開第２０１２／０２４４１３３  Ａ１号、国際公開第２０１２／１２９２０１  Ａ１号、米国特許出願公開第２０１３／０１０２０７５  Ａ１号、米国特許第８，９５６，８６０号、国際公開第２０１３／１７３８３５  Ａ１号、及び米国特許出願公開第２０１５／０１７５９６６  Ａ１号（これらの開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるものが含まれる。かかるプロセスはまた、Jin, et al., J. Immunotherapy 2012, 35, 283-292（この開示は参照により本明細書に援用される）にも記載されている。
【１０６５】
[001058]  ある実施形態において、ガス透過性容器はG-Rex 10フラスコ（Wilson Wolf Manufacturing Corporation、NewBrighton, MN, USA）である。ある実施形態において、ガス透過性容器は１０ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器は４０ｍＬの細胞培養培地容量を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器は２回の培地交換後に１〜３億個のＴＩＬを提供する。
【１０６６】
[001059]  ある実施形態において、ガス透過性容器はG-Rex 100フラスコ（Wilson Wolf ManufacturingCorporation、New Brighton, MN, USA）である。ある実施形態において、ガス透過性容器は１００ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器は４５０ｍＬの細胞培養培地容量を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器は２回の培地交換後に１０〜３０億個のＴＩＬを提供する。
【１０６７】
[001060]  ある実施形態において、ガス透過性容器はG-Rex 100Mフラスコ（Wilson Wolf ManufacturingCorporation、New Brighton, MN, USA）である。ある実施形態において、ガス透過性容器は１００ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器は１０００ｍＬの細胞培養培地容量を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器は培地交換なしに１０〜３０億個のＴＩＬを提供する。
【１０６８】
[001061]  ある実施形態において、ガス透過性容器はG-Rex 100Lフラスコ（Wilson Wolf ManufacturingCorporation、New Brighton, MN, USA）である。ある実施形態において、ガス透過性容器は１００ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器は２０００ｍＬの細胞培養培地容量を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器は培地交換なしに１０〜３０億個のＴＩＬを提供する。
【１０６９】
[001062]  ある実施形態において、ガス透過性容器はG-Rex 24ウェルプレート（Wilson Wolf ManufacturingCorporation、New Brighton, MN, USA）である。ある実施形態において、ガス透過性容器はウェルを備えたプレートを含み、ここで各ウェルは２ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器はウェルを備えたプレートを含み、ここで各ウェルは８ｍＬの細胞培養培地容量を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器は２回の培地交換後にウェル当たり２０００〜６０００万個の細胞を提供する。
【１０７０】
[001063]  ある実施形態において、ガス透過性容器はG-Rex 6ウェルプレート（Wilson Wolf ManufacturingCorporation、New Brighton, MN, USA）である。ある実施形態において、ガス透過性容器はウェルを備えたプレートを含み、ここで各ウェルは１０ｃｍ２のガス透過性培養表面を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器はウェルを備えたプレートを含み、ここで各ウェルは４０ｍＬの細胞培養培地容量を含む。ある実施形態において、ガス透過性容器は２回の培地交換後にウェル当たり１〜３億個の細胞を提供する。
【１０７１】
[001064]  ある実施形態において、第１及び／又は第２のガス透過性容器内の細胞培地はろ過されていない。ろ過されていない細胞培地を使用すると、細胞数の拡大に必要な手順が簡便になり得る。ある実施形態において、第１及び／又は第２のガス透過性容器内の細胞培地はβ−メルカプトエタノール（ＢＭＥ）を含まない。
【１０７２】
[001065]  ある実施形態において、哺乳類から腫瘍組織試料を入手すること；細胞培地が中に入った第１のガス透過性容器内で腫瘍組織試料を培養すること；腫瘍組織試料からＴＩＬを入手すること；ＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用して細胞培地が中に入った第２のガス透過性容器内でＴＩＬ数を約１４〜約４２日間、例えば約２８日間拡大することを含む本方法の所要期間。
【１０７３】
[001066]  ある実施形態において、迅速拡大培養におけるＴＩＬ対ＴＮＦＲＳＦアゴニスト比（細胞数対モル数）は、約１対２５、約１対５０、約１対１００、約１対１２５、約１対１５０、約１対１７５、約１対２００、約１対２２５、約１対２５０、約１対２７５、約１対３００、約１対３２５、約１対３５０、約１対５００、約１対１０００、又は約１対１００００である。ある実施形態において、迅速拡大培養におけるＴＩＬ対ＴＮＦＲＳＦアゴニスト比は１対５０〜１対３００である。ある実施形態において、迅速拡大培養におけるＴＩＬ対ＴＮＦＲＳＦアゴニスト比は１対１００〜１対２００である。
【１０７４】
[001067]  ある実施形態において、ＴＩＬ対ＴＮＦＲＳＦアゴニスト比（ＴＩＬ：ＴＮＦＲＳＦアゴニスト、細胞数対モル数）は、１：５、１：１０、１：１５、１：２０、１：２５、１：３０、１：３５、１：４０、１：４５、１：５０、１：５５、１：６０、１：６５、１：７０、１：７５、１：８０、１：８５、１：９０、１：９５、１：１００、１：１０５、１：１１０、１：１１５、１：１２０、１：１２５、１：１３０、１：１３５、１：１４０、１：１４５、１：１５０、１：１５５、１：１６０、１：１６５、１：１７０、１：１７５、１：１８０、１：１８５、１：１９０、１：１９５、１：２００、１：２２５、１：２５０、１：２７５、１：３００、１：３５０、１：４００、１：４５０、１：５００、１：１０００、１：５０００、１：１００００、及び１：５００００からなる群から選択される。
【１０７５】
[001068]  ある実施形態において、ＴＩＬはガス透過性容器内で拡大培養される。ガス透過性容器は、米国特許出願公開第２００５／０１０６７１７  Ａ１号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるものを含め、当該技術分野において公知の方法、組成物、及び装置を用いたＰＢＭＣを使用したＴＩＬの拡大培養に用いられている。ある実施形態において、ＴＩＬはガス透過性バッグ内で拡大培養される。ある実施形態において、ＴＩＬは、Xuri Cell Expansion System W25（GE Healthcare）など、ガス透過性バッグ内でＴＩＬを拡大培養する細胞拡大培養システムを使用して拡大培養される。ある実施形態において、ＴＩＬは、Xuri Cell Expansion System W5（GE Healthcare）としても知られるWAVE Bioreactor Systemなど、ガス透過性バッグ内でＴＩＬを拡大培養する細胞拡大培養システムを使用して拡大培養される。ある実施形態において、細胞拡大培養システムは、約１００ｍＬ、約２００ｍＬ、約３００ｍＬ、約４００ｍＬ、約５００ｍＬ、約６００ｍＬ、約７００ｍＬ、約８００ｍＬ、約９００ｍＬ、約１Ｌ、約２Ｌ、約３Ｌ、約４Ｌ、約５Ｌ、約６Ｌ、約７Ｌ、約８Ｌ、約９Ｌ、約１０Ｌ、約１１Ｌ、約１２Ｌ、約１３Ｌ、約１４Ｌ、約１５Ｌ、約１６Ｌ、約１７Ｌ、約１８Ｌ、約１９Ｌ、約２０Ｌ、約２５Ｌ、及び約３０Ｌからなる群から選択される容積を有するガス透過性細胞バッグを含む。ある実施形態において、細胞拡大培養システムは、５０〜１５０ｍＬ、１５０〜２５０ｍＬ、２５０〜３５０ｍＬ、３５０〜４５０ｍＬ、４５０〜５５０ｍＬ、５５０〜６５０ｍＬ、６５０〜７５０ｍＬ、７５０〜８５０ｍＬ、８５０〜９５０ｍＬ、及び９５０〜１０５０ｍＬからなる群から選択される容積範囲を有するガス透過性細胞バッグを含む。ある実施形態において、細胞拡大培養システムは、１Ｌ〜２Ｌ、２Ｌ〜３Ｌ、３Ｌ〜４Ｌ、４Ｌ〜５Ｌ、５Ｌ〜６Ｌ、６Ｌ〜７Ｌ、７Ｌ〜８Ｌ、８Ｌ〜９Ｌ、９Ｌ〜１０Ｌ、１０Ｌ〜１１Ｌ、１１Ｌ〜１２Ｌ、１２Ｌ〜１３Ｌ、１３Ｌ〜１４Ｌ、１４Ｌ〜１５Ｌ、１５Ｌ〜１６Ｌ、１６Ｌ〜１７Ｌ、１７Ｌ〜１８Ｌ、１８Ｌ〜１９Ｌ、及び１９Ｌ〜２０Ｌからなる群から選択される容積範囲を有するガス透過性細胞バッグを含む。ある実施形態において、細胞拡大培養システムは、０．５Ｌ〜５Ｌ、５Ｌ〜１０Ｌ、１０Ｌ〜１５Ｌ、１５Ｌ〜２０Ｌ、２０Ｌ〜２５Ｌ、及び２５Ｌ〜３０Ｌからなる群から選択される容積範囲を有するガス透過性細胞バッグを含む。ある実施形態において、細胞拡大培養システムは、約３０分、約１時間、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、約６時間、約７時間、約８時間、約９時間、約１０時間、約１１時間、約１２時間、約２４時間、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約８日、約９日、約１０日、約１１日、約１２日、約１３日、約１４日、約１５日、約１６日、約１７日、約１８日、約１９日、約２０日、約２１日、約２２日、約２３日、約２４日、約２５日、約２６日、約２７日、及び約２８日の揺動時間を利用する。ある実施形態において、細胞拡大培養システムは、３０分〜１時間、１時間〜１２時間、１２時間〜１日、１日〜７日、７日〜１４日、１４日〜２１日、及び２１日〜２８日の揺動時間を利用する。ある���施形態において、細胞拡大培養システムは、約２回揺動／分、約５回揺動／分、約１０回揺動／分、約２０回揺動／分、約３０回揺動／分、及び約４０回揺動／分の揺動速度を利用する。ある実施形態において、細胞拡大培養システムは、２回揺動／分〜５回揺動／分、５回揺動／分〜１０回揺動／分、１０回揺動／分〜２０回揺動／分、２０回揺動／分〜３０回揺動／分、及び３０回揺動／分〜４０回揺動／分の揺動速度を利用する。ある実施形態において、細胞拡大培養システムは、約２°、約３°、約４°、約５°、約６°、約７°、約８°、約９°、約１０°、約１１°、及び約１２°の揺動角度を利用する。ある実施形態において、細胞拡大培養システムは、２°〜３°、３°〜４°、４°〜５°、５°〜６°、６°〜７°、７°〜８°、８°〜９°、９°〜１０°、１０°〜１１°、及び１１°〜１２°の揺動角度を利用する。
【１０７６】
[001069]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用してＴＩＬを拡大培養する方法は、優れた腫瘍応答性に関してＴＩＬを選択するステップを更に含む。当該技術分野において公知の任意の選択方法を用いることができる。例えば、優れた腫瘍応答性に関するＴＩＬの選択には、米国特許出願公開第２０１６／００１００５８  Ａ１号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載される方法が用いられてもよい。
【１０７７】
[001070]  ある実施形態において、細胞培養培地はＯＫＴ−３抗体を更に含む。好ましい実施形態において、細胞培養培地は約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．５ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ、約２．５ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約７．５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約１５ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約２５ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約３５ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ、約２００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ、及び約１μｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、０．１ｎｇ／ｍＬ〜１ｎｇ／ｍＬ、１ｎｇ／ｍＬ〜５ｎｇ／ｍＬ、５ｎｇ／ｍＬ〜１０ｎｇ／ｍＬ、１０ｎｇ／ｍＬ〜２０ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ〜３０ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬ〜４０ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ、又は５０ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は１０ｎｇ／ｍＬ〜６０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ−３抗体を含む。
【１０７８】
[001071]  ある実施形態において、細胞培養培地はＩＬ−２を更に含む。好ましい実施形態において、細胞培養培地は約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、約５００ＩＵ／ｍＬ、約７００ＩＵ／ｍＬ、約８００ＩＵ／ｍＬ、約１０００ＩＵ／ｍＬ、約１１００ＩＵ／ｍＬ、約１２００ＩＵ／ｍＬ、約１５００ＩＵ／ｍＬ、約２０００ＩＵ／ｍＬ、約２５００ＩＵ／ｍＬ、約３０００ＩＵ／ｍＬ、約３５００ＩＵ／ｍＬ、約４０００ＩＵ／ｍＬ、約４５００ＩＵ／ｍＬ、約５０００ＩＵ／ｍＬ、約５５００ＩＵ／ｍＬ、約６０００ＩＵ／ｍＬ、約６５００ＩＵ／ｍＬ、約７０００ＩＵ／ｍＬ、約７５００ＩＵ／ｍＬ、又は約８０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、５００〜１０００ＩＵ／ｍＬ、８００〜１２００ＩＵ／ｍＬ、１０００〜２０００ＩＵ／ｍＬ、２０００〜３０００ＩＵ／ｍＬ、３０００〜４０００ＩＵ／ｍＬ、４０００〜５０００ＩＵ／ｍＬ、５０００〜６０００ＩＵ／ｍＬ、６０００〜７０００ＩＵ／ｍＬ、７０００〜８０００ＩＵ／ｍＬ、又は８０００ＩＵ／ｍＬの間のＩＬ−２を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は１０〜６０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は５００〜２０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は８００〜１１００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。
【１０７９】
[001072]  ある実施形態において、細胞培養培地は、例えば国際公開第２０１５／１８９３５６  Ａ１号及び国際公開第２０１５／１８９３５６  Ａ１号（これらの各々の開示は本明細書に参照により援用される）記載されるとおり、ＩＬ−１５を更に含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．５ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ、約２．５ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約７．５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約１５ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約２５ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約３５ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ、約２００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ、又は約１μｇ／ｍＬのＩＬ−１５を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、０．１ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬ、２ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ、又は５ｎｇ／ｍＬ〜２５ｎｇ／ｍＬのＩＬ−１５を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、１０ｎｇ／ｍＬ〜２０ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ〜３０ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬ〜４０ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ、５０ｎｇ／ｍＬ〜６０ｎｇ／ｍＬ、６０ｎｇ／ｍＬ〜７０ｎｇ／ｍＬ、７０ｎｇ／ｍＬ〜８０ｎｇ／ｍＬ、８０ｎｇ／ｍＬ〜９０、又は９０ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬのＩＬ−１５を含む。
【１０８０】
[001073]  ある実施形態において、細胞培養培地は、例えば国際公開第２０１５／１８９３５６  Ａ１号及び同第２０１５／１８９３５６  Ａ１号（これらの各々の開示は本明細書に参照により援用される）に記載されるとおり、ＩＬ−２１を更に含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．５ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ、約２．５ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約７．５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約１５ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約２５ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約３５ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ、約２００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ、又は約１μｇ／ｍＬのＩＬ−２１を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、０．１ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬ、２ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ、又は５ｎｇ／ｍＬ〜２５ｎｇ／ｍＬのＩＬ−２１を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、１０ｎｇ／ｍＬ〜２０ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ〜３０ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬ〜４０ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ、５０ｎｇ／ｍＬ〜６０ｎｇ／ｍＬ、６０ｎｇ／ｍＬ〜７０ｎｇ／ｍＬ、７０ｎｇ／ｍＬ〜８０ｎｇ／ｍＬ、８０ｎｇ／ｍＬ〜９０、又は９０ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬのＩＬ−２１を含む。
【１０８１】
[001074]  ある実施形態において、細胞培養培地はＩＬ−４及び／又はＩＬ−７を更に含む。
【１０８２】
[001075]  ある実施形態において、本発明のＴＮＦＲＳＦアゴニストがＴ細胞の拡大培養に使用され得る。ＴＩＬの拡大培養について記載している本発明の前述の任意の実施形態もまた、Ｔ細胞の拡大培養に適用し得る。ある実施形態において、本発明のＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用してＣＤ８＋Ｔ細胞が拡大培養されてもよい。ある実施形態において、本発明のＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用してＣＤ４＋Ｔ細胞が拡大培養されてもよい。ある実施形態において、本発明のＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用して、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ−Ｔ）で形質導入されたＴ細胞が拡大培養されてもよい。ある実施形態において、本発明のＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用して、修飾Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を含むＴ細胞が拡大培養されてもよい。ＣＡＲ−Ｔ細胞は、当該技術分野において、例えば米国特許第７，０７０，９９５号；同第７，４４６，１９０号；同第８，３９９，６４５号；同第８，９１６，３８１号；及び同第９，３２８，１５６号（これらの開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるとおり、ＣＤ１９を含めた任意の好適な抗原に対して標的化し得る。修飾ＴＣＲ細胞は、当該技術分野において、例えば米国特許第８，３６７，８０４号及び同第７，５６９，６６４号（これらの開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるとおり、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、チロシナーゼ癌抗原、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＳＳＸ−２、及びＶＥＧＦＲ２を含めた任意の好適な抗原、又はその抗原性部分に対して標的化し得る。
【１０８３】
[001076]  別の実施形態において、プロセス２Ａとして知られる例示的ＴＩＬ製造／拡大培養プロセスが図１３に概略的に示される。特定の態様において、本方法は、対象／患者への投与時に複製サイクルを増加させる能力を有するＴＩＬを作製し、従って古いＴＩＬ（即ち、対象／患者への投与前に更なる回数の複製ラウンドが更に行われているＴＩＬ）に優る更なる治療利益を提供し得る。若いＴＩＬの特徴は、文献、例えば、Donia, at al., Scandinavian Journal of Immunology, 75:157-167 (2012)；Dudley et al., Clin Cancer Res, 16:6122-6131 (2010)；Huang et al., J Immunother, 28(3):258-267 (2005)；Besser et al., Clin Cancer Res, 19(17):OF1-OF9 (2013)；Besser et al., J Immunother 32:415-423 (2009)；Robbins, et al., J Immunol 2004；173:7125-7130；Shen et al., J Immunother, 30:123-129 (2007)；Zhou, et al., J Immunother, 28:53-62 (2005)；及びTran, et al., J Immunother, 31:742-751 (2008)（これらは全て、全体として参照により本明細書に援用される）に記載されている。
【１０８４】
[001077]  本明細書において考察されるとおり、本発明は、患者への移植前に凍結保存された（cyropreserved）ＴＩＬを再刺激することによりその代謝活性、ひいては相対的健康を増加させることに関するステップ、及び前記代謝的健康の試験方法を含み得る。概して本明細書に概説されるとおり、ＴＩＬは概して患者試料から採取し、操作することにより、患者への移植前にその数が拡大される。一部の実施形態において、ＴＩＬは任意選択で以下に考察するとおり遺伝的に操作されてもよい。
【１０８５】
[001078]  一部の実施形態において、ＴＩＬは凍結保存されてもよい。解凍後、ＴＩＬは患者への注入前に再刺激によってその代謝が高められてもよい。
【１０８６】
[001079]  一部の実施形態において、以下、並びに実施例及び図に詳細に考察するとおり、第１の拡大培養（プレＲＥＰと称されるプロセスを含む）は従来の拡大培養方法と比較して７〜１４日に短縮され、第２の拡大培養（ＲＥＰと称されるプロセスを含む）は７〜１４日に短縮される。
【１０８７】
[001080]  図１４は例示的２Ａプロセスを示す。図１４に示され、且つ以下に更に詳細に説明されるとおり、一部の実施形態において、第１の拡大培養（ステップＢ）は１１日に短縮され、第２の拡大培養（ステップＤ）は１１日に短縮される。一部の実施形態において、第１及び第２の拡大培養（ステップＢ及びステップＤ）の組み合わせは、以下、並びに実施例及び図に詳細に考察するとおり、２２日に短縮される。理解されるであろうとおり、図１４に示され、且つ以下に記載されるプロセスは例示であり、本明細書に記載される方法は、記載されるステップに対する代替及び追加並びに任意の組み合わせを包含する。
【１０８８】
[001081]  一般に、ＴＩＬは、初めは患者腫瘍試料から入手され（「初代ＴＩＬ」）、次に本明細書に記載されるとおりの更なる操作のためより大きい集団へと拡大培養され、任意選択で凍結保存され（cyropreserved）、本明細書に概説されるとおり再刺激され、及び任意選択でＴＩＬの健康の指標として表現型及び代謝パラメータが判定される。
【１０８９】
[001082]  患者腫瘍試料は当該技術分野において公知の方法を用いて、概して、外科的切除、針生検又はその他の、腫瘍とＴＩＬ細胞との混合物を含む試料を入手するための手段によって入手されてもよい。一般に、腫瘍試料は、原発腫瘍、浸潤性腫瘍又は転移性腫瘍を含めた任意の固形腫瘍からであってもよい。腫瘍試料はまた、血液学的悪性腫瘍から入手された腫瘍など、液性腫瘍であってもよい。固形腫瘍は、限定はされないが、乳癌、膵癌、前立腺癌、結腸直腸癌、肺癌、脳癌、腎癌、胃癌、及び皮膚癌（限定はされないが、扁平上皮癌、基底細胞癌、及び黒色腫を含む）を含めた任意の癌型のものであってもよい。一部の実施形態において、有用なＴＩＬは、特に高レベルのＴＩＬを有すると報告されていることに伴い悪性黒色腫腫瘍から入手される。一部の実施形態において、腫瘍は約１．５ｃｍより大きく約４ｃｍより小さい。一部の実施形態において、腫瘍は４ｃｍより小さい。
【１０９０】
[001083]  入手後、腫瘍試料は概して鋭的剥離を用いて１〜約８ｍｍ３の小片に断片化され、約２〜３ｍｍ３が特に有用である。ＴＩＬは酵素的腫瘍消化物を使用してこれらの断片から培養される。かかる腫瘍消化物は、酵素培地（例えば、ロズウェルパーク記念研究所（Roswell Park Memorial Institute：ＲＰＭＩ）１６４０緩衝液、２ｍＭグルタミン酸塩、１０ｍｃｇ／ｍＬゲンタマイシン、３０単位／ｍＬのＤＮアーゼ及び１．０ｍｇ／ｍＬのコラゲナーゼ）中でのインキュベーションと、それに続く機械的解離（例えば、組織解離装置を用いる）によって作製されてもよい。腫瘍消化物は、腫瘍を酵素培地中に置き、腫瘍を約１分間機械的に解離した後、続いて５％ＣＯ２下３７℃で３０分間インキュベートし、続いてごく小さい組織片しか存在しなくなるまで前述の条件下で機械的解離及びインキュベーションのサイクルを繰り返すことにより作製されてもよい。この処理の終了時、細胞懸濁液が多数の赤血球又は死細胞を含有する場合、FICOLL分枝状親水性多糖を使用した密度勾配分離を実施して、そうした細胞を除去してもよい。米国特許出願公開第２０１２／０２４４１３３  Ａ１号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されるものなど、当該技術分野において公知の代替的な方法を用いてもよい。前述の方法のいずれも、ＴＩＬの拡大培養方法及びプロセス又は癌の治療方法に関して本明細書に記載される任意の実施形態において用いることができる。
【１０９１】
[001084]  一般に、採取された細胞懸濁液は「初代細胞集団」又は「新鮮に採取した」細胞集団と呼ばれる。
【１０９２】
[001085]  ある実施形態において、ＴＩＬは初めに、患者から入手された酵素的腫瘍消化物及び腫瘍断片から培養することができる。
【１０９３】
[001086]  一部の実施形態において、ＴＩＬは腫瘍断片から入手される。一部の実施形態において、腫瘍断片は鋭的剥離で入手される。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１ｍｍ３〜１０ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１ｍｍ３〜８ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約２ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約３ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約４ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約５ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約６ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約７ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約８ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約９ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１０ｍｍ３である。一部の実施形態において、およその腫瘍断片は約８〜２７ｍｍ３である。一部の実施形態において、およその腫瘍断片は約１０〜２５ｍｍ３である。一部の実施形態において、およその腫瘍断片は約１５〜２５ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約８〜２０ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１５〜２０ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約８〜１５ｍｍ３である。一部の実施形態において、腫瘍断片は約８〜１０ｍｍ３である。
【１０９４】
[001087]  一部の実施形態において、腫瘍断片の数は約４０〜約５０腫瘍断片である。一部の実施形態において、腫瘍断片の数は約４０腫瘍断片である。一部の実施形態において、腫瘍断片の数は約５０腫瘍断片である。一部の実施形態において、腫瘍断片サイズは約８〜２７ｍｍ３であり、約５０腫瘍断片より少ない。
【１０９５】
[001088]  一部の実施形態において、ＴＩＬは腫瘍消化物から入手される。一部の実施形態では、腫瘍消化物は、酵素培地中、例えば限定はされないが、ＲＰＭＩ  １６４０、２ｍＭ  GlutaMAX、１０ｍｇ／ｍＬゲンタマイシン、３０Ｕ／ｍＬ  ＤＮアーゼ、及び１．０ｍｇ／ｍＬコラゲナーゼ中におけるインキュベーションと、それに続く機械的解離（GentleMACS、Miltenyi Biotec、Auburn, CA）によって作成した。腫瘍を酵素培地に置いた後、腫瘍を約１分間機械的に解離し得る。次に溶液を５％ＣＯ２下３７℃で３０分間インキュベートし、次にそれを再び約１分間機械的に破壊し得る。再び５％ＣＯ２下３７℃で３０分間インキュベートした後、腫瘍を３度目に約１分間機械的に破壊し得る。一部の実施形態において、３度目の機械的破壊後に大型の組織片が存在した場合、５％ＣＯ２下３７℃での更に３０分間のインキュベーションを伴い又は伴わず、１回又は２回の更なる機械的解離を試料に適用した。一部の実施形態において、最終回のインキュベーションの終了時に細胞懸濁液が多数の赤血球又は死細胞を含有した場合、Ficollを使用した密度勾配分離を実施して、そうした細胞を除去してもよい。
【１０９６】
[001089]  ステップＡにおいて腫瘍断片を剥離又は消化した後、得られた細胞は、腫瘍及び他の細胞よりもＴＩＬの成長に有利な条件下でＩＬ−２含有血清において培養される。一部の実施形態において、腫瘍消化物は、２ｍＬウェルにおいて、不活性化ヒトＡＢ血清を６０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２と共に含む培地中でインキュベートされる。この初代細胞集団は、数日、概して３〜１４日の期間にわたって培養され、それによりバルクＴＩＬ集団、概して約１×１０８個のバルクＴＩＬ細胞が得られる。一部の実施形態において、この初代細胞集団は７〜１４日の期間にわたって培養され、それによりバルクＴＩＬ集団、概して約１×１０８個のバルクＴＩＬ細胞が得られる。一部の実施形態において、この初代細胞集団は１０〜１４日の期間にわたって培養され、それによりバルクＴＩＬ集団、概して約１×１０８個のバルクＴＩＬ細胞が得られる。一部の実施形態において、この初代細胞集団は約１１日の期間にわたって培養され、それによりバルクＴＩＬ集団、概して約１×１０８個のバルクＴＩＬ細胞が得られる。一部の実施形態において、この初代細胞集団は約１１日の期間にわたって培養され、それによりバルクＴＩＬ集団、概して約２００×１０６個以下のバルクＴＩＬ細胞が得られる。
【１０９７】
[001090]  好ましい実施形態において、ＴＩＬの拡大培養は、以下及び本明細書に記載するとおりの初期バルクＴＩＬ拡大培養ステップ（図１４に図示されるとおりのステップＢ、これはプレＲＥＰと称されるプロセスを含み得る）と、それに続く、以下のステップＤ及び本明細書に記載するとおりの第２の拡大培養（ステップＤ、迅速拡大培養プロトコル（ＲＥＰ）ステップと称されるプロセスを含む）と、それに続く任意選択の凍結保存と、それに続く、以下及び本明細書に記載するとおりの第２のステップＤ（再刺激ＲＥＰステップと称されるプロセスを含む）を用いて実施されてもよい。このプロセスから得られたＴＩＬは、任意選択で、本明細書に記載されるとおり表現型特徴及び代謝パラメータに関して特徴付けられてもよい。
【１０９８】
[001091]  ＴＩＬ培養が２４ウェルプレートで、例えばCostar２４ウェル細胞培養クラスター、平底（Corning Incorporated、Corning, NYを使用して開始される実施形態において、各ウェルには、ＩＬ−２（６０００ＩＵ／ｍＬ；Chiron Corp.、Emeryville, CA）を含む２ｍＬの完全培地（ＣＭ）中、１×１０６個の腫瘍消化物細胞又は１個の腫瘍断片を播種することができる。一部の実施形態において、腫瘍断片は約１ｍｍ３〜１０ｍｍ３である。
【１０９９】
[001092]  一部の実施形態において、ステップＢのＣＭは、１０％ヒトＡＢ血清、２５ｍＭヘペス、及び１０ｍｇ／ｍＬゲンタマイシンを補足したGlutaMAX含有ＲＰＭＩ  １６４０からなる。培養が４０ｍＬ容量及び１０ｃｍ２ガス透過性シリコン底のガス透過性フラスコ（例えば、G-Rex10；Wilson Wolf Manufacturing、New Brighton, MN）内で開始される実施形態では（図１）、各フラスコに、１０〜４０ｍＬのＩＬ−２含有ＣＭ中の１０〜４０×１０６個の腫瘍消化物生細胞又は５〜３０個の腫瘍断片をロードした。G-Rex10及び２４ウェルプレートのいずれも、加湿インキュベーターにおいて５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートし、培養開始から５日後に培地の半分を取り出して新鮮なＣＭ及びＩＬ−２を補充し、５日目以降は２〜３日毎に培地の半分を交換した。
【１１００】
[001093]  ある実施形態において、細胞培養培地はＩＬ−２を更に含む。好ましい実施形態において、細胞培養培地は約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、約１０００ＩＵ／ｍＬ、約１５００ＩＵ／ｍＬ、約２０００ＩＵ／ｍＬ、約２５００ＩＵ／ｍＬ、約３０００ＩＵ／ｍＬ、約３５００ＩＵ／ｍＬ、約４０００ＩＵ／ｍＬ、約４５００ＩＵ／ｍＬ、約５０００ＩＵ／ｍＬ、約５５００ＩＵ／ｍＬ、約６０００ＩＵ／ｍＬ、約６５００ＩＵ／ｍＬ、約７０００ＩＵ／ｍＬ、約７５００ＩＵ／ｍＬ、又は約８０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、１０００〜２０００ＩＵ／ｍＬ、２０００〜３０００ＩＵ／ｍＬ、３０００〜４０００ＩＵ／ｍＬ、４０００〜５０００ＩＵ／ｍＬ、５０００〜６０００ＩＵ／ｍＬ、６０００〜７０００ＩＵ／ｍＬ、７０００〜８０００ＩＵ／ｍＬ、又は８０００ＩＵ／ｍＬの間のＩＬ−２を含む。
【１１０１】
[001094]  一部の実施形態において、実施例及び図で考察するとおり、第１の拡大培養（プレＲＥＰと称されるプロセスを含む；ステップＢ）プロセスは３〜１４日に短縮される。一部の実施形態において、ステップＢの第１の拡大培養は、実施例で考察され、且つ図４及び図５に示されるとおり、７〜１４日に短縮される。一部の実施形態において、ステップＢの第１の拡大培養は、実施例で考察され、且つ図４及び図５に示されるとおり、１０〜１４日に短縮される。一部の実施形態において、ステップＢの第１の拡大培養は、実施例で考察され、且つ図４及び図５に示されるとおり、１１日に短縮される。
【１１０２】
[001095]  一部の実施形態において、本明細書に記載されるとおりのステップＢプロセスの間に、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１５、及びＩＬ−２１並びにこれらの組み合わせが含まれ得る。
【１１０３】
[001096]  一部の実施形態において、ステップＢは閉鎖系バイオリアクターで実施される。一部の実施形態において、本明細書に記載されるとおりのＴＩＬ拡大培養には閉鎖系が用いられる。一部の実施形態において、単一のバイオリアクターが用いられる。一部の実施形態において、用いられる単一のバイオリアクターは、例えばGREX-10又はGREX-100である。
【１１０４】
[001097]  一部の実施形態において、ステップＢからのバルクＴＩＬ集団は、当該技術分野において公知の及び本明細書に記載される方法を用いて直ちに凍結保存することができる。或いは、バルクＴＩＬ集団は、以下で考察するとおり第２の拡大培養（ＲＥＰ）に供し、次に凍結保存してもよい。
【１１０５】
[001098]  一部の実施形態において、ステップＢのＴＩＬは保存されず、ステップＢのＴＩＬはステップＤに直接進められる。一部の実施形態において、本明細書に更に記載するとおり、この移行は閉鎖系で行われる。
【１１０６】
[001099]  一部の実施形態において、ＴＩＬ細胞集団は採取及び初期バルク処理後（即ち、ステップＡ及びステップＢの後）に数が拡大される。これは、本明細書では第２の拡大培養と称され、これには、当該技術分野で概して迅速拡大培養プロセス（ＲＥＰ）と称される拡大培養処理が含まれ得る。この第２の拡大培養は、概して、フィーダー細胞、サイトカイン源、及び抗ＣＤ３抗体を含め、幾つもの成分を含むガス透過性容器内の培養培地を使用して達成される。一部の実施形態において、第２の拡大培養には、第２の拡大培養で得られるＴＩＬの数を増加させるためのスケールアップが含まれ得る。
【１１０７】
[001100]  ある実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、本開示の方法を用いてガス透過性容器において実施することができる。例えば、ＴＩＬは、インターロイキン−２（ＩＬ−２）又はインターロイキン−１５（ＩＬ−１５）の存在下で非特異的Ｔ細胞受容体刺激を用いて迅速に拡大培養することができる。非特異的Ｔ細胞受容体刺激としては、例えば、約３０ｎｇ／ｍｌのＯＫＴ３、マウスモノクローナル抗ＣＤ３抗体（Ortho-McNeil、Raritan, NJ又はMiltenyi Biotech、Auburn, CAから市販されている）を挙げることができる。ＴＩＬは、任意選択で３００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ−２又はＩＬ−１５など、Ｔ細胞成長因子の存在下で、ヒト白血球抗原Ａ２（ＨＬＡ−Ａ２）結合ペプチド、例えば、０．３μΜ  ＭＡＲＴ−１：２６−３５（２７Ｌ）又はｇｐ１００：２０９−２１７（２１０Ｍ）など、任意選択でベクターから発現させることのできる、１つ又は複数のエピトープなど、その抗原性部分を含めた癌の１つ以上の抗原によるインビトロでのＴＩＬの更なる刺激により、迅速に拡大培養することができる。他の好適な抗原としては、例えば、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、チロシナーゼ癌抗原、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＳＳＸ−２、及びＶＥＧＦＲ２、又はその抗原性部分を挙げることができる。ＴＩＬはまた、ＨＬＡ−Ａ２発現抗原提示細胞にパルスした癌の同じ１つ又は複数の抗原による再刺激によっても迅速に拡大培養し得る。或いは、ＴＩＬは、例えば照射自己リンパ球によるか、又は照射ＨＬＡ−Ａ２＋同種異系リンパ球及びＩＬ−２によって更に再刺激することができる。
【１１０８】
[001101]  ある実施形態において、細胞培養培地はＩＬ−２を更に含む。好ましい実施形態において、細胞培養培地は約３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、約１０００ＩＵ／ｍＬ、約１５００ＩＵ／ｍＬ、約２０００ＩＵ／ｍＬ、約２５００ＩＵ／ｍＬ、約３０００ＩＵ／ｍＬ、約３５００ＩＵ／ｍＬ、約４０００ＩＵ／ｍＬ、約４５００ＩＵ／ｍＬ、約５０００ＩＵ／ｍＬ、約５５００ＩＵ／ｍＬ、約６０００ＩＵ／ｍＬ、約６５００ＩＵ／ｍＬ、約７０００ＩＵ／ｍＬ、約７５００ＩＵ／ｍＬ、又は約８０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、１０００〜２０００ＩＵ／ｍＬ、２０００〜３０００ＩＵ／ｍＬ、３０００〜４０００ＩＵ／ｍＬ、４０００〜５０００ＩＵ／ｍＬ、５０００〜６０００ＩＵ／ｍＬ、６０００〜７０００ＩＵ／ｍＬ、７０００〜８０００ＩＵ／ｍＬ、又は８０００ＩＵ／ｍＬの間のＩＬ−２を含む。
【１１０９】
[001102]  ある実施形態において、細胞培養培地はＯＫＴ３抗体を含む。好ましい実施形態において、細胞培養培地は約３０ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ３抗体を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．５ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ、約２．５ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ、約７．５ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ、約１５ｎｇ／ｍＬ、約２０ｎｇ／ｍＬ、約２５ｎｇ／ｍＬ、約３０ｎｇ／ｍＬ、約３５ｎｇ／ｍＬ、約４０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ、約６０ｎｇ／ｍＬ、約７０ｎｇ／ｍＬ、約８０ｎｇ／ｍＬ、約９０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ、約２００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ、及び約１μｇ／ｍＬのＯＫＴ３抗体を含む。ある実施形態において、細胞培養培地は、０．１ｎｇ／ｍＬ〜１ｎｇ／ｍＬ、１ｎｇ／ｍＬ〜５ｎｇ／ｍＬ、５ｎｇ／ｍＬ〜１０ｎｇ／ｍＬ、１０ｎｇ／ｍＬ〜２０ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ〜３０ｎｇ／ｍＬ、３０ｎｇ／ｍＬ〜４０ｎｇ／ｍＬ、４０ｎｇ／ｍＬ〜５０ｎｇ／ｍＬ、及び５０ｎｇ／ｍＬ〜１００ｎｇ／ｍＬのＯＫＴ３抗体を含む。
【１１１０】
[001103]  一部の実施形態において、本明細書に記載されるとおりのステップＤプロセスにおける第２の拡大培養の間には、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１５、及びＩＬ−２１並びにこれらの組み合わせが含まれ得る。
【１１１１】
[001104]  一部の実施形態において、第２の拡大培養は、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３、及び抗原提示フィーダー細胞を含む添加細胞培養培地において実施することができる。
【１１１２】
[001105]  一部の実施形態において、抗原提示フィーダー細胞（ＡＰＣ）はＰＢＭＣである。ある実施形態において、迅速拡大培養及び／又は第２の拡大培養におけるＴＩＬとＰＢＭＣ及び／又は抗原提示細胞との比は、約１対２５、約１対５０、約１対１００、約１対１２５、約１対１５０、約１対１７５、約１対２００、約１対２２５、約１対２５０、約１対２７５、約１対３００、約１対３２５、約１対３５０、約１対３７５、約１対４００、又は約１対５００である。ある実施形態において、迅速拡大培養及び／又は第２の拡大培養におけるＴＩＬとＰＢＭＣとの比は１対５０〜１対３００である。ある実施形態において、迅速拡大培養及び／又は第２の拡大培養におけるＴＩＬとＰＢＭＣとの比は１対１００〜１対２００である。
【１１１３】
[001106]  ある実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、バルクＴＩＬを１５０ｍｌ培地中の１００倍又は２００倍過剰の不活性化フィーダー細胞、３０ｍｇ／ｍＬ  ＯＫＴ３抗ＣＤ３抗体及び３０００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ−２と混合してフラスコ内で実施される。細胞を別の成長チャンバに移すまで培地補充が行われる（概して新鮮培地による呼吸（respiration）を介した３分の２の培地補充）。別の成長チャンバには、以下に更に十分に考察するとおりのGRexフラスコ及びガス透過性容器が含まれる。
【１１１４】
[001107]  一部の実施形態において、第２の拡大培養（ＲＥＰプロセスとも称される）は、実施例及び図で考察するとおり、７〜１４日に短縮される。一部の実施形態において、第２の拡大培養は１１日に短縮される。
【１１１５】
[001108]  ある実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、先述のとおりＴ−１７５フラスコ及びガス透過性バッグ（Tran, et al., J. Immunother. 2008, 31, 742-51；Dudley, et al., J. Immunother. 2003, 26, 332-42）又はガス透過性培養ウェア（G-Rexフラスコ）を使用して実施し得る。Ｔ−１７５フラスコ内でのＴＩＬ迅速拡大培養及び／又は第２の拡大培養については、１５０ｍＬの培地に懸濁された１×１０６個のＴＩＬを各Ｔ−１７５フラスコに加え得る。ＴＩＬは、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍｌの抗ＣＤ３を補足したＣＭとAIM-V培地との１対１混合物中で培養してもよい。Ｔ−１７５フラスコは３７℃５％ＣＯ２でインキュベートし得る。５日目に、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む５０／５０培地を使用して培地の半分を交換し得る。７日目に２つのＴ−１７５フラスコからの細胞を３Ｌバッグに合わせ、その３００ｍｌのＴＩＬ懸濁液に５％ヒトＡＢ血清及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含有する３００ｍＬのAIM Vを加えた。各バッグの細胞数を毎日又は２日毎にカウントし、新鮮培地を加えて細胞数を０．５〜２．０×１０６細胞／ｍＬに保った。
【１１１６】
[001109]  ある実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、１００ｃｍガス透過性シリコン底の５００ｍＬ容量ガス透過性フラスコ（G-Rex 100、Wilson Wolf Manufacturing Corporation、NewBrighton, MN, USAから市販されている）において実施してもよく、５％ヒトＡＢ血清、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍｌの抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）を添加した４００ｍＬの５０／５０培地中で５×１０６又は１０×１０６個のＴＩＬをＰＢＭＣと培養し得る。G-Rex 100フラスコは５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートし得る。５日目、２５０ｍＬの上清を取り出して遠心ボトルに入れ、１５００ｒｐｍ（４９１×ｇ）で１０分間遠心し得る。５％ヒトＡＢ血清、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む１５０ｍＬの新鮮培地にＴＩＬペレットを再懸濁し、元のG-Rex 100フラスコに戻し加え得る。G-Rex 100フラスコ内でＴＩＬを連続的に拡大培養するときは、７日目に各G-Rex 100のＴＩＬを各フラスコ内に存在する３００ｍＬの培地に懸濁してもよく、及び細胞懸濁液を３つの１００ｍＬアリコートに分割してもよく、それらを３つのG-Rex 100フラスコの播種に使用してもよい。次に、５％ヒトＡＢ血清及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む１５０ｍＬのAIM-Vを各フラスコに加え得る。G-Rex 100フラスコは５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートしてもよく、４日後、各G-Rex100フラスコに３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む１５０ｍＬのAIM-Vを加え得る。細胞は培養１４日目に回収し得る。
【１１１７】
[001110]  ある実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、バルクＴＩＬを１５０ｍｌ培地中の１００倍又は２００倍過剰の不活性化フィーダー細胞、３０ｍｇ／ｍＬ  ＯＫＴ３抗ＣＤ３抗体及び３０００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ−２と混合してフラスコ内で実施される。細胞を別の成長チャンバに移すまで培地補充が行われる（概して新鮮培地による呼吸（respiration）を介した３分の２の培地補充）。別の成長チャンバには、以下に更に十分に考察するとおりのGRexフラスコ及びガス透過性容器が含まれる。
【１１１８】
[001111]  ある実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養が実施され、これは優れた腫瘍応答性に関してＴＩＬを選択するステップを更に含む。当該技術分野において公知の任意の選択方法を用いることができる。例えば、米国特許出願公開第２０１６／００１００５８  Ａ１号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載される方法が、優れた腫瘍応答性に関するＴＩＬの選択に用いられてもよい。
【１１１９】
[001112]  ＴＩＬのＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養は、先述のとおりＴ−１７５フラスコ及びガス透過性バッグ（Tran KQ, Zhou J, Durflinger KH, et al., 2008, J Immunother.,31:742-751及びDudley ME, Wunderlich JR, Shelton TE, etal. 2003, J Immunother., 26:332-342）又はガス透過性G-Rexフラスコを使用して実施することができる。一部の実施形態において、ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養はフラスコを使用して実施される。一部の実施形態において、ＲＥＰはガス透過性G-Rexフラスコを使用して実施される。Ｔ−１７５フラスコにおけるＴＩＬ  ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養については、約１×１０６個のＴＩＬを約１５０ｍＬの培地中に懸濁し、これを各Ｔ−１７５フラスコに加える。ＴＩＬは、「フィーダー」細胞としての照射（５０Ｇｙ）された同種異系ＰＢＭＣと１対１００の比で培養し、及び細胞は、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍＬの抗ＣＤ３を添加したＣＭとAIM-V培地との１対１混合物（５０／５０培地）中で培養した。Ｔ−１７５フラスコは５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートする。一部の実施形態において、５日目に３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む５０／５０培地を使用して培地の半分を交換する。一部の実施形態において、７日目、２つのＴ−１７５フラスコからの細胞を３Ｌバッグに合わせ、その３００ｍＬのＴＩＬ懸濁液に、５％ヒトＡＢ血清及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む３００ｍＬのAIM-Vを加える。毎日又は２日毎に各バッグの細胞数をカウントしてもよく、新鮮培地を加えて細胞数を約０．５〜約２．０×１０６細胞／ｍＬに保ち得る。
【１１２０】
[001113]  １００ｃｍ２ガス透過性シリコン底の５００ｍＬ容量フラスコ（G-Rex100、Wilson Wolf）におけるＴＩＬ  ＲＥＰ及び／又は第２の拡大培養については（図１）、３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び３０ｎｇ／ｍＬの抗ＣＤ３を添加した４００ｍＬの５０／５０培地中で約５×１０６又は１０×１０６個のＴＩＬを照射同種異系ＰＢＭＣと１対１００の比で培養する。G-Rex100フラスコを５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートする。一部の実施形態において、５日目、２５０ｍＬの上清を取り出して遠心ボトルに入れ、１５００ｒｐｍ（４９１ｇ）で１０分間遠心する。次に３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む１５０ｍＬの新鮮５０／５０培地にＴＩＬペレットを再懸濁し、元のG-Rex100フラスコに加え戻し得る。ＴＩＬがG-Rex100フラスコ内で連続的に拡大培養される実施形態では、７日目に各G-Rex100内のＴＩＬを各フラスコ内に存在する３００ｍＬの培地に懸濁し、及び細胞懸濁液を３つの１００ｍＬアリコートに分割しており、それらを３つのG-Rex100フラスコの播種に使用する。次に、各フラスコに、５％ヒトＡＢ血清及び３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む１５０ｍＬのAIM-Vを加える。G-Rex100フラスコを５％ＣＯ２下３７℃でインキュベートし、４日後、各G-Rex100フラスコに３０００ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２を含む１５０ｍＬのAIM-Vを加える。培養１４日目に細胞を回収する。
【１１２１】
[001114]  ある実施形態において、本明細書に記載される第２の拡大培養手順には（ＲＥＰを含む、ステップＤ）、ＲＥＰ  ＴＩＬ拡大培養の間及び／又は第２の拡大培養の間に過剰量のフィーダー細胞が必要である。多くの実施形態において、フィーダー細胞は、健常供血者からの標準的な全血ユニットから入手される末梢血単核球（ＰＢＭＣ）である。ＰＢＭＣは、Ficoll-Paque勾配分離などの標準方法を用いて入手される。
【１１２２】
[001115]  実施例、詳細には、照射同種異系ＰＢＭＣの複製無能力を判定するための例示的プロトコルを提供する実施例１４に記載されるとおり、一般に、同種異系ＰＢＭＣは照射又は熱処理のいずれかで不活性化され、ＲＥＰ手順において使用される。
【１１２３】
[001116]  一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、１４日目における生細胞の総数が、ＲＥＰの０日目及び／又は第２の拡大培養の０日目（即ち第２の拡大培養の開始日）に培養にかけた初期生細胞数より少ない場合、複製能がないと見なされ、本明細書に記載されるＴＩＬ拡大培養手順における使用が認められる。
【１１２４】
[001117]  一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、７日目及び１４日目に、ＯＫＴ３及びＩＬ−２の存在下で培養した生細胞の総数が、ＲＥＰの０日目及び／又は第２の拡大培養の０日目（即ち第２の拡大培養の開始日）に培養にかけた初期生細胞数から増加していない場合、複製能がないと見なされ、本明細書に記載されるＴＩＬ拡大培養手順における使用が認められる。一部の実施形態において、ＰＢＭＣは３０ｎｇ／ｍｌ  ＯＫＴ３抗体及び３０００ＩＵ／ｍｌ  ＩＬ−２の存在下で培養される。
【１１２５】
[001118]  一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、７日目及び１４日目に、ＯＫＴ３及びＩＬ−２の存在下で培養した生細胞の総数が、ＲＥＰの０日目及び／又は第２の拡大培養の０日目（即ち第２の拡大培養の開始日）に培養にかけた初期生細胞数から増加していない場合、複製能がないと見なされ、本明細書に記載されるＴＩＬ拡大培養手順における使用が認められる。一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、５〜６０ｎｇ／ｍｌ  ＯＫＴ３抗体及び１０００〜６０００ＩＵ／ｍｌ  ＩＬ−２の存在下で培養される。一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、１０〜５０ｎｇ／ｍｌ  ＯＫＴ３抗体及び２０００〜５０００ＩＵ／ｍｌ  ＩＬ−２の存在下で培養される。一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、２０〜４０ｎｇ／ｍｌ  ＯＫＴ３抗体及び２０００〜４０００ＩＵ／ｍｌ  ＩＬ−２の存在下で培養される。一部の実施形態において、ＰＢＭＣは、２５〜３５ｎｇ／ｍｌ  ＯＫＴ３抗体及び２５００〜３５００ＩＵ／ｍｌ  ＩＬ−２の存在下で培養される。
【１１２６】
[001119]  ある実施形態において、ＲＥＰ段階では、ＰＢＭＣの代わりとして、又はそれと組み合わせて人工抗原提示細胞が使用される。
【１１２７】
[001120]  本明細書に記載される拡大培養方法は、当該技術分野において公知のとおり、概して、高用量のサイトカイン、詳細にはＩＬ−２を含む培養培地を使用する。
【１１２８】
[001121]  或いは、ＴＩＬの迅速拡大培養及び／又は第２の拡大培養にサイトカインの組み合わせを使用することが更に可能であり、ＩＬ−２、ＩＬ−１５及びＩＬ−２１のうちの２つ以上の組み合わせについては、概して国際公開第２０１５／１８９３５６号及びＷ国際公開第２０１５／１８９３５７号（本明細書によって全体として参照により明示的に援用される）に概説されるとおりである。従って、可能な組み合わせとしては、ＩＬ−２とＩＬ−１５、ＩＬ−２とＩＬ−２１、ＩＬ−１５とＩＬ−２１とＩＬ−２、ＩＬ−１５とＩＬ−２１が挙げられ、後者には多くの実施形態において特定の使用が見出される。これらの明細書に記載されるとおり、サイトカインの組み合わせを使用することは、特にリンパ球、詳細にはＴ細胞の生成に有利である。
【１１２９】
[001122]  一部の実施形態において、本明細書に記載される拡大培養方法（ＲＥＰを含む）で使用される培養培地はまた、抗ＣＤ３抗体も含む。抗ＣＤ３抗体をＩＬ−２と併用すると、ＴＩＬ集団においてＴ細胞活性化及び細胞分裂が誘導される。この効果は完全長抗体並びにＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片で見ることができ、前者が概して好ましい；例えば、Tsoukas et al., J. Immunol. 1985, 135, 1719（本明細書によって全体として参照により援用される）を参照のこと。
【１１３０】
[001123]  当業者は理解するであろうとおり、本発明において使用が見出される好適な抗ヒトＣＤ３抗体は、限定はされないが、マウス、ヒト、霊長類、ラット、及びイヌ抗体を含めた、様々な哺乳類からの抗ヒトＣＤ３ポリクローナル及びモノクローナル抗体を含め、幾つも存在する。詳細な実施形態では、ＯＫＴ３抗ＣＤ３抗体が使用される（Ortho-McNeil、Raritan, NJ又はMiltenyi Biotech、Auburn, CAから市販されている）。
【１１３１】
[001124]  第２の拡大培養ステップの後、細胞は回収することができる。一部の実施形態において、ＴＩＬは、１、２、３、４回又はそれ以上の第２の拡大培養ステップの後に回収される。
【１１３２】
[001125]  ＴＩＬは、例えば遠心によることを含め、任意の適切な且つ無菌の方法で回収することができる。ＴＩＬ回収方法は当該技術分野において周知であり、本プロセスと共に任意のかかる公知の方法を用いることができる。一部の実施形態において、ＴＩＬは自動システムを使用して回収される。一部の実施形態において、ＴＩＬは半自動システムを使用して回収される。一部の実施形態において、第２の拡大培養からのＴＩＬは半自動機械を使用して回収される。一部の実施形態において、LOVOシステムが利用される（例えばBenchmark Electronicsから市販されている）。一部の実施形態において、回収ステップには、ＴＩＬの洗浄、ＴＩＬの製剤化、及び／又はＴＩＬのアリコート分けが含まれる。一部の実施形態において、細胞は任意選択で、回収後に、又は回収の一環として、凍結される。
【１１３３】
[001126]  ステップＡ〜Ｅが完了した後、細胞は患者への投与における使用のため容器に移される。
【１１３４】
[001127]  ある実施形態において、本開示のＡＰＣを使用して拡大培養したＴＩＬは、医薬組成物として患者に投与される。ある実施形態において、医薬組成物は滅菌緩衝液中のＴＩＬの懸濁液である。本開示のＰＢＭＣを使用して拡大培養したＴＩＬは、当該技術分野において公知のとおりの任意の好適な経路によって投与されてよい。一部の実施形態において、Ｔ細胞は単回動脈内又は静脈内注入として投与され、これは好ましくは約３０〜６０分間継続される。他の好適な投与経路としては、腹腔内、髄腔内、及びリンパ内が挙げられる。
【１１３５】
[001128]  理解されるであろうとおり、上記に記載されるステップＡ〜Ｆのいずれも、任意の回数だけ繰り返すことができ、更に、上記の記載と異なる順序で実施してもよい。
【１１３６】
[001129]  一部の実施形態において、拡大培養ステップのうちの１つ以上を最終製剤化ステップＦの前に繰り返してもよい。かかる追加の拡大培養ステップは、上記に記載される第１及び／又は第２の拡大培養ステップの要素を含み得る（例えば、記載されている細胞培養培地中の構成成分を含み得る）。追加の拡大培養ステップは、更に、追加の拡大培養ステップの前及び／又はその最中に細胞培養培地に補足される細胞培養培地中の追加の構成成分を含め、追加の要素を含み得る。
【１１３７】
[001130]  更なる実施形態において、図１４及び上記の段落に記載される拡大培養ステップのいずれも、その前又は後に凍結保存ステップがあってよく、ここでは拡大培養ステップの間に作製される細胞が、製造／拡大培養プロセスの残りのステップに必要になるまで、貯蔵に関する当該技術分野において公知の方法を用いて保存される。
【１１３８】
[001131]  ある実施形態において、本発明は、前述の方法のいずれかに係るＴＩＬを拡大培養するためのキットを含む。
【１１３９】
ＴＩＬの医薬組成物、投薬量、及び投与レジメン
[001132]  ある実施形態において、本開示のプロセス及び方法を使用して拡大培養したＴＩＬは、医薬組成物として患者に投与される。ある実施形態において、医薬組成物は滅菌緩衝液中のＴＩＬの懸濁液である。本開示のプロセス及び方法を使用して拡大培養したＴＩＬは、当該技術分野において公知のとおりの任意の好適な経路によって投与されてよい。好ましくは、ＴＩＬは単回動脈内又は静脈内注入として投与され、これは好ましくは約３０〜６０分間継続される。他の好適な投与経路としては、腹腔内、髄腔内、及びリンパ内投与が挙げられる。
【１１４０】
[001133]  任意の好適な用量のＴＩＬを投与することができる。好ましくは、約２．３×１０１０〜約１３．７×１０１０  ＴＩＬが投与され、特に癌が黒色腫である場合、平均約７．８×１０１０  ＴＩＬである。ある実施形態において、約１．２×１０１０〜約４．３×１０１０のＴＩＬが投与される。
【１１４１】
[001134]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの数は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、及び９×１０１３である。ある実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの数は、１×１０６〜５×１０６、５×１０６〜１×１０７、１×１０７〜５×１０７、５×１０７〜１×１０８、１×１０８〜５×１０８、５×１０８〜１×１０９、１×１０９〜５×１０９、５×１０９〜１×１０１０、１×１０１０〜５×１０１０、５×１０１０〜１×１０１１、５×１０１１〜１×１０１２、１×１０１２〜５×１０１２、及び５×１０１２〜１×１０１３の範囲である。
【１１４２】
[001135]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの濃度は、例えば、医薬組成物の１００％、９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．４％、０．３％、０．２％、０．１％、０．０９％、０．０８％、０．０７％、０．０６％、０．０５％、０．０４％、０．０３％、０．０２％、０．０１％、０．００９％、０．００８％、０．００７％、０．００６％、０．００５％、０．００４％、０．００３％、０．００２％、０．００１％、０．０００９％、０．０００８％、０．０００７％、０．０００６％、０．０００５％、０．０００４％、０．０００３％、０．０００２％又は０．０００１％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖ未満である。
【１１４３】
[001136]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの濃度は、医薬組成物の９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１９．７５％、１９．５０％、１９．２５％  １９％、１８．７５％、１８．５０％、１８．２５％  １８％、１７．７５％、１７．５０％、１７．２５％  １７％、１６．７５％、１６．５０％、１６．２５％  １６％、１５．７５％、１５．５０％、１５．２５％  １５％、１４．７５％、１４．５０％、１４．２５％  １４％、１３．７５％、１３．５０％、１３．２５％  １３％、１２．７５％、１２．５０％、１２．２５％  １２％、１１．７５％、１１．５０％、１１．２５％  １１％、１０．７５％、１０．５０％、１０．２５％  １０％、９．７５％、９．５０％、９．２５％  ９％、８．７５％、８．５０％、８．２５％  ８％、７．７５％、７．５０％、７．２５％  ７％、６．７５％、６．５０％、６．２５％  ６％、５．７５％、５．５０％、５．２５％  ５％、４．７５％、４．５０％、４．２５％、４％、３．７５％、３．５０％、３．２５％、３％、２．７５％、２．５０％、２．２５％、２％、１．７５％、１．５０％、１２５％、１％、０．５％、０．４％、０．３％、０．２％、０．１％、０．０９％、０．０８％、０．０７％、０．０６％、０．０５％、０．０４％、０．０３％、０．０２％、０．０１％、０．００９％、０．００８％、０．００７％、０．００６％、０．００５％、０．００４％、０．００３％、０．００２％、０．００１％、０．０００９％、０．０００８％、０．０００７％、０．０００６％、０．０００５％、０．０００４％、０．０００３％、０．０００２％又は０．０００１％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ、又はｖ／ｖ超である。
【１１４４】
[001137]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの濃度は、医薬組成物の約０．０００１％〜約５０％、約０．００１％〜約４０％、約０．０１％〜約３０％、約０．０２％〜約２９％、約０．０３％〜約２８％、約０．０４％〜約２７％、約０．０５％〜約２６％、約０．０６％〜約２５％、約０．０７％〜約２４％、約０．０８％〜約２３％、約０．０９％〜約２２％、約０．１％〜約２１％、約０．２％〜約２０％、約０．３％〜約１９％、約０．４％〜約１８％、約０．５％〜約１７％、約０．６％〜約１６％、約０．７％〜約１５％、約０．８％〜約１４％、約０．９％〜約１２％又は約１％〜約１０％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖの範囲である。
【１１４５】
[001138]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの濃度は、医薬組成物の約０．００１％〜約１０％、約０．０１％〜約５％、約０．０２％〜約４．５％、約０．０３％〜約４％、約０．０４％〜約３．５％、約０．０５％〜約３％、約０．０６％〜約２．５％、約０．０７％〜約２％、約０．０８％〜約１．５％、約０．０９％〜約１％、約０．１％〜約０．９％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖの範囲である。
【１１４６】
[001139]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの量は、１０ｇ、９．５ｇ、９．０ｇ、８．５ｇ、８．０ｇ、７．５ｇ、７．０ｇ、６．５ｇ、６．０ｇ、５．５ｇ、５．０ｇ、４．５ｇ、４．０ｇ、３．５ｇ、３．０ｇ、２．５ｇ、２．０ｇ、１．５ｇ、１．０ｇ、０．９５ｇ、０．９ｇ、０．８５ｇ、０．８ｇ、０．７５ｇ、０．７ｇ、０．６５ｇ、０．６ｇ、０．５５ｇ、０．５ｇ、０．４５ｇ、０．４ｇ、０．３５ｇ、０．３ｇ、０．２５ｇ、０．２ｇ、０．１５ｇ、０．１ｇ、０．０９ｇ、０．０８ｇ、０．０７ｇ、０．０６ｇ、０．０５ｇ、０．０４ｇ、０．０３ｇ、０．０２ｇ、０．０１ｇ、０．００９ｇ、０．００８ｇ、０．００７ｇ、０．００６ｇ、０．００５ｇ、０．００４ｇ、０．００３ｇ、０．００２ｇ、０．００１ｇ、０．０００９ｇ、０．０００８ｇ、０．０００７ｇ、０．０００６ｇ、０．０００５ｇ、０．０００４ｇ、０．０００３ｇ、０．０００２ｇ、又は０．０００１ｇ以下である。
【１１４７】
[001140]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬの量は、０．０００１ｇ、０．０００２ｇ、０．０００３ｇ、０．０００４ｇ、０．０００５ｇ、０．０００６ｇ、０．０００７ｇ、０．０００８ｇ、０．０００９ｇ、０．００１ｇ、０．００１５ｇ、０．００２ｇ、０．００２５ｇ、０．００３ｇ、０．００３５ｇ、０．００４ｇ、０．００４５ｇ、０．００５ｇ、０．００５５ｇ、０．００６ｇ、０．００６５ｇ、０．００７ｇ、０．００７５ｇ、０．００８ｇ、０．００８５ｇ、０．００９ｇ、０．００９５ｇ、０．０１ｇ、０．０１５ｇ、０．０２ｇ、０．０２５ｇ、０．０３ｇ、０．０３５ｇ、０．０４ｇ、０．０４５ｇ、０．０５ｇ、０．０５５ｇ、０．０６ｇ、０．０６５ｇ、０．０７ｇ、０．０７５ｇ、０．０８ｇ、０．０８５ｇ、０．０９ｇ、０．０９５ｇ、０．１ｇ、０．１５ｇ、０．２ｇ、０．２５ｇ、０．３ｇ、０．３５ｇ、０．４ｇ、０．４５ｇ、０．５ｇ、０．５５ｇ、０．６ｇ、０．６５ｇ、０．７ｇ、０．７５ｇ、０．８ｇ、０．８５ｇ、０．９ｇ、０．９５ｇ、１ｇ、１．５ｇ、２ｇ、２．５、３ｇ、３．５、４ｇ、４．５ｇ、５ｇ、５．５ｇ、６ｇ、６．５ｇ、７ｇ、７．５ｇ、８ｇ、８．５ｇ、９ｇ、９．５ｇ、又は１０ｇ超である。
【１１４８】
[001141]  本発明の医薬組成物中に提供されるＴＩＬは、広い投薬量範囲にわたって有効である。正確な投薬量は、投与経路、化合物の投与形態、治療対象の性別及び年齢、治療対象の体重、並びに主治医の優先傾向及び経験に依存することになる。臨床的に確立されたＴＩＬの投薬量もまた、適宜用いられ得る。ＴＩＬの投薬量など、本明細書の方法を用いて投与される医薬組成物の量は、治療下のヒト又は哺乳類、障害又は病態の重症度、投与速度、医薬品有効成分の性質及び処方医師の裁量に依存することになる。
【１１４９】
[001142]  一部の実施形態において、ＴＩＬは単回用量で投与されてもよい。かかる投与は、注射、例えば静脈内注射によってもよい。一部の実施形態において、ＴＩＬは複数回用量で投与されてもよい。投与は、年１回、２回、３回、４回、５回、６回、又は６回超であってもよい。投与は、月１回、２週間に１回、週１回、又は隔日１回であってもよい。ＴＩＬの投与は必要な限り継続されてもよい。
【１１５０】
[001143]  一部の実施形態において、ＴＩＬの有効投薬量は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、２×１０１２、３×１０１２、４×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、及び９×１０１３である。一部の実施形態において、ＴＩＬの有効投薬量は、１×１０６〜５×１０６、５×１０６〜１×１０７、１×１０７〜５×１０７、５×１０７〜１×１０８、１×１０８〜５×１０８、５×１０８〜１×１０９、１×１０９〜５×１０９、５×１０９〜１×１０１０、１×１０１０〜５×１０１０、５×１０１０〜１×１０１１、５×１０１１〜１×１０１２、１×１０１２〜５×１０１２、及び５×１０１２〜１×１０１３の範囲である。
【１１５１】
[001144]  一部の実施形態において、ＴＩＬの有効投薬量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約４．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．２ｍｇ／ｋｇ、約０．３５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．３ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約１．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇ、約０．５５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．６５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約０．７５ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１．８５ｍｇ／ｋｇ、約１．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ  ｍｇ〜約１．６ｍｇ／ｋｇ、約１．３５ｍｇ／ｋｇ〜約１．５ｍｇ／ｋｇ、約２．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約２．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．４ｍｇ／ｋｇ、約２．４ｍｇ／ｋｇ〜約３．３ｍｇ／ｋｇ、約２．６ｍｇ／ｋｇ〜約３．１５ｍｇ／ｋｇ、約２．７ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、約２．８ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、又は約２．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２．９５ｍｇ／ｋｇの範囲である。
【１１５２】
[001145]  一部の実施形態において、ＴＩＬの有効投薬量は、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５ｍｇ〜約４５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約４０ｍｇ、約１５ｍｇ〜約３５ｍｇ、約２０ｍｇ〜約３０ｍｇ、約２３ｍｇ〜約２８ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約６０ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約７０ｍｇ〜約１３０ｍｇ、約８０ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約９０ｍｇ〜約１１０ｍｇ、又は約９５ｍｇ〜約１０５ｍｇ、約９８ｍｇ〜約１０２ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１６０ｍｇ〜約２４０ｍｇ、約１７０ｍｇ〜約２３０ｍｇ、約１８０ｍｇ〜約２２０ｍｇ、約１９０ｍｇ〜約２１０ｍｇ、約１９５ｍｇ〜約２０５ｍｇ、又は約１９８〜約２０７ｍｇの範囲である。
【１１５３】
[001146]  有効量のＴＩＬは、鼻腔内及び経皮経路、動脈内注射によること、静脈内、腹腔内、非経口的、筋肉内、皮下、局所、移植又は腫瘍への直接注射によること、又は吸入によることを含め、同様の有用性を有する薬剤について一般に認められている任意の投与方式により、単回用量又は複数回用量のいずれかで投与され得る。
【１１５４】
ＴＮＦＲＳＦアゴニストの医薬組成物、投薬量、及び投与レジメン
[001147]  一実施形態において、本発明は、本明細書に記載される疾患及び病態の治療における使用のための医薬組成物を提供する。好ましい実施形態において、本発明は、過剰増殖性疾患の治療における使用のための、以下に記載されるものを含めた医薬組成物を提供する。好ましい実施形態において、本発明は、癌の治療における使用のための、以下に記載されるものを含めた医薬組成物を提供する。
【１１５５】
[001148]  一部の実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト抗体製剤は、トリス塩酸塩、塩化ナトリウム、マンニトール、ペンテト酸、ポリソルベート８０、水酸化ナトリウム、及び塩酸から選択される１つ以上の賦形剤を含む。
【１１５６】
[001149]  ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、約５ｍｇ、約８ｍｇ、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約７００ｍｇ、約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、約１４００ｍｇ、約１５００ｍｇ、約１６００ｍｇ、約１７００ｍｇ、約１８００ｍｇ、約１９００ｍｇ、及び約２０００ｍｇからなる群から選択される用量を注入することにより対象に投与される。ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは毎週投与される。ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは２週間毎に投与される。ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは３週間毎に投与される。ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは毎月投与される。ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、１２週間の期間で４用量にわたって３週間毎に与えられる８ｍｇの用量で静脈内投与される。ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストはより低い初期用量で投与され、これが毎月投与される後続の間隔を置いて投与されるときに漸増される。例えば、初回注入で３００ｍｇのＴＮＦＲＳＦアゴニストが送達されてもよく、後続の毎週の用量によって８週間にわたり２，０００ｍｇのＴＮＦＲＳＦアゴニストが送達され、続いて２，０００ｍｇのＴＮＦＲＳＦアゴニストの毎月の用量が送達される可能性がある。
【１１５７】
[001150]  ＴＮＦＲＳＦアゴニストの投与量は、治療下のヒト又は哺乳類、障害又は病態の重症度、投与速度、化合物の性質及び処方医師の裁量に依存することになる。しかしながら、各々の有効投薬量は、単回又は分割用量で、１日約０．００１〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重、例えば約１〜約３５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。７０ｋｇのヒトであれば、これは約０．０５〜７ｇ／日、例えば約０．０５〜約２．５ｇ／日に相当し得る。場合によっては、前記範囲の下限を下回る投薬量レベルが一層適切であることもあるが、他の場合には、いかなる有害な副作用も生じることなく、なおも高い用量が−例えば、かかる高用量を幾つかの小用量に分割して終日投与することにより−用いられることもある。１つ又は複数のＴＮＦＲＳＦアゴニストの投薬量は、ｍｇ／ｋｇ体重又はｍｇ／ｍ２体表面積の単位で提供され得る。ある実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト及び第２のＴＮＦＲＳＦアゴニストは、ｍｇ／ｋｇ又はｍｇ／ｍ２で約２０：１、約１９：１、約１８：１、約１７：１、約１６：１、約１５：１、約１４：１、約１３：１、約１２：１、約１１：１、約１０：１、約９：１、約８：１、約７：１、約６：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：６、約１：７、約１：８、約１：９、約１：１０、約１：１１、約１：１２、約１：１３、約１：１４、約１：１５、約１：１６、約１：１７、約１：１８、約１：１９、及び約１：２０からなる群から選択される比（ration）で送達される。
【１１５８】
[001151]  一部の実施形態において、ＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組み合わせは単回用量で投与される。かかる投与は、ＴＮＦＲＳＦアゴニストを導入するため、注射、例えば静脈内注射によってもよい。
【１１５９】
[001152]  一部の実施形態において、ＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組み合わせは複数回用量で投与される。好ましい実施形態において、ＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組み合わせは複数回用量で投与される。ＴＮＦＲＳＦアゴニストの投与は、１日１回、２回、３回、４回、５回、６回、又は６回超であってもよい。ＴＩＬ及びＴＮＦＲＳＦアゴニストの投与は、月１回、２週間に１回、週１回、又は隔日１回であってもよい。
【１１６０】
[001153]  選択された実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、１、２、３、４、５、６、７、１４、２８日、２ヵ月、３ヵ月、６ヵ月、１２ヵ月、又は２４ヵ月間より長く投与される。ある場合には、必要な限り継続投与が達成及び維持される。
【１１６１】
[001154]  一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投薬量は、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約３０ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約９０ｍｇ、約２０ｍｇ〜約８０ｍｇ、約３０ｍｇ〜約７０ｍｇ、約４０ｍｇ〜約６０ｍｇ、約４５ｍｇ〜約５５ｍｇ、約４８ｍｇ〜約５２ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約６０ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約７０ｍｇ〜約１３０ｍｇ、約８０ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約９０ｍｇ〜約１１０ｍｇ、約９５ｍｇ〜約１０５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１６０ｍｇ〜約２４０ｍｇ、約１７０ｍｇ〜約２３０ｍｇ、約１８０ｍｇ〜約２２０ｍｇ、約１９０ｍｇ〜約２１０ｍｇ、約１９５ｍｇ〜約２０５ｍｇ、又は約１９８〜約２０２ｍｇの範囲である。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投薬量は、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２５ｍｇ、又は約２５０ｍｇである。
【１１６２】
[001155]  一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投薬量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約４．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．２ｍｇ／ｋｇ、約０．３５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．３ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約１．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇ、約０．５５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．６５ｍｇ／ｋｇ〜約０．８ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約０．７５ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１．８５ｍｇ／ｋｇ、約１．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ  ｍｇ〜約１．６ｍｇ／ｋｇ、約１．３５ｍｇ／ｋｇ〜約１．５ｍｇ／ｋｇ、約２．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約２．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．４ｍｇ／ｋｇ、約２．４ｍｇ／ｋｇ〜約３．３ｍｇ／ｋｇ、約２．６ｍｇ／ｋｇ〜約３．１５ｍｇ／ｋｇ、約２．７ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、約２．８ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、又は約２．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２．９５ｍｇ／ｋｇの範囲である。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投薬量は、約０．３５ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ、約１．８ｍｇ／ｋｇ、約２．１ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約３．２ｍｇ／ｋｇ、又は約３．６ｍｇ／ｋｇである。
【１１６３】
[001156]  一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投薬量は、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５ｍｇ〜約４５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約４０ｍｇ、約１５ｍｇ〜約３５ｍｇ、約２０ｍｇ〜約３０ｍｇ、約２３ｍｇ〜約２８ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約６０ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約７０ｍｇ〜約１３０ｍｇ、約８０ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約９０ｍｇ〜約１１０ｍｇ、又は約９５ｍｇ〜約１０５ｍｇ、約９８ｍｇ〜約１０２ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１６０ｍｇ〜約２４０ｍｇ、約１７０ｍｇ〜約２３０ｍｇ、約１８０ｍｇ〜約２２０ｍｇ、約１９０ｍｇ〜約２１０ｍｇ、約１９５ｍｇ〜約２０５ｍｇ、又は約１９８〜約２０７ｍｇの範囲である。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投薬量は、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２５ｍｇ、又は約２５０ｍｇである。
【１１６４】
[001157]  一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストの有効投薬量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約４．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．２ｍｇ／ｋｇ、約０．３５ｍｇ／ｋｇ〜約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約０．７ｍｇ／ｋｇ、約０．０７ｍｇ／ｋｇ〜約０．６５ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ〜約０．６ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約０．４５ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約０．４ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ〜約２．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１．８５ｍｇ／ｋｇ、約１．１５ｍｇ／ｋｇ〜約１．７ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ〜約１．６ｍｇ／ｋｇ、約１．３５ｍｇ／ｋｇ〜約１．５ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ〜約１．４５ｍｇ／ｋｇ、約２．１５ｍｇ／ｋｇ〜約３．６ｍｇ／ｋｇ、約２．３ｍｇ／ｋｇ〜約３．４ｍｇ／ｋｇ、約２．４ｍｇ／ｋｇ〜約３．３ｍｇ／ｋｇ、約２．６ｍｇ／ｋｇ〜約３．１５ｍｇ／ｋｇ、約２．７ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、約２．８ｍｇ／ｋｇ〜約３ｍｇ／ｋｇ、又は約２．８５ｍｇ／ｋｇ〜約２．９５ｍｇ／ｋｇの範囲である。一部の実施形態において、本明細書に開示されるＴＮＦＲＳＦアゴニストは、約０．４ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ、約１．８ｍｇ／ｋｇ、約２．１ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約２．８５ｍｇ／ｋｇ、約３．２ｍｇ／ｋｇ、又は約３．６ｍｇ／ｋｇである。
【１１６５】
[001158]  一部の実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、１０〜１０００ｍｇ  ＢＩＤ、例えば、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、又は２００ｍｇ  ＢＩＤの投薬量で投与される。
【１１６６】
[001159]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＮＦＲＳＦアゴニスト、及びその組み合わせの濃度は、独立に、例えば、医薬組成物の１００％、９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．４％、０．３％、０．２％、０．１％、０．０９％、０．０８％、０．０７％、０．０６％、０．０５％、０．０４％、０．０３％、０．０２％、０．０１％、０．００９％、０．００８％、０．００７％、０．００６％、０．００５％、０．００４％、０．００３％、０．００２％、０．００１％、０．０００９％、０．０００８％、０．０００７％、０．０００６％、０．０００５％、０．０００４％、０．０００３％、０．０００２％又は０．０００１％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖ未満である。
【１１６７】
[001160]  一部の実施形態において、本発明の医薬組成物中に提供されるＴＮＦＲＳＦアゴニスト、及びその組み合わせの濃度は、独立に、医薬組成物の９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１９．７５％、１９．５０％、１９．２５％  １９％、１８．７５％、１８．５０％、１８．２５％  １８％、１７．７５％、１７．５０％、１７．２５％  １７％、１６．７５％、１６．５０％、１６．２５％  １６％、１５．７５％、１５．５０％、１５．２５％  １５％、１４．７５％、１４．５０％、１４．２５％  １４％、１３．７５％、１３．５０％、１３．２５％  １３％、１２．７５％、１２．５０％、１２．２５％  １２％、１１．７５％、１１．５０％、１１．２５％  １１％、１０．７５％、１０．５０％、１０．２５％  １０％、９．７５％、９．５０％、９．２５％  ９％、８．７５％、８．５０％、８．２５％  ８％、７．７５％、７．５０％、７．２５％  ７％、６．７５％、６．５０％、６．２５％  ６％、５．７５％、５．５０％、５．２５％  ５％、４．７５％、４．５０％、４．２５％、４％、３．７５％、３．５０％、３．２５％、３％、２．７５％、２．５０％、２．２５％、２％、１．７５％、１．５０％、１２５％、１％、０．５％、０．４％、０．３％、０．２％、０．１％、０．０９％、０．０８％、０．０７％、０．０６％、０．０５％、０．０４％、０．０３％、０．０２％、０．０１％、０．００９％、０．００８％、０．００７％、０．００６％、０．００５％、０．００４％、０．００３％、０．００２％、０．００１％、０．０００９％、０．０００８％、０．０００７％、０．０００６％、０．０００５％、０．０００４％、０．０００３％、０．０００２％又は０．０００１％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ、又はｖ／ｖ超である。
【１１６８】
[001161]  一部の実施形態において、医薬組成物中のＴＮＦＲＳＦアゴニストの濃度は、独立に、医薬組成物の約０．０００１％〜約５０％、約０．００１％〜約４０％、約０．０１％〜約３０％、約０．０２％〜約２９％、約０．０３％〜約２８％、約０．０４％〜約２７％、約０．０５％〜約２６％、約０．０６％〜約２５％、約０．０７％〜約２４％、約０．０８％〜約２３％、約０．０９％〜約２２％、約０．１％〜約２１％、約０．２％〜約２０％、約０．３％〜約１９％、約０．４％〜約１８％、約０．５％〜約１７％、約０．６％〜約１６％、約０．７％〜約１５％、約０．８％〜約１４％、約０．９％〜約１２％又は約１％〜約１０％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖの範囲である。
【１１６９】
[001162]  一部の実施形態において、医薬組成物中のＴＮＦＲＳＦアゴニストの濃度は、独立に、医薬組成物の約０．００１％〜約１０％、約０．０１％〜約５％、約０．０２％〜約４．５％、約０．０３％〜約４％、約０．０４％〜約３．５％、約０．０５％〜約３％、約０．０６％〜約２．５％、約０．０７％〜約２％、約０．０８％〜約１．５％、約０．０９％〜約１％、約０．１％〜約０．９％ｗ／ｗ、ｗ／ｖ又はｖ／ｖの範囲である。
【１１７０】
[001163]  一部の実施形態において、医薬組成物中のＴＮＦＲＳＦアゴニストの濃度は、独立に、１０ｇ、９．５ｇ、９．０ｇ、８．５ｇ、８．０ｇ、７．５ｇ、７．０ｇ、６．５ｇ、６．０ｇ、５．５ｇ、５．０ｇ、４．５ｇ、４．０ｇ、３．５ｇ、３．０ｇ、２．５ｇ、２．０ｇ、１．５ｇ、１．０ｇ、０．９５ｇ、０．９ｇ、０．８５ｇ、０．８ｇ、０．７５ｇ、０．７ｇ、０．６５ｇ、０．６ｇ、０．５５ｇ、０．５ｇ、０．４５ｇ、０．４ｇ、０．３５ｇ、０．３ｇ、０．２５ｇ、０．２ｇ、０．１５ｇ、０．１ｇ、０．０９ｇ、０．０８ｇ、０．０７ｇ、０．０６ｇ、０．０５ｇ、０．０４ｇ、０．０３ｇ、０．０２ｇ、０．０１ｇ、０．００９ｇ、０．００８ｇ、０．００７ｇ、０．００６ｇ、０．００５ｇ、０．００４ｇ、０．００３ｇ、０．００２ｇ、０．００１ｇ、０．０００９ｇ、０．０００８ｇ、０．０００７ｇ、０．０００６ｇ、０．０００５ｇ、０．０００４ｇ、０．０００３ｇ、０．０００２ｇ、又は０．０００１ｇ以下である。
【１１７１】
[001164]  一部の実施形態において、医薬組成物中のＴＮＦＲＳＦアゴニストの濃度は、独立に、０．０００１ｇ、０．０００２ｇ、０．０００３ｇ、０．０００４ｇ、０．０００５ｇ、０．０００６ｇ、０．０００７ｇ、０．０００８ｇ、０．０００９ｇ、０．００１ｇ、０．００１５ｇ、０．００２ｇ、０．００２５ｇ、０．００３ｇ、０．００３５ｇ、０．００４ｇ、０．００４５ｇ、０．００５ｇ、０．００５５ｇ、０．００６ｇ、０．００６５ｇ、０．００７ｇ、０．００７５ｇ、０．００８ｇ、０．００８５ｇ、０．００９ｇ、０．００９５ｇ、０．０１ｇ、０．０１５ｇ、０．０２ｇ、０．０２５ｇ、０．０３ｇ、０．０３５ｇ、０．０４ｇ、０．０４５ｇ、０．０５ｇ、０．０５５ｇ、０．０６ｇ、０．０６５ｇ、０．０７ｇ、０．０７５ｇ、０．０８ｇ、０．０８５ｇ、０．０９ｇ、０．０９５ｇ、０．１ｇ、０．１５ｇ、０．２ｇ、０．２５ｇ、０．３ｇ、０．３５ｇ、０．４ｇ、０．４５ｇ、０．５ｇ、０．５５ｇ、０．６ｇ、０．６５ｇ、０．７ｇ、０．７５ｇ、０．８ｇ、０．８５ｇ、０．９ｇ、０．９５ｇ、１ｇ、１．５ｇ、２ｇ、２．５、３ｇ、３．５ｇ、４ｇ、４．５ｇ、５ｇ、５．５ｇ、６ｇ、６．５ｇ、７ｇ、７．５ｇ、８ｇ、８．５ｇ、９ｇ、９．５ｇ、又は１０ｇ超である。
【１１７２】
[001165]  以下に、非限定的医薬組成物及びその調製方法を記載する。
【１１７３】
注射用医薬組成物
[001166]  好ましい実施形態において、本発明は、腫瘍内注射又は静脈内注入を含めた注射に好適なＴＩＬと少なくとも１つのＴＮＦＲＳＦアゴニスト、及びその組み合わせとの組み合わせ、及び医薬賦形剤を含有する注射用医薬組成物を提供する。組成物中の薬剤の構成成分及び量は、本明細書に記載されるとおりである。
【１１７４】
[001167]  注射による投与用に本発明の組成物を配合し得る形態としては、水性又は油性懸濁液、又はエマルションであって、ゴマ油、トウモロコシ油、綿実油、又はピーナッツ油含有のもの、並びにエリキシル剤、マンニトール、デキストロース、又は滅菌水溶液、及び同様の医薬媒体が挙げられる。
【１１７５】
[001168]  生理食塩水中の水溶液もまた、従来注射用に使用されている。エタノール、グリセロール、プロピレングリコール及び液体ポリエチレングリコール（及びこれらの好適な混合物）、シクロデキストリン誘導体、及び植物油もまた利用し得る。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散液の場合には必要な粒度の維持のため、及び界面活性剤の使用によって維持することができる。微生物作用の防止は、様々な抗細菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸及びチメロサールによってもたらすことができる。
【１１７６】
[001169]  滅菌注射用溶液は、適切な媒体中に必要な量のＴＮＦＲＳＦアゴニストとＴＩＬとの組み合わせを適宜上記に列挙されるとおりの種々の他の成分と共に配合し、続いてろ過滅菌することにより調製される。概して、分散液は、基礎分散媒及び上記に列挙されるものからの他の必要な成分を含有する滅菌媒体中に様々な滅菌活性成分を配合することにより調製される。滅菌注射用溶液の調製用の滅菌粉末の場合、特定の望ましい調製方法は、活性成分＋任意の追加的な所望の成分の粉末を予め滅菌ろ過されたその溶液から生じさせる真空乾燥法及び凍結乾燥法である。
【１１７７】
他の医薬組成物
[001170]  医薬組成物はまた、本明細書に記載される組成物と、舌下、頬側、直腸、骨内、眼内、鼻腔内、硬膜上、又は脊髄内投与に好適な１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤とから調製されてもよい。かかる医薬組成物の調製は当該技術分野において周知である。例えば、Anderson, Philip O.; Knoben, James E.; Troutman, William G, eds.,Handbook of Clinical Drug Data, Tenth Edition, McGraw-Hill, 2002；及びPratt and Taylor, eds., Principles of Drug Action, Third Edition,Churchill Livingston, N.Y., 1990（これらの各々は、参照により全体として本明細書に援用される）を参照のこと。
【１１７８】
[001171]  ＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組み合わせの投与は、作用部位への化合物の送達を可能にする任意の方法によって達成することができる。これらの方法としては、経口経路、十二指腸内経路、非経口注射（静脈内、動脈内、皮下、筋肉内、血管内、腹腔内又は注入を含む）、局所（例えば、経皮的塗布）、直腸投与、カテーテル若しくはステントによる局所送達を介すること、又は吸入によることが挙げられる。化合物の組み合わせはまた、脂肪内又は髄腔内にも投与することができる。
【１１７９】
[001172]  本発明はまた、キットも提供する。キットは、好適なパッケージング中にある単独での、或いは組み合わせでの即時投与可能なＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組み合わせ、並びに使用説明書、臨床試験の考察及び副作用一覧を含み得る文書資料を含む。かかるキットはまた、組成物の活性及び／又は利点を指示又は確立する、及び／又は用量設定、投与、副作用、薬物相互作用、又は医療提供者に有用な他の情報を記載する情報、例えば、参考科学文献、添付文書資料、臨床試験結果、及び／又はこれらの要約なども含み得る。かかる情報は、様々な試験、例えば、インビボモデルが関わる実験動物を使用した試験及びヒト臨床試験に基づく試験の結果に基づき得る。キットは、別の医薬品有効成分を更に含み得る。選択された実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト及びＴＩＬ及び別の医薬品有効成分は、キット内で別個の容器に別個の組成物として提供される。選択された実施形態において、ＴＮＦＲＳＦアゴニスト及びＴＩＬからなる群から選択される分子は、キットにある容器内に単一の組成物として提供される。好適なパッケージング及び使用のための追加的な物品（例えば、液体調製物用の計量カップ、曝気を最小限に抑えるためのフォイル包装材など）は当該技術分野において公知であり、キットに含まれてもよい。本明細書に記載されるキットは、医師、看護師、薬剤師、処方薬剤管理者などを含めた医療提供者に提供され、販売され、及び／又は宣伝され得る。キットはまた、選択された実施形態では、消費者に直接販売されてもよい。
【１１８０】
[001173]  上記に記載されるキットは好ましくは、本明細書に記載される疾患及び病態の治療における使用のためのものである。好ましい実施形態において、キットは、癌の治療における使用のためのものである。好ましい実施形態において、キットは、固形腫瘍癌、リンパ腫及び白血病の治療における使用のためのものである。
【１１８１】
[001174]  好ましい実施形態において、本発明のキットは、本明細書に記載される任意の癌を含め、癌の治療における使用のためのものである。
【１１８２】
癌の治療方法
[001175]  本明細書に記載されるＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組成物及び併用は、過剰増殖性障害の治療方法において使用することができる。好ましい実施形態において、これは、癌の治療における使用のためのものである。好ましい実施形態において、本発明は、癌を治療する方法並びに癌を治療するためのＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組成物及び併用を提供し、ここで癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、及び肉腫からなる群から選択される。好ましい実施形態において、本発明は、癌を治療する方法並びに癌を治療するためのＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組成物及び併用を提供し、ここで癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）又はトリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫、及びぶどう膜（眼）黒色腫からなる群から選択される。好ましい実施形態において、本発明は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌（頭頸部扁平上皮癌）、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌、及び肉腫からなる群から選択される癌をＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの併用で治療する方法を提供する。好ましい実施形態において、本発明は、癌を治療するためのＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組成物及び併用を提供し、ここで癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌、及び肉腫からなる群から選択される。好ましい実施形態において、本発明は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）又はトリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫、及びぶどう膜（眼）黒色腫からなる群から選択される癌をＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの併用で治療する方法を提供する。好ましい実施形態において、本発明は、癌を治療するためのＴＩＬとＴＮＦＲＳＦアゴニストとの組成物及び併用を提供し、ここで癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）又はトリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫、及びぶどう膜（眼）黒色腫からなる群から選択される。ある実施形態において、ＴＩＬは、本明細書に記載されるプロセスによって拡大培養される。
【１１８３】
[001176]  一部の実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップ
を含み；
ここで癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌、肉腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）又はトリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫、及びぶどう膜（眼）黒色腫からなる群から選択される。
【１１８４】
[001177]  一部の実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２を含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップ
を含み；
ここで癌は、黒色腫、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、膀胱癌、乳癌、頭頸部癌、腎細胞癌、急性骨髄性白血病、結腸直腸癌、胆管癌、肉腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）又はトリプルネガティブ乳癌、二重抵抗性黒色腫、及びぶどう膜（眼）黒色腫からなる群から選択される。
【１１８５】
[001178]  一部の実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２を含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；及び
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップ
を含み；
ここで癌はぶどう膜（眼）黒色腫である。
【１１８６】
[001179]  ある実施形態において、本発明は、前述の方法のいずれかに係るＴＩＬ集団で癌を治療するためのキットを含む。
【１１８７】
[001180]  適応される疾患又は障害の治療、予防及び／又は管理における本明細書に記載される方法、化合物及び化合物の併用の有効性は、当該技術分野において公知の様々な動物モデルを用いて試験することができる。膵癌治療の有効性を決定するためのモデルについては、Herreros-Villanueva, et al., World J. Gastroenterol. 2012, 18,1286-1294に記載されている。乳癌治療の有効性を決定するためのモデルについては、例えば、Fantozzi,Breast Cancer Res. 2006, 8, 212に記載されている。卵巣癌治療の有効性を決定するためのモデルについては、例えば、Mullany, et al., Endocrinology 2012, 153, 1585-92；及びFong, et al., J. Ovarian Res. 2009, 2, 12に記載されている。黒色腫治療の有効性を決定するためのモデルについては、例えば、Damsky, et al., Pigment Cell & Melanoma Res. 2010, 23, 853-859に記載されている。肺癌治療の有効性を決定するためのモデルについては、例えば、Meuwissen, et al., Genes & Development, 2005, 19, 643-664に記載されている。肺癌治療の有効性を決定するためのモデルについては、例えば、Kim, Clin. Exp. Otorhinolaryngol. 2009, 2, 55-60；及びSano, Head Neck Oncol. 2009, 1, 32に記載されている。ＣＴ２６モデルを含め、結腸直腸癌治療の有効性を決定するためのモデルについては、Castle, et al., BMC Genomics, 2013, 15, 190；Endo,et al., Cancer Gene Therapy, 2002, 9, 142-148；Roth, etal., Adv. Immunol. 1994, 57, 281-351；Fearon, et al.,Cancer Res. 1988, 48, 2975-2980に記載されている。
【１１８８】
ＩＬ−２の共投与
[001181]  ある実施形態において、本発明は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）集団で癌を治療する方法を提供し、この方法は、
（ａ）患者から腫瘍を切除するステップ；
（ｂ）腫瘍から第１のＴＩＬ集団を入手するステップ；
（ｃ）第１の細胞培養培地中で第１のＴＩＬ集団の初期拡大培養を行うことにより第２のＴＩＬ集団を入手するステップであって、第２のＴＩＬ集団が第１のＴＩＬ集団より少なくとも５倍数が多く、第１の細胞培養培地がＩＬ−２及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストを含み、及び初期拡大培養が２１日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｄ）第２の細胞培養培地中で第２のＴＩＬ集団の迅速拡大培養を行うことにより第３のＴＩＬ集団を入手するステップであって、迅速拡大培養の開始から７日後に第３のＴＩＬ集団が第２のＴＩＬ集団より少なくとも５０倍数が多く；第２の細胞培養培地が、ＩＬ−２、ＯＫＴ−３（抗ＣＤ３抗体）、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、及び任意選択でＴＮＦＲＳＦアゴニストを含み、及び迅速拡大培養が１４日以下の期間にわたって行われるステップ；
（ｅ）第３のＴＩＬ集団を回収するステップ；
（ｆ）癌を有する患者に治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与するステップ；及び
（ｇ）患者にＩＬ−２レジメンを投与するステップ
を含む。
【１１８９】
[001182]  ある実施形態において、ＩＬ−２レジメンは高用量ＩＬ−２レジメンを含み、ここで高用量ＩＬ−２レジメンは、治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与した翌日から静脈内（intraveneously）投与されるアルデスロイキン、又はそのバイオシミラー若しくは変異体を含み、ここでアルデスロイキン又はそのバイオシミラー若しくは変異体は、忍容量まで８時間毎に１５分ボーラス静脈内注入を用いて、最大１４用量にわたって６００，０００又は７２０，０００ＩＵ／ｋｇ（患者体重）の用量で投与される。９日間の休息後、このスケジュールを更なる１４用量にわたって繰り返し、合計で最大２８用量としてもよい。
【１１９０】
[001183]  ある実施形態において、ＩＬ−２レジメンは高用量ＩＬ−２レジメンを含み、ここで高用量ＩＬ−２レジメンは、治療上有効な分量の第３のＴＩＬ集団を投与した翌日から静脈内（intraveneously）投与されるアルデスロイキン、又はそのバイオシミラー若しくは変異体を含み、ここでアルデスロイキン又はそのバイオシミラー若しくは変異体は、忍容量まで８時間毎に１５分ボーラス静脈内注入を用いて、最大１４用量にわたって０．０３７ｍｇ／ｋｇ又は０．０４４ｍｇ／ｋｇ  ＩＵ／ｋｇ（患者体重）の用量で投与される。９日間の休息後、このスケジュールを更なる１４用量にわたって繰り返し、合計で最大２８用量としてもよい。
【１１９１】
[001184]  ある実施形態において、ＩＬ−２レジメンは漸減ＩＬ−２レジメンを含む。漸減ＩＬ−２レジメンについては、O’Day, etal., J. Clin. Oncol. 1999, 17, 2752- 61及びEton, et al.,Cancer 2000, 88, 1703-9（これらの開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。ある実施形態において、漸減ＩＬ−２レジメンは、６時間かけて静脈内（intraveneously）投与される１８×１０６ＩＵ／ｍ２と、続く１２時間かけて静脈内（intraveneously）投与される１８×１０６ＩＵ／ｍ２と、続く２４時間かけて静脈内（intraveneously）投与される１８×１０６ＩＵ／ｍ２と、続く７２時間かけて静脈内（intraveneously）投与される４．５×１０６ＩＵ／ｍ２を含む。この治療サイクルは、２８日毎に最大４サイクルにわたって繰り返されてもよい。ある実施形態において、漸減ＩＬ−２レジメンは、１日目に１８，０００，０００ＩＵ／ｍ２、２日目に９，０００，０００ＩＵ／ｍ２、並びに３及び４日目に４，５００，０００ＩＵ／ｍ２を含む。
【１１９２】
[001185]  ある実施形態において、ＩＬ−２レジメンは、０．１０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日の用量での１、２、４、６、７、１４又は２１日毎のペグ化ＩＬ−２の投与を含む。
【１１９３】
化学療法による骨髄非破壊的リンパ球枯渇
[001186]  ある実施形態において、本発明は、ＴＩＬ集団で癌を治療する方法を含み、ここで患者はＴＩＬの注入前及び本開示に係るＴＮＦＲＳＦアゴニストによる治療の前又はそれと同時に骨髄非破壊的化学療法で前処置される。ある実施形態において、骨髄非破壊的化学療法は、２日間（ＴＩＬ注入前２７日目及び２６日目）のシクロホスファミド６０ｍｇ／ｋｇ／日及び５日間（ＴＩＬ注入前２７〜２３日目）のフルダラビン２５ｍｇ／ｍ２／日である。ある実施形態において、骨髄非破壊的化学療法及び本開示に係るＴＩＬ注入（０日目）の後、患者は生理学的忍容量まで８時間毎に静脈内に７２０，０００ＩＵ／ｋｇのＩＬ−２の静脈内注入を受ける。
【１１９４】
[001187]  実験的知見から、腫瘍特異的Ｔリンパ球の養子移入前のリンパ球枯渇が、調節性Ｔ細胞及び免疫系の競合エレメント（「サイトカインシンク」）の除去により、治療有効性の増強において重要な役割を果たすことが指摘される。従って、本発明の一部の実施形態は、本発明のｒｅＲＥＰ  ＴＩＬの導入前に患者に対してリンパ球枯渇ステップ（「免疫抑制コンディショニング」とも称される）を利用する。
【１１９５】
[001188]  一般に、リンパ球枯渇は、フルダラビン又はシクロホスファミド（その活性型はマホスファミドと称される）及びこれらの併用の投与を用いて実現される。かかる方法については、Gassner, et al., Cancer Immunol. Immunother. 2011, 60, 75-85、Muranski, et al., Nat. Clin. Pract. Oncol., 2006, 3, 668-681、Dudley, et al., J. Clin. Oncol. 2008, 26, 5233-5239、及びDudley, et al., J. Clin. Oncol. 2005, 23, 2346-2357（これらは全て、本明細書において全体として参照により援用される）に記載されている。
【１１９６】
[001189]  一部の実施形態において、フルダラビンは０．５μｇ／ｍｌ〜１０μｇ／ｍｌフルダラビンの濃度で投与される。一部の実施形態において、フルダラビンは１μｇ／ｍｌフルダラビンの濃度で投与される。一部の実施形態において、フルダラビン処置は、１日、２日、３日、４日、５日、６日、又は７日間又はそれ以上投与される。一部の実施形態において、フルダラビンは、１０ｍｇ／ｋｇ／日、１５ｍｇ／ｋｇ／日、２０ｍｇ／ｋｇ／日、２５ｍｇ／ｋｇ／日、３０ｍｇ／ｋｇ／日、３５ｍｇ／ｋｇ／日、４０ｍｇ／ｋｇ／日、又は４５ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量で投与される。一部の実施形態において、フルダラビン処置は３５ｍｇ／ｋｇ／日で２〜７日間投与される。一部の実施形態において、フルダラビン処置は３５ｍｇ／ｋｇ／日で４〜５日間投与される。一部の実施形態において、フルダラビン処置は２５ｍｇ／ｋｇ／日で４〜５日間投与される。
【１１９７】
[001190]  一部の実施形態において、活性型のシクロホスファミドであるマホスファミドは、シクロホスファミドの投与によって０．５μｇ／ｍＬ〜１０μｇ／ｍＬの濃度で得られる。一部の実施形態において、活性型のシクロホスファミドであるマホスファミドは、シクロホスファミドの投与によって１μｇ／ｍＬの濃度で得られる。一部の実施形態において、シクロホスファミド処置は１日、２日、３日、４日、５日、６日、又は７日間又はそれ以上投与される。一部の実施形態において、シクロホスファミドは、１００ｍｇ／ｍ２／日、１５０ｍｇ／ｍ２／日、１７５ｍｇ／ｍ２／日、２００ｍｇ／ｍ２／日、２２５ｍｇ／ｍ２／日、２５０ｍｇ／ｍ２／日、２７５ｍｇ／ｍ２／日、又は３００ｍｇ／ｍ２／日の投薬量で投与される。一部の実施形態において、シクロホスファミドは静脈内に（即ちｉ．ｖ．）投与される。一部の実施形態において、シクロホスファミド処置は３５ｍｇ／ｋｇ／日で２〜７日間投与される。一部の実施形態において、シクロホスファミド処置は２５０ｍｇ／ｍ２／日ｉ．ｖ．で４〜５日間投与される。一部の実施形態において、シクロホスファミド処置は２５０ｍｇ／ｍ２／日ｉ．ｖ．で４日間投与される。
【１１９８】
[001191]  一部の実施形態において、リンパ球枯渇は、フルダラビン及びシクロホスファミドを一緒に患者に投与することにより実施される。一部の実施形態において、フルダラビンは２５ｍｇ／ｍ２／日ｉ．ｖ．で投与され、シクロホスファミドは２５０ｍｇ／ｍ２／日ｉ．ｖ．で４日間にわたって投与される。
【１１９９】
[001192]  ある実施形態において、リンパ球枯渇は、６０ｍｇ／ｍ２／日の用量で２日間のシクロホスファミドの投与と、それに続く２５ｍｇ／ｍ２／日の用量で５日間のフルダラビンの投与によって実施される。
【１２００】
ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１阻害薬との併用
[001193]  プログラム死１（ＰＤ−１）は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）Ｔ細胞、活性化単球、及び樹状細胞が発現する２８８アミノ酸の膜貫通免疫チェックポイント受容体タンパク質である。ＣＤ２７９としても知られるＰＤ−１はＣＤ２８ファミリーに属し、ヒトでは２番染色体上のＰｄｃｄ１遺伝子によってコードされる。ＰＤ−１は、１つの免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリードメインと、膜貫通領域と、免疫受容体チロシン抑制性モチーフ（ＩＴＩＭ）及び免疫受容体チロシンスイッチモチーフ（ＩＴＳＭ）を含む細胞内ドメインとからなる。ＰＤ−１及びそのリガンド（ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２）は、Keir, et al., Annu. Rev. Immunol. 2008, 26, 677-704に記載されるとおり、免疫寛容において重要な役割を果たすことが知られている。ＰＤ−１は、Ｔ細胞免疫応答を負に調節する抑制シグナルを提供する。ＰＤ−Ｌ１（Ｂ７−Ｈ１又はＣＤ２７４としても知られる）及びＰＤ−Ｌ２（Ｂ７−ＤＣ又はＣＤ２７３としても知られる）は腫瘍細胞及び間質細胞に発現し、ＰＤ−１を発現する活性化Ｔ細胞がこれらに遭遇すると、Ｔ細胞の免疫抑制につながり得る。ＰＤ−Ｌ１は、ヒト９番染色体上のＣｄ２７４遺伝子によってコードされる２９０アミノ酸の膜貫通タンパク質である。ＰＤ−１阻害薬、ＰＤ−Ｌ１阻害薬、及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害薬を使用することによりＰＤ−１とそのリガンドＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２との間の相互作用を遮断すると、Topalian, et al., N. Eng. J. Med. 2012, 366, 2443-54に記載されるものなど、最近の臨床試験で実証されるとおり、免疫耐性に打ち勝つことができる。ＰＤ−Ｌ１は多くの腫瘍細胞株で発現するが、ＰＤ−Ｌ２は主に樹状細胞に発現し、腫瘍株には少数が発現する。Ｔ細胞（活性化後にＰＤ−１を誘導的に発現する）に加えて、ＰＤ−１はまた、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、活性化単球、及び樹状細胞にも発現する。
【１２０１】
[001194]  本明細書に記載されるＴＩＬ及びＴＮＦＲＳＦアゴニストの方法、組成物、及び併用はまた、プログラム死−１（ＰＤ−１）、プログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）、及び／又はプログラム死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）結合抗体、アンタゴニスト、又は阻害薬（即ち遮断薬）と更に組み合わされてもよい。ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害薬は、ＴＩＬ拡大培養のプレＲＥＰ又はＲＥＰ段階において本明細書に記載されるＴＮＦＲＳＦアゴニストと併せて細胞培養物中に使用されてもよい。ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害薬はまた、腫瘍の外科的切除前、又はＴＩＬの注入中若しくは注入後にＴＮＦＲＳＦアゴニストと併せて使用されてもよい。例えば、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト及びＧＩＴＲアゴニストを含むアゴニストＧＩＴＲ抗体及び組成物と併せてＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害薬を使用する好適な方法について、国際公開第２０１５／０２６６８４  Ａ１号（この開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。
【１２０２】
[001195]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、当該技術分野において公知の任意のＰＤ−１阻害薬又はＰＤ−１遮断薬であってよい。詳細には、それは、以下の段落に更に詳細に記載されるＰＤ−１阻害薬又は遮断薬のうちの一つである。用語「阻害薬」、「アンタゴニスト」、及び「遮断薬」は、本明細書ではＰＤ−１阻害薬を指して同義的に使用される。誤解を避けるために言えば、本明細書において抗体であるＰＤ−１阻害薬への言及は、化合物又はその抗原結合断片、変異体、コンジュゲート、若しくはバイオシミラーを指し得る。誤解を避けるために言えば、本明細書においてＰＤ−１阻害薬への言及はまた、小分子化合物又はその薬学的に許容可能な塩、エステル、溶媒和物、水和物、共結晶、若しくはプロドラッグも指し得る。
【１２０３】
[001196]  一部の実施形態において、本明細書に記載される組成物及び方法はＰＤ−１阻害薬を含む。一部の実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は小分子である。好ましい実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は抗体（即ち抗ＰＤ−１抗体）、Ｆａｂ断片を含めたその断片、又はその単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。一部の実施形態において、ＰＤ−１阻害薬はポリクローナル抗体である。好ましい実施形態において、ＰＤ−１阻害薬はモノクローナル抗体である。一部の実施形態において、ＰＤ−１阻害薬はＰＤ−１と結合に関して競合し、及び／又はＰＤ−１上のエピトープに結合する。ある実施形態において、抗体はＰＤ−１と結合に関して競合し、及び／又はＰＤ−１上のエピトープに結合する。
【１２０４】
[001197]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、ヒトＰＤ−１と約１００ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−１と約９０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−１と約８０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−１と約７０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−１と約６０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−１と約５０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−１と約４０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−１と約３０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−１と約２０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−１と約１０ｐＭ以下のＫＤで結合する、又はヒトＰＤ−１と約１ｐＭ以下のＫＤで結合するＰＤ−１阻害薬を含む。
【１２０５】
[001198]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、ヒトＰＤ−１に約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約８×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約９×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、又はヒトＰＤ−１に約１×１０６  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合するＰＤ−１阻害薬を含む。
【１２０６】
[001199]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、ヒトＰＤ−１に約２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．１×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．４×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．５×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．６×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する又はヒトＰＤ−１に約２．７×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．８×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．９×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、又はヒトＰＤ−１に約３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合するＰＤ−１阻害薬を含む。
【１２０７】
[001200]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約１０ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約９ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約８ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約７ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約６ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約５ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約４ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約３ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約２ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する、又はヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約１ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害するＰＤ−１阻害薬を含む。
【１２０８】
[001201]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬はニボルマブ（Bristol-Myers Squibb Co.からOPDIVOとして市販されている）、又はそのバイオシミラー、抗原結合断片、コンジュゲート、若しくは変異体である。ニボルマブは、ＰＤ−１受容体を遮断する完全ヒトＩｇＧ４抗体である。ある実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、免疫グロブリンＧ４κ、抗（ヒトＣＤ２７４）抗体である。ニボルマブにはケミカル・アブストラクツ・サービス（Chemical AbstractsService：ＣＡＳ）登録番号９４６４１４−９４−４が割り当てられており、５Ｃ４、ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ−１１０６、及びＯＮＯ−４５３８としても知られる。ニボルマブの調製及び特性については、米国特許第８，００８，４４９号及び国際公開第２００６／１２１１６８号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。様々な癌型におけるニボルマブの臨床上の安全性及び有効性については、Wang, et al., Cancer Immunol Res. 2014, 2, 846-56；Page, et al., Ann. Rev. Med., 2014, 65, 185-202；及びWeber, et al., J. Clin. Oncology, 2013, 31, 4311-4318（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に記載されている。ニボルマブのアミノ酸配列は表４８に示す。ニボルマブは、２２〜９６，１４０〜１９６、２５４〜３１４、３６０〜４１８、２２’’〜９６’’、１４０’’〜１９６’’、２５４’’〜３１４’’、及び３６０’’〜４１８’’に重鎖内ジスルフィド結合；２３’〜８８’、１３４’〜１９４’、２３’’’〜８８’’’、及び１３４’’’〜１９４’’’に軽鎖内ジスルフィド結合；１２７〜２１４’、１２７’’〜２１４’’’に重鎖−軽鎖間ジスルフィド結合、２１９〜２１９’’及び２２２〜２２２’’に重鎖−重鎖間ジスルフィド結合；及び２９０、２９０’’にＮ−グリコシル化部位（Ｈ  ＣＨ２  ８４．４）を有する。
【１２０９】
[001202]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は配列番号４６３によって提供される重鎖と配列番号４６４によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６３及び配列番号４６４に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【１２１０】
[001203]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬はニボルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４６５に示される配列を含み、及びＰＤ−１阻害薬軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４６６に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６５及び配列番号４６６に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６５及び配列番号４６６に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６５及び配列番号４６６に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６５及び配列番号４６６に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６５及び配列番号４６６に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【１２１１】
[001204]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４６７、配列番号４６８、及び配列番号４６９に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号４７０、配列番号４７１、及び配列番号４７２に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、抗体は、前述の抗体のいずれかと結合に関して競合し、及び／又はそれと同じＰＤ−１上のエピトープに結合する。
【１２１２】
[001205]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、ニボルマブに準じて医薬品規制当局の承認を受けた抗ＰＤ−１バイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーは、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はニボルマブである）を含む抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されている抗ＰＤ−１抗体であり、この抗ＰＤ−１抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はニボルマブである。抗ＰＤ−１抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はニボルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はニボルマブである。
【１２１３】
【表５６】
2020514289.tif 000059
【１２１４】
[001206]  別の実施形態において、ＰＤ−１阻害薬はペンブロリズマブ（Merck & Co., Inc., Kenilworth, NJ, USAからKEYTRUDAとして市販されている）、又はその抗原結合断片、コンジュゲート、若しくは変異体を含む。ペンブロリズマブにはＣＡＳ登録番号１３７４８５３−９１−４が割り当てられており、ランブロリズマブ、ＭＫ−３４７５、及びＳＣＨ−９００４７５としても知られる。ペンブロリズマブは、免疫グロブリンＧ４、抗（ヒトタンパク質ＰＤＣＤ１（プログラム細胞死１））（ヒト−マウス（Mus musculus）モノクローナル重鎖）、ジスルフィドと、ヒト−マウス（Mus musculus）モノクローナル軽鎖、二量体構造を有する。ペンブロリズマブの構造はまた、免疫グロブリンＧ４、抗（ヒトプログラム細胞死１）；ヒト化マウスモノクローナル［２２８−Ｌ−プロリン（Ｈ１０−Ｓ＞Ｐ）］γ４重鎖（１３４〜２１８’）−ジスルフィドと、ヒト化マウスモノクローナルκ軽鎖二量体（２２６〜２２６’’：２２９〜２２９’’）−ビスジスルフィドとしても記述し得る。ペンブロリズマブの特性、使用、及び調製については、国際公開第２００８／１５６７１２  Ａ１号、米国特許第８，３５４，５０９号及び米国特許出願公開第２０１０／０２６６６１７  Ａ１号、同第２０１３／０１０８６５１  Ａ１号、及び同第２０１３／０１０９８４３  Ａ２号（これらの開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。様々な癌型におけるペンブロリズマブの臨床上の安全性及び有効性については、Fuerst, Oncology Times, 2014, 36, 35-36；Robert,et al., Lancet, 2014, 384, 1109-17；及びThomas, et al.,Exp. Opin. Biol. Ther., 2014, 14, 1061-1064に記載されている。ペンブロリズマブのアミノ酸配列は表４９に示す。ペンブロリズマブは以下のジスルフィド架橋：２２〜９６、２２’’〜９６’’、２３’〜９２’、２３’’’〜９２’’’、１３４〜２１８’、１３４’’〜２１８’’’、１３８’〜１９８’、１３８’’’〜１９８’’’、１４７〜２０３、１４７’’〜２０３’’、２２６〜２２６’’、２２９〜２２９’’、２６１〜３２１、２６１’’〜３２１’’、３６７〜４２５、及び３６７’’〜４２５’’、及び以下のグリコシル化部位（Ｎ）：Ａｓｎ−２９７及びＡｓｎ−２９７’’を含む。ペンブロリズマブは、Ｆｃ領域に安定化Ｓ２２８Ｐ突然変異を有するＩｇＧ４／κアイソタイプである；ＩｇＧ４ヒンジ領域におけるこの突然変異の挿入は、ＩｇＧ４抗体に典型的に見られる半分子の形成を防止する。ペンブロリズマブは、各重鎖のＦｃドメイン内のＡｓｎ２９７で不均一にグリコシル化されており、インタクトな抗体について約１４９ｋＤａの分子量がもたらされる。ペンブロリズマブの優勢なグリコフォームはフコシル化アガラクトバイアンテナリーグリカン型（Ｇ０Ｆ）である。
【１２１５】
[001207]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は配列番号４７３によって提供される重鎖と配列番号４７４によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７３及び配列番号４７４に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【１２１６】
[001208]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬はペンブロリズマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４７５に示される配列を含み、及びＰＤ−１阻害薬軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４７６に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７５及び配列番号４７６に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７５及び配列番号４７６に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７５及び配列番号４７６に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７５及び配列番号４７６に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７５及び配列番号４７６に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【１２１７】
[001209]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、それぞれ配列番号４７７、配列番号４７８、及び配列番号４７９に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号４８０、配列番号４８１、及び配列番号４８２に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、抗体は、前述の抗体のいずれかと結合に関して競合し、及び／又はそれと同じＰＤ−１上のエピトープに結合する。
【１２１８】
[001210]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、ペンブロリズマブに準じて医薬品規制当局の承認を受けた抗ＰＤ−１バイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーは、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はペンブロリズマブである）を含む抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されている抗ＰＤ−１抗体であり、この抗ＰＤ−１抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はペンブロリズマブである。抗ＰＤ−１抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はペンブロリズマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はペンブロリズマブである。
【１２１９】
【表５７】
2020514289.tif 000060
【１２２０】
[001211]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、抗ｍ−ＰＤ−１クローンＪ４３（カタログ番号ＢＥ００３３−２）及びＲＭＰ１−１４（カタログ番号ＢＥ０１４６）（Bio X Cell, Inc.、West Lebanon, NH, USA）など、市販の抗ＰＤ−１モノクローナル抗体である。幾つもの市販の抗ＰＤ−１抗体が当業者に公知である。
【１２２１】
[001212]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、米国特許第８，３５４，５０９号又は米国特許出願公開第２０１０／０２６６６１７  Ａ１号、同第２０１３／０１０８６５１  Ａ１号、同第２０１３／０１０９８４３  Ａ２号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に開示される抗体である。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、米国特許第８，２８７，８５６号、同第８，５８０，２４７号、及び同第８，１６８，７５７号及び米国特許出願公開第２００９／００２８８５７  Ａ１号、同第２０１０／０２８５０１３  Ａ１号、同第２０１３／００２２６００  Ａ１号、及び同第２０１１／０００８３６９  Ａ１号（これらの教示は本明細書によって参照により援用される）に記載される抗ＰＤ−１抗体である。別の実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、米国特許第８，７３５，５５３  Ｂ１号（この開示は参照により本明細書に援用される）に開示される抗ＰＤ−１抗体である。ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、ＣＴ−０１１としても知られるピジリズマブであり、これについては米国特許第８，６８６，１１９号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。
【１２２２】
[001213]  ある実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、米国特許第８，９０７，０５３号；同第９，０９６，６４２号；及び同第９，０４４，４４２号及び米国特許出願公開第２０１５／００８７５８１号に記載されるものなどの小分子又はペプチド、又はペプチド誘導体；米国特許出願公開第２０１５／００７３０２４号に記載されるものなどの１，２，４−オキサジアゾール化合物及び誘導体；米国特許出願公開第２０１５／００７３０４２号に記載されるものなどの環状ペプチドミメティクス化合物及び誘導体；米国特許出願公開第２０１５／０１２５４９１号に記載されるものなどの環式化合物及び誘導体；国際公開第２０１５／０３３３０１号に記載されるものなどの１，３，４−オキサジアゾール及び１，３，４−チアジアゾール化合物及び誘導体；国際公開第２０１５／０３６９２７号及び同第２０１５／０４４９０号に記載されるものなどのペプチドベースの化合物及び誘導体、又は米国特許出願公開第２０１４／０２９４８９８号に記載されるものなどの大環状ペプチドベースの化合物及び誘導体（これらの各々の開示は本明細書によって全体として参照により援用される）であってもよい。
【１２２３】
[001214]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬は、当該技術分野において公知の任意のＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬、アンタゴニスト、又は遮断薬であってよい。詳細には、それは、以下の段落に更に詳細に記載されるＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬、アンタゴニスト、又は遮断薬のうちの一つである。用語「阻害薬」、「アンタゴニスト」、及び「遮断薬」は、本明細書ではＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２阻害薬を指して同義的に使用される。誤解を避けるために言えば、本明細書において抗体であるＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬への言及は、化合物又はその抗原結合断片、変異体、コンジュゲート、若しくはバイオシミラーを指し得る。誤解を避けるために言えば、本明細書においてＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬への言及は、化合物又はその薬学的に許容可能な塩、エステル、溶媒和物、水和物、共結晶、若しくはプロドラッグを指し得る。
【１２２４】
[001215]  一部の実施形態において、本明細書に記載される組成物、プロセス及び方法はＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬を含む。一部の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬は小分子である。好ましい実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬は、抗体（即ち抗ＰＤ−１抗体）、Ｆａｂ断片を含めたその断片、又はその単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。一部の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬はポリクローナル抗体である。好ましい実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬はモノクローナル抗体である。一部の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２阻害薬はＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２と結合に関して競合し、及び／又はＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２上のエピトープに結合する。ある実施形態において、抗体はＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２と結合に関して競合し、及び／又はＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２上のエピトープに結合する。
【１２２５】
[001216]  一部の実施形態において、本明細書に提供されるＰＤ−Ｌ１阻害薬はＰＤ−Ｌ１に対して選択的であり、即ち、この化合物は、それがＰＤ−Ｌ２受容体を含めた他の受容体と結合又は相互作用するよりも実質的に低い濃度でＰＤ−Ｌ１と結合又は相互作用する。特定の実施形態において、この化合物は、ＰＤ−Ｌ２受容体に対するより少なくとも約２倍高い濃度、約３倍高い濃度、約５倍高い濃度、約１０倍高い濃度、約２０倍高い濃度、約３０倍高い濃度、約５０倍高い濃度、約１００倍高い濃度、約２００倍高い濃度、約３００倍高い濃度、又は約５００倍高い濃度の結合定数でＰＤ−Ｌ１受容体に結合する。
【１２２６】
[001217]  一部の実施形態において、本明細書に提供されるＰＤ−Ｌ２阻害薬はＰＤ−Ｌ２に対して選択的であり、即ち、この化合物は、それがＰＤ−Ｌ１受容体を含めた他の受容体と結合又は相互作用するよりも実質的に低い濃度でＰＤ−Ｌ２と結合又は相互作用する。特定の実施形態において、この化合物は、ＰＤ−Ｌ１受容体に対するより少なくとも約２倍高い濃度、約３倍高い濃度、約５倍高い濃度、約１０倍高い濃度、約２０倍高い濃度、約３０倍高い濃度、約５０倍高い濃度、約１００倍高い濃度、約２００倍高い濃度、約３００倍高い濃度、又は約５００倍高い濃度の結合定数でＰＤ−Ｌ２受容体に結合する。
【１２２７】
[001218]  いかなる理論によっても拘束されることなく、腫瘍細胞がＰＤ−Ｌ１を発現し、及びＴ細胞がＰＤ−１を発現すると考えられる。しかしながら、腫瘍細胞によるＰＤ−Ｌ１発現はＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１阻害薬又は遮断薬の有効性に必須ではない。ある実施形態において、腫瘍細胞はＰＤ−Ｌ１を発現する。別の実施形態において、腫瘍細胞はＰＤ−Ｌ１を発現しない。一部の実施形態において、本明細書に記載される方法及び組成物は、ＴＩＬと併用した、本明細書に記載されるものなどの、ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１抗体の併用を含む。ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１抗体並びにＴＩＬの併用の投与は同時であっても、又は逐次的であってもよい。
【１２２８】
[001219]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２と約１００ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２と約９０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２と約８０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２と約７０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２と約６０ｐＭ以下のＫＤ、約５０ｐＭ以下のＫＤで結合する、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２と約４０ｐＭ以下のＫＤで結合する、又はヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２と約３０ｐＭ以下のＫＤで結合するＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害薬を含む。
【１２２９】
[001220]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に約７．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に約８×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に約８．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に約９×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に約９．５×１０５  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合する、又はヒトＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に約１×１０６  １／Ｍ・ｓ又はそれより速いｋａｓｓｏｃで結合するＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害薬を含む。
【１２３０】
[001221]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、ヒトＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２に約２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．１×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．２×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．４×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．５×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−１に約２．６×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、ヒトＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２に約２．７×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合する、又はヒトＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２に約３×１０−５  １／ｓ又はそれより遅いｋｄｉｓｓｏｃで結合するＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害薬を含む。
【１２３１】
[001222]  一部の実施形態において、記載される組成物及び方法は、ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約１０ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する；ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約９ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する；ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約８ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する；ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約７ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する；ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約６ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する；ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約５ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する；ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約４ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する；ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約３ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する；ヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約２ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害する；又はヒトＰＤ−１を遮断する、又はヒトＰＤ−１へのヒトＰＤ−Ｌ１又はヒトＰＤ−Ｌ２の結合を約１ｎＭ以下のＩＣ５０で遮断又は阻害するＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害薬を含む。
【１２３２】
[001223]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ＭＥＤＩ４７３６としても知られるデュルバルマブ（AstraZeneca plc.の子会社Medimmune, LLC、Gaithersburg, Marylandから市販されている）、又はその抗原結合断片、コンジュゲート、若しくは変異体である。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、米国特許第８，７７９，１０８号又は米国特許出願公開第２０１３／００３４５５９号（これらの開示は本明細書に参照により援用される）に開示される抗体である。デュルバルマブの臨床的有効性については、Page, et al., Ann. Rev. Med., 2014, 65, 185-202；Brahmer, et al., J. Clin. Oncol. 2014, 32, 5s (supplement, abstract8021)；及びMcDermott, et al., Cancer Treatment Rev., 2014,40, 1056-64に記載されている。デュルバルマブの調製及び特性については、米国特許第８，７７９，１０８号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。デュルバルマブのアミノ酸配列は表５０に示す。デュルバルマブモノクローナル抗体は、２２〜９６、２２’’〜９６’’、２３’〜８９’、２３’’’〜８９’’’、１３５’〜１９５’、１３５’’’〜１９５’’’、１４８〜２０４、１４８’’〜２０４’’、２１５’〜２２４、２１５’’’〜２２４’’、２３０〜２３０’’、２３３〜２３３’’、２６５〜３２５、２６５’’〜３２５’’、３７１〜４２９、及び３７１’’〜４２９’にジスルフィド結合；及びＡｓｎ−３０１及びＡｓｎ−３０１’’にＮ−グリコシル化部位を含む。
【１２３３】
[001224]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は配列番号４８３によって提供される重鎖と配列番号４８４によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８３及び配列番号４８４に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【１２３４】
[001225]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬はデュルバルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４８５に示される配列を含み、及びＰＤ−Ｌ１阻害薬軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４８６に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８５及び配列番号４８６に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８５及び配列番号４８６に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８５及び配列番号４８６に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８５及び配列番号４８６に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８５及び配列番号４８６に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【１２３５】
[001226]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４８７、配列番号４８８、及び配列番号４８９に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号４９０、配列番号４９１、及び配列番号４９２に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、抗体は、前述の抗体のいずれかと結合に関して競合し、及び／又はそれとＰＤ−Ｌ１上の同じエピトープに結合する。
【１２３６】
[001227]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、デュルバルマブに準じて医薬品規制当局の承認を受けた抗ＰＤ−Ｌ１バイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーは、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はデュルバルマブである）を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されている抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はデュルバルマブである。抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はデュルバルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はデュルバルマブである。
【１２３７】
【表５８】
2020514289.tif 000061
【１２３８】
[001228]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ＭＳＢ００１０７１８Ｃとしても知られるアベルマブ（Merck KGaA/EMD Seronoから市販されている）、又はその抗原結合断片、コンジュゲート、若しくは変異体である。アベルマブの調製及び特性については、米国特許出願公開第２０１４／０３４１９１７  Ａ１号（この開示は具体的に参照によって本明細書に援用される）に記載されている。アベルマブのアミノ酸配列は表５１に示す。アベルマブは、２２〜９６、１４７〜２０３、２６４〜３２４、３７０〜４２８、２２’’〜９６’’、１４７’’〜２０３’’、２６４’’〜３２４’’、及び３７０’’〜４２８’’に重鎖内ジスルフィド結合（Ｃ２３〜Ｃ１０４）；２２’〜９０’、１３８’〜１９７’、２２’’’〜９０’’’、及び１３８’’’〜１９７’’’に軽鎖内ジスルフィド結合（Ｃ２３〜Ｃ１０４）；２２３〜２１５’及び２２３’’〜２１５’’’に重鎖−軽鎖内ジスルフィド結合（ｈ  ５〜ＣＬ  １２６）；２２９〜２２９’’及び２３２〜２３２’’に重鎖−重鎖内ジスルフィド結合（ｈ  １１、ｈ  １４）；３００、３００’’にＮ−グリコシル化部位（Ｈ  ＣＨ２  Ｎ８４．４）；フコシル化複合バイアンテナリーＣＨＯ型グリカン；及び４５０及び４５０’にＨ  ＣＨＳ  Ｋ２  Ｃ末端リジンクリッピングを有する。
【１２３９】
[001229]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は配列番号４９３によって提供される重鎖と配列番号４９４によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９３及び配列番号４９４に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【１２４０】
[001230]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬はアベルマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号４９５に示される配列を含み、及びＰＤ−Ｌ１阻害薬軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号４９６に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９５及び配列番号４９６に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９６及び配列番号４９６に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９５及び配列番号４９６に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９５及び配列番号４９６に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９５及び配列番号４９６に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【１２４１】
[001231]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号４９７、配列番号４９８、及び配列番号４９９に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号５００、配列番号５０１、及び配列番号５０２に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、抗体は、前述の抗体のいずれかと結合に関して競合し、及び／又はそれとＰＤ−Ｌ１上の同じエピトープに結合する。
【１２４２】
[001232]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、アベルマブに準じて医薬品規制当局の承認を受けた抗ＰＤ−Ｌ１バイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーは、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はアベルマブである）を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されている抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はアベルマブである。抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はアベルマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はアベルマブである。
【１２４３】
【表５９】
2020514289.tif 000062
【１２４４】
[001233]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、ＭＰＤＬ３２８０Ａ又はＲＧ７４４６としても知られるアテゾリズマブ（Roche Holding AG、Basel, Switzerlandの子会社Genentech, Inc.からTECENTRIQとして市販されている）、又はその抗原結合断片、コンジュゲート、若しくは変異体である。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、米国特許第８，２１７，１４９号（この開示は具体的に参照によって本明細書に援用される）に開示される抗体である。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、米国特許出願公開第２０１０／０２０３０５６  Ａ１号、同第２０１３／００４５２００  Ａ１号、同第２０１３／００４５２０１  Ａ１号、同第２０１３／００４５２０２  Ａ１号、又は同第２０１４／００６５１３５  Ａ１号（これらの開示は具体的に本明細書において参照によって援用される）に開示される抗体である。アテゾリズマブの調製及び特性については、米国特許第８，２１７，１４９号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載されている。アテゾリズマブのアミノ酸配列は表５２に示す。アテゾリズマブは、２２〜９６、１４５〜２０１、２６２〜３２２、３６８〜４２６、２２’’〜９６’’、１４５’’〜２０１’’、２６２’’〜３２２’’、及び３６８’’〜４２６’’に重鎖内ジスルフィド結合（Ｃ２３〜Ｃ１０４）；２３’〜８８’、１３４’〜１９４’、２３’’’〜８８’’’、及び１３４’’’〜１９４’’’に軽鎖内ジスルフィド結合（Ｃ２３〜Ｃ１０４）；２２１〜２１４’及び２２１’’〜２１４’’’に重鎖−軽鎖内ジスルフィド結合（ｈ  ５〜ＣＬ  １２６）；２２７〜２２７’’及び２３０〜２３０’’に重鎖−重鎖内ジスルフィド結合（ｈ  １１、ｈ  １４）；及び２９８及び２９８’にＮ−グリコシル化部位（Ｈ  ＣＨ２  Ｎ８４．４＞Ａ）を有する。
【１２４５】
[001234]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は配列番号５０３によって提供される重鎖と配列番号５０４によって提供される軽鎖とを含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列を有する重鎖及び軽鎖、又はその抗原結合断片、Ｆａｂ断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、変異体、若しくはコンジュゲートを含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列と各々少なくとも９９％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列と各々少なくとも９８％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列と各々少なくとも９７％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列と各々少なくとも９６％同一の重鎖及び軽鎖を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０３及び配列番号５０４に示される配列と各々少なくとも９５％同一の重鎖及び軽鎖を含む。
【１２４６】
[001235]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬はアテゾリズマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域（ＶＲ）を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬重鎖可変領域（ＶＨ）は配列番号５０５に示される配列を含み、及びＰＤ−Ｌ１阻害薬軽鎖可変領域（ＶＬ）は配列番号５０６に示される配列を含み、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０５及び配列番号５０６に示される配列と各々少なくとも９９％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０５及び配列番号５０６に示される配列と各々少なくとも９８％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０５及び配列番号５０６に示される配列と各々少なくとも９７％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０５及び配列番号５０６に示される配列と各々少なくとも９６％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０５及び配列番号５０６に示される配列と各々少なくとも９５％同一のＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【１２４７】
[001236]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、それぞれ配列番号５０７、配列番号５０８、及び配列番号５０９に示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換、並びにそれぞれ配列番号５１０、配列番号５１１、及び配列番号５１２に示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ドメイン、及びその保存的アミノ酸置換を含む。ある実施形態において、抗体は、前述の抗体のいずれかと結合に関して競合し、及び／又はそれとＰＤ−Ｌ１上の同じエピトープに結合する。
【１２４８】
[001237]  ある実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブに準じて医薬品規制当局の承認を受けた抗ＰＤ−Ｌ１バイオシミラーモノクローナル抗体である。ある実施形態において、バイオシミラーは、先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤のアミノ酸配列と少なくとも９７％の配列同一性、例えば、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、且つ先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤と比較したとき１つ以上の翻訳後修飾を含むアミノ酸配列（ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はアテゾリズマブである）を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態において、１つ以上の翻訳後修飾は、以下の１つ以上から選択される：グリコシル化、酸化、アミド分解、及びトランケーション。一部の実施形態において、バイオシミラーは、認可されている又は認可が申請されている抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤の処方物と異なる処方物で提供され、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はアテゾリズマブである。抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国ＦＤＡ及び／又は欧州連合ＥＭＡなどの医薬品規制当局によって認可され得る。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はアテゾリズマブである。一部の実施形態において、バイオシミラーは、１つ以上の賦形剤を更に含む組成物として提供され、１つ以上の賦形剤は先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤に含まれる賦形剤と同じであるか、又は異なり、ここで先発医薬品製剤又は先発バイオ製剤はアテゾリズマブである。
【１２４９】
【表６０】
2020514289.tif 000063
【１２５０】
[001238]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、米国特許出願公開第２０１４／０３４１９１７  Ａ１号（この開示は参照により本明細書に援用される）に記載される抗体を含む。別の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１への結合に関してこれらの抗体のいずれかと競合する抗体もまた含まれる。ある実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３５５５９としても知られるＭＤＸ−１１０５であり、これは米国特許第７，９４３，７４３号（この開示は本明細書に参照により援用される）に開示されている。ある実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国特許第７，９４３，７４３号（これは本明細書に参照により援用される）に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される。
【１２５１】
[001239]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ１阻害薬は、INVIVOMAB抗ｍ−ＰＤ−Ｌ１クローン１０Ｆ．９Ｇ２（カタログ番号ＢＥ０１０１、BioX Cell, Inc.、West Lebanon, NH, USA）などの市販のモノクローナル抗体である。ある実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、AFFYMETRIX EBIOSCIENCE（ＭＩＨ１）などの市販のモノクローナル抗体である。幾つもの市販の抗ＰＤ−Ｌ１抗体が当業者に公知である。
【１２５２】
[001240]  ある実施形態において、ＰＤ−Ｌ２阻害薬は、BIOLEGEND 24F.10C12マウスＩｇＧ２ａ、κアイソタイプ（カタログ番号３２９６０２、Biolegend, Inc.、San Diego, CA）、SIGMA抗ＰＤ−Ｌ２抗体（カタログ番号ＳＡＢ３５００３９５、Sigma-AldrichCo.、St. Louis, MO）、又は当業者に公知の他の市販の抗ＰＤ−Ｌ２抗体など、市販のモノクローナル抗体である。
【１２５３】
[001241]  本明細書には本発明の好ましい実施形態が示され、説明されるが、かかる実施形態は単に例として提供されるに過ぎず、他に本発明の範囲を限定することを意図するものではない。本発明の実施においては、説明されている本発明の実施形態の様々な代替例を用いることができる。
【実施例】
【１２５４】
実施例
[001242]  ここで、以下の実施例を参照して、本明細書に包含される実施形態を説明する。これらの実施例はあくまでも例示を目的として提供されるものであり、本明細書に包含される開示がこれらの実施例に限定されると解釈されることがあっては決してならず、むしろ、本明細書に提供される教示の結果として明らかになるあらゆる変形例を包含すると解釈されなければならない。
【１２５５】
実施例１  −  ＴＩＬの拡大培養方法及び拡大培養したＴＩＬによる癌の治療方法
[001243]  ＴＩＬは、当該技術分野において公知の方法及び本明細書に記載される任意の方法を用いて拡大培養されてもよい。例えば、ＴＩＬの拡大培養方法が図１に示される。図１の方法に、本明細書に記載されるとおりＴＮＦＲＳＦアゴニストが加えられてもよい。ＴＮＦＲＳＦアゴニストは、例えば４−１ＢＢ又はＯＸ４０アゴニストであってもよく、プレＲＥＰ又はＲＥＰ段階、又は両方の段階で、ＴＩＬ成長を増強するのに十分な濃度で加えられてもよい。ＴＩＬの拡大培養は、本明細書に記載されるＴＮＦＲＳＦアゴニストと併用した患者の癌の任意の治療方法と更に組み合わされてもよい。ＴＩＬの拡大培養方法及び拡大培養したＴＩＬによる癌患者の治療方法は図２に示す。
【１２５６】
実施例２  −  ４−１ＢＢアゴニストを使用したＴＩＬの拡大培養方法
[001244]  ４−１ＢＢ−Ｆｃハイブリドーマを作製し、二次抗体との架橋結合によって４−１ＢＢシグナル伝達経路を活性化させるその能力に関してスクリーニングした。ＮＦ−ｋＢを発現するジャーカット細胞上の４−１ＢＢシグナル伝達を用量依存的に活性化させるその能力に関して緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）レポーターを使用してハイブリドーマ上清を評価した。上清をジャーカット細胞と室温で２０分間インキュベートし、続いてヤギ抗マウス二次抗体（１ｍｇ／ｍＬ）と３７℃で一晩架橋結合させた。ジャーカット細胞上の４−１ＢＢに結合したことが同定された１０個のクローンについて、結果を図３〜図１２に示す。
【１２５７】
[001245]  ＧＦＰレポーター発現によって明らかになるＮＫｋＢ経路活性化に関して細胞をIntellicyteで分析した。結果は、抗体が二次抗体架橋結合なしにジャーカット細胞上の４−１ＢＢ経路を活性化することを示す。
【１２５８】
実施例３  −  ウトミルマブ又はウレルマブ及び１１Ｄ４／１８Ｄ８を使用したエキソビボ培養固形腫瘍断片（複数の組織学）からのＴＩＬの拡大培養方法並びに４−１ＢＢ及び／又はＯＸ４０に対する抗体による活性化がＴＩＬの拡大培養及び機能に及ぼす効果
[001246]  ＴＩＬは、主に抗原を経験した（非ナイーブ）Ｔ細胞であり、ダメージ関連分子パターン分子（ＤＡＭＰ）の局所的蓄積並びにＣＴＬＡ−４及びＰＤ−１を含む誘導型チェックポイント受容体が多くの場合に関与している免疫抑制性微小環境に関連する全ての成人腫瘍に様々な程度で見られる。Chacon, et al., Clin. Cancer Res. 2015, 21,611-21；Joseph, et al.,Clin. Cancer Res. 2011, 17, 4882-91。これらのマーカー、並びにＴＩＭ３、ＬＡＧ３、及びＴＩＧＩＴは、消耗表現型を定義する。そのため、ＴＩＬが発現する共刺激受容体はＴＩＬの運命及び拡大を修飾する。ＴＩＬ上で４−１ＢＢ及び／又はＯＸ４０が活性化すると、ＩＬ−２単独で達成可能なものを越えて腫瘍断片からＴＩＬを拡大培養することが可能になる。他の共刺激受容体の活性化及び／又はチェックポイント受容体の拮抗がＴＩＬ機能（生存、腫瘍免疫抑制の回避）、腫瘍断片からの遊出を更に増強し、及びインビトロ拡大培養を促進し得る。更に、これらのインビトロ研究では、これらの抗体の単独での、又はＴＩＬの養子移入と組み合わせたインビボ適用に対する反応を予測し得る。これらの２つの活性化共刺激分子（例えば、ＯＸ４０、１１Ｄ４又は１８Ｄ８、及び４−１ＢＢ、ウトミルマブ又はウレルマブ）に特異的な免疫調節性ｍＡｂは、かかる能力に関して試験することができる。腫瘍断片内での共刺激受容体４−１ＢＢ及びＯＸ４０の活性化により、腫瘍の断片からのＴＩＬ遊出、増殖、メモリー表現型の促進及び新生Ｔ細胞の細胞傷害性が増強されると仮定される。本研究の主目標は、（ａ）組み合わせでの４−１ＢＢ及びＯＸ４０又は（ｂ）抗４−１ＢＢ及び（ｃ）抗ＯＸ４０単独に特異的なｍＡｂが腫瘍断片からのＴＩＬの細胞傷害性及びメモリー表現型を増大させるかどうかを決定することである。
【１２５９】
[001247]  （ａ）ＯＸ４０及び（ｂ）４−１ＢＢに特異的な各精製ｍＡｂの１５ｍｇを使用する。様々な組織学の腫瘍は商業的供給元から入手し得る。合計２０個の独立した患者腫瘍を入手することになる。腫瘍は滅菌ＨＢＳＳ又は別の適切な媒体中に入れて発送されることになる。無菌条件を維持するため、腫瘍は層流フード内においてのみ取り扱うことになる。可能な場合（腫瘍＞０．５ｃｍ直径であれば）、下流ＩＨＣ及び／又はＤＮＡ／ＲＮＡ単離用に腫瘍の一部分をＦＦＰＥ処理及び／又は凍結保存することになる。ＩＨＣによるバイオマーカー分析には、ＣＤ３、ＣＤ１１ｃ、並びにＰＤ１及びＰＤ−Ｌ１が含まれることになる。可能であれば常に、自己血液試料（最大２０ｍＬ）を取得することになり、及びＰＢＭＣは凍結保存することになる。腫瘍に対して全エクソームシーケンシングを実施する場合、バンクに保存された自己ＰＢＭＣからのエクソーム配列が正常（即ち、突然変異がない）と定義されることになる。或いは、腫瘍単一細胞懸濁液を利用してもよい。腫瘍は受領後に洗浄し、２〜３ｍｍ断片に分割し、６，０００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ−２（組換え）単独、ＯＸ４０アゴニスト、抗４−１ＢＢアゴニスト、並びにＯＸ４０及び４−１ＢＢアゴニストの組み合わせを補足した培養培地と共にトリプリケートで２４ウェルプレート（１断片／ウェル）又は６ウェルプレート（４断片／ウェル）中に細胞培養下に置くことになる。十分な腫瘍が利用可能な一部の実験では、ＩＬ−２の力価測定（６，０００；６００；６０；及び０ＩＵのＩＬ−２）を試験することになる。ＩＬ−２の賦形剤対照を使用することになる。各ｍＡｂの最終濃度は３０μｇ／ｍＬとなることになる。２４〜４８時間培養した後、各条件から２５０μＬの上清を回収し、続くサイトカイン及びケモカイン濃度（μｇ／１０６細胞／２４時間）の分析のため−２０℃で保存することになる。ＴＩＬは、１１日目、２１日目及び／又は「プレＲＥＰ」の日に各条件から回収することになる（少なくとも５００，０００細胞／試料）。ＴＩＬの２つのアリコートをペレット化し、＜１０μＬのＰＢＳ中に再懸濁することになり、及び−８０℃で凍結することになる。＜１０６細胞未満が回収された場合、遺伝子発現アレイのみを実施することになる。培養物は、７日目に「使用済み」の培地を部分的に取り除き、等容積の培養培地＋６０００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ−２を加えることによりフィーディングすることになる。使用済み培地は、続く多重アッセイを用いたサイトカイン／ケモカイン分析（例えば、Luminex 100システム）のため、−２０℃で保存することになる。２回以上の実験条件レプリケートを開始するのに十分な腫瘍断片が利用可能な場合、７日目に培養物に更なるｍＡｂを加えることになる。ＴＩＬ培養物は更に１４日間維持することになる。２１日目、フローサイトメトリーを用いて総細胞収率、生存、細胞表面及び細胞内免疫表現型を決定することになる。以下のマーカーが含まれることになる：ＣＤ４５ＲＡ、ＣＣＲ７、ＣＤ３、ＴＣＲ−α／β、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＸＣＲ３、ＣＤ５６、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＢＴＬＡ、ＫＬＲＧ１、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＣＤ３３、ＣＤ５７、ＣＤ２５、ＣＤ１２７��ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＴＩＧＩＴ、ＲＡＧＥ、及びＫｉ６７。十分な細胞が利用可能な場合には、ＣＤ１０７ａ、ＮＫＧ２Ｄ、ＫＩＲＳ、ケモカインデス受容体（Ｆａｓ、ＤＲ４）及び抗アポトーシス性／オートファジー促進性タンパク質（ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬ、Ｂｉｍ、ＣＤ２００、及びＬＣ３／ＨＭＧＢ１）を含めた他のバイオマーカーもまた評価することになる。細胞傷害性及び調節性Ｔ細胞の細胞内マーカー、それぞれ、グランザイムＢ、ｐＳＴＡＴ３、ｐＳＴＡＴ１、及びＦＯＸＰ３を評価することになる。溶解アッセイを用いてＴＩＬの溶解能を決定することになる。更なる腫瘍材料が利用可能な場合、及び（ａ）酵素消化後に生じる腫瘍細胞懸濁液、（ｂ）前述の腫瘍から生じる自己腫瘍株、及び／又は（ｃ）同種細胞株（利用可能な場合）を回収したＴＩＬと共に共培養し、ＩＦＮ−γ遊離を測定することになる。過剰な細胞が得られた場合、後に拡大された予算を用いて実施し得る遺伝子発現解析（ＴＣＲ  Ｖβクロノタイピング分析を含む）用のＲＮＡ及びＤＮＡの単離のため、それらは凍結保存することになる。抗ＰＤＬ−１及び抗ＣＴＬＡ−４又はこれらの組み合わせで有効性（以下に定義する）が認められた場合、腫瘍断片培養物中の指示されるｍＡｂの濃度を下げる、又はより詳細な用量反応評価を実施する可能性を探ることになる。７日目に培養物中に腫瘍断片が目に見える場合、それらは回収することになり、単一細胞懸濁液の作成後に十分な細胞が利用可能な場合、それらは遺伝子解析及びフローサイトメトリーによる表現型分析に供することになる（この優先順位で；要交渉）。フローサイトメトリー分析は、適切な蛍光ｍＡｂパネルを使用した染色後のＴ細胞、樹状細胞、マクロファージ、Ｂ細胞、及びＮＫ細胞の表現型に重点を置くことになる。マーカーには以下が含まれることになる：ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＨＬＡクラスＩＩ、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ８３、ＣＤ５６、ＣＤ１６、ＣＤ１９、及びＣＤ２０。
【１２６０】
[001248]  腫瘍断片培養物に４−１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、及びこれらの組み合わせを加えた有効性の評価に用いる基準は、以下のとおり要約される：
・拡大培養後のＴＩＬ数の増加（ＣＤ４及び／又はＣＤ８）
・拡大培養後のＴｒｅｇ数の減少
・エフェクター及びＴｒｅｇ中のＴ細胞増殖マーカー（Ｋｉ６７）の変化
・エフェクター／メモリー／分化表現型、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ５７、ＣＤ４５ＲＡ、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＣＲ７、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、ＣＤ４５ＲＡ；テロメラーゼ長さの変化））
・ＮＫ細胞（ＣＤ３−／ＣＤ５６＋）数の増加、増殖及び活性化状態
・Ｔ細胞における細胞内シグナル伝達タンパク質又はリンタンパク質レベル（例えば、ＡＫＴ対ＥＲＫ）の探索的変化
・リダイレクトされた溶解によって測定したときのＣＴＬ活性／溶解能の増加
・ＴＩＬ／腫瘍ライセート、ＴＩＬ／自己腫瘍及び／又はＴＩＬ／同種組織腫瘍共培養物中におけるＩＦＮ−γ／ＨＭＧＢ１産生の増加。
【１２６１】
[001249]  実施すべき更なる実験としては、（１）変異遺伝子及び可能性のあるネオエピトープを同定するためのＦＦＰＥ又は新鮮凍結腫瘍材料での全エクソームシーケンシング及びＲＮＡＳｅｑ、（２）腫瘍断片培養開始後２４〜４８時間で収集した培養上清のサイトカイン及びケモカイン分析、（３）７日目に初期培養物から取り出した腫瘍断片の遺伝子発現解析、（４）ハイスループットＴＣＲ  Ｖβ  ＣＤＲ３領域シーケンシングを用いた単離したＴＩＬのＴＣＲクローン型解析、（５）自己／同種組織腫瘍上のＰＤ−Ｌ１のＩＦＮ−γ誘導性上方制御の存在下でｍＡｂがバンク保存ＴＩＬのＴＩＬエフェクター機能に及ぼす影響（以下に概説する）及びＰＣＲ／ＩＨＣ／消化による残存Ｔ細胞に関する残りの断片の分析が挙げられる。
【１２６２】
[001250]  アッセイパラメータの差は、対応のある及び対応のないｔ検定（ウィルコクソン順位和及び符号付き順位検定）を使用して有意性に関して検定することになる。多重パラメータ比較には、一元配置及び二元配置ＡＮＯＶＡ分析を用いることになる。適用可能な場合、連続測定値間の相関の評価にスピアマン回帰分析を用いることになる。データは全て、表にして分析することができる。
【１２６３】
実施例４  −  ４−１ＢＢ、ＯＸ４０、及び他のＴＮＦＲＳＦメンバーに対する六量体リガンドを使用したＴＩＬの拡大培養
[001251]  この例では、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、及び他のＴＮＦＲＳＦメンバーに対する結合ドメインを有する構造Ｉ−Ａの六量体融合タンパク質による活性化がエキソビボ培養した固形腫瘍断片（複数の組織学）からの腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の拡大培養及び機能に及ぼす効果を調べる。１００ｍｇの各六量体融合タンパク質（例えば、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、及びＣＤ２７）が、以下の対象疾患から入手した腫瘍と共に使用されることになり得る：肉腫、結腸直腸癌、急性骨髄性白血病、卵巣癌、トリプルネガティブ乳癌、膵癌（Ｒａｓ発現）、腎癌、及び膀胱癌。様々な組織学の腫瘍は商業的供給元から入手することになる。約２０個の独立した患者腫瘍を入手することになる（上記に挙げたとおりの対象疾患につき２〜３個の腫瘍）。腫瘍は滅菌ＨＢＳＳ又は別の適切な媒体に入れてLionに発送されることになる。無菌条件を維持するため、腫瘍は層流フード内においてのみ取り扱うことになる。或いは、腫瘍単一細胞懸濁液を利用してもよい。腫瘍は受領後に洗浄し、２〜３ｍｍ（長さ×幅×高さ）断片に分割し、６，０００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ２（組換え）単独、４−１ＢＢの組み合わせ  ＨＥＲＡ単独を補足した培養培地と共にトリプリケートで２４ウェルプレート（１断片／ウェル）又は６ウェルプレート（４断片／ウェル）中に細胞培養下に置くことになり、対照として供し、及びそれぞれ３つの実験条件を利用することになる。ＩＬ−２の賦形剤対照を使用することになる。ＨＥＲＡの最終濃度は３０μｇ／ｍＬとなることになる。２４〜４８時間培養した後、各条件から２５０μＬの上清を回収し、続くサイトカイン及びケモカイン濃度（ｐｇ／１０６細胞／２４時間）の分析のため−２０℃で保存することになる。ＴＩＬは、１１日目、２１日目及び／又は「プレＲＥＰ」の日に各条件から回収することになる（少なくとも５００，０００細胞／試料）。ＴＩＬの２つのアリコートをペレット化し、＜１０μＬのＰＢＳ中に再懸濁することになり、及び凍結することになる。＜１０６細胞未満が回収された場合、遺伝子発現アレイのみを実施することになる。培養物は、７日目に「使用済み」の培地を部分的に取り除き、等容積の培養培地＋６０００ＩＵ／ｍＬ  ＩＬ−２を加えることによりフィーディングすることになる。使用済み培地は、続く多重アッセイを用いたサイトカイン／ケモカイン分析（例えば、Luminex 100システム）のため、−２０℃で保存することになる。２回以上の実験条件レプリケートを開始するのに十分な腫瘍断片が利用可能な場合、７日目に培養物に更なるリガンドを加えることになる。ＴＩＬ培養物は更に１４日間維持することになる。
【１２６４】
[001252]  ２１日目、フローサイトメトリーを用いて総細胞収率、生存、細胞表面及び細胞内免疫表現型を決定することになる。以下のマーカーが含まれることになる：ＣＤ４５ＲＡ、ＣＣＲ７、ＣＤ３、ＴＣＲ−α／β、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＸＣＲ３、ＣＤ５６、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＢＴＬＡ、ＫＬＲＧ１、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＣＤ３３、ＣＤ５７、ＣＤ２５、ＣＤ１２７、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＴＩＧＩＴ、ＲＡＧＥ、及びＫｉ６７。十分な細胞が利用可能な場合には、ＣＤ１０７ａ、ＮＫＧ２Ｄ、ＫＩＲＳ、ケモカインデス受容体（Ｆａｓ、ＤＲ４）及び抗アポトーシス性／オートファジー促進性タンパク質（ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬ、Ｂｉｍ、ＣＤ２００、及びＬＣ３／ＨＭＧＢ１）を含めた他のバイオマーカーもまた評価することになる。細胞傷害性及び調節性Ｔ細胞の細胞内マーカー、それぞれ、グランザイムＢ、ｐＳＴＡＴ３、ｐＳＴＡＴ１、及びＦＯＸＰ３を評価することになる。溶解アッセイを用いてＴＩＬの溶解能を決定することになる。更なる腫瘍材料が利用可能な場合、及び（ａ）酵素消化後に生じる腫瘍細胞懸濁液、（ｂ）前述の腫瘍から生じる自己腫瘍株、及び／又は（ｃ）同種細胞株（利用可能な場合）を回収したＴＩＬと共に共培養し、ＩＦＮ−γ遊離を測定することになる。過剰な細胞が得られた場合、Nanostringヒト免疫学パネルによる遺伝子発現解析（ＴＣＲ  Ｖβクロノタイピング分析を含む）用のＲＮＡ及びＤＮＡの単離のため、それらは凍結保存することになる。７日目に培養物中に腫瘍断片が目に見える場合、それらは回収することになり、単一細胞懸濁液の作成後に十分な細胞が利用可能な場合、それらは遺伝子解析及びフローサイトメトリーによる表現型分析に供することになる。フローサイトメトリー分析は、適切な蛍光ｍＡｂパネルを使用した染色後のＴ細胞、樹状細胞、マクロファージ、Ｂ細胞、及びＮＫ細胞の表現型に重点を置くことになる。マーカーには以下が含まれることになる：ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＨＬＡクラスＩＩ、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ８３、ＣＤ５６、ＣＤ１６、ＣＤ１９、及びＣＤ２０。
【１２６５】
[001253]  腫瘍断片培養に六量体融合タンパク質を加えた有効性の評価に用いる基準は上記の実施例３に要約され、更なる任意選択の基準について表５３に記載する。
【１２６６】
【表６１】
2020514289.tif 000064
【１２６７】
[001254]  更なる実験としては、（１）変異遺伝子及び可能性のあるネオエピトープを同定するためのＦＦＰＥ又は新鮮凍結腫瘍材料での全エクソームシーケンシング及びＲＮＡＳｅｑ、（２）腫瘍断片培養開始後２４〜４８時間で収集した培養上清のサイトカイン及びケモカイン分析、（３）７日目に初期培養物から取り出した腫瘍断片の遺伝子発現解析、（４）ハイスループットＴＣＲ  Ｖβ  ＣＤＲ３領域シーケンシングを用いた単離したＴＩＬのＴＣＲクローン型解析、（５）自己／同種組織腫瘍上のＰＤ−Ｌ１のＩＦＮ−γ誘導性上方制御の存在下で六量体融合タンパク質がLionバンク保存ＴＩＬのＴＩＬエフェクター機能に及ぼす影響及びＰＣＲ／ＩＨＣ／消化による残存Ｔ細胞に関する残りの断片の分析が挙げられる。
【１２６８】
[001255]  アッセイパラメータの差は、対応のある及び対応のないｔ検定（ウィルコクソン順位和及び符号付き順位検定）を使用して有意性に関して検定することになる。多重パラメータ比較には、一元配置及び二元配置ＡＮＯＶＡ分析を用いることになる。適用可能な場合、連続測定値間の相関の評価にスピアマン回帰分析を用いることになる。
【１２６９】
実施例５  −  ４−１ＢＢ及び抗ＯＸ４０アゴニスト抗体がＴＩＬ拡大培養及びエフェクター機能に及ぼす影響の判定
[001256]  本研究の目的は、４−１ＢＢ（ウレルマブ）及び抗ＯＸ４０アゴニスト抗体がＴＩＬ拡大培養及びエフェクター機能に及ぼす影響を判定すること、並びに拡大培養中のＩＣＯＳ及びＧＩＴＲ発現に関する情報を入手することである。
【１２７０】
[001257]  ＴＩＬ拡大培養及び表現型に対する抗４−１ＢＢ及び抗ＯＸ４０アゴニスト抗体のインビトロ評価は以下のとおり実施する。腫瘍断片及び吸引物で抗体力価測定を行い、ＴＩＬ拡大培養で用いるのに好適な濃度を決定する。（１）ＩＬ−２＋抗４−１ＢＢ単独、（２）ＩＬ−２  抗ＯＸ４０単独、（３）ＩＬ−２＋抗４１ＢＢ＋抗ＯＸ４０、及び（４）ＩＬ−２単独（対照）について、プレＲＥＰ及びＲＥＰの両方で（これらの特異的条件において）抗４−１ＢＢ及び抗ＯＸ４０アゴニストがＴＩＬ拡大培養に及ぼす影響を判定する。ＴＩＬ拡大培養及び表現型は、（１）割合及び絶対細胞数の両方で見たＣＤ３＋サブセット、ＣＤ３＋ＣＤ８＋サブセット、及びＣＤ３＋ＣＤ４＋の拡大並びに生存率、及び（２）１８カラーフローを使用したフローサイトメトリーによる分化及び活性化状態の評価（ＩＣＯＳ及びＧＩＴＲ、Ｋｉ６７、及びアポトーシスマーカーに関する染色を含む）によって評価することになる。
【１２７１】
[001258]  抗４−１ＢＢ及び抗ＯＸ４０アゴニスト抗体で拡大培養したＴＩＬのＴＣＲレパートリー及び発現プロファイリングのインビトロ評価は以下のとおり実施する。特異的抗ＴＲＢＶ抗体での染色及びiRepertoire, Inc.からの市販のＴＣＲレパートリーアッセイの使用により、処理条件との比較におけるＩＬ−２単独で拡大培養したＴＩＬのＴＣＲレパートリーが明らかになる。個々のＴＩＬの発現プロファイリングは、nCounter Vantage（商標）ＲＮＡ適応免疫パネルをNanostring解析と共に用いて実施する。
【１２７２】
[001259]  腫瘍応答性及びエフェクター機能のインビトロ評価は以下のとおり実施する。自己腫瘍細胞懸濁液又は腫瘍細胞株を作成する（可能な限り）。自己腫瘍細胞／選別後自己腫瘍細胞懸濁液と、上記に記載した処理条件との比較におけるＩＬ−２単独で拡大培養した自己ＴＩＬとを共培養することにより、腫瘍溶解アッセイにおける腫瘍応答性を評価する。自己腫瘍細胞懸濁液／腫瘍細胞株を利用できない場合、代わりに抗ＣＤ３／ＣＤ２８／ＣＤ１３７によるＴ細胞活性化アッセイを実施してＩＦＮ−γ産生／ＣＤ１０７ａ発現を測定することによりエフェクター機能を評価することになる。
【１２７３】
実施例６  −  ＴＩＬのエキソビボ拡大培養及びそのエフェクター機能活性に対する４−１ＢＢ及びＯＸ４０抗体の更なる判定
[001260]  ＯＸ４０及び４−１ＢＢは、それぞれ抗原特異的ＣＤ４＋及びＣＤ８＋サブセットによって発現されることが分かっている。Ｔ細胞上で共刺激分子（４−１ＢＢ及びＯＸ４０）が活性化すると、エフェクター機能、細胞生存、及び細胞拡大が増強される。マウスモデルにおいて、ＯＸ４０及び４−１ＢＢ受容体の活性化がＴＩＬ拡大及び抗腫瘍機能を改善することが示された。抗４−１ＢＢアゴニスト抗体は、インビトロ拡大培養から得られる黒色腫ＴＩＬの収率を増加させることが示された。以下のプロトコルに従い、４−１ＢＢ及びＯＸ４０に対するアゴニスト抗体が、単独及び組み合わせで、ＴＩＬのエキソビボ拡大培養及びそのエフェクター機能活性に及ぼす効果を調べてもよい。
【１２７４】
[001261]  図１３は、本研究で使用したＴＩＬ拡大培養プロトコルを説明する。図１５に示されるとおり、患者から腫瘍組織を回収し、断片化して、本明細書に記載されるとおりＩＬ−２の存在下でプレＲＥＰプロセスに供した。次に組織を照射ＰＢＭＣと共にＩＬ−２及び抗ＣＤ３抗体の存在下でＲＥＰプロセスに供した（図１３）。
【１２７５】
[001262]  本試験では以下の実験条件を実行した：
【１２７６】
【表６２】
2020514289.tif 000065
【１２７７】
【表６３】
2020514289.tif 000066
【１２７８】
[001263]  Ｔ細胞活性化、増殖、及び消耗は、以下のリストに従うフローサイトメトリー（flow-cytommetry）によってモニタすることができ、ここでパネル１は免疫細胞系統、Ｔ細胞サブセット、及びＴ細胞分化を示し、パネル２はＴ細胞活性化及び消耗を示す：
【１２７９】
【表６４】
2020514289.tif 000067
【１２８０】
[001264]  本発明のいずれか１つの理論に限定されることなく、抗４−１ＢＢと抗ＯＸ４０アゴニストとの組み合わせは、単独で、又はプロセス２Ａとの組み合わせで、プレＲＥＰ  ＴＩＬの拡大培養を特にＣＤ３＋ＣＤ８＋ＴＩＬサブセットにおいて改善し；ある種の腫瘍の成功率を改善し；プレＲＥＰ  ＴＩＬ拡大培養の所要時間を短縮し；及び／又は抗原再刺激後のエフェクター機能及び細胞生存を含めたＴＩＬの多機能性を増強し得ることが予想される。
【１２８１】
実施例７  −  自己ＴＩＬの有効性及び安全性を評価する臨床試験
[001265]  本実施例は、複数の腫瘍型にわたる自己ＴＩＬの有効性を判定するための第１／２相臨床試験について記載する。本治験の目的は、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１による客観的奏効率（ＯＲＲ）を用いて卵巣癌及び骨肉腫を有する対象における有効性を判定することである。膵管腺癌（ＰＤＡＣ）コホートについての主要目的は、６ヵ月生存率によって測定したときの有効性を判定することである。
【１２８２】
[001266]  副次的目的には、以下が含まれ得る：（１）ＲＥＣＩＳＴ  ｖ．１．１を用いてＰＤＡＣにおけるＯＲＲを判定する；（２）コホート内及びコホート間の病勢制御割合（ＤＣＲ）を決定する；（３）奏効期間（ＤＯＲ）を決定する；（４）無進行生存（ＰＦＳ）及び全生存（ＯＳ）を決定する；及び（５）複数の腫瘍型でＴＩＬによる養子細胞療法の安全性プロファイルを更に特徴付ける。
【１２８３】
定義／略称
ＡＣＴ    養子細胞療法
ＡＥ    有害事象
ＡＬＴ    アラニントランスアミナーゼ
ＡＮＣ    絶対好中球数
ＡＳＴ    アスパラギン酸トランスアミナーゼ
ＡＳＭＲ    年齢標準化死亡率
ａＰＴＴ    活性化部分トロンボプラスチン時間
ＢＩＤ    １日２回
ＢＳＡ    体表面積
ＣＢＣ    全血球計算
ＣＤ４＋Ｔ    ＣＤ４＋  Ｔ細胞
ＣＤ８＋Ｔ    ＣＤ８＋  Ｔ細胞
ＣＦＲ    米国連邦規則集
ＣＩ    信頼区間
ＣＬＳ    毛細血管漏出症候群
ＣＭＯ    医薬品製造受託機関(Contract ManufacturingOrganization)
ＣＯＰＤ    慢性閉塞性肺疾患
ＣＲ    完全奏効
ＣｒＣｌ    クレアチニンクリアランス
ＣＴ    コンピュータ断層撮影法
ＣＴＣＡＥｖ４．０３    有害事象共通用語規準(CommonTerminology Criteria for Adverse Events)第４．０３版
Ｄ５Ｗ    デキストロース５重量％
ＤＣＲ    病勢制御割合
ＤＯＲ    奏効期間
ＥＢＶ    エプスタイン・バーウイルス
ＥＣＨＯ    心エコー図
ＥＫＧ    心電図
ＥＯＣ    上皮性卵巣癌
ＥＯＲＴＣ  ＱＬＤ−Ｃ３０    研究治療機関(EuropeanOrganisation for Research and Treatment of Cancer)クオリティ・オブ・ライフ質問票−コア３０項目
ＥＷＶ    早期離脱ビジット(Early Withdrawal Visit)
ＦＤＡ    食品医薬品局(Food and DrugAdministration)
ＦＥＶ    努力呼気量
ＦＶＣ    努力肺活量
ＧＣＰ    医薬品の臨床試験の実施の基準(Good ClinicalPractice)
Ｈｇｂ    ヘモグロビン
ＨＩＶ    ヒト免疫不全ウイルス
ＨＲＱｏＬ    健康に関連した生活の質
ＩＣＨ    ハーモナイゼーション国際会議(InternationalConference on Harmonization)
ＩＬ    インターロイキン
ＩＮＤ    治験薬（申請）
ｉｒＲＥＣＩＳＴ    免疫関連固形癌効果判定基準(Immune-related Response Evaluation Criteria in Solid Tumors)
ＩＲＢ    治験審査委員会(Institutional ReviewBoard)
ＩＵＤ    子宮内避妊器具
ＩＶ    静脈内
ＩＶＰＢ    静脈内ピギーバック
ＬＶＥＦ    左室駆出率
Ｍ１    ＨＬＡ−ＤＲ＋ＣＤ６８＋  Ｍ１マクロファージ
Ｍ２    ＣＤ１６３＋又はＣＤ２０４＋  Ｍ２マクロファージ
ＭＲＩ    磁気共鳴画像法
ＭＵＧＡ    マルチゲートスキャン(Multiple GatedAcquisition Scan)
ＮＣＩ    国立癌研究所(National CancerInstitute)
Ｎｅｕ    ＣＤ６６ｂ＋  好中球
ＮＭＡ    骨髄非破壊的
ＮＳ    通常生理食塩水
ＯＣ    卵巣癌
ＯＲＲ    客観的奏効率
ＯＳ    全生存
ＰＢＭＣ    末梢血単核球
ＰＣＲ    ポリメラーゼ連鎖反応
ＰＤ    進行性疾患
ＰＤＡＣ    膵管腺癌
ＰＥ    理学的検査
ＰＥＴ    陽電子放射断層撮影法
ＰＦＳ    無進行生存
ＰＨＩ    個人健康情報(Personal HealthInformation)
ＰＩ    治験責任医師
ＰＪＰ    ニューモシスチス肺炎(Pneumonitis Jiroveci Pneumonia)
ＰＯ    経口で（口から）
ＰＲ    部分奏効
ＰＳ    パフォーマンスステータス
ＰＴ    プロトロンビン時間
ＱＴｃ    補正ＱＴ時間
ＲＥＣＩＳＴ    固形癌効果判定基準
ＲＥＰ    迅速拡大培養プロトコル
ＳＡＥ    重篤有害事象
ＳＡＰ    統計解析計画書
ＳＤ    安定疾患
ＳＧＯＴ    血清グルタミン酸オキサロ酢酸トランスアミナーゼ
ＳＧＰＴ    血清グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ
ＳＭＸ    スルファメトキサゾール
ＳＴＳ    軟部組織肉腫
ＴＣＲ    Ｔ細胞受容体
ＴＩＬ    腫瘍浸潤リンパ球
ＴＭＡ    組織マイクロアレイ
ＴＭＰ    トリメトプリム
Ｔｒｅｇ    ＦＯＸＰ３＋  調節性Ｔ細胞
ＴＳＨ    甲状腺刺激ホルモン
ＵＬＮ    正常範囲上限
【１２８４】
[001267]  研究デザイン及びエンドポイント：本研究は、ａ）再発性又は通常療法に不応性の骨肉腫、ｂ）白金耐性卵巣癌、及びｃ）フロントライン療法を進行中の、又はそれから最大限の利益が得られているＰＤＡＣを有する対象におけるＴＩＬの有効性を判定することを目標とする。第１段階は各コホートにつき１０人の対象で開始し、第２段階への拡張は、修正版のサイモン（Simon）の２段階デザインを指針とする。
【１２８５】
[001268]  主要エンドポイントは、卵巣癌及び骨肉腫についてはＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１によるＯＲＲ、ＰＤＡＣでは６ヵ月生存率である。ＰＤＡＣコホートの主要エンドポイントは６ヵ月生存率である。
【１２８６】
[001269]  副次的有効性エンドポイントには、ＯＲＲ（ＰＤＡＣについて）、ＣＲＲ、ＤＣＲ、ＤＯＲ、ＰＦＳ（ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１を用いる）、及びＯＳが含まれる。ＤＣＲには、完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）、及び安定疾患（ＳＤ）が含まれる。安全性エンドポイントには、グレード及び研究治療との関係による、グレード３以上の非血液学的毒性、ＳＡＥ及び治療中に発生したＡＥを含めたＡＥの総合的評価が含まれ得る。ＰＤＡＣコホートの副次的エンドポイントは、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１を用いたＯＲＲである。
【１２８７】
[001270]  探索的エンドポイントには、（１）ＴＩＬ注入後に連続的に単離した注入Ｔ細胞のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）シーケンシングか、或いはＴＣＲに関するｍＲＮＡのiRepertoire評価によって決定したときのＴＩＬ持続期間；（２）免疫関連奏効基準によって決定したときの奏効；（３）マルチチャンネルフローサイトメトリーによる注入時点におけるＴＩＬの免疫学的表現型；（４）ＩＨＣ、ＴＣＲシーケンシング、及び転写解析によるベースライン及び治療後腫瘍評価；及び（５）ＥＯＲＴＣ  ＱＬＱ−Ｃ３０質問票によって評価したときのＨＲＱＯＬが含まれ得る。
【１２８８】
[001271]  参加者組入れ基準。対象は１８〜７０歳であり得る（骨肉腫コホートには年齢１６〜７０歳の対象が登録し得る）。対象はインフォームドコンセントを提出する意思及び能力がなければならない。１８歳未満の患者については、その親又は法定後見人がインフォームドコンセントの書面に署名しなければならない。同意は、適宜、施設内ガイドラインに従い得られてもよい。登録時及びリンパ球枯渇化学療法の開始から７日以内にＥＣＯＧ０又は１の臨床的パフォーマンスステータス。対象は、奏効評価に使用する標的病変とは別個の、それに加えたＴＩＬ作成用の切除生検に適した腫瘍範囲を有しなければならない。悪性腫瘍に向けられた任意の先行療法は、放射線療法、化学療法、及び生物学的な／標的化された薬剤を含め、ＴＩＬ療法準備のための腫瘍切除の少なくとも２８日前に中止されなければならない。
【１２８９】
[001272]  登録から７〜１４（例えば７日）日以内及びリンパ球枯渇化学療法の開始から１２時間〜４８時間（例えば２４時間）以内に対象は以下の検査基準のうちの１つ以上を満たし得る：（１）絶対好中球数（ＡＮＣ）＞１０００／ｍｍ３；（２）ヘモグロビン＞８．０ｇ／ｄＬ（輸血可）；（３）血小板数＞１００，０００／ｍｍ３；（４）ＡＬＴ／ＳＧＰＴ及びＡＳＴ／ＳＧＯＴ＜２．５×正常範囲上限（ＵＬＮ）（肝転移を有する患者はＬＦＴ≦５．０×ＵＬＮを有してもよい）；（５）クレアチニンクリアランス算出値（コッククロフト・ゴールト）≧４０．０ｍＬ／分；（６）総ビリルビン≦１．５×ＵＬＮ；（７）プロトロンビン時間（ＰＴ）及び活性化部分トロンボプラスチン時間（ａＰＴＴ）≦１．５×ＵＬＮ（ビタミンＫによる補正可）、但し対象が抗凝固薬療法（これは切除生検前及び後に施設内規範に基づき管理されなければならない）を受けていないものとする；及び（８）血清妊娠検査陰性（妊娠の可能性がある女性対象）。
【１２９０】
[001273]  更に、対象は、確認されたヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症を有してはならない。対象は、活動性虚血なし及び４８０ｍｓ未満の補正ＱＴ時間（ＱＴｃ）を示す１２誘導心電図（ＥＫＧ）を有しなければならない。４０歳以上の対象はまた、負荷心検査（即ちＥＫＧ負荷検査、負荷タリウム、ドブタミン心エコー図又はその他の、心虚血を除外し得る負荷検査）も陰性でなければならない。負荷検査は、治療を行う責任医師によって家族歴又はリスク要因から正当化される場合には、４０歳未満の対象に必要となり得る。妊娠の可能性がある対象は、承認済みの高度に有効な受胎調節方法をインフォームドコンセント時に開始してリンパ球枯渇レジメンの完了後１年にわたって実施する意思がなければならない。対象は研究ビジットスケジュール及び他のプロトコル要件に従うことが可能でなければならない。最後に、予測値の６５％より高い１秒間努力呼気量（ＦＥＶ）１又は予測値の６５％より高い努力肺活量（ＦＶＣ）を実証する肺機能検査（スパイロメトリー）。
【１２９１】
[001274]  上記の一般的な組入れ基準を満たすことに加えて、対象はまた、コホート特異的基準も満たさなければならない。
【１２９２】
[001275]  卵巣癌について、対象は高悪性度の粘液非産生性組織学を有し得る（癌肉腫は許容される）。更に、対象は、少なくとも２つの先行化学療法ライン（即ちフロントラインアジュバント化学療法＋再発性／進行性疾患に対するもう一つのライン）が不奏効であった者であり得る。
【１２９３】
[001276]  骨肉腫について、対象は再発した者か、又は通常療法に不応性になった者で、且つ高用量メトトレキサート、ドキソルビシン、シスプラチン、及び／又はイホスファミドの何らかの併用を含むレジメンを受けている者であり得る。
【１２９４】
[001277]  膵臓腺癌（pancreatic adenocarcincoma）について、対象は、少数転移疾患を伴うＰＤＡＣの組織学的又は細胞学的に裏付けられた診断を有し得る。対象はフロントライン療法を進行中の、又はそれから最大限の利益が得られている者であり得る。患者は無制限の先行標準治療療法ラインを受けている者であり得る。腹水又は癌腫症を有する患者は本試験に適格でない。患者には、登録から７日以内に≧３．０ｍｇ／ｄＬのアルブミンが求められ得る。
【１２９５】
[001278]  参加者除外基準。幾つもの基準によって本試験から参加者が除外され得る：
ａ．静脈内抗生物質が必要な活動性全身感染症、血液凝固障害又はその他の心血管系、呼吸器系又は免疫系の重大な医学的疾患。登録の妥当性に関しては、ＰＩ又はその指名を受けた者が最終的に決定するものとする。
ｂ．活動性ウイルス性肝炎を有する患者。
ｃ．スクリーニング時に左室駆出率（ＬＶＥＦ）＜４５％の患者。
ｄ．養子細胞療法の前歴を有する患者。
ｅ．登録前の末梢性ニューロパチー、脱毛症、又は白斑を除く、有害事象の共通毒性基準（Common Toxicity Criteria for Adverse Events：ＣＴＣＡＥ）ｖ４．０３に係るグレード２より高い先行療法に関連する持続的毒性。
ｆ．原発性免疫不全症。
ｇ．臓器移植歴又は造血幹細胞移植歴。
ｈ．慢性ステロイド療法、しかしながら＜１０ｍｇ／日のプレドニゾン又はその等価物は許容される。
ｉ．妊娠中又は授乳中の患者。
ｊ．治験責任医師又はその指名を受けた者の見解によれば適切なインフォームドコンセントを妨げる可能性がある顕著な精神疾患があること。
ｋ．活動性の、既往の、又は疑わしい自己免疫疾患を含めた、臨床的に重大な自己免疫疾患歴。先行チェックポイント阻害薬療法からの寛解した副作用、白斑、乾癬、１型糖尿病又は寛解した小児喘息／アトピーを有する対象は、この原則に当てはまらないものとし得る。気管支拡張薬又は局所ステロイド注射の断続的使用が必要な対象は除外されないものとし得る。ホルモン補充で安定している甲状腺機能低下症又はシェーグレン症候群を有する対象は除外されなくてよい。
ｌ．臨床的に重大な慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、又は他の慢性肺疾患歴。
ｍ．二次性悪性腫瘍歴（過去５年で診断を受けたもの）。例外には、治癒の可能性のある療法を受けたことのある皮膚基底細胞癌、皮膚扁平上皮癌、又は子宮頸部上皮内癌が含まれる。
ｎ．活動性中枢神経系転移及び／又は癌性髄膜炎の既往歴。以前に治療された脳転移を有する対象は、安定していて（試験治療の初回投与前少なくとも４週間はイメージングによる進行のエビデンスがない、及びいかなる神経症状もベースラインに戻っていない）、脳転移の新たな出現又は拡大のエビデンスがなく、及びリンパ球枯渇開始前少なくとも７日間はステロイドを使用していないことを条件に参加し得る。
ｏ．リンパ球枯渇開始前３０日以内に生ワクチンを受けたことがある。
ｐ．治験責任医師の判断で参加のリスクを著しく高め得る任意の他の条件。
【１２９６】
[001279]  治療の完了又は離脱。治療の完了は、任意の容積のＴＩＬ注入と、続く少なくとも１用量のアジュバントＩＬ−２を受けたものとして定義され得る。
【１２９７】
[001280]  本試験は、リンパ球枯渇化学療法、ＴＩＬ注入、及びアジュバントＩＬ−２（最大６用量）からなる単回治療レジメンを含む。以下の基準のいずれかを満たす場合、試験治療からの離脱を考慮しなければならない。しかしながら、患者が同時に試験参加からの離脱の基準も満たす場合を除き、全治療過程を完了しない患者を含め、全ての患者について、イベントスケジュールに特定されるとおりのフォローアップ及び評価を継続するためあらゆる努力がなされ得る。
【１２９８】
[001281]  治療からの早期離脱基準は以下である：
ａ．ＴＩＬ注入後に現れる症状を伴う重要器官（心臓、腎臓、脳、眼、肝臓、結腸、副腎、肺）に関わるグレード３以上の自己免疫；
ｂ．治験責任医師の意見によれば医学的管理後も寛解しない気管支攣縮又は全身性蕁麻疹を含むグレード３以上のアレルギー反応；
ｃ．管理から９６時間以内にグレード２以下に下がらないＩＬ−２に起因するグレード３以上の毒性；
ｄ．治療継続が患者の最大の利益とならないという治験責任医師による決定；
ｅ．患者による撤回。患者（又は１８歳未満の患者については親／法定後見人）は治療への同意を撤回し得るが、フォローアップ判定及び／又は生存状態に関しては同意を継続し得る；
ｆ．妊娠；
ｇ．患者が試験からの早期離脱基準を満たす；及び
ｈ．患者が腫瘍摘出後、及びＴＩＬ又はＩＬ−２投与前に試験に不適格となった。
【１２９９】
[001282]  試験からの早期離脱基準は以下である：
ａ．患者による撤回。患者（又は１８歳未満の患者については親／法定後見人）は同意を撤回し得る。生存状態フォローアップに関する同意は継続するようあらゆる努力がなされなければならない；
ｂ．患者が腫瘍摘出後に試験に不適格となったか、又はいかなる試験治療も受けなかった；
ｃ．切除手技からの任意の合併症又は治癒の遅れがあり、治験責任医師の意見によれば、それによってリンパ球枯渇、養子ＴＩＬ療法及びアジュバントＩＬ−２のリスクが高まり得る；
ｄ．パフォーマンスステータスがＥＣＯＧ＞１に下がっている（リンパ球枯渇開始前の７日以内）；
ｅ．死亡；及び
ｆ．患者への連絡が記録付きで３回試みられた後の追跡不能例。
【１３００】
[001283]  一部の対象は、腫瘍摘出及びＴＩＬ製造は経ても、治験薬の注入を受けないことがある。いかなる理由であれ、リンパ球枯渇化学療法後であっても患者にＴＩＬが投与されない場合、その患者は試験に留まるべきであり、しかしデータ収集は３年間の生存状態及び任意の新規抗癌療法の開始に縮小し得る。かかる対象は、有効性の統計的分析上は評価不能と見なされ得るとともに、差し替えられ得る。
【１３０１】
[001284]  患者が抗癌療法を開始した場合、又はＴＩＬ注入後に疾患の進行を呈する場合、その患者は試験に留まり得るが、データ収集は３年間の奏効状態、生存状態及び他の抗癌療法に縮小し得る。
【１３０２】
[001285]  試験薬。リンパ球枯渇レジメンは、その患者についてＴＩＬ産生の成功が見込まれることを告知したうえで−７日目に開始するようにスケジュールされる。患者は、治験責任医師の裁量により入院患者又は外来患者としてリンパ球枯渇化学療法を受け得る。臨床指標次第でリンパ球枯渇レジメンの変更が許容され、持続的骨髄回復歴を有する過酷な前治療を受けた患者又は対象においてはフルダラビンについて以下に記載するとおりの日々の血液パラメータを指針とすべきである。レジメンは、シクロホスファミド（メスナを伴う）の２回の１日用量と、続くフルダラビンの５回の１日用量を含み、骨髄非破壊的化学療法の施設内プロトコル／標準に従い投与されなければならない。調製及び投与のガイドラインを以下に記載する。対象には実際の体重を用いて、但し以下に定義するとおりの理想体重の１４０％を超過しないように投与されなければならない：
ａ．男性の理想体重＝５０ｋｇ＋２．３×（身長で６０インチを超える分のインチ数）。
例：５フィート１０インチの男性対象の理想体重
５０＋２．３×１０＝７３ｋｇ
ｂ．女性の理想体重＝４５．５ｋｇ＋２．３（身長で６０インチを超える分のインチ数）。
例：５フィート３インチの女性対象の理想体重
４５．５＋２．３×３＝５２．４ｋｇ
【１３０３】
[001286]  リンパ球枯渇に必要な薬物には、シクロホスファミド、フルダラビン、及び／又はメスナが含まれる。
【１３０４】
[001287]  ０日目より前のリンパ球枯渇からの変化（例えば注入回数；治療スケジュール等）は診療記録に文書化され得るが、プロトコル違反／逸脱とは見なさなくてもよい。
【１３０５】
[001288]  シクロホスファミドは−７及び−６日目に２５０ｍＬ通常生理食塩水（ＮＳ）中２０〜８０ｍｇ／ｋｇ／日（例えば６０ｍｇ／ｋｇ／日）で約２時間かけてＩＶ投与され得る。−７及び−６日目にデキストロース５重量％（Ｄ５Ｗ）を含有するメスナ６０ｍｇ／ｋｇ又はＮＳが２４時間かけて静脈内注入される。上述のとおり、用量は患者の実際の体重に基づき得るが、過度の毒性を防ぐため、最大理想体重（上記に定義される）の１４０％に基づく用量を超えないものとし得る。シクロホスファミドについては用量調整があってもよい。
【１３０６】
[001289]  次にフルダラビンが−５〜−１日目に１５〜５０ｍｇ／ｍ２（例えば２５ｍｇ／ｍ２）でＩＶピギーバック（ＰＢ）で毎日約１５〜３０分かけて注入されることになる。フルダラビンによる過度の毒性を防ぐため、用量は体表面積（ＢＳＡ）に基づき得るが、最大理想体重の１４０％より重い体重に基づく表面積で算出される用量を超えないものとし得る。血液パラメータ（全血球計算［ＣＢＣ］及び分画）は、リンパ球枯渇の間、毎日レビューされるべきである。３又は４用量のフルダラビン後、絶対リンパ球数が１００細胞／ｍｍ３を下回った場合、残りの１つ又は複数の用量のフルダラビンはＰＩとの話し合い後に省略されてもよい。フルダラビン用量は、以下のとおり推算クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）に従い調整されてもよい：（１）ＣｒＣｌ５０〜７９ｍＬ／分：用量を２０ｍｇ／ｍ２に減らす；及び／又は（２）ＣｒＣｌ４０〜４９ｍＬ／分：用量を１５ｍｇ／ｍ２に減らす。
【１３０７】
[001290]  本プロトコルで使用し得るＴＩＬ製剤は、患者自身の腫瘍に由来する自己ＴＩＬの生細胞懸濁液を含む細胞性治験薬である。各用量が最大１５０×１０９個の総生存リンパ球を含有し得る。総注入容積は、総細胞用量に依存して最大６００ｍＬであり得る。
【１３０８】
[001291]  リンパ球枯渇化学療法のために既に入院済みでない場合、計画されたＴＩＬ投与の１〜２日前に患者を収容し、ＴＩＬ投与前に一晩静脈内補液で調製してもよい。患者は、施設内規準に従いＩＬ−２療法の完了まで入院したままであってもよい。
【１３０９】
[001292]  ＩＬ−２注入はＴＩＬ注入の完了後３〜２４時間で開始し得る。ＩＬ−２は、２００，０００〜１，０００，０００ＩＵ／ｋｇ（例えば、６００，０００ＩＵ／ｋｇ）の用量（総体重に基づく）で投与してもよく、施設内標準治療に従い８〜１２時間毎の頻度でＩＶ注入によって投与して、最大６用量まで、又は忍容量次第で継続してもよい。下痢、悪心、嘔吐、低血圧症、皮膚変化、食欲不振症、粘膜炎、嚥下障害、又は全身症状及び検査値変化などのＩＬ−２によく見られる可逆的グレード３毒性を除くＩＬ−２に起因するグレード３又は４毒性が患者に起こった場合、ＩＬ−２用量は省いてもよい。ＩＬ−２の管理については表５４に詳述する。これらの毒性が対症手段によって２４時間以内に容易に好転し得る場合、追加用量を与えてもよい。２用量より多いＩＬ−２が省かれる場合、ＩＬ−２投与は中止し得る。加えて、投与は適宜保留又は中止し得る。
【１３１０】
【表６５】
2020514289.tif 000068
【１３１１】
[001293]  試験手順及びスケジュール。本試験では以下の手順を用い得る。
[001294]  治験責任医師によって候補対象に試験に関する情報が提供され得る。リスク、利益、及び代替案が話し合われてもよく、試験に関連するいずれの評価の実施についても、事前にインフォームドコンセント文書に署名がなされ得る。
【１３１２】
[001295]  対象は、ほとんどの、又は好ましくは全ての組入れ基準を満たさなければならず、好ましくは除外基準に指定された条件を一切有しない。一般的、コホート特異的、及び治療組み入れ／除外基準の確認は、リンパ球枯渇化学療法の開始から７日以内に文書化されなければならない。
【１３１３】
[001296]  人口統計学的データには、出生日（各施設の規則により許容され次第）、年齢、性別、及び人種／民族起源が含まれ得る。
【１３１４】
[001297]  全ての患者についてスクリーニング時（ビジット１）に関連性のある重要な病歴／手術歴及び併発症を収集し、適宜更新し得る。既存の状態からのいかなる悪化も、ＡＥとして報告されなければならない。患者の先行抗癌治療もまた収集し得る。
【１３１５】
[001298]  癌のコホート特異的診断を文書化し、組織学的に確認し得る。
【１３１６】
[001299]  同意時に、本試験で禁止されている薬物を中止した日を含め、スクリーニング（ビジット１）の２８日前まで患者が服用した全ての薬物及び療法薬（処方薬、及びハーブ系サプリメントを含めた非処方薬）をデータベースに収集し得る。患者が服用する薬物及び療法薬、又はその変更は全て、本試験中に随時診療記録に記録し得る。
【１３１７】
[001300]  ベースライン時のグレード２以上の毒性は全て、ＣＴＣＡＥ  ｖ４．０３に従い評価し得る。スクリーニング後だが登録／腫瘍切除前に起こった事象はいずれも、その事象がプロトコル上要求される手順に関連しない限り、病歴としてデータベースに記録し得る。登録／腫瘍切除後に起こる事象はいずれも、６ヵ月目のビジットまで、対象が試験を外れるまで、又は他の癌療法の開始まで、ＡＥとしてデータベースに取り込み得る。
【１３１８】
[001301]  バイタルサインには、身長、体重、脈拍、呼吸、血圧及び体温が含まれるものとする。身長はスクリーニング時（ビジット１）のみ測定し得る。他のバイタルサインは全て、適用可能な時点で測定し得る。０日目（ビジット１１／ＴＩＬ注入）にバイタルサインをモニタしてもよく、ＴＩＬ注入後約２４時間までモニタし得る。
【１３１９】
[001302]  スクリーニング時（ビジット１）及びイベントスケジュールに指示される他の時点においてＥＣＯＧパフォーマンスステータスを評価し得る。
【１３２０】
[001303]  腫瘍切除を除く全てのビジットについて理学的検査を行うことができ、これにはバイタルサイン及び体重、頭頸部、心血管、肺、四肢、及び他の関連性のある判定が含まれるものとする。フォローアップ中に行われる検査は、症状に左右され得る。臨床的に重大な検査所見の変化は指示されるとおり有害事象として記録し得る。
【１３２１】
[001304]  イベントスケジュールに指示されるとおりビジットの度に各施設で安全性血液及び尿検査を収集し、分析し得る。
【１３２２】
[001305]  スクリーニング時（ビジット１）に高分解能ＨＬＡクラスＩタイピング用の試料採取を行い得る。
【１３２３】
[001306]  スクリーニング時（ビジット１）に、各施設で施設内規準に従い分析すべき以下の疾患の血清学を完了し得る：ＨＩＶ、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、単純ヘルペスウイルス；エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）（腫瘍切除／ビジット２に先立つ３ヵ月以内であり得る）、シャーガス病、ヒトＴ細胞リンパ球向性ウイルス、及びウエストナイルウイルス。鎌状赤血球症もまたスクリーニングし得る。臨床指標次第で更なる検査が行われるべきである。
【１３２４】
[001307]  クレアチニンクリアランスは、スクリーニング時のみ現地でコッククロフト・ゴールト式を用いて計算され得る。
【１３２５】
[001308]  全ての対象が、ベースライン１２誘導ＥＣＧ及び心エコー図又はＭＵＧＡによる心室機能評価を有し得る。加えて、年齢４０歳以上の対象及び心血管疾患歴又は胸痛歴を有する４０歳未満の対象は、虚血がないことを実証する負荷検査を有し得る。ＭＵＧＡ又は心エコー図異常を有する患者は駆出分画要件を満たし、登録前に心臓クリアランスを入手してもよい。
【１３２６】
[001309]  肺の判定はスクリーニング（ビジット１）から２８日以内に完了し得る。スクリーニング（ビジット１）前の６ヵ月以内に完了された先行判定は認められ得る。予測値の６５％より高いＦＥＶ１又は予測値の６５％より高いＦＶＣが要求される。上気道の解剖学的構造の異常（例えば気管開口術）に起因して信頼のおけるＰＦＴスパイロメトリー測定を実施できない患者は、肺機能の判定のため６分間歩行検査を受け得る。このような患者は、その年齢及び性別についての予測値の少なくとも８０％の距離の歩行並びに一貫して９０％より高い酸素飽和の維持を達成しなければならず、好ましくは達成することができる。
【１３２７】
[001310]  結腸鏡検査は、スクリーニングから６ヵ月以内に先行免疫療法に起因するグレード２以上の下痢又は大腸炎の記録が確認された患者にのみ要求される。目視評価で非炎症性粘膜を有する、スクリーニングから少なくとも６ヵ月間無症候性であった、又は抗ＰＤ−１／抗ＰＤ−Ｌ１治療後に正常な結腸鏡検査所見を有した患者は、結腸鏡検査を繰り返さなくてもよい。
【１３２８】
[001311]  健康関連クオリティ・オブ・ライフ（ＨＲＱＯＬ）質問票をベースライン時−２１日目（ビジット３）に対面で実施し、後続のビジットで最初の手順として行い得る。具体的な時点についてはイベントスケジュールを参照のこと。任意の質問票を完了できなかった場合、要報告の逸脱と見なされ得る。
【１３２９】
[001312]  全ての患者について腫瘍評価のため、胸部、腹部及び骨盤の造影を伴うコンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャンによるＸ線写真評価が必要である。ＣＴスキャンは、修正版ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１による進行性疾患が認められる（又は患者が完全な同意を撤回した場合）まで、イベントスケジュールに指示されるとおり行う。奏効評価は、治験に参加している資格のある放射線科医が判定し、文書化しなければならない。造影剤に不耐容性を示す患者には、ＣＴスキャンの代わりに、胸部、腹部及び骨盤の磁気共鳴画像（ＭＲＩ）又は陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）スキャンが許容され得る。同定及び報告される各病変の特徴付けには、試験全体を通じて一貫して同じ評価方法（ＣＴ又はＭＲＩ）及び同じデータ取得技法を用いなければならない。初期Ｘ線写真評価はＴＩＬ注入後６、１２、１８及び２４週間に行い得る。その後、約１２週間毎に患者の奏効を判定し得る。臨床指標次第で更なる放射線学的評価を行い得る。
【１３３０】
[001313]  外科的生検の前に対象の適格性を確認してもよく、ＰＩ又は指名を受けた者が臨床試験への患者登録及び続く腫瘍切除の承認を与え得る。対象は、手続き前の相談、及び外科的生検を行うチームによる施設内規準に従った別個のインフォームドコンセントを受け得る。理想的には、標的腫瘍は過去に放射線照射を受けていないものでなければならない。腫瘍が過去に放射線照射を受けたことがある場合、照射と切除との間に最低でも１〜６ヵ月（例えば３ヵ月）が経過していることもあり、その間に別の標的腫瘍成長が示されていることもある。登録した場合、腫瘍切除は見込まれるＴＩＬ注入（０日目）の約１〜１２週間前（例えば６週間前）に行われることが期待される。ＴＩＬは、従来の薬物生産の配達よりも自己血液製剤の配達でより一般的な手段によって調達及び配達される自己由来の治験薬である。患者自身の（自己）試験治療薬（ＴＩＬ）のみが同じ個々の患者に投与されることが不可欠である。このような理由で、確実に標本の品質を最適化し、処理実験施設との往復にかかる輸送時間を最小限に抑えるとともに、患者に注入し戻すときを含め、常に確実に試験製剤を適切に識別することができるように、患者標本は厳格なプロトコルに従い調達され、取り扱われ得る。
【１３３１】
[001314]  ＴＩＬ採取のための初回切除生検時点で追加の又は余分な腫瘍組織を安全に調達することができる場合、研究用の余分な腫瘍組織を調達してもよい。ＴＩＬ製造に十分な量の腫瘍組織の供給は、研究に回される追加の腫瘍組織の収集よりも優先度が高い。ＴＩＬ製造及び追加分析の両方に十分な腫瘍組織を入手するため、あらゆる努力がなされなければならない。加えて、治療後の分子的及び免疫学的変化の確認に、並びに腫瘍における注入したＴ細胞の存在の実証に、強制的に試験中の生検が使用され得る。腫瘍組織分析には以下が含まれ得る：１）個々の免疫細胞集団を同定する免疫組織化学；及び／又は２）ＤＮＡ及びＲＮＡ分析、例えば可能性のある探索的ゲノム及びトランスクリプトーム判定並びにＴＣＲシーケンシングによる注入したＴＩＬの腫瘍へのホーミングの（治療後生検での）判定。ＴＩＬ製造に十分な量の腫瘍組織の供給は、研究用の追加の腫瘍組織の収集よりも優先度が高い。ＴＩＬ製造及び追加分析の両方に十分な腫瘍組織を入手するため、あらゆる努力がなされなければならない。
【１３３２】
[001315]  注入製剤からの最大５００×１０６個のＴＩＬ（及びこれらの試料から抽出される遺伝物質）を研究用に貯蔵し得る。注入したＴＩＬのフローサイトメトリー分析を実施してもよく、注入製剤からのＤＮＡをＴＣＲシーケンシングに回してもよい。これらの研究試験における試料を使用して、疾患及び注入前及び注入後のＴＩＬの特性に関する更なる情報を得てもよい。免疫モニタリング及びＴＣＲシーケンシングを使用したＴ細胞トラッキング用に、患者から末梢血を収集してもよい。免疫モニタリング用の血液は腫瘍切除時（ビジット２）に採取してもよく、続く採血は適用可能な時点で採取してもよい（表５５及び表５６を参照）。
【１３３３】
【表６６】
2020514289.tif 000069
【１３３４】
【表６７】
2020514289.tif 000070
【１３３５】
【表６８】
2020514289.tif 000071
【１３３６】
[001316]  併用薬投与、治療、及び手順。抗新生物剤以外の医学的問題に対する薬物投与が許可される。ＰＩの承認がある場合にのみ、ＴＩＬ投与に影響を及ぼす可能性のある慢性病態に対する抗炎症薬が必要な病態を有する者について考慮し得る。それが標的及び非標的病変に影響を及ぼさない限り、腫瘍切除とリンパ球枯渇との間に緩和放射線療法が許可される。≦１０ｍｇ／日のプレドニゾン又は等価物の全身ステロイド療法の使用は許可される。試験中に既往疾患が増悪した場合には、又は新規症状の治療のため、治験責任医師の裁量で＞１０ｍｇ／日のプレドニゾン又は等価物の使用が許可される。治験全体を通して併用薬物投与のいかなる変更も患者の診療記録にのみ記録し得る。ＣＴ  ＩＶ造影剤アレルギーを有する対象については、ＭＲＩ又はＰＥＴ−ＣＴ（静脈内造影剤なし）を用いた放射線学的判定が好ましい管理である。各患者のイメージングモダリティの一貫性を保つため、あらゆる試みがなされなければならない。
【１３３７】
[001317]  他の全ての抗新生物薬及び放射線療法は禁止されている。対象はまた、市販のサプリメント及びホメオパシー製品、特にボスウェリア（boswelia）など、抗炎症性とされる特性を有するものも使用しないよう指示される。
【１３３８】
[001318]  リンパ球枯渇の処置を受ける患者は日和見感染症を起こし易く、適切な感染病原体予防が必要である。以下に挙げる予防レジメン及び継続期間は、臨床指標次第で感染性疾患の専門医と相談のうえ変更されてもよい。
【１３３９】
[001319]  患者はＡＮＣが５００／ｍｍ３超に回復するまで毎日１００〜１０００ｍｇ（例えば５００ｍｇ）のレボフロキサシン（又は等価な抗生物質）の投与を受け得る。
【１３４０】
[001320]  患者は、トリメトプリム（ＴＭＰ）とスルファメトキサゾール（ＳＭＸ）との固定的併用の投与を複効（ＤＳ）錠［ＤＳ錠＝ＴＭＰ１６０ｍｇ／錠及びＳＭＸ８００ｍｇ／錠］としてＰＯ  ＢＩＤ週２回で受け得る。ＴＭＰ／ＳＭＸ−ＤＳの服用は患者によって−７日目に開始され、リンパ球枯渇後最低でも６ヵ月間継続され得る。サルファ剤アレルギーを有する患者については、リンパ球枯渇後６ヵ月間にわたって２１日毎に３００ｍｇ  ＩＶのペンタミジンを与えてもよい（退院した後）。退院後にＩＶペンタミジンが実行可能でない場合、ＰＣＰ予防はリンパ球枯渇後６ヵ月間にわたる標準治療に従うアトバコンなどの経口抗微生物薬で代用することができる。高用量ＩＬ−２療法の間、患者には予防用抗生物質を静脈内投与し得る。
【１３４１】
[001321]  ＴＩＬ注入の当日から、経口薬を服用可能な患者の場合にはバラシクロビル（valacylcovir）１００〜１０００ｍｇ（例えば５００ｍｇ）ＰＯを毎日、又は静脈内薬物投与が必要な患者の場合にはアシクロビル５ｍｇ／ｋｇ  ＩＶＰＢを８時間毎に対象に投与してもよく、これは６ヵ月間（又は治療を行う医師の裁量で）継続される。アシクロビルのＩＶ投与では可逆的腎不全が報告されているが、経口アシクロビルではない。より高用量のアシクロビルでは、譫妄、振戦、昏睡、急性精神障害、及び異常脳波を含めた神経毒性が報告されている。症状が起こった場合、投薬量調整を行い得るか、又は薬物を中止し得る。アシクロビルは、ＤＮＡ合成に干渉する他のヌクレオシド類似体（例えばガンシクロビル）との併用では使用されないものであり得る。腎疾患を有する患者では、製品表示に従い用量を調整する。
【１３４２】
[001322]  患者は、Ｔ細胞注入（０日目）に伴いフルコナゾール５０〜５００ｍｇ（例えば２００ｍｇ）ＰＯを毎日開始し、６ヵ月間（又は治療を行う医師の裁量で）継続し得る。
【１３４３】
[001323]  ＮＭＡリンパ球枯渇化学療法後の好中球減少期間を短縮するため、ＡＮＣ＞５００／ｍｍ３まで少なくとも２日連続でフィルグラスチム（Ｇ−ＣＳＦ）を１〜１０μｇ／ｋｇ／日（例えば５μｇ／ｋｇ／日）で毎日皮下投与し得る。３００ｍｃｇ又は４８０ｍｃｇ剤形に対応するよう近似的投与設定が許容される。
【１３４４】
[001324]  化学療法準備レジメンの間の悪心嘔吐の制御にオンダンセトロンが使用されてもよい。これは、頭痛、眩暈、筋肉痛、眠気、倦怠、及び脱力感を引き起こし得る。まれに見られる副作用としては、胸痛、低血圧症、掻痒症、便秘及び尿閉が挙げられる。副作用及び具体的な用量指示の完全な一覧については、添付文書を参考にされたい。
【１３４５】
[001325]  シクロホスファミドによる化学療法調製レジメン中の尿排出量を亢進させるには、フロセミドが使用されてもよい。有害作用としては、眩暈、眩暈、錯感覚、脱力感、起立性低血圧、光線過敏症、発疹及び掻痒症が挙げられる。副作用及び具体的な用量の指示の完全な一覧については、添付文書を参考にされたい。
【１３４６】
[001326]  患者は、ＡＮＣ５００／ｍｍ３未満で体温≧３８．５℃について、広域抗生物質、各施設のアンチバイオグラムに従い十分なシュードモナス有効範囲を有する第３世代又は第４世代のいずれかのセファロスポリンか、又はキノロンを開始し得る。アミノグリコシドは可能な限り避けなければならない。原因不明発熱又は任意の感染性合併症を有する全ての患者から感染性疾患の相談を受け得る。
【１３４７】
[001327]  毎日のＣＢＣ値を指針として使用して、患者はまた、必要に応じて血小板及び濃厚赤血球の投与を受けてもよい。臨床シナリオを指針としたＨｇｂ＞８．０ｇ／ｄＬ、及び血小板＞２０，０００／ｍＬを保つ試みがなされ得る。輸血されたＷＢＣに対する感受性化を低下させ、及びＣＭＶ感染リスクを低下させるため、全ての血液及び血小板輸血に白血球フィルタを利用し得る。照射済みの血液及び血液製剤を使用しなければならない。
【１３４８】
[001328]  統計的方法の説明。卵巣癌及び骨肉腫コホートの主要エンドポイントは、治験責任医師がＲＥＣＩＳＴ  １．１基準を用いて評価したときのＯＲＲである。ＯＲＲは、確定したＣＲ又は部分奏効（ＰＲ）の患者の人数の合計を全治療例（All-Treated）アナリシスセットの患者の人数で除したもの×１００％として導出される。ＰＤＡＣコホートの主要エンドポイントは、１８３日間生存する患者のパーセンテージである。カプラン・マイヤー法に基づき６ヵ月ランドマーク生存率を計算し得る。
【１３４９】
[001329]  ＰＦＳは、リンパ球枯渇開始日から、ＰＤ又は全死因死亡のいずれか早い方の事象までの時間（月数）として定義される。データカット又は試験終了（即ちデータベースロック）時点でＰＤ又は死亡が起きない患者は、そのイベント時間を最後の適切な腫瘍評価で打ち切りとし得る。ＤＯＲは、ＣＲ又はＰＲのうちいずれか最初に観察される奏効に関して測定基準が初めて満たされた時点から、進行性疾患（ＰＤ）又は死亡が起こる最初の日付まで測定する。データカット又は試験終了時点より前にＰＤ又は死亡が起きない患者は、そのイベント時間を最後の適切な腫瘍評価で打ち切りとし得る。ＤＯＲの分析は、治験責任医師がＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従い評価したときの奏効例のみに基づく。ＤＣＲは、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従いＰＲ／ＣＲ又はＳＤが得られた患者の人数の合計を全治療例（All-Treated）アナリシスセットの患者の人数で除したもの×１００％として導出される。ＯＳは、リンパ球枯渇の開始日から全死因死亡までの時間（月数）として定義される。データカット又は試験終了時点で止息していない患者は、そのイベント時間をその生存状態が分かっている最後の日付で打ち切りとし得る。
【１３５０】
[001330]  探索的分析は全て記述的とし、コホート別に実施し得る。一部の分析結果は最終的な治験総括報告書と別に報告し得る。Ｔ細胞レパートリー分析を用いてＴＩＬ持続性を決定し得る。ＴＩＬ療法前及び療法後の腫瘍の分子的及び免疫学的特徴は、エクソームシーケンシング及び免疫組織化学／免疫蛍光分析を用いて決定し得る。治験責任医師がｉｒＲＥＣＩＳＴ基準を用いて測定したときのＯＲＲ、ＤＣＲ、ＤＯＲ、及びＰＦＳに関する感度分析を実施し得る。表現型属性（ＣＤ８％、ＣＤ２７とＣＤ２８発現等）と療法に対する腫瘍応答との間の関係の定量化には、適宜ピアソン相関係数及び線形回帰を用い得る。ＰＤＡＣを有する患者のベースラインＣＡ１９−９及び卵巣癌を有する患者のベースラインＣＡ−１２５を有効性結果との相関可能性に関して評価し得る。
【１３５１】
[001331]  グレード３以上の治療中に発生したＡＥ及びその発生率を他の癌疾患型におけるＴＩＬの履歴データと記述的に比較し得る。コホート毎の及び全コホートを合わせたＡＥ発生率を９５％ＣＩと共に推定し得る。治療中に発生したＡＥは、シクロホスファミドの初回投与から開始して、ＩＬ−２の最終投与から最長６ヵ月に至るまでである。
【１３５２】
[001332]  スタディ・ディスポジション・サマリー（study disposition summary）において、試験から早期に抜ける患者の人数及び割合を以下の２つに分けて主な理由別に示し得る：（１）腫瘍摘出後リンパ球枯渇前；及び（２）シクロホスファミドの初回投与時又は投与後。治療を受け、且つ試験終了時点で生存状態がフォローされている患者（即ち完了者）は、本サマリーに含めない。計画された全試験治療用量を受けなかった患者もまた、その主な理由別にまとめ得る。
【１３５３】
[001333]  コホート毎の腫瘍応答データのサマリーは、治験責任医師がＲＥＣＩＳＴ  １．１に従い評価したときの最良総合効果に基づき得る。このサマリーは、全治療例（All-Treated）アナリシスセットの患者における割合をウィルコクソンスコア法によってＯＲＲに関しては８０％信頼区間（ＣＩ）及びＤＣＲに関しては９５％ＣＩと共に示し得る。事象発生までの時間（time-to-event）の中央値及びランドマーク率もまたＫＭ法によって６ヵ月生存率に関して８０％ＣＩ及びＤＯＲ、ＰＦＳ、ＯＳ、及び他のランドマーク率に関して９５％ＣＩと共に測定し得る。
【１３５４】
[001334]  探索的分析は全て記述的とし、コホート別に実施し得る。分析は、本試験の統計解析計画書とは別に定義し、治験総括報告書（ＣＳＲ）の外部で独立に報告し得る。ＨＲＱＯＬはＥＯＲＴＣ  ＱＬＱ−Ｃ３０インストルメントを用いて評価し、既発表の判定マニュアルに従い分析し得る。
【１３５５】
[001335]  標本サイズ。卵巣癌及び骨肉腫については、サイモン（Simon）の二段階ミニマックスデザインを使用して各コホートの有効性を独立にモニタし得る。過去の５％の奏効率が２０％の推定実験コホート奏効率に対して検定される帰無仮説。第一段階では、各コホート１０人の患者を治療し得る。患者が判定可能である限りにおいて、これらの１０人の患者に確定された奏効が得られない場合、そのコホートは終了とし得る。終了には、標的病変直径の和の最大％減少率及び／又はＰＤ／死亡までの時間を含めた他の有効性推定値を考慮し得る。奏効の確定はＲＥＣＩＳＴ  １．１基準によって決定されるものとし、６週間時点で初回評価、１２週間時点で２回目の確認のためのスキャンがある。試験がステージＩＩに進む場合、追加の８人の患者を治療して、当該コホートについて合計１８人の患者となるようにしてもよい。そのコホートについて１８例の治療した患者のうち３例以上の奏効例が、更なる調査を正当化するのに臨床的に関連性があると見なされ得る。本デザインの検出力は、片側、１０％の第１種の過誤率で≧７０％である。
【１３５６】
[001336]  ＰＤＡＣについてもまた、サイモン（Simon）のミニマックス二段階デザインを用いて６ヵ月生存率をモニタし得る。過去の３５％の６ヵ月生存率が５０％の推定実験コホート生存率に対して検定される帰無仮説（ASCO Jan 2016）。第一段階では１１人の患者を治療し、更なる登録を保留せずに６ヵ月以上の間フォローする。初回治験薬投与から数えて１８３日以内に最初の１１人の患者に８例以上の死亡があった場合、そのコホートは終了と見なされ得る。
【１３５７】
[001337]  他の場合、追加の１１人の患者を治療し、合計２２人とし得る。コホートの最終的な結果は、１０人以上の患者が少なくとも１８３日間生存していた場合に臨床的に有意味とし得る。本設計の検出力は、片側、１０％の第１種の過誤率で約７０％である。
【１３５８】
実施例８  −  プレＲＥＰ及びＲＥＰステップにおけるＴＮＦＲＳＦアゴニストを使用したＴＩＬの拡大培養方法
[001338]  本例で使用した抗体は本明細書の他の部分に記載され、更に表５７に記載される。
【１３５９】
【表６９】
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【１３６０】
[001339]  上記に記載されるモノクローナル抗体に加えて、本明細書に記載される特定の実験においてはＯＸ４０アゴニスト抗体クローンＢｅｒ−ＡＣＴ３５（BioLegend、SanDiego, CA, USA）もまた使用した。
【１３６１】
[001340]  全体的な実験戦略には以下のステップが含まれた：試薬調達及びバリデーション；エキソビボ拡大培養実験計画；新鮮な黒色腫、肺、子宮頸部腫瘍試料を使用して、プレＲＥＰ実験の０日目に抗４−１ＢＢ又は抗ＯＸ４０を加えること；解凍した頭頸部、肺、黒色腫、トリプルネガティブ乳癌、及び乳癌プレＲＥＰ  ＴＩＬ試料で行われる２１ミニＲＥＰにおいて抗ＯＸ４０を評価すること；並びにＴＩＬ収率及び細胞系統表現型（ＣＤ４：ＣＤ８）の評価、Ｔ細胞サブセット／拡張表現型、及び機能アッセイ。
【１３６２】
[001341]  ２つの４−１ＢＢアゴニストについての抗４−１ＢＢ結合親和性の同等性を評価した。４−１ＢＢレポーター細胞をＦＩＴＣコンジュゲートマウス抗ヒトＩｇＧと共に０．０１、０．０３、０．１、０．３、１、及び３μｇ／ｍｌの濃度の抗４−１ＢＢ抗体（Creative Biolabs）又は抗４−１ＢＢ（BPS Biosciences）で染色し、フローサイトメトリーによって分析した。結果は図１６及び図１７に示し（それぞれ、４−１ＢＢ＋細胞％及び４−１ＢＢ＋細胞の平均蛍光強度（ＭＦＩ）についてのもの）、Creative Biolabs（ＣＢ）４−１ＢＢウレルマブ抗体が最も高い結合親和性を有することが指摘される。
【１３６３】
[001342]  ４−１ＢＢアゴニスト抗体のＮＦ−κＢ経路活性化の評価もまた実施した。４−１ＢＢレポーター細胞を１、２、４、及び８μｇ／ｍＬの濃度のいずれかの抗４−１ＢＢ（ＣＢ又はＢＰＳ抗体）で２４時間処理した。細胞をOne-Stepルシフェラーゼ試薬を使用して溶解し、ルシフェラーゼ活性をルミノメーターによって測定した。結果は図１８に示す。ＣＢ抗体のＬｏｇ  ＥＣ５０は３．９μｇ／ｍＬと決定され、ＢＰＳ抗体については２．１３μｇ／ｍＬと決定された。ＢＰＳ抗体の方が高いＮＦ−κＢシグナル伝達活性化を呈したにも関わらず、ＣＢ及びＢＰＳの両方の抗４−１ＢＢアゴニストとも同様のＬｏｇ  ＥＣ５０値を有した。
【１３６４】
[001343]  ＣＢ  ＯＸ４０アゴニストの結合親和性もまた評価した。ＯＸ４０レポーター細胞をＦＩＴＣコンジュゲートマウス抗ヒトＩｇＧと共に０．０１、０．０３、０．１、０．３、１、及び３μｇ／ｍｌの濃度の抗ＯＸ４０  Creative Biolabs（ＣＢ）アゴニストで染色し、フローサイトメトリーによって分析した。結果は、それぞれＯＸ４０＋細胞の％及びＯＸ４０＋細胞のＭＦＩについて図１９及び図２０に示し、ＣＢ  ＯＸ４０が高い結合親和性を有することが指摘される。
【１３６５】
[001344]  ２つのＯＸ４０アゴニスト、ＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト及びＯＸ４０アゴニスト抗体クローンＢｅｒ−ＡＣＴ３５（BioLegend、SanDiego, CA, USA）についてのＯＸ４０結合親和性の同等性を評価した。５つの異なる組織学のＴＩＬ株（子宮頸部、頭頸部、肺、及び黒色腫を含む）を０．１、０．３、１、３、１０（μｇ／ｍＬ）の濃度のいずれかの抗ＯＸ４０アゴニスト抗体で抗ヒトＩｇＧ二次抗体と共に、又は抗ＯＸ４０（クローンBer-ACT35）単独で染色した。結果は図２１に示し、２つのアゴニストの同等の結合親和性が指摘される。
【１３６６】
[001345]  ＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト抗体のＮＦ−κＢ経路活性化の評価もまた実施し、その結果は図２２に示す。ＯＸ４０レポーター細胞をフィーダー細胞と共に又はなしで１、２、４、８、及び１６μｇ／ｍＬの濃度の抗ＯＸ４０単独又はアイソタイプ対照のいずれかにより２４時間処理した。細胞をOne-Stepルシフェラーゼ試薬を使用して溶解し、ルシフェラーゼ活性をルミノメーターによって測定した。ＰＢＭＣフィーダーを使用するとＯＸ４０レポーター細胞株を使用したＮＦ−κＢ活性化が惹起されたことから、活性化にクラスター化が関わることが示唆される。
【１３６７】
[001346]  プレＲＥＰステップにおける４−１ＢＢ及びＯＸ４０アゴニストの使用に関する実験計画を図２３に示す。調査した腫瘍組織学を図２４に示す。データ解析戦略を図２５に示す。未処理（ＩＬ−２単独）、抗４−１ＢＢ、及び抗ＯＸ４０をマッチドペア方式で分析した。この手法を用いて、以下を含む３つの異なる群に試料を割り付けた：群１、未処理及び抗４−１ＢＢ（ｎ＝３）；群２、未処理及び抗ＯＸ４０（ｎ＝５）；及び群３、未処理及び抗４−１ＢＢ及び抗ＯＸ４０（ｎ＝２）。拡大培養からの総細胞数結果を図２６（ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト対未試験、Ｎ＝３）；図２７（ＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト対未試験、Ｎ＝５）；及び図２８（ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＯＸ−４０アゴニスト、Ｎ＝２）に示す。細胞拡大培養についてのＣＤ８＋細胞数結果を図２９（ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト対未試験、Ｎ＝３）；図３０（ＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト対未試験、Ｎ＝５）；及び図３１（ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＯＸ−４０アゴニスト、Ｎ＝２）に示す。細胞拡大培養についての総ＣＤ８＋／ＣＤ４＋細胞数比結果を図３２（ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト対未試験、Ｎ＝３）；図３３（ＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト対未試験、Ｎ＝５）；及び図３４（ＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト及びＯＸ−４０アゴニスト、Ｎ＝２）に示す。
【１３６８】
[001347]  図３５に示すスキームを用いて、４−１ＢＢ又はＯＸ４０アゴニストの存在下で拡大培養したプレＲＥＰ  ＴＩＬのＲＥＰ増殖もまた調べた。プレＲＥＰ  ＴＩＬをＣＢ  ４−１ＢＢアゴニスト又はＣＢ  ＯＸ４０アゴニストのいずれかで拡大培養し、ＲＥＰプロトコルにおいて、照射ＰＢＭＣ、抗ＣＤ３抗体（３０ｎｇ／ｍＬ）、及びＩＬ−２（３０００ＩＵ／ｍＬ）の存在下で１１日間更に増殖させた。ＴＩＬを回収してカウントし、拡大倍数を決定した。結果は図３６、図３７、及び図３８に示す。
【１３６９】
[001348]  ＲＥＰ段階におけるＯＸ４０の評価もまた試験した。異なる組織学からの２１個のＴＩＬ株（図３９）を５μｇ／ｍＬの濃度のＣＢ  ＯＸ４０アゴニスト又はアイソタイプ対照抗体を加えてＲＥＰで増殖させた。実験スキームは図４０に示す。結果は図４１、図４２、及び図４３に示す。意外にも、ＯＸ４０アゴニストはＲＥＰにおいてＣＤ８＋ＴＩＬを優先的に拡大培養する。ＯＸ４０アゴニストで処理したＴＩＬを奏効例又は非奏効例として分類した。
【１３７０】
[001349]  非奏効例及び奏効例ＴＩＬ株における抗ＯＸ４０用量タイトレーションを実施してこの効果を更に調べ、奏効例及び非奏効例におけるＯＸ４０アゴニストの最適濃度を定義した。抗ＯＸ４０処理後のＣＤ８＋への偏り（skewness）の亢進に基づきＴＩＬ株を２つの群（奏効例及び非奏効例）に分類した。３つの非奏効例（Ｌ４００５、Ｈ３００５、及びＭ１０２２）及び奏効例（Ｔ６００１、Ｔ６００３、及びＬ４００２）を図４４に示す条件に従いＯＸ４０アゴニスト又はアイソタイプ対照抗体の存在下においてＲＥＰで増殖させた。図４５及び図４６は、奏効例では抗ＯＸ４０処理後に用量依存的なＣＤ８＋への偏り方が観察され、１〜１０μｇ／ｍＬ範囲の濃度で偏りが促進されたことを示す。非奏効例は高濃度（３０μｇ／ｍＬ）であっても抗ＯＸ４０処理後にＣＤ８＋への偏りを呈しなかった。
【１３７１】
[001350]  奏効例においてＯＸ４０アゴニストがＴＣＲｖｂレパートリーに及ぼす影響もまた調べた。ＣＤ８＋集団を偏らせることが先に示された抗ＯＸ４０が特定のＴＣＲ  ｖｂレパートリーを優先的に拡大するかどうかを決定するため、２４ウェルプレートにおいて奏効例ＴＩＬ株をＩＬ−２単独又はＩＬ−２とＣＤ  ＯＸ４０アゴニストモノクローナル抗体（５μｇ／ｍＬ）のいずれかと共にＲＥＰで増殖させた。１１日目、ＴＩＬを回収し、抗ＣＤ３、抗ＣＤ８、抗ＣＤ４、及びＴＣＲｖｂレパートリー抗体で染色し、フローサイトメトリーによって分析した。３つの組織学の３例の奏効例について結果を図４７、図４８、及び図４９に示す。ＴＣＲｖｂレパートリーの変化が最小限であることが観察されたことから、図１又は図２の実施形態における短縮２２日間プロセスが呈する高度なポリクロナリティーが、ＲＥＰ中のＯＸ４０アゴニストの使用と併せて意外にも維持されることが示される。
【１３７２】
[001351]  結論として、ＣＢ抗ＯＸ４０抗体の使用によりプレＲＥＰ  ＣＤ８＋ＴＩＬ拡大培養が著しく亢進した一方、ＣＢ抗４−１ＢＢ抗体の使用もまた有望な傾向を実証した。ＲＥＰ拡大倍数は前処理条件に関わらず同等であった。意外にも、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、以前ＩＬ−２単独で成長させたＲＥＰ  ＴＩＬにおけるＣＤ８＋／ＣＤ４＋比を増加させた。非奏効例ＴＩＬでは、抗ＯＸ４０処理後にＣＤ４＋サブセットにおいてＯＸ−４０の下方調節は観察されなかった。奏効例では、抗ＯＸ４０処理後に用量依存的なＣＤ８＋への偏り方が観察された。大幅なＣＤ８＋への偏りが観察されたにも関わらず、ＴＣＲｖｂレパートリーの変化はごく僅かであった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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