(57)【要約】  心血管・脳血管疾患の予防及び治療における三七とアスピリンの併用又は組み合わせの応用。前記併用又は組み合わせにおいては、三七総サポニンの用量範囲が２５−５００ｍｇ／ｄであり、アスピリンの用量範囲が２０−７００ｍｇ／ｄである。前記三七は、市販製品、三七漢方薬、三七抽出物、三七有効成分及びその三七製剤などを含む。両者は相乗作用を果たし、心血管・脳血管疾患の予防及び治療、アスピリンによるラット胃粘膜傷害の軽減に対して良好な効果を奏する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
心血管・脳血管疾患の予防及び治療における三七とアスピリンの併用又は組み合わせの応用。
【請求項２】
心血管・脳血管疾患の予防及び治療における一級又は二級予防への応用である、ことを特徴とする請求項１に記載の応用。
【請求項３】
前記三七は、市販製品、三七漢方薬、生薬から抽出して製造される三七抽出物、三七有効成分及びその三七製剤を含む、ことを特徴とする請求項１又は２に記載の応用。
【請求項４】
前記三七において、三七総サポニンの含有量は５５−９０重量％である、ことを特徴とする請求項３に記載の応用。
【請求項５】
前記併用又は組み合わせは、三七総サポニンとアスピリンの併用又は組み合わせである、ことを特徴とする請求項１−４のいずれか１項に記載の応用。
【請求項６】
併用する場合、三七総サポニンの用量範囲が２５−５００ｍｇ／ｄであり、アスピリンの用量範囲が２０−７００ｍｇ／ｄである、ことを特徴とする請求項５に記載の応用。
【請求項７】
併用する場合、三七総サポニンの用量範囲が２５０−５００ｍｇ／ｄであり、アスピリンの用量範囲が８１−１００ｍｇ／ｄである、ことを特徴とする請求項６に記載の応用。
【請求項８】
組み合わせて使用する場合、三七総サポニンとアスピリンの重量比が３−９４：６−９７である、ことを特徴とする請求項５に記載の応用。
【請求項９】
組み合わせて使用する場合、三七総サポニンとアスピリンの重量比が７１−８６：１４−２９である、ことを特徴とする請求項８に記載の応用。
【請求項１０】
前記心血管疾患は、冠状動脈性心臓病、急性心筋梗塞及びほかのアテローム性動脈硬化性血管疾患を含み、脳血管疾患は、虚血性脳卒中、脳梗塞、一過性脳虚血発作、血栓性脳血管疾患を含む、ことを特徴とする請求項１−９のいずれか１項に記載の応用。
【請求項１１】
アスピリンによるラット胃粘膜傷害を同時に軽減する、ことを特徴とする請求項１０に記載の応用。
【請求項１２】
投与期間が、１週間から長期である、ことを特徴とする請求項１−１１のいずれか１項に記載の応用。
【請求項１３】
三七又は三七抽出物、アスピリン及び薬学的に許容される担体を用いて、臨床的に許容される任意の剤形を調製する、ことを特徴とする請求項１−１１のいずれか１項に記載の応用。
【請求項１４】
前記剤形は、口腔内崩壊錠、徐放錠、口腔内崩壊錠、徐放錠、放出制御錠剤を含む錠剤、徐放カプセル、放出制御カプセルを含むカプセル、経口液、シロップ、顆粒、滴下丸薬、水針、凍結乾燥粉末注射剤、無菌粉末注射剤、又は輸液剤から選ばれる、ことを特徴とする請求項１３に記載の応用。
【請求項１５】
前記薬学的に許容される担体は、充填剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、共溶媒、界面活性剤、吸着担体、溶剤、酸化防止剤、共溶媒、吸着剤、浸透圧調整剤、ｐＨ調整剤から選ばれる、ことを特徴とする請求項１４に記載の応用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、漢方薬の分野に属し、具体的には、心血管・脳血管疾患の予防及び治療における三七と化学薬品のアスピリンの併用又は組み合わせの応用に関し、特に、心血管・脳血管疾患の予防における三七漢方薬（根、切り口、筋、茎葉等の様々な漢方薬製品）、三七抽出物、三七有効部位及びその三七製剤とアスピリンの応用に関し、アスピリンによるラット胃粘膜傷害を軽減するとともに、出血のリスクを低減させ、効果強化及び毒性軽減の効果を奏する。
【背景技術】
【０００２】
心血管・脳血管疾患の二級予防とは、冠状動脈性心臓病、脳梗塞やほかのアテローム性動脈硬化性血管疾患が発症した患者の早期発見、早期診断、早期治療を指し、それは、症状を改善し、病死・障害率を低減させ、疾患の進行を防止し、予後を改善し、冠状動脈性心臓病、脳梗塞等の疾患の再発を防止することを目的とする。現在、臨床において一般的に使用される心血管・脳血管疾患の二級予防薬はアスピリンであり、主な目的は、血小板の凝集と放出を防止し、プロスタグランジンとトロンボキサンＡ２のバランスを改善し、動脈硬化性血栓症の形成を予防し、冠状動脈性心臓病又は脳梗塞の再発を防止するということである。しかし、アスピリンには、消化道出血、頭蓋内出血やアスピリン耐性などの副作用があるため、その使用に影響を及ぼす。
【０００３】
漢方薬は、マルチチャネル・マルチターゲットの作用効果があり、心血管・脳血管疾患の制御に対して独特な優位性があり、全体的な調節を重視化し、毒作用や副作用が小さいため、臨床医により広く認められている。
【０００４】
三七は、ウコギ科多年生草本植物である三七の根であり、甘くて少し苦味があり、湿った特性を持ち、肝臓、胃に作用を奏し、生製品は、うっ血を減らして、出血を止め、腫れを減らして、痛みを和らげ、喀血、吐血、外傷による腫れ、外傷による出血に効き、熟製品は、血を補って血の流れを良くし、失血や貧血に使用される。従って、三七は、伝統的な漢方薬として、体内及び体外で発生した各種の出血や外傷による損傷、うっ滞、腫れ、痛みに用いられる薬物である。三七総サポニンは、三七の有効活性成分であり、中国国内外での研究により、抗酸化ストレス、抗炎症の効果があり、且つ体外及び体外で明確な神経保護効果があり、脳虚血の改善、血小板凝集の抑制、血液粘度の低減、抗血栓等に使用できることが証明されている。しかし、心血管・脳血管疾患における三七総サポニンの作用メカニズムについては詳細に研究されておらず、アスピリン等の抗血小板薬物と併用する発明創造もなく、三七総サポニンとアスピリンの併用の研究開発は、薬物の相乗作用及び毒性軽減という使用効果を十分に発揮することができ、その有効性を向上させ、臨床における心血管・脳血管疾患の治療及び予防のために、より安全で効果的な薬物の組み合わせ及び使用方法を提供する。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、心血管・脳血管疾患の予防及び治療における三七とアスピリンの併用又は組み合わせの応用を提供する。特に一級又は二級予防への応用である。
【０００６】
本発明は、心血管・脳血管疾患を予防及び治療するとともに、アスピリンによるラット胃粘膜傷害を軽減するための三七とアスピリンの併用又は組み合わせの応用を提供する。
【０００７】
本発明は、三七とアスピリンを併用又は組み合わせて使用することにより心血管・脳血管疾患を予防及び治療し、両方は相乗作用を果たし、心血管・脳血管疾患の予防及び治療に対して良好な効果を奏するとともに、アスピリンによるラット胃粘膜傷害を軽減する。
【０００８】
本発明の前記三七は、市販製品、三七漢方薬（根、切り口、筋、茎葉等の様々な漢方薬製品）、生薬から常法により抽出して製造される三七抽出物、三七有効成分及びその三七製剤（注射剤、経口剤などのさまざまな製剤を含む）を含む。
【０００９】
本発明の三七抽出物は、水抽出法、水抽出アルコール沈殿法、抽出法、浸漬法、浸透法、還流抽出法、連続還流抽出法、多孔質樹脂吸着法などで製造できる。薬効をより良好に発揮するために、以下の方法で三七を抽出することが好ましいが、本発明の保護範囲を制限するものではない。三七の根を粉砕してエタノールで抽出し、抽出液をエタノールで回収し、濃縮してからマクロポーラス吸着樹脂カラムに加え、水及びエタノールで順に溶離し、エタノール溶離液を収集し、エタノールを回収して乾燥させる。
【００１０】
三七抽出物において、三七総サポニンの含有量は５５−９０％重量％である。
【００１１】
本発明の好ましい技術案は、心血管・脳血管疾患を予防及び治療するとともに、アスピリンによるラット胃粘膜傷害を軽減するための三七総サポニンとアスピリンの併用又は組み合わせの応用である。
【００１２】
本発明は、三七、アスピリン及び薬学的に許容される担体を用いて、臨床的に許容される任意の剤形を調製してなる医薬組成物を提供する。三七総サポニンとアスピリンの組み合わせは好ましい。
【００１３】
本発明の前記三七総サポニンとアスピリンを併用する場合、三七総サポニンの用量範囲が２５−５００ｍｇ／ｄであり、アスピリンの用量範囲が２０−７００ｍｇ／ｄである。好ましくは、三七総サポニンの用量範囲が２５０−５００ｍｇ／ｄであり、アスピリンの用量範囲が８１−１００ｍｇ／ｄである。
【００１４】
本発明の前記三七総サポニンとアスピリンを組み合わせて使用する場合、三七総サポニンとアスピリンの重量比が３−９４：６−９７である。好ましくは、三七総サポニンとアスピリンの重量比が７１−８６：１４−２９である。
【００１５】
本発明の投与期間が、１週間から長期である。
【００１６】
本発明の前記医薬組成物剤形は、口腔内崩壊錠、徐放錠、口腔内崩壊錠、徐放錠、放出制御錠剤を含む錠剤、徐放カプセル、放出制御カプセルを含むカプセル、経口液、シロップ、顆粒、滴下丸薬、水針、凍結乾燥粉末注射剤、無菌粉末注射剤、又は輸液剤から選ばれる。
【００１７】
前記薬学的に許容される担体は、充填剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、共溶媒、界面活性剤、吸着担体、溶剤、酸化防止剤、共溶媒、吸着剤、浸透圧調整剤、ｐＨ調整剤から選ばれる。
【００１８】
本発明は、心血管・脳血管疾患の予防及び治療における三七とアスピリンの併用又は組み合わせの応用である。両方は相乗作用及び毒性低減の作用を果たし、心血管・脳血管疾患を予防及び治療するとともに、アスピリンによるラット胃粘膜傷害の軽減に対して良好な効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】三七総サポニンは、アスピリンによるラット胃粘膜傷害を顕著に軽減する。
【図２】三七総サポニンは、アスピリンによるラット十二指腸微絨毛傷害を顕著に軽減する。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
以下、実験例にて本発明の前記薬物の有益な効果をさらに説明し、これらの実験例は、本発明の組成物の脳血管疾患の予防及び治療への作用を含む。
【００２１】
実施例１：ラットの心筋虚血再灌流障害における三七総サポニンとアスピリンの併用の相乗作用
１．試験動物
健康な雄ＳＤラット（体重２８０−３００ｇ）を、北京維通利華実験動物公司により提供し、中国医学科学院薬用植物研究所の動物センターで飼育した。動物を１週間適応的に飼育した後に試験に用いた。実験前に中国医学科学院／北京協和医学院薬用植物研究所の実験動物管理及び動物福祉委員会によって審査して承認した。
【００２２】
２．試験方法
２．１  動物群の分け及び薬物処置
２４０匹の雄ＳＤラットを８群にランダムに分け、１群ごとに３０匹とし、それぞれ、偽手術群、心筋虚血再灌流障害モデル群、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）群、アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）群、アスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）群、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）＋アスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）群とした。三七総サポニンとアスピリン処置群に対しては、前週に毎日強制経口投与し、偽手術群とモデル群のラットに対しては、等体積の蒸留水を強制経口投与した。
【００２３】
２．２モデルの作成
ペントバルビタールナトリウム（体重で４０ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内注射してラットを麻酔し、経口カニューレを介して呼吸数７０回／分、呼吸比１：１、一回換気量１ｍＬの小動物人工呼吸器に接続し、ＡＤ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ製マルチチャンネル生理学的レコーダーを採用してラットの心電図をリアルタイムに記録した。ラットに対して胸骨切開術を行い、胸骨の左側の約０．５ｃｍ、３〜４肋間に約２〜３ｃｍ切開し、肋骨を開胸器で押し開き、呼気中に心膜を切開して、心臓を露出させた。左冠静脈幹をマークとして、肺動脈円錐と左心耳の間に、左心耳の下方の約２ｍｍで、６−０絹糸を針に通して心筋表面の約１〜１．５ｍｍまで刺し、スパンを２〜３ｍｍとした。５ｍｉｎ安定化させた後、絹糸を長さが約３．５ｃｍの使い捨て型点滴用ホースに通し、糸を通した後、糸の一端を軽く引き上げ、ホースを押し下げ、止血鉗子でクランプして固定した。３０ｍｉｎ虚血後、止血鉗子を緩め、結紮糸を除去した後、１ｄ、３ｄ、７ｄ及び１４ｄ再灌流し、心筋虚血再灌流障害モデルを作成した。結紮成功の判断標準は、心電図のＳＴセグメントが上昇し、局所心筋組織の色が赤から灰白になり、３０ｍｉｎ再灌流した後、ＳＴセグメントが５０％以上低下し、心筋の色が灰白から赤になることであった。
【００２４】
２．３  心筋梗塞の体積の測定
心筋梗塞の体積をテトラゾリウムレッド（ＴＴＣ）染色で測定した。ラット（ｎ＝５）を２４ｈ再灌流した後、断首して殺して、心臓を迅速に取り出し、−２０℃の冷蔵庫に入れて短時間凍結した後、アイストレイに置いて厚さ２ｍｍで５枚に切り、心臓切片を１．５ｍＬの２％ＴＴＣ溶液に入れて暗所で３０ｍｉｎインキュベートし、次に心臓切片を１０％パラホルムアルデヒドに入れて一晩固定し、写真を撮り分析した。Ｉｍａｇｅ−Ｐｒｏ  ｐｌｕｓ  ５．１ソフトウェアを使用して心筋梗塞の体積を測定して計算した。
【００２５】
２．４  心筋の三種の酵素指標の検出
再灌流が終わった後、腹部大動脈から血液を採取し、自動生化学分析装置で血漿中の心筋の三種の酵素（ＡＳＴ、ＬＤＨ、ＣＫ）のレベルを検出した。
【００２６】
３．  実験結果
３．１  三七総サポニンとアスピリンの併用による、心筋虚血再灌流障害によって誘発される心筋梗塞の体積の減少
表−１に示されるように、偽手術群に比べて、心筋虚血再灌流障害モデル群の心筋梗塞の体積は大幅に増加し、モデル群に比べて、三七総サポニンとアスピリン処置群の心筋梗塞の体積は大幅に減少した。アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）単独使用群に比べて、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）とアスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）併用群の心筋梗塞の体積は大幅に減少した。
【００２７】
【表１】
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【００２８】
３．２  三七総サポニンとアスピリンの併用による、虚血再灌流障害における心筋組織のＡＳＴ、ＬＤＨ、ＣＫ活性の低下
表−２に示されるように、偽手術群に比べて、虚血再灌流障害モデル群の心筋組織におけるＡＳＴ、ＬＤＨ、ＣＫは大幅に増加し、モデル群に比べて、三七総サポニンとアスピリン処置群の心筋組織におけるＡＳＴ、ＬＤＨ、ＣＫは大幅に減少した。アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）単独使用群に比べて、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）とアスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）併用群の心筋組織におけるＡＳＴ、ＬＤＨ、ＣＫは大幅に減少した。
【００２９】
【表２】
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【００３０】
実施例２：ラットの脳虚血再灌流障害における三七総サポニンとアスピリンの併用の相乗作用
１．試験動物
健康な雄ＳＤラットを、北京維通利華実験動物公司から提供し、中国医学科学院薬用植物研究所の動物センターで飼育した。動物を１週間適応的に飼育した後に試験に用いた。実験前に中国医学科学院／北京協和医学院薬用植物研究所の実験動物管理及び動物福祉委員会によって審査して承認した。
【００３１】
２．  試験方法
２．１  動物群の分け及び薬物処置
２４０匹の雄ＳＤラットを８群にランダムに分け、１群ごとに３０匹とし、それぞれ、偽手術群、中大脳動脈塞栓（ＭＣＡＯ／Ｒ）モデル群、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）群、アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）群、アスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）群、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）＋アスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）群とした。三七総サポニンとアスピリン処置群に対しては、ＭＣＡＯの前週に毎日強制経口投与し、偽手術群とＭＣＡＯモデル群のラットに対しては、等体積の蒸留水を強制経口投与した。
【００３２】
２．２  中大脳動脈閉塞（ＭＣＡＯ）モデル
縫合閉塞法で中大脳動脈閉塞（ＭＣＡＯ）モデルを作成し、手術中に厳密に無菌で操作し、主な手術過程は、以下のとおりであった。ケタミン（８０ｍｇ／ｋｇ）とキシラジン（１０ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内注射してラットを麻酔し、総頸動脈（ＣＣＡ）、外頸動脈（ＥＣＡ）及び内頸動脈（ＩＣＡ）を分離して、微小動脈クランプで総頸動脈をクランプし、双極電気凝固ペンで外頸動脈の分岐を電気凝固した。外頸動脈の主幹を遊離し、総頸動脈の分岐から３〜４ｍｍの箇所で結紮した。微小動脈クランプで内頸動脈を一時的にクランプし、眼科用剪刀で外頸動脈に小さな開口を切開し、メチルポリシロキサンでコーティングされた４−０モノフィラメントナイロン糸を挿入して、外頸動脈の切り口で結紮糸を緩めに結び、内頸動脈の血液の逆流を遮断し、内頸動脈の微小動脈クランプを取り外し、ナイロン糸を内頸動脈に軽く押し込んで、頭蓋内の前大脳動脈に送達し、中大脳動脈（ＭＣＡ）の開口を遮断し、挿入深さを約１８−２２ｍｍとした。総頸動脈の微小動脈クランプを取り外し、消毒後、皮下組織と皮膚を層ごとに縫合し、術後２ｈ、ナイロン糸をゆっくりと引き出してから、２４ｈ再灌流した。偽手術群では、ナイロン糸を挿入しない以外、残りの操作は同じであった。実験に亘って、すべてのラットの直腸温度は３７℃に維持された。
【００３３】
２．３  神経学的機能の評価
Ｌｏｎｇａの５級スコアリング方法ですべてのラットに対して神経行動学的にスコアリングした。Ｌｏｎｇａスコアリングの基準は以下のとおりであった。０：正常であり、神経学的障害がない。１：左前肢に伸展障害があり、機能が低下している。２：左に回し、左前肢が不随になり、機能が深刻に低下し、ラットの尾が持ち上げられると、ラットは絶えずに障害部に振り向く。３：歩くときに左側に転倒する。４：肢体が不随になり、無意識になる。５、死亡。
【００３４】
２．４  脳含水量の測定
乾湿重量法で脳組織含水量を測定し、つまり、先ず、ラット（ｎ＝１０）の脳組織を坩堝内に入れ、秤量した後、それぞれ記録し、次に、番号の付いた脳組織を１１０℃のオーブンに入れて２４ｈ以上ベーキングし、一定の重量に達した後、乾燥した脳の重量を量り、以下の式により脳組織の含水率を計算した。脳組織含水量＝（湿重量−乾燥重量）／湿重量×１００％
【００３５】
２．５  脳梗塞の体積の測定
脳梗塞の体積をテトラゾリウムレッド（ＴＴＣ）染色で測定した。ラット（ｎ＝５）を２４ｈ再灌流した後、断首により殺して、脳全体を迅速に取り出し、−２０℃の冷蔵庫に入れて短時間凍結した後、アイストレイに置いて嗅球を取り除き、前脳を冠状面に沿って厚さ２ｍｍで５枚に切り、脳切片を１．５ｍＬの２％ＴＴＣ溶液に入れて暗所で３０ｍｉｎインキュベートし、次に脳切片を１０％パラホルムアルデヒドに入れて一晩固定し、写真を撮り分析した。Ｉｍａｇｅ−Ｐｒｏ  ｐｌｕｓ  ５．１ソフトウェアを使用して脳梗塞の体積を測定して計算した。
【００３６】
２．５  血小板の最大凝集率の測定
動物（ｎ＝１０）から血液３．６ｍＬを採取し、３．８％クエン酸ナトリウム（９：１）で抗凝固処置し、１５０ｇを１０ｍｉｎ遠心分離し、多血小板血漿を分離し、次に、１５００ｇを１０ｍｉｎ遠心分離し、上清液を取って、乏血小板血漿を得た。多血小板血漿０．３ｍＬを比濁管内に入れ、乏血小板血漿で光透過率を調整し、アデノシン二リン酸（ＡＤＰ）を誘発剤として使用し（最終濃度２μｍｏｌ／Ｌ）、５ｍｉｎ内の多血小板血漿における血小板の最大凝集及び最大凝集時間を血液凝集装置で検出した。
【００３７】
２．６  酸化ストレス指標、イヌ尿素及び炎症因子の検出
動物（ｎ＝８）の腹部大動脈から血液５ｍＬを採取し、３０００ｒｐｍで１０ｍｉｎ遠心分離して、血清を得た。脳組織を取り、海馬と大脳皮質を分離し、組織をホモジネートし、３０００ｒｐｍで１０ｍｉｎ遠心分離して、上清を得た。南京建成製キットで血清ＭＤＡ、ＳＯＤ、ＣＡＴ及びＧＳＨ−Ｐｘのレベルを検出し、ＥＬＩＳＡキットでイヌ尿素及び炎症反応指標ＭＣＰ−１、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−４、ＩＬ−６及びＩＬ−１０のレベルを検出した。
【００３８】
２．７データ統計
ＳＰＳＳ統計ソフトウェアで統計して分析した。対応しないｔ検出とＯｎｅ−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡで計量データの統計分析を行い、Ｐ＜０．０５は統計学的差異があることを示す。
【００３９】
３．  実験結果
３．１  三七総サポニンとアスピリンの併用による、ＭＣＡＯ／Ｒによって誘発されるラットの神経学的機能障害の改善
表−３に示されるように、偽手術群に比べて、ＭＣＡＯ／Ｒモデル群の神経学的機能障害のスコアリングは大幅に増加し、ＭＣＡＯ／Ｒモデル群に比べて、三七総サポニンとアスピリン処置群の神経学的機能障害のスコアリングは大幅に減少した。アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）単独使用群に比べて、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）とアスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）併用群の神経学的機能障害のスコアリングは大幅に減少した。
【００４０】
【表３】
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【００４１】
３．２  三七総サポニンとアスピリンの併用による、ＭＣＡＯ／Ｒによって誘発されるラットの脳梗塞の体積の低減
表−４に示されるように、偽手術群に比べて、ＭＣＡＯ／Ｒモデル群の脳梗塞の体積は大幅に増加し、ＭＣＡＯ／Ｒモデル群に比べて、三七総サポニンとアスピリン処置群の脳梗塞の体積は大幅に減少した。アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）単独使用群に比べて、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）とアスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）併用群の脳梗塞の体積は大幅に減少した。
【００４２】
【表４】
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【００４３】
３．３  三七総サポニンとアスピリンの併用による、血小板の最大凝集率の低減
表−５に示されるように、偽手術群に比べて、ＭＣＡＯ／Ｒモデル群の血小板の最大凝集率は大幅に増加し、ＭＣＡＯ／Ｒモデル群に比べて、三七総サポニンとアスピリン処置群は血小板の最大凝集率を大幅に低減させた。アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）単独使用群に比べて、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）とアスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）併用群の血小板の最大凝集率は増加し、有意差がなかった。
【００４４】
【表５】
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【００４５】
３．４  三七総サポニンとアスピリンの併用による、血清中の炎症因子の低減、及び抗炎症因子の増加
表−６に示されるように、偽手術群に比べて、ＭＣＡＯ／Ｒモデル群のラットの血清ＩＬ−１β、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＮＦ−α、ＭＣＰ−１はいずれも大幅に増加し、ＭＣＡＯ／Ｒモデル群に比べて、三七総サポニンとアスピリン処置群のラットの血清ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＭＣＰ−１は大幅に減少し、ＩＬ−４とＩＬ−１０は大幅に増加し、アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）単独使用群に比べて、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）とアスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）併用群のＩＬ−６、ＭＣＰ−１は大幅に減少し、ＩＬ−１０は大幅に増加した。
【００４６】
【表６】
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【００４７】
３．５  三七総サポニンとアスピリンの併用による、血清、海馬及び大脳皮質組織中のイヌ尿素のレベルの低減
表−７に示されるように、偽手術群に比べて、ＭＣＡＯ／Ｒモデル群の血清、海馬及び大脳皮質組織中のイヌ尿素のレベルは大幅に高くなり、ＭＣＡＯ／Ｒモデル群に比べて、三七総サポニンとアスピリン処置群は血清、海馬及び大脳皮質組織中のイヌ尿素のレベルを大幅に低減させた。アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）単独使用群に比べて、三七総サポニン（５０ｍｇ／ｋｇ）とアスピリン（５ｍｇ／ｋｇ）併用群の血清、海馬及び大脳皮質中のイヌ尿素のレベルは大幅に低減した。
【００４８】
【表７】
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【００４９】
実施例３：アスピリンによって誘発される胃腸粘膜傷害に対する三七総サポニンの抑制作用
１．  試験動物
健康な雄ＳＤラット（体重２８０−３００ｇ）を、北京維通利華実験動物公司から提供し、中国医学科学院薬用植物研究所の動物センターで飼育した。動物を１週間適応的に飼育した後試験に用いた。実験前に中国医学科学院／北京協和医学院薬用植物研究所の実験動物管理及び動物福祉委員会によって審査して承認した。
【００５０】
２．  試験方法
２．１  動物群の分け及び薬物処置
４０匹の雄ＳＤラットを４群にランダムに分け、１群ごとに１０匹とし、それぞれ、空白対照群、アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）群、三七総サポニン（１００ｍｇ／ｋｇ）＋アスピリン（１０ｍｇ／ｋｇ）群、三七総サポニン（１００ｍｇ／ｋｇ）群とした。三七総サポニンとアスピリン処置群に対しては、三七総サポニンとアスピリンを毎日強制経口投与し、合計４週間投与し、空白対照群のラットに対しては、等体積の生理的食塩水を毎日強制経口投与した。
【００５１】
２.２  ＨＥ染色による胃粘膜の病理学的変化の検出
４週間投与した後、各群のラットの胃組織を取り、４％ホルムアルデヒド溶液で固定し、常用のパラフィンで包埋してスライシングし、組織の炎症の病変の程度をＨＥ染色で観察した。
【００５２】
２．３  透過型電子顕微鏡による十二指腸絨毛の超微細構造の検出
４週間投与した後、各群のラットの十二指腸を取り、２．５％グルタルアルデヒド緩衝液で２ｈ固定し、次に、ＰＨ７．４緩衝液で３回洗浄して、１％四酸化オスミウムで３０ｍｉｎ浸漬し、分別用アルコール及びアセトンで脱水し、その後エポキシ樹脂８１２に埋め込み、極薄切片を製造し、２００メッシュの銅グリッドを取り、酢酸ウラニル及びクエン酸鉛で再浸染し、次に各群のラットの十二指腸の超微細構造の変化を電子顕微鏡で観察した。
【００５３】
３．  実験結果
３．１  三七総サポニンによる、アスピリンによるラット胃粘膜傷害の大幅な軽減
図１に示されるように、空白対照群に比べて、アスピリン群のラットの胃粘膜の上皮細胞が壊死し、炎症性細胞が浸潤した。アスピリン群に比べて、三七総サポニンは、アスピリンによる胃粘膜上皮細胞の壊死及び炎症性細胞の浸潤を大幅に軽減することができた。三七総サポニンを単独で使用する場合、ラットの胃粘膜に対して有意な影響がなかった。
【００５４】
３．２  三七総サポニンによる、アスピリンによるラットの十二指腸微絨毛傷害の大幅な軽減
図２に示されるように、空白対照群に比べて、アスピリン群のラット十二指腸の表面の微絨毛が減少した。アスピリン群に比べて、三七総サポニンは、アスピリンによる十二指腸の表面の微絨毛傷害を大幅に軽減することができた。三七総サポニンを単独で使用する場合、ラットの胃粘膜に対して有意な影響がなかった。
【００５５】
もちろん、本発明の上記実施例は、本発明を明瞭に説明するための例に過ぎず、本発明の実施形態を限定するものではない。当業者にとって、上記説明に基づいて、ほかのさまざまな形態の変化又変更を行うことができる。ここで、あらゆる実施形態を挙げる必要がなく、また、それも不可能である。これらの本発明の主旨から得られる自明な変化又は変更も、本発明の保護範囲に属する。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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