(57)【要約】  本発明は、エンドウ豆アルブミンにおいて、それが１グラムのアルブミン当たり６００ｍｌを超えるコーンオイルを乳化し得ることから、その乳化活性が向上されていることを特徴とするエンドウ豆アルブミンに関する。本発明は、本発明によるエンドウ豆アルブミンを得る方法にも関する。最後に、本発明は、工業、特に食品及び製薬用途における本発明によるエンドウ豆アルブミンの使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
エンドウ豆アルブミンにおいて、その乳化活性は、１グラムのアルブミン当たり６００ｍｌのコーンオイルより大きいことを特徴とするエンドウ豆アルブミン。
【請求項２】
前記乳化活性が、１グラムのアルブミン当たり８００ｍｌのコーンオイルより大きい、請求項１に記載のエンドウ豆アルブミン。
【請求項３】
前記乳化活性が、１グラムのアルブミン当たり１０００ｍｌのコーンオイルより大きい、請求項２に記載のエンドウ豆アルブミン。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のエンドウ豆アルブミンを得るためにエンドウ豆可溶性画分を処理する方法であって、
ａ．エンドウ豆可溶性画分を提供すること、
ｂ．それに続いて、前記エンドウ豆可溶性画分を真空脱気するステップ、
ｃ．それに続いて、前記脱気された可溶性画分を精密濾過又は遠心分離し、精密濾過透過液又は遠心分離上清をもたらすステップ、
ｄ．それに続いて、前記精密濾過透過液又は遠心分離上清を限外濾過し、限外濾過濃縮水をもたらすステップ、
ｅ．それに続いて、前記限外濾過透過液を逆浸透させ、前記逆浸透から生じる透過液及び濃縮水をもたらす任意選択的なステップ、
ｆ．それに続いて、ステップｄ）又はｅ）において得られた前記濃縮水のｐＨを中和すること、
ｇ．それに続いて、ステップｆ）の前記中和された濃縮水をＵＨＴ加熱処理すること、
ｈ．それに続いて、ステップｇ）の前記加熱処理された濃縮水を乾燥させること
を含む方法。
【請求項５】
ステップｆ）の前記中和ｐＨは、６．５〜７．５であることを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ステップｆ）は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム又は水性アンモニアから選択される塩基、優先的には水酸化ナトリウムを添加することによって実施されることを特徴とする、請求項４又は５に記載の方法。
【請求項７】
ステップｇ）の前記加熱処理は、１３０℃〜１５０℃、優先的には１４０℃の温度において、５〜１５秒間、優先的には１０秒間前後の処理時間にわたって実施されることを特徴とする、請求項４〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ステップｈ）の前記乾燥は、一段式噴霧乾燥によって実施されることを特徴とする、請求項４〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
食用調合物を製造するための、請求項１〜３のいずれか一項に記載のエンドウ豆アルブミンの使用。
【請求項１０】
コーヒーホワイトナーを製造するための、請求項９に記載のエンドウ豆アルブミンの使用。
【請求項１１】
「直ちに飲める」タイプの飲料を製造するための、請求項９に記載のエンドウ豆アルブミンの使用。
【請求項１２】
化粧品又は製薬調合物を製造するための、請求項１〜３のいずれか一項に記載のエンドウ豆アルブミンの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エンドウ豆アルブミンにおいて、それが１グラムのアルブミン当たり６００ｍｌを超えるコーンオイルを乳化し得ることから、その乳化活性が向上されていることを特徴とするエンドウ豆アルブミンに関する。本発明は、本発明による前記エンドウ豆アルブミンを得る方法にも関する。最後に、本発明は、工業用途、特に食品、化粧品及び製薬用途における本発明による前記エンドウ豆アルブミンの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
１９７０年代以来、エンドウ豆は、特に動物飼料のタンパク質資源として、またそれだけでなくヒトが消費するための食品として、欧州及び主にフランスで最も広く開発されているマメ科の種子植物である。エンドウ豆は、およそ２７重量％のタンパク質を含有する。「エンドウ豆」という用語は、本明細書では、その最も広い意味で考慮され、ヒトが消費するための食品、動物飼料及び／又は他の用途などの一般的に意図される用途にかかわりなく、特に「丸エンドウ豆」の全ての野生型並びに「丸エンドウ豆」及び「しわエンドウ豆」の全ての変異種を含む。
【０００３】
エンドウ豆の構成物のうち、現在最も活用されているのは、不活性構成物とも称されるデンプン、繊維及びタンパク質である。対応する利用工程は、最初にエンドウ豆粉と水とを混練機内で混合し、豆粉の懸濁液を製造することを含む。この混合物からデンプン及び繊維を遠心分離によって抽出した後、タンパク質に富む画分又は軽い画分が入手できる。この画分から、等電点ｐＨにおけるタンパク質の選択的な沈殿によって単離物が得られ、目的は、グロブリンに富む関心のあるタンパク質を不溶化することである。次に、豆粉の懸濁液又は「豆乳」に対して特に熱凝固によって分離操作が実施され、この目的は、グロブリンからなる関心のあるタンパク質を不溶化することである。工程のこの段階において、グロブリンが非常に豊富な組成物を分離するために、特に「フロック」とも称される遠心分離傾斜法による分離を実施する必要がある。上清は、当業者が一般的に「可溶性画分」と称するものを構成する。
【０００４】
「可溶性画分」という用語は、言語の乱用となることを最初に明記する必要があり、前記画分は、種々の様々なコロイドなどのいくつかの不溶性粒子だけでなく、特にタンパク質も含有する。これらの可溶性画分は、最初に蒸発によって濃縮されなければならず、その結果、それらが含有する不溶性化合物、特にタンパク質が回収され得る。現時点では、可溶性画分は、非常にわずかにのみ利用されており、それらは、発酵中の窒素源として及びこの前記画分が繊維で富化されている場合には家畜の栄養飼料としてほとんど独占的に使用される。
【０００５】
ここで、最初のエンドウ豆からグロブリンに富む組成物であるフロックに至る全体的な工程の収率は、１００％にはほど遠いことに留意すべきである。工業的レベルでは、可溶性画分内には、出発エンドウ豆に最初に含有されるタンパク質の重量の５％〜２５％、より一般的には２０％前後が存在すると推定される。
【０００６】
この可溶性画分に存在する、主にアルブミンタイプのこのタンパク質画分を回収するためにいくつかの研究が実施されている。文献“Ｐｉｌｏｔ  ｓｃａｌｅ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｆｒｏｍ  ａ  ｐｅａ  ｗｈｅｙ  ｄｉｓｃｈａｒｇｅ  ｂｙ  ｕｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ”（Ｌｅｉ（Ｌｅｉｇｈ）Ｇａｏ，Ｌｅｂｅｎｓｍ．−Ｗｉｓｓ．ｕ．−Ｔｅｃｈｎｏｌ．，Ｖｏｌ  ３４，ｐｐ．１４９−１５８，２００１）は、遠心分離とそれに続く限外濾過、次にｐＨ７での中和及び噴霧乾燥によるエン
ドウ豆アルブミンの回収に関する。
【０００７】
次に、国際公開第２００６／０５２００３号は、膜濾過とそれに続く炭酸カルシウムの添加による中和及び乾燥により、液体エンドウ豆転換溶出物から得られる可溶性ポリペプチドを調製する方法に関する。
【０００８】
本出願人は、連続するａ）遠心分離又は精密濾過、ｂ）限外濾過、ｃ）最後に、任意選択的に逆浸透に基づいて、アルブミンに富む画分を回収する、国際公開第２０１４／１１８４４９号に記載される方法も開発している。
【０００９】
乳化特性は、慣習的に、乳化活性（ＥＡ）及びエマルション安定性（ＥＳ）の２つの指標で評価される（Ｂｏｙｅ  ｅｔ  ａｌ．２０１０ａ）。乳化活性（ＥＡ）は、エマルションの分解又は相転換前に、規定量の乳化剤を含有する水溶液に分散され得る油の最大量によって定義される（Ｓｈｅｒｍａｎ，１９９５）。
【００１０】
乳アルブミンは、それらの高い乳化活性で知られている。これまでの進展にもかかわらず、エンドウ豆アルブミンの乳化活性は、有利であるが、なおも基準とされる乳アルブミン画分のものよりも低いままである。
【００１１】
“Ｐｉｌｏｔ  ｓｃａｌｅ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｆｒｏｍ  ａ  ｐｅａ  ｗｈｅｙ  ｄｉｓｃｈａｒｇｅ  ｂｙ  ｕｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ”（Ｌｅｉ（Ｌｅｉｇｈ）Ｇａｏ，Ｌｅｂｅｎｓｍ．−Ｗｉｓｓ．ｕ．−Ｔｅｃｈｎｏｌ．，ｖｏｌ３４，ｐｐ．１４９−１５８，２００１）は、その表３において、エンドウ豆アルブミンの乳化活性又は乳化力が大豆又はミルクの乳化活性よりもはるかに低く、その中の乳化活性が卵アルブミンの半分に満たないことを教示している。この論文には、起泡能力、すなわち製品が泡を形成する傾向が優れていることも記載されており、特定の用途において有利であり得るこの特性は、本発明に関連して求められる特性に反する。確かに、これらの化合物を膜濾過工程に供しなければならない場合、気泡形成は、問題になり得、次に化学消泡剤の添加を実施しなければならない。それらのより低い乳化活性のために、エンドウ豆アルブミンは、冷製調理済み肉若しくはコーヒーホワイトナーなどのいくつかの食品用途又は特定の医薬品若しくは化粧品の用途でも、乳タンパク質、特に乳アルブミンを完全に置換し得ない。この乳化活性を改善するためのいくつかのアプローチが提案されている。“Ｆｏａｍｉｎｇ  ａｎｄ  ｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ
ｏｆ  ｐｅａ  ａｌｂｕｍｉｎ  ｆｒａｃｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｐａｒｔｉａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｕｒｆａｃｅ−ａｃｔｉｖｅ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ”（Ｌｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｓｃｉ．Ｆｏｏｄ．Ａｇｒｉｃ．，８０：１９６４−１９７２，２０００）は、エンドウ豆アルブミンの乳化特性が酸性ｐＨで最大であること、及びエンドウ豆アルブミンの乳化特性を改善するには、Ｐａ２と称される細画分にアクセスするための複雑な分画工程を実施する必要があることを教示している。他の複雑で費用がかかる戦略は、例えば、酵素加水分解又は化学修飾を伴う。これらのアプローチは、やはり複雑で高価なままである。
【００１２】
その業績として、本出願人は、乳化活性が改善されたエンドウ豆アルブミンを単離する方法を把握しており、それを得るための簡単な工程を設計しており、前記改良されたエンドウ豆アルブミンを用いた食品、化粧品及び製薬用途を開発しており、これは、既知の植物性アルブミンでは現在まで実行不可能であった。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１３】
したがって、本発明の第１の主題は、エンドウ豆アルブミンであって、その乳化活性は
、１グラムのアルブミン当たり６００ｍｌのコーンオイルより大きいことを特徴とするエンドウ豆アルブミンからなる。優先的には、乳化活性は、１グラムのアルブミン当たり８００ｍｌのコーンオイルより大きい。より優先的には、乳化活性は、１グラムのアルブミン当たり１０００ｍｌのコーンオイルより大きい。
【００１４】
本出願において、「エンドウ豆アルブミン」という用語は、エンドウ豆の種々の構成物の水性分画の処理中に抽出される水溶性タンパク質画分を意味することが意図される（例えば、本出願人に付与された欧州特許第１４００５３７号明細書を参照されたい）。
【００１５】
乳化活性は、エマルションの分解又は相転換前に、規定量の乳化剤を含有する水溶液に分散され得る油の最大量として定義される（Ｓｈｅｒｍａｎ，１９９５）。それを定量化するため、本出願人は、それを容易且つ迅速に再現性良く定量化できるようにする試験を開発した。この工程は、次のステップを実施することを含む：
１．０．２ｇの製品サンプルを２０ｍｌの水に分散させる。
２．この溶液を、Ｕｌｔｒａｔｕｒａｘ  ＩＫＡ  Ｔ２５装置を使用して毎分９５００回転（ｒｐｍ）の速度で３０秒間均質化する。
３．先行するステップ２と同一条件下で均質化しながら、Ｃａｒｇｉｌｌ社によってＡｍｐｈｏｒａの名称の下で販売される２０ｍｌのコーンオイルを添加する。
４．３１００ｇで５分間遠心分離する。
ａ．良好なエマルションが得られた場合、すなわちエマルションの分解又は相転換がない場合、水及びコーンオイルの量を５０％増して、ステップ１から試験を再開する。
ｂ．例えば、エマルションの相分離、分解又は相転換などの不良なエマルションが得られた場合、水及びコーンオイルの量を５０％減らして、ステップ１から試験を再開する。
【００１６】
乳化され得る油の最大量（ｍｌ単位のＱｍａｘ）は、このように繰り返して判定される。
【００１７】
したがって、乳化活性は、１グラムの製品当たりで乳化され得るコーンオイルの最大量である。
乳化活性＝（Ｑｍａｘ／０．２）×１００
【００１８】
本発明の第２の主題は、エンドウ豆アルブミンを得ることを可能にする、エンドウ豆可溶性画分を処理する方法であって、
ａ．エンドウ豆可溶性画分を提供すること、
ｂ．それに続いて、前記エンドウ豆可溶性画分を真空脱気するステップ、
ｃ．それに続いて、脱気された可溶性画分を精密濾過又は遠心分離し、精密濾過透過液又は遠心分離上清をもたらすステップ、
ｄ．それに続いて、先行する精密濾過透過液又は先行する遠心分離上清を限外濾過し、限外濾過濃縮水をもたらすステップ、
ｅ．それに続いて、前記限外濾過透過液を逆浸透させ、前記逆浸透から生じる透過液及び濃縮水をもたらす任意選択的なステップ、
ｆ．それに続いて、ステップｄ）又はｅ）において得られた前記濃縮水のｐＨを中和すること、
ｇ．それに続いて、ステップｆ）の前記中和された濃縮水をＵＨＴ加熱処理すること、
ｈ．それに続いて、ステップｇ）の前記加熱処理された濃縮水を乾燥させること
を含む方法からなる。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
したがって、第１のステップは、エンドウ豆可溶性画分を提供することからなる。「エ
ンドウ豆可溶性画分」という用語は、エンドウ豆粉の水性乳からデンプン、内部繊維及びグロブリンを抽出した後に得られる残留溶液を意味することが意図される（例えば、本出願人に付与された特許欧州特許第１４００５３７号明細書を参照されたい）。
【００２０】
したがって、第２のステップは、真空脱気ステップからなる。ここでの目的は、真空処理によって溶解ガスのエンドウ豆可溶性画分を除去することである。適切な装置は、例えば、ＳＰＸ  Ｄｅｒｏｘ  ｓｋｉｄであり得る。可溶性画分は、例えば、４５℃〜５５℃、好ましくは５０℃前後の入口温度及び低圧条件に曝される。適用される「真空」は、例えば、０．０５バール〜０．１５バール、好ましくは０．１バール前後の圧力に対応する。このステップは、アルブミンの機能的特性を劣化させる、従来法で実施されていた消泡剤の添加を省略できるようにする。
【００２１】
本発明による方法の第３のステップは、先行するステップから得られる、脱気されたエンドウ豆可溶性画分に対して直接行われる精密濾過又は遠心分離ステップである。このステップは、アルブミンに富むタンパク質画分を単離する目的を特に有する。
【００２２】
第３のステップが遠心分離である場合、当業者は、遠心分離機、水平デカンター、プレート遠心分離機又はデスラッジャーディスク遠心分離機など、遠心力を使用して分離するための任意の機器を使用し得る。
【００２３】
第３のステップが精密濾過である場合、それは、好ましくは、接線膜精密濾過である。より具体的には、接線精密濾過は、０．０１μｍ〜１μｍ、好ましくは０．０５μｍ〜０．５μｍの空隙率を有するセラミック膜を用いて実施される。
【００２４】
任意選択的に、この精密濾過又は遠心分離ステップの前に、さらに当業者に知られている任意の技術による、植物の可溶性画分に含有される不溶性粒子の軟凝集ステップが先行し得る。
【００２５】
本発明による方法の第４のステップは、精密濾過透過液又は遠心分離上清に対して実施されるｄ）の限外濾過ステップからなる。それは、一方ではアルブミンに富む限外濾過濃縮水、他方では糖類及び塩類に富む限外濾過透過液を得られるようにする。任意選択的に、この限外濾過ステップの上流に、水の量を低下させて限外濾過ステップを容易にする任意の濃縮ステップを追加することが可能である。この目的を達成するために、当業者は、例えば、蒸発器又は逆浸透を使用し得る。
【００２６】
より具体的には、５〜２０キロダルトン（ＫＤａ）、好ましくは５又は１０ＫＤａのカットオフ閾値を有する膜を用いて限外濾過を実施することが推奨され、膜間圧力は、４バール未満に維持される。
【００２７】
次に、本発明による方法は、任意選択的な第５のステップを含み得、それは、限外濾過透過液に対して実施される逆浸透である。本出願人は、塩化ナトリウム除去率９７〜９９．９％の塩化ナトリウム除去率を有する膜を用いて、この浸透を行うことを推奨する。
【００２８】
第６のステップは、撹拌しながら塩基を添加することにより、先行するステップの濃縮水を中和することからなる。優先的には、濃縮水のｐＨは、６〜８に調節され、より優先的には、６．５〜７．５に調節される。優先的には、使用される塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム又は水性アンモニアから選択される。より優先的には、使用される塩基は、水酸化ナトリウムである。炭酸塩は、得られたアルブミン画分の味に対して有害作用を有することから、炭酸塩の使用を避けるべきであることに留意すべきである。
【００２９】
第７のステップは、先行する中和された濃縮水のＵＨＴ加熱処理からなる。処理温度は、１３０℃〜１５０℃、優先的には１４０℃である。処理時間は、５〜１５秒間、優先的には１０秒間である。
【００３０】
第８のステップは、当業者に知られている任意の技術による濃縮水の最終乾燥である。優先的には、一段式噴霧乾燥機が使用される。
【００３１】
本発明の第３の最後の主題は、非乳製品のコーヒーホワイトナータイプの食品用途において、特に乳タンパク質が完全に置換されている場合、大量の油を乳化するための前記エンドウ豆アルブミンの使用、特に乳タンパク質が完全に又は部分的に置換されている、臨床栄養を意図したタンパク質及び脂質に富むＵＨＴ飲料又は特に乳タンパク質が完全に又は部分的に置換されている、アイスクリームからなる。本発明によるアルブミンは、製薬及び化粧品分野における用途も構想できるようにする。
【００３２】
続く実施例は、その範囲を限定することなく本出願をより良く例証することを可能にする。
【実施例】
【００３３】
実施例１
本実施例は、ＰＡと称される、先行技術の国際公開第２０１４／１１８４４９号によるエンドウ豆アルブミンの生産を例示する。
【００３４】
第１のステップは、エンドウ豆の可溶性画分を得ることである。１００ｐｍのグリッドを備えたＡｌｐｉｎｅハンマーミル上において、殻をむいた飼料エンドウ豆を粉砕することにより、エンドウ豆粉を最初に調製する。次に、ｐＨ６．５において乾燥ベースで２５％の最終濃度で固形分８７％の３００ｋｇの豆粉を水に浸漬する。次に、固形分２５％の１０４４ｋｇの豆粉懸濁液、すなわち２６１ｋｇの乾燥豆粉を５００ｋｇの水と共に１４段液体サイクロンの組に投入する。これを第５段階の豆粉懸濁液と共に供給する。この分離は、第１段階の出量に対応する軽相の入手をもたらす。それは、タンパク質、内部繊維及び可溶性物質の混合物からなる。
【００３５】
液体サイクロンの出口にあるこの軽相は、混合物として乾燥ベースで合計１４２ｋｇを含有する：およそ１４．８重量％、すなわち乾燥ベースで２１ｋｇの繊維、およそ４２．８重量％、すなわち乾燥ベースで６０．８ｋｇのタンパク質及びおよそ４２．４重量％、すなわち乾燥ベースで６０．２ｋｇの可溶性物質。この画分は、１１．４％の固形分を有する。工業用ジャガイモデンプン加工装置で使用されるＷｅｓｔｆａｌｉａ型の遠心分離デカンター上で繊維を分離する。遠心デカンターの出口の軽相は、タンパク質と可溶性物質との混合物を含有し、重相は、エンドウ豆繊維を含有する。重相は、固形分２０％の１０５ｋｇの繊維を含有する。事実上、全ての繊維が確かにこの画分に存在することが了解される。
【００３６】
タンパク質及び可溶性物質の画分について、それは、１１４２ｋｇの可溶性物質とタンパク質との混合溶液を含有する（６％の固形分を含む画分）。遠心分離デカンターの出口の軽相をｐＨ４．５に調節し、５０℃に加熱することにより、タンパク質を等電点で軟凝集させる。
【００３７】
このようにして軟凝集させたタンパク質を熟成タンク内に１０分間放置する。タンパク質の沈殿後、固形分９３％の５６ｋｇのグロブリン型タンパク質（乾燥ベースで８６％のＮｘ６．２５）と、アルブミン、糖類及び塩類を含有する可溶性画分とを含有し、固形分に対して１００ｇ当たり２．５ｇを含有しそのうちの２７％がタンパク質である、沈殿物
を乾燥後に回収できるようにする遠心分離傾斜法を実施する。
【００３８】
次に、このエンドウ豆可溶性画分を、０．１４μｍの空隙率（４．５ｍｍの１９チャンネル）を有するＩｎｓｉｄｅ  Ｃｅｒａｍ（登録商標）タイプのセラミック膜を備えた精密濾過装置を通してポンプ輸送する。濾過の全体を通じて、温度を６０℃に調節し、膜間圧力を０．４〜０．６バールの値に保つ。このようにして、２．５ｇ／１００ｇの固形物を含有する７０７リットルの精密濾過透過液と、２．５ｇ／１００ｇの固形物を含有する１７６８リットルの精密濾過濃縮水とを回収する。
【００３９】
精密濾過透過液の５５０リットルを、限外濾過装置を通してポンプ輸送する。限外濾過装置は、Ｎｏｖａｓｅｐ社によって販売され、カットオフ閾値が１５ＫＤａ（７チャンネル、６ｍｍ）のＫｅｒａｓｅｐ（登録商標）ＢＸタイプのセラミック膜を備えている。濾過の全体を通じて、温度を６０℃に調節し、膜間圧力を１〜３バールの値に保つ。
【００４０】
２．２ｇ／１００ｇの固形分を含有する４６７リットルの限外濾過透過液と、３３リットルの濃縮水とを回収する。ＰＡ限外濾過濃縮水は、一段式噴霧乾燥機タイプの噴霧乾燥塔上で噴霧乾燥する。入口温度設定値は、１９０℃であり、出口温度は、８５〜９０℃である。
【００４１】
最終アルブミン画分の組成（噴霧乾燥ＰＡ限外濾過濃縮水液）を下の表に示す。
【００４２】
【表１】
2020517243.tif 000002
【００４３】
実施例２
本実施例は、本発明者らがＰＡ＿ＩＮＶと称する、本発明によるエンドウ豆アルブミンの生産を例示する。
【００４４】
この方法は、実施例１の最初の段落に記載されるステップに従ってエンドウ豆可溶性画分を入手するまで同様である。
【００４５】
このようにして得られたエンドウ豆可溶性画分を、最初にＳＰＸ  Ｄｅｒｏｘスキッドを通過させることによって脱気する。前記ＳＰＸ  Ｄｅｒｏｘスキッドの制御パラメータは、次の通りである。
【００４６】
【表２】
2020517243.tif 000003
【００４７】
入口及び出口で溶存酸素を測定することによって適切な脱気を検証する。
【００４８】
次に、この脱気されたエンドウ豆可溶性画分を、０．１４μｍの空隙率（４．５ｍｍの１９チャンネル）を有するＩｎｓｉｄｅ  Ｃｅｒａｍ（登録商標）タイプのセラミック膜を備えた精密濾過装置を通してポンプ輸送する。濾過の全体を通じて、温度を６０℃に調節し、膜間圧力を０．４〜０．６バールの値に保つ。
【００４９】
透過液を、限外濾過装置を通してポンプ輸送する。限外濾過装置は、Ｎｏｖａｓｅｐ社によって販売され、カットオフ閾値が１５ＫＤａ（７チャンネル、６ｍｍ）のＫｅｒａｓｅｐ（登録商標）ＢＸタイプのセラミック膜を備えている。濾過の全体を通じて、温度を６０℃に調節し、膜間圧力を１〜３バールの値に保つ。
【００５０】
０．５％ＳＣ未満の透過液の固形分が得られるまで、一定体積の濃縮水への一定体積の飲用脱炭酸水の添加と、それに続く限外濾過の３回の繰り返しからなる３回の透析濾過を連続して実施する。
【００５１】
次に、得られた限外濾過濃縮水を撹拌しながら、５０％の濃水酸化ナトリウムを添加することによってｐＨ６．８に補正する。
【００５２】
次に、約１０秒間の接触時間で１４０℃の温度においてＶｏｍａｔｅｃスキッドを通過させ、次におよそ９０℃の真空下でフラッシュすることを含む、ＵＨＴ加熱処理を中和された限外濾過濃縮水に適用する。
【００５３】
ＵＨＴ加熱処理の出口で得られた溶液を最終的に一段式噴霧乾燥機タイプの噴霧乾燥塔で噴霧乾燥する。入口温度設定値は、１９０℃であり、出口温度は、８５〜９０℃である。
【００５４】
得られたエンドウ豆アルブミン粉末は、ＰＡ＿ＩＮＶと称される。その組成を下の表に示す。
【００５５】
【表３】
2020517243.tif 000004
【００５６】
実施例３
本実施例は、実施例１（先行技術による）及び実施例２（本発明による）で先に得られたエンドウ豆アルブミンの乳化活性（ＥＡ）を測定するために使用されるプロトコルを説明することを目的とする。
１．０．２ｇの製品サンプルを２０ｍｌの水に分散させる。
２．この溶液を、Ｕｌｔｒａｔｕｒａｘ  ＩＫＡ  Ｔ２５装置を使用して毎分９５００回転（ｒｐｍ）の速度で３０秒間均質化する。
３．先行するステップ２と同一条件下で均質化しながら、Ｃａｒｇｉｌｌ社によってＡｍｐｈｏｒａの名称の下で販売される２０ｍｌのコーンオイルを添加する。
４．３１００ｇで５分間遠心分離する。
ａ．良好なエマルションが得られた場合、すなわちエマルションの分解又は相転換がない場合、水及びコーンオイルの量を５０％増して、ステップ１から試験を再開する。
ｂ．例えば、エマルションの相分離、分解又は相転換などの不良なエマルションが得られた場合、水及びコーンオイルの量を５０％減らして、ステップ１から試験を再開する。
【００５７】
乳化され得る油の最大量（ｍｌ単位のＱｍａｘ）は、このように繰り返して判定される。
【００５８】
したがって、乳化活性は、１グラムの製品当たりで乳化され得るコーンオイルの最大量である。
乳化活性＝（Ｑｍａｘ／０．２）×１００
【００５９】
実施例４
本実施例は、２つのエンドウ豆アルブミンＰＡ（先行技術による実施例１）及びＰＡ＿ＩＮＶ（本発明による実施例２）と、またいくつかのアルブミン、植物性及び乳製品並びに参照市販グロブリンとの比較を提示することを目的とする。
【００６０】
【表４】
2020517243.tif 000005
【００６１】
本発明によるアルブミンを用いて、先行技術のエンドウ豆アルブミンの２倍を超える乳化活性値が成功裏に達成されることが明らかに分かる。新しい値は、卵又はミルク由来のアルブミンなどの動物性タンパク質によって可能な用途と同様の用途を構想できるようにする。
【００６２】
実施例５：コーヒーホワイトナータイプの食品用途における本発明によって得られたアル
ブミンの使用：
本実施例は、従来使用されているカゼインナトリウムを完全に置き換えることを目的とする、「コーヒーホワイトナー」（コーヒー用ミルク代替品）の製造結果を提示することにより、本発明によるエンドウ豆アルブミンによって提供される食品用途の可能性を例示する。
【００６３】
種々の混合物の組成を最終組成物の粗重量による百分率として以下の表に示す。それらを調製するために次の手順に従う：
・ココナツ油を撹拌しながら８０℃に加熱し、Ｄｉｍｏｄａｎ  ＨＰを添加してモノグリセリドを可溶化する。
・水の９０％を５０℃に加熱し、撹拌しながらタンパク質を添加する。
・残りの１０％の水にリン酸塩を可溶化する。
・タンパク質の水溶液を含有する容器にリン酸塩とグルコースシロップとの溶液を添加する。
・Ｄｉｍｏｄａｎ  ＨＰ／油溶液を、ホモジナイザーを用いて１００００ｒｐｍで５分間予備乳化する。
・乳化溶液が得られるまで、７５℃において１６０バールのホモジナイザー内で２つの溶液を混合する。
・８０℃で５秒間低温殺菌する。
【００６４】
エマルションの品質を定量化するために、Ｍａｌｖｅｒｎ社の粒度分析装置（Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｓｉｚｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒ）３０００を用いて粒度を測定する。Ｄｍｏｄｅは、乳化粒子の平均サイズを表す。
【００６５】
【表５】
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【００６６】
本発明によるエンドウ豆アルブミンＰＡ＿ＩＮＶのみが、１ミクロン未満の平均サイズを有する乳化粒子を得られるようにすることが明らかに分かる。
【００６７】
実施例６：食餌栄養、スポーツ栄養又は臨床栄養のためのＵＨＴ処理された直ちに飲める（ｒｅａｄｙ−ｔｏ−ｄｒｉｎｋ又はＲＴＤ）飲料タイプの食品用途における、本発明により得られたアルブミンの使用
本実施例は、従来使用されているカゼインナトリウムを部分的に（およそ５０％）置換することを目的とする、主流の栄養、食餌栄養、スポーツ栄養又は臨床栄養のためのＵＨＴ処理された直ちに飲める飲料の製造結果を提示することにより、本発明によるエンドウ豆アルブミンによって提供される食品用途の可能性を例示する。本実施例は、およそ１０重量％のタンパク質を含有する組成物を提示するが、本発明によるエンドウ豆アルブミンは、タンパク質含有量が５重量％〜１５重量％の範囲にわたるか又は２０重量％にさえ至
る組成物にも適する。同様に、より高い含油量も可能であり、当業者は、本発明によるエンドウ豆アルブミンを用いたレシピを調節することで十分であろう。本発明によるアルブミンの乳化特性に照らして、乳タンパク質の完全な置換も想定し得る。
【００６８】
種々の混合物の組成を最終組成物の重量百分率として以下の表に示す。それらを調製するために次の手順に従う：
・粉末製品（タンパク質、マルトデキストリン及びスクロース）を乾式混合する。
・水を５０℃に加熱し、事前に準備した粉末混合物を添加し、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ高せん断ミキサーで３０分間、５０℃、３５００ｒｐｍにおいて分散させ、バニラフレーバーを添加する。
・レシチン及び油を別個の容器に入れ、撹拌して５０℃に加熱する。
・３０分間の水和後、高剪断ミキサーを５分間（１００００ｒｐｍ）用いて、このレシチン／油溶液を第１の混合物（タンパク質、マルトデキストリン及びスクロース）に添加する。
・２００バール及び７５℃において２段階で均質化する（２番目の段階で３０％）。
・１４２℃で５秒間にわたりＵＨＴ処理を実施する。
・冷却して４℃で保管する。
【００６９】
エマルションの品質を定量化するために、Ｍａｌｖｅｒｎ社の粒度分析装置（Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｓｉｚｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒ）３０００を用いて粒度を測定する。Ｄｍｏｄｅは、乳化粒子の平均サイズを表す。
【００７０】
【表６】
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【００７１】
本発明によるエンドウ豆アルブミンＰＡ＿ＩＮＶのみが、乳製品起源のカゼインによって得られる基準と同程度に良好な（１ミクロン未満）のＤｍｏｄｅを得られるようにすることが明らかに分かる。
【００７２】
実施例７：毎日の摂食を意図した「エンドウ豆乳」又は「野菜乳」タイプの食品用途における、本発明により得られるアルブミンの使用
本実施例は、毎日の摂取が意図される「エンドウ豆乳」又は「野菜乳」タイプの飲料の製造結果を提示することにより、本発明によるエンドウアルブミンによって提供される食品用途の可能性を例示する。
【００７３】
種々の混合物の組成を以下の表に示す。それらを調製するために次の手順に従う：
・必要に応じて撹拌しながら、水及びジェランガムを９０℃の水に完全に溶解するまで混合する。
・７０℃に冷却する。
・必要に応じて撹拌しながら、油、ヒマワリレシチン及びバニラフレーバーを除く他の構成物を完全に溶解するまで添加する。
・ヒマワリ油を加熱してレシチンを添加する。
・高剪断ミキサーで撹拌しながら、油／レシチン混合物及びバニラフレーバーを添加する。
・２７０バール（第１段階）及び３０バール（第２段階）の高圧ホモジナイザーを用いて、溶液を７５℃で均質化する。
・１４２℃で５秒間のＵＨＴ処理によって滅菌する。
・パッケージングして４℃で保管する。
【００７４】
エマルションの品質を定量化するために、Ｍａｌｖｅｒｎ社の粒度分析装置（Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｓｉｚｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒ）３０００を用いて粒度を測定する。Ｄｍｏｄｅは、乳化粒子の平均サイズを表す。
【００７５】
【表７】
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【００７６】
本発明によるエンドウ豆アルブミンＰＡ＿ＩＮＶのみが、エンドウ豆グロブリンによって得られる基準と同程度に良好な（１ミクロン未満）のＤｍｏｄｅを得られるようにすることが明らかに分かる。先行技術のエンドウ豆アルブミンは、１ミクロン未満且つ参照グロブリンと同様の乳化小球のＤｍｏｄｅが得られるようにせず、本発明によるエンドウ豆アルブミンのみがそれを可能にする。
【国際調査報告】
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