(57)【要約】  本発明は、ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤を用いた、多発性骨髄腫の併用療法を対象とする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
医薬としての使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤。
【請求項２】
多発性骨髄腫の治療における使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤。
【請求項３】
ＢＥＴ阻害剤が２−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−フェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−１−チア−５，７，８，９ａ−テトラアザ−シクロペンタ［ｅ］アズレン−６−イル］−Ｎ−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−アセトアミド（ＲＧ６１４６）である、請求項１又は２に記載の、使用のための、ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤。
【請求項４】
Ｂｃｌ−２阻害剤がベネトクラクスである、請求項１から３のいずれか一項に記載の、使用のための、ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤。
【請求項５】
一又は複数の追加の他の、細胞毒性剤、化学療法剤又は抗がん剤を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の、使用のための、ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤。
【請求項６】
ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤並びに一又は複数の薬学的に許容される添加剤を含む、薬学的組成物。
【請求項７】
多発性骨髄腫の治療のための医薬の製造のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の使用。
【請求項８】
多発性骨髄腫の治療におけるＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の使用。
【請求項９】
多発性骨髄腫の治療方法であって、それを必要とする患者へＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤を投与することを含む、方法。
【請求項１０】
前記ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の同時、別個又は逐次投与のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤を含むキット。
【請求項１１】
多発性骨髄腫の治療における使用のための請求項１０に記載のキット。
【請求項１２】
ＢＥＴ阻害剤が２−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−フェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−１−チア−５，７，８，９ａ−テトラアザ−シクロペンタ［ｅ］アズレン−６−イル］−Ｎ−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−アセトアミド（ＲＧ６１４６）である、請求項６から１１のいずれか一項に記載の薬学的組成物、使用、方法又はキット。
【請求項１３】
Ｂｃｌ−２阻害剤がベネトクラクスである、請求項６から１２のいずれか一項に記載の薬学的組成物、使用、方法又はキット。
【請求項１４】
上に記載した発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤を用いた、特に多発性骨髄腫の併用療法を対象とする。
【背景技術】
【０００２】
多発性骨髄腫（ＭＭ）は、衰弱性の悪性腫瘍であり、意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）から形質細胞性白血病までの幅広い疾患の一部である。ＭＭは、１８４８年に最初に記載され、悪性形質細胞の増殖とその後の過剰なモノクローナルパラプロテイン（Ｍプロテイン）を特徴とする。
【０００３】
ＭＭの症状は無症候から重症まで幅広く、合併症には緊急治療が必要である。全身性疾患には、出血、感染及び腎不全が含まれ；病的骨折及び脊髄圧迫が生じ得る。
【０００４】
エピジェネティックな調節不全は、様々な血液悪性腫瘍で見られる異常な遺伝子発現パターンを引き起こす上で重要な役割を果たしている。多くのエピジェネティックな変化は可逆的であるため、これらの因子は潜在的な抗悪性腫瘍標的としてかなりの注目を集めている。重要な臨床的関心のある特定の標的は、タンパク質のブロモドメイン及び末端外（ＢＥＴ）ファミリーであり、ＢＲＤ２、ＢＲＤ３、ＢＲＤ４、及び精巣特異的ＢＲＤＴを含める。ブロモドメイン（ＢＲＤ）は、クロマチン内のアセチル化ヒストンタンパク質を含めた、アセチル化モチーフへの結合に高い親和性を有するタンパク質ドメインである。タンパク質のＢＥＴファミリーは、アセチル化クロマチンに結合し、遺伝子転写を調節する。
【０００５】
ＢＥＴタンパク質とアセチル化クロマチンとの間の相互作用の選択的阻害は、急性白血病、リンパ腫、及び多発性骨髄腫（ＭＭ）の前臨床モデルに顕著な活性をもたらした。ＢＥＴタンパク質を標的とすることは、がん遺伝子及び疾患の発症と進行に重要な遺伝子の転写を特異的に標的とすることができる。
【０００６】
Ｂｃｌ−２タンパク質は、多くの疾患、特にがん、白血病、免疫疾患、及び自己免疫疾患で役割を果たす。Ｂｃｌ−２タンパク質は、膀胱がん、脳がん、乳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ球性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞又はＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、メラノーマ、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、前立腺がん、小細胞肺がん、脾臓がんに関与すると言われている。Ｂｃｌ−２タンパク質の過剰発現は、免疫系の様々ながん及び障害における化学療法に対する耐性、臨床転帰、疾患進行、全体的な予後又はそれらの組み合わせと相関している。
【０００７】
ＢＥＴ阻害剤とＢｃｌ−２阻害剤の組み合わせは多発性骨髄腫に対して有意に高まった効果を示し、明確な腫瘍縮小を引き起こすことが驚くべきことに発見された。驚くべきことに、この組み合わせによる腫瘍縮小は相加以上であり、すなわち、２つの成分のそれぞれによって別々に誘導される累積抗腫瘍効果よりも優れている。
【発明の概要】
【０００８】
よって、本発明は、特に：
医薬としての使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤；
多発性骨髄腫の治療における使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤；
ＢＥＴ阻害剤が２−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−フェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−１−チア−５，７，８，９ａ−テトラアザ−シクロペンタ［ｅ］アズレン−６−イル］−Ｎ−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−アセトアミド（ＲＧ６１４６）、ＩＮＣＢ−０５４３２９、ＩＮＣＢ−０５７６４３、ＧＳＫ５２５７６２、ＧＳ−５８２９、ＣＰＩ−０６１０、ビラブレシブ、ＰＬＸ５１１０７、ＡＢＢＶ−０７５、ＢＩ  ８９４９９９、ＦＴ−１１０１、ＺＥＮ−３６９４、ＧＳＫ−２８２０１５１又はＢＭＳ−９８６１５８である、本発明による使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤；
ＢＥＴ阻害剤が２−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−フェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−１−チア−５，７，８，９ａ−テトラアザ−シクロペンタ［ｅ］アズレン−６−イル］−Ｎ−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−アセトアミド（ＲＧ６１４６）である、本発明による使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤；
Ｂｃｌ−２阻害剤が、ベネトクラクス、ナビトクラクス、オバトクラクス、Ｓ−０５５７４６又はＰＮＴ−２２５８である、本発明による使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤；
Ｂｃｌ−２阻害剤がベネトクラクスである、本発明による使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤；
一又は複数の追加の他の細胞毒性剤、化学療法剤又は抗がん剤を含む、本発明による使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤；
前記薬剤の効果を高める電離放射線を含む、本発明による使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤；
ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤並びに一又は複数の薬学的に許容される添加剤を含む、薬学的組成物；
多発性骨髄腫の治療における使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤並びにそれらの一又は複数の薬学的に許容される塩を含む、薬学的組成物；
多発性骨髄腫の治療のための医薬の製造のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の使用。
多発性骨髄腫の治療におけるＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の使用；
それを必要とする患者へＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤を投与することを含む、多発性骨髄腫の治療方法。
前記ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の同時、別個又は逐次投与のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤を含むキット；
多発性骨髄腫の治療における使用のための本発明によるキット；
ＢＥＴ阻害剤が、２−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−フェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−１−チア−５，７，８，９ａ−テトラアザ−シクロペンタ［ｅ］アズレン−６−イル］−Ｎ−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−アセトアミド（ＲＧ６１４６）、ＩＮＣＢ−０５４３２９、ＩＮＣＢ−０５７６４３、ＧＳＫ５２５７６２、ＧＳ−５８２９、ＣＰＩ−０６１０、ビラブレシブ、ＰＬＸ５１１０７、ＡＢＢＶ−０７５、ＢＩ  ８９４９９９、ＦＴ−１１０１、ＺＥＮ−３６９４、ＧＳＫ−２８２０１５１又はＢＭＳ−９８６１５８である、本発明による薬学的組成物、使用、方法又はキット；
ＢＥＴ阻害剤が２−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−フェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−１−チア−５，７，８，９ａ−テトラアザ−シクロペンタ［ｅ］アズレン−６−イル］−Ｎ−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−アセトアミド（ＲＧ６１４６）である、本発明による薬学的組成物、使用、方法又はキット；
Ｂｃｌ−２阻害剤が、ベネトクラクス、ナビトクラクス、オバトクラクス、Ｓ−０５５７４６又はＰＮＴ−２２５８である、本発明による薬学的組成物、使用、方法又はキット；並びに
Ｂｃｌ−２阻害剤がベネトクラクスである、本発明による薬学的組成物、使用、方法又はキット
に関する。
【０００９】
よって、本発明によるＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤は、組み合わせて投与（又は共投与）される。
【００１０】
よって、本発明は、本発明による組み合わせ使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤に関する。
【００１１】
よって、本発明は、医薬としての組み合わせ使用のための、特に多発性骨髄腫の治療における組み合わせ使用のためのＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤に関する。
【００１２】
一実施態様では、ＢＥＴ阻害剤は、国際公開第２０１１／１４３６６９号に記載される化合物から選択される化合物である。前記ＢＥＴ阻害剤を製造する方法も、国際公開第２０１１／１４３６６９号に開示されている。
【００１３】
最も好ましくは、ＢＥＴ阻害剤は、以下の式にあるような２−［（Ｓ）−４−（４−クロロ−フェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−１−チア−５，７，８，９ａ−テトラアザ−シクロペンタ［ｅ］アズレン−６−イル］−Ｎ−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−アセトアミド又はその塩である。国際公開第２０１１／１４３６６９号の例ＪＱ３５は、その調製のための方法を開示している。
【００１４】
好ましいＢＥＴ阻害剤は、以下の式で図示される：
2020528418.tif 000002
【００１５】
上のＢＥＴ阻害剤は、ＲＧ６１４６、ＪＱ３５又はＴＥＮ−０１０としても知られている。
【００１６】
一実施態様では、Ｂｃｌ−２阻害剤は、国際公開第２０１０／１３８５８８号に記載される化合物から選択される化合物である。前記Ｂｃｌ−２阻害剤を製造する方法も、国際公開第２０１０／１３８５８８号に開示されている。
【００１７】
最も好ましくは、Ｂｃｌ−２阻害剤は、以下の式にあるような４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキス−１−エン−１−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミド又はその塩である。国際公開第２０１０／１３８５８８の例５は、前記Ｂｃｌ−２阻害剤の調製のための方法を記載している。
【００１８】
好ましいＢｃｌ−２阻害剤は、以下の式で図示される：
2020528418.tif 000003
【００１９】
上のＢｃｌ−２阻害剤はまた、ＡＢＴ−１９９、ＧＤＣ−０１９９又はベネトクラクスとも称される。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】ＲＧ６１４６及びベネトクラクスの２剤の、ビヒクル及び単剤療法と比較した併用療法の抗腫瘍効果（第１４日〜第２５日）。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明による用語「ＢＥＴ阻害剤」は、約０．００１μＭから約２μＭのＩＣ５０を有するＢＥＴタンパク質の活性を妨げる薬剤を指す。
【００２２】
本発明による用語「Ｂｃｌ−２阻害剤」は、約０．００１μＭから約２μＭのＩＣ５０を有するＢｃｌ−２タンパク質の活性を妨げる薬剤を指す。
【００２３】
「塩」は、薬学的に許容される塩のような化合物の塩を指す。そのような塩は、アルカリ金属（カリウム、ナトリウム等）を有する塩、アルカリ土類金属（カルシウム、マグネシウム等）を有する塩、アンモニウム塩、薬学的に許容される有機アミン（テトラメチルアンモニウム、トリエチルアミン、メチルアミン、ジメチルアミン、シクロペンチルアミン、ベンジルアミン、フェネチルアミン、ピペリジン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、リジン、アルギニン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン等）を有する塩、及び酸付加塩（無機酸塩（塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩等）及び有機酸塩（酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、グルクロン酸塩、グルコン酸塩等など））により例示することができる。
【００２４】
「ＩＣ５０」は、特定の測定活性の５０％を阻害するために必要とされる特定の化合物の濃度を指す。
【００２５】
用語「組み合わせ」、「共投与」又は「共投与すること」は、一又は複数の製剤での、本発明によるＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の投与を指す。共投与は、同時であっても、又は任意の順序で逐次的であってもよく、両方（又はすべて）の活性剤がそれらの生物活性を同時に発揮する期間があることが好ましい。ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤は、同時又は逐次的のいずれかで共投与することができる。治療剤が逐次的に共投与されるとき、例えば、用量を三回の別個の投与で同日に投与してもよく、又はそれらの薬剤の一つを第１日に、第２の薬剤を第２日から第７日、好ましくは第２日から第４日に共投与してもよい。よって、一実施態様では、用語「逐次的に」とは、第１の成分の投与後７日以内、好ましくは４日以内を意味し；用語「同時に」とは、同時又は同日を意味する。ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の維持量に関する用語「共投与」とは、治療サイクルが両方の薬剤に適切である、例えば１週間毎である場合、維持量を同時に共投与することができることを意味する。あるいは、成分の一方（Ｂｃｌ−２阻害剤又はＢＥＴ阻害剤のいずれか）は例えば第１日から第３日毎に投与することができ、第２の成分は１週間毎に投与することができる。あるいは、維持量は、１日以内又は数日以内に逐次的に共投与される。
【００２６】
それぞれの化合物又は組み合わせの量が、研究者、獣医、医師若しくは他の臨床家が求める組織、系、動物若しくはヒトの生物学的又は医学的奏功を引き出す量である、「治療的有効量」（又は単に「有効量」）で阻害剤が患者に投与されることは自明である。
【００２７】
ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の共投与の量及び共投与のタイミングは、治療される患者のタイプ（人種、性別、年齢、体重等）及び状態、並びに治療される疾患又は状態の重症度に依拠する。
【００２８】
ＢＥＴ阻害剤は、好ましくは皮下投与される。
【００２９】
ＢＥＴ阻害剤は、好ましくは、約０．３ｍｇ／ｋｇ／ｄから約０．６５ｍｇ／ｋｇ／ｄの用量で投与される。
【００３０】
ＢＥＴ阻害剤は、好ましくは、３週間毎（すなわち、２週間投与、１週間休薬）に１４日連続して毎日投与される。
【００３１】
ＢＥＴ阻害剤は、好ましくは、約０．３ｍｇ／ｋｇ／ｄから約０．６５ｍｇ／ｋｇ／ｄの用量で皮下投与される。
【００３２】
ＢＥＴ阻害剤は、好ましくは、約０．３ｍｇ／ｋｇ／ｄから約０．６５ｍｇ／ｋｇ／ｄの用量で、３週間毎（すなわち、２週間投与、１週間休薬）に１４日連続して皮下投与される。
【００３３】
ＢＥＴ阻害剤は好ましくはＲＧ６１４６である。
【００３４】
ＢＥＴ阻害剤、特にＲＧ６１４６の投与は、最大３週間、すなわち１、２又は３週間中断することができる。
【００３５】
Ｂｃｌ−２阻害剤は、好ましくは経口投与される。
【００３６】
Ｂｃｌ−２阻害剤は、好ましくは、約４００ｍｇ／ｄから約８００ｍｇ／ｄの用量で投与される。
【００３７】
Ｂｃｌ−２阻害剤は、好ましくは、約４００ｍｇ／ｄから約８００ｍｇ／ｄの用量で経口投与される。
【００３８】
Ｂｃｌ−２阻害剤は、好ましくは毎日投与される。これは、連続投与と呼ばれる。
【００３９】
Ｂｃｌ−２阻害剤は、好ましくは、約４００ｍｇ／ｄから約８００ｍｇ／ｄの用量で、毎日経口投与される。
【００４０】
Ｂｃｌ−２阻害剤は、好ましくはベネトクラクスである。
【００４１】
ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の投与サイクルは、好ましくは同日に開始される。
【００４２】
疾患の種類及び重症度に応じて、以下の量が投与され得る：約０．３ｍｇ／ｋｇ／ｄから約０．６５ｍｇ／ｋｇ／ｄのＢＥＴ阻害剤、好ましくはＲＧ６１４６；約４００ｍｇ／ｄから約８００ｍｇ／ｄのＢｃｌ−２阻害剤、好ましくはベネトクラクス。
【００４３】
特定の有利な組み合わせは、約０．３ｍｇ／ｋｇ／ｄから約０．６５ｍｇ／ｋｇ／ｄのＢＥＴ阻害剤、好ましくはＲＧ６１４６を３週間毎（すなわち、２週間投与、１週間休薬）に１４日連続して毎日投与し；約４００ｍｇ／ｄから約８００ｍｇ／ｄのＢｃｌ−２阻害剤、好ましくはベネトクラクスを連続的に（すなわち、毎日）投与することである。
【００４４】
さらなる特定の有利な組み合わせは、約０．３ｍｇ／ｋｇ／ｄから約０．６５ｍｇ／ｋｇ／ｄのＢＥＴ阻害剤、好ましくはＲＧ６１４６を３週間毎（すなわち、２週間投与、１週間休薬）に１４日連続して毎日皮下投与し；約４００ｍｇ／ｄから約８００ｍｇ／ｄのＢｃｌ−２阻害剤、好ましくはベネトクラクスを連続的に（すなわち、毎日）経口投与することである。
【００４５】
上の投与計画では、ＢＥＴ阻害剤、特にＲＧ６１４６の投与は、最大３週間、すなわち１、２又は３週間中断することができる。
【００４６】
上の投与計画では、Ｂｃｌ−２阻害剤、特にベネトクラクスの投与は、最大３週間、すなわち１、２又は３週間中断することができる。
【００４７】
化学療法剤のさらなる共投与がある場合、推奨用量は変化し得る。
【００４８】
本発明は、多発性骨髄腫に罹患しているそのような患者における転移又はさらなる播種を予防又は減少させるのに有用である。この発明は、そのような患者の生存期間を増加させること、そのような患者の無増悪生存を増加させること、奏功期間を増加させること、生存期間、無増悪生存、奏効率又は奏功期間により測定された場合に治療された患者の統計的に有意で臨床的に有意義な改善をもたらすことに有用である。好ましい実施態様では、この発明は、患者群における奏効率を増加させることに有用である。
【００４９】
本発明に関連して、追加のその他の細胞傷害剤、化学療法剤若しくは抗がん剤、又はそのような薬剤（例えばサイトカイン）の効果を高める化合物若しくは電離放射線が使用され得る。このような分子は、好適には、意図した目的に有効な量で組み合わされて存在する。
【００５０】
そのような追加の薬剤は、例えば以下を含む：シクロホスファミド（ＣＴＸ；例えば、シトキサン（登録商標））、クロラムブシル（ＣＨＬ；例えば、ロイケラン（登録商標））、シスプラチン（ＣｉｓＰ；例えば、プラチノール（登録商標））、ブスルファン（例えば、ミレラン（登録商標））、メルファラン、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ストレプトゾトシン、トリエチレンメラミン（ＴＥＭ）、マイトマイシンＣ等のアルキル化剤又はアルキル化作用を有する薬剤；メトトレキサート（ＭＴＸ）、エトポシド（ＶＰ１６；例えば、べプシド（登録商標））、６−メルカプトプリン（６ＭＰ）、６−チオグアニン（６ＴＧ）、シタラビン（Ａｒａ−Ｃ）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、カペシタビン（例えば、ゼローダ（登録商標））、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）等の代謝拮抗剤；アクチノマイシンＤ、ドキソルビシン（ＤＸＲ；例えば、アドリアマイシン（登録商標））、ダウノルビシン（ダウノマイシン）、ブレオマイシン、ミスラマイシン等の抗生物質；ビンカアルカロイド（例えば、ビンクリスチン（ＶＣＲ）、ビンブラスチン、及び同類のもの）等のアルカロイド；並びに、パクリタキセル（例えば、タキソール（登録商標））や、パクリタキセル誘導体等の他の抗腫瘍剤、細胞増殖抑制剤、デキサメサゾン（ＤＥＸ；例えば、デカドロン（登録商標））等のグルココルチコイド、及び、プレドニゾン等のコルチコステロイド、ヒドロキシウレア等のヌクレオシド酵素阻害剤、アスパラギナーゼ、ロイコボリンや他の葉酸誘導体等のアミノ酸除去酵素、及び類似の様々な抗腫瘍剤。以下の薬剤も、追加の薬剤として使用されてもよい：アミホスチン（ａｒｎｉｆｏｓｔｉｎｅ）（例えば、エチオール（登録商標））、ダクチノマイシン、メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード）、ストレプトゾシン、シクロホスファミド、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、ドキソルビシン  リポ（例えば、ドキシル（登録商標））、ゲムシタビン（例えば、ジェムザール（登録商標））、ダウノルビシン  リポ（例えば、ダウノキソーム（登録商標））、プロカルバジン、マイトマイシン、ドセタキセル（例えば、タキソテール（登録商標））、アルデスロイキン、カルボプラチン、オキサリプラチン、クラドリビン、カンプトセシン、ＣＰＴ  １１（イリノテカン）、１０−ヒドロキシ  ７−エチル−カンプトセシン（ＳＮ３８）、フロクスウリジン、フルダラビン、イホスファミド、イダルビシン、メスナ、インターフェロン  ベータ、インターフェロン  アルファ、ミトキサントロン、トポテカン、ロイプロリド、メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、プリカマイシン、ミトタン、ペグアスパルガーゼ、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、タモキシフェン、テニポシド、テストラクトン、チオグアニン、チオテパ、ウラシルマスタード、ビノレルビン又はクロラムブシル。
【００５１】
化学療法レジメンにおける上記の細胞傷害剤及び抗がん剤並びにタンパク質キナーゼ阻害剤のような抗増殖性標的特異的抗がん剤の使用は、一般に、がん治療の分野において特徴が明らかにされており、本明細書におけるその使用も、耐性及び有効性のモニタリング並びに投与経路及び投与量の制御について、幾らか調節した上で、同様に考慮される。例えば、細胞傷害剤の実際の用量は、組織培養法を用いることにより決定される患者の培養細胞応答に応じて変化し得る。一般に、用量は、追加の他の薬剤の非存在下で使用される量と比較して減らされる。
【００５２】
有効な細胞傷害剤の典型的な用量は、製造者によって推奨される範囲であってよく、インビトロ反応又は動物モデルにおける反応により指示される場合、最大約１桁までの範囲で濃度又は量を減らすことができる。したがって、実際の用量は、医師の判断、患者の状態、及び初代培養悪性細胞若しくは組織培養試料のインビトロ応答性に基づくか、又は適切な動物モデルにおいて観察される応答に基づく治療法の有効性によって決まる。
【００５３】
本発明に関連して、電離放射線の有効量が実施されてもよく、且つ／又は放射性医薬品が使用されてもよい。放射線源は、治療されるべき患者の外部又は内部のいずれかにあってよい。放射線源が患者に対して外部である場合、治療は外部照射療法（ＥＢＲＴ）として知られている。放射線源が患者に対して内部である場合、治療は近接照射療法（ＢＴ）と称される。本発明に関連して使用される放射性原子は、ラジウム、イットリウム−９０、セシウム−１３７、イリジウム−１９２、アメリシウム−２４１、金−１９８、コバルト−５７、銅−６７、テクネチウム−９９、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１、及びインジウム−１１１を含むがこれらに限定されない群から選択され得る。抗体をそのような放射性同位体で標識することも可能である。
【００５４】
放射線療法は、切除不可能若しくは手術不可能な腫瘍及び／又は腫瘍転移物を抑制するための標準的な治療である。放射線療法が化学療法と併用された場合に、改善した結果が見られた。放射線療法は、標的領域に送達された高用量の放射線が腫瘍組織及び正常組織の両方において生殖細胞の死をもたらすという原理に基づいている。放射線投与レジメンは、一般的に、放射線吸収用量（Ｇｙ）、時間及び細分化の観点から定義され、がん専門医によって注意深く定められる必要がある。患者が受ける放射線量は、様々な考慮に依拠することになるが、二つの最も重要なことは、体の他の重要な構造又は臓器に対する腫瘍の位置及び腫瘍が広がる程度である。放射線療法を受ける患者の典型的な治療過程は、約１．８から２．０Ｇｙの単回一日画分で週に５日、総用量で１０から８０Ｇｙ患者に投与される、１から６週間にわたる治療スケジュールである。本発明の好ましい実施態様において、ヒト患者の腫瘍が本発明の併用療法と放射線とを用いて治療される場合に相乗効果がある。換言すれば、本発明の組み合わせを含む薬剤による腫瘍増殖の阻害は、放射線と組み合わされた時に、場合により追加の化学療法剤又は抗がん剤と組合わされた時に、亢進される。アジュバント放射線療法のパラメーターは、例えば、国際公開第９９／６００２３号に包含されている。
【００５５】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」又は「薬学的に許容される添加剤」という用語は、薬物投与に適合するすべての物質を含むことを意図し、そのような物質には、溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌性及び抗真菌性薬剤、等張及び吸収遅延剤、並びに薬物投与に適合する他の物質及び化合物が含まれる。但し、活性化合物と適合性である限り従来の媒体又は薬剤のいずれについても、本発明の組成物におけるその使用が考慮される。補足的活性化合物も、組成物中に取り込むことができる。
【００５６】
薬学的組成物は、本発明によるＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤を薬学的に許容される無機若しくは有機担体又は添加剤で加工することにより得ることができる。例えば、そのような担体として、ラクトース、コーンスターチ又はそれらの誘導体、タルク、ステアリン酸又はその塩などが、錠剤、コーティング錠、ドラジェ及び硬ゼラチンカプセル剤に使用され得る。軟ゼラチンカプセル剤に適した担体は、例えば、植物油、ワックス、油脂、半固体物質及び液状ポリオールなどである。しかしながら、活性物質の性質により、軟ゼラチンカプセル剤の場合には担体は通常必要とされない。溶液及びシロップの製造に適した担体は、例えば、水、ポリオール、グリセロール、植物油などである。坐剤に適した担体は、例えば、天然油又は硬化油、ワックス、油脂、半液状又は液状ポリオールなどである。
【００５７】
さらに、薬学的組成物は、防腐剤、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、香味剤、浸透圧を変えるための塩、バッファー、マスキング剤、又は抗酸化剤を含有することができる。それらは、さらに他の治療的に有効な物質を含むこともできる。
【００５８】
ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤の薬学的組成物は、単独で又は組み合わせて、凍結乾燥製剤又は水溶液の形で、所望の純度を有する抗体を任意選択的な薬学的に許容される担体、添加又は安定剤と混合することにより（Remington’s Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. (ed.) (1980)）、保存用に調製することができる。許容される担体、添加剤、又は安定剤は、使用される投薬量及び濃度でレシピエントに毒性でなく、これには、リン酸塩、クエン酸塩及び他の有機酸のような緩衝液；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチオルベンジルアンモニウムクロライド；ヘキサメトニウムクロライド；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチル若しくはベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えば、メチル若しくはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、若しくは免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン若しくはリジン；マンノサッカライド、ジサッカライド、及びグルコース、マンノース若しくはデキストリンを含む他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロース若しくはソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム、金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質錯体）；及び／又はＴＷＥＥＮＴＭ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳＴＭ若しくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の非イオン性界面活性剤が挙げられる。
【００５９】
ＢＥＴ阻害剤の薬学的組成物とＢｃｌ−２阻害剤の薬学的組成物は、経口、鼻腔、局所（頬側及び舌下を含む）、直腸、膣内及び／又は非経口投与に適したものを含める。簡便には、組成物は、単位投与形態で提示することができ、薬学の分野において周知の何れかの方法により調製することができる。単一投与形態を製造するために担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、治療されている宿主、並びに特定の投与様式によって様々である。単一投与形態を製造するために担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、通常、治療効果を生むＢｃｌ−２阻害剤又はＢＥＴ阻害剤の量である。一般的に、１００パーセントのうち、この量は、約１パーセントから約９９パーセント、好ましくは約５パーセントから約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセントから約３０パーセントの活性成分の範囲となる。このような組成物を調製する方法は、Ｂｃｌ−２阻害剤又はＢＥＴ阻害剤を、担体及び任意選択的に一又は複数の副成分と会合させる工程を含む。一般に、薬学的組成物は、Ｂｃｌ−２阻害剤及びＢＥＴ阻害剤を、液体担体、又は微粉固体担体、又はそれら両方と均一且つ密接に会合させ、次いで必要に応じて製品を成形することにより調製される。経口投与に適した薬学的組成物は、カプセル剤、カシェ剤、サシェ剤、丸薬、錠剤、ロゼンジ（香味料ベース、通常スクロース及びアカシア又はトラガカントを使用）、粉末、顆粒の形態、又は水性若しくは非水性液体中の溶液又は懸濁液としての形態、又は水中油型若しくは油中水型液体エマルションの形態としての形態、又はエリキシル又はシロップとしての形態、又は香錠（ゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアカシアのような不活性ベースを使用）及び／又は洗口剤のようなものとしての形態であってよく、それらはそれぞれ、活性成分として、所定量のＢｃｌ−２阻害剤及びＢＥＴ阻害剤を含有する。Ｂｃｌ−２阻害剤及びＢＥＴ阻害剤はまた、ボーラス、舐剤又はペーストとして投与されてもよい。
【００６０】
本発明のさらなる実施態様では、ＢＥＴ阻害剤及びＢｃｌ−２阻害剤は、一つ又は二つの別個の薬学的組成物に配合される。
【００６１】
また、活性成分はまた、例えば、コアセルベーション技術又は界面重合（interracial polymerization）により調製したマイクロカプセル、例えば、それぞれ、コロイド状薬物送達系（例えばリポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）において又はマクロエマルジョンにおいて、ヒドロキシメチルセルロース又はゼラチンのマイクロカプセル及びポリ−（メチルメタクリラート）マイクロカプセル中に封入されてもよい。このような技術は、Remington’s Pharmaceutical Sciences, 16th edition, Osol, A. (ed.) (1980)に開示される。
【００６２】
徐放性調製物が調製されてもよい。徐放性調製物の好適な例は、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスを含み、そのマトリックスは成形品、例えばフィルム又はマイクロカプセルの形をしている。徐放性マトリックスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、又はポリ（ビニルアルコール））、ポリ乳酸（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸とガンマ−エチル−Ｌ−グルタメートとの共重合体、非分解性エチレン−酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴＴＭ（乳酸−グリコール酸共重合体及び酢酸ロイプロリドからなる注射可能なミクロスフェア）のような分解性乳酸−グリコール酸共重合体、並びにポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。
【００６３】
ｉｎ  ｖｉｖｏ投与に使用される製剤は、無菌である必要がある。これは、滅菌濾過膜を通して濾過することにより容易に達成される。
【００６４】
以下の実施例及び図面は、本発明を説明するために提供され、限定的な特徴を有しない。
【実施例】
【００６５】
実施例１：Ｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍効果
Ｂｃｌ−２阻害剤ベネトクラクス（ＧＤＣ−０１９９）と組み合わせたＢＥＴ阻害剤ＲＧ６１４６のｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍効果を、ＫＭＳ−１２ＢＭ  ＭＭ異種移植片に対して評価した。
【００６６】
試験剤  
ＢＥＴ阻害剤  ＲＧ６１４６は、Ｒｏｃｈｅ（バーゼル、スイス）、から粉末として提供され、使用前に再懸濁された。Ｂｃｌ−２阻害剤ベネトクラクスは、Genentech, South San Francisco, USAにより提供され、使用前に配合された。
【００６７】
細胞株及び培養条件
元のＫＭＳ−１２ＢＭヒト多発性骨髄腫細胞株（ＭＭ）をＡＴＣＣ（Manassas, VA, USA）から購入した。プロトコールに従い、ＴＡＰ  ＣｏｍｐａｃＴ  ＣｅｌｌＢａｓｅ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｒｏｂｏｔｅｒで移植のための腫瘍細胞の拡大を行った。ＲＰＭＩ１６４０培地、ＦＣＳ１０％及びＬ−グルタミン２ｍＭで、３７℃、５％ＣＯ２の水飽和雰囲気で日常的に腫瘍細胞株を培養した。トリプシン／ＥＤＴＡ  １×を用いて１週間に２回スプリットして培養継代を実施し、継代３を移植に使用した。
【００６８】
動物
到着時に生後５−７週のメスのＣＩＥＡ  ＮＯＧベージュマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ）を、徹底したガイドラインに従い、１２時間明／１２時間暗の毎日のサイクルで、特定の病原体がない条件下で保持した。実験的な研究プロトコールが審査され、地方自治体により承認された。動物を到着後１週間、新しい環境への馴致及び観察のために動物施設に保持した。継続的な健康モニタリングを定期的に実施した。食料及びオートクレーブ水を不断給餌した。
【００６９】
モニタリング
動物は、臨床症状、及び副作用の検出のために毎日制御された。実験期間を通して、モニタリングのために動物の体重を記録した。
【００７０】
動物の治療
中央腫瘍サイズが約１７０ｍｍ３であったランダム化後に、動物の治療を開始した。ビヒクルを第１４−２５日に１日１回（ＱＤ）ｉｐ投与した。３０ｍｇ／ｋｇでのＢＥＴ阻害剤  ＲＧ６１４６のｉｐ治療を、第１４−２５日に単一薬剤として、及び組み合わせて行った。そして、Ｂｃｌ−２阻害剤ベネトクラクスを、単一薬剤として、及び組み合わせて、第１４−２５日に１００ｍｇ／ｋｇで経口投与した。
【００７１】
抗腫瘍効果
ＫＭＳ−１２ＢＭヒトＭＭ細胞をマトリゲルでメスＣＩＥＡ−ＮＯＧマウスに皮下接種した。腫瘍保有マウスを１４日後に指定の研究グループにランダム化し、化合物治療を開始した。腫瘍保有動物をビヒクルコントロール、３０ｍｇ／ｋｇのＢＥＴ阻害剤  ＲＧ６１４６、又は１００ｍｇ／ｋｇのＢｃｌ−２阻害剤ベネトクラクスで、単剤として、及びそれらを組み合わせて治療した。結果として、単剤として投与された全ての化合物は、ＫＭＳ−１２ＢＭ異種移植片に対して有意な抗腫瘍効果を実証した。簡潔には、ＢＥＴ阻害剤ＲＧ６１４６での治療は、コントロールと比較して、ＫＭＳ−１２ＢＭ異種移植片に対し、強固で有意な効果をもたらし、ほぼ腫瘍停滞となった（９４％腫瘍増殖阻害）。これとは対照的に、Ｂｃｌ−２阻害剤ベネトクラクスでの治療後には弱い活性を示した（４９％  ＴＧＩ）が、一方、ＢＥＴ阻害剤  ＲＧ６１６４＋Ｂｃｌ−２阻害剤ベネトクラクスを含む２剤併用グループでの治療後には優れた効果を達成した。
【００７２】
より詳細には、２剤併用アプローチは、腫瘍縮小を実質的に誘発し、それは最終的に５４％に達した。ＫＭＳ−１２ＢＭ  ＭＭ異種移植片の腫瘍が縮小した２剤併用群の強固な効果は、それぞれの単剤群と比較して、相加作用以上であった。
【００７３】
結果を以下の表１及び図１に示す。
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ＴＣＲ：治療対コントロール比；ｐＴＣＲ：ノンパラメトリック腫瘍コントロール比；ＣＩ：信頼区間
【図１】
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【国際調査報告】
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