(57)【要約】  ＣＤＫ４／６を選択的に分解／破壊するヘテロ二官能性低分子および組成物を設計する方法、ならびにＣＤＫ４／６媒介性がんの治療にそのような分解剤／破壊剤を使用する方法が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
分解／破壊タグにコンジュゲートされたサイクリン依存性キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）リガンドを含む二価化合物。
【請求項２】
前記ＣＤＫ４／６リガンドがＣＤＫ４／６阻害剤である、請求項１に記載の二価化合物。
【請求項３】
前記ＣＤＫ４／６リガンドが、アベマシクリブ、パルボシクリブ、リボシクリブ、トリラシクリブ、Ｇ１Ｔ３８、ＳＨＲ６３９０、およびこれらの類似体からなる群から選択される、請求項２に記載の二価化合物。
【請求項４】
前記ＣＤＫ４／６リガンドが、ＣＤＫ４／６に結合される、請求項１から３のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項５】
前記分解／破壊タグが、ポマリドミド、サリドマイド、レナリドミド、ＶＨＬ−１、アダマンタン、およびこれらの類似体からなる群から選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項６】
前記分解／破壊タグが、ユビキチンリガーゼに結合する、またはＣＤＫ４もしくはＣＤＫ６タンパク質ミスフォールディングをもたらす疎水性基として働く、請求項１から５のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項７】
前記ＣＤＫ４／６リガンドが、リンカーを介して前記分解／破壊タグにコンジュゲートされている、請求項１から６のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項８】
前記二価化合物が、式Ｉの構造：
【化１】
2020514252.tif 000223
［式中、ＰＩは、ＣＤＫ４／６リガンドを含み、ＥＬは、分解／破壊タグを含む］
を有する、請求項１から７のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項９】
ＰＩが、式ＩＩの構造
【化２】
2020514252.tif 000224
［式中、Ｘ１、Ｘ２、およびＸ３は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＯＲ５、ＣＯ２Ｒ５、ＣＯＮＲ５Ｒ６、またはＮＲ５ＣＯＲ６であり、
Ｒ１およびＲ４は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ５、ＳＲ５、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＮＲ７Ｒ８、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＣ（Ｏ）Ｒ７、ＣＯＲ５、ＣＯ２Ｒ５、ＣＯＮＲ５Ｒ６、ＮＲ５ＣＯＲ６、ＮＲ５ＳＯＲ６、ＮＲ５ＳＯ２Ｒ６、ＳＯＲ５、ＳＯ２Ｒ５、ＳＯ２ＮＲ５Ｒ６、（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−アリール、または（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ７ヘテロシクリルであり、
Ｒ３は、水素、アリール、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ７ヘテロシクリルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロアリールアルキルであり、
場合により、Ｒ１とＲ２、Ｒ５とＲ６、またはＲ７とＲ８は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
ＸおよびＹは、独立に、ＣＲ５Ｒ６またはＮである］、
式ＩＩＩの構造
【化３】
2020514252.tif 000225
［式中、Ｒ１は、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ７ヘテロシクリルであり、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ７、ＳＲ７、ＮＲ７Ｒ８、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ７Ｒ８）ｍＮＲ９Ｒ１０、（ＣＲ７Ｒ８）ｍＣ（Ｏ）Ｒ９、ＣＯＲ７、ＣＯ２Ｒ７、ＣＯＮＲ７Ｒ８、ＮＲ７ＣＯＲ８、ＮＲ７ＳＯＲ８、ＮＲ７ＳＯ２Ｒ８、ＳＯＲ７、ＳＯ２Ｒ７、ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８、（ＣＲ７Ｒ８）ｍ−アリール、または（ＣＲ７Ｒ８）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロアリールアルキルであり、
場合により、Ｒ７とＲ８、またはＲ９とＲ１０は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
ＸおよびＹは、独立に、ＣＲ７Ｒ８またはＮである］、
式ＩＶの構造
【化４】
2020514252.tif 000226
［式中、Ｒ１は、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニル、ＣＮ、ＣＯＲ４、ＣＯ２Ｒ４、またはＣＯＮＲ４Ｒ５であり、
Ｒ３は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ４、ＳＲ４、ＮＲ４Ｒ５、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ４Ｒ５）ｍＮＲ６Ｒ７、（ＣＲ４Ｒ５）ｍＣ（Ｏ）Ｒ６、ＣＯＲ４、ＣＯ２Ｒ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＮＲ４ＣＯＲ５、ＮＲ４ＳＯＲ５、ＮＲ４ＳＯ２Ｒ５、ＳＯＲ４、ＳＯ２Ｒ４、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ４Ｒ５）ｍ−アリール、または（ＣＲ４Ｒ５）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロアリールアルキルであり、
場合により、Ｒ１とＲ２、Ｒ４とＲ５、またはＲ６とＲ７は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、独立に、ＣＲ４Ｒ５またはＮである］、
または式ＶＩの構造
【化５】
2020514252.tif 000227
［式中、Ｒ１およびＲ２は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｒ３は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、またはＣ２〜Ｃ６アルキニルであり、
Ｒ４は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ５、ＳＲ５、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＮＲ７Ｒ８、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＣ（Ｏ）Ｒ７、ＣＯＲ５、ＣＯ２Ｒ５、ＣＯＮＲ５Ｒ６、ＮＲ５ＣＯＲ６、ＮＲ５ＳＯＲ６、ＮＲ５ＳＯ２Ｒ６、ＳＯＲ５、ＳＯ２Ｒ５、ＳＯ２ＮＲ５Ｒ６、（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−アリール、または（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
ｎは、０〜４であり、
場合により、Ｒ１とＲ２、Ｒ５とＲ６、またはＲ７とＲ８は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、独立に、ＣＲ５Ｒ６またはＮである］
を有する、請求項８に記載の二価化合物。
【請求項１０】
前記ＣＤＫ４／６リガンドが、アベマシクリブ、パルボシクリブ、リボシクリブ、トリラシクリブ（Ｇ１Ｔ２８）、Ｇ１Ｔ３８、ＳＨＲ６３９０、およびこれらの類似体からなる群から選択される、請求項８または９に記載の二価化合物。
【請求項１１】
前記ＣＤＫ４／６リガンドが、
【化６】
2020514252.tif 000228
からなる群から選択される、請求項８または９に記載の二価化合物。
【請求項１２】
前記ＣＤＫ４／６リガンドが、ＣＤＫ４／６に結合される、請求項８から１１のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項１３】
ＥＬが、
【化７】
2020514252.tif 000229
［式中、Ｖ、Ｗ、およびＸは、独立に、ＣＲ２またはＮであり、
Ｙは、ＣＯまたはＣＨ２であり、
Ｚは、ＣＨ２、ＮＨ、またはＯであり、
Ｒ１は、水素、メチル、またはフルオロであり、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、またはＣ１〜Ｃ５アルキルである］、
【化８】
2020514252.tif 000230
［式中、Ｒ１およびＲ２は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルである］、
または
【化９】
2020514252.tif 000231
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、およびＺは、独立に、ＣＲ４またはＮである］
から選択される、請求項８から１２のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項１４】
前記分解／破壊タグが、ポマリドミド、サリドマイド、レナリドミド、ＶＨＬ−１、アダマンタン、１−（（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチル）スルフィニル）ノナン、ヌトリン３ａ、ＲＧ７１１２、ＲＧ７３３８、ＡＭＧ２３２、ＡＡ−１１５、べスタチン、ＭＶ−１、ＬＣＬ１６１、およびこれらの類似体からなる群から選択される、請求項１から１３のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項１５】
前記分解／破壊タグが、
【化１０】
2020514252.tif 000232
からなる群から選択される、請求項１から１３のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項１６】
前記分解／破壊タグがユビキチンリガーゼに結合される、請求項１から１５のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項１７】
前記分解／破壊タグが、ＣＤＫ４もしくはＣＤＫ６タンパク質ミスフォールディングをもたらす疎水性基として機能する、請求項１から１６のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項１８】
前記リンカーが、種々の長さの、非環式もしくは環式飽和もしくは不飽和炭素、エチレングリコール、アミド、アミノ、エーテル、尿素、カルバメート、芳香族、ヘテロ芳香族、ヘテロ環、または含カルボニル基を含む、請求項８から１７のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項１９】
前記リンカーが、
【化１１】
2020514252.tif 000233
［式中、Ｘは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｙは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
ｎは、０〜１５である］、
【化１２】
2020514252.tif 000234
［式中、Ｘは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｙは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
ｍは、０〜１５であり、
ｎは、０〜６であり、
ｏは、０〜１５である］、または
【化１３】
2020514252.tif 000235
［式中、Ｘは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｙは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｒは、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、−ＣＨ（Ｃ１〜３アルキル）−、−Ｃ（Ｃ１〜３アルキル）（Ｃ１〜３アルキル）−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ（Ｃ１〜３アルキル）＝Ｃ（Ｃ１〜３アルキル）−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１〜３アルキル）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜３アルキル）−、３〜１３員環、３〜１３員縮合環、３〜１３員架橋環、または３〜１３員スピロ環であり、
ｍは、０〜１５であり、
ｎは、０〜１５である］
からなる群から選択される、請求項８から１７のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項２０】
前記リンカーが式Ｃであり、Ｒが、３〜１３員環、３〜１３員縮合環、３〜１３員架橋環、および３〜１３員スピロ環からなる群から選択され、Ｒは、１個または複数のヘテロ原子を含んでいる、請求項１９に記載の二価化合物。
【請求項２１】
前記リンカーが式Ｃであり、Ｒが、
【化１４】
2020514252.tif 000236
からなる群から選択される、請求項１９に記載の二価化合物。
【請求項２２】
前記ＣＤＫ４／６リガンドが、
【化１５】
2020514252.tif 000237
からなる群から選択される、請求項１に記載の二価化合物。
【請求項２３】
前記ユビキチンリガーゼがＥ３リガーゼである、請求項６から２２のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項２４】
前記Ｅ３リガーゼが、セレブロンＥ３リガーゼ、ＶＨＬ  Ｅ３リガーゼ、ＭＤＭ２リガーゼ、ＴＲＩＭ２４リガーゼ、ＴＲＩＭ２１リガーゼ、およびＩＡＰリガーゼからなる群から選択される、請求項２３に記載の二価化合物。
【請求項２５】
前記二価化合物が、ＸＹ０２８−０８２、ＸＹ０２８−００３、ＸＹ０２８−００４、ＸＹ０２８−００５、ＸＹ０１９−０９８、ＸＹ０２８−００６、ＸＹ０２８−００７、ＸＹ０２８−００８、ＸＹ０２８−００９、ＸＹ０２８−０８５、ＸＹ０２８−０８４、ＸＹ０２８−０８３、ＸＹ０２８−１３２、ＸＹ０２８−１３３、ＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−１６２、ＸＹ０２８−１６３、ＸＹ０２８−００２、ＸＹ０２８−１１４、ＸＹ０２８−０９７、ＸＹ０１９−１０８、ＸＹ０２８−１０５、ＸＹ０２８−１０６、ＸＹ０２８−１４０、ＸＹ０２８−１４１、ＸＹ０２８−１４２、ＸＹ０２８−１４３、ＸＹ０２８−１４４、ＸＹ０２８−１４５、ＹＸ２６−５６、ＹＸ２６−６６、ＹＸ２６−５８、ＹＸ３０−１０８、ＹＸ３０−１０７、ＹＸ３０−８５、ＹＸ３０−８６、ＹＸ３０−１１７、ＹＸ３０−１１８、ＹＸ３０−１２６、ＹＸ３０−１２５、ＸＹ０２８−１８６、ＹＸ３３−２９、ＹＸ３３−３１、ＹＸ３３−７４、ＹＸ３３−９４、ＹＸ３３−１０８、ＹＸ３３−９６、ＹＸ３３−９７、ＹＸ３３−１０９、ＹＸ３３−１１０、ＹＸ３３−１１２、ＹＸ３３−１２３、ＹＸ３５−４８、ＹＸ３９−４７、ＹＸ３９−４８、ＹＸ３９−５６、ＹＸ３９−６５、ＹＸ３９−７４、ＹＸ３９−１２３、ＹＸ３９−１２４、ＹＸ３９−１４７、ＹＸ４４−１８、ＹＸ４４−１９、ＹＸ４４−２２、ＹＸ４４−４６、ＹＸ４４−４８、ＹＸ４４−７８、ＹＳ３６−９５、ＹＳ３６−６０、ＹＳ３６−６１、ＹＳ３６−６２、ＹＳ３６−６３、ＹＳ３６−６４、ＹＳ３６−６５、ＹＳ３６−６６、ＹＳ３６−６７、ＹＳ３６−６８、ＹＳ３６−６９、ＹＳ３６−７０、ＹＳ３６−７１、化合物例８０〜１３５、およびこれらの類似体からなる群から選択される、請求項１から８のいずれか一項に記載の二価化合物。
【請求項２６】
ＸＹ０２８−０８２、ＸＹ０２８−００３、ＸＹ０２８−００４、ＸＹ０２８−００５、ＸＹ０１９−０９８、ＸＹ０２８−００６、ＸＹ０２８−００７、ＸＹ０２８−００８、ＸＹ０２８−００９、ＸＹ０２８−０８５、ＸＹ０２８−０８４、ＸＹ０２８−０８３、ＸＹ０２８−１３２、ＸＹ０２８−１３３、ＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−１６２、ＸＹ０２８−１６３、ＸＹ０２８−００２、ＸＹ０２８−１１４、ＸＹ０２８−０９７、ＸＹ０１９−１０８、ＸＹ０２８−１０５、ＸＹ０２８−１０６、ＸＹ０２８−１４０、ＸＹ０２８−１４１、ＸＹ０２８−１４２、ＸＹ０２８−１４３、ＸＹ０２８−１４４、ＸＹ０２８−１４５、ＹＸ２６−５６、ＹＸ２６−６６、ＹＸ２６−５８、ＹＸ３０−１０８、ＹＸ３０−１０７、ＹＸ３０−８５、ＹＸ３０−８６、ＹＸ３０−１１７、ＹＸ３０−１１８、ＹＸ３０−１２６、ＹＸ３０−１２５、ＸＹ０２８−１８６、ＹＸ３３−２９、ＹＸ３３−３１、ＹＸ３３−７４、ＹＸ３３−９４、ＹＸ３３−１０８、ＹＸ３３−９６、ＹＸ３３−９７、ＹＸ３３−１０９、ＹＸ３３−１１０、ＹＸ３３−１１２、ＹＸ３３−１２３、ＹＸ３５−４８、ＹＸ３９−４７、ＹＸ３９−４８、ＹＸ３９−５６、ＹＸ３９−６５、ＹＸ３９−７４、ＹＸ３９−１２３、ＹＸ３９−１２４、ＹＸ３９−１４７、ＹＸ４４−１８、ＹＸ４４−１９、ＹＸ４４−２２、ＹＸ４４−４６、ＹＸ４４−４８、ＹＸ４４−７８、ＹＳ３６−９５、ＹＳ３６−６０、ＹＳ３６−６１、ＹＳ３６−６２、ＹＳ３６−６３、ＹＳ３６−６４、ＹＳ３６−６５、ＹＳ３６−６６、ＹＳ３６−６７、ＹＳ３６−６８、ＹＳ３６−６９、ＹＳ３６−７０、ＹＳ３６−７１、化合物例８０〜１３５、およびこれらの類似体からなる群から選択される、二価化合物。
【請求項２７】
サイクリン依存性キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）媒介性がんを治療する方法であって、ＣＤＫ４／６媒介性がんを有している、それを必要とする対象に、分解／破壊タグにコンジュゲートされたＣＤＫ４／６リガンドを含む二価化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２８】
前記ＣＤＫ４／６媒介性がんが、サイクリン依存性キナーゼ４（ＣＤＫ４）またはサイクリン依存性キナーゼ６（ＣＤＫ６）を、同じ種および組織タイプの野生型組織と比べて過剰発現するものである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＣＤＫ４／６媒介性がんが、同じ種および組織タイプの野生型組織と比べて高いＣＤＫ４またはＣＤＫ６酵素活性を含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
少なくとも１種の二価化合物が、ＸＹ０２８−０８２、ＸＹ０２８−００３、ＸＹ０２８−００４、ＸＹ０２８−００５、ＸＹ０１９−０９８、ＸＹ０２８−００６、ＸＹ０２８−００７、ＸＹ０２８−００８、ＸＹ０２８−００９、ＸＹ０２８−０８５、ＸＹ０２８−０８４、ＸＹ０２８−０８３、ＸＹ０２８−１３２、ＸＹ０２８−１３３、ＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−１６２、ＸＹ０２８−１６３、ＸＹ０２８−００２、ＸＹ０２８−１１４、ＸＹ０２８−０９７、ＸＹ０１９−１０８、ＸＹ０２８−１０５、ＸＹ０２８−１０６、ＸＹ０２８−１４０、ＸＹ０２８−１４１、ＸＹ０２８−１４２、ＸＹ０２８−１４３、ＸＹ０２８−１４４、ＸＹ０２８−１４５、ＹＸ２６−５６、ＹＸ２６−６６、ＹＸ２６−５８、ＹＸ３０−１０８、ＹＸ３０−１０７、ＹＸ３０−８５、ＹＸ３０−８６、ＹＸ３０−１１７、ＹＸ３０−１１８、ＹＸ３０−１２６、ＹＸ３０−１２５、ＸＹ０２８−１８６、ＹＸ３３−２９、ＹＸ３３−３１、ＹＸ３３−７４、ＹＸ３３−９４、ＹＸ３３−１０８、ＹＸ３３−９６、ＹＸ３３−９７、ＹＸ３３−１０９、ＹＸ３３−１１０、ＹＸ３３−１１２、ＹＸ３３−１２３、ＹＸ３５−４８、ＹＸ３９−４７、ＹＸ３９−４８、ＹＸ３９−５６、ＹＸ３９−６５、ＹＸ３９−７４、ＹＸ３９−１２３、ＹＸ３９−１２４、ＹＸ３９−１４７、ＹＸ４４−１８、ＹＸ４４−１９、ＹＸ４４−２２、ＹＸ４４−４６、ＹＸ４４−４８、ＹＸ４４−７８、ＹＳ３６−９５、ＹＳ３６−６０、ＹＳ３６−６１、ＹＳ３６−６２、ＹＳ３６−６３、ＹＳ３６−６４、ＹＳ３６−６５、ＹＳ３６−６６、ＹＳ３６−６７、ＹＳ３６−６８、ＹＳ３６−６９、ＹＳ３６−７０、ＹＳ３６−７１、化合物例８０〜１３５、およびこれらの類似体からなる群から選択される、請求項２７から２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
少なくとも１種の二価化合物が、経口、非経口、皮内、皮下、局所、または直腸投与される、請求項２７から３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
がん治療のための１種または複数の追加治療レジメンによって前記対象を治療することをさらに含む、請求項２８から３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記１種または複数の追加治療レジメンが、手術、化学療法、放射線療法、ホルモン療法、および免疫療法からなる群から選択される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記ＣＤＫ４／６媒介性がんが、中皮腫、肝細胞がん、中枢神経系新生物、肺がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、黒色腫、卵巣がん、結腸がん、直腸がん、肛門がん、胃がん、胃腸がん、乳がん、子宮がん、卵管がん、子宮内膜がん、子宮頸がん、腟がん、外陰がん、食道がん、胃腸がん、内分泌がん、甲状腺がん、副甲状腺がん、副腎がん、軟部組織肉腫、尿道がん、陰茎がん、前立腺がん、精巣がん、白血病、リンパ腫、膀胱がん、腎細胞がん、脳幹神経膠腫、下垂体がん、副腎皮質がん、胆嚢がん、多発性骨髄腫、胆管癌、線維肉腫、神経芽細胞腫、および網膜芽細胞腫からなる群から選択される、請求項２７から３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３５】
前記乳がんがエストロゲン受容体陽性（ＥＲ＋）である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記ＣＤＫ４／６媒介性がんが、再発したがんである、請求項２７から３５のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
前記ＣＤＫ４／６媒介性がんが、１種または複数の以前の治療に対して治療抵抗性であった、請求項２７から３６のいずれかに記載の方法。
【請求項３８】
ＣＤＫ４またはＣＤＫ６の分解／破壊を媒介する二価化合物を同定するための方法であって、前記方法は、
分解／破壊タグにコンジュゲートされたＣＤＫ４／６リガンドを含むヘテロ二官能性試験化合物を用意するステップ；、
前記ヘテロ二官能性試験化合物を、ユビキチンリガーゼとＣＤＫ４およびＣＤＫ６の少なくとも一方とを含む細胞と接触させるステップ；
前記細胞においてＣＤＫ４またはＣＤＫ６レベルが低下するかどうかを判定するステップ；および
（ｉ）前記細胞においてＣＤＫ４レベルが低下し、かつ、前記細胞においてＣＤＫ６レベルが低下しない場合、前記ヘテロ二官能性試験化合物を、ＣＤＫ４の分解／減少を媒介する二価化合物として同定するステップ、
（ｉｉ）前記細胞においてＣＤＫ６レベルが低下し、かつ、前記細胞においてＣＤＫ４レベルが低下しない場合、前記ヘテロ二官能性試験化合物を、ＣＤＫ６の分解／減少を媒介する二価化合物として同定するステップ、または
（ｉｉｉ）前記細胞においてＣＤＫ４とＣＤＫ６の両方のレベルが低下する場合、前記ヘテロ二官能性試験化合物を、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６の分解／減少を媒介する二価化合物として同定するステップ
を含む、方法。
【請求項３９】
前記細胞ががん細胞である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記がん細胞が、ＣＤＫ４／６媒介性がん細胞である、請求項３９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本開示は、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）４および／または６を選択的に分解および／または破壊する二価化合物（たとえば、二官能低分子化合物）、その二価化合物の１種または複数を含む組成物、ならびにそれを必要とする対象においてＣＤＫ４／６媒介性がんを治療するためのその使用方法に関する。本開示はまた、そのような二価化合物を設計する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明の背景
サイクリン依存性キナーゼ４（ＣＤＫ４、ＣＭＭ３およびＰＳＫ−Ｊ３としても知られる）（Matsushime et al., 1992）およびサイクリン依存性キナーゼ６（ＣＤＫ６、ＭＣＰＨ１２およびＰＬＳＴＩＲＥとしても知られる）（Meyerson and Harlow, 1994）は、サイクリンＤ／ＣＤＫ４／６／Ｒｂ／Ｅ２Ｆシグナル伝達経路において肝要な役割を果たす、関係のあるセリン／トレオニンキナーゼ（一まとめにして「ＣＤＫ４／６」と呼ぶ）である（「ＣＤＫ４／６／Ｒｂシグナル伝達」）（Sherr et al., 2016）。ＣＤＫ４／６／Ｒｂシグナル伝達は、生理的な細胞周期進行および細胞増殖を媒介する。脱リン酸化したＲｂは、Ｅ２Ｆファミリーの転写因子を結合し、したがって、Ｓ期を通過する妨げとなる。ＣＤＫ４およびＣＤＫ６は、Ｒｂをリン酸化することにより、細胞周期進行を促進する。Ｒｂのリン酸化によって、Ｅ２ＦのＲｂからの解離が可能になり、細胞周期のＳ期の通過が促進される（Burkhart and Sage, 2008）。
【０００３】
乳がんを始めとするいくつものタイプのがんについて、その進行がＣＤＫ４／６／Ｒｂシグナル伝達の異常な活性化に左右されることがわかっている（「ＣＤＫ４／６媒介性がん」）（Yu et al., 2006、Hamilton and Infante, 2016、Lim et al., 2016）。従来のがん治療には、手術、放射線療法、化学療法（たとえば、ゲムシタビンＨＣｌおよびテモゾロミド、細胞傷害性ＤＮＡアルキル化剤）、ホルモン療法、標的化抗体療法、およびこれらの組合せが含まれる。女性の中で、乳がんは、罹患率が他のがんよりもかなり高くなっている（１００，０００人あたり４３．３人）。北米において、乳がんは、肺がんに次ぐ、女性における主ながん死因の１つである（約１５％）。
【０００４】
ＣＤＫ４／６の活性を阻害しうる治療剤の開発には、かなりの努力が費やされてきた。３種のＣＤＫ４／６阻害剤（パルボシクリブ（ＰＤ−０３３２９９１、Ｐｆｉｚｅｒ）、アベマシクリブ（ＬＹ２８３５２１９、Ｌｉｌｌｙ）、およびリボシクリブ（ＬＥＥ０１１、Ｎｏｖａｒｔｉｓ））が承認されている。３種すべての化合物が、腫瘍における無傷のＲｂの発現に応じて、腫瘍モデルの範囲で前臨床活性を示している。最近では、トリラシクリブ（Ｇ１Ｔ２８）、Ｇ１Ｔ３８、およびＳＨＲ６３９０という追加の３種のＣＤＫ４／６阻害剤が、第Ｉ相臨床試験に入っている。
【０００５】
臨床結果から、エストロゲン受容体（ＥＲ）陽性（ＥＲ＋）乳腺腫瘍を有する患者が、内分泌療法（すなわち、１種または複数のアロマターゼ阻害剤またはＥＲアンタゴニストによる治療）と組み合わせたＣＤＫ４／６阻害剤で治療されると、際立った応答および無増悪生存期間の延長を示すことがわかった（Finn et al., 2015、Turner et al., 2015）。しかし、これらの患者の大半は、このような治療に対する初期の応答にもかかわらず、結局、１４〜２８か月以内に、こうした治療に抵抗性が現れる（Finn et al., 2015）。予備データからは、このような獲得抵抗性が、阻害剤によるＣＤＫ４／６／Ｒｂシグナル伝達の抑制不足、またはＲｂの減少に起因する場合があることが示唆される（Herrera-Abreu et al., 2016）．全体として、ＣＤＫ４／６阻害剤単剤療法（すなわち、内分泌または他の療法なしでＣＤＫ４／６治療単独）の臨床的有効性は、控え目であるように思われる（Sherr et al., 2016）。毒性のために、腫瘍におけるＲｂリン酸化を十分に阻害するだけの高い濃度でこうした阻害剤を投与することが制限されることもある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
要旨
本開示は、一般に、ＣＤＫ４／６を選択的に分解および／または破壊する二価化合物（たとえば、二官能低分子化合物）、ならびにＣＤＫ４／６媒介性がん（すなわち、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、もしくは両方を過剰発現するがん；ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、もしくは両方の活性に依存するがん；またはＣＤＫ４、ＣＤＫ６、もしくは両方の活性のレベルが同じ種および組織タイプの野生型組織と比べて上昇しているがん）を治療するための方法に関する。留意すべき重要な点は、ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤は二重機能（酵素阻害とタンパク質分解／破壊）を有するので、ここで開示／特許請求する二価化合物は、ＣＤＫ４／６の酵素活性を阻害するがＣＤＫ４／６タンパク質レベルには影響を及ぼさない現用のＣＤＫ４／６阻害剤よりかなり有効な治療剤となりうることである。本開示はさらに、本明細書に記載されるようなＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤を同定する方法を提供する。
【０００７】
より詳細には、本開示は、分解／破壊タグにコンジュゲートされたサイクリン依存性キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）リガンドを含む二価化合物を提供する。
【０００８】
一態様では、ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤は、以下に示すような「ＰＩ−リンカー−ＥＬ」の形を取る。
【０００９】
【化１】
2020514252.tif 000002
式中、ＰＩは、ＣＤＫ４／６リガンド（たとえば、ＣＤＫ４／６阻害剤）を含み、ＥＬは、分解／破壊タグ（たとえば、Ｅ３リガーゼリガンド）を含む。例示的なＣＤＫ４／６リガンド（ＰＩ）および例示的な分解／破壊タグ（ＥＬ）は、本明細書で開示する。
【００１０】
たとえば、ＰＩとしては、限定はしないが、
【００１１】
【化２】
2020514252.tif 000003
を挙げることができる。
式中、Ｘ１、Ｘ２、およびＸ３は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＯＲ５、ＣＯ２Ｒ５、ＣＯＮＲ５Ｒ６、またはＮＲ５ＣＯＲ６であり、
Ｒ１およびＲ４は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ５、ＳＲ５、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＮＲ７Ｒ８、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＣ（Ｏ）Ｒ７、ＣＯＲ５、ＣＯ２Ｒ５、ＣＯＮＲ５Ｒ６、ＮＲ５ＣＯＲ６、ＮＲ５ＳＯＲ６、ＮＲ５ＳＯ２Ｒ６、ＳＯＲ５、ＳＯ２Ｒ５、ＳＯ２ＮＲ５Ｒ６、（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−アリール、または（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ７ヘテロシクリルであり、
Ｒ３は、水素、アリール、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ７ヘテロシクリルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロアリールアルキルであり、
場合により、Ｒ１とＲ２、Ｒ５とＲ６、またはＲ７とＲ８は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
ＸおよびＹは、独立に、ＣＲ５Ｒ６またはＮである。
【００１２】
たとえば、ＰＩとして、
【００１３】
【化３】
2020514252.tif 000004
を挙げることができる。
式中、Ｒ１は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ７ヘテロシクリルであり、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ７、ＳＲ７、ＮＲ７Ｒ８、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ７Ｒ８）ｍＮＲ９Ｒ１０、（ＣＲ７Ｒ８）ｍＣ（Ｏ）Ｒ９、ＣＯＲ７、ＣＯ２Ｒ７、ＣＯＮＲ７Ｒ８、ＮＲ７ＣＯＲ８、ＮＲ７ＳＯＲ８、ＮＲ７ＳＯ２Ｒ８、ＳＯＲ７、ＳＯ２Ｒ７、ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８、（ＣＲ７Ｒ８）ｍ−アリール、または（ＣＲ７Ｒ８）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロアリールアルキルであり、
場合により、Ｒ７とＲ８、Ｒ９とＲ１０は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
ＸおよびＹは、独立に、ＣＲ７Ｒ８またはＮである。
【００１４】
たとえば、ＰＩとして、
【００１５】
【化４】
2020514252.tif 000005
を挙げることができる。
式中、Ｒ１は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＣＮ、ＣＯＲ４、ＣＯ２Ｒ４、またはＣＯＮＲ４Ｒ５；であり、
Ｒ３は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ４、ＳＲ４、ＮＲ４Ｒ５、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ４Ｒ５）ｍＮＲ６Ｒ７、（ＣＲ４Ｒ５）ｍＣ（Ｏ）Ｒ６、ＣＯＲ４、ＣＯ２Ｒ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＮＲ４ＣＯＲ５、ＮＲ４ＳＯＲ５、ＮＲ４ＳＯ２Ｒ５、ＳＯＲ４、ＳＯ２Ｒ４、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ４Ｒ５）ｍ−アリール、または（ＣＲ４Ｒ５）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロアリールアルキルであり、
場合により、Ｒ１とＲ２、Ｒ４とＲ５、Ｒ６とＲ７は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、独立に、ＣＲ４Ｒ５またはＮである。
【００１６】
たとえば、ＰＩとして、
【００１７】
【化５】
2020514252.tif 000006
を挙げることができる。
式中、Ｒ１およびＲ２は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｒ３は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、またはＣ２〜Ｃ６アルキニルであり、
Ｒ４は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ５、ＳＲ５、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＮＲ７Ｒ８、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＣ（Ｏ）Ｒ７、ＣＯＲ５、ＣＯ２Ｒ５、ＣＯＮＲ５Ｒ６、ＮＲ５ＣＯＲ６、ＮＲ５ＳＯＲ６、ＮＲ５ＳＯ２Ｒ６、ＳＯＲ５、ＳＯ２Ｒ５、ＳＯ２ＮＲ５Ｒ６、（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−アリール、または（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
ｎは、独立に、０〜４であり、
場合により、Ｒ１とＲ２、Ｒ５とＲ６、Ｒ７とＲ８は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、独立に、ＣＲ５Ｒ６またはＮである。
【００１８】
ＣＤＫ４／６リガンドは、たとえば、アベマシクリブ、パルボシクリブ、リボシクリブ、トリラシクリブ（Ｇ１Ｔ２８）、Ｇ１Ｔ３８、ＳＨＲ６３９０、および／またはこれらの類似体などのＣＤＫ４／６阻害剤でよい。
【００１９】
一部の態様では、ＣＤＫ４／６リガンドは、たとえば、
【００２０】
【化６】
2020514252.tif 000007
である場合がある。
【００２１】
ＣＤＫ４／６リガンドは、ＣＤＫ４／６に結合することができる。
【００２２】
Ｅｌとしては、限定はしないが、
【００２３】
【化７】
2020514252.tif 000008
が挙げられる。
式中、Ｖ、Ｗ、Ｘは、独立に、ＣＲ２またはＮであり、
Ｙは、ＣＯまたはＣＨ２であり、
Ｚは、ＣＨ２、ＮＨ、またはＯであり、
Ｒ１は、水素、メチル、またはフルオロであり、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、またはＣ１〜Ｃ５アルキルである。
【００２４】
たとえば、ＥＬには、
【００２５】
【化８】
2020514252.tif 000009
が含まれる。
式中、Ｒ１およびＲ２は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルである。
【００２６】
たとえば、ＥＬとして、
【００２７】
【化９】
2020514252.tif 000010
を挙げることができる。
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニル；であり、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｚは、独立に、ＣＲ４またはＮである。
【００２８】
一部の態様では、分解／破壊タグは、たとえば、ポマリドミド、サリドマイド、レナリドミド、ＶＨＬ−１、アダマンタン、１−（（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチル）スルフィニル）ノナン、ヌトリン３ａ、ＲＧ７１１２、ＲＧ７３３８、ＡＭＧ２３２、ＡＡ−１１５、べスタチン、ＭＶ−１、ＬＣＬ１６１、および／またはこれらの類似体である場合がある。
【００２９】
一部の態様では、分解／破壊タグは、たとえば、
【００３０】
【化１０】
2020514252.tif 000011
式ＸＩＶ〜ＸＸＸ（左から右へ、次いで上から下へ、上部左の角の式ＸＩＶから出発し、下部右の角の式ＸＸＸで終わる）である場合がある。
【００３１】
一部の態様では、分解／破壊タグは、ユビキチンリガーゼ（例として、Ｅ３リガーゼ、たとえばセレブロンＥ３リガーゼ、ＶＨＬ  Ｅ３リガーゼ、ＭＤＭ２リガーゼ、ＴＲＩＭ２１リガーゼ、ＴＲＩＭ２４リガーゼ、および／またはＩＡＰリガーゼ）に結合し、かつ／またはＣＤＫ４もしくはＣＤＫ６タンパク質ミスフォールディングをもたらす疎水性基として働く場合がある。
【００３２】
上述の化合物のいずれにおいても、ＣＤＫ４／６リガンドは、リンカーを介して分解／破壊タグにコンジュゲートさせることができる。リンカーとしては、たとえば、種々の長さの、非環式もしくは環式飽和もしくは不飽和炭素、エチレングリコール、アミド、アミノ、エーテル、尿素、カルバメート、芳香族、ヘテロ芳香族、ヘテロ環、および／または含カルボニル基（carbonyl containing group）を挙げることができる。
【００３３】
一部の実施形態では、リンカーは、次の部分である場合がある。
【００３４】
【化１１】
2020514252.tif 000012
［式中、Ｘは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｙは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
ｎは、０〜１５である］、
【００３５】
【化１２】
2020514252.tif 000013
［式中、Ｘは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｙは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
ｍは、０〜１５であり、
ｎは、０〜６であり、
ｏは、０〜１５である］、または
【００３６】
【化１３】
2020514252.tif 000014
［式中、
Ｘは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｙは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｒは、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、−ＣＨ（Ｃ１〜３アルキル）−、−Ｃ（Ｃ１〜３アルキル）（Ｃ１〜３アルキル）−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ（Ｃ１〜３アルキル）＝Ｃ（Ｃ１〜３アルキル）−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１〜３アルキル）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜３アルキル）−、３〜１３員環、３〜１３員縮合環、３〜１３員架橋環（bridged ring）、および／または３〜１３員スピロ環であり、
ｍは、０〜１５であり、
ｎは、０〜１５である］。
【００３７】
式Ｃの一部の実施形態では、Ｒは、３〜１３員環、３〜１３員縮合環、３〜１３員架橋環、および／または３〜１３員スピロ環であり、これらの１つまたは複数が、１個または複数のヘテロ原子を含んでいる場合もある。
【００３８】
式Ｃの一部の実施形態では、Ｒは、
【００３９】
【化１４】
2020514252.tif 000015
の構造を有する。
【００４０】
一部の態様では、二価化合物は、ＸＹ０２８−０８２、ＸＹ０２８−００３、ＸＹ０２８−００４、ＸＹ０２８−００５、ＸＹ０１９−０９８、ＸＹ０２８−００６、ＸＹ０２８−００７、ＸＹ０２８−００８、ＸＹ０２８−００９、ＸＹ０２８−０８５、ＸＹ０２８−０８４、ＸＹ０２８−０８３、ＸＹ０２８−１３２、ＸＹ０２８−１３３、ＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−１６２、ＸＹ０２８−１６３、ＸＹ０２８−００２、ＸＹ０２８−１１４、ＸＹ０２８−０９７、ＸＹ０１９−１０８、ＸＹ０２８−１０５、ＸＹ０２８−１０６、ＸＹ０２８−１４０、ＸＹ０２８−１４１、ＸＹ０２８−１４２、ＸＹ０２８−１４３、ＸＹ０２８−１４４、ＸＹ０２８−１４５、ＹＸ２６−５６、ＹＸ２６−６６、ＹＸ２６−５８、ＹＸ３０−１０８、ＹＸ３０−１０７、ＹＸ３０−８５、ＹＸ３０−８６、ＹＸ３０−１１７、ＹＸ３０−１１８、ＹＸ３０−１２６、ＹＸ３０−１２５、ＸＹ０２８−１８６、ＹＸ３３−２９、ＹＸ３３−３１、ＹＸ３３−７４、ＹＸ３３−９４、ＹＸ３３−１０８、ＹＸ３３−９６、ＹＸ３３−９７、ＹＸ３３−１０９、ＹＸ３３−１１０、ＹＸ３３−１１２、ＹＸ３３−１２３、ＹＸ３５−４８、ＹＸ３９−４７、ＹＸ３９−４８、ＹＸ３９−５６、ＹＸ３９−６５、ＹＸ３９−７４、ＹＸ３９−１２３、ＹＸ３９−１２４、ＹＸ３９−１４７、ＹＸ４４−１８、ＹＸ４４−１９、ＹＸ４４−２２、ＹＸ４４−４６、ＹＸ４４−４８、ＹＸ４４−７８、ＹＳ３６−９５、ＹＳ３６−６０、ＹＳ３６−６１、ＹＳ３６−６２、ＹＳ３６−６３、ＹＳ３６−６４、ＹＳ３６−６５、ＹＳ３６−６６、ＹＳ３６−６７、ＹＳ３６−６８、ＹＳ３６−６９、ＹＳ３６−７０、ＹＳ３６−７１、および化合物例８０〜１３５、またはこれらの類似体から選択される化合物である。
【００４１】
一部の態様では、本明細書は、サイクリン依存性キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）媒介性がんを治療する方法であって、ＣＤＫ４／６媒介性がんを有する、それを必要とする対象に、分解／破壊タグにコンジュゲートされたＣＤＫ４／６リガンドを含む１種または複数の二価化合物を投与することを含む方法を提供する。ＣＤＫ４／６媒介性がんは、サイクリン依存性キナーゼ４（ＣＤＫ４）および／またはサイクリン依存性キナーゼ６（ＣＤＫ６）を、同じ種および組織タイプの野生型組織と比べて過剰発現するがんでよい。ＣＤＫ４／６媒介性がんは、ＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６酵素活性が、同じ種および組織タイプの野生型組織と比べて上昇しているものでもよい。ＣＤＫ４／６媒介性がんの非限定的な例としては、中皮腫、肝細胞がん、中枢神経系新生物、肺がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、黒色腫、卵巣がん、結腸がん、直腸がん、肛門がん、胃がん、胃腸がん、乳がん（たとえば、エストロゲン受容体陽性（ＥＲ＋）乳がん）、子宮がん、卵管がん、子宮内膜がん、子宮頸がん、腟がん、外陰がん、食道がん、胃腸がん、内分泌がん、甲状腺がん、副甲状腺がん、副腎がん、軟部組織肉腫、尿道がん、陰茎がん、前立腺がん、精巣がん、白血病、リンパ腫、膀胱がん、腎細胞がん、脳幹神経膠腫、下垂体がん、副腎皮質がん、胆嚢がん、多発性骨髄腫、胆管癌、線維肉腫、神経芽細胞腫、および／または網膜芽細胞腫が挙げられる。ＣＤＫ４／６媒介性がんは、再発したがんである場合もある。ＣＤＫ４／６媒介性がんは、１種または複数の以前の治療に対して治療抵抗性になっている場合もある。
【００４２】
上述の方法のいずれにおいても、二価化合物は、ＸＹ０２８−０８２、ＸＹ０２８−００３、ＸＹ０２８−００４、ＸＹ０２８−００５、ＸＹ０１９−０９８、ＸＹ０２８−００６、ＸＹ０２８−００７、ＸＹ０２８−００８、ＸＹ０２８−００９、ＸＹ０２８−０８５、ＸＹ０２８−０８４、ＸＹ０２８−０８３、ＸＹ０２８−１３２、ＸＹ０２８−１３３、ＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−１６２、ＸＹ０２８−１６３、ＸＹ０２８−００２、ＸＹ０２８−１１４、ＸＹ０２８−０９７、ＸＹ０１９−１０８、ＸＹ０２８−１０５、ＸＹ０２８−１０６、ＸＹ０２８−１４０、ＸＹ０２８−１４１、ＸＹ０２８−１４２、ＸＹ０２８−１４３、ＸＹ０２８−１４４、ＸＹ０２８−１４５、ＹＸ２６−５６、ＹＸ２６−６６、ＹＸ２６−５８、ＹＸ３０−１０８、ＹＸ３０−１０７、ＹＸ３０−８５、ＹＸ３０−８６、ＹＸ３０−１１７、ＹＸ３０−１１８、ＹＸ３０−１２６、ＹＸ３０−１２５、ＸＹ０２８−１８６、ＹＸ３３−２９、ＹＸ３３−３１、ＹＸ３３−７４、ＹＸ３３−９４、ＹＸ３３−１０８、ＹＸ３３−９６、ＹＸ３３−９７、ＹＸ３３−１０９、ＹＸ３３−１１０、ＹＸ３３−１１２、ＹＸ３３−１２３、ＹＸ３５−４８、ＹＸ３９−４７、ＹＸ３９−４８、ＹＸ３９−５６、ＹＸ３９−６５、ＹＸ３９−７４、ＹＸ３９−１２３、ＹＸ３９−１２４、ＹＸ３９−１４７、ＹＸ４４−１８、ＹＸ４４−１９、ＹＸ４４−２２、ＹＸ４４−４６、ＹＸ４４−４８、ＹＸ４４−７８、ＹＳ３６−９５、ＹＳ３６−６０、ＹＳ３６−６１、ＹＳ３６−６２、ＹＳ３６−６３、ＹＳ３６−６４、ＹＳ３６−６５、ＹＳ３６−６６、ＹＳ３６−６７、ＹＳ３６−６８、ＹＳ３６−６９、ＹＳ３６−７０、ＹＳ３６−７１、および化合物例８０〜１３５、またはこれらの類似体である場合がある。
【００４３】
開示する方法の一部の実施形態では、二価化合物は、たとえば、経口、非経口、皮内、皮下、局所、および／または直腸投与される場合がある。
【００４４】
上述の方法はいずれも、がん治療のための１種または複数の追加治療レジメンによって対象を治療することをさらに含む場合がある。がん治療のための１種または複数の追加治療レジメンは、たとえば、手術、化学療法、放射線療法、ホルモン療法、または免疫療法の１つまたは複数である場合がある。
【００４５】
本明細書は、ＣＤＫ４および／またはＣＤＫ６の分解／破壊を媒介する二価化合物を同定する方法であって、分解／破壊タグにコンジュゲートされたＣＤＫ４／６リガンドを含むヘテロ二官能性試験化合物を用意するステップと、ヘテロ二官能性試験化合物を、ユビキチンリガーゼとＣＤＫ４およびＣＤＫ６の少なくとも一方とを含む細胞（たとえば、ＣＤＫ４／６媒介性がん細胞などのがん細胞）と接触させるステップとを含む方法もさらに提供する。本方法は、細胞においてＣＤＫ４またはＣＤＫ６レベルが低下するかどうかを判定するステップと、（ｉ）細胞においてＣＤＫ４レベルが低下し、細胞においてＣＤＫ６レベルが低下しない場合、ヘテロ二官能性試験化合物を、ＣＤＫ４の分解／減少を媒介する二価化合物として同定し、（ｉｉ）細胞においてＣＤＫ６レベルが低下し、細胞においてＣＤＫ４レベルが低下しない場合、ヘテロ二官能性試験化合物を、ＣＤＫ６の分解／減少を媒介する二価化合物として同定し、または（ｉｉｉ）細胞においてＣＤＫ４とＣＤＫ６の両方のレベルが低下する場合、ヘテロ二官能性試験化合物を、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６の分解／減少を媒介する二価化合物として同定するステップとを含む場合がある。
【００４６】
本明細書で使用するとき、用語「約」および「およそ」は、所与の値または状態のプラスマイナス１０％の範囲内、好ましくは、前記の値または状態のプラスマイナス５％の範囲内であると定義される。
【００４７】
別段定義しない限り、本明細書で使用するすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般に理解されているのと同じ意味を有する。本発明において使用するための方法および材料を本明細書に記載するが、当業界で公知である適切な他の方法および材料を使用してもよい。材料、方法、および実施例は、説明のためのものにすぎず、限定する意図はない。すべての刊行物、特許出願、特許、配列、データベースエントリ、および本明細書で言及する他の参考資料は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。相容れない場合では、定義を含めて、本明細書によって統制される。
【００４８】
本発明の他の特色および利点は、以下の詳細な説明および図面ならびに請求項から明らかとなる。
【図面の簡単な説明】
【００４９】
【図１】（Ｒｂリン酸化（ｐＲｂレベル）によって証明される）ＣＤＫ４／６活性ならびにＲｂ／Ｅ２Ｆ下流ターゲットであるＰＬＫ１およびサイクリンＡの発現に対する種々のＣＤＫ４／６阻害剤の異なる濃度での効果を示す一連のウエスタンブロットである。パルボシクリブ（ＰＢ）で処理した乳がん細胞（Ａ）、アベマシクリブ（ＡＢ）で処理した乳がん細胞（Ｂ）、ＰＢで処理した黒色腫細胞（Ｃ）、ＡＢで処理した黒色腫細胞（Ｄ）、２１９４７６で処理した乳がん細胞（Ｅ）。
【図２】表示された乳がん細胞における、ＰＬＫ１およびサイクリンＡ（ＣＣＮＡ２）ｍＲＮＡレベルに対する種々のＣＤＫ４／６阻害剤の異なる濃度での効果を示す一連の棒グラフである。
【図３】表示された黒色腫細胞における、ＰＬＫ１およびサイクリンＡ（ＣＣＮＡ２）ｍＲＮＡレベルに対するＰＢの異なる濃度での効果を示す一連の棒グラフである。
【図４】細胞周期進行に対する種々のＣＤＫ４／６阻害剤の異なる濃度での効果を示す一連の棒グラフである。
【図５】ＣＤＫ４またはＣＤＫ６発現に対する種々のＣＤＫ４／６阻害剤の異なる濃度での効果を示す一連のウエスタンブロットである。ＰＢまたはＡＢで処理した乳がん細胞（Ａ）、ＰＢで処理した黒色腫細胞（Ｂ）、ＡＢで処理した黒色腫細胞（Ｃ）。
【図６】ＣＤＫ４  ｍＲＮＡレベルに対する種々のＣＤＫ４／６阻害剤の異なる濃度での効果を示す一連の棒グラフである。
【図７】Ｖ５でタグ付けされたＣＤＫ４またはＣＤＫ６の異所性の発現に対する種々のＣＤＫ４／６阻害剤の異なる濃度での効果を示す一連のウエスタンブロットである。
【図８】異所性に発現した（Ａ）または内因性の（Ｂ）いずれかのＣＤＫ４のユビキチン化に対する種々のＣＤＫ４／６阻害剤の異なる濃度での効果を示す一連のプルダウンアッセイである。
【図９】ＥＲ＋乳がん細胞、パルボシクリブ抵抗性ＥＲ＋乳がん細胞（ａ）、および黒色腫細胞（ｂ）においての、Ｒｂリン酸化の阻害におけるパルボシクリブの有効性を示す一連のウエスタンブロットである。
【図１０】ＭＣＦ７（Ａ）またはＴ４７Ｄ（Ｂ）いずれかの乳がん細胞においての、ＣＤＫ４／６活性の阻害およびＣＤＫ４／６発現の抑制における種々のＣＤＫ４／６分解剤の有効性を示す一連のウエスタンブロットである。
【図１１】黒色腫細胞においての、ＣＤＫ４／６活性の阻害およびＣＤＫ４／６発現の抑制における異なるリンカーを用いた種々のＣＤＫ４／６分解剤の有効性を示す一連のウエスタンブロット（Ａ、Ｂ、およびＣ）である。
【図１２】黒色腫細胞においての、ＣＤＫ４／６活性の阻害およびＣＤＫ４／６発現の抑制における異なるリンカーを用いた種々のＣＤＫ４／６分解剤の有効性を示す一連のウエスタンブロット（Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤ）である。
【図１３】黒色腫細胞においてのＣＤＫ４／６活性の阻害およびＣＤＫ４／６発現の抑制における種々のＣＤＫ４／６分解剤の効果を示す一連のウエスタンブロットである。
【図１４】黒色腫細胞においてのＣＤＫ４／６活性の阻害およびＣＤＫ４／６発現の抑制における種々のＣＤＫ４／６分解剤の効果を示す一連のウエスタンブロットである。
【図１５】乳がん（Ａ）および黒色腫（Ｂ）細胞においてのＣＤＫ４／６活性の阻害およびＣＤＫ４／６発現の抑制における種々のＣＤＫ４／６分解剤の効果を示す一連のウエスタンブロットである。
【図１６】黒色腫細胞においてのＣＤＫ４／６活性の阻害およびＣＤＫ４／６発現の抑制における種々のＣＤＫ４／６分解剤の効果を示す一連のウエスタンブロット（ＡおよびＢ）である。
【図１７】乳がん細胞においてのＣＤＫ４／６活性の阻害およびＣＤＫ４／６発現の抑制における種々のＣＤＫ４／６分解剤の効果を示す一連のウエスタンブロットである。
【図１８】黒色腫細胞においてのＣＤＫ４／６活性の阻害およびＣＤＫ４／６発現の抑制における種々のＣＤＫ４／６分解剤の効果を示す一連のウエスタンブロットである。
【図１９】乳がん細胞においてのＣＤＫ４／６活性の阻害およびＣＤＫ４／６発現の抑制における種々のＣＤＫ４／６分解剤の効果を示す一連のウエスタンブロットである。
【図２０】黒色腫細胞の細胞増殖の抑制におけるＣＤＫ４／６分解剤ＸＹ０２８−１３３の効果を示す一連の画像である。
【図２１】黒色腫細胞の細胞増殖の抑制におけるＣＤＫ４／６分解剤ＸＹ０２８−１３３の効果を示す一連のクローン原性アッセイである。
【図２２】乳がん細胞の細胞増殖における種々のＣＤＫ４／６分解剤の効果を示す一連のクローン原性アッセイである。
【図２３】乳がん細胞の細胞増殖における種々のＣＤＫ４／６分解剤の効果を示す一連のクローン原性アッセイである。
【発明を実施するための形態】
【００５０】
詳細な説明
本開示は、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、またはＣＤＫ４およびＣＤＫ６両方を選択的に分解する新規なヘテロ二官能性低分子（「タンパク質分解をターゲットとするキメラ（ＰＲＯｔｅｏｌｙｓｉｓ  ＴＡｒｇｅｔｉｎｇ  Ｃｈｉｍｅｒａ）」または「ＰＲＯＴＡＣ」）が、ＣＤＫ４／６媒介性がん、特に、エストロゲン受容体（ＥＲ）陽性（ＥＲ＋）乳がんの治療において有用であるという発見に基づく部分がある。
【００５１】
低分子によって誘発されるターゲットタンパク質の選択的な分解／破壊のための奏効する戦略は、Ｅ３ユビキチンリガーゼを動員し、疎水性のタグでタンパク質ミスフォールディングを模倣することを含む（Buckley and Crews, 2014）。ＰＲＯＴＡＣは、一方の部分がＥ３ユビキチンリガーゼを結合し、別の部分が目的のタンパク質ターゲットを結合する二価の阻害剤である（Buckley and Crews, 2014）。近接が誘発された結果、ターゲットは、ユビキチン化され、その後、プロテアソームにおいて分解される。２種類の高親和性低分子Ｅ３リガーゼリガンド、すなわち、カリン−ＲＩＮＧユビキチンリガーゼ（ＣＲＬ）複合体の成分であるセレブロン（ＣＲＢＮまたはＣＲＬ４ＣＲＢＮ）を結合する、サリドマイドやポマリドミドなどの免疫調節薬（ＩＭｉＤｓ）（Ito et al., 2010、Chamberlain et al., 2014、Fischer et al., 2014、Bondeson et al., 2015、Winter et al., 2015）と、別のＣＲＬ複合体の成分であるｖａｎ  Ｈｉｐｐｅｌ−Ｌｉｎｄａｕタンパク質（ＶＨＬまたはＣＲＬ２ＶＨＬ）を結合する、含ヒドロキシプロリンリガンドであるＶＨＬ−１（Buckley et al., 2012、Buckley et al., 2012、Galdeano et al., 2014、Bondeson et al., 2015、Zengerle et al., 2015）が同定／開発されている。ＰＲＯＴＡＣ技術は、いくつものターゲットの分解にうまく適用されているが（Bondeson et al., 2015、Buckley et al., 2015、Lu et al., 2015、Winter et al., 2015、Zengerle et al., 2015、Lai et al., 2016）、ＣＤＫ４／６の分解には適用されていない。加えて、プロテアソームによるターゲットタンパク質の分解につながるタンパク質ミスフォールディングを模倣するために、かさ高で疎水性のアダマンチル基を利用する疎水性タギング手法が開発されている（Buckley and Crews, 2014）。この手法は、偽キナーゼＨｅｒ３の選択的な分解にうまく適用されているが（Xie et al., 2014）、ＣＤＫ４／６の分解には適用されていない。
【００５２】
以下の実施例において考察するとおり、本開示は、新規なＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤の詳細な例を提供し、ＣＤＫ４／６活性の阻害／破壊、ＣＤＫ４／６発現の抑制、およびがん細胞増殖の阻害における例示的な分解剤／破壊剤の効果を調べている。結果からは、こうした新規な低分子が、がん、特に、乳がん、黒色腫、および肺がんの治療において有益となりうることが示唆されている。
【００５３】
パルボシクリブ、アベマシクリブ、リボシクリブ、トリラシクリブ（Ｇ１Ｔ２８）、Ｇ１Ｔ３８、ＳＨＲ６３９０などの、いくつかの選択的低分子触媒ＣＤＫ４／６阻害剤が、最近になって発見されている。これら阻害剤のいくつかは、ＥＲ＋乳がん治療についての臨床試験に入っている。しかし、こうした阻害剤は、単独で投与しても、非常に限られた奏効しか示さず、むしろ、オフターゲット効果および毒性の増大を引き起こす、内分泌療法などの第２の療法と共投与しなければならない。さらに、第２の療法と共投与したときでさえ、試験において治療された患者の大多数は、１４か月もの早期に抵抗性が現れた。
【００５４】
驚いたことに、毒性の問題に加えて、ＣＤＫ４／６阻害剤は、高濃度で投与されると、ＣＤＫ４／６活性を抑制することさえできなかったことが発見された（実施例５、図１）。実際に、パルボシクリブまたはアベマシクリブ濃度とＲｂ／Ｅ２Ｆ下流ターゲットであるＰＬＫ１およびサイクリンＡの発現とには正相関があり（実施例６、図２および３）、阻害剤濃度と細胞周期進行の抑制とには、対応する逆相関があった（実施例７、図４）。この理由は、ＣＤＫ４／６阻害剤が、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６の活性を阻害することができるとしても、実際には（思いがけなく）、ＣＤＫ４とＣＤＫ６両方の発現を上向き調節し、阻害剤濃度とＣＤＫ４／６発現とに正相関が存在するためであったことがわかっている（実施例８、図５）。ＣＤＫ４／６阻害剤は、ｍＲＮＡレベルではＣＤＫ４およびＣＤＫ６の発現を上向き調節せず（実施例８、図６および７）、むしろ、ＣＤＫ４／６を、ユビキチン化から遮断することにより、分解から保護する（実施例９、図８）。上の結果と一致して、ＣＤＫ４／６発現の増加は、ＣＤＫ４／６阻害剤の有効性の低下と関連していた（実施例１０、図９）。これは、ＣＤＫ４／６阻害剤が、狭い活性枠しかもたないことを示しており、がん細胞が阻害剤に抵抗性が現れても、抵抗性を克服するために阻害剤投与量を単純に増やせないことを示唆している。
【００５５】
ＣＤＫ４／６をターゲットとする現用薬物は、一般に、その触媒機能の阻害に着目している。ここでは、ＣＤＫ４／６の触媒機能だけでなく、タンパク質レベルでのその発現レベルも直接かつ選択的にターゲットとする化合物を開発する、異なる手法をとった。タンパク質分解を誘発する戦略は、Ｅ３ユビキチンリガーゼを動員し、疎水性のタグでタンパク質ミスフォールディングを模倣し、シャペロンを阻害することを含む。たとえば、サリドマイド−ＪＱ１二価化合物が、セレブロンＥ３リガーゼの乗っ取りに使用されて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏで選択性の高いＢＥＴタンパク質分解を誘発し、結果としてマウスにおける白血病進行の遅延を示している（Winter et al., 2015）。同様に、ＢＥＴタンパク質分解は、別のＥ３リガーゼであるＶＨＬによっても誘発されている（Zengerle et al., 2015）。Ｈｅｒ３の部分的な分解が、アダマンタンで修飾された化合物を使用して誘発されている（Xie et al., 2014）。二価低分子化合物の使用に基づく、このような手法では、遺伝子ノックアウトやｓｈＲＮＡノックダウンなどの技術に比べて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏでのタンパク質発現のより柔軟な調節が可能になる。遺伝子ノックアウトまたはｓｈＲＮＡノックダウンとは異なり、低分子手法では、該当する低分子を投与する濃度および頻度を様々に変えることで、疾患モデルにおいて用量および時間依存性を研究する機会がさらに得られる。
【００５６】
ＰＲＯＴＡＣ
一部の態様では、本開示は、分解タグにコンジュゲートされたＣＤＫ４／６リガンド（またはターゲット指向性部分（targeting moiety））を含む、本明細書ではＰＲＯＴＡＣとも呼ぶ二価化合物を提供する。ＣＤＫ４／６リガンドの分解タグへの連結は、直接である場合、またはリンカーを介して間接的である場合がある。
【００５７】
本明細書で使用するとき、用語「サイクリン依存性キナーゼ４／６（ＣＤＫ４／６）リガンド」または「ＣＤＫ４／６リガンド」または「ＣＤＫ４／６ターゲット指向性部分」は、広く解釈され、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、またはＣＤＫ４およびＣＤＫ６両方と会合するまたはこれに結合する、低分子から大きなタンパク質に及ぶ多種多様な分子を包含する。ＣＤＫ４／６リガンドまたはターゲット指向性部分は、たとえば、低分子化合物（すなわち、分子量が約１．５キロダルトン（ｋＤａ）未満の分子）、ペプチドもしくはポリペプチド、核酸もしくはオリゴヌクレオチド、オリゴ糖などの炭水化物、または抗体もしくはその断片である場合がある。
【００５８】
ＣＤＫ４／６リガンドまたはターゲット指向性部分は、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、またはＣＤＫ４およびＣＤＫ６両方の酵素活性の妨げとなりうるＣＤＫ４／６阻害剤（たとえば、アベマシクリブ、パルボシクリブ、リボシクリブ、トリラシクリブ（Ｇ１Ｔ２８）、Ｇ１Ｔ３８、ＳＨＲ６３９０、およびこれらの類似体）である場合がある。本明細書で使用するとき、「阻害剤」とは、生理的、化学的、または酵素的作用または機能を抑止する、阻止する、または別な形で阻害を引き起こす薬剤を指す。阻害剤は、酵素活性の少なくとも５％の低下を引き起こしうる。阻害剤は、加えて、または別法として、遺伝子またはタンパク質の発現、転写、または翻訳を妨げ、または減少させる薬物、化合物、または薬剤を指す場合もある。阻害剤は、たとえば、別のタンパク質もしくは受容体に結合する、またはこれを活性化／不活性化することにより、タンパク質の機能を低減させ、または妨げることができる
【００５９】
例示的なＣＤＫ４／６リガンドとしては、限定はしないが、以下に示す化合物が挙げられる。
【００６０】
【化１５】
2020514252.tif 000016
【００６１】
本明細書で使用するとき、用語「分解／破壊タグ」とは、ユビキチンリガーゼと会合する、もしくはこれに結合して、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、もしくはＣＤＫ４およびＣＤＫ６両方に、対応するユビキチン化機構を動員する、またはＣＤＫ４、ＣＤＫ６、もしくはＣＤＫ４およびＣＤＫ６両方のタンパク質ミスフォールディング、および後続のプロテアソームにおける分解もしくは機能の喪失を誘発する化合物を指す。
【００６２】
一部の態様では、本開示の分解／破壊タグとして、たとえば、サリドマイド、ポマリドミド、レナリドミド、ＶＨＬ−１、アダマンタン、１−（（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチル）スルフィニル）ノナン、ヌトリン３ａ、ＲＧ７１１２、ＲＧ７３３８、ＡＭＧ２３２、ＡＡ−１１５、べスタチン、ＭＶ−１、ＬＣＬ１６１、および／またはこれらの類似体が挙げられる。
【００６３】
本明細書で使用するとき、「リンカー」とは、２つの別個のエンティティー（entity）を互いに結び付ける結合、分子、または分子群である。リンカーによって、２つのエンティティーの間隔を最適にすることができる。一部の態様では、用語「リンカー」は、ＣＤＫ４／６リガンドを分解／破壊タグに架橋させるいずれかの薬剤または分子を指す。本開示の複合物に一度取り付けられたリンカーは、ＰＲＯＴＡＣの機能、すなわち、ＣＤＫ４／６をターゲットとし、ユビキチンリガーゼを動員するその能力の妨げとならないという前提で、本開示のＰＲＯＴＡＣの機能に必要でないＣＤＫ４／６リガンドまたは分解／破壊タグ上の部位が、リンカーを取り付けるのに理想的な部位であることは、当業者に認知されている。
【００６４】
二価化合物のリンカーの長さは、分解剤／破壊剤の分子量が最小限に抑えられ、ＣＤＫ４／６リガンドもしくはターゲット指向性部位によるユビキチンリガーゼとの衝突が回避されるように、または疎水性タグによるＣＤＫ４／６ミスフォールディングが同時に誘発されるように、調整することができる。
【００６５】
一部の実施形態では、本開示の分解／破壊タグとして、たとえば、サリドマイド、ポマリドミド、レナリドミド、ＶＨＬ−１、アダマンタン、１−（（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチル）スルフィニル）ノナン、ヌトリン３ａ、ＲＧ７１１２、ＲＧ７３３８、ＡＭＧ２３２、ＡＡ−１１５、べスタチン、ＭＶ−１、ＬＣＬ１６１、およびこれらの類似体が挙げられる。分解／破壊タグは、有効な二価化合物を生成するために、ＣＤＫ４／６リガンドまたはターゲット指向性部分（たとえば、アベマシクリブ、パルボシクリブ、リボシクリブ、トリラシクリブ（Ｇ１Ｔ２８）、Ｇ１Ｔ３８、またはＳＨＲ６３９０）の構造における目的の各部分に、異なるタイプおよび長さのリンカーを用いて取り付けることができる。特に、分子のどちらかの部分にサリドマイドを取り付けることで、ＣＤＫ４／６／ＨＳＰ９０／ＣＤＣ３７複合体との破壊的な立体相互作用を引き起こすことなく、ＣＤＫ４／６にセレブロンＥ３リガーゼを動員することができる。
【００６６】
本明細書で開示する二価化合物は、ＷＴ細胞と比較して、ＣＤＫ４／６媒介性がん細胞（たとえば、ＥＲ＋細胞）に選択的に影響を及ぼすことができ（すなわち、ＣＤＫ４／６分解剤  破壊剤（CDK4/6 degrader disruptor）は、ＷＴ細胞を溶解させ、またはその成長を阻害する能力は比較的低いながらも、ＣＤＫ４／６媒介性がん細胞を死滅させ、またはその成長を阻害することができる）、たとえば、１種または複数のＣＤＫ４／６媒介性がん細胞についてのＧＩ５０は、１種または複数のＷＴ細胞、たとえば、ＣＤＫ４／６媒介性がん細胞と同じ種および組織タイプのＷＴ細胞のＧＩ５０の、１．５分の１未満、２分の１未満、２．５分の１未満、３分の１未満、４分の１未満、５分の１未満、６分の１未満、７分の１未満、８分の１未満、９分の１未満、１０分の１未満、１５分の１未満、または２０分の１未満である。
【００６７】
本明細書で開示する原理および方法を使用して、追加の二価化合物（すなわち、ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤）を開発することができる。たとえば、他のリンカー、分解タグ、および（アベマシクリブ、パルボシクリブ、リボシクリブ、トリラシクリブ（Ｇ１Ｔ２８）、Ｇ１Ｔ３８、およびＳＨＲ６３９０に限らない）ＣＤＫ４／６を結合／阻害する部分を合成し、試験することができる。ＣＤＫ４／６破壊剤／分解剤（たとえば、二価化合物）の非限定的な例を表１（以下）に示している。ＣＤＫ４／６破壊剤／分解剤の左の部分は、（アベマシクリブ、パルボシクリブ、リボシクリブ、トリラシクリブ（Ｇ１Ｔ２８）、Ｇ１Ｔ３８、およびＳＨＲ６３９０がなすように）ＣＤＫ４／６に結合し、右の部分は、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６のポリユビキチン化および分解を誘発するユビキチン化機構をＣＤＫ４／６に動員し、またはＣＤＫ４／６ミスフォールディングおよび後続の機能喪失もしくはプロテアソームでの分解を誘発する。
【００６８】
二価化合物の非限定的な例を、以下で表１に示す。
【００６９】
【表１−１】
2020514252.tif 000017
【００７０】
【表１−２】
2020514252.tif 000018
【００７１】
【表１−３】
2020514252.tif 000019
【００７２】
【表１−４】
2020514252.tif 000020
【００７３】
【表１−５】
2020514252.tif 000021
【００７４】
【表１−６】
2020514252.tif 000022
【００７５】
【表１−７】
2020514252.tif 000023
【００７６】
【表１−８】
2020514252.tif 000024
【００７７】
【表１−９】
2020514252.tif 000025
【００７８】
【表１−１０】
2020514252.tif 000026
【００７９】
【表１−１１】
2020514252.tif 000027
【００８０】
【表１−１２】
2020514252.tif 000028
【００８１】
【表１−１３】
2020514252.tif 000029
【００８２】
【表１−１４】
2020514252.tif 000030
【００８３】
【表１−１５】
2020514252.tif 000031
【００８４】
【表１−１６】
2020514252.tif 000032
【００８５】
【表１−１７】
2020514252.tif 000033
【００８６】
【表１−１８】
2020514252.tif 000034
【００８７】
【表１−１９】
2020514252.tif 000035
【００８８】
【表１−２０】
2020514252.tif 000036
【００８９】
【表１−２１】
2020514252.tif 000037
【００９０】
【表１−２２】
2020514252.tif 000038
【００９１】
【表１−２３】
2020514252.tif 000039
【００９２】
【表１−２４】
2020514252.tif 000040
【００９３】
【表１−２５】
2020514252.tif 000041
【００９４】
【表１−２６】
2020514252.tif 000042
【００９５】
【表１−２７】
2020514252.tif 000043
【００９６】
【表１−２８】
2020514252.tif 000044
【００９７】
【表１−２９】
2020514252.tif 000045
【００９８】
【表１−３０】
2020514252.tif 000046
【００９９】
【表１−３１】
2020514252.tif 000047
【０１００】
【表１−３２】
2020514252.tif 000048
【０１０１】
【表１−３３】
2020514252.tif 000049
【０１０２】
【表１−３４】
2020514252.tif 000050
【０１０３】
【表１−３５】
2020514252.tif 000051
【０１０４】
【表１−３６】
2020514252.tif 000052
【０１０５】
【表１−３７】
2020514252.tif 000053
【０１０６】
【表１−３８】
2020514252.tif 000054
【０１０７】
【表１−３９】
2020514252.tif 000055
【０１０８】
【表１−４０】
2020514252.tif 000056
【０１０９】
【表１−４１】
2020514252.tif 000057
【０１１０】
【表１−４２】
2020514252.tif 000058
【０１１１】
【表１−４３】
2020514252.tif 000059
【０１１２】
【表１−４４】
2020514252.tif 000060
【０１１３】
【表１−４５】
2020514252.tif 000061
【０１１４】
【表１−４６】
2020514252.tif 000062
【０１１５】
【表１−４７】
2020514252.tif 000063
【０１１６】
【表１−４８】
2020514252.tif 000064
【０１１７】
【表１−４９】
2020514252.tif 000065
【０１１８】
【表１−５０】
2020514252.tif 000066
【０１１９】
【表１−５１】
2020514252.tif 000067
【０１２０】
【表１−５２】
2020514252.tif 000068
【０１２１】
【表１−５３】
2020514252.tif 000069
【０１２２】
【表１−５４】
2020514252.tif 000070
【０１２３】
【表１−５５】
2020514252.tif 000071
【０１２４】
【表１−５６】
2020514252.tif 000072
【０１２５】
【表１−５７】
2020514252.tif 000073
【０１２６】
【表１−５８】
2020514252.tif 000074
【０１２７】
【表１−５９】
2020514252.tif 000075
【０１２８】
【表１−６０】
2020514252.tif 000076
【０１２９】
【表１−６１】
2020514252.tif 000077
【０１３０】
【表１−６２】
2020514252.tif 000078
【０１３１】
【表１−６３】
2020514252.tif 000079
【０１３２】
【表１−６４】
2020514252.tif 000080
【０１３３】
【表１−６５】
2020514252.tif 000081
【０１３４】
【表１−６６】
2020514252.tif 000082
【０１３５】
【表１−６７】
2020514252.tif 000083
【０１３６】
【表１−６８】
2020514252.tif 000084
【０１３７】
一態様では、ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤は、以下に示すような「ＰＩ−リンカー−ＥＬ」の形態を取る。
【０１３８】
【化１６】
2020514252.tif 000085
式中、ＰＩは、ＣＤＫ４／６リガンド（たとえば、ＣＤＫ４／６阻害剤）を含み、ＥＬは、分解／破壊タグ（たとえば、Ｅ３リガーゼリガンド）を含む。例示的なＣＤＫ４／６リガンド（ＰＩ）および例示的な分解／破壊タグ（ＥＬ）は、本明細書で開示する。
【０１３９】
たとえば、ＰＩとしては、限定はしないが、
【０１４０】
【化１７】
2020514252.tif 000086
を挙げることができる。
式中、Ｘ１、Ｘ２、およびＸ３は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２、ＣＯＲ５、ＣＯ２Ｒ５、ＣＯＮＲ５Ｒ６、またはＮＲ５ＣＯＲ６であり、
Ｒ１およびＲ４は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ５、ＳＲ５、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＮＲ７Ｒ８、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＣ（Ｏ）Ｒ７、ＣＯＲ５、ＣＯ２Ｒ５、ＣＯＮＲ５Ｒ６、ＮＲ５ＣＯＲ６、ＮＲ５ＳＯＲ６、ＮＲ５ＳＯ２Ｒ６、ＳＯＲ５、ＳＯ２Ｒ５、ＳＯ２ＮＲ５Ｒ６、（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−アリール、または（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ７ヘテロシクリルであり、
Ｒ３は、水素、アリール、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ７ヘテロシクリルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロアリールアルキルであり、
場合により、Ｒ１とＲ２、Ｒ５とＲ６、またはＲ７とＲ８は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
ＸおよびＹは、独立に、ＣＲ５Ｒ６またはＮである。
【０１４１】
たとえば、ＰＩとして、
【０１４２】
【化１８】
2020514252.tif 000087
を挙げることができる。
式中、Ｒ１は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、またはシクロプロピルであり、
Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、独立に、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ７ヘテロシクリルであり、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ７、ＳＲ７、ＮＲ７Ｒ８、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ７Ｒ８）ｍＮＲ９Ｒ１０、（ＣＲ７Ｒ８）ｍＣ（Ｏ）Ｒ９、ＣＯＲ７、ＣＯ２Ｒ７、ＣＯＮＲ７Ｒ８、ＮＲ７ＣＯＲ８、ＮＲ７ＳＯＲ８、ＮＲ７ＳＯ２Ｒ８、ＳＯＲ７、ＳＯ２Ｒ７、ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８、（ＣＲ７Ｒ８）ｍ−アリール、または（ＣＲ７Ｒ８）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロアリールアルキルであり、
場合により、Ｒ７とＲ８、Ｒ９とＲ１０は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
ＸおよびＹは、独立に、ＣＲ７Ｒ８またはＮである。
【０１４３】
たとえば、ＰＩとして、
【０１４４】
【化１９】
2020514252.tif 000088
を挙げることができる。
式中、Ｒ１は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＣＮ、ＣＯＲ４、ＣＯ２Ｒ４、またはＣＯＮＲ４Ｒ５；であり、
Ｒ３は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ４、ＳＲ４、ＮＲ４Ｒ５、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ４Ｒ５）ｍＮＲ６Ｒ７、（ＣＲ４Ｒ５）ｍＣ（Ｏ）Ｒ６、ＣＯＲ４、ＣＯ２Ｒ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＮＲ４ＣＯＲ５、ＮＲ４ＳＯＲ５、ＮＲ４ＳＯ２Ｒ５、ＳＯＲ４、ＳＯ２Ｒ４、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ４Ｒ５）ｍ−アリール、または（ＣＲ４Ｒ５）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロアリールアルキルであり、
場合により、Ｒ１とＲ２、Ｒ４とＲ５、Ｒ６とＲ７は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、独立に、ＣＲ４Ｒ５またはＮである。
【０１４５】
たとえば、ＰＩとして、
【０１４６】
【化２０】
2020514252.tif 000089
を挙げることができる。
式中、Ｒ１およびＲ２は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｒ３は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、またはＣ２〜Ｃ６アルキニルであり、
Ｒ４は、水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＯＲ５、ＳＲ５、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＮＲ７Ｒ８、（ＣＲ５Ｒ６）ｍＣ（Ｏ）Ｒ７、ＣＯＲ５、ＣＯ２Ｒ５、ＣＯＮＲ５Ｒ６、ＮＲ５ＣＯＲ６、ＮＲ５ＳＯＲ６、ＮＲ５ＳＯ２Ｒ６、ＳＯＲ５、ＳＯ２Ｒ５、ＳＯ２ＮＲ５Ｒ６、（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−アリール、または（ＣＲ５Ｒ６）ｍ−ヘテロアリールであり、ｍは、０〜８であり、
ｎは、０〜４であり、
場合により、Ｒ１とＲ２、Ｒ５とＲ６、Ｒ７とＲ８は、独立に、４〜８員アルキルまたはヘテロシクリル環を形成しており、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＺは、独立に、ＣＲ５Ｒ６またはＮである。
【０１４７】
ＣＤＫ４／６リガンドは、たとえば、アベマシクリブ、パルボシクリブ、リボシクリブ、トリラシクリブ（Ｇ１Ｔ２８）、Ｇ１Ｔ３８、ＳＨＲ６３９０、および／またはこれらの類似体などのＣＤＫ４／６阻害剤でよい。
【０１４８】
一部の態様では、ＣＤＫ４／６リガンドは、たとえば、
【０１４９】
【化２１】
2020514252.tif 000090
である場合がある。
【０１５０】
ＣＤＫ４／６リガンドは、ＣＤＫ４／６に結合することができる。
【０１５１】
ＥＬとしては、限定はしないが、
【０１５２】
【化２２】
2020514252.tif 000091
が挙げられる。
式中、Ｖ、Ｗ、Ｘは、独立に、ＣＲ２またはＮであり、
Ｙは、ＣＯまたはＣＨ２であり、
Ｚは、ＣＨ２、ＮＨ、またはＯであり、
Ｒ１は、水素、メチル、またはフルオロであり、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、またはＣ１〜Ｃ５アルキルである。
【０１５３】
たとえば、ＥＬとして、
【０１５４】
【化２３】
2020514252.tif 000092
を挙げることができる。
式中、Ｒ１およびＲ２は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルである。
【０１５５】
たとえば、ＥＬとして、
【０１５６】
【化２４】
2020514252.tif 000093
を挙げることができる。
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、またはＣ２〜Ｃ８アルキニルであり、
Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｚは、独立に、ＣＲ４またはＮである。
【０１５７】
一部の態様では、分解／破壊タグは、たとえば、ポマリドミド、サリドマイド、レナリドミド、ＶＨＬ−１、アダマンタン、１−（（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチル）スルフィニル）ノナン、ヌトリン３ａ、ＲＧ７１１２、ＲＧ７３３８、ＡＭＧ２３２、ＡＡ−１１５、べスタチン、ＭＶ−１、ＬＣＬ１６１、および／またはこれらの類似体である場合がある。
【０１５８】
一部の態様では、分解／破壊タグは、たとえば、
【０１５９】
【化２５】
2020514252.tif 000094
式ＸＩＶ〜ＸＸＸ（左から右へ、次いで上から下へ、上部左の角の式ＸＩＶから出発し、下部右の角の式ＸＸＸで終わる）
である場合がある。
【０１６０】
一部の態様では、分解／破壊タグは、たとえばＥ３リガーゼなどのユビキチンリガーゼに結合することができる。例示的なＥ３リガーゼとしては、たとえば、セレブロンＥ３リガーゼ、ＶＨＬ  Ｅ３リガーゼ、ＭＤＭ２リガーゼ、ＴＲＩＭ２１リガーゼ、ＴＲＩＭ２４リガーゼ、および／またはＩＡＰリガーゼが挙げられる。一部の態様では、分解／破壊タグは、ＣＤＫ４またはＣＤＫ６タンパク質ミスフォールディングをもたらす疎水性基として働く場合がある。
【０１６１】
上述の化合物のいずれにおいても、ＣＤＫ４／６リガンドは、リンカーを介して分解／破壊タグにコンジュゲートさせることができる。リンカーとしては、たとえば、種々の長さの、非環式もしくは環式飽和もしくは不飽和炭素、エチレングリコール、アミド、アミノ、エーテル、尿素、カルバメート、芳香族、ヘテロ芳香族、ヘテロ環、および／または含カルボニル基を挙げることができる。
【０１６２】
一部の実施形態では、リンカーは、次の部分である場合がある。
【０１６３】
【化２６】
2020514252.tif 000095
［式中、Ｘは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｙは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
ｎは、０〜１５である］、
【０１６４】
【化２７】
2020514252.tif 000096
［式中、Ｘは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｙは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
ｍは、０〜１５であり、
ｎは、０〜６であり、
ｏは、０〜１５である］、または
【０１６５】
【化２８】
2020514252.tif 000097
［式中、
Ｘは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｙは、Ｃ＝ＯまたはＣＨ２であり、
Ｒは、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、−ＣＨ（Ｃ１〜３アルキル）−、−Ｃ（Ｃ１〜３アルキル）（Ｃ１〜３アルキル）−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ（Ｃ１〜３アルキル）＝Ｃ（Ｃ１〜３アルキル）−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１〜３アルキル）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１〜３アルキル）−、３〜１３員環、３〜１３員縮合環、３〜１３員架橋環、および／または３〜１３員スピロ環であり、
ｍは、０〜１５であり、
ｎは、０〜１５である］。
【０１６６】
式Ｃの一部の実施形態では、Ｒは、３〜１３員環、３〜１３員縮合環、３〜１３員架橋環、および／または３〜１３員スピロ環であり、これらの１つまたは複数が、１個または複数のヘテロ原子を含んでいる場合もある。
【０１６７】
式Ｃの一部の実施形態では、Ｒは、
【０１６８】
【化２９】
2020514252.tif 000098
の構造を有する。
【０１６９】
二価化合物の合成および試験
合成された新規な二価化合物（すなわち、ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤）の結合親和性は、当業界で公知である標準の生物物理学的アッセイ（たとえば、ＩＴＣ）を使用して評価することができる。次いで、細胞アッセイを使用して、二価化合物の、ＣＤＫ４／６分解を誘発し、がん細胞増殖を阻害する能力を評価することができる。二価化合物によって誘発された、ＣＤＫ４／６のタンパク質発現の変化を評価するほかに、ＣＤＫ４／６酵素活性を評価することもできる。設計、合成、および生物学的試験を何回も繰り返すことができる。次いで、当業界で公知である方法を使用して、見込みのある二価化合物をさらに最適化して、その薬動学的／薬力学的特性（たとえば、吸収、分布、代謝、および排泄（ＡＤＭＥ）特性）を改良することができる。こうしたステップのいずれかまたはすべてにおける使用に適するアッセイは、当業界で公知であり、たとえば、ウエスタンブロッティング、定量的質量分析（ＭＳ）、フローサイトメトリー、酵素阻害、等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）、細胞成長阻害、および異種移植およびＰＤＸモデルがある。こうしたステップのいずれかまたはすべてにおける使用に適する細胞株は、当業界で公知であり、たとえば、乳がん細胞株（たとえば、ＭＣＦ７、Ｔ４７Ｄ、ＺＲ−７５−１などのＥＲ＋がん細胞株）および黒色腫細胞株（たとえば、Ａ３７５、ＳＫ−ＭＥＬ−２、ＳＫ−ＭＥＬ−３０、ＷＭ１３８２）がある。
【０１７０】
非限定的な例として、詳細な合成プロトコールを、特定の例示的なＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤について、実施例において記載している。
【０１７１】
本明細書で開示する化合物の薬学的に許容される同位体変形形態が企図され、当業界で公知である従来の方法、または実施例に記載する方法に相当する（適切な試薬に代えて、そうした試薬の適切な同位体変形形態を用いる）方法を使用して合成することができる。詳細には、同位体変形形態は、少なくとも１個の原子が、原子番号は同じであるが原子質量が自然界で通常見られる原子質量とは異なっている原子で置き換えられている化合物である。有用な同位体は、当業界で公知であり、たとえば、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、および塩素の同位体である。したがって、例示的な同位体としては、たとえば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、および３６Ｃｌが挙げられる。
【０１７２】
同位体変形形態（たとえば、２Ｈを含んだ同位体変形形態）は、代謝安定性がより高いために生じる治療上の優位点、たとえば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の延長または投与必要量の削減をもたらす場合がある。加えて、ある特定の同位体変形形態（特に、放射性同位体を含んだもの）は、薬物または基質組織分布研究において使用することができる。放射性同位体であるトリチウム（３Ｈ）および炭素１４（１４Ｃ）は、組み込みやすく、検出手段が得やすいことから、この目的に特に有用である。
【０１７３】
本明細書で開示する化合物の薬学的に許容される溶媒和物が企図される。本明細書で開示する化合物を結晶化するのに使用する溶媒に代えて、同位体変形形態（たとえば、Ｈ２Ｏの代わりにＤ２Ｏ、アセトンの代わりにｄ６−アセトン、またはＤＭＳＯの代わりにｄ６−ＤＭＳＯ）を用いることにより、溶媒和物を生成することができる。
【０１７４】
本明細書で開示する化合物の薬学的に許容されるフッ素化変形形態が企図され、当業界で公知である従来の方法、または実施例に記載する方法に相当する（適切な試薬に代えて、そうした試薬の適切なフッ素化変形形態を用いる）方法を使用して合成することができる。詳細には、フッ素化変形形態は、少なくとも１個の水素原子がフルオロ原子で置き換えられている化合物である。フッ素化変形形態は、代謝安定性がより高いために生じる治療上の優位点、たとえば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の延長または投与必要量の削減をもたらす場合がある。
【０１７５】
例示的なＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤の特徴付け
特定の例示的なアベマシクリブ、リボシクリブ、およびパルボシクリブ系ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤を、種々の異なる乳がんおよび黒色腫細胞において特徴付けた（実施例１２および１３、図１０〜２３）。特に、ＸＹ０１９−０９８、ＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−００３、ＸＹ０１９−１０８、ＸＹ０２８−１３２、ＸＹ０２８−１３３、ＹＸ２６−６６、ＸＹ０２８−１４０、ＸＹ０２８−１４４、ＹＸ０３９−４８、ＹＸ０３９−１２４、ＹＸ０３９−１２３、ＹＸ０３９−１４７、ＹＸ０３９−５６、およびＹＸ０３９−６５が、ＣＤＫ４／６発現とＣＤＫ４／６活性の両方の抑制において特に有効であることがわかった。ＣＤＫ４／６発現およびＣＤＫ４／６活性の抑制におけるこの有効性は、がん細胞増殖の阻害における有効性と相関関係があった。
【０１７６】
医薬組成物
一部の態様では、本明細書に記載の組成物および方法は、本明細書で開示するとおりの１種または複数の二価化合物を含む医薬組成物および医薬の製造および使用を含む。医薬組成物それ自体も含まれる。
【０１７７】
一部の態様では、本明細書で開示する組成物は、がん治療に使用される他の化合物、薬物、または薬剤を含む場合がある。たとえば、一部の例では、本明細書で開示する医薬組成物が、１種または複数（たとえば、１、２、３、４、５種、または１０種未満）の化合物と組み合わせられる場合がある。そのような追加化合物として、たとえば、当業界で公知である従来の化学療法剤（たとえば、ゲムシタビンＨＣｌおよびテモゾロミド）を挙げることができる。本明細書で開示するＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤は、共投与されると、従来の化学療法剤と共に作用して、機構的相加または相乗治療効果を生じる場合がある。
【０１７８】
一部の態様では、本明細書で開示する組成物のｐＨは、ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤またはその送達形態の安定性を向上させるために、薬学的に許容される酸、塩基、または緩衝剤を用いて調整される場合がある。
【０１７９】
医薬組成物は、通常、薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む。本明細書で使用するとき、語句「薬学的に許容される」とは、生理的に許容できると一般的に考えられており、ヒトに投与されたとき、アレルギーまたは同様の不都合な反応、たとえば、急性胃蠕動や眩暈などを通常は生じさせない分子エンティティーおよび組成物を指す。薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルとは、本発明の化合物と共に患者に投与することができ、治療的な量の化合物を送達するのに十分な用量で投与されたとき、その薬理活性を損なわず、非毒性である組成物である。薬学的に許容される例示的な従来の非毒性担体、アジュバント、およびビヒクルとしては、医薬投与に適合する食塩水、溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌および抗カビ剤、等張剤および吸収遅延剤などが挙げられる。
【０１８０】
特に、本発明の医薬組成物中に使用することのできる薬学的に許容される担体、アジュバント、およびビヒクルとしては、限定はしないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００コハク酸エステルなどの自己乳化薬物送達系（ＳＥＤＤＳ）、Ｔｗｅｅｎや他の同様の高分子送達マトリックスなどの、医薬品剤形に使用される界面活性剤、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩など緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、たとえば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、蝋、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコール、および羊毛脂が挙げられる。α−、β−、およびγ−シクロデキストリンなどのシクロデキストリンを好都合に使用して、本明細書に記載する式の化合物の送達を強化することもできる。
【０１８１】
本明細書で使用するとき、本明細書で開示するＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤は、薬学的に許容されるその誘導体またはプロドラッグを包含すると定義される。「薬学的に許容される誘導体」とは、受容個体に投与されると、本明細書で開示する化合物またはその活性代謝産物もしくは残基を（直接または間接的に）提供することのできる、本明細書で開示する化合物もしくは薬剤の薬学的に許容されるいずれかの塩、溶媒和物、またはプロドラッグ、たとえば、カルバメート、エステル、リン酸エステル、エステルの塩、または他の誘導体を意味する。特に好まれる誘導体およびプロドラッグは、こうした化合物が哺乳動物に投与されるとき、本明細書で開示する化合物の生物学的利用能を（たとえば、経口投与された化合物の血中へのより容易な吸収を可能にすることにより）向上させる、または生物学的な区画（たとえば、脳またはリンパ系）への親化合物の送達を、親化学種に比べて強化するものである。好ましいプロドラッグとしては、本明細書に記載する式の構造に、水への溶解性または腸膜を介した活発な輸送を増強する基が添えられている誘導体が挙げられる。そのような誘導体は、当業者には、必要以上の実験なしで確認可能である。それでもなお、Burger’s Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5th Edition, Vol. 1: Principles and Practiceの教示を参考文献として引用し、この文献は、そのような誘導体について教示する程度に、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１８２】
本明細書で開示するＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤には、純粋な鏡像異性体、鏡像異性体の混合物、純粋なジアステレオ異性体、ジアステレオ異性体の混合物、ジアステレオ異性体のラセミ体、ジアステレオ異性体のラセミ体の混合物、およびメソ形、ならびに薬学的に許容されるその塩、溶媒錯体、形態型（morphological form）、または重水素化誘導体が含まれる。
【０１８３】
特に、本明細書で開示するＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤の薬学的に許容される塩には、たとえば、薬学的に許容される無機および有機の酸および塩基から導かれるものが含まれる。適切な酸の塩の例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、半硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、パルモ酸塩（palmoate）、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、トリフルオロメチルスルホン酸塩、およびウンデカン酸塩が挙げられる。適切な塩基から導かれる塩としては、たとえば、アルカリ金属（たとえば、ナトリウム）、アルカリ土類金属（たとえば、マグネシウム）、アンモニウム、およびＮ−（アルキル）４＋塩が挙げられる。本発明は、本明細書で開示するＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤のいずれかの塩基性含窒素基の四級化も構想する。そのような四級化によって、水または油に可溶性または分散性の製品を得ることができる。
【０１８４】
一部の態様では、本明細書で開示する医薬組成物は、１種または複数のＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤の有効量を含む場合がある。本明細書で使用する用語「有効量」および「治療に有効」とは、（急性または慢性投与および周期的または継続的な投与を含めて）一定期間利用される本明細書に記載の１種または複数の化合物または医薬組成物の、その投与状況の範囲内で目的の効果または生理的アウトカム（たとえば、細胞成長、細胞増殖、またはがんの治療または予防）を引き起こすのに有効である量または濃度を指す。一部の態様では、医薬組成物は、がん治療に使用される１種または複数の追加化合物、薬物、または薬剤（たとえば、従来の化学療法剤）を、目的の効果または生理的アウトカム（たとえば、細胞成長、細胞増殖、またはがんの治療または予防）を引き起こすのに有効な量でさらに含む場合がある。
【０１８５】
一部の態様では、本明細書で開示する医薬組成物は、米国における販売、米国への輸入、または米国からの輸出用に製剤される場合がある。
【０１８６】
医薬組成物の投与
本明細書で開示する医薬組成物は、いずれかの経路、たとえば、食品医薬局（ＦＤＡ）によって承認されているいずれかの経路による対象への投与向けに製剤し、またはそれに適合させることができる。例示的な方法は、ＦＤＡ  Ｄａｔａ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  Ｍａｎｕａｌ（ＤＳＭ）（http://www.fda.gov/Drugs/DevelopmentApprovalProcess/FormsSubmissionRequirements/ElectronicSubmissions/DataStandardsManualmonographsにおいて入手可能）に記載されている。
特に、医薬組成物は、経口、非経口、または経皮送達用に製剤され、その送達によって投与される場合がある。本明細書で使用する用語「非経口」は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、腹腔内、関節内、動脈内、滑液包内、胸骨内、くも膜下腔内、病巣内、および頭蓋内注射または注入技術を包含する。
【０１８７】
たとえば、本明細書で開示する医薬組成物は、たとえば、局所、直腸、経鼻（たとえば、吸入スプレーまたはネブライザーによる）、頬側、経膣、真皮下（たとえば、注射または埋め込み式リザーバーによる）、または眼内投与される場合がある。
【０１８８】
たとえば、本発明の医薬組成物は、限定はしないが、カプセル剤、錠剤、乳剤、ならびに水性懸濁剤、分散剤、および溶液剤を含めた、経口的に許容されるいずれかの剤形として経口投与される場合がある。経口用途向けの錠剤の場合では、一般的に使用される担体として、ラクトースおよびトウモロコシデンプンが挙げられる。ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤も、通常は加えられる。カプセル形態での経口投与については、有用な希釈剤として、ラクトースおよび乾燥トウモロコシデンプンが挙げられる。水性懸濁剤または乳剤が経口投与されるとき、活性成分は、乳化剤または懸濁化剤と組み合わされた油相に懸濁または溶解させることができる。所望なら、ある特定の甘味剤、香味剤、または着色剤を加えてもよい。
【０１８９】
たとえば、本発明の医薬組成物は、直腸投与用の坐剤の形で投与される場合がある。こうした組成物は、本発明の化合物を、室温では固体であるが直腸温度では液体であり、したがって、直腸において融解して活性成分を放出する、非刺激性の適切な賦形剤と混合することにより調製することができる。そのような材料としては、限定はしないが、カカオ脂、蜜ろう、およびポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１９０】
たとえば、本発明の医薬組成物は、経鼻エアゾールまたは吸入によって投与される場合がある。このような組成物は、医薬製剤の業界で周知である技術に従って調製され、ベンジルアルコールまたは他の適切な保存剤、生物学的利用能を向上させるための吸収促進剤、過フッ化炭化水素または当業界で公知である他の可溶化もしくは分散化剤を用いて、食塩水溶液として調製することができる。
【０１９１】
たとえば、本発明の医薬組成物は、注射によって（たとえば、溶液または粉末として）投与される場合がある。このような組成物は、適切な分散化または湿潤剤（たとえば、Ｔｗｅｅｎ８０など）および懸濁化剤を使用して、当業界で公知である技術に従って製剤することができる。滅菌注射用調製物は、たとえば、１，３−ブタンジオール中溶液としての、非経口的に許容される非毒性希釈剤または溶媒中の滅菌注射用溶液または懸濁液でもよい。許容されるビヒクルおよび溶媒の中でも、マンニトール、水、リンゲル液、および等張性塩化ナトリウム溶液を用いることができる。加えて、滅菌固定油も、溶媒または懸濁媒として従来用いられている。この目的では、合成モノまたはジグリセリドを始めとして、無刺激性のいずれの固定油を用いてもよい。オレイン酸などの脂肪酸およびそのグリセリド誘導体は、薬学的に許容される自然の油、たとえば、オリーブ油またはヒマシ油、特にそれらのポリオキシエチル化されたものと同様に、注射剤の調製において有用である。こうした油溶液または懸濁液は、長鎖アルコール希釈剤もしくは分散化剤、または乳剤や懸濁剤などの薬学的に許容される剤形の製剤において一般的に使用されるカルボキシメチルセルロースもしくは同様の分散化剤も含有する場合がある。Ｔｗｅｅｎ、Ｓｐａｎ、もしくは他の同様の乳化剤などの一般的に使用される他の界面活性剤、または薬学的に許容される固体、液体、もしくは他の剤形の製造において一般的に使用される生物学的利用能向上剤も、製剤の目的で使用される場合がある。
【０１９２】
一部の態様では、本発明の医薬組成物の有効な用量には、限定はしないが、約０．００００１、０．０００１、０．００１、０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．１５、０．２、０．２５、０．３、０．３５、０．４、０．４５、０．５、０．５５、０．６、０．６５、０．７、０．７５、０．８、０．８５、０．９、０．９５、１、１．２５、１．５、１．７５、２、２．５、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、２５００、５０００、もしくは１００００ｍｇ／ｋｇ／日を含めることができ、または特定の医薬組成物の要件に従う。
【０１９３】
本明細書で開示する医薬組成物が、本明細書に記載する式の化合物（たとえば、ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤）と１種または複数の追加化合物（たとえば、がん、またはがんと関連するもしくはがんによって引き起こされることがわかっている状態もしくは疾患を含めた他のいずれかの状態もしくは疾患の治療に使用される１種または複数の追加化合物、薬物、または薬剤）の組合せを含むとき、化合物と追加化合物は両方とも、単剤療法レジメンにおいて普通に投与される投与量の約１％〜１００％の間、より好ましくは、約５％〜９５％の間の投与量レベルで存在すべきである。追加の薬剤は、多回用量レジメンの一部として、本発明の化合物とは別々に投与される場合がある。別法として、こうした薬剤は、単一組成物中に本発明の化合物と混ぜ合わされた、単一剤形の一部になる場合もある。
【０１９４】
一部の態様では、本明細書で開示する医薬組成物は、投与についての説明書を添えて、容器、パック、または分注器に収められる場合がある。
【０１９５】
治療方法
本明細書で開示する方法は、有効量の化合物または組成物を投与して、所望または規定の効果を実現することを企図している。通常、本発明の化合物または組成物は、１日約１〜約６回、または別法としてもしくは加えて、持続注入として投与される。このような投与は、慢性または急性療法として使用することができる。単一剤形を製造するために担体材料と合わせることのできる活性成分の量は、治療を受けるホストおよび特定の投与方式に応じて様々となる。典型的な調製物は、約５％〜約９５％の活性化合物（ｗ／ｗ）を含有する。別法として、そのような調製物は、約２０％〜約８０％の活性化合物を含有する場合もある。
【０１９６】
一部の態様では、本開示は、本明細書で開示する医薬組成物（以下で「Ｘ」として示す）を始めとするＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤を含む組成物を以下の方法において使用する方法を提供する。
本明細書で開示する１種または複数の疾患または状態（たとえば、以下の例において「Ｙ」と呼ぶ、がん）の治療において医薬として使用するための物質Ｘ。Ｙを治療する医薬を製造するための物質Ｘの使用、Ｙの治療において使用するための物質Ｘ。
【０１９７】
一部の態様では、開示する方法は、本明細書に記載の化合物または組成物の１種または複数を、そのような治療を必要としている、またはそれが必要であると判断されている対象（たとえば、哺乳動物対象、たとえば、ヒト対象）に治療有効量投与することを含む。一部の態様では、開示する方法は、対象を選択することと、対象に、本明細書に記載の化合物または組成物の１種または複数を有効量投与することと、任意選択で、がんの予防および治療に必要なだけ投与を繰り返すこととを含む。
【０１９８】
一部の態様では、対象の選択は、対象（たとえば、候補対象）からサンプルを取得し、対象が選択に適切となる指標についてサンプルを試験することを含む場合がある。一部の態様では、対象は、たとえば、健康管理の専門家によって、状態または疾患を有したことがあるまたは有していることを、確認または同定される場合がある。一部の態様では、適切な対象として、たとえば、状態もしくは疾患を有しているまたは有したことがあるが、疾患もしくはその一側面を解決している、（たとえば、同じ状態または疾患を有する他の対象（たとえば、対象の大半）に比べて）疾患の症状の軽減を示す、または状態もしくは疾患を抱えたまま、たとえば、（たとえば、同じ状態もしくは疾患を有する他の対象（たとえば、対象の大半）に比べて）無症候の状態で、（たとえば、同じ状態もしくは疾患を有する他の対象（たとえば、対象の大半）に比べて）長期間生存する対象が挙げられる。一部の態様では、状態または疾患に対する肯定的な免疫応答は、患者記録、家族歴、または肯定的な免疫応答の指標の検出から示される場合がある。一部の態様では、複数の関係者が対象選択に含められる場合がある。たとえば、第１の関係者が、候補対象からサンプルを取得する場合があり、第２の関係者が、サンプルを試験する場合がある。一部の態様では、対象は、医療従業者（たとえば、一般医）によって選択または付託される場合がある。一部の態様では、対象選択は、選択された対象からサンプルを取得し、サンプルを貯蔵する、または本明細書に記載の方法において使用することを含む場合がある。サンプルには、たとえば、細胞または細胞集団が含まれる場合がある。
【０１９９】
一部の態様では、治療方法には、対象が罹患している疾患または状態（たとえば、ＣＤＫ４／６媒介性がん、たとえば、ＥＲ＋乳がん）の予防または治療に必要となるような、本明細書で開示する１種または複数の化合物の単回投与、複数回投与、および反復投与が含まれる場合がある。一部の態様では、治療方法は、治療より前、治療中、または治療後に、対象において疾患のレベルを評価することを含む場合がある。一部の態様では、治療は、対象における疾患のレベルの低下が検出されるまで続く場合がある。
【０２００】
本明細書で使用する用語「対象」とは、いずれかの動物を指す。一部の例では、対象は、哺乳動物である。一部の例では、本明細書で使用する用語「対象」は、ヒト（たとえば、男性、女性、または子供）を指す。
【０２０１】
本明細書で使用する用語「投与する」、「投与すること」、または「投与」とは、形態にかかわらず、化合物または組成物を、埋め込む、摂取する、注射する、吸入する、または別な形で吸収することを指す。たとえば、本明細書で開示する方法は、有効量の化合物または組成物を投与して、所望または規定の効果を実現することを含む。
【０２０２】
本明細書で使用する用語「治療する」、「治療すること」、または「治療」とは、対象が罹患している疾患または状態を部分的または完全に緩和し、抑制し、改善し、または軽減することを指す。これは、疾患または障害（たとえば、がん）の症状の１つまたは複数が改善される、または別な形で有益に変更されるいずれかの手段を意味する。本明細書で使用するとき、特定の障害（たとえば、がん）の症状の改善とは、永久的であろうと一時的であろうと、永続性であろうと一過性であろうと、本発明の組成物および方法による治療に起因し、またはそれと関連しうるいずれかの減少を指す。一部の実施形態では、治療によって、たとえば、（たとえば、対象における）腫瘍細胞の数の、治療前の腫瘍細胞の数と比べての減少、（たとえば、対象における）腫瘍細胞の生存度（たとえば、平均／中間生存度）の、治療前の腫瘍細胞の生存度と比べての低下、腫瘍細胞の成長速度の低減、局所または遠隔腫瘍転移の速度の低減、あるいは対象における１種または複数の腫瘍と関連する１つまたは複数の症状の、治療前の対象の症状と比べての減少が促進され、または結果としてもたらされうる。
【０２０３】
本明細書で使用するとき、用語「がんを治療」とは、腫瘍の成長速度、および／もしくは腫瘍のサイズ、および／もしくは局所もしくは遠隔腫瘍転移の速度、および／もしくは対象における全体としての腫瘍負荷の部分的もしくは完全な低減、および／または本明細書に記載の分解剤／破壊剤（たとえば、ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤）の存在下での腫瘍生存度のいずれかの低下を引き起こすことを意味する。
【０２０４】
本明細書で使用する用語「予防する」、「予防すること」、および「予防」とは、対象において、疾患の発生を減少させる、または疾患もしくはその関連する症状を患うリスクを低減することを指すものとする。予防は、完璧、たとえば、対象における疾患または病的細胞が完全に存在しない場合もある。予防は、対象における疾患または病的細胞の出現が、本発明なしで起こるより少ない、より遅くに起こる、またはより緩徐に進展するような部分的なものでもよい。
【０２０５】
ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤で治療することのできる、例示的なＣＤＫ４／６媒介性がんとしては、たとえば、固形腫瘍（たとえば、乳がん（たとえば、ＥＲ＋乳がん）および前立腺がん）、白血病（たとえば、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、ヘアリー細胞白血病、および骨髄性白血病）、リンパ腫（たとえば、バーキットリンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、および非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ））、副腎皮質がん、ＡＩＤＳ関連がん、肛門がん、星状細胞腫、基底細胞癌、皮膚がん（非黒色腫）、胆管がん、膀胱がん、骨がん（たとえば、線維肉腫／骨肉腫／悪性線維性組織球腫）、脳腫瘍（たとえば、大脳星状細胞腫、上衣腫、神経膠腫、髄芽細胞腫、およびテント上原始神経外胚葉性腫瘍（ＰＮＥＴ））、脳幹神経膠腫、気管支腺腫／カルチノイド、カルチノイド腫瘍、中枢神経系新生物、子宮頸がん、胆管癌、慢性骨髄増殖性障害、結腸がん、子宮内膜がん、食道がん、黒色腫（たとえば、皮膚または眼内）、胆嚢がん、胃腸がん（たとえば、結腸直腸、十二指腸、および胃がん）、胚細胞腫瘍、頭頸部がん、肝細胞（肝臓）がん、下咽頭がん、膵島細胞癌、カポジ肉腫、腎臓（腎細胞）がん、喉頭がん、口唇および口腔がん、肺がん（小細胞および非小細胞）、メルケル細胞癌、中皮腫、内分泌がん（たとえば、多発性内分泌腫瘍症候群）、多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍  菌状息肉腫、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性障害、鼻腔および副鼻腔がん、上咽頭がん、神経芽細胞腫、中咽頭がん、卵巣がん、膵臓がん、副甲状腺がん、陰茎がん、下垂体がん、胸膜肺芽細胞腫、直腸がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺がん、ユーイング肉腫、軟部組織肉腫、セザリー症候群、扁平上皮癌、扁平上皮性頚部がん、滑膜肉腫、精巣がん、胸腺腫、胸腺癌、甲状腺がん、移行上皮がん、絨毛性腫瘍、尿道がん、子宮がん、卵管がん、腟がん、視覚路および視床下部神経膠腫、外陰がん、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、およびウィルムス腫瘍が挙げられる。
【０２０６】
本明細書で使用するとき、対象において「疾患を予防する」（たとえば、がんを予防する）という用語は、たとえば、対象における疾患の１つまたは複数の症状の発症を、それが出現する、またはたとえば患者もしくは患者の医師によって検出可能になる前に阻止することを意味する。疾患（たとえば、がん）は、全く発症しない、すなわち、検出可能な疾患の症状がないことが好ましい。しかし、疾患の１つまたは複数の症状の発症を遅らせるまたは緩徐にする結果となる場合もある。別法として、または加えて、その後発症する１つまたは複数の症状の重症度が軽減される結果となる場合もある。
【０２０７】
特定のいずれかの患者のための詳細な投与量および治療レジメンは、用いる特定の化合物の活性、年齢、体重、全般的な健康状態、性別、食事、投与時間、排泄速度、薬物の組合せ、疾患、状態、または症状の重症度および経過、疾患、状態、または症状に対する患者の素因、ならびに治療する医師の判断を始めとする、様々な要素に応じて決まる。
【０２０８】
有効量は、１回または複数の投与、適用、または投与量で投与される場合がある。治療用化合物の治療有効量（すなわち、有効投与量）は、選択される治療用化合物次第である。さらに、治療有効量の本明細書に記載の化合物または組成物による対象の治療には、１回の治療または一連の治療が含まれる場合がある。たとえば、有効量は、少なくとも１回投与される場合がある。組成物は、１日おきを含めて、１日１または複数回から、１週間に１または複数回投与される場合がある。限定はしないが、疾患または障害の重症度、以前の治療、対象の全般的な健康または年齢、および存在する他の疾患を含めて、ある特定の要素が、対象を有効に治療するのに必要となる投与量および時機に影響する場合があることは、当業者の察するところとなる。
【０２０９】
投与後、対象は、その疾患のレベルを検出、査定、または判定するための評価を受ける場合がある。一部の例では、治療は、対象における疾患のレベルの変化（たとえば、低下）が検出されるまで続く場合がある。患者の状態が改善（たとえば、対象における疾患レベルが変化（たとえば、低下））すると、必要に応じて、本明細書で開示する化合物または組成物の維持量が投与される場合がある。その後、投与量もしくは投与頻度または両方を、たとえば、症状に応じて、症状の改善が維持されるレベルに減らすことができる。しかし、疾患症状が再発すれば、患者には、長期的に、断続的な治療が必要となる場合もある。
【実施例】
【０２１０】
実施例１
ＶＨＬ−１アルキルリンカーの合成手順
【０２１１】
【化３０】
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二酸（１０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ／ＴＨＦ（１：１、２００ｍｌ）溶液に、０℃で、ＶＨＬ−１（２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１ｍｌ、７．１ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（３００ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（４２０ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を順次加えた。得られる溶液を０℃で２時間撹拌した後、室温（ＲＴ）に温めた。室温で終夜撹拌した後、反応液を水で失活させた。減圧下で濃縮した後、得られる残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物を得た。
【０２１２】
【化３１】
2020514252.tif 000100
リンカー１：白色固体としての４−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−４−オキソブタン酸（８１０ｍｇ、８５％）。1H NMR (600 MHz CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.64 (s, 1H), 4.60-4.49 (m, 3H), 4.39 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.91 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 9.6, 3.6 Hz, 1H), 2.67 - 2.55 (m, 4H), 2.52 (s, 3H), 2.25 - 2.22 (m, 1H), 2.12 - 2.07 (m, 1H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２６Ｈ３５Ｎ４Ｏ６Ｓについての計算値５３１．２２７２、実測値５３１．２２８０。
【０２１３】
【化３２】
2020514252.tif 000101
リンカー２：白色固体としての５−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタン酸（２３０ｍｇ、４３％）。1H NMR (600 MHz CD3OD) δ 9.14 (s, 1H), 7.51 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.65 (s, 1H), 4.60 - 4.57 (m, 1H), 4.56 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.53 - 4.50 (m, 1H), 4.38 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.94 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 11.4, 3.6 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.40 - 2.30 (m, 4H), 2.26 - 2.22 (m, 1H), 2.12-2.08 (m, 1H), 1.91 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２７Ｈ３７Ｎ４Ｏ６Ｓについての計算値５４５．２４２８、実測値５４５．２４３２。
【０２１４】
【化３３】
2020514252.tif 000102
リンカー３：白色固体としての６−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−６−オキソヘキサン酸（７００ｍｇ、６３％）。1H NMR (600 MHz CD3OD) δ 9.12 (s, 1H), 7.51 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.65 (s, 1H), 4.60 - 4.55 (m, 2H), 4.53 - 4.50 (m, 1H), 4.38 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 11.4, 3.6 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.38 - 2.21 (m, 5H), 2.12-2.08 (m, 1H), 1.71-1.62 (m, 4H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２８Ｈ３９Ｎ４Ｏ６Ｓについての計算値５５９．２５８５、実測値５５９．２６０５。
【０２１５】
【化３４】
2020514252.tif 000103
リンカー４：白色固体としての７−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−７−オキソヘプタン酸（８１０ｍｇ、７９％）。1H NMR (600 MHz CD3OD) δ 8.98 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 4.65 (s, 1H), 4.60 - 4.49 (m, 3H), 4.38 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 11.4, 3.6 Hz, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.35 - 2.22 (m, 5H), 2.13 - 2.08 (m, 1H), 1.68 - 1.59 (m, 4H),1.42 - 1.34 (m, 2H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２９Ｈ４１Ｎ４Ｏ６Ｓについての計算値５７３．２７４１、実測値５７３．２７５４。
【０２１６】
【化３５】
2020514252.tif 000104
リンカー５：白色固体としての８−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−８−オキソオクタン酸（９８０ｍｇ、７８％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.94 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 4.63 (s, 1H), 4.59 - 4.47 (m, 3H), 4.35 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 10.9, 3.9 Hz, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.32 - 2.17 (m, 5H), 2.08 (ddd, J = 13.3, 9.1, 4.5 Hz, 1H), 1.67 - 1.55 (m, 4H), 1.40 - 1.28 (m, 4H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３０Ｈ４３Ｎ４Ｏ６Ｓについての計算値５８７．２８９８、実測値：５８７．２９０３。
【０２１７】
【化３６】
2020514252.tif 000105
リンカー６：白色固体としての９−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−９−オキソノナン酸（７５０ｍｇ、６６％）。1H NMR (600 MHz CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 7.51 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.66 (s, 1H), 4.61 - 4.50 (m, 3H), 4.38 (d, J = 15.6 Hz,1 1H), 3.93 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 11.4, 3.6 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.36 - 2.22 (m, 5H), 2.12 - 2.07 (m, 1H), 1.68 - 1.59 (m, 4H),1.40 - 1.34 (m, 8H), 1.06 (s, 9H);ＨＰＬＣ９８％；ｔＲ＝４．２４分；ＨＲＭＳ（ＴＯＦ）  Ｃ３１Ｈ４５Ｎ４Ｏ６Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋についての計算値、６０１．３０５４、実測値６０１．３０６４。
【０２１８】
【化３７】
2020514252.tif 000106
リンカー７：白色固体としての１０−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−１０−オキソデカン酸（９００ｍｇ、７３％）。1H NMR (600 MHz CD3OD) δ 8.98 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.45 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 4.66 (s, 1H), 4.61 - 4.50 (m, 3H), 4.38 (d, J = 14.4 Hz,1 1H), 3.93 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.83 (dd, J = 11.4, 3.6 Hz, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.35 - 2.22 (m, 5H), 2.13 - 2.08 (m, 1H), 1.66 - 1.58 (m, 4H),1.38 - 1.32 (m, 10H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＴＯＦ）  Ｃ３２Ｈ４７Ｎ４Ｏ６Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋についての計算値、６１５．３２１１、実測値６１５．３２２４。
【０２１９】
【化３８】
2020514252.tif 000107
リンカー８：白色固体としての１１−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−１１−オキソウンデカン酸（９３０ｍｇ、７８％）。1H NMR (600 MHz CD3OD) δ 8.95 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 4.66 (s, 1H), 4.61 - 4.50 (m, 3H), 4.38 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 11.4, 3.6 Hz, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.35 - 2.21 (m, 5H), 2.12 - 2.07 (m, 1H), 1.66 - 1.57 (m, 4H),1.37 - 1.29 (m, 12H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）  Ｃ３３Ｈ４９Ｎ４Ｏ６Ｓについての計算値、６２９．３３６７、実測値６２９．３３６８。
【０２２０】
実施例２
ＶＨＬ−１  ＰＥＧリンカーの合成手順
【０２２１】
【化３９】
2020514252.tif 000108
二酸（４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍｌ）およびＤＣＭ（２５０ｍｌ）溶液に、０℃で、ＮＭＭ（１０ｍｍｏｌ）、ＶＨＬ−１（２ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（２．４ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（２．４ｍｍｏｌ）を加えた。得られる反応溶液を、０℃で６時間、次いで室温で終夜撹拌した。反応の進行をＬＣ／ＭＳによってモニターした。ＶＨＬ−１が完全に消費された後、反応液を濃縮し、得られる残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、生成物を得た。
【０２２２】
【化４０】
2020514252.tif 000109
リンカー９：白色固体としての２−（２−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−２−オキソエトキシ）酢酸（８１０ｍｇ、６９％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.97 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 4.69 (s, 1H), 4.60 - 4.47 (m, 3H), 4.36 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 4.27 - 4.17 (m, 2H), 4.16 - 4.07 (m, 2H), 3.89 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.81 (dd, J = 11.0, 3.8 Hz, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.22 (dd, J = 13.1, 7.6 Hz, 1H), 2.08 (ddd, J = 13.3, 9.2, 4.5 Hz, 1H), 1.05 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２６Ｈ３５Ｎ４Ｏ７Ｓについての計算値、５４７．２２２１、実測値：５４７．２２３０。
【０２２３】
【化４１】
2020514252.tif 000110
リンカー１０：白色固体としての３−（３−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−３−オキソプロポキシ）プロパン酸（４５０ｍｇ、６３％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.00 (s, 1H), 7.45 (d, J = 22.1 Hz, 4H), 4.64 (s, 1H), 4.61 - 4.44 (m, 3H), 4.36 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 3.84 (dd, J = 57.3, 10.5 Hz, 2H), 3.75 - 3.56 (m, 4H), 2.60 - 2.39 (m, 7H), 2.24 - 2.17 (m, 1H), 2.11 - 2.03 (m, 1H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２８Ｈ３９Ｎ４Ｏ７Ｓについての計算値、５７５．２５３４、実測値：５７５．２５４３。
【０２２４】
【化４２】
2020514252.tif 000111
リンカー１１：白色固体としての２−（２−（２−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−２−オキソエトキシ）エトキシ）酢酸（６８０ｍｇ、５４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.05 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 4.69 (s, 1H), 4.56 (dd, J = 18.6, 12.1 Hz, 2H), 4.50 (s, 1H), 4.36 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 4.21 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 4.13 (d, J = 16.9 Hz, 1H), 4.08 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.04 (d, J = 15.7 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.83 - 3.69 (m, 5H), 2.49 (s, 3H), 2.25 - 2.19 (m, 1H), 2.08 (ddd, J = 13.3, 9.2, 4.4 Hz, 1H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２８Ｈ３９Ｎ４Ｏ８Ｓについての計算値、５９１．２４８３、実測値：５９１．２４７７。
【０２２５】
【化４３】
2020514252.tif 000112
リンカー１２：白色固体としての３−（２−（３−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−３−オキソプロポキシ）エトキシ）プロパン酸（６８０ｍｇ、６４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.98 (d, J = 20.1 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 4.64 (s, 1H), 4.59 - 4.51 (m, 2H), 4.49 (s, 1H), 4.35 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 10.9, 3.8 Hz, 1H), 3.76 - 3.67 (m, 4H), 3.63 - 3.55 (m, 4H), 2.60 - 2.43 (m, 7H), 2.21 (dd, J = 13.1, 7.6 Hz, 1H), 2.08 (ddd, J = 13.2, 9.1, 4.5 Hz, 1H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３０Ｈ４３Ｎ４Ｏ８Ｓについての計算値６１９．２７９６、実測値：６１９．２８００。
【０２２６】
【化４４】
2020514252.tif 000113
リンカー１３：白色固体としての（Ｓ）−１３−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−カルボニル）−１４，１４−ジメチル−１１−オキソ−３，６，９−トリオキサ−１２−アザペンタデカン酸（８８０ｍｇ、５４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.05 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 4.69 (s, 1H), 4.60 - 4.51 (m, 2H), 4.50 (s, 1H), 4.36 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 4.10 (s, 1H), 4.07 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.03 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 11.0, 3.8 Hz, 1H), 3.76 - 3.64 (m, 9H), 2.50 (s, 3H), 2.22 (dd, J = 13.1, 7.6 Hz, 1H), 2.08 (ddd, J = 13.3, 9.2, 4.4 Hz, 1H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３０Ｈ４３Ｎ４Ｏ９Ｓについての計算値、６３５．２７４５、実測値：６３５．２７５１。
【０２２７】
【化４５】
2020514252.tif 000114
リンカー１４：白色固体としての（Ｓ）−１５−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−カルボニル）−１６，１６−ジメチル−１３−オキソ−４，７，１０−トリオキサ−１４−アザヘプタデカン酸（６７７ｍｇ、５７％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.95 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 4.65 (s, 1H), 4.59 - 4.51 (m, 2H), 4.49 (s, 1H), 4.35 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 10.9, 3.9 Hz, 1H), 3.76 - 3.67 (m, 4H), 3.66 - 3.54 (m, 8H), 2.60 - 2.50 (m, 3H), 2.50 - 2.43 (m, 4H), 2.21 (dd, J = 13.1, 7.6 Hz, 1H), 2.08 (ddd, J = 13.3, 9.1, 4.5 Hz, 1H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３２Ｈ４７Ｎ４Ｏ９Ｓについての計算値、６６３．３０５８、実測値：６６３．３０５９。
【０２２８】
【化４６】
2020514252.tif 000115
リンカー１５：白色固体としての（Ｓ）−１８−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−カルボニル）−１９，１９−ジメチル−１６−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１７−アザイコサン酸（５９０ｍｇ、６５％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 4.65 (s, 1H), 4.59 - 4.51 (m, 2H), 4.49 (s, 1H), 4.35 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 10.9, 3.8 Hz, 1H), 3.77 - 3.67 (m, 4H), 3.67 - 3.54 (m, 12H), 2.61 - 2.43 (m, 7H), 2.21 (dd, J = 13.0, 7.6 Hz, 1H), 2.08 (ddd, J = 13.2, 9.1, 4.4 Hz, 1H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３４Ｈ５１Ｎ４Ｏ１０Ｓについての計算値、７０７．３３２０、実測値：７０７．３３２１。
【０２２９】
【化４７】
2020514252.tif 000116
リンカー１６：白色固体としての（Ｓ）−１９−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−カルボニル）−２０，２０−ジメチル−１７−オキソ−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサ−１８−アザヘンイコサン酸（４９６ｍｇ、５４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.89 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 4.69 (s, 1H), 4.59 - 4.46 (m, 3H), 4.36 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 4.16 - 4.00 (m, 4H), 3.87 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 11.0, 3.7 Hz, 1H), 3.76 - 3.53 (m, 16H), 2.48 (s, 3H), 2.22 (dd, J = 13.1, 7.6 Hz, 1H), 2.08 (ddd, J = 13.3, 9.2, 4.4 Hz, 1H), 1.04 (s, 7H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３４Ｈ５１Ｎ４Ｏ１１Ｓについての計算値、７２３．３２７０、実測値：７２３．３２６９。
【０２３０】
【化４８】
2020514252.tif 000117
リンカー１７：白色固体としての（Ｓ）−２１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−カルボニル）−２２，２２−ジメチル−１９−オキソ−４，７，１０，１３，１６−ペンタオキサ−２０−アザトリコサン酸（４２０ｍｇ、４２％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.89 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 4.65 (s, 1H), 4.59 - 4.51 (m, 2H), 4.49 (s, 1H), 4.35 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 10.9, 3.8 Hz, 1H), 3.77 - 3.67 (m, 4H), 3.67 - 3.51 (m, 16H), 2.61 - 2.42 (m, 7H), 2.24 - 2.18 (m, 1H), 2.08 (ddd, J = 13.2, 9.1, 4.4 Hz, 1H), 1.02 (d, J = 14.3 Hz, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３６Ｈ５５Ｎ４Ｏ１１Ｓについての計算値、７５１．３５８３、実測値：７５１．３５８９。
【０２３１】
実施例３
ポマリドミドリンカーの合成手順
【０２３２】
【化４９】
2020514252.tif 000118
ポマリドミド類似体（１当量）、アミン（１当量）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．５当量）のＤＭＦ（ポマリドミド１ｍｍｏｌあたり２．０ｍｌ）溶液を、マイクロ波反応器において８５℃に４０分間加熱した。室温に冷却した後、反応液を水で失活させ、酢酸エチルで抽出した（３回）。合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られる残渣を、（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ：０〜１００％を溶離液とする）シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、所望のｔ−Ｂｕエステル中間体を油状物として得た。この中間体を、塩化水素のジオキサン溶液（４Ｍ、ポマリドミド１ｍｍｏｌあたり５ｍｌ）で終夜処理した。減圧下で濃縮した後、所望の酸生成物を黄色の油状物として得た。
【０２３３】
【化５０】
2020514252.tif 000119
リンカー１８：３−（２−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）エトキシ）プロパン酸。上記手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−アミノエトキシ）プロパノエート（１．０ｇ、５．３ｍｍｏｌ）を使用して、表題化合物（５００ｍｇ、２４％）を調製した。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 7.54 (dd, J = 8.3, 7.0, 1.2 Hz, 1H), 7.09 (d, 1H), 7.04 (d, J = 7.0, 1.1 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 12.5, 5.4, 1.2 Hz, 1H), 3.75 (t, J = 6.2, 1.2 Hz, 2H), 3.65-3.69 (m, 2H), 3.45-3.49 (m, 2H), 2.88 - 2.82 (m, 1H), 2.76 - 2.70 (m, 2H), 2.56 (t, J = 6.2, 1.2 Hz, 2H), 2.10 (ddt, J = 14.9, 7.6, 3.7, 1.6 Hz, 1H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３９０．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３４】
【化５１】
2020514252.tif 000120
リンカー１９：３−（２−（２−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−プロパン酸。上記手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）プロパノエート（０．７０ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を使用して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（２−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）−エトキシ）エトキシ）プロパノエート（５７５ｍｇ、３９％）を調製した。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.13 (s, 1H), 7.53 - 7.45 (m, 1H), 7.10 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.49 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.91 (dd, J = 12.4, 5.3 Hz, 1H), 3.76 - 3.69 (m, 4H), 3.67 - 3.60 (m, 4H), 3.46 (q, J = 5.5 Hz, 2H), 2.89 (dt, J = 16.8, 3.2 Hz, 1H), 2.84 - 2.69 (m, 2H), 2.51 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.16 - 2.08 (m, 1H), 1.44 (s, 9H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４９０．２［Ｍ＋Ｈ］＋。ｔ−Ｂｕエステル中間体をギ酸（１０ｍｌ）に溶解させ、得られる溶液を室温で終夜撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、表題化合物（５１２ｍｇ、１００％）を取得し、これ以上精製せずに次の反応に使用した。
【０２３５】
【化５２】
2020514252.tif 000121
リンカー２０：３−（２−（２−（２−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）プロパン酸。上記手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）プロパノエート（１．０ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を使用して、表題化合物（２４０ｍｇ、１０％）を調製した。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 7.55 (dd, J = 8.4, 7.2 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 12.4, 5.4 Hz, 1H), 3.71 (dt, J = 9.4, 5.7 Hz, 4H), 3.66 - 3.63 (m, 4H), 3.62 (dd, J = 6.0, 3.5 Hz, 2H), 3.58 (dd, J = 6.1, 3.5 Hz, 2H), 3.50 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.86 (ddd, J = 19.1, 14.1, 5.3 Hz, 1H), 2.77 - 2.66 (m, 2H), 2.52 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.11 (ddt, J = 10.3, 5.0 Hz, 1H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４７８．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３６】
【化５３】
2020514252.tif 000122
リンカー２１：１−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−酸。上記一般手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチル１−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−オエート（０．９６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を使用して、ｔ−Ｂｕエステル中間体を調製した。ｔ−Ｂｕエステル中間体をギ酸（１０ｍｌ）に溶解させ、得られる溶液を室温で終夜撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、表題化合物（９５０ｍｇ、６１％）を取得し、これ以上精製せずに次の反応に使用した。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 7.55 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 12.6, 5.3 Hz, 1H), 3.75 - 3.68 (m, 4H), 3.68 - 3.55 (m, 12H), 3.50 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.78 - 2.66 (m, 2H), 2.52 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.14 - 2.07 (m, 1H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ５２２．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３７】
【化５４】
2020514252.tif 000123
リンカー２２：１−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサオクタデカン−１８−酸。上記手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチル１−アミノ−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサオクタデカン−１８−オエート（１．１０ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を使用して、ｔｅｒｔ−ブチル１−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサオクタデカン−１８−オエート（１．３５ｇ、７２％）を調製した。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.32 (s, 1H), 7.48 (dd, J = 8.5, 7.1 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.49 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.91 (dd, J = 12.4, 5.3 Hz, 1H), 3.74 - 3.68 (m, 4H), 3.68 - 3.63 (m, 12H), 3.63 - 3.58 (m, 4H), 3.46 (q, J = 5.6 Hz, 2H), 2.92 - 2.85 (m, 1H), 2.83 - 2.68 (m, 2H), 2.49 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.15 - 2.08 (m, 1H), 1.43 (s, 9H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ６２２．２［Ｍ＋Ｈ］＋。ｔ−Ｂｕエステル中間体をギ酸（１０ｍｌ）に溶解させ、得られる溶液を室温で終夜撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、表題化合物（１．２３ｇ、１００％）を取得し、これ以上精製せずに次の反応に使用した。
【０２３８】
【化５５】
2020514252.tif 000124
リンカー２３：（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）グリシン。上記一般手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチルグリシネート（８３８ｍｇ、５．０ｍｍｏｌ）を使用して、表題化合物（２４０ｍｇ、１４％）を調製した。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 7.57 (dd, J = 8.5, 7.1 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 12.6, 5.5 Hz, 1H), 4.12 (s, 2H), 2.86 (ddd, J = 18.0, 14.4, 5.4 Hz, 1H), 2.74 - 2.67 (m, 2H), 2.15 - 2.08 (m, 1H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３３２．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３９】
【化５６】
2020514252.tif 000125
リンカー２４：３−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）プロパン酸。上記手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノプロパノエートＨＣｌ塩（１．０ｇ、５．９７ｍｍｏｌ）を使用して、表題化合物（７００ｍｇ、４％）を調製した。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 7.57 (dd, J = 8.6, 7.1 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 12.6, 5.5 Hz, 1H), 3.62 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.88 - 2.82 (m, 1H), 2.76 - 2.69 (m, 2H), 2.64 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.13 - 2.07 (m, 1H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３４６．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４０】
【化５７】
2020514252.tif 000126
リンカー２５：４−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）ブタン酸。上記手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチル４−アミノブタノエート（１．０ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を使用して、表題化合物（５５０ｍｇ、２５％）を調製した。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 7.55 (dd, J = 8.6, 7.1 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 12.4, 5.5 Hz, 1H), 3.39 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.85 - 2.82 (m, 1H), 2.76 - 2.69 (m, 2H), 2.42 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.10 (tq, J = 8.0, 3.8 Hz, 1H), 1.94 (dp, J = 14.3, 7.0 Hz, 2H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３６０．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４１】
【化５８】
2020514252.tif 000127
リンカー２６：６−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）ヘキサン酸。上記手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチル６−アミノヘキサノエート（１．０ｇ、４．４７ｍｍｏｌ）を使用して、表題化合物（４６０ｍｇ、２７％）を調製した。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 7.54 (dd, J = 8.6, 7.1 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 7.8, 3.8 Hz, 2H), 5.05 (dd, J = 12.5, 5.4 Hz, 1H), 3.33 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.88 - 2.82 (m, 1H), 2.75 - 2.67 (m, 2H), 2.31 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.10 (tdd, J = 10.1, 5.3, 3.1 Hz, 1H), 1.70 - 1.64 (m, 4H), 1.46 (dddd, J = 13.0, 8.9, 7.1, 4.2 Hz, 2H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３８８．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４２】
【化５９】
2020514252.tif 000128
リンカー２７：７−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）ヘプタン酸。上記手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチル７−アミノヘプタノエート（１．０ｇ、４．９６ｍｍｏｌ）を使用して、表題化合物（５００ｍｇ、２５％）を調製した。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 7.54 (dd, 1H), 7.03 (dd, J = 7.8, 3.7 Hz, 2H), 5.05 (dd, J = 12.5, 5.5 Hz, 1H), 3.30-3.33 (m, 2H), 2.90 - 2.79 (m, 1H), 2.77 - 2.68 (m, 2H), 2.29 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.13 - 2.07 (m, 1H), 1.68 - 1.61 (m, 4H), 1.46 - 1.40 (m, 4H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４０２．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４３】
【化６０】
2020514252.tif 000129
リンカー２８：８−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）オクタン酸。上記手順に従いながら、ｔｅｒｔ−ブチル８−アミノオクタノエート（１．０ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を使用して、表題化合物（６２０ｍｇ、３２％）を調製した。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 7.53 (dd, J = 8.6, 7.0, 1.5 Hz, 1H), 7.08 - 6.93 (m, 2H), 5.05 (dd, J = 12.5, 5.5, 1.5 Hz, 1H), 3.31 (t, 2H), 2.90 - 2.79 (m, 1H), 2.75 - 2.66 (m, 2H), 2.28 (t, J = 7.5, 1.5 Hz, 2H), 2.13 - 2.07 (m, 1H), 1.66 - 1.51 (m, 4H), 1.43 - 1.33 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ４１６．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４４】
実施例４
二価化合物の合成手順
【０２４５】
【化６１】
2020514252.tif 000130
２−（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエトキシ）酢酸（中間体１）。パルボシクリブ（２５ｍｇ、０．０５５９ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１ｍｌ）およびＤＣＭ（１０ｍｌ）溶液に、ＮＭＭ（３４ｍｇ、０．３３５ｍｍｏｌ）、２，２’−オキシ二酢酸（１８ｍｇ、０．１３５ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（２０ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（２８ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。パルボシクリブが消費された後、反応液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物（３０ｍｇ、９６％）を得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.55 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.21 (s, 2H), 3.85 - 3.70 (m, 4H), 3.39 - 3.26 (m, 4H), 2.49 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.35 - 2.25 (m, 2H), 2.13 - 2.04 (m, 2H), 1.95 - 1.85 (m, 2H), 1.74 - 1.64 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２８Ｈ３４Ｎ７Ｏ６についての計算値、５６４．２５６５、実測値：５６４．２５６０。
【０２４６】
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（２−（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエトキシ）アセトアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例１）。中間体１（３０ｍｇ、０．０５５３ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１ｍL）溶液に、ＮＭＭ（２７ｍｇ、０．２６６ｍｍｏｌ）、ＶＨＬ−１（３０ｍｇ、０．０６３９ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１１ｍｇ、０．０７９９ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（１５ｍｇ、０．０７９９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。ＶＨＬ−１が消費された後、反応液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物（３６ｍｇ、６９％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.17 (dd, J = 2.9, 9.6 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.46 - 7.42 (m, 2H), 7.38 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.99 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.62 - 4.30 (m, 6H), 4.17 (d, J = 15.1 Hz, 1H), 4.10 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.85 - 3.74 (m, 3H), 3.72 - 3.62 (m, 2H), 3.37 - 3.25 (m, 4H), 2.49 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 2.35 - 2.21 (m, 3H), 2.14 - 2.04 (m, 3H), 1.94 - 1.85 (m, 2H), 1.75 - 1.63 (m, 2H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５０Ｈ６２Ｎ１１Ｏ８Ｓについての計算値、９７６．４４９８、実測値：９７６．４４９２。
【０２４７】
【化６２】
2020514252.tif 000131
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（３−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロポキシ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例２）。パルボシクリブ（５３ｍｇ、０．１１９ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２ｍｌ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（７６ｍｇ、０．５９４ｍｍｏｌ）、３，３’−オキシジプロピオン酸（２５ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（５７ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌し、その時点で、ＴＢＴＵ（５７ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）およびＶＨＬ−１（５５ｍｇ、０．１１９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。ＶＨＬ−１が消費された後、反応液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物（２２ｍｇ、１８％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.92 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.95 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 5.88 (p, J = 9.1 Hz, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.56 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.49 (s, 1H), 4.45 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.33 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.80-3.70 (m, 9H), 3.15 (dt, J = 5.1, 29.0 Hz, 4H), 2.73 (d, J = 2.7 Hz, 2H), 2.57-2.49 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.34-2.25 (m, 5H), 2.24-2.18 (m, 1H), 2.12-2.03 (m, 1H), 2.03-1.95 (m, 2H), 1.89-1.80 (m, 2H), 1.71-1.61 (m, 2H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５２Ｈ６６Ｎ１１Ｏ８Ｓについての計算値、１００４．４８１１、実測値：１００４．４８１３。
【０２４８】
例３、４、５、６、７、８、９、および１８化合物（以下）は、例２化合物の調製手順（上記）に従って合成した。
【０２４９】
【化６３】
2020514252.tif 000132
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（２−（２−（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエトキシ）エトキシ）アセトアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例３）（９ｍｇ、４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.06 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.16 (dd, J = 2.9, 9.6 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 7.5, 9.5 Hz, 1H), 4.53 - 4.45 (m, 2H), 4.41 - 4.31 (m, 3H), 4.06 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 3.89 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.85 - 3.70 (m, 9H), 3.37 - 3.24 (m, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.34 - 2.23 (m, 3H), 2.14 - 2.05 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.74 - 1.65 (m, 2H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５２Ｈ６６Ｎ１１Ｏ９Ｓについての計算値、１０２０．４７６０、実測値：１０２０．４７６９。
【０２５０】
【化６４】
2020514252.tif 000133
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（３−（２−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロポキシ）エトキシ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例４）（１３ｍｇ、１１％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.20 (dd, J = 3.1, 9.6 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.60 - 4.47 (m, 3H), 4.35 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.82 - 3.75 (m, 7H), 3.74 - 3.67 (m, 2H), 3.65 - 3.57 (m, 5H), 3.33 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.26 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.72 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.56 - 2.51 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.35 - 2.26 (m, 2H), 2.25 - 2.20 (m, 1H), 2.14 - 2.04 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.74 - 1.66 (m, 2H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ７０Ｎ１１Ｏ９Ｓについての計算値、１０４８．５０７３、実測値：１０４８．５０６９。
【０２５１】
【化６５】
2020514252.tif 000134
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−１４−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチル）−４，１４−ジオキソ−６，９，１２−トリオキサ−３−アザテトラデカノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例５）（１５ｍｇ、１７％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.18 (dd, J = 3.0, 9.6 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.60 - 4.48 (m, 3H), 4.39 - 4.26 (m, 3H), 4.09 - 3.96 (m, 2H), 3.88 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.83 - 3.63 (m, 12H), 3.27 (t, J = 5.0 Hz, 4H), 2.49 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.34 - 2.21 (m, 3H), 2.13 - 2.04 (m, 3H), 1.93 - 1.86 (m, 2H), 1.72 - 1.66 (m, 2H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ７０Ｎ１１Ｏ１０Ｓについての計算値、１０６４．５０２２、実測値：１０６４．５０２６。
【０２５２】
【化６６】
2020514252.tif 000135
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−１６−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチル）−４，１６−ジオキソ−７，１０，１３−トリオキサ−３−アザヘキサデカノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例６）（１３ｍｇ、１３％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.20 (dd, J = 3.0, 9.7 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.01 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.58 - 4.47 (m, 3H), 4.35 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.83 - 3.75 (m, 7H), 3.74 - 3.65 (m, 2H), 3.64 - 3.55 (m, 8H), 3.33 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.27 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.71 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.59 - 2.52 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.34 - 2.26 (m, 2H), 2.24 - 2.19 (m, 1H), 2.13 - 2.04 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.74 - 1.65 (m, 2H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５６Ｈ７４Ｎ１１Ｏ１０Ｓについての計算値、１０９２．５３３５、実測値：１０９２．５３３９。
【０２５３】
【化６７】
2020514252.tif 000136
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−１９−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチル）−４，１９−ジオキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−３−アザノナデカノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例７）（１２ｍｇ、１２％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.21 (dd, J = 3.0, 9.5 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.59 - 4.47 (m, 3H), 4.35 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.83 - 3.75 (m, 7H), 3.75 - 3.66 (m, 2H), 3.64 - 3.53 (m, 13H), 3.34 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.28 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.59 - 2.52 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.35 - 2.26 (m, 2H), 2.24 - 2.19 (m, 1H), 2.13 - 2.04 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.64 (m, 2H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５８Ｈ７８Ｎ１１Ｏ１１Ｓについての計算値、１１３６．５５９７、実測値：１１３６．５５９５。
【０２５４】
【化６８】
2020514252.tif 000137
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２０−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチル）−４，２０−ジオキソ−６，９，１２，１５，１８−ペンタオキサ−３−アザイコサノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例８）（６ｍｇ、７％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.20 (dd, J = 3.0, 9.6 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.41 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 8.7 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.59 - 4.48 (m, 3H), 4.36 (d, J = 15.7 Hz, 1H), 4.30 (s, 2H), 4.05 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 4.00 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.83 - 3.72 (m, 5H), 3.72 - 3.58 (m, 16H), 3.36 - 3.25 (m, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.34 - 2.27 (m, 2H), 2.26 - 2.21 (m, 1H), 2.15 - 2.05 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.65 (m, 2H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５８Ｈ７８Ｎ１１Ｏ１２Ｓについての計算値、１１５２．５５４７、実測値：１１５２．５５４８。
【０２５５】
【化６９】
2020514252.tif 000138
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチル）−４，２２−ジオキソ−７，１０，１３，１６，１９−ペンタオキサ−３−アザドコサノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例９）（２５ｍｇ、１９％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 8.21 (dd, J = 3.0, 9.6 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.41 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.60 - 4.46 (m, 3H), 4.35 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.84 - 3.66 (m, 10H), 3.65 - 3.55 (m, 16H), 3.35 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 3.28 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.72 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.61 - 2.53 (m, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.34 - 2.26 (m, 2H), 2.25 - 2.19 (m, 1H), 2.12 - 2.03 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.65 (m, 2H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６０Ｈ８２Ｎ１１Ｏ１２Ｓについての計算値、１１８０．５８６０、実測値：１１８０．５８５９。
【０２５６】
【化７０】
2020514252.tif 000139
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（１１−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−１１−オキソウンデカンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例１８）（１７ｍｇ、１３％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.20 (dd, J = 2.9, 9.6 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.41 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.01 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.59 - 4.46 (m, 3H), 4.35 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.84 - 3.72 (m, 5H), 3.36 - 3.24 (m, 4H), 2.53 - 2.40 (m, 10H), 2.36 - 2.18 (m, 5H), 2.15 - 2.03 (m, 3H), 1.95 - 1.86 (m, 2H), 1.74 - 1.53 (m, 6H), 1.42 - 1.27 (m, 11H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５７Ｈ７６Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１０５８．５６４４、実測値：１０５８．５６４０。
【０２５７】
中間体２、３、および４、ならびに例１０、１１、および１２化合物は、例１化合物の調製手順（上記）に従って合成した。
【０２５８】
【化７１】
2020514252.tif 000140
３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロパン酸（中間体２）（１８ｍｇ、５１％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.09 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.62 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.06 - 5.95 (m, 1H), 3.86 - 3.72 (m, 4H), 3.59 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 3.40 - 3.22 (m, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.37 - 2.27 (m, 2H), 2.14 - 2.03 (m, 2H), 1.95 - 1.85 (m, 2H), 1.75 - 1.66 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２７Ｈ３２Ｎ７Ｏ５についての計算値、５３４．２４５９、実測値：５３４．２４５０。
【０２５９】
【化７２】
2020514252.tif 000141
黄色固体としての６−アセチル−８−シクロペンチル−Ｎ−（５−（４−（３−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−３−オキソプロパノイル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−アミニウム（化合物例１０）（１９ｍｇ、５９％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.20 (dd, J = 3.0, 9.7 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.41 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 9.0 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.59 - 4.43 (m, 4H), 4.37 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.94 - 3.84 (m, 2H), 3.84 - 3.68 (m, 5H), 3.41 - 3.20 (m, 4H), 2.49 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.34 - 2.27 (m, 2H), 2.24 - 2.18 (m, 1H), 2.13 - 2.04 (m, 3H), 1.93 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.66 (m, 2H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４９Ｈ６０Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、９４６．４３９２、実測値：９４６．４３９１。
【０２６０】
【化７３】
2020514252.tif 000142
４−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−４−オキソブタン酸（中間体３）（２７ｍｇ、８８％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 8.17 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.57 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 9.0 Hz, 1H), 3.78 (t, J = 5.8 Hz, 4H), 3.35 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 3.28 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 2.73 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.64 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.36 - 2.27 (m, 2H), 2.13 - 2.04 (m, 2H), 1.95 - 1.86 (m, 2H), 1.75 - 1.64 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２８Ｈ３４Ｎ７Ｏ５についての計算値、５４８．２６１６、実測値：５４８．２６１２。
【０２６１】
【化７４】
2020514252.tif 000143
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（４−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−４−オキソブタンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例１１）（３２ｍｇ、６８％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.20 (dd, J = 3.0, 9.6 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.41 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.58 - 4.54 (m, 1H), 4.52 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 4.50 - 4.47 (m, 1H), 4.36 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.84 - 3.70 (m, 5H), 3.34 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 3.27 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.80 - 2.62 (m, 3H), 2.60 - 2.54 (m, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.35 - 2.26 (m, 2H), 2.24 - 2.19 (m, 1H), 2.13 - 2.05 (m, 3H), 1.93 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.66 (m, 2H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５０Ｈ６２Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、９６０．４５４９、実測値：９６０．４５４５。
【０２６２】
【化７５】
2020514252.tif 000144
５−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−５−オキソペンタン酸（中間体４）（３０ｍｇ、９６％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.14 (s, 1H), 8.21 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.56 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 4.04 (d, J = 13.3 Hz, 2H), 3.77 (t, J = 12.2 Hz, 2H), 3.44 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 3.15 (td, J = 3.4, 12.3 Hz, 2H), 2.53 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.40 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.35 - 2.26 (m, 2H), 2.13 - 2.05 (m, 2H), 1.95 - 1.86 (m, 4H), 1.74 - 1.65 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２９Ｈ３６Ｎ７Ｏ５についての計算値、５６２．２７７２、実測値：５６２．２７７５。
【０２６３】
【化７６】
2020514252.tif 000145
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（５−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−５−オキソペンタンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例１２）（４０ｍｇ、７７％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.12 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.17 (dd, J = 2.9, 9.6 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.41 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.99 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.59 - 4.49 (m, 3H), 4.37 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.94 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.83 - 3.71 (m, 6H), 3.34 - 3.25 (m, 4H), 2.49 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.39 - 2.20 (m, 6H), 2.11 - 2.05 (m, 3H), 1.95 - 1.85 (m, 4H), 1.72 - 1.65 (m, 2H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５１Ｈ６４Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、９７４．４７０５、実測値：９７４．４７０３。
【０２６４】
【化７７】
2020514252.tif 000146
メチル８−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−８−オキソオクタノエート（中間体５）。パルボシクリブ（５０ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）およびＤＣＭ（２０ｍｌ）溶液に、ＮＭＭ（３４ｍｇ、０．３３５ｍｍｏｌ）、８−メトキシ−８−オキソオクタン酸（２５ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（２０ｍｇ、０．１４６ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（２８ｍｇ、０．１４６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。パルボシクリブが消費された後、反応液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物（６９ｍｇ、９８％）を黄色の固体として得た。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３３Ｈ４４Ｎ７Ｏ５についての計算値、６１８．３３９８、実測値：６１８．３４０１。
【０２６５】
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（８−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−８−オキソオクタンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例１５）  撹拌状態の中間体５（６９ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２０ｍｌ／５ｍｌ）溶液に無水ＬｉＯＨ（６ｍｇ、０．２２３ｍｍｏｌ）を加え、得られる混合物を室温で終夜撹拌した。出発材料の消失をＬＣ／ＭＳによってモニターした。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られる残渣をＤＣＭ／ＤＭＳＯ（１０ｍｌ／３ｍｌ）に溶解させた。得られる溶液に、ＮＭＭ（１３ｍｇ、０．３３５ｍｍｏｌ）、ＶＨＬ−１（５７ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（２０ｍｇ、０．１４５ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（２８ｍｇ、０．１４５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。出発材料が消費された後、反応液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物（６８ｍｇ、６０％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.21 (dd, J = 3.0, 9.7 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.53 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 6.01 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.59-4.45 (m, 3H), 4.36 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.84-3.72 (m, 5H), 3.33-3.25 (m, 4H), 2.53 - 2.40 (m, 10H), 2.36-2.18 (m, 6H), 2.13-2.03 (m, 3H), 1.95-1.85 (m, 2H), 1.74-1.58 (m, 6H), 1.45-1.32 (m, 4H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ７０Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１０１６．５１７５、実測値：１０１６．５１８０。
【０２６６】
【化７８】
2020514252.tif 000147
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（６−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−６−オキソヘキサンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例１３）。パルボシクリブ（１２ｍｇ、０．０２６８ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１ｍｌ）およびＤＣＭ（５ｍL）溶液に、ＮＭＭ（１３．６ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）、リンカー４（１５ｍｇ、０．０２６８ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（５．５ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（７．７ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。出発材料が消費された後、反応液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物（２４ｍｇ、８１％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.19 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.60 - 4.48 (m, 3H), 4.36 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.83 - 3.73 (m, 5H), 3.35 - 3.31 (m, 2H), 3.29 - 3.25 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.36 - 2.27 (m, 4H), 2.24 - 2.19 (m, 1H), 2.13 - 2.05 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.61 (m, 6H), 1.41 - 1.24 (m, 2H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５２Ｈ６６Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、９８８．４８６２、実測値：９８８．４８７１。
【０２６７】
例１４、１６、および１７化合物は、例１３化合物の調製手順（上記）を使用して合成した。
【０２６８】
【化７９】
2020514252.tif 000148
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（７−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−７−オキソヘプタンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−アルボキサミド（化合物例１４）（２０ｍｇ、６８％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.20 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.01 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.58 - 4.48 (m, 3H), 4.36 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.83 - 3.72 (m, 5H), 3.32 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.28 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.48 - 2.44 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.35 - 2.24 (m, 4H), 2.24 - 2.19 (m, 1H), 2.13 - 2.05 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.74 - 1.60 (m, 6H), 1.40 (dt, J = 8.7, 7.4 Hz, 2H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５３Ｈ６８Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１００２．５０１８、実測値：１００２．５０１９。
【０２６９】
【化８０】
2020514252.tif 000149
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（９−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−９−オキソノナンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例１６）（１８ｍｇ、６３％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.20 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.41 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.60 - 4.47 (m, 3H), 4.36 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.82 - 3.72 (m, 5H), 3.34 - 3.23 (m, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.48 - 2.44 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.34 - 2.18 (m, 5H), 2.13 - 2.04 (m, 3H), 1.94 - 1.85 (m, 2H), 1.73 - 1.57 (m, 6H), 1.41 - 1.30 (m, 6H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５５Ｈ７２Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１０３０．５３３１、実測値：１０３０．５３３５。
【０２７０】
【化８１】
2020514252.tif 000150
黄色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（１０−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−１０−オキソデカンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例１７）（１８ｍｇ、６４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.19 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.41 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.00 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.60 - 4.47 (m, 3H), 4.35 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.83 - 3.70 (m, 5H), 3.36 - 3.23 (m, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.48 - 2.44 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.34 - 2.19 (m, 5H), 2.12 - 2.05 (m, 3H), 1.93 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.66 (m, 2H), 1.65 - 1.56 (m, 4H), 1.40 - 1.28 (m, 8H), 1.03 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５６Ｈ７４Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１０４４．５４８８、実測値：１０４４．５４８７。
【０２７１】
【化８２】
2020514252.tif 000151
３−（２−（２−（２−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アミノ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）プロパン酸ｔｅｒｔ−ブチル（中間体６）。２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−４−フルオロイソインドリン−１，３−ジオン（１００ｍｇ、０．３６２ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）プロパノエート（１００ｍｇ、０．３６２ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（０．５ｍｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液を、１００℃で終夜加熱した。出発材料が消費された後、反応液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物（７２ｍｇ、３７％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 7.55 (dd, J = 7.1, 8.6 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 5.4, 12.4 Hz, 1H), 4.10 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 3.72 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 3.69 - 3.59 (m, 8H), 3.59 - 3.55 (m, 2H), 3.50 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.91 - 2.82 (m, 1H), 2.78 - 2.68 (m, 2H), 2.45 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 1.43 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ２６Ｈ３６Ｎ３Ｏ９についての計算値、５３４．２４４６、実測値：５３４．２４５９。
【０２７２】
４−（（２−（２−（２−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロポキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２１）。中間体６（２０ｍｇ、０．０３０８ｍｍｏｌ）のＨＣＯ２Ｈ（５ｍＬ）溶液を、室温で終夜撹拌した。反応液を減圧下で濃縮し、得られる残渣をＤＣＭ／ＤＭＳＯ（１０ｍｌ／２ｍｌ）に溶解させた。得られる溶液に、パルボシクリブ（１３．７ｍｇ、０．０３０８ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ（１６ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（５．４ｍｇ、０．０３９９ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（７．６ｍｇ、０．０３９９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。パルボシクリブが消費された後、反応液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物（２５ｍｇ、９０％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.98 (s, 1H), 8.13 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.44 - 7.35 (m, 2H), 6.94 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.03 - 5.93 (m, 1H), 5.09 (dd, J = 5.5, 12.7 Hz, 1H), 3.87 - 3.75 (m, 8H), 3.67 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.65 - 3.58 (m, 9H), 3.41 - 3.37 (m, 2H), 2.92 - 2.84 (m, 1H), 2.79 - 2.63 (m, 4H), 2.52 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.36 - 2.28 (m, 2H), 2.13 - 2.07 (m, 4H), 1.97 - 1.88 (m, 2H), 1.75 - 1.67 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４６Ｈ５５Ｎ１０Ｏ１０についての計算値、９０７．４０９７、実測値：９０７．４０９５。
【０２７３】
例１９、２０、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、および２９化合物は、例２１化合物の調製手順（上記）に従って合成した。
【０２７４】
【化８３】
2020514252.tif 000152
黄色固体としての４−（（２−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロポキシ）エチル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例１９）（２８ｍｇ、８８％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 7.99 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 8.3, 7.2 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.02 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 12.8, 5.6 Hz, 1H), 3.99 - 3.79 (m, 4H), 3.79 - 3.61 (m, 4H), 3.48 - 3.36 (m, 2H), 3.30 - 3.24 (m, 1H), 3.23 - 3.13 (m, 2H), 3.13 - 3.05 (m, 1H), 2.90 - 2.77 (m, 2H), 2.76 - 2.70 (m, 1H), 2.70 - 2.60 (m, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.37 - 2.27 (m, 2H), 2.15 - 2.04 (m, 3H), 1.96 - 1.87 (m, 2H), 1.75 - 1.66 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４２Ｈ４７Ｎ１０Ｏ８についての計算値、８１９．３５７３、実測値：８１９．３５７３。
【０２７５】
【化８４】
2020514252.tif 000153
黄色固体としての４−（（２−（２−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２０）（２２ｍｇ、７３％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.99 (s, 1H), 8.08 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 8.4, 7.2 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.99 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.08 (dd, J = 12.8, 5.6 Hz, 1H), 3.86 - 3.70 (m, 6H), 3.69 - 3.61 (m, 6H), 3.41 - 3.31 (m, 4H), 3.26 - 3.17 (m, 2H), 2.92 - 2.82 (m, 1H), 2.78 - 2.63 (m, 4H), 2.51 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.36 - 2.28 (m, 2H), 2.13 - 2.07 (m, 3H), 1.96 - 1.87 (m, 2H), 1.74 - 1.66 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４４Ｈ５１Ｎ１０Ｏ９についての計算値、８６３．３８３５、実測値：８６３．３８４２。
【０２７６】
【化８５】
2020514252.tif 000154
黄色固体としての４−（（１５−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデシル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２２）（３４ｍｇ、８５％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.97 (s, 1H), 8.17 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.44 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.39 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.96 (p, J = 8.7 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 12.8, 5.4 Hz, 1H), 3.87 - 3.73 (m, 6H), 3.70 - 3.51 (m, 14H), 3.42 - 3.32 (m, 4H), 3.30 - 3.22 (m, 2H), 2.91 - 2.83 (m, 1H), 2.78 - 2.59 (m, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.34 - 2.24 (m, 2H), 2.15 - 2.03 (m, 3H), 1.95 - 1.86 (m, 2H), 1.74 - 1.64 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４８Ｈ５９Ｎ１０Ｏ１１についての計算値、９５１．４３５９、実測値：９５１．４３５３。
【０２７７】
【化８６】
2020514252.tif 000155
黄色固体としての４−（（１８−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−１８−オキソ−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサオクタデシル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２３）（１８ｍｇ、５１％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.03 - 8.97 (m, 1H), 8.20 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 7.43 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.97 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 12.8, 5.5 Hz, 1H), 3.84 - 3.78 (m, 4H), 3.77 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 3.66 - 3.53 (m, 16H), 3.44 - 3.38 (m, 2H), 3.37 - 3.32 (m, 2H), 3.29 - 3.22 (m, 2H), 2.90 - 2.82 (m, 1H), 2.77 - 2.62 (m, 4H), 2.51 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 2.34 - 2.26 (m, 2H), 2.13 - 2.05 (m, 3H), 1.95 - 1.87 (m, 2H), 1.74 - 1.65 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５０Ｈ６３Ｎ１０Ｏ１２についての計算値、９９５．４６２１、実測値：９９５．４６２８。
【０２７８】
【化８７】
2020514252.tif 000156
黄色固体としての４−（（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２４）（２８ｍｇ、７２％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 8.21 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.55 - 7.50 (m, 2H), 7.03 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.04 - 5.97 (m, 1H), 5.08 (dd, J = 12.7, 5.5 Hz, 1H), 4.24 (s, 2H), 3.88 - 3.73 (m, 4H), 3.42 - 3.31 (m, 4H), 2.92 - 2.82 (m, 1H), 2.80 - 2.67 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.35 - 2.27 (m, 2H), 2.15 - 2.06 (m, 3H), 1.94 - 1.87 (m, 2H), 1.73 - 1.66 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３９Ｈ４１Ｎ１０Ｏ７についての計算値、７６１．３１５４、実測値：７６１．３１５０。
【０２７９】
【化８８】
2020514252.tif 000157
黄色固体としての４−（（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロピル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２５）（２６ｍｇ、６７％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.13 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 8.5, 7.1 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.03 (dd, J = 12.7, 5.5 Hz, 1H), 3.76 (dt, J = 10.3, 4.7 Hz, 4H), 3.68 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.18 (br. s, 4H), 2.88 - 2.80 (m, 1H), 2.79 (td, J = 5.9, 1.9 Hz, 2H), 2.75 - 2.62 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.34 - 2.26 (m, 2H), 2.13 - 2.03 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.64 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４０Ｈ４３Ｎ１０Ｏ７についての計算値、７７５．３３１１、実測値：７７５．３３１６。
【０２８０】
【化８９】
2020514252.tif 000158
黄色固体としての４−（（４−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−４−オキソブチル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２６）（１７ｍｇ、４５％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 8.13 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.54 - 7.45 (m, 2H), 7.08 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 12.7, 5.5 Hz, 1H), 3.80 - 3.70 (m, 4H), 3.41 (td, J = 6.5, 1.3 Hz, 2H), 3.25 - 3.16 (m, 4H), 2.90 - 2.82 (m, 1H), 2.77 - 2.65 (m, 2H), 2.58 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.35 - 2.27 (m, 2H), 2.13 - 2.06 (m, 3H), 2.00 (p, J = 6.7 Hz, 2H), 1.95 - 1.86 (m, 2H), 1.70 (dt, J = 10.1, 8.6 Hz, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４１Ｈ４５Ｎ１０Ｏ７についての計算値、７８９．３４６７、実測値：７８９．３４７４。
【０２８１】
【化９０】
2020514252.tif 000159
黄色固体としての４−（（６−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−６−オキソヘキシル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２７）（２４ｍｇ、６６％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 8.13 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.52 - 7.46 (m, 2H), 7.02 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.01 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 5.04 (dd, J = 12.7, 5.5 Hz, 1H), 3.83 - 3.69 (m, 4H), 3.36 - 3.29 (m, 2H), 3.27 - 3.16 (m, 4H), 2.85 (ddd, J = 17.5, 13.9, 5.4 Hz, 1H), 2.76 - 2.62 (m, 2H), 2.54 - 2.45 (m, 5H), 2.43 (s, 3H), 2.36 - 2.27 (m, 2H), 2.14 - 2.04 (m, 3H), 1.95 - 1.86 (m, 2H), 1.75 - 1.63 (m, 6H), 1.54 - 1.44 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４３Ｈ４９Ｎ１０Ｏ７についての計算値、８１７．３７８０、実測値：８１７．３７７３。
【０２８２】
【化９１】
2020514252.tif 000160
黄色固体としての４−（（７−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−７−オキソヘプチル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２８）（２６ｍｇ、７４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.16 (dd, J = 9.7, 2.9 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.55 - 7.45 (m, 2H), 7.00 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.04 (dd, J = 12.8, 5.5 Hz, 1H), 3.82 - 3.69 (m, 4H), 3.32 - 3.20 (m, 6H), 2.84 (ddd, J = 17.8, 14.1, 5.3 Hz, 1H), 2.77 - 2.63 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.46 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.35 - 2.25 (m, 2H), 2.13 - 2.05 (m, 3H), 1.95 - 1.85 (m, 2H), 1.74 - 1.60 (m, 6H), 1.50 - 1.39 (m, 4H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４４Ｈ５１Ｎ１０Ｏ７についての計算値、８３１．３９３７、実測値：８３１．３９２９。
【０２８３】
【化９２】
2020514252.tif 000161
黄色固体としての４−（（８−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−８−オキソオクチル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２９）（２３ｍｇ、６６％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.16 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.54 - 7.48 (m, 2H), 7.01 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.01 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 12.8, 5.5 Hz, 1H), 3.82 - 3.71 (m, 4H), 3.33 - 3.22 (m, 6H), 2.85 (ddd, J = 17.7, 14.1, 5.3 Hz, 1H), 2.76 - 2.64 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.46 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.32 (td, J = 15.4, 7.8 Hz, 2H), 2.14 - 2.04 (m, 3H), 1.95 - 1.86 (m, 2H), 1.74 - 1.60 (m, 6H), 1.50 - 1.36 (m, 6H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４５Ｈ５３Ｎ１０Ｏ７についての計算値、８４５．４０９３、実測値：８４５．４１０１。
【０２８４】
【化９３】
2020514252.tif 000162
２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−４−（（２−（２−（２−（３−（４−（（６−（（５−フルオロ−４−（４−フルオロ−１−イソプロピル−２−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−６−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロポキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）アミノ）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例３０）。リンカー２０（３２ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）およびアベマシクリブ（２４ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２  （４ｍｌ）およびＤＭＦ（１ｍｌ）に溶かした溶液に、ＤＩＥＡ（１７μｌ、０．１ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（２２ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（３７ｍｇ、２ステップで８０％）を得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.52 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.80 - 7.78 (m, 2H), 7.49 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 6.6 Hz, J = 3.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.00 (dd, J = 12.6 Hz, J = 6.0 Hz, 1H), 3.75 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.71 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.66 - 3.60 (m, 14H), 3.46 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.88 - 2.73 (m, 4H), 2.70 (s, 3H), 2.64 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.65 - 2.50 (m, 4H), 2.12 - 2.10 (m, 1H), 1.74 (d, J =6.6 Hz, 6H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４７Ｈ５４Ｆ２Ｎ１１Ｏ８についての計算値、９３８．４１１９、実測値：９３８．４１４８。
【０２８５】
【化９４】
2020514252.tif 000163
Ｎ−（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）−８−（４−（（６−（（５−フルオロ−４−（４−フルオロ−１−イソプロピル−２−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−６−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−８−オキソオクタンアミド（化合物例３１）。メチル８−クロロ−８−オキソオクタノエート（３０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびポマリドミド（４０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍｌ）に溶解させた。得られる溶液を、還流させながら３時間加熱した後、減圧下で溶媒を蒸発させた。残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、中間体７（５３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を黄色の油状物として得た。マイクロ波反応器において、中間体７（５３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液を１６０℃にてＬｉＣｌ（２５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）で２時間処理した。室温に冷却した後、反応混合物を水（５ｍｌ）中に注ぎ、ＤＣＭ（３×５ｍｌ）で抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、中間体８（２１ｍｇ、４０％）を黄色の油状物として得た。中間体８（２１ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）およびアベマシクリブ（１９ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（４ｍｌ）およびＤＭＦ（１ｍｌ）に溶かした溶液に、ＤＩＥＡ（１７μｌ、０．１ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（１５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（２５ｍｇ、７０％）を得た。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 9.47 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.86 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.50 - 8.49 (m, 2H), 8.28 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.84 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.75 - 7.73 (m, 2H), 7.58 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.02 - 4.99 (m, 1H), 4.79 - 4.74 (m, 1H), 3.86 - 3.85 (m, 1H), 3.61 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.52 - 3.33 (m, 3H), 3.41 - 3.37 (m, 1H), 3.03 - 3.01 (m, 1H), 2.89 - 2.81 (m, 2H), 2.72 (s, 3H), 2.63 - 2.56 (m, 1H), 2.53 - 2.37 (m, 4H), 2.36 - 2.28 (m, 3H), 2.25 - 2.18 (m, 1H), 1.86 - 1.78 (m, 2H), 1.74 (d. J = 6.6 Hz, 6H), 1.70 - 1.60 (m, 2H), 1.46 - 1.35 (5H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４６Ｈ５０Ｆ２Ｎ１１Ｏ６についての計算値、８９０．３９０８、実測値：８９０．３９３１。
【０２８６】
【化９５】
2020514252.tif 000164
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（８−（４−（（６−（（５−フルオロ−４−（４−フルオロ−１−イソプロピル−２−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−６−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−８−オキソオクタンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例３２）。リンカー５（２９ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）およびアベマシクリブ（１９ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（４ｍｌ）およびＤＭＦ（１ｍｌ）に溶かした溶液に、ＤＩＥＡ（１７μｌ、０．１ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（１５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、例３２（３１ｍｇ、２ステップで７６％）を得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.88 (s, 1H), 8.55 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.36-8.35 (m, 2H), 8.25 (s, 1H), 7.86 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.81 - 7.78 (m, 2H), 7.48 - 7.41 (m, 3H), 4.66 - 4.51 (m, 4H), 4.36 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.91 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.81 (dd, J = 10.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 3.66 - 3.54 (m, 7H), 2.71 (s, 3H), 2.51 - 2.48 (m, 6H), 2.40 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.34 - 2.21 (m, 3H), 2.12 - 2.06 (m, 1H), 1.73 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 1.63 - 1.60 (m, 4H), 1.37 - 1.27 (m, 5H), 1.05 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５５Ｈ６９Ｆ２Ｎ１２Ｏ５Ｓについての計算値、１０４７．５１９７、実測値：１０４７．５１９２。
【０２８７】
【化９６】
2020514252.tif 000165
７−シクロペンチル−２−（（５−（４−（６−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−６−オキソヘキサノイル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物例３３）。リボシクリブ（９ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）およびリンカー３（１４ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１、２ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（１７μｌ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（８ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。得られる残渣をＭｅＯＨに溶解させ、分取ＨＰＬＣによって精製して、生成物（１９ｍｇ、８４％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD): 主要異性体(回転異性体比6:1) δ 9.02 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.08 (dd, J = 9.6, 2.4 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.45 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H),  4.86-4.80 (m, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.62-4.52 (m, 3H), 4.38 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.84-3.76 (m, 5H), 3.29 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.24 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 2.52-2.47 (m, 7H), 2.39-2.30 (m, 3H), 2.14-2.08 (m, 5H), 1.77-1.64 (m, 6H), 1.06 (s, 9H);ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５１Ｈ６７Ｎ１２Ｏ６Ｓについての計算値、９７５．５０２２、実測値９７５．５０２４。
【０２８８】
例３４、３５、および３６化合物は、例３３化合物の調製手順（上記）に従って合成した。
【０２８９】
【化９７】
2020514252.tif 000166
黄色固体としての７−シクロペンチル−２−（（５−（４−（７−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−７−オキソヘプタノイル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物例３４）（１７ｍｇ、８３％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) 主要異性体(回転異性体比7:2) δ 9.03 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.08 (dd, J = 9.6, 2.4 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.46-7.43 (m, 3H), 6.82 (s, 1H), 4.86-4.80 (m, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.61-4.51 (m, 3H), 4.39 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.84-3.77 (m, 5H), 3.29 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.24 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 2.51-2.47 (m, 7H), 2.37-2.23 (m, 3H), 2.16-2.08 (m, 5H), 1.79-1.73 (m, 2H), 1.70-1.63 (m, 4H), 1.45-1.39 (m, 2H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５２Ｈ６９Ｎ１２Ｏ６Ｓについての計算値、９８９．５１７８、実測値９８９．５１８０。
【０２９０】
【化９８】
2020514252.tif 000167
黄色固体としての７−シクロペンチル−２−（（５−（４−（８−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−８−オキソオクタノイル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物例３５）（２５ｍｇ、９８％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) 主要異性体(回転異性体比8:1)  δ 9.02 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.08 (dd, J = 9.6, 2.4 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.50 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.82 (s, 1H),  4.86-4.79 (m, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.62-4.52 (m, 3H), 4.38 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.84-3.77 (m, 5H), 3.29-3.28 (m, 2H), 3.24-3.22 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.49-2.47 (m, 4H), 2.36-2.32 (m, 3H), 2.16-2.08 (m, 5H), 1.80-1.72 (m, 2H), 1.69-1.62 (m, 4H), 1.46-1.36 (m, 4H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５３Ｈ７１Ｎ１２Ｏ６Ｓについての計算値、１００３．５３３５、実測値１００３．５３６１。
【０２９１】
【化９９】
2020514252.tif 000168
黄色固体としての７−シクロペンチル−２−（（５−（４−（３−（３−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−３−オキソプロポキシ）プロパノイル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物例３６）（１７ｍｇ、７４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) 主要異性体(回転異性体比7:2) δ 9.04 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.07 (dd, J = 9.6, 2.4 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.81 (s, 1H),  4.85-4.79 (m, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.58 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.54-4.51 (m, 1H), 4.49 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.38 (d, J = 14.4Hz, 1H), 3.93 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.84-3.78 (m, 7H), 3.74 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.28-3.22 (m, 4H), 3.19 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 2.81-2.71 (m, 2H), 2.60-2.48 (m, 7H), 2.28-2.25 (m, 1H), 2.16-2.08 (m, 5H), 1.79-1.72 (m, 2H), 1.07 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５１Ｈ６７Ｎ１２Ｏ７Ｓについての計算値、９９１．４９７１、実測値９９１．４９７５。
【０２９２】
【化１００】
2020514252.tif 000169
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（６−（４−（（６−（（５−フルオロ−４−（４−フルオロ−１−イソプロピル−２−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−６−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−６−オキソヘキサンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例３７）。アベマシクリブ（１３ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）およびリンカー３（１８ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１、２ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（１７μｌ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（１０ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。得られる残渣をＭｅＯＨに溶解させ、分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物（３１ｍｇ、９６％）を白色の固体として得た。1HNMR (CD3OD, 600 MHz) (1Hが溶媒ピーク中に埋まっている) 9.13 (s, 1H), 8.85 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.57 (d, J= 11.4 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.86 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 5.15-5.10 (m, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.62-4.51 (m, 5H), 4.39 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.93-3.82 (m, 6H), 3.41-3.33 (m, 4H), 2.94 (s, 3H), 2.51-2.45 (m, 5H), 2.39-2.29 (m, 2H), 2.26-2.23 (m, 1H), 2.12-2.08 (m, 1H), 1.82 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.72-1.62 (m, 4H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５３Ｈ６５Ｆ２Ｎ１２Ｏ５Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋についての計算値、１０１９．４８８４、実測値：１０１９．４８８１。
【０２９３】
例３８化合物は、例３７化合物の調製手順（上記）に従って合成した。
【０２９４】
【化１０１】
2020514252.tif 000170
白色固体としての（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（７−（４−（（６−（（５−フルオロ−４−（４−フルオロ−１−イソプロピル−２−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−６−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−７−オキソヘプタンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例３８）（２４ｍｇ、９８％）。1H NMR (CD3OD, 600 MHz) (1Hが溶媒ピーク中に埋まっている) δ 9.11 (s, 1H), 8.85 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 8.56 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 5.14-5.10 (m, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.62-4.51 (m, 5H), 4.39 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 3.94-3.82 (m, 6H), 3.46-3.30 (m, 4H), 2.95 (s, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.47 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.36-2.23 (m, 3H), 2.13-2.08 (m, 1H), 1.82 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.69-1.62 (m, 4H), 1.41-1.39 (m, 2H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ６７Ｆ２Ｎ１２Ｏ５Ｓについての計算値、１０３３．５０４１、実測値１０３３．５０５３。
【０２９５】
【化１０２】
2020514252.tif 000171
７−シクロペンチル−２−（（５−（４−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）グリシル）ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミド（化合物例３９）。リボシクリブ（１２ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）およびリンカー２３（１１ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１、２ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（１７μｌ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（１２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液を室温で１時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。得られる残渣をＭｅＯＨに溶解させ、分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物（１５ｍｇ、７４％）を黄色の固体として得た。1H NMR (CD3OD, 600 MHz) δ 8.86 (s, 1H), 7.89 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.52-7.49 (m, 2H), 7.08 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.65 (s, 1H), 4.96-4.93 (m, 1H), 4.78-4.72 (m, 1H), 4.17 (s, 2H), 3.85-3.83 (m, 2H), 3.72-3.72 (m, 2H), 3.30-3.28 (m, 2H), 3.23-3.21 (m, 2H), 3.18 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 2.84-2.73 (m, 3H), 2.46-2.40 (m, 2H), 2.15-2.02 (m, 5H), 1.75-1.67 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３８Ｈ４１Ｎ１１Ｏ６についての計算値、７４８．３３１４、実測値７４８．３３９１。
【０２９６】
【化１０３】
2020514252.tif 000172
２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−４−（（２−（４−（（６−（（５−フルオロ−４−（４−フルオロ−１−イソプロピル−２−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−６−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例４０）。アベマシクリブ（１２ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）および化合物２３（１０ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ／ＤＭＦ（１：１、２ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（１７μｌ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（１１ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。得られる残渣をＭｅＯＨに溶解させ、分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物（１６ｍｇ、８１％）を黄色の固体として得た。1H NMR (CD3OD, 600 MHz) δ 8.59 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.13 (s, 2H), 7.89 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.36 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.95-4.92 (m, 1H), 4.89-4.84 (m, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.04 (s, 2H), 3.98-3.74 (m, 4H), 3.31-3.20 (m, 4H), 3.18 (s, 3H), 2.85-2.69 (m, 6H), 2.13-2.11 (m, 1H), 1.73 (d, J = 7.8 Hz, 6H);ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３８Ｈ４１Ｎ１１Ｏ６についての計算値、７９２．３１７６、実測値７９２．３１８０。
【０２９７】
【化１０４】
2020514252.tif 000173
メチル７−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ヘプタノエート（中間体９）。パルボシクリブ（５０ｍｇ、０．１１２ｍｍｏｌ）、メチル７−ブロモヘプタノエート（７５ｍｇ、０．３３５ｍｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（４６ｍｇ、０．３３５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液を、マイクロ波反応器において６０℃で１時間加熱した室温に冷却した後、反応混合物を濾過し、濃縮し、得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（４０ｍｇ、６０％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 8.21 (dd, J = 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.99 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 3.93 (s, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.38 - 3.16 (m, 6H), 2.49 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.37 - 2.25 (m, 4H), 2.13 - 2.03 (m, 2H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.85 - 1.78 (m, 2H), 1.72 - 1.59 (m, 4H), 1.47 - 1.36 (m, 4H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３２Ｈ４４Ｎ７Ｏ４についての計算値、５９０．３４４９、実測値：５９０．３４４６。
【０２９８】
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（７−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ヘプタンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（化合物例４１）  撹拌状態の中間体９（４０ｍｇ、０．０６７８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１０ｍｌ／２ｍｌ）溶液に無水ＬｉＯＨ（３．３ｍｇ、０．１３６ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物を室温で終夜撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、得られる残渣をＤＣＭ／ＤＭＳＯ（５ｍｌ／１ｍｌ）に溶解させた。得られる溶液に、ＮＭＭ（６８ｍｇ、０．６７８ｍｍｏｌ）、ＶＨＬ−１（３２ｍｇ、０．０６７８ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１４ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（１９．５ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した後、反応液を濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（８ｍｇ、１１％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.20 (dd, J = 9.5, 2.6 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.05 - 5.96 (m, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.58 - 4.47 (m, 3H), 4.37 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.99 - 3.84 (m, 3H), 3.84 - 3.79 (m, 1H), 3.80 - 3.66 (m, 2H), 3.34 - 3.18 (m, 6H), 2.50 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.36 - 2.26 (m, 4H), 2.23 (dd, J = 13.1, 7.6 Hz, 1H), 2.14 - 2.05 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.84 - 1.75 (m, 2H), 1.74 - 1.61 (m, 4H), 1.48 - 1.38 (m, 4H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５３Ｈ７０Ｎ１１Ｏ６Ｓについての計算値、９８８．５２２６、実測値：９８８．５２２６。
【０２９９】
【化１０５】
2020514252.tif 000174
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（８−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）オクタンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例４２）  パルボシクリブ（４５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、８−ブロモオクタン酸（６４ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、およびＴＥＡ（０．０５ｍｌ、０．３６ｍｍｏｌ）のｉ−ＰｒＯＨ（１ｍｌ）溶液を、マイクロ波反応器において１３０℃で１５分間加熱した。室温に冷却した後、反応混合物を濃縮し、得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、中間体１０（２４ｍｇ、４０％）を黄色の固体として得た。撹拌状態の中間体１０（２４ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ／ＤＭＳＯ（５ｍｌ／１ｍｌ）溶液に、ＴＥＡ（０．０５ｍｌ、０．３６ｍｍｏｌ）、ＶＨＬ−１（２０ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（１２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した後、反応液を濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（２０ｍｇ、５０％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.13 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.23 (dd, J = 9.6, 3.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.45 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.03 (p, J = 8.7 Hz, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.60 - 4.53 (m, 3H), 4.40 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.96 - 3.71 (m, 6H), 3.30 - 3.20 (m, 6H), 2.52 (s, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.37 - 2.24 (m, 5H), 2.17 - 2.03 (m, 3H), 1.97 - 1.87 (m, 2H), 1.84 - 1.80 (m, 2H), 1.77 - 1.60 (m, 4H), 1.50 - 1.33 (m, 6H), 1.05 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ７２Ｎ１１Ｏ６Ｓについての計算値、１００２．５３８９、実測値：１００２．５３９０。
【０３００】
【化１０６】
2020514252.tif 000175
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（６−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）ヘキサンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例４３）  パルボシクリブ（４０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）、６−ブロモヘキサン酸（５５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、およびＴＥＡ（０．０５ｍｌ、０．３６ｍｍｏｌ）のｉ−ＰｒＯＨ（１ｍｌ）溶液を、マイクロ波反応器において１３０℃で１５分間加熱した。室温に冷却した後、反応混合物を濃縮し、得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、中間体１１（４４ｍｇ、８８％）を黄色の固体として得た。撹拌状態の中間体１１（４４ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ／ＤＭＳＯ（５ｍｌ／１ｍｌ）溶液に、ＴＥＡ（０．０５ｍｌ、０．３６ｍｍｏｌ）、ＶＨＬ−１（３４ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（２２ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した後、反応液を濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（３７ｍｇ、５９％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.12 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.23 (dd, J = 9.8, 2.4 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.02 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.62 - 4.49 (m, 3H), 4.40 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.96 - 3.71 (m, 6H), 3.30 - 3.20 (m, 6H), 2.52 (s, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.40 - 2.21 (m, 5H), 2.16 - 2.05 (m, 3H), 1.97 - 1.88 (m, 2H), 1.88 - 1.78 (m, 2H), 1.72 - 1.67 (m, 4H), 1.49 - 1.40 (m, 2H), 1.07 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５２Ｈ６８Ｎ１１Ｏ６Ｓについての計算値、９７４．５０６９、実測値：９７４．５０６９。
【０３０１】
【化１０７】
2020514252.tif 000176
４−（（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）エチル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（例４４）  パルボシクリブ（４５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル（２−ブロモエチル）カルバメート（６９ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、およびＴＥＡ（０．０５ｍＬ、０．３６ｍｍｏｌ）のｉ−ＰｒＯＨ（１ｍｌ）溶液を、マイクロ波反応器において１３０℃で１５分間加熱した。室温に冷却した後、反応混合物を濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、中間体１２（２４ｍｇ、４０％）を黄色の固体として得た。撹拌状態の中間体１２（２４ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。混合物を室温で撹拌し、反応の進行をＬＣ／ＭＳによってモニターした。反応が完了した後、反応溶液を濃縮し、得られる残渣をＤＭＦ（１ｍｌ）に溶解させた。この溶液に、ＴＥＡ（０．０５ｍＬ、０．３６ｍｍｏｌ）およびポマリドミド類似体（１７ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物を、マイクロ波反応器において９０℃で４５分間加熱した。室温に冷却した後、反応混合物を濃縮し、得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（４ｍｇ、１３％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 8.14 (dd, J = 9.5, 2.7 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.70 - 7.65 (m, 2H), 7.22 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 6.02 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.11 (dd, J = 12.5, 5.5 Hz, 1H), 3.90 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.63 (br, 8H), 3.55 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.94 - 2.86 (m, 1H), 2.80 - 2.65 (m, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.38 - 2.26 (m, 42H), 2.17 - 2.05 (m, 3H), 1.99 - 1.84 (m, 2H), 1.77 - 1.64 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３９Ｈ４３Ｎ１０Ｏ６についての計算値、７４７．３３６２、実測値：７４７．３３４２。
【０３０２】
【化１０８】
2020514252.tif 000177
４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）−Ｎ−（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキサミド（例４５）  ポマリドミド（２７８ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、４−ニトロフェニルカルボノクロリデート（３０７ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍｌ）溶液を、還流させながら終夜加熱した。室温に冷却した後、反応混合物を濃縮した。得られる残渣を酢酸エチルで洗浄し、ＮａＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、中間体１３（２４０ｍｇ、５５％）を黄色の固体として得た。撹拌状態の中間体１３（１９ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍL）溶液に、ＤＩＥＡ（０．０１４ｍL、０．１ｍｍｏｌ）およびパルボシクリブ（１８ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した後、濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（１４ｍｇ、４６％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.56 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.10 (dd, J = 9.6, 2.6 Hz, 1H), 7.78 - 7.70 (m, 1H), 7.64 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.97 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 12.5, 5.5 Hz, 1H), 3.86 - 3.79 (m, 4H), 3.45 - 3.40 (m, 4H), 2.89 - 2.72 (m, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.33 - 2.27 (m, 2H), 2.22 - 2.15 (m, 1H), 2.11 - 2.06 (m, 2H), 1.96 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.59 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３８Ｈ３９Ｎ１０Ｏ７についての計算値、７４７．２９９８、実測値：７４７．２９７０。
【０３０３】
【化１０９】
2020514252.tif 000178
３−（（３−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−３−オキソプロピル）（メチル）アミノ）プロパン酸（中間体１４）  ３，３’−（メチルアザンジイル）ジプロピオン酸（７００ｍｇ、４ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ／ＴＨＦ（１：１、１０ｍｌ）溶液に、０℃で、ＶＨＬ−１（４７２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．５ｍｌ、３．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１７３ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（２４２ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を順次加えた。得られる溶液を０℃で２時間撹拌した後、室温（ＲＴ）に温めた。室温で終夜撹拌した後、反応を水で失活させ、減圧下で濃縮した。得られる残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（４７０ｍｇ、８０％）を白色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.93 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 4.61 - 4.54 (m, 4H), 4.37 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 10.9, 3.8 Hz, 1H), 3.37 (s, 4H), 2.92 (s, 3H), 2.87 (dt, J = 18.1, 6.5 Hz, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.28 - 2.22 (m, 1H), 2.16 - 2.09 (m, 1H), 1.08 (s, 9H).
【０３０４】
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（３−（（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロピル）（メチル）アミノ）プロパンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例４６）  撹拌状態の中間体１４（２２ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液に、ＴＥＡ（０．０１５ｍｌ、０．１１ｍｍｏｌ）、パルボシクリブ（１３．１ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（１１．３ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した後、濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（２２ｍｇ、７５％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.11 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.19 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.03 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.65 - 4.49 (m, 4H), 4.38 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.97 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.90 - 3.64 (m, 5H), 3.64 - 3.51 (m, 2H), 3.43 - 3.36 (m, 4H), 3.10 - 3.02 (m, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.93 - 2.85 (m, 4H), 2.52 (s, 3H), 2.49 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.37 - 2.29 (m, 2H), 2.29 - 2.20 (m, 1H), 2.16 - 2.07 (m, 3H), 1.97 - 1.88 (m, 2H), 1.76 - 1.66 (m, 2H), 1.07 (d, J = 10.7 Hz, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５３Ｈ６９Ｎ１２Ｏ７Ｓについての計算値、１０１７．５１２７、実測値：１０１７．５０１３。
【０３０５】
【化１１０】
2020514252.tif 000179
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（６−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−カルボニル）スピロ［３．３］ヘプタン−２−カルボキサミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例４７）  スピロ［３．３］ヘプタン−２，６−ジカルボン酸（２５０ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ／ＴＨＦ（１：１、５ｍｌ）溶液に、０℃で、ＶＨＬ−１（２１８ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２１ｍｌ、１．４ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（１１２ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を順次加えた。得られる溶液を０℃で２時間撹拌した後、室温（ＲＴ）に温めた。室温で終夜撹拌した後、反応を水で失活させ、減圧下で濃縮した。得られる残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、中間体１５（２１０ｍｇ、７５％）を白色の固体として得た。撹拌状態の中間体１５（１９ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液に、ＴＥＡ（０．０１ｍL、０．０７ｍｍｏｌ）、パルボシクリブ（１２．７ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（１４．２ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した後、濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（２６ｍｇ、９０％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.11 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.21 (dd, J = 9.6, 3.0 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 2H), 7.45 - 7.42 (m, 2H), 6.02 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.69 - 4.62 (m, 1H), 4.62 - 4.47 (m, 3H), 4.41 - 4.27 (m, 1H), 3.92 (dd, J = 11.0, 4.4 Hz, 1H), 3.86 - 3.70 (m, 3H), 3.71 - 3.56 (m, 2H), 3.37 - 3.22 (m, 6H), 3.17 - 3.03 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.40 - 2.04 (m, 13H), 1.96 - 1.88 (m, 2H), 1.76 - 1.68 (m, 2H), 1.04 (d, J = 3.4 Hz, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５５Ｈ６８Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１０２６．５０１８、実測値：１０２６．４９８５。
【０３０６】
【化１１１】
2020514252.tif 000180
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（（Ｅ）−８−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−８−オキソオクタ−４−エンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例４８）  （Ｅ）−オクタ−４−エン二酸（２５０ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍｌ）溶液に、０℃で、ＶＨＬ−１（２３９ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２１ｍｌ、１．４ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（１０４ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を順次加えた。得られる溶液を０℃で２時間撹拌した後、室温（ＲＴ）に温めた。室温で終夜撹拌した後、反応を水で失活させ、減圧下で濃縮した。得られる残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、中間体１６（２０８ｍｇ、７０％）を白色の固体として得た。撹拌状態の中間体１６（１９ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液に、ＴＥＡ（０．０１ｍＬ、０．０７ｍｍｏｌ）、パルボシクリブ（１１．１ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（１０．４ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した後、濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（２４ｍｇ、９５％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.12 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.21 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.03 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 5.61 - 5.50 (m, 2H), 4.66 (s, 1H), 4.60 - 4.48 (m, 3H), 4.37 (dd, J = 15.3, 8.6 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.83 - 3.77 (m, 5H), 3.31 - 3.25 (m, 3H), 2.54 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.49 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.40 - 2.28 (m, 9H), 2.26 - 2.23 (m, 1H), 2.16 - 2.07 (m, 3H), 1.96 - 1.87 (m, 2H), 1.76 - 1.66 (m, 2H), 1.04 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ６８Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１０１４．５０１８、実測値：１０１４．５０１１。
【０３０７】
【化１１２】
2020514252.tif 000181
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（２−（４−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−カルボニル）ピペリジン−１−イル）アセトアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例４９）  ２−（４−（メトキシカルボニル）ピペリジン−１−イル）酢酸（３００ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍｌ）溶液に、室温で、ＶＨＬ−１（７１５ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．０７ｍｌ、７．７ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（５１３ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を順次加えた。室温で終夜撹拌した後、反応を水で失活させ、減圧下で濃縮し、得られる残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、中間体１７（５５２ｍｇ、９０％）を白色の固体として得た。撹拌状態の中間体１７（５２ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（５：１、３ｍｌ）溶液に、無水ＬｉＯＨ（３．３ｍｇ、０．１３６ｍｍｏｌ）を加えた。得られる混合物を室温で終夜撹拌した後、減圧下で濃縮した。得られる残基をＤＭＦ（１ｍｌ）に溶解させた。得られる溶液に、ＴＥＡ（０．０１５ｍＬ、０．１１ｍｍｏｌ）、パルボシクリブ（１３．３ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（１４ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した後、反応液を濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（２５ｍｇ、３０％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.12 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.22 (dd, J = 10.1, 3.0 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 9.6, 5.5 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.03 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.69 - 4.65 (m, 1H), 4.61 - 4.54 (m, 3H), 4.38 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 4.13 - 3.90 (m, 3H), 3.90 - 3.76 (m, 5H), 3.72 - 3.64 (m, 2H), 3.40 - 3.32 (m, 2H), 3.30 - 3.28 (m, 2H), 3.15 (br, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.37 - 2.29 (m, 2H), 2.29 - 2.23 (m, 1H), 2.16 - 1.99 (m, 9H), 1.98 - 1.88 (m, 2H), 1.77 - 1.65 (m, 2H), 1.09 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ６９Ｎ１２Ｏ７Ｓについての計算値、１０２９．５１２７、実測値：１０２９．５０４８。
【０３０８】
【化１１３】
2020514252.tif 000182
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（２−（４−（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）フェニル）アセトアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例５０）  ２，２’−（１，４−フェニレン）二酢酸（４１４ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）溶液に、０℃で、ＶＨＬ−１（２１７ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２１ｍｌ、１．４ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（１１０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を順次加えた。得られる溶液を０℃で２時間撹拌した後、室温（ＲＴ）に温めた。室温で終夜撹拌した後、反応を水で失活させ、減圧下で濃縮した。得られる残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、中間体１８（１７０ｍｇ、６０％）を白色の固体として得た。撹拌状態の中間体１８（２０ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液に、ＴＥＡ（０．０１５ｍＬ、０．１１ｍｍｏｌ）、パルボシクリブ（１２ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（１２．２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した後、反応液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（９ｍｇ、３２％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.15 (dd, J = 9.7, 2.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 7.46 - 7.38 (m, 4H), 7.34 - 7.25 (m, 4H), 6.06 - 5.97 (m, 1H), 4.66 - 4.61 (m, 1H), 4.59 - 4.46 (m, 3H), 4.38 - 4.32 (m, 1H), 3.92 - 3.83 (m, 3H), 3.81 - 3.70 (m, 4H), 3.64 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 3.58 (d, J = 14.7 Hz, 1H), 3.24 - 3.18 (m, 1H), 3.16 - 3.09 (m, 1H), 3.08 - 3.02 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.49 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.37 - 2.31 (m, 2H), 2.26 - 2.20 (m, 1H), 2.15 - 2.08 (m, 3H), 1.96 - 1.87 (m, 2H), 1.76 - 1.68 (m, 2H), 0.97 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５６Ｈ６６Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１０３６．４８６２、実測値：１０３６．４８６０。
【０３０９】
【化１１４】
2020514252.tif 000183
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（２−（４−（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）ピペラジン−１−イル）アセトアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例５１）  ２−（４−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）ピペラジン−１−イル）酢酸（３４０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液に、室温で、ＶＨＬ−１（２７７ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．７ｍｌ、５ｍｍｏｌ）、およびＥＤＣＩ（２２４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を順次加えた。室温で終夜撹拌した後、反応を水で失活させ、減圧下で濃縮した。得られる残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、中間体１７（３５０ｍｇ、８８％）を白色の固体として得た。撹拌状態の中間体１９（１５ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１ｍｌ）溶液に、ＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。得られる混合物を室温で撹拌した。出発材料の消失をＬＣ／ＭＳによってモニターした。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られる残渣をＤＭＦ（１ｍｌ）に溶解させた。得られる溶液に、ＴＥＡ（０．０１５ｍＬ、０．１１ｍｍｏｌ）、パルボシクリブ（８．３ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（７ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した後、濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（７ｍｇ、３５％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.13 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.24 (dd, J = 9.6, 2.4 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.59 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.45 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.08 - 5.98 (m, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.61 - 4.50 (m, 3H), 4.44 - 4.38 (m, 1H), 4.25 (s, 2H), 3.92 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.88 - 3.79 (m, 3H), 3.68 (br, 2H), 3.50 - 3.37 (m, 8H), 3.37 - 3.34 (m, 2H), 3.06 (br, 4H), 2.53 (s, 2H), 2.51 (s, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.37 - 2.25 (m, 3H), 2.17 - 2.07 (m, 3H), 1.97 - 1.87 (m, 2H), 1.76 - 1.69 (m, 2H), 1.07 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ７０Ｎ１３Ｏ７Ｓについての計算値、１０４４．５２３６、実測値：１０４４．５２２６。
【０３１０】
【化１１５】
2020514252.tif 000184
１−（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）ピペリジン−４−カルボキサミド（例５２）  パルボシクリブ（４３ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に、室温で、２−（４−（メトキシカルボニル）ピペリジン−１−イル）酢酸（２０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．０３５ｍＬ、０．２５ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（４２ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を順次加えた。室温で終夜撹拌した後、反応を水で失活させた。減圧下で濃縮した後、得られる残渣を逆相クロマトグラフィーによって精製して、中間体２０（５０ｍｇ、８２％）を白色の固体として得た。撹拌状態の中間体２０（５０ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（５：１、３ｍＬ）溶液に、無水ＬｉＯＨ（６ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で撹拌し、反応の進行をＬＣ／ＭＳによってモニターした。中間体２０が完全に消費された後、反応液を濃縮した。得られる残基をＤＭＦ（１ｍｌ）に溶解させた。溶液に、ＴＥＡ（０．０２ｍＬ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＶＨＬ−１（２６ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）、およびＴＢＴＵ（１６ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した後、濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（３０ｍｇ、３７％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.15 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.24 (dd, J = 9.6, 2.7 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.03 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.62 - 4.51 (m, 3H), 4.42 - 4.32 (m, 3H), 3.91 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.87 - 3.82 (m, 3H), 3.79 - 3.70 (m, 1H), 3.65 (br, 2H), 3.50 (br, 1H), 3.40 (br, 2H), 3.37 - 3.34 (m, 3H), 3.20 - 3.07 (m, 1H), 2.74 (br, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.36 - 2.24 (m, 3H), 2.21 - 2.03 (m, 7H), 1.97 - 1.88 (m, 2H), 1.77 - 1.64 (m, 2H), 1.07 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ６９Ｎ１２Ｏ７Ｓについての計算値、１０２９．５１２７、実測値：１０２９．５１０６。
【０３１１】
【化１１６】
2020514252.tif 000185
２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）アセトアミド（例５３）  ポマリドミド（９０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）および２−クロロアセチルクロリド（０．０２６ｍＬ、０．３３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍｌ）溶液を、還流させながら終夜加熱した。室温に冷却した後、反応混合物を濃縮し、得られる残渣を酢酸エチルで洗浄して、中間体２１（７５ｍｇ、６５％）を黄色の固体として得た。撹拌状態の中間体１３（３６ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１ｍＬ）溶液に、ＤＩＥＡ（０．０４３ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）およびパルボシクリブ（３９ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を８０℃で加熱した。出発材料が消費された後、反応液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（３６ｍｇ、５４％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 11.19 (s, 1H), 8.89 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.71 (t, J = 4.2 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.38 (dd, J = 9.1, 2.9 Hz, 1H), 5.87 (p, J = 9.0 Hz, 1H), 4.94 (dd, J = 12.7, 5.3 Hz, 1H), 3.39 (br, 4H), 3.34 (AB, Jab = 17.4 Hz, 1H), 3.27 (AB, Jab = 17.4 Hz, 1H), 2.92 - 2.73 (m, 8H), 2.54 (s, 3H), 2.40 - 2.29 (m, 4H), 2.14 - 2.09 (m, 1H), 2.08 - 2.00 (m, 2H), 1.90 - 1.81 (m, 2H), 1.70 - 1.59 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３９Ｈ４１Ｎ１０Ｏ７についての計算値、７６１．３１５４、実測値：７６１．３１５７。
【０３１２】
ポマリドミド類似体の種々のリンカーの合成
【０３１３】
【化１１７】
2020514252.tif 000186
３−（７−ブロモ−１−オキソイソインドリン−２−イル）ピペリジン−２，６−ジオン（中間体２２）  メチル２−ブロモ−６−（ブロモメチル）ベンゾエート（９７０ｍｇ、３．１６ｍｍｏｌ）、３−アミノピペリジン−２，６−ジオン（６６７ｍｇ、４．０６ｍｍｏｌ）、およびＴＥＡ（０．６２ｍＬ、４．４ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１０ｍｌ）溶液を、還流させながら１６時間加熱した。室温に冷却した後、反応液を濃縮した。得られる残渣に、酢酸エチル（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）を加えた。濾過した後、固体を収集し、乾燥させて、表題化合物（５３４ｍｇ、５４％）を紫色の個体として得た。
【０３１４】
（Ｅ）−３−（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−３−オキソイソインドリン−４−イル）アクリル酸（リンカー２９）  中間体２２（４６ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、アクリル酸（０．０２ｍＬ、０．２９ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２３．３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）、およびＴＥＡ（０．０２ｍＬ、０．１４ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１ｍＬ）溶液を、マイクロ波反応器において１３０℃で３０分間加熱した。室温に冷却した後、混合物を濾過した。溶液を濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（３８ｍｇ、８６％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 12.51 (sbr, 1H), 11.03 (s, 1H), 8.87 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 7.98 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 6.69 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.47 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.35 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 2.98 - 2.86 (m, 1H), 2.62 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 2.42 (qd, J = 13.2, 4.5 Hz, 1H), 2.07 - 1.99 (m, 1H).
【０３１５】
３−（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−３−オキソイソインドリン−４−イル）プロパン酸（リンカー３０）  リンカー２９（２０ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（５ｍｇ）のＭｅＯＨ／ＤＭＳＯ（１：１、２ｍｌ）中の混合物を、Ｈ２雰囲気下で１６時間撹拌した。濾過してＰｄ／Ｃを除去した後、溶液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（１１ｍｇ、５０％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 10.99 (br, 2H), 7.55 - 7.47 (m, 1H), 7.43 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.13 - 5.03 (m, 1H), 4.41 (dd, J = 16.8, 8.8 Hz, 1H), 4.30 (dd, J = 16.8, 8.8 Hz, 1H), 3.33 - 3.27 (m, 2H), 2.97 - 3.84 (m, 1H), 2.63 - 2.55 (m, 3H), 2.43 - 2.38 (m, 1H), 2.06 - 1.98 (m, 1H).
【０３１６】
【化１１８】
2020514252.tif 000187
２−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）オキシ）酢酸（リンカー３１）  丸底フラスコに、２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−４−ヒドロキシイソインドリン−１，３−ジオン（６８ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（２ｍＬ）、ｔｅｒｔ−ブチル−２−ブロモアセテートエステル（０．０４５ｍＬ、０．３ｍｍｏｌ）、炭酸水素ナトリウム（４９ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、およびヨウ化カリウム（１０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を装入した。反応混合物を６０℃で終夜加熱した。室温に冷却した後、不溶性の固体を濾過によって除去した。溶液を集め、濃縮した。得られる残渣をｒｅｖｅｒｓｅ−ＩＳＣＯによって精製して、中間体２３（８３ｍｇ、８６％）を得た。中間体２３（８３ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）をＤＣＭ／ＴＦＡ（２：１、３ｍＬ）に溶解させた。反応液を室温で３時間撹拌した後、溶媒を除去して、表題化合物（６０ｍｇ、９０％）を白色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 11.11 (br, 2H), 7.82 - 7.77 (m, 1H), 7.48 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.11 (ddd, J = 12.8, 5.4, 1.2 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 2.95 - 2.80 (m, 1H), 2.63 - 2.53 (m, 2H), 2.08 - 2.00 (m, 1H).
【０３１７】
【化１１９】
2020514252.tif 000188
（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１−オキソイソインドリン−４−イル）グリシン（リンカー３２）  表題化合物は、リンカー３１の調製と同じ手順を使用して合成した。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 12.66 (br, 1H), 11.03 (s, 1H), 7.29 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.13 (dd, J = 13.3, 4.9 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 4.18 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 3.93 (s, 2H), 2.98 - 2.84 (m, 1H), 2.63 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 2.34 (qd, J = 13.2, 4.1 Hz, 1H), 2.08 - 1.97 (m, 1H).
【０３１８】
【化１２０】
2020514252.tif 000189
３−（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−５−イル）プロパン酸（リンカー３３）  表題化合物は、リンカー３０の調製と同じ手順を使用して合成した。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 11.15 (br, 2H), 7.85 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.76 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.14 (dd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 3.02 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.93 - 2.84 (m, 1H), 2.65 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.60 - 2.53 (m, 2H), 2.08 - 2.04 (m, 1H).
【０３１９】
【化１２１】
2020514252.tif 000190
３−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−オキソイソインドリン−２−イル）ピペリジン−２，６−ジオン（中間体２６）  表題化合物は、中間体２２の調製と同じ手順を使用して合成した（３８％）。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 10.98 (s, 1H), 7.44 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.11 (dd, J = 13.2, 4.8 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 17.3 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 2.96 - 2.82 (m, 1H), 2.66 - 2.53 (m, 2H), 2.02 - 1.96 (m, 1H), 0.99 (s, 9H), 0.26 (s, 6H).
【０３２０】
２−（（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１−オキソイソインドリン−４−イル）オキシ）酢酸（リンカー３４）  表題化合物は、リンカー３１の調製と同じ手順を使用して合成した。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 11.00 (s, 1H), 7.47 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.19 - 5.05 (m, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.41 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 17.3 Hz, 1H), 3.00 - 2.84 (m, 1H), 2.63 - 2.58 (m, 1H), 2.49 - 2.38 (m, 1H), 2.04 - 1.92 (m, 1H).
【０３２１】
【化１２２】
2020514252.tif 000191
３−（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１−オキソイソインドリン−４−イル）プロパン酸（リンカー３５）  表題化合物は、リンカー３０の調製と同じ手順を使用して合成した。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 12.23 (br, 1H), 11.01 (s, 1H), 7.59 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.51 - 7.46 (m, 2H), 5.14 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 17.0 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 2.97 - 2.83 (m, 3H), 2.67 - 2.58 (m, 3H), 2.49 - 2.39 (m, 1H), 2.05 - 1.99 (m, 1H).
【０３２２】
【化１２３】
2020514252.tif 000192
３−（２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）−１，３−ジオキソイソインドリン−４−イル）プロパン酸（リンカー３６）  表題化合物は、リンカー３０の調製と同じ手順を使用して合成した。1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 11.15 (br, 2H), 7.79 - 7.73 (m, 3H), 5.14 (dd, J = 12.9, 5.4 Hz, 1H), 3.27 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.95 - 2.83 (m, 1H), 2.67 - 2.52 (m, 4H), 2.12 - 2.01 (m, 1H).
【０３２３】
例５４〜６１化合物は、リンカー２９〜３６を用い、例４０化合物の調製と同じ手順を使用して合成した。
【０３２４】
【化１２４】
2020514252.tif 000193
黄色固体としての（Ｅ）−３−（７−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロパ−１−エン−１−イル）−１−オキソイソインドリン−２−イル）ピペリジン−２，６−ジオン（例５４）（５２ｍｇ、５８％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 8.74 (d, J = 15.7 Hz, 1H), 8.17 (dd, J = 9.7, 2.7 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.62 - 7.54 (m, 2H), 7.51 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 15.7 Hz, 1H), 5.98 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 5.13 (dd, J = 12.6, 5.4 Hz, 1H), 4.47 (AB, Jab = 16.8 Hz, 1H), 4.43 (AB, Jab = 16.8 Hz, 1H), 3.97 (br, 2H), 3.90 (br, 2H), 3.28 (br, 2H), 3.34 (br, 2H), 2.87 - 2.75 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.50 - 2.44 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.35 - 2.25 (m, 2H), 2.25 - 2.15 (m, 2H), 2.14 - 2.03 (m, 3H), 1.94 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.64 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４０Ｈ４２Ｎ９Ｏ６についての計算値、７４４．３２５３、実測値：７４４．３２７４。
【０３２５】
【化１２５】
2020514252.tif 000194
黄色固体としての４−（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエトキシ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例５５）（２７ｍｇ、５１％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.11 (s, 1H), 8.19 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.88 (br, 1H), 7.76 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.06 - 5.96 (m, 1H), 5.22 - 5.15 (m, 2H), 5.12 (dd, J = 12.7, 5.4 Hz, 1H), 3.93 - 3.76 (m, 4H), 3.45 - 3.24 (m, 4H), 2.95 - 2.69 (m, 3H), 2.53 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.37 - 2.27 (m, 2H), 2.20 - 2.05 (m, 3H), 1.96 - 1.87 (m, 2H), 1.77 - 1.62 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３９Ｈ４０Ｎ９Ｏ８についての計算値、７６２．２９９４、実測値：７６２．３００８。
【０３２６】
【化１２６】
2020514252.tif 000195
黄色固体としての３−（７−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロピル）−１−オキソイソインドリン−２−イル）ピペリジン−２，６−ジオン（例５６）（９ｍｇ、４８％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 8.81 (s, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 2H), 7.63 (s, 1H), 7.31 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.75 -5.70 (m, 1H), 4.93 (dd, J = 13.2, 5.1 Hz, 1H), 3.69 - 3.48 (m, 4H), 3.31 - 3.21 (m, 1H), 3.21 - 3.09 (m, 3H), 3.07 - 3.00 (m, 2H), 2.99 - 2.77 (m, 2H), 2.76 - 2.63 (m, 3H), 2.63 - 2.54 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.28 - 2.16 (m, 4H), 2.15 - 2.02 (m, 3H), 1.94 - 1.85 (m, 2H), 1.75 - 1.65 (m, 2H), 1.55 - 1.44 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４０Ｈ４４Ｎ９Ｏ６についての計算値、７４６．３４０９、実測値：７４６．３４２７。
【０３２７】
【化１２７】
2020514252.tif 000196
３−（４−（（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−オキソイソインドリン−２−イル）ピペリジン−２，６−ジオン（例５７）（３９ｍｇ、８０％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.09 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.34 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.96 (p, J = 8.7 Hz, 1H), 5.14 (dd, J = 13.2, 4.1 Hz, 1H), 4.37 (s, 2H), 4.18 - 4.06 (m, 2H), 3.85 - 3.79  (m, 4H), 3.38 - 3.22 (m, 4H), 2.90 - 2.76 (m, 2H), 2.56 - 2.48 (m, 3H), 2.49 - 2.38 (m, 4H), 2.27 (t, J = 18.1 Hz, 2H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.09 (s, 2H), 1.90 (s, 2H), 1.68 (d, J = 3.0 Hz, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３９Ｈ４３Ｎ１０Ｏ６についての計算値、７４７．３３６２、実測値：７４７．３３７０。
【０３２８】
【化１２８】
2020514252.tif 000197
５−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロピル）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（例５８）（４ｍｇ、３３％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.04 (s, 1H), 7.99 - 7.96 (m, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.82 - 7.78 (m, 1H), 7.74 - 7.70 (m, 1H), 7.67 - 7.63 (m, 1H), 6.31 (s, 1H), 5.99 - 5.93 (m, 1H), 5.04 (dd, J = 11.8, 6.0 Hz, 1H), 3.87 - 3.63 (m, 4H), 3.26 - 3.01 (m, 5H), 2.88 - 2.72 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.35 - 2.22 (m, 2H), 2.19 - 2.10 (m, 1H), 2.08 - 2.04 (m, 2H), 1.92 - 1.87 (m, 2H), 1.74 - 1.63 (m, 2H), 1.30 - 1.26 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４０Ｈ４２Ｎ９Ｏ７についての計算値、７６０．３２０２、実測値：７６０．３２２６。
【０３２９】
【化１２９】
2020514252.tif 000198
３−（４−（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエトキシ）−１−オキソイソインドリン−２−イル）ピペリジン−２，６−ジオン（例５９）（４３ｍｇ、９０％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 8.14 (dd, J = 9.7, 2.8 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.48 - 7.40 (m, 2H), 7.15 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.98 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 5.15 (dd, J = 13.3, 5.1 Hz, 1H), 5.03 (AB, Jab= 14.4 Hz, 1H), 4.99 (AB, Jab = 14.4 Hz, 1H),  4.53 (AB, Jab = 17.4 Hz, 1H), 4.49 (AB, Jab = 17.4 Hz, 1H), 3.90 - 3.67 (m, 4H), 3.42 - 3.20 (m, 4H), 2.96 - 2.73 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.52 - 2.47 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.34 - 2.28 (m, 2H), 2.26 - 2.16 (m, 1H), 2.12 - 2.05 (m, 2H), 1.96 - 1.83 (m, 2H), 1.74 - 1.59 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ３９Ｈ４９Ｎ９Ｏ７についての計算値、７４８．３２０２、実測値：７４８．３２３６。
【０３３０】
【化１３０】
2020514252.tif 000199
３−（４−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロピル）−１−オキソイソインドリン−２−イル）ピペリジン−２，６−ジオン（例６０）（１５ｍｇ、７５％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.12 (s, 1H), 8.11 (dd, J = 9.7, 2.9 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.58 - 7.52 (m, 2H), 7.49 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.01 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.17 (dd, J = 13.3, 5.2 Hz, 1H), 4.56 (q, J = 16.9 Hz, 2H), 3.83 - 3.72 (m, 2H), 3.63 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 3.22 - 3.13 (m, 2H), 3.08 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.03 - 2.97 (m, 1H), 2.94 - 2.82 (m, 5H), 2.59 - 2.49 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.35 - 2.29 (m, 2H), 2.27 - 2.16 (m, 1H), 2.14 - 2.04 (m, 2H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 1.75 - 1.63 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４０Ｈ４４Ｎ９Ｏ６についての計算値、７４６．３４０９、実測値：７４６．３３８２。
【０３３１】
【化１３１】
2020514252.tif 000200
４−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロピル）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（例６１）（１７ｍｇ、４３％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 8.14 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.81 - 7.65 (m, 3H), 7.59 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 5.13 (dd, J = 12.5, 5.3 Hz, 1H), 3.82  - 3.74 (m, 4H), 3.47 - 3.37 (m, 2H), 3.31 - 3.20 (m, 4H), 2.92 - 2.69 (m, 5H), 2.54 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.39 - 2.26 (m, 2H), 2.22 - 2.16 (m, 1H), 2.14 - 2.06 (m, 2H), 1.96 - 1.86 (m, 2H), 1.76 - 1.65 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４０Ｈ４２Ｎ９Ｏ７についての計算値、７６０．３２０２、実測値：７６０．３２１０。
【０３３２】
【化１３２】
2020514252.tif 000201
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（７−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）−１，４−ジアゼパン−１−イル）−７−オキソヘプタンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例６２）  表題化合物は、リンカー４を用い、例４０化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（９ｍｇ、７４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD)  δ 9.10 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.06 - 8.01 (m, 1H), 7.80 - 7.75 (m, 1H), 7.55 - 7.41 (m, 5H), 6.06 - 5.98 (m, 1H), 4.66 - 4.49 (m, 5H), 4.38 (dd, J = 15.4, 4.1 Hz, 1H), 3.93 - 3.77 (m, 5H), 3.77 - 3.54 (m, 4H), 2.52 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.40 - 2.05 (m, 9H), 2.00 - 1.88 (m, 4H), 1.76 - 1.46 (m, 6H), 1.40 - 1.23 (m, 3H), 1.06 - 1.01 (m, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ７０Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１０１６．５１７５、実測値：１０１６．５１６６。
【０３３３】
【化１３３】
2020514252.tif 000202
４−（（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）−１，４−ジアゼパン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−２−（２，６−ジオキソピペリジン−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（例６３）  表題化合物は、リンカー２４を用い、例４０化合物の調製と同じ手順を使用して、黄色の固体として合成した（４ｍｇ、４４％）。回転異性体（３：２）主要なもの1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.02 (s, 1H), 7.81 (dd, J = 9.6, 3.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.37 - 7.33 (m, 2H), 6.92 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.06 - 6.00 (m, 1H), 5.05 (dd, J = 12.8, 5.5 Hz, 1H), 4.24 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 4.16 - 4.14 (m, 1H), 3.96 - 3.79 (m, 4H), 3.74 -3.65 (m, 4H), 2.90 - 2.63 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.40 - 2.28 (m, 2H), 2.16 - 2.06 (m, 2H), 1.98 - 1.87 (m, 4H), 1.78 - 1.65 (m, 2H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ４０Ｈ４３Ｎ１０Ｏ７についての計算値、７７５．３３１１、実測値：７７５．３３１４。
【０３３４】
【化１３４】
2020514252.tif 000203
７−（（（Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（（（Ｓ）−１−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）フェニル）エチル）カルバモイル）ピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−７−オキソヘプタン酸（リンカー３７）  表題化合物は、中間体１の調製と同じ手順を使用して合成した（２２ｍｇ、６４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.23 (s, 1H), 7.48 (dd, J = 12.0, 7.3 Hz, 4H), 5.06 - 5.00 (m, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.59 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.46 - 4.42 (m, 1H), 3.91 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.77 (dd, J = 11.0, 4.0 Hz, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.35 - 2.26 (m, 4H), 2.24 - 2.16 (m, 1H), 1.99 - 1.94 (m, 1H), 1.67 - 1.62 (m, 4H), 1.52 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.45 - 1.34 (m, 2H), 1.06 (s, 9H).
【０３３５】
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−（７−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−７−オキソヘプタンアミド）−３，３−ジメチルブタノイル）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（４−（４−メチルチアゾール−５−イル）フェニル）エチル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例６４）  表題化合物は、リンカー３７を用い、例４０化合物の調製と同じ手順を使用して合成した（１５ｍｇ、３７％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.12 (s, 1H), 8.98 (s, 1H), 8.23 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.45 (q, J = 8.3 Hz, 4H), 6.03 (p, J = 8.8 Hz, 1H), 5.02 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.60 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 4.46 (br, 1H), 3.90 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.85 - 3.74 (m, 5H), 3.39 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.30 (m, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.39 - 2.26 (m, 5H), 2.26 - 2.18 (m, 1H), 2.14 - 2.09 (m, 2H), 2.01 - 1.88 (m, 3H), 1.76 - 1.62 (m, 7H), 1.51 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.46 - 1.41 (m, 2H), 1.06 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５４Ｈ７０Ｎ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１０１６．５１７５、実測値：１０１６．５１５４。
【０３３６】
【化１３５】
2020514252.tif 000204
２−（（３Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−１−（（Ｓ）−１−（（４−（５−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−５−オキソペンタノイル）ピペラジン−１−イル）スルホニル）−３，３−ジメチルブタン−２−イル）−５−（３−クロロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−メチル−２−オキソピペリジン−３−イル）酢酸（例６５）  表題化合物は、例１５化合物の調製と同じ手順を使用して合成した（４ｍｇ、７％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.13 (s, 1H), 8.24 (dd, J = 9.6, 2.8 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.79 (br, 1H), 7.57 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.47 (br, 1H), 7.19 (br, 1H), 7.16 - 7.07 (m, 3H), 7.07 (br, 1H), 7.02 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.08 - 5.98 (m, 1H), 5.09 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.96 (dd, J = 13.6, 11.5 Hz, 1H), 3.87 - 3.67 (m, 8H), 3.55 (dd, J = 11.4, 2.2 Hz, 1H), 3.43 - 3.36 (m, 9H), 3.03 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.94 (dd, J = 13.6, 2.2 Hz, 1H), 2.66 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 2.56 (dd, J = 13.6, 7.0 Hz, 4H), 2.53 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.89 - 2.35 (m, 3H), 2.16 - 2.08 (m, 3H), 2.01 - 1.90 (m, 4H), 1.72 (dd, J = 10.5, 5.4 Hz, 2H), 1.40 (s, 3H), 0.73 (s, 9H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５９Ｈ７３Ｃｌ２Ｎ１０Ｏ９Ｓについての計算値、１１６７．４６５４、実測値：１１６７．４６５３。
【０３３７】
【化１３６】
2020514252.tif 000205
５−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−（（Ｓ）−２−（４−（４−フルオロベンゾイル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）−Ｎ−メチル−５−オキソペンタンアミド（例６６）  表題化合物は、例１５化合物の調製と同じ手順を使用して合成した（９ｍｇ、１８％）。回転異性体（４：３）主要なもの1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 8.41 - 8.15 (m, 3H), 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.56 - 7.50 (m, 1H), 7.30 - 7.20 (m, 2H), 6.08 - 6.00 (m, 1H), 5.46 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.17 - 5.13 (m, 1H), 4.58 - 4.52 (m, 1H), 4.28 - 4.23 (m, 1H), 3.85 - 3.69 (m, 5H), 3.36 - 3.19 (m, 4H), 2.88 (s, 3H), 2.56 - 2.25 (m, 12H), 2.21 - 2.06 (m, 4H), 2.01 - 1.66 (m, 11H), 1.35 (d, J = 7.1 Hz, 4H), 1.34 - 0.84 (m, 7H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５５Ｈ６７ＦＮ１１Ｏ７Ｓについての計算値、１０４４．４９２４、実測値：１０４４．４９４０。
【０３３８】
【化１３７】
2020514252.tif 000206
Ｎ−（６−（３−（４−（（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）（メチル）アミノ）ブトキシ）−５−プロポキシフェノキシ）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）−３，４−ジメトキシベンゼンスルホンアミド（例６７）  中間体２７（１０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１−ヒドロキシ−７−アザベンゾ−トリアゾール）（４．３ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）、および中間体２（５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１ｍｌ）溶液に、室温で、ＮＭＭ（１４μＬ、０．１３ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（６．０５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を加えた。室温で終夜撹拌した後、混合物を分取ＨＰＬＣ（１０％〜１００％のメタノール／Ｈ２Ｏ中０．１％のＴＦＡ）によって精製して、例６７を白色の固体（６ｍｇ、５４％）を得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.15 (dd, J = 10.0, 2.7 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.51 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.18 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 6.04 - 5.97 (m, 1H), 5.72 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 5.61 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 4.52 - 4.25 (m, 2H), 3.97 - 3.83 (m, 4H), 3.82 - 3.78 (m, 3H), 3.75 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.60 (s, 6H), 3.39 (s, 5H), 3.24 (s, 6H), 2.99 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.31 (dt, J = 15.7, 8.4 Hz, 2H), 2.09 (dq, J = 12.3, 7.0 Hz, 2H), 2.02 - 1.87 (m, 4H), 1.83 (p, J = 6.8 Hz, 2H), 1.76 - 1.65 (m, 4H), 1.00 (t, J = 7.4 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５７Ｈ７０Ｎ１１Ｏ１１Ｓ＋についての計算値、１１１６．４９７１、実測値１１１６．４９６１。
【０３３９】
【化１３８】
2020514252.tif 000207
Ｎ−（２−（２−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例６８）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（７ｍｇ、５５％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.05 (s, 1H), 8.16 (dd, J = 9.7, 2.9 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.17 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.14 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.73 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 45.2 Hz, 2H), 3.86 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.82 - 3.71 (m, 14H), 3.59 (d, J = 3.9 Hz, 7H), 3.54 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 3.45 - 3.37 (m, 5H), 3.28 - 3.22 (m, 6H), 2.95 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.50 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.31 (dt, J = 15.2, 7.6 Hz, 2H), 2.09 (s, 2H), 1.92 (dt, J = 15.9, 8.2 Hz, 4H), 1.82 (p, J = 6.3 Hz, 2H), 1.71 (dq, J = 20.6, 6.3, 5.6 Hz, 4H), 1.00 (dd, J = 7.9, 6.8 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６４Ｈ８３Ｎ１２Ｏ１４Ｓ＋についての計算値、１２７５．５８６７、実測値１２７５．５８８７。
【０３４０】
【化１３９】
2020514252.tif 000208
Ｎ−（１５−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデシル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例６９）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（６ｍｇ、４４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.06 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.17 (dd, J = 9.6, 3.0 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 8.5, 1.9 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.20 - 6.11 (m, 1H), 6.05 - 5.92 (m, 1H), 5.75 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.63 - 5.41 (m, 1H), 3.97 (d, J = 43.7 Hz, 2H), 3.88 - 3.84 (m, 2H), 3.83 - 3.68 (m, 13H), 3.62 - 3.56 (m, 14H), 3.54 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 3.45 - 3.38 (m, 5H), 3.35 - 3.19 (m, 8H), 2.95 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 2.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.50 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 2.42 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.30 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 2.09 (s, 2H), 1.95 - 1.87 (m, 4H), 1.82 (q, J = 7.1, 6.7 Hz, 2H), 1.72 (dq, J = 20.9, 7.2 Hz, 4H), 1.01 (td, J = 7.4, 1.2 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６８Ｈ９１Ｎ１２Ｏ１６Ｓ＋についての計算値、１３６３．６３９１、実測値１３６３．６３８７。
【０３４１】
【化１４０】
2020514252.tif 000209
Ｎ−（１８−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−１８−オキソ−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサオクタデシル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例７０）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（９ｍｇ、６４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.09 - 9.04 (m, 1H), 8.18 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 8.4, 1.9 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.75 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.61 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 3.97 (d, J = 42.8 Hz, 2H), 3.86 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.83 - 3.73 (m, 13H), 3.63 - 3.56 (m, 18H), 3.54 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 3.48 - 3.38 (m, 5H), 3.36 - 3.21 (m, 8H), 2.95 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.50 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.31 (dd, J = 12.5, 7.3 Hz, 2H), 2.09 (s, 2H), 1.96 - 1.88 (m, 4H), 1.82 (q, J = 7.2, 6.6 Hz, 2H), 1.72 (dq, J = 25.3, 6.3, 5.6 Hz, 4H), 1.07 - 0.88 (m, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ７０Ｈ９４Ｎ１２Ｏ１７Ｓ＋についての計算値、１４０７．６６５３、実測値１４０７．６６２８。
【０３４２】
【化１４１】
2020514252.tif 000210
Ｎ−（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例７１）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（７ｍｇ、６０％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 8.13 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.54 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.78 (dd, J = 8.6, 1.6 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.01 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 5.73 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 5.64 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 37.0 Hz, 2H), 4.08 (d, J = 31.5 Hz, 2H), 3.87 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.82 - 3.68 (m, 10H), 3.60 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 3.41 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 3.25 (d, J = 1.6 Hz, 8H), 2.98 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 2.50 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 2.43 (d, J = 1.7 Hz, 3H), 2.31 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 2.09 (s, 2H), 1.93 (dd, J = 16.5, 9.0 Hz, 4H), 1.83 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 1.73 (dt, J = 19.8, 9.9 Hz, 4H), 1.00 (td, J = 7.4, 1.7 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５９Ｈ７３Ｎ１２Ｏ１２Ｓ＋についての計算値、１１７３．５１８６、実測値、１１７３．５１９５。
【０３４３】
【化１４２】
2020514252.tif 000211
Ｎ−（４−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−４−オキソブチル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例７２）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（７ｍｇ、５８％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.14 (dd, J = 9.5, 2.9 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.54 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.18 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.14 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.62 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 50.2 Hz, 2H), 3.86 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.78 - 3.66 (m, 7H), 3.61 (s, 3H), 3.41 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 3.31 - 3.18 (m, 10H), 2.95 (s, 3H), 2.52 - 2.46 (m, 5H), 2.42 (s, 3H), 2.31 (q, J = 9.1, 7.5 Hz, 2H), 2.09 (s, 2H), 1.94 - 1.88 (m, 4H), 1.83 (dt, J = 14.3, 7.4 Hz, 4H), 1.76 - 1.66 (m, 4H), 1.00 (t, J = 7.4 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６１Ｈ７７Ｎ１２Ｏ１２Ｓ＋についての計算値、１２０１．５４９９、実測値、１２０１．５４８９。
【０３４４】
【化１４３】
2020514252.tif 000212
Ｎ−（２−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロポキシ）エチル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例７３）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（８ｍｇ、６５％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.05 (s, 1H), 8.10 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.56 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.34 - 7.26 (m, 1H), 7.18 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.84 - 6.72 (m, 1H), 6.67 - 6.50 (m, 1H), 6.14 (s, 1H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.63 (s, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.86 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.83 - 3.72 (m, 15H), 3.60 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 3.56 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.40 (d, J = 1.1 Hz, 4H), 3.26 - 3.22 (m, 5H), 2.96 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.70 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.50 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.42 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.31 (dd, J = 12.5, 7.3 Hz, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.93 (dt, J = 16.9, 8.3 Hz, 4H), 1.86 - 1.79 (m, 2H), 1.72 (dt, J = 19.2, 9.6 Hz, 4H), 1.00 (td, J = 7.5, 1.2 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６２Ｈ７９Ｎ１２Ｏ１３Ｓ＋についての計算値、１２３１．５６０５、実測値、１２３１．５６２１。
【０３４５】
【化１４４】
2020514252.tif 000213
Ｎ−（２−（２−（２−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロポキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例７４）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（８ｍｇ、６１％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.06 (s, 1H), 8.16 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.18 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.14 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 9.0 Hz, 1H), 5.74 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.61 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 36.9 Hz, 2H), 3.85 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.82 - 3.70 (m, 13H), 3.63 - 3.52 (m, 15H), 3.45 - 3.36 (m, 5H), 3.29 - 3.19 (m, 5H), 2.95 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.50 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.30 (d, J = 9.4 Hz, 2H), 2.09 (s, 2H), 1.92 (q, J = 8.3, 7.9 Hz, 4H), 1.81 (p, J = 6.3 Hz, 2H), 1.71 (ddd, J = 23.2, 12.4, 6.2 Hz, 4H), 1.00 (t, J = 7.4 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６６Ｈ８７Ｎ１２Ｏ１５Ｓ＋についての計算値、１３１９．６１２９、実測値、１３１９．６１３２。
【０３４６】
【化１４５】
2020514252.tif 000214
Ｎ−（３−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロピル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例７５）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（９ｍｇ、７６％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.15 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.14 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 6.01 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.74 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 5.61 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 48.7 Hz, 2H), 3.86 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.80 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 3.76 (t, J = 6.6 Hz, 6H), 3.69 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.60 (d, J = 1.2 Hz, 5H), 3.40 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 3.30 - 3.21 (m, 7H), 2.95 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.68 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.51 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.43 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.37 - 2.27 (m, 2H), 2.10 (s, 2H), 1.91 (q, J = 8.1 Hz, 4H), 1.86 - 1.79 (m, 2H), 1.72 (dq, J = 14.0, 7.1 Hz, 4H), 1.00 (td, J = 7.4, 1.2 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５７Ｈ７０Ｎ１１Ｏ１１Ｓ＋についての計算値、１１８７．５３４３、実測値、１１８７．５３５５。
【０３４７】
【化１４６】
2020514252.tif 000215
Ｎ−（５−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−５−オキソペンチル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例７６）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（５ｍｇ、４１％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.17 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.78 (dd, J = 8.5, 1.2 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 6.14 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 6.01 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.73 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 5.62 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.07 - 3.93 (m, 2H), 3.86 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.80 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 3.79 - 3.68 (m, 10H), 3.60 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 3.40 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 3.34 - 3.23 (m, 7H), 2.95 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 2.50 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 2.48 - 2.38 (m, 5H), 2.31 (q, J = 9.0, 7.5 Hz, 2H), 2.10 (s, 2H), 1.92 (dt, J = 15.5, 7.9 Hz, 4H), 1.82 (p, J = 6.3 Hz, 2H), 1.72 (dq, J = 20.1, 6.3, 5.5 Hz, 4H), 1.61 (dq, J = 28.9, 7.8 Hz, 4H), 1.00 (td, J = 7.5, 1.3 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６２Ｈ７９Ｎ１２Ｏ１２Ｓ＋についての計算値、１２１５．５６５６、実測値、１２１５．５６３７。
【０３４８】
【化１４７】
2020514252.tif 000216
Ｎ−（６−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−６−オキソヘキシル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例７７）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（６ｍｇ、４１％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.16 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.53 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 8.5, 1.9 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.14 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 6.05 - 5.93 (m, 1H), 5.74 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 5.62 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 46.5 Hz, 2H), 3.86 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.81 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 3.79 - 3.69 (m, 10H), 3.60 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 3.41 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 3.25 (d, J = 1.3 Hz, 7H), 2.95 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 2.50 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 2.43 (d, J = 6.8 Hz, 5H), 2.31 (q, J = 9.0, 7.5 Hz, 2H), 2.09 (s, 2H), 1.92 (dt, J = 15.7, 8.0 Hz, 4H), 1.82 (q, J = 7.1, 6.6 Hz, 2H), 1.73 (ddt, J = 16.9, 10.7, 6.1 Hz, 4H), 1.59 (dp, J = 38.0, 7.4 Hz, 4H), 1.38 (p, J = 7.8 Hz, 2H), 1.01 (td, J = 7.4, 1.3 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６３Ｈ８０Ｎ１２Ｏ１２Ｓ＋についての計算値、１２２９．５８１２、実測値、１２２９．５８０２。
【０３４９】
【化１４８】
2020514252.tif 000217
Ｎ−（７−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−７−オキソヘプチル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例７８）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（８ｍｇ、６４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 8.18 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.53 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.22 - 7.16 (m, 1H), 7.13 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.14 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 6.00 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.74 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 5.61 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 44.8 Hz, 2H), 3.85 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.82 - 3.67 (m, 13H), 3.60 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 3.41 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 3.26 (dd, J = 10.4, 3.4 Hz, 7H), 2.94 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 2.50 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 2.43 (d, J = 5.7 Hz, 5H), 2.36 - 2.29 (m, 2H), 2.09 (s, 2H), 1.92 (p, J = 7.6 Hz, 4H), 1.81 (p, J = 6.4 Hz, 2H), 1.72 (dq, J = 19.2, 6.7 Hz, 4H), 1.59 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 1.53 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.36 (s, 4H), 1.03 - 0.89 (m, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６４Ｈ８３Ｎ１２Ｏ１２Ｓ＋についての計算値、１２４３．５９６９、実測値、１２４３．５９６７。
【０３５０】
【化１４９】
2020514252.tif 000218
Ｎ−（８−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−８−オキソオクチル）−２−（（４−（３−（（６−（（３，４−ジメトキシフェニル）スルホンアミド）−１，３−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−５−イル）オキシ）−５−プロポキシフェノキシ）ブチル）（メチル）アミノ）アセトアミド（例７９）  表題化合物は、例６７化合物の調製と同じ手順を使用して、白色の固体として合成した（８ｍｇ、６４％）。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 8.19 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.18 (dd, J = 8.4, 2.1 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.14 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.01 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.75 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.60 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 48.0 Hz, 2H), 3.85 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.83 - 3.69 (m, 13H), 3.61 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 3.41 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 3.28 - 3.21 (m, 7H), 2.94 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.50 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.43 (q, J = 3.4 Hz, 5H), 2.31 (dd, J = 12.5, 7.5 Hz, 2H), 2.10 (s, 2H), 1.96 - 1.87 (m, 4H), 1.82 (q, J = 7.1, 6.6 Hz, 2H), 1.78 - 1.66 (m, 4H), 1.59 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 1.56 - 1.48 (m, 2H), 1.34 (s, 6H), 1.03 - 0.90 (m, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ６５Ｈ８５Ｎ１２Ｏ１２Ｓ＋についての計算値、１２５７．６１２５、実測値、１２５７．６１０３。
【０３５１】
【化１５０】
2020514252.tif 000219
ｔｅｒｔ−ブチル２−（２−（（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−１−（（Ｓ）−３−メチル−２−（１−オキソイソインドリン−２−イル）ブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド）メチル）−５−（４−メチルチアゾール−５−イル）フェノキシ）アセテート（中間体２８）  （２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）−１−（（Ｓ）−３−メチル−２−（１−オキソイソインドリン−２−イル）ブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド（１２４ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（１３０ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル−２−ブロモ−アセテートエステル（０．０３７ｍｍＬ、０．２５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を５０℃で１８時間撹拌した。室温に冷却した後、混合物を濾過して、溶解させることのできない材料を除去した。濾液を減圧下で濃縮した。得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（５２ｍｇ、３４％）を褐色の油状物として得た。1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ 9.10 (s, 1H), 7.80 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.67 - 7.57 (m, 2H), 7.56 - 7.47 (m, 2H), 7.11 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 4.88 - 4.85 (m, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.68 - 4.46 (m, 6H), 3.99 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.91 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.50 - 2.40 (m, 1H), 2.27 - 2.18 (m, 1H), 2.15 - 2.05 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.04 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
【０３５２】
（２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−（２−（２−（４−（６−（（６−アセチル−８−シクロペンチル−５−メチル−７−オキソ−７，８−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）アミノ）ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエトキシ）−４−（４−メチルチアゾール−５−イル）ベンジル）−４−ヒドロキシ−１−（（Ｓ）−３−メチル−２−（１−オキソイソインドリン−２−イル）ブタノイル）ピロリジン−２−カルボキサミド（例１２６）  中間体２８（５２ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ／ＴＦＡ（２：１、３ｍＬ）に溶解させた。溶液を室温で３時間撹拌した後、濃縮した。残渣をＤＣＭ／ＤＭＦ（３：１、２ｍＬ）に溶解させた。得られる溶液に、パルボシクリブ（３３ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ（２５ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（０．０４ｍｌ、０．２４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。濃縮した後、得られる残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（３２ｍｇ、４０％）を黄色の固体として得た。1H NMR (600 MHz, メタノール-d4) δ 9.07 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.18 (dd, J = 9.7, 2.9 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.58 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.48 - 7.44 (m, 2H), 7.12 - 7.07 (m, 2H), 5.99 (p, J = 8.9 Hz, 1H), 5.14 - 5.00 (m, 2H), 4.88 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.62 - 4.41 (m, 6H), 4.02 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.96 (dd, J = 11.1, 3.9 Hz, 1H), 3.91 - 3.83 (m, 4H), 3.39 - 3.30 (m, 4H), 2.53 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.43 - 2.38 (m, 1H), 2.37 - 2.23 (m, 3H), 2.16 - 2.05 (m, 3H), 1.98 - 1.85 (m, 2H), 1.76 - 1.66 (m, 2H), 1.03 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 6.6 Hz, 3H).ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋  Ｃ５５Ｈ６２Ｎ１１Ｏ８Ｓ＋についての計算値，１０３６．４４９８、実測値，１０３６．４５０８。
【０３５３】
材料および方法：
化学的一般法
すべての化合物についてのＨＰＬＣスペクトルを、Ａｇｉｌｅｎｔ１２００シリーズのシステムをＤＡＤ検出器と共に使用して取得した。クロマトグラフィーは、２．１×１５０ｍｍのＺｏｒｂａｘ３００ＳＢ−Ｃ１８  ５μｍカラムにおいて、溶媒Ａとしての０．１％のギ酸を含有する水および溶媒Ｂとしての０．１％のギ酸を含有するアセトニトリルを用い、０．４ｍｌ／分の流量で実施した。勾配プログラムは、次のとおりである：１％のＢ（０〜１分）、１〜９９％のＢ（１〜４分）、および９９％のＢ（４〜８分）。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）データは、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｇ１９６９Ａ  ＡＰＩ−ＴＯＦを使用し、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）源を用い、陽イオンモードで取得した。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  ＤＲＸ−６００分光計において、プロトン（１Ｈ  ＮＭＲ）については６００ＭＨｚ、炭素（１３Ｃ  ＮＭＲ）については１５０ＭＨｚで取得しており、化学シフトを（δ）で報告する。分取ＨＰＬＣは、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｒｅｐ  １２００シリーズにおいて、２５４ｎｍに設定したＵＶ検出器を用いて実施した。サンプルをＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ７５×３０ｍｍ、５μｍ、Ｃ１８カラムに室温で注入した。流量は、４０ｍｌ／分とした。Ｈ２Ｏ中１０％（または５０％）のＭｅＯＨ（Ａ）（０．１％のＴＦＡ含有）（Ｂ）から１００％のＭｅＯＨ（Ａ）の線形勾配を使用した。ＨＰＬＣを使用して、ターゲット化合物の純度を確かめた。上述のＨＰＬＣ法を使用すると、すべての最終化合物が、９５％より高い純度を有した。
【０３５４】
細胞培養
乳がん細胞株（ＭＣＦ７、Ｔ４７Ｄ、およびＺＲ−７５−１）および黒色腫細胞株（Ａ３７５、ＳＫ−ＭＥＬ−２、ＳＫ−ＭＥＬ−３０、およびＷＭ１３８２）を、１０％ＦＢＳが補足されたＤＭＥＭまたはＲＰＭＩにおいて、ペニシリンおよびストレプトマイシンの存在下で培養した。
【０３５５】
細胞生存度アッセイ
異なる化合物の存在下で細胞を７〜１１日間培養した。化合物を含んだ培地を２日毎に補充した。実験終了時に、培地を吸引し、生細胞を０．５％のクリスタルバイオレット染料で染色した。
【０３５６】
ＢｒｄＵ細胞増殖アッセイ
ＢｒｄＵ細胞増殖キット（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を製造者の指示通りに使用して、ＢｒｄＵ取込みを測定した。簡潔に述べると、９６ウェルプレートにおいてＥＲ＋または黒色腫細胞を１×１０５細胞／ｍｌで播いた。翌日、培養した細胞を、異なる濃度のアベマシクリブまたはパルボシクリブで１２時間処理した後、ＢｒｄＵ標識溶液と共に４時間インキュベートした。分光光度計マイクロプレートリーダーを４５０／５５０ｎｍの二重波長で用い、ＢｒｄＵ吸光度を測定した。測定された吸光度は、細胞増殖の度合いを反映していた。各群を３通りに培養した。
【０３５７】
定量的リアルタイムＰＣＲ分析
細胞をＣＤＫ４／６ｉで２４時間処理し、ＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｎｉキット（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して全ＲＮＡを抽出した。ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ  ＩＩＩ  Ｆｉｒｓｔ  Ｓｔｒａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）を用いて相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）を合成した。ＡＢＩ−７５００  Ｆａｓｔ  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍを用い、Ｆａｓｔ  ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘを使用して、定量的リアルタイムＰＣＲを実施した。ハウスキーピング遺伝子ＧＡＰＤＨを使用して、サンプルを標準化した。発現の差を、ΔΔＣＴ法を使用して算出した。
【０３５８】
ＰＣＲ分析では、以下のプライマー配列を使用した。
ＧＡＰＤＨ：
Ｆ：５’−ＡＣＡＡＣＴＴＴＧＧＴＡＴＣＧＴＧＧＡＡＧＧ−３’（配列番号１）；
Ｒ：５’−ＧＣＣＡＴＣＡＣＧＣＣＡＣＡＧＴＴＴＣ−３’（配列番号２）
ＣＤＫ４：
Ｆ：５’−ＣＴＧＧＴＧＴＴＴＧＡＧＣＡＴＧＴＡＧＡＣＣ−３’（配列番号３）；
Ｒ：５’−ＧＡＴＣＣＴＴＧＡＴＣＧＴＴＴＣＧＧＣＴＧ−３’（配列番号４）
ＣＤＫ６：
Ｆ：５’−ＴＣＴＴＣＡＴＴＣＡＣＡＣＣＧＡＧＴＡＧＴＧＣ−３’（配列番号５）；
Ｒ：５’−ＴＧＡＧＧＴＴＡＧＡＧＣＣＡＴＣＴＧＧＡＡＡ−３’（配列番号６）
ＣＣＮＡ２：
Ｆ：５’−ＣＧＣＴＧＧＣＧＧＴＡＣＴＧＡＡＧＴＣ−３’（配列番号７）；
Ｒ：５’−ＧＡＧＧＡＡＣＧＧＴＧＡＣＡＴＧＣＴＣＡＴ−３’（配列番号８）
ＰＬＫ１：
Ｆ：５’−ＣＡＣＣＡＧＣＡＣＧＴＣＧＴＡＧＧＡＴＴＣ−３’（配列番号９）；
Ｒ：５’−ＣＣＧＴＡＧＧＴＡＧＴＡＴＣＧＧＧＣＣＴＣ−３’（配列番号１０）
【０３５９】
ウエスタンブロットアッセイ
細胞可溶化液からＢＣＡによってタンパク質濃度を求め、等しい量のタンパク質をＢｉｓ−Ｔｒｉｓ  ４〜１２％ゲルに載せた。１×泳動緩衝液（２５ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ８．３、１．９２Ｍのグリシン、０．１％のＳＤＳ）を使用して、ゲルを８０Ｖで４時間泳動にかけた。転写緩衝液（２５ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ８．３、１．９２Ｍのグリシン、２０％のメタノール）を使用して、タンパク質を１００Ｖで２時間かけてニトロセルロース膜に移した。ポンソーＳ染色（０．１％のポンソーＳ、１％の酢酸）を使用して、タンパク質の膜への転写を確認した後、ブロッキング緩衝液（ＴＢＳ中５％の無脂肪粉乳、０．１％のＴｗｅｅｎ、０．０２％のアジ化ナトリウム）を使用して、膜を室温で３０分間ブロッキングした。ブロッキングされた膜を、ブロッキング緩衝液中にて一次抗体（１：１０００希釈）と共に４℃で終夜インキュベートした。一次リン光体抗体を使用したときは、乳の代わりに５％ＢＳＡと共に膜をインキュベートした。膜を洗浄緩衝液（ＴＢＳ中０．１％のＴｗｅｅｎ）で１０分ずつ３回洗浄した後、ＴＢＳ中２．５％の無脂肪粉乳、０．１％のＴｗｅｅｎ中にて二次ＨＲＰ結合抗体（１：５０００希釈）と共に室温で１時間インキュベートした。膜を洗浄緩衝液（ＴＢＳ中０．１％のＴｗｅｅｎ）で１０分ずつ３回洗浄した。膜をＥＣＬと共に１分間インキュベートし、青いオートラジオグラフィックフィルムに暴露した後、タンパク質を検出した。
【０３６０】
実施例５  ＣＤＫ４／６阻害剤は、高濃度ではＣＤＫ４／６活性を抑制しない
ＭＣＦ７、Ｔ４７Ｄ、またはＺＲ−７５−１乳がん細胞を、０、０．１、０．３、１、３、１０、または３０μＭのパルボシクリブ（ＰＢ）またはアベマシクリブ（ＡＢ）で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ホスホ−Ｒｂ、ＰＬＫ１、サイクリンＡ、ならびに（対照としての）全Ｒｂおよびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした（図１、パネルＡおよびＢ）。同様に、ＳＫ−ＭＥＬ−２、ＳＫ−ＭＥＬ−３０、またはＭＣＦ７黒色腫細胞を、０、０．１、０．３、１、３、１０、または３０μＭのパルボシクリブ（ＰＢ）、アベマシクリブ（ＡＢ）、または２１９４７６で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ホスホ−Ｒｂ、ＰＬＫ１、サイクリンＡ、ならびに（対照としての）全Ｒｂおよびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした（図１、パネルＣ、Ｄ、およびＥ）。結果から、試験した３種すべてのＣＤＫ４／６阻害剤が、狭い活性枠しかもたなかったことが示唆された。これら阻害剤は、予想どおり、低濃度で投与すると、乳がんまたは黒色腫細胞において、（Ｒｂリン酸化（ｐＲｂレベル）によって証明されるとおり）ＣＤＫ４／６活性を抑制せず、驚いたことに、高濃度（たとえば、約１０μＭ以下の濃度）で投与しても、ＣＤＫ４／６活性を抑制しなかった。
【０３６１】
実施例６  ＣＤＫ４／６阻害剤は、ＰＬＫ１およびサイクリンＡ  ｍＲＮＡの発現を増加させる
ＭＣＦ７、Ｔ４７Ｄ、もしくはＺＲ−７５−１乳がん細胞、またはＳＫ−ＭＥＬ−２もしくはＳＫ−ＭＥＬ−３０黒色腫細胞を、０、１、７．５、１５、または３０μＭのパルボシクリブまたはアベマシクリブで２４時間処理し、次いで、溶解させ、Ｒｂ／Ｅ２Ｆ下流ターゲットであるＰＬＫ１およびサイクリンＡ（ＣＣＮＡ２）の発現についてのＰＣＲ分析にかけた。パルボシクリブもアベマシクリブも、ｍＲＮＡレベルではＰＬＫ１またはサイクリンＡの発現を抑制せず、実際のところ、阻害剤濃度の上昇と遺伝子発現の増加とには正相関があった（図２および３）。このデータは、ＣＤＫ４／６阻害剤が、高濃度で投与されるとＣＤＫ４／６活性を抑制しないことの説明となる機構的事実を示唆している。
【０３６２】
実施例７  ＣＤＫ４／６阻害剤は、高濃度では細胞増殖をそれほど有効に抑制しない
ＭＣＦ７、Ｔ４７Ｄ、もしくはＺＲ−７５−１乳がん細胞、またはＳＫ−ＭＥＬ−２もしくはＳＫ−ＭＥＬ−３０黒色腫細胞を、０、０．３、１、３、１０、２０、または３０μＭのパルボシクリブまたはアベマシクリブで１６時間処理し、ＢｒｄＵ組込みアッセイを使用して、Ｓ期の細胞周期進行を明らかにした。実施例５および６（上記）における結果と一致して、結果から、阻害剤濃度の上昇と細胞周期進行の抑制とに逆相関があったことが示された（図４）。
【０３６３】
実施例８  ＣＤＫ４／６阻害剤は、ＣＤＫ４／６の発現を増加させる
ＭＣＦ７、Ｔ４７Ｄ、もしくはＺＲ−７５−１乳がん細胞、またはＳＫ−ＭＥＬ−２黒色腫細胞を、０、０．１、０．３、１、３、１０、または３０μＭのパルボシクリブ（ＰＢ）またはアベマシクリブ（ＡＢ）で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。結果からは、ＣＤＫ４／６阻害剤のＣＤＫ４およびＣＤＫ６活性阻害能にもかかわらず、阻害剤は、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６両方の発現を実際には上向き調節し、阻害剤濃度の上昇とＣＤＫ４／６発現の増加とに正相関があることが示された（図５、パネルＡ〜Ｃ）。このデータは、ＣＤＫ４／６阻害剤濃度とＰＬＫ１およびサイクリンＡ  ｍＲＮＡの発現増加の間にある正相関の説明となる機構的事実を示唆している。
【０３６４】
ＭＣＦ７、Ｔ４７Ｄ、またはＺＲ−７５−１乳がん細胞を、０、１、７．５、１５、または３０μＭのパルボシクリブまたはアベマシクリブで２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ４の発現についてのＰＣＲ分析にかけた。ＣＤＫ４／６阻害剤は、ＣＤＫ４  ｍＲＮＡの発現を上向き調節せず（図６）、ＣＤＫ４／６阻害剤が、（転写を増進するまたはｍＲＮＡ半減期を延長するのではなく）タンパク質分解を阻害することによりＣＤＫ４／６タンパク質発現を増加させることが示唆された。
【０３６５】
上記発見を確認するために、Ｖ５でタグ付けされたＣＤＫ４またはＶ５でタグ付けされたＣＤＫ６を異所性に発現する２９３Ｈ細胞を、１、３、または１０μＭのパルボシクリブ（ＰＢ）、アベマシクリブ（ＡＢ）、またはリボシクリブ（ＲＩＢ）で２４時間処理し、次いで、溶解させ、（Ｖ５でタグ付けされたＣＤＫ４またはＣＤＫ６を検出するための）Ｖ５およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。図５と一致して、調べた３種すべてのＣＤＫ４／６阻害剤によって、Ｖ５でタグ付けされたＣＤＫ４およびＣＤＫ６の発現が上向き調節された（図７）。
【０３６６】
実施例９  ＣＤＫ４／６阻害剤は、ＣＤＫ４のユビキチン化を妨げる
Ｖ５でタグ付けされたＣＤＫ４とＨＡでタグ付けされたユビキチンを異所性に同時発現する２９３Ｈ細胞を、１または１０μＭのパルボシクリブまたはアベマシクリブで２４時間処理し、次いで、溶解させ、１）（Ｖ５でタグ付けされたＣＤＫ４を引き出すために）Ｖ５抗体を用いて免疫沈降にかけた後、（ＨＡでタグ付けされたユビキチンを検出するために）ＨＡについて免疫ブロットするか、または２）Ｖ５、ＨＡ、およびアクチンに対する抗体で、そのまま免疫ブロットした。データから、ＣＤＫ４／６阻害剤が、ＣＤＫ４のユビキチン化を阻害し、したがって、これを分解から保護し、ＣＤＫ４の細胞内レベルを上昇させることが示唆された（図８、パネルＡ）。
【０３６７】
Ｔ４７Ｄ乳がん細胞を、１または１０μＭのアベマシクリブの存在下または非存在下、プロテアソーム阻害剤ＭＧ１３２で２４時間処理し、次いで、溶解させ、１）ＣＤＫ４抗体を用いた免疫沈降にかけた後、ユビキチンについて免疫ブロットするか、または２）ユビキチン、ＣＤＫ４、およびアクチンに対する抗体でそのまま免疫ブロットした。Ｖ５でタグ付けされたＣＤＫ４についての上の結果と一致して、データから、ＣＤＫ４／６阻害剤が、未変性ＣＤＫ４のユビキチン化を阻害することが示された（図８、パネルＢ）。
【０３６８】
実施例１０  ＣＤＫ４／６発現の増加は、ＣＤＫ４／６阻害剤有効性の低下と関連付けられる
ＭＣＦ７細胞を１μＭのパルボシクリブで１２週間処理することにより、パルボシクリブに抵抗性であるＭＣＦ７乳がん細胞（ＭＣＦ７−ＰＢＲ）を作製した。次いで、ＭＣＦ７−ＰＢＲ細胞を１、３、または１０μＭのパルボシクリブ（ＰＢ）で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲＢ）、Ｒｂ（ＲＢ）、ＰＬＫ１、サイクリンＡ、ＣＤＫ２、ＣＤＫ６、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした（図９）。これらの結果によって、ＭＣＦ７−ＰＢＲ細胞のパルボシクリブに対する抵抗性が確認され、この抵抗性が、ＣＤＫ６の発現の増進と関連していることが証明された（アクチン対照が、ＭＣＦ７およびＭＣＦ７−ＰＢＲレーンにおける全タンパク質に等しい量を示すことに注目しながら、ＭＣＦ７レーンにおけるＣＤＫ６レベルを、ＭＣＦ７−ＰＢＲレーンのいずれかにおけるＣＤＫ６レベルと比較する）。
【０３６９】
実施例１１  パルボシクリブは、Ｒｂリン酸化を、ＥＲ＋乳がん細胞においてより有効に抑制する
ＭＣＦ７もしくはＴ４７Ｄ乳がん細胞、またはＳＫ−ＭＥＬ−２、Ａ３７５、もしくはＷＭ１３８２黒色腫細胞を、０．５μＭのパルボシクリブで２４時間処理し、または処理せず、次いで、溶解させ、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、サイクリンＡ、ＰＬＫ１、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした（図９）。結果から、パルボシクリブが、Ｒｂリン酸化を、黒色腫細胞よりＥＲ＋乳がん細胞において有効に抑制することが示された。
【０３７０】
実施例１２  ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤は、ＣＤＫ４／６活性を阻害し、ＣＤＫ４／６発現を抑制する
ＭＣＦ７乳がん細胞を、１または５μＭのＸＹ０１９−０９５、ＸＹ０１９−０９８、ＸＹ０１９−０１００、ＸＹ０１９−１０５Ａ、ＸＹ０１９−１０５Ｂ、ＸＹ０１９−１０６、またはＸＹ０１９−１０８で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした（図１０、パネルＡ）。結果から、ＸＹ０１９−０９８、ＸＹ０１９−１０６、およびＸＹ０１９−１０８が、１μＭでさえ、ＣＤＫ４／６発現の抑制において特に有効であり、この効果が、５μＭでも減少しなかったことが示された。Ｔ４７Ｄ乳がん細胞を、０．１、０．３、１、３、１０、または３０μＭのＸＹ０１９−１０６で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲＢ）、ＣＤＫ４、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした（図１０、パネルＢ）。結果から、ＸＹ０１９−１０６が、ＣＤＫ４発現を抑制し、（Ｒｂリン酸化の減少によって証明されるとおり）ＣＤＫ４活性も阻害し、０．３μＭ程度の低い濃度で有意に有効であることが示された。さらに、ＸＹ０１９−１０６は、パルボシクリブなどのＣＤＫ４／６阻害剤とは異なり、高濃度（たとえば、３０μＭ程度の高い濃度）で投与されたときでさえ、Ｒｂリン酸化を阻害した。
【０３７１】
ＳＫ−ＭＥＬ−２またはＡ３７５黒色腫細胞（図１１、パネルＡおよびＢ）を、１または３μＭのＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−００２、ＸＹ０２８−００３、ＸＹ０２８−００４、ＸＹ０２８−００５、ＸＹ０２８−００６、またはＸＹ０２８−００７で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。同様に、Ａ３７５黒色腫細胞を、１または３μＭのパルボシクリブ（ＰＢ）、ＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−００３、ＸＹ０２８−０８２、ＸＹ０２８−０８３、ＸＹ０２８−０８４、またはＸＹ０２８−０８５で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ６、ＣＤＫ４、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、サイクリンＡ、ＰＬＫ１、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした（図１１、パネルＣ）。
【０３７２】
結果から、ＣＤＫ４／６発現および（Ｒｂリン酸化の減少によって証明される）ＣＤＫ４／６活性両方の阻害における、ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤、特に、ＸＹ０１９−１０６およびＸＹ０２８−００３の有効性が確認された。
【０３７３】
Ａ３７５黒色腫細胞（図１２、パネルＡ）を、１または３μＭのパルボシクリブ（ＰＢ）、ＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−００３、ＸＹ０２８−１３２、ＸＹ０２８−１３３、ＸＹ０２８−１１４、ＸＹ０２８−０９７、ＸＹ０２８−１０５、またはＸＹ０２８−１０６で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。同様に、Ａ３７５黒色腫細胞を、１または３μＭのパルボシクリブ（ＰＢ）、ＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−００３、ＸＹ０２８−１３２、ＸＹ０２８−１３３、ＸＹ０２８−１４０、ＸＹ０２８−１４１、ＸＹ０２８−１４２、またはＸＹ０２８−１４３で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ６、ＣＤＫ４、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、サイクリンＡ、ＰＬＫ１、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした（図１２、パネルＢ）。同様に、Ａ３７５黒色腫細胞を、１または３μＭのＸＹ０２８−１３２、ＸＹ０２８−１３３、ＸＹ０２８−１４０、ＸＹ０２８−１４１、ＸＹ０２８−１４２、ＸＹ０２８−１４３、ＸＹ０２８−１４４、またはＸＹ０２８−１４５で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ６、ＣＤＫ４、サイクリンＡ、ＰＬＫ１、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした（図１２、パネルＣ）。同様に、Ａ３７５黒色腫細胞を、１または３μＭのパルボシクリブ（ＰＢ）、ＸＹ０１９−１０６、ＸＹ０２８−１０３、ＸＹ０２８−１０８、ＸＹ０２８−１３２、ＸＹ０２８−１３３、またはＸＹ０２８−１４０で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ６、ＣＤＫ４、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、サイクリンＡ、ＰＬＫ１、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした（図１２、パネルＤ）。
【０３７４】
結果から、ＣＤＫ４／６発現および（Ｒｂリン酸化の減少によって証明される）ＣＤＫ４／６活性両方の阻害における、ＣＤＫ４／６分解剤、特に、ＸＹ０２８−１３３、ＸＹ０２８−１４０、ＸＹ０１９−１０６、およびＸＹ０２８−００３の有効性が確認された。
【０３７５】
Ａ３７５黒色腫細胞（図１３）を、１または３μＭのリボシクリブ（ＲＢ）、ＹＸ０３０−１２６、ＹＸ０３０−１０８、ＹＸ０３０−１０７、ＹＸ０３０−０８６、ＹＸ０３０−０８５、またはＸＹ０２８−１３３で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、サイクリンＡ、ＰＬＫ１、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。
【０３７６】
結果から、リボシクリブ系ＣＤＫ４／６分解剤、特に、ＹＸ−０８５が、ＣＤＫ４／６発現および（Ｒｂリン酸化の減少によって証明される）ＣＤＫ４／６活性両方の阻害において、同様に有効であることが証明された。
【０３７７】
Ａ３７５黒色腫細胞（図１４）を、１または３μＭのアベマシクリブ（ＡＢ）、ＹＸ０３０−１２５、ＹＸ０３０−１１７、ＹＸ０３０−１１８、またはＸＹ０２８−１３３で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、サイクリンＡ、ＰＬＫ１、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。
【０３７８】
ＺＲ−７５−１乳がん細胞（図１５、パネルＡ）またはＳＫ−ＭＥＬ−２黒色腫細胞（図１５、パネルＢ）を、１または５μＭのアベマシクリブ（ＡＢ）、ＹＸ２６−５６、ＹＸ２６−５８、またはＹＸ２６−６６で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、全Ｒｂ、ＰＬＫ１、サイクリンＡ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。結果から、アベマシクリブ系ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤が、ＣＤＫ４／６発現および（Ｒｂリン酸化の減少によって証明される）ＣＤＫ４／６活性両方の阻害において、同様に有効であることが証明された。
【０３７９】
Ａ３７５黒色腫細胞（図１６、パネルＡ）を、０．３または１μＭのＸＹ０２８−１４０、ＹＸ０３９−６５、ＹＸ０３９−４８、ＹＸ０３９−１２３、ＹＸ０３９−５６、ＹＸ０３９−１２４、またはＹＸ０３９−１４７で２４時間処理した。Ａ３７５黒色腫細胞を、１または３μＭのＸＹ０２８−１４０、ＹＸ０３９−５６、ＹＸ０３９−６５、またはＸＹ０２８−１３３で処理した（図１６、パネルＢ）。細胞を溶解させ、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、全Ｒｂ、ＰＬＫ１、サイクリンＡ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。結果から、ＣＤＫ４／６発現および（Ｒｂリン酸化の減少によって証明される）ＣＤＫ４／６活性両方の阻害における、ＣＤＫ４／６分解剤、特に、ＸＹ０２８−１３３の有効性が確認された。
【０３８０】
Ｔ４７Ｄ乳がん細胞（図１７）を、０．３または１μＭのＸＹ０２８−１４０、ＹＸ０３９−４８、ＹＸ０３９−１２３、ＹＸ０３９−５６、ＹＸ０３９−１２４、ＹＸ０３９−６５、ＹＸ０３９−１４７、またはＹＸ０３９−７４で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、全Ｒｂ、ＰＬＫ１、サイクリンＡ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。結果から、ＣＤＫ４／６発現および（Ｒｂリン酸化の減少によって証明される）ＣＤＫ４／６活性両方の阻害における、ＣＤＫ４／６分解剤、特に、ＸＹ０２８−１４０およびＹＸ０３９−１２３の有効性が確認された。
【０３８１】
Ａ３７５黒色腫細胞（図１８）を、１または３μＭのＸＹ０２８−１３３、ＹＸ０４４−１８、ＹＸ０４４−２２、ＸＹ０２８−１４０、ＹＸ０４４−１９、またはＹＸ０４４−３８で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、全Ｒｂ、ＰＬＫ１、サイクリンＡ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。結果から、ＣＤＫ４／６発現および（Ｒｂリン酸化の減少によって証明される）ＣＤＫ４／６活性両方の阻害における、ＣＤＫ４／６分解剤、特に、ＸＹ０２８−１３３およびＹＸ０４４−１８の有効性が確認された。
【０３８２】
Ｔ４７Ｄ乳がん細胞（図１９）を、０．３または１μＭのＸＹ０２８−１３３、ＹＸ０４４−１８、ＹＸ０４４−２２、ＸＹ０２８−１４０、ＹＸ０４４−１９、またはＹＸ０４４−３８で２４時間処理し、次いで、溶解させ、ホスホ−Ｒｂ（ｐＲｂ）、全Ｒｂ、ＰＬＫ１、サイクリンＡ、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６、およびアクチンに対する抗体で免疫ブロットした。結果から、ＣＤＫ４／６発現および（Ｒｂリン酸化の減少によって証明される）ＣＤＫ４／６活性両方の阻害における、ＣＤＫ４／６分解剤、特に、ＸＹ０２８−１４０、ＹＸ０４４−２２、およびＹＸ０４４−１９の有効性が確認された。
【０３８３】
実施例１３  ＣＤＫ４／６分解剤／破壊剤は、がん細胞増殖を阻害する
Ａ３７５黒色腫細胞（図２０）を、１または２μＭのパルボシクリブまたはＸＹ０２８−１３３で７日間処理した。明視野画像処理によって、黒色腫細胞では、ＸＹ０２８−１３３が、がん細胞増殖の阻害において、同じ濃度ではパルボシクリブより有効であったことが示された。
【０３８４】
Ａ３７５黒色腫細胞（図２１）を、０．０３、０．１、０．３、１、または３μＭのパルボシクリブまたはＸＹ０２８−１３３で１１日間処理した。クリスタルバイオレット染色によって、黒色腫細胞では、ＸＹ０２８−１３３が、がん細胞増殖の阻害において、１および３μＭでパルボシクリブより有効であったことが示された。
【０３８５】
Ｔ４７Ｄ乳がん細胞（図２２）を、０．０３、０．１、０．３、１、または３μＭのパルボシクリブ、ＸＹ０２８−１４０、ＹＸ０３９−４８、ＹＸ０３９−１２４、ＹＸ０３９−１２３、ＹＸ０３９−１４７、ＹＸ０３９−５６、またはＹＸ０３９−６５で１１日間処理した。クリスタルバイオレット染色によって、ＣＤＫ４／６分解剤、特に、ＸＹ０２８−１４０、ＹＸ０３９−１２３、ＹＸ０３９−５６、およびＹＸ０３９−６５が、乳がん細胞において、がん細胞増殖を、同じ濃度ではパルボシクリブより有効に阻害したことが示された。
【０３８６】
Ｔ４７Ｄ乳がん細胞（図２３）を、０．００３、０．０１、または０．０３μＭのパルボシクリブ、ＸＹ０２８−１４０、ＹＸ０３９−１２３、ＹＸ０３９−５６、またはＹＸ０３９−６５で１１日間処理した。クリスタルバイオレット染色によって、ＣＤＫ４／６分解剤が、乳がん細胞において、がん細胞増殖を、同じ濃度ではパルボシクリブより有効に阻害したことが示された。
【０３８７】
他の実施形態
本発明について、その詳細な説明と共に記載してきたが、前述の記載事項は、説明のためのものであり、本発明の範囲を限定するものでなく、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって規定されると理解される。他の態様、利点、および変更形態は、以下の特許請求の範囲の範囲内に含まれる。
【０３８８】
【表２−１】
2020514252.tif 000220
【表２−２】
2020514252.tif 000221
【表２−３】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
2020514252.tif 000243
【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【配列表】
2020514252000001.app
【国際調査報告】
2020514252.tif 000261
2020514252.tif 000262