(57)【要約】  小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）の処置を必要とする対象における当該処置に使用されるＴＬＲ−９アゴニストであって、処置される対象が、低レベルの活性化Ｂ細胞を有し、かつ／または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）を有すると診断されている、ＴＬＲ−９アゴニストが提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）の処置を必要とする対象における当該処置に使用されるＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドであって、処置される対象が、以下の特徴：
ｉ．２０％以下、好ましくは１８％以下、より好ましくは１７％以下、最も好ましくは１５．４％以下である、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）との診断
のうちの１または複数を有する、ＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項２】
活性化Ｂ細胞が、ＣＤ８６陽性である、請求項１に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項３】
ＳＣＬＣが、限局型ＳＣＬＣまたは進展型ＳＣＬＣ、好ましくは進展型ＳＣＬＣである、請求項１または２に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項４】
対象が、ＴＬＲ−９アゴニスト、特に白金ベースの化学療法剤による処置の前に、第１のがん処置を受けている、請求項１から３のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項５】
切替え維持療法において使用される、請求項１から４のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項６】
ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドが、進展型ＳＣＬＣを有する対象において、切替え維持療法として、毎週２回投与され、対象が、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療の後で、少なくとも部分寛解を達成している、請求項１から５のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項７】
少なくとも１つの非メチル化ＣＧジヌクレオチドを含むポリデオキシリボヌクレオチドを含み、少なくとも１つのＣＧジヌクレオチドが、配列Ｎ１Ｎ２ＣＧＮ３Ｎ４の一部であり、Ｎ１Ｎ２は、ＡＡ、ＴＴ、ＧＧ、ＧＴ、ＧＡ、またはＡＴであり、Ｎ３Ｎ４は、ＣＴ、ＴＴ、ＴＣ、ＴＧ、またはＧＧであり、Ｃは、デオキシシチジンであり、Ｇは、デオキシグアノシンであり、Ａは、デオキシアデノシンであり、Ｔは、デオキシチミジンである、請求項１から６のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項８】
ポリデオキシリボヌクレオチドが、Ｌ立体配置にある少なくとも１つのヌクレオチドを含む、請求項７に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項９】
ポリデオキシリボヌクレオチドが、二本鎖ステムおよび２つの一本鎖ループを含み、ダンベルの形状を形成する、請求項７または８に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項１０】
ポリデオキシリボヌクレオチドが、共有結合で閉鎖されている、請求項９に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項１１】
少なくとも１つのＣＧジヌクレオチドが、一本鎖ループのうちの１つまたは各々の中に位置する、請求項９または１０に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項１２】
配列番号３の配列からなる、請求項９から１１のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
【請求項１３】
ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、
ｉ．ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．対象が、ＣＯＰＤを有すると診断されているのかどうか
を決定することにより、ＳＣＬＣを患っている対象が、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置に応答するのかどうかを予測する方法。
【請求項１４】
ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、
ｉ．ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．対象が、ＣＯＰＤを有すると診断されているのかどうか
を決定することにより、ＳＣＬＣを患っている対象の内、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置に対するレスポンダーと、非レスポンダーとを識別する方法。
【請求項１５】
レスポンダーが、非レスポンダーより全生存（ＯＳ）が良好である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＳＣＬＣの処置における使用のための、ＰＢＳ中に１ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１０ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは１５ｍｇ／ｍｌのレフィトリモドを含む医薬組成物であって、ＰＢＳが、６〜８、特に７．２〜７．６のｐＨを有し、
・６ｍｇ／ｍｌ〜１２ｍｇ／ｍｌ、好ましくは８．０ｍｇ／ｍｌの塩化ナトリウム、
・０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．３ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．２ｍｇ／ｍｌの塩化カリウム、
・０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．３ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．２ｍｇ／ｍｌのリン酸二水素カリウム、および
・１．０ｍｇ／ｍｌ〜１．５ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１．１５ｍｇ／ｍｌのリン酸水素二ナトリウム
を含む医薬組成物。
【請求項１７】
がん、特にＳＣＬＣを患っている対象における、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドによる処置に対する応答を予測するためのバイオマーカーとして使用される活性化Ｂ細胞。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は一般に、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）患者が、具体的な療法に応答するのかどうかについての、ＳＣＬＣ患者の同定に関する。より詳細には、本発明は、ＳＣＬＣの処置における使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモド、対象がＴＬＲ−９アゴニストによる処置に応答するのかどうかを予測するための方法、および前記ＴＬＲ−９アゴニストを含む医薬組成物に関する。本発明は、詳細には、ＴＬＲ−９アゴニストであるレフィトリモドに関する。
【背景技術】
【０００２】
バイオマーカーとは、血液中または他の体液中または組織内に見出される物質である。例えば、バイオマーカーは、例えば、がんのような状態または疾患の存在または非存在を示す、細胞上の受容体である。バイオマーカーはまた、免疫細胞の存在、非存在、または頻度の場合もあり、状態または疾患の存在または非存在の場合もある。バイオマーカーの一例は、予測的バイオマーカーである。予測的バイオマーカーは、患者が、特定の処置に応答するか、またはこれから利益を得る確率について評価するのに使用することが最も多い。
【０００３】
抗がん薬、特に、化学療法であり、とりわけ、ターゲティングされた処置によるがんの処置は、通常、侵襲性の大きな薬物の使用を伴い、したがって、重度の有害作用を引き起こすことが多い。不要な処置を回避するために、患者が、特定の処置から利益を得るのかどうかについて評価することを可能とする手段が、常に必要とされている。
【０００４】
療法がますます標的特異的となるという事実に関して、バイオマーカーの役割は、さらに増大するであろう。バイオマーカーは、治療法を個別化し、個別化腫瘍学への道筋をつけやすくする一助となるであろう。また、具体的な療法に対するレスポンダーを、非レスポンダーから区別する可能性も、患者を、不要な処置にかけることを防止する一助となるであろう。
【０００５】
化学療法剤の副作用を低減するために、多くの試み、例えば、化学療法剤を、免疫活性化剤と組み合わせることにより化学療法剤の投与量を最小化する試みが企図されている。１つの手法は、免疫活性化ＤＮＡ（本明細書の後出ではまた、「ポリデオキシリボヌクレオチド」、または、単に、「ポリヌクレオチド」とも称する）の使用である。
【０００６】
いわゆる非メチル化ＣＧヌクレオチド配列（「ＣＧジヌクレオチド」）は、免疫系を、極めて効果的に活性化させることが示されている（Ｋｒｉｅｇ  ＡＭ、Ｙｉ  ＡＫ、Ｍａｔｓｏｎ  Ｓ、Ｗａｌｄｓｃｈｍｉｄｔ  ＴＪ、Ｂｉｓｈｏｐ  ＧＡ、Ｔｅａｓｄａｌｅ  Ｒ、Ｋｏｒｅｔｚｋｙ  ＧＡ、Ｋｌｉｎｍａｎ  ＤＭ、「ＣｐＧ  ｍｏｔｉｆｓ  ｉｎ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ＤＮＡ  ｔｒｉｇｇｅｒ  ｄｉｒｅｃｔ  Ｂ−ｃｅｌｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ」、Ｎａｔｕｒｅ、１９９５年４月６日、３７４：６５２２、５４６〜９）。これらの配列は、細菌に由来する。ＥＰ１１９６１７８Ａ１は、部分的に自己相補的な配列を伴う、共有結合で閉鎖された、環状ＤＮＡであって、両末端における一本鎖ループであり、非メチル化ＣＧモチーフを含む一本鎖ループを伴う二本鎖ステム（ダンベル形状の構造をもたらす）を有するポリヌクレオチドを結果としてもたらす環状ＤＮＡについて開示する。
【０００７】
ＥＰ１１９６１７８Ａ１のダンベル形状のポリヌクレオチドの、がん性疾患を処置するための化学療法剤との組合せは、ＥＰ１７７６１２４Ａ１により提案されている。これらのポリヌクレオチドにより処置された患者が、その後、化学療法剤処置を受けたことが開示される。これにより、化学療法剤の量を低減することができるであろう。これらの化合物の、免疫療法との組合せ、すなわち、チェックポイント阻害剤との組合せは、ＷＯ２０１７／０４２３３６Ａ１から公知である。
【０００８】
小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）は、気管支性癌のうちの約１５％を占める。診断時に、ＳＣＬＣを有する患者のうちの約３０％は、原発部位である半胸郭、縦隔、または鎖骨上リンパ節に限定された腫瘍を有する。これらの患者は、限局期ＳＣＬＣを有すると称される。鎖骨上領域を越えて広がった腫瘍を有する患者は、進展期ＳＣＬＣを有するという。
【０００９】
小細胞肺がんは、肺がんのほかの細胞型より、化学療法および放射線療法に対して応答性であるが、ＳＣＬＣは、診断時までに、広範に播種される傾向が大きいため、治癒を達成することが困難である。処置をしなければ、ＳＣＬＣは、任意の種類の肺腫瘍のうちで、最も侵襲性の大きな臨床経過をたどり、診断時からの中央値生存は、２〜４カ月間にとどまる。過去２５年間になされた、診断および治療の改善にもかかわらず、ＳＣＬＣを有する患者の目下の予後は、不良である。
【００１０】
現在、ＳＣＬＣ患者の処置選択肢は、患者の組織学、病期、および全般的健康状態、ならびに併存疾患により決定される。疑わしいＳＣＬＣを有する患者についての探索は、診断を確認し、疾患の程度を決定することに焦点を当てている。
【００１１】
がんを患っている患者が、ＥＰ１１９６１７８Ａ１の、ダンベル形状のポリヌクレオチドによる処置に応答するのかどうかを評価するための方法は、国際特許出願第ＷＯ２０１４／１９１２２２Ａ１号により提案されている。この手法は、処置される患者における活性化ナチュラルキラーＴ（「ＮＫＴ」）の頻度を決定することに基づく。しかし、この文献は、ＳＣＬＣ患者が、ＥＰ１１９６１７８Ａ１のポリヌクレオチドなど、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置から利益を得るのかどうかについて評価するのに、この情報（または他の任意のバイオマーカー）を使用する可能性については触れていない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
したがって、ＳＣＬＣを患っている患者が、ＴＬＲ−９アゴニスト、詳細には、ＥＰ１１９６１７８Ａ１の、ダンベル形状のポリデオキシリボヌクレオチド、さらにより詳細には、ポリデオキシリボヌクレオチドである、レフィトリモドによる処置から利益を得るのかどうかを評価するための方法を提供することが、本発明の目的である。さらに、ＳＣＬＣを有する患者の処置における使用のためのＴＬＲ−９アゴニストと、前記ＴＬＲ−９アゴニストを含む医薬組成物とを提供することも、本発明の目的である。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
この目的は、請求項１に従うＴＬＲ−９アゴニストの使用により解決される。本発明者らは、処置される対象が、以下の特徴：
ｉ．２０％以下、好ましくは、１８％以下、より好ましくは、１７％以下、最も好ましくは、１５．４％以下である、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）との診断
のうちの一方または両方を有する場合に、ＳＣＬＣ患者が、ＴＬＲ−９アゴニスト、特に、ＥＰ１１９６１７８において開示されているポリデオキシリボヌクレオチドであって、ＩＮＮレフィトリモド（ＣＡＳ登録番号：１５４８４３９−５１−５；また、「ＭＧＮ１７０３」としても公知である；図１を参照されたい）下で当業者に公知である、最も好ましい免疫調節性ポリデオキシリボヌクレオチドによる処置から利益を得ることを見出した。
【００１４】
活性化Ｂ細胞は、活性化マーカーであ表面抗原分類（ＣＤ）８６の発現により決定することができる。活性化Ｂ細胞の比は、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対して与えられる。
【００１５】
したがって、本発明に従い、上記で与えられた、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／またはＳＣＬＣ患者が、ＣＯＰＤを患っているという事実を、ＳＣＬＣ患者が、ＴＬＲ−９アゴニスト、特にレフィトリモドによる処置に応答するのかどうかを予測するためのバイオマーカーとして用いることができる。特に、これらのマーカーにより、患者が、その全生存（ＯＳ）に関して、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置から利益を得る可能性が極めて高いのかどうかを評価することができる。これは、特に、ＴＬＲ−９アゴニスト（特にレフィトリモド）を、化学療法または放射線療法との切替え維持療法において使用する場合に当てはまる。化学療法としては、白金ベースの薬剤が、とりわけ、好ましい。
【００１６】
これらのバイオマーカーはまた、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置に対する患者の応答の質についての評価も支援しうる。したがって、なおさらなる態様において、本発明は、ＳＣＬＣを患っている対象における、全生存、部分寛解（ＰＲ）、または完全寛解（ＣＲ）を予測するための方法であって、対象が、ＴＬＲ−９アゴニストにより処置される方法に関する。これと共に、本発明はまた、ＳＣＬＣを患っている対象の間で、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置に対するレスポンダーと、非レスポンダーとを識別するための方法も提供する。よって、本発明は、患者に対する処置であって、患者に対する臨床利益を伴わない処置を回避する一助となる。
【００１７】
さらに、本発明は、とりわけ、ＳＣＬＣ患者を、ＴＬＲ−９アゴニスト、特にレフィトリモドにより処置するのに適する投与／適用および／または投与スキームに関する。レフィトリモドを含み、本発明の方法において使用されうる医薬組成物についてもまた示唆される。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
それを必要とする対象における小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）の処置における使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドであって、処置される対象が、以下の特徴：
ｉ．２０％以下、好ましくは、１８％以下、より好ましくは、１７％以下、最も好ましくは、１５．４％以下である、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）との診断
のうちの１または複数を有する、ＴＬＲ−９アゴニストが提供される。
【００１９】
活性化Ｂ細胞は、活性化マーカーである表面抗原分類（ＣＤ）８６の発現により決定することができる。活性化Ｂ細胞の比は、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対して与えられる。したがって、好ましい実施形態では、活性化Ｂ細胞は、ＣＤ８６陽性である。
【００２０】
対象のこれらの特徴は、好ましくは、ＴＬＲ−９アゴニストにより、対象の処置を開始する前（ベースライン）に決定することが好ましい。対象のこれらの特徴は、処置される対象が、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置に応答する、特に、これから利益を得るのかどうかを予測するためのバイオマーカーとして用いうることが好ましい。
【００２１】
「Ｔｏｌｌ様受容体」（ＴＬＲ）とは、脊椎動物の生得的免疫系の一部である。ＴＬＲは、タンパク質、脂質構造、糖構造、およびある特定の核酸など、高度に保存的な病原体関連の分子パターンを検出すると、防御的免疫応答を誘導する、特化した免疫受容体のファミリーである。ＴＬＲ−３、ＴＬＲ−４、ＴＬＲ−７、ＴＬＲ−８、およびＴＬＲ−９を含む、いくつかのＴＬＲに対する合成アゴニストが、一般に、腫瘍の存在下で、免疫系を活性化させることを意図して、がんの処置のために開発されているか、または開発されつつある。
【００２２】
ＴＬＲ−９は、典型的に、細菌内で見出されるが、事実上、ヒトゲノムＤＮＡ内では見出されない、非メチル化ＣＧを含有するＤＮＡ配列の存在を認識する。したがって、非メチル化ＣＧを含有するＤＮＡ配列（「ＣＧモチーフ」）を含むポリデオキシヌクレオチドを、合成ＴＬＲ−９アゴニストとしてデザインした。とりわけ、ＥＰ１１９６１７８Ａ１では、有利なダンベル形状のＴＬＲ−９アゴニストが開示されている。他の好ましい免疫活性化ポリデオキシリボヌクレオチドも、ＷＯ２０１２／０８５２９１Ａ１から公知である。その中で最も好ましいポリデオキシリボヌクレオチドに対する、これらの文献の開示は、参考文献として、本明細書に完全に組み込まれる。
【００２３】
本発明の好ましい実施形態では、対象は、進展期ＳＣＬＣ（本明細書の後出ではまた、「進展型ＳＣＬＣ」または「ＥＤ」とも表記される）を患っている。ＥＤは、鎖骨上領域を越えて広がったＳＣＬＣとして規定される。進展期ＳＣＬＣは、忍容可能な放射線治療ポート内に包摂できないくらいに、極めて広範にわたる。患者胸水、肺腫瘍塊、対側鎖骨上リンパ節、および任意の遠隔転移が、進展期ＳＣＬＣの、この定義内に含まれる。
【００２４】
しかし、本発明はまた、限局期ＳＣＬＣ（本明細書の後出ではまた、「限局型ＳＣＬＣ」または「ＬＤ」とも表記される）にも関する。ＬＤは、原発部位である半胸郭、縦隔、または鎖骨上リンパ節に限定された、ＳＣＬＣの形態である。
【００２５】
ＳＣＬＣの診断のためには、確立されたガイドラインが存在する。ガイドラインは、病理学的方法、組織学的方法、および／または細胞学的方法を含む。ガイドラインは、例えば、欧州腫瘍学会議（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ）により提供されている（Ｆｒｕｅｈ．Ｍら、「Ｓｍａｌｌ−ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ（ＳＣＬＣ）：ＥＳＭＯ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｄｉａｇｎｏｓｏｓ，ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｆｏｌｌｏｗ−ｕｐ」、Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、２４（増刊６号）  ｖｉ９９〜ｖｉ１０５、２０１３）。
【００２６】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）とは、長期にわたる気流の不良を特徴とする閉塞性肺疾患である。主要な症状は、息切れおよび痰の産生を伴う咳を含む。ＣＯＰＤは、典型的に、時間と共に増悪することを意味する、進行性疾患である。
【００２７】
２０１５年には、全世界で、この疾患により、約３００万人の死亡が引き起こされたと推定される（すなわち、この年における、全世界の全死亡数のうちの５％）。ＣＯＰＤは、治癒可能ではないが、処置は、症状を緩和し、生活の質を改善し、死の危険性を低減することができる。
【００２８】
当業者には、ＣＯＰＤを診断するための、多様な方法が利用可能である。確立された方法は、肺活量測定などの肺（ｌｕｎｇ（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ））機能検査を含む。肺活量測定は、症状が発生する前であってもなお、ＣＯＰＤを検出しうる。他の肺機能検査は、肺容量および肺拡散量の測定を含む。他の可能性は、胸部Ｘ線、ＣＴスキャン、パルス・オキシメトリー、または動脈血ガス分析である。
【００２９】
本発明の特定の実施形態では、ＴＬＲ−９アゴニストにより処置される対象は、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、がん処置を受けている。この事前のがん処置は、少なくとも１つの化学療法剤または放射線療法による処置でありうる。特に好ましい実施形態では、第１のがん処置は、化学療法である。
【００３０】
好ましくは、事前のがん処置は、白金ベースの化学療法剤による治療である。白金ベースの化学療法剤とは、白金を伴う配位錯体を特徴とする物質（また、単に、「プラチン」とも呼ばれる）である。それらの作用は、ＤＮＡの架橋に基づくと想定される。本発明に従う白金ベースの化学療法剤は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、フェナントリプラチン、ピコプラチン、およびサトラプラチン、またはこれらの混合物からなる群から選択しうることが好ましい。シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、およびネダプラチンからなる群が好ましい。なおより好ましいプラチンベースの化学療法剤は、シスプラチンおよびカルボプラチンであり；シスプラチンが最も好ましい。１つを超える白金ベースの化学療法剤の組合せによる処置もまた可能である。
【００３１】
本発明の別の好ましい実施形態では、処置される対象は、事前の、さらなる抗がん剤と組み合わせた、白金ベースの化学療法剤を受けている。この組合せ療法は、好ましくは、白金ベースの化学療法剤としてのシスプラチンまたはカルボプラチンを含む。さらなる抗がん剤は、好ましくは、エトポシド、イリノテカン、ゲムシタビン、およびトポテカンからなる群から選択される。最も好ましくは、組合せ治療は、エトポシド−シスプラチン、イリノテカン−シスプラチン、ゲムシタビン−カルボプラチン、およびトポテカン−シスプラチンによる処置である。１または複数の白金ベースの化学療法剤と、少なくとも１つのさらなる抗がん剤との組合せはまた、「白金ベースの組合せ化学療法剤」とも称することができる。
【００３２】
そうでないことが明示的に言明されない限りにおいて、本発明の文脈では、「白金ベースの化学療法」または「白金ベースの化学療法剤」という用語は、１または複数の白金ベースの化学療法剤による対象の処置、および１または複数の白金ベースの化学療法剤と、少なくとも１つのさらなる抗がん剤との組合せによる処置の両方を含む。
【００３３】
本発明の好ましい実施形態に従い、処置される対象は、第一選択治療としての、白金ベースの化学療法剤を受けている。これは、本発明に従うＴＬＲ−９アゴニストにより処置される対象が、白金ベースの化学療法の前に、抗がん化学療法剤による処置を受けていないことを意味する。好ましくは、対象は、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、白金ベースの化学療法剤による、少なくとも１つの処置サイクル、好ましくは、少なくとも４つの処置サイクルを完了している。
【００３４】
「放射線療法」とは、イオン化放射線を使用する治療を指す。放射線療法は、細胞増殖を制御する、その能力のために、一般に、がん性腫瘍へと適用される。イオン化放射線は、がん性組織のＤＮＡに損傷を与えることから、細胞死をもたらすことにより作用する。放射線療法の適用はまた、照射とも称することができる。頭蓋照射とは、頭蓋の照射を指す。
【００３５】
上記で概括した通り、本発明の好ましい一実施形態では、処置される対象は、第１の抗がん治療、特に白金ベースの化学療法の、少なくとも１つの処置サイクル、好ましくは、少なくとも４つの処置サイクル、最も好ましくは、４つの処置サイクルを完了している。処置サイクルとは、間に休止期間を伴い、定期的なスケジュールで繰り返される、処置のコースを指す。例えば、１週間にわたり施される処置であって、３週間にわたる休止を後続させる処置は、１つの処置サイクルである。化学療法剤またはそれらの組合せのほか、処置される対象の状態に応じて、処置サイクルの持続期間は、変動しうる。
【００３６】
また、対象が、１つのサイクルにおいて、１つの白金ベースの化学療法剤を施され、別のサイクルにおいて、同じもしくは別の白金ベースの化学療法剤を施されるか、または１つのサイクルにおいて、白金ベースの化学療法剤の組合せを施され、別のサイクルにおいて、同じもしくは白金ベースの化学療法剤の別の組合せを施される場合も含まれる。
【００３７】
好ましくは、本発明に従う、処置される対象は、事前の抗がん処置に応答している、特に、対象は、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、事前の抗がん処置、特に白金ベースの化学療法による部分寛解（ＰＲ）または完全寛解（ＣＲ）を示している。よって、本発明のこの実施形態では、第１の治療は、ＳＣＬＣ患者のＰＲ、またはＣＲを結果としてもたらしている。処置（ＰＲ、またはＣＲにより）に応答した対象を、「レスポンダー」と称することができる。
【００３８】
対象の、処置に対する応答に関して、進行（ＰＤ）と、安定（ＳＤ）とを、さらに識別することができる。
【００３９】
部分寛解とは、体内の、腫瘍サイズまたはがんの広がりの減少と理解される。完全寛解とは、好ましくは、腫瘍により引き起こされる症状が消失しているが、必ずしも、腫瘍が消失したわけではない状態を指す。しかし、これは、がんが治癒したことを意味するわけではない。
【００４０】
がん処置に対する患者の応答（また、目的の応答とも称する）は、学術コミュニティーおよび規制機関により受容されている、十分に確立された基準である、いわゆる「ＲＥＣＩＳＴガイドライン」（Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒら、「Ｎｅｗ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｕｒｓ：Ｒｅｖｉｓｅｄ  ＲＥＣＩＳＴ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ（ｖｅｒｓｉｏｎ  １．１）」、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ、４５（２００９）、２２８〜２４７）により評価することができる。
【００４１】
ＲＥＣＩＳＴガイドライン（ｖｅｒｓｉｏｎ  １．１）によれば、査定される病変が、臨床検査だけにより評価されるのではない限りにおいて、イメージング・ベースの査定は、臨床検査より好ましい。好ましいイメージング・ベースの方法は、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）および／または核磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）である。ＣＴスキャンおよび／またはＭＲＩスキャンは、上腹部を含む、患者の胸部について実施される。ＲＥＣＩＳＴ査定、および本発明の好ましい実施形態に基づき、抗がん処置に対する患者の応答は、以下の通りに類別することができる。
完全寛解：全ての標的病変および非標的病変の消失。腫瘍マーカーレベルの正常化。任意の病理学的リンパ節（標的リンパ節であれ、非標的リンパ節であれ）は、短軸の、＜１０ｍｍへの低減を示さなければならない。
部分寛解：ベースラインの合計直径を基準とした場合の、標的病変の直径の合計の、少なくとも３０％の減少。
進行：研究時における最小合計を基準とした場合の、標的病変の直径の合計の、少なくとも２０％の増大。２０％の相対増大に加えて、合計はまた、少なくとも５ｍｍの絶対増大も裏付けなければならない。１または複数の新たな病変の出現もまた、進行と考えられる。さらに、既存の非標的病変の、明白な進行もまた、進行と考えられる。
安定：研究時における最小の合計直径を基準とした場合の、ＰＲに類別するのに十分な退縮も、進行に類別するのに十分な増大も見られないこと。
【００４２】
代替的に、処置に対する患者の応答はまた、「免疫関連応答基準」（ｉｒＲＣ）により評価することもできる。この査定法は、標的病変の二次元的腫瘍測定を使用する、改訂ＷＨＯ基準に基づき、さらなる応答パターンを捕捉するように、２００９年に開発された（Ｗｏｌｃｈｏｋ  ＪＤ、Ｈｏｏｓ  Ａ、Ｏ’Ｄａｙ  Ｓら、「Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ：ｉｍｍｕｎｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｃｒｉｔｅｒｉａ」、Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、２００９；１５（２３）：７４１２〜２０）。
【００４３】
本発明に従い、ＲＥＣＩＳＴガイドラインを適用して、抗がん処置に対する患者の応答を、特に、ＰＲ、またはＣＲとして類別することが好ましい。これらの基準はまた、患者を、ＴＬＲ−９アゴニストの処置、特にレフィトリモドに対する、可能なレスポンダーまたは非レスポンダーとして類別するのにも適用されることが好ましい。
【００４４】
ＴＬＲ−９アゴニストにより処置される対象が、第１の抗がん処置、特に白金ベースの化学療法を受けている場合、本発明のバイオマーカー（活性化Ｂ細胞およびＣＯＰＤの存在／非存在）は、好ましくは、第１の抗がん処置の完了後、かつ、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前であるが、いずれにせよ、初回のＴＬＲ−９アゴニストの投与の前に決定される。
【００４５】
本発明の好ましい実施形態に従い、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドは、単剤療法として使用する。「単剤療法」という用語は、特定の障害または疾患を処置するための、単一の医薬有効成分（ＡＰＩ）としての薬物の使用を指す。したがって、単剤療法では、薬物を、別の薬物と組み合わせずに投与する。しかし、単剤療法という用語は、好ましくは、別の薬物物質、好ましくは、化学療法剤、最も好ましくは白金ベースの化学療法剤を、単剤療法で使用される薬物（好ましくはＴＬＲ−９アゴニスト、より好ましくはレフィトリモド）の投与の前に、またはこの後で投与しうることを含む。
【００４６】
本発明のさらに別の好ましい実施形態では、ＴＬＲ−９アゴニスト、特にレフィトリモドは、切替え維持療法において使用する。本発明に従う切替え維持とは、少なくとも１つの処置サイクルの完了の後で、抗がん剤を、異なる、第１の抗がん剤と共に使用することを意味する。本発明の好ましい実施形態に従い、第１の白金ベースの化学療法、好ましくは、少なくとも４つのサイクルを完了させ、次いで、ＴＬＲ−９アゴニストを、処置レジメへと導入する。
【００４７】
特に好ましい実施形態では、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドは、進展型ＳＣＬＣを有する対象において、切替え維持療法として、毎週２回投与され、この場合、対象は、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療の後で、少なくとも部分寛解を達成している。
【００４８】
特に好ましい実施形態では、ＴＬＲ−９アゴニスト、とりわけ、レフィトリモドは、白金ベースの化学療法の、４つの処置サイクルの完了の後でまず投与される。化学療法の第５処置サイクルの場合、ＴＬＲ−９アゴニストを、化学療法の第５処置サイクルにおいて使用される化学療法剤の投与の後で投与する。化学療法の第５処置サイクルおよび第６処置サイクルの場合、ＴＬＲ−９アゴニストを、第５処置サイクルにおいて使用される化学療法剤の投与の後、および化学療法の第６処置サイクルにおいて使用される化学療法剤の投与の後のそれぞれにおいて投与する。化学療法において使用される化学療法剤の投与の、少なくとも１、好ましくは、少なくとも２、より好ましくは、少なくとも３日後に、ＴＬＲ−９アゴニストを投与することが好ましく、少なくとも７日後に、ＴＬＲ−９アゴニストを投与することがなおより好ましい。化学療法剤の投与がなされない、第５サイクルまたは第５サイクルおよび第６サイクルの週中の、ＴＬＲ−９アゴニストの投与が、最も好ましい。好ましくは、化学療法の第５処置サイクルおよび第６処置サイクルの場合、ＴＬＲ−９アゴニストの投与を、投与の第６処置サイクルの投与の１つの／複数の週中に休止し、化学療法において使用される化学療法剤の投与の少なくとも１、好ましくは少なくとも２、より好ましくは少なくとも３日後に再開することが好ましく、少なくとも７日後に再開することがなおより好ましい。化学療法剤の投与の１つの／複数の週に続く週中におけるＴＬＲ−９アゴニストの投与の再開が、最も好ましい。レジメ（研究デザイン）の一実施形態を、図２に描示する。
【００４９】
本発明の好ましい実施形態では、ＴＬＲ−９アゴニストを、患者へと、少なくとも２回にわたり投与する。これらの２回の投与の間の、最短の間隔は、好ましくは、４８時間である。ＴＬＲ−９アゴニストは、少なくとも毎週２回、好ましくは、毎週２回投与されうる。
【００５０】
ＴＬＲ−９アゴニストは、１日当たり、１０〜２００ｍｇ、好ましくは、４０〜１００ｍｇ、最も好ましくは、６０ｍｇの量で施すことが好ましい。毎日の用量は、２回の投与に分割することが好ましい（３０ｍｇずつ、２回の投与が最も好ましい）。これは、患者の体内の、２つの異なる部位への投与を可能とする。好ましくは、毎日の用量を、毎週２回施す。ＴＬＲ−９アゴニストを、最も好ましくは、注射により、最も好ましくは、皮下により施す。
【００５１】
ＴＬＲ−９アゴニストを、患者の体内の、異なる部位に施すことが有利である。適用レジメは、対象の左右上腕部、対象の左右大腿部、および／または対象の左右臍傍領域を含むことが好ましい。よって、ＴＬＲ−９アゴニストを、少なくとも２つの異なる適用部位の、交互のローテーション・スキームにより投与することが好ましい。
【００５２】
上記で記載された好ましい投与および投与レジメンは、特に、レフィトリモド、好ましくは、進展期ＳＣＬＣの、レフィトリモドによる処置に当てはまる。
【００５３】
本発明に従う処置はまた、組合せモダリティー療法の一部も形成しうる。組合せモダリティー療法とは、患者を、手術、放射線治療、免疫療法、または任意の種類の投薬（例えば、化学療法剤または抗体などの生物学的薬剤）など、２つまたはこれを超える、異なる処置モダリティーにより処置する場合の治療法である。白金ベースの化学療法剤の、頭蓋照射との組合せ、さらに、本発明に従うＴＬＲ−９アゴニストの投与との組合せは、特に、有利である。
【００５４】
本発明に従うＴＬＲ−９アゴニストは、好ましくは、少なくとも１つの非メチル化ＣＧジヌクレオチド、好ましくは、少なくとも２つのＣＧを含むポリデオキシリボヌクレオチドを含み、Ｃは、デオキシシチジンであり、Ｇは、デオキシグアノシンである。少なくとも１つのＣＧジヌクレオチドは、配列Ｎ１Ｎ２ＣＧＮ３Ｎ４の一部でありえ、Ｎ１Ｎ２は、ＡＡ、ＴＴ、ＧＧ、ＧＴ、ＧＡ、またはＡＴであり、Ｎ３Ｎ４は、ＣＴ、ＴＴ、ＴＣ、ＴＧ、またはＧＧであり、Ｃは、デオキシシチジンであり、Ｇは、デオキシグアノシンであり、Ａは、デオキシアデノシンであり、Ｔは、デオキシチミジンである。
【００５５】
好ましい実施形態では、ＴＬＲ−９アゴニストは、Ｌ立体配置にある少なくとも１つのヌクレオチドを含む。これは、好ましくは、ポリデオキシリボヌクレオチドの、少なくとも１つの末端の、末端から５ヌクレオチド中に位置する。この実施形態では、ポリデオキシリボヌクレオチドは、好ましくは少なくとも２０ヌクレオチド、より好ましくは２０〜２５ヌクレオチドを含む。
【００５６】
ポリデオキシリボヌクレオチドは、好ましくは、二本鎖ステムと、２つの一本鎖ループとを含み、ダンベルの形状を形成する。ポリデオキシリボヌクレオチドは、共有結合で閉鎖されていることが好ましい。少なくとも１つのＣＧジヌクレオチドは、一本鎖ループのうちの１つまたは各々の中に位置することが有利である。
【００５７】
本開示に従う「ステム」とは、同じＤＮＡ分子（この場合、部分的に、自己相補的なＤＮＡ分子）内において、または異なるＤＮＡ分子（部分的に相補的なＤＮＡ分子、または完全に相補的なＤＮＡ分子）間において、塩基対合により形成されるＤＮＡ二本鎖として理解されるものとする。分子内塩基対合とは、同じ分子内の塩基対合を表し、異なるＤＮＡ分子の間の塩基対合は、分子間塩基対合と称する。
【００５８】
本開示の意味における「ループ」とは、ステム構造内またはステム構造の末端における、非対合の一本鎖領域として理解されるものとする。
【００５９】
「ダンベル形状」とは、二本鎖ステム（同じポリヌクレオチド内の塩基対合）、および二本鎖ステムの両方の末端における、２つの一本鎖ループを含むポリヌクレオチドについて記載する。
【００６０】
これらのダンベル形状のポリヌクレオチド内で、好ましくは、全てのヌクレオチドは、Ｄ立体配置にある。さらに、ポリデオキシリボヌクレオチドは、少なくとも５０、好ましくは、少なくとも８０、最も好ましくは、１１６ヌクレオチドを含むことが好ましい。この種類のＴＬＲ−９アゴニストの、２つの好ましい代表的ＴＬＲ−９アゴニストのヌクレオチド配列を、図３に描示する。
【００６１】
本発明に従う使用のための最も好ましいＴＬＲアゴニストは、レフィトリモド（配列番号３）である。
【００６２】
本発明の、さらに別の実施形態では、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、
ｉ．ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．対象が、ＣＯＰＤを有すると診断されているのかどうか
を決定することにより、ＳＣＬＣを患っている対象、特に進展型ＳＣＬＣを患っている対象が、ＴＬＲ−９アゴニスト、特にレフィトリモドによる処置に応答するのかどうかを予測するための方法が提供される。
【００６３】
活性化Ｂ細胞の数と、ＣＤ１９陽性細胞の総数とは、処置される対象の血液試料（全血）中で測定する。
【００６４】
本発明の文脈では、「比」はまた、「頻度」とも称する。
【００６５】
「〜を予測すること」とは、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、処置される対象が、処置に応答する、すなわち、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置から利益を得るのかどうかを決定しうることを意味する。これにより、不要な処置を回避することができる。
【００６６】
好ましい予測方法では、ＳＣＬＣを患っている対象、特に進展型ＳＣＬＣを患っている対象であって、ＴＬＲ−９アゴニスト、特にレフィトリモドによる処置に応答する対象は、
ｉ．２０％以下、好ましくは、１８％以下、より好ましくは、１７％以下、最も好ましくは、１５．４％以下である、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）との診断
を有する。
【００６７】
本発明の、さらに別の実施形態では、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、
ｉ．ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．対象が、ＣＯＰＤを有すると診断されているのかどうか
を決定することにより、ＳＣＬＣを患っている対象、特に進展型ＳＣＬＣを患っている対象の間で、ＴＬＲ−９アゴニスト、特にレフィトリモドによる処置に対するレスポンダーと、非レスポンダーとを識別するための方法が提供される。
【００６８】
したがって、識別方法は、ＳＣＬＣを患っている対象が、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置に応答するのかどうかを評価することを可能とする。これにより、不要な処置を回避することができる。
【００６９】
好ましい識別方法では、ＳＣＬＣを患っている対象、特に進展型ＳＣＬＣを患っている対象であって、ＴＬＲ−９アゴニスト、特にレフィトリモドによる処置に応答する対象は、
ｉ．２０％以下、好ましくは、１８％以下、より好ましくは、１７％以下、最も好ましくは、１５．４％以下である、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）との診断
を有する。
【００７０】
上記で記載されたバイオマーカーを決定することにより、レスポンダーが、非レスポンダーより、良好な全生存（ＯＳ）を有するのかどうかを評価することが、特に、好ましい。「全生存」とは、処置により始まり、死亡（＝事象）まで、または患者から得られる、最後の情報の日付まで続く時間と規定される。
【００７１】
よって、さらに別の好ましい実施形態では、本発明は、がん、特にＳＣＬＣを患っている対象における、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドによる処置に対する応答を予測するためのバイオマーカーとしての使用のための活性化Ｂ細胞に関する。
【００７２】
したがって、好ましい実施形態では、がん、特にＳＣＬＣを患っている対象における、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドによる処置に対する応答を予測するためのバイオマーカーは、特に、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比を、２０％以下、好ましくは、１８％以下、より好ましくは、１７％以下、最も好ましくは、１５．４％以下とする、活性化Ｂ細胞である。したがって、一実施形態では、活性化Ｂ細胞の比の決定は、バイオマーカーとして使用する。
【００７３】
「バイオマーカー」とは、血液中または他の体液中または組織内に見出される物質である。例えば、バイオマーカーは、例えば、がんのような状態または疾患の存在または非存在を示す、細胞上の受容体である。バイオマーカーはまた、免疫細胞の存在、非存在、または頻度の場合もあり、状態または疾患の存在または非存在の場合もある。バイオマーカーの一例は、予測的バイオマーカーである。予測的バイオマーカーは、患者が、特定の処置に応答するか、またはこれから利益を得る確率について評価するのに使用することが最も多い。
【００７４】
本発明のさらなる実施形態では、レフィトリモドを含む医薬組成物であって、ＳＣＬＣの処置に適する医薬組成物が提供される。この組成物は、ＳＣＬＣの処置における使用のために、リン酸緩衝生理食塩液（ＰＢＳ）中に、１ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１０ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは１５ｍｇ／ｍｌのレフィトリモドを含み、ＰＢＳは、ｐＨ６〜８、特に７．０〜７．５のｐＨを有し、
・６ｍｇ／ｍｌ〜１２ｍｇ／ｍｌ、好ましくは８．８ｍｇ／ｍｌの塩化ナトリウム、
・０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．３ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．２２ｍｇ／ｍｌの塩化カリウム、
・０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．３ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．２２ｍｇ／ｍｌのリン酸二水素カリウム、および
・１．０ｍｇ／ｍｌ〜１．５ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１．２６５ｍｇ／ｍｌのリン酸水素二ナトリウム
を含む。
【００７５】
特に好ましい実施形態では、ＰＢＳは、７．２〜７．６のｐＨを有し、
・８．０ｍｇ／ｍｌの塩化ナトリウム、
・０．２ｍｇ／ｍｌの塩化カリウム、
・０．２ｍｇ／ｍｌのリン酸二水素カリウム
および
・１．１５ｍｇ／ｍｌのリン酸水素二ナトリウム
を含む。
【００７６】
さらなる実施形態では、対象におけるＳＣＬＣの処置方法であって、対象へと、有効量のＴＬＲ−９アゴニストを投与するステップを含み、処置される対象が、以下の特徴： 
ｉ．２０％以下、好ましくは、１８％以下、より好ましくは、１７％以下、最も好ましくは、１５．４％以下である、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対するＣＤ８６陽性Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）との診断
のうちの１または複数を有する処置方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００７７】
【図１】レフィトリモド（ＭＧＮ１７０３）の配列および構造を示す図である。
【図２】研究デザインを示す図である。
【図３】ダンベル形状のＴＬＲ−９アゴニストであるレフィトリモド（ＭＧＮ１７０３）およびｄＳＬＩＭ  ２００６の部分配列および完全配列を示す図である。部分配列は、完全配列の合成のために使用する。
【図４Ａ】活性化Ｂ細胞の比が、≦１５．４２％である患者のサブグループについての、カプラン−マイヤープロット（日数単位の全生存対事象までの時間）を示す図であり；図４Ａは、第１の解析を示す図である。
【図４Ｂ】活性化Ｂ細胞の比が、≦１５．４２％である患者のサブグループについての、カプラン−マイヤープロット（日数単位の全生存対事象までの時間）を示す図であり；図４Ｂは、第２の解析を示す図である。
【図４Ｃ】活性化Ｂ細胞の比が、≦１５．４２％である患者のサブグループについての、カプラン−マイヤープロット（日数単位の全生存対事象までの時間）を示す図であり；図４Ｃは、中央値、四分位数、および五分位数についての描示である（第２の解析）。
【図５Ａ】ＣＯＰＤと診断された患者のサブグループについての、カプラン−マイヤープロット（日数単位の全生存対事象までの時間）を示す図であり；図５Ａは、第１の解析を示す図である。
【図５Ｂ】ＣＯＰＤと診断された患者のサブグループについての、カプラン−マイヤープロット（日数単位の全生存対事象までの時間）を示す図であり；図５Ｂは、第２の解析を示す図である。
【００７８】
具体的な実施形態
１．それを必要とする対象における小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）の処置における使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドであって、処置される対象が、以下の特徴：
ｉ．２０％以下、好ましくは、１８％以下、より好ましくは、１７％以下、最も好ましくは、１５．４％以下である、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対するＣＤ８６陽性Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）との診断
のうちの１または複数を有する、ＴＬＲ−９アゴニスト。
２．小細胞肺がんが、限局型小細胞肺がんまたは進展型小細胞肺がん、好ましくは進展型小細胞肺がんである、実施形態１に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３．限局型小細胞肺がんまたは進展型小細胞肺がんが、病理学的に、組織学的に、かつ／または細胞学的に同定される、実施形態２に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
４．対象が、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、第１のがん処置を受けている、実施形態１から３のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５．第１のがん処置が、化学療法剤または放射線療法による処置である、実施形態４に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
６．化学療法剤による処置が、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療、好ましくは白金ベースの組合せ化学療法剤による処置である、実施形態５に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
７．対象が、少なくとも１つのサイクル、好ましくは、４つのサイクルの第一選択治療を完了した、実施形態６に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
８．サイクルが、１週間を超える長さを有する、実施形態７に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
９．第一選択治療が、各サイクルの１週目中に投与される、実施形態８に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
１０．白金ベースの化学療法が、第１の抗がん剤および第２の抗がん剤を含み、第１の抗がん剤が、エトポシド、イリノテカン、ゲムシタビン、およびトポテカンからなる群から選択され、第２の抗がん剤が、シスプラチンおよびカルボプラチンからなる群から選択される、実施形態５から９のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
１１．白金ベースの化学療法が、エトポシド−シスプラチン、イリノテカン−シスプラチン、ゲムシタビン−カルボプラチン、およびトポテカン−シスプラチンを含む群から選択される、実施形態１０に記載のＴＬＲ−９アゴニスト。
１２．対象が、他の既往の化学療法を受けていない、実施形態６から１０のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
１３．対象が、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、部分寛解（ＰＲ）または完全寛解（ＣＲ）を達成している、実施形態４から１２のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
１４．ＰＲ、またはＣＲが、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）または核磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）によるスキャンを使用して評価される、実施形態１３に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
１５．単剤療法として使用される、実施形態１から１４のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
１６．切替え維持療法において使用される、実施形態１から１５のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
１７．切替え維持療法が、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療の投与に後続する、ＴＬＲ−９アゴニストの投与を含む、実施形態１６に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
１８．対象が、４つのサイクルにわたる、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療を完了し、第５サイクルの、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療、または第５サイクルおよび第６サイクルの、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療を受け、白金ベースの化学療法剤が、各サイクル１週目だけにおいて投与される、実施形態１７に記載のＴＬＲ−９アゴニスト。
１９．ＴＬＲ−９アゴニストが、化学療法剤の投与がなされない、第５サイクルの週に始まるか；または化学療法剤の投与がなされない、第５サイクルの週に始まり、化学療法剤の投与がなされる、第６サイクルの週に休止し、化学療法剤の投与がなされない、第６サイクルの週に再開して投与される、実施形態１８に記載のＴＬＲ−９アゴニスト。
２０．組合せモダリティー療法において使用される、実施形態１から１９のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
２１．組合せモダリティー療法が、手術、放射線療法、および投薬からなる群から選択される、さらなる処置を含み、投薬が、化学療法剤または生物学的薬剤の投与である、実施形態２０に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
２２．白金ベースの化学療法剤による第一選択治療が、頭蓋照射と組み合わされる、実施形態２０また２１に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
２３．少なくとも２回にわたり投与される、実施形態１から２２のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
２４．２回の投与の間に、最短で４８時間の間隔を置く、実施形態２３に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
２５．少なくとも毎週２回、好ましくは、毎週２回投与される、実施形態１から２４のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
２６．１０〜２００ｍｇ、好ましくは、４０〜１００ｍｇ、最も好ましくは、６０ｍｇのＴＬＲ−９アゴニストが投与される、実施形態１から２５のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
２７．６０ｍｇのＴＬＲ−９アゴニストが、毎週２回投与される、実施形態１から２６のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
２８．３０ｍｇのＴＬＲ−９アゴニストが、２つの適用部位に、毎週２回投与される、実施形態１から２７のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
２９．対象が、４つのサイクルにわたる、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療を完了し、第５サイクルの、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療に後続して、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドの投与を受けるが、この場合、第５サイクルにおいて、白金ベースの化学療法剤が、第５サイクルの１週目中に投与され、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドが、第５サイクルの２週目中または３週目中から始めて、毎週２回投与される、実施形態１から２８のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３０．対象が、第５サイクルおよび第６サイクルの、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療に後続して、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドの投与を受けるが、この場合、第６サイクルにおいて、白金ベースの化学療法剤が、第６サイクルの１週目中に投与され、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドが、第６サイクルの２週目中または３週目中に、毎週２回投与され、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドの投与が、その後継続される、実施形態２７に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３１．注射、好ましくは、皮下注射により投与される、実施形態１から３０のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３２．ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくはレフィトリモドが、進展型小細胞肺がんを有する対象において、切替え維持療法として、毎週２回、皮下投与され、対象が、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療の後で、少なくとも部分寛解を達成している、実施形態１から３１のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３３．３０ｍｇのＴＬＲ−９アゴニストが、２つの適用部位に、毎週２回投与される、実施形態２９から３２のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３４．各回の投与が、２つの適用部位における投与を含む、実施形態１から３３のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３５．適用部位が、対象の左右上腕部、対象の左右大腿部、および対象の左右臍傍領域を含む、実施形態３４に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３６．適用部位が、ローテーション・スキームで、交互に使用される、実施形態３４また３５に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３７．少なくとも１つの非メチル化ＣＧジヌクレオチドを含むポリデオキシリボヌクレオチドを含み、Ｃは、デオキシシチジンであり、Ｇは、デオキシグアノシンである、実施形態１から３６のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３８．少なくとも１つのＣＧジヌクレオチドが、配列Ｎ１Ｎ２ＣＧＮ３Ｎ４の一部であり、Ｎ１Ｎ２は、ＡＡ、ＴＴ、ＧＧ、ＧＴ、ＧＡ、またはＡＴであり、Ｎ３Ｎ４は、ＣＴ、ＴＴ、ＴＣ、ＴＧ、またはＧＧであり、Ｃは、デオキシシチジンであり、Ｇは、デオキシグアノシンであり、Ａは、デオキシアデノシンであり、Ｔは、デオキシチミジンである、実施形態３７に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
３９．ポリデオキシリボヌクレオチドが、Ｌ立体配置にある少なくとも１つのヌクレオチドを含む、実施形態３７また３８に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
４０．ポリデオキシリボヌクレオチドが、少なくとも２０ヌクレオチド、好ましくは、２０〜２５ヌクレオチドを含む、実施形態３７から３９のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
４１．Ｌ立体配置にある少なくとも１つのヌクレオチドが、ポリデオキシリボヌクレオチドの、少なくとも１つの末端の、末端から５ヌクレオチド中に含まれる、実施形態３９また４０に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
４２．Ｄ立体配置にある少なくとも３つの保存的デオキシグアノシンが、ポリデオキシリボヌクレオチドの、少なくとも１つの末端の、末端から６ヌクレオチド中に位置する、実施形態３９から４１のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
４３．ポリデオキシリボヌクレオチドが、少なくとも２つのＣＧジヌクレオチドを含む、実施形態３７から４２のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
４４．少なくとも３つの、保存的デオキシグアノシが、２つのＣＧジヌクレオチドの間に位置する、実施形態４３に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
４５．少なくとも５ヌクレオチドが、デオキシグアノシンを除く、２つのＣＧジヌクレオチドの間に位置する、実施形態４３に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
４６．ポリデオキシリボヌクレオチドが、一本鎖および／または部分的もしくは完全な二本鎖である、実施形態３７から４５のいずれかに記載のＴＬＲ−９アゴニスト。
４７．少なくとも１つのＣＧジヌクレオチドが、ポリデオキシリボヌクレオチドの一本鎖領域内および／または二本鎖領域内に位置する、実施形態４６に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
４８．ポリデオキシリボヌクレオチドが、二本鎖ステムと、少なくとも１つの一本鎖ループとを含む、実施形態３７から４７のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
４９．ポリデオキシリボヌクレオチドが、２つの一本鎖ループを含み、ダンベルの形状を形成する、実施形態４８に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５０．全てのヌクレオチドが、Ｄ立体配置にある、実施形態４８また４９に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５１．ポリデオキシリボヌクレオチドが、少なくとも５０、好ましくは、少なくとも８０、最も好ましくは、１１６ヌクレオチドを含む、実施形態４８から５０のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５２．ポリデオキシリボヌクレオチドが、最大で２００、好ましくは、最大で１５０、最も好ましくは、１１６ヌクレオチドを含む、実施形態４８から５１のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５３．少なくとも１つのＣＧジヌクレオチドが、
ａ）一本鎖ループの１つもしくは各々の中、好ましくは、一本鎖ループの各々の中、または
ｂ）二本鎖ステム内、または
ｃ）一本鎖ループの１つもしくは各々の中、および二本鎖ステム内
に位置する、実施形態４８から５２のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５４．ポリデオキシリボヌクレオチドが、二本鎖ステムと、少なくとも１つの一本鎖ループとを含み、少なくとも１つのＣＧジヌクレオチドが、一本鎖ループ内に位置する、実施形態４８から５３のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５５．ポリデオキシリボヌクレオチドが、二本鎖ステム、２つの一本鎖ループを含み、ダンベルの形状を形成し、少なくとも１つのＣＧジヌクレオチドが、一本鎖ループの各々の中に位置する、実施形態４８から５４のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５６．３つのＣＧジヌクレオチドが、一本鎖ループの各々の中に位置する、実施形態５５に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５７．一本鎖ループの１つまたは各々が、少なくとも２０ヌクレオチドを含み、好ましくは、３０ヌクレオチドからなる、実施形態４８から５６のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５８．一本鎖ループの各々が、３０ヌクレオチドからなり、同一な配列である、実施形態４９に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
５９．二本鎖ステムが、少なくとも１５、好ましくは、少なくとも２０塩基対を含み、最も好ましくは、２８塩基対からなる、実施形態４８から５８のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
６０．二本鎖ステムが、最大で９０、好ましくは、最大で６０塩基対を含み、最も好ましくは、２８塩基対からなる、実施形態４８から５９のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
６１．一本鎖ループの各々が、３０ヌクレオチドからなり、二本鎖ステムが、２８塩基対からなり、３つのＣＧジヌクレオチドが、一本鎖ループの各々の中に位置する、実施形態４９に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
６２．共有結合で閉鎖されており、部分的に２回ハイブリダイズした、配列番号１の配列からなる、実施形態４９に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
６３．共有結合で閉鎖されており、部分的に２回ハイブリダイズした、配列番号２の配列からなる、実施形態４９に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
６４．共有結合で閉鎖されており、配列番号３の配列からなる、実施形態４９に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
６５．共有結合で閉鎖されており、配列番号４の配列からなる、実施形態４９に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
６６．少なくとも１つのヌクレオチドが、カルボキシル基、アミン基、アミド基、アルジミン基、ケタール基、アセタール基、エステル基、エーテル基、ジスルフィド基、チオール基およびアルデヒド基を含む群から選択される官能基で修飾される、実施形態３７から６５のいずれかに記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
６７．修飾ヌクレオチドが、ペプチド、タンパク質、炭水化物、抗体、脂質、ミセル、小胞、合成分子、ポリマー、遺伝子銃、金属粒子、ナノ粒子、および固相を含む群から選択される化合物へと連結される、実施形態６６に記載の使用のためのＴＬＲ−９アゴニスト。
６８．対象における小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）の処置方法であって、対象へと、有効量のＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくは、実施形態１から６７のいずれかに記載のＴＬＲ−９アゴニストを投与するステップを含み、処置される対象が、以下の特徴： 
ｉ．２０％以下、好ましくは、１８％以下、より好ましくは、１７％以下、最も好ましくは、１５．４％以下である、ＣＤ１９陽性細胞の総数に対するＣＤ８６陽性Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）との診断
のうちの１または複数を有する処置方法。
６９．ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、
ｉ．ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．対象が、ＣＯＰＤを有すると診断されているのかどうか
を決定することにより、ＳＣＬＣを患っている対象が、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくは、実施形態１から６７のいずれかに記載のＴＬＲ−９アゴニストによる処置に応答するのかどうかを予測するための方法。
７０．ＴＬＲ−９アゴニストによる処置の前に、
ｉ．ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比、および／または
ｉｉ．対象が、ＣＯＰＤを有すると診断されているのかどうか
を決定することにより、ＳＣＬＣを患っている対象の間で、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくは、実施形態１から６７のいずれかに記載のＴＬＲ−９アゴニストによる処置に対するレスポンダーと、非レスポンダーとを識別するための方法。
７１．レスポンダーが、非レスポンダーより全生存（ＯＳ）が良好である、実施形態７０に記載の方法。
７２．ＳＣＬＣの処置における使用のための、ＰＢＳ中に１ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１０ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは１５ｍｇ／ｍｌのレフィトリモドを含む医薬組成物であって、ＰＢＳが、ｐＨ６〜８、特に、７．２〜７．６のｐＨを有し、
・６ｍｇ／ｍｌ〜１２ｍｇ／ｍｌ、好ましくは８．０ｍｇ／ｍｌの塩化ナトリウム、
・０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．３ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．２ｍｇ／ｍｌの塩化カリウム、
・０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．３ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．２ｍｇ／ｍｌのリン酸二水素カリウム、および
・１．０ｍｇ／ｍｌ〜１．５ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１．１５ｍｇ／ｍｌのリン酸水素二ナトリウム
を含む医薬組成物。
７３．がん、特にＳＣＬＣを患っている対象における、ＴＬＲ−９アゴニスト、好ましくは実施形態１から６７のいずれかに記載のＴＬＲ−９アゴニスト、より好ましくはレフィトリモドによる処置に対する応答を予測するためのバイオマーカーとしての使用のための活性化Ｂ細胞。
【００７９】
ＭＧＮ１７０３（レフィトリモド）について示される、ＴＬＲ−９アゴニストの合成
配列番号１に示される配列である、ＣＣＴＡＧＧＧＧＴＴ  ＡＣＣＡＣＣＴＴＣＡ  ＴＴＧＧＡＡＡＡＣＧ  ＴＴＣＴＴＣＧＧＧＧ  ＣＧＴＴＣＴＴＡＧＧ  ＴＧＧＴＡＡＣＣ（ＴＩＢ−Ｍｏｌｂｉｏｌ、Ｂｅｒｌｉｎ）を伴う、５’−リン酸化オリゴヌクレオチドを、５分間にわたり、９０℃の温度へと加熱し、その後、氷上で冷却して、ステム−ループ構造の発生を可能とした。このようなオリゴヌクレオチドの自己相補的突出を、Ｔ４  ＤＮＡリガーゼ（０．１Ｕ／μｇのオリゴヌクレオチド）の存在下、３７℃で、２４時間にわたり、最終濃度を１μｇ／μｌとするＤＮＡとライゲーションした。産物は、フェノール抽出、および後続の、クロロホルムによる抽出のほか、ＭｇＣｌ２（最終濃度：１０ｍＭ）およびＮａＡｃ（最終濃度：３００ｍＭ）の存在下におけるイソプロパノール沈殿、ならびに、その後における遠心分離および水中の懸濁の後で得た。
【００８０】
内毒素汚染を除去するために、ライゲーション産物を、その後アニオン交換クロマトグラフィー（担体物質：ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  ＤＭＡＥ、Ｍｅｒｃｋ  Ｄａｒｍｓｔａｄｔ；５０ｍＭのＮａ３ＰＯ４中に、０〜１ＭのＮａＣｌ）にかけ、イソプロパノール沈殿により濃縮した。ｉｎ  ｖｉｖｏにおける実験のために、この方法を、滅菌条件下で実行し、最終産物を、滅菌ＰＢＳ中に懸濁させる。
【００８１】
図１は、ホスホジエステル結合により連結された１１６ヌクレオチドの、共有結合で閉鎖されたダンベル形状のポリデオキシリボヌクレオチドである、ＭＧＮ１７０３（すなわち、レフィトリモド）配列（配列番号３）の構造を示す。構造は、３０塩基ずつの、２つの一本鎖ループと、２８塩基対の二本鎖ステムとからなる。配列は、非コード配列であるが、各ループ内に３つずつのＣＧジヌクレオチドを伴う、合計６つのＣＧジヌクレオチドを含有する。
【００８２】
図３は、レフィトリモド（ＭＧＮ１７０３）の部分配列（配列番号１）および完全配列（配列番号３）のほか、代替的なダンベル形状のＴＬＲ−９アゴニスト（ｄＳＬＩＭ  ２００６）の部分配列（配列番号２）および完全（配列番号４）配列を示す。
【実施例】
【００８３】
臨床試験「インパルス」
１．梗概
本発明に従うデータは、進展型ＳＣＬＣを伴い、４つのサイクルにわたる、白金ベースの化学療法剤による、第１選択の化学療法を経た患者における、免疫モジュレーターＭＧＮ１７０３（別名：レフィトリモド）による切替え維持療法についての、オープン・ラベル無作為化臨床研究から得る。
【００８４】
ＳＣＬＣについての組織学またはＳＣＬＣについての混合組織学に基づき、病理学者により確認された、進展型ＳＣＬＣを有する患者が、４つのサイクルにわたる、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療を施され、第４サイクルの終了時に、部分寛解（略号：ＰＲ）または完全寛解（略号：ＣＲ）を確認していた場合に、これらの患者を、研究に適格とした。いかなる理由によるのであれ、組織学を得ることができなかった場合に、病理学者により確認されたＳＣＬＣについての細胞学的診断を許容可能とした。Ｅａｓｔｅｒｎ  Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐ（略号：ＥＣＯＧ）パフォーマンス・ステータスは、０または１（Ｏｋｅｎ  ＭＭ、Ｃｒｅｅｃｈ  ＲＨ、Ｔｏｒｍｅｙ  ＤＣら（１９８２）、「Ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｏｆ  Ｅａｓｔｅｒｎ  Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐ」、Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．、５（６）：６４９〜５５）でなければならなかった。スクリーニングは、白金ベースの化学療法の第４サイクルの、最終回の適用の後で開始した。
【００８５】
第５サイクルの化学療法に後続して、ＭＧＮ１７０３（アームＡ）の処置、または第５サイクルの化学療法に後続して、地域標準治療（アームＢ；これらの患者には、世界標準処置選択肢が存在しない）を受けるように、適格患者を無作為化した（３：２の比で）。無作為化の後、患者は、死亡まで、または最長２年間にわたり、研究下に置かれる。
【００８６】
無作為化の後に、処置期間を開始した。この期間中に、患者は、第５サイクルの白金ベースの化学療法（地域ケアと連携してスケジュールを組んだ）を受けた。以下では、アームＡ（被験アーム）へと無作為化された患者は、化学療法の投与がなされない、第５サイクルの週に始めて、毎週２回、２つの適用部位において、ＭＧＮ１７０３のｓ．ｃ．投与を受けた。アームＢ（対照アーム）における患者は、地域の臨床慣行に従う、任意の標準治療であって、例えば、同じ白金ベースの化学療法剤の継続、新たな維持レジメンの開始、または化学療法を伴わない、最良の支持療法を含みうる、標準治療を受けた。
【００８７】
地域の慣行に従い、治験責任医師は、
・患者が、４つのサイクルにわたる、白金ベースの化学療法を完了したら、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療を終了すること；この場合、アームＡにおける患者だけが、ＭＧＮ１７０３を受け、アームＢにおける患者は、地域の標準治療を受けた；
・さらなる第６サイクルの白金ベースの化学療法剤を施すこと。第５サイクルと同様に、これに後続して、毎週２回、２つの適用部位に、ｓ．ｃ．投与される、ＭＧＮ１７０３による処置を施す（アームＡ（被験アーム））か、またはこれに後続して、地域の標準治療（アームＢ（対照アーム））を施すこと
を選択できた。
【００８８】
処置期間は、最長２年間であった。処置期間を終了した後、全ての患者は、処置後監視期間に入り、これは、無作為化の、最長２年後に終了した。この期間中に、生存状態およびがん治療を、１２週間ごとに評価した。
【００８９】
研究への登録に適格であるために、患者は、特に、以下の基準：
ＳＣＬＣについての組織学もしくはＳＣＬＣについての混合組織学、または、組織学を得ることができない場合の細胞学的診断に基づき、病理学者により確認された、進展型ＳＣＬＣ；
４つのサイクルにわたる、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療の完了、および他の既往の化学療法を伴わないこと；
ＣＴ、またはＭＲＩスキャンを使用する、第４サイクルの、白金ベースの化学療法剤による第一選択治療の終了時に、治験責任医師により評価された、腫瘍応答（ＰＲ、またはＣＲ）についての記録された証拠
を満たさなければならなかった。
【００９０】
ＳＣＬＣを患っている、合計１０２例の患者（２回目の解析：１０３例の患者）であって、標準白金ベースの化学療法剤による第一選択治療により、４つのサイクルにわたり以前に処置されている患者を、研究のために選択した。
【００９１】
患者の無作為化を実施した後で、６２例の患者は、
ｉ）ＭＧＮ１７０３維持療法（毎週２回の、ＴＬＲ−９アゴニストであるＭＧＮ１７０３（すなわち、レフィトリモド）の、投与１回当たり６０ｍｇのｓ．ｃ．）、または
ｉｉ）第５サイクルの、白金ベースの化学療法に後続する、ＭＧＮ１７０３維持療法（毎週２回の、ＴＬＲ−９アゴニストであるＭＧＮ１７０３（すなわち、レフィトリモド）の、投与１回当たり６０ｍｇのｓ．ｃ．）であって、白金ベースの化学療法剤の投与に続く、１または２週間後に開始したＭＧＮ１７０３維持療法、または
ｉｉｉ）第５サイクルおよび第６サイクルの、白金ベースの化学療法に後続する、ＭＧＮ１７０３維持療法（毎週２回の、ＴＬＲ−９アゴニストであるＭＧＮ１７０３（すなわち、レフィトリモド）の、投与１回当たり６０ｍｇのｓ．ｃ．）であって、第５サイクルの、白金ベースの化学療法剤の投与に続く、１または２週間後に開始し、第６サイクルの、白金ベースの化学療法剤の投与の週に休止し、第６サイクルの、白金ベースの化学療法剤の投与後の週に再開したＭＧＮ１７０３維持療法
を受けた。
【００９２】
４０例の患者（２回目の解析：４１例の患者）は、第５サイクルの、白金ベースの化学療法、または第５サイクルおよび第６サイクルの、白金ベースの化学療法に後続する、地域の臨床慣行に従う、任意の標準治療を受けた。
【００９３】
したがって、６２例の患者は、少なくとも４つのサイクルにわたる、白金ベースの化学療法に後続する、ＭＧＮ１７０３維持療法（毎週２回の、ＴＬＲ−９アゴニストであるＭＧＮ１７０３（すなわち、レフィトリモド）の、投与１回当たり６０ｍｇのｓ．ｃ．）を受けた。
【００９４】
処置から８±２週間ごとに、全ての患者を、腫瘍の進行について検査した。腫瘍の進行が評価されるまで、各患者のために、処置を継続した。
【００９５】
ＭＧＮ１７０３の初回の適用の前に（１回目の来院（ベースライン）における対照）、全ての患者の血液試料を回収した。
【００９６】
研究デザインの一部の側面についての外観を、図２に示す。
【００９７】
２．試料の操作
蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）解析のための全血液（１０ｍＬ）を、ＳｔｒｅｃｋＣｙｔｏ−Ｃｈｅｘ（登録商標）ＢＣＴチューブ内に回収した。サンプリング後、２時間以内に、血液試料を、解析検査室へと送付した。試料は、採血後２４時間以内に解析した。確立されたプロトコールに従い、試料を送付し、解析の前に、室温で保存した。
【００９８】
３．解析法：ＦＡＣＳ解析
ＣＤ１９陽性細胞の総数に対する活性化Ｂ細胞の比を査定した。各患者の各試料について、比を記録した。
【００９９】
Ｂ細胞は、表面抗原分類（ＣＤ）分子の以下の組合せ：ＣＤ４５＋／ＣＤ１９＋により同定した。
【０１００】
活性化Ｂ細胞は、ＣＤ分子の以下の組合せ：ＣＤ４５＋／ＣＤ１９＋／ＣＤ８６＋により同定した。
【０１０１】
ＦＡＣＳ解析は、当業者に公知の、確立されたプロトコールに従い実施した。全血試料を、溶解させ、蛍光標識抗体により染色した。表１は、フローサイトメトリーのために使用される試薬を示す。
【０１０２】
【表１】
2020517665.tif 000002
【０１０３】
あらゆる実験に、アイソタイプ対照を使用して、特異的結合を、非特異的結合から識別した。ＣＤ４５を、白血球マーカーとして使用した。
【０１０４】
試料を、１０色型Ｎａｖｉｏｓフローサイトメーターにかけ、Ｎａｖｉｏｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（全て、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ製）を使用して解析した。
【０１０５】
詳細な染色プロトコールは、以下の通りである。
細胞を、モノクローナル抗体の以下の組合せ：抗ＣＤ１６９−ＰＥ、抗ＣＤ８６−ＰＣ５．５、抗ＣＤ１４−ＡＰＣ、抗ＣＤ１９−ＰａｃＢｌｕｅ、抗ＣＤ４５−ＫｒＯｒａｎｇｅで染色した。
Ｂ細胞に、ＣＤ１９陽性細胞として、ゲートをかけた。Ｂ細胞集団内では、ＣＤ８６を、活性化マーカーとして使用した。
【０１０６】
４．結果
以下のパラメータを、決定および査定した。処置転帰（全生存、ＯＳ）の、ベースラインにおいて測定されたパラメータとの相関を解析した。
【０１０７】
活性化Ｂ細胞の比
ＣＯＰＤの診断
パラメータを、第１の解析および第２の解析をもたらす、第１の時点および第２の時点において査定した。第２の解析は、患者についての、より長期にわたる追跡を可能とした。
【０１０８】
第１のステップでは、一変量Ｃｏｘ回帰モデルを使用して、転帰（ＯＳ）に影響を及ぼしうるパラメータであって、それにより、一変量Ｃｏｘ回帰モデル以外の方法もまた使用しうるパラメータを同定した。パラメータについて、以下のステップで検討するための有意性レベルは、０．２であった。以下の多変量解析の解釈について、さらなる情報をもたらすように、このステップで同定されるパラメータの相関を解析した。
【０１０９】
前出のステップで同定されたパラメータとしての、「活性化Ｂ細胞の比」および「ＣＯＰＤの診断」を含む解析のために、多変量Ｃｏｘ回帰モデルを使用した。後退選択を適用して、多変量解析において、転帰（ＯＳ）に影響を及ぼさないパラメータを消去した。パラメータを、モデルから除去するための有意性レベルは、０．１であった。
【０１１０】
Ｃｏｘ回帰は、ハザード関数を考慮せずに、パラメータの影響を推定することを可能とする。このような計算から得られるハザード比は、１を下回り、０．０５を下回る、有意なｐ値と関連するものとする。これが成り立たないならば、観察される影響は、適用されたＴＬＲ−９アゴニストと関連しないであろう。これらの基準は、「活性化Ｂ細胞の比」および「ＣＯＰＤの診断」のいずれにも適用された。
【０１１１】
活性化Ｂ細胞
活性化Ｂ細胞の比について、「導出カットオフ値」は、以下の通りに計算した。
ａ．患者の、可能な二分化の各々のために、ＯＳについてのＣｏｘ比例ハザードモデルを解析し、ＣＩを９５％とする、それぞれのハザード比を計算した；
ｂ．「導出カットオフ値」を、サブグループの、ＯＳとの、モデル内で最も有意または関与性の相関が観察される（ｐ値が最小となる）場合の値として規定する。
【０１１２】
活性化Ｂ細胞を１５．４２％とする「導出カットオフ値」を、一変量ＣＯＸ回帰モデルにより決定した。
【０１１３】
活性化Ｂ細胞の比について、以下の結果を得た（表２）。
【０１１４】
【表２】
2020517665.tif 000003
【０１１５】
カプラン−マイヤープロットを、図４（ＭＧＮ１７０３で処置された患者：実線；対照で処置された患者：点線）に示す。図４Ａは、第１の解析を示し、図４Ｂは、第２の解析を示す。プロットおよび表２で見ることができる通り、活性化Ｂ細胞の比が１５．４２％以下である患者サブグループは、ＭＧＮ１７０３による処置から利益を得る（中央値：２８４日間（第１の解析）／３００日間（第２の解析）対２３１．５日間（＋５２．５日間（第１の解析）／＋６８．５日間（第２の解析））；ＨＲ：０．５８９４（第１の解析）／０．５３（第２の解析））。したがって、活性化Ｂ細胞の比が１５．４２％以下である患者サブグループの、良好な生存確率は、ＭＧＮ１７０３の適用と関連する。活性化Ｂ細胞の比が、＞１５．４２％である患者は、ＭＧＮ１７０３による処置から利益を得なかった。
【０１１６】
異なる方法：中央値、四分位数、および五分位数における分割のほか、導出カットオフ値における分割を適用して、連続パラメータについてのサブグループ、例えば、活性化Ｂ細胞の比によるサブグループを規定した。このシグナルの頑健さは、中央値、四分位数、および五分位数のような、これらの異なるカットオフであって、Ｂ細胞数が小さな患者の、一貫した有益性が検出されたカットオフを使用して確認した（第２の解析；図４Ｃ）。
【０１１７】
ＣＯＰＤの診断
ＣＯＰＤと診断された患者について、以下の結果を得た（表３）。
【０１１８】
【表３】
2020517665.tif 000004
【０１１９】
カプラン−マイヤープロットを、図５（ＭＧＮ１７０３で処置された患者：実線；対照で処置された患者：点線）に示す。図５Ａは、第１の解析を示し、図５Ｂは、第２の解析を示す。プロットおよび表３で見ることができる通り、ＣＯＰＤと診断された患者サブグループは、ＭＧＮ１７０３による処置から利益を得る（中央値：３１６日間対２４６日間（＋７０日間）；ＨＲ：０．５４１９（第１の解析）／０．４８（第２の解析））。したがって、ＣＯＰＤと診断された患者サブグループの、良好な生存確率は、ＭＧＮ１７０３の適用と関連する。ＣＯＰＤを有していなかった患者は、ＭＧＮ１７０３による処置から利益を得なかった。
【０１２０】
本発明は、がん、特にＳＣＬＣを患っている対象における、ＴＬＲ−９アゴニスト、特にレフィトリモドによる処置に対する応答を予測するための、新たなバイオマーカーを提供する。活性化Ｂ細胞の比、および患者が、ＣＯＰＤと診断されたのかどうかの決定は、患者が、ＴＬＲ−９アゴニストによる処置に対するレスポンダーであるのかどうかの確率を評価することを可能とする。
【図１】
2020517665.tif 000005
【図２】
2020517665.tif 000006
【図３】
2020517665.tif 000007
【図４Ａ】
2020517665.tif 000008
【図４Ｂ】
2020517665.tif 000009
【図４Ｃ】
2020517665.tif 000010
【図５Ａ】
2020517665.tif 000011
【図５Ｂ】
2020517665.tif 000012
【配列表】
2020517665000001.app
【国際調査報告】
2020517665.tif 000013
2020517665.tif 000014
2020517665.tif 000015
2020517665.tif 000016