(57)【要約】眼科用組成物、組成物の使用方法、およびそれを必要とする対象のドライアイを治療するための組成物を含むキットを開示する。組成物は、経内皮移動の阻害剤である少なくとも１つのペプチド、その類似体、変異体、誘導体、または薬学的に許容される塩、ならびにドライアイおよび炎症の眼疾患を治療するための薬学的に許容される賦形剤が含まれる。
2020510037.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号：1）、H-DSer-Val-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-Glu-Orn-NH2（配列番号：2）、H-Hyp-Val-Thr-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Hyp-DAsn-Glu-Glu-Aha-NH2（配列番号：3）、H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号：4）、H-DSer-Val-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号：5）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号：6）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-Glu-Orn-NH2（配列番号：7）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号：8）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号：9）、H-Chex-Thr-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Hyp-DAsn-Glu-DGln-NH2（配列番号：10）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号：11）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号：12）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号：13）、H-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号：14）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号：15）、H-AlloThr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号：16）、H-DSer-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-DSer-DAsn-DGln-NH2（配列番号：17）、H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-NH2（配列番号：18）、H-DSer-Val-Thr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Nle-NH2（配列番号：19）、H-Hyp-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Aha-NH2（配列番号：20）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-NH2（配列番号：21）、H-Nva-Thr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Leu-DSer-NH2（配列番号：22）、H-Chex-Thr-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Hyp-NH2（配列番号：23）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-NH2（配列番号：24）、H-AlloThr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Leu-Ser-DAsn-NH2（配列番号：25）、H-DSer-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-DGln-NH2（配列番号：26）、H-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号：27）、H-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号：28）、H-IsoGln-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-Asn-GluOMe-NH2（配列番号：29）、H-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号：30）、H-DAsn-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-Glu-NMeGlu-NH2（配列番号：31）、H-IsoGln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-GluOMe-NH2（配列番号：32）、H-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号：33）、H-Nva-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-Glu-Glu-Orn-NH2（配列番号：34）、およびH-βAla-Ala-Glu-Leu-DSer-Asn-Glu-Glu-NMeArg-NH2（配列番号：35）、その類似体、その変異体、およびその誘導体からなる群から選択されるペプチドを含む１つ以上のペプチドを含む組成物。
【請求項２】
H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号：1）、H-DSer-Val-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-Glu-Orn-NH2（配列番号：2）、H-Hyp-Val-Thr-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Hyp-DAsn-Glu-Glu-Aha-NH2（配列番号：3）、H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（SEQ ID NO：4）、H-DSer-Val-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号：5）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号：6）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-Glu-Orn-NH2（配列番号：7）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号：8）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号：9）、H-Chex-Thr-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Hyp-DAsn-Glu-DGln-NH2（配列番号：10）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号：11）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号：12）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号：13）、HAlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号：14）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号：15）、H-AlloThr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号：16）、H-DSer-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-DSer-DAsn-DGln-NH2（配列番号：17）、H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-NH2（配列番号：18）、H-DSer-Val-Thr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Nle-NH2（配列番号：19）、H-Hyp-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Aha-NH2（配列番号：20）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-NH2（配列番号：21）、H-Nva-Thr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Leu-DSer-NH2（配列番号：22）、H-Chex-Thr-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Hyp-NH2（配列番号：23）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-NH2（配列番号：24）、H-AlloThr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Leu-Ser-DAsn-NH2（SEQ ID番号：25）、H-DSer-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-DGln-NH2（配列番号：26）、H-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号：27）、H-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号：28）、H-IsoGln-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-Asn-GluOMe-NH2（配列番号：29）、H-G1n-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号：30）、H-DAsn-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-Glu-NMeGlu-NH2（SEQ ID NO：31）、H-IsoGln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-GluOMe-NH2（配列番号：32）、H-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号：33）、H-Nva-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-Glu-Glu-Orn-NH2（配列番号：34）、およびH-βAla-Ala-Glu-Leu-DSer-Asn-Glu-Glu-NMeArg-NH2（配列番号：35）、その類似体、その変異体、およびその誘導体のグループから選択されたペプチドからなる１つ以上のペプチドの組成。
【請求項３】
ポリヌクレオチド配列は、配列番号１から配列番号35のいずれか１つの前記ペプチド、その類似体、その変異体、またはその誘導体をコードする請求項１または２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４】
前記ペプチドをコード化するポリヌクレオチドは、前記DNA形態またはDNA / RNAハイブリッド形態であり、およびその相補配列であることを特徴とする請求項１または２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
請求項１または２に記載の医薬組成物、および医薬的に許容される賦形剤。
【請求項６】
前記ペプチドは、医薬組成物がそれを必要とする対象に投与されたときにドライアイの涙液層の安定性を改善するのに十分な量で存在することを特徴とする請求項５記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記薬学的に許容される賦形剤が、溶媒、緩衝剤、防腐剤、キレート剤、酸化防止剤、安定剤、乳化剤、懸濁剤、および希釈剤のうちの少なくとも１つを含むことを特徴とする請求項５記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記ペプチドが合成ペプチドであることを特徴とする請求項２記載の組成物。
【請求項９】
1.0％から10.0％のリフィテグラストまたはその塩をさらに含むことを特徴とする請求項１乃至８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ドライアイ治療は、局所治療、硝子体内注射、結膜下注射、結膜下注射、筋肉内注射、皮下注射、静脈内注射、前房内注射、および被験者の眼への移植からなる群から選択されることを特徴とする請求項１乃至９のいずれか一項に記載の眼科用組成物。
【請求項１１】
前記ドライアイは、涙液分泌の変化、涙液クリアランスの変化、眼表面の損傷、角膜上皮欠損、眼表面細胞の変化、涙液層の安定性の変化、涙液量の変化、涙液層の組成の変化、涙の浸透圧の変化、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるドライアイの少なくとも１つの症状または臨床徴候を示すことを特徴とする請求項１乃至１０のいずれか一項に記載の眼科用組成物。
【請求項１２】
前記ドライアイは、ドライアイは、涙液分泌低下、涙液不足、眼球乾燥症、シェーグレン症候群のドライアイ、非シェーグレン症候群のドライアイ、乾性角結膜炎、涙液欠乏性ドライアイ（ADDE）、蒸発ドライアイ（EDE）、環境ドライアイ、スティーブンスジョンソン症候群、眼性類天疱瘡眼底炎、まぶたの閉鎖障害、感覚神経麻痺、アレルギー性結膜炎関連のドライアイ、ウイルス性結膜炎後のドライアイ、白内障手術後のドライアイ、VDT操作関連のドライアイ、及びコンタクトレンズ装用関連のドライアイ、涙液不足、涙液欠乏症、眼乾燥症、シェーグレン症候群ドライアイ、非シェーグレン症候群ドライアイ、乾性角結膜炎、涙液欠乏性ドライアイからなる群から選択される少なくとも１つの症状またはドライアイの臨床的な徴候を示すADDE）、蒸発性ドライアイ（EDE）、環境ドライアイ、スティーブンスジョンソン症候群、眼性類天疱瘡眼eph炎、まぶた閉鎖不全、感覚神経麻痺、アレルギー性結膜炎関連ドライアイ、ウイルス性結膜炎ドライアイ、白内障後手術用ドライアイ、ディスプレイ操作関連のドライアイ、コンタクトレンズ装用関連のドライアイからなる群から選択される少なくとも１つの症状またはドライアイの臨床徴候を示すことを特徴とする請求項１乃至１０のいずれか一項に記載の眼科用組成物。
【請求項１３】
前記ドライアイは、ブドウ膜炎、強膜炎、眼球手術後の炎症、角膜移植、角膜創傷治癒、結膜炎、網膜疾患、緑内障、高眼圧症、翼状片およびそれらの組み合わせからなる群から選択される炎症に関連する眼疾患であることを特徴とする請求項１乃至１０のいずれか一項に記載の眼科用組成物。
【請求項１４】
前記ペプチドは、最終組成物の約0.01％（wt）から約5.0％（wt）の間の量で存在することを特徴とする請求項１乃至１３のいずれか一項に記載の眼科用組成物。
【請求項１５】
前記被験対象に必要なドライアイの治療は、１日１回、１日２回、１日３回、またはより頻繁に行われることを特徴とする請求項１乃至１４のいずれか一項に記載の眼科用組成物。
【請求項１６】
前記被験対象に必要なドライアイの治療は、１日おきにまたはそれよりも少ない頻度で行われることを特徴とする請求項１乃至１４のいずれか一項に記載の眼科用組成物。
【請求項１７】
前記眼科用組成物が、溶液、懸濁液、シロップ、液体、ゲル、ヒドロゲル、エマルジョン、リポソーム、エアロゾル、ミスト、フィルム、懸濁液、プラグ、ポリマー、インプラント、コンタクトレンズ、眼内挿入物からなる群から選択される製剤中にあり、ナノ粒子、マイクロ粒子、徐放性製剤、および眼科医療機器に適した製剤であることを特徴とする請求項１乃至１６のいずれか一項に記載の眼科用組成物。
【請求項１８】
前記眼科用組成物が前記被験対象に必要なドライアイを治療するために、シクロスポリン、人工涙液、コルチコステロイド、抗炎症剤、またはその任意の組み合わせを含むことを特徴とする請求項１乃至１７のいずれか一項に記載の眼科用組成物。
【請求項１９】
眼科用組成物が、２つ以上の異なるペプチドまたはその類似体をさらに含むことを特徴とする請求項１乃至１８のいずれか一項に記載の眼科用組成物。
【請求項２０】
被験対象に必要なドライアイを治療する方法が、
ａ）請求項１または２に記載のペプチドを含む治療的有効量の組成物；及び
b）薬学的に許容される賦形剤
を被験対象に投与することを特徴とする方法。
【請求項２１】
前記ペプチドが、硝子体内注射、結膜下注射、結膜注射、筋肉内注射、皮下注射、静脈内注射、前房内注射、または被験者の眼への移植によって局所投与されることを特徴とする請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ドライアイが、涙液不足、涙液欠乏症、眼乾燥症、シェーグレン症候群ドライアイ、非シェーグレン症候群ドライアイ、乾性角結膜炎、涙液欠乏性ドライアイ（ADDE）、蒸発性ドライアイ（EDE）、環境ドライアイ、スティーブンスジョンソン症候群、眼性類天疱瘡眼底炎、まぶた閉鎖不全、感覚神経麻痺、アレルギー性結膜炎関連ドライアイ、ウイルス性結膜炎ドライアイ、白内障手術後ドライアイ、ディスプレイ操作に関連するドライアイ、およびコンタクトレンズ装用に関連するドライアイからなる群から選択されることと特徴とする請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
約1.0％から約10.0％のリフィテグラストをさらに含むことと特徴とする請求項２０から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記組成物が対象に１日１回、１日２回、１日３回またはそれ以上の頻度で投与されることを特徴とするとする請求項２０〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記組成物が１日おきに投与されるか、またはより少ない頻度で投与されることを特徴とする請求項２０乃至２３のいずれか一項記載の方法。
【請求項２６】
前記ペプチドが、最終組成物の約0.01％（wt）から約5.0％（wt）の間の量で存在することを特徴とする請求項２０乃至２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記組成物が、溶液、懸濁液、シロップ、液体、ゲル、ヒドロゲル、エマルジョン、リポソーム、エアロゾル、ミスト、フィルム、懸濁液、プラグ、ポリマー、インプラント、コンタクトレンズ、眼内挿入物、ナノ粒子、微粒子、持続放出製剤及び眼科医療機器に適した製剤からなる群から選択される製剤中にあることを特徴とする請求項２０乃至２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記方法は、シクロスポリン（0.1〜1.0mg／ml）、人工涙液、コルチコステロイド、抗炎症剤、またはそれらの任意の組み合わせの組成物が投与されることをさらに含む請求項２０乃至２７のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、2017年３月９日に出願された米国仮出願第62/469,170号の優先権を主張し、この先行出願の開示は、その全体を参照文献として本明細書に組み込む。
【ＥＦＳ−ＷＥＢを介して提出された配列リスト配列表】
【０００２】
本出願は、サイズが19kbの「Ally001PCT_ST25」という名前のシーケンスリストのASCIIテキストファイルの内容は、2018年３月５日に作成され、EFS-Webを介して電子的に送信された全てを参照文献としてここに組み込む。
【０００３】
〔分野〕
本願発明は、炎症プロセスに応答したＴ細胞の経内皮移動の阻害に関与するペプチドに関する内容を教示する。ドライアイおよび眼の疾患および障害を患っている対象の疾患の治療は、ペプチド、その類似体、変異体、誘導体または薬学的に許容される塩を含む組成物および方法を使用して開発することができる。
【背景技術】
【０００４】
眼表面システムは、角膜、結膜、涙腺、マイボーム腺、鼻涙管、およびそれらに関連する涙液および結合組織マトリックス、ならびにまぶたおよびまつげで構成され、すべて連続上皮によって統合され、神経、内分泌、免疫、および血管系は相互に繋がっている。涙腺は人間の涙を生成する。涙はまばたきによって供給され、眼表面から蒸発し、鼻涙管から排出されます。眼表面上皮細胞の涙液浸透圧上昇への曝露は、炎症誘発性サイトカインの放出を含む炎症経路を活性化する。これは、眼表面への免疫細胞、特に抗原提示細胞とＴ細胞の補充と浸潤につながる。
【０００５】
乾性角結膜炎としても知られるドライアイ疾患（DEDまたはドライアイ）は、涙と眼表面の多因子障害である。それらの特徴は、乾燥により炎症を起こした目、過度の涙目、熱感および刺痛、光過敏症、異物感、痛みおよび赤み、目の疲労、および/または視力障害である。ドライアイでは、眼表面上皮は扁平上皮化生を受け、杯細胞の損失、ムチン欠乏および角質化によって現れ、涙液層が不安定になる。涙液層の安定性と浸透圧に悪影響を与える要因は、眼表面の損傷を誘発し、先天性および適応性の免疫応答を生成する炎症カスケードを開始する可能性がある。これらの免疫炎症反応は、さらなる眼表面損傷と自己持続性炎症サイクルの発生につながる（スティーベンソン等、眼科学アーカイブ（Arch. Ophthalmol）2012、130（i）：90-100）。
【０００６】
ドライアイの主なクラスは、涙液欠乏性ドライアイ（ADDE）および蒸発性ドライアイ（EDE）である。ADDEは涙液分泌の不足によるものであり、このクラスはシェーグレン症候群のドライアイ（涙腺と唾液腺は自己免疫プロセス、例えばリウマチ性関節炎の標的となる）および非シェーグレン症候群のドライアイ（涙液機能障害、しかし、シェーグレン症候群の全身性自己免疫機能は除外される（例、加齢に伴うドライアイがある）。EDEは、通常の涙液分泌機能の存在下で露出した眼表面からの過剰な水分損失が原因である。その原因は、内因性（瞼の構造またはダイナミクスに影響を与える内因性疾患、例えばマイボーム腺機能不全）または外因性（外因性曝露、例えばビタミンＡ欠乏により眼表面疾患が発生する場合）である可能性がある。マイボーム腺機能不全では、涙の脂質層が変化し、涙液の蒸発が増加する。（例えば、「ドライアイ疾患の定義と分類：2007年国際ドライアイワークショップのガイドライン」、眼表面（Ocul Surf）、2007、5（2）：75-92を参照のこと）。ドライアイの両方のクラスで、最終的な結果は、刺激と炎症の自己永続的なサイクルです。
【０００７】
50歳以上のおよそ500万人のアメリカ人がDEDであり、数百万人がドライアイの突発的な症状を経験していると推定され、これらのうち、約３分の２は女性である。DEDの有病率は、年齢の増加とともに劇的に上昇する。ドライアイ疾患は、日常生活の活動のパフォーマンスを妨げる可能性があり、DEDは生活の質の全体的な低下と関連する。
【０００８】
眼の表面疾患指数（OSDI）アンケート、ドライアイの症状評価（SADE）、涙の分解時間（TBUT）、眼表面の生体色素染色、涙液メニスカス高さ分析、涙液膜浸透圧分析、シルマーテストなどを含む。TBUTテストは、３層の涙液層が崩壊するのに必要な時間を測定します。TBUTテスト時間の短縮は、涙の質の低下を示し、ドライアイであることを示す。シルマーのテストでは、生成された涙の量を測定し、各眼の下瞼（結膜嚢）内に数分にわたって、ろ紙の小さな紙片を配置し、毛細管現象によって涙液をろ紙に引き込むことによって実行される。その後、紙を取り除き、水分量をミリメートル単位で測定する。通常、５mm未満の測定値はドライアイを示す。
【０００９】
慢性DED患者を治療する眼科医は、眼表面の炎症の症状を管理する必要がある。視力の低下とは別に、そのような炎症の症状には、結膜や瞼の赤み、痛み、腫れ、浮腫（結膜浮腫）も含まれる。DEDでは、刺激性の症状は、炎症性サイトカインの放出と眼表面への炎症細胞の浸潤（ラム等、アメリカ眼科ジャーナル（Am J Ophthalmol）、2009、147：198-205; アルバースマイヤー等、Exp Eye Res、2010、90（3）：444-451）、ならびに眼表面に分布する神経線維の刺激によるものであり（クネール等、眼科学アーカイブ（Arch. Ophthalmol）2000、118-（11）：1489-96）、眼表面組織の損傷を引き起こします。炎症は、DEDで特定される重要な臨床的な徴候である上皮障害にもつながります。
【００１０】
ドライアイの現在の治療法は、症状を軽減するための涙液の補充に焦点を合わせた緩和的治療である。ドライアイの軽度および中程度の症例の従来の治療には、補助潤滑が含まれる。数時間ごとに治療用の点眼薬や人工涙液などの眼科用製剤を塗布すると、眼の表面の涙液膜を維持および強化し、一時的に緩和することができる。潤滑性の軟膏も使用される。涙軟膏は、白色ワセリン、鉱油、および同様の潤滑剤を含み、潤滑剤および皮膚軟化剤として機能する。これらの緩和療法は短期的には利点があるが、ドライアイの長期制御療法にはあまり有用性がない。
【００１１】
RESTASIS(登録商標)（シクロスポリンＡ）は、ドライアイ治療用の最初の処方製品である。シクロスポリンＡは、いくつかの経路を介して免疫抑制活性を発揮し、シクロスポリンＡの免疫調節活性は、移植拒絶、乾癬、潰瘍性大腸炎、関節リウマチ、DEDなどの免疫に基づく障害の治療に使用される。シクロスポリンＡの局所投与は、おそらく副交感神経系関連神経伝達物質の局所放出を促進することにより、涙液分泌を増加させることが示される。DEDにおけるシクロスポリンＡ治療の有益な効果は十分に確立されている。しかし、多くのDED患者が局所シクロスポリンＡに対して一貫した治療反応を示さないことは明らかである。
【００１２】
したがって、現在、炎症に関連するドライアイおよび眼疾患の患者の大多数に対する有効な治療選択肢は殆どない。驚くべきことに、開示された変性ペプチドは、眼疾患における炎症に応答したＴ細胞の移動を阻害することが示され得る。そのため、効果的で安全な治療法に対して高く満たされていないニーズがある。本発明はこの必要性を満たし、他の利点も提供する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本願発明の一態様を、それを必要とする対象において炎症に関連するドライアイおよび眼疾患を治療するための組成物および方法が本明細書で提供する。この方法は、炎症に関連する眼疾患を治療するために、Ｔ細胞の経内皮遊走のペプチド阻害剤またはその薬学的に許容される塩と呼ばれるペプチド化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む治療有効量の組成物を対象に投与することを含む。いくつかの実施態様において、組成物は、２つ以上の異なる、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、10以上の異なるペプチドまたはその類似体または薬学的に許容されるその塩が本願には含まれる。
【００１４】
本願発明の別の実施態様において、ペプチドは、以下の表１に示されるペプチド配列によって表される。一実施態様には、表１のペプチドの類似体、変異体、誘導体、および薬学的に許容される塩が含まれる。一実施態様では、眼科用組成物は、その類似体、その変異体、およびその誘導体を含み、配列番号１から配列番号35からなる群から選択されるペプチドを含む。一実施態様では、ポリヌクレオチド配列は、配列番号１から配列番号35のいずれか１つのペプチドをコード化する。ペプチドをコード化するポリヌクレオチドは、そのDNA型またはDNA/RNAハイブリッド型であり得、その相補配列である。一実施態様では、眼科用組成物は、表１のペプチドまたはペプチドのその類似体、または配列番号１から配列番号３５のいずれか１つのペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を有する。ペプチドをコードするポリヌクレオチドは、そのDNA型またはDNA / RNAハイブリッド型であり得、その相補配列である。一実施態様では、ペプチドは合成ペプチドである。
【００１５】
別の実施態様では、本発明は、H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号1）、H-DSer-Val-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-Glu-Orn-NH2（配列番号2）、H-Hyp-Val-Thr-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Hyp-DAsn-Glu-Glu-Aha-NH2（配列番号3）、H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号4）、H-DSer-Val-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号5）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号6）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-Glu-Orn-NH2（配列番号7）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号8）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号9）、H-Chex-Thr-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Hyp-DAsn-Glu-DGln-NH2（配列番号10）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号11）、HNva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号12）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号13）、H-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号14）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号15）、H-AlloThr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号16）、H-DSer-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-DSer-DAsn-DGln-NH2（配列番号17）、H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-NH2（配列番号18）、H-DSer-Val-Thr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Nle-NH2（配列番号19）、H-Hyp-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Aha-NH2（配列番号20）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-NH2（SEQ ID NO：21）、H-Nva-Thr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Leu-DSer-NH2（配列番号22）、H-Chex-Thr-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Hyp-NH2（配列番号23）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-NH2（配列番号24）、H-AlloThr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Leu-Ser-DAsn-NH2（配列番号25）、H-DSer-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-DGln-NH2（配列番号26）、H-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号：27）、H-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号28）、H-IsoGln-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-Asn-GluOMe-NH2（配列番号29）、H-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号30）、H-DAsn-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-Glu-NMeGlu-NH2（配列番号31）、H-IsoGln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-GluOMe-NH2（配列番号32）、H-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号33）、H-Nva-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-Glu-Glu-Orn-NH2（配列番号：34）、およびH-βAla-Ala-Glu-Leu-DSer-Asn-Glu-Glu-NMeArg-NH2（配列番号35）からなる群から選択されるペプチドを含む１つまたは複数のペプチドを含む組成物であり、その類似体、その変異体、およびその誘導体である。
【００１６】
更に、別の発明において、本発明は、H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号1）、H-DSer-Val-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-Glu-Orn-NH2（配列番号：2）、H-Hyp-Val-Thr-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Hyp-DAsn-Glu-Glu-Aha-NH2（配列番号3）、H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号4）、H-DSer-Val-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号5）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号：6）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-Glu-Orn-NH2（配列番号7）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号8）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号9）、H-Chex-Thr-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Hyp-DAsn-Glu-DGln-NH2（配列番号10）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号11）、H-Nva-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号12）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号13）、H-AlloThr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-GluOMe-NH2（配列番号14）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号15）、H-AlloThr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号16）、H-DSer-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-DSer-DAsn-DGln-NH2（配列番号17）、H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-NH2（配列番号18）、H-DSer-Val-Thr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Nle-NH2（配列番号19）、H-Hyp-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Aha-NH2（配列番号20）、H-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-NH2（配列番号NO：21）、H-Nva-Thr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Leu-DSer-NH2（配列番号22）、H-Chex-Thr-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Hyp-NH2（配列番号23）、H-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-NH2（配列番号24）、H-AlloThr-Glu-Gln-Nva-Ala-Glu-Leu-Ser-DAsn-NH2（配列番号25）、H-DSer-Glu-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-DGln-NH2（配列番号26）、H-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-NH2（配列番号27）、H-NMeGlu-Gln-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-NMeGlu-NH2（配列番号28）、H-IsoGln-Gln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-Asn-GluOMe-NH2（配列番号29）、H-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-NH2（配列番号30）、H-DAsn-Gly-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-Glu-NMeGlu-NH2（配列番号31）、H-IsoGln-Gly-βAla-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-GluOMe-NH2（配列番号32）、H-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号33）、H-Nva-Ala-Glu-Nle-Ser-Asn-Glu-Glu-Orn-NH2（配列番号NO：34）、およびH-βAla-Ala-Glu-Leu-DSer-Asn-Glu-Glu-NMeArg-NH2（配列番号35）からなる群から選択されるペプチドからなる１つまたは複数のペプチドの組成物であり、その類似体、その変異体、およびその誘導体である。
【００１７】
一態様では、表１の少なくとも１つのペプチド化合物またはその医薬的に活性な塩を含む医薬組成物が提供され、薬学的に許容される賦形剤である。表１の少なくとも１つのペプチド化合物またはその医薬的に活性な塩を含む医薬組成物は、医薬組成物がそれを必要とする対象に投与されるとき涙膜安定性を改善するのに十分な量で組成物中に存在し得る。一実施態様では、薬学的に許容される賦形剤は、溶媒、緩衝剤、防腐剤、キレート剤、酸化防止剤、安定剤、乳化剤、懸濁剤、および希釈剤のうちの少なくとも１つを含んでも良い。一実施態様では、組成物はさらに1.0％〜10.0％のリフィテグラスト（Lifitegrast）またはその塩を含んでも良い。
【００１８】
いくつかの実施態様では、組成物を使用して、少なくとも１つのドライアイの症状を有するドライアイを治療することができ、赤み、分泌物、過剰な涙（excessive tearing）、涙の生成不能、乾燥、刺激、かゆみ、痛み、不快感、炎症、疲労、異物感、光線過敏症、視力障害、およびそれらの任意の組み合わせ、目の刺すような痛み、焼けるような感覚、または目の中のかすかな感覚、眼の乾燥またはざらつき、目の中または周りの糸状の目脂（stringy mucus）、目の刺激の増加、目の疲労、光に対する感受性（羞明：photophobia）、目の赤み、過剰な涙、かすみ目症状の発現（episode of blurred vision）、目の異物感、目の周りまたは目の痛みまたは痛み感情的にストレスを受けたときに泣くことができない症状（inability to cry when emotionally stressed）、持続的に視覚的注意を必要とする際の活動の耐性の低下（decreased tolerance of an activity requiring sustained visual attention）、およびその任意の組み合わせが対象となる。いくつかの実施態様では、ドライアイは、涙液分泌の変化、涙液クリアランスの変化、眼表面損傷、角膜上皮欠損、眼表面細胞の変化を含むがこれらに限定されず、ドライアイの少なくとも１つの症状または臨床的な徴候を示す涙液層の安定性の変化、涙液量の変化、涙液膜組成の変化、涙液浸透圧の変化、およびそれらの任意の組み合わせが含まれる。いくつかの実施態様では、ドライアイは、涙液不足、涙液欠乏症、眼乾燥症（xerophthalmia）、シェーグレン症候群ドライアイ（Sjogren's syndrome dry eye）、非シェーグレン症候群ドライアイ、乾性角結膜炎（keratoconjunctivitis sicca）、涙液欠乏性ドライアイ（ADDE：aqueous tear-deficiency dry eye）、蒸発性ドライアイ（EDE）、環境ドライアイ、スティーブンスジョンソン症候群、眼性類天疱瘡（ocular pemphigoid）、眼瞼縁炎（blepharitis marginal）、まぶた閉鎖不全、感覚神経麻痺、アレルギー性結膜炎関連ドライアイ、ウイルス性結膜炎ドライアイ、白内障手術後ドライアイ、VDT手術に関連したドライアイ、およびコンタクトレンズ装用に関連したドライアイからなる群から選択される。一実施態様において、ドライアイは、ブドウ膜炎、強膜炎、眼球手術後の炎症、角膜移植、角膜創傷治癒、結膜炎、網膜疾患、緑内障、高眼圧症、翼状片、および翼状片からなる群から選択される炎症に関連する眼疾患及びそれらの組み合わせである。
【００１９】
いくつかの実施態様では、ドライアイの治療用組成物は、硝子体内注射、結膜下注射、結膜注射、筋肉内注射、皮下注射、静脈内注射、前房内注射、または被験者の眼への移植によって局所投与することができる。いくつかの実施態様では、組成物は、溶液、懸濁液、シロップ、液体、ゲル、ヒドロゲル、エマルジョン、リポソーム、エアロゾル、ミスト、フィルム、懸濁液、プラグ、ポリマー、インプラント、コンタクトレンズからなる群から選択される製剤である。眼内挿入物、ナノ粒子、微粒子、徐放性製剤、および眼科医療機器に適した製剤。いくつかの実施態様において、ペプチド化合物は、最終組成物の約0.01％（wt）から約5.0％（wt）の間の量で存在する。いくつかの実施態様において、組成物は、１日に１回、１日に２回、１日に３回、またはより頻繁に（より頻繁に）対象に投与される。他の実施態様において、組成物は、１日おきに投与されるか、より少ない頻度で（あまり頻繁ではない）投与される。いくつかの実施態様では、それを必要とする対象は、シクロスポリン、人工涙液、リフィテグラスト、タビルルミド、コルチコステロイド、抗炎症剤、またはそれらの任意の組み合わせを含む組成物をさらに受け取ることができる。
【００２０】
別の実施態様では、それを必要とする対象のドライアイを治療する方法を本明細書では提供する。この方法は、対象のドライアイを治療するために、表１の少なくとも１つのペプチドまたはその薬学的塩および薬学的に許容される賦形剤を含む治療有効量の組成物を対象に投与することを含む。いくつかの実施態様では、ペプチドは、硝子体内注射、結膜下注射、結膜注射、筋肉内注射、皮下注射、静脈内注射、前房内注射、または被験者の眼への移植によって、局所投与することができる。いくつかの実施態様では、ドライアイは、催涙液不足、涙欠乏症、眼球乾燥症、シェーグレン症候群ドライアイ、非シェーグレン症候群ドライアイ、乾性角結膜炎、涙液欠乏性ドライアイ（ADDE）、蒸発性ドライアイ（EDE）、環境ドライアイ、スティーブンスジョンソン症候群、眼性類天疱瘡、眼瞼縁炎、まぶた閉鎖不全、感覚神経麻痺、アレルギー性結膜炎関連ドライアイ、ウイルス性結膜炎ドライアイ、白内障手術後のドライアイ、ディスプレイ操作関連のドライアイ及びコンタクトレンズ装用関連のドライアイからなる群から選択されるドライアイ疾患の少なくとも１つの症状または臨床的な徴候を示す。
【００２１】
一実施態様では、組成物はさらに1.0％〜10.0％のリフィテグラスト（Lifitegrast）またはその塩を含む。いくつかの実施態様において、組成物は、１日に１回、１日に２回、１日に３回、またはより頻繁に（より高頻度で）対象に投与される。他の実施態様において、組成物は、１日おきに投与されるか、より少ない頻度で（あまり頻繁ではない）投与される。いくつかの実施態様において、ペプチド化合物は、最終組成物の約0.01％（wt）から約5.0％（wt）の間の量で存在する。いくつかの実施態様では、それを必要とする対象は、シクロスポリン、人工涙液、コルチコステロイド、抗炎症剤、またはそれらの任意の組み合わせを含む組成物をさらに受け取ることができる。一実施態様では、この方法は、配列番号１から配列番号35からなる群から選択されるペプチド、その類似体、その変異体、その誘導体、またはその薬学的に許容される塩を投与する。別の実施態様では、この方法は、配列番号１から配列番号35のいずれか１つのペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を利用する。ペプチドをコードするポリヌクレオチドは、そのDNA型またはDNA/RNAハイブリッド型であってもよく、そしてその相補配列であっても良い。一実施態様において、この方法は、配列番号１から配列番号35のペプチドまたはその類似体を含む薬学的に許容される組成物を投与する。一実施態様では、ペプチドは合成ペプチドである。
【００２２】
一実施態様では、この方法は、赤み、分泌物、過剰な涙、涙の生成不能、乾燥、刺激、かゆみ、痛み、不快感、炎症、疲労、異物感、体の感覚、光感受性、かすみ目、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるドライアイの少なくとも１つの症状を緩和または治療する。いくつかの実施態様では、ドライアイは、涙液分泌の変化、涙液クリアランスの変化、眼表面損傷、角膜上皮欠損、眼表面細胞の変化を含むが、これらに限定されず、ドライアイの少なくとも１つの症状または臨床的な徴候を示すが、涙液層の安定性の変化、涙液量の変化、涙液膜組成の変化、涙液浸透圧の変化、およびそれらの任意の組み合わせも含まれる。いくつかの実施態様では、ドライアイは、催涙液不足、涙欠乏症、眼球乾燥症、シェーグレン症候群ドライアイ、非シェーグレン症候群ドライアイ、乾性角結膜炎、涙液欠乏症、ドライアイ（ADDE）、蒸発性ドライアイ（EDE）、環境ドライアイ、スティーブンスジョンソン症候群、眼性類天疱瘡、眼瞼縁炎、まぶた閉鎖不全、感覚神経麻痺、アレルギー性結膜炎関連ドライアイ、ウイルス性結膜炎ドライアイ、白内障手術後のドライアイ、ディスプレイ操作関連のドライアイ及びコンタクトレンズ装用関連のドライアイからなる群から選択されるドライアイ疾患の少なくとも１つの症状または臨床的な徴候を示す。一実施態様において、ドライアイは、ブドウ膜炎、強膜炎、眼球手術後の炎症、角膜移植、角膜創傷治癒、結膜炎、網膜疾患、緑内障、高眼圧症、翼状片、および翼状片からなる群から選択される炎症に関連する眼疾患及びそれらの組み合わせである。
【００２３】
さらに別の態様を本明細書で開示するが、必要とされる対象の炎症に関連する眼疾患を治療する方法である。この方法は、ペプチド化合物またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される賦形剤を含む治療有効量の組成物を対象に投与して、対象の炎症に関連する眼疾患を治療することを含む。いくつかの実施態様では、組成物は、２つ以上、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、10以上の異なるペプチドまたはその類似体または薬学的に許容されるその塩を含む。いくつかの実施態様では、炎症に関連する眼疾患は、ブドウ膜炎、強膜炎、眼球手術後の炎症、角膜移植、角膜創傷治癒、結膜炎、網膜疾患、緑内障、高眼圧症、翼状片およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００２４】
別の態様において、本明細書に開示されるのは、それを必要とする対象におけるドライアイの少なくとも１つの症状または臨床的な徴候を緩和する方法である。この方法は、ペプチド化合物またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される賦形剤を含む治療有効量の組成物を対象に投与して、対象のドライアイの少なくとも１つの症状または臨床的な徴候を緩和することを含む。いくつかの実施態様において、組成物は、２つ以上の異なる、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、10以上の異なるペプチド化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２５】
別の態様では、本明細書で開示されるのは、それを必要とする対象において炎症に関連する眼疾患を治療する方法である。この方法は、ペプチド化合物またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される賦形剤を含む治療有効量の組成物を対象に投与して、対象の炎症に関連する眼疾患を治療することを含む。いくつかの実施形態において、組成物は、２つ以上の異なる、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、10以上の異なるペプチド化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２６】
一実施態様では、ドライアイは、催涙液不足、涙欠乏症、眼球乾燥症、シェーグレン症候群ドライアイ、非シェーグレン症候群ドライアイ、乾性角結膜炎、涙液欠乏性ドライアイ（ADDE）、蒸発性ドライアイ（EDE）、環境ドライアイ、スティーブンスジョンソン症候群、眼性類天疱瘡、眼瞼縁炎、まぶた閉鎖不全、感覚神経麻痺、アレルギー性結膜炎関連ドライアイ、ウイルス性結膜炎ドライアイ、白内障手術後のドライアイ、ディスプレイ操作関連のドライアイ及びコンタクトレンズ装用関連のドライアイからなる群から選択されるドライアイ疾患の少なくとも１つの症状または臨床的な徴候を緩和する方法を示す。
一実施態様では、この方法は、赤み、分泌物、過剰な涙、涙の生成不能、乾燥、刺激、かゆみ、痛み、不快感、炎症、疲労、異物感、体の感覚、光感受性、かすみ目、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるドライアイの少なくとも１つの症状を緩和または治療する方法を示す。いくつかの実施態様では、ドライアイは、涙液分泌の変化、涙液クリアランスの変化、眼表面損傷、角膜上皮欠損、眼表面細胞の変化を含むが、これらに限定されず、ドライアイの少なくとも１つの症状または臨床的な徴候を示すが、涙液層の安定性の変化、涙液量の変化、涙液膜組成の変化、涙液浸透圧の変化、およびそれらの任意の組み合わせの少なくとも１つの臨床的な徴候を緩和する方法を示す。
【００２７】
いくつかの実施態様では、溶液、懸濁液、シロップ、液体、ゲルからなる群から選択される製剤で組成物を投与することができ、ヒドロゲル、エマルジョン、リポソーム、エアロゾル、ミスト、フィルム、懸濁液、プラグ、ポリマー、インプラント、コンタクトレンズ、眼内挿入物、ナノ粒子、微粒子、持続放出製剤、眼科医療機器に適した製剤ドライアイの少なくとも１つの症状または臨床徴候を緩和する方法、または眼疾患を治療する方法を示す。いくつかの実施態様において、ペプチド化合物は、最終組成物の約0.01％（wt）から約5.0％（wt）の間の量で存在する。いくつかの実施態様において、組成物は、１日に１回、１日に２回、１日に３回、またはより頻繁に（より高い頻度で）対象に投与される。他の実施態様において、組成物は、１日おきに投与されるか、より少ない頻度で（あまり頻繁ではない）投与される。いくつかの実施態様では、それを必要とする対象は、シクロスポリン、人工涙液、コルチコステロイド、抗炎症剤、またはそれらの任意の組み合わせを含む組成物をさらに受け取ることができる。一実施態様では、ドライアイを治療する方法は、約1.0％〜約10.0％のリフィテグラストをさらに含むペプチド組成物の治療有効量を対象に投与することをさらに含む。
【００２８】
一実施態様では、配列番号１から配列番号35からなる群から選択されるペプチド、その類似体、その変異体、その誘導体、またはその薬学的に許容される塩を投与することによりドライアイの少なくとも１つの症状または臨床徴候を緩和する方法、または眼疾患を治療する方法を示す。一実施態様では、ペプチドまたはその類似体は、薬学的に許容される組成物として投与しても良い。一実施態様では、ペプチドまたはその類似体は、ドライアイの少なくとも１つの症状または臨床徴候を緩和するために、または眼疾患を治療するために使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
図１は、涙液層破壊時間の変化を示す棒グラフであり、ドライアイを５％リフィテグラストまたは0.1％配列番号１のペプチド阻害剤（PEPITEM）いずれかで治療後の１日および10日の涙液層破壊時間の変化を示す。
【００３０】
図２は、涙液層破壊時間の変化を示す棒グラフであり、ドライアイを５％リフィテグラストまたは0.1％配列番号１のペプチド阻害剤（PEPITEM）いずれかで治療後の５日および10日の経内皮遊走の変化を示す。
【００３１】
図３は、角膜表面染色の４枚の写真を示す。
【００３２】
図４Ａ〜４Ｅは、ドライアイが結膜内に存在し、治療の10日後の活性化Ｔ細胞の存在の変化を示す散布図である。図４Ａは、正常（UT）眼の活性化されたＴ細胞レベルの散布図である。図４Ｂは、ドライアイ（車両）の活性化されたＴ細胞レベルの散布図である。図４Ｃは、５％リフィテグラスト投与後の活性化Ｔ細胞レベルの散布図を示す。図４Ｄは、0.1％配列番号１の経内皮移動のペプチド阻害剤の投与後の活性化Ｔ細胞レベルの散布図である。
詳細な説明
【００３３】
本明細書に開示されるのは、治療を必要とする被験対象においてドライアイまたは炎症に関連する眼疾患を治療するための組成物、方法およびキットの実施態様である。この方法は、ペプチド化合物またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される賦形剤を含む治療的に有効な組成物を前記対象に投与することを含む。本明細書では、対象におけるドライアイの少なくとも１つの症状または臨床的な徴候を緩和する方法も提供される。いくつかの実施態様では、治療上有効な組成物は、少なくとも２つの異なるペプチド化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。本発明は、ドライアイを有する被験者のペプチド化合物またはその薬学的に許容される塩の眼への投与が涙液量を増加させ、角膜表面の不規則性を減少させるという発見に一部基づく。
【００３４】
本明細書で使用される場合、以下の用語は、特に明記しない限り、それらに帰する意味を有する。
【００３５】
本明細書で使用される「a」、「an」、または「the」という用語は、１つの要素の態様を含むだけでなく、２つ以上の要素の態様も含む。例えば、単数形「a」、「an」、および「the」には、文脈からそうでないことが明確に示されていない限り、複数の指示対象が含まれる。したがって、例えば、「細胞」への言及には複数のそのような細胞が含まれ、「薬剤」への言及には当業者に知られている１つまたは複数の薬剤への言及などが含まれる。
【００３６】
「ドライアイ」という用語は、「ドライアイ疾患の定義と分類：2007国際ドライアイワークショップのガイドライン」、Ocul Surf、2007、5（2）：75-92）に定義されているように、涙と眼表面（角膜、結膜、まぶたを含む）の多因子性疾患を意味し、不快感、視覚障害、涙液膜不安定性の症状を引き起こす。ドライアイには、涙液層の浸透圧の増加と眼表面の炎症が伴う場合がある。ドライアイには、ドライアイ症候群、乾性角結膜炎（KCS）、機能不全涙症候群、涙液角結膜炎、蒸発性涙液欠乏症、涙液欠乏症、およびレーシック誘発神経栄養性上皮障害（LE）が含まれる。
【００３７】
「炎症に関連する眼疾患」という用語は、炎症が眼表面系に損傷を引き起こす眼の疾患または障害を指す。本明細書で使用される「眼表面システム」には、角膜、結膜、涙腺、マイボーム腺、鼻涙管、およびそれらに関連する涙液および結合組織マトリックス、ならびにまぶたおよびまつげが含まれ、すべて連続した上皮および相互に連結された神経によって統合される、内分泌、免疫、および血管系を含む。炎症に関連する眼疾患には、ブドウ膜炎、強膜炎、眼手術後の炎症、角膜移植、角膜創傷治癒、結膜炎、網膜疾患、緑内障、高眼圧症、翼状片、ドライアイ、角膜炎、アレルギー性眼疾患、感染性角膜炎、ヘルペス性角膜炎、角膜血管新生、リンパ管新生、ブドウ膜炎、翼状片、網膜炎、脈絡膜炎、急性多巣性プラコイド色素上皮症、ベーチェット病、手術後の角膜創傷治癒、レーザーによる状態、光線力学療法による状態、湿性および乾燥加齢黄斑変性（ARMD）、眼の後部に影響を与える状態、黄斑変性、網膜変性、非滲出性加齢黄斑変性、滲出性加齢黄斑変性、脈絡膜血管新生、糖尿病性網膜症（増殖）、未熟児網膜症（ROP）、急性黄斑神経網膜症、中心性漿液性脈絡網膜症、嚢胞性黄斑浮腫及び糖尿病性黄斑浮腫、バードショット網膜脈絡膜症、感染症（梅毒、ライム病、結核、トキソプラズマ症）、中程度のブドウ膜炎（扁平上皮炎）、多巣性脈絡膜炎、多発性エバネセント白点症候群（mewds）、眼サルコイドーシス、後部強膜炎、蛇行性脈絡膜炎、網膜下線維症およびブドウ膜炎症候群、フォークト・小柳および原田症候群、網膜動脈閉塞性疾患、網膜中心静脈閉塞、嚢胞性黄斑浮腫、播種性血管内凝固障害、網膜静脈分枝閉塞、高血圧性眼底変化、眼虚血症候群、網膜動脈小動脈瘤疾患、傍中心性毛細血管拡張症、半網膜静脈閉塞症、乳頭静脈炎、中心網膜動脈閉塞症、網膜動脈閉塞症、頸動脈疾患（CAD）、つや消し枝血管炎、鎌状赤血球網膜症およびその他のヘモグロビン症、アンジオイドストリーク、家族性滲出性網膜症病気及びエールズ病、交感性眼炎、ぶどう膜性網膜疾患、網膜剥離、外傷、光線力学療法に起因する状態、光凝固、手術中の灌流低下、放射線網膜症、および骨髄移植網膜症、増殖性硝子体網膜症および網膜膜、増殖性糖尿病性網膜症、眼ヒストプラスマ症、眼トキソカラ症眼ヒストプラスマ症候群（PONS）、眼内炎、トキソプラズマ症、HIV感染に伴う網膜疾患、HIV感染に伴う脈絡膜疾患、HIV感染に伴うブドウ膜疾患、ウイルス性網膜炎、急性網膜壊死、進行性網膜外壊死、真菌性網膜疾患、眼球梅毒、眼結核、びまん性片側亜急性神経網膜炎、ハエ症、網膜色素変性症、網膜ジストロフィーの全身性障害、先天性定常夜盲症、錐体ジストロフィー、シュタルガルト病、眼底軟化症、ベスト病、網膜色素上皮のパターンジストロフィー、X連鎖網膜分離症、ソービーの眼底ジストロフィー、良性同心性黄斑症、ビエッティの結晶性ジストロフィー、弾性黄色腫網膜剥離、黄斑円孔、巨大な網膜裂傷、腫瘍に伴う網膜疾患、網膜色素上皮の先天性肥大、後部ブドウ膜黒色腫、脈絡膜血管腫、脈絡膜骨腫、脈絡膜転移、網膜と網膜色素上皮の過誤腫、網膜芽腫、網膜芽細胞腫、網膜芽腫、網膜芽細胞腫、眼底の腫瘍、網膜星細胞腫、眼内リンパ系腫瘍、眼の後部に影響を与える他の疾患、点状の内���脈絡膜症、急性後部多発性プラコイド色素上皮症、近視網膜変性、急性網膜色素上皮炎、術後角膜炎、眼瞼炎、MGD、緑内障、高眼圧症、枝静脈閉塞、網膜疾患、ベストの水晶体黄斑変性、網膜色素変性症、増殖性硝子体網膜症（PVR）、および光受容体または網膜色素上皮（RPE）およびそれらの組み合わせのその他の変性疾患が含まれるが、これらに限定されない。
【００３８】
「治療有効量」、「有効量」または「治療有効量」という用語は、上記のように、障害を改善するのに十分な治療薬の量を指す。例えば、与えられたパラメータに対して、治療有効量は少なくとも５％、10％、15％、20％、25％、40％、50％、60％、75％、80％、90％、または少なくとも100％の治療効果の増加または減少を示す。治療効果は、「倍」の増加または減少として表現することもできる。例えば、治療的有効量は、制御によって少なくとも1.2倍、1.5倍、２倍、５倍、またはそれ以上の効果を持ちうる。本発明の文脈において、ペプチド化合物の有効量は、他の治療薬の同時投与または個体の疾患プロファイル（年齢、疾患の重症度などの他の因子の中で）に応じて異なり得る。
【００３９】
「療法」、「治療」、および「改善」という用語は、症状の重症度の低下を指す。ドライアイなどの眼疾患を治療する場合、用語は、人工涙液の追加、涙液の保存、涙液蒸発の減少、涙液産生の増加、まぶたまたは眼表面の炎症の減少、ドライアイへの眼徴候の減少等を指すことができます。本願明細書で使用される「治療する」および「予防する」という用語は、絶対的な用語であることを意図しない。治療とは、発症の遅延、症状の改善、患者の生活の質の改善などを指す。治療の効果は、治療を受けていない個人または個人のプール、または治療前または治療中の異なる時間に同じ患者と比較することができる。いくつかの態様において、例えば、投与前の個体または治療を受けていない対照個体と比較して、疾患の重症度は少なくとも10％減少する。いくつかの態様では、例えば、投与前の個体または治療を受けていない対照個体と比較して、疾患の重症度は少なくとも10％低下する。いくつかの側面では、疾患の重症度は少なくとも25％、50％、75％）、80％）、または90％減少するか、場合によっては標準的な診断技術では検出できなくなります。治療とは、発症の遅延、症状の改善、患者の生活の質の改善などを指します。治療の効果は、治療を受けていない個人または個人のプール、または治療前の同じ患者、または治療中の別の時間に。いくつかの態様では、例えば、投与前の個体または治療を受けていない対照個体と比較して、疾患の重症度は少なくとも10％低下する。いくつかの側面では、疾患の重症度は少なくとも25％、50％、75％）、80％）、または90％減少するか、場合によっては標準的な診断技術では検出できなくなる。
【００４０】
「治療する」または「治療」という用語は、患者の疾患または病状（ドライアイまたは炎症に関連する眼疾患など）の治療または治療を指し、哺乳類（特に人間または動物）などに対して：疾患または病状の改善、すなわち、患者の疾患または病状の除去または退縮を引き起こす;疾患または病状の抑制、すなわち、患者における疾患または病状の発症の遅延または阻止;または、患者の疾患または病状の１つまたは複数の症状を緩和する。この用語は、特定の疾患または状態を獲得または発症するリスクを予防または低減するため、または再発のリスクを予防または低減するための、疾患または状態の予防的治療を包含する。
【００４１】
「ペプチド」という用語は、ペプチド結合によって共有結合された２つ以上のアミノ酸の鎖を含む有機化合物を指す。ペプチドは、構成アミノ酸の数に関して言及される場合があります。つまり、ジペプチドには２つのアミノ酸残基が含まれ、トリペプチドには３つのアミノ酸残基が含まれる、などである。
【００４２】
本明細書で使用される「アミノ酸」という用語は、塩基性アミノ基と酸性カルボキシル基の両方を含む有機化合物を意味する。この用語に含まれるのは、天然アミノ酸（Ｌ-アミノ酸など）、変性アミノ酸および異常アミノ酸（Ｄ-アミノ酸など）、および遊離または結合形態で生物学的に発生することが知られているが通常は存在するアミノ酸であり、タンパク質には発生しない。この用語には、例えば、Roberts and Vellaccio（1983）The Peptides、5：342-429に開示されているような変性された異常なアミノ酸が含まれ、その教示は参照により本明細書に組み込まれる。天然タンパク質のアミノ酸には、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、セリン、スレオニン、チロシン、チロシン、トリプトファン、プロリン、およびバリンが含まれますが、これらに限定されない。天然の非タンパク質アミノ酸には、アルギニノコハク酸、シトルリン、システインスルフィン酸、３,４-ジヒドロキシフェニルアラニン、ホモシステイン、ホモセリン、オルニチン、３-モノヨードチロシン、３,５-ジヨードチロシン、３,５,５'-トリヨードサイロニン、および３、３'、５,５'-テトラヨードチロニンが含まれるが、これらに限定されない。本発明を実施するために使用することができる変性または異常なアミノ酸（注記を除くすべてのL-配置）には、D-アミノ酸、N-メチル-グルタミン酸（NMeGlu）、D-セリン（DSer）、アロトレオニン（AlloThr）、ヒドロキシプロリン（Hyp）、オルニチン（Orn）、D-アスパラギン（DAsn）、グルタミン酸メチルエステル（GluOMe）、ノルロイシン（Nle）、ノルバリン（Nva）、1-アミノ-シクロヘキシルカルボン酸（Chex）、イソグルタミン（IsoGln）、β-アラニン（βAla）、６-アミノ-ヘキサン酸（Aha）、N-メチルアルギニン（NMeArg）、ヒドロキシリジン、４-ヒドロキシプロリン、N-Cbz保護アミノ酸、２,４-ジアミノ酪酸、ホモアルギニン、ノルロイシン、N-メチルアミノ酪酸、ナフチルアラニン、フェニルグリシン、ベータ-フェニルプロリン、tert-ロイシン、４-アミノシクロヘキシルアラニン、N-メチル-ノルロイシン、３,４-デヒドロプロリン、N、N-ジメチルアミノグリシン、N-メチルアミノグリシン、４-アミノピペリジン-４-カルボン酸、６-アミノカプロン酸、トランス-４-（アミノメチル）-シクロヘキサンカルボン酸、２-、３-、および４-（アミノメチル）-安息香酸、１-アミノシクロロペンタンカルボン酸、１-アミノシクロプロパンカルボン酸、および２-ベンジル-５-アミノペンタン酸が含まれるが、これらに限定されない。
【００４３】
「非天然アミノ酸」という用語は、自然にそれ自体では存在しないが、人間によって合成または作成されたアミノ酸を指すために使用できる。非天然アミノ酸の例には、ヨウ素化チロシン、メチル化チロシン、グリコシル化セリン、グリコシル化トレオニン、アゼチジン-２-カルボン酸、３,４-デヒドロプロリン、ペルチアプロリン、カナバニン、エチオニン、ノルロイシン、セレノメチオニン、アミノヘキサン酸、テルロメチオニン、ホモアリルグリシン、およびホモプロパルギルグリシンが含まれるが、これらに限定されない。
【００４４】
本願明細書で使用される「変性ペプチド」という語句は、配列番号１の配列に由来する長さ９〜14アミノ酸残基のペプチドを指し、ペプチド機能を保持し、少なくとも１つの置換、欠失、挿入を有し、または、天然タンパク質発生アミノ酸、天然非タンパク質アミノ酸、または当業者に知られている変性または異常アミノ酸残基から選択される置換アミノ酸残基であり、配列番号２〜35は、変性ペプチド配列の例示であり得るが、当業者は他の変性ペプチド配列を想定し得る。
【００４５】
本発明の好ましい実施形態は、９〜14塩基長のペプチドの少なくとも１つからすべてのアミノ酸までが、天然の非タンパク質アミノ酸、変性または異常および／または非アミノ酸で置換され得るものであり、天然アミノ酸および本発明の変性ペプチド中の２つの末端非天然アミノ酸残基置換も含むことができる。例示的な変性ペプチドを表１に示す。
【００４６】
本明細書で使用される「薬学的に許容される」とは、以下の化合物、材料、組成物、および／または剤形を指し、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または合理的な利益/リスク比に見合った他の問題の合併症のない人間や動物の組織との接触に適している。
【００４７】
「薬学的に許容される塩」という用語は、酸付加塩および塩基付加塩を含むその酸または塩基塩を作ることにより親化合物が修飾されている開示化合物の誘導体を指す。薬学的に許容される塩の例には、アミンなどの塩基性残基の無機または有機酸塩が含まれるが、これらに限定されない。カルボン酸などの酸性残基のアルカリまたは有機塩などである。「酸付加塩」という用語は、酸の添加により調製された親化合物の対応する塩誘導体を指す。
【００４８】
薬学的に許容される塩には、例えば無機酸または有機酸から形成される親化合物の従来の塩または四級アンモニウム塩が含まれる。例えば、そのような従来の塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸から誘導されるもの、および、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、アジピン酸、アルギン酸、アスパラギン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２-アセトキシ安息香酸、フマル酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、２-ナフタレンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、グルコヘプタン酸、グリセロリン酸、ヘミスルファン酸、ヘプタン酸、ヘキサン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、２-ヒドロキシエタンスルホン酸、2-ナフタレンスルホン酸、ペクチン酸、リン酸、硫酸、３-フェニルプロピオン、ピクリン酸、ピバリン酸、チオシアン酸、p-トルエンスルホン酸、酪酸、樟脳、樟脳スルホン酸、ジグルコン酸、シクロペンタンプロピオン酸、重硫酸、ドデシル硫酸、エタンスルホン酸、およびウンデカン酸などの有機酸から調製された塩が含まれるが、これらに限定されない。したがって、用語「塩基付加塩」は、塩基の添加により調製された親化合物の対応する塩誘導体を指す。また、塩基性窒素含有基は、塩化メチル、エチル、プロピル、ブチルなどのハロゲン化低級アルキル、臭化物、ヨウ化物などの試薬で四級化することができる。硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチル、ジアミルなどの硫酸ジアルキル、塩化デシル、ラウリル、ミリスチル、ステアリルなどの長鎖ハロゲン化物、臭化物、ヨウ化物、臭化ベンジル、フェネチルなどのハロゲン化アラルキルなどが含まれる。薬学的に許容される塩には、例えば無機または有機塩基から形成される親化合物の従来の塩または第四級アンモニウム塩が含まれる。例えば、そのような従来の塩には、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウムおよび水酸化アンモニウムなどの無機塩基から誘導されるもの、およびメチルアミンなどの有機アミン、エチルアミン、イソプロピルアミン、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、エタノールアミン、モルホリン、ジアゼピン、エチレンジアミン、ピリジン、キノリン、キヌクリジンなどから調製される塩が含まれるが、これらに限定されない。
【００４９】
「対象」、「個体」または「患者」という用語は、典型的にはヒトを含むが、例えば他の霊長類、げっ歯類、イヌ、ネコ、ウマ、ヒツジ、ブタなどのような他の動物も含むことができる。
【００５０】
「症状」という用語は、患者が経験または知覚する障害または疾患の主観的な兆候または観察を指す。
【００５１】
「臨床的な徴候」という用語は、臨床医によって検出または解釈される可能性のある障害または疾患の客観的な適応、観察または証拠を指す。
【００５２】
「経内皮移動ペプチドのペプチド阻害剤」という用語は、配列H-Ser-Val-Thr-Glu-Gln-Gly-Ala-Glu-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Arg-NH2（配列番号：１）を有するポリペプチドを指し、その類似体、変異体、誘導体、および薬学的に許容されるその塩とドライアイを治療するための表１のペプチドが含まれるがこれらに限定されない。ペプチドは、自己反応性Ｔ細胞を含むＴリンパ球（Ｔ細胞）の移動を阻害できる。このペプチドはＢ細胞から分泌され、傷害、刺激または炎症性事象に応じてＴ細胞遊走が開始される状態の治療に効果があることが示される。本発明者は、それを必要とする対象におけるドライアイまたは炎症に関連する眼疾患の治療のために開示されたペプチドを使用して治療的有用性を示すことができた。
【表１】
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【００５３】
炎症中のアディポネクチンに応答して、経内皮移動のペプチド阻害剤が分泌される可能性がある。ペプチドは、14.3.3ゼータデルタ（14.3.3.ζδ）タンパク質からタンパク質分解的に誘導できる。Ｂ細胞は、経内皮遊走ペプチドのペプチド阻害剤の分泌により、Ｔ細胞の移動を強く阻害することができる。カドヘリン-15はペプチドによって内皮細胞の表面に結合し、スフィンゴシン-1-リン酸の合成と放出を促進し、これにより、他の白血球の動員に影響を与えずにＴ細胞の輸送が妨げられる。年齢とともに、Ｂ細胞上のアディポネクチン受容体の発現と、アディポネクチンへの応答における経内皮移動ペプチドのペプチド阻害剤の分泌の両方が減少し、経路の免疫老化が示唆される。１型糖尿病、関節リウマチの人でも同様の変化が見られる。しかし、経内皮移動ペプチドの外因性ペプチド阻害剤の投与後、Ｔ細胞の移動が再確立される。同様の結果は、腹膜炎、肝虚血=再灌流障害、およびサルモネラ感染の動物モデルでも見られた。（Chimen、M.et al.2015 Nat. Med.21（5）：467-475）
【００５４】
米国特許第8,815,795号は、眼疾患の予防または治療のために提案されている247アミノ酸の配列であるアディポネクチンに関する。アディポネクチンは炎症性サイトカインを減少させることができ、ドライアイ（症候群）、コンタクトレンズの使用による眼の合併症、眼表面の不規則性の緩和、炎症性サイトカインの減少、結膜杯細胞密度、ならびにアイクリーナー用組成物またはコンタクトレンズ装用者用潤滑剤の提供をする。アディポネクチンに応答してＢ細胞によって分泌される小さな配列である開示された14塩基長ペプチドが何らかの価値を有すること、また炎症性サイトカインを減少させることができることについての言及はない。米国特許第9,073,965号は、開示された配列番号１の短いアディポネクチンペプチド模倣物、およびそれを含む医薬製剤/組成物を、癌およびアテローム性動脈硬化の治療に関して提示する。US20150051137も配列番号１を開示するが、糖尿病（１型）、関節リウマチ、クローン病、腎症、アテローム性動脈硬化症、乾癬、肝疾患とブドウ膜炎などの慢性炎症性疾患および自己免疫疾患の治療および／または予防のためのペプチドまたはその類似体に関する。しかし、先行技術のいずれも、炎症のドライアイおよび眼表面疾患を治療するための開示されたペプチド、その誘導体または類似体の使用を開示していない。
【００５５】
Rainer等（WO2013104928）には、アディポネクチンは多面的な薬剤であるため、代謝ホメオスタシスの役割を持ち、Ｔ細胞の移動を阻害するペプチドのＢリンパ球分泌を活性化する可能性があるため、Ｔ細胞の調節に関与するアディポネクチンの下流の経路を標的とする治療薬移行、特定のアクションモードをターゲットにすることができる旨の提案がなされている。
【００５６】
開示された配列番号１、ペプチド、変異体、類似体、誘導体、変性ペプチドおよびそれらの薬学的に許容される塩の使用は、ドライアイ疾患の治療のための抗炎症ペプチドとして有効であることが本発明者によって提案された。マウスモデルでは、瞬き後に角膜表面に乾燥斑点が現れるまでの時間を決定するために、涙液膜破壊時間アッセイを実施しました。このアッセイは、涙液層の安定性を評価し、蒸発性ドライアイが存在するかどうかを判断する方法を提供する。涙は３つの層で構成され、親水性ムチンの最内層、眼表面上皮を覆う杯細胞によって生成されるぬるぬるした物質、ムチン層の上に浮かび、約0.9％生理食塩水である涙腺によって生成される水性涙層、マイボーム腺によって生成される表面の薄い脂質層は、均一な涙液の広がりを助け、涙液の蒸発を遅くする。この３層構造により、涙液膜が安定し、涙液膜が目の保湿性を維持し、光が目を通過するための滑らかな表面を作成し、目の前に栄養を与え、怪我や感染から保護する。眼表面システムの繊細な恒常性バランスを乱す要因は、涙液層の安定性と浸透圧に悪影響を及ぼし、浸透圧、機械的、および炎症性損傷を引き起こす可能性がある。
【００５７】
図１は、涙液膜破壊のネズミ研究を示し、より長い時間はより安定した涙液膜を示す。涙液量は正常であるが涙液膜が不安定な被験者は、ドライアイの症状を説明できる。涙液の不安定性は、涙液組成の不均衡を示し、涙液の蒸発が速すぎるか、目の表面への付着が不適切であることを示す。あるいは、マイボーム腺機能不全によるマイボーム腺による不十分な脂質分泌も涙液膜の不安定性を引き起こす可能性がある。評価は５日と10日で行われ、通常の時間は約３〜５秒より大きい。<2.2-3.0秒が限界、<2.2秒が低く、ドライアイ症状の可能性が高い。
【００５８】
涙液層破壊の結果は、５％のリフィテグラストと経内皮移行ペプチドの0.1％ペプチド阻害剤の両方が、マウスモデルで誘発されたドライアイを改善できることを示す。0.1％ペプチドを投与した群では、両方の間隔で涙液膜時間が著しく改善された。実施例１に涙液層破壊実験の詳細を示す。
【００５９】
実施例２は、マウスによるドライアイ被験者の角膜上皮への損傷を判定する角膜染色アッセイである。図２は、染色結果のグレーディングを示す。フルオレセイン染色は、角膜の上皮の破壊、輪郭の変化、および損傷を検出する。染色グレードが低いほど、角膜の損傷はそれほど深刻ではない。再び、涙液層破壊試験の場合のように、図２は、５％のリフィテグラストと0.1％の配列番号１の両方が角膜破壊を改善したことを示す。図３は、角膜表面の汚れのコバルトブルー光の観察を提供し、緑の染色によって混乱が特定され、角膜上皮の低グレードの損傷を表し、高グレードでは、例えば不透明領域を含むさまざまな原因に起因する重傷を表し、それは例えば、コンタクトレンズの誤用、角膜の炎症、傷、角膜内の物体などの場合である。
【００６０】
Ｔ細胞は、急性炎症時に血液から血管外組織に補充される。しかし、アテローム性動脈硬化症、関節リウマチ、クローン病などを含むがこれらに限定されない慢性炎症性疾患では、病変組織におけるＴ細胞の不適切な蓄積が病因の一因となる。炎症中にＴ細胞輸送が調節されるメカニズムはよく理解されておらず、治療法の開発が困難になっている。理論に拘束されたくはないが、輸送Ｔ細胞のための調整経路の制御が制御できないとき、Ｔ細胞は炎症を起こした組織への接近が可能となる。そして、慢性疾患状態を引き起こす。経内皮移動ペプチド療法のペプチド阻害剤は、炎症反応を調節するための新しい経路を提供する。
【００６１】
結膜はまぶたの内部の表面に沿って並んでいる表面で、目(強膜)の白目を覆う。角膜細胞を含む角質化されていない層状扁平上皮と層状円柱上皮が結膜を構成する。結膜は血管が豊富で、多数の微小血管が通っているため、研究の想像に好適である。図４Ａ〜４Ｄは、目の結膜内の活性化Ｔ細胞の数の変化の散布図を表わす。実施例３は、マウスドライアイモデルにおける活性化Ｔ細胞の変化を測定するアッセイを示す。活性化Ｔ細胞の正常範囲は15％〜22％である。10日後、経内皮移動ペプチドのわずか0.1％のペプチド阻害剤が、正常範囲21.67％内の活性化Ｔ細胞を再確立し、対照は18.86％であった。
【００６２】
ドライアイのその他の潜在的な治療法には、リフィテグラスト（商品名XLIDRA）およびRestasis（登録商標）眼科用乳剤（シクロスポリン）点眼薬がある。リフィテグラストが、Ｔ細胞が炎症を調停するメカニズムを下方制御することによって、乾性角結膜炎(ドライアイ症候群)を治療する。リフィテグラストは、リンパ球機能関連抗原１（LFA-1）のインテグリンが細胞間接着分子１（ICAM-1）に結合するのを阻害するように作用する。
【００６３】
シクロスポリンcyclosporin（シクロスポリンciclosporin、シクロスポリンcyclosporine）は、Ｔ細胞の活性と免疫応答を低下させるように作用する。シクロスポリンが、タンパク質の折りたたみを促進する多機能タンパク質であるシクロフィリンに結合すると、タンパク質シャペロンとして機能し、他のタンパク質の活性を調節する。カルシニューリンのホスファターゼ活性はシクロスポリン/シクロフィリン複合体によって阻害され、Ｔリンパ球による炎症性サイトカインの発現を上方制御する転写因子の活性化をブロックする。
【００６４】
リフィテグラスト、レスタシス点眼薬などを含むがこれらに限定されない他の医薬品と組み合わせた経内皮移動ペプチドのペプチド阻害剤の使用も考えられる。
方法
【００６５】
乾燥ストレス誘発ドライアイ（実験的ドライアイ;EDE）のマウスモデルにおける５％リフィテグラストと比較した経内皮移動ペプチドのペプチド阻害剤の抗炎症活性および治療可能性を以下の方法を用いて有効性を評価した。
【００６６】
Ａ.誘導実験ドライアイを使用したテストシステム：
【００６７】
乾燥ストレスは、0.5mg/0.2mLのスコポラミン臭化水素酸塩（Sigma-Aldrich、ミズーリ州セントルイス）を１日３回（3x.3mlを4.5時間間隔で投与）皮下注射することにより、６から８週齢の雌C57BL/6マウスに誘発させた。空気通風と30％の周囲湿度への暴露を投与期間にわたって維持した。これらの実験中、動物の行動、食物、および水の摂取は制限しなかった。５日間または10日間の終了点で治療を終了し、テストを実施した。
【００６８】
Ｂ.治療グループ：
【００６９】
各治療グループは、ランダムに割り当てられた５匹の動物（n=10目/グループ）で構成された。グループは次のように局所的に扱われた。
１．乾燥ストレスにさらされていない、または局所的に治療されていない未治療（正常）対照マウス
２．バランスの取れた塩溶液で処理されたEDEマウス（BSS、ビークル、アルコン、テキサス州フォートワース）
３．５％（wt）リフィテグラスト（Shire Plc）で処理したEDEマウス
４．経内皮移動ペプチドの0.01％ペプチド阻害剤で処理したEDEマウス（配列番号１、CS Bio、カリフォルニア州メンロパーク）
【００７０】
Ｃ．投与手順：
【００７１】
全ての治療グループは、１日３回２μLの点眼薬を投与された。各処理グループのマウス：BSSで処理されたEDE、５％リフィテグラストで処理されたEDE、および0.1％配列番号１で処理されたEDEに、各処理の２μL点眼薬を１日３回投与/処理した（ただし、正常のグループを除く）。さらに、すべてのグループ（正常を除く）にもスコポラミン溶液を１日３回投与した。
【００７２】
Ｄ.涙液膜破壊時間（TBUT）：
【００７３】
TBUTは、マイクロピペットを使用して1μLの1％フルオレセインナトリウムを下結膜嚢に滴下して測定した。３回まばたきした後、涙液膜破壊時間（BUT）は、コバルトブルー光下で細隙灯生体顕微鏡（BQ-900; Haag-Streit、Bern、Switzerland）を使用して数秒で記録された。その結果を図１に示す。
【００７４】
Ｅ.角膜フルオレセイン染色：
【００７５】
フルオレセインの滴がTBUTを測定するために加えられた90秒後、角膜表面の点状染色はマスクされた方法で評価された。各角膜を４つの象限に分割し、個別に採点した。角膜フルオレセイン染色の重症度スコアは、４点スケールを使用して計算され、０=なし、１=30点未満のわずかに点状の染色、２=点状染色>30スポット、ただし拡散なし、３=重度のびまん性染色、陽性プラークなし、４=フルオレセイン陽性プラークである。４つのスコアを加えて、最終評点（16ポイントの可能性がある合計）を生成した。その結果を図２および図３に示す。
【００７６】
Ｆ.流動細胞計測法
【００７７】
前述のように、結膜からのCD4+およびCCR5+Ｔ細胞の定量のために流動細胞計測法を実施した（Yoon KC、Heo H、Kang IS、et al.Cornea（2008）27：454‐460）。組織は薄くそがれて、0.5mg/mLのコラゲナーゼ・タイプDで、60分の間37□Cに向かって攪拌された。
【００７８】
シリンジ用プランジャーで粉砕し、細胞濾過器で濾過した後、細胞を取り出し、遠心分離し、１％ウシ血清アルブミンを含むPBSに再懸濁した。洗浄後、サンプルをフルオレセイン結合抗CD4抗体（BD Biosciences、カリフォルニア州サンノゼ）、フィコエリトリン結合抗CCR5抗体（BD Biosciences）、およびアイソタイプコントロール抗体とともに37□Cで30分間培養した。
【００７９】
CD4+およびCCR5+Ｔ細胞の数は、CellQuestソフトウェア（BD Biosciences）を搭載したFACSCaliburサイトメーターで計数した。各治療グループの結果を、図４Ａ〜４Ｄに示す。
【００８０】
統計解析：
【００８１】
涙液崩壊時間、角膜染色、および正常スコアの結果の統計的差異は、一元配置分散分析と事後分析によって評価した。Kruskal-WallisおよびMann-Whitneyテストを用いて、グループ間の流動細胞計測結果を比較した。AP値<0.05は統計的に有意と考えられる。
【００８２】
以下の実施例は、経内皮遊走ペプチドの活性、有効性、および治療可能性のペプチド阻害剤を評価するために、ネズミ被験体で実施した実験結果を示す。
【００８３】
【実施例１】
【００８４】
涙液膜破壊：この実験では、乾燥誘導性ドライアイ（DED）の改善における経内皮移動ペプチドのペプチド阻害剤の抗炎症活性と有効性を評価した。まばたきの後に角膜表面に乾燥斑点が現れる時間を評価した。このアッセイは、涙液層の安定性を評価する方法と、蒸発性ドライアイが存在するかどうかを判定する方法を提供する。涙液層が崩壊するまでの時間が長いほど、涙液層がより安定していることを示す。涙の量は正常であるが涙液膜が不安定な被験者は、ドライアイの症状を説明できる。涙液の不安定性は、涙液組成の不均衡を示し、涙液の蒸発が速すぎるか、眼表面への付着が不適切であることを示す。あるいは、マイボーム腺機能不全によるマイボーム腺による不十分な脂質分泌も、涙液膜の不安定性を引き起こす可能性がある。評価は５日間と10日間のエンドポイントで行われ、通常の時間は約３〜５秒でした。<2.2-3.0秒の限界および<2.2秒の低さおよびドライアイ症状の可能性が高く、有効性の認識可能な改善はない。
【００８５】
図１は、涙液膜破壊のマウス研究の結果を示す。５％リフィテグラストと0.1％の経内皮移行ペプチドのペプチド阻害剤（配列番号：１）は、マウスモデルでDEDを改善できる。0.1％の配列番号１を投与されたグループは、未処理（ドライアイ、車両）および５％リフィテグラストと比較して、両方の終了点で涙液膜時間を顕著に改善した。
【００８６】
【実施例２】
【００８７】
角膜染色：
【００８８】
角膜染色アッセイの目的は、ドライアイの誘発の結果として、または経内皮移動ペプチドのペプチド阻害剤によるマウスDED被験者の角膜上皮への損傷を評価することである。さらに、経内皮遊走ペプチドのペプチド阻害剤は、抗炎症活性とDEDのマウスモデルの有効性を評価した。フルオレセイン染色は、角膜の上皮表面細胞の破壊、検出可能な損傷、および角膜の輪郭の変化を検出する。染色グレードが低いほど、角膜の損傷はそれほど深刻ではない。角膜染色は、16点が最大スコアである４点スケールを使用して４つの象限で評価した。図２は、染色結果のグレーディングを示す。繰り返すが、涙液層破壊試験のように、５％のリフティグラストと0.1％の経内皮移動ペプチドのペプチド阻害剤の両方、配列番号１は、それぞれのグレードが低いため、誘発されたドライアイに起因する角膜破壊を改善した未処理のドライアイである。図３は、破壊が緑の染色によって選別される角膜表面の染色のコバルトブルー光観察の写真を提供し、青は角膜の非染色、非損傷領域を示す。上述の結果は、角膜上皮の低度の損傷（グレード１）の例であり、高層（下の写真）では、不透明度の領域、接触の誤用など、さまざまな原因に起因する重傷を示す。レンズ、角膜の炎症、傷、角膜内の物体は、重度のグレード４の染色の原因になる。
【００８９】
【実施例３】
【００９０】
活性化Ｔ細胞の変化：
【００９１】
マウスのドライアイ研究では、結膜に存在する活性化Ｔ細胞の数について、各グループの眼結膜を評価した。このアッセイは、DEDによる結膜の炎症の結果としての活性化Ｔ細胞の浸潤と存在を評価する方法を提供する。赤い点はそれぞれ、活性化されたＴ細胞を表す。活性化Ｔ細胞の割合が高いほど、活性化Ｔ細胞が上皮細胞を通過するため結膜内の炎症が大きくなる。マウスでは、活性化Ｔ細胞の正常範囲は15％から約22％である。22％を超える値は、重度の炎症として中程度から30％以上を示唆する。不安定な涙液膜の有無にかかわらず、非常に赤い表面として見られる過度に炎症を起こした結膜を持つ被験者には、多数の活性化Ｔ細胞が存在することで説明できる。結膜は、まぶたの内面を覆い、白眼を覆う表面として、強膜であり、杯細胞を含む非角化層化扁平上皮と層状円柱上皮の両方を含み、活性化された浸潤の可能性があるため炎症の結果としてのＴ細胞は非常に可能性が高い。図４Ａ-４Ｄは、各被験者の10日間の眼結膜内の活性化Ｔ細胞の数の変化の散布図である。図４Ａは、正常な目を表す。図４Ｂは、未処理のドライアイを表す。図４Ｃは、５％リフィテグラストで処理された誘導ドライアイを表し、図４Ｄは、0.1％の配列番号１で処理された誘導ドライアイを表す。結果は、10日後には0.1％の配列番号１のみが正常範囲内の活性化Ｔ細胞レベルを再確立したことを示す。パーセンテージは21.67％であり、対照は18.86％であった。
【００９２】
本願発明の原理を特定の実施形態に関連して説明したが、これらの説明は例としてのみ行われ、本発明の範囲を限定するものではないことを明確に理解されたい。本願明細書で開示されたものは、例示および説明の目的で提供した。網羅的であること、または開示されている内容を記載されている正確な形式に限定することは意図しない。当業者には多くの修正および変形が明らかであろう。開示されたものは、説明された技術の開示された実施形態の原理および実際の適用を最もよく説明するために選択され、説明され、それにより、当業者が、意図される特定の用途に適した様々な実施態様および様々な修正が可能であることを理解されたい。開示された範囲は、以下の特許請求の範囲およびそれらの同等物によって定義されることを意図する。本願明細書において引用を特定することにより言及されるすべての刊行物、特許、特許出願および公開された特許出願の開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。Uniform Resource Locator（URL）の先頭にある「World-Wide-Web」を使用するWebサイトの参照は、「World-Wide-Web」を「www」に置き換えによりアクセス可能である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年2月5日(2020.2.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７７】
前述のように、結膜からのCD4 +およびCCR5 + Ｔ細胞の定量のために流動細胞計測法を実施した（Yoon KC、Heo H、Kang IS、et al.Cornea（2008）27：454‐460）。組織は薄くそがれて、0.5mg/mLのコラゲナーゼ・タイプDで、60分の間37℃に向かって攪拌された。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７８】
シリンジ用プランジャーで粉砕し、細胞濾過器で濾過した後、細胞を取り出し、遠心分離し、１％ウシ血清アルブミンを含むPBSに再懸濁した。洗浄後、サンプルをフルオレセイン結合抗CD4抗体（BD Biosciences、カリフォルニア州サンノゼ）、フィコエリトリン結合抗CCR5抗体（BD Biosciences）、およびアイソタイプコントロール抗体とともに37℃で30分間培養した。
【国際調査報告】
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