(57)【要約】  本明細書において、抗ウイルス特性を有するペプチドを開示する。ペプチドには、右旋性（Ｄ）または右旋性／左旋性（Ｌ）アミノ酸の混合物が含まれ、複数のタイプのエンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルスに対する抗ウイルス特性を有し、エンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルス感染症の治療または予防の医薬組成物として有用である。
2020528072.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
宿主動物において、ウイルスがインフルエンザウイルスまたはオルトミクソウイルスではない、マトリックスタンパク質層ウイルスまたはエンベロープウイルスにより、少なくとも部分的に引き起こされる感染症の治療のための薬剤の製造における、配列ｔｗｆｔｆｉｎまたは式Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７のｔｗｆｔｆｉｎの類似体もしくは誘導体を含む治療有効量のペプチドの使用であって、式中、Ａ１がｔまたはｗであり、Ａ２がｋまたはｗであり、Ａ３がｓまたはｆであり、Ａ４がｒまたはｔであり、Ａ５がｆ、ｈ、ｉ、ｎ、またはｗであり、Ａ６がｉまたはｄであり、Ａ７がｎまたはａであり、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つが、任意に別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノで置換されていてもよい、治療有効量のペプチドの使用、あるいは、上述のいずれかの医薬組成物の使用。
【請求項２】
前記ウイルスが、レトロウイルス、レンチウイルス、パラミクソウイルス、フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ダニ媒介脳炎、黄熱病、デング熱ウイルス、フィロウイルス、トガウイルス、ブニヤウイルス、ヘルペスウイルス、ヘプナウイルス、パラミクソウイルス、またはコロナウイルスである、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記ウイルスが、ＨＩＶ、エボラ、マールブルグウイルス、風疹ウイルス、ハンタウイルス、アレナウイルス、サイトメガロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、またはトロウイルスである、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
前記感染症が、エイズ、ヘルペス、またはＳＡＲＳである、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
前記ペプチドが、配列ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、またはＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘを含み、Ｘ／ｘがグリシン、または任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸であり、各配列において、１つの追加のアミノ酸が挿入、欠失、あるいは様々なＤ−アミノ酸、またはグリシン、または任意のＬ−アミノ酸１つのアミノ酸に変更された、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６】
前記ペプチドが、配列Ｘ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘを含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
前記ペプチドが、配列ＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７、ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９またはＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記ペプチドが、Ｎ末端および／またはＣ末端システイン残基をさらに含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記ペプチドが、１つまたは複数の溶解性タグをさらに含み、タグのそれぞれが独立して選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
前記ペプチドが、環状形態である、請求項１から９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１１】
前記ペプチドが、ウイルスに対して１００μΜ未満のＩＣ５０を有する、請求項１から１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１２】
前記薬剤が、経鼻的、肺、経口的または非経口的投与に適している、請求項１から１１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１３】
前記薬剤が、予防的治療のためのものである、請求項１から１２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１４】
宿主動物において、ウイルスがインフルエンザウイルスまたはオルトミクソウイルスではない、マトリックスタンパク質層ウイルスまたはエンベロープウイルスにより、少なくとも部分的に引き起こされる感染症を治療するための、配列ｔｗｆｔｆｉｎまたはｔｗｆｔｆｉｎの類似体もしくは誘導体を含む治療有効量のペプチド、または上述のいずれかの医薬組成物、および説明書を含む、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、多種多様なエンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルスに対する広域抗ウイルス活性を有する治療用ペプチドに関する。
【背景技術】
【０００２】
エンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルスによるウイルス感染症は、依然として人類にとって深刻な問題である。インフルエンザウイルスは多くの研究者の注目を集めているが、単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、呼吸器多核体ウイルス、およびヒト免疫不全ウイルスを含むがこれらに限定されない、他のエンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルスのウイルス治療は、依然として、重大な医学的必要性が満たされていない。
【０００３】
呼吸器多核体ウイルス（ＲＳＶ）は、エンベロープ、ネガティブセンス、一本鎖および非ＲＮＡゲノムを含むパラミクソウイルス科のファミリーに属する１。ＲＳＶは重要な小児病原体の１つであるが、それらは、すべての年齢、特に高齢者の個体、および免疫無防備状態の個体に影響を及ぼすことができる。ＲＳＶはヒトにのみ感染し、非常に感染力がある。現在、治療に利用できる承認された治療薬はない２。毎年、５歳未満の子供が約３，４００万人感染しており、約４００万人が入院し、１００，０００〜２００，０００人が死亡していると推定されている。一般に、ＲＳＶは上気道感染症を引き起こすが、感染した小児の２０〜３０％は、細気管支炎および／または肺炎などの下気道感染症の症状を示す２。ＲＳＶ感染症の症状には、脱力感、易刺激性、咳、喘鳴、湿性ラ音、頻呼吸および食欲不振が含まれる。心臓病、未熟児の慢性肺疾患、免疫不全、免疫抑制などの因子は、ＲＳＶ感染症の症状を増大させたり悪化させたりする可能性がある。現在のＲＳＶ感染症の治療法は、主に高リスクまたは非常に高リスクの患者の予防的使用のために処方されている３。より一般的な治療ならびに感染後の治療が必要である。
【０００４】
サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）は、直鎖二本鎖ＤＮＡゲノムを含むヘルペスウイルス科に属する。上記ウイルスのゲノムは、それ自体がテグメント（マトリックス層）および脂質二重層に囲まれているヌクレオカプシドタンパク質に覆われている４、５。ＣＭＶはすべての年齢の人に感染し、４０歳までに、ほとんどの人々は、生涯にＣＭＶ感染があることが報告されている。一般に、ＣＭＶ感染は、いかなる症状も示さず、免疫系が弱体化している人、および先天性感染を有する幼児は、重篤な合併症を引き起こしやすい傾向がある６、７。ＣＭＶ感染の症状は、無症候から発熱および疲労、内部器官、眼および脳への損傷を引き起こし得る重篤な症状まで広範囲にわたる。網膜炎の治療のために、バルガンシクロビル、ガンシクロビル、シドホビル、ホスカルネット、またはこれらの組み合わせなど、いくつかの抗ウイルス薬が利用可能であるが、これらの薬剤は重篤な副作用を引き起こし、感染症を治癒させない可能性がある。より一般的な治療法、ならびに重篤な副作用が少ないまたは小さい治療法が必要である８〜１０。
【０００５】
単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２）は、ゲノムとして直鎖二本鎖ＤＮＡを含むヘルペスウイルス科に属する。単純ヘルペスウイルスのゲノムは、それ自体がテグメント（マトリックス層）および脂質二重層に囲まれている正二十面体型のヌクレオカプシドタンパク質に覆われている５、１１。これらのウイルスは、一般的に皮膚、眼、唇および生殖器において感染症を引き起こす。症状には、感染部位における痛みを伴う水疱または潰瘍、口、性器および臀部の周辺の刺痛感、リンパ腺肥大、発熱、および身体の痛みが含まれる。単純ヘルペスウイルスはまた、免疫無防備状態の個体では髄膜炎や脳炎を引き起こし、新生児では新生児ヘルペスを引き起こす可能性がある１１。最近のＷＨＯ推定によれば、世界的に約３５億人がＨＳＶ−１感染を有し１２、１３、約５億人がＨＳＶ−２感染を有する１４。単純ヘルペスウイルスに対する、アシクロビル、ファムシクロビル、およびバラシクロビルなどの現在の抗ウイルス剤は、ＨＳＶ感染の治療に使用されるが、一般的に、疾患の症状を軽減するのに有効であるのみで；感染症を治癒することはできない１５、１６。
【０００６】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）は、そのゲノムとして２本の一本鎖ＲＮＡを含むレトロウイルス科に属する。上記ウイルスのゲノムは、それ自体がマトリックスタンパク質を伴う脂質二重層により囲まれているヌクレオカプシドタンパク質に覆われている１７。ＨＩＶはヒト免疫系を攻撃し、後天性免疫不全症候群（エイズ）を引き起こす。免疫系の弱体化により、エイズ患者は生命を脅かす可能性のある無数の感染症を引き起こしやすい傾向がある。現在の治療法はＨＩＶ感染症の治療に利用できるが、感染症を治癒することはできない１８、１９。
【０００７】
ウイルス感染症の高い有病率にもかかわらず、本明細書に開示されているようなエンベロープウイルス感染症を治療および／または予防するための承認された薬剤は、まだ非常に少ない。さらに、現在の治療法は、依然として最適以下の有効性および重篤な毒性に悩まされており、治療費の増加と薬剤耐性株の出現によって妨げられている。
【０００８】
製薬会社は、特にタンパク質−タンパク質相互作用などの、薬を作ることができない標的のために、パイプラインを拡大するという課題に直面している２０。タンパク質−タンパク質相互作用は宿主−病原体相互作用の一部であるが、それらはまた、健康な細胞の多くの細胞機能においても重要な役割を果たしている。タンパク質間相互作用の調節は、病原体の侵入または複製の阻害を含む多くの疾患を緩和する魅力的な方法として認識されている２１。しかし、小分子はそのような相互作用を阻害するのに非効率的であることが多いことが報告されている２２。これらの相互作用の阻害または調節において、モノクローナル抗体が非常に特異的で強力であるが、組織または細胞浸透が十分でないことが多い２３。理論に拘束されるものではなく、本明細書では、細胞透過性を有する大環状ペプチドは、最良の解決策として作用することができると考えられる。大環状ペプチドはまた、多くのウイルスが高度に変異性であることを考慮する場合、最良の選択肢であり得、したがって、タンパク質−タンパク質相互作用を標的とする薬剤は、このような変異に耐えるのに十分なほど柔軟であるべきである。さらに、ペプチドは、高い特異性、選択性、優れた効力など、小分子に比べて多くの利点を提供し、一般的に忍容性が良好である２４、２５。同様に、ペプチドは、そのより低い製造複雑性およびより良好な標的接近性のために、抗体などの他の巨大分子よりも有利であり得る２４。理論に拘束されるものではなく、本明細書では、ペプチドは、小分子または大きな巨大分子のいずれよりも多くの利点を有し、より多くの制限を克服できると考えられている２４〜３０。
【０００９】
インフルエンザウイルスに対する広域活性を有する新規ペプチド治療薬（ＦＰＴ）が発見された３１、３２。インフルエンザウイルスに対するＦＰＴの作用メカニズムが研究された。理論に拘束されるものではなく、本明細書では、ＦＰＴは、インフルエンザウイルスのマトリックスタンパク質（Ｍ１）の結合により、およびその完全性を変化させることにより、ＦＰＴの作用を発揮すると考えられている。その後、インフルエンザウイルスのマトリックスタンパク質は、ＨＩＶ、ＨＳＶ、ＲＳＶおよびＣＭＶと十分な構造的類似性を共有し、ＦＰＴがこれらのウイルスおよびその他のエンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルスに対しても活性であることが発見された。
【発明の概要】
【００１０】
驚くべきことに、配列ｔｗｆｔｆｉｎを含むペプチドは、多種多様なエンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルスに対して活性であることが発見された。驚くべきことに、１つまたは２つの他のアミノ酸が独立して、挿入、欠失、あるいは様々なＤ−アミノ酸、またはグリシン、または任意のＬ−アミノ酸に変更された、ｔｗｆｔｆｉｎの配列変異を含むペプチドはまた、多種多様なエンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルスに対して高度に活性であることが発見された。本明細書に記載のペプチドは、一般に、すべてのＬ−アミノ酸配列を含むペプチドよりも何倍も優れた抗ウイルス活性を示し、多種多様なエンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルスに対して広域活性を示している。
【００１１】
本発明の例示的な一実施形態では、本明細書においてＦＴＰとも呼ばれる、右旋性または右旋性／左旋性アミノ酸の混合物を含むペプチドが本明細書に記載されている。別の実施形態では、エンベロープウイルスまたはマトリックスタンパク質層ウイルスに対する抗ウイルス特性を有するペプチドが本明細書に記載されている。別の実施形態では、複数のエンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルスに対する抗ウイルス特性を有するペプチドが本明細書に記載されている。別の例示的な実施形態では、エンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルス感染症を治療または予防するための薬剤を製造するための、本明細書に記載されるペプチドのいずれかの１つまたは複数の使用が記載されている。別の例示的な実施形態では、本明細書に記載されるペプチドのいずれかの１つまたは複数を含む医薬組成物、剤形、および投与単位は、エンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルス感染症の治療または予防において使用するために記載されている。別の例示的な実施形態では、エンベロープウイルスおよびマトリックスタンパク質層ウイルス感染症を治療または予防する方法が本明細書に記載されており、それらの方法は、本明細書に記載されるペプチドのいずれかの１つまたは複数、あるいはそれらのペプチドを含む医薬組成物、剤形、投与単位、および薬剤を投与することを含む。
【００１２】
別の実施形態では、エンベロープウイルスまたはマトリックスタンパク質層ウイルスは、レトロウイルス、レンチウイルス、パラミクソウイルス、フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ダニ媒介脳炎、黄熱病、デング熱ウイルス、フィロウイルス、トガウイルス、ブニヤウイルス、ヘルペスウイルス、ヘプナウイルス、パラミクソウイルス、またはコロナウイルスである。別の実施形態では、エンベロープウイルスまたはマトリックスタンパク質層ウイルスは、単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、呼吸器多核体ウイルス、またはヒト免疫不全ウイルスである。別の実施形態では、上記ウイルスは、ＨＩＶ、エボラ、マールブルグウイルス、風疹ウイルス、ハンタウイルス、アレナウイルス、サイトメガロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、またはトロウイルスである。
【００１３】
別の実施形態では、上記感染症は、エイズ、ヘルペス、またはＳＡＲＳである。
【００１４】
別の実施形態では、配列ｔｋｓｒｆＸ／ｘｎ（式Ｉ）を含むペプチドが本明細書に記載されている。別の実施形態では、配列ｔＸ／ｘｓｒｆｉｎ（式ＩＩ）を含むペプチドが本明細書に記載されている。別の実施形態では、配列ｔｗＸ／ｘｒｆｉｎ（式Ｖ）を含むペプチドが本明細書に記載されている。別の実施形態では、配列ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ（式ＶＩ）を含むペプチドが本明細書に記載されている。別の実施形態では、配列Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ（式ＶＩＩ）を含むペプチドが本明細書に記載されている。別の実施形態では、配列ｗｗｆｔｆｉＸ／ｘ（式ＶＩＩＩ）を含むペプチドが本明細書に記載されている。別の実施形態では、配列ｗｗｆｔＸ／ｘｉａ（式ＩＸ）を含むペプチドが本明細書に記載されている。別の実施形態では、配列Ｘ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘ（式Ｘ）を含むペプチドが本明細書に記載されている。前述のそれぞれにおいて、Ｘ／ｘは、グリシン、または任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸である。
【００１５】
別の実施形態では、本明細書に記載されるペプチドのいずれかはまた、Ｎ末端および／またはＣ末端システイン残基を含む。Ｎ末端とＣ末端の両方にシステイン残基が含まれる場合、ペプチドを環化できる。あらゆる場合において、システイン残基は、Ｄ−システインおよびＬ−システインから独立して選択されることが理解されるべきである。
【００１６】
別の実施形態では、本明細書に記載されるペプチドのいずれかはまた、１つまたは複数の溶解性タグを含む。実例として、溶解性タグは、Ｎ末端および／またはＣ末端に含まれる。その環状誘導体を含む、Ｎ末端および／またはＣ末端システイン残基を含む本明細書に記載されるペプチドはまた、１つまたは複数の溶解性タグを含み得ることが理解されるべきである。あらゆる場合において、各溶解性タグは独立して選択されることも理解されるべきである。
【００１７】
ＦＰＴに関するさらなる詳細は、ＰＣＴ国際出願シリアル番号ＰＣＴ／ＩＢ２０１６／０５７１４６に開示されており、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれている。
【００１８】
別の実施形態では、本明細書に記載されるペプチドの類似体および誘導体が記載される。本明細書に記載される類似体および誘導体は、ＰＣＴ国際公開第２００９／１５１３１３号に開示されているペプチドを含まないことが理解されるべきである。別の実施形態では、ＰＣＴ国際公開第２００９／１５１３１３号に開示されている配列のいずれも含まないペプチドが本明細書に記載されている。
【００１９】
本明細書で使用されるように、用語単離ペプチドは、一般に、エクスビボ、および／またはバルク形態にあるペプチドを指す。単離ペプチドは、他の化合物との混合物、および／または溶液または懸濁液中にあり得ることが理解されるべきである。
【００２０】
本明細書に記載されるペプチドの配列は、一般に、各アミノ酸について従来の単一文字コードを使用して示されている。大文字のコードはアミノ酸の左旋体に対応し、小文字のコードはアミノ酸の右旋体に対応する。例えば、単一文字コード「Ａ」はＬ−アラニンを示し、単一文字コード「ａ」はＤ−アラニンを示し；「Ｒ」はＬ−アルギニンを示し、「ｒ」はＤ−アルギニンを示し；以下同様である。
【００２１】
別の実施形態では、配列Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７を含む単離ペプチドが本明細書に記載され、配列中、Ａ１はｔまたはｗであり、Ａ２はｋまたはｗであり、Ａ３はｓまたはｆであり、Ａ４はｒまたはｔであり、Ａ５はｈ、ｉ、ｎ、またはｗであり、Ａ６はｉまたはｄであり、Ａ７はｎまたはａであり、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つは、別のＤ−アミノ酸、グリシン、または任意のＬ−アミノ酸で置換されていてもよい。一変形形態では、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７の１つまたは２つが、対応するＬ−アミノ酸で置換されているペプチドが本明細書に記載されている。
【００２２】
別の実施形態では、配列Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７を含む単離ペプチドが本明細書に記載され、配列中、Ａ１はｔまたはｗであり、Ａ２はｋまたはｗであり、Ａ３はｓまたはｆであり、Ａ４はｒまたはｔであり、Ａ５はｈ、ｉ、ｎ、またはｗであり、Ａ６はｉまたはｄであり、Ａ７はｎまたはａであり、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つは、別のＤ−アミノ酸、グリシン、または任意のＬ−アミノ酸で置換されていてもよい。一変形形態では、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７の１つが、対応するＬ−アミノ酸で置換されているペプチドが本明細書に記載されている。
【００２３】
別の実施形態では、ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、およびＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘから選択される配列を含む単離抗ウイルスペプチドが本明細書に記載されている。
【００２４】
別の実施形態では、ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、およびＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘから選択される配列を含み、各配列において、１つの追加のアミノ酸が挿入、欠失、あるいは様々なＤ−アミノ酸、またはグリシン、または任意のＬ−アミノ酸１つのアミノ酸に変更された、単離抗ウイルスペプチドが本明細書に記載されている。
【００２５】
別の実施形態では、ＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７、ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９およびＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１から選択される配列を含む単離抗ウイルスペプチドが本明細書に記載されている。
【００２６】
別の実施形態では、表１〜８のいずれかに示す配列を含むペプチドが本明細書に記載されている。生物学的活性を保持するこれらの表のペプチドの機能的変異体はまた、本明細書に記載される本発明の範囲内であることが理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】図１：インビトロでのＲＳＶ  Ａ２に対するＨ−ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉａｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１）の効果。ＲＳＶ  Ａ２の複製を阻害するペプチドの能力は、Ｈｅｐ−２細胞に対するＣＰＥアッセイによって決定された。実験は３回繰り返して行い、ＤＭＳＯの存在下または試験化合物の濃度を増加させて実施した。
【図２】図２：インビトロでのＲＳＶ  Ａ２に対するＨ−ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉａｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７）の効果。ＲＳＶ  Ａ２の複製を阻害するペプチドの能力は、Ｈｅｐ−２細胞に対するＣＰＥアッセイによって決定された。実験は３回繰り返して行い、ＤＭＳＯの存在下または試験化合物の濃度を増加させて実施した。
【図３】図３：インビトロでのＨＳＶ−２に対するＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１の効果。ＨＳＶの複製を阻害するペプチドの能力は、Ｖｅｒｏ細胞に対するＣＰＥアッセイによって決定された。実験は３回繰り返して行い、ＤＭＳＯの存在下または試験化合物の濃度を増加させて実施した。
【図４】図４：インビトロでのＨＳＶ−２に対するＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７の効果。ＨＳＶの複製を阻害するペプチドの能力は、Ｖｅｒｏ細胞に対するＣＰＥアッセイによって決定された。実験は３回繰り返して行い、ＤＭＳＯの存在下または試験化合物の濃度を増加させて実施した。
【図５】図５：インビトロでのＣＭＶに対するＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１の効果。ＣＭＶの複製を阻害するペプチドの能力は、ＨＦＦＦ−２細胞に対するＣＰＥアッセイによって決定された。実験は３回繰り返して行い、ＤＭＳＯの存在下または試験化合物の濃度を増加させて実施した。
【図６】図６：インビトロでのＣＭＶに対するＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７の効果。ＣＭＶの複製を阻害するペプチドの能力は、ＨＦＦＦ−２細胞に対するＣＰＥアッセイによって決定された。実験は３回繰り返して行い、ＤＭＳＯの存在下または試験化合物の濃度を増加させて実施した。
【図７】図７：インビトロでのＨＩＶ−１  ９２ＵＧ０２９に対するＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１の効果。ＨＩＶの複製を阻害するペプチドの能力は、ＰＢＭＣに対する逆転写酵素アッセイによって決定された。実験は、ＤＭＳＯの存在下またはペプチドの濃度を増加させて実施した。結果は、３回測定の平均値として示す。
【図８】図８：インビトロでのＨＩＶ−１  ９２ＵＧ０２９に対するＨ−ｃｗｗｆｔｆｉｎｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９−Ｃ）の効果。ＨＩＶの複製を阻害するペプチドの能力は、ＰＢＭＣに対する逆転写酵素アッセイによって決定された。実験は、ＤＭＳＯの存在下またはペプチドの濃度を増加させて実施した。結果は、３回測定の平均値として示す。
【図９】図９：インビトロでのＨＩＶ−１  ９２ＵＧ０２９に対するＨ−ＲＲＫＫｔｗｆｔｆｉｎ−ＯＨ（ＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７−ＬＳ）の効果。ＨＩＶの複製を阻害するペプチドの能力は、ＰＢＭＣに対する逆転写酵素アッセイによって決定された。実験は、ＤＭＳＯの存在下またはペプチドの濃度を増加させて実施した。結果は、３回測定の平均値として示す。
【図１０】図１０：ヒト肝細胞における抗ウイルスペプチドの細胞毒性効果。抗ウイルスペプチドＨ−ＲＲＫＫｃｔｗｄｒｆｉｎｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  ＩＩＩ  Ｂ３）、Ｈ−ＲＲＫＫｃｔｗｆｒｆｉｎｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  ＩＩＩ  Ｂ５）、Ｈ−ＲＲＫＫｃｔｗｓｒｆｉｎｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  ＩＩＩ  Ｂ１６）、Ｈ−ＲＲＫＫｃｔｗｗｒｆｉｎｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  ＩＩＩ  Ｂ１９）、Ｈ−ＲＲＫＫｃｔｗｙｒｆｉｎｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  ＩＩＩ  Ｂ２０）、およびＨ−ＲＲＫＫｃｔｗｆｆｆｉｎｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  ＩＶ  Ａ５）の細胞毒性効果。毒性効果は、細胞培養条件下で実証された分化肝細胞表現型を有する細胞であるヒト肝細胞ＨｅｐａＲＧ（商標）で、２つの異なる濃度で試験した。データは、３回測定の平均値±標準偏差として示す。この実験は、例３に記載されているように行った。
【図１１】図１１：ヒト肝細胞における抗ウイルスペプチドの細胞毒性効果。抗ウイルスペプチドＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７、Ｈ−ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｎｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９）、Ｈ−ＲＲＫＫｃｍｗｆｔｆｉｎｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１１）、ＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１、およびＨ−ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｓｃ−ＯＨ（ＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１６）の細胞毒性効果。毒性効果は、細胞培養条件下で実証された分化肝細胞表現型を有する細胞であるヒト肝細胞ＨｅｐａＲＧ（商標）で、２つの異なる濃度で試験した。データは、３回測定の平均値±標準偏差として示す。この実験は、例３に記載されているように行った。
【図１２】図１２：ＭＤＣＫおよびＡ５４９細胞に対する抗ウイルスペプチドＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９の細胞毒性効果。抗ウイルスペプチドＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９の細胞毒性効果。上記ペプチドの毒性効果は、例４に記載されているようにＭＤＣＫおよびＡ５４９細胞に対して多くの異なる濃度で試験し、未処理の対照と比較した。データは、３回測定の平均値±標準偏差として示す。
【図１３】図１３：ＭＤＣＫおよびＡ５４９細胞に対する抗ウイルスペプチドＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１の細胞毒性効果。抗ウイルスペプチドＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１の細胞毒性効果。上記ペプチドの毒性効果は、例４に記載されているようにＭＤＣＫおよびＡ５４９細胞に対して多くの異なる濃度で試験し、未処理の対照と比較した。データは、３回測定の平均値±標準偏差として示す。
【図１４】図１４：３０  μＭ濃度での様々な抗ウイルスペプチドの溶血活性。Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００または様々な抗ウイルスペプチドＰＳＰ  ＩＩＩ  Ｂ５、ＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７、ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９およびＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１の溶血活性を、例５に記載のように３０μＭの濃度で試験し、未処理の対照と比較した。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明は、以下の例示的な実施形態によってさらに説明される。以下の節では、本発明の様々な例示的な態様をより詳細に定義する。そのように定義された各態様は、そうでないことが明確に示されていない限り、他の態様と組み合わせることができる。特に、好ましいまたは有利であると示されている特徴は、好ましいまたは有利であると示されている他の特徴と組み合わせることができる。しかし、本発明は、好ましいまたは有利であると示されたそのような特徴に限定されず、好ましいまたは有利であると示されたいかなる特徴も必要ではないことが理解されるべきである。
【００２９】
本発明の実施は、特に明記しない限り、当業者の範囲内の化学、生化学、分子生物学、組換えＤＮＡ技術、細胞生物学、免疫学およびバイオインフォマティクスの従来の技術を使用する。そのような技術は、文献で完全に説明されている。
【００３０】
本開示を通して、標準的な一文字コードは、ＩＵＰＡＣ／ＩＵＢガイドラインに従ってアミノ酸を示すために使用される。本明細書に記載の配列では、配列の左端のアミノ酸がアミノ末端（Ｈ−で示されてもよい）を表し、右端のアミノ酸がカルボキシ末端（−ＯＨで示されてもよい）を表す。アキラルであるグリシンを除いて、左旋体のアミノ酸は大文字で表記され、右旋体のアミノ酸は小文字で表記される。特に明記しない限り、Ｌ−アミノ酸への言及にはグリシンが含まれることが理解されるべきである。
【００３１】
本発明は、抗ウイルス活性を有するペプチドに関する。さらに、本発明は、複数のエンベロープまたはマトリックスタンパク質層ウイルスに対する抗ウイルス活性を有するペプチドに関する。さらに、本発明は、複数のエンベロープまたはマトリックスタンパク質層ウイルスサブタイプに対して抗ウイルス活性を有するペプチドに関する。さらに、本発明は、本明細書に記載されるペプチドを含む医薬組成物、および本明細書に記載されるペプチドを使用してウイルス感染症を予防および／または治療する方法に関する。
【００３２】
本発明の例示的な実施形態は、以下の節によって説明される：
【００３３】
配列ｔｗｆｔｆｉｎの単離ペプチド、または配列ｔｗｆｔｆｉｎを含む単離ペプチド。
【００３４】
配列ｔｗｆｔｆｉｎの類似体または誘導体の単離ペプチド、または配列ｔｗｆｔｆｉｎの類似体または誘導体を含む単離ペプチド。
【００３５】
配列Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７の単離ペプチド、または配列Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７を含む単離ペプチドであり、配列中、Ａ１はｔまたはｗであり、Ａ２はｋまたはｗであり、Ａ３はｓまたはｆであり、Ａ４はｒまたはｔであり、Ａ５はｆ、ｈ、ｉ、ｎ、またはｗであり、Ａ６はｉまたはｄであり、Ａ７はｎまたはａであり、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つは、別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸で置換されていてもよい。
【００３６】
配列Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７の単離ペプチド、または配列Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７を含む単離ペプチドであり、配列中、Ａ１はｔまたはｗであり、Ａ２はｋまたはｗであり、Ａ３はｓまたはｆであり、Ａ４はｒまたはｔであり、Ａ５はｈ、ｉ、ｎ、またはｗであり、Ａ６はｉまたはｄであり、Ａ７はｎまたはａであり、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つは、別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸で置換されていてもよい。
【００３７】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７の１つまたは２つが、対応するＬ−アミノ酸で置換されている、先行節のペプチド。
【００３８】
配列Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７の単離ペプチド、または配列Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７を含む単離ペプチドであり、配列中、Ａ１はｔまたはｗであり、Ａ２はｋまたはｗであり、Ａ３はｓまたはｆであり、Ａ４はｒまたはｔであり、Ａ５はｉまたはｗであり、Ａ６はｉまたはｄであり、Ａ７はｎまたはａであり、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つは、別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸で置換されていてもよい。
【００３９】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７の１つまたは２つが、対応するＬ−アミノ酸で置換されている、先行節のペプチド。
【００４０】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つが、別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸で置換されていてもよい、先行節のいずれか１つのペプチド。
【００４１】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７の１つが、対応するＬ−アミノ酸で置換されている、先行節のペプチド。
【００４２】
Ａ１がｔである、先行節のいずれかのペプチド。
【００４３】
Ａ１−Ａ２がｔｋまたはｔｗである、先行節のいずれかのペプチド。
【００４４】
Ａ２−Ａ３がｋｓまたはｗｆである、先行節のいずれかのペプチド。
【００４５】
Ａ１−Ａ２−Ａ３がｔｋｓまたはｔｗｆである、先行節のいずれかのペプチド。
【００４６】
Ａ３−Ａ４がｓｒまたはｆｔである、先行節のいずれかのペプチド。
【００４７】
Ａ２−Ａ３−Ａ４がｋｓｒまたはｗｆｔである、先行節のいずれかのペプチド。
【００４８】
Ａ４がｒまたはｔである、先行節のいずれかのペプチド。
【００４９】
Ａ５がｆ、ｈ、ｉ、ｎ、またはｗである、先行節のいずれかのペプチド。
【００５０】
Ａ５がｈ、ｉ、ｎ、またはｗである、先行節のいずれかのペプチド。
【００５１】
Ａ５がｉまたはｗである、先行節のいずれかのペプチド。
【００５２】
Ａ５がｆである、先行節のいずれかのペプチド。
【００５３】
Ａ１−Ａ２がｗｗである、先行節のいずれかのペプチド。
【００５４】
Ａ６−Ａ７がｉａである、先行節のいずれかのペプチド。
【００５５】
Ａ４がｒまたはｔであり、Ａ６がｉである、先行節のいずれかのペプチド。
【００５６】
Ａ６−Ａ７がｉｎである、先行節のいずれかのペプチド。
【００５７】
Ａ７がｎである、先行節のいずれかのペプチド。
【００５８】
ｔｋｓｒｆＸ／ｘｎを含み、Ｘ／ｘがｉ、ｌ、またはｙである、先行節のいずれかのペプチド。
【００５９】
ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎを含み、Ｘ／ｘがｉ、ｌ、ｍ、ｒ、ｓ、ｔ、ｖ、またはｗである、先行節のいずれかのペプチド。
【００６０】
ｔｗＸ／ｘｒｆｉｎを含み、Ｘ／ｘがａ、ｃ、ｅ、ｆ、Ｇ、ｈ、ｉ、ｋ、ｌ、ｍ、ｎ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｖ、ｗ、またはｙである、先行節のいずれかのペプチド。
【００６１】
ｔＸ／ｘｓｒｆｉｎを含み、Ｘ／ｘがｐ、ｒ、ｓ、またはｗである、先行節のいずれかのペプチド。
【００６２】
Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎを含み、Ｘ／ｘがｍまたはｗである、先行節のいずれかのペプチド。
【００６３】
ｗｗｆｔＸ／ｘｉａを含み、Ｘ／ｘがｈ、ｉ、ｎ、またはｗである、先行節のいずれかのペプチド。
【００６４】
ｗｗｆｔＸ／ｘｉａを含み、Ｘ／ｘがｉまたはｗである、先行節のいずれかのペプチド。
【００６５】
ｔｋｓｒｆＸ／ｘｎ、ｔＸ／ｘｓｒｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｒｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｗｗｆｔｆｉＸ／ｘ、ｗｗｆｔＸ／ｘｉａ、およびｔｋｓｒｆｄｎまたはそれら誘導体から選択される配列を含み、Ｘ／ｘがグリシン、または任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸である、先行節のいずれかのペプチド。
【００６６】
ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、およびＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘから選択される配列を含み、Ｘ／ｘがグリシン、または任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸である、先行節のいずれかのペプチド。
【００６７】
ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、およびＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘから選択される配列を含み、Ｘ／ｘがグリシン、または任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸であり、各配列において、１つの追加のアミノ酸が挿入、欠失、あるいは様々なＤ−アミノ酸、またはグリシン、または任意のＬ−アミノ酸１つのアミノ酸に変更された、先行節のいずれかのペプチド。
【００６８】
ＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７、ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９およびＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１から選択される配列を含む、先行節のいずれかのペプチド。
【００６９】
配列ｔｋｓｒｆＸ／ｘｎ（式Ｉ）を含む、先行節のいずれかのペプチド。
【００７０】
配列ｔＸ／ｘｓｒｆｉｎ（式ＩＩ）を含む、先行節のいずれかのペプチド。
【００７１】
配列ｔｗＸ／ｘｒｆｉｎ（式Ｖ）を含む、先行節のいずれかのペプチド。
【００７２】
配列ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ（式ＶＩ）を含む、先行節のいずれかのペプチド。
【００７３】
配列Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ（式ＶＩＩ）を含む、先行節のいずれかのペプチド。
【００７４】
配列ｗｗｆｔｆｉＸ／ｘ（式ＶＩＩＩ）を含む、先行節のいずれかのペプチド。
【００７５】
配列ｗｗｆｔＸ／ｘｉａ（式ＩＸ）を含む、先行節のいずれかのペプチド。
【００７６】
配列Ｘ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘ（式Ｘ）を含む、先行節のいずれかのペプチド。
【００７７】
Ｎ末端および／またはＣ末端システイン残基をさらに含む、先行節のいずれかのペプチド。
【００７８】
環状形態の先行節のペプチド。
【００７９】
１つまたは複数の溶解性タグをさらに含み、タグのそれぞれが独立して選択される、先行節のいずれかのペプチド。
【００８０】
溶解性タグがＮ末端および／またはＣ末端にある、先行節のペプチド。
【００８１】
溶解性タグがＲＲＫＫおよびｒｒｋｋから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００８２】
ペプチドがレトロウイルス、レンチウイルス、パラミクソウイルス、フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ダニ媒介脳炎、黄熱病、デング熱ウイルス、フィロウイルス、トガウイルス、ブニヤウイルス、ヘルペスウイルス、ヘプナウイルス、パラミクソウイルス、またはコロナウイルスに対する抗ウイルス活性を有する、先行節または次節のいずれかの１つのペプチド。
【００８３】
ペプチドが単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、呼吸器多核体ウイルス、またはヒト免疫不全ウイルスに対して抗ウイルス活性を有する、先行節または次節のいずれかの１つのペプチド。
【００８４】
ペプチドがＨＩＶ、エボラ、マールブルグウイルス、風疹ウイルス、ハンタウイルス、アレナウイルス、サイトメガロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、またはトロウイルスに対する抗ウイルス活性を有する、先行節または次節のいずれかの１つのペプチド。
【００８５】
感染症がＡＩＤＳ、ヘルペス、またはＳＡＲＳである、先行節または次節のいずれかの１つのペプチド。
【００８６】
ペプチドが単純ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、呼吸器多核体ウイルス、および／またはヒト免疫不全ウイルスに対して抗ウイルス活性を有する、先行節または次節のいずれかの１つのペプチド。
【００８７】
ウイルスに対するＩＣ５０が１００μＭ未満である、先行節または次節のいずれかの１つのペプチド。
【００８８】
Ｘ／ｘが任意のタンパク質構成アミノ酸から選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００８９】
Ｘ／ｘが任意のタンパク質構成アミノ酸のＤ−異性体から選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００９０】
ｃｔｋｓｒｆＸ／ｘｎｃ、ｒｒｋｋｃｔＸ／ｘｓｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗＸ／ｘｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆＸ／ｘｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃＸ／ｘｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉＸ／ｘｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔＸ／ｘｉａｃ、およびｃｔｋｓｒｆｄｎｃから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００９１】
ｘがａ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｈ、ｉ、ｋ、ｌ、ｍ、ｎ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｖ、ｗ、ｙまたはＧから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００９２】
ペプチドが配列ＲＲＫＫｃｔｗＸ／ｘｒｆｉｎｃを含むか、またはＲＲＫＫｃｔｗａｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｃｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｄｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｅｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗＧｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｈｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｉｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｋｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｌｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｍｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｎｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｐｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｑｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｒｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｓｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｔｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｖｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｗｒｆｉｎｃまたはＲＲＫＫｃｔｗｙｒｆｉｎｃから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００９３】
ペプチドが配列ＲＲＫＫｃｔｗｆＸ／ｘｆｉｎｃを含むか、またはＲＲＫＫｃｔｗｆａｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｃｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｄｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｅｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｆｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆＧｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｈｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｉｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｋｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｌｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｍｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｎｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｐｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｑｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｓｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｖｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｗｆｉｎｃ、およびＲＲＫＫｃｔｗｆｙｆｉｎｃから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００９４】
ペプチドが配列ＲＲＫＫｃＸ／ｘｗｆｔｆｉｎｃを含むか、またはＲＲＫＫｃａｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｃｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｄｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｅｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｆｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃＧｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｈｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｉｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｋｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｌｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｍｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｎｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｐｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｑｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｒｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｓｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｖｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｎｃおよびＲＲＫＫｃｙｗｆｔｆｉｎｃから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００９５】
ペプチドが配列ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉＸ／ｘｃを含むか、またはＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｃｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｄｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｅｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｆｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉＧｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｈｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｉｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｋｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｌｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｍｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｐｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｑｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｒｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｓｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｔｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｖｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｗｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｙｃから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００９６】
ペプチドがｃｔｋｓｒｆａｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｃｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｄｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｅｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｆｎｃ、ｃｔｋｓｒｆＧｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｈｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｉｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｋｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｌｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｍｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｎｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｐｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｑｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｒｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｓｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｔｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｖｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｗｎｃおよびｃｔｋｓｒｆｙｎｃから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００９７】
ペプチドがｒｒｋｋｃｔａｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｃｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｄｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｅｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｆｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔＧｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｈｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｉｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｋｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｌｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｍｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｎｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｐｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｑｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｒｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｓｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｔｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｖｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｗｓｒｆｉｎｃおよびｒｒｋｋｃｔｙｓｒｆｉｎｃから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００９８】
ペプチドがＲＲＫＫｃｗｗｆｔａｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｃｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｄｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｅｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔＧｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｈｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｉｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｋｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｌｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｍｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｎｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｐｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｑｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｒｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｓｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｖｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｗｉａｃ、およびＲＲＫＫｃｗｗｆｔｙｉａｃから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【００９９】
ペプチドがｔｗｆｒｆｉｎ、ｔｗｆｆｆｉｎ、ｔｗｆｔｆｉｎ、ｗｗｆｔｆｉｎ、およびｗｗｆｔｆｉａを含む、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【０１００】
ペプチドがｃｔｗｆｒｆｉｎｃ、ｃｔｗｆｆｆｉｎｃ、ｃｔｗｆｔｆｉｎｃ、ｃｗｗｆｔｆｉｎｃおよびｃｗｗｆｔｆｉａｃを含む、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【０１０１】
ペプチドがＲＲＫＫｃｔｗｆｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｆｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｎｃおよびＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉａｃから選択される、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【０１０２】
薬剤の製造に使用するための、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【０１０３】
薬剤として使用するための、先行節のいずれかの１つのペプチド。
【０１０４】
先行節のいずれかの１つのペプチドを含む医薬組成物。
【０１０５】
ウイルス感染症の治療に使用するのに適した、先行節のいずれかの１つのペプチドまたはその医薬組成物。
【０１０６】
ウイルス感染症の治療のための薬剤の製造における、先行節のいずれかの１つのペプチドまたはその医薬組成物の使用。
【０１０７】
先行節のいずれかの１つのペプチドまたはその医薬組成物の治療有効量を宿主動物に投与することを含む、宿主動物のウイルス感染症を治療する方法。
【０１０８】
ペプチドまたは医薬組成物が鼻、肺、気管支内、経口または非経口経路により投与される、先行節のいずれか１つの方法。
【０１０９】
ペプチドまたは医薬組成物が予防的に投与される、先行節のいずれか１つの方法。
【０１１０】
先行節のいずれか１つのペプチドの誘導体を作成し、抗ウイルス活性をスクリーニングすることを含む、抗ウイルス活性を有するペプチドを検出する方法。
【０１１１】
先行節のいずれか１つのペプチドまたはその医薬組成物、およびウイルス感染症を治療するためのペプチドまたは医薬組成物の使用説明書を含むキット。
【０１１２】
先行節のいずれか１つのペプチドをコードする核酸を含むベクター。
【０１１３】
先行節のいずれか１つのペプチドをコードする核酸を含むプラスミド。
【０１１４】
先行節のいずれか１つのペプチドを発現する宿主細胞。
【０１１５】
先行節のいずれか１つのペプチド、ならびに核酸、ペプチド、タンパク質、造影剤、抗体、毒素および小分子から選択される第２の薬剤とを含む組み合わせ。
【０１１６】
先行節のいずれか１つのペプチドを含む組換えライブラリー。
【０１１７】
理論に拘束されるものではなく、本明細書で開示されるペプチドは、抗ウイルス活性において重要な役割を果たす可能性のある基礎となるマトリックスタンパク質へのアクセスを得るために、ウイルスの脂質エンベロープを破壊する膜移行モチーフを含むと考えられる。したがって、本発明のペプチドは、風疹ウイルスを含むトガウイルス科；ＨＩＶなどのレンチウイルスを含むレトロウイルス科；ハンタウイルスおよびアレナウイルスなどのブニヤウイルス科；ヘルペスウイルスおよびサイトメガロウイルスなどのヘルペスウイルス科；Ｂ型肝炎ウイルスなどのヘプナウイルス科；パラミクソウイルスなどのパラミクソウイルス科；フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ダニ媒介脳炎、黄熱病およびデング熱ウイルスなどのフラビウイルス科；エボラウイルスおよびマールブルグウイルスなどのフィロウイルス科；ならびにＳＡＲＳウイルスを含むコロナウイルスおよびトロウイルスなどのコロナウイルス科を含むがこれに限定されない任意の脂質エンベロープ含有ウイルスに結合し、阻害することが期待される。
【０１１８】
ｔｗｆｔｆｉｎの誘導体には、表１に示すように、１つまたは複数のアミノ酸が欠失しているか、様々なアミノ酸で置換されたペプチドが含まれる。誘導体にはまた、少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％の配列同一性を持つペプチドが含まれる。誘導体は、好ましくは、７つのアミノ酸を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる。別の実施形態では、誘導体は、７つのアミノ酸のコアペプチドを含み、本明細書に記載される様々な特性、溶解性を改善するために、または環化を可能にするために追加のアミノ酸をさらに含む。コアペプチドは、活性ペプチド、つまり抗ウイルス活性を付与するペプチドである。誘導体は機能的であり、つまり生物学的に活性であり、好ましくは複数のウイルスに対して抗ウイルス特性を示す。
【０１１９】
本明細書で使用される用語「ペプチド」は、アミノ酸残基を含むポリマーを指す。例示的な実施形態では、ペプチドは、２〜約１００残基または２〜約５０残基を含む。別の実施形態では、ペプチドは、約７〜２０残基、例えば７〜１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８または１９残基を含む。特定の実施形態では、ペプチドを含むアミノ酸残基はすべて「Ｄ型」アミノ酸残基であるが、様々な実施形態では、「Ｌ」アミノ酸をペプチドに組み込むことができると認識されている。したがって、いくつかの実施形態では、本発明のペプチドは、Ｄ型アミノ酸とＬ型アミノ酸との混合物である。例えば、ペプチドは、７つのＤ−アミノ酸のコアを含んでもよく、そこで、１つまたは複数のアミノ酸がＬ型であってもよい。
【０１２０】
ペプチドにはまた、１つまたは複数のアミノ酸残基が、対応する天然アミノ酸の人工化学類似体、またはＤ−アミノ酸類似体であるアミノ酸ポリマー、ならびに天然アミノ酸ポリマーが含まれる。さらに、この用語は、ペプチド結合により、または他の「修飾された結合」（例えば、ペプチド結合がα−エステル、β−エステル、チオアミド、ホスホンアミド、カルバマート、ヒドロキシラートなどによって置換されている）によって結合されたアミノ酸にも適用される。
【０１２１】
特定の実施形態では、本発明のペプチドは、７残基を有する活性コアペプチドを含む。さらに、ペプチドは、ペプチドが環状ペプチドを形成できる１つ以上の残基および／または本明細書に記載されるペプチドの溶解性を増加させる１つ以上の残基を含むがこれらに限定されない、さらなる残基を含んでもよい。
【０１２２】
本明細書に記載されるペプチドは、天然に存在するものでも天然に存在しないものでもよい。それらは、ａ）化学合成により生成、ｂ）組換えＤＮＡ技術により生成、ｃ）より大きな分子の生化学的断片化または酵素的断片化により生成、ｄ）上記ａ〜ｄのいずれかの方法の組み合わせにより生成、ｅ）ペプチドを生成するための任意の他の手段により生成することができる。別の実施形態では、ペプチドは、天然には存在しない。別の実施形態では、ペプチドは、天然に存在しない修飾を含む。そのような修正の例は、本明細書に記載されている。
【表１】
2020528072.tif 000003
【０１２３】
別の実施形態では、ｔｋｓｒｆＸ／ｘｎ、ｔＸ／ｘｓｒｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｒｆｉｎ，  ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｗｗｆｔｆｉＸ／ｘ、ｗｗｆｔＸ／ｘｉａ、およびｔｋｓｒｆｄｎから選択される配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる、抗ウイルスペプチドを記載する。別の実施形態では、ｔｋｓｒｆＸ／ｘｎ、ｔＸ／ｘｓｒｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｒｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｗｗｆｔｆｉＸ／ｘ、およびｗｗｆｔＸ／ｘｉａから選択される配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる、抗ウイルスペプチドを記載する。
【０１２４】
別の実施形態では、ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、およびＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘから選択される配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、Ｘ／ｘがグリシン、任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸である、抗ウイルスペプチドを記載する。
【０１２５】
別の実施形態では、ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、およびＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘから選択される配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、Ｘ／ｘがグリシン、任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸であり、各配列において、１つの追加のアミノ酸が挿入、欠失、あるいは様々なＤ−アミノ酸、またはグリシン、または任意のＬ−アミノ酸１つのアミノ酸に変更された、抗ウイルスペプチドを記載する。
【０１２６】
別の実施形態では、ｃｔｋｓｒｆＸ／ｘｎｃ、ｃｔＸ／ｘｓｒｆｉｎｃ、ｃｔｗＸ／ｘｒｆｉｎｃ、ｃｔｗｆＸ／ｘｆｉｎｃ、ｃＸ／ｘｗｆｔｆｉｎｃ、ｃｗｗｆｔｆｉＸ／ｘｃ、ｃｗｗｆｔＸ／ｘｉａｃ、およびｃｔｋｓｒｆｄｎｃから選択される配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる、抗ウイルスペプチドを記載する。別の実施形態では、ｃｔｋｓｒｆＸ／ｘｎｃ、ｃｔＸ／ｘｓｒｆｉｎｃ、ｃｔｗＸ／ｘｒｆｉｎｃ、ｃｔｗｆＸ／ｘｆｉｎｃ、ｃＸ／ｘｗｆｔｆｉｎｃ、ｃｗｗｆｔｆｉＸ／ｘｃ、およびｃｗｗｆｔＸ／ｘｉａｃから選択される配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる、抗ウイルスペプチドを記載する。
【０１２７】
別の実施形態では、ＲＲＫＫｃｔｋｓｒｆＸ／ｘｎｃ、ＲＲＫＫｃｔＸ／ｘｓｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗＸ／ｘｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆＸ／ｘｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃＸ／ｘｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉＸ／ｘｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔＸ／ｘｉａｃ、およびＲＲＫＫｃｔｋｓｒｆｄｎｃから選択される配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる、抗ウイルスペプチドを記載する。別の実施形態では、ＲＲＫＫｃｔｋｓｒｆＸ／ｘｎｃ、ＲＲＫＫｃｔＸ／ｘｓｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗＸ／ｘｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆＸ／ｘｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃＸ／ｘｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉＸ／ｘｃ、およびＲＲＫＫｃｗｗｆｔＸ／ｘｉａｃから選択される配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる、抗ウイルスペプチドを記載する。
【０１２８】
別の実施形態では、ｒｒｋｋｃｔｋｓｒｆＸ／ｘｎｃ、ｒｒｋｋｃｔＸ／ｘｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｗＸ／ｘｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｗｆＸ／ｘｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃＸ／ｘｗｆｔｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｗｗｆｔｆｉＸ／ｘｃ、ｒｒｋｋｃｗｗｆｔＸ／ｘｉａｃ、およびｒｒｋｋｃｔｋｓｒｆｄｎｃから選択される配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる、抗ウイルスペプチドを記載する。別の実施形態では、ｒｒｋｋｃｔｋｓｒｆＸ／ｘｎｃ、ｒｒｋｋｃｔＸ／ｘｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｗＸ／ｘｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｗｆＸ／ｘｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃＸ／ｘｗｆｔｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｗｗｆｔｆｉＸ／ｘｃ、およびｒｒｋｋｃｗｗｆｔＸ／ｘｉａｃから選択される配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる、抗ウイルスペプチドを記載する。
【０１２９】
上述の実施形態のいずれにおいても、Ｄ−システインはＬ−システインであってもよいことが理解されるべきである。
【０１３０】
本明細書に記載される配列において、アミノ酸表記「Ｘ／ｘ」は、置換が行われる位置を表し、任意のＬ−アミノ酸またはＤ−アミノ酸、または任意のアミノ酸類似体が含まれてもよい。文字「Ｘ／ｘ」は、タンパク質構成アミノ酸、つまり２０種類の天然アミノ酸のいずれかを１つを意味する。アキラルであるＧを除き、ＸはＬ型のアミノ酸を示し、ｘはＤ型のアミノ酸を示す。別の実施形態では、Ｘ／ｘはｘ、すなわちＤ型のアミノ酸であるか、またはＸ、すなわちＬ型のアミノ酸である。別の実施形態では、ｘは、Ｄ型の以下のアミノ酸から選択される：ａ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｈ、ｉ、ｋ、ｌ、ｍ、ｎ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｖ、ｗ、またはｙ。別の実施形態では、Ｘは、Ｌ型の以下のアミノ酸から選択される：Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷまたはＹ。別の実施形態では、Ｘはグリシンである。
【０１３１】
別の実施形態では、ペプチドは、１００μＭ未満、または５０μＭ未満、または１０μＭ未満、または５μＭ未満、または１μＭ未満、または０．１μＭ未満のＩＣ５０を有する。別の実施形態では、ペプチドは、少なくとも１つのウイルスおよび／または少なくとも１つのウイルスサブタイプ、好ましくは少なくとも２つのウイルスおよび／または少なくとも２つのウイルスサブタイプの少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％以上の阻害を示す。好ましくは、阻害は、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％以上、または少なくとも７５％、８０％、９０％、９５％以上である。
【０１３２】
別の実施形態では、ペプチドは、例えば、ＭＤＣＫ細胞についてのプラーク減少アッセイにおいて、０．０１μＭ〜１００μＭのペプチドを使用して測定されるように、好ましくは２、３、４以上のウイルスおよび／またはウイルスサブタイプに対して抗ウイルス活性を有する。別の実施形態では、ペプチドは、少なくとも２つのウイルスサブタイプの少なくとも７５％、８０％、９０％または９５％の阻害を示す。
【０１３３】
別の実施形態では、本発明のペプチドは１つまたは複数の溶解性タグを含む。例示的な一実施形態では、溶解性タグは、荷電アミノ酸から構成される短いペプチドであり、疎水性ペプチドのＮ末端またはＣ末端に共有結合すると、連結ペプチドの溶解性が増加する。例えば、溶解性タグは、親水性を有する場合、Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ヒドロキシ−プロリンおよびピロ−グルタミン酸から選択される１つまたは複数のアミノ酸を含んでもよい。これらは、左旋体または右旋体のいずれかである。Ｎ末端またはＣ末端のいずれかにおいて、任意の組み合わせまたは繰り返しで、特にＥ／Ｄ／Ｒ／Ｋである、これらのアミノ酸のいずれかを添加することにより、ペプチドの溶解性を増加させることができる。溶解性はまた、ジペプチドＥＥ、トリペプチドＳＧＳを添加することにより、および／または高グリコシル化およびペグ化により、または溶解性を増加させるための当技術分野で公知の他の方法により増加させることができる。
【０１３４】
例えば、溶解性タグは、ペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に結合した溶解性タグＲＲＫＫ（左旋体ＲＲＫＫまたは右旋体ｒｒｋｋのいずれか）を含むか、またはそれからなってもよい。
【０１３５】
本発明のペプチドは、直鎖または環状形態であってもよい。別の実施形態では、本発明のペプチドは、環状形態である。ペプチドは、例えば、システイン残基間（または、より一般的には、ポリペプチドに存在する少なくとも２つのシステイン残基のうちの２つの間（例えば、末端領域で））のジスルフィド結合の形成により環化することができる。各システイン残基は独立してＤ−システインまたはＬ−システインであることが理解されるべきである。例えば、システイン残基の１つは、少なくとも２つのシステイン残基を付加することができ、その１つまたは両方は、ペプチドのＣ末端またはＮ末端にあってもよい。したがって、抗ウイルスペプチドならびにその誘導体は、それらの末端システイン残基とのジスルフィド結合により環化され得る。本明細書に示すように、ペプチドの直鎖バージョン（すなわち、環化なし）は、抗ウイルス特性を示す。ペプチドが３つ以上のシステイン残基を含む場合、その残基がジスルフィド結合の形成に関与するのを防ぐために、１つまたは複数の残基を修飾することができることも理解されるべきである。好都合には、これは、システインのチオール基をアセトアミドメチルで保護し、システイン類似体アセトアミドメチル−システイン（Ｃｙｓ（Ａｃｍ））を形成することにより達成することができる。本発明のペプチドの文脈では、これは内部システイン残基を用いて行うことができる。修飾は合成中に実行でき（つまり、修飾された残基は合成に使用される）、または合成後に実行できる。
【０１３６】
直鎖前駆体から環状ポリペプチドを調製するための戦略が記載されており、本ペプチドで使用することができる。例えば、アプローチには、化学的架橋、化学的分子内ライゲーション法、および酵素的分子内ライゲーション法が含まれ、直鎖合成ペプチドを水性条件下で効率的に環化できる。
【０１３７】
別の実施形態では、環状形態であり、溶解性タグ、例えばＲＲＫＫ（左旋体または右旋体のいずれか）を含むペプチドが本明細書に記載されている。
【０１３８】
別の実施形態では、ペプチドは、ｃｔｋｓｒｆＸ／ｘｎｃ、ｒｒｋｋｃｔＸ／ｘｓｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗＸ／ｘｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆＸ／ｘｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃＸ／ｗｆｔｆｉｎｃまたはＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉＸ／ｘｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔＸ／ｘｉａｃ、またはｃｔｋｓｒｆｄｎｃから選択される。
【０１３９】
別の実施形態では、本発明のペプチドは、一般配列ｔｗＸ／ｘｒｆｉｎ（式Ｖ）を含み、Ｘ／ｘはａ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｌ、ｍ、ｎ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｖ、ｗ、またはｙである。ペプチドは、環化および／または溶解性タグのためにＮ末端およびＣ末端にシステイン残基を含んでもよい。別の実施形態では、ペプチドは、ＲＲＫＫｃｔｗａｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｃｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｄｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｅｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗＧｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｈｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｉｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｋｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｌｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｍｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｎｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｐｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｑｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｒｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｓｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｔｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｖｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｗｒｆｉｎｃまたはＲＲＫＫｃｔｗｙｒｆｉｎｃから選択される。また、溶解性タグがＤ型（ｒｒｋｋ）である、上記に示すペプチドも本発明の範囲内である。また、環化のないこれらのペプチドの機能的誘導体も本発明の範囲内である。
【表２】
2020528072.tif 000004
【０１４０】
別の実施形態では、本発明のペプチドは、一般配列ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ（式ＶＩ）を含み、Ｘ／ｘはａ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、Ｇ、ｈ、ｉ、ｋ、ｌ、ｍ、ｎ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｖ、ｗ、またはｙである。ペプチドは、環化および／または溶解性タグのためにＮ末端およびＣ末端にシステイン残基を含んでもよい。別の実施形態では、ペプチドは、ＲＲＫＫｃｔｗｆａｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｃｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｄｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｅｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｆｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆＧｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｈｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｉｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｋｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｌｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｍｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｎｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｐｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｑｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｒｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｓｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｖｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｗｆｉｎｃ、およびＲＲＫＫｃｔｗｆｙｆｉｎｃから選択される。また、溶解性タグがＤ型（ｒｒｋｋ）である、上記に示すペプチドも本発明の範囲内である。また、環化のないこれらのペプチドの機能的誘導体も本発明の範囲内である。
【表３】
2020528072.tif 000005
【０１４１】
別の実施形態では、本発明のペプチドは一般配列Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ（式ＶＩＩ）を含み、Ｘ／ｘはａ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、Ｇ、ｈ、ｉ、ｋ、ｌ、ｍ、ｎ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｖ、ｗ、またはｙである。ペプチドは、環化および／または溶解性タグのためにＮ末端およびＣ末端にシステイン残基を含んでもよい。別の実施形態では、ペプチドは、ＲＲＫＫｃａｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｃｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｄｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｅｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｆｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃＧｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｈｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｉｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｋｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｌｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｍｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｎｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｐｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｑｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｒｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｓｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｔｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｖｗｆｔｆｉｎｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｎｃおよびＲＲＫＫｃｙｗｆｔｆｉｎｃから選択される。また、溶解性タグがＤ型（ｒｒｋｋ）である、上記に示すペプチドも本発明の範囲内である。また、環化のないこれらのペプチドの機能的誘導体も本発明の範囲内である。
【表４】
2020528072.tif 000006
【０１４２】
別の実施形態では、本発明のペプチドは、一般配列ｗｗｆｔｆｉＸ／ｘ（式ＶＩＩＩ）を含み、Ｘ／ｘはａ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、Ｇ、ｈ、ｉ、ｋ、ｌ、ｍ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｖ、ｗ、またはｙである。ペプチドは、環化および／または溶解性タグのためにＮ末端およびＣ末端にシステイン残基を含んでもよい。別の実施形態では、ペプチドは、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｃｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｄｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｅｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｆｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉＧｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｈｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｉｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｋｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｌｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｍｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｐｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｑｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｒｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｓｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｔｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｖｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｗｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｆｉｙｃから選択される。また、溶解性タグがＤ型（ｒｒｋｋ）である、上記に示すペプチドも本発明の範囲内である。また、環化のないこれらのペプチドの機能的誘導体も本発明の範囲内である。
【表５】
2020528072.tif 000007
【０１４３】
別の実施形態では、本発明のペプチドは、一般配列ｔｋｓｒｆＸ／ｘｎ（式Ｉ）を含み、Ｘ／ｘはａ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、Ｇ、ｈ、ｉ、ｋ、ｌ、ｍ、ｎ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｖ、ｗ、またはｙである。ペプチドは、環化および／または溶解性タグのためにＮ末端およびＣ末端にシステイン残基を含んでもよい。別の実施形態では、ペプチドは、ｃｔｋｓｒｆａｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｃｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｄｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｅｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｆｎｃ、ｃｔｋｓｒｆＧｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｈｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｉｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｋｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｌｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｍｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｎｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｐｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｑｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｒｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｓｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｔｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｖｎｃ、ｃｔｋｓｒｆｗｎｃおよびｃｔｋｓｒｆｙｎｃから選択される。溶解性タグがＬ型（ＲＲＫＫ）またはＤ型（ｒｒｋｋ）である、上記に示すペプチドも本発明の範囲内である。また、環化のないこれらのペプチドの機能的誘導体も本発明の範囲内である。
【表６】
2020528072.tif 000008
【０１４４】
別の実施形態では、本発明のペプチドは、一般配列ｔＸ／ｘｓｒｆｉｎ（式ＩＩ）を含み、Ｘ／ｘはａ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、Ｇ、ｈ、ｉ、ｋ、ｌ、ｍ、ｎ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔ、ｖ、ｗ、またはｙである。ペプチドは、環化および／または溶解性タグのためにＮ末端およびＣ末端にシステイン残基を含んでもよい。別の実施形態では、ペプチドは、ｒｒｋｋｃｔａｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｃｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｄｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｅｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｆｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔＧｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｈｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｉｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｋｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｌｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｍｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｎｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｐｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｑｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｒｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｓｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｔｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｖｓｒｆｉｎｃ、ｒｒｋｋｃｔｗｓｒｆｉｎｃおよびｒｒｋｋｃｔｙｓｒｆｉｎｃから選択される。溶解性タグがＬ型（ＲＲＫＫ）である上記に示すペプチドも本発明の範囲内である。また、環化のないこれらのペプチドの機能的誘導体も本発明の範囲内である。
【表７】
2020528072.tif 000009
【０１４５】
別の実施形態では、本発明のペプチドは、一般配列ｗｗｆｔＸ／ｘｉａ（式ＩＸ）を含み、Ｘ／ｘはａ、ｃ、ｄ、ｅ、Ｇ、ｈ、ｉ、ｋ、ｌ、ｍ、ｎ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、ｖ、ｗ、またはｙである。ペプチドは、環化および／または溶解性タグのためにＮ末端およびＣ末端にシステイン残基を含んでもよい。別の実施形態では、ペプチドは、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔａｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｃｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｄｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｅｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔＧｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｈｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｉｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｋｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｌｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｍｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｎｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｐｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｑｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｒｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｓｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｖｉａｃ、ＲＲＫＫｃｗｗｆｔｗｉａｃ、およびＲＲＫＫｃｗｗｆｔｙｉａｃから選択される。また、溶解性タグがＤ型（ｒｒｋｋ）である、上記に示すペプチドも本発明の範囲内である。また、環化のないこれらのペプチドの機能的誘導体も本発明の範囲内である。
【表８】
2020528072.tif 000010
【０１４６】
別の実施形態では、本明細書に記載されるペプチドは、ヒトに感染する少なくとも１つの、好ましくは複数のウイルスに対する抗ウイルス活性を有する。別の実施形態では、本明細書に記載されるペプチドは、ヒトに感染するウイルスの複数のサブタイプ、好ましくは複数のサブタイプに対する抗ウイルス活性を有する。例えば、ＲＳＶ  Ａ２、ＨＳＶ−２、ＣＭＶ  ＡＤ  １６９、ＨＩＶ−１  ９２ＵＧ０２９などを含むがこれらに限定されない、様々なサブタイプのＨＩＶ、ＲＳＶ、ＨＳＶおよびＣＭＶによって引き起こされる感染症は、本明細書に記載されるペプチドを使用して治療することができる。別の実施形態では、ウイルスは、インフルエンザウイルスまたはオルトミクソウイルスではない。
【０１４７】
特徴的なペプチドおよびその生物学的に活性な変異体は、多くの方法で修飾することができる。例えば、追加のアミノ酸残基、他の置換基、および保護基を含む薬剤を、アミノ末端、カルボキシ末端、またはその両方に追加することができる。例えば、上述のように、ペプチドは、システイン残基または他の硫黄含有残基またはジスルフィド結合形成に関与し得る薬剤を含むように修飾することができる。
【０１４８】
本発明のペプチドはまた、溶解性、安定性、反応性を高めるため、または他の特性を改善するために、任意の位置および／またはＮ末端および／またはＣ末端に１つまたは複数の修飾アミノ酸を含んでもよい。これらの修飾には、アセチル、カルボベンゾイル、ダンシル、ｔ−ブチルオキシカルボニル基、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基、またはアミノ末端および／またはｔ−ブチルオキシカルボニルへの親水性基、またはアミド基またはパラニトロベンジルエステル基またはカルボキシ末端への親水性基を含むがこれらに限定されない、化学基の付加が含まれる。それらはまた、Ｎ−メチル化などの修飾アミド結合を含んでもよい。
【０１４９】
別の実施形態では、本明細書に記載されるペプチドのいずれかは、１つまたは複数の置換基を含む。例えば、ペプチドは、アミノ末端、カルボキシ末端、および／または反応性アミノ酸残基側鎖に置換基を含むことができる。置換基は、アシル基あるいは置換または非置換アミン基であってもよい（例えば、Ｎ末端の置換基は、アシル基であってもよく、Ｃ末端は、置換または非置換アミン基（例えば、同じであっても異なっていてもよい、１つ、２つ、または３つの置換基を有するアミノ基）でアミド化されてもよい）。アミン基は、低級アルキル（例えば、１〜４つの炭素を有するアルキル）、アルケニル、アルキニル、またはハロアルキル基であってもよい。アシル基は、低級アシル基（例えば、最大４つの炭素原子を有するアシル基）、特にアセチル基であってもよい。置換基は、非タンパク質ポリマー、例えば、ポリエーテル、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、またはポリオキシアルキレン、ポリアルキレングリコール（例えば、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリブチレングリコール（ＰＢＧ）、またはＰＰＧ−ＰＥＧブロック／ランダムポリマー）であってもよい。
【０１５０】
非タンパク質ポリマーのサイズおよび形状は様々であってもよい。例えば、上記の非タンパク質ポリマーのいずれか（例えば、ＰＥＧ）は、直鎖、分岐状、または櫛形であってもよい。サイズに関しては、分子量は様々であってもよい。例えば、ＰＥＧは、例えば約３００Ｄａ、約１０００Ｄａ、約２０００Ｄａ、約３０００Ｄａ、約４０００Ｄａ、約５０００Ｄａ、約６０００Ｄａ、約７０００Ｄａ、約８０００Ｄａ、約９０００Ｄａ、約１００００Ｄａ、約１１，０００Ｄａ、約１２０００Ｄａ、約１３０００Ｄａ、約１４０００Ｄａ、約１５０００Ｄａ、約２００００Ｄａ、約３００００Ｄａ、約４００００Ｄａ、または約５００００Ｄａの分子量を有することができる。例えば、ＰＥＧは、３００ＤＡ〜２０００Ｄａ、３００Ｄａ〜３０００Ｄａ、１０００Ｄａ〜２０００Ｄａ、および１０００〜３０００Ｄａのいずれかの分子量であってもよい。非タンパク質ポリマー（例えば、ＰＥＧ）は、任意の数の官能基化学（例、カルボキシル化ｍＰＥＧ、ｐ−ニトロフェニル−ＰＥＧ、アルデヒド−ＰＥＧ、アミノ−ＰＥＧ、チオール−ＰＥＧ、マレイミド−ＰＥＧ、アミノキシ−ＰＥＧ、ヒドラジン−ＰＥＧ、トシル−ＰＥＧ、ヨードアセトアミド−ＰＥＧ、スクシンイミジルスクシナート−ＰＥＧ、スクシンイミジルグルタラート−ＰＥＧ、スクシンイミジルカルボキシペンチル−ＰＥＧ、ｐ−ニトロフェニルカルボナート−ＰＥＧ、またはエタンチオール−ＰＥＧ）によりペプチドに結合することができる。非タンパク質ポリマー（例えば、ＰＥＧ）は、アミノ末端アミノ酸、カルボキシ末端アミノ酸、遊離アミン、および遊離スルフヒドリル基を含むがこれらに限定されない任意の数の化学基を介してペプチドに結合することができる。
【０１５１】
非タンパク質ポリマー（例えば、ＰＥＧ）は、官能化することができる（例えば、単官能性活性化直鎖ＰＥＧ、ホモ二官能性活性化直鎖ＰＥＧ、ヘテロ二官能性活性化直鎖ＰＥＧ、マルチアーム活性化ＰＥＧ（例えば、２アーム、４アーム、８アームなど）、分岐活性化ＰＥＧおよび櫛型活性化ＰＥＧ）。
【０１５２】
本発明の抗ウイルスペプチドはまた、検出、単離、精製などの目的のために、その末端アミノ酸に反応性タグを含んでもよい。これらのタグには、ビオチン、ヒスチジン、ＧＳＴなどが含んでもよい（しかし、これらに限定されない）。適切なタグは当技術分野で公知である。
【０１５３】
本発明のペプチドはまた、溶解性、タンパク質分解安定性または他の特性および／または活性を増強／変更するために、脂質（リン脂質）またはポリエチレングリコールに結合することができる。したがって、本発明のペプチドには、そのようなリポペプチドが含まれる。
【０１５４】
本明細書で使用されるように、本発明の抗ウイルスペプチドは、ペプチドのコア構造を模倣することができる化合物である模倣物またはペプチド模倣物誘導体を含んでもよい。同様に、抗ウイルスペプチドは、アイソスターまたはバイオアイソスターなどの１つまたは複数のアミノ酸置換を含んでもよいことが理解されるべきである。
【０１５５】
別の実施形態では、本発明の抗ウイルスペプチドは、多量体形態であってもよい。多量体は、二量体、三量体または四量体；好ましくは二量体であってもよい。多量体を形成する単量体抗ウイルスペプチドは、同じまたは異なるペプチドで構成されていてもよい。好ましい実施形態では、多量体を形成するペプチドは、共有結合している。
【０１５６】
別の実施形態では、本発明の抗ウイルスペプチドは、異なる物理的形態で示されてもよい。物理的形態は、結晶、アモルファス、または当技術分野で公知の他のものであってもよい。
【０１５７】
本特許出願で提供される様々な例は、表１〜８に記載された様々な配列に示されるように、置換アミノ酸を有するＦＰＴが抗ウイルス活性を保持することを実証している。そのような誘導体は、本発明の範囲内である。別の実施形態では、本発明の抗ウイルスペプチドのアミノ酸は、保存的置換で置換されてもよい。保存的置換とは、一次配列を変更するが機能は変更しない可能性がある代替アミノ酸でのアミノ酸の置換を指す。保存的アミノ酸置換の例には、バリン、イソロイシンおよびロイシン；リジンおよびアルギニン；アスパラギンおよびグルタミン；セリンおよびスレオニン；グリシンおよびアラニン；フェニルアラニンおよびチロシンおよびアスパラギン酸およびグルタミン酸が含まれる。特定のグループ内のアミノ酸は、同じグループの別のアミノ酸で保存的に置換されてもよい。
【０１５８】
別の実施形態では、本発明の抗ウイルスペプチドのアミノ酸は、β−アミノ酸（β３およびβ２）、ホモアミノ酸、プロリンおよびピルビン酸誘導体、３−置換アラニン誘導体、グリシン誘導体、環置換フェニルアラニンおよびチロシン誘導体、Ｎ−メチルアミノ酸、および当技術分野で公知の他のものを含むが、これらに限定されない非天然または非天然アミノ酸およびそれらの誘導体で置換されてもよい。
【０１５９】
本発明のペプチドまたはその誘導体は、以下の例で説明する方法を使用して、それらの抗ウイルス活性について試験することができる。
【０１６０】
開示されたペプチドおよびそれらの誘導体は、液相または固相合成などのペプチド合成で使用される一般的な方法、または当技術分野で公知の他の方法を介して合成することができる。
【０１６１】
本発明のペプチドは、様々なタイプおよび／またはサブタイプを含むウイルスに対して広域抗ウイルス活性を示す。ウイルスは、ヒトまたは動物起源、例えばサル起源のものであってもよい。好ましいウイルスは、ヒト起源またはヒト感染性ウイルスである。
【０１６２】
したがって、本発明の別の態様によれば、上述の本発明の１つまたは複数のペプチドを医薬組成物に製剤化することができる。この組成物は、必要に応じて、希釈剤、担体などの賦形剤、および安定化剤、防腐剤、可溶化剤、バッファーなどの添加剤を含む、１つまたは複数の薬学的に許容される担体と共に、本発明の少なくとも１つのペプチドを含むことができる。薬学的に許容される担体は、本発明のペプチドを投与することができ、本明細書に記載される活性抗ウイルスペプチドの有効性を阻害または低減しない１つまたは複数の非毒性成分を含む化合物である。
【０１６３】
薬学的に許容される担体または媒体は粒子状であってもよく、そのため、組成物は、例えば、錠剤または散剤形態である。担体は液体であってもよく、組成物は、例えば、経口シロップまたは注射可能な液体である。さらに、例えば吸入投与に有用なエアロゾル組成物を提供するために、担体は気体であってもよい。
【０１６４】
そのような医薬担体は、水、ならびにピーナッツ油、大豆油、鉱油、ゴマ油などの石油、動物、植物または合成起源のものを含む油などの液体であってもよい。担体は、食塩水、アカシアゴム、ゼラチン、デンプンペースト、タルク、ケラチン、コロイドシリカ、尿素などであってもよい。さらに、補助剤、安定剤、増粘剤、潤滑剤、着色剤を使用することができる。別の実施形態では、動物に投与される場合、本発明のペプチドまたは組成物および薬学的に許容される担体は、無菌である。本発明のペプチドを静脈内投与する場合、水が好ましい担体である。食塩水および水性デキストロースおよびグリセロール溶液はまた、特に注射液の液体担体として使用することができる。適切な医薬担体には、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどの賦形剤が含まれる。本組成物はまた、必要に応じて、少量の湿潤剤または乳化剤、またはｐＨバッファー剤を含むことができる。
【０１６５】
別の実施形態では、担体および賦形剤の特定の非限定的な例には、水、食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなど、またはそれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。製剤賦形剤には、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシルセルロース、アカシア、ポリエチレングリコール、マンニトール、塩化ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムが含まれてもよい。
【０１６６】
経口投与用の固体組成物として、組成物は、散剤、顆粒、圧縮錠剤、丸薬、カプセル、チューインガム、オブラートなどの形態に製剤化することができる。そのような固体組成物は、典型的には、１つまたは複数の不活性希釈剤を含む。さらに、以下の１つまたは複数が存在してもよい：カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、微結晶セルロース、またはゼラチンなどの結合剤；デンプン、ラクトースまたはデキストリンなどの賦形剤、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、コーンスターチなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤；スクロースおよびサッカリンなどの甘味料；ペパーミント、サリチル酸メチル、オレンジ風味などの風味剤；および着色剤。
【０１６７】
局所投与製剤の場合、様々なクリーム、軟膏、ゲル、ローションなどのいずれかを使用してもよい。
【０１６８】
経口投与を目的とする場合、組成物は、好ましくは固体または液体の形態であり、半固体、半液体、懸濁液およびゲルの形態は、本明細書で固体または液体とみなされる形態に含まれる。
【０１６９】
組成物は、液体の形態、例えば、エリキシル、シロップ、溶液、エマルジョンまたは懸濁液であってもよい。液体は、経口投与または注射による送達に有用であってもよい。経口投与を目的とする場合、組成物は、１つまたは複数の甘味料、防腐剤、染料／着色剤、および風味増強剤を含むことができる。注射による投与のための組成物では、１つまたは複数の界面活性剤、防腐剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、バッファー、安定剤および等張剤も含むことができる。少なくとも１つまたは複数の緩衝成分を含む水は、安定化剤、防腐剤および可溶化剤と一緒であることが好ましく、または一緒でないことも好ましい。組成物がカプセル（例えば、ゼラチンカプセル）の形態である場合、上述のタイプの材料に加えて、ポリエチレングリコール、シクロデキストリンまたは脂肪油などの液体担体を含むことができる。
【０１７０】
ほとんどの医薬製剤では、非活性成分が製剤の重量または体積の大部分を構成する。医薬製剤では、様々な測定放出製剤、徐放製剤または持続放出製剤および添加剤のいずれかを使用することができ、その結果、用量は、本発明のペプチドの一定期間にわたる送達を達成するように処方されてもよいことも考えられる。
【０１７１】
経口、非経口、デポー、バッカルなどを含むがこれらに限定されない、任意の適切な投与経路または送達方法を、本明細書に記載されるペプチドと共に使用できることが理解されるべきである。
【０１７２】
特定の実施形態では、ペプチドは、非共有結合性担体と共に製剤化される。非共有結合性担体は、当業者に公知である。
【０１７３】
特定の実施形態では、ペプチドは、脂質などの担体と複合体を形成するか、リポソーム、生物分解性または非生物分解性微粒子、マイクロカプセル、ミクロスフェアおよびナノ粒子に製剤化される。リポソーム、微粒子、マイクロカプセル、ミクロスフェアおよびナノ粒子を生成し、その中に化合物を複合化またはカプセル化する方法は、当業者に公知である。
【０１７４】
特定の実施形態では、本明細書に記載される抗ウイルスペプチドは、ナノエマルジョンに製剤化される。ナノエマルジョンには、水中油（Ｏ／Ｗ）ナノエマルジョン、および油中水（Ｗ／Ｏ）ナノエマルジョンが含まれるが、これらに限定されない。ナノエマルジョンは、平均液滴直径が約２０〜約１０００ｎｍの範囲のエマルジョンとして定義することができる。通常、平均液滴サイズは約２０ｎｍまたは５０ｎｍ〜約５００ｎｍである。
【０１７５】
例示的な水中油型（Ｏ／Ｗ）および／または油中水型（Ｗ／Ｏ）ナノエマルジョンには、以下が含まれるが、これらに限定されない：
１）界面活性剤ミセル−主に疎水性ペプチドに適した小分子界面活性剤または洗浄剤（例えば、ＳＤＳ／ＰＢＳ／２−プロパノール）で構成されるミセル；
２）ポリマーミセル−主に疎水性ペプチドに適したポリマー、コポリマー、またはブロックコポリマー界面活性剤（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ６４／ＰＢＳ／２−プロパノール）で構成されるミセル；
３）ブレンドミセル：複数の界面活性剤成分が存在するミセル、または液相の１つ（一般に、アルコールまたは脂肪酸化合物）が、主に疎水性ペプチドに適したミセル（例えば、オクタン酸／ＰＢＳ／ＥｔＯＨ）の形成に関与するミセル；
４）複合ペプチドミセル〜ペプチドが補助界面活性剤として作用し、両親媒性ペプチドに適したミセルの不可欠な部分（例えば、両親媒性ペプチド／ＰＢＳ／ミネラルオイル）を形成するブレンドミセル；および
５）ピッケリング（固相）エマルジョン〜両親媒性ペプチドに適した固体ナノ粒子（例えば、ポリスチレンナノ粒子／ＰＢＳ／油相なし）の外側にペプチドが結合しているエマルジョン。
【０１７６】
別の実施形態では、本発明は、薬剤として使用するための本発明のペプチドまたは組成物に関する。
【０１７７】
本発明のペプチドおよび組成物の投与には、経口、局所、非経口、舌下、直腸、膣、眼、肺（吸入）および鼻腔内が含まれるが、これらに限定されない。非経口投与には、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内注射または注入技術が含まれる。好ましくは、組成物は、非経口、肺または経口で投与される。本発明の医薬組成物は、動物、好ましくはヒトへの組成物の投与時に、本発明のペプチドが生物学的に利用可能となるように製剤化することができる。組成物は、１つまたは複数の投与単位の形態をとることができ、例えば、錠剤は単一の投与単位であることができ、エアロゾル形態の本発明のペプチドを含む容器は複数の投与単位を保持することができる。
【０１７８】
非経口投与には、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外、脳内、脳室内、くも膜下腔内、膣内または経皮が含まれるが、これらに限定されない。好ましい投与様式は、医師の裁量に任されており、病状の部位に一部依存する。
【０１７９】
本発明の液体組成物はまた、溶液、懸濁液または他の同様の形態であるかどうかにかかわらず、以下の１つまたは複数を含むことができる：注射用水、食塩水、好ましくは生理食塩水、リンゲル液、等張性塩化ナトリウムなどの滅菌希釈剤、合成モノまたはジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、またはその他の溶媒などの固定油；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤；および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの等張化剤。非経口組成物は、アンプル、使い捨て注射器、あるいはガラス、プラスチックまたは他の材料で作成された複数回投与バイアルに封入することができる。生理食塩水が好ましい補助剤である。
【０１８０】
ペプチドまたは組成物は、治療有効量で投与される。用語「治療有効量」または「薬学的有効量」は、所望の結果をもたらすのに必要な１つまたは複数の化合物の量および／または用量、および／または投与方式を指し、例えば、ウイルスの増殖を低下またはブロックするのに十分な量、あるいはウイルス性疾患の症状の重症度を低下させるか、増悪を遅らせるのに十分な量（例えば、治療有効量）、リスクを軽減するか、発症を遅らせるか、および／またはウイルス感染により引き起こされる疾患の最終的な重症度を低下させるのに十分な量（例えば、予防有効量）を指す。
【０１８１】
化合物の正確な用量は、特定の製剤、適用方法、およびその特定の部位、宿主、治療する疾患によって異なる。年齢、体重、性別、食事、投与時間、排出率、宿主の状態、薬物の組み合わせ、反応感受性、疾患の重症度などの他の因子を考慮しなければならない。投与は、最大耐量内で連続的または定期的に実施できる。
【０１８２】
典型的には、この量は、組成物に対して少なくとも約０．０１重量％である本発明のペプチドである。経口投与を目的とする場合、この量は、組成物に対して約０．１重量％〜約８０重量％の範囲で変化してもよい。好ましい経口組成物は、組成物に対して約４重量％〜約５０重量％である本発明のペプチドを含むことができる。
【０１８３】
本発明の好ましい組成物は、非経口投与単位が本発明のペプチドを約０．０１重量％〜約２重量％以上含むように調製される。
【０１８４】
静脈内投与の場合、組成物は、典型的には約０．１ｍｇ／日〜約２５０ｍｇ／日、好ましくは、約０．１ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日を含むことができる。
【０１８５】
ペプチドは、治療的または予防的に投与されてもよい。適切な治療は、１日１〜４回行われ、好ましくは、１〜７日以上続けられる。本明細書で使用される用語「治療」、「治療する」、または「処置する」は、疾患または状態の症状または病状に望ましい効果を生じる行為、特に本明細書に記載されるペプチドを使用してもたらされる効果を生じる行為を指し、これには、治療中の疾患または状態の１つまたは複数の測定可能なマーカーにおける、最小の変化または改善でさえ含まれるが、これらに限定されない。治療はまた、用語が適用される疾患または状態、またはそのような疾患または状態の１つまたは複数の症状の発症の遅延、増悪の遅延または逆転、重症度の軽減、あるいは軽減または予防を指す。「治療」、「治療する」、または「処置する」は、必ずしも疾患または状態、またはその関連症状の完全な根絶または治癒を示すものではない。別の実施形態では、治療は、治療中の疾患の少なくとも１つの症状の改善を含む。改善は、部分的であってもよく、または完全であってもよい。この治療を受ける対象は、治療を必要とする対象である。臨床的改善の例示的なマーカーは、当業者には明らかであろう。
【０１８６】
本発明のペプチドまたは組成物は、任意の好都合な経路、例えば注入またはボーラス注射、上皮または粘膜皮膚の内層を介した吸収により投与することができる。
【０１８７】
肺投与はまた、例えば、吸入器またはネブライザーの使用、およびエアロゾル化剤を含む製剤、またはフルオロカーボンまたは合成肺界面活性剤での灌流を介して使用することができる。特定の実施形態では、本発明のペプチドまたは組成物は、トリグリセリドなどの従来の結合剤および担体と共に坐剤として製剤化することができる。
【０１８８】
上述のように、投与経路に依存して、本発明の抗ウイルスペプチドは、錠剤、カプセル、カプレット、懸濁液、散剤、凍結乾燥製剤、坐剤、点眼剤、皮膚パッチ、経口可溶性製剤、噴霧剤、エアゾール剤などを含むが、これらに限定されない、当技術分野で公知の任意の手段によって製剤化することができ、および当技術分野で公知のバッファー、結合剤、賦形剤、安定剤、抗酸化剤および他の薬剤と混合および製剤化することができる。
【０１８９】
投与はまた、別の活性化合物、例えば別の抗ウイルス化合物と一緒であってもよい。本発明の複数のペプチドを投与することもできる。
【０１９０】
本明細書に記載されるペプチドはまた、薬学的に許容される塩として提供することができる。「薬学的に許容される塩」には、無機塩基（例えば、ナトリウムまたはカリウムなどのアルカリ金属；カルシウムおよびマグネシウムまたはアルミニウムなどのアルカリ土類金属；およびアンモニア）、有機塩基（例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、およびトリエタノールアミン）、無機酸（例えば、塩酸、ホウ酸、硝酸、硫酸、およびリン酸）または有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸）との塩が含まれる。本明細書で引用される例は非限定的である。
【０１９１】
本発明はまた、本発明のペプチドまたは組成物と、使用説明書と、場合により補助剤とを含むキットに関する。
【０１９２】
本発明はまた、本明細書に記載される単離抗ウイルスペプチドの誘導体を作成し、ペプチドをウイルスに曝露し、抗ウイルス活性をスクリーニングすることを含む、抗ウイルス活性を有するペプチドを検出するスクリーニング方法に関する。
【０１９３】
本発明はまた、本発明の抗ウイルスペプチドをコードする、ＤＮＡまたはＲＮＡ分子を含む単離核酸分子に関する。別の実施形態では、単離された核酸は、天然には存在しない。
【０１９４】
本発明はまた、本発明の抗ウイルスペプチドをコードする核酸を含むベクターに関する。ベクターは、特に真核細胞での発現のための発現ベクターであってもよい。そのようなベクターは、例えば、ウイルス、プラスミド、コスミド、または人工染色体（例えば、酵母人工染色体）ベクターであってもよい。
【０１９５】
本明細書に記載されるベクターは、当技術分野内の様々な公知の方法のいずれかによって、細胞または組織に導入することができる。そのような方法は、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、第４版（２０１２年６月１５日）に記載されている。
【０１９６】
本発明はまた、本発明の抗ウイルスペプチドを含む宿主細胞に関する。
【０１９７】
宿主細胞は、任意の原核細胞または真核細胞であってもよいが、真核細胞が好ましい。例示的な真核細胞には、哺乳動物細胞（チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）またはＣＯＳ細胞など）が含まれる。他の適切な宿主細胞は、当技術分野で公知である。
【０１９８】
したがって、本発明では、細胞をインビトロまたはエクスビボでトランスフェクトすることができ、発現ペプチドは、当技術分野で公知の方法によって細胞から単離することができる。細胞はまた、対象に投与することができ、あるいは、細胞はインビボで直接改変することができる。
【０１９９】
本発明はまた、本発明の抗ウイルスペプチドと、例えば核酸、ペプチド、タンパク質、造影剤、抗体、毒素および小分子から選択される第２の薬剤とを含む組み合わせに関する。
【０２００】
本発明はまた、本発明のペプチドを含む組換えライブラリー、例えばファージライブラリーに関する。
【０２０１】
前述の開示は、本発明を作成および使用する方法ならびにその最良の形態を含む、本発明の範囲内に包含される主題の一般的な説明を提供するが、以下の例は、当業者が本発明を実施することをさらに可能にし、その完全な記載を提供するために提供される。しかし、当業者は、これらの例の詳細が、本発明を限定するものとして読まれるべきではなく、その範囲が、特許請求の範囲および本開示に添付されるその等価物から理解されるべきであることを理解するであろう。本開示を考慮して、本発明の様々なさらなる態様および実施形態が当業者には明らかであろう。これらの例の詳細は、限定として扱われるべきではない。
【０２０２】
「および／または」は、本明細書で使用される場合、他のものを伴うまたは伴わない、２つの指定された特徴またはコンポーネントの各々の具体的な開示として解釈されるべきである。例えば、「Ａおよび／またはＢ」は、それぞれが本明細書中で個別に記載されているかのように、（ｉ）Ａ、（ｉｉ）Ｂならびに（ｉｉｉ）ＡおよびＢの各々の具体的な開示として解釈されるべきである。
【０２０３】
文脈上他の意味に解すべき場合を除き、上述の特徴の説明および定義は、本発明の特定の態様または実施形態に限定されず、記載されるすべての態様および実施形態に等しく適用される。
【０２０４】
例
以下の非限定的な例は、本発明をさらに説明するために提供される。
【０２０５】
例１。材料および方法。
細胞培養およびウイルス：ＨＳＶ、ＲＳＶ、ＣＭＶ、およびＨＩＶを、それぞれＶｅｒｏ、Ｈｅｐ−２、ＨＦＦＦ−２細胞、およびＰＢＭＣで複数回継代することにより増殖させ、高力価の作業用ストックを得た。
【０２０６】
ペプチド合成：ペプチドは、固体法を使用して、Ｍｉｍｏｔｏｐｅｓ社（オーストラリア）またはＧｅｎｓｃｒｉｐｔ社（アメリカ）によって合成した。この研究で使用した例示的なペプチドの配列を表１〜８に列挙する。すべてのペプチドをＨＰＬＣ（９０超の純度）で精製し、質量分析計で配列を確認した。配列「ＲＲＫＫ」（または「ｒｒｋｋ」）は、溶解性を増加させるために、すべてのペプチドのＮ末端に追加されてもよい。すべてのペプチドは、配列に応じて、右旋性アミノ酸または左旋性アミノ酸を使用して合成される。すべてのペプチドは、ペプチドに存在するシステイン残基を使用してジスルフィド結合で環化された。
【０２０７】
ＨＳＶ、ＲＳＶ、およびＣＭＶの細胞変性効果（ＣＰＥ）アッセイ：適切な細胞を９６ウェルプレートに播種し、培養密度が約７０％になるまで一晩インキュベートした。ウイルスを様々な濃度のペプチドまたは媒体で４℃で９０分間処理し、残りのアッセイのために細胞のコンフルエントな単層に添加した。インキュベーション期間の終わりに、ＭＴＴ試薬を添加し、５％ＣＯ２で３７℃で２〜４時間プレートをインキュベートすることにより、細胞の生存率を決定した。インキュベーション後、１００％イソプロパノールを添加してホルマザン結晶を可溶化し、６２０ｎｍのバックグラウンドを差し引いて５４０ｎｍの吸光度を記録した。
【０２０８】
陽性対照または試験化合物によって達成された細胞保護率を計算するために、パウエル式（以下に示す）を使用した。
細胞保護率＝（［ＯＤｔ］ウイルス−［ＯＤｃ］ウイルス／［ＯＤｃ］ニセ−［ＯＤｃ］ウイルス）ｘ  １００
式中：
［ＯＤｔ］ウイルス＝ウイルス感染細胞に対する所定濃度の試験物または陽性対照の効果を調べるウェルで測定された光学密度。
［ＯＤｃ］ウイルス＝ウイルス感染細胞に対する陰性対照の効果を調べるウェルで測定された光学密度。
［ＯＤｃ］ニセ＝偽感染細胞に対する陰性対照の効果を調べるウェルで測定された光学密度
【０２０９】
これらのパーセンテージは、ＩＤＢＳ  ＸＬＦｉｔ  Ｅｘｃｅｌアドインバージョン５．４．０．８を使用して、非線形回帰分析によって計算されたＥＣ５０を決定するために使用された。
【表９】
2020528072.tif 000011
【０２１０】
新鮮なヒトＰＢＭＣでの抗ＨＩＶ有効性評価：ＰＢＭＣに様々な濃度のペプチド処理ウイルスを感染させ、３７℃、５％ＣＯ２で７日間インキュベートした。このインキュベーション後、細胞を遠心分離し、逆転写酵素活性（ＲＴ）アッセイのために上清を回収した。化合物の細胞毒性効果は、上清を除去した後、細胞にＭＴＳを添加して研究した。ＩＣ５０およびＴＣ５０のデータ分析は、社内のコンピュータプログラムを使用してＣＲＯによって行った。
【０２１１】
逆転写酵素活性アッセイ：逆転写酵素（ＲＴ）アッセイをマイクロタイタープレートで実施した。簡単には、トリチウム化チミジン三リン酸（３Ｈ−ＴＴＰ、８０  Ｃｉ／ｍｍｏｌ、ＮＥＮ；（ＧＥヘルスケア社）を、１５０μＬのポリｒＡ（２０ｍｇ／ｍＬ）と０．５ｍＬのオリゴｄＴ（２０単位／ｍＬ）および５．３５ｍＬの滅菌ｄＨ２Ｏとを組み合わせることによりストック溶液として調製した。新しいＲＴ反応バッファーを、１２５μＬの１．０  Ｍ  ＥＧＴＡ、１２５μＬのｄＨ２Ｏ、１２５μＬの２０％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ１００、５０μＬの１．０  Ｍ  Ｔｒｉｓ（ｐＨ  ７．４）、５０μＬの１．０  Ｍ  ＤＴＴ、および４０μＬの１．０  Ｍ  ＭｇＣｌ２で調製した。最終的な反応混合物は、１部の３Ｈ−ＴＴＰ、４部のｄＨ２Ｏ、２．５部のｐｏｌｙ  ｒＡ：ｏｌｉｇｏ  ｄＴストック、および２．５部の反応バッファーを混合することにより得た。１０μＬのこの反応混合物をマイクロタイタープレートに添加し、１５μＬのウイルス含有上清を添加して混合した。次いで、プレートを３７℃で６０分間インキュベートした。インキュベーション後、反応容積をＤＥ８１フィルターマット（Ｗａｌｌａｃ社）にスポットし、５％リン酸ナトリウムバッファーまたは２Ｘ  ＳＳＣ（ライフテクノロジーズ社）で十分に洗浄した後、蒸留水で洗浄し、次いで、７０％エタノールで洗浄し、風乾した。標準的な液体シンチレーション技術を使用して、取り込まれた放射能（１分あたりのカウント、ＣＰＭ）を定量した。
【０２１２】
細胞毒性アッセイ１：ＲＴアッセイの最後に、２０μＬの可溶性テトラゾリウムベースのＭＴＳ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  ９６  Ｒｅａｇｅｎｔ、プロメガ社）試薬をプレートの各ウェルに添加して、細胞の生存率を決定し、化合物の毒性を定量した。次いで、マイクロタイタープレートを、加湿した５％ＣＯ２雰囲気中、３７℃で４〜６時間インキュベートした。インキュベーション間隔は、最適な色素減少のために実験的に決定された時間に基づいて選択された。ＭＴＳの細胞還元によって生成された可溶性ホルマザンの量を、マイクロプレートリーダーを使用して４９０／６５０ｎｍで分光光度計で測定した。
【０２１３】
細胞毒性アッセイ２：ＭＤＣＫ細胞またはＡ５４９細胞（約５０００細胞／ウェル）を９６ウェルプレートで一晩増殖させる。培地を連続希釈ペプチドに置き換え、２４／４８時間再びインキュベートする。培地を除去し、２０μｌのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−３，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド］（プロメガ社、ウィスコンシン州、米国）を添加し、３７°Ｃで２時間インキュベートする。マイクロプレートリーダー（ｉＭＡＲＫ、バイオ・ラッド社、米国）で４９０ｎｍの光学密度を測定する。
【０２１４】
アラニンスキャニング：精製ウイルスを、ブラッドフォードアッセイ（サーモサイエンティフィック社、米国）によって定量する。１５μｇ／ウェルの精製ウイルスを、９６ウェルＥＬＩＳＡマイクロプレート（エッペンドルフ社、米国）に４℃で一晩コーティングする。コーティングされたウェルを、１ｘＰＢＳＴ（Ｔｗｅｅｎ−２０を含むリン酸緩衝生理食塩水）で２回洗浄し、１ｘＰＢＳ中の５ｍｇ／ｍｌ  ＢＳＡで室温で１時間ブロックする。コーティングされたウェルを、１％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）／１ｘＰＢＳＴ中の１５０μＭビオチン結合ペプチドと共に室温で２時間インキュベートする。１ｘＰＢＳＴを使用して３回洗浄した後、ビオチン結合ペプチドを、一次抗ビオチンウサギ抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ社  １：２５０、ＭＡ）およびＨＲＰ結合抗ウサギ二次抗体（Ａｂｃａｍ社  １：５０００、ＭＡ）を使用して検出する。吸光度を、Ｂｉｏｒａｄ  ｉＭａｒｋマイクロプレートリーダーにおいて、４１５ｎｍで読み取る。
【０２１５】
血球凝集アッセイ：ニワトリ赤血球（ｃＲＢＣ）の血球凝集を、Ｊｏｎｅｓら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、８０（２４）：１１９６０−１１９６７（２００６年）で説明されているように、Ｖ型底の９６ウェルマイクロタイタープレートで行う。
【０２１６】
ブラッドフォードアッセイ：タンパク質の定量を、クーマシー（ブラッドフォード）タンパク質アッセイキット（サーモサイエンティフィック社、米国）を用いて、製造元の指示に従って行う。
【０２１７】
ＩＣ５０の計算：すべての実験を３回繰り返し、データは少なくとも３つの独立した決定の結果を表す。ＩＣ５０値を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ（商標）ソフトウェアまたはＩＤＢＳ  ＸＬＦｉｔ  Ｅｘｃｅｌｌアドインバージョン５．４．０．８で分析された用量反応曲線に基づいて計算する。
【０２１８】
溶血アッセイ：新たに得られたヒト赤血球を、ＰＢＳ（ｐＨ７．４）バッファーで５００ｘｇを用いて、１０分間の遠心分離により３回洗浄する。ペプチドをＶ型底のマイクロタイタープレートで、洗浄ＲＢＣと１時間インキュベートする。１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を陽性対照として使用する。インキュベーション後、プレートを５００ｘｇで５分間遠心分離し、上清を新しい透明底の９６ウェルプレートに移し、ｉＭａｒｋマイクロプレートリーダー（バイオ・ラッド社、米国）で５４５ｎｍの吸光度を測定する。
【０２１９】
例２。血球凝集活性に対する抗ウイルスペプチドの効果：この例では、ウイルスのＨＡタンパク質に結合することによりペプチドがウイルス複製を阻害するかどうかを支持するために、ウイルスの血球凝集を阻害する能力について抗ウイルスペプチドを試験する。簡単に言えば、１０μＭのペプチドを４ＨＡＵ／５０μｌのウイルスと混合し、ニワトリ赤血球でＨＡ活性を測定する。ペプチド処理では、血球凝集活性の阻害は観察されなかった。
【０２２０】
例３。ヒト肝細胞に対するＦＰＴの細胞毒性効果：細胞培養条件下で、実証された分化肝細胞表現型を有する細胞であるヒト肝細胞ＨｅｐａＲＧ（商標）に対する抗ウイルスペプチドの細胞毒性効果を、ＡｖａｎｔｉＣｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ社、英国により分析した。簡単に言えば、試験物質の細胞毒性を、２４時間の試験中の細胞質内容物、特に細胞質デヒドロゲナーゼの放出として測定する。培地への細胞内容物の放出は、高感度の蛍光ベースのアッセイによって測定される。陰性対照（試験物質の溶媒）および既知の細胞毒性剤の形態の陽性対照の使用により、アッセイ性能をモニタリングした。試験期間の最後に、アッセイの読み取り値を標準的な方法によって作成し、結果は、完全に溶解された洗浄剤処理対照（１００％溶解）によって生成した測定値と、試験測定値とを比較することにより、細胞溶解率（％溶解）として計算される。
【０２２１】
例４。ＭＤＣＫ細胞またはＡ５４９細胞に対する抗ウイルスペプチドの細胞毒性効果：抗ウイルスペプチドの細胞毒性効果を、図１２および図１３に示し、例１で説明したように評価する。簡単に言えば、ＭＤＣＫ細胞／Ａ５４９細胞を、０μＭペプチド（ニセ）または濃度を増加させた（すなわち、０．１μＭ、０．３μＭ、１μＭ、３μＭ、１０μＭ、３０μＭおよび１００μＭ）ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９およびＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１で処理し、製造業者によって説明されているように、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ  Ｏｎｅ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ細胞増殖アッセイキット（プロメガ社、米国）を用いた細胞毒性アッセイにより、細胞死を感染の４８時間後に決定する。結果は、模擬処理された細胞に対して正規化される。結果に示すように、ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９およびＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１は、ＭＤＣＫ細胞／Ａ５４９細胞に対して、３０μＭ超のＣＥ５０（細胞毒性効果５０）値を有する有意な毒性を示さなかった。
【０２２２】
例５。ＦＰＴの溶血活性：抗ウイルスペプチドの溶血効果を、図１４に示し、例１で説明したように評価した。簡単に言えば、様々な濃度のペプチドをヒト赤血球とインキュベートし、インキュベーションの１時間後に、Ｂｉｏｒａｄ  ｉＭａｒｋマイクロプレートリーダーを使用して、５４５ｎｍでの上清中の放出ヘモグロビンの吸光度により、溶血を決定する。
【０２２３】
例６。表１０のペプチドは、ウイルスを含む様々なマトリックス層含有ウイルスに対する本明細書に記載される例示的な抗ウイルスペプチドのＩＣ５０またはＥＣ５０値を示す。
【表１０】
2020528072.tif 000012
【０２２４】
参考文献
１．Ｒｏｂｅｒｔ  Ａ  Ｌａｍｂ  ＧＤＰ，ｅｄ  Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ．（パラミクソウイルス）５  ｅｄ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；２００７．Ｄａｖｉｄ  Ｍ  Ｋｎｉｐｅ  ＰＭＨ，ｅｄ．Ｆｉｅｌｄｓ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ；Ｎｏ．１．
２．Ｎａｉｒ  Ｈ，Ｎｏｋｅｓ  ＤＪ，Ｇｅｓｓｎｅｒ  ＢＤ，ｅｔ  ａｌ．Ｇｌｏｂａｌ  ｂｕｒｄｅｎ  ｏｆ  ａｃｕｔｅ  ｌｏｗｅｒ  ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｄｕｅ  ｔｏ  ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｓｙｎｃｙｔｉａｌ  ｖｉｒｕｓ  ｉｎ  ｙｏｕｎｇ  ｃｈｉｌｄｒｅｎ：ａ  ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  ｒｅｖｉｅｗ  ａｎｄ  ｍｅｔａ−ａｎａｌｙｓｉｓ．（若年児童における呼吸器合胞体ウイルスによる急性下気道感染症の世界的負担：体系的レビューとメタ分析）Ｌａｎｃｅｔ．Ｍａｙ  ０１  ２０１０；３７５（９７２５）：１５４５−１５５５．
３．Ｅｒｉｃ  Ａ．Ｆ．Ｓｉｍｏｅｓ  ＪＰＤ，Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｂｏｅｃｋｈ，Ｌｏｕｉｓ  Ｂｏｎｔ，Ｊａｍｅｓ  Ｅ．Ｃｒｏｗｅ  Ｊｒ，Ｐａｕｌ  Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，，Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ  Ｇ．Ｈａｙｄｅｎ  ＲＬＨ，Ｒｏｓａｌｉｎｄ  Ｌ．Ｓｍｙｔｈ，Ｋｅｉｔｈ  Ｓｐｅｎｃｅｒ，Ｓｔｅｆｆｅｎ  Ｔｈｉｒｓｔｒｕｐ，Ｅｄｗａｒｄ  Ｅ．Ｗａｌｓｈ，，Ｗｈｉｔｌｅｙ  ａＲＪ．Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ  ａｎｄ  Ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ  ｉｎ  Ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｓｙｎｃｙｔｉａｌ  Ｖｉｒｕｓ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．（呼吸器合胞体ウイルス治療薬の開発における課題と機会）Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ．２０１５；２１１（Ｓ１）：Ｓ１−２０．
４．Ｅｄｗａｒｄ  Ｓ  Ｍｏｃａｒｓｋｉ  Ｊ，Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｈｅｎｋ，Ｒｏｂｅｒｔ  Ｆ  Ｐａｓｓ，ｅｄ  Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓｅｓ．（サイトメガロウイルス）Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；２００７．Ｄａｖｉｄ  Ｍ  Ｋｎｉｐｅ  ＰＭＨ，ｅｄ  Ｆｉｅｌｄｓ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ；  Ｎｏ．２．
５．Ｐｈｉｌｉｐ  Ｅ  Ｐｅｌｌｅｔ  ＢＲ，ｅｄ  Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｉｄａｅ．５  ｅｄ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；２００７  Ｄａｖｉｄ  Ｍ  Ｋｎｉｐｅ  ＰＭＨ，ｅｄ．Ｆｉｅｌｄｓ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ；Ｎｏ．２．
６．Ｐｌｏｓａ  ＥＪ，Ｅｓｂｅｎｓｈａｄｅ  ＪＣ，Ｆｕｌｌｅｒ  ＭＰ，Ｗｅｉｔｋａｍｐ  ＪＨ．Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．（サイトメガロウイルス感染）Ｐｅｄｉａｔｒ  Ｒｅｖ．Ａｐｒ  ２０１２；３３（４）：１５６−１６３；ｑｕｉｚ  １６３．
７．Ｒａｗｌｉｎｓｏｎ  ＷＤ，Ｂｏｐｐａｎａ  ＳＢ，Ｆｏｗｌｅｒ  ＫＢ，ｅｔ  ａｌ．Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐｒｅｇｎａｎｃｙ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｎｅｏｎａｔｅ：ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ．（妊娠中と新生児における先天性サイトメガロウイルス感染：予防、診断及び診断のための合意推奨事項）Ｌａｎｃｅｔ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．Ｍａｒ  １０  ２０１７．
８．Ｋｈａｌｉｌ  Ａ，Ｊｏｎｅｓ  Ｃ，Ｖｉｌｌｅ  Ｙ．Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｕｐｄａｔｅ．（先天性サイトメガロウイルス感染：管理アップデート）Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．Ｊｕｎ  ２０１７；３０（３）：２７４−２８０．
９．Ｔａｎ  ＢＨ．Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．（サイトメガロウイルス治療）Ｃｕｒｒ  Ｔｒｅａｔ  Ｏｐｔｉｏｎｓ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．２０１４；６（３）：２５６−２７０．
１０．Ｈａｒｔｅｒ  Ｇ，Ｍｉｃｈｅｌ  Ｄ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ａｎ  ｕｐｄａｔｅ．（サイトメガロウイルス感染の抗ウイルス治療）Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．Ａｐｒ  ２０１２；１３（５）：６２３−６２７．
１１．Ｂｅｒｎａｒｄ  Ｒｏｉｚｍａｎ  ＤＭＫ，Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｊ  Ｗｈｉｔｌｅｙ，ｅｄ  Ｈｅｒｐｅｓ  Ｓｉｍｐｌｅｘ  Ｖｉｒｕｓｅｓ．（単純ヘルペスウイルス）５  ｅｄ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；２００７．Ｄａｖｉｄ  Ｍ  Ｋｎｉｐｅ  ＰＭＨ，ｅｄ．Ｆｉｅｌｄｓ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ；Ｎｏ．２．
１２．Ｈａｒｒｉｓ  Ｍ．Ｇｌｏｂａｌｌｙ，ａｎ  ｅｓｔｉｍａｔｅｄ  ｔｗｏ−ｔｈｉｒｄｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｕｎｄｅｒ  ５０  ａｒｅ  ｉｎｆｅｃｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｈｅｒｐｅｓ  ｓｉｍｐｌｅｘ  ｖｉｒｕｓ  ｔｙｐｅ  １．（５０歳以下の人口の推定３分の２が単純ヘルペスウイルス１型に感染）Ｇｅｎｅｖａ：Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ；２０１５．
１３．Ｌｏｏｋｅｒ  ＫＪ，Ｍａｇａｒｅｔ  ＡＳ，Ｍａｙ  ＭＴ，ｅｔ  ａｌ．Ｇｌｏｂａｌ  ａｎｄ  Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ｅｓｔｉｍａｔｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｅｖａｌｅｎｔ  ａｎｄ  Ｉｎｃｉｄｅｎｔ  Ｈｅｒｐｅｓ  Ｓｉｍｐｌｅｘ  Ｖｉｒｕｓ  Ｔｙｐｅ  １  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ２０１２．（２０１２年における単純ヘルペスウイルス１型感染の流行と発生率の世界的及び地域的評価）ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ．２０１５；１０（１０）：ｅ０１４０７６５．
１４．Ｋａｔｈａｒｉｎｅ  Ｊ  Ｌｏｏｋｅｒ  ＧＰＧ，Ｇｅｏｒｇｅ  Ｐ  Ｓｃｈｍｉｄ．Ａｎ  ｅｓｔｉｍａｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｇｌｏｂａｌ  ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  ｈｅｒｐｅｓ  ｓｉｍｐｌｅｘ  ｖｉｒｕｓ  ｔｙｐｅ  ２  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．（単純ヘルペスウイルス２型感染の世界的流行と発生率の評価）Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ２００８；８６（１０）：７３７−８１６．
１５．Ｌｅ  Ｃｌｅａｃｈ  Ｌ，Ｔｒｉｎｑｕａｒｔ  Ｌ，Ｄｏ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．Ｏｒａｌ  ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｅｎｉｔａｌ  ｈｅｒｐｅｓ  ｏｕｔｂｒｅａｋｓ  ｉｎ  ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｅｔｅｎｔ  ａｎｄ  ｎｏｎｐｒｅｇｎａｎｔ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．（免疫適格及び非妊娠患者における性器ヘルペス発生の予防のための経口抗ウイルス療法）Ｃｏｃｈｒａｎｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  Ｓｙｓｔ  Ｒｅｖ．Ａｕｇ  ０３  ２０１４（８）：ＣＤ００９０３６．
１６．Ｖｅｒｅ  Ｈｏｄｇｅ  ＲＡ  ＦＨ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｈｅｒｐｅｓ  ｓｉｍｐｌｅｘ  ｖｉｒｕｓ．（単純ヘルペスウイルスの抗ウイルス剤）Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２０１３；６７：１−３８．
１７．Ｇｏｆｆ  ＳＰ，ｅｄ  Ｒｅｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ：Ｔｈｅ  Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ．（レトロウイルス：レトロウイルスとその複製）５  ｅｄ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；２００７．Ｄａｖｉｄ  Ｍ  Ｋｎｉｐｅ  ＰＭＨ，ｅｄ．Ｆｉｅｌｄｓ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ；Ｎｏ．２．
１８．Ｄａｎｉｅｌ  Ｒ  Ｋｕｒｉｔｚｋｅｓ  ＢＤＷ，ｅｄ  ＨＩＶ−１  Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．（病因、臨床的症状と治療）５  ｅｄ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；２００７．Ｄａｖｉｄ  Ｍ  Ｋｎｉｐｅ  ＰＭＨ，ｅｄ．Ｆｉｅｌｄｓ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ；Ｎｏ．２．
１９．Ｐｒｏｋｏｆｊｅｖａ  ＭＭ，Ｋｏｃｈｅｔｋｏｖ  ＳＮ，Ｐｒａｓｓｏｌｏｖ  ＶＳ．Ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ＨＩＶ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ．（ＨＩＶ感染の療法：現在のアプローチと展望）Ａｃｔａ  Ｎａｔｕｒａｅ．Ｏｃｔ−Ｄｅｃ  ２０１６；８（４）：２３−３２．
２０．Ｊｏｓｅｐｈ  Ｌ．Ｋｕｋｕｒａ  ＭＰＴ，ｅｄ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ  ａｎｄ  Ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ：Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ；２０１０．Ｅｎｄｅ  ＤＪａ，ｅｄ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ：Ｒ＆Ｄ  ｔｏ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ（医薬産業における化学工学：製造へのＲ＆Ｄ）；Ｎｏ．１．
２１．Ｆｒｙ  ＤＣ．Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．（創薬のための標的タンパク質−タンパク質相互作用）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．２０１５；１２７８：９３−１０６．
２２．Ｓｃｏｔｔ  ＤＥ，Ｂａｙｌｙ  ＡＲ，  Ａｂｅｌｌ  Ｃ，Ｓｋｉｄｍｏｒｅ  Ｊ．Ｓｍａｌｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，ｂｉｇ  ｔａｒｇｅｔｓ：ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｆａｃｅｓ  ｔｈｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｃｈａｌｌｅｎｇｅ．（小さな分子、大きな標的：創薬はタンパク質−タンパク質相互作用チャレンジに直面する）Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ａｕｇ  ２０１６；１５（８）：５３３−５５０．
２３．Ｓａｍａｒａｎａｙａｋｅ  Ｈ，Ｗｉｒｔｈ  Ｔ，Ｓｃｈｅｎｋｗｅｉｎ  Ｄ，Ｒａｔｙ  ＪＫ，Ｙｌａ−Ｈｅｒｔｔｕａｌａ  Ｓ．Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ  ｉｎ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｂａｓｅｄ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ．（モノクローナル抗体ベースの療法における課題）Ａｎｎ  Ｍｅｄ．２００９；４１（５）：３２２−３３１．
２４．Ｆｏｓｇｅｒａｕ  Ｋ，Ｈｏｆｆｍａｎｎ  Ｔ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：ｃｕｒｒｅｎｔ  ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  Ｔｏｄａｙ．（ペプチド治療薬：現状と将来の方向性）Ｊａｎ  ２０１５；２０（１）：１２２−１２８．
２５．Ｏｔｖｏｓ  Ｌ，Ｊｒ．，Ｗａｄｅ  ＪＤ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ  ｉｎ  ｐｅｐｔｉｄｅ−ｂａｓｅｄ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．（ペプチドベースの創薬における現在の課題）Ｆｒｏｎｔ  Ｃｈｅｍ．２０１４；２：６２．
２６．Ｏｙｓｔｏｎ  ＰＣ，Ｆｏｘ  ＭＡ，Ｒｉｃｈａｒｄｓ  ＳＪ，Ｃｌａｒｋ  ＧＣ．Ｎｏｖｅｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．（感染の治療のための新しいペプチド治療薬）Ｊ  Ｍｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ａｕｇ  ２００９；５８（Ｐｔ  ８）：９７７−９８７．
２７．Ｓｅｏ  ＭＤ，Ｗｏｎ  ＨＳ，Ｋｉｍ  ＪＨ，Ｍｉｓｈｉｇ−Ｏｃｈｉｒ  Ｔ，Ｌｅｅ  ＢＪ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ：ａ  ｒｅｖｉｅｗ．（治療的用途のための抗菌ペプチド：総説）Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．Ｏｃｔ  １８  ２０１２；１７（１０）：１２２７６−１２２８６．
２８．Ｒａｊｉｋ  Ｍ，Ｊａｈａｎｓｈｉｒｉ  Ｆ，Ｏｍａｒ  ＡＲ，Ｉｄｅｒｉｓ  Ａ，Ｈａｓｓａｎ  ＳＳ，Ｙｕｓｏｆｆ  Ｋ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｔｉ−ｖｉｒａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｇａｉｎｓｔ  ａｖｉａｎ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖｉｒｕｓ  Ｈ９Ｎ２．（鳥インフルエンザウイルスに対する新しい抗ウイルスペプチドの同定と特性評価）Ｖｉｒｏｌ  Ｊ．Ｊｕｎ  ０５  ２００９；６：７４．
２９．Ｒａｊｉｋ  Ｍ，Ｙｕｓｏｆｆ  Ｋ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｇａｉｎｓｔ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖｉｒｕｓ．（インフルエンザウイルスに対するペプチド阻害剤）Ａｎｔｉｖｉｒ  Ｃｈｅｍ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｍａｒ  ０７  ２０１１；２１（４）：１５１−１５４．
３０．Ｖｌｉｅｇｈｅ  Ｐ，Ｌｉｓｏｗｓｋｉ  Ｖ，Ｍａｒｔｉｎｅｚ  Ｊ，Ｋｈｒｅｓｔｃｈａｔｉｓｋｙ  Ｍ．Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ：ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｍａｒｋｅｔ．（合成治療用ペプチド：科学と市場）Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  Ｔｏｄａｙ．Ｊａｎ  ２０１０；１５（１−２）：４０−５６．
３１．Ｒａｊｉｋ  Ｍ，Ｉｎｖｅｎｔｏｒ；Ｖｉｒａｍａｔｉｘ  Ｓｄｎ  Ｂｈｄ，ａｓｓｉｇｎｅｅ．Ｂｒｏａｄ−ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ２０１５．（広域スペクトル抗インフルエンザ治療用ペプチド２０１５）
３２．Ｒａｊｉｋ  Ｍ，Ｉｎｖｅｎｔｏｒ；Ｖｉｒａｍａｔｉｘ  Ｓｄｎ  Ｂｈｄ，ａｓｓｉｇｎｅｅ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  ｕｓｅｓ  ｔｈｅｒｅｆｏｒ  ａｓ  ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ａｇｅｎｔｓ２０１６．（抗ウイルス剤としてのペプチドとその使用２０１６）
【０２２５】
本明細書で引用される各文書および刊行物は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【図１】
2020528072.tif 000013
【図２】
2020528072.tif 000014
【図３】
2020528072.tif 000015
【図４】
2020528072.tif 000016
【図５】
2020528072.tif 000017
【図６】
2020528072.tif 000018
【図７】
2020528072.tif 000019
【図８】
2020528072.tif 000020
【図９】
2020528072.tif 000021
【図１０】
2020528072.tif 000022
【図１１】
2020528072.tif 000023
【図１２】
2020528072.tif 000024
【図１３】
2020528072.tif 000025
【図１４】
2020528072.tif 000026
【手続補正書】
【提出日】平成29年11月2日(2017.11.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
宿主動物において、ウイルスがインフルエンザウイルスまたはオルトミクソウイルスではない、マトリックスタンパク質層ウイルスまたはエンベロープウイルスにより、少なくとも部分的に引き起こされる感染症の治療のための薬剤の製造における、配列ｔｗｆｔｆｉｎまたは式Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７のｔｗｆｔｆｉｎの類似体もしくは誘導体を含む治療有効量のペプチドの使用であって、式中、Ａ１はｔまたはｗであり、Ａ２はｋまたはｗであり、Ａ３はｓまたはｆであり、Ａ４はｒまたはｔであり、Ａ５はｆ、ｈ、ｉ、ｎ、またはｗであり、Ａ６はｉまたはｄであり、Ａ７はｎまたはａであり、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つは、任意に別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸で置換されていてもよく、ペプチドは、約５０残基以下の長さを有する、治療有効量のペプチドの使用、あるいは、上述のいずれかの医薬組成物の使用。
【請求項２】
前記ウイルスが、レトロウイルス、レンチウイルス、パラミクソウイルス、フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ダニ媒介脳炎、黄熱病、デング熱ウイルス、フィロウイルス、トガウイルス、ブニヤウイルス、ヘルペスウイルス、ヘパドナウイルス、またはコロナウイルスである、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記ウイルスが、ＨＩＶ、エボラ、マールブルグウイルス、風疹ウイルス、ハンタウイルス、アレナウイルス、サイトメガロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、またはトロウイルスである、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
前記感染症が、エイズ、ヘルペス、またはＳＡＲＳである、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つが、任意に別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸で置換されていてもよい、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つが、対応するＬ−アミノ酸で置換されている、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
前記ペプチドが、配列ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、またはＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘを含み、Ｘ／ｘがグリシン、または任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸であり、各配列において、１つの追加のアミノ酸が挿入、欠失、あるいは様々なＤ−アミノ酸、またはグリシン、または任意のＬ−アミノ酸に変更された、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記ペプチドが、配列ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、またはＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘを含み、Ｘ／ｘがグリシン、または任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸である、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記ペプチドが、配列ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、またはｔｗｆｔｆｉＸ／ｘを含む、請求項８記載の使用。
【請求項１０】
前記ペプチドが、配列Ｘ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘを含む、請求項８記載の使用。
【請求項１１】
前記ペプチドが、配列ＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７、ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９またはＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１２】
前記ペプチドが、Ｎ末端および／またはＣ末端システイン残基をさらに含む、請求項１から１１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１３】
前記ペプチドが、１つまたは複数の溶解性タグをさらに含み、タグのそれぞれが独立して選択される、請求項１から１２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１４】
前記ペプチドが、環状形態である、請求項１から１３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１５】
前記ペプチドが、ウイルスに対して１００μΜ未満のＩＣ５０を有する、請求項１から１４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１６】
前記薬剤が、経鼻的、肺、経口的または非経口的投与に適している、請求項１から１５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１７】
前記薬剤が、予防的治療のためのものである、請求項１から１６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１８】
宿主動物において、ウイルスがインフルエンザウイルスまたはオルトミクソウイルスではない、マトリックスタンパク質層ウイルスまたはエンベロープウイルスにより、少なくとも部分的に引き起こされる感染症を治療するための、配列ｔｗｆｔｆｉｎまたは式Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７のｔｗｆｔｆｉｎの類似体もしくは誘導体を含み、Ａ１はｔまたはｗであり、Ａ２はｋまたはｗであり、Ａ３はｓまたはｆであり、Ａ４はｒまたはｔであり、Ａ５はｆ、ｈ、ｉ、ｎ、またはｗであり、Ａ６はｉまたはｄであり、Ａ７はｎまたはａであり、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つは、任意に別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸、またはグリシンで置換されていてもよい、ペプチドを含む治療有効量の医薬組成物、ならびに前記感染症を治療するために医薬組成物を使用するための説明書を含む、キット。
【手続補正書】
【提出日】令和2年5月11日(2020.5.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列ｔｗｆｔｆｉｎまたは式Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７のｔｗｆｔｆｉｎの類似体もしくは誘導体を含む治療有効量のペプチドを含む感染症の治療のための医薬組成物であって、式中、Ａ１はｔまたはｗであり、Ａ２はｋまたはｗであり、Ａ３はｓまたはｆであり、Ａ４はｒまたはｔであり、Ａ５はｆ、ｈ、ｉ、ｎ、またはｗであり、Ａ６はｉまたはｄであり、Ａ７はｎまたはａであり、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つは、任意に別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸で置換されていてもよく、ペプチドは、約５０残基以下の長さを有し、または前記のいずれかの医薬組成物は1つまたは複数の担体、賦形剤、もしくは希釈剤、またはそれらの組み合わせをさらに含み、前記感染症は宿主動物においてマトリックスタンパク質層ウイルスまたはエンベロープウイルスにより、少なくとも部分的に引き起こされ、ウイルスがインフルエンザウイルスまたはオルトミクソウイルスではない、上記医薬組成物。
【請求項２】
前記ウイルスが、レトロウイルス、レンチウイルス、パラミクソウイルス、フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ダニ媒介脳炎、黄熱病、デング熱ウイルス、フィロウイルス、トガウイルス、ブニヤウイルス、ヘルペスウイルス、ヘパドナウイルス、またはコロナウイルスである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ウイルスがコロナウイルスである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記ウイルスが、ＨＩＶ、エボラ、マールブルグウイルス、風疹ウイルス、ハンタウイルス、アレナウイルス、サイトメガロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、またはトロウイルスである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記感染症が、エイズ、ヘルペス、ＡＤＲＳ、またはＳＡＲＳである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記感染症がＳＡＲＳである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つが、任意に別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸で置換されていてもよい、請求項１から６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つが、対応するＬ−アミノ酸で置換されている、請求項１から６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記ペプチドが、配列ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、またはＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘを含み、Ｘ／ｘがグリシン、または任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸であり、各配列において、１つの追加のアミノ酸が挿入、欠失、あるいは様々なＤ−アミノ酸、またはグリシン、または任意のＬ−アミノ酸に変更された、請求項１から６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記ペプチドが、配列ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、ｔｗｆｔｆｉＸ／ｘ、またはＸ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘを含み、Ｘ／ｘがグリシン、または任意のＤ−アミノ酸、または任意のＬ−アミノ酸である、請求項１から６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記ペプチドが、配列ｔｗｆｔｆｉｎ、Ｘ／ｘｗｆｔｆｉｎ、ｔＸ／ｘｆｔｆｉｎ、ｔｗＸ／ｘｔｆｉｎ、ｔｗｆＸ／ｘｆｉｎ、ｔｗｆｔＸ／ｘｉｎ、ｔｗｆｔｆＸ／ｘｎ、またはｔｗｆｔｆｉＸ／ｘを含む、請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ペプチドが、配列Ｘ／ｘｗｆｔｆｉＸ／ｘを含む、請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記ペプチドが、配列ＰＳＰ  ＩＶ  Ａ１７、ＰＳＰ  Ｖ  Ａ１９またはＰＳＰ  ＶＩ  Ａ１を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記ペプチドが、Ｎ末端および／またはＣ末端システイン残基をさらに含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記ペプチドが、１つまたは複数の溶解性タグをさらに含み、タグのそれぞれが独立して選択される、請求項１から１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記ペプチドが、環状形態である、請求項１から１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記薬剤が、経鼻的、肺、経口的または非経口的投与に適している、請求項１から１６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記薬剤が、予防的治療のためのものである、請求項１から１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
宿主動物においてマトリックスタンパク質層ウイルスまたはエンベロープウイルスにより、少なくとも部分的に引き起こされ、ウイルスがインフルエンザウイルスまたはオルトミクソウイルスではない、感染症を治療するための、配列ｔｗｆｔｆｉｎまたは式Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７のｔｗｆｔｆｉｎの類似体もしくは誘導体を含み、Ａ１はｔまたはｗであり、Ａ２はｋまたはｗであり、Ａ３はｓまたはｆであり、Ａ４はｒまたはｔであり、Ａ５はｆ、ｈ、ｉ、ｎ、またはｗであり、Ａ６はｉまたはｄであり、Ａ７はｎまたはａであり、Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、またはＡ７のいずれか１つまたは２つは、任意に別のＤ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸、またはグリシンで置換されていてもよい、ペプチドを含む治療有効量の医薬組成物、または請求項１〜１８のいずれか一項に記載の医薬組成物、ならびに前記感染症を治療するために医薬組成物を使用するための説明書を含む、キット。
【国際調査報告】
2020528072.tif 000027
2020528072.tif 000028
2020528072.tif 000029