(57)【要約】  出血部位において止血をもたらすための薬剤として使用するための、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む組成物、並びにその調製方法が提供される。
2020502241.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
出血部位において止血をもたらすための薬剤として使用するための、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む組成物。
【請求項２】
前記アニオン交換体が、マトリックスに結合した１つ又は２つ以上の正荷電基を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記正荷電基が、強塩基、弱塩基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される塩基によってもたらされている、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記強塩基が、四級アミノ基を含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記弱塩基が、一級アミノ基、二級アミノ基、三級アミノ基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ基を含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項６】
前記弱塩基がジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基からなる、請求項３に記載の組成物。
【請求項７】
前記マトリックスが、脂肪族ポリエステル、多糖類、ポリペプチド、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、シリカ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている、請求項２〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記マトリックスが架橋している、請求項２〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記マトリックスが共有結合で架橋している、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物が、血液凝固カスケードのいかなるタンパク質も実質的に欠いている、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、スラリー、粉末、フィルム、パッチ、及び液体からなる群から選択される形態である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記スラリー又は液体の形態の前記組成物が、医薬的に許容される担体を更に含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記使用が、所望により前記出血部位に向けて、前記組成物に圧力を加えることを含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
アニオン交換体と、
カルシウム塩と、
所望により、医薬的に許容される担体とを含む、止血用組成物。
【請求項１５】
前記アニオン交換体が、マトリックスに結合した１つ又は２つ以上の正荷電基を含む、請求項１４に記載の止血用組成物。
【請求項１６】
前記正荷電基が、強塩基、弱塩基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される塩基によってもたらされている、請求項１５に記載の止血用組成物。
【請求項１７】
前記強塩基が、四級アミノ基を含む、請求項１６に記載の止血用組成物。
【請求項１８】
前記弱塩基が、一級アミノ基、二級アミノ基、三級アミノ基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ基を含む、請求項１６に記載の止血用組成物。
【請求項１９】
前記弱塩基がジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基からなる、請求項１６に記載の止血用組成物。
【請求項２０】
前記マトリックスが、脂肪族ポリエステル、多糖類、ポリペプチド、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、シリカ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている、請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の止血用組成物。
【請求項２１】
前記マトリックスが架橋している、請求項１５〜２０のいずれか一項に記載の止血用組成物。
【請求項２２】
前記架橋ポリマーが共有結合で架橋している、請求項２１に記載の止血用組成物。
【請求項２３】
前記多糖類が、セルロース、デキストラン、アガロース、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている、請求項２０〜２２のいずれか一項に記載の止血用組成物。
【請求項２４】
前記組成物が、血液凝固カスケードのいかなるタンパク質も実質的に欠いている、請求項１５〜２３のいずれか一項に記載の止血用組成物。
【請求項２５】
前記組成物が、スラリー、粉末、フィルム、パッチ、及び液体からなる群から選択される形態である、請求項１５〜２４のいずれか一項に記載の止血用組成物。
【請求項２６】
前記スラリー又は液体の形態の前記組成物が、医薬的に許容される担体を更に含む、請求項２５に記載の止血用組成物。
【請求項２７】
マトリックスに結合したジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）と、
カルシウム塩とを含む、止血用組成物。
【請求項２８】
止血用組成物の調製方法であって、
１つ又は２つ以上の正荷電基を架橋マトリックスに共有結合させることによってアニオン交換体を調製することと、
前記アニオン交換体にカルシウム塩を添加することと、を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、止血用組成物の分野に関する。より具体的には、本発明は、アニオン交換体及びカルシウムを含む止血用組成物、並びにその使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
出血は、脊椎動物の循環系からの血液の漏出を説明するために一般的に使用される用語である。出血は、身体の内側（内部出血）、又は身体の外側（外部出血）で起こり得る。出血部位は、身体のほとんど全ての領域であり得る。典型的には、内部出血は、血管又は臓器への損傷によって血液が漏出するときに生じる。外部出血は、血液が皮膚の損傷を通って出るとき、又は血液が、口、鼻、耳、膣、又は直腸などの身体の自然開口部を通って出るときのいずれかで起こる。
【０００３】
出血は、外傷性損傷（擦傷、かすり傷、裂傷、切開、針又はナイフなどの道具による穿刺創、挫滅傷、及び銃痕を含む）、又は凝固因子が欠乏している、関連する凝固障害を有する対象などの特定の医学的状態を含む、多種多様な障害又は状態によって引き起こされ得る。更に、出血は、いくつかの非ステロイド性抗炎症薬（non-steroidal anti-inflammatory drug、ＮＳＡＩＤ）又は抗凝固薬、例えば、ワルファリン、低分子量ヘパリン、アピキサバン（ＥＬＩＱＵＩＳ（登録商標））、ダビガトラン（ＰＲＡＤＡＸＡ（登録商標））、エドキサバン（ＳＡＶＡＹＳＡ（登録商標））、及び）リバーロキサバン（ＸＡＲＥＬＴＯ（登録商標））などの特定の薬剤を使用することによって引き起こされ得る。
【０００４】
継続的に、未処理の出血は、瀉血、すなわち、血液量の過剰な減少（血液量減少症）をもたらし、死につながる場合がある。
【０００５】
出血の停止又は制御は止血と呼ばれ、これは血液凝固を伴い、この機序の促進、加速、又は強化は、応急処置及び手術の両方の重要な部分である。止血を増強、促進、又は加速する薬剤及び組成物は、「止血剤」と呼ばれる。
【０００６】
止血剤（hemostatic agent）は、止血剤（hemostat）、シーラント、又は粘着剤を含んでもよい。典型的には、止血剤は、機械的止血剤（ゼラチン、コラーゲン、酸化再生セルロースなど）、活性止血剤（トロンビンなど）、流動性止血剤（トロンビンと併用するゼラチンマトリックスなど）、及びフィブリンシーラントに細分される。
【０００７】
いくつかの既知の止血剤は、緊急事態において貴重な時間を浪費する多数の工程を伴う、使用前の長時間の調製を必要とする。
【０００８】
生物学的止血剤は非常に有効であるが、潜在的な安全リスクを有し、その生産コストは高い。
【０００９】
多くの既知の止血剤は冷蔵を必要とし、その冷蔵は、発展途上国において、及び様々な状況において（戦場において、隔離領域において、緊急事態においてを含む）、又は電気障害の間に、利用できないか、又は非常に高価である場合がある。更に、冷蔵の必要条件は、製造、出荷、及び保管のコストを増加させる。
【００１０】
多くの既知の止血剤は、ヘパリン、アスピリン、又はクマジンなどの抗凝血薬を使用する患者にとって効果的ではない。
【００１１】
多くの既知の止血剤には、汚染の潜在的リスクを伴い、高生産コスト、短い有効期限を有し、通常は冷蔵を必要とする、凝血剤が含まれる。
【００１２】
したがって、先行技術の欠点の少なくともいくつかを有しない、安全かつ有効な止血剤が必要とされている。
【００１３】
背景技術は、米国特許第５，５０２，０４２号及び同第８，７４１，３３５号、米国特許出願公開第２００９／００６２８４９号、並びに国際公開第２０１３／０７１２３５号及び同第１９９３／０５８２２号を含む。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、アニオン交換体と、カルシウムと、医薬的に許容される担体とを含む止血用組成物、並びに止血をもたらすためのその使用方法を提供する。
【００１５】
本発明のいくつかの実施形態の一態様によれば、それを必要とする対象の出血部位において止血をもたらす方法であって、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む有効量の止血用組成物を出血部位に適用することを含む方法が提供される。
【００１６】
いくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、マトリックスに結合した１つ又は２つ以上の正荷電基を含む。
【００１７】
いくつかの実施形態によれば、正荷電基（ポリカチオンとも呼ばれる）は、強塩基、弱塩基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される塩基によってもたらされている。
【００１８】
いくつかの実施形態によれば、強塩基は、四級アミノ基を含む。
【００１９】
いくつかの実施形態によれば、弱塩基は、一級アミノ基、二級アミノ基、三級アミノ基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ基を含む。
【００２０】
いくつかの実施形態によれば、弱塩基はジエチルアミノエチル（Diethylaminoethyl、ＤＥＡＥ）基からなる。
【００２１】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは、脂肪族ポリエステル、多糖類、ポリペプチド、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、タンパク質（コラーゲンゼラチン又はアルブミンなど）、シリカ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている。
【００２２】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは架橋しており、所望により共有結合で架橋している。
【００２３】
いくつかの実施形態によれば、組成物は、血液凝固カスケードのいかなるタンパク質も実質的に欠いている。
【００２４】
いくつかの実施形態によれば、組成物は、スラリー、粉末、繊維、フィルム、パッチ、及び液体からなる群から選択される形態である。
【００２５】
いくつかの実施形態によれば、スラリー又は液体の形態の組成物は、医薬的に許容される担体を更に含む。
【００２６】
いくつかの実施形態によれば、適用は、組成物に、所望により、出血部位に向かって圧力を加えることによって行われる。
【００２７】
本発明のいくつかの実施形態の態様によれば、アニオン交換体と、カルシウム塩と、所望により医薬的に許容される担体とを含む止血用組成物が提供される。
【００２８】
いくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、マトリックスに結合した１つ又は２つ以上の正荷電基を含む。
【００２９】
いくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、固相に連結される。
【００３０】
いくつかの実施形態によれば、正荷電基は、強塩基、弱塩基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される塩基からなる。
【００３１】
いくつかの実施形態によれば、強塩基は、四級アミノ基を含む。
【００３２】
いくつかの実施形態によれば、弱塩基は、一級アミノ基、二級アミノ基、三級アミノ基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ基を含む。
【００３３】
いくつかの実施形態によれば、弱塩基はジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基からなる。
【００３４】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは、脂肪族ポリエステル、多糖類、ポリペプチド、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、シリカ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている。
【００３５】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは架橋しており、所望により共有結合で架橋している。
【００３６】
いくつかの実施形態によれば、多糖類は、セルロース、デキストラン、アガロース、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている。
【００３７】
いくつかの実施形態によれば、タンパク質は、コラーゲン若しくはゼラチンなどの構造タンパク質、又はアルブミンなどの血漿中に多量にあるタンパク質である。
【００３８】
いくつかの実施形態によれば、組成物は、血液凝固カスケードのいかなるタンパク質も実質的に欠いている。
【００３９】
いくつかの実施形態によれば、組成物は、スラリー、粉末、フィルム、パッチ、及び液体からなる群から選択される形態である。
【００４０】
いくつかの実施形態によれば、スラリー又は液体の形態の組成物は、医薬的に許容される担体を更に含む。
【００４１】
本発明のいくつかの実施形態の態様によれば、マトリックスに結合したジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）とカルシウム塩とを含む止血用組成物が提供される。
【００４２】
本発明のいくつかの実施形態の態様によれば、１つ又は２つ以上の正荷電基を架橋マトリックスに共有結合させることによってアニオン交換体を調製することと、上記アニオン交換体にカルシウム塩を添加することと、を含む、止血用組成物の調製方法が提供される。
【００４３】
本発明のいくつかの実施形態の態様によれば、本明細書に開示される方法によって得ることができる止血用組成物が提供される。
【００４４】
本明細書中で使用される場合、「止血をもたらす」という用語は、止血を引き起こす、もたらす、促進する、加速する、及び／又は増強することを指す。
【００４５】
本明細書中で使用される場合、「出血部位」という用語は、能動的に出血している部位を指し、かつ、例えば手術部位、吻合部位、及び／又は縫合糸部位などの出血性合併症の傾向又は影響を受けやすい可能性がある部位を指す。
【００４６】
本明細書中で使用される場合、「医薬的に許容される担体」という用語は、生物活性を有さず、ヒト又は他の動物での使用に適した任意の不活性希釈剤又はビヒクルを指す。担体は、リン酸緩衝溶液（phosphate buffered solution、ＰＢＳ）、生理食塩水、塩化ナトリウム溶液、塩化カルシウム溶液、乳酸リンゲル（lactated ringers、ＬＲ）、通常の生理食塩水中の５％デキストロース溶液、種々の糖類、糖アルコール（マンニトール、ソルビトールなど）、及び注射用水などであるが、これらに限定されない、当該技術分野において既知の任意の担体から選択することができる。
【００４７】
本明細書中で使用される場合、「スラリー」という用語は、厚い、軟質の、湿った物質を指す。典型的には、スラリーは、乾燥成分（例えば、粉末又は固体親水性粒子）を液体と混合することによって生成される。乾燥成分濃度は、スラリー組成物全体の０．５％〜９９％  ｗ／ｗであり得る。典型的には、スラリーは、１５〜４０℃の温度範囲で成形可能な材料である。
【００４８】
本明細書中で使用される場合、組成物の成分に関する「〜を欠く」という用語は、組成物全体の０．１％  ｗ／ｗ未満の濃度で組成物中に存在する成分を指す。
【００４９】
本明細書中で使用される場合、「〜を含む（comprising）」、「〜を含む（including）」、「有する」、及びその文法的変形は、記載される特徴、整数、工程、又は構成要素を特定するものとして理解されるが、１つ以上の追加的特徴、整数、工程、構成要素、又はこれらの群の追加を排除するものではない。これらの用語は、「〜からなる」及び「〜から本質的になる」という用語を包含する。
【００５０】
本明細書中で使用される場合、不定冠詞「１つの（a）」及び「１つの（an）」は、文脈が明確にそうでない旨を表さない限り、「少なくとも１つの」又は「１つ又は２つ以上の」を意味する。
【００５１】
本明細書で使用される場合、「約」という用語は、±１０％を指す。
【００５２】
別段の規定がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野における当業者によって一般的に理解されている意味と同一の意味を有する。加えて、表現、材料、方法、及び実施例は、単に例示的なものであり、限定することを意図するものではない。本発明を実施する上で、本明細書に記載されるものと類似又は同等の方法及び材料を使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
本発明のいくつかの実施形態は、添付の図面を参照して、本明細書において説明されている。図面と共に説明を読むことにより、本発明のいくつかの実施形態がどのように実施され得るかということが、当業者にとって明らかとなる。図面は、例示的考察を目的とするものであり、実施形態における構造の詳細を、本発明の基本的理解に必要である以上に詳細に示そうとするものではない。明確性のため、図面に示されるいくつかの物体は、縮尺通りではない。
【００５４】
図において：
【図１】３０秒間（ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０について）、又は６０秒間（市販のゼラチン止血剤について）の圧縮時間で、ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（１０％  ｗ／ｖ）及び市販のゼラチン止血剤を適用した後の、インビボヘパリン化ブタ脾臓円形パンチモデル（直径４ｍｍ、深さ２ｍｍ）における出血の低減を示す。
【図２ａ】「銃弾様」創傷を作製するために、ブタ脾臓の解決しにくい出血モデルに使用される装置を示す。
【図２ｂ】ブタ脾臓における図２ａの装置によって作製された創傷を示す。図２ｂに見られるように、創傷は、脾臓から重度の出血をもたらす。ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を、２０ｍＭ  ＣａＣｌ２中１０％  ｗ／ｖのスラリーとして調製し、創傷に適用した。スラリーの適用後、４分間の圧縮時間に続いて、図１に記載されるように、適用後の出血強度を評価した。
【図２ｃ】重度出血創傷の完全な止血を達成した、ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０及びタンポナーデを適用した後の銃弾様の創傷を示す。
【発明を実施するための形態】
【００５５】
本発明は、アニオン交換体と、カルシウム塩と、所望により、医薬的に許容される担体とを含む止血用組成物、並びに止血を達成するためのその使用方法を提供する。
【００５６】
本明細書における教示の原理、使用法、及び実施は、添付の記載を参照してよりよく理解され得る。本明細書を精査することにより、当業者は、過度な努力又は実験を行うことなく、本発明を実施することができる。
【００５７】
少なくとも１つの実施形態を詳細に説明する前に、本発明は、その用途において、構成要素の構造若しくは構成及び／又は以下の説明に記載する方法の詳細に必ずしも限定されないことを理解されたい。本発明は他の実施形態が可能であり、あるいは様々な方法で実行又は実施することが可能である。
【００５８】
本明細書において使用される表現及び用語は、便宜上のものであり、限定するものとしてみなされるべきではない。
【００５９】
本発明のいくつかの実施形態の一態様によれば、必要とする対象において出血部位での止血をもたらす方法であって、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む有効量の止血用組成物を出血部位に適用することを含む方法が提供される。
【００６０】
本発明のいくつかの実施形態の態様によれば、出血部位における止血をもたらすのに使用するための、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む止血用組成物が提供される。
【００６１】
本発明のいくつかの実施形態の態様によれば、止血をもたらすための薬剤の製造における、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む止血用組成物の使用が提供される。
【００６２】
本発明のいくつかの実施形態の態様によれば、止血をもたらすための薬剤の製造における、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む止血医薬用組成物の使用が提供される。
【００６３】
本明細書に開示される、方法、使用のための組成物、調製の使用、又は方法のいくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、マトリックスに結合した１つ又は２つ以上の正荷電基（２〜１０の範囲のｐＨで）（ポリカチオンとも呼ばれる）を含む。いくつかのこのような実施形態では、止血用組成物は、ポリアニオンを欠く。
【００６４】
本明細書に開示される、方法、使用のための医薬組成物、調製の使用、又は方法のいくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、マトリックスに結合した１つ又は２つ以上の正荷電基（２〜１０の範囲のｐＨで）（ポリカチオンとも呼ばれる）を含む。いくつかのこのような実施形態では、止血用組成物は、ポリアニオン（ポリアニオンポリマーなど）を欠く。
【００６５】
ポリアニオンは、１つを超える負電荷を有する分子又は化学錯体である。ポリカチオンは、１つを超える正電荷を有する分子又は化学錯体である。
【００６６】
一実施形態において、マトリックスはアニオン性残基を含んでもよいが、アニオン交換体の全体的な正味電荷は正である。
【００６７】
いくつかの実施形態によれば、正荷電基は、２ｍｍｏｌ／ｇ以上、例えば２〜５、３〜４ｍｍｏｌ／ｇの総イオン容量で止血用組成物中に存在する。
【００６８】
本明細書中で使用される場合、「総イオン容量」という用語は、交換のために利用可能な組成物中の荷電部位の総量を指す。総イオン容量は、乾燥重量、湿重量、又は湿潤体積に基づいて表される。
【００６９】
いくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、全止血用組成物の０．５〜９９％  ｗ／ｖの濃度、所望により、全止血用組成物の５〜１５％  ｗ／ｖ、例えば５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％  １４％又は１５％などの濃度で存在する。
【００７０】
いくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、全止血用組成物の少なくとも１０％  ｗ／ｖの濃度で存在し、止血用組成物中のアニオン交換体とカルシウムとの間の比は、１：５〜１：７０の範囲である。いくつかの実施形態において、この比は約１：３４である。
【００７１】
いくつかの実施形態によれば、正荷電基は、強塩基（四級アミノ基を含むものなど）、弱塩基（一級アミノ基、二級アミノ基、三級アミノ基からなる群から選択されるアミノ基を含むものなど）、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される塩基からなる。
【００７２】
いくつかの実施形態によれば、弱塩基はジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基からなる。
【００７３】
いくつかの実施形態によれば、正荷電基は、マトリックス支持体と正荷電基との間に存在するリンカーを介してマトリックス、例えばマトリックス支持体に結合する。
【００７４】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは、脂肪族ポリエステル、多糖類、ポリペプチド（ゼラチン、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、若しくはコラーゲン、又はこれらの組み合わせなど）、ポリアクリルアミド、アクリレートコポリマー、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、シリカ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている。
【００７５】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは架橋しており、所望により共有結合で架橋している。いくつかのこのような実施形態では、マトリックスはイオン架橋を欠いている。
【００７６】
いくつかの実施形態によれば、多糖類は、セルロース、デキストラン、アガロース、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている。
【００７７】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは、ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）（デキストラン）、ＳＥＰＨＡＣＥＬ（商標）（セルロース）、若しくはＴＯＹＯＰＥＡＲＬ（商標）（ヒドロキシル化メタクリルポリマー）、又はこれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態によれば、組成物は、スラリー、粉末、フィルム、パッチ、及び液体からなる群から選択される形態である。いくつかのこのような実施形態によれば、スラリー又は液体の形態の組成物は、医薬的に許容される担体を更に含む。
【００７８】
本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態によれば、出血部位に止血用組成物を適用することは、出血部位に向けて（例えばガーゼによって）組成物に圧力を適用することによって実施される。
【００７９】
本発明のいくつかの実施形態の態様によると、アニオン交換体と、カルシウム塩と、所望により医薬的に許容される担体とを含む止血用組成物が提供される。
【００８０】
いくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、マトリックスに結合した１つ又は２つ以上の正荷電基（ポリカチオンとも呼ばれる）を含む。いくつかのこのような実施形態では、止血用組成物は、ポリアニオンを実質的に欠いている。
【００８１】
いくつかの実施形態によれば、正荷電基は、２ｍｍｏｌ／ｇ以上、例えば２〜５、３〜４ｍｍｏｌ／ｇの総イオン容量で止血用組成物中に存在する。
【００８２】
いくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、全止血用組成物の少なくとも１０％  ｗ／ｖの濃度で存在し、止血用組成物中のアニオン交換体とカルシウムとの間の比は、１：５〜１：７０の範囲である。いくつかの実施形態において、この比は約１：３４である。
【００８３】
いくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、全止血用組成物の１〜９９％  ｗ／ｖの濃度、所望により、全止血用組成物の５〜１５％  ｗ／ｖ、例えば５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％  １４％又は１５％などの濃度で存在する。
【００８４】
いくつかの実施形態によれば、正荷電基は、強塩基（四級アミノ基を含むものなど）、弱塩基（一級アミノ基、二級アミノ基、三級アミノ基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ基を含むものなど）、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される塩基によってもたらされている。
【００８５】
いくつかの実施形態によれば、弱塩基はジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基を含む。
【００８６】
いくつかの実施形態によれば、正帯電基は、マトリックス支持体と正荷電基との間に存在するリンカーを介してマトリックスに結合する。
【００８７】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは、多糖類、ポリペプチド（ゼラチン、ウシ血清アルブミン（bovine serum albumin、ＢＳＡ）、若しくはコラーゲン、又はこれらの組み合わせなど）、ポリアクリルアミド、アクリレートコポリマー、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、シリカ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている。
【００８８】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは架橋しており、所望により共有結合で架橋している。いくつかのこのような実施形態では、マトリックスはイオン架橋を欠いている。
【００８９】
いくつかの実施形態によれば、多糖類は、セルロース、デキストラン、アガロース、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている。
【００９０】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは、ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）（デキストラン）、ＳＥＰＨＡＣＥＬ（商標）（セルロース）、若しくはＴＯＹＯＰＥＡＲＬ（商標）（ヒドロキシル化メタクリルポリマー）、又はこれらの組み合わせを含む。
【００９１】
いくつかの実施形態によれば、組成物は、スラリー、粉末、フィルム、パッチ、及び液体からなる群から選択される形態である。いくつかのこのような実施形態によれば、スラリー又は液体の形態の組成物は、医薬的に許容される担体を更に含む。
【００９２】
いくつかの実施形態によれば、本明細書で使用される塩は、正の二価カチオンである。
【００９３】
本明細書に開示される方法、使用のための組成物、使用、又は止血用組成物のいくつかの実施形態によれば、カルシウムは、塩化カルシウム、酢酸カルシウム、乳酸カルシウム、シュウ酸カルシウム、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、リン酸カルシウム、グリセロリン酸カルシウム、又はこれらの組み合わせなどのカルシウム塩として、止血用組成物中に存在する。いくつかの実施形態では、カルシウム塩は、所望により溶液として存在する塩化カルシウムであり、更に所望により１〜１００ｍＭの濃度で存在する。いくつかのこのような実施形態では、止血用組成物中に存在するカルシウムは、塩化カルシウムである。
【００９４】
本明細書に開示される方法、使用のための組成物、使用、又は止血用組成物のいくつかの実施形態によれば、止血用組成物は、血液凝固カスケードの全てのタンパク質を実質的に欠いている。
【００９５】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは、以下のポリアニオン性ポリマー、すなわち、アルギネート及び／又はヒアルロネートを欠いている。
【００９６】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは、ポリスチレンスルホネート（ポリスチレンスルホン酸ナトリウムなど）、ポリアクリレート（ポリアクリル酸ナトリウムなど）、ポリメタクリレート（ポリメタクリレートナトリウムなど）、ポリビニルサルフェート（ポリビニルサルフェートナトリウムなど）、ポリホスフェート（ポリリン酸ナトリウムなど）、イオタカラギーナン、カッパカラギーナン、ジェランガム、カルボキシルメチルセルロース、カルボキシルメチルアガロース、カルボキシルメチルデキストラン、カルボキシルメチルキチン、カルボキシルメチルキトサン、カルボキシルメチル基で修飾されたポリマー、アルギネート（アルギン酸ナトリウムなど）、複数のカルボキシレート基を含むポリマー、キサンタンガム、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される１つ又は２つ以上の架橋性ポリアニオン性ポリマーを欠いている。
【００９７】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスのポリマーは、カルボキシメチル（carboxymethyl、ＣＭ）基の付加によって修飾されていない。
【００９８】
いくつかの実施形態によれば、生体適合性ポリマーは、カチオン性官能基を得るためにジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基で修飾され、ポリカチオン性ポリマーとなっている。
【００９９】
いくつかの実施形態によれば、ポリカチオン性ポリマーは、キトサン（キトサンクロリドなど）、キチン、ジエチルアミノエチル−デキストラン、ジエチルアミノエチル−セルロース、ジエチルアミノエチル−アガロース、ジエチルアミノエチル−アルギネート、ジエチルアミノエチル基で修飾されたポリマー、複数のプロトン化アミノ基を含むポリマー、及び７を超える平均残基等電点を有するポリペプチド、並びにこれらの組み合わせからなる群から選択される。好ましくは、ポリカチオン性ポリマーはジエチルアミノエチル−デキストラン（ＤＥＡＥ−デキストラン）である。
【０１００】
本明細書に開示される方法、使用のための組成物、使用、又は止血用組成物のいくつかの実施形態によれば、マトリックスは、アルギン酸及びペクチン酸を欠いている。
【０１０１】
本発明のいくつかの実施形態の態様によれば、マトリックスに結合したジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）とカルシウム塩とを含む止血用組成物が提供される。
【０１０２】
本発明のいくつかの実施形態の態様によれば、少なくとも１つの正荷電基を架橋マトリックスに共有結合させることによってアニオン交換体を調製することと、当該アニオン交換体にカルシウム塩を添加することと、を含む、止血用組成物の調製方法が提供される。
【０１０３】
本発明のこのような実施形態の更なる態様によれば、本明細書に開示される方法によって得ることができる止血用組成物が提供される。
【０１０４】
本明細書に開示される方法、使用のための組成物、使用、止血用組成物のいくつかの実施形態によれば、止血用組成物は、全ての生物学的止血剤を実質的に欠いており、すなわち、血液凝固カスケードの全てのタンパク質成分、すなわち、フィブリノーゲン、フィブリン、第Ｖ因子、第Ｖａ因子、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、ＶＩＩＩａ因子、第ＩＸ因子、第ＩＸａ因子、第Ｘ因子、第Ｘａ因子、第ＸＩａ因子、第ＸＩ因子、第ＸＩＩ因子、第ＸＩＩａ因子、組織因子（tissue factor、ＴＦ）、及びトロンビン、及びプロトロンビンナーゼ複合体、プロトロンビン、及びｖＷＦ、タンナーゼ複合体、高分子キニノゲン（high-molecular-weight kininogen、ＨＭＷＫ）、プレカリクレイン、カリクレイン、トロンボプラスチンを欠いている。
【０１０５】
本明細書に開示される方法、使用のための組成物、使用、又は止血用組成物のいくつかの実施形態によれば、止血用組成物は、血液凝固カスケードの全てのタンパク質（トロンビン、プロトロンビン、及びフィブリノーゲンなど）を実質的に欠いている。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、アニオン交換体は、固体又は半固体であり得るマトリックス（「支持体」、「バッキング」、「バックグラウンド」、「塩基ビーズ」又は「樹脂」とも呼ばれる）を含み、このマトリックスは、所望により、１つ又は２つ以上の正荷電基が結合するビーズの形態であってもよい。
【０１０７】
有利には、マトリックスは、出血を止めるため補助材料を使用する場合に手術中に典型的に加えられる圧力を、崩壊せずに支持することができる。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、マトリックスは架橋ポリマーを含む。いくつかの実施形態では、固体又は半固体のマトリックス材料は、止血が達成されるまで（止血用組成物の適用から少なくとも１分）溶解又は崩壊しない。
【０１０９】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスが形成されるポリマーは水に不溶性であり、好ましくは多孔質であり、少なくとも２０ＫＤａの排除限界を有する。
【０１１０】
いくつかの実施形態によれば、マトリックスは、手動の物理的圧縮を受けたときに崩壊しない。
【０１１１】
本明細書中で使用される場合、「正荷電基」という用語は、アンモニウム、アルキルアンモニウム、ジアルキルアンモニウム、トリアルキルアンモニウム、第四級アンモニウム、ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）、ジメチルアミノエチル（ＤＭＡＥ）、トリエチルアミノエチル、トリメチルアミノエチル、アルキル基、アミノ官能基（例えば、ＮＲ２Ｈ＋）、ジエチル−（２−ヒドロキシプロピル）アミノエチル、トリメチルアミノ−ヒドロキシプロピル、及びこれらの組み合わせなどのｐＨ範囲で２．０〜１０の正電荷を担持する化学基を含む分子を指す。
【０１１２】
一実施形態では、イオン交換体は、６〜１４の範囲の複数のｐＫａ値を有する。更なる実施形態では、イオン交換体は、９を超える単一のｐＫａ値を有する。
【０１１３】
いくつかの実施形態によれば、アニオン交換体は、マトリックスの止血有効性を高めるために、止血特性を有することが知られている任意のマトリックスに結合したＤＥＡＥを含む。適したマトリックスの例としては、ゼラチン、セルロース、コラーゲン、及びデンプンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１４】
いくつかの実施形態によれば、止血用組成物は、少なくともアニオン交換体とカルシウムとの配合物を含む。「配合物」という用語は、少なくともアニオン交換体とカルシウムとの、任意の形態の、均質又は不均質の混合物を指すことを意図する。配合物は、所望により他の成分を更に含んでもよい。
【０１１５】
いくつかの実施形態によれば、配合物は、血液凝固カスケードの任意のタンパク質成分を実質的に含まないか、又は欠いており（すなわち、そのような成分は、全組成物の０．１％  ｗ／ｗ未満の濃度で組成物中に存在する）、例えば、配合物は、トロンビン及びフィブリノーゲンを実質的に含まなくてもよく、又は欠いていてもよい。
【０１１６】
いくつかの実施形態によれば、配合物は、スラリー、粉末又は液体配合物である。
【０１１７】
いくつかの実施形態によれば、配合物は凍結状態で提供され、使用前に、製品は解凍され、配合物がその使用可能な状態にある、室温（すなわち、１５〜４０℃範囲）になるようにされる。
【０１１８】
いくつかの実施形態によれば、本明細書に開示される組成物は、１分以内に創傷の出血を止める。
【０１１９】
本明細書中で使用される場合、「止血剤」又は「止血用組成物」という用語は、血液を血塊にさせる、すなわち止血をもたらすことによって機能する材料又は組成物を指す。典型的には、止血剤は血液凝固を増加させる。
【０１２０】
一実施形態では、組成物に関する「止血をもたらす」という用語は、プロトロンビンなどの凝固因子の活性化によって血液を血塊にさせ、結果として出血の停止又は出血強度の低下をもたらす組成物を指す。
【０１２１】
本明細書中で使用される場合、組成物に関する「出血を止める」又は「出血の停止」という用語は、創傷部位に適用されるとき、以下の材料及び方法のセクションに記載されるように、例えば０（出血なし）〜５のスケールで出血が生じない組成物を指す。
【０１２２】
本明細書中で使用される場合、「出血強度の低下」（本明細書では「止血有効性」とも呼ばれる）という用語は、初期出血強度と適用後の出血強度との間の差を指す。
【０１２３】
本明細書中で使用される場合、「初期出血強度」という用語は、創傷の形成直後及び組成物の適用前に、例えば、以下の材料及び方法のセクションに記載されるような０〜５のスケールで評価される、出血の強度を指す。
【０１２４】
本明細書中で使用される場合、特定の圧縮時間に関する「適用後の出血強度」という用語は、以下の材料及び方法のセクションに記載されるように、組成物の適用後及び圧縮時間後、例えば０〜５のスケールで評価される、出血の強度を指す。
【０１２５】
本組成物の止血有効性は、出血創傷に適用されたときの圧縮時間の観点から評価することができる。
【０１２６】
本明細書中で使用される場合、「圧縮時間」という用語は、組成物の適用後に、手動での圧縮が出血創傷に適用される時間を指す。典型的には、この力は、止血を達成するための補助製品の使用時に外科医によって通常加えられる強度に等しい。圧縮が適用されないいくつかの実施形態では、圧縮時間は０秒と呼ばれる。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、圧縮時間は約８〜１２分である。いくつかの実施形態では、解決しにくい出血において、圧縮時間は約５分である。いくつかの実施形態では、一般的な外科的処置において遭遇する出血において、圧縮時間は約１〜２分である。「解決しにくい出血」は、クラスＩＩＩ出血として定義され、世界保健機関の分類に応じて上記に定義される。典型的には、クラスＩＩＩ出血は、循環血液量の３０〜４０％の損失を伴う。典型的な症状としては、患者の血圧の低下、心拍数の増加、末梢低灌流（ショック）が挙げられる。
【０１２８】
いかなる理論にも束縛されるものではないが、本発明者らは、本明細書に開示される組成物が出血創傷又は部位に適用されると、トロンビンがインサイチューで生成されると仮定する。驚くべきことに、このインサイチュートロンビン生成は、止血を達成するのに十分な程度及び十分な速度で発生することが見出された。
【０１２９】
有利には、物理的マトリックスの存在により、止血用組成物を出血部位に、所望により圧縮によって、容易に適用することが可能となる。更に、マトリックス自体は、酸化再生セルロース（oxidized regenerated cellulose、ＯＲＣ）と同様に、血小板を封入することによって凝固に寄与し得る。
【０１３０】
以下の実施例のセクションに示されるように、マトリックスは、ＤＥＡＥなどの正荷電官能基の止血能力に必要なものであることが見出された。典型的には、マトリックスは、液体との最初の接触時に溶解せず、止血が達成されるまで、例えば、少なくとも１分間、その完全性を維持し、血液タンパク質の凝集が創傷部位で局所的に濃縮され、したがって凝固カスケードの開始を可能にするような性質であるべきである。有利には、マトリックスは、止血を達成するために一般的な手術中に外科医によって通常加えられる圧力下で安定である。有利には、マトリックスの性質は、所望により圧縮を使用して、適用後に創傷上及び／又は創傷内に分布するようなものである。
【０１３１】
本発明によれば、種々のＳｅｐｈａｄｅｘタイプ及び市販のゼラチン止血剤は、出血を止めることができなかった（肝臓出血モデルにおいて）、すなわち、出血強度の低下は観察されなかったことが見出された。
【０１３２】
同一のベースポリマー、すなわち、スラリーを調製する粉末として提供される架橋デキストランを含むとき、種々のＳｅｐｈａｄｅｘタイプは、驚くべきことに出血を低減した。
【０１３３】
更に、ＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｄｅｘの適用後、臓器を両側から折り畳むことによって脾臓を手作業で操作して、再出血が生じなかった。
【０１３４】
市販のゼラチン止血剤は、６０秒の圧縮時間後に出血を止めることができなかったが、ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０  １０％（ｗ／ｖ）は、３０秒の短い圧縮時間後であっても出血を首尾よく止めることが判明した。また、マトリックスに結合したＤＥＡＥなどのアニオン交換体を、カルシウム塩と共に含む組成物は、完全な止血をもたらすことも見出された。
【０１３５】
これらの組成物は、使用される特定のマトリックスにかかわらず、完全な止血を実質的にもたらす。
【０１３６】
また、ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）、ＳＥＰＨＡＣＥＬ（商標）、及びＴＯＹＯＰＥＡＲＬ（商標）（それぞれ、デキストラン、セルロース、及びヒドロキシ化メタクリルポリマー）などの、マトリックスに結合したＤＥＡＥなどのアニオン交換体を、カルシウム塩と共に含む組成物は、完全な止血をもたらすことも見出された。
【０１３７】
より具体的には、ＣａＣｌ２を加えたＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｄｅｘｉｎは、６０秒及び３０秒の圧縮後に出血を止めることができたことが見出された。
【０１３８】
ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（８％  ｗ／ｖ）の適用を、圧縮なしで使用して、出血強度を低下させることができることが見出された。
【０１３９】
ＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｄｅｘ（ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０など）及びカルシウム塩を含む組成物の止血能力は、例えば、同一の圧縮時間（３０秒又は１０秒の圧縮など）を使用したときに、市販のトロンビンを含むゼラチン止血剤と同様の有効性を示すことが見出された。しかしながら、マトリックスに結合したＤＥＡＥを含むアニオン交換体とカルシウム塩とに基づく止血剤の止血能力は、トロンビンなどの生物学的活性成分の不在下で市販のゼラチン止血剤の止血能力よりも十分に優れていた。
【０１４０】
本発明によれば、ＮａＣｌを有して調製したがカルシウム塩を欠く、ＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｄｅｘを含む組成物は、出血強度を低下させなかったことが見出された。
【０１４１】
結果は、カルシウム塩の存在下でマトリックスに結合したＤＥＡＥ基を含む組成物の使用が、効果的に止血を達成したことを示す。
【０１４２】
結果はまた、カルシウム塩の存在下でのＤＥＡＥ  Ｓｅｐｈａｄｅｘ適用後の３０秒及び６０秒の圧縮時間が、完全な止血をもたらしたことも示した。
【０１４３】
カルシウムの存在下での正常血漿の止血時間（ＴＴＨ）（例えば、凝固アッセイによって測定される）は、約２００秒である。一方で、本発明によるカルシウム及びアニオン交換体の存在下での正常な血漿のＴＴＨは、約１０〜１８０秒の範囲、例えば約１０〜６０秒の範囲、約１０〜３０秒の範囲、約１５〜６０秒の範囲、約１５〜３０秒の範囲、及び約３０〜６０秒の範囲である。一実施形態において、ＴＴＨは約３０秒である。
【０１４４】
本発明によれば、マトリックスに結合したＤＥＡＥなどのアニオン交換体が、カルシウム塩と共に、完全な止血をもたらしたことが示された。この結果は、使用されるマトリックスにかかわらず得られた。結果は、ゼラチンなどの市販の止血剤をトロンビンと共に使用するときに得られるものと同等である。
【０１４５】
ＱＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）は、カルシウム塩と共に出血を低減したことが見出された。
【０１４６】
カルシウム塩及び／又はマトリックスを欠く組成物は、出血強度に影響を及ぼさなかった。
【０１４７】
ＤＥＡＥ及びＱＡＥによるこれらの結果は、マトリックスに結合したアニオン交換体を含み、かつカルシウム塩を含む組成物が止血剤として有効であることを示唆する。
【０１４８】
カルシウム塩の存在下で架橋ポリマーに結合したＤＥＡＥの止血能力は、参照により、完全に本明細書に記載されているかのように本明細書に組み込まれる、Ｈｏｌｃｏｍｂ  ＪＢ、Ｐｕｓａｔｅｒｉ  ＡＥ、Ｈａｒｒｉｓ  ＲＡら（Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｄｒｙ  ｆｉｂｒｉｎ  ｓｅａｌａｎｔ  ｄｒｅｓｓｉｎｇｓ  ｖｅｒｓｕｓ  ｇａｕｚｅ  ｐａｃｋｉｎｇ  ｏｎ  ｂｌｏｏｄ  ｌｏｓｓ  ｉｎ  ｇｒａｄｅ  Ｖ  ｌｉｖｅｒ  ｉｎｊｕｒｉｅｓ  ｉｎ  ｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｅｄ  ｓｗｉｎｅ．Ｊ  Ｔｒａｕｍａ．１９９９；４６：４９〜５８）によって開示されているものから修正された、解決しにくい出血のより困難なモデルで更に裏付けられた。
【０１４９】
本発明による架橋マトリックスに結合したＤＥＡＥは、ヘパリン化ブタ脾臓円形パンチモデルにおいてインビボで完全な止血を達成するのに成功した一方で、マトリックスに結合していないＤＥＡＥは、出血強度を低下させなかったことが示された。
【０１５０】
本明細書に開示されるマトリックスに結合している正荷電基の密度（すなわち存在）は、止血を達成するために重要であることが示されている。マトリックス上の電荷は、有利には、本発明による止血を達成するのに十分な密度で存在し得る。
【０１５１】
評価された全ての正電荷が同一レベルの止血有効性を提供していないことが、本発明により見出された。したがって、電荷密度及び電荷の種類を評価するために、最適な密度範囲が存在することを確実にするために分析を行うことができる。
【０１５２】
例えば、合成されたマトリックスは、酸加水分解などによってモノマー化され、それらが担持する種々の電荷に基づいてモノマーを分離することができる分析器具（例えば、高圧液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー）に適用することができる。このようにして、特定の分子上の電荷密度を評価するために分析を実施することができる。
【実施例】
【０１５３】
材料及び方法
【０１５４】
【表１−１】
2020502241.tif 000003
【０１５５】
【表１−２】
2020502241.tif 000004
【０１５６】
インビボ円形パンチモデル。
モデルは、国際公開第２０１２／０８７７７４（Ａ１）号に既に記載されているモデルに基づいており、いくつかの改変を行った。このモデルは、インビボで出血を低下させる試験組成物の有効性（止血有効性）を評価する。
【０１５７】
最初に、止血が研究される臓器を露出させ、次いで、単一の生検パンチ（実施例１及び５において、直径４ｍｍ、深さ２ｍｍ、実施例２の第２の実験において、直径４ｍｍ、深さ２ｍｍ、又は直径８ｍｍ、深さ３ｍｍ）に供した。パンチ内の組織を除去した。初期出血強度（「初期出血」）は、０−「出血なし」、１−「毛細管性出血」、２−「非常に軽度の出血」、３−「軽度の出血」、４−「中程度の出血」、５−「重度の出血」の、０〜５のスケールで格付けした。
【０１５８】
各試験組成物の止血有効性を評価するために、約０．５ｍｌのスラリー又は１００ｍｇの粉末（粉末として適用された組成物の場合）を、出血性パンチ創傷に適用した。スラリーとして適用した組成物はシリンジを使用して創傷に適用し、粉末として適用した組成物は、創傷上に直接適用した。
【０１５９】
組成物の適用後、ガーゼを使用して、特定の時間（本明細書では「圧縮時間」とも呼ばれる）にわたって所望により手動圧縮を適用した。圧縮後、ガーゼを除去し、適用後の出血強度を直ちに評価し、更に１分後、定性的に（はい／いいえ）、又は定量的に（上記のように０〜５のスケールを使用して）評価した。
【０１６０】
出血強度（少なくとも３で開始）を、１（毛細管性出血）又は０（出血なし）へと減少させる試験組成物は、有効であると考えられた。定性的判定のために、出血の有無を視覚的に調べ、また、処理領域の周縁に押し付けられたガーゼ片を観察した。
【０１６１】
ヘパリン化生検パンチモデルは、強い止血を評価するのに適したモデルであると考えられる。
【０１６２】
止血までの時間（Time to Hemostasis、ＴＴＨ）を、組成物の適用後に評価した。止血までの時間（ＴＴＨ）を、組成物の適用後に評価した。ＴＴＨは、組成物の適用から完全な止血（スコア０）が観察されるまでの時間間隔として定義される。
【０１６３】
実施例１：インビボ脾臓モデルにおける、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む組成物の止血特性。
アニオン交換体及びカルシウム塩を含む組成物の止血特性の初期評価は、アニオン交換体としてＳｅｐｈａｄｅｘに共有結合したＤＥＡＥ（ＤＥＡＥ−ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標））を使用して、上記のようなインビボヘパリン化ブタ脾臓円形パンチモデルで実施した。この実験では、パンチサイズは直径４ｍｍ、深さ２ｍｍであった。適用後、３０又は６０秒の圧縮時間を使用した。ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を２つの濃度で試験した。この実験では、適用後の出血強度を定性的に評価した。
【０１６４】
以下の組成物（上記表１の詳細を参照）を、止血有効性について評価した：
１．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の１０％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（０．５ｍｌは、５０ｍｇのＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を含む）（３０秒圧縮時間）、
２．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の６．６％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（０．５ｍｌは、３３ｍｇのＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を含む）（６０秒圧縮時間）、
３．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の１０％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−７５  Ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ（０．５ｍｌは、５０ｍｇのＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−７５  Ｓｕｐｅｒｆｉｎｅを含む）（６０秒圧縮時間）、
４．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の１０％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−５０  Ｍｅｄｉｕｍ（０．５ｍｌは、５０ｍｇのＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−５０  Ｍｅｄｉｕｍを含む）（６０秒圧縮時間）、
５．スラリーとして調製された市販のゼラチン止血剤（０．５ｍｌは５５ｍｇのゼラチンを含む）（６０秒圧縮時間）。
【０１６５】
４つのＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）サンプルは全て、同一のベースポリマー、架橋デキストランを含む。組成物１〜４を、スラリーを調製する粉末として提供し、上記の表１に記載のようにスラリーを調製した。市販のゼラチン流動性止血剤を対照例として使用した。
【０１６６】
ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−５０  Ｍｅｄｉｕｍ、ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−７５  Ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ、及び市販のゼラチン止血剤は、出血を止めることができない、すなわち、出血強度の低下は観察されなかったことが見出された（結果は示さず）。
【０１６７】
驚くべきことに、ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０は、試験された全ての圧縮時間において出血を低下させた。ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０の適用後、臓器を両側から折り畳むことによって脾臓を手作業で操作した。試験した濃度のいずれにおいても、２つの異なる圧縮時間に続いて、再出血は生じなかった（結果は示さず）。ＤＥＡＥ基を補充したマトリックスにおいてのみ止血が生じたため、止血効果はＤＥＡＥ基の存在によるものであると結論付けられた。
【０１６８】
図１は、ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０  １０％（ｗ／ｖ）及び市販のゼラチンを使用して得られた例示的な結果を示す。図に示されるように、市販のゼラチン止血剤は、６０秒の圧縮時間後に出血を止めることができなかったが、一方でＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０  １０％（ｗ／ｖ）は、３０秒のより短い圧縮時間後であっても出血を首尾よく止めた。
【０１６９】
実施例２：インビボブタ肝臓モデルにおける、止血に対する、アニオン交換体及びカルシウムを含む組成物の効果。
以下の実施例では、上記のように、インビボヘパリン化ブタ肝臓円形パンチモデルを使用して、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む組成物の各成分の止血に対する効果を、別々に及び組み合わせて評価した。本実験は、止血を達成するために組成物の成分のいずれが必要であるかを特定する。
【０１７０】
各組成物の調製を上記表１に記載する。圧縮時間を下記表２に列挙する。この実験では、初期出血強度及び適用後の出血強度を、０〜５スケールに従って評価した。
【０１７１】
以下の組成物を評価した：
１．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の８％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（０．５ｍｌは、４０ｍｇのＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を含む）、
２．スラリーとして調製された市販のゼラチン止血剤（０．５ｍｌは５５ｍｇのゼラチンを含む）、
３．スラリーとして調製されたトロンビンを含む市販のゼラチン止血剤（０．５ｍｌは５５ｍｇのゼラチンを含む）、
４．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の１４％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−５０  Ｍｅｄｉｕｍ（０．５ｍｌは、７０ｍｇのＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−５０  Ｍｅｄｉｕｍを含む）、
５．２０ｍＭ  ＮａＣｌ溶液中の８％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（０．５ｍｌは、４０ｍｇのＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を含む）、
６．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の８％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＳＰ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｃ−５０（０．５ｍｌは、４０ｍｇのＳＰ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｃ−５０を含む）、
７．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の８％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＱＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）（０．５ｍｌは、４０ｍｇのＱＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）を含む）、
８．スラリーとして調製されたＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＣＥＬ（商標）（１００ｍｇ）、及び
９．粉末形態で調製されたＴＯＹＯＰＥＡＲＬ  ＤＥＡＥ−６５０Ｍ（商標）（１００ｍｇ）。
【０１７２】
各試験組成物の適用後の圧縮時間、及び出血強度の結果を表２に示す。初期出血強度から適用後の出血強度を減じることによって、出血強度低下を計算した。
【０１７３】
【表２】
2020502241.tif 000005
＊初期出血強度から適用後の出血強度を減じることによって計算した。
【０１７４】
【表３】
2020502241.tif 000006
＊初期出血強度から適用後の出血強度を減じることによって計算した。
【０１７５】
概して、マトリックスに結合したＤＥＡＥなどのアニオン交換体をカルシウム塩と共に含む組成物が、完全な止血をもたらすことが分かる（全てカルシウム塩を含むＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０、ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＣＥＬ（商標）、及びＴＯＹＯＰＥＡＲＬ  ＤＥＡＥ−６５０Ｍ（商標）について表２を参照されたい）。これらの組成物は、使用される特定のマトリックスにかかわらず、完全な止血を実質的にもたらす。例えば、ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）、ＳＥＰＨＡＣＥＬ（商標）、及びＴＯＹＯＰＥＡＲＬ（商標）（それぞれ、デキストラン、セルロース及びヒドロキシル化メタクリルポリマー）などのマトリックスは、出血強度を低下させるのに同様の効果を有した。
【０１７６】
より具体的には、ＣａＣｌ２中のＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０  ８％ｗ／ｖは、６０及び３０秒の圧縮後に出血を止めることができた。結果はまた、ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（８％  ｗ／ｖ）の適用を、圧縮なしで使用して、出血強度を低下させることができることを示した（表２）。
【０１７７】
ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０及びカルシウム塩を含む組成物の止血能力は、同一の圧縮時間（３０秒）を使用したとき、及びわずか１０秒の圧縮でさえも、市販のトロンビンを含むゼラチン止血剤と同様の有効性を示した。しかしながら、マトリックスに結合したＤＥＡＥを含むアニオン交換体とカルシウム塩とに基づく止血剤の止血能力は、トロンビンなどの生物学的活性成分の不在下で市販のゼラチン止血剤の止血能力よりも十分に優れていた。
【０１７８】
表３に示すように、ＮａＣｌを用いて調製され、カルシウム塩を欠くＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）を含む組成物は出血強度の低下をもたらさず、このサンプルは出血を止めるのに有効ではなかったと結論付けることができる。
【０１７９】
イオン交換基の止血能力に対する影響を評価する際、カルシウム塩と共にアニオン性基、スルホプロピル（ＳＰ）を含むＳＰ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）は、出血強度を低下させなかったことが示された。換言すれば、正（ＤＥＡＥ）基の代わりに負（ＳＰ）基を有する材料は、止血剤として有効ではなかった。
【０１８０】
カルシウム塩を有する四級アミノエチル、ＱＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）が、出血強度を低下させることができたことが更に示された。
【０１８１】
実施例１と同様に、官能基が不在のマトリックス単独（カルシウム塩を有するが、ＤＥＡＥ基を有さないＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−５０）では、止血有効性を有しなかったことも示された。
【０１８２】
結果は、カルシウム塩の存在下でマトリックスに結合したＤＥＡＥ基を含む組成物の使用が、効果的に止血を達成したことを示す。
【０１８３】
結果はまた、ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（８％  ｗ／ｖ）適用後の３０秒及び６０秒の圧縮時間が完全な止血をもたらすことをも示し、したがってＴＴＨが３０秒として定義された。
【０１８４】
したがって、マトリックスに結合したＤＥＡＥなどのアニオン交換体が、カルシウム塩と共に、完全な止血をもたらしたことが示された。この結果は、使用されるマトリックスにかかわらず得られた。結果は、トロンビンを含むゼラチンなどの市販の止血剤を使用するときに得られるものと同等である。
【０１８５】
ＱＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）は、カルシウム塩と共に出血を低減したことが見出された。
【０１８６】
カルシウム塩及び／又はマトリックスを欠く組成物は、出血強度に影響を及ぼさなかった。
【０１８７】
これらの結果は、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む組成物が止血剤として有効であることを示唆する。
【０１８８】
実施例３：インビボブタ脾臓モデルにおける、止血に対する、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む組成物の効果。
前の実験は、架橋ポリマーに結合したＤＥＡＥからなるアニオン交換体及びカルシウム塩を含む組成物が、インビボ脾臓円形パンチモデルにおいて出血強度を低下させるのに有効であったことを示した。
【０１８９】
この実験では、組成物の止血活性が、別のモデルである、インビボヘパリン化ブタ脾臓円形パンチモデル（上記のように実施される）で裏付けられた。このモデルは、出血強度に関して以前のモデルよりも重度であった。全てのサンプルの圧縮時間は３０秒であった。サンプル１〜６について、パンチサイズは、直径４ｍｍ及び深さ２ｍｍであった。サンプル７〜９について、パンチサイズは、直径８ｍｍ及び深さ３ｍｍであった。典型的には、出血の重症度は、パンチサイズの増加及び／又はヘパリンの添加によって増加した。
【０１９０】
以下のサンプルを、止血有効性について試験した：
１．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の８％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（０．５ｍｌは、４０ｍｇのＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を含む）、
２．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の１０％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（０．５ｍｌは、５０ｍｇのＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を含む）、２連で試験された、
３．スラリーとして調製された市販のゼラチン止血剤（０．５ｍｌは５５ｍｇのゼラチンを含む）、
４．スラリーとして調製されたトロンビンを含む市販のゼラチン止血剤（０．５ｍｌは５５ｍｇのゼラチンを含む）、
５．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の１４％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−５０  Ｍｅｄｉｕｍ（０．５ｍｌは、７０ｍｇのＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−５０  Ｍｅｄｉｕｍを含む）、
６．２０ｍＭ  ＮａＣｌ溶液中の８％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（０．５ｍｌは、４０ｍｇのＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を含む）、
７．純ＤＥＡＥ、
８．ＣａＣｌ２（２０ｍＭ）、及び
９．ＣａＣｌ２を有するＤＥＡＥ。
【０１９１】
ＣａＣｌ２の存在下でＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０  ８％及び１０％  ｗ／ｖは、出血強度を低下させることができ（約２〜３点の減少が観察された）、より高い割合でより良好な結果をもたらすことが観察された。このモデルでは、ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０の止血能力は、トロンビンを有する又は有さない市販のゼラチンベースの止血剤の止血能力よりも優れていた。
【０１９２】
肝臓実験に示されるように、ナトリウム塩を有する、ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ｇ−５０単独とＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）の両方が、出血強度を低下させなかった。
【０１９３】
純ＤＥＡＥは、出血強度を低下させなかった。したがって、ＤＥＡＥが架橋ポリマーに結合していないとき、有効な止血剤として機能しない（すなわち、顕著な出血低下が生じていない）と結論付けられた。カルシウム塩の添加は、カルシウム塩組成物と共にＤＥＡＥを含む組成物に見られるように（０点減少）、マトリックスの不在下でのＤＥＡＥの止血能力を改善しなかった。カルシウム塩単独で止血能力を有さなかったことも実証された。
【０１９４】
この実験は、前の実験を更に裏付け、実証された止血有効性のために、カルシウム塩、ＤＥＡＥ基、及びマトリックスの組み合わせが必要であったことを示した。
【０１９５】
実施例４：インビボブタ脾臓解決しにくい出血モデルにおける、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む溶液の止血特性。
この実施例では、カルシウム塩の存在下で架橋ポリマーに結合したＤＥＡＥの止血能力は、参照により、完全に本明細書に記載されているかのように本明細書に組み込まれる、Ｈｏｌｃｏｍｂ  ＪＢ、Ｐｕｓａｔｅｒｉ  ＡＥ、Ｈａｒｒｉｓ  ＲＡら（Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｄｒｙ  ｆｉｂｒｉｎ  ｓｅａｌａｎｔ  ｄｒｅｓｓｉｎｇｓ  ｖｅｒｓｕｓ  ｇａｕｚｅ  ｐａｃｋｉｎｇ  ｏｎ  ｂｌｏｏｄ  ｌｏｓｓ  ｉｎ  ｇｒａｄｅ  Ｖ  ｌｉｖｅｒ  ｉｎｊｕｒｉｅｓ  ｉｎ  ｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｅｄ  ｓｗｉｎｅ．Ｊ  Ｔｒａｕｍａ．１９９９；４６：４９〜５８）によって開示されているものから修正された解決しにくい出血のより困難なモデルで更に試験された。
【０１９６】
ＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を、２５ｍＭのＣａＣｌ２溶液中で１０％  ｗ／ｖスラリーとして調製した。パンチを専用の装置（図２ａを参照）を使用して実施し、各アームは５．５ｃｍの長さであり、中心孔は１．５ｃｍ深さ、銃弾形状、及び直径９．５ｍｍであるＸ字形状の創傷をもたらした（図２ｂ）。創傷は、解決しにくい出血（銃弾による負傷など）を表している。
【０１９７】
約２０ｍｌの試験組成物を創傷に適用した。手動圧縮を創傷部位に４分間適用した。試験した組成物は出血を止めた。
【０１９８】
実験を３回実施し（更に２回の繰り返し）、同様の結果を得た。
【０１９９】
第１のトライアルにおいて、完全な止血を達成するために十分な材料が存在しない場合、追加の材料を適用し、圧縮を更に３分間加えた。次いで、完全な止血を達成した。
【０２００】
実施例５：マトリックス要件の評価
以下の実施例では、ＤＥＡＥが結合するマトリックスの要件を、上記のように、インビボヘパリン化ブタ脾臓円形パンチモデルを使用して更に評価した。組成物の調製を上記表１に記載する。圧縮時間は６０秒であった。この実験では、初期出血強度及び適用後の出血強度を、０〜５スケールに従って評価した。
【０２０１】
ＤＥＡＥデキストラン５００は、デキストランのポリカトニック誘導体であり、デキストラン鎖が架橋されていない、平均分子量５００ｋＤのデキストランから調製される。
【０２０２】
以下の組成物を評価した：
１．２０ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液中の１０％  ｗ／ｖスラリーとして調製されたＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０（０．５ｍｌは、４０ｍｇのＤＥＡＥ  ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）Ａ−５０を含む）、
２．１０％（ｗ／ｗ）ＣａＣｌ２粉末によって調製したＤＥＡＥデキストラン５００（１００ｍｇ粉末は、９０ｍｇのＤＥＡＥデキストラン及び１０ｍｇのＣａＣｌ２を含んでいた）。
【０２０３】
種々の試験組成物の出血強度の結果を表４に示す。
【０２０４】
【表４】
2020502241.tif 000007
【０２０５】
架橋マトリックスに結合したＤＥＡＥは、完全な止血を達成するのに成功したが、マトリックスに結合していないＤＥＡＥは、出血強度を低下させなかった。
【０２０６】
実施例６：止血に対する正荷電基の効果
本明細書に開示されるマトリックスに結合している正荷電基の密度（すなわち存在）は、止血を達成するために重要であることが示されている。マトリックス上の電荷は、有利には、上記のように止血を達成するのに十分な密度で存在すべきである。
【０２０７】
評価された全ての正電荷が同一レベルの止血有効性を提供していないことが、これまでの実施例で示された。したがって、電荷密度及び電荷の種類を評価するために、最適な密度範囲が存在することを確実にするために分析を実施する。
【０２０８】
この目的のために、合成されたマトリックスは、酸加水分解などによってモノマー化され、それらが担持する種々の電荷に基づいてモノマーを分離することができる分析器具（例えば、高圧液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー）に適用する。このようにして、特定の分子上の電荷密度を評価するために分析を実施する。
【０２０９】
本発明の特定の特徴は、明確性のために別個の実施形態の文脈において記載されているが、これはまた、単一の実施形態において組み合わせて提示されてもよいことが理解されるであろう。逆に、本発明の様々な特徴は、簡潔さのために、単一の実施形態の文脈において記載されているが、これはまた、別個に、若しくは任意の好適な部分的組み合わせで、又は本発明の任意のその他の記載される実施形態において好適にもたらされてもよい。様々な実施形態の文脈において記載される特定の特徴は、その実施形態がそれらの要素なしには動作不可能である場合を除き、それらの実施形態の必須特徴であるとして考慮されるべきではない。
【０２１０】
本発明は、その特定の実施形態と共に記載されてきたが、多くの代替、修正、及び変形が当業者には明白となることは明らかである。したがって、添付の請求項の範囲内にある全てのそのような代替、修正、及び変形を包含することが意図される。
【０２１１】
本出願におけるいずれの参照文献の引用又は特定も、そのような文献が本発明の先行技術として利用可能であることを認めるものと解釈されるべきではない。
【０２１２】
〔実施の態様〕
（１）  出血部位において止血をもたらすための薬剤として使用するための、アニオン交換体及びカルシウム塩を含む組成物。
（２）  前記アニオン交換体が、マトリックスに結合した１つ又は２つ以上の正荷電基を含む、実施態様１に記載の組成物。
（３）  前記正荷電基が、強塩基、弱塩基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される塩基によってもたらされている、実施態様２に記載の組成物。
（４）  前記強塩基が、四級アミノ基を含む、実施態様３に記載の組成物。
（５）  前記弱塩基が、一級アミノ基、二級アミノ基、三級アミノ基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ基を含む、実施態様３に記載の組成物。
【０２１３】
（６）  前記弱塩基がジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基からなる、実施態様３に記載の組成物。
（７）  前記マトリックスが、脂肪族ポリエステル、多糖類、ポリペプチド、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、シリカ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている、実施態様２〜６のいずれかに記載の組成物。
（８）  前記マトリックスが架橋している、実施態様２〜７のいずれかに記載の組成物。
（９）  前記マトリックスが共有結合で架橋している、実施態様８に記載の組成物。
（１０）  前記組成物が、血液凝固カスケードのいかなるタンパク質も実質的に欠いている、実施態様１〜９のいずれかに記載の組成物。
【０２１４】
（１１）  前記組成物が、スラリー、粉末、フィルム、パッチ、及び液体からなる群から選択される形態である、実施態様１〜１０のいずれかに記載の組成物。
（１２）  前記スラリー又は液体の形態の前記組成物が、医薬的に許容される担体を更に含む、実施態様１１に記載の組成物。
（１３）  前記使用が、所望により前記出血部位に向けて、前記組成物に圧力を加えることを含む、実施態様１〜１２のいずれかに記載の組成物。
（１４）  アニオン交換体と、
カルシウム塩と、
所望により、医薬的に許容される担体とを含む、止血用組成物。
（１５）  前記アニオン交換体が、マトリックスに結合した１つ又は２つ以上の正荷電基を含む、実施態様１４に記載の止血用組成物。
【０２１５】
（１６）  前記正荷電基が、強塩基、弱塩基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される塩基によってもたらされている、実施態様１５に記載の止血用組成物。
（１７）  前記強塩基が、四級アミノ基を含む、実施態様１６に記載の止血用組成物。
（１８）  前記弱塩基が、一級アミノ基、二級アミノ基、三級アミノ基、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ基を含む、実施態様１６に記載の止血用組成物。
（１９）  前記弱塩基がジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基からなる、実施態様１６に記載の止血用組成物。
（２０）  前記マトリックスが、脂肪族ポリエステル、多糖類、ポリペプチド、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、シリカ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている、実施態様１４〜１９のいずれかに記載の止血用組成物。
【０２１６】
（２１）  前記マトリックスが架橋している、実施態様１５〜２０のいずれかに記載の止血用組成物。
（２２）  前記架橋ポリマーが共有結合で架橋している、実施態様２１に記載の止血用組成物。
（２３）  前記多糖類が、セルロース、デキストラン、アガロース、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されている、実施態様２０〜２２のいずれかに記載の止血用組成物。
（２４）  前記組成物が、血液凝固カスケードのいかなるタンパク質も実質的に欠いている、実施態様１５〜２３のいずれかに記載の止血用組成物。
（２５）  前記組成物が、スラリー、粉末、フィルム、パッチ、及び液体からなる群から選択される形態である、実施態様１５〜２４のいずれかに記載の止血用組成物。
【０２１７】
（２６）  前記スラリー又は液体の形態の前記組成物が、医薬的に許容される担体を更に含む、実施態様２５に記載の止血用組成物。
（２７）  マトリックスに結合したジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）と、
カルシウム塩とを含む、止血用組成物。
（２８）  止血用組成物の調製方法であって、
１つ又は２つ以上の正荷電基を架橋マトリックスに共有結合させることによってアニオン交換体を調製することと、
前記アニオン交換体にカルシウム塩を添加することと、を含む、方法。
（２９）  実施態様２８に記載の方法により得ることのできる、止血用組成物。
【図１】
2020502241.tif 000008
2020502241.tif 000009
【図２Ａ】
2020502241.tif 000010
2020502241.tif 000011
【図２Ｂ】
2020502241.tif 000012
2020502241.tif 000013
【図２Ｃ】
2020502241.tif 000014
2020502241.tif 000015
【国際調査報告】
2020502241.tif 000016
2020502241.tif 000017