(57)【要約】上皮間葉転換（ＥＭＴ）を阻害または低減する、アルブミン組成物を含む組成物が記載されている。実施形態において、そのような組成物は、アルブミンを含み、ｉ）ＥＭＴ促進剤を含まない、もしくは低濃度のＥＭＴ促進剤を含むか、ｉｉ）７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比でＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の含有量を含むか、またはｉｉｉ）その両方を含む。ＥＭＴ促進剤は、オクタン酸、オクタン酸塩、またはこれらの組み合わせである。抗ＥＭＴ剤は、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである。アルブミンに基づいた様々な治療用途における、より詳細にはＥＭＴが予防されるべき、または最小限に抑えられるべき疾患または状態の治療における、そのようなアルブミン組成物の使用である。これらのアルブミン組成物は、有利には、既知の活性成分と組み合わせて使用することができる。様々な治療適応症の治療において、より詳細にはＥＭＴが予防されるべき、または最小限に抑えられるべき疾患または状態の治療において使用される、抗ＥＭＴ剤の組成物も記載されている。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
疾患または状態の治療のためにアルブミンの組成物を受ける必要のある対象において、前記疾患または前記状態の治療に使用される組成物であって、前記組成物が、上皮間葉転換（ＥＭＴ）を阻害または低減し、
−アルブミンを含有し、
−ＥＭＴ促進剤を含有せず、もしくは低濃度のＥＭＴ促進剤を含有し、及び／または
−７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比でＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の含有量を含有し、
ここで、
−前記ＥＭＴ促進剤が、オクタン酸、オクタン酸塩、またはこれらの組み合わせであり、
−前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせであり、
−前記低濃度のＥＭＴ促進剤が、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル未満であり、
−但し、前記ＥＭＴ促進剤及び前記抗ＥＭＴ剤が脂肪酸である場合、これらが別個の脂肪酸であること、またはジグリセリドもしくはトリグリセリドの一部であることが条件である、前記組成物。
【請求項２】
前記低濃度のＥＭＴ促進剤が、アルブミン１グラムあたり０．０４ミリモル以下である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記低濃度のＥＭＴ促進剤が、０．００７％（ｗ／ｗ）以下である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
ＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の前記比が５：５〜０：１０である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸の塩、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のジグリセリド、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ１０脂肪酸、Ｃ１０脂肪酸の塩、またはこれらの組み合わせである、請求項６記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物が、約１％〜約４０％（ｗ／ｖ）のアルブミンを含む水性アルブミン調合剤である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記塩が、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、亜鉛、鉄、もしくは銅の塩、またはこれらの組み合わせである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記塩がナトリウムの塩である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物が薬学的活性剤を更に含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記活性剤が抗がん薬であり、前記医薬が、がんを治療するためのものである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記抗がん薬がタキサンである、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
タキサンがパクリタキセルまたはドセタキセルである、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記アルブミンの組成物が、医師により前記疾患または前記状態の治療のために推奨される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記疾患または状態が、出血、血液量減少、熱傷、急性肝不全、肝機能障害、低アルブミン血症、成人呼吸促迫症候群、硬変、新生児溶血性疾患、心肺バイパス術、ネフローゼ、がん、肝腎症候群、敗血症、臓器灌流、または臓器再灌流である、請求項１〜１１および１５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を阻害または低減するために使用される組成物であって、前記組成物が、
−ＥＭＴ促進剤を含まず、もしくは低濃度のＥＭＴ促進剤を含み、及び／または
−７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比でＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の含有量を含み、
ここで、
−前記ＥＭＴ促進剤が、オクタン酸、オクタン酸塩、またはこれらの組み合わせであり、
−前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせであり、
−前記低濃度のＥＭＴ促進剤が０．０２Ｍ未満であり、
−但し、前記ＥＭＴ促進剤及び前記抗ＥＭＴ剤が脂肪酸である場合、これらが別個の脂肪酸であること、またはジグリセリドもしくはトリグリセリドの一部であることが条件である、前記組成物。
【請求項１８】
前記低濃度のＥＭＴ促進剤が０．０１Ｍ以下である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
前記低濃度のＥＭＴ促進剤が０．００１Ｍ以下である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項２０】
ＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の前記比が５：５〜０：１０である、請求項１７に記載の組成物。
【請求項２１】
ＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の前記比が約０：１０である、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである、請求項１７〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２３】
前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸の塩、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のジグリセリド、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ１０脂肪酸、Ｃ１０脂肪酸の塩、Ｃ１０脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１０脂肪酸のジグリセリド、Ｃ１０脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記塩が、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、亜鉛、鉄、もしくは銅の塩、またはこれらの組み合わせである、請求項１７〜２４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２６】
前記塩がナトリウムの塩である、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
前記組成物が薬学的活性剤を更に含む、請求項１７〜２６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２８】
前記活性剤が抗がん薬であり、前記医薬が、がんを治療するためのものである、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記抗がん薬がタキサンである、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
タキサンがパクリタキセルまたはドセタキセルである、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
出血、血液量減少、熱傷、急性肝不全、肝機能障害、低アルブミン血症、成人呼吸促迫症候群、硬変、新生児溶血性疾患、心肺バイパス術、ネフローゼ、がん、肝腎症候群、敗血症、臓器灌流、臓器再灌流、瘢痕形成、乾癬、または湿疹である疾患または状態を治療するために使用される、請求項１７〜２７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３２】
ＥＭＴ促進剤と抗ＥＭＴ剤の総濃度が、経口または局所投与では１用量あたり前記対象の５ｍｇ／ｋｇ〜３００ｍｇ／ｋｇである、請求項１７〜２７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記総濃度が１用量あたり１０ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇである、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記総濃度が、静脈内、腹腔内、直腸内、筋肉内、または皮下投与では１用量あたり前記対象の０．５ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇである、請求項１７〜２７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３５】
前記総濃度が１用量あたり０．５ｍｇ／ｋｇ〜４ｍｇ／ｋｇである、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記組成物が局所投与され、前記医薬が、熱傷を治療するため、瘢痕形成を予防するため、または瘢痕、乾癬、もしくは湿疹を治療するためのものである、請求項１７〜２７、３２及び３３のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防または最小限にする方法、及び上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防または最小限にする医薬の調製における対応する使用に関する。より詳細には、本発明は、アルブミン調合剤及び様々な医学的用途におけるそれらの使用に関する。アルブミン調合剤は、ＥＭＴ促進剤を含まず、もしくは低濃度のＥＭＴ促進剤を含み、または抗ＥＭＴ剤を含み、ＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比は、７：３〜０：１０である。抗ＥＭＴ剤は、炭素が９〜１４個のアルキル鎖を含む脂肪酸、またはその塩もしくはそのモノグリセリドもしくはそのジグリセリドもしくはそのトリグリセリド、あるいはこれらの組み合わせである。ＥＭＴ促進剤は、オクタン酸（Ｃ８脂肪酸）またはオクタン酸塩（Ｃ８脂肪酸の塩）である。
【０００２】
本発明は、様々な医学的状態の治療における抗ＥＭＴ剤の方法及び使用にも関する。
【背景技術】
【０００３】
アルブミン
ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）は、ヒトの血漿中に最も豊富に存在するタンパク質である（濃度３５〜５０ｇ／Ｌ）。ＨＳＡは、血漿中において可溶性であり、タンパク質モノマーとして存在する（ＭＷ＝６６，５００）。肝臓において産生され、多数の機能を実行し、その大部分は小分子の輸送を伴う。ＨＳＡは、疎水性カルボン酸に優先的に結合する。ＨＳＡに結合し、ＨＳＡにより輸送される分子には、遊離脂肪酸、甲状腺ホルモンなどのホルモン、非抱合型ビリルビン及び様々な薬物が含まれる。このように、ＨＳＡは、薬物に結合して半減期を延長することができ、その後の異化過程に遅延をもたらす。体循環中のＨＳＡの比較的高い濃度のため、循環系内のコロイド（膠質）浸透圧を維持している。膠質浸透圧は、主に、ＨＳＡの大分子が血管壁から逃避できないことによって生じる。
【０００４】
アルブミンの熱処理
このように、ＨＳＡは、血液量減少症の治療に広く使用されている。血液量減少症は、血漿の損失によって生じる血液量の有意な減少をもたらす状態を指す。いくつかの原因が血液量減少症を引き起こすことがあり、これらには、外傷、熱傷及び外科手術が含まれる。従来のＨＳＡは、血漿の低温エタノール分画によって調製され、Ｃｏｈｎプロセス（第二次世界大戦中に開発された）及びその変形である。しかし、精製されたＨＳＡは、ウイルス病原体を含有することもあり、６０℃で１０時間にわたる熱処理または加熱低温殺菌の過程を必要とする。アルブミンは、変性し易く、熱処理（例えば、滅菌）の際に不溶性（非機能性）の凝集体を後形成し易い。したがって、熱処理によるＨＳＡの変性を最小限にするため、市販のＨＳＡ製剤は、低温殺菌する前に、中鎖脂肪酸、オクタン酸及びＮ−アセチルトリプトファンを添加することによって調製される。オクタン酸ナトリウムはモノマーＨＳＡを熱から保護し、一方、Ｎ−アセチルトリプトファンは酸化ストレスから保護することが示されている。Ｍ．Ａｎｒａｋｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．ＡＣＴＡ  １７０２（１），９−１７（２００４）。中鎖及び長鎖脂肪酸を使用するアルブミンの安定化も、Ｓｈｒａｋｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ８１（４），２３５−２４８（２００６）、米国特許出願第２０１５／０１６５０００号及び米国特許第７，３５１，８００号に記載されている。注目すべきは、容易な利用可能性及び長鎖脂肪酸に対する大きな可溶性のため、オクタン酸ナトリウムが、市販のアルブミン調合剤の安定剤として現在使用されている主要な安定剤を構成していることである。更に、数十年にわたる使用の後、オクタン酸ナトリウム及びＮ−アセチルトリプトファン安定化ＨＳＡは、オクタン酸ナトリウム及びＮ−アセチルトリプトファンを代謝することができる健康な肝臓を有する対象に比較的安全に使用されるということが確立されている。
【０００５】
アルブミン調合剤の治療用途
アルブミンを含有する調合剤は、多くの場合、ヒト及び動物に治療的に提供されている。例えば、アルブミンを含有する調合剤は、以下の適応症：ショックを伴う、または伴わない血液量減少；アルブミンの不十分な産生（栄養失調、熱傷、重傷、先天性無アルブミン血症、肝疾患、感染、悪性腫瘍、もしくは内分泌障害に起因する）、過剰な異化作用（熱傷、重傷、膵炎、甲状腺中毒症、天疱瘡、もしくはネフローゼに起因する）、身体からのアルブミンの損失（出血、過剰腎排泄、熱傷滲出液、滲出性腸疾患、もしくは剥脱性皮膚炎に起因する）及び／または身体内のアルブミンの再分布（大手術、腹水を伴う硬変、もしくは様々な炎症状態）からもたらされうる低アルブミン血症；心肺バイパス術の前または最中；ならびに熱傷または硬変の治療のうちの１つ以上のためにヒトに一般的に投与される。
【０００６】
治療用途のためにアルブミンを（典型的には、５または２５％の濃度で）含有する多数の異なる調合剤が市販されており、または市販されてきており、例えば以下が含まれる。
●Ａｌｂｕｍｉｎａｒ（登録商標）−２５（Ｃｅｎｔｅｏｎ／Ａｖｅｎｔｉｓ  Ｂｅｈｒｉｎｇ）は、Ｃｏｈｎプロセスに従って低温制御分画によって大きな成人静脈血漿プールから得た、２５％のアルブミンの滅菌水溶液を含有する。これは、０．０２ＭのＮ−アセチルトリプトファンナトリウム及び０．０２Ｍのカプリル酸ナトリウムで安定化され、６０℃で１０時間低温殺菌されている。
●Ｂｕｍｉｎａｔｅ（登録商標）（Ｂａｘｔｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）は、Ｃｏｈｎ冷エタノール分画プロセスを使用してヒト静脈血漿から調製され、重炭酸ナトリウム及び／または水酸化ナトリウムで生理学的ｐＨに調整され、Ｎ−アセチルトリプトファン（０．０１６Ｍ）及びカプリル酸ナトリウム（０．０１６Ｍ）で安定化されている、アルブミンの滅菌水溶液である。Ｂｕｍｉｎａｔｅ（登録商標）５％は、５％（重量／体積）のアルブミンを含有し、Ｎ−アセチルトリプトファン（０．００４Ｍ）及びカプリル酸ナトリウム（０．００４Ｍ）で安定化されている。Ｂｕｍｉｎａｔｅ（登録商標）２５％は、２５％（重量／体積）のアルブミンを含有し、Ｎ−アセチルトリプトファン（０．０２Ｍ）及びカプリル酸ナトリウム（０．０２Ｍ）で安定化されている。ナトリウムイオン含有量は、１４５±１５ｍＥｑ／Ｌである。この溶液は、防腐剤を含有せず、新鮮な全血または血漿において見出される凝固因子を含有しない。
●Ｐｌａｓｂｕｍｉｎ（登録商標）−２５（Ｇｒｉｆｏｌｓ）は、水性希釈剤中２５％（重量／体積）のアルブミンの滅菌溶液である。この調合剤は、０．０２Ｍのカプリル酸ナトリウム及び０．０２ＭのＮ−アセチルトリプトファンで安定化され、炭酸ナトリウムで緩衝されている。この製品のアルミニウム含有量は、２００μｇ／Ｌ以下である。この製品の推定ナトリウムイオン含有量は、１４５ｍＥｑ／Ｌである。
●Ａｌｂｕｔｅｉｎ（登録商標）２５％（Ｇｒｉｆｏｌｓ）は、２５％（重量／体積）のヒトアルブミンを含有する滅菌水溶液であり、静脈血から得たヒトプール血漿から冷アルコール分画法により得られる。この製品は、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモルのカプリル酸ナトリウム及び０．０８ミリモルのＮ−アセチルトリプトファンナトリウムにより安定化されている。アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモルのカプリル酸ナトリウムは、２５％アルブミンの溶液中０．０２Ｍのカプリル酸ナトリウムに相当する。Ａｌｂｕｔｅｉｎ（登録商標）２５％溶液は、１リットルあたり１３０〜１６０ミリ当量のナトリウムイオンを含有し、６．９±０．５のｐＨを有する。この製品は防腐剤を含有しない。
●Ａｌｂｕｍａｒｃ（登録商標）（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｒｅｄ  Ｃｒｏｓｓ）は、Ｃｏｈｎ冷エタノール分画プロセスを使用してヒト静脈血漿から調製され、重炭酸ナトリウム及び／または水酸化ナトリウムで生理学的ｐＨに調整され、カプリル酸ナトリウム及びＮ−アセチルトリプトファンナトリウムで安定化されている、５％または２５％（重量／体積）のアルブミンの滅菌水溶液である。
●Ｒｅｃｏｍｂｕｍｉｎ  Ｐｒｉｍｅ（登録商標）（Ａｌｂｕｍｅｄｉｘ／Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）は、ＩＣＨ  Ｑ７基準に準じて製造された組み換えヒトアルブミン（ｒＡｌｂｕｍｉｎ）である。Ｒｅｃｏｍｂｕｍｉｎ（登録商標）の供給源は、組み換えＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（パン酵母）発酵であり、動物またはヒト由来の材料を使用することなく製造されている。Ｒｅｃｏｍｂｕｍｉｎ  Ｐｒｉｍｅ（登録商標）は、２０％（ｗ／ｖ）のタンパク質溶液を含有する５０ｍｌのタイプＩＩガラスバイアルで販売されている。これは、３２ｍＭのカプリル酸ナトリウム、１４５ｍＭの塩化ナトリウム及び１５ｍｇ／ＬのＰｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０で安定化されている。
●Ｒｅｃｏｍｂｕｍｉｎ  ２０％  Ａｌｐｈａ（登録商標）（Ａｌｂｕｍｅｄｉｘ／Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）は、ＩＣＨ  Ｑ７基準に準じて製造された組み換えヒトアルブミン（ｒＡｌｂｕｍｉｎ）である。Ｒｅｃｏｍｂｕｍｉｎの供給源は、組み換えＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（パン酵母）発酵であり、動物またはヒト由来の材料を使用することなく製造されている。Ｒｅｃｏｍｂｕｍｉｎ  Ａｌｐｈａ（登録商標）は、２０％（ｗ／ｖ）のタンパク質溶液を含有する５０ｍｌのタイプＩＩガラスバイアルで販売されている。これは、１６ｍＭのカプリル酸ナトリウム及び１４５ｍＭの塩化ナトリウムで安定化されている。
●Ｒｅｃｏｍｂｕｍｉｎ  １０％  Ａｌｐｈａ（登録商標）（Ａｌｂｕｍｅｄｉｘ／Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）は、ＩＣＨ  Ｑ７基準に準じて製造された組み換えヒトアルブミン（ｒＡｌｂｕｍｉｎ）である。Ｒｅｃｏｍｂｕｍｉｎ（登録商標）の供給源は、組み換えＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（パン酵母）発酵であり、動物またはヒト由来の材料を使用することなく製造されている。Ｒｅｃｏｍｂｕｍｉｎ  Ａｌｐｈａ（登録商標）は、１０％（ｗ／ｖ）のタンパク質溶液を含有する５０ｍｌのタイプＩＩガラスバイアルで販売されている。これは、８ｍＭのカプリル酸ナトリウム及び１４５ｍＭの塩化ナトリウムで安定化されている。
●Ａｌｂａｇｅｎ（登録商標）５％（Ｎｅｗ  Ｃｅｎｔｕｒｙ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）は、Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓを用いて製造された組み換えヒトアルブミン（ｒＡｌｂｕｍｉｎ）である。Ｎ末端に単一の欠失（Ａｓｐ）を有するプロトタイプヒト血清アルブミン配列から誘導されている。これは、ニッケル及び銅への高親和性部位が低減されているヒト血清アルブミンの生物学的特性を全て有している。４ｍＭのカプリル酸ナトリウム及び４ｍＭのＮ−アセチルトリプトファンを含有する、ＰＢＳ中の滅菌５％溶液である。
●Ｋｅｄｂｕｍｉｎ（登録商標）（Ｋｅｄｒｉｏｎ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）は、２５％のアルブミンを含有する単回用量静脈内投与用の滅菌水溶液であり、ヒトプール血漿から冷エタノール分画により調製される。この製品は、アルブミン１グラムあたり０．０８ｍｍｏｌのカプリル酸ナトリウム及び０．０８ｍｍｏｌのＮ−アセチルトリプトファンナトリウムの添加により安定化されている。アルブミン１グラムあたり０．０８ｍｍｏｌのカプリル酸ナトリウムは、２５％アルブミンの溶液中０．０２Ｍのカプリル酸ナトリウムに相当する。加えて、材料は１リットル毎に１３０〜１６０ｍＥｑのナトリウムイオン及び≦２００μｇのアルミニウムを含有する。この製品は防腐剤を含有しない。
【０００７】
このように、市販のヒトアルブミン調合剤は、典型的にはオクタン／カプリル酸（またはオクタン／カプリル酸ナトリウム）を使用して安定化されている。
【０００８】
薬物の送達ビヒクルとしてのアルブミン
ＨＳＡは、親油性抗がん薬のための潜在的な送達ビヒクルとして考慮されてきた。例えば、Ａｂｒａｘａｎｅ（商標）（ナノ粒子アルブミン結合パクリタキセル）は、米国において転移性乳癌（２００５年）、非小細胞肺癌（２０１２年）及び転移性膵癌（２０１３年）について承認されている。この場合、親油性パクリタキセルは、０．９％塩化ナトリウムにより再構成される注射用懸濁剤に使用するため、アルブミン結合ナノ粒子（平均サイズ：１３０ｎＭ）として処方され、ＨＳＡは、以前は、オクタン酸ナトリウム（カプリル酸ナトリウム）及びＮ−アセチルトリプトファン（ナトリウムＮ−アセチルトリプトファネート）で治療されていた。他の難水溶性がん薬の送達ビヒクルとしてのＨＳＡの潜在的な使用が、文献において考証されている。例えば、Ｑ．Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ６，３９７−４０５（２０１１）は、葉酸抱合型ＨＳＡ−１０−ヒドロキシカプトテシン装填ナノ粒子が持続放出の挙動を実証し、癌細胞により取り込まれる薬物の効果的な送達系であることを実証したと報告している。同じ学術誌のより最近の版は、１０−ヒドロキシカプトテシン装填グリチルリチン酸抱合型アルブミンナノ粒子が、肝細胞癌標的療法に有望なビヒクルであることを実施した。Ｙ．Ｚｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ８，１２０７−１２２２（２０１３）。アルブミンナノ粒子は、例えば、Ｓ．Ａｂｂａｓｉ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ２０１２：Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  ６８６１０８，８  ｐａｇｅｓ）によりがん薬のドキソルビシンの送達ビヒクルとしても研究されており、ポリエチレンイミンのコーティングの添加によりＨＳＡナノ粒子を改質してカチオン性アルブミンナノ粒子とすると、ＭＣＦ−７乳癌細胞に対するドキソルビシンの治療指数を改善したことを報告している。ナノ粒子の正味正電荷が癌細胞への貫入を（ＨＳＡと比較して）改善し、それによって長期間にわたって癌細胞に対するより強力な細胞傷害性効果を生じたことが観察された。
【０００９】
安定した安全なアルブミン調合剤への継続的な必要性が存在する。
【００１０】
本記載は、多数の文書を参照しているが、その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【発明の概要】
【００１１】
本発明は、以下の項目に関する。
【００１２】
項目１：アルブミンを含む組成物により疾患または状態を治療し、同時に上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防または最小限にする方法であって、有効量の前記組成物を、必要性のある対象に投与することを含み、前記組成物がオクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含有せず、または低減量のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含有し、前記低減量が、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル未満である、前記方法。
【００１３】
項目２：前記低減量のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩がアルブミン１グラムあたり０．０５ミリモル未満である、項目１に記載の方法。
【００１４】
項目３：前記低減量のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩がアルブミン１グラムあたり０．００５ミリモル未満である、項目１に記載の方法。
【００１５】
項目４：前記低減量のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩がアルブミン１グラムあたり０．０００５ミリモル未満である、項目１に記載の方法。
【００１６】
項目５：前記組成物がオクタン酸またはオクタン酸塩を実質的に含まない、項目１に記載の方法。
【００１７】
項目６：前記組成物がオクタン酸またはオクタン酸塩を含まない、項目１に記載の方法。
【００１８】
項目７：前記組成物が、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル以下の量の脂肪酸及び／またはその塩を含有し、前記量の脂肪酸及び／またはその塩の少なくとも３０％が、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である、項目１に記載の方法。
【００１９】
項目８：前記脂肪酸及び／またはその塩の少なくとも５０％がＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である、項目７に記載の方法。
【００２０】
項目９：前記脂肪酸及び／またはその塩の少なくとも７０％がＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である、項目７に記載の方法。
【００２１】
項目１０：前記脂肪酸及び／またはその塩の少なくとも９０％がＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である、項目７に記載の方法。
【００２２】
項目１１：前記脂肪酸及び／またはその塩の少なくとも９５％がＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である、項目７に記載の方法。
【００２３】
項目１２：前記脂肪酸及び／またはその塩の１００％がＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である、項目７に記載の方法。
【００２４】
項目１３：前記組成物が、約１％〜約４０％（ｗ／ｖ）のアルブミンを含む水性アルブミン調合剤である、項目１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【００２５】
項目１４：前記組成物が、約５％〜約２５％（ｗ／ｖ）のアルブミンを含む水性アルブミン調合剤である、項目１３に記載の方法。
【００２６】
項目１５：前記組成物が、約２０％〜約２５％（ｗ／ｖ）のアルブミンを含む水性アルブミン調合剤である、項目１３に記載の方法。
【００２７】
項目１６：前記Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩が、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸及び／またはその塩である、項目７〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【００２８】
項目１７：前記Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸及び／またはその塩がデカン酸またはデカン酸の塩である、項目１６に記載の方法。
【００２９】
項目１８：前記塩が、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、亜鉛、鉄、または銅の塩である、項目７〜１２及び１６または１７のいずれか１項に記載の方法。
【００３０】
項目１９：前記塩がナトリウムまたはカリウムの塩である、項目１８に記載の方法。
【００３１】
項目２０：前記塩がナトリウムの塩である、項目１８に記載の方法。
【００３２】
項目２１：前記アルブミンがヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）である、項目１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【００３３】
項目２２：前記組成物が液体形態であり、１つ以上の薬学的に許容される浸透圧調節剤を更に含む、項目１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【００３４】
項目２３：前記１つ以上の浸透圧調節剤が、ナトリウム塩、カリウム塩、またはその両方を含む、項目２２に記載の方法。
【００３５】
項目２４：前記組成物が液体形態であり、少なくとも１つの薬学的に許容される抗酸化剤または安定剤を更に含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【００３６】
項目２５：前記少なくとも１つの薬学的に許容される抗酸化剤または安定剤が、抗酸化アミノ酸またはその誘導体である、項目２４に記載の方法。
【００３７】
項目２６：前記少なくとも１つの薬学的に許容される抗酸化剤または安定剤が、Ｎ−アシルメチオニンまたはＮ−アセチルトリプトファネートである、項目２４に記載の方法。
【００３８】
項目２７：前記組成物がナノ粒子の形態である、項目１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【００３９】
項目２８：前記組成物が薬学的活性剤を更に含む、項目１〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【００４０】
項目２９：前記組成物が薬学的活性剤を更に含み、前記薬学的活性薬剤が前記ナノ粒子内にカプセル化されている、項目２７に記載の方法。
【００４１】
項目３０：前記薬学的活性剤が抗癌薬である、項目２８または２９に記載の方法。
【００４２】
項目３１：前記抗がん薬が、タキサン、カンプトテシン、イリノテカン、ゲムシタビン、シトキサン、またはドキソルビシンである、項目３０に記載の方法。
【００４３】
項目３２：前記タキサンがパクリタキセルまたはドセタキセルである、項目３１に記載の方法。
【００４４】
項目３３：前記疾患または状態が、出血、血液量減少性ショック、熱傷、急性肝不全、低アルブミン血症、成人呼吸促迫症候群、硬変、新生児溶血性疾患、心肺バイパス術、ネフローゼ、またはがんである、項目１〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【００４５】
項目３４：前記疾患または状態が、がんである、項目３０〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【００４６】
項目３５：疾患または状態を治療し、同時に上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防または最小限にするためのアルブミンを含む組成物の使用であって、前記組成物がオクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含有せず、または低減量のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含有し、前記低減量が、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル未満である、前記使用。
【００４７】
項目３６：前記組成物が、ある量の脂肪酸及び／またはその塩を含有し、前記量がアルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル以下であり、前記量の脂肪酸及び／またはその塩の少なくとも３０％がＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である、項目３５に記載の使用。
【００４８】
項目３７：疾患または状態を治療し、同時に上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防または最小限にする薬剤の製造のためのアルブミンを含む組成物の使用であって、前記組成物がオクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含有せず、または低減量のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含有し、前記低減量が、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル未満である、前記使用。
【００４９】
項目３８：前記組成物が、ある量の脂肪酸及び／またはその塩を含有し、前記量の脂肪酸及び／またはその塩の少なくとも３０％がＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である、項目３７に記載の使用。
【００５０】
項目３９：疾患または状態を治療し、同時に上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防または最小限にするために使用されるアルブミンを含む組成物であって、前記組成物がオクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含有せず、または低減量のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含有し、前記低減量が、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル未満である、前記組成物。
【００５１】
項目４０：アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル以下の量の脂肪酸及び／またはその塩を含有し、前記量の脂肪酸及び／またはその塩の少なくとも３０％がＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である、項目３９に記載の組成物。
【００５２】
項目４１：アルブミンと、
●アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル未満の量のオクタン酸及び／またはその塩、及び／または
●ある量の脂肪酸及び／またはその塩とを含む組成物であって、前記量の脂肪酸及び／またはその塩の少なくとも３０％がＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である、前記組成物。
【００５３】
項目４２：前記量のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩がアルブミン１グラムあたり０．０５ミリモル未満である、項目４１に記載の組成物。
【００５４】
項目４３：前記量のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩がアルブミン１グラムあたり０．００５ミリモル未満である、項目４２に記載の組成物。
【００５５】
項目４４：前記量のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩がアルブミン１グラムあたり０．０００５ミリモル未満である、項目４３に記載の組成物。
【００５６】
項目４５：アルブミンが１％〜４０％の濃度である、項目４１〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【００５７】
項目４６：アルブミンが５％〜２５％の濃度である、項目４５に記載の組成物。
【００５８】
項目４７：薬学的活性剤を更に含む、項目４１〜４６のいずれか１項に記載の組成物。
【００５９】
項目４８：前記薬学的活性剤が抗がん薬である、項目４７に記載の組成物。
【００６０】
項目４９：前記抗がん薬が、タキサン、カンプトテシン、イリノテカン、ゲムシタビン、シトキサン、またはドキソルビシンである、項目４８に記載の組成物。
【００６１】
項目５０：前記タキサンがパクリタキセルまたはドセタキセルである、項目４９に記載の組成物。
【００６２】
項目５１：前記組成物がオクタン酸またはオクタン酸塩を実質的に含まない、項目４８〜５０のいずれか１項に記載の組成物。
【００６３】
項目５２：疾患または状態を治療し、同時に上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防または最小限にするために使用される、項目４１〜５１のいずれか１項に記載の組成物。
【００６４】
項目５３：前記疾患または状態が、出血、血液量減少性ショック、熱傷、急性肝不全、低アルブミン血症、成人呼吸促迫症候群、硬変、新生児溶血性疾患、心肺バイパス術、またはネフローゼである、項目５２に記載の組成物。
【００６５】
項目５４：疾患または状態を治療し、同時に上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防または最小限にするために使用され、前記疾患または状態が、がんである、項目４８〜５０のいずれか１項に記載の組成物。
【００６６】
項目５５：必要性のある対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防する、最小限にする、または低減する方法であって、有効量のＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリドを含む組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
【００６７】
項目５６：前記Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリドが、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ９〜Ｃ１２脂肪酸のトリグリセリドである、項目５５に記載の方法。
【００６８】
項目５７：前記Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリドが、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ１０〜Ｃ１２脂肪酸のトリグリセリドである、項目５５に記載の方法。
【００６９】
項目５８：前記Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリドが、デカン酸エステルである、項目５５に記載の方法。
【００７０】
項目５９：前記Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリドが、デカン酸ナトリウムである、項目５５に記載の方法。
【００７１】
項目６０：前記Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリドが、デカン酸である、項目５５に記載の方法。
【００７２】
項目６１：前記Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリドが、トリデカン酸グリセリルである、項目５５に記載の方法。
【００７３】
項目６２：前記組成物が脂肪酸の塩を含み、前記塩が、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、亜鉛、鉄、または銅の塩である、項目５５〜５８のいずれか１項に記載の方法。
【００７４】
項目６３：前記塩がナトリウムまたはカリウムの塩である、項目６２に記載の方法。
【００７５】
項目６４：前記塩がナトリウムの塩である、項目６２に記載の方法。
【００７６】
項目６５：前記有効量が、経口または局所投与では１用量あたり５ｍｇ／ｋｇ〜３００ｍｇ／ｋｇである、項目５５〜６４のいずれか１項に記載の方法。
【００７７】
項目６６：前記有効量が、経口または局所投与では１用量あたり１０ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇである、項目６５に記載の方法。
【００７８】
項目６７：前記有効量が、静脈内、腹腔内、直腸内、筋肉内、または皮下投与では１用量あたり０．５ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇである、項目５５〜６３のいずれか１項に記載の方法。
【００７９】
項目６８：前記有効量が、静脈内、腹腔内、直腸内、筋肉内、または皮下投与では１用量あたり０．５ｍｇ／ｋｇ〜４ｍｇ／ｋｇである、項目６７に記載の方法。
【００８０】
項目６９：前記組成物が局所投与される、項目５５〜６４のいずれか１項に記載の方法。
【００８１】
項目７０：前記対象が熱傷または創傷を被っている、項目６９に記載の方法。
【００８２】
項目７１：前記疾患または状態が、出血、血液量減少性ショック、熱傷、急性肝不全、低アルブミン血症、成人呼吸促迫症候群、硬変、新生児溶血性疾患、心肺バイパス術、またはネフローゼである、項目５５〜６４及び６７または６８に記載の方法。
【００８３】
項目７２：対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防する、最小限にする、または低減するための、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリドの使用。
【００８４】
項目７３：対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防する、最小限にする、または低減する医薬の調製のための、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩、及び／またはＣ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリドの使用。
【００８５】
項目７４：前記使用が、有効量のデカン酸及び／またはデカン酸塩を前記対象に投与することを含む、項目７２または７３に記載の使用。
【００８６】
項目７５：前記使用が、有効量のトリデカン酸グリセリルを前記対象に投与することを含む、項目７２または７３に記載の使用。
【００８７】
項目７６：疾患または状態の治療のためにアルブミンの組成物を受ける必要のある対象において、前記疾患または状態を治療する医薬の調製のためのアルブミンの組成物の使用であって、前記アルブミンの組成物が、上皮間葉転換（ＥＭＴ）を阻害または低減し、
−ＥＭＴ促進剤を含有せず、もしくは低濃度のＥＭＴ促進剤を含有し、及び／または
−７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比でＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の含有量を含有し、
ここで、
−前記ＥＭＴ促進剤が、オクタン酸、オクタン酸塩、またはこれらの組み合わせであり、
−前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせであり、
−前記低濃度のＥＭＴ促進剤が、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル未満であり、
−但し、前記ＥＭＴ促進剤及び前記抗ＥＭＴ剤が脂肪酸である場合、これらが別々の脂肪酸であること、またはジグリセリドもしくはトリグリセリドの一部であることが条件である、前記使用。
【００８８】
項目７７：前記低濃度のＥＭＴ促進剤が、アルブミン１グラムあたり０．０４ミリモル以下である、項目７６に記載の使用。
【００８９】
項目７８：前記低濃度のＥＭＴ促進剤が、０．００７％（ｗ／ｗ）以下である、項目７６に記載の使用。
【００９０】
項目７９：ＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の前記比が５：５〜０：１０である、項目７６に記載の使用。
【００９１】
項目８０：前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである、項目７６〜７９のいずれか１項に記載の使用。
【００９２】
項目８１：前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸の塩、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のジグリセリド、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである、項目８０に記載の使用。
【００９３】
項目８２：前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ１０脂肪酸、Ｃ１０脂肪酸の塩、またはこれらの組み合わせである、項目８１に記載の使用。
【００９４】
項目８３：前記組成物が、約１％〜約４０％（ｗ／ｖ）のアルブミンを含む水性アルブミン調合剤である、項目７６〜８２のいずれか１項に記載の使用。
【００９５】
項目８４：前記塩が、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、亜鉛、鉄、もしくは銅の塩、またはこれらの組み合わせである、項目７６〜８３のいずれか１項に記載の使用。
【００９６】
項目８５：前記塩がナトリウムの塩である、項目８４に記載の使用。
【００９７】
項目８６：前記組成物が薬学的活性剤を更に含む、項目７６〜８５のいずれか１項に記載の使用。
【００９８】
項目８７：前記活性剤が抗がん薬であり、前記医薬が、がんを治療するためのものである、項目８６に記載の使用。
【００９９】
項目８８：前記抗がん薬がタキサンである、項目８７に記載の使用。
【０１００】
項目８９：タキサンがパクリタキセルまたはドセタキセルである、項目８８に記載の使用。
【０１０１】
項目９０：前記アルブミンの組成物が、医師により前記疾患または状態の治療のために推奨される、項目７６〜８６のいずれか１項に記載の使用。
【０１０２】
項目９１：前記医薬が、出血、血液量減少、熱傷、急性肝不全、肝機能障害、低アルブミン血症、成人呼吸促迫症候群、硬変、新生児溶血性疾患、心肺バイパス術、ネフローゼ、がん、肝腎症候群、敗血症、臓器灌流、または臓器再灌流である疾患または状態を治療するためのものである、項目７６〜９０のいずれか１項に記載の使用。
【０１０３】
項目９２：対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を阻害または低減する医薬の調製のための組成物の使用であって、前記組成物が、
−ＥＭＴ促進剤を含有せず、もしくは低濃度のＥＭＴ促進剤を含有し、及び／または
−７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比でＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の含有量を含有し、
ここで、
−前記ＥＭＴ促進剤が、オクタン酸、オクタン酸塩、またはこれらの組み合わせであり、
−前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせであり、
−前記低濃度のＥＭＴ促進剤が０．０２Ｍ未満であり、
−但し、前記ＥＭＴ促進剤及び前記抗ＥＭＴ剤が脂肪酸である場合、これらが別々の脂肪酸であること、またはジグリセリドもしくはトリグリセリドの一部であることが条件である、前記使用。
【０１０４】
項目９３：前記低濃度のＥＭＴ促進剤が０．０１Ｍ以下である、項目９２に記載の使用。
【０１０５】
項目９４：前記低濃度のＥＭＴ促進剤が０．００１Ｍ以下である、項目９２に記載の使用。
【０１０６】
項目９５：ＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の前記比が５：５〜０：１０である、項目９２に記載の使用。
【０１０７】
項目９６：ＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の前記比が約０：１０である、項目９５に記載の使用。
【０１０８】
項目９７：前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１２脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである、項目９２〜９６のいずれか１項に記載の使用。
【０１０９】
項目９８：前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸の塩、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のジグリセリド、Ｃ１０〜Ｃ１２脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである、項目９７に記載の使用。
【０１１０】
項目９９：前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ１０脂肪酸、Ｃ１０脂肪酸の塩、Ｃ１０脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１０脂肪酸のジグリセリド、Ｃ１０脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである、項目９８に記載の使用。
【０１１１】
項目１００：前記塩が、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、亜鉛、鉄、もしくは銅の塩、またはこれらの組み合わせである、項目９２〜９９のいずれか１項に記載の使用。
【０１１２】
項目１０１：前記塩がナトリウムの塩である、項目１００に記載の使用。
【０１１３】
項目１０２：前記組成物が薬学的活性剤を更に含む、項目９２〜１０１のいずれか１項に記載の使用。
【０１１４】
項目１０３：前記活性剤が抗がん薬であり、前記医薬が、がんを治療するためのものである、項目１０２に記載の使用。
【０１１５】
項目１０４：前記抗がん薬がタキサンである、項目１０３に記載の使用。
【０１１６】
項目１０５：タキサンがパクリタキセルまたはドセタキセルである、項目１０４に記載の使用。
【０１１７】
項目１０６：前記医薬が、出血、血液量減少、熱傷、急性肝不全、肝機能障害、低アルブミン血症、成人呼吸促迫症候群、硬変、新生児溶血性疾患、心肺バイパス術、ネフローゼ、がん、肝腎症候群、敗血症、臓器灌流、臓器再灌流、瘢痕形成、乾癬、または湿疹である疾患または状態を治療するためのものである、項目９２〜１０２のいずれか１項に記載の使用。
【０１１８】
項目１０７：ＥＭＴ促進剤と抗ＥＭＴ剤の総濃度が、経口または局所投与では１用量あたり前記対象の５ｍｇ／ｋｇ〜３００ｍｇ／ｋｇである、項目９２〜１０２のいずれか１項に記載の使用。
【０１１９】
項目１０８：前記総濃度が１用量あたり１０ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇである、項目１０７に記載の使用。
【０１２０】
項目１０９：前記総濃度が、静脈内、腹腔内、直腸内、筋肉内、または皮下投与では１用量あたり前記対象の０．５ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇである、項目９２〜１０２のいずれか１項に記載の使用。
【０１２１】
項目１１０：前記総濃度が１用量あたり０．５ｍｇ／ｋｇ〜４ｍｇ／ｋｇである、項目１０９に記載の使用。
【０１２２】
項目１１１：前記組成物が局所投与され、前記医薬が、熱傷を治療するため、瘢痕形成を予防するため、または瘢痕、乾癬、もしくは湿疹を治療するためのものである、項目９２〜１０２、１０７及び１０８のいずれか１項に記載の使用。
【０１２３】
項目１１２：疾患または状態の治療のためにアルブミンの組成物を受ける必要のある対象において、前記疾患または状態を治療する方法であって、上皮間葉転換（ＥＭＴ）の刺激を阻害または低減する、且つ
−ＥＭＴ促進剤を含有しない、もしくは低濃度のＥＭＴ促進剤を含有する、または
−７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比でＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の含有量を含有する、アルブミンの組成物を投与することを含み、
ここで、
−前記ＥＭＴ促進剤が、オクタン酸、オクタン酸塩、またはこれらの組み合わせであり、
−前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせであり、
−前記低濃度のＥＭＴ促進剤が、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル未満であり、
−但し、前記ＥＭＴ促進剤及び前記抗ＥＭＴ剤が脂肪酸である場合、これらが別々の脂肪酸であること、またはジグリセリドもしくはトリグリセリドの一部であることが条件である、前記方法。
【０１２４】
項目１１３：対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を阻害または低減する方法であって、
−ＥＭＴ促進剤を含まない、もしくは低濃度のＥＭＴ促進剤を含む、及び／または
−７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比でＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の含有量を含む、組成物を投与することを含み、
ここで、
−前記ＥＭＴ促進剤が、オクタン酸、オクタン酸塩、またはこれらの組み合わせであり、
−前記抗ＥＭＴ剤が、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせであり、
−前記低濃度のＥＭＴ促進剤が０．０２Ｍ未満であり、
−但し、前記ＥＭＴ促進剤及び前記抗ＥＭＴ剤が脂肪酸である場合、これらが別々の脂肪酸であること、またはジグリセリドもしくはトリグリセリドの一部であることが条件である、前記方法。
【０１２５】
添付の図面は、以下の通りである。
【図面の簡単な説明】
【０１２６】
【図１】ＨＰＬＣのクロマトグラムを示し、４０ｍＭのカプリル酸ナトリウムの溶液（上段パネル）、４０ｍＭのデカン酸ナトリウムの溶液（中段パネル）及び実施例１に記載されているように、オクタン酸ナトリウムをデカン酸ナトリウムに代えた後の５％アルブミンの組成物（下段パネル）である。
【０１２７】
【図２】アルブミンを有する及びアルブミンを有さない、オクタン酸ナトリウム：デカン酸ナトリウムの１００：０、９５：５、７０：３０、５０：５０、３０：７０、５：９５、または０：１００の比を含む組成物における、実施例４に記載されているインビトロアッセイのＥＭＴマーカー（コラーゲン）の産生を示す。
【０１２８】
【図３】未変性ＨＳＡプレタンパク質（配列番号１、ＮＣＢＩ基準配列：ＮＰ ０００４６８．１、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ｐ０２７６８）のアミノ酸配列を示す。
【０１２９】
【図４】ＴＧＦ−β誘導ヒト微小血管内皮細胞（ＨＭＥＣ）におけるコラーゲン１α１  ｍＲＮＡ発現（ＥＭＴマーカー）に対する、アルブミンの存在下及び不在下でのオクタン酸ナトリウム及びデカン酸ナトリウムの効果を示す。
【０１３０】
【図５】ＴＧＦ−β誘導ヒト肝細胞癌細胞株ＨｅｐＧ２におけるコラーゲン１α１  ｍＲＮＡ発現（ＥＭＴマーカー）に対する、アルブミンの存在下及び不在下でのオクタン酸ナトリウム及びデカン酸ナトリウムの効果を示す。
【０１３１】
【図６】ＴＧＦ−β誘導ヒト肺上皮細胞Ａ５４９におけるコラーゲン１α１  ｍＲＮＡ発現（ＥＭＴマーカー）に対する、アルブミンの存在下及び不在下でのオクタン酸ナトリウム及びデカン酸ナトリウムの効果を示す。
【０１３２】
【図７】マイトマイシン処理ＥＧＦ誘導ＰＣ−３細胞を使用したスクラッチアッセイの図を示し、細胞の遊走に対する、アルブミンの存在下及び不在下でのオクタン酸ナトリウム及びデカン酸ナトリウムの効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【０１３３】
本発明は、
●脂肪酸もしくはその塩を含まない、または
●ＥＭＴ促進剤を含まない、または
●低濃度のＥＭＴ促進剤を含む、及び／または
●７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比を含む、アルブミンの組成物に関し、
前記ＥＭＴ促進剤は、オクタン酸、オクタン酸塩、またはこれらの組み合わせであり、前記抗ＥＭＴ剤は、９、１０、１１、１２、１３、もしくは１４個の炭素のアルキル鎖を有する脂肪酸（すなわち、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸）、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである。
【０１３４】
本発明は、オクタン酸及びオクタン酸塩がＥＭＴ促進性である、すなわち、オクタン酸及びオクタン酸塩が上皮間葉転換（ＥＭＴ）を刺激するという発見に基づいている。ＥＭＴの刺激が過剰な瘢痕化に寄与するので、重度の熱傷などの、医師が以前はアルブミン調合剤の投与を処方していた多くの医学的状態において、ＥＭＴの刺激は有害である。ＥＭＴの刺激が有害である他の治療適応症は、本明細書の下記に記載されている。
【０１３５】
本発明者たちは、他の脂肪酸、その塩及びそのトリグリセリドが抗ＥＭＴであることも発見した。前記の抗ＥＭＴ剤は、ノナン酸もしくはペラルゴン酸などのＣ９脂肪酸、ノナン酸塩などのＣ９脂肪酸の塩、Ｃ９脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９脂肪酸のジグリセリド、オクタン酸のトリグリセリドもしくはトリノナン酸グリセリルなどのＣ９脂肪酸のトリグリセリド、デカン酸もしくはカプリン酸などのＣ１０脂肪酸、デカン酸塩もしくはカプリン酸塩などのＣ１０脂肪酸の塩、Ｃ１０脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１０脂肪酸のジグリセリド、デカン酸のトリグリセリドもしくはトリデカン酸グリセリルもしくはグリセリルトリカプリンなどのＣ１０脂肪酸のトリグリセリド、ウンデカン酸もしくはウンデシル酸などのＣ１１脂肪酸、ウンデカン酸塩などのＣ１１脂肪酸の塩、Ｃ１１脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１１脂肪酸のジグリセリド、ウンデカン酸のトリグリセリドもしくはトリウンデカン酸グリセリルなどのＣ１１脂肪酸のトリグリセリド、ドデカン酸もしくはラウリン酸などのＣ１２脂肪酸、ドデカン酸塩などのＣ１２脂肪酸の塩、Ｃ１２脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１２脂肪酸のジグリセリド、ドデカン酸のトリグリセリドもしくはグリセリルトリラウリンなどのＣ１２脂肪酸のトリグリセリド、トリデカン酸もしくはトリデシル酸などのＣ１３脂肪酸、トリデカン酸塩などのＣ１３脂肪酸の塩、Ｃ１３脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１３脂肪酸のジグリセリド、トリデカン酸のトリグリセリドもしくはトリデカン酸グリセリルなどのＣ１３脂肪酸のトリグリセリド、テトラデカン酸などのＣ１４脂肪酸、テトラデカン酸塩などのＣ１４脂肪酸の塩、Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド、テトラデカン酸のトリグリセリドもしくはトリテトラデカン酸グリセリルもしくはグリセリルトリミリスチンなどのＣ１４脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである。Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３及びＣ１４脂肪酸のトリグリセリドの効果が試験されており、トリグリセリドが、腸を通過した後に１つのグリセロール分子及び３つの脂肪酸に分解されるので、対応するトリグリセリドと同じ量の脂肪酸を遊離するようにモノグリセリド及びジグリセリドの量が調整されると、対応するモノグリセリド及びジグリセリドが同じ効力を提供すると予測されるのは当然のことである。トリグリセリド、ジグリセリド及びモノグリセリドの抗ＥＭＴ効果は、インビボに放出されたＣ９〜Ｃ１４脂肪酸の活性により伝えられる。
【０１３６】
抗ＥＭＴ剤がアルブミン調合剤に存在する場合、その濃度は、７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比によって表され、７：３、６：４、５：５、４：６；３：７、２：８、１：９及び０：１０が含まれる。１つの実施形態において、７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比のＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の含有量は、２つのオクタン酸と１つのＣ９〜Ｃ１４脂肪酸（すなわち、実施例４に例示されているように２：１の比）もしくは１つのオクタン酸と２つのＣ９〜Ｃ１４脂肪酸（すなわち、１：２の比）から構成されるトリグリセリド、または１つのオクタン酸と１つのＣ９〜Ｃ１４脂肪酸（すなわち、５：５の比）から構成されるジグリセリドによって具体化されている。１つの実施形態において、組成物中のＥＭＴ促進剤の含有量は、低濃度ではない（低濃度のＥＭＴ促進剤は下記に定義されている）が、抗ＥＭＴ剤の含有量は、ＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比が７：３〜０：１０、好ましくは２：１、また好ましくは１：１、更に好ましくは１：２、また好ましくは１：１〜０：１であるようなものである。別の実施形態において、組成物中のＥＭＴ促進剤の含有量は、不在であるか、または低濃度であり（低濃度のＥＭＴ促進剤は下記に定義されている）、抗ＥＭＴ剤の含有量は、ＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比が７：３〜０：１０、好ましくは２：１、６：４、１：１、１：２、３：７、２：８、１：９、または０：１０であるようなものである。
【０１３７】
前記抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ９〜Ｃ１４脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ９脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１０脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１１脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１２脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１３脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１４脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ９〜１２脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１０〜１２脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１０脂肪酸、その塩、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１０脂肪酸、またはその塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１０脂肪酸の塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１１脂肪酸、その塩、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１１脂肪酸、またはその塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１１脂肪酸の塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１２脂肪酸、その塩、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１２脂肪酸、またはその塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１２脂肪酸の塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ９脂肪酸、その塩、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ９脂肪酸、またはその塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ９脂肪酸の塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１０脂肪酸、その塩、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１３脂肪酸、またはその塩、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１３脂肪酸、またはその塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１３脂肪酸の塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１４脂肪酸、その塩、またはそのトリグリセリドである。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１４脂肪酸、またはその塩である。抗ＥＭＴ剤は、好ましくはＣ１０脂肪酸の塩である。
【０１３８】
組成物は、好ましくはオクタン酸またはオクタン酸の塩を実質的に含まない。Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸は、９個の炭素から１４個の炭素の鎖長さを有する脂肪酸である。オクタン酸をカプリル酸またはＣ８脂肪酸と呼ぶこともでき、これは８個の炭素の鎖長さを有する脂肪酸である。本発明は、例えば、対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）の刺激に関連する有害作用を有することなく、すなわち、ＥＭＴの刺激を回避もしくは予防しながら、またはＥＭＴを阻害しながら、対象において疾患または状態を治療するための、本明細書に記載されている組成物の使用にも関する。本発明は、必要性のある対象において、望ましくないＥＭＴの刺激を有することなく、すなわち、ＥＭＴを予防または最小限にしながら疾患または状態を治療する方法であって、本明細書に記載されている組成物を対象に投与することを含む方法にも関する。そのような使用及び方法は、対象において、ＥＭＴの増加をもたらさない、もしくは実質的にもたらさない、及び／または実施形態ではＥＭＴを阻害もしくは低減することができる。
【０１３９】
アルブミンの存在を伴っても、伴わなくても、本明細書に開示されている抗ＥＭＴ剤は、ＥＭＴを阻害することが見出されている。したがって、本発明は、様々な医学的状態を治療するための抗ＥＭＴ剤または抗ＥＭＴ剤の組み合わせの使用にも関する。本発明は、対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を最小限にする、または低減するための抗ＥＭＴ剤または抗ＥＭＴ剤の組み合わせの使用にも関する。抗ＥＭＴ剤または抗ＥＭＴ剤の組み合わせを含む、対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防する、阻害する、最小限にする、または低減するために使用される組成物も包含される。
【０１４０】
本発明の塩は、好ましくは薬学的に許容される塩である。
【０１４１】
上皮間葉転換（ＥＭＴ）及び内皮間葉転換（ＥｎｄｏＭＴ）
上皮間葉転換（ＥＭＴ）及び逆の過程であるＭＥＴ（間葉上皮転換）は、胚形成の際の多くの組織及び臓器の発生にとって重要な過程である。近年、新たに認識された種類の細胞分化転換である内皮間葉転換（ＥｎｄｏＭＴ）が、組織の筋線維芽細胞の別の有力な供給源として出現している。ＥｎｄｏＭＴは複雑な生物学的過程であり、内皮細胞が特定のマーカーを失い、間葉系表現型を取得し、α平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）及びＩ型コラーゲンなどの間葉細胞産物を発現するものである。ＥＭＴと同様に、ＥｎｄｏＭＴは形質転換増殖因子（ＴＧＦ−β）により誘導されうる。本発明の文章を簡素化するため、用語「ＥＭＴ」が本明細書において使用され、細胞分化転換／分化の同一過程であるＥＭＴとＥｎｄｏＥＭＴ過程の両方を包含することが意図される。
【０１４２】
上皮（または内皮）及び間葉細胞は、細胞表現型及び機能に関して互いに異なる。上皮及び内皮細胞は、密着結合、ギャップ結合及び接着結合により互いに密接に結合しており、細胞極性（頂底極性、細胞骨格の極性化）を示し、基底膜で結合している。一方、間葉細胞は、この細胞極性を欠いており、紡錘状表現型を有し、互いに最小限に相互作用する。また、上皮及び内皮細胞は、Ｅ−カドヘリン及びβ−カテニンなどの特徴的な細胞マーカーを発現し、一方、間葉細胞は、Ｎ−カドヘリン、フィブロネクチン、ビメンチン及びα−ＳＭＡ（平滑筋アクチン）などの細胞マーカーを発現する。加えて、間葉細胞は、上皮細胞と比較して増加した遊走能力を有する。このように、ＥＭＴの過程は、細胞形態及び表現型に顕著な変化をもたらす。大まかに言うと、ＥＭＴは３つの過程：胚形成、細胞繁殖遊走及び創傷治癒の際に生じる。ＥＭＴの阻害が、がんまたは過剰な創傷治癒（瘢痕化）などの病態において望ましいので、ＥＭＴを阻害する潜在的な薬物の発見に関する研究が行われてきた。ＥＭＴは繁殖中の細胞に特徴的であるので、ＴＧＦ（形質転換増殖因子）、ＣＴＧＦ（結合組織増殖因子）、ＥＧＦ（上皮増殖因子）、ＨＧＦ（肝細胞増殖因子）及びＩＧＦ（インスリン増殖因子）などのタンパク質増殖因子により誘導される。次いで、増殖因子の阻害剤は、ＥＭＴの阻害剤としての潜在性を提供する。例えば、小細胞（ＭＷ＝３８４）置換イミダゾリルベンズアミドＳＢ−４３１５４２は、ＴＧＦ−β１受容体（アクチビン受容体様キナーゼ、Ｉｎｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００２），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６２（１）６５−７４）の阻害剤であり、ＴＧＦ−β誘導ＥＭＴを含むＴＧＦ−βの腫瘍促進効果を減弱する。同様に、別の小細胞ＥＷ−７２０３は、哺乳類上皮細胞においてＴＧＦ−β１媒介ＥＭＴを遮断する（Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１），Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．１０２（１）：１８８９−９６）。必須キナーゼ（ＰＡＫ：ｐ２１活性化セリン／トレオニンキナーゼ）の阻害も、ＥＭＴ過程を阻害することが見出された（例えば、米国特許出願第２００９／０２８６８５０号を参照すること）。
【０１４３】
Ｃ８脂肪酸またはその塩がＥＭＴを増加させ、一方、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド及びそのトリグリセリドのいずれもがＥＭＴを減少させることが見出された。したがって、アルブミン組成物の投与によってＥＭＴ刺激を予防するため、Ｃ８脂肪酸またはその塩の含有量を低下させること、または完全に無くすることが有益である。あるいは、アルブミン組成物中のＣ８脂肪酸またはその塩の少なくとも３０％の部分を抗ＥＭＴ剤に置き換えると、Ｃ８脂肪酸またはその塩の悪影響を補うことが見出された。あるいは、抗ＥＭＴ剤がＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の総含有量の少なくとも３０％に相当するように、アルブミン組成物に抗ＥＭＴ剤を添加することも本発明により考慮される。
【０１４４】
必要性のある対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防する、阻害する、最小限にする、または低減する方法であって、ＥＭＴ促進剤を含まない、もしくは低量のＥＭＴ促進剤を含む、及び／またはＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の総量の少なくとも３０％に相当する量の抗ＥＭＴ剤を含む、アルブミン組成物を対象に投与することを含む前記方法も提供される。
【０１４５】
必要性のある対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防する、阻害する、最小限にする、または低減するためのアルブミンを含む組成物の使用も提供され、前記アルブミン組成物は、ＥＭＴ促進剤を含まない、もしくは低量のＥＭＴ促進剤を含む、及び／またはＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の総量の少なくとも３０％に相当する量の抗ＥＭＴ剤を含む。
【０１４６】
必要性のある対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防する、阻害する、最小限にする、または低減する医薬の調製のためのアルブミンを含む組成物の使用も提供され、前記アルブミン組成物は、ＥＭＴ促進剤を含まない、もしくは低量のＥＭＴ促進剤を含む、及び／またはＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の総量の少なくとも３０％に相当する量の抗ＥＭＴ剤を含む。
【０１４７】
必要性のある対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を予防する、阻害する、最小限にする、または低減するために使用される、アルブミンを含む組成物も提供され、前記アルブミン組成物は、ＥＭＴ促進剤を含まない、もしくは低量のＥＭＴ促進剤を含む、及び／またはＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の総量の少なくとも３０％に相当する量の抗ＥＭＴ剤を含む。
【０１４８】
本明細書に記載されている使用及び方法は、上皮間葉転換（ＥＭＴ）の刺激を予防する、最小限にする、低減する、阻害する、縮小する、刺激を最小化する、刺激をしない、または刺激を回避することが意図される。本発明は、ＥＭＴを刺激しないので、ＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤を欠いているアルブミン組成物にも関する。本発明の代替的実施形態において、抗ＥＭＴ剤はアルブミン組成物に存在する。本発明の代替的実施形態において、ＥＭＴ促進剤はアルブミン組成物に不在である。本発明の代替的実施形態において、ＥＭＴ促進剤は「低濃度」でアルブミン組成物に存在し、ここで前記「低濃度」は、市販のアルブミン組成物に一般に使用される濃度を下回るもの（すなわち、アルブミン１グラムあたり約０．０８ミリモルのオクタン酸塩）である。好ましくは、低濃度のＥＭＴ促進剤は、アルブミン１グラムあたり０．０００７〜０．０７ミリモル、またはアルブミン１グラムあたり０．０００７〜０．００７ミリモル、またはアルブミン１グラムあたり０．００７〜０．０７ミリモル、またはアルブミン１グラムあたり０．００５〜０．０５ミリモル、またはアルブミン１グラムあたり０．０００５〜０．０５ミリモル、またはアルブミン１グラムあたり０．００２〜０．０２ミリモル、またはアルブミン１グラムあたり０．０００２〜０．０２ミリモル、またはアルブミン１グラムあたり０．０４〜０．０８ミリモル、またはアルブミン１グラムあたり０．０４〜０．０７ミリモル、またはアルブミン１グラムあたり０．０５〜０．０７ミリモルである。本明細書に記載されているように、「低濃度」及び「低量」は、低量が組成物中のアルブミンの量に対して相対的なものであるので、同じものを示している２つの表現である。代替的な実施形態において、アルブミン組成物は、任意のＥＭＴ促進剤を欠いていない。別の実施形態において、ＥＭＴ促進剤は、アルブミン１グラムあたり０．００８ミリモル〜０．００７％（ｗ／ｗ）の濃度でアルブミンの組成物に存在する。別の実施形態において、対象を解毒する目的でのアルブミン組成物の使用、または解毒療法が目的の、もしくは解毒を必要とする対象におけるアルブミン組成物の使用は、本発明から除外される。対象を解毒するためのアルブミン組成物は、米国特許第８，８７７，７１１号に開示されている。１つの実施形態において、対象は、ＥＭＴの予防もしくはＥＭＴ刺激の低減、または過剰瘢痕化の予防、または過剰瘢痕化する刺激の低減、または細胞分化の予防、または細胞分化する刺激の低減が必要である。
【０１４９】
本発明は、出血、血液量減少、熱傷、急性肝不全、肝機能障害、低アルブミン血症、成人呼吸促迫症候群、硬変、新生児溶血性疾患、心肺バイパス術、ネフローゼ、がん、肝腎症候群、敗血症、臓器灌流、臓器再灌流、瘢痕形成、乾癬及び湿疹などの、ＥＭＴ関連疾患、もしくはＥＭＴ関連状態、またはＥＭＴ刺激が望ましくない、もしくは適していない、及び／またはコラーゲンの発現が望ましくない、もしくは適していない疾患または状態の治療における、ならびにＥＭＴ刺激が望ましくない、または適していない疾患または状態の治療のため、抗がん薬などの難水溶性薬と組み合わせた治療用途などのための（ｉ）ＥＭＴ促進剤を含まない、もしくは低量のＥＭＴ促進剤を含む、及び／またはアルブミン組成物中のＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の総量の少なくとも３０％に相当する量の抗ＥＭＴ剤を含む前記アルブミン組成物、及び（ｉｉ）抗ＥＭＴ剤の前記組成物の使用に更に関する。本発明は、アルブミン組成物の投与が医師によって推奨される疾患または状態を治療する医薬の調製のための、本発明のアルブミンの組成物の使用にも関する。アルブミン組成物の投与が医師によって推奨される疾患または状態の治療には、ショックを伴う、または伴わない血液量減少；低アルブミン血症（例えば、栄養失調、熱傷、重傷、先天性無アルブミン血症、肝疾患、肝機能障害、感染、悪性腫瘍、化学療法、内分泌障害などに起因する）、過剰な異化作用（例えば、熱傷、重傷、膵炎、甲状腺中毒症、天疱瘡、ネフローゼなどに起因する）、身体からのアルブミンの損失（例えば、出血、過剰腎排泄、熱傷滲出液、滲出性腸疾患、剥脱性皮膚炎などに起因する）、及び／または身体内のアルブミンの再分布（例えば、大手術、整形外科手術、腹水を伴う硬変、腹膜炎、癒着、憩室炎、様々な炎症状態などに起因する）；心肺バイパス手術の前または最中、熱傷、硬変、急性肝不全または慢性肝疾患の急性代償不全を有する患者におけるアルブミン透析（例えば、体外肝臓支持）、中毒、感染、手術合併症、敗血症性ショック、重症敗血症が含まれるが、これらに限定されない。本発明は、薬物を安定化する、もしくは薬物をより可溶性にする、もしくは薬物の効力を増加するような薬物処方のため、または他の目的のため、または薬物の送達ビヒクルのための、本発明のアルブミンの組成物の使用にも関する。この文脈において、用語「薬物」及び「活性剤」は交換可能でありうる。本発明は、幹細胞療法または体外受精（ＩＶＦ）における幹細胞または胚の凍結保存のため本発明のアルブミンの組成物の使用にも関する。
【０１５０】
１つの実施形態において、本発明の組成物に存在するＣ８〜１４脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドの濃度は、全て、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモルを超える、または０．０８ミリモルに等しい、または０．０８ミリモル未満である。１つの実施形態において、Ｃ８〜１４脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドの総量は、抗ＥＭＴ剤の少なくとも３０％を構成する。
【０１５１】
本発明は、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモルを超える、または０．０８ミリモルに等しい、または０．０８ミリモル未満の量のＣ８〜１４脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドを含むアルブミンの組成物の使用にさらに関し、ＥＭＴ促進剤の量は、組成物に存在するアルブミンの量に対して低濃度であるか、または不在であり、Ｃ８〜１４脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドの前記量の少なくとも３０％、または少なくとも４０％、または少なくとも５０％、または少なくとも６０％は、抗ＥＭＴ剤またはその組み合わせである。前記使用には、血清アルブミンの熱安定化が含まれる。アルブミン組成物が、ＥＭＴ促進剤の含有量を低減もしくは枯渇するように、及び／または本発明の濃度及び／または割合に従った抗ＥＭＴ剤の含有量を添加するように、低温殺菌の後に変更されることも本発明に包含される。
【０１５２】
本発明を記載する文脈における（とりわけ、以下の特許請求における文脈における）用語「ａ」及び「ａｎ」及び「ｔｈｅ」、ならびに同様の参照は、本明細書において特に示されない限り、または文脈と明確に矛盾しない限り、単数及び複数の両方を網羅すると解釈されるべきである。
【０１５３】
用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含まれる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」及び「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」は、特に示されない限り、制約のない用語（すなわち、「含まれるが、これらに限定されない」を意味する）と解釈されるべきである。
【０１５４】
本明細書に列挙されている一連の値は、本明細書に特に示されない限り、単に、この範囲内に入るそれぞれ別々の値を個別に参照する省略方法として機能することが意図され、それぞれ別々の値は、本明細書において個別に列挙されているかのように本明細書に組み込まれる。この範囲内の値の全てのサブセットも、本明細書において個別に列挙されているかのように本明細書に組み込まれる。
【０１５５】
本明細書に記載されている全ての方法は、本明細書に特に示されない限り、または文脈と明確に矛盾しない限り、任意の適切な順番で実施することができる。
【０１５６】
任意及び全ての例の使用、または本明細書に提示される例示的な言葉（例えば、「など」）は、単に、本発明をより良く説明することが意図され、特に要求されない限り、本発明の範囲に制限を課すものではない。
【０１５７】
本発明の実施に必須であるものとして任意の非請求項要素を示すと解釈されるべき言葉は、本明細書中にはない。
【０１５８】
ここで、用語「約」は、通常の意味を有する。用語「約」は、値が、値を決定するために用いられる装置もしくは方法に固有の変動誤差を含むこと、または列挙された値に近い値、例えば、列挙された値（もしくは一連の値）の１０％もしくは５％以内の値を包含することを示すために使用される。
【０１５９】
特に定義されない限り、本明細書に使用される全ての技術及び科学用語は、本発明が属する当業者に一般的に理解されるものと同じ意味を有する。
【０１６０】
本明細書に記載されている研究において、本発明者たちは、オクタン酸及びその塩が、遊離形態またはアルブミンとの複合体のいずれかによって上皮間葉転換（ＥＭＴ）を刺激することを、ヒト近位尿細管上皮細胞におけるＴＧＦ−β誘導コラーゲン発現（ＥＭＴのマーカー）の増加により評価することによって実証している。対照的に、ヒト近位尿細管上皮細胞によるＴＧＦ−β誘導コラーゲン発現の減少（すなわち、ＥＭＴの阻害を示す）が、遊離形態またはアルブミンとの複合体のいずれかの他の飽和脂肪酸（すなわち、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸）またはそのトリグリセリドによる治療の後に検出された。このように、本明細書に提示されている結果は、オクタン酸安定化ＨＳＡの使用が、特に、ＥＭＴの刺激が回避される／最小限に抑えられるべき、がんまたは過剰創傷治癒（瘢痕化）などの特定の病態において望ましくない生物学的効果と関連しうるという証拠、及びＥＭＴに対する阻害効果を有するＣ９〜Ｃ１４脂肪酸安定化ＨＳＡの使用が好ましいという証拠を提供している。
【０１６１】
本発明は、必要性のある対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）の刺激を予防する、最小限にする、または低減する方法であって、アルブミンを含有せず、且つ
−ＥＭＴ促進剤を含まない、もしくは低濃度のＥＭＴ促進剤を含む、及び／または
−７：３〜０：１０のＥＭＴ促進剤：抗ＥＭＴ剤の比でＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の含有量を含む
組成物を、対象に投与することを含む前記方法にも関する。
【０１６２】
ＥＭＴ促進剤は、アルブミン組成物において上記に記載されたものであり、すなわち、オクタン酸、オクタン酸塩、またはこれらの組み合わせである。抗ＥＭＴ剤は、アルブミン組成物において上記に記載されたものであり、すなわち、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の塩、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリド、またはこれらの組み合わせである。ＥＭＴ促進剤の濃度は、高すぎないことが有利であり、好ましくは０．０２Ｍを超えない。実施形態において、ＥＭＴ促進剤の濃度は、０．０１Ｍ以下、０．００１Ｍ以下、０．０００１Ｍ以下である。組成物がアルブミンを含有しないこれらの実施形態において、ＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤は、これらが脂肪酸である場合、別々もしくは別個の化合物でありうる、または、同じ比を保ちながら、ジグリセリドもしくはトリグリセリドの一部である。この実施形態の一例が表２に提示されており、試験トリグリセリドは２本のオクタン酸鎖及び１本のデカン酸鎖を含み、２：１の比をもたらしている。
【０１６３】
本発明は、対象において上皮間葉転換（ＥＭＴ）を阻害または低減する医薬の調製のための組成物の使用も包含し、組成物は、有効量の上記に記載された抗ＥＭＴ剤を含む。１つの実施形態において、有効量の抗ＥＭＴ剤は、ヒトの経口または局所投与では、１用量あたり対象の５ｍｇ／ｋｇ〜３００ｍｇ／ｋｇ、または５ｍｇ／ｋｇ〜２００ｍｇ／ｋｇ、または５ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、または１０ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇを構成する。１つの実施形態において、有効量の抗ＥＭＴ剤は、ヒトの静脈内、腹腔内、直腸内、筋肉内、または皮下投与では、１用量あたり対象の０．５ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、または０．５ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ、または０．５ｍｇ／ｋｇ〜２５ｍｇ／ｋｇ、または０．５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、または０．５ｍｇ／ｋｇ〜４ｍｇ／ｋｇを構成する。前記用量は、治療期間中に１回または反復様式で投与される。１つの実施形態において、前記反復様式は、毎日、２日毎、３日毎、２週間毎、または毎週である。前記治療期間は、好ましくは、医師によって確定される、または望ましい医学的結果が達成されるまでである。
【０１６４】
有効量は、１回または反復式で投与されうる。反復投与は、１日に２〜４回、１日に１回、２日毎に１回、３日毎に１回、１週間に２回、または１週間に１回である。
【０１６５】
１つの実施形態において、抗ＥＭＴ剤は、薬学的に許容されるビヒクルまたは担体を含む薬学的組成物に存在する。
【０１６６】
用語「脂肪酸」は、本明細書において使用されるとき、一般に４〜２８個の炭素の脂肪族鎖（飽和または不飽和にかかわらず）を有するカルボン酸を指す。用語「Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸」は、９、１０、１１、１２、１３、もしくは１４個の炭素の脂肪族鎖を有する脂肪酸、またはその任意の混合物を指す。１つの実施形態において、脂肪族鎖は飽和している。用語「Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリド」は、３つのＣ９〜Ｃ１４脂肪酸にエステル結合しているグリセロール分子を指し、以下の式によって表すことができる。
【化１】
2020502203.tif 000002
【０１６７】
式中、Ｒ’、Ｒ”及びＲ”’は、グリセロール主鎖にエステル化されている、炭素主鎖中に９、１０、１１、１２、１３、または１４個の炭素を有する飽和脂肪酸または塩から独立して選択される。用語「Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のモノグリセリド」は、１つのＣ９〜Ｃ１４脂肪酸にエステル結合しているグリセロール分子を指し、用語「Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸のジグリセリド」は、２つのＣ９〜Ｃ１４脂肪酸にエステル連結しているグリセロール分子を指す。脂肪酸、その塩、及び脂肪酸のトリグリセリドは、直接エステル化、転位、分画、エステル転移反応など、当該技術に既知の任意の方法によって調製されうる。例えば、脂質を、ヤシ油などの植物油源から、転位プロセスなどによって単離または誘導することができる。鎖長の長さ及び分布は、源の油によって変わりうる。Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、その塩、及びＣ９〜Ｃ１４脂肪酸のトリグリセリドの商業的供給源を利用することができ、当業者に知られている。
【０１６８】
１つの実施形態において、アルブミン組成物は、９、１０、１１、１２、１３、もしくは１４個の炭素の単一の脂肪酸またはその塩を含む。別の実施形態において、アルブミン組成物は、９、１０、１１、１２、１３、もしくは１４個の炭素の２つ以上の脂肪酸及び／またはその塩の任意の混合物を含む。
【０１６９】
実施形態において、アルブミン組成物に含まれる脂肪酸及び／または脂肪酸の塩の少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％は、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である。１つの実施形態において、アルブミン組成物に含まれる脂肪酸及び／または脂肪酸の塩の１００％は、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である。
【０１７０】
実施形態において、アルブミン組成物に含まれる脂肪酸及び／または脂肪酸の塩の６０％、５０％、４０％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、または５％以下は、Ｃ８脂肪酸（「オクタン酸」もしくは「カプリル酸」）及び／またはその塩である。１つの実施形態において、アルブミン組成物に含まれる脂肪酸は、オクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含まない、または実質的に含まない。
【０１７１】
用語「オクタン酸」または「カプリル酸」は、本明細書において交換可能に使用され、８個の炭素原子を含む飽和脂肪酸を指す。以下の構造を有する。
【化２】
2020502203.tif 000003
【０１７２】
用語「オクタン酸塩」、「オクタン酸の塩」、「カプリル酸塩」及び「カプリル酸の塩」は、本明細書において交換可能に使用される。
【０１７３】
表現「低減量のＥＭＴ促進剤」及び「低濃度のＥＭＴ促進剤」は、両方とも、市場の市販品アルブミン調合剤に現在使用されているオクタン酸及び／またはオクタン酸塩の量より少ないオクタン酸及び／またはオクタン酸塩の量を指す。市販のアルブミン調合剤は、２５％のアルブミンの調製に０．０２Ｍのカプリル酸ナトリウム、５％のアルブミンの調製に約０．００４Ｍのカプリル酸ナトリウムを使用する。したがって、商業的に使用されるカプリル酸ナトリウムの濃度は、２５％のアルブミンで０．０２Ｍであり、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモルとなる。したがって、低減量のオクタン及び／またはオクタン酸塩は、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモル未満、またはアルブミン１グラムあたり０．０５ミリモル未満、またはアルブミン１グラムあたり０．０１ミリモル未満、またはアルブミン１グラムあたり０．００５ミリモル未満、またはアルブミン１グラムあり０．００１ミリモル未満、またはアルブミン１グラムあたり０．０００５ミリモル未満、またはアルブミン１グラムあたり０．０００１ミリモル未満を表す。
【０１７４】
用語「オクタン酸及び／またはオクタン酸塩を実質的に含まない」は、本明細書において使用されるとき、一般的な技術により定量化されない、または検出されない濃度のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩を指す。本発明者たちに既知であり、使用される技術によって、定量化及び検出のレベルは、０．１ｍＭであり、これは、アルブミン１グラムあたり０．０００５ミリモルに相当する。したがって、「オクタン酸及び／またはオクタン酸塩を実質的に含まない」は、アルブミン１グラムあたり０．０００５ミリモル未満、またはアルブミン１グラムあたり０．０００１ミリモル未満を表す。
【０１７５】
用語「オクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含まない」は、本明細書において使用されるとき、オクタンン酸及び／またはオクタン酸塩が不在であること、または微量が存在していることを指す。例えば、オクタン酸及び／またはその塩を含まない、アルブミンの組成物は、オクタンン酸及び／またはその塩が添加されていない組成物である、またはオクタン酸及び／またはその塩が添加され、後に除去／枯渇されている組成物である。例えば、オクタン酸及び／またはその塩の含有量を、低温殺菌の際にアルブミンを安定化するために添加し、低温殺菌した後に除去することができる。例えば、Ｓｉｇｍａのネイキドアルブミンは、実施例３に使用されており、脂肪酸を有さないものと考慮されているが、製品仕様書は、０．００７％（ｗ／ｗ）以下の微量の脂肪酸を有することを示している。脂肪酸（ＥＭＴ促進剤）を除去するいくつかの方法を本発明の目的に使用することができ、（ｉ）中空糸膜、キャスト（ｃａｓｔ）膜などを使用して抗ＥＭＴ剤に交換する限外濾過／透析（ＵＦ／ＤＦ）、（ｉｉ）抗ＥＭＴ剤に交換する透析管による透析、（ｉｉｉ）サイズ排除カラムもしくは脱塩カラムなどのゲル濾過、（ｉｖ）低ｐＨでの活性炭吸着による吸着、その後の活性炭を除去するための濾過／精製、（ｖ）炭素粒子など、もしくはゼオライト、シリカなどを含む様々な鉱物粉末などの固相への吸着、（ｖｉ）クロマトグラフィー、（ｖｉｉ）３７℃でのＬｉｐｉｄｅｘ  １０００（Ｃ１５炭化水素基２５グラム）などの疎水性カラムクロマトグラフィー、（ｖｉｉｉ）エタノールの添加、場合によりｐＨの低下、続いて不安定な沈殿タンパク質の加熱及び濾過による除去、任意の残留脂肪酸を排除し、同時にエタノールを除去する及び／またはｐＨを中性に近づけるように調整するためのＵＦ／ＤＦ、（ｉｘ）アニオン及びカチオン交換樹脂による、また透析によるイオン交換、（ｘ）ＥＭＴ促進剤を枯渇させるためのアルブミンのアンフォールディング及び抗ＥＭＴ剤によるリフォールディング（すなわち、場合により還元剤（例えば、メルカプトエタノール）の存在下でカオトロープ（例えば、尿素もしくは塩酸グアニジン）を使用してアンフォールドして、アルブミンを解き、結合していたＥＭＴ促進剤を放出し、場合により希釈もしくは透析／透析濾過を進めて微量の任意のＥＭＴ促進剤を除去し、希釈、透析、透析濾過などによりカオトロープの存在を取り除き、抗ＥＭＴ剤の存在下でリフォールディングする）、またはこれらの方法の組み合わせなどである。
【０１７６】
１つの実施形態において、組成物に存在するＣ８〜Ｃ１４脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、もしくはそのトリグリセリド、またはこれらの組み合わせの含有量の少なくとも３０％、または少なくとも４０％、または少なくとも５０％、または少なくとも６０％、または少なくとも７０％、または少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％、または９６％、または９７％、または９８％、または９９％、または１００％（すなわち、ＥＭＴ促進剤及び抗ＥＭＴ剤の総含有量の％）は、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、もしくはそのトリグリセリド、または好ましくはＣ９〜Ｃ１２脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、もしくはそのトリグリセリド、または好ましくはＣ１０〜Ｃ１２脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、もしくはそのトリグリセリド、または好ましくはＣ１０脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、もしくはそのトリグリセリド、または好ましくはデカン酸及び／またはデカン酸塩である。実施形態において、組成物に存在する脂肪酸、その塩、そのモノグリセリド、そのジグリセリド、またはそのトリグリセリドは、放射標識されていない。
【０１７７】
用語「デカン酸」または「カプリン酸」は、本明細書において交換可能に使用され、１０個の炭素原子を含む飽和脂肪酸を指す。以下の構造を有する。
【化３】
2020502203.tif 000004
【０１７８】
用語「デカン酸塩」は、デカン酸の塩、カプリン酸の塩、またはカプリレートの塩を指す。
【０１７９】
有利には、塩は、薬学的に許容される。Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の薬学的に許容される塩の例には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、亜鉛、鉄及び銅の塩、好ましくはナトリウム塩もしくはカリウム塩、またはナトリウムとカリウムの塩の組み合わせが含まれる。１つの実施形態において、塩はナトリウム塩である。１つの実施形態において、Ｃ９〜Ｃ１４脂肪酸の塩は、デカン酸ナトリウムなどのナトリウム塩である。
【０１８０】
１つの実施形態において、アルブミン組成物中の脂肪酸及び／またはその塩の量は、低温殺菌プロセスにおいてアルブミンを安定化するのに適した量であり、２５％のアルブミン濃度では約０．０２Ｍである。より低い濃度のアルブミンは、比例してより少ない量の脂肪酸及び／またはその塩によって安定化される。アルブミンの安定化は、オクタン酸及び／またはオクタン酸塩により実施できること、及び必要な安定化（すなわち、低温殺菌過程）の後、オクタン酸及び／またはオクタン酸塩はアルブミン組成物から除去されることが、本明細書において考慮される。そのような除去は、ストリッピングまたは枯渇と呼ばれる。そのような除去の結果は、脂肪酸またはその塩を実質的に含まないアルブミン組成物であり、ネイキドアルブミン組成物とも呼ばれる。ネイキドアルブミン組成物の使用は、ＥＭＴを予防または最小限にするため、本発明により考慮される。あるいは、アルブミンを安定化するのに使用される脂肪酸またはその塩は、純粋なオクタン酸及び／またはその塩ではなく、少なくとも３０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または１００％であるが、これらに限定されないＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩、またはＣ９〜１２脂肪酸及び／もしくはその塩、またはＣ１０〜Ｃ１２脂肪酸及び／またはその塩、またはＣ１０脂肪酸及び／またはその塩を含有する。脂肪酸及び／またはその塩の少なくとも３０％がＣ９〜Ｃ１４脂肪酸及び／またはその塩である場合では、必要な安定化（すなわち、低温殺菌過程）の後に脂肪酸及び／またはその塩の除去は、本発明の目的においては必要ない。
【０１８１】
１つの実施形態において、調合剤中のアルブミンの量は、約５％〜約４０％（ｗ／ｖ）未満である。１つの実施形態において、調合剤中のアルブミンの量は、約５％〜約２５％（ｗ／ｖ）である。１つの実施形態において、調合剤中のアルブミンの量は、約２０％〜約２５％（ｗ／ｖ）である。１つの実施形態において、調合剤中のアルブミンの量は、約５％（ｗ／ｖ）である。１つの実施形態において、調合剤中のアルブミンの量は、約２０％（ｗ／ｖ）である。１つの実施形態において、調合剤中のアルブミンの量は、約２５％（ｗ／ｖ）である。用語「アルブミンの組成物」、「アルブミン組成物」及び「アルブミン調合剤」は、本明細書において交換可能に使用され、アルブミンを含む組成物を意味する。
【０１８２】
用語「アルブミン」は、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）と同じ及び／または非常に類似した三次構造を有するタンパク質を意味する。１つの実施形態において、アルブミンは未変性ＨＳＡ、またはＨＳＡの機能／特性を保持するその変異体である。図３は未変性ＨＳＡプレタンパク質（配列番号１、ＮＣＢＩ基準配列：ＮＰ＿０００４６８．１、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ｐ０２７６８）のアミノ酸配列を示す。未変性ＨＳＡプレタンパク質のアミノ酸配列の天然の変異は、個々に発生しうることに留意するべきである。
【０１８３】
コード化プレタンパク質は、タンパク質分解的にプロセスされて成熟ＨＳＡタンパク質を生成し、これは、残基２５〜６０９のプレタンパク質を含む（残基１〜１８はシグナルペプチドを定義し、残基１９〜２４はプレペプチドを定義する）。
【０１８４】
アルブミンのいくつかの主な機能／特性は、ｉ）血漿量を調節する能力、ｉｉ）ほぼ１９日±５日の長い血漿半減期、ｉｉｉ）リガンド結合、例えば、ビリルビン脂肪酸、ヘミン及びチロキシンを含む親油性カルボン酸などの内在性分子の結合（Ｔａｂｌｅ  １  ｏｆ  Ｋｒａｇｈ−Ｈａｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ，２００２，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２５，６９５も参照すること）、ｉｖ）酸性または電気陰性の特徴を有する小分子有機化合物、例えば、ワルファリン、ジアゼパム、イブプロフェン及びパクリタキセルなどの薬物の結合（Ｔａｂｌｅ  １  ｏｆ  Ｋｒａｇｈ−Ｈａｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ，２００２，ｓｕｐｒａも参照すること）である。
【０１８５】
用語「変異体」は、未変性ＨＳＡと比べて、１つ以上（いくつか）の位置に変更、すなわち、置換、挿入及び／または欠失を含むポリペプチドを意味する。変更ポリペプチド（変異体）は、ヒトの介入によって未変性アルブミンをコードするポリヌクレオチド配列を修飾することによって得ることができる、または天然に生じうる。変異アルブミンのアミノ酸配列は、配列番号１の残基１〜６０９に少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であり、好ましくは、未変性ＨＳＡの少なくとも１つの機能／特性を維持する。例えば、本発明のアルブミン変異体は、３〜５８５配列のフラグメントを含む。２つのアミノ酸配列の配列同一性は、周知のアルゴリズム、例えば、ＥＭＢＯＳＳパッケージ（ＥＭＢＯＳＳ：Ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｏｐｅｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｓｕｉｔｅ，Ｒｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ．２０００，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｇｅｎｅｔ．１６：２７６−２７７）のＮｅｅｄｌｅプログラムにより実行されるＮｅｅｄｌｅｍａｎ−Ｗｕｎｓｃｈアルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３−４５３）を使用して、決定することができる。配列同一性は、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−１０に記載されているＢＬＡＳＴアルゴリズムを使用して（公開されたディフォルト設定を使用して）決定することもできる。ＢＬＡＳＴ分析を実施するソフトウエアは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎを介して入手することができる。
【０１８６】
したがって、１つの実施形態において、本発明は、未変性成熟アルブミンタンパク質（すなわち、上記の残基２５〜６０９）に少なくとも７０％の同一性を有するアルブミンを含むアルブミン組成物を包含する。実施形態において、本発明は、未変性成熟アルブミンタンパク質に少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するアルブミンの使用を包含する。未変性成熟ＨＳＡタンパク質のそのような変異体は、未変性成熟アルブミンタンパク質と比べて、アミノ酸欠失（複数可）、置換（複数可）及び／または付加（複数可）を有することがある。
【０１８７】
本明細書に定義されている調合剤に存在するアルブミンを、任意の供給源、例えば、血液、血漿、分画ヒト血清から、または遺伝子改変（組み換えアルブミン）によって、単離／得ることができる。分画ヒト血清からのアルブミンは、例えば、血漿の低温エタノール分画（例えば、Ｃｏｈｎプロセス及びその変形）によって調製することができる。アルブミンは、クロマトグラフィーによっても血漿から精製することができる。アルブミンは、一連のアフィニティー及びイオン交換カラムに血漿を適用し、精製されたアルブミンをもたらすことによって得ることができる。精製されたアルブミンは、滅菌のため、典型的には、６０℃で１０時間の熱処理または加熱低温殺菌に付される。熱処理に起因するアルブミンの変性を最小限にするため、アルブミンを脂肪酸（またはその塩）と複合体形成する。アルブミンは、従来の遺伝子改変法を使用して組み換え的に調製することもできる（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ及びＳａｍｂｒｏｏｋ  ａｎｄ  Ｒｕｓｓｅｌｌ（２００１）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ；Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙを参照すること）。例えば、アルブミンポリペプチドをコードする核酸配列を含む組み換え発現ベクターを、細胞、例えば、宿主細胞（細菌または真核細胞）に導入することができ、宿主細胞には、定義された組み換え発現ベクターからタンパク質コード領域を発現することができる生細胞が含まれることがある。リン酸カルシウムまたは塩化カルシウム共沈殿、ＤＥＡＥ−デキストラン媒介形質移入、リポフェクション、電気穿孔、マイクロインジェクション及びウイルス媒介形質移入を含む従来の形質転換または形質移入技術を介して、ベクターを細胞に導入することができる。宿主に形質転換または形質移入するのに適した方法は、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．（ｓｕｐｒａ）、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ａｎｄ  Ｒｕｓｓｅｌｌ（ｓｕｐｒａ）及び他の実験室マニュアルにおいて見出すことができる。本発明の組成物に存在するアルブミンには、アルブミン融合タンパク質及び共有結合を介してタンパク質に抱合しているアルブミンが含まれる。例えば、融合は、柔軟なグリシンセリンリンカーまたは他のリンカーを介してアミノ酸配列（タンパク質またはそのフラグメントを表す）のＣ末端またはＮ末端に遺伝子的に融合しているアルブミンからもたらすことができる。例えば、抱合は、アルブミンのチオール基に反応し共有結合するマレイミド基により修飾されているタンパク質によって生じることができる。
【０１８８】
未変性ＨＳＡの機能／特性の少なくとも１つを維持しているＨＳＡ変異体は、当該技術において良く知られている。本明細書に使用することができる組み換え血清アルブミンの例には、以前に米国特許第５，７８０，５９４号及び米国特許第５，９４８，６０９号に開示されているものが含まれる。加えて、米国特許第６．７８７，６３６号に開示されているものなどの修飾または切断ヒトアルブミンを、本発明に利用することもできる。本明細書に記載されているように、血清アルブミンは、銅及び／またはニッケルなどの微量金属へのアルブミンの親和性を低減し、それによって微量金属へのアレルギー反応を引き起こす可能性を低減するように、Ｎ末端での立体障害を引き起こすのに十分である、Ｎ末端に１つ、もしくは２つのアミノ酸切断、またはＮ末端に任意の他の突然変異を有するもの（すなわち、低アレルギー性ＨＳＡ）でありうる。なお他の形態のＨＳＡも、例えば、ＷＯ２０１１／０５１４８９、米国特許第８，８２２，４１７号、ＷＯ２０１１／１２４７１８及びＷＯ２０１２／０５９４８６に開示されている変更された血漿半減期を有するアルブミン変異体など、特定の用途に適切でありうる。
【０１８９】
実施形態において、本明細書に記載されている調合剤のｐＨは、約５〜約７．５、例えば約５．５〜約７．５、好ましくは約６．５〜７．４である。
【０１９０】
１つ以上の抗酸化剤または安定剤を調合剤に添加することもでき、例えば、システイン、シスチン、メチオニンもしくはＮ−アセチルメチオニンなどのそのＮ−アシル（例えば、Ｎ−アセチル）誘導体などの抗酸化もしくは安定化活性を示すことが知られている含硫アミノ酸、アミノ酸塩、もしくはその誘導体（米国特許第７，３５１，８００号を参照すること）、またはＮ−アセチルトリプトファン（もしくは、Ｎ−アセチルトリプトファネート）などの他の抗酸化剤もしくは安定剤である。このように、１つの実施形態において、本明細書において定義されている調合剤または組成物は、１つ以上の薬学的に許容される抗酸化剤または安定剤、例えば、上記に示された抗酸化剤または安定剤を含む。１つの更なる実施形態において、１つ以上の薬学的に許容される抗酸化剤または安定剤は、Ｎ−アセチルメチオニン及び／またはＮ−アセチルトリプトファンを含む。
【０１９１】
１つの実施形態において、調合剤中の１つ以上の薬学的に許容される抗酸化剤または安定剤は、約０．００１Ｍ〜約０．５Ｍ、約０．００５〜約０．１Ｍ、約０．０１〜約０．１Ｍ、約０．０１〜約０．０８Ｍ、または約０．０１〜約０．０５Ｍ、例えば、約０．０１Ｍ、約０．０２Ｍ、約０．０３Ｍ、約０．０４Ｍ、もしくは約０．０５Ｍ、または上記の任意の２つの数値の間の範囲である。
【０１９２】
１つの実施形態において、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤または担体には、例えば、着色剤、安定剤、防腐剤、希釈剤、ｐＨ調節剤（例えば、塩基性アミノ酸、酸性アミノ酸、塩酸、酢酸、リンゴ酸、もしくは水酸化ナトリウム）、浸透圧調節剤（例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、硫酸マグネシウム、重炭酸ナトリウム、塩化カルシウム、グルコン酸カルシウム、もしくはクエン酸などの電解質）及び／または界面活性剤が含まれる。１つの実施形態において、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤または担体は、浸透圧調節剤（例えば、電解質）を含む。１つの実施形態において、浸透圧調節剤は、約１０ｍＭ〜約５００ｍＭの濃度である。更なる実施形態において、浸透圧調節剤は、約５０ｍＭ〜約３００ｍＭ、約１００ｍＭ〜約２００ｍＭ、約１２０ｍＭ〜約１８０ｍＭ、または約１２５ｍＭ〜約１７５ｍＭの濃度である。１つの実施形態において、浸透圧調節剤は、ナトリウム、カリウム、またはその両方を含む。更なる実施形態において、浸透圧調節剤は、ナトリウム及びカリウムを含む。１つの実施形態において、ナトリウムは、約１３０〜約１６０ｍＭの量である。１つの実施形態において、カリウムは、約１ｍＭ〜約５ｍＭ、例えば、約２ｍＭの量である。
【０１９３】
本明細書に記載されているアルブミン調合剤は、ｉ）脂肪酸、もしくはその塩、もしくはそのモノグリセリド、もしくはそのジグリセリド、もしくはそのトリグリセリド、またはこれらの組み合わせ及びｉｉ）１つ以上の薬学的に許容される賦形剤または担体を、ｉｉｉ）アルブミン水溶液（例えば、薬学的調合剤、注射用水または生理食塩水として投与されうるリン酸緩衝液などの緩衝液）と均一に混合することによって、調製することができる。溶解した後、混合溶液は、対象への投与、例えば、静脈用液体調合剤または注射液剤などの非経口投与に適した製剤に加工される。実施形態において、これらの調合剤を皮下または静脈内投与することができる。
【０１９４】
１つの実施形態において、本明細書に記載されているアルブミン調合剤及び抗ＥＭＴ剤の組成物を、ショックを伴う、または伴わない血液量減少；アルブミンの不十分な産生（例えば、栄養失調、熱傷、重傷、先天性無アルブミン血症、肝疾患、感染、悪性腫瘍、化学療法、もしくは内分泌障害に起因する）、過剰な異化作用（例えば、熱傷、重傷、膵炎、甲状腺中毒症、天疱瘡、もしくはネフローゼに起因する）、身体からのアルブミンの損失（例えば、出血、過剰腎排泄、熱傷滲出液、滲出性腸疾患、もしくは剥脱性皮膚炎に起因する）及び／または身体内のアルブミンの再分布（例えば、大手術、整形外科手術、腹水を伴う硬変、腹膜炎、癒着、憩室炎、もしくは様々な炎症状態）からもたらされうる低アルブミン血症；心肺バイパス術の前または最中；ならびに熱傷または硬変の治療など、市販のアルブミン調合剤が現在使用されている治療適応症のために使用することができる。１つの実施形態において、本明細書に記載されているアルブミン調合剤または組成物は、急性肝不全または慢性肝疾患の急性代償不全を有する患者におけるアルブミン透析（例えば、体外肝臓支持）のために使用される。１つの実施形態において、本明細書に記載されているアルブミン調合剤は、中毒を治療するために使用される。１つの実施形態において、本明細書に記載されているアルブミン調合剤は、感染、手術合併症、敗血症性ショック、または重症敗血症を治療するために使用される。１つの実施形態において、本明細書に記載されているアルブミン調合剤は、薬物を安定化する、もしくは薬物をより可溶性にする、もしくは薬物の効力を増加するような薬物処方のため、または他の目的のため、または薬物の送達ビヒクルのために使用される。この文脈において、用語「薬物」及び「活性剤」は交換可能でありうる。１つの実施形態において、本明細書に記載されているアルブミン調合剤は、幹細胞療法または体外受精（ＩＶＦ）における幹細胞または胚の凍結保存のために使用される。
【０１９５】
このように、本発明は、アルブミンによる治療を必要とする患者を治療する方法であって、有効量の本明細書に記載されているアルブミン調合剤または組成物を前記対象に投与することを含む方法を提供する。本発明は、アルブミンによる治療を必要とする患者を治療するための、本明細書に記載されているアルブミン調合剤の使用を提供する。本発明は、アルブミンによる治療を必要とする患者の治療に使用するために、本明細書に記載されているアルブミン調合剤を提供する。
【０１９６】
１つの実施形態において、前記投与及び使用は、前記対象においてＥＭＴを刺激または増加しない。別の実施形態において、前記投与及び使用は、前記対象においてＥＭＴを予防もしくは最小限にする、またはＥＭＴ刺激を低減する。１つの実施形態において、そのような投与及び使用は、対象において、ＥＭＴの増加をもたらさない、もしくは実質的にもたらさない、及び更なる実施形態ではＥＭＴを阻害もしくは低減する。本明細書において使用されるとき、「ＥＭＴを刺激もしくは増加しない」、「ＥＭＴを予防もしくは最小限にする」、または「ＥＭＴの増加をもたらさない、もしくは実質的にもたらさない」は、本明細書に記載されている組成物または調合剤の投与または使用が、既知の市販のアルブミン調合剤と比較して、ＥＭＴの増加をもたらさない、または実質的にもたらさないことを意味する。これらの表現は、本明細書に記載されている組成物または調合剤の投与または使用が、オクタン酸及び／またはオクタン酸塩による、またはアルブミンと、アルブミン１グラムあたり０．０８ミリモルの濃度のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩とを含む、もしくは抗ＥＭＴ剤が不在である組成物による治療からもたらされるＥＭＴレベルと比べて、対象において低いＥＭＴレベルをもたらすことも意味する。「ＥＭＴを阻害または低減する」は、本明細書に記載されている組成物または調合剤の投与または使用が、治療前の対象のＥＭＴレベルと比較して、対象においてＥＭＴの増加をもたらさない、または実質的にもたらさないだけでなく、ＥＭＴのレベルを低減することも意味する。「ＥＭＴの増加を実質的にもたらさない」は、本明細書において使用されるとき、投与または使用が、ＥＭＴの有意な増加をもたらさないことを意味し、その実施形態では、本明細書に記載されている組成物または調合剤により対象を治療する前と比べて、ＥＭＴの１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１％未満の増加を指す。
【０１９７】
ＥＭＴは、当該技術に既知の様々な方法によって評価することができ、例えば、ＥＭＴに関連する１つ以上のマーカーの発現またはレベルを評価することである。例には、上皮バイオマーカーの発現もしくはレベル、及び／または間葉バイオマーカーの発現もしくはレベルの決定が含まれる。更に、多数の試薬、製品及びキットがＥＭＴ評価のために市販されている。１つの実施形態において、ＥＭＴはヒト近位尿細管上皮細胞におけるＴＧＦ−β誘導コラーゲン発現を評価することによって決定することができ、ヒト近位尿細管上皮細胞におけるＴＧＦ−β誘導コラーゲン発現の増加はＥＭＴの増加を示し、ヒト近位尿細管上皮細胞におけるＴＧＦ−β誘導コラーゲン発現の減少はＥＭＴの減少を示す。
【０１９８】
１つの実施形態において、本明細書に記載されている抗ＥＭＴ剤の調合剤または組成物は、ＥＭＴを予防する、または最小限にする（過剰な創傷治癒または瘢痕化を予防する、または最小限にする）ことが有益である疾患または状態の治療のため、例えば、熱傷（例えば、重症の熱傷もしくは転移）を患っている患者、臓器移植を受けている患者、肝腎疾患を有する患者（例えば、そのような状態に関連する臓器病変を予防もしくは低減するため）、またはがんを有する患者（例えば、化学療法の効力を増加するため）、またはがんを有する患者（例えば、転移過程に関与するＥＭＴの刺激を予防するため）において使用される。
【０１９９】
本明細書に記載されているアルブミン調合剤は、一般に、１回につき約５〜１２．５ｇのアルブミンの用量で成人に投与される。本明細書に記載されている抗ＥＭＴ剤のアルブミン調合剤または組成物は、疾患の状態に応じて、１週間に１回、１週間に２回、３日毎、２日毎、１日に１回もしくは１日に約２〜４回分割、または１回だけ投与することができる。
【０２００】
１つの実施形態において、本明細書に記述されている任意の組成物中のアルブミンは、１％〜４０％、２％〜４０％、５％〜４０％、５％〜３０％、５％〜２５％、２０％〜２５％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、または約２５％の濃度である。
【０２０１】
１つの実施形態において、本明細書に記載されている抗ＥＭＴ剤のアルブミン調合剤または組成物は、活性成分を更に含む。１つの実施形態において、活性成分はアルブミンに抱合されている。別の実施形態において、活性成分はアルブミンに抱合されていない。
【０２０２】
用語「活性剤」は、「活性成分」と交換可能に使用することができる。薬学的活性剤は、例えば、鎮痛薬、麻酔薬、抗炎症剤、抗寄生虫薬（例えば、駆虫薬）、抗不整脈剤、抗喘息剤、抗生物質、抗がん剤、抗凝固薬、抗うつ薬、抗糖尿病剤、抗てんかん薬、抗ヒスタミン薬、鎮咳薬、降圧剤、抗ムスカリン剤、抗マイコバクテリア剤、抗新生物剤、抗酸化剤、解熱薬、免疫抑制薬、免疫賦活薬、抗甲状腺剤、抗ウイルス剤、抗不安鎮静薬（睡眠薬及び神経遮断薬）、収斂薬、静菌剤、ベータアドレナリン受容体遮断剤、血液製剤及び代用薬、気管支拡張薬、緩衝剤、強心剤、化学療法薬、造影剤、コルチコステロイド、鎮咳薬（去痰薬及び粘液溶解薬）、診断用薬剤、画像診断用薬剤、利尿薬、ドーパミン作動薬（抗パーキンソン病剤）、フリーラジカル除去剤、増殖因子、止血薬、免疫剤、脂質調節剤、筋弛緩薬、タンパク質、ペプチド及びポリペプチド、副交感神経刺激薬、副甲状腺カルシトニン及びビスホスホネート、プロスタグランジン、放射性医薬品、ホルモン、性ホルモン（ステロイドを含む）、持効性結合剤、抗アレルギー剤、刺激薬及び食欲抑制薬、ステロイド、交感神経模倣薬、甲状腺用薬剤、ワクチン、血管拡張薬、ならびにキサンチンが含まれる様々な既知のクラスの薬物から選択することができる。
【０２０３】
１つの実施形態において、薬学的活性成分は、水に不溶性または僅かに可溶性である。アルブミンと共に組成物に組み込むことができる薬学的活性成分の例には、アミノグルテチミド、アザチオプリン、ブレオマイシン硫酸塩、ブスルファン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、シクロスポリン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、アミシン、エトポシド、フルオロウラシル、インターフェロン−α、ロムスチン、メルカプトプリン、メトトレキセート、ミトタン、プロカルバジン塩酸塩、チオグアニン、ビンブラスチン硫酸塩、ビンクリスチン硫酸塩、タキサン（例えば、パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、２’−Ｏ−ヘキサノイルドセタキセル及び２’−ベンゾイルドセタキセルなどのドセタキセルの疎水性誘導体）；ラパマイシン及びその誘導体（例えば、テムシロリムス及びエベロリムス）、エポチロンＢ及びその誘導体、タネスピマイシン及びその誘導体などのマクロライド；１０−ヒドロキシカプトテシン、ＳＮ−３８及びその誘導体が含まれるが、これらに限定されないカンプトテシン；アクラシノマイシン及びピラルビシンが含まれるが、これらに限定されないアントラサイクリン抗生物質；またはコルヒチン及びその誘導体、チオコルヒチン二量体、アミオダロン、リオチロニン、シクロスポリン、エキセメスタン、フルタミド、フルベストラント、ロミデプシン、セムスチン、イブプロフェン、シクロスポリン、プロポフォール、ビンブラスチンなどが含まれる他の薬学的活性成分などが含まれる。いくつかの実施形態において、活性成分は抗がん薬であり、例えば、タキサン、カンプトテシン、イリノテカン、ゲムシタビン、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（商標））、ドキソルビシン、またはシスプラチン、好ましくはパクリタキセルまたはドセタキセルなどのタキサンである。特定の実施形態において、活性成分はパクリタキセルである。
【０２０４】
１つの実施形態において、アルブミンはナノ粒子の形態である。したがって、別の態様において、本発明は、（ｉ）アルブミン、（ｉｉ）抗ＥＭＴ剤及び（ｉｉｉ）薬学的活性（例えば、治療）剤を前記アルブミン内に組み込んで含む、またはカプセル化して含むナノ粒子を提供する。したがって、別の態様において、本発明は、（ｉ）アルブミンを含み、（ｉｉ）オクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含まない、または低濃度のオクタン酸及び／またはオクタン酸塩を含むナノ粒子を提供する。前記「低濃度」については上記に記載されている。アルブミン及び薬学的活性剤を含むナノ粒子、ならびにそれを生成する方法は、例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１５／０１８３８０号及び同第ＷＯ２０１６／０００６５３号に開示されている。
【０２０５】
用語「ナノ粒子」は、本明細書において使用されるとき、例えば、約１ｎｍ、約１０ｎｍ、約１００ｎｍ、または約５００ｎｍのレベルのナノスケールのサイズを有する粒子を指す。１つの実施形態において、ナノ粒子は、約１ｎｍ〜約５００ｎｍ、約１０ｎｍ〜約２００ｎｍ、例えば、約３０、５０、７０、８０、もしくは１００〜約１２０、１４０、１６０、１８０、もしくは２００ｎｍ、または上記の任意の２つの数値の間の範囲のサイズを有する。
【０２０６】
１つの実施形態において、組成物（例えば、ナノ粒子）中のアルブミンと薬学的活性剤との重量比は、約０．０１：１〜約１００：１である。更なる実施形態において、組成物（例えば、ナノ粒子）中のアルブミンと薬学的活性剤との重量比は、約０．０２：１〜約５０：１、約０．０５：１〜約２０：１、約０．１：１〜約１０：１、もしくは約０．２：１〜約５：１、または上記の任意の２つの数値の間の範囲である。
【０２０７】
１つの実施形態において、液体形態の薬学的組成物は、約０．１％〜約４０％（ｗ／ｖ）、例えば、約０．５％（ｗ／ｖ）、１％（ｗ／ｖ）、または２％（ｗ／ｖ）〜約５％（ｗ／ｖ）、約１０％（ｗ／ｖ）、約１５％（ｗ／ｖ）、約２０％（ｗ／ｖ）、約３０％（ｗ／ｖ）、または約３５％（ｗ／ｖ）のアルブミンを含む。いくつかの実施形態において、液体形態の薬学的組成物は、約２０％〜約２５％（ｗ／ｖ）のアルブミン、または上記の任意の２つの数値の間の範囲のアルブミンを含む。
【０２０８】
用語「約」は、本明細書において使用されるとき、用語「約」により定義される値の±１０％、好ましくは用語「約」により定義される値の±５％を意味することが意図される。
【０２０９】
１つの実施形態において、本発明は、本明細書に定義されている組成物または調合剤を含み、且つ１つ以上の薬学的に許容される担体または賦形剤を更に含む、薬学的組成物を提供する。そのような薬学的組成物は、薬学技術に周知の方法により調製することができる。担体／賦形剤は、例えば、静脈内、非経口、皮下、筋肉内、頭蓋内、眼窩内、眼内、脳室内、嚢内、脊髄内、髄腔内、硬膜外、大槽内、直腸内、腹腔内、鼻腔内、または経肺（例えば、エアロゾル）投与に適したものでありうる（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，ｂｙ  Ｌｏｙｄ  Ｖ  Ａｌｌｅｎ，Ｊｒ，２０１２，２２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ；Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，ｂｙ  Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，７ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓを参照すること）。治療用製剤は、望ましい程度の純度を有する組成物または調合剤と、１つ以上の任意の薬学的に許容される担体、賦形剤及び／または安定剤とを混合する、当該技術に既知の標準的な方法を使用して調製される。
【０２１０】
「賦形剤」は、本明細書において使用されるとき、当該技術において通常の意味を有し、それ自体が活性成分（薬物）ではない任意の成分である。賦形剤には、例えば、緩衝液、滑沢剤、安定化剤及び／または他の構成成分が含まれる。「薬学的に許容される賦形剤」は、本明細書において使用されるとき、活性成分の生物学的活性の有効性を妨げず、且つ対象に対して毒性でない、すなわち、対象に対して毒性でない種類の賦形剤である及び／または対象に対して毒性でない量で使用される、任意の賦形剤を指す。賦形剤は当該技術において良く知られており、本発明の系は、これらの態様に限定されない。当業者に認識されるように、単一の賦形剤が、一度に２つに機能を満たすことができる、例えば、結合剤と増粘剤の両方として作用することができる。これも当業者に認識されるように、これらの用語は必ずしも相互排他的であるとは限らない。
【０２１１】
１つの実施形態において、本明細書に記載されている抗ＥＭＴ剤のアルブミン調合剤または組成物は、懸濁剤または液剤、例えば注射用の懸濁剤または液剤である。アルブミン調合剤または組成物は、賦形剤、担体、または安定剤を含んでも含まなくてもよい、薬学的に許容される、または生理学的に許容される液体などの任意の適切な液体または希釈剤に懸濁または溶解されうる。任意の及び全ての溶媒及び分散媒体が含まれる。液体または希釈剤の例には、リン酸、クエン酸及び他の有機酸などの緩衝液、アスコルビン酸を含む抗酸化剤が含まれる。水性の液体または希釈剤が好ましく、水（例えば、注射用水）、生理食塩水０．９％ＮａＣｌ（ｗ／ｖ）などの食塩水、またはｐＨ緩衝水溶液などである。
【０２１２】
非経口投与用の製剤は、例えば、賦形剤、滅菌水、食塩水、またはポリエチレングリコールなどのポリアルキレングリコールを含有することができる。生体適合性の生分解性ラクチドポリマー、ラクチド／グリコリドコポリマー、またはポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーを使用して、化合物の放出を制御することができる。本明細書に記載されている抗ＥＭＴ剤のアルブミン調合剤または組成物に潜在的に有用な他の非経口送達系には、エチレンビニルアセテートコポリマー粒子、浸透圧ポンプ、植込み型注入系及びリポソームが含まれる。吸入用製剤は、賦形剤（例えば、ラクトース）を含有してもよく、または例えば、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、グリココレート及びデオキシコレートを含有する水溶液であってもよく、または点鼻薬もしくはゲルの形態で投与される油性液剤であってもよい。
【０２１３】
本明細書に記載されている抗ＥＭＴ剤のアルブミン調合剤または組成物は、乾燥製剤（例えば、凍結乾燥組成物）であってもよく、または生体適合性媒体に懸濁されていてもよい。薬学的組成物が凍結乾燥粉末の形態である実施形態において、安定剤（複数可）及び増量剤（複数可）、マンニトール、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、デキストラン、緩衝液、水、またはこれらの混合物などの１つ以上の凍結乾燥賦形剤を含む。適切な生体適合性媒体には、水、緩衝水性媒体、食塩水、緩衝食塩水、場合により緩衝されているアミノ酸溶液、場合により緩衝されているタンパク質溶液、場合により緩衝されている糖溶液、場合により緩衝されているビタミン溶液、場合により緩衝されている合成ポリマー溶液、脂質エマルションなどが含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、組成物は滅菌凍結乾燥粉末である。いくつかの実施形態において、組成物は、滅菌水または緩衝液で再構成される。例えば、組成物（薬学的組成物など）を、０．９％塩化ナトリウム緩衝液などの塩化ナトリウム溶液で再構成することができる。
【０２１４】
別の実施形態において、本明細書に記載されている抗ＥＭＴ剤のアルブミン調合剤または組成物は、局所投与用のものである。局所調合剤の形態は、クリーム剤、乳剤、油状剤、泡状剤、ゲル剤、ローション剤、軟膏剤、ペースト剤、噴霧剤、または懸濁剤などの任意の形態でありうる。局所調合剤／組成物は、場合により１つ以上の局所的に許容される補助剤を含み、例えば、担体、賦形剤、乳化剤、界面活性剤、防腐剤、油、増粘剤、ポリマー、ゲル形成剤、稠度調節剤、抗酸化剤、消泡剤、帯電防止剤、樹脂、溶媒、溶解促進剤、中和剤、安定剤、滅菌剤、噴射剤、水溶性もしくは分散性シリコーン含有ポリマー、保湿剤、皮膚軟化薬、またはこれらの任意の混合物が含まれる。局所製剤に組み込むことができる従来のゲル化剤には、以下のヒドロキシエチルセルロース、カルボマー、ポリエチレンホモポリマー、ポリエチレン／酢酸ビニルコポリマー、ポリエチレン／アクリル酸コポリマー、アゼライン酸、アロエベラ、レシチン、熱可逆性多糖及びセチルヒドロキシエチルセルロースのうちの１つ以上が含まれるが、これらに限定されない。
【０２１５】
望ましい場合、投与される薬学的組成物は、小量の非毒性補助物質を含有してもよく、湿潤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤などであり、例えば、酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミンナトリウムアセテート、トリエタノールアミンオレエートなどである。望ましい場合、着色剤を加えることもできる。
【０２１６】
別の態様において、本発明は、本明細書に記載されている抗ＥＭＴ剤のアルブミン調合剤または組成物を使用する方法を提供する。本明細書に記載されている抗ＥＭＴ剤のアルブミン調合剤または組成物を、活性成分に応答する任意の疾患または障害の治療に使用することができる。
【０２１７】
例えば、本明細書に記載されている抗ＥＭＴ剤のアルブミン調合剤または組成物は、１つ以上の抗がん剤を含んでもよく、肝癌、前立腺癌及び肺癌などのがんを治療するために使用することができる。治療することができる追加的な疾患または障害には、乳癌、多発性骨髄腫、移植片拒絶、結腸癌またはリンパ腫が含まれる。１つの実施形態において、がんは膵癌ではない
【０２１８】
特定の態様において、本発明は、治療有効量の本明細書に提供されている薬学的組成物またはナノ粒子を必要性のある対象に投与することを含む、がんを治療する方法を提供し、薬学的活性成分は抗腫瘍または化学療法剤である。
【０２１９】
特定の実施形態において、対象は哺乳動物であり、ヒト、イヌ、マウス及びラットが含まれるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、アルブミンは対象と同一遺伝子型のものである。
【０２２０】
任意の適切な量の薬学的組成物を、対象に投与することができる。投与量は、投与様式を含む多くの要因によって左右される。
【０２２１】
所定の疾患または状態の重篤度の予防、治療または低減における、組成物の適切な投与量は、治療される疾患または状態の種類、疾患または状態の重篤度及び経過、組成物が予防または治療目的で投与されているか否か、以前の療法、患者の病歴及び組成物に対する応答、ならびに担当医の判断によって左右される。組成物は、一度に、または一連の治療にわたって患者に適切に投与される。好ましくは、ヒトに試験する前に、用量応答曲線をインビトロにおいて、次に有用な動物モデルにおいて決定することが望ましい。本発明は、化合物及びそれを含む組成物の投与量を提供する。数日間またはそれ以上にわたる反復投与では、状態に応じて、治療は、疾患症状の望ましい抑制が生じるまで持続される。しかし、他の投与量レジメンも有用でありうる。この療法の進行は、従来の技術及びアッセイにより容易に監視される。
【実施例】
【０２２２】
本発明の実施形態を本明細書下記に例示する。
【０２２３】
実施例１：オクタン酸ナトリウムの枯渇／置き換えによる、アルブミン及びデカン酸ナトリウムの組成物の調製
０．１２ＭのＮａＣｌ、３０ｍＭのカプリル酸塩（オクタン酸ナトリウム）の溶液中２００ｇ／Ｌの濃度のヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を出発材料として使用した（Ｓｉｇｍａ、Ｃａｔａｌｏｇ  ＃Ｃ５０３８−１ＫＧ）。この試料を０．１２ＭのＮａＣｌに１：２０で希釈し、約１０ｇ／Ｌの濃度のアルブミン溶液をもたらした。次にこの試料を、０．１２ＭのＮａＣｌで８回ダイアフィルトレート（すなわち、緩衝液交換）し、約５０ｇ／Ｌのアルブミンに再濃縮した。次に第２のダイアフィルトレーションステップを、３０ｍＭのデカン酸ナトリウム及び０．１２ＭのＮａＣｌを含む溶液により３容量のダイアフィルトレーションで実施し、試料を３０ｍＭのデカン酸ナトリウムで２００ｇ／Ｌの最終アルブミン濃度にした。
【０２２４】
ヒト血清アルブミン組成物中のデカン酸ナトリウムの定量決定を、実施例２に記載されている方法に従って実施した。
【０２２５】
実施例２：アルブミン溶液中のデカン酸ナトリウムに対するオクタン酸ナトリウムの検出
アルブミン溶液中のオクタン酸ナトリウムの定量決定法は、Ｄｅｎｇｌｅｒ  Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｆｕｓｉｏｎｓｔｈｅｒａｐｉｅ  １５：２７３−２７４（６／１９８８）の発表に基づいた。逆相の内部標準はデカン酸ナトリウムであった。デカン酸ナトリウムの定量検出のため、オクタン酸ナトリウムを標準として使用し、デカン酸ナトリウムは複合体形成剤であった。ヒト血清アルブミン組成物が抽出されたオクタン酸及びデカン酸の２１４ｎｍでの相対的応答及び相対的回収の決定である。
【０２２６】
オクタン酸ナトリウムをデカン酸ナトリウムに置き換えることによってもたらされるアルブミン組成物、ならびに４０ｍＭのカプリル酸ナトリウム（オクタン酸ナトリウム）及び４０ｍＭのデカン酸ナトリウムの溶液を、ＨＰＬＣ分析に掛けて、アルブミン組成物中のオクタン酸ナトリウムがデカン酸ナトリウムに完全に置き換わっていることを確認した。
【０２２７】
試料の調製：２５０μｌの試験組成物を８００μｌのメタノールに加え、２０秒間ボルテックス（ｖｏｒｔｅｘ）した。沈殿物を１０Ｋ  ＲＰＭで５分間遠心分離し、上澄みを取り除き、０．４５μｍのＭｉｌｌｅｘ（商標）ＨＶフィルターで濾過した。アリコートをオートサンプラーのバイアルに移した。抽出物の逆相高速液体クロマトグラフィーを、メタノール／水（４：１）中の０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を有する４．６×２５０ｍｍのＮｕｃｌｅｏｓｉｌ−Ｃ１８（５μｍ）カラムを移動相として０．８ｍｌ／分の流速で用いて行った。２０μｌを注入した。検出は、２１４ｎｍでの紫外線（ＵＶ）吸収によって行った。それぞれの試料抽出物を３回注入し、ピーク面積を平均した。ＨＰＬＣ分析は、Ｇ１３１５Ｂダイオードアレイ検出器、Ｇ１３１１Ａクォータナリポンプ、Ｇ１３２９Ａサーモスタット付オートサンプラー、Ｇ１３１６Ａサーモスタット付カラムコンパートメント及びＣｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ（登録商標）１０．０２ソフトウエア搭載ＨＰ  Ｃｏｍｐａｑ（登録商標）ｄ５３０ｃコンピュータ（ＷＩＮ  ＸＰ（登録商標））を備えたＨｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋａｒｄ（登録商標）Ｍｏｄｅｌ  １１００  ＨＰＬＣにより行った。Ａｌｌｔｅｃｈ  Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ  Ｃ−１８、４．６ｍｍ×２５０ｍｍカラム、５μｍによって、均一濃度逆相分析を実施した。
【０２２８】
図１に示されているように、検出可能な量のオクタン酸ナトリウムは、実施例１において調製されたアルブミン組成物に残留していなかったことが見出された。これは、最初にアルブミンと複合体形成していたオクタン酸ナトリウムが成功裏に除去され、デカン酸ナトリウムに置き換えられたことを意味する。
【０２２９】
実施例３：デカン酸ナトリウム及びネイキドヒトアルブミンを含むアルブミン組成物の調製
Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（登録商標）（＃Ａ１８８７）のヒト血清アルブミン（ＨＳＡ−遊離脂肪酸）をこの実験に使用した。このヒト血清アルブミンは「ネイキドヒトアルブミン」とも呼ばれ、０．００７％（ｗ／ｗ）以下の微量の脂肪酸のみを含有する。ＨＳＡをＰＢＳに溶解して、６．６％（６．６ｇ／１００ｍｌ）の濃度を得て、０．２μｍフィルターを使用して濾過した。７５μｌのオクタン酸ナトリウムまたはデカン酸ナトリウムの１０ｍＭを７５μｌのＨＳＡ  ６．６％と混合し（ボルテックスなし）、室温で１０分間インキュベートした。１００μＬのこの混合物を実施例４のアッセイに、１ｍｌの最終容積（希釈１：１０）で使用した。
【０２３０】
実施例４：ＴＧＦ−β誘導上皮細胞（ＨＫ−２細胞）におけるＥＭＴの調節
分析を実施して、不死化ヒト近位尿細管上皮細胞（ＨＫ−２細胞）におけるＥＭＴマーカーであるＴＧＦ−β誘導コラーゲン１発現に対する、様々な組成物の効果を決定した。ＨＫ−２細胞をＴＧＦ−β（ＥＭＴの誘導因子）により１０ｎｇ／ｍｌの濃度で試験した。ＥＭＴマーカーのコラーゲン１  ｍＲＮＡの発現を定量的リアルタイムＰＣＲで決定した。
【０２３１】
実施例１または実施例３の方法により調製されたアルブミン組成物を、２．５または５．０×１０−４Ｍのデカン酸ナトリウムまたはオクタン酸ナトリウムで処方した。デカン酸ナトリウム及びオクタン酸ナトリウム単独（すなわち、アルブミンなし）を同じ濃度、ならびにノナン酸、ウンデカン酸及びラウリル酸ナトリウムを指示された濃度で並行して試験した。
【０２３２】
表１は、デカン酸ナトリウムが、単独またはアルブミンとの処方のいずれにしても、ＴＧＦ−β誘導ＨＫ−２細胞におけるコラーゲンの発現を減少（または、阻害）することを示している。単独で使用されたノナン酸、ウンデカン酸及びラウリル酸ナトリウムもＴＧＦ−β誘導ＨＫ−２細胞におけるコラーゲンの発現を阻害した。対照的に、コラーゲンの発現は、オクタン酸ナトリウム単独またはアルブミンとの処方によって処理されたＴＧＦ−β誘導細胞において増加した（または、刺激された）。このように、ＨＫ−２細胞におけるＴＧＦ−β誘導コラーゲン１の発現により評価すると、デカン酸ナトリウム及びオクタン酸ナトリウムはＥＭＴに対して反対の効果を有し、デカン酸ナトリウムは、ＥＭＴを阻害し、オクタン酸ナトリウムはＥＭＴを刺激しており、そのような効果は、アルブミンの存在下で保持されている。ノナン酸、ウンデカン酸及びラウリル酸ナトリウムは、デカン酸ナトリウムと類似した効果をＥＭＴに対して示すと思われる。組成物中のアルブミンの存在及び不在は、ＥＭＴに対して何も影響を与えず、ＥＭＴの阻害または刺激は、組成物に存在する脂肪酸または塩の結果であることを証明している。「ＨＳＡ」は、実施例３に従ってネイキドアルブミンから調製されたアルブミン組成物を指す。「ＡＬＢ」は、実施例１に従ってオクタン酸ナトリウムの枯渇及びデカン酸ナトリウムへの置き換えによって調製されたアルブミン組成物を指す。
【表１】
2020502203.tif 000005
【０２３３】
ＨＫ−２細胞によるコラーゲンｍＲＮＡ発現に対する遊離Ｃ１０〜Ｃ１４トリグリセリド（飽和炭素鎖を有する）の効果も試験した。結果を表２に報告する。
【表２】
2020502203.tif 000006
【０２３４】
７０％のＣ８鎖及び３０％のＣ１０鎖を有するトリカプリンとトリグリセリドの混合物について、表２の結果を比較すると、７０％のＣ８鎖の存在がコラーゲン発現の阻害を低減することが分かる。
【０２３５】
オクタン酸ナトリウム：デカン酸ナトリウムの１００：０、９５：５、７０：３０、５０：５０、３０：７０、５：９５及び０：１００の比を、アルブミンを有する及びアルブミンを有さない組成物において上記に記載されたインビトロモデルによって試験した。脂肪酸の塩とアルブミンとの様々な組み合わせを、実施例３に記載された方法によって調製した。コラーゲン１α１  ｍＲＮＡ発現を図２に報告する。リアルタイムＰＣＲは、ヒトＧＡＰＤＨ内在性対照に正規化したヒトＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙを使用した。基準はＴＧＦ−β１対照（ＲＱ＝１）である。＊及び＊＊は、基準と比較した、それぞれ０．０５及び０．０１のｐ値を意味する。オクタン酸ナトリウムとデカン酸ナトリウムの混合物の試験濃度は、５００μＭである。実験の回数は３回（ｎ＝３）である。
【０２３６】
第１には、図２に示されている結果は、アルブミンがコラーゲン発現に影響を及ぼさず、したがってＥＭＴに影響を及ぼさないことを確認する。第２には、コラーゲンの発現は、オクタン酸ナトリウムに対するデカン酸ナトリウムの割合に用量依存的であることが分かる。第３には、デカン酸ナトリウムが脂肪酸塩の総含有量の３０％以上で存在する場合に、コラーゲンの発現の有意な低減が観察できることが分かる。オクタン酸ナトリウム：デカン酸ナトリウムの７０：３０、５０：５０、３０：７０、５：９５及び０：１００の比は、コラーゲン発現を有意に低減または阻害する。これは、オクタン酸ナトリウム：デカン酸ナトリウムの７０：３０の比が、デカン酸ナトリウムの阻害効果がオクタン酸ナトリウムの刺激効果を成功裏に補う最小限の比であることを確認している。オクタン酸ナトリウムの刺激効果は、観察されたコラーゲン発現が対照（ＴＧＦ−β１処理ＨＫ−２細胞）のレベルを超えて上昇する、オクタン酸ナトリウム：デカン酸ナトリウムの１００：０及び９５：５の比によるこの研究によって証明されている。
【０２３７】
実施例５：ＴＧＦ−β誘導ヒト微小血管内皮細胞（ＨＭＥＣ）におけるＥＭＴの調節
本記載において使用されるＥＭＴという表現の定義に含まれる内皮間葉転換（ＥｎｄｏＭＴ）は、形質転換増殖因子（ＴＧＦ−β）により誘導されうる。ＥｎｄｏＭＴの分析を行い、分析方法は実施例４に記載されている。リアルタイムＰＣＲは、ヒトＧＡＰＤＨ内在性対照に正規化したヒトＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙを使用した。基準はＴＧＦ−β１対照（ＲＱ＝１）である。＊＊及び＊＊＊は、基準と比較した、それぞれ０．０１及び０．００１のｐ値を意味する。オクタン酸ナトリウムとデカン酸ナトリウムの試験濃度は、５００μＭである。実験の回数は３回（ｎ＝３）である。
【０２３８】
図４は、ＴＧＦ−βによるＥｎｄｏＭＴの誘導を示し、コラーゲン１α１  ｍＲＮＡ発現の増加によって発現する。図４は、アルブミンの存在下（ＨＳＡあり）またはアルブミンの不在下（ＨＳＡなし）の両方でデカン酸ナトリウムが、オクタン酸ナトリウムと反対に、ＴＧＦ−βにより誘導された間葉転換を有意に低減したことも示している。したがって、本発明の抗ＥＭＴ剤は、内皮細胞においてＥＭＴを成功裏に阻害または低減する。
【０２３９】
実施例６：ＴＧＦ−β誘導ヒト肝細胞癌細胞ＨｅｐＧ２におけるＥＭＴの調節
ＥＭＴの分析を、実施例４に記載されている方法に従って、ヒト肝細胞癌細胞株ＨｅｐＧ２に行った。これらの細胞は、高度に分化しており、正常な肝細胞の遺伝子型特性の多くを示している（Ｓａｓｓａ  ｅｔ  ａｌ．１９８７）。したがって、ＨｅｐＧ２細胞をＥＭＴのスクリーニングに使用することができ、図５に例示されているように、ＴＧＦ−βは、ＥＭＴのマーカーであるコラーゲン１α１  ｍＲＮＡ発現も増加させた。リアルタイムＰＣＲは、ヒトＧＡＰＤＨ内在性対照に正規化したヒトＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙを使用した。基準はＴＧＦ−β１対照（ＲＱ＝１）である。＊、＊＊及び＊＊＊＊は、基準と比較した、それぞれ０．０５、０．０１及び０．０００１のｐ値を意味する。オクタン酸ナトリウムとデカン酸ナトリウムの試験濃度は、５００μＭである。実験の回数は３回（ｎ＝３）である。
【０２４０】
図５は、アルブミンの存在下（ＨＳＡあり）またはアルブミンの不在下（ＨＳＡなし）の両方でデカン酸ナトリウムが、オクタン酸ナトリウムと反対に、ＴＧＦ−βにより誘導された間葉転換を有意に低減したことも示している。したがって、本発明の抗ＥＭＴ剤は、肝細胞においてＥＭＴを成功裏に阻害または低減する。
【０２４１】
実施例７：ＴＧＦ−β誘導ヒト肺上皮細胞Ａ５４９におけるＥＭＴの調節
ＥＭＴの分析を、実施例４に記載されている方法に従って、ヒト肺上皮細胞Ａ５４９にも行った。ＴＧＦ−βは、ヒト肺上皮細胞Ａ５４９においても、ＥＭＴのマーカーであるコラーゲン１α１  ｍＲＮＡ発現を増加させた。リアルタイムＰＣＲは、ヒトＧＡＰＤＨ内在性対照に正規化したヒトＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙを使用した。基準はＴＧＦ−β１対照（ＲＱ＝１）である。＊＊＊及び＊＊＊＊は、基準と比較した、それぞれ０．００１及び０．０００１のｐ値を意味する。オクタン酸ナトリウムとデカン酸ナトリウムの試験濃度は、５００μＭである。実験の回数は３回（ｎ＝３）である。
【０２４２】
図６は、アルブミンの存在下（ＨＳＡあり）またはアルブミンの不在下（ＨＳＡなし）の両方でデカン酸ナトリウムが、有意な結果を提供しなかったオクタン酸ナトリウムと反対に、ＴＧＦ−βにより誘導された間葉転換を有意に低減したことも示している。したがって、本発明の抗ＥＭＴ剤は、肺細胞においてＥＭＴを成功裏に阻害または低減する。
【０２４３】
実施例８：ＴＧＦ−β誘導ヒト前立腺癌ＰＣ−３におけるＥＭＴの調節
上皮間葉転換（ＥＭＴ）は、上皮細胞が細胞極性及び細胞間接着を失い、遊走及び浸潤特性を得て、間葉幹細胞になる過程であり、間葉幹細胞は様々な細胞型に分化しうる多分化能間質細胞である。ＥＭＴは、中胚葉形成及び神経管形成を含む多数の発生過程に必須である。ＥＭＴは、創傷治癒、瘢痕化過程及びがん進行における転移開始において生じることも示されている。
【０２４４】
本発明の実験は、「スクラッチアッセイ」におけるＰＣ−３細胞の浸潤/遊走を介して、がん細胞のＥＭＴ分析を例示している。このアッセイは、「スクラッチ」と呼ばれる新たな人工的な隙間を集密細胞の単層に作り出して、新たに作り出した隙間の縁にある細胞が開口部に移動してスクラッチを閉じるという観察に基づいている。ＥＧＦ（上皮増殖因子）を使用して、ＰＣ−３細胞のスクラッチへの遊走／浸潤を誘導した。簡潔には、培養挿入物を２４ウエル細胞培養プレートに入れる。ＰＣ−３細胞を培養挿入物に接種し、ＣＯ２インキュベーターにより３７℃で一晩インキュベートする。次に細胞を無血清培地により更に２４時間飢餓させる。挿入物を取り除き、５００μｍの可視無細胞隙間を残す。細胞を、５０ｎｇ／ｍＬのＥＧＦ及び１０μｇ／ｍＬのマイトマイシンＣ（Ｍｉｔｏ＋ＥＧＦ）、ならびにＥＭＴ促進剤のオクタン酸ナトリウム（Ｍｉｔｏ＋ＥＧＦ＋オクタン酸ナトリウム）または抗ＥＭＴ剤のデカン酸ナトリウム（Ｍｉｔｏ＋ＥＧＦ＋デカン酸ナトリウム）により、ＨＳＡを伴って（図７の第２列）及びＨＳＡを伴わず（図７の第１列）、２４時間処理した。写真を各群の集密対照として処理の１時間後に撮影した。２４時間後、細胞をＣｒｙｓｔａｌ  Ｖｉｏｌｅｔ染色で固定し、処理の２４時間後の写真を撮る前に空気乾燥する。写真を図７に報告する。
【０２４５】
ＥＧＦはマイトマイシンで処理されたＰＣ−３細胞の遊走または浸潤を促進することが、図７から分かる。図７は、デカン酸ナトリウム（アルブミンあり及びなし）の細胞培養物への添加が、ＥＧＦ誘導ＰＣ−３の誘導または浸潤の阻害を生じ、一方、オクタン酸ナトリウムが細胞遊走を阻害しないことを実証している。遊走は、オクタン酸ナトリウムがアルブミンと組み合わされたときに増加している。
【０２４６】
特許請求の範囲は、実施例に記載された好ましい実施形態によって制限されるべきではなく、全体として記載と一致する最も広範囲な解釈を提示するべきである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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