(57)【要約】本発明は、タウ凝集阻害剤の分野に関する。より具体的には、本発明は、抗アミロイド治療薬に関する。より具体的には、本発明は、ある特定のペプチドで凝集関連状態または疾患を治療する薬学的組成物および方法を提供する。本発明は、タウタンパク質の凝集を阻害する活性を呈するペプチドを提供する。本出願は、例えば、タウまたはタウ原線維と結合するペプチドに関する。本発明は、タウタンパク質のジッパー領域と効率的に結合するペプチドを提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉのアミノ酸配列を含むペプチドであって、
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０（Ｉ）（配列番号１）
式中、
Ｘａａ１が、不在、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ２が、不在、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり、
Ｘａａ４が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ５が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ６が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ７が、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、またはＬｅｕであり、
Ｘａａ８が、不在、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ９が、不在、Ｔｒｐ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ１０が、不在、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＬｅｕであり、
ただし、Ｘａａ２が不在である場合、Ｘａａ１が不在であり、さらに、Ｘａａ９が不在である場合、Ｘａａ１０が不在であることを条件とし、さらに、Ｘａａ８が不在である場合、Ｘａａ１０およびＸａａ９が不在であることを条件とする、ペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
式Ｉａのアミノ酸配列を含むペプチドであって、
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０（Ｉａ）（配列番号２２２）
式中、
Ｘａａ１が、不在、Ｌｅｕ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ２が、不在、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり、
Ｘａａ４が、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、Ｔｙｒ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ５が、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、ＮＭｅＩｌｅ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ６が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、ＮＭｅＡｒｇ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ７が、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、またはＬｅｕであり、
Ｘａａ８が、不在、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在、Ｔｒｐ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ１０が、不在、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＬｅｕであり、
ただし、Ｘａａ２が不在である場合、Ｘａａ１が不在であり、さらに、Ｘａａ９が不在である場合、Ｘａａ１０が不在であり、さらにＸａａ８が不在である場合、Ｘａａ１０およびＸａａ９が不在であることを条件とし、さらに、前記ペプチドがＷＲＦＲＬＹＬＲ（配列番号１５）ではないことを条件とする、ペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｘａａ１が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、不在、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４がＩｌｅであり、Ｘａａ５がＴｒｐであり、Ｘａａ６がＩｌｅであり、Ｘａａ７がＡｒｇであり、Ｘａａ８が、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が、不在またはＴｒｐである、請求項２に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｘａａ１が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、不在、Ｌｅｕ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４がＩｌｅであり、Ｘａａ５がＡｒｇであり、Ｘａａ６がＬｅｕであり、Ｘａａ７が、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ８が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が、不在またはＡｒｇである、請求項２に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｘａａ１が、不在、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、不在、Ｉｌｅ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４がＩｌｅであり、Ｘａａ５がＡｒｇであり、Ｘａａ６がＩｌｅであり、Ｘａａ７がＴｒｐであり、Ｘａａ８が、不在、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒであり、Ｘａａ９が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、請求項２記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸およびアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｘａａ１が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４がＩｌｅであり、Ｘａａ５が、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ６が、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｌｅｕ、またはＶａｌであり、Ｘａａ７がＡｒｇであり、Ｘａａ８が、ＴｙｒまたはＴｒｐであり、Ｘａａ９がＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、請求項２に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が、不在、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ  Ｌｅｕ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４がＩｌｅであり、Ｘａａ５がＡｒｇであり、Ｘａａ６がＩｌｅであり、Ｘａａ７がＡｒｇであり、Ｘａａ８が、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、請求項２に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ４が、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ５が、Ｉｌｅ、ＮＭｅＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ６が、ＮＭｅＡｒｇまたはＡｒｇであり、Ｘａａ７がＩｌｅであり、Ｘａａ８がＡｒｇであり、Ｘａａ９がＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、請求項２に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が不在であり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４が、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ５がＡｒｇであり、Ｘａａ６がＩｌｅであり、Ｘａａ７がＴｒｐであり、Ｘａａ８がＩｌｅであり、Ｘａａ９がＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、請求項２に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が不在であり、Ｘａａ３がＴｒｐであり、Ｘａａ４がＡｒｇであり、Ｘａａ５が、ＬｅｕまたはＡｌａであり、Ｘａａ６がＡｒｇであり、Ｘａａ７が、ＡｌａまたはＬｅｕであり、Ｘａａ８が、Ａｒｇであり、Ｘａａ９がＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、請求項２に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
以下のうちのいずれかを含む、請求項２に記載のペプチド、
【表１】
2020523035.tif 000019
またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
以下のうちのいずれかを含むペプチドであって、
【表２−１】
2020523035.tif 000020
【表２−２】
2020523035.tif 000021
【表２−３】
2020523035.tif 000022
【表２−４】
2020523035.tif 000023
「ｈＲ」が、ホモアルギニンである、ペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のペプチドと少なくとも７０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のポリペプチドの１つ以上のアミノ酸の修飾、欠失、挿入、または置換を含むペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１５】
アミノ酸置換を含み、前記置換が、等価の、保存的もしくは非保存的置換、または合成もしくは化学的に修飾されたカチオン性アミノ酸残基である、請求項１４に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１６】
アミノ酸置換を含み、前記置換が、等価の、保存的もしくは非保存的置換である、請求項１４に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１７】
前記修飾が、持続時間増強部分、または持続時間増強部分へのリンカーである、請求項１４に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１８】
前記修飾が、前記ペプチドに結合した細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）であり、ただし、前記ＣＰＰ修飾ペプチドが、５−ＴＡＭＲＡ−ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＲＩＲＬＹＷＷＲ（配列番号９９）または５−ＴＡＭＲＡ−ＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＲＩＲＬＹＷＷＲ（配列番号１０１）ではないことを条件とし、さらに、前記ＣＰＰが、ＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号１０７）を含まないことを条件とする、請求項１４に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１９】
前記ＣＰＰを前記ペプチドに連結する配列−ＧＧＳＧＧ−（配列番号９１）のリンカーをさらに含む、請求項１８に記載のペプチド、およびその薬学的に許容される塩。
【請求項２０】
ＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＬＦＹＬＲＬＴ（配列番号９６）、ＲＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＷＲＩＷＩＲＹＷ（配列番号９７）、およびＲＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＷＲＬＫＶＲＷＷ（配列番号９８）から選択される、請求項１８に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれか一項に記載のペプチド、前記ペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸、または前記核酸を含むベクターと、
薬学的に許容される担体と、を含む薬学的組成物。
【請求項２２】
請求項１〜２０のいずれか一項に記載の単離されたペプチド。
【請求項２３】
請求項１〜２０のいずれかに記載のペプチドと、ペプチド安定化賦形剤を含む薬学的に許容される担体と、を含む組成物。
【請求項２４】
請求項１〜２０のいずれかに記載のペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
【請求項２５】
請求項２４に記載の核酸を含むベクター。
【請求項２６】
タウタンパク質の凝集を治療する方法であって、前記タウタンパク質を請求項１〜２０のいずれかに記載のペプチドまたは請求項２１に記載の薬学的組成物と接触させることを含む、方法。
【請求項２７】
アルツハイマー病；パーキンソン病（ａ−シヌクレインアミロイドーシス）；筋萎縮性側索硬化症；ＩＩ型糖尿病（膵島アミロイドポリペプチド（ＩＡＰＰ）アミロイドーシス）；リゾチームアミロイドーシス；家族性および老人性アミロイドーシス；プリオン病の変種のクロイツフェルト・ヤコブ病（ｖＣＪＤ）およびゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群（ＧＳＳ）；心臓アミロイドーシス；精液の前立腺活性化タンパク質の精液由来エンハンサーのウイルス感染（ＳＥＶＩ）形態に関連するヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の性感染、ならびに腎機能に影響を与える抗体軽鎖アミロイドーシスからなる群から選択される疾患または状態を、そのような治療を必要とする患者において治療する方法であって、薬理学的有効量の、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のペプチド、請求項２４に記載の核酸、または請求項２５に記載のベクターを前記患者に投与することを含む、方法。
【請求項２８】
タウ凝集に影響を与える方法であって、請求項１〜２０のいずれかに記載のペプチドによる治療を含む、方法。
【請求項２９】
前記ポリヌクレオチドまたは前記ベクターを前記患者に投与することを含む、請求項２７に記載の疾患または状態を治療する方法。
【請求項３０】
前記核酸を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）に由来するプラスミドまたはベクターを投与することを含む、請求項２９に記載の疾患または状態を治療する方法。
【請求項３１】
前記ＡＡＶが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ−ＤＪ、またはＡＡＶ−ＤＪ８から選択される、請求項３０に記載の疾患または状態を治療する方法。
【請求項３２】
ＶＱＩＩＮＫ（配列番号２２０）関連凝集に影響を与える方法であって、請求項２１に記載の薬学的組成物による治療を含む、方法。
【請求項３３】
タウ原線維の形成を阻害する方法であって、タウ原線維形成が阻害されるように、請求項２１に記載の薬学的組成物を投与することを含む、方法。
【請求項３４】
タウタンパク質の播種を阻害する方法であって、タウ原線維形成が阻害されるように、請求項２１に記載の組成物を投与することを含む、方法。
【請求項３５】
タウ凝集を阻害するため、またはタウ原線維形成を阻害するため、またはタウタンパク質の播種を阻害するための、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項３６】
アルツハイマー病；パーキンソン病（ａ−シヌクレインアミロイドーシス）；筋萎縮性側索硬化症；ＩＩ型糖尿病（膵島アミロイドポリペプチド（ＩＡＰＰ）アミロイドーシス）；リゾチームアミロイドーシス；家族性および老人性アミロイドーシス；プリオン病の変種のクロイツフェルト・ヤコブ病（ｖＣＪＤ）およびゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群（ＧＳＳ）；心臓アミロイドーシス；および精液の前立腺活性化タンパク質の精液由来エンハンサーのウイルス感染（ＳＥＶＩ）形態に関連するヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の性感染、ならびに腎機能に影響を与える抗体軽鎖アミロイドーシスからなる群から選択される疾患または状態を治療するための、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩、または請求項２４に記載の核酸、または請求項２５に記載のベクターの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１７年６月７日に出願された米国特許出願第６２／５１６，３９３号に対する優先権を主張し、その内容は、その全体が参照により組み込まれる。
電子的に提出された資料の参照による組み込み
【０００２】
２０１８年６月６日に作成された、以下の「５２０９７Ａ＿Ｓｅｑｌｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔ」という名前の９０，０００バイトのＡＳＣＩＩ（テキスト）ファイルとして同時にこれと提出され、識別されるコンピュータで読み取り可能なヌクレオチド／アミノ酸配列表は、その全体が参照により組み込まれる。
（技術分野）
【０００３】
本発明は、タウ凝集阻害剤の分野に関する。より具体的には、本発明は、抗アミロイド治療薬に関する。より具体的には、本発明は、ある特定のペプチドで凝集関連状態または疾患を治療する薬学的組成物および方法を提供する。
【背景技術】
【０００４】
アミロイド疾患は、通常可溶性タンパク質の、伸長された、分岐していないタンパク質凝集体であるアミロイド線維への形質転換と関連している。アルツハイマー病の患者では、脳試料に２つの異なる種類の線維性凝集体：アミロイドベータタンパク質（Ａβ）の堆積物を含むアミロイドプラークと、微小管関連タンパク質タウからなる神経原線維濃縮体とが一般に見出される。アルツハイマー病および老人性認知症を含むいくつかの疾患とのタウの関連により、タウは、細線維化を破壊するための重要な標的となる。当該技術分野では、原線維形成の改善された阻害剤の必要性が残っている。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、タウタンパク質の凝集を阻害する活性を呈するペプチドを提供する。本出願は、例えば、タウまたはタウ原線維と結合するペプチドに関する。
【０００６】
本発明は、タウタンパク質のジッパー領域と効率的に結合するペプチドを提供する。したがって、本発明は、ペプチドおよび凝集関連状態の治療におけるそれらの使用を提供する。
【０００７】
本発明は、タウタンパク質のＶＱＩＩＮＫ（配列番号２２０）領域と効率的に結合するペプチドを提供する。
【０００８】
本発明は、タウタンパク質のＶＱＩＶＹＫ（配列番号２１９）領域と効率的に結合するペプチドを提供する。
【０００９】
本発明は、タウタンパク質と結合する非常に強力なペプチドの同定に基づく。したがって、本発明は、一態様において、配列番号１〜８８および１０８〜２１０のいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる組換えまたは合成ペプチドを提供する。本発明はまた、以下により詳細に記載されるように、そのような配列の類似体およびバリアントであるペプチドを提供する。
【００１０】
本発明の一態様は、より詳細に以下に定義されるように、式Ｉ−ＸＩＶで表されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる凝集阻害ペプチドである。本発明はまた、以下により詳細に記載されるように、そのような配列の類似体およびバリアントであるペプチドを提供する。本発明の阻害ペプチドは、活性バリアントを含め、本明細書では、時に、「本発明の阻害ペプチド」と称される。
【００１１】
本発明はまた、本明細書に記載のペプチド（またはその類似体もしくは誘導体）の各々をコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸を含む。例示的な核酸には、ＤＮＡおよびＲＮＡが含まれる。関連して、本発明は、当該コード配列と、プロモーター、開始コドン、またはポリアデニル化シグナル配列などの１つ以上の発現制御配列とを含む合成遺伝子を含む。本発明はまた、核酸または合成遺伝子を含むベクター、および遺伝子またはベクターで形質転換またはトランスフェクトされた単離された細胞を含む。
【００１２】
本開示はまた、アミノ酸配列配列番号１〜８８および１０８〜２１０を含むか、またはそれからなるペプチドと、本明細書に記載のその類似体または誘導体と、薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物、ならびに患者における疾患または医学的状態（例えば、アルツハイマー病）を治療または予防する方法をさらに含む。方法は、疾患または医学的状態を治療するのに有効な量で、薬学的組成物に任意に製剤化された、ここに開示されているペプチドまたはペプチドバリアントを患者に投与することを含む。関連して、本発明は、疾患または医学的状態を治療または予防するための本発明のペプチドの使用と、疾患または医学的状態を治療または予防するための医薬品の製造におけるペプチドの使用とを含む。
【００１３】
本発明はさらに、本発明の核酸、ベクター、および／または形質転換された細胞と、薬学的に許容される担体とを含む組成物を含む。
【００１４】
本発明はまた、インビトロ（培養された細胞において含む）およびインビボの両方でタウタンパク質凝集などのタンパク質凝集を阻害、遅延、または減少させるための、本明細書に記載のペプチドまたは組成物の使用を含む。
【００１５】
本発明はまた、患者における疾患または医学的状態（例えば、アルツハイマー病）を治療または予防する方法を含み、本発明に記載の核酸、ベクター、および／または形質転換された細胞を患者に投与することを含む。
【００１６】
関連して、発明は、患者における疾患または状態（アルツハイマー病など）の症状の発症を遅延させるか、または症状の進行を遅らせる方法を含む。症状の発症を遅延させるか、または症状の進行を遅らせる有効性は、適切な動物モデルの集団研究または臨床試験で、対照研究と比較して、または治療を受けていない対象の過去のデータと比較して示され得る。
【００１７】
治療の方法などの、方法のような本明細書に記載の本発明の態様はまた、材料、ペプチド、核酸、ベクター、組成物などの「使用」を包含することが理解されるべきである。例えば、薬剤を接触させることまたは投与することを含む本明細書に記載の治療の全ての方法に関して、疾患または状態を治療するための同じ薬剤の使用、または疾患または状態を治療するための医薬品の製造における薬剤の使用に関する、同等の実施形態が企図される。
【００１８】
本発明の他の態様は、詳細な説明およびその後に続く特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】ＤＹＫＤＤＤＤＫ−ＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＷＲＩＷＩＲＹＷ（配列番号１０６）の発現のためのＡＡＶウイルス構築物の構造を示す。
【図２】対照ＤＹＫＤＤＤＤＫ−ＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ（配列番号２１８）の発現のためのＡＡＶウイルス構築物の構造を示す。
【図３】ペプチドおよび対照配列の発現レベルを示す。注射されたウイルスの同一性は各群で確認された。
【図４】ペプチドでの治療による濃縮体の数が、皮質において２４％および海馬において３５％低減したことを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
一態様において、本開示は、タウタンパク質凝集、より具体的には、アルツハイマー病に治療的に影響を与えるペプチドを提供する。
【００２１】
一実施形態において、本開示は、配列番号１〜８８および１０８〜２１０のいずれか１つに示されるアミノ酸配列のいずれかのペプチドを含む。
【００２２】
一実施形態は、式Ｉのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０（Ｉ）（配列番号１）
式中、
Ｘａａ１が、不在、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、不在、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり、Ｘａａ４が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ５が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ６が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ７が、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ８が、不在、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在、Ｔｒｐ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ１０が、不在、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＬｅｕであり、ただし、Ｘａａ２が不在である場合、Ｘａａ１が不在であり、さらに、Ｘａａ９が不在である場合、Ｘａａ１０が不在であることを条件とし、さらに、Ｘａａ８が不在である場合、Ｘａａ１０およびＸａａ９が不在であることを条件とする、ペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２３】
一実施形態は、式Ｉのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が、不在、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、不在、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ４が、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｔｒｐ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ５が、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ６が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ７が、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、またはＬｙｓであり、Ｘａａ８が、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在、Ｐｈｅ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が、不在、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＬｅｕである、ペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２４】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０（Ｉａ）（配列番号２２２）
式中、Ｘａａ１が、不在、Ｌｅｕ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、不在、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり、Ｘａａ４が、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、Ｔｙｒ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ５が、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、ＮＭｅＩｌｅ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ６が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、ＮＭｅＡｒｇ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ７が、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ８が、不在、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在、Ｔｒｐ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ１０が、不在、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＬｅｕであり、ただし、Ｘａａ２が不在である場合、Ｘａａ１が不在であり、さらに、Ｘａａ９が不在である場合、Ｘａａ１０が不在であることを条件とし、さらに、Ｘａａ８が不在である場合、Ｘａａ１０およびＸａａ９が不在であることを条件とし、さらに、ペプチドがＷＲＦＲＬＹＬＲ（配列番号１５）ではないことを条件とする、ペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２５】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、不在、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３が、Ａｒｇであり、Ｘａａ４が、Ｉｌｅであり、Ｘａａ５が、Ｔｒｐであり、Ｘａａ６が、Ｉｌｅであり、Ｘａａ７が、Ａｒｇであり、Ｘａａ８が、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９は不在、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、ＬｅｕまたはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が、不在またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２６】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、不在、Ｌｅｕ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３が、Ａｒｇであり、Ｘａａ４が、Ｉｌｅであり、Ｘａａ５が、Ａｒｇであり、Ｘａａ６が、Ｌｅｕであり、Ｘａａ７が、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ８が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が、不在またはＡｒｇである、ペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２７】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が、不在、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、不在、Ｉｌｅ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４がＩｌｅであり、Ｘａａ５がＡｒｇであり、Ｘａａ６がＩｌｅであり、Ｘａａ７がＴｒｐであり、Ｘａａ８が、不在、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒであり、Ｘａａ９が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、ペプチド、または、Ｃ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２８】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が、不在、Ｌｅｕ、またはＬｙｓであり、Ｘａａ２がＴｒｐであり、Ｘａａ３がＴｒｐであり、Ｘａａ４がＩｌｅであり、Ｘａａ５がＡｒｇであり、Ｘａａ６がＩｌｅであり、Ｘａａ７がＡｒｇであり、Ｘａａ８がＴｙｒであり、Ｘａａ９がＴｒｐであり、Ｘａａ１０が、不在、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＬｅｕである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２９】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ２がＡｒｇであり、Ｘａａ３がＩｌｅであり、Ｘａａ４がＴｒｐであり、Ｘａａ５がＬｅｕであり、Ｘａａ６が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ７が、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｖａｌ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ８が、ＡｒｇまたはＴｒｐであり、Ｘａａ９が不在であり、Ｘａａ１０が不在である、ペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００３０】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４がＰｈｅであり、Ｘａａ５がＡｒｇであり、Ｘａａ６が、ＬｅｕまたはＰｈｅであり、Ｘａａ７が、ＴｙｒまたはＴｒｐであり、Ｘａａ８が、Ｌｅｕ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９がＡｒｇであり、Ｘａａ１０が不在である、ペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００３１】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が、不在、Ｌｙｓ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＩｌｅであり、Ｘａａ４がＡｒｇであり、Ｘａａ５がＬｅｕであり、Ｘａａ６がＴｙｒであり、Ｘａａ７が、ＴｒｐまたはＶａｌであり、Ｘａａ８が、Ａｒｇ、Ｖａｌ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在、Ｔｒｐ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ１０が不在である、ペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００３２】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ２が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４がＩｌｅであり、Ｘａａ５が、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ６が、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｌｅｕ、またはＶａｌであり、Ｘａａ７がＡｒｇであり、Ｘａａ８が、ＴｙｒまたはＴｒｐであり、Ｘａａ９がＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、ペプチド、または、Ｃ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００３３】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が、不在、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ  Ｌｅｕ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４がＩｌｅであり、Ｘａａ５がＡｒｇであり、Ｘａａ６がＩｌｅであり、Ｘａａ７がＡｒｇであり、Ｘａａ８が、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、ペプチド、または、Ｃ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００３４】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が、Ｐｈｅ、Ｉｌｅ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４がＩｌｅであり、Ｘａａ５がＡｒｇであり、Ｘａａ６が、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ７が、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ８が、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ９が、不在、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、ペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００３５】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ４が、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｒｇであり、Ｘａａ５が、Ｉｌｅ、ＮＭｅＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ６が、ＮＭｅＡｒｇまたはＡｒｇであり、Ｘａａ７がＩｌｅであり、Ｘａａ８がＡｒｇであり、Ｘａａ９がＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、ペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００３６】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が不在であり、Ｘａａ３がＡｒｇであり、Ｘａａ４が、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ５がＡｒｇであり、Ｘａａ６がＩｌｅであり、Ｘａａ７がＴｒｐであり、Ｘａａ８がＩｌｅであり、Ｘａａ９がＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、ペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００３７】
一実施形態は、式Ｉａのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１が不在であり、Ｘａａ２が不在であり、Ｘａａ３がＴｒｐであり、Ｘａａ４がＡｒｇであり、Ｘａａ５が、ＬｅｕまたはＡｌａであり、Ｘａａ６がＡｒｇであり、Ｘａａ７が、ＡｌａまたはＬｅｕであり、Ｘａａ８がＡｒｇであり、Ｘａａ９がＴｒｐであり、Ｘａａ１０が不在である、ペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００３８】
一実施形態は、配列番号２〜８０および１０８〜２１７のいずれか１つからなる群から選択されるペプチド、または表１Ａに列挙されるものから選択されるペプチドを含むか、またはそれからなる。
【表１Ａ−１】
2020523035.tif 000002
【表１Ａ−２】
2020523035.tif 000003
【表１Ａ−３】
2020523035.tif 000004
【表１Ａ−４】
2020523035.tif 000005
【表１Ａ−５】
2020523035.tif 000006
【００３９】
一実施形態は、式ＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４（ＩＩ）（配列番号８１）
式中、Ｘａａ１１が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ１２が、不在、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１３が、極性側鎖を有するアミノ酸、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１４が、不在またはＴｒｐであり、ただし、Ｘａａ１２が不在である場合、Ｘａａ１１が不在であることを条件とする、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００４０】
一実施形態は、式ＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１１が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ１２が、不在、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１３が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１４が、不在またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００４１】
一実施形態は、ＷＲＩＷＩＲＹＷ（配列番号９）またはＷＹＲＩＷＩＲＷ（配列番号５６）から選択される式ＩＩのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００４２】
一実施形態は、式ＩＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０（ＩＩＩ）（配列番号８２）
式中、Ｘａａ１５が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ１６が、不在、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１７が、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１８が、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１９が、不在、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２０が、不在またはＡｒｇであり、ただし、Ｘａａ１６が不在である場合、Ｘａａ１５が不在であることを条件とし、さらに、Ｘａａ１９が不在である場合、Ｘａａ２０が不在であることを条件とする、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００４３】
一実施形態は、式ＩＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ１５が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ１６が、不在、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１７が、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１８が、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１９が、不在、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２０が、不在またはＡｒｇである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００４４】
一実施形態は、ＷＲＩＲＬＲＹＷ（配列番号３）、ＷＲＩＲＬＲＷ（配列番号５７）、ＷＲＩＲＬＲＧＷ（配列番号５８）、ＷＹＲＩＲＬＲＹＷ（配列番号５９）、ＲＩＲＬＷＹＷ（配列番号６０）、またはＲＩＲＬＹＷＷ（配列番号２４）から選択される式ＩＩＩのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００４５】
一実施形態は、式ＩＶのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ２１−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｘａａ２２−Ｔｒｐ（ＩＶ）（配列番号８３）
式中、Ｘａａ２１が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２２が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００４６】
一実施形態は、式ＩＶのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ２１が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ２２が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＴｙｒである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００４７】
一実施形態は、ＲＩＲＩＷＬＷ（配列番号２６）、ＲＩＲＩＷＩＷ（配列番号３４）、ＲＩＲＩＷＹＷ（配列番号６１）、またはＷＲＩＲＩＷＹＷ（配列番号１２）から選択される式ＩＶのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００４８】
一実施形態は、式Ｖのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ２３−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｒｐ−Ｘａａ２４（Ｖ）（配列番号８４）
式中、Ｘａａ２３が、不在、または非極性側鎖もしくは極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２４が、不在、または極性側鎖もしくは非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００４９】
一実施形態は、式Ｖのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ２３が、不在、Ｌｅｕ、またはＬｙｓであり、Ｘａａ２４が、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＨｉｓであり、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５０】
一実施形態は、ＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号１０）、ＫＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号７９）、ＷＷＩＲＩＲＹＷＫ（配列番号６４）、ＷＷＩＲＩＲＹＷＬ（配列番号６５）、ＷＷＩＲＩＲＹＷＲ（配列番号６６）、ＬＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号６７）、またはＷＷＩＲＩＲＹＷＨ（配列番号６８）から選択される式Ｖのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５１】
一実施形態は、式ＶＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ２５−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８（ＶＩ）（配列番号８５）
式中、Ｘａａ２５が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２６が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２７が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２８が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５２】
一実施形態は、式ＶＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ２５が、不在、Ｌｅｕ、またはＬｙｓであり、Ｘａａ２６が、Ｔｒｐ、Ａｒｇ、またはＴｙｒであり、Ｘａａ２７が、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、またはＴｙｒであり、Ｘａａ２８が、ＡｒｇまたはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５３】
一実施形態は、ＷＲＩＷＬＷＹＲ（配列番号２）、ＷＲＩＷＬＹＷＲ（配列番号６）、ＲＩＷＬＲＬＷ（配列番号３０）、ＲＩＷＬＲＶＷ（合い列番号３１）、またはＷＲＩＷＬＲＹＷ（配列番号１７）から選択される式ＶＩのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５４】
一実施形態は、式ＶＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ２９−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ａｒｇ（ＶＩＩ）（配列番号８６）
式中、Ｘａａ２９が、不在、または極性側鎖もしくは非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３０が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３１が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３２が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５５】
一実施形態は、式ＶＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ２９が、不在、Ｌｅｕ、またはＬｙｓであり、Ｘａａ３０が、ＬｅｕまたはＰｈｅであり、Ｘａａ３１はＴｒｐまたはＴｙｒであり、Ｘａａ３２が、Ｌｅｕ、Ｔｒｐ、またはＴｙｒである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５６】
一実施形態は、（）、ＲＦＲＬＹＬＲ（配列番号２０）、ＲＦＲＦＹＬＲ（配列番号２１）、ＲＦＲＦＷＹＲ（配列番号３３）、またはＲＦＲＦＹＷＲ（配列番号３９）から選択される式ＶＩＩのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５７】
一実施形態は、ＲＦＲＬＹＬＲ（配列番号２０）、ＲＦＲＦＹＬＲ（配列番号２１）、ＲＦＲＦＷＹＲ（配列番号３３）、またはＲＦＲＦＹＷＲ（配列番号３９）から選択される式ＶＩＩのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５８】
一実施形態は、式ＶＩＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ３３−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６（ＶＩＩＩ）（配列番号８７）
式中、Ｘａａ３３が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３４が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３５が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３６が、不在、または極性側鎖もしくは非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５９】
一実施形態は、式ＶＩＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ３３が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ３４が、ＶａｌまたはＴｒｐであり、Ｘａａ３５が、ＴｒｐまたはＡｒｇであり、Ｘａａ３６が、不在、Ｌｅｕ、Ｔｒｐ、またはＡｒｇである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６０】
一実施形態は、ＷＩＲＬＹＷＲＷ（配列番号７４）、ＩＲＬＹＷＷＲ（配列番号４０）、ＩＲＬＹＷＷ（配列番号４６）、ＩＲＬＹＷＲＷ（配列番号４２）、またはＩＲＬＹＶＷ（配列番号５３）から選択される式ＶＩＩＩのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６１】
一実施形態は、式ＩＸのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ａｒｇ−Ｘａａ４１−Ｘａａ４２（ＩＸ）（配列番号８８）
式中、Ｘａａ３７が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３８が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３９が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４０が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４１が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４２が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６２】
一実施形態は、式ＩＸのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ３７が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ３８が、ＴｙｒまたはＴｒｐであり、Ｘａａ３９が、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ４０が、ＶａｌまたはＩｌｅであり、Ｘａａ４１が、ＴｒｐまたはＴｙｒであり、Ｘａａ４２が、不在またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６３】
一実施形態は、ＷＲＩＱＩＲＷ（配列番号６９）、ＷＹＲＩＷＶＲＹＷ（配列番号７０）、またはＷＲＩＮＩＲＹＷ（配列番号８０）から選択される式ＩＸのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６４】
一実施形態は、式ＩＩａのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４−Ｘａａ４３（ＩＩａ）（配列番号２２３）
式中、Ｘａａ１１が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ１２が、不在、極性側鎖を有するアミノ酸、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ１３が、不在、極性側鎖を有するアミノ酸、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ１４が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４３が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、ただし、Ｘａａ１２が不在の場合、Ｘａａ１１が不在であり、さらに、Ｘａａ１３が不在の場合、Ｘａａ１４およびＸａａ４３が不在であり、さらに、Ｘａａ１４が不在の場合、Ｘａａ４３が不在であることを条件とする、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６５】
一実施形態は、式ＩＩａのアミノ酸配列のペプチドであって、Ｘａａ１１が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ１２が、不在、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１３が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ｖａｌ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１４が、不在、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ４３が、不在またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６６】
一実施形態は、ＷＲＩＷＩＲＹＷ（配列番号９）またはＷＹＲＩＷＩＲＷ（配列番号５６）から選択される式ＩＩａのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６７】
一実施形態は、式ＩＩＩａのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０（ＩＩＩａ）（配列番号２２４）
式中、Ｘａａ１５が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ１６が、不在、極性側鎖を有するアミノ酸、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ１７が、極性側鎖を有するアミノ酸、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１８が、非極性側鎖を有するアミノ酸、またはＴｙｒであり、Ｘａａ１９が、不在、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２０が、不在またはＡｒｇであり、ただし、Ｘａａ１６が不在の場合、Ｘａａ１５が不在であることを条件とし、さらに、Ｘａａ１９が不在の場合、Ｘａａ２０が不在であることを条件とする、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６８】
一実施形態は、式ＩＩＩａのアミノ酸配列のペプチドであって、Ｘａａ１５が不在であり、Ｘａａ２０が不在である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６９】
一実施形態は、式ＩＩＩａのアミノ酸配列を含むペプチドであって、Ｘａａ１５が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ１６が、不在、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１７が、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１８が、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１９が、不在、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２０が、不在またはＡｒｇである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００７０】
一実施形態は、ＷＲＩＲＬＲＹＷ（配列番号３）、ＷＲＩＲＬＲＷ（配列番号５７）、ＷＲＩＲＬＲＧＷ（配列番号５８）、ＷＹＲＩＲＬＲＹＷ（配列番号５９）、ＲＩＲＬＷＹＷ（配列番号６０）、またはＲＩＲＬＹＷＷ（配列番号２４）、ＹＲＩＲＬＲＹ（配列番号１１３）、またはＬＲＩＲＬＲＬ（配列番号１１１）から選択される式ＩＩＩａのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００７１】
一実施形態は、式ＩＶａのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ４４−Ｘａａ２１−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｘａａ２２−Ｘａａ４５（ＩＶａ）（配列番号２２５）
式中、Ｘａａ４４が、不在であり、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２１が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２２が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４５が、不在またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００７２】
一実施形態は、式ＩＶａのアミノ酸配列のペプチドであって、Ｘａａ４４が、不在、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２１が、不在、Ｉｌｅ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２２が、不在、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＴｙｒであり、Ｘａａ４５が、不在またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００７３】
一実施形態は、ＲＩＲＩＷＬＷ（配列番号２６）、ＲＩＲＩＷＩＷ（配列番号３４）、ＲＩＲＩＷＹＷ（配列番号６１）、またはＷＲＩＲＩＷＹＷ（配列番号１２）から選択される式ＩＶａのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００７４】
一実施形態は、式ＶＩＩＩａのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ３３−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６（ＶＩＩＩａ）（配列番号２２６）
式中、Ｘａａ３３が、不在、非極性側鎖を有するアミノ酸、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３４が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３５が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３６が、不在、または極性側鎖もしくは非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００７５】
一実施形態は、式ＶＩＩＩａのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むペプチドであって、Ｘａａ３３が、不在、Ｌｙｓ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３４が、ＶａｌまたはＴｒｐであり、Ｘａａ３５が、ＴｒｐまたはＡｒｇであり、Ｘａａ３６が、不在、Ｌｅｕ、Ｔｒｐ、またはＡｒｇである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００７６】
一実施形態は、ＷＩＲＬＹＷＲＷ（配列番号７４）、ＩＲＬＹＷＷＲ（配列番号４０）、ＩＲＬＹＷＷ（配列番号４６）、ＩＲＬＹＷＲＷ（配列番号４２）、またはＩＲＬＹＶＷ（配列番号５３）から選択される式ＶＩＩＩａのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００７７】
一実施形態は、式ＩＸａのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ａｒｇ−Ｘａａ４１−Ｘａａ４２（ＩＸａ）（配列番号２２７）
式中、Ｘａａ３７が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３８が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３９が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４０が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４１が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４２が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００７８】
一実施形態は、式ＩＸａのアミノ酸配列のペプチドであって、Ｘａａ３７が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ３８が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ３９が、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｇｌｎ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ４０が、Ｌｅｕ、Ｔｒｐ、Ａｌａ、Ｖａｌ、またはＩｌｅであり、Ｘａａ４１が、ＴｒｐまたはＴｙｒであり、Ｘａａ４２が、不在またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００７９】
一実施形態は、ＷＲＩＲＷＲＹＷ（配列番号１６）、ＷＲＩＱＩＲＷ（配列番号６９）、ＷＹＲＩＷＶＲＹＷ（配列番号７０）、またはＷＲＩＮＩＲＹＷ（配列番号８０）から選択される式ＩＸａのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００８０】
一実施形態は、式Ｘのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ４７−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｘａａ４８−Ｘａａ４９−Ｘａａ５０（Ｘ）（配列番号２２８）
式中、Ｘａａ４７が、不在、極性側鎖を有するアミノ酸、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４８が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４９が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ５０が、不在またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００８１】
一実施形態は、式Ｘのアミノ酸配列のペプチドであって、Ｘａａ４７が、不在、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ４８が、ＡｒｇまたはＴｙｒであり、Ｘａａ４９が、Ｌｅｕ、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ａｒｇ、またはＴｙｒであり、Ｘａａ５０が、不在またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００８２】
一実施形態は、ＷＲＩＲＩＲＷ（配列番号６２）から選択される式Ｘのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００８３】
一実施形態は、式ＸＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ５１−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｘａａ５２−Ｘａａ５３−Ｘａａ５４−Ｘａａ５５（ＸＩ）（配列番号２２９）
式中、Ｘａａ５１が、不在、または非性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ５２が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ５３が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ５４が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ５５が、不在またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００８４】
一実施形態は、式ＸＩのアミノ酸配列のペプチドであって、Ｘａａ５１が、不在、Ｐｈｅ、Ｉｌｅ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ５２が、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ５３が、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ａｒｇ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ５４が、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｈｉｓ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ５５が、不在、Ｐｈｅ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、またはＴｒｐである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００８５】
一実施形態は、ＲＩＲＶＷＩＦ（配列番号６３）から選択される式ＸＩのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００８６】
一実施形態は、式ＸＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ５６−Ｘａａ５７−Ｘａａ５８−Ｘａａ５９−Ｘａａ６０−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ（ＸＩＩ）（配列番号２３０）
式中、Ｘａａ５６が、不在、または非性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ５７が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ５８が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ５９が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ６０が、極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００８７】
一実施形態は、式ＸＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、Ｘａａ５６が、不在またはＴｒｐであり、Ｘａａ５７が、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ５８が、Ａｌａ、Ａｒｇ、またはＧｌｕであり、Ｘａａ５９が、Ｉｌｅ、Ｎ−ＭｅＩｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ６０が、ＡｒｇまたはＮＭｅＡｒｇである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００８８】
一実施形態は、式ＸＩＩのアミノ酸配列のペプチドであって、Ｘａａ５８がＡｒｇである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００８９】
一実施形態は、ＷＲＩ（Ｎ−Ｍｅ）ＲＩＲＷ（配列番号１１０）およびＷＹＲＬＲＩＲＷ（配列番号７１）から選択される式ＸＩＩのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００９０】
一実施形態は、式ＸＩＩＩのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ６１−Ｘａａ６２−Ｘａａ６３−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ（ＸＩＩＩ）（配列番号２３１）
式中、Ｘａａ６１が、不在、または極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ６２が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ６３が、極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００９１】
一実施形態は、式ＸＩＩＩのアミノ酸配列のペプチドであって、Ｘａａ６１が、不在、Ａｒｇ、またはｈｏｍｏＡｒｇであり、Ｘａａ６２が、Ｔｙｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ６３が、ＡｒｇまたはｈｏｍｏＡｒｇである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００９２】
一実施形態は、ＲＷＲＩＷＩＷ（配列番号１１２）から選択される式ＸＩＩＩのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００９３】
一実施形態は、式ＸＩＶのアミノ酸配列のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｘａａ６４−Ｘａａ６５−Ｘａａ６６−Ａｒｇ−Ｔｒｐ（ＸＩＶ）（配列番号：２３２）
式中、Ｘａａ６４が、−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−、または極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ６５が、極性側鎖を有するアミノ酸または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ６６が、非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００９４】
一実施形態は、式ＸＩＶのアミノ酸配列のペプチドであって、Ｘａａ６４が、−Ｖａｌ−ＴＲＰ−Ｇｌｙ−、Ｌｅｕ、またはＡｌａであり、Ｘａａ６５が、ＡｒｇまたはＴｒｐであり、Ｘａａ６６が、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＡｌａである、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００９５】
一実施形態は、ＷＲＬＲＬＲＷ（配列番号１０８）から選択される式ＸＩＶのアミノ酸配列のペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００９６】
一実施形態は、表１Ｂのペプチドから選択されるペプチド、
【表１Ｂ】
2020523035.tif 000007
ならびにその薬学的に許容される塩を含むか、またはそれらからなる。
【００９７】
一実施形態では、発明は、表１Ｃのペプチドから選択されるペプチド、
【表１Ｃ】
2020523035.tif 000008
ならびにその薬学的に許容される塩を含むか、またはそれらからなる。
【００９８】
一実施形態では、発明は、表１Ｄのペプチドから選択されるペプチド、
【表１Ｄ】
2020523035.tif 000009
およびその薬学的に許容される塩を含むか、またはそれからなる。
【００９９】
一実施形態は、アミノ酸配列ＷＲＬＲＬＲＷ（配列番号１０８）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドペプチドは、配列番号１０８に対して最大２個のアミノ酸修飾を含む配列番号１０８の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号１０８に対して１個のアミノ酸修飾を含む配列番号１０８の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、または７のうちの１つにあり、アミノ酸番号付けは、配列番号１０８に対応する。
【０１００】
一実施形態は、アミノ酸配列ＲＩＷＩＹＷＦＲ（配列番号１０９）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドペプチドは、配列番号１０９に対して最大２個のアミノ酸修飾を含む配列番号１０９の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号１０９に対して１個のアミノ酸修飾を含む配列番号１０９の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、７、または８のうちの１つにあり、アミノ酸番号付けは、配列番号１０９に対応する。
【０１０１】
一実施形態は、アミノ酸配列ＷＲＩ（ＮＭｅ）ＲＩＲＷ（配列番号１１０）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドペプチドは、配列番号１１０に対して最大２個のアミノ酸修飾を含む配列番号１１０の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号１１０に対して１個のアミノ酸修飾を含む配列番号１１０の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、または７のうちの１つにあり、アミノ酸番号付けは、配列番号１１０に対応する。
【０１０２】
一実施形態は、アミノ酸配列ＬＲＩＲＬＲＬ（配列番号１１１）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドペプチドは、配列番号１１１に対して最大２個のアミノ酸修飾を含む配列番号１１１の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号１１１に対して１個のアミノ酸修飾を含む配列番号１１１の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、または７のうちの１つにあり、アミノ酸番号付けは、配列番号１１１に対応する。
【０１０３】
一実施形態は、アミノ酸配列ＷＲＩＲＷＲＹＷ（配列番号１６）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドペプチドは、配列番号１６に対して最大２個のアミノ酸修飾を含む配列番号１６の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号１６に対して１個のアミノ酸修飾を含む配列番号１６の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、７、または８のうちの１つにあり、アミノ酸番号付けは、配列番号１６に対応する。
【０１０４】
一実施形態は、アミノ酸配列ＲＩＲＩＷＩＷ（配列番号３４）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドペプチドは、配列番号３４に対して最大２個のアミノ酸修飾を含む配列番号３４の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号３４に対して１個のアミノ酸修飾を含む配列番号３４の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、または７のうちの１つにあり、アミノ酸番号付けは、配列番号３４に対応する。
【０１０５】
一実施形態は、アミノ酸配列ＷＹＲＬＲＩＲＷ（配列番号７１）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドペプチドは、配列番号７１に対して最大２個のアミノ酸修飾を含む配列番号７１の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号７１に対して１個のアミノ酸修飾を含む配列番号７１の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、７、または８のうちの１つにあり、アミノ酸番号付けは、配列番号７１に対応する。
【０１０６】
一実施形態は、アミノ酸配列ＷＲＩＲＩＲＷ（配列番号６２）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドペプチドは、配列番号６２に対して最大２個のアミノ酸修飾を含む配列番号６２の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号６２に対して１個のアミノ酸修飾を含む配列番号６２の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、または７のうちの１つにあり、アミノ酸番号付けは、配列番号６２に対応する。
【０１０７】
一実施形態は、アミノ酸配列ＷＲＩＲＬＲＷ（配列番号５７）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドペプチドは、配列番号５７に対して最大２個のアミノ酸修飾を含む配列番号５７の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号５７に対して１個のアミノ酸修飾を含む配列番号５７の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、または７のうちの１つにあり、アミノ酸番号付けは、配列番号５７に対応する。
【０１０８】
一実施形態は、アミノ酸配列ＷＹＲＩＷＩＲＷ（配列番号５６）のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドペプチドは、配列番号５６に対して最大２個のアミノ酸修飾を含む配列番号５６の修飾形態である。いくつかの実施形態では、ペプチドは、配列番号５６に対して１個のアミノ酸修飾を含む配列番号５６の修飾形態であり、修飾（複数可）は、位置１、２、３、４、５、６、７、または８のうちの１つにあり、アミノ酸番号付けは、配列番号５６に対応する。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるペプチドは、アミノ酸配列配列番号１〜８８および１０８〜２１０のうちのいずれか１つと少なくとも６６％の配列同一性を有する配列を含む。特定の実施形態では、同一性％は、例えば、所定の配列と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、またはそれ以上の配列同一性から選択される。特定の実施形態では、同一性％は、例えば、約６５％〜約７０％、約７０％〜約８０％、約８０％〜約８５％、約８５％〜約９０％、または約９０％〜約９５％、約７０％〜約８０％、約８０％〜約９０％、および約９０％〜約９９％の配列同一性の範囲である。
【０１１０】
本開示のペプチドは、任意の方法および任意の理由で、例えば、（１）タンパク質分解に対する感受性を低下させるため、（２）結合親和性を改変するため、および（３）他の物理化学または機能特性を付与または修飾するために、修飾されているペプチドを含む。例えば、単一または複数のアミノ酸置換（例えば、等価、保存的または非保存的置換、欠失または付加）が配列内で行われ得る。
【０１１１】
保存的アミノ酸置換は、類似の性質、例えば、サイズ、電荷、疎水性、親水性、および／または芳香族性を有する機能的に類似のアミノ酸を含むアミノ酸のペプチドでの置換を指す。以下の６つの群は各々、互いに保守的な置換であるアミノ酸を含み、表２に見出される。
表２
ｉ．アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、およびトレオニン（Ｔ）
ｉｉ．アスパラギン酸（Ｄ）およびグルタミン酸（Ｅ）
ｉｉｉ．アスパラギン（Ｎ）およびグルタミン（Ｑ）
ｉｖ．アルギニン（Ｒ）およびリジン（Ｋ）
ｖ．イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、およびバリン（Ｖ）
ｖｉ．フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、およびトリプトファン（Ｗ）
【０１１２】
さらに、本明細書に適用される「等価のアミノ酸置換」という用語の意味の範囲内で、１個のアミノ酸が別のものに置換することができ、一実施形態では、本明細書の以下に示されるアミノ酸の群内で置換することができる。
１．極性側鎖を有するアミノ酸（ＡＳＰ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、およびＣｙｓ）
２．小さな非極性またはわずかに極性の残基を有するアミノ酸（Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ）
３．非極性側鎖を有するアミノ酸（Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｐｒｏ、およびＭｅｔ）
４．大きな脂肪族、非極性残基を有するアミノ酸（Ｍｅｔ、のＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｃｙｓ、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、ホモシステイン）
５．脂肪族側鎖を有するアミノ酸（Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ）
６．環状側鎖を有するアミノ酸（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ、Ｐｒｏ）
７．芳香族側鎖を有するアミノ酸（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ）
８．酸性側鎖を有するアミノ酸（Ａｓｐ、Ｇｌｕ）
９．塩基性側鎖を有するアミノ酸（Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ）
１０．アミド側鎖を有するアミノ酸（Ａｓｎ、Ｇｌｎ）
１１．ヒドロキシル側鎖を有するアミノ酸（Ｓｅｒ、Ｔｈｒ）
１２．硫黄含有側鎖を有するアミノ酸（Ｃｙｓ、Ｍｅｔ）
１３．中性、弱疎水性アミノ酸（Ｐｒｏ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ）
１４．親水性、酸性アミノ酸（Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、ＡＳＰ）、および
１５．疎水性アミノ酸（Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ）。
【０１１３】
いくつかの実施形態では、アミノ酸置換は、保存的アミノ酸置換ではなく、例えば、非保存的アミノ酸置換である。この分類には、一般に、対応するＤ−アミノ酸、ホモアミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸、ベータアミノ酸、および他の非天然アミノ酸が含まれる。非保存的アミノ酸置換は、依然として上記の等価のアミノ酸置換について特定される説明の範囲内にある［例えば、極性、非極性など］。非保存的アミノ酸の例は、以下に提供される。
【０１１４】
アラニンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：Ｄ−アラニン［Ｄａｌａ、（ｄＡ）、ａ］、Ｎ−アセチル−３−（３，４−ジメトキシフェニル）−Ｄ−アラニン、Ｎ−Ｍｅ−Ｄ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｈ−β−Ａｌａ−β−ナフタレン、Ｌ−（−）−２−アミノ−３−ウレイド酸、（Ｒ）−（＋）−α−アリルアラニン、（Ｓ）−（−）−α−アリルアラニン、Ｄ−２−アミノ酪酸、Ｌ−２−アミノ酪酸、ＤＬ−２−アミノ酪酸、２−アミノイソ酪酸、α−アミノイソ酪酸、（Ｓ）−（＋）−２−アミノ−４−フェニル酪酸エチルエステル、α−アミノイソ酪酸ベンジル、Ａｂｕ−ＯＨ、Ａｉｂ−ＯＨ、β−（９−アントリル）−Ａｌａ−ＯＨ、β−（３−ベンゾチエニル）−Ａｌａ−ＯＨ、β−（３−ベンゾチエニル）−Ｄ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｃｈａ−ＯＨ、Ｃｈａ−ＯＭｅ、β−（２−フリル）−Ａｌａ−ＯＨ、β−（２−フリル）−Ｄ−Ａｌａ−ＯＨ、β−ヨード−Ａｌａ−ＯＢｚｌ、β−ヨード−Ｄ−Ａｌａ−ＯＢｚｌ、３−ヨード−Ｄ−Ａｌａ−ＯＭｅ、β−ヨード−Ａｌａ−ＯＭｅ、１−Ｎａｌ−ＯＨ、Ｄ−１−Ｎａｌ−ＯＨ、２−Ｎａｌ−ＯＨ、Ｄ−２−Ｎａｌ−ＯＨ、（Ｒ）−３−（２−ナフチル）−β−Ａｌａ−ＯＨ、（Ｓ）−３−（２−ナフチル）−β−Ａｌａ−ＯＨ、β−フェニル−Ｐｈｅ−ＯＨ、３−（２−ピリジル）−Ａｌａ−ＯＨ、３−（３−ピリジル）−Ａｌａ−ＯＨ、３−（３−ピリジル）−Ｄ−Ａｌａ−ＯＨ、（Ｓ）−３−（３−ピリジル）−β−Ａｌａ−ＯＨ、３−（４−ピリジル）−Ａｌａ−ＯＨ、３−（４−ピリジル）−Ｄ−Ａｌａ−ＯＨ、β−（２−キノリル）−Ａｌａ−ＯＨ、３−（２−キノリル）−ＤＬ−Ａｌａ−ＯＨ、３−（３−キノリル）−ＤＬ−Ａｌａ−ＯＨ、３−（２−キノキサリル）−ＤＬ−Ａｌａ−ＯＨ、β−（４−チアゾリル）−Ａｌａ−ＯＨ、β−（２−チエニル）−Ａｌａ−ＯＨ、β−（２−チエニル）−Ｄ−Ａｌａ−ＯＨ、β−（３−チエニル）−Ａｌａ−ＯＨ、β−（３−チエニル）−Ｄ−Ａｌａ−ＯＨ、３−クロロ−Ｄ−アラニンメチルエステル、Ｎ−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−β−アラニン、３−シクロヘキシル−Ｄ−アラニン、３−シクロペンチル−ＤＬ−アラニン、（−）−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−メチル−Ｌ−アラニン、３，３−ジフェニル−Ｄ−アラニン、３，３−ジフェニル−Ｌ−アラニン、Ｎ−［（Ｓ）−（＋）−１−（エトキシカルボニル）−３−フェニルプロピル］−Ｌ−アラニン、Ｎ−［１−（Ｓ）−（＋）−エトキシカルボニル−３−フェニルプロピル］−Ｌ−アラニルカルボキシ無水物、Ｎ−（３−フルオロベンジル）アラニン、Ｎ−（３−インドリルアセチル）−Ｌ−アラニン、メチル（ＲＳ）−２−（アミノメチル）−３−フェニルプロピオネート、３−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−４−キノリニル）アラニン、３−（１−ピラゾリル）−Ｌ−アラニン、３−（２−ピリジル）−Ｄ−アラニン、３−（２−ピリジル）−Ｌ−アラニン、３−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニン、３−（４−ピリジル）−Ｄ−アラニン、３−（４−ピリジル）−Ｌ−アラニン、３−（２−キノリル）−ＤＬ−アラニン、３−（４−キノリル）−ＤＬ−アラニン、Ｄ−スチリルアラニ���、Ｌ−スチリルアラニン、３−（２−チエニル）−Ｌ−アラニン、３−（２−チエニル）−ＤＬ−アラニン、３−（２−チエニル）−ＤＬ−アラニン、３，３，３−トリフルオロ−ＤＬ−アラニン、Ｎ−メチル−Ｌ−アラニン、３−ウレイドプロピオン酸、Ａｉｂ−ＯＨ、Ｃｈａ−ＯＨ、デヒドロ−Ａｌａ−ＯＭｅ、デヒドロ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｄ−２−Ｎａｌ−ＯＨ、β−Ａｌａ−ＯＮｐ、β−Ｈｏｍｏａｌａ−ＯＨ、β−Ｄ−Ｈｏｍｏａｌａ−ＯＨ、β−アラニン、β−アラニンエチルエステル、β−アラニンメチルエステル、（Ｓ）−ジフェニル−β−Ｈｏｍｏａｌａ−ＯＨ、（Ｒ）−４−（４−ピリジル）−β−Ｈｏｍｏａｌａ−ＯＨ、（Ｓ）−４−（４−ピリジル）−β−Ｈｏｍｏａｌａ−ＯＨ、β−Ａｌａ−ＯＨ、（Ｓ）−ジフェニル−β−Ｈｏｍｏａｌａ−ＯＨ、Ｌ−β−ホモアラニン、（Ｒ）−４−（３−ピリジル）−β−Ｈｏｍｏａｌａ−ＯＨ、α−メチル−α−ナフチルアラニン［Ｍａｎａｐ］、Ｎ−メチル−シクロヘキシルアラニン［Ｎｍｃｈｅｘａ］、シクロヘキシルアラニン［Ｃｈｅｘａ］、Ｎ−メチル−シクロペンチルアラニン［Ｎｍｃｐｅｎ］、シクロペンチルアラニン［Ｃｐｅｎ］、Ｎ−メチル−α−ナフチルアラニン［Ｎｍａｎａｐ］、α−ナフチルアラニン［Ａｎａｐ］、Ｌ−Ｎ−メチルアラニン［Ｎｍａｌａ］、Ｄ−Ｎ−メチルアラニン［Ｄｎｍａｌａ］、α−メチル−シクロヘキシルアラニン［Ｍｃｈｅｘａ］、α−メチル−シクロペンチルアラニン［Ｍｃｐｅｎ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１１５】
アルギニンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：ホモアルギニン（ｈＡｒｇ）、Ｎ−メチルアルギニン（ＮＭｅＡｒｇ）、シトルリン、２−アミノ−３−グアニジノプロピオン酸、Ｎ−イミノエチル−Ｌ−オルニチン、Νω−モノメチル−Ｌ−アルギニン、Νω−ニトロ−Ｌ−アルギニン、Ｄ−アルギニン、２−アミノ−３−ウレイドプロピオン酸、Νω，ω−ジメチル−Ｌ−アルギニン、Νω−ニトロ−Ｄ−アルギニン、Ｌ−α−メチルアルギニン［Ｍａｒｇ］、Ｄ−α−メチルアルギニン［Ｄｍａｒｇ］、Ｌ−Ｎ−メチルアルギニン［Ｎｍａｒｇ］、Ｄ−Ｎ−メチルアルギニン［Ｄｎｍａｒｇ］、β−Ｈｏｍｏａｒｇ−ＯＨ、Ｌ−ホモアルギニン［ｈｏｍｏＡｒｇ、ｈＲ］、Ｎ−（３−グアニジノプロピル）グリシン［Ｎａｒｇ］、およびＤ−アルギニン［Ｄａｒｇ、（ｄＲ）、ｒ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
アスパラギンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：Ｌ−α−メチルアスパラギン［Ｍａｓｎ］、Ｄ−α−メチルアスパラギン［Ｄｍａｓｎ］、Ｌ−Ｎ−メチルアスパラギン［Ｎｍａｓｎ］、Ｄ−Ｎ−メチルアスパラギン［Ｄｎｍａｓｎ］、Ｎ−（カルバミルメチル）グリシン［Ｎａｓｎ］、およびＤ−アスパラギン［Ｄａｓｎ、（ｄＮ）、ｎ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１１６】
アスパラギン酸の非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：Ｌ−α−メチルアスパラギン酸塩［ＭＡＳＰ］、Ｄ−α−メチルアスパラギン酸塩［Ｄｍａｓｐ］、Ｌ−Ｎ−メチルアスパラギン酸［Ｎｍａｓｐ］、Ｄ−Ｎ−メチルアスパラギン酸塩［Ｄｎｍａｓｐ］、Ｎ−（カルボキシメチル）グリシン［Ｎａｓｐ］、およびＤ−アスパラギン酸［Ｄａｓｐ、（ｄＤ）、ｄ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１１７】
システイン非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：Ｌ−システイン酸、Ｌ−システインスルフィン酸、Ｄ−エチオニン、Ｓ−（２−チアゾリル）−Ｌ−システイン、ＤＬ−ホモシステイン、Ｌ−ホモシステイン、Ｌ−ホモシスチン、Ｌ−α−メチルシステイン［Ｍｃｙｓ］、Ｄ−α−メチルシステイン［Ｄｍｃｙｓ］、Ｌ−Ｎ−メチルシステイン［Ｎｍｃｙｓ］、Ｄ−Ｎ−メチルシステイン［Ｄｎｍｃｙｓ］、Ｎ−（チオメチル）グリシン［Ｎｃｙｓ］、およびＤ−システイン［Ｄｃｙｓ、（ｄＣ）、ｃ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１１８】
グルタミン酸の非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：γ−カルボキシ−ＤＬ−グルタミン酸、４−フルオロ−ＤＬ−グルタミン酸、β−グルタミン酸、Ｌ−β−ホモグルタミン酸、Ｌ−α−メチルグルタミン酸塩［Ｍｇｌｕ］、Ｄ−α−メチルグルタミン酸［Ｄｍｇｌｕ］、Ｌ−Ｎ−メチルグルタミン酸［Ｎｍｇｌｕ］、Ｄ−Ｎ−メチルグルタミン酸塩［Ｄｎｍｇｌｕ］、Ｎ−（２−カルボキシエチル）グリシン［Ｎｇｌｕ］、およびＤ−グルタミン酸［Ｄｇｌｕ、（ｄＥ）、ｅ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１１９】
グルタミンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：Ｃｉｔ−ＯＨ、Ｄ−シトルリン、チオ−Ｌ−シトルリン、β−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｌ−β−ホモグルタミン、Ｌ−α−メチルグルタミン［Ｍｇｌｎ］、Ｄ−α−メチルグルタミン［Ｄｍｇｌｎ］、Ｌ−Ｎ−メチルグルタミン［Ｎｍｇｌｎ］、Ｄ−Ｎ−メチルグルタミン［Ｄｍｇｎｌｎ］、Ｎ−（２−カルバミルエチル）グリシン［Ｎｇｌｎ］、およびＤ−グルタミン［Ｄｇｌｎ、（ｄＱ）、ｑ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１２０】
グリシンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：ｔＢｕ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｄ−アリルグリシン、Ｎ−［ビス（メチルチオ）メチレン］グリシンメチルエステル、Ｃｈｇ−ＯＨ、Ｄ−Ｃｈｇ−ＯＨ、Ｄ−シクロプロピルグリシン、Ｌ−シクロプロピルグリシン、（Ｒ）−４−フルオロフェニルグリシン、（Ｓ）−４−フルオロフェニルグリシン、イミノ二酢酸、（２−インダニル）−Ｇｌｙ−ＯＨ、（±）−α−ホスホノグリシントリメチルエステル、Ｄ−プロパルギルグリシン、プロパルギル−Ｇｌｙ−ＯＨ、（Ｒ）−２−チエニルグリシン、（Ｓ）−２−チエニルグリシン、（Ｒ）−３−チエニルグリシン、（Ｓ）−３−チエニルグリシン、２−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ＤＬ−グリシン、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−α−（カルボキシシクロプロピル）グリシン、Ｎ−（クロロアセチル）グリシンエチルエステル、（Ｓ）−（＋）−２−クロロフェニルグリシンメチルエステル、Ｎ−（２−クロロフェニル）−Ｎ−（メチルスルホニル）グリシン、Ｄ−α−シクロヘキシルグリシン、Ｌ−α−シクロプロピルグリシン、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−イミノジカルボキシレート、アセトアミドシアノ酢酸エチル、Ｎ−（２−フルオロフェニル）−Ｎ−（メチルスルホニル）グリシン、Ｎ−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−（メチルスルホニル）グリシン、Ｎ−（２−フルフリリデンアセチル）グリシンメチルエステル、Ｎ−（２−フロイル）グリシン、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸、Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）グリシン、イミノ二酢酸、Ｎ−ラウロイルサルコシンナトリウム塩、Ｌ−α−ネオペンチルグリシン、Ｎ−（ホスホノメチル）グリシン、Ｄ−プロパルギルグリシン、Ｌ−Ｃ−プロパルギルグリシン、サルコシン、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシンエチルエステル、Ｄ−Ｃｈｇ−ＯＨ、α−ホスホノグリシントリメチルエステル、Ｎ−シクロブチルグリシン［Ｎｃｂｕｔ］、Ｌ−α−メチルエチルグリシン［Ｍｅｔｇ］、Ｎ−シクロヘプチルグリシン［Ｎｃｈｅｐ］、Ｌ−α−メチル−ｉ−ブチルグリシン［Ｍｔｂｕｇ］、Ｎ−メチルグリシン［Ｎｍｇｌｙ］、Ｌ−Ｎ−メチルエチルグリシン［Ｎｍｅｔｇ］、Ｌ−エチルグリシン［Ｅｔｇ］、Ｌ−Ｎ−メチル−ｔ−ブチルグリシン［Ｎｍｔｂｕｇ］、Ｌ−ｔ−ブチルグリシン［Ｔｂｕｇ］、Ｎ−シクロヘキシルグリシン［Ｎｃｈｅｘ］、Ｎ−シクロデシルグリシン［Ｎｃｄｅｃ］、Ｎ−シクロドデシルグリシン［Ｎｃｄｏｄ］、Ｎ−シクロオクチルグリシン［Ｎｃｏｃｔ］、Ｎ−シクロプロピルグリシン［Ｎｃｐｒｏ］、Ｎ−シクロウンデシルグリシン［Ｎｃｕｎｄ］、Ｎ−（２−アミノエチル）グリシン［Ｎａｅｇ］、Ｎ−（Ｎ−（２，２−ジフェニルエチル）ジフェニルエチル）グリシン［Ｎｎｂｈｍ］、Ｎ−（２，２−カルバミルメチルグリシン［Ｎｂｈｍ］、Ｎ−（Ｎ−（３，３−ジフェニルプロピル）ジフェニルプロピル）グリシン［Ｎｎｂｈｅ］、およびＮ−（３，３−カルバミルメチルグリシン［Ｎｂｈｅ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１２１】
ヒスチジンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：Ｌ−α−メチルヒスチジン［Ｍｈｉｓ］、Ｄ−α−メチルヒスチジン［Ｄｍｈｉｓ］、Ｌ−Ｎ−メチルヒスチジン［Ｎｍｈｉｓ］、Ｄ−Ｎ−メチルヒスチジン［Ｄｎｍｈｉｓ］、Ｎ−（イミダゾリルエチル）グリシン［Ｎｈｉｓ］、およびＤ−ヒスチジン［Ｄｈｉｓ、（ｄＨ）、ｈ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１２２】
イソロイシンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：Ｎ−メチル−Ｌ−イソロイシン［Ｎｍｉｌｅ］、Ｎ−（３−インドイルアセチル）−Ｌ−イソロイシン、アロ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｄ−アロ−イソロイシン、Ｌ−β−ホモイソロイシン、Ｌ−α−メチルイソロイシン［Ｍｉｌｅ］、Ｄ−α−メチルイソロイシン［Ｄｍｉｌｅ］、Ｄ−Ｎ−メチルイソロイシン［Ｄｎｍｉｌｅ］、Ｎ−（１−メチルプロピル）グリシン［Ｎｉｌｅ］、およびＤ−イソロイシン［Ｄｉｌｅ、（ｄＤ）、ｉ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１２３】
ロイシンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：Ｄ−ロイシン［Ｄｌｅｕ、（ｄＬ）、ｌ］。シクロロイシン、ＤＬ−ロイシン、Ｎ−ホルミル−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｄ−ｔｅｒｔ−ロイシン、Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシン、ＤＬ−ｔｅｒｔ−ロイシン、Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシンメチルエステル、５，５，５−トリフルオロ−ＤＬ−ロイシン、Ｄ−β−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｌ−β−ロイシン、ＤＬ−β−ロイシン、Ｌ−β−ホモロイシン、ＤＬ−β−ホモロイシン、Ｌ−Ｎ−メチル−ロイシン［Ｎｍｌｅｕ］、Ｄ−Ｎ−メチル−ロイシン［Ｄｎｍｌｅｕ］、Ｌ−α−メチル−ロイシン［Ｍｌｅｕ］、Ｄ−α−メチル−ロイシン［Ｄｍｌｅｕ］、Ｎ−（２−メチルプロピル）グリシン［Ｎｌｅｕ］、Ｄ−ロイシン［Ｄｌｅｕ、ｌ］、Ｄ−ノルロイシン、Ｌ−ノルロイシン、ＤＬ−ノルロイシン、Ｌ−Ｎ−メチルノルロイシン［Ｎｍｎｌｅ］、およびＬ−ノルロイシン［Ｎｌｅ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１２４】
リジンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：ＤＬ−５−ヒドロキシリジン、（５Ｒ）−５−ヒドロキシ−Ｌ−リジン、β−Ｌｙｓ−ＯＨ、Ｌ−β−ホモリジン、Ｌ−α−メチル−リジン［Ｍｌｙｓ］、Ｄ−α−メチル−リジン［Ｄｍｌｙｓ］、Ｌ−Ｎ−メチル−リジン［Ｎｍｌｙｓ］、Ｄ−Ｎ−メチル−リジン［Ｄｎｍｌｙｓ］、Ｎ−（４−アミノブチル）グリシン［Ｎｌｙｓ］、およびＤ−リジン［Ｄｌｙｓ、（ｄＫ）、ｋ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１２５】
メチオニンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：Ｌ−β−ホモメチオニン、ＤＬ−β−ホモメチオニン、Ｌ−α−メチルメチオニン［Ｍｍｅｔ］、Ｄ−α−メチルメチオニン［Ｄｍｍｅｔ］、Ｌ−Ｎ−メチルメチオニン［Ｎｍｍｅｔ］、Ｄ−Ｎ−メチルメチオニン［Ｄｎｍｍｅｔ］、Ｎ−（２−メチルチオエチル）グリシン［Ｎｍｅｔ］、およびＤ−メチオニン［Ｄｍｅｔ、（ｄＭ）、ｍ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１２６】
フェニルアラニンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は次のとおりである：Ｎ−アセチル−２−フルオロ−ＤＬ−フェニルアラニン、Ｎ−アセチル−４−フルオロ−ＤＬ−フェニルアラニン、４−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン、３−［３，４−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］−Ｌ−アラニン、Ｂｐａ−ＯＨ、Ｄ−Ｂｐａ−ＯＨ、４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｐｈｅ−ＯＨ、４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、４−（アミノ）−Ｌ−フェニルアラニン、ｒａｃ−β２−ホモフェニルアラニン、２−メトキシ−Ｌ−フェニルアラニン、（Ｓ）−４−メトキシ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、２−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン、ペンタフルオロ−Ｄ−フェニルアラニン、ペンタフルオロ−Ｌ−フェニルアラニン、Ｐｈｅ（４−Ｂｒ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（４−Ｂｒ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（４−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２−Ｃｌ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２−Ｃｌ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２，４−Ｃｌ２）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２，４−Ｃｌ２）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３−Ｃｌ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３，４−Ｃｌ２）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−Ｃｌ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（４−Ｃｌ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２−ＣＮ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２−ＣＮ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３−ＣＮ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−ＣＮ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（４−ＣＮ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２−Ｍｅ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２−Ｍｅ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３−Ｍｅ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３−Ｍｅ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−Ｍｅ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−ＮＨ２）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−ＮＯ２）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２−Ｆ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２−Ｆ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３−Ｆ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３−Ｆ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３，４−Ｆ２）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３，４−Ｆ２）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３，５−Ｆ２）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−Ｆ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（４−Ｆ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−Ｉ）−ＯＨ、Ｄ−３，４，５−トリフルオロフェニルアラニン、ｐ−ブロモ−ＤＬ−フェニルアラニン、４−ブロモ−Ｌ−フェニルアラニン、β−フェニル−Ｄ−フェニルアラニン、４−クロロ−Ｌ−フェニルアラニン、ＤＬ−２，３−ジフルオロフェニルアラニン、ＤＬ−３，５−ジフルオロフェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシ−Ｌ−フェニルアラニン、３−（３，４−ジメトキシフェニル）−Ｌ−アラニン、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−２−メトキシ−Ｌ−フェニルアラニン、ｏ−フルオロ−ＤＬ−フェニルアラニン、ｍ−フルオロ−Ｌ−フェニルアラニン、ｍ−フルオロ−ＤＬ−フェニルアラニン、ｐ−フルオロ−Ｌ−フェニルアラニン、ｐ−フルオロ−ＤＬ−フェニルアラニン、４−フルオロ−Ｄ−フェニルアラニン、２−フルオロ−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル、ｐ−フルオロ−ＤＬ−Ｐｈｅ−ＯＭｅ、Ｄ−３−ブロモフェニルアラニン、Ｄ−４−ブロモフェニルアラニン、Ｌ−β−（６−クロロ−４−ピリジニル）アラニン、Ｄ−３，５−ジフルオロフェニルアラニン、Ｌ−３−フルオロフェニルアラニン、Ｌ−４−フルオロフェニルアラニン、Ｌ−β−（１Ｈ−５��インドリル）アラニン、２−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン、ペンタフルオロ−Ｌ−フェニルアラニン、ｐｈｅ（３−ｂｒ）−ｏｈ、Ｐｈｅ（４−Ｂｒ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（４−ＣＦ３）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２−Ｃｌ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２−Ｃｌ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２，４−Ｃｌ２）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２，４−Ｃｌ２）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３，４−Ｃｌ２）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３，４−Ｃｌ２）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−Ｃｌ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（４−Ｃｌ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２−ＣＮ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２−ＣＮ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３−ＣＮ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−ＣＮ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（２−Ｍｅ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３−Ｍｅ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３−Ｍｅ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−ＮＯ２）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（４−ＮＯ２）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（２−Ｆ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３−Ｆ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（３−Ｆ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３，４−Ｆ２）−ＯＨ、Ｐｈｅ（３，５−Ｆ２）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（４−Ｆ）−ＯＨ、Ｐｈｅ（４−Ｉ）−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｅ（４−Ｉ）−ＯＨ、４−（ホスホノメチル）−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｌ−４−トリフルオロメチルフェニルアラニン、３，４，５−トリフルオロ−Ｄ−フェニルアラニン、Ｌ−３，４，５−トリフルオロフェニルアラニン、６−ヒドロキシ−ＤＬ−ＤＯＰＡ、４−（ヒドロキシメチル）−Ｄ−フェニルアラニン、Ｎ−（３−インドリルアセチル）−Ｌ−フェニルアラニン、ｐ−ヨード−Ｄ−フェニルアラニン、４−ヨード−Ｌ−フェニルアラニン、α−メチル−Ｄ−フェニルアラニン、α−メチル−Ｌ−フェニルアラニン、α−メチル−ＤＬ−フェニルアラニン、α−メチル−ＤＬ−フェニルアラニンメチルエステル、４−ニトロ−Ｄ−フェニルアラニン、４−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン、４−ニトロ−ＤＬ−フェニルアラニン、（Ｓ）−（＋）−４−ニトロフェニルアラニンメチルエステル、２−（トリフルオロメチル）−Ｄ−フェニルアラニン、２−（トリフルオロメチル）−Ｌ−フェニルアラニン、３−（トリフルオロメチル）−Ｄ−フェニルアラニン、３−（トリフルオロメチル）−Ｌ−フェニルアラニン、４−（トリフルオロメチル）−Ｄ−フェニルアラニン、３，３´，５−トリヨード−Ｌ−チロニン、（Ｒ）−４−ブロモ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｎ−アセチル−ＤＬ−β−フェニルアラニン、（Ｓ）−４−ブロモ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−４−クロロ−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−４−クロロ−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−４−クロロ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−４−クロロ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−２−シアノ−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−４−シアノ−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−４−シアノ−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−３−シアノ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−４−シアノ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−４−シアノ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−３，４−ジメトキシ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−３，４−ジメトキシ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−４−フルオロ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−４−フルオロ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−４−ヨード−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−３−シアノ−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−３，４−ジフルオロ−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−４−フルオロ−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−β２−ホモフェニルアラニン、（Ｒ）−３−メトキシ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−３−メトキシ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−４−メトキシ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−４−メチル−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−２−メチル−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−２−メチル−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−３−メチル−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−３−メチル−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−４−メチル−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−４−メチル−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、β−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｄ−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−２−（トリフルオロメチル）−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−２−（トリフルオロメチル）−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−３−（トリフルオロメチル）−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−４−（トリフルオロメチル）−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−２−（トリフルオロメチル）−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−３−（トリフルオロメチル）−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−３−（トリフルオロメチル）−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｒ）−４−（トリフルオロメチル）−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−４−（トリフルオロメチル）−β−Ｐｈｅ−ＯＨ、β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、Ｄ−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−２−メチル−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−３−メチル−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、β−Ｐｈｅ−ＯＨ、β−Ｄ−Ｐｈｅ−ＯＨ、（Ｓ）−３−（トリフルオロメチル）−β−Ｈｏｍｏｐｈｅ−ＯＨ、Ｌ−β−ホモフェニルアラニン、ＤＬ−β−ホモフェニルアラニン、ＤＬ−β−フェニルアラニン、ＤＬ−ホモフェニルアラニンメチルエステル、Ｄ−ホモフェニルアラニン、Ｌ−ホモフェニルアラニン、ＤＬ−ホモフェニルアラニン、Ｄ−ホモフェニルアラニンエチルエステル、（Ｒ）−β２−ホモフェニルアラニン、Ｌ−α−メチル−ホモフェニルアラニン［Ｍｈｐｈｅ］、Ｌ−α−メチルフェニルアラニン［Ｍｐｈｅ］、Ｄ−ａ−メチルフェニルアラニン［Ｄｍｐｈｅ］、Ｌ−Ｎ−メチルホモフェニルアラニン［Ｎｍ  ｐｈｅ］、Ｌ−ホモフェニルアラニン［Ｈｐｈｅ］、Ｌ−Ｎ−メチルフェニルアラニン［Ｎｍｐｈｅ］、Ｄ−Ｎ−メチルフェニルアラニン［Ｄｎｍｐｈｅ］、Ｎ−ベンジルグリシン［Ｎｐｈｅ］、およびＤ−フェニルアラニン［Ｄｐｈｅ、（ｄＦ）、ｆ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１２７】
プロリンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：ホモプロリン（ｈＰｒｏ）、（４−ヒドロキシ）Ｐｒｏ（４ＨｙＰ）、（３−ヒドロキシ）Ｐｒｏ（３ＨｙＰ）、ガンマ−ベンジル−プロリン、ガンマ−（２−フルオロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３−フルオロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（４−フルオロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（２−クロロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３−クロロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（４−クロロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（２−ブロモ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３−ブロモ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（４−ブロモ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（２−メチル−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３−メチル−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（４−メチル−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（２−ニトロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３−ニトロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（４−ニトロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（１−ナフタレニルメチル）−プロリン、ガンマ−（２−ナフタレニルメチル）−プロリン、ガンマ−（２，４−ジクロロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３，４−ジクロロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３，４−ジフルオロ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（２−トリフルオロ−メチル−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３−トリフルオロ−メチル−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（４−トリフルオロ−メチル−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（２−シアノ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３−シアノ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（４−シアノ−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（２−ヨード−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３−ヨード−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（４−ヨード−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３−フェニル−アリル−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（３−フェニル−プロピル−ベンジル）−プロリン、ガンマ−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンジル）−プロリン、ガンマ−ベンズヒドリル−プロリン、ガンマ−（４−ビフェニル−メチル）−プロリン、ガンマ−（４−チアゾリル−メチル）−プロリン、ガンマ−（３−ベンゾチエニル−メチル）−プロリン、ガンマ−（２−チエニル−メチル）−プロリン、ガンマ−（３−チエニル−メチル）−プロリン、ガンマ−（２−フラニル−メチル）−プロリン、ガンマ−（２−ピリジニル−メチル）−プロリン、ガンマ−（３−ピリジニル−メチル）−プロリン、ガンマ−（４−ピリジニル−メチル）−プロリン、ガンマ−アリル−プロリン、ガンマ−プロピニル−プロリン、アルファ修飾プロリン残基、ピペコリン酸、アゼチジン−３−カルボン酸、Ｌ−β−ホモプロリン、Ｌ−β３−ホモプロリン、Ｌ−β−ホモヒドロキシプロリン、ヒドロキシプロリン［Ｈｙｐ］、Ｌ−α−メチルプロリン［Ｍｐｒｏ］、Ｄ−α−メチルプロリン［Ｄｍｐｒｏ］、Ｌ−Ｎ−メチルプロリン［Ｎｍｐｒｏ］、Ｄ−Ｎ−メチルプロリン［Ｄｎｍｐｒｏ］、およびＤ−プロリン［Ｄｐｒｏ、（ｄＰ）、ｐ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１２８】
セリンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：（２Ｒ，３Ｓ）−３−フェニルイソセリン、Ｄ−シクロセリン、Ｌ−イソセリン、ＤＬ−イソセリン、ＤＬ−３−フェニルセリン、Ｌ−β−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｄ−ホモセリン、Ｌ−３−ホモセリン、Ｌ−ホモセリン、Ｌ−α−メチルセリン［Ｍｓｅｒ］、Ｄ−α−メチルセリン［Ｄｍｓｅｒ］、Ｌ−Ｎ−メチルセリン［Ｎｍｓｅｒ］、Ｄ−Ｎ−メチルセリン［Ｄｎｍｓｅｒ］、Ｄ−セリン［Ｄｓｅｒ、（ｄＳ）、ｓ］、Ｎ−（ヒドロキシメチル）グリシン［Ｎｓｅｒ］、およびホスホセリン［ｐＳｅｒ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１２９】
トレオニンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：Ｌ−アロ−トレオニン、Ｄ−チロキシン、Ｌ−β−ホモトレオニン、Ｌ−α−メチルトレオニン［Ｍｔｈｒ］、Ｄ−α−メチルトレオニン［Ｄｍｔｈｒ］、Ｌ−Ｎ−メチルトレオニン［Ｎｍｔｈｒ］、ＤＮ−メチルトレオニン［Ｄｎｍｔｈｒ］、Ｄ−トレオニン［Ｄｔｈｒ、（ｄＴ）、ｔ］、Ｎ−（１−ヒドロキシエチル）グリシン［Ｎｔｈｒ］、およびホスホトレオニン［ｐＴｈｒ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１３０】
トリプトファンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：５−フルオロ−Ｌ−トリプトファン、５−フルオロ−ＤＬ−トリプトファン、５−ヒドロキシ−Ｌ−トリプトファン、５−メトキシ−ＤＬ−トリプトファン、Ｌ−アブリン、５−メチル−ＤＬ−トリプトファン、Ｈ−Ｔｐｉ−ＯＭｅ。β−Ｈｏｍｏｔｒｐ−ＯＭｅ、Ｌ−β−ホモトリプトファン、Ｌ−α−メチルトリプトファン［Ｍｔｒｐ］、Ｄ−α−メチルトリプトファン［Ｄｍｔｒｐ］、Ｌ−Ｎ−メチルトリプトファン［Ｎｍｔｒｐ］、Ｄ−Ｎ−メチルトリプトファン［Ｄｎｍｔｒｐ］、Ｎ−（３−インドリルエチル）グリシン［Ｎｈｔｒｐ］、Ｄ−トリプトファン［Ｄｔｒｐ、（ｄＷ）、ｗ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１３１】
チロシンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：３，５ジヨードチロシン（３，５−ｄＩＴｙｒ）、３，５−ジブロモチロシン（３，５−ｄＢＴｙｒ）、ホモチロシン、Ｄ−チロシン、３−アミノ−Ｌ−チロシン、３−アミノ−Ｄ−チロシン、３−ヨード−Ｌ−チロシン、３−ヨード−Ｄ−チロシン、３−メトキシ−Ｌ−チロシン、３−メトキシ−Ｄ−チロシン、Ｌ−チロキシン、Ｄ−チロキシン、Ｌ−チロニン、Ｄ−チロニン、Ｏ−メチル−Ｌ−チロシン、Ｏ−メチル−Ｄ−チロシン、Ｄ−チロニン、Ｏ−エチル−Ｌ−チロシン、Ｏ−エチル−Ｄ−チロシン、３，５，３´−トリヨード−Ｌ−チロニン、３，５，３´−トリヨード−Ｄ−チロニン、３，５−ジヨード−Ｌ−チロニン、３，５−ジヨード−Ｄ−チロニン、Ｄ−メタ−チロシン、Ｌ−メタ−チロシン、Ｄ−オルト−チロシン、Ｌ−オルト−チロシン、フェニルアラニン、置換ファエニルアラニン、Ｎ−ニトロフェニルアラニン、ｐ−ニトロフェニルアラニン、３−クロロ−Ｄｔｙｒ−ｏｈ、Ｔｙｒ（３，５−ｄｉＩ）、３−クロロ−Ｌ−チロシン、Ｔｙｒ（３−ＮＯ２）−ＯＨ、Ｔｙｒ（３，５−ｄｉＩ）−ＯＨ、Ｎ−Ｍｅ−Ｔｙｒ−ＯＨ、α−メチル−ＤＬ−チロシン、３−ニトロ−Ｌ−チロシン、ＤＬ−ｏ−チロシン、β−Ｈｏｍｏｔｙｒ−ＯＨ、（Ｒ）−β−Ｔｙｒ−ＯＨ、（Ｓ）−β−Ｔｙｒ−ＯＨ、Ｌ−α−メチルチロシン［Ｍｔｙｒ］、Ｄ−α−メチルチロシン［Ｄｍｔｙｒ］、Ｌ−Ｎ−メチルチロシン［Ｎｍｔｙｒ］、Ｄ−Ｎ−メチルチロシン［Ｄｎｍｔｙｒ］、Ｄ−チロシン［Ｄｔｙｒ、（ｄＹ）、ｙ］、Ｏ−メチル−チロシン、およびホスホチロシン［ｐＴｙｒ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１３２】
バリンの非保存的アミノ酸の非限定的な例は、次のとおりである：３−フルオロ−ＤＬ−バリン、４，４，４，４´，４´，４´−ヘキサフルオロ−ＤＬバリン、Ｄ−バリン［ＤＶＡＬ、（ｄＶ）、ｖ］、Ｎ−Ｍｅ−Ｖａｌ−ＯＨ［Ｎｍｖａｌ］、Ｎ−Ｍｅ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｌ−α−メチルバリン［Ｍｖａｌ］、Ｄ−α−メチルバリン［Ｄｍｖａｌ］、（Ｒ）−（＋）−α−メチルバリン、（Ｓ）−（−）−α−メチルバリン、およびＤ−Ｎ−メチルバリン［Ｄｎｍｖａｌ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１３３】
非保存的置換として置換されていてもよい他の非天然アミノ酸は、次のものを含む：オルニチンおよびその修飾：Ｄ−オルニチン［Ｄｏｒｎ、Ｏ］、Ｌ−オルニチン［Ｏｒｎ］、ＤＬ−オルニチン、Ｌ−α−メチルオルニチン［Ｍｏｒｎ］、Ｄ−α−メチルオルニチン［Ｄｍｏｒｎ］、Ｌ−Ｎ−メチルオルニチン［Ｎｍｏｒｎ］、Ｄ−Ｎ−メチルオルニチン［Ｄｎｍｏｒｎ］、およびＮ−（３−アミノプロピル）グリシン［Ｎｏｒｎ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１３４】
脂環式アミノ酸：Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸、Ｌ−２，３−ジアミノプロピオン酸、Ｎ−Ｍｅ−Ａｉｂ−ＯＨ、（Ｒ）−２−（アミノ）−５−ヘキシン酸、ピペリジン２−カルボン酸、アミノノルボルニル−カルボキシレート［Ｎｏｒｂ］、アルファ−アミノ酪酸［Ａｂｕ］、アミノシクロプロパン−カルボキシレート［Ｃｐｒｏ］、（シス）−３−アミノビシクロ［２．２．１］ヘプタン−２−カルボン酸、エクソ−シス−３−アミノビシクロ［２．２．１］ｈｅｐｔ−５−エン−２−カルボン酸、１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸、シス−２−アミノシクロヘプタンカルボン酸、１−アミノシクロヘキサンカルボン酸、シス−２−アミノシクロヘキサンカルボン酸、トランス−２−アミノシクロヘキサンカルボン酸、シス−６−アミノ−３−シクロヘキセン−１−カルボン酸、２−（１−アミノシクロヘキシル）酢酸、シス−２−アミノ−１−シクロオクタンカルボン酸、シス−２−アミノ−３−シクロオクテン−１−カルボン酸、（１Ｒ，２Ｓ）−（−）−２−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸、（１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−２−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸、シス−２−−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸、２−（１−アミノシクロペンチル）酢酸、シス−２−アミノ−２−メチルシクロヘキサンカルボン酸、シス−２−アミノ−２−メチルシクロペンタンカルボン酸、３−アミノ−３−（４−ニトロフェニル）プロピオン酸、３−アゼチジンカルボン酸、ａｍｃｈｃ−ｏｈ、１−アミノシクロブタンカルボン酸、１−（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、シス−２−（アミノ）−シクロヘキサンカルボン酸、トランス−２−（アミノ）−シクロヘキサンカルボン酸、シス−４−（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、トランス−４−（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、（±）−シス−２−（アミノ）−３−シクロヘキセン−１−カルボン酸、（±）−シス−６−（アミノ）−３−シクロヘキセン−１−カルボン酸、２−（１−アミノシクロヘキシル）酢酸、シス−［４−（アミノ）シクロヘキシル］酢酸、１−（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（±）−シス−２−（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（１Ｒ，４Ｓ）−（＋）−４−（アミノ）−２−シクロペンテン−１−カルボン酸、（±）−シス−２−（アミノ）−３−シクロペンテン−１−カルボン酸、２−（１−アミノシクロペンチル）酢酸、１−（アミノ）シクロプロパンカルボン酸、１−アミノシクロプロパンカルボン酸エチル、１，２−トランス−ａｃｈｅｃ−ｏｈ、１−（アミノ）シクロブタンカルボン酸、１−（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、シス−２−（アミノ）−シクロヘキサンカルボン酸、トランス−２−（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、シス−４−（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、トランス−４−（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、シス−［４−（アミノ）シクロヘキシル］酢酸、１−（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（１Ｒ，４Ｓ）−（＋）−４−（アミノ）−２−シクロペンテン−１−カルボン酸、（１Ｓ，４Ｒ）−（−）−４−（アミノ）−２−シクロペンテン−１−カルボン酸、１−（アミノ）シクロプロパンカルボン酸、トランス−４−（アミノメチル）シク���ヘキサンカルボン酸、β−Ｄａｂ−ＯＨ、３−アミノ−３−（３−ブロモフェニル）プロピオン酸、３−アミノブタン酸、シス−２−アミノ−３−シクロペンテン−１−カルボン酸、ＤＬ−３−アミノイソ酪酸、（Ｒ）−３−アミノ−２−フェニルプロピオン酸、（±）−３−（アミノ）−４−（４−ビフェニリル）酪酸、シス−３−（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、（１Ｓ，３Ｒ）−（＋）−３−（アミノ）シクロペンタンカルボン酸、（２Ｒ，３Ｒ）−３−（アミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニル酪酸、（２Ｓ，３Ｒ）−３−（アミノ）−２−ヒドロキシ−４−フェニル酪酸、２−（アミノメチル）フェニル酢酸、（Ｒ）−３−（アミノ）−２−メチルプロピオン酸、（Ｓ）−３−（アミノ）−２−メチルプロピオン酸、（Ｒ）−３−（アミノ）−４−（２−ナフチル）酪酸、（Ｓ）−３−（アミノ）−４−（２−ナフチル）酪酸、（Ｒ）−３−（アミノ）−５−フェニルペンタン酸、（Ｒ）−３−（アミノ）−２−フェニルプロピオン酸、３−（ベンジルアミノ）プロピオン酸エチル、シス−３−（アミノ）シクロヘキサンカルボン酸、（Ｓ）−３−（アミノ）−５−ヘキセン酸、（Ｒ）−３−（アミノ）−２−メチルプロピオン酸、（Ｓ）−３−（アミノ）−２−メチルプロピオン酸、（Ｒ）−３−（アミノ）−４−（２−ナフチル）酪酸、（Ｓ）−３−（アミノ）−４−（２−ナフチル）酪酸、（Ｒ）−（−）−ピロリジン−３−カルボン酸、（Ｓ）−（＋）−ピロリジン−３−カルボン酸、Ｎ−メチル−γ−アミノブチレート［Ｎｍｇａｂｕ］、γ−アミノ酪酸［Ｇａｂｕ］、Ｎ−メチル−α−アミノ−α−メチルブチレート［Ｎｍａａｂｕ］、α−アミノ−α−メチルブチレート［Ａａｂｕ］、Ｎ−メチル−α−アミノイソブチレート［Ｎｍａｉｂ］、α−アミノイソ酪酸［Ａｉｂ］、α−メチル−ｙ−アミノブチレート［Ｍｇａｂｕ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
フェニルグリシンおよびその修飾：Ｐｈｇ−ＯＨ、Ｄ−Ｐｈｇ−ＯＨ、２−（ピペラジノ）−２−（３，４−ジメトキシフェニル）酢酸、２−（ピペラジノ）−２−（２−フルオロフェニル）酢酸、２−（４−ピペラジノ）−２−（３−フルオロフェニル）酢酸、２−（４−ピペラジノ）−２−（４−メトキシフェニル）酢酸、２−（４−ピペラジノ）−２−（３−ピリジル）酢酸、２−（４−ピペラジノ）−２−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］酢酸、Ｌ−（＋）−２−クロロフェニルグリシン、（±）−２−クロロフェニルグリシン、（±）−４−クロロフェニルグリシン、（Ｒ）−（−）−２−（２，５−ジヒドロフェニル）グリシン、（Ｒ）−（−）−Ｎ−（３，５−ジニトロベンゾイル）−α−フェニルグリシン、（Ｓ）−（＋）−Ｎ−（３，５−ジニトロベンゾイル）−α−フェニルグリシン、２，２−ジフェニルグリシン、２−フルオロ−ＤＬ−α−フェニルグリシン、４−フルオロ−Ｄ−α−フェニルグリシン、４−ヒドロキシ−Ｄ−フェニルグリシン、４−ヒドロキシ−Ｌ−フェニルグリシン、２−フェニルグリシン、Ｄ−（−）−α−フェニルグリシン、Ｄ−（−）−α−フェニルグリシン、ＤＬ−α−フェニルグリシン、Ｌ−（＋）−α−フェニルグリシン、Ｎ−フェニルグリシン、（Ｒ）−（−）−２−フェニルグリシンメチルエステル、（Ｓ）−（＋）−２−フェニルグリシンメチルエステル、２−フェニルグリシノニトリル塩酸塩、α−フェニルグリシノニトリル、３−（トリフルオロメチル）−ＤＬ−フェニルグリシン、および４−（トリフルオロメチル）−Ｌ−フェニルグリシン。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１３５】
ペニシラミンおよびその修飾：Ｎ−アセチル−Ｄ−ペニシラミン、Ｄ−ペニシラミン、Ｌ−ペニシラミン［Ｐｅｎ］、ＤＬ−ペニシラミン。α−メチルペニシラミン［Ｍｐｅｎ］、Ｎ−メチルペニシラミン［Ｎｍｐｅｎ］。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１３６】
β−ホモピロリジン。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１３７】
芳香族アミノ酸：３−アセトアミド安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、４−アセトアミド−２−メチル安息香酸、Ｎ−アセチルアントラニル酸、３−アミノ安息香酸、３−アミノ安息香酸塩酸塩、４−アミノ安息香酸、４−アミノ安息香酸、４−アミノ安息香酸、４−アミノ安息香酸、４−アミノ安息香酸、４−アミノ安息香酸、２−アミノベンゾフェノン−２´−カルボン酸、２−アミノ−４−ブロモ安息香酸、２−アミノ−５−ブロモ安息香酸、３−アミノ−２−ブロモ安息香酸、３−アミノ−４−ブロモ安息香酸、３−アミノ−５−ブロモ安息香酸、４−アミノ−３−ブロモ安息香酸、５−アミノ−２−ブロモ安息香酸、２−アミノ−３−ブロモ−５−メチル安息香酸、２−アミノ−３−クロロ安息香酸、２−アミノ−４−クロロ安息香酸、２−アミノ−５−クロロ安息香酸、２−アミノ−５−クロロ安息香酸、２−アミノ−６−クロロ安息香酸、３−アミノ−２−クロロ安息香酸、３−アミノ−４−クロロ安息香酸、４−アミノ−２−クロロ安息香酸、４−アミノ−３−クロロ安息香酸、５−アミノ−２−クロロ安息香酸、５−アミノ−２−クロロ安息香酸、４−アミノ−５−クロロ−２−メトキシ安息香酸、２−アミノ−５−クロロ−３−メチル安息香酸、３−アミノ−２，５−ジクロロ安息香酸、４−アミノ−３，５−ジクロロ安息香酸、２−アミノ−４，５−ジメトキシ安息香酸、４−（２−アミノエチル）安息香酸塩酸塩、２−アミノ−４−フルオロ安息香酸、２−アミノ−５−フルオロ安息香酸、２−アミノ−６−フルオロ安息香酸、４−アミノ−２−フルオロ安息香酸、２−アミノ−５−ヒドロキシ安息香酸、３−アミノ−４−ヒドロキシ安息香酸、４−アミノ−３−ヒドロキシ安息香酸、２−アミノ−５−ヨード安息香酸、５−アミノイソフタル酸、２−アミノ−３−メトキシ安息香酸、２−アミノ−４−メトキシ安息香酸、２−アミノ−５−メトキシ安息香酸、３−アミノ−２−メトキシ安息香酸、３−アミノ−４−メトキシ安息香酸、３−アミノ−５−メトキシ安息香酸、４−アミノ−２−メトキシ安息香酸、４−アミノ−３−メトキシ安息香酸、５−アミノ−２−メトキシ安息香酸、２−アミノ−３−メチル安息香酸、２−アミノ−５−メチル安息香酸、２−アミノ−６−メチル安息香酸、３−（アミノメチル）安息香酸、３−アミノ−２−メチル安息香酸、３−アミノ−４−メチル安息香酸、４−（アミノメチル）安息香酸、４−アミノ−２−メチル安息香酸、４−アミノ−３−メチル安息香酸、５−アミノ−２−メチル安息香酸、３−アミノ−２−ナフトエ酸、６−アミノ−２−ナフトエ酸、２−アミノ−３−ニトロ安息香酸、２−アミノ−５−ニトロ安息香酸、２−アミノ−５−ニトロ安息香酸、４−アミノ−３−ニトロ安息香酸、５−アミノ−２−ニトロ安息香酸、３−（４−アミノフェニル）プロピオン酸、３−アミノフタル酸、４−アミノフタル酸、３−アミノサリチル酸、４−アミノサリチル酸、５−アミノサリチル酸、５−アミノサリチル酸、２−アミノテレフタル酸、２−アミノ−３，４，５，６−テトラフルオロ安息香酸、４−アミノ−２，３，５，６−テトラフルオロ安息香酸、（Ｒ）−２−アミノ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−カルボン酸、（Ｓ）−２���アミノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−ナフタレンカルボン酸、２−アミノ−３−（トリフルオロメチル）安息香酸、２−アミノ−３−（トリフルオロメチル）安息香酸、３−アミノ−５−（トリフルオロメチル）安息香酸、５−アミノ−２，４，６−トリヨードイソフタル酸、２−アミノ−３，４，５−トリメトキシ安息香酸、２−アニリノフェニル酢酸、２−Ａｂｚ−ＯＨ、３−Ａｂｚ−ＯＨ、４−Ａｂｚ−ＯＨ、２−（アミノメチル）安息香酸、３−（アミノメチル）安息香酸、４−（アミノメチル）安息香酸、ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ安息香酸塩、ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ香酸塩、ｔｅｒｔ−ブチル４−アミノ安息香酸塩、４−（ブチルアミノ）安息香酸、２，３−ジアミノ安息香酸、３，４−ジアミノ安息香酸、３，５−ジアミノ安息香酸、３，５−ジアミノ安息香酸、３，５−ジクロロアントラニル酸、４−（ジエチルアミノ）安息香酸、４，５−ジフルオロアントラニル酸、４−（ジメチルアミノ）安息香酸、４−（ジメチルアミノ）安息香酸、３，５−ジメチルアントラニル酸、５−フルオロ−２−メトキシ安息香酸、２−Ａｂｚ−ＯＨ、３−Ａｂｚ−ＯＨ、４−Ａｂｚ−ＯＨ、３−（アミノメチル）安息香酸、４−（アミノメチル）安息香酸、４−（２−ヒドラジノ）安息香酸、３−ヒドロキシアントラニル酸、３−ヒドロキシアントラニル酸、３−アミノ安息香酸メチル、３−（メチルアミノ）安息香酸、４−（メチルアミノ）安息香酸、２−アミノ−４−クロロ安息香酸メチル、２−アミノ−４，５−ジメトキシ安息香酸メチル、４−ニトロアントラニル酸、Ｎ−フェニルアントラニル酸、Ｎ−フェニルアントラニル酸、および４−アミノサリチル酸ナトリウム。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１３８】
他のアミノ酸：（Ｓ）−α−アミノ−γ−ブチロラクトン、ＤＬ−２−アミノカプリル酸、７−アミノセファロスポラン酸、４−アミノケイ酸、（Ｓ）−（＋）−α−アミノシクロヘキサンプロピオン酸、（Ｒ）−アミノ−（４−ヒドロキシフェニル）酢酸メチルエステル、５−アミノレブリン酸、４−アミノ−ニコチン酸、３−アミノフェニル酢酸、４−アミノフェニル酢酸、２−アミノ−２−フェニル酪酸、４−（４−アミノフェニル）酪酸、２−（４−アミノフェニルチオ）酢酸、ＤＬ−α−アミノ−２−チオフェン酢酸、５−アミノ吉草酸、８−ベンジル（Ｓ）−２−アミノオクタンジオエート、４−（アミノ）−１−メチルピロール−２−カルボン酸、４−（アミノ）テトラヒドロチオピラン−４−カルボン酸、（１Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−カルボン酸、Ｌ−アゼチジン−２−カルボン酸、アゼチジン−３−カルボン酸、４−（アミノ）ピペリジン−４−カルボン酸、ジアミノ酢酸、Ｉｎｐ−ＯＨ、（Ｒ）−Ｎｉｐ−ＯＨ、（Ｓ）−４−オキソピペリジン−２−カルボン酸、２−（４−ピペラジノ）−２−（４−フルオロフェニル）酢酸、２−（４−ピペラジノ）−２−フェニル酢酸、４−ピペリジンアセトアルデヒド、４−ピペリジル酢酸、（−）−Ｌ−チオプロリン、Ｔｌｅ−ＯＨ、３−ピペリジンカルボン酸、Ｌ−（＋）−カナバニン、（±）−カルニチン、クロラムブシル、２，６−ジアミノピメリン酸、メソ−２，３−ジアミノコハク酸、４−（ジメチルアミノ）桂皮酸、４−（ジメチルアミノ）フェニル酢酸、（Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−ピペリジン−３−カルボン酸エチル、ピペラジノ酢酸エチル、４−［２−（アミノ）エチル］ピペラジン−１−イル酢酸、（Ｒ）−４−（アミノ）−５−フェニルペンタン酸、（Ｓ）−アゼチジン−２−カルボン酸、アゼチジン−３−カルボン酸、グバシン、Ｉｎｐ−ＯＨ、（Ｒ）−Ｎｉｐ−ＯＨ、ＤＬ−Ｎｉｐ−ＯＨ、４−フェニル−ピペリジン−４−カルボン酸、１−ピペラジン酢酸、４−ピペリジン酢酸、（Ｒ）−ピペリジン−２−カルボン酸、（Ｓ）−ピペリジン−２−カルボン酸、（Ｓ）−１，２，３，４−テトラヒドロノルハルマン−３−カルボン酸、Ｔｉｃ−ＯＨ、Ｄ−Ｔｉｃ−ＯＨ、イミノ二酢酸、インドリン−２−カルボン酸、ＤＬ−キヌレニン、Ｌ−アジリジン−２−カルボキシレート、４−アミノ酪酸メチル、（Ｓ）−２−ピペラジンカルボン酸、２−（１−ピペラジニル）酢酸、（Ｒ）−（−）−３−ピペリジンカルボン酸、２−ピロリドン−５−カルボン酸、（Ｒ）−（＋）−２−ピロリドン−５−カルボン酸、（Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロ−３−イソキノリンカルボン酸、（Ｓ）−１，２，３，４−テトラヒドロ−３−イソキノリンカルボン酸、Ｌ−４−チアゾリジンカルボン酸、（４Ｒ）−（−）−２−チオキソ−４−チアゾリジンカルボン酸、ヒドラジノ酢酸、および３，３´，５−トリヨード−Ｌ−チロニン。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、さらに改善された安定性および細胞透過性特性を有するペプチド模倣化合物を含む。いくつかの実施形態は、配列番号１〜８８および１０８〜２１０のうちのいずれかによるペプチドを含み、ペプチド内の当該ペプチド結合（−ＣＯ−ＮＨ−）は、例えば、Ｎ−メチル化アミド結合（−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＯ−）、エステル結合（−Ｃ（＝０）−０−）、ケトメチレン結合（−ＣＯ−ＣＨ２−）、スルフィニルメチレン結合（−Ｓ（＝０）−ＣＨ２−）、α−アザ結合（−ＮＨ−Ｎ（Ｒ）−ＣＯ−）によって置換されていてもよく、Ｒは、任意のアルキル（例えば、メチル）、アミン結合（−ＣＨ２−ＮＨ−）、スルフィド結合（−ＣＨ２−Ｓ−）、エチレン結合（−ＣＨ２−ＣＨ２−）、ヒドロキシエチレン結合（−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−）、チオアミド結合（−ＣＳ−ＮＨ−）、オレフィン二重結合（−ＣＨ＝ＣＨ−）、フッ素化オレフィン二重結合（−ＣＦ＝ＣＨ−）、またはレトロアミド結合（−ＮＨ−ＣＯ−）、ペプチド誘導体（−Ｎ（Ｒｘ）−ＣＨ２−ＣＯ−）であり、ここでＲｘは、炭素原子上に天然に存在する「通常の」側鎖である。これらの修飾は、ペプチド鎖に沿った結合のうちのいずれかで生じ得、同時に複数（２〜３）の結合でも生じ得る。各可能性は、個別の実施形態を表す。
【０１４０】
本発明は、半減期を延長するか、または細胞浸透性を増加させるための部分に複合体化される本明細書に記載のペプチドおよび類似体のいずれかを含む複合体をさらに提供する。例えば、半減期延長部分は、ペプチドまたはタンパク質であり、複合体は、融合ペプチドまたはキメラペプチドである。あるいは、半減期延長部分は、ポリマー、例えば、ポリエチレングリコールである。本開示はさらに、本明細書に記載のペプチドおよび類似体のいずれかを含む二量体および多量体を提供する。能動的または受動的に促進するか、または細胞への化合物の透過性を高めることが当該技術分野で既知である任意の部分を、本発明によるペプチドコアとの複合体化に使用することができる。非限定的な例としては、脂肪酸、ステロイド、およびバルキーな芳香族または脂肪族化合物などの疎水性部分；ステロイド、ビタミンおよび糖、天然および非天然のアミノ酸、ならびに輸送ペプチドなどの細胞膜受容体または担体を含むみ得る部分が挙げられる。好ましい実施形態によれば、疎水性部分は、脂質部分またはアミノ酸部分である。透過性増強部分は、ペプチド部分の任意の位置に、直接またはスペーサもしくはリンカーを介して、好ましくはペプチド部分のアミノ末端に接続されていてもよい。本発明による疎水性部分は、好ましくは、脂質部分またはアミノ酸部分を含み得る。特定の実施形態によれば、疎水性部分は、リン脂質、ステロイド、スフィンゴシン、セラミド、オクチル−グリシン、２−シクロヘキシルアラニン、ベンゾリルフェニルアラニン、プロピオノイル（Ｃ３）；ブタノイル（Ｃ４）；ペンタノイル（Ｃ５）；カプロイル（Ｃ６）；ヘプタノイル（Ｃ７）；カプリロイル（Ｃ８）；ノナノイル（Ｃ９）；カプリル（Ｃ１０）；ウンデカノイル（Ｃ１１）；ラウロイル（Ｃ１２）；トリデカノイル（Ｃ１３）；ミリストイル（Ｃ１４）；ペンタデカノイル（Ｃ１５）；パルミトイル（Ｃ１６）；フタノイル（（ＣＨ３）４）；ヘプタデカノイル（Ｃ１７）；ステアロイル（Ｃ１８）；ノナデカノイル（Ｃ１９）；アラキドイル（Ｃ２０）；ヘニエコサノイル（Ｃ２１）；ベヘノイル（Ｃ２２）；トルシサノイル（Ｃ２３）；およびリグノセロイル（Ｃ２４）からなる群から選択され、当該疎水性部分は、アミド結合、スルフヒドリル、アミン、アルコール、フェノール基、または炭素−炭素結合で当該キメラポリペプチドに結合される。本発明に従って使用され得る脂質部分の他の例：リポフェクタミン、トランスフェクタセ、トランスフェクタム、サイトフェクチン、ＤＭＲＩＥ、ＤＬＲＩＥ、ＧＡＰ−ＤＬＲＩＥ、ＤＯＴＡＰ、ＤＯＰＥ、ＤＭＥＡＰ、ＤＯＤＭＰ、ＤＯＰＣ、ＤＤＡＢ、ＤＯＳＰＡ、ＥＤＬＰＣ、ＥＤＭＰＣ、ＤＰＨ、ＴＭＡＤＰＨ、ＣＴＡＢ、リシル−ＰＥ、ＤＣ−Ｃｈｏ、−アラニルコレステロール；ＤＣＧＳ、ＤＰＰＥＳ、ＤＣＰＥ、ＤＭＡＰ、ＤＭＰＥ、ＤＯＧＳ、ＤＯＨＭＥ、ＤＰＥＰＣ、プルロニック、Ｔｗｅｅｎ、ＢＲＩＪ、プラズマローゲン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルコリン、グリセロール−３−エチルホスファチジルコリン、ジメチルアンモニウムプロパン、トリメチルアンモニウムプロパン、ジエチルアンモニウムプロパン、トリエチルアンモニウムプロパン、ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド、スフィンゴ脂質、スフィンゴミエリン、リゾ脂質、糖脂質、スルファチド、スフィンゴ糖脂質、コレステロール、コレステロールエステル、コレステロール塩、油、Ｎ−スクシニルジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジオレオイル−グリセロール、１，３−ジパルミトイル−２−スクシニルグリセロール、１，２−ジパルミトイル−３−スクシニルグリセロール、１−ヘキサデシル−２−パルミトイルグリセロホスファチジルエタノールアミン、パルミトイルホモシスチエン、Ν，Ν´−ビス（ドデシアミノカルボニルメチレン）−Ｎ，Ｎ´−ビス（（−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムエチル−アミノカルボニルメチレン）エチレンジアミン四ヨウ化物；Ｎ，Ｎ´´−ビス（ヘキサデシルアミノカルボニルメチレン）−Ｎ，Ｎ´，Ｎ´´−トリス（（−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム−エチルアミノカルボニルメチレンジエチレントリアミンヘキサヨウ化物；Ν，Ν´−ビス（ドデシルアミノカルボニルメチレン）−Ｎ，Ｎ´´−ビス（（−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムエチルアミノカルボニルメチレン）シクロヘキシレン−１，４−ジアミン四ヨウ化物；１，７，７−テトラ−（（−Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ−テトラメチルアンモニウムエチルアミノ−カルボニルメチレン）−３−ヘキサデシルアミノカルボニル−メチレン−１，３，７−トリアアザヘプタンヘプタヨウ化物；Ｎ，Ｎ，Ｎ´，Ｎ´−テトラ（（−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム−エチルアミノカルボニルメチレン）−Ｎ´−（１，２−ジオレオイルグリセロ−３−ホスホエタノールアミノカルボニルメチレン）ジエチレントリアミン四ヨウ化物；ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、脂肪酸、リゾ脂質、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴ脂質、糖脂質（ｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄ）、糖脂質（ｇｌｕｃｏｌｉｐｉｄ）、スルファチド、スフィンゴ糖脂質、ホスファチジン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、オレイン酸、ポリマーを保持する脂質、スルホン化糖を保持する脂質、コレステロール、トコフェロールヘミスクシネート、エーテル結合脂肪酸を含む脂質、エステル結合脂肪酸を含む脂質、重合脂質、リン酸ジアセチル、ステアリルアミン、カルジオリピン、長さ６〜８個の炭素の脂肪酸を含むリン脂質、非対称アシル鎖を含むリン脂質、６−（５−コレステン−３ｂ−イルオキシ）−１−チオ−ｂ−Ｄ−ガラクトピラノシド、ジガラクトシルジグリセリド、６−（５−コレステン−３ｂ−イルオキシ）ヘキシル−６−アミノ−６−デオキシ−１−チオβ−Ｄ−ガラクトピラノシド、６−（５−コレステン−３ｂ−イルオキシ）ヘキシル−６−アミノ−６−デオキシル−１−チオα−Ｄ−マンノピラノシド、１２−（（（７´−ジエチルアミノクマリン−３−イル）カルボニル）メチルアミノ）−オクタデカノイル；Ｎ−［１２−（（（７´−ジエチルアミノクマリン−３−イル）カルボニル）メチル−アミノ）オクタデカノイル］−２−アミノパルミチン酸；コレステリル）４´−トリメチル−アンモニオ）ブタノエー���；Ｎ−スクシニルジオレオイル−ホスファチジルエタノールアミン；１，２−ジオレオイル−グリセロール；１，２−ジパルミトイル−３−スクシニルグリセロール；１，３−ジパルミトイル−２−スクシニルグリセロール、１−ヘキサデシル−２−パルミトイルグリセロ−ホスホエタノールアミン、およびパルミトイルホモシステイン。
【０１４１】
本発明のペプチドは、浸透剤に（共有結合または非共有結合のいずれかで）結合され得る。本明細書で使用される場合、「浸透剤」という語句は、細胞膜を通過する結合されたペプチドのうちのいずれかの転位を高める薬剤を指す。典型的には、ペプチドベースの浸透剤は、リジンまたはアルギニンなどの正に荷電したアミノ酸の高い相対存在量を含むアミノ酸組成物、または極性／荷電アミノ酸および非極性の疎水性アミノ酸の交互パターンを含む配列のいずれかを有する。そのような細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）は、４＜ｎ＜１７（例えば、ｎ＝５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６）であるポリＡｒｇ［Ｒ（ｎ））を含み得る（配列番号８９）。非限定的な例として、細胞内浸透を高めるためにＣＰＰ配列を使用してもよい。他の実施形態では、リンカーを用いて高電荷ＣＰＰを阻害剤ペプチドから分離することが望ましい。様々なリンカーのうちのいずれかを使用することができる。リンカーのサイズは、例えば、１〜７個またはさらにはそれ以上のアミノ酸（例えば、１、２、３、４、５、６、または７個のアミノ酸）の範囲であり得る。いくつかの実施形態では、リンカーは、阻害ペプチドに融合した−ＧＧ−（配列番号９０）または−ＧＧＳＧＧ−（配列番号９１）であり得る。ＣＰＰは、例えば、ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（配列番号９２）、ＹＧＲＫＫＲＲ（配列番号９３）、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号９４）、またはＲＲＱＲＲ（配列番号９５）］などのＨＩＶ  ＴＡＴタンパク質のタンパク質形質導入ドメイン（ＰＴＤ）の短いバージョンおよび長いバージョンを含み得る。しかしながら、本開示はそのように限定されず、任意の好適な浸透剤が使用され得る。細胞浸透を高める別の方法は、Ｎ末端ミリストイル化によるものである。このタンパク質修飾では、ミリストイル基（ミリスチン酸かに由来する）が、アミド結合を介してペプチドのＮ末端アミノ酸のアルファ−アミノ基に共有結合される。いくつかの技術は、Ｓｏｒｉａｇａ，ｅｔ  ａｌ．“Ａ  Ｄｅｓｉｇｎｅｄ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｐ５３  Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｃｕｅｓ  ｐ５３  Ｔｕｍｏｒ  Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｏｖａｒｉａｎ  Ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ．”Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，２９，ｎｏ．１（Ｊａｎｕａｒｙ  １１，２０１６）：９０−１０３に記載されている。他の細胞透過技術は、特許公開第ＷＯ２０１６／１０２３３９号、同第ＷＯ２０１４／１３１８９２号、同第ＷＯ２０１６／０８７８４２号、同第ＷＯ２０１４／０４１５０５号、同第ＷＯ２０１３／０９８３３７号、同第ＷＯ２０１０／０１２８５０号、同第ＷＯ２０１４／１４７１９３号、同第ＷＯ２０１４／００１２２９号、同第ＷＯ２０１５／０７５７４７号、同第ＷＯ２０１２／０９０１５０号、同第ＷＯ２０１４／０５６８１３号、同第ＷＯ２０１４／００９２５９号、および同第ＷＯ２０１１／１５７７１３号に見出されるものを含む。
【０１４２】
本発明の実施形態は、ＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＬＦＹＬＲＬＴ（配列番号９６）、ＲＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＷＲＩＷＩＲＹＷ（配列番号９７）、およびＲＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＷＲＬＫＶＲＷＷ（配列番号９８）から選択される式ＡのペプチドのＣＰＰ、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【０１４３】
いくつかの実施形態によれば、ペプチドは修飾されており、例えば、持続時間増強部分を含んでもよい。持続時間増強部分は、水溶性ポリマーまたは長鎖脂肪族基であり得る。いくつかの実施形態では、複数の持続時間増強部分がペプチドに結合され、その場合、各持続時間増強部分に対する各リンカーは独立して、本明細書に記載のリンカーから選択される。
【０１４４】
いくつかの実施形態によれば、ペプチドのアミノ末端は修飾されており、例えば、アシル化されていてもよい。さらなる実施形態によれば、カルボキシ末端は修飾されており、例えば、アシル化、アミド化、還元、またはエステル化されていてもよい。いくつかの実施形態によれば、ペプチドは、アシル化アミノ酸（例えば、非コード化アシル化アミノ酸（例えば、天然型アミノ酸に対して非天然のアシル基を含むアミノ酸））を含む。一実施形態によれば、ペプチドは、循環中の半減期を延長および／または発症の遅延および／または作用の持続期間を延長および／またはプロテアーゼへの耐性を改善する目的のために、エステル、チオエステル、またはアミド結合を介してペプチドに結合されているアシル基を含む。アシル化は、ペプチド内の任意の位置（例えば、Ｃ末端のアミノ酸など）で実施することができ、ただし、活性化が強化されない場合に保持されることを条件とする。いくつかの実施形態におけるペプチドは、親水性部分が結合している同じアミノ酸位置、または異なるアミノ酸位置でアシル化され得る。アシル基は、ペプチドのアミノ酸に直接、またはスペーサを介してペプチドのアミノ酸に間接的に共有結合することができ、スペーサは、ペプチドのアミノ酸とアシル基との間に位置する。
【０１４５】
特定の態様では、ペプチドは、直接、ペプチドのアミノ酸の側鎖のアミン、ヒドロキシル基、またはチオールのアシル化によりアシル基を含むように修飾される。これに関して、アシル化ペプチドは、配列番号１〜８８および１０８〜２１０のうちのいずれかのアミノ酸配列、または本明細書に記載のアミノ酸修飾のうちの１つ以上を含むその修飾アミノ酸配列を含むことができる。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、類似体とアシル基との間にスペーサを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、アシル基に共有結合しているスペーサに共有結合している。いくつかの実施形態では、スペーサは、側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸、または側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸を含むジペプチドまたはトリペプチドである。スペーサが結合されているアミノ酸は、スペーサへの結合を可能にする部分を含む任意のアミノ酸（例えば、単一または二重のα−置換アミノ酸）であり得る。例えば、側鎖ＮＨ２、−ＯＨ、または−ＣＯＯＨ（たとえば、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ、Ａｓｐ、またはＧｌｕ）を含むアミノ酸が好適である。いくつかの実施形態では、スペーサは、側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸、または側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸を含むジペプチドまたはトリペプチドである。アシル化がスペーサのアミン基を介して起こる場合、アシル化は、アミノ酸のアルファアミンまたは側鎖アミンを介して生じ得る。アルファアミンがアシル化されている場合、スペーサのアミノ酸は任意のアミノ酸であり得る。例えば、スペーサのアミノ酸は、疎水性アミノ酸、例えば、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、６−アミノヘキサン酸、５−アミノ吉草酸、７−アミノヘプタン酸、および８−アミノオクタン酸であり得る。あるいは、スペーサのアミノ酸は、酸性残基、例えば、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、ホモグルタミン酸、ホモシステイン酸、システイン酸、ガンマ−グルタミン酸であり得る。スペーサのアミノ酸の側鎖アミンがアシル化されている場合、スペーサのアミノ酸は、側鎖アミンを含むアミノ酸である。この場合、ペプチドがジアシル化されるように、スペーサのアミノ酸のアルファアミンおよび側鎖アミンの両方をアシル化することが可能である。実施形態には、そのようなジアシル化分子が含まれる。アシル化がスペーサのヒドロキシル基を介して生じる場合、アミノ酸またはジペプチドもしくはトリペプチドのアミノ酸のうちの１つは、Ｓｅｒであり得る。アシル化がスペーサのチオール基を介して起こる場合、アミノ酸またはジペプチドもしくはトリペプチドのアミノ酸のうちの１つは、Ｃｙｓであり得る。いくつかの実施形態では、スペーサは、親水性二官能性スペーサである。特定の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、２つ以上の反応性基、例えば、アミン、ヒドロキシル、チオール、およびカルボキシル基、またはそれらの任意の組み合わせを含む。特定の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、ヒドロキシル基およびカルボキシレートを含む。他の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、アミン基およびカルボキシレートを含む。他の実施形態では、親水性二官能性スペーサは、チオール基およびカルボキシレートを含む。
【０１４７】
特定の実施態様では、スペーサは、アミノ酸、ポリ（アルキルオキシ）カルボキシレートを含む。これに関して、スペーサは、例えば、ＮＨ２（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ（ＣＨ２）ｍＣＯＯＨを含むことができ、ｍは、１〜６の任意の整数であり、ｎは、２〜１２の任意の整数であり、例えば、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸などであり、これは、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．（Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ，Ｋｙ）から市販されている。いくつかの実施形態では、スペーサは、疎水性二官能性スペーサである。疎水性二官能性スペーサは当該技術分野において既知である。例えば、その全体が参照により組み込まれる、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｇ．Ｔ．Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．，１９９６）を参照されたい。特定の実施形態では、疎水性二官能性スペーサは、２つ以上の反応性基、例えば、アミン、ヒドロキシル、チオール、およびカルボキシル基、またはそれらの任意の組み合わせを含む。特定の実施形態では、疎水性二官能性スペーサは、ヒドロキシル基およびカルボキシレートを含む。他の実施形態では、疎水性二官能性スペーサは、アミン基およびカルボキシレートを含む。他の実施形態では、疎水性二官能性スペーサは、チオール基およびカルボキシレートを含む。カルボキシレートおよびヒドロキシル基またはチオール基を含む好適な疎水性二官能性スペーサは、当該技術分野において既知であり、例えば、８−ヒドロキシオクタン酸および８−メルカプトオクタン酸を含む。いくつかの実施形態では、二官能性スペーサは、カルボキシレート基間に１〜７個の炭素原子の非分岐メチレンを含むジカルボン酸ではない。いくつかの実施形態では、二官能性スペーサは、カルボキシレート基間に１〜７個の炭素原子の非分岐メチレンを含むジカルボン酸である。特定の実施形態におけるスペーサ（例えば、アミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、親水性二官能性スペーサ、または疎水性二官能性スペーサ）は、３〜１０個の原子（例えば、６〜１０個の原子（例えば、６、７、８、９、または１０個の原子）の長さである。より具体的な実施形態では、スペーサおよびアシル基の全長が、１４〜２８個の原子、例えば、約１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８個の原子であるように、スペーサは、約３〜１０個の原子（例えば、６〜１０原子）の長さであり、アシル基は、Ｃ１２〜Ｃ１８脂肪アシル基、例えば、Ｃ１４脂肪アシル基、Ｃ１６脂肪アシル基である。いくつかの実施形態では、スペーサおよびアシル基の長さは、１７〜２８（例えば、１９〜２６、１９〜２１）個の原子である。ある特定前述の実施形態によれば、二官能性スペーサは、３〜１０個の原子の長さであるアミノ酸骨格（例えば、６−アミノヘキサン酸、５−アミノ吉草酸、７−アミノヘプタン酸、および８−アミノオクタン酸）を含む合成または天然型アミノ酸（これらに限定されないが、本明細書に記載のもののうちのいずれかを含む）であり得る。あるいは、スペーサは、３〜１０個の原子（例えば、６〜１０個の原子）の長さであるペプチド骨格���有するジペプチドまたはトリペプチドスペーサであり得る。ジペプチドまたはトリペプチドスペーサの各アミノ酸は、ジペプチドまたはトリペプチドの他のアミノ酸（複数可）と同じでも異なっていてもよく、独立して、例えば、天然型アミノ酸（Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｐｒｏ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ）のＤもしくはＬ異性体のいずれか、またはβ−アラニン（β−Ａｌａ）、Ｎ−α−メチル−アラニン（Ｍｅ−Ａｌａ）、アミノ酪酸（Ａｂｕ）、γ−アミノ酪酸（７−Ａｂｕ）、アミノヘキサン酸（ε−Ａｈｘ）、アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、アミノメチルピロールカルボン酸、アミノピペリジンカルボン酸酸、アミノセリン（Ａｍｓ）、アミノテトラヒドロピラン−４−カルボン酸、アルギニンＮ−メトキシ−Ｎ−メチルアミド、β−アスパラギン酸（β−Ａｓｐ）、アゼチジンカルボン酸、３−（２−ベンゾチアゾリル）アラニン、α−ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、２−アミノ−５−ウレイド−ｎ−吉草酸（シトルリン、Ｃｉｔ）、β−シクロヘキシルアラニン（Ｃｈａ）、アセトアミドメチル−システイン、ジアミノブタン酸（Ｄａｂ）、ジアミノプロピオン酸（Ｄｐｒ）、ジヒドロキシフェニルアラニン（ＤＯＰＡ）、ジメチルチアゾリジン（ＤＭＴＡ）、γ−グルタミン酸（γ−Ｇｌｕ）、ホモセリン（Ｈｓｅ）、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、イソロイシンＮ−メトキシ−Ｎ−メチルアミド、メチルイソロイシン（ＭｅＩｌｅ）、イソニペコチン酸（Ｉｓｎ）、メチル−ロイシン（ＭｅＬｅｕ）、メチル−リジン、ジメチル−リジン、トリメチル−リジン、メタノプロリン、メチオニン−スルホキシド（Ｍｅｔ（Ｏ））、メチオニン−スルホン（Ｍｅｔ（Ｏ２））、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、メチル−ノルロイシン（Ｍｅ−Ｎｌｅ）、ノルバリン（Ｎｖａ）、オルニチン（Ｏｒｎ）、パラ−アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）、ペニシラミン（Ｐｅｎ）、メチルフェニルアラニン（ＭｅＰｈｅ）、４−クロロフェニルアラニン（Ｐｈｅ（４−Ｃｌ））、４−フルオロフェニルアラニン（Ｐｈｅ（４−Ｆ））、４−ニトロフェニルアラニン（Ｐｈｅ（４−ＮＯ２））、４−シアノフェニルアラニン（（Ｐｈｅ（４−ＣＮ））、フェニルグリシン（Ｐｈｇ）、ピペリジニルアラニン、ピペリジニルグリシン、３，４−デヒドロプロリン、ピロリジニルアラニン、サルコシン（Ｓａｒ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、Ｏ−ベンジル−ホスホセリン、４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸（Ｓｔａ）、４−アミノ−５−シクロヘキシル−３−ヒドロキシペンタン酸（ＡＣＨＰＡ）、４−アミノ−３−ヒドロキシ−５−フェニルペンタン酸（ＡＨＰＰＡ）、１，２，３，４，−テトラヒドロ−イソキノリン−３−カルボン酸（Ｔｉｃ）、テトラヒドロピラングリシン、チエニルアラニン（Ｔｈｉ）、Ｏ−ベンジル−ホスホチロシン、Ｏ−ホスホチロシン、メトキシチロシン、エトキシチロシン、Ｏ−（ビス−ジメチルアミノ−ホスホノ）−チロシン、チロシン硫酸テトラブチルアミン、メチル−バリン（ＭｅＶａｌ）、およびアルキル化３−メルカプトプロピオン酸からなる群から選択される非天然型または非コード化アミノ酸の任意のＤまたはＬ異性体を含む、天然型もしくはコード化および／または非コード化もしくは非天然型アミノ酸からなる群から選択され得る。いくつかの実施形態では、スペーサは、全体的に負電荷を含み、例えば、１つまたは２つの負に荷電したアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ジペプチドは、一般構造Ａ〜Ｂのジペプチドのうちのいずれでもなく、Ａは、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、およびＰｒｏからなる群から選択され、Ｂは、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｔｒｐからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ジペプチドスペーサは、Ａｌａ−Ａｌａ、β−Ａｌａ−β−Ａｌａ、Ｌｅｕ−Ｌｅｕ、Ｐｒｏ−Ｐｒｏ、γ−アミノ酪酸−γ−アミノ酪酸、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、およびγ−Ｇｌｕ−γ−Ｇｌｕからなる群から選択される。
【０１４８】
アミン、ヒドロキシル、およびチオールを介したペプチドアシル化の好適な方法は、当該技術分野において既知である。例えば、Ｍｉｌｌｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ  ２１８：３７７−３８２（１９９６）、Ｓｈｉｍｏｈｉｇａｓｈｉ  ａｎｄ  Ｓｔａｍｍｅｒ，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｅｐｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ  １９：５４−６２（１９８２）、およびＰｒｅｖｉｅｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ  ２６３：７−１３（１９７２）（ヒドロキシルを介したアシル化の方法について）、ならびにＳａｎ  ａｎｄ  Ｓｉｌｖｉｕｓ，Ｊ  Ｐｅｐｔ  Ｒｅｓ  ６６：１６９−１８０（２００５）（チオールを介したアシル化の方法について）、ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．“Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｈｉｓｔｏｒｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”ｐａｇｅｓ  １，２−１２（１９９０）、Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｕｅｔｉｃａｌ  Ｒｅｓ．“Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐａｌｍｉｔｏｙｌ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｓｕｌｉｎ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ”Ｖｏｌ．６，Ｎｏ：２  ｐｐ．１７１−１７６（１９８９）を参照されたい。アシル化アミノ酸のアシル基は、任意のサイズ、例えば、任意の長さの炭素鎖であり得、直鎖状または分岐状であり得る。いくつかの特定の実施形態では、アシル基は、Ｃ４〜Ｃ３０脂肪酸である。例えば、アシル基は、Ｃ４脂肪酸、Ｃ６脂肪酸、Ｃ８脂肪酸、Ｃ１０脂肪酸、Ｃ１２脂肪酸、Ｃ１４脂肪酸、Ｃ１６脂肪酸、Ｃ１８脂肪酸、Ｃ２０脂肪酸、Ｃ２２脂肪酸、Ｃ２４脂肪酸、Ｃ２６脂肪酸、Ｃ２８脂肪酸、またはＣ３０脂肪酸のうちのいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、アシル基は、Ｃ８〜Ｃ２０脂肪酸、例えば、Ｃ１４脂肪酸またはＣ１６脂肪酸である。代替的な実施形態では、アシル基は胆汁酸である。胆汁酸は、これらに限定されないが、コール酸、ケノデオキシコール酸、デオキシコール酸、リトコール酸、タウロコール酸、グリココール酸、およびコレステロール酸を含む、任意の好適な胆汁酸であり得る。いくつかの実施形態では、ペプチドは、ペプチド上の長鎖アルカンのアシル化によるアシル化アミノ酸を含む。特定の態様では、長鎖アルカンは、ペプチドのカルボキシル基またはその活性化形態と反応するアミン、ヒドロキシル、またはチオール基（例えば、オクタデシルアミン、テトラデカノール、およびヘキサデカンチオール）を含む。ペプチドのカルボキシル基またはその活性化形態は、ペプチドのアミノ酸（例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸）の側鎖の一部であるか、または類似体骨格の一部であり得る。ある特定の実施形態では、ペプチドは、ペプチドに結合したスペーサによる長鎖アルカンのアシル化によってアシル基を含むように修飾される。特定の態様では、長鎖アルカンは、スペーサのカルボキシル基またはその活性化形態と反応するアミン、ヒドロキシル、またはチオール基を含む。カルボキシル基またはその活性化形態を含む好適なスペーサは、本明細書に記載されており、例えば、二官能性スペーサ、例えば、アミノ酸、ジペプチ���、トリペプチド、親水性二官能性スペーサ、および疎水性二官能性スペーサを含む。
【０１４９】
本明細書で使用される場合、カルボキシル基の「活性化形態」という用語は、一般式Ｒ（Ｃ＝Ｏ）Ｘを有するカルボキシル基を指し、Ｘは、脱離基であり、Ｒは、ペプチドまたはスペーサである。例えば、カルボキシル基の活性化形態は、これらに限定されないが、塩化アシル、無水物、およびエステルを含み得る。いくつかの実施形態では、活性化されたカルボキシル基は、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＳ）脱離基を有するエステルである。
【０１５０】
長鎖アルカンがペプチドまたはスペーサによってアシル化されるこれらの態様に関して、長鎖アルカンは、任意のサイズのものであり得、任意の長さの炭素鎖を含み得る。長鎖アルカンは、直鎖状または分岐状であり得る。ある特定の態様において、長鎖アルカンは、Ｃ４〜Ｃ３０アルカンである。例えば、長鎖アルカンは、Ｃ４アルカン、Ｃ６アルカン、Ｃ８アルカン、Ｃ１０アルカン、Ｃ１２アルカン、Ｃ１４アルカン、Ｃ１６アルカン、Ｃ１８アルカン、Ｃ２０アルカン、Ｃ２２アルカン、Ｃ２４アルカン、Ｃ２６アルカン、Ｃ２８アルカン、またはＣ３０アルカンのうちのいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、長鎖アルカンは、Ｃ８〜Ｃ２０アルカン、例えば、Ｃ１４アルカン、Ｃ１６アルカン、またはＣ１８アルカンを含む。
【０１５１】
また、いくつかの実施形態では、ペプチドのアミン、ヒドロキシル、またはチオール基は、コレステロール酸でアシル化される。特定の実施形態では、ペプチドは、アルキル化デス−アミノＣｙｓスペーサ、すなわち、アルキル化３−メルカプトプロピオン酸スペーサを介してコレステロール酸に結合される。アルキル化デス−アミノＣｙｓスペーサは、例えば、ドデカエチレングリコール部分を含むデス−アミノＣｙｓスペーサであり得る。
【０１５２】
本明細書に記載のペプチドは、親水性部分を含むようにさらに修飾され得る。いくつかの特定の実施形態では、親水性部分は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖を含むことができる。親水性部分の組み込みは、本明細書に記載される方法のうちのいずれかなどの任意の好適な手段によって達成することができる。この点に関して、ペプチドは、本明細書に記載の修飾のうちのいずれかを含む配列番号１〜８８および１０８〜２１０のうちのいずれかであり得、その修飾において、アミノ酸のうちの少なくとも１つは、アシル基を含み、アミノ酸のうちの少なくとも１つは、親水性部分（例えば、ＰＥＧ）に共有結合される。いくつかの実施形態では、アシル基は、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ホモ−Ｃｙｓ、またはＡｃ−Ｐｈｅを含むスペーサを介して結合され、親水性部分は、Ｃｙｓ残基に組み込まれる。
【０１５３】
あるいは、ペプチドは、スペーサを含むことができ、スペーサは、親水性部分を含むようにアシル化および修飾の両方である。好適なスペーサの非限定的な例には、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ホモ−Ｃｙｓ、およびＡｃ−Ｐｈｅからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を含むスペーサが含まれる。
【０１５４】
いくつかの実施形態によれば、ペプチドは、アルキル化化アミノ酸（例えば、非コード化アルキル化アミノ酸（例えば、天然型アミノ酸に対して非天然のアルキル基を含むアミノ酸））を含む。アルキル化は、これらに限定されないが、アミノ酸位置のうちのいずれか、Ｃ末端伸長内の位置、またはＣ末端を含む、アシル化の部位として本明細書に記載の位置のうちのいずれかを含むペプチド内の任意の位置で実施することができ、ただし、生物学的活性が保持されることを条件とする。アルキル基は、ペプチドのアミノ酸に直接、またはスペーサを介してペプチドのアミノ酸に間接的に共有結合することができ、スペーサは、ペプチドのアミノ酸とアルキル基との間に位置する。ペプチドは、親水性部分が結合している同じアミノ酸位置、または異なるアミノ酸位置でアルキル化され得る。特定の態様では、ペプチドは、直接、ペプチドのアミノ酸の側鎖のアミン、ヒドロキシル基、またはチオールのアルキル化によりアルキル基を含むように修飾される。これに関して、アルキル化ペプチドは、側鎖アミン、ヒドロキシル、またはチオールを含む任意のアミノ酸に修飾されたアミノ酸のうちの少なくとも１つを含むアミノ酸配列を含むことができる。さらに他の実施形態では、側鎖アミン、ヒドロキシル、またはチオールを含むアミノ酸は、二置換アミノ酸である。いくつかの実施形態では、アルキル化ペプチドは、ペプチドとアルキル基との間にスペーサを含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、アルキル基に共有結合しているスペーサに共有結合している。いくつかの例示的な実施形態では、ペプチドは、アミノ酸の側鎖に結合されているスペーサのアミン、ヒドロキシル、またはチオールのアルキル化によりアルキル基を含むように修飾される。スペーサが結合されているアミノ酸は、スペーサへの結合を可能にする部分を含む任意のアミノ酸であり得る。例えば、側鎖ＮＨ２、−ＯＨ、または−ＣＯＯＨ（たとえば、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、Ｓｅｒ、Ａｓｐ、またはＧｌｕ）を含むアミノ酸が好適である。いくつかの実施形態では、スペーサは、側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸、または側鎖アミン、ヒドロキシル、もしくはチオールを含むアミノ酸を含むジペプチドまたはトリペプチドである。アルキル化がスペーサのアミン基を介して生じる場合、アルキル化は、アミノ酸のアルファアミンまたは側鎖アミンを介して起こりうる。アルファアミンがアルキル化されている場合、スペーサのアミノ酸は任意のアミノ酸であり得る。例えば、スペーサのアミノ酸は、疎水性アミノ酸、例えば、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、６−アミノヘキサン酸、５−アミノ吉草酸、７−アミノヘプタン酸、および８−アミノオクタン酸であり得る。あるいは、スペーサのアミノ酸は、酸性残基、例えば、ＡｓｐおよびＧｌｕであり得、ただし、アルキル化は酸性残基のアルファアミン上で生じることを条件とする。スペーサのアミノ酸の側鎖アミンがアルキル化されている場合、スペーサのアミノ酸は、側鎖アミン、例えば、式Ｉのアミノ酸（例えば、ＬｙｓまたはＯｒｎ）を含むアミノ酸である。この場合、ペプチドがジアルキルされるように、スペーサのアミノ酸のアルファアミンおよび側鎖アミンの両方をアルキル化することが可能である。本発明の実施形態は、そのようなジアルキル化分子を含む。アルキル化がスペーサのヒドロキシル基を介して生じる場合、アミノ酸はＳｅｒであり得る。アルキル化がスペーサのチオール基を介して生じる場合、アミノ酸はＣｙｓであり得る。いくつかの実施形態では、スペーサは、親水性二官能性スペーサである。アミン、ヒドロキシル、およびチオールを介したペプチドアルキル化の好適な方法は、当該技術分野において既知である。例えば、ウィリアムソンのエーテル合成を使用して、ペプチドのヒドロキシル基とアルキル基との間にエーテル結合を形成することができる。また、ペプチドのハロゲン化アルキルとの求核置換反応は、エーテル、チオエーテル、またはアミノ結合のいずれかをもたらし得る。アルキル化ペプチドのアルキル基は、任意のサイズ、例えば、任意の長さの炭素鎖であり得、直鎖状または分岐状であり得る。いくつかの実施形態では、アルキル基は、Ｃ４〜Ｃ３０アルキルである。例えば、アルキル基は、Ｃ４アルキル、Ｃ６アルキル、Ｃ８アルキル、Ｃ１０アルキル、Ｃ１２アルキル、Ｃ１４アルキル、Ｃ１６アルキル、Ｃ１８アルキル、Ｃ２０アルキル、Ｃ２２アルキル、Ｃ２４アルキル、Ｃ２６アルキル、Ｃ２８アルキル、またはＣ３０アルキルのちのいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、アルキル基は、Ｃ８〜Ｃ２０アルキル、例えば、Ｃ１４アルキルまたはＣ１６アルキルである。本開示のいくつかの実施形態では、ペプチドは、求核長鎖アルカンをペプチドと反応させることによってアルキル化アミノ酸を含み、ペプチドは、求核置換に好適な脱離基を含む。特定の態様では、長鎖アルカンの求核基は、アミン、ヒドロキシル、またはチオール基（例えば、オクタデシルアミン、テトラデカノール、およびヘキサデカンチオール）を含む。ペプチドの脱離基は、アミノ酸の側鎖の一部であるか、またはペプチド骨格の一部であり得る。好適な脱離基には、例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ハロゲン、およびスルホン酸エステルが含まれる。ある特定の実施形態では、ペプチドは、求核長鎖アルカンを、ペプチドに結されているスペーサと反応させることによってアルキル基を含むように修飾され、スペーサは脱離基を含む。特定の態様では、長鎖アルカンは、アミン、ヒドロキシル、またはチオール基を含む。ある特定の実施形態では、脱離基を含むスペーサは、本明細書で論じられる任意のスペーサ、例えば、好適な脱離基をさらに含むアミノ酸、ジペプチド、トリペプチド、親水性二官能性スペーサ、および疎水性二官能性スペーサであり得る。長鎖アルカンがペプチドまたはスペーサによってアルキル化される本開示のこれらの態様に関して、長鎖アルカンは、任意のサイズのものであり得、任意の長さの炭素鎖を含み得る。長鎖アルカンは、直鎖状または分岐状であり得る。ある特定の態様において、長鎖アルカンは、Ｃ４〜Ｃ３０アルカンである。例えば、長鎖アルカンは、Ｃ４アルカン、Ｃ６アルカン、Ｃ８アルカン、Ｃ１０アルカン、Ｃ１２アルカン、Ｃ１４アルカン、Ｃ１６アルカン、Ｃ１８アルカン、Ｃ２０アルカン、Ｃ２２アルカン、Ｃ２４アルカン、Ｃ２６アルカン、Ｃ２８アルカン、またはＣ３０アルカンのうちのいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、長鎖アルカンは、Ｃ８〜Ｃ２０アルカン、例えば、Ｃ１４アルカン、Ｃ１６アルカン、またはＣ１８アルカンを含む。また、いくつかの実施形態では、ペプチドとコレステロール部分との間でアルキル化が生じ得る。例えば、コレステロールのヒドロキシル基は、長鎖アルカン上の脱離基を置換して、コレステロール−ペプチド生成物を形成し得る。本明細書に記載のアルキル化ペプチドは、親水性部分を含むようにさらに修飾され得る。いくつかの特定の実施形態では、親水性部分は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖を含むことができる。親水性部分の組み込みは、本明細書に記載される方法のうちのいずれかなどの任意の好適な手段によって達成することができる。あるいは、アルキル化ペプチドは、スペーサを含むことができ、スペーサは、親水性部分を含むようにアルキル化および修飾の両方である。好適なスペーサの非限定的な例には、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ホモ−Ｃｙｓ、およびＡｃ−Ｐｈｅからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を含むスペーサが含まれる。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、位置１または２において、または位置１および２の両方において、ペプチダーゼ切断に対するペプチドの耐性を達成するアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、位置１において、Ｄ−ヒスチジン、デスアミノヒスチジン、ヒドロキシル−ヒスチジン、アセチル−ヒスチジン、ホモ−ヒスチジン、Ｎ−メチルヒスチジン、アルファ−メチルヒスチジン、イミダゾール酢酸、またはアルファ、アルファ−ジメチルイミダゾール酢酸（ＤＭＩＡ）からなる群から選択されるアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、位置２において、Ｄ−セリン、Ｄ−アラニン、バリン、グリシン、Ｎ−メチルセリン、Ｎ−メチルアラニン、またはアルファ、アミノイソ酪酸からなる群から選択されるアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、位置２において、ペプチダーゼに対するペプチドの耐性を達成するアミノ酸と、Ｄ−セリンではないペプチダーゼに対するペプチドの耐性を達成するアミノ酸とを含む。いくつかの実施形態では、この共有結合は、ラクタム架橋以外の分子内架橋である。例えば、好適な共有結合方法には、オレフィンメタセシス、ランチオニンベースの環化、ジスルフィド架橋または修飾硫黄含有架橋形成、α，ω−ジアミノアルカンテザーの使用、金属原子架橋の形成、およびペプチド環化の他の手段が挙げられる。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、類似体のＣ末端部分に電荷アミノ酸を導入するアミノ酸置換および／または付加によって修飾されている。いくつかの実施形態では、そのような修飾は、安定性および溶解性を高める。本明細書で使用する場合、「電荷アミノ酸」または「電荷残基」という用語は、生理学的ｐＨで水溶液中の負電荷（すなわち、脱プロトン化）または正電荷（すなわち、プロトン化）の側鎖を含むアミノ酸を指す。いくつかの態様では、電荷アミノ酸修飾を導入するこれらのアミノ酸置換および／または付加は、Ｃ末端位置にある。いくつかの実施形態では、１つ、２つ、または３つ（いくつかの場合では、４つ以上）の電荷アミノ酸がＣ末端位置で導入される。例示的な実施形態では、電荷アミノ酸のうちの１つ、２つ、または全てが負電荷である。いくつかの実施形態における負電荷アミノ酸は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、またはホモグルタミン酸である。いくつかの態様では、これらの修飾は溶解性を増加させる。
【０１５７】
いくつかの実施形態によれば、本明細書に開示されるペプチドは、１つまたは２つのアミノ酸残基によってＣ末端の切断により修飾されている。これに関して、ペプチドは、配列（配列番号１〜８８および１０８〜２１０）を含むことができ、任意に本明細書に記載の追加の修飾のうちのいずれかとともに含むことができる。
【０１５８】
いくつかの実施形態では、Ｃ末端アミノ酸のペプチドがアミドまたはエステルなどの電荷中性基で置き換えられているカルボン酸修飾された配列番号１〜８８および１０８〜２１０含む。したがって、いくつかの実施形態では、ペプチドは、Ｃ末端残基がアミノ酸のアルファカルボキシレートの代わりにアミドを含むように、アミド化ペプチドである。本明細書で使用される場合、ペプチドまたは類似体への一般的な言及は、修飾アミノ末端、カルボキシ末端、またはアミノ末端とカルボキシ末端の両方を有するペプチドを包含することを意図している。例えば、末端カルボン酸の代わりにアミド基を構成するアミノ酸鎖は、標準アミノ酸を指定するアミノ酸配列によって包含されることが意図されている。
【０１５９】
いくつかの実施形態によれば、本明細書に開示されるペプチドは、少なくとも１つのアミノ酸残基への複合体化によって修飾されていてもよい。これに関して、ペプチドは、配列（配列番号１〜８８および１０８〜２１０）を含むことができ、任意に本明細書に記載の追加の複合体のうちのいずれかとともに含むことができる。
【０１６０】
発明は、異種部分に複合体化される本明細書に記載のペプチドのうちの１つ以上を含む複合体をさらに提供する。本明細書で使用される場合、「異種部分」という用語は、「複合体部分」という用語と同義であり、本明細書に記載のペプチドとは異なる任意の分子（化学的または生化学的、天然型または非コード化）を指す。本明細書に記載の類似体のうちのいずれかに結合され得る例示的な複合体部分には、これらに限定されないが、異種ペプチドもしくはポリペプチド（例えば、血漿タンパク質を含む）、標的化剤、免疫グロブリンもしくはその一部（例えば、可変領域、ＣＤＲ、またはＦｃ領域）、放射性同位体、フルオロフォアもしくは酵素標識などの診断ラベル、水溶性ポリマーを含むポリマー、または他の治療薬もしくは診断薬が含まれる。いくつかの実施形態では、本発明のペプチドおよび血漿タンパク質を含む複合体が提供され、血漿タンパク質は、アルブミン、トランスフェリン、フィブリノゲン、およびグロブリンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、複合体の血漿タンパク質部分は、アルブミンまたはトランスフェリンである。
【０１６１】
いくつかの実施形態での複合体は、本明細書に記載のペプチドのうちの１つ以上と、異なるペプチド（本明細書に記載のペプチドとは異なる）、ポリペプチド、核酸分子、抗体またはその断片、ポリマー、量子ドット、小分子、毒素、診断薬、炭水化物、アミノ酸のうちの１つ以上とを含む。いくつかの実施形態では、異種部分はポリマーである。いくつかの実施形態では、ポリマーは、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレンおよびポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリアルキレンテレフタレートを含むその誘導体、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（エチルメタクリレート）、ポリ（ブチルメタクリレート）、ポリ（イソブチルメタクリレート）、ポリ（ヘキシルメタクリレート）、ポリ（イソデシルメタクリレート）、ポリ（ラウリルメタクリレート）、ポリ（フェニルメタクリレート）、ポリ（メチルアクリレート）、ポリ（イソプロピルアクリレート）、ポリ（イソブチルアクリレート）、およびポリ（オクタデシルアクリレート）を含むアクリルおよびメタクリルエステルのポリマー、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ポリビニルハライド、ポリ（酢酸ビニル）、およびポリビニルピロリドンを含むポリビニルポリマー、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリウレタンおよびそのコポリマー、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、ニトロセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシ−プロピル−メチルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、セルロースアセテート、セルロースプロピオネート、セルロースアセテートブチレート、セルロースアセテートフタレート、カルボキシルエチルセルロース、セルローストリアセテート、およびセルロース硫酸ナトリウム塩を含むセルロース、ポリプロピレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、およびポリ（エチレンテレフタレート）を含むポリエチレン、ならびにポリスチレンからなる群から選択される。いくつかの態様では、ポリマーは、合成生分解性ポリマー（例えば、乳酸とグリコール酸のポリマー、ポリ無水物、ポリ（オルト）エステル、ポリウレタン、ポリ（酪酸）、ポリ（吉草酸）、およびポリ（ラクチド−コカプロラクトン））、および天然の生分解性ポリマー（例えば、アルギン酸塩ならびにデキストランおよびセルロースを含む他の多糖類、コラーゲン、その化学誘導体（置換、化学基の付加、例えば、アルキル、アルキレン、ヒドロキシル化、酸化、および当事者によって日常的に行われる他の修飾）、および当業者によって日常的に行われる他の修飾）、アルブミンおよび他の親水性タンパク質（例えば、ゼインおよび他のプロラミンならびに疎水性タンパク質））、ならびにそれらの任意のコポリマーまたは混合物である。一般に、これらの材料は、酵素加水分解またはインビボでの水への曝露のいずれかによって、表面侵食またはバルク侵食により分解する。いくつかの態様では、ポリマーは、その教示が本明細書に組み込まれるＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，１９９３，２６，５８１−５８７にＨ．Ｓ．Ｓａｗｈｎｅｙ、Ｃ．Ｐ．Ｐａｔｈａｋ、およびＪ．Ａ．Ｈｕｂｂｅｌｌによって説明される生体侵食性ヒドロゲル、ポリヒアルロン酸、カゼイン、ゼラチン、グルチン、ポリ無水物、ポリアクリル酸、アルギン酸塩、キトサン、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（エチルメタクリレート）、ポリ（ブチルメタクリレート）、ポリ（イソブチルメタクリレート）、ポリ（ヘキシルメタクリレート）、ポリ（イソデシルメタクリレート）、ポリ（ラウリルメタクリレート）、ポリ（フェニルメタクリレート）、ポリ（メチルアクリレート）、ポリ（イソプロピルアクリレート）、ポリ（イソブチルアクリレート）、およびポリ（オクタデシルアクリレート）などの生体付着性ポリマーである。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、ポリマーは、水溶性ポリマーまたは親水性ポリマーである。親水性ポリマーは、本明細書において「親水性部分」の下にさらに説明される。好適な水溶性ポリマーは、当該技術分野において既知であり、例えば、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ、Ｋｌｕｃｅｌ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ）、ニトロセルロース、ヒドロキシプロピルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルブチルセルロース、ヒドロキシプロピルペンチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース（Ｅｔｈｏｃｅｌ）、ヒドロキシエチルセルロース、様々なアルキルセルロースおよびヒドロキシアルキルセルロース、様々なセルロースエーテル、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、酢酸ビニル／クロトン酸コポリマー、ポリ−ヒドロキシアルキルメタクリレート、ヒドロキシメチルメタクリレート、メタクリル酸コポリマー、ポリメタクリル酸、ポリメチルメタクリレート、無水マレイン酸／メチルビニルエーテルコポリマー、ポリビニルアルコール、ナトリウムおよびカルシウムポリアクリル酸、ポリアクリル酸、酸性カルボキシポリマー、カルボキシポリメチレン、カルボキシビニルポリマー、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンコポリマー、ポリメチルビニルエーテルコマレイン酸無水物、カルボキシメチルアミド、カリウムメタクリレートジビニルベンゼンコポリマー、ポリオキシエチレングリコール、ポリエチレンオキシド、ならびにそれらの誘導体、塩、および組み合わせが挙げられる。特定の実施形態では、ポリマーは、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含むポリアルキレングリコールである。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、異種部分は炭水化物である。いくつかの実施形態では、炭水化物は、単糖（例えば、グルコース、ガラクトース、フルクトース）、二糖（例えば、スクロース、ラクトース、マルトース）、オリゴ糖（例えば、ラフィノース、スタキオース）、多糖（デンプン、アミラーゼ、アミロペクチン、セルロース、キチン、カロース、ラミナリン、キシラン、マンナン、フコイダン、ガラクトマンナンである。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、異種部分は脂質である。脂質は、いくつかの実施形態では、脂肪酸、エイコサノイド、プロスタグランジン、ロイコトリエン、トロンボキサン、Ｎ−アシルエタノールアミン）、グリセロ脂質（例えば、モノ、ジ、トリ置換グリセロール）、グリセロリン脂質（例えば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン）、スフィンゴ脂質（例、スフィンゴシン、セラミド）、ステロール脂質（例、ステロイド、コレステロール）、プレノール脂質、糖脂質、またはポリケチド、油、ワックス、コレステロール、ステロール、脂溶性ビタミン、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド、リン脂質である。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、異種部分は、本開示のペプチドと非共有結合または共有結合を介して結合される。ある特定の態様では、異種部分は、リンカーを介して本開示のペプチドに結合される。結合は、共有化学結合、静電気、水素、イオン、ファンデルワールスなどの物理的な力、または疎水性もしくは親水性相互作用によって達成され得る。ビオチン−アビジン、リガンド／受容体、酵素／基質、核酸／核酸結合タンパク質、脂質／脂質結合タンパク質、細胞接着分子パートナー、または互いに親和性を有する任意の結合パートナーもしくはその断片を含む、様々な非共有結合系が使用されてもよい。いくつかの実施形態におけるペプチドは、類似体の標的化されたアミノ酸残基を、選択された側鎖またはこれらの標的化されたアミノ酸のＮまたはＣ末端残基と反応することができる有機誘導体化剤と反応させることによって、直接共有結合を介して複合体部分に結合される。類似体または複合体部分の反応性基には、例えば、アルデヒド、アミノ、エステル、チオール、α−ハロアセチル、マレイミド、またはヒドラジノ基が含まれる。誘導体化剤には、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル（システイン残基を介した複合体化）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（リジン残基を介した）、グルタルアルデヒド、コハク酸無水物、または当該技術分野で既知の他の薬剤が挙げられる。あるいは、複合体部分は、多糖類またはポリペプチド担体などの中間担体を介して間接的に類似体に結合され得る。多糖類担体の例には、アミノデキストランが含まれる。好適なポリペプチド担体の例としては、ポリリジン、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、それらのコポリマー、およびこれらのアミノ酸の混合ポリマー、ならびに他、例えば、得られる担持担体に望ましい溶解特性を付与するためのセリンが挙げられる。システイニル残基は、最も一般的には、クロロ酢酸、クロロアセトアミドなどのα−ハロアセテート（および対応するアミン）と反応して、カルボキシメチルまたはカルボキシアミドメチル誘導体を生じる。システイニル残基はまた、ブロモトリフルオロアセトン、アルファ−ブロモ−β−（５−イミドゾイル）プロピオン酸、クロロアセチルホスフェート、Ｎ−アルキルマレイミド、３−ニトロ−２−ピリジルジスルフィド、メチル２−ピリジルジスルフィド、ｐ−クロロメルクリベンゾエート、２−クロロメルクリ−４−ニトロフェノール、またはクロロ−７−ニトロベンゾ−２−オキサ−１，３−ジアゾールとの反応により誘導体化される。この薬剤はヒスチジル側鎖に比較的特異的であるため、ヒスチジル残基はｐＨ５．５〜７．０でジエチルピロカーボネートとの反応により誘導体化される。パラ−ブロモフェナシルブロミドもまた有用であり、反応は、ｐＨ６．０の０．１Ｍカコジル酸ナトリウム中で行うことが好ましい。リジニルおよびアミノ末端残基は、コハク酸または他のカルボン酸無水物と反応する。これらの薬剤による誘導体化は、リジニル残基の電荷を逆転させる効果を有する。アルファ−アミノ含有残基を誘導体化するための他の好適な試薬には、ピコリンイミン酸メチル、リン酸ピリドキサール、ピリドキサール、水素化ホウ素、トリニトロベンゼンスルホン酸、Ｏ−メチルイソ尿素、２，４−ペンタンジオン、およびグリオキシレートとのトランスアミナーゼ触媒反応などのイミドエステルが挙げられる。アルギニル残基は、１つまたはいくつかの従来の試薬、その中でもフェニルグリオキサール、２，３−ブタンジオン、１，２−シクロヘキサンジオン、およびニンヒドリンとの反応によって修飾される。アルギニン残基の誘導体化は、グアニジン官能基のｐＫａが高いため、反応をアルカリ性条件で行う必要がある。さらに、これらの試薬は、リジンの基ならびにアルギニンイプシロン−アミノ基と反応し得る。チロシル残基の特定の修飾は、芳香族ジアゾニウム化合物またはテトラニトロメタンとの反応によるチロシル残基へのスペクトル標識の導入に特に関心をもって行われ得る。最も一般的には、Ｎ−アセチルイミジゾールおよびテトラニトロメタンが、それぞれＯ−アセチルチロシル種および３−ニトロ誘導体を形成するために使用される。カルボキシル側基（アスパルチルまたはグルタミル）はカルボジイミド（Ｒ−Ｎ＝Ｃ＝Ｎ−Ｒ’）との反応により選択的に修飾され、ＲおよびＲ´が、１−シクロヘキシル−３−（２−モルホリニル−４−エチル）カルボジイミドまたは１−エチル−３−（４−アゾニア−４，４−ジメチルペンチル）カルボジイミドなどの異なるアルキル基である。さらに、アスパルチルおよびグルタミル残基は、アンモニウムイオンとの反応によりアスパラギニルおよびグルタミニル残基に変換される。他の修飾としては、プロリンおよびリジンのヒドロキシル化、セリルまたはスレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リシン、アルギニン、およびヒスチジン側鎖のアルファ−アミノ基のメチル化（Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ｐｐ．７９−８６（１９８３））、アスパラギンもしくはグルタミンの脱アミド化、Ｎ末端アミンのアセチル化、および／またはＣ末端カルボキシル基のアミド化もしくはエステル化が挙げられる。別の種類の共有結合修飾は、グリコシドをペプチドに化学的または酵素的にカップリングすることに関与する。糖（複数可）は（ａ）アルギニンおよびヒスチジン、（ｂ）遊離カルボキシル基、（ｃ）遊離システインのものなどの遊離スルフヒドリル基、（ｄ）セリン、スレオニン、もしくはヒドロキシプロリンなどの遊離ヒドロキシル基、（ｅ）チロシン、もしくはトリプトファンのものなどの芳香族残基、または（ｆ）グルタミンのアミド基に結合され得る。これらの方法は、１９８７年９月１１日に公開されたＷＯ８７／０５３３０、およびＡｐｌｉｎ  ａｎｄ  Ｗｒｉｓｔｏｎ，ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，ｐｐ．２５９−３０６（１９８１）に記載されている。いくつかの実施形態では、ペプチドは、ペプチドのアミノ酸の側鎖と異種部分との間の共有結合を介して異種部分に複合体化される。いくつかの態様では、異種部分に共有結合したアミノ酸（例えば、異種部分を含むアミノ酸）は、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｈｏｍｏ−Ｃｙｓ、またはＡｃ−Ｐｈｅであり、アミノ酸の側鎖は異種部分に共有結合されている。いくつ��の実施形態では、複合体は、ペプチドを異種部分に結合するリンカーを含む。いくつかの態様では、リンカーは、１〜約６０、または１〜３０以上の原子、２〜５原子、２〜１０原子、５〜１０原子、または１０〜２０原子長の原子の鎖を含む。いくつかの実施形態では、鎖原子は全て炭素原子である。いくつかの実施形態では、リンカーの骨格の鎖原子は、Ｃ、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される。鎖原子およびリンカーは、より多くの溶解性複合体を提供するためにそれらの予期される溶解性（親水性）に従って選択され得る。いくつかの実施形態では、リンカーは、標的組織または器官または細胞に見られる酵素または他の触媒または加水分解条件による切断を受ける官能基を提供する。いくつかの実施形態では、リンカーの長さは、立体障害の可能性を低減するのに十分な長さである。リンカーが共有結合またはペプチジル結合であり、複合体がポリペプチドである場合、複合体全体が融合タンパク質であり得る。そのようなペプチジルリンカーは、任意の長さであり得る。例示的なリンカーは、約１〜５０アミノ酸の長さ、５〜５０、３〜５、５〜１０、５〜１５、または１０〜３０アミノ酸の長さである。あるいは、そのような融合タンパク質は、組換え遺伝子操作方法により産生され得る。
【０１６６】
上記のように、いくつかの実施形態では、ペプチドは、複合体化され、例えば、免疫グロブリンまたはその一部（例えば、可変領域、ＣＤＲ、またはＦｃ領域）に融合される。既知の種類の免疫グロブリン（Ｉｇ）には、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはＩｇＭが含まれる。Ｆｃ領域は、Ｉｇ重鎖のＣ末端領域であり、それはリサイクル（長い半減期をもたらす）、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）などの活動を行うＦｃ受容体への結合を担う。例えば、いくつかの定義によれば、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６から重鎖のＣ末端まで伸びている。「ヒンジ領域」は、一般に、ヒトＩｇＧ１のＧｌｕ２１６からＰｒｏ２３０まで延在する（他のＩｇＧアイソタイプのヒンジ領域は、システイン結合に関与するシステインを整列させることによりＩｇＧ１配列と整列させることができる）。ＩｇＧのＦｃ領域には、２つの定常ドメイン、ＣＨ２およびＣＨ３が含まれる。ヒトＩｇＧ  Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインは通常、アミノ酸２３１からアミノ酸３４１まで延在する。ヒトＩｇＧ  Ｆｃ領域のＣＨ３ドメインは通常、アミノ酸３４２から４４７まで延在する。免疫グロブリンもしくは免疫グロブリン断片、または領域のアミノ酸番号付けに関する言及は全て、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．１９９１，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．に基づく。関連する実施形態では、Ｆｃ領域は、ＣＨ１以外、例えば、ＩｇＧおよびＩｇＡのＣＨ２およびＣＨ３領域、またはＩｇＥのＣＨ３およびＣＨ４領域などの、免疫グロブリン重鎖由来の１つ以上の天然または修飾定常領域を含み得る。好適な複合体部分には、ＦｃＲｎ結合部位を含む免疫グロブリン配列の部分が含まれる。サルベージ受容体であるＦｃＲｎは、免疫グロブリンをリサイクルし、血液中の循環にそれらを戻すことを担う。ＦｃＲｎ受容体と結合するＩｇＧのＦｃ部分の領域は、Ｘ線結晶構造解析に基づいて説明されている（Ｂｕｒｍｅｉｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．１９９４，Ｎａｔｕｒｅ  ３７２：３７９）。ＦｃのＦｃＲｎとの主要な接触領域は、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインの接合部付近である。Ｆｃ−ＦｃＲｎ接触は全て単一のＩｇ重鎖内にある。主要な接触部位は、ＣＨ２ドメインのアミノ酸残基２４８、２５０〜２５７、２７２、２８５、２８８、２９０〜２９１、３０８〜３１１、および３１４と、ＣＨ３ドメインのアミノ酸残基３８５〜３８７、４２８、および４３３〜４３６を含む。いくつかの複合体部分は、ＦｃγＲ結合部位（複数可）を含んでも含まなくてもよい。ＦｃγＲは、ＡＤＣＣおよびＣＤＣを担う。ＦｃγＲと直接接触するＦｃ領域内の位置の例は、アミノ酸２３４〜２３９（下側ヒンジ領域）、アミノ酸２６５〜２６９（Ｂ／Ｃループ）、アミノ酸２９７〜２９９（Ｃ´／Ｅループ）、およびアミノ酸３２７〜３３２（Ｆ／Ｇ）ループである（Ｓｏｎｄｅｒｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ４０６：２６７−２７３，２０００）。ＩｇＥの下側ヒンジ領域もまた、ＦｃＲＩ結合に関与している（Ｈｅｎｒｙ，ｅｔ  ａ��．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３６，１５５６８−１５５７８，１９９７）。ＩｇＡ受容体の結合に関与する残基は、Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，（Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７５：６６９４−７０１，２００５）に記載されている。ＩｇＥ受容体の結合に関与するアミノ酸残基は、Ｓａｙｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ  ＢｉｏｌＣｈｅｍ．２７９（３４）：３５３２０−５，２００４）に記載されている。アミノ酸修飾は、免疫グロブリンのＦｃ領域に行われ得る。そのようなバリアントＦｃ領域は、Ｆｃ領域のＣＨ３ドメインにおける少なくとも１つのアミノ酸修飾（残基３４２〜４４７）および／またはＦｃ領域のＣＨ２ドメインにおける少なくとも１つのアミノ酸修飾（残基２３１〜３４１）を含む。ＦｃＲｎに対する増加された親和性に影響を与えると考えられる変異には、Ｔ２５６Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、およびＮ４３４Ａが挙げられる（Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１）。他の変異は、ＦｃＲｎに対する親和性を著しく低減することなく、Ｆｃ領域のＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、および／またはＦｃγＲＩＩＩＡへの結合を低減し得る。例えば、Ｆｃ領域の位置２９７でのＡｓｎの、Ａｌａまたは別のアミノ酸との置換は、高度に保存されたＮ−グリコシル化部位を除去し、Ｆｃ領域の付随する長い半減期を有する低減された免疫原生、ならびにＦｃγＲｓへの低減された結合をもたらし得る（Ｒｏｕｔｌｅｄｇｅ  ｅｔ  ａｌ．１９９５，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ６０：８４７、Ｆｒｉｅｎｄ  ｅｔ  ａｌ．１９９９，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ６８：１６３２、Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．１９９５，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１）ＦｃγＲへの結合を低減するＩｇＧ１の２３３〜２３６位におけるアミノ酸修飾が行われている（Ｗａｒｄ  ａｎｄ  Ｇｈｅｔｉｅ  １９９５，Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２：７７  ａｎｄ  Ａｒｍｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ．１９９９，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９：２６１３）。いくつかの例示的なアミノ酸置換は、米国特許第７，３５５，００８号および同第７，３８１，４０８号に記載されており、各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。特定の実施形態では、本明細書に記載のペプチドは、免疫グロブリン分子内のループ領域に挿入される。他の実施形態では、本明細書に記載のペプチドは、免疫グロブリン分子内のループ領域の１つ以上のアミノ酸を置き換える。
【０１６７】
本明細書に記載のペプチドは、生物学的活性を保持しながら、生理学的ｐＨの水溶液中でのその溶解性および安定性を改善するためにさらに修飾され得る。ＰＥＧ基などの親水性部分は、タンパク質を活性化ポリマー分子と反応させるために使用される任意の好適な条件下で類似体に結合され得る。アシル化、還元的アルキル化、マイケル付加、チオールアルキル化、またはＰＥＧ部分の反応性基（例えば、アルデヒド、アミノ、エステル、チオール、α−ハロアセチル、マレイミド、またはヒドラジノ基）から標的化合物の反応性基（例えば、アルデヒド、アミノ、エステル、チオール、α−ハロアセチル、マレイミド、またはヒドラジノ基）をとおした他の化学選択的複合体化／ライゲーションを含む、当該技術分野で既知の任意の手段が使用され得る。水溶性ポリマーを１つ以上のタンパク質に結合するために使用され得る活性化基には、限定されないが、スルホン、マレイミド、スルフヒドリル、チオール、トリフレート、トレシレート、アジジリン、オキシラン、５−ピリジル、およびアルファ−ハロゲン化アシル基（例えば、アルファ−ヨード酢酸、アルファ−ブロモ酢酸、アルファ−クロロ酢酸）が挙げられる。還元的アルキル化により類似体に結合される場合、選択されたポリマーは、重合の程度が制御されるように単一の反応性アルデヒドを有するべきである。例えば、Ｋｉｎｓｔｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．５４：４７７−４８５（２００２）、Ｒｏｂｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．５４：４５９−４７６（２００２）、およびＺａｌｉｐｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．１６：１５７−１８２（１９９５）を参照されたい。特定の態様では、チオールを有するペプチドのアミノ酸残基は、ＰＥＧなどの親水性部分で修飾されている。一部の実施形態では、チオールは、マイケル付加反応においてマレイミド活性化ＰＥＧで修飾されて、チオエーテル結合を含むＰＥＧ化類似体をもたらす。いくつかの実施形態では、チオールは、求核置換反応においてハロアセチル活性化ＰＥＧで修飾されて、チオエーテル結合を含むＰＥＧ化類似体をもたらす。好適な親水性部分には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、ＰＯＧ）、ポリオキシエチル化ソルビトール、ポリオキシエチル化グルコース、ポリオキシエチル化グリセロール（ＰＯＧ）、ポリオキシアルキレン、ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒド、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、モノメトキシ−ポリエチレングリコール、モノ−（Ｃ１〜Ｃ１０）アルコキシ−またはアリールオキシ−ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、ポリアセタール、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリ（ベータ−アミノ酸）（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、ポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー（ＰＰＧ）および他のポリ���ルキレンオキシド、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、結腸酸または他の多糖類ポリマー、フィコールまたはデキストランおよびそれらの混合物が挙げられる。デキストランは、主にα１−６結合により結合したグルコースサブユニットの多糖ポリマーである。デキストランは、多くの分子量範囲、例えば、約１ｋＤ〜約１００ｋＤ、または約５、１０、１５、または２０ｋＤ〜約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、または９０ｋＤで利用可能である。直鎖状または分岐状ポリマーが企図される。複合体の得られる配合物は、本質的に単分散または多分散であってもよく、類似体あたり約０．５、０．７、１、１．２、１．５、または２個のポリマー部分を有してもよい。いくつかの実施形態では、ペプチドは、ペプチドのアミノ酸の側鎖と親水性部分との間の共有結合を介して親水性部分に複合体化される。
【０１６８】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、アミノ酸、Ｃ末端伸長内の位置、またはＣ末端アミノ酸、またはこれらの位置の組み合わせの側鎖を介して親水性部分に複合体化される。いくつかの態様では、親水性部分に共有結合したアミノ酸（例えば、親水性部分を含むアミノ酸）は、Ｃｙｓ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｈｏｍｏ−Ｃｙｓ、またはＡｃ−Ｐｈｅであり、アミノ酸の側鎖は親水性部分（例えば、ＰＥＧ）に共有結合されている。いくつかの実施形態では、本開示の複合体は、国際特許出願公開第ＷＯ２００９／０２３２７０号および米国特許出願公開第ＵＳ２００８／０２８６８０８号に記載されているものなど、化学的ＰＥＧ（例えば、組換えＰＥＧ（ｒＰＥＧ）分子）と同様の伸長立体構造を形成することができるアクセサリー類似体に融合したペプチドを含む。いくつかの態様におけるｒＰＥＧ分子は、グリシン、セリン、グルタミン酸、アスパラギン酸、アラニン、またはプロリンのうちの１つ以上を含むポリペプチドである。いくつかの態様では、ｒＰＥＧは、ホモポリマー、例えば、ポリ−グリシン、ポリ−セリン、ポリ−グルタミン酸、ポリ−アスパラギン酸、ポリ−アラニン、またはポリ−プロリンである。他の実施形態では、ｒＰＥＧは、繰り返される２種類のアミノ酸、例えば、ポリ（Ｇｌｙ−Ｓｅｒ）、ポリ（Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）、ポリ（Ｇｌｙ−Ａｌａ）、ポリ（Ｇｌｙ−Ａｓｐ）、ポリ（Ｇｌｙ−Ｐｒｏ）、ポリ（Ｓｅｒ−Ｇｌｕ）などを含む。いくつかの態様では、ｒＰＥＧは、３つの異なる種類のアミノ酸、例えば、ポリ（Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ）を含む。特定の態様では、ｒＰＥＧは、ペプチドの半減期を増加させる。いくつかの態様では、ｒＰＥＧは、正味の正電荷または正味の負電荷を含む。いくつかの態様におけるｒＰＥＧは、二次構造を欠いている。いくつかの実施形態では、ｒＰＥＧは、１０アミノ酸以上の長さであり、いくつかの実施形態では、約４０〜約５０アミノ酸の長さである。いくつかの態様におけるアクセサリーペプチドは、ペプチド結合またはプロテイナーゼ切断部位を介して本開示のペプチドのＮ末端またはＣ末端に融合されるか、または本開示のペプチドのループに挿入される。いくつかの態様におけるｒＰＥＧは、親和性タグを含むか、または５ｋＤａを超えるＰＥＧに結合されている。いくつかの実施形態では、ｒＰＥＧは、本開示のペプチドに増加した流体力学的半径、血清半減期、プロテアーゼ耐性、または溶解度を付与し、いくつかの態様では、類似体に減少した免疫原性を付与する。
【０１６９】
配列（配列番号１〜８８および１０８〜２１０）を含み、任意に、本明細書に記載の複合体のうちのいずれかを有するペプチドは、実施形態として企図される。
【０１７０】
他の実施形態では、発明は、本明細書に記載の配列番号１〜８８および１０８〜２１０に示されるポリペプチドまたは融合タンパク質のいずれかをコードする核酸配列を含む単離された核酸分子を提供する。本発明の核酸分子は、上記の核酸分子のうちのいずれかによってコードされるのと同じアミノ酸配列を変性するが、それをコードする核酸配列を包含する。
【０１７１】
発明は、ホモもしくはヘテロ多量体またはホモもしくはヘテロ二量体を含む、本明細書に開示されるペプチドの多量体または二量体をさらに提供する。類似体のうちの２つ以上は、当業者に既知の標準結合剤および手順を使用して一緒に結合され得る。例えば、特に、システイン、リジンオルニチン、ホモシステイン、またはアセチルフェニルアラニン残基で置換されている類似体の場合、二官能性チオール架橋剤および二官能性アミン架橋剤を使用して、２つのペプチド間で二量体を形成することができる。二量体は、ホモ二量体、または代替的にはヘテロ二量体であり得る。ある特定の実施形態では、２つ（またはそれ以上の）の類似体を接続するリンカーは、ＰＥＧ、例えば、５ｋＤａ  ＰＥＧ、２０ｋＤａ  ＰＥＧである。いくつかの実施形態では、リンカーは、ジスルフィド結合である。例えば、二量体の各単量体は、Ｃｙｓ残基（例えば、末端または内部に位置するＣｙｓ）を含み得、各Ｃｙｓ残基の硫黄原子は、ジスルフィド結合の形成に関与する。いくつかの態様では、単量体は、末端アミノ酸（例えば、Ｎ末端またはＣ末端）、内部アミノ酸、または少なくとも１つの単量体の末端アミノ酸および少なくとも１つの他の単量体の内部アミノ酸を介して接続される。特定の態様では、モノマーは、Ｎ末端アミノ酸を介して接続されていない。いくつかの態様では、多量体の単量体は、各単量体のＣ末端アミノ酸が一緒に結合されている「尾から尾へ」の方向で一緒に結合されている。
【０１７２】
本発明のペプチドは、当該技術分野で既知の様々な方法で行われる。ペプチドを新規に合成する好適な方法は、例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，８５，２１４９（１９６３）、Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．，１０，３９４−４１４（１９８５）、Ｌａｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，１１５，  ６２４７（１９９３）、Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．，４４，１８３（１９９４）、Ｏ´Ｄｏｎｎｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，１１８，６０７０（１９９６）、Ｓｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ，Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｆｒｅｅｍａｎ（１９６９）、Ｆｉｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，３  ｅｄ．，ｖｏｌ．２，ｐｐ．１０５−２５３（１９７６）、Ｅｒｉｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，３ｒｄｅｄ．，ｖｏｌ．２，ｐｐ．２５７−５２７（１９７６）、およびＣｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｍｏｃ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ，２００５に記載されている。発明は、合成ペプチドを企図する。
【０１７３】
あるいは、ペプチドは、標準的な組換え方法を使用して、ペプチドを発現するように培養された宿主細胞に本発明のペプチドをコードする核酸を導入することによって組換え的に発現される。例えば、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ．３ｒｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．２００１、およびＡｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎ．Ｙ．，１９９４を参照されたい。そのようなペプチドは、培養培地または細胞ペレットから精製される。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、本開示のペプチドは、単離されている。いくつかの実施形態では、本開示のペプチドは、精製されている。「純度」は相対的な用語であり、必ずしも絶対的な純度または絶対的な濃縮または絶対的な選択として解釈されるものではないことが認識される。いくつかの態様では、純度は、少なくともまたは約５０％であり、少なくともまたは約６０％、少なくともまたは約７０％、少なくともまたは約８０％、または少なくともまたは約９０％（例えば、少なくとももしくは約９１％、少なくとももしくは約９２％、少なくとももしくは約９３％、少なくとももしくは約９４％、少なくとももしくは約９５％、少なくとももしくは約９６％、少なくとももしくは約９７％、少なくとももしくは約９８％、少なくとももしくは約９９％、または約１００％である。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のペプチドは、Ｉｎｎｏｐｅｐ  Ｉｎｃ．（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．）などの会社によって商業的に合成されている。これに関して、ペプチドは、合成、組換え、単離、および／または精製されていてもよい。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のペプチドは、キットの一部として、一実施形態に従って提供され得る。したがって、いくつかの実施形態では、ペプチドをそれを必要とする患者に投与するためのキットが提供され、キットは本明細書に記載のペプチドを含む。
【０１７７】
一実施形態では、キットは、患者に組成物を投与するためのデバイスが提供されており、例えば、注射針、ペンデバイス、ジェット式注射器、または他の無針注射器である。キットは、代替的または追加的に、１つ以上の容器、例えば、バイアル、チューブ、ボトル、単一または複数チャンバーの事前充填シリンジ、カートリッジ、注入ポンプ（外部または埋め込み可能）、ジェット式注射器、事前充填ペンデバイスなどを含み、任意に、凍結乾燥形態または水溶液でペプチドを含む。いくつかの実施形態におけるキットは、使用のための説明書を含む。一実施形態によれば、キットのデバイスはエアロゾル分配デバイスであり、組成物はエアロゾルデバイス内に予め包装されている。別の実施形態では、キットは、注射器および針を含み、一実施形態では、滅菌組成物はシリンジ内に予め包装されている。
【０１７８】
さらなる実施形態は、疾患を治療するためのペプチドを供給する方法を含み、当該方法は、当該ペプチドの販売に関して医師、処方集、患者、または保険会社に償還することを含む。
【０１７９】
本発明のさらなる実施形態は、疾患を治療するためのペプチドを供給する方法を含み、当該方法は、当該ペプチドの販売に関して医師、処方集、患者、または保険会社に償還することを含む。
定義
【０１８０】
「ペプチド」という用語は、ペプチド結合によって互いに結合された２個の以上のアミノ酸残基を含む分子を指す。これらの用語は、例えば、タンパク質配列の天然および人工タンパク質、タンパク質断片およびポリペプチド類似体（ムテイン、バリアント、および融合タンパク質など）、ならびに翻訳後に、またはそうでなければ共有結合もしくは非共有結合で修飾されたペプチドを包含する。ペプチドは、単量体でもあってもポリマーであってもよい。ある特定の実施形態では、「ペプチド」は、アルファ炭素がペプチド結合を介して結合しているアミノ酸の鎖である。したがって、鎖の一方の端部（アミノ末端）の末端アミノ酸は遊離アミノ基を有する一方で、鎖の他方の端部（カルボキシ末端）の末端アミノ酸は遊離カルボキシル基を有する。本明細書で使用される場合、「アミノ末端」（略称Ｎ末端）という用語は、ペプチドのアミノ末端のアミノ酸の遊離α−アミノ基、またはペプチド内の任意の他の位置のアミノ酸の遊離α−アミノ基（ペプチド結合に関与する場合のイミノ基）を指す。同様に、「カルボキシ末端」という用語は、ペプチドのカルボキシ末端の遊離カルボキシル基、またはペプチド内の任意の他の位置のアミノ酸のカルボキシル基を指す。ペプチドはまた、これに限定されないが、アミド結合とは対照的にエーテルにより結合されたアミノ酸などのペプチド模倣物を含む任意のポリアミノ酸を本質的に含む。
【０１８１】
「治療用ペプチド」という用語は、１つ以上の治療および／または生物学的活性を有する、ペプチドまたはその断片もしくはバリアントである。
【０１８２】
本明細書で使用される「類似体」という用語は、これらに限定されないが、任意の利用可能な位置での、任意の天然または非天然アミノ酸、合成アミノ酸またはペプチド模倣薬のアミノ酸残基のうちのいずれか１つの置換および／または１つ以上の欠失および／または１つ以上の付加などの、１つ以上のアミノ酸修飾および／または天然もしくは非天然アミノ酸、合成アミノ酸またはペプチド模倣薬のうちのいずれか１つへの側鎖の結合を説明する。アミノ酸残基の付加または欠失は、ペプチドのＮ末端および／またはペプチドのＣ末端で起こり得る。
【０１８３】
ペプチド配列は、標準的な１文字または３文字の略称を使用して示される。特に明記しない限り、ペプチド配列は、左側にそれらのアミノ末端、右側にそれらのカルボキシ末端を有する。ペプチドの特定のセクションは、アミノ酸３〜６などのアミノ酸残基番号によって、またはＭｅｔ３〜Ｇｌｙ６などのその部位の実際の残基によって指定され得る。特定のペプチド配列はまた、参照配列とどのように異なるかを説明することによっても記載され得る。
【０１８４】
本明細書で使用される場合、「天然のアミノ酸」という用語は、グリシン（ＧｌｙおよびＧ）、プロリン（ＰｒｏおよびＰ）、アラニン（ＡｌａおよびＡ）、バリン（ＶａｌおよびＶ）、ロイシン（ＬｅｕおよびＬ）、イソロイシン（ＩｌｅおよびＩ）、メチオニン（ＭｅｔおよびＭ）、システイン（ＣｙｓおよびＣ）、フェニルアラニン（ＰｈｅおよびＦ）、チロシン（ＴｙｒおよびＹ）、トリプトファン（ＴｒｐおよびＷ）、ヒスチジン（ＨｉｓおよびＨ）、リジン（ＬｙｓおよびＫ）、アルギニン（ＡｒｇおよびＲ）、グルタミン（ＧｉｎおよびＱ）、アスパラギン（ＡｓｎおよびＮ）、グルタミン酸（ＧｌｕおよびＥ）、アスパラギン酸（ＡｓｐおよびＤ）、セリン（ＳｅｒおよびＳ）、ならびにスレオニン（ＴｈｒおよびＴ）からなる群から選択されるアミノ酸（通常の３文字コードおよび括弧内の１文字コードを有する）である。この発明のどこかで、さらに特定することなく、Ｇ、Ｐ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｍ、Ｃ、Ｆ、Ｙ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｑ、Ｎ、Ｅ、Ｄ、Ｓ、またはＴを含むか、または含まない、ペプチド、類似体、もしくは誘導体、または本発明によるペプチドに言及される場合、アミノ酸を意味する。特に明記しない限り、大文字の１文字コードで示されるアミノ酸は、Ｌ−アイソフォームを示すが、しかしながら、アミノ酸が小文字で示される場合、このアミノ酸はそれがＤ形態であるとして使用／適用される。本明細書の式では、プレースホルダー「Ｘａａ」によって表されるアイソフォーム（複数可）は、個々の場合に応じて定義される。
【０１８５】
本明細書で使用される場合、アミノ酸またはその略称の前に記載された「ＮＭｅ」は、アミノ酸がＮ−メチル化であることを意味する。例えば、「ＮＭｅＡｒｇ」または「（ＮＭｅ）Ｒ」は、Ｎ−メチル化アルギニンを意味する。また、例えば、「ＮＭｅＩｌｅ」または「（ＮＭｅ）Ｉ」は、Ｎ−メチル化イソロイシンを意味する。
【０１８６】
本明細書で使用される場合、ペプチド配列の文脈における「Ｏ」（大文字のＯ）の使用は、オルニチンを意味する。
【０１８７】
本明細書で使用される場合、ペプチド配列の文脈における「Ｚ」（大文字のＺ）の使用は、「ｈｏｍｏＡｒｇ」または「ｈＲ」がホモアルギニンを指すことを意味する。
【０１８８】
入力ミスが原因で、一般的に使用されるコードからの偏差がある場合、一般的に使用されるコードを適用する。本発明のペプチドに存在するアミノ酸は、好ましくは、核酸によってコードされ得るアミノ酸である。上記の例から明らかなように、アミノ酸残基は、それらのフルネーム、それらの１文字コード、および／またはそれらの３文字コードによって識別されてもよい。これら３つの方法は完全に同等である。
【０１８９】
「非保存的アミノ酸置換」とは、これらの分類のうちの１つのメンバーの、別の分類からのメンバーでの置換を指す。そのような変更を行う際、ある特定の実施形態によれば、アミノ酸のハイドロパシーインデックスが考慮され得る。各アミノ酸に、その疎水性および電荷特性に基づいてハイドロパシーインデックスが割り当てられている。それらは、イソロイシン（＋４．５、バリン（＋４．２）、ロイシン（＋３．８）、フェニルアラニン（＋２．８）、システイン／システイン（＋２．５）、メチオニン（＋１．９）、アラニン（＋１．８）、グリシン（−０．４）、スレオニン（−０．７）、セリン（−０．８）、トリプトファン（−０．９）、チロシン（−１．３）、プロリン（−１．６）、ヒスチジン（−３．２）、グルタメート（−３．５）、グルタミン（−３．５）、アスパルテート（−３．５）、アスパラギン（−３．５）、リジン（−３．９）、およびアルギニン（−４．５）である。タンパク質上の相互作用的な生物学的機能の付与におけるアミノ酸のハイドロパシーインデックスの重要性は、当該技術分野で理解されている（例えば、Ｋｙｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９８２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７：１０５−１３１を参照されたい）。ある特定のアミノ酸が、同様のハイドロパシーインデックスまたはスコアを有する他のアミノ酸に置換され得、依然として同様の生物学的活性を保持することが知られている。ハイドロパシーインデックスに基づいて変更を行う際に、ある特定の実施形態では、ハイドロパシーインデックスが＋２以内であるアミノ酸の置換が含まれる。ある特定の実施形態では、＋１以内にあるものが含まれ、ある特定の実施形態では、＋０．５以内にあるものが含まれる。同様なアミノ酸の置換は、特に、それにより作成された生物学的機能性タンパク質またはペプチドが、本明細書に開示される免疫学的実施形態での使用を意図する場合、親水性に基づいて有効になされ得ることもまた、当該技術分野で理解されている。ある特定の実施形態では、その隣接アミノ酸の親水性によって支配されるタンパク質の最大局所平均親水性は、その免疫原性および抗原性、すなわち、タンパク質の生物学的特性と相関する。これらのアミノ酸残基には、次の親水性値が割り当てられている：アルギニン（＋３．０）、リジン（＋３．０）、アスパラギン酸（＋３．０±１）、グルタミン酸（＋３．０±１）、セリン（＋０．３）、アスパラギン（＋０．２）、グルタミン（＋０．２）、グリシン（０）、スレオニン（−０．４）、プロリン（−０．５±１）、アラニン（−０．５）、ヒスチジン（−０．５）、システイン（−１．０）、メチオニン（−１．３）、バリン（−１．５）、ロイシン（−１．８）、イソロイシン（−１．８）、チロシン（−２．３）、フェニルアラニン（−２．５）、およびトリプトファン（−３．４）。同様の親水性値に基づいて変更を行う際、ある特定の実施形態では、親水性値が＋２以内のアミノ酸の置換が含まれ、ある特定の実施形態では、＋１以内にあるものが含まれ、ある特定の実施形態では、＋０．５以内にあるものが含まれる。
【０１９０】
他の例示的なアミノ酸置換は、表３に示される。
表３
元の残基例示的置換好ましい置換
ＡｌａＶａｌ、Ｌｅｕ、ＩｌｅＶａｌ
ＡｒｇＬｙｓ、Ｇｌｎ、ＡｓｎＬｙｓ
ＡｓｎＧｌｎＧｌｎ
ＡｓｐＧｌｕＧｌｕ
ＣｙｓＳｅｒ、ＡｌａＳｅｒ
ＧｌｎＡｓｎＡｓｎ
ＧｌｕＡｓｐＡｓｐ
ＧｌｙＰｒｏ、ＡｌａＡｌａ
ＨｉｓＡｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ＡｒｇＡｒｇ
ＩｌｅＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、ノルロイシンＬｅｕ
Ｌｅｕノルロイシン、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ａｌａ、ＰｈｅＩｌｅ
ＬｙｓＡｒｇ、１，４−ジアミノ酪酸Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ
ＭｅｔＬｅｕ、Ｐｈｅ、ＩｌｅＬｅｕ
ＰｈｅＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、ＴｙｒＬｅｕ
ＰｒｏＡｌａＧｌｙ
ＳｅｒＴｈｒ、Ａｌａ、ＣｙｓＴｈｒ
ＴｈｒＳｅｒＳｅｒ
ＴｒｐＴｙｒ、ＰｈｅＴｙｒ
ＴｙｒＴｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、ＳｅｒＰｈｅ
ＶａｌＩｌｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ａｌａ、ノルロイシンＬｅｕ
【０１９１】
本明細書で使用する場合、「電荷アミノ酸」または「電荷残基」という用語は、生理学的ｐＨで水溶液中の負電荷（すなわち、脱プロトン化）または正電荷（すなわち、プロトン化）の側鎖を含むアミノ酸を指す。例えば、負電荷アミノ酸には、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、およびホモグルタミン酸が含まれるが一方、正電荷アミノ酸には、アルギニン、リジン、およびヒスチジンが含まれる。電荷アミノ酸には、２０個のコードされたアミノ酸の中の電荷アミノ酸、ならびに非定型または非天然型または非コード化アミノ酸が含まれる。
【０１９２】
本明細書で使用される場合、「酸性アミノ酸」という用語は、例えば、カルボン酸またはスルホン酸基を含む、（アミノ酸のカルボン酸以外の）第２の酸性部分を含むアミノ酸を意味する。
【０１９３】
本明細書で使用される場合、「アシル化アミノ酸」という用語は、それが産生される手段にかかわらず（例えば、ペプチドへアミノ酸を組み込む前のアシル化、またはペプチドへの組み込み後のアシル化）、天然型アミノ酸に対して非天然型であるアシル基を含むアミノ酸を指す。
【０１９４】
本明細書で使用される場合、「アルキル化アミノ酸」という用語は、それが産生される手段にかかわらず、天然型アミノ酸に対して非天然型であるアルキル基を含むアミノ酸を指す。したがって、本開示のアシル化アミノ酸およびアルキル化アミノ酸は、非コード化アミノ酸である。
【０１９５】
様々な実施形態では、本明細書に記載のペプチドは、本明細書に記載の特徴のうちのいずれかを実現する修飾またはそのバリアント形態を含め、凝集阻害または抗アミロイド活性として特徴付けることができる少なくとも１つの生物学的活性を有する。例えば、いくつかの変形において、ペプチドは、タウタンパク質の凝集を阻害し、かつ／またはタウ原線維の形成もしくは播種を阻害する。いくつかの変形において、ペプチドは、配列ＶＱＩＩＮＫ（配列番号２２０）を含むペプチドの凝集を阻害する。
【０１９６】
いくつかの実施形態では、阻害活性は、例えば、以下に記載のアッセイにおけるＩＣ５０またはＥＣ５０濃度で、定量的方法で特徴付けることができる。例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に記載のペプチドは、以下に記載のアッセイにおいて、１００未満、または７５未満、または５０未満、または４５未満、または４０未満、または３５未満、または３０未満、または２５未満、または２０未満、１５未満、または１０未満、または９未満、または８未満、または７未満、または６未満、または５未満、または４未満、または３未満、２未満、または１未満のＩＣ５０濃度（μＭ単位で）を有する。いくつかの変形では、ペプチドは、以下に記載のアッセイにおいて、０．０１〜１０、または０．０５〜１０、または０．１〜１０、または０．５〜１０の範囲のＩＣ５０濃度（μＭ単位で）を有する。
【０１９７】
当業者は、本明細書に示されるペプチドの好適なバリアントを決定することができるであろう。ある特定の実施形態では、当業者は、活性に重要であると考えられない領域を標的とすることによって、活性を破壊することなく変更され得る分子の好適な領域を特定し得る。他の実施形態では、当業者は、同様のペプチド間で保存されている分子の残基および部分を特定することができる。さらなる実施形態では、生物学的活性または構造に重要であり得る領域でさえ、生物学的活性を破壊することなく、またはペプチド構造に悪影響を与えることなく、保存的アミノ酸置換を受け得る。
【０１９８】
さらに、当業者は、活性または構造に重要な同様のペプチドで残基を特定する構造−機能研究を再検討することができる。そのような比較を考慮して、当業者は、類似のペプチドの活性または構造に重要なアミノ酸残基に対応するペプチドのアミノ酸残基の重要性を予測することができる。当業者は、そのような予測される重要なアミノ酸残基の化学的に同様のアミノ酸置換を選択してもよい。
【０１９９】
当業者はまた、類似のペプチドの三次元構造およびその構造に関するアミノ酸配列を分析することができる。そのような情報を考慮して、当業者は、その三次元構造に関してペプチドのアミノ酸残基のアラインメントを予測し得る。ある特定の実施形態では、当業者は、ペプチドの表面上にあると予測されるアミノ酸残基に、ラジカル変化を起こさないことを選択してもよく、これは、そのような残基が他の分子との重要な相互作用に関与し得るためである。さらに、当業者は、所望の各アミノ酸残基において単一のアミノ酸置換を含む試験バリアントを生成し得る。次いで、以下の実施例に記載されるもののような活性アッセイまたは当業者に既知の代替アッセイを使用して、バリアントをスクリーニングすることができる。そのようなバリアントは、好適なバリアントに関する情報を収集するために使用され得る。例えば、特定のアミノ酸残基への変化が破壊、望ましくない減少、または好適でない活性をもたらしたことを発見した場合、そのような変化を伴うバリアントは避けることができる。言い換えれば、そのような日常的な実験から収集された情報に基づいて、当業者は、単独でまたは他の変異と組み合わせてのいずれかでさらなる置換を回避するべきアミノ酸を容易に決定することができる。
【０２００】
本明細書に記載のペプチドのサイズ変異は、具体的に企図される。例示的なペプチドは、６〜５０個のアミノ酸から構成される。６〜５０個のアミノ酸（例えば、７〜５０個のアミノ酸、８〜５０個のアミノ酸、９〜５０個のアミノ酸、６〜４９個のアミノ酸、６〜４８個のアミノ酸、７〜４９個のアミノ酸など）の全ての整数の部分範囲は、本発明の属として具体的に企図され、全ての整数値（例えば、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０個のアミノ酸）は、本発明の種として企図される。本明細書に記載の他の変異のようなサイズ変異をスクリーニングして、凝集阻害活性または抗アミロイド活性などの所望の活性を保持するバリアントを検証／選択することができる。
【０２０１】
本明細書で使用される「誘導体」という用語は、１つ以上の側鎖がペプチドに共有結合されている化学的に修飾されたペプチドを意味する。「側鎖」という用語はまた、「置換基」と称されてもよい。したがって、そのような側鎖を含む誘導体は、「誘導体化」ペプチドまたは「誘導体化」類似体となる。この用語はまた、遊離カルボキシ基のエステルおよびアミド、遊離アミノ基のアシルおよびアルキル誘導体、リン酸エステルおよび遊離ヒドロキシ基のエーテルなど、通常ペプチド分子の一部ではない１つ以上の化学部分を含むペプチドを指してもよい。そのような修飾は、ペプチドの標的化されたアミノ酸残基を、選択された側鎖または末端残基と反応することができる有機誘導体化剤と反応させることによって分子に導入され得る。好ましい化学誘導体には、リン酸化、Ｃ末端アミド化、またはＮ末端アセチル化されているペプチドが含まれる。この用語はまた、当該技術分野で既知の手段によって、残基またはＮもしくはＣ末端基上の側鎖として生じる官能基から調製することができ、かつそれらが薬学的に許容される限り、すなわち、それらがペプチドの活性を破壊せず、それを含む組成物に有毒性を付与せず、その抗原特性に悪影響を与えない限り、本発明に含まれる、本明細書で使用される本発明のペプチドを指し得る。これらの誘導体は、例えば、カルボキシル基の脂肪族エステル、アンモニアまたは一級もしくは二級アミンとの反応により産生されるカルボキシル基のアミド、アシル部分との反応により形成されるアミノ酸残基（例えば、アルカノイルまたは炭素環式アロイル基）の遊離アミノ基のＮ−アシル誘導体、またはアシル部分との反応により形成される遊離ヒドロキシル基（例えば、セリルまたはトレオニル残基のもの）のＯ−アシル誘導体を含む。
【０２０２】
修飾されたアミノ酸残基は、アミノ酸残基の官能性が保存されている限り、または官能性が変化した場合（例えば、置換フェニルアラニンによるチロシンの置換）には修飾が修飾された残基を含むペプチドの活性を損なわない限り、任意の基または結合が欠失、付加、または異なる基もしくは結合による置換によって修飾されたアミノ酸残基である。
【０２０３】
本明細書で使用される「置換基」または「側鎖」という用語は、特にアミノ酸残基の任意の利用可能な位置に、アミノ酸残基に、結合、特に共有結合された任意の好適な部分を意味する。典型的には、好適な部分は化学部分である。
【０２０４】
「脂肪酸」という用語は、４〜２８個の炭素原子を有する脂肪族モノカルボン酸を指し、好ましくは非分岐状であり、飽和または不飽和であってもよい。本発明では、１０〜１６個のアミノ酸を含む脂肪酸が好ましい。
【０２０５】
「脂肪族二酸」という用語は、上に定義されるが、オメガ位置で追加のカルボン酸基を有する脂肪酸を指す。したがって、脂肪二酸はジカルボン酸である。本発明では、１４〜２０個のアミノ酸を含む脂肪酸が好ましい。
【０２０６】
「配列同一性％」という用語は、「同一性％」という用語と交換可能に本明細書で使用され、配列アラインメントプログラムを使用して整列された場合、２つ以上のペプチド配列間のアミノ酸配列同一性のレベル、または２つ以上のヌクレオチド配列間のヌクレオチド配列同一性のレベルを指す。例えば、本明細書で使用される場合、８０％の同一性とは、定義されたアルゴリズムによって決定される８０％の配列同一性と同じことを意味し、所定の配列が別の配列の別の長さと少なくとも８０％同一であることを意味する。
【０２０７】
「配列相同性％」という用語は、「相同性％」という用語と交換可能に本明細書で使用され、配列アラインメントプログラムを使用して整列された場合、２つ以上のペプチド配列間のアミノ酸配列相同性のレベル、または２つ以上のヌクレオチド配列間のヌクレオチド配列相同性のレベルを指す。例えば、本明細書で使用される場合、８０％の相同性とは、定義されたアルゴリズムによって決定される８０％の配列相同性と同じことを意味し、したがって、所定の配列の相同体が所定の配列の長さにわたって８０％を超える配列相同性を有することを意味する。
【０２０８】
２つの配列間の同一性を決定するために使用され得る例示的なコンピュータプログラムには、これらに限定されないが、ＢＬＡＳＴプログラム一式、例えば、ＮＣＢＩウェブサイトでインターネット上で公開されている、ＢＬＡＳＴＮ、ＢＬＡＳＴＸ、ＴＢＬＡＳＴＸ、ＢＬＡＳＴＰ、およびＴＢＬＡＳＴＮが挙げられる。Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−１０（デフォルト設定、すなわち、パラメータｗ＝４、ｔ＝１７への特別な参照を伴う）およびＡｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，２５：３３８９−３４０２もまた参照されたい。ＧｅｎＢａｎｋ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓおよびその他の公開データベースのアミノ酸配列に対して、所定のアミノ酸配列を評価する場合、典型的には、配列検索はＢＬＡＳＴＰプログラムを使用して実施される。ＢＬＡＳＴＸプログラムは、全てのリーディングフレームで翻訳されている核酸配列を、ＧｅｎＢａｎｋ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓおよび他の公開データベースのアミノ酸配列に対して検索するのに好ましい。ＢＬＡＳＴＰおよびＢＬＡＳＴＸの両方は、１１．０のオープンギャップペナルティおよび１．０の伸長ギャップペナルティのデフォルトパラメータを使用して実行され、ＢＬＯＳＵＭ−６２マトリックス（Ｉｄ）を利用する。配列同一性パーセントの計算に加えて、ＢＬＡＳＴアルゴリズムはまた、２つの配列間の類似性の統計分析も実行する（例えば、Ｋａｒｌｉｎ＆Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ´ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：５８７３−５７８７（１９９３）を参照されたい）。ＢＬＡＳＴアルゴリズムによって提供される類似性の尺度の１つは、最小合計確率（Ｐ（Ｎ））であり、これは、２つのヌクレオチドまたはアミノ酸配列間の一致が偶然に生じる確率の表示を提供する。
【０２０９】
タンパク質に関する「立体構造」という用語は、空間中のタンパク質の構造的配置（折り畳み）を対象とする。
【０２１０】
「薬学的組成物」は、動物またはヒトにおける薬学的使用に好適な組成物を指す。薬学的組成物は、薬理学的および／または治療有効量の活性剤と薬学的に許容される担体とを含む。本発明の薬学的組成物およびそれらの調製方法は、当業者には容易に明らかであろう。そのような組成物およびそれらの調製方法は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ´ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９５）に見出され得る。薬学的組成物は、一般に、減菌で、実質的に等張であり、米国食品医薬品局の全てのＧＭＰ規制に完全に準拠して製剤化される。この用語はまた、ヒトを含む動物において使用するために、米国薬局方に列挙されている薬剤のうちのいずれかを包含する。好適な薬学的担体および製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ´ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２１ｓｔ  Ｅｄ．２００５，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ，Ｅａｓｔｏｎに記載されている。
【０２１１】
「薬学的に許容される担体」または「薬学的に許容される賦形剤」は、動物またはヒトに投与した場合に、有害、アレルギー、または他の不都合な反応を生じない組成物を指す。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」または「薬学的に許容される賦形剤」は、生理学的に適合可能な、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。薬学的に許容される賦形剤のいくつかの例は、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなど、ならびにそれらの組み合わせである。多くの場合、賦形剤は、等張剤、例えば、糖、マンニトールなどの多価アルコール、ソルビトール、または塩化ナトリウムを組成物中に含む。薬学的に許容される賦形剤の追加の例は、ペプチドの貯蔵寿命または有効性を高める、湿潤剤、または湿潤剤もしくは乳化剤、防腐剤もしくは緩衝剤などの少量の補助物質である。
【０２１２】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、親ペプチドの生物学的活性を保持するペプチドの塩を指し、それらは、生物学的にまたは他の点で望ましくない。本明細書に開示される化合物の多くは、アミノおよび／もしくはカルボキシル基またはそれらに類似した基の存在により、酸および／または塩基塩を形成することができる。薬学的に許容される塩基付加塩は、無機および有機塩基から調製され得る。無機塩基に由来する塩には、ほんの一例として、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、およびマグネシウムの塩が含まれる。有機塩基に由来する塩には、これらに限定されないが、一級、二級、および三級アミンの塩が含まれる。
【０２１３】
本明細書で使用される場合、開示され請求された方法に従って対象に提供される場合の「治療有効量」のペプチドは、そのような凝集の治療などの生物学的活性に影響を与える。
【０２１４】
本明細書で使用される場合、「凝集」とは、得られる構造が、規則的または不規則な繰り返しまたは非繰り返し、安定もしくは不安定なまたは秩序あるまたは乱れた天然状態であるかにかかわらず、ペプチド部分の収集および会合を意味する。このような会合は、分子間相互作用、イオン結合、疎水性相互作用、水素結合、ファンデルワールス力、すなわち、「ロンドン分散力」、および双極子間結合、または２つ以上のペプチドもしくはペプチド領域の集合または会合を一緒にもたらし得る任意の力もしくは物質により生じ得る。本明細書で使用される場合、「凝集」は、例えば、細線維化、または原線維の形成を包含する。「凝集」はまた、立体ジッパーの形成も包含する。本明細書で使用される場合、「標的タンパク質」または「標的ポリペプチド」とは、原線維、例えば、アミロイド原線維を形成する傾向がある任意のペプチド構造を意味する。
【０２１５】
本明細書で使用される場合、「立体ジッパー配列」または「ジッパー形成配列とも称される「立体ジッパー領域」とは、他のポリペプチド上の同様の配列と相互作用して、例えば、原線維などの立体ジッパー構造を形成する、原線維形成ポリペプチドなどの凝集ポリペプチド中のアミノ酸残基の配列を意味する。一例では、立体ジッパー領域は、しばしば、隣接するβシート上の同様のアミノ酸配列とともに、界面にわたってその隣接するβシートと嵌合することができるβシート内のアミノ酸配列を含み得る。そのような嵌合は、例えば、アミノ酸残基の側鎖を通して生じ得る。
【０２１６】
「治療する」、「治療すること」、および「治療」参照という用語は、有益なまたは所望の臨床結果を得るためのアプローチを指す。さらに、「治療」への本明細書における言及には、治癒的、緩和的、および予防的治療への言及が含まれる。「治療する」という用語は、病理（疾患、障害、または状態）の発症を抑制、予防、もしくは停止すること、および／または病理の低減、寛解、または退行を引き起こすことを指す。当業者は、様々な方法論およびアッセイを使用して病理の発症を評価することができ、同様に、様々な方法論およびアッセイを使用して病理の低減、寛解、または退行を評価し得ることを理解するであろう。
【０２１７】
明確にするために、「指示」という用語は、その一般に理解される定義に加えて、規制当局によって承認された標識の情報を含むことを意味する。
【０２１８】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ｏｒ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が別段に明確に示されない限り、複数の指示対象を含む。本明細書に記載の本開示の態様および変形は、態様および変形「からなる」および／または「から本質的なる」を含むことが理解される。
【０２１９】
本明細書で使用される場合、「からなる」は、特許請求項の要素に指定されていない任意の要素、ステップ、または要因を除外する。「から本質的になる」とは、本明細書に記載されるように、アミノ酸配列が、列挙された配列番号の配列に対して約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５％変化し、生物学的活性を依然として保持し得ることを意味する。本明細書で使用される場合、「から本質的になる」は、特許請求項の基本的および新規の特性に実質的に影響を与えない材料またはステップを除外しない。
【０２２０】
本明細書および続く特許請求の範囲を通して、文脈上他の意味に解釈する必要のない限り、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という用語、ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」等の変形は、記載の整数もしくはステップ、または整数もしくはステップの群を含むが、他のいずれの整数もしくはステップ、または整数もしくはステップの群を除外しないことを意味するものと理解されよう。本明細書で使用される場合、「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、「含有している（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」または「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語で、または時に本明細書で使用される場合、「有する」という用語で置換され得る。
【０２２１】
別段に示されない限り、一連の要素に先行する「少なくとも」という用語は、一連の全ての要素を指すものと理解されるべきである。当業者であれば、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの同等物を認識するか、または日常的な実験のみを使用して確認することができるであろう。そのような同等物は、本発明によって包含されることが意図される。
【０２２２】
本明細書のいかなる場所においても使用される場合、「および／または」という用語は、「および」、「または」、および「当該用語により接続されている要素の全てまたは任意の他の組合せ」の意味を含む。
【０２２３】
本明細書で使用される「約」または「およそ」という用語は、所定の値または範囲の±２０％以内、好ましくは±１５％以内、より好ましくは±１０％以内、および最も好ましくは±５％以内を意味するが、より広い定義のみに任意の値または値の範囲を指定することを意図しない。「約」という用語が先行する各値または値の範囲はまた、述べられた絶対値または値の範囲の実施形態を包含することを意図する。
【０２２４】
本明細書で使用される場合、「予防する」という用語は、疾患の危険にあり得る対象において発生から疾患、障害、または状態を保つが、疾患を有するとはまだ診断されていないことを指す。
【０２２５】
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、病理に苦しむ任意の年齢の哺乳動物、好ましくはヒトを含む。好ましくは、この用語は、病理を発症する危険性がある個体を包含する。
【０２２６】
本発明の薬学的組成物は、典型的には、非経口投与に好適である。本明細書で使用される場合、薬学的組成物の「非経口投与」は、対象の組織の物理的破壊および組織の破壊による薬学的組成物の投与によって特徴付けられる投与の任意の経路を含み、したがって一般的に血流、筋肉、または内蔵への直接投与をもたらす。したがって、非経口投与には、これらに限定されないが、組成物の注射による、外科的切開による組成物の適用による、組織貫通非外科的創傷による組成物の適用によるなどの、薬学的組成物の投与が含まれる。特に、非経口投与には、これらに限定されないが、皮下注射、腹腔内注射、筋肉内注射、胸骨内注射、静脈内注射、動脈内注射、髄腔内注射、脳室内注射、尿道内注射、頭蓋内注射、滑液嚢内注射、もしくは点滴、または腎臓透析注入技術を含むことが企図される。
【０２２７】
様々な実施形態では、ペプチドは、経口で、または静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射、腹腔内注射、経皮注射、動脈内注射、胸骨内注射、髄腔内注射、脳室内注射、尿道内注射、頭蓋内注射、滑液嚢内注射を介して、または点滴を介して対象に全身的に投与することができる薬学的組成物を形成するために、薬学的に許容される担体と混合される。薬学的組成物は、好ましくは、自然界には見られない少なくとも１つの構成成分を含む。
【０２２８】
非経口投与に好適な薬学的組成物の製剤は、典型的には、一般に、滅菌水または滅菌等張生理食塩水などの薬学的に許容される担体と組み合わせた活性成分を含む。そのような製剤は、ボーラス投与または連続投与に好適な形態で調製、包装、または販売され得る。注射可能な製剤は、アンプルまたは防腐剤を含む複数回投与容器などの単位剤形で調製、包装、または販売され得る。非経口投与用の製剤には、これらに限定されないが、懸濁液、溶液、油性または水性ビヒクル中の乳濁液、ペーストなどが含まれる。そのような製剤は、これらに限定されないが、懸濁剤、安定化剤、または分散剤を含む１つ以上の追加の成分をさらに含んでもよい。非経口投与用の製剤の一実施形態では、活性成分は、再構成された組成物の非経口投与前に好適なビヒクル（例えば、減菌の発熱性物質を含まない水）で再構成するための乾燥（すなわち、粉末または顆粒）形態で提供される。非経口製剤にはまた、塩、炭水化物、および緩衝剤などの担体を含み得る水溶液が含まれるが（好ましくは３〜９のｐＨ）、いくつかの用途では、それらは、滅菌非水溶液として、または減菌の発熱性物質を含まない水などの好適なビヒクルと組み合わせて使用される乾燥形態としてより好適に製剤化され得る。例示的な非経口投与形態には、滅菌水溶液中の溶液または懸濁液、例えば、水性プロピレングリコールまたはデキストロース溶液が含まれる。そのような剤形は、所望の場合、好適に緩衝化することができる。有用な他の非経口投与可能な製剤には、微結晶形態の、またはリポソーム製剤の活性成分を含むものが含まれる。非経口投与用の製剤は、即時および／または調節放出となるように製剤化され得る。放出調節製剤は、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム放出を含む。
【０２２９】
経皮投与は、例えば、イオン泳動パッチなどのパッチから、または経粘膜経路を介する、例えば、頬の、無針注射による、さらなる選択である。本発明は、経皮送達または局所送達のための組成物および方法を含み、適用点で局所的に作用するか、または体の血液循環に入ると全身的に作用する。これらのシステムでは、軟膏などの形態の物質または薬物の直接局所適用などの技術によって、または薬物（または他の物質）を保持するリザーバーなどとのパッチの接着によって送達を達成することができ、時間制御された様式で皮膚にそれを放出する。局所投与のために、本発明の組成物は、乳濁液、ローション、ゲル、クリーム、ゼリー、溶液、懸濁液、軟膏、および経皮パッチの形態であり得る。いくつかの局所送達用組成物は、ポリエニルホスファチジルコリン（本明細書では「ＰＰＣ」と省略される）を含み得る。いくつかの場合では、ＰＰＣを使用して表皮浸透を高めることができる。「ポリエニルホスファチジルコリン」という用語は、本明細書で使用される場合、２つの脂肪酸部分を有する任意のホスファチジルコリンを意味し、２つの脂肪酸のうちの少なくとも１つは、リノール酸などのその構造において少なくとも２つの二重結合を有する不飽和脂肪酸である。そのような局所製剤は、１つ以上の乳化剤、１つ以上の界面活性剤、１つ以上のポリグリコール、１つ以上のレシチン、１つ以上の脂肪酸エステル、または１つ以上の経皮浸透促進剤を含み得る。調製物は、ある特定の実施形態において対象の血液と等張であり得る、減菌の水性または非水性の溶液、懸濁液、および乳濁液を含むことができる。非水性溶媒の例は、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、ゴマ油、ココナッツ油、落花生油、ピーナッツ油、鉱油、オレイン酸エチルなどの有機エステル、または合成モノまたはジ−グリセリドを含む固定油である。水性溶媒には、生理食塩水および緩衝媒体を含む、水、アルコール／水溶液、乳濁液または懸濁液が含まれる。非経口ビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、１，３−ブタンジオール、リンゲルデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸加リンゲル液、または固定油が含まれる。静脈内ビヒクルには、液体および栄養補給剤、電解質補給剤（リンゲルデキストロースに基づくものなど）などが含まれる。例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、および不活性ガスなどの防腐剤および他の添加物もまた存在し得る。
【０２３０】
例えば、一態様では、注射可能な減菌溶液は、必要な場合、濾過滅菌が後に続く、上記に列挙した成分の１つまたは組み合わせとともに適切な溶媒中に必要な量のペプチドを組み込むことによって調製することができる。一般に、分散剤は、活性化合物を、塩基性分散媒体および上に列挙されるものからの必要な他の成分を含む滅菌ビヒクルに組み込むことによって調製される。注射可能な滅菌溶液の調製のための滅菌粉末剤の場合、真空乾燥およびフリーズドライなどの調製方法は、その以前に滅菌濾過された溶液からの任意の追加の所望の成分に加えて、活性成分の粉末剤を産生する。溶液の適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散の場合には必要な粒径の維持によって、かつ界面活性剤の使用によって維持され得る。注射可能な組成物の長期吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチンを組成物に含むことによりほぼもたらされ得る。様々な実施形態では、注射可能な組成物は、市販の使い捨ての注射可能なデバイスを使用して投与される。
【０２３１】
非経口製剤は、アンプルおよびバイアルなどの単位用量または複数回用量密封容器で提供することができ、無菌液体賦形剤、例えば、使用直前の注射用の水の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存することができる。即時注射溶液および懸濁液は、当該技術分野で既知の種類の滅菌粉末剤、顆粒、および錠剤から調製することができる。注射可能な製剤は、本発明によるものである。注射可能な組成物のための有効な薬学的担体の要件は、当業者に周知である（例えば、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，Ｂａｎｋｅｒ  ａｎｄ  Ｃｈａｌｍｅｒｓ，ｅｄｓ．，ｐａｇｅｓ  ２３８−２５０（１９８２）、およびＡＳＨＰ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｎ  Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ  Ｄｒｕｇｓ，Ｔｏｉｓｓｅｌ，４ｔｈ  ｅｄ．，ｐａｇｅｓ  ６２２−６３０（１９８６）を参照されたい）。
【０２３２】
さらに、本開示のペプチドは、乳化塩基または水溶性塩基などの様々な塩基と混合することによって、直腸投与用の坐剤にすることができる。膣内投与に好適な製剤は、活性成分に加えて、当該技術分野で適切であることが既知である担体などを含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、またはスプレー製剤として提供することができる。
【０２３３】
上述の薬学的組成物に加えて、本開示のペプチドは、シクロデキストリン包接錯体、またはリポソームなどの封入錯体として製剤化することができることが当業者によって理解されるであろう。
【０２３４】
本発明のペプチドは、好適な噴射剤の使用ありまたはなしで、加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザー（好ましくは電気流体力学を使用して細かいミストを産生するアトマイザー）、または噴霧器からのエアゾールスプレーとして、または点鼻剤として、典型的には、乾燥粉末吸入器から乾燥粉末の形態で（例えば、好適な薬学的に許容される担体と混合して、単独で、混合物として、または混合成分粒子としてのいずれか）、鼻腔内にまたは吸入によって投与することができる。加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザー、またはネブライザーは一般に、例えば、溶媒としての活性噴射剤（複数可）の分散、可溶化、または放出の延長に好適な薬剤を含む、本発明のペプチドの溶液または懸濁液を含む。乾燥粉末剤または懸濁液製剤で使用する前に、製剤は一般に、吸入による送達に好適なサイズ（典型的には、５ミクロン未満）に微粉化される。これは、スパイラルジェットミル、流動層ジェットミル、ナノ粒子を形成するための超臨界流体処理、高圧均質化、または噴霧乾燥などの任意の適切な粉砕方法によって達成され得る。吸入器または吹入器で使用するためのカプセル、ブリスター、およびカートリッジは、本発明のペプチド、好適な粉末基剤、および性能調整剤の粉末混合物を含むように製剤化され得る。メントールおよびレボメントールなどの好適な香味料、またはサッカリンまたはサッカリンナトリウムなどの甘味料を、吸入／鼻腔内投与用の本発明の製剤に添加してもよい。吸入／鼻腔内投与用の製剤は、即時および／または調節放出となるように製剤化され得る。放出調節製剤は、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出、およびプログラム放出を含む。乾燥粉末吸入器およびエアロゾルの場合、投与量単位は、計量された量を送達するバルブによって決定される。本発明によるユニットは、典型的には、本発明のペプチドの計量された用量または「パフ」を投与するように配置される。全体の１日用量は、典型的には、単回用量、またはより一般的には、１日を通して分割用量で投与される。
【０２３５】
一実施形態では、ペプチドは、遺伝子治療法を介してそれらのヌクレオチドの等価物として投与することができる。そのような遺伝子治療方法は当該技術分野において既知である。例えば、Ｃｏｍｂｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  １３８２：３３９−３６６（２０１６）を参照されたい。したがって、例示的な態様では、ペプチドは、本明細書に記載のペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を投与することにより投与される。そのような核酸は、本発明によりさらに提供される。例示的な例において、核酸は、配列番号１〜８８および１０８〜２１７から選択されるアミノ酸配列を含むペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む。本明細書で使用される「核酸」とは、「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」、および「核酸分子」を含み、一般に、ＤＮＡまたはＲＮＡのポリマーを意味し、それは、一本鎖または二本鎖、天然源から合成または得られることができ（例えば、単離および／または精製された）、天然、非天然、または改変ヌクレオチドを含むことができ、未修飾オリゴヌクレオチドのヌクレオチド間に見られるホスホジエステルの代わりに、ホスホロアミデート結合またはホスホロチオエート結合などの天然、非天然、または改変ヌクレオチド間結合を含むことができる。一般に、核酸は、いかなる挿入、欠失、逆位、および／または置換も含まないことが好ましい。しかしながら、本明細書で論じられるように、核酸が１つ以上の挿入、欠失、逆位、および／または置換を含むことがいくつかの場合において好適であり得る。
【０２３６】
ある特定の態様では、本発明の核酸は、組換え体である。本明細書で使用される場合、「組換え」という用語は、（ｉ）天然または合成の核酸セグメントを生細胞内で複製可能な核酸分子に結合することにより生細胞外で構築される分子、または（ｉｉ）上記の（ｉ）記載のものの複製から得られる分子を指す。本明細書における目的のために、複製は、インビトロ複製またはインビボ複製であり得る。
【０２３７】
例示的な態様では、核酸は、化学合成および／または当該技術分野で既知の手順を使用する酵素的ライゲーション反応に基づいて構築されている。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）およびＡｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）を参照されたい。例えば、核酸は、分子の生物学的安定性を高めるために、またはハイブリダイゼーション時に形成される二重鎖の物理的安定性を高めるために設計された天然型ヌクレオチドまたは修飾ヌクレオチド（例えば、ホスホロチオエート誘導体およびアクリジン置換ヌクレオチド）を使用して、化学的に合成することができる。核酸の生成に使用され得る修飾ヌクレオチドの例には、これらに限定されないが、５−フルオロウラシル、５−ブロモウラシル、５−クロロウラシル、５−ヨードウラシル、ヒポキサンチン、キサンチン、４−アセチルシトシン、５−（カルボキシヒドロキシメチル）ウラシル、５−カルボキシメチルアミノメチル−２−チオウリドム、５−カルボキシメチルアミノメチルウラシル、ジヒドロウラシル、ベータ−Ｄ−ガラクトシルケオシン、イノシン、Ｎ６−イソペンテニルアデニン、１−メチルグアニン、１−メチルイノシン、２，２−ジメチルグアニン、２−メチルアデニン、２−メチルグアニン、３−メチルシトシン、５−メチルシトシン、Ｎ−置換アデニン、７−メチルグアニン、５−メチルアミノメチルウラシル、５−メトキシアミノメチル−２−チオウラシル、ベータ−Ｄ−マンノシルクレオシン、５´−メトキシカルボキシメチルウラシル、５−メトキシウラシル、２−メチルチオ−Ｎ６−イソペンテニルアデニン、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ）、ウィブトキソシン、プソイドウラチル、ケオシン、２−チオシトシン、５−メチル−２−チオウラシル、２−チオウラシル、４−チオウラシル、５−メチルウラシル、ウラシル−５−オキシ酢酸メチルエステル、３−（３−アミノ−３−Ｎ−２−カルボキシプロピル）ウラシル、および２，６−ジアミノプリンが挙げられる。
【０２３８】
例示的な態様では、核酸は、少なくとも１つの非天然型ヌクレオチドを含む。例示的な態様では、核酸は、リボースの２´位におけるヒドロキシルの、Ｏ−アルキル基、例えば、−Ｏ−ＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３での置換を含む。例示的な態様では、核酸は、修飾リボヌクレオチドを含み、リボースの２´ヒドロキシルは、メトキシ（ＯＭｅ）またはメトキシ−エチル（ＭＯＥ）基に修飾されている。例示的な態様では、核酸は、修飾リボヌクレオチドを含み、リボースの２´ヒドロキシルは、アリル、アミノ、アジド、ハロ、チオ、Ｏ−アリル、Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０置換アルキル、Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０置換アルコキシ、ＯＣＦ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２−ＯＮ（Ｒ１）（Ｒ２）、またはＯ（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ１）（Ｒ２）で置き換えられ、Ｒ１およびＲ２の各々は独立して、Ｈ、アミノ保護基、または置換もしくは非置換Ｃ１−Ｃ１０アルキルからなる群から選択される。例示的な態様では、核酸は、修飾リボヌクレオチドを含み、リボースの２´ヒドロキシルは、２´Ｆ、ＳＨ、ＣＮ、ＯＣＮ、ＣＦ３、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ（Ｒ１）アルキル、Ｏ−アルケニル、Ｓ−アルケニル、またはＮ（Ｒ１）−アルケニル、Ｏ−アルキニル、Ｓ−アルキニル、Ｎ（Ｒ１）−アルキニル、Ｏ−アルキレニル、Ｏ−アルキル、アルクニル、アルカリール、アラルキル、Ｏ−アルカリール、またはＯ−アラルキルで置き換えられる。例示的な態様では、核酸は、リボースの２´位における水素の、ハロ、例えば、Ｆでの置換を含む。例示的な態様では、核酸は、フッ素誘導体核酸を含む。
【０２３９】
例示的な態様では、核酸は、置換された環を含む。例示的な態様では、核酸は、ヘキシトール核酸であるかまたはそれを含む。例示的な態様では、核酸は、二環式または三環式糖部分を有するヌクレオチドであるかまたはそれを含む。例示的な態様では、二環式糖部分は、４´および２´フラノース環原子間の架橋を含む。
【０２４０】
例示的な態様では、核酸は、少なくとも１つの非天然型ヌクレオチド間結合を含む。例示的な態様では、核酸は、リン酸基を置き換える化学基を含むことにより、天然型ヌクレオチドとは異なる非天然型ヌクレオチドを含む。例示的な態様では、核酸は、メチルホスホネートオリゴヌクレオチドを含むか、またはメチルホスホネートオリゴヌクレオチドであり、これは、非架橋酸素原子、例えば、リン酸のアルファ酸素がメチル基で置き換えられている非電荷オリゴマーである。例示的な態様では、核酸は、ホスホロチオエートを含むか、またはホスホロチオエートであり、非架橋酸素原子のうちの少なくとも１つ、例えば、リン酸のアルファ酸素は、硫黄で置き換えられている。例示的な態様では、核酸は、ボラノホスフェートオリゴヌクレオチドを含むか、またはボラノホスフェートオリゴヌクレオチドであり、非架橋酸素原子のうちの少なくとも１つ、例えば、リン酸のアルファ酸素は、−ＢＨ３によって置き換えられている。
【０２４１】
例示的な態様では、核酸は、修飾された骨格を含む。例示的な態様では、核酸は、核酸塩基がメチレンカルボニルリンカーを介して結合されている繰り返しＮ−（２−アミノエチル）グリシン単位を含む非電荷柔軟性ポリアミド骨格を含むペプチド核酸（ＰＮＡ）であるか、またはそれを含む。例示的な態様では、核酸は骨格置換を含む。例示的な態様では、核酸は、アミン基によってリボース上の３´位における酸素の置換から生じるＮ３´→Ｐ５´ホスホルアミデートであるか、またはそれを含む。そのような核酸類似体は、Ｄｉａｓ  ａｎｄ  Ｓｔｅｉｎ，Ｍｏｌｅｃ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ  １：３４７−３５５（２００２）にさらに記載されている。例示的な態様では、核酸は、立体構造ロックを含むヌクレオチドを含む。例示的な態様では、アンチセンス核酸類似体は、ロックされた核酸であるか、またはそれを含む。
【０２４２】
本明細書で提供される核酸は、いくつかの態様では、ベクターに組み込まれる。本明細書で使用される場合、「ベクター」または「発現ベクター」は、輸送、形質導入、またはそうでなければ、本発明の核酸などの異種分子の担体として作用する任意の分子または部分である。これに関して、本発明は、本明細書に記載のペプチドのうちのいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸のうちのいずれかを含むベクターを提供する。例示的な態様では、構築物が、ｍＲＮＡ、タンパク質、ポリペプチド、またはペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む場合、ベクターは、宿主細胞によるｍＲＮＡ、タンパク質、ポリペプチド、またはペプチドの発現を可能にする遺伝子修飾されたオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチド構築物であり、ベクターは、細胞内で発現されるｍＲＮＡ、タンパク質、ポリペプチド、またはペプチドを有するのに十分な条件下で細胞と接触する。細胞内でのｍＲＮＡ、タンパク質、ポリペプチド、またはペプチドの発現に十分な条件は、当該技術分野で既知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，２００１を参照されたい。本発明のベクターは、例示的な例では、全体として天然型ではない。本発明の組換え発現ベクターは、これらに限定されないが、ＤＮＡおよびＲＮＡを含む任意の種類のヌクレオチドを含むことができ、これは、一本鎖または二本鎖、天然源から合成または部分的に得られることができ、天然、非天然、または改変されたヌクレオチドを含み得る。組換え発現ベクターは、天然型もしくは非天然型ヌクレオチド間結合、または両方の種類の結合を含むことができる。好ましくは、改変されたヌクレオチドまたは非天然型ヌクレオチド間結合は、ベクターの転写または複製を妨げない。
【０２４３】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチド（例えば、核酸）は、プラスミドまたはベクター、任意に、ウイルスベクター内にコードされている。好適なベクターには、プラスミドおよびウイルスなど、増殖および拡大のために、または発現もしくはその両方のために設計されたものが含まれる。ベクターは、ｐＵＣシリーズ（Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔシリーズ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、ＬａＪｏＩＩａ，ＣＡ）、ｐＥＴシリーズ（Ｎｏｖａｇｅｎ、Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）、ｐＧＥＸシリーズ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）、およびｐＥＸシリーズ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ、Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）からなる群から選択され得る。λＧＴＩＯ、λＧＴ１１、λＺａｐＩＩ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）、λＥＭＢＬ４、およびλＮＭ１１４９などのバクテリオファージベクターも使用することができる。植物発現ベクターの例には、ｐＢＩＯ１、ｐＢＩ１０１．２、ｐＢＩ１０１．３、ｐＢＩ１２１、およびｐＢＩＮ１９（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）が挙げられる。動物発現ベクターの例には、ｐＥＵＫ−Ｃｌ、ｐＭＡＭ、およびｐＭＡＭｎｅｏ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）が挙げられる。好ましくは、ベクターは、ウイルスベクター、例えば、レトロウイルスベクターである。「ウイルスベクター」は、対象のペイロード分子をコードするかまたは含む１つ以上のポリヌクレオチド領域、例えば、導入遺伝子、ポリペプチドまたはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含むベクターである。例示的な態様では、ウイルスベクターは、ワクシニアウイルスベクター、ポックスウイルスベクター、アデノウイルスベクター、または単純ヘルペスウイルスベクターである。
【０２４４】
本発明のベクターは、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，ｓｕｐｒａ，ａｎｄ  Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｍｅｄｉａ，ＰＡ，１９８８に記載の標準的な組換えＤＮＡ技術を用いて調製され得る。円形または直鎖状のベクターの構築物は、原核生物または真核生物の宿主細胞で機能する複製系を含むように調製することができる。複製系は、例えば、ＣｏＩＥ１、２μプラスミド、λ、ＳＶ４０、ウシパピローマウイルスなどから誘導され得る。
【０２４５】
望ましくは、ベクターは、適切な場合、ベクターがＤＮＡベースまたはＲＮＡベースであるかを考慮して、ベクターが導入される宿主の種類（例えば、細菌、真菌、植物、または動物）に対して特異的である、転写および翻訳開始および終止コドンなどの調節配列を含む。
【０２４６】
当業者は、標的細胞が、これらに限定されないが、種特異的、誘導性、組織特異的、または細胞周期特異的であるプロモーターを含む特異的プロモーターを必要とし得ることを認識することができる（Ｐａｒｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．３：１１４５−９（１９９７）、その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。いくつかの態様では、ベクターは、ペプチドをコードするヌクレオチド配列、またはペプチドをコードするヌクレオチド配列に相補的であるかまたはハイブリダイズするヌクレオチド配列に作動可能に結合された天然または規範的プロモーターを含む。プロモーターの選択、例えば、強い、弱い、誘導性、組織特異的、および発達特異的などは、当業者の通常の技術の範囲内である。同様に、ヌクレオチド配列のプロモーターとの組み合わせもまた、当業者の技術の範囲内である。プロモーターは、非ウイルス性プロモーターまたはウイルス性プロモーター、例えば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、ＳＶ４０プロモーター、ＲＳＶプロモーター、ＣＡＧプロモーター、ニワトリβ−アクチン（ＣＢＡ）プロモーター、およびマウス幹細胞ウイルスの長末端繰り返しに見られるプロモーターであり得る。例示的な態様では、プロモーターは、ＣＢｈと称され、Ｇｒａｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  ２２（９）：１１４３−１１５３（２０１１）に記載の、ＣＢＡプロモーターのハイブリッドである。追加のプロモーターは、当該技術分野に記載されている。例えば、ｖｏｎ  Ｊｏｎｑｕｉｅｒｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ８（６）：ｅ６５６４６  （２０１３）、およびＣｏｍｂｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  １３８２：  ３３９−３６６（２０１６）を参照されたい。
【０２４７】
ベクターは、形質転換またはトランスフェクトされた宿主の選択を可能にする１つ以上のマーカー遺伝子を含むことができる。マーカー遺伝子には、殺生物剤耐性、例えば、抗生物質、重金属などに対する耐性、原栄養性を提供するための栄養要求性宿主における相補性などが含まれる。現在開示されている発現ベクターに好適なマーカー遺伝子には、例えば、ネオマイシン／Ｇ４１８耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子、ヒスチジノール耐性遺伝子、テトラサイクリン耐性遺伝子、およびアンピシリン耐性遺伝子が含まれる。いくつかの態様におけるマーカー遺伝子は、例えば、増強されたＧＦＰ（ｅＧＦＰ）などの緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）である。
【０２４８】
本発明のベクターは、いずれかの一過性発現のために、安定な発現のため、またはその両方のために設計され得る。また、構成的発現または誘導性発現のためにベクターを作製することができる。
【０２４９】
例示的な態様では、ベクターは、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）に由来する。ＡＡＶは、組換えＡＡＶウイルスであってもよく、これらに限定されないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ−ＤＪ、およびＡＡＶ−ＤＪ８などのカプシド血清型を含んでもよい。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶ２である。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶｒｈ１０である。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶ９（ｈｕ１４）である。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶ−ＤＪである。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶ９．４７である。非限定的な例として、組換えＡＡＶウイルスのカプシドはＡＡＶ−ＤＪ８である。一実施形態は、配列番号１〜１０６のペプチド配列のヌクレオチド等価物を含む。
【０２５０】
本発明のウイルスベクターは、組換え的に産生されてもよく、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づいてもよい。本発明において有用であり得る血清型には、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕｌ４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈｌＯ、ＡＡＶ−ＤＪ、およびＡＡＶ−ＤＪ８から生じるもののうちのいずれかが含まれる。
【０２５１】
一実施形態では、本発明において有用であり得る血清型は、ＡＡＶ−ＤＪ８であり得る。ＡＡＶ−ＤＪ８のアミノ酸配列は、ヘパリン結合ドメイン（ＨＢＤ）を除去するために２つ以上の変異を含んでもよい。非限定的な例として、その内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第７，５８８，７７２号に配列番号１として記載されているＡＡＶ−ＤＪ配列は、２つの変異を含み得る：（１）アミノ酸５８７におけるアルギニン（Ｒ、ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ、ｇｌｎ）に変更されるＲ５８７Ｑ、および（２）アミノ酸５９０におけるアルギニン（Ｒ、ａｒｇ）がスレオニン（Ｔ、ｔｈｒ）に変更されるＲ５９０Ｔ。別の非限定的な例として、３つの変異を含み得る：（１）アミノ酸４０６におけるリジン（Ｋ、ｌｙｓ）がアルギニン（Ｒ、ａｒｇ）に変更されるＫ４０６Ｒ、（２）アミノ酸５８７におけるアルギニン（Ｒ、ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ、ｇｌｎ）に変更されるＲ５８７Ｑ、および（３）アミノ酸５９０におけるアルギニン（Ｒ、ａｒｇ）がトレオニン（Ｔ、ｔｈｒ）に変更されるＲ５９０Ｔ。
【０２５２】
ＡＡＶベクターはまた、自己相補性ＡＡＶベクター（ｓｃＡＡＶｓ）も含むことができる。ｓｃＡＡＶベクターは、一緒にアニールして二本鎖ＤＮＡを形成する両方のＤＮＡ鎖を含む。第２の鎖合成をスキップすることにより、ｓｃＡＡＶは細胞内での迅速な発現を可能にする。
【０２５３】
一実施形態では、薬学的組成物は、ＡＡＶカプシドおよびＡＡＶベクターゲノムを含む組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む。ＡＡＶベクターゲノムは、これらに限定されないが、配列番号１〜８８および１０８〜２１０、またはそれと少なくとも９５％の同一性を有するバリアントなどの、本明細書に記載の少なくとも１つのペプチド関連ポリヌクレオチドを含み得る。薬学的組成物中の組換えＡＡＶベクターは、ＡＡＶベクターゲノムを含む少なくとも７０％を有してもよい。
【０２５４】
一実施形態では、薬学的組成物は、ＡＡＶカプシドおよびＡＡＶベクターゲノムを含む組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターを含む。ＡＡＶベクターゲノムは、追加のＮ末端プロリンに加えて、これらに限定されないが、配列番号１〜８８および１０８〜２１０、またはそれと少なくとも９５％の同一性を有するバリアントなどの、本明細書に記載の少なくとも１つのペプチド関連ポリヌクレオチドを含み得る。薬学的組成物中の組換えＡＡＶベクターは、ＡＡＶベクターゲノムを含む少なくとも７０％を有してもよい。
【０２５５】
細胞中での発現のために核酸を送達する方法は、当該技術分野で既知であり、例えば、カチオン性脂質または他の化学的方法（例えば、リン酸カルシウム沈殿、ＤＥＡＥ−デキストラン、ポリブレン）を用いる脂質送達、電気穿孔法、またはウイルス送達を含む。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ａｎｄ  Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄ．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ（２００１）、Ｎａｙｅｒｏｓｓａｄａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ｒｅｓ  １：２７（２０１２）、およびＨｅｓｉｅｒ，Ｗｉｌｌｉａｍ（ｅｄ．），Ｇｅｎｅ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ，Ｖｏｌ  １．，Ｎｏｎ−ｖｉｒａｌ  Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，（２００４）を参照されたい。
【０２５６】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、その内容はその全体が参照により組み込まれる、欧州特許出願第ＥＰ１８５７５５２号に記載のＡＡＶビリオンを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２５７】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、その内容はその全体が参照により組み込まれる、欧州特許出願第ＥＰ２６７８４３３号に記載のＡＡＶベクターを使用してタンパク質を送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２５８】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、その内容はその全体が参照により組み込まれる、米国特許第ＵＳ５８５８３５１号に記載のＡＡＶベクターを使用してＤＮＡ分子を送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２５９】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、その内容はその全体が参照により組み込まれる、米国特許第ＵＳ６２１１１６３号に記載の血液流にＤＮＡを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２６０】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、その内容はその全体が参照により組み込まれる、米国特許第ＵＳ６３２５９９８号に記載のＡＡＶビリオンを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２６１】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、その内容はその全体が参照により組み込まれる、米国特許第ＵＳ７５８８７５７号に記載の中枢神経系にペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２６２】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、その内容はその全体が参照により組み込まれる、米国特許第ＵＳ８２８３１５１号に記載のペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２６３】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、その内容はその全体に参照により組み込まれる、国際特許公開第ＷＯ２００１／０８９５８３号に記載のグルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）送達ベクターを使用してペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２６４】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、その内容はその全体が参照により組み込まれる、国際特許公開第ＷＯ２０１２／０５７３６３号に記載の神経細胞にペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２６５】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、その内容はその全体が参照により組み込まれる、米国特許第９５８５９７１号に記載の細胞にペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２６６】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、Ｄｅｖｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，３４，２０４−０９（２０１６）に記載の細胞にペイロードを送達するための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２６７】
一実施形態では、ペプチド関連ポリヌクレオチドを含むウイルスベクターは、ＵＳ７１９８９５１［アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）血清型９の配列、それを含むベクター、およびその使用］、ＵＳ９２１７１５５［新規ＡＡＶの単離およびその使用］、ＷＯ２０１１１２６８０８［薬理学的に誘導された導入遺伝子除去システム］、ＵＳ６０１５７０９［転写活性化因子、ならびにそれに関連する組成物および使用］、ＵＳ７０９４６０４［偽型組換えＡＡＶビリオンの産生］、ＷＯ２０１６１２６９９３［抗タウ構築物］、ＵＳ７０９４６０４［組換えＡＡＶカプシドタンパク質］、ＵＳ８，２９２，７６９［鳥類アデノ随伴ウイルス（ａａａｖ）およびその使用］、ＵＳ９１０２９４９［ＣＮＳ標的ａａｖベクターおよびその使用方法］、ＵＳ２０１６０１２０９６０［中枢神経系へのアデノ随伴ウイルス媒介遺伝子導入］、ＷＯ２０１６０７３６９３［パーキンソン病の治療のためのＡＡＤＣポリヌクレオチド］、ＷＯ２０１５１６８６６６［網膜およびＣＮＳ遺伝子療法のためのＡＡＶベクター］、ＵＳ２００９０１１７１５６［ニーマンピック病Ａ型の遺伝子療法］、またはＷＯ２００５１２０５８１［神経代謝障害の遺伝子療法］に記載のＡＡＶビリオンの送達のための方法を用いて投与または送達され得る。
【０２６８】
一実施形態では、ペプチドは、細胞療法を介してそれらの細胞等価物を投与することに対して投与することができる。したがって、例示的な態様では、ペプチドは、本明細書に記載のペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、例えば、それらでトランスフェクトされた細胞を投与することにより投与される。そのような細胞は、本発明によりさらに提供される。核酸を含むまたは核酸でトランスフェクトされた細胞は、いくつかの態様では、真核細胞、例えば、植物、動物、真菌、または藻類である。例示的な態様では、細胞は、原核細胞、例えば、細菌または原生動物である。いくつかの場合によっては、細胞は、培養細胞または初代細胞であり、すなわち、生物、例えば、ヒトから直接単離されたものである。ある特定の例では、細胞は、付着細胞または懸濁細胞、すなわち、懸濁状態で成長する細胞である。本明細書に記載の核酸でトランスフェクトされ得る好適な細胞は、当該技術分野で既知であり、例えば、ＤＨ５α  Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、チャイニーズハムスター卵巣細胞、サルＶＥＲＯ細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＥＫ２９３細胞などが含まれる。ベクターを増幅または複製する目的のために、細胞は、好ましくは原核細胞、例えば、ＤＨ５α細胞である。核酸のヌクレオチド配列によってコードされるペプチドを産生する目的のために、細胞は、好ましくは哺乳動物の細胞、または哺乳動物細胞である。本明細書で使用される場合、「哺乳動物」という用語は、これらに限定されないが、単球、有袋類、および胎盤分類群のうちのいずれかを含む哺乳動物分類の任意の脊椎動物を指す。いくつかの実施形態では、哺乳動物は、マウスおよびハムスターなどの齧歯目の哺乳動物、ならびにウサギなどのウサギ目の哺乳動物のうちの１つである。例示的な実施形態では、哺乳動物は、ネコ科（ネコ）およびイヌ科（イヌ）を含む肉食目に由来するものである。例示的な実施形態では、哺乳動物は、ウシ科（ウシ類）およびブタ科（ブタ類）、またはウマ科（ウマ類）を含む奇蹄目のものを含む偶蹄目に由来するものである。いくつかの例では、哺乳類は、霊長目、セボイド、もしくはシモイド（サル）または真猿亜目（ヒト類および類人猿類）である。特定の実施形態では、哺乳動物はヒトである。したがって、例示的な例では、細胞はヒト細胞である。細胞は、任意の細胞型であり得、任意の型の組織に由来し得、任意の発達段階であり得る。いくつかの態様では、細胞は、対象から単離されるかまたは得られる。対象から単離されるかまたは得られると、細胞は、核酸でトランスフェクトされ、その後、対象に投与し戻される。
【０２６９】
ＣＮＳへの本発明のペプチドまたは組成物の送達は、この発明のいくつかの実施形態では、脳への、全身投与、ＣＳＦ経路への注射、または直接注射によるものであってもよく、いくつかの実施形態では、この発明の組成物は、これらの経路のいずれかのために製剤化される。一実施形態では、本発明の組成物は、ＣＮＳにおける標的された作用のためにＣＮＳへの全身または直接投与によって投与され、いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、これらの経路のうちのいずれかのために製剤化される。一実施形態では、本明細書に示される組成物は、脳特異的送達のために製剤化され、いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、これらの経路のうちのいずれかのために製剤化される。一実施形態では、脳への薬物送達の戦略には、血液脳関門（ＢＢＢ）の浸透圧および化学的開口、ならびに血液脳関門内皮中の分子の浸透を制御する輸送または担体系、酵素、および受容体の使用が含まれ、いくつかの実施形態では、この発明の組成物は、これらの経路のうちのいずれかのために製剤化される。別の実施形態では、受容体媒介トランスサイトーシスは、ＢＢＢを通過してペプチドおよびタンパク質を輸送することができ、いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、これらの経路のうちのいずれかのために製剤化される。他の実施形態では、脳への薬物送達の戦略は、ＢＢＢをバイパスすることを伴い、いくつかの実施形態では、この発明の組成物は、これらの経路のうちのいずれかのために製剤化される。いくつかの実施形態では、ＢＢＢを開くために様々な薬理学的薬剤が使用され、いくつかの実施形態では、この発明の組成物は、これらの経路のうちのいずれかのために製剤化される。一実施形態では、投与経路は、神経変性状態によって影響を受ける器官または系を対象とし得る。例えば、化合物は、局所的に投与され得る。別の実施形態では、投与経路は、神経変性状態によって影響を受けるものとは異なる器官または系を対象とし得る。例えば、化合物は、神経変性状態を治療するために非経口投与されてもよい。したがって、本発明は、当業者によって理解されるように、本明細書に列挙される経路のうちのいずれか、およびそのような材料のＣＮＳを利用する任意の経路を使用する投与に好適な様々な剤形の使用を提供する。
【０２７０】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物／薬剤は、具体的には、それらが血液脳関門（ＢＢＢ）を横断するように製剤化される。そのような製剤の一例は、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号、第５，３７４，５４８号、および第５，３９９，３３１号に記載されているように製造され得る特殊なリポソームの使用を含む。いくつかの実施形態では、リポソームは、特定の細胞または器官に選択的に輸送される１つ以上の部分（「標的化部分」または「標的化グループ」または「輸送ベクター」）を含み、したがって標的化された薬物送達を提供する（例えば、参照により本明細書に完全に組み込まれる、Ｖ．Ｖ．ＲａｎａｄｅＪ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｍａｃｏｌ．２９，６８５（１９８９）を参照されたい）。いくつかの実施形態では、薬剤は、血液脳関門の浸透を促進する標的化グループに結合されている。いくつかの実施形態では、ＢＢＢを通過する本発明の薬剤の輸送を促進するために、それらはＢＢＢ輸送ベクターにカップリングされ得る（例えば、参照により本明細書に完全に組み込まれる、Ｂｉｃｋｅｌ  ｅｔ  ａｈ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ４６，２４７−７９（２００１）を参照されたい）。いくつかの実施形態では、輸送ベクターには、カチオン化アルブミンまたはトランスフェリン受容体に対する０Ｘ２６モノクローナル抗体が含まれ、これらは、それぞれＢＢＢを介する吸収媒介および受容体媒介のトランスサイトーシスを経る。標的化グループとして使用され得る天然細胞代謝産物には、とりわけ、プトレシン、スペルミジン、スペルミン、またはＤＨＡが含まれる。他の例示的な標的化部分には、葉酸またはビオチン（例えば、参照により本明細書に完全に組み込まれる、米国特許第５，４１６，０１６号を参照されたい）、マンノシド（参照により本明細書に完全に組み込まれる、Ｕｍｅｚａｗａ  ｅｔ  ａｈ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１５３，１０３８（１９８８））、抗体（Ｐ．Ｇ．Ｂｌｏｅｍａｎ  ｅｔ  ａｌ，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３５７，１４０（１９９５）、Ｍ．Ｏｗａｉｓ  ｅｔ  ａｌ，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．３９，１８０（１９９５））、界面活性剤プロテインＡ受容体（参照により本明細書に完全に組み込まれる、Ｂｒｉｓｃｏｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１２３３，１３４（１９９５））、ｇｐｌ２０（Ｓｃｈｒｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９，９０９０（１９９４））が含まれ、また、Ｋ．Ｋｅｉｎａｎｅｎ  ａｎｄ  Ｍ．Ｌ．Ｌａｕｋｋａｎｅｎ，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３４６，１２３（１９９４）、ＪＪ．Ｋｉｌｌｉｏｎ  ａｎｄ  ＩＪ．Ｆｉｄｌｅｒ，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ  ４，２７３（１９９４）も参照されたく、その全てが参照により本明細書に完全に組み込まれる。
【０２７１】
標的受容体が媒介することいくつかの実施形態では、脳への受容体媒介輸送系を標的とするＢＢＢ輸送ベクターは、インスリン、インスリン様成長因子（「ＩＧＦ−Ｉ」および「ＩＧＦ−ＩＩ」）、アンジオテンシンＩＩ、心房性および脳性ナトリウム利尿ペプチド（「ＡＮＰ」および「ＢＮＰ」）、インターロイキンＩ（「ＩＬ−Ｉ」）、ならびにトランスフェリンなどの因子を含む。これらの因子と結合する受容体に対するモノクローナル抗体もまた、ＢＢＢ輸送ベクターとして使用され得る。吸収媒介トランスサイトーシスのメカニズムを標的とするＢＢＢ輸送ベクターには、ポリリジン、カチオン化アルブミン、またはカチオン化免疫グロブリンとカップリングされたカチオン化ＬＤＬ、アルブミン、または西洋ワサビペルオキシダーゼなどのカチオン性部分が含まれる。ダイノルフィン類似体Ｅ−２０７８およびＡＣＴＨ類似体エビラチドなどの小さな塩基性オリゴペプチドもまた、吸収媒介トランスサイトーシスを介して脳を通過し、潜在的な輸送ベクターである。他のＢＢＢ輸送ベクターは、栄養素を脳に輸送するための系を標的とする。そのようなＢＢＢ輸送ベクターの例には、ヘキソース部分、例えば、グルコースおよびモノカルボン酸、例えば、乳酸および中性アミノ酸、例えば、フェニルアラニンおよびアミン、例えば、コリンおよび塩基性アミノ酸、例えば、アルギニン、ヌクレオシド、例えば、アデノシンおよびプリン塩基、例えば、アデニン、ならびに甲状腺ホルモン、例えば、トリヨードチリジンが挙げられる。栄養輸送体の細胞外ドメインに対する抗体もまた、輸送ベクターとして使用され得る。他の可能なベクターには、アンジオテンシンＩＩおよびＡＮＰが含まれ、これらはＢＢＢ透過性の調節に関与し得る。
【０２７２】
いくつかの場合では、輸送ベクターへの治療剤を連結する結合は、生物学的に活性な薬剤を放出するために、脳への輸送後に切断され得る。例示的なリンカーには、ジスルフィド結合、エステルに基づく結合、チオエーテル結合、アミド結合、酸不安定性結合、およびシッフ塩基結合が含まれる。アビジンがＢＢＢ薬物輸送ベクターに共有結合しているアビジン／ビオチンリンカーもまた使用され得る。アビジン自体が薬物輸送ベクターであり得る。血液脳関門を通過する組成物の受容体媒介輸送を含むトランスサイトーシスも、本発明の薬剤に好適であり得る。トランスフェリン受容体媒介送達は、米国特許第５，６７２，６８３号、第５，３８３，９８８号、第５，５２７，５２７号、第５，９７７，３０７号、および第６，０１５，５５５号に開示されており、これらの全ては参照により本明細書に完全に組み込まれる。トランスフェリン媒介輸送もまた既知である。Ｐ．Ｍ．Ｆｒｉｄｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２７８，１４９１−９８（１９９６）、ＨＪ．Ｌｅｅ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｉｔｅｒ．２９２，１０４８−５２（２０００）の全ては、参照により本明細書に完全に組み込まれる。ＥＧＦ受容体媒介送達は、Ｙ．Ｄｅｇｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｈ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．１０，３２−３７（１９９９）に記載されており、トランスサイトーシスは、Ａ．Ｃｅｒｌｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．８，４３５−４６（２０００）に記載されており、これらの全ては、参照により本明細書に完全に組み込まれる。インスリン断片はまた、血液脳関門を通過するための担体としても使用されている。Ｍ．Ｆｕｋｕｔａ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１１．１６８１−８８（１９９４）。中性アビジンおよびカチオン化ヒトアルブミンの複合体を介する薬剤の送達もまた記載されている。Ｙ．Ｓ．Ｋａｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１，１２５７−６４（１９９４）の全ては、参照により本明細書に完全に組み込まれる。血液脳関門を通過する本発明の薬剤の浸透を高めるための他の改変は、当該技術分野で既知の方法および誘導体を使用して達成され得る。例えば、米国特許第６，０２４，９７７号は、脳および中枢神経系を標的とする共有極性脂質複合体を開示している。米国特許第５，０１７，５６６号は、ジヒドロピリジン酸化還元標的部分のリポイド形態の包接錯体を含むシクロデキストリン誘導体を開示している。米国特許第５，０２３，２５２号は、大環状エステル、ジエステル、アミド、ジアミド、アミジン、ジアミジン、チオエステル、ジチオエステル、チオアミド、ケトン、またはラクトンを含む血液脳関門を通過する薬物の輸送を促進するための神経学的に活性な薬物および化合物を含む薬学的組成物の使用を開示している。米国特許第５，０２４，９９８号は、シクロデキストリン誘導体を含む水不溶性薬物の非経口溶液を開示している。米国特許第５，０３９，７９４号は、血液脳関門を通過する化合物の輸送を促進するための転移性腫瘍由来退行因子の使用を開示している。米国特許第５，１１２，８６３号は、血液脳関門を通過する送達のための抗精神病薬物としてのＮ−アシルアミノ酸誘導体の使��を開示している。米国特許第５，１２４，１４６号は、脳病変に関連する透過性の増加部位で血液脳関門を通過する治療薬を送達するための方法を開示している。米国特許第５，１５３，１７９号は、細胞膜の改善された浸透のための医薬品に使用するためのアシル化グリセロールおよび誘導体を開示している。米国特許第５，１７７，０６４号は、血液脳関門を通過する送達のためのヌクレオシド抗ウイルス剤のリポイドホスホネート誘導体の使用を開示している。米国特許第５，２５４，３４２号は、トランスフェリン受容体をこのプロセスを増強または加速する薬学的化合物と組み合わせて使用する、血液脳関門の受容体媒介トランスサイトーシスを開示している。米国特許第５，２５８，４０２号は、抗痙攣性スルファメートのイミデート誘導体によるてんかんの治療を開示している。米国特許第５，２７０，３１２号は、中枢神経系薬剤として置換されたピペラジンを開示している。米国特許第５，２８４，８７６号は、ドーパミン薬物の脂肪酸複合体を開示している。米国特許第５，３８９，６２３号は、血液脳関門を通過する送達のための抗炎症ステロイドまたはステロイド性ホルモンの脂質ジヒドロピリジン誘導体の使用を開示している。米国特許第５，４０５，８３４号は、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモンのプロドラッグ誘導体を開示している。米国特許第５，４１３，９９６号は、脳組織におけるそのような薬物の陰イオン封鎖のための神経学的に活性な薬物のアシルオキシアルキルホスホネート複合体を開示している。米国特許第５，４３４，１３７号は、頸動脈に注入されたブラジキニンを使用して異常な脳組織毛細血管を選択的に開く方法を開示している。米国特許第５，４４２，０４３号は、生物学的活性を有し、かつ血液脳関門を通過することができないペプチドと、生物学的活性を呈さず、かつ受容体媒介エンドサイトーシスにより血液脳関門を通過することができるペプチドとの間のペプチド複合体を開示している。米国特許第５，４６６，６８３号は、てんかんの治療のための抗痙攣薬の水溶性類似体を開示している。米国特許第５，５２５，７２７号は、体循環に仕切り戻すことを防ぐ血液脳関門を通過する取り込みの際に、酸化還元塩を形成する脂質形態のジヒドロピリジンとの、麻薬性鎮痛薬ならびにアゴニストおよびそのアンタゴニストの複合体を含む脳組織組成物を開示し、これらの全ては、参照により本明細書に完全に組み込まれる。
【０２７３】
一酸化窒素は、体の正常組織における末梢血管系の血管拡張剤である。一酸化窒素シンターゼによる一酸化窒素の生成の増加は、血圧を低下させることなく血管拡張を引き起こす。脳組織を通って流れる血圧に依存しない血流の増加は、血液由来の組成物の脳の生物学的利用能を増加させる。一酸化窒素のこの増加は、Ｌ−アルギニンを投与することによって刺激され得る。一酸化窒素が増加すると、脳血流が結果的に増加し、血流中の薬物は脳組織への増加した流れとともに運ばれる。したがって、本発明の薬学的組成物にＬ−アルギニンを使用して、ＷＯ００／５６３２８に記載のように、Ｌ−アルギニンの血流増強量と実質的に同時に対象の血流に薬学的組成物を導入した後、脳組織への薬剤の送達を高めることができる。
【０２７４】
血液脳関門の浸透を高める修飾のさらなる例は、グリセロ脂質またはその誘導体を含む薬物組成物を開示している国際（ＰＣＴ）出願公開番号ＷＯ８５／０２３４２に記載されている。ＰＣＴ公開番号ＷＯ０８９／１１２９９は、別々に投与される神経学的に活性なプロドラッグを活性化するために脳病変部位に特異的に送達される酵素との抗体の化学的複合体を開示している。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９１／０４０１４は、輸送特異的受容体リガンドまたは抗体を使用して、脳組織を標的とするリポソームに薬物をカプセル化することにより、血液脳関門を通過して治療薬および診断薬を送達するための方法を開示している。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９１／０４７４５は、細胞接着分子およびその断片を使用して、血管内皮の密着結合の透過性を高める血液脳関門を通過する輸送を開示している。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９１／１４４３８は、血液脳関門を通過する物質の輸送を促進するための修飾キメラモノクローナル抗体の使用を開示している。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９４／０１１３１は、抗体を含む脂質化タンパク質を開示している。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９４／０３４２４は、血液脳関門を通過する輸送を促進するための薬物複合体としてのアミノ酸誘導体の使用を開示している。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９４／０６４５０は、神経学的に活性な薬物と、ジヒドロピリジン型レドックス標的化部分との複合体を開示し、アミノ酸結合および脂肪族残基を含む。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９４／０２１７８は、血液脳関門を通過する送達のための抗体標的化リポソームを開示している。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９５／０７０９２は、血液脳関門を通過して薬物を送達するための薬物成長因子複合体の使用を開示している。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９６／００５３７は、中枢神経系内の部位に生物活性剤を送達するための注射可能な薬物送達ビヒクルとしてのポリマーミクロスフェアを開示している。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９６／０４００１は、脳組織送達のための神経学的に活性な薬物のオメガ−３−脂肪酸複合体を開示している。ＰＣＴ公開番号ＷＯ９６／２２３０３は、脳組織送達のための神経学的に活性な薬物の脂肪酸およびグリセロ脂質複合体を開示している。一実施形態では、活性化合物は、小胞、例えば、リポソームで送達することができる。別の実施形態では、活性化合物は、ナノ粒子として送達することができる。一実施形態では、送達は、ＣＮＳを特異的に標的とすることができる。別の実施形態では、活性化合物は、本明細書に記載の任意の方法により送達され得る。本発明の組成物は、対象への投与のための組成物を製剤化するのに有用であることが当業者に既知である成分を含んでもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、薬学的に許容される担体または希釈剤を含み、いくつかの実施形態では、「薬学的に許容される担体または希釈剤」という句は、固体製剤用の固体担体もしくは希釈剤、液体製剤用の液体担体もしくは希釈剤、またはそれらの混合物を含み得る。
【０２７５】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物／薬剤は、すなわち、ＣＮＳへの特定の望ましい薬剤、またはそれらの組み合わせを送達するために、すなわち、それらが血液脳関門（ＢＢＢ）を通過することを確実にするために、「ピギーバック機構」を含む。
【０２７６】
一実施形態では、血液脳関門の浸透を高める技術の改変は、ＷＯ２００９１１７０４１［血液脳関門を通過してペプチドを運ぶためのピレンの使用］、ＵＳ２００６０１８２６８４［血液脳関門を通過して化合物を輸送するための方法］、ＵＳ６２５８７８０［血液脳関門を通過できるようにするための方法および組成物］、またはＵＳ２００６０２９３２４２［血液脳関門を通過するタキソイド誘導体の輸送］に記載されている。
【０２７７】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物／薬剤は、腹腔内注射または脳室内注射によって投与される。
【０２７８】
本明細書に記載のウイルスベクターの薬学的組成物は、生物学的利用能、治療域、および／または分布の体積のうちの１つ以上によって特徴付けられ得る。
【０２７９】
いくつかの実施形態では、ペプチド関連ヌクレオチドおよび／または本発明のペプチド関連ヌクレオチド組成物は、デバイス上にコーティングまたはデバイス内に埋め込まれて、組み合わせることができる。デバイスには、これらに限定されないが、ステント、ポンプ、および／または他の埋め込み可能な治療デバイスを備え得る。加えて、ペプチド関連ヌクレオチドおよび／またはペプチド関連ヌクレオチド組成物は、対象が、これらに限定されないが、対象における深部静脈血栓症（ＤＶＴ）の可能性を低減させるための圧縮デバイスなどの圧縮デバイスを使用している間に、対象に送達されてもよい。本発明は、１つ以上のペプチド関連ポリヌクレオチドペイロード分子をコードするウイルスベクターを組み込むことができるデバイスを提供する。これらのデバイスは、安定した製剤に、それを必要とする対象、例えば、ヒト患者に即時に送達することができるウイルスベクターを含む。
【０２８０】
投与のためのデバイスは、本明細書に教示される単回、複数回、または分割投与計画に従って、本発明のペプチド関連ヌクレオチドを含むウイルスベクターを送達するために用いられ得る。
【０２８１】
細胞、器官、および組織への複数回投与のための当該技術分野で既知の方法およびデバイスは、本発明の実施形態として本明細書に開示される方法および組成物と組み合わせて使用するために企図される。これらには、例えば、これらの方法および複数の針を有するデバイス、例えば、ルーメンまたはカテーテルを用いるハイブリッドデバイス、ならびに熱、電流、または放射線駆動機構を利用するデバイスが含まれる。
【０２８２】
いくつかの実施形態では、ペプチド関連ヌクレオチドおよび／または本発明のペプチド関連するポリヌクレオチド組成物は、これらに限定されないが、ステント、チューブ、カテーテル、管、ストロー、針、および／またはダクトなどのデバイスを使用して送達することができる。これらのデバイスを使用する方法は本明細書に記載されており、当該技術分野で既知である。
【０２８３】
一実施形態では、本発明のペプチド関連するポリヌクレオチドは、画像誘導治療を組み込み、これらに限定されないが、レーザー、ＭＲｇＦＵＳ、内視鏡、およびロボット手術デバイスなどの撮像を組み込む送達システムを使用して、対象に投与することができる。
【０２８４】
一実施形態では、本発明のペプチド関連ポリヌクレオチドは、ＭＲＩ  Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．のＣＬＥＡＲＰＯＩＮＴ（登録商標）神経介入システムを使用して対象に投与することができる。ＣＬＥＡＲＰＯＩＮＴ（登録商標）神経介入システムは、単独で、または本明細書に記載の他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。ＣＬＥＡＲＰＯＩＮＴ（登録商標）神経介入システムは、神経学的な手順の計画および操作中に機器およびデバイスの配置および操作において定位ガイダンスを提供するのに役立つ。
【０２８５】
一実施形態では、本発明のペプチド関連ポリヌクレオチドは、Ｒｅｎｉｓｈａｗ  ＰＬＣのＮＥＵＲＯＭＡＴＥ（登録商標）定位ロボットシステムを使用して対象に投与することができる。ＮＥＵＲＯＭＡＴＥ（登録商標）システムは、単独で、または本明細書に記載の他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。非限定的な例として、ＮＥＵＲＯＭＡＴＥ（登録商標）システムは、ヘッドホルダ、ＣＴ画像ローカライザ、フレームアタッチメント、リモートコントロール、およびソフトウェアとともに使用することができる。［０００１４６］一態様では、本発明のペプチド関連ポリヌクレオチドは、Ｅｌｅｋｔａ  ＡＢのＥｌｅｋｔａ  ＭＩＣＲＯＤＲＩＶＥ（商標）デバイスを使用して対象に投与することができる。ＭＩＣＲＯＤＲＩＶＥ（商標）デバイスは、単独で、または本明細書に記載の他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。非限定的な例として、ＭＩＣＲＯＤＲＩＶＥ（商標）デバイスは、十字線およびＡ−Ｐホルダーを使用して電極（例えば、微小電極記録（ＭＥＲ）、マクロ刺激および脳深部刺激（ＤＢＳ）電極の移植のため）、カテーテルの埋め込み、管またはＤＢＳ電極を配置するのに使用されてもよく、位置、生検、注射および吸引、脳病変、内視鏡ガイダンス、ならびにＧＡＭＭＡ  ＫＮＩＦＥ（登録商標）放射線手術を検証する。
【０２８６】
一実施形態では、本発明のペプチド関連ポリヌクレオチドは、ＭＯＮＴＥＲＩＳ（登録商標）Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｉｎｃ．のＡＸＩＩＩＳ（登録商標）定位ミニフレームを使用して対象に投与することができる。ＡＸＩＩＩＳ（登録商標）は、単独で、または本明細書に記載の他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。ＡＸＩＩＩＳ（登録商標）定位ミニフレームは、レーザー凝固、生検、カテーテル留置、電極移植、内視鏡、および血餅排出のために使用され得る軌道アライメントデバイスである。ミニフレームは、３６０度のインターフェイスを可能にし、簡単な調整で複数の頭蓋内標的物へのアクセスを提供する。さらに、ミニフレームはＭＲＩと互換性がある。
【０２８７】
一実施形態では、本発明のペプチド関連ポリヌクレオチドは、Ｉｎｔｅｇｒａ  ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎのＩＮＴＥＧＲＡ（商標）ＣＲＷ（登録商標）システムを使用して対象に投与することができる。ＩＮＴＥＧＲＡ（商標）ＣＲＷ（登録商標）システムは、単独で、または本明細書に記載の他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。ＣＲＷ（登録商標）システムは、これらに限定されないが、定位手術、顕微、カテーテル、および生検などの様々な用途に使用され得る。ＣＲＷ（登録商標）システムは、システム（例えば、親指ロックねじ、バーニアスケーリング、二重ボルト固定、および固体フレーム）を使用する者に正確さを提供するように設計されている。
【０２８８】
一実施形態では、本発明のペプチド関連ポリヌクレオチドは、ＮＩＯＢＥ（登録商標）ＥＳ磁気ナビゲーションシステム、ＶＤＲＩＶＥ（登録商標）ロボットナビゲーションシステム、および／またはＯＤＹＳＳＥＹ（登録商標）情報溶液（全てＳｔｅｒｅｏｔａｘｉｓ，Ｉｎｃ．より）を含み得るＳｔｅｒｅｏｔａｘｉｓ，Ｉｎｃ．のＥＰＯＣＨ（登録商標）溶液系を使用して対象に投与することができる。ＥＰＯＣＨ（登録商標）溶液系は、単独で、または本明細書に記載の他の投与方法およびデバイスのいずれかと組み合わせて使用することができる。非限定的な例として、ＮＩＯＢＥ（登録商標）ＥＳ磁気ナビゲーションシステムは、正確に対象に接触するために使用され得る。別の非限定的な例として、ＮＩＯＢＥ（登録商標）ＥＳ磁気システムは、精密な動きおよび安定性を提供するために、ＶＤＲＩＶＥ（登録商標）ロボットナビゲーションシステムとともに使用することができる。
【０２８９】
一実施形態では、本発明のペプチド関連ポリヌクレオチドは、これらに限定されないが、手術計画、生検、開頭術、内視鏡、術中超音波、および放射線療法などの用途のために画像ガイダンスを提供するために、フレームレス定位方法を使用するＮｅｕｒｏ  Ｓｔａｔｉｏｎワークステーションを使用して対象に投与することができる。
【０２９０】
一実施形態では、本発明のペプチド関連ポリヌクレオチドは、これらに限定されないが、その内容はその全体の参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，０７８，１４０号に記載のデバイスなどのロボット定位システムを使用して対象に投与することができる。デバイスのロボットアームを使用して、手術を行うために使用される手術または他の器具を精密に方向付けることができる。
【０２９１】
一実施形態では、本発明のペプチド関連ポリヌクレオチドは、これらに限定されないが、その内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，８６５，７４４号に記載のデバイスなどの自動送達システムを使用して対象に投与することができる。送達システムによって収集された画像に基づいて、コンピュータは、特定の対象に適切な深さになるように針の投与を調整する。
【０２９２】
経皮的使用を意図した薬学的組成物は、薬学的組成物の製造のための当該技術分野で既知の任意の方法に従って調製することができる。
【０２９３】
一態様によれば、本発明の化合物は、医薬品、特にヒト医薬品おける使用のためのものである。ペプチドは、タウタンパク質凝集関連疾患を治療するのに有効である。
【０２９４】
本発明はまた、有効量のペプチドまたはそのバリアントを治療を必要とする対象に投与することを含む、タウタンパク質凝集関連疾患を治療する方法も含む。
【０２９５】
本開示はまた、細線維化阻害ペプチドを提供する。例えば、タウ細線維化に関連する細線維化阻害ペプチドは、配列番号１〜８８および１０８〜２１０のものを含む。これらのペプチドの各々は、一般に、アミノ酸残基ＶＱＩＶＹＫ（配列番号２１９）を含む立体ジッパー領域でタウ原線維と結合する。これらのペプチドの各々は、一般に、アミノ酸残基ＶＱＩＩＮＫ（配列番号２２０）を含む立体ジッパー領域でタウ原線維と結合する。阻害ペプチドは、発生期の原線維への後のジッパー配列の結合を妨げるように、阻害ペプチド配列骨格から突出する側鎖を含むジッパー阻害特徴を含む。一実施形態では、これらのペプチドの各々は、２０μＭ以下のペプチド濃度でＶＱＩＶＹＫ（配列番号２１９）と結合する。一実施形態では、これらのペプチドの各々は、２０μＭ以下のペプチド濃度でＶＱＩＩＮＫ（配列番号２２０）と結合する。一実施形態では、これらのペプチドの各々は、２０μＭ以下のペプチド濃度でタウ原線維凝集を阻害する。
【０２９６】
タウタンパク質は、組み立ておよび分解の繰り返しサイクル中に微小管と同時精製する多数のタンパク質ファミリーのうちの１つのファミリーとして特徴付けられ（Ｓｈｅｌａｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９７３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７０，７６５−７６８）、微小管関連タンパク質（ＭＡＰ）として既知である。加えて、タウファミリーは、ファミリーの全てのメンバーによって共有される特徴的なＮ末端セグメントの存在、脳で発達的に調節されるＮ末端セグメントに挿入される約５０個のアミノ酸の配列、３１〜３２個のアミノ酸の３または４個のタンデムリピートからなる特徴的なタンデムリピート領域、およびＣ末端尾によって特徴付けられる。
【０２９７】
タウオリゴマーは、タウタンパク質サブユニットの凝集体を含む。タウオリゴマーの最小サイズは、２サブユニットであり、この出願で言及されるタウオリゴマーの最大サイズは、１２タウサブユニットである。これらのタウオリゴマーは、タウダイマー、タウトリマー、タウテトラマー、タウペンタマー、タウヘキサマー、タウセプターマー、タウオクタマー、タウノナマー、タウデカマー、タウウナデカマー、タウドデカマーである。いくつかの実施形態では、サブユニットは、任意の３Ｒまたは４Ｒタウから構成され得る。
【０２９８】
タウオリゴマーは、実質的に精製および／または単離することができる。いくつかの実施形態では、タウタンパク質は、ＳＰセファロースを使用するカチオン交換、９５℃で５分間のレムリ試料緩衝剤中の熱変性、および連続ＳＤＳ−ＰＡＧＥからの画分収集によって精製することができる。タウオリゴマーは、３７℃で緩衝剤（５０ｍＭトリスｐＨ７．４）中のタウサブユニットをインキュベートすることにより形成することができる。オリゴマーのサイズ範囲は、タウ濃度、インキュベーションの長さ、緩衝剤組成物、ならびに／またはタウアイソフォーム、断片、もしくはペプチドおよび／またはそれらの混合物の選択の調節により制御され得る。
【０２９９】
タウオリゴマーサブユニットは、ジスルフィド結合によって結合してもしなくてもよい。いくつかの実施形態では、タウオリゴマーは、ジスルフィド結合により安定化され得、非還元環境で少なくとも２ヶ月間安定である。
【０３００】
タウフィラメントは、色素チオフラビンＳ（ＴＨＳ）と結合し、蛍光シグナルを生じ、クロスベータ回折パターンを有する（Ｂｅｒｒｉｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３；Ｆｒｉｅｄｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８）。アルツハイマー病および老人性認知症を含むいくつかの疾患とのタウの関連により、タウは、細線維化を破壊するための重要な標的となる。タウは、４つの微小管結合領域を含み、これらはタウフィラメントの組み立てに関与している。これらの繰り返しドメインは、複数のタウアイソフォームからのＰＨＦのコアに見られ、孤立してＰＨＦ様原線維に組み立てることができる（Ｋｏｎｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８、Ｗｉｌｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２；Ｗｉｓｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８）。タウの細線維化は、３番目の繰り返しからの短いセグメントＶＱＩＶＹＫ（配列番号２１９）によるβシートの形成と、このセグメントが孤立してアミロイド様原線維を形成することとに依存する。その結果、原線維の脊椎に関与するこのタウのセグメントは、タウの細線維化を乱すための標的として使用することができる。完全長のタウアイソフォームは約４００アミノ酸の長さであるため、同様の特性を有するいくつかのより小さな構築物が実験の便宜上のために作成されている。Ｋ１２と称されるこれらの構築物のうちの１つは、３つのタウ微小管結合繰り返し配列を含み、その配列は、２番目の微小管結合繰り返し配列Ｖ２７５〜Ｓ３０５を有さない開始Ｍｅｔ残基を有する残基Ｑ２４４〜Ｙ３９４を含む（Ｓｃｈｗｅｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５、Ｗｉｌｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２）。このタウの１３ｋＤａ誘導体は、ＶＱＩＶＹＫ（配列番号：２１９）セグメントを含み、インビトロでＰＨＦを形成する（Ｓｃｈｗｅｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５、Ｗｉｌｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２）。
【０３０１】
アミロイドおよびアミロイド様原線維を形成するタンパク質からのいくつかの短いセグメントの構造が決定されている。タウからのＶＱＩＶＹＫ（配列番号２１９）を含むこれらのセグメント構造は、アミロイド様原線維で観察される一般的な特徴の分子基盤を明らかにする。立体ジッパーと称されるこれらの全てのセグメントの主な一般的な構造的特徴は、一方のβシートからのアミノ酸側鎖が全ての溶媒を除外する界面を通過してその隣接するβシートと交互に噛み合う１対のβシートを含む。これらのセグメント構造には、その親タンパク質の細線維化に重要な分子特徴が含まれており、セグメント構造のパッキングの破壊は、完全長タンパク質の細線維化の破壊に適用することができる。本明細書に開示される方法は、阻害分子と立体ジッパーセグメント構造との間に新規の界面を作成することを含む、Ｄ−アミノ酸原線維キャッピングペプチドを設計するアプローチを提供する。タウからのＶＱＩＶＹＫ（配列番号２１９）セグメントの原子レベルの構造から開始して、そのフィブリル様足場と良好に相互作用するが、足場から離れて側鎖を突出するＤ−アミノ酸原線維遮断薬が設計され、原線維の脊椎への分子の付加を防ぐ。ＴｈＳ蛍光アッセイおよび電子顕微鏡を使用して、これらのＤ−アミノ酸ペプチドが原線維形成を阻害することを示すことができる。この構造に基づくアプローチは、原線維形成セグメントの構造が既知であるか、または正確に予測できる場合、他のタンパク質によって形成されるアミロイド原線維の阻害剤を設計するために使用することができる。
【０３０２】
本発明の阻害ペプチドは、細線維化関連疾患を治療する方法において使用することができる。本発明は、細線維化関連疾患の治療に有用な薬学的組成物を提供する。薬学的組成物は、細線維化阻害ペプチドおよび薬学的に許容される賦形剤を含む。これらの組成物で使用するのに好適な賦形剤は、血液脳関門などの生理学的関門を通過する阻害ペプチドを支援することができる。
【０３０３】
このようなペプチドは、タウオパチー、アルツハイマー病、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）、ＦＴＤＰ−１７、進行性核上性麻痺（ＰＳＰ）、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、大脳皮質神経節変性症（ＣＢＤ）、てんかん、および動物のタウの発現を阻害することによるドラベ症候群を含む神経変性疾患を治療、予防、または改善するのに有用である。
【０３０４】
「タウオパチー」という用語は、リン酸化タウの蓄積が神経細胞およびグリア細胞で生じるような患者の脳における微小管関連タンパク質タウの異常な形態の出現を伴う全ての神経疾患を包含し、脳内のタウの病理学的凝集を伴う。この用語には、これらに限定されないが、以下の疾患が含まれる：アルツハイマー病（ＡＤ）、ゲルストルナン・シュトラウス・シャインカー病、英国認知症、デンマーク認知症、ピック病、進行性核上性麻痺、副腎変性、嗜銀顆粒性認知症、グアム・パーキンソニズム認知症複合、神経原線維型老年認知症、球状グリア封入体を伴う白質タウオパチー、前頭側頭型認知症（例えば、ＦＴＤＰ−１７）、および１７番染色体に連鎖するパーキソニズム。
【０３０５】
家族性および散発性ＡＤに加えて、他の例示的なタウオパチーは、染色体１７に連鎖するパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症（ＦＴＤＰ−１７）、進行性皮質下神経膠症、神経原線維型老年認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、筋萎縮性側索硬化症パーキンソニズム−認知症複合、ダウン症候群、ハラーフォルデン・スパッツ病、封入体筋炎、クロイツフェルト・ヤコブ病、多系統萎縮症、ニーマンピック病Ｃ型、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、亜急性硬化性全脳炎、筋緊張性ジストロフィー、神経原線維濃縮体を伴う非グアナミアン運動ニューロン疾患、脳卒中後のパーキンソニズム、および拳闘家痴呆（ボクシング病）などの慢性外傷性脳症である。（Ｍｏｒｒｉｓ，ｅｔ  ａｌ．Ｎｅｕｒｏｎ７０：４１０−２６，２０１１）。
【０３０６】
タウオパチーの防止は、タウオパチーの発生を防止することを意味する。タウオパチーの治療とは、タウオパチー障害の進行を予防または改善／低減させることを意味する。
【０３０７】
タウオパチー関連行動表現型には、認知機能障害、早期の人格変化および脱抑制、無関心、無為、無言、失行、保続、常同運動行動、口唇傾向、無秩序、逐次的タスクの計画または整理ができないこと、わがまま／冷淡、反社会性、共感の欠如、停止、頻繁な錯語エラーを伴うが比較的保持された理解力のある失文法型発話、低下された理解力および単語発見の欠乏、ゆっくりと進行する歩行不安定性、後方突進、すくみ行動、頻繁な転倒、非レボドパ反応性軸剛性、核上性注視麻痺、矩形波様眼球運動、遅い垂直方向の衝動性眼球運動、仮性球麻痺、四肢失行、ジストニア、皮質感覚損失、および振戦が含まれる。
【０３０８】
治療の対象となる患者には、ＡＤまたは他のタウオパチーの危険性がある無症候性の個体、ならびに現在症状を示している患者が含まれる。治療の対象となる患者には、ＡＤの家族歴またはゲノム内の遺伝的危険因子の存在などのＡＤの既知の遺伝的危険性を有する個体が含まれる。例示的な危険因子は、特に７１７位および６７０位および６７１位におけるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の変異である（それぞれハーディーおよびスウェーデンの変異）。他の危険因子は、プレセニリン遺伝子、ＰＳ１およびＰＳ２、ならびにＡｐｏＥ４での変異、高コレステロール血症またはアテローム性動脈硬化の家族歴である。現在ＡＤに罹患している個体は、上記の危険因子の存在によって特徴的な認知症から認識される。さらに、ＡＤを有する個体を特定するためのいくつかの診断試験が利用可能である。これらには、脳脊髄液のタウおよびΑβ４２レベルの測定が含まれる。タウの上昇およびΑβ４２レベルの低下は、ＡＤの存在を示す。ＡＤに罹患している個体は、ＡＤおよび関連障害協会の基準によって診断することもできる。
【０３０９】
いくつかの実施形態では、方法は、任意の程度のカスパーゼ２タウ切断に対して阻害するのに有効な、本明細書に記載されるような薬学的組成物の量を、概して、タウオパチー状態を有するかまたはその危険性がある対象に投与することを含む。他の実施形態では、方法は、概して、タウオパチー状態に特徴的な少なくとも１つの臨床的徴候または症状を改善するのに有効な、本明細書に記載されるような薬学的組成物の量を、タウオパチー状態を有するかまたはその危険性がある対象に投与することを含む。他の実施形態では、方法は、概して、タウオパチー状態の発症に対して対象を保護するのに有効な、本明細書に記載されるような薬学的組成物の量を、タウオパチー状態を有するかまたはその危険性がある対象に投与することを含む。
【０３１０】
本明細書中で使用される場合、「危険性がある」とは、記載されている危険性を実際に持っているか持っていない対象を指す。したがって、例えば、タウオパチー状態を発症する「危険性のある」対象は、１つ以上の兆候を欠く個体と比較して対象が症状を持っているかまたは発症しているいずれかの症状または臨床的兆候を示しているかどうかにかかわらず、特定の症状を有するかまたは発症する高い危険性の１つ以上の兆候を持つ対象である。タウオパシー状態の例示的な兆候には、例えば、ある特定の遺伝子（例えば、ＡＰＰ、ＰＳＥＮ１、ＰＳＥＮ２、ＣＨＭＰ２Ｂ、ＦＵＳ、ＧＲＮ、ＭＡＰＴ、ＴＡＲＤＢＰ、ＶＣＰ、および／またはＡＰＯＥのＡＰＯＥ４バリアント）における変異、および／またはアルツハイマー病もしくは前頭側頭型認知症の家族歴が含まれ得る。本明細書で使用される場合、「保護する」とは、特定の状態に特徴的な少なくとも１つの症状または臨床的徴候の発症の任意の遅延、または特定の状態に特徴的な少なくとも１つの症状もしくは臨床的徴候の発症の程度、重症度、頻度、および／または可能性の任意の低減を指す。
【０３１１】
本明細書で使用される場合、「アミロイドーシス」は、アミロイドタンパク質が器官および／または組織に異常に堆積されている様々な状態を包含する。タンパク質は、例えば、その二次構造の変化により、ベータプリーツシートに類似する凝集した不溶性形態をとる場合、アミロイドであると説明される。アミロイドーシスを伴う状態の例には、例えば、アルツハイマー病が含まれる。
【０３１２】
本明細書で使用される場合、「ポリペプチド凝集関連状態」とは、一種のポリペプチドの凝集によって特徴付けられるか、または健康な対象においては一般に観察されない程度の状態を意味する。そのような状態の例には、例えば、アルツハイマー病が含まれる。
【０３１３】
「同時投与（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」、「同時投与（ｃｏ−ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」、「同時投与（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」、および「同時に投与」という句は、化合物を組み合わせて投与することを意味する。
【０３１４】
本発明は、配列番号１〜８８および１０８〜２１０で提供される化合物、および１つ以上の追加の薬学的に活性な薬剤（複数可）の組み合わせの使用を含む。活性剤の組み合わせが投与される場合、それらは、別々の剤形で逐次的にもしくは同時に投与されてもよく、または単一の剤形で組み合わされてもよい。したがって、本発明はまた、次の量を含む薬学的組成物も含む：（ａ）配列番号１〜８８および１０８〜２１０の化合物または化合物の薬学的に許容される塩を含む第１の薬剤、（ｂ）第２の薬学的に活性な薬剤、ならびに（ｃ）薬学的に許容される担体、ビヒクル、または希釈剤。
【０３１５】
本発明の化合物はまた、本明細書に記載の疾患、状態、および／または障害を治療するための他の薬学的薬剤と組み合わせて使用され得る。したがって、本発明の化合物を他の薬学的薬剤と組み合わせて投与することを含む治療方法もまた提供される。本発明の化合物と組み合わせて使用され得る好適な薬学的薬剤としては、限定されないが、以下を含む：
（ｉ）パンＨＬＡ  ＤＲ−結合エピトープ（ＰＡＤＲＥ（登録商標））、ＡＣＣ−００１（Ｅｌａｎ／Ｗｙｅｔｈ）、およびＡｆｆｉｔｏｐｅに複合体化されているΑβ１−５などのアミロイド−β（またはその断片）；
（ｉｉ）ｐｏｎｅｚｕｍａｂ、ｓｏｌａｎｅｚｕｍａｂ、ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ（ＡＡＢ−００１としても知られている）、ＡＡＢ−００２（Ｗｙｅｔｈ／Ｅｌａｎ）、Ｇａｎｔｅｎｅｒｕｍａｂ、静脈内Ｉｇ（ＧＡＭＭＡＧＡＲＤ（登録商標））、ＬＹ２０６２４３０（ヒト化ｍ２６６；Ｌｉｌｌｙ）、ならびに国際特許公開第ＷＯ０４／０３２８６８号、同第ＷＯ０５／０２５６１６号、同第ＷＯ０６／０３６２９１号、同第ＷＯ０６／０６９０８１号、同第ＷＯ０６／１１８９５９号、米国特許公開第ＵＳ２００３／００７３６５５号、同第ＵＳ２００４／０１９２８９８号、同第ＵＳ２００５／００４８０４９号、同第ＵＳ２００５／００１９３２８号、欧州特許公開第ＥＰ０９９４７２８号および同第１２５７５８４号、ならびに米国特許第５，７５０，３４９号に記載されているものなどのアミロイド−βに対する抗体（またはその断片）；
（ｉｉｉ）エプロジセート（ＫＩＡＣＴＡ（登録商標））、セレコキシブ、ロバスタチン、アナプソス、コロストリニン、ピオグリタゾン、クリオキノール（ＰＢＴ１としても知られている）、ＰＢＴ２（Ｐｒａｎａ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、フルルビプロフェン（ＡＮＳＡＩ  Ｄ（登録商標）、ＦＲＯＢＥＮ（登録商標））およびそのＲ−エナンチオマータレンフルルビル（ＦＬＵＲＩＺＡＮ（登録商標））、ニトロフルルビプロフェン、フェノプロフェン（ＦＥＮＯＰＲＯＮ、ＮＡＬＦＯＮ（登録商標））、イブプロフェン（ＡＤＶＩＬ（登録商標）、ＭＯＴＲＩＮ（登録商標）、ＮＵＲＯＦＥＮ（登録商標））、イブプロフェンリシネート、メクロフェナム酸、メクロフェナム酸ナトリウム（ＭＥＣＬＯＭＥＮ（登録商標））、インドメタシン（ＩＮＤＯＣＩＮ（登録商標））、ジクロフェナクナトリウム（ＶＯＬＴＡＲＥＮ（登録商標））、ジクロフェナクカリウム、スリンダク（ＣＬＩＮＯＲＩ  Ｌ（登録商標））、スリンダク硫化物、ジフルニサル（ＤＯＬＯＢＩＤ（登録商標））、ナプロキセン（ＮＡＰＲＯＳＹＮ（登録商標））、ナプロキセンナトリウム（ＡＮＡＰＲＯＸ（登録商標）、ＡＬＥＶＥ（登録商標））、インスリン分解酵素（インスリシンとしても知られている）、イチョウ葉抽出物ＥＧｂ−７６１（ＲＯＫＡＮ（登録商標）、ＴＥＢＯＮＩＮ（登録商標））、トラミプロセート（ＣＥＲＥＢＲＩＬ（登録商標）、ＡＬＺＨＥＭＥＤ（登録商標））、ネプリライシン（中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）としても知られている）、シロ−イノシトール（シリトールとしても知られている）、アトルバスタチン（ＬＩ  ＰＩＴＯＲ（登録商標））、シンバスタチン（ＺＯＣＯＲ（登録商標））、イブタモレンメシラート、ＬＹ４５０１３９（Ｌｉｌｌｙ）、ＢＭＳ−７８２４５０、およびＧＳＫ−１８８９０９などのＢＡＣＥ阻害剤、ＥＬＮＤ−００７、ＢＭＳ−７０８１６３（Ａｖａｇａｃｅｓｔａｔ）、およびＤＳＰ８６５８（Ｄａｉｎｉｐｐｏｎ）などのガンマセクレターゼモジュレーターおよび阻害剤、ならびにＴＡＧＥ４８８（Ｔｒａｎｓｔｅｃｈ）およびＴＴＰ４０００（Ｔｒａｎｓｔｅｃｈ）などのＲＡＧＥ（終末糖化産物の受容体）阻害剤、およびＰＴＩ−７７７を含む米国特許第７，２８５，２９３号に開示されているものなどのアミロイド低下または阻害剤（アミロイド生成、蓄積、および線維化を低減するものを含む）；
（ｉｖ）アルファ−アドレナリン受容体アゴニストおよびベータ−アドレナリン受容体遮断薬（ベータ遮断薬）、抗コリン薬、抗痙攣薬、抗精神病薬、カルシウムチャネル遮断薬、カテコールＯ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤、中枢神経系刺激剤、コルチコステロイド、ドーパミン受容体アゴニストおよびアンタゴニスト、ドーパミン再取り込み阻害剤、ガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）受容体アゴニスト、免疫抑制剤、インターフェロン、ムスカリン受容体アゴニスト、神経保護薬、ニコチン性受容体アゴニスト、ノルエピネフリン（ノルアドレナリン）再取り込み阻害剤、キノリン、ならびに栄養因子；
（ｖ）ＰＦ−３６５４７４６、ならびに米国特許公開第ＵＳ２００５／００４３３５４号、同第ＵＳ２００５／０２６７０９５号、同第ＵＳ２００５／０２５６１３５号、同第ＵＳ２００８／００９６９５５号、同第ＵＳ２００７／１０７９１７５号、および同第ＵＳ２００８／０１７６９２５号、国際特許公開第ＷＯ２００６／１３６９２４号、同第ＷＯ２００７／０６３３８５号、同第ＷＯ２００７／０６９０５３号、同第ＷＯ２００７／０８８４５０号、同第ＷＯ２００７／０９９４２３号、同第ＷＯ２００７／１０５０５３号、同第ＷＯ２００７／１３８４３１号、および同第ＷＯ２００７／０８８４６２号、ならびに米国特許第７，１１５，６００号）に記載されているものなどのヒスタミン３（Ｈ３）アンタゴニスト；
（ｖｉ）メマンチン（ＮＡＭＥＮＤＡ、ＡＸＵＲＡ、ＥＢＩＸＡ）、アマンタジン（ＳＹＭＭＥＴＲＥＬ）、アカンプロセート（ＣＡＭＰＲＡＬ）、ベソンプロジル、ケタミン（ＫＥＴＡＬＡＲ）、デルセミン、デキサナビノール、デキセファロキサン、デキストロメトルファン、デキストロルファン、トラキソプロジル、ＣＰ−２８３０９７、ヒマンタン、イダンタドール、イペノキサゾン、Ｌ−７０１２５２（Ｍｅｒｃｋ）、ランシセミン、レボルファノール（ＤＲＯＭＯＲＡＮ）、メタドン、（ＤＯＬＯＰＨＩＮＥ）、ネラメキサン、ペルジンインフォテル、フェンシクリジン、チアネプチン（ＳＴＡＢＬＯＮ）、ジゾシルピン（ＭＫ−８０１としても知られている）、イボガイン、ボアカンギン、チレタミン、リルゾール（ＲＩＬＵＴＥＫ）、アプチガネル（ＣＥＲＥＳＴＡＴ）、ギブスチネル、およびレマシミドなどのＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体アンタゴニスト；
（ｖｉｉ）セレギリン（ＥＭＳＡＭ）、セレギリン塩酸塩（ｌ−デプレニル、ＥＬＤＥＰＲＹＬ、ＺＥＬＡＰＡＲ）、ジメチルセレギリン、ブロファロミン、フェネルジン（ＮＡＲＤＩＬ）、トラニルシプロミン（ＰＡＲＮＡＴＥ）、モクロベミド（ＡＵＲＯＲＩＸ、ＭＡＮＥＲＩＸ）、ベフロキサトン、サフィンアミド、イソカルボキサジド（ＭＡＲＰＬＡＮ）、ニアラミド（ＮＩＡＭＩ  Ｄ）、ラサギリン（ＡＺＩＬＥＣＴ）、イプロニアジド（ＭＡＲＳＩＬＩＤ、ＩＰＲＯＺＩＤ、ＩＰＲＯＮＩＤ）、イプロクロジド、トロキサトン（ＨＵＭＯＲＹＬ、ＰＥＲＥＮＵＭ）、ビフェメラン、デスオキシペガニン、ハルミン（テレパチンまたはバナステリンとしても知られている）、ハルマリン、リネゾリド（ＺＹＶＯＸ、ＺＹＶＯＸＩＤ）、およびパルギリン（ＥＵＤＡＴＩＮ、ＳＵＰＩＲＤＹＬ）などのモノアミンオキシダーゼ（ＭＡＯ）阻害剤；
（ｖｉｉｉ）（ａ）ＰＤＥ１阻害剤、（ｂ）ＰＤＥ２阻害剤、（ｃ）ＰＤＥ３阻害剤、（ｄ）ＰＤＥ４阻害剤、（ｅ）ＰＤＥ５阻害剤、（ｆ）ＰＤＥ９阻害剤（例えば、ＰＦ−０４４４７９４３、ＢＡＹ７３−６６９１（Ｂａｙｅｒ  ＡＧ）、ならびに米国特許公開第ＵＳ２００３／０１９５２０５号、同第ＵＳ２００４／０２２０１８６号、同第ＵＳ２００６／０１１１３７２号、同第ＵＳ２００６／０１０６０３５号、およびＵＳＳＮ１２／１１８，０６２（２００８年５月９日に出願）に記載されているもの）、および（ｇ）２−（｛４−［１−メチル−４−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ｝メチル）キノリン（ＰＦ−２５４５９２０）などのＰＤＥ１０阻害剤を含むホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）阻害剤；
（ｉｘ）スピペロン、／ｅｖｏ−ピンドロール、レコゾタンなどのセロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン）１Ａ（５−ＨＴ−ＩＡ）受容体アンタゴニスト；
（ｘ）バビカゼリンおよびジクロナピンなどのセロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン）２Ｃ（５−ＨＴ２ｃ）受容体アゴニスト、ＰＲＸ−０３１４０（Ｅｐｉｘ）およびＰＦ−０４９９５２７４などのセロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン）４（５−ＨＴ４）受容体アゴニスト／アンタゴニスト；
（ｘｉ）オンダンセトロン（Ｚｏｆｒａｎ）などのセロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン）３Ｃ（５−ＨＴ３ｃ）受容体アンタゴニスト；
（ｘｉｉ）ミアンセリン（ＴＯＬＶＯＮ、ＢＯＬＶＩＤＯＮ、ＮＯＲＶＡＬ）、メチオテピン（メチテピンとしても知られている）、リタンセリン、ＳＢ−２７１０４６、ＳＢ−７４２４５７（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、Ｌｕ  ＡＥ５８０５４（Ｌｕｎｄｂｅｃｋ  Ａ／Ｓ）、ＳＡＭ−７６０、およびＰＲＸ−０７０３４（Ｅｐｉｘ）などのセロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン）６（５−ＨＴ６）受容体アンタゴニスト；
（ｘｉｉｉ）アラプロクレート、シタロプラム（ＣＥＬＥＸＡ、ＣＩＰＲＡＭＩＬ）、エスシタロプラム（ＬＥＸＡＰＲＯ、ＣＩＰＲＡＬＥＸ）、クロミプラミン（ＡＮＡＦＲＡＮＩＬ）、デュロキセチン（ＣＹＭＢＡＬＴＡ）、フェモキセチン（ＭＡＬＥＸＩＬ）、フェンフルラミン（ＰＯＮＤＩＭＩＮ）、ノルフェンフルラミン、フルオキセチン（ＰＲＯＺＡＣ）、フルボキサミン（ＬＵＶＯＸ）、インダルピン、ミルナシプラン（ＩＸＥＬ）、パロキセチン（ＰＡＸＩＬ、ＳＥＲＯＸＡＴ）、セルトラリン（ＺＯＬＯＦＴ、ＬＵＳＴＲＡＬ）、トラゾドン（ＤＥＳＹＲＥＬ、ＭＯＬＩＰＡＸＩＮ）、ベンラファクシン（ＥＦＦＥＸＯＲ）、ジメリジン（ＮＯＲＭＵＤ、ＺＥＬＭＩＤ）、ビシファジン、デスベンラファキシン（ＰＲＩＳＴＩＱ）、ブラソフェンシン、ビラゾドン、カリプラジン、およびテソフェンシンなどのセロトニン（５−ＨＴ）再取り込み阻害剤；
（ｘｉｖ）パリフルチン、ＯＲＧ−２５９３５、およびＯＲＧ−２６０４１などのグリシン輸送体−１阻害剤、ならびにＡＦＱ−０５９およびアマンチジンなどのｍＧｌｕＲモジュレーター；
（ｘｖ）ペランパネル、ミバンパトル、セルランパネル、ＧＳＫ−７２９３２７、およびＮ−｛（３Ｓ，４Ｓ）−４−［４−（５−シアノチオフェン−２−イル）フェノキシ］テトラヒドロフラン−３−イル｝プロパン−２−スルホンアミドなどのＡＭＰＡ型グルタミン酸受容体モジュレーター；
（ｘｖｉ）リトナビルなどのＰ４５０阻害剤；
（ｘｖｉｉ）ダブネチドなどのタウ療法の標的物；
（ｘｖｉｉｉ）ＢＡＣＥ阻害剤など。
【０３１６】
ＡＤ治療薬の例としては、これらに限定されないが、本明細書に記載のＢＡＣＥ−１阻害剤、ＢＡＣＥ−１阻害剤ＣＴＳ−２１  １６６（ＣｏＭｅｎｔｉｓ  Ｉｎｃ．）、ＡＺＤ３２９３（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、Ｅ−２６０９（エーザイ）、ＴＡＫ−０７０（タケダ）、およびＨＰＰ−８５４（Ｔｒａｎｓｔｅｃｈ）、ガンマセクレターゼ阻害剤（例えば、ＷＯ２００７／０８４５９５およびＷＯ２００９／００８９８０に記載されているような）、ガンマセクレターゼモジュレーター（例えば、ＷＯ２００８／１５３７９３およびＷＯ２０１０／０５６８４９に記載されているような）、ｓｏｌａｎｅｚｕｍａｂ（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ）、リラグルチド（Ｌａｎｃａｓｔｅｒ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、ベキサロテン（商品名Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ（登録商標））、ＡＣＣ−００１（ワクチン）、ムスカリンアンタゴニスト（例えば、ｍｉアゴニスト（アセチルコリン、オキソトレモリン、カルバコール、またはＭｃＮａ３４３など）、またはｍ２アンタゴニスト（アトロピン、ジシクロベリン、トルテロジン、オキシブチニン、イプラトロピウム、メトクトラミン、トリプタミン、またはガラミンなど）、コリンエステラーゼ阻害剤（例えば、ドネペジル（Ａｒｉｃｅｐｔ（登録商標）、ガランタミン（Ｒａｚａｄｙｎｅ（登録商標））、およびリバスチグミン（Ｅｘｅｌｏｎ（登録商標））などのアセチルおよび／またはブチリルコリンエステラーゼ阻害剤、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体アンタゴニスト（例えば、Ｎａｍｅｎｄａ（登録商標）（Ｆｏｒｒｅｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から入手可能なメマンチンＨＣ１）、コリンエステラーゼ阻害剤およびＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体アンタゴニストの組み合わせ、非ステロイド系抗炎症剤、神経炎症を低減することができる抗炎症剤、抗アミロイド抗体（ｂａｐｉｎｅｕｚｅｍａｂ、Ｗｙｅｔｈ／Ｅｌａｎなど）、ビタミンＥ、ニコチン性アセチルコリン受容体アゴニスト、ＣＢ１受容体インバースアゴニストまたはＣＢ１受容体アンタゴニスト、抗生物質、成長ホルモン分泌促進剤、ヒスタミンＨ３アンタゴニスト、ＡＭＰＡアゴニスト、ＰＤＥ４阻害剤、ＧＡＢＡＡインバースアゴニスト、アミロイド凝集の阻害剤、グリコーゲンシンターゼキナーゼベータ阻害剤、アルファセクレターゼ活性のプロモーター、ＰＤＥ−１０阻害剤、タウキナーゼ阻害剤（例えば、ＧＳＫ３ベータ阻害剤、ｃｄｋ５阻害剤、またはＥＲＫ阻害剤）、タウ凝集阻害剤（例えば、Ｒｅｍｂｅｒ（登録商標））、ＲＡＧＥ阻害剤（例えば、ＴＴＰ４８８（ＰＦ−４４９４７００））、抗Ａｂｅｔａワクチン、ＡＰＰリガンド、インスリンを上方制御する薬剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤などのコレステロール低下剤（例えば、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチンなどのスタチン）および／もしくはコレステロール吸収阻害剤（エゼチミブなど）、またはＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤およびコレステロール吸収阻害剤の組み合わせ（例えば、Ｖｙｔｏｒｉｎ（登録商標）など）、フィブラート系薬剤（例えば、クロフィブラート、ク��フィブリド、エトフィブラート、およびアルミニウムクロフィブラートなど）、フィブラート系薬剤とコレステロール低下剤および／またはコレステロール吸収阻害剤との組み合わせ、ニコチン性受容体アゴニスト、ナイアシン、ナイアシンとコレステロール吸収阻害剤および／またはコレステロール低下剤との組み合わせ（例えば、Ｓｉｍｃｏｒ（登録商標）（Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．から入手可能なナイアシン／シンバスタチン）、ＬＸＲアゴニスト、ＬＲＰ模倣物、Ｈ３受容体アンタゴニスト、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、ｈｓｐ９０阻害剤、５−ＨＴ４アゴニスト（例えば、ＰＲＸ−０３１４０（Ｅｐｉｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ））、５−ＨＴ６受容体アンタゴニスト、ｍＧｌｕＲ１受容体モジュレーターまたはアンタゴニスト、ｍＧｌｕＲ５受容体モジュレーターまたはアンタゴニスト、ｍＧｌｕＲ２／３アンタゴニスト、プロスタグランジンＥＰ２受容体アンタゴニスト、ＰＡＩ−１阻害剤、ゲルゾリンなどのＡｂｅｔａ流出物を誘発することができる薬剤、金属タンパク質弱毒化化合物（例えば、ＰＢＴ２）、およびＧＰＲ３モジュレーター、ならびにジメボリンなどの抗ヒスタミン薬（例えば、Ｄｉｍｅｂｏｎ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ）が挙げられる。
【０３１７】
本発明の一態様は、別々に投与され得る薬学的に活性な化合物の組み合わせによる疾患／状態の治療を企図するため、本発明はさらに、キットの形態で別々の薬学的組成物を組み合わせることにも関する。キットは、２つの別々の薬学的組成物：本発明の化合物、および第２の薬学的化合物を含む。キットは、分割されたボトルまたは分割されたホイルパケットなどの別々の組成物を収容するための容器を含む。容器の追加の例には、シリンジ、箱、バッグが含まれる。典型的には、キットには、別々の構成要素の使用説明書が含まれる。キットの形態は、別々の成分が異なる剤形で好ましく投与される場合（例えば、経口および非経口）、異なる投与間隔で投与される場合、または処方医師または獣医が組み合わせの個々の成分の滴定が望ましい場合に特に有利である。。
【０３１８】
したがって、当業者は、用量および投与計画は、治療分野で知られている方法に従って調整することが、本明細書に提供される開示に基づいて理解するであろう。すなわち、最大耐量を容易に確立することができ、被験者に検出可能な治療効果を提供するための各薬剤を投与するための時間的要件と同様に、被験者に検出可能な治療効果を提供する有効量も決定することができる。したがって、特定の用量および投与計画が本明細書で例示されているが、これらの例は、本開示を実施する際に対象に提供され得る用量および投与計画を決して限定しない。本発明の治療有効量のペプチドによる対象の治療は、単一の治療を含むことができ、または、好ましくは、一連の治療を含むことができる。好ましい例では、対象は毎日、週に１回または隔週でペプチドで治療される。治療は数日、数週間、数ヶ月、または数年間持続します（定期的に繰り返されます）。
【０３１９】
投薬量の値は緩和すべき状態の種類および重症度に応じて変動してもよいし、単一または複数の用量を含んでもよいことに留意すべきです。特定の対象については、個々の必要性および組成物の投与を管理または監督する人の専門的判断に従って、特定の投与計画を経時的に調整する必要があり、本明細書に記載の投与量範囲は例示であることをさらに理解されたいクレームされた組成物の範囲または実施を制限することを意図したものではありません。さらに、本開示の組成物の投与計画は、疾患の種類、年齢、体重、性別、対象の病状、病状の重症度、投与経路、および使用される特定の抗体。したがって、投与計画は大きく異なり得るが、標準的な方法を使用して日常的に決定され得る。例えば、用量は、薬物動態学的または薬力学的パラメータに基づいて調整することができ、これには毒性効果および／または検査値などの臨床効果が含まれる場合がある。したがって、本開示は、当業者によって決定される被験者内の用量漸増を包含する。適切な投与量およびレジメンの決定は、関連技術分野で周知であり、本明細書に開示される教示が提供されれば、当業者に包含されると理解されるであろう。
【０３２０】
本発明のペプチドの用量はまた、本開示の特定のペプチドの投与に伴うかもしれない任意の有害な副作用の存在、性質および程度によって決定されるであろう。通常、主治医は、年齢、体重、一般的な健康、食事、性別、本発明のペプチドなどの様々な要因を考慮して、個々の患者を治療する本開示のペプチドの投与量を決定する。投与される開示、投与経路、および治療されている状態の重症度。例として、本発明を限定することを意図するものではないが、本開示のペプチドの用量は、約０．０００１〜約１００ｍｇ／治療対象の体重１ｋｇ／日であり得る。ペプチドは、１〜３用量などの１回以上の用量で投与することができる。
【０３２１】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、類似体のいずれかは、患者への投与に適した純度レベルで本明細書に開示される含みます。一部の実施形態において、類似体は、少なくとも約９０％、好ましくは約９５％を超える、より好ましくは約９９％を超える純度レベル、および薬学的に許容される希釈剤、担体または賦形剤を有する。
【０３２２】
医薬組成物は、生理学的に適合するｐＨを達成するように製剤化することができます。いくつかの実施形態において、医薬組成物のｐＨは、製剤および投与経路に応じて、少なくとも５、または少なくとも６、または少なくとも７であり得る。
【０３２３】
必要と被験者が許容する様々な実施形態は、医薬組成物の単回または複数回投与で投与量および頻度に応じて投与されます。いずれにしても、組成物は、対象を効果的に治療するのに十分な量の本明細書に開示されるペプチドの少なくとも１つを提供する必要がある。投与量は１回投与できるが、治療結果が得られる、または副作用が治療の中止を保証するかのいずれかまで、定期的に適用することができる。
【０３２４】
ペプチド薬学的組成物の投与の投与頻度は、治療および治療される特定の疾患の性質に依存する。本発明の治療有効量のペプチドによる対象の治療は、単一の治療を含むことができ、または、好ましくは、一連の治療を含むことができる。好ましい例では、対象は毎日、週に１回または隔週でペプチドにより治療される。
【０３２５】
追加のまたは関連する実施形態は、以下の番号の段落で定義される。
１．式Ｉのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０（Ｉ）（配列番号１）
式中、
Ｘａａ１が、不在、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ２が、不在、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり、
Ｘａａ４が、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ５が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ６が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｐｈｅ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ７が、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、またはＬｅｕであり、
Ｘａａ８が、不在、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｔｙｒ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ９が、不在、Ｔｒｐ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ１０が、不在、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＬｅｕであり、
ただし、Ｘａａ２が不在である場合、Ｘａａ１が不在であり、さらに、Ｘａａ９が不在である場合、Ｘａａ１０が不在であることを条件とし、さらに、Ｘａａ８が不在である場合、Ｘａａ１０およびＸａａ９が不在であることを条件とする、ペプチド、またはそのＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
２．Ｘａａ１が、不在、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ２が、不在、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ３が、Ｉｌｅ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ４が、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｔｒｐ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ５が、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ６が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ７が、Ｔｙｒ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、またはＬｙｓであり、
Ｘａａ８が、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ９が、不在、Ｐｈｅ、またはＴｒｐであり、
Ｘａａ１０が、不在、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、またはＬｅｕである、
段落１に記載のペプチド、またはＣ末端の酸およびアミド、ならびにそれらのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
３．ＷＲＩＷＬＷＹＲ（配列番号２）、
ＷＲＩＲＬＲＹＷ（配列番号３）、
ＷＲＩＲＬＹＷＷ（配列番号４）、
ＷＲＩＲＬＷＹＷ（配列番号５）、
ＷＲＩＷＬＹＷＲ（配列番号６）、
ＷＲＩＲＬＷＹＲ（配列番号７）、
ＷＷＩＲＬＲＹＷ（配列番号８）、
ＷＲＩＷＩＲＹＷ（配列番号９）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号１０）、
ＷＲＩＲＩＲＹＷ（配列番号１１）、
ＷＲＩＲＩＷＹＷ（配列番号１２）、
ＷＹＲＲＲＷＩＬ（配列番号１３）、
ＷＲＹＷＲＲＩＬ（配列番号１４）、
ＷＲＦＲＬＹＬＲ（配列番号１５）、
ＷＲＩＲＷＲＹＷ（配列番号１６）、
ＷＲＩＷＬＲＹＷ（配列番号１７）、
ＷＷＲＲＲＩＬＹ（配列番号１８）、
ＷＲＩＲＬＹＷＲ（配列番号１９）、
ＲＦＲＬＹＬＲ（配列番号２０）、
ＲＦＲＦＹＬＲ（配列番号２１）、
ＲＩＷＩＲＬＷ（配列番号２２）、
ＲＩＲＩＷＶＷ（配列番号２３）、
ＲＩＲＬＹＷＷ（配列番号２４）、
ＲＩＲＩＹＷＷ（配列番号２５）、
ＲＩＲＩＷＬＷ（配列番号２６）、
ＲＩＷＩＲＶＷ（配列番号２７）、
ＲＹＷＬＷＲＲＩ（配列番号２８）、
ＲＩＲＬＹＷＷＲ（配列番号２９）、
ＲＩＷＬＲＬＷ（配列番号３０）、
ＲＩＷＬＲＶＷ（配列番号３１）、
ＲＲＷＷＹＩＬ（配列番号３２）、
ＲＦＲＦＷＹＲ（配列番号３３）、
ＲＩＲＩＷＩＷ（配列番号３４）、
ＷＦＲＬＹＷＲ（配列番号３５）、
ＬＦＹＬＲＬＴ（配列番号３６）、
ＦＦＲＬＹＬＲ（配列番号３７）、
ＲＩＲＦＷＹＲ（配列番号３８）、
ＲＦＲＦＹＷＲ（配列番号３９）、
ＩＲＬＹＷＷＲ（配列番号４０）、
ＩＲＬＩＶＷ（配列番号４１）、
ＩＲＬＹＷＲＷ（配列番号４２）、
ＩＲＩＷＶＷ（配列番号４３）、
ＩＲＬＷＩＷ（配列番号４４）、
ＩＲＩＷＩＷ（配列番号４５）、
ＩＲＬＹＷＷ（配列番号４６）、
ＩＷＩＲＩＷ（配列番号４７）、
ＩＲＩＹＷＷ（配列番号４８）、
ＩＷＬＲＩＷ（配列番号４９）、
ＩＷＩＲＬＷ（配列番号５０）、
ＩＲＩＷＬＷ（配列番号５１）、
ＩＲＬＷＶＷ（配列番号５２）、
ＩＲＬＹＶＷ（配列番号５３）、
ＩＲＬＷＬＷ（配列番号５４）、
ＷＲＩＷＩＲＷ（配列番号５５）、
ＷＹＲＩＷＩＲＷ（配列番号５６）、
ＷＲＩＲＬＲＷ（配列番号５７）、
ＷＲＩＲＬＲＧＷ（配列番号５８）、
ＷＹＲＩＲＬＲＹＷ（配列番号５９）、
ＲＩＲＬＷＹＷ（配列番号６０）、
ＲＩＲＩＷＹＷ（配列番号６１）、
ＷＲＩＲＩＲＷ（配列番号６２）、
ＲＩＲＶＷＩＦ（配列番号６３）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＫ（配列番号６４）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＬ（配列番号６５）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＲ（配列番号６６）、
ＬＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号６７）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＨ（配列番号６８）、
ＷＲＩＱＩＲＷ（配列番号６９）、
ＷＹＲＩＷＶＲＹＷ（配列番号７０）、
ＷＹＲＬＲＩＲＷ（配列番号７１）、
ＷＫＩＫＬＫＹＷ（配列番号７２）、
ＷＲＶＷＧＷＶＲＷ（配列番号７３）、
ＷＩＲＬＹＷＲＷ（配列番号７４）、
ＷＫＶＱＶＲＬＷ（配列番号７５）、
ＩＬＲＹＷＨ（配列番号７６）、
ＹＫＬＨＩＲＨＷ（配列番号７７）、
ＷＹＲＶＲＧＲＶＷ（配列番号７８）、
ＫＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号７９）、および
ＷＲＩＮＩＲＹＷ（配列番号８０）から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる段落１に記載のペプチド。
４．ＷＲＩＲＷＲＹＷ（配列番号１６）、
ＲＩＲＩＷＩＷ（配列番号３４）、
ＷＹＲＬＲＩＲＷ（配列番号７１）、
ＷＲＩＲＩＲＷ（配列番号６２）、
ＷＲＩＲＬＲＷ（配列番号５７）、
ＷＹＲＩＷＩＲＷ（配列番号５６）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＫ（配列番号６４）、
ＷＲＩＲＬＲＹＷ（配列番号３）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号１０）、
ＷＹＲＩＲＬＲＹＷ（配列番号５９）、
ＷＫＩＫＬＫＹＷ（配列番号７２）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＬ（配列番号６５）、
ＷＲＩＲＩＲＹＷ（配列番号１１）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＲ（配列番号６６）、
ＷＷＩＲＬＲＹＷ（配列番号８）、
ＬＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号６７）、
ＷＲＩＱＩＲＷ（配列番号６９）、
ＲＩＲＬＹＷＷ（配列番号２４）、
ＷＲＶＷＧＷＶＲＷ（配列番号７３）、
ＷＹＲＩＷＶＲＹＷ（配列番号７０）、
ＷＲＩＲＬＲＧＷ（配列番号５８）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＨ（配列番号６８）、
ＷＩＲＬＹＷＲＷ（配列番号７４）、
ＷＫＶＱＶＲＬＷ（配列番号７５）、
ＩＬＲＹＷＨ（配列番号７６）、
ＷＲＩＷＩＲＷ（配列番号５５）、
ＷＲＩＷＩＲＹＷ（配列番号９）、
ＲＩＲＩＷＹＷ（配列番号６１）、
ＹＫＬＨＩＲＨＷ（配列番号７７）、
ＷＹＲＶＲＧＲＶＷ（配列番号７８）、
ＲＩＲＶＷＩＦ（配列番号６３）、
ＫＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号７９）、
ＷＲＩＮＩＲＹＷ（配列番号８０）、および
ＲＩＲＬＷＹＷ（配列番号６０）から選択されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる段落１に記載のペプチド、
ならびにその薬学的に許容される塩。
５．ＷＲＩＲＷＲＹＷ（配列番号１６）、
ＲＩＲＩＷＩＷ（配列番号３４）、
ＷＹＲＬＲＩＲＷ（配列番号７１）、
ＷＲＩＲＩＲＷ（配列番号６２）、
ＷＲＩＲＬＲＷ（配列番号５７）、
ＷＹＲＩＷＩＲＷ（配列番号５６）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＫ（配列番号６４）、
ＷＲＩＲＬＲＹＷ（配列番号３）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号１０）、
ＷＹＲＩＲＬＲＹＷ（配列番号５９）、
ＷＫＩＫＬＫＹＷ（配列番号７２）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＬ（配列番号６５）、
ＷＲＩＲＩＲＹＷ（配列番号１１）、
ＷＷＩＲＩＲＹＷＲ（配列番号６６）、
ＷＷＩＲＬＲＹＷ（配列番号８）、
ＬＷＷＩＲＩＲＹＷ（配列番号６７）、
ＷＲＩＱＩＲＷ（配列番号６９）、
ＲＩＲＬＹＷＷ（配列番号２４）、
ＷＲＶＷＧＷＶＲＷ（配列番号７３）、
ＷＹＲＩＷＶＲＹＷ（配列番号７０）、および
ＷＲＩＲＬＲＧＷ（配列番号５８）のうちのいずれかから選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなる段落１に記載のペプチド、
またはその薬学的に許容される塩。
６．式ＩＩのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ１１−Ｘａａ１２−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｘａａ１３−Ｘａａ１４（ＩＩ）（配列番号８１）
式中、Ｘａａ１１が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ１２が、不在、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１３が、極性側鎖を有するアミノ酸、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１４が、不在またはＴｒｐであり、ただし、Ｘａａ１２が不在である場合、Ｘａａ１１が不在であることを条件とする、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
７．式ＩＩＩのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ１５−Ｘａａ１６−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｘａａ１７−Ｘａａ１８−Ｘａａ１９−Ｘａａ２０（ＩＩＩ）（配列番号８２）
式中、Ｘａａ１５が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ１６が、不在、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１７が、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１８が、Ｇｌｙ、Ｔｙｒ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１９が、不在、Ａｒｇ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ２０が、不在またはＡｒｇであり、ただし、Ｘａａ１６が不在である場合、Ｘａａ１５が不在であることを条件とし、さらに、Ｘａａ１９が不在である場合、Ｘａａ２０が不在であることを条件とする、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
８．式ＩＶのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ２１−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｘａａ２２−Ｔｒｐ（ＩＶ）（配列番号８３）
式中、Ｘａａ２１が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２２が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
９．式Ｖのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ２３−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｒｐ−Ｘａａ２４（Ｖ）（配列番号８４）
式中、Ｘａａ２３が、不在、または非極性側鎖もしくは極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２４が、不在、または極性側鎖もしくは非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
１０．式ＶＩのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ２５−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｘａａ２６−Ｘａａ２７−Ｘａａ２８（ＶＩ）（配列番号８５）
式中、Ｘａａ２５が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２６が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２７が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ２８が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
１１．式ＶＩＩのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ２９−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｘａａ３０−Ｘａａ３１−Ｘａａ３２−Ａｒｇ（ＶＩＩ）（配列番号８６）
式中、Ｘａａ２９が、不在、または極性側鎖もしくは非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３０が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３１が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３２が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
１２．式ＶＩＩＩのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ３３−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ｘａａ３４−Ｘａａ３５−Ｘａａ３６（ＶＩＩＩ）（配列番号８７）
式中、Ｘａａ３３が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３４が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３５が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３６が、不在、または極性側鎖もしくは非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
１３．式ＩＸのアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるペプチドであって、
Ｘａａ３７−Ｘａａ３８−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｘａａ３９−Ｘａａ４０−Ａｒｇ−Ｘａａ４１−Ｘａａ４２（ＩＸ）（配列番号８８）
式中、Ｘａａ３７が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３８が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ３９が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４０が、非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４１が、極性側鎖または非極性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘａａ４２が、不在、または非極性側鎖を有するアミノ酸である、ペプチド、またはＣ末端の酸もしくはアミド、またはそのＮ−アセチル誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
１４．段落１〜１３のいずれか１つに記載のペプチドと少なくとも７０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチド。
１５．段落１〜１３のいずれか１つに記載のポリペプチドの１つ以上のアミノ酸の修飾、欠失、挿入、または置換を含むペプチド。
１６．置換が、等価の、保存的もしくは非保存的置換、または合成もしくは化学的に修飾されたカチオン性アミノ酸残基である、段落１５に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
１７．置換が、等価の、保存的もしくは非保存的置換である、段落１５に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
１８．修飾が、持続時間増強部分、または持続時間増強部分へのリンカーである、段落１５に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
１９．修飾がＣＰＰであり、ただし、ＣＰＰ修飾ペプチドが、５−ＴＡＭＲＡ−ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＲＩＲＬＹＷＷＲ（配列番号９９）または５−ＴＡＭＲＡ−ＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＲＩＲＬＹＷＷＲ（配列番号１０１）ではないことを条件とし、さらに、ＣＰＰが、ＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号１０７）を含まないことを条件とする、段落１５に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
２０．配列−ＧＧＳＧＧ−（配列番号９３）のリンカーをさらに含む、段落１９に記載のペプチド、およびその薬学的に許容される塩。
２１．Ｒ  ＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＬＦＹＬＲＬＴ（配列番号９６）、ＲＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＷＲＩＷＩＲＹＷ（配列番号９７）、およびＲＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＷＲＬＫＶＲＷＷ（配列番号９８）から選択されるアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなる段落１９に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
２２．段落１〜２１のいずれかに記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩を含む薬学的組成物。
２３．段落１〜２１のいずれかに記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩でタウタンパク質の凝集を治療する方法。
２４．アルツハイマー病；パーキンソン病（ａ−シヌクレインアミロイドーシス）；筋萎縮性側索硬化症；ＩＩ型糖尿病（膵島アミロイドポリペプチド（ＩＡＰＰ）アミロイドーシス）；リゾチームアミロイドーシス；家族性および老人性アミロイドーシス；プリオン病の変種のクロイツフェルト・ヤコブ病（ｖＣＪＤ）およびゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群（ＧＳＳ）；心臓アミロイドーシス；精液の前立腺活性化タンパク質の精液由来エンハンサーのウイルス感染（ＳＥＶＩ）形態に関連するヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の性感染、ならびに腎機能に影響を与える抗体軽鎖アミロイドーシスから選択される疾患または状態を、そのような治療を必要とする患者において治療する方法であって、薬理学的有効量の、段落１〜２１のいずれか１つに記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩を患者に投与することを含む、方法。
２５．段落１〜２１のいずれかに記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩による治療を含む、タウ凝集に影響を与える方法。
２６．ペプチドを、遺伝子治療法を介してポリヌクレオチドの等価物として投与することができる、段落２５に記載の疾患または状態を治療する方法。
２７．ペプチド関連ヌクレオチドの等価物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）に由来するプラスミドまたはベクターにコードされる、段落２５に記載の疾患または状態を治療する方法。
２８．ＡＡＶが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ−ＤＪ、またはＡＡＶ−ＤＪ８から選択される、段落２７に記載の疾患または状態を治療する方法。
２９．段落１〜２１のいずれかに記載の単離されたペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
３０．段落１〜２１のいずれかに記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩、およびペプチド安定化賦形剤を含む薬学的に許容される担体を含む組成物。
３１．段落１〜２１のいずれかに記載の阻害剤またはその薬学的に許容される塩による治療を含む、ＶＱＩＩＮＫ（（配列番号２２０））に関連する凝集に影響を与える方法。
３２．段落１〜２１のいずれかに記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩のヌクレオチドの等価物。
【０３２６】
本発明が説明されているが、以下の実施例は、例示として提示され、限定としてではなく提示されない。
【実施例】
【０３２７】
本開示は、様々な配列を含むペプチドを提供します。
実施例１
【０３２８】
本発明のペプチドは、特に明記されていない限り、以下の記載のものと同様の方法によって、ｔ−ＢｏｃもしくはＦｍｏｃ化学または他の技術（例えば、Ｓｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ，Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＩＩ．，１９８４、Ｅ．Ａｔｈｅｒｔｏｎ  ａｎｄ  Ｒ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ，Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｏｘｆｏｒｄ−ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８９、Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９９、Ｆｌｏｒｅｎｃｉｏ  Ｚａｒａｇｏｚａ  Ｄｏｒｗａｌｄ，”Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｎ  ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ”，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ  Ｖｅｒｌａｇ  ＧｍｂＨ，２０００、および”Ｆｍｏｃ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｗ．Ｃ．Ｃｈａｎ  ａｎｄ  Ｐ．Ｄ．Ｗｈｉｔｅ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，２０００を参照されたい）を使用して好適な樹脂上での固相合成を介して調製される。
【０３２９】
固相合成を、Ｎ末端保護されたアミノ酸をそのカルボキシ末端とともに切断可能なリンカーを運ぶ不活性固体支持体に結合することによって開始する。この固体支持体は、開始アミノ酸、例えば、４−ヒドロキシメチル−フェニルアセトアミドメチル（ＰＡＭ）樹脂、トリチル樹脂、クロロトリチル樹脂、Ｗａｎｇ樹脂、またはカルボキシ基（またはＲｉｎｋ樹脂のカルボキサミド）の樹脂への結合が酸に対して感受性である（Ｆｍｏｃ戦略を使用する場合）Ｒｉｎｋ樹脂のカップリングを可能にする任意のポリマーであり得る。ポリマー支持体は、ペプチド合成中にα−アミノ基を脱保護するために使用される条件下で安定している。最初のアミノ酸が固体支持体にカップリングされた後、このアミノ酸のα−アミノ保護基を除去する。次いで、残りの保護されたアミノ酸は、適切なアミドカップリング試薬、例えば、ＢＯＰ（ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウム）、ＨＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチル−ウロニウム）、ＨＡＴＵ（Ｏ−（７−アザベンズトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウム）、またはＤＩＣ（Ν，Ν´−ジイソプロピルカルボジイミド）／ＨＯＢｔ（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）を使用してペプチド配列によって表される順番で次々に結合され、ＢＯＰ、ＨＢＴＵ、およびＨＡＴＵが第三級アミン塩基とともに使用される。あるいは、遊離したＮ末端は、アミノ酸以外の基、例えば、カルボン酸などで官能化することができる。通常、アミノ酸の反応性側鎖基は、好適なブロッキング基で保護されている。これらの保護基を、所望のペプチドが組み立てられた後に除去する。それらを、同じ条件下で樹脂からの所望の生成物の切断に付随して除去する。保護基および保護基を導入するための手順は、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｄ  ｅｄ．，Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．，Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：１９９９）に見出され得る。いくつかの場合によっては、選択的に除去され得る側鎖保護基を有することが望ましい場合があるが、他の側鎖保護基はそのままである。この場合、融資した官能性を選択的に官能化することができる。例えば、リジンは、非常に求核性の塩基、例えば、ＤＭＦ中の４％ヒドラジン（ジメチルホルムアミド）に対して不安定である、ｉｖＤｄｅ保護基（Ｓ．Ｒ．Ｃｈｈａｂｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３９，（１９９８），１６０３）で保護されている。したがって、Ｎ末端アミノ基および全ての側鎖官能基が酸に不安定な保護基で保護されている場合、ｉｖＤｄｅ（［１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘクス−１−イリデン）−３−メチルブチル）基は、ＤＭＦ中の４％ヒドラジンを使用して選択的に除去することができ、対応する遊離アミノ基は、次いで、例えば、アシル化によりさらに修飾することができる。あるいは、リジンを保護されたアミノ酸にカップリングし、次いで、このアミノ酸のアミノ基を脱保護して、アシル化またはさらなるアミノ酸に結合され得る別の遊離アミノ基を得ることができる。最後に、ペプチドを樹脂から切断する。これは、ＨＦまたはキングのカクテル（Ｄ．Ｓ．Ｋｉｎｇ，Ｃ．Ｇ．Ｆｉｅｌｄｓ，Ｇ．Ｂ．Ｆｉｅｌｄｓ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．３６，１９９０，２５５−２６６）を使用することにより達成することができる。次に、必要な場合、原料を、クロマトグラフィー、例えば、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製することができる。
【０３３０】
実験の部分に記載されているように、非天然アミノ酸および／または共有結合したＮ末端モノもしくはジペプチド模倣物を含む本発明のこれらのペプチド、類似体、または誘導体を製造してもよい。または、例えば、Ｈｏｄｇｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ：‘‘Ｔｈｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｎｏｎ−ｎａｔｕｒａｌ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ’’、およびＣｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，ｖｏｌ．３３，ｎｏ．７（２００４），ｐ．４２２−４３０を参照されたい。
【０３３１】
ペプチドは、以下に言及されるペプチド合成に従って調製され、表１に示されるペプチドは、特に明記しない限り、以下に言及される合成と同様に調製することができる。
【０３３２】
ペプチド合成の方法の１つは、マイクロ波に基づくＬｉｂｅｒｔｙペプチド合成装置（ＣＥＭ  Ｃｏｒｐ．、Ｎｏｒｔｈ  Ｃａｒｏｌｉｎａ）でのＦｍｏｃ化学によるものである。樹脂は、約０．２５ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＴｅｎｔａｇｅｌ  Ｓ  ＲＡＭ、または約０．４３ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＰＡＬ−ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ、または０．５〜０．７５ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＰＡＬ  ＡＭマトリックスである。カップリング化学は、０．３Ｍのアミノ酸溶液および６〜８倍のモル過剰を用いる、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）またはＤＭＦ中のＤＩＣ／ＨＯＡｔ（１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール）またはＤＩＣ／Ｏｘｙｍａ（エチルシアノヒドロキシイミノアセテート）である。カップリング条件は、最大７０℃で５分である。脱保護は、最大７０℃でＮＭＰ中の１０％ピペリジンを使用する。使用される保護されたアミノ酸は、標準のＦｍｏｃ−アミノ酸（例えば、ＡｎａｓｐｅｃまたはＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍまたはＰｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから供給される）である。
【０３３３】
ペプチド合成の別の方法は、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチド合成装置（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ａｒｉｚｏｎａ）でのＦｍｏｃ化学によるものである。樹脂は、約０．２５ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＴｅｎｔａｇｅｌ  Ｓ  ＲＡＭ、または約０．４３ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＰＡＬ−ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ、または０．５〜０．７５ｍｍｏｌ／ｇの負荷のＰＡＬ  ＡＭである。カップリング化学は、０．３Ｍのアミノ酸溶液および６〜８倍のモル過剰を用いる、ＮＭＰまたはＤＭＦ中のＤＩＣ／ＨＯＡｔまたはＤＩＣ／Ｏｘｙｍａである。カップリング条件は、室温で１または２時間の単一または二重カップリングである。脱保護は、ＮＭＰ中の２０％ピペリジンを使用する。使用される保護されたアミノ酸は、標準のＦｍｏｃ−アミノ酸（例えば、ＡｎａｓｐｅｃまたはＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍまたはＰｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから供給される）である。粗ペプチドを、５ｕｍまたは７ｕｍのいずれかのＣ−１８シリカを充填した２０ｍｍ×２５０ｍｍカラムでのセミ分取ＨＰＬＣなどにより精製する。ペプチド溶液をＨＰＬＣカラムに注入し、沈殿したペプチドを、５ｍｌの５０％酢酸Ｈ２Ｏに溶解し、Ｈ２Ｏで２０ｍｌに希釈し、次いで、４０℃で５０分間１０ｍｌ／分で、０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）中４０〜６０％のＣＨ３ＣＮの勾配で溶出されるカラム上に注入する。ペプチド含有画分を収集する。精製されたペプチドを、溶出液を水で希釈した後、凍結乾燥する。
【０３３４】
Ｃ末端アミドを含む全てのペプチドを、特に明記されていない限り、以下に記載のものと同様の方法によって調製する。ＭＢＨＡ樹脂（４−メチルベンズヒドリルアミンポリスチレン樹脂）を、ペプチド合成時に使用する。ＭＢＨＡ樹脂、１００〜１８０メッシュ、１％ジビニルベンゼン（ＤＶＢ）架橋結合ポリスチレン、０．７〜１．０ｍｍｏｌ／ｇの負荷）、Ｂｏｃ保護およびＦｍｏｃ保護されたアミノ酸は、Ｍｉｄｗｅｓｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈから購入することができる。Ｂｏｃ保護されたアミノ酸を使用する固相ペプチド合成を、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ  ４３０Ａペプチド合成装置で実行する。Ｆｍｏｃ保護されたアミノ酸合成を、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓモデル４３３ペプチド合成装置を使用して実行する。
ペプチドの合成を、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍモデル４３０Ａペプチド合成装置で実行する。合成ペプチドを、２ｍｍｏｌのＢｏｃ保護されたアミノ酸を含むカートリッジにアミノ酸を連続的に添加することにより構築する。具体的には、Ｂｏｃ３−（ジエトキシホスホリルオキシ）−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン（ＤＥＰＢＴ）−活性化単一カップリングを使用して合成を実施する。カップリングステップの最後に、ペプチジル樹脂をＴＦＡで処理して、Ｎ末端Ｂｏｃ保護基を除去する。ＤＭＦで繰り返し洗浄し、この繰り返しサイクルを所望のカップリングステップ数だけ繰り返す。組み立て後、側鎖保護であるＦｍｏｃを、２０％ピペリジン処理によって除去し、ＤＩＣを使用してアシル化を行った。合成全体の最後のペプチジル樹脂は、ジクロロメタン［ＤＣＭ］を使用することによって乾燥させ、ペプチドを、無水ＨＦで樹脂から切断する。ペプチジル樹脂を無水ＨＦで処理し、これは、典型的には、約３５０ｍｇ（収率約５０％）の粗脱保護されたペプチドをもたらす。具体的には、ペプチジル樹脂（３０ｍｇ〜２００ｍｇ）を切断のためにフッ化水素（ＨＦ）反応容器に入れる。５００μＬのｐ−クレゾールを、カルボニウムイオンスカベンジャーとして容器に添加した。容器をＨＦシステムに取り付けて、メタノール／ドライアイス混合物に浸す。容器を真空ポンプで真空にし、１０ｍｌのＨＦを反応容器に蒸留する。このペプチジル樹脂およびＨＦの反応混合物を、０℃で１時間撹拌し、その後、真空を確立し、ＨＦを迅速に真空にする（１０〜１５分）。容器を慎重に取り出し、約３５ｍｌのエーテルで充填し、ペプチドを沈殿させ、ＨＦ処理から生じるｐ−クレゾールおよび小分子有機保護基を抽出する。この混合物をテフロン（登録商標）フィルターを利用して濾過し、２回繰り返して、全ての過剰なクレゾールを除去する。この濾液を廃棄する。沈殿したペプチドを、約２０ｍｌの１０％酢酸（ａｑ）に溶解する。所望のペプチドを含んだこの濾液を収集し、凍結乾燥する。
実施例２
Ｈｉｓ−Ｔａｕ４０  ＷＴ発現ＳＯＰ
【０３３５】
フラスコに２５ｇの溶原性ブロス「ＬＢ」粉末［Ｆｉｓｈｅｒ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、カタログ番号ＢＰ９７２３−５］を添加することにより６つの９５０ｍＬのＬＢブロスを作り、次いで、２Ｌプラスチック三角フラスコにＤＩ水で９５０ｍＬまで充填し、８．７５ｇのＬＢ粉末を添加することによって１つの３５０ｍＬに充填し、次いで、１ＬガラスフラスコにＤＩ水で３５０ｍＬに充填する。オートクレーブして滅菌する。滅菌の３５０ｍＬのＬＢフラスコにタンパク質発現プラスミドを含むＢＬ２１細菌を次のプロセスによって接種する：３５０ｕＬの３５ｍｇ／ｍＬカナマイシン（１０００倍）および１．７５ｍＬの４０％グルコース（培養液１００ｍＬあたり５００ｕＬ）を添加する。次に、保管されたＬＢ−寒天プレートからコロニーを選択するか、またはひとすくいのグリセロールストックを添加し、２２５ｒｐｍ、３７℃で一晩インキュベートする［Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ製のＩｎｎｏｖａ４３３０インキュベーターシェーカー］。翌朝、各９５０ｍＬのＬＢフラスコに１ｍＬの３５ｍｇ／ｍＬカナマイシンを添加する（１０００倍）。６つの９５０ｍＬのＬＢフラスコの各々に、５０ｍＬの一晩培養物を接種する。ＯＤ６００が０．８〜１．０になるまで、６つの１Ｌフラスコを３７℃および２２５ｒｐｍでインキュベートする（約１時間）。イソプロピルベータ−Ｄチオガラクトピラノシドを１ｍＭの最終濃度まで添加する（フラスコあたり１ｍＬの１Ｍ溶液を添加する）。溶液を、１８０ｒｐｍで４時間、３７℃でインキュベートする。培養を、４℃で１５分間、５，０００ｒｐｍで遠心分離する。上清を捨て、細菌ペレットを５０ｍＬコニカルチューブにすくい取る。−２０℃で保管する。
実施例３
ＢＬ２１細菌発現ＨｉｓＴａｕ４０  ＷＴの溶解
【０３３６】
実施例１の１２Ｌの凍結細菌ペレットから、−２０℃で５０ｍＬコニカルチューブに保管する。最初に細胞を次の手順で溶解する：室温で細菌ペレットを解凍する。２０ｍＭ  ２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸ＭＥＳ（ｐＨ６．８、０．２２ｕｍ濾過済み）、２００ｍＭ  ＮａＣｌを含む５００ｍＬ（不完全）細胞溶解緩衝剤を調製し、ＤＩ水で５００ｍＬまで充填する。解凍した細菌ペレットをきれいな５００ｍＬガラスビーカーにすくい取り、約２００ｍＬの溶解緩衝剤にペレットを再懸濁する。ペレットを砕く。残りの溶解緩衝剤試薬を５００ｍＬビーカー［１ｍＭフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）、１ｍＭジチオトレイトール（ＤＴＴ）、ＤＮａｓｅ１、約１０ｕｇ／ｍＬ、リゾチーム、約１２５ｕｇ／ｍＬ。］に添加する。ビーカーを溶解緩衝剤で約３００ｍＬまで充填する。溶解物を室温で３０分〜１時間撹拌する。溶解ビーカーを、全ての溶解物が冷却されるのに十分な深さの氷水浴に入れる。ソニケーターのマクロチップを使用して、溶解物を超音波処理する。７０％アンペアで１５分のパルス（合計実行時間３０分）の対してパルスを１秒オン、１秒オフする。溶解物を４０ｍＬ遠心分離チューブに移す。４℃で３０分間、３０，０００ｘｇで回転させる。上清をきれいな５００ｍＬボトルに真空濾過する。最初に０．８ｕｍフィルターを使用し、次に０．２２ｕｍフィルターを使用する。溶解物が濃すぎて濾過できない場合は、ＤＮａｓｅおよび／またはリゾチームをさらに添加し、室温でインキュベートする。
実施例４
Ｈｉｓ−ｔａｇ親和性によるＨｉｓ−Ｔａｕ４０  ＷＴの精製（２０ｍＬ  ＨｉｓＰｒｅｐ  ＦＦ１６／１０カラム）
【０３３７】
高速タンパク質液体クロマトグラフィー（ＦＰＬＣ）緩衝剤を調製する。
ａ．緩衝剤Ａ−２０ｍＭ  ＭＥＳ、ｐＨ６．８、２０ｍＭイミダゾール、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．２２ｕｍ濾過済み；
ｂ．緩衝剤Ｂ−２０ｍＭ  ＭＥＳ、ｐＨ６．８、０．５Ｍイミダゾール、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．２２ｕｍ濾過済み
【０３３８】
５ｍＬ／分の流量で２０ｍＬ  ＨｉｓＰｒｅｐ  ＦＦカラムに溶解物を充填する。６カラム体積（ＣＶ）の緩衝剤Ａでカラムを洗浄する。５ｍＬ／分で、０〜１００％の勾配で添加される２０ＣＶの緩衝剤Ｂを使用して、１０ｍＬ画分に溶出する。所望の画分をプールする。必要な場合、４℃で一晩保管する。
実施例５
ペプチド阻害剤によるＨｉｓ  Ｔａｕ４０  ＷＴの阻害−チオフラビンＴ（ＴｈＴ）アッセイ
【０３３９】
上述のペプチド阻害剤によるタウアミロイド阻害のＩＣ５０を評価するために使用される実験方法を以下に記載する。これらの用量反応における阻害剤ペプチドの物理的設定は、ＢｉｏＭｅｋ３０００液体ハンドラー上の８スパンヘッドを使用して、Ｃｏｓｔａｒの光学的に９６ウェルの透明な黒色プレートに自動的に行われる。阻害剤ペプチドを、２０ｍＭの濃度で１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）溶液中に−８０℃で凍結保存し、アッセイの直前に解凍する。Ｂｉｏｍｅｋは、６点用量反応曲線の複製のために、単一の阻害剤の２回連続希釈を行う。その後、５倍の反応緩衝剤を添加する。アッセイの最終反応緩衝剤濃度は、５０ｍＭ  ＭＥＳ、ｐＨ６．８、１２５ｍＭ  ＮａＣｌ、１０μＭヘパリン、５０μ  ＭＴｈＴである。Ｔａｕ基質を、９６ヘッドＭｕｌｔｉｍｅｋ液体ハンドラーによって添加し、アッセイを設定する前にＤＴＴが直接添加されるＴａｕ４０  Ｐ３０１Ｌタンパク質の４：１０希釈を行う。タウのＰ３０１Ｌ変異体は、ヒトタウオパチーの特徴と関連している（Ｃｏｍｂ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）、Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２５：４０２−４０５（２０００））。アッセイにおけるＴａｕ４０  Ｐ３０１ＬおよびＤＴＴの最終濃度は、それぞれ２．５μＭおよび５ｍＭである。蛍光プレートリーダーを使用して、４４０および４８５ｎｍの励起および発光波長で１０分毎にチオフラビンＴ（ＴｈＴ）蛍光を監視することによって、アミロイド形成を測定する。アッセイの全期間中、アッセイプレートをプレートリーダーに保持し、２４時間連続的に振盪しながら３７℃でインキュベートする。Ｔｅｃａｎ製のプレートリーダーモデルＧｅｎｉｏｓおよびＳｐｅｃｔｒａｆｌｕｏｒ  Ｐｌｕｓを使用し、データをＭａｇｅｌｌａｎソフトウェアを使用して取得する。ＩＣ５０の計算は、Ｒ統計プログラミング言語を使用して開発された自動アルゴリズムによって行われる。簡単に言えば、アルゴリズムは、プレートリーダーからエクセル形式でエクスポートされたデータを使用して、６点用量反応における各阻害剤濃度の累積ＴｈＴ蛍光を平均化する。ＩＣ５０を、正規化されたＴｈＴ蛍光および阻害剤濃度の相関に適合したシグモイド曲線の中間点として計算する。結果を表４に報告する。
【表４−１】
2020523035.tif 000010
【表４−２】
2020523035.tif 000011
【表４−３】
2020523035.tif 000012
【表４−４】
2020523035.tif 000013
「Ｏ」＝オルニチン、「（ｈＲ）」＝ホモ−アルギニン、（ＮＭｅ）Ｉ＝Ｎ−メチル化イソロイシン、（ＮＭｅ）Ｒ＝Ｎ−メチル化アルギニン。
実施例６
修飾ペプチド阻害剤
【０３４０】
リンカーおよびＣＰＰ配列が含んだ追加のペプチドを調製した。実施例１に記載の標準的なペプチド合成方法を使用して、リンカーおよびＣＰＰ配列を含む修飾ペプチドを調製した。ＴＡＭＲＡ（ＴＡＭ）およびＴＡＭＲＡ５（ＴＡＭ５）は、テトラメチルローダミン色素の異性体である。以下の配列を調製し、実施例５に記載のアッセイで試験した。ＮＴは試験されていないことを意味する。ＮＤは、ＩＣ５０が計算されていないことを意味する。
【表５】
2020523035.tif 000014
実施例７
修飾ペプチド阻害剤を使用したタウ凝集のＨＥＫ  ２９３細胞アッセイ
【０３４１】
Ｍｉｒｂａｈａ  ｅｔ  ａｌ．，［ＴＨＥ  ＪＯＵＲＮＡＬ  ＯＦ  ＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ  ＶＯＬ．２９０，ＮＯ．２４，ｐｐ．１４８９３−１４９０３，Ｊｕｎｅ  １２，２０１５］によってもともと開発および記載されている、ＴａｕＲＤ  （Ｐ３０１Ｓ）−ＮｌｕｃおよびＴａｕＲＤ（Ｐ３０１Ｓ）−Ｃｌｕｃスプリットルシフェラーゼ相補対を安定して発現するＨＥＫ２９３細胞は、ワシントン大学から入手した。ヒトタウのＰ３０１Ｓ変異体は、真正のタウオパシーで見られるヒトタウの病理に関連している（Ｔａｋｅｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ６（６）：ｅ２１０５０  （２０１１））。ルシフェリンカリウム塩を、Ｇｏｌｄ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＵＳＡから入手し、ルシフェラーゼ細胞溶解緩衝剤を、Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓから入手し、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００、ＤＭＥＭ、およびＯＰＴＩ−ＭＥＭを、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから入手し、ヘパリン（平均分子量１８０００）を、Ｓｉｇｍａから入手した。キャップ付き１．５ｍＬポリプロピレン試料チューブで連続的に振盪しながら、３７℃で２４時間、１．０ｍＬ体積の反応緩衝剤（５０ｍＭ  ＭＥＳ、ｐＨ６．８、１２５ｍＭ  ＮａＣｌ、１０μＭヘパリン、５ｍＭ  ＤＴＴ）中２０μＭでＨｉｓ−Ｔａｕ４０  Ｐ３０１Ｌタウをインキュベートすることによって、タウ原線維を調製した。タウ凝集レポーター細胞を、１０％ｖ／ｖウシ胎児血清を含む１００μＬ／ウェルのＤＭＥＭ中３０，０００個の細胞／ウェルの開始密度で、白色の９６ウェル組織培養処理プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−ｏｎｅカタログ番号６５５０８３）に播種した。次いで、試験化合物を添加する前に、プレートを３７℃および５％ＣＯ２に設定した加湿インキュベーターで一晩インキュベートした。水に４ｍＭで事前に溶解したペプチドストックを、１０点用量曲線にわたってそれらの報告された試験濃度の１０倍で、ＯＰＴＩＭＥＭで連続的に希釈した。各濃度の１０μＬを、タウ原線維：リポフェクタミン２０００錯体との細胞タウ凝集応答を誘発する４時間前に、３つ組の細胞培養ウェルに添加した。細胞アッセイを播種する直前に、タウ原線維を、マイクロチップ超音波処理で５分間超音波処理し、アリコート（５０〜２００μＬ）をＯＰＴＩＭＥＭ中で１２μＭに希釈した。１体積のＯＰＴＩＭＥＭ中１２．５％ｖ／ｖリポフェクタミン２０００を添加し、６μＭタウ原線維溶液を作成し、そして２０分間室温で錯体化させる。溶液を、ＯＰＴＩＭＥＭで６５０ｎＭのタウ濃度に再度希釈し、２０μＬ／ウェルを投与前の細胞に添加して、フィブリル形態で１００ｎＭの最終タウ濃度にする。インキュベーター中で４８時間後、アッセイプレートを吸引し、ウェルを２０μＬのルシフェラーゼ細胞溶解緩衝液で溶解する。１０ｍＭのＭｇＣｌ２、３００μＭのＡＴＰ、および９４０μＭのルシフェリンを含むルシフェラーゼ細胞溶解緩衝液をさらに２０μＬ添加した直後に、相対光単位の１秒の積分時間を使用してＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｅｎｖｉｓｉｏｎ  ２１１０でルシフェラーゼ補体応答強度を読み取る。ＩＣ５０値を、ペプチド処理した試料を処理していない��照の割合として正規化し、正規化された値対阻害剤濃度の対数をプロットすることにより計算する。ＩＣ５０値を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ７．００  ｆｏｒ  Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標），ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｌａ  Ｊｏｌｌａ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａによって行われる対数（阻害剤）対正規化応答−可変勾配曲線適合アルゴニズムで決定する。結果を表６に報告する。ＮＡは、ＥＣ５０が計算されなかったことを意味する。
【表６】
2020523035.tif 000015
実施例８
ペプチド阻害剤によるＶＱＩＩＮＫ（配列番号２２０）凝集の阻害
【０３４２】
上述のペプチド阻害剤によるＶＱＩＩＮＫ（配列番号２２０）の凝集の阻害のＩＣ５０を評価するために使用される実験的方法を以下に記載する。上述のペプチド合成方法を使用してＡｃ−ＶＱＩＩＮＫ−ＮＨ２を含むペプチド配列（Ｃ末端がアミド化されている（配列番号２２０））を調製する。Ａｃ−ＶＱＩＩＮＫ−ＮＨ２（配列番号２２０）を１０ｍＭで１００％ＤＭＳＯ中に−８０℃で保管し、単一凝集アッセイプレートに十分なアリコート体積を除去する。ストック凝集緩衝液（５倍）を、２５０ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ８．０）、１２５ｍＭのＫＣｌ、および５００マイクロモルのチオフラビンＴ（ＴｈＴ）を用いて調製する。凝集アッセイを、ＢｉｏＴｅｋのプレートリーダーモデルＦＬＸ−８００上で、室温で振盪しながら行う。一次Ａｃ−ＶＱＩＩＮＫ−ＮＨ２（配列番号２２０）溶解用の水を、４℃に冷却する（７．２４５ミリリットル）。緩衝液を５倍ストックから添加する（４０マイクロリットル、アッセイプレート中の最終体積１３０マイクロリットル、最終緩衝液濃度：５０ミリモルのＮａＰＯ４（ｐＨ８．０）、２５ミリモルのＫＣｌ、および１００マイクロモルのチオフラビンＴ）。アッセイプレートを４℃に冷却する。Ａｃ−ＶＱＩＩＮＫ−ＮＨ２（１０５マイクロリットル（配列番号２２０））を冷水に添加し（最終体積７．３５０ミリリットル）、これをプールされたリザーバーに添加し、９６チャネルロボットピペッタを使用して、７０マイクロリットルの希釈Ａｃ−ＶＱＩＩＮＫ−ＮＨ２（配列番号２２０）をアッセイプレートに添加して、２００マイクロリットルの最終アッセイ体積中で５０マイクロモルの最終濃度（ウェル毎）を達成する。Ｍａｇｅｌｌａｎソフトウェアを使用してデータを取得する。Ｒ統計プログラミング言語を使用して開発された自動化アルゴリズムによってＩＣ５０の計算を行う。簡単に言えば、アルゴリズムは、プレートリーダーからエクセル形式でエクスポートされたデータを使用して、６点用量反応における各阻害剤濃度の累積ＴｈＴ蛍光を平均化する。ＩＣ５０を、正規化されたＴｈＴ蛍光および阻害剤濃度の相関に適合したシグモイド曲線の中間点として計算する。本発明の化合物は、ＶＱＩＩＮＫ（配列番号２２０）の凝集を阻害する。
【表７−１】
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【表７−２】
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【表７−３】
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実施例９
ペプチド阻害剤による播種阻害のＨＥＫ  ２９３細胞アッセイ
【０３４３】
プレキャップタウ原線維が阻害剤を用いることによりこれらの原線維の播種凝集可能性を低減するかを決定するために、バイオセンサ細胞播種アッセイ前に阻害剤を固定原線維濃度に対して滴定した。Ｔａｕ４０Ｐ３０１Ｌ原線維を実施例７と同様に調製し、その後、ＯｐｔｉＭＥＭ中で２．５μＭに希釈した。ＯｐｔｉＭＥＭ中に溶解した２０μＬの阻害剤を２０μＬの２．５μＭ  Ｔａｕ４０Ｐ３０１Ｌ原線維に、バイオセンサ細胞試験ウェル内に導入した最終濃度の２０倍の阻害剤濃度で添加した。結果として得られた１．２５μＭの原線維溶液を阻害剤と室温で１６時間インキュベートした後、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００希釈標準溶液を添加した。１体積のＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００トランスフェクション試薬を１９体積のＯｐｔｉＭＥＭに希釈することによって調製した４０μＬのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００希釈標準溶液を、プレキャップ原線維と２０分間インキュベートした。１０μＬのこれらのプレキャップ原線維：Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ溶液を９０μＬのバイオセンサ細胞に添加して、最終報告阻害剤濃度を達成した。バイオセンサ細胞およびルシフェラーゼ相補性アッセイは、他の点では［００６］に記載のものと同一であった。この方法をＰ．Ｍ．Ｓｅｉｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．ＮａｔＣｈｅｍ．Ｆｅｂ  ２０１８  １０（２）：１７０−１７６．２０１８に記載されるものから適合した。本発明のペプチドは、原線維播種を１０μＭ未満の濃度で阻害する。
実施例１０
細胞療法データ
【０３４４】
ＤＹＫＤＤＤＤＫ−ＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ−ＷＲＩＷＩＲＹＷ（配列番号１０６）またはＤＹＫＤＤＤＤＫ−ＲＲＲＲＲＲＲＲＲ−ＧＧＳＧＧ（配列番号２１８）の配列をコードするヌクレオチド配列を含むウイルス構築物を、Ｄｅｖｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．［Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，３４，２０４−２０９（２０１６）］に記載のものと同様のＡＡＶ技術を使用して調製した。図１〜２を参照されたい。これらの構築物を、Ｋｏｓｉｋの神経変性マウスモデルで評価した［ＳａｎｔａＣｒｕｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００５  Ｊｕｌｙ  １５；３０９（５７３３）：４７６−４８１を参照されたい］。動物は、１１〜１２週齢でのタウ病変の発症前に、２．５×１０１２ウイルスゲノムコピー／動物の単一の眼窩後注射を受けた。動物を投与の３．５ヶ月後に屠殺した。転写レベルの定量的ＰＣＲ分析により、注射したウイルスベクターの同一性（ＴＡＩまたは対照配列）が検証されたＴＡＩおよび対照配列が同様のレベルで発現した（図３）。ＧＦＰおよびｈＴａｕ転写物も確認された。このモデルは、抗ＭＣ１免疫組織化学によって示されるように、活性ウイルスで見られるもつれ数の統計的に有意な減少（図４）を特定した。大理石埋没および入れ子状態などの挙動アッセイの変化は観察されなかった。
【０３４５】
本明細書に開示され、特許請求される物品および方法は全て、本開示の観点から過度の実験なしで作製および実行され得る。本開示の物品および方法が好ましい実施形態の観点から記載されているが、本開示の趣旨および範囲から逸脱することなく、物品および方法に変化が適用され得ることが当業者には明らかであろう。現在存在するか、または今後開発されるかにかかわらず、当業者に明らかなそのような変形および等価物は全て、添付の特許請求の範囲によって定義される本開示の趣旨および範囲内にあるとみなされる。本明細書で言及された全ての特許、特許出願、および刊行物は、本開示が属する当業者のレベルを示している。全ての特許、特許出願、および出版物は、全ての目的のために、かつ各個々の出版物が全ての目的のために参照によりそれらの全体が組み込まれると具体的かつ個別に示されているのと同程度に、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。本明細書に例示的に記載される開示は、本明細書に具体的に開示されていない要素の不在下で好適に実施され得る。したがって、例えば、本明細書の各例において、「を含む」、「から本質的になる」、および「からなる」という用語はいずれも、他の２つの用語のいずれかに置き換えられてもよい。用いられている用語および表現は、用語を説明するものとして使用されており、限定するものではなく、そのような用語および表現の使用において、示され説明される特徴のいずれの等価物またはその一部を除外するようには意図されておらず、特許請求される開示の範囲内で様々な修正が可能であることが認識される。したがって、本開示が好ましい実施形態および任意の特徴によって具体的に開示されているが、本明細書に開示される概念の修正および変形が当業者によってなされてもよく、そのような修正および変形が添付の特許請求の範囲によって定義される本開示の範囲内にあるとみなされることを理解されたい。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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