(57)【要約】本発明は、単一分子内に、以下の３つの別個の部分：（a）疾患関連の標的分子に結合することが可能な１つまたはそれより多くのリガンド、（b）ケイ素原子とフッ素原子との間の共有結合を含む、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分、および（c）１つまたはそれより多くのキレート化基（キレート化された非放射性または放射性カチオンを含有し得る）を含む、リガンド-ＳＩＦＡ-キレーターコンジュゲートに関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
単一分子内に、以下の３つの別個の部分：
（ａ）疾患関連の標的分子に結合することが可能な１つまたはそれより多くのリガンド、
（ｂ）ケイ素原子とフッ素原子との間の共有結合を含む、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分、および
（ｃ）キレート化された非放射性または放射性カチオンを任意に含有し得る、１つまたはそれより多くのキレート化基
を含む、リガンド−ＳＩＦＡ−キレーターコンジュゲート。
【請求項２】
前記リガンドが、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合することが可能である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３】
前記フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分が、式（Ｉ）：
【化１】
2020528461.tif 000110
（式中、
Ｒ１ＳおよびＲ２Ｓは、独立して、直鎖状または分岐状のＣ３〜Ｃ１０アルキル基であり；
Ｒ３Ｓは、Ｃ１〜Ｃ２０炭化水素基であり、該炭化水素基は、１つまたはそれより多くの芳香族および／もしくは脂肪族単位、ならびに／またはＯおよびＳから選択される最大３個のヘテロ原子を含み；
ここで該ＳＩＦＡ部分は、
【化２】
2020528461.tif 000111
で示される結合を介してコンジュゲートの残りに付着されている）
で表される構造を有する、請求項１または２に記載のコンジュゲート。
【請求項４】
前記フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分が、式（Ｉａ）：
【化３】
2020528461.tif 000112
（式中、ｔ−Ｂｕは、ｔｅｒｔ−ブチル基を示す）
で表される構造を有する、請求項３に記載のコンジュゲート。
【請求項５】
前記キレート化基が、
（ｉ）８〜２０個の環原子を有する大環状環構造であって、該環原子のうち２個またはそれより多くは、酸素原子および窒素原子から選択されるヘテロ原子である、大環状環構造；
（ｉｉ）８〜２０個の主鎖原子を有する非環式の開鎖キレート化構造であって、該主鎖原子のうち２個またはそれより多くは、酸素原子および窒素原子から選択されるヘテロ原子である、開鎖キレート化構造；または
（ｉｉｉ）第四炭素原子を含有する分岐状のキレート化構造
の少なくとも１つを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項６】
前記キレート化基が、ビス（カルボキシメチル）−１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン（ＣＢＴＥ２ａ）、シクロヘキシル−１，２−ジアミン四酢酸（ＣＤＴＡ）、４−（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカ−１−イル）−メチル安息香酸（ＣＰＴＡ）、Ｎ’−［５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル］−Ｎ−［５−［［４−［５−アミノペンチル−（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル］アミノ］ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシブタンジアミド（ＤＦＯ）、４，１１−ビス（カルボキシメチル）−１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン（ＤＯ２Ａ）１，４，７，１０−テトラシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＤＯＴＡ）、α−（２−カルボキシエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７，１０テトラアザシクロドデカンＮ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’１，４，７，１０−テトラ（メチレン）ホスホン酸（ＤＯＴＭＰ）、Ｎ，Ｎ’−ジピリドキシルエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ジアセテート−５，５’−ビス（リン酸）（ＤＰＤＰ）、ジエチレントリアミンＮ，Ｎ’，Ｎ’’ペンタ（メチレン）ホスホン酸（ＤＴＭＰ）、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）、エチレンジアミン−Ν，Ν’−四酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレングリコール−Ｏ，Ｏ−ビス（２−アミノエチル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ）、Ｎ，Ｎ−ビス（ヒドロキシベンジル）−エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−二酢酸（ＨＢＥＤ）、ヒドロキシエチルジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、１−（ｐ−ニトロベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロデカン−４，７，１０−トリアセテート（ＨＰ−ＤＯＡ３）、６−ヒドラジニル−Ｎ−メチルピリジン−３−カルボキサミド（ＨＹＮＩＣ）、テトラ３−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−２−ピリジノンキレーター（４−（（４−（３−（ビス（２−（３−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−カルボキシアミド）エチル）アミノ）−２−（（ビス（２−（３−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−カルボキシアミド）エチル）アミノ）メチル）プロピル）フェニル）アミノ）−４−オキソブタン酸）、Ｍｅ−３，２−ＨＯＰＯと略記されるもの、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−コハク酸−４，７−二酢酸（ＮＯＤＡＳＡ）、１−（１−カルボキシ−３−カルボキシプロピル）−４，７−（カルボキシ）−１，４，７−トリアザシクロノナン（ＮＯＤＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナン三酢酸（ＮＯＴＡ）、４，１１−ビス（カルボキシメチル）−１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン（ＴＥ２Ａ）、１，４，８，１１−テトラアザシクロドデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、トリス（ヒドロキシピリジノン）（ＴＨＰ）、ターピリジン−ビス（メチレンアミン四酢酸（ＴＭＴ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−トリス［メチレン（２−カルボキシエチル）ホスフィン酸］（ＴＲＡＰ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＴＲＩＴＡ）、３−［［４，７−ビス［［２−カルボキシエチル（ヒドロキシ）ホスホリル］メチル］−１，４，７−トリアゾナン−１−イル］メチル−ヒドロキシ−ホスホリル］プロパン酸、およびトリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）から選択される、請求項５に記載のコンジュゲート。
【請求項７】
前記キレート化基が、１，４，７，１０−テトラシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＤＯＴＡ）、α−（２−カルボキシエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡＧＡ）または１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−トリス［メチレン（２−カルボキシエチル）ホスフィン酸］（ＴＲＡＰ）である、請求項５に記載のコンジュゲート。
【請求項８】
前記キレーターが、４３Ｓｃ、４４Ｓｃ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、９０Ｙ、１１１Ｉｎ、１４９Ｔｂ、１５２Ｔｂ、１５５Ｔｂ、１６１Ｔｂ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ，２１２Ｐｂ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２２５Ａｃ、および２２７Ｔｈのカチオンから選択されるキレート化されたカチオン、または１８Ｆを含むカチオン性分子を含有する、請求項５に記載のコンジュゲート。
【請求項９】
前記ＳＩＦＡのフッ素原子が、１８Ｆである、請求項１〜８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１０】
式（ＩＩＩ）：
【化４】
2020528461.tif 000113
［式中、
ＳＩＦＡは、ケイ素原子とフッ素原子との間の共有結合を含む、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分であり；
ｍは、２〜６の整数であり；
ｎは、２〜６の整数であり；
Ｒ１Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり；
Ｒ３Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり；
Ｒ２Ｌは、ＣまたはＰ（ＯＨ）であり；
Ｘ１は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、およびアミン結合から選択され；
Ｘ２は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、およびアミン結合から選択され；
Ｌ１は、オリゴアミド、オリゴエーテル、オリゴチオエーテル、オリゴエステル、オリゴチオエステル、オリゴ尿素、オリゴ（エーテル−アミド）、オリゴ（チオエーテル−アミド）、オリゴ（エステル−アミド）、オリゴ（チオエステル−アミド）、オリゴ（尿素−アミド）、オリゴ（エーテル−チオエーテル）、オリゴ（エーテル−エステル）、オリゴ（エーテル−チオエステル）、オリゴ（エーテル−尿素）、オリゴ（チオエーテル−エステル）、オリゴ（チオエーテル−チオエステル）、オリゴ（チオエーテル−尿素）、オリゴ（エステル−チオエステル）、オリゴ（エステル−尿素）、およびオリゴ（チオエステル−尿素）から選択される構造を有する２価の結合基であり、Ｌ１は、任意選択で、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣＨ３、−ＮＨ２、および−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２から独立して選択される１つまたはそれより多くの置換基で置換されていてもよく；
Ｘ３は、アミド結合、エステル結合、エーテル、およびアミンから選択され；
ＲＢは、３価のカップリング基であり；
Ｘ４は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、アミン結合、式：
【化５】
2020528461.tif 000114
の結合基（ここで、
【化６】
2020528461.tif 000115
で示されるアミド結合は、前記キレート化基と共に形成され、
【化７】
2020528461.tif 000116
で示される他方の結合は、ＲＢに結合している）、および式：
【化８】
2020528461.tif 000117
の結合基（ここで、カルボニル末端における
【化９】
2020528461.tif 000118
で示される結合は、前記キレート化基と共に形成され、
【化１０】
2020528461.tif 000119
で示される他方の結合は、ＲＢに結合している）
から選択され；
ＲＣＨは、キレート化された放射性または非放射性カチオンを含有していてもよいキレート化基である］
の化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項２〜９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１１】
−Ｘ１−Ｌ１−Ｘ２−が、以下の構造（Ｌ−１）および（Ｌ−２）：
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ６−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ７−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−１）
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ８−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ１０−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−２）
｛式中、Ｒ６〜Ｒ１０は、独立して、Ｃ２〜Ｃ１０アルキレンから選択され、該アルキレン基はそれぞれ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣＨ３、−ＮＨ２、および−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２から独立して選択される１つまたはそれより多くの置換基によって置換されていてもよい｝
のうち一方を表すか、
または−Ｘ１−Ｌ１−Ｘ２−は、以下の構造（Ｌ−３）および（Ｌ−４）：
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ１２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−３）
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−Ｒ１３−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１４−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ１５−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−４）
｛式中、Ｒ１１〜Ｒ１５は、独立して、Ｃ２〜Ｃ８アルキレンから選択される｝
のうち一方を表す、請求項１０に記載のコンジュゲート。
【請求項１２】
ＲＢが、式（ＩＶ）：
【化１１】
2020528461.tif 000120
［式中、
Ａは、Ｎ、ＣＲ１６（ここでＲ１６はＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである）、および５〜７員環の炭素環式または複素環式基から選択され；
（ＣＨ２）ａにおける
【化１２】
2020528461.tif 000121
で示される結合は、Ｘ２と共に形成され、ａは、０〜４の整数であり；
（ＣＨ２）ｂにおける
【化１３】
2020528461.tif 000122
で示される結合は、Ｘ３と共に形成され、ｂは、０〜４の整数であり；
（ＣＨ２）ｃにおける
【化１４】
2020528461.tif 000123
で示される結合は、Ｘ４と共に形成され、ｃは、０〜４の整数である］
で表される構造を有する、請求項１０または１１に記載のコンジュゲート。
【請求項１３】
式（ＩＩＩａ）：
【化１５】
2020528461.tif 000124
［式中、
ｍは、２〜６の整数であり；
ｎは、２〜６の整数であり；
ｂは、０〜４の整数であり；
ｃは、０〜４の整数であり；
Ｒ１Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり；
Ｒ３Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり；
Ｒ２Ｌは、ＣまたはＰ（ＯＨ）であり；
Ｘ１は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、およびアミン結合から選択され；
Ｌ１は、オリゴアミド、オリゴエーテル、オリゴチオエーテル、オリゴエステル、オリゴチオエステル、オリゴ尿素、オリゴ（エーテル−アミド）、オリゴ（チオエーテル−アミド）、オリゴ（エステル−アミド）、オリゴ（チオエステル−アミド）、オリゴ（尿素−アミド）、オリゴ（エーテル−チオエーテル）、オリゴ（エーテル−エステル）、オリゴ（エーテル−チオエステル）、オリゴ（エーテル−尿素）、オリゴ（チオエーテル−エステル）、オリゴ（チオエーテル−チオエステル）、オリゴ（チオエーテル−尿素）、オリゴ（エステル−チオエステル）、オリゴ（エステル−尿素）、およびオリゴ（チオエステル−尿素）から選択される構造を有する２価の結合基であり、Ｌ１は、任意選択で、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣＨ３、−ＮＨ２、および−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２から独立して選択される１つまたはそれより多くの置換基で置換されていてもよく；
Ｘ４は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、アミン結合、式：
【化１６】
2020528461.tif 000125
の結合基（ここで、
【化１７】
2020528461.tif 000126
で示されるアミド結合は、前記キレート化基と共に形成される）、
および式：
【化１８】
2020528461.tif 000127
の結合基（ここで、カルボニル末端における
【化１９】
2020528461.tif 000128
で示される結合は、前記キレート化基と共に形成される）
から選択され；
ＲＣＨは、キレート化された放射性または非放射性カチオンを任意に含有し得るキレート化基である］
の化合物またはその医薬的に許容される塩である、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１４】
前記コンジュゲートが、キレート化された非放射性または放射性カチオンを任意選択で含有し得る、
【化２０】
2020528461.tif 000129
【化２１】
2020528461.tif 000130
【化２２】
2020528461.tif 000131
からなる群から選択される化合物、および医薬的に許容される塩、ならびにそれらの個々の異性体であり、前記フッ素原子が、任意選択で１８Ｆである、請求項２〜１３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の１つ以上のコンジュゲートまたは化合物を含むか、またはそれからなる医薬または診断用組成物。
【請求項１６】
がん診断剤または造影剤として使用するための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート、化合物または組成物。
【請求項１７】
請求項１〜１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート、化合物または組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、がんをイメージングおよび／または診断する方法。
【請求項１８】
がんの処置において使用するための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート、化合物または組成物。
【請求項１９】
血管新生／血管新生の診断、イメージングまたは予防のための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート、化合物または組成物。
【請求項２０】
がん診断剤または造影剤として使用するための、またはがんの処置において使用するための、請求項２〜１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート、化合物または組成物であって、該がんは、前立腺癌、乳癌、肺癌、結腸直腸癌または腎細胞癌である、コンジュゲート、化合物または組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、単一分子内に、（ａ）疾患関連の標的分子に結合することが可能な１つまたはそれより多くのリガンド、（ｂ）ケイ素原子とフッ素原子との間の共有結合を含み、１９Ｆの１８Ｆでの同位体交換によって１８Ｆで標識できるかまたは１８Ｆで標識されている、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分、および（ｃ）キレート化された非放射性または放射性カチオンを含有していてもよい、１つまたはそれより多くのキレート化基を含む、リガンド−ＳＩＦＡ−キレーターコンジュゲートに関する。
【背景技術】
【０００２】
本明細書中、特許出願や製造元のマニュアルを含む多数の文書が引用されている。これらの文書の開示は、本発明の特許性に関連するとはみなされないが、その全体が参照により組み入れられる。より詳細には、参照される全ての文書は、それぞれ個々の文書が具体的かつ個々に参照により組み入れられると示されているのと同程度に、参照により組み入れられる。
【０００３】
前立腺がん
前立腺がん（ＰＣａ）は、この１０年にわたり、男性において、高い発生率で生存率が低い最も一般的な悪性疾患であり続けている。前立腺がんにおけるその過剰発現のために（Silverら、Clinical Cancer Research 3, 81〜85（1997））、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）またはグルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩ（ＧＣＰ  ＩＩ）は、ＰＣａの内部放射線療法およびイメージングのための高感度の放射標識薬剤を開発するための優れた標的としてのその適格性が証明されている（Afshar-Oromiehら、European journal of nuclear medicine and molecular imaging 42、197〜209 （2015）；Benesovaら、Journal of Nuclear Medicine 56、914〜920（2015）；Robuら、Journal of Nuclear Medicine, jnumed.116.178939（2016）；Weineisenら、Journal of Nuclear Medicine 55、1083〜1083（2014）；Roweら、Prostate cancer and prostatic diseases（2016）；Maurerら、Nature Reviews Urology（2016））。前立腺特異的膜抗原は、細胞外のヒドロラーゼであり、その触媒中心は、架橋を形成する水酸基リガンドと共に２つの亜鉛（ＩＩ）イオンを含む。これは転移性およびホルモン抵抗性前立腺癌において高度にアップレギュレートされるが、腎臓、唾液腺、小腸、脳で、程度は低いが健康な前立腺組織でも、その生理学的な発現が報告されている。腸において、ＰＳＭＡは、プテロイルポリ−γ−グルタミン酸をプテロイルグルタミン酸塩（葉酸塩）に変換することによって、葉酸塩の吸収を容易にする。脳において、ＰＳＭＡは、Ｎ−アセチル−Ｌアスパルチル−Ｌ−グルタミン酸（ＮＡＡＧ）を、Ｎ−アセチル−Ｌ−アスパラギン酸およびグルタミン酸に加水分解する。
【０００４】
前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）は、前立腺がんの上皮細胞で高度に過剰発現されるＩＩ型膜貫通糖タンパク質である。その名称にもかかわらず、ＰＳＭＡは、様々な前立腺以外のがんの新生血管系でも様々な程度で発現される。ＰＳＭＡ発現が明らかになっている最も一般的な前立腺以外のがんとしては、なかでも特に、乳癌、肺癌、結腸直腸癌、および腎細胞癌が挙げられる。
【０００５】
ＰＳＭＡ標的分子の一般的な必須構造は、Ｐ１’グルタミン酸部分に接続された亜鉛結合基を包囲する結合単位（例えば尿素（Zhouら、Nature Reviews Drug Discovery 4、1015〜1026（2005））、ホスフィン酸またはホスホロアミド酸）を含み、これが、ＰＳＭＡに対する高親和性および特異性を保証し、典型的にはエフェクター官能基にさらに接続されている（Machulkinら、Journal of drug targeting、1〜15（2016））。エフェクター部分は、よりフレキシブルであり、構造改変に対してある程度寛容である。入口のトンネルは、２つの他の中心的な構造的特徴と合っており、これは、リガンド結合にとって重要である。第１の構造的特徴は、アルギニンパッチであり、これは、じょうご型の入口の壁における正電荷を有する領域であり、ＰＳＭＡのＰ１位で負電荷を有する官能基が選ばれる機械論的な説明になっている。これは、リガンド−足場内の負電荷残基の好ましい取込みの理由と考えられている。これまでに行われてこなかったＰＳＭＡリガンドへの正電荷の作用に関する徹底した分析を行うことによって、本発明者らの知見を得るに至った。結合すると、アルギニン側鎖が協調して再配置されることにより、Ｓ１疎水性アクセサリーポケットの開口をもたらすことができ、これは、第２の重要な構造であり、いくつかの尿素ベースの阻害剤のヨード−ベンジル基を受け入れることから、そのＰＳＭＡへの高親和性に寄与することが示されている（Barinkaら、Journal of medicinal chemistry 51、7737〜7743（2008））。
【０００６】
Zhangらは、二座の結合様式に採用できるＰＳＭＡの遠隔結合部位を発見した（Zhangら、Journal of the American Chemical Society 132、12711〜12716（2010））。いわゆるアレーン結合部位は、Ａｒｇ４６３、Ａｒｇ５１１およびＴｒｐ５４１の側鎖によって形作られる単純な構造的モチーフであり、ＧＣＰＩＩ入口のふたの一部である。アレーン結合部位と遠位阻害剤部分とがかみ合うと、結合活性作用によりＰＳＭＡへの阻害剤親和性を実質的に増加させることができる。結合様式の結晶構造分析が入手できていないにもかかわらず、この方法でＰＳＭＡと相互作用させる意図でＰＳＭＡ  Ｉ＆Ｔが開発された。Ｚｈａｎｇらによる必須の特徴は、リンカー単位（ＰＳＭＡ  Ｉ＆Ｔの場合はスベリン酸）であり、これは、ＧＣＰＩＩの入口のふたが開いたコンフォメーションを助長し、それによってアレーン結合部位の接近しやすさを有効にする。さらに、リンカーの構造的組成が、腫瘍標的化および生物学的活性に加えて、高いイメージング品質と効率的な標的化内部放射線療法の両方にとって重要な特性であるイメージングのコントラストと薬物動態学にも顕著な影響を与えることが示された（Liuら、Bioorganic & medicinal chemistry letters 21, 7013〜7016（2011））。
【０００７】
現在、ＰＳＭＡ標的阻害剤の２つのカテゴリーが臨床条件に使用されている。一方のカテゴリーは、放射性核種の複合体化のためのキレート化単位、例えばＰＳＭＡ  Ｉ＆Ｔまたは関連化合物と共にトレーサーが存在するものである（Kiessら、The quarterly journal of nuclear medicine and molecular imaging 59、241（2015））。他方のものは、標的化単位およびエフェクター分子を含む小分子が存在するものである。
【０００８】
選択的なＰＳＭＡイメージングに最も頻繁に使用される薬剤は、ＰＳＭＡ  ＨＢＥＤ−ＣＣ（Ederら、Bioconjugate chemistry 23, 688〜697（2012））、ＰＳＭＡ−６１７（Benesovaら、Journal of Nuclear Medicine 56、914〜920（2015））およびＰＳＭＡ  Ｉ＆Ｔ（Weineisenら；Journal of Nuclear Medicine 55、1083〜1083（2014））、であり、これらは、６８Ｇａで優勢に標識される（８８．９％β＋、Ｅβ＋，ｍａｘ＝１．８９ＭｅＶ、ｔ1/2＝６８分）。これらのなかでも、６８Ｇａ−ＰＳＭＡ−ＨＢＥＤ−ＣＣ（６８Ｇａ−ＰＳＭＡ−１１としても公知）が、これまでＰＣａのＰＥＴイメージングのための代表的存在とみなされている。
【０００９】
１８Ｆ標識
近年、いくつかのグループが、ＰＣａ診断のための新規の１８Ｆ標識尿素ベースの阻害剤の開発に注力している。商業的に分配された６８Ｇｅ／６８Ｇａ放射性核種発生器から得ることができる放射性金属６８Ｇａ（６８Ｇｅ；ｔ1/2＝２７０．８ｄ）とは対照的に、放射線同位体１８Ｆ−フッ化物（９６．７％β＋、Ｅβ＋，ｍａｘ＝６３４ｋｅＶ）は、その生産のためにその場でのサイクロトロンを必要とする。この限界にもかかわらず、１８Ｆは、そのより長い半減期（ｔ1/2＝１０９．８分）およびそのより低い陽電子エネルギーのために、日常的な取り扱いおよび画像品質に関して顕著な利点を提供する。加えて、サイクロトロンでの大規模生産の可能性があり、これ、より高い患者処理能力および生産コスト低減にとって有益と予想される。１８Ｆ標識尿素ベースのＰＳＭＡ阻害剤である１８Ｆ−ＤＣＦＰｙｌは、原発性および転移性ＰＣａの検出において有望な結果を示し（Roweら、Molecular Imaging and Biology、1〜9（2016））、さらに比較研究において６８Ｇａ−ＰＳＭＡ−ＨＢＥＤ−ＣＣのほうが優れていることを示した（Dietleinら、Molecular Imaging and Biology 17、575〜584（2015））。近年、ＰＳＭＡ−６１７の構造に基づき、匹敵する腫瘍対臓器の比率を示す１８Ｆ標識類似体ＰＳＭＡ−１００７が開発された（Cardinaleら、Journal of nuclear medicine：official publication、Society of Nuclear Medicine 58、425〜431（2017）；Gieselら、European journal of nuclear medicine and molecular imaging 43、1929〜1930（2016））。６８Ｇａ−ＰＳＭＡ−ＨＢＥＤ−ＣＣとの比較研究から、両方のトレーサーが類似の診断精度を有し、１８Ｆ−ＰＳＭＡ−１００７の尿クリアランスが低下したことが解明され、これは、前立腺のより優れた評価を可能にする（Gieselら、European journal of nuclear medicine and molecular imaging 44、678〜688（2017））。
【００１０】
１８Ｆ標識を導入するための魅力的なアプローチは、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）の使用である。フッ化ケイ素アクセプターは、例えば、Lindnerら、Bioconjugate Chemistry 25、738〜749（2014）で説明されている。フッ化ケイ素の結合を保存するために、フッ化ケイ素アクセプターの使用は、ケイ素（silicone、シリコーン）原子の周りに空間配置的に要求される基の必要性を導入する。これは順に、フッ化ケイ素アクセプターを高度に疎水性にする。標的分子、特定にはＰＳＭＡである標的分子への結合に関して、フッ化ケイ素（silicone fluoride、シリコーンフッ化物）アクセプターによって提供される疎水性部分は、放射線診断剤または放射線療法化合物と、Zhangら、Journal of the American Chemical Society 132, 12711〜12716（2010）に記載される疎水性ポケットとの相互作用を確立する目的のために活用することができる。それでもなお、結合以前の問題として、分子に導入されるより高度な親油性が、インビボで好適な生体内分布を有する、すなわち非標的組織での非特異的な結合が少ない放射性医薬の開発に関連する重大な問題をもたらしている。
【００１１】
疎水性問題解決の失敗
先行技術において、多くの試みにもかかわらず、フッ化ケイ素アクセプターによって引き起こされる疎水性問題は満足がいくほど解決されていない。
【００１２】
さらに説明するために、Schirrmacher E.ら（Bioconjugate Chem. 2007、18、2085〜2089）は、フッ化ケイ素アクセプターの一例である極めて有効な標識シントンであるｐ−（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフルオロシリル）ベンズアルデヒド（［１８Ｆ］ＳＩＦＡ−Ａ）を使用して、異なる１８Ｆ標識ペプチドを合成した。ＳＩＦＡ技術は、予想外の効率的な同位体１９Ｆ−１８Ｆ交換をもたらし、ＨＰＬＣ精製を適用することなく、ほぼ定量可能な収量で１８Ｆ−シントンを、２２５〜６８０ＧＢｑ／μｍｏｌ（６０８１〜１８３７８Ｃｉ／ｍｍｏｌ）の高い特異的活性で生じた。最終的に［１８Ｆ］ＳＩＦＡ−ベンズアルデヒドを使用して、Ｎ末端アミノ−オキシ（Ｎ−ＡＯ）誘導体化ペプチドであるＡＯ−Ｔｙｒ３−オクトレオテート（ＡＯ−ＴＡＴＥ）、シクロ（ｆＫ（ＡＯ−Ｎ）ＲＧＤ）およびＮ−ＡＯ−ＰＥＧ２−［Ｄ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｔｈｉ−Ｎｌｅ−ＮＨ２］（ＡＯ−ＢＺＨ３、ボンベシン誘導体）を高い放射化学的収量で標識した。それにもかかわらず、標識ペプチドは高度に親油性であり（この論文に記載された条件を使用したＨＰＬＣ保持時間から得ることができるものとして）、したがって動物モデルまたはヒトでのさらなる評価には不適切である。
【００１３】
Wangler C.ら（Bioconjugate Chem.、2009、20（2）、317〜321頁）において、タンパク質（ラット血清アルブミン、ＲＳＡ）の最初のＳＩＦＡベースのＫｉｔ様放射性フッ素化が記載されている。標識剤として、４−（ジ−ｔｅｒｔ−ブチル［１８Ｆ］フルオロシリル）ベンゼンチオール（Ｓｉ［１８Ｆ］ＦＡ−ＳＨ）を、簡単な同位体交換によって４０〜６０％の放射化学的収量（ＲＣＹ）で生産し、２０〜３０分以内に生成物をマレイミド誘導体化血清アルブミンに１２％の全ＲＣＹで直接カップリングした。この技術的に簡単な標識手順は、いかなる手の込んだ精製手順を必要とせず、ＰＥＴを用いたインビボでのイメージングのためのＳｉ−１８Ｆ化学適用の複雑でない成功例である。時間−活性曲線およびマウスのμＰＥＴ画像は、活性のほとんどが肝臓に局在化されたことを示し、したがってこれは、この標識剤は親油性が高すぎること、およびインビボでプローブを肝胆汁排出と徹底した肝臓代謝に方向付けることを実証している。
【００１４】
その後Wangler C.ら（Bioconjug Chem. 2010年12月15日；21（12）：2289〜96を参照）は、新しいＳＩＦＡ−オクトレオテート類似体（ＳＩＦＡ−Ｔｙｒ３−オクトレオテート、ＳＩＦＡ−Ａｓｎ（ＡｃＮＨ−β−Ｇｌｃ）−Ｔｙｒ３−オクトレオテートおよびＳＩＦＡ−Ａｓｎ（ＡｃＮＨ−β−Ｇｌｃ）−ＰＥＧ−Ｔｙｒ３−オクトレオテート）を合成して評価することによって、ＳＩＦＡ技術の主要な欠点である得られた放射性医薬の高い親油性を克服することを試みた。これらの化合物では、ペプチドと、ＳＩＦＡ部分、すなわち炭水化物およびＰＥＧリンカーに加えて炭水化物との間に、親水性リンカーおよび薬物動態調節剤が導入された。コンジュゲートの親油性の尺度としてｌｏｇＰ（ｏｗ）を決定したところ、ＳＩＦＡ−Ａｓｎ（ＡｃＮＨ−β−Ｇｌｃ）−ＰＥＧ−Ｔｙｒ3−オクトレオテートでは０．９６、およびＳＩＦＡ−Ａｓｎ（ＡｃＮＨ−β−Ｇｌｃ）−Ｔｙｒ3−オクトレオテートでは１．２３であることが見出された。これらの結果から、ＳＩＦＡ部分の高い親油性は、親水性部分を適用することによってわずかしか相殺できないことが示される。第１のイメージング研究から過剰な肝臓クリアランス／肝臓での取込みが実証されたため、第１のヒトでの研究に移行することはなかった。
【００１５】
Bernard-Gauthierら（Biomed Res Int．2014；2014：454503）は、低分子補欠分子団や他の低分子量化合物から標識ペプチド、ごく最近ではアフィボディ分子に至る文献で報告されたおびただしい量の様々なＳＩＦＡ種について総論している。これらのデータに基づいて、ＳＩＦＡベースの置換基の親油性の問題は、まだ解決されておらず、すなわちＳＩＦＡコンジュゲートペプチドの全体の親油性をおよそ−２．０より低いｌｏｇＤに低下させる手法はまだ説明されていない。
【００１６】
Lindner S.ら（Bioconjug Chem.2014年4月16日；25（4）：738〜49）において、特異的なＧＲＰ受容体リガンドとしてのペグ化ボンベシン（ＰＥＳＩＮ）誘導体および特異的なαｖβ３バインダーとしてＲＧＤ（アルギニン−グリシン−アスパラギン酸の１文字コード）ペプチドを合成し、ケイ素−フッ素−アクセプター（ＳＩＦＡ）部分でタグ付けしたことが記載されている。ＳＩＦＡ部分の高い親油性を相殺するために様々な親水性構造改変を導入したところ、ｌｏｇＤ値が低下した。ＳＩＦＡ−Ａｓｎ（ＡｃＮＨ−β−Ｇｌｃ）−ＰＥＳＩＮ、ＳＩＦＡ−Ｓｅｒ（β−Ｌａｃ）−ＰＥＳＩＮ、ＳＩＦＡ−Ｃｙａ−ＰＥＳＩＮ、ＳＩＦＡ−ＬｙｓＭｅ３−ＰＥＳＩＮ、ＳＩＦＡ−γ−カルボキシ−ｄ−Ｇｌｕ−ＰＥＳＩＮ、ＳＩＦＡ−Ｃｙａ２−ＰＥＳＩＮ、ＳＩＦＡ−ＬｙｓＭｅ３−γ−カルボキシ−ｄ−Ｇｌｕ−ＰＥＳＩＮ、ＳＩＦＡ−（γ−カルボキシ−ｄ−Ｇｌｕ）２−ＰＥＳＩＮ、ＳＩＦＡ−ＲＧＤ、ＳＩＦＡ−γ−カルボキシ−ｄ−Ｇｌｕ−ＲＧＤ、ＳＩＦＡ−（γ−カルボキシ−ｄ−Ｇｌｕ）２−ＲＧＤ、ＳＩＦＡ−ＬｙｓＭｅ３−γ−カルボキシ−ｄ−Ｇｌｕ−ＲＧＤ。これらのペプチドの全てを親油性を低下させる目的で予め改善および誘導体化したところ、＋２〜−１．２２の範囲のｌｏｇＤ値を示した。
【００１７】
Niedermoser S.ら（J Nucl Med. 2015年7月；56（7）：1100〜5）において、新たに開発された１８Ｆ−ＳＩＦＡ−および１８Ｆ−ＳＩＦＡｌｉｎ−（ＳＩＦＡ＝フッ化ケイ素アクセプター）で改変されたＴＡＴＥ誘導体を、ソマトスタチン受容体を保持する腫瘍の高品質イメージングについて、現状で臨床上最も代表的な６８Ｇａ−ＤＯＴＡＴＡＴＥと比較した。この目的のために、１８Ｆ−ＳＩＦＡ−ＴＡＴＥおよび２つの極めて複雑な類似体、１８Ｆ−ＳＩＦＡ−Ｇｌｃ−ＰＥＧ１−ＴＡＴＥ、１８Ｆ−ＳＩＦＡｌｉｎ−Ｇｌｃ−Ａｓｐ２−ＰＥＧ１−ＴＡＴＥを開発した。ｌｏｇＤ＜−１．５を示した薬剤はなかった。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１８】
【非特許文献１】Silverら、Clinical Cancer Research 3, 81〜85（1997）
【非特許文献２】Afshar-Oromiehら、European journal of nuclear medicine and molecular imaging 42、197〜209 （2015）
【非特許文献３】Benesovaら、Journal of Nuclear Medicine 56、914〜920（2015）
【非特許文献４】Robuら、Journal of Nuclear Medicine, jnumed.116.178939（2016）
【非特許文献５】Weineisenら、Journal of Nuclear Medicine 55、1083〜1083（2014）
【非特許文献６】Roweら、Prostate cancer and prostatic diseases（2016）
【非特許文献７】Maurerら、Nature Reviews Urology（2016）
【非特許文献８】Zhouら、Nature Reviews Drug Discovery 4、1015〜1026（2005）
【非特許文献９】Machulkinら、Journal of drug targeting、1〜15（2016）
【非特許文献１０】Barinkaら、Journal of medicinal chemistry 51、7737〜7743（2008）
【非特許文献１１】Zhangら、Journal of the American Chemical Society 132、12711〜12716（2010）
【非特許文献１２】Liuら、Bioorganic & medicinal chemistry letters 21, 7013〜7016（2011）
【非特許文献１３】Kiessら、The quarterly journal of nuclear medicine and molecular imaging 59、241（2015）
【非特許文献１４】Ederら、Bioconjugate chemistry 23, 688〜697（2012））
【非特許文献１５】Benesovaら、Journal of Nuclear Medicine 56、914〜920（2015）
【非特許文献１６】Weineisenら；Journal of Nuclear Medicine 55、1083〜1083（2014）
【非特許文献１７】Roweら、Molecular Imaging and Biology、1〜9（2016）
【非特許文献１８】Dietleinら、Molecular Imaging and Biology 17、575〜584（2015）
【非特許文献１９】Cardinaleら、Journal of nuclear medicine：official publication、Society of Nuclear Medicine 58、425〜431（2017）
【非特許文献２０】Gieselら、European journal of nuclear medicine and molecular imaging 43、1929〜1930（2016）
【非特許文献２１】Gieselら、European journal of nuclear medicine and molecular imaging 44、678〜688（2017）
【非特許文献２２】Lindnerら、Bioconjugate Chemistry 25、738〜749（2014）
【非特許文献２３】Zhangら、Journal of the American Chemical Society 132, 12711〜12716（2010）
【非特許文献２４】Schirrmacher E.ら（Bioconjugate Chem. 2007、18、2085〜2089）
【非特許文献２５】Wangler C.ら（Bioconjugate Chem.、2009、20（2）、317〜321頁）
【非特許文献２６】Wangler C.ら（Bioconjug Chem. 2010年12月15日；21（12）：2289〜96
【非特許文献２７】Bernard-Gauthierら（Biomed Res Int．2014；2014：454503
【非特許文献２８】Lindner S.ら（Bioconjug Chem.2014年4月16日；25（4）：738〜49）
【非特許文献２９】Niedermoser S.ら（J Nucl Med. 2015年7月；56（7）：1100〜5）
【発明の概要】
【００１９】
上記のことを考慮して、本発明の土台となる技術的な問題は、フッ化ケイ素（silicone fluoride）アクセプターを含有し、同時に好都合なインビボの特性を特徴とする放射線診断剤および放射線療法剤を提供することで理解することができる。
【００２０】
以下で明らかになるように、本発明は、高親和性で標的としての前立腺特異的抗原（ＰＳＭＡ）に結合する特異的なコンジュゲートを使用して原理証明を確立した。したがって、本発明の土台となるさらなる技術的な問題は、がん、好ましくは前立腺がんである医療上の適応症のための改善された放射線療法剤および診断剤を提供することで理解することができる。
【００２１】
これらの技術的な問題は、特許請求の範囲の主題によって解決される。したがって、第１の形態において、本発明は、単一分子内に、（ａ）疾患関連の標的分子に結合することが可能な１つまたはそれより多くのリガンド、（ｂ）ケイ素原子とフッ素原子との間の共有結合を含み、１９Ｆの１８Ｆでの同位体交換によって１８Ｆで標識できるかまたは１８Ｆで標識されている、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分、および（ｃ）キレート化された非放射性または放射性カチオンを含有していてもよい、１つまたはそれより多くのキレート化基を含む、リガンド−ＳＩＦＡ−キレーターコンジュゲートに関する。
【００２２】
リガンド−ＳＩＦＡ−キレーターコンジュゲートは、３つの別個の部分を含む。３つの別個の部分は、（ａ）疾患関連の標的分子に結合することが可能な１つまたはそれより多くのリガンド、（ｂ）ケイ素原子とフッ素原子との間の共有結合を含む、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分、および（ｃ）キレート化された非放射性または放射性カチオンを含有していてもよい、１つまたはそれより多くのキレート化基である。
【００２３】
ＳＩＦＡ部分におけるフッ素原子は、１９Ｆまたは１８Ｆであってもよい。
疾患関連の標的分子に結合することが可能な特定のリガンドは、環状ペプチドであってもよいが、さらなるキレート化部分の非存在下で疎水性のＳＩＦＡ部分の問題が解決されていないことから、このような環状ペプチドは、本明細書で想定されるようなキレート化基ではない。したがって、本発明の化合物は、疾患関連の標的分子に結合することが可能なリガンドに加えて、親水性キレート化基を必要とする。親水性キレート化基は、ＳＩＦＡ部分の存在によって引き起こされる化合物の疎水性の性質を低減するのに必要である。
【００２４】
本発明の第１の形態に関するリガンドは、機能的な観点で定義される。これが該当するのは、本発明が構造的な観点でリガンドの特定の性質に依存しないためである。そうではなく、本発明の主要な形態は、単一分子内での、フッ化ケイ素アクセプターおよびキレーターまたはキレートの組合せである。これらの２つの構造的なエレメントであるＳＩＦＡとキレーターは、空間的に近接した状態を示す。好ましくは、２つのエレメントの２つの原子間の最短距離は、２５Å未満またはそれに等しく、より好ましくは２０Å未満であり、さらにより好ましくは１５Å未満である。代替として、または加えて、２５以下の共有結合が、ＳＩＦＡ部分の原子とキレーターの原子とを分離することが好ましく、好ましくは２０以下の化学結合、さらにより好ましくは１５以下の化学結合である。
【００２５】
第１の形態の項目（ｃ）に記載のカチオンは、放射性または非放射性カチオンである。上記カチオンは、好ましくは、放射性または非放射性金属カチオンであり、より好ましくは、放射性金属カチオンである。さらに以下で、例を示す。
【００２６】
結果として、ＳＩＦＡ部分とキレート化基の両方で放射標識されているコンジュゲート、２つの側のうち一方のみで放射性標識されている分子、加えてまったく放射標識されていない分子が、第１の形態の観点に該当する。後者の場合、キレート化基は、コールド（非放射性）イオンの複合体であるか、またはイオンがまったくないかのいずれかであり得る。
【００２７】
本発明者らは、驚くべきことに、これらに限定されないが、ＤＯＴＡＧＡまたはＤＯＴＡなどの親水性キレーターの近隣に、フッ化ケイ素（silicone fluoride）アクセプターを配置することが、化合物をインビボ投与に好適にする範囲で放射線療法または診断化合物の全体的な疎水性をシフトさせる程度に、ＳＩＦＡ部分の親油性を効率的に遮蔽または相殺することを発見した。
【００２８】
加えて、１８Ｆ−フッ化物を用いたＳＩＦＡにおけるキレーターおよび同位体交換の使用の組合せも、その場のサイクロトロンを備えた施設、またはサイクロトロンの施設からの出荷によって１８Ｆ−フッ化物を得る施設のいずれかで［１８Ｆ］［ｎａｔＩｏｎ］トレーサーとして使用できる「対になった」診断トレーサーをもたらし、それに対し、１８Ｆ−フッ化物へのアクセスを有さないが、放射線同位体発生器、例えばＧｅ−６８／Ｇａ−６８ジェネレーターへのアクセスを有する施設で、対応するバージョン、例えば［ｎａｔＦ］［６８Ｇａ］トレーサーを使用できる。
【００２９】
いずれの場合においても重要なことは、化学的に同一な放射性医薬が注射されること、したがって、インビボでの挙動において相違が予測されないことである。それに対して現在のところ、化学的な相違によって、１つの地域の患者コホートによって提供される１８Ｆ標識化合物の臨床データは、別の地域の別のグループによって提供される６８Ｇａ−類似体の臨床データと直接比較できないが、本発明に係る放射性医薬および／または診断剤は直接比較でき、したがって、このようなデータ（例えばＦ−１８を使って研究を行っている欧州の施設からのデータとＧａ−６８を使って研究を行っているインドの別の施設）が連結されることになる。
【００３０】
さらにキレートも、適切に選択されるのであれば、治療用同位体、例えばベータ放出同位体Ｌｕ−１７７、Ｙ−９０、またはアルファ放出同位体Ａｃ−２２５などで標識化するのに使用でき、したがって、「対になった」トレーサーの概念を拡張して、診断剤（［１８Ｆ］［ｎａｔＬｕ］トレーサー）と治療用放射性医薬（［ｎａｔＦ］［１７７Ｌｕ］）とを架橋することができる。
【００３１】
化合物、特に本発明のＰＳＭＡ標的化化合物のさらなる利点は、他のＰＳＭＡ標的化放射性医薬、例えばＰＳＭＡ  Ｉ＆Ｔと比較して、それらのマウス腎臓における蓄積が驚くほど低いことである。これは、特定の理論に縛られることは望まないが、構造的なエレメントであるＳＩＦＡと、予想外の腎臓における蓄積の低減をもたらすキレーターとの組合せによるようである。
【００３２】
親油性／親水性に関して、ｌｏｇＰ値（時にはｌｏｇＤ値とも称される）は、当業界で確立された尺度である。
用語「親油性」は、脂質溶液中に溶解もしくは吸収される、または脂質様表面またはマトリックスで吸着される強度に関する。これは、脂質（文字通りの意味）、または有機または無極性の液体、または水と比較して小さい双極子モーメントを有する液体、溶液もしくは表面を好むことを意味する。用語「疎水性」は、本明細書では等しい意味で使用される。親油性および疎水性という形容詞は、上述した名詞に対応する意味で使用される。
【００３３】
２つの不混和性または実質的に不混和性の溶媒の境界面における分子の質量流束は、その親油性によって支配される。分子の親油性が高いほど、親油性有機相中におけるその可溶性が高くなる。親油性の標準尺度として、水とｎ−オクタノールとの間で観察される分子の分配係数が用いられてきた。種Ａの分配係数Ｐは、比率Ｐ＝［Ａ］ｎ−オクタノール／［Ａ］水と定義される。一般的に報告される数値はｌｏｇＰ値であり、これは分配係数の対数である。分子がイオン化可能な場合、複数の別個の微細種（分子のイオン化された形態およびイオン化されていない形態）が、原則的に両方の相に存在すると予想される。イオン化可能な種の全体の親油性を説明する量、分配係数Ｄであり、これは、比率Ｄ＝［全微細種の濃度の合計］ｎ−オクタノール／［全微細種の濃度の合計］水と定義される。ｌｏｇＰと同様に、分配係数の対数、ｌｏｇＤが報告されることが多い。しばしば、緩衝系、例えばリン酸緩衝塩類溶液が、上述したｌｏｇＰの決定において水の代替物として使用される。
【００３４】
第１の分子における置換基の親油性特徴が、定量的に評価および／または決定されることになれば、その置換基に対応する第２の分子を評価することができ、その場合前記第２の分子は、例えば、前記置換基を第１の分子の残りに接続する結合を破壊することで得られた自由原子価を水素に接続することによって得られる。
【００３５】
代替として、分子のｌｏｇＰへの置換基の寄与率を決定してもよい。分子Ｒ−ＸのｌｏｇＰへの置換基Ｘの寄与率πＸＸは、πＸＸ＝ｌｏｇＰＲ−Ｘ−ｌｏｇＰＲ−Ｈと定義され、式中Ｒ−Ｈは、非置換の親化合物である。
【００３６】
１より大きいＰおよびＤの値に加えて、ゼロより大きいｌｏｇＰ、ｌｏｇＤおよびπＸＸ値は、親油性／疎水性特徴を示し、それに対して１より小さいＰおよびＤの値に加えて、ゼロより小さいｌｏｇＰ、ｌｏｇＤおよびπＸＸ値は、それぞれの分子または置換基の親水性特徴を示す。
【００３７】
本発明に係る親油性基または分子全体の親油性を特徴付ける上述のパラメーターは、実験手段によって決定してもよいし、および／または当業界において公知のコンピューターによる方法によって予測してもよい（例えばSangster、Octanol-water Partition Coefficients：fundamentals and physical chemistry、John Wiley & Sons、Chichester.（1997）を参照）。
【００３８】
好ましい実施態様において、本発明の化合物のｌｏｇＰ値は、−５〜−１．５の間である。特に好ましくは、ｌｏｇＰ値は、−３．５〜−２．０の間である。
好ましい実施態様において、本発明に係るリガンドは、ペプチド、ペプチド模擬体または置換された尿素、アミノ酸を含む置換基を含むかまたはそれからなる。ペプチドまたはペプチド模擬体を含むリガンドはまた、非ペプチド性部分や非ペプチド模擬体部分も含むことが理解される。分子量に関して、１５ｋＤａ未満、１０ｋＤａ未満または５ｋＤａ未満の分子量が好ましい。したがって、低分子量タンパク質も用語「リガンド」に包含される。標的分子としては、特に限定されないが、酵素、受容体、エピトープ、輸送体、細胞表面分子および細胞外マトリックスのタンパク質が挙げられる。好ましくは、疾患に関連する標的である。特に好ましくは、因果的に所与の疾患に関与する標的であるか、もしくは所与の疾患において高度に過剰発現される標的であるか、および／またはその阻害が、所与の疾患に罹っている患者において有益な作用を引き起こす可能性がある標的である。リガンドは、好ましくは、好ましい親和性を有する高親和性リガンドであり、このような親和性は、ＩＣ５０として表され、５０ｎＭ未満、２０ｎＭ未満または５ｎＭ未満である。
【００３９】
特に好ましくは、高親和性で、疾患関連の標的分子または疾患関連の生体分子、これらに限定されないが、ソマトスタチン受容体、ボンベシン受容体、ケモカイン受容体、インテグリン受容体、コレシストキニン受容体、メラノコルチン受容体、血管作用性小腸ペプチド受容体、ニューロテンシン受容体、神経ペプチドＹ受容体、ニューロキニン受容体、グルカゴン（glucacon）様ペプチド１受容体、Ｈｅｒ２−受容体、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−１、ゴナドトロピン放出ホルモン受容体および前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）などと結合するリガンドである。
【００４０】
用語「疾患関連」は、好ましくは、疾患における原因としての関与を指す。
好ましくは、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分は、式（Ｉ）：
【００４１】
【化１】
2020528461.tif 000002
【００４２】
で表される構造を有し、
式中、Ｒ１ＳおよびＲ２Ｓは、独立して、直鎖状または分岐状のＣ３〜Ｃ１０アルキル基であり、好ましくはＲ１ＳおよびＲ２Ｓは、イソプロピルおよびｔｅｒｔ−ブチルから選択され、より好ましくはＲ１ＳおよびＲ２Ｓは、ｔｅｒｔ−ブチルであり；
Ｒ３Ｓは、Ｃ１〜Ｃ２０炭化水素基であり、該炭化水素基は、１つまたはそれより多くの芳香族単位および１つまたはそれより多くの脂肪族単位、ならびに／またはＯおよびＳから選択される最大３個のヘテロ原子を含んでいてもよく、好ましくはＲ３Ｓは、芳香環を含み、１つまたはそれより多くの脂肪族単位を含んでいてもよいＣ６〜Ｃ１０炭化水素基であり；より好ましくはＲ３Ｓは、フェニル環であり、最も好ましくは、Ｒ３Ｓは、Ｓｉを含有する置換基と
【００４３】
【化２】
2020528461.tif 000003
【００４４】
で示される結合とがパラ位にあるフェニル環であり、ここで該ＳＩＦＡ部分は、
【００４５】
【化３】
2020528461.tif 000004
【００４６】
で示される結合を介してコンジュゲートの残りに付着されている。
より好ましくは、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分は、式（Ｉａ）：
【００４７】
【化４】
2020528461.tif 000005
【００４８】
で表される構造を有し、式中、ｔ−Ｂｕは、ｔｅｒｔ−ブチル基を示す。
好ましいキレート化基は、以下の（ｉ）、（ｉｉ）または（ｉｉｉ）の少なくとも１つを含む。
【００４９】
（ｉ）８〜２０個の環原子を有する大環状環構造であって、該環原子のうち２個またはそれより多く、より好ましくは３つまたはそれより多くは、酸素原子または窒素原子から選択される。好ましくは、６個またはそれ未満の環原子は、酸素原子または窒素原子から選択される。特に好ましくは、３または４個の環原子が窒素原子または酸素原子である。酸素および窒素原子のなかでも、窒素原子が好ましい。大環状環構造と組み合わせて、好ましいキレート化基は、２個またはそれより多くの、例えば２〜６個、好ましくは２〜４個のカルボキシル基および／またはヒドロキシル基を含んでいてもよい。カルボキシル基およびヒドロキシル基のなかでも、カルボキシル基が好ましい。
【００５０】
（ｉｉ）８〜２０個の主鎖（バックボーン）原子を有する非環式の開鎖キレート化構造であって、該バックボーン原子のうち２個またはそれより多く、より好ましくは３つまたはそれより多くが、酸素原子または窒素原子から選択されるヘテロ原子である、開鎖キレート化構造。好ましくは、６個またはそれ未満のバックボーン原子は、酸素原子または窒素原子から選択される。酸素および窒素原子のなかでも、窒素原子が好ましい。より好ましくは、開鎖キレート化構造は、２個またはそれより多くの、より好ましくは３個またはそれより多くの、酸素原子または窒素原子から選択されるヘテロ原子、および２個またはそれより多くの、例えば２〜６個、好ましくは２〜４個の、カルボキシル基および／またはヒドロキシル基の組合せを含む構造である。カルボキシル基およびヒドロキシル基のなかでも、カルボキシル基が好ましい。
【００５１】
（ｉｉｉ）第四炭素原子を含有する分岐状のキレート化構造。好ましくは、第四炭素原子は、ＳＩＦＡ／リガンド部分に加えて３個の同一なキレート化基で置換されている。置換されたキレート化基は、アミドを含んでいてもよい。置換されたキレート化基は、芳香族基を含んでいてもよい。置換されたキレート化基は、ヒドロキシピリジノンを含んでいてもよい。
【００５２】
好ましい具体的な例において、キレート化基は、ビス（カルボキシメチル）−１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン（ＣＢＴＥ２ａ）、シクロヘキシル−１，２−ジアミン四酢酸（ＣＤＴＡ）、４−（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカ−１−イル）−メチル安息香酸（ＣＰＴＡ）、Ｎ’−［５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル］−Ｎ−［５−［［４−［５−アミノペンチル−（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル］アミノ］ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシブタンジアミド（ＤＦＯ）、４，１１−ビス（カルボキシメチル）−１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン（ＤＯ２Ａ）１，４，７，１０−テトラシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＤＯＴＡ）、α−（２−カルボキシエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７，１０テトラアザシクロドデカンＮ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’１，４，７，１０−テトラ（メチレン）ホスホン酸（ＤＯＴＭＰ）、Ｎ，Ｎ’−ジピリドキシルエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ジアセテート−５，５’−ビス（リン酸）（ＤＰＤＰ）、ジエチレントリアミンＮ，Ｎ’，Ｎ’’ペンタ（メチレン）ホスホン酸（ＤＴＭＰ）、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）、エチレンジアミン−Ν，Ν’−四酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレングリコール−Ｏ，Ｏ−ビス（２−アミノエチル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ）、Ｎ，Ｎ−ビス（ヒドロキシベンジル）−エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−二酢酸（ＨＢＥＤ）、ヒドロキシエチルジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、１−（ｐ−ニトロベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロデカン−４，７，１０−トリアセテート（ＨＰ−ＤＯＡ３）、６−ヒドラジニル−Ｎ−メチルピリジン−３−カルボキサミド（ＨＹＮＩＣ）、テトラ３−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−２−ピリジノンキレーター（４−（（４−（３−（ビス（２−（３−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−カルボキシアミド）エチル）アミノ）−２−（（ビス（２−（３−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−カルボキシアミド）エチル）アミノ）メチル）プロピル）フェニル）アミノ）−４−オキソブタン酸）、Ｍｅ−３，２−ＨＯＰＯと略記されるもの、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−コハク酸−４，７−二酢酸（ＮＯＤＡＳＡ）、１−（１−カルボキシ−３−カルボキシプロピル）−４，７−（カルボキシ（carbooxy））−１，４，７−トリアザシクロノナン（ＮＯＤＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナン三酢酸（ＮＯＴＡ）、４，１１−ビス（カルボキシメチル）−１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン（ＴＥ２Ａ）、１，４，８，１１−テトラアザシクロドデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、トリス（ヒドロキシピリジノン）（ＴＨＰ）、ターピリジン−ビス（メチレンアミン四酢酸（ＴＭＴ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−トリス［メチレン（２−カルボキシエチル）ホスフィン酸］（ＴＲＡＰ）、１，４，７，１０−���トラアザシクロトリデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＴＲＩＴＡ）、３−［［４，７−ビス［［２−カルボキシエチル（ヒドロキシ）ホスホリル］メチル］−１，４，７−トリアゾナン−１−イル］メチル−ヒドロキシ−ホスホリル］プロパン酸、およびトリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）から選択されるキレート剤の残基であり、これらの残基は、キレート剤に含有されるカルボキシル基をコンジュゲートの残りに、エステルまたはアミド結合を介して共有結合することによって提供される。
【００５３】
特定のキレーターを以下に示す：
【００５４】
【化５】
2020528461.tif 000006
【００５５】
上記の例示的なキレート剤のなかでも、ＴＲＡＰ、ＤＯＴＡおよびＤＯＴＡＧＡから選択されるキレート剤が特に好ましい。
金属またはカチオンでキレート化した大環状および非環式の化合物が当業界において周知であり、数々の製造元より入手可能である。本発明に係るキレート化部分は特に限定されないが、当業者は、多数の部分を既製品の形態でさらなる処理を行うことなく使用できることが理解される。
【００５６】
キレート化基は、放射性または非放射性であってもよいキレート化されたカチオンを含んでいてもよく、好ましくは、放射性または非放射性であってもよいキレート化された金属カチオンを含んでいてもよい。より好ましくは、キレート化された放射性金属同位体である。
【００５７】
キレート化基によってキレート化され得るカチオンの好ましい例は、４３Ｓｃ、４４Ｓｃ、４７Ｓｃ、５１Ｃｒ、５２ｍＭｎ、５８Ｃｏ、５２Ｆｅ、５６Ｎｉ、５７Ｎｉ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、６６Ｇａ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、８９Ｚｒ、９０Ｙ、８９Ｙ、＜Ｔｃ、９９ｍＴｃ、９７Ｒｕ、１０５Ｒｈ、１０９Ｐｄ、１１１Ａｇ，１１０ｍＩｎ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ、１１４ｍＩｎ、１１７ｍＳｎ、１２１Ｓｎ、１２７Ｔｅ、１４２Ｐｒ、１４３Ｐｒ、１４９Ｐｍ、１５１Ｐｍ、１４９Ｔｂ、１５２Ｔｂ、１５５Ｔｂ、１６１Ｔｂ、１５３Ｓｍ、１５７Ｇｄ、１６１Ｔｂ、１６６Ｈｏ、１６５Ｄｙ、１６９Ｅｒ、１６９Ｙｂ、１７５Ｙｂ、１７２Ｔｍ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１９１Ｐｔ、１９７Ｈｇ、１９８Ａｕ、１９９Ａｕ、２１２Ｐｂ、２０３Ｐｂ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２２３Ｒａ、２２５Ａｃ、２２７Ｔｈのカチオンであるか、１８Ｆを含むカチオン性分子であるか、または１８Ｆ−［ＡｌＦ］２＋などのカチオンであり；より好ましくは、４４Ｓｃ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、６８Ｇａ、９０Ｙ、１１１Ｉｎ、１６１Ｔｂ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８８Ｒｅ、２１２Ｐｂ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２２５Ａｃ、および２２７Ｔｈのカチオンであるか、または１８Ｆを含むカチオン性分子である。
【００５８】
一例としてＰＳＭＡバインダーを使用して、本発明者らは、上記で開示された発明を実施に移した。これは、以下で開示される好ましい形態および実施態様の主題である。それでもなお、ＳＩＦＡ部分の親油性を驚くべき程度に相殺するという本発明者らによってなされた驚くべき発見は、ＰＳＭＡバインダーを含む分子に限定されない。
【００５９】
したがって、リガンドは、好ましくは、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に結合することが可能である。
より好ましくは、リガンドは、式（ＩＩ）：
【００６０】
【化６】
2020528461.tif 000007
【００６１】
で表される構造を有し、
式中、ｍは、２〜６の整数、好ましくは２〜４の整数、より好ましくは２であり；ｎは、２〜６の整数、好ましくは２〜４の整数、より好ましくは２または３であり；Ｒ１Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり、好ましくはＮＨであり；Ｒ３Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり、好ましくはＮＨであり；Ｒ２Ｌは、ＣまたはＰ（ＯＨ）であり、好ましくはＣであり；ここで該リガンドは、
【００６２】
【化７】
2020528461.tif 000008
【００６３】
で示される結合を介してコンジュゲートの残りに付着されている。
リガンドは、式（ＩＩａ）：
【００６４】
【化８】
2020528461.tif 000009
【００６５】
で表される構造を有していてもよく、式中、ｎは、２〜６の整数であり；ここで該リガンドは、
【００６６】
【化９】
2020528461.tif 000010
【００６７】
で示される結合を介してコンジュゲートの残りに付着されている。
数々のＰＳＭＡバインダーが当業界において公知であり、それらは本発明に従っていずれも好適である。上記の好ましい実施態様は、ＰＳＭＡバインダーの好ましいグループの構造的な定義である。
【００６８】
特に好ましくは、第１の形態のコンジュゲートが、式（ＩＩＩ）：
【００６９】
【化１０】
2020528461.tif 000011
【００７０】
の化合物であるまたはその医薬的に許容される塩であり、式中、
ＳＩＦＡは、ケイ素原子とフッ素原子との間の共有結合を含み、１９Ｆの１８Ｆでの同位体交換によって１８Ｆで標識できるかまたは１８Ｆで標識されている、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分であり；好ましくはＳＩＦＡは、上記で定義された式（Ｉ）の、より好ましくは式（Ｉａ）のＳＩＦＡ部分であり；
ｍは、２〜６の整数、好ましくは２または３、より好ましくは２であり；
ｎは、２〜６の整数、好ましくは２または３、より好ましくは２または４であり；
Ｒ１Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり、好ましくはＮＨであり；
Ｒ３Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり、好ましくはＮＨであり；
Ｒ２Ｌは、ＣまたはＰ（ＯＨ）であり、好ましくはＣであり；
Ｘ１は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、およびアミン結合から選択され、好ましくはアミド結合であり；
Ｘ２は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、およびアミン結合から選択され、好ましくはアミド結合であり；
Ｌ１は、オリゴアミド、オリゴエーテル、オリゴチオエーテル、オリゴエステル、オリゴチオエステル、オリゴ尿素、オリゴ（エーテル−アミド）、オリゴ（チオエーテル−アミド）、オリゴ（エステル−アミド）、オリゴ（チオエステル−アミド）、オリゴ（尿素−アミド）、オリゴ（エーテル−チオエーテル）、オリゴ（エーテル−エステル）、オリゴ（エーテル−チオエステル）、オリゴエーテル−尿素）、オリゴ（チオエーテル−エステル）、オリゴ（チオエーテル−チオエステル）、オリゴ（チオエーテル−尿素）、オリゴ（エステル−チオエステル）、オリゴ（エステル−尿素）、およびオリゴ（チオエステル−尿素）から選択される構造を有する２価の結合基であり、好ましくは、オリゴアミドおよびオリゴ（エステル−アミド）から選択される構造を有する。
【００７１】
Ｌ１は、任意選択で、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣＨ３、−ＮＨ２、および−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２から独立して選択される１つまたはそれより多くの置換基で置換されていてもよい。
【００７２】
Ｘ３は、アミド結合、およびエステル結合、エーテル、アミン、ならびに式：
【００７３】
【化１１】
2020528461.tif 000012
【００７４】
の結合基（ここで、ＮＨ基における
【００７５】
【化１２】
2020528461.tif 000013
【００７６】
で示される結合は、ＲＢに結合しており、
【００７７】
【化１３】
2020528461.tif 000014
【００７８】
で示される他方の結合は、ＳＩＦＡに結合している）
から選択され；
好ましくはＸ３は、アミド結合であり；ＲＢは、３価のカップリング基であり；
Ｘ４は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、およびエステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、アミン結合、式：
【００７９】
【化１４】
2020528461.tif 000015
【００８０】
の結合基（ここで、
【００８１】
【化１５】
2020528461.tif 000016
【００８２】
で示されるアミド結合は、前記キレート化基と共に形成され、
【００８３】
【化１６】
2020528461.tif 000017
【００８４】
で示される他方の結合は、ＲＢに結合している）；および式：
【００８５】
【化１７】
2020528461.tif 000018
【００８６】
の結合基（ここで、カルボニル末端における
【００８７】
【化１８】
2020528461.tif 000019
【００８８】
で示される結合は、前記キレート化基と共に形成され、
【００８９】
【化１９】
2020528461.tif 000020
【００９０】
で示される他方の結合は、ＲＢに結合している）
から選択され；好ましくはＸ４は、アミド結合であり；
ＲＣＨは、キレート化された放射性または非放射性カチオンを含有していてもよいキレート化基であり、好ましくは放射性または非放射性金属カチオンであり、前記キレート化基および任意選択のキレート化されたカチオンの好ましい実施態様は、上記で定義された通りである。
【００９１】
用語「オリゴ」は、オリゴアミド、オリゴエーテル、オリゴチオエーテル、オリゴエステル、オリゴチオエステル、オリゴ尿素、オリゴ（エーテル−アミド）、オリゴ（チオエーテル−アミド）、オリゴ（エステル−アミド）、オリゴ（チオエステル−アミド）、オリゴ（尿素−アミド）、オリゴ（エーテル−チオエーテル）、オリゴ（エーテル−エステル）、オリゴ（エーテル−チオエステル）、オリゴ（エーテル−尿素）、オリゴ（チオエーテル−エステル）、オリゴ（チオエーテル−チオエステル）、オリゴ（チオエーテル−尿素）、オリゴ（エステル−チオエステル）、オリゴ（エステル−尿素）、およびオリゴ（チオエステル−尿素）で使用される場合、好ましくは、２〜２０個、より好ましくは２〜１０個のサブユニットが、同じ用語で特定されたタイプの結合によって連結されている基を指すと理解されるものとする。熟練した読者であれば理解していると予想されるが、括弧内に２つの異なるタイプの結合が示されている場合、両方のタイプの結合が関連する基に含有される（例えば「オリゴ（エステル−アミド）」において、エステル結合とアミド結合が含有される）。
【００９２】
Ｌ１は、その骨格内に、合計１〜５、より好ましくは合計１〜３、最も好ましくは合計１または２つのアミドおよび／またはエステル結合、好ましくはアミド結合を含むことが好ましい。
【００９３】
それゆえにオリゴアミドという用語は、ＮＨＣＯまたはＣＯＮＨから選択される基が散在しているＣＨ２またはＣＨＲ基の鎖を有する部分を記載する。Ｒ部分の各出現は、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣＨ３、−ＮＨ２、および−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２から選択される任意選択の置換基である。
【００９４】
また好ましくは、−Ｘ１−Ｌ１−Ｘ２−が、以下の構造（Ｌ−１）および（Ｌ−２）のうち一方を表す：
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ６−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ７−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−１）
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ８−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ１０−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−２）
上記式中、Ｒ６〜Ｒ１０は、独立して、Ｃ２〜Ｃ１０アルキレン、好ましくは直鎖状Ｃ２〜Ｃ１０アルキレンから選択され、該アルキレン基はそれぞれ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣＨ３、−ＮＨ２、および−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２から独立して選択される１つまたはそれより多くの置換基によって置換されていてもよい。
【００９５】
特に好ましくは、Ｒ６およびＲ７中の炭素原子の総数が、任意選択の置換基に含有される炭素原子を除いて、４〜２０個であり、より好ましくは４〜１６個である。特に好ましくは、Ｒ８〜Ｒ１０中の炭素原子の総数が、任意選択の置換基に含有される炭素原子を除いて、６〜２０個であり、より好ましくは６〜１６個である。
【００９６】
特に好ましくは、−Ｘ１−Ｌ１−Ｘ２−が、以下の構造（Ｌ−３）および（Ｌ−４）のうち一方を表す：
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ１２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−３）
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−Ｒ１３−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１４−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ１５−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−４）
上記式中、Ｒ１１〜Ｒ１５は、独立して、Ｃ２〜Ｃ８アルキレン、好ましくは直鎖状Ｃ２〜Ｃ８アルキレンから選択される。
【００９７】
特に好ましくは、Ｒ１１およびＲ１２またはＲ１３〜Ｒ１５中の炭素原子の総数がそれぞれ、８〜１８個であり、より好ましくは８〜１２個であり、さらにさらにより好ましくは９または１０個である。
【００９８】
好ましくは、ＲＢは、式（ＩＶ）：
【００９９】
【化２０】
2020528461.tif 000021
【０１００】
で表される構造を有し、
式中、Ａは、Ｎ、ＣＲ１６（ここでＲ１６はＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである）、および５〜７員環の炭素環式または複素環式基から選択され；好ましくはＡは、ＮおよびＣＨから選択され、より好ましくは、Ａは、ＣＨであり；（ＣＨ２）ａにおける
【０１０１】
【化２１】
2020528461.tif 000022
【０１０２】
で示される結合は、Ｘ２と共に形成され、ａは、０〜４の整数、好ましくは０または１、最も好ましくは０であり；
（ＣＨ２）ｂにおける
【０１０３】
【化２２】
2020528461.tif 000023
【０１０４】
で示される結合は、Ｘ３と共に形成され、ｂは、０〜４の整数、好ましくは０〜２の整数、より好ましくは０または１であり；
（ＣＨ２）ｃにおける
【０１０５】
【化２３】
2020528461.tif 000024
【０１０６】
で示される結合は、Ｘ４と共に形成され、ｃは、０〜４の整数、好ましくは０〜２の整数、より好ましくは０または１である。
本発明に係るコンジュゲートとしてさらにより好ましくは、それらの全ての好ましい実施態様を含めて、式（ＩＩＩａ）：
【０１０７】
【化２４】
2020528461.tif 000025
【０１０８】
（式中、ｍ、ｎ、Ｒ１Ｌ、Ｒ２Ｌ、Ｒ３Ｌ、Ｘ１、Ｌ１、ｂ、ｃ、Ｘ４およびＲＣＨは、上記で定義された通りである）
の化合物またはその医薬的に許容される塩である。
【０１０９】
式（ＩＩＩａ）の化合物にとって、ｂ＋ｃ≧１であることが好ましい。
式（ＩＩＩａ）の化合物にとって、ｂ＋ｃ≦３であることも好ましい。
式（ＩＩＩａ）の化合物にとって、ｂが１であり、ｃが０であることがより好ましい。
【０１１０】
式（ＩＩＩ）の化合物にとって、−Ｘ４−ＲＣＨが、そのカルボン酸基のうちの１つと、アミド結合を介してコンジュゲートの残りに結合したＤＯＴＡおよびＤＯＴＡＧＡから選択されるキレート剤の残基を表すことも好ましい。
【０１１１】
式（ＩＩＩ）の化合物の好ましい実施態様において、前記化合物は、式（ＩＩＩｂ）：
【０１１２】
【化２５】
2020528461.tif 000026
【０１１３】
（式中、ｍ、ｎ、Ｒ１Ｌ、Ｒ２Ｌ、Ｒ３Ｌ、Ｘ１、Ｌ１、ｂ、ｃ、Ｘ４およびＲＣＨは、上記で定義された通りであり；ｒは、０または１である）
の化合物またはその医薬的に許容される塩である。
【０１１４】
特に好ましくは、−Ｎ（Ｈ）−ＲＣＨは、そのカルボン酸基のうちの１つと、アミド結合を介してコンジュゲートの残りに結合したＤＯＴＡおよびＤＯＴＡＧＡから選択されるキレート剤の残基を表す。
【０１１５】
本発明の最も好ましい化合物は、以下である：
【０１１６】
【化２６】
2020528461.tif 000027
【０１１７】
およびその異性体：
【０１１８】
【化２７】
2020528461.tif 000028
【０１１９】
【化２８】
2020528461.tif 000029
【０１２０】
【化２９】
2020528461.tif 000030
【０１２１】
およびその異性体
【０１２２】
【化３０】
2020528461.tif 000031
【０１２３】
【化３１】
2020528461.tif 000032
【０１２４】
【化３２】
2020528461.tif 000033
【０１２５】
およびその異性体
【０１２６】
【化３３】
2020528461.tif 000034
【０１２７】
【化３４】
2020528461.tif 000035
【０１２８】
【化３５】
2020528461.tif 000036
【０１２９】
【化３６】
2020528461.tif 000037
【０１３０】
【化３７】
2020528461.tif 000038
【０１３１】
【化３８】
2020528461.tif 000039
【０１３２】
【化３９】
2020528461.tif 000040
【０１３３】
およびその異性体
【０１３４】
【化４０】
2020528461.tif 000041
【０１３５】
【化４１】
2020528461.tif 000042
【０１３６】
【化４２】
2020528461.tif 000043
【０１３７】
【化４３】
2020528461.tif 000044
【０１３８】
【化４４】
2020528461.tif 000045
【０１３９】
【化４５】
2020528461.tif 000046
【０１４０】
【化４６】
2020528461.tif 000047
【０１４１】
およびその異性体
【０１４２】
【化４７】
2020528461.tif 000048
【０１４３】
【化４８】
2020528461.tif 000049
【０１４４】
【化４９】
2020528461.tif 000050
【０１４５】
【化５０】
2020528461.tif 000051
【０１４６】
およびその異性体：
【０１４７】
【化５１】
2020528461.tif 000052
【０１４８】
【化５２】
2020528461.tif 000053
【０１４９】
【化５３】
2020528461.tif 000054
【０１５０】
【化５４】
2020528461.tif 000055
【０１５１】
およびその異性体：
【０１５２】
【化５５】
2020528461.tif 000056
【０１５３】
【化５６】
2020528461.tif 000057
【０１５４】
【化５７】
2020528461.tif 000058
【０１５５】
これらの最も好ましい化合物のための好ましい標識化スキームは、本明細書の上記で定義した通りである。
さらなる形態において、本発明は、本明細書の上記で開示された１つまたはそれより多くの本発明のコンジュゲートまたは化合物を含むか、またはそれからなる医薬組成物を提供する。
【０１５６】
さらなる形態において、本発明は、本明細書の上記で開示された１つまたはそれより多くの本発明のコンジュゲートまたは化合物を含むか、またはそれからなる診断用組成物を提供する。
【０１５７】
さらなる形態において、本発明は、本明細書の上記で開示された１つまたはそれより多くの本発明のコンジュゲートまたは化合物を含むか、またはそれからなる治療用組成物を提供する。
【０１５８】
医薬組成物は、医薬的に許容される担体、賦形剤および／または希釈剤をさらに含んでいてもよい。好適な製剤用担体、賦形剤および／または希釈剤の例は当業界において周知であり、その例としては、リン酸緩衝生理食塩水、水、エマルジョン、例えば油／水エマルジョン、様々な種類の湿潤剤、滅菌溶液などが挙げられる。このような担体を含む組成物は、周知の従来の方法によって製剤化することができる。これらの医薬組成物は、好適な用量で対象に投与することができる。好適な組成物の投与は、様々な方法によって実行することができ、例えば、静脈内、腹膜内、皮下、筋肉内、局所、皮内、経鼻または気管支内投与によって実行することができる。特に好ましくは、前記投与は、例えば、膵臓中の部位への、または脳動脈への、または脳組織への直接的な注射および／または送達によって行われる。組成物はまた、標的部位に直接投与してもよく、例えば、遺伝子銃送達によって、外部の標的部位に、または膵臓または脳のような内部の標的部位に投与してもよい。投薬レジメンは、主治医および臨床的な要因によって決定されることになる。医療分野において周知の通り、いずれか１人の患者に対する投薬量は、患者のサイズ、体表面積、年齢、投与される特定の化合物、性別、投与の時間および経路、全身の健康状態、ならびに同時に投与される他の薬物などの多くの要因に依存する。医薬活性を有する物質は、体重１ｋｇ当たり０．１ｎｇ〜１０ｍｇ／用量の量で存在していてもよい。しかしながら、特に上述の要因を考慮して、この例示的な範囲未満またはそれを超える用量も想定される。
【０１５９】
さらなる形態において、本発明は、医学において使用するための、本明細書の上記で開示された１つまたはそれより多くの本発明の化合物を提供する。
医学における好ましい使用は、罹患した組織における好ましくはＰＳＭＡの過剰発現に関連する疾患の、核医学、例えば核分子イメージングとも称される核画像診断、および／または標的化放射線療法である。
【０１６０】
さらなる形態において、本発明は、がん、好ましくは前立腺がんを診断および／または病期分類する方法で使用するための、本明細書の上記で定義される本発明の化合物を提供する。前立腺がんは、ＰＳＭＡを発現する唯一のがんではない。ＰＳＭＡ発現を示す前立腺以外のがんとしては、乳癌、肺癌、結腸直腸癌、および腎細胞癌が挙げられる。したがって、本明細書に記載されるＰＳＭＡ結合部分を有するあらゆる化合物を、ＰＳＭＡ発現を有するがんの診断、イメージングまたは処置で使用することができる。
【０１６１】
好ましい適用は、例えば、これらに限定されないが、高悪性度神経膠腫、肺がん、ならびに特に前立腺がんおよび転移した前立腺がんなどのがんの検出または病期分類、中程度のリスクから高リスクに至る原発性前立腺がんを有する患者における転移性疾患の検出、ならびに低い血清ＰＳＡ値であっても、生化学的に再発性の前立腺がんを有する患者における転移部位の検出である。別の好ましい適用は、血管新生（neoangiogensis）のイメージングおよび可視化である。
【０１６２】
療法、特に放射線療法に供される医療上の適応症に関して、がんは、好ましい適応症である。前立腺がんが、特に好ましい適応症である。
さらなる形態において、本発明は、がん、好ましくは前立腺がんを診断および／または病期分類する方法において使用するための、本明細書の上記で定義される本発明のコンジュゲートまたは化合物を提供する。
【０１６３】
さらに本発明の開示は、以下の項目に関する。
１．単一分子内に、
（ａ）疾患関連の標的分子に結合することが可能な１つまたはそれより多くのリガンド、
（ｂ）ケイ素原子とフッ素原子との間の共有結合を含み、１９Ｆの１８Ｆでの同位体交換によって１８Ｆで標識できるかまたは１８Ｆで標識されている、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分、および
（ｃ）キレート化された非放射性または放射性カチオンを含有していてもよい、１つまたはそれより多くのキレート化基
を含む、リガンド−ＳＩＦＡ−キレーターコンジュゲート。
【０１６４】
２．前記フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分が、式（Ｉ）：
【０１６５】
【化５８】
2020528461.tif 000059
【０１６６】
（式中、Ｒ１ＳおよびＲ２Ｓは、独立して、直鎖状または分岐状のＣ３〜Ｃ１０アルキル基であり、好ましくはＲ１ＳおよびＲ２Ｓは、イソプロピルおよびｔｅｒｔ−ブチルから選択され、より好ましくはＲ１ＳおよびＲ２Ｓは、ｔｅｒｔ−ブチルであり；
Ｒ３Ｓは、Ｃ１〜Ｃ２０炭化水素基であり、該炭化水素基は、１つまたはそれより多くの芳香族単位および１つまたはそれより多くの脂肪族単位、ならびに／またはＯおよびＳから選択される最大３個のヘテロ原子を含んでいてもよく、好ましくはＲ３Ｓは、芳香環を含み、１つまたはそれより多くの脂肪族単位を含んでいてもよいＣ６〜Ｃ１０炭化水素基であり；より好ましくはＲ３Ｓは、フェニル環であり、最も好ましくは、Ｒ３Ｓは、Ｓｉを含有する置換基と
【０１６７】
【化５９】
2020528461.tif 000060
【０１６８】
で示される結合とがパラ位にあるフェニル環であり、ここで該ＳＩＦＡ部分は、
【０１６９】
【化６０】
2020528461.tif 000061
【０１７０】
で示される結合を介してコンジュゲートの残りに付着されている）
で表される構造を有する、項目１に記載のコンジュゲート。
３．前記フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分が、式（Ｉａ）：
【０１７１】
【化６１】
2020528461.tif 000062
【０１７２】
（式中、ｔ−Ｂｕは、ｔｅｒｔ−ブチル基を示す）
で表される構造を有する、項目２に記載のコンジュゲート。
４．前記キレート化基が、
（ｉ）８〜２０個の環原子を有する大環状環構造であって、該環原子のうち２個またはそれより多く、好ましくは３つまたはそれより多くは、酸素原子および窒素原子から選択される、大環状環構造；および
（ｉｉ）８〜２０個の主鎖原子を有する非環式の開鎖キレート化構造であって、該主鎖原子のうち２個またはそれより多く、好ましくは３つまたはそれより多くは、酸素原子および窒素原子から選択されるヘテロ原子である、開鎖キレート化構造
の少なくとも１つを含む、項目１〜３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【０１７３】
５．前記キレート化基が、ビス（カルボキシメチル）−１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン（ＣＢＴＥ２ａ）、シクロヘキシル−１，２−ジアミン四酢酸（ＣＤＴＡ）、４−（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカ−１−イル）−メチル安息香酸（ＣＰＴＡ）、Ｎ’−［５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル］−Ｎ−［５−［［４−［５−アミノペンチル−（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル］アミノ］ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシブタンジアミド（ＤＦＯ）、４，１１−ビス（カルボキシメチル）−１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン（ＤＯ２Ａ）１，４，７，１０−テトラシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ’−ジピリドキシルエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ジアセテート−５，５’−ビス（リン酸）（ＤＰＤＰ）、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）、エチレンジアミン−Ν，Ν’−四酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレングリコール−Ｏ，Ｏ−ビス（２−アミノエチル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ）、Ｎ，Ｎ−ビス（ヒドロキシベンジル）−エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−二酢酸（ＨＢＥＤ）、ヒドロキシエチルジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、１−（ｐ−ニトロベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロデカン−４，７，１０−トリアセテート（ＨＰ−ＤＯＡ３）、６−ヒドラジニル−Ｎ−メチルピリジン−３−カルボキサミド（ＨＹＮＩＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−コハク酸−４，７−二酢酸（ＮＯＤＡＳＡ）、１−（１−カルボキシ−３−カルボキシプロピル）−４，７−（カルボキシ）−１，４，７−トリアザシクロノナン（ＮＯＤＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナン三酢酸（ＮＯＴＡ）、４，１１−ビス（カルボキシメチル）−１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン（ＴＥ２Ａ）、１，４，８，１１−テトラアザシクロドデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、ターピリジン−ビス（メチレンアミン四酢酸（ＴＭＴ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＴＲＩＴＡ）、およびトリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）から選択されるキレート剤の残基であり、これらの残基は、キレート剤に含有されるカルボキシル基をコンジュゲートの残りに、エステルまたはアミド結合を介して、好ましくはアミド結合を介して共有結合することによって提供される、項目１〜３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【０１７４】
６．前記キレート剤が、ＤＯＴＡおよびＤＯＴＡＧＡから選択される、項目５に記載のコンジュゲート。
７．前記キレート化基が、キレート化されたカチオン、好ましくは、４４Ｓｃ、４７Ｓｃ、５１Ｃｒ、５２ｍＭｎ、５８Ｃｏ、５２Ｆｅ、５６Ｎｉ、５７Ｎｉ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、６６Ｇａ、６８Ｇａ、６７Ｇａ、８９Ｚｒ、９０Ｙ、８９Ｙ、＜Ｔｃ、９９ｍＴｃ、９７Ｒｕ、１０５Ｒｈ、１０９Ｐｄ、１１１Ａｇ，１１０ｍＩｎ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ、１１４ｍＩｎ、１１７ｍＳｎ、１２１Ｓｎ、１２７Ｔｅ、１４２Ｐｒ、１４３Ｐｒ、１４９Ｐｍ、１５１Ｐｍ、１４９Ｔｂ、１５３Ｓｍ、１５７Ｇｄ、１６１Ｔｂ、１６６Ｈｏ、１６５Ｄｙ、１６９Ｅｒ、１６９Ｙｂ、１７５Ｙｂ、１７２Ｔｍ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１９１Ｐｔ、１９７Ｈｇ、１９８Ａｕ、１９９Ａｕ、２１２Ｐｂ、２０３Ｐｂ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２２３Ｒａ、２２５Ａｃ、２２７Ｔｈから選択されるキレート化された放射性カチオン、１８Ｆを含むカチオン性分子、または１８Ｆ−［ＡｌＦ］２＋などのカチオン；より好ましくは、４４Ｓｃ、４７Ｓｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、６８Ｇａ、９０Ｙ、１１１Ｉｎ、１６１Ｔｂ、１６６Ｈｏ、１７７Ｌｕ、１８８Ｒｅ、２１２Ｐｂ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２２５Ａｃ、および２２７Ｔｈのカチオン、または１８Ｆを含むカチオン性分子を含む、項目１〜６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【０１７５】
８．前記リガンドが、ＰＳＭＡに結合することが可能である、項目１〜８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
９．前記リガンドが、式（ＩＩ）：
【０１７６】
【化６２】
2020528461.tif 000063
【０１７７】
（式中、
ｍは、２〜６の整数、好ましくは２〜４の整数、より好ましくは２であり；
ｎは、２〜６の整数、好ましくは２〜４の整数、より好ましくは２または３であり；
Ｒ１Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり、好ましくはＮＨであり；
Ｒ３Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり、好ましくはＮＨであり；
Ｒ２Ｌは、ＣまたはＰ（ＯＨ）であり、好ましくはＣであり；
ここで該リガンドは、
【０１７８】
【化６３】
2020528461.tif 000064
【０１７９】
で示される結合を介してコンジュゲートの残りに付着されている）
で表される構造を有する、項目１〜８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
１０．式（ＩＩＩ）：
【０１８０】
【化６４】
2020528461.tif 000065
【０１８１】
［式中、
ＳＩＦＡは、ケイ素原子とフッ素原子との間の共有結合を含み、１９Ｆと１８Ｆとの間の同位体交換によって１８Ｆで標識できるかまたは１８Ｆで標識されている、フッ化ケイ素アクセプター（ＳＩＦＡ）部分であり；好ましくはＳＩＦＡは、請求項２で定義されたＳＩＦＡ部分であり；
ｍは、２〜６の整数、好ましくは２〜４の整数、より好ましくは２であり；
ｎは、２〜６の整数、好ましくは２〜４の整数、より好ましくは２または３であり；
Ｒ１Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり、好ましくはＮＨであり；
Ｒ３Ｌは、ＣＨ２、ＮＨまたはＯであり、好ましくはＮＨであり；
Ｒ２Ｌは、ＣまたはＰ（ＯＨ）であり、好ましくはＣであり；
Ｘ１は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、およびアミン結合から選択され、好ましくはアミド結合であり；
Ｘ２は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、およびアミン結合から選択され、好ましくはアミド結合であり；
Ｌ１は、オリゴアミド、オリゴエーテル、オリゴチオエーテル、オリゴエステル、オリゴチオエステル、オリゴ尿素、オリゴ（エーテル−アミド）、オリゴ（チオエーテル−アミド）、オリゴ（エステル−アミド）、オリゴ（チオエステル−アミド）、オリゴ（尿素−アミド）、オリゴ（エーテル−チオエーテル）、オリゴ（エーテル−エステル）、オリゴ（エーテル−チオエステル）、オリゴエーテル−尿素）、オリゴ（チオエーテル−エステル）、オリゴ（チオエーテル−チオエステル）、オリゴ（チオエーテル−尿素）、オリゴ（エステル−チオエステル）、オリゴ（エステル−尿素）、およびオリゴ（チオエステル−尿素）から選択される構造を有する２価の結合基であり；好ましくは、オリゴアミドおよびオリゴ（エステル−アミド）から選択される構造を有し；
Ｘ３は、アミド結合、エステル結合、エーテル、アミン、および式：
【０１８２】
【化６５】
2020528461.tif 000066
【０１８３】
の結合基（ここで、ＮＨ基において
【０１８４】
【化６６】
2020528461.tif 000067
【０１８５】
で示される結合は、ＲＢに結合しており、
【０１８６】
【化６７】
2020528461.tif 000068
【０１８７】
で示される他方の結合は、ＳＩＦＡに結合している）
から選択され；
好ましくはＸ３は、アミド結合であり；
ＲＢは、３価のカップリング基であり；
Ｘ４は、アミド結合、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、チオエステル結合、尿素架橋、アミン結合、および式：
【０１８８】
【化６８】
2020528461.tif 000069
【０１８９】
の結合基（ここで、
【０１９０】
【化６９】
2020528461.tif 000070
【０１９１】
で示されるアミド結合は、前記キレート化基と共に形成され、
【０１９２】
【化７０】
2020528461.tif 000071
【０１９３】
で示される他方の結合は、ＲＢに結合している）
から選択され；好ましくはＸ４は、アミド結合であり；
ＲＣＨは、キレート化された放射性または非放射性カチオンを含有していてもよいキレート化基であり、好ましくは放射性または非放射性金属カチオンであり、好ましくは項目４で定義されたキレート化基、より好ましくは項目５で定義されたキレート化基、最も好ましくは項目６で定義されたキレート化基である］
の化合物またはその医薬的に許容される塩である、項目１〜９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【０１９４】
１１．Ｌ１が、その骨格内に、合計１〜５、より好ましくは合計１〜３、最も好ましくは合計１または２つのアミドおよび／またはエステル結合、好ましくはアミド結合を含む、項目１０に記載のコンジュゲート。
【０１９５】
１２．  −Ｘ１−Ｌ１−Ｘ２−が、以下の構造（Ｌ−１）および（Ｌ−２）：
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ６−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ７−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−１）
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ８−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ９−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ１０−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−２）
（式中、Ｒ６〜Ｒ１０は、独立して、Ｃ２〜Ｃ１０アルキレン、好ましくは直鎖状Ｃ２〜Ｃ１０アルキレンから選択され、該アルキレン基はそれぞれ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣＨ３、−ＮＨ２、および−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２から独立して選択される１つまたはそれより多くの置換基によって置換されていてもよい）
のうち一方を表す、項目１０に記載のコンジュゲート。
【０１９６】
１３．Ｒ６およびＲ７またはＲ８〜Ｒ１０中の炭素原子の総数がそれぞれ、任意選択の置換基に含有される炭素原子を除いて、８〜２０個であり、より好ましくは８〜１４個である、項目１２に記載のコンジュゲート。
【０１９７】
１４．−Ｘ１−Ｌ１−Ｘ２−が、以下の構造（Ｌ−３）および（Ｌ−４）：
−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ１２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−３）
−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−Ｒ１３−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１４−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｒ１５−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−    （Ｌ−４）
（式中、Ｒ１１〜Ｒ１５は、独立して、Ｃ２〜Ｃ８アルキレン、好ましくは直鎖状Ｃ２〜Ｃ８アルキレンから選択される）
のうち一方を表す、項目１０に記載のコンジュゲート。
【０１９８】
１５．Ｒ１１およびＲ１２またはＲ１３〜Ｒ１５中の炭素原子の総数がそれぞれ、８〜１８個であり、より好ましくは８〜１２個であり、さらにさらにより好ましくは９または１０個である、項目１４に記載のコンジュゲート。
【０１９９】
１６．ＲＢが、式（ＩＶ）：
【０２００】
【化７１】
2020528461.tif 000072
【０２０１】
［式中、Ａは、Ｎ、ＣＲ１６（ここでＲ１６はＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである）、および５〜７員環の炭素環式または複素環式基から選択され；好ましくはＡは、ＮおよびＣＨから選択され、より好ましくは、Ａは、ＣＨであり；
（ＣＨ２）ａにおける
【０２０２】
【化７２】
2020528461.tif 000073
【０２０３】
で示される結合は、Ｘ２と共に形成され、ａは、０〜４の整数、好ましくは０または１、最も好ましくは０であり；
（ＣＨ２）ｂにおける
【０２０４】
【化７３】
2020528461.tif 000074
【０２０５】
で示される結合は、Ｘ３と共に形成され、ｂは、０〜４の整数、好ましくは０〜２の整数、より好ましくは０または１であり；
（ＣＨ２）ｃにおける
【０２０６】
【化７４】
2020528461.tif 000075
【０２０７】
で示される結合は、Ｘ４と共に形成され、ｃは、０〜４の整数、好ましくは０〜２の整数、より好ましくは０または１である］
で表される構造を有する、項目１０〜１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【０２０８】
１７．式（ＩＩＩａ）：
【０２０９】
【化７５】
2020528461.tif 000076
【０２１０】
（式中、ｍ、ｎ、Ｒ１Ｌ、Ｒ２Ｌ、Ｒ３Ｌ、Ｘ１、Ｌ１、ｂ、ｃ、Ｘ４およびＲＣＨは、項目１０〜１６で定義された通りである）
の化合物またはその医薬的に許容される塩である、項目１０〜１６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【０２１１】
１８．ｂ＋ｃ≧１である、項目１７に記載のコンジュゲート。
１９．ｂ＋ｃ≦３である、項目１７〜１８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
２０．ｂが１であり、ｃが０である、項目１７〜１９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【０２１２】
２１．−Ｘ４−ＲＣＨが、そのカルボン酸基のうちの１つと、アミド結合を介してコンジュゲートの残りに結合したＤＯＴＡおよびＤＯＴＡＧＡから選択されるキレート剤の残基を表す、項目１０〜２０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【０２１３】
２２．式（ＩＩＩｂ）：
【０２１４】
【化７６】
2020528461.tif 000077
【０２１５】
（式中、ｍ、ｎ、Ｒ１Ｌ、Ｒ２Ｌ、Ｒ３Ｌ、Ｘ１、Ｌ１、ｂ、ｃ、Ｘ４およびＲＣＨは、項目１０〜２０で定義された通りであり；
ｒは、０または１である）
の化合物またはその医薬的に許容される塩である、項目１０〜２０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【０２１６】
２３．−Ｎ（Ｈ）−ＲＣＨが、そのカルボン酸基のうちの１つと、アミド結合を介してコンジュゲートの残りに結合したＤＯＴＡおよびＤＯＴＡＧＡから選択されるキレート剤の残基を表す、項目２２に記載のコンジュゲート。
【０２１７】
図面は以下を例示する。
【図面の簡単な説明】
【０２１８】
【図１】図１は、ヒト血清アルブミン（ＯｒｉｇｉｎＰｒｏ  ２０１６Ｇ）への９つの参照物質の結合の決定の例示的な相関である。
【図２】図２は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける６８Ｇａ−ｎａｔＦ−５の代表的なＰＥＴ画像（最大強度投影、背面の骨組み）（１時間ｐ．ｉ．、１５分の捕捉時間）および選択された臓器のＲＯＩ定量化である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝４）として表される。％ＩＤ／ｍＬ＝１ｍＬ当たりの注射された用量％。腫瘍の位置は矢印で示される。
【図３】図３は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける６８Ｇａ−ｎａｔＦ−６の代表的なＰＥＴ画像（最大強度投影、背面の骨組み）（１時間ｐ．ｉ．、１５分の捕捉時間）および選択された臓器のＲＯＩ定量化である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝４）として表される。％ＩＤ／ｍＬ＝１ｍＬ当たりの注射された用量％。腫瘍の位置は矢印で示される。
【図４】図４は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおけるＰＭＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）と共に注射された６８Ｇａ−ｎａｔＦ−７および６８Ｇａ−ｎａｔＦ−７（１時間ｐ．ｉ．、１５分の捕捉時間）の代表的なＰＥＴ画像（最大強度投影、背面の骨組み）およびブロッキングなしのＰＥＴスキャンの選択された臓器のＲＯＩ定量化である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝２）として表される。％ＩＤ／ｍＬ＝１ｍＬ当たりの注射された用量％。腫瘍の位置は矢印で示される。
【図５】図５は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける６８Ｇａ−ｎａｔＦ−７の血液プール（心臓）、筋肉、腎臓、肝臓およびＬＮＣａＰ腫瘍異種移植片における動的ＰＥＴデータ（９０分の捕捉時間、ＯＳＥＭ  ３Ｄ再構成）から得られたＩＤ／ｍＬでの時間活性曲線（ＴＡＣ、対数プロット）である。
【図６】図６は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１８Ｆ−７（遊離のキレートと共に）（１時間ｐ．ｉ．、１５分の捕捉時間）の代表的なＰＥＴ画像（最大強度投影、背面の骨組み）およびブロッキングなしのＰＥＴスキャンの選択された臓器のＲＯＩ定量化である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝３）として表される。％ＩＤ／ｍＬ＝１ｍＬ当たりの注射された用量％。腫瘍の位置は矢印で示される。
【図７】図７は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１８Ｆ−７（遊離のキレートと共に）の血液プール（心臓）、筋肉、腎臓、肝臓およびＬＮＣａＰ腫瘍異種移植片における動的ＰＥＴデータ（９０分の捕捉時間、ＯＳＥＭ  ３Ｄ再構成）から得られたＩＤ／ｍＬでの時間活性曲線（ＴＡＣ、対数プロット）である。
【図８】図８は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１時間ｐ．ｉ．での６８Ｇａ−ｎａｔＦ−７（灰色のバー）および１８Ｆ−７（遊離のキレートと共に）（白色のバー）の生体内分布（％ＩＤ／ｇでの）である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝３）として表される。
【図９】図９は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおけるＰＭＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）と共に注射された６８Ｇａ−ｎａｔＦ−８および６８Ｇａ−ｎａｔＦ−８（１時間ｐ．ｉ．、１５分の捕捉時間）の代表的なＰＥＴ画像（最大強度投影、背面の骨組み）およびブロッキングなしのＰＥＴスキャンの選択された臓器のＲＯＩ定量化である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝２）として表される。％ＩＤ／ｍＬ＝１ｍＬ当たりの注射された用量％。腫瘍の位置は矢印で示される。
【図１０】図１０は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける６８Ｇａ−ｎａｔＦ−８の血液プール（心臓）、筋肉、腎臓、肝臓およびＬＮＣａＰ腫瘍異種移植片における動的ＰＥＴデータ（９０分の捕捉時間、ＯＳＥＭ  ３Ｄ再構成）から得られたＩＤ／ｍＬでの時間活性曲線（ＴＡＣ、対数プロット）である。
【図１１】図１１は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおけるＰＭＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）と共に注射された１８Ｆ−８（遊離のキレート）および１８Ｆ−８（遊離のキレート）（１時間ｐ．ｉ．、１５分の捕捉時間）の代表的なＰＥＴ画像（最大強度投影、背面の骨組み）およびブロッキングなしのＰＥＴスキャンの選択された臓器のＲＯＩ定量化である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝３）として表される。％ＩＤ／ｍＬ＝１ｍＬ当たりの注射された用量％。腫瘍の位置は矢印で示される。縮尺が異なることに留意されたい（左は０〜１０；右は０〜２０）
【図１２】図１２は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１８Ｆ−８の血液プール（心臓）、筋肉、腎臓、肝臓およびＬＮＣａＰ腫瘍異種移植片における動的ＰＥＴデータ（９０分の捕捉時間、ＯＳＥＭ  ３Ｄ再構成）から得られたＩＤ／ｍＬでの時間活性曲線（ＴＡＣ、対数プロット）である。
【図１３】図１３は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１時間ｐ．ｉ．での６８Ｇａ−ｎａｔＦ−８（遊離のキレート）、（灰色のバー）および１８Ｆ−８（白色のバー）の生体内分布（％ＩＤ／ｇでの）である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝３）として表される。
【図１４】図１４は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおけるＰＭＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）と共に注射された６８Ｇａ−ｎａｔＦ−９（遊離のキレート）および６８Ｇａ−ｎａｔＦ−９（遊離のキレート）（１時間ｐ．ｉ．、１５分の捕捉時間）の代表的なＰＥＴ画像（最大強度投影、背面の骨組み）およびブロッキングなしのＰＥＴスキャンの選択された臓器のＲＯＩ定量化である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝３）として表される。％ＩＤ／ｍＬ＝１ｍＬ当たりの注射された用量％。腫瘍の位置は矢印で示される。
【図１５】図１５は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける６８Ｇａ−ｎａｔＦ−９の血液プール（心臓）、筋肉、腎臓、肝臓およびＬＮＣａＰ腫瘍異種移植片における動的ＰＥＴデータ（９０分の捕捉時間、ＯＳＥＭ  ３Ｄ再構成）から得られたＩＤ／ｍＬでの時間活性曲線（ＴＡＣ、対数プロット）である。
【図１６】図１６は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおけるＰＭＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）と共に注射された１８Ｆ−９（遊離のキレート）および１８Ｆ−９（遊離のキレート）（１時間ｐ．ｉ．、１５分の捕捉時間）の代表的なＰＥＴ画像（最大強度投影、背面の骨組み）およびブロッキングなしのＰＥＴスキャンの選択された臓器のＲＯＩ定量化である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝４）として表される。％ＩＤ／ｍＬ＝１ｍＬ当たりの注射された用量％。腫瘍の位置は矢印で示される。
【図１７】図１７は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１８Ｆ−９（遊離のキレート）の血液プール（心臓）、筋肉、腎臓、肝臓およびＬＮＣａＰ腫瘍異種移植片における動的ＰＥＴデータ（９０分の捕捉時間、ＯＳＥＭ  ３Ｄ再構成）から得られたＩＤ／ｍＬでの時間活性曲線（ＴＡＣ、対数プロット）である。
【図１８】図１８は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１時間ｐ．ｉ．での６８Ｇａ−ｎａｔＦ−９（灰色のバー）および１８Ｆ−９（遊離のキレート）（白色のバー）の生体内分布（％ＩＤ／ｇでの）である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝３）として表される。
【図１９】図１９は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおけるＰＭＰＡ（８ｍｇ／ｋｇ）と共に注射された１８Ｆ−ｎａｔＧａ−７（遊離のキレート）および１８Ｆ−ｎａｔＧａ−７（遊離のキレート）（１時間ｐ．ｉ．、１５分の捕捉時間）の代表的なＰＥＴ画像（最大強度投影、背面の骨組み）およびブロッキングなしのＰＥＴスキャンの選択された臓器のＲＯＩ定量化である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝３）として表される。％ＩＤ／ｍＬ＝１ｍＬ当たりの注射された用量％。腫瘍の位置は矢印で示される。
【図２０】図２０は、構造的に同一な化合物６８Ｇａ−ｎａｔＦ−７（遊離のキレート）（灰色のバー）と比較したＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１時間ｐ．ｉ．での１８Ｆ−ｎａｔＧａ−７（遊離のキレート）（白色のバー）の生体内分布（％ＩＤ／ｇでの）である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝３）として表される。
【図２１】図２１は、左の画像は、正常な生体内分布（検出可能な腫瘍病変がない）対象のＰＥＴからの最大強度投影（ＭＩＲ）を示すである。２７２ＭＢｑの１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の注射後７６分に画像を獲得した。図２１右は、高い病変対バックグラウンド比で複数の腫瘍病変を示す中程度に進行した疾患を有する対象のＰＥＴからの最大強度投影（ＭＩＰ）を実証する。３１２ＭＢｑの１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の注射後１０２分に画像を獲得した。
【図２２】図２２は、表６のグラフ表示である。
【図２３】図２３は、表７のグラフ表示である。
【図２４】図２４は、表８のグラフ表示である。
【図２５】図２５は、表９のグラフ表示である。
【図２６】図２６は、根治的前立腺摘除術の１．５年後に生化学的再発を有する７０歳患者（グリーソン８、ｐＴ２ｃ、ｐＮ１）のＭＩＲ（Ａ）および体軸横断画像（Ｂ〜Ｄ）を示す。１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）を高度に取り込んだ右骨盤における５ｍｍの直径を有する単一の前立腺がんの典型的な病変が存在する。病変の悪性の性質を組織病理学によって検証した。
【図２７】図２７は、進行性の進行去勢抵抗性前立腺がんを有する８０歳患者（ＰＳＡ６６．４ｎｇ／ｍｌ）の一連の画像である。画像は、前立腺がん病変の異なるクラス（局所腫瘍、リンパ節転移、骨転移、肝臓転移）において１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の高い取込みを示す。実証された病変は、２ｍｍもの小ささである（矢印は、全てではないが代表的な腫瘍病変を示す）。
【図２８】図２８は、６８Ｇａ標識ＳｉＦＡ置換キレーターベースのＰＥＴトレーサーの概念調査の証明を示す。
【図２９】図２９は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１８Ｆ−ｎａｔＬｕ−ｒｈ−７（１時間ｐ．ｉ．、１５分の捕捉時間）およびブロッキングなしのＰＥＴスキャンの選択された臓器のＲＯＩ定量化の代表的なＰＥＴ画像（最大強度投影、背面の骨組み）である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝３）として表される。％ＩＤ／ｍＬ＝１ｍＬ当たりの注射された用量％。腫瘍の位置は矢印で示される。
【図３０】図３０は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１８Ｆ−ｎａｔＬｕ−ｒｈ−７の血液プール（心臓）、筋肉、腎臓、肝臓およびＬＮＣａＰ腫瘍異種移植片における動的ＰＥＴデータ（９０分の捕捉時間、ＯＳＥＭ  ３Ｄ再構成）から得られたＩＤ／ｍＬでの時間活性曲線（ＴＡＣ、対数プロット）である。
【図３１】図３１は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける２４時間ｐ．ｉ．での１７７Ｌｕ−ｎａｔＦ−７、１７７Ｌｕ−ｎａｔＦ−８および１７７Ｌｕ−ｎａｔＦ−１０の生体内分布（％ＩＤ／ｇでの）である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝４）として表される。
【図３２】図３２は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１時間および２４時間ｐ．ｉ．での１７７Ｌｕ−ｎａｔＦ−１０の生体内分布（％ＩＤ／ｇでの）である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝４）として表される。
【図３３】図３３は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける２４時間ｐ．ｉ．での確立された、および新しいｒｈＰＳＭＡ−リガンドの比較生体内分布（％ＩＤ／ｇでの）である。データは、平均±ＳＤとして表される（ｎ＝４〜５）。
【図３４】図３４は、ＬＮＣａＰ腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおける１時間ｐ．ｉ．での１７７Ｌｕ−ｎａｔＦ−１０および６８Ｇａ−ｎａｔＦ−１０の生体内分布（％ＩＤ／ｇでの）である。データは、平均±ＳＤ（ｎ＝４）として表される。
【発明を実施するための形態】
【０２１９】
以下の実施例において本発明を例示する。
【実施例１】
【０２２０】
実施例１：材料および方法
総論
Ｆｍｏｃ−（９−フルオレニルメトキシカルボニル−）および全ての他の保護されたアミノ酸類似体を、ベイケム（Bachem）（ブーベンドルフ、スイス）またはアイリスバイオテック（Iris Biotech）（マルクトレドヴィッツ、ドイツ）から購入した。トリチルクロリドポリスチレン（ＴＣＰ）樹脂を、ＰｅｐＣｈｅｍ（チュービンゲン、ドイツ）から得た。ケマテック（Chematech）（ディジョン、フランス）が、キレーターＤＯＴＡＧＡ無水物およびＮＯＴＡを提供した。ＴＲＡＰキレーター（１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−トリス［メチレン（２−カルボキシエチル）ホスフィン酸］）を、以前述べられたようにして合成した（Notniら、Chemistry（Weinheim an der Bergstrasse、ドイツ）16）、7174〜85（2010））。フッ化ケイ素アクセプターＳＩＦＡ−安息香酸の合成を、これまでに公開された手順に従って実行した（Iovkovaら、Chemistry（Weinheim an der Bergstrasse、ドイツ）15、2140〜7（2009））。全ての必要な溶媒および他の有機試薬を、アルファ・エイサー（Alfa Aesar）（カールスルーエ、ドイツ）、シグマ−アルドリッチ（Sigma-Aldrich）（ミュンヘン、ドイツ）またはＶＷＲ（ダルムシュタット、ドイツ）のいずれかから購入した。ペプチドの固相合成を、Ｉｎｔｅｌｌｉ−ミキサーシリンジシェーカー（Neolab、ハイデルベルグ、ドイツ）を使用して手作業で行った。分析および分取逆相高圧クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を、それぞれＳＰＤ−２０Ａ  ＵＶ／Ｖｉｓデテクター（２２０ｎｍ、２５４ｎｍ）を備えた島津（Shimadzu）勾配システム（Shimadzu Deutschland GmbH、ノイファールン、ドイツ）を使用して実行した。ヌクレオシル（Nucleosil）１００  Ｃ１８（１２５×４．６ｍｍ、５μｍ粒度）カラム（CS GmbH、ランガーヴェーエ、ドイツ）を、１ｍＬ／分の流速で分析的測定に使用した。特定の勾配と対応する保持時間ｔＲはどちらも、本文に述べられている。分取用ＨＰＬＣ精製を、マルトスフェア（Multospher）１００  ＲＰ１８（２５０×１０ｍｍ、粒度５μｍ）カラム（CS GmbH、ランガーヴェーエ、ドイツ）を用いて５ｍＬ／分の一定流速度で行った。分析および分取放射線ＲＰ−ＨＰＬＣを、ヌクレオシル１００  Ｃ１８（５μｍ、１２５×４．０ｍｍ）カラム（CS GmbH、ランガーヴェーエ、ドイツ）を使用して実行した。全てのＨＰＬＣ操作のための溶離剤は、両方とも０．１％トリフルオロ酢酸を含有する水（溶媒Ａ）およびアセトニトリル（溶媒Ｂ）であった。物質の特徴付けのためのエレクトロスプレーイオン化質量スペクトルを、エクスプレッションＬ（expressionL）ＣＭＳ質量分析計（アドビジョン社（Advion Ltd.）、ハーロー、英国）で獲得した。ＵＶ−光度計の出口の連結部からＥＧ＆Ｇオルテック（EG&G Ortec）（ミュンヘン、ドイツ）からのＮａＩ（Ｔｌ）ウェル型シンチレーションカウンターにわたり放射活性を検出した。ゲル透過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）を、セファデックス（Sephadex）ＧＰ−１０（１００ｇ、約３０×３ｃｍのベッドサイズ）において溶離剤として水を用いて行い、溶出液を２０ｍＬ画分で分離した。ＮＭＲスペクトルを、ブルカー（Bruker）ＡＶＨＤ−３００またはＡＶＨＤ−４００分光計で、３００Ｋで記録した。ｐＨ値を、セブンイージー（SevenEasy）ｐＨ−メーター（メトラー・トレド��Mettler Toledo）、ギーセン、ドイツ）を用いて測定した。
【０２２１】
合成プロトコール
１）Ｆｍｏｃ戦略による固相ペプチド合成
ＴＣＰ樹脂のローディング
Ｆｍｏｃ保護アミノ酸（ＡＡ）を有するトリチルクロリドポリスチレン（ＴＣＰ）樹脂のローディングを、ＤＩＰＥＡ（４．５当量）を含む無水ＤＣＭ中のＴＣＰ樹脂（１．９５ｍｍｏｌ／ｇ）およびＦｍｏｃ−ＡＡ−ＯＨ（１．５当量）の溶液を室温で２時間撹拌することによって行った。残存するトリチルクロリドを、１５分にわたりメタノール（２ｍＬ／ｇ樹脂）を添加することによってキャップした。その後、樹脂をろ過し、ＤＣＭ（２×５ｍＬ／ｇ樹脂）、ＤＭＦ（２×５ｍＬ／ｇ樹脂）、メタノール（５ｍＬ／ｇ樹脂）で洗浄し、真空中で乾燥させた。Ｆｍｏｃ−ＡＡ−ＯＨの最終ローディングｌを、以下の方程式によって決定した：
【０２２２】
【数１】
2020528461.tif 000078
【０２２３】
ｍ２＝ローディングされた樹脂の質量［ｇ］
ｍ１＝ローディングされなかった樹脂の質量［ｇ］
ＭＷ＝ＡＡの分子量［ｇ／ｍｏｌ］
ＭＨＣｌ＝ＨＣｌの分子量［ｇ／ｍｏｌ］
樹脂上でのペプチド形成
それぞれの側鎖が保護されたＦｍｏｃ−ＡＡ−ＯＨ（１．５当量）を、ＤＭＦ（８ｍＬ／ｇ樹脂）中に溶解させ、ＴＢＴＵ（１．５当量）、ＨＯＢｔ（１．５当量）およびＤＩＰＥＡ（４．５当量）を添加することによって予備的に活性化させた。ＳＩＦＡ−ＢＡの予備活性化を同じように実行した。アジドで置換されたアミノ酸（２．０当量）の場合、ＨＡＴＵ（３．０当量）、ＨＯＡｔ（３．０当量）およびＤＩＰＥＡ（６．０当量）を使用した。１５分活性化した後、溶液を樹脂が結合した遊離アミンペプチドＴＣＰ−ＡＡ−ＮＨ２に添加し、室温で２時間振盪した。その後、樹脂をＤＭＦ（６×５ｍＬ／ｇ樹脂）で洗浄し、Ｆｍｏｃ脱保護の後、次のアミノ酸を同じようにカップリングした。
【０２２４】
樹脂上でのＦｍｏｃ脱保護
樹脂に結合したＦｍｏｃ−ペプチドを、ＤＭＦ（ｖ／ｖ、８ｍＬ／ｇ樹脂）中の２０％ピペリジンで、５分、それに続いて１５分処理した。その後、樹脂をＤＭＦ（８×５ｍＬ／ｇ樹脂）で徹底的に洗浄した。
【０２２５】
樹脂上でのＤｄｅ脱保護
Ｄｄｅで保護されたペプチド（１．０当量）を、ＤＭＦ（ｖ／ｖ、５ｍＬ／ｇ樹脂）中の２％ヒドラジン一水和物の溶液に溶解させ、１５分振盪した。Ｆｍｏｃ基が存在する場合、室温で３時間かけて、ＮＭＰ（２．５ｍＬ）およびＤＭＦ（０．５ｍＬ）中のイミダゾール（０．４６ｇ）、塩酸ヒドロキシルアミン（０．６３ｇ）の溶液を添加することによって、Ｄｄｅ脱保護を実行した。脱保護の後、樹脂を、ＤＭＦ（６×５ｍＬ／ｇ樹脂）で洗浄した。
【０２２６】
樹脂上でのＡｌｌｏｃ脱保護
アリルオキシ保護基を、ＤＣＭ（６ｍＬ）中に溶解したトリイソプロピルシラン（ＴＩＰＳ）（５０．０当量）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（Ｐｄ（ＰＰｈ３）４）（０．３当量）の添加によって除去した。室温で１．５時間後、樹脂を、ＤＣＭ（６×５ｍＬ／ｇ樹脂）で洗浄した。
【０２２７】
ｔＢｕ／Ｂｏｃ脱保護
未精製の生成物をＴＦＡ中に溶解させ、室温で４０分撹拌することによって、ｔＢｕ／ｔＢｏｃ保護基の除去を行った。窒素流下でＴＦＡを除去した後、残留物を、ｔｅｒｔ−ブタノールと水およびの混合物中に溶解させた。凍結乾燥した後、粗製ペプチドを得た。
【０２２８】
樹脂からのペプチド切断
ａ）酸不安定性保護基の保存：樹脂に結合したペプチドを、ＤＣＭ／ＴＦＥ／ＡｃＯＨ（ｖ／ｖ／ｖ；６／３／１、８ｍＬ／ｇ樹脂）の混合物中に溶解させ、３０分振盪した。完全に保護されたペプチドを含有する溶液をろ過し、樹脂を、切断溶液の別の部分で３０分処理した。両方の画分を合わせ、トルエンと水を連続的に添加することによって酢酸を減圧下で除去した。残存する水を凍結乾燥した後、粗製の完全に保護されたペプチドを得た。
【０２２９】
ｂ）全ての酸不安定性保護基の脱保護：完全に保護された樹脂に結合したペプチドを、ＴＦＡ／ＴＩＰＳ／水（ｖ／ｖ／ｖ；９５／２．５／２．５）の混合物中に溶解させ、３０分振盪した。溶液をろ過し、樹脂を同じ方法でさらに３０分処理した。両方のろ液を合わせ、窒素流下で濃縮した。ｔｅｒｔ−ブタノールおよび水の混合物中に残留物を溶解させ、続いて凍結乾燥した後、粗製ペプチドを得た。
【０２３０】
２）結合モチーフの合成
Ｌｙｓ−尿素−Ｇｌｕ（（ｔＢｕＯ）ＫｕＥ（ＯｔＢｕ）２）（１）
【０２３１】
【化７７】
2020528461.tif 000079
【０２３２】
ｔＢｕで保護されたＬｙｓ−尿素−Ｇｌｕ結合モチーフ（ＥｕＫ）の合成を、液相合成によって以前述べられたようにして行った（Weineisenら、EJNMMI research 4、63（2014））。生成物をワックス状の固体として得た（９１．５％）。ＨＰＬＣ（１５分で１０〜９０％のＢ）：ｔＲ＝１２．６分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ２４Ｈ４５Ｎ３Ｏ７）：４８７．６、実測値：ｍ／ｚ＝４８８．３［Ｍ＋Ｈ］＋、５１０．３［Ｍ＋Ｎａ］＋。
Ｇｌｕ−尿素−Ｇｌｕ（（ｔＢｕＯ）ＥｕＥ（ＯｔＢｕ）２）（２）
【０２３３】
【化７８】
2020528461.tif 000080
【０２３４】
ｔＢｕで保護されたＧｌｕ−尿素−Ｇｌｕ結合モチーフ（ＥｕＥ）を、これまでに公開された手順に従って合成した（Weineisenら、EJNMMI research 4、63（2014））。生成物を吸湿性の固体として得た（８４％）。ＨＰＬＣ（１５分で１０％〜９０％のＢ）：ｔＲ＝１１．３分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ２３Ｈ４９Ｎ２Ｏ９）：４８８．３；実測値：ｍ／ｚ＝４８９．４［Ｍ＋Ｈ］＋、５１６．４［Ｍ＋Ｎａ］＋。
ＰｆｐＯ−Ｓｕｂ−（ｔＢｕＯ）ＫｕＥ（ＯｔＢｕ）２（３）
【０２３５】
【化７９】
2020528461.tif 000081
【０２３６】
ＥｕＫのスベリン酸スペーサーへのコンジュゲーションを以前述べられたようにして実行した（Weineisenら、EJNMMI research 4、63（2014））。生成物を無色の油状物として得た（７２％）。ＨＰＬＣ（１５分で１０〜９０％のＢ）：ｔＲ＝１５．５分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ３８Ｈ５６Ｆ５Ｎ３Ｏ１０）：８０９．４、実測値：ｍ／ｚ＝８１０．６［Ｍ＋Ｈ］＋、８３２．４［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０２３７】
ＥｕＫ−ｓｕｂ部分（３）のペプチドへのコンジュゲーション
Ｎ末端で脱保護されたペプチド（１．０当量）をＤＭＦ中の３（１．２当量）の溶液に添加し、ＴＥＡ（８当量）を添加した。溶液を室温で２時間撹拌した後、ＤＭＦを真空中で除去した。ｔＢｕ−エステルの切断のために、ＴＦＡを添加し、溶液を室温で４５分撹拌した。窒素流下でＴＦＡを除去した後、未精製の生成物をＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した。
【０２３８】
３）プロパルギル−ＴＲＡＰ（４）の合成
【０２３９】
【化８０】
2020528461.tif 000082
【０２４０】
プロパルギル−ＴＲＡＰの合成を以前述べられたようにして行った（Reichら、Chemical communications（ケンブリッジ、英国）53、2586〜2589（2017））。分取用ＨＰＬＣによって最終的な精製を行い、６０．２ｍｇ（８２．４μｍｏｌ、４６％）のプロパルギル−ＴＲＡＰを無色の固体として得た。ＨＰＬＣ（２０分で２〜４０％のＢ）：ｔＲ＝６．０分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ２１Ｈ３９Ｎ４Ｏ１１Ｐ３）：６１６．５、実測値：ｍ／ｚ＝６１７．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４１】
1H-NMR (300 MHz, D-2O, 300 K) δ = 1.96-2.08 (m, 6H, C(O)-CH2), 2.46-2.55 (m, 2H, PB-CH2-C), 2.59-2.70 (m, 4H, PA-CH2-C), 3.36 (d, 2H, 2JPH= 6 Hz, PB-CH2-N), 3.41 (d, 4H, 2JPH= 6 Hz, PA-CH2-N), 3.47-3.48 (m, 12H, ring-CH-2), 3.95 (d, 2H, CH2-C≡CH, 4JHH = 3 Hz) ppm*. 13C{1H}-NMR (101 MHz, D2O, 300 K) δ = 24.61 (d, 1JPP= 95 Hz, PB-C-C), 25.07 (d, 1JPP = 94 Hz, PA-C-C), 26.71 (d, 2JPP = 4 Hz, PB-C-C), 27.82 (d, 2JPP= 3 Hz, PA-C-C), 28.89 (C-C≡C), 51.29 / 51.41 / 51.50 (３つの異なる環-C), 53.66 (d, 1JPP= 91 Hz, N-C-PA), 53.66 (d, 1JPP = 90 Hz, N-C-PB), 71.79 (C-C≡C), 79.65 (C-C≡C), 174.46 (d, 3JPP = 14 Hz, N(H)-C=OB), 177.24 (d, 3JPP = 13 Hz, C=OA) ppm*. 31P{1H}-NMR (162 MHz, D2O, 300 K) δ = 37.99 (PA), 38.68(PB) ppm*。＊：添え字ＡおよびＢは、それぞれ未修飾Ａおよび修飾Ｂ側枝に属するＰおよびＯ原子を示す。
【０２４２】
プロパルギル−ＴＲＡＰ（４）のペプチドへのカップリング
銅（Ｉ）触媒によるアルキン−アジ化物付加環化を介したアジ化物で官能化したペプチドのプロパルギル−ＴＲＡＰへのコンジュゲーションについては、これまでに開発された手順を適用した（Reichら、Chemical communications（ケンブリッジ、英国）53、2586〜2589（2017））。簡単に言えば、プロパルギル−ＴＲＡＰ（１．０当量）を水（４０ｍＭ溶液）中に溶解させ、ｔＢｕＯＨと水ｔＢｕＯＨおよび水の１：１（ｖ／ｖ）混合物中のペプチド（１．１当量）の溶液と合わせた。その後、水中のアスコルビン酸ナトリウム（０．５Ｍ、５０当量）の溶液を添加した。反応を開始させるために、Ｃｕ（ＯＡｃ）２・Ｈ２Ｏの水溶液（０．０５Ｍ、１．２当量）を添加したところ、茶色の沈殿が生じ、この沈殿は、透明な緑色の溶液中で撹拌した後に溶解した。ＴＲＡＰの脱金属のために、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸の水溶液（ＮＯＴＡ、８ｍＭ、１２当量）を添加し、ｐＨを１ＭのＨＣｌ水溶液で２．２に調整した。６０℃で１時間、または室温で４８時間のいずれかの後、混合物を分取用ＨＰＬＣ精製に直接供した。
【０２４３】
４）ＤＯＴＡＧＡのコンジュゲーション
ペプチドとそれぞれのキレーターＤＯＴＡＧＡ無水物との縮合は、数々の公報に記載されており、以下のように要約される：Ｎ末端で脱保護されたペプチド（１．０当量）を、無水ＤＭＦ中のＤＯＴＡＧＡ無水物（１．５当量）およびＤＩＰＥＡ（１０．０当量）と共に溶解した。反応混合物を一晩撹拌した後、ＤＭＦを真空中で除去し、未精製の生成物を得た。
【０２４４】
５）ＥｕＫベースのＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ阻害剤の合成
ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ１（５）
【０２４５】
【化８１】
2020528461.tif 000083
【０２４６】
ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ１を、上述した方法を適用したトリチルクロリドポリスチレン（ＴＣＰ）樹脂での標準的なＦｍｏｃ−固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）に従って合成した。簡単に言えば、樹脂に結合したＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）を、ＤＭＦ中の２０％ピペリジンでＦｍｏｃ脱保護し、ＤＭＦ中のＨＯＢｔ（２．０当量）、ＴＢＴＵ（２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（６．０当量）を適用して、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（Ｄｄｅ）−ＯＨ（２．０当量）をコンジュゲートした。ＮＭＰおよびＤＭＦの混合物中のイミダゾールおよび塩酸ヒドロキシルアミンでのオルトゴナルなＤｄｅ脱保護の後、ＳＩＦＡ−ＢＡ（１．５当量）を同じようにコンジュゲートした。それに続くＦｍｏｃ脱保護とＤＣＭ中のＴＦＥおよびＡｃＯＨを用いた樹脂からの穏やかな切断とにより、Ｂｏｃで保護されたペプチド骨格を得た。ＤＯＴＡＧＡ無水物（１．５当量）の縮合を、ＤＭＦ中のＤＩＰＥＡ（１０当量）を添加することによって実行した。ＴＦＡ中でのＢｏｃ脱保護の後、ＰｆｐＯ−Ｓｕｂ−（ｔＢｕＯ）ＫｕＥ（ＯｔＢｕ）２部分（１．２当量）を、ＴＥＡ（８当量）およびＤＭＦの混合物中に添加した。ＴＦＡ中でのｔＢｕ−エステルの最終的な切断とＲＰ−ＨＰＬＣ精製により、ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ１（７０％）を無色の固体として得た。ＨＰＬＣ（１５分で１０〜９０％のＢ）：ｔＲ＝９．１分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ６３Ｈ１０２ＦＮ１１Ｏ２２Ｓｉ）：１４１１．７、実測値：ｍ／ｚ＝１４１２．３［Ｍ＋Ｈ］＋、７０６．８［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【０２４７】
【化８２】
2020528461.tif 000084
【０２４８】
スキーム１：ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ１の合成：ａ）２０％ピペリジン（ＤＭＦ）；ｂ）Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（Ｄｄｅ）−ＯＨ、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ（ＤＭＦ）；ｃ）イミダゾール、塩酸ヒドロキシルアミン、（ＮＭＰ、ＤＭＦ）；ｄ）ＳＩＦＡ−ＢＡ、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ（ＤＭＦ）；ｅ）ＴＦＥ、ＡｃＯＨ、（ＤＣＭ）；ｆ）ＤＯＴＡＧＡ無水物、ＤＩＰＥＡ、（ＤＭＦ）；ｇ）ＴＦＡ；ｈ）ＰｆｐＯ−Ｓｕｂ−（ｔＢｕＯ）ＫｕＥ（ＯｔＢｕ）２、ＴＥＡ、（ＤＭＦ）。
【０２４９】
ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ２（６）
【０２５０】
【化８３】
2020528461.tif 000085
【０２５１】
ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ２の合成を、上述した一般的な方法および手順を適用することによって行った。手短に言えば、樹脂に結合したＦｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨを、ＤＭＦ中の２０％ピペリジンでＦｍｏｃ脱保護し、ＤＭＦ中のＨＡＴＵ（３．０当量）、ＨＯＡｔ（３．０当量）およびＤＩＰＥＡ（６．０当量）を用いてＮ３−Ｌ−Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ（２．０当量）にコンジュゲートした。Ｆｍｏｃ基の切断後、ＳＩＦＡ−ＢＡ（１．５当量）を、ＤＭＦ中のＨＯＢｔ（１．５当量）、ＴＢＴＵ（１．５当量）およびＤＩＰＥＡ（４．５当量）と共に添加した。それに続くＴＦＡを用いた樹脂からの切断により、完全に脱保護されたペプチド骨格を得た。ＥｕＫ部分のコンジュゲーションのために、ＰｆｐＯ−Ｓｕｂ−（ｔＢｕＯ）ＫｕＥ（ＯｔＢｕ）２（１．２当量）を、ＴＥＡ（８当量）およびＤＭＦの混合物中に添加した。ｔＢｕ−エステルの切断を、ＴＦＡを添加することによって実行した。最終的な工程において、精製したペプチド（１．１当量）を、上述したように、銅（Ｉ）で触媒されるアルキン−アジ化物付加環化においてプロパルギル−ＴＲＡＰ（１．０当量）と反応させた。ＲＰ−ＨＰＬＣ精製の後、ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ２（４％）を無色の固体として得た。ＨＰＬＣ（１５分で１０〜９０％のＢ）：ｔＲ＝８．５分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ６５Ｈ１０９ＦＮ１３Ｏ２４Ｐ３Ｓｉ）：１５９５．７、実測値：ｍ／ｚ＝１５９６．５［Ｍ＋Ｈ］＋、７９９．１［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【０２５２】
【化８４】
2020528461.tif 000086
【０２５３】
スキーム２：ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ２の合成：ａ）２０％ピペリジン（ＤＭＦ）；ｂ）Ｎ３−Ｌ−Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、ＨＡＴＵ、ＨＯＡｔ、ＤＩＰＥＡ（ＤＭＦ）；ｃ）ＳＩＦＡ−ＢＡ、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ（ＤＭＦ）；ｄ）ＴＦＡ；ｅ）ＰｆｐＯ−Ｓｕｂ−（ｔＢｕＯ）−ＫｕＥ（ＯｔＢｕ）２、ＴＥＡ、（ＤＭＦ）；ｆ）プロパルギル−ＴＲＡＰ、Ｃｕ（ＯＡｃ）２・Ｈ２Ｏ、アスコルビン酸ナトリウム（ｔＢｕＯＨ、Ｈ２Ｏ）。
【０２５４】
６）ＥｕＥベースのＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ阻害剤の合成
ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）
【０２５５】
【化８５】
2020528461.tif 000087
【０２５６】
ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３を、上述した標準的なＦｍｏｃ−ＳＰＰＳプロトコールを適用することによって合成した。簡単に言えば、樹脂に結合したＦｍｏｃ−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｄｄｅ）−ＯＨを、ＤＭＦ中の２０％ピペリジンでＦｍｏｃ脱保護し、（ｔＢｕＯ）ＥｕＥ（ＯｔＢｕ）２（２．０当量）を、ＤＭＦ中のＨＯＢｔ（２．０当量）、ＴＢＴＵ（２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（６．０当量）とコンジュゲートした。ＤＭＦ中の２％ヒドラジンの混合物でＤｄｅ基を切断した後、ＤＭＦ中の無水コハク酸（７．０当量）およびＤＩＰＥＡ（７．０当量）の溶液を添加した。Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ−ＯＡｌｌ・ＨＣｌ（１．５当量）のコンジュゲーションが、ＤＭＦ中のＨＯＢｔ（１．５当量）、ＴＢＴＵ（１．５当量）およびＤＩＰＥＡ（４．５当量）の混合物を添加することによって達成された。ＤＭＦ中の２０％ピペリジンでＦｍｏｃ基を切断した後、ＤＭＦ中のＨＯＢｔ（２．０当量）、ＴＢＴＵ（２．０当量）およびＤＩＰＥＡ（６．０当量）の混合物中でのアミノ酸の予備活性化して、遊離アミンをＦｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（Ｄｄｅ）−ＯＨ（２．０当量）にコンジュゲートした。それに続き、ＮＭＰおよびＤＭＦの混合物中に溶解したイミダゾールおよび塩酸ヒドロキシルアミンを使用してオルトゴナルなＤｄｅ脱保護を行った。ＳＩＦＡ−ＢＡ（１．５当量）を、ＤＭＦ中の活性化試薬としてＨＯＢｔ（１．５当量）、ＴＢＴＵ（１．５当量）およびＤＩＰＥＡ（４．５当量）を用いて、側鎖の遊離アミンと反応させた。アリルオキシ保護基を、ＤＣＭ中に溶解したＴＩＰＳ（５０．０当量）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．３当量）の添加によって除去した。ピペリジンでのＦｍｏｃ脱保護の後、ＤＣＭ中のＴＦＥおよびＡｃＯＨの混合物を使用して酸不安定性の保護基を保存することにより、ペプチドを樹脂から切断した。ＤＯＴＡＧＡ無水物（１．５当量）の最終的な縮合が、ＤＭＦ中のピペリジン（１０当量）を用いて達成された。ＥｕＥ部分のｔＢｕ−エステルをＴＦＡで切断した後、粗製ペプチドをＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（２４％）を無色の固体として得た。ＨＰＬＣ（１５分で１０〜７０％のＢ）：ｔＲ＝１０．４分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ６３Ｈ９９ＦＮ１２Ｏ２５Ｓｉ）：１４７０．７、実測値：ｍ／ｚ＝１４７１．８［Ｍ＋Ｈ］＋、７３６．７［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【０２５７】
【化８６】
2020528461.tif 000088
【０２５８】
スキーム３：ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３の合成：ａ）２０％ピペリジン、（ＤＭＦ）；ｂ）（ｔＢｕＯ）ＥｕＥ（ＯｔＢｕ）２、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、（ＤＭＦ）；ｃ）２％ヒドラジン（ＤＭＦ）；ｄ）無水コハク酸、ＤＩＰＥＡ、（ＤＭＦ）；ｅ）Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ−ＯＡｌｌ・ＨＣｌ、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、（ＤＭＦ）；ｆ）Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（Ｄｄｅ）−ＯＨ、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、（ＤＭＦ）；ｇ）イミダゾール、塩酸ヒドロキシルアミン、（ＮＭＰ、ＤＭＦ）；ｈ）ＳＩＦＡ−ＢＡ、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ（ＤＭＦ）；ｉ）ＴＩＰＳ、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４、（ＤＣＭ）；ｊ）ＴＦＥ、ＡｃＯＨ（ＤＣＭ）；ｋ）ＤＯＴＡＧＡ無水物、ＤＩＰＥＡ、（ＤＭＦ）；ｌ）ＴＦＡ。
【０２５９】
ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ４（８）
【０２６０】
【化８７】
2020528461.tif 000089
【０２６１】
ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ４を、化合物７のように、ただし以下の１点を変更して、ＳＰＰＳを介して合成した；Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（Ｄｄｅ）−ＯＨのコンジュゲーションの後、Ｆｍｏｃ保護基を、最初にＤＭＦ中の２０％ピペリジンで切断し、ＳＩＦＡ−ＢＡをペプチドの遊離のＮ末端と反応させた。ＮＭＰおよびＤＭＦの混合物中に溶解したイミダゾールおよび塩酸ヒドロキシルアミンを使用することによってアリルオキシ保護基を除去した後に、残存するＤｄｅ基を切断した。それに続く反応工程はＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３と同一であった。ＲＰ−ＨＰＬＣ精製後、ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ４（１１％）を無色の固体として得た。ＨＰＬＣ（１５分で１０〜７０％のＢ）：ｔＲ＝１０．４分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ６３Ｈ９９ＦＮ１２Ｏ２５Ｓｉ）：１４７０．７、実測値：ｍ／ｚ＝１４７１．７［Ｍ＋Ｈ］＋、７３６．８［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【０２６２】
【化８８】
2020528461.tif 000090
【０２６３】
スキーム４：ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ４の合成：ａ）２０％ピペリジン、（ＤＭＦ）；ｂ）Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（Ｄｄｅ）−ＯＨ、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、（ＤＭＦ）；ｃ）ＳＩＦＡ−ＢＡ、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ（ＤＭＦ）；ｄ）ＴＩＰＳ、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４、（ＤＣＭ）；ｅ）イミダゾール、塩酸ヒドロキシルアミン、（ＮＭＰ、ＤＭＦ）；ｆ）ＴＦＥ、ＡｃＯＨ（ＤＣＭ）；ｇ）ＤＯＴＡＧＡ無水物、ＤＩＰＥＡ、（ＤＭＦ）；ｈ）ＴＦＡ。
【０２６４】
ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ５（９）
【０２６５】
【化８９】
2020528461.tif 000091
【０２６６】
ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ５のペプチド骨格をリガンド７および８と同じように調製した。最終的なプロパルギル−ＴＲＡＰでのクリック反応に必要な、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｄａｐ（Ｄｄｅ）−ＯＨの代わりにＮ３−Ｌ−Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨを使用することが異なっていた。アジドで置換されたアミノ酸（２．０当量）を、ＤＭＦ中のＨＡＴＵ（３．０当量）、ＨＯＡｔ（３．０当量）およびＤＩＰＥＡ（６．０当量）とコンジュゲートした。その側鎖を２０％ピペリジンでＦｍｏｃ脱保護した後、ＳＩＦＡ−ＢＡ（１．５当量）を上述したように反応させた。キレーター部分のコンジュゲーションまでの全ての残りの反応工程は、ペプチド７および８と同一であった。全ての酸不安定性の保護基を並行して脱保護しながらＴＦＡを用いて樹脂から切断した後、精製したＥｕＥ−アジド−コンジュゲート（１．１当量）を、銅（Ｉ）で触媒されるアルキン−アジ化物付加環化においてプロパルギル−ＴＲＡＰ（１．０当量）と反応させた。ＲＰ−ＨＰＬＣ精製により、ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ５（９％）を無色の固体として得た。ＨＰＬＣ（１５分で１０〜９０％のＢ）：ｔＲ＝８．７分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ６５Ｈ１０６ＦＮ１４Ｏ２７Ｐ３Ｓｉ）：１６５４．６、実測値：ｍ／ｚ＝１６５５．６［Ｍ＋Ｈ］＋、８２８．４［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【０２６７】
【化９０】
2020528461.tif 000092
【０２６８】
スキーム５：ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ５の合成：ａ）２０％ピペリジン、（ＤＭＦ）；ｂ）Ｎ３−Ｌ−Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、（ＤＭＦ）；ｃ）ＳＩＦＡ−ＢＡ、ＨＯＢｔ、ＴＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ（ＤＭＦ）；ｄ）ＴＩＰＳ、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４、（ＤＣＭ）；ｅ）ＴＦＡ；ｆ）プロパルギル−ＴＲＡＰ、Ｃｕ（ＯＡｃ）２・Ｈ２Ｏ、アスコルビン酸ナトリウム（ｔＢｕＯＨ、Ｈ２Ｏ）。
【０２６９】
複合体化実験
ｎａｔＧａ−ＴＲＡＰ複合体の合成：ＤＭＳＯ中のＰＳＭＡ前駆体の２ｍＭストック溶液５００μＬを、２ｍＭのＧａ（ＮＯ３）３水溶液７５０μＬと合わせた。複合体化が室温で瞬間的に起こった。反応の完了は、ＲＰ−ＨＰＬＣとそれに続く質量分析によって制御した。
【０２７０】
ｎａｔＧａ−ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ２：ＨＰＬＣ（１５分で１０〜９０％のＢ）：ｔＲ＝９．５分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ６５Ｈ１０６ＦＧａＮ１３Ｏ２４Ｐ３Ｓｉ）：１６６１．６、実測値：ｍ／ｚ＝１６６３．９［Ｍ＋Ｈ］＋、８３２．６［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【０２７１】
ｎａｔＧａ−ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ５：ＨＰＬＣ（１５分で１０〜９０％のＢ）：ｔＲ＝９．０分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ６５Ｈ１０３ＦＧａＮ１４Ｏ２７Ｐ３Ｓｉ）：１７２０．５、実測値：ｍ／ｚ＝１７２０．８［Ｍ＋Ｈ］＋、８６１．１［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【０２７２】
ｎａｔＧａ−ＤＯＴＡＧＡ複合体の合成：ＤＭＳＯ中のＰＳＭＡ前駆体の２ｍＭストック溶液５００μＬを、２ｍＭのＧａ（ＮＯ３）３水溶液１５００μＬと合わせた。反応混合物を６０℃で３０分加熱した。反応の結果を、ＲＰ−ＨＰＬＣとそれに続く質量分析によってモニターした。［ｎａｔＧａ］ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡリガンドを１８Ｆで放射性標識するために、複合体化した化合物を、ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、その後、反応物を標識化した。
【０２７３】
ｎａｔＧａ−ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ１：ＨＰＬＣ（１５分で１０〜９０％のＢ）：ｔＲ＝９．１分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ６３Ｈ９９ＦＧａＮ１１Ｏ２２Ｓｉ）：１４７７．６、実測値：ｍ／ｚ＝１４７９．５［Ｍ＋Ｈ］＋、７４０．２［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【０２７４】
ｎａｔＧａ−ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３：ＨＰＬＣ（１５分で１０〜７０％のＢ）：ｔＲ＝１０．４分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ６３Ｈ９６ＦＧａＮ１２Ｏ２５Ｓｉ）：１５３６．６、実測値：ｍ／ｚ＝１５３９．４［Ｍ＋Ｈ］＋、７７０．３［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【０２７５】
ｎａｔＧａ−ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ４：ＨＰＬＣ（１５分で１０〜７０％のＢ）：ＨＰＬＣ（１５分で１０〜７０％のＢ）：ｔＲ＝１０．４分。モノアイソトピック質量の計算値（Ｃ６３Ｈ９６ＦＧａＮ１２Ｏ２５Ｓｉ）：１５３６．６、実測値：ｍ／ｚ＝１５３９．１［Ｍ＋Ｈ］＋、７７０．５［Ｍ＋２Ｈ］２＋。
【０２７６】
ｎａｔＬｕ−複合体化：対応するｎａｔＬｕＩＩＩ−複合体を、過量の２．５モル濃度のＬｕＣｌ３（２０ｍＭ溶液）を含むＰＳＭＡ阻害剤の２ｍＭ水溶液から調製し、９５℃で３０分加熱した。冷却後、ＨＰＬＣおよびＭＳを使用して、ｎａｔＬｕＩＩＩ−キレート形成が確認された。次いで得られたそれぞれのｎａｔＬｕ−複合体の１ｍＭ水溶液を希釈し、それ以上処理せずにインビトロのＩＣ５０研究で使用した。
【０２７７】
放射標識
６８Ｇａ標識化：６８Ｇａ標識化を、以前述べられたようにして自動システム（ＧａｌｌＥｌｕｔ＋、シントミクス（Scintomics）製、ドイツ）を使用して行った（Notniら、EJNMMI research、28（2012））。簡単に言えば、ＳｎＯ２マトリックス（IThemba LABS）を有する６８Ｇｅ／６８Ｇａジェネレーターを１．０ＭのＨＣｌ水溶液で溶出させ、それから活性のおよそ８０％（５００〜７００ＭＢｑ）を有する画分（１．２５ｍＬ）を反応バイアル（ALLTECH、５ｍＬ）に移した。溶出前に、リアクターに、２．７ＭのＨＥＰＥＳ水溶液中の２〜５ｎｍｏｌのそれぞれのキレーターコンジュゲート（ＤＯＴＡＧＡ−コンジュゲート：９００μＬ、ＴＲＡＰ−コンジュゲート：４００μＬ）をローディングした。溶出後、バイアルを９５℃で５分加熱した。反応混合物を固相抽出カートリッジ（Ｃ８ライト、ＳｅｐＰａｋ）に通過させ、水（１０ｍＬ）でパージし、生成物を５０％水性エタノール（２ｍＬ）、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、１ｍＬ）および再度水（１ｍＬ）で溶出させることによって、精製した。真空中でエタノールを除去した後、放射標識された化合物の純度を、放射線ＴＬＣ（ＩＴＬＣ−ＳＧクロマトグラフィーペーパー、移動相：０．１Ｍクエン酸三ナトリウムおよび１Ｍ酢酸アンモニウムとメタノールとの１：１混合物（ｖ／ｖ））によって決定した。
【０２７８】
１８Ｆ標識化：１８Ｆ標識化のために、これまでに公開された手順（Wanglerら、Nat Protoc 7、1946〜55（2012））をわずかに改変したものを適用した。簡単に言えば、１８Ｆ−水溶液をＳＡＸカートリッジ（Sep-Pak Accell Plus QMAカーボネートライト）に通過させ、１０ｍＬの水で予備調整した。１０ｍＬの空気で乾燥させた後、１０ｍＬの無水アセトニトリル、それに続いて２０ｍＬの空気でカートリッジを濯ぐことによって水を除去した。１８Ｆを、５００μＬの無水アセトニトリル中に溶解した１００μｍｏｌの［Ｋ＋⊂２．２．２］ＯＨ￣で溶出させた。標識化の前に、無水アセトニトリル（１Ｍ、２５μＬ）中の２５μｍｏｌのシュウ酸を添加した。この混合物を、１０〜２５μｍｏｌのＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ（無水ＤＭＳＯ中の１Ｍ）のフッ素化のために、全体またはアリコートとして使用した。得られた反応混合物を室温で５分インキュベートした。トレーサーの精製のために、１０ｍＬのＥｔＯＨ、続いて１０ｍＬのＨ２Ｏで予備調整したＳｅｐ−Ｐａｋ  Ｃ１８ライトカートリッジを使用した。標識化混合物を９ｍＬの０．１ＭのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ３）で希釈し、およびカートリッジ、続いて１０ｍＬのＨ２Ｏに通過させた。ペプチドを、水中のＥｔＯＨの４：１混合物（ｖ／ｖ）５００μＬで溶出させた。標識された化合物の放射化学的純度を、放射線ＲＰ−ＨＰＬＣおよび放射線ＴＬＣ（シリカゲル６０ＲＰ−１８Ｆ２５４ｓ、移動相：１０％の２ＭのＮａＯＡｃ溶液および１％のＴＦＡが補充されたＨ２Ｏ中のＭｅＣＮの３：２混合物（ｖ／ｖ））によって決定した。
【０２７９】
１２５Ｉ標識化：インビトロでの研究のための参照リガンド（［１２５Ｉ］Ｉ−ＢＡ）ＫｕＥを、これまでに公開された手順（Weineisenら、EJNMMI research、4、63（2014））に従って調製した。簡単に言えば、０．１ｍｇのスタンニル化前駆体（ＳｎＢｕ３−ＢＡ）（ＯｔＢｕ）ＫｕＥ（ＯｔＢｕ）２を、２０μＬの過酢酸、５．０μＬ（２１ＭＢｑ）の［１２５Ｉ］ＮａＩ（７４ＴＢｑ／ｍｍｏｌ、３．１ＧＢｑ／ｍＬ、４０ｍＭのＮａＯＨ、ハルトマン・アナリティック（Hartmann Analytic）、ブラウンシュバイク、ドイツ）、２０μＬのＭｅＣＮおよび１０μＬの酢酸を含有する溶液中に溶解させた。反応溶液を室温で１０分インキュベートし、カートリッジにローディングし、１０ｍＬの水で濯いだ（１０ｍＬのＭｅＯＨおよび１０ｍＬの水で予備調整したＣ１８  Ｓｅｐ  Ｐａｋプラスカートリッジ）。ＥｔＯＨ／ＭｅＣＮの１：１混合物（ｖ／ｖ）２．０ｍＬで溶出した後、穏やかな窒素流下で放射性溶液を蒸発乾固させ、２００μＬのＴＦＡで３０分処理し、続いてＴＦＡを蒸発させた。（［１２５Ｉ］Ｉ−ＢＡ）ＫｕＥの未精製の生成物を、ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した（２０分で２０％〜４０％のＢ）：ｔＲ＝１３．０分。
【０２８０】
１７７Ｌｕでの標識付け：１０μＬの反応体積になるまで、１．０ＭのＮＨ４ＯＡｃ緩衝液ｐＨ＝５．９を、０．７５〜１．０ｎｍｏｌのトレーサー（７．５〜１０μＬ）、１０〜４０ＭＢｑの１７７ＬｕＣｌ３（特異的な活性（ＡＳ）＞３０００ＧＢｑ／ｍｇ、７４０ＭＢｑ／ｍＬ、０．０４ＭのＨＣｌ、ＩＴＧ、ガルヒンク、ドイツ）に添加し。最後にほぼ純粋な水（メルク（Ｍｅｒｃｋ）、ダルムシュタット、ドイツ）を１００μＬまで充填した。反応混合物を９５℃で３０分加熱し、放射化学的純度を、放射線ＴＬＣ（シリカゲル６０ＲＰ−１８Ｆ２５４ｓ、１０％の２ＭのＮａＯＡｃ溶液が補充されたＨ２Ｏ中のＭｅＣＮおよび１％のＴＦＡの３：２混合物（ｖ／ｖ）、Ｒｆ＝０．５）を使用して決定した。
【０２８１】
インビトロの実験
ＩＣ５０の決定
ＰＳＭＡ陽性（posivite）ＬＮＣａＰ細胞を、１０％ウシ胎児血清が補充されたグルタマックス（Glutamax）−Ｉ（１：１で）（Invitrigon）を含むダルベッコ（Dublecco）改変イーグル培地／栄養混合物Ｆ−１２中で増殖させ、加湿した５％のＣＯ２雰囲気中、３７℃で維持した。ＰＳＭＡ親和性（ＩＣ５０）の決定のために、細胞を、実験前の２４±２時間で回収し、２４−ウェルプレート中にシーディングした（１ｍＬ／ウェル中、細胞１．５×１０５個）。培養培地を除去した後、細胞を５００μＬのＨＢＳＳ（ハンクス平衡塩溶液、バイオクロム（Biochrom）、ベルリン、ドイツ、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）添加）で一度処理し、２００μＬのＨＢＳＳ（１％のＢＳＡ）中で平衡化するために氷上で１５分放置した。次に、ＨＢＳＳ（１％のＢＳＡ、対照）または濃度を増加させた（ＨＢＳＳ中１０−１０〜１０−４Ｍ）それぞれのリガンドのいずれかを含有する２５μＬ／ウェルの溶液を添加し、続いてＨＢＳＳ（１％のＢＳＡ）中の２５μＬの（［１２５Ｉ］Ｉ−ＢＡ）ＫｕＥ（２．０ｎＭ）を添加した。全ての実験を各濃度につき少なくとも３回実行した。氷上で６０分インキュベートした後、培地を除去し、２００μＬのＨＢＳＳで連続して濯ぐことによって実験を終結させた。遊離の放射性リガンドの量を示す両方の工程の培地を１つの画分に合わせた。その後、細胞を２５０μＬの１ＭのＮａＯＨで溶解させ、以下の洗浄工程の２００μＬのＨＢＳＳと一緒にした。結合したおよび遊離の放射性リガンドの定量化をγカウンターで行った。
【０２８２】
内在化
内在化研究のために、ＬＮＣａＰ細胞を、実験前の２４±２時間で回収し、２４−ウェルプレート中にシーディングした（１ｍＬ／ウェル中、細胞１．２５×１０５個）。培養培地を除去した後、細胞を５００μＬのＤＭＥＭ−Ｆ１２（５％のＢＳＡ）で１回洗浄し、放置して、３７℃で少なくとも１５分、２００μＬのＤＭＥＭ−Ｆ１２（５％のＢＳＡ）中で平衡化した。各ウェルを、ブロックするために、２５μＬのＤＭＥＭ−Ｆ１２（５％のＢＳＡ）または１００μＭのＰＭＰＡ溶液のいずれかで処理した。次に、２５μＬの６８Ｇａ／１８Ｆ標識ＰＳＭＡ阻害剤（５．０ｎＭ）を添加し、細胞を３７℃で６０分インキュベートした。２４−ウェルプレートを氷上に３分置き、連続して培地を除去することによって実験を終結させた。各ウェルを２５０μＬのＨＢＳＳで濯ぎ、遊離の放射性リガンドの量を表すこれらの最初の二段階からの画分を合わせた。表面に結合した活性物質の除去を、細胞を２５０μＬの氷冷ＰＭＰＡ（ＰＢＳ中１０μＭ）溶液と共に５分インキュベートし、別の２５０μＬの氷冷ＰＢＳで再度濯ぐことによって行った。２５０μＬの１ＭのＮａＯＨ中で細胞をインキュベートし、それに続く２５０μＬの１．０ＭのＮａＯＨでの洗浄工程の画分と合わせることによって、内在化した活性物質を決定した。各実験（対照およびブロック）は３連で実行された。遊離の、表面に結合した、および内在化した活性物質をγカウンターで定量化した。全ての内在化研究に伴い、（［１２５Ｉ］Ｉ−ＢＡ）ＫｕＥ（ｃ＝０．２ｎＭ）を使用した参照研究を同じようにして実行した。データを非特異的な内在化に関して補正し、放射性ヨウ素で処理した参照化合物で観察された特異的な内在化に正規化した。
【０２８３】
オクタノール−水の分配係数
およそ１ＭＢｑの標識されたトレーサーを、エッペンドルフチューブ中で、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、ｐＨ７．４）とｎ−オクタノールとの１：１混合物（体積により）１ｍＬ中に溶解させた。懸濁液を力強く室温で３分混合した後、バイアルを１５０００ｇで３分遠心分離し（Biofuge 15、Heraus Sepatech、オステローデ、ドイツ）、両方の層の１００μＬのアリコートをガンマカウンターで測定した。実験を少なくとも６回繰り返した。
【０２８４】
ＨＳＡ結合
ＨＳＡ結合の決定のために、キラルパック（Chiralpak）ＨＳＡカラム（５０×３ｍｍ、５μｍ、Ｈ１３Ｈ−２４３３）を０．５ｍＬ／分の一定流速度で使用した。移動相（Ａ：ＮＨ４ＯＡｃ、水中５０ｍＭ、ｐＨ７およびＢ：イソプロパノール）を各実験につき新たに調製し、１日のみ使用した。カラムを室温で維持し、捕捉時間を短くするためにシグナル検出後に各実行を止めた。全ての物質を、５０％２−プロパノールおよび５０％５０ｍＭのｐＨ６．９酢酸アンモニウム緩衝液中に０．５ｍｇ／ｍｌ濃度で溶解させた。ペプチドに関連する広範な様々なアルブミン結合が想定されるため、選ばれた参照物質は、１３％から９９％のＨＳＡ結合の範囲を示した。９種全ての参照物質（表１を参照）を連続的に注入して、ＯｒｉｇｉｎＰｒｏ  ２０１６Ｇを用いた非線形回帰を確立した；図１を参照されたい。
【０２８５】
【表１】
2020528461.tif 000093
【０２８６】
実行された実験ごとに例示的な保持時間が示される；ｔＲ  保持時間；Ｌｉｔ．ＨＳＡ  ヒト血清アルブミン結合の文献値［％］；Ｌｏｇ  Ｋ  ＨＡＳ  ヒト血清アルブミン結合の対数Ｋ。
【０２８７】
インビボでの実験
全ての動物実験をドイツにおける一般的な動物福祉規則および動物のケアおよび使用に関する業務用ガイドラインに従って実行した。腫瘍異種移植片を確立するために、ＬＮＣａＰ細胞（細胞１０７個／２００μＬ）を、グルタマックス−Ｉ（１：１）およびマトリゲル（Matrigel）（ＢＤバイオサイエンス（BD Biosciences）、ドイツ）を含むダルベッコ改変イーグル培地／栄養混合物Ｆ−１２の１：１混合物（ｖ／ｖ）中にに懸濁し、６〜８週齢ＣＢ１７−ＳＣＩＤマウス（チャールス・リバー（Charles River）、ズルツフェルト、ドイツ）の右肩の皮下に植え付けた。腫瘍が５〜８ｍｍの直径に成長したら（植え付けの３〜４週間後）、マウスを使用した。
【０２８８】
μＰＥＴイメージング
シーメンス（Siemens）のインヴェロン（Inveon）小動物ＰＥＴシステムでイメージング研究を実行した。データを、３次元の規則正しいサブセットの期待値最大（ＯＳＥＭ３Ｄ）アルゴリズムを採用する単一フレームとして再構築し、続いてインヴェロンリサーチワークプレイス（Inveon Research Workplace）ソフトウェアを使用してデータ分析（ＲＯＩベースの定量化）を行った。ＰＥＴ研究のために、マウスをイソフルランで麻酔し、尾静脈に０．１５〜０．２５ｎｍｏｌ（２〜２０ＭＢｑ）の６８Ｇａまたは１８Ｆ標識トレーサーを注射した。ベッド上で９０分注射した後、動的イメージングを実行した。１５分の捕捉時間を含む注射の１時間後に静止画像を記録した。遮断のために、トレーサー注射の前に８ｍｇ／ｋｇのＰＭＰＡを直接投与した。
【０２８９】
生体内分布
ＬＮＣａＰ腫瘍を有する雄ＣＢ−１７ＳＣＩＤマウスの尾静脈に、およそ２〜２０ＭＢｑ（０．２ｎｍｏｌ）の６８Ｇａまたは１８Ｆ標識ＰＳＭＡ阻害剤を注射し、注射の１時間後に致死させた（ｎ＝３）。選択された臓器を取り出し、重さを量り、γカウンターで測定した。
【０２９０】
ヒトでの実験
ヒトにおける使用の概念実証評価を、人道的使用下で実行した。ドイツ医薬品法（German Medicinal Products Act）、ＡＭＧ§１３  ２ｂに従って、さらに監督規制機関（オーバーバイエルン管轄）に従って薬剤を適用した。
【０２９１】
全ての対象を、バイオグラフ（Biograph）ｍＣＴスキャナー（シーメンス・メディカル・ソリューションズ（Siemens Medical Solutions）、エルランゲン、ドイツ）またはバイオグラフｍＭＲスキャナー（シーメンス・メディカル・ソリューションズ、エルランゲン、ドイツ）で検査した。全てのＰＥＴスキャンを、ベッド位置当たり２〜４分の捕捉時間を用いた３Ｄモードで獲得した。放出データを、無作為、死亡時間、散乱、および減衰に関して補正し、規則正しいサブセットの期待値最大化アルゴリズム（４回の反復、８つのサブセット）によって、続いて再構成後の平滑化ガウスフィルター（最大の２分の１で全幅５ｍｍ）によって、反復して再構築した。前立腺がんを有する５３人の対象の画像を、平均３２４（２３６〜４２４の範囲）ＭＢｑの１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）を注射した後に、注射後平均８４分（４２〜１６６分の範囲）で得た。４７人の対象がＰＥＴ／ＣＴでのイメージングを受け、６人の対象がＰＥＴ／ＭＲスキャナーでのイメージングを受けた。３３人の対象には、トレーサー注射時にフロセミドを適用し、２０人の対象には、フロセミドを与えなかった。
【０２９２】
耳下腺、顎下腺、肺、縦隔の血液プール、肝臓、脾臓、膵頭部、十二指腸、腎臓、膀胱および罹患していない骨の平均および最大の標準取込み値（ＳＵＶｍｅａｎ／ＳＵＶｍａｘ）を分析した。ＳＵＶの計算のために、円形の関心領域を、体軸横断切片における局所的に増加した取込みを有する領域の周りに描き、５０％の等輪郭（isocontour）で自動的に３次元の関心体積（ＶＯＩ）に適合させた。外観的に前立腺がんの再発または転移を示唆するとみなされる病変を計数した。同じタイプ（局所腫瘍、リンパ節転移、骨転移、内臓転移）からの１または２つの病変を、上述したようなＳＵＶｍａｘおよびＳＵＶｍｅａｎを使用して患者ごとに分析した。臀筋は、バックグラウンドとして利用した。
【実施例２】
【０２９３】
実施例２：結果
合成したＰＳＭＡ−ＳＩＦＡリガンドの一覧
【０２９４】
【化９１】
2020528461.tif 000094
【０２９５】
【化９２】
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【０２９６】
【化９３】
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【０２９７】
【化９４】
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【０２９８】
【化９５】
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【０２９９】
【化９６】
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【０３００】
【化９７】
2020528461.tif 000100
【０３０１】
親油性
表２に、６８Ｇａまたは１８Ｆ標識化合物の決定されたオクタノール／水の分配係数（ｌｏｇＤ）を示す。６８Ｇａ標識ＥｕＫベースの阻害剤のなかでも、ＴＲＡＰ官能化化合物（５）が、ＤＯＴＡＧＡをキレーターとして使用した場合、６より高い親水性であることが見出された。この結果は６８Ｇａ標識ＥｕＥベースの薬剤についても見出され、ＴＲＡＰ誘導体（９）が最大の親油性を示した。１８Ｆ標識化合物の全てが、６８Ｇａ標識トレーサーと比較してより低い親水性を示した。
【０３０２】
【表２】
2020528461.tif 000101
【０３０３】
ＰＳＭＡ親和性の決定
ＥｕＥ結合モチーフを有する合成化合物（７、８、９）は、ＥｕＫベースの薬剤（５、６）と比較してより高いＰＳＭＡ親和性を示した。ＴＲＡＰ−キレーターを有する化合物（６および９）は、それらのＤＯＴＡＧＡ類似体（それぞれ５および７）と比較して、わずかに減少した親和性を示した。ｎａｔＧａ複合体化薬剤とそれぞれの複合体化されていない化合物との間に、ＰＳＭＡ親和性に関する有意差は観察されなかった（表３）。
【０３０４】
【表３】
2020528461.tif 000102
【０３０５】
内在化
結合親和性と同様に、ＥｕＥベースの化合物（７、８、９）は、ＥｕＫ結合モチーフを有するペプチド（５、６）と比較して有意に高い内在化値を示した。キレーターの影響に関して、ＤＯＴＡＧＡ類似体のほうが高い結合親和性があったとしても、ＴＲＡＰは、内在化に対して正の作用を有することが示された（５および９、それぞれ６および７と比較して）（表３）。１８Ｆ標識化合物の全ては、それぞれの６８Ｇａ標識トレーサーと比較して高い内在化値を示した（表４）。
【０３０６】
【表４】
2020528461.tif 000103
【０３０７】
ヒト血清アルブミン結合
【０３０８】
【表５】
2020528461.tif 000104
【０３０９】
小動物ＰＥＴイメージングおよび生体内分布
１．［６８Ｇａ］［ｎａｔＦ］ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ１（６８Ｇａ−ｎａｔＦ−５）
図２を参照されたい。
２．［６８Ｇａ］［ｎａｔＦ］ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ２（６８Ｇａ−ｎａｔＦ−６）
図３を参照されたい。
【０３１０】
３．ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）
ａ）静止６８Ｇａ−ＰＥＴイメージング
図４を参照されたい。
ｂ）動的６８Ｇａ−ＰＥＴイメージング
図５を参照されたい。
ｃ）静止１８Ｆ−ＰＥＴイメージング
図６を参照されたい。
ｄ）動的１８Ｆ−ＰＥＴイメージング
図７を参照されたい。
ｅ）生体内分布研究
図８を参照されたい。
【０３１１】
４．ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ４（８）
ａ）静止６８Ｇａ−ＰＥＴイメージング
図９を参照されたい。
ｂ）動的６８Ｇａ−ＰＥＴイメージング
図１０を参照されたい。
ｃ）静止１８Ｆ−ＰＥＴイメージング
図１１を参照されたい。
ｄ）動的１８Ｆ−ＰＥＴイメージング
図１２を参照されたい。
ｅ）生体内分布研究
図１３を参照されたい。
【０３１２】
５．ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ５（９）
ａ）静止６８Ｇａ−ＰＥＴイメージング
図１４を参照されたい。
ｂ）動的６８Ｇａ−ＰＥＴイメージング
図１５を参照されたい。
ｃ）静止１８Ｆ−ＰＥＴイメージング
図１６を参照されたい。
ｄ）静止１８Ｆ−ＰＥＴイメージング
図１７を参照されたい。
ｅ）生体内分布研究
図１８を参照されたい。
【０３１３】
６．の概念研究の証明
ｎａｔＧａ−ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（ｎａｔＧａ−７）
ａ）静止１８Ｆ−ＰＥＴイメージング
図１９を参照されたい。
ｂ）生体内分布研究
図２０を参照されたい。
【０３１４】
７．ルテニウム（Luthenium）ｒｈＰＳＭＡリガンドを使用した小動物ＰＥＴイメージング
ａ）静止ＰＥＴイメージング：１８Ｆ−ｎａｔＬｕ−ｒｈ−７
図２９を参照されたい。
ｂ）動的ＰＥＴイメージング：１８Ｆ−ｎａｔＬｕ−ｒｈ７
図３０を参照されたい。
ｃ）２４時間における１７７Ｌｕ−ｎａｔＦ−７、１７７Ｌｕ−ｎａｔＦ−８および１７７Ｌｕ−ｎａｔＦ−１０の生体内分布研究
図３１を参照されたい。
ｄ）１時間および２４時間における１７７Ｌｕ−ｎａｔＦ−１０の生体内分布
図３２を参照されたい。
ｅ）２４時間における確立された、および新しいｒｈＰＳＭＡ−リガンドの生体内分布の比較
図３３を参照されたい。
ｆ）１時間における１７７Ｌｕ−ｎａｔＦ−ｒｈＰＳＭＡ−１０および６８Ｇａ−ｎａｔＦ−ｒｈＰＳＭＡ−１０の生体内分布の比較
図３４を参照されたい。
【０３１５】
ヒトＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の生体内分布および腫瘍病変における取込み
有害事象または臨床的に検出可能な薬理作用は記録されなかった。
図２１は、正常な生体内分布（検出可能な腫瘍病変がない）対象のＰＥＴからの最大強度投影（ＭＩＲ）を示す。２７２ＭＢｑの１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の注射後７６分に画像を獲得した。図２１右は、高い病変対バックグラウンド比で複数の腫瘍病変を示す中程度に進行した疾患を有する対象のＰＥＴからの最大強度投影（ＭＩＰ）を実証する。３１２ＭＢｑの１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の注射後１０２分に画像を獲得した。
【０３１６】
取込みのパラメーターは、異なる組織タイプのバックグラウンドのＰＳＭＡ発現を反映する。有意な放射性トレーサーの取込みは、唾液腺、腎臓、肝臓、脾臓および十二指腸でのみ認識された。バックグラウンドの組織における取込みは低かった。腫瘍病変における取込みは、低ＰＳＭＡ発現組織より実質的に高かった。
【０３１７】
【表６】
2020528461.tif 000105
【０３１８】
低いバックグラウンド活性のために、臓器および腫瘍病変のバックグラウンドに対するＳＵＶの比率は、臨床イメージングに好都合である。腫瘍病変は、バックグラウンドと比較して高いコントラストで表示される。
【０３１９】
【表７】
2020528461.tif 000106
【０３２０】
腫瘍病変における取込みおよびバックグラウンドに対するコントラストは、異なるタイプの腫瘍間で相対的に等しかった（局所腫瘍［ｎ＝２４］、リンパ節転移［ｎ＝２３］、骨転移［ｎ＝２１］、内臓転移［ｎ＝４］）。
【０３２１】
【表８】
2020528461.tif 000107
【０３２２】
膀胱におけるヒトＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）トレーサーの保持
排泄系泌尿器系におけるトレーサーの保持は、ＰＳＭＡ−リガンドイメージングの共通の欠点である。ＳｉＦＡ置換キレーターベースのＰＥＴ剤の可能性がある鉛化合物としての１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）は、尿排泄系を介して排出されるが、その程度は、ほとんどの他のＰＥＴ剤よりかなり低い。加えて、その膀胱における保持は、トレーサー注射時のフロセミド適用によって顕著な影響を受ける可能性がある。ｔ検定８は、フロセミドを適用した場合、より統計的に有意に低いトレーサーの保持を明らかにした（ＳＵＶｍａｘとＳＵＶｍｅａｎの両方についてｐ＝０．０１８）。
【０３２３】
【表９】
2020528461.tif 000108
【０３２４】
腫瘍病変のＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）検出の臨床結果および組織病理学的な検証
対象を、一次病期分類（ｎ＝６）および再発性疾患（ｎ＝４７）に関してイメージングした。３９人の患者で、前立腺がんを示す病変が検出された。７２個の病変を分析した。７２個の病変のうち２１個が、形態学的なイメージングにおいて相関を示さなかった。測定された７２個の病変のうち１４個が、形態学的なイメージングで５ｍｍに等しいまたはそれより小さいサイズを示した。形態学的なイメージングで、これ以外の方法では臨床的に気付かれない病変を検出したことから、両方とも１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の高い臨床的な価値があることが実証される。形態学的なイメージングで相関がないかまたは小さいサイズの３５個の病変の取込みパラメーターは、好都合な取込みパラメーターを示した。
【０３２５】
【表１０】
2020528461.tif 000109
【０３２６】
イメージングの例は、好都合な特徴を示す。異なる組織タイプを含む小さい１センチメートル未満の病変とびまん性転移性疾患の両方が示される。
図２６は、根治的前立腺摘除術の１．５年後に生化学的再発を有する７０歳患者（グリーソン８、ｐＴ２ｃ、ｐＮ１）のＭＩＲ（Ａ）および体軸横断画像（Ｂ〜Ｄ）を示す。１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）を高度に取り込んだ右骨盤における５ｍｍの直径を有する単一の前立腺がんの典型的な病変が存在する。病変の悪性の性質を組織病理学によって検証した。
【０３２７】
図２７は、進行性の進行去勢抵抗性前立腺がんを有する８０歳患者（ＰＳＡ６６．４ｎｇ／ｍｌ）の一連の画像を示す。画像は、前立腺がん病変の異なるクラス（局所腫瘍、リンパ節転移、骨転移、肝臓転移）において１８Ｆ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の高い取込みを示す。実証された病変は、２ｍｍもの小ささである（矢印は、全てではないが代表的な腫瘍病変を示す）。
【０３２８】
６８Ｇａ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の臨床的な応用
６８Ｇａ標識ＳｉＦＡ置換キレーターベースのＰＥＴトレーサーの概念調査に対する証明として、根治的前立腺摘除術後に生化学的再発を有する１人の対象（ＰＳＡ０．４４ｎｇ／ｍｌ、ｐＴ２ｃ、ｐＮＯ、グリーソン７ｂ）は、１４４ＭＢｑの６８Ｇａ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の注射後にＰＥＴ／ＭＲを６６分受けた。２ｍｍのリンパ節で、再発性前立腺がんに典型的な取込みが実証される。
【０３２９】
図２８は、６８Ｇａ標識ＳｉＦＡ置換キレーターベースのＰＥＴトレーサーの概念調査の証明を示す。
ヒトＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）研究
１．生体内分布および腫瘍病変における取込み
（ａ）正常な生体内分布を有する対象のＰＥＴからの最大強度投影
図２１を参照されたい。
（ｂ）異なる組織における平均標準取込み値
図２２を参照されたい。
（ｃ）異なる組織における標準取込み値の平均比率
図２３を参照されたい。
（ｄ）異なる腫瘍タイプにおける平均標準取込み値
図２４を参照されたい。
【０３３０】
２．膀胱におけるトレーサーの保持
（ａ）膀胱におけるトレーサーの保持の平均標準取込み値
図２５を参照されたい。
【０３３１】
３．腫瘍病変の検出および組織病理学の検証のための臨床結果
図２６および２７を参照されたい。
４．６８Ｇａ標識ＰＳＭＡ−ＳＩＦＡ３（７）の臨床的な応用
図２８を参照されたい。
【図１】
2020528461.tif 000132
【図２】
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【図３】
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【図４】
2020528461.tif 000135
【図５】
2020528461.tif 000136
【図６】
2020528461.tif 000137
【図７】
2020528461.tif 000138
【図８】
2020528461.tif 000139
【図９】
2020528461.tif 000140
【図１０】
2020528461.tif 000141
【図１１】
2020528461.tif 000142
【図１２】
2020528461.tif 000143
【図１３】
2020528461.tif 000144
【図１４】
2020528461.tif 000145
【図１５】
2020528461.tif 000146
【図１６】
2020528461.tif 000147
【図１７】
2020528461.tif 000148
【図１８】
2020528461.tif 000149
【図１９】
2020528461.tif 000150
【図２０】
2020528461.tif 000151
【図２１】
2020528461.tif 000152
【図２２】
2020528461.tif 000153
【図２３】
2020528461.tif 000154
【図２４】
2020528461.tif 000155
【図２５】
2020528461.tif 000156
【図２６】
2020528461.tif 000157
【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
2020528461.tif 000161
【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【国際調査報告】
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2020528461.tif 000167
2020528461.tif 000168