(57)【要約】本発明は、新規二環式ヌクレオシドおよびそれから調製されたオリゴマーに関する。特に、本発明は、式（Ｉ）の化合物に関し、  【化１】2020502072.tif 000105式中、Ｔ１およびＴ２のうちの１つはＯＲ１またはＯＲ２であり；Ｔ１およびＴ２の他方はＯＲ１またはＯＲ２であり；Ｒ１はＨまたはヒドロキシル保護基であり、Ｒ２はリン部分であり；ならびに式中、Ｂｘは核酸塩基である。さらに、本発明は、疾患の予防、治療または診断における薬剤としての使用のための上記化合物、二環式ヌクレオシドおよび上記オリゴマーに関する。【選択図】なし
2020502072.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物であって：
【化１】
2020502072.tif 000094
式中、
Ｔ１およびＴ２のうちの１つはＯＲ１またはＯＲ２であり；
Ｔ１およびＴ２の他方はＯＲ１またはＯＲ２であり；
Ｒ１はＨまたはヒドロキシル保護基であり、
Ｒ２はリン部分であり；ならびに、
Ｂｘは核酸塩基であり、好ましくは前記Ｂｘはプリン塩基またはピリミジン塩基から選択され、さらに好ましくはＢｘはウラシル、チミン、シトシン、５−メチルシトシン、アデニンまたはグアニンから選択される、化合物。
【請求項２】
前記式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩ）の化合物であって、
【化２】
2020502072.tif 000095
式中、
（ｉ）Ｔ１はＯＲ１であり、Ｔ２はＯＲ１もしくはＯＲ２であるか；または
（ｉｉ）Ｔ１はＯＲ１もしくはＯＲ２であり、Ｔ２はＯＲ１であり：
好ましくはＴ１はＯＲ１またはＯＲ２であり、Ｔ２はＯＲ１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩＩ）の化合物であって、
【化３】
2020502072.tif 000096
式中、
（ｉ）Ｔ１はＯＲ１であり、Ｔ２はＯＲ１もしくはＯＲ２であるか；または
（ｉｉ）Ｔ１はＯＲ１もしくはＯＲ２であり、Ｔ２はＯＲ１であり：
好ましくはＴ１はＯＲ１であり、Ｔ２はＯＲ１またはＯＲ２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
前記リン部分Ｒ２はホスフェート部分、ホスホラミデート部分およびホスホラミダイト部分から選択される、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
前記化合物は下記から選択される、請求項１に記載の化合物：
【化４】
2020502072.tif 000097
2020502072.tif 000098
2020502072.tif 000099
【請求項６】
少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物を含むオリゴマーであって、
【化５】
2020502072.tif 000100
式中、前記少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物の各々に対して独立して
Ｔ３またはＴ４のうちの１つはヌクレオシド連結基であり；
Ｔ３およびＴ４の他方はＯＲ１、ＯＲ２、５’末端基、７’末端基またはヌクレオシド連結基であり、Ｒ１はＨまたはヒドロキシル保護基であり、Ｒ２はリン部分であり；
Ｂｘは核酸塩基であり；好ましくはＢｘはプリン塩基またはピリミジン塩基から選択され、さらに好ましくはＢｘはウラシル、チミン、シトシン、５−メチルシトシン、アデニンまたはグアニンから選択される、オリゴマー。
【請求項７】
前記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であって、
【化６】
2020502072.tif 000101
式中、
（ｉ）Ｔ３はヌクレオシド連結基であり、Ｔ４は７’末端基、ＯＲ１、もしくはＯＲ２であり、好ましくはＴ４は７’末端基もしくはＯＲ１であるか；または
（ｉｉ）Ｔ３は５’末端基、ＯＲ１、もしくはＯＲ２であり、好ましくはＴ３は５’末端基もしくはＯＲ２であり；
Ｔ４はヌクレオシド連結基であるか；または
（ｉｉｉ）Ｔ３およびＴ４は互いに独立してヌクレオシド連結基である、請求項６に記載のオリゴマー。
【請求項８】
前記式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物であって、
【化７】
2020502072.tif 000102
式中、
（ｉ）Ｔ３はヌクレオシド連結基であり、Ｔ４は７’末端基、ＯＲ１、もしくはＯＲ２であり、好ましくはＴ４は７’末端基もしくはＯＲ２であるか；または
（ｉｉ）Ｔ３は５’末端基、ＯＲ１、もしくはＯＲ２であり、好ましくはＴ３は５’末端基もしくはＯＲ１であり；
Ｔ４はヌクレオシド連結基であるか；または
（ｉｉｉ）Ｔ３およびＴ４は互いに独立してヌクレオシド連結基である、請求項６に記載のオリゴマー。
【請求項９】
各ヌクレオシド連結基は互いに独立して、ホスホジエステル連結基、ホスホトリエステル連結基、ホスホロチオエート連結基、ホスホロジチオエート連結基、ホスホネート連結基、ホスホノチオエート連結基、ホスフィナート連結基、ホスホルチオアミデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｔｈｉｏａｍｉｄａｔｅ）連結またはホスホラミデート連結基から選択され、好ましくは各ヌクレオシド連結基は互いに独立して、ホスホジエステル連結基またはホスホロチオエート連結基であり、さらに好ましくは各ヌクレオシド連結基はホスホロチオエート連結基である、請求項６〜８のいずれか一項に記載のオリゴマー。
【請求項１０】
少なくとも２つの連続した式（ＩＶ）の化合物を含むか、または好ましくはこれから構成され、前記連続した式（ＩＶ）の化合物の各々は、前記隣接する連続した式（ＩＶ）の化合物に前記ヌクレオシド連結基により独立して連結され、前記ヌクレオシド連結基は、２つの連続した式（ＩＶ）の化合物の５’末端および７’末端を連結させる、請求項６〜９のいずれか一項に記載のオリゴマー。
【請求項１１】
前記オリゴマーは少なくとも１つの核酸配列を含むか、または好ましくはこれから構成され、前記核酸配列は、前記少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物を含み、前記核酸配列は配列番号１〜２４のいずれか１つ、好ましくは配列番号２４から選択される、請求項６〜１０のいずれか一項に記載のオリゴマー。
【請求項１２】
前記オリゴマーは核酸配列を含み、前記核酸配列は少なくとも２つの連続した式（Ｖ）の化合物から構成され、前記核酸配列はその５’末端およびその７’末端で前記式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接しており、
前記核酸配列の５’末端は前記式（ＩＶ）の化合物とは異なる前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドの５’末端に連結され、前記核酸配列の７’末端は前記式（ＩＶ）の化合物とは異なる前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドの３’末端に連結される、請求項６、７、９〜１１のいずれか一項に記載のオリゴマー。
【請求項１３】
前記オリゴマーは核酸配列を含み、前記核酸配列は少なくとも２つの連続した式（ＶＩ）の化合物から構成され、前記核酸配列はその５’末端およびその７’末端でそれぞれ、前記式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接しており、
前記核酸配列の５’末端は前記式（ＩＶ）の化合物とは異なる前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドの３’末端に連結され、前記核酸配列の７’末端は前記式（ＩＶ）の化合物とは異なる前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドの５’末端に連結される、請求項６、８〜１１のいずれか一項に記載のオリゴマー。
【請求項１４】
前記式（ＩＶ）の化合物は下記から選択される、請求項６〜１３のいずれか一項に記載のオリゴマー：
【化８】
2020502072.tif 000103
2020502072.tif 000104
【請求項１５】
疾患の予防、治療または診断における薬剤としての使用のための、好ましくは前記疾患は筋ジストロフィーであり、さらに好ましくは前記疾患はＤｕｃｈｅｎｎｅ型筋ジストロフィーである、請求項６〜１４のいずれか一項に記載のオリゴマー。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規二環式ヌクレオシドおよびそれから調製されたオリゴマーに関する。特に、本発明は、式（Ｉ）の化合物、少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物を含むオリゴマー、疾患の予防、治療または診断における薬剤としての使用のための本発明の化合物またはオリゴマー、および本発明の少なくとも１つの化合物または少なくとも１つのオリゴマーを含む医薬組成物に関する。本発明はまた、標的核酸配列に結合するための本発明のオリゴマーのインビトロ使用および本発明のオリゴマーの固相合成のための方法を示す。
【背景技術】
【０００２】
アンチセンス療法は、革新的薬物の開発のための重要なプラットフォームとして成熟してきた。一本鎖ＲＮＡまたは二本鎖ＤＮＡへ強く配列特異的な結合を示し、酵素分解に対する耐性を示すオリゴヌクレオチド類似体は、タンパク質発現の阻害剤またはモジュレーターとしての治療応用のための有望な候補である。化学修飾されたヌクレオシドは、ヌクレアーゼ耐性、薬物動態または標的ＲＮＡに対する親和性などの特性を増強させるためにアンチセンス化合物に組み込まれる。
【０００３】
近年、合成生物学の分野は、本来使用される公知の分子成分に頼らない改善された効力および有効性を有するアンチセンス系を開発するという一般目標をもって進化してきた。この目標を達成するための基本的な要件は、天然ＤＮＡまたはＲＮＡの機能を果たす、しばしばゼノ核酸（ＸＮＡ）と呼ばれる人工遺伝子ポリマーの開発である（Ｈｅｒｄｅｗｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ  ２００９，  ６，  ７９１）。そのような系の利用能およびそれらの生体中への組み込みは、それらにバイオテクノロジーおよび医薬の分野において興味深い新規特性を授けると予想される。
【０００４】
最近の３０年にわたって現れた核酸修飾の膨大なレパートリーから、一握りの候補が、別の遺伝子材料としてのそれらの適合性に対して検査されている。最小化学的変化により非天然成分を天然遺伝機構に導入しようとして、Ｅ．ｃｏｌｉ株のゲノム中のチミジンは、進化過程において最小残留チミジン含量まで、５−クロロウリジンにより置き換えることができることが示されている（Ｍａｒｌｉｅｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ，  Ｉｎｔ．  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ２０１１，  ５０，  ７１０９）。異なるアプローチでは、非天然核酸、例えば１，５−アンヒドロヘキシトール核酸（ＨＮＡ；Ｈｅｎｄｒｉｘ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  １９９７，  ３，  １１０）およびシクロヘキセン核酸（ＣｅＮＡ；Ｎａｕｗｅｌａｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  ２００５，  ３３，  ２４５２）、フルオロアラビノオリゴヌクレオチド（ＦＡＮＡ；Ｗｉｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  ２０００，  ２８，  ３６２５）、アラビノ核酸（ＡＮＡ；Ｄａｍｈａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  １９９８，  １２０，  １２９７６）、トレオース核酸（ＴＮＡ；Ｓｃｈｏｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２０００，  ２９０，  １３４７）およびロックド核酸（ＬＮＡ；Ｋｏｓｈｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  １９９８，  １２０，  １３２５２；  Ｏｂｉｋａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．  １９９８，  ３９，  ５４０１）は、ＤＮＡ−ポリメラーゼにより、ＤＮＡから転写させ、これに逆転写させることができることが報告されている。
【０００５】
別のアプローチでは、ＲＮＡおよびＤＮＡのバックボーン構造は、３’から２’酸素へのヌクレオシド間リン酸単位の糖への付着点を変化させることにより変更されている（２’，５’−ＤＮＡまたは２’，５’−ＲＮＡ）。２’，５’−ＲＮＡは天然起源生体高分子であるが、細菌中で２’，５’ポリアデニレートの形態で最初に見出され、２’，５’−ＤＮＡは人工である（Ｔｒｕｊｉｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  １９８７，  １６９，  １６７）。両方のポリマーの対形成および複製特性は過去に調査されている。２’，５’−ＲＮＡは相補的ＲＮＡに結合するが、ＤＮＡには結合しないことが見出された。ＲＮＡとの二本鎖は、純粋ＲＮＡ二本鎖と比べてわずかに安定ではなく、純粋２’，５’−ＲＮＡシリーズにおける二本鎖は、存在するが、さらに安定ではない（Ｗａｓｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９８，  ３７，  ７４７８）。加えて、プライマーテンプレート伸長実験において、テンプレート上の最大４つの２’，５’−連結ヌクレオチドのストレッチは、２’，５’−ＤＮＡの天然ＤＮＡへの著しい親和性が存在しなくても、ポリメラーゼまたは逆転写酵素を用いてＤＮＡに逆転写させることができることが示された（Ｓｉｎｈａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ２００４，  １２６，  ４０）。
【０００６】
相補的天然核酸との複合体形成をエントロピー的に安定化するために、中心Ｃ（３’）とＣ（５’）間に配置された追加のエチレン架橋により天然ＤＮＡとは異なる二環式ＤＮＡ類似体が設計されている。連結ホスホジエステルユニットの付着点は、天然起源核酸、すなわち３’および５’末端と同じである。この炭素骨格の変化により、糖コンホメーションがロックされ、このため、ビシクロ−デオキシヌクレオシドは二本鎖形成のための一本鎖のより高度な前組織化を示すこととなる。ビシクロ−デオキシアデノシンおよびビシクロ−チミジンの十量体はそれらの天然ＲＮＡおよびＤＮＡ相補体に、ならびに互いに結合し、二重および三重らせん構造を形成する。天然ＤＮＡと比べて、二本鎖形成は、低減された対形成エンタルピーおよびエントロピー条件と関連し、二本鎖形成の自由エネルギーに対して補償効果を有する（Ｂｏｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  １９９６，  ２４，  ４６６０）。
【０００７】
アンチセンス分野での３０年を超える研究にもかかわらず、臨床応用は、このクラスの化合物の低い生体内安定性、不十分な薬物動態特性およびオフターゲット毒性により、依然として制限される。
【０００８】
よって、インビボでの酵素分解に耐性があり、核酸に対して強く配列特異的な結合を示すアンチセンス化合物が依然として必要とされている。
【発明の概要】
【０００９】
第１の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物を提供し：
【化１】
2020502072.tif 000003
式中、Ｔ１およびＴ２のうちの１つはＯＲ１またはＯＲ２であり；
Ｔ１およびＴ２の他方はＯＲ１またはＯＲ２であり；
Ｒ１はＨまたはヒドロキシル保護基であり、
Ｒ２はリン部分であり；ならびに、式中、
Ｂｘは核酸塩基である。
【００１０】
第２の態様では、本発明は少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物を含むオリゴマーを提供し
【化２】
2020502072.tif 000004
式中、上記少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物の各々に対して独立して
Ｔ３またはＴ４のうちの１つはヌクレオシド連結基であり；
Ｔ３およびＴ４の他方はＯＲ１、ＯＲ２、５’末端基、７’末端基またはヌクレオシド連結基であり、Ｒ１はＨまたはヒドロキシル保護基であり、Ｒ２はリン部分であり；Ｂｘは核酸塩基である。
【００１１】
第３の態様では、本発明は、疾患の予防または治療における薬剤として使用するための式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の本発明の化合物または本発明のオリゴマーを提供する。
【００１２】
さらなる態様では、本発明は、疾患の予防、治療または診断における薬剤としての使用のための、本発明のオリゴマー、好ましくは式（Ｖ）の本発明のオリゴマーを提供し、上記疾患は筋ジストロフィーであり、好ましくは上記疾患はＤｕｃｈｅｎｎｅ型筋ジストロフィーである。
【００１３】
さらなる態様では、本発明は、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）から選択される少なくとも１つの化合物または少なくとも１つの本発明のオリゴマーを含む医薬組成物を提供する。
【００１４】
さらなる態様では、本発明のオリゴマーは標的核酸配列に結合するためにインビトロで使用される。
【００１５】
さらなる態様では、本発明は、本発明のオリゴマーの固相合成のための方法を提供する。
【００１６】
本明細書で記載される本発明は、新化合物を提供し、他の実体への連結のために使用される基、例えばヌクレオシド連結基の位置は、先行技術の化合物と比べてシフトされる。よって、本発明の化合物はその二環糖の５’末端および７’末端を介してヌクレオシドまたはヌクレオチドなどの他の実体に連結させることができ、または連結される（図１Ｃおよび図１Ｄ）。対照的に、先行技術では、二環糖を含む公知のヌクレオシドもしくはヌクレオチド（図１Ｂ）にしろ、または天然ＤＮＡもしくはＲＮＡ（図１Ａ）においても、ヌクレオシドまたはヌクレオチドは３’および５’末端を介して連結される。
【００１７】
そのシフトされた連結の結果として、オリゴマー内の本発明の化合物のバックボーン幾何学が変化する。この変化したバックボーン幾何学が今度は、天然核酸ヘリックスのそれとは異なる本発明の化合物の核酸塩基スタッキングを誘導する。その結果として、本発明のオリゴマーは、天然ＤＮＡのそれとは明確に異なるヘリックスコンホメーションを採用する。さらに、これらの所見に基づき、二本鎖構造を形成する本発明のオリゴマーは、従来の古典的二本鎖から外れた幾何学を有すると予測される。
【００１８】
バックボーン幾何学および核酸塩基スタッキングの変化にもかかわらず、本発明者らは驚くべきことに、本発明のオリゴマーが天然ＤＮＡおよびＲＮＡとのクロス対形成し、本発明のオリゴマーの自己二本鎖は、天然ＤＮＡ二本鎖のそれと同じ範囲にある熱安定性を示すことを見出した。その結果として、本発明のオリゴマーは、天然ＤＮＡの機能を果たすことができる新規ゼノ核酸となるのに必要な構造および塩基対形成特性を有する。その上、本発明のオリゴマーは、その天然ＤＮＡ対応物と比べて、同等の塩基対形成選択性を示し、さらに良好なミスマッチ識別能力を有する。ミスマッチ識別が増加すると、典型的には、可能性のあるオフターゲット効果が低減し、そのため、アンチセンス候補に魅力的な特性を表す。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】Ａ）α−単環式ＤＮＡ；Ｂ）二環式（ｂｃ−）ＤＮＡ；Ｃ）７’，５’−β−ｂｃ−ＤＮＡ、すなわち本発明の式（ＩＩＩ）の化合物；Ｄ）７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡ、すなわち本発明の式（ＩＩ）の化合物を示す。
【図２】７’，５’−β−ｂｃ−ＤＮＡ、すなわち左側に示される本発明の式（ＩＩＩ）の化合物と、７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡ、すなわち右側に示される本発明の式（ＩＩ）の化合物との比較を示す。
【図３】ａ）５’−Ｏ−ｐ−ニトロベンゾイル−７’，５’−α−ｂｃ−Ｔ、ｂ）５’−Ｏ−アセチル−７’，５’−α−ｂｃ−ＧＡｃのＸ線構造を示す。非極性水素原子は明確にするために省略される。
【図４】β−ＤＮＡの内側での極性逆転を有する７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡの挿入を示す。
【図５】対応する天然ＤＮＡ二本鎖と比較した、完全修飾平行（オリゴヌクレオチドＯＮ２２；配列番号２２）および逆平行（オリゴヌクレオチドＯＮ２３；配列番号２３）相補体と、平行ＤＮＡおよび平行ＲＮＡと、オリゴヌクレオチドＯＮ２１（配列番号２１）とのＵＶ−融解曲線（２６０ｎｍ）を示す。総ストランド濃度：１０ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ中２μＭ、ｐＨ７．０。
【図６】２０℃での二本鎖ａ）ＤＮＡ・ＲＮＡ、ｂ）ＯＮ２１・ＲＮＡおよびｃ）ＯＮ２１・ＤＮＡｄ）ＯＮ２１・ＯＮ２２のＣＤ−スペクトルを示す。実験条件：総ストランド濃度：１０ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ中２μＭ、ｐＨ７．０。
【図７】ゲルの切り取った写真を示す。ａ）ＤＮＡ対照実験；ｂ）１時間ｃ）２時間ｄ）４時間ｅ）２４時間後のＤＮＡ消化反応；ｆ）オリゴヌクレオチドＯＮ２１を用いた対照実験；ｇ）１時間ｈ）２時間ｉ）４時間ｊ）２４時間後のＯＮ２１消化反応。
【図８】Ｃ３補体活性化の結果；ＰＯはリン酸ヌクレオシド連結を示し、ＰＳはホスホロチオエートヌクレオシド連結を示し、ｂｃ−ＤＮＡは７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡ足場を示し、ｔｃ−ＤＮＡはトリシクロ足場を示す。各測定は少なくとも３回繰り返した。配列は５つのＯＮについて同様である。
【図９】ＰＳ−α−ｂｃ−ＤＮＡまたはＰＳ−ｔｃ−ＤＮＡとのインキュベーション後のｍＲＮＡ発現レベルの比較を示す。配列は２つのＯＮについて同様である。略語は図８において言及される通りである。
【図１０】７’−Ｏ−ｐ−ニトロベンゾイル−７’，５’−β−ｂｃ−ＴのＸ線構造を示す。水素原子は明確にするために省略される。
【図１１】対応する天然ＤＮＡ二本鎖と比較した、ホモ７’，５’−β−ｂｃ−ＤＮＡ二本鎖のＵＶ−融解曲線（２６０ｎｍ）を示す。総ストランド濃度：１０ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ中２μＭ、ｐＨ７．０。
【図１２】１０〜８０℃の温度での、３つの二本鎖ａ）ＯＮ１３・ＯＮ１４、ｂ）ＯＮ１３・ＤＮＡおよびｃ）ＤＮＡ・ＤＮＡのＣＤ−スペクトルを示す。実験条件：総ストランド濃度  １０ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、１Ｍ  ＮａＣｌ中２μＭ、ｐＨ７．０、１０℃。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
別に規定されない限り、本明細書で使用される全ての技術および科学用語は、本発明が属する当業者により普通に理解されるものと同じ意味を有する。
【００２１】
本明細書で同じ意味で使用される「アミノのための保護基」、「アミノ基のための保護基」、または「アミノ保護基」という用語は当技術分野でよく知られており、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｔ．  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ，  第３版，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  １９９９，  Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ，  第５版，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  ２０１４，およびＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｓ．  Ｌ．  Ｂｅａｕｃａｇｅ    ｅｔ  ａｌ．により編集  ０６／２０１２、およびここでは、特に第２章において詳細記載されているものを含む。本発明のために好適な「アミノ保護基」は、メチルカルバメート、エチルカルバメート、９−フルオレニルメチルカルバメート（Ｆｍｏｃ）、９−（２−スルホ）フルオレニルメチルカルバメート、２，７−ジ−ｔ−ブチル−［９−（１０，１０−ジオキソ−１０，１０，１０，１０−テトラヒドロチオキサンチル）］メチルカルバメート（ＤＢＤ−Ｔｍｏｃ）、４−メトキシフェナシルカルバメート（Ｐｈｅｎｏｃ）、２，２，２−トリクロロエチルカルバメート（Ｔｒｏｃ）、２−トリメチルシリルエチルカルバメート（Ｔｅｏｃ）、２−フェニルエチルカルバメート（ｈＺ）、１，１−ジメチル−２，２−ジブロモエチルカルバメート（ＤＢ−ｔ−ＢＯＣ）、１，１−ジメチル−２，２，２−トリクロロエチルカルバメート（ＴＣＢＯＣ）、ベンジルカルバメート（Ｃｂｚ）、ｐ−メトキシベンジルカルバメート（Ｍｏｚ）および２，４，６−トリメチルベンジルカルバメート；ならびにホルムアミド、アセトアミド、ベンズアミドを含み、典型的に、かつ好ましくは、各出現において独立してこれらから選択される。
【００２２】
本明細書で同じ意味で使用される「ヒドロキシルのための保護基」、「ヒドロキシル基のための保護基」、または「ヒドロキシル保護基」という用語は当技術分野でよく知られており、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｔ．  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ，  第３版，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  １９９９；  Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ，  第５版，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  ２０１４，およびＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｓ．  Ｌ．  Ｂｅａｕｃａｇｅ  ｅｔ  ａｌ．により編集  ０６／２０１２、およびここでは特に第２章において詳細に記載されるものを含む。ある一定の実施形態では、本発明の「ヒドロキシル保護基」は、アセチル、ベンゾイル、ベンジル、β−メトキシエトキシメチルエーテル（ＭＥＭ）、ジメトキシトリチル、［ビス−（４−メトキシフェニル）フェニルメチル］（ＤＭＴｒ）、メトキシメチルエーテル（ＭＯＭ）、メトキシトリチル［（４−メトキシフェニル）ジフェニルメチル］（ＭＭＴ）、ｐ−メトキシベンジルエーテル（ＰＭＢ）、メチルチオメチルエーテル、ピバロイル（Ｐｉｖ）、テトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トリチル（トリフェニルメチル、Ｔｒ）、シリルエーテル、例えばｔ−ブチルジフェニルシリルエーテル（ＴＢＤＰＳ）、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、ｔｒｉ−イソ−プロピルシリルオキシメチル（ＴＯＭ）、およびトリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）エーテル；メチルエーテル、エトキシエチルエーテル（ＥＥ）を含み、典型的に、かつ好ましくは、各出現において独立してこれらから選択される。
【００２３】
好ましい実施形態では、本発明の「ヒドロキシル保護基」は、アセチル、ｔ−ブチル、ｔ−ブトキシメチル、メトキシメチル、テトラヒドロピラニル、１−エトキシエチル、１−（２−クロロエトキシ）エチル、２−トリメチルシリルエチル、ｐ−クロロフェニル、２，４−ジニトロフェニル、ベンジル、ベンゾイル、ｐ−フェニルベンゾイル、２，６−ジクロロベンジル、ジフェニルメチル、ｐ−ニトロベンジル、トリフェニルメチル（トリチル）、４，４’−ジメトキシトリチル、トリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、ｔ−ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）、トリフェニルシリル、トリイソプロピルシリル、ベンゾイルギ酸、クロロアセチル、トリクロロアセチル、トリフルオロ（ｔｒｉｆｉｕｏｒｏ）アセチル、ピバロイル、９−フルオレニルメチルカーボネート、メシレート、トシレート、トリフラート、４−モノメトキシトリチル（ＭＭＴｒ）、４，４’ジメトキシトリチル、（ＤＭＴｒ）および４，４’，４’’−トリメトキシトリチル（ＴＭＴｒ）、２−シアノエチル（ＣＥまたはＣｎｅ）、２−（トリメチルシリル）エチル（ＴＳＥ）、２−（２−ニトロフェニル）エチル、２−（４−シアノフェニル）エチル２−（４−ニトロフェニル）エチル（ＮＰＥ）、２−（４−ニトロフェニルスルホニル）エチル、３，５−ジクロロフェニル、２，４−ジメチルフェニル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、２，４，６−トリメチルフェニル、２−（２−ニトロフェニル）エチル、ブチルチオカルボニル、４，４’，４’’−トリス（ベンゾイルオキシ）トリチル、ジフェニルカルバモイル、レブリニル（ｌｅｖｕｌｉｎｙｌ）、２−（ジブロモメチル）ベンゾイル（Ｄｂｍｂ）、２−（イソプロピルチオメトキシメチル）ベンゾイル（Ｐｔｍｔ）、９−フェニルキサンテン−９−イル（ｐｉｘｙｌ）または９−（ｐ−メトキシフェニル）キサンチン−９−イル（ＭＯＸ）を含み、典型的に、かつ好ましくは、各出現において独立してこれらから選択される。
【００２４】
いくつかの実施形態では、ヒドロキシル保護基は、各出現において独立して、アセチル、ベンジル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、トリチル、４−モノメトキシトリチル、４，４’−ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）、４，４’，４’’−トリメトキシトリチル（ＴＭＴｒ）、９−フェニルキサンチン−９−イル（Ｐｉｘｙｌ）および９−（ｐ−メトキシフェニル）キサンチン−９−イル（ＭＯＸ）から選択される。好ましい実施形態では、ヒドロキシル保護基は、各出現において独立して、トリフェニルメチル（トリチル）、４−モノメトキシトリチル、４，４’−ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）、４，４’，４’’−トリメトキシトリチル（ＴＭＴｒ）、９−フェニルキサンチン−９−イル（Ｐｉｘｙｌ）および９−（ｐ−メトキシフェニル）キサンチン−９−イル（ＭＯＸ）から選択される。さらに好ましい実施形態では、ヒドロキシル保護基は、各出現において独立して、トリチル、４−モノメトキシトリチルおよび４，４’−ジメトキシトリチル基から選択される。非常に好ましい実施形態では、上記ヒドロキシル保護基は、各出現において独立して、トリフェニルメチル（トリチル）、４−モノメトキシトリチル、４，４’−ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）、４，４’，４’’−トリメトキシトリチル（ＴＭＴｒ）、９−フェニルキサンチン−９−イル（Ｐｉｘｙｌ）および９−（ｐ−メトキシフェニル）キサンチン−９−イル（ＭＯＸ）から選択される。より好ましい実施形態では、本発明のヒドロキシル保護基はアセチル、ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、トリ−イソ−プロピルシリルオキシメチル（ＴＯＭ）、またはｔ−ブチルジフェニルシリルエーテル（ＴＢＤＰＳ）である。重ねて非常に好ましい実施形態では、上記ヒドロキシル保護基は各出現において独立して４，４’−ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）または４−モノメトキシトリチルから選択される。重ねてさらに非常に好ましい実施形態では、上記ヒドロキシル保護基は４、４’−ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）である。
【００２５】
「リン部分」という用語は、本明細書では、ＰＩＩＩまたはＰＶ価電子状態のリン原子を含む部分を示し、これは式（ＶＩＩ）により表され
【化３】
2020502072.tif 000005
式中、
ＷはＯ、ＳもしくはＳｅを表し、またはＷは電子対を表し；
Ｒ３およびＲ４は互いに独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、ＯＲ５、ＮＲ６Ｒ７、ＳＨ、ＳＲ８、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アミノアルキルであり；Ｒ５はＣ１−Ｃ９アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アセチル；ヒドロキシル保護基であり；Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アリール（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アミノ保護基であるか；または、それらが付着している窒素原子と一緒に複素環を形成し、好ましくは上記複素環はピロリジニル（ｐｙｒｏｌｌｉｄｉｎｙｌ）、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびホモピペラジンから選択され、上記複素環はＣ１−Ｃ３アルキルで任意で置換され；ならびに、Ｒ８はチオール保護基であり；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。ＷがＯ、ＳまたはＳｅを表す場合、上記リン部分内の上記Ｐ原子はそのＰＶ価電子状態にある。Ｗが電子対を表す場合、そうすると、上記リン部分内の上記Ｐ原子はそのＰＩＩＩ原子価にある。式（ＶＩＩ）の部分は任意の可能な立体異性体を含む。式（ＶＩＩ）により表される上記部分にはその塩がさらに含まれ、典型的におよび好ましくは、上記塩は、無機塩基またはアミンを用いた処理で形成され、典型的におよび好ましくは、（互いに独立して）上記Ｒ３およびＲ４であるＯＨまたはＳＨ基との反応から誘導される塩である。ＯＨまたはＳＨ基との上記塩形成につながる好ましい無機塩基またはアミンは当技術分野でよく知られており、典型的におよび好ましくは、トリメチルアミン、ジエチルアミン、メチルアミンまたは水酸化アンモニウムである。本発明に含まれるこれらのリン部分はまた、適切な場合、「Ｏ−ＨＢ＋」として省略され、上記ＨＢ＋は形成される対カチオンを示す。
【００２６】
好ましい実施形態では、「リン部分」では、Ｒ３およびＲ４は互いに独立して、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ５、ＮＲ６Ｒ７、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アミノアルキルであり；Ｒ５はＣ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲンで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール（各々互いに独立してシアノ、ニトロ、ハロゲンで任意で置換される）；アセチル；ヒドロキシル保護基であり；Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲンで任意で置換される）；アリール（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アミノ保護基であり；ならびに、Ｒ８はチオール保護基であり；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。
【００２７】
「リン部分」という用語は、本明細書では、ホスホネート、ホスファイトトリエステル、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスフェートトリエステル、ホスフェートジエステル、チオホスフェートエステル、ジチオホスフェートエステルまたはホスホラミダイト由来の部分を含み、典型的にかつ好ましくは、各出現において独立してそれらから選択される。
【００２８】
よって、好ましい実施形態では、上記ＯＲ２は、各出現において独立してホスホネート、ホスファイトトリエステル、モノホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、ホスフェートトリエステル、ホスフェートジエステル、チオホスフェートエステル、ジチオホスフェートエステルまたはホスホラミダイトから選択され、好ましくは上記ＯＲ２はホスホラミダイトまたはホスフェートトリエステル、より好ましくはホスホラミダイトである。
【００２９】
好ましい実施形態では、リン部分は、式（ＶＩＩ）により表されるホスホネートから誘導され、式中、ＷはＯであり、Ｒ３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アミノアルキルから選択され、Ｒ４はＯＨまたはＯ−ＨＢ＋であり；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。別の実施形態では、式（ＶＩＩ）のリン部分はＨ−ホスホネートであり、ＷはＯであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４はＯＨまたはＯ−ＨＢ＋であり；ならびに、好ましくは上記Ｏ−ＨＢ＋はＨＮＥｔ３＋である。さらなる実施形態では、式（ＶＩＩ）のリン部分はアルキル−ホスホネートであり、ＷはＯであり、Ｒ３はアルキルであり、Ｒ４はＯＨまたはＯ−ＨＢ＋であり；ならびに、好ましくは上記Ｏ−ＨＢ＋はＨＮＥｔ３＋である。より好ましくは、式（ＶＩＩ）のリン部分はメチル−ホスホネートであり、ＷはＯであり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４はＯＨまたはＯ−ＨＢ＋であり；ならびに好ましくは上記Ｏ−ＨＢ＋はＨＮＥｔ３＋である。別の実施形態では、式（ＶＩＩ）のリン部分はホスホノカルボキシレートであり、Ｒ３またはＲ４は互いに独立してカルボン酸である。好ましくは、上記ホスホノカルボキシレートはホスホノ酢酸またはホスホノギ酸である。さらなる実施形態では、式（ＶＩＩ）のリン部分は２−アミノエチル−ホスホネートである。
【００３０】
好ましい実施形態では、式（ＶＩＩ）のリン部分のＲ３およびＲ４は互いに独立してＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＯＲ５、ＮＲ６Ｒ７、ＳＨ、ＳＲ８、Ｃ１−Ｃ４アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、好ましくはＣ１−Ｃ２ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、好ましくはＣ１−Ｃ２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、好ましくはＣ１−Ｃ２ハロアルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アミノアルキル、好ましくはＣ１−Ｃ２アミノアルキルであり；Ｒ５はＣ１−Ｃ６アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ３アルキル（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ３アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ３アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アセチル；ヒドロキシル保護基であり；Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ４アルキル（各々互いに独立してシアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アリール（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アミノ保護基であるか；または、それらが付着している窒素原子と一緒に複素環を形成し、好ましくは、上記複素環はピロリジニル（ｐｙｒｏｌｌｉｄｉｎｙｌ）、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびホモピペラジンから選択され、上記複素環はＣ１−Ｃ３アルキルで任意で置換され；ならびに、Ｒ８はチオール保護基であり；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。
【００３１】
別の好ましい実施形態では、式（ＶＩＩ）のリン部分のＲ３またはＲ４は各出現において互いに独立して、ハロゲン、好ましくは塩素、またはＯＲ５であり、Ｒ５はヒドロキシル保護基である。本発明において使用される追加のリン部分はＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｒｅｐｏｒｔ  Ｎｕｍｂｅｒ  ３０９  （Ｂｅａｕｃａｇｅ  ａｎｄ  Ｉｙｅｒ，  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，  １９９２，  ４８，  ２２２３−２３１１）において開示される。
【００３２】
「リン部分」という用語は、本明細書では、好ましくは、ＰＩＩＩまたはＰＶ価電子状態のリン原子を含み、各出現において独立して式（ＶＩＩＩ）、式（ＩＸ）または式（Ｘ）のいずれかにより表される基Ｒ２を示し、
【化４】
2020502072.tif 000006
式中、ＹはＯ、ＳまたはＳｅであり、Ｙは好ましくはＯまたはＳであり、より好ましくはＹはＯであり；式中、Ｒ５およびＲ５’は各出現において互いに独立して水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；ヒドロキシル保護基であり；Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アリール、好ましくはフェニル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アミノ保護基であるか；または、それらが付着している窒素原子と一緒に複素環を形成し、好ましくは上記複素環はピロリジニル（ｐｙｒｏｌｌｉｄｉｎｙｌ）、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびホモピペラジンから選択され、上記複素環はＣ１−Ｃ３アルキルで任意で置換され；ならびに、Ｒ８はチオール保護基であり；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。
【００３３】
好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（ＶＩＩＩ）により表され
【化５】
2020502072.tif 000007
式中、ＹはＯ、ＳまたはＳｅであり、Ｙは好ましくはＯまたはＳであり、最も好ましくはＹはＯであり；式中、Ｒ５およびＲ５’は各出現において互いに独立して水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；ヒドロキシル保護基；Ｐ（Ｏ）（ＯＲ９）（ＯＲ９’）、Ｐ（Ｏ）ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ９）（ＯＲ９’）であり；Ｒ９およびＲ９’は各出現において互いに独立して水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；ヒドロキシル保護基であり；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。
【００３４】
好ましい実施形態では、式（ＶＩＩＩ）のＲ５およびＲ５’は各出現において互いに独立して水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、好ましくはＣ１−Ｃ２アルコキシ（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、好ましくはフェニル、Ｃ１−Ｃ４アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ４アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；ヒドロキシル保護基である。
【００３５】
好ましい実施形態では、式（ＶＩＩＩ）のＲ５およびＲ５’は互いに独立してＣ１−Ｃ４アルキルまたはアリール、好ましくはフェニルである。別の好ましい実施形態では、式（ＶＩＩＩ）のＲ５およびＲ５’は互いに独立してメチルまたはエチルである。さらに好ましい実施形態では、式（ＶＩＩＩ）のＲ５およびＲ５’は互いに独立してフェニルまたはベンジルである。別の好ましい実施形態では、Ｒ５およびＲ５’は各出現において互いに独立して水素またはヒドロキシル保護基、好ましくはヒドロキシル保護基である。好ましい実施形態では、式（ＶＩＩＩ）では、Ｒ５およびＲ５’は各出現において互いに独立して水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々互いに独立してシアノ、ニトロ、ハロゲンで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール（各々互いに独立してシアノ、ニトロ、ハロゲンで任意で置換される）；またはヒドロキシル保護基である。典型的におよび好ましくは、式（ＶＩＩＩ）により表される上記リン部分Ｒ２は本明細書では「ホスフェート部分」と呼ばれる。
【００３６】
好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（ＩＸ）により表され
【化６】
2020502072.tif 000008
式中、
ＹはＯ、ＳまたはＳｅであり、Ｙは好ましくはＯまたはＳであり、最も好ましくはＹはＯであり；式中、
Ｒ５は各出現において独立して水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；ヒドロキシル保護基であり； 
Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アリール、好ましくはフェニル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アミノ保護基であるか；または、それらが付着している窒素原子と一緒に複素環を形成し、好ましくは上記複素環はピロリジニル（ｐｙｒｏｌｌｉｄｉｎｙｌ）、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびホモピペラジンから選択され、上記複素環はＣ１−Ｃ３アルキルで任意で置換され；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。典型的におよび好ましくは、式（ＩＸ）により表される上記リン部分Ｒ２は本明細書では「ホスホラミデート部分」、または、同じ意味で使用される「ホスホロアミデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏａｍｉｄａｔｅ）部分」と呼ばれる。
【００３７】
好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（Ｘ）により表され
【化７】
2020502072.tif 000009
式中、
Ｒ５は水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニル、ヒドロキシル保護基で任意で置換される）；式中、
Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）、アリール、好ましくはフェニル、（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）であるか；または、それらが付着している窒素原子と一緒に複素環を形成し、好ましくは上記複素環はピロリジニル（ｐｙｒｏｌｌｉｄｉｎｙｌ）、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびホモピペラジンから選択され、、上記複素環はＣ１−Ｃ３アルキルで任意で置換され、ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。典型的におよび好ましくは、式（Ｘ）により表される上記リン部分Ｒ２は本明細書では「ホスホラミダイト部分」または、同じ意味で使用される「ホスホロアミダイト部分」と呼ばれる。
【００３８】
好ましい実施形態では、式（ＩＸ）では、上記ＹはＯであり；上記Ｒ５は、各出現において独立して水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々互いに独立してシアノ、ニトロ、ハロゲンで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール（各々互いに独立してシアノ、ニトロ、ハロゲンで任意で置換される）；ヒドロキシル保護基であり；式中、Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ６アルケニルで任意で置換される）；アリール（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アミノ保護基であり；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。
【００３９】
好ましい実施形態では、式（Ｘ）では、上記Ｒ５は、各出現において独立して水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々互いに独立してシアノ、ニトロ、ハロゲンで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール（各々互いに独立してシアノ、ニトロ、ハロゲンで任意で置換される）；ヒドロキシル保護基であり；式中、Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ６アルケニルで任意で置換される）；アリール（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アミノ保護基であり；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。
【００４０】
非常に好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は、各出現において独立して、ホスフェート部分、ホスホラミデート部分およびホスホラミダイト部分から選択される。
【００４１】
さらに好ましい実施形態では、上記Ｒ５は、各出現において独立して水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ４アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ４アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；ヒドロキシル保護基であり；式中、Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アリール（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アミノ保護基であるか；または、それらが付着している窒素原子と一緒に複素環を形成し、好ましくは上記複素環はピロリジニル（ｐｙｒｏｌｌｉｄｉｎｙｌ）、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびホモピペラジンから選択され、上記複素環はＣ１−Ｃ３アルキルで任意で置換され；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。
【００４２】
さらに好ましい実施形態では、上記Ｒ５は、Ｃ１−Ｃ３アルキル（シアノ、塩素、フッ素または臭素で任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ３アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ３アルキレンジアリール（各々互いに独立してシアノ、ニトロ、塩素、フッ素、臭素、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、Ｃ１ハロアルキルで任意で置換される）である。より好ましい実施形態では、上記Ｒ５は、任意で、および好ましくは、シアノ、塩素、フッ素または臭素で置換された；好ましくは、シアノで置換されたＣ１−Ｃ３アルキルである。再びより好ましい実施形態では、上記Ｒ５はシアノ置換されたＣ２アルキルであり、好ましくは上記Ｒ５は-ＣＨ２ＣＨ２−ＣＮである。
【００４３】
さらに好ましい実施形態では、上記Ｒ５はＣ１−Ｃ４アルキル、好ましくはメチルまたはエチル；アリール、好ましくはフェニルまたはベンジル；塩化物またはヒドロキシル保護基である。さらに好ましい実施形態では、上記Ｒ５はメチルまたはヒドロキシル保護基である。
【００４４】
さらに好ましい実施形態では、上記Ｒ５はＣ１−Ｃ６アルコキシ（シアノ、塩素、フッ素または臭素で任意で置換される）である。
【００４５】
さらに好ましい実施形態では、上記Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、ＨもしくはＣ１−Ｃ３アルキルであるか；または、それらが付着している窒素原子と一緒に複素環を形成し、上記複素環は、ピロリジニル（ｐｙｒｏｌｌｉｄｉｎｙｌ）、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニルから選択され、上記複素環はメチルで任意で置換される。さらに好ましい実施形態では、上記Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、Ｃ１−Ｃ３アルキル、アルコキシまたはアリールであり、アリールは好ましくはフェニルまたはベンジルであり、シアノ、ニトロ、塩素、フッ素、臭素で任意で置換される。さらに好ましい実施形態では、上記Ｒ６は水素であり、Ｒ７は（ｉ）Ｃ１−Ｃ９アルキルまたは（ｉｉ）アリールであり、（ｉ）または（ｉｉ）はシアノ、ニトロ、ハロゲン、アリールで任意で置換され、好ましくはＲ７はＣ１−Ｃ３アルキル、フェニルまたはベンジルである。
【００４６】
さらに好ましい実施形態では、上記Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、メチル、エチル、イソプロピルまたはイソブチルから選択される。より好ましい実施形態では、上記Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、イソプロピルである。
【００４７】
別の非常に好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（Ｘ）により表され、上記Ｒ５は（ｉ）Ｃ１−Ｃ９アルキル；（ｉｉ）アリール、好ましくはフェニル；または（ｉｉｉ）シアノ、ニトロ、ハロゲン、アリールで任意で置換される上記（ｉ）もしくは上記（ｉｉ）であり；上記Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、Ｃ１−Ｃ９アルキル、好ましくはイソプロピルである。
【００４８】
別の非常に好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（Ｘ）により表され、Ｒ５はＣ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）であり；Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、Ｃ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）、フェニル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）であるか；または、それらが付着している窒素原子と一緒に複素環を形成し、好ましくは上記複素環はピロリジニル（ｐｙｒｏｌｌｉｄｉｎｙｌ）、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびホモピペラジンから選択され、上記複素環はＣ１−Ｃ３アルキルで任意で置換され；ならびに式中、波線は上記ＯＲ２基の酸素の付着を示す。
【００４９】
別の非常に好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（Ｘ）により表され、上記Ｒ５はＣ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、塩素、フッ素、臭素、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンジアリール（互いに独立して、シアノ、ニトロ、塩素、フッ素、臭素、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキルで任意で置換される）である。
【００５０】
別の非常に好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（Ｘ）により表され、上記Ｒ５はＣ１−Ｃ３アルキル（シアノ、塩素、フッ素および臭素で任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ３アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ３アルキレンジアリール、（互いに独立してシアノ、ニトロ、塩素、フッ素、臭素、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、Ｃ１ハロアルキルで任意で置換される）である。
【００５１】
別の非常に好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（Ｘ）により表され、上記Ｒ５はＣ１−Ｃ３アルキル、２−シアノエチル、２，２，２−トリクロロエチル、２，２，２−トリブロモエチル、−（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（Ｏ）ＣＦ３（ｎ＝３〜６である）；フェニル、Ｃ１−Ｃ３アルキレンフェニル、ベンズヒドリル（互いに独立してシアノ、ニトロ、塩素、フッ素、臭素、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、−ＣＦ３で任意で置換される）である。
【００５２】
別の非常に好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（Ｘ）により表され、上記Ｒ５はメチル、エチル、２−シアノエチル、再び好ましくは２−シアノエチル（ＣＨ２）２ＣＮである。
【００５３】
別の非常に好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（Ｘ）により表され、上記Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、Ｃ１−Ｃ３アルキルであるか、または、それらが付着している窒素原子と一緒に複素環を形成し、上記複素環は、ピロリジン（ｐｙｒｏｌｌｉｄｉｎｅ）、ピペリジン、モルホリンから選択され、上記複素環はＣ１−Ｃ３アルキルで任意で置換され、再びさらに好ましくは上記複素環はメチルで任意で置換される。
【００５４】
別の非常に好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（Ｘ）により表され、Ｒ６はＲ７に等しく、Ｒ６およびＲ７はイソ−プロピルまたはメチルである。
【００５５】
別の非常に好ましい実施形態では、上記リン部分Ｒ２は式（Ｘ）により表され、上記Ｒ５はメチル、エチル、２−シアノエチル、好ましくは２−シアノエチルであり、Ｒ６はＲ７に等しく、Ｒ６およびＲ７はイソ−プロピルまたはメチルである。
【００５６】
単独の、またはより大きな基、例えばアルコキシまたはアルキレンの一部としての各アルキル部分は直鎖または分枝鎖であり、好ましくはＣ１−Ｃ６アルキル、より好ましくはＣ１−Ｃ３アルキルである。例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、プロプ−２−イル（イソ−プロピル；特に描かれた化学式において、同じ意味で本明細書ではｉＰｒまたはＰｒｉと省略）、ｎ−ブチル、ブト−２−イル、２−メチル−プロプ−１−イルまたは２−メチル−プロプ−２−イルが挙げられる。アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ネオ−ペントキシ、ｎ−ヘキソキシが挙げられる。本明細書で記載されるように、アルコキシは、ハロアルコキシ部分を生じるハロゲン原子などのさらなる置換基を含んでもよい。
【００５７】
各アルキレン部分は直鎖または分枝鎖であり、例えば、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、またはＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）−である。
【００５８】
単独の、またはより大きな基、例えばアルケニルオキシまたはアルケニレンの一部としての各アルケニル部分は直鎖または分枝鎖であり、好ましくはＣ２−Ｃ６アルケニル、より好ましくはＣ２−Ｃ４アルケニルである。各部分は、（Ｅ）−または（Ｚ）−立体配置のいずれかのものであることができる。例としては、ビニルおよびアリルが挙げられる。よって、アルケニル部分を含む本発明の化合物は、妥当な場合、その（Ｅ）−立体配置にある上記アルケニル部分を有する上記化合物、その（Ｚ）−立体配置にある上記アルケニル部分を有する上記化合物および任意の比率のそれらの混合物を含み得る。
【００５９】
単独の、またはより大きな基、例えばアルキニルオキシの一部としての各アルキニル部分は直鎖または分枝鎖であり、好ましくはＣ２−Ｃ６アルキニル、より好ましくはＣ２−Ｃ４アルキニルである。例としては、エチニルおよびプロパルギルがある。
【００６０】
ハロゲンはフッ素、塩素、臭素、またはヨウ素であり、好ましくは塩素である。好ましい実施形態では、ハロゲン置換基は塩素である。
【００６１】
単独の、またはより大きな基、例えばハロアルコキシの一部としての各ハロアルキル部分は、１つ以上の同じかまたは異なるハロゲン原子により置換されたアルキル基である。例としては、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、クロロジフルオロメチルおよび２，２，２−トリフルオロ−エチルが挙げられる。
【００６２】
「アリール」という用語は、本明細書では、親芳香環系の単一の炭素原子から１つの水素原子を除去することにより誘導された６−１４炭素原子（Ｃ６−Ｃ１４）の一価芳香族炭化水素ラジカル、ならびに、独立して、１つ以上の置換基、典型的におよび好ましくは以下で記載される１つまたは２つの置換基で任意で置換された上記アリールを示す。アリールは飽和、部分不飽和環、または芳香族炭素環もしくは複素環に縮合された芳香環を含む二環式ラジカルを含む。アリール基は、１つ以上の置換基で、典型的におよび好ましくは１つまたは２つの置換基で独立して、任意で置換され、上記置換基は各出現において独立してＣ１−Ｃ４アルキル、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、ＮＲ２０Ｒ２１、Ｃ６Ｈ５、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、ＮＲ２０Ｒ２１で置換されたＣ６Ｈ５から選択され、Ｒ２０、Ｒ２１は各出現において独立してＨ、Ｃ１−Ｃ３アルキルである。典型的なアリール基としては、ベンゼン（フェニル）、置換フェニル、ナフタレン、アントラセン、ビフェニル、インデニル、インダニル、１，２−ジヒドロナフタレン（ｎａｐｔｈａｌｅｎｅ）、１，２，３，４−テトラヒドロナフチルなどから誘導されるラジカルが挙げられるが、それらに限定されない。「アリール」という用語は、本明細書では、好ましくは１〜３のＲ２２で任意で置換されるフェニルを示し、Ｒ２２は、各出現において独立してハロゲン、−ＯＨ、Ｃ１−Ｃ３アルキル（１つまたは２つのＯＨ、Ｃ１−Ｃ２フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ２アルコキシＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、−ＮＨ２、ＮＨＣＨ３またはＮ（ＣＨ３）２で任意で置換される）である。
【００６３】
基が任意で置換されると言われる場合、好ましくは、任意で１−５の置換基、より好ましくは任意で１−３の置換基、再びより好ましくは任意で１つまたは２つの置換基が存在する。基が任意で置換されると言われる場合、および、上記基の上記任意的な置換のために２つ以上の置換基が存在する場合、上記２つ以上の置換基は、同じかまたは異なることができる。
【００６４】
「核酸塩基」という用語は、本明細書では、Ｂｘとして省略され、未修飾または天然由来核酸塩基、ならびに修飾または非天然由来核酸塩基およびその合成模倣物を示す。核酸塩基は、核酸の複素環塩基に水素結合することができる１つ以上の原子または原子の基を含む任意の複素環塩基である。
【００６５】
１つの実施形態では、核酸塩基はプリン塩基またはピリミジン塩基であり、好ましくは上記プリン塩基はプリンまたは置換プリンであり、上記ピリミジン塩基はピリミジンまたは置換ピリミジンである。より好ましくは、核酸塩基は、（ｉ）アデニン（Ａ）、（ｉｉ）シトシン（Ｃ）、（ｉｉｉ）５−メチルシトシン（ＭｅＣ）、（ｉｖ）グアニン（Ｇ）、（ｖ）ウラシル（Ｕ）、もしくは（ｖｉ）５−メチルウラシル（ＭｅＵ）、または（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）もしくは（ｖｉ）の誘導体である。「（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）または（ｖｉ）の誘導体」、および「核酸塩基誘導体」という用語は本明細書で同じ意味で使用される。（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）または（ｖｉ）の誘導体、および核酸塩基誘導体は、それぞれ、当業者に知られており、例えば、Ｓｈａｒｍａ  Ｖ．  Ｋ．    ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｃｏｍｍｕｎ．，  ２０１４，  ５，  １４５４−１４７１において記載され、限定はされないが、５−ヒドロキシメチルシトシン、キサンチン、ヒポキサンチン、２−アミノアデニン、アルキルアデニン、例えば６−メチルアデニン、２−プロピルアデニン、アルキルグアニン、例えば６−メチルグアニン、２−プロピルグアニン、２−チオウラシル、２−チオチミンおよび２−チオシトシン、５−ハロウラシル、５−ハロシトシン、アルキニルピリミジン塩基、例えば５−プロピニル（−Ｃ＝Ｃ−ＣＨ３）ウラシル、５−プロピニル（−Ｃ＝Ｃ−ＣＨ３）シトシン、６−アゾウラシル、６−アゾシトシン、６−アゾチミン、シュードウラシル、４−チオウラシル；８−置換プリン塩基、例えば８−ハロ−、８−アミノ−、８−チオール−、８−チオアルキル−、８−ヒドロキシル−アデニンまたはグアニン、５−置換ピリミジン塩基、例えば５−ハロ−、特に５−ブロモ−、５−トリフルオロメチル−ウラシルまたは−シトシン；７−メチルグアニン、７−メチルアデニン、２−Ｆ−アデニン、２−アミノ−アデニン、８−アザグアニンおよび８−アザアデニン、７−デアザグアニン、７−デアザアデニン、３−デアザグアニン、３−デアザアデニン、疎水性塩基、プロミスキャス塩基、サイズ拡大塩基、またはフッ素化塩基が挙げられる。ある一定の実施形態では、核酸塩基としては、限定はされないが、三環式ピリミジン、例えば１，３−ジアザフェノキサジン−２−オン、１，３−ジアザフェノチアジン−２−オンまたは９−（２−アミノエトキシ）−１，３−ジアザフェノキサジン−２−オン（Ｇ−クランプ）が挙げられる。「核酸塩基誘導体」という用語はまた、プリンまたはピリミジン塩基が、他の複素環により置き換えられているものを含み、例えば７−デアザ−アデニン、７−デアザグアノシン、２−アミノピリジンまたは２−ピリドンである。本発明のさらなる核酸塩基としては、限定はされないが、当業者に知られているものが挙げられる（例えば米国特許３，６８７，８０８号；Ｓｗａｙｚｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，  ｉｎ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ａ  Ｄｒｕｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，  Ｃｈａｐｔｅｒ  ６，  ｐｐ．  １４３−１８２  （Ｃｒｏｏｋｅ，  Ｓ．Ｔ．，  ｅｄ．，  ２００８）；  Ｔｈｅ  Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  Ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ａｎｄ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，  Ｋｒｏｓｃｈｗｉｔｚ，  Ｊ．Ｉ．，  Ｅｄ．，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  １９９０，  ｐｐ．  ８５８−８５９；  Ｅｎｇｌｉｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ，  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  １９９１，  Ｖｏｌ．  ３０  （６），  ｐｐ．  ６１３−６２３；  Ｓａｎｇｈｖｉ，  Ｙ．Ｓ．，  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，  Ｃｒｏｏｋｅ，  Ｓ．Ｔ．  ａｎｄ  Ｌｅｂｌｅｕ，  Ｂ．，  Ｅｄｓ．，  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９３，  ｐｐ．  ２７３−３０２）。
【００６６】
好ましい核酸塩基誘導体としては、メチル化アデニン、グアニン、ウラシルおよびシトシン、ならびに、好ましくは（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の核酸塩基誘導体が挙げられ、個々のアミノ基、好ましくは環外アミノ基は、アシル保護基またはジアルキルホルムアミジノ、好ましくはジメチルホルムアミジノ（ＤＭＦ）により保護され、さらに、核酸塩基誘導体、例えば２−フルオロウラシル、２−フルオロシトシン、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、２，６−ジアミノプリン、アザシトシンおよびピリミジン類似体、例えばシュードイソシトシンおよびシュードウラシルが含まれる。
【００６７】
さらに好ましい実施形態では、上記核酸塩基誘導体は、メチル化アデニン、メチル化グアニン、メチル化ウラシルおよびメチル化シトシンから、ならびに（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の核酸塩基誘導体から選択され、個々のアミノ基、好ましくは環外アミノ基は保護基により保護される。
【００６８】
さらに好ましい実施形態では、上記核酸塩基誘導体はメチル化アデニン、メチル化グアニン、メチル化ウラシルおよびメチル化シトシンから、ならびに（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の核酸塩基誘導体から選択され、個々のアミノ基、好ましくは環外アミノ基は、アシル保護基またはジアルキルホルムアミジノ、好ましくはジメチルホルムアミジノ（ＤＭＦ）により保護される。
【００６９】
さらに好ましい実施形態では、上記核酸塩基誘導体は（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の核酸塩基誘導体から選択され、個々のアミノ基、好ましくは環外アミノ基は保護基により保護される。
【００７０】
さらに好ましい実施形態では、上記核酸塩基誘導体は（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の核酸塩基誘導体であり、環外アミノ基はアシル保護基またはジアルキルホルムアミジノ、好ましくはジメチルホルムアミジノ（ＤＭＦ）により保護される。
【００７１】
さらに非常に好ましい実施形態では、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の上記核酸塩基誘導体の上記環外アミノ基の上記アシル保護基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１であり、互いに独立してＲ１１はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリールＣ１−Ｃ１０アルキレン、またはＣ６−Ｃ１０アリールオキシＣ１−Ｃ１０アルキレンから選択され、上記ジアルキルホルムアミジノ保護基は＝Ｃ（Ｈ）−ＮＲ１２Ｒ１３であり、Ｒ１２およびＲ１３は互いに独立して、Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択される。
【００７２】
さらに非常に好ましい実施形態では、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の上記核酸塩基誘導体の上記環外アミノ基の上記アシル保護基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１４であり、互いに独立してＲ１４は、Ｃ１−Ｃ４アルキル；フェニル；ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシで置換されたフェニル；ベンジル；ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシで置換されたベンジル；またはハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシで任意で置換されるフェニルオキシＣ１−Ｃ２アルキレンから選択され；ならびに、上記ジアルキルホルムアミジノ保護基は＝Ｃ（Ｈ）−ＮＲ１２Ｒ１３であり、Ｒ１２およびＲ１３は互いに独立して、Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択される。
【００７３】
さらに非常に好ましい実施形態では、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の上記核酸塩基誘導体の上記環外アミノ基の上記アシル保護基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１５であり、互いに独立してＲ１５はＣ１−Ｃ４アルキル；フェニル；ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ５−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシで置換されたフェニル；ベンジル；ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシで置換されたベンジル；またはフェニルオキシメチレン（ＣＨ２−ＯＣ６Ｈ５）（フェニルはハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ５−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシで任意で置換される）から選択され；ならびに、上記ジアルキルホルムアミジノ保護基は＝Ｃ（Ｈ）−ＮＲ１２Ｒ１３であり、Ｒ１２およびＲ１３は互いに独立して、Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択される。
【００７４】
さらに非常に好ましい実施形態では、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の上記核酸塩基誘導体の上記環外アミノ基の上記アシル保護基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１６であり、互いに独立してＲ１６はＣ１−Ｃ３アルキル；フェニル；Ｃ１−Ｃ３アルキル、メトキシで置換されたフェニル；ベンジル；Ｃ１−Ｃ３アルキル、メトキシで置換されたベンジル；またはフェニルオキシメチレン（ＣＨ２−ＯＣ６Ｈ５）（Ｃ６Ｈ５は、Ｃ１−Ｃ３アルキル、メトキシで任意で置換される）から選択され；ならびに、上記ジアルキルホルムアミジノ保護基は＝Ｃ（Ｈ）−ＮＲ１２Ｒ１３であり、Ｒ１２およびＲ１３は互いに独立して、Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択される。
【００７５】
さらに非常に好ましい実施形態では、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の上記核酸塩基誘導体の上記環外アミノ基の上記アシル保護基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１７であり、互いに独立してＲ１７は、Ｃ１−Ｃ３アルキル；フェニル；Ｃ１−Ｃ３アルキル、メトキシで置換されたフェニル；ベンジル；Ｃ１−Ｃ３アルキル、メトキシで置換されたベンジル；またはフェニルオキシメチレン（ＣＨ２−ＯＣ６Ｈ５）（Ｃ６Ｈ５は、Ｃ１−Ｃ３アルキル、メトキシで任意で置換される）から選択され；ならびに、上記ジアルキルホルムアミジノ保護基はジメチルホルムアミジノ（ＤＭＦ）である。
【００７６】
さらに非常に好ましい実施形態では、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の上記核酸塩基誘導体の上記環外アミノ基の上記アシル保護基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１８であり、互いに独立してＲ１８はメチル、イソ−プロピル、フェニル、ベンジル、またはフェニルオキシメチレン（ＣＨ２−ＯＣ６Ｈ５）（Ｃ６Ｈ５は、Ｃ１−Ｃ３アルキル、メトキシで任意で置換される）から選択され；ならびに上記ジアルキルホルムアミジノ保護基はジメチルホルムアミジノ（ＤＭＦ）である。
【００７７】
さらに非常に好ましい実施形態では、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の上記核酸塩基誘導体の上記環外アミノ基の上記アシル保護基は−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１９であり、互いに独立してＲ１９はメチル、イソ−プロピル、フェニル、ベンジル、またはフェニルオキシメチレン（ＣＨ２−ＯＣ６Ｈ５）（Ｃ６Ｈ５はメチル、イソ−プロピルで任意で置換される）から選択され；ならびに、上記ジアルキルホルムアミジノ保護基はジメチルホルムアミジノ（ＤＭＦ）である。
【００７８】
「ジアルキルホルムアミジノ」という用語は、本明細書では、＝Ｃ（Ｈ）−ＮＲ１２Ｒ１３を示し、Ｒ１２およびＲ１３は互いに独立して、Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択される。好ましい実施形態では、上記ジアルキルホルムアミジノは、（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）の上記核酸塩基誘導体の上記環外アミノ基の保護基である。得られた化合物は、本発明の範囲内に含まれるならば、（Ｅ）−または（Ｚ）−立体配置のいずれか、および両方の形態、および任意の比率のそれらの混合物のものであってもよい。好ましい実施形態では、本発明の化合物は、（Ｚ）立体配置の、ジアルキルホルムアミジノ、好ましくはジメチルホルムアミジノ（ＤＭＦ）を含む。
【００７９】
１つの実施形態によれば、Ｂｘは、ウラシル、チミン、シトシン、５−メチルシトシン、アデニンおよびグアニンから選択される。好ましくは、Ｂｘはチミン、５−メチルシトシン、アデニンおよびグアニンから選択される。１つの実施形態によれば、Ｂｘは、塩基ウラシル、チミン、シトシン、５−メチルシトシン、アデニンおよびグアニンの代わりに、ＤＮＡまたはＲＮＡオリゴマーに組み込まれると、塩基対を形成することができる芳香族複素環部分である。
【００８０】
「ヌクレオシド連結基」という用語は、本明細書では、本発明によるオリゴマー内で、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の上記発明の化合物を、さらなる化合物、好ましくは式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）のさらなる本発明の化合物を含むヌクレオシド化合物に連結させることができる、好ましくは連結させる当技術分野で知られている任意の連結基を示す。そのような可能な連結基を教示する代表的な特許は、限定はされないが、米国特許５，０３４，５０６号；５，１６６，３１５号；５，１８５，４４４号；５，２１４，１３４号；５，２１６，１４１号；５，２３５，０３３号；５，２６４，５６２号；５，２６４，５６４号；５，４０５，９３８号；５，４３４，２５７号；５，４６６，６７７号；５，４７０，９６７号；５，４８９，６７７号；５，５４１，３０７号；５，５６１，２２５号；５，５９６，０８６号；５，６０２，２４０号；５，６０８，０４６号；５，６１０，２８９号；５，６１８，７０４号；５，６２３，０７０号；５，６６３，３１２号；５，６３３，３６０号；５，６７７，４３７号；５，６７７，４３９号；５，６４６，２６９号および５，７９２，６０８号である。上記さらなる化合物は、ヌクレオシド化合物または非ヌクレオシド化合物から選択される。上記ヌクレオシド化合物は、限定はされないが、少なくとも１つの（ｉ）ヌクレオシド、（ｉｉ）ヌクレオチド、（ｉｉｉ）オリゴヌクレオチドまたは（ｉｖ）（ｉ）、（ｉｉ）もしくは（ｉｉｉ）の修飾物を含み、典型的にかつ好ましくは、これらから選択される。上記非ヌクレオシド化合物は、ペプチド、タンパク質、ケイ酸塩化合物またはさらには固体支持体を含み、典型的にかつ好ましくはこれらから選択される。固体支持体としては、限定はされないが、表面、ビーズ、ガラス支持体、ポリマーまたは樹脂が挙げられる。好ましい実施形態では、ガラスは、好ましくは５００Å、１０００Åまたは２０００Å細孔を有する、細孔が制御されたガラスである。ビーズとしては、限定はされないが、ガラスビーズ、好ましくは細孔が制御されたガラス、または磁気ビーズが挙げられる。ポリマーとしては、限定はされないが、例えばジビニルベンゼン、スチレン、およびクロロメチルスチレンを含むポリスチレンが挙げられる。好ましい実施形態では、固体支持体は高度に架橋されたポリスチレンビーズである。
【００８１】
「ヌクレオシド連結基」という用語はリン連結基および非リン連結基を含む。非リン連結基はリン原子を含まず、非リン連結基の例としては、アルキル、アリール、好ましくは、フェニル、ベンジル、またはベンゾイル、シクロアルキル、アルキレンアリール、アルキレンジアリール、アルコキシ、アルコキシアルキレン、アルキルスルホニル、アルキン、エーテル（各々互いに独立してシアノ、ニトロ、ハロゲンで任意で置換される）；カルボキシル、アミド、アミン、アミノ、イミン、チオール、スルフィド、スルホキシド、スルホン、スルファメート、スルホネート、スルホンアミド、シロキサンまたはそれらの混合物が挙げられ、典型的にかつ好ましくは、これらから選択される。好ましい実施形態では、非リン連結基はアミノプロピル、長鎖アルキルアミン基、イニル（ｉｎｙｌ）、アセチルアミド、アミノメチル、ホルムアセタール、チオホルムアセタール、チオホルムアセチル、リボアセチル、メチレンイミノ、メチレンヒドラジノまたは中性非イオン性ヌクレオシド連結基、例えばアミド−３（３’−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−５’）またはアミド−４（３’−ＣＨ２−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（＝Ｏ）−５’）である。好ましい実施形態では、非リン連結基としては、アルキル、アリール、好ましくはフェニル、ベンジル、またはベンゾイル、シクロアルキル、アルキレンアリール、アルキレンジアリール、アルコキシ、アルコキシアルキレン、アルキルスルホニル、アルキン、またはエーテルから選択される化合物が挙げられ、化合物はＣ１−Ｃ９、Ｃ１−Ｃ６、またはＣ１−Ｃ４を含む。
【００８２】
好ましい実施形態では、上記ヌクレオシド連結基はリン連結基であり、上記リン連結基は、式（ＸＩ）により表されるＰＩＩＩまたはＰＶ価電子状態のリン原子を含む部分を示し：
【化８】
2020502072.tif 000010
式中、
ＷはＯ、Ｓ、Ｓｅまたは電子対を表し；好ましくはＷはＯまたはＳを表し；
Ｒ１０はＨ、ハロゲン、ＯＨ、ＯＲ５、ＮＲ６Ｒ７、ＳＨ、ＳＲ８、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アミノアルキルであり；Ｒ５はＣ１−Ｃ９アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アセチル；ヒドロキシル保護基であり；Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ９アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アリール（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アミノ保護基であるか；または、それらが付着している窒素原子と一緒に複素環を形成し、好ましくは上記複素環はピロリジニル（ｐｙｒｏｌｌｉｄｉｎｙｌ）、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニルおよびホモピペラジンから選択され、上記複素環はＣ１−Ｃ３アルキルで任意で置換され；ならびに、Ｒ８はチオール保護基であり；ならびに式中、波線の各々は、本発明によるオリゴマー内での、式（ＸＩ）の上記リン連結基のさらなる化合物、好ましくは式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）のさらなる本発明の化合物を含むヌクレオシド化合物への付着を示す。ＷがＯ、ＳまたはＳｅを表す場合、上記リン部分内の上記Ｐ原子はそのＰＶ価電子状態にある。Ｗが電子対を表す場合、上記リン部分内の上記Ｐ原子はそのＰＩＩＩ原子価にある。式（ＸＩ）の部分は任意の可能な立体異性体を含む。式（ＸＩ）により表される上記部分にはその塩がさらに含まれ、典型的におよび好ましくは、上記塩は、無機塩基またはアミンを用いた処理で形成され、典型的におよび好ましくは、（互いに独立して）上記Ｒ１０であるＯＨまたはＳＨ基との反応から誘導される塩である。ＯＨまたはＳＨ基との上記塩形成に導く好ましい無機塩基またはアミンは当技術分野でよく知られており、典型的におよび好ましくは、トリメチルアミン、ジエチルアミン、メチルアミンまたは水酸化アンモニウムである。本発明に含まれるこれらのリン部分はまた、適切な場合、「Ｏ−ＨＢ＋」と省略され、上記ＨＢ＋は形成された対カチオンを示す。
【００８３】
好ましい実施形態では、式（ＸＩ）のリン連結基では、Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ６アルケニルで任意で置換される）；アリール（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキルで任意で置換される）；またはアミノ保護基である。
【００８４】
好ましい実施形態では、式（ＸＩ）のリン連結基では、ＷはＯまたはＳを表し；Ｒ１０はＨ、ＯＨ、ＯＲ５、ＮＲ６Ｒ７、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アミノアルキルであり；Ｒ５はＣ１−Ｃ９アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンアリール、Ｃ１−Ｃ６アルキレンジアリール（各々互いに独立して、シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキルスルホニルで任意で置換される）；アセチル；またはヒドロキシル保護基であり；Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アリール（シアノ、ニトロ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシで任意で置換される）；アミノ保護基であり；ならびに、Ｒ８はチオール保護基である。
【００８５】
さらに好ましい実施形態では、上記ヌクレオシド連結基はリン連結基であり、上記リン連結基はホスホジエステル連結基、ホスホトリエステル連結基、ホスホロチオエート連結基、ホスホロジチオエート連結基、ホスホネート連結基、好ましくはＨ−ホスホネート連結基またはメチルホスホネート連結基；ホスホノチオエート連結基、好ましくはＨ−ホスホノチオエート連結基、メチルホスホノチオエート連結基；ホスフィナート連結基、ホスホルチオアミデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｔｈｉｏａｍｉｄａｔｅ）連結、ホスホラミデート連結基、またはホスファイト連結基から選択される。別の非常に好ましい実施形態では、上記ヌクレオシド連結基はリン連結基であり、上記リン連結基はホスホジエステル連結基、ホスホトリエステル連結基、ホスホロチオエート連結基、またはホスホネート連結基から選択され、ホスホネートは好ましくはＨ−ホスホネート連結基またはメチルホスホネート連結基である。
【００８６】
別の非常に好ましい実施形態では、上記ヌクレオシド連結基はリン連結基であり、上記リン連結基はホスホジエステル連結基である。別の非常に好ましい実施形態では、上記ヌクレオシド連結基はリン連結基であり、上記リン連結基はホスホロチオエート連結基である。
【００８７】
好ましい実施形態では、リン連結基は、アルキルホスホジエステル連結基、アルキレンホスホジエステル連結基、チオノアルキルホスホジエステル連結基またはアミノアルキルホスホジエステル連結基、アルキルホスホトリエステル連結基、アルキレンホスホトリエステル連結基、チオノアルキルホスホトリエステル連結基またはアミノアルキルホスホトリエステル連結基、アルキルホスホネート連結基、アルキレンホスホネート連結基、アミノアルキルホスホネート連結基、チオノアルキルホスホネート連結基またはキラルホスホネート連結基から選択される。より好ましくは、上記ヌクレオシド連結基はリン連結基であり、上記リン連結基はホスホジエステル連結基−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）Ｏ−または［ＨＢ＋］を対イオンとして有する−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ−）Ｏ−、ホスホロチオエート−Ｏ−Ｐ（＝Ｓ）（ＯＨ）Ｏ−または［ＨＢ＋］を対イオンとして有する−Ｏ−Ｐ（＝Ｓ）（Ｏ−）Ｏ−、メチルホスホネート−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ３）Ｏ−である。リン連結基の様々な塩、混合塩および遊離酸形態が含まれる。
【００８８】
さらなる実施形態では、上記ヌクレオシド連結基は、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドをさらなるヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドと連結させる。
【００８９】
本発明の化合物のＢｘと二環コアの間の結合を象徴する式（Ｉ）および（ＩＶ）内の波線は、核酸塩基Ｂｘの任意の空間定位が式（Ｉ）または（ＩＶ）により包含されることを示す。それにより、式（Ｉ）および（ＩＶ）は、αまたはβコンホメーションのいずれか、あるいは本発明の化合物のαおよびβアノマーの任意の混合物を包含することが意味される。
【００９０】
本明細書では、「ヌクレオシド」という用語は、核酸塩基および上記核酸塩基に共有結合により連結された糖を含む化合物を示す。「ヌクレオチド」という用語は、本明細書では、ヌクレオシド連結基またはリン部分をさらに含む、ヌクレオシドを示し、上記ヌクレオシド連結基または上記リン部分は、上記ヌクレオシドの糖に共有結合により連結される。
【００９１】
本明細書では、「ヌクレオシド」または「ヌクレオチド」という用語は、天然または化学オリゴマー合成を用いてオリゴマーに組み込むことができる、あらゆる種類の天然起源もしくは修飾ヌクレオシドもしくはヌクレオシド模倣物、または天然起源もしくは修飾ヌクレオチドもしくはヌクレオチド模倣物を、それぞれ含むことが意味される。典型的におよび好ましくは、「ヌクレオシド」という用語は、本明細書では、天然起源ヌクレオシド、修飾ヌクレオシドまたはヌクレオシド模倣物を示す。典型的におよび好ましくは、「ヌクレオチド」という用語は、本明細書では、天然起源ヌクレオチド、修飾ヌクレオチドまたはヌクレオチド模倣物を示す。
【００９２】
「修飾ヌクレオシド」という用語は、当業者に知られており、本明細書で記載される、ヌクレオシドの糖および／または核酸塩基に対して行われる修飾を含むことが意図される。「修飾ヌクレオチド」という用語は、当業者に知られており、本明細書で記載される、ヌクレオチドの糖および／または核酸塩基および／またはヌクレオシド連結基またはリン部分に対して行われる修飾を含むことが意図される。
【００９３】
「ヌクレオシド模倣物」という用語は、糖および核酸塩基を置き換えるために使用されるそれらの構造を含むことが意図される。ヌクレオシド模倣物の例としては、核酸塩基がフェノキサジン部分（例えば９−（２−アミノエトキシ）−１，３−ジアザフェノキサジン−２−オン基）と置き換えられ、糖部分がシクロヘキセニルまたはビシクロ［３．１．０］ヘキシル部分と置き換えられたヌクレオシドが挙げられる。「ヌクレオチド模倣物」という用語は本明細書では、糖およびヌクレオシド連結基を置き換えるために使用されるヌクレオチドを含むことが意味される。ヌクレオチド模倣物の例としては、ペプチド核酸（ＰＮＡ）またはモルホリノが挙げられる。
【００９４】
「ヌクレオシド」または「ヌクレオチド」という用語はまた、２つ以上の核酸塩基修飾、２つ以上の糖修飾または少なくとも１つの核酸塩基および少なくとも１つの糖修飾などの修飾の組み合わせを含む。
【００９５】
ヌクレオシドまたはヌクレオチドの糖としては、限定はされないが、単環式、二環式または三環式環系、好ましくは三環式または二環式系または単環式リボースまたはデ（ス）オキシリボースが挙げられる。さらに、糖の修飾としては修飾立体化学的配置、基の少なくとも１つの置換または基の少なくとも１つの欠失が挙げられるが、それらに限定されない。修飾糖は、典型的におよび好ましくは、ＲＮＡおよびＤＮＡにおいて天然で生じるリボシル部分（すなわち、フラノシル部分）の修飾バージョン、例えば二環糖、テトラヒドロピラン、２’−修飾糖、３’−修飾糖、４’−修飾糖、５’−修飾糖、または４’−置換糖である。好適な糖修飾の例は当業者に知られており、２’、３’および／または４’置換ヌクレオシド（例えば４’−Ｓ−修飾ヌクレオシド）；２’−Ｏ−修飾ＲＮＡヌクレオチド残基、例えば２’−Ｏ−アルキルまたは２’−Ｏ−（置換）アルキル、例えば２’−Ｏ−メチル、２’−Ｏ−（２−シアノエチル）、２’−Ｏ−（２−メトキシ）エチル（２’−ＭＯＥ）、２’−Ｏ−（２−チオメチル）エチル；２’−Ｏ−（ハロアルコキシ）メチル、例えば２’−Ｏ−（２−クロロエトキシ）メチル（ＭＣＥＭ）、２’−Ｏ−（２，２−ジクロロエトキシ）メチル（ＤＣＥＭ）；２’−Ｏ−アルコキシカルボニル、例えば２’−Ｏ−［２−（メトキシカルボニル）エチル］（ＭＯＣＥ）、２’−Ｏ−［２−（Ｎ−メチルカルバモイル）エチル］（ＭＣＥ）、２’−Ｏ−［２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバモイル）エチル］（ＤＭＣＥ）、特に２’−Ｏ−メチル修飾または２’−Ｏ−メトキシエチル（２’−Ｏ−ＭＯＥ）；あるいは他の修飾糖部分、例えばモルホリノ（ＰＭＯ）、カチオン性モルホリノ（ＰＭＯＰｌｕｓ）または修飾モルホリノ基、例えばＰＭＯ−Ｘが挙げられるが、それらに限定されない。「ＰＭＯ−Ｘ」という用語は、少なくとも１つの３’または５’末端修飾、例えば、３’−蛍光タグ、３’クエンチャー（例えば３’−カルボキシフルオレセイン、３’−Ｇｅｎｅ  Ｔｏｏｌｓ  Ｂｌｕｅ、３’−リサミン、３’−ダブシル）、３’−親和性タグおよび化学連結のための官能基（例えば、３’−ビオチン、３’−一級アミン、３’−ジスルフィドアミド、３’−ピリジルジチオ）、５’−末端修飾（５’−一級アミン、５’−ダブシル）、３’−アジド、３’−アルキン、５’−アジド、５’−アルキンを含む、またはＷＯ２０１１／１５０４０８号およびＵＳ２０１２／００６５１６９号において開示される修飾モルホリノ基を示す。
【００９６】
「二環（Ｂｉｃｙｌｉｃ）糖部分」は、２つの相互に連結された環系、例えば二環式ヌクレオシドを含み、糖部分は、２’−Ｏ−ＣＨ（アルキル）−４’または２’−Ｏ−ＣＨ２−４’基、ロックド核酸（ＬＮＡ）、キシロ−ＬＮＡ、α−Ｌ−ＬＮＡ、β−Ｄ−ＬＮＡ、ｃＥｔ（２’−Ｏ，４’−Ｃ制限エチル）ＬＮＡ、ｃＭＯＥｔ（２’−Ｏ，４’−Ｃ制限メトキシエチル）ＬＮＡ、エチレン−架橋核酸（ＥＮＡ）、ヘキシトール核酸（ＨＮＡ）、フッ素化ＨＮＡ（Ｆ−ＨＮＡ）、ピラノシル−ＲＮＡ（ｐ−ＲＮＡ）、または３’−デオキシピラノシル−ＤＮＡ（ｐ−ＤＮＡ）を有する。あるいは、ヌクレオシドまたはヌクレオチドの糖は、例えば、ＷＯ２０１３／１３５９００号およびＷＯ２０１４／１４０３４８号に記載される三環糖部分を含む。
【００９７】
「オリゴマー」という用語は、本明細書では、ヌクレオシド連結基により連結された２つ以上のモノマーサブユニットを含む化合物を示し、上記２つ以上のモノマーサブユニットの少なくとも１つは、式（ＩＶ）の化合物、好ましくは式（Ｖ）の化合物または式（ＶＩ）の化合物である。好ましい実施形態では、オリゴマーは、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の少なくとも１つの化合物および少なくとも１つのリボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドを含む。より好ましくは、オリゴマーは、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の少なくとも１つの化合物および少なくとも１つのデオキシリボヌクレオチドを含む。
【００９８】
「モノマーサブユニット」という用語は、本明細書では、α−Ｄ−リボヌクレオシド、β−Ｄ−リボヌクレオシド、α−Ｄ−２’−デオキシリボヌクレオシド、β−Ｄ−２’−デオキシリボヌクレオシド、天然起源ヌクレオシド、天然起源ヌクレオチド、修飾ヌクレオシド、修飾ヌクレオチド、ヌクレオシドの模倣物、ヌクレオチドの模倣物、および式（Ｉ）〜（ＶＩ）のいずれか一つの任意の化合物を含む、本明細書で提供される本発明の化合物などのモノマーサブユニットを含み、かつ典型的におよび好ましくはそれらを示す、オリゴマー合成に適しているあらゆる種類のモノマーユニットを含むことを意味する。
【００９９】
好ましい実施形態では、オリゴマーはオリゴヌクレオチドである。「オリゴヌクレオチド」という用語は、本明細書では、各々、ヌクレオシド連結基により互いに連結された少なくとも２つのヌクレオシドを含む化合物を示す。よって、「オリゴヌクレオチド」という用語は、本明細書では、ヌクレオシド連結基により連結された少なくとも２つのヌクレオシドを含む化合物を含み、典型的におよび好ましくはこれを示し、上記少なくとも２つのヌクレオシドは、天然起源ヌクレオシド、修飾ヌクレオシドまたはヌクレオシド模倣物から独立して選択される。よって、「オリゴヌクレオチド」という用語は、本明細書では、天然起源ヌクレオチド、修飾ヌクレオチドまたはヌクレオチド模倣物を含む化合物を含み、よって、「オリゴヌクレオチド」という用語は、本明細書では、当業者に知られており、本明細書で記載される、糖および／または核酸塩基および／またはヌクレオシド連結基に対して行われる修飾を有するオリゴヌクレオチドを含む。
【０１００】
オリゴマーは一本鎖または二本鎖とすることができる。１つの実施形態では、オリゴマーは二本鎖（すなわち二重鎖）である。好ましい実施形態では、オリゴマーは一本鎖である。
【０１０１】
好ましい実施形態では、オリゴマーは非ヌクレオシド化合物、好ましくは固体支持体に結合される。固体支持体は好ましくは、ビーズ、ポリマーまたは樹脂から選択される。ある一定の実施形態では、オリゴマーは４０までのモノマーサブユニット、好ましくは３０までのモノマーサブユニット、より好ましくは３０までのモノマーサブユニット、再びより好ましくは２０までのモノマーサブユニットまたは１５までのモノマーサブユニットの長さを有する。さらなる実施形態では、上記オリゴマーは５〜４０のモノマーサブユニット、好ましくは８〜３０のモノマーサブユニット、より好ましくは８〜２５のモノマーサブユニット、再びより好ましくは８〜２０のモノマーサブユニットを含む。
【０１０２】
ある一定の実施形態では、本明細書で提供されるオリゴマーは１つ以上の末端基の、オリゴマーの５’または７’末端への共有結合により修飾される。末端基はまた、オリゴマーの末端のいずれかで付着させることができる。
【０１０３】
「の末端」という用語はオリゴマー、核酸配列または式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物の端部または末端を示し、整数（３’、５’または７’など）は、オリゴマーのヌクレオシド、核酸配列または式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物に含まれる糖の炭素原子を示す。「５’末端基」または「７’末端基」という用語は、本明細書では、それぞれ、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物に含まれる糖の５’末端または７’末端に位置する基を示す。「５’末端基」または「７’末端基」の例としては、限定はされないが、キャッピング基、ジホスフェート、トリホスフェート、標識、例えば、蛍光標識（例えばフルオレセインまたはローダミン）、色素、オリゴマーを追跡するのに好適なレポーター基、固体支持体、非ヌクレオシド基、抗体またはコンジュゲート基が挙げられる。好ましくは「５’末端基」または「７’末端基」は、ジホスフェート、トリホスフェート、蛍光標識、色素、オリゴマーを追跡することができるレポーター基、固体支持体、非ヌクレオシド基、抗体またはコンジュゲート基から選択される。
【０１０４】
ある一定の実施形態では、本明細書で提供されるオリゴマーまたは式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物は、１つ以上のコンジュゲート基の共有結合により修飾される。一般に、コンジュゲート基は、それらが付着される化合物の１つ以上の特性を改変する。そのような特性としては、限定はされないが、ヌクレアーゼ安定性、結合親和性、薬力学、薬物動態、結合、吸収、細胞分布、細胞取込、送達、帯電およびクリアランスが挙げられる。コンジュゲート基は化学分野においてルーチン的に使用され、直接、または任意的な連結基を介して、オリゴマーなどの親化合物に連結される。「コンジュゲート基」という用語は、限定はされないが、インターカレーター、ポリアミン、ポリアミド、ポリエチレングリコール、チオエーテル、ポリエーテル、コレステロール、チオコレステロール、コール酸部分、葉酸、脂質、リン脂質、ビオチン、フェナジン、フェナントリジン、アントラキノン、アダマンタン、アクリジン、親油性部分、またはクマリンを含み、好ましくはこれらを示す。
【０１０５】
「核酸」または「核酸配列」という用語は、本明細書で同じ意味で使用され、少なくとも２つの連結されたヌクレオチドまたはヌクレオシド連結基により連結された少なくとも２つのヌクレオシドを含むオリゴマまたはポリマー分子として理解される。本発明との関連で、核酸はリボ核酸（ＲＮＡ）およびデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）を含み、好ましくは天然起源ＲＮＡ、天然起源ＤＮＡ、修飾ＤＮＡ、修飾ＲＮＡ、その混合物、例えばＲＮＡ−ＤＮＡハイブリッドから選択される。修飾は、さらに本明細書で記載されるように、バックボーン、例えばヌクレオシド連結基および／またはヌクレオシドおよび／または糖を含んでもよい。核酸は、化学的にまたは酵素的にポリメラーゼにより合成することができる。
【０１０６】
「天然」または「天然起源」という用語は、本明細書で同じ意味で使用され、天然起源を有する化合物を示す。
【０１０７】
「立体異性体」という用語は、同一の化学構成を有するが、原子または基の空間における配列に関しては異なっている化合物を示す。
【０１０８】
「ジアステレオマー」は、キラリティーの２つ以上の中心を有し、化合物が互いに鏡像ではない立体異性体を示す。ジアステレオマーは異なる物理的性質、例えば融点、沸点、スペクトル特性、ならびに化学的および生物学的反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動およびクロマトグラフィーなどの高分解能分析手順下で分離され得る。
【０１０９】
「鏡像異性体」は、互いの重ねることができない鏡像である化合物の２つの立体異性体を示す。
【０１１０】
本明細書で使用される立体化学定義および慣習は一般にＳ．Ｐ．  Ｐａｒｋｅｒ，  Ｅｄ．，  ＭｃＲａｗ−Ｈｉｆｆ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｒｍｓ  （１９８４），  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｂｏｏｋ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；およびＥｌｉｅｌ，  Ｅ．  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｎ，  Ｓ．，  “Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９４に従う。
【０１１１】
本明細書では、「Ｔｍ」（融解温度）は二本鎖核酸の２つのストランドが分離する温度である。Ｔｍはしばしば、相補的核酸に対するアンチセンス化合物の二本鎖安定性の尺度として使用される。
【０１１２】
第１の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物を提供し：
【化９】
2020502072.tif 000011
式中、Ｔ１およびＴ２のうちの１つはＯＲ１またはＯＲ２であり；
およびＴ１およびＴ２の他方はＯＲ１またはＯＲ２であり；
Ｒ１はＨまたはヒドロキシル保護基であり、
Ｒ２はリン部分であり；ならびに、式中、
Ｂｘは核酸塩基である。
【０１１３】
好ましい実施形態では、本発明の上記式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩ）の化合物であり
【化１０】
2020502072.tif 000012
式中、
（ｉ）Ｔ１はＯＲ１であり、Ｔ２はＯＲ１もしくはＯＲ２であるか；または
（ｉｉ）Ｔ１はＯＲ１もしくはＯＲ２であり、Ｔ２はＯＲ１であり；
好ましくはＴ１はＯＲ１またはＯＲ２であり、Ｔ２はＯＲ１である。
【０１１４】
式（ＩＩ）の化合物は、１’末端の第１の炭素のキラル中心でのＢｘの空間立体配置がβアノマーとは異なるαアノマーまたはαアノマーモノマーである。
【０１１５】
別の好ましい実施形態では、上記式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩＩ）の化合物であり
【化１１】
2020502072.tif 000013
式中、
（ｉ）Ｔ１はＯＲ１であり、Ｔ２はＯＲ１もしくはＯＲ２であるか；または
（ｉｉ）Ｔ１はＯＲ１もしくはＯＲ２であり、Ｔ２はＯＲ１であり；
好ましくはＴ１はＯＲ１であり、およびＴ２はＯＲ１またはＯＲ２である。
【０１１６】
式（ＩＩＩ）の化合物は、１’末端の第１の炭素のキラル中心でのＢｘの空間立体配置がαアノマーとは異なるβアノマーまたはβアノマーモノマーである。
【０１１７】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物では、上記リン部分Ｒ２は、ホスフェート部分、ホスホラミデート部分およびホスホラミダイト部分から選択される。別の好ましい実施形態では、式（ＩＩ）の化合物では、上記リン部分Ｒ２は、ホスフェート部分、ホスホラミデート部分およびホスホラミダイト部分から選択される。別の好ましい実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物では、上記リン部分Ｒ２は、ホスフェート部分、ホスホラミデート部分およびホスホラミダイト部分から選択される。
【０１１８】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物では、上記Ｂｘはプリン塩基またはピリミジン塩基から選択され、好ましくはＢｘは（ｉ）アデニン（Ａ）、（ｉｉ）シトシン（Ｃ）、（ｉｉｉ）５−メチルシトシン（ＭｅＣ）、（ｉｖ）グアニン（Ｇ）、（ｖ）ウラシル（Ｕ）、または（ｖｉ）５−メチルウラシル（ＭｅＵ）、あるいは（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）または（ｖｉ）の誘導体から選択され、さらに好ましくは、Ｂｘはウラシル、チミン、シトシン、５−メチルシトシン、アデニンまたはグアニンから選択される。再びより好ましくは、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物では、Ｂｘは、チミン、５−メチルシトシン、アデニンまたはグアニンから選択される。
【０１１９】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物は非ヌクレオシド化合物、好ましくは固相に連結される。
【０１２０】
好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は下記から選択される：
【化１２】
2020502072.tif 000014
2020502072.tif 000015
【０１２１】
第２の態様では、本発明は少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物を含むオリゴマーを提供し、
【化１３】
2020502072.tif 000016
式中、上記少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物の各々に対して独立して
Ｔ３またはＴ４のうちの１つはヌクレオシド連結基であり；
Ｔ３およびＴ４の他方はＯＲ１、ＯＲ２、５’末端基、７’末端基またはヌクレオシド連結基であり、Ｒ１はＨまたはヒドロキシル保護基であり、およびＲ２はリン部分であり；Ｂｘは核酸塩基である。
【０１２２】
好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは、少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物を含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり：
【化１４】
2020502072.tif 000017
式中、
（ｉ）Ｔ３はヌクレオシド連結基であり、Ｔ４は７’末端基、ＯＲ１、もしくはＯＲ２であり、好ましくはＴ４は７’末端基もしくはＯＲ１であるか；または
（ｉｉ）Ｔ３は５’末端基、ＯＲ１、もしくはＯＲ２であり、好ましくはＴ３は５’末端基もしくはＯＲ２であり；Ｔ４はヌクレオシド連結基であるか；または
（ｉｉｉ）Ｔ３およびＴ４は互いに独立してヌクレオシド連結基である。
【０１２３】
別の好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは、少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物を含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物であり：
【化１５】
2020502072.tif 000018
式中、
（ｉ）Ｔ３はヌクレオシド連結基であり、Ｔ４は７’末端基、ＯＲ１、もしくはＯＲ２であり、好ましくはＴ４は７’末端基もしくはＯＲ２であるか；または
（ｉｉ）Ｔ３は５’末端基、ＯＲ１、もしくはＯＲ２であり、好ましくはＴ３は５’末端基もしくはＯＲ１であり；
Ｔ４はヌクレオシド連結基であるか；または
（ｉｉｉ）Ｔ３およびＴ４は互いに独立してヌクレオシド連結基である。
【０１２４】
好ましい実施形態では、上記オリゴマーはオリゴヌクレオチドである。さらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーはオリゴヌクレオチドであり、上記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物である。別の好ましい実施形態では、上記オリゴマーはオリゴヌクレオチドであり、上記式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物である。より好ましい実施形態では、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の上記少なくとも１つの化合物を含むオリゴマーはＤＮＡである。
【０１２５】
別の実施形態では、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の上記少なくとも１つの化合物を含む本発明のオリゴマーは、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物のいずれとも異なる少なくとも１つのヌクレオチドをさらに含み、好ましくは、少なくとも１つの異なるヌクレオチドは、（ｉ）単環糖を含むヌクレオチド、すなわち単環式ヌクレオチド、または（ｉｉ）二環糖を含むヌクレオチド、すなわち二環式ヌクレオチド、または（ｉｉｉ）三環糖を含むヌクレオチド、すなわち、三環式ヌクレオチドである。好ましくは、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドは二環糖を含むヌクレオチドである。好ましくは、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドは三環糖を含むヌクレオチドである。より好ましくは、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドは単環糖を含むヌクレオチドである。
【０１２６】
本発明のオリゴマーの別の好ましい実施形態では、上記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり、上記オリゴマーは式（Ｖ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドをさらに含み、好ましくは、少なくとも１つの異なるヌクレオチドは、（ｉ）単環糖を含むヌクレオチド、すなわち単環式ヌクレオチド、または（ｉｉ）二環糖を含むヌクレオチド、すなわち二環式ヌクレオチド、または（ｉｉｉ）三環糖を含むヌクレオチド、すなわち三環式ヌクレオチドである。好ましくは、式（Ｖ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドは二環糖を含むヌクレオチドである。好ましくは、式（Ｖ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドは三環糖を含むヌクレオチドである。より好ましくは、式（Ｖ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドは単環糖を含むヌクレオチドである。
【０１２７】
本発明のオリゴマーの別の好ましい実施形態では、上記式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物であり、上記オリゴマーは、式（ＶＩ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドをさらに含み、好ましくは少なくとも１つの異なるヌクレオチドは、（ｉ）単環糖を含むヌクレオチド、すなわち単環式ヌクレオチド、または（ｉｉ）二環糖を含むヌクレオチド、すなわち二環式ヌクレオチド、または（ｉｉｉ）三環糖を含むヌクレオチド、すなわち三環式ヌクレオチドである。好ましくは、式（ＶＩ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドは二環糖を含むヌクレオチドである。好ましくは、式（ＶＩ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドは三環糖を含むヌクレオチドである。より好ましくは、式（ＶＩ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドは単環糖を含むヌクレオチドである。
【０１２８】
別の実施形態では、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合を含むオリゴマーは式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる少なくとも２つのヌクレオチドをさらに含み、上記少なくとも２つの異なるヌクレオチドはヌクレオシド連結基により互いに連結され、各ヌクレオシド連結基は互いに独立して、ホスホジエステル連結基、ホスホトリエステル連結基、ホスホロチオエート連結基、ホスホロジチオエート連結基、ホスホネート連結基、ホスホノチオエート連結基、ホスフィナート連結基、ホスホルチオアミデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｔｈｉｏａｍｉｄａｔｅ）連結またはホスホラミデート連結基から選択され、好ましくは各ヌクレオシド連結基は互いに独立してホスホジエステル連結基またはホスホロチオエート連結基であり、さらに好ましくは各ヌクレオシド連結基はホスホロチオエート連結基である。
【０１２９】
本発明のオリゴマーの別の好ましい実施形態では、上記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり、および上記オリゴマーは式（Ｖ）の化合物とは異なる少なくとも２つのヌクレオチドをさらに含み、上記少なくとも２つの異なるヌクレオチドはヌクレオシド連結基により互いに連結され、各ヌクレオシド連結基は互いに独立して、ホスホジエステル連結基、ホスホトリエステル連結基、ホスホロチオエート連結基、ホスホロジチオエート連結基、ホスホネート連結基、ホスホノチオエート連結基、ホスフィナート連結基、ホスホルチオアミデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｔｈｉｏａｍｉｄａｔｅ）連結またはホスホラミデート連結基から選択され、好ましくは各ヌクレオシド連結基は互いに独立して、ホスホジエステル連結基またはホスホロチオエート連結基であり、さらに好ましくは各ヌクレオシド連結基はホスホロチオエート連結基である。
【０１３０】
本発明のオリゴマーの別の好ましい実施形態では、上記式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物であり、および上記オリゴマーは、式（ＶＩ）の化合物とは異なる少なくとも２つのヌクレオチドをさらに含み、上記少なくとも２つの異なるヌクレオチドはヌクレオシド連結基により互いに連結され、各ヌクレオシド連結基は互いに独立して、ホスホジエステル連結基、ホスホトリエステル連結基、ホスホロチオエート連結基、ホスホロジチオエート連結基、ホスホネート連結基、ホスホノチオエート連結基、ホスフィナート連結基、ホスホルチオアミデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｔｈｉｏａｍｉｄａｔｅ）連結またはホスホラミデート連結基から選択され、好ましくは各ヌクレオシド連結基は互いに独立して、ホスホジエステル連結基またはホスホロチオエート連結基であり、さらに好ましくは各ヌクレオシド連結基はホスホロチオエート連結基である。
【０１３１】
別の好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーでは、Ｂｘはプリン塩基またはピリミジン塩基から選択され、好ましくはＢｘは、（ｉ）アデニン（Ａ）、（ｉｉ）シトシン（Ｃ）、（ｉｉｉ）５−メチルシトシン（ＭｅＣ）、（ｉｖ）グアニン（Ｇ）、（ｖ）ウラシル（Ｕ）、または（ｖｉ）５−メチルウラシル（ＭｅＵ）、あるいは（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）または（ｖｉ）の誘導体から選択され、さらに好ましくはＢｘは、ウラシル、チミン、シトシン、５−メチルシトシン、アデニンまたはグアニンから選択される。より好ましくは、本発明のオリゴマーでは、Ｂｘはチミン、５−メチルシトシン、アデニンまたはグアニンから選択される。
【０１３２】
別の好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーでは、各ヌクレオシド連結基は互いに独立して、ホスホジエステル連結基、ホスホトリエステル連結基、ホスホロチオエート連結基、ホスホロジチオエート連結基、ホスホネート連結基、ホスホノチオエート連結基、ホスフィナート連結基、ホスホルチオアミデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｔｈｉｏａｍｉｄａｔｅ）連結またはホスホラミデート連結基から選択され、好ましくは各ヌクレオシド連結基は互いに独立して、ホスホジエステル連結基またはホスホロチオエート連結基であり、さらに好ましくは各ヌクレオシド連結基はホスホロチオエート連結基である。
【０１３３】
別の実施形態では、本発明のオリゴマーは、１〜５、好ましくは１〜４、より好ましくは１〜２、再びより好ましくは１〜２、再びより好ましくはちょうど１つの、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物を含む。本発明のオリゴマーの好ましい実施形態では、上記式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物であり、上記オリゴマーは１〜５、好ましくは１〜４、より好ましくは１〜２、再びより好ましくは１〜２、再びより好ましくはちょうど１つの式（ＶＩ）の化合物を含む。特に、ＤＮＡ二本鎖内での、オリゴヌクレオチド内での式（ＶＩ）の化合物の単一組み込み、好ましくは式（ＶＩ）の化合物の単一組み込み（Ｂｘはメチルシトシンである）は実質的な安定化効果を有することが見出されている。よって、本発明のオリゴマーの非常に好ましい実施形態では、上記オリゴマーは、ちょうど１つの式（ＩＶ）の化合物を含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物であり、上記Ｂｘはメチルシトシンであり、上記オリゴマーはオリゴヌクレオチドであり、式（ＶＩ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドをさらに含み、好ましくは少なくとも１つの異なるヌクレオチドは単環糖を含むヌクレオチドである。
【０１３４】
本発明のオリゴマーの別の好ましい実施形態では、上記オリゴマーは、少なくとも２つの式（ＩＶ）の化合物を含み、式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドをさらに含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり、上記式（Ｖ）の化合物の各々はその５’末端を用いて、（ｉ）式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドの５’末端、または（ｉｉ）別の式（Ｖ）の化合物の７’末端に連結され；上記式（Ｖ）の化合物はその７’末端を用いて、（ｉ）式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドの３’末端または（ｉｉ）別の式（Ｖ）の化合物の５’末端に連結される。
【０１３５】
本発明のオリゴマーの別の実施形態では、上記オリゴマーは少なくとも２つの式（ＩＶ）の化合物を含み、式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドをさらに含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物であり、上記式（ＶＩ）の化合物の各々はその５’末端を用いて、（ｉ）式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドの３’末端または（ｉｉ）別の式（ＶＩ）の化合物の３’末端に連結され；上記式（ＶＩ）の化合物の各々はその３’末端を用いて、（ｉ）式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記少なくとも１つのヌクレオチドの５’末端または（ｉｉ）別の式（ＶＩ）の化合物の５’末端に連結される。
【０１３６】
本発明のオリゴマーの好ましい実施形態では、上記オリゴマーは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも２つのヌクレオチドをさらに含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり、式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記ヌクレオチドの各々はその３’末端を用いて、（ｉ）上記式（Ｖ）の化合物の７’末端または（ｉｉ）式（ＩＶ）の化合物とは異なる別のヌクレオチドの５’末端に連結され、式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記ヌクレオチドの各々はその５’末端を用いて、（ｉ）上記式（Ｖ）の化合物の５’末端または（ｉｉ）式（ＩＶ）の化合物とは異なる別のヌクレオチドの３’末端に連結される。
【０１３７】
本発明のオリゴマーの好ましい実施形態では、上記オリゴマーは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも２つのヌクレオチドをさらに含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり、式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記ヌクレオチドの各々はその３’末端を用いて、（ｉ）上記式（Ｖ）の化合物の７’末端または（ｉｉ）式（ＩＶ）の化合物とは異なる別のヌクレオチドの５’末端に連結され、式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記ヌクレオチドの各々はその５’末端を用いて、（ｉ）上記式（Ｖ）の化合物の５’末端または（ｉｉ）式（ＩＶ）の化合物とは異なる別のヌクレオチドの３’末端に連結される。
【０１３８】
本発明のオリゴマーの好ましい実施形態では、上記オリゴマーは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも２つのヌクレオチドをさらに含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり、少なくとも１つの式（Ｖ）の化合物の各々はその５’末端およびその７’末端を用いて式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記ヌクレオチドに連結される。
【０１３９】
本発明のオリゴマーの好ましい実施形態では、上記オリゴマーは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも２つのヌクレオチドをさらに含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり、式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記ヌクレオチドの各々はその３’末端を用いて、（ｉ）上記式（Ｖ）の化合物の７’末端または（ｉｉ）式（ＩＶ）の化合物とは異なる別のヌクレオチドの５’末端に連結され、式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記ヌクレオチドの各々はその５’末端を用いて、（ｉ）上記式（Ｖ）の化合物の５’末端または（ｉｉ）式（ＩＶ）の化合物とは異なる別のヌクレオチドの３’末端に連結される。
【０１４０】
本発明のオリゴマーの好ましい実施形態では、上記オリゴマーは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも２つのヌクレオチドをさらに含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物であり、少なくとも１つの式（ＶＩ）の化合物の各々はその５’末端およびその７’末端を用いて式（ＩＶ）の化合物とは異なる上記ヌクレオチドに連結される。
【０１４１】
本発明のオリゴマーの別の好ましい実施形態では、上記オリゴマーは少なくとも２つの式（ＩＶ）の化合物を含み、式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも２つのヌクレオチドをさらに含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり、少なくとも１つの式（Ｖ）の化合物の各々はその７’末端を用いて、式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドの３’末端に；およびその５’末端を用いて、式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドの５’末端に連結される。
【０１４２】
本発明のオリゴマーの別の好ましい実施形態では、上記オリゴマーは少なくとも２つの式（ＩＶ）の化合物を含み、式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも２つのヌクレオチドをさらに含み、上記式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物であり、少なくとも１つの式（ＶＩ）の化合物の各々はその５’末端を用いて、式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドの３’末端；および、その７’末端を用いて式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドの５’末端に連結される。
【０１４３】
本発明のオリゴマーの好ましい実施形態では、上記オリゴマーは少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物を含み、上記化合物は式（ＶＩ）の化合物であり、少なくとも１つの式（ＶＩ）の化合物の各々はその５’末端およびその７’末端を用いて式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドに連結され、Ｂｘはシトシンまたは５−メチルシトシン、好ましくは５−メチルシトシンである。
【０１４４】
本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーはちょうど１つの式（ＩＶ）の化合物を含み、上記化合物は式（ＶＩ）の化合物であり、上記式（ＶＩ）の化合物はその５’末端およびその７’末端を用いて式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドに連結され、Ｂｘはシトシンまたは５−メチルシトシン、好ましくは５−メチルシトシンである。
【０１４５】
別の好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは、１〜５、好ましくは１〜４、より好ましくは１〜２、再びより好ましくは１〜２、再びより好ましくはちょうど１つの式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）、好ましくは式（ＶＩ）の化合物を含み、Ｂｘはピリミジン塩基、より好ましくはシトシンまたは５−メチルシトシン、再びより好ましくは５−メチルシトシンである。より好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーはちょうど１つの式（ＶＩ）の化合物を含み、Ｂｘはシトシンまたは５−メチルシトシン、好ましくは５−メチルシトシンである。ちょうど１つまたはほんの数個の式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）、好ましくは式（ＶＩ）の化合物の組み込み（Ｂｘはピリミジン塩基である）では、小さな不安定化につながるにすぎず、または本発明のオリゴマーを用いた二本鎖形成が安定化されることさえある。とりわけ、核酸塩基がシトシンまたはシトシン誘導体、好ましくは５−メチルシトシンである場合、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）、好ましくは式（ＶＩ）の化合物を含む本発明のオリゴマーの、相補的ＤＮＡとの二本鎖は著しく安定化される。この安定化効果は、５−メチルシトシンヌクレオシドでより顕著になる。別の実施形態では、本発明のオリゴマーは、１〜５、好ましくは１〜４、より好ましくは１〜２、再びより好ましくは１〜２、再びより好ましくはちょうど１つの式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）、好ましくは式（ＶＩ）の化合物を含み、Ｂｘはプリン塩基である。核酸塩基プリンは、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）、好ましくは式（ＶＩ）の化合物を含む本発明のオリゴマーの、相補的ＲＮＡとの二本鎖を安定化する。
【０１４６】
別の好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは少なくとも２つの連続した式（ＩＶ）の化合物を含むか、または好ましくはこれから構成され、連続した式（ＩＶ）の化合物の各々は、ヌクレオシド連結基により隣接する連続した式（ＩＶ）の化合物に独立して連結され、ヌクレオシド連結基は２つの連続した式（ＩＶ）の化合物の５’末端および７’末端を連結させる。別の好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは少なくとも２つの連続した式（Ｖ）の化合物を含むか、または好ましくはこれから構成され、連続した式（Ｖ）の化合物の各々は、ヌクレオシド連結基により隣接する連続した式（Ｖ）の化合物に独立して連結され、ヌクレオシド連結基は２つの連続した式（Ｖ）の化合物の５’末端および７’末端を連結させる。別の好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは少なくとも２つの連続した式（ＶＩ）の化合物を含むか、または好ましくはこれから構成され、連続した式（ＶＩ）の化合物の各々は、ヌクレオシド連結基により隣接する連続した式（ＶＩ）の化合物に独立して連結され、ヌクレオシド連結基は２つの連続した式（ＶＩ）の化合物の５’末端および７’末端を連結させる。
【０１４７】
さらに好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは１０〜４０の連続した式（ＩＶ）の化合物、好ましくは１０〜３０の連続した式（ＩＶ）の化合物、より好ましくは１０〜２５の連続した式（ＩＶ）の化合物、再びより好ましくは１０〜２０の連続した式（ＩＶ）の化合物または１０〜１５の連続した式（ＩＶ）の化合物を含むか、または好ましくはこれから構成される。本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり、上記オリゴマーは、１０〜４０の連続した式（Ｖ）の化合物、好ましくは１０〜３０の連続した式（Ｖ）の化合物、より好ましくは１０〜２５の連続した式（Ｖ）の化合物、再びより好ましくは１０〜２０の連続した式（Ｖ）の化合物、および再びより好ましくは１０〜１５の連続した式（Ｖ）の化合物を含むか、または好ましくはこれから構成される。本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物は式（ＶＩ）の化合物であり、上記オリゴマーは、１０〜４０の連続した式（ＶＩ）の化合物、好ましくは１０〜３０の連続した式（ＶＩ）の化合物、より好ましくは１０〜２５の連続した式（ＶＩ）の化合物、再びより好ましくは１０〜２０の連続した式（ＶＩ）の化合物、および再びより好ましくは１０〜１５の連続した式（ＶＩ）の化合物を含むか、または好ましくはこれから構成される。
【０１４８】
本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物は式（Ｖ）の化合物であり、上記オリゴマーは、１０〜４０の連続した式（Ｖ）の化合物、好ましくは１０〜３０の連続した式（Ｖ）の化合物、より好ましくは１０〜２５の連続した式（Ｖ）の化合物、再びより好ましくは１０〜２０の連続した式（Ｖ）の化合物、および再びより好ましくは１０〜１５の連続した式（Ｖ）の化合物を含むか、または好ましくはこれから構成され、連続した式（Ｖ）の化合物の各々は、ヌクレオシド連結基により隣接する連続した式（Ｖ）の化合物に独立して連結され、ヌクレオシド連結基は２つの連続した式（Ｖ）の化合物の５’末端および７’末端を連結させ、上記ヌクレオシド連結基はリン連結基であり、上記リン連結基はホスホジエステル連結基、ホスホトリエステル連結基およびホスホロチオエート連結基から選択され、好ましくは上記リン連結基はホスホジエステル連結基またはホスホロチオエート連結基である。
【０１４９】
さらに好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは、少なくとも１つの核酸配列を含むか、または好ましくはこれから構成され、上記核酸配列は上記少なくとも１つの式（ＩＶ）の化合物を含み、上記核酸配列は配列番号１〜２４、好ましくは配列番号２４から選択される。さらに好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは少なくとも１つの核酸配列を含むか、または好ましくはこれから構成され、上記核酸配列は上記少なくとも１つの式（Ｖ）の化合物を含み、上記核酸配列は配列番号１６〜２４、好ましくは配列番号２１〜２４、より好ましくは配列番号２４から選択される。さらに好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは少なくとも１つの核酸配列を含むか、または好ましくはこれから構成され、上記核酸配列は上記少なくとも１つの式（ＶＩ）の化合物を含み、上記核酸配列は配列番号１〜１５、好ましくは配列番号１３−１５から選択される。より好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは、配列番号１３〜１５または２１〜２４、好ましくは配列番号２４から選択される核酸配列から構成される。別の好ましい実施形態では、上記オリゴマーは配列番号１３〜１５または２１〜２４から選択される核酸配列であり、好ましくは上記オリゴマーは配列番号２４である。
【０１５０】
本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーは核酸配列を含み、上記核酸配列は少なくとも２つの連続した式（ＩＶ）の化合物から構成され、上記核酸配列はその５’末端またはその７’末端で式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接している。本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーは核酸配列を含み、上記核酸配列は少なくとも２つの連続した式（Ｖ）の化合物から構成され、上記核酸配列はその５’末端またはその７’末端で、式（Ｖ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接している。本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーは核酸配列を含み、上記核酸配列は少なくとも２つの連続した式（ＶＩ）の化合物から構成され、上記核酸配列はその５’末端またはその７’末端で、式（ＶＩ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接している。
【０１５１】
本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーは核酸配列を含み、上記核酸配列は少なくとも２つの連続した式（ＩＶ）の化合物から構成され、上記核酸配列はその５’末端およびその７’末端で式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接している。本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーは核酸配列を含み、上記核酸配列は、少なくとも２つの連続した式（Ｖ）の化合物から構成され、上記核酸配列はその５’末端およびその７’末端で、式（Ｖ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接している。本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーは核酸配列を含み、上記核酸配列は、少なくとも２つの連続した式（ＶＩ）の化合物から構成され、上記核酸配列はその５’末端およびその７’末端で式（ＶＩ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接している。
【０１５２】
本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーは核酸配列を含み、上記核酸配列は少なくとも２つの連続した式（Ｖ）の化合物から構成され、上記核酸配列はその５’末端またはその７’末端で、式（Ｖ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接しており、上記核酸配列の５’末端は、式（Ｖ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドの５’末端に連結され；または上記核酸配列の７’末端は式（Ｖ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドまたはヌクレオシドの３’末端に連結される。
【０１５３】
本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーは核酸配列を含み、上記核酸配列は少なくとも２つの連続した式（Ｖ）の化合物から構成され、上記核酸配列はその５’末端およびその７’末端で式（Ｖ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接しており、上記核酸配列の５’末端は式（Ｖ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドまたはヌクレオシドの５’末端に連結され；上記核酸配列の７’末端は式（Ｖ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドまたはヌクレオシドの３’末端に連結される。
【０１５４】
本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーは核酸配列を含み、上記核酸配列少なくとも２つの連続した式（ＶＩ）の化合物から構成され、上記核酸配列はその５’末端またはその７’末端で式（ＶＩ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なる少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接しており、上記核酸配列の５’末端は式（ＶＩ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドまたはヌクレオシドの３’末端に連結され；または上記核酸配列の７’末端は式（ＶＩ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドまたはヌクレオシドの５’末端に連結される。
【０１５５】
本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記オリゴマーは核酸配列を含み、上記核酸配列は、少なくとも２つの連続した式（ＶＩ）の化合物から構成され、上記核酸配列はその５’末端およびその７’末端でそれぞれ、式（ＶＩ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なる、少なくとも１つのヌクレオチドまたはヌクレオシドと隣接しており、上記核酸配列の５’末端は、式（ＶＩ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドまたはヌクレオシドの３’末端に連結され；上記核酸配列の７’末端は式（ＶＩ）の化合物とは異なる、好ましくは式（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物とは異なる、さらに好ましくは式（ＩＶ）の化合物とは異なるヌクレオチドまたはヌクレオシドの５’末端に連結される。
【０１５６】
本発明のオリゴマーのさらに好ましい実施形態では、上記式（ＩＶ）の化合物は下記から選択される
【化１６】
2020502072.tif 000019
2020502072.tif 000020
【０１５７】
さらに好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは二本鎖である。ある一定の実施形態では、上記二本鎖オリゴマーのちょうど１つまたは両方のストランドは少なくとも１つの、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）の化合物を含む。
【０１５８】
第３の態様では、本発明は、疾患の予防、治療または診断における薬剤としての使用のための、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の本発明の化合物または本発明のオリゴマーを提供する。
【０１５９】
ある一定の実施形態では、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物は、疾患の予防または治療における薬剤として使用される。本発明は、治療的有効量の式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）を患者に投与することにより、患者において疾患を予防する、または疾患を患う患者を治療する方法を提供する。別の実施形態では、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物は疾患の予防または治療のための薬剤の製造のために使用される。
【０１６０】
さらなる実施形態では、本発明のオリゴマーは、疾患の予防または治療における薬剤として使用される。本発明は、治療的有効量の本発明のオリゴマーを患者に投与することにより、患者において疾患を予防する、または疾患を患う患者を治療する方法を提供する。別の好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは疾患の予防または治療のための薬剤の製造のために使用される。
【０１６１】
「患者」という用語は、本明細書では、ヒトまたは動物を示し、動物は好ましくは哺乳類である。「患者」という用語は、疾患または障害の症状を示す被験体に制限されず、健康な被験体（すなわち症状なし）または症状を示すリスクがある被験体を含む。「治療的有効量」は、単一用量として、または一連の用量の一部として被験体に投与される量を示し、それは、被験体において所望の生理応答または治療効果を生成させるのに有効である。所望の治療効果の例としては、限定はされないが、症状または病態の改善、症状または病態の進行の低減、および疾患の症状または病態の発症の減速が挙げられる。治療的有効量は、使用される製剤の性質およびレシピエントの型および状態によって変動する。任意の組成物に対する適切な量の決定は当技術分野の技能の範囲内であり、適切な治療レベルを評価するように設計された標準シリーズの試験による。アンチセンスオリゴヌクレオチドの典型的なおよび好ましい治療的有効量は約０．０５〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、特に約５〜５００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。
【０１６２】
さらなる実施形態では、本発明のオリゴマーはアンチセンスオリゴヌクレオチドである。好ましい実施形態では、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは疾患の予防、治療または診断において使用される。本明細書では、「アンチセンスオリゴヌクレオチド」という用語は、標的核酸配列とハイブリダイズすることができるオリゴヌクレオチドを示す。好ましい実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは標的核酸配列に相補的である。オリゴヌクレオチドおよび標的核酸における十分な数の相補的位置が相補的核酸塩基により占められており、それらは互いに水素結合を形成することができ、よって、特異的結合がオリゴヌクレオチドと標的核酸の間で起こる場合、オリゴヌクレオチドは標的核酸に相補的である。例えば、アデニンおよびチミンは相補的核酸塩基であり、それらは、水素結合の形成により対形成する。ハイブリダイゼーションは様々な環境下で起こり得る。当技術分野では、アンチセンスオリゴヌクレオチドの配列は、ハイブリダイズ可能な標的核酸のヌクレオチドに１００％相補的であるヌクレオチドを含む必要はないことが理解される。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、１つ以上のヌクレオチドについてハイブリダイズすることができるが、介在または隣接するヌクレオチドはハイブリダイゼーションに関与しない。本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチド部分は標的核酸内の標的領域に対し少なくとも７０％配列相補性を有することが好ましく、より好ましくはそれらは８５％または９０％配列相補性を有し、さらにいっそう好ましくは標的核酸配列内の標的領域に対し９５％配列相補性を有する。
【０１６３】
ある一定の実施形態では、本発明のオリゴマーは疾患の予防または治療において使用され、オリゴマーは、標的核酸の複製、翻訳、転写、トランスロケーション、触媒活性、複合体形成、スプライシングまたは完全性を妨害することができる。ある一定の実施形態では、本発明のオリゴマーは疾患の予防または治療において使用され、オリゴマーは、標的核酸に結合する、標的核酸の発現を下方制御する、標的核酸配列を立体的にブロックするまたは標的核酸において核酸干渉、遺伝子サイレンシング、分解またはエクソンスキッピングを誘導することができる。好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは疾患の予防または治療において使用され、オリゴマーは、標的核酸に結合する、および上記標的核酸の発現を下方制御することができる。別の好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは疾患の予防または治療において使用され、オリゴマーは標的核酸に結合する、上記標的核酸を立体的にブロックする、および上記標的核酸においてエクソンスキッピングを誘導することができる。好ましい実施形態では、上記標的核酸はＤＮＡまたはＲＮＡである。ＲＮＡは好ましくはプレｍＲＮＡ（処理前または前駆体メッセンジャーＲＮＡ）または成熟ＲＮＡである。ＲＮＡはｍＲＮＡまたは非翻訳ＲＮＡの機能形態、例えば長鎖非翻訳ＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、低分子干渉ＲＮＡ、核小体低分子ＲＮＡ、Ｐｉｗｉ結合ＲＮＡ、ｔＲＮＡ由来小型ＲＮＡ、小型ｒＤＮＡ由来ＲＮＡ、ｒＲＮＡまたはｔＲＮＡである。ある一定の実施形態では、本発明のオリゴマーは疾患の予防または治療において使用され、オリゴマーは標的核酸におけるスプライスプロセスを変化させることができ、好ましくは標的核酸はプレｍＲＮＡである。好ましくは上記オリゴマーは標的プレｍＲＮＡにおいてエクソンスキッピングを誘導することができる。「エクソン」は、タンパク質をコードする核酸の規定されたセクション、またはプレｍＲＮＡのいずれかの一部がスプライシングにより除去された後ＲＮＡ分子の成熟型において表される核酸配列を示す。
【０１６４】
さらなる実施形態では、本発明のオリゴマーは、疾患の予防または治療における薬剤として使用され、上記疾患は遺伝性疾患である。好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは、疾患の予防または治療における薬剤として使用され、上記疾患は筋ジストロフィー、好ましくはＤｕｃｈｅｎｎｅ型筋ジストロフィーである。別の好ましい実施形態では、疾患の予防、治療または診断における薬剤としての使用のためのオリゴマーは配列番号２１の核酸配列または配列番号２４の核酸配列、好ましくは配列番号２４の核酸配列であり、疾患は筋ジストロフィー、好ましくはＤｕｃｈｅｎｎｅ型筋ジストロフィーである。本発明のオリゴマー、特に配列番号２４はＲＮＡに対して良好な親和性を維持し、式（Ｖ）の化合物から構成されるオリゴマーは、その天然起源の対応するＤＮＡと比べて、著しく改善された生体内安定性を与えると考えられる。その上、配列番号２４の核酸は補体を著しくは活性化せず、補体活性化は、アンチセンスオリゴヌクレオチドのインビボ使用と関連する重要な毒性応答を示す。よって、本発明のオリゴマー、好ましくは式（Ｖ）の化合物を含む、または好ましくはこれから構成されるオリゴマーは有望なアンチセンス候補である。最後に、式（Ｖ）の化合物から構成されるオリゴマー、好ましくは配列番号２４の核酸はエクソン２３の強いエクソンスキッピングおよびエクソン２２および２３のダブルエクソンスキッピングを誘導することができる。これらの有望な結果により、本発明のオリゴマー、とりわけ式（Ｖ）の化合物からなるオリゴマーは必要条件を満たし、筋ジストロフィー、例えばＤｕｃｈｅｎｎｅに苦しむ患者において強い治療効果が誘導されることが示される。
【０１６５】
別の態様では、本発明は、疾患の予防または治療における薬剤として使用するための本発明のオリゴマーを提供する。
【０１６６】
さらなる態様では、本発明のオリゴマーは疾患の診断において使用される。さらなる態様では、本発明のオリゴマーは疾患の診断において薬剤として使用される。別の好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは、疾患の診断のための薬剤の製造のために使用される。本発明は患者において疾患を診断する方法を提供する。上記診断または上記診断をすることは、
（ｉ）有効量の、標識されている本発明のオリゴマーを患者に投与すること、および
（ｉｉ）標識されたオリゴマーの非侵襲性または侵襲性、好ましくは非侵襲性インビボイメージング、または
（ｉ’）患者から試料を得ること、
（ｉｉ’）標識されている、本発明のオリゴマーを試料に添加すること、および
（ｉｉｉ’）標識されたオリゴマーの、試料中に含まれる核酸との結合について試料を分析することを含む。好ましい実施形態では、疾患の診断で使用される本発明のオリゴマーはオリゴヌクレオチド、より好ましくはアンチセンスオリゴヌクレオチドである。患者から得られた試料は好ましくは、血液、血清、液または組織試料である。「標識されたオリゴマー」という用語は、本明細書では、標識を含むオリゴマーを示す。好ましくは、標識は、蛍光標識、色素、レポーター基または放射標識から選択される。
【０１６７】
さらなる態様では、本発明は、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）から選択される少なくとも１つの化合物を含む医薬組成物を提供する。さらなる態様では、本発明は少なくとも１つの本発明のオリゴマーを含む医薬組成物を提供する。好ましい実施形態では、上記医薬組成物は、１つ以上の本発明のオリゴマーを含み、上記１つ以上のオリゴマーの少なくとも１つはオリゴヌクレオチド、より好ましくはアンチセンスオリゴヌクレオチドである。好ましい実施形態では、医薬組成物は、好ましくは１つ以上の薬学的に許容される担体と一緒に製剤化された、治療的に有効な量の、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の少なくとも１つの化合物または少なくとも１つの本発明のオリゴマーを含む。１つの実施形態では、本発明の医薬組成物の単位用量は、約１マイクログラム〜２０，０００マイクログラムの、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）のオリゴマーまたは化合物／単位、好ましくは約１０〜１０００マイクログラムを含む。静脈内送達では、医薬製剤の単位用量は、好ましくは０．５〜５００マイクログラム／ｋｇ体重、より好ましくは５〜３００マイクログラム／ｋｇ体重の本発明のオリゴマーを含む。本発明の医薬組成物では、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）のオリゴマーまたは化合物は、通常、組成物の総重量に基づき、約０．５−９５重量％の量で存在する。
【０１６８】
好ましい実施形態では、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の少なくとも１つの化合物または本発明の少なくとも１つのオリゴマーを含む医薬組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体をさらに含む。「薬学的に許容される担体」という用語は、本明細書では、薬学的に許容される材料、組成物またはビヒクル、例えば、液体または固体フィラー、希釈剤、賦形剤、製造助剤（例えば、潤滑剤、タルクマグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは亜鉛、あるいは立体酸（ｓｔｅｒｉｃ  ａｃｉｄ））、または溶媒封入材料を意味する。薬学的に許容される担体は対象化合物を１つの器官または身体の一部から別のところへ運搬または輸送するのに関係することができる。核酸の送達のための方法は、例えば、Ａｋｈｔａｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２，  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏ．，  ２：１３９；およびＤｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  ｅｄ．  Ａｋｈｔａｒ；  Ｓｕｌｌｉｖａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＣＴ  ＷＯ  ９４／０２５９５号において記載される。これらのおよび他のプロトコルは、事実上、任意のヌクレオチドまたは核酸分子、例えば式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物および本発明のオリゴマーの送達のために使用することができる。本発明はまた、Ｐ−糖タンパク質阻害剤（例えばプルロニックＰ８５）（薬物の様々な組織中への進入を増強させることができる）；埋め込み後の徐放送達のための生分解性ポリマー、例えばポリ（ＤＬ−ラクチド−コグリコリド）ミクロスフェア（Ｅｍｅｒｉｃｈ，  ＤＦ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９，  Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ，  ８，  ４７−５８）  Ａｌｋｅｒｍｅｓ，  Ｉｎｃ．  Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，  Ｍａｓｓ）；ナノ粒子、例えばポリブチルシアノアクリレートで製造されたもの（薬物を血液脳関門を横切って送達させることができ、細胞取込メカニズムを変更させることができる）（Ｐｒｏｇ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｂｉｏｌ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，  ２３，  ９４１−９４９，  １９９９）；またはポリエチレングリコール−脂質を含むリポソームをさらに含む本発明の医薬組成物を特徴とする。
【０１６９】
医薬組成物、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物または本発明のオリゴマーの投与は、当技術分野で知られている様々なメカニズムを使用して実施することができる。好ましい実施形態では、本発明の医薬組成物、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物またはオリゴマーは局部または全身投与される。好ましい実施形態では、本発明の医薬組成物、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物またはオリゴマーは、経口的に（例えば、水溶液または非水溶液あるいは懸濁液、錠剤、ボーラス、粉末、顆粒、ペーストとして）、非経口的に（例えば、皮下、筋肉内、静脈内、腹腔内または硬膜外注射により、例えば、無菌溶液または懸濁液、あるいは徐放製剤として）、局所的に（例えば、クリーム、軟膏剤、または放出制御パッチまたはスプレーとして）、腟内または直腸内に（例えばペッサリー、クリームまたはフォームとして）、舌下に、眼内に、経皮的に、経鼻的に、細胞内に、または直接局所腫瘍注射により投与される。好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーを含む医薬組成物は、標的核酸の発現を下方制御する、標的核酸配列を立体的にブロックするまたは標的核酸において核酸干渉、遺伝子サイレンシング、分解またはエクソンスキッピングを誘導するために使用される。
【０１７０】
さらなる態様では、本発明のオリゴマーは標的核酸配列に結合するためインビトロで使用される。好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは、標的核酸の発現を下方制御する、標的核酸配列を立体的にブロックするまたは標的核酸において核酸干渉、遺伝子サイレンシング、分解またはエクソンスキッピングを誘導するために、インビトロで使用される。ある一定の実施形態では、本発明のオリゴマーは、標的核酸の複製、翻訳、転写、トランスロケーション、触媒活性、複合体形成、スプライシングまたは完全性を妨害するためにインビトロで使用される。好ましい実施形態では、本発明のオリゴマーは、標的核酸に結合するためにインビトロで使用され、エクソンスキッピングが上記標的核酸において誘導される。好ましい実施形態では、本発明は、本発明のオリゴマーを細胞膜を横切って送達させることにより、細胞のサイトゾル中での標的遺伝子の発現を下方制御するインビトロ法を提供する。好ましい実施形態では、標的核酸はＤＮＡ、プレｍＲＮＡまたは成熟ｍＲＮＡである。
【０１７１】
さらなる態様では、本発明は、式（Ｉ）〜（ＶＩ）の化合物のいずれか１つの使用を含む、本発明のオリゴマーの固相合成のための方法を提供する。
【０１７２】
実施例
一般手順
全ての反応は乾燥させたガラス器具中、アルゴンの不活性雰囲気下で実施した。反応のための無水溶媒は、活性アルミナに通す濾過により、またはモレキュラーシーブ（４Å）上での貯蔵により得た。カラムクロマトグラフィー（ＣＣ）をシリカゲル（ＳｉｌｉａＦｌａｓｈ  Ｐ６０、４０−６３μｍ、６０Å）上で実施した。ＣＣのために使用したメタノールはＨＰＬＣグレードを有し、ＣＣのために使用した全ての他の溶媒は技術グレードを有し、使用前に蒸留した。薄層クロマトグラフィーをシリカゲルプレート上で実施した（ｍａｃｈｅｒｅｙ−ｎａｇｅｌ、プレコートＴＬＣ−プレートｓｉｌ  Ｇ−２５  ＵＶ２５４）。化合物をＵＶ光下、またはｐ−アニスアルデヒド染色溶液［ｐ−アニスアルデヒド（３．７ｍＬ）、氷酢酸（３．７ｍＬ）、濃硫酸（５ｍＬ）、エタノール（１３５ｍＬ）］に浸漬後、ヒートガンで加熱することにより可視化した。ＮＭＲスペクトルを３００または４００ＭＨｚ（１Ｈ）で、７５または１０１ＭＨｚ（１３Ｃ）で、および１２２ＭＨｚ（３１Ｐ）で、ＣＤＣｌ３、ＣＤ３ＯＤまたはＣＤ３ＣＮのいずれか中で記録した。化学シフト（δ）を残留処理不十分溶媒ピーク［ＣＤＣｌ３：７．２６ｐｐｍ（１Ｈ）、７７．１６ｐｐｍ（１３Ｃ）；ＣＤ３ＯＤ：３．３１ｐｐｍ（１Ｈ）、４９．００ｐｐｍ（１３Ｃ）］に対して報告する。シグナル帰属はＡＰＴおよびＤＥＰＴならびに１Ｈ，１Ｈおよび１Ｈ，１３Ｃ相関実験（ＣＯＳＹ、ＨＳＱＣ、ＨＭＢＣ）に基づく。高分解能質量検出をポジティブモードでのエレクトロスプレーイオン化により実施した（イオントラップ、ＥＳＩ＋）。
【０１７３】
この実施例セクション内では、簡単にするために、この実施例セクションで言及したヌクレオチドまたはヌクレオシドは、特定的にαアノマーと言及しない限り、βアノマーを示す。さらに、これに一貫して、この実施例セクション内で言及したオリゴマーまたはオリゴヌクレオチドは、特定的にαアノマーと言及しない限り、βアノマーを含む。
【０１７４】
融解温度
ＵＶ−融解実験をＶａｒｉａｎ  Ｃａｒｙ  Ｂｉｏ  １００  ＵＶ／ｖｉｓ分光光度計上で記録した。実験を２μＭ二本鎖濃度、１０ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、０Ｍ〜１５０ｍＭ  ＮａＣｌ（αアノマー）または０．０５Ｍ〜１．００Ｍ  ＮａＣｌ（βアノマー）および７．０に調整したｐＨで実施した。試料をジメチルポリシロキサンのカバリング層により蒸発から保護した。吸光度を２６０ｎｍでモニタした。実験毎に、３回の冷却−加熱サイクルを、０．５℃／分の温度勾配を用いて実施した。曲線一次導関数の最大値をＶａｒｉａｎ  ＷｉｎＵＶソフトウェアで抽出し、Ｔｍ値を６つの勾配の平均として報告した。
【０１７５】
円二色性分光法
ＪａｓｃｏＰＦＯ−３５０Ｓ温度制御装置を備えたＪａｓｃｏ  Ｊ−７１５分光偏光計上で、ＣＤ−スペクトルを記録した。試料条件はＵＶ−融解実験と同じであった。２１０〜３２０ｎｍ、５０ｎｍ／分速度でスペクトルを記録し、温度を直接、試料から測定した。各実験について、試料と同じ塩濃度を含むブランクを記録した。報告したスペクトルは、３つの走査の平滑化平均をとり、対応するブランクスペクトルを減算することにより得た。
【表１】
2020502072.tif 000021
【０１７６】
実施例１
本発明の化合物の合成
（全体概観）
その後のヌクレオシド合成のために想定される二環式足場７および１０は、前に記載された中間体１から構築することができた（Ｔａｒｋoｙ，  Ｍ．；  Ｂｏｌｌｉ，  Ｍ．；  Ｓｃｈｗｅｉｚｅｒ，  Ｂ．；  Ｌｅｕｍａｎｎ，  Ｃ．  Ｈｅｌｖ．  Ｃｈｉｍ．  Ａｃｔａ  １９９３，  ７６，  ４８１）（スキーム１）。１内のエポキシド環を効率的に−７８℃でのＬｉＨＭＤＳ媒介分子内脱離により開環させ、不飽和エステル２を良好な収率で得た。２のその後のニッケル触媒ＮａＢＨ４還元は、二環コア構造の凸側から立体特異的に進み、エステル３が唯一の特定できるジアステレオ異性体として得られた。３中のヒドロキシル官能基をその後ＴＢＤＰＳ保護し、４を定量的収率で得た。その結果として、中間体４を、ＤＩＢＡＬで−７８℃にて還元させ、アルデヒド５を得た。５中のアセトニド保護基をその後、緩やかな条件下で、Ｉｎ（ＯＴｆ）３を触媒として用いて、ＭｅＣＮおよびＨ２Ｏの混合物中で、加水分解させた（Ｇｏｌｄｅｎ，  Ｋ．  Ｃ．；  Ｇｒｅｇｇ，  Ｂ．  Ｔ．；  Ｑｕｉｎｎ，  Ｊ．  Ｆ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．  ２０１０，  ５１，  ４０１０）、得られた二環式ヘミアセタールを、単に溶媒をＭｅＯＨに変更することにより、メチルグリコシド６に変換させた。化合物６をその後、アセチル化し、保護前駆体７を得、これを、Ｖｏｒｂｒuｇｇｅｎ化学による対応するプリンヌクレオシドの合成のために使用した。
【化１７】
2020502072.tif 000022
スキーム１：（ａ）ＬｉＨＭＤＳ、ＴＨＦ、−７８℃、２ｈ、７４％；（ｂ）ＮａＢＨ４、ＮｉＣｌ２、ＥｔＯＨ、０℃→ｒｔ、２ｈ、９０％；（ｃ）ＴＢＤＰＳＣｌ、Ｉ２、Ｎ−メチルイミダゾール、ＴＨＦ、ｒｔ、３ｈ、ｑｕａｎｔ；（ｄ）ＤｉＢＡＬ−Ｈ、ＣＨ２Ｃｌ２、−７８℃、９０ｍｉｎ、８９％；（ｅ）ｉ）Ｉｎ（ＯＴｆ）３、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、ｒｔ、４８ｈ、ｉｉ）ＭｅＯＨ、６ｈ、８１％；（ｆ）Ａｃ２Ｏ、ＤＭＡＰ、ＤＣＭ、ｒｔ、２ｈ、９６％；（ｇ）ｉ）ＴＭＳＯＴｆ、２，６−ルチジン、ＤＣＭ、ｒｔ、６０ｍｉｎ、ｉｉ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、０℃、２０ｍｉｎ、９２％；（ｈ）ＤＭＴｒ−Ｃｌ、ＡｇＯＴｆ、ＤＣＭ／ルチジン、ｒｔ、４ｈ、９３％；（ｉ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、ｒｔ、２０ｈ、ｑｕａｎｔ。
【０１７７】
本発明の好ましいピリミジンヌクレオシドの合成は、確立した適用では、対応する二環式グリカールへの、核酸塩基のβ−立体選択的ＮＩＨ誘導付加から構成された（Ｍｅｄｖｅｃｋｙ，  Ｍ．；  Ｉｓｔｒａｔｅ，  Ａ．；  Ｌｅｕｍａｎｎ，  Ｃ．  Ｊ．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１５，  ８０，  ３５５６；  Ｄｕｇｏｖｉｃ，  Ｂ．；  Ｌｅｕｍａｎｎ，  Ｃ．  Ｊ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２０１４，  ７９，  １２７１；  Ｌｉｅｔａｒｄ，  Ｊ．；  Ｌｅｕｍａｎｎ，  Ｃ．  Ｊ．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ２０１２，  ７７，  ４５６６）。最初に、チミン核酸塩基を導入するために、Ｎ−ヨードスクシンイミド（ＮＩＳ）誘導ヌクレオシド化（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄａｔｉｏｎ）を、６からＴＭＳＯＴｆのみを用いた処理により容易に得られたグリカール８の直接前駆体（Ｒ１＝ＴＭＳである）上で実施した。このアプローチで対応するβ−ヌクレオシドの立体選択的形成が得られたが、しかしながら、７％のα−アノマーの著しい汚染を伴い、それは、標準クロマトグラフィー技術により分離不能のままであった。β−選択性は、グリカール１０のように、Ｒ１での立体容積を増加させ、Ｒ２での立体容積を減少させることにより増強させることができたことは理にかなっていた。これは、Ｃ（４）での求電子性ヨウ素の初期α−攻撃に有利となるであろう。この目的を達成するために、ＴＭＳＯＴｆを用い、続いて、ＴＢＡＦを用いた短い処理を用いて、新たに導入したＴＭＳ基を選択的に除去して、化合物６をグリカール８に変換させた。中間体８をその後、ジメトキシトリチル化合物９に構成させ、これを最終的に、ＴＢＡＦを用いたＴＢＤＰＳ保護基の除去に供し、所望の糖成分１０を得た。
【０１７８】
インサイチューＴＭＳ保護グリカール１０上でのＮＩＳ−ヌクレオシド化、続いて、ヨウ化物中間体のＢｕ３ＳｎＨによるラジカル還元により、ＤＭＴｒ保護チミジン誘導体１１を、わずかな量のみの（１Ｈ−ＮＭＲにより＜２％）α−アノマーを含んだ良好な収率で得た（スキーム２）。２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイトによる最終ホスフィチル化により、チミジンホスホラミダイトビルディングブロック１２を得た。５−メチルシトシンヌクレオシドの合成を塩基チミンの変換により達成した。この目的を達成するために、ヌクレオシド１１をＴＭＳ保護し、１，２，４−トリアゾールおよびＰＯＣｌ３を用いた処理により対応するトリアゾリドに変換させた。アンモニアおよび１，４−ジオキサンの混合物中でのこのトリアゾリドのその後の処理により、対応する５−メチルシトシンヌクレオシドを得、これを直接Ｂｚ２Ｏで保護し、１３を３工程にわたって８８％収率で得た。ホスホラミダイト１４を前述のようなホスフィチル化により得た。
【化１８】
2020502072.tif 000023
スキーム２：（ａ）ｉ）チミン、ＢＳＡ、ＮＩＳ、ＤＣＭ、ｒｔ、７ｈ；ｉｉ）Ｂｕ３ＳｎＨ、ＡＩＢＮ、トルエン、７０℃、３０ｍｉｎ、７３％；（ｂ）２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト、ＥＴＴ、ＤＣＭ、ｒｔ、３０ｍｉｎ、１２では７０％、１４では７５％；（ｃ）ｉ）ＢＳＡ、トリアゾール、ＰＯＣｌ３、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ３ＣＮ、ｒｔ、５ｈ、ｉｉ）１，４−ジオキサン／ＮＨ４ＯＨ、ｒｔ、２ｈ、ｉｉｉ）Ｂｚ２Ｏ、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、ｒｔ、２０ｈ、８８％。
【０１７９】
古典的Ｖｏｒｂｒuｇｇｅｎヌクレオシド化をプリン核酸塩基を導入するために適用し、一般にα−ヌクレオシドの普及を得た。Ｎ６−ベンゾイルアデニンまたは２−アミノ−６−クロロプリンのいずれかを用いた前駆体７の変換では、分離不能アノマー混合物１５および２０となり、それぞれ、α／β比は４：１および７：３である（スキーム３）。アノマーの分離は脱アセチル後可能となり、純粋β−アノマー１６および２１につながった。ここから、アデニンビルディングブロック１９は、標準ジメトキシトリチル化（→１７）、続いてシリル保護基のＴＢＡＦ媒介切断（→１９）およびホスフィチル化により得ることができた。グアニンビルディングブロックの合成は、２−アミノ−６−クロロプリン核酸塩基の変換を必要とした。これは、２１の３−ヒドロキシプロピオニトリルおよびＴＢＤによる処理、およびその後の２−アミノ基のＤＭＦによる保護により達成され、保護グアノシン誘導体２２を得た。上記と同じ化学経路に従い、グアニンビルディングブロック２５の合成を、ジメトキシトリチル化（→２３）、続いてシリル保護基の除去（→２４）およびホスフィチル化により達成した。
【化１９】
2020502072.tif 000024
スキーム３：（ａ）Ｎ６−ベンゾイルアデニン、ＢＳＡ、ＴＭＳＯＴｆ、ＭｅＣＮ、７０℃、２０ｍｉｎ、６４％；（ｂ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、０℃、２０ｍｉｎ、６９％；（ｃ）ＤＭＴｒ−Ｃｌ、ピリジン、ｒｔ、２４ｈ、８７％；（ｄ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、ｒｔ、４８ｈ、８７％；（ｅ）ＣＥＰ−Ｃｌ、ＤＩＰＥＡ、ＴＨＦ、ｒｔ、２ｈ、７１％；（ｆ）２−アミノ−６−クロロプリン、ＢＳＡ、ＴＭＳＯＴｆ、ＭｅＣＮ、５５℃、５０ｍｉｎ、７７％；（ｇ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、０℃、２０ｍｉｎ、８５％；（ｉ）ｉ）ＴＢＤ、３−ヒドロキシプロピオニトリル、ＤＣＭ、４８ｈ、ｉｉ）Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール、ＤＭＦ、５５℃、２ｈ、７３％；（ｊ）ＤＭＴｒ−Ｃｌ、ピリジン、ｒｔ、１８ｈ、７０％；（ｋ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、ｒｔ、７ｈ、８７％；（ｌ）２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト、ＥＴＴ、ＤＣＭ、ｒｔ、５０ｍｉｎ、６９％。
【０１８０】
保護された糖７から開始して、本発明の４つの好ましいホスホラミダイトビルディングブロックの合成を開発した。糖７およびインサイチューシリル化チミンの混合物のＴＭＳＯＴｆによる処理でおよそ８５：１５の有利なアノマー比α／βを有するヌクレオシド３５の円滑な形成を得た（１Ｈ−ＮＭＲにより決定）（スキーム４）。５’位でＤＭＴｒ基を有するチミジンホスホラミダイトに至る化学経路では、標準クロマトグラフィーによるアノマーの分離が可能とならない。そのため、および極性逆転を有する修飾をＤＮＡ鎖に導入するために、ＤＭＴｒ基を７’位で導入した。この目的を達成するために、３５のシリル基を、ＴＢＡＦを用いた短い処理（→３６）、続いて標準ジメトキシトリチル化（→３７）により除去した。２つのアノマーの分離は標準脱アセチル後可能となり、純粋α−アノマー３８が得られた。チミジンビルディングブロック３９を最後に、２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイトを用いた、５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾールの存在下でのホスフィチル化により得た。中間体３８はまた、インサイチューＴＭＳ保護ヌクレオシド３８の、ＰＯＣｌ３および１，２，４−トリアゾールを用いた対応するトリアゾリドへの変換、続いてアンモニアおよび１，４−ジオキサンの混合物中での処理により、５−メチルシトシンヌクレオシドへの短いアクセスを提供した。ＤＭＦ中のＢｚ２Ｏによる直接保護によりヌクレオシド４０の効率的な形成が得られ、不安定なシリル保護基はそのプロセス中に切断された。前述のような条件での最終ホスフィチル化により、５−メチルシチジンホスホラミダイト４１を得た。
【化２０】
2020502072.tif 000025
スキーム４：（ａ）チミン、ＢＳＡ、ＴＭＳＯＴｆ、ＭｅＣＮ、ｒｔ、１８ｈ、８２％；（ｂ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、２ｈ、７５％；（ｃ）ＤＭＴｒ−Ｃｌ、ピリジン、ｒｔ、２４ｈ、９６％；（ｄ）Ｋ２ＣＯ３、ＭｅＯＨ、３ｈ、８６％；（ｅ）２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト、ＥＴＴ、ＤＣＭ、ｒｔ、１ｈ、３９では８１％、３０ｍｉｎ、４１では８０％；ｆ）ｉ）ＢＳＡ、１，２，４−トリアゾール、ＰＯＣｌ３、Ｅｔ３Ｎ、ＭｅＣＮ、ｒｔ、７ｈ、ｉｉ）１，４−ジオキサン／ＮＨ４ＯＨ、ｒｔ、３ｈ、ｉｉｉ）Ｂｚ２Ｏ、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、ｒｔ、１８ｈ、８３％。
【０１８１】
プリン核酸塩基では、プリンの導入を、短いヌクレオシド化により、わずかに上昇させた温度で、Ｎ６−ベンゾイルアデニンまたは２−アミノ−６−クロロプリンのいずれかを用いて実施し、ヌクレオシド１５および２０を、それぞれ、４：１および７：３のα／β比で得た（スキーム５）。アノマーを分離するために、アセチル基を緩やかな条件下で除去し、純粋α−アノマー４２および４８を得た。アデノシンビルディングブロックの形成はアセチル保護基の再導入（→４３）、ＴＢＡＦによるＴＰＤＰＳ保護基の除去（→４４）、続いて標準ジメトキシトリチル化（→４５）を続ける。アセチル基の選択的脱保護（→４６）後に、前述のような条件でのホスフィチル化により、アデニンビルディングブロック４７を得た。
【０１８２】
グアニンビルディングブロックでは、２つのアノマーの分離後、６−クロロプリンを、ＴＢＤおよび３−ヒドロキシプロピオニトリルを用いた処理によりグアニン核酸塩基に変換させ、グアノシンヌクレオシド４９を得た。４８時間にわたるアセチル化により、５’−ヒドロキシ基および２−アミノ基の同時保護が可能になり、保護ヌクレオシド５０を得た。上記と同様に、ＤＭＴｒ基を、ＴＢＡＦによるシリル保護基の除去（→５１）、続いてジメトキシトリチル化（→５２）により導入した。２つのアセチル基をＫ２ＣＯ３を用いた処理により除去し、得られた極性生成物を直接ＤＭＦで保護し、グアノシンヌクレオシド５３を得た。最終ホスフィチル化により、ビルディングブロック５４を得た。
【化２１】
2020502072.tif 000026
スキーム５：ａ）Ｎ６−ベンゾイルアデニン、ＢＳＡ、ＴＭＳＯＴｆ、ＭｅＣＮ、７０℃、２０ｍｉｎ、６４％；（ｂ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、０℃、２０ｍｉｎ、５１％α−アノマー、１８％β−アノマー；（ｃ）Ａｃ２Ｏ、ＤＭＡＰ、ＤＣＭ、ｒｔ、１８ｈ、９０％；（ｄ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、ｒｔ、３．５ｈ、９０％；（ｅ）ＤＭＴｒ−Ｃｌ、ピリジン、ｒｔ、２４ｈ、８９％；（ｆ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、０℃、３０ｍｉｎ、９４％（ｇ）２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピル−ホスホルジアミダイト、ＥＴＴ、ＤＣＭ、ｒｔ、１ｈ、４７では７７％、５０ｍｉｎ、５４では６７％；（ｈ）２−アミノ−６−クロロプリン、ＢＳＡ、ＴＭＳＯＴｆ、ＭｅＣＮ、５５℃、５０ｍｉｎ、７７％；（ｉ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、０℃、２０ｍｉｎ、８５％；（ｊ）ＴＢＤ、３−ヒドロキシプロピオニトリル、ＤＣＭ、４８ｈ、８７％（ｋ）Ａｃ２Ｏ、ＤＭＡＰ、ＤＣＭ、ｒｔ、４８ｈ、７６％；（ｌ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、ｒｔ、４ｈ、８７％；（ｍ）ＤＭＴｒ−Ｃｌ、ピリジン、ｒｔ、４８ｈ、９９％；（ｎ）ｉ）Ｋ２ＣＯ３、ＭｅＯＨ、ｒｔ、７ｈ、ｉｉ）Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール、ＤＭＦ、５５℃、２ｈ、７７％。
【０１８３】
実施例２
エチル（ＥおよびＺ、１‘Ｒ，５’Ｓ，７’Ｒ）−（７’−ヒドロキシ−３’，３’−ジメチル−２‘，４‘−ジオキサビシクロ［３．３．０］オクト−６‘−イリデン）アセテート（２ａ／ｂ）
【化２２】
2020502072.tif 000027
エポキシド１（４．４６ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）の溶液を−７８℃まで冷却した。次いで、ＬｉＨＭＤＳ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、２２．１ｍＬ、２２．１ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。溶液を２時間−７８℃で撹拌し、その後室温まで温め、１Ｍ  ＨＣｌ水溶液（２２．１ｍＬ）の添加により中和した。次いで、混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、ＴＨＦを減圧下で除去した。次いで、混合物を０．５Ｍ  ＮａＨ２ＰＯ４（５０ｍＬ）で洗浄し、水相をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出する。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン３：１）により精製し、２つの異性体２ａ／ｂ（３．３０ｇ、７４％）を淡黄色固体として得た。
２ａについてのデータ：Ｒｆ＝０．３７（ＥｔｏＡｃ／ヘキサン１：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ６．０７−５．９８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、５．５９（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．９４−４．８１（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．６５（ｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、４．１８（ｑ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ３ＣＨ２）、２．６７（ｂｒ、１Ｈ、ＯＨ）、２．３７（ｄｄ、Ｊ＝１３．５、７．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８’））、１．５５−１．４２（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８’））、１．４０、１．３３（２ｓ、６Ｈ、（ＣＨ３）２Ｃ）、１．２６（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ２ＣＨ３）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６５．７５（Ｃ（１））、１６１．６１（Ｃ（６’））、１１６．５３（Ｃ（２））、１１０．６９（Ｃ（３’））、７６．５５（Ｃ（５’））、７５．５２（Ｃ（１’））、７１．６３（Ｃ（７’））、６０．５１（ＣＨ２ＣＨ３）、３７．４６（Ｃ（８’））、２６．４４、２４．１１（（ＣＨ３）２Ｃ）、１４．２７（ＣＨ２ＣＨ３）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ１２Ｈ１９Ｏ５（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算２４３．１２２７、観測２４３．１２３１。
２ｂについてのデータ：Ｒｆ＝０．５２（ＥｔｏＡｃ／ヘキサン１：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ６．１５−６．０５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、５．３７−５．０２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’）、ＯＨ）、４．８７（ｄ、Ｊ＝３．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．６７（ｔ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、４．２０（ｑｄ、Ｊ＝７．１、０．９Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ３ＣＨ２）、２．５５（ｄｄ、Ｊ＝１４．６、８．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８’））、１．９４−１．７７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８’））、１．３９−１．２５（ｍ、９Ｈ、（ＣＨ３）２Ｃ、ＣＨ２ＣＨ３）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６７．９１（Ｃ（１））、１６７．４３（Ｃ（６’））、１２０．１３（Ｃ（２））、１１１．７５（Ｃ（３’））、８１．６２（Ｃ（５’））、７８．０８（Ｃ（１’））、７０．８５（Ｃ（７’））、６１．２５（ＣＨ２ＣＨ３）、３６．５３（Ｃ（８’））、２７．３８、２５．４５（（ＣＨ３）２Ｃ）、１４．１９（ＣＨ２ＣＨ３）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ１２Ｈ１９Ｏ５（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算２４３．１２２７、観測２４３．１２２７。
【０１８４】
実施例３
エチル（１‘Ｒ，５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−（７’−ヒドロキシ−３’，３’−ジメチル−２‘，４‘−ジオキサビシクロ［３．３．０］オクト−６‘−イル）アセテート（３）
【化２３】
2020502072.tif 000028
アルコール２ａ／ｂ（１２．６５ｇ、５２．２ｍｍｏｌ）および塩化ニッケル六水和物（２．４８ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）を含むＥｔＯＨ（３００ｍＬ）の溶液に水素化ホウ素ナトリウム（９．８８ｇ、２６１ｍｍｏｌ）を０℃で少しずつ添加した。得られた暗色溶液を３０分間０℃で、および９０分間室温で撹拌した。次いで、ＥｔＯＨを注意深く減圧下で濃縮し、得られた固体をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）および過剰のＮａＢＨ４で希釈し、０℃の水（１００ｍＬ）の添加により反応停止させ、続いて室温で３０分間撹拌した。次いで、２つの相を分離する。有機相を水（１００ｍＬ）で洗浄した。次いで、水相を合わせ、濾過し、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出する。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン２：１）により精製し、３（１１．４ｇ、９０％）を白色固体として得た。
３についてのデータ：Ｒｆ＝０．４０（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ４．６５−４．５２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’）、Ｈ−Ｃ（５’））、４．１５（ｑｄ、Ｊ＝７．１、１．４Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ３ＣＨ２）、４．０５（ｄｄｄ、Ｊ＝１０．０、９．９９、６．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．８６（ｂｒ、ｓ、１Ｈ、ＯＨ）、２．６５（ｑｄ、Ｊ＝１６．９、７．１Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、２．２４（ｄｄ、Ｊ＝１３．７、６．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８’））、１．９３（ｄｔ、Ｊ＝１２．７、７．１Ｈｚ、１Ｈ．Ｈ−Ｃ（６’））、１．５６（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．９、１０．２、５．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８’））、１．３８（ｓ、３Ｈ、（ＣＨ３）２Ｃ）、１．３０−１．２１（ｍ、６Ｈ、（ＣＨ３）２Ｃ、ＣＨ２ＣＨ３）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７４．３８（Ｃ（１））、１０９．０６（Ｃ（３’））、７９．６５（Ｃ（５’））、７７．１９（Ｃ（１’）、７４．３２（Ｃ（７’）、６０．８０（ＣＨ２ＣＨ３）、４６．６６（Ｃ（６’））、４０．３８（Ｃ（８’））、３２．４３（Ｃ（２））、２６．００、２３．６９（（ＣＨ３）２Ｃ）、１４．１７（ＣＨ２ＣＨ３）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ１２Ｈ２１Ｏ５（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算２４５．１３８４、観測２４５．１３８８。
【０１８５】
実施例４
エチル（１‘Ｒ，５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−（７’−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−３’，３’−ジメチル−２‘，４‘−ジオキサビシクロ［３．３．０］オクト−６‘−イル）アセテート（４）
【化２４】
2020502072.tif 000029
アルコール３（２．５０ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルイミダゾール（１２．６ｇ、１５３ｍｍｏｌ）およびヨウ素（７．８０ｇ、３０．６ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（６０ｍＬ）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジフェニルシラン（３．０ｍＬ、１１．２ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。溶液を３時間室温で撹拌し、次いで、ＴＨＦを蒸発させ、混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、１０％Ｎａ２Ｏ３Ｓ２水溶液（２×４０ｍＬ）で洗浄した。次いで、水相を合わせ、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出する。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：１０）により精製し、４（５．０１ｇ、定量的収率）を白色固体として得た。
４についてのデータ：Ｒｆ＝０．８７（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ１０：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．７７−７．５９（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５１−７．３２（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、４．６１（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．４９（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．１５（ｑ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ、ＣＨ３ＣＨ２）、３．９６（ｄｄ、Ｊ＝１５．５、９．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．６４−２．３２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、２．１５（ｔｔ、Ｊ＝９．０、４．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．８３（ｄｄ、Ｊ＝１２．７、５．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８’））、１．６１−１．４５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８’））、１．２７（ｔｄ、Ｊ＝７．１、１．９Ｈｚ、３Ｈ、ＣＨ２ＣＨ３）、１．１８（ｓ、６Ｈ、（ＣＨ３）２Ｃ）、１．０９、１．０８（２ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７３．０７（Ｃ（１））、１３５．８７、１３５．８５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３４．０８、１３３．７３（Ｃ−ａｒｏｍ）、１２９．８０、１２９．７５、１２７．６７、１２７．５８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１０８．８２（Ｃ（３’））、７７．９２（Ｃ（５’））、７６．９６（Ｃ（１’））、７４．９３（Ｃ（７’））、６０．２４（ＣＨ２ＣＨ３）、４７．２７（Ｃ（６’））、４０．２７（Ｃ（８’））、３１．１０（Ｃ（２））、２７．０４（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、２５．８６（（ＣＨ３）２Ｃ）、２３．８３（（ＣＨ３）２Ｃ）、１９．２３（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１４．２４（ＣＨ２−ＣＨ３）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ２８Ｈ３９Ｏ５Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算４８３．２５６１、観測４８３．２５６２。
【０１８６】
実施例５
（１‘Ｒ，５’Ｓ，６’Ｓ，７’Ｒ）−（７’−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−３’，３’−ジメチル−２‘，４‘−ジオキサビシクロ［３．３．０］オクト−６‘−イル）アセトアルデヒド（５）
【化２５】
2020502072.tif 000030
エステル４（８．５６ｇ、１６．３ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１２０ｍＬ）の溶液を−７８℃まで冷却し、次いで、ＤｉＢＡＬ−Ｈ（１Ｍシクロヘキサン溶液、１８ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。溶液を−７８℃で９０分間さらに撹拌し、その後、室温まで昇温させた。反応を、０．５Ｍ  ＮａＨ２ＰＯ４水溶液（１００ｍＬ）の添加により停止させた。有機相を分離し、水相をＤＣＭ（２×１００ｍＬ）でさらに抽出した。有機相を合わせ、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン２：１０〜２：１）により精製し、アルデヒド５（６．３６ｇ、８９％）およびアルコール３４（０．６３７ｇ、９％）を得た。
５についてのデータ：Ｒｆ＝０．６５（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン２：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．７２（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１））、７．６５（ｔｄ、Ｊ＝８．０、１．６Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４７−７．３３（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、４．５７（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．５１（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、３．９９（ｔｄ、Ｊ＝１０．０、５．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．５８−２．４３（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、２．２０−２．０８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．８７（ｄｄ、Ｊ＝１３．５、５．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８’））、１．５３（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．５、１０．１、５．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８’））、１．１６（ｄ、Ｊ＝３．５Ｈｚ、６Ｈ、（（ＣＨ３）２Ｃ）、１．０５（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ２０１．８７（Ｃ（１））、１３５．９３、１３５．９０（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．９６、１３３．７３（Ｃ−ａｒｏｍ）、１２９．９６、１２９．８９、１２７．７９、１２７．６８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１０８．８９（Ｃ（３’））、７７．７６（Ｃ（５’））、７７．１７（Ｃ（１’））、７４．９６（Ｃ（７’）、４５．４４（Ｃ（６’））、４１．３１（Ｃ（２））、４０．１６（Ｃ（８’））、２７．０８（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、２５．８７（（ＣＨ３）２Ｃ）、２３．７９（（ＣＨ３）２Ｃ）、１９．２５（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ２６Ｈ３５Ｏ４Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算４３９．２２９９、観測４３９．２２９７。
【０１８７】
実施例６
（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＳ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２−メトキシヘキサヒドロ−２Ｈ−シクロペンタ［ｂ］フラン−６−オール（６）
【化２６】
2020502072.tif 000031
アルデヒド５（１３．７３ｇ、３１．３１ｍｍｏｌ）を含むＭｅＣＮ（１７０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１９ｍＬ）の溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸インジウム（ＩＩＩ）（７０３ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を４８時間さらに撹拌し、次いで、溶媒を減圧下で除去し、トルエンと共蒸発させた。残渣を乾燥ＭｅＯＨに溶解し、６時間撹拌した。溶媒の蒸発後、粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン３：１０）により精製し、アノマー比α／β≒４：１の６の混合物（１０．５０ｇ、８１％）を無色油として得た。
６についてのデータ：Ｒｆ＝０．５３（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．６３（ｄｄ、Ｊ＝７．１、０．６Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４６−７．３４（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、４．９８（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、４．９１（ｄｄ、Ｊ＝５．９、１．３Ｈｚ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、４．６３−４．５４（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６ａ））、４．５３−４．３７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、４．０９（ｍ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（４））、３．９２（ｂｒ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（４））、３．２９、３．２７（２ｓ、３Ｈ、ＭｅＯ）、２．７９（ｄｄ、Ｊ＝１７．０、８．２Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（３ａ））、２．６４−２．５１（ｍ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３ａ））、２．２９（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ、ＯＨ）、２．１０−１．８０（ｍ、２．４Ｈ、Ｈ−Ｃ（３）、Ｈ−Ｃ（５））、１．６５（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．２、９．１、４．４Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（５））、１．４４−１．３４（ｍ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３））、１．２２（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．２、８．１、４．９Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（３））、１．０５（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１３５．７８、１３５．７４（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．９６、１３３．８４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１２９．７８、１２７．７２（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１０７．２１、１０６．５０（Ｃ（２））、８５．３７、８１．７６（Ｃ（６ａ））、７８．１１、７７．１９（Ｃ（４））、７３．０３、７２．４４（Ｃ（６））、５５．３０、５４．４６（ＭｅＯ）、５０．９１、４９．６７（Ｃ（３ａ））、４１．１３、４０．２９（Ｃ（３））、３８．１６、３７．９８（Ｃ（５））、２６．９６、２６．９２（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．０７（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ２６Ｈ３５Ｏ４Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算４３５．１９６２、観測４３５．１９５０。
【０１８８】
実施例７
（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＳ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２−メトキシヘキサヒドロ−２Ｈ−シクロペンタ［ｂ］フラン−６−イルアセテート（７）
【化２７】
2020502072.tif 000032
糖６（３．３５ｇ、８．１２ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（１．２９ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１００ｍＬ）の溶液に無水酢酸（３．８ｍＬ、４１ｍｍｏｌ）を室温で添加した。２時間撹拌した後、反応を飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）を徐々に添加することにより停止させる。次いで、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出する。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（Ｈｅｘａｎｎｅ）１：２）により精製し、アノマー比α／β≒４：１の７の混合物（３．５３ｇ、９６％）を無色油として得た。
７についてのデータ：Ｒｆ＝０．４２（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：２）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．７０−７．５９（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４８−７．３４（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．４１（ｄｔ、Ｊ＝１１．０、５．６Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、５．２８（ｄｄｄ、Ｊ＝１１．７、６．６、５．２Ｈｚ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、４．９９（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、４．８９−４．８１（ｍ、０．４Ｈ、Ｈ−Ｃ（２）、Ｈ−Ｃ（６ａ））、４．７６−４．６９（ｍ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（６ａ））、４．１１（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（４））、３．９０（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（４））、３．２７、３．２４（２ｓ、３Ｈ、ＭｅＯ）、２．８１（ｄｄ、Ｊ＝１６．６、７．６Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（３ａ））、２．６０（ｄｄ、Ｊ＝１０．１、７．０Ｈｚ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３ａ））、２．３０−２．１８（ｍ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（５））、２．１２、２．１０（２ｓ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、３Ｈ、ＭｅＣＯ２）、２．０７−１．８２（ｍ、２．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（５）、Ｈ−Ｃ（３））、１．２４（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．９、７．６、３．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３））、１．０７（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．７５、１７０．６６（ＭｅＣＯ２）、１３５．７７、１３５．７３、１３５．７２（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．７５、１３３．６５（Ｃ−ａｒｏｍ）、１２９．８２、１２９．７４、１２７．７６、１２７．７５、１２７．７１（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１０６．１９、１０６．１５（Ｃ（２））、８３．１７、７９．８０（Ｃ（６ａ））、７７．４９、７６．４６（Ｃ（４））、７５．６４、７４．４１（Ｃ（６））、５４．３４、５４．２５（ＭｅＯ）、５１．４８、５０．１７（Ｃ（３ａ））、３８．０５、３７．９８（Ｃ（３））、３６．９６、３６．２１（Ｃ（５））、２６．９５、２６．９０（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、２１．０９、２１．０４（ＭｅＣＯ２）、１９．０４（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ２６Ｈ３４Ｏ５ＮａＳｉ（［Ｍ＋Ｎａ］＋）について計算４７７．２０６８、観測４７７．２０６３。
【０１８９】
実施例８
（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＳ）−４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−３ａ，５，６，６ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ［ｂ］フラン−６−オール（８）
【化２８】
2020502072.tif 000033
糖６（２．０８ｇ、５．０４ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（３５ｍＬ）の溶液に、２，６−ルチジン（２．９５ｍＬ、２５．２ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。２０分間０℃で撹拌した後、ＴＭＳＯＴｆ（２．７３ｍＬ、１５．１ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加し、次いで、溶液を室温まで昇温させ、さらに６０分間撹拌した。次いで、反応を、飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）の添加により停止させた。有機相を分離し、水相をＤＣＭ（３×３０ｍＬ）でさらに抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【０１９０】
得られた生成物を乾燥ＴＨＦ（３５ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却させ、ＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、５．６ｍＬ、５．６ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を１０分間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×４０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：４）により精製し、グリカール８（１．７６ｇ、９２％）を得た。
８についてのデータ：Ｒｆ＝０．４９（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：２）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．６６（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４２（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．２２（ｔ、Ｊ＝２．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、４．９１（ｄｄ、Ｊ＝８．２、５．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３））、４．７０（ｄｔ、Ｊ＝１１．１、５．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、４．５６（ｔ、Ｊ＝２．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６ａ））、３．９７（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４））、３．２４（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３ａ））、２．３０（ｂｒ、１Ｈ、ＯＨ）、２．０３（ｄｄ、Ｊ＝１２．６、５．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５））、１．５１（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．７、１１．２、４．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５））、１．０８（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４６．２４（Ｃ（２））、１３５．７２、１３５．６９（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３４．０３、１３３．７４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１２９．８０、１２９．７８、１２７．７３（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１０１．８４（Ｃ（３））、８４．５９（Ｃ（６ａ））、７６．７９（Ｃ（４））、７４．１０（Ｃ（６））、５５．５６（Ｃ（３ａ））、３９．３８（Ｃ（５））、２６．９３（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．０８（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ２３Ｈ２９Ｏ３Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算３８１．１８８０、観測３８１．１８９３。
【０１９１】
実施例９
（（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＳ）−６−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−３ａ，５，６，６ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ［ｂ］フラン−４−イル）オキシ）（ｔｅｒｔ−ブチル）ジフェニルシラン（９）
【化２９】
2020502072.tif 000034
グリカール８（１．３４ｇ、３．５２ｍｍｏｌ）およびＤＭＴｒ−Ｃｌ（１．４３ｇ、４．２３ｍｍｏｌ）を含む、乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）および乾燥２，６−ルチジン（１５ｍＬ）の混合物の溶液に、銀トリフラート（１．１３ｇ、４．４０ｍｍｏｌ）を少しずつ添加し、深紅の懸濁液を得た。２時間室温で撹拌した後、追加の部分のＤＭＴｒ−Ｃｌ（２３９ｍｇ、０．７０５ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を２時間さらに撹拌し、次いで、濾過した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で洗浄し、水相をＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：７、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、保護グリカール９（２．２４、９３％）を白色フォームとして得た。
９についてのデータ：Ｒｆ＝０．５９（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：２）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．７６（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．６９−７．６０（ｍ、Ｊ＝９．３、５．９、４．６Ｈｚ、８Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５６−７．３９（ｍ、８Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３３（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．００−６．９３（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．４７−６．３７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、４．６７−４．５８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、４．５８−４．５０（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３）、Ｈ−Ｃ（６ａ））、３．８６、３．８５（２ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．８２（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４））、３．０８（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３ａ））、１．６７（ｔｄ、Ｊ＝１２．４、４．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５））、１．２８（ｄｄ、Ｊ＝１２．７、５．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５））、１．１１（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５８．６７（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１４７．６１（Ｃ（２））、１４６．２６、１３７．３６、１３７．２１（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．８１、１３５．７８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３４．１７、１３４．０４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．４８、１２９．８３、１２９．８１、１２８．３７、１２７．９８、１２７．７６、１２７．７３、１２６．７９、１１３．３２、１１３．２８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１００．２９（Ｃ（３））、８６．９６（Ｃ（Ｐｈ）３）、８４．９５（Ｃ（６ａ））、７６．１７（Ｃ（６））、７６．０７（Ｃ（４））、５５．２６（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、５５．１１（Ｃ（３ａ））、３７．３２（Ｃ（５））、２７．０４（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．２１（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４４Ｈ４６Ｏ５ＮａＳｉ（［Ｍ＋Ｎａ］＋）について計算７０５．３００７、観測７０５．３０２１。
【０１９２】
実施例１０
（３ａＳ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＳ）−６−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−３ａ，５，６，６ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ［ｂ］フラン−４−オール（１０）
【化３０】
2020502072.tif 000035
グリカール９（２．２３ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）の溶液にＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、２０ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を２０時間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×８０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（０．５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、１０（１．４５ｇ、ｑｕａｎｔ．）を白色フォームとして得た。
１０についてのデータ：Ｒｆ＝０．４４（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．５３−７．４６（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４３−７．３５（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２１（ｄｄ、Ｊ＝１０．７、５．３Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．１６−７．０８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８０−６．７１（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．３０（ｔ、Ｊ＝２．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、４．６８（ｔ、Ｊ＝２．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３））、４．２９−４．１４（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（６）、Ｈ−Ｃ（６ａ））、３．７１（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．６５（ｄ、Ｊ＝３．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４））、２．８７（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３ａ））、１．５９（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．２、１１．６、４．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５））、１．０５−０．９５（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（５）、ＯＨ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５８．５４（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１４７．６４（Ｃ（２））、１４５．８２、１３７．１２、１３７．０８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．２６、１２８．２９、１２７．８１、１２６．７１、１１３．１３（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１００．１７（Ｃ（３））、８６．７５（Ｃ（Ｐｈ）３）、８４．４２Ｃ（６ａ））、７５．５４（Ｃ（６））、７４．５９（Ｃ（４））、５５．２２（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、５４．２５（Ｃ（３ａ））、３７．５６（Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３０Ｈ２７Ｏ５（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算４６７．１８５３、観測４６７．１８４４。
【０１９３】
実施例１１
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−ヒドロキシ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（１１）
【化３１】
2020502072.tif 000036
グリカール１０（１．４５ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（４５ｍＬ）の溶液に、０°で、ＢＳＡ（２．０ｍＬ、８．１８ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加し、次いで、溶液を室温まで昇温させた。４５分間撹拌した後、チミン（５９５ｍｇ、４．９１ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を６０分間室温でさらに撹拌した。次いで、混合物を０℃まで冷却し、Ｎ−ヨードスクシンイミド（８７５ｍｇ、３．９２ｍｍｏｌ）を添加した。３時間０℃で、および４時間室温で撹拌した後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、その後、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（１００ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で洗浄した。水相を合わせ、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【０１９４】
粗生成物を乾燥トルエン（４５ｍＬ）に溶解し、次いで、Ｂｕ３ＳｎＨ（１．３２ｍＬ、４．９１ｍｍｏｌ）およびアゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ、５３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を室温で添加した。７０℃で３０分間加熱した後、混合物を室温まで冷却し、ＴＢＡＦを添加した（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、６．５ｍＬ、６．５ｍｍｏｌ）。溶液を２５分間さらに撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×７０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（３％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、１１（１．４５ｇ、２工程にわたり７３％）を白色フォームとして得た。
１１についてのデータ：Ｒｆ＝０．２９（６％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．３７（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、７．８３（ｄ、Ｊ＝１．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、７．５８−７．５２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４８−７．４１（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２８（ｔ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２１（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８４（ｄｄ、Ｊ＝８．９、１．２Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．９１（ｄｄ、Ｊ＝８．０、５．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．２５（ｄｔ、Ｊ＝１０．８、６．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．１３−４．０８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．８６（ｄ、Ｊ＝３．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’）、３．７９（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．７０（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．８、１０．２、５．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．６１（ｄｄ、Ｊ＝１６．９、８．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、１．８４（ｄ、Ｊ＝０．８Ｈｚ、３Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５））、１．８０（ｂｒ、１Ｈ、ＯＨ）、１．６０（ｄｄｄ、Ｊ＝１４．２、１０．５、４．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．３３（ｄｔ、Ｊ＝１２．９、８．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．１４（ｄｄ、Ｊ＝１３．７、６．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．１７（Ｃ（４））、１５８．６４（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５０．４７（Ｃ（２））、１４５．６５、１３６．８５、１３６．７１（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．５２（Ｃ（６））、１３０．２０、１２８．１２、１２７．９１、１２６．９０、１１３．２２、１１３．２１（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１０．６９（Ｃ（５））、８７．２１（Ｃ（Ｐｈ）３）、８６．５７（Ｃ（１’））、８２．０２（Ｃ（４’））、７４．１９（Ｃ（５’））、７４．１３（Ｃ（７’））、５５．２５（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．４０（Ｃ（３’））、３８．５１（Ｃ（６’））、３７．６４（Ｃ（２’））、１２．５８（Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３３Ｈ３４Ｏ７Ｎ２Ｎａ（［Ｍ＋Ｎａ］＋）について計算５９３．２２５８、観測５９３．２２５０。
【０１９５】
実施例１２
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛７’−Ｏ−［（２−シアノエトキシ）−ジイソプロピルアミノホスファニル］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（１２）
【化３２】
2020502072.tif 000037
ヌクレオシド１１（２３２ｍｇ、０．４０６ｍｍｏｌ）および５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（９０ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）の溶液に、２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト（０．２６ｍＬ、０．８１ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。３０分間撹拌した後、反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（２×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄した。水相を合わせ、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（１．８％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、１２（２１９ｍｇ、２つの異性体の混合物、７０％）を白色フォームとして得た。
１１についてのデータ：Ｒｆ＝０．６８（６％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．９３（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、７．８５（ｄ、Ｊ＝１．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、７．６５−７．５２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５２−７．４０（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４０−７．２１（ｍ、３Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．９６−６．８１（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．００、５．９４（２ｄｄ、Ｊ＝８．３、５．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．２９−４．１７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．１２−３．８９（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’）、Ｈ−Ｃ（７’））、３．８５、３．８４（２ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．８１−３．６３（ｍ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、３．５６−３．４１（ｍ、２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２．８８−２．６９（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’）、Ｈ−Ｃ（２’））、２．６１、２．５６（ｄｔ、Ｊ＝１２，９６．３Ｈｚ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１．９２、１．８２（２ｄ、Ｊ＝０．８Ｈｚ、３Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５））、１．７５−１．５６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．５２−１．３６（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．２２−１．０１（ｍ、１２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６３．８６（Ｃ（４））、１５８．６６、１５８．６４（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５０．２９、１５０．２７（Ｃ（２））、１４５．５８、１４５．５２、１３６．７６、１３６．７１、１３６．６９、１３６．６０（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．４９、１３５．３５（Ｃ（６））、１３０．２１、１３０．１６、１２８．１７、１２８．１３、１２７．８８、１２６．９１、１２６．８９（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１７．４９（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１１３．１８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１０．７４（Ｃ（５））、８７．２７、８７．２５（Ｃ（Ｐｈ）３）、８６．５８、８６．４５（Ｃ（１’））、８１．７９、８１．６８（Ｃ（４’））、７６．０２、７５．５０（ＪＣ，Ｐ＝１６．５、１５．７Ｈｚ、Ｃ（７’））、７４．２２（Ｃ（５’））、５８．２６、５８．０６、５７．８７（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、５５．２６、５５．２２（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４８．８５、４８．６２（ＪＣ，Ｐ＝２．６、５．０Ｈｚ、Ｃ（３’））、４３．１０、４３．０４（ＪＣ，Ｐ＝１２．３、１２．４Ｈｚ（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、３７．７８（ＪＣ，Ｐ＝５．３ＨｚＣ（６’））、３７．６２、３７．４８（Ｃ（２’））、３７．４１（ＪＣ，Ｐ＝３．６ＨｚＣ（６’））、２４．５７、２４．５３、２４．５０、２４．４６、２４．４４、２４．３９、２４．３７（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２０．３５、２０．２５（ＪＣ，Ｐ＝７．１、７．０Ｈｚ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１２．５８、１２．４１（７ｓ、Ｍｅ−Ｃ（５））。
３１Ｐ  ＮＭＲ（１２２ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４７．３２、１４６．９８。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４２Ｈ５２Ｏ８Ｎ４Ｐ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算７７１．３５１７、観測７７１．３５１２。
【０１９６】
実施例１３
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ４−ベンゾイル−１−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−ヒドロキシ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝−５−メチルシトシン（１３）
【化３３】
2020502072.tif 000038
ヌクレオシド１１（３０２ｍｇ、０．５３０ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＣＮ（５ｍＬ）の溶液に、ＢＳＡ（０．３１ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を０°で１滴ずつ添加し、次いで、溶液を一晩室温で撹拌した。別のフラスコ中で、１，２，４−トリアゾール（１．２８ｇ、１８．５５ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＣＮ（５０ｍＬ）の懸濁液を０℃まで冷却し、ＰＯＣｌ３（０．４０ｍＬ、４．２ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（２．９６ｍＬ、２１．２ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を３０分間０℃で撹拌し、次いで、シリル化化合物１１の前に調製した溶液を懸濁液に添加し、混合物を５時間室温でさらに撹拌した。反応を飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）の添加で停止させ、ＭｅＣＮを減圧下で除去し、得られた混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（３５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×４０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【０１９７】
次いで、粗生成物を１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）および濃ＮＨ４ＯＨ（１０ｍＬ）の混合物に溶解した。２時間室温で撹拌した後、混合物を真空で、体積の半分まで低減させ、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×３０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【０１９８】
次いで、粗生成物を乾燥ＤＭＦ（１３ｍＬ）に溶解し、Ｅｔ３Ｎ（９０μＬ、０．６４ｍｍｏｌ）、続いてＢｚ２Ｏ（３００ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を室温で添加し、溶液を一晩撹拌した。得られた褐色溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）の注意深い添加により反応停止させ、ＤＣＭ（４×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ１：２、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、１３（３１５ｍｇ、８８％）を白色フォームとして得た。
１３についてのデータ：Ｒｆ＝０．５７（４％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１３．３９（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、８．４６−８．２６（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、８．１３（ｄ、Ｊ＝０．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ（６））、７．６１（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５８−７．４３（ｍ、７Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３４（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３０−７．２３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８９（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．９６（ｄｄ、Ｊ＝７．５、５．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．３８−４．２５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．２２−４．１２（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．９０（ｄ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．８３（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．８２（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．３、１０．２、５．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．６６（ｄｄ、Ｊ＝１７．０、８．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．０８（ｓ、３Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５））、１．７７（ｂｒ、１Ｈ、ＯＨ）、１．７１−１．５７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．４９−１．３６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．２１（ｄｄ、Ｊ＝１３．７、６．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７９．５６（ＣＯＮＨ）、１６０．０１（Ｃ（４））、１５８．７０（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１４７．９６（Ｃ（２））、１４５．６５（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３７．２６（Ｃ（６））、１３６．９９、１３６．８３、１３６．７１（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．４１、１３０．２２、１２９．８９、１２８．１６、１２８．１４、１２７．９５、１２６．９４、１１３．２５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１１．５７（Ｃ（５））、８７．３４（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．３２（Ｃ（１’））、８２．５７（Ｃ（４’））、７４．３０（Ｃ（５’））、７４．１６（Ｃ（７’））、５５．２７（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．５６（Ｃ（３’））、３８．５２（Ｃ（６’））、３８．００（Ｃ（２’））、１３．６３（Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４０Ｈ４０Ｏ７Ｎ３（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６７４．２８６１、観測６７４．２８６２。
【０１９９】
実施例１４
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ４−ベンゾイル−１−｛７’−Ｏ−［（２−シアノエトキシ）−ジイソプロピルアミノホスファニル］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝−５−メチルシトシン（１４）
【化３４】
2020502072.tif 000039
ヌクレオシド１３（２７６ｍｇ、０．４０９ｍｍｏｌ）および５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（６９ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）の溶液に、２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト（０．２０ｍＬ、０．６１ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。６０分間撹拌した後、反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（２×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄した。水相を合わせ、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（Ｈｅｘａｎｎｅ）２：３、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、１４（２６８ｍｇ、２つの異性体の混合物、７５％）を白色フォームとして得た。
１４についてのデータ：Ｒｆ＝０．７７（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１３．３２（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．４１−８．２８（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、８．１３−８．０４（ｍ、１Ｈ、Ｃ（６））、７．６１−７．５１（ｍ、３Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５１−７．４０（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３７−７．２９（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２９−７．２０（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．９２−６．８２（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．０７−５．８７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．２４（ｄｑ、Ｊ＝１１．７、５．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．１３−４．００（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．９４（ｄｄｄ、Ｊ＝１４．５、１０．５、２．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．８３、３．８２（２ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．６９（ｍ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、３．５３−３．４０（ｍ、２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２．９１−２．７０（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（３’））、２．５７、２．５３（２ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、２．０８、１．９９（２ｄ、Ｊ＝０．６Ｈｚ、３Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５））、１．７２−１．５６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．５４−１．３６（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．１０（ｍ、１２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７９．５４（ＣＯＮＨ）、１５９．９８（Ｃ（４））、１５８．６９（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１４７．９０（Ｃ（２））、１４５．５８、１４５．５４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３７．３０、１３６．９３（Ｃ（６））、１３６．８１、１３６．８０、１３６．７３、１３６．７０、１３６．６７、１３６．６０（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．３７、１３２．３５、１３０．２２、１３０．１７、１２９．８９、１２８．１７、１２８．１５、１２８．１１、１２７．９３、１２６．９４（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１７．４９（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１１３．２３（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１１．６０（Ｃ（５））、８７．３６、８７．３５（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．３３、８７．２５（Ｃ（１’））、８２．３３、８２．２５（Ｃ（４’））、７６．０５、７５．５２（ＪＣ，Ｐ＝１６．４、１５．６Ｈｚ、Ｃ（７’））、７４．３２（Ｃ（５’））、５８．１８、５７．９８（ＪＣ，Ｐ＝１９．５ＨｚＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、５５．２８、５５．２４（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４８．９３、４８．７２（ＪＣ，Ｐ＝２．７、４．９Ｈｚ、Ｃ（３’））、４３．１１、４３．０５（ＪＣ，Ｐ＝１２．４Ｈｚ（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、３８．０２、３７．８８（Ｃ（２’））、３７．７４、３７．４０（ＪＣ，Ｐ＝５．３、３．４Ｈｚ、Ｃ（６’））、２４．５８、２４．５４、２４．５０、２４．４７、２４．４０、２４．３８（６ｓ、Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２０．３６、２０．２６（ＪＣ，Ｐ＝７．１Ｈｚ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ），）、１３．６６、１３．４９（Ｍｅ−Ｃ（５））。
【０２００】
３１Ｐ  ＮＭＲ（１２２ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４７．３７、１４７．０７。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４９Ｈ５７Ｏ８Ｎ５Ｐ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算８７４．３９３９、観測８７４．３９３７。
【０２０１】
実施例１５
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛５’−Ｏ−アセチル−７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−α，β−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（１５）
【化３５】
2020502072.tif 000040
糖７（１．８６ｇ、４．１０ｍｍｏｌ）およびＮ６−ベンゾイルアデニン（１．９６ｇ、８．２０ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＣＮ（４０ｍＬ）の懸濁液に、ＢＳＡ（４．００ｍＬ、１６．４ｍｍｏｌ）を室温で添加した。２５分間撹拌した後、懸濁液は透明溶液になり、次いで、７０℃まで加熱した。ＴＭＳＯＴｆ（１．４８ｍＬ、８．２０ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加し、溶液を２０分間７０℃でさらに撹拌した。次いで、溶液を、室温まで冷却させ、飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）の添加により反応停止させ、ＥｔＯＡｃ（４×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、アノマー比α／β≒４：１の１５の混合物（１．７４ｇ、６４％）を白色フォームとして得た。
１５についてのデータ：Ｒｆ＝０．３３（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン４：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．３３（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、８．６８（ｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、８．６４（ｄ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、８．１０（ｄ、Ｊ＝１．５Ｈｚ、０．２Ｈ．Ｈ−Ｃ（８））、７．９９（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．９５（ｓ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．６３（ｔ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５５（ｄｄ、Ｊ＝１３．０、６．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５０−７．３４（ｍ、８Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．２０（ｄｄ、Ｊ＝６．３、２．５Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、６．０５（ｔ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．４３−５．３２（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、５．０３−４．９７（ｍ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．８３（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．１４（ｂｒ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、４．０８（ｄ、Ｊ＝３．７Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．０２（ｄｄ、Ｊ＝１６．１、６．６Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．８３（ｄｄ、Ｊ＝１６．９、７．７Ｈｚ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．５９−２．３９（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．１８−２．１１（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、２．０７（ｄ、Ｊ＝１．６Ｈｚ、２．４Ｈ、ＭｅＣＯ２）、２．０２（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、０．６Ｈ、ＭｅＣＯ２）、２．０１−１．９２（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．９１−１．８０（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、１．０７（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．５７、１７０．４９（ＭｅＣＯ２）、１６４．８２（ＣＯＮＨ）、１５２．５０（Ｃ（２））、１５１．２７（Ｃ（４））、１４９．５６（Ｃ（６））、１４１．３７、１４１．０６（Ｃ（８））、１３５．７２、１３５．６８、１３５．６６（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．６７、１３３．５７、１３３．２４、１３３．２２（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．７３、１３０．０３、１２９．９８、１２８．８０、１２８．７８、１２７．９２、１２７．８６、１２７．８５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．６１（Ｃ（５））、８７．１９、８６．１７（Ｃ（１’））、８３．２２、８０．９６（Ｃ（４’）、７６．５０、７６．０４（Ｃ（７’））、７４．３８（Ｃ（５’））、５１．０７（Ｃ（３’））、３７．２９、３７．１５、３６．８０、３６．６０（Ｃ（２’）、Ｃ（６’））、２６．８９（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、２０．９７、２０．９０（ＭｅＣＯ２）、１９．０１（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３７Ｈ４０Ｏ５Ｎ５Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６６２．２７９３、観測６６２．２７８７。
【０２０２】
実施例１６
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−β−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（１６）：
【化３６】
2020502072.tif 000041
ヌクレオシド１５（１．７４ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）を０．１５Ｍ  ＮａＯＨを含むＴＨＦ／メタノール／Ｈ２Ｏ（５：４：１、８０ｍＬ）に０℃で溶解した。反応物を２０分間撹拌し、ＮＨ４Ｃｌ（１．０６ｇ）の添加により反応停止させた。次いで、溶媒を減圧下で除去し、生成物をＣＣ（５％イソプロパノールを含むＤＣＭ）により精製し、１６（２８７ｍｇ、１８％）およびその対応するαアノマー（８３６ｍｇ、５１％）を白色フォームとして得た。
１６についてのデータ：Ｒｆ＝０．４４（６％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．７０（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、８．０９−７．９８（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．９７（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．６３（ｄｄｄ、Ｊ＝７．４、５．７、１．５Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５９−７．５５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５１（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４４−７．３３（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．０２（ｄｄ、Ｊ＝９．４、５．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．５７（ｄｄ、Ｊ＝８．１、５．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．４３（ｄｄ、Ｊ＝１１．８、５．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．２６（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．７８（ｑ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．３２−１．８０（ｍ、５Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’）、ＯＨ）、１．０６（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．８５（ＣＯＮＨ）、１５２．５６（Ｃ（２））、１５１．１７（Ｃ（４））、１４９．８６（Ｃ（６））、１４１．２５（Ｃ（８））、１３５．６８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．８７、１３３．３９（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．７８、１２９．９２、１２８．７８、１２８．０１、１２７．７８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．５１（Ｃ（５））、８７．６５（Ｃ（１’））、８２．９１（Ｃ（４’））、７６．６６（Ｃ（７’））、７２．５４（Ｃ（５’））、５０．４４（Ｃ（３’））、４１．４２（Ｃ（６’））、３６．１７（Ｃ（２’））、２６．８９（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．０３（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３５Ｈ３８Ｏ４Ｎ５Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６２０．２６８８、観測６２０．２６７１。
【０２０３】
実施例１７
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（１７）
【化３７】
2020502072.tif 000042
ヌクレオシド１６（３０７ｍｇ、０．４９５ｍｍｏｌ）を含む乾燥ピリジン（６ｍＬ）の溶液に、ＤＭＴｒ−Ｃｌ（５０３ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を１日間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×７０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（１．５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、１７（３９５ｍｇ、８７％）を黄色フォームとして得た。
１７についてのデータ：Ｒｆ＝０．６５（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ８．６４（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、８．６１（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、８．０８（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．６８−７．１７（ｍ、２２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８６−６．７５（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．１４（ｄｄ、Ｊ＝７．４、６．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．４８−４．３１（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．２８−４．１５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．８８（ｄ、Ｊ＝３．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．７５、３．７４（２ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．６７（ｄｄ、Ｊ＝１６．６、６．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．４７（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．３、１０．２、６．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．１５−１．９４（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．７１（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．０、１１．３、４．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．１１（ｄｄ、Ｊ＝１２．２、４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、０．９５（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．６９（ＣＯＮＨ）、１５８．６１、１５８．６０（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５２．４２（Ｃ（２））、１５１．２７（Ｃ（４））、１４９．４１（Ｃ（６））、１４５．８１（Ｃ−ａｒｏｍ）、１４１．２５（Ｃ（８））、１３７．００、１３６．８５（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．６０、１３５．５７（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．８０、１３３．６９、１３３．４３（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．７０、１３０．２８、１３０．２５、１２９．８５、１２９．８１、１２８．８４、１２８．１８、１２７．８９、１２７．７１、１２７．６５、１２６．７８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．５２（Ｃ（５））、１１３．２２、１１３．１９（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８７．０９（Ｃ（Ｐｈ）３）、８６．４１（Ｃ（１’））、８３．５２（Ｃ（４’））、７６．０５（Ｃ（７’））、７４．７８（Ｃ（５’））、５５．２０（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、５０．４３（Ｃ（３’））、３８．１０（Ｃ（２’）、Ｃ（６’））、２６．８４（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．００（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ５６Ｈ５６Ｏ６Ｎ５Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算９２２．３９９４、観測９２２．３９５３。
【０２０４】
実施例１８
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−ヒドロキシ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（１８）
【化３８】
2020502072.tif 000043
ヌクレオシド１７（３７６ｍｇ、０．４０８ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（９ｍＬ）の溶液に、ＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、１．２２ｍＬ、１．２２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を２日間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×２５ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（４％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、１８（２４２ｍｇ、８７％）を白色フォームとして得た。
１８についてのデータ：Ｒｆ＝０．３３（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ３ＣＮ）δ９．３５（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、８．６７（ｓ、１Ｈ、Ｃ（２））、８．４６（ｓ、１Ｈ、Ｃ（８））、８．０１（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５４（ｍ、５Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３５（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３０−７．１７（ｍ、３Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８４（ｄ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．０９（ｄｄ、Ｊ＝７．８、６．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．１２（ｄｔ、Ｊ＝１１．２、５．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ（５’））、３．８７−３．７９（ｍ、２Ｈ、Ｃ（４’）、Ｃ（７’））、３．７５（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．８３−２．６４（ｍ、２Ｈ、Ｃ（２’）、ＯＨ）、２．５８−２．４６（ｍ、１Ｈ、Ｃ（３’））、２．２１（ｄｄ、Ｊ＝１３．９、７．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｃ（２’））、１．９２−１．８２（ｍ、１Ｈ、Ｃ（６’））、１．２９−１．１７（ｍ、１Ｈ、Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６５．０３（ＣＯＮＨ）、１５８．５７（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５２．４０（Ｃ（２））、１５１．２３（Ｃ（４））、１４９．５２（Ｃ（６））、１４５．６８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１４１．４９（Ｃ（８））、１３６．８６、１３６．８４、１３３．７７（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．７７、１３０．２２、１２８．８１、１２８．１６、１２８．０２、１２７．８９、１２６．８４（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．４０（Ｃ（５））、１１３．１９（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８７．０６（Ｃ（Ｐｈ）３）、８６．７４（Ｃ（１’））、８３．５８（Ｃ（４’））、７４．６２（Ｃ（５’））、７４．３８（Ｃ（８’））、５５．２５（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．７７（Ｃ（３’））、３８．５５、３８．３２（Ｃ（６’）、Ｃ（２’））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４０Ｈ３８Ｏ６Ｎ５（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６８４．２８１７、観測６８４．２８３０。
【０２０５】
実施例１９
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛７’−Ｏ−［（２−シアノエトキシ）−ジイソプロピルアミノホスファニル］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（１９）
【化３９】
2020502072.tif 000044
ヌクレオシド１８（１７３ｍｇ、０．２５３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（８ｍＬ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルクロロホスホラミダイト（０．１１ｍＬ、０．５０ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を２時間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×４０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、１９（１７７ｍｇ、２つの異性体の混合物、７１％）を白色フォームとして得た。
１９についてのデータ：Ｒｆ＝０．３８、０．４４（ＥｔＯＡｃ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．０５（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、８．７０、８．７０（２ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、８．４７、８．４６（２ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．９７（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５７−７．５０（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４９−７．４１（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３９−７．３１（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２４−７．１７（ｍ、５．４Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．１３（ｄｔ、Ｊ＝１２．５、６．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８３−６．７０（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．１４−５．９７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．１４（ｄｄｄ、Ｊ＝１１．１、７．８、３．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．９１−３．７４（ｍ、２Ｈ、Ｈ−（４’）、Ｈ−Ｃ（７’））、３．７１、３．７０（２ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．６５−３．５０（ｍ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、３．３７（ｄｄｑ、Ｊ＝１３．９、１０．２、６．８Ｈｚ、２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２．９０−２．７６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．７５−２．６０（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．４７、２．４２（２ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、２．１１（ｄｔ、Ｊ＝１２．７、６．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．７３（ｄｄｔ、Ｊ＝１３．６、１０．４、５．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．３９（ｄｄｄ、Ｊ＝５０．２、１３．４、６．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．１０−０．８９（ｍ、１２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．６６（ＣＯＮＨ）、１５８．５７（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５２．４６（Ｃ（２））、１５１．３２、１５１．２６（Ｃ（４））、１４９．４５、１４９．４３（Ｃ（６））、１４５．６０、１４５．５９（Ｃ−ａｒｏｍ）、１４１．５２、１４１．４７（Ｃ（８））、１３６．８８、１３６．８３、１３６．８１、１３３．７８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．７５、１３２．７３、１３０．２２、１３０．２１、１３０．１９、１３０．１７、１２８．８７、１２８．１７、１２７．８７、１２６．８２、１２６．８０（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．５９（Ｃ（５））、１１７．５３、１１７．５０（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１１３．１７（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８７．１０、８７．０７（Ｃ（Ｐｈ）３）、８６．７２、８６．６８（Ｃ（１’））、８３．３６、８３．２５（Ｃ（４’））、７６．５５、７５．８１（ＪＣ，Ｐ＝１６．９、１５．７Ｈｚ、Ｃ（７’））、７４．６３、７４．６０（Ｃ（５’））、５８．２４、５７．８６（ＪＣ，Ｐ＝１９．１、１９．２ＨｚＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、５５．２５、５５．２１（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．２９、４９．０８（ＪＣ，Ｐ＝２．６、４．７Ｈｚ、Ｃ（３’））、４３．１２、４３．００（ＪＣ，Ｐ＝２．４、２．３Ｈｚ（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、３８．２７、３８．２３（Ｃ（２’））、３７．４１、３７．２２（ＪＣ，Ｐ＝５．３、３．５Ｈｚ、Ｃ（６’））２４．５６、２４．５３、２４．４９、２４．４７、２４．４３、２４．４１、２４．３６、２４．３３（８ｓ、Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２０．３６、２０．２５（ＪＣ，Ｐ＝７．２、７．０Ｈｚ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）。
３１Ｐ  ＮＭＲ（１２２ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４７．６４、１４６．８７。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４９Ｈ５５Ｏ７Ｎ７（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算８８４．３８９５、観測８８４．３８９８。
【０２０６】
実施例２０
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−２−アミノ−６−クロロ−９−｛５’−Ｏ−アセチル−７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−α，β−Ｄ−リボフラノシル｝プリン（２０）
【化４０】
2020502072.tif 000045
糖７（１．７５ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）および２−アミノ−６−クロロプリン（１．０５ｇ、６．１７ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＣＮ（２０ｍＬ）の懸濁液に、ＢＳＡ（３．８０ｍＬ、１５．４ｍｍｏｌ）を室温で添加した。懸濁液を５５℃まで加熱し、３０分間撹拌した。その後、ＴＭＳＯＴｆ（１．０５ｍＬ、５．７８ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加し、溶液を５０分間５５℃でさらに撹拌した。溶液を室温まで冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）の添加により反応停止させ、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、ＳｉＯ２の短いパッドに通して濾過した。ＳｉＯ２を追加のＥｔＯＡｃで洗浄した。次いで、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（２×８０ｍＬ）で洗浄し、水相を合わせ、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（２．５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、比α／β≒７：３の２０の混合物（１．７７ｇ、７７％）を白色フォームとして得た。
２０についてのデータ：Ｒｆ＝０．５４（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン５：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．８６（ｓ、０．３Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．６９（ｓ、０．７Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．６８−７．６０（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４７−７．３４（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．０４（ｄｄ、Ｊ＝６．９、３．０Ｈｚ、０．７Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．８７（ｄｄ、Ｊ＝８．０、６．２Ｈｚ、０．３Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．３７（ｄｔ、Ｊ＝１４．２、４．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、５．１６（ｂｒ、２Ｈ、ＮＨ２）、４．９１（ｄｄ、Ｊ＝６．５、５．１Ｈｚ，０．７Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．７９（ｄｄ、Ｊ＝６．９、５．２Ｈｚ、０．３Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．１３（ｂｒ、０．３Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、４．０６（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、０．７Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．９５（ｄｄ、Ｊ＝１６．３、６．６Ｈｚ、０．７Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．８１（ｄｄ、Ｊ＝１７．０、７．４Ｈｚ、０．３Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．４９−２．３０（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．１４（ｄｄ、Ｊ＝１３．１、６．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、２．０８（ｓ、２．１Ｈ、ＭｅＣＯ２）、２．０２（ｓ、０．９Ｈ、ＭｅＣＯ２）、２．０２−１．９１（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．８０（ｔｄ、Ｊ＝１３．４、６．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．０７、１．０６（２ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．５５、１７０．４４（ＭｅＣＯ２）、１５８．９８、１５８．９１（Ｃ（２））、１５３．１８、１５２．９５（Ｃ（４））、１５１．４０、１５１．３４（Ｃ（６））、１４０．３８、１４０．１４（Ｃ（８））、１３５．７３、１３５．７０（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．７８、１３３．６２、１３３．２４、１３３．１７（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．０３、１３０．００、１２７．８８、１２７．８６（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２５．６５、１２５．５７（Ｃ（５））、８６．５９、８５．７４（Ｃ（１’））、８２．９３、８０．９９（Ｃ（４’））、７６．５７、７６．１４（Ｃ（７’））、７４．３４、７４．３２（Ｃ（５’））、５１．１５、５１．１０（Ｃ（３’））、３７．１９、３６．９９（Ｃ（６’））、３６．７０、３６．２５（Ｃ（２’））、２６．８７（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、２０．９５、２０．８６（ＭｅＣＯ２）、１９．００（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３０Ｈ３５Ｏ４Ｎ５ＣｌＳｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算５９２．２１４１、観測５９２．２１５８。
【０２０７】
実施例２１
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−２−アミノ−６−クロロ−９−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−β−Ｄ−リボフラノシル｝プリン（２２ｂ）
【化４１】
2020502072.tif 000046
ＮａＯＨを含むＴＨＦ
ヌクレオシド２０（１．７８ｇ、３．０１ｍｍｏｌ）を０．５Ｍ  ＮａＯＨを含むＴＨＦ／メタノール／Ｈ２Ｏ（５：４：１、１５ｍＬ）に０℃で溶解した。反応物を２０分間０℃で撹拌し、ＮＨ４Ｃｌ（４８４ｍｇ）の添加により反応停止させた。次いで、懸濁液を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×７５ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（３％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、２１（４２８ｍｇ、２５％）およびその対応するαアノマー（９９２ｍｇ、６０％）を白色フォームとして得た。
２１についてのデータ：Ｒｆ＝０．４３（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．７１（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．６８−７．６０（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４４−７．３３（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．８５（ｄｄ、Ｊ＝９．３、５．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．３３（ｂｒ、２Ｈ、ＮＨ２）、４．６２（ｄｄ、Ｊ＝８．４、４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．４４（ｄｄ、Ｊ＝１０．７、５．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．４０−４．１５（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’）、ＯＨ）、２．７９（ｑ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．２２（ｄｄ、Ｊ＝１５．２、９．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、２．１１−２．０２（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、２．０２−１．８５（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．０６（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５８．７３（Ｃ（２））、１５２．７８（Ｃ（４））、１５１．９４（Ｃ（６））、１４０．７０（Ｃ（８））、１３５．７０（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．９１、１３３．４８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１２９．９０、１２７．７８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２５．９７（Ｃ（５））、８７．９６（Ｃ（１’））、８２．８８（Ｃ（５’））、７６．８５（Ｃ（７’））、７２．３６（Ｃ（５’））、５０．４１（Ｃ（３’））、４１．９６（Ｃ（６’））、３５．７３（Ｃ（２’））、２６．９０（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．０２（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ２８Ｈ３３Ｏ３Ｎ５ＣｌＳｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算５５０．２０３６、観測５５０．２０１５。
【０２０８】
実施例２２
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジノ）−９−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−β−Ｄ−リボフラノシル｝グアニン（２２）
【化４２】
2020502072.tif 000047
２１（３８０ｍｇ、０．６４５ｍｍｏｌ）および３−ヒドロキシプロピオニトリル（０．２２ｍＬ、３．２３ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）の溶液に、１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デク−５−エン（４００ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。溶液を３時間０℃で、次いで、２日間室温で撹拌した。反応をシリカの添加により中止させた。溶媒の蒸発後、ＳｉＯ２粉末を濾過し、ＭｅＯＨで洗浄し、溶媒を蒸発させ、褐色フォームを得た。
【０２０９】
粗生成物を乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（０．４３ｍＬ、３．２ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を２時間、５５℃で撹拌し、次いで、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をＣＣ（６％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、２３（２７４ｍｇ、７３％）を黄色がかったフォームとして得た。
２２についてのデータ：Ｒｆ＝０．４５（１２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．５２（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．４６（ｓ、１Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、７．６３（ｄｄ、Ｊ＝７．７、１．５Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５０（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．４４−７．３０（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．８３（ｄｄ、Ｊ＝９．３、６．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．６１（ｄｄ、Ｊ＝８．７、５．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．４３−４．３２（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．２９（ｄｄ、Ｊ＝７．０、４．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．９５（ｄ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、１Ｈ、ＯＨ）、２．９８（ｓ、６Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、２．７９（ｄｄ、Ｊ＝１８．０、７．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．２０（ｄｔ、Ｊ＝１２．８、５．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、２．０９−１．８８（ｍ、３Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．０５（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５８．７３（Ｃ（２））、１５７．７９（Ｃ（６））、１５６．９１（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、１４９．８４（Ｃ（４））、１３７．００（Ｃ（８））、１３５．７０、１３５．６７（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．７８、１３３．６０（Ｃ−ａｒｏｍ）、１２９．９３、１２９．８６、１２７．７８、１２７．７２（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２１．６１（Ｃ（５））、８８．０４（Ｃ（１’））、８２．２１（Ｃ（４’））、７７．４９（Ｃ（７’））、７１．９４（Ｃ（５’））、５０．１３（Ｃ（３’））、４２．２３（Ｃ（６’））、４１．２０（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、３５．５０（Ｃ（２’））、３４．９７（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、２６．８７（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．０２（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３１Ｈ３８Ｏ４Ｎ６Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）５８６．２７１８について計算、観測５８６．２７０３。
【０２１０】
実施例２３
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジノ）−９−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝グアニン（２３）
【化４３】
2020502072.tif 000048
２２（１３９ｍｇ、０．２３７ｍｍｏｌ）を含む乾燥ピリジン（２ｍＬ）の溶液に、ＤＭＴｒ−Ｃｌ（２４０ｍｇ、０．７０８ｍｍｏｌ）を、６回に分けて３時間にわたって室温で添加した。一晩撹拌した後、オレンジ溶液を飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（４％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、２３（１４８ｍｇ、７０％）を黄色がかったフォームとして得た。
２３についてのデータ：Ｒｆ＝０．５２（１０％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．４９（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．３８（ｓ、１Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、７．８０（ｓ、１Ｈ、Ｃ（８））、７．５０−７．４３（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４２−７．２７（ｍ、１０Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２６−７．１５（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．１４−７．０８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．７７−６．６８（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．７８（ｄｄ、Ｊ＝８．２、５．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．２５（ｄｔ、Ｊ＝１１．０、５．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．１４−４．０３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．７０−３．６４（ｍ、７Ｈ、ＭｅＯ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．００（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、２．９７（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、２．４３（ｄｄ、Ｊ＝１６．７、７．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．２４（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．３、１０．１、５．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．６２（ｔｄ、Ｊ＝１３．１、４．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．４３（ｄｔ、Ｊ＝１３．５、８．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、０．９９（ｄｄ、Ｊ＝１３．３、６．２Ｈｚ、１Ｈ）、０．８６（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５８．５１、１５８．４９（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５８．０４（Ｃ（２））、１５７．９１（Ｃ（６））、１５６．６０（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、１４９．７６（Ｃ（４））、１４５．８３、１３７．１２、１３６．９４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３６．０１（Ｃ（８））、１３５．６０、１３５．５９（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．８１、１３３．４７（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．３２、１３０．２６、１２９．７７、１２８．２４、１２７．８２、１２７．６５、１２７．６２、１２６．６７（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２０．６５（Ｃ（５））、１１３．１３、１１３．０９（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８６．８２（Ｃ（Ｐｈ）３）、８５．０１（Ｃ（１’））、８２．２６（Ｃ（４’））、７６．１４（Ｃ（７’））、７４．６１（Ｃ（５’））、５５．１９（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、５０．１８（Ｃ（３’））、４１．２９（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、３８．０１（Ｃ（６’））、３７．７６（Ｃ（２’））、３５．１４（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）２６．８１８７（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．０１（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ５２Ｈ５７Ｏ６Ｎ６Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算８８９．４１０３、観測８８９．４１２８。
【０２１１】
実施例２４
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジノ）−９−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−ヒドロキシ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝グアニン（２４）
【化４４】
2020502072.tif 000049
２３（２４３ｍｇ、０．２７３ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）の溶液に、ＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、１．６５ｍＬ、１．６３ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を７時間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×３０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（７％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、２４（１５５ｍｇ、８７％）を依然として微量のＴＢＡＦを含む白色フォームとして得た。
２４についてのデータ：Ｒｆ＝０．４４（１０％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．５５（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．４５（ｓ、１Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、８．００（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．６０−７．５０（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４９−７．３９（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３１−７．２３（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２１−７．１２（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．９３（ｄｄ、Ｊ＝７．５、６．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．２６（ｄｔ、Ｊ＝１１．１、５．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．０７−３．９８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．９１（ｄ、Ｊ＝４．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．７７（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．１４（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、３．０４（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、２．７３（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．３、１０．１、６．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．６３−２．４８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．１２（ｂｒ、１Ｈ、ＯＨ）、１．９５−１．８２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．１４（ｄｄ、Ｊ＝１３．４、６．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５８．５２（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５８．１２（Ｃ（２））、１５７．８８（Ｃ（６））、１５６．６５（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、１４９．７８（Ｃ（４））、１４５．６９、１３７．０２、１３６．９９（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３６．０７（Ｃ（８））、１３０．２６、１２８．２６、１２７．８２、１２６．７４（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２０．５３（Ｃ（５））、１１３．１２（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８６．８１（Ｃ（Ｐｈ）３）、８５．３５（Ｃ（１’））、８２．６４（Ｃ（４’））、７４．６１（Ｃ（７’））、７４．４８（Ｃ（５’））、５５．２３（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．６３（Ｃ（３’））、４１．３７（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、３８．５５（Ｃ（６’））、３８．２３（Ｃ（２’））、３５．１４（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３６Ｈ３９Ｏ６Ｎ６（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６５１．２９２６、観測６５１．２９１２。
【０２１２】
実施例２５
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジノ）−９−｛７’−Ｏ−［（２−シアノエトキシ）−ジイソプロピルアミノホスファニル］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝グアニン（２５）
【化４５】
2020502072.tif 000050
ヌクレオシド２４（１４３ｍｇ、０．２２０ｍｍｏｌ）および５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（４３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）の溶液に、２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト（０．１２ｍＬ、０．３８ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。５０分間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（３．５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、２５（１３０ｍｇ、２つの異性体の混合物、６９％）を白色フォームとして得た。
２５についてのデータ：Ｒｆ＝０．６０（１０％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．５４、９．４７（２ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．５４、８．５２（２ｓ、１Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、８．０２．８．００（２ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．５８−７．４９（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４６−７．３６（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２５（ｄｄ、Ｊ＝１１．０、３．５Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２１−７．１３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８０（ｄｄ、Ｊ＝８．８、２．２Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．００−５．８２（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．１６（ｄｄ、Ｊ＝１０．７、５．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．００−３．８２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’）、Ｈ−Ｃ（７’））、３．７７、３．７７（２ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．６２（ｄｔ、Ｊ＝１２．２、６．１Ｈｚ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、３．５１−３．３３（ｍ、２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、３．１５、３．１４（２ｓ、３Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、３．０７（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、２．８５−２．６１（ｍ、２Ｈ、Ｃ（２’）、Ｃ（３’））、２．５９−２．４４（ｍ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、２．００−１．７９（ｍ、２Ｈ、Ｈ−（Ｃ２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．５３−１．２６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．１０、１．０１（２ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、１２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５８．５０（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５８．０４、１５８．００（Ｃ（２））、１５７．９３（Ｃ（６））、１５６．６１、１５６．６０（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、１４９．７３、１４９．７２（Ｃ（４））、１４５．６２、１４５．６２、１３６．９７、１３６．９４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３６．１４（Ｃ（８））、１３０．２７、１３０．２４、１３０．２２、１２８．２６、１２７．８１、１２６．７３（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２０．８１、１２０．７６（Ｃ（５））、１１７．６７、１１７．５６（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１１３．１０（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８６．８８、８６．８５（Ｃ（Ｐｈ）３）、８５．５８、８５．３７（Ｃ（１’））、８２．４１、８２．０７（Ｃ（４’））、７７．０８、７６．０１（ＪＣ，Ｐ＝３７．０、１５．１Ｈｚ、Ｃ（７’））、７４．５２、７４．４６（Ｃ（５’））、５８．１９、５７．７４（ＪＣ，Ｐ＝１８．９、１９．０ＨｚＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、５５．２５、５５．２１（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．１０、４８．８３（ＪＣ，Ｐ＝２．２、４．８Ｈｚ、Ｃ（３’））、４３．１２、４３．００（（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、４１．３４、４１．３３（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、３８．４８、３８．４１（Ｃ（２’））、３７．２３、３６．９２（ＪＣ，Ｐ＝５．７、３．３ＨｚＣ（６’））、３５．１７（（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２４．５６、２４．５３、２４．４８、２４．４７、２４．４３、２５．３６、２４．３５（７ｓ、Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２０．３９、２０．２８（ＪＣ，Ｐ＝７．１、６．９Ｈｚ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）。
３１Ｐ  ＮＭＲ（１２２ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４７．６９、１４６．３７。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４５Ｈ５６Ｏ７Ｎ８Ｐ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算８５１．４００４、観測８５１．４０１８。
【０２１３】
実施例２６
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−β−Ｄ−リボフラノシル｝ウラシル（２６）
【化４６】
2020502072.tif 000051
糖６（６６９ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１３ｍＬ）の溶液に、２，６−ルチジン（０．９４ｍＬ、８．１０ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。２０分間０℃で撹拌した後、ＴＭＳＯＴｆ（０．８９ｍＬ、４．８６ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加し、次いで、溶液を室温まで昇温させ、さらに３時間撹拌した。次いで、反応を、飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）の添加により停止させた。有機相を分離し、水相をＤＣＭ（２×２０ｍＬ）でさらに抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【０２１４】
粗生成物を乾燥ＤＣＭ（１２ｍＬ）に溶解し、次いで、ウラシル（５４５ｍｇ、４．８６ｍｍｏｌ）およびＢＳＡ（１．８ｍＬ、７．２９ｍｍｏｌ）を室温で添加した。６０分間室温で撹拌した後、得られた微細懸濁液を０℃まで冷却し、Ｎ−ヨードスクシンイミド（５７８ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）を添加した。３０分間０℃で、４時間室温で撹拌した後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、その後、１０％  Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（３０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）で洗浄した。水相を合わせ、ＤＣＭ（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【０２１５】
粗生成物を乾燥トルエン（１５ｍＬ）に溶解し、次いで、Ｂｕ３ＳｎＨ（０．６５ｍＬ、２．４３ｍｍｏｌ）およびアゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ、１３ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）を室温で添加した。９５℃で２時間加熱した後、混合物を室温まで冷却し、ＭｅＯＨ（７ｍＬ）およびＨＣｌ（１Ｍ水溶液、１．６ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を１５分間さらに撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン４：１）により精製し、２６（４９０ｍｇ、３工程にわたって６１％）を白色フォームとして得た。
２６についてのデータ：Ｒｆ＝０．１５（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン２：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．９５（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、７．６９（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５４−７．３９（ｍ、７Ｈ、Ｈ−Ｃ（６）、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．９８（ｄｄ、Ｊ＝９．３、５．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．７１（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５））、４．５１（ｄｄ、Ｊ＝１３．７、６．３Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’）、Ｈ−Ｃ（５’））、４．１４（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．２５（ｂｒ、１Ｈ、ＯＨ）、２．７４（ｄｄ、Ｊ＝１７．１、８．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．２６−１．８７（ｍ、３Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．４９−１．１９（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．１２（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６３．６５（Ｃ（４））、１５０．４６（Ｃ（２））、１３９．８５（Ｃ（６））、１３５．６９、１３５．６６（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．７１、１３３．４２（Ｃ−ａｒｏｍ）、１２９．９８、１２９．９３、１２７．８５、１２７．８１（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１０２．８４（Ｃ（５））、８６．１７（Ｃ（１’））、８１．８３（Ｃ（４’））、７６．９４（Ｃ（７’））、７２．４５（Ｃ（５’））、５０．０９（Ｃ（３’））、４０．９３（Ｃ（６’））、３５．８３（Ｃ（２’））、２６．９１（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．０３（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ２７Ｈ３２Ｏ５Ｎ２ＮａＳｉ（［Ｍ＋Ｎａ］＋）について計算５１５．１９７３、観測５１５．１９６３。
【０２１６】
実施例２７
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝ウラシル（２７）
【化４７】
2020502072.tif 000052
ヌクレオシド２６（４３８ｍｇ、０．８８９ｍｍｏｌ）を含む乾燥ピリジン（７ｍＬ）の溶液に、ＤＭＴｒ−Ｃｌ（１．２０ｇ、３．５５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を１日間室温で撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×４０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（１．５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、２７（６０１ｍｇ、８０％）を黄色フォームとして得た。
２７についてのデータ：Ｒｆ＝０．４８（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン２：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．２６（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、７．８４（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、７．４０−７．０８（ｍ、１９Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．６９（ｄｄ、Ｊ＝８．８、４．９Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．７０（ｄｄ、Ｊ＝７．８、５．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．４９（ｄｄ、Ｊ＝８．１、１．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５））、４．２４−４．１１（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．０５−３．９５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．６５（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．６２（ｄ、Ｊ＝３．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．４１（ｄｄ、Ｊ＝１７．２、８．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．２４（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．５、１０．２、５．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．３９−１．２４（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．０４（ｄｄ、Ｊ＝１３．１、５．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、０．８９（ｄｔ、Ｊ＝１３．８、８．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、０．８１（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６３．５８（Ｃ（４））、１５８．６６（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５０．３８（Ｃ（２））、１４５．６１（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３９．９２（Ｃ（６））、１３６．７１、１３６．５６（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．６１、１３５．５５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．５５、１３３．４１（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．３０、１２９．９２、１２９．８４、１２８．１６、１２７．９０、１２７．７４、１２７．６７、１２６．９０、１１３．１９、１１３．１５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１０２．１２（Ｃ（５））、８７．４１（Ｃ（Ｐｈ）３）、８６．８０（Ｃ（１’））、８２．３２（Ｃ４’））、７５．５４（Ｃ（７’））、７４．４１（Ｃ（５’））、５５．２３（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、５０．０５（Ｃ（３’））、３８．４９（Ｃ（６’））、３７．５３（Ｃ（２’））、２６．８１（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１８．９９（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４８Ｈ５０Ｏ７Ｎ２ＮａＳｉ（［Ｍ＋Ｎａ］＋）について計算８１７．３２７９、観測８１７．３２８６。
【０２１７】
実施例２８
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝シトシン（２８）
【化４８】
2020502072.tif 000053
１，２，４−トリアゾール（１．８３ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＣＮ（７０ｍＬ）の懸濁液に、０℃で、ＰＯＣｌ３（０．５７ｍＬ、６．０５ｍｍｏｌ）、続いてＥｔ３Ｎ（４．２ｍＬ、３０．２ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を３０分間０℃で撹拌し、次いで、ヌクレオシド２７（６０１ｍｇ、０．７５６ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＣＮ（４ｍＬ）の溶液を０℃で添加した。４時間、室温で撹拌した後、反応を飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）の添加により停止させ、ＭｅＣＮを減圧下で除去し、得られた混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×６０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【０２１８】
次いで、粗生成物を、１，４−ジオキサン（１８ｍＬ）および濃ＮＨ４ＯＨ（１８ｍＬ）の混合物に溶解した。３時間室温で撹拌した後、混合物を真空で、体積の半分まで低減させ、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、２８（５２０ｍｇ、８７％）を白色フォームとして得た。
２８についてのデータ：Ｒｆ＝０．４１（１０％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．９６（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ，Ｈ−Ｃ（６））、７．４５（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３８−７．０８（ｍ、１７Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．７３（ｄｄ、Ｊ＝８．７、４．７Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．７３（ｔ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（５）、Ｈ−Ｃ（１’））、４．３２−４．１６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．０３（ｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．６６（ｄ、Ｊ＝０．９Ｈｚ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．６１（ｄ、Ｊ＝２．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．５０−２．３３（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（３’））、１．４７−１．２８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．０３（ｄｄ、Ｊ＝１２．９、５．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、０．９２−０．７５（ｍ、１０Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６５．７８（Ｃ（４））、１５８．５９（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５５．９４（Ｃ（２））、１４５．８８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１４０．６８（Ｃ（６））、１３６．９３、１３６．７８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．５９、１３５．５３（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．６０、１３３．５４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．３１、１２９．８６、１２９．７７、１２８．１５、１２７．８８、１２７．７１、１２７．６４、１２６．７９、１１３．１８、１１３．１４（ＣＨ−ａｒｏｍ）、９４．５３（Ｃ（５））、８７．５５（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．２２（Ｃ（１’））、８２．２３（Ｃ（４’））、７５．７６（Ｃ（７’））、７４．６８（Ｃ（５’））、５５．２１（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、５０．１８（Ｃ（３’））、３８．２５（Ｃ（６’））、３８．０８（Ｃ（２’））、２６．８３（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．００（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４８Ｈ５２Ｏ６Ｎ３Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算７９４．３６２０、観測７９４．３６４９。
【０２１９】
実施例２９
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ４−ベンゾイル−１−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝シトシン（２９）
【化４９】
2020502072.tif 000054
ヌクレオシド２８（５１９ｍｇ、０．６５３ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＭＦ（１５ｍＬ）の溶液に、Ｅｔ３Ｎ（１１０μＬ、０．７８４ｍｍｏｌ）、続いてＢｚ２Ｏ（３７０ｍｇ、１６３３ｍｍｏｌ）を室温で添加し、溶液を一晩撹拌した。次いで、溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３（６０ｍＬ）の注意深い添加により反応停止させ、ＤＣＭ（３×７０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ２：３、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、２９（５８０ｍｇ、９９％）を白色フォームとして得た。
２９についてのデータ：Ｒｆ＝０．５１（ＥｔＯＡｃ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．６１（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、７．８１（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４９−７．１３（ｍ、２４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ、Ｈ−Ｃ（５））、６．７７（ｄｄ、Ｊ＝８．５、４．４Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．７３（ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．３９−４．２０（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．０５（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．７０（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．６３（ｄ、Ｊ＝２．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．７２−２．５５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．４８（ｄｄ、Ｊ＝１６．０、８．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、１．４２−１．２９（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．１９−１．１１（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．０７−０．９６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、０．８５（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６６．６４（ＣＯＮＨ）、１６２．２５（Ｃ（４））、１５８．７０（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５４．８４（Ｃ（２））、１４５．７１（Ｃ−ａｒｏｍ）、１４４．８４（Ｃ（６））、１３６．７４、１３６．６７（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．５９、１３５．５１（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．５２、１３３．４２、１３３．２４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３３．１１、１３０．３０、１２９．９２、１２９．８５、１２９．０２、１２８．１２、１２７．９７、１２７．７６、１２７．６８、１２７．６１、１２６．９４、１１３．２５、１１３．２２（ＣＨ−ａｒｏｍ）、９６．２２（Ｃ（５））、８９．０７（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．５３（Ｃ（１’））、８３．４６（Ｃ（４’））、７５．５９（Ｃ（７’））、７４．７１（Ｃ（５’））、５５．２４（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、５０．３５（Ｃ（３’））、３８．６１（Ｃ（６’））、３８．１５（Ｃ（２’））、２６．８２（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．００（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ５５Ｈ５６Ｏ７Ｎ３Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算８９８．３８８２、観測８９８．３８９８。
【０２２０】
実施例３０
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ４−ベンゾイル−１−｛−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−ヒドロキシ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝シトシン（３０）
【化５０】
2020502072.tif 000055
２９（５８０ｍｇ、０．６４８ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（１４ｍＬ）の溶液に、ＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、３．２５ｍＬ、３．２５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を１日間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×４０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（３％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、３０（３６６ｍｇ、８５％）を白色フォームとして得た。
３０についてのデータ：Ｒｆ＝０．３１（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．９０（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、８．７３（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、７．８２（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５５−７．３１（ｍ、１０Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ、Ｈ−Ｃ（５））、７．２８−７．０９（ｍ、３Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．７６（ｄｄ、Ｊ＝８．８、１．７Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．７３（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．２８−４．１３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．８３（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．７５（ｄ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．７０（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．８６（ｄ、Ｊ＝１４．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ−（２’））、２．５４（ｄｄ、Ｊ＝１７．４、７．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、１．６８−１．５５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．４５−１．１３（ｍ、３Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’）、ＯＨ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６６．６３（ＣＯＮＨ）、１６２．３４（Ｃ（４））、１５８．６５（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５５．００（Ｃ（２））、１４５．６２（Ｃ−ａｒｏｍ）、１４５．１１（Ｃ（６））、１３６．７２、１３６．６４、１３３．１６（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．２５、１２９．０２、１２８．１２、１２７．９３、１２７．６１、１２６．９５、１１３．２０（ＣＨ−ａｒｏｍ）、９６．２４（Ｃ（５））、８９．２０（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．４８（Ｃ（１’））、８３．４０（Ｃ（４’））、７４．５０、（Ｃ（５’））７３．９０（Ｃ（７’））、５５．２５（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、５０．０５（Ｃ（３’））、３８．９０（Ｃ（６’））、３８．４０（Ｃ（２’））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３９Ｈ３８Ｏ７Ｎ３（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６６０．２７０４、観測６６０．２７０７。
【０２２１】
実施例３１
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ４−ベンゾイル−１−｛７’−Ｏ−［（２−シアノエトキシ）−ジイソプロピルアミノホスファニル］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝シトシン（３１）
【化５１】
2020502072.tif 000056
ヌクレオシド３０（６７ｍｇ、０．１０１ｍｍｏｌ）および５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（２２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（３ｍＬ）の溶液に、２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト（６５μＬ、０．２０ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。４０分間撹拌した後、反応混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（２×１５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）で洗浄した。水相を合わせ、ＤＣＭ（２０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、３１（７５ｍｇ、２つの異性体の混合物、８６％）を白色フォームとして得た。
３１についてのデータ：Ｒｆ＝０．６７（４％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．８８（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．７９（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、７．９３（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．６７−７．４０（ｍ、１０Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ、Ｈ−Ｃ（５））、７．３９−７．２２（ｍ、３Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．９３−６．７９（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．９７−５．７７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．２２（ｄｔ、Ｊ＝１４．５、５．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−（５’））、３．９８−３．８４（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’）、Ｈ−Ｃ（７’））、３．８２（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．６６（ｄｄｄ、Ｊ＝１６．８、１３．５、６．７Ｈｚ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、３．５３−３．３７（ｍ、２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、３．１４−２．９３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．８４−２．６６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．５３（ｄｔ、Ｊ＝１２．４、６．３Ｈｚ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１．８３−１．５６（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．４６（ｔｄ、Ｊ＝１４．１、７．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．１８−０．９７（ｍ、１２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６６．７０（ＣＯＮＨ）、１６２．３２、１６２．２８（Ｃ（４））、１５８．６８（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５４．９３（Ｃ（２））、１４５．５３（Ｃ−ａｒｏｍ）、１４４．９５、１４４．８９（Ｃ（６））、１３６．６９、１３６．６３、１３６．５６、１３６．５２、１３３．２４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３３．１０、１３０．２４、１３０．２０、１２９．０１、１２８．１０、１２７．９４、１２７．６０、１２６．９６（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１７．５３（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１１３．２０（ＣＨ−ａｒｏｍ）、９６．２４（Ｃ（５））、８９．１５、８９．１０（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．５５、８７．５４（Ｃ（１’））、８３．１１、８３．０４（Ｃ（４’））、７５．９３、７５．３７（ＪＣ，Ｐ＝１６．７、１５．５Ｈｚ、Ｃ（７’））、７４．４８（Ｃ（５’））、５８．２５、５７．９９（ＪＣ，Ｐ＝１７．９、１８．１ＨｚＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、５５．２７、５５．２４（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．２７、４９．０３（ＪＣ，Ｐ＝３．１、４．８Ｈｚ、Ｃ（３’））、４３．１５、４２．９８（（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、３８．８９、３８．８０（Ｃ（２’））、３７．４４、３７．２４（ＪＣ，Ｐ＝５．２、３．２Ｈｚ、Ｃ（６’））、２４．５８、２４．５４、２４．４８、２４．４５、２４．３５（５ｓ、Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２０．３３、２０．２４（ＪＣ，Ｐ＝５．８、５．７Ｈｚ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）。
３１Ｐ  ＮＭＲ（１２１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４７．１９、１４６．９４。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４８Ｈ５５Ｏ８Ｎ５Ｐ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算８６０．３７８３、観測８６０．３７９１。
【０２２２】
実施例３２
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−（４−ニトロベンゾエート）−５’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−β−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（３２）
【化５２】
2020502072.tif 000057
ヌクレオシド１１（１００ｍｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（２６ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（８ｍＬ）の溶液に、４−ニトロベンゾイルクロリド（５９ｍｇ、０．３１５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。６時間撹拌した後、反応を飽和ＮａＨＣＯ３（５ｍＬ）の添加により停止させる。次いで、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出する。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（２．５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、３２（９８ｍｇ、７８％）を微量のＥｔ３Ｎを含む白色フォームとして得た。
３２についてのデータ：Ｒｆ＝０．４２（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．２６（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ、ＨＮ（３））、８．００（ｄ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．７２（ｄ、Ｊ＝１．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、７．５５（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４４（ｄｄ、Ｊ＝８．８、６．６Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３５−７．１８（ｍ、３Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８３（ｄｄ、Ｊ＝９．０、２．６Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．０１（ｄｄ、Ｊ＝８．２、５．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．９６（ｄ、Ｊ＝３．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、４．３３−４．２４（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．２４−４．１３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．７８（ｄ、Ｊ＝０．９Ｈｚ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．９２−２．７２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．８１（ｄ、Ｊ＝０．６Ｈｚ、３Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５））、１．７９−１．６２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．２２（ｄ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．０５、１６３．８４（Ｃ（４）、ＣＯ２Ｒ）、１５８．８１（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５０．６４、１５０．５２（Ｏ２Ｎ−Ｃ−ａｒｏｍ、Ｃ（２））、１４５．２９、１３６．４３、１３６．３４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．１８（Ｃ（６））、１３０．６２、１３０．２０、１３０．１７、１２８．１６、１２８．０１、１２７．１５、１２３．５８、１１３．３０、１１３．２７（Ｃ−ａｒｏｍ）、１１１．１７（Ｃ（５））、８７．５３（Ｃ（Ｐｈ）３）、８６．２９（Ｃ（１’））、８１．５９（Ｃ（４’））、７８．６５（Ｃ（７’））、７４．１６（Ｃ（５’））、５５．２６（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４７．０７（Ｃ（３’））、３７．３５（Ｃ（２’））、３５．７１（Ｃ（６’））、１２．５１（Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４０Ｈ３７Ｏ１０Ｎ３Ｎａ（［Ｍ＋Ｎａ］＋）について計算７４２．２３７１、観測７４２．２３７５
【０２２３】
実施例３３
（（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−（４−ニトロベンゾエート）−β−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（３３）
【化５３】
2020502072.tif 000058
３２（６０ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）を含む、乾燥ＤＣＭ（１ｍＬ）およびＭｅＯＨ（０．４ｍＬ）の混合物の溶液に、ジクロロ酢酸（０．２ｍＬ）を室温で１滴ずつ添加した。３時間撹拌した後、次いで、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出する。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、３３（２９ｍｇ、８４％）を白色フォームとして得た。Ｘ線分析に好適な結晶を、Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨの混合物中での再結晶化により得た。
３３についてのデータ：Ｒｆ＝０．１８（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．３３（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、８．３４（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、８．２７−８．１３（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．７８（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、５．９６（ｄｄ、Ｊ＝９．３、５．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．１８（ｔ、Ｊ＝３．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、５．１２（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、１Ｈ、ＯＨ）、４．３３（ｄｄ、Ｊ＝７．３、４．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．２７（ｔｄ、Ｊ＝１０．５、５．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、２．９０（ｄｄ、Ｊ＝１７．２、８．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．５８−２．４６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．３０（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．８、８．８、５．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、２．０３（ｄｄ、Ｊ＝９．６、４．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．９２−１．７６（ｍ、４Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｍｅ−Ｃ（５））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１６４．３３、１６４．２３（Ｃ（４）、ＣＯ２Ｒ）、１５０．９１、１５０．７５（Ｏ２Ｎ−Ｃ−ａｒｏｍ、Ｃ（２））、１３６．７９（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．６９（Ｃ（６））、１３１．２０、１２４．３２（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１０９．８９（Ｃ（５））、８５．３１（Ｃ（１’））、８１．４８（Ｃ（４’））、８０．０７（Ｃ（７’））、７１．７２（Ｃ（５’））、４７．１８（Ｃ（３’））、３７．７７（Ｃ（６’））、３５．４８（Ｃ（２’））、１２．６６１２．５８（Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ１９Ｈ２０Ｏ８Ｎ３（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算４１８．１２４５、観測４１８．１２４２。
【０２２４】
実施例３５
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛５’−Ｏ−アセチル−７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−α，β−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（３５）
【化５４】
2020502072.tif 000059
糖７（９３３ｍｇ、２．０５ｍｍｏｌ）およびチミン（３７２ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＣＮ（１２ｍＬ）の溶液に、ＢＳＡ（１．５ｍＬ、６．１５ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。５０分間室温で撹拌した後、溶液を０℃まで冷却し、ＴＭＳＯＴｆ（０．４５ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加した。３時間０℃で、１５時間室温でさらに撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×４０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（２．５％イソプロパノールを含むＤＣＭ）により精製し、アノマー比α／β≒８５：１５の３５の混合物（９２４ｍｇ、８２％）を白色フォームとして得た。
３５についてのデータ：Ｒｆ＝０．５６（７％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．１４（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、７．５３（ｄｄ、Ｊ＝７．７、１．６Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３９−７．２３（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．０９（ｄ、Ｊ＝１．０Ｈｚ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、６．８７（ｄ、Ｊ＝１．０Ｈｚ、０．８５Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、５．８３（ｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、０．８５Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．８０−５．７０（ｍ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．３６−５．０４（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．８９（ｄｄ、Ｊ＝６．３、５．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．６２（ｄｄ、Ｊ＝７．１、５．６Ｈｚ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．０１−３．８５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．７６−２．５５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．０９−１．９１（ｍ、４Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’）、ＭｅＣＯ２）、１．９０−１．５８（ｍ、６Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’）、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｍｅ−Ｃ（５））、０．９６（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．７０（ＭｅＣＯ２）、１６３．８７（Ｃ（４））、１５０．２９（Ｃ（２））、１３５．６９、１３５．６７（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３４．９９（Ｃ（６））、１３３．５８、１３３．１８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．０３、１２７．８７（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１１．０５（Ｃ（５））、８７．５６（Ｃ（１’））、８２．８５（Ｃ（４’））、７６．５０（Ｃ（７’））、７４．７６（Ｃ（５’））、５０．７２（Ｃ（３’））、３７．７９（Ｃ（６’））、３６．９４（Ｃ（２’））、２６．８８（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、２０．９５（ＭｅＣＯ２）、１９．０１（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１２．６３（Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３０Ｈ３７Ｏ６Ｎ２Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算５４９．２４１５、観測５４９．２４０１。
【０２２５】
実施例３６
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−ヒドロキシ−α，β−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（３６）
【化５５】
2020502072.tif 000060
ヌクレオシド３５（９２４ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）の溶液に、ＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、３．４ｍＬ、３．４ｍｍｏｌ）を室温で添加した。２時間室温で撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（８０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×８０ｍＬ）およびＤＣＭ（２×８０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、３６のアノマー混合物（３９１ｍｇ、７５％）を得た。
３６についてのデータ：Ｒｆ＝０．２４（７％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．６６（ｂｒ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、９．６３（ｂｒ、０．８５Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、７．２７（ｄ、Ｊ＝１．０Ｈｚ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、７．０６（ｄ、Ｊ＝１．０Ｈｚ、０．８５Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、６．００（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、０．８５Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．９１（ｄｄ、Ｊ＝８．８、５．５Ｈｚ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．２６−５．１０（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．９２（ｄｄ、Ｊ＝６．５、５．３Ｈｚ、０．８５Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．６５（ｄｄ、Ｊ＝６．９、５．７Ｈｚ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．１９−４．０３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．９１−２．７２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’）、ＯＨ）、２．６４（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．３、９．８、５．５Ｈｚ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．２５−２．１５（ｍ、１．７０Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．０５（ｓ、０．４５Ｈ、ＭｅＣＯ２）、２．０４（ｓ、２．５５Ｈ、ＭｅＣＯ２）、２．０３−１．８９（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．８８（ｄ、Ｊ＝０．７Ｈｚ、０．４５Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５））、１．８５（ｄ、Ｊ＝０．６Ｈｚ、２．５５Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５））、１．４２−１．２８（ｍ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．８７（ＭｅＣＯ２）、１６４．２６（Ｃ（４））、１５０．６６（Ｃ（２））、１３５．５４（Ｃ（６））、１１１．２２（Ｃ（５））、８７．９７（Ｃ（１’））、８２．９７（Ｃ（４’））、７５．０８（Ｃ（７’））、７４．５２（Ｃ（５’））、５０．０７（Ｃ（３’））、３７．８１（Ｃ（２’））、３７．２３（Ｃ（６’））、２１．０２（ＭｅＣＯ２）、１２．６７（Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ１４Ｈ１９Ｏ６Ｎ２（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算３１１．１２３８、観測３１１．１２３４。
【０２２６】
実施例３７
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α，β−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（３７）
【化５６】
2020502072.tif 000061
ヌクレオシド３６（３６４ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）を含む乾燥ピリジン（７ｍＬ）の溶液に、ＤＭＴｒ−Ｃｌ（１．１９ｇ、３．５１ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を１日間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン２：１、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、３７のアノマー混合物（６９０ｍｇ、９６％）を黄色フォームとして得た。
３７についてのデータ：Ｒｆ＝０．７０（８％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．１７（ｂｒ、０．８５Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、８．５６（ｂｒ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、７．３８−７．３２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２９−７．１５（ｍ、７Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８２（ｄ、Ｊ＝１．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、６．７６（ｄ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．８６（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、０．８５Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．７１（ｄｄ、Ｊ＝８．９、５．４Ｈｚ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．２５（ｄｄ、Ｊ＝１０．２、５．６Ｈｚ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、５．２１−５．１１（ｍ、０．８５Ｈ、Ｈ−（Ｃ５’））、４．７８（ｄｄ、Ｊ＝６．７、４．８Ｈｚ、０．８５Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．４９（ｄｄ、Ｊ＝７．１、５．３Ｈｚ、０．１５Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．８４（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３，７２、３．７１（２ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．３４−２．２３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．０１、１．９９（２ｓ、３Ｈ、ＭｅＣＯ２）、１．８２（ｄ、Ｊ＝０．５Ｈｚ、Ｍｅ−Ｃ（５））、１．８０−１．５６（ｍ、４Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．６９（ＭｅＣＯ２）、１６３．９１（Ｃ（４））、１５８．８２（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５０．３３（Ｃ（２））、１４５．３４、１３６．６４、１３６．５８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．００（Ｃ（６））、１３０．２５、１２８．３９、１２８．０７、１２７．１５、１１３．４１（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１１．０４（Ｃ（５））、８７．７０（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．３１（Ｃ（１’））、８３．１５（Ｃ（４’））、７７．１６（Ｃ（７’））、７４．９６（Ｃ（５’））、５５．３７（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．１２（Ｃ（３’））、３７．５５（Ｃ（２’））、３６．８２（Ｃ（６’））、２１．０７（ＭｅＣＯ２）、１２．６６（Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３５Ｈ３６Ｏ８Ｎ２（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６１２．２４６６、観測６１２．２４５３。
【０２２７】
実施例３８
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（３８）
【化５７】
2020502072.tif 000062
ヌクレオシド３７（６９０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（４６７ｍｇ、３．３６ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を３時間撹拌し、次いで、飽和ＮａＣｌ（６０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×６０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（３％イソプロパノールを含むＥｔ２Ｏ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、α−アノマー３８（５５０ｍｇ、８６％）を白色固体として得た。
３８についてのデータ：Ｒｆ＝０．３９（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．３７（ｂｒ、ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、７．３９−７．３１（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２５（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２０（ｔ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．１６−７．０８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．７８（ｄ、Ｊ＝１．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、６．７４（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．９１（ｄｄ、Ｊ＝６．５、４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．５７（ｄｄ、Ｊ＝７．２、４．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．３５−４．１８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．８６（ｄ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．６９（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．５３（ｂｒ、１Ｈ、ＯＨ）、２．２２（ｄｄ、Ｊ＝１５．３、６．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、１．８５−１．６９（ｍ、５Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５）、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．６６−１．４９（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６３．９８（Ｃ（４））、１５８．６７（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５０．４７（Ｃ（２））、１４５．４８、１３６．８０、１３６．７５（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３４．９４（Ｃ（６））、１３０．１９、１３０．１８、１２８．３５、１２７．９７、１２７．０１、１１３．３１（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１１．０４（Ｃ（５））、８７．８２（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．０５（Ｃ（１’））、８５．７４（Ｃ（４’））、７８．２６（Ｃ（７’））、７３．３３（Ｃ（５’））、５５．３１（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４８．８１（Ｃ（３’））、４０．２１（Ｃ（６’））、３７．６８（Ｃ（２’））、１２．６５（Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３３Ｈ３５Ｏ７Ｎ２（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算５７１．２４３９、観測５７１．２４２１。
【０２２８】
実施例３９
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛５’−Ｏ−［（２−シアノエトキシ）−ジイソプロピルアミノホスファニル］２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（３９）
【化５８】
2020502072.tif 000063
ヌクレオシド３８（２００ｍｇ、０．３５０ｍｍｏｌ）および５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（５９ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（７ｍＬ）の溶液に、２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト（０．１７ｍＬ、０．５３ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。１時間撹拌した後、反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（２×２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）で洗浄した。水相を合わせ、ＤＣＭ（３０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、３９（２２０ｍｇ、２つの異性体の混合物、８１％）を白色固体として得た。
３９についてのデータ：Ｒｆ＝０．４４（４％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．０３（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、７．３６（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３０−７．０７（ｍ、７Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８４（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、６．８０−６．６９（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．９５、５．８８（２ｄｄ、Ｊ＝６．６、４．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．７０、４．６１（２ｄｄ、Ｊ＝７．３、４．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．４１−４．２０（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．９４−３．８２（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．８１−３．６２（ｍ、８Ｈ、ＭｅＯ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、３．５９−３．４０（ｍ、２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２．６１−２．４６（ｍ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、２．２８（ｄｄｄ、Ｊ＝１４．１、１３．２、７．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、１．９１−１．７３（ｍ、５Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５）、Ｈ−Ｃ（６’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．７２−１．４６（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．１６−１．００（ｍ、１２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．０１、１６３．９８（Ｃ（４））、１５８．７０（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５０．３９、１５０．１７（Ｃ（２））、１４５．５２、１３６．８４、１３６．７８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．４４、１３５．３９（Ｃ（６））、１３０．２１、１２８．３６、１２８．３２、１２８．００、１２７．０３（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１８．０２、１１７．７６（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１１３．３２（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１０．９１、１１０．５９（Ｃ（５））、８８．３１、８８．０６（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．１１、８７．０６（Ｃ（１’））、８５．４４、８５．３９（ＪＣ，Ｐ＝４．６、３．１Ｈｚ、Ｃ（４’））、７８．２５、７８．１３（Ｃ（７’））、７４．７０、７４．３４（ＪＣ，Ｐ＝１３．５、１８．５Ｈｚ、Ｃ（５’））、５８．７３、５８．４７（ＪＣ，Ｐ＝１８．９、２０．１Ｈｚ、（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ））、５５．３５、５５．３２（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４８．８０、４８．６４（Ｃ（３’））、４３．２２、４３．０６（ＪＣ，Ｐ＝１２．４、１１．０Ｈｚ（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、３９．６８、３９．６３（Ｃ（６’））、３８．０６、３７．９３（Ｃ（２’））、２４．８１、２４．７４、２４．７１、２４．６８、２４．６５、２４．５９（６ｓ、Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２０．３７、２０．３５（ＪＣ，Ｐ＝７．１、６．８Ｈｚ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１２．６６（Ｍｅ−Ｃ（５））。
３１Ｐ  ＮＭＲ（１２２ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４８．１８、１４７．８０。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４２Ｈ５２Ｏ８Ｎ４Ｐ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算７７１．３５１７、観測７７１．３５１７。
【０２２９】
実施例４０
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ４−ベンゾイル−１−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α−Ｄ−リボフラノシル｝−５−メチルシトシン（４０）
【化５９】
2020502072.tif 000064
ヌクレオシド３８（２６８ｍｇ、０．４７０ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＣＮ（５ｍＬ）の溶液にＢＳＡ（０．２８ｍＬ、１．１３ｍｍｏｌ）を０°で１滴ずつ添加し、次いで、溶液を一晩室温で撹拌した。別のフラスコ中で、１，２，４−トリアゾール（１．１４ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＣＮ（５０ｍＬ）の懸濁液を０℃まで冷却し、ＰＯＣｌ３（０．３５ｍＬ、３．８ｍｍｏｌ）続いてＥｔ３Ｎ（２．６２ｍＬ、１８．８ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液を３０分間０℃で撹拌し、次いで、シリル化化合物３８の前に調製した溶液を懸濁液に添加し、混合物を７時間室温でさらに撹拌した。反応を、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）の添加により停止させ、ＭｅＣＮを減圧下で除去し、得られた混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【０２３０】
次いで、粗生成物を、１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）および濃ＮＨ４ＯＨ（１０ｍＬ）の混合物に溶解した。３時間室温で撹拌した後、混合物を真空でその体積の半分まで低減させ、飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×３０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。
【０２３１】
次いで、粗生成物を乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解した。Ｅｔ３Ｎ（８０μＬ、０．５６ｍｍｏｌ）、続いてＢｚ２Ｏ（２６６ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）を室温で添加し、溶液を一晩撹拌した。得られた褐色がかった溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）の注意深い添加により反応停止させ、ＤＣＭ（４×４０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：１、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、４０（２６３ｍｇ、８３％）を白色フォームとして得た。
４０についてのデータ：Ｒｆ＝０．５３（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン３：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１３．１１（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、８．３０−８．１０（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４７−７．２９（ｍ、５Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２８−７．０６（ｍ、７Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．００（ｄ、Ｊ＝０．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、６．７４（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．８９（ｄｄ、Ｊ＝６．３、４．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．６１（ｄｄ、Ｊ＝７．２、４．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．３３−４．２０（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．８７（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．６９（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．３２−２．１３（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’）、ＯＨ）、１．９９（ｓ、３Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５））、１．８７−１．７３（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．６６−１．４７（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７９．６１（ＣＯＮＨ）、１５９．７６（Ｃ（４））、１５８．７４（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１４７．８７（Ｃ（２））、１４５．４７（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３７．１７（Ｃ（６））、１３６．７７、１３６．６８、１３６．０３（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．５５、１３０．２１、１２９．９８、１２８．３４、１２８．２１、１２８．０３、１２７．０７、１１３．３５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１１．８１（Ｃ（５））、８８．７４（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．１３（Ｃ（１’））、８６．１２（Ｃ（４’））、７８．１７（Ｃ（７’））、７３．３１（Ｃ（５’））、５５．３５（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４８．６３（Ｃ（３’））、４０．３５（Ｃ（６’））、３８．０６（Ｃ（２’））、１３．７８（Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４０Ｈ４０Ｏ７Ｎ３（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６７４．２８６１、観測６７４．２８７７。
【０２３２】
実施例４１
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ４−ベンゾイル−１−｛５’−Ｏ−［（２−シアノエトキシ）−ジイソプロピルアミノホスファニル］２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α−Ｄ−リボフラノシル｝−５−メチルシトシン（４１）
【化６０】
2020502072.tif 000065
ヌクレオシド４０（２５０ｍｇ、０．３７１ｍｍｏｌ）および５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（７３ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（８ｍＬ）の溶液に、２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト（０．２０ｍＬ、０．６３ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。３０分間撹拌した後、反応混合物をＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（２×２０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２０ｍＬ）で洗浄した。水相を合わせ、ＤＣＭ（２０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：１、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、４１（２６０ｍｇ、２つの異性体の混合物、８０％）を白色フォームとして得た。
４１についてのデータ：Ｒｆ＝０．５７（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１３．２６（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、８．３２（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５８−７．３９（ｍ、５Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３８−７．１４（ｍ、８Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ、Ｈ−Ｃ（６））、６．８８−６．７７（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．０１、５．９６（２ｄｄ、Ｊ＝６．３、４．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．８２、４．７４（２ｄｄ、Ｊ＝７．３、４．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．４２（ｔｄ、Ｊ＝１０．６、６．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．９７（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．９１−３．６８（ｍ、８Ｈ、ＭｅＯ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、３．５９（ｄｔｄ、Ｊ＝１６．７、６．７、３．４Ｈｚ、２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ））、２．６２（ｄｔ、Ｊ＝１５．５、６．４Ｈｚ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、２．４９−２．２３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．１１、２．０９（２ｄ、Ｊ＝０．５Ｈｚ、３Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５））、２．００−１．８２（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．８２−１．５５（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．１７（ｄｄ、Ｊ＝１６．３、６．８Ｈｚ、１２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７９．６０（ＣＯＮＨ）、１５９．９７（Ｃ（４））、１５８．７６（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１４７．８１、１４７．７０（Ｃ（２））、１４５．５４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３７．３４、１３６．８３（Ｃ（６））、１３６．７７、１３６．７２、１３６．６５、１３６．５５（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．４５、１３０．２２、１３０．２０、１２９．９６、１２８．３４、１２８．３１、１２８．１８、１２８．００、１２７．０４（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１７．８９、１１７．７１（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１１３．３５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１１．６０、１１１．３６（Ｃ（５））、８９．２４、８９．０１（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．１６、８７．１２（Ｃ（１’））、８５．７８、８５．６２（ＪＣ，Ｐ＝４．３、３．２Ｈｚ、Ｃ（４’））、７８．２０、７７．９８（Ｃ（７’））、７４．６８、７４．３７（ＪＣ，Ｐ＝１３．４、１８．２Ｈｚ、Ｃ（５’））、５８．７０、５８．４４（ＪＣ，Ｐ＝１８．５、２０．０Ｈｚ、（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ））、５５．３６、５５．３３（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４８．６５、４８．４４（Ｃ（３’））、４３．２７、４３．１４（ＪＣ，Ｐ＝１２．４、１２．３Ｈｚ（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、３９．８７、３９．６４（ＪＣ，Ｐ＝３．４、３．７Ｈｚ（Ｃ（６’））、３８．３０、３８．２２（Ｃ（２’））、２４．８０、２４．７２、２４．７０、２４．６７、２４．６３（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２０．３９、２０．３７（ＪＣ，Ｐ＝７．２、６．８Ｈｚ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１３．７２（Ｍｅ−Ｃ（５））。
３１Ｐ  ＮＭＲ（１２１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４８．１８、１４７．９６。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４９Ｈ５７Ｏ８Ｎ５Ｐ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算８７４．３９３９、観測８７４．３９４６。
【０２３３】
実施例４２
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−α−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（４２）
【化６１】
2020502072.tif 000066
ヌクレオシド１５（１．７４ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）を０．１５Ｍ  ＮａＯＨを含むＴＨＦ／メタノール／Ｈ２Ｏ（５：４：１、８０ｍＬ）に０℃で溶解した。反応物を２０分間撹拌し、ＮＨ４Ｃｌ（１．０６ｇ）の添加により反応停止させた。次いで、溶媒を減圧下で除去し、生成物をＣＣ（５％イソプロパノールを含むＤＣＭ）により精製し、４２（α−アノマー、８３６ｍｇ、５１％）および１６（β−アノマー、２８７ｍｇ、１８％）を白色フォームとして得た。
４２についてのデータ：Ｒｆ＝０．３５（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．３４（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．７１（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、８．０２（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ））、７．９２（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．６８−７．５８（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５８−７．３１（ｍ、９Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．２３（ｄｄ、Ｊ＝６．７、２．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．７４（ｄｄ、Ｊ＝６．６、４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．４９（ｄｔ、Ｊ＝１２．５、６．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．１０（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．０７（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、１Ｈ、ＯＨ）、２．９２（ｄｄ、Ｊ＝１５．４、７．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．５２−２．３５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．１０−１．９７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．９４−１．７７（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．０６（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．９８（ＣＯＮＨ）、１５２．６５（Ｃ（２））、１５１．３１（Ｃ（４））、１４９．６９（Ｃ（６））、１４０．９３（Ｃ（８））、１３５．７４（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．８２、１３３．６８、１３３．３９（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．７７、１３０．０２、１２９．９８、１２８．７６、１２８．０６、１２７．８７、１２７．８５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．３８（Ｃ（５））、８７．１６（Ｃ（１’））、８５．３５（Ｃ（４’））、７７．４０（Ｃ（７’））、７２．７９（Ｃ（５’））、５０．６３（Ｃ（３’））、４０．８６（Ｃ（６’））、３７．２５（Ｃ（２’））、２６．９４（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．０５（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３５Ｈ３８Ｏ４Ｎ５Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６２０．２６８８、観測６２０．２６７１。
【０２３４】
実施例４３
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛５’−Ｏ−アセチル−７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−α−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（４３）
【化６２】
2020502072.tif 000067
ヌクレオシド４２（１．０９ｇ、１．７５ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（３２１ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（５０ｍＬ）の溶液に、無水酢酸（０．８３ｍＬ、８．８ｍｍｏｌ）を室温で添加した。一晩撹拌した後、反応を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）の添加により停止させた。相を分離させ、水相をさらにＤＣＭ（２×８０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（２．５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、４３（１．０４ｇ、９０％）を白色フォームとして得た。
４３についてのデータ：Ｒｆ＝０．３３（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン４：１）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．９９（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、８．７３（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、８．０９−７．９９（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．９８（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．７０−７．５８（ｍ、５Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５７−７．４８（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４７−７．３４（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．２２（ｄｄ、Ｊ＝６．８、３．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．４５−５．３５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、５．０１（ｄｄ、Ｊ＝６．７、５．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．０９（ｄ、Ｊ＝４．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．０２（ｄｔ、Ｊ＝９．５、６．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．５５（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．５、１０．０、３．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．１５（ｄｄ、Ｊ＝１３．２、６．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、２．０９（ｓ、３Ｈ、ＭｅＣＯ２）、２．０１（ｄｔ、Ｊ＝８．０、３．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．８８（ｄｔ、Ｊ＝１３．６、５．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．０８（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．６１（ＭｅＣＯ２）、１６４．７５（ＣＯＮＨ）、１５２．６７（Ｃ（２））、１５１．３７（Ｃ（４））、１４９．６４（Ｃ（６））、１４１．４１（Ｃ（８））、１３５．８５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．７１、１３３．３８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．９１、１３０．１５、１３０．１０、１２８．９９、１２８．０２、１２７．９９、１２７．９７（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．６４（Ｃ（５））、８７．３７（Ｃ（１’））、８３．３７（Ｃ（４’））、７６．６３（Ｃ（７’））、７４．５１（Ｃ（５’））、５１．１９（Ｃ（３’））、３７．４４（Ｃ（２’））、３７．３２（Ｃ（６’））、２７．０１（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、２１．０８（ＭｅＣＯ２）、１９．１４（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３７Ｈ４０Ｏ５Ｎ５Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６６２．２７９３、観測６６２．２７８７。
【０２３５】
実施例４４
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−ヒドロキシ−α−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（４４）
【化６３】
2020502072.tif 000068
ヌクレオシド４３（９９０ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）の溶液に、ＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、３．０ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）を室温で添加した。３．５時間室温で撹拌した後、溶液をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、ＴＨＦを減圧下で除去した。次いで、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（６％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、４４（５７０ｍｇ、９０％）を、微量のＴＢＡＦを含む白色フォームとして得た。
４４についてのデータ：Ｒｆ＝０．３３（１０％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．６０（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、８．６７（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、８．０９（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．９６（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５１（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４２（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．３３（ｄｄ、Ｊ＝６．７、３．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．２５（ｄｄｄ、Ｊ＝９．７、６．４、５．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．９２（ｄｄ、Ｊ＝６．４、５．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．１４（ｂｒ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’）、ＯＨ）、３．０６（ｄｄ、Ｊ＝１６．０、６．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．８７（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．２、９．９、３．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．２６−２．１７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ２’））、２．１０−１．９８（ｍ、５Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’）、ＭｅＣＯ２）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．６４（ＭｅＣＯ２）、１６５．２７（ＣＯＮＨ）、１５２．４９（Ｃ（２））、１５１．２６（Ｃ（４））、１４９．５８（Ｃ（６））、１４１．６４（Ｃ（８））、１３３．６０（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．８２、１２８．７６、１２８．０６（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．３０（Ｃ（５））、８７．３０（Ｃ（１’））、８３．１７（Ｃ（４’））、７４．６７（Ｃ（７’））、７４．２０（Ｃ（５’））、５０．４１（Ｃ（３’））、３７．４３（Ｃ（２’））、３６．９２（Ｃ（６’））、２０．９６（ＭｅＣＯ２）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ２１Ｈ２２Ｏ５Ｎ５（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算４２４．１６１５、観測４２４．１６２３。
【０２３６】
実施例４５
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（４５）
【化６４】
2020502072.tif 000069
ヌクレオシド４４（５７０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を含む乾燥ピリジン（１６ｍＬ）の溶液に、ＤＭＴｒ−Ｃｌ（１．３７ｇ、４．０４ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を１日間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×８０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、４５（８７６ｍｇ、８９％）を黄色フォームとして得た。
４５についてのデータ：Ｒｆ＝０．８１（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．４２（ｄ、Ｊ＝１４．６Ｈｚ、１Ｈ、ＮＨ）、８．７３（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、８．０３（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．９３（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．６６−７．５５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５５−７．４５（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４５−７．２２（ｍ、７Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．２５（ｄｄ、Ｊ＝６．６、２．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．４７−５．３３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．８９（ｄｄ、Ｊ＝６．７、４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．０２（ｄ、Ｊ＝２．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．７９（ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．５８（ｄｄ、Ｊ＝１６．０、６．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．３８（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．７、１０．０、２．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．１１（ｓ、３Ｈ、ＭｅＣＯ２）、２．０９−１．８７（ｍ、３Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．４０（ＭｅＣＯ２）、１６４．８４（ＣＯＮＨ）、１５８．６６（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５２．４５（Ｃ（２））、１５１．２２（Ｃ（４））、１４９．５１（Ｃ（６））、１４５．２３（Ｃ−ａｒｏｍ）、１４１．２３（Ｃ（８））、１３６．５１、１３３．６５（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．６８、１３０．１２、１２８．７５、１２８．３３、１２７．９５、１２７．９０、１２７．０３（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．５５（Ｃ（５））、１１３．２７（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８７．１９（Ｃ（Ｐｈ）３）、８７．１２（Ｃ（１’））、８３．２５（Ｃ（４’））、７７．１６（Ｃ（７’））、７４．４１（Ｃ（５’））、５５．２３（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．２３（Ｃ（３’））、３７．６１（Ｃ（２’））、３６．２２（Ｃ（６’））、２０．９８（ＭｅＣＯ２）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４２Ｈ４０Ｏ７Ｎ５（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算７２６．２９２２、観測７２６．２９０５。
【０２３７】
実施例４６
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（４６）
【化６５】
2020502072.tif 000070
ヌクレオシド４５（８７０ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）を０．１Ｍ  ＮａＯＨを含むＴＨＦ／メタノール／Ｈ２Ｏ（５：４：１、５０ｍＬ）に０℃で溶解した。反応物を３０分間０℃で撹拌し、次いで、ＮＨ４Ｃｌ（３２１ｍｇ）の添加により反応停止させた。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×８０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（３％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、４６（７７７ｍｇ、９４％）を白色フォームとして得た。
４６についてのデータ：Ｒｆ＝０．２６（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．３９（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．６１（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、７．９３（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．７５（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．４６（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４０−７．３１（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２９−７．１６（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．１１（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．７３（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．１２（ｄｄ、Ｊ＝６．５、１．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．５３（ｄｄ、Ｊ＝７．５、４．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．３２（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．９０（ｔ、Ｊ＝４．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．６６、３．６５（２ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．３１（ｂｒ、１Ｈ、ＯＨ）、２．３６（ｄｄ、Ｊ＝１６．５、８．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．０４（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．０、９．９、２．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．９２−１．６９（ｍ、３Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．９２（ＣＯＮＨ）、１５８．６４（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５２．６０（Ｃ（２））、１５１．２８（Ｃ（４））、１４９．６１（Ｃ（６））、１４５．４４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１４０．７１（Ｃ（８））、１３６．７７、１３３．６５（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．７２、１３０．１５、１３０．１２、１２８．７３、１２８．３９、１２８．０４、１２７．９６、１２７．０２（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．２７（Ｃ（５））、１１３．２８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８７．１１（Ｃ（１’））、８７．０１（Ｃ（Ｐｈ）３）、８５．６０（Ｃ（４’））、７８．１６（Ｃ（７’））、７２．７２（Ｃ（５’））、５５．２８（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４８．８９（Ｃ（３’））、３９．９３（Ｃ（６’））、３７．５５（Ｃ（２’））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４０Ｈ３８Ｏ６Ｎ５（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６８４．２８１７、観測６８４．２８００。
【０２３８】
実施例４７
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ６−ベンゾイル−９−｛５’−Ｏ−［（２−シアノエトキシ）−ジイソプロピルアミノホスファニル］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α−Ｄ−リボフラノシル｝アデニン（４７）
【化６６】
2020502072.tif 000071
ヌクレオシド４６（１９９ｍｇ、０．２９０ｍｍｏｌ）および５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（５７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（７ｍＬ）の溶液に、２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト（０．１６ｍＬ、０．４９ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。６０分間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、４７（１９７ｍｇ、２つの異性体の混合物、７７％）を白色フォームとして得た。
４７についてのデータ：Ｒｆ＝０．７５（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．９８（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、８．６８、８．６７（２ｓ、１Ｈ、Ｃ（２））、７．９４（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．９０、７．８４（２ｓ、１Ｈ、Ｃ（８））、７．５６−７．４９（ｍ、１Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．４８−７．３４（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．３０−７．１０（ｍ、７Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．８０−６．６９（ｍ、４Ｈ、Ｈａｒｏｍ）、６．２１、６．１５（２ｄｄ、Ｊ＝６．８、２．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．６９、４．５９（２ｄｄ、Ｊ＝７．３、４．５Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．４４（ｔｔ、Ｊ＝１２．３、６．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．９０（ｄｄ、Ｊ＝９．０、３．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．８２−３．６３（ｍ、８Ｈ、ＭｅＯ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、３．５９−３．４３（ｍ、２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２．６１−２．４９（ｍ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、２．４７−２．０７（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．９８−１．６６（ｍ、３Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．１５−１．０３（ｍ、１２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．６７（ＣＯＮＨ）、１５８．７７（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５２．５８（Ｃ（２））、１５１．３４、１５１．２９（Ｃ（４））、１４９．４６（Ｃ（６））、１４５．５５、１４５．５４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１４１．５８、１４１．５０（Ｃ（８））、１３６．８７、１３６．８５、１３６．８４、１３３．８５（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３２．８５、１３０．２６、１３０．２３、１３０．２０、１２８．９７、１２８．４７、１２８．４３、１２８．０２、１２７．９６、１２７．０８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２３．６２、１２３．５８（Ｃ（５））、１１７．９１、１１７．７０（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１１３．３７（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８７．８０、８７．６７（Ｃ（１’））、８７．２０、８７．１４（Ｃ（Ｐｈ）３）、８５．２９、８５．２２（（ＪＣ，Ｐ＝４．２、３．１Ｈｚ、Ｃ（４’））、７８．１６、７７．９６（Ｃ（７’））、７４．２８、７３．９８（ＪＣ，Ｐ＝１４．８、１８．４Ｈｚ、Ｃ（５’））、５８．８０、５８．６１（ＪＣ，Ｐ＝１６．２、１７．３ＨｚＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、５５．３７、５５．３５（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．０２、４８．９１（Ｃ（３’））、４３．２９、４３．１６（ＪＣ，Ｐ＝８．９、９．０Ｈｚ、（（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、３９．０９（Ｃ（６’））、３７．９９、３７．９５（Ｃ（２’））、２４．８２、２４．７７、２４．７４、２４．７０、２４．６４（（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２０．４３、２０．４２（ＪＣ，Ｐ＝１．４、１．９Ｈｚ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）。
３１Ｐ  ＮＭＲ（１２１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４８．１４、１４８．１１。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４５Ｈ５６Ｏ７Ｎ８Ｐ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算８８４．３８９５、観測８８４．３９０４。
【０２３９】
実施例４８
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−２−アミノ−６−クロロ−９−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−α−Ｄ−リボフラノシル｝プリン（４８）
【化６７】
2020502072.tif 000072
ヌクレオシド２０（１．７８ｇ、３．０１ｍｍｏｌ）を０．５Ｍ  ＮａＯＨを含むＴＨＦ／メタノール／Ｈ２Ｏ（５：４：１、１５ｍＬ）に０℃で溶解した。反応物を２０分間０℃で撹拌し、ＮＨ４Ｃｌ（４８４ｍｇ）の添加により反応停止させた。次いで、懸濁液を飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×７５ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（３％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、４８（α−アノマー、９９２ｍｇ、６０％）および２１（β−アノマー、４２８ｍｇ、２５％）を白色フォームとして得た。
４８についてのデータ：Ｒｆ＝０．３４（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．７１−７．６０（ｍ、５Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ、Ｈ−（Ｃ（８））、７．４９−７．３４（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．０８（ｄｄ、Ｊ＝６．９、２．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．２６（ｓ、２Ｈ、ＮＨ２）、４．７０（ｄｄ、Ｊ＝７．５、４．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．４７（ｄｔ、Ｊ＝１０．０、５．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．１１（ｔ、Ｊ＝３．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．８７（ｄｄ、Ｊ＝１６．５、７．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．５７（ｂｒ、１Ｈ、ＯＨ）、２．２７（ｄｄｄ、Ｊ＝１４．０、９．９、２．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．１０−２．０１（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、１．９２−１．７６（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．０６（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５９．０９（Ｃ（２））、１５３．０５（Ｃ（４））、１５１．４６（Ｃ（６））、１３９．９１（Ｃ（８））、１３５．７１（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．９６、１３３．２７（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．００、１２９．９６、１２７．８６、１２７．８３（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２５．５２（Ｃ（５））、８６．４６（Ｃ（１’））、８４．９２（Ｃ（４’））、７７．４０（Ｃ（７’））、７２．６３（Ｃ（５’））、５０．５５（Ｃ（３’））、４０．９２（Ｃ（６’））、３６．７８（Ｃ（２’））、２６．８８（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．０１（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ２８Ｈ３３Ｏ３Ｎ５ＣｌＳｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算５５０．２０３６、観測５５０．２０１９。
【０２４０】
実施例４９
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−９−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−α−Ｄ−リボフラノシル｝グアニン（４９）
【化６８】
2020502072.tif 000073
ヌクレオシド４８（６１０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）の溶液に３−ヒドロキシプロピオニトリル（０．２８ｍＬ、４．１２ｍｍｏｌ）、続いて１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デク−５−エン（２８７ｍｇ、２．０６ｍｍｏｌ）を室温で添加した。４時間室温で撹拌した後、第２の部分の３−ヒドロキシプロピオニトリル（０．２８ｍＬ、３．２３ｍｍｏｌ）、続いて１，５，７−トリアザビシクロ［４．４．０］デク−５−エン（２８７ｍｇ、２．０６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物をさらに２日間撹拌し、次いで、ＣＣ（１０％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により直接精製し、４９（５００ｍｇ、８７％）を白色フォームとして得た。
４９についてのデータ：Ｒｆ＝０．３０（１０％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ７．７３−７．６１（ｍ、５Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ、Ｈ−Ｃ（８））、７．５３−７．３２（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．０６（ｄｄ、Ｊ＝６．９、３．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．７４（ｄｄ、Ｊ＝７．０、４．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．４６−４．３６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．１１（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．９１（ｄｄ、Ｊ＝１６．２、６．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．３１（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．８、１０．０、３．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、１．９８−１．７８（ｍ、３Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（３’））、１．０７（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ１５９．３０（Ｃ（２））、１５５．１４（Ｃ（６））、１５２．３８（Ｃ（４））、１３７．２８（Ｃ（８））、１３６．９３、１３６．８８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３５．１３、１３４．７８（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３１．０７、１３１．０６、１２８．９１、１２８．８９（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１７．９８（Ｃ（５））、８７．７２（Ｃ（１’））、８６．２５（Ｃ（４’））、７９．２１、（Ｃ（７’））７３．８７（Ｃ（５’））、５２．１３（Ｃ（３’））、４１．４４（Ｃ（６’））、３８．３５（Ｃ（２’））、２７．４２（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．８２（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ２８Ｈ３４Ｏ４Ｎ５Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算５３２．２３８６、観測５３２．２３６７。
【０２４１】
実施例５０
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ２−アセチル−９−｛５’−Ｏ−アセチル−７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−α−Ｄ−リボフラノシル｝グアニン（５０）
【化６９】
2020502072.tif 000074
ヌクレオシド４９（５００ｍｇ、０．９４０ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（２７６ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）の溶液に、無水酢酸（１．０ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）を室温で添加した。２日間撹拌した後、反応を飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）の添加により停止させた。次いで、混合物をＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（３．５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、５０（４４１ｍｇ、７６％）を白色フォームとして得た。
５０についてのデータ：Ｒｆ＝０．６２（１０％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１２．１１（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ−Ｃ（４））、９．９４（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（１））、７．６２（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、５Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ、Ｈ−Ｃ（８））、７．４６−７．３１（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．０３（ｄｄ、Ｊ＝６．７、２．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．３１（ｄｔ、Ｊ＝１０．３、５．２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−（Ｃ５’））、４．９９−４．８１（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．０２（ｄ、Ｊ＝３．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．８８（ｄｄ、Ｊ＝１６．０、６．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．４４−２．２０（ｍ、４Ｈ、ＭｅＣＯＮＨ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．１２−１．７３（ｍ、６Ｈ、ＭｅＣＯ２、Ｈ−Ｃ（６’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．０４（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７２．７３（ＭｅＣＯＮＨ）、１７０．４６（ＭｅＣＯ２）、１５５．８７（Ｃ（６））、１４８．０９（Ｃ（４））、１４７．４７（Ｃ（２））、１３７．１３（Ｃ（８））、１３５．７４（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３３．６２、１３３．２９（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．１３、１３０．０９、１２７．９６、１２７．９３（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２１．５４（Ｃ（５））、８６．４７（Ｃ（１’））、８２．８１（Ｃ（４’））、７６．６０（Ｃ（７’））、７４．３７（Ｃ（５’））、５１．２３（Ｃ（３’））、３７．０４、３７．０１、（Ｃ（２’）、Ｃ（６’））２６．９２（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、２４．４６（ＭｅＣＯＮＨ）、２１．００（ＭｅＣＯ２）、１９．０５（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３２Ｈ３８Ｏ６Ｎ５Ｓｉ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６１６．２５８６、観測６１６．２５８０。
【０２４２】
実施例５１
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ２−アセチル−９−｛５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−ヒドロキシ−α−Ｄ−リボフラノシル｝グアニン（５１）
【化７０】
2020502072.tif 000075
ヌクレオシド５０（４４０ｍｇ、０．７１４ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）の溶液に、ＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、１．１ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を４時間室温で撹拌し、次いで、ＣＣ（１３％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により直接精製し、５１（２３５ｍｇ、８７％）を白色フォームとして得た。Ｘ線分析に好適な結晶をＨ２Ｏ／ＭｅＯＨの混合物中での再結晶化により得た。
５１についてのデータ：Ｒｆ＝０．２５（１３％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ８．０３（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、６．２８（ｄｄ、Ｊ＝７．０、３．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．２１（ｄｄｄ、Ｊ＝９．２、６．８、５．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．９８（ｄｄ、Ｊ＝６．７、５．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−（４’））、４．１３−４．０５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．１７−３．０５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．８６（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．８、１０．０、３．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．３９−２．２７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’））、２．２４（ｓ、３Ｈ、ＭｅＣＯＮＨ）、２．１６−２．００（ｍ、５Ｈ、ＭｅＣＯ２、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）δ１７４．９５（ＭｅＣＯＮＨ）、１７２．３２（ＭｅＣＯ２）、１５７．５０（Ｃ（６））、１４９．９６（Ｃ（４））、１４９．３８（Ｃ（２））、１３９．６６（Ｃ（８））、１２１．７６（Ｃ（５））、８８．２３（Ｃ（１’））、８４．２３（Ｃ（４’））、７５．８３（Ｃ（５’）、Ｃ（７’））、５１．６５（Ｃ（３’））、３８．０４、３７．９３（Ｃ（２’）、Ｃ（６’））、２３．８３（ＭｅＣＯＮＨ）、２０．７１（ＭｅＣＯ２）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ１６Ｈ２０Ｏ６Ｎ５（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算３７８．１４０８、観測３７８．１４１９。
【０２４３】
実施例５２
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ２−アセチル−９−｛５’−Ｏ−アセチル−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α−Ｄ−リボフラノシル｝グアニン（５２）
【化７１】
2020502072.tif 000076
ヌクレオシド５１（１８６ｍｇ、０．４９２ｍｍｏｌ）を含む乾燥ピリジン（１０ｍＬ）の溶液に、ＤＭＴｒ−Ｃｌ（５０１ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ）を室温で添加した。溶液を２日間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（３％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、５２（３３３ｍｇ、９９％）を黄色フォームとして得た。
５２についてのデータ：Ｒｆ＝０．５６（１０％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１２．０５（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ−Ｃ（４））、９．９０（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（１））、７．４０（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（８））、７．３８−７．３１（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２８−７．０８（ｍ、７Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．７５（ｄｄ、Ｊ＝９．０、２．７Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．９５−５．８５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．３０−５．１０（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、４．７０−４．５８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、３．８１（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．６８、３．６８（２ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、２．２５−２．０７（ｍ、５Ｈ、ＭｅＣＯＮＨ、Ｈ−Ｃ（３’）、Ｈ−Ｃ（２’））、１．９６−１．７９（ｍ、５Ｈ、ＭｅＣＯ２、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．７４−１．５９（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７２．６５（ＭｅＣＯＮＨ）、１７０．４２（ＭｅＣＯ２）、１５８．７３、１５８．７０（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５５．８６（Ｃ（６））、１４７．９６（Ｃ（４））、１４７．４３（Ｃ（２））、１４５．３１（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３７．１７（Ｃ（８））、１３６．６９、１３６．４４（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．３２、１３０．２１、１２８．２９、１２８．０５、１２７．０９（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２１．５３（Ｃ（５））、１１３．３８、１１３．３５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８７．２５（Ｃ（Ｐｈ）３）、８６．７３（Ｃ（１’））、８２．７７（Ｃ（４’））、７７．１９（Ｃ（７’））、７４．３７（Ｃ（５’））、５５．３８（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．２８（Ｃ（３’））、３７．２５（Ｃ（２’））、３６．０６（Ｃ（６’））、２４．４０（ＭｅＣＯＮＨ）、２１．０１（ＭｅＣＯ２）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３７Ｈ３８Ｏ８Ｎ５（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６８０．２７１５、観測６８０．２７１８。
【０２４４】
実施例５３
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジノ）−９−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α−Ｄ−リボフラノシル｝グアニン（５３）
【化７２】
2020502072.tif 000077
ヌクレオシド５２（３３３ｍｇ、０．４９０ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（３０５ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ）を室温で添加した。懸濁液を７時間室温で撹拌し、次いで、ＮＨ４Ｃｌ（７８ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物をＳｉＯ２の短いパッドに通して濾過した。ＳｉＯ２を追加のＭｅＯＨで洗浄し、次いで、溶媒を蒸発させた。
【０２４５】
粗生成物を乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（０．３３ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を２時間５５℃で撹拌し、次いで、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をＣＣ（７％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、５３（２４５ｍｇ、７７％）を、微量のＥｔ３Ｎを含む白色フォームとして得た。
５３についてのデータ：Ｒｆ＝０．３２（１２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．７５（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（１））、８．２５（ｓ、１Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、７．３７（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．２９−７．０８（ｍ、８Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ、Ｈ−Ｃ（８））、６．７４（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．０３（ｄｄ、Ｊ＝６．７、２．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．５７（ｄｄ、Ｊ＝７．５、４．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．３７−４．２６（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、３．８９（ｔ、Ｊ＝３．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．６７、３．６７（２ｓ、６Ｈ、ＭｅＯ）、３．２４（ｂｒ、１Ｈ、ＯＨ）、２．９４（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、２．８７（ｓ、３Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、２．３５（ｄｄ、Ｊ＝１５．９、７．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、１．９４−１．６８（ｍ、４Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５８．６１（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５８．２８（Ｃ（２））、１５７．９２（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、１５６．６９（Ｃ（６））、１４９．９０（Ｃ（４））、１４５．５２、１３６．８６、１３６．７７（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．５０（Ｃ（８））、１３０．１５、１２８．３２、１２７．９２、１２６．９５（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２０．２７（Ｃ（５））、１１３．２４（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８６．９２（Ｃ（Ｐｈ）３）、８５．５７（Ｃ（１’））、８５．１２（Ｃ（４’））、７８．３１（Ｃ（７’））、７２．６９（Ｃ（５’））、５５．２８（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．２８（Ｃ（３’））、４１．３８（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、３９．７７（Ｃ（６’））、３７．５８（Ｃ（２’））、３５．０４（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３６Ｈ３９Ｏ６Ｎ６（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算６５１．２９２６、観測６５１．２９２１。
【０２４６】
実施例５４
（３’Ｓ，５’Ｒ，７’Ｒ）−Ｎ２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミジノ）−９−｛５’−Ｏ−［（２−シアノエトキシ）−ジイソプロピルアミノホスファニル］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−Ｏ−［（４，４’−ジメトキシトリフェニル）メチル］−α−Ｄ−リボフラノシル｝グアニン（５４）
【化７３】
2020502072.tif 000078
ヌクレオシド５３（２４５ｍｇ、０．３７７ｍｍｏｌ）および５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（７４ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）の溶液に、２−シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホルジアミダイト（０．２０ｍＬ、０．６４ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。５０分間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（３％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ、＋０．５％Ｅｔ３Ｎ）により精製し、５４（２１２ｍｇ、２つの異性体の混合物、６７％）を白色フォームとして得た。
５４についてのデータ：Ｒｆ＝０．４２（７％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．３５（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（１））、８．５１、８．４９（２ｓ、１Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、７．４１−７．１０（ｍ、１０Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ、Ｈ−Ｃ（８））、６．８３−６．７０（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．１５−６．００（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、４．６４−４．３６（ｍ、２Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’）、Ｈ−Ｃ（５’））、３．９０−３．８２（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、３．８０−３．６２（ｍ、８Ｈ、ＭｅＯ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、３．５９−３．４３（ｍ、２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、３．０４、３．０２（２ｓ、６Ｈ、ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、２．６７−２．４８（ｍ、２Ｈ、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、２．３２（ｄｄｄ、Ｊ＝２４．１、１５．１、６．７Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．０２−１．６３（ｍ、４Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．１４−１．０３（ｍ、１２Ｈ、（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１５８．７６（ＭｅＯ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１５８．１７、１５８．１２（Ｃ（２））、１５８．０３（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、１５６．６６、１５６．５９（Ｃ（６））、１４９．８５、１４９．７９（Ｃ（４））、１４５．５１、１４５．４９、１３６．８４、１３６．７７、１３６．７３、１３６．７１（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．７６、１３５．５９（Ｃ（８））、１３０．２４、１３０．２０、１２８．４１、１２８．３３、１２８．０２、１２７．１０、１２７．０８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１２０．７４、１２０．７０（Ｃ（５））、１１７．９８、１１７．７２（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、１１３．３４（ＣＨ−ａｒｏｍ）、８７．１６、８７．１０（Ｃ（Ｐｈ）３）、８６．００、８５．７２（Ｃ（１’））、８４．１３、８４．１０（ＪＣ，Ｐ＝３．６、２．５Ｈｚ、Ｃ（４’））、７８．０２、７７．６７（Ｃ（７’））、７４．１５、７３．７４（ＪＣ，Ｐ＝１５．３、１８．７Ｈｚ、Ｃ（５’））、５８．９０、５８．６７（ＪＣ，Ｐ＝１８．７、１９．７ＨｚＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）、５５．３８、５５．３６（ＭｅＯ−ＤＭＴｒ）、４９．２０、４９．０９（Ｃ（３’））、４３．２０、４３．１５（ＪＣ，Ｐ＝１２．４、１２．６Ｈｚ、（（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、４１．４２、４１．３８（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、３８．６８、３８．６５（Ｃ（６’））、３７．９７、３７．８４（Ｃ（２’））、３５．２５（ＮＣＨＮ（ＣＨ３）２）、２４．８３、２４．７５、２４．６８、２４．６０、２４．５３（（Ｍｅ２ＣＨ）２Ｎ）、２０．３５、２０．２８（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＮ）。
３１Ｐ  ＮＭＲ（１２１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１４８．２１、１４８．０１。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ４５Ｈ５６Ｏ７Ｎ８Ｐ（［Ｍ＋Ｈ］＋）について計算８５１．４００４、観測８５１．４０１３。
【０２４７】
実施例５５
（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＳ）−４−（（Ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２−メトキシヘキサヒドロ−２Ｈ−シクロペンタ［ｂ］フラン−６−イル（４−ニトロベンゾエート）（５５）
【化７４】
2020502072.tif 000079
糖６（１９５ｍｇ、０．４３７ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（７０ｍｇ、０．５６８ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）の溶液に、４−ニトロベンゾイルクロリド（１５８ｍｇ、０．８５０ｍｍｏｌ）を室温で添加した。一晩撹拌した後、反応を、飽和ＮａＨＣＯ３（３ｍＬ）を徐々に添加することにより停止させた。次いで、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（ｈｅｘａｎｎｅ）１：５）により精製し、アノマー比α／β≒４：１の５５の混合物（２６０ｍｇ、９８％）を白色固体として得た。
５５についてのデータ：Ｒｆ＝０．６２（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：２）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．３３−８．１７（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．７２−７．６１（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５１−７．３２（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、５．６５−５．４７（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、４．９７（ｄｄ、Ｊ＝９．２、５．６Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（２））、４．８７（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６ａ））、４．１８（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（４））、３．９８（ｄ、Ｊ＝３．５Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（４））、３．２１（ｄ、Ｊ＝１５．１Ｈｚ、３Ｈ、ＭｅＯ）、２．８８（ｄｄ、Ｊ＝１６．６、７．９Ｈｚ、０．８Ｈ、Ｈ−Ｃ（３ａ））、２．７５−２．６２（ｍ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（３ａ））、２．４９−２．３４（ｍ、０．２Ｈ、Ｈ−Ｃ（５））、２．２４−１．８３（ｍ、２．８Ｈ、Ｈ−（５）、Ｈ−Ｃ（３））、１．２８（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．０、７．９、４．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３））、１．０９（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．４６、１６４．４１（ＣＯ２Ｒ）、１５０．６３（Ｏ２Ｎ−Ｃ−ａｒｏｍ）、１３５．８７、１３５．８２（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３４．０７、１３３．７５、１３３．６９（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３０．９８、１３０．８９、１２９．９８、１２９．９６、１２９．９１、１２７．８９、１２７．８７、１２７．８５、１２３．５９（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１０６．４９、１０６．３９（Ｃ（２））、８３．２１、７９．８７（Ｃ（６ａ））、７６．５４（Ｃ（４））、７６．０９（Ｃ（６））、５４．５５、５４．４７（ＭｅＯ）、５１．６９、５０．３０（Ｃ（３ａ）、３８．０７（Ｃ（３））、３７．１７、３６．６５（Ｃ（５））、２７．０４、２６．９９９０（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．１４（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３１Ｈ３５Ｏ７ＮａＳｉ（［Ｍ＋Ｎａ］＋）について計算５８４．２０７５、観測５８４．２０８５。
【０２４８】
実施例５６
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛７’−［（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ］−２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−５’−Ｏ−（４−ニトロベンゾエート）−α，β−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（５６）
【化７５】
2020502072.tif 000080
糖５５（２６０ｍｇ、０．４６３ｍｍｏｌ）およびチミン（８４ｍｇ、０．６９５ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＭｅＣＮ（３ｍＬ）の溶液に、ＢＳＡ（０．３４ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）を室温で１滴ずつ添加した。３０分間室温で撹拌した後、溶液を０℃まで冷却し、ＴＭＳＯＴｆ（０．１０ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加した。２時間０℃で、および１８時間室温でさらに撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×４０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、アノマー比α／β≒８８：１２の５６の混合物（２４０ｍｇ、７９％）を白色フォームとして得た。
５６についてのデータ：Ｒｆ＝０．５６（ＤＣＭ＋３％ＭｅＯＨ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．３８（ｂｒ、１Ｈ、（ｓ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、８．３２−８．２３（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、８．２２−８．１１（ｍ、２Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．６５（ｄｄ、Ｊ＝７．７、１．５Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．５０−７．３６（ｍ、６Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、６．９５（ｄ、Ｊ＝０．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、５．９６（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．５５（ｄｔ、Ｊ＝９．９、６．０Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、５．１３（ｄｄ、Ｊ＝６．４、５．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．２０−４．０５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．９４−２．７８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．２２（ｄｄ、Ｊ＝１３．３、６．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’））、２．０９−１．７３（ｍ、６Ｈ、Ｈ−Ｃ（６’）、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｍｅ−Ｃ（５））、１．０９（ｓ、９Ｈ、（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）。
【０２４９】
１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６４．３２、１６３．７９（Ｃ（４）、ＣＯ２Ｒ）、１５０．６５、１５０．３９（Ｏ２Ｎ−Ｃ−ａｒｏｍ、Ｃ（２））、１３５．７０、１３５．６８（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１３５．１３（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３４．８３（Ｃ（６））、１３３．４６、１３３．１０（Ｃ−ａｒｏｍ）、１３０．９１、１３０．７３、１３０．１１、１２７．９３、１２３．６０（ＣＨ−ａｒｏｍ）、１１１．３０（Ｃ（５））、８７．２６（Ｃ（１’））、８２．４４（Ｃ（４’））、７６．４０（Ｃ（７’））、７６．０７（Ｃ（５’））、５０．７６（Ｃ（３’））、３７．９４（Ｃ（６’））、３６．６８（Ｃ（２’））、２６．８９（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１９．０３（（ＣＨ３）３−Ｃ−Ｓｉ）、１２．６２（Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ３５Ｈ３７Ｏ８Ｎ３ＮａＳｉ（［Ｍ＋Ｎａ］＋）について計算６７８．２２４２、観測６７８．２２５４。
【０２５０】
実施例５７
（３’Ｒ，５’Ｒ，７’Ｒ）−１−｛２’，３’−ジデオキシ−３’，５’−エタノ−７’−ヒドロキシ−５’−Ｏ−（４−ニトロベンゾエート）−α，β−Ｄ−リボフラノシル｝チミン（５７）
【化７６】
2020502072.tif 000081
ヌクレオシド５６（２２０ｍｇ、０．３３５ｍｍｏｌ）を含む乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）の溶液にＴＢＡＦ（１Ｍ  ＴＨＦ溶液、０．８４ｍＬ、０．８４ｍｍｏｌ）を室温で添加した。４時間室温で撹拌した後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）およびＤＣＭ（２×８０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をＣＣ（５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭ）により精製し、５７のアノマー混合物を得た（１０１ｍｇ、７２％）。Ｘ線分析に好適な結晶をＥｔＯＡｃ中での再結晶化により得た。
５７についてのデータ：Ｒｆ＝０．５０（ＤＣＭ＋７％ＭｅＯＨ）；
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．９６（ｂｒ、１Ｈ、Ｈ−Ｎ（３））、８．３４−８．１７（ｍ、４Ｈ、Ｈ−ａｒｏｍ）、７．０７（ｄ、Ｊ＝１．１Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（６））、６．１１（ｔ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（１’））、５．５７−５．４５（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（５’））、５．１５（ｄｄ、Ｊ＝６．６、５．４Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（４’））、４．３８−４．２３（ｍ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（７’））、２．９６（ｄｄ、Ｊ＝１３．５、６．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−Ｃ（３’））、２．２６（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．１、１０．３、５．４Ｈｚ、４Ｈ、Ｈ−Ｃ（２’）、Ｈ−Ｃ（６’））、１．９１（ｄ、Ｊ＝０．９Ｈｚ、３Ｈ、Ｍｅ−Ｃ（５））。
ＥＳＩ＋−ＨＲＭＳｍ／ｚ  Ｃ１９Ｈ１９Ｏ８Ｎ３Ｎａ（［Ｍ＋Ｎａ］＋）について計算４４０．１０６４、観測４４０．１０７２。
【０２５１】
実施例５８
αアノマーモノマーのオリゴマーの設計および合成
天然β−ＤＮＡ鎖の内部の修飾の適応を評価するために、チミジンビルディングブロック６の単一または複数の挿入を有する５つのオリゴデオキシヌクレオチド（ＯＮ１６−２０）を調製した。β−ＤＮＡの幾何学に適合するために、修飾は極性逆転で挿入し、３’−７’および５’−‘５ヌクレオシド連結が得られた（図１および４を参照されたい）。この新規系の天然核酸との、また、それ自身に対する対形成特性を試験するために、４つ全ての核酸塩基を含む完全修飾ＯＮ２１、ならびにその逆平行（ＯＮ２２）および平行（ＯＮ２３）完全修飾相補体を調製した。最後に、その可能性のあるアンチセンス特性を試験する目的で、ホスホロチオエート連結を有する完全修飾ストランドを合成した（ＯＮ２４）。古典的自動化ホスホラミダイト化学を使用して合成を実施した。５’→７’方向で完全修飾ストランドを合成した。結果として、ＤＭＴｒ保護基の７’位からの完全切断は、５％ジクロロ酢酸を含むジクロロエタンの溶液を必要とした。これらの条件においては、カップリング収率はトリチルアッセイに基づき＞９８％であった。完全修飾ストランドは、濃アンモニア中５５℃で一晩の滑面処理（ｓｍｏｏｔｈ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）により普遍的固体支持体から完全に切断させることができた（さらなる合成および分析の詳細については下記を参照されたい）。
【０２５２】
αアノマーオリゴヌクレオチド合成、脱保護および精製のプロセス
オリゴヌクレオチド合成をＰｈａｒｍａｃｉ−Ｇｅｎｅ−Ａｓｓｅｍｂｌｅｒ−Ｐｌｕｓ  ＤＮＡシンセサイザー上で１．３μｍｏｌスケールで実施した。天然ＤＮＡホスホラミダイト（ｄＴ、ｄＣ４ｂｚ、ｄＧ２ＤＭＦ、ｄＡ６Ｂｚ）および固体支持体（ｄＡ−Ｑ−ＣＰＧ５００、ｄｍｆ−ｄＧ−Ｑ−ＣＰＧ５００、Ｇｌｅｎ  Ｕｎｙｓｕｐｐｏｒｔ５００）をＧｌｅｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈから購入した。天然ＤＮＡホスホラミダイトを０．１ＭのＭｅＣＮ溶液として調製し、４分工程を使用してカップリングさせた。７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡホスホラミダイトを０．１Ｍの１，２−ジクロロエタン溶液として調製し、延長１２分工程を使用してカップリングさせた。５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（０．２５ＭのＭｅＣＮ溶液）をカップリング剤として使用した。修飾ヌクレオシドの脱トリチル化を、５％ジクロロ酢酸を含むジクロロエタンの溶液を用いて実施した。硫化を、０．２Ｍフェニルアセチルジスルフィドを含むＭｅＣＮ／ピリジン（１：１）の溶液および３．５分の反応時間を用いて実施した。キャッピングおよび酸化を標準条件を用いて実施した。固体支持体からの切断およびオリゴヌクレオチドの脱保護を５５℃で１６時間、濃アンモニアを用いた処理により達成した。遠心分離後、上清を収集し、ビーズをＨ２Ｏ（０．５ｍＬ×２）でさらに洗浄し、得られた溶液を蒸発乾固させた。粗オリゴヌクレオチドをイオン交換ＨＰＬＣ（Ｄｉｏｎｅｘ−ＤＮＡＰａｃ  ＰＡ２００）により精製した。２５ｍＭ  Ｔｒｉｚｍａを含むＨ２Ｏ、ｐＨ８．０の緩衝液を移動相「Ａ」として使用し、２５ｍＭ  Ｔｒｉｚｍａ、１．２５Ｍ  ＮａＣｌを含むＨ２Ｏ、ｐＨ８．０を移動相「Ｂ」として使用した。ホスホロチオエートストランドでは、１０ｍＭ  ＮａＯＨを含むＨ２Ｏ、ｐＨ１２．０の緩衝液を移動相「Ａ」として使用し、１０ｍＭ  ＮａＯＨ、２．５０Ｍ  ＮａＣｌを含むＨ２Ｏ、ｐＨ１２．０を移動相「Ｂ」として使用した。次いで、精製オリゴヌクレオチドを、Ｓｅｐ−ｐａｃｋ  Ｃ−１８カートリッジを用いて脱塩した。濃度を、Ｎａｎｏｄｒｏｐ分光光度計を用い、対応する天然ＤＮＡオリゴヌクレオチドの消衰係数を使用して、２６０ｎｍでの吸光度を測定することにより決定した。オリゴヌクレオチドの特徴付けをＥＳＩ−質量分析またはＬＣ−ＭＳにより実施した。
【０２５３】
実施例５９
αアノマーモノマーから合成された修飾オリゴデオキシヌクレオチドの相補的ＤＮＡおよびＲＮＡとの対形成特性
オリゴヌクレオチドの二本鎖の安定性を２６０ｎｍでのＵＶ融解曲線により評価し、それらのＴｍをそれらの天然ＤＮＡ類似体と比較した（表１）。単一組み込みを有するオリゴヌクレオチドＯＮ１６−１７ではＤＮＡ相補体との強い不安定化およびＲＮＡとのわずかに低い不安定化という結果となった。このペナルティは、累積的であると考えられ、２つの前の位置が修飾されているＯＮ１８では、さらにＴｍが減少した。しかしながら、２または５つの修飾を継続的に導入すると（ＯＮ１９−２０）、修飾ごとの不安定化は、およそ、ＤＮＡに対して−３℃およびＲＮＡに対して−１．３℃に低減された。これらのデータから、配列構成によって、ＤＮＡと７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡの間の接合部は強い不安定化を誘導し、−４〜−９℃のＴｍの下落を伴うことが示唆される。ヘテロバックボーン接合部によるそのような不安定化はα−ＤＮＡ（Ａｒａｍｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ  １９９８，  ２６，  ５６４４，  Ａｒａｍｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９７，  ３６，  ９７１５）およびα−ＬＮＡ（Ｎｉｅｌｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  −  Ａ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ２００２，  ８，  ７１２）についてすでに観察されている。この不安定化は修飾をブロックとして挿入することにより補償することができた。
【表２】
2020502072.tif 000082
【０２５４】
実施例６０
αアノマーモノマーから合成された完全修飾オリゴヌクレオチドの対形成特性
予想通りに、３つ全ての完全修飾配列ＯＮ２１−２３はそれらの平行ＤＮＡおよびＲＮＡ相補体と協同的な可逆融解挙動を示す（図５）が、それらの逆平行相補体とは示さない。得られた７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡ／ＤＮＡ二本鎖はそれらの天然対応物よりもわずかに安定ではなく、修飾ごとに−０．１〜−０．５℃の不安定化を有する（表２）。驚いたことに、ＯＮ２１−２３は、ＲＮＡと非常に安定な二本鎖を形成し、修飾ごとに１．３〜１．５℃の大きな安定化が得られたことが見出されている。完全修飾ストランドと単一または複数の組み込みを有する天然オリゴデオキシヌクレオチドストランドの間では、安定化効果についてかなり驚くべき違いが存在している。これは、新規対形成系を特徴付けるために、完全修飾ストランドを合成する重要性を強調する。
【表３】
2020502072.tif 000083
【０２５５】
ミスマッチ識別を試験するために、ＵＶ融解実験をＯＮ２１および位置４で３つ全ての代替核酸塩基を有するその平行ＤＮＡ相補体を用いて実施した（表３）。そのような誤対合は強い不安定化効果を有し、Ｔｍを−９．６〜−１４．３℃だけ低減させる。その天然対応物と比較すると、７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡは、さらに−１．０〜−２．４℃だけ低減されたＴｍを有するより良好なミスマッチ識別能力を有する。ミスマッチ識別を増加させると、可能性のあるオフターゲット効果が低減されるはずであり、アンチセンス候補のための魅力的な特性が表される。ホスホロチオエート連結による修飾は７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡとの関連でよく適応され、不安定化効果は、この修飾について報告されているヌクレオチドごとに−０．５℃の範囲にある（（Ｋｕｒｒｅｃｋ，  Ｊ．  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ／ＦＥＢＳ  ２００３，  ２７０，  １６２８）。ＯＮ２４は、天然ＤＮＡと比べて、ＲＮＡに対して良好な親和性を維持し、０．６℃の安定化効果を有する。
【表４】
2020502072.tif 000084
【０２５６】
それ自体のシリーズでは、ＯＮ２１はその逆平行相補体ＯＮ２２に対して非常に安定な二本鎖を形成し、８３．６℃という予想外のＴｍが得られた。この高いＴｍのために、完全古典的Ｓ字形転移が、塩化ナトリウムがない場合のみに観察することができ、Ｔｍは６８．６℃まで減少した（表４）。興味深いことに、二本鎖の形成により、たった１０％の低い淡色効果が得られた（図５）。これは、古典的へリックスとは異なる塩基スタッキングを示し、そのため、古典的ＡまたはＢ−二本鎖から外れた幾何学を有する二本鎖の形成を予測することができた。他方、ＯＮ２１とその平行相補体ＯＮ２３の間では、Ｓ字形融解転移は観察されなかった（図５）。起こる淡色効果の変化は２つの一本鎖について別々に実施したＵＶ融解実験とは異なっておらず、それは一本鎖の内側で起こる塩基スタッキングと関連した。７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡがＡ−様へリックスの中に収まる能力を試験するために、融解実験をトリシクロ−ＤＮＡ（ｔｃ−ＤＮＡ）、ＲＮＡのコンホメーション的に制限された模倣物に対して実施した（Ｒｅｎｎｅｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ２００２，  １２４，  ５９９３）。ＯＮ２１を相補的平行ｔｃ−ＤＮＡ鎖（Ｔｃ１）と混合させると、驚いたことに８１℃という高いＴｍが観察され、７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡのこのへリックス幾何学に適合する能力が証明された。
【表５】
2020502072.tif 000085
【０２５７】
実施例６１
αアノマーオリゴマーの二本鎖形成の熱力学データ
ＯＮ２１のＤＮＡおよびＲＮＡとの二本鎖形成およびそれらの天然対応物についての熱力学データを、実験融解曲線への曲線フィッティングにより、確立された方法に従い、抽出した（Ｐｅｔｅｒｓｈｅｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９８３，  ２２，  ２５６）（表５）。予想通りに、２５℃での自由エネルギーΔＧはＴｍデータと同じ傾向に従い、ＯＮ２１・ＲＮＡが最も好ましい二本鎖である。天然系に関しては、ＯＮ２１は天然核酸とより低いエンタルピーで結合する。しかしながら、この不安定化はエントロピー増大により補償される。この挙動はｂｃ−ＤＮＡシリーズにおいて典型的であり、エチレン架橋により付加されるコンホメーションの剛性から生じる。興味深いことに、ＤＮＡを超えるＲＮＡに対する７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡの選択性は、大部分はエンタルピー駆動である。
【表６】
2020502072.tif 000086
【０２５８】
実施例６２
αアノマーオリゴマーのＣＤ−分光法
ＤＮＡ、ＲＮＡまたはＯＮ２２との二本鎖のＯＮ２１のＣＤ−スペクトルを測定し、対応する天然ＤＮＡ／ＲＮＡ二本鎖と比較した（図６）。ＤＮＡまたはＲＮＡとのＯＮ２１のどちらの二本鎖も、天然Ａ／Ｂ−へリックスに比較的近いＣＤ特性を有する。しかしながら、ＯＮ２１／ＤＮＡ二本鎖は２１０ｎｍで負のシグナルを示さず、５ｎｍだけブルーシフトし、振幅の増加と関連する２２６ｎｍでの楕円率を有する。ＯＮ２１／ＲＮＡ二本鎖はまた、２２６ｎｍでより高い正の振幅のピークを有し、２６６での正の楕円率は４ｎｍだけブルーシフトされ、より鋭いピークが形成される。他方、修飾ホモ二本鎖は、２７５〜３００ｎｍの小さな振幅のブロードな負の楕円率および２５９ｎｍおよび２１８ｎｍの２つの正のピークにより特徴付けられる、非常に非定型のＣＤ特性を有する。二本鎖形成での低い淡色効果変化に一致して、ホモ二本鎖のＣＤスペクトルは、従来のへリックスから外れた構造の形成を示す。
【０２５９】
実施例６３
αアノマーオリゴマーの生物学的安定性
完全修飾オリゴヌクレオチドＯＮ２１の生体内安定性を模擬生理的条件下で、その対応する天然オリゴヌクレオチドと比較して研究した。オリゴヌクレオチドを、Ｈ２Ｏおよびヒト血清の１：１混合物中、３７℃でインキュベートし、反応結果を２０％変性ＰＡＧＥにより分析した。詳細には、ＯＮ２１およびその対応する天然オリゴヌクレオチドを、Ｈ２Ｏおよびヒト血清（ヒト男性ＡＢ血漿由来、ＵＳＡ起源、滅菌濾過（Ｓｉｇｍａ））の１：１混合物中１０μＭまで希釈した。反応を２０μＬスケールで実施し、３７℃でインキュベートした。対照反応（ａ、ｆ）を、オリゴヌクレオチドを、Ｈ２Ｏ中１０μＭで、３７℃にて２４時間インキュベートすることにより実施した。特定の時間でホルムアミド（２０μＬ）の添加により、反応を中止させた。得られた混合物を−２０℃で保存し、その後、５分間９０℃で熱変性させ、次いで、２０％変性ＰＡＧＥにより分析した。可視化を、ステインズ−オール（ｓｔａｉｎｓ−ａｌｌ）溶液を用いて実施した。実験は４時間後すでに天然ＤＮＡ鎖の完全消化を示し（ｄ）、修飾オリゴヌクレオチドは２４時間後でさえも完全に安定なままであった（ｊ）（図７）。７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡ修飾は、著しく改善された生体内安定性を与えると考えられる。
【０２６０】
実施例６４
αアノマーオリゴマーによる補体Ｃ３活性化
補体活性化は、しばしばアンチセンスＯＮのインビボ使用と関連する重要な毒性応答を表す。その上、ｔｃ−ＤＮＡを用いて実施されたインビボ試験は、時折、そのような急性毒性を誘導し、その結果としてそれらの使用が制限された。この状況では、ホスホロチオエートヌクレオシド連結を含む７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡの補体活性化を試験し、それをよく特徴付けられた修飾または天然ＯＮと比較することは特に興味深い。実験を、マウス血清試料を４ｍｇ／ｍｌの試験されるＯＮと３７℃で４５分間インキュベートすることにより実施した。マウスＣ３補体活性化をその後、ＥＬＩＳＡによりＰａｎＳｐｅｃｉｆｉｃ  Ｃ３試薬、続いてＳＣ５ｂ−９キットを使用して分析した。
【０２６１】
ＯＮ２４（ＰＳ−７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡ足場）とのインキュベーションにより、天然ＤＮＡより低いＣ３補体タンパク質のレベルが得られたが、ＰＳ−ＤＮＡより高かった（図８）。タンパク質レベルは無毒性ＰＯ−ｔｃ−ＤＮＡと同様である。これらの有望な結果により、ＯＮ２４は補体を有意には活性化しないことが示される。
【０２６２】
実施例６５
アンチセンス活性
Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）は、ＤＭＤ遺伝子の突然変異（アウトオブフレームジストロフィン転写物となり、最終的に機能性ジストロフィンタンパク質の欠如という結果となる）に起因する致死的筋肉変性疾患である。ＤＭＤでは、異常な疾患関連プレｍＲＮＡ転写物は、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＯ）により機能的に回復させることができる。そのようなＡＯはスライスパターンを変化させることができ、特定のジストロフィンエクソンの排除により、異常なアウトオブフレームジストロフィン転写物を補正することができる。よって、オープンリーディングフレームが回復され、短縮されたが機能的なジストロフィンタンパク質生成物が作製される（Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ＰｌｏＳ  ｏｎｅ  ２０１３，  ８，  ｅ６１５８４）。７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡ足場の、エクソンスキッピングを誘導する能力を、ｍｄｘマウス−Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型筋ジストロフィーのためのマウスモデル−由来の筋芽細胞に、リポフェクタミンＬＴＸを用いてＯＮ２４をトランスフェクトすることにより、インビトロで評価した。Ｍｄｘ筋芽細胞を７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡと共にインキュベートし、ＲＮＡを単離し、ネステッドＲＴ−ＰＣＲにより増幅させ、ゲル（ＰＡＧＥ）により分析した。
【０２６３】
結果は高レベルのエクソン２３スキッピング、ならびにかなりのレベルの、エクソン２２および２３のダブルスキップを示す（図９）。このダブルエクソンスキッピングは、破壊された読み枠を回復させるのに効率的な化合物でしばしば見られ（Ｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ  ２００１，  ９８，  ４２；  Ｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｅ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｇｅｎｅ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２００２，  ４，  ６４４；  Ｙｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｔｈｅｒａｐｙ．  Ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄｓ  ２０１３，  ２，  ｅ１２４；  Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ＰｌｏＳ  ｏｎｅ  ２０１３，  ８，  ｅ６１５８４）、筋ジストロフィーにおける治療的エクソンスキッピングのためのＯＮ２４の効力の証拠となる。その上、７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡは、ｔｃ−ＤＮＡ、マウスにおいて著しい治療効果を有することが知られている修飾よりも高いレベルのエクソンスキッピング誘導した（Ｇｏｙｅｎｖａｌｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ  Ｍｅｄ  ２０１５，  ２１，  ２７０）。そのため、７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡ足場は、治療的エクソンスキッピングにおいて強い効果を誘導する必要条件を満たす。
【０２６４】
実施例６６
α−アノマーのＸ線結晶構造決定
モノマーの結晶を、主に７’，５’−α−ｂｃ−ＤＮＡシリーズの相対立体配置を確認するために、またこの構造をアブイニシオ計算により見出された最小値と比較するために入手した。チミジンおよびグアノシンモノマーのための結晶を入手するために、Ｔモノマー（化合物５７）を結晶化することができるように、ｐ−ニトロベンゾエートをＯ３’で導入した。この分子はＥｔＯＡｃと共結晶化し、低品質の結晶を生じさせた。得られた構造（図３ａ）は、炭素環において、Ｃ１’−エンド、Ｏ４’−エキソ糖パッカおよびＣ６’−エンドコンホメーションを採用する。このコンホメーションは、Ｃ５’置換基を疑似エクアトリアル位置で、Ｃ７’ヒドロキシル基を疑似アキシアル位置で配向させる。この構造はアブイニシオ計算により予測される最小から糖パッカにおいて逸脱する。しかしながら、さらなる分析により、ｐ−ニトロベンゾエート置換基は糖コンホメーションを妨害することが証明された。保護グアノシン５１は良好な品質の結晶を生じさせた。この場合（図３ｂ）、フラノースはほぼ完全なＣ１’−エキソコンホメーションを採用し、一方、炭素環は前述のような幾何学を採用する。今回、構造は、アブイニシオ計算により予測される最小コンフォマーの１つと完全に一致する。
【０２６５】
化合物５７：［Ｃ１９Ｈ１９Ｎ３Ｏ８］２［０．５（Ｃ４Ｈ８Ｏ２）］の無色透明な結晶を空気中で固定し、周囲条件でのＸ線構造決定のために使用した。全ての測定は、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  ＳｕｐｅｒＮｏｖａエリア検出器回折計上（Ｄｕｐｒａｄｅａｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ  ２００８，  ３６，  Ｄ３６０）で、ミラー光学モノクロ化Ｍｏ  Ｋα線（λ＝０．７１０７３Å）を使用して実施し、Ａｌフィルタにかけた（Ｌｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ２００８，  ３，  １２１３）。データ収集のための単位格子定数および配向マトリクスを１．７°＜θ＜２８．０７°の範囲の反射の設定角の最小二乗精密化から得た。合計４４０フレームを、ω走査を使用し、１５＋１５秒曝露時間、フレームあたり１°の回転角、６５．１ｍｍの結晶−検出器距離を用いて、Ｔ＝２２３（２）Ｋで収集した。データ整理をＣｒｙｓＡｌｉｓＰｒｏプログラムを使用して実施した（Ｄｕｐｒａｄｅａｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ  ２００８，  ３６，  Ｄ３６０）。強度をローレンツおよび分極効果に対して補正し、マルチスキャン法に基づく、ＣｒｙｓＡｌｉｓＰｒｏにおけるＳＣＡＬＥ３  ＡＢＳＰＡＣＫを使用する吸収補正を適用した。データ収集および精密化パラメータを表６において与える。構造を直接法によりＳＨＥＬＸＴを使用して解明し、これにより、標題化合物の全ての非水素原子の位置が明らかになった。非水素原子を異方的に精密化した。全てのＨ−原子を幾何的に計算した位置に置き、ライディングモデルを用いて精密化し、ここで、各Ｈ−原子にはその親原子の１．２Ｕｅｑに等しい値を有する、固定された等方性原子変位パラメータを割り当てた。構造の精密化をＦ２について、フルマトリクス最小二乗手順（これは、関数Σｗ（Ｆｏ２−Ｆｃ２）２を最小化した）を用いて実施した。重み付けスキームは計数統計に基づき、激しい反射を減少させる因子を含んだ。全ての計算は、ＳＨＥＬＸＬ−２０１４／７プログラムを使用して実施した。化合物は単斜晶系空間群Ｃ２で結晶化し、単斜晶系の角度は非常に９０°に近く、これにより容易にデコンボリューションされ得ない擬似欠面双晶形成が意味される。その上、主分子のｐ−ＮＯ２−ベンゾエート基は、２つのコンホメーションよりも無秩序であり、共結晶化される酢酸溶媒は二回回転軸周りで無秩序とされる。これら全ての理由のために、構造決定および精密化は幾分複雑になり、いくつかの短い分子間接触が計算され、絶対配置は決定することができない（Ｆｌａｃｋパラメータは非現実的である）が、それは反応順序に従い割り当てられる。
【表７】
2020502072.tif 000087
【０２６６】
化合物５１：［Ｃ１６Ｈ１９Ｎ５Ｏ６］．（ＣＨ４Ｏ）の無色透明な結晶を空気中で固定し、周囲条件でのＸ線構造決定のために使用した。全ての測定はＯｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  ＳｕｐｅｒＮｏｖａエリア検出器回折計上（Ｄｕｐｒａｄｅａｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ  ２００８，  ３６，  Ｄ３６０）で、ミラー光学モノクロ化Ｍｏ  Ｋα線（λ＝０．７１０７３Å）を使用して実施し、Ａｌフィルタにかけた。データ収集のための単位格子定数および配向マトリクスを１．５°＜θ＜２７．２°の範囲の反射の設定角の最小二乗精密化から得た。合計９７０フレームを、ω走査を使用し、４５＋４５秒曝露時間、フレームあたり１°の回転角、６５．１ｍｍの結晶−検出器距離を用いて、Ｔ＝１２３（２）Ｋで収集した。データ整理をＣｒｙｓＡｌｉｓＰｒｏプログラムを使用して実施した。強度をローレンツおよび分極効果に対して補正し、マルチスキャン法に基づく、ＣｒｙｓＡｌｉｓＰｒｏにおけるＳＣＡＬＥ３  ＡＢＳＰＡＣＫを使用する吸収補正を適用した。データ収集および精密化パラメータを表７において与える。構造を直接法によりＳＨＥＬＸＳ−９７を使用して解明し、これにより、標題化合物の全ての非水素原子の位置が明らかになった。非水素原子を異方的に精密化した。全てのＨ−原子を幾何的に計算した位置に置き、ライディングモデルを用いて精密化し、ここで、各Ｈ−原子にはその親原子の１．２Ｕｅｑに等しい値を有する、固定された等方性原子変位パラメータを割り当てた。構造の精密化をＦ２について、フルマトリクス最小二乗手順（これは、関数Σｗ（Ｆｏ２−Ｆｃ２）２を最小化した）を用いて実施した。重み付けスキームは計数統計に基づき、激しい反射を減少させる因子を含んだ。全ての計算は、ＳＨＥＬＸＬ−９７プログラムを使用して実施した（Ｌｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ２００８，  ３，  １２１３）。
【表８】
2020502072.tif 000088
【０２６７】
実施例６７
βアノマーモノマーのオリゴマーの設計および合成
ビルディングブロック１２、１４、１９および２５の単一および複数の組み込みを有する一連のオリゴヌクレオチドならびに完全修飾配列を、古典的自動化ホスホラミダイト化学を用いて合成した（合成および分析の詳細については、補足情報を参照されたい）。単一および複数の組み込みを有するオリゴヌクレオチドを、相補的ＤＮＡおよびＲＮＡと複合体形成させた時のＴｍに対する修飾の効果を決定するために、ならびにＷａｔｓｏｎ−Ｃｒｉｃｋ塩基対形成選択性を決定するために、主として調製した。天然ＤＮＡおよびＲＮＡとの対形成挙動を特徴付けるためだけではなく、７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡの自己対形成を調べるために、完全修飾オリゴヌクレオチドを合成した。ここでの一番の関心事は、この新規構造的ＤＮＡ類似体が、別の遺伝子系として対象となることができる独立した塩基対形成系を形成することができるかどうかを決定することであった。
【０２６８】
βアノマーオリゴヌクレオチド合成、脱保護および精製のプロセス
オリゴヌクレオチド合成を、Ｐｈａｒｍａｃｉ−Ｇｅｎｅ−Ａｓｓｅｍｂｌｅｒ−Ｐｌｕｓ  ＤＮＡシンセサイザー上で１．３μｍｏｌスケールで実施した。天然ＤＮＡホスホラミダイト（ｄＴ、ｄＣ４ｂｚ、ｄＧ２ＤＭＦ、ｄＡ６Ｂｚ）および固体支持体（ｄＡ−Ｑ−ＣＰＧ５００、ｄｍｆ−ｄＧ−Ｑ−ＣＰＧ５００、Ｇｌｅｎ  Ｕｎｙｓｕｐｐｏｒｔ５００）をＧｌｅｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈから購入した。天然ＤＮＡホスホラミダイトを０．１ＭのＭｅＣＮ溶液として調製し、４分工程を用いてカップリングさせた。Ｂｃ−ＤＮＡホスホラミダイトを０．１Ｍの１，２−ジクロロエタン溶液として調製し、延長１２分工程を使用してカップリングさせた。５−（エチルチオ）−１Ｈ−テトラゾール（０．２５ＭのＭｅＣＮ溶液）をカップリング剤として使用した。キャッピング、酸化および脱トリチル化を標準条件を用いて実施した。固体支持体からの切断およびオリゴヌクレオチドの脱保護を５５℃での１６時間の濃アンモニアを用いた処理により達成した。遠心分離後、上清を収集し、ビーズをＨ２Ｏ（０．５ｍＬ×２）でさらに洗浄し、得られた溶液を蒸発乾固させた。完全修飾配列をＮａＯＨ（０．４Ｍを含むＨ２Ｏ／ＭｅＯＨ  １：１）で１時間室温でさらに処理して普遍的支持体リンカーからの完全切断を達成し、次いで、スピン−カラム（アミコンウルトラ０．５ｍＬ遠心式フィルタ、ＭＷＣＯ  ３ｋＤａ）を用いて濾過した。粗オリゴヌクレオチドをイオン交換ＨＰＬＣ（Ｄｉｏｎｅｘ−ＤＮＡＰａｃ  ＰＡ２００）により精製した。２５ｍＭ  Ｔｒｉｚｍａを含むＨ２Ｏ、ｐＨ８．０の緩衝液を移動相「Ａ」として使用し、２５ｍＭ  Ｔｒｉｚｍａ、１．２５Ｍ  ＮａＣｌを含むＨ２Ｏ、ｐＨ８．０を移動相「Ｂ」として使用した。次いで、精製オリゴヌクレオチドを、Ｓｅｐ−ｐａｃｋＣ−１８カートリッジを用いて脱塩した。濃度を、Ｎａｎｏｄｒｏｐ分光光度計を用い、対応する天然ＤＮＡオリゴヌクレオチドの消衰係数を使用して、２６０ｎｍでの吸光度を測定することにより決定した。オリゴヌクレオチドの特徴付けをＥＳＩ−質量分析により実施した。
【０２６９】
実施例６８
修飾β−オリゴデオキシヌクレオチドの相補的ＤＮＡおよびＲＮＡとの対形成特性
二本鎖安定性に対する単一および複数の修飾の効果を決定するために、修飾オリゴデオキシヌクレオチドＯＮ１−ＯＮ１１を調製し、表８に示し、ＵＶ−融解曲線分析による相補的ＤＮＡおよびＲＮＡとの二本鎖のＴｍ値を測定した。
【表９】
2020502072.tif 000089
【０２７０】
△Ｔｍ／ｍｏｄデータによれば、熱二本鎖安定性に対する単一または二重修飾の影響は比較的穏やかである。プリン修飾（ＯＮ６、７）は相補的ＤＮＡとの二本鎖を不安定化する傾向があるが、相補的ＲＮＡとでは、Ｔｍのわずかな増加を示す。しかしながら、ピリミジンシリーズ内では、より大きな可変性が存在する。修飾チミジンヌクレオシド（ＯＮ１−３）は典型的には、相補体としてのＲＮＡと共にＴｍの小さな低下を引き起こし、一方、ＤＮＡとは明確な傾向は観察されない。興味深いことに、どちらのシトシン修飾（ＯＮ４、５、８−１０）も、相補的ＤＮＡとの二本鎖を著しく安定化させるが、相補的ＲＮＡとでは、Ｔｍに対する効果がより小さい。安定化効果は５−メチルシトシンヌクレオシドではより顕著となり、隣接する塩基対とのスタッキング相互作用を強化するその可能性が指摘される。
【０２７１】
塩基対形成選択性を決定するために、修飾部位に対向する３つ全ての可能なミスマッチ塩基を有する相補的ＤＮＡとの複合体のＯＮ２のＴｍを測定した（表９）。ミスマッチ二本鎖のＴｍは５．１〜１３℃だけ低く、ＧＴゆらぎ対は、予想通りに、不安定化が最も小さい。これらのデータは完全天然ミスマッチシリーズによく匹敵し、修飾の塩基対形成選択性の有意の変化はないことが示される。
【表１０】
2020502072.tif 000090
実験条件：総ストランド濃度２μＭを含む１０ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．０
【０２７２】
実施例６９
完全修飾β−オリゴヌクレオチドの相補的ＤＮＡおよびＲＮＡとの対形成特性
ピリミジン塩基のみから構成される完全修飾九量体（ＯＮ１２）ならびに４つ全ての塩基を含む３つの十二量体（ＯＮ１３−１５）を調製し、逆平行または平行配向のいずれかの相補的ＤＮＡまたはＲＮＡへのそれらの親和性を試験した。対応するＴｍデータ（表１０）から、結合は一般に弱いことが明らかになる。高塩（１Ｍ  ＮａＣｌ）条件下であっても、逆平行ＤＮＡまたはＲＮＡ相補体とのＯＮ１２では、５−８０℃の温度範囲において融解転移は観察できず、二本鎖が形成されなかったが示唆された。しかしながら、より長い十二量体ＯＮ１３−１５を用いると、転移が相補的逆平行ＤＮＡおよびＲＮＡと共に観察された。これらの二本鎖のＴｍは、天然対照二本鎖と比べて大体３０℃低く、−２．５℃の平均△Ｔｍ／ｍｏｄに達した。これは単一組み込みのＴｍ実験からは予測されず（表８）、新規対形成系を特徴付ける場合には完全修飾オリゴヌクレオチドが重要であることが強調される。重要なことには、対応する平行ＤＮＡおよびＲＮＡ相補体との二本鎖形成の徴候は見出されなかった。これにより、７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡは依然として、実質的により低い親和性レベルであるにもかかわらず、逆平行二本鎖構造を介して天然核酸と連絡することができることが明確に証明される。
【表１１】
2020502072.tif 000091
実験条件：総ストランド濃度：２μＭを含む１０ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、１Ｍ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．０。ａｎ．ｍ．：未測定。ｂｎ．ｄ．：２８℃のＴｍを有する対応するＲＮＡストランドの自己構造の形成のために不検出。
【０２７３】
実施例７０
７’，５’−β−ｂｃ−ＤＮＡの自己対形成
ＯＮ１４をＯＮ１３に対して逆平行相補体となるように、ＯＮ１５を平行相補体となるように設計した。これと共に、両方の配向の７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡの自己対形成を研究することが可能となった。逆平行二本鎖ＯＮ１３・ＯＮ１４は古典的Ｓ字形融解挙動を示し（図１１）、Ｔｍは５４．５℃であったことが判明した。これは、同じ配列の天然二本鎖と比べて５．４℃だけ高い。興味深いことに、７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡ二本鎖の２６０ｎｍでの濃色性は天然二本鎖の２０％にすぎない。これにより、両方の二本鎖コンホメーションにおける塩基の著しく異なるスタッキング配列が示される。平行配向では（ＯＮ１３・ＯＮ１５）、転移は見出すことができず、７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡにおいて平行二本鎖形成ができないことが証明される。
【０２７４】
実施例７１
βアノマーオリゴマーの二本鎖形成の熱力学データ
公知の方法に類似する実験融解曲線へのカーブフィッティングにより、二本鎖ＯＮ１３・ＯＮ１４および対応する天然二本鎖について転移エンタルピーおよびエントロピーを決定した（表１１）（Ｐｅｔｅｒｓｈｅｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９８３，  ２２，  ２５６）。これらのデータにより、天然二本鎖はエンタルピー的に安定化され、一方、７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡ二本鎖はエントロピー的に好ましいことが示唆される。これは、ｂｃ−ＤＮＡシリーズにおける前の所見と一致し、エントロピー安定化の起源としての７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡバックボーンのコンホメーション制限を暗示する。二本鎖形成の自由エンタルピー（△Ｇ）はＴｍデータと一致し、これにより、熱力学二本鎖安定性のための尺度としての資格が与えられる。
【表１２】
2020502072.tif 000092
【０２７５】
実施例７２
βアノマーオリゴマーのβアノマーのＣＤ−分光法
ホモ７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡ二本鎖およびハイブリッド７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡ／ＤＮＡ二本鎖の構造特性についての洞察を得るために、ＣＤ−スペクトルを測定し、対応する天然ＤＮＡ二本鎖と比較した（図１２）。予想通りに、天然二本鎖は、Ｂ−ＤＮＡ二本鎖の古典的特徴を示す。しかしながら、ホモ７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡ二本鎖はＡ−またはＢ型二重らせんとは著しく異なるＣＤ特性を有する。それは、最大２４３ｎｍの、２１５および２６５ｎｍ付近の２つの最小楕円率により特徴付けられる。ハイブリッド二本鎖はＤＮＡ二本鎖により近い特性を有する。Ｂ−ＤＮＡと比べて、２６０ｎｍでの最小楕円率は約１５ｎｍだけレッドシフトし、２８８ｎｍでの最大楕円率は約７ｎｍだけレッドシフトし、振幅の損失と関連する。このように、３つのＣＤスペクトルの差は、各ストランドのバックボーン幾何学の変化により誘導される塩基−スタック内の塩基の異なる配列を示す。これは、対応するＵＶ−融解曲線における２つの対形成系の異なる濃色性と一致する（図１１）。
【０２７６】
実施例７３
７’，５’−β−ｂｃ−ＤＮＡモノマーのＸ線結晶構造
Ｏ７’にｐ−ニトロベンゾエート基を有する、７’，５’−ｂｃ−Ｔ類似体を調製した。この化合物は結晶化させることができ、その構造を解析することができた（図１０）。７’，５’−ｂｃ−ＤＮＡシリーズの相対立体配置についての決定的証拠を確立する他に、本発明者らはまた、二環糖足場の好ましいコンホメーションについての情報を得た。フラノース部分は完全１’−エキソコンホメーションで存在し、一方、炭素環は６’−エンド立体配置で生じ、よって、オキシ−置換基はＣ７’にて疑似アキシアルで５’ＯＨ基は疑似エクアトリアル位置で配置されることが明らかになる。この構造はアブイニシオ計算により決定される２つの低エネルギー配座異性体のちょうど１つにマッチする。
【０２７７】
化合物３３：［Ｃ１９Ｈ１９Ｎ３Ｏ８］の無色透明な結晶を空気中で固定し、周囲条件でのＸ線構造決定のために使用した。全ての測定は、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  ＳｕｐｅｒＮｏｖａエリア検出器回折計（Ｏｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ（２０１０））上で、ミラー光学モノクロ化Ｍｏ  Ｋα線（λ＝０．７１０７３Å）を使用して実施し、Ａｌフィルタにかけた（Ｍａｃｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｐｐｌ．  Ｃｒｙｓｔ  ２０１１，  ４４，  ７６３）。データ収集のための単位格子定数および配向マトリクスを、２°＜θ＜２７°の範囲の反射の設定角の最小二乗精密化から得た。合計５３０フレームを、ω走査を使用し、２．５＋２．５秒曝露時間、フレームあたり１°の回転角、６５．１ｍｍの結晶−検出器距離を用いて、Ｔ＝１７３（２）Ｋで収集した。データ整理をＣｒｙｓＡｌｉｓＰｒｏ（バージョン１．１７１．３４．４４）Ｏｘｆｏｒｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｌｔｄ．，  Ｙ．，  Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ，  ＵＫ）プログラムを使用して実施した。強度をローレンツおよび分極効果に対して補正し、マルチスキャン法に基づく、ＣｒｙｓＡｌｉｓＰｒｏにおけるＳＣＡＬＥ３  ＡＢＳＰＡＣＫを使用する吸収補正を適用した。データ収集および精密化パラメータを表１２において与える。構造を直接法によりＳＨＥＬＸＳ−９７（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，  Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ．  ２００８，  Ａ６４，  １１２−１２２）を使用して解明し、これにより、標題化合物の全ての非水素原子の位置が明らかになった。非水素原子を異方的に精密化した。全てのＨ−原子を幾何的に計算した位置に置き、ライディングモデルを用いて精密化し、ここで、各Ｈ−原子にはその親原子の１．２Ｕｅｑに等しい値を有する、固定された等方性原子変位パラメータを割り当てた。構造の精密化をＦ２について、フルマトリクス最小二乗手順（これは、関数Σｗ（Ｆｏ２−Ｆｃ２）２を最小化した）を用いて実施した。重み付けスキームは計数統計に基づき、激しい反射を減少させる因子を含んだ。全ての計算は、ＳＨＥＬＸＬ−９７プログラムを使用して実施した（Ｍａｃｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｐｐｌ．  Ｃｒｙｓｔ  ２０１１，  ４４，  ７６３）。
【表１３】
2020502072.tif 000093
【図１】
2020502072.tif 000106
【図２】
2020502072.tif 000107
【図３】
2020502072.tif 000108
【図４】
2020502072.tif 000109
【図５】
2020502072.tif 000110
【図６】
2020502072.tif 000111
【図７】
2020502072.tif 000112
【図８】
2020502072.tif 000113
【図９】
2020502072.tif 000114
【図１０】
2020502072.tif 000115
【図１１】
2020502072.tif 000116
【図１２】
2020502072.tif 000117
【配列表】
2020502072000001.app
【国際調査報告】
2020502072.tif 000118
2020502072.tif 000119
2020502072.tif 000120