(57)【要約】  本発明は、様々な種類の癌の治療のための、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）の単独又は免疫チェックポイント阻害剤（例えば、抗体などの抗ＣＴＬＡ−４、抗ＰＤ−１及び抗ＰＤ−Ｌ１化合物）との組み合わせのいずれかでの使用に関する。加えて、本発明は、腫瘍溶解性ウイルスの単独又は免疫チェックポイント阻害剤との組み合わせのいずれかでのこのような使用に関連する組成物及びキットに関する。
2020510050.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療有効量の腫瘍溶解性ウイルスを投与することにより、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫を治療する方法。
【請求項２】
前記腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
（ｉ）治療有効量の腫瘍溶解性ウイルスと、
（ｉｉ）治療有効量のチェックポイント阻害剤と
を投与することにより、Ｂ細胞性リンパ腫、結腸直腸がん、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法。
【請求項５】
前記チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ１ブロッカーである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスである、請求項４又は５に記載の方法。
【請求項７】
前記単純ヘルペスウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫の治療において使用するための治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項９】
ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫を治療する方法で使用するための医薬組成物であって、腫瘍溶解性ウイルスを含む医薬組成物。
【請求項１０】
単純ヘルペスウイルスである、請求項８又は９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項１１】
前記単純ヘルペスウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである、請求項１０に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項１２】
Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸がん、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）の治療で使用するための治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス及びチェックポイント阻害剤。
【請求項１３】
Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸がん、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法において使用するための医薬組成物であって、治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス及びチェックポイント阻害剤を含む医薬組成物。
【請求項１４】
ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１ブロッカーである、請求項１２又は１３に記載のチェックポイント阻害剤。
【請求項１５】
単純ヘルペスウイルスである、請求項１３又は１４に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項１６】
前記単純ヘルペスウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである、請求項１５に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、参照により本明細書に組み込まれる、２０１７年３月１５日に出願された米国仮特許出願第６２／４７１，８７５号明細書の利益を米国特許法第１１９条（ｅ）の下で主張するものである。
【背景技術】
【０００２】
過去数十年にわたるがん治療の進歩に鑑みて、肺がん、結腸がん、乳がん及び前立腺がんなどの最も一般的な種類のがんについてのがんによる死亡率は、男女共に低下し続けている。この生存率の改善は、特定のがんの初期段階での診断の進歩、治療法の改善及び予防処置並びにスクリーニングを奨励する公衆衛生の取り組みの結果に起因する可能性が高い。
【０００３】
それでもなお、がんは、毎年１，６００万人を超える人々が診断される、公衆衛生上の重大な問題のままである。加えて、がんの診断は、患者並びにその家族及び友人に深刻な影響を与える。実際、米国において、がんは、二番目に多い死亡原因のままであり（心臓疾患のみが上回る）、４件の死亡原因のうちのほぼ１件を占める。２０１７年３月８日アクセスのｐｒｏｇｒｅｓｓｒｅｐｏｒｔ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ／ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎを参照されたい。
【０００４】
がん療法の望ましい目標は、正常細胞に有害な影響を及ぼすことなくがん細胞を優先的に死滅させることである。この目標を達成しようとして手術、放射線療法、化学療法及び腫瘍溶解性ウイルスによる療法を含むいくつかの方法が用いられてきた。
【０００５】
放射線療法及び手術などの局所治療は、外科的技術又は高線量の放射線療法を通してアクセス可能である身体の領域内で腫瘍量を低減する方法を提供する。しかしながら、がん治療の主なアプローチは、化学療法である。しかし、化学療法剤は、多くの一般的な固形腫瘍を含む多くのがんの種類を治療するためのそれらの有効性が限られている。この不成功は、多くの腫瘍細胞における薬剤耐性（獲得性であろうと内在性であろうと）に部分的に起因する。化学療法剤の使用の重大な障害は、それらの重篤な副作用である。これらには、骨髄抑制、吐き気、嘔吐、抜け毛及び口内の潰瘍が挙げられる。
【０００６】
提案されている代替療法としては、腫瘍溶解性ウイルスの投与及び抗がん活性を有する導入遺伝子を送達させるためのウイルスベクターの使用が挙げられる。腫瘍溶解性薬剤として使用するためのウイルスの遺伝子工学は、初期には、非腫瘍細胞に対するウイルス誘導損傷を防止しようとして複製不全ウイルスの使用に焦点を当てていた。このアプローチの主な制限は、これらの複製不全ウイルスが、宿主細胞中での組み込み及び／又は複製を可能にするためにヘルパーウイルスを必要とすることであった。これらのウイルスは、各複製欠損レトロウイルス粒子が単一細胞のみに進入することができ、それ以降、他の細胞中で増殖性感染することができないため、それらの有効性が限られている。したがって、これらは、プロデューサー細胞から離れて拡散することができず、インビボで多くの腫瘍細胞に完全に侵入することができない。ごく最近では、腫瘍溶解性ウイルスの遺伝子工学は、ウイルスが他の腫瘍細胞に拡散することを可能にしながら、全身感染を回避しようとして「複製制限型」ウイルスの生成に焦点を当てている。
【０００７】
現在、米国及びヨーロッパにおいて唯一承認された腫瘍溶解性ウイルスベースの薬剤は、タリモジーン・ラハーパレプベック（ｔａｌｉｍｏｇｅｎｅ  ｌａｈｅｒｐａｒｅｐｖｅｃ）（ＩＭＬＹＧＩＣ（登録商標））である。タリモジーン・ラハーパレプベックは、臨床株ＪＳ１（欧州認証細胞培養機関（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅｓ）（ＥＣＡＡＣ）に登録番号０１０１０２０９で寄託）に由来するＨＳＶ−１である。タリモジーン・ラハーパレプベックにおいて、ＩＣＰ３４．５及びＩＣＰ４７をコードするＨＳＶ−１ウイルス遺伝子は、機能的に欠失されている。ＩＣＰ４７の機能欠失は、腫瘍選択性を減少させることなく腫瘍細胞内のウイルス成長を促進する遺伝子であるＵＳ１１の早期発現をもたらす。加えて、ヒトＧＭ−ＣＳＦに対するコード配列がウイルスゲノム中に以前のＩＣＰ３４．５遺伝子部位において挿入されている。Ｌｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．，１０：２９２−３０３，２００３を参照されたい。
【０００８】
腫瘍溶解性ウイルスとチェックポイント阻害剤との治療的組み合わせが探究されている。例えば、タリモジーン・ラハーパレプベックと免疫療法（例えば、イピリムマブ及びペンブロリズマブ）との組み合わせは、現在、メラノーマ（ＮＣＴ０１７４０２９７及びＮＣＴ０２２６３５０８）並びに頭頸部扁平上皮癌（ＮＣＴ０２６２６０００）の臨床試験で探究中である。イピリムマブ（ＣＴＬＡ−４抗体）、ペンブロリズマブ並びにニボルマブ（抗ＰＤ−１抗体）及びアテゾリズマブ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）などのチェックポイント阻害剤は、様々な腫瘍型において効能を証明している。Ｇｒｏｓｓｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎ．，１３：５（２０１３）；Ｐａｒｄｏｌｌ，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ，１２：２５２−２６４（２０１２）；及びＣｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，３９：１−１０（２０１３）を参照されたい。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｌｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．，１０：２９２−３０３，２００３
【非特許文献２】Ｇｒｏｓｓｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎ．，１３：５（２０１３）；Ｐａｒｄｏｌｌ，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ，１２：２５２−２６４（２０１２）
【非特許文献３】Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，３９：１−１０（２０１３）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
しかしながら、副作用を減少させた（例えば、化学療法と比べて）有効ながん療法を更に開発する必要性が依然として残っている。転移性がんに対して有効であるがん療法を更に開発する必要性も依然として残っている。本発明は、これら及び他の必要性に対処する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
一実施形態では、本発明は、治療有効量の腫瘍溶解性ウイルスを投与することにより、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌（すなわち結腸癌）、メラノーマ、扁平上皮癌（例えば、頭頸部扁平上皮癌）、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫を治療する方法に関する。いくつかの実施形態では、このがんは、転移性がんである。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスである。この単純ヘルペスウイルスは、単純ヘルペスウイルス１型であり得る。いくつかの実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有しないように改変されている。単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有しないようにも改変され得る。更に他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉｉ）それが、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ）をコードする遺伝子を含有するように改変されている。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【００１２】
本発明は、（ｉ）治療有効量の腫瘍溶解性ウイルスと、（ｉｉ）治療有効量のチェックポイント阻害剤とを投与することにより、Ｂ細胞性リンパ腫、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法にも関する。いくつかの実施形態では、このがんは、転移性がんである。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ−４ブロッカー（例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体）である。特定の実施形態では、抗ＣＴＬＡ−４抗体は、イピリムマブである。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＰＤ−Ｌ１ブロッカー（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体）である。特定の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブである。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＰＤ−１ブロッカー（例えば、抗ＰＤ−１抗体）である。特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ又はペンブロリズマブである。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスである。この単純ヘルペスウイルスは、単純ヘルペスウイルス１型であり得る。いくつかの実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有しないように改変されている。単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有しないようにも改変され得る。更に他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉｉ）それが、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ）をコードする遺伝子を含有するように改変されている。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【００１３】
具体的な一実施形態では、本発明は、（ｉ）治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）と、（ｉｉ）治療有効量のＣＴＬＡ−４ブロッカー（例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えばイピリムマブなど）とを投与することにより、Ｂ細胞性リンパ腫、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法にも関する。いくつかの実施形態では、このがんは、転移性がんである。別の実施形態では、本発明は、（ｉ）治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）と、（ｉｉ）治療有効量のＰＤ−Ｌ１ブロッカー（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えばアテゾリズマブなど）とを投与することにより、Ｂ細胞性リンパ腫、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法に関する。他の実施形態では、本発明は、（ｉ）治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）と、（ｉｉ）治療有効量のＰＤ−１ブロッカー（例えば、抗ＰＤ−１抗体、例えばニボルマブ又はペンブロリズマブなど）とを投与することにより、Ｂ細胞性リンパ腫、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法に関する。
【００１４】
本発明は、（ｉ）治療有効量の腫瘍溶解性ウイルスと、（ｉｉ）治療有効量のＧＩＴＲアゴニストとを投与することにより、Ｂ細胞性リンパ腫を治療する方法にも関する。いくつかの実施形態では、このがんは、転移性Ｂ細胞性リンパ腫である。特定の実施形態では、ＧＩＴＲアゴニストは、ＡＭＧ２２８（９Ｈ６ｖ３とも称される）、ＴＲＸ５１８、ＭＥＤＩ１８７３又はＭＫ−４１６６である。ＰＣＴ公開国際公開第２０１５０３１６６７号パンフレット及び米国特許第９，４６４，１３９号明細書を参照されたい（これらの両方は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスである。この単純ヘルペスウイルスは、単純ヘルペスウイルス１型であり得る。いくつかの実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有しないように改変されている。単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有しないようにも改変され得る。更に他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉｉ）それが、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ）をコードする遺伝子を含有するように改変されている。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【００１５】
本発明は、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫の治療で使用するための治療有効量の腫瘍溶解性ウイルスに更に関する。いくつかの実施形態では、このがんは、転移性がんである。更に別の態様では、本発明は、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫を治療する方法で使用するための医薬組成物であって、腫瘍溶解性ウイルスを含む医薬組成物に関する。このような実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスであり得る。この単純ヘルペスウイルスは、単純ヘルペスウイルス１型であり得る。いくつかの実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有しないように改変されている。他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有しないようにも改変されている。更に他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉｉ）それが、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ）をコードする遺伝子を含有するように改変されている。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【００１６】
他の態様では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）の治療で使用するための治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス及びチェックポイント阻害剤に関する。いくつかの実施形態では、このがんは、転移性がんである。別の実施形態では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法で使用するための医薬組成物であって、治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス及びチェックポイント阻害剤を含む医薬組成物に関する。このような実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ−４ブロッカー（例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体）である。特定の実施形態では、抗ＣＴＬＡ−４抗体は、イピリムマブである。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＰＤ−Ｌ１ブロッカー（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体）である。特定の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブである。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＰＤ−１ブロッカー（例えば、抗ＰＤ−１抗体）である。特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ又はペンブロリズマブである。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスである。この単純ヘルペスウイルスは、単純ヘルペスウイルス１型であり得る。いくつかの実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有しないように改変されている。他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有しないようにも改変されている。更に他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉｉ）それが、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ）をコードする遺伝子を含有するように改変されている。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【００１７】
加えて、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）の治療で使用するための治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）及びＣＴＬＡ−４ブロッカー（例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えばイピリムマブなど）に関する。いくつかの実施形態では、このがんは、転移性がんである。別の実施形態では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）の治療で使用するための治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）及びＰＤ−Ｌ１ブロッカー（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えばアテゾリズマブなど）に関する。別の実施形態では、本発明は、治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）及びＰＤ−１ブロッカー（例えば、抗ＰＤ−１抗体、例えばニボルマブ、ペンブロリズマブなど）に関する。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスである。この単純ヘルペスウイルスは、単純ヘルペスウイルス１型であり得る。いくつかの実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有しないように改変されている。他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有しないようにも改変されている。更に他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉｉ）それが、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ）をコードする遺伝子を含有するように改変されている。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【００１８】
別の実施形態では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法で使用するための医薬組成物であって、治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）及びＣＴＬＡ−４ブロッカー（例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えばイピリムマブなど）を含む医薬組成物に関する。いくつかの実施形態では、このがんは、転移性がんである。別の実施形態では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法で使用するための医薬組成物であって、治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）及びＰＤ−Ｌ１ブロッカー（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えばアテゾリズマブなど）を含む医薬組成物に関する。別の実施形態では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法で使用するための医薬組成物であって、治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）及びＰＤ−１ブロッカー（例えば、抗ＰＤ−１抗体、例えばニボルマブ又はペンブロリズマブなど）を含む医薬組成物に関する。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスである。この単純ヘルペスウイルスは、単純ヘルペスウイルス１型であり得る。いくつかの実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有しないように改変されている。他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有しないようにも改変されている。更に他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉｉ）それが、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ）をコードする遺伝子を含有するように改変されている。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】タリモジーン・ラハーパレプベックの腫瘍内投与のＢａｌｂ／ｃヌードマウスにおけるＡ−６７３ユーイング肉腫の腫瘍体積に及ぼす効果を示す。
【図２】タリモジーン・ラハーパレプベックの腫瘍内投与のＢａｌｂ／ｃヌードマウスにおけるＳＫ−Ｎ−ＡＳ神経芽細胞腫の腫瘍体積に及ぼす効果を示す。
【図３】タリモジーン・ラハーパレプベックの腫瘍内投与のＢａｌｂ／ｃヌードマウスにおけるＧ−４０１横紋筋肉腫様腫瘍の腫瘍体積に及ぼす効果を示す。
【図４】タリモジーン・ラハーパレプベックの腫瘍内投与のＢａｌｂ／ｃヌードマウスにおけるＳＪＳＡ−１骨肉腫の腫瘍体積に及ぼす効果を示す。
【図５】タリモジーン・ラハーパレプベックの腫瘍内投与のＢａｌｂ／ｃヌードマウスにおけるＳＪＣＲＨ３０横紋筋肉腫の腫瘍体積に及ぼす効果を示す。
【図６】ＷＳＵ−ＮＨＬ（ＧＣＢサブタイプ）及びＴＭＤ８（ＡＢＣサブタイプ）ＤＬＢＣＬ細胞株におけるタリモジーン・ラハーパレプベックの濃度増大によって達成された細胞増殖阻害の程度を示す。
【図７】ＨＣＴ−１１６（結腸直腸）及びＳＫ−ＭＥＬ−５（メラノーマ）細胞株におけるタリモジーン・ラハーパレプベックの濃度増大によって達成された細胞増殖阻害の程度を示す。
【図８】ＨＵＴ−７８（ＣＴＣＬ）及びＲＰＭＩ  ８２２６（多発性骨髄腫）細胞株におけるタリモジーン・ラハーパレプベックの濃度増大によって達成された細胞増殖阻害の程度を示す。
【図９】ＣＴ−２６及びＭＣ−３８（結腸直腸）細胞株におけるタリモジーン・ラハーパレプベックの濃度増大によって達成された細胞増殖阻害の程度を示す。
【図１０ａ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦの３種の用量：３×１０４ＰＦＵ、３×１０５ＰＦＵ及び３×１０６ＰＦＵで処置されたＡ２０腫瘍担持動物における注入された腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１０ｂ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦの３種の用量：３×１０４ＰＦＵ、３×１０５ＰＦＵ及び３×１０６ＰＦＵで処置されたＡ２０腫瘍担持動物における注入されなかった（対側性）腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１０ｃ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦの３種の用量：３×１０４ＰＦＵ、３×１０５ＰＦＵ及び３×１０６ＰＦＵで処置されたＡ２０腫瘍担持動物の生存期間中央値に及ぼす効果を示す。
【図１０ｄ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ及びＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせの投与のマウスの体重に及ぼす効果を示す。
【図１０ｅ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ及びＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせの投与のマウスの体重に及ぼす効果を示す。
【図１０ｆ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦの３種の用量：５×１０４ＰＦＵ、５×１０５ＰＦＵ及び５×１０６ＰＦＵで処置されたｎｅｕｒｏ２ａ神経芽細胞腫腫瘍担持マウスにおける注入された腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１０ｇ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦの３種の用量：５×１０４ＰＦＵ、５×１０５ＰＦＵ及び５×１０６ＰＦＵで処置されたｎｅｕｒｏ２ａ神経芽細胞腫腫瘍担持マウスの生存期間中央値に及ぼす効果を示す。
【図１０ｈ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦの５×１０６ＰＦＵで処置されたｎｅｕｒｏ２ａ神経芽細胞腫腫瘍担持マウスにおける注入（処置）腫瘍及び注入されなかった（対側性／未処置）腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１０ｉ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦの５×１０６ＰＦＵで処置されたｎｅｕｒｏ２ａ神経芽細胞腫腫瘍担持マウスの生存期間中央値に及ぼす効果を示す。
【図１１ａ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせによるＡ２０腫瘍担持動物の処置の、直接注入された腫瘍及び注入されなかった（対側性）腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１１ｂ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせによるＡ２０腫瘍担持動物の処置のマウスの生存期間中間値に及ぼす効果を示す。
【図１１ｃ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂとの組み合わせによるＡ２０腫瘍担持動物の処置の、直接注入された腫瘍及び注入されなかった（対側性）腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１１ｄ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂとの組み合わせによるＡ２０腫瘍担持動物の処置のマウスの生存期間中間値に及ぼす効果を示す。
【図１２ａ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせによるＣＴ−２６腫瘍担持動物の処置の、直接注入された腫瘍及び注入されなかった（対側性）腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１２ｂ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせによるＣＴ−２６腫瘍担持動物の処置のマウスの生存期間中間値に及ぼす効果を示す。
【図１２ｃ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂとの組み合わせによるＣＴ−２６腫瘍担持動物の処置の、直接注入された腫瘍及び注入されなかった（対側性）腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１２ｄ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂとの組み合わせによるＣＴ−２６腫瘍担持動物の処置のマウスの生存期間中間値に及ぼす効果を示す。
【図１２ｅ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、ＣＴＬＡ−４阻害薬又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦとＣＴＬＡ−４阻害薬との組み合わせで処置されたＣＴ−２６腫瘍担持マウスのＥＬＩＳｐｏｔによる、又はＦＡＣＳを使用するデキストラマー染色による全身的（脾臓の）抗ＡＨ１  ＣＤ８＋Ｔ細胞の定量化を示す。
【図１２ｆ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、ＣＴＬＡ−４阻害薬又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦとＣＴＬＡ−４阻害薬との組み合わせで処置されたＣＴ−２６腫瘍担持マウスのＥＬＩＳｐｏｔによる、又はＦＡＣＳを使用するデキストラマー染色による全身的（脾臓の）抗ＡＨ１  ＣＤ８＋Ｔ細胞の定量化を示す。
【図１２ｇ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、ＣＴＬＡ−４阻害薬又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦとＣＴＬＡ−４阻害薬との組み合わせで処置されたＣＴ−２６腫瘍担持マウスの局所的（腫瘍）抗ＡＨ１  ＣＤ８＋Ｔ細胞の定量化を示す。
【図１３ａ】対照、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、ＣＴＬＡ−４阻害薬又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦとＣＴＬＡ−４阻害薬との組み合わせで処置されたＢ１６Ｆ１０ネクチン１腫瘍担持マウスの処置の、注入された腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１３ｂ】対照、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、ＣＴＬＡ−４阻害薬又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦとＣＴＬＡ−４阻害薬との組み合わせでの処置後の、腫瘍担持マウスへの肺転移負荷の評価（肺転移の数によって証明される）を示す。
【図１３ｃ】対照又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦとＣＴＬＡ−４阻害薬との組み合わせによる処置の腫瘍担持マウスの生存期間中央値に及ぼす効果を示す。
【図１３ｄ】対照、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、ＣＴＬＡ−４阻害薬又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦとＣＴＬＡ−４阻害薬との組み合わせによる処置後、Ｂ細胞が専ら腫瘍周辺部に残りながら、マクロファージが、腫瘍内及び腫瘍周辺部での密な細胞浸潤内の両方で際立っていたことを示す。
【図１４】対照又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦによる４Ｔ１腫瘍担持マウスの処置の、注入された腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１５ａ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂとの組み合わせによるＡ２０腫瘍担持動物の処置の、直接注入された腫瘍及び注入されなかった（対側性）腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１５ｂ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂとの組み合わせによるＡ２０腫瘍担持動物の処置の、マウスの生存期間中央値に及ぼす効果を示す。
【図１６ａ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−１  ｍＡｂ及びＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−１  ｍＡｂとの組み合わせの投与の、マウスの体重に及ぼす効果を示す。
【図１６ｂ】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−１  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−１  ｍＡｂとの組み合わせによるＭＣ−３８腫瘍担持動物の処置の、直接注入された腫瘍及び注入されなかった（対側性）腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１７】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂとの組み合わせによるＭＣ−３８腫瘍担持動物の処置の、直接注入された腫瘍及び注入されなかった（対側性）腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【図１８】ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−１  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−１  ｍＡｂとの組み合わせによるＢ１６Ｆ１０腫瘍担持動物の処置の、直接注入された腫瘍の体積に及ぼす効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本明細書で使用されるセクションの見出しは、構成上の目的に過ぎず、記載される主題を限定するものと解釈されるべきではない。本明細書の本文で引用される全ての参考文献は、それらの全体が参照により明示的に組み込まれる。
【００２１】
標準的技法を組換えＤＮＡ、オリゴヌクレオチド合成、組織培養及び形質転換、タンパク質精製などに使用することができる。酵素反応及び精製技術は、製造業者の仕様書に従って又は当該技術分野において一般的に達成されるように若しくは本明細書に記載されるように実施され得る。以下の手法及び技法は、当該技術分野において周知の従来の方法に従って、且つ明細書全体を通して引用され論議される様々な一般的且つより具体的な参考文献に記載されるように概ね実施することができる。例えば、いかなる目的に対しても、参照により本明細書に組み込まれるＳａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕｅｌ，３ｒｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．を参照されたい。特定の定義が提供されない限り、本明細書に記載の分析化学、有機化学及び医薬品並びに製薬化学に関連して使用される命名法及びこれらの実験室手法並びに技法は、当該技術分野において周知であり、一般的に使用されるものである。標準的技法は、化学合成、化学分析、医薬調製物、製剤及び患者の送達並びに処置に使用することができる。
【００２２】
腫瘍溶解性ウイルス
本明細書で論議されるように、本発明は、腫瘍溶解性ウイルスが単独で又はチェックポイント阻害剤と組み合わせて様々な腫瘍型において抗腫瘍効果をもたらし得ることを証明している。本発明の腫瘍溶解性ウイルスの顕著な有益性は、例えば、化学療法と比べて抗腫瘍効果がそれほど重篤／マイナスではない副作用を伴うことである。例えば、一実施形態では、本発明は、がんの治療における腫瘍溶解性ウイルスの使用に関する。別の実施形態では、本発明は、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫を治療するための腫瘍溶解性ウイルスの使用に関する。別の実施形態では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌を治療するための、腫瘍溶解性ウイルスとチェックポイント阻害剤との組み合わせの使用に関する。
【００２３】
いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスである。この単純ヘルペスウイルスは、単純ヘルペスウイルス１型であり得る。いくつかの実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有しないように改変されている。他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有しないように改変されている。更に他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、（ｉ）それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、（ｉｉ）それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有せず、且つ（ｉｉｉ）それが、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ）をコードする遺伝子を含有するように改変されている。特定の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【００２４】
タリモジーン・ラハーパレプベック、ＨＳＶ−１［ＪＳ１株］ＩＣＰ３４．５−／ＩＣＰ４７−／ｈＧＭ−ＣＳＦ（以前にはＯｎｃｏＶｅｘＧＭ−ＣＳＦとして知られていた）は、固形腫瘍内で選択的に複製する免疫増強型ＨＳＶ−１を含む、腫瘍内送達される腫瘍溶解性免疫療法である（Ｌｕｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，１０：２９２−３０３，２００３；米国特許第７，２２３，５９３号明細書及び米国特許第７，５３７，９２４号明細書）。ＨＳＶ−１は、欧州認証細胞培養機関（ＥＣＡＡＣ）に登録番号０１０１０２０９で寄託されたＪＳ１株に由来した。タリモジーン・ラハーパレプベックにおいて、ＩＣＰ３４．５をコードするＨＳＶ−１ウイルス遺伝子は、機能的に欠失されている。ＨＳＶ感染中に病原性因子として作用するＩＣＰ３４．５の機能欠失は、非分裂細胞における複製を制限し、ウイルスを非病原性にする。ＩＣＰ３４．５が機能的に欠失されたＨＳＶの安全性は、複数の臨床試験で示されている（ＭａｃＫｉｅ  ｅｔ  ａｌ，Ｌａｎｃｅｔ  ３５７：５２５−５２６，２００１；Ｍａｒｋｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  ７：８６７−８７４，２０００；Ｒａｍｐｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  ７：８５９−８６６，２０００；Ｓｕｎｄａｒｅｓａｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ  ７４：３８２２−３８４１，２０００；Ｈｕｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  Ａｕｇ；７３（８）：６３１９−６３２６，１９９９）。加えて、ＩＣＰ４７（主要組織適合遺伝子複合体クラスＩ及びＩＩ分子に対するウイルス抗原提示をブロックする）は、タリモジーン・ラハーパレプベックから機能的に欠失されている。ＩＣＰ４７の機能欠失はまた、腫瘍選択性を減少させることなく、腫瘍細胞中のウイルス増殖を促進する遺伝子であるＵＳ１１の早期発現をもたらす。本明細書で使用される場合、「機能ウイルス遺伝子欠く」とは、機能ウイルスタンパク質が、単純ヘルペスウイルスによってその遺伝子からもはや発現され得ないように、遺伝子が単純ヘルペスウイルスゲノム中で部分的又は完全に欠失されるか、置き換えられるか、再配置されるか、又は他に変更されていることを意味する。免疫応答の刺激に関与するサイトカインであるヒトＧＭ−ＣＳＦに対するコード配列は、タリモジーン・ラハーパレプベックのウイルスゲノム中に挿入されている（ＩＣＰ３４．５遺伝子の２つの以前の部位において）。ヒトＧＭ−ＣＳＦをコードする遺伝子の挿入は、これがＩＣＰ３４．５遺伝子のほぼ全てに取って代わるように行われ、タリモジーン・ラハーパレプベックと野生型ウイルスとの間のいかなる潜在的な組換え事象も、無能にされた非病原性ウイルスのみをもたらすことができ、またヒトＧＭ−ＣＳＦに対する遺伝子を運ぶ野生型ウイルスの生成をもたらすことができないことを確実なものにする。ＨＳＶチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子は、タリモジーン・ラハーパレプベック中にインタクトなまま残り、これは、ウイルスをアシクロビルなどの抗ウイルス剤に対して感受性にする。したがって、アシクロビルは、必要に応じて、タリモジーン・ラハーパレプベック複製をブロックするために使用することができる。
【００２５】
改変され得る追加のＨＳＶ遺伝子の例としては、非分裂細胞におけるヌクレオチド代謝及びウイルスＤＮＡ合成に関与するが、分裂細胞に関与しないリボヌクレオチドレダクターゼの大サブユニットであるＩＣＰ６が挙げられる。アシクロビル一リン酸塩へのアシクロビルのリン酸化を担当するチミジンキナーゼ、ビリオントランス活性化因子タンパク質ｖｍｗ６５、糖タンパク質Ｈ、ｖｈｓ、ＩＣＰ４３及びＩＣＰ４、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ２２並びに／又はＩＣＰ０をコードする最初期遺伝子も改変され得る。
【００２６】
改変は、単純ヘルペスウイルス遺伝子の発現のタイミングを変更するためにも行われ得る。例えば、ＵＳ１１は、Ｕｓ１２プロモーター下にＵＳ１１遺伝子を配置することにより、初期遺伝子として発現され得る（Ｍｕｌｖｅｙ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｊ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，７３：４，３３７５−３３８５、米国特許第５８２４３１８号明細書、Ｍｏｈｒ＆Ｇｌｕｚｍａｎ（１９９６）ＥＭＢＯ  １５：４７５９−４７６６）。
【００２７】
当業者であれば理解されるように、ヒトＧＭ−ＣＳＦをコードするものなどの異種遺伝子をＨＳＶウイルスゲノム中に挿入することができ、ＩＣＰ３４．５及びＩＣＰ４７などのウイルス遺伝子を、プラスミドＤＮＡとの相同組換えを用いて機能的に欠失させることができる。
【００２８】
タリモジーン・ラハーパレプベックは、腫瘍中のウイルスの複製による直接腫瘍溶解性効果及びＧＭ−ＣＳＦの局所発現並びに溶解を介した腫瘍由来抗原の放出によって増強される抗腫瘍免疫応答の誘導を作り出す。多くのがんは、患者において原発性及び続発性（すなわち転移性）腫瘍として存在するため、この二重活性は、治療的処置として有益である。意図される臨床効果としては、注入された腫瘍の破壊、局在する局所領域の遠隔の注入されなかった腫瘍の破壊、新たな転移の形成の低減、最初に存在する疾患の処置後の全体の進行の速度並びに再発速度の低減及び全生存期間の延長が挙げられる。
【００２９】
本明細書で使用される場合、「患者」又は「対象」という用語は、互換的に使用され、ヒト、非ヒト哺乳動物、例えばウシ、ウマ、イヌ、ヒツジ又はネコを含むが、これらに限定されない、哺乳動物を意味する。好ましくは、患者は、ヒトである。
【００３０】
タリモジーン・ラハーパレプベック及びＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ（ヒトＧＭ−ＣＳＦがネズミＧＭ−ＣＳＦで置き換えられている以外、タリモジーン・ラハーパレプベックと同じ遺伝子改変を有するＨＳＶ−１ウイルス）は、様々なインビトロ（細胞株）及びインビボネズミ腫瘍モデルにおける効力について試験されており、臨床試験で使用されたものに匹敵する用量で腫瘍を根絶するか、又はそれらの増殖を実質的に阻害することが示されている。非臨床的な評価も、ＧＭ−ＣＳＦが生じた免疫応答を増強させ、注入された腫瘍の反応及び注入されなかった腫瘍の反応の両方を増強させること、及びＭＨＣクラスＩ分子の増加した表面レベルがＩＣＰ４７の欠失から生じることを確認している。タリモジーン・ラハーパレプベックは、正常なマウス及び腫瘍担持マウスに注入され、その安全性を評価している。概して、このウイルスは、良好な耐容性を示し、最大で１×１０８ＰＦＵ／投与量の用量は、安全性に関する懸念の兆候を示さなかった。（例えば、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  １０：２９２−３０３，２００３を参照されたい）。
【００３１】
臨床試験がいくつかの進行性腫瘍型において行われるか又は現在行われており、４００人を超える対象がタリモジーン・ラハーパレプベックで治療されている（例えば、Ｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎ  Ｒｅｓ  １２：６７３７−６７４７，２００６；Ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２７（１５ａ）：ａｂｓｔｒａｃｔ  ６０１８，２００９；Ｋａｕｆｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｓｕｒｇｉｃ  Ｏｎｃｏｌ．１７：７１８−７３０，２０１０；Ｋａｕｆｍａｎ  ａｎｄ  Ｂｉｎｅｓ，Ｆｕｔｕｒｅ  Ｏｎｃｏｌ．６（６）：９４１−９４９，２０１０を参照されたい）。臨床データは、タリモジーン・ラハーパレプベックが、進行性メラノーマを有する患者に対して全体的な臨床的有用性を提供する可能性があることを示す。特に、ＩＩＩｃ期〜ＩＶ期のメラノーマにおいて高率の完全奏効が達成された（Ｓｃｅｎｚｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２７１（１２）：９０７−９１３，２００９）。加えて、奏効は、内蔵部位を含む注入された部位及び注入されなかった部位の両方で観察された。
【００３２】
本発明のウイルスは、単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ−２）株又はその派生株にも由来し得る。派生株としては、ＨＳＶ−１及びＨＳＶ−２株からのＤＮＡを含有するインタータイプ組換え体が挙げられる。このようなインタータイプ組換え体は、例えば、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９８）Ｖｉｒｕｓ  Ｇｅｎｅｓ  １（３）；２７５  ２８６及びＭｅｉｇｎｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９８）Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１５９；６０２  ６１４で当該技術分野において説明されている。
【００３３】
単純ヘルペスウイルス株は、臨床分離株に由来し得る。このような株は、再発性単純疱疹を有するものなどの感染個体から単離される。米国特許第７，０６３，８３５号明細書及び同第７，２２３，５９３号明細書（これらのそれぞれは、その全体が参照により組み込まれる）に記載されるように、臨床分離株は、標準的な実験室株と比べて、インビトロ及び／又はインビボでの腫瘍及び／又は他の細胞中での増強された複製などの所望の能力又は特性についてスクリーニングされ得る。一実施形態では、単純ヘルペスウイルスは、再発性単純疱疹からの臨床分離株である。
【００３４】
単純ヘルペスウイルス１型ウイルス株としては、ＪＳ１株、１７＋株、Ｆ株及びＫＯＳ株、Ｐａｔｔｏｎ株が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３５】
改変された単純ヘルペスウイルスの更なる例としては、限定されないが、単純ヘルペスウイルス１型のＳｅｐｒｅｈｖｉｒ（商標）（ＨＳＶ１７１６）１７＋株が挙げられ、これは、ＨＳＶゲノムの長い反復領域のＢａｍＨＩのフラグメント（０〜０−０２及び０−８１〜０．８３マップ単位）の各コピー内に位置する７５９ｂｐの欠失を有し、１８ｂｐのＤＲから「ａ」配列のエレメントまでの１つの完全なコピーを除去し、最初期（ＩＥ）遺伝子１の５’末端の１１０５ｂｐ上流で終端する（ＭａｃＬｅａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ７９：６３１−６３９を参照されたい）。
【００３６】
Ｇ２０７は、ＨＳＶ神経毒性の主要な決定因子のＩＣＰ３４．５遺伝子の両方のコピーの欠失及び感染細胞タンパク質６（ＩＣＰ６）をコードするＵＬ３９中の大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ｌａｃＺ遺伝子の不活化挿入を有する、野生型ＨＳＶ−１のＦ株に由来する腫瘍溶解性ＨＳＶ−１である（Ｍｉｎｅｔａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｎａｔ  Ｍｅｄ．１：９３８−９４３を参照されたい）。
【００３７】
ＯｒｉｅｎＸ０１０は、ガンマ３４．５及びＩＣＰ４７遺伝子の両方のコピーの欠失並びにＩＣＰ６遺伝子の割込み及びヒトＧＭ−ＣＳＦ遺伝子の挿入を有する単純ヘルペスウイルスである（Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１３）Ｗｏｒｌｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １９（３１）：５１３８−５１４３を参照されたい）。
【００３８】
ＮＶ１０２０は、ＩＣＰ３４．５、ＵＬ２４及びＵＬ５６．３４、３５の１つのコピーを含む、ロング（Ｌ）及びショート（Ｓ）領域の接合領域が欠失されている単純ヘルペスウイルスである。欠失領域は、ＨＳＶ−２  ＵＳ  ＤＮＡのフラグメント（ＵＳ２、ＵＳ３（ＰＫ）、ｇＪ及びｇＧ）で置き換えられた（Ｔｏｄｏ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．９８：６３９６−６４０１を参照されたい）。
【００３９】
Ｍ０３２は、ＩＣＰ３４．５遺伝子の両方のコピーの欠失及びインターロイキン１２の挿入を有する単純ヘルペスウイルスである（Ｃａｓｓａｄｙ  ａｎｄ  Ｎｅｓｓ  Ｐａｒｋｅｒ，（２０１０）Ｔｈｅ  Ｏｐｅｎ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ４：１０３−１０８を参照されたい）。
【００４０】
ＩｍｍｕｎｏＶＥＸ  ＨＳＶ−２は、ｖｈｓ、ＩＣＰ４７、ＩＣＰ３４．５、ＵＬ４３及びＵＳ５をコードする遺伝子の機能欠失を有する単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ−２）である。
【００４１】
ＯｎｃｏＶｅｘＧＡＬＶ／ＣＤは、ＩＣＰ３４．５及びＩＣＰ４７をコードする遺伝子が機能的に欠失され、シトシンデアミナーゼ及びテナガザル（ｇｉｂｂｏｎ  ａｐｅ）白血病融合性糖タンパク質をコードする遺伝子がＩＣＰ３４．５遺伝子の代わりにウイルスゲノム中に挿入された状態であり、これもＨＳＶ−１のＪＳ１株に由来する。
【００４２】
改変単純ヘルペスウイルスの追加の例としては、Ｇ４７デルタ、Ｇ４７デルタＩＬ−１２、ＯＮＣＲ−００１、ＯｒｉｅｎＸ−０１０、ＮＳＣ  ７３３９７２、ＨＦ−１０、ＢＶ−２７１１、ＪＸ−５９４、Ｍｙｂ３４．５、ＡＥ−６１８、Ｂｒａｉｎｗｅｌ（商標）及びＨｅａｐｗｅｌ（商標）が挙げられる。
【００４３】
ヘルペスウイルス株及びそのような株の作製法は、米国特許第５８２４３１８号明細書、同第６７６４６７５号明細書、同第６，７７０，２７４号明細書、同第７，０６３，８３５号明細書、同第７，２２３，５９３号明細書、同第７７４９７４５号明細書、同第７７４４８９９号明細書、同第８２７３５６８号明細書、同第８４２００７１号明細書、同第８４７０５７７号明細書、ＷＩＰＯ公開国際公開１９９６００００７号パンフレット、同第１９９６３９８４１号パンフレット、同第１９９９０７３９４号パンフレット、同第２０００５４７９５号パンフレット、同第２００６００２３９４号パンフレット、同第２０１３０６７９５号パンフレット、中国特許第１２８３０３号明細書、同第１０２３０３３４号明細書及び同第１０２３０３３５号明細書、Ｖａｒｇｈｅｓｅ  ａｎｄ  Ｒａｂｋｉｎ，（２００２）Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ９：９６７−９７並びにＣａｓｓａｄｙ  ａｎｄ  Ｎｅｓｓ  Ｐａｒｋｅｒ，（２０１０）Ｔｈｅ  Ｏｐｅｎ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ４：１０３−１０８にも記載されており、これらのそれぞれは、参照により本明細書に組み込まれる。
【００４４】
チェックポイント阻害剤
免疫チェックポイントは、Ｔ細胞（細胞媒介性免疫において中心的役割を果たす）などの何らかの種類の免疫系細胞を制御するタンパク質である。免疫チェックポイントは、免疫応答を抑制することを補助するが、これらは、Ｔ細胞ががん細胞を死滅させないようにすることもできる。免疫チェックポイント阻害剤（又は簡単に「チェックポイント阻害剤」）は、免疫チェックポイントタンパク質活性をブロックし、免疫系の「ブレーキ」を解除し、Ｔ細胞ががん細胞をより良好に死滅させることを可能にし得る。
【００４５】
本明細書で使用される場合、「免疫チェックポイント阻害剤」又は「チェックポイント阻害剤」という用語は、１つ以上のチェックポイントタンパク質を完全に又は部分的に低減させるか、阻害するか、干渉するか、又は調節する分子を指す。チェックポイントタンパク質は、Ｔ細胞活性化又は機能を制御する。ＣＴＬＡ−４及びそのリガンドＣＤ８０並びにＣＤ８６及びＰＤ−１と共にそのリガンドＰＤ−Ｌ１並びにＰＤ−Ｌ２などの多数のチェックポイントタンパク質が知られている（Ｐａｒｄｏｌｌ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  １２：２５２−２６４，２０１２）。これらのタンパク質は、Ｔ細胞応答の共刺激又は阻害性相互作用を担当している。免疫チェックポイントタンパク質は、自己免疫寛容及び生理学的免疫応答の持続時間並びに振れ幅を制御且つ維持する。免疫チェックポイント阻害剤は、抗体を含むか又は抗体に由来し得る。
【００４６】
チェックポイント阻害剤は、小分子阻害剤を含み得るか、又は免疫チェックポイント受容体に結合し、それをブロック若しくは阻害する抗体又はその抗原結合フラグメント、或いは免疫チェックポイント受容体リガンドに結合し、それをブロック若しくは阻害する抗体を含み得る。ブロッキング又は阻害のために標的とされ得る例示的なチェックポイント分子としては、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＰＤ−１、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４（分子のＣＤ２ファミリーに属し、全てのＮＫ、γδ及びメモリーＣＤ８＋（αβ）Ｔ細胞上で発現される）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５とも称される）、ＣＧＥＮ−１５０４９、ＣＨＫ  １並びにＣＨＫ２キナーゼ、Ａ２ａＲ及び様々なＢ−７ファミリーリガンドが挙げられるが、これらに限定されない。Ｂ７ファミリーリガンドとしては、Ｂ７−１、Ｂ７−２、Ｂ７−ＤＣ、Ｂ７−Ｈ１、Ｂ７−Ｈ２、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、Ｂ７−Ｈ５、Ｂ７−Ｈ６及びＢ７−Ｈ７が挙げられるが、これらに限定されない。チェックポイント阻害剤としては、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＰＤ−１、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ３、ＧＡＬ９、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４、ＣＤ１６０及びＣＧＥＮ−１５０４９の１つ以上に結合し、これらの１つ以上の活性をブロック又は阻害する抗体若しくはその抗体結合フラグメント、他の結合タンパク質、生物学的治療薬又は小分子が挙げられる。
【００４７】
細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）は、Ｔ細胞活性化の経路をダウンレギュレートする免疫チェックポイント分子である。ＣＴＬＡ−４は、Ｔ細胞活性化の負の調節因子である。ＣＴＬＡ−４の遮断は、Ｔ細胞の活性化及び増殖を増強させることが示されている。単純ヘルペスウイルスと抗ＣＴＬＡ−４抗体との組み合わせは、腫瘍内のウイルスの細胞溶解性複製後に放出される腫瘍抗原に対する抗腫瘍免疫応答を増強させるために、２つの異なる機序を通してＴ細胞活性化を向上させることを意図するものである。したがって、単純ヘルペスウイルスと抗ＣＴＬＡ−４抗体との組み合わせは、注入された腫瘍及び注入されていない／遠位の腫瘍の破壊を増大させ、全体の腫瘍応答を改善し、特に、全生存期間の延長が抗ＣＴＬＡ−４抗体を単独で使用して得られるものと比較される場合に全生存期間を延長させることができる。
【００４８】
プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ−１）は、Ｔ細胞及びプロＢ細胞上で発現され、それらの運命／分化において役割を果たす２８８個のアミノ酸の細胞表面タンパク質分子である。ＰＤ−１の２つのリガンドのＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２は、Ｂ７ファミリーのメンバーである。ＰＤ−１は、感染に対する炎症反応の際に末梢組織におけるＴ細胞の活性を制限し、インビトロで自己免疫ＰＤ−１遮断を制限することは、特異的抗原標的によるか又は混合リンパ球反応中の同種細胞によるチャレンジに応答してＴ細胞増殖及びサイトカイン産生を向上させる。ＰＤ−１の発現と応答との間の強い相関関係がＰＤ−１の遮断によって示された（Ｐａｒｄｏｌｌ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ，１２：２５２−２６４，２０１２）。ＰＤ−１遮断は、ＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１に結合する抗体を含む様々な機序によって達成することができる。
【００４９】
分化抗原群２７４（ＣＤ２７４）又はＢ７ホモログ１（Ｂ７−Ｈ１）とも称されるプログラム細胞死−リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）は、ＣＤ２７４遺伝子によってコードされるタンパク質である。Ｅｎｔｒｅｚ  Ｇｅｎｅ：ＣＤ２７４  ＣＤ２７４分子を参照されたい。ＰＤ−Ｌ１は、免疫系の抑制において役割を果たす４０ｋＤａの１型膜貫通タンパク質であり、細胞活性化又は阻害を調節するために、活性化Ｔ細胞、Ｂ細胞及び骨髄細胞上で見出されるその受容体（ＰＤ−１）に結合する。Ｃｈｅｍｎｉｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１７３（２）：９４５−５４（２００４）を参照されたい。
【００５０】
他の免疫チェックポイント阻害剤としては、リンパ球活性化遺伝子−３（ＬＡＧ−３）阻害剤、例えばＩＭＰ３２１、可溶性Ｉｇ融合タンパク質（Ｂｒｉｇｎｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７９：４２０２−４２１１）が挙げられる。また、Ｂ７阻害剤、例えばＢ７−Ｈ３及びＢ７−Ｈ４阻害剤（例えば、抗Ｂ７−Ｈ３抗体ＭＧＡ２７１（Ｌｏｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．Ｊｕｌｙ  １５（１８）３８３４））も含まれる。別のチェックポイント阻害剤は、ＴＩＭ３（Ｔ細胞免疫グロブリンドメイン及びムチンドメイン３）である（Ｆｏｕｒｃａｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，Ｊ．  Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０７：２１７５−８６及びＳａｋｕｉｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０７：２１８７−９４）。
【００５１】
本明細書に更に記載されるように、一態様では、本発明は、がんの治療のための、腫瘍溶解性ウイルスとチェックポイント阻害剤との組み合わせの使用に関する。別の態様では、本発明は、腫瘍溶解性ウイルスとチェックポイント阻害剤との組み合わせを含む医薬組成物に関する。
【００５２】
したがって、本発明の一態様では、チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２のブロッカー又は阻害剤である。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、トレメリムマブ、イピリムマブ（１０Ｄ１、ＭＤＸ−Ｄ０１０としても知られる）、ＢＭＳ−９８６２４９、ＡＧＥＮ−１８８４などのＣＴＬＡ−４のブロッカー又は阻害剤及び抗ＣＴＬＡ−４抗体（それぞれ参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，８１１，０９７号明細書、同第５，８１１，０９７号明細書、同第５，８５５，８８７号明細書、同第６，０５１，２２７号明細書、同第６，２０７，１５７号明細書、同第６，６８２，７３６号明細書、同第６，９８４，７２０号明細書及び同第７，６０５，２３８号明細書に記載される）である。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−１のブロッカー又は阻害剤（例えば、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害剤との相互作用を阻害する分子）であり、例えばペンブロリズマブ（抗ＰＤ−１抗体）、ニボルマブ（抗ＰＤ−１抗体）、ＣＴ−０１１（抗ＰＤ−１抗体）、ＣＸ−０７２（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＩＯ−１０３（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＢＧＢ―Ａ３３３（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＷＢＰ−３１５５（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＭＤＸ−１１０５（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＬＹ−３３０００５４（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＫＮ−０３５（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＦＡＺ−０５３（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＣＫ−３０１（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＡＫ−１０６（抗ＰＤ−Ｌ１）、Ｍ−７８２４（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＣＡ−１７０（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＣＳ−１００１（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＳＨＲ−１３１６（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＢＭＳ  ９３６５５８（抗ＰＤ−１抗体）、ＢＭＳ−９３６５５９（抗ＰＤ−１抗体）、アテゾリズマブ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＡＭＰ  ２２４（ＰＤ−Ｌ２／ＰＤ−１相互作用をブロックするように設計された、ＰＤ−Ｌ２の細胞外ドメインとＩｇＧ１抗体との融合タンパク質）、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ；抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）及び米国特許第７，４８８，８０２号明細書、同第７，９４３，７４３号明細書、同第８，００８，４４９号明細書、同第８，１６８，７５７号明細書、同第８，２１７，１４９号明細書並びにＰＣＴ公開特許出願国際公開０３０４２４０２号パンフレット、同第２００８１５６７１２号パンフレット、同第２０１００８９４１１号パンフレット、同第２０１００３６９５９号パンフレット、同第２０１１０６６３４２号パンフレット、同第２０１１１５９８７７号パンフレット、同第２０１１０８２４００号パンフレット及び同第２０１１１６１６９９号パンフレットに記載されているもの（これらのそれぞれは、参照により本明細書に組み込まれる）が挙げられる。追加の抗ＰＤ−１抗体としては、ＰＤＲ−００１、ＳＨＲ−１２１０、ＢＧＢ―Ａ３１７、ＢＣＤ−１００、ＪＮＪ−６３７２３２８３、ＰＦ−０６８０１５９１、ＢＩ−７５４０９１、ＪＳ−００１、ＡＧＥＮ−２０３４、ＭＧＤ−０１３、ＬＺＭ−００９、ＧＬＳ−０１０、ＭＧＡ−０１２、ＡＫ−１０３、ゲノリムズマブ（ｇｅｎｏｌｉｍｚｕｍａｂ）、ドスタルリマブ��ｄｏｓｔａｒｌｉｍａｂ）、セミプリマブ、ＩＢＩ−３０８、カムレリズマブ（ｃａｍｒｅｌｉｚｕｍａｂ）、ＡＭＰ−５１４、ＴＳＲ−０４２、Ｓｙｍ−０２１、ＨＸ−００８及びＡＢＢＶ−３６８が挙げられる。
【００５３】
ＢＭＳ  ９３６５５８は、ＰＤ−１を標的化する完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体である。第１相臨床試験において、進行した難治性悪性腫瘍を有する対象におけるＢＭＳ−９３６５５８の隔週投与は、持続的な部分的又は完全な退縮を示した。最も顕著な奏効率は、メラノーマ（２８％）及び腎細胞癌（２７％）の対象で観察されたが、実質的臨床活性は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の対象でも観察され、一部の奏効は、１年を超えて持続した。
【００５４】
ＢＭＳ  ９３６５５９は、ＰＤ−１リガンドのＰＤ−Ｌ１を標的化する完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体である。第１相試験結果は、この薬剤の隔週投与が特にメラノーマの対象で持続的奏効をもたらすことを示した。客観的奏効率は、進行期ＮＳＣＬＣ、メラノーマ、ＲＣＣ又は卵巣がんを有する対象においてがんの種類に応じて６％〜１７％）の範囲であり、一部の対象は、１年以上にわたって続く奏効を経験した。
【００５５】
ＡＭＰ  ２２４は、第２のＰＤ−１リガンド、ＰＤ−Ｌ２の細胞外ドメインとＩｇＧ１との融合タンパク質であり、ＰＤ−Ｌ２／ＰＤ−１相互作用をブロックする能力を有する。ＡＭＰ−２２４は、現在、進行がんの対象において単独療法として第１相臨床試験中である。
【００５６】
ＭＥＤＩ４７３６は、この用量漸増試験において許容可能な安全性プロファイル及び持続可能な臨床活性を証明した抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。ＭＥＤＩ４７３６の複数のがんにおける展開及び単独療法としての並びに併用でのＭＥＤＩ４７３６の開発が継続中である。
【００５７】
ＧＩＴＲアゴニスト
グルココルチコイド誘導性ＴＮＦＲ関連遺伝子（ＧＩＴＲ：ＴＮＦＲＳＦ  １８）は、活性化誘導性ＴＮＦＲファミリーメンバー（ＡＩＴＲ）と呼ばれることもあり、ＴＮＦ受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）に属する受容体である。これは、その同族リガンドのＧＩＴＲリガンド（ＧＩＴＲＬ、ＴＮＦＳＦ１８）によって活性化される。ＧＩＴＲは、ＴＮＦＲファミリーメンバーの特徴である、システインに富む細胞外ドメインを含有するＩ型膜貫通タンパク質である。例えば、ＧＩＴＲの細胞質ドメインは、４−１ＢＢ及びＣＤ２７などの特定の他のＴＮＦＲファミリーメンバーと密接な相同性を共有する（Ｎｏｃｅｎｔｉｎｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９４：６２１６−６２２１（１９９７））。ＧＩＴＲアゴニスト抗体は、ＣＤ８＋Ｔエフェクターメモリー細胞集団を増殖させる手段として、一方では同時にＴｒｅｇの消失又は阻害の促進の手段として現在検証中である。
【００５８】
レスポンダーＴ細胞の共刺激及び制御性Ｔ細胞の抑制活性の抑止は、ＧＩＴＲ活性化が免疫応答の増強をもたらすことを意味する。このような活性化は、感染及び腫瘍に対する免疫応答を回復させる可能性を有する。したがって、ＧＩＴＲを活性化することができる分子は、免疫応答の増強を誘発させることが望ましい状況において免疫刺激剤としての価値があるであろう。
【００５９】
本明細書に更に記載されるように、一態様では、本発明は、がんの治療における腫瘍溶解性ウイルスとＧＩＴＲアゴニストとの組み合わせの使用に関する。別の態様では、本発明は、腫瘍溶解性ウイルスとＧＩＴＲアゴニストとの組み合わせを含む医薬組成物に関する。
【００６０】
いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲアゴニストは、ＡＭＧ  ２２８（９Ｈ６ｖ３とも称される）、ＴＲＸ５１８、ＭＥＤＩ１８７３、ＭＫ−４１６６、ＢＭＳ−９８６１５６、ＭＫ−１２４８、ＩＮＣＡＧＮ０１８７６又はＧＷＮ３２３である。
【００６１】
ＴＲＸ５１８は、ＧＩＴＲの相互作用をブロックし、がんモデルにおいて化学療法剤と相乗的に作用することが示されているヒト化されたＦｃ無効化抗ＧＩＴＲモノクローナル抗体である。ＴＲＸ５１８は、ＮＣＴ０１２３９１３４（ＩＩＩ期若しくはＩＶ期悪性メラノーマ又は他の固形腫瘍）及びＮＣＴ０２６２８５７４（進行性固形腫瘍）を含む臨床試験で現在検討中である。
【００６２】
ＭＥＤＩ１８７３は、潜在的な免疫調節及び抗新生物活性を有するＧＩＴＲアゴニスト（ＧＩＴＲリガンド（ＧＩＴＲＬ）ＩｇＧ１融合タンパク質）である。ＭＥＤＩ１８７３は、ＮＣＴ０２５８３１６５（進行性固形腫瘍）を含む臨床試験において現在検討中である。
【００６３】
ＭＫ−４１６６は、がんモデルにおいて化学療法剤と相乗的に作用することが示されている抗ＧＩＴＲ作動性モノクローナル抗体である。ＭＫ−４１６６は、ＮＣＴ０２１３２７５４（進行性固形腫瘍においてペンブロリズマブとの組み合わせで）を含む臨床試験で現在検討中である。
【００６４】
ＢＭＳ−９８６１５６は、抗ＧＩＴＲ作動性モノクローナル抗体である。ＢＭＳ−９８６１５６は、ＮＣＴ０２５９８９６０（進行性固形腫瘍の対象において、単独療法として及びニボルマブとの組み合わせで）を含む臨床試験で現在検討中である。
【００６５】
ＭＫ−１２４８は、抗ＧＩＴＲ作動性モノクローナル抗体である。ＭＫ−１２４８は、ＮＣＴ０２５５３４９９（進行性固形腫瘍の対象において、単独療法として及びペンブロリズマブとの組み合わせで）を含む臨床試験で現在検討中である。
【００６６】
ＩＮＣＡＧＮ０１８７６は、抗ＧＩＴＲ作動性モノクローナル抗体である。ＩＮＣＡＧＮ０１８７６は、ＮＣＴ０２６９７５９１（進行性又は転移性固形腫瘍の対象における）を含む臨床試験で現在検討中である。
【００６７】
ＧＷＮ３２３は、抗ＧＩＴＲ作動性モノクローナル抗体である。ＧＷＮ３２３は、ＮＣＴ０２６９７５９１（進行性がん又はリンパ腫の対象において、単独療法として及びＰＤＲ００１との組み合わせで）を含む臨床試験で現在検討中である。
【００６８】
疾患又は障害の治療方法
本発明は、がんなどの疾患又は障害を治療する方法にも関する。いくつかの実施形態では、がんは、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫である。他の実施形態では、がんは、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸がん、メラノーマ又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）である。いくつかの実施形態では、がんは、転移性がんである。
【００６９】
「転移性がん」という用語は、それが発生した体の部分（すなわち原発部位）から体の他の部分に拡がったがんを指す。がんが新しい領域に拡がる（すなわち転移する）と、依然としてそれが発生した体の部分に従って命名される。例えば、膵臓に転移した結腸がんは、膵臓がんではなく、「膵臓への転移性結腸がん」と称される。治療も、がんが生じた場所に基づく。結腸がんが骨に転移する場合にも、これは、依然として結腸がんであり、関連医師は、転移性結腸がんに対処することが示された治療を推奨するであろう。
【００７０】
本発明は、がんの治療のための、腫瘍溶解性ウイルスとチェックポイント阻害剤との組み合わせの使用にも関する。いくつかの実施形態では、がんは、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫である。他の実施形態では、がんは、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸がん、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）である。いくつかの実施形態では、がんは、転移性がんである。
【００７１】
本発明は、（ｉ）治療有効量の腫瘍溶解性ウイルスと、（ｉｉ）治療有効量のＧＩＴＲアゴニストとを投与することにより、がんなどの疾患又は障害を治療する方法にも関する。特定の実施形態では、がんは、Ｂ細胞性リンパ腫である。他の実施形態では、ＧＩＴＲアゴニストは、ＡＭＧ  ２２８、ＴＲＸ５１８、ＭＥＤＩ１８７３又はＭＫ−４１６６である。
【００７２】
腫瘍溶解性ウイルスは、本明細書に記載されるもののいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルス（例えば、単純ヘルペスウイルス１型）である。他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有しないように改変されている。他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、且つそれがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有しないように改変されている。更に他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有せず、且つそれが、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ）をコードする遺伝子を含有するように改変されている。具体的な実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【００７３】
チェックポイント阻害剤は、免疫系の阻害経路をブロック又は阻害する任意の分子であり得る。例えば、以下のチェックポイント分子がブロッキング又は阻害のために標的化され得る：ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＰＤ−１、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＧＡＬ９、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４（分子のＣＤ２ファミリーに属し、全てのＮＫ、γδ及びメモリーＣＤ８＋（αβ）Ｔ細胞上で発現される）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５とも称される）、ＣＧＥＮ−１５０４９、ＣＨＫ  １並びにＣＨＫ２キナーゼ、Ａ２ａＲ及び様々なＢ−７ファミリーリガンド。Ｂ７ファミリーリガンドとしては、Ｂ７−１、Ｂ７−２、Ｂ７−ＤＣ、Ｂ７−Ｈ１、Ｂ７−Ｈ２、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、Ｂ７−Ｈ５、Ｂ７−Ｈ６及びＢ７−Ｈ７が挙げられるが、これらに限定されない。チェックポイント阻害剤の例としては、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＰＤ−１、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ３、ＧＡＬ９、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４、ＣＤ１６０及びＣＧＥＮ−１５０４９の１つ以上に結合し、これらの１つ以上の活性をブロック又は阻害する結合タンパク質（例えば、抗体又はその抗体結合フラグメント）、生物学的治療薬又は小分子が挙げられる。
【００７４】
いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２のブロッカー若しくは阻害剤である。ＣＴＬＡ−４阻害剤の例としては、トレメリムマブ、イピリムマブ（１０Ｄ１、ＭＤＸ−Ｄ０１０としても知られる）、ＢＭＳ−９８６２４９、ＡＧＥＮ−１８８４及び抗ＣＴＬＡ−４抗体（それぞれ参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，８１１，０９７号明細書、同第５，８１１，０９７号明細書、同第５，８５５，８８７号明細書、同第６，０５１，２２７号明細書、同第６，２０７，１５７号明細書、同第６，６８２，７３６号明細書、同第６，９８４，７２０号明細書及び同第７，６０５，２３８号明細書に記載される）が挙げられる。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２阻害剤との相互作用を阻害する分子の例としては、ペンブロリズマブ（抗ＰＤ−１抗体）、ニボルマブ（ＢＭＳ  ９３６５５８；抗ＰＤ−１抗体）、ＣＴ−０１１（抗ＰＤ−１抗体）、ＢＭＳ  ９３６５５８（抗ＰＤ−１抗体）、ＢＭＳ−９３６５５９（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＣＸ−０７２（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＩＯ−１０３（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＢＧＢ―Ａ３３３（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＷＢＰ−３１５５（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＭＤＸ−１１０５（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＬＹ−３３０００５４（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＫＮ−０３５（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＦＡＺ−０５３（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＣＫ−３０１（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＡＫ−１０６（抗ＰＤ−Ｌ１）、Ｍ−７８２４（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＣＡ−１７０（抗ＰＤ−Ｌ１）、ＣＳ−１００１（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＳＨＲ−１３１６（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、アテゾリズマブ（抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＡＭＰ  ２２４（ＰＤ−Ｌ２／ＰＤ−１相互作用をブロックするように設計された、ＰＤ−Ｌ２の細胞外ドメインとＩｇＧ１抗体との融合タンパク質）、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ；抗ＰＤ−Ｌ１抗体）、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ；抗ＰＤ−Ｌ１抗体）及び米国特許第７，４８８，８０２号明細書、同第７，９４３，７４３号明細書、同第８，００８，４４９号明細書、同第８，１６８，７５７号明細書、同第８，２１７，１４９号明細書並びにＰＣＴ公開特許出願国際公開第０３０４２４０２号パンフレット、同第２００８１５６７１２号パンフレット、同第２０１００８９４１１号パンフレット、同第２０１００３６９５９号パンフレット、同第２０１１０６６３４２号パンフレット、同第２０１１１５９８７７号パンフレットに記載されているものが挙げられる。追加の抗ＰＤ−１抗体としては、ＰＤＲ−００１、ＳＨＲ−１２１０、ＢＧＢ―Ａ３１７、ＢＣＤ−１００、ＪＮＪ−６３７２３２８３、ＰＦ−０６８０１５９１、ＢＩ−７５４０９１、ＪＳ−００１、ＡＧＥＮ−２０３４、ＭＧＤ−０１３、ＬＺＭ−００９、ＧＬＳ−０１０、ＭＧＡ−０１２、ＡＫ−１０３、ゲノリムズマブ（ｇｅｎｏｌｉｍｚｕｍａｂ）、ドスタルリマブ（ｄｏｓｔａｒｌｉｍａｂ）、セミプリマブ、ＩＢＩ−３０８、カムレリズマブ（ｃａｍｒｅｌｉｚｕｍａｂ）、ＡＭＰ−５１４、ＴＳＲ−０４２、Ｓｙｍ−０２１、ＨＸ−００８及びＡＢＢＶ−３６８が挙げられる。
【００７５】
特定の実施形態では、本発明は、腫瘍溶解性ウイルスと抗ＰＤ−１抗体との組み合わせ、腫瘍溶解性ウイルスと抗ＰＤ−Ｌ１抗体との組み合わせ又は腫瘍溶解ウイルスと抗ＣＴＬＡ−４抗体との組み合わせに関する。具体的な実施形態では、腫瘍溶解ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【００７６】
多くの場合、がんは、原発性腫瘍として（すなわち腫瘍進行が開始し、がん性塊をもたらし続ける解剖学的部位において増殖する腫瘍）及び二次性腫瘍又は転移（すなわちその原発部位から体の他の部分への腫瘍の拡がり）としての両方で患者に存在する。本発明の腫瘍溶解性ウイルスは、溶解効果及び全身性免疫効果を介した腫瘍の治療で有効であり得る。例えば、タリモジーン・ラハーパレプベックに関して、ウイルスは、腫瘍を物理的に溶解して原発性腫瘍細胞死を引き起こす。加えて、［１］腫瘍細胞の溶解は、その後、免疫系によって認識される腫瘍由来抗原を放出し、［２］ＧＭ−ＣＳＦの産生は、抗腫瘍免疫応答の誘導の補助となり、これらの両方の機序が全身性免疫応答をもたらし、これにより、免疫系が原発性及び二次性腫瘍／転移の両方を認識及び攻撃することができると考えられる。腫瘍溶解性ウイルスがチェックポイント阻害剤と組み合わされる実施形態では、チェックポイント阻害剤は、プライミングを増強させ、Ｔ細胞などの免疫系細胞上の免疫チェックポイントタンパク質の阻害効果を低減させることにより、全身性免疫応答を更に高めると考えられる。更に、腫瘍溶解性ウイルスがＧＩＴＲアゴニストと組み合わされる実施形態では、ＧＩＴＲアゴニストは、ＣＤ８＋Ｔエフェクターメモリー細胞集団を増殖させることによって全身性免疫応答を更に高めて、Ｔｒｅｇの消失又は阻害を推進すると考えられる。したがって、本発明は、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）を単独で又はチェックポイント阻害剤との組み合わせのいずれかで用いた、原発性腫瘍、転移（すなわち二次性腫瘍）又はこれら両方の治療を企図する。
【００７７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の治療又は使用の方法は、放射線による治療又は放射線との組み合わせ治療を含まない。他の実施形態では、本明細書に記載の治療又は使用の方法は、化学療法剤（すなわち悪性細胞及び組織に対して選択的に破壊的である化学薬剤又は薬物  −  典型的には小分子化合物）、例えばシスプラチンよる治療又は化学療法剤（例えば、シスプラチン）との組み合わせ治療を含まない。更に他の実施形態では、本明細書に記載の治療又は使用の方法は、放射線及び化学療法剤（例えば、シスプラチン）の組み合わせによる治療を含まない。
【００７８】
本発明の方法は、いくつかの異なる病期のがんを治療するために使用することができる。大部分の病気分類システムは、がんがリンパ節の近くに拡がっているかどうか、腫瘍が体のいずれの箇所に位置するか、細胞型（例えば、扁平上皮癌）、がんが体の異なる部分に拡がっているかどうか、腫瘍のサイズ及び腫瘍の悪性度（すなわち細胞異常のレベル、腫瘍が増殖し拡がる可能性）に関する情報を含む。例えば、０期とは、組織の近くに拡がっていない異常細胞  −  すなわちがんになる可能性がある細胞の存在を指す。Ｉ期、ＩＩ期及びＩＩＩ期のがんは、がんの存在を指す。病期が高くなるにつれて、がん性腫瘍が大きくなり、組織の近くにより拡がるようになる。ＩＶ期のがんは、体の遠隔部分に拡がったがんである。いくつかの実施形態では、本発明の方法は、転移性がんを治療するために使用することができる。
【００７９】
医薬組成物
本発明は、腫瘍溶解性ウイルスを含むか、又は腫瘍溶解性ウイルスとチェックポイント阻害剤との組み合わせを含む医薬組成物にも関する。医薬組成物は、例えば、組成物のｐＨ、オスモル濃度、粘度、清澄度、色、等張性、臭気、無菌性、安定性、溶解若しくは放出の速度、吸着又は浸透を変更、維持又は保存するための製剤材料を含有し得る。医薬的に活性な薬剤は、例えば、経口又は非経口、例えば静脈内、筋肉内、皮下、眼窩内、嚢内、腹腔内、大槽内、直腸内、腫瘍内、血管内、皮内を含む様々な経路により、又は例えば皮膚パッチ若しくは経皮イオントフォレーシスをそれぞれ使用して、皮膚を介した受動的若しくは促進された吸収により患者に投与することができる。一実施形態では、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）は、腫瘍内に注入される（すなわち腫瘍内注射を介して）。別の実施形態では、チェックポイント阻害剤（例えば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体又は抗ＣＴＬＡ−４抗体）は、全身投与される（例えば、静脈内で）。
【００８０】
当業者であれば、本開示の任意の態様に従って投与量及び治療期間を決定することができるであろう。例えば、当業者は、患者をモニターして、治療を開始するべきか、継続するべきか、中断するべきか、又は再開するべきかを判定することができる。特定の患者に対する有効量は、治療される状態、患者の全体的健康状態及び投与の方法、経路並びに用量などの因子に応じて変化し得る。臨床医は、当該技術分野において既知のパラメータを使用して適切な用量の決定を下す。治療的に使用される医薬組成物の有効量は、例えば、治療の背景及び目的に依存するであろう。当業者であれば、治療に適切な投与量レベルが、このように送達される分子、結合薬剤分子が使用される適応症、投与の経路及び患者のサイズ（体重、体表面又は臓器サイズ）並びに状態（年齢及び全身の健康状態）に部分的に応じて変化することを理解するであろう。したがって、臨床医は、投与量を力価測定し、最適な治療効果を得るために投与の経路を変更し得る。
【００８１】
臨床研究は、タリモジーン・ラハーパレプベックが、可視であり、触知可能である皮膚病変、皮下病変若しくはリンパ節病変に直接注入することができるか、又は超音波誘導を用いて注入され得ることを証明した。したがって、一態様では、タリモジーン・ラハーパレプベックを含む医薬組成物は、病変内注射を介して投与される。タリモジーン・ラハーパレプベックは、現在、一定の投与濃度：初回投与のための１０６ｐｆｕ／ｍＬ及びその後の投与のための１０８ｐｆｕ／ｍＬにおいて１ｍＬの使い捨てバイアルで提供されている（Ｒｅｓｋｅ，ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００８，１８０（１１）：ｐ．７５２５−３６）。注入される容量は、腫瘍型に応じて変化し得る。例えば、タリモジーン・ラハーパレプベックは、注入可能な皮膚腫瘍、皮下腫瘍及びリンパ節腫瘍中、１週目の１日目に１０６プラーク形成単位／ｍＬ（ＰＦＵ／ｍＬ）の最大４．０ｍＬの用量で、続いて４週目の１日目に１０８ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍＬの用量で、その後、２週間（±３日）毎に腫瘍内注射によって投与される。別の実施形態では、タリモジーン・ラハーパレプベックは、注入可能な皮膚腫瘍、皮下腫瘍及びリンパ節腫瘍中、１週目の１日目に１０６プラーク形成単位／ｍＬ（ＰＦＵ／ｍＬ）の最大４．０ｍＬの用量で、続いて４週目の１日目に１０７ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍＬの用量で、その後、２週間（±３日）毎に腫瘍内注射によって投与される。腫瘍中に注入されるタリモジーン・ラハーパレプベックの推奨される容量は、腫瘍のサイズに応じ、表１（及び参照により本明細書に組み込まれる特許出願ＰＣＴ／米国特許出願公開第２０１３／０５７５４２号明細書に示されるような）注入量ガイドラインに従って決定され得る。
【００８２】
【表１】
2020510050.tif 000003
【００８３】
一般的に、全ての適正に注入可能な病変は、個々の投与事例に有効な最大投与量で注入されなければならない。各処置日において、注射の優先順位付けは、次の通り推奨される：前回の注射以降に出現した任意の新たな注入可能な腫瘍；腫瘍サイズによって最大の腫瘍から開始し；現在注入可能である任意の以前に注入されていない腫瘍。
【００８４】
本発明の組成物は、生理学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤を含む１つ以上の追加の成分を含むことができる。例えば、本組成物は、緩衝液、アスコルビン酸などの酸化防止剤、低分子量ポリペプチド（例えば、１０個より少ないアミノ酸を有するもの）、タンパク質、アミノ酸、グルコース、スクロース又はデキストリンなどの炭水化物、ＥＤＴＡなどのキレート剤、グルタチオン、安定剤及び賦形剤の１つ以上を含み得る。許容される担体としては、例えば、中性緩衝生理食塩水又は特定の血清アルブミンと混合された生理食塩水が挙げられる。ベンジルアルコールなどの防腐剤も添加され得る。本組成物は、適切な賦形剤溶液（例えば、スクロース）を希釈剤として用いて凍結乾燥物として製剤化され得る。
【００８５】
特定の実施形態では、チェックポイント阻害剤は、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ又はこれらの任意の組み合わせ用量で投与される。特定の実施形態ではチェックポイント阻害剤は、１週間に１回、１週間に２回、１週間に３回、２週間毎に１回又は毎月１回投与される。特定の実施形態では、チェックポイント阻害剤は、単回投与、２回投与、３回投与、４回投与、５回投与又は６回以上の投与で投与される。
【００８６】
特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、約１〜３０ｍｇ／ｋｇ、例えば約５〜２５ｍｇ／ｋｇ、約１０〜２０ｍｇ／ｋｇ、約１〜５ｍｇ／ｋｇ又は約３ｍｇ／ｋｇの用量で注射（例えば、皮下又は静脈内）により投与される。投与計画は、例えば、１週間に１回〜２、３又は４週間ごとに１回で変化することができる。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、隔週に約１０〜２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【００８７】
一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子、例えばニボルマブは、２週間毎に約１ｍｇ／ｋｇ〜３ｍｇ／ｋｇ、例えば約１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ又は３ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与される。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子、例えばニボルマブは、３週間間隔において約２ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与される。一実施形態では、ニボルマブは、約１ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇ、例えば３ｍｇ／ｋｇの量で投与され、１週間におよそ１回〜２、３又は４週間毎に１回、６０分間の時間にわたって投与され得る。
【００８８】
一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子、例えばペンブロリズマブは、３週間毎に約１ｍｇ／ｋｇ〜３ｍｇ／ｋｇの用量、例えば約１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ又は３ｍｇ／ｋｇで静脈内投与される。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子、例えばペンブロリズマブは、３週間間隔において約２ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与される。別の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子、例えばペンブロリズマブは、３週間毎に約１００ｍｇ／ｋｇ〜３００ｍｇ／ｋｇ、例えば約１００ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ又は３００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与される。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子、例えばペンブロリズマブは、３週間間隔において約２００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与される。
【００８９】
特定の実施形態では、抗ＣＴＬＡ−４抗体（例えば、イピリムマブ）は、約３ｍｇ／ｋｇの用量においてＩＶ  Ｑ３Ｗで最大４回投与、約３ｍｇ／ｋｇの用量においてＩＶ  Ｑ６Ｗで最大４回投与、約３ｍｇ／ｋｇの用量においてＩＶ  Ｑ１２Ｗで最大４回投与、約１０ｍｇ／ｋｇの用量においてＩＶ  Ｑ３Ｗで最大４回投与又は約１０ｍｇ／ｋｇの用量においてＩＶ  Ｑ１２Ｗで最大４回投与において注射（例えば、皮下又は静脈内）により投与される。特定の実施形態では、抗ＣＴＬＡ−４抗体（例えば、トレメリムマブ）は、約１０ｍｇ／ｋｇの用量においてＱ４Ｗ又は約１５ｍｇ／ｋｇの用量において３ヶ月毎に注射（例えば、皮下又は静脈内）により投与される。
【００９０】
特定の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（例えば、アテゾリズマブ）は、疾患進行又は許容できない毒性に至るまで、約１２００ｍｇの用量においてＩＶ  Ｑ３Ｗで注射（例えば、皮下又は静脈内）により投与される。
【００９１】
したがって、一実施形態では、本発明は、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫を治療する方法で使用するための医薬組成物であって、腫瘍溶解性ウイルスを含む医薬組成物に関する。別の実施形態では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸がん、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）を治療する方法で使用するための医薬組成物であって、治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス及びチェックポイント阻害剤を含む医薬組成物に関する。追加の実施形態では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫を治療する方法で使用するための医薬組成物であって、治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス及びＧＩＴＲアゴニストを含む医薬組成物に関する。
【００９２】
他の実施形態では、本発明は、ユーイング肉腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫様腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫又は多発性骨髄腫の治療で使用するための治療有効量の腫瘍溶解性ウイルスに関する。更に他の実施形態では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫）、結腸直腸がん、メラノーマ、頭頸部扁平上皮癌又は乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳癌）の治療で使用するための治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス及びチェックポイント阻害剤に関する。追加の実施形態では、本発明は、Ｂ細胞性リンパ腫の治療で使用するための治療有効量の腫瘍溶解性ウイルス及びＧＩＴＲアゴニストに関する。
【００９３】
いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルス（例えば、単純ヘルペスウイルス１型）である。他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有しないように改変されている。他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、且つそれがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有しないように改変されている。更に他の実施形態では、単純ヘルペスウイルス１型は、それがインタクトなＩＣＰ３４．５遺伝子を含有せず、それがインタクトなＩＣＰ４７遺伝子を含有せず、且つそれが、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトＧＭ−ＣＳＦ）をコードする遺伝子を含有するように改変されている。具体的な実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、タリモジーン・ラハーパレプベックである。
【００９４】
医薬組成物がチェックポイント阻害剤を含む実施形態では、チェックポイント阻害剤は、本明細書に論じられるもののいずれかであり得る。例えば、チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ−４ブロッカー、ＰＤ−Ｌ１ブロッカー又はＰＤ−１ブロッカーであり得る。ＣＴＬＡ−４ブロッカーは、例えば、イピリムマブなどの抗ＣＴＬＡ−４抗体であり得る。ＰＤ−Ｌ１ブロッカーは、例えば、アテゾリズマブなどの抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり得る。ＰＤ−１ブロッカーは、例えば、ニボルマブ又はペンブロリズマブなどの抗ＰＤ−１抗体であり得る。
【００９５】
いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲアゴニストは、ＡＭＧ  ２２８、ＴＲＸ５１８、ＭＥＤＩ１８７３又はＭＫ−４１６６である。
【００９６】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物は、放射線と共に又は放射線との組み合わせ治療で使用されない。他の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物は、化学療法剤（例えば、シスプラチン）を含まない。更に他の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物は、放射線及び化学療法剤（例えば、シスプラチン）の組み合わせによる治療で使用されない。
【００９７】
キット
別の態様では、本発明は、［１］任意選択で、チェックポイント阻害剤と組み合わせた腫瘍溶解性ウイルスと、［２］患者への投与に関する指示書とを含むキットに関する。例えば、本発明のキットは、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）と、がんの患者を治療するための指示書（例えば、添付文書又はラベルにおいて）とを含み得る。いくつかの実施形態では、このがんは、転移性がんである。別の実施形態では、本発明のキットは、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）と、チェックポイント阻害剤（例えば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体又は抗ＣＴＬＡ−４抗体）と、がんの患者を治療するための指示書（例えば、添付文書又はラベルにおいて）とを含み得る。
【００９８】
別の態様では、本発明は、［１］任意選択で、ＧＩＴＲアゴニストと組み合わせた腫瘍溶解性ウイルスと、［２］患者への投与に関する指示書とを含むキットに関する。他の実施形態では、本発明のキットは、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、タリモジーン・ラハーパレプベック）と、ＧＩＴＲアゴニスト（例えば、ＡＭＧ２２８（９Ｈ６ｖ３とも称される）、ＴＲＸ５１８、ＭＥＤＩ１８７３又はＭＫ−４１６６）と、がんの患者を治療するための指示書（例えば、添付文書又はラベルにおいて）とを含み得る。
【００９９】
いくつかの実施形態では、タリモジーン・ラハーパレプベックを含むキットは、１週目の１日目に１０６ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍｌの用量で、続いて４週目の１日目に１０８ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍｌの用量で、その後、（例えば、完全奏効まで）２週間毎の腫瘍内注射による投与に関する指示書（例えば、添付文書又はラベルにおいて）を含む。いくつかの実施形態では、タリモジーン・ラハーパレプベックを含むキットは、１週目の１日目に１０６ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍｌの用量で、続いて４週目の１日目に１０７ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍｌの用量で、その後、（例えば、完全奏効まで）２週間毎の腫瘍内注射による投与に関する指示書（例えば、添付文書又はラベルにおいて）を含む。
【０１００】
キットが抗ＰＤ−１抗体を含む実施形態では、キットは、本明細書に記載の用量で静脈内投与するための指示書（例えば、添付文書又はラベルにおいて）を含む。抗ＰＤ−１抗体の例としては、ペンブロリズマブ及びニボルマブが挙げられる。
【０１０１】
キットが抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む実施形態では、キットは、本明細書に記載の用量で静脈内投与するための指示書（例えば、添付文書又はラベルにおいて）を含む。抗ＰＤ−Ｌ１抗体の例としては、アテゾリズマブが挙げられる。
【０１０２】
キットが抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む実施形態では、キットは、本明細書に記載の用量で静脈内投与するための指示書（例えば、添付文書又はラベルにおいて）を含む。抗ＣＴＬＡ−４抗体の例としては、イピリムマブが挙げられる。
【０１０３】
キットがＧＩＴＲアゴニストを含む実施形態では、キットは、本明細書に記載の用量で静脈内投与するための指示書（例えば、添付文書又はラベルにおいて）を含む。抗ＧＩＴＲ抗体の例としては、ＡＭＧ  ２２８、ＴＲＸ５１８、ＭＥＤＩ１８７３又はＭＫ−４１６６が挙げられる。
【０１０４】
別の実施形態では、本発明のキットを製造する方法が提供される。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のキットは、放射線と共に又は放射線との組み合わせ治療で使用されない。他の実施形態では、本明細書に記載のキットは、化学療法剤（例えば、シスプラチン）を含まない。更に他の実施形態では、本明細書に記載のキットは、放射線及び化学療法剤（例えば、シスプラチン）の組み合わせによる治療で使用されない。
【実施例】
【０１０６】
以下の実施例は、本発明の具体的な実施形態又は特徴を例示する目的で提供されるものであり、その範囲を限定することを意図するものではない。
【０１０７】
実施例１：タリモジーン・ラハーパレプベックは、インビボマウスモデルにおいてある範囲の腫瘍型に対して抗腫瘍活性を示す
この実施例は、タリモジーン・ラハーパレプベックの腫瘍担持マウスへの投与が腫瘍死滅をもたらすことを証明する。
【０１０８】
タリモジーン・ラハーパレプベックの抗腫瘍効力をＢａｌｂ／ｃヌードマウスにおけるいくつかのマウス異種移植研究で評価した。腫瘍細胞（Ａ−６７３ヒト小児ユーイング肉腫、ＳＪＣＲＨ３０ヒト小児横紋筋肉腫、Ｇ−４０１ヒト小児横紋筋肉腫様腫瘍、ＳＫ−Ｎ−ＡＳヒト小児神経芽細胞腫又はＳＪＳＡ−１ヒト小児骨肉腫）を皮下注射によって各マウスの右脇腹に移植した。いずれの場合にも、１００〜２００μＬの５０％マトリゲル／５０％ＤＭＥＭ中の５×１０６〜１×１０７個細胞をマウスに移植した。
【０１０９】
腫瘍測定値を週に２回得た。タリモジーン・ラハーパレプベックによる処置は、腫瘍が平均で４〜６ｍｍの直径に達した際に開始した。３種のタリモジーン・ラハーパレプベックの用量（５×１０４、５×１０５又は５×１０６ＰＦＵ／投与量、５０ｕＬの投与容量）を腫瘍内注射によって３日間離して投与した。体重、総括的臨床所見及び腫瘍測定値を週に２回得た。腫瘍重量が体重の１０％を超えたときに動物を安楽死させた。
【０１１０】
この実験では、タリモジーン・ラハーパレプベックは、６５〜１１２％の腫瘍増殖阻害及び腫瘍型にわたる動物の３〜３０％での完全退縮の証拠により、試験された全ての細胞株に対して抗腫瘍効力を示した。
【０１１１】
ユーイング肉腫
Ａ−６７３ユーイング肉腫担持マウスをタリモジーン・ラハーパレプベックで５×１０４、５×１０５又は５×１０６ＰＦＵ／投与量において治療的に処置した。タリモジーン・ラハーパレプベックは、試験８日目、１１日目及び１４日目に１日１回の腫瘍内注射によって投与した（図１の赤色の矢印）。腫瘍を１週間当たり２〜３回測定した。結果は、０日目が腫瘍摂取の日である日数での時間の関数として、ｍｍ３±平均値の標準誤差での群の平均腫瘍体積として表される（１６日目、２０日目及び２３日目のビヒクル対照群について注記されている場合を除き、１群当たりｎ＝１０）。星印は、試験２３日目にビヒクル対照に対して全てのタリモジーン・ラハーパレプベック群がｐ＜０．０００１であることを示す。
【０１１２】
結果を図１に示す。
【０１１３】
神経芽細胞腫
ＳＫ−Ｎ−ＡＳ神経芽細胞腫担持マウスをタリモジーン・ラハーパレプベックで５×１０４、５×１０５又は５×１０６ＰＦＵ／投与量において治療的に処置した。タリモジーン・ラハーパレプベックは、試験６日目、９日目及び１２日目に１日１回の腫瘍内注射によって投与した（図２の赤色の矢印）。腫瘍を１週間当たり２〜３回測定した。結果は、０日目が腫瘍摂取の日である日数での時間の関数として、ｍｍ３±平均値の標準誤差での群の平均腫瘍体積として表される（１８日目、２０日目及び２３日目の５×１０４ＰＦＵ／投与量の群について注記されている場合を除き、１群当たりｎ＝１０）。星印は、試験２３日目に製剤緩衝液対照に対して５×１０６及び５×１０５ＰＦＵ／投与量群についてｐ＜０．０００１であり、５×１０４ＰＦＵ／投与量群についてｐ＝０．０００１であることを示す。
【０１１４】
結果を図２に示す。
【０１１５】
横紋筋肉腫様腫瘍
Ｇ−４０１横紋筋肉腫様腫瘍担持マウスをタリモジーン・ラハーパレプベックで５×１０４、５×１０５又は５×１０６ＰＦＵ／投与量において治療的に処置した。タリモジーン・ラハーパレプベックは、試験１４日目、１７日目及び２０日目に１日１回の腫瘍内注射によって投与した（図３の赤色の矢印）。腫瘍を１週間当たり２〜３回測定した。結果は、０日目が腫瘍摂取の日である日数での時間の関数として、ｍｍ３±平均値の標準誤差での群の平均腫瘍体積として表される（注記されている場合を除き、１群当たりｎ＝１０）。星印は、試験４０日目にビヒクル対照に対して全てのタリモジーン・ラハーパレプベック投与群がｐ＜０．０００１であることを示す。
【０１１６】
結果を図３に示す。
【０１１７】
骨肉腫
ＳＪＳＡ−１骨肉腫担持マウスをタリモジーン・ラハーパレプベックで５×１０４、５×１０５又は５×１０６ＰＦＵ／投与量において治療的に処置した。タリモジーン・ラハーパレプベックは、試験９日目、１２日目及び１５日目に１日１回の腫瘍内注射によって投与した（図４の赤色の矢印）。腫瘍を１週間当たり２〜３回測定した。結果は、０日目が腫瘍摂取の日である日数での時間の関数として、ｍｍ３±平均値の標準誤差での群の平均腫瘍体積として表される（１群当たりｎ＝１０）。
【０１１８】
結果を図４に示す。
【０１１９】
横紋筋肉腫
ＳＪＣＲＨ３０横紋筋肉腫担持マウスをタリモジーン・ラハーパレプベックで５×１０４、５×１０５又は５×１０６ＰＦＵ／投与量において治療的に処置した。タリモジーン・ラハーパレプベックは、試験８日目、１１日目及び１４日目に１日１回の腫瘍内注射によって投与した（図５の赤色の矢印）。腫瘍を１週間当たり２〜３回測定した。結果は、０日目が腫瘍摂取の日である日数での時間の関数として、ｍｍ３±平均値の標準誤差での群の平均腫瘍体積として表される（２６日目、３０日目及び３３日目の５×１０４ＰＦＵ／投与量の群と、３０日目及び３３日目の５×１０６ＰＦＵ／投与量の群とについて注記されている場合を除き、１群当たりｎ＝１０）。星印は、試験２６日目（全ての対照動物が試験中である最後の試験日）にビヒクル対照に対して全てのタリモジーン・ラハーパレプベック投与群についてｐ＜０．０００１であることを示す。
【０１２０】
結果を図５に示す。
【０１２１】
実施例２：タリモジーン・ラハーパレプベックは、細胞ベースのアッセイにおいてある範囲のヒト腫瘍型の増殖を阻害する
びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ又はＤＬＢＬ）
いくつかのＤＬＢＣＬ細胞株（ＳＵ−ＤＨＬ−２、ＯＣＩ−ＬＹ−３、ＴＭＤ８、ＲＩ−１（ＡＢＣサブタイプ）及びＷＳＵ−ＮＨＬ（ＧＣＢサブタイプ））を１ウェル当たり５，０００個細胞で９６ウェルプレートに播種し、３７℃で一晩インキュベートした。各細胞株について、タリモジーン・ラハーパレプベックを、１００ＭＯＩで開始して９個のウェル中で段階希釈した（１：４の段階希釈）。７２時間のインキュベーション後、各ウェルに残った細胞数を、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  ｃｅｌｌ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を使用して定量化した。
【０１２２】
タリモジーン・ラハーパレプベックは、２１種のＤＬＢＣＬ細胞株のうちの１４種で１００を下回るＭＯＩで有効であった。５種の細胞株（ＳＵ−ＤＨＬ−２、ＯＣＩ−ＬＹ−３、ＴＭＤ８、ＲＩ−１（ＡＢＣサブタイプ）及びＷＳＵ−ＮＨＬ（ＧＣＢサブタイプ））は、１以下のＭＯＩ  ＩＣ５０で最高の感受性を示した（表２）。対照的に、ＯＣＩ−ＬＹ−１、ＫＡＲＰＡＳ４２２、ＷＳＵ−ＤＬＣＬ２、ＳＵ−ＤＨＬ−４、ＳＵ−ＤＨＬ−１０及びＯＣＩ−ＬＹ−７（全てＧＣＢサブタイプのもの）は、最高１００ＭＯＩでタリモジーン・ラハーパレプベックに対する耐性を示した（表２）。細胞増殖の阻害は、１のＭＯＩ  ＩＣ５０を下回る感受性を示してほとんどの細胞株で最大であった。図６は、ＷＳＵ−ＮＨＬ（ＧＣＢサブタイプ）及びＴＭＤ８（ＡＢＣサブタイプ）ＤＬＢＣＬ細胞株においてタリモジーン・ラハーパレプベックの濃度を増加させることによって達成される細胞増殖阻害の程度を示す。これらの結果は、ＤＬＢＣＬ細胞株をタリモジーン・ラハーパレプベックで処置することがＤＬＢＣＬ腫瘍細胞増殖の強力な阻害をもたらすことを証明している。
【０１２３】
【表２】
2020510050.tif 000004
【０１２４】
追加の固形腫瘍
様々な固形腫瘍細胞株（メラノーマ、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌及びトリプルネガティブ乳癌）を１ウェル当たり２，０００〜１０，０００個細胞で９６ウェルプレートに播種し、３７℃で一晩インキュベートした。各細胞株について、タリモジーン・ラハーパレプベックを、１００ＭＯＩで開始して９個のウェル中で段階希釈した（１：４の段階希釈）。７２時間のインキュベーション後、各ウェルに残った細胞数を、ＡＴＰ−Ｌｉｔｅ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を使用して定量化した。
【０１２５】
タリモジーン・ラハーパレプベックは、試験した全ての１３種のメラノーマ及び癌細胞株に対して有効であった。試験した全ての細胞株は、１を下回るＭＯＩ  ＩＣ５０を示した（表３）。図７は、ＨＣＴ１１６（結腸直腸癌）及びＳＫ−ＭＥＬ−５（メラノーマ）細胞株においてタリモジーン・ラハーパレプベックの濃度を増加させることによって達成される細胞増殖阻害の程度を示す。これらの結果は、メラノーマ、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、胃癌及びトリプルネガティブ乳癌細胞株をタリモジーン・ラハーパレプベックで処置することが、腫瘍細胞増殖の強力な阻害をもたらすことを証明している。
【０１２６】
【表３】
2020510050.tif 000005
【０１２７】
皮膚Ｔ細胞性リンパ腫（ＣＴＣＬ）及び多発性骨髄腫（ＭＭ）
ＣＴＣＬ及びＭＭ細胞株を１ウェル当たり２，０００〜１０，０００個細胞で９６ウェルプレートに播種し、３７℃で一晩インキュベートした。各細胞株について、タリモジーン・ラハーパレプベックを、１００ＭＯＩで開始して９個のウェル中で段階希釈した（１：４の段階希釈）。７２時間のインキュベーション後、各ウェルに残った細胞数を、ＡＴＰ−Ｌｉｔｅ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を使用して定量化した。
【０１２８】
タリモジーン・ラハーパレプベックは、試験した全ての５種の細胞株に対して有効であった（表４）。多発性骨髄腫細胞株は、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫株よりも高い感受性を示した。図８は、ＨＵＴ−７８（ＣＴＣＬ）及びＲＰＭＩ  ８２２６（多発性骨髄腫）細胞株においてタリモジーン・ラハーパレプベックの濃度を増加させることによって達成される細胞増殖阻害の程度を示す。これらの結果は、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫（ＣＴＣＬ）及び多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞株をタリモジーン・ラハーパレプベックで処置することが腫瘍細胞増殖の強力な阻害をもたらすことを証明している。
【０１２９】
【表４】
2020510050.tif 000006
【０１３０】
実施例３：タリモジーン・ラハーパレプベックは、細胞ベースのアッセイにおいて様々なネズミ腫瘍細胞株の増殖を阻害する
メラノーマ、結腸直腸癌及びＢ細胞性リンパ腫のネズミ細胞株を１ウェル当たり２，０００〜１０，０００個細胞で９６ウェルプレートに播種し、３７℃で一晩インキュベートした。各細胞株について、タリモジーン・ラハーパレプベックを、１００ＭＯＩで開始して９個のウェル中で段階希釈した（１：４の段階希釈）。７２時間のインキュベーション後、各ウェルに残った細胞数を、ＡＴＰ−Ｌｉｔｅ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を使用して定量化した。
【０１３１】
タリモジーン・ラハーパレプベックは、試験した５種の細胞株のうちの４種に対して有効であった（表５）。Ｂ１６Ｆ１０メラノーマ細胞株は、タリモジーン・ラハーパレプベックに対する耐性を証明した。この耐性は、Ｍｉｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，３（２）：１６０−１６８（２００１）により以前に記載されたように、単純ヘルペスウイルス１型に対するエントリー受容体の欠如によって媒介される。Ｃｌｏｕｄｍａｎ  ＣＬ  Ｍ３（メラノーマ）、ＣＴ−２６及びＭＣ−３８（結腸直腸癌）細胞株は、約０．２のＭＯＩ  ＩＣ５０で同様の感受性を示した。図９は、ＣＴ−２６及びＭＣ−３８（結腸直腸癌）細胞株においてタリモジーン・ラハーパレプベックの濃度を増加させることによって達成される細胞増殖阻害の程度を示す。これらの結果は、ネズミ腫瘍細胞株（メラノーマ、結腸直腸癌及びＢ細胞性リンパ腫）をタリモジーン・ラハーパレプベックで処置することが腫瘍細胞増殖の強力な阻害をもたらすことを証明している。
【０１３２】
【表５】
2020510050.tif 000007
【０１３３】
実施例４：ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦは、マウスモデルにおいてＢ細胞性リンパ腫及び神経芽細胞腫の増殖を阻害する
Ａ２０腫瘍細胞を０日目において雌ＢＡＬＢ／ｃマウスの右及び左脇腹に皮下注射した（２×１０６個細胞）。腫瘍体積（ｍｍ３）を、電子ノギスを用いて週に２回（Ｑ２Ｗ）測定した。腫瘍が平均でおよそ１００ｍｍ３に達したら、マウスを、処置施行の開始時の平均腫瘍体積（両脇腹における）及び腫瘍体積のばらつきが処置群全体に均一であるように群に無作為化した（１群当たり１０匹のマウス）。次いで、マウスにＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ（３×１０４〜３×１０６ＰＦＵ／投与量）又はビヒクルの３回の腫瘍内注射を１０日目、１３日目及び１６日目に施した。臨床徴候、体重変化及び生存期間（腫瘍が８００ｍｍ３に達した場合、マウスを試験から除外した）を試験が終了するまで週に２〜３回測定した。
【０１３４】
Ａ２０腫瘍担持動物のＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦによる処置は、全ての３種の用量：３×１０４ＰＦＵ、３×１０５ＰＦＵ、３×１０６ＰＦＵにおいて、全ての直接注入された腫瘍の１００％の完全退縮をもたらした（図１０ａ）。結腸直腸腫瘍は、３×１０４ＰＦＵの用量で奏効を示さず、３×１０５ＰＦＵの用量で５０％の腫瘍増殖を示し、及び３×１０６ＰＦＵの用量で１００％の腫瘍増殖阻害を示した（図１０ｂ）。生存期間中央値は、ビヒクルと比べて、３×１０５ＰＦＵ（ｐ＝０．００５４）及び３×１０６ＰＦＵの用量（ｐ＝０．０００４）群で有意に延びた（それぞれ３８日間対２１日間  −  図１０ｃ）。体重の減少は、観察されず、試験した処置が安全且つ忍容性があることを示す（図１０ｄ及び１０ｅ）。表６は、各群における腫瘍のない対象の割合を示す。
【０１３５】
加えて、ｎｅｕｒｏ２ａ神経芽細胞腫腫瘍担持マウスをＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦで５×１０４、５×１０５又は５×１０６ＰＦＵ／投与量において処置した（１群当たりｎ＝１０）。ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦは、試験の１０日目、１３日目及び１６日目に１日１回の腫瘍内注射によって投与した（図１０ｆ）。注入された腫瘍を週に２回測定した。結果は、０日目が腫瘍摂取の日である日数での時間の関数として、ｍｍ３での個々の腫瘍体積として表される。生存期間中央値は、ビヒクルと比べて、５×１０４ＰＦＵ／投与量群（ｐ＝０．００５６）、５×１０５ＰＦＵ／投与量群（ｐ＜０．０００１）及び５×１０６ＰＦＵ／投与量群（ｐ＜０．０００１）で有意に延びた（図１０ｇ）。
【０１３６】
ｎｅｕｒｏ２ａ神経芽細胞腫腫瘍担持マウスにおける注入されなかった（「未処置」）腫瘍に及ぼすＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ処置の効果も評価した。ｎｅｕｒｏ２ａ腫瘍細胞を雌Ａ／Ｊマウスの左右の脇腹に０日目において皮下埋め込みした。腫瘍体積（ｍｍ３）を、電子ノギスを用いて週に２回（Ｑ２Ｗ）測定した。腫瘍が平均でおよそ１００ｍｍ３に達したら、マウスを、処置施行の開始時の平均腫瘍体積（両脇腹における）及び腫瘍体積のばらつきが処置群全体に均一であるように群に無作為化した（１群当たり１０匹のマウス）。次いで、マウスにＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ（５×１０６ＰＦＵ／投与量）又はビヒクルの３回の腫瘍内注射を１０日目、１３日目及び１６日目において右側（「処置」側）に投与した。腫瘍体積及び生存期間（腫瘍がいずれかの側で８００ｍｍ３に達した場合、マウスを試験から除外した）を試験が終了するまで週に２回測定した（図１０ｈ）。ｎｅｕｒｏ２ａ腫瘍担持動物のＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦによる処置は、１０個の直接注入された腫瘍のうちの８個で完全退縮をもたらした（図１０ｈ）。対側性の注入されていない（「未処置」）腫瘍は、腫瘍増殖における著しい遅延を示した（図１０ｈ）。生存期間中央値は、ビヒクルと比べて、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ処置群で有意に延びた（３２日間対１８日間、ｐ＜０．０００１、図１０ｉ）。
【０１３７】
これらの結果は、インビボマウスモデルにおける定着したＢ細胞性リンパ腫及び神経芽細胞種腫瘍のＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦによる処置が腫瘍増殖の強力な阻害をもたらすことを証明している。抗腫瘍活性は、直接注入された腫瘍（おそらく腫瘍溶解及び免疫応答を介して）及び同じ宿主における注入されていない対側性腫瘍（おそらく適応免疫応答を介して）で観察された。
【０１３８】
【表６】
2020510050.tif 000008
【０１３９】
実施例５：ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦとＣＴＬＡ−４又はＰＤ−Ｌ１阻害剤との組み合わせは、マウスモデルにおいてＢ細胞性リンパ腫の腫瘍増殖を阻害する
Ａ２０腫瘍細胞を０日目において雌ＢＡＬＢ／ｃマウスの右及び左脇腹に皮下注射した（２×１０６個細胞）。腫瘍体積（ｍｍ３）を、電子ノギスを用いて週に２回（Ｑ２Ｗ）測定した。腫瘍が平均でおよそ１００ｍｍ３に達したら、動物を、処置施行の開始時の平均腫瘍体積（両脇腹における）及び腫瘍体積のばらつきが処置群全体に均一であるように群に無作為化した（１群当たり１０匹のマウス）。次いで、動物にＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ（５×１０６ＰＦＵ／投与量）単独又は抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ若しくは抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂの腹腔内注射と組み合わせて３回の腫瘍内注射を施した。臨床徴候、体重変化及び生存期間（腫瘍が８００ｍｍ３に達した場合、マウスを試験から除外した）を試験が終了するまで週に２〜３回測定した。
【０１４０】
Ａ２０腫瘍担持動物のＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせによる処置は、全ての直接注入された腫瘍の完全退縮をもたらした（図１１ａ）。腹腔内抗ＣＴＬ４−４単独によって処置された（両脇腹）腫瘍は、約５０％の腫瘍阻害を示した。対側性腫瘍は、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ単独でいくらか一貫した効果を示した一方、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせは、全ての腫瘍を退縮させ、１０匹のうちの９匹のマウスで完全治癒をもたらした。生存期間中央値は、ビヒクルと比べて、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ群、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ群及びＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせ群において有意に延びた。加えて、生存期間中央値における有意な延長は、いずれかの単剤単独と比べて組み合わせ群において測定された（ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦに対してｐ＝０．０１２、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂに対してｐ＝０．００１）。生存期間中央値は、ビヒクルでは２５．５日間であり、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ群では３６．５日間であり、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ群では３２日間であった。組み合わせ群についての生存期間中央値は、４０日目を過ぎて未確定のままであり、この時点で１０匹のマウスのうちの９匹が腫瘍の徴候を示さなかった（図１１ｂ及び表７ａ）。
【０１４１】
【表７】
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【０１４２】
Ａ２０腫瘍担持動物のＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂとの組み合わせによる処置は、全ての直接注入された腫瘍の完全退縮をもたらした（図１１ｃ）。腹腔内抗ＣＴＬ４−４単独によって処置された（両脇腹）腫瘍は、腫瘍成長に対して効果を示さなかった。対側性腫瘍は、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ単独でいくらか一貫した効果を示した一方、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂとの組み合わせは、全ての腫瘍を退縮させ、１０匹のうちの１０匹のマウスで完全治癒をもたらした。生存期間中央値は、ビヒクルと比べて、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ群及び組み合わせ群において有意に延びた。加えて、生存期間中央値における有意な延長は、抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ単独と比べて組み合わせ群において測定された。組み合わせをＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと比較するとき、全生存期間における傾向の強まりも観察されたが、統計的優位性は、観察されなかった（ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦに対してｐ＝０．０６７、抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂに対してｐ＝０．００１３）。生存期間中央値は、ビヒクルでは２３日間であり、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ群では４８日間であり、抗ＰＤ―Ｌ１  ｍＡｂ群では２６日間であった。組み合わせ群についての生存期間中央値は、４０日目を過ぎて未確定のままであり、この時点で１０匹のマウスのうちの１０匹が腫瘍の徴候を示さなかった（図１１ｄ及び表７ｂ）。
【０１４３】
【表８】
2020510050.tif 000010
【０１４４】
これらの結果は、インビボマウスモデルにおける定着したＢ細胞性リンパ腫腫瘍のＰＤ−Ｌ１又はＣＴＬＡ−４阻害剤のいずれかと組み合わせたＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦによる処置が、いずれかの単剤単独と比べて腫瘍増殖のより良好な阻害をもたらすことを証明している。抗腫瘍活性は、直接注入された腫瘍（おそらく腫瘍溶解及び免疫応答を介して）及び同じ宿主における注入されていない対側性腫瘍（おそらく適応免疫応答を介して）で観察された。
【０１４５】
実施例６：ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦは、単独又はＣＴＬＡ−４若しくはＰＤ−Ｌ１阻害剤との組み合わせのいずれかでマウスモデルにおける結腸直腸腫瘍の増殖を阻害する
ＣＴ−２６腫瘍細胞を０日目において雌ＢＡＬＢ／ｃマウスの右及び左脇腹に皮下注射した（２×１０６個細胞）。腫瘍体積（ｍｍ３）を、電子ノギスを用いて週に２回（Ｑ２Ｗ）測定した。腫瘍が平均でおよそ１００ｍｍ３に達したら、動物を、処置施行の開始時の平均腫瘍体積（両脇腹における）及び腫瘍体積のばらつきが処置群全体に均一であるように４つの群に無作為化した（１群当たり１０匹のマウス）。次いで、動物にａ）ＰＢＳ＋ＩｇＧ対照、ｂ）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ＋ＩｇＧ対照、ｃ）ＰＢＳ＋抗ＣＴＴＬＡ−４  ｍＡｂ若しくはＰＢＳ＋抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ、又はｄ）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ＋抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ若しくはＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ＋抗ＰＤ−Ｌ１ｍＡｂを投与した。臨床徴候、体重変化及び生存期間（腫瘍が８００ｍｍ３に達した場合、マウスを試験から除外した）を試験が終了するまで週に２〜３回測定した。
【０１４６】
ＣＴ−２６腫瘍担持動物のＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ又はこれらの組み合わせによる処置は、２０日目までに、全ての直接注入された腫瘍の約７５％の腫瘍増殖阻害をもたらした（データを図示せず）。対側性腫瘍は、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ単独に対して奏効を示さなかった（約２５％のＴＧＩ）一方、約７５％の腫瘍増殖阻害は、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ及び組み合わせ群で観察された。生存期間中央値は、ビヒクルと比べて、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ及び組み合わせ群において有意に延びた（図１２ｂ）。生存期間中央値は、ビヒクルでは２０日間であり、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ群では２２日間であり、抗ＣＴＬＡ−４群では４１日間であった。組み合わせ群についての生存期間中央値は、５０日間よりも長く、実験が中止された際に未確定のままであった。組み合わせ群における生存期間中央値は、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ単独群（ｐ＝０．０００１）又は抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ単独群（ｐ＝０．００３１）のいずれかよりも有意に長かった（図１２ｂ及び表８ａ）。
【０１４７】
【表９】
2020510050.tif 000011
【０１４８】
ＣＴ−２６腫瘍担持動物のＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂとの組み合わせによる処置は、１８日目までに、全ての直接注入された腫瘍の約７５％の腫瘍増殖阻害をもたらした（データを図示せず）。抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂの腹腔内注射は、腫瘍の増殖（いずれかの脇腹）にほとんど効果がなかった。対側性腫瘍は、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ又は抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ単独に対して奏効を示さなかった一方、約７５％の腫瘍増殖阻害は、組み合わせ群で観察された（図１２ｃ）。生存期間中央値は、いずれかの薬剤単独と比べて、組み合わせ群において有意に延びた（ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦに対してｐ＝０．０１２、抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂに対してｐ＝０．００７）。生存期間中央値は、ビヒクル及び抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂでは２１日間であり、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ群では２３日間であり、組み合わせ群では３４日間であった（図１２ｄ及び表８ｂ）。
【０１４９】
【表１０】
2020510050.tif 000012
【０１５０】
これらの結果は、インビボマウスモデルにおける定着した結腸直腸腫瘍の、１）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、２）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４阻害剤との組み合わせ、又は３）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１阻害剤との組み合わせによる処置が腫瘍増殖の強力な阻害をもたらすことを証明している。抗腫瘍活性は、１）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、２）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４阻害剤との組み合わせ、及び３）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１阻害剤との組み合わせで直接注入された腫瘍（おそらく腫瘍溶解及び免疫応答を介して）で観察された。抗腫瘍活性は、１）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４阻害剤との組み合わせ、及び２）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１阻害剤との組み合わせで処置された同じ宿主における注入されていない対側性腫瘍（おそらく適応免疫応答を介して）で観察された。
【０１５１】
ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４阻害剤との組み合わせの抗腫瘍活性を更に理解するために、１）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、２）抗ＣＴＬＡ−４阻害剤、及び３）ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４阻害剤との組み合わせの、腫瘍抗原を放出し、抗腫瘍特異的Ｔ細胞応答を刺激する能力を評価した。ニトロセルロースフィルターベースを備えた９６ウェルのＥＬＩＳｐｏｔプレート（Ｍｉｌｌｉｔｉｔｅｒ  ＨＡ；Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｔｅｍｅｃｕｌａ，ＣＡ）を精製抗ＩＦＮ−γ（２μｇ／ｍｌ）抗体でコーティングした。ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ又は組み合わせで処置されたＣＴ−２６腫瘍担持マウスの１０日目の脾臓細胞（８×１０５）を対照ペプチド（ＧＦＰ）又はＡＨ１ペプチド（ＳＰＳＹＶＹＨＱＦ）と共に１μＭの最終濃度において３７℃で２０時間インキュベートした。ＡＨ１ペプチドは、ＭＨＣクラスＩＬｄ分子（２５）によって提示された内在性ネズミ白血病ウイルスのエンベロープタンパク質（ｇｐ７０）に由来する免疫優勢Ａｇである。スポットを、ＣＴＬＳ６  Ｆｌｕｏｒｏｓｐｏｔアナライザー（ＣＴＬ，Ｓｈａｋｅｒ  Ｈｅｉｇｈｔ，ＯＨ）を用いて計数した。全身性（脾臓の）抗ＡＨ１  ＣＤ８＋Ｔ細胞の、ＥＬＩＳｐｏｔによるか又はＦＡＣＳを用いたデキストラマー染色による定量化は、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ、抗ＣＴＬＡ−４阻害剤又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４阻害剤との組み合わせで処置されたマウスにおけるＡＨ１反応性Ｔ細胞の有意な増加を証明した（図１２ｅ、１２ｆ）。局所的（腫瘍）抗ＡＨ１  ＣＤ８＋Ｔ細胞の定量化は、組み合わせ群のみで有意な増加を示した。Ｔｒｅｇの有意な減少もＣＴ−２６モデルで観察された。この効果は、ＣＴＬＡ−４阻害剤との組み合わせでより大きかった（図１２ｇ）。この実験は、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４阻害剤との組み合わせがエフェクター細胞の存在の増加及び制御性Ｔ細胞の存在の減少をもたらし、これが、次に、いずれかの化合物単独を超える組み合わせの有効性の増加をもたらすことを証明している。
【０１５２】
実施例７：ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦは、単独で又はＣＴＬＡ−４阻害剤と組み合わせてマウスモデルにおけるメラノーマ腫瘍の増殖を阻害する
Ｂ１６Ｆ１０細胞（５×１０４−ＨＳＶ−１エントリー受容体の欠如のためにＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ溶菌に対して耐性）を０日目に静脈内注射した。２日目に、マウスネクチン１でトランスフェクトしたＢ１６Ｆ  １０メラノーマ細胞（ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ溶菌に対して感受性）を雌ＢＬ６マウスの右脇腹に皮下注射した。腫瘍体積（ｍｍ３）を、電子ノギスを用いて週に２回（Ｑ２Ｗ）測定した。皮下腫瘍が平均でおよそ１００ｍｍ３に達したら、動物を、処置施行の開始時の平均腫瘍体積及び腫瘍体積のばらつきが処置群全体に均一であるように４つの群に無作為化した（１群当たり１０匹のマウス）。次いで、動物にＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ（５×１０６ＰＦＵ／投与量）の３回の腫瘍内注射、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂの４回の腹腔内注射、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ（５×１０６ＰＦＵ／投与量）の３回の腫瘍内注射と抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂの４回の腹腔内注射との組み合わせ又はビヒクル単独を施した。臨床徴候、体重変化及び生存期間（腫瘍が８００ｍｍ３に達した場合、マウスを試験から除外した）を試験が終了するまで週に２〜３回測定した。
【０１５３】
Ｂ１６Ｆ１０ネクチン１腫瘍担持マウスのＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせによる処置は、それぞれ約８５％及び９９％の腫瘍（皮下）増殖阻害をもたらした。抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ単独では阻害が観察されなかった（図１３ａ）。肺転移負荷の評価は、肺転移の阻害において、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせがいずれかの単独の処置よりも有意に効果的であることを示した（ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦに対してｐ＝０．０００８、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂに対してｐ＝０．０００７）（図１３ｂ）。生存期間中央値は、ビヒクルと比べて組み合わせ群で有意に延びた（ｐ＜０．０００１）。生存期間中央値は、ビヒクルでは３０日間であり、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ＋抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ群では４６日間であった（図１３ｃ及び表９）。
【０１５４】
【表１１】
2020510050.tif 000013
【０１５５】
これらの結果は、インビボマウスモデルにおける定着したメラノーマ腫瘍の、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせによる処置が腫瘍増殖の強力な阻害をもたらすことを証明している。これらの結果は、肺転移を阻害する組み合わせの能力からも明らかであるように、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせが、いずれかの処置単独と比べて、有意によりロバストな全身性抗腫瘍効果を証明することも示す。抗腫瘍活性は、直接注入された腫瘍（おそらく腫瘍溶解及び免疫応答を介して）及び同じ宿主における注入されていない対側性腫瘍（おそらく適応免疫応答を介して）で観察された。
【０１５６】
ビヒクル、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ及び抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ群における肺腫瘍は、腫瘍周辺部及び穏やかな腫瘍内マクロファージにおいて散乱したＴ細胞及びＢ細胞を稀に示すことも観察された。興味深いことに、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂとの組み合わせ群における腫瘍は、腫瘍周辺部における優勢なＴ細胞並びに腫瘍中へのＴ細胞浸潤を可変数で示した。マクロファージは、腫瘍中及び腫瘍周辺部での密な浸潤細胞の両方で優勢であった。Ｂ細胞は、専ら腫瘍周辺部に留まった（図１３ｄ及びデータを図示せず）。
【０１５７】
これらの肺腫瘍の免疫浸潤結果は、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＣＴＬＡ−４阻害剤との組み合わせが、変換された不十分に浸潤したＢ１６Ｆ１０転移（すなわち「コールド」腫瘍）を、十分に浸潤したＢ１６Ｆ１０転移（すなわち「ホット」腫瘍）に変換し得ることを示す。
【０１５８】
実施例８：ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦは、マウスモデルにおいてトリプルネガティブ乳癌腫瘍の増殖を阻害する
４Ｔ１腫瘍細胞を０日目において雌ＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に皮下注射した（２×１０６個細胞）。腫瘍体積（ｍｍ３）を、電子ノギスを用いて週に２回（Ｑ２Ｗ）測定した。腫瘍が平均でおよそ１００ｍｍ３に達したら、動物を、処置施行の開始時の平均腫瘍体積及び腫瘍体積のばらつきが処置群全体に均一であるように４つの群に無作為化した（１群当たり１０匹のマウス）。次いで、動物にＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ（５×１０４、５×１０５又は５×１０６ＰＦＵ／投与量）又はビヒクルの３回の腫瘍内注射を施した。臨床徴候、体重変化及び生存期間（腫瘍が８００ｍｍ３に達した場合、マウスを試験から除外した）を試験が終了するまで週に２〜３回測定した。
【０１５９】
４Ｔ１腫瘍担持動物のＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦによる処置は、５×１０６ＰＦＵ／投与量において約７５％の腫瘍増殖阻害をもたらした（ｐ＜０．０００１）。ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦの５×１０４及び５×１０５用量は、いかなる測定可能な腫瘍増殖阻害ももたらさなかった（図１４）。
【０１６０】
これらの結果は、定着したトリプルネガティブ乳癌腫瘍のＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦによる処置が腫瘍増殖の強力な阻害をもたらすことを証明している。抗腫瘍活性は、直接注入された腫瘍のみで測定された。
【０１６１】
実施例９：ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦは、単独で又はＧＩＴＲアゴニストと組み合わせてマウスモデルにおけるＢ細胞性リンパ腫腫瘍の増殖を阻害する
Ａ２０腫瘍細胞を０日目において雌ＢＡＬＢ／ｃマウスの右及び左脇腹に皮下注射した（２×１０６個細胞）。腫瘍体積（ｍｍ３）を、電子ノギスを用いて週に２回（Ｑ２Ｗ）測定した。腫瘍が平均でおよそ１００ｍｍ３に達したら、動物を、処置施行の開始時の平均腫瘍体積（両脇腹における）及び腫瘍体積のばらつきが処置群全体に均一であるように４つの群に無作為化した（１群当たり１０匹のマウス）。次いで、動物にＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ又はＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂとの組み合わせを投与した。臨床徴候、体重変化及び生存期間（腫瘍が８００ｍｍ３に達した場合、マウスを試験から除外した）を試験が終了するまで週に２〜３回測定した。
【０１６２】
抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂで腹腔内処置された腫瘍は、腫瘍の３０％を治癒した（注入された腫瘍及び他側性腫瘍の両方において）。ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦは、注入された腫瘍１０個中６個で（６０％）を治癒した一方、対側性腫瘍は、治癒することなくわずかな応答を示した。ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂとの組み合わせは、全ての腫瘍（注入された腫瘍及び対側性腫瘍の両方において）を退縮させ、１０匹中７匹のマウスで完全治癒をもたらした。図１５ａを参照されたい。生存期間中央値は、ビヒクルと比べて、抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂ群、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ群及びＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂとの組み合わせ群で有意に延びた。加えて、生存期間中央値における有意な延長は、いずれかの単剤単独と比べて、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂとの組み合わせ群で測定された（ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦに対してｐ＜０．０００１、抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂに対してｐ＝。０．０３９）。生存期間中央値は、ビヒクルでは２４日間であり、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ群では２６日間であり、抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂ群では４３日間であった。組み合わせ群についての生存期間中央値は、４９日目を過ぎて未確定のままであり、この時点で１０匹のマウスのうちの７匹が腫瘍の徴候を示さなかった。図１５ｂ及び表１０を参照されたい。
【０１６３】
【表１２】
2020510050.tif 000014
【０１６４】
これらの結果は、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ及びＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ群と抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂとの組み合わせによるＢ細胞性リンパ腫の処置が腫瘍増殖の強力な阻害をもたらすことを証明している。
【０１６５】
実施例１０：マウス結腸（結腸直腸）腺癌（ＭＣ−３８）腫瘍モデルにおけるＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦ群と抗ＰＤ−１阻害との組み合わせを評価する試験
この試験は、マウスＭＣ−３８腫瘍モデルにおいて、ＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−１阻害又はＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−１阻害との組み合わせの忍容性及び抗腫瘍活性を評価するように設計した。
【０１６６】
Ｃ５７ＢＬ／６マウスに対して同系ＭＣ−３８腫瘍細胞を右及び左脇腹の両方に接種した。腫瘍が平均して５ｍｍの直径になった（６０ｍｍ３の腫瘍体積）接種後１０日目に動物を６つの群に割り当てた（１群当たりｎ＝１０）。ＯｎｃｏＶＥＸｍｕＧＭ−ＣＳＦ（５×１０６ＰＦＵ／投与量）又は製剤緩衝液対照を右側腫瘍に１日１回、３日毎に合計３回投与で腫瘍内投与した。左側腫瘍は、注射を受けなかった。
【０１６７】
抗マウスＰＤ−１（クローンＲＭＰ１−１４、ＢｉｏＸＣｅｌｌ）又はアイソタイプ対照抗体（ラットＩｇＧ２ａ、クローン２Ａ３、ＢｉｏＸＣｅｌｌ）を１ｍｇ／投与量又は３００μｇ／投与量のいずれかで週に２回腹腔内投与した（試験１０日目に開始して、試験３０日目に終了した（７回投与量））。注入した（右側）腫瘍及び注入されなかった（左側）腫瘍の両方の腫瘍体積、体重及び総括的臨床所見を週に２〜３回採取した。総腫瘍体積（右側＋左側）が体重の＞１０％のＩＡＣＵＣ強制終了に達した場合又は動物が苦痛の徴候を示した場合、動物を安楽死させた。試験１４日目及び２０日目（投与開始後、それぞれ４日目及び１０日目）にイムノフェノタイピング分析のために末梢血を採取した。赤血球溶解後、白血球を次のマーカー：ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ４９ｂ（ＮＫマーカー）、ＦｏｘＰ３、ＧＩＴＲ、ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１について染色し、フローサイトメトリーによって分析した。
【０１６８】
全ての動物は、実験期間中に生存し、体重（図１６ａ）又は生存期間から明らかなように、処置に関連する有害な健康への影響の証拠を示さず、毎日の健康モニタリング検査で特定された特記される有害な臨床徴候がなかった。対照群と比べての処置群におけるわずかに低い体重は、以下に論じられるように、処置動物と比べて対照動物におけるより侵襲性の高い腫瘍増殖に起因する。
【０１６９】
腫瘍増殖阻害は、抗ｍＰＤ−１抗体（１投与量当たり３００μｇ及び１ｍｇの試験された用量の両方において）又はＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦのいずれかによる単独療法処置に応答して見られた（図１６ｂ）。表１１は、右側（注入された側）又は左側（注入されていない側）脇腹のいずれかでの、実験の終了時に腫瘍がない（退縮した）動物の数をまとめている。いずれかの薬剤による単剤活性は、注入された腫瘍において１０〜２０％の完全退縮に限定された（及び注入されていない腫瘍の完全退縮なし）のに対し、組み合わせは、注入された腫瘍での８０〜９０％の退縮（及び注入されていない腫瘍の１０〜２０％の完全退縮）をもたらした。これらのデータは、ＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−１との組み合わせ療法が、マウスＭＣ−３８腫瘍モデルにおいて実質的に改善された腫瘍クリアランスをもたらしたことを示す。
【０１７０】
【表１３】
2020510050.tif 000015
【０１７１】
これらの結果は、ＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦが単独で又はＰＤ−１阻害剤との組み合わせのいずれかで結腸直腸ＭＣ−３８腫瘍の増殖を阻害することを証明している。
【０１７２】
実施例１１：マウス結腸（結腸直腸）腺癌（ＭＣ−３８）腫瘍モデルにおけるＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦ群と抗ＰＤ−Ｌ１阻害との組み合わせを評価する試験
この試験は、マウスＭＣ−３８腫瘍モデルにおいて、ＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−Ｌ１阻害又はＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１阻害との組み合わせの忍容性及び抗腫瘍活性を評価するように設計した。
【０１７３】
ＭＣ−３８腫瘍細胞を０日目において雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスの右及び左脇腹に皮下注射した。腫瘍体積（ｍｍ３）を、電子ノギスを用いて週に２回（Ｑ２Ｗ）測定した。腫瘍が平均でおよそ１００ｍｍ３に達したら、動物を、処置施行の開始時の平均腫瘍体積及び腫瘍体積のばらつきが処置群全体に均一であるように４つの群に無作為化した（１群当たり１０匹のマウス）。ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ（５×１０６ＰＦＵ／投与量）又は製剤緩衝液対照を単独で又は抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂ（クローンＭＩＨ５、マウスＩｇＧ１）又は対照ＩｇＧ１と組み合わせて（ｍＡｂは、合計で４回投与であった）、３日毎に合計３回の注射を腫瘍内投与した。注入されていない腫瘍（対側性；動物の左側での）は、注射を受けなかった。臨床徴候、体重変化及び生存期間（腫瘍が８００ｍｍ３に達した場合、マウスを試験から除外した）を試験が終了するまで週に２〜３回測定した。
【０１７４】
全ての動物は、実験期間中に生存し、体重から明らかであるように、処置に関連する有害な健康への影響の証拠を示さず、毎日の健康モニタリング検査で特定された特記される有害な臨床徴候がなかった。
【０１７５】
腫瘍増殖阻害は、注入された腫瘍及び対側性腫瘍の両方でＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ又は抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂのいずれかによる単独療法処置に応答して見られた（図１７）一方、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂとの組み合わせは、全ての注入された腫瘍及び１０個の注入された腫瘍のうちの７個を退縮させた。
【０１７６】
実施例１２：マウスメラノーマ（Ｂ１６Ｆ１０）腫瘍モデルにおけるＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦ群と抗ＰＤ−１阻害との組み合わせを評価する試験
この試験は、マウスメラノーマ（Ｂ１６Ｆ１０）腫瘍モデルにおいて、ＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦ、抗ＰＤ−１阻害又はＯｎｃｏＶｅｘｍｕＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−１阻害との組み合わせの忍容性及び抗腫瘍活性を評価するように設計した。
【０１７７】
ｍＮｅｃｔｉｎを発現するように操作されたＢ１６Ｆ１０腫瘍細胞を０日目において雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスの右脇腹に皮下注射した。腫瘍体積（ｍｍ３）を、電子ノギスを用いて週に２回（Ｑ２Ｗ）測定した。腫瘍が平均でおよそ１００ｍｍ３に達したら、動物を、処置施行の開始時の平均腫瘍体積及び腫瘍体積のばらつきが処置群全体に均一であるように４つの群に無作為化した（１群当たり１０匹のマウス）。ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ（５×１０６ＰＦＵ／投与量）又は製剤緩衝液対照を単独で又は抗ＰＤ−１  ｍＡｂ（クローン２９Ｆ１Ａ１２、マウスＩｇＧ１）又は対照ＩｇＧ１と組み合わせて（ｍＡｂは、合計で４回投与であった）、３日毎に３回、腫瘍内投与した。臨床徴候、体重変化及び生存期間（腫瘍が８００ｍｍ３に達した場合、マウスを試験から除外した）を試験が終了するまで週に２〜３回測定した。
【０１７８】
全ての動物は、実験期間中に生存し、体重から明らかであるように、処置に関連する有害な健康への影響の証拠を示さず、毎日の健康モニタリング検査で特定された特記される有害な臨床徴候がなかった。
【０１７９】
腫瘍増殖阻害は、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦ単独療法による単独療法処置に応答して見られた（１０匹のマウスのうちの３匹が、腫瘍退縮を示した）一方、抗ＰＤ−１  ｍＡｂ単独療法は、腫瘍増殖に対していかなる阻害効果も有さなかった（図１８）。ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−１  ｍＡｂとの組み合わせは、１０個の注入された腫瘍のうちの５個を退縮させ（図１８）、ＯｎｃｏＶｅｘｍＧＭ−ＣＳＦと抗ＰＤ−１  ｍＡｂとの組み合わせが単独療法と比べて優れた抗腫瘍活性を有することを証明した。
【０１８０】
実施例１３：直接注入しやすい進行性非中枢神経系腫瘍を有する小児対象においてタリモジーン・ラハーパレプベックの安全性及び有効性を評価するための第１相、多施設、オープンラベル、用量デエスカレーション試験
この実施例は、直接注入しやすい進行性非中枢神経系腫瘍を有する小児対象においてタリモジーン・ラハーパレプベックの安全性及び有効性を評価するための第１相、多施設、オープンラベル、用量デエスカレーション試験の記述である。米国国立公衆衛生研究所ウェブサイト（ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ）、試験識別子：ＮＣＴ  ０２７５６８４５を参照されたい（これは、参照により本明細書に組み込まれる）。
【０１８１】
本試験の主な目的は、直接注入しやすい進行性非ＣＮＳ腫瘍を有する小児対象において、用量規定毒性（ＤＬＴ）の発生によって評価される、タリモジーン・ラハーパレプベックの安全性及び有効性を判定することである。
【０１８２】
タリモジーン・ラハーパレプベックは、直接注入しやすい進行性非ＣＮＳ腫瘍を有する小児対象のおよそ１８〜３６人に投与される。小児対象は、年齢及びベースライン単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）血清状態によって層別化されたコホートに全体的に登録される（３〜６人の対象／コホート）。ＤＬＴは、そのコホート中の３〜６人のＤＬＴ評価可能な対象に基づいて評価されることになる。
【０１８３】
腫瘍評価項目は、直接注入しやすい進行性非中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍を有する小児対象において、用量規定毒性（ＤＬＴ）の発生によって評価される、タリモジーン・ラハーパレプベックの安全性及び有効性を判定することである。
【０１８４】
副次評価項目は、（１）全奏効率（ＯＲＲ）、奏効期間（ＤＯＲ）、初回奏効までの期間（ＴＴＲ）、無増悪期間（ＴＴＰ）、修正された固形腫瘍における効果判定基準（Ｉｍｍｕｎｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  Ｓｉｍｕｌａｔｉｎｇ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ（ｉｒＲＣ−ＲＥＣＩＳＴ）を使用する無増悪生存期間（ＰＦＳ）及び全生存期間（ＯＳ）によって評価される、タリモジーン・ラハーパレプベックを評価することと、（２）アーカイブの腫瘍組織中の顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）受容体／サブユニットと、臨床的成果（ＯＲＲ、ＤＯＲ、ＴＴＲ、ＴＴＰ、ＰＦＳ及びＯＳなどの安全性エンドポイント及び有効性エンドポイント）との間の関連を評価することとである。
【０１８５】
選択基準
・対象がインフォームドコンセント／アセントを提出するには法的にあまりにも若すぎる場合、対象の法的に認められる代理人がインフォームドコンセント／アセントを提出しており、対象には、いかなる試験に特定な活動／処置も開始される前に、条例及び／又はガイドラインに基づいて書かれたアセントが提供されていること。
・インフォームドコンセント／アセントの時点で男性又は女性の対象が０歳〜１８歳未満であること。
・登録前２８日以内に局所的ＨＳＶ−１血清状態を提出する意思があるべきであること。
・標準的治療後に再発したか又は利用できる標準的治療がない、組織学的若しくは細胞学的に確認された非ＣＮＳ固形腫瘍であること。
・測定可能な（ｉｒＲＣ−ＲＥＣＩＳＴにより定義された）又は修正ｉｒＲＣ−ＲＥＣＩＳＴによって定義されるような測定不能な病変が存在すること。
・以下の１つ以上として定義される病変内注射の候補である対象：
−  最長径≧１０ｍｍの少なくとも１つの注射可能な病変
−  全体として≧１０ｍｍの最長径を有する、複数の注射可能な病変
注記：内蔵病変は、注射対象外である。更に、注射が容易である軟組織成分がない限り、骨病変は、注射対象外である。
・パフォーマンスステータス：
−  １２歳〜１８歳未満について、カルノフスキーパフォーマンスステータスが≧７０％であること
−  ０歳〜１２歳未満の子供について、ランスキープレースケールが≧７０％であること
・平均余命が登録の日時から＞４ヶ月であること
・以下のように定義される十分な臓器機能があること：
−  血液機能（造血成長因子を必要とすることなく）
好中球絶対数（ＡＮＣ）が≧１．０×１０９／Ｌであること
血小板数が≧７５×１０９／Ｌであること
ヘモグロビンが≧８ｇ／ｄＬのヘモグロビン（輸血支援なしに）であること
−  腎機能
血清クレアチニンが≦１．５×年齢の正常値上限（ＵＬＮ）であるか、又は＞１．５×年齢のＵＬＮのクレアチニンレベルを有する対象について、クレアチニンクリアランスが≧６０ｍＬ／分／１．７３ｍ２であること（クレアチンクリアランスは、ベースライン血清クレアチニンが≦１．５×年齢のＵＬＮである場合、判定される必要がないことに留意されたい。クレアチニンクリアランスは、施設内規準に従って判定されるべきである）。
−  肝機能
血清ビリルビンが≦１．５×年齢のＵＬＮであるか、又は直接型ビリルビンが、＞１．５×年齢のＵＬＮの総ビリルビンレベルを有する対象について≦年齢のＵＬＮであること
アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）が≦２．５×年齢のＵＬＮであるか、又は肝臓転移を有する対象について≦５×年齢のＵＬＮであること
アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）が≦２．５×年齢のＵＬＮであるか、又は肝臓転移を有する対象について≦５×年齢のＵＬＮであること
−  凝固機能
国際標準比（ＩＮＲ）又はプロトロンビン時間（ＰＴ）が≦１．５×年齢のＵＬＮであること
部分トロンボプラスチン時間（ＰＴＴ）又は活性化部分トロンボプラスチン時間（ａＰＴＴ）が≦１．５×年齢のＵＬＮであること
・投与前７２時間以内に尿又は血清妊娠検査が陰性でなければならない妊娠が可能な女性対象。尿検査が陽性であるか又は陰性と確認できない場合、血清妊娠検査が必要となる。
【０１８６】
除外基準
・白血病、非ホジキンリンパ腫、ホジキン病又は他の血液悪性腫瘍と診断されていること
・登録前６週間以内又は頭蓋脊髄軸若しくは骨盤の少なくとも６０％への事前放射を受けている場合には登録前３ヶ月以内、局所緩和放射線療法を受けている場合には登録の２週間前以内に骨髄への放射線療法を受けていること
・ＣＮＳ腫瘍又は臨床的に活動性の脳転移があること
・原発性眼内メラノーマ又は粘膜メラノーマがあること
・巨大先天性色素細胞性母斑、異形成母斑症候群又は色素性乾皮症の病歴又は証拠があること
・以下の例外を除いて、過去５年以内に他の悪性腫瘍の病歴があること：
−  治療目的で処置された悪性腫瘍であり、既知の活動性疾患を有さず、登録前＞５年間化学療法を受けておらず、治療医が再発のリスクが低いと感じている悪性腫瘍
・全身治療（すなわち疾患修飾剤、コルチコステロイド又は免疫抑制薬を使用しての）を必要とする活動性自己免疫疾患の病歴又は証拠があること。補充療法（例えば、チロキシン、インスリン又は副腎若しくは下垂体機能不全のための生理学的コルチコステロイド補充療法など）は、全身治療の形態とみなされない。
・以下のような臨床的に意味がある免疫抑制があること：
−  重度複合免疫不全症などの原発性免疫不全症
−  同時日和見感染
−  経口ステロイド投与を含む全身免疫抑制療法を受けていること（登録の＞２週間前）（維持的な生理学的補充療法を除外する）。吸入のためのステロイドの不連続使用又は局所ステロイド注射を必要とする対象は、本試験から除外されない。
・活動性のヘルペス性皮膚病変があること、又は以前にヘルペス感染症の合併症（例えば、ヘルペス性角膜炎若しくはヘルペス性脳炎）があること
・タリモジーン・ラハーパレプベック又は任意の他の腫瘍溶解性ウイルスによる処置を以前に受けていること
・腫瘍ワクチンによる処置を以前に受けていること
・不連続的な局所使用以外の、抗ヘルペス薬（例えば、アシクロビル）による不連続的又は慢性的処置の必要性があること
・登録前２８日以内に化学療法、放射線療法若しくは生物学的がん療法を以前に受けているか、又は登録前２８日を超えて施されたがん療法に起因する有害事象から有害事象共通用語規準（ＣＴＣＡＥ）のグレード１以上まで回復していないこと
・別の治験用医療機器若しくは薬物における処置を現在受けているか、又は別の治験用医療機器若しくは薬物での処置終了から２８日未満であること。本試験に参加しながら他の治験処置を受けることは除外される。
・登録前≦２８日に大手術を受けていること
・本試験中、局所緩和放射線治療を除いて他のがん療法を必要とすることが予想されること
・急性若しくは慢性の活動性Ｂ型肝炎ウイルス若しくはＣ型肝炎ウイルス感染症を有するか、又は試験処置の開始から１２週間以内において、Ｂ型肝炎ウイルスの処置で使用されるもの（例えば、ラミブジン、アデホビル、テノホビル、テルビブジン及びエンテカビル）、リバビリン若しくはインターフェロンアルファなどのヌクレオチド類似体での処置を受けていること
・ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症が既知であるか又はそれが疑われること
・登録前２８日以内に生ワクチンを受けていること
・静脈カテーテルの開通性を維持するために必要な低用量ヘパリンを除く、タリモジーン・ラハーパレプベックの注入前７日以内に許可された抗血小板薬又は抗凝固薬がないこと
・試験処置中及びタリモジーン・ラハーパレプベックの最後の投与後３か月間を通して、女性対象が妊娠若しくは授乳しているか又は妊娠することを計画していること
・試験処置中及びタリモジーン・ラハーパレプベックの最後の投与後３か月間を通して、有効な避妊の承諾可能な方法の使用を望んでいない妊娠可能な女性対象であること。注記：有効な避妊の承諾可能な方法は、インフォームドコンセント／アセントフォームで規定されている。条例及び規制で義務付けられている場合、追加の国で規定された避妊要件は、プロトコルの付録セクションの最後にある国で規定されたプロトコル捕足で概説されている。
・処置中及びタリモジーン・ラハーパレプベックによる処置後３０日以内の性的接触時、ウイルス伝播を回避するための男性用又は女性用ラテックスコンドームの使用を望まない性的に活発な対象及びそのパートナー
・投薬中、投与される製剤又は構成成分のいずれかに感受性であることが知られている対象
・全てのプロトコルで要求される試験時の来院若しくは処置を完了することができず、且つ／又は全ての要求される試験手順を、対象及び治験医師が知っている限りで遵守することができない可能性が高い対象
・相談にあずかる場合、治験医師又はＡｍｇｅｎの医師の意見では、対象の安全性に危険を及ぼすか、又は試験評価、処置若しくは完了を妨害すると思われる任意の精神障害、薬物乱用又は任意の他の臨床的に意味のある障害、状態若しくは疾患（上記に概説されたものを除く）の病歴又は証拠があること
・タリモジーン・ラハーパレプベック処置中及びタリモジーン・ラハーパレプベックの最後の投与後２８日間を通して、対象の血液又は体液を、ＨＩＶ−１誘発性合併症のリスクがより高い個体（免疫抑制個体、ＨＩＶ陽性個体、妊娠女性又は１歳以下の乳児）への暴露を最小限に抑えることを望まない対象
【０１８７】
選択基準及び除外基準の定義により、タリモジーン・ラハーパレプベックは、注射可能な皮膚、皮下、リンパ節及び他の非内蔵腫瘍中のみに病変内注射によって投与されるであろう。したがって、本試験のために予想される適格な腫瘍型は、以下の通りである。
・骨の肉腫：ユーイング肉腫及び骨肉腫
・軟部肉腫：横紋筋肉腫及び非横紋筋肉腫軟部肉腫
・神経芽細胞腫
・メラノーマ
【０１８８】
タリモジーン・ラハーパレプベックの第１の用量は、１日目に投与される１０６ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍＬである。１０８ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍＬ（又は用量デエスカレーションコホートについて１０６ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍＬ）の第２の注射は、初回注射後２１（＋３）日目に投与される（すなわち２２日目以降であるが、２１日目の時点から３日を過ぎて遅延されるべきではない）。１０８ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍＬ（又は用量デエスカレーションコホートについて１０６ＰＦＵ／ｍＬの最大４．０ｍＬ）である全ての後続の注射は、１４（±３）日毎に投与されることになる。処置サイクル間隔は、毒性が原因で延ばされ得る。いかなる用量でも、タリモジーン・ラハーパレプベックの投与される最大量は、任意の個々の病変に対してまたいかなる処置においても４．０ｍＬである。腫瘍中に注入されるタリモジーン・ラハーパレプベックの推奨量は、腫瘍のサイズに応じ、表１２の注入量ガイドラインに従って決定されるであろう。下記の優先順位モデル及び腫瘍サイズに基づく注入量ガイドラインを使用して、各病変は、次の病変に移動する前に各来院時の腫瘍特性に起因して注入することが可能な最大量を受け取るべきであることが推奨される。
【０１８９】
【表１４】
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【０１９０】
各処置日に、注射の優先順位は、以下の通り推奨される。
１．前回の注射以降に出現した任意の新たな注入可能な腫瘍
２．腫瘍サイズによって最大の腫瘍から開始する
３．現在では注入するのに十分に大きくなった、腫瘍評価時に注入するには小さすぎた以前に見られた任意の腫瘍
【０１９１】
対象が完全奏効（ＣＲ）を達成し、注入可能な腫瘍が存在しなくなり、修正ｉｒＲＣ−ＲＥＣＩＳＴに従って病態進行（ＰＤ）を確認し、試験処置の忍容性が悪化し、タリモジーン・ラハーパレプベックの第１の投与の日時から２４ヶ月が経ち、いずれか早い方において代替抗がん療法又は試験の終了が必要となるまで、対象にタリモジーン・ラハーパレプベックが投与される。作用機序に起因して、対象は、タリモジーン・ラハーパレプベックの最大の臨床的有用性の前に既存の腫瘍の増殖又は新たな腫瘍の出現を経験する場合がある。したがって、修正ｉｒＲＣ−ＲＥＣＩＳＴを奏効評価に使用することになる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０ａ】
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【図１０ｂ】
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【図１０ｃ】
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【図１０ｄ】
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【図１０ｅ】
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【図１０ｆ】
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【図１０ｇ】
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【図１０ｈ】
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【図１０ｉ】
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【図１１ａ】
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【図１１ｂ】
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【図１１ｃ】
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【図１１ｄ】
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【図１２ａ】
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【図１２ｂ】
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【図１２ｃ】
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【図１２ｄ】
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【図１２ｅ】
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【図１２ｆ】
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【図１２ｇ】
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【図１３ａ】
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【図１３ｂ】
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【図１３ｃ】
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【図１３ｄ】
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【図１４】
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【図１５ａ】
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【図１５ｂ】
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【図１６ａ】
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【図１６ｂ】
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【図１７】
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【図１８】
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【国際調査報告】
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