(57)【要約】本発明は、免疫学の分野、ならびにＭ２マクロファージ優位および／またはＴｈ２／Ｔｒｅｇ優位のヒト患者または動物においてＭ１／Ｔｈ１優位の免疫応答を誘導するための方法に関する。これらの方法は、Ｍ２マクロファージ媒介性および／またはＴｈ２／Ｔｒｅｇ媒介性の病態を処置または予防するための治療法の開発に有用である。本発明は、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位免疫応答を誘導するためにＭ１優位の免疫バックグラウンドを有する健常個体由来の免疫が活性化された血清を用いるインビボアプローチを利用する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から免疫活性な同種または異種血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記Ｍ２優位の患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
【請求項２】
前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原で免疫されている、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入と同時に免疫原で免疫される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原で免疫されていない、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記健常ドナー被験体が、正常な免疫応答バックグラウンドを有する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
工程（ａ）の血清サンプルを得る前に、前記健常ドナー被験体に、１つまたは複数の免疫原を接種するか、または（生存）微生物を感染させる、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記工程（ａ）の血清サンプルを得るためのタイムスケジュールおよび前記工程（ｂ）の血清サンプルを注入するためのタイムスケジュールがそれぞれ、前記ドナー被験体の接種後の約８時間〜約１４日間から個別に選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記タイムスケジュールがそれぞれ、約８時間、２４時間、４８時間、９６時間、１６８時間および１９２時間から個別に選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
Ｍ２マクロファージ媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性の病態を処置するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から免疫活性な血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
【請求項１０】
前記病態が、癌、慢性ウイルス感染症、アレルギーおよび喘息から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記病態が、癌である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記患者を既存の（従来の）癌治療で処置する工程をさらに含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記既存の癌治療が、化学療法、放射線療法、免疫療法およびそれらの組み合わせから選択される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、哺乳動物である、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、ヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記Ｍ２優位の患者が、ヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための治療用血清であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清。
【請求項１８】
免疫原をさらに含む、請求項１７に記載の治療用血清。
【請求項１９】
請求項１７に記載の治療用血清を含む、薬学的組成物。
【請求項２０】
インビボにおけるＭ１優位の免疫応答の誘導に不可欠な活性因子をさらに含む、請求項１９に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
前記活性因子が、サイトカイン、ケモカイン、成長因子、マクロファージ活性化因子、酵素およびそれらの組み合わせから選択される、請求項２０に記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
免疫原をさらに含む、請求項１９〜２１のいずれかに記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
前記血清が、同種血清である、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
前記血清が、異種血清である、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
同種血清である、請求項１７に記載の治療用血清。
【請求項２６】
異種血清である、請求項１７に記載の治療用血清。
【請求項２７】
前記血清が、活性因子を含み、同種血清である、請求項１９〜２２のいずれかに記載の薬学的組成物。
【請求項２８】
前記血清が、活性因子を含み、異種血清である、請求項１９〜２２のいずれかに記載の薬学的組成物。
【請求項２９】
健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清の使用であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用。
【請求項３０】
前記血清サンプルが、免疫原をさらに含む、請求項２９に記載の治療用血清の使用。
【請求項３１】
Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴＨ１およびＴｃｙｃｔｏｔｏｘｉｃの免疫応答を誘導するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から免疫活性な同種または異種血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
【請求項３２】
Ｍ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態を処置するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から免疫活性な血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
【請求項３３】
前記血清が、免疫原をさらに含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１およびＴｃｙｃｔｏｔｏｘｉｃの免疫応答を誘導するための治療用血清であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清。
【請求項３５】
健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１およびＴｃｙｔｏｔｏｘｉｃの免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清の使用であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用。
【請求項３６】
前記血清サンプルが、免疫原をさらに含む、請求項３５に記載の治療用血清の使用。
【請求項３７】
Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から得られる免疫活性な同種または異種血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記Ｍ１優位の免疫応答を誘導するための前記Ｍ２優位の患者への注入において使用するための治療用血清調製物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
【請求項３８】
前記血清サンプルが、免疫原をさらに含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原の接種が済んでいる、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原で免疫されていない、請求項３７に記載の方法。
【請求項４１】
前記健常ドナー被験体が、正常な免疫応答バックグラウンドを有する、請求項３７に記載の方法。
【請求項４２】
前記血清サンプルを前記健常ドナー被験体から得る前に、前記健常ドナー被験体に、１つまたは複数の免疫原を接種するか、または（生存）微生物を感染させる、請求項３７に記載の方法。
【請求項４３】
前記ドナー被験体から前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュールおよび前記治療用血清調製物を注入するためのタイムスケジュールがそれぞれ、前記ドナー被験体の接種後の約８時間〜約１４日間から個別に選択される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記タイムスケジュールがそれぞれ、約８時間、２４時間、４８時間、９６時間、１６８時間および１９２時間から個別に選択される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
Ｍ２マクロファージ媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性の病態を処置するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から得られる免疫活性な血清サンプルを提供する工程；および
（ｂ）前記Ｍ２マクロファージ媒介性の病態を処置するための前記患者への注入において使用するための治療用血清調製物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
【請求項４６】
工程（ｂ）において、前記血清サンプルが、免疫原とともに製剤化される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記病態が、癌、慢性ウイルス感染症、アレルギーおよび喘息からなる群より選択される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４８】
前記病態が、癌である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記薬が、既存の（従来の）癌治療と併用して前記患者に投与される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記既存の癌治療が、化学療法、放射線療法、免疫療法およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、哺乳動物である、請求項３７に記載の方法。
【請求項５２】
前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、ヒトである、請求項３７に記載の方法。
【請求項５３】
前記Ｍ２優位の患者が、ヒトである、請求項３７に記載の方法。
【請求項５４】
健常ドナーから得られる有効量の血清サンプルを活性成分として含む、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための治療用血清調製物であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清調製物。
【請求項５５】
請求項５４に記載の治療用血清調製物を含む、薬学的組成物。
【請求項５６】
インビボにおけるＭ１優位の免疫応答の誘導に不可欠な活性因子をさらに含む、請求項５５に記載の薬学的組成物。
【請求項５７】
前記活性因子が、サイトカイン、ケモカイン、成長因子、マクロファージ活性化因子、酵素およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、請求項５６に記載の薬学的組成物。
【請求項５８】
前記血清が、同種血清である、請求項３７〜５１のいずれかに記載の方法。
【請求項５９】
前記血清が、異種血清である、請求項３７〜５１のいずれかに記載の方法。
【請求項６０】
同種血清である、請求項５４に記載の治療用血清調製物。
【請求項６１】
異種血清である、請求項５４に記載の治療用血清調製物。
【請求項６２】
前記血清が、同種血清である、請求項５５〜５７のいずれかに記載の薬学的組成物。
【請求項６３】
前記血清が、異種血清である、請求項５５〜５７のいずれかに記載の薬学的組成物。
【請求項６４】
Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清調製物の使用であって、前記治療用血清調製物は、健常ドナーから得られた血清サンプルを含み、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用。
【請求項６５】
Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴＨ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から得られる免疫活性な同種または異種血清サンプルを提供する工程；および
（ｂ）前記ＴＨ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための前記Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者への前記血清サンプルの注入において使用するための組成物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
【請求項６６】
Ｍ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態を処置するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から得られる免疫活性な血清サンプルを提供する工程；および
（ｂ）前記Ｍ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態を処置するための前記患者への前記血清サンプルの注入において使用するための組成物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
【請求項６７】
工程（ｂ）において、前記血清が、免疫原とともに製剤化される、請求項６５または６６に記載の方法。
【請求項６８】
健常ドナーから得られた有効量の血清サンプルを含む、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための治療用血清調製物であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清調製物。
【請求項６９】
免疫原をさらに含む、請求項６８に記載の治療用血清。
【請求項７０】
Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清調製物の使用であって、前記治療用血清調製物は、健常ドナーから得られた血清サンプルを含み、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用。
【請求項７１】
免疫原をさらに含む、請求項７０に記載の治療用血清。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、免疫学の分野、およびＭ２優位のヒト患者または動物においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための方法に関する。これらの方法は、Ｍ２マクロファージ媒介性の病態を処置または予防するための治療法の開発に有用である。それらの方法は、様々な形態の癌および他の免疫関連疾患を処置するための治療法の開発に有用である。本発明は、癌および他の疾患を処置するための、免疫が活性化された同種または異種血清、ならびに癌または他の疾患の処置を必要とするＭ２優位のヒトまたは動物においてＭ１優位の免疫応答を誘導するために、それらのヒトまたは動物に、そのような免疫が活性化された同種または異種血清を免疫原ありまたは免疫原なしで投与することによって、癌または他の疾患を処置するための方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
マクロファージは、全身の種々の組織に見られる多機能の細胞であり、組織の発達、リモデリングおよびホメオスタシスに寄与する［１．Ｅｐｅｌｍａｎら、２．Ｂｒｏｗｎら］。これらの細胞は、局所環境を調査し、栄養因子を分泌し、細胞および残屑を貪食し、修復を行って、ホメオスタシスを維持する。マクロファージは、局所的キューに応答して、異常なほどの転写リプログラミングを起こして、その表現型および機能を適応させる。その高度のマクロファージの適応性のおかげで、マクロファージは、ホメオスタシスを維持するために、容易に種々の表現型および機能に変化できる。しかしながら、種々の病態において、正常な制御機構が働かないとき、この高度の適応性は問題になることがあり、場合によっては、マクロファージは、ホメオスタシスを維持する正常な機能を失い、癌などの症状において疾患を促進する物質に変化する。
【０００３】
マクロファージは、自然免疫反応において重要な化合物である［４，Ｔａｒｉｑら、５，Ｍｉｌｌｓら］。マクロファージを活性化する方法は広範囲に及ぶが、Ｍ１（古典的活性化）マクロファージおよびＭ２（選択的活性化）マクロファージと呼ばれる主要な群が２つある。正常な免疫バックグラウンドの個体において、マクロファージは、微生物を貪食、すなわち摂取すると、活性化されて、Ｍ１マクロファージになる。これらの条件下において、マクロファージは、ｔｏｌｌ様レセプター（ＴＬＲ）リガンド（例えば、貪食された微生物由来のリポ多糖類（ＬＰＳ）を含む病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ））を通じて刺激される。Ｍ１マクロファージは、炎症促進性サイトカインならびに活性窒素種および活性酸素種の分泌を特徴とする。Ｍ１マクロファージは、殺菌作用および抗腫瘍作用を有するので、侵入微生物および癌などの他の細胞異常と戦う自然免疫反応における主力の１つである。Ｍ１マクロファージは、高レベルのインターロイキン（ＩＬ）−１２および低レベルのＩＬ−１０を分泌する。対照的に、Ｔｈ２サイトカインのＩＬ−４およびＩＬ−１３は、マクロファージを抗炎症性Ｍ２表現型に偏らせる。Ｍ２マクロファージは、ＩＬ−１０のような抗炎症性サイトカインを産生することによって、損傷を与える免疫応答をオフにし、一方で、組織修復および創傷治癒のような構成上のプロセスに関わる機能を発揮する。Ｍ２マクロファージは、高レベルのＩＬ−１０、ＴＧＦ−ベータおよび低レベルのＩＬ−１２を産生する。正常な免疫バックグラウンドの個体では、侵入者（例えば、微生物およびウイルス感染細胞）と戦うように、また、異常物質（例えば、腫瘍細胞および酸化ＬＤＬ）を掃除するように、そして局所組織を再構築するように、Ｍ１マクロファージとＭ２マクロファージとが調整されている。Ｍ１およびＭ２マクロファージの活性化は、組織のホメオスタシスにおいて、陰陽のように、バランスが取られていなければならない。
【０００４】
マクロファージは、適応免疫応答の活性化および平衡化において重要な役割を果たす［４．Ｔａｒｉｑら、５．Ｍｉｌｌｓら］。Ｍ１マクロファージは、活性化されると、高レベルのＭＨＣクラスＩＩ分子を発現する。Ｍ１マクロファージは、貪食された微生物を処理し、次いで、これらの処理された微生物または腫瘍細胞から、ＭＨＣクラスＩＩ分子と関連した状態において抗原を提示することにより、タイプ１Ｔヘルパー細胞（Ｔｈ１）を活性化する。Ｍ１マクロファージは、Ｔｈ１応答を活性化し、そのＴｈ１応答は、Ｔｈ１細胞によるＩＦＮ−γの産生を通じて、反対にＭ１マクロファージ活性をさらに増幅し得る（フィードバックループ）。腫瘍抗原などの特異的抗原が存在する場合、Ｍ１マクロファージ指向型の適応免疫は、腫瘍特異的なＴｃｙｔｏｔｏｘｉｃを刺激し得る。Ｍ１優位の抗原非特異的マクロファージと抗原特異的Ｔｈ１／Ｔｃｙｔｏｔｏｘｉｃ細胞とが強いネットワークを形成して、侵入微生物および体内で生じている異常と戦う。対照的に、Ｍ２マクロファージは、ＴＧＦ−βおよびＩＬ−１０などの自然シグナルを通じて、タイプ２Ｔヘルパー細胞（Ｔｈ２）および制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）に変化するようにＴ細胞を誘導する。適応免疫系のＴｈ１／ＴｃｙｔｏｔｏｘｉｃおよびＴｈ２／Ｔｒｅｇアームは、抗原特異的免疫応答の２つの主要化合物である。これらの２つのアームは、正常な免疫バックグラウンドを有する個体では、調和するように調整され、バランスのとれた免疫応答を示す。
【０００５】
マクロファージの活性は、病態において重要である。癌などの局所的な病態によって影響されると、動員マクロファージは、大量にＭ２マクロファージに変わる［４．Ｔａｒｉｑら、５．Ｍｉｌｌｓら］。Ｍ２マクロファージ優位の自然免疫反応は、アンバランスな適応免疫応答をもたらし、例えば、Ｔｈ２およびＴｒｅｇが優勢となる。Ｍ２マクロファージ、Ｔｈ２およびＴｒｅｇは、癌を有する患者においてＭ１、Ｔｈ１およびＴｃｙｔｏｔｏｘｉｃの免疫応答を強く抑制する、抑制免疫応答ネットワークを形成する。マクロファージを標的にするストラテジーは、抑制された免疫応答の起源を遮断し得るので、癌を有する患者においてＭ２優位の免疫バックグラウンドを破綻させる方法であり得る。腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）は、腫瘍微小環境において最も豊富なＭ２マクロファージである。ＴＡＭは、ほぼすべての種々のレベルにおいて腫瘍進行に寄与する：１）遺伝的不安定性の促進；２）癌幹細胞の養育；３）血管新生の増強；４）免疫抑制の発現および防御適応免疫の制御、ならびに５）腫瘍の浸潤および転移の支援。臨床研究によって、腫瘍におけるＴＡＭの高流入と、肝細胞癌、卵巣癌、子宮頸癌および乳癌における予後不良との間に関連があることが実証された。研究は、ＴＡＭが、腫瘍の発達に直接関与する高レベルの抗炎症因子を産生することも示した。
【０００６】
マクロファージは、その高度の適応性に起因して、腫瘍細胞および腫瘍微小環境からの「教育」を容易に受け入れることにより、腫瘍細胞の補助者または共謀者となる。マクロファージは、腫瘍細胞がそれらの生存および拡大のために遂行するのに必要であるが遂行できない上記の機能を腫瘍細胞が遂行するのを助ける。したがって、ＴＡＭは、癌の予後を指示する中心的役割を果たす。ＴＡＭを標的にすることは、癌免疫療法に新しいアプローチをもたらし得る。
【０００７】
抗癌治療に向けたマクロファージを標的にするアプローチは、研究中であり、そのアプローチには、腫瘍微小環境へのマクロファージの動員を阻害することおよび／または腫瘍微小環境におけるマクロファージの生存を阻害すること；抗腫瘍Ｍ１様マクロファージ（ｍｉｃｒｏｐｈａｇｅ）になるようにＴＡＭをリプログラミングすること；ならびにマクロファージ媒介性の細胞外殺滅、すなわちファゴサイトーシス、および癌細胞の細胞内破壊を誘発する、腫瘍を標的にするモノクローナル抗体が含まれる［３．Ｍａｒｅｌｌｉら、４．Ｔａｒｉｑら、５．Ｍｉｌｌｓら］。ＴＡＭに注目した治療ストラテジーは、化学療法と免疫療法の両方を補完し、それらと相乗作用を示す可能性を有する。
【０００８】
マクロファージの応答を標的にすることが、免疫療法の成功を促すブレークスルーであることをエビデンスが示しているにもかかわらず、依然として、安全かつ有効な治療を開発するために克服すべき多くのハードルがある。１）達成する必要がある第１の目標は、効力または有効性である。マクロファージを標的にする多くのアプローチが、明白な有効性（ａｆｆｅｃｔｉｖｉｔｙ）を有しない。この効力の欠如は、インビボにおけるマクロファージの不均一性（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｉｃｉｔｙ）に起因し得る。確立されたＭ２優位のバックグラウンドに打ち勝つために、すべてのＭ２マクロファージをＭ１様マクロファージに変えるためには、１つの方法では不十分である。２）それらの治療を臨床で使用できるようになる前に達成する必要があるもう１つの目標は、単純さである。多くの研究が、Ｍ２マクロファージを単離した後、インビトロにおいてそれらを再度Ｍ１様マクロファージに変え、次いで、それらを患者に再注入する試みを行った。しかしながら、これらは、非常に複雑な手順であり、日常的に臨床で使用するには実用的でない。３）Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答をインビボで誘導することは、多くの不必要な手順を回避できる。例えば、不活化された微生物（コーリートキシン）の注射によってマクロファージ／自然免疫を刺激する試みが行われてきた。しかしながら、このストラテジーは、危険な副作用を伴い、これは、より最近の免疫療法の試みにおいても観察された。４）マクロファージを標的にするための既存のストラテジーは、もっぱら患者自身の免疫応答に焦点を当てる傾向があり、Ｍ２優位個体においてＭ１優位の免疫応答の誘導を大きく妨害し得る。
【０００９】
以前の研究は、ＴＡＭの不均一性が原因で有効でなかった。多くの研究が、臨床での使用には実用的でないインビトロアプローチを用いており、ゆえに、インビボアプローチのほうが優れている。たいていの研究が、患者自身の免疫系を使用することに注目していたが、患者自身の免疫系は、Ｍ２優位免疫応答によってすでに妨害されている。
【００１０】
現行の治療には多くの欠点があり、効果的な治療を開発するために解決する必要がある課題が多いことが、前述したことからわかる。本発明は、これまでの欠陥を克服しようとする別の解決法を提案する。本発明は、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位免疫応答を誘導するためにＭ１優位の免疫バックグラウンドを有する健常個体由来の免疫が活性化された血清を用いるインビボアプローチを利用する。詳細を下記で説明する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Origin and functions of tissue macrophages. Epelman S, Lavine KL,Randolph GJ. Immunity. 41(1):21-35 (2014).
【非特許文献２】The Promise of Targeting Macrophages in Cancer Therapy. Brown JM,Recht L, Strober S, Clin Cancer Res. 23(13):3241-3250 (2017).
【非特許文献３】Inflammation as target in cancer therapy. Marelli G, Sica A,Vannucci L, Allavena P. Curr Opin Pharmacol. 35:57-65 (2017).
【非特許文献４】Macrophage Polarization: Anti-Cancer Strategies to TargetTumor-Associated Macrophage in Breast Cancer. Muhammad Tariq, Jieqiong Zhang,Guikai Liang, Ling Ding, Qiaojun He, and Bo Yang. J Cell Biochem. 9999:1-18(2017).
【非特許文献５】A Breakthrough: Macrophage-Directed Cancer Immunotherapy. Mills CD,Lenz LL, Harris RA. Cancer Res. 76(3):513-6 (2016).
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
発明の要旨
本発明は、免疫学の分野、およびＭ２優位のヒト患者または動物においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための方法に関する。これらの方法は、Ｍ２マクロファージ媒介性の病態を処置または予防するための治療法の開発に有用である。
【００１３】
本発明者らは、驚くべきことに、Ｍ２優位のヒトまたは動物において、Ｍ１優位の免疫応答を誘導することが可能であることを本発明において見出した。この誘導は、広範囲のＭ２マクロファージ媒介性の病態または症状を処置または予防するための実用的な応用性を有する。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
発明の詳細な説明
本発明は、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から免疫活性な同種または異種血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記Ｍ２優位の患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法に関する。
【００１５】
別の態様では、本発明は、前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原で免疫されている方法に関する。
【００１６】
別の態様では、本発明は、前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原で免疫されていない方法に関する。
【００１７】
別の態様では、本発明は、前記健常ドナー被験体が、正常な免疫応答バックグラウンドを有する方法に関する。
【００１８】
別の態様では、本発明は、工程（ａ）の血清サンプルを得る前に、前記健常ドナー被験体に、１つまたは複数の免疫原を接種するか、または（生存）微生物を感染させる方法に関する。
【００１９】
別の態様では、本発明は、前記工程（ａ）の血清サンプルを得るためのタイムスケジュールおよび前記工程（ｂ）の血清サンプルを注入するためのタイムスケジュールがそれぞれ、前記ドナー被験体の接種後の約８時間〜約１４日間から個別に選択される方法に関する。
【００２０】
別の態様では、本発明は、前記タイムスケジュールがそれぞれ、約８時間、２４時間、４８時間、９６時間、１６８時間および１９２時間から個別に選択される方法に関する。
【００２１】
別の態様では、本発明は、Ｍ２マクロファージ媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性の病態を処置するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から免疫活性な血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする方法に関する。
【００２２】
別の態様では、本発明は、前記病態が、癌、慢性ウイルス感染症、アレルギーおよび喘息から選択される方法に関する。
【００２３】
別の態様では、本発明は、前記病態が、癌である方法に関する。
【００２４】
別の態様では、本発明は、前記患者を既存の（従来の）癌治療で処置する工程をさらに含む方法に関する。
【００２５】
別の態様では、本発明は、前記既存の癌治療が、化学療法、放射線療法、免疫療法およびそれらの組み合わせから選択される方法に関する。
【００２６】
別の態様では、本発明は、前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、哺乳動物である方法に関する。
【００２７】
別の態様では、本発明は、前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、ヒトである方法に関する。
【００２８】
別の態様では、本発明は、前記Ｍ２優位の患者が、ヒトである方法に関する。
【００２９】
別の態様では、本発明は、健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための治療用血清であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清に関する。
【００３０】
別の態様では、本発明は、本発明の治療用血清を含む、薬学的組成物に関する。
【００３１】
別の態様では、本発明は、インビボにおけるＭ１優位の免疫応答の誘導に不可欠な活性因子をさらに含む薬学的組成物に関する。
【００３２】
別の態様では、本発明は、前記活性因子が、サイトカイン、ケモカイン、成長因子、マクロファージ活性化因子、酵素およびそれらの組み合わせから選択される薬学的組成物に関する。
【００３３】
別の態様では、本発明は、前記血清が、同種血清である方法に関する。
【００３４】
別の態様では、本発明は、前記血清が、異種血清である方法に関する。
【００３５】
別の態様では、本発明は、同種血清である治療用血清に関する。
【００３６】
別の態様では、本発明は、異種血清である治療用血清に関する。
【００３７】
別の態様では、本発明は、前記血清が、同種血清である薬学的組成物に関する。
【００３８】
別の態様では、本発明は、前記血清が、異種血清である薬学的組成物に関する。
【００３９】
別の態様では、本発明は、健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清の使用であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用に関する。
【００４０】
別の態様では、本発明は、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴＨ１およびＴｃｙｃｔｏｔｏｘｉｃの免疫応答を誘導するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から免疫活性な同種または異種血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法に関する。
【００４１】
別の態様では、本発明は、Ｍ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態を処置するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から免疫活性な血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法に関する。
【００４２】
別の態様では、本発明は、健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１およびＴｃｙｃｔｏｔｏｘｉｃの免疫応答を誘導するための治療用血清であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清に関する。
【００４３】
別の態様では、本発明は、健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１およびＴｃｙｔｏｔｏｘｉｃの免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清の使用であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用に関する。
【００４４】
別の態様では、本発明は、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から得られる免疫活性な同種または異種血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記Ｍ１優位の免疫応答を誘導するための前記Ｍ２優位の患者への注入において使用するための治療用血清調製物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法に関する。
【００４５】
別の態様では、本発明は、前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原の接種が済んでいる方法に関する。
【００４６】
別の態様では、本発明は、前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原で免疫されていない方法に関する。
【００４７】
別の態様では、本発明は、前記健常ドナー被験体が、正常な免疫応答バックグラウンドを有する方法に関する。
【００４８】
別の態様では、本発明は、前記血清サンプルを前記健常ドナー被験体から得る前に、前記健常ドナー被験体に、１つまたは複数の免疫原を接種するか、または（生存）微生物を感染させる方法に関する。
【００４９】
別の態様では、本発明は、前記ドナー被験体から前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュールおよび前記治療用血清調製物を注入するためのタイムスケジュールがそれぞれ、前記ドナー被験体の接種後の約８時間〜約１４日間から個別に選択される方法に関する。
【００５０】
別の態様では、本発明は、前記タイムスケジュールがそれぞれ、約８時間、２４時間、４８時間、９６時間、１６８時間および１９２時間から個別に選択される方法に関する。
【００５１】
別の態様では、本発明は、Ｍ２マクロファージ媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性の病態を処置するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から得られる免疫活性な血清サンプルを提供する工程；および
（ｂ）前記Ｍ２マクロファージ媒介性の病態を処置するための前記患者への注入において使用するための治療用血清調製物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法に関する。
【００５２】
別の態様では、本発明は、前記病態が、癌、慢性ウイルス感染症、アレルギーおよび喘息からなる群より選択される方法に関する。
【００５３】
別の態様では、本発明は、前記病態が、癌である方法に関する。
【００５４】
別の態様では、本発明は、前記薬が、既存の（従来の）癌治療と併用して前記患者に投与される方法に関する。
【００５５】
別の態様では、本発明は、前記既存の癌治療が、化学療法、放射線療法、免疫療法およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される方法に関する。
【００５６】
別の態様では、本発明は、前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、哺乳動物である方法に関する。
【００５７】
別の態様では、本発明は、前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、ヒトである方法に関する。
【００５８】
別の態様では、本発明は、前記Ｍ２優位の患者が、ヒトである方法に関する。
【００５９】
別の態様では、本発明は、健常ドナーから得られる有効量の血清サンプルを活性成分として含む、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための治療用血清調製物であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清調製物に関する。
【００６０】
別の態様では、本発明は、本発明の治療用血清調製物を含む、薬学的組成物に関する。
【００６１】
別の態様では、本発明は、インビボにおけるＭ１優位の免疫応答の誘導に不可欠な活性因子をさらに含む薬学的組成物に関する。
【００６２】
前記活性因子が、サイトカイン、ケモカイン、成長因子、マクロファージ活性化因子、酵素およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される薬学的組成物に関する。
【００６３】
別の態様では、本発明は、前記血清が、同種血清である本発明による方法に関する。
【００６４】
別の態様では、本発明は、前記血清が、異種血清である本発明による方法に関する。
【００６５】
別の態様では、本発明は、同種血清である治療用血清調製物に関する。
【００６６】
別の態様では、本発明は、異種血清である治療用血清調製物に関する。
【００６７】
別の態様では、本発明は、前記血清が、同種血清である薬学的組成物に関する。
【００６８】
別の態様では、本発明は、前記血清が、異種血清である薬学的組成物に関する。
【００６９】
別の態様では、本発明は、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清調製物の使用であって、前記治療用血清調製物は、健常ドナーから得られた血清サンプルを含み、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用に関する。-
【００７０】
別の態様では、本発明は、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴＨ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から得られる免疫活性な同種または異種血清サンプルを提供する工程；および
（ｂ）前記ＴＨ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための前記Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者への前記血清サンプルの注入において使用するための組成物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法に関する。
【００７１】
別の態様では、本発明は、Ｍ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態を処置するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から得られる免疫活性な血清サンプルを提供する工程；および
（ｂ）前記Ｍ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態を処置するための前記患者への前記血清サンプルの注入において使用するための組成物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法に関する。
【００７２】
別の態様では、本発明は、健常ドナーから得られた有効量の血清サンプルを含む、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための治療用血清調製物であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清調製物に関する。
【００７３】
別の態様では、本発明は、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清調製物の使用であって、前記治療用血清調製物は、健常ドナーから得られた血清サンプルを含み、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用に関する。
【００７４】
定義
本明細書中で使用されるとき、以下の用語は、反対のことが明確に述べられない限り、記載される意味を有する。
【００７５】
用語「同種」は、本明細書中で使用されるとき、血清またはサンプルが、健常ドナーまたは被験体から採取され、同じ種の別の患者レシピエントまたは被験体に移されることを意味する。対照的に、用語「異種」は、本明細書中で使用されるとき、血清またはサンプルが、ある被験体から採取され、異なる種の異なる被験体に移されることを意味する。
【００７６】
用語「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処置する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、本明細書中で使用されるとき、予防的および／または治療的に、病態もしくは症状を軽減すること、和らげること、もしくは回復させること、あるいは病態もしくは症状を予防すること、あるいは病態もしくは症状を得るリスクまたは病態もしくは症状の症候を示すリスクを低下させること、症候の根本原因を回復させることまたは予防すること、病態もしくは症状を阻害すること、病態もしくは症状の発症を止めること、病態もしくは症状を緩和すること、病態もしくは症状を後退させること、あるいは病態もしくは症状の症候を停止することを含む。
【００７７】
用語「Ｍ１優位の免疫応答」は、本明細書中で使用されるとき、Ｍ１マクロファージが重要な役割を果たす免疫応答である。結果として、誘導されたその免疫応答では、Ｔｈ１細胞およびＴｃｙｔｏｔｏｘｉｃ細胞が重要な役割を果たす。そのような処置は、そのような処置を必要とする被験体において所望の効果を誘導する（例えば、Ｍ１優位の免疫応答の誘導、Ｍ２マクロファージ媒介性の病態の処置および／またはＴＨ１および細胞傷害性の免疫応答の誘導を必要とする被験体、例えば、Ｍ２優位の患者、特に、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者において、Ｍ１優位の免疫応答を誘導する、Ｍ２マクロファージ媒介性の病態を処置する、および／またはＴＨ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導する）ために、その被験体に、有効量の活性成分、またはそのような活性成分を含む調製物もしくは組成物（例えば、本明細書中に記載されるような血清サンプル、またはそれを含む調製物／組成物）を投与することによって行われ得る。
【００７８】
用語「Ｍ２優位の患者」は、本明細書中で使用されるとき、Ｍ２マクロファージが重要な役割を果たす病態もしくは症状を有する被験体または患者である。結果として、誘導されたその免疫応答では、Ｔｈ２およびＴｒｅｇが重要な役割を果たす。これらの病態または症状の例は、癌、慢性ウイルス感染症、ならびにアレルギーおよび喘息である。
【００７９】
用語「免疫原」は、本明細書中で使用されるとき、不活化された微生物もしくは組換え微生物（細菌またはウイルス）またはそれらのサブユニット（ＣｐＧまたはＬＰＳ）である。用語「免疫原」は、本明細書中で使用されるとき、ＣｐＧおよびＬＰＳ以外の、病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）の化合物である。
【００８０】
用語「健常ドナー被験体」は、本明細書中で使用されるとき、正常な免疫応答バックグラウンドを有するドナー被験体である。
【００８１】
用語「患者」および「被験体」は、ヒトを含むと主に意図されているが、他の哺乳動物および鳥類などの非哺乳動物も含み得る。さらに、上に記載されたような用語「異種」に関して、血清またはサンプルの移行は、２つの異なる種の間で行われ得る。
【００８２】
Ｍ１およびＭ２マクロファージならびに免疫系
マクロファージおよび炎症。マクロファージは、炎症中および修復中に、１）侵入微生物およびアポトーシス細胞の残屑を除去するための主要な食細胞として、および２）組織修復を行う作用物質としての、２つの役割を有する［１，Ｅｐｅｌｍａｎら、２，Ｂｒｏｗｎら］。マクロファージのこれらの機能は両方とも、Ｍ１様マクロファージおよびＭ２様マクロファージによって発揮される。循環血液中の単球は、まず、血小板由来のケモカインのシグナルを受け取り、次いで、死にゆく細胞および侵入微生物からそれぞれ放出される損傷関連分子パターン（ＤＡＭＰ）および病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）とともに他の非特異的因子を受け取ることによって、Ｍ１マクロファージに変化する。これらのパターン因子がｔｏｌｌ様レセプター（ＴＬＲ）に結合すると、マクロファージが刺激されて、Ｍ１マクロファージに変化する。これは、侵入微生物および細胞残屑の除去のための炎症開始の印となる。この炎症段階では、Ｍ１マクロファージは、「炎症および線維症の主要制御因子」として機能する。炎症が正常に進むにつれて、優勢なマクロファージ集団は、「炎症性」の表現型：Ｍ１様のマクロファージから、様々なパラクリン因子の分泌を特徴とする「組織修復」の表現型：Ｍ２様のマクロファージにシフトとする。これらの因子は集団で、血管新生を促進し、さらに、線維芽細胞および組織修復のための他の細胞の増殖を促進する。Ｍ１マクロファージ集団がＭ２集団にシフトすることは、炎症終了の印となり、組織修復が始まる。その後、創傷は治癒する。
【００８３】
Ｍ１マクロファージは、殺菌作用および抗腫瘍作用を有するので、Ｍ１マクロファージは、侵入微生物および癌などの他の細胞異常と戦う自然免疫反応における主力の１つである。いくつかの癌の状況において、腫瘍抗原は、免疫系に曝露されないか、または腫瘍抗原は、弱すぎる。これらの状況では、通常、Ｍ１マクロファージが、非特異的ファゴサイトーシスを通じて癌に対抗する唯一の戦力である。Ｍ１様マクロファージは、活性化されると、癌細胞および侵入微生物を直接殺滅する、一酸化窒素および活性酸素中間体などの広範な有毒メディエーターを分泌する（ｓｅｃｒｅｔ）。一方で、Ｍ１マクロファージは、最も優勢なＴＮＦ−ａおよびＩＬ−１２を長期間にわたって分泌して、適応免疫応答を活性化する。Ｍ１マクロファージは、活性化された適応免疫応答、例えば、抗原特異的なＴｈ１細胞およびＴｃｙｔｏｔｏｘｉｃ細胞とともに、強力な免疫ネットワークを形成して、癌細胞および侵入微生物と効果的に戦う。
【００８４】
ＴＡＭおよび癌。対照的に、Ｍ２マクロファージは、肉芽組織の形成が生じる炎症の治癒プロセスにおいて、優勢に存在する［３，Ｍａｒｅｌｌｉら、４，Ｔａｒｉｑら、５，Ｍｉｌｌｓら］。正常な炎症プロセスにおいてＭ１からＭ２にシフトするための原動力の１つは、ＴＲＬリガンド（例えば、侵入微生物由来のパターン因子、ＬＰＳおよびＣｐＧ）の消失である。ＴＲＬリガンドの刺激がないと、Ｍ１マクロファージは、徐々に消え、Ｍ２マクロファージは、ＩＬ−１０などの抗炎症性サイトカインを産生することによって、損傷を与える免疫応答をオフにするので、治癒の開始が可能になる。次いで、Ｍ２マクロファージは、線維芽細胞を動員し、線維芽細胞を活性化することにより、内皮前駆細胞を動員し、新しい脈管形成を可能にするように血管新生促進因子を放出する筋線維芽細胞に分化させて、組織修復プロセスを完了する。
【００８５】
癌において、組織修復プロセスは、決して終わらず、ゆえに、癌は、「決して癒えない傷」と呼ばれがちである。循環血液中の単球は、まず、成長因子およびケモカイン（例えば、ＣＣＬ２、Ｍ−ＣＳＦおよびＶＥＧＦ）の作用によって腫瘍組織に動員される。腫瘍部位への単球の動員は、低酸素によってさらに促進される。腫瘍微小環境では、腫瘍由来因子が、単球から腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）への極性化を惹起する。ＴＡＭは、Ｍ２様の極性化した細胞である。腫瘍組織は、侵入微生物を有しないので、腫瘍微小環境に存在するＴＲＬリガンド（例えば、病原体関連分子パターン）を有しない。ＴＲＬリガンドの刺激が無いことに起因して、マクロファージをＭ１マクロファージに変化させるように刺激する力はほとんどない。他方で、腫瘍細胞は、Ｍ２マクロファージの極性化を促進する因子を分泌する。結果として、Ｍ２マクロファージが、時間とともに腫瘍微小環境において優勢になる。
【００８６】
研究は、ＴＡＭが、腫瘍微小環境に動員され、変化すると、共謀者になることを明らかに示した。マクロファージは、高度の適応性を有し、容易に腫瘍細胞および腫瘍微小環境に影響されて、腫瘍細胞の補助者または共謀者になる。ＴＡＭは、腫瘍細胞が、それらの生存および拡大のために成し遂げる必要があるが完了できないタスクを腫瘍細胞が完了するのを助ける。ＴＡＭは、成長因子およびケモカインを分泌し、それらは、腫瘍細胞の成長および生存を支持する分子の発現をもたらし（ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ１２および成長因子を通じて）；マトリックスリモデリングを制御し（ＭＭＰＳ、ＴＮＦおよびケモカイン（ｃｈｉｍｏｋｉｎｅｓ）を通じて）；血管新生を促進し（ＶＥＧＦ、ＴＮＦおよびケモカインを通じて）；腫瘍の浸潤および転移を増強する（ＭＭＰＳ、ＴＮＦおよびケモカインを通じて）。ＴＡＭは、Ｔｈ１細胞の活性を阻害し、Ｔｈ２細胞およびＴｒｅｇ細胞の動員を増強し、ＴＧＦ−ベータ  ＩＬ−１８、ＩＬ−１０およびＣＣＬ２２の分泌を通じてナイーブＴ細胞を活発にする。
【００８７】
腫瘍細胞は、ＴＡＭの助けなしでは、生存することはできず、他の組織に転移することができないことが分かっている。ＨａｎａｈａｎおよびＷｅｉｎｂｅｒｇによると、癌は、６つの不可欠な生理学的特徴：（１）成長シグナルの自給自足、（２）成長阻害性シグナルに対する感受性の欠如、（３）プログラム細胞死の回避、（４）無限の複製能、（５）持続性の血管新生、ならびに（６）浸潤および転移として現れる［６，ＨａｎａｈａｎおよびＷｅｉｎｂｅｒｇ］。これらの形質ならびに免疫抑制および化学療法剤抵抗性の促進役として、ＴＡＭの存在は、癌の第７の特徴として働き得る。ＴＡＭが、これらの形質を有する腫瘍細胞に対して最も積極的な役割を果たすことを考えると、ＴＡＭの存在は、腫瘍細胞の生存および転移に対する特徴として理解できる。
【００８８】
ＴＡＭを標的にすることに基づく抗癌ストラテジー。腫瘍進行におけるＴＡＭの重要性が認識されると、ＴＡＭを標的にする抗癌治療ストラテジーに注目が集まった［３，Ｍａｒｅｌｌｉら、４，Ｔａｒｉｑら］。これらのストラテジーは、以下のものを含む。１）腫瘍部位への単球の動員の阻止。このストラテジーは、種々の阻害剤およびモノクローナル抗体を用いて、ケモカインおよび成長因子（ＣＣＬ２、ＣＣＬ５およびＶＥＧＦ）を阻止することを含む。ＣＳＦ−１レセプターを阻害する複数の方法も開発された。放射線照射も、単球の動員を阻害する。２）Ｍ２マクロファージ極性化の阻害。このストラテジーは、モノクローナル抗体、シグナル伝達分子阻害剤の使用によって達成される。３）化学薬品およびトキシン結合体化モノクローナル抗体による単球およびＴＡＭの枯渇；および４）Ｍ１極性化の促進。この目標は、低線量の放射線照射、抗ＩＬ−１０および抗ＣＤ４０モノクローナル抗体によって達成される。最近、Ｍ２をＭ１にリプログラミングすることが、ＣｐＧ  ＤＮＡおよび抗ＩＬ−１０のインビトロ刺激を介して行われた。ＴＡＭの極性化をＭ２からＭ１表現型に逆転することによって、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて腫瘍転移を阻害できる。また、クロロゲン酸は、マクロファージをＭ２からＭ１表現型に再極性化することによって、神経膠芽腫の成長を阻害する。
【００８９】
侵入微生物から放出された病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）がＴｏｌｌ様レセプターに結合することが、Ｍ１極性化に不可欠である。１００年超前に、Ｄｒ．Ｗｉｌｌｉａｍ  Ｃｏｌｅｙは、不活化細菌を用いて、癌を有する患者に接種したところ、いくらかの程度の治療目的を達成した。この方法は、危険な副作用のせいで、米国では断念されている。しかしながら、Ｍ１極性化には、ＰＡＭＰ、組換え微生物および不活化微生物、ＬＰＳおよびＣｐＧなどのサブユニットによる刺激が必要であるというコンセプトが、かなり調査され、抗癌免疫療法として使用されている。
【００９０】
本発明の方法および治療法および治療薬
したがって、癌および他のＭ２関連疾患を処置するためにマクロファージを標的にするという目標を達成するために、有効かつ単純な方法が必要とされている。本発明は、Ｍ２優位患者においてＭ１優位の免疫応答をインビボで誘導するために、Ｍ２優位の免疫バックグラウンドに打ち勝つことができる方法の開発を目指している。本発明者らは、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答の誘導を「助ける」、Ｍ１優位免疫バックグラウンドを有する健常個体由来の免疫が活性化された血清を用いるインビボアプローチを開発した。本発明の方法は、以下の特徴を有する。１）有効性。癌を有する患者の免疫応答能力は、通常、大量に存在するＭ２マクロファージによって抑制されている。そのまま介入なしでＭ１優位の免疫応答を誘導することは困難である。本発明者らは、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答の誘導の機会を大幅に増やす、健常個体由来の免疫が活性化された血清の「助け」を借りる方法を開発した。２）実施可能性および単純性。免疫が活性化された同種および異種血清は両方とも、細胞を含まないので、ＭＨＣミスマッチの問題は存在しない。サイトカインの異種間の特異性は、免疫が活性化された異種血清が他の種を超えてＭ１免疫応答の助けを提供することを可能にする。インビトロでのマクロファージの変化および増幅は必要ない。３）安全性。免疫が活性化された同種または異種血清は、Ｍ２優位の免疫バックグラウンド個体において持続性のＭ１優位の免疫応答を誘導する「一時的な助け」を提供する。「有害作用」は、たとえあったにしても、一時的であり、数日で消えていく。４）広範な用途。本発明は、様々な形態の癌および他のＭ２マクロファージ関連疾患、例えば、慢性ウイルス感染症、アレルギーおよび喘息において使用され得る方法に関する。
【００９１】
Ｍ２優位の免疫バックグラウンドのヒト患者または動物におけるＭ１優位の免疫応答の誘導方法
癌、特に、末期癌を有する患者または動物において、免疫応答は通常、局所的に（腫瘍微小環境において）、ならびに全身的に（ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃａｌｌｙ）、大量に提示されているＭ２マクロファージによって抑制されている。現行の免疫療法レジメンは、通常、癌を有する患者においてＭ２優位の免疫バックグラウンドに打ち勝つのに効果がなく、ゆえに、癌に対してＭ１優位の免疫応答を誘導できないことが多い。これらの患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導できないことは、現行の既存の腫瘍免疫療法がうまくいかない原因であり得、また、腫瘍の再発の原因であり得る。
【００９２】
Ｍ２優位の免疫バックグラウンドに打ち勝つこと、およびこれらのＭ２優位の患者において腫瘍に対してＭ１優位の免疫応答を開始させることを目指して、様々な（Ｖａｒｉｅｓ）方法が、開発途中である。
【００９３】
ＴＡＭを標的にする方法が、抗腫瘍療法として開発された。それらの方法は、化学薬品およびモノクローナル抗体を通じてＴＡＭの生存を抑制する工程、ＴＡＭの腫瘍促進活性を阻止する工程、および腫瘍部位へのマクロファージの動員を阻害する工程を含む。もう１つのストラテジーは、Ｍ１殺腫瘍活性の増強である。最近、マクロファージをＭ２からＭ１に再極性化することが、神経膠芽腫の成長を阻害すると報告された。しかしながら、これらの方法は、臨床において有効性を達成せず、その発展のためにより多くの研究を必要とする。
【００９４】
不活化微生物または組換え微生物を作製する方法が開発されたことから、癌に対してＭ１優位の強い免疫応答を誘導することを目指して、これらの微生物（例えば、コーリートキシン）を用いて、癌を有する患者を免疫した。これらの治療目標は、臨床でのそれらの使用を制限する重篤な副作用のせいで達成されなかった。
【００９５】
Ｍ２優位の免疫バックグラウンドに起因して抑制された自己ナチュラルキラー細胞の埋め合わせをすることを目指して、ナチュラルキラー細胞などの同種の免疫担当細胞を癌患者に養子移入する方法が開発された。この方法の開発における障壁は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）の壁である。臨床で日常的に使用できるようになるまでには、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）という難題を解決する必要がある。
【００９６】
個体の免疫応答バックグラウンドが、免疫原に対して効率的な免疫応答の誘導の基盤であると予想される。癌を有する患者では、免疫バックグラウンドは、大量に存在するＭ２マクロファージによって支配されている。これらの患者における免疫化は通常、Ｍ２優位免疫応答をもたらす。Ｍ２優位の免疫バックグラウンド個体においてＭ１優位の免疫応答の誘導に効果が無い理由は、これらの患者においていくつかのＭ１優位の免疫応答誘導因子が不足していることに起因し得る。ゆえに、これらの患者における免疫化では、Ｍ２優位の免疫応答バックグラウンドに打ち勝ち、Ｍ１優位の免疫応答を誘導するために、何らかの外部からの「助け」が必要である。
【００９７】
ある免疫応答バックグラウンドを有し、微生物もしくはアジュバントによる免疫化の際または微生物への感染の際にＭ１優位の免疫応答を生じる正常な個体由来の、免疫が活性化された同種血清は、癌を有する患者が、彼らのＭ２優位の免疫バックグラウンドに打ち勝つことを助け、Ｍ１優位の免疫応答を誘導することを助けることも予想される。
【００９８】
その免疫が活性化された同種血清は、癌を有するこれらのＭ２優位の患者において、Ｍ２優位の免疫応答バックグラウンドに効果的に打ち勝つため、およびＭ１優位の免疫応答を効果的に誘導するために必要なすべての化合物（Ｍ１傾向のサイトカインを含むがこれに限定されない）を含むことも予想される。
【００９９】
免疫が活性化された同種血清の「ヘルプ活性」は、有効性に時間枠があることも予想される。それらの「ヘルプ活性」は、免疫化または感染の約６時間後〜約１４日後（約２週間後）、また、約８時間後〜約１４日後（約２週間後）に開始する。約１４日後（約２週間後）、「ヘルプ活性」は通常、消滅する。
【０１００】
免疫が活性化された同種血清は、同種の細胞を含まないので、その血清の注入には、ＭＨＣミスマッチの問題がない。
【０１０１】
免疫が活性化された同種血清は、単独で、または免疫原と併用して、治療剤としてレシピエントに投与され得る。
【０１０２】
免疫が活性化された同種血清は、単独で、またはＴ細胞特異的特異的抗原と併用して、アジュバントとしてレシピエントに投与され得る。
【０１０３】
免疫応答が正常であり、微生物による免疫化または感染の際にＭ１優位の免疫応答を生じる異種の個体（哺乳動物または鳥類）由来の免疫が活性化された血清が、Ｍ２優位の免疫バックグラウンドを有する異種のレシピエント（例えば、ヒト）がＭ１優位の免疫応答を生じるのを助けることも予想される。
【０１０４】
その免疫が活性化された異種血清は、Ｍ２優位の免疫応答バックグラウンドに効果的に打ち勝つため、およびＭ１優位の免疫応答を効果的に誘導するために必要なすべての構成要素（Ｍ１傾向のサイトカインを含むがこれに限定されない）を含むことも予想される。異種の免疫賦活化サイトカインは、種特異性を克服でき、癌を有する患者においてＭ１優位の免疫応答を効果的に誘導し得ることも予想される。
【０１０５】
免疫が活性化された異種血清は、有効性に時間枠がある。それらの活性化能力は、免疫化の約６時間後〜約１４日後（約２週間後）、また、約８時間後〜約１４日後（約２週間後）に開始する。
【０１０６】
免疫が活性化された異種血清は、異種の細胞を含まないので、その異種血清の注入は、ＭＨＣミスマッチの問題に悩まされる可能性は低い。
【０１０７】
免疫が活性化された異種血清は、単独で、または免疫原と併用して、治療剤としてレシピエントに投与され得る。
【０１０８】
免疫が活性化された異種血清は、単独で、またはＴ細胞特異的抗原と併用して、アジュバントとしてレシピエントに投与され得る。
【０１０９】
免疫が活性化された血清の注入の最大限の効果を得るために、免疫が活性化された血清の回収および注入の時間経過は、ウイルスまたは細菌（例えば、インフルエンザウイルス）による急性感染症に対する免疫応答を誘導する自然経過を模倣するべきであることも予想される。
【０１１０】
免疫が活性化された同種血清中の活性な「ヘルプ」化合物を定義する必要があることも予想される。同定された活性な化合物は、Ｍ２優位の個体においてＭ１優位の免疫応答を誘導するというそれらの「ヘルプ」活性について試験されるために、製剤に製剤化される。
【０１１１】
活性な化合物の製剤は、単独で、または免疫原と併用して、使用され得る。
【０１１２】
活性な化合物の製剤は、単独で、またはＴ細胞特異的抗原と併用して、アジュバントとして使用され得る。
【０１１３】
癌および他のＭ２優位の免疫関連疾患を処置する方法。
本発明は、癌および他のＭ２マクロファージ優位の疾患を処置するための方法に直接関する。本発明は、様々な形態の癌を処置するために、全く新しい視点から、価値ある方法を提供する。Ｍ２優位の免疫バックグラウンドに打ち勝つために患者自身に注目している他の現行の既存の処置方法とは異なり、本発明は、癌を有するこれらの患者においてＭ２優位の免疫バックグラウンドを破綻させる目的で、健常個体由来の材料を利用しようとしている。
【０１１４】
他の既存の癌処置方法と比べて、本発明は、いくつかの利点を有する。１）有効性。癌を有する患者における免疫応答能力は、通常、大量に存在するＭ２マクロファージによって抑制されている。そのまま介入なしでＭ１優位の免疫応答を誘導することは困難である。本発明者らは、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答の誘導の機会を大幅に増やす、健常個体由来の免疫が活性化された血清の「助け」を借りる方法を開発した。２）実施可能性および単純性。免疫が活性化された同種および異種血清は両方とも、細胞を含まないので、ＭＨＣミスマッチの問題は存在しない。サイトカインの異種間の特異性は、免疫が活性化された異種血清が他の種を超えてＭ１免疫応答の助けを提供することを可能にする。３）安全性。免疫が活性化された同種または異種血清は、Ｍ２優位の免疫バックグラウンド個体において持続性のＭ１優位の免疫応答を誘導する「一時的な助け」を提供する。「有害作用」は、たとえあったにしても、一時的であり、数日で消えていく。４）広範な用途。本発明は、様々な形態の癌および他のＭ２マクロファージ関連疾患、例えば、慢性ウイルス感染症、アレルギーおよび喘息において使用され得る方法に関する。
【０１１５】
治療剤および薬学的組成物
治療剤は、正常な免疫応答バックグラウンドを有し、免疫原で免疫されたかまたは自然に微生物に感染した個体由来の免疫が活性化された同種血清である。
【０１１６】
免疫が活性化された同種血清は、単独で、または免疫原とともに、Ｍ２優位の個体（癌または他のＭ２関連疾患を有する患者）に注入される。
【０１１７】
あるいは、免疫が活性化された同種血清は、単独で、またはＴ細胞特異的抗原とともに、Ｍ２優位の個体（癌または他のＭ２関連疾患を有する患者）に注入される。
【０１１８】
あるいは、免疫が活性化された同種血清は、既存の免疫療法に組み込まれ得る。
【０１１９】
治療剤は、正常な免疫応答バックグラウンドを有し、免疫原で免疫された個体由来の免疫が活性化された異種血清である。それらの血清は、単独で、または免疫原とともに、Ｍ２優位の個体（癌または他のＭ２関連疾患を有する患者）に注入される。
【０１２０】
免疫が活性化された異種血清は、単独で、またはＴ細胞特異的抗原とともに、個体（癌または他のＭ２関連疾患を有する患者）に注入される。あるいは、免疫が活性化された異種血清は、既存の免疫療法に組み込まれ得る。
【０１２１】
治療剤は、免疫が活性化された有効な同種血清から同定された活性な化合物の製剤である。それらの製剤は、免疫原もしくはＴ細胞抗原とともに、またはそれらなしで、使用され得る。それらの製剤は、既存の免疫療法レジメンに組み込まれ得る。
【０１２２】
治療剤は、免疫が活性化された有効な異種血清から同定された活性な化合物の製剤である。それらの製剤は、免疫原もしくはＴ細胞抗原とともに、またはそれらなしで、使用され得る。それらの製剤は、既存の免疫療法レジメンに組み込まれ得る。
【０１２３】
Ｔ細胞特異的抗原は、Ｔ細胞特異的免疫応答を誘導し得る。
【０１２４】
本発明は、ウイルスおよび細菌による急性感染症に対して免疫応答を誘導する自然経過を模倣する際の、治療用試薬を使用する免疫化スケジュールにも関する。
【０１２５】
本明細書中に記載されるような活性な血清の起源は、哺乳動物、特にヒトであり得る。本明細書中に記載されるような血清調製物は、遠心分離および濾過などの当該分野で公知であるような従来の方法を用いて、血液から生成され得る。血清調製物は、望まれない構成要素、例えば、感染物質を除去するために、さらに精製され得る。血清調製物は必要に応じて、投与目的のために必要な好適なキャリアを用いて製剤化され得る。典型的な投与経路は、注射である。
【実施例】
【０１２６】
以下の実施例は、本発明の範囲内の実施形態をさらに説明し、実証する。本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、多くの変更が可能であるので、実施例は、単に例証目的で与えられ、本発明の限定として解釈されるべきでない。
【０１２７】
これらの実施例において、本発明者らは、実験モデルにおいて２系統のマウスを使用した。本発明者らは、ＬＰＳを免疫原として使用した。ＢＡＬＢ／ｃマウスは、細菌感染およびＬＰＳによる免疫化において、Ｍ２／Ｔｈ２傾向のマウスである。対照的に、Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、細菌感染およびＬＰＳによる免疫化において、Ｍ１／Ｔｈ１傾向のマウスである［７，Ｍｉｌｌｓ  ＣＤら、８，Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｈら］。本発明者らは、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを免疫が活性化された同種血清のドナーとして使用し、ＢＡＬＢ／ｃマウスを免疫が活性化された同種血清のレシピエントとして使用する。ＬＰＳの免疫化によって活性化されたＣ５７ＢＬ／６血清の注入が、ＬＰＳによる免疫化ありまたはなしで、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＭ１優位の免疫応答を誘導するのを助けられるかを試験するために。驚くべきことに、ＬＰＳの免疫化によって活性化されたＣ５７ＢＬ／６血清をＢＡＬＢ／ｃマウスに注入すると、ＬＰＳのみで免疫されたＢＡＬＢ／ｃマウスと比べて、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＭ１優位の免疫応答が誘導される。
【０１２８】
材料および方法：
マウスおよび抗体：ｔＣ５７／ＢＬ６およびＢＡＬＢ／ｃマウスを宿主とし、病院の実験動物委員会の規則に従って、病院の動物施設において飼育する。抗体の情報を表１に示す。Ｆ４／８０およびＴＮＦ−ａダブルポジティブ細胞を、Ｍ１マクロファージと定義し、Ｆ４／８０およびＣＤ２０６ダブルポジティブ細胞を、Ｍ２マクロファージと定義する。
【０１２９】
【表１】
2020528077.tif 000002
【０１３０】
マウスの免疫化および血清注入：マウスを尾部から静脈内（ｉ．ｖ．）にＬＰＳで免疫した。まず、ＬＰＳの致死量の半量を定義するために、ＢＡＬＢ／ｃマウスとＣ５７ＢＬ／６マウスの両方を、３つの異なる用量（０．５ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇおよび４．５ｍｇ／ｋｇ（ＬＰＳ／体重））のＬＰＳで免疫する必要があった。本発明者らは、１．５ｍｇ／ｋｇのＬＰＳが、マウスが許容できる用量であることを見出した。次いで、本発明者らは、その後のすべての実験において１．５ｍｇ／ｋｇの用量を使用した。種々の時点において、Ｃ５７／ＢＬ６マウスを屠殺し、血清を得た；各Ｃ５７ＢＬ／６マウスからおよそ０．５ｍｌの血清を得た。次いで、それらの血清をプールした後、等分し、続いて、ＬＰＳで免疫されたＢＡＬＢ／ｃマウスにｉ．ｖ．注入した。最後の用量は、１匹のＣ５７ＢＬ／６マウスから１匹のＢＡＬＢ／ｃマウスへの血清であった。ＬＰＳ免疫化の８、２０および４４時間後の時点において、３回の注入を行った。免疫化の７２時間後に、Ｃ５７ＢＬ／６およびＢＡＬＢ／ｃマウスを屠殺し、表１におけるマーカーを用いてＭ１およびＭ２細胞数を測定するための脾細胞懸濁液を生成するために、脾臓を得た。
【０１３１】
Ｍ１およびＭ２マーカーによる脾細胞の染色
１．細胞の固定および透過処理
脾細胞懸濁液を生成した。細胞を固定し、透過処理するために、１０６個の脾細胞を、５ｍｌのＦＡＣＳチューブ内の２５０μＬのＢＤ  Ｃｙｔｏｆｉｘ／Ｃｙｔｏｐｅｒｍ液（ｃａｔ．＃）にしっかり再懸濁し、氷上で２０分間インキュベートした。注意：ＢＤ  Ｃｙｔｏｆｉｘ／Ｃｙｔｏｐｅｒｍ（商標）液を加える前にボルテックスすることによって、細胞凝集を避けることができる。
【０１３２】
上記細胞を、１ｍｌの１Ｘ  ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）緩衝液（１０Ｘ  ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）緩衝液（ｃａｔ））で２回洗浄した。この緩衝液は、洗浄緩衝液および抗体希釈剤として使用することができる。
【０１３３】
２．細胞内サイトカインの染色
固定／透過処理された細胞を、１００μＬのサポニン含有緩衝液（例えば、ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）緩衝液）にしっかり再懸濁した。この緩衝液は、提唱されている抗体希釈のために、抗体データシートに従って、所定の最適な濃度の蛍光結合体化抗Ｆ４／８０抗体および蛍光結合体化サイトカイン抗体も含んでいた。それらの細胞を暗所において４℃で３０分間インキュベートした。抗体の併用については、表１を参照のこと。それらの細胞を、１ｍｌの１Ｘサポニン含有緩衝液（例えば、ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）緩衝液）で２回洗浄し、０．３ｍｌのＦＡＣＳ緩衝液に再懸濁した後、フローサイトメトリー解析を行った。
【０１３４】
フローサイトメトリー解析およびデータ解析。Ｆ４／８０／ＴＮＦ−ａ（Ｍ１マクロファージ）およびＦ４／８０／ＣＤ２０６（Ｍ２マクロファージ）ダブルポジティブ脾細胞の数を、標準的な手法を用いて２色フローサイトメトリー解析で測定した。Ｍ１対Ｍ２の相対比を計算し、それを用いて、Ｍ１優位の免疫応答が起きているか、またはＭ２優位の免疫応答が起きているかを判定した。
【０１３５】
実施例１：ＬＰＳの免疫化において、Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、Ｍ１優位の免疫応答を生じ、ＢＡＬＢ／ｃマウスは、Ｍ２優位の免疫応答を生じる
この実験は、ＬＰＳで免疫されたとき、Ｃ５７ＢＬ／６マウスおよびＢＡＬＢ／ｃマウスが、それぞれＭ１優位の免疫応答およびＭ２優位の免疫応答を生じることができるかを試験するようにデザインされている。
【０１３６】
実験を行うために、１．５ｍｇ／ｋｇのＬＰＳを２００ｕｌのＰＢＳに溶解し、マウスの尾静脈（ｔａｉｌ  ｖａｉｎ）にｉ．ｖ．注射する。マウスを３日間維持し、脾細胞懸濁液を得て、マーカー染色に使用して、Ｍ１マクロファージおよびＭ２マクロファージを定義した。Ｍ１マクロファージを特定するために、Ｆ４／８０およびＴＮＦ−ａ二重染色を用い、Ｍ２マクロファージを特定するために、Ｆ４／８０およびＣＤ２０６二重染色を用いる。種々のマウスにおいてＭ１およびＭ２細胞のパーセンテージを測定するために、ＦＡＣＳ解析を行う。表２の結果は、Ｃ５７ＢＬ／６マウスが、Ｍ１優位の免疫応答を生じ、ＢＡＬＢ／ｃマウスが、Ｍ２優位の免疫応答を生じることを示している。
【０１３７】
【表２】
2020528077.tif 000003
【０１３８】
実施例２：ＬＰＳで免疫されたＣ５７／ＢＬ６マウス由来血清をＬＰＳで免疫されたＢＡＬＢ／ｃマウスに注入すると、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＭ１優位の免疫応答が誘導された。
次に、本発明者らは、ＬＰＳで免疫されたＣ５７／ＢＬ６由来の血清をＬＰＳで免疫されたＢＡＬＢ／ｃ（ＬＰＳ−ＢＡＬＢ／ｃ）マウスに注入することによって、ＬＰＳによる免疫化ありおよび免疫化なしのＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて、Ｍ２優先の免疫応答からＭ１優位の免疫応答に変換できるかを解析した。ＢＡＬＢ／ｃマウスおよびＣ５７ＢＬ／６マウスを、尾静脈を介して１．５ｍｇ／ｋｇのＬＰＳで免疫した。８、２０および４４時間後の時点において、それぞれ５匹のＬＰＳで免疫されたＣ５７ＢＬ／６マウスを屠殺し、それらの血清をプールし、次いで、５つのアリコート（ｅｌｉｑｕａｔｅｓ）に分け、５匹のＢＡＬＢ／ｃマウスに尾静脈を介して注射した。３つの時点に対して、合計１５匹のＣ５７ＢＬ／６マウスを使用した。７２時間後の時点において、ＢＡＬＢ／ｃマウスを屠殺し、Ｍ１およびＭ２マクロファージの数を測定するための染色に向けて、脾細胞を得た。種々の群のＭ１／Ｍ２比を表３に示す。表３から、ＬＰＳで免疫され、ＬＰＳで免疫されたＣ５７ＢＬ／６マウス由来の血清を注入されたＢＡＬＢ／ｃマウス（群４）が、Ｍ１優位の免疫応答を生じ、それは、ＬＰＳ−ＢＡＬＢ／ｃマウス（群３）のそれより有意に高かった（ｐ＜０．０５）。そのような免疫された血清を、ＬＰＳで免疫されていないＢＡＬＢ／ｃマウス（群２）に注入しても、Ｍ１優位の免疫応答を有意に誘導しない（ｐ＞０．０５）ことが分かる。
【０１３９】
【表３】
2020528077.tif 000004
【０１４０】
実施例３：免疫されていないＣ５７／ＢＬ６マウス由来の血清および１４日前にＬＰＳで免疫されたＣ５７ＢＬ／６マウス由来の血清をＬＰＳ−ＢＡＬＢ／ｃマウスに注入しても、Ｍ１優位の免疫応答を誘導しない
免疫されていないＣ５７ＢＬ／６マウス由来の血清が、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＭ１優位の免疫応答を誘導するか否かを判定するために、ＢＡＬＢ／ｃマウスを、免疫されていないＣ５７ＢＬ／６マウス由来の血清の投与ありおよびなしで、１．５ｍｇ／ｋｇのＬＰＳで免疫する（それぞれ８、２０および４４時間後の時点において）。表４の結果は、免疫されていない血清が、ＬＰＳ−ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＭ１優位の免疫応答を有意に誘導しないこと（ｐ＞０．０５）（群２  対  群４）を示唆している。
【０１４１】
次に、本発明者らは、１４日前にＬＰＳで免疫されたＣ５７ＢＬ／６マウス由来の血清が、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＭ１優位の免疫応答を誘導するか否かを判定した。ＢＡＬＢ／ｃマウスを１．５ｍｇ／ｋｇのＬＰＳで免疫し、１４日前にＬＰＳで免疫されたＣ５７ＢＬ／６マウス由来の血清を投与するかまたは投与しなかった（８、２０および４４時間後の時点において）。表４の結果は、１４日前にＬＰＳで免疫されたＣ５７ＢＬ／６由来の血清が、ＬＰＳ−ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＭ１優位の免疫応答を有意に誘導しないこと（ｐ＞０．０５）（群２  対  群５）ことを示唆している。
【０１４２】
注入の８、２０および４４時間前の時点においてＬＰＳで免疫されたＣ５７ＢＬ／６マウス由来の血清だけが、ＬＰＳ−ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＭ１優位の免疫応答を有意に誘導した（ｐ＜０．０５）（表３、および表４の群２  対  群３）。
【０１４３】
【表４】
2020528077.tif 000005
【０１４４】
実施例４：Ｍ１優位の免疫応答を誘導するための血清の調製および製剤化
この実施例では、本発明の治療用血清の調製を説明する。一般に、血清は、免疫原を接種された健常ドナーから得る。免疫活性な同種血清および異種血清の調製は、以下の工程を含む。
（ａ）健常ドナーに規定量の規定の免疫原を接種した後、規定の待機期間を経て、ドナーにおいて免疫原に対する応答を生じさせる工程。前記健常ドナーは、前記免疫原を接種された後、正常な免疫応答を示す。本発明の実施例において、本発明者らは、１．５ｍｇ／ｋｇの用量のＬＰＳが、Ｃ５７ＢＬ／６マウス（正常な免疫応答を有する健常ドナーとして使用された）においてＭ１優位の免疫応答を誘導することを定義した。待機時間は、免疫原の接種後の８時間、２０時間および４４時間である。本発明者らは、１４日を超える待機時間の後に、血清の免疫活性は失われ、ＬＰＳ−ＢＡＬＢ／ｃマウスはＭ１優位の免疫応答を誘導しないことを示した（表４）。
（ｂ）免疫原を接種された健常ドナー被験体から得られた全血から免疫活性な同種または異種血清サンプルを生成する工程。Ｃ５７ＢＬ／６マウス由来の全血を、ふた付きの試験管に回収する。全血を回収した後、血餅が形成するのを邪魔しないように、その血液を室温で１５分間放置する。次いで、その血液を冷却遠心機において１，０００〜２，０００×ｇで１０分間遠心して、血餅および全血液細胞を除去する。直ちに、液体の構成要素（血清）を清浄なポリプロピレンチューブに移す。それらのサンプルを取り扱っている間、２〜８℃で維持した。本発明者らの目的のために、その血液中のすべての細胞（ＲＢＣ、ＷＢＣおよび血小板）を、全血の血餅とともに除去する。この工程は、レシピエントに注入した後の潜在的な移植片対宿主反応（ＧＶＨＲ）を回避するために重要である。
【０１４５】
上記実験において、本発明者らは、通常、１匹のＣ５７ＢＬ／６マウスから約０．１５ｍｌの血清を得る。注入前に、その血清を０．２ｍｌになるようにＰＢＳで希釈する。便宜上、本発明者らは、５つの全血サンプルをプールし、次いで、そのサンプルを遠心して血清を得て、次いで、その血清を５つのアリコートに分け、それぞれ５匹のＢＡＬＢ／ｃマウスに注入した。免疫活性な血清の最大効力を維持するために、すぐにＢＡＬＢ／ｃマウスへの注入を行う。
（ｃ）所望のＭ１優位の免疫応答を誘導するためのＭ２優位の個体への注入において使用するための治療用血清調製物を形成するために、有効量の血清サンプルを活性成分として製剤化する工程。この製剤化工程は、１）免疫原の使用ありおよびなしで、血清の免疫活性を定義する工程、２）免疫原と併用して血清の最大効力を達成するための血清注入スケジュールを定義する工程；および３）注入されるべき免疫活性な血清の用量を定義する工程を含む。これらの実験では、免疫活性な血清を、ドナーマウスの接種の８、２０および４４時間後の時点において、マウス１匹あたり０．２ｍｌ（０．１５ｍｌの血清＋０．０５ｍｌのＰＢＳ）の用量で注入する。これらの実験は、レシピエントマウスが、ドナーマウスが接種されるのと同じ時点において免疫原で免疫される必要があることも示した。レシピエントマウス（ＢＡＬＢ／ｃマウス）が免疫原で免疫されていない場合、それらの血清の免疫活性は、限定的である（表３）。
【０１４６】
さらなる実施形態において、ヒトに臨床で使用する際、それらの血清は、さらに濃縮される必要があり得るか、またはその血清の免疫活性を高めるためもしくは潜在的な副作用を低減するために、血清中のアルブミン画分を全体的もしくは部分的に除去する必要がある。治療用血清調製物の薬学的組成物は、さらなる構成要素を様々な組み合わせで含み得る。活性因子は、サイトカイン、ケモカイン、成長因子、マクロファージ活性化因子および酵素からなる群より選択される。
【０１４７】
本明細書中に記載される血清は、Ｍ１優位の免疫応答の誘導、Ｍ２マクロファージ媒介性の病態の処置、および／またはＴＨ１および細胞傷害性の免疫応答の誘導を必要とする被験体（例えば、Ｍ２優位の患者またはＭ２／Ｔｈ２優位の患者）において、Ｍ１優位の免疫応答を誘導するため、Ｍ２マクロファージ媒介性の病態を処置するため、および／またはＴＨ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための薬として有用である。
【０１４８】
実施例の考察
これらの実験の目的は、免疫が活性化された同種血清の注入が、Ｍ２優位の個体においてＭ１優位の免疫応答を誘導するかを判定することであった。本発明者らは、Ｃ５７ＢＬ／６およびＢＡＬＢＣ／ｃマウスを同種系統として用いて、これらの実験を行った。研究［７  Ｍｉｌｌｓ  ＣＤら、８．Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｈら］は、Ｃ５７ＢＬ／６マウスが、ＬＰＳもしくは死滅微生物で免疫されるかまたは生存微生物に感染すると、Ｍ１／Ｔｈ１優位の免疫応答を生じる一方で、ＢＡＬＢ／ｃマウスは、同じ作用物質で免疫されるかまたは同じ作用物質に感染すると、Ｍ２／Ｔｈ２優位の免疫応答を生じることを示していた。本発明者らは、ＬＰＳで免疫されたＣ５７ＢＬ／６マウス由来の免疫が活性化された血清が、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＭ２優位の免疫バックグラウンドを破綻させることができ、Ｍ１優位の免疫応答を誘導できることを実証した。本発明者らの結果は、ＬＰＳで免疫されたＣ５７ＢＬ／６マウス由来の免疫が活性化された血清が、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいてＭ１優位の免疫応答を統計的に有意に誘導することを示す。
【０１４９】
腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）とも呼ばれるＭ２マクロファージは、腫瘍、特に、末期の腫瘍を有する患者において優勢である。ＴＡＭは、腫瘍の成長および腫瘍の転移（ｍａｔａｓｔａｓｉｓ）に必要である。ＴＡＭはまた、体内の腫瘍特異的免疫応答を抑制する。したがって、ＴＡＭは、腫瘍免疫療法の有望な標的である。他の腫瘍免疫療法（ｔｕｍｏｒ  ｉｕｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ）の方法は、Ｍ２免疫バックグラウンドを有する腫瘍患者を直接免疫するので、それらの方法は、通常、Ｍ２優位の免疫応答を誘導するか、またはＭ１優位の免疫応答を少なくとも誘導せず、それらの免疫療法の失敗をもたらしている。本発明者らは、健常個体由来の血清（助け）が、Ｍ２優位の免疫バックグラウンドを破綻させるために必要であり、Ｍ２優位の免疫バックグラウンドを有する腫瘍患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するために必要であると仮定する。これらの実験のデータは、基礎をなす技術を裏付けるものである。
【０１５０】
参考文献
1.  Originand functions of tissue macrophages. Epelman S, Lavine KL, Randolph GJ.Immunity. 41(1):21-35 (2014).
2.  ThePromise of Targeting Macrophages in Cancer Therapy. Brown JM, Recht L, StroberS, Clin Cancer Res. 23(13):3241-3250 (2017).
3.  Inflammationas target in cancer therapy. Marelli G, Sica A, Vannucci L, Allavena P. CurrOpin Pharmacol. 35:57-65 (2017).
4.  MacrophagePolarization: Anti-Cancer Strategies to Target Tumor-Associated Macrophage inBreast Cancer. Muhammad Tariq, Jieqiong Zhang, Guikai Liang, Ling Ding, QiaojunHe, and Bo Yang. J Cell Biochem. 9999:1-18 (2017).
5.  ABreakthrough: Macrophage-Directed Cancer Immunotherapy. Mills CD, Lenz LL,Harris RA. Cancer Res. 76(3):513-6 (2016).
6.  Hallmarks of Cancer: the next generation. Hanahan D, Weinberg RA.Cell. 144(5):646-74 (2011).
7.  M-1/M-2 macrophages and the Th1/Th2 paradigm. Mills CD, Kincaid K, AltJM, Heilman MJ, Hill AM.. J Immunol. 164(12):6166-73 (2000).
8.  Innate immune response in Th1- and Th2-dominant mousestrains.
Watanabe H, Numata K,Ito T, Takagi K, Matsukawa A.. Shock. 22(5):460-6 (2004).
【０１５１】
参照による援用
特許文書（補正証明書、特許出願文書を含む）、科学論文、政府の報告書、ウェブサイト、および本明細書中で言及される他の参考文献の各々の全開示が、あらゆる目的のために、その全体が本明細書中で参照により援用される。用語法に矛盾がある場合、本明細書が支配する。
【０１５２】
均等物
本発明は、その趣旨または必須の特徴から逸脱することなく、他の具体的な形態で具体化することができる。前述の実施形態は、あらゆる点において、本明細書中に記載される本発明に対する限定ではなく、例証であるとみなされるべきである。本発明の方法および組成物の様々な実施形態において、列挙されている工程または組成物に関して用語が使用されている場合、それらの方法および組成物は、その列挙されている工程または構成要素から本質的になるか、またはそれらからなるとも企図される。さらに、工程の順序またはある特定の行為を行う順序は、本発明が依然として実施可能である限り、重要ではない。さらに、２つまたはそれを超える工程または行為を同時に行うことができる。
【０１５３】
本明細書において、文脈が明らかに他のことを指示しない限り、単数形は、複数形も含む。別段定義されない限り、本明細書中で使用されるすべての専門用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者が通常理解している意味と同じ意味を有する。矛盾がある場合、本明細書が支配する。
【０１５４】
さらに、ある特定の構成要素は、混合されると、さらに反応し得るかまたは他の材料に変化し得るので、ある特定の場合において、ある組成物は、混合前の構成要素から構成されていると説明され得ることが認識されるべきである。
【０１５５】
本明細書中で使用されるすべてのパーセンテージおよび比は、別段示されない限り、重量基準である。
（項目１）
Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から免疫活性な同種または異種血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記Ｍ２優位の患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
（項目２）
前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原で免疫されている、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原で免疫されていない、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記健常ドナー被験体が、正常な免疫応答バックグラウンドを有する、項目１に記載の方法。
（項目５）
工程（ａ）の血清サンプルを得る前に、前記健常ドナー被験体に、１つまたは複数の免疫原を接種するか、または（生存）微生物を感染させる、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記工程（ａ）の血清サンプルを得るためのタイムスケジュールおよび前記工程（ｂ）の血清サンプルを注入するためのタイムスケジュールがそれぞれ、前記ドナー被験体の接種後の約８時間〜約１４日間から個別に選択される、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記タイムスケジュールがそれぞれ、約８時間、２４時間、４８時間、９６時間、１６８時間および１９２時間から個別に選択される、項目６に記載の方法。
（項目８）
Ｍ２マクロファージ媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性の病態を処置するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から免疫活性な血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
（項目９）
前記病態が、癌、慢性ウイルス感染症、アレルギーおよび喘息から選択される、項目８に記載の方法。
（項目１０）
前記病態が、癌である、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記患者を既存の（従来の）癌治療で処置する工程をさらに含む、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
前記既存の癌治療が、化学療法、放射線療法、免疫療法およびそれらの組み合わせから選択される、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、哺乳動物である、項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、ヒトである、項目１に記載の方法。
（項目１５）
前記Ｍ２優位の患者が、ヒトである、項目１に記載の方法。
（項目１６）
健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための治療用血清であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清。
（項目１７）
項目１６に記載の治療用血清を含む、薬学的組成物。
（項目１８）
インビボにおけるＭ１優位の免疫応答の誘導に不可欠な活性因子をさらに含む、項目１７に記載の薬学的組成物。
（項目１９）
前記活性因子が、サイトカイン、ケモカイン、成長因子、マクロファージ活性化因子、酵素およびそれらの組み合わせから選択される、項目１８に記載の薬学的組成物。
（項目２０）
前記血清が、同種血清である、項目１〜１３のいずれかに記載の方法。
（項目２１）
前記血清が、異種血清である、項目１〜１３のいずれかに記載の方法。
（項目２２）
同種血清である、項目１６に記載の治療用血清。
（項目２３）
異種血清である、項目１６に記載の治療用血清。
（項目２４）
前記血清が、同種血清である、項目１７〜１９のいずれかに記載の薬学的組成物。
（項目２５）
前記血清が、異種血清である、項目１７〜１９のいずれかに記載の薬学的組成物。
（項目２６）
健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清の使用であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用。
（項目２７）
Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴＨ１およびＴｃｙｃｔｏｔｏｘｉｃの免疫応答を誘導するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から免疫活性な同種または異種血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
（項目２８）
Ｍ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態を処置するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から免疫活性な血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記患者に前記血清サンプルを注入する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
（項目２９）
健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１およびＴｃｙｃｔｏｔｏｘｉｃの免疫応答を誘導するための治療用血清であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清。
（項目３０）
健常ドナーから得られた血清サンプルを含む、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１およびＴｃｙｔｏｔｏｘｉｃの免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清の使用であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用。
（項目３１）
Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から得られる免疫活性な同種または異種血清サンプルを得る工程；および
（ｂ）前記Ｍ１優位の免疫応答を誘導するための前記Ｍ２優位の患者への注入において使用するための治療用血清調製物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
（項目３２）
前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原の接種が済んでいる、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記Ｍ２優位の患者が、前記血清サンプルの注入前に、免疫原で免疫されていない、項目３１に記載の方法。
（項目３４）
前記健常ドナー被験体が、正常な免疫応答バックグラウンドを有する、項目３１に記載の方法。
（項目３５）
前記血清サンプルを前記健常ドナー被験体から得る前に、前記健常ドナー被験体に、１つまたは複数の免疫原を接種するか、または（生存）微生物を感染させる、項目３１に記載の方法。
（項目３６）
前記ドナー被験体から前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュールおよび前記治療用血清調製物を注入するためのタイムスケジュールがそれぞれ、前記ドナー被験体の接種後の約８時間〜約１４日間から個別に選択される、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
前記タイムスケジュールがそれぞれ、約８時間、２４時間、４８時間、９６時間、１６８時間および１９２時間から個別に選択される、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
Ｍ２マクロファージ媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性の病態を処置するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から得られる免疫活性な血清サンプルを提供する工程；および
（ｂ）前記Ｍ２マクロファージ媒介性の病態を処置するための前記患者への注入において使用するための治療用血清調製物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
（項目３９）
前記病態が、癌、慢性ウイルス感染症、アレルギーおよび喘息からなる群より選択される、項目３８に記載の方法。
（項目４０）
前記病態が、癌である、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
前記薬が、既存の（従来の）癌治療と併用して前記患者に投与される、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
前記既存の癌治療が、化学療法、放射線療法、免疫療法およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、哺乳動物である、項目３１に記載の方法。
（項目４４）
前記Ｍ２優位の患者と前記健常ドナーとの両方が、ヒトである、項目３１に記載の方法。
（項目４５）
前記Ｍ２優位の患者が、ヒトである、項目３１に記載の方法。
（項目４６）
健常ドナーから得られる有効量の血清サンプルを活性成分として含む、Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための治療用血清調製物であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清調製物。
（項目４７）
項目４６に記載の治療用血清調製物を含む、薬学的組成物。
（項目４８）
インビボにおけるＭ１優位の免疫応答の誘導に不可欠な活性因子をさらに含む、項目４７に記載の薬学的組成物。
（項目４９）
前記活性因子が、サイトカイン、ケモカイン、成長因子、マクロファージ活性化因子、酵素およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、項目４８に記載の薬学的組成物。
（項目５０）
前記血清が、同種血清である、項目３１〜４３のいずれかに記載の方法。
（項目５１）
前記血清が、異種血清である、項目３１〜４３のいずれかに記載の方法。
（項目５２）
同種血清である、項目４６に記載の治療用血清調製物。
（項目５３）
異種血清である、項目４６に記載の治療用血清調製物。
（項目５４）
前記血清が、同種血清である、項目４７〜４９のいずれかに記載の薬学的組成物。
（項目５５）
前記血清が、異種血清である、項目４７〜４９のいずれかに記載の薬学的組成物。
（項目５６）
Ｍ２優位の患者においてＭ１優位の免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清調製物の使用であって、前記治療用血清調製物は、健常ドナーから得られた血清サンプルを含み、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用。
（項目５７）
Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴＨ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体から得られる免疫活性な同種または異種血清サンプルを提供する工程；および
（ｂ）前記ＴＨ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための前記Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者への前記血清サンプルの注入において使用するための組成物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
（項目５８）
Ｍ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態の処置を必要とする患者におけるＭ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態を処置するための薬を製造するための方法であって、前記方法は、
（ａ）健常ドナー被験体（前記患者以外）から得られる免疫活性な血清サンプルを提供する工程；および
（ｂ）前記Ｍ２マクロファージ媒介性またはＴｈ２媒介性の病態を処置するための前記患者への前記血清サンプルの注入において使用するための組成物を形成するために、有効量の前記血清サンプルを活性成分として製剤化する工程
を含み、ここで、前記血清サンプルを得るためのタイムスケジュール（レジメン）および前記血清サンプルを注入するためのタイムスケジュール（レジメン）は、ウイルスまたは細菌によって引き起こされる急性感染症に対する免疫応答誘導の自然の時間経過をモデルにする、方法。
（項目５９）
健常ドナーから得られた有効量の血清サンプルを含む、Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための治療用血清調製物であって、ここで、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、治療用血清調製物。
（項目６０）
Ｍ２／Ｔｈ２優位の患者においてＴｈ１および細胞傷害性の免疫応答を誘導するための薬を製造するための治療用血清調製物の使用であって、前記治療用血清調製物は、健常ドナーから得られた血清サンプルを含み、前記ドナーは、免疫原の接種が済んでいる、使用。
【国際調査報告】
2020528077.tif 000006
2020528077.tif 000007
2020528077.tif 000008