(57)【要約】  個々に関連する免疫系を考慮に入れた悪性腫瘍の治療のための薬剤を提供する方法、およびまたその使用におけるそれによって提供される抗体が開示され、ここで、悪性腫瘍と免疫系との間の個々のコミュニケーション構造が、胚ＨＬＡ群の発現パターンの決定および免疫担当細胞上／内に存在する受容体タイプの決定によって確認され、ならびに少なくとも１つの決定された受容体タイプにリガンドとして特異的に結合し、結果として発現パターンの少なくとも一部がそれを見つけ出すことができないかまたはより低い作用でしかそこに結合できないように受容体をブロックまたはマスクするが、それ自体は関連する免疫担当細胞を抑制しない種類の抗体が提供される。
2020510695.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
特定の個々の関連する免疫系を含む悪性腫瘍の治療のための薬剤を調製する方法であって、
（ａ）前記悪性腫瘍と前記免疫系との間の個々のコミュニケーション構造を決定する工程であって、
−前記悪性腫瘍上に存在する胚ＨＬＡ群の少なくとも１つの発現パターンを決定することと、
−前記発現パターンの少なくとも一部にリガンドとして結合することができ、この結合に基づいて免疫担当細胞に抑制作用を及ぼすことができる、前記免疫系の免疫担当細胞上／内に存在する少なくとも１つの受容体タイプを決定すること
とを含む工程、および
（ｂ）−前記少なくとも１つの決定された受容体タイプにリガンドとして特異的に結合し、結果として前記発現パターンの少なくとも一部がそこに結合することができないかまたはより小さな作用でしか結合できないように前記受容体をブロックまたはマスクする、
−ただし、それ自体は関連する前記免疫担当細胞を抑制しない
種類の抗体を提供する工程
を含む、方法。
【請求項２】
前記少なくとも１つの受容体タイプが、ＫＩＲ受容体、ＮＫＧ２受容体、ＬＩＬ−Ｒ受容体のうちの１つ以上を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
−免疫担当細胞の受容体に結合した後、前記免疫担当細胞に対する活性化作用を開始する種類の活性化抗体を提供する工程
をさらに含む、請求項１〜２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４】
（ａ’）ＨＬＡ−Ｃが過剰発現しているかどうかを判定する工程であって、ＨＬＡ−Ｃが過剰発現している場合は、
−ＨＬＡ−Ｃ群のＨＬＡ−Ｃ発現パターンを決定することと、
−前記ＨＬＡ−Ｃ発現パターンの少なくとも一部にリガンドとして結合することができ、この結合に基づいて、免疫担当細胞に抑制または活性化作用を及ぼすことができる第二の受容体タイプを決定すること
とを含む工程、および
（ｂ’）−前記第二の受容体タイプに特異的に結合し、結果として前記ＨＬＡ−Ｃ発現パターンの少なくとも一部がそこに結合することができないかまたはより小さな作用でしか結合できないように前記第二の受容体をブロックまたはマスクする、
−ただし、それ自体は前記関連する免疫担当細胞を抑制または活性化しない
種類の第二の抗体を提供する工程
を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法によって提供される抗体。
【請求項６】
悪性腫瘍の治療における薬剤としての、請求項５に記載の抗体の使用。
【請求項７】
−前記抗体によって免疫担当細胞上の前記少なくとも１つの決定された受容体タイプの受容体をブロックまたはマスクする工程
を含む、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
−受容体が前記抗体によって特異的に結合される前記免疫担当細胞が１人のドナーに由来する、請求項６または７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、悪性腫瘍の治療のための薬剤を提供する分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
悪性腫瘍疾患の治療のための古典的な療法、例えば切除術、化学療法および放射線療法に加えて、免疫応答を開始するためのワクチンまたは悪性腫瘍に結合するための抗体（断片）の投与に基づく、能動または受動免疫療法がますます使用されている。悪性腫瘍を治療するための薬剤は、高度に選択的であり、耐性を生じさせないものでなければならない。
【０００３】
それにもかかわらず、腫瘍疾患には免疫応答を回避するための機構がある。そのようないわゆる逃避機構の１つは、ＭＨＣ（主要組織適合遺伝子複合体）、特に、ヒトにおける細胞対話に役立つそのＨＬＡ群（ヒト白血球抗原）に基づく。文献では、ＨＬＡという略語は、コード遺伝子またはそれらによって発現されるタンパク質を表すことができる。以下で使用されるＨＬＡ群の概念は、本明細書では特に細胞表面の遺伝子によって発現される表面タンパク質を表すべきである。一般に、ＨＬＡ群は、例えば次の４つのクラスに分けることができる：
（ｉ）本質的にすべての成熟細胞と体細胞を識別するＨＬＡ群Ａ、ＢおよびＣ（ＭＨＣ−Ｉ）；
（ｉｉ）免疫担当細胞および抗原の提示において重要な役割を果たすＨＬＡ群Ｄ（ＤＲ、ＤＰ、ＤＱなど、ＭＨＣ−ＩＩ）；
（ｉｉｉ）特にいわゆる浸潤最前線の胚細胞を識別するＨＬＡ群Ｅ、ＦおよびＧ；
（ｉｖ）ＨＬＡ群Ｈとそれに続く群、いわゆる偽遺伝子。
【０００４】
悪性腫瘍細胞は、それらの表面に典型的な胚ＨＬＡ群（すなわちＨＬＡ−Ｅ、ＨＬＡ−Ｆおよび／またはＨＬＡ−Ｇ）を発現することができる。胚ＨＬＡ群は、悪性細胞が生物自体の非特異的および／または特異的免疫防御の攻撃を回避するという事実に寄与し得る。細胞の表面上のこれらの典型的なＨＬＡ群の発現の結果として、後者は免疫担当細胞の対応する受容体を活性化することができるようになる。原則として、活性化後にこれらの免疫担当細胞の機能を抑制する受容体、例えばナチュラルキラー細胞上のキラー免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）またはリンパ球上の白血球免疫グロブリン様受容体（ＬＩＬＲ）が関与する。
【０００５】
したがって、特に胚細胞上（特に胎盤および栄養膜細胞上）の抗原ＨＬＡ−Ｅ、ＦおよびＧは、母親の免疫系が細胞を攻撃するのを防ぐ。このようにして、胚は免疫応答を回避することができる。この逃避機構は、妊娠の免疫学的制御の骨格を構成する。拒絶反応は起こらず、遺伝的に半異質（父親由来の異質部分５０％）または異質の胚（単細胞ドナーまたは胚ドナーまたは代理母の場合１００％）が満期に至ることができる。
【０００６】
大きく異なる組織の悪性腫瘍がこの胚の逃避機構を利用することができ、免疫防御を抑制または回避する。結果として、それらはまた、いくつかの治療戦略に対抗する、すなわち攻撃に基づく戦略を抑制することができる。この理由から、悪性腫瘍を治療するためには免疫系を含むことが有利であり得る。
【０００７】
抗腫瘍薬の製造方法は欧州特許出願公開第２５６１８９０Ａ１号明細書から公知であり、その中では、悪性腫瘍細胞の発現パターンの決定後に、そこで発現された胚ＨＬＡ群がマスクまたは破壊される。マスクまたは破壊されたＨＬＡ群は、もはや免疫系を抑制することができないので、免疫担当細胞の攻撃が考慮されることになる。このためには、できるだけ多くの悪性腫瘍細胞をマスクすることが必要である。しかし、ＨＬＡ群をマスクすることは、やはり胚ＨＬＡ群を発現する他の非悪性組織にも影響を及ぼし得る。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】欧州特許出願公開第２５６１８９０Ａ１号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
この背景を考慮して、本発明は、悪性腫瘍を治療するための薬剤、抗体、およびそのような抗体の使用を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
この目的は、独立請求項に記載の方法、抗体およびそれらの使用によって解決される。従属請求項は、好ましい実施形態を説明する。
【００１１】
特定の個々に関連する免疫系を含む、悪性腫瘍を治療するための薬剤を提供する本発明による方法は、悪性腫瘍と免疫系との間の個々のコミュニケーション構造の決定、ならびに抗体の提供を含む。
【００１２】
悪性腫瘍と免疫系との間の個々のコミュニケーション構造を決定するために、悪性腫瘍上に存在する胚ＨＬＡ群の少なくとも１つの発現パターン、ならびに免疫系の免疫担当細胞上／内に存在する少なくとも１つの受容体の状態または受容体タイプを決定する。組織病理学的に同一と分類される腫瘍または転移でさえも、個体間で、または個体内のある場所と別の場所で異なる発現パターンを有し得る。治療法、例えば化学治療剤またはホルモン拮抗薬の投与は、発現パターンにさらに影響を及ぼし得る。個々の表現パターンの決定はこれらの違いに対処する。
【００１３】
少なくとも１つの受容体の状態、特に受容体のタイプの決定は、リガンドとして発現パターンの少なくとも一部に結合することができ、この所見に基づいて、免疫担当細胞に抑制作用を及ぼすことができる少なくとも１つの受容体のタイプに関係する。特定の受容体状態のこれらの受容体タイプは、それらの表面の免疫担当細胞によって発現され、シグナル伝達によってシグナル経路を開始する表面タンパク質または膜貫通タンパク質のクラスである。
【００１４】
抑制作用は、本明細書では免疫担当細胞の細胞傷害活性を低下させるまたは妨げる免疫調節作用を表すべきである。このシグナル経路は、例えば免疫受容体チロシン依存性抑制モチーフ（ＩＴＩＭ）、すなわち細胞質リン酸化を介して開始され得る。
【００１５】
抗体の提供とは、一方では少なくとも１つの決定された受容体タイプにリガンドとして特異的に結合するが、関連する免疫担当細胞を抑制せず、他方で発現パターンの少なくとも一部がそこに結合することができないかまたはわずかな作用でしか結合できないように受容体をブロックまたはマスクする種類の抗体を指す。受容体をマスクまたはブロックすること、したがって、この受容体上の胚ＨＬＡ群の発現パターンの結合を防ぐことは、それらの抑制作用を回避することができる。
【００１６】
一般に、本発明によって提供される抗体は、受容体に結合することによって、免疫担当細胞に抑制作用を及ぼすことができない、すなわち固有の活性を持たない。上記とは対照的に、悪性腫瘍細胞の胚ＨＬＡ群の発現パターンは、受容体に結合した場合に免疫担当細胞に抑制作用を及ぼす。
【００１７】
いくつかの実施形態では、発現パターンの決定は、胚ＨＬＡ群が好ましくは存在するか否かを調べるための検査を含む。さらに、発現パターンの決定は、好ましくは発現レベルの定量的決定を含む。例えば、発現パターンまたは発現レベルは、ＲＮＡ配列決定、ＤＮＡマイクロアレイ、定量ＰＣＲ（定量的ポリメラーゼ連鎖反応）、発現プロファイリング、ＳＡＧＥ（遺伝子発現の連続解析、連続遺伝子発現解析）などの公知の方法によって決定することができる。
【００１８】
悪性腫瘍細胞の概念は、原発性悪性腫瘍の転移細胞も含む。本発明による方法は、転移の個々の相違、特にそれらの胚ＨＬＡ群の個々の発現パターンを調べるために、好ましくはいくつかの、特に好ましくはすべての転移に対して個々に行われる。
【００１９】
少なくとも１つの受容体タイプは、好ましくは免疫担当細胞の表面上の膜貫通タンパク質として発現される。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの受容体タイプは、ＫＩＲ受容体（キラー免疫グロブリン様受容体）、ＮＫＧ２受容体、ＬＩＬ受容体（白血球免疫グロブリン様受容体）のうちの１つ以上を含む。
【００２０】
いくつかのＮＫＧ２受容体、特にＮＫＧ２  Ａ、ＮＫＧ２  Ｂ、ＮＫＧ２  Ｃ、ＮＫＧ２  Ｄ、ＮＫＧ２  ＥおよびＮＫＧ２  Ｆは、例えばＨＬＡ−Ｅに結合することができる。いくつかのＬＩＬ受容体、特にＬＩＬ  Ｂ１、ＬＩＬ  Ｂ２およびＬＩＬ  Ｂ４は、例えばＨＬＡ−Ｆに結合することができる。ＫＩＲ  ２ＤＬ３またはＬＩＬ  Ａ２は、例えばＨＬＡ−Ｇに結合することができる。
【００２１】
提供される抗体は、少なくとも１つの受容体タイプに結合する種類のものである。したがって、例えば抗ＫＩＲ  ２ＤＳ１と表される抗体は、ＫＩＲ  ２ＤＳ１型の受容体にリガンドとして結合する。抗ＫＩＲ  ２ＤＳ４と表される抗体は、ＫＩＲ  ２ＤＳ４型の受容体に結合することができる。
【００２２】
いくつかの実施形態では、受容体タイプの決定は、どの受容体が個体に配置されたかを考慮することもできる。どの受容体が個体に配置されたかを確認する検査は、例えば遺伝子分析または発現分析によって実施することができる。特定の受容体タイプが個体に存在しない場合、この抵抗型に対する抗体の投与は指示されない。
【００２３】
いくつかの実施形態では、免疫担当細胞は、ＮＫ細胞（ナチュラルキラー細胞）および／またはリンパ球を含む。
【００２４】
いくつかの実施形態では、この方法は、免疫担当細胞の受容体に結合した後、後者に対する活性化作用を開始するタイプの活性化抗体を提供することをさらに含む。
【００２５】
さらに、いくつかの実施形態では、方法は、ＨＬＡ−Ｃが過剰発現されているかどうかの判定を含み得る。ＨＬＡ−Ｃの過剰発現の場合、その発現パターンおよびこの発現パターンの第２の受容体タイプ、すなわちＨＬＡ−Ｃ発現パターンの少なくとも一部にリガンドとして結合することができ、この結合に基づいて、免疫担当細胞に活性化作用を及ぼすものを決定することができる。例えば、第２の受容体タイプは、ＮＫ細胞に対して活性化作用を及ぼすことができるＫＩＲ  ＤＳ受容体の群からの受容体タイプであり得る。ＨＬＡ−Ｃに結合する活性化受容体の例は、ＫＩＲ  ２ＤＳ１、ＫＩＲ  ２ＤＳ２またはＫＩＲ  ２ＤＳ４である。そのようなＫＩＲ−ＤＳ型の受容体は、免疫担当細胞を活性化することができ、それにより、例えばサイトカインまたは成長因子などの成長活性物質またはさらには腫瘍増殖物質を産生する。
【００２６】
あるいは、第２の受容体タイプは、ＨＬＡ−Ｃ発現パターンの少なくとも一部にリガンドとして結合することができ、この結合に基づいて、免疫担当細胞に抑制作用を及ぼすことができる。例えば、第２の受容体タイプは、ＮＫ細胞に抑制作用及ぼすことができるＫＩＲ−ＤＬ受容体の群からの受容体タイプであり得る。ＨＬＡ−Ｃに結合する抑制性受容体の例は、ＫＩＲ  ２ＤＬ１、ＫＩＲ  ２ＤＬ２、ＫＩＲ  ２ＤＬ３またはＫＩＲ  ３ＤＬ３である。
【００２７】
第２の受容体タイプから出発して、第２の受容体タイプに特異的に結合するが、関連する免疫担当細胞を抑制または活性化せず、同時にＨＬＡ−Ｃ発現パターンの少なくとも一部がそこに結合することができないかまたはわずかな作用でしか結合できないように第２の受容体をブロックまたはマスクするタイプの第２の抗体を提供することができる。
【００２８】
さらに、本発明は、本発明による方法によって利用可能にされた抗体を提供し、さらに、悪性腫瘍の治療における薬剤としての本発明による抗体の使用が提供される。
【００２９】
いくつかの実施形態では、本発明による方法は、免疫担当細胞上の少なくとも１つの決定された受容体タイプの受容体を抗体によってブロックまたはマスクすることを含む。抗体のそのような使用法では、悪性腫瘍細胞上に発現された胚ＨＬＡ群の、免疫担当細胞上の少なくとも１つの特定の受容体タイプの受容体への結合が防止または低減される。抗体は、好ましくは受容体タイプに対して高い親和性、特に悪性腫瘍細胞の胚ＨＬＡ群の親和性に匹敵するか、より高いまたは実質的により高い親和性を示す。親和性は、好ましくは抗体の拡散および／または競合的置換を防ぐのに十分な高さである。
【００３０】
特に、ブロッキングまたはマスキングは、インビボで、例えば患者の生体内で起こり得る。いくつかの実施形態では、抗体の使用は局所的または全身的に起こり得る。局所使用は、例えば悪性腫瘍またはその周辺への注射を含む。全身使用は、例えば経口、経鼻、舌下、直腸、皮下、静脈内、経皮などの方法の１つでの投与を含む。
【００３１】
インビボでの遮断の代わりに、例えば全身的な副作用を回避するために、インビトロでブロッキングまたはマスキングを行って、その後免疫担当細胞を輸血することができる。インビトロでの遮断の場合、免疫担当細胞を除去し、抗体に暴露して、マスキングが行われた後に輸血して戻すことができる。
【００３２】
本発明による使用のいくつかの実施形態では、例えば全身的な副作用を回避するために、その発現パターンが決定された細胞および／またはその受容体が抗体によって特異的に結合される免疫担当細胞は、同一の患者に由来する。そのような実施形態は、胚ＨＬＡ群の発現の個体間変動が大きい場合に特に好ましい可能性がある。
【００３３】
いくつかの実施形態では、その受容体が抗体によって特異的に結合される免疫担当細胞は、１人のドナーに由来する。ドナーは、悪性腫瘍を患っていない第三者であり得る。免疫担当細胞は、例えば受容体の遮断またはマスキングの後に注射することができ、胚ＨＬＡ群からその発現が決定された悪性腫瘍を治療するのに使用される。
例示的な実施形態の以下の説明において添付の図面を参照する。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】図１は、例示的な実施形態による方法のフローチャートを示す。
【図２】図２は、例示的な実施形態による方法を実施することができる異なる個体の３つの悪性腫瘍細胞の概略図を示す。
【図３】図３は、胚ＨＬＡ群と免疫担当細胞の受容体との間の結合を伴う、悪性腫瘍細胞および免疫担当細胞の概略図を示す。
【図４】図４は、例示的な実施形態による方法を実施することができる悪性腫瘍細胞および免疫担当細胞の概略図を示す。
【図５】図５は、例示的な実施形態による方法を実施することができる悪性腫瘍細胞および免疫担当細胞の概略図を示す。
【図６】図６は、例示的な実施形態による方法を実施することができる悪性腫瘍細胞および２つの免疫担当細胞の概略図を示す。
【図７】図７は、例示的な実施形態による抗体による免疫担当細胞の受容体のマスキングを伴う、悪性腫瘍細胞および免疫担当細胞の概略図を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
図１は、薬剤を提供するための方法１０のフローチャートを示す。方法１０は、発現パターンの決定１２、少なくとも１つの受容体タイプの決定１４、および抗体の提供１６を含む。
【００３６】
悪性腫瘍上に位置する胚ＨＬＡ群の発現が、発現パターンの決定１２の間に決定される。
【００３７】
少なくとも１つの受容体タイプの決定１４の間に、胚ＨＬＡ群の発現パターンの少なくとも一部にリガンドとして結合することができ、この結合に基づいて免疫担当細胞に抑制作用を及ぼすことができる受容体タイプが決定される。
【００３８】
工程１６で提供される抗体は、免疫担当細胞の少なくとも１つの特定の受容体タイプにリガンドとして特異的に結合し、胚ＨＬＡ群の発現パターンの少なくとも一部がそこに結合することができないかまたはより小さな作用でしか結合できないように受容体をブロックまたはマスクするが、それ自体は関連する免疫担当細胞を抑制することができない種類のものである。
【００３９】
図２は、本発明による方法を実施することができる異なる個体Ａ、ＢおよびＣの３つの悪性腫瘍細胞２０ａ、２０ｂ、２０ｃの概略図を示す。特に、特定の発現パターンは、示されている３つの悪性腫瘍細胞２０ａ、２０ｂ、２０ｃのそれぞれ、特に特定の個体についてのものまたは特定の悪性腫瘍についての個々の発現パターンを使用して決定することができる。３つの悪性腫瘍細胞２０ａ、２０ｂ、２０ｃは、免疫系との個々のコミュニケーション構造が異なる。
【００４０】
第一の悪性腫瘍細胞２０ａは、個体Ａから採取された。この悪性腫瘍細胞２０ａは、個体Ａの悪性腫瘍の組織試料の一部として採取されたと考えられる。悪性腫瘍細胞２０ａは、その表面に複数の膜タンパク質（図示していない）を含む。これらの膜タンパク質のいくつかは、胚ＨＬＡ群に属する。悪性腫瘍細胞２０ａは、特にＨＬＡ−Ｅ型およびＨＬＡ−Ｇ型の胚ＨＬＡ群２４ａを含む（ただしＨＬＡ−Ｆ型のものは含まない）。したがって、悪性腫瘍細胞２０ａによって発現される胚ＨＬＡ群２４ａの発現パターン２６ａを決定することができる。
【００４１】
個体Ｂから採取された第二の悪性腫瘍細胞２０ｂは、それによって発現された胚ＨＬＡ群２４ｂが第一の悪性腫瘍細胞２０ａによって発現されたものと一致するか、部分的に逸脱するか、または完全に逸脱し得る。示されている場合では、第二の悪性腫瘍細胞２０ｂは、ＨＬＡ−Ｆ型の胚ＨＬＡ群２４ｂを発現する。したがって、悪性腫瘍細胞２０ｂによって発現される胚ＨＬＡ群２４ｂの発現パターン２６ｂも決定することができる。
【００４２】
悪性腫瘍細胞２０ｃによって発現された胚ＨＬＡ群２４ｃの発現パターン２６ｃも、個体Ｃから採取された第三の悪性腫瘍細胞２０ｃについて決定することができる。示されている場合では、発現パターン２６ｃは、ＨＬＡ−Ｆ型およびＨＬＡ−Ｇ型の胚ＨＬＡ群２４ｃを含む。
【００４３】
特定の発現パターンから出発して、発現パターンに含まれる胚ＨＬＡ群の１つにリガンドとして結合することができ、この結合に基づいて免疫担当細胞に抑制作用を及ぼすことができる少なくとも１つの受容体タイプが決定される。
【００４４】
受容体とリガンドの結合が確立され、受容体が第一の細胞（例えば免疫担当細胞）上で発現され、リガンドが第二の細胞（例えば悪性腫瘍細胞）上で発現されると、細胞対話が起こり、この協力は、例えば活性化または抑制作用を発現させることができる。細胞の同定でさえも、そのような受容体−リガンド結合に基づく。
【００４５】
図３は、悪性腫瘍細胞２０の胚ＨＬＡ群２４と免疫担当細胞３０の受容体３２との間の結合を伴う、悪性腫瘍細胞２０および免疫担当細胞３０の概略図を示す。示されている胚ＨＬＡ群２４の結合に基づいて、悪性腫瘍細胞２０は免疫担当細胞３０に抑制作用２８を及ぼす。悪性腫瘍細胞２０の発現パターンと免疫担当細胞の受容体との間のこの相互作用は、悪性腫瘍と免疫系との間の個々のコミュニケーション構造に特徴的である。この抑制作用は、免疫担当細胞３０の免疫応答が実質的に起こらないという結果をもたらす。
【００４６】
図４は、本発明による方法を実施することができる悪性腫瘍細胞２０および免疫担当細胞３０の概略図を示す。この例示的な実施形態は、特に、特定の発現パターンを使用して少なくとも１つの受容体タイプを決定することができる方法を説明する。この決定は、悪性腫瘍と免疫系との間の個々のコミュニケーション構造の決定に寄与する。
【００４７】
したがって、胚ＨＬＡ群の発現パターン２６は、そのパターンがＨＬＡ−Ｆ型のＨＬＡ群を含む悪性腫瘍細胞２０上で決定することができる。
【００４８】
決定された発現パターン２６に基づいて、発現された胚ＨＬＡ群の１つ、すなわちＨＬＡ−Ｆ型のＨＬＡ群２４にリガンドとして結合することができ、胚ＨＬＡ群２４の結合に基づいて、免疫担当細胞３０に抑制作用を及ぼすことができる少なくとも１つの受容体タイプ３２が決定される。免疫担当細胞３０はリンパ球である。上記の前提条件を満たす受容体タイプ３２は、ＬＩＬＲ  Ｂ１（白血球免疫グロブリン様受容体Ｂ１）である。
【００４９】
本発明による方法を実施することなく、悪性腫瘍細胞２０は、ＨＬＡ群２４によってリンパ球３０の抑制性受容体３２に結合することができ、したがって免疫系の抑制を生じさせることができると考えられる。これは、免疫系の攻撃を回避するために、悪性腫瘍細胞の逃避機構を構成する。
【００５０】
この逃避機構を抑制する抗体を、決定された発現パターン２６および決定された受容体タイプ３２に基づいて本発明による方法で提供することができる。抗体の提供は、例えば公知の作製方法またはハイブリドーマ技術などの単離方法に従って実施することができる。
【００５１】
図５は、薬剤を提供するための方法を実施することができる別の悪性腫瘍細胞２０およびリンパ球３０の概略図を示す。悪性腫瘍細胞によって発現される胚ＨＬＡ群によって、悪性腫瘍細胞２０上で発現パターン２６を再び決定することができる。発現パターン２６は、ＨＬＡ−Ｅ型およびＨＬＡ−Ｇ型のＨＬＡ群２４を含む。この例示的な実施形態は、特に、悪性腫瘍と免疫系との間の個々のコミュニケーション構造に特徴的な特定の発現パターンを使用して、いくつかの受容体タイプを決定することができる方法を説明する。
【００５２】
２つの受容体タイプ３２、すなわち受容体ＮＫＧ２およびＫＩＲは、発現パターン２６に基づいて決定される。これらの２つの受容体タイプ３２は、発現された胚ＨＬＡ群２４の１つにリガンドとして結合することができ、胚ＨＬＡ群の結合に基づいて、免疫担当細胞３０に抑制作用を及ぼすことができる。したがって、ＮＫＧ２受容体は、ＨＬＡ−Ｅ型のＨＬＡ群にリガンドとして結合することができ、ＨＬＡ−Ｅ群の結合に基づいて、リンパ球３０に抑制作用を及ぼすことができる。さらに、ＫＩＲ受容体は、ＨＬＡ−Ｇ型のＨＬＡ群にリガンドとして結合することができ、ＨＬＡ−Ｇ群の結合に基づいて、リンパ球３０に抑制作用を及ぼすことができる。
【００５３】
示されている例のように、いくつかの受容体タイプが決定されると、これらのいくつかの受容体タイプまたはそれらの少なくとも一部をブロックまたはマスクすることができ、遮断の特定の階層を観察できる。したがって、例えばＫＩＲ  ２ＤＬ４の受容体は、抑制作用にとって特に重要であると考えられる。したがって、副作用を回避するために、最も重要な受容体タイプへの限定が好ましい、特にインビボでのマスキングの場合、全身性の副作用を回避するために好ましいことがあり得る。
【００５４】
いくつかの例示的な実施形態では、例えばいくつかの受容体タイプの抑制作用の相対的分類が個々の場合にまだ知られていない場合、個々の受容体タイプを段階的にブロックすることができる。免疫応答が欠如しているまたは不十分である場合、１つ以上のさらなるまたは他の受容体タイプをさらなる段階でブロックすることができる。そのような手順は、全身性副作用を回避するために、特にインビボマスキングにおいて好ましいことがあり得る。このようにして、免疫系のマスキングおよび応答の精巧に低減された制御を実施することができる。
【００５５】
他の実施形態では、例えばいくつかの受容体タイプの抑制作用の相対的な分類がまだ知られていない場合、すべてまたは少なくとも多数の受容体タイプを同時にマスクすることができる。そのような手順は、とりわけ、抗体による全身性副作用がそこで起こる可能性が一般に低いため、インビトロマスキングにおいて特に好ましいことがあり得る。さらに、インビトロマスキングでは、典型的にはすべての免疫担当細胞の一部のみが使用されるため、この点で免疫系に対するマスキングの影響は限定される。
【００５６】
図６は、薬剤を提供するための方法を実施することができる、悪性腫瘍細胞２０および２つの免疫担当細胞、すなわちリンパ球３０ａおよびＮＫ細胞３０ｂの概略図を示す。再び、悪性腫瘍細胞によって発現される胚ＨＬＡ群の発現パターン２６は、悪性腫瘍細胞２０上で決定することができる。発現パターン２６は、ＨＬＡ−Ｆ型およびＨＬＡ−Ｇ型のＨＬＡ群２４を含む。この例示的な実施形態は、特に、決定された受容体タイプが、リンパ球およびＮＫ細胞などの異なる免疫担当細胞に対して抑制作用を有し得ることを説明する。悪性腫瘍と免疫系との間の個々のコミュニケーション構造はこのようにして決定される。
【００５７】
２つの発現されたＨＬＡ群に基づいて、２つの受容体タイプ３２、すなわちＬＩＬ−Ｒ（白血球免疫グロブリン様受容体）およびＫＩＲ（キラー細胞免疫グロブリン様受容体）が決定される。ＬＩＬ受容体は、ＨＬＡ−Ｆ型のＨＬＡ群にリガンドとして結合することができ、ＨＬＡ−Ｆ群の結合に基づいて、リンパ球３０ａに抑制作用を及ぼすことができる。さらに、ＫＩＲ受容体は、ＨＬＡ−Ｇ型のＨＬＡ群にリガンドとして結合することができ、ＨＬＡ−Ｇ群の結合に基づいて、ＮＫ細胞３０ｂに抑制作用を及ぼすことができる。したがって、２つの受容体タイプ３２は、発現された胚ＨＬＡ群２４の１つにリガンドとして結合することができ、胚ＨＬＡ群の結合に基づいて、異なる免疫担当細胞３０ａ、３０ｂに対して抑制作用を及ぼすことができる。
【００５８】
図７は、ＨＬＡ群２４を有する悪性腫瘍細胞２０および受容体３２を有する免疫担当細胞３０の概略図を示す。さらに、本発明による抗体３４が示されている。この例示的な実施形態は、特に、本発明による抗体がどのようにして受容体をブロックまたはマスクすることができるかを説明する。
【００５９】
受容体タイプ３２は、基本的に悪性腫瘍細胞２０の胚ＨＬＡ群２４にリガンドとして結合することができ、胚ＨＬＡ群２４の結合に基づいて、免疫担当細胞３０に抑制作用を及ぼすことができる。しかしながら、免疫担当細胞３０の受容体３２は抗体３４によってマスクされている。
【００６０】
抗体３４は、受容体３２にリガンドとして特異的に結合し、結果として、一方では胚ＨＬＡ群２４が受容体３２に結合できないかまたはわずかな作用でしか結合できないように受容体３２をブロックまたはマスクし、他方で関連する免疫担当細胞には抑制作用を及ぼさない種類のものである。受容体に結合し、活性化されないリガンドの原理は、例えば生殖医学で使用される性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）受容体Ｇに対する薬理学から公知である。ＧｎＲＨアンタゴニストは、受容体に結合し、それを活性化しないリガンドの例である。
【００６１】
抗体３４がなければ、悪性腫瘍細胞２０はＨＬＡ群２４によって免疫担当細胞３０の抑制性受容体３２に結合されることができず、このようにして免疫系の抑制を生じさせる。これは、免疫系を回避するための悪性腫瘍細胞の逃避機構を構成する。
【００６２】
抗体２４の存在下では、抑制性受容体３２はマスクされ、逃避機構が抑制され得る。免疫担当細胞３０の免疫応答は抑制されない。したがって、抗体は、特定の個々に関連する免疫系を含む悪性腫瘍の治療に役立ち得る。
【００６３】
抑制性受容体３２のマスキングに使用される抗体を、免疫担当細胞の抑制性受容体タイプに対するヒト化抗体のライブラリに含めることができる。それは、ライブラリの多様性が異なる抑制性受容体タイプの数に依存することを意味する。これらの受容体タイプ（その抗体はすでにライブラリの一部である）への別の発現パターン、例えばＨＬＡ偽遺伝子の結合をブロックまたはマスクしようとする場合、ライブラリの拡張（例えば新たなヒト化抗体を作製することによる）は必要なく、むしろ既存のライブラリを抗体の提供に使用することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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