(57)【要約】  本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物を有効成分として含む化粧料組成物に関し、特に皮膚弾力増進、シワ改善、皮膚保湿、皮膚トラブル改善などに優れた効果を有する化粧料組成物に関する。また、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物を有効成分として含む食品組成物及び医薬部外品組成物に関する。  本発明の竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物又はその分画物を有効成分として含む化粧料組成物は、皮膚弾力増進もしくはシワ改善、皮膚保湿、又は皮膚トラブル改善効能に優れる。具体的には、本発明の組成物は、コラーゲン合成促進及びエラスターゼ活性阻害効果に優れ、抗炎症及び保湿効果に優れるので、皮膚弾力増進又はシワ改善用、皮膚保湿用、及び皮膚トラブル改善用化粧料組成物としての活用度が高い。また、本発明の竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物又はその分画物を有効成分として含む組成物は、食品組成物及び医薬部外品組成物として用いることができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む化粧料組成物。
【請求項２】
皮膚弾力増進又はシワ改善用である、請求項１に記載の化粧料組成物。
【請求項３】
皮膚保湿用である、請求項１に記載の化粧料組成物。
【請求項４】
皮膚トラブル改善用である、請求項１に記載の化粧料組成物。
【請求項５】
コラーゲン合成促進、エラスターゼ活性抑制、保湿又は抗炎症効果を有するものである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化粧料組成物。
【請求項６】
溶液、外用軟膏、クリーム、フォーム、栄養化粧水、柔軟化粧水、パック、柔軟水、乳液、メイクアップベース、エッセンス、石鹸、液体洗浄料、入浴剤、サンスクリーンクリーム、サンオイル、懸濁液、乳濁液、ペースト、ゲル、ローション、パウダー、界面活性剤含有クレンジング、オイル、粉末ファンデーション、乳濁液ファンデーション、ワックスファンデーション、パッチ及びスプレーからなる群から選択される剤形である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化粧料組成物。
【請求項７】
竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む食品組成物。
【請求項８】
皮膚弾力増進もしくはシワ改善用、皮膚保湿用、又は皮膚トラブル改善用である、請求項７に記載の食品組成物。
【請求項９】
竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む医薬部外品組成物。
【請求項１０】
皮膚弾力増進もしくはシワ改善用、皮膚保湿用、又は皮膚トラブル改善用である、請求項９に記載の医薬部外品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物を有効成分として含む化粧料組成物に関し、特に皮膚弾力増進、シワ改善、皮膚保湿、皮膚トラブル改善などに優れた効果を有する化粧料組成物に関する。また、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物を有効成分として含む食品組成物及び医薬部外品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
コラーゲンは、皮膚の線維芽細胞（Fibroblast）で産生される主要基質タンパク質であり、細胞外間質に存在し、重要な機能としては皮膚の機械的堅固性、結合組織の抵抗力と組織の結合力、細胞接着の支持、細胞分割と分化（有機体の成長又は傷治癒時）の誘導などが知られている。このようなコラーゲンは加齢や紫外線照射による光老化により減少し、コラーゲンを分解するコラゲナーゼの酵素活性によりコラーゲン減少が促進される。これは、皮膚のシワ形成に密接な関連があることが知られている。
【０００３】
また、エラスチン（Elastin）線維は、コラーゲンと架橋結合を形成し、皮膚弾力に関与するシワ生成に重要な皮膚構成成分である。エラスチン線維の欠乏と凝集、エラスチン分解酵素であるエラスターゼ（Elastase）の活性度の著しい増加は、皮膚のシワ生成要因の一つとして知られている。エラスターゼはエラスチンを分解する唯一の酵素であり、それに対する阻害は皮膚のシワ改善を根本的に低減できることが知られている。
【０００４】
また、コラーゲン及びエラスチン線維は、真皮層内の水分保有に重要な役割を果たす基質タンパク質であり、このような基質タンパク質が水分を吸着し、それらが形成する構造の内部の水分保有力を向上させ、皮膚が適正水分を含有する状態を維持できるようにし、それにより皮膚の弾力の維持に関与することが知られている。
【０００５】
現在、皮膚弾力増進及びシワ改善化粧料としては、レチノイド、アデノシン、動物胎盤由来のタンパク質、クロレラ抽出物などが知られている。最もよく知られているレチノールは、コラーゲン合成を促進し、エラスターゼ酵素を阻害する物質であるが、不安定であり、皮膚に適用する際には刺激、発赤などの安全性問題により使用量の制限があり、クロレラ抽出物などは、効果が少なく、実質的に皮膚弾力増進やシワ改善効果は期待できないことが知られている。
【０００６】
一般に、皮膚に用いられる保湿用化粧料組成物は、人の毛髪や皮膚などの水分を所定量に維持することにより、柔らかく、みずみずしい状態にし、ひび割れ、乾燥などの損傷を防ぐ機能を有する。すなわち、皮膚保湿用化粧料組成物は、皮膚や毛髪に所定量以上の水分を供給したり、水分を維持させることにより、皮膚や毛髪を美化し、健康を維持する目的で用いられる。
【０００７】
皮膚が水分調節の約６５〜７０％を担当するので、化粧品分野においては、水分の供給、維持、すなわち保湿に関する研究が盛んに行われており、最近は天然物などから得た生理活性物質を化粧料に導入して皮膚自体の防御機能を維持させることにより保湿力を高める化粧品の開発が盛んに行われている。
【０００８】
例えば、特許文献１においては、複合生薬抽出物を含む皮膚保護用化粧料組成物を開示している。ただし、生薬抽出物単独、それ自体の皮膚保護効果については開示していない。
【０００９】
化粧品は皮膚を保護して皮膚の美化及び清潔のために用いる製品であるが、その組成には、皮膚保護の目的に反する成分が製品の形成のためにやむを得ず含まれる。そのような成分としては、界面活性剤、防腐剤、香料、紫外線遮断剤、色素だけでなく、その他の効能及び効果を与えるための様々な成分が挙げられる。それらの成分は、一般に皮膚に炎症や吹き出物、浮腫などの各種トラブルを発生させることが知られている（非特許文献１）。また、体内から排出される皮脂や汗、化粧品成分中の脂肪酸、高級アルコール、タンパク質成分などが皮膚上に存在する皮膚常在菌により毒性が強い物質に分解され、それによる皮膚炎症が誘発され、太陽から放射される紫外線によっても皮膚炎症が誘発されることは周知の事実である。
【００１０】
炎症反応は、発赤（feeling of redness）、疼痛（pricking feeling）、熱感（burning hotness）、腫脹（swelling）、組織の変化などの５種類の現象として現れるが、それらは有害な周囲環境、すなわち細菌などの外部物質の侵入や機械的損傷から生体を保護する生理的な反応である。このような炎症現象は、各種多形核白血球（PMNs）と免疫物質の大幅な増加を招き、こうして増加した細胞は、炎症性細胞産物である各種タンパク質分解酵素やサイトカインなどを分泌することにより治療及び防御を可能にする。しかし、このような作用は、隣接する組織細胞や非細胞成分に有害な損傷を引き起こすこともある。よって、適切な条件下では炎症の初期状態が過ぎると正常機能を取り戻すが、炎症を刺激する刺激剤が絶えなかったり、さらに生成されると、結果として慢性炎症が生じ、より深刻な組織の損傷をもたらす。
【００１１】
一方、竜眼肉（Longanae Arillus）とは、リュウガン（Dimocarpus longan Loureiro）（ムクロジ科，Sapindaceae）の仮種皮である。具体的には、竜眼肉とは、ムクロジ科（Sapindaceae）の常緑高木であるリュウガンの果肉を意味する。すなわち、果肉のように見える透明な仮種皮（arillus）であり、乾燥させると黒褐色の竜眼肉（Lonaganae Arillus）になる。竜眼肉は、主に中国、東南アジア地域に分布、自生しており、鎮静、健胃、滋養作用があり、不眠症に効果がある。竜眼肉以外に、桂円、鮫涙、蜜脾、亜茘枝、驪珠、燕卵、竜目、竜眼、竜眼乾、円眼、元眼肉、益智、川弾子、枝奴ともいう。
【００１２】
蔓荊子は、クマツヅラ科のハマゴウ（Vitex rotundifolia L.）の果実から作った薬材である。蔓荊子は、風邪によるめまい、頭痛、高血圧などに用いられ、円球形又は偏球形であり、外面は黒色か黒褐色であり、下側は灰白色の薄い萼で包まれており、軽く、硬いので、潰れにくい。蔓荊子以外に、小荊、荊子、蔓荊実、蔓青子ともいう。
【００１３】
沈香は、ジンコウ（Aquilaria agallocha Roxburgh）（ジンチョウゲ科，Thymeleaceae）の樹脂が沈着した樹幹である。主産地はインド、マレーシア、中国南部などであり、表面は褐色又は黒褐色と黄色が交差しており、若干の光沢がある。沈香は、ジンコウに天然に分泌された樹脂が沈着してジンコウの芯材部位で組織学的に硬い塊りとなった部分である。沈水香、伽南香、奇南香、蜜香、棧香ともいう。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】韓国公開特許第２００２−００４４２６６号公報
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】Maibach. H. I., Contact Dermatitis, 6. 369-404, 1980
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
本発明者らは、天然に存在する天然資源から皮膚弾力増進、シワ改善、皮膚保湿及び皮膚トラブル改善効果に優れた物質を得るべく研究を重ね、竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物を有効成分として含む組成物がコラーゲン合成促進、エラスターゼ活性阻害、保湿及び抗炎症効果を発揮することを解明し、それを活用した化粧料組成物、食品組成物及び医薬部外品組成物を完成するに至った。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む化粧料組成物を提供することを目的とする。
【００１８】
また、具体的には、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む皮膚弾力増進又はシワ改善用化粧料組成物を提供することを目的とする。
【００１９】
さらに、具体的には、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む皮膚保湿用化粧料組成物を提供することを目的とする。
【００２０】
さらに、具体的には、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む皮膚トラブル改善用化粧料組成物を提供することを目的とする。
【００２１】
また、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む食品組成物を提供することを目的とする。
【００２２】
さらに、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む医薬部外品組成物を提供することを目的とする。
【発明の効果】
【００２３】
本発明の竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物又はその分画物を有効成分として含む化粧料組成物は、皮膚弾力増進もしくはシワ改善、皮膚保湿、又は皮膚トラブル改善効能に優れる。具体的には、本発明の組成物は、コラーゲン合成促進及びエラスターゼ活性阻害効果に優れ、抗炎症及び保湿効果に優れるので、皮膚弾力増進又はシワ改善用、皮膚保湿用及び皮膚トラブル改善用化粧料組成物としての活用度が高い。また、本発明の竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物又はその分画物を有効成分として含む組成物は、食品組成物及び医薬部外品組成物として用いることができる。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明の一態様は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む化粧料組成物を提供する。
【００２５】
本発明における「竜眼肉（Longanae Arillus）」とは、リュウガン（Dimocarpus longan Loureiro）（ムクロジ科，Sapindaceae）の仮種皮であり、具体的にはムクロジ科（Sapindaceae）の常緑高木であるリュウガンの果肉を意味する。すなわち、果肉のように見える透明な仮種皮（arillus）であり、乾燥させると黒褐色の竜眼肉（Lonaganae Arillus）になる。このような竜眼肉は、主に中国、東南アジア地域に分布、自生しており、鎮静、健胃、滋養作用があり、不眠症に効果がある。竜眼肉以外に、桂円、鮫涙、蜜脾、亜茘枝、驪珠、燕卵、竜目、竜眼、竜眼乾、円眼、元眼肉、益智、川弾子、枝奴ともいう。
【００２６】
本発明における「蔓荊子」とは、クマツヅラ科のハマゴウ（Vitex rotundifolia L.）の果実から作った薬材を意味する。蔓荊子は、風邪によるめまい、頭痛、高血圧などに用いられる。蔓荊子は、円球形又は偏球形であり、外面は黒色か黒褐色であり、下側は灰白色の薄い萼で包まれており、軽く、硬いので、潰れにくい。蔓荊子以外に、小荊、荊子、蔓荊実、蔓青子ともいう。
【００２７】
本発明における「沈香」とは、ジンコウ（Aquilaria agallocha Roxburgh）（ジンチョウゲ科，Thymeleaceae）の樹脂が沈着した樹幹である。主産地はインド、マレーシア、中国南部などであり、表面は褐色又は黒褐色と黄色が交差しており、若干の光沢がある。沈香は、ジンコウに天然に分泌された樹脂が沈着してジンコウの芯材部位で組織学的に硬い塊りとなった部分である。沈水香、伽南香、奇南香、蜜香、棧香ともいう。
【００２８】
本発明における「抽出物」とは、前記竜眼肉、蔓荊子又は沈香の抽出処理により得られる抽出液、前記抽出液の希釈液や濃縮液、前記抽出液を乾燥させて得られる乾燥物、前記抽出液の粗精製物や精製物、又はそれらの混合物など、抽出液自体及び抽出液を用いて形成可能なあらゆる剤形の抽出物が含まれるものである。
【００２９】
本発明の前記抽出物は、前述した各該当植物の天然、雑種又は変種植物から抽出することができ、植物組織培養物からも抽出することができる。
【００３０】
本発明の前記竜眼肉、蔓荊子又は沈香の抽出において、前記抽出物を抽出する方法は特に限定されるものではなく、当該技術分野で通常用いられる方法により抽出することができる。前記抽出方法としては、例えば熱水抽出法、超音波抽出法、濾過法、還流抽出法などが挙げられるが、これらに限定されるものではなく、これらは単独で用いてもよく、２種以上の方法を併用してもよい。
【００３１】
本発明において、前記竜眼肉、蔓荊子又は沈香を抽出するのに用いる抽出溶媒の種類は、特に限定されるものではなく、当該技術分野で公知の任意の溶媒を用いることができる。前記抽出溶媒としては、例えば水や、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、ブチルアルコールなどのＣ１〜Ｃ４の低級アルコールや、グリセリン、ブチレングリコール、プロピレングリコールなどの多価アルコールや、酢酸メチル、酢酸エチル、アセトン、ベンゼン、ヘキサン、ジエチルエーテル、ジクロロメタンなどの炭化水素系溶媒や、それらの混合物を用いることができるが、これらに限定されるものではなく、水、低級アルコール、１，３−ブチレングリコール、酢酸エチルを単独で用いるか、２種以上を混合して用いることが好ましい。
【００３２】
本発明において、竜眼肉、蔓荊子又は沈香の漢方薬材を抽出する溶媒として、より具体的には水（又は蒸留水）を用いることができる。前記溶媒を用いて、竜眼肉、蔓荊子又は沈香の漢方薬材を１回以上抽出することにより溶媒抽出物を作製することができ、前記溶媒抽出物を減圧蒸留し、その後凍結乾燥又は噴霧乾燥させることにより乾燥抽出物を作製することができる。本発明の具体的な一実施例においては、水（又は蒸留水）を用いて、竜眼肉、蔓荊子、沈香の抽出物をそれぞれ作製した。
【００３３】
本発明において、熱水抽出又は冷浸抽出した抽出物は、浮遊する固体粒子を除去するために、濾過、例えばナイロンなどを用いて粒子を濾過したり、冷凍濾過法などを用いて濾過してそのまま用いることもでき、それを凍結乾燥、熱風乾燥、噴霧乾燥などで乾燥させて用いることもできる。
【００３４】
本発明における「分画物」とは、様々な構成成分を含む混合物から特定成分又は特定成分グループを分離するために分画を行って得られた結果物を意味する。
【００３５】
本発明において、前記分画物を得る分画方法は、特に限定されるものではなく、当該技術分野で通常用いられる方法により行われる。前記分画方法としては、例えば、竜眼肉、蔓荊子又は沈香から抽出した抽出物を所定の溶媒で処理することにより前記抽出物から分画物を得る方法が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３６】
本発明において、前記分画物を得るのに用いる溶媒の種類は、特に限定されるものではなく、当該技術分野で公知の任意の溶媒を用いることができる。前記分画溶媒としては、例えば水、アルコールなどの極性溶媒や、ヘキサン（Hexane）、酢酸エチル（Ethyl acetate）、クロロホルム（Chloroform）、ジクロロメタン（Dichloromethane）などの非極性溶媒などが挙げられる。これらは単独で用いてもよく、２種以上を混合して用いてもよい。前記分画溶媒のうちアルコールを用いる場合、具体的にはＣ１〜Ｃ４のアルコールを用いてもよい。
【００３７】
本発明の竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物において、少なくとも２種の混合抽出物は、前記竜眼肉、蔓荊子及び沈香をそれぞれ抽出し、その後各抽出物を少なくとも２種混合して作製してもよく、前記竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも２種を共に抽出する方式で作製してもよい。
【００３８】
本発明の前記竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも２種の抽出物において、少なくとも２種の混合抽出物又はその分画物からなる群から選択される少なくとも２種の重量比は、特に限定されるものではないが、２種の混合抽出物の場合、具体的には１：１であってもよく、３種の混合抽出物の場合、具体的には１：１：１であってもよい。
【００３９】
具体的には、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む皮膚弾力増進又はシワ改善用化粧料組成物を提供する。
【００４０】
本発明における「皮膚弾力増進」とは、皮膚の垂れやたるみの程度を緩和することをいい、エラスチンで構成された弾力線維がコラーゲン（collagen）という膠原線維と共に存在するが、エラスチンとコラーゲンが十分に存在する状態で皮膚弾力が維持されることを意味する。
【００４１】
本発明における「シワ改善」とは、皮膚にシワが生成されることを抑制又は阻害することや、既に生成されたシワを緩和することを意味する。
【００４２】
本発明の一実施例においては、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物をヒト由来の線維芽細胞の培養液に添加してコラーゲン合成促進効果を実験した結果、前記抽出物を添加した全ての実験群において、対照群と比較して優れたコラーゲン合成促進効果が現れ、２種の混合抽出物を添加した場合に単独抽出物で処理した場合よりコラーゲン合成促進効果が高く、特に竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物を全て混合した３種の混合抽出物で処理した場合に最も高いコラーゲン合成効果が現れることが確認された（表３）。
【００４３】
また、本発明の一実施例においては、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物を添加した全ての実験群において、対照群と比較して優れたエラスターゼ阻害効果が現れ、２種の混合抽出物を添加した場合に単独抽出物で処理した場合よりエラスターゼ阻害効果が高く、３種の混合抽出物で処理した場合に最も高いエラスターゼ阻害効果が現れることが確認された（表４）。
【００４４】
本発明の竜眼肉、蔓荊子及び沈香抽出物は、単独で処理した場合にそれぞれコラーゲン合成促進効果及びエラスターゼ阻害効果があるので、皮膚弾力増進又はシワ改善用途に用いることができ、特に少なくとも２種の混合抽出物を用いるとより優れた効果がある。
【００４５】
具体的には、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む皮膚保湿用化粧料組成物を提供する。
【００４６】
本発明における「皮膚保湿」とは、皮膚の水分感を増加させ、しっとりとした状態を維持することを意味する。皮膚保湿効果は、皮膚のシワ改善、弾力性増加をサポートする。本発明の竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物は、優れたコラーゲン合成効果及びエラスターゼ活性阻害効果を示すので、本発明の化粧料組成物を皮膚保湿用途に用いることができることを確認した（表３及び表４）。
【００４７】
本発明の一実施例においては、本発明の竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物の水分保有効果をそれぞれ確認した結果、前記抽出物を添加した全ての実験群において、対照群と比較して優れた皮膚保湿効果が現れ、２種の混合抽出物を添加した場合に単独抽出物で処理した場合より水分保有効果が高く、特に３種の混合抽出物で処理した場合に最も高い水分保有効果が現れることが確認された（表５）。
【００４８】
本発明の竜眼肉、蔓荊子及び沈香抽出物は、単独で処理した場合にそれぞれ水分保有効果があるので、皮膚保湿用途に用いることができ、特に少なくとも２種の混合抽出物を用いるとより優れた保湿効果がある。
【００４９】
具体的には、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む皮膚トラブル改善用化粧料組成物を提供する。
【００５０】
本発明における「皮膚トラブル」とは、マクロファージにおける過度な一酸化窒素（ＮＯ）産生により誘発された炎症により発生し得る皮膚疾患を意味する。前記皮膚トラブルは、炎症に関する皮膚疾患であればその種類に関係なく全て含まれ、前記炎症に関する皮膚疾患としては、例えばアトピー性皮膚炎、乾癬、放射線、化学物質、火傷などにより触発される紅斑性疾患、酸火傷、水疱性皮膚病、苔癬状類疾患、アレルギーによる掻痒症、脂漏性湿疹、酒焼け、尋常性天疱瘡、多形滲出性紅斑、結節性紅斑、亀頭炎、外陰炎、円形脱毛症などの炎症性脱毛、皮膚Ｔ細胞リンパ腫などが挙げられ、具体的には皮膚発疹、にきび、吹き出物、酒さ（赤ら顔）などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。また、本発明における「トラブル改善」とは、皮膚にトラブルが生じることを抑制又は阻害することや、既に生じたトラブルを緩和することを意味する。
【００５１】
本発明における「抗炎症」とは、炎症を抑制することを意味し、前記炎症とは、ある刺激に対する生体組織の防御反応の一つであり、組織の変質、循環障害と浸出、組織の増殖の三つを併発する複雑な病変を意味する。より具体的には、炎症は先天性免疫の一部であり、他の動物と同様に、ヒトの先天性免疫は病原体に特異的に存在する細胞表面のパターンを認識する。食細胞は、そのような表面を有する細胞を非自己と認識して病原体を攻撃する。もし、病原菌が身体の物理的障壁を破壊して侵入すると炎症反応が起こる。炎症反応は、創傷部位に侵入した微生物に対する敵対環境を作る非特異的な防御作用である。炎症反応において、創傷が生じた場合や、外部の感染体が体内に侵入した場合、初期段階の免疫反応を担う白血球が集まってサイトカインを発現する。よって、細胞内のサイトカインの発現量が炎症反応活性化の指標となる。本発明の抗炎症は、皮膚で発生した炎症を抑制するものであってもよい。
【００５２】
本発明の一実施例においては、本発明の竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物のＮＯ産生抑制力を測定した結果、前記抽出物を添加した全ての実験群において、対照群と比較して優れたＮＯ産生抑制効果が現れ、２種の混合抽出物を添加した場合に単独抽出物で処理した場合よりＮＯ産生抑制効果が高く、特に３種の混合抽出物で処理した場合に最も高いＮＯ産生抑制効果が現れることが確認された（表６）。
【００５３】
本発明の竜眼肉、蔓荊子及び沈香抽出物は、単独で処理した場合にそれぞれＮＯ産生抑制効果による抗炎症効果があるので、皮膚トラブル改善用途に用いることができ、特に少なくとも２種の混合抽出物を用いるとより優れたトラブル改善効果がある。
【００５４】
総括すると、本発明の竜眼肉、蔓荊子及び沈香抽出物は、単独で処理した場合に皮膚弾力増進もしくはシワ改善、皮膚保湿、又は皮膚トラブル改善効果がある。また、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも２種を混合した抽出物は、それぞれの抽出物を単独で用いる場合より皮膚弾力増進もしくはシワ改善、皮膚保湿、又は皮膚トラブル改善に優れた効果を発揮する。前記竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも２種の混合抽出物のシナジー効果は、抽出物間の、及び／又は、抽出物内の有効成分間のシナジー効果又は協調作用により、前記それぞれの単独抽出物より優れた皮膚弾力増進もしくはシワ改善、皮膚保湿、又は皮膚トラブル改善効能を示す。これは本発明において最初に解明されたものである。
【００５５】
本発明による化粧料組成物は、溶液、外用軟膏、クリーム、フォーム、栄養化粧水、柔軟化粧水、パック、柔軟水、乳液、メイクアップベース、エッセンス、石鹸、液体洗浄料、入浴剤、サンスクリーンクリーム、サンオイル、懸濁液、乳濁液、ペースト、ゲル、ローション、パウダー、界面活性剤含有クレンジング、オイル、粉末ファンデーション、乳濁液ファンデーション、ワックスファンデーション、パッチ及びスプレーからなる群から選択される剤形に製造することができるが、これらに限定されるものではない。
【００５６】
また、本発明の化粧料組成物は、一般の皮膚化粧料に配合される化粧品学的に許容される担体を１種以上さらに含んでもよく、通常の成分として、例えば油分、水、界面活性剤、保湿剤、低級アルコール、増粘剤、キレート剤、色素、防腐剤、香料などを適宜配合してもよいが、これらに限定されるものではない。
【００５７】
本発明の化粧料組成物に含まれる化粧品学的に許容される担体は、剤形によって様々である。
【００５８】
本発明の剤形が軟膏、ペースト、クリーム又はゲルの場合は、担体成分として、動物性油、植物性油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、シリカ、タルク、酸化亜鉛又はそれらの混合物が用いられてもよい。
【００５９】
本発明の剤形がパウダー又はスプレーの場合は、担体成分として、ラクトース、タルク、シリカ、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、ポリアミドパウダー又はそれらの混合物が用いられてもよく、特にスプレーの場合は、さらにハイドロクロロフルオロカーボン、プロパン／ブタン又はジメチルエーテルなどの推進剤が含まれてもよい。
【００６０】
本発明の剤形が溶液又は乳濁液の場合は、担体成分として、溶媒、可溶化剤又は乳濁化剤が用いられ、例えば水、エタノール、イソプロパノール、炭酸ジエチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチルグリコールオイルが用いられてもよく、特に綿実油、ピーナッツオイル、トウモロコシ胚種油、オリーブ油、ヒマシ油及びゴマ油、グリセリン脂肪族エステル、ポリエチレングリコール又はソルビタンの脂肪酸エステルが用いられてもよい。
【００６１】
本発明の剤形が懸濁液の場合は、担体成分として、水、エタノール、プロピレングリコールなどの液状の希釈剤や、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステル、ポリオキシエチレンソルビタンエステルなどの懸濁剤や、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、アガー、トラガカントなどが用いられてもよい。
【００６２】
本発明の剤形が石鹸の場合は、担体成分として、脂肪酸のアルカリ金属塩、脂肪酸ヘミエステル塩、脂肪酸タンパク質加水分解物、イセチオン酸塩、ラノリン誘導体、脂肪族アルコール、植物性油、グリセリン、糖などが用いられてもよい。
【００６３】
本発明の化粧料組成物において、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物は、具体的には乾燥重量で化粧料組成物の総重量に対して０．０００１〜５０重量％含まれてもよく、より具体的には０．０００５〜１０重量％含まれてもよい。前記含有量範囲は、優れた皮膚弾力増進もしくはシワ改善、皮膚保湿、又は皮膚トラブル改善効能を示すが、組成物の剤形の安定化などの要件に応じて調節してもよい。
【００６４】
本発明の他の態様は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む食品組成物を提供する。
【００６５】
また、具体的には、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む皮膚弾力増進もしくはシワ改善用、皮膚保湿用、又は皮膚トラブル改善用食品組成物を提供する。
【００６６】
本発明の竜眼肉抽出物、蔓荊子抽出物、沈香抽出物、皮膚弾力増進、シワ改善、皮膚保湿及び皮膚トラブル改善については前述した通りである。前記食品組成物は、機能性食品の形態で用いられるが、これに限定されるものではない。
【００６７】
本発明の食品組成物に含まれる竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物は、本発明の抽出物を含む動植物、その抽出物、その分画物又はその加工物の形態で含まれてもよい。また、前記組成物は、有効成分以外に、食品学的に許容される食品補助添加剤を含んでもよい。
【００６８】
本発明における「食品補助添加剤」とは、食品に補助的に添加する構成要素を意味し、各剤形の機能性食品を製造する際に添加されるものであり、当業者が適宜選択して用いることができる。食品補助添加剤の例としては、様々な栄養剤、ビタミン、ミネラル（電解質）、合成風味剤や天然風味剤などの風味剤、着色剤及び充填剤、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護コロイド、増粘剤、ｐＨ調整剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に用いられる炭酸化剤などが挙げられるが、前記例に本発明の食品補助添加剤の種類が限定されるものではない。
【００６９】
本発明の食品組成物には機能性食品が含まれてもよい。本発明における「機能性食品」とは、人体に有用な機能性を有する原料や成分を用いて、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、液剤、丸剤などの形態に製造及び加工した食品を意味する。ここで、「機能性」とは、人体の構造及び機能に対して栄養素を調節するか、生理学的作用などの保健用途に有用な効果を与えることを意味する。本発明の機能性食品は、当該技術分野で通常用いられる方法により製造することができ、その製造時には当該技術分野で通常添加する原料及び成分を添加して製造することができる。また、前記機能性食品の剤形も、機能性食品として認められる剤形であれば限定されるものではない。本発明の食品組成物は、様々な形態の剤形に製造することができ、一般薬品とは異なり、食品を原料とするので薬品の長期服用時に発生し得る副作用などがないという利点があり、携帯性に優れるので、本発明の機能性食品は、皮膚弾力増進もしくはシワ改善、皮膚保湿、又は皮膚トラブル改善効果を増進させる補助剤として摂取することができる。
【００７０】
本発明の機能性食品が用いられる形態には制限がなく、通常の意味の食品が全て含まれ、健康機能食品などの当該技術分野で公知の用語と混用される。また、本発明の機能性食品は、当業者の選択により食品に含まれ得る好適な他の補助成分や公知の添加剤を混合して製造することができる。添加できる食品の例としては、肉類、ソーセージ、パン、チョコレート、キャンディー類、スナック類、菓子類、ピザ、ラーメン、その他の麺類、ガム類、アイスクリーム類をはじめとする乳製品、各種スープ、清涼飲料水、茶、ドリンク剤、アルコール飲料、ビタミン複合剤などが挙げられ、本発明による抽出物を主成分として作製した汁、茶、ゼリー、ジュースなどに添加することにより製造することができる。また、動物用の飼料として用いられる食品も含まれる。
【００７１】
本発明のさらに他の態様は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む医薬部外品組成物を提供する。
【００７２】
また、具体的には、本発明は、竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物又はその分画物を有効成分として含む皮膚弾力増進もしくはシワ改善用、皮膚保湿用、又は皮膚トラブル改善用医薬部外品組成物を提供する。
【００７３】
本発明の竜眼肉抽出物、蔓荊子抽出物、沈香抽出物、皮膚弾力増進、シワ改善、皮膚保湿及び皮膚トラブル改善については前述した通りである。
【００７４】
本発明の医薬部外品組成物は、前記成分以外に、必要に応じて薬学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤をさらに含んでもよい。前記薬学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤は、本発明の効果を損なわない限り限定されるものではなく、例えば充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などが挙げられる。
【００７５】
本発明の薬学的に許容される担体、賦形剤又は希釈剤の代表的な例としては、ラクトース、グルコース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、マルチトール、デンプン、ゼラチン、グリセリン、アカシアゴム、アルギン酸塩、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、ヒドロキシ安息香酸メチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、鉱物油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物性油、注射可能なエステル、ウィテップゾール、マクロゴール、ツイーン６１、カカオ脂、ラウリン脂などが挙げられる。
【００７６】
また、本発明の抽出物を医薬部外品として用いる場合、さらに同一又は類似の機能を有する有効成分を１種以上含有させてもよい。例えば、公知の弾力増進、シワ改善、保湿又は抗炎症成分が挙げられる。さらなる弾力増進、シワ改善、保湿又は抗炎症成分を含む場合、本発明の組成物の皮膚弾力増進、シワ改善、保湿又は皮膚トラブル改善効果は一層増加する。前記成分を追加する場合は、複合使用に伴う皮膚安全性、剤形化の容易性、有効成分の安定性を考慮する。前記医薬部外品組成物は、当該技術分野で公知の弾力増進、シワ改善又は保湿成分として、レチノイン酸、ＴＧＦ、動物胎盤由来のタンパク質、ベツリン酸及びクロレラ抽出物、当該技術分野で公知の抗炎症成分として、非ステロイド系のフルフェナム酸、イブプロフェン、ベンジダミン、インドメタシン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、アラントイン、アズレン、ヒドロコルチゾン及びそれらの誘導体と各種植物抽出物からなる群から選択される１種又は２種以上の成分をさらに含んでもよい。追加成分は、組成物の総重量に対して０．０００１重量％〜１０重量％含まれてもよく、前記含有量範囲は、皮膚安全性、本発明の竜眼肉、蔓荊子、沈香又はそれらの混合抽出物の剤形化の容易性などの要件に応じて調節してもよい。
【００７７】
本発明の医薬部外品組成物としては、消毒清潔剤、シャワーフォーム、軟膏液、ウェットティッシュ、コーティング剤などが挙げられるが、これらに限定されるものではなく、医薬部外品の製剤化方法、用量、利用方法、構成成分などは技術分野で公知の通常の技術から適宜選択される。
【００７８】
また、本発明の竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物を個体の皮膚に塗布するステップを含む、皮膚弾力増進もしくはシワ改善、皮膚保湿、又は皮膚トラブル改善方法に用いることができる。前記個体には、マウス、家畜、ヒトなどを含む哺乳動物が全て含まれる。
【実施例】
【００７９】
以下、実施例を挙げて本発明の構成及び効果をより詳細に説明する。これらの実施例はあくまで本発明を例示するためのものにすぎず、本発明がこれらの実施例に限定されるものではない。
【００８０】
作製例１：竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物の作製
竜眼肉、蔓荊子、沈香を乾燥させて細切りしておき、乾燥重量１００ｇをフラスコに入れて抽出溶媒（蒸留水）１０００ｇに３日間冷浸して抽出した。冷浸した抽出物を、０．２μｍの気孔サイズを有するフィルターで濾過してそれぞれ竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物を作製した。
【００８１】
また、作製例１で作製した各竜眼肉抽出物、蔓荊子抽出物、沈香抽出物を混合して混合抽出物を作製した。混合抽出物の構成比の例を表１に示す。
【００８２】
【表１】
2020502172.tif 000002
【００８３】
作製例２：竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物を含むエッセンスの作製
実施例１〜７の抽出物を含むエッセンスを作製した。エッセンスを構成する詳細な組成（重量％）を表２に示す。
【００８４】
【表２】
2020502172.tif 000003
【００８５】
実験例１：人体由来の線維芽細胞における１型コラーゲン（typeIcollagen）合成促進効果−皮膚弾力増進又はシワ改善効果
作製例１で得られた７種の抽出物をヒト由来の線維芽細胞の培養液に添加して細胞レベルでの１型コラーゲン合成促進効果を確認した。合成されたコラーゲンの測定は、ＰＩＣＰ ＥＩＡ ｋｉｔ（Procollagen Type I C-Peptide Enzyme Immuno Assay KIT）を用いて定量した。コラーゲン合成量を測定するために、実施例１〜７の抽出物をそれぞれ最終濃度１０００ｐｐｍ、１００００ｐｐｍで線維芽細胞の培養培地（ＤＭＥＭ培地）に添加して４８時間培養し、その後培養液を採取してＰＩＣＰ ＥＩＡキットにより各濃度における１型コラーゲン合成の程度を分光光度計で４５０ｎｍにて測定した。
【００８６】
効果の比較のために、抽出物で処理していない線維芽細胞の培養培地（陰性対照群）と、ビタミンＣを最終濃度５２．８５ｐｐｍになるように添加した培養培地（陽性対照群）において、同様にコラーゲン合成の程度を測定した。コラーゲン産生増加率は、陰性対照群に対する相対的なコラーゲン産生量の割合で計算した。その結果を表３に示す。実験を４回ずつ行った平均値を示す。
【００８７】
【表３】
2020502172.tif 000004
【００８８】
表３に示すように、竜眼肉、蔓荊子、沈香の単独抽出物である実施例１〜３で処理した場合、全て陰性対照群に比べてコラーゲン合成が増加し、それは濃度依存的であることが確認された。また、２種の混合抽出物である実施例４〜６で処理した場合に同じ濃度の単独抽出物である実施例１〜３で処理した場合よりコラーゲン合成促進効果が高く、特に竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物を全て混合した実施例７で処理した場合に最も高いコラーゲン合成効果が現れることが確認された。
【００８９】
よって、竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物は、それぞれ単独でコラーゲン合成促進効果があり、前記抽出物を混合して用いると効果がさらに高まることが分かった。実施例１〜７の抽出物は、コラーゲン合成を誘導するので、皮膚弾力増進、シワ改善又は皮膚保湿用途に用いることができる。
【００９０】
実験例２：エラスターゼ活性阻害効果−皮膚弾力増進又はシワ改善、皮膚保湿効果
作製例１で得られた７種の抽出物が、エラスチン（elastin）を分解する酵素であるエラスターゼ（elastase）の活性を阻害する効果を奏するか否かを確認した。
【００９１】
エラスターゼ（elastase）はヒト白血球細胞由来のものを用い、エラスターゼの基質として合成基質であるＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ｐＮＡを用いた。緩衝液は１００ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．５）溶液を用いた。エラスターゼは、緩衝液を用いて最終的に０．２ｍＵにした。また、エラスターゼの合成基質は、ＤＭＳＯを用いて１００ｍＭ溶液を作り、その後最終濃度が０．５ｍＭになるように緩衝液を用いて希釈した。ここで、陽性対照群は、エラスターゼ阻害物質として知られるケルセチン（Quercetin）を１０ｐｐｍの濃度で入れたものに設定した。実施例１〜７の抽出物は、最終濃度が１０００ｐｐｍ、１００００ｐｐｍになるように添加した。反応は９６ウェルプレートで行い、常温で２０分間反応させた。分光光度計を用いて１分間隔で４０５ｎｍにて吸光度を測定し、各時間における吸光度の傾きを求めて酵素の活性度を測定した。エラスターゼ阻害率は数式１により計算した。その結果を表４に示す。実験をそれぞれ３回ずつ行った平均値を示す。
【００９２】
［数式１］：
エラスターゼ阻害率（％）
＝（対照群の傾き−試料の傾き）／対照群の傾き×１００
【００９３】
【表４】
2020502172.tif 000005
【００９４】
表４に示すように、竜眼肉、蔓荊子、沈香の単独抽出物である実施例１〜３で処理した場合、全て濃度依存的にエラスターゼ活性阻害効果を発揮することが確認された。また、２種の混合抽出物である実施例４〜６で処理した場合に同じ濃度の単独抽出物である実施例１〜３で処理した場合よりエラスターゼ活性阻害効果が高く、特に竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物を全て混合した実施例７で処理した場合に最も高いエラスターゼ活性阻害効果が現れることが確認された。
【００９５】
よって、竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物は、それぞれ単独でエラスターゼ活性阻害効果があり、前記抽出物を混合して用いるとその効果がさらに高まることが分かった。実施例１〜７の抽出物は、エラスターゼ活性を阻害するので、皮膚弾力増進、シワ改善又は皮膚保湿用途に用いることができる。
【００９６】
実験例３：水分保有能評価−皮膚保湿効果
作製例２で作製した竜眼肉、蔓荊子及び／又は沈香抽出物を含むエッセンスの皮膚保湿力を評価するために、前記エッセンスをそれぞれ皮膚に定量塗布して角質層の水分保有量を測定し、それを評価する方法を用いた。
【００９７】
測定機器としては、皮膚水分含有量測定装置（スキンサーフェースハイグロメーター，skin surface hygrometer，モデル名：SKICON-200，日本ＩＢＳ社製）を用いた。
【００９８】
具体的には、２５℃、相対湿度４５の恒温恒湿室でエッセンスをそれぞれ２０人の被試験者の腕の内側に所定量（２ｍｇ／ｃｍ２）塗布して擦り込み、評価前の水分保有能を基準に１時間及び３時間後の水分増加率（％）を測定して保湿効果を評価した。得られた結果を表５に示す。
【００９９】
【表５】
2020502172.tif 000006
【０１００】
表５に示すように、竜眼肉、蔓荊子、沈香の単独抽出物を含むエッセンスを塗布すると、前記抽出物を含まない比較例に比べて、塗布１時間後及び３時間後の水分増加率が全て高くなった。また、２種の混合抽出物を含むエッセンスを塗布すると水分増加率がさらに増加し、特に竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物を全て含む３種の混合抽出物を含むエッセンスを塗布すると塗布１時間後及び３時間後の両方で水分増加率が最も高くなることが確認された。
【０１０１】
よって、竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物は、単独で皮膚保湿効果があり、前記抽出物を混合して用いると効果がさらに高まることが分かった。前記竜眼肉、蔓荊子及び沈香からなる群から選択される少なくとも１種の抽出物は、水分保有力に優れるので、皮膚保湿用組成物に用いることができる。
【０１０２】
実験例４：ＮＯ産生抑制による抗炎症効果−皮膚トラブル改善効果
作製例１で得られた７種の抽出物の抗炎症効果及び皮膚トラブル改善効果を確認するために、ＲＡＷ２６４．７細胞株（ATCC number: CRL-2278）を用いたＧＲＩＥＳＳ法により一酸化窒素（ＮＯ）産生抑制実験を行った。
【０１０３】
具体的には、マウスのマクロファージであるＲＡＷ２６４．７細胞を数回継代培養し、前記培養した細胞を１ウェル当たり３×１０５個となるように２４ウェルプレートに入れ、その後２４時間培養した。次に、１００ｐｐｍ、１００ｐｐｍ、１００ｐｐｍの濃度に希釈した前記７種の抽出物を含有する細胞培地に交換した。ここで、陽性対照群としてＮＯ産生抑制物質であるＬ−ＮＭＭＡ（Ｌ−ＮＧ−モノメチルアルギニン，L-NG-Monomethylarginine）で共に処理して３０分間培養し、刺激因子としてＬＰＳ（Lipopolysaccharide）で１μｇずつ処理して２４時間培養した。上清を１００μｌずつ採取して９６ウェルプレートに移し、ＧＲＩＥＳＳ溶液を１００μｌずつ加えて常温で１０分間反応させ、その後５４０ｎｍでの吸光度を測定することにより、抽出物のＮＯ抑制効果を判断した。ＮＯ産生阻害率（％）は数式２により計算した。その結果を表６に示す。実験をそれぞれ３回ずつ行った平均値を示す。
【０１０４】
［数式２］：
ＮＯ産生阻害率（％）
＝{（陰性対照群の吸光度−各抽出物の吸光度）／陰性対照群の吸光度}×１００
【０１０５】
【表６】
2020502172.tif 000007
【０１０６】
表６に示すように、竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物である実施例１〜３でそれぞれ処理した場合、濃度依存的にＮＯ産生抑制効果を発揮することが確認された。また、２種の混合抽出物である実施例４〜６で処理した場合に同じ濃度の単独抽出物である実施例１〜３で処理した場合よりＮＯ産生抑制効果が高かった。さらに、竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物を全て混合した実施例７で処理した場合に最も高いＮＯ産生抑制効果が現れることが確認された。
【０１０７】
よって、竜眼肉、蔓荊子、沈香抽出物は、それぞれ単独でＮＯ産生抑制効果があり、前記抽出物を混合して用いるとその効果がさらに高まることが分かった。実施例１〜７の抽出物は、ＮＯ産生抑制による抗炎症効果があるので、皮膚トラブル改善用途に用いることができ、皮膚美白、弾力増進、シワ改善及び皮膚保湿において補助的な役割を果たすので、相乗効果が期待できる。
【国際調査報告】
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2020502172.tif 000011
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