(57)【要約】本開示は、個体の免疫応答を調節する方法を提供する。本開示は、治療の方法を提供する。本開示は、個体に、多量体ポリペプチド（ｓｙｎＴａｃ）及び免疫チェックポイント阻害剤を投与することを含む、方法を提供する。本開示は、免疫チェックポイント阻害剤による治療を受けている個体に、多量体ポリペプチド（ｓｙｎＴａｃ）を投与することを含む、方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫応答を調節することを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤を投与することを含み、
前記多量体ポリペプチドは、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）任意選択により、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドまたは非Ｉｇ骨格
を含む、第２のポリペプチドと
を含み、
前記多量体ポリペプチドは、１つ以上の免疫調節ポリペプチドを含み、前記１つ以上の免疫調節ポリペプチドは、
Ａ）前記第１のポリペプチドのＣ末端、
Ｂ）前記第２のポリペプチドのＮ末端、
Ｃ）前記第２のポリペプチドのＣ末端、または
Ｄ）前記第１のポリペプチドのＣ末端及び前記第２のポリペプチドのＮ末端に位置し、
前記投与することは、前記個体において、免疫応答を調節する、前記方法。
【請求項２】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）免疫調節ドメイン、
ｉｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）免疫調節ドメイン
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）免疫調節ドメイン、及び
ｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記多量体ポリペプチドの前記非Ｉｇ骨格が、ＸＴＥＮポリペプチド、トランスフェリンポリペプチド、Ｆｃ受容体ポリペプチド、エラスチン様ポリペプチド、シルク様ポリペプチド、またはシルクエラスチン様ポリペプチドである、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記多量体ポリペプチドの前記第１のＭＨＣポリペプチドがβ２−ミクログロブリンポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記多量体ポリペプチドの前記β２−ミクログロブリンポリペプチドが、図６に記載されるアミノ酸配列のうちの１つに対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記多量体ポリペプチドの前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−ＢまたはＨＬＡ−Ｃの重鎖である、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、図５Ａ〜５Ｃのうちの１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記多量体ポリペプチドの前記第１のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩＩのα鎖ポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩＩのβ鎖ポリペプチドである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記エピトープがＴ細胞エピトープである、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記多量体ポリペプチドの多量体ポリペプチドが、Ｆｃポリペプチドを含み、前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡ  Ｆｃポリペプチド、またはＩｇＭ  Ｆｃポリペプチドである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、図４Ａ〜４Ｃに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記多量体ポリペプチドの前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドが、非共有結合的に会合している、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記多量体ポリペプチドの前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドが、共有結合的に連結されている、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記共有結合が、ジスルフィド結合によるものである、請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
前記多量体ポリペプチドの前記第１のＭＨＣポリペプチド、または前記エピトープと前記第１のＭＨＣポリペプチドとの間のリンカーが、第１のＣｙｓ残基をもたらすアミノ酸置換を含み、前記多量体ポリペプチドの前記第２のＭＨＣポリペプチドが、第２のＣｙｓ残基をもたらすアミノ酸置換を含み、前記ジスルフィド連結が、前記第１のＣｙｓ残基と前記第２のＣｙｓ残基との間にある、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記多量体ポリペプチドが、前記エピトープと前記第１のＭＨＣポリペプチドとの間、前記免疫調節ポリペプチドと前記ＭＨＣポリペプチドとの間、または前記ＭＨＣポリペプチドと前記Ｉｇ  Ｆｃとの間にリンカーを含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記多量体ポリペプチドの前記免疫調節ポリペプチドが、４−１ＢＢＬポリペプチド、Ｂ７−１ポリペプチド、Ｂ７−２ポリペプチド、ＩＣＯＳ−Ｌポリペプチド、ＯＸ−４０Ｌポリペプチド、ＣＤ８０ポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド、ＦａｓＬポリペプチド、及びＰＤ−Ｌ２ポリペプチドから選択される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記多量体ポリペプチドが２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含む、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記２つ以上の免疫調節ポリペプチドがタンデムに並んでいる、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記免疫調節ポリペプチドが、４−１ＢＢＬポリペプチド、ＣＤ８０ポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＩＬ−２ポリペプチド、Ｂ７−１ポリペプチド、Ｂ７−２ポリペプチド、ＩＣＯＳ−Ｌポリペプチド、ＯＸ−４０Ｌポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド、ＦａｓＬポリペプチド、及びＰＤ−Ｌ２ポリペプチドから選択される、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記免疫調節ポリペプチドが、変異免疫調節ポリペプチドであり、前記免疫調節ポリペプチドの天然型と比較して１つ以上のアミノ酸置換を有し、前記変異免疫調節ポリペプチドは、前記免疫調節ポリペプチドの前記天然型が結合する共調節ポリペプチドに対して、結合親和性の低下を呈する、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記免疫調節ポリペプチドが、配列番号１に記載のものに対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、変異ＩＬ−２ポリペプチドであり、
前記変異ＩＬ−２ポリペプチドは、配列番号１に記載のものと比較して、１つ以上のアミノ酸置換を有し、
前記変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列を有するα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ−２受容体（ＩＬ２Ｒ）に対して、配列番号１のうち１つのものに記載されるＩＬ−２アミノ酸配列の前記ＩＬ２Ｒに対する結合親和性と比較して、結合親和性の低下を呈する、
請求項１〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記変異ＩＬ−２ポリペプチドが、Ｅ１５、Ｈ１６、Ｄ２０、Ｆ４２、Ｙ４５及びＱ１２６のうちの１つ以上の置換を含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記変異ＩＬ−２ポリペプチドが、
ａ）Ｆ４２及びＤ２０の置換、
ｂ）Ｆ４２及びＨ１６の置換、
ｃ）Ｆ４２、Ｄ２０及びＹ４５の置換、または
ｄ）Ｆ４２、Ｈ１６及びＱ１２６の置換
を含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記免疫調節ポリペプチドが、変異４−１ＢＢＬ免疫調節ポリペプチドであり、
前記変異４−１ＢＢＬ免疫調節ポリペプチドが、図３７に示されるアミノ酸配列を有する４−１ＢＢポリペプチドに対して、図３６Ａに示される４−１ＢＢＬアミノ酸配列の結合親和性と比較して、結合親和性の低下を呈し、及び／または
前記変異４−１ＢＢＬ免疫調節ポリペプチドが、図３６Ａに示される４−１ＢＢＬアミノ酸配列の産生レベルと比較して、哺乳動物細胞による産生レベルの増加を呈する、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記変異４−１ＢＢＬ免疫調節ポリペプチドが、図３６Ａに記載されるアミノ酸ナンバリングに基づいて、アミノ酸９１、９２、９４〜１１５、１１７〜１２６、１２８〜１３２、１４４〜１５３、１５５〜１５８、１８４〜１８７、１８９〜１９１、１９３〜１９５、１９７、２１０〜２１９、２２１〜２２４、２２６、２２８〜２３１、２３３及び２３４のうちの１つの置換を含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記変異免疫調節ポリペプチドが、前記４−１ＢＢポリペプチドに対して、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３〜２１５のうちの１つに記載される４−１ＢＢＬアミノ酸配列によって呈される結合親和性の５０％未満の結合親和性を呈する、請求項３０または３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記多量体ポリペプチドが、Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓから選択される１つ以上のアミノ酸置換を含むＩｇ  Ｆｃポリペプチドを含む、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、
ａ）Ｎ２９７Ａ置換、
ｂ）Ｌ２３４Ａ置換及びＬ２３５Ａ置換、
ｃ）Ｌ２３４Ｆ置換及びＬ２３５Ｅ置換、または
ｄ）Ｌ２３４Ｆ置換、Ｌ２３５Ｅ置換及びＰ３３１Ｓ置換
を含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記多量体ポリペプチドの前記エピトープが、アミノ酸配列ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ（配列番号７７）を含む、請求項１〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記多量体ポリペプチドの前記β２−ミクログロブリンポリペプチドが、図３４Ａに示されるアミノ酸配列を含む、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記多量体ポリペプチドの前記主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）の重鎖ポリペプチドが、図３４Ｃに示されるアミノ酸配列を含む、請求項１〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記免疫チェックポイント阻害剤が、前記免疫チェックポイント阻害剤に特異的な抗体である、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記抗体が、少なくとも１つのヒト化軽鎖及び／または重鎖フレームワーク領域を含む、請求項３８または３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記抗体が、Ｆｃポリペプチドを含み、前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡ  Ｆｃポリペプチド、またはＩｇＭ  Ｆｃポリペプチドである、請求項３８に記載の方法。
【請求項４２】
前記抗体が、Ｆｖ断片、ナノボディまたはＦａｂ断片である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４３】
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ１２２、ＣＤ９６、ＣＤ７３、ＣＤ４７、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＳＦ１Ｒ、ＪＡＫ、ＰＩ３Ｋδ、ＰＩ３Ｋγ、ＴＡＭ、アルギナーゼ、ＣＤ１３７（４−１ＢＢとしても知られる）、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ−４、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＶＩＳＴＡ、ＣＤ９６、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１２２、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２から選択される免疫チェックポイント阻害剤に特異的な抗体である、請求項３８〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ１に特異的な抗体である、請求項３８〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
前記抗体が、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、ピジリズマブまたはＢＭＳ−３９８８６である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ−Ｌ１に特異的な抗体である、請求項３８〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４７】
前記抗体が、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、ＫＮ０３５またはアベルマブである、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＴＬＡ４に特異的な抗体である、請求項３８〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
前記抗体が、イピリムマブまたはトレメリムマブである、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記多量体ポリペプチド及び前記免疫チェックポイント阻害剤が、同じ投与経路によって投与される、請求項１〜４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５１】
前記多量体ポリペプチド及び前記免疫チェックポイント阻害剤が、異なる投与経路によって投与される、請求項１〜４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
前記多量体ポリペプチドが、皮下、静脈内、腫瘍近傍及び筋肉内から選択される投与経路によって投与される、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５３】
前記免疫チェックポイント阻害剤が、皮下、静脈内、腫瘍近傍、及び筋肉内から選択される投与経路によって投与される、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
前記個体がヒトである、請求項１〜５３のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１７年３月１５日に出願された米国仮特許出願第６２／４７１，８３２号及び２０１７年６月１６日に出願された米国仮特許出願第６２／５２１，００９号の利益を主張するものであり、当該出願の全体を参照により本明細書に援用する。
【背景技術】
【０００２】
緒言
適応免疫応答は、Ｔ細胞の表面上に存在するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）と、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ；ヒトの場合、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）複合体とも称される）によって抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面上に非共有結合的に提示される小ペプチド抗原との結合を必要とする。この結合は、免疫系の標的化機序を代表するものであり、Ｔ細胞の調節（活性化または抑制）及びエフェクター機能に必要な分子相互作用である。エピトープ特異的な細胞標的化に続いて、標的化されたＴ細胞は、ＡＰＣ上にある共刺激タンパク質と、Ｔ細胞上の対応する共刺激タンパク質との結合を介して活性化される。Ｔ細胞の特異性及び活性化または抑制をもたらすには、エピトープ／ＴＣＲの結合及びＡＰＣ共刺激タンパク質とＴ細胞共刺激タンパク質との結合の両方のシグナルが必要とされる。ＴＣＲは、特定のエピトープに特異的であるが、共刺激タンパク質は、エピトープに特異的ではなく、むしろ全てのＴ細胞または大きなＴ細胞サブセットに広く発現している。
【発明の概要】
【０００３】
概要
本開示は、個体の免疫応答を調節する方法を提供する。本開示は、治療の方法を提供する。本開示は、個体に、多量体ポリペプチド（ｓｙｎＴａｃ）及び免疫チェックポイント阻害剤を投与することを含む、方法を提供する。本開示は、免疫チェックポイント阻害剤による治療を受けている個体に、多量体ポリペプチド（ｓｙｎＴａｃ）を投与することを含む、方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【０００４】
【図１】Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドの様々な実施形態を模式的に示す。これらの実施形態において、別個のポリペプチド中に存在するＭＨＣ（例えば、ＨＬＡ）ポリペプチドの間にジスルフィド結合が形成される。
【図２】野生型ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を示し（図２Ａ）、変異ＩＬ−２ポリペプチドのアミノ酸配列を示す（図２Ｂ〜２Ｑ）。
【図３】ＩＬ−２受容体のα鎖（図３Ａ）、β鎖（図３Ｂ）及びγ鎖（図３Ｃ）のアミノ酸配列を示す。
【図４】免疫グロブリンＦｃポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図５】ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。シグナル配列には下線が引かれている。
【図６】ホモ・サピエンス（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）（ＮＰ＿００４０３９．１；配列番号９５）、チンパンジー（Ｐａｎ  ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓ）（ＮＰ＿００１００９０６６．１；配列番号１９５）、アカゲザル（Ｍａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａ）（ＮＰ＿００１０４０６０２．１；配列番号９６）、ウシ（Ｂｏｓ  ｔａｕｒｕｓ）（ＮＰ＿７７６３１８．１；配列番号９７）及びマウス（Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ）（ＮＰ＿０３３８６５．２；配列番号９８）に由来するβ−２ミクログロブリン（β２Ｍ）前駆体（すなわち、リーダー配列を含む）の複数のアミノ酸配列アラインメントを示す。アミノ酸１〜２０は、シグナルペプチドである。
【図７】一過性トランスフェクション後の本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ（「Ｃｕｅ−ＩＬ−２−ａ」及びＣｕｅ−ＩＬ−２−ｂ」）の産生を示す。図７Ａは、未精製の収量を示し、図７Ｂは、精製生成物を示す。
【図８】本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの産生を示す。ＩＬ−２ポリペプチドは、軽鎖（ＭＨＣクラスＩ分子の軽鎖（例えば、β２Ｍ）を含むポリペプチド鎖）上、または重鎖（ＭＨＣクラスＩ分子の重鎖を含むポリペプチド鎖）上に存在する。
【図９】ＩＬ−２／ｓｙｎ−Ｔａｃの発現レベルを示す。ＩＬ−２は、野生型（ｗｔ）であるか、Ｆ４２Ａ、Ｄ２０Ｋ、Ｑ１２６Ａ、Ｅ１５Ａ、Ｙ４５Ａ及びＨ１６Ａの様々な組み合わせを含む。
【図１０】本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの発現を示す。ＩＬ−２は、ｓｙｎＴａｃ中に、１コピー（１Ｘ）、２コピー（２Ｘ）または３コピー（３Ｘ）存在する。
【図１１】本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃによる抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞及び非特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞のｉｎ  ｖｉｔｒｏ刺激を示す。Ｆ４２Ａ及びＨ１６Ａの置換を含むＩＬ−２変異体は、ｓｙｎＴａｃ中に２コピー存在する。
【図１２】特異的（リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス；ＬＣＭＶ）または非特異的（ＯＴ１；オボアルブミンを認識）ＣＤ８＋Ｔ細胞に対するＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ結合を示す。
【図１３】抗原特異的（ＬＣＭＶ）または非特異的（ＢＬ６）ＣＤ８＋Ｔ細胞におけるＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ媒介シグナル伝達を示す。
【図１４】本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを様々なＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ濃度で用いたＣＤ８＋抗原特異的（ＬＣＭＶ）細胞または非特異的（ＢＬ６）細胞の刺激後における、リン酸化シグナル伝達転写活性化因子５（ｐＳＴＡＴ５）陽性細胞のパーセントを示す。
【図１５】本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃのｉｎ  ｖｉｖｏ活性を示す。左パネルは、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、組換えＩＬ−２（ｒＩＬ−２）、または本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの投与後における、抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞数の倍率変化を示す。右パネルは、ＰＢＳ、ｒＩＬ−２、または本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの投与後における、抗原特異的応答及び非抗原特異的応答を示す。
【図１６】用量漸増（図１６Ａ）及び投与経路（図１６Ｂ）の影響を示す。
【図１７】腫瘍に対するｉｎ  ｖｉｖｏ有効性へのＩＬ−２のコピー数の影響を示す。
【図１８】本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを１０ｍｇ／ｋｇの量で腹腔内投与した後のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの血清半減期を示す。
【図１９】本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを１０ｍｇ／ｋｇの量で腹腔内投与してから２時間後のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの安定性を示す。
【図２０】本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを４℃または３７℃で５日間維持した後のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃに関するサイズ排除クロマトグラフィーのデータを示す。
【図２１】リーダーペプチドを含む、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示す。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｎ２９７Ａの置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃを含む。
【図２２】リーダーペプチドを含まない、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示す。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｎ２９７Ａの置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃを含む。
【図２３】図２１に示されるＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ重鎖をコードするヌクレオチド配列（図２３Ａ）及び配列に関する解説（図２３Ｂ）を示す。
【図２４】リーダーペプチドを含む、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示す。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａの置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃを含む。
【図２５】リーダーペプチドを含まない、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示す。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａの置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃを含む。
【図２６】図２４に示されるＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ重鎖をコードするヌクレオチド配列（図２６Ａ）及び配列に関する解説（図２６Ｂ）を示す。
【図２７】リーダーペプチドを含む、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示す。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓの置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃを含む。
【図２８】リーダーペプチドを含まない、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの重鎖のアミノ酸配列を示す。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ重鎖は、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓの置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃを含む。
【図２９】図２７に示されるＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ重鎖をコードするヌクレオチド配列（図２９Ａ）及び配列に関する解説（図２９Ｂ）を示す。
【図３０】リーダーペプチドを含む、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの軽鎖のアミノ酸配列を示す。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ軽鎖は、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ７エピトープを含む。
【図３１】リーダーペプチドを含まない、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの軽鎖のアミノ酸配列を示す。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ軽鎖は、ＨＰＶ  Ｅ７エピトープを含む。
【図３２】図３０に示されるＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ軽鎖をコードするヌクレオチド配列を示す。
【図３３】野生型ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ（図３３Ａ）、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓの置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃ（図３３Ｂ）、Ｎ２９７Ａの置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃ（図３３Ｃ）、ならびにＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａの置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃ（図３３Ｄ）のアミノ酸配列を示す。
【図３４】β２−ミクログロブリン（Ｒ１２Ｃ）ポリペプチド（図３４Ａ）、変異ＩＬ−２（Ｈ１６Ａ；Ｆ４２Ａ）ポリペプチド（図３４Ｂ）、及びクラスＩＭＨＣ−Ｈ鎖Ａ０２０１（Ｙ８４Ａ；Ａ２３６Ｃ）（図３４Ｃ）のアミノ酸配列を示す。
【図３５】腫瘍体積の減少に対する、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ及び抗ＰＤ１抗体の相乗効果を示す。
【図３６】４−１ＢＢＬのアミノ酸配列（図３６Ａ）及び変異４−１ＢＢＬポリペプチドの例（図３６Ｂ〜３６ＩＩＩＩ）を示す。
【図３７】４−１ＢＢのアミノ酸配列を示す。
【図３８】本開示の実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと３日間（図３８Ａ）または５日間（図８Ｂ）接触させた標的細胞によるインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）分泌を示す。
【図３９】本開示の実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと３日間（図３９Ａ）または５日間（図９Ｂ）接触させた標的細胞によるインターロイキン−２（ＩＬ−２）分泌を示す。
【図４０】本開示の実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと３日間（図４０Ａ）または５日間（図４０Ｂ）接触させた標的細胞によるインターロイキン−６（ＩＬ−６）分泌を示す。
【図４１】本開示の実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと３日間（図４１Ａ）または５日間（図４１Ｂ）接触させた標的細胞による腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦα）分泌を示す。
【図４２】本開示の実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと３日間（図４２Ａ）または５日間（図４２Ｂ）接触させた標的細胞によるインターロイキン−１０（ＩＬ−１０）分泌を示す。
【図４３】本開示の実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと３日間（図４３Ａ）または５日間（図４３Ｂ）接触させた標的細胞によるインターロイキン−１７Ａ（ＩＬ−１７Ａ）分泌を示す。
【図４４】本開示の実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと３日間（図４４Ａ）または５日間（図４４Ｂ）接触させた標的細胞によるインターロイキン−４（ＩＬ−４）分泌を示す。
【図４５】本開示の実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと接触させた標的細胞の増殖を示す。
【図４６】本開示の実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと接触させた標的細胞の生存率を示す。
【図４７】ＣＨＯ細胞において産生された様々なｓｙｎＴａｃポリペプチドの発現レベルを示す。
【図４８】本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドの腫瘍体積に対するｉｎ  ｖｉｖｏ効果を示す。
【図４９】腫瘍量及びグランザイムＢ＋腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）パーセントに対する、様々な用量の４−１ＢＢＬ／ｓｙｎＴａｃ及び抗ＰＤ１抗体の共投与の効果を示す。
【図５０】ＰＤ−Ｌ１ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図５１】ＣＤ８０ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図５２】ＩＣＯＳ−Ｌポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図５３】ＯＸ４０Ｌポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図５４】ＰＤ−Ｌ２ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図５５】ＣＤ８６（Ｂ７−２）ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図５４】Ｆａｓリガンド（ＦＡＳ−Ｌ）ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００５】
定義
「ポリヌクレオチド」及び「核酸」という用語は、本明細書中で区別なく使用され、リボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドのいずれかである、任意の長さのヌクレオチドの重合形態を指す。したがって、本用語は、限定するものではないが、一本鎖、二本鎖もしくは多鎖のＤＮＡもしくはＲＮＡ、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ＤＮＡとＲＮＡのハイブリッド、またはプリン塩基及びピリミジン塩基を含む重合体、または他の天然ヌクレオチド塩基、化学的もしくは生化学的に修飾されたヌクレオチド塩基、非天然ヌクレオチド塩基もしくは誘導体化ヌクレオチド塩基を含む重合体を含む。
【０００６】
「ペプチド」、「ポリペプチド」及び「タンパク質」という用語は、本明細書中で区別なく使用され、任意の長さのアミノ酸の重合形態を指し、これらには、コードアミノ酸及び非コードアミノ酸、化学的もしくは生化学的に修飾されたアミノ酸、または誘導体化されたアミノ酸、ならびに修飾されたペプチド骨格を有するポリペプチドが含まれ得る。
【０００７】
ポリヌクレオチドまたはポリペプチドが別のポリヌクレオチドまたはポリペプチドに対して、あるパーセントの「配列同一性」を有するということは、整列させ、２つの配列を比較したとき、当該パーセンテージの塩基またはアミノ酸が同じであり、同じ相対位置にあることを意味する。配列同一性は、多数の異なる方法で決定することができる。配列同一性を決定するには、様々な簡便な方法及びコンピュータープログラム（例えば、ＢＬＡＳＴ、Ｔ−ＣＯＦＦＥＥ、ＭＵＳＣＬＥ、ＭＡＦＦＴなど）を使用して配列を整列させることができ、こうした方法及びコンピュータープログラムは、ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｌｉ．ｇｏｖ／ＢＬＡＳＴ、ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｍｓａ／ｔｃｏｆｆｅｅ／、ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｍｓａ／ｍｕｓｃｌｅ／、ｍａｆｆｔ．ｃｂｒｃ．ｊｐ／ａｌｉｇｎｍｅｎｔ／ｓｏｆｔｗａｒｅ／を含むワールドワイドウェブ上のサイトを通じて利用可能である。例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９０），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｉ．２１５：４０３−１０を参照されたい。
【０００８】
「保存的アミノ酸置換」という用語は、類似の側鎖を有するアミノ酸残基のタンパク質の互換性を指す。例えば、脂肪族側鎖を有するアミノ酸の群は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン及びイソロイシンからなり、脂肪族ヒドロキシル側鎖を有するアミノ酸の群は、セリン及びトレオニンからなり、アミド含有側鎖を有するアミノ酸の群は、アスパラギン及びグルタミンからなり、芳香族側鎖を有するアミノ酸の群は、フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファンからなり、塩基性側鎖を有するアミノ酸の群は、リシン、アルギニン及びヒスチジンからなり、酸性側鎖を有するアミノ酸の群は、グルタミン酸及びアスパラギン酸からなり、硫黄含有側鎖を有するアミノ酸の群は、システイン及びメチオニンからなる。例示的な保存的アミノ酸置換基は、バリン−ロイシン−イソロイシン、フェニルアラニン−チロシン、リシン−アルギニン、アラニン−バリン−グリシン、及びアスパラギン−グルタミンである。
【０００９】
本明細書で（例えば、Ｔ細胞上のポリペプチド（例えば、Ｔ細胞受容体）に対するＴ細胞調節多量体ポリペプチドの結合に関して）使用される「結合」は、非共有結合的な相互作用を指す。結合相互作用は、一般に、１０−６Ｍ未満、１０−７Ｍ未満、１０−８Ｍ未満、１０−９Ｍ未満、１０−１０Ｍ未満、１０−１１Ｍ未満、１０−１２Ｍ未満、１０−１３Ｍ未満、１０−１４Ｍ未満、または１０−１５Ｍ未満の解離定数（ＫＤ）を特徴とする。「親和性」は、結合の強さを指し、結合親和性の増大は、ＫＤの低下と相関する。
【００１０】
本明細書で使用される「免疫学的シナプス」または「免疫シナプス」という用語は、一般に、適応免疫応答において相互作用する２つの免疫細胞の間の天然の界面を指し、例えば、抗原提示細胞（ＡＰＣ）または標的細胞と、エフェクター細胞、例えば、リンパ球、エフェクターＴ細胞、ナチュラルキラー細胞などとの間の界面が含まれる。ＡＰＣとＴ細胞との間の免疫学的シナプスは、例えば、Ｂｒｏｍｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１；１９：３７５−９６に記載されているように、一般に、Ｔ細胞抗原受容体と主要組織適合遺伝子複合体分子との相互作用によって開始される。当該文献の開示は、その全体が参照により本明細書に援用される。
【００１１】
「Ｔ細胞」は、Ｔヘルパー細胞（ＣＤ４＋細胞）、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＤ８＋細胞）、Ｔ制御性細胞（Ｔｒｅｇ）及びＮＫ−Ｔ細胞を含む、ＣＤ３を発現する全てのタイプの免疫細胞を含む。
【００１２】
「共刺激ポリペプチド」（本明細書中、「免疫調節ポリペプチド」とも称される）は、当該用語が本明細書で使用されるとき、Ｔ細胞上の同種の共刺激ポリペプチド（本明細書において「同種の免疫共調節ポリペプチド」とも称される）に特異的に結合することによって、一次シグナル（例えば、ＴＣＲ／ＣＤ３複合体と、ペプチドをロードした主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチドとの結合によってもたらされるもの）に加えて、Ｔ細胞応答（限定するものではないが、増殖、活性化、分化などを含む）を媒介するシグナルをもたらす、抗原提示細胞（ＡＰＣ）（例えば、樹状細胞、Ｂ細胞など）上のポリペプチドを含む。共刺激リガンドには、限定するものではないが、ＣＤ７、Ｂ７−１（ＣＤ８０）、Ｂ７−２（ＣＤ８６）、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、４−１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、誘導性共刺激リガンド（ＩＣＯＳ−Ｌ）、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ＨＬＡ−Ｇ、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＨＶＥＭ、リンホトキシンβ受容体、３／ＴＲ６、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、ＨＶＥＭ、Ｔｏｌｌリガンド受容体に結合するアゴニストまたは抗体、及びＢ７−Ｈ３と特異的に結合するリガンドが含まれ得る。また、共刺激リガンドは、とりわけ、Ｔ細胞上に存在する共刺激分子と特異的に結合する抗体、限定するものではないが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）、ＣＤ２、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３、及びＣＤ８３に特異的に結合するリガンドなども包含する。
【００１３】
Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドの「調節ドメイン」（「ＭＯＤ」）は、共刺激ポリペプチド、例えば、変異ＩＬ−２ポリペプチドなどのＩＬ−２ポリペプチドを含む。
【００１４】
「異種」とは、本明細書で使用されるとき、未変性の核酸またはタンパク質にはみられないヌクレオチドまたはポリペプチドをそれぞれ意味する。
【００１５】
「組換え」とは、本明細書で使用されるとき、特定の核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡ）が、天然系でみられる内因性核酸とは区別可能な構造的なコード配列または非コード配列を有する構築物をもたらす、クローニング、制限、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）及び／またはライゲーションの各工程の様々な組み合わせの産物であることを意味する。ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列は、ｃＤＮＡ断片又は一連の合成オリゴヌクレオチドから組み立てることができ、細胞又は無細胞転写翻訳系に含有される組換え転写単位からの発現が可能な合成核酸が得られる。
【００１６】
「組換え発現ベクター」または「ＤＮＡ構築物」という用語は、ベクター及び１つのインサートを含むＤＮＡ分子を指すために本明細書中で区別なく使用される。組換え発現ベクターは、通常、インサート（複数可）の発現及び／または伝播のために、あるいは、他の組換えヌクレオチド配列の構築のために作製される。インサート（複数可）は、プロモーター配列に作動可能に連結されても連結されなくてもよく、ＤＮＡ制御配列に作動可能に連結されても連結されなくてもよい。
【００１７】
「抗体」及び「免疫グロブリン」という用語は、任意のアイソタイプの抗体または免疫グロブリン、抗原への特異的結合を保持している抗体断片（限定するものではないが、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ及びＦｄ断片を含む）、キメラ抗体、ヒト化抗体、一本鎖抗体（ｓｃＡｂ）、単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）、単一ドメイン重鎖抗体、単一ドメイン軽鎖抗体、二重特異性抗体、多重特異性抗体、ならびに抗体及び非抗体タンパク質の抗原結合（本明細書中、抗原結合とも称される）部分を含む融合タンパク質を含む。また、本用語には、Ｆａｂ’、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）２及びまたは抗原への特異的結合を保持している他の抗体断片、ならびにモノクローナル抗体も包含される。本明細書で使用されるとき、モノクローナル抗体は、同一の細胞群によって産生される抗体であり、それらは全て、反復的な細胞複製によって単一の細胞から産生される。すなわち、細胞のクローンは、単一の抗体種のみを産生する。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ作製技術を使用して産生することができるが、当業者に知られている他の産生方法も使用することができる（例えば、抗体ファージディスプレイライブラリーに由来する抗体）。抗体は、一価または二価であり得る。抗体は、Ｉｇ単量体であってよく、これは、ジスルフィド結合によって連結された２つの重鎖と２つの軽鎖の４つのポリペプチド鎖からなる「Ｙ型」分子である。
【００１８】
本明細書で使用される「ヒト化抗体」という用語は、異なる起源の抗体の部分を含む抗体であって、少なくとも１つの部分がヒト起源のアミノ酸配列を含む、抗体を指す。例えば、ヒト化抗体は、マウスなどの必要な特異性を有する非ヒト起源の免疫グロブリンに由来する部分と、ヒト起源の免疫グロブリン配列に由来する部分とを含み得（例えば、キメラ免疫グロブリン）、これらは、従来技術（例えば、合成）によって化学的に一緒に接続され得るか、遺伝子工学技術を使用して連続するポリペプチドとして作製され得る（例えば、キメラ抗体のタンパク質部分をコードするＤＮＡを発現させて連続するポリペプチド鎖を生成することができる）。ヒト化抗体の別の例は、非ヒト起源の抗体に由来するＣＤＲと、ヒト起源の軽鎖及び／または重鎖に由来するフレームワーク領域とを含む１つ以上の抗体鎖を含有する抗体である（例えば、フレームワークの変更を伴うまたは伴わないＣＤＲグラフト抗体）。キメラまたはＣＤＲグラフト化一本鎖抗体もまた、ヒト化免疫グロブリンという用語に包含される。例えば、Ｃａｂｉｌｌｙらの米国特許第４，８１６，５６７号、Ｃａｂｉｌｌｙらの欧州特許第０，１２５，０２３Ｂ１号、Ｂｏｓｓらの米国特許第４，８１６，３９７号、Ｂｏｓｓらの欧州特許第０，１２０，６９４Ｂ１号、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．らのＷＯ８６／０１５３３、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．らの欧州特許第０，１９４，２７６Ｂ１号、Ｗｉｎｔｅｒの米国特許第５，２２５，５３９号、Ｗｉｎｔｅｒの欧州特許第０，２３９，４００Ｂ１号、Ｐａｄｌａｎ，Ｅ．Ａ．らの欧州特許出願第０，５１９，５９６Ａ１号を参照されたい。また、一本鎖抗体に関しては、Ｌａｄｎｅｒらの米国特許第４，９４６，７７８号、Ｈｕｓｔｏｎの米国特許第５，４７６，７８６号、及びＢｉｒｄ，Ｒ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４２：４２３−４２６（１９８８））を参照されたい。
【００１９】
例えば、ヒト化抗体は、合成核酸及び／または組換え核酸を使用して所望のヒト化鎖をコードする遺伝子（例えば、ｃＤＮＡ）を調製し、作製することができる。例えば、ヒト化可変領域をコードする核酸（例えば、ＤＮＡ）配列は、先にヒト化された可変領域のＤＮＡ鋳型などの、ヒト鎖またはヒト化鎖をコードするＤＮＡ配列をＰＣＲ変異導入法を使用して変更し、構築することができる（例えば、Ｋａｍｍａｎ，Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，１７：５４０４（１９８９））；Ｓａｔｏ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５３：８５１−８５６（１９９３）；Ｄａｕｇｈｅｒｔｙ，Ｂ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，１９（９）：２４７１−２４７６（１９９１）；及びＬｅｗｉｓ，Ａ．Ｐ．ａｎｄ  Ｊ．Ｓ．Ｃｒｏｗｅ，Ｇｅｎｅ，１０１：２９７−３０２（１９９１）参照）。これらの方法または他の好適な方法を使用して、変異体も容易に作製することができる。例えば、クローニングした可変領域に変異導入を行うことができ、所望の特異性を持つ変異をコードする配列を選択することができる（例えば、ファージライブラリーから；例えば、Ｋｒｅｂｂｅｒらの米国特許第５，５１４，５４８号；１９９３年４月１日に公開されたＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍらのＷＯ９３／０６２１３参照）。
【００２０】
「抗体断片」は、インタクト抗体の一部、例えば、インタクト抗体の抗原結合領域または可変領域を含む。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ'、Ｆ（ａｂ'）２及びＦｖ断片；ダイアボディ；直鎖抗体（Ｚａｐａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７−１０６２（１９９５））；ドメイン抗体（ｄＡｂ；Ｈｏｌｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２１：４８４）；一本鎖抗体分子；ならびに抗体断片から形成された多重特異性抗体が挙げられる。抗体をパパイン消化すると、それぞれが単一の抗原結合部位を有する「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片と、容易に結晶化する能力を反映した表記である残留「Ｆｃ」断片とが生成される。ペプシン処理では、２つの抗原結合部位を有し、抗原に依然として架橋することができる、Ｆ（ａｂ'）２断片が得られる。
【００２１】
「Ｆｖ」は、完全な抗原認識結合部位を含有する最小の抗体断片である。この領域は、１つの重鎖可変ドメインと１つの軽鎖可変ドメインの二量体から構成され、非共有結合的にしっかり会合している。この構成において、各可変ドメインの３つのＣＤＲが相互作用して、ＶＨ−ＶＬ二量体の表面上に抗原結合部位を画定する。全体として、６つのＣＤＲが、抗体に抗原結合特異性を付与する。しかしながら、単一の可変ドメイン（または抗原に対して特異的なＣＤＲを３つしか含まない半分のＦｖ）であっても、完全な結合部位よりも親和性は低くなるが、抗原を認識し結合する能力を有する。
【００２２】
「Ｆａｂ」断片はまた、軽鎖の定常ドメインと、重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）とを含有する。Ｆａｂ断片とＦａｂ'断片は、重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシル末端に、抗体ヒンジ領域に由来する１つ以上のシステインを含む数個の残基が付加されている点で異なる。Ｆａｂ’−ＳＨとは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を持つＦａｂ’の本明細書における表記である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元来、その断片間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として作製された。抗体断片の他の化学的カップリングも知られている。
【００２３】
任意の脊椎動物種に由来する抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、κ及びλと呼ばれる２つの明確に異なるタイプのうちの１つに割り当てられ得る。免疫グロブリンは、その重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、異なるクラスに割り当てることができる。免疫グロブリンには、５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭがあり、これらのクラスのいくつかは、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ及びＩｇＡ２のサブクラス（アイソタイプ）に更に分類することができる。サブクラスは、タイプ、例えば、ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂに更に分けることができる。
【００２４】
「一本鎖Ｆｖ」または「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨドメイン及びＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一ポリペプチド鎖中に存在する。いくつかの実施形態において、Ｆｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーを更に含み、このリンカーにより、ｓＦｖは、抗原結合に望ましい構造を形成することが可能になる。ｓＦｖの概説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）を参照されたい。
【００２５】
「ダイアボディ」という用語は、２つの抗原結合部位を有する小さな抗体断片であって、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に連結された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を同じポリペプチド鎖（ＶＨ−ＶＬ）中に含む、断片を指す。同じ鎖上の２つのドメイン間で対合が起こらないような短いリンカーを使用することにより、これらのドメインを別の鎖の相補的ドメインと対合させ、２つの抗原結合部位を形成させる。ダイアボディについては、例えば、ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ９３／１１１６１；及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８において、より完全に記載されている。
【００２６】
本明細書で使用されるとき、「親和性」という用語は、２つの作用物質（例えば、抗体及び抗原）の可逆的結合の平衡定数を指し、解離定数（ＫＤ）で表される。親和性は、無関係のアミノ酸配列に対する抗体の親和性よりも、少なくとも１倍超、少なくとも２倍超、少なくとも３倍超、少なくとも４倍超、少なくとも５倍超、少なくとも６倍超、少なくとも７倍超、少なくとも８倍超、少なくとも９倍超、少なくとも１０倍超、少なくとも２０倍超、少なくとも３０倍超、少なくとも４０倍超、少なくとも５０倍超、少なくとも６０倍超、少なくとも７０倍超、少なくとも８０倍超、少なくとも９０倍超、少なくとも１００倍超、もしくは少なくとも１，０００倍超、またはそれ以上であり得る。抗体の標的タンパク質に対する親和性は、例えば、約１００ナノモル（ｎＭ）〜約０．１ｎＭ、約１００ｎＭ〜約１ピコモル（ｐＭ）、または約１００ｎＭ〜約１フェムトモル（ｆＭ）以上であり得る。本明細書で使用されるとき、「アビディティ」という用語は、希釈後における２つ以上の作用物質の複合体の解離抵抗性を指す。「免疫反応性」及び「優先的結合」という用語は、抗体及び／または抗原結合断片に関して、本明細書中で区別なく使用される。
【００２７】
「結合」という用語は、例えば、共有結合的、静電的、疎水性、ならびにイオン性及び／または水素結合相互作用（塩橋及び水橋などの相互作用を含む）による２つの分子間の直接的会合を指す。「特異的結合」は、少なくとも約１０−７Ｍ超、例えば、５×１０−７Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−８Ｍ超の親和性を有する結合を指す。「非特異的結合」は、約１０−７Ｍ未満の親和性を有する結合、例えば、１０−６Ｍ、１０−５Ｍ、１０−４Ｍなどの親和性を有する結合を指す。
【００２８】
本明細書で使用されるとき、「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」という用語は、重鎖と軽鎖の両ポリペプチドの可変領域内にみられる非連続的な抗原結合部位を意味することが意図される。ＣＤＲについては、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９−６６１６（１９７７）；Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９９１）（本明細書中、Ｋａｂａｔ  １９９１とも称される）によって、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７）（本明細書中、Ｃｈｏｔｈｉａ  １９８７とも称される）；及びＭａｃＣａｌｌｕｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２−７４５（１９９６）によって記載されており、ここで、定義には、互いに比較したときのアミノ酸残基の重複またはサブセットが含まれる。しかしながら、抗体もしくはグラフト抗体またはその変異体のＣＤＲを指すいずれの定義の適用も、本明細書で定義及び使用される用語の範囲内であることが意図される。上記の参考文献のそれぞれによって定義されるＣＤＲを包含するアミノ酸残基を以下の表に比較として記載する。表２に列挙されるＣＤＲは、Ｋａｂａｔ  １９９１に従って定義されたものである。
表：ＣＤＲの定義
2020514375.tif 000002
１  残基ナンバリングは、上掲のＫａｂａｔらの表記法に従う。
２  残基ナンバリングは、上掲のＣｈｏｔｈｉａらの表記法に従う。
３  残基ナンバリングは、上掲のＭａｃＣａｌｌｕｍらの表記法に従う。
【００２９】
本明細書で使用されるとき、「ＣＤＲ−Ｌ１」、「ＣＤＲ−Ｌ２」及び「ＣＤＲ−Ｌ３」という用語は、軽鎖可変領域中の第１、第２及び第３のＣＤＲをそれぞれ指す。本明細書で使用されるとき、「ＣＤＲ−Ｈ１」、「ＣＤＲ−Ｈ２」及び「ＣＤＲ−Ｈ３」という用語は、重鎖可変領域中の第１、第２及び第３のＣＤＲをそれぞれ指す。本明細書で使用されるとき、「ＣＤＲ−１」、「ＣＤＲ−２」及び「ＣＤＲ−３」という用語は、いずれかの鎖の可変領域の第１、第２及び第３のＣＤＲをそれぞれ指す。
【００３０】
本明細書で使用されるとき、「フレームワーク」という用語は、抗体可変領域に関して使用される場合、抗体の可変領域内のＣＤＲ領域以外の全てのアミノ酸残基を意味することが意図される。可変領域フレームワークは、一般に、約１００〜１２０アミノ酸長の不連続なアミノ酸配列であるが、ＣＤＲ以外のアミノ酸のみを指すことが意図される。本明細書で使用されるとき、「フレームワーク領域」という用語は、ＣＤＲによって分離されたフレームワークの各ドメインを意味することが意図される。
【００３１】
「治療」、「治療すること」などの用語は、一般に、所望の薬理学的作用及び／または生理学的作用を得ることを意味するために本明細書で使用される。作用は、疾患もしくはその症状を完全もしくは部分的に防ぐという点で予防的であり得、及び／または疾患及び／または当該疾患に起因し得る有害作用を部分的もしくは完全に治すという点で治療的であり得る。本明細書で使用される「治療」は、哺乳動物における疾患または症状のあらゆる治療を包含し、（ａ）疾患もしくは症状に罹患する素因があり得るが、まだ罹患の診断を受けていない対象における疾患もしくは症状の発症予防、（ｂ）疾患もしくは症状の阻害、すなわち、その発生の阻止、または（ｃ）疾患の緩和、すなわち、疾患の退行誘起を含む。治療薬は、疾患または損傷の発生前、発生中、または発生後に投与され得る。進行中の疾患の治療が特に対象となり、この場合、治療は、患者の望ましくない臨床症状を安定化または低減させる。そのような治療は、望ましくは、患部組織における機能が完全に失われる前に実施される。主題の治療法は、望ましくは、疾患の症状期中、いくつかの場合においては疾患の症状期後に投与される。
【００３２】
「個体」、「対象」、「宿主」及び「患者」という用語は、本明細書中で区別なく使用され、診断、治療または治療法が望まれるあらゆる哺乳動物対象を指す。哺乳動物には、例えば、ヒト、非ヒト霊長類、齧歯類（例えば、ラット、マウス）、ウサギ目（例えば、ウサギ）、有蹄類（例えば、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、ヤギなど）などが含まれる。
【００３３】
本発明を更に説明する前に、本発明が、記載される特定の実施形態に限定されず、当然のことながら、それ自体多様であり得ることを理解されたい。また、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的にしており、本発明の範囲が添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるため、限定を意図するものではないことも理解されたい。
【００３４】
値の範囲が記載される場合、別途明確な記載がない限り、その範囲の上限値と下限値との間にある、下限値の１０分の１の単位までの各介在値と、その指定範囲内の任意の他の指定値または介在値とが本発明内に包含されることが理解される。これらのより狭い範囲の上限値及び下限値は、より狭い範囲内に独立して含まれ得、指定範囲内の任意の特定の限界値が除外される場合もまた本発明内に包含される。指定範囲が限界値の一方または両方を含む場合、当該含まれる限界値の一方または両方を除いた範囲もまた本明細書に含まれる。
【００３５】
別途の定義がない限り、本明細書で使用される全ての専門用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されている意味と同一の意味を有する。本発明の実施または検証においては、本明細書に記載のものと同様または同等の任意の方法及び材料を使用することができるが、ここでは好ましい方法及び材料について記載する。本明細書で言及される全ての公開物は、当該公開物に関連して引用される方法及び／または材料を開示及び記載するために、参照により本明細書に援用される。
【００３６】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用される場合、「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」という単数形は、別途明記されない限り、複数の指示物を含むことに留意すべきである。したがって、例えば、「変異ＩＬ−２ポリペプチド」への言及は、複数の当該ポリペプチドを含み、「クラスＩのＨＬＡ重鎖ポリペプチド」への言及は、１つ以上のクラスＩのＨＬＡ重鎖ポリペプチド及び当業者に知られているその同等物への参照を含むなどである。更に、特許請求の範囲は、何らかの任意選択の要素を除外して記載される場合があることにも留意されたい。したがって、本記述は、請求項の要素の詳述に関連した「だけ」、「のみ」などの排他的用語の使用、または「否定による」限定の使用に対する前提として働くことが意図される。
【００３７】
明確を期すために、本発明のいくつかの特徴が別個の実施形態の文脈で記載されるが、１つの実施形態として組み合わせて提供され得ることも認識される。逆に、煩雑になるのを避けるために、本発明の様々な特徴が１つの実施形態の文脈で記載されるが、これもまた別個に提供されてもよいし、任意の好適な部分的組み合わせで提供されてもよい。本発明に関する実施形態の全ての組み合わせが本発明に明確に包含され、ありとあらゆる組み合わせが個別にかつ明確に開示された場合と同様に本明細書に開示される。加えて、様々な実施形態及びその要素の全ての部分的組み合わせもまた本発明に明確に包含され、ありとあらゆるそのような部分的組み合わせが個別にかつ明確に本明細書に開示された場合と同様に本明細書に開示される。
【００３８】
本明細書で考察される公開物は、本出願の出願日以前の開示についてのみ記載される。本明細書におけるいかなる記載も、本発明が先行発明に基づいてかかる公開物に先行する権利がないという自認を構成するものではない。更に、記載される公開日は、実際の公開日とは異なる場合があり、これは個別に確認する必要がある場合がある。
【００３９】
詳細な説明
本開示は、治療方法であって、それを必要とする個体に、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド（「ｓｙｎＴａｃ」多量体ポリペプチド）及び少なくとも１つの追加の治療薬を投与することを含む、治療方法を提供する。いくつかの場合において、少なくとも１つの追加の治療薬は、免疫チェックポイント阻害剤である。いくつかの場合において、免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイントに特異的な抗体である。本開示は、個体に、多量体ポリペプチド（ｓｙｎＴａｃ）及び免疫チェックポイント阻害剤を投与することを含む、方法を提供する。本開示は、免疫チェックポイント阻害剤による治療を受けている個体に、多量体ポリペプチド（ｓｙｎＴａｃ）を投与することを含む、方法を提供する。
【００４０】
「Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド」はまた、本明細書中、「ｓｙｎＴａｃポリペプチド」または「ｓｙｎＴａｃ多量体ポリペプチド」または単純に「ｓｙｎＴａｃ」とも称される。ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、調節ドメインを含む。いくつかの場合において、調節ドメインは、野生型アミノ酸配列、例えば、天然に生じる調節ポリペプチドに認められるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、調節ドメインは、変異調節ドメインであり、変異調節ドメインは、免疫調節ポリペプチドに対して、当該免疫調節ポリペプチドに対する野生型調節ドメインの親和性と比較して、結合親和性の低下を呈する。ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、標的とするＴ細胞の活性を調節することができる。変異調節ドメインを含むｓｙｎＴａｃポリペプチドは、標的細胞の特異性の向上をもたらす。
【００４１】
いくつかの場合において、本開示の治療方法は、それを必要とする個体に、ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイント阻害剤を投与することを含む。いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイント阻害剤は、単独で投与した場合のｓｙｎＴａｃ（単剤療法）または免疫チェックポイント阻害剤単独（単剤療法）の効果（複数可）と比較して、相乗効果をもたらす。
【００４２】
ｓｙｎＴａｃと免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせは、いくつかの場合において、単剤療法として投与されるｓｙｎＴａｃまたは単剤療法として投与される免疫チェックポイント阻害剤の相加効果よりも効果的である。例えば、いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃと免疫チェックポイント阻害剤の相乗効果により、ｓｙｎＴａｃもしくは免疫チェックポイント阻害剤の低用量使用及び／またはｓｙｎＴａｃもしくは免疫チェックポイント阻害剤を必要とする個体へのその投与頻度の減少が可能となる。治療薬（ｓｙｎＴａｃまたは免疫チェックポイント阻害剤）を低用量で使用できること、及び／または当該薬剤を低頻度で投与できることにより、単剤療法での当該治療薬の投与に付随し得る毒性または他の有害な副作用を、治療における当該治療薬の有効性を低下させることなく、減らすことができる。加えて、ｓｙｎＴａｃと免疫チェックポイント阻害剤の相乗効果により、ｓｙｎＴａｃ単剤療法または免疫チェックポイント阻害剤単剤療法で得られる臨床的便益と比較して、臨床的便益が向上し得る。臨床的便益の例には、例えば、個体における腫瘍量の減少、個体におけるがん細胞数の減少、個体の生存時間の増加、寛解時間の増加などが挙げられる。最後に、ｓｙｎＴａｃと免疫チェックポイント阻害剤の相乗効果により、ｓｙｎＴａｃ単剤療法または免疫チェックポイント阻害剤単剤療法に伴う有害な副作用または望ましくない副作用を減らすことができる。
【００４３】
免疫チェックポイント阻害剤
例示的な免疫チェックポイント阻害剤としては、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ１２２、ＣＤ９６、ＣＤ７３、ＣＤ４７、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＳＦ１Ｒ、ＪＡＫ、ＰＩ３Ｋδ、ＰＩ３Ｋγ、ＴＡＭ、アルギナーゼ、ＣＤ１３７（４−１ＢＢとしても知られる）、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ−４、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＶＩＳＴＡ、ＣＤ９６、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１２２、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２などの、免疫チェックポイントポリペプチドを標的にする阻害剤が挙げられる。いくつかの場合において、免疫チェックポイントポリペプチドは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１２２及びＣＤ１３７から選択される刺激性チェックポイント分子である。いくつかの場合において、免疫チェックポイントポリペプチドは、Ａ２ＡＲ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ−４、ＩＤＯ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＰＤ−１、ＴＩＭ３、ＣＤ９６、ＴＩＧＩＴ及びＶＩＳＴＡから選択される抑制性チェックポイント分子である。
【００４４】
いくつかの場合において、免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイントに特異的な抗体である。いくつかの場合において、抗免疫チェックポイント抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの場合において、抗免疫チェックポイント抗体は、当該抗体がヒトの免疫応答を実質的に惹起しないように、ヒト化または脱免疫化されている。いくつかの場合において、抗免疫チェックポイント抗体は、ヒト化モノクローナル抗体である。いくつかの場合において、抗免疫チェックポイント抗体は、脱免疫化モノクローナル抗体である。いくつかの場合において、抗免疫チェックポイント抗体は、完全ヒトモノクローナル抗体である。いくつかの場合において、抗免疫チェックポイント抗体は、免疫チェックポイントポリペプチドのリガンドに対する免疫チェックポイントポリペプチドの結合を阻害する。いくつかの場合において、抗免疫チェックポイント抗体は、免疫チェックポイントポリペプチドの受容体に対する免疫チェックポイントポリペプチドの結合を阻害する。
【００４５】
免疫チェックポイントに特異的であり、免疫チェックポイント阻害剤として機能する抗体、例えば、モノクローナル抗体は、当該技術分野において知られている。例えば、Ｗｕｒｚ  ｅｔ  ａｌ．（２０１６）Ｔｈｅｒ．Ａｄｖ．Ｍｅｄ．Ｏｎｃｏｌ．８：４；及びＮａｉｄｏｏ  ｅｔ  ａｌ．（２０１５）Ａｎｎ．Ｏｎｃｏｌ．２６：２３７５を参照されたい。
【００４６】
好適な抗免疫チェックポイント抗体には、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ）、ピジリズマブ（Ｃｕｒｅｔｅｃｈ）、ＡＭＰ−２２４（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ／Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ）、ＭＤＸ−１１０５（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．／Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−４７３６（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、アレルマブ（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ，Ｌｔｄ．）、ＩＭＰ３２１（Ｉｍｍｕｔｅｐ  Ｓ．Ａ．）、ＭＧＡ２７１（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）、ＢＭＳ−９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、リリルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ウレルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＰＦ−０５０８２５６６（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＰＨ２１０１（Ｉｎｎａｔｅ  Ｐｈａｒｍａ／Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＭＥＤＩ−６４６９（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＣＰ−８７０，８９３（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、モガムリズマブ（Ｋｙｏｗａ  ＨａｋｋｏＫｉｒｉｎ）、バルリルマブ（ＣｅｌＩＤｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、アベルマブ（ＥＭＤ  Ｓｅｒｏｎｏ）、ガリキシマブ（Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ＡＭＰ−５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ／ＡＺ）、ＡＵＮＰ  １２（Ａｕｒｉｇｅｎｅ  ａｎｄ  ＰｉｅｒｒｅＦａｂｒｅ）、インドキシモド（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＮＬＧ−９１９（ＮｅｗＬｉｎｋ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ）、ＫＮ０３５及びこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【００４７】
好適な抗ＬＡＧ３抗体には、例えば、ＢＭＳ−９８６０１６及びＬＡＧ５２５が含まれる。好適な抗ＧＩＴＲ抗体には、例えば、ＴＲＸ５１８、ＭＫ−４１６６、ＩＮＣＡＧＮ０１８７６及びＭＫ−１２４８が含まれる。好適な抗ＯＸ４０抗体には、例えば、ＭＥＤＩ０５６２、ＩＮＣＡＧＮ０１９４９、ＧＳＫ２８３１７８１、ＧＳＫ−３１７４９９８、ＭＯＸＲ−０９１６、ＰＦ−０４５１８６００及びＬＡＧ５２５が含まれる。好適な抗ＶＩＳＴＡ抗体は、例えば、ＷＯ２０１５／０９７５３６に記載されている。
【００４８】
抗免疫チェックポイント抗体の好適な用量は、１日あたり約１ｍｇ／ｋｇ〜約２４００ｍｇ／ｋｇであり、例えば、１日あたり約１ｍｇ／ｋｇ〜約１２００ｍｇ／ｋｇであり、１日あたり約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１２００ｍｇ／ｋｇを含む。当該薬剤の他の代表的な用量には、１日あたり約５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１２５ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、１７５ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ、６００ｍｇ／ｋｇ、７００ｍｇ／ｋｇ、８００ｍｇ／ｋｇ、９００ｍｇ／ｋｇ、１０００ｍｇ／ｋｇ、１１００ｍｇ／ｋｇ、１２００ｍｇ／ｋｇ、１３００ｍｇ／ｋｇ、１４００ｍｇ／ｋｇ、１５００ｍｇ／ｋｇ、１６００ｍｇ／ｋｇ、１７００ｍｇ／ｋｇ、１８００ｍｇ／ｋｇ、１９００ｍｇ／ｋｇ、２０００ｍｇ／ｋｇ、２１００ｍｇ／ｋｇ、２２００ｍｇ／ｋｇ及び２３００ｍｇ／ｋｇが含まれる。抗体の有効用量は、１日を通して適切な間隔で別個に投与される、２、３、４、５、６回以上のサブ用量として投与されてもよい。
【００４９】
抗ＰＤ−１抗体
いくつかの場合において、免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ−１抗体である。
【００５０】
好適な抗ＰＤ−１抗体には、例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブ（ＭＫ−３４７５としても知られる）、ピジリズマブ、ＳＨＲ−１２１０、ＰＤＲ００１及びＡＭＰ−２２４が含まれる。いくつかの場合において、抗ＰＤ−１モノクローナル抗体は、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはＰＤＲ００１である。好適な抗ＰＤ１抗体は、米国特許出願公開第２０１７／００４４２５９号に記載されている。ピジリズマブについては、例えば、Ｒｏｓｅｎｂｌａｔｔ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３４：４０９−１８を参照されたい。
【００５１】
いくつかの場合において、抗ＰＤ１抗体は、ペンブロリズマブである。ペンブロリズマブの重鎖のアミノ酸配列は、
2020514375.tif 000003
である。重鎖可変（ＶＨ）領域のアミノ酸配列に下線が引かれている。
【００５２】
ペンブロリズマブの軽鎖のアミノ酸配列は、
2020514375.tif 000004
である。軽鎖可変（ＶＬ）領域のアミノ酸配列に下線が引かれている。
【００５３】
いくつかの場合において、抗ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブのＶＨ領域及びＶＬ領域を含む。いくつかの場合において、抗ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブの重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含む。
【００５４】
いくつかの場合において、抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ（ＭＤＸ−１１０６またはＢＭＳ−９３６５５８としても知られる）である。例えば、Ｔｏｐａｌｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｎ．Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．３６６：２４４３−２４５４；及び米国特許第８，００８，４４９号）を参照されたい。ニボルマブの重鎖のアミノ酸配列は、
2020514375.tif 000005
である。
【００５５】
ニボルマブの軽鎖のアミノ酸配列は、
2020514375.tif 000006
である。
【００５６】
いくつかの場合において、抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブの重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含む。
【００５７】
抗ＣＴＬＡ４抗体
いくつかの場合において、抗ＣＴＬＡ−４抗体は、イピリムマブまたはトレメリムマブである。トレメリムマブについては、例えば、Ｒｉｂａｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３１：６１６−２２を参照されたい。
【００５８】
いくつかの場合において、抗ＣＴＬＡ−４抗体は、イピリムマブである。イピリムマブの重鎖のアミノ酸配列は、
2020514375.tif 000007
である。ＶＨ領域のアミノ酸配列に下線が引かれている。
【００５９】
イピリムマブの軽鎖のアミノ酸配列は、
2020514375.tif 000008
である。ＶＬ領域のアミノ酸配列に下線が引かれている。
【００６０】
いくつかの場合において、抗ＣＴＬＡ４抗体は、イピリムマブのＶＨ領域及びＶＬ領域を含む。いくつかの場合において、抗ＣＴＬＡ４抗体は、イピリムマブの重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含む。
【００６１】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体
いくつかの場合において、免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体である。いくつかの場合において、抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体は、ＢＭＳ−９３５５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（ＲＧ７４４６としても知られる）、ＫＮ０３５、またはＭＳＢ００１０７１８Ｃである。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体は、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）またはＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）である。デュルバルマブについては、例えば、ＷＯ２０１１／０６６３８９を参照されたい。アテゾリズマブについては、例えば、米国特許第８，２１７，１４９号を参照されたい。
【００６２】
いくつかの場合において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブである。アテゾリズマブの重鎖のアミノ酸配列は、
2020514375.tif 000009
である。
【００６３】
アテゾリズマブの軽鎖のアミノ酸配列は、
2020514375.tif 000010
である。
【００６４】
いくつかの場合において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブの重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含む。
【００６５】
いくつかの場合において、抗ＰＤＬ１抗体は、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドに融合された完全ヒト化抗ＰＤ−Ｌ１単一ドメイン抗体のＫＮ０３５である。Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２０１７）Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｃｏｖ．３：１７００４；及びＷＯ２０１７／０２０８０１。ＫＮ０３５の単一ドメイン抗体部分は、アミノ酸配列：
2020514375.tif 000011
を含み得、配列中、下線が引かれたアミノ酸は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３である。
【００６６】
Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド（ｓｙｎＴａｃ）
本開示の方法での使用に好適な多量体（例えば、ヘテロ二量体、ヘテロ三量体）ポリペプチドについて、以下に記載する。多量体ポリペプチドは、Ｔ細胞調節ポリペプチドであり、本明細書中、「Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド」または「ｓｙｎＴａｃ」（「Ｔ細胞活性化のための免疫学的シナプス（ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｙｎａｐｓｅ  ｆｏｒ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ）」）とも称される。
【００６７】
Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及びｉｉ）任意選択により、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドまたは非Ｉｇ骨格を含む、第２のポリペプチドとを含み、多量体ポリペプチドは、１つ以上の免疫調節（「ＭＯＤ」）ドメインを含み、１つ以上の免疫調節ドメインは、Ａ）第１のポリペプチドのＣ末端、Ｂ）第２のポリペプチドのＮ末端、Ｃ）第２のポリペプチドのＣ末端、またはＤ）第１のポリペプチドのＣ末端及び第２のポリペプチドのＮ末端に位置する。いくつかの場合において、Ｔ細胞多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及びｉｉｉ）免疫調節ドメインを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及びｉｉ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、Ｔ細胞多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）免疫調節ドメイン、ｉｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及びｉｉ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、Ｔ細胞多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及びｉｉ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド、及びｉｉｉ）免疫調節（「ＭＯＤ」）ドメインを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、Ｔ細胞多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及びｉｉ）免疫調節ドメインを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、Ｔ細胞多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）免疫調節ドメイン、及びｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、Ｔ細胞多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及びｉｉｉ）免疫調節ドメインを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。
【００６８】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、非Ｉｇ骨格を含む。例えば、いくつかの場合において、非Ｉｇ骨格は、ＸＴＥＮポリペプチド、トランスフェリンポリペプチド、Ｆｃ受容体ポリペプチド、エラスチン様ポリペプチド、シルク様ポリペプチド、またはシルクエラスチン様ポリペプチドである。
【００６９】
いくつかの場合において、第１のＭＨＣポリペプチドはβ２−ミクログロブリン（β２Ｍ）ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである。好適なβ２−Ｍポリペプチドは、図６に示されるβ２Ｍポリペプチドのアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−ＢまたはＨＬＡ−Ｃの重鎖である。いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図５Ａ〜５Ｃのうちの１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、第１のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩＩのα鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩＩのβ鎖ポリペプチドである。
【００７０】
多量体ポリペプチド中に存在するエピトープは、Ｔ細胞エピトープであり得る。
【００７１】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドを含む。いくつかの場合において、Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドは、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡ  Ｆｃポリペプチド、またはＩｇＭ  Ｆｃポリペプチドである。いくつかの場合において、Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドは、図４Ａ〜４Ｃに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７２】
多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、非共有結合的に会合し得る。多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、共有結合的に連結され得る。多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、共有結合的に連結され得、ここで、共有結合は、ジスルフィド結合によるものである。いくつかの場合において、第１のＭＨＣポリペプチド、またはエピトープと第１のＭＨＣポリペプチドとの間のリンカーは、第１のＣｙｓ残基をもたらすアミノ酸置換を含み、第２のＭＨＣポリペプチドは、第２のＣｙｓ残基をもたらすアミノ酸置換を含み、ジスルフィド連結は、第１のＣｙｓ残基と第２のＣｙｓ残基との間にある。
【００７３】
多量体ポリペプチドは、エピトープと第１のＭＨＣポリペプチドとの間、２つの免疫調節（「ＭＯＤ」）ポリペプチドコピーの間、免疫調節ポリペプチドと第２のＭＨＣポリペプチドとの間、及び第２のＭＨＣポリペプチドとＩｇ  Ｆｃポリペプチドとの間のうちの１つ以上にリンカーを含み得る。
【００７４】
Ｔ細胞多量体ポリペプチドに含めるのに好適な免疫調節ポリペプチドは、４−１ＢＢＬポリペプチド、Ｂ７−１ポリペプチド、Ｂ７−２ポリペプチド、ＩＣＯＳ−Ｌポリペプチド、ＯＸ−４０Ｌポリペプチド、ＣＤ８０ポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＩＬ−２ポリペプチド、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド、ＦａｓＬポリペプチド、及びＰＤ−Ｌ２ポリペプチドが含まれるが、これらに限定されない。
【００７５】
多量体ポリペプチドは、２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含み得る。多量体ポリペプチドは、２つの免疫調節ポリペプチドを含み得る。いくつかの場合において、２つの免疫調節ポリペプチドは、タンデムに並んでいる。多量体ポリペプチドは、３つの免疫調節ポリペプチドを含み得る。いくつかの場合において、３つの免疫調節ポリペプチドは、タンデムに並んでいる。
【００７６】
多量体ポリペプチドは、第３のポリペプチドを含み得、第３のポリペプチドは、第１のポリペプチドまたは第２のポリペプチドの免疫調節ポリペプチドに対して、少なくとも９０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、免疫調節ポリペプチドを含む。いくつかの場合において、第３のポリペプチドは、第１のポリペプチドに共有結合的に連結される。
【００７７】
好適な多量体ポリペプチドの例は、ＷＯ２０１７／１５１９４０；ＷＯ２０１７／２０１２１０；及びＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０６７６６３に記載されている。ＷＯ２０１７／１５１９４０、ＷＯ２０１７／２０１２１０及びＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０６７６６３の開示は、参照により本明細書に援用される。
【００７８】
ＭＨＣポリペプチド
上記のとおり、本開示の多量体ポリペプチドは、ＭＨＣポリペプチドを含む。本開示の目的上、「主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド」という用語は、ヒトのＭＨＣ（ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）とも称される）ポリペプチド、齧歯類（例えば、マウス、ラットなど）のＭＨＣポリペプチド、及び他の哺乳動物種（例えば、ウサギ目、非ヒト霊長類、イヌ科動物、ネコ科動物、有蹄類（例えば、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギなど）のＭＨＣポリペプチドなどを含む、様々な種のＭＨＣポリペプチドを含むことが意図される。「ＭＨＣポリペプチド」という用語は、クラスＩのＭＨＣポリペプチド（例えば、β−２ミクログロブリン及びＭＨＣクラスＩ重鎖）及びＭＨＣクラスＩＩポリペプチド（例えば、ＭＨＣクラスＩＩのαポリペプチド及びＭＨＣクラスＩＩのβポリペプチド）を含むことが意図される。
【００７９】
上記のとおり、本開示の多量体ポリペプチドのいくつかの実施形態において、第１及び第２のＭＨＣポリペプチドは、クラスＩのＭＨＣポリペプチドであり、例えば、いくつかの場合において、第１のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩのβ２−ミクログロブリン（β２Ｍ）ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩの重鎖（Ｈ鎖）である。他の場合において、第１及び第２のＭＨＣポリペプチドは、クラスＩＩのＭＨＣポリペプチドであり、例えば、いくつかの場合において、第１のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩＩのα鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩＩのβ鎖ポリペプチドである。他の場合において、第１のポリペプチドはＭＨＣクラスＩＩのβ鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩＩのα鎖ポリペプチドである。
【００８０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣポリペプチドは、ヒトＭＨＣポリペプチドであり、ヒトＭＨＣポリペプチドは、「ヒト白血球抗原」（「ＨＬＡ」）ポリペプチドとも称される。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣポリペプチドは、クラスＩのＨＬＡポリペプチド、例えば、β２−ミクログロブリンポリペプチドまたはクラスＩのＨＬＡ重鎖ポリペプチドである。クラスＩのＨＬＡ重鎖ポリペプチドには、ＨＬＡ−Ａ重鎖ポリペプチド、ＨＬＡ−Ｂ重鎖ポリペプチド、ＨＬＡ−Ｃ重鎖ポリペプチド、ＨＬＡ−Ｅ重鎖ポリペプチド、ＨＬＡ−Ｆ重鎖ポリペプチド、及びＨＬＡ−Ｇ重鎖ポリペプチドが含まれる。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣポリペプチドは、クラスＩＩのＨＬＡポリペプチド、例えば、クラスＩＩのＨＬＡ  α鎖またはクラスＩＩのＨＬＡ  β鎖である。ＭＨＣクラスＩＩポリペプチドには、ＭＣＨクラスＩＩのＤＰ  α及びβポリペプチド、ＤＭ  α及びβポリペプチド、ＤＯＡ  α及びβポリペプチド、ＤＯＢ  α及びβポリペプチド、ＤＱ  α及びβポリペプチド、ならびにＤＲ  α及びβポリペプチドが含まれる。
【００８１】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図５Ａ〜５Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。
【００８２】
ＨＬＡ−Ａ
一例として、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ａ重鎖アミノ酸配列：
2020514375.tif 000012
に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。
【００８３】
ＨＬＡ−Ａ（Ｙ８４Ａ；Ａ２３６Ｃ）
いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、Ｙ８４Ａ及びＡ２３６Ｃの置換を含む。例えば、いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ａ重鎖（Ｙ８４Ａ；Ａ２３６Ｃ）アミノ酸配列：
2020514375.tif 000013
（配列中、アミノ酸８４はＡｌａであり、アミノ酸２３６はＣｙｓである）に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。いくつかの場合において、Ｃｙｓ−２３６は、Ｒ１２Ｃの置換を含む変異β２ＭポリペプチドのＣｙｓ−１２と鎖間ジスルフィド結合を形成する。
【００８４】
ＨＬＡ−Ａ（Ｙ８４Ｃ；Ａ１３９Ｃ）
いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃの置換を含む。例えば、いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ａ重鎖（Ｙ８４Ｃ；Ａ１３９Ｃ）アミノ酸配列：
2020514375.tif 000014
（配列中、アミノ酸８４はＣｙｓであり、アミノ酸１３９はＣｙｓである）に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。いくつかの場合において、Ｃｙｓ−８４は、Ｃｙｓ−１３９と鎖間ジスルフィド結合を形成する。
【００８５】
ＨＬＡ−Ａ  Ａ１１（ＨＬＡ−Ａ１１）
非限定的な一例として、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ａ  Ａ１１（「ＨＬＡ−Ａ１１」とも称される）重鎖アミノ酸配列：
2020514375.tif 000015
に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。かかるＭＨＣクラスＩ重鎖は、アジア系の個体の集団を含む、アジア人集団で顕著であり得る。
【００８６】
ＨＬＡ−Ａ  Ａ１１（Ｙ８４Ａ；Ａ２３６Ｃ）
非限定的な一例として、いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、Ｙ８４Ａ及びＡ２３６Ｃの置換を含むＨＬＡ−Ａ  Ａ１１アレルである。例えば、いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ａ  Ａ１１重鎖（Ｙ８４Ａ；Ａ２３６Ｃ）アミノ酸配列：
2020514375.tif 000016
（配列中、アミノ酸８４はＡｌａであり、アミノ酸２３６はＣｙｓである）に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、Ｃｙｓ−２３６は、Ｒ１２Ｃの置換を含む変異β２ＭポリペプチドのＣｙｓ−１２と鎖間ジスルフィド結合を形成する。
【００８７】
ＨＬＡ−Ｂ
別の例として、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ｂ重鎖アミノ酸配列：
2020514375.tif 000017
に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。
【００８８】
ＨＬＡ−Ｂ（Ｙ８４Ａ；Ａ２３６Ｃ）
非限定的な一例として、いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、Ｙ８４Ａ及びＡ２３６Ｃの置換を含むＨＬＡ−Ｂポリペプチドである。例えば、いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ｂ重鎖（Ｙ８４Ａ；Ａ２３６Ｃ）アミノ酸配列：
2020514375.tif 000018
（配列中、アミノ酸８４はＡｌａであり、アミノ酸２３６はＣｙｓである）に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、Ｃｙｓ−２３６は、Ｒ１２Ｃの置換を含む変異β２ＭポリペプチドのＣｙｓ−１２と鎖間ジスルフィド結合を形成する。
【００８９】
ＨＬＡ−Ｂ（Ｙ８４Ｃ；Ａ１３９Ｃ）
いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃの置換を含む。例えば、いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ｂ重鎖（Ｙ８４Ｃ；Ａ１３９Ｃ）アミノ酸配列：
2020514375.tif 000019
（配列中、アミノ酸８４はＣｙｓであり、アミノ酸１３９はＣｙｓである）に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、Ｃｙｓ−８４は、Ｃｙｓ−１３９と鎖間ジスルフィド結合を形成する。
【００９０】
ＨＬＡ−Ｃ
別の例として、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ｃ重鎖アミノ酸配列：
2020514375.tif 000020
に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。
【００９１】
ＨＬＡ−Ｃ（Ｙ８４Ａ；Ａ２３６Ｃ）
非限定的な一例として、いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、Ｙ８４Ａ及びＡ２３６Ｃの置換を含むＨＬＡ−Ｃポリペプチドである。例えば、いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ｃ重鎖（Ｙ８４Ａ；Ａ２３６Ｃ）アミノ酸配列：
2020514375.tif 000021
（配列中、アミノ酸８４はＡｌａであり、アミノ酸２３６はＣｙｓである）に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、Ｃｙｓ−２３６は、Ｒ１２Ｃの置換を含む変異β２ＭポリペプチドのＣｙｓ−１２と鎖間ジスルフィド結合を形成する。
【００９２】
ＨＬＡ−Ｃ（Ｙ８４Ｃ；Ａ１３９Ｃ）
いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、Ｙ８４Ｃ及びＡ１３９Ｃの置換を含む。例えば、いくつかの場合において、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のヒトＨＬＡ−Ｃ重鎖（Ｙ８４Ｃ；Ａ１３９Ｃ）アミノ酸配列：
2020514375.tif 000022
（配列中、アミノ酸８４はＣｙｓであり、アミノ酸１３９はＣｙｓである）に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、Ｃｙｓ−８４は、Ｃｙｓ−１３９と鎖間ジスルフィド結合を形成する。
【００９３】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。
【００９４】
一例として、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３Ａに示されるヒトＨＬＡ−Ａ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列のアミノ酸２５〜３６５に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。
【００９５】
別の例として、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３Ｂに示されるヒトＨＬＡ−Ｂ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列のアミノ酸２５〜３６２に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。
【００９６】
別の例として、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３Ｃに示されるヒトＨＬＡ−Ｃ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列のアミノ酸２５〜３６２に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。
【００９７】
別の例として、多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る：
2020514375.tif 000023
。
【００９８】
多量体ポリペプチドのβ２−ミクログロブリン（β２Ｍ）ポリペプチドは、ヒトβ２Ｍポリペプチド、非ヒト霊長類β２Ｍポリペプチド、ネズミβ２Ｍポリペプチドなどであり得る。いくつかの場合において、β２Ｍポリペプチドは、図６に示されるβ２Ｍアミノ酸配列に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、β２Ｍポリペプチドは、図６に示されるβ２Ｍアミノ酸配列のアミノ酸２１〜１１９に対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９９】
いくつかの場合において、ＭＨＣポリペプチドは、参照ＭＨＣポリペプチド（参照ＭＨＣポリペプチドは野生型ＭＨＣポリペプチドであり得る）と比較して、単一のアミノ酸置換を含み、単一のアミノ酸置換は、１つのアミノ酸をシステイン（Ｃｙｓ）残基で置換するものである。かかるシステイン残基は、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチドのＭＨＣポリペプチド中に存在する場合、本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチド鎖中に存在するシステイン残基とジスルフィド結合を形成することができる。
【０１００】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド中の第１のＭＨＣポリペプチド及び／または多量体ポリペプチドの第２のポリペプチド中の第２のＭＨＣポリペプチドは、１つのアミノ酸をシステインで置換するアミノ酸置換を含み、第１のＭＨＣポリペプチド中の置換システインが、第２のＭＨＣポリペプチド中のシステインとジスルフィド結合を形成するか、第１のＭＨＣポリペプチド中のシステインが、第２のＭＨＣポリペプチド中の置換システインとジスルフィド結合を形成するか、あるいは第１のＭＨＣポリペプチド中の置換システインが、第２のＭＨＣポリペプチド中の置換システインとジスルフィド結合を形成する。
【０１０１】
例えば、いくつかの場合において、ＨＬＡ  β２−ミクログロブリン及びＨＬＡクラスＩ重鎖中の次の残基ペアのうちの１つがシステインで置換される（残基番号は成熟ポリペプチドのものである）：１）β２Ｍ残基１２、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３６；２）β２Ｍ残基１２、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３７；３）β２Ｍ残基８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３４；４）β２Ｍ残基１０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３５；５）β２Ｍ残基２４、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３６；６）β２Ｍ残基２８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３２；７）β２Ｍ残基９８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基１９２；８）β２Ｍ残基９９、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３４；９）β２Ｍ残基３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基１２０；１０）β２Ｍ残基３１、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基９６；１１）β２Ｍ残基５３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基３５；１２）β２Ｍ残基６０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基９６；１３）β２Ｍ残基６０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基１２２；１４）β２Ｍ残基６３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２７；１５）β２Ｍ残基Ａｒｇ３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｙ１２０；１６）β２Ｍ残基Ｈｉｓ３１、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｎ９６；１７）β２Ｍ残基Ａｓｐ５３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ａｒｇ３５；１８）β２Ｍ残基Ｔｒｐ６０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｎ９６；１９）β２Ｍ残基Ｔｒｐ６０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ａｓｐ１２２；２０）β２Ｍ残基Ｔｙｒ６３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｔｙｒ２７；２１）β２Ｍ残基Ｌｙｓ６、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｕ２３２；２２）β２Ｍ残基Ｇｌｎ８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ａｒｇ２３４；２３）β２Ｍ残基Ｔｙｒ１０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｐｒｏ２３５；２４）β２Ｍ残基Ｓｅｒ１１、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｎ２４２；２５）β２Ｍ残基Ａｓｎ２４、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ａｌａ２３６；２６）β２Ｍ残基Ｓｅｒ２８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｕ２３２；２７）β２Ｍ残基Ａｓｐ９８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｈｉｓ１９２；及び２８）β２Ｍ残基Ｍｅｔ９９、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ａｒｇ２３４。ＭＨＣ／ＨＬＡクラスＩ重鎖のアミノ酸ナンバリングは、シグナルペプチドのない成熟ＭＨＣ／ＨＬＡクラスＩ重鎖を基準にしている。例えば、図５Ａに示されるシグナルペプチドを含むアミノ酸配列において、Ｇｌｙ１２０はＧｌｙ１４４であり、Ｇｌｎ９６はＧｌｎ１２０などである。いくつかの場合において、β２ＭポリペプチドはＲ１２Ｃの置換を含み、ＨＬＡクラスＩ重鎖はＡ２３６Ｃの置換を含む。かかる場合において、β２ＭポリペプチドのＣｙｓ−１２とＨＬＡクラスＩ重鎖のＣｙｓ−２３６との間にジスルフィド結合が形成される。例えば、いくつかの場合において、成熟ＨＬＡ−Ａアミノ酸配列の残基２３６（すなわち、図５Ａに示されるアミノ酸配列の残基２６０）がＣｙｓで置換される。いくつかの場合において、成熟ＨＬＡ−Ｂアミノ酸配列の残基２３６（すなわち、図５Ｂに示されるアミノ酸配列の残基２６０）がＣｙｓで置換される。いくつかの場合において、成熟ＨＬＡ−Ｃアミノ酸配列の残基２３６（すなわち、図５Ｃに示されるアミノ酸配列の残基２６０）がＣｙｓで置換される。いくつかの場合において、図６に示されるアミノ酸配列残基３２（成熟β２ＭのＡｒｇ−１２に対応する）がＣｙｓで置換される。
【０１０２】
いくつかの場合において、β２Ｍポリペプチドは、アミノ酸配列：
2020514375.tif 000024
を含む。いくつかの場合において、β２Ｍポリペプチドは、アミノ酸配列：
2020514375.tif 000025
を含む。
【０１０３】
いくつかの場合において、ＨＬＡクラスＩ重鎖ポリペプチドは、アミノ酸配列：
2020514375.tif 000026
を含む。
【０１０４】
いくつかの場合において、ＨＬＡクラスＩ重鎖ポリペプチドは、アミノ酸配列：
2020514375.tif 000027
を含む。
【０１０５】
いくつかの場合において、ＨＬＡクラスＩ重鎖ポリペプチドは、アミノ酸配列：
2020514375.tif 000028
を含む。
【０１０６】
いくつかの場合において、β２Ｍポリペプチドは、次のアミノ酸配列：
2020514375.tif 000029
を含み、本開示の多量体ポリペプチドのＨＬＡクラスＩ重鎖ポリペプチドは、次のアミノ酸配列：
2020514375.tif 000030
を含み、下線太字のＣｙｓ残基は、多量体ポリペプチド内で互いにジスルフィド結合を形成する。
【０１０７】
いくつかの場合において、β２Ｍポリペプチドは、アミノ酸配列：
2020514375.tif 000031
を含む。
【０１０８】
骨格ポリペプチド
Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドは、Ｆｃポリペプチド、または別の好適な骨格ポリペプチドを含む。
【０１０９】
好適な骨格ポリペプチドには、抗体ベースの骨格ポリペプチド及び非抗体ベースの骨格が含まれる。非抗体ベースの骨格には、例えば、アルブミン、ＸＴＥＮ（延長組換え）ポリペプチド、トランスフェリン、Ｆｃ受容体ポリペプチド、エラスチン様ポリペプチド（例えば、Ｈａｓｓｏｕｎｅｈ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．５０２：２１５参照；例えば、（Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｘ−Ｇｌｙ；配列番号２１２）（配列中、Ｘは、プロリン以外の任意のアミノ酸である）のペンタペプチド反復単位を含むポリペプチド）、アルブミン結合ポリペプチド、シルク様ポリペプチド（例えば、Ｖａｌｌｕｚｚｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｐｈｉｌｏｓ  Ｔｒａｎｓ  Ｒ  Ｓｏｃ  Ｌｏｎｄ  Ｂ  Ｂｉｏｌ  Ｓｃｉ．３５７：１６５参照）、シルクエラスチン様ポリペプチド（ＳＥＬＰ；例えば、Ｍｅｇｅｅｄ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ．５４：１０７５参照）などが含まれる。好適なＸＴＥＮポリペプチドには、例えば、ＷＯ２００９／０２３２７０、ＷＯ２０１０／０９１１２２、ＷＯ２００７／１０３５１５、ＵＳ２０１０／０１８９６８２及びＵＳ２００９／００９２５８２に開示されているものが含まれる。また、Ｓｃｈｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２７：１１８６）も参照されたい。好適なアルブミンポリペプチドには、例えば、ヒト血清アルブミンが含まれる。
【０１１０】
好適な骨格ポリペプチドは、いくつかの場合において、半減期延長ポリペプチドである。したがって、いくつかの場合において、好適な骨格ポリペプチドは、骨格ポリペプチドを持たない対照多量体ポリペプチドと比較して、多量体ポリペプチドのｉｎ  ｖｉｖｏ半減期（例えば、血清半減期）を増大させる。例えば、いくつかの場合において、骨格ポリペプチドは、骨格ポリペプチドを持たない対照多量体ポリペプチドと比較して、多量体ポリペプチドのｉｎ  ｖｉｖｏ半減期（例えば、血清半減期）を、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約２倍、少なくとも約２．５倍、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、または１００倍を超えて増大させる。一例として、いくつかの場合において、Ｆｃポリペプチドは、Ｆｃポリペプチドを持たない対照多量体ポリペプチドと比較して、多量体ポリペプチドのｉｎ  ｖｉｖｏ半減期（例えば、血清半減期）を、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約２倍、少なくとも約２．５倍、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、または１００倍を超えて増大させる。
【０１１１】
Ｆｃポリペプチド
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドの第１及び／または第２のポリペプチド鎖は、Ｆｃポリペプチドを含む。多量体ポリペプチドのＦｃポリペプチドは、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ、ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ、ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃなどであり得る。いくつかの場合において、Ｆｃポリペプチドは、図４Ａ〜Ｃに示されるＦｃ領域のアミノ酸配列に対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、Ｆｃ領域は、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドに対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、Ｆｃ領域は、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドに対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、またＮ７７の置換を含み、例えば、Ｆｃポリペプチドは、Ｎ７７Ａの置換を含む。いくつかの場合において、Ｆｃポリペプチドは、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ２  Ｆｃポリペプチドに対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、例えば、Ｆｃポリペプチドは、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ２  Ｆｃポリペプチドのアミノ酸９９〜３２５に対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、Ｆｃポリペプチドは、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ３  Ｆｃポリペプチドに対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、例えば、Ｆｃポリペプチドは、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ３  Ｆｃポリペプチドのアミノ酸１９〜２４６に対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、Ｆｃポリペプチドは、図４Ｂに示されるヒトＩｇＭ  Ｆｃポリペプチドに対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも��９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、例えば、Ｆｃポリペプチドは、図４Ｂに示されるヒトＩｇＭ  Ｆｃポリペプチドのアミノ酸１〜２７６に対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、Ｆｃポリペプチドは、図４Ｃに示されるヒトＩｇＡ  Ｆｃポリペプチドに対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、例えば、Ｆｃポリペプチドは、図４Ｃに示されるヒトＩｇＡ  Ｆｃポリペプチドのアミノ酸１〜２３４に対して、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１２】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、図３３Ａに示されるアミノ酸配列（ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ）を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、Ｎ２９７のアスパラギン以外のアミノ酸による置換を除き、図３３Ａに示されるアミノ酸配列（ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ）を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、図３３Ｃに示されるアミノ酸配列（Ｎ２９７Ａの置換を含むヒトＩｇＧ１  Ｆｃ）を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、Ｌ２３４のロイシン以外のアミノ酸による置換を除き、図３３Ａに示されるアミノ酸配列（ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ）を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、Ｌ２３５のロイシン以外のアミノ酸による置換を除き、図３３Ａに示されるアミノ酸配列（ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ）を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、図３３Ｄに示されるアミノ酸配列（Ｌ２３４Ａの置換及びＬ２３５Ａの置換を含むヒトＩｇＧ１  Ｆｃ）を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、Ｐ３３１のプロリン以外のアミノ酸による置換を除き、図３３Ａに示されるアミノ酸配列（ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ）を含み、いくつかの場合において、置換は、Ｐ３３１Ｓの置換である。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、Ｌ２３４及びＬ２３５のロイシン以外のアミノ酸による置換を除き、図３３Ａに示されるアミノ酸配列（ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ）を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、Ｌ２３４及びＬ２３５のロイシン以外のアミノ酸による置換ならびにＰ３３１のプロリン以外のアミノ酸による置換を除き、図３３Ａに示されるアミノ酸配列（ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ）を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、図３３Ｂに示されるアミノ酸配列を含む（Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓの置換を含むヒトＩｇＧ１  Ｆｃ）。いくつかの場合において、多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドは、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａの置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドである。
【０１１３】
リンカー
多量体ポリペプチドは、例えば、エピトープとＭＨＣポリペプチドとの間、ＭＨＣポリペプチドと免疫調節ポリペプチドとの間、ＭＨＣポリペプチドとＩｇ  Ｆｃポリペプチドとの間、第１の免疫調節ポリペプチドと第２の免疫調節ポリペプチドとの間、または第２の免疫調節ポリペプチドと第３の免疫調節ポリペプチドとの間に挿入されたリンカーペプチドを含み得る。
【０１１４】
例えば、多量体ポリペプチドは、例えば、エピトープとＭＨＣポリペプチドとの間、ＭＨＣポリペプチドと免疫調節ポリペプチドとの間、ＭＨＣポリペプチドとＩｇ  Ｆｃポリペプチドとの間、第１の変異ＩＬ−２ポリペプチドと第２の変異ＩＬ−２ポリペプチドとの間、または第２の変異ＩＬ−２ポリペプチドと第３の変異ＩＬ−２ポリペプチドとの間に挿入されたリンカーペプチドを含み得る。別の例として、多量体ポリペプチドは、例えば、エピトープとＭＨＣポリペプチドとの間、ＭＨＣポリペプチドと免疫調節ポリペプチドとの間、ＭＨＣポリペプチドとＩｇ  Ｆｃポリペプチドとの間、第１の変異４−１ＢＢＬポリペプチドと第２の変異４−１ＢＢＬポリペプチドとの間、または第２の変異４−１ＢＢＬポリペプチドと第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドとの間に挿入されたリンカーペプチドを含み得る。
【０１１５】
好適なリンカー（「スペーサー」とも称される）は、容易に選択することができ、１アミノ酸〜２５アミノ酸、３アミノ酸〜２０アミノ酸、２アミノ酸〜１５アミノ酸、３アミノ酸〜１２アミノ酸など、また４アミノ酸〜１０アミノ酸、５アミノ酸〜９アミノ酸、６アミノ酸〜８アミノ酸、または７アミノ酸〜８アミノ酸を含む、多くの好適な長さのいずれかであってよい。好適なリンカーは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５アミノ酸長であり得る。
【０１１６】
例示的なリンカーには、グリシンポリマー（Ｇ）ｎ、グリシン−セリンポリマー（例えば、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号２１０）及び（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２１１）（配列中、ｎは、少なくとも１つの整数である）を含む）、グリシン−アラニンポリマー、アラニン−セリンポリマー、及び当該技術分野において知られている他の柔軟性のあるリンカーが挙げられる。グリシン及びグリシン−セリンポリマーを使用することができ、ＧｌｙとＳｅｒはいずれも比較的非構造的であることから、構成成分間の中間テザーとして機能することができる。グリシンポリマーを使用することができ、グリシンは、実にアラニンよりも極めて多くのΦ−Ψ空間を利用でき、長い側鎖を持つ残基よりも制限が少ない（Ｓｃｈｅｒａｇａ，Ｒｅｖ．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｅｍ．１１１７３−１４２（１９９２）参照）。
【０１１７】
例示的なリンカーは、限定するものではないが、ＧＧＳＧ（配列番号６５）、ＧＧＳＧＧ（配列番号６６）、ＧＳＧＳＧ（配列番号６７）、ＧＳＧＧＧ（配列番号６８）、ＧＧＧＳＧ（配列番号６９）、ＧＳＳＳＧ（配列番号７０）などを含む、アミノ酸配列を含み得る。例示的なリンカーには、例えば、Ｇｌｙ（Ｓｅｒ４）ｎを挙げることができ、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。いくつかの場合において、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７１）を含み、ｎは、４である。いくつかの場合において、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７２）を含み、ｎは、５である。いくつかの場合において、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２０５）を含み、ｎは、１である。いくつかの場合において、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２０６）を含み、ｎは、２である。いくつかの場合において、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２０７）を含み、ｎは、３である。いくつかの場合において、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２０８）を含み、ｎは、４である。いくつかの場合において、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２０９）を含み、ｎは、５である。いくつかの場合において、リンカーは、アミノ酸配列ＡＡＡＧＧ（配列番号７３）を含む。
【０１１８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド中に存在するリンカーポリペプチドは、本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチド中に存在するシステイン残基とジスルフィド結合を形成することができるシステイン残基を含む。いくつかの場合において、例えば、好適なリンカーは、アミノ酸配列
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を含む。
【０１１９】
エピトープ
本開示の多量体ポリペプチド中に存在するエピトープ（１つ以上のエピトープを与えるペプチド）は、約４アミノ酸〜約２５アミノ酸の長さを有し得、例えば、エピトープは、４アミノ酸（ａａ）〜１０ａａ、１０ａａ〜１５ａａ、１５ａａ〜２０ａａまたは２０ａａ〜２５ａａの長さを有し得る。例えば、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するエピトープは、４アミノ酸（ａａ）、５ａａ、６ａａ、７、ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、２０ａａ、２１ａａ、２２ａａ、２３ａａ、２４ａａまたは２５ａａの長さを有し得る。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するエピトープは、５アミノ酸〜１０アミノ酸、例えば、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａまたは１０ａａの長さを有する。
【０１２０】
本開示の多量体ポリペプチド中に存在するエピトープは、Ｔ細胞によって特異的に結合され、すなわち、エピトープは、エピトープ特異的Ｔ細胞によって特異的に結合される。エピトープ特異的Ｔ細胞は、参照アミノ酸配列を有するエピトープに結合するが、参照アミノ酸配列と異なるエピトープには実質的に結合しない。例えば、エピトープ特異的Ｔ細胞は、参照アミノ酸配列を有するエピトープに結合し、参照アミノ酸配列と異なるエピトープに結合したとしても１０−６Ｍ未満、１０−５Ｍ未満、または１０−４Ｍ未満の親和性である。エピトープ特異的Ｔ細胞は、少なくとも１０−７Ｍ、少なくとも１０−８Ｍ、少なくとも１０−９Ｍ、または少なくとも１０−１０Ｍの親和性で、特異的なエピトープに結合することができる。
【０１２１】
好適なエピトープには、がん関連抗原中に存在するエピトープが含まれるが、これらに限定されない。がん関連抗原には、葉酸受容体α、炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡＩＸ）、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ４４ｖ７／８、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、上皮糖タンパク質−２（ＥＧＰ−２）、上皮糖タンパク質−４０（ＥＧＰ−４０）、葉酸結合タンパク質（ＦＢＰ）、胎児型アセチルコリン受容体、ガングリオシド抗原ＧＤ２、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、κ軽鎖、ＬｅＹ、Ｌ１細胞接着分子、黒色腫関連抗原（ＭＡＧＥ）、ＭＡＧＥ−Ａ１、メソテリン、ＭＵＣ１、ＮＫＧ２Ｄリガンド、腫瘍胎児抗原（ｈ５Ｔ４）、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、腫瘍関連糖タンパク質−７２（ＴＡＧ−７２）、及び血管内皮細胞増殖因子受容体−２（ＶＥＧＦ−Ｒ２）が含まれるが、これらに限定されない。例えば、Ｖｉｇｎｅｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １３：１５；及びＶｉｇｎｅｒｏｎ（２０１５）ＢｉｏＭｅｄ  Ｒｅｓ．Ｉｎｔ’ｌ  Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  ９４８５０１を参照されたい。いくつかの場合において、エピトープは、ヒトパピローマウイルスＥ７抗原エピトープである。例えば、Ｒａｍｏｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３６：６６を参照されたい。
【０１２２】
いくつかの場合において、エピトープは、ＨＰＶ１６Ｅ７／８２−９０（ＬＬＭＧＴＬＧＩＶ；配列番号７５）である。いくつかの場合において、エピトープは、ＨＰＶ１６Ｅ７／８６−９３（ＴＬＧＩＶＣＰＩ；配列番号７６）である。いくつかの場合において、エピトープは、ＨＰＶ１６Ｅ７／１１−２０（ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ；配列番号７７）である。いくつかの場合において、エピトープは、ＨＰＶ１６Ｅ７／１１−１９（ＹＭＬＤＬＱＰＥＴ；配列番号７８）である。更なる好適なＨＰＶエピトープについては、例えば、Ｒｅｓｓｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（（１９９５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：５９３４）を参照されたい。
【０１２３】
免疫調節ポリペプチド
好適な免疫調節ポリペプチドには、ＩＬ−２ポリペプチド、４−１ＢＢＬポリペプチド、Ｂ７−１ポリペプチド、Ｂ７−２ポリペプチド、ＩＣＯＳ−Ｌポリペプチド、ＯＸ−４０Ｌポリペプチド、ＣＤ８０ポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド、ＦａｓＬポリペプチド、及びＰＤ−Ｌ２ポリペプチドが含まれるが、これらに限定されない。
【０１２４】
いくつかの場合において、免疫調節ポリペプチドは、図５０Ａまたは図５０Ｂに示されるＰＤ−Ｌ１ポリペプチドのアミノ酸配列と、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２５】
いくつかの場合において、免疫調節ポリペプチドは、図５１に示されるＣＤ８０ポリペプチドのアミノ酸配列と、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２６】
いくつかの場合において、免疫調節ポリペプチドは、図５１に示されるＩＣＯＳ−Ｌポリペプチドのアミノ酸配列と、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２７】
いくつかの場合において、免疫調節ポリペプチドは、図５３に示されるＯＸ４０Ｌポリペプチドのアミノ酸配列と、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２８】
いくつかの場合において、免疫調節ポリペプチドは、図５４に示されるＰＤ−Ｌ２ポリペプチドのアミノ酸配列と、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２９】
いくつかの場合において、免疫調節ポリペプチドは、図５５に示されるＣＤ８６ポリペプチドのアミノ酸配列と、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３０】
いくつかの場合において、免疫調節ポリペプチドは、図５６に示されるＦＡＳ−Ｌポリペプチドのアミノ酸配列と、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３１】
いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃ中に存在する免疫調節ポリペプチドは、Ｔ細胞の表面上に発現される同種の免疫共調節ポリペプチドに対して、同じ同種の免疫共調節ポリペプチドに対する野生型免疫調節ポリペプチドの結合親和性と比較して、結合親和性の低下を呈する。いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃが、親和性を低下させた免疫調節ポリペプチドを含む場合、当該ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、Ｔ細胞の表面上に発現される同種の免疫共調節ポリペプチドに対する結合の低下を呈する。例えば、いくつかの場合において、親和性を低下させた免疫調節ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃポリペプチドは、同種の免疫共調節ポリペプチドに対して、同じ同種の免疫共調節ポリペプチドに対する野生型免疫調節ポリペプチドを含む対照ｓｙｎＴａｃポリペプチドの結合親和性よりも、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で結合する。
【０１３２】
結合親和性の決定
免疫調節ポリペプチドとその同種の免疫共調節ポリペプチドとの間の結合親和性は、バイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）によって、精製された免疫調節ポリペプチド及び精製された同種の免疫共調節ポリペプチドを使用して決定することができる。本開示のｓｙｎＴａｃとその同種の免疫共調節ポリペプチドとの間の結合親和性もまた、ＢＬＩによって、精製されたｓｙｎＴａｃ及び同種の免疫共調節ポリペプチドを使用して決定することができる。ＢＬＩ法は、当業者によく知られている。例えば、Ｌａｄ  ｅｔ  ａｌ．（２０１５）Ｊ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｓｃｒｅｅｎ．２０（４）：４９８−５０７；及びＳｈａｈ  ａｎｄ  Ｄｕｎｃａｎ（２０１４）Ｊ．Ｖｉｓ．Ｅｘｐ．１８：ｅ５１３８３を参照されたい。本開示中に記載される、免疫調節ポリペプチドとその同種の免疫共調節ポリペプチドとの間、またはｓｙｎＴａｃとその同種の免疫共調節ポリペプチドとの間の特異的及び相対的結合親和性は、以下の手順を使用して決定することができる。
【０１３３】
本開示のｓｙｎＴａｃとその同種の免疫共調節ポリペプチドとの間の結合親和性を決定するために、Ｏｃｔｅｔ  ＲＥＤ  ９６（Ｐａｌ  ＦｏｒｔｅＢｉｏ）機器または同様の機器を使用して、ＢＬＩアッセイを以下のように実施することができる。Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド（例えば、本開示のｓｙｎＴａｃ；または対照Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド（ここで、対照Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドは、野生型免疫調節ポリペプチドを含む））の結合親和性を決定するために、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドを不溶性支持体（「バイオセンサー」）上に固定する。固定化されたＴ細胞調節多量体ポリペプチドが「標的」である。固定化は、捕捉抗体を不溶性支持体上に固定化することによって行うことができ、捕捉抗体は、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドを固定化する。例えば、固定化は、抗Ｆｃ（例えば、抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ）抗体を不溶性支持体上に固定化することによって行うことができ、固定化された抗Ｆｃ抗体は、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド（ここで、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドは、ＩｇＦｃポリペプチドを含む）に結合し、これを固定化する。固定化されたＴ細胞調節多量体ポリペプチドに免疫共調節ポリペプチドをいくつかの異なる濃度でアプライして、機器の応答を記録する。アッセイは、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ６．８）、５％ポリ（エチレン）グリコール６０００、５０ｍＭ  ＫＣｌ、０．１％ウシ血清アルブミン、及び０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０非イオン性界面活性剤を含む液体媒体中で実施される。固定化されたＴ細胞調節多量体ポリペプチドに対する免疫共調節ポリペプチドへの結合は、３０℃で実施される。結合親和性の陽性対照として、抗ＭＨＣクラスＩモノクローナル抗体を使用することができる。例えば、７ｎＭのＫＤを有する抗ＨＬＡクラスＩモノクローナル抗体Ｗ６／３２（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＨＢ−９５；Ｐａｒｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．（１９７９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２３：３４２を使用することができる。抗ＭＨＣクラスＩモノクローナル抗体の連続希釈物を使用して、標準曲線を作成することができる。免疫共調節ポリペプチドまたは抗ＭＨＣクラスＩ  ｍＡｂが「アナライト」である。ＢＬＩは、ｉ）固定化されたポリペプチド（「標的」）と、ｉｉ）内部リファレンスレイヤーの２つの表面から反射される白色光の干渉波を解析する。バイオセンサーチップに結合する分子（「アナライト」；例えば、免疫共調節ポリペプチド、抗ＨＬＡ抗体）の数の変化によって、干渉波にシフトが生じ、この干渉波のシフトをリアルタイムに測定することができる。標的／アナライト相互作用の親和性を記述する２つの動力学的用語は、結合定数（ｋａ）と解離定数（ｋｄ）である。これらの２つの用語の比（ｋｄ／ａ）が親和性定数ＫＤを与える。
【０１３４】
上記のとおり、免疫調節ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２またはＩＬ−２変異）とその同種の免疫共調節ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２Ｒ）との間の結合親和性の決定もまた、ＢＬＩによって決定することができる。アッセイは、ｓｙｎＴａｃ多量体ポリペプチドについて上に記載したものと同様である。Ｏｃｔｅｔ  ＲＥＤ  ９６（Ｐａｌ  ＦｏｒｔｅＢｉｏ）機器または同様の機器を使用して、ＢＬＩアッセイを以下のように実施することができる。本開示のｓｙｎＴａｃの構成成分である免疫調節ポリペプチド（例えば、本開示の変異ＩＬ−２ポリペプチド）及び対照免疫調節ポリペプチド（ここで、対照免疫調節ポリペプチドは、野生型免疫調節ポリペプチド、例えば、野生型ＩＬ−２を含む））を不溶性支持体（「バイオセンサー」）上に固定する。免疫調節ポリペプチドが「標的」である。固定化は、捕捉抗体を不溶性支持体上に固定化することによって行うことができ、捕捉抗体は、免疫調節ポリペプチドを固定化する。例えば、標的が免疫親和性タグ（例えば、ＦＬＡＧ、ヒトＩｇＧ  Ｆｃ）に融合されている場合、固定化は、免疫親和性タグ（例えば、抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ）に対する適切な抗体を不溶性支持体上に固定化することによって行うことができ、固定化された抗体は、免疫調節ポリペプチド（ここで、免疫調節ポリペプチドは、ＩｇＦｃポリペプチドを含む）に結合し、これを固定化する。固定化された免疫調節ポリペプチドに免疫共調節ポリペプチド（または複数ポリペプチド）をいくつかの異なる濃度でアプライして、機器の応答を記録する。あるいは、免疫共調節ポリペプチド（または複数のポリペプチド）をバイオセンサーに固定化し（例えば、ＩＬ−２受容体ヘテロ三量体、例えば、単量体サブユニット、ヘテロ二量体サブ複合体、または完全なヘテロ三量体に対して）、固定化された免疫共調節ポリペプチド（複数可）に免疫調節ポリペプチドをいくつかの異なる濃度でアプライして、機器の応答を記録する。アッセイは、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ６．８）、５％ポリ（エチレン）グリコール６０００、５０ｍＭ  ＫＣｌ、０．１％ウシ血清アルブミン、及び０．０２％  Ｔｗｅｅｎ  ２０非イオン性界面活性剤を含む液体媒体中で実施される。固定化された免疫調節ポリペプチドに対する免疫共調節ポリペプチドへの結合は、３０℃で実施される。結合親和性の陽性対照として、抗ＭＨＣクラスＩモノクローナル抗体を使用することができる。例えば、７ｎＭのＫＤを有する抗ＨＬＡクラスＩモノクローナル抗体Ｗ６／３２（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  Ｎｏ．ＨＢ−９５；Ｐａｒｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．（１９７９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２３：３４２を使用することができる。抗ＭＨＣクラスＩモノクローナル抗体の連続希釈物を使用して、標準曲線を作成することができる。免疫共調節ポリペプチドまたは抗ＭＨＣクラスＩ  ｍＡｂが「アナライト」である。ＢＬＩは、ｉ）固定化されたポリペプチド（「標的」）と、ｉｉ）内部リファレンスレイヤーの２つの表面から反射される白色光の干渉波を解析する。バイオセンサーチップに結合する分子（「アナライト」；例えば、免疫共調節ポリペプチド、抗ＨＬＡ抗体）の数の変化によって、���渉波にシフトが生じ、この干渉波のシフトをリアルタイムに測定することができる。標的／アナライト相互作用の親和性を記述する２つの動力学的用語は、結合定数（ｋａ）と解離定数（ｋｄ）である。これらの２つの用語の比（ｋｄ／ａ）が親和性定数ＫＤを与える。したがって、野生型免疫調節ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２）のその受容体（例えば、ＩＬ−２Ｒ）に対する結合親和性と、変異免疫調節ポリペプチド（例えば、本明細書で開示されるＩＬ−２変異体）のその同種の免疫共調節ポリペプチド（例えば、その受容体）（例えば、ＩＬ−２Ｒ）に対する結合親和性の両方を決定することにより、野生型免疫共調節ポリペプチドと比較した、同種の免疫共調節ポリペプチドに対する変異免疫共調節ポリペプチドの相対結合親和性を決定することが可能となる。すなわち、変異免疫調節ポリペプチドのその受容体（その同種の免疫共調節ポリペプチド）に対する結合親和性が、野生型免疫調節ポリペプチドの同じ同種の免疫共調節ポリペプチドに対する結合親和性と比較して減少するかどうかを決定することができ、もしそうであれば、その結合親和性は、野生型免疫共調節ポリペプチドの結合親和性からパーセンテージが小さくなる。
【０１３５】
ＢＬＩアッセイは、マルチウェルプレートで実施される。アッセイを実施するには、プレートのレイアウトを決め、アッセイのステップを決め、バイオセンサーをＯｃｔｅｔデータ取得ソフトウエアに割り当てる。バイオセンサーアセンブリを水和する。水和したバイオセンサーアセンブリ及びアッセイプレートをＯｃｔｅｔ機器で１０分間平衡化する。データを取得したら、その取得データをＯｃｔｅｔデータ解析ソフトウエアに読み込ませる。処理ウインドウで、リファレンスの差し引き、ｙ軸の位置合わせ、ステップ間補正及びＳａｖｉｔｚｋｙ−Ｇｏｌａｙフィルターの方法を指定することによって、データ処理を行う。解析ウインドウで、解析するステップ（結合及び解離）を指定し、カーブフィッティングモデル（１：１）、フィッティング方法（グローバル）及び目的のウインドウ（秒単位）を選択することによって、データ解析を行う。フィッティングの質を評価する。各データのトレース（アナライト濃度）のＫＤ値は、３倍の範囲内であれば、平均化することができる。ＫＤエラー値は、親和性定数値の１０倍以内でなければならず、Ｒ２値は、０．９５を超えるものとする。例えば、Ａｂｄｉｃｈｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｊ．Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３７７：２０９を参照されたい。
【０１３６】
いくつかの場合において、ｉ）対照Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド（ここで、対照は、野生型免疫調節ポリペプチド、例えば、野生型ＩＬ−２を含む）の、同種の免疫共調節ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２Ｒ）に対する結合親和性と、ｉｉ）野生型免疫調節ポリペプチドの変異体（例えば、変異ＩＬ−２）を含む本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドの、同種の免疫共調節ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２Ｒ）に対する結合親和性との比は、ＢＬＩによって（上記のとおり）測定したとき、少なくとも１．５：１、少なくとも２：１、少なくとも５：１、少なくとも１０：１、少なくとも１５：１、少なくとも２０：１、少なくとも２５：１、少なくとも５０：１、少なくとも１００：１、少なくとも５００：１、少なくとも１０２：１、少なくとも５×１０２：１、少なくとも１０３：１、少なくとも５×１０３：１、少なくとも１０４：１、少なくとも１０５：１、または少なくとも１０６：１である。いくつかの場合において、ｉ）対照Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド（ここで、対照は、野生型免疫調節ポリペプチドを含む）の、同種の免疫共調節ポリペプチドに対する結合親和性と、ｉｉ）野生型免疫調節ポリペプチドの変異体を含む本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドの、同種の免疫共調節ポリペプチドに対する結合親和性との比は、ＢＬＩによって測定したとき、１．５：１〜１０６：１、例えば、１．５：１〜１０：１、１０：１〜５０：１、５０：１〜１０２：１、１０２：１〜１０３：１、１０３：１〜１０４：１、１０４：１〜１０５：１、または１０５：１〜１０６：１の範囲内である。
【０１３７】
いくつかの場合において、ｉ）対照免疫調節ポリペプチド（ここで、対照は、野生型免疫調節ポリペプチド、例えば、野生型ＩＬ−２を含む）の、同種の免疫共調節ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２Ｒ）に対する結合親和性と、ｉｉ）野生型免疫調節ポリペプチドの変異体（例えば、変異ＩＬ−２）を含む本開示の免疫調節ポリペプチドの、同種の免疫共調節ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２Ｒ）に対する結合親和性との比は、ＢＬＩによって（上記のとおり）測定したとき、少なくとも１．５：１、少なくとも２：１、少なくとも５：１、少なくとも１０：１、少なくとも１５：１、少なくとも２０：１、少なくとも２５：１、少なくとも５０：１、少なくとも１００：１、少なくとも５００：１、少なくとも１０２：１、少なくとも５×１０２：１、少なくとも１０３：１、少なくとも５×１０３：１、少なくとも１０４：１、少なくとも１０５：１、または少なくとも１０６：１である。いくつかの場合において、ｉ）対照免疫調節ポリペプチド（ここで、対照は、野生型免疫調節ポリペプチドを含む）の、同種の免疫共調節ポリペプチドに対する結合親和性と、ｉｉ）野生型免疫調節ポリペプチドの変異体を含む本開示の免疫調節ポリペプチドの、同種の免疫共調節ポリペプチドに対する結合親和性との比は、ＢＬＩによって測定したとき、１．５：１〜１０６：１、例えば、１．５：１〜１０：１、１０：１〜５０：１、５０：１〜１０２：１、１０２：１〜１０３：１、１０３：１〜１０４：１、１０４：１〜１０５：１、または１０５：１〜１０６：１の範囲内である。
【０１３８】
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、調節ドメインとして、野生型（天然）ＩＬ−２を含む。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、調節ドメインとして、変異ＩＬ−２ポリペプチドを含む。
【０１３９】
調節（「ＭＯＤ」）ドメインとしてＩＬ−２ポリペプチドを含むＴ細胞調節多量体ポリペプチドは、「ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ」、「ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチド」または「ＩＬ−２／多量体ポリペプチド」とも称される。
【０１４０】
いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、野生型ＩＬ−２ポリペプチドを含む。いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、野生型ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを１つ含む。いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、野生型ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含む。いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、野生型ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含む。いくつかの場合において、野生型ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。ヒトＩＬ２ポリペプチドの野生型アミノ酸配列は、次のとおりであり得る：
2020514375.tif 000033
。
【０１４１】
いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドを含む。多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、ＩＬ２Ｒに対して、野生型ＩＬ−２のＩＬ２Ｒに対する結合親和性と比較して、結合親和性の低下を呈する。変異ＩＬ−２ポリペプチドを含む多量体ポリペプチドもまた、ＩＬ２Ｒに対して、野生型ＩＬ−２を含む対照多量体ポリペプチドのＩＬ２Ｒ（例えば、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列（成熟型）を含むα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ２Ｒ）に対するものと比較して、結合親和性の低下を呈する。
【０１４２】
いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ２Ｒに対して、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチドのＩＬ２Ｒに対する結合親和性と比較して、結合親和性の低下を呈する。例えば、いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチドを含む対照ｓｙｎＴａｃポリペプチドの、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列（成熟型）を含むα、β、及びγポリペプチドを含むＩＬ２Ｒに対する結合親和性よりも低い結合親和性で、ＩＬ２Ｒに結合する。例えば、いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＩＬ−２ポリペプチドを含む対照ｓｙｎＴａｃポリペプチドの、ＩＬ２Ｒ（例えば、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列（成熟型）を含むα、β、及びγポリペプチドを含むＩＬ２Ｒ）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、ＩＬ２Ｒに結合する。
【０１４３】
いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ２Ｒに対して、１００ｎｍ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜５００ｎＭの結合親和性を有する。例えば、いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ２Ｒ（例えば、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列（成熟型）を含むα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ２Ｒ）に対して、約１００ｎＭ〜約１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約４５０ｎＭ、または約４５０ｎＭ〜約５００ｎＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ２Ｒ（例えば、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列（成熟型）を含むα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ２Ｒ）に対して、約５００ｎＭ〜１μＭの結合親和性を有する。例えば、いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ２Ｒ（例えば、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列（成熟型）を含むα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ２Ｒ）に対して、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、または約９００ｎＭ〜約１μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ２Ｒ（例えば、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列（成熟型）を含むα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ２Ｒ）に対して、約１μＭ〜１０μＭの結合親和性を有する。例えば、いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ２Ｒ（例えば、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列（成熟型）を含むα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ２Ｒ）に対して、約１μＭ〜２μＭ、約２μＭ〜約３μＭ、約３μＭ〜約４μＭ、約４μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約６μＭ、約６μＭ〜約７μＭ、約７μＭ〜約８μＭ、約８μＭ〜約９μＭ、または約９μＭ〜約１０μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ２Ｒ（例えば、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列（成熟型）を含むα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ２Ｒ）に対して、約１０μＭ〜１００μＭの結合親和性を有する。例えば、いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ２Ｒ（例えば、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列（成熟型）を含むα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ２Ｒ）に対して、約１０μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約３０μＭ、約３０μＭ〜約４０μＭ、約４０μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約６０μＭ、約６０μＭ〜約７０μＭ、約７０μＭ〜約８０μＭ、約８０μＭ〜約９０μＭ、または約９０μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。
【０１４４】
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、１つのアミノ酸置換を有し得る。いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、２〜１０のアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、２つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、３つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、４つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、５つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、６つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、７つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、８つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、９つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチド中に存在する変異ＩＬ２ポリペプチドは、野生型ＩＬ２ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるまたは配列番号１に記載されるアミノ酸配列を含むＩＬ２ポリペプチド）と比較して、１０のアミノ酸置換を有する。
【０１４５】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、第１のポリペプチドと、第２のポリペプチドとを含み、第１のポリペプチドは、アミノ末端（Ｎ末端）からカルボキシル末端（Ｃ末端）の順に、ａ）エピトープ（例えば、Ｔ細胞エピトープ）、ｂ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド、及びｃ）免疫調節ポリペプチド（例えば、本開示の変異ＩＬ２ポリペプチド）を含み、第２のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）第２のＭＨＣポリペプチド、及びｂ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドを含む。他の場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、第１のポリペプチドと、第２のポリペプチドとを含み、第１のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）エピトープ（例えば、Ｔ細胞エピトープ）、及びｂ）第１のＭＨＣポリペプチドを含み、第２のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）免疫調節ポリペプチド（例えば、本開示の変異ＩＬ２ポリペプチド）、ｂ）第２のＭＨＣポリペプチド、及びｃ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドを含む。いくつかの場合において、第１及び第２のＭＨＣポリペプチドは、クラスＩのＭＨＣポリペプチドであり、例えば、いくつかの場合において、第１のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩのβ２−ミクログロブリン（Ｂ２Ｍまたはβ２Ｍ）ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ重鎖（Ｈ鎖）であるか、あるいは、第１のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩのＨ鎖であり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩのβ２Ｍポリペプチド）である。他の場合において、第１及び第２のＭＨＣポリペプチドは、クラスＩＩのＭＨＣポリペプチドであり、例えば、いくつかの場合において、第１のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩＩのα鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩＩのβ鎖ポリペプチドである。他の場合において、第１のポリペプチドはＭＨＣクラスＩＩのβ鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドはＭＨＣクラスＩＩのα鎖ポリペプチドである。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含み、免疫調節ポリペプチドのうちの少なくとも１つは、本開示の変異ＩＬ２免疫調節ポリペプチドである。本開示の多量体ポリペプチドが２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含む場合、いくつかの場合において、２つ以上の免疫調節ポリペプチドは、同じポリペプチド鎖中に存在し、タンデムに並び得る。本開示の多量体ポリペプチドが２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含む場合、いくつかの場合において、２つ以上の免疫調節ポリペプチドは、別個のポリペプチド中に存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ヘテロ二量体である。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、三量体ポリペプチドである。
【０１４６】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及びｉｉ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド、及びｉｉｉ）免疫調節ドメイン（例えば、本開示の変異ＩＬ２ポリペプチド）を含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及びｉｉ）免疫調節ドメイン（例えば、本開示の変異ＩＬ２ポリペプチド）を含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）免疫調節ドメイン（例えば、本開示の変異ＩＬ２ポリペプチド）、及びｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及びｉｉｉ）免疫調節ドメイン（例えば、本開示の変異ＩＬ２ポリペプチド）を含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドが非Ｉｇ骨格を含む場合、非Ｉｇ骨格は、ＸＴＥＮペプチド、トランスフェリンポリペプチド、Ｆｃ受容体ポリペプチド、エラスチン様ポリペプチド、シルク様ポリペプチド、またはシルクエラスチン様ポリペプチドである。
【０１４７】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、一価である。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、多価である。いくつかの場合において、本開示の多価の多量体ポリペプチドは、第１または第２のポリペプチドのうちの１つに免疫グロブリンＦｃポリペプチドを含む。例えば、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するＦｃポリペプチドに応じて、多量体ポリペプチドは、ホモ二量体であり得、この場合、ホモ二量体中に多量体ポリペプチドの２つの分子が存在し、多量体ポリペプチドの２つの分子は、例えば、２つの分子中に存在するＦｃポリペプチドを介して、互いにジスルフィド連結され得る。別の例として、本開示の多量体ポリペプチドは、３、４または５つの分子の多量体ポリペプチドを含み得、この場合、多量体ポリペプチドの各分子は、例えば、各分子中に存在するＦｃポリペプチドを介して、互いにジスルフィド連結され得る。
【０１４８】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及びｉｉｉ）本開示の変異ＩＬ２ポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）β２Ｍポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の変異ＩＬ２ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｉｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異ＩＬ２ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異ＩＬ２ポリペプチド、及びｖ）本開示の第３の変異ＩＬ２ポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、第１、第２及び第３の変異ＩＬ２ポリペプチドは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの場合において、第１、第２及び第３の変異ＩＬ２ポリペプチドは、アミノ酸配列が互いに異なる。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）β２Ｍポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異ＩＬ２ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異ＩＬ２ポリペプチド、及びｉｉｉ）本開示の第３の変異ＩＬ２ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｖ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、第１、第２及び第３の変異ＩＬ２ポリペプチドは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの場合において、第１、第２及び第３の変異ＩＬ２ポリペプチドは、アミノ酸配列が互いに異なる。
【０１４９】
Ｆ４２の置換
いくつかの場合において、多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１５０】
Ｙ４５の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４５は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４５は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４５は、Ｖａｌである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４５は、Ｌｅｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４５は、Ｉｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１５１】
Ｑ１２６の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｇに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２６は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｇに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｇに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｇに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｇに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２６は、Ｖａｌである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｇに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２６は、Ｌｅｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｇに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２６は、Ｉｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１５２】
Ｆ４２及びＨ１６の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸１６は、ヒスチジン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、Ｆ４２Ａ及びＨ１６Ａの置換を含むＩＬ−２変異体のコピーを２つ含み、多量体ポリペプチドは、ＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍポリペプチドを含み、ＩＬ−２（Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ）の２つのコピーは、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図３４Ｂに示されるアミノ酸配列（Ｈ１６Ａ及びＦ４２Ａの置換を含む）を含む。
【０１５３】
Ｆ４２及びＤ２０の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸２０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌであり、アミノ酸２０は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕであり、アミノ酸２０は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｎである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｌｙｓである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｒｇである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｈｉｓである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプ��ド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１５４】
Ｆ４２、Ｄ２０及びＥ１５の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸２０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕであり、アミノ酸１５は、グルタミン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。いくつかの場合において、本開示の変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓであり、アミノ酸１５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１５は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１５は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１５は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎであり、アミノ酸１５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｎであり、アミノ酸１５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｌｙｓであり、アミノ酸１５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｒｇであり、アミノ酸１５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｈｉｓであり、アミノ酸１５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１５５】
Ｆ４２、Ｄ２０及びＨ１６の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸２０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕであり、アミノ酸１６は、ヒスチジン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓであり、アミノ酸１６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｎであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｌｙｓであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｒｇであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｈｉｓであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１５６】
Ｆ４２、Ｄ２０及びＱ１２６の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸２０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕであり、アミノ酸１２６は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｎであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｌｙｓであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｒｇであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｈｉｓであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１５７】
Ｆ４２、Ｄ２０及びＹ４５の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸２０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕであり、アミノ酸４５は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸４５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｙであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎであり、アミノ酸４５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｎであり、アミノ酸４５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｌｙｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｒｇであり、アミノ酸４５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｈｉｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１５８】
Ｆ４、Ｄ２０、Ｙ４５及びＨ１６の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸２０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕであり、アミノ酸４５は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸１６は、ヒスチジン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸４５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｙであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１６は、Ｖａｌである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｎであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｌｙｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｒｇであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｈｉｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１５９】
Ｆ４２、Ｄ２０、Ｙ４５及びＱ１２６の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸２０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕであり、アミノ酸４５は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸１２６は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸４５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｙであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１２６は、Ｖａｌである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｎであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｌｙｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｒｇであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｈｉｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１６０】
Ｆ４２、Ｄ２０、Ｙ４５、Ｈ１６及びＱ１２６の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸２０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕであり、アミノ酸４５は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸１２６は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸１６は、ヒスチジン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸４５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｙであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１２６は、Ｖａｌであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅであり、アミノ酸２０は、Ａｌａであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｓｎであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｇｌｎであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｌｙｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ａｒｇであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸２０は、Ｈｉｓであり、アミノ酸４５は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または当該ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有す��。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１６１】
Ｆ４２、Ｑ１２６及びＨ１６の置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸１２６は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、アミノ酸１６は、ヒスチジン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅであり、アミノ酸１２６は、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、ＡｒｇまたはＨｉｓであり、アミノ酸１６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＬｅｕまたはＩｌｅである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙであり、アミノ酸１６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｖａｌであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｌｅｕであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ｇｌｙである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ｉｌｅであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｓｎであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｌａであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ｌｙｓであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ａｒｇであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図２Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、Ａｌａであり、アミノ酸１２６は、Ｈｉｓであり、アミノ酸１６は、Ａｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中には、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーが１つ存在する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含み、例えば、２つのコピーは、２つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを３つ含み、例えば、３つのコピーは、３つのコピーの間にリンカーなくタンデムに並んでいるか、またはタンデムに並んでいてリンカーペプチドで分離されている。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、ＨＬＡクラスＩ重鎖を含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがＨＬＡクラスＩ重鎖及びβ２Ｍを含む場合、ＩＬ−２ポリペプチド（複数可）は、β２Ｍポリペプチドを含むポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチド、または変異ＩＬ−２ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃは、ＩＬ２Ｒに対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチドは、１３３アミノ酸の長さを有する。
【０１６２】
４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の方法での使用に好適なｓｙｎＴａｃは、免疫調節ドメイン（複数可）として４−１ＢＢＬポリペプチドを含む。好適な４−１ＢＢＬ免疫調節ドメインには、野生型４−１ＢＢＬ免疫調節ドメイン、及び変異４−１ＢＢＬ免疫調節ドメインが含まれる。
【０１６３】
野生型ヒト４−１ＢＢＬアミノ酸配列は、図３６Ａに示される。ヒト４−１ＢＢＬの腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）相同ドメイン（ＴＨＤ）は、図３６Ａに示されるアミノ酸配列のアミノ酸８１〜２５４、アミノ酸８０〜２５４、またはアミノ酸８０〜２４６を含む。したがって、ヒト４−１ＢＢＬのＴＨＤの野生型アミノ酸配列は、例えば、次の配列番号２１３〜２１５のうちの１つであり得る。
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【０１６４】
野生型４−１ＢＢＬは、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）に結合する。４−１ＢＢのアミノ酸配列は、図３７に示される。本開示の変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬの４−１ＢＢへの結合と比較して低い親和性で、４−１ＢＢに結合する。
【０１６５】
変異４−１ＢＢＬポリペプチドには、対応する野生型４−１ＢＢＬポリペプチドに対して、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を有するものが含まれ、対応する野生型４−１ＢＢＬポリペプチドと比較して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４もしくは１５のアミノ酸、または１５を超えるアミノ酸が異なる変異４−１ＢＢＬポリペプチドが含まれる。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドのアミノ酸配列は、野生型４−１ＢＢＬポリペプチドとアミノ酸が１つだけ異なる。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドのアミノ酸配列は、野生型４−１ＢＢＬポリペプチドとアミノ酸が２つのみ異なる。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドのアミノ酸配列は、野生型４−１ＢＢＬポリペプチドとアミノ酸が３つのみ異なる。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドのアミノ酸配列は、野生型４−１ＢＢＬポリペプチドとアミノ酸が４つのみ異なる。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドのアミノ酸配列は、野生型４−１ＢＢＬポリペプチドとアミノ酸が５つのみ異なる。
【０１６６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、４−１ＢＢに対して、図３６Ａに示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチドの４−１ＢＢに対する結合親和性と比較して、結合親和性の低下を呈する。例えば、いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ａに示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチドの、図３７に示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢポリペプチドに対する結合親和性よりも低い結合親和性で、４−１ＢＢに結合する。例えば、いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ａに示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチドの、４−１ＢＢ（例えば、図３７に示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢポリペプチド）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％低い、少なくとも１５％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも２５％低い、少なくとも３０％低い、少なくとも３５％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも４５％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、４−１ＢＢに結合する。
【０１６７】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、４−１ＢＢに対して、配列番号２１３に示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチドの４−１ＢＢに対する結合親和性と比較して、結合親和性の低下を呈する。例えば、いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチドの、図３７Ａ〜３７Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢポリペプチドに対する結合親和性よりも低い結合親和性で、４−１ＢＢに結合する。例えば、いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチドの、４−１ＢＢ（例えば、図３７に示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢポリペプチド）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％低い、少なくとも１５％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも２５％低い、少なくとも３０％低い、少なくとも３５％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも４５％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、４−１ＢＢに結合する。
【０１６８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、４−１ＢＢに対して、１００ｎＭ〜１００μＭの結合親和性を有する。別の例として、いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、４−１ＢＢ（例えば、図３７に示されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢポリペプチド）に対して、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭの結合親和性を有する。
【０１６９】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、哺乳動物宿主細胞において、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）を含む対照多量体ポリペプチドの同じ哺乳動物宿主細胞における産生と比較して、産生の増加を呈する。例えば、いくつかの場合において、多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、哺乳動物宿主細胞において発現される場合、同じ哺乳動物宿主細胞で産生される、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）を含む対照多量体ポリペプチドの量よりも、２５％〜約５０％多い、約５０％〜約７５％多い、約７５％〜約２倍多い、約２倍〜約５倍多い、約５倍〜約１０倍多い、約１０倍〜約２０倍多い、約２０倍〜約３０倍多い、約３０倍〜約４０倍多い、約４０倍〜約５０倍多い、約５０倍〜約７５倍多い、約７５倍〜約１００倍多い、または１００倍を超えて多い量で産生される。
【０１７０】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、哺乳動物宿主細胞において、約５０ｍｇ／Ｌ〜約７５ｍｇ／Ｌ、約７５ｍｇ／Ｌ〜約１００ｍｇ／Ｌ、約１００ｍｇ／Ｌ〜約１５０ｍｇ／Ｌ、約１５０ｍｇ／Ｌ〜約２００ｍｇ／Ｌ、約２００ｍｇ／Ｌ〜約２５０ｍｇ／Ｌ、約２５０ｍｇ／Ｌ〜約５００ｍｇ／Ｌ、または５００ｍｇ／Ｌ超の量で産生される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、哺乳動物宿主細胞において、約１０ｍｇ／Ｌ〜約１５ｍｇ／Ｌ、約１５ｍｇ／Ｌ〜約２０ｍｇ／Ｌ、約２０ｍｇ／Ｌ〜約２５ｍｇ／Ｌ、約２５ｍｇ／Ｌ〜約３０ｍｇ／Ｌ、約３５ｍｇ／Ｌ〜約４０ｍｇ／Ｌ、約４０ｍｇ／Ｌ〜約４５ｍｇ／Ｌ、または約４５ｍｇ／Ｌ〜約５０ｍｇ／Ｌの量で産生される。
【０１７１】
多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、１つのアミノ酸置換を有し得る。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、２〜１０のアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、２つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、３つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、４つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、５つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、６つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示の変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、７つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、８つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、９つのアミノ酸置換を有する。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、１０のアミノ酸置換を有する。
【０１７２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、１１〜５０のアミノ酸置換を有する。例えば、いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、野生型４−１ＢＢＬポリペプチド（例えば、図３６Ａに示されるまたは配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む４−１ＢＢＬポリペプチド）と比較して、１１〜１５、１５〜２０、２０〜２５、２５〜３０、３０〜３５、３５〜４０、４０〜４５、または４５〜５０のアミノ酸置換を有する。
【０１７３】
本開示の多量体ポリペプチド中に含まれ得る好適な変異４−１ＢＢＬポリペプチドには、上記のものが含まれる。
【０１７４】
Ｋ１２７の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０１７５】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｋ４８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｋ４８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｋ４８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｋ４８にアミノ酸置換を含む。
【０１７６】
Ｋ１２７＋Ｍ９１置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｍ９１のアミノ酸置換であり、アミノ酸９１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸９１はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸１１は、メチオニン以外であり、例えば、アミノ酸１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸１１はＡｌａである。
【０１７７】
Ｋ１２７＋Ｆ９２置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｆ９２のアミノ酸置換であり、アミノ酸９２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸９２はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸１２は、フェニルアラニン以外であり、例えば、アミノ酸１２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸１２はＡｌａである。
【０１７８】
Ｋ１２７＋Ｑ９４置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｑ９４のアミノ酸置換であり、アミノ酸９４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸９４はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸１４は、グルタミン以外であり、例えば、アミノ酸１４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸１４はＡｌａである。
【０１７９】
Ｋ１２７＋Ｌ９５置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｌ９５のアミノ酸置換であり、アミノ酸９５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸９５はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸１５は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸１５はＡｌａである。
【０１８０】
Ｋ１２７＋Ｖ９６置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｖ９６のアミノ酸置換であり、アミノ酸９６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸９６はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸１６は、バリン以外であり、例えば、アミノ酸１６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸１６はＡｌａである。
【０１８１】
Ｋ１２７＋Ｑ９８置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｑ９８のアミノ酸置換であり、アミノ酸９８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸９８はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸１８は、グルタミン以外であり、例えば、アミノ酸１８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸１８はＡｌａである。
【０１８２】
Ｋ１２７＋Ｎ９９置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｎ９９のアミノ酸置換であり、アミノ酸９９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸９９はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸１９は、アスパラギン以外であり、例えば、アミノ酸１９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸１９はＡｌａである。
【０１８３】
Ｋ１２７＋Ｖ１００置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｖ１００のアミノ酸置換であり、アミノ酸１００は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１００はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸２０は、バリン以外であり、例えば、アミノ酸２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸２０はＡｌａである。
【０１８４】
Ｋ１２７＋Ｌ１０１置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｌ１０１のアミノ酸置換であり、アミノ酸１０１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１０１はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸２１は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸２１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸２１はＡｌａである。
【０１８５】
Ｋ１２７＋Ｌ１０２置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｌ１０２のアミノ酸置換であり、アミノ酸１０２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１０２はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸２２は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸２２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸２２はＡｌａである。
【０１８６】
Ｋ１２７＋Ｉ１０３置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｉ１０３のアミノ酸置換であり、アミノ酸１０３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１０３はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸２３は、イソロイシン以外であり、例えば、アミノ酸２３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸２３はＡｌａである。
【０１８７】
Ｋ１２７＋Ｄ１０４置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｄ１０４のアミノ酸置換であり、アミノ酸１０４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１０４はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸２４は、アスパラギン酸以外であり、例えば、アミノ酸２４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸２４はＡｌａである。
【０１８８】
Ｋ１２７＋Ｇ１０５置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｇ１０５のアミノ酸置換であり、アミノ酸１０５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１０５はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸２５は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸２５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸２５はＡｌａである。
【０１８９】
Ｋ１２７＋Ｐ１０６置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｐ１０６のアミノ酸置換であり、アミノ酸１０６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１０６はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸２６は、プロリン以外であり、例えば、アミノ酸２６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸２６はＡｌａである。
【０１９０】
Ｋ１２７＋Ｌ１０７置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｌ１０７のアミノ酸置換であり、アミノ酸１０７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１０７はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸２７は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸２７はＡｌａである。
【０１９１】
Ｋ１２７＋Ｓ１０８置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｓ１０８のアミノ酸置換であり、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１０８はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸２８は、セリン以外であり、例えば、アミノ酸２８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸２８はＡｌａである。
【０１９２】
Ｋ１２７＋Ｗ１０９置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｗ１０９のアミノ酸置換であり、アミノ酸１０９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１０９はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸２９は、トリプトファン以外であり、例えば、アミノ酸２９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸２９はＡｌａである。
【０１９３】
Ｋ１２７＋Ｙ１１０置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｙ１１０のアミノ酸置換であり、アミノ酸１１０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１１０はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸３０は、チロシン以外であり、例えば、アミノ酸３０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸３０はＡｌａである。
【０１９４】
Ｋ１２７＋Ｓ１１１置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｓ１１１のアミノ酸置換であり、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１１１はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸３１は、セリン以外であり、例えば、アミノ酸３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸３１はＡｌａである。
【０１９５】
Ｋ１２７＋Ｄ１１２置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｄ１１２のアミノ酸置換であり、アミノ酸１１２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１１２はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸３２は、アスパラギン酸以外であり、例えば、アミノ酸３２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸３２はＡｌａである。
【０１９６】
Ｋ１２７＋Ｐ１１３置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｐ１１３のアミノ酸置換であり、アミノ酸１１３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１１３はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸３３は、プロリン以外であり、例えば、アミノ酸３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸３３はＡｌａである。
【０１９７】
Ｋ１２７＋Ｇ１１４置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｇ１１４のアミノ酸置換であり、アミノ酸１１４は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１１４はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸３４は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸３４は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸３４はＡｌａである。
【０１９８】
Ｋ１２７＋Ｌ１１５置換
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）Ｌ１１５のアミノ酸置換であり、アミノ酸１１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸１２７はＡｌａであり、アミノ酸１１５はＡｌａである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ｉ）アミノ酸４７は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、ｉｉ）アミノ酸３５は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸３５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、アミノ酸４７はＡｌａであり、アミノ酸３５はＡｌａである。
【０１９９】
Ｑ２２７の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｄに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２７（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４７は、グルタミン以外であり、例えば、アミノ酸１４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２００】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１４８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ１４８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１４８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ１４８にアミノ酸置換を含む。
【０２０１】
Ｍ９１の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｅに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸９１（「ｘ」で示される）は、メチオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸９１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１は、メチオニン以外であり、例えば、アミノ酸１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２０２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｍ１２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｍ１２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｍ１２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｍ１２にアミノ酸置換を含む。
【０２０３】
Ｆ９２の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｆに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸９２（「ｘ」で示される）は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸９２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２は、フェニルアラニン以外であり、例えば、アミノ酸１２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２０４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｆ１３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｆ１３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｆ１３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｆ１３にアミノ酸置換を含む。
【０２０５】
Ｑ９４の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｇに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸９４（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸９４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４は、グルタミン以外であり、例えば、アミノ酸１４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２０６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ１５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ１５にアミノ酸置換を含む。
【０２０７】
Ｌ９５の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｈに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸９５（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸９５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２０８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ１６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ１６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ１６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ１６にアミノ酸置換を含む。
【０２０９】
Ｖ９６の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｉに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸９６（「ｘ」で示される）は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸９６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１６は、バリン以外であり、例えば、アミノ酸１６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２１０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ１７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ１７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ１７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ１７にアミノ酸置換を含む。
【０２１１】
Ｑ９８の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｊに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸９８（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸９８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１８は、グルタミン以外であり、例えば、アミノ酸１８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２１２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ１９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ１９にアミノ酸置換を含む。
【０２１３】
Ｎ９９の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｋに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸９９（「ｘ」で示される）は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸９９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１９は、アスパラギン以外であり、例えば、アミノ酸１９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２１４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｎ２０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｎ２０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｎ２０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｎ２０にアミノ酸置換を含む。
【０２１５】
Ｖ１００の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｌに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１００（「ｘ」で示される）は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１００は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２０は、バリン以外であり、例えば、アミノ酸２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２１６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ２１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ２１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ２１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ２１にアミノ酸置換を含む。
【０２１７】
Ｌ１０１の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｍに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０１（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸２１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２１８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ２２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ２２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ２２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ２２にアミノ酸置換を含む。
【０２１９】
Ｌ１０２の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｎに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０２（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸２２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２２０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ２３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ２３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ２３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ２３にアミノ酸置換を含む。
【０２２１】
Ｉ１０３の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｏに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０３（「ｘ」で示される）は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２３は、イソロイシン以外であり、例えば、アミノ酸２３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２２２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｉ２４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｉ２４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｉ２４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｉ２４にアミノ酸置換を含む。
【０２２３】
Ｄ１０４の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｐに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０４（「ｘ」で示される）は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２４は、アスパラギン酸以外であり、例えば、アミノ酸２４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。
【０２２４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｄ２５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｄ２５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｄ２５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｄ２５にアミノ酸置換を含む。
【０２２５】
Ｇ１０５の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｑに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０５（「ｘ」で示される）は、グリシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２５は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸２５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２２６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ２６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ２６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ２６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ２６にアミノ酸置換を含む。
【０２２７】
Ｐ１０６の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｒに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０６（「ｘ」で示される）は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２６は、プロリン以外であり、例えば、アミノ酸２６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２２８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｐ２７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｐ２７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｐ２７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｐ２７にアミノ酸置換を含む。
【０２２９】
Ｌ１０７の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｓに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０７（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２７は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２３０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ２８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ２８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ２８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ２８にアミノ酸置換を含む。
【０２３１】
Ｓ１０８の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｔに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０８（「ｘ」で示される）は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２８は、セリン以外であり、例えば、アミノ酸２８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２３２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ２９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ２９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ２９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ２９にアミノ酸置換を含む。
【０２３３】
Ｗ１０９の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｕに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０９（「ｘ」で示される）は、トリプトファン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２９は、トリプトファン以外であり、例えば、アミノ酸２９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２３４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｗ３０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｗ３０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｗ３０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｗ３０にアミノ酸置換を含む。
【０２３５】
Ｙ１１０の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｖに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１０（「ｘ」で示される）は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸３０は、チロシン以外であり、例えば、アミノ酸３０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２３６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｙ３１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｙ３１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｙ３１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｙ３１にアミノ酸置換を含む。
【０２３７】
Ｓ１１１の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｗに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１１（「ｘ」で示される）は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸３１は、セリン以外であり、例えば、アミノ酸３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２３８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ３２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ３２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ３２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ３２にアミノ酸置換を含む。
【０２３９】
Ｄ１１２の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｘに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１２（「ｘ」で示される）は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸３２は、アスパラギン酸以外であり、例えば、アミノ酸３２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。
【０２４０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｄ３３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｄ３３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｄ３３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｄ３３にアミノ酸置換を含む。
【０２４１】
Ｐ１１３の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｙに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１３（「ｘ」で示される）は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸３３は、プロリン以外であり、例えば、アミノ酸３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２４２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｐ３４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｐ３４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｐ３４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｐ３４にアミノ酸置換を含む。
【０２４３】
Ｇ１１４の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６Ｚに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１４（「ｘ」で示される）は、グリシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１４は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸３４は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸３４は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２４４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ３５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ３５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ３５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ３５にアミノ酸置換を含む。
【０２４５】
Ｌ１１５の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＡＡに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１５（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸３５は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸３５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２４６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ３６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ３６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ３６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ３６にアミノ酸置換を含む。
【０２４７】
Ｇ１１７の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＢＢに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１７（「ｘ」で示される）は、グリシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸３７は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸３７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２４８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ３８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ３８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ３８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ３８にアミノ酸置換を含む。
【０２４９】
Ｖ１１８の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＣＣに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１８（「ｘ」で示される）は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸３８は、バリン以外であり、例えば、アミノ酸３８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２５０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ３９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ３９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ３９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ３９にアミノ酸置換を含む。
【０２５１】
Ｓ１１９の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＤＤに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１９（「ｘ」で示される）は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸３９は、セリン以外であり、例えば、アミノ酸３９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２５２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ４０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ４０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ４０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ４０にアミノ酸置換を含む。
【０２５３】
Ｌ１２０の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＥＥに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２０（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４０は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸４０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２５４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ４１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ４１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ４１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ４１にアミノ酸置換を含む。
【０２５５】
Ｔ１２１の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＦＦに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２１（「ｘ」で示される）は、トレオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４１は、トレオニン以外であり、例えば、アミノ酸４１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２５６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｔ４２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｔ４２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｔ４２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｔ４２にアミノ酸置換を含む。
【０２５７】
Ｇ１２２の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＧＧに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２２（「ｘ」で示される）は、グリシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２２は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４２は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸４２は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２５８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ４３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ４３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ４３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ４３にアミノ酸置換を含む。
【０２５９】
Ｇ１２３の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＨＨに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２３（「ｘ」で示される）は、グリシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４３は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸４３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２６０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ４４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ４４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ４４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ４４にアミノ酸置換を含む。
【０２６１】
Ｌ１２４の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＩＩに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２４（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４４は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸４４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２６２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ４５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ４５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ４５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ４５にアミノ酸置換を含む。
【０２６３】
Ｓ１２５の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＪＪに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２５（「ｘ」で示される）は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４５は、セリン以外であり、例えば、アミノ酸４５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２６４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ４６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ４６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ４６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ４６にアミノ酸置換を含む。
【０２６５】
Ｙ１２６の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＫＫに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２６（「ｘ」で示される）は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４６は、チロシン以外であり、例えば、アミノ酸４６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２６６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｙ４７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｙ４７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｙ４７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｙ４７にアミノ酸置換を含む。
【０２６７】
Ｅ１２８の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＬＬに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２８（「ｘ」で示される）は、グルタミン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４８は、グルタミン酸以外であり、例えば、アミノ酸４８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。
【０２６８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ４９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ４９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ４９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ４９にアミノ酸置換を含む。
【０２６９】
Ｄ１２９の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＭＭに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２９（「ｘ」で示される）は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸４９は、アスパラギン酸以外であり、例えば、アミノ酸４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。
【０２７０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｄ５０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｄ５０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｄ５０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｄ５０にアミノ酸置換を含む。
【０２７１】
Ｔ１３０の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＮＮに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３０（「ｘ」で示される）は、トレオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１３０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸５０は、トレオニン以外であり、例えば、アミノ酸５０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２７２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｔ５１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｔ５１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｔ５１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｔ５１にアミノ酸置換を含む。
【０２７３】
Ｋ１３１の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＯＯに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３１（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸５１は、リシン以外であり、例えば、アミノ酸５１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２７４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｋ５２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｋ５２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｋ５２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｋ５２にアミノ酸置換を含む。
【０２７５】
Ｅ１３２の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＰＰに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３２（「ｘ」で示される）は、グルタミン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１３２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸５２は、グルタミン酸以外であり、例えば、アミノ酸５２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。
【０２７６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ５３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ５３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ５３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ５３にアミノ酸置換を含む。
【０２７７】
Ｆ１４４の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＱＱに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４４（「ｘ」で示される）は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１４４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸６４は、フェニルアラニン以外であり、例えば、アミノ酸６４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２７８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｆ６５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｆ６５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｆ６５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｆ６５にアミノ酸置換を含む。
【０２７９】
Ｆ１４５の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＲＲに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４５（「ｘ」で示される）は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１４５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸６５は、フェニルアラニン以外であり、例えば、アミノ酸６５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２８０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｆ６６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｆ６６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｆ６６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｆ６６にアミノ酸置換を含む。
【０２８１】
Ｑ１４６の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＳＳに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４６（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１４６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸６６は、グルタミン以外であり、例えば、アミノ酸６６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２８２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ６７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ６７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ６７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ６７にアミノ酸置換を含む。
【０２８３】
Ｌ１４７の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＴＴに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４７（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸６７は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸６７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２８４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ６８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ６８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ６８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ６８にアミノ酸置換を含む。
【０２８５】
Ｅ１４８の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＵＵに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４８（「ｘ」で示される）は、グルタミン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１４８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸６８は、グルタミン酸以外であり、例えば、アミノ酸６８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。
【０２８６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ６９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ６９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ６９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ６９にアミノ酸置換を含む。
【０２８７】
Ｌ１４９の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＶＶに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４９（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸６９は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸６９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２８８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ７０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ７０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ７０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ７０にアミノ酸置換を含む。
【０２８９】
Ｒ１５０の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＷＷに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５０（「ｘ」で示される）は、アルギニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸７０は、アルギニン以外であり、例えば、アミノ酸７０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２９０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ７１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ７１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ７１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ７１にアミノ酸置換を含む。
【０２９１】
Ｒ１５１の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＸＸに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５１（「ｘ」で示される）は、アルギニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸７１は、アルギニン以外であり、例えば、アミノ酸７１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２９２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ７２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ７２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ７２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ７２にアミノ酸置換を含む。
【０２９３】
Ｖ１５２の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＹＹに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５２（「ｘ」で示される）は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸７２は、バリン以外であり、例えば、アミノ酸７２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２９４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ７３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ７３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ７３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ７３にアミノ酸置換を含む。
【０２９５】
Ｖ１５３の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＺＺに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５３（「ｘ」で示される）は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸７３は、バリン以外であり、例えば、アミノ酸７３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２９６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ７４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ７４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ７４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ７４にアミノ酸置換を含む。
【０２９７】
Ｇ１５５の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＡＡＡに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５５（「ｘ」で示される）は、グリシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸７５は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸７５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０２９８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ７６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ７６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ７６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ７６にアミノ酸置換を含む。
【０２９９】
Ｅ１５６の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＢＢＢに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５６（「ｘ」で示される）は、グルタミン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸７６は、グルタミン酸以外であり、例えば、アミノ酸７６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。
【０３００】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ７７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ７７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ７７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ７７にアミノ酸置換を含む。
【０３０１】
Ｇ１５７の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＣＣＣに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５７（「ｘ」で示される）は、グリシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸７７は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸７７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３０２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ７８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ７８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ７８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ７８にアミノ酸置換を含む。
【０３０３】
Ｓ１５８の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＤＤＤに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５８（「ｘ」で示される）は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸７８は、セリン以外であり、例えば、アミノ酸７８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３０４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ７９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ７９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ７９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ７９にアミノ酸置換を含む。
【０３０５】
Ｄ１８４の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＥＥＥに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１８４（「ｘ」で示される）は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１８４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０４は、アスパラギン酸以外であり、例えば、アミノ酸１０４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＧｌｕである。
【０３０６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｄ１０５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｄ１０５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｄ１０５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｄ１０５にアミノ酸置換を含む。
【０３０７】
Ｌ１８５の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＦＦＦに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１８５（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１８５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０５は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸１０５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３０８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ１０６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ１０６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ１０６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ１０６にアミノ酸置換を含む。
【０３０９】
Ｐ１８６の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＧＧＧに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１８６（「ｘ」で示される）は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１８６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０６は、プロリン以外であり、例えば、アミノ酸１０６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３１０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｐ１０７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｐ１０７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｐ１０７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｐ１０７にアミノ酸置換を含む。
【０３１１】
Ｐ１８７の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＨＨＨに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１８７（「ｘ」で示される）は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１８７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０７は、プロリン以外であり、例えば、アミノ酸１０７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３１２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｐ１０８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｐ１０８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｐ１０８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｐ１０８にアミノ酸置換を含む。
【０３１３】
Ｓ１８９の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＩＩＩに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１８９（「ｘ」で示される）は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１８９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１０９は、セリン以外であり、例えば、アミノ酸１０９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３１４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ１１０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ１１０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ１１０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ１１０にアミノ酸置換を含む。
【０３１５】
Ｓ１９０の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＪＪＪに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１９０（「ｘ」で示される）は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１０は、セリン以外であり、例えば、アミノ酸１１０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３１６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ１１１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ１１１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ１１１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ１１１にアミノ酸置換を含む。
【０３１７】
Ｅ１９１の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＫＫＫに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１９１（「ｘ」で示される）は、グルタミン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１１は、グルタミン酸以外であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。
【０３１８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ１１２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ１１２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ１１２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ１１２にアミノ酸置換を含む。
【０３１９】
Ｒ１９３の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＬＬＬに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１９３（「ｘ」で示される）は、アルギニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１３は、アルギニン以外であり、例えば、アミノ酸１１３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３２０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ１１４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ１１４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ１１４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ１１４にアミノ酸置換を含む。
【０３２１】
Ｎ１９４の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＭＭＭに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１９４（「ｘ」で示される）は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１４は、アスパラギン以外であり、例えば、アミノ酸１１４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３２２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｎ１１５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｎ１１５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｎ１１５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｎ１１５にアミノ酸置換を含む。
【０３２３】
Ｓ１９５の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＮＮＮに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１９５（「ｘ」で示される）は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１５は、セリン以外であり、例えば、アミノ酸１１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３２４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ１１６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ１１６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｓ１１６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｓ１１６にアミノ酸置換を含む。
【０３２５】
Ｆ１９７の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＯＯＯに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１９７（「ｘ」で示される）は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１１７は、フェニルアラニン以外であり、例えば、アミノ酸１１７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３２６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｆ１１８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｆ１１８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｆ１１８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｆ１１８にアミノ酸置換を含む。
【０３２７】
Ｑ２１０の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＰＰＰに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１０（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２１０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３０は、グルタミン以外であり、例えば、アミノ酸１３０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３２８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１３１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ１３１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１３１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ１３１にアミノ酸置換を含む。
【０３２９】
Ｒ２１１の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＱＱＱに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１１（「ｘ」で示される）は、アルギニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３１は、アルギニン以外であり、例えば、アミノ酸１３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３３０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ１３２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ１３２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ１３２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ１３２にアミノ酸置換を含む。
【０３３１】
Ｌ２１２の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＲＲＲに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１２（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２１２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３２は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸１３２は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３３２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ１３３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ１３３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ１３３にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ１３３にアミノ酸置換を含む。
【０３３３】
Ｇ２１３の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＳＳＳに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１３（「ｘ」で示される）は、グリシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２１３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３３は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸１３３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３３４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ１３４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ１３４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ１３４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ１３４にアミノ酸置換を含む。
【０３３５】
Ｖ２１４の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＴＴＴに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１４（「ｘ」で示される）は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２１４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３４は、バリン以外であり、例えば、アミノ酸１３４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３３６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ１３５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ１３５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ１３５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ１３５にアミノ酸置換を含む。
【０３３７】
Ｈ２１５の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＵＵＵに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１５（「ｘ」で示される）は、ヒスチジン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２１５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３５は、ヒスチジン以外であり、例えば、アミノ酸１３５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３３８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｈ１３６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｈ１３６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｈ１３６にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｈ１３６にアミノ酸置換を含む。
【０３３９】
Ｌ２１６の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＶＶＶに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１６（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２１６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３６は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸１３６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３４０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ１３７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ１３７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ１３７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ１３７にアミノ酸置換を含む。
【０３４１】
Ｈ２１７の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＷＷＷに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１７（「ｘ」で示される）は、ヒスチジン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２１７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３７は、ヒスチジン以外であり、例えば、アミノ酸１３７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３４２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｈ１３８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｈ１３８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｈ１３８にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｈ１３８にアミノ酸置換を含む。
【０３４３】
Ｔ２１８の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＸＸＸに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１８（「ｘ」で示される）は、トレオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２１８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３８は、トレオニン以外であり、例えば、アミノ酸１３８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３４４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｔ１３９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｔ１３９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｔ１３９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｔ１３９にアミノ酸置換を含む。
【０３４５】
Ｅ２１９の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＹＹＹに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２１９（「ｘ」で示される）は、グルタミン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２１９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１３９は、グルタミン酸以外であり、例えば、アミノ酸１３９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＨｉｓまたはＡｓｐである。
【０３４６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ１４０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ１４０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｅ１４０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｅ１４０にアミノ酸置換を含む。
【０３４７】
Ｒ２２１の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＺＺＺに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２１（「ｘ」で示される）は、アルギニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４１は、アルギニン以外であり、例えば、アミノ酸１４１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３４８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ１４２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ１４２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ１４２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ１４２にアミノ酸置換を含む。
【０３４９】
Ｒ２２３の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＡＡＡＡに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２３（「ｘ」で示される）は、アルギニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４３は、アルギニン以外であり、例えば、アミノ酸１４３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３５０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ１４４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ１４４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｒ１４４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｒ１４４にアミノ酸置換を含む。
【０３５１】
Ｈ２２４の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＢＢＢＢに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２４（「ｘ」で示される）は、ヒスチジン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４４は、ヒスチジン以外であり、例えば、アミノ酸１４４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３５２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｈ１４５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｈ１４５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｈ１４５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｈ１４５にアミノ酸置換を含む。
【０３５３】
Ｗ２２６の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＣＣＣＣに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２６（「ｘ」で示される）は、トリプトファン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４６は、トリプトファン以外であり、例えば、アミノ酸１４６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３５４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｗ１４７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｗ１４７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｗ１４７にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｗ１４７にアミノ酸置換を含む。
【０３５５】
Ｌ２２８の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＤＤＤＤに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２８（「ｘ」で示される）は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４８は、ロイシン以外であり、例えば、アミノ酸１４８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３５６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ１４９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ１４９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｌ１４９にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｌ１４９にアミノ酸置換を含む。
【０３５７】
Ｔ２２９の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＥＥＥＥに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２９（「ｘ」で示される）は、トレオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１４９は、トレオニン以外であり、例えば、アミノ酸１４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３５８】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｔ１５０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｔ１５０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｔ１５０にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｔ１５０にアミノ酸置換を含む。
【０３５９】
Ｑ２３０の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＦＦＦＦに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２３０（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２３０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５０は、グルタミン以外であり、例えば、アミノ酸１５０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３６０】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１５１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ１５１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１５１にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｑ１５１にアミノ酸置換を含む。
【０３６１】
Ｇ２３１の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＧＧＧＧに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２３１（「ｘ」で示される）は、グリシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２３１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５１は、グリシン以外であり、例えば、アミノ酸１５１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３６２】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ１５２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ１５２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｇ１５２にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｇ１５２にアミノ酸置換を含む。
【０３６３】
Ｔ２３３の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＨＨＨＨに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２３３（「ｘ」で示される）は、トレオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５３は、トレオニン以外であり、例えば、アミノ酸１５３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３６４】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｔ１５４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｔ１５４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｔ１５４にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｔ１５４にアミノ酸置換を含む。
【０３６５】
Ｖ２３４の置換を含む４−１ＢＢＬ
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、図３６ＩＩＩＩに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２３４（「ｘ」で示される）は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２３４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１５４は、バリン以外であり、例えば、アミノ酸１５４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３６６】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ１５５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１４に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ１５５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｖ１５５にアミノ酸置換を含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチド中に存在する変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、配列番号２１５に記載されるアミノ酸配列を含み、Ｖ１５５にアミノ酸置換を含む。
【０３６７】
４−１ＢＢＬ免疫調節ポリペプチドを含む例示的な多量体ポリペプチド
本開示の方法での使用に好適な例示的な多量体ポリペプチドについて、以下に記載する。
【０３６８】
Ｋ１２７
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及びｉｉｉ）図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、変異４−１ＢＢＬポリペプチドであって、アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐもしくはＧｌｕである、変異４−１ＢＢＬポリペプチド、または配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｋ４７にアミノ酸置換を含む、本開示の変異４−１ＢＢＬポリペプチドであって、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐもしくはＧｌｕである、変異４−１ＢＢＬポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）β２Ｍポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、変異４−１ＢＢＬポリペプチドであって、アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐもしくはＧｌｕである、変異４−１ＢＢＬポリペプチド、または配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｋ４７にアミノ酸置換を含む、本開示の変異４−１ＢＢＬポリペプチドであって、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐもしくはＧｌｕである、変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｉｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、及びｖ）本開示の第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、例えば、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｋ４７にアミノ酸置換を含み、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）β２Ｍポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、及びｉｉｉ）本開示の第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｖ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｖ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、例えば、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｋ４７にアミノ酸置換を含み、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＭ９１の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ���２７の置換及びＦ９２の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＱ９４の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＬ９５の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＶ９６の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＱ９８の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＮ９９の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＶ１００の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＬ１０１の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＬ１０２の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＩ１０３の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＤ１０４の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＧ１０５の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＰ１０６の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＬ１０７の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＳ１０８の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＷ１０９の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＹ１１０の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＳ１１１の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＤ１１２の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＰ１１３の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬ���リペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＧ１１４の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＬ１１５の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。
【０３６９】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）β２Ｍポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｖｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｖｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、図３６Ｂに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸１２７（「ｘ」で示される）は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、例えば、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｋ４７にアミノ酸置換を含み、例えば、アミノ酸４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号１３１）の配列を含み、ｎは、１、２、３、４、または５である。いくつかの場合において、ｎは、４である。いくつかの場合において、ｎは、５である。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＭ９１の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＦ９２の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＱ９４の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＬ９５の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＶ９６の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＱ９８の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＮ９９の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＶ１００の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合にお���て、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＬ１０１の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＬ１０２の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＩ１０３の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＤ１０４の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＧ１０５の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＰ１０６の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＬ１０７の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＳ１０８の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＷ１０９の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＹ１１０の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＳ１１１の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＤ１１２の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＰ１１３の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＧ１１４の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。いくつかの場合において、変異４−１ＢＢＬポリペプチドは、Ｋ１２７の置換及びＬ１１５の置換を含む（図３６Ａに示されるナンバリングに基づく）。
【０３７０】
Ｑ２２７
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及びｉｉｉ）図３６Ｄに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、変異４−１ＢＢＬポリペプチドであって、アミノ酸２２７（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐもしくはＧｌｕである、変異４−１ＢＢＬポリペプチド、または配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１４７にアミノ酸置換を含む、本開示の変異４−１ＢＢＬポリペプチドであって、例えば、アミノ酸１４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐもしくはＧｌｕである、変異４−１ＢＢＬポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）β２Ｍポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図３６Ｄに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、変異４−１ＢＢＬポリペプチドであって、アミノ酸２２７（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐもしくはＧｌｕである、変異４−１ＢＢＬポリペプチド、または配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１４７にアミノ酸置換を含む、本開示の変異４−１ＢＢＬポリペプチドであって、例えば、アミノ酸１４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐもしくはＧｌｕである、変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｉｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、及びｖ）本開示の第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、図３６Ｄに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２７（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、あるいは、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１４７にアミノ酸置換を含み、例えば、アミノ酸１４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）β２Ｍポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、及びｉｉｉ）本開示の第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｖ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｖ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、図３６Ｄに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２７（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、あるいは、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１４７にアミノ酸置換を含み、例えば、アミノ酸１４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。
【０３７１】
いくつかの場合において、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及びｉｉ）β２Ｍポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチド、ｖｉ）クラスＩのＭＨＣ重鎖、及びｖｉｉ）Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、図３６Ｄに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、アミノ酸２２７（「ｘ」で示される）は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２２７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、あるいは、第１、第２及び第３の変異４−１ＢＢＬポリペプチドのそれぞれは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｑ１４７にアミノ酸置換を含み、例えば、アミノ酸１４７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＡｓｐまたはＧｌｕである。いくつかの場合において、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号１３１）の配列を含み、ｎは、１、２、３、４、または５である。いくつかの場合において、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号１３１）の配列を含み、ｎは、４である。いくつかの場合において、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号１３１）の配列を含み、ｎは、５である。いくつかの場合において、リンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎの配列を含み、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。いくつかの場合において、リンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎの配列を含み、ｎは、２である。いくつかの場合において、リンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎの配列を含み、ｎは、３である。いくつかの場合において、リンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎの配列を含み、ｎは、４である。いくつかの場合において、リンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｎの配列を含み、ｎは、５である。
【０３７２】
複数の免疫調節ドメイン
上記のとおり、いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含む。いくつかの場合において、２つ以上の免疫調節ポリペプチドのうちの少なくとも１つは、変異免疫調節ポリペプチドである。例えば、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの場合、いくつかの場合において、２つ以上の免疫調節ポリペプチドのうちの少なくとも１つは、変異ＩＬ−２ポリペプチドである。別の例として、４−１ＢＢＬ／ｓｙｎＴａｃの場合、いくつかの場合において、２つ以上の免疫調節ポリペプチドのうちの少なくとも１つは、変異４−１ＢＢＬポリペプチドである。
【０３７３】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、本開示の変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ以上含む。いくつかの場合において、２つ以上の変異ＩＬ−２ポリペプチドは、多量体ポリペプチドの同じポリペプチド鎖上にある。いくつかの場合において、２つ以上の変異ＩＬ−２ポリペプチドは、多量体ポリペプチドの異なるポリペプチド鎖上にある。
【０３７４】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、第１の免疫調節ポリペプチドと、少なくとも第２の免疫調節ポリペプチドとを含み、第１の免疫調節ポリペプチドは、本開示の変異ＩＬ−２ポリペプチドであり、第２の免疫調節ポリペプチドは、ＩＬ−２ポリペプチドではない。例えば、いくつかの場合において、第２の免疫調節ポリペプチドは、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーのメンバー、例えば、ＦａｓＬポリペプチド、４−１ＢＢＬポリペプチド、ＣＤ４０ポリペプチド、ＯＸ４０Ｌポリペプチド、ＣＤ３０Ｌポリペプチド、ＣＤ７０ポリペプチドなどである。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドの第２の免疫調節ポリペプチドは、Ｔ細胞共刺激ポリペプチドであり、免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーのメンバー、例えば、ＣＤ７ポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＩＣＡＭポリペプチドなどである。いくつかの場合において、第２の免疫調節ポリペプチドは、４−１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＩＣＯＳ−Ｌ、ＩＣＡＭ、ＰＤ−Ｌ１、ＣＤ８６、ＦａｓＬ、及びＰＤ−Ｌ２である。本開示の多量体ポリペプチドの好適な免疫調節ポリペプチドには、例えば、ＣＤ７、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ＨＬＡ−Ｇ、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＨＶＥＭ、リンホトキシンβ受容体、３／ＴＲ６、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、またはＨＶＥＭが含まれる。
【０３７５】
本開示の多量体ポリペプチド中に含まれ得る更なるＴ細胞調節ドメイン（ＭＯＤ）には、天然または合成のヒト遺伝子産物（タンパク質）、ヒト遺伝子産物（限定するものではないが、古典的及び非古典的（例えば、ＦＧＦ２、ＩＬ１、Ｓ１００Ａ４）分泌機序から生じる全ての分泌タンパク質を含む）を標的にする親和性試薬（例えば、抗体、抗体断片、一本鎖Ｆｖ、アプタマー、ナノボディ）、及び遺伝子的にコードされた天然タンパク質セグメント（単一または複数の膜貫通領域）または翻訳後修飾（ＧＰＩ連結など）によって固定された全ての細胞表面タンパク質の細胞外ドメインが含まれる。細胞表面グリカンまたは他の翻訳後修飾（例えば、硫酸化）を標的にする、あらゆる天然または合成の親和性試薬（例えば、抗体、抗体断片、一本鎖Ｆｖ、アプタマー、ナノボディ、レクチンなど）。例としては、ＴＮＦ／ＴＮＦＲファミリーのメンバー（ＯＸ４０Ｌ、ＩＣＯＳＬ、ＦＡＳＬ、ＬＴＡ、ＬＴＢＴＲＡＩＬ、ＣＤ１５３、ＴＮＦＳＦ９、ＲＡＮＫＬ、ＴＷＥＡＫ、ＴＮＦＳＦ１３、ＴＮＦＳＦ１３ｂ、ＴＮＦＳＦ１４、ＴＮＦＳＦ１５、ＴＮＦＳＦ１８、ＣＤ４０ＬＧ、ＣＤ７０）もしくはＴＮＦ／ＴＮＦＲファミリーメンバーに対する親和性試薬；免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバー（ＶＩＳＴＡ、ＰＤ１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、Ｂ７１、Ｂ７２、ＣＴＬＡ４、ＣＤ２８、ＴＩＭ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９、Ｔ細胞受容体鎖、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳリガンド、ＨＨＬＡ２、ブチロフィリン、ＢＴＬＡ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＣＤ３、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＩｇＳＦ  ＣＡＭＳ（ＣＤ２、ＣＤ５８、ＣＤ４８、ＣＤ１５０、ＣＤ２２９、ＣＤ２４４、ＩＣＡＭ−１を含む）、白血球免疫グロブリン様受容体（ＬＩＬＲ）、キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ））、レクチンスーパーファミリーメンバー、セレクチン、サイトカイン／ケモカイン及びサイトカイン／ケモカイン受容体、成長因子及び成長因子受容体）、接着分子（インテグリン、フィブロネクチン、カドヘリン）、またはマルチスパン内在性膜タンパク質の細胞外ドメイン、または免疫グロブリンスーパーファミリー及び列挙された遺伝子産物に対する親和性試薬が挙げられるが、これらに限定されない。加えて、これらの遺伝子産物の活性なホモログ／オルソログ、限定するものではないが、ウイルス配列（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ）、細菌配列、真菌配列、真核病原体（例えば、住血吸虫属（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ）、プラスモディウム属（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）、バベシア属（Ｂａｂｅｓｉａ）、エイメリア属（Ｅｉｍｅｒｉａ）、タイレリア属（Ｔｈｅｉｌｅｒｉａ）、トキソプラズマ属（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ）、エントアメーバ属（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ）、リーシュマニア属（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ）、及びトリパノソーマ属（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ））及び哺乳動物由来コード領域を含む。加えて、ＭＯＤは、ヒト遺伝子産物を標的にする小分子薬物を含み得る。
【０３７６】
追加のポリペプチド
多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖は、上記のものに加えて、１つ以上のポリペプチドを含み得る。好適な追加のポリペプチドには、エピトープタグ及び親和性ドメインが含まれる。１つ以上の追加ポリペプチドは、多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖のＮ末端、多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖のＣ末端、または多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖の内部に含まれ得る。
【０３７７】
エピトープタグ
好適なエピトープタグには、ヘマグルチニン（ＨＡ；例えば、ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ（配列番号７９）、ＦＬＡＧ（例えば、ＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号８０）、ｃ−ｍｙｃ（例えば、ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ；配列番号８１）などが含まれるが、これらに限定されない。
【０３７８】
親和性ドメイン
親和性ドメインは、同定または精製に有用な結合パートナー、例えば、固体支持体上に固定されたものなどと相互作用することができるペプチド配列を含む。発現タンパク質に融合されたヒスチジンなどの複数の連続する単一アミノ酸をコードするＤＮＡ配列を、ニッケルセファロースなどの樹脂カラムへの高親和性結合による組換えタンパク質のワンステップ精製に使用することができる。例示的な親和性ドメインには、Ｈｉｓ５（ＨＨＨＨＨ）（配列番号８２）、ＨｉｓＸ６（ＨＨＨＨＨＨ）（配列番号８３）、Ｃ−ｍｙｃ（ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ）（配列番号８１）、Ｆｌａｇ（ＤＹＫＤＤＤＤＫ）（配列番号８０）、ＳｔｒｅｐＴａｇ（ＷＳＨＰＱＦＥＫ）（配列番号８４）、ヘマグルチニン、例えば、ＨＡタグ（ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ）（配列番号７９）、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、チオレドキシン、セルロース結合ドメイン、ＲＹＩＲＳ（配列番号８５）、Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ（配列番号８６）、キチン結合ドメイン、Ｓ−ペプチド、Ｔ７ペプチド、ＳＨ２ドメイン、Ｃ末端ＲＮＡタグ、ＷＥＡＡＡＲＥＡＣＣＲＥＣＣＡＲＡ（配列番号８７）、金属結合ドメイン、例えば、亜鉛結合ドメインまたはカルシウム結合ドメイン、例えば、カルシウム結合タンパク質、例えば、カルモジュリン、トロポニンＣ、カルシニューリンＢ、ミオシン軽鎖、リカバリン、Ｓ−モジュリン、ビジニン、ＶＩＬＩＰ、ニューロカルシン、ヒポカルシン、フリクエニン、カルトラクチン、カルパイン大サブユニット、Ｓ１００タンパク質、パルブアルブミン、カルビンジンＤ９Ｋ、カルビンジンＤ２８Ｋ及びカルレチニンに由来するものなど、インテイン、ビオチン、ストレプトアビジン、ＭｙｏＤ、Ｉｄ、ロイシンジッパー配列、ならびにマルトース結合タンパク質が挙げられる。
【０３７９】
ＩＬ−２／多量体ポリペプチドの例
以下は、本開示の治療方法での使用に好適なＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ多量体ポリペプチドの非限定的な実施形態である。
【０３８０】
いくつかの場合において、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）図３４Ａに示されるアミノ酸配列を含むβ２−ミクログロブリン（β２Ｍ）ポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の変異ＩＬ−２ポリペプチド、ｉｉ）図３４Ｃに示されるアミノ酸配列を含む主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）重鎖ポリペプチド、ならびにｉｉｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓから選択される１つ以上のアミノ酸置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、変異ＩＬ−２ポリペプチドは、Ｈ１６Ａ及びＦ４２Ａの置換を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、Ｎ２９７Ａの置換を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、Ｌ２３４Ａの置換及びＬ２３５Ａの置換を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、Ｌ２３４Ｆの置換及びＬ２３５Ｅの置換を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、Ｌ２３４Ｆの置換、Ｌ２３５Ｅの置換、及びＰ３３１Ｓの置換を含む。いくつかの場合において、第２のポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含む。いくつかの場合において、第１のポリペプチドは、エピトープとβ２Ｍポリペプチドとの間にペプチドリンカーを含む。いくつかの場合において、第２のポリペプチドは、ａ）変異ＩＬ−２ポリペプチドの第１のコピーと変異ＩＬ−２ポリペプチドの第２のコピーとの間、ｂ）変異ＩＬ−２ポリペプチドとＭＨＣ重鎖ポリペプチドとの間、及びｃ）ＭＨＣ重鎖ポリペプチドとＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドとの間のうちの１つ以上に、ペプチドリンカーを含む。いくつかの場合において、ペプチドリンカーは、（ＧＧＧＧＳ）３（配列番号２０７）、（ＧＧＧＧＳ）４（配列番号２０８）、及びＡＡＡＧＧ（配列番号７３）から選択される。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｂに示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｃに示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｄに示されるアミノ酸配列を含む。
【０３８１】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）図３４Ａに示されるアミノ酸配列を含むβ２−ミクログロブリンポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図３４Ｂに示されるアミノ酸配列を含む変異ＩＬ−２ポリペプチド、ｉｉ）図３４Ｃに示されるアミノ酸配列を含む主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）重鎖ポリペプチド、ならびにｉｉｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓから選択される１つ以上のアミノ酸置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、Ｎ２９７Ａの置換を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、Ｌ２３４Ａの置換及びＬ２３５Ａの置換を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、Ｌ２３４Ｆの置換及びＬ２３５Ｅの置換を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、Ｌ２３４Ｆの置換、Ｌ２３５Ｅの置換、及びＰ３３１Ｓの置換を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｂに示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｃに示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｄに示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、第２のポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含む。いくつかの場合において、第１のポリペプチドは、エピトープとβ２Ｍポリペプチドとの間にペプチドリンカーを含む。いくつかの場合において、第２のポリペプチドは、ａ）変異ＩＬ−２ポリペプチドの第１のコピーと変異ＩＬ−２ポリペプチドの第２のコピーとの間、ｂ）変異ＩＬ−２ポリペプチドとＭＨＣ重鎖ポリペプチドとの間、及びｃ）ＭＨＣ重鎖ポリペプチドとＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドとの間のうちの１つ以上に、ペプチドリンカーを含む。いくつかの場合において、ペプチドリンカーは、（ＧＧＧＧＳ）３（配列番号２０７）、（ＧＧＧＧＳ）４（配列番号２０８）、及びＡＡＡＧＧ（配列番号７３）から選択される。
【０３８２】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）アミノ酸配列ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ（配列番号７７）を含むエピトープ、ｉｉ）図３４Ａに示されるアミノ酸配列を含むβ２−ミクログロブリンポリペプチドを含む、第１のポリペプチドと、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図３４Ｂに示されるアミノ酸配列を含む変異ＩＬ−２ポリペプチド、ｉｉ）図３４Ｃに示されるアミノ酸配列を含む主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）重鎖ポリペプチド、及びｉｉｉ）図３３Ａ、３３Ｂ、３３Ｃまたは３３Ｄに示されるアミノ酸配列を含むＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドを含む、第２のポリペプチドとを含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｂに示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｃに示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｄに示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、第２のポリペプチドは、変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含む。いくつかの場合において、第１のポリペプチドは、エピトープとβ２Ｍポリペプチドとの間にペプチドリンカーを含む。いくつかの場合において、第２のポリペプチドは、ａ）変異ＩＬ−２ポリペプチドの第１のコピーと変異ＩＬ−２ポリペプチドの第２のコピーとの間、ｂ）変異ＩＬ−２ポリペプチドとＭＨＣ重鎖ポリペプチドとの間、及びｃ）ＭＨＣ重鎖ポリペプチドとＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドとの間のうちの１つ以上に、ペプチドリンカーを含む。いくつかの場合において、ペプチドリンカーは、（ＧＧＧＧＳ）３（配列番号２０７）、（ＧＧＧＧＳ）４（配列番号２０８）、及びＡＡＡＧＧ（配列番号７３）から選択される。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｂに示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｃに示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの場合において、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドは、図３３Ｄに示されるアミノ酸配列を含む。
【０３８３】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、ａ）図３１に示されるアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、ｂ）図２２に示されるアミノ酸配列を含む第２のポリペプチドとを含む。
【０３８４】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、ａ）図３１に示されるアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、ｂ）図２５に示されるアミノ酸配列を含む第２のポリペプチドとを含む。
【０３８５】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、ａ）図３１に示されるアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、ａｂ）図２８に示されるアミノ酸配列を含む第２のポリペプチドとを含む。
【０３８６】
製剤、用量及び投与経路
本開示の治療方法を実施するために、ｓｙｎＴａｃは、薬学的に許容される賦形剤を含む組成剤に製剤化され得、免疫チェックポイント阻害剤は、薬学的に許容される賦形剤を含む組成剤に製剤化され得る。簡潔さのために、「活性剤」という用語は、ｓｙｎＴａｃまたは免疫チェックポイント阻害剤を指すために以下で使用される。一般に、ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイント阻害剤は、別個の組成物中に存在する。
【０３８７】
組成物は、薬学的に許容される賦形剤を含み得、賦形剤については、様々なものが当該技術分野において知られており、本明細書で詳細に論じる必要はない。薬学的に許容される賦形剤は、例えば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，１９ｔｈ  Ｅｄ．（１９９５）または最新版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ；Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９９）Ｈ．Ｃ．Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ  ７ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２０００）Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，３ｒｄ  ｅｄ．Ａｍｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃ．を含む、様々な公開物中に十分記載されている。
【０３８８】
医薬組成物は、ｓｙｎＴａｃまたは免疫チェックポイント阻害剤と、薬学的に許容される賦形剤とを含み得る。いくつかの場合において、医薬組成物は、対象への投与に好適なものであり、例えば、無菌である。例えば、いくつかの場合において、医薬組成物は、ヒト対象への投与に好適なものであり、例えば、組成物が無菌である場合、検出可能な発熱物質及び／または他の毒素を含まない。
【０３８９】
組成物は、他の成分、例えば、医薬品等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルカム、セルロース、グルコース、スクロース、マグネシウム、カーボネートなどを含み得る。組成物は、生理学的条件に近づけるために必要とされる薬学的に許容される補助物質、例えば、ｐＨ調整剤及び緩衝剤、毒性調整剤など、例えば、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、乳酸ナトリウム、塩酸塩、硫酸塩、溶媒和物（例えば、混合イオン性塩、水、有機物質）、水和物（例えば、水）などを含み得る。
【０３９０】
例えば、組成物には、水溶液、粉末形態、顆粒剤、錠剤、丸剤、坐剤、カプセル剤、懸濁剤、スプレーなどが含まれ得る。組成物は、以下に記載される様々な投与経路に応じて製剤化され得る。
【０３９１】
活性剤（ｓｙｎＴａｃまたは免疫チェックポイント阻害剤）が注射剤として組織に直接投与される場合（例えば、皮下、腹腔内、筋肉内、及び／または静脈内投与）、製剤は、即時使用可能な剤形として、または非水性形態（例えば、再構成可能な貯蔵安定性粉末）もしくは薬学的に許容される担体及び賦形剤で構成される液剤などの水性形態として、提供することができる。製剤はまた、投与後の活性剤の血清半減期を延長するように提供することもできる。例えば、タンパク質は、コロイドとして調製されたリポソーム製剤、または血清半減期を延長する他の従来技術で提供され得る。リポソームの調製には、例えば、Ｓｚｏｋａ  ｅｔ  ａｌ．１９８０  Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｂｉｏｅｎｇ．９：４６７、米国特許第４，２３５，８７１号、同第４，５０１，７２８号及び同第４，８３７，０２８号に記載されるような様々な方法が利用可能である。調製物はまた、制御放出形態または徐放性形態で提供されてもよい。
【０３９２】
非経口投与に好適な製剤の他の例には、等張無菌注射用液剤、抗酸化剤、静菌剤、及び製剤を対象のレシピエントの血液と等張にする溶質、懸濁化剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤、及び保存剤が挙げられる。例えば、主題の医薬組成物は、容器、例えば、無菌容器、例えば、注射器中に存在し得る。製剤は、アンプル及びバイアルなどの単位用量または複数回用量の密封容器で提供することができ、使用直前に注射剤用の無菌液状賦形剤、例えば、水の添加のみを要するフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存することができる。即時注射用液剤及び懸濁剤は、滅菌された散剤、顆粒剤及び錠剤から調製することができる。
【０３９３】
製剤中の活性剤（ｓｙｎＴａｃまたは免疫チェックポイント阻害剤）の濃度は、大きく変えることができ（例えば、約０．１重量％未満（通常約２重量％または少なくとも約２重量％）から２０重量％〜５０重量％までまたはそれ以上）、選択された特定の投与経路及び患者の必要性に従って、主に、液量、粘度、及び患者による因子に基づいて通常選択される。
【０３９４】
本開示は、活性剤（ｓｙｎＴａｃまたは免疫チェックポイント阻害剤）を含む容器、例えば、活性剤を含む液体組成物を含む容器を提供する。容器は、例えば、注射器、アンプルなどであってよい。いくつかの場合において、容器は、無菌である。いくつかの場合において、容器と組成物の両方が無菌である。
【０３９５】
本開示は、活性剤（ｓｙｎＴａｃまたは免疫チェックポイント阻害剤）を含む組成物（医薬組成物を含む）を提供する。組成物は、ａ）活性剤（ｓｙｎＴａｃまたは免疫チェックポイント阻害剤）と、ｂ）上記の賦形剤とを含み得る。いくつかの場合において、賦形剤は、薬学的に許容される賦形剤である。
【０３９６】
核酸または組換え発現ベクターを含む組成物
いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃは、多量体ポリペプチドそのものとして投与される。他の場合において、ｓｙｎＴａｃを多量体ポリペプチドそのものとして投与する代わりに、ｓｙｎＴａｃをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸が投与される。核酸（複数可）は、医薬組成物中に存在し得る。医薬組成物は、１つ以上の核酸を含む１つ以上の組換え発現ベクターを含み得る。薬学的に許容される賦形剤は、多種多様なものが当該技術分野において知られており、本明細書で詳細に論じる必要はない。薬学的に許容される賦形剤は、例えば、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９９）Ｈ．Ｃ．Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ  ７ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２０００）Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，３ｒｄ  ｅｄ．Ａｍｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃ．を含む、様々な公開物中に十分記載されている。
【０３９７】
医薬製剤は、本開示の核酸または組換え発現ベクターを、約０．００１％〜約９０％（ｗ／ｗ）の量で含み得る。製剤の以下の記載において、「核酸または組換え発現ベクター」は、ｓｙｎＴａｃをコードするヌクレオチド配列を含む核酸または組換え発現ベクターを含むことが理解される。
【０３９８】
核酸または組換え発現ベクターは、他の化合物または化合物の混合物との混合、カプセル化、コンジュゲート、または別の方法による会合が可能であり、かかる化合物には、例えば、リポソームまたは受容体標的分子が含まれ得る。核酸または組換え発現ベクターは、取込み、分布及び／または吸収を助ける１つ以上の成分と組み合わせて製剤にすることができる。
【０３９９】
核酸または組換え発現ベクター組成物は、限定するものではないが、錠剤、カプセル剤、ゲルカプセル剤、液状シロップ剤、軟質ゲル剤、坐剤、及び浣腸剤などの多くの可能な剤形のうちのいずれかに製剤化することができる。核酸または組換え発現ベクター組成物はまた、水性、非水性または混合媒体中の懸濁剤として製剤化することもできる。水性懸濁剤は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール及び／またはデキストランを含む、懸濁剤の粘度を高める物質を更に含有し得る。懸濁液は、安定剤も含有し得る。
【０４００】
核酸または組換え発現ベクターを含む製剤は、リポソーム製剤であり得る。本明細書で使用されるとき、「リポソーム」という用語は、球状の二重層（複数可）に配置された両親媒性脂質から構成される小胞を意味する。リポソームは、親油性材料から形成される膜と、送達される組成物を含有する水性内部とを有する、単層または多層の小胞である。カチオン性リポソームは、正に荷電したリポソームであり、負に荷電したＤＮＡ分子と相互作用して安定な複合体を形成することができる。ｐＨ感受性または負に荷電したリポソームは、ＤＮＡと複合体を形成するのではなく、ＤＮＡを捕捉すると考えられる。カチオン性及び非カチオン性のいずれのリポソームも、主題の核酸または組換え発現ベクターを送達するために使用することができる。
【０４０１】
リポソームにはまた、「立体的に安定化された」リポソームも含まれ、この用語は、本明細書で使用されるとき、１つ以上の特殊な脂質を含むリポソームを指し、この特殊な脂質は、リポソームに組み込まれると、そのような特殊な脂質を欠くリポソームと比較して循環寿命を向上させる。立体的に安定化されたリポソームの例は、リポソームの小胞形成脂質部分の一部が１つ以上の糖脂質を含むもの、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分などの１つ以上の親水性ポリマーにより誘導体化されているものである。リポソーム及びその使用は、米国特許第６，２８７，８６０号に更に記載されており、その全体が参照により本明細書に援用される。
【０４０２】
本開示の製剤及び組成物はまた、界面活性剤を含み得る。薬物製品、製剤及び乳剤における界面活性剤の使用は、当該技術分野においてよく知られている。界面活性剤及びその使用は、米国特許第６，２８７，８６０号に更に記載されている。
【０４０３】
一実施形態において、核酸の効率的な送達をもたらすために、様々な浸透促進剤が含まれる。非脂溶性薬物が細胞膜を超えて拡散することを助けるのに加えて、浸透促進剤は、脂溶性薬物の透過性も向上させる。浸透促進剤は、５つの広い分類、すなわち、界面活性剤、脂肪酸、胆汁酸塩、キレート化剤、及び非キレート化非界面活性剤のうちの１つに属するように分類され得る。浸透促進剤及びその使用は、米国特許第６，２８７，８６０号に更に記載されており、その全体が参照により本明細書に援用される。
【０４０４】
経口投与用の組成物及び製剤には、散剤または顆粒剤、微粒子、ナノ粒子、水もしくは非水性媒体中の懸濁剤もしくは液剤、カプセル剤、ゲルカプセル剤、サシェ剤、錠剤、またはミニ錠剤が含まれる。粘稠剤、矯味剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤または結合剤が望ましい場合がある。好適な経口製剤には、主題のアンチセンス核酸が、１つ以上の浸透促進剤、界面活性剤及びキレート剤とともに投与されるものが含まれる。好適な界面活性剤には、脂肪酸及び／またはそのエステルもしくは塩、胆汁酸及び／またはその塩が含まれるが、これらに限定されない。好適な胆汁酸／塩及び脂肪酸ならびにその使用は、米国特許第６，２８７，８６０号に更に記載されている。また、浸透促進剤の組み合わせ、例えば、胆汁酸／塩と組み合わせた脂肪酸／塩も好適である。例示的な好適な組み合わせは、ラウリン酸、カプリン酸及びＵＤＣＡのナトリウム塩である。更なる浸透促進剤には、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、及びポリオキシエチレン−２０−セチルエーテルが含まれるが、これらに限定されない。好適な浸透促進剤にはまた、プロピレングリコール、ジメチルスルホキシド、トリエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、２−ピロリドン及びその誘導体、テトラヒドロフルフリルアルコール、ならびにＡＺＯＮＥ（商標）が含まれる。
【０４０５】
治療方法
本開示は、ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイント阻害剤を投与することを含む、治療方法を提供する。いくつかの場合において、方法は、それを必要とする個体に、ａ）ｓｙｎＴａｃを含む第１の組成物と、ｂ）免疫チェックポイント阻害剤を含む第２の組成物とを投与することを含む。いくつかの場合において、本開示の治療方法は、それを必要とする個体に、ａ）ｓｙｎＴａｃをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の組換え発現ベクターを含む第１の組成物と、ｂ）免疫チェックポイント阻害剤を含む第２の組成物とを投与することを含む。いくつかの場合において、本開示の治療方法は、それを必要とする個体に、ａ）多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上のｍＲＮＡ分子を含む第１の組成物と、ｂ）免疫チェックポイント阻害剤を含む第２の組成物とを投与することを含む。いくつかの場合において、免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイントポリペプチドに特異的な抗体である。
【０４０６】
したがって、例えば、本開示の治療方法は、ｓｙｎＴａｃ（例えば、上記のような４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃ、ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃなど）と、免疫チェックポイントに特異的な抗体との共投与を含み得る。「共投与」とは、ｓｙｎＴａｃ（例えば、上記のような４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃ、ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃなど）と、免疫チェックポイントに特異的な抗体の両方が個体に投与されることを意味するが、ｓｙｎＴａｃと免疫チェックポイント阻害剤の両方を投与した結果である治療効果を達成するために、必ずしも同時に投与される必要はない。ｓｙｎＴａｃ（例えば、４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃ、ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃなど）及び免疫チェックポイントに特異的な抗体の投与は、実質的に同時であってよく、例えば、ｓｙｎＴａｃ（例えば、４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃ、ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃなど）は、免疫チェックポイントに特異的な抗体の投与の約１分〜約２４時間以内（例えば、約１分以内、約５分以内、約１５分以内、約３０分以内、約１時間以内、約４時間以内、約８時間以内、約１２時間以内、または約２４時間以内）に個体に投与され得る。いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃ（例えば、４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃ、ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃなど）は、免疫チェックポイントに特異的な抗体による治療を受けている個体に投与される。ｓｙｎＴａｃ（例えば、４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃ、ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃなど）及び免疫チェックポイントに特異的な抗体の投与は、異なる時間及び／または異なる頻度で行われてもよい。
【０４０７】
したがって、例えば、本開示の治療方法は、４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃと、免疫チェックポイントに特異的な抗体の共投与を含み得る。「共投与」とは、４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃと、免疫チェックポイントに特異的な抗体の両方が個体に投与されることを意味するが、ｓｙｎＴａｃと免疫チェックポイント阻害剤の両方を投与した結果である治療効果を達成するために、必ずしも同時に投与される必要はない。４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイントに特異的な抗体の投与は、実質的に同時であってよく、例えば、４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃは、免疫チェックポイントに特異的な抗体の投与の約１分〜約２４時間以内（例えば、約１分以内、約５分以内、約１５分以内、約３０分以内、約１時間以内、約４時間以内、約８時間以内、約１２時間以内、または約２４時間以内）に個体に投与され得る。いくつかの場合において、４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃは、免疫チェックポイントに特異的な抗体による治療を受けている個体に投与される。４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイントに特異的な抗体の投与は、異なる時間及び／または異なる頻度で行われてもよい。
【０４０８】
別の例として、本開示の治療方法は、ｓｙｎＴａｃ（例えば、上記のようなＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃ）と、免疫チェックポイントに特異的な抗体との共投与を含み得る。「共投与」とは、ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃと、免疫チェックポイントに特異的な抗体の両方が個体に投与されることを意味するが、ｓｙｎＴａｃと免疫チェックポイント阻害剤の両方を投与した結果である治療効果を達成するために、必ずしも同時に投与される必要はない。ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイントに特異的な抗体の投与は、実質的に同時であってよく、例えば、ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃは、免疫チェックポイントに特異的な抗体の投与の約１分〜約２４時間以内（例えば、約１分以内、約５分以内、約１５分以内、約３０分以内、約１時間以内、約４時間以内、約８時間以内、約１２時間以内、または約２４時間以内）に個体に投与され得る。いくつかの場合において、ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃは、免疫チェックポイントに特異的な抗体による治療を受けている個体に投与される。ＩＬ−２  ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイントに特異的な抗体の投与は、異なる時間及び／または異なる頻度で行われてもよい。
【０４０９】
本開示は、ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイント阻害剤を投与することを含む、治療方法を提供する。本開示の治療方法は、標的Ｔ細胞の活性を調節することができる。いくつかの場合において、例えば、標的Ｔ細胞がＣＤ８＋Ｔ細胞である場合、多量体ポリペプチドは、クラスＩのＭＨＣポリペプチド（例えば、β２−ミクログロブリン及びクラスＩのＭＨＣ重鎖）を含む。いくつかの場合において、例えば、標的Ｔ細胞がＣＤ４＋Ｔ細胞である場合、多量体ポリペプチドは、クラスＩＩのＭＨＣポリペプチド（例えば、クラスＩＩのＭＨＣα鎖；クラスＩＩのＭＨＣβ鎖）を含む。
【０４１０】
多量体ポリペプチドが、活性化ポリペプチドである免疫調節ポリペプチドを含む場合、本開示の方法は、エピトープ特異的Ｔ細胞を活性化する。いくつかの場合において、エピトープ特異的Ｔ細胞は、がん細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、エピトープ特異的Ｔ細胞を多量体ポリペプチドと接触させることは、がん細胞に対するＴ細胞の細胞傷害活性を増大させる。いくつかの場合において、エピトープ特異的Ｔ細胞は、がん細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、本開示の方法は、エピトープ特異的Ｔ細胞の数を増加させる。
【０４１１】
いくつかの場合において、エピトープ特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、本開示の方法は、ウイルス感染細胞に対するＴ細胞の細胞傷害活性を増大させる。いくつかの場合において、エピトープ特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、本開示の方法は、エピトープ特異的Ｔ細胞の数を増加させる。
【０４１２】
本開示の多量体ポリペプチドが、抑制ポリペプチドである免疫調節ポリペプチドを含む場合、本開示の方法は、エピトープ特異的Ｔ細胞を抑制する。いくつかの場合において、エピトープ特異的Ｔ細胞は、自己抗原に存在するエピトープに特異的な自己反応性Ｔ細胞であり、本開示の方法は、自己反応性Ｔ細胞の数を減少させる。
【０４１３】
いくつかの場合において、免疫調節ポリペプチドは、活性化ポリペプチドであり、多量体ポリペプチドは、エピトープ特異的Ｔ細胞を活性化させる。いくつかの場合において、エピトープは、がん関連エピトープであり、多量体ポリペプチドは、がん関連エピトープに特異的なＴ細胞の活性を増大させる。
【０４１４】
いくつかの場合において、本開示の治療方法は、がんを有する個体のがんを治療する。したがって、本開示は、個体のがんを治療する方法であって、ａ）本開示の多量体ポリペプチド、または当該多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸（例えば、発現ベクター、ｍＲＮＡなど）と、ｂ）免疫チェックポイント阻害剤とを投与することを含み、当該多量体ポリペプチドは、がんエピトープであるＴ細胞エピトープを含み、当該多量体ポリペプチドは、刺激性免疫調節ポリペプチドを含む、方法を提供する。いくつかの場合において、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤の「有効量」は、それを必要とする個体に１以上の用量で投与されたとき、当該個体におけるがん細胞の数が減少する量である。例えば、いくつかの場合において、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤の「有効量」は、それを必要とする個体に１以上の用量で投与されたとき、当該個体におけるがん細胞の数が、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤の投与前、または多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤による投与のない状態の個体におけるがん細胞の数と比較して、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％減少する量である。いくつかの場合において、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤の「有効量」は、それを必要とする個体に１以上の用量で投与されたとき、当該個体におけるがん細胞の数が検出不可能なレベルまで減少する量である。いくつかの場合において、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤の「有効量」は、それを必要とする個体に１以上の用量で投与されたとき、当該個体における腫瘍量が減少する量である。例えば、いくつかの場合において、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤の「有効量」は、それを必要とする個体に１以上の用量で投与されたとき、当該個体における腫瘍量が、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤の投与前、または多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤による投与のない状態の個体における腫瘍量と比較して、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％減少する量である。いくつかの場合において、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤の「有効量」は、それを必要とする個体に１以上の用量で投与されたとき、当該個体の生存期間が増大する量である。例えば、いくつかの場合において、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤の「有効量」は、それを必要とする個体に１以上の用量で投与されたとき、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤による投与のない状態の個体において予想される生存期間と比較して、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、３ヶ月〜６ヶ月、６ヶ月〜１年、１年〜２年、２年〜５年、５年〜１０年、または１０年を超えて当該個体の生存期間が増大する量である。
【０４１５】
いくつかの場合において、エピトープ特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、本開示の方法は、ウイルス感染細胞に対するＴ細胞の細胞傷害活性を増大させる。いくつかの場合において、エピトープ特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、本開示の方法は、エピトープ特異的Ｔ細胞の数を増加させる。
【０４１６】
上記のとおり、いくつかの場合において、主題の治療方法の実施にあたり、多量体ポリペプチドは、それを必要とする個体に、ポリペプチドそのものとして投与される。他の場合において、主題の治療方法の実施にあたり、多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸が、それを必要とする個体に投与される。したがって、他の場合において、ｓｙｎＴａｃをコードする１つ以上の核酸が、それを必要とする個体に投与される。
【０４１７】
用量−ｓｙｎＴａｃ
ｓｙｎＴａｃの好適な用量は、様々な臨床学的因子に基づいて、主治医または他の有資格医療関係者によって決定され得る。医療分野においてよく知られているように、任意のある患者に対する用量は、患者の体格、体表面積、年齢、投与される特定のポリペプチドまたは核酸、患者の性別、投与の時間及び経路、全般的な健康状態、ならびに同時に投与される他の薬物を含む、多くの因子に依存する。多量体ポリペプチド（ｓｙｎＴａｃ）は、１用量当たり１ｎｇ／ｋｇ体重〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜５ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与され得るが、前述の因子を特に考慮した上で、この例示的範囲を下回る用量または上回る用量が想定される。レジメンが連続注入である場合、１μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／分の範囲内であってもよい。多量体ポリペプチドは、約１ｍｇ／ｋｇ体重〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、約１ｍｇ／ｋｇ体重〜約５ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１５ｍｇ／ｋｇ体重、約１５ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重、約２０ｍｇ／ｋｇ体重〜約２５ｍｇ／ｋｇ体重、約２５ｍｇ／ｋｇ体重〜約３０ｍｇ／ｋｇ体重、約３０ｍｇ／ｋｇ体重〜約３５ｍｇ／ｋｇ体重、約３５ｍｇ／ｋｇ体重〜約４０ｍｇ／ｋｇ体重、または約４０ｍｇ／ｋｇ体重〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与され得る。
【０４１８】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドの好適な用量は、０．０１μｇ〜１００ｇ／ｋｇ体重、０．１μｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重、１μｇ〜１ｇ／ｋｇ体重、１０μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、１００μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、または１００μｇ〜１ｍｇ／ｋｇ体重である。当業者であれば、体液または組織において測定された投与薬剤の滞留時間及び濃度に基づいて、反復投与頻度を容易に推定することができる。治療が成功した後、疾患状態の再発を予防するために、患者に維持療法を受けさせることが望ましい場合もあり、この場合、多量体ポリペプチドは、０．０１μｇ〜１００ｇ／ｋｇ体重、０．１μｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重、１μｇ〜１ｇ／ｋｇ体重、１０μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、１００μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、または１００μｇ〜１ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の維持用量で投与される。
【０４１９】
当業者であれば、具体的な多量体ポリペプチド、症状の重症度及び副作用に対する対象の感受性に応じて、用量レベルが変わり得ることを容易に理解するであろう。所与の化合物に好ましい用量は、様々な手段により、当業者によって容易に決定される。
【０４２０】
いくつかの実施形態において、複数回用量の多量体ポリペプチド（または多量体ポリペプチドをコードする核酸または組換え発現ベクター）が投与される。多量体ポリペプチドの投与頻度は、様々な因子のいずれか、例えば、症状の重症度などに応じて変わり得る。例えば、いくつかの実施形態において、多量体ポリペプチドは、月１回、月２回、月３回、隔週（ｑｏｗ）、週１回（ｑｗ）、週２回（ｂｉｗ）、週３回（ｔｉｗ）、週４回、週５回、週６回、隔日（ｑｏｄ）、１日１回（ｑｄ）、１日２回（ｑｉｄ）、または１日３回（ｔｉｄ）投与される。
【０４２１】
多量体ポリペプチドの投与継続期間、例えば、多量体ポリペプチドが投与される期間は、様々な因子のいずれか、例えば、患者の応答などに応じて変わり得る。例えば、多量体ポリペプチドは、約１日〜約１週間、約２週間〜約４週間、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年以上に及ぶ期間にわたって投与され得る。
【０４２２】
ｓｙｎＴａｃの好適な用量は、様々な臨床学的因子に基づいて、主治医または他の有資格医療関係者によって決定され得る。医療分野においてよく知られているように、任意のある患者に対する用量は、患者の体格、体表面積、年齢、投与される特定のポリペプチドまたは核酸、患者の性別、投与の時間及び経路、全般的な健康状態、ならびに同時に投与される他の薬物を含む、多くの因子に依存する。多量体ポリペプチド（ｓｙｎＴａｃ）は、１用量当たり１ｎｇ／ｋｇ体重〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜５ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与され得るが、前述の因子を特に考慮した上で、この例示的範囲を下回る用量または上回る用量が想定される。レジメンが連続注入である場合、１μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／分の範囲内であってもよい。多量体ポリペプチドは、約１ｍｇ／ｋｇ体重〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、約１ｍｇ／ｋｇ体重〜約５ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１５ｍｇ／ｋｇ体重、約１５ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重、約２０ｍｇ／ｋｇ体重〜約２５ｍｇ／ｋｇ体重、約２５ｍｇ／ｋｇ体重〜約３０ｍｇ／ｋｇ体重、約３０ｍｇ／ｋｇ体重〜約３５ｍｇ／ｋｇ体重、約３５ｍｇ／ｋｇ体重〜約４０ｍｇ／ｋｇ体重、または約４０ｍｇ／ｋｇ体重〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与され得る。
【０４２３】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドの好適な用量は、０．０１μｇ〜１００ｇ／ｋｇ体重、０．１μｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重、１μｇ〜１ｇ／ｋｇ体重、１０μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、１００μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、または１００μｇ〜１ｍｇ／ｋｇ体重である。当業者であれば、体液または組織において測定された投与薬剤の滞留時間及び濃度に基づいて、反復投与頻度を容易に推定することができる。治療が成功した後、疾患状態の再発を予防するために、患者に維持療法を受けさせることが望ましい場合もあり、この場合、多量体ポリペプチドは、０．０１μｇ〜１００ｇ／ｋｇ体重、０．１μｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重、１μｇ〜１ｇ／ｋｇ体重、１０μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、１００μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、または１００μｇ〜１ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の維持用量で投与される。
【０４２４】
当業者であれば、具体的な多量体ポリペプチド、症状の重症度及び副作用に対する対象の感受性に応じて、用量レベルが変わり得ることを容易に理解するであろう。所与の化合物に好ましい用量は、様々な手段により、当業者によって容易に決定される。
【０４２５】
いくつかの実施形態において、複数回用量の多量体ポリペプチド（または多量体ポリペプチドをコードする核酸または組換え発現ベクター）が投与される。多量体ポリペプチドの投与頻度は、様々な因子のいずれか、例えば、症状の重症度などに応じて変わり得る。例えば、いくつかの実施形態において、多量体ポリペプチドは、月１回、月２回、月３回、隔週（ｑｏｗ）、週１回（ｑｗ）、週２回（ｂｉｗ）、週３回（ｔｉｗ）、週４回、週５回、週６回、隔日（ｑｏｄ）、１日１回（ｑｄ）、１日２回（ｑｉｄ）、または１日３回（ｔｉｄ）投与される。
【０４２６】
多量体ポリペプチドの投与継続期間、例えば、多量体ポリペプチドが投与される期間は、様々な因子のいずれか、例えば、患者の応答などに応じて変わり得る。例えば、多量体ポリペプチドは、約１日〜約１週間、約２週間〜約４週間、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年以上に及ぶ期間にわたって投与され得る。
【０４２７】
用量−免疫チェックポイント阻害剤
免疫チェックポイント阻害剤の好適な用量は、様々な臨床学的因子に基づいて、主治医または他の有資格医療関係者によって決定され得る。医療分野においてよく知られているように、任意のある患者に対する用量は、患者の体格、体表面積、年齢、投与される特定のポリペプチドまたは核酸、患者の性別、投与の時間及び経路、全般的な健康状態、ならびに同時に投与される他の薬物を含む、多くの因子に依存する。免疫チェックポイント阻害剤は、１用量当たり１ｎｇ／ｋｇ体重〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜５ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与され得るが、前述の因子を特に考慮した上で、この例示的範囲を下回る用量または上回る用量が想定される。レジメンが連続注入である場合、１μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／分の範囲内であってもよい。免疫チェックポイント阻害剤は、約１ｍｇ／ｋｇ体重〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、約１ｍｇ／ｋｇ体重〜約５ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１５ｍｇ／ｋｇ体重、約１５ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重、約２０ｍｇ／ｋｇ体重〜約２５ｍｇ／ｋｇ体重、約２５ｍｇ／ｋｇ体重〜約３０ｍｇ／ｋｇ体重、約３０ｍｇ／ｋｇ体重〜約３５ｍｇ／ｋｇ体重、約３５ｍｇ／ｋｇ体重〜約４０ｍｇ／ｋｇ体重、または約４０ｍｇ／ｋｇ体重〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与され得る。
【０４２８】
いくつかの場合において、免疫チェックポイント阻害剤の好適な用量は、０．０１μｇ〜１００ｇ／ｋｇ体重、０．１μｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重、１μｇ〜１ｇ／ｋｇ体重、１０μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、１００μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、または１００μｇ〜１ｍｇ／ｋｇ体重である。当業者であれば、体液または組織において測定された投与薬剤の滞留時間及び濃度に基づいて、反復投与頻度を容易に推定することができる。治療が成功した後、疾患状態の再発を予防するために、患者に維持療法を受けさせることが望ましい場合もあり、この場合、免疫チェックポイント阻害剤は、０．０１μｇ〜１００ｇ／ｋｇ体重、０．１μｇ〜１０ｇ／ｋｇ体重、１μｇ〜１ｇ／ｋｇ体重、１０μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、１００μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、または１００μｇ〜１ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の維持用量で投与される。
【０４２９】
当業者であれば、具体的な免疫チェックポイント阻害剤、症状の重症度及び副作用に対する対象の感受性に応じて、用量レベルが変わり得ることを容易に理解するであろう。所与の化合物に好ましい用量は、様々な手段により、当業者によって容易に決定される。
【０４３０】
いくつかの実施形態において、複数回用量の免疫チェックポイント阻害剤が投与される。免疫チェックポイント阻害剤の投与頻度は、様々な因子のいずれか、例えば、症状の重症度などに応じて変わり得る。例えば、いくつかの実施形態において、多量体ポリペプチドは、月１回、月２回、月３回、隔週（ｑｏｗ）、週１回（ｑｗ）、週２回（ｂｉｗ）、週３回（ｔｉｗ）、週４回、週５回、週６回、隔日（ｑｏｄ）、１日１回（ｑｄ）、１日２回（ｑｉｄ）、または１日３回（ｔｉｄ）投与される。
【０４３１】
免疫チェックポイント阻害剤の投与継続期間、例えば、免疫チェックポイント阻害剤が投与される期間は、様々な因子のいずれか、例えば、患者の応答などに応じて変わり得る。例えば、免疫チェックポイント阻害剤は、約１日〜約１週間、約２週間〜約４週間、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年以上に及ぶ期間にわたって投与され得る。
【０４３２】
以下は、非限定的な例である。
【０４３３】
ペンブロリズマブは、それを必要とする個体に、３週間ごとに２ｍｇ／ｋｇの量で投与され得る。ペンブロリズマブは、それを必要とする個体に、３週間ごとに２００ｍｇの量で投与され得る。いくつかの場合において、本開示の方法は、臨床的便益を達成するために投与が必要とされる抗ＰＤ１の量を低下させる。例えば、いくつかの場合において、臨床的便益を達成するために投与が必要とされるペンブロリズマブの量は、ｓｙｎＴａｃによる治療がない状態における臨床的便益を達成するために投与が必要とされるペンブロリズマブの量と比較して、１０％〜５０％、または５０％を超えて低下し得る。
【０４３４】
ニボルマブは、それを必要とする個体に、２週間ごとに３ｍｇ／ｋｇの量で投与され得る。ニボルマブは、それを必要とする個体に、２週間ごとに２４０ｍｇの量で投与され得る。いくつかの場合において、本開示の方法は、臨床的便益を達成するために投与が必要とされる抗ＰＤ１の量を低下させる。例えば、いくつかの場合において、臨床的便益を達成するために投与が必要とされるニボルマブの量は、ｓｙｎＴａｃによる治療がない状態における臨床的便益を達成するために投与が必要とされるニボルマブの量と比較して、１０％〜５０％、または５０％を超えて低下し得る。
【０４３５】
アテゾリズマブは、それを必要とする個体に、３週間ごとに１２００ｍｇの量で投与され得る。いくつかの場合において、本開示の方法は、臨床的便益を達成するために投与が必要とされる抗ＰＤ１の量を低下させる。例えば、いくつかの場合において、臨床的便益を達成するために投与が必要とされるアテゾリズマブの量は、ｓｙｎＴａｃによる治療がない状態における臨床的便益を達成するために投与が必要とされるアテゾリズマブの量と比較して、１０％〜５０％、または５０％を超えて低下し得る。
【０４３６】
イピリムマブは、それを必要とする個体に、３週間ごとに３ｍｇ／ｋｇの量で投与され得る。イピリムマブは、それを必要とする個体に、３週間ごとに１０ｍｇ／ｋｇの量で投与され得る。イピリムマブは、それを必要とする個体に、１２週間ごとに１０ｍｇ／ｋｇの量で投与され得る。いくつかの場合において、本開示の方法は、臨床的便益を達成するために投与が必要とされる抗ＰＤ１の量を低下させる。例えば、いくつかの場合において、臨床的便益を達成するために投与が必要とされるイピリムマブの量は、ｓｙｎＴａｃによる治療がない状態における臨床的便益を達成するために投与が必要とされるイピリムマブの量と比較して、１０％〜５０％、または５０％を超えて低下し得る。
【０４３７】
投与経路
活性剤（多量体ポリペプチド；免疫チェックポイント阻害剤）は、ｉｎ  ｖｉｖｏ法及びｅｘ  ｖｉｖｏ法、ならびに全身及び局所投与経路を含む、薬物送達に好適な任意の利用可能な方法及び経路を使用して個体に投与される。いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃは、第１の投与経路を介して投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、第１の投与経路とは異なる第２の投与経路を介して投与される。いくつかの場合において、ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイント阻害剤は、同じ投与経路を介して投与される。
【０４３８】
従来の薬学的に許容される投与経路には、腫瘍内、腫瘍近傍、筋肉内、気管内、頭蓋内、皮下、皮内、局所適用、静脈内、動脈内、経直腸、経鼻、経口、ならびに他の経腸及び非経口の投与経路が含まれる。投与経路は、多量体ポリペプチド、免疫チェックポイント阻害剤及び／または所望の効果に応じて、組み合わせてもよいし、所望により、調節されてもよい。
【０４３９】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、静脈内投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、静脈内投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、筋肉内投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、筋肉内投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、局所投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、局所投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、腫瘍内投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、腫瘍内投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、腫瘍近傍に投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、腫瘍近傍に投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、頭蓋内投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、頭蓋内投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、皮下投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、皮下投与される。
【０４４０】
いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、静脈内投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、腫瘍近傍に投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、筋肉内投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、静脈内投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、全身投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、局所投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、腫瘍内投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、静脈内投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、全身投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、腫瘍近傍に投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、静脈内投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、頭蓋内投与される。いくつかの場合において、多量体ポリペプチドは、皮下投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、静脈内投与される。
【０４４１】
多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤は、全身または局所経路を含む、従来の薬物送達に好適な任意の利用可能な従来の方法及び経路を使用して宿主に投与され得る。一般に、本開示の方法での使用が企図される投与経路には、経腸、非経口及び吸入経路が含まれるが、必ずしもこれらに限定されない。
【０４４２】
吸入投与以外の非経口投与経路には、局所、経皮、皮下、筋肉内、眼窩内、嚢内、脊髄内、胸骨内、腫瘍内、腫瘍近傍及び静脈内経路、すなわち、消化管経路以外の任意の投与経路が含まれるが、必ずしもこれらに限定されない。非経口投与は、活性剤（ｓｙｎＴａｃまたは免疫チェックポイント阻害剤）の全身送達または局所送達をもたらすように実施され得る。全身送達が所望される場合、投与は、静脈内送達を伴い得る。
【０４４３】
治療に好適な対象
本開示の方法による治療に好適な対象には、がんを有する個体が含まれ、これには、がんであると診断された個体、がんに対する治療を受けたが、当該治療に応答しなかった個体、及びがんに対する治療を受け、当該治療に最初は応答したが、その後抵抗性となった個体が含まれる。本開示の方法による治療に好適な対象には、感染（例えば、細菌、ウイルス、原生動物などの病原体による感染）を有する個体が含まれ、これには、感染していると診断された個体、及び感染に対する治療を受けたが、当該治療に応答しなかった個体が含まれる。本開示の方法による治療に好適な対象には、細菌感染を有する個体が含まれ、これには、細菌感染であると診断された個体、及び細菌感染に対する治療を受けたが、当該治療に応答しなかった個体が含まれる。本開示の方法による治療に好適な対象には、ウイルス感染を有する個体が含まれ、これには、ウイルス感染であると診断された個体、及びウイルス感染に対する治療を受けたが、当該治療に応答しなかった個体が含まれる。本開示の方法による治療に好適な対象には、自己免疫疾患を有する個体が含まれ、これには、自己免疫疾患であると診断された個体、及び自己免疫疾患に対する治療を受けたが、当該治療に応答しなかった個体が含まれる。
【０４４４】
いくつかの場合において、本開示の方法は、免疫チェックポイント阻害剤による治療を受けている個体に、ｓｙｎＴａｃを投与することを含む。いくつかの場合において、本開示の方法は、抗ＰＤ１抗体による治療を受けている個体に、ｓｙｎＴａｃを投与することを含む。例えば、いくつかの場合において、本開示の方法は、ペンブロリズマブによる治療を受けている個体に、ｓｙｎＴａｃを投与することを含む。別の例として、いくつかの場合において、本開示の方法は、ニボルマブによる治療を受けている個体に、ｓｙｎＴａｃを投与することを含む。いくつかの場合において、本開示の方法は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体による治療を受けている個体に、ｓｙｎＴａｃを投与することを含む。例えば、いくつかの場合において、本開示の方法は、アテゾリズマブによる治療を受けている個体に、ｓｙｎＴａｃを投与することを含む。いくつかの場合において、本開示の方法は、抗ＣＴＬＡ４抗体による治療を受けている個体に、ｓｙｎＴａｃを投与することを含む。例えば、いくつかの場合において、本開示の方法は、イピリムマブによる治療を受けている個体に、ｓｙｎＴａｃを投与することを含む。別の例として、いくつかの場合において、本開示の方法は、トレメリムマブによる治療を受けている個体に、ｓｙｎＴａｃを投与することを含む。
【０４４５】
いくつかの場合において、例えば、エピトープがＨＰＶエピトープである場合、本開示の方法による治療に好適な対象は、ＨＰＶ関連がんまたはＨＰＶに起因すると考えられるがんであると診断された個体である。ＨＰＶ関連がん及びＨＰＶに起因すると考えられるがんには、例えば、頭頸部癌、子宮頸癌及び性器癌が含まれる。
【０４４６】
共刺激ポリペプチドを免疫チェックポイント阻害剤とともに個体に選択的に送達する方法
したがって、本開示は、ＩＬ−２などの共刺激ポリペプチド、または本明細書で開示されるＩＬ−２変異体などの親和性を低下させた天然共刺激ポリペプチドの変異体を、例えば、所与のエピトープに特異的なＴＣＲを標的にするように、チェックポイント阻害剤の共投与とともに、選択されたＴ細胞または選択されたＴ細胞集団に送達し、共刺激ポリペプチドとチェックポイント阻害剤の選択的送達の両方の治療効果を患者にもたらす、方法を提供する。本開示は、ＩＬ−２などの共刺激ポリペプチド、または本明細書で開示されるＩＬ−２変異体などの親和性を低下させた天然共刺激ポリペプチドの変異体を、チェックポイント阻害剤の共投与とともに、本開示の多量体ポリペプチド中に存在するエピトープに特異的なＴＣＲを持つ標的Ｔ細胞に選択的に送達し、共刺激ポリペプチドとチェックポイント阻害剤の選択的送達の両方の治療効果を患者にもたらす、方法を提供する。方法は、Ｔ細胞集団を本開示の多量体ポリペプチドと接触させることを含む。Ｔ細胞集団は、ｉ）標的Ｔ細胞と、ｉｉ）エピトープに特異的でない非標的Ｔ細胞（例えば、エピトープ特異的Ｔ細胞が結合するエピトープ以外のエピトープ（複数可）に特異的なＴ細胞）とを含む、混合集団であり得る。エピトープ特異的Ｔ細胞は、多量体ポリペプチド中に存在するエピトープ提示ペプチドに特異的であり、多量体ポリペプチドによって提供されるペプチドＨＬＡ複合体またはペプチドＭＨＣ複合体に結合する。Ｔ細胞集団を多量体ポリペプチドに接触させると、多量体ポリペプチド中に存在する共刺激ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２または親和性を低下させたＩＬ−２変異体）が、多量体ポリペプチド中に存在するエピトープに特異的なＴ細胞（複数可）に選択的に送達される。チェックポイント阻害剤は、多量体ポリペプチドと共投与され（多量体ポリペプチドの投与と同時、あるいは投与前及び／または投与後の異なる時点のいずれか）、これにより、共刺激ポリペプチドとチェックポイント阻害剤の選択的送達の両方の治療効果が患者にもたらされる。
【０４４７】
したがって、本開示は、患者に、（ｉ）上記のチェックポイント阻害剤と、（ｉｉ）ＩＬ−２などの共刺激ポリペプチド、もしくは本明細書で開示されるＩＬ−２変異体などの親和性を低下させた天然共刺激ポリペプチドの変異体、または両方の組み合わせとを、標的Ｔ細胞に選択的に送達する方法であって、Ｔ細胞の混合集団を本開示の多量体ポリペプチドと接触させることを含む、方法を提供する。Ｔ細胞の混合集団は、標的Ｔ細胞と、非標的Ｔ細胞とを含む。標的Ｔ細胞は、多量体ポリペプチド内に存在するエピトープに特異的である。Ｔ細胞の混合集団を本開示の多量体ポリペプチドに接触させると、多量体ポリペプチド内に存在する共刺激ポリペプチド（複数可）が、標的Ｔ細胞に送達される。したがって、チェックポイント阻害剤と多量体ポリペプチドの共投与（多量体ポリペプチドの投与と同時、あるいは投与前及び／または投与後の異なる時点のいずれか）は、共刺激ポリペプチドとチェックポイント阻害剤の選択的送達の両方の治療効果を患者にもたらす。
【０４４８】
例えば、本開示の多量体ポリペプチドを、ｉ）多量体ポリペプチド中に存在するエピトープに特異的な標的Ｔ細胞（複数可）と、ｉｉ）非標的Ｔ細胞（複数可）、例えば、多量体ポリペプチド中に存在するエピトープではない第２のエピトープ（複数可）に特異的なＴ細胞（複数可）とを含む、Ｔ細胞集団に接触させる。当該集団に接触させると、多量体ポリペプチド中に存在する共刺激ポリペプチド（複数可）（例えば、天然共刺激ポリペプチド（例えば、天然ＩＬ−２）または親和性を低下させた天然共刺激ポリペプチドの変異体（例えば、本明細書で開示されるＩＬ−２変異体））の選択的送達が標的Ｔ細胞にもたらされる。したがって、多量体ポリペプチドに結合する非標的Ｔ細胞は、例えば、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満、または４％未満、３％未満、２％未満または１％未満であり、結果として、多量体ポリペプチド中に存在する共刺激ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２またはＩＬ−２変異体）は、非標的Ｔ細胞には実質的に送達されない。したがって、チェックポイント阻害剤と多量体ポリペプチドの共投与（多量体ポリペプチドの投与と同時、あるいは投与前及び／または投与後の異なる時点のいずれか）は、共刺激ポリペプチドとチェックポイント阻害剤の選択的送達の両方の治療効果を患者にもたらす。
【０４４９】
いくつかの場合において、Ｔ細胞集団は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏのものである。いくつかの場合において、Ｔ細胞集団は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏであり、本開示の多量体ポリペプチドに対する標的Ｔ細胞集団の生物学的応答（例えば、Ｔ細胞の活性化及び／または増大及び／または表現型分化）は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ培養の環境で惹起される。例えば、Ｔ細胞の混合集団は、個体から取得することができ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで多量体ポリペプチドと接触させることができる。かかる接触は、定められた用量（複数可）及び／または曝露スケジュール（複数可）でのＴ細胞集団の単回または複数回の曝露を含み得る。いくつかの場合において、当該接触により、Ｔ細胞集団内の標的Ｔ細胞の選択的な結合／活性化及び／または拡大が生じ、活性化及び／または拡大された標的Ｔ細胞の集団が生成される。一例として、Ｔ細胞の混合集団は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）であり得る。例えば、患者由来のＰＢＭＣは、標準的な採血及びＰＢＭＣ濃縮技術によって取得することができ、その後、標準的なリンパ球培養条件下で０．１〜１０００ｎＭの本開示の多量体ポリペプチドに曝露される。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ培養物中の標的Ｔ細胞の存在量は、定められた用量及びスケジュールでのＴ細胞混合集団の曝露前、曝露中、及び曝露後の時点で、特定のペプチド−ＭＨＣ多量体及び／または表現型マーカー及び／または機能活性（例えば、サイトカインＥＬＩＳｐｏｔアッセイ）によってモニタリングすることができる。いくつかの場合において、抗原特異的細胞の最適な存在量及び／または表現型がｉｎ  ｖｉｔｒｏで達成されたら、活性化及び／または拡大された標的Ｔ細胞集団の全てまたは一部が個体（Ｔ細胞の混合集団が取得された個体）に投与され、当該個体は、標的Ｔ細胞の投与前にチェックポイント阻害剤の投与を既に受けており、及び／または標的Ｔ細胞の投与後にチェックポイント阻害剤の投与を受ける。
【０４５０】
いくつかの場合において、Ｔ細胞集団は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏのものである。例えば、Ｔ細胞の混合集団は、個体から取得され、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで本開示の多量体ポリペプチドと接触させる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞培養の環境における、定められた用量（複数可）及び／または曝露スケジュール（複数可）でのＴ細胞の単回または複数回の曝露を含み得る、かかる接触を使用して、当該Ｔ細胞の混合集団が、多量体ポリペプチドによって提示されるエピトープに特異的であるＴ細胞を含むかどうかを決定することができる。多量体ポリペプチドのエピトープに特異的なＴ細胞の存在は、Ｔ細胞の混合集団を含む試料を評価することによって決定することができ、Ｔ細胞集団は、エピトープに特異的でないＴ細胞（非標的Ｔ細胞）を含み、エピトープに特異的なＴ細胞（標的Ｔ細胞）を含み得る。既知のアッセイを使用して、標的Ｔ細胞の活性化及び／または増殖を検出することができ、これにより、特定の多量体ポリペプチド（ｓｙｎＴａｃ）が、個体内に存在するＴ細胞に結合するエピトープを保有しているかどうか、ひいては、当該多量体ポリペプチドが、その個体にとって、治療用組成物としての利用可能性を有するかどうかを決定することができる、ｅｘ  ｖｉｖｏアッセイが提供される。標的Ｔ細胞の活性化及び／または増殖を検出するのに好適な既知のアッセイには、例えば、Ｔ細胞の表現型及び／または抗原特異性及び／または増殖についてのフローサイトメトリーによる特性評価が含まれる。エピトープ特異的Ｔ細胞の存在を検出するそのようなアッセイ、例えば、コンパニオン診断には、多量体ポリペプチドが標的Ｔ細胞の選択的な結合／活性化及び／または拡大をもたらすかどうかを決定するための追加のアッセイ（例えば、エフェクターサイトカインＥＬＩＳｐｏｔアッセイ）及び／または適切な対照（例えば、抗原特異的及び抗原非特異的な多量体ペプチド−ＨＬＡ染色試薬）が更に含まれ得る。したがって、例えば、本開示は、個体から取得されたＴ細胞の混合集団において、目的のエピトープに結合する標的Ｔ細胞の存在を検出する方法であって、ａ）Ｔ細胞の混合集団を本開示の多量体ポリペプチドとｉｎ  ｖｉｔｒｏで接触させることであって、当該多量体ポリペプチドは、目的のエピトープを含む、接触させることと、ｂ）当該接触に応じたＴ細胞の活性化及び／または増殖を検出することであって、活性化及び／または増殖されたＴ細胞は、標的Ｔ細胞の存在を示す、検出することとを含む、方法を提供する。代替的及び／または付加的に、多量体ポリペプチドを使用して所望のＴ細胞集団の活性化及び／または拡大（増殖）が得られた場合、次いで、活性化／拡大されたＴ細胞を含むＴ細胞集団の全てまたは一部が、治療として、当該個体に投与され得る（個体は、Ｔ細胞の投与前にチェックポイント阻害剤の投与を受けており、及び／またはＴ細胞の投与後にチェックポイント阻害剤の投与を受ける）。
【０４５１】
いくつかの場合において、Ｔ細胞集団は、個体におけるｉｎ  ｖｉｖｏのものである。そのような場合、共刺激ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２または親和性を低下させたＩＬ−２）をエピトープ特異的Ｔ細胞に選択的に送達するための本開示の方法は、多量体ポリペプチドを個体に投与することを含む。
【０４５２】
共刺激ポリペプチド（例えば、ＩＬ−２または親和性を低下させたＩＬ−２）が選択的に送達されるエピトープ特異的Ｔ細胞はまた、本明細書中、「標的Ｔ細胞」とも称される。いくつかの場合において、標的Ｔ細胞は、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）である。いくつかの場合において、Ｔｒｅｇは、自己反応性Ｔ細胞の活性を阻害または抑制する。
【０４５３】
いくつかの場合において、標的Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞である。例えば、標的Ｔ細胞は、がんエピトープ（例えば、がん細胞によって提示されるエピトープ）に特異的な細胞傷害性Ｔ細胞であり得る。
【０４５４】
本開示の非限定的な態様の例
上に記載される本主題の実施形態を含む態様は、単独でも、または１つ以上の他の態様もしくは実施形態との組み合わせでも有益であり得る。前述の説明を限定することなく、態様１〜１２２、態様Ａ〜Ｚ、態様ＡＡ〜ＺＺ、及び態様ＡＡＡ〜ＢＢＢと示される本開示の特定の非限定的な態様が以下に記載される。本開示を読めば当業者には明らかであるように、個々に番号が付された態様のそれぞれは、個々に番号が付された先行の態様または後述の態様のいずれかとともに使用または組み合わせてもよい。これは、全てのそのような態様の組み合わせに対する支持を提供することを意図しており、以下に明示的に記載される態様の組み合わせに限定されるものではない。
【０４５５】
態様１．配列番号１に記載のものに対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、変異ＩＬ−２ポリペプチドであって、前記変異ＩＬ−２ポリペプチドは、配列番号１に記載のものと比較して、１つ以上のアミノ酸置換を有し、前記変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列を有するα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ−２受容体（ＩＬ２Ｒ）に対して、配列番号１のものに記載されるＩＬ−２アミノ酸配列の前記ＩＬ２Ｒに対する結合親和性と比較して、結合親和性の低下を呈する、前記変異ＩＬ−２ポリペプチド。
【０４５６】
態様２．前記変異が、Ｅ１５、Ｈ１６、Ｄ２０、Ｆ４２、Ｙ４５及びＱ１２６のうちの１つ以上の置換を含む、態様１に記載の変異ＩＬ２ポリペプチド。
【０４５７】
態様３．前記変異免疫調節ポリペプチドが、前記ＩＬ２Ｒに対して、配列番号１に記載されるＩＬ２アミノ酸配列によって示される結合親和性の１０％未満〜５０％未満の結合親和性を呈する、態様１または２に記載の変異ＩＬ２ポリペプチド。
【０４５８】
態様４．前記変異が、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＩｌｅまたはＬｅｕによるＦ４２の置換を含む、態様１〜３のいずれか１つに記載の変異ＩＬ２ポリペプチド。
【０４５９】
態様５．前記変異が、Ｆ４２及びＤ２０の置換を含む、態様１〜３のいずれか１つに記載の変異ＩＬ２ポリペプチド。
【０４６０】
態様６．前記変異が、Ｆ４２及びＨ１６の置換を含む、態様１〜３のいずれか１つに記載の変異ＩＬ２ポリペプチド。
【０４６１】
態様７．前記変異が、Ｆ４２、Ｄ２０及びＹ４５の置換を含むか、あるいは、前記変異が、Ｆ４２、Ｈ１６及びＱ１２６の置換を含む、態様１〜３のいずれか１つに記載の変異ＩＬ２ポリペプチド。
【０４６２】
態様８．
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）任意選択により、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドまたは非Ｉｇ骨格
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、多量体ポリペプチドであって、
前記多量体ポリペプチドは、１つ以上の免疫調節ドメインを含み、前記１つ以上の免疫調節ドメインは、
Ａ）前記第１のポリペプチドのＣ末端、
Ｂ）前記第２のポリペプチドのＮ末端、
Ｃ）前記第２のポリペプチドのＣ末端、または
Ｄ）前記第１のポリペプチドのＣ末端及び前記第２のポリペプチドのＮ末端
に位置し、
前記１つ以上の免疫調節ドメインのうちの少なくとも１つは、態様１〜７のいずれか１つに記載の変異ＩＬ２ポリペプチドであり、
前記多量体ポリペプチドは、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列を有するα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ−２受容体（ＩＬ２Ｒ）に対して、配列番号１に記載されるＩＬ２アミノ酸配列を含む対照多量体ポリペプチドの前記ＩＬ２Ｒポリペプチドに対する結合親和性と比較して、結合親和性の低下を呈する、前記多量体ポリペプチド。
【０４６３】
態様９．
ａ）前記第１のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）前記エピトープ、
ｉｉ）前記第１のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）前記変異ＩＬ２ポリペプチド
を含み、
ｂ）前記第２のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）前記第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド
を含む、態様８の多量体ポリペプチド。
【０４６４】
態様１０．
ａ）前記第１のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）前記エピトープ、及び
ｉｉ）前記第１のＭＨＣポリペプチド
を含み、
ｂ）前記第２のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）前記変異ＩＬ２ポリペプチド、
ｉｉ）前記第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド
を含む、態様８の多量体ポリペプチド。
【０４６５】
態様１１．
ａ）前記第１のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）前記エピトープ、及び
ｉｉ）前記第１のＭＨＣポリペプチド
を含み、
ｂ）前記第２のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）前記第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）変異ＩＬ２ポリペプチド
を含む、態様８の多量体ポリペプチド。
【０４６６】
態様１２．
ａ）前記第１のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）前記エピトープ、及び
ｉｉ）前記第１のＭＨＣポリペプチド
を含み、
ｂ）第２のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）前記変異ＩＬ２ポリペプチド、及び
ｉｉ）前記第２のＭＨＣポリペプチド
を含む、態様８の多量体ポリペプチド。
【０４６７】
態様１３．
ａ）前記第１のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）前記エピトープ、
ｉｉ）前記第１のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）前記変異ＩＬ２ポリペプチド
を含み、
ｂ）前記第２のポリペプチドが、前記第２のＭＨＣポリペプチド
を含む、態様８の多量体ポリペプチド。
【０４６８】
態様１４．前記非Ｉｇ骨格が、ＸＴＥＮポリペプチド、トランスフェリンポリペプチド、エラスチン様ポリペプチド、シルク様ポリペプチド、またはシルクエラスチン様ポリペプチドである、態様８の多量体ポリペプチド。
【０４６９】
態様１５．前記第１のＭＨＣポリペプチドがβ２−ミクログロブリンポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである、態様８〜１４のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４７０】
態様１６．前記β２−ミクログロブリンポリペプチドが、図６に記載されるアミノ酸配列のうちの１つに対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、態様１５に記載の多量体ポリペプチド。
【０４７１】
態様１７．前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−ＢまたはＨＬＡ−Ｃの重鎖である、態様１５に記載の多量体ポリペプチド。
【０４７２】
態様１８．前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、図５Ａ〜５Ｃのうちの１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、態様１５に記載の多量体ポリペプチド。
【０４７３】
態様１９．前記第１のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩＩのα鎖ポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩＩのβ鎖ポリペプチドである、態様８〜１４のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４７４】
態様２０．前記エピトープがＴ細胞エピトープである、態様８〜１９のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４７５】
態様２１．前記多量体ポリペプチドが、Ｆｃポリペプチドを含み、前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡ  Ｆｃポリペプチド、またはＩｇＭ  Ｆｃポリペプチドである、態様８〜１３及び１５〜２０のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４７６】
態様２２．前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、図４Ａ〜４Ｃに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、態様２１に記載の多量体ポリペプチド。
【０４７７】
態様２３．前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドが、非共有結合的に会合している、態様８〜２２のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４７８】
態様２４．前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドが、互いに共有結合的に連結されている、態様８〜２２のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４７９】
態様２５．前記共有結合が、ジスルフィド結合によるものである、態様２４に記載の多量体ポリペプチド。
【０４８０】
態様２６．前記第１のＭＨＣポリペプチド、または前記エピトープと前記第１のＭＨＣポリペプチドとの間のリンカーが、第１のＣｙｓ残基をもたらすアミノ酸置換を含み、前記第２のＭＨＣポリペプチドが、第２のＣｙｓ残基をもたらすアミノ酸置換を含み、前記ジスルフィド連結が、前記第１のＣｙｓ残基と前記第２のＣｙｓ残基との間にある、態様２５に記載の多量体ポリペプチド。
【０４８１】
態様２７．前記エピトープと前記第１のＭＨＣポリペプチドとの間に挿入されたリンカーを含む、態様８〜２６のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４８２】
態様２８．前記ＭＨＣポリペプチドと前記免疫調節ポリペプチドとの間に挿入されたリンカーを含む、態様８〜２６のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４８３】
態様２９．２つの変異ＩＬ２ポリペプチドを含む、態様８〜２８のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４８４】
態様３０．３つの変異ＩＬ２ポリペプチドを含む、態様８〜２８のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４８５】
態様３１．前記２つまたは３つの変異ＩＬ２ポリペプチドがタンデムに並んでおり、前記多量体ポリペプチドが前記変異ＩＬ２ポリペプチド間にリンカーを含む、態様２９または３０に記載の多量体ポリペプチド。
【０４８６】
態様３２．前記変異ＩＬ２が、Ｅ１５、Ｈ１６、Ｄ２０、Ｆ４２、Ｙ４５及びＱ１２６のうちの１つ以上の置換を含む、態様８〜２８のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４８７】
態様３３．前記変異ＩＬ２が、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、ＩｌｅまたはＬｅｕによるＦ４２の置換を含む、態様８〜２８のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０４８８】
態様３４．前記変異ＩＬ２が、Ｆ４２及びＤ２０の置換を含む、態様３３に記載の多量体ポリペプチド。
【０４８９】
態様３５．前記変異ＩＬ２が、Ｆ４２及びＨ１６の置換を含む、態様３３に記載の多量体ポリペプチド。
【０４９０】
態様３６．前記変異ＩＬ２が、Ｆ４２、Ｄ２０及びＹ４５の置換を含むか、あるいは、前記変異ＩＬ−２が、Ｆ４２、Ｈ１６及びＱ１２６の置換を含む、態様３３に記載の多量体ポリペプチド。
【０４９１】
態様３７．組換えポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、核酸であって、
ｉ）前記組換えポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ａ）エピトープ、
ｂ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド、
ｃ）免疫調節ポリペプチド、
ｄ）タンパク質分解により切断可能なリンカーまたはリボソームスキッピングシグナル、
ｅ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｆ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド
を含み、
前記免疫調節ポリペプチドは、態様１〜７のいずれか１つに記載の変異免疫調節ポリペプチドであるか、あるいは、
ｉｉ）前記組換えポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ａ）エピトープ、
ｂ）第１のＭＨＣポリペプチド、
ｃ）タンパク質分解により切断可能なリンカーまたはリボソームスキッピングシグナル、
ｄ）免疫調節ポリペプチド
ｅ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｆ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド
を含み、
前記免疫調節ポリペプチドは、態様１〜７のいずれか１つに記載の変異免疫調節ポリペプチドである、前記核酸。
【０４９２】
態様３８．前記第１のＭＨＣポリペプチドがβ２−ミクログロブリンポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである、態様３７に記載の核酸。
【０４９３】
態様３９．前記β２−ミクログロブリンポリペプチドが、図６に記載されるアミノ酸配列のうちの１つに対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、態様３８に記載の核酸。
【０４９４】
態様４０．前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−ＢまたはＨＬＡ−Ｃの重鎖である、態様３８に記載の核酸。
【０４９５】
態様４１．前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、図５Ａ〜５Ｃのいずれか１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、態様４０に記載の核酸。
【０４９６】
態様４２．前記第１のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩＩのα鎖ポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩＩのβ鎖ポリペプチドである、態様３７に記載の核酸。
【０４９７】
態様４３．前記エピトープがＴ細胞エピトープである、態様３７〜４３のいずれか１つに記載の核酸。
【０４９８】
態様４４．前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡ  Ｆｃポリペプチド、またはＩｇＭ  Ｆｃポリペプチドである、態様３７〜４３のいずれか１つに記載の核酸。
【０４９９】
態様４５．前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、図４Ａ〜４Ｃに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、態様４４に記載の核酸。
【０５００】
態様４６．前記変異ＩＬ２免疫調節ポリペプチドが、Ｅ１５、Ｈ１６、Ｄ２０、Ｆ４２、Ｙ４５及びＱ１２６のうちの１つ以上の置換を含む、態様３７〜４５のいずれか１つに記載の核酸。
【０５０１】
態様４７．前記多量体ポリペプチドが、ＣＤ７、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ＨＬＡ−Ｇ、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＨＶＥＭ、リンホトキシンβ受容体、３／ＴＲ６、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４及びＨＶＥＭから選択される第２の免疫調節ポリペプチドを含む、態様３７〜４６のいずれか１つに記載の核酸。
【０５０２】
態様４８．前記タンパク質分解により切断可能なリンカーまたはリボソームスキッピングシグナルが、
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から選択されるアミノ酸配列を含む、態様３７〜４７のいずれか１つに記載の核酸。
【０５０３】
態様４９．前記組換えポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ａ）第１のリーダーペプチド、
ｂ）前記エピトープ、
ｃ）前記第１のＭＨＣポリペプチド、
ｄ）前記免疫調節ポリペプチド、
ｅ）前記タンパク質分解により切断可能なリンカーまたはリボソームスキッピングシグナル、
ｆ）第２のリーダーペプチド、
ｇ）前記第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｈ）前記免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド
を含む、態様３１に記載の核酸。
【０５０４】
態様５０．前記第１のリーダーペプチド及び前記第２のリーダーペプチドが、β２Ｍリーダーペプチドである、態様４９に記載の核酸。
【０５０５】
態様５１．前記ヌクレオチド配列が、転写制御要素に作動可能に連結される、態様３７〜５０のいずれか１つに記載の核酸。
【０５０６】
態様５２．前記転写制御要素が、真核細胞において機能するプロモーターである、態様５１に記載の核酸。
【０５０７】
態様５３．前記第１のＭＨＣポリペプチド、または前記エピトープと前記第１のＭＨＣポリペプチドとの間のリンカーが、第１のＣｙｓ残基をもたらすアミノ酸置換を含み、前記第２のＭＨＣポリペプチドが、第２のＣｙｓ残基をもたらすアミノ酸置換を含み、前記第１のＣｙｓ残基及び前記第２のＣｙｓ残基が、前記第１のＭＨＣポリペプチドと前記第２のＭＨＣポリペプチドとの間のジスルフィド連結をもたらす、態様３７〜５２のいずれか１つに記載の核酸。
【０５０８】
態様５４．態様３７〜５２のいずれか１つに記載の核酸を含む、組換え発現ベクター。
【０５０９】
態様５５．前記ベクターがウイルスベクターまたは非ウイルスベクターである、態様５４に記載の組換え発現ベクター。
【０５１０】
態様５６．態様４８〜５５に記載の組換え発現ベクターにより遺伝子改変された、宿主細胞。
【０５１１】
態様５７．前記宿主細胞がｉｎ  ｖｉｔｒｏのものである、態様５６に記載の宿主細胞。
【０５１２】
態様５８．前記宿主細胞が、当該細胞が内因性ＭＨＣ  β２−ミクログロブリンポリペプチドを産生しないように遺伝子改変される、態様５７に記載の宿主細胞。
【０５１３】
態様５９．
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン
を含む第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
前記免疫調節ドメインは、態様１〜７のいずれか１つに記載の変異ＩＬ２ポリペプチドである、第１の核酸と、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド
を含む第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、第１の核酸と
を含む、組成物。
【０５１４】
態様６０．
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド
を含む第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、第１の核酸と、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）免疫調節ドメインであって、態様１〜７のいずれか１つに記載の変異ＩＬ２ポリペプチドである、前記免疫調節ドメイン、
ｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド
を含む第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、第１の核酸と
を含む、組成物。
【０５１５】
態様６１．前記第１の核酸及び／または前記第２の核酸が、組換え発現ベクター中に存在する、態様５９または６０に記載の組成物。
【０５１６】
態様６２．態様５９〜６１のいずれか１つに記載の組成物により遺伝子改変された、宿主細胞。
【０５１７】
態様６３．態様８〜３６のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチドを産生する方法であって、
ａ）態様５６〜５８及び６２のいずれか１つに記載の宿主細胞を、前記宿主細胞が前記多量体ポリペプチドを合成する条件下における培養培地中でｉｎ  ｖｉｔｒｏ培養することと、
ｂ）前記宿主細胞及び／または前記培養培地から前記多量体ポリペプチドを単離することと
を含む、前記方法。
【０５１８】
態様６４．前記第２のポリペプチドが親和性タグを含み、前記単離することが、前記細胞によって産生された前記多量体ポリペプチドを、前記親和性タグに対する結合パートナーと接触させることを含み、前記結合パートナーが固定化されることにより、前記多量体ポリペプチドが固定化される、態様６３に記載の方法。
【０５１９】
態様６５．前記固定化された多量体ポリペプチドを溶出することを含む、態様６４に記載の方法。
【０５２０】
態様６６．エピトープ特異的Ｔ細胞を選択的に活性化する方法であって、前記Ｔ細胞を、態様８〜３６のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチドと接触させることを含み、前記接触させることが、前記エピトープ特異的Ｔ細胞を選択的に活性化させる、前記方法。
【０５２１】
態様６７．前記接触させることが、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる、態様６６に記載の方法。
【０５２２】
態様６８．前記接触させることが、ｉｎ  ｖｉｖｏで行われる、態様６６に記載の方法。
【０５２３】
態様６９．前記エピトープががん関連エピトープであり、前記投与することが、前記がん関連エピトープに特異的なＴ細胞の活性を選択的に増大させる、態様６６に記載の方法。
【０５２４】
態様７０．個体のがんを治療する方法であって、前記個体に、
ａ）態様８〜３６のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド、または
ｂ）態様８〜３６のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、１つ以上の組換え発現ベクター、または
ｃ）態様８〜３６のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、１つ以上のｍＲＮＡ
を、有効量で投与することを含み、
前記エピトープは、がん関連エピトープであり、前記投与することは、個体において、がんエピトープ特異的Ｔ細胞を選択的に活性化するのに有効である、前記方法。
【０５２５】
態様７１．前記投与することが皮下投与である、態様７０に記載の方法。
【０５２６】
態様７２．前記投与することが静脈内投与である、態様７０に記載の方法。
【０５２７】
態様７３．前記投与することが腫瘍近傍の投与である、態様７０に記載の方法。
【０５２８】
態様７４．前記投与することが全身投与である、態様７０に記載の方法。
【０５２９】
態様７５．前記投与することが、治療部位に対して遠位への投与である、態様７０に記載の方法。
【０５３０】
態様７６．前記投与することが局所投与である、態様７０に記載の方法。
【０５３１】
態様７７．前記投与することが、治療部位または治療部位付近への投与である、態様７０に記載の方法。
【０５３２】
態様７８．
ａ）態様８〜３６のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド、及び
ｂ）薬学的に許容される賦形剤
を含む、組成物。
【０５３３】
態様７９．
ａ）態様３７〜５３のいずれか１つに記載の核酸または態様５４もしくは５５に記載の組換え発現ベクター、及び
ｂ）薬学的に許容される賦形剤
を含む、組成物。
【０５３４】
態様８０．
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）図３４Ａに示されるアミノ酸配列を含むβ２−ミクログロブリン（β２Ｍ）ポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）態様１〜７のいずれか１つに記載の変異ＩＬ−２ポリペプチド、
ｉｉ）図３４Ｃに示されるアミノ酸配列を含む主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）重鎖ポリペプチド、ならびに
ｉｉｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ（図３３Ａに示されるアミノ酸ナンバリングに基づく場合、それぞれＮ７７Ａ、Ｌ１４Ａ、Ｌ１５Ａ、Ｌ１４Ｆ、Ｌ１５Ｅ及びＰ１１１Ｓ）から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、多量体ポリペプチド。
【０５３５】
態様８１．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、Ｎ２９７Ａの置換（図３３Ａに示されるアミノ酸ナンバリングに基づくと、Ｎ７７Ａ）を含む、態様８０に記載の多量体ポリペプチド。
【０５３６】
態様８２．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、Ｌ２３４Ａの置換及びＬ２３５Ａの置換（図３３Ａに示されるアミノ酸ナンバリングに基づくと、Ｌ１４Ａ及びＬ１５Ａ）を含む、態様８０に記載の多量体ポリペプチド。
【０５３７】
態様８３．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、Ｌ２３４Ｆの置換及びＬ２３５Ｅの置換（図３３Ａに示されるアミノ酸ナンバリングに基づくと、Ｌ１４Ｆ及びＬ１５Ｅ）を含む、態様８０に記載の多量体ポリペプチド。
【０５３８】
態様８４．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、Ｌ２３４Ｆの置換、Ｌ２３５Ｅの置換及びＰ３３１Ｓ（図３３Ａに示されるアミノ酸ナンバリングに基づくと、Ｌ１４Ｆ、Ｌ１５Ｅ及びＰ１１１Ｓの置換）を含む、態様８０に記載の多量体ポリペプチド。
【０５３９】
態様８５．前記第２のポリペプチドが、前記変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含む、態様８０〜８４のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０５４０】
態様８６．前記第１のポリペプチドが、前記エピトープと前記β２Ｍポリペプチドとの間にペプチドリンカーを含む、態様８０〜８５のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０５４１】
態様８７．前記第２のポリペプチドが、
ａ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドの第１のコピーと前記変異ＩＬ−２ポリペプチドの第２のコピーとの間、
ｂ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドと前記ＭＨＣ重鎖ポリペプチドとの間、及び
ｃ）前記ＭＨＣ重鎖ポリペプチドと前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドとの間
のうちの１つ以上にペプチドリンカーを含む、態様８０〜８６のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０５４２】
態様８８．前記ペプチドリンカーが、（ＧＧＧＧＳ）３、（ＧＧＧＧＳ）４、及びＡＡＡＧＧから選択される、態様８６または８７に記載の多量体ポリペプチド。
【０５４３】
態様８９．
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）図３４Ａに示されるアミノ酸配列を含むβ２−ミクログロブリンポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）図３４Ｂに示されるアミノ酸配列を含む変異ＩＬ−２ポリペプチド、
ｉｉ）図３４Ｃに示されるアミノ酸配列を含む主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）重鎖ポリペプチド、ならびに
ｉｉｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ（図３３Ａに示されるアミノ酸ナンバリングに基づく場合、それぞれＮ７７Ａ、Ｌ１４Ａ、Ｌ１５Ａ、Ｌ１４Ｆ、Ｌ１５Ｅ及びＰ１１１Ｓ）から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含むＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、多量体ポリペプチド。
【０５４４】
態様９０．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、Ｎ２９７Ａの置換（図３３Ａに示されるアミノ酸ナンバリングに基づくと、Ｎ７７Ａ）を含む、態様８９に記載の多量体ポリペプチド。
【０５４５】
態様９１．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、Ｌ２３４Ａの置換及びＬ２３５Ａの置換（図３３Ａに示されるアミノ酸ナンバリングに基づくと、Ｌ１４Ａ及びＬ１５Ａ）を含む、態様８９に記載の多量体ポリペプチド。
【０５４６】
態様９２．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、Ｌ２３４Ｆの置換及びＬ２３５Ｅの置換（図３３Ａに示されるアミノ酸ナンバリングに基づくと、Ｌ１４Ｆ及びＬ１５Ｅ）を含む、態様８９に記載の多量体ポリペプチド。
【０５４７】
態様９３．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、Ｌ２３４Ｆの置換、Ｌ２３５Ｅの置換及びＰ３３１Ｓの置換（図３３Ａに示されるアミノ酸ナンバリングに基づくと、Ｌ１４Ｆ、Ｌ１５Ｅ及びＰ１１１Ｓ）を含む、態様８９に記載の多量体ポリペプチド。
【０５４８】
態様９４．前記第２のポリペプチドが、前記変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含む、態様８９〜９３のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０５４９】
態様９５．前記第１のポリペプチドが、前記エピトープと前記β２Ｍポリペプチドとの間にペプチドリンカーを含む、態様８９〜９４のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０５５０】
態様９６．前記第２のポリペプチドが、
ａ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドの第１のコピーと前記変異ＩＬ−２ポリペプチドの第２のコピーとの間、
ｂ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドと前記ＭＨＣ重鎖ポリペプチドとの間、及び
ｃ）前記ＭＨＣ重鎖ポリペプチドと前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドとの間
のうちの１つ以上にペプチドリンカーを含む、態様８９〜９５のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０５５１】
態様９７．前記ペプチドリンカーが、（ＧＧＧＧＳ）３、（ＧＧＧＧＳ）４、及びＡＡＡＧＧから選択される、態様９５または９６に記載の多量体ポリペプチド。
【０５５２】
態様９８．
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）アミノ酸配列ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ（配列番号７７）を含むエピトープ、
ｉｉ）図３４Ａに示されるアミノ酸配列を含むβ２−ミクログロブリンポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）図３４Ｂに示されるアミノ酸配列を含む変異ＩＬ−２ポリペプチド、
ｉｉ）図３４Ｃに示されるアミノ酸配列を含む主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）重鎖ポリペプチド、及び
ｉｉｉ）図３３Ａ、３３Ｂ、３３Ｃまたは３３Ｄに示されるアミノ酸配列を含むＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、多量体ポリペプチド。
【０５５３】
態様９９．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、図３３Ｂに示されるアミノ酸配列を含む、態様９８に記載の多量体ポリペプチド。
【０５５４】
態様１００．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、図３３Ｃに示されるアミノ酸配列を含む、態様９８に記載の多量体ポリペプチド。
【０５５５】
態様１０１．前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドが、図３３Ｄに示されるアミノ酸配列を含む、態様９８に記載の多量体ポリペプチド。
【０５５６】
態様１０２．前記第２のポリペプチドが、前記変異ＩＬ−２ポリペプチドのコピーを２つ含む、態様９８〜１０１のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０５５７】
態様１０３．前記第１のポリペプチドが、前記エピトープと前記β２Ｍポリペプチドとの間にペプチドリンカーを含む、態様９８〜１０２のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０５５８】
態様１０４．前記第２のポリペプチドが、
ａ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドの第１のコピーと前記変異ＩＬ−２ポリペプチドの第２のコピーとの間、
ｂ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドと前記ＭＨＣ重鎖ポリペプチドとの間、及び
ｃ）前記ＭＨＣ重鎖ポリペプチドと前記ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドとの間
のうちの１つ以上にペプチドリンカーを含む、態様９８〜１０３のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド。
【０５５９】
態様１０５．前記ペプチドリンカーが、（ＧＧＧＧＳ）３、（ＧＧＧＧＳ）４、及びＡＡＡＧＧから選択される、態様１０３または１０４に記載の多量体ポリペプチド。
【０５６０】
態様１０６．
ａ）図３１に示されるアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド、
ｂ）図２２に示されるアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド
を含む、多量体ポリペプチド。
【０５６１】
態様１０７．
ａ）図３１に示されるアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド、
ｂ）図２５に示されるアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド
を含む、多量体ポリペプチド。
【０５６２】
態様１０８．
ａ）図３１に示されるアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド、
ｂ）図２８に示されるアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド
を含む、多量体ポリペプチド。
【０５６３】
態様１０９．
ａ）態様８０〜１０８のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド、及び
ｂ）薬学的に許容される賦形剤
を含む医薬組成物。
【０５６４】
態様１１０．態様８０〜１０８のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチドの前記第１のポリペプチド及び／または前記第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、１つ以上の核酸。
【０５６５】
態様１１１．前記核酸（複数可）が組換え発現ベクター中に存在する、態様１１０に記載の１つ以上の核酸。
【０５６６】
態様１１２．エピトープ特異的Ｔ細胞を選択的に活性化する方法であって、前記Ｔ細胞を、態様８０〜１０８のいずれか１つに記載の前記多量体ポリペプチドと接触させることを含み、前記接触させることが、前記エピトープ特異的Ｔ細胞を選択的に活性化させる、前記方法。
【０５６７】
態様１１３．前記接触させることが、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる、態様１１２に記載の方法。
【０５６８】
態様１１４．前記接触させることが、ｉｎ  ｖｉｖｏで行われる、態様１１２に記載の方法。
【０５６９】
態様１１５．
ａ）態様８０〜１０８のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチド、または
ｂ）態様８０〜１０８のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、１つ以上の組換え発現ベクター、または
ｃ）態様８０〜１０８のいずれか１つに記載の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、１つ以上のｍＲＮＡを、個体に、有効量で投与することを含み、前記投与することが、前記個体において、エピトープに対するＴ細胞応答を誘導する、方法。
【０５７０】
態様１１６．前記投与することが皮下投与である、態様１１５に記載の方法。
【０５７１】
態様１１７．前記投与することが静脈内投与である、態様１１５に記載の方法。
【０５７２】
態様１１８．前記投与することが全身投与である、態様１１５に記載の方法。
【０５７３】
態様１１９．前記投与することが筋肉内投与である、態様１１５に記載の方法。
【０５７４】
態様１２０．前記投与することが、治療部位に対して遠位への投与である、態様１１５に記載の方法。
【０５７５】
態様１２１．前記投与することが局所投与である、態様１１５に記載の方法。
【０５７６】
態様１２２．前記投与することが、治療部位または治療部位付近への投与である、態様１１５に記載の方法。
【０５７７】
態様Ａ．免疫応答を調節することを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤を投与することを含み、
前記多量体ポリペプチドは、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）任意選択により、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドまたは非Ｉｇ骨格
を含む、第２のポリペプチドと
を含み、
前記多量体ポリペプチドは、１つ以上の免疫調節ポリペプチドを含み、前記１つ以上の免疫調節ポリペプチドは、
Ａ）前記第１のポリペプチドのＣ末端、
Ｂ）前記第２のポリペプチドのＮ末端、
Ｃ）前記第２のポリペプチドのＣ末端、または
Ｄ）前記第１のポリペプチドのＣ末端及び前記第２のポリペプチドのＮ末端
に位置し、
前記投与することは、前記個体において、免疫応答を調節する、前記方法。
【０５７８】
態様Ｂ．多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤を個体に投与することを含む、治療方法であって、
前記多量体ポリペプチドは、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）任意選択により、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドまたは非Ｉｇ骨格
を含む、第２のポリペプチドと
を含み、
前記多量体ポリペプチドは、１つ以上の免疫調節ポリペプチドを含み、前記１つ以上の免疫調節ポリペプチドは、
Ａ）前記第１のポリペプチドのＣ末端、
Ｂ）前記第２のポリペプチドのＮ末端、
Ｃ）前記第２のポリペプチドのＣ末端、または
Ｄ）前記第１のポリペプチドのＣ末端及び前記第２のポリペプチドのＮ末端
に位置し、
前記投与することは、前記個体を治療する、前記治療方法。
【０５７９】
態様Ｃ．個体のがんを治療する方法であって、多量体ポリペプチド及び免疫チェックポイント阻害剤を前記個体に投与することを含み、
前記多量体ポリペプチドは、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）任意選択により、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドまたは非Ｉｇ骨格
を含む、第２のポリペプチドと
を含み、
前記多量体ポリペプチドは、１つ以上の免疫調節ポリペプチドを含み、前記１つ以上の免疫調節ポリペプチドは、
Ａ）前記第１のポリペプチドのＣ末端、
Ｂ）前記第２のポリペプチドのＮ末端、
Ｃ）前記第２のポリペプチドのＣ末端、または
Ｄ）前記第１のポリペプチドのＣ末端及び前記第２のポリペプチドのＮ末端
に位置し、
前記投与することは、前記個体の前記がんを治療する、前記方法。
【０５８０】
態様Ｄ．多量体ポリペプチドを個体に投与することを含む、治療方法であって、前記個体は、免疫チェックポイント阻害剤による治療を受けており、
前記多量体ポリペプチドは、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）任意選択により、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドまたは非Ｉｇ骨格
を含む、第２のポリペプチドと
を含み、
前記多量体ポリペプチドは、１つ以上の免疫調節ポリペプチドを含み、前記１つ以上の免疫調節ポリペプチドは、
Ａ）前記第１のポリペプチドのＣ末端、
Ｂ）前記第２のポリペプチドのＮ末端、
Ｃ）前記第２のポリペプチドのＣ末端、または
Ｄ）前記第１のポリペプチドのＣ末端及び前記第２のポリペプチドのＮ末端
に位置し、
前記投与することは、前記個体を治療する、前記治療方法。
【０５８１】
態様Ｅ．前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、態様Ａ〜Ｄのいずれか１つに記載の方法。
【０５８２】
態様Ｆ．前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）免疫調節ドメイン、
ｉｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、態様Ａ〜Ｄのいずれか１つに記載の方法。
【０５８３】
態様Ｇ．前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）Ｉｇ  Ｆｃポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、態様Ａ〜Ｄのいずれか１つに記載の方法。
【０５８４】
態様Ｈ．前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）免疫調節ドメイン
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、態様Ａ〜Ｄのいずれか１つに記載の方法。
【０５８５】
態様Ｉ．前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）免疫調節ドメイン、及び
ｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、態様Ａ〜Ｄのいずれか１つに記載の方法。
【０５８６】
態様Ｊ．前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン
を含む、第１のポリペプチドと、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド
を含む、第２のポリペプチドと
を含む、態様Ａ〜Ｄのいずれか１つに記載の方法。
【０５８７】
態様Ｋ．前記多量体ポリペプチドの前記非Ｉｇ骨格が、ＸＴＥＮポリペプチド、トランスフェリンポリペプチド、Ｆｃ受容体ポリペプチド、エラスチン様ポリペプチド、シルク様ポリペプチド、またはシルクエラスチン様ポリペプチドである、態様Ａ〜Ｄのいずれか１つに記載の方法。
【０５８８】
態様Ｌ．前記多量体ポリペプチドの前記第１のＭＨＣポリペプチドがβ２−ミクログロブリンポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである、態様Ａ〜Ｋのいずれか１つに記載の方法。
【０５８９】
態様Ｍ．前記多量体ポリペプチドの前記β２−ミクログロブリンポリペプチドが、図６に記載されるアミノ酸配列のうちの１つに対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、態様Ｌに記載の方法。
【０５９０】
態様Ｎ．前記多量体ポリペプチドの前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−ＢまたはＨＬＡ−Ｃの重鎖である、態様Ｌに記載の方法。
【０５９１】
態様Ｏ．前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、図５Ａ〜５Ｃのうちの１つに記載されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、態様１１に記載の方法。
【０５９２】
態様Ｐ．前記多量体ポリペプチドの前記第１のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩＩのα鎖ポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドがＭＨＣクラスＩＩのβ鎖ポリペプチドである、態様Ａ〜Ｋのいずれか１つに記載の方法。
【０５９３】
態様Ｑ．前記エピトープがＴ細胞エピトープである、態様Ａ〜Ｐのいずれか１つに記載の方法。
【０５９４】
態様Ｒ．前記多量体ポリペプチドの多量体ポリペプチドが、Ｆｃポリペプチドを含み、前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡ  Ｆｃポリペプチド、またはＩｇＭ  Ｆｃポリペプチドである、態様Ａ〜Ｊのいずれか１つに記載の方法。
【０５９５】
態様Ｓ．前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、図４Ａ〜４Ｃに示されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、態様Ｒに記載の方法。
【０５９６】
態様Ｔ．前記多量体ポリペプチドの前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドが、非共有結合的に会合している、態様Ａ〜Ｓのいずれか１つに記載の方法。
【０５９７】
態様Ｕ．前記多量体ポリペプチドの前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドが、共有結合的に連結されている、態様Ａ〜Ｓのいずれか１つに記載の方法。
【０５９８】
態様Ｖ．前記共有結合が、ジスルフィド結合によるものである、態様Ｕに記載の方法。
【０５９９】
態様Ｗ．前記多量体ポリペプチドの前記第１のＭＨＣポリペプチド、または前記エピトープと前記第１のＭＨＣポリペプチドとの間のリンカーが、第１のＣｙｓ残基をもたらすアミノ酸置換を含み、前記多量体ポリペプチドの前記第２のＭＨＣポリペプチドが、第２のＣｙｓ残基をもたらすアミノ酸置換を含み、前記ジスルフィド連結が、前記第１のＣｙｓ残基と前記第２のＣｙｓ残基との間にある、態様Ｖに記載の方法。
【０６００】
態様Ｘ．前記多量体ポリペプチドが、前記エピトープと前記第１のＭＨＣポリペプチドとの間、前記免疫調節ポリペプチドと前記ＭＨＣポリペプチドとの間、または前記ＭＨＣポリペプチドと前記Ｉｇ  Ｆｃとの間にリンカーを含む、態様Ａ〜Ｋのいずれか１つに記載の方法。
【０６０１】
態様Ｙ．前記多量体ポリペプチドの前記免疫調節ポリペプチドが、４−１ＢＢＬポリペプチド、Ｂ７−１ポリペプチド、Ｂ７−２ポリペプチド、ＩＣＯＳ−Ｌポリペプチド、ＯＸ−４０Ｌポリペプチド、ＣＤ８０ポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド、ＦａｓＬポリペプチド、及びＰＤ−Ｌ２ポリペプチドから選択される、態様Ａ〜Ｋのいずれか１つに記載の方法。
【０６０２】
態様Ｚ．前記多量体ポリペプチドが２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含む、態様Ａ〜Ｙのいずれか１つに記載の方法。
【０６０３】
態様ＡＡ．前記２つ以上の免疫調節ポリペプチドがタンデムに並んでいる、態様Ｚに記載の方法。
【０６０４】
態様ＢＢ．前記免疫調節ポリペプチドが、４−１ＢＢＬポリペプチド、ＣＤ８０ポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＩＬ−２ポリペプチド、Ｂ７−１ポリペプチド、Ｂ７−２ポリペプチド、ＩＣＯＳ−Ｌポリペプチド、ＯＸ−４０Ｌポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド、ＦａｓＬポリペプチド、及びＰＤ−Ｌ２ポリペプチドから選択される、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡのいずれか１つに記載の方法。
【０６０５】
態様ＣＣ．前記免疫調節ポリペプチドが、変異免疫調節ポリペプチドであり、前記免疫調節ポリペプチドの天然型と比較して１つ以上のアミノ酸置換を有し、前記変異免疫調節ポリペプチドは、前記免疫調節ポリペプチドの前記天然型が結合する共調節ポリペプチドに対して、結合親和性の低下を呈する、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＢＢのいずれか１つに記載の方法。
【０６０６】
態様ＤＤ．前記免疫調節ポリペプチドが、配列番号１に記載のものに対して、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、変異ＩＬ−２ポリペプチドであり、前記変異ＩＬ−２ポリペプチドは、配列番号１に記載のものと比較して、１つ以上のアミノ酸置換を有し、前記変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列を有するα、β及びγポリペプチドを含むＩＬ−２受容体（ＩＬ２Ｒ）に対して、配列番号１のものに記載されるＩＬ−２アミノ酸配列の前記ＩＬ２Ｒに対する結合親和性と比較して、結合親和性の低下を呈する、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＢＢのいずれか１つに記載の方法。
【０６０７】
態様ＥＥ．前記変異ＩＬ−２ポリペプチドが、Ｅ１５、Ｈ１６、Ｄ２０、Ｆ４２、Ｙ４５及びＱ１２６のうちの１つ以上の置換を含む、態様ＤＤに記載の方法。
【０６０８】
態様ＦＦ．前記変異ＩＬ−２ポリペプチドが、
ａ）Ｆ４２及びＤ２０の置換、
ｂ）Ｆ４２及びＨ１６の置換、
ｃ）Ｆ４２、Ｄ２０及びＹ４５の置換、または
ｄ）Ｆ４２、Ｈ１６及びＱ１２６の置換
を含む、態様ＥＥに記載の方法。
【０６０９】
態様ＧＧ．前記多量体ポリペプチドが、Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓから選択される１つ以上のアミノ酸置換を含むＩｇ  Ｆｃポリペプチドを含む、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＦＦのいずれか１つに記載の方法。
【０６１０】
態様ＨＨ．前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、
ａ）Ｎ２９７Ａ置換、
ｂ）Ｌ２３４Ａ置換及びＬ２３５Ａ置換、
ｃ）Ｌ２３４Ｆ置換及びＬ２３５Ｅ置換、または
ｄ）Ｌ２３４Ｆ置換、Ｌ２３５Ｅ置換及びＰ３３１Ｓ置換
を含む、態様ＧＧに記載の方法。
【０６１１】
態様ＩＩ．前記多量体ポリペプチドの前記エピトープが、アミノ酸配列ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ（配列番号７７）を含む、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＨＨのいずれか１つに記載の方法。
【０６１２】
態様ＪＪ．前記多量体ポリペプチドの前記β２−ミクログロブリンポリペプチドが、図３４Ａに示されるアミノ酸配列を含む、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＨＨのいずれか１つに記載の方法。
【０６１３】
態様ＫＫ．前記多量体ポリペプチドの前記主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）の重鎖ポリペプチドが、図３４Ｃに示されるアミノ酸配列を含む、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＪＪのいずれか１つに記載の方法。
【０６１４】
態様ＬＬ．前記免疫チェックポイント阻害剤が、前記免疫チェックポイント阻害剤に特異的な抗体である、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＫＫのいずれか１つに記載の方法。
【０６１５】
態様ＭＭ．前記抗体がモノクローナル抗体である、態様ＬＬに記載の方法。
【０６１６】
態様ＮＮ．前記抗体が、少なくとも１つのヒト化軽鎖及び／または重鎖フレームワーク領域を含む、態様ＫＫまたはＬＬに記載の方法。
【０６１７】
態様ＯＯ．前記抗体が、Ｆｃポリペプチドを含み、前記Ｉｇ  Ｆｃポリペプチドが、ＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４  Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡ  Ｆｃポリペプチド、またはＩｇＭ  Ｆｃポリペプチドである、態様ＬＬに記載の方法。
【０６１８】
態様ＰＰ．前記抗体が、Ｆｖ断片、ナノボディまたはＦａｂ断片である、態様ＬＬに記載の方法。
【０６１９】
態様ＱＱ．前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ１２２、ＣＤ９６、ＣＤ７３、ＣＤ４７、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＳＦ１Ｒ、ＪＡＫ、ＰＩ３Ｋδ、ＰＩ３Ｋγ、ＴＡＭ、アルギナーゼ、ＣＤ１３７（４−１ＢＢとしても知られる）、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ−４、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＶＩＳＴＡ、ＣＤ９６、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１２２、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２から選択される免疫チェックポイント阻害剤に特異的な抗体である、態様ＬＬ〜ＰＰのいずれか１つに記載の方法。
【０６２０】
態様ＲＲ．前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ１に特異的な抗体である、態様ＬＬ〜ＰＰのいずれか１つに記載の方法。
【０６２１】
態様ＳＳ．前記抗体が、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、ピジリズマブまたはＢＭＳ−３９８８６である、態様ＲＲに記載の方法。
【０６２２】
態様ＴＴ．前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ−Ｌ１に特異的な抗体である、態様ＬＬ〜ＰＰのいずれか１つに記載の方法。
【０６２３】
態様ＵＵ．前記抗体が、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、ＫＮ０３５またはアベルマブである、態様ＴＴに記載の方法。
【０６２４】
態様ＶＶ．前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＴＬＡ４に特異的な抗体である、態様ＬＬ〜ＰＰのいずれか１つに記載の方法。
【０６２５】
態様ＷＷ．前記抗体が、イピリムマブまたはトレメリムマブである、態様ＶＶに記載の方法。
【０６２６】
態様ＸＸ．前記多量体ポリペプチド及び前記免疫チェックポイント阻害剤が、同じ投与経路によって投与される、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＷＷのいずれか１つに記載の方法。
【０６２７】
態様ＹＹ．前記多量体ポリペプチド及び前記免疫チェックポイント阻害剤が、異なる投与経路によって投与される、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＷＷのいずれか１つに記載の方法。
【０６２８】
態様ＺＺ．前記多量体ポリペプチドが、皮下、静脈内、腫瘍近傍及び筋肉内から選択される投与経路によって投与される、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＹＹのいずれか１つに記載の方法。
【０６２９】
態様ＡＡＡ．前記免疫チェックポイント阻害剤が、皮下、静脈内、腫瘍近傍、及び筋肉内から選択される投与経路によって投与される、態様Ａ〜Ｚ及びＡＡ〜ＹＹのいずれか１つに記載の方法。
【０６３０】
態様ＢＢＢ．前記個体がヒトである、態様Ａ〜Ｚ、ＡＡ〜ＺＺ及びＡＡＡのいずれか１つに記載の方法。
【実施例】
【０６３１】
以下の実施例は、本発明の実施法及び使用法に関する完全な開示と説明を当業者に提供するために記載されるものであり、発明者らが発明とみなすものの範囲を限定するものではなく、また、以下の実験が行われた実験の全てであることまたは以下の実験のみが行われたことを示すものでもない。使用される数（例えば量、温度など）に関しては、正確さを確保するように努めたが、いくらかの実験上の誤差及び偏差を考慮されたい。別途指定のない限り、部は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏度であり、圧力は大気圧または大気圧付近である。標準的な略語、例えば、ｂｐ：塩基対（複数可）、ｋｂ：キロベース（複数可）、ｐｌ：ピコリットル（複数可）、ｓまたはｓｅｃ：秒（複数可）、ｍｉｎ：分（複数可）、ｈまたはｈｒ：時間（複数可）、ａａ：アミノ酸（複数可）、ｋｂ：キロベース（複数可）、ｂｐ：塩基対（複数可）、ｎｔ：ヌクレオチド（複数可）、キロダルトン（複数可）：ｋＤａ、ｉ．ｍ．：筋肉内、ｉ．ｐ．：腹腔内、ｓ．ｃ．：皮下などが使用され得る。
【０６３２】
実施例１：ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの産生
一過性トランスフェクションした哺乳動物細胞によるＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの産生を分析した。図７Ａに示されるように、細胞の一過性トランスフェクションから６〜７日後の２つの異なるＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの産生レベル（培養培地中（ｍｇ／Ｌ））は、９０ｍｇ／Ｌより大きかった。
【０６３３】
哺乳動物細胞によって産生されたＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを精製し、還元及び非還元でのポリアクリルアミドゲル電気泳動にかけた。結果を図７Ｂに示す。サイズをｋＤａの単位で示す。
【０６３４】
「軽鎖」（すなわち、ＭＨＣクラスＩ軽鎖；例えば、β２Ｍを含むポリペプチド）中、または「重鎖」（すなわち、ＭＨＣクラスＩ重鎖を含むポリペプチド）中にＩＬ−２ポリペプチドが存在するＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを生成した。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの発現レベル及び安定性を分析した。
【０６３５】
ｓｙｎＴａｃは、哺乳動物細胞で産生された。図８Ａに示されるように、重鎖上にＩＬ−２を含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、軽鎖上にＩＬ−２を含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃのレベルよりも約２５倍高いレベルで産生された。
【０６３６】
哺乳動物細胞によって産生されたＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを還元及び非還元でのポリアクリルアミドゲル電気泳動にかけ、ゲルをクーマシーブルーで染色した。図８Ｂに示されるように、重鎖上にＩＬ−２を含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、軽鎖上にＩＬ−２を含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃよりも安定していた。サイズをｋＤａの単位で示す。
【０６３７】
変異ＩＬ−２を含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの発現レベルを評価した。図９は、ＩＬ−２／ｓｙｎ−Ｔａｃの発現レベルを示す。ＩＬ−２は、野生型（ｗｔ）であるか、Ｆ４２Ａ、Ｄ２０Ｋ、Ｑ１２６Ａ、Ｅ１５Ａ、Ｙ４５Ａ及びＨ１６Ａの様々な組み合わせを含む。発現レベルは、野生型ＩＬ−２を含むｓｙｎＴａｃの発現レベルに対する変化率として表す。
【０６３８】
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ中のＩＬ−２のコピー数が発現レベルに与える影響を評価した。ｓｙｎＴａｃ中に１コピー（１Ｘ）、２コピー（２Ｘ）または３コピー（３Ｘ）を含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ。様々なＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを哺乳動物細胞で産生し、発現レベルを評価した。データを図１０に示す。ＩＬ−２を１コピーまたは２コピー含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、類似の発現レベルを呈するが、ＩＬ−２を３コピー含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、より低い発現レベルを呈した。発現レベルは、ＩＬ−２を１コピー含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの発現レベルに対する倍率変化として表す。
【０６３９】
実施例２：ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃのｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性
Ｔ細胞受容体を介した標的化の特異性を最大限に達成するには、共刺激ポリペプチドのそのリガンドに対する親和性が、ＭＨＣのＴＣＲに対する親和性よりも低くなければならない。ＴＣＲに対するペプチド／ＭＨＣ親和性は、約１０μＭであり得る。
【０６４０】
Ｆ４２Ａ及びＨ１６Ａの置換を含む変異ＩＬ−２を２コピー含む、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを作製した。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃによって誘導される共刺激シグナル伝達を、抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞及び非特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞で試験した。抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞及び非特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を様々な濃度のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃと接触させた。
【０６４１】
図１１に示されるように、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞において、非特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞よりもはるかに低い濃度で、共刺激シグナル伝達を誘導した。
【０６４２】
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ結合の選択性を試験した。ＬＣＭＶまたはＯＴ１マウスの脾臓からＣＤ８＋Ｔ細胞を単離した。ＣＤ８＋Ｔ細胞を様々な濃度のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃとインキュベートし、２０分間結合させた。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、ＩｇＧ２ａ  Ｆｃを含む。ＣＤ８＋Ｔ細胞に対するＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの結合は、フィコエリトリン（ＰＥ）標識抗ＩｇＧ２ａ抗体を使用して検出した。フローサイトメトリーの使用によりＰＥ蛍光を検出して、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃに結合した細胞のパーセントを決定した。
【０６４３】
図１２に示されるように、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、ＬＣＭＶ  ＣＤ８＋Ｔ細胞に抗原特異的に結合するが、ＯＴ１  ＣＤ８＋Ｔ細胞に対しては有意な結合を示さない。したがって、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ中に存在するエピトープに特異的なＣＤ８＋Ｔ細胞に選択的に結合する。
【０６４４】
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃが標的Ｔ細胞を選択的に活性化するかどうかを決定した。ＬＣＭＶまたはＯＴ１マウスの脾臓からＣＤ８＋Ｔ細胞を単離した。使用したＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、Ｆ４２Ａの単一アミノ酸置換、またはＦ４２ＡとＨ１６Ａの置換のいずれかを含んだ。ＣＤ８＋Ｔ細胞を様々な濃度のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃで２０分間刺激した。次いで、細胞をＰＥ標識抗リン酸化ＳＴＡＴ５抗体で染色した。フローサイトメトリーの使用によりＰＥ蛍光を検出して、リン酸化ＳＴＡＴ５陽性である細胞のパーセントを決定した。リン酸化ＳＴＡＴ５は、活性化のマーカーである。
【０６４５】
図１３に示されるように、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、抗原特異的（ＬＣＭＶ）ＣＤ８＋Ｔ細胞において、非特異的（ＢＬ６）ＣＤ８＋Ｔ細胞よりもはるかに低い濃度で、ＣＤ８＋刺激を誘導した（リン酸化ＳＴＡＴ５陽性細胞の％で示されるとおり）。
【０６４６】
様々なＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの特異的活性を分析した。ＩＬ−２を１コピー、ＩＬ−２を２コピー、またはＩＬ−２を３コピー含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃであって、ＩＬ−２は、Ｆ４２Ａ、Ｄ２０Ｋ、Ｑ１２６Ａ、Ｅ１５Ａ、Ｈ１６Ａ及びＹ４５Ａの置換の様々な組み合わせを含む、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃのＣＤ８＋抗原特異的（ＬＣＭＶ）または非特異的（ＢＬ６）細胞に対する刺激について、様々な濃度で試験した。リン酸化シグナル伝達転写活性化因子５（ｐＳＴＡＴ５）が陽性であるパーセントを決定した。データを図１４Ａ〜１４Ｆに示す。
【０６４７】
実施例３：ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃのｉｎ  ｖｉｖｏ活性
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃのｉｎ  ｖｉｖｏ活性を試験した。リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、組換えＩＬ−２（ｒＩＬ−２）、または本開示のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの投与後における、抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞のｉｎ  ｖｉｖｏ倍率変化を試験した。データを図１５の左パネルに示す。データは、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがｒＩＬ−２よりも１０倍強力であることを示している。
【０６４８】
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃのｉｎ  ｖｉｖｏ特異性を試験した。ＰＢＳ、ｒＩＬ−２またはＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの投与後における、抗原特異的応答及び非抗原特異的応答を評価した。データは、ＰＢＳ、ｒＩＬ−２またはＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの投与後に抗原特異的または抗原非特異的であったリンパ節細胞のパーセントとして表す。図１５の右パネルに示されるように、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、抗原特異的応答を誘導した（Ｔ細胞増殖の指標である、カルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）の最大希釈％として表す）。対照的に、ｒＩＬ−２によって誘導された応答は、抗原特異的ではなかった。
【０６４９】
用量反応アッセイを実施した。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ（Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ）を４ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、及び１６ｍｇ／ｋｇの濃度で腹腔内投与した。結果を図１６Ａに示す。図１６Ａに示されるように、４ｍｇ／ｋｇまたは８ｍｇ／ｋｇで投与されたＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、同様の結果を示した。１６ｍｇ／ｋｇで投与されたＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、最も強力な免疫賦活作用を誘導した。
【０６５０】
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの投与経路の効果を試験した。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ（Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ）を４ｍｇ／ｋｇで皮下（ＳｕｂＱ）または腹腔内（ＩＰ）のいずれかで投与した。図１６Ｂに示されるように、皮下投与は、ＩＰ投与よりも強力な免疫賦活作用をもたらした。
【０６５１】
ＩＬ−２のコピー数が有効性に与える影響を決定した。ＩＬ−２（Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ）を１コピーまたはＩＬ−２（Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ）を２コピー含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを、ＨＰＶ  Ｅ７エピトープを有する腫瘍を持つマウスに注射した。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ中に含まれるエピトープは、ＨＰＶ  Ｅ７エピトープであった。図１７Ａ及び１７Ｂに示されるように、ＩＬ−２（Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ）を２コピー含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、腫瘍サイズの縮小において、ＩＬ−２（Ｆ４２Ａ、Ｈ１６Ａ）を１コピーのみ含むＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃよりも効果的であった。
【０６５２】
実施例４：ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃのＰＫ／ＰＤ及び安定性試験
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの薬物動態（ＰＫ）解析を実施した。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ（Ｆ４２Ａ、Ｄ２０Ｋ、Ｈ１６Ａ）を１０ｍｇ／ｋｇでＩＰ投与した。投与後の様々な時点で、血清試料を得、血清試料中のＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃのレベルを測定した。図１８に示されるように、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃの血清半減期は、約４時間であった。
【０６５３】
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを１０ｍｇ／ｋｇでＣ５７ＢＬ／６マウスにＩＰ注射し、注射から２時間後に血清を採取した。ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、Ｈｉｓ６タグを含んだ。１００ｎｇの入力タンパク質、または４０μｌの血清に相当するものをドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）にかけ、抗（Ｈｉｓ）６抗体または抗β−２Ｍ抗体でプローブした。図１９に示される結果は、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃがｉｎ  ｖｉｖｏで少なくとも２時間安定あり、そのままの状態であることを示している。
【０６５４】
ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃを４℃または３７℃で５日間維持した。０．５ｍｇの各試料（１０ｍｇ／ｍｌ）をサイズ排除クロマトグラフィーによって解析した。図２０に示されるように、ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃは、４℃または３７℃で、少なくとも５日間、安定であり、そのままの状態である。
【０６５５】
実施例５：ＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ及び抗ＰＤ１抗体の腫瘍体積に対する効果
図３５に示されるように、腫瘍を有するマウスへのＩＬ−２／ｓｙｎＴａｃ及び抗ＰＤ１抗体の投与により、腫瘍体積が減少した。
【０６５６】
実施例６：変異４−１ＢＢＬを含むｓｙｎＴａｃポリペプチドの生成及び特性評価
ｓｙｎＴａｃポリペプチドを合成し、特性評価を行った。オボアルブミン（ＯＶＡ）特異的Ｔ細胞に対する活性について、以下のｓｙｎＴａｃポリペプチドを試験した。
【０６５７】
１）Ｓｙｎ８３／５１。Ｓｙｎ８３／５１の軽鎖は、ａ）ＯＶＡ  Ｔ細胞エピトープ、ｂ）野生型４−１ＢＢＬポリペプチドのアミノ酸５０〜２５４、及びｃ）β２Ｍを含み、Ｓｙｎ８３／５１の重鎖は、ａ）ＭＨＣ重鎖、及びｂ）Ｉｇ  Ｆｃを含む。
【０６５８】
２）Ｓｙｎ２３９／３４５。Ｓｙｎ２３９／３４５の軽鎖は、ａ）ＯＶＡ  Ｔ細胞エピトープ、ｂ）野生型４−１ＢＢＬのアミノ酸８０〜２５４の三量体、及びｃ）β２Ｍを含み、Ｓｙｎ２３９／３４５の重鎖は、ａ）ＭＨＣ重鎖、及びｂ）ＩｇＧ２ａ  Ｆｃを含む。
【０６５９】
３）Ｓｙｎ３４１／３４８。Ｓｙｎ３４１／３４８の軽鎖は、ａ）ＯＶＡ  Ｔ細胞エピトープ、ｂ）野生型４−１ＢＢＬの三量体、及びｃ）β２Ｍを含み、Ｓｙｎ２３９／３４５の重鎖は、ａ）ＭＨＣ重鎖、及びｂ）ＩｇＧ２ａ  Ｆｃを含む。Ｓｙｎ３４１／３４８において、４−１ＢＢＬ三量体の第１のユニットは、野生型４−１ＢＢＬのアミノ酸５０〜２５４を含み、４−１ＢＢＬ三量体の第２及び第３のユニットは、野生型４−１ＢＢＬのアミノ酸８０〜２５４を含む。
【０６６０】
４）Ｓｙｎ３４１／３４９。Ｓｙｎ３４１／３４９の軽鎖は、ＯＶＡ  Ｔ細胞エピトープ、ｂ）４−１ＢＢＬのアミノ酸８０〜２５４の三量体であって、三量体の各ユニットにＫ１２７Ａ置換を含み、三量体の第１のユニットと第２のユニットとの間、及び第２のユニットと第３のユニットとの間にリンカーＧｌｙＳｅｒＳｅｒＳｅｒＳｅｒを含む、三量体、ならびにｃ）β２Ｍを含み、Ｓｙｎ２３９／３４５の重鎖は、ａ）ＭＨＣ重鎖、及びｂ）ＩｇＧ２ａ  Ｆｃを含む。
【０６６１】
得られたｓｙｎＴａｃヘテロ二量体を、０、１、３．１７、１０．０１、３１．６５及び１００ｎＭのｓｙｎＴａｃ濃度で、オボアルブミン特異的Ｔ細胞とともに３日間または５日間ｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養した。対照には、ａ）培地のみ、ｂ）ホルボール１２−ミリステート１３−アセテート（ＰＭＡ）とイオノフォアＡ２３１８７、及びｃ）抗ＣＤ３抗体と抗ＣＤ２８抗体を含めた。
【０６６２】
３日後及び５日後に、培養培地中のＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＮＦ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−４の濃度を決定した。加えて、ＯＶＡ特異的Ｔ細胞の生存率及びＯＶＡ特異的Ｔ細胞の増殖を決定した。
【０６６３】
データを図３８〜４６に示す。
【０６６４】
図３８〜図４６に示されるように、Ｓｙｎ３４１／３４９は、ＩＬ−２（細胞に適応するサイトカイン）の産生を誘導し、細胞傷害性サイトカインＴＮＦα及びＩＦＮ−γの産生を誘導し、また、エピトープ特異的Ｔ細胞の増殖を誘導し、生存率を高める。
【０６６５】
実施例７：ＣＨＯ細胞におけるｓｙｎＴａｃの産生
野生型（ｗｔ）４−１ＢＢＬを含むＳｙｎＴａｃ、または図４７に記載されるアミノ酸置換を含む４−１ＢＢＬを含むＳｙｎＴａｃを、ＣＨＯ細胞で一過性に発現させた。ｓｙｎＴａｃの産生量を決定した。産生量を図４７に記載する。
【０６６６】
実施例８：４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃのｉｎ  ｖｉｖｏ効果
側腹部に移植されたＨＰＶ＋ＴＣ−１肺癌を有するマウスに、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ７抗原ペプチド及び本開示の４−１ＢＢＬ  Ｋ１２７Ａ変異体を含むｓｙｎＴａｃ（図４８中、「ＣＵＥ：４−１ＢＢＬ（Ｋ１２７Ａ）」と称される）を腹腔内（ＩＰ）注射によって５ｍｇ／ｋｇで投与した。対照として、同腫瘍を有するマウスにリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を投与した。図４８に示されるように、ＰＢＳで治療したマウスと比較して、ＣＵＥ：４−１ＢＢＬ（Ｋ１２７Ａ）で治療したマウスで腫瘍体積が減少した。
【０６６７】
実施例９：４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃ及び免疫チェックポイント阻害剤の共投与のｉｎ  ｖｉｖｏ効果
図４９に示されるように、本開示の４−１ＢＢＬ  ｓｙｎＴａｃと抗ＰＤ１抗体の共投与は、マウス腫瘍モデルの腫瘍体積を減少させ、グランザイムＢ＋である腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）のパーセントを増加させた。
【０６６８】
本発明について、その具体的な実地形態を参照しながら説明してきたが、当業者であれば、本発明の本来の趣旨及び範囲から逸脱することなく、種々の変更を行うことができ、等価物を代わりに使用できることが理解されよう。更に、特定の状況、材料、物質の組成、プロセス、１つまたは複数のプロセスステップを本発明の目的、趣旨及び範囲に適合させるように、多くの改変を行ってもよい。こうした改変は全て、本明細書に添付される特許請求の範囲に含まれるものとする。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図２Ｅ】
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【図２Ｆ】
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【図２Ｇ】
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【図２Ｈ】
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【図２Ｉ】
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【図２Ｊ】
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【図２Ｋ】
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【図２Ｌ】
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【図２Ｍ】
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【図２Ｎ】
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【図２Ｏ】
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【図２Ｐ】
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【図２Ｑ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６】
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【図７Ａ】
2020514375.tif 000064
【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
2020514375.tif 000070
【図１２】
2020514375.tif 000071
【図１３】
2020514375.tif 000072
【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１４Ｃ】
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【図１４Ｄ】
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【図１４Ｅ】
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【図１４Ｆ】
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【図１５】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３Ａ】
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【図２３Ｂ】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６Ａ】
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【図２６Ｂ】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９Ａ】
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【図２９Ｂ】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６−０１】
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【図３６−０２】
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【図３６−０３】
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【図３６−０４】
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【図３６−０５】
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【図３６−０６】
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【図３６−０７】
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【図３６−０８】
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【図３６−０９】
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【図３６−１０】
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【図３６−１１】
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【図３６−１２】
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【図３６−１３】
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【図３６−１４】
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【図３６−１５】
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【図３６−１６】
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【図３６−１７】
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【図３６−１８】
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【図３６−１９】
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【図３６−２０】
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【図３６−２１】
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【図３６−２２】
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【図３６−２３】
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【図３６−２４】
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【図３６−２５】
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【図３６−２６】
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【図３６−２７】
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【図３６−２８】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７−１】
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【図４７−２】
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【図４７−３】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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