(57)【要約】  本発明は、一般に、神経変性疾患の発症または進行を治療するための剤および方法に関する。特に、本発明は、運動ニューロン疾患（ＭＮＤ）および認知症疾患または関連する症状などの神経変性疾患の発症または進行の治療において使用するためのＣＤ１４アンタゴニストに関する。本発明はさらに、そのような剤を含む組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
神経変性疾患を有する対象の末梢において哺乳動物細胞からの炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させる方法であって、膜結合型ＣＤ１４（ｍＣＤ１４）または可溶性ＣＤ１４（ｓＣＤ１４）を、末梢細胞からの炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させるために充分な量のＣＤ１４アンタゴニスト抗体と接触させることを含む、からなるまたはから本質的になる、方法。
【請求項２】
対象において神経変性疾患の発症もしくは進行またはその症状を治療する方法であって、有効量のＣＤ１４アンタゴニスト抗体を前記対象に全身投与することを含む、からなるまたはから本質的になる、方法。
【請求項３】
神経変性疾患の発症または進行を治療するためのＣＤ１４アンタゴニスト抗体の使用であって、前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が全身投与される、使用。
【請求項４】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、前記適用のための医薬として製造されたものである、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、前記対象において末梢細胞による１つまたは複数の炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させる、請求項２〜４のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項６】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体がｍＣＤ１４およびｓＣＤ１４の両方に結合する、請求項５に記載の方法または使用。
【請求項７】
前記末梢細胞が免疫細胞である、請求項１、請求項５または請求項６に記載の方法または使用。
【請求項８】
前記免疫細胞が、単球、マクロファージ、樹状細胞またはＴ細胞から選択される、請求項７に記載の方法または使用。
【請求項９】
前記炎症促進性メディエーターが、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１（ＩＬ−１）−α、ＩＬ−６、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１β、ＩＬ−８、ＩＬ−１７およびＩＬ−１８のうちの１つまたは複数から選択されるサイトカインである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項１０】
好適には前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体の投与の前に、前記対象が神経変性疾患を有するかまたは神経変性疾患を発症するリスクがあることを同定することをさらに含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項１１】
前記神経変性疾患または障害が、ＭＮＤまたは認知症から選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項１２】
前記ＭＮＤが、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、原発性側索硬化症（ＰＬＳ）、進行性筋萎縮症（ＰＭＡ）、進行性球麻痺（ＰＢＰ）、仮性球麻痺からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法または使用。
【請求項１３】
前記ＭＮＤがＡＬＳである、請求項１２に記載の方法または使用。
【請求項１４】
前記認知症が、アルツハイマー病、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）および血管性認知症からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法または使用。
【請求項１５】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、
（１）配列：
ＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨＷＹＱＱＫＡＧＱＰＰＫＳＳＩＹＲＡＡＮＬＥＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＦＣＱＱＳＹＥＤＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＧＮＱ［配列番号１］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（３Ｃ１０  ＶＬ）；および
配列：
ＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＡＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰＤＮＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＩＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＧＹＹＤＹＨＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ［配列番号２］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（３Ｃ１０  ＶＨ）
を含む、抗体；
（２）配列：
ＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＱＳ  ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＣＣＱＱＳＮＥＤＰＴＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ［配列番号３］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（２８Ｃ５  ＶＬ）；および
配列：
ＬＱＱＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＴＶＴＧＹＳＩＴＳＤＳＡＷＮＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＶＲＧＬＲＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ［配列番号４］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（２８Ｃ５  ＶＨ）
を含む、抗体；ならびに
（３）配列：
ＱＴＰＳＳＬＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＳＣＲＡＳＱＤＩＫＮＹＬＮＷＹＱＱＰＧＧＴＶＫＶＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＳＬＴＩＳＮＬＥＱＥＤＦＡＴＹＦＣＱＲＧＤＴＬＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ［配列番号５］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（１８Ｅ１２  ＶＬ）；および
配列：
ＬＥＳＧＰＧＬＶＡＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＤＩＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＴＳＧＧＴＮＹＮＳＡＦＭＳＲＬＳＩＴＫＤＮＳＥＳＱＶＦＬＫＭＮＧＬＱＴＤＤＴＧＩＹＹＣＶＲＧＤＧＮＦＹＬＹＮＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ［配列番号６］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（１８Ｅ１２  ＶＨ）
を含む、抗体
から選択される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項１６】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、請求項１３に定義される上記の抗体のＶＬおよびＶＨ  ＣＤＲ配列を含む、からなるまたはから本質的になる、請求項１５に記載の方法または使用。
【請求項１７】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、
（１）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ［配列番号７］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＲＡＡＮＬＥＳ［配列番号８］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＱＳＹＥＤＰＷＴ［配列番号９］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＳＹＡＭＳ［配列番号１０］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰＤＮＶＫＧ［配列番号１１］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＹＹＤＹＨＹ［配列番号１２］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体；
（２）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨ［配列番号１３］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＲＡＳＮＬＱＳ［配列番号１４］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＱＳＮＥＤＰＴＴ［配列番号１５］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＳＤＳＡＷＮ［配列番号１６］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ［配列番号１７］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＬＲＦＡＹ［配列番号１８］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体；ならびに
（３）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＱＤＩＫＮＹＬＮ［配列番号１９］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＹＴＳＲＬＨＳ［配列番号２０］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＲＧＤＴＬＰＷＴ［配列番号２１］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＮＹＤＩＳ［配列番号２２］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＶＩＷＴＳＧＧＴＮＹＮＳＡＦＭＳ［配列番号２３］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＤＧＮＦＹＬＹＮＦＤＹ［配列番号２４］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体
から選択される、請求項１６に記載の方法または使用。
【請求項１８】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体がヒト化されている、請求項１７に記載の方法または使用。
【請求項１９】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体がＶＬドメインおよびＶＨドメインを含み、
前記ＶＬドメインが、アミノ酸配列：
ＭＥＴＤＴＩＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＱＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ［配列番号２５］
を含み、かつ
前記ＶＨドメインが、アミノ酸配列：
ＭＫＶＬＳＬＬＹＬＬＴＡＩＰＧＩＬＳＤＶＱＬＱＱＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＴＶＴＧＹＳＩＴＳＤＳＡＷＮＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＶＲＧＬＲＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ［配列番号２６］
を含む、
請求項１８に記載の方法または使用。
【請求項２０】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、ＩＣ１４、またはその抗原結合断片である、請求項１９に記載の方法または使用。
【請求項２１】
前記ＣＤ１４アンタゴニストが、前記神経変性疾患または前記その症状を治療する１つまたは複数の補助的な抗神経変性剤と組み合わせて投与される、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項２２】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体および前記補助的な抗神経変性剤が、相乗的に有効な量で投与される、請求項２１に記載の方法または使用。
【請求項２３】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体および前記補助的な抗神経変性剤が、同時にまたは逐次的に投与される、請求項２２に記載の方法または使用。
【請求項２４】
前記補助的な抗神経変性剤が抗炎症剤である、請求項２３に記載の方法または使用。
【請求項２５】
前記抗炎症剤が補体経路阻害剤である、請求項２４に記載の方法または使用。
【請求項２６】
前記補体経路阻害剤がＣ５ａ阻害剤である、請求項２５に記載の方法または使用。
【請求項２７】
前記Ｃ５ａ阻害剤がＰＭＸ２０５またはエクリズマブである、請求項２６に記載の方法または使用。
【請求項２８】
前記補助的な抗神経変性剤が、ＣＤ４０とＣＤ４０リガンドとの相互作用を遮断する剤である、請求項２３に記載の方法または使用。
【請求項２９】
前記剤が、ＣＤ４０および／またはＣＤ４０リガンドに特異的に結合する抗体である、請求項２８に記載の方法または使用。
【請求項３０】
前記抗体がＡＴ−１５０２である、請求項２９に記載の方法または使用。
【請求項３１】
前記補助的な抗神経変性剤がリルゾールまたはエダラボンである、請求項２０に記載の使用方法。
【請求項３２】
神経変性疾患の進行もしくは発症、またはその症状を治療するための医薬組成物であって、薬学的に許容される担体または希釈剤と共にＣＤ１４アンタゴニスト抗体を含み、からなりまたはから本質的になり、前記組成物が全身投与のために配合されている、組成物。
【請求項３３】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、ｓＣＤ１４およびｍＣＤ１４の両方に結合し、かつ、対象において末梢細胞による１つまたは複数の炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させる、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記細胞が免疫細胞である、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記免疫細胞が、単球、マクロファージ、樹状細胞またはＴ細胞から選択される、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記炎症促進性メディエーターが、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１（ＩＬ−１）−α、ＩＬ−６、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１β、ＩＬ−８、ＩＬ−１７およびＩＬ−１８のうちの１つまたは複数から選択されるサイトカインである、請求項３２〜３５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
好適には前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体の投与の前に、対象が神経変性疾患を有するかまたは神経変性疾患を発症するリスクがあることを同定することをさらに含む、請求項３２〜３６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
前記神経変性疾患または障害が、ＭＮＤまたは認知症から選択される、請求項３２〜３７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記ＭＮＤが、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、原発性側索硬化症（ＰＬＳ）、進行性筋萎縮症（ＰＭＡ）、進行性球麻痺（ＰＢＰ）、仮性球麻痺からなる群から選択される、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記ＭＮＤがＡＬＳである、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記認知症が、アルツハイマー病、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）および血管性認知症からなる群から選択される、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、
（１）配列：
ＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨＷＹＱＱＫＡＧＱＰＰＫＳＳＩＹＲＡＡＮＬＥＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＦＣＱＱＳＹＥＤＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＧＮＱ［配列番号１］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（３Ｃ１０  ＶＬ）；および
配列：
ＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＡＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰＤＮＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＩＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＧＹＹＤＹＨＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ［配列番号２］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（３Ｃ１０  ＶＨ）
を含む、抗体；
（２）配列：
ＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＱＳ  ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＣＣＱＱＳＮＥＤＰＴＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ［配列番号３］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（２８Ｃ５  ＶＬ）；および
配列：
ＬＱＱＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＴＶＴＧＹＳＩＴＳＤＳＡＷＮＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＶＲＧＬＲＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ［配列番号４］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（２８Ｃ５  ＶＨ）
を含む、抗体；ならびに
（３）配列：
ＱＴＰＳＳＬＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＳＣＲＡＳＱＤＩＫＮＹＬＮＷＹＱＱＰＧＧＴＶＫＶＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＳＬＴＩＳＮＬＥＱＥＤＦＡＴＹＦＣＱＲＧＤＴＬＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ［配列番号５］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（１８Ｅ１２  ＶＬ）；および
配列：
ＬＥＳＧＰＧＬＶＡＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＤＩＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＴＳＧＧＴＮＹＮＳＡＦＭＳＲＬＳＩＴＫＤＮＳＥＳＱＶＦＬＫＭＮＧＬＱＴＤＤＴＧＩＹＹＣＶＲＧＤＧＮＦＹＬＹＮＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ［配列番号６］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（１８Ｅ１２  ＶＨ）
を含む、抗体
から選択される、請求項３２〜４１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、請求項１０に定義される上記の抗体のＶＬおよびＶＨ  ＣＤＲ配列を含む、からなるまたはから本質的になる、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、
（１）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ［配列番号７］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＲＡＡＮＬＥＳ［配列番号８］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＱＳＹＥＤＰＷＴ［配列番号９］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＳＹＡＭＳ［配列番号１０］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰＤＮＶＫＧ［配列番号１１］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＹＹＤＹＨＹ［配列番号１２］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体；
（２）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨ［配列番号１３］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＲＡＳＮＬＱＳ［配列番号１４］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＱＳＮＥＤＰＴＴ［配列番号１５］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＳＤＳＡＷＮ［配列番号１６］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ［配列番号１７］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＬＲＦＡＹ［配列番号１８］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体；ならびに
（３）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＱＤＩＫＮＹＬＮ［配列番号１９］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＹＴＳＲＬＨＳ［配列番号２０］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＲＧＤＴＬＰＷＴ［配列番号２１］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＮＹＤＩＳ［配列番号２２］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＶＩＷＴＳＧＧＴＮＹＮＳＡＦＭＳ［配列番号２３］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＤＧＮＦＹＬＹＮＦＤＹ［配列番号２４］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体
から選択される、請求項４３に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体がヒト化されている、請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体がＶＬドメインおよびＶＨドメインを含み、
前記ＶＬドメインが、アミノ酸配列：
ＭＥＴＤＴＩＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＱＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ［配列番号２５］
を含み、かつ
前記ＶＨドメインが、アミノ酸配列：
ＭＫＶＬＳＬＬＹＬＬＴＡＩＰＧＩＬＳＤＶＱＬＱＱＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＴＶＴＧＹＳＩＴＳＤＳＡＷＮＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＶＲＧＬＲＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ［配列番号２６］
を含む、
請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、ＩＣ１４、またはその抗原結合断片である、請求項４６に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
前記医薬組成物が、補助的な抗神経変性剤をさらに含み、前記補助剤が、前記疾患またはその症状を治療する、請求項３１〜４６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
前記補助的な抗神経変性剤が抗炎症剤である、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
前記抗炎症剤が補体阻害剤である、請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
前記補体阻害剤がＣ５ａ阻害剤である、請求項５０に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
前記Ｃ５ａ阻害剤がＰＭＸ２０５またはエクリズマブである、請求項５１に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
前記補助的な抗神経変性剤が、ＣＤ４０とＣＤ４０リガンドとの相互作用を遮断する剤である、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５４】
前記剤が、ＣＤ４０および／またはＣＤ４０リガンドに特異的に結合する抗体である、請求項５３に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
前記抗体がＡＴ−１５０２である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項５６】
前記補助的な抗神経変性剤がリルゾールまたはエダラボンである、請求項４８に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１７年４月２１日に出願された「Ａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ  ｍｏｔｏｒ  ｎｅｕｒｏｎｅ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  ｕｓｅｓ  ｔｈｅｒｅｆｏｒ」というタイトルのオーストラリア仮出願第２０１７９０１４６２号および２０１８年３月８日に出願された「Ａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  ｕｓｅｓ  ｔｈｅｒｅｆｏｒ」というタイトルのオーストラリア仮出願第２０１８９００７６２号への優先権を主張し、これらの仮出願の内容は、参照することによりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、一般に、神経変性疾患の発症または進行を治療するための剤および方法に関する。特に、本発明は、運動ニューロン疾患（ＭＮＤ）および認知症疾患または関連する症状などの神経変性疾患の発症または進行の治療において使用するためのＣＤ１４アンタゴニストに関する。本発明はさらに、そのような剤を含む組成物を提供する。
【背景技術】
【０００３】
神経変性疾患は、ニューロンの構造および機能の進行性喪失により特徴付けられる高度に衰弱性の状態であり、最終的にニューロンの死に繋がり、生活の質に対する有害な影響力を有し、最終的に早期の死に繋がる。周囲の家族のメンバーおよびコミュニティーに対する大きな社会的影響力もある。集団が高齢になるにつれて、神経変性障害を患う患者のために必要とされる緩和ケアは、コミュニティーに対する大きな健康上のコストとなりつつある。米国単独で、神経変性疾患患者の管理および失われる生産性は、年間数百億ドルである。マサチューセッツ州ケンブリッジのＡＬＳ  Ｔｈｅｒａｐｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅは、運動ニューロン疾患（ＭＮＤ）患者の数を米国において３０，０００人より多く、世界中で少なくとも４５０，０００人と推定している。２０１０年の認知症の全世界のコストは６０４０憶ドルと推定され、これは世界国内総生産の約１％であり、米国においてＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎは、アルツハイマー病（ＡＤ）患者のケアのコストを年間２０００億ドルと推定している。現在の傾向が続くと、このコストは、２０５０年までに年間１．１兆ドルにまで増大すると予測される。これらの衰弱性状態に対する治癒を見出すための大々的な研究が進行中であるが、神経変性の効果を後退させまたは予防するための成功裡の治療が発見されるまでに数十年かかる可能性がある。
【０００４】
最も一般的な神経変性疾患としては、ＭＮＤ、例えば、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、原発性側索硬化症（ＰＬＳ）、進行性筋萎縮症（ＰＭＡ）、進行性球麻痺（ＰＢＰ）および仮性球麻痺、および認知症（例えば、アルツハイマー病、レビー小体型認知症、すなわちレビー小体を伴う認知症（ＤＬＢ）およびパーキンソン病型認知症（ＰＤＤ）、血管性認知症および前頭側頭型認知症（ＦＴＤ））、パーキンソン病およびハンチントン病が挙げられる。
【０００５】
運動ニューロン疾患（ＭＮＤ）は、典型的に発症の４〜６年以内に死に繋がる破壊的な進行性疾患である。ＭＮＤの発生率は、年間１００，０００人当たり２〜３症例とかなり均一であり、弧発性疾患について５８〜６３歳、家族性疾患について４７〜５２歳という発症のピーク年齢を有する（Ｋｉｅｒｎａｎ  Ｍ．Ｃ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｌａｎｃｅｔ  ３７７：９４２−９５５  （２０１１））。病理学的には、ＭＮＤは、運動皮質、脳幹および脊髄における運動ニューロンの喪失により特徴付けられる。患者は、典型的に、進行性の筋委縮、麻痺、痙縮、および反射異常亢進を示し、これは最終的に呼吸筋の不全を通じて死に繋がる（Ｚｈａｏ  Ｗ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｇｌｉａ  ５８：２３１−２４３  （２０１０））。ＭＮＤの治療オプションは極度に限られている。多数の療法が齧歯動物モデルにおいて有効性を実証され、小規模な第２相臨床試験において有効であるようであったが、過去２３年間にリルゾール（Ｒｉｌｕｔｅｋ（登録商標）／Ｔｅｇｌｕｔｉｋ（登録商標））およびエダラボン（Ｒａｄｉｃａｖａ（登録商標）／Ｒａｄｉｃｕｔ（登録商標））という２つの化合物のみが米国食品医薬品局（ＦＤＡ）の承認を受けた。両者は、限られた有効性を有し、生活の質を向上させずに患者の生存を３〜４ヶ月延ばす。現在第ＩＩＩ相試験中の別の薬物はＧｅｎｅｒｖｏｎの薬物候補ＧＭ６０４であり、これは、ヒト神経系のインスリン受容体、ＩＧＦ１受容体、およびＩＧＦ２に結合する内因性胚性期チロシンキナーゼ運動ニューロン栄養因子（ｍｏｎｏｎｅｕｒｏｎｏｔｒｏｐｈｉｃ  ｆａｃｔｏｒ）調節剤である。臨床試験において筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）症状（ＭＮＤの最も一般的な形態）に関していくつもの良好な効果を示しているが、企業自身の表現によれば、薬物はそれ自体では「治癒」を与えない。治癒的ＡＬＳ試験の一貫した失敗およびＡＤ試験の９９．６％の失敗率は、単一／遺伝子標的還元主義の広汎かつ支配的な薬物開発パラダイムはＡＬＳならびに他の神経学的および神経変性多因子性疾患を治癒できないことの証拠である。これは、神経変性疾患およびその症状の治療の治療的開発における改善にかなりの余地があることを意味し、満たされていない医学上の必要性を強調する。
【０００６】
ＡＬＳは、全てのＭＮＤ症例の約６０〜７０％を占める。米国において、ＡＬＳは一般に「ルー・ゲーリッグ病」として知られ、１００，０００人当たり約７人に影響する。ＡＬＳには２つの形態があり、対象が遺伝子における遺伝性の突然変異を呈する家族性および弧発性がある。ＡＬＳ（およびＭＮＤの他の形態）に関連する突然変異を伴う遺伝子としては、ＡＬＳの最も一般的な遺伝学的原因であるＣ９ＯＲＦ７２、Ｃｕ／Ｚｎスーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ１）、ＮＥＫ１、ＴＡＲ  ＤＮＡ結合タンパク質４３（ＴＤＰ−４３）、Ｆｕｓｅｄ  ｉｎ  ｓａｒｃｏｍａ（ＦＵＳ）およびユビキリン−２（ＵＢＱＬＮ２）が挙げられる。ＶＣＰ（バロシン含有タンパク質）、ＡＬＳ２（アルシン）、ＳＥＴＸ（セナタキシン）、ＡＮＧ（アンギオゲニン）、ＰＦＮ１（プロフィリン−１）、ＭＡＴＲ３（マトリン−３）、ＣＨＣＨＤ１０（コイルドコイル−ヘリックス−コイルドコイル−ヘリックスドメイン含有１０）、ＴＵＢＡ４Ａ（チューブリン、アルファ４Ａ）、ＴＢＫ１（ＴＡＮＫ結合キナーゼ１）、Ｃ２１ｏｒｆ２およびＯＰＴＮ（オプチニューリン）などの遺伝子における突然変異もまた、小さいパーセンテージの患者において発見されている。
【０００７】
ＡＬＳの原因となる性質は様々であり、この点で疾患はスペクトル障害と考えることができる。ＡＬＳは、急速に進行する筋萎縮、構音障害および呼吸困難により特徴付けられる。筋肉とニューロンとの脱接続は、約４０ヶ月後に呼吸不全に繋がる。筋肉が機能できないことに起因して筋肉衰弱および萎縮に繋がる上位および下位運動ニューロンの変性がある。最終的に、完全な虚弱となる。一般に認知機能は残されるが、筋萎縮は患者の生活の質を大幅に低減させるのに充分である。
【０００８】
近年、神経学的疾患の進行における炎症の重要性の認識が大きくなっている。神経疾患における炎症の役割は、多発性硬化症において長い間認識されており、有意な治療的影響力を有する免疫調節薬物の導入を結果としてもたらした（Ｒａｎｓｏｈｏｆｆ，  Ｒ．  Ｍ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ．  Ｒｅｖ．  Ｎｅｕｒｏｌ．  １１，  １３４−１４２  （２０１５））。
【０００９】
脳および脊髄における免疫応答は、脳の内在性免疫細胞である小膠細胞により主に媒介される。中枢神経系（ＣＮＳ）における病的変化による活性化に応答することにより、例えば、損傷した組織からの損傷関連分子パターン（ＤＡＭＰ）のような危険シグナルの放出により、それらは第一線の防御として作用し、炎症促進性メディエーターの産生の開始および神経炎症応答の持続において鍵となる役割を果たす。ＭＮＤ患者およびマウスＭＮＤモデルの両方における運動ニューロンの損傷部位において小膠細胞活性化が研究により示されており、生きたＭＮＤ患者の脳においてＰＥＴスキャンにより検出可能な広範な小膠細胞活性化が存在する（Ｔｕｒｎｅｒ  Ｍ．Ｒ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．  Ｄｉｓ．  １５：６０１−９  （２００４）；  Ｃｏｒｃｉａ  Ｐ．，  ｅｔ  ａｌ．  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ７：６−１２  （２０１２））。ＭＮＤ患者における上位運動ニューロンの徴候の重篤度と運動皮質における小膠細胞活性化のレベルとの間の相関も実証されている（Ｔｕｒｎｅｒ  Ｍ．Ｒ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．  Ｄｉｓ．  １５：６０１−９  （２００４））。マウスＭＮＤモデルもまた、疾患進行における小膠細胞の役割を支持しており、ＭＮＤ活性化小膠細胞が疾患発症に先立ち、末期疾患を通じて疾患進行と共に増加し（Ｈｅｎｋｅｌ  Ｊ．Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  ３１：４２７−３７  （２００６）；  Ａｌｅｘｉａｎｕ  Ｍ．Ｅ．  ｅｔ  ａｌ，  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ５７：１２８２−９  （２００１））、小膠細胞活性化の強度が運動ニューロン変性に対応し、小膠細胞の活発な役割を支持することを指し示している。
【００１０】
アルツハイマーの患者の脳において多数のＤＡＭＰが同定されている。これらとしては、ＨＭＧＢ１、Ｓ１００ファミリーメンバーＳ１００Ａ９およびＳ１００Ｂ、クロモグラニン、循環ＤＮＡならびに熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）が挙げられる。ＨＳＰを例外として、これらのＤＡＭＰの全ては、疾患において上昇することが示されており、Ａβプラークと物理的に会合し、進行中の神経炎症に関与する（Ｖｅｎｅｇａｓ，  Ｃ．  ＆  Ｈｅｎｅｋａ，  Ｍ．  Ｔ．  Ｊ．  Ｌｅｕｋｏｃ．  Ｂｉｏｌ．  １０１，  ８７−９８  （２０１７））。Ａβによる小膠細胞の刺激は、サイトカインおよびケモカイン産生などの多数の炎症促進性応答の開始を結果としてもたらす。
【００１１】
小膠細胞活性化はまた、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）およびレビー小体型認知症（ＬＢＤ）における神経変性と関連付けられており、ＬＢＤは、２つの密接に関連する状態を含み、これらは、レビー小体を伴う認知症（ＤＬＢ）および高齢者における認知症の２番目に多い原因であるパーキンソン病型認知症（ＰＤＤ）である。これらの変性性脳疾患は、α−シヌクレインと呼ばれるタンパク質の異常な塊と関連付けられる。ＦＴＤは、脳の側頭葉および前頭葉の進行性の変性の結果としてもたらされる関連する状態の群であり、ＴＤＰ−４３の沈着により特徴付けられる。脳のこれらの区画は、決定、行動制御、情動および言語において重大な役割を果たす。α−シヌクレインおよびＴＤＰ−４３の両方は、ＤＡＭＰとして作用し得る。小膠細胞活性化はまた、パーキンソン病の早期におけるドーパミン作動性喪失と関連付けられている。この小膠細胞活性化はまた、認知機能と逆相関し、それが疾患病理に関係し得ることを示唆する。
【００１２】
中枢神経系の疾患の診断および療法は、高度に特異的なモノクローナル抗体を薬物として応用することから利益を得る可能性がある。しかしながら、神経変性障害の治療の開発における困難の１つは、血液脳関門（ＢＢＢ）を超えてＣＮＳ中の標的部位に薬物を送達するという問題である。これは、脳疾患を標的とする薬物の有効性を制限し、脳の疾患のために生物学的薬剤を使用することを困難とする。小さい抗体断片（Ｆｖ、Ｆａｂ）のサイズでさえも、インタクトなＢＢＢを通じた受動拡散による送達を増加させる試みを極度に制限するので、評価される方法は、脳脊髄液または脳組織への直接的な投与により障壁を回避しようとするか、または高浸透圧溶液により一時的に障壁を破壊しようとする。両方のアプローチは侵襲的技術を必要とする。
【００１３】
神経変性疾患の重篤性、および利用可能な治療オプションが限られていることに鑑みて、神経変性疾患を治療するための剤および方法の必要性が存在する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、部分的に、ＡＬＳを有する対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の外側でのＣＤ１４アンタゴニスト抗体の全身性投与は、対象の末梢における細胞による炎症促進性メディエーター（例えば、サイトカイン）の産生を阻害し、疾患進行の減弱および／またはＣＮＳにおけるＡＬＳの症状の改善を結果としてもたらし、したがって、派生的な炎症エフェクターを処置するよりもむしろ炎症性プロセスの生成および持続に関与する原因シグナルに対処するという決定から生じたものである。
【００１５】
ＣＤ１４は、可溶性形態（ｓＣＤ１４）、および、例えば、マクロファージ、単球、クッパー細胞、好中球、樹状細胞およびＢ細胞のような免疫細胞の他に、内皮細胞および上皮細胞などの様々な細胞の表面上の細胞膜結合形態（ｍＣＤ１４）の両方において存在する糖タンパク質である（Ｊｅｒｓｍａｎｎ，  ＨＰＡ，  ２００５．  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ８３：  ４６２−４６７）。
【００１６】
ＣＤ１４は、パターン認識受容体（ＰＲＲ）ファミリーを介した細胞活性化の媒介に関与する鍵となる分子であり、病原体（病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ））に由来するか、またはＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）による内因性組織損傷もしくはストレス（損傷関連分子パターン（ＤＡＭＰ））の帰結としての危険シグナルの認識、およびその後の炎症性カスケードの開始に関与する。ＣＤ１４は、例示的なＰＡＭＰである、グラム陰性細菌のエンドトキシンとしても公知のリポ多糖（ＬＰＳ）の受容体としても公知であり、血液中のＬＰＳ結合タンパク質（ＬＢＰ）からＬＰＳを受け取って複合体を形成する。ＬＰＳはまたｓＣＤ１４に結合し、結果として生じた複合体は、炎症促進性サイトカインなどの炎症促進性メディエーターのｍＣＤ１４から独立した産生を誘導することができる。可溶性ＣＤ１４とのヒトＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＯ＋メモリーＴ細胞の培養もまた、レチノイン酸関連オーファン受容体γ胸腺の上方調節およびＩＬ−１７の産生のために充分であることが示されている（Ｉｌａｒｒｅｇｕｉ  Ｊ．Ｍ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ９４：  （２０１６））。
【００１７】
グラム陰性細菌の成分であるＬＰＳに加えて、ＣＤ１４はまた、例えば、ペプチドグリカンおよびグラム陽性菌のリポタイコ酸、マイコバクテリアのリポアラビノマンナンおよびウイルスエンベロープタンパク質などの他のＰＡＭＰのための補助受容体として作用する。ＣＤ１４はまた、広範な炎症性の状況と関連付けられる組織損傷および炎症の結果としてストレスを受けた、損傷したまたは死亡する細胞から放出される内因性分子である宿主由来のＤＡＭＰリガンドを認識する。ＤＡＭＰは、ＴＬＲファミリーのメンバーとの相互作用を通じて活性を発揮し、ＣＤ１４は、ＳＯＤ１、ＴＤＰ−４３、熱ショックタンパク質ファミリーのメンバーの他に、ＨＭＧＢ１、Ｓ１００Ａおよび神経変性障害と関連付けられる様々なミスフォールディングしたタンパク質などの多数のこれらの活性を媒介するのに必要とされると記載されている。
【００１８】
炎症促進細胞および疾患重篤度と相関するサイトカインが神経変性疾患を有する患者の循環中に存在する。炎症性単球のレベルの変化が、ＭＮＤ患者の循環中およびマウスＭＮＤモデルにおいて観察されている（Ｂｕｔｏｖｓｋｙ  Ｏ．  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  １２２：３０６３  （２０１２）．；  Ｍｕｒｄｏｃｋ  Ｂ．Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｎｅｕｒｏｌ．  Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ３：ｅ２４２  （２０１６））。さらには、ＩＬ−６Ｒに対するヒト化抗体である静脈内トシリズマブを用いるＭＮＤ患者の処置を伴う小規模研究により、ＩＶ投薬が血清炎症性サイトカインレベルを減少させ、かつ患者の部分集団において疾患進行を減弱させることが実証された（Ｆｉａｌａ  Ｍ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒ．  Ｄｉｓ．  ２：１２９−１３９  （２０１３））。ＭＮＤ病理と関連付けられる炎症応答を標的化する療法が検討されてきた。しかしながら、これらは、変性および疾患を推進する一次開始因子を標的化するよりむしろ炎症のエフェクターに対処するＩＬ−６受容体を標的化することに関する。炎症性カスケードの開始および炎症促進性メディエーターの産生におけるＣＤ１４の役割に起因して、ｍＣＤ１４を介して、および直接的にｓＣＤ１４を介しての両方で、ＣＤ１４媒介性の炎症応答の阻害または減少は、炎症の効果よりむしろ原因に対処することにより神経変性疾患と関連付けられる炎症のためのより有効な治療を提供することが本明細書において提唱される。
【００１９】
本明細書に記載されるように、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体を使用する神経変性疾患を有する患者のＣＮＳの外側に位置する細胞による炎症促進性メディエーターの産生の阻害または減少は、ＣＮＳにおけるものなどの疾患の発症もしくは進行またはその症状を治療することができる。
【００２０】
したがって、一態様では、本発明は、神経変性疾患を有するか、または神経変性疾患を発症するリスクがある対象の末梢中に存在する哺乳動物細胞における炎症促進性メディエーター（例えば、サイトカイン）の産生を阻害しまたは減少させる方法を提供する。一実施形態では、これらの方法は、ｍＣＤ１４を含む末梢細胞を、細胞からの炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させるために充分な量の抗ＣＤ１４アンタゴニスト抗体と接触させることを含む、からなるまたはから本質的になる。
【００２１】
別の実施形態では、方法は、末梢循環性ｓＣＤ１４を、末梢細胞からの炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させるために充分な量の抗ＣＤ１４アンタゴニスト抗体と接触させることを含む、からなるまたはから本質的になる。
【００２２】
好適には、末梢細胞は、免疫細胞（例えば、単球、マクロファージ、樹状細胞またはＴ細胞）である。
【００２３】
炎症促進性メディエーターは、典型的に、サイトカイン、例えば、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１（ＩＬ−１）−α、ＩＬ−６、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１β、ＩＬ−８、ＩＬ−１７、またはＩＬ−１８である。
【００２４】
関連する態様では、上記に定義される方法は、神経変性疾患媒介性の症状を治療するために使用される。これらの方法は、一般に、ｍＣＤ１４を含む末梢細胞、または循環性ｓＣＤ１４を、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体、好適には、末梢細胞における炎症促進性メディエーターのＣＤ１４依存性の産生を阻害しまたは減少させるために充分な量のＣＤ１４アンタゴニスト抗体と接触させ、それにより症状を治療することを含む、からなるまたはから本質的になる。特定の実施形態では、疾患は、ＭＮＤまたは認知症である。好適には、疾患がＭＮＤ（例えば、ＡＬＳ）である場合、症状としては、例えば、進行性筋萎縮、麻痺、痙縮、呼吸変化および反射異常亢進が挙げられる。一実施形態では、疾患は認知症であり、かつ、症状としては、例えば、記憶喪失、鬱病、コミュニケーション障害、判断力低下、見当識障害、錯乱、睡眠障害、運動症状、幻覚、神経遮断薬過敏性、挙動変化ならびに発話、嚥下および歩行困難が挙げられる。
【００２５】
本発明のさらに別の態様は、対象において神経変性疾患の発症もしくは進行またはその症状を治療する方法を提供する。これらの方法は、一般に、有効量のＣＤ１４アンタゴニスト抗体を対象に全身投与し、それにより対象において神経変性疾患の発症もしくは進行、またはその症状を治療することを含む、からなるまたはから本質的になる。一部の実施形態では、対象の末梢細胞における１つまたは複数の炎症促進性メディエーターの産生は、阻害されまたは減少する。好適には、炎症促進性メディエーターはサイトカインである。
【００２６】
関連する態様では、本発明は、神経変性疾患を有するか、もしくは神経変性疾患を発症するもしくは神経変性疾患が進行するリスクがある対象における末梢細胞による１つもしくは複数の炎症促進性メディエーター（例えば、サイトカイン）の産生の阻害もしくは減少のため、または神経変性疾患の発症もしくは進行を治療するためのＣＤ１４アンタゴニスト抗体の使用を提供する。一部の実施形態では、ＣＤ１４アンタゴニストは、それらの応用のいずれか１つまたは複数のための医薬として製造される。
【００２７】
一部の実施形態では、方法は、好適にはＣＤ１４アンタゴニスト抗体の投与の前に、対象が神経変性疾患を有するかまたは神経変性疾患を発症するもしくは神経変性疾患が進行するリスクがあることを同定することをさらに含む。このタイプの実例では、方法は、好適にはＣＤ１４アンタゴニスト抗体の投与の前に、生体試料中、好適には対象から採取された生体試料中の神経変性疾患のマーカーの存在を決定することを含み、生体試料の実例としては、血液、血清、血漿、唾液、脳脊髄液、尿、皮膚もしくは他の組織、またはこれらの小部分が挙げられる。
【００２８】
一実施形態では、疾患はＭＮＤであり、かつ、マーカーは、例えば、ＳＯＤ１、ＴＤＰ−４３、ＦＵＳ、Ｃ９ＯＲＦ７２、ＡＬＳ２、ＡＬＳ４、ＡＬＳ８、ＮＥＫ１、ＵＢＱＬＮ２、ＶＣＰ、ＳＥＴＸ、ＡＮＧ、ＰＦＮ１、ＭＡＴＲ３、ＣＨＣＨＤ１０、ＴＵＢＡ４Ａ、ＴＢＫ１、Ｃ２１ｏｒｆ２およびＯＰＴＮまたはこれらの発現産物のうちの１つまたは複数から選択される。この実施形態では、神経変性疾患のマーカーの存在は、好適には、生体試料におけるマーカー遺伝子の発現産物の存在もしくは過剰発現および／またはマーカー遺伝子（例えば、ＳＯＤ１、ＴＤＰ−４３、ＦＵＳ、Ｃ９ＯＲＦ７２、ＡＬＳ２、ＡＬＳ４、ＡＬＳ８、ＮＥＫ１、ＵＢＱＬＮ２、ＶＣＰ、ＳＥＴＸ、ＡＮＧ、ＰＦＮ１、ＭＡＴＲ３、ＣＨＣＨＤ１０、ＴＵＢＡ４Ａ、ＴＢＫ１、Ｃ２１ｏｒｆ２およびＯＰＴＮ  ｍＲＮＡまたはポリペプチド）における突然変異の存在を検出することにより決定される。ＭＮＤについての一部の実施形態では、ＴＤＰ−４３陽性封入物の細胞質沈着ならびに／またはニューロフィラメントの血清および／もしくはＣＳＦレベルの上昇の存在もまた決定され得る。
【００２９】
別の実施形態では、疾患は、アルツハイマー病、ＦＴＤ  ＬＢＤ（ＤＬＢおよびＰＤＤ）および血管性認知症などの認知症であり、かつ、マーカーは、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）ならびにプレセニリン１および２をコードする遺伝子における突然変異、アポリポタンパク質Ｅ（ＡＰＯＥ）遺伝子のε４、２および３アレル（ＡＰＯＥ−ε４、ＡＰＯＥ−ε２、ＡＰＯＥ−ε３）における突然変異、Ｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｏｎ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｃｅｌｌｓ  ２（ＴＲＥＭ２）遺伝子、タンパク質タウを作る第１７染色体上のＭＡＰＴ遺伝子、プログラニュリンタンパク質を作る第１７染色体上の、ＰＧＲＮ遺伝子とも呼ばれるＧＲＮ遺伝子、分子量４３ｋＤａのトランス活性応答ＤＮＡ結合タンパク質（ＴＤＰ−４３）を産生する第１染色体上のＴＡＲＤＢＰ遺伝子、バロシン含有タンパク質をコードする第９染色体上のＶＣＰ遺伝子および荷電性多小胞体タンパク質２Ｂ（ｃｈａｒｇｅｄ  ｍｕｌｔｉｖｅｓｉｃｕｌａｒ  ｂｏｄｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ２Ｂ）（クロマチン修飾タンパク質２Ｂとしても公知）を発現する第３染色体上のＣＨＭＰ２Ｂ遺伝子における突然変異のうちの１つまたは複数から選択される。α−シヌクレイン、Ｓ１００Ａ９およびＳ１００Ｂ、クロモグラニン、循環ＤＮＡ、熱ショックタンパク質およびアミロイドの血清および／またはＣＳＦレベルの上昇もまた決定され得る。
【００３０】
他の実施形態では、神経変性疾患のリスクがある対象はまた、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）における疾患と関連付けられる炎症促進性マーカー、例えば、ＴＮＦ−α、インターロイキン−１（ＩＬ−１）−α、ＩＬ−６、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１β、ＩＬ−８、ＩＬ−１８、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、ＩＬ−１７、ケモカイン、ＣＤ１４高発現単球および炎症性メディエーターｍＲＮＡ転写物のうちの１つまたは複数のレベルの上昇の存在を決定することにより同定され得る。一実施形態では、疾患はＭＮＤであり、かつ、検出されるサイトカインは、ＩＬ−６またはＩＬ−１７のうちの１つまたは複数から選択される。一実施形態では、疾患は認知症であり、かつ、検出されるサイトカインは、ＩＬ−１、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αから選択される。
【００３１】
好ましい実施形態では、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、ＩＣ１４、またはその抗原結合断片である。
【００３２】
ＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、単独でまたは神経変性疾患もしくはその症状の発症もしくは進行を治療する１つもしくは複数の補助剤と組み合わせて投与され得る。したがって、さらに別の態様では、本発明は、好適には、神経変性疾患の発症もしくは進行またはその症状を治療するために、全身投与のために配合された医薬組成物を提供する。これらの組成物は、任意選択的に、薬学的に許容される担体または希釈剤と共に、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体を含む、からなるまたはから本質的になる。一実施形態では、組成物は、補助的な抗神経変性剤をさらに含む。
【００３３】
関連する態様では、本発明は、対象において神経変性疾患の発症もしくは進行またはその症状を治療する方法を提供する。これらの方法は、一般に、有効量の全身投与されるＣＤ１４アンタゴニスト抗体および有効量の補助的な抗神経変性剤を対象に並行して投与し、それにより対象において神経変性疾患の発症もしくは進行、またはその症状を治療することを含む、からなるまたはから本質的になる。好適には、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体および補助的な抗神経変性剤は、相乗的に有効な量で投与される。
【００３４】
特定の実施形態では、補助的な抗神経変性剤は抗炎症剤である。一実施形態では、疾患はＭＮＤ（例えば、ＡＬＳ）であり、かつ、補助的な抗神経変性剤は、リルゾール（Ｒｉｌｕｔｅｋ（登録商標）／Ｔｅｇｌｕｔｉｋ（登録商標））、補体経路阻害剤（例えば、ＰＭＸ２０５またはエクリズマブ）、ＣＤ４０とＣＤ４０リガンドとの相互作用を遮断する剤、例えば、ＣＤ４０および／またはＣＤ４０リガンドに特異的に結合する抗体（例えば、ＡＴ−１５０２）、ＮｕｒＯｗｎ幹細胞療法（ＢｒａｉｎＳｔｏｒｍ  Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＧＭ６０４、エダラボン（Ｒａｄｉｃａｖａ（登録商標）／Ｒａｄｉｃｕｔ（登録商標））、マシチニブ、メマンチンまたはチラセムチブから選択される。一実施形態では、疾患は、ＬＢＤ、ＡＤまたはＦＴＤのような認知症であり、かつ、補助的な抗神経変性剤はコリンエステラーゼ阻害剤である。別の実施形態では、疾患はＡＤであり、かつ、補助剤は、例えば、アリセプト、ラザダイン、ナメンダ、イクセロンおよびナムザリック（Ｎａｍｚａｒｉｃ）から選択される承認された治療剤である。
【００３５】
別の関連する態様では、本発明は、神経変性疾患の発症もしくは進行、またはその症状を治療するための、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体および補助的な抗神経変性剤の使用を提供する。一部の実施形態では、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体および補助的な抗神経変性剤は、本出願のための全身投与用の医薬として製造される。好適には、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体および補助的な抗神経変性剤は、並行投与のために配合される。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
以下の図面を参照して、単なる非限定的な例により、本開示の実施形態を本明細書に記載する。
【図１】図１は、試験１日目に４ｍｇ／ｋｇならびに試験２、３および４日目に２ｍｇ／ｋｇの投与量のＩＣ１４を用いたＭＮＤ患者のｉ．ｖ．投与後のＣＳＦにおけるＩＬ−１７、ニューロフィラメント軽鎖（ＮＦＬ）およびＩＬ−１βのレベルを示す。
【図２Ａ】図２は、初代ヒト小膠細胞のＴＤＰ−４３活性化後のサイトカインまたはケモカインレベルに対するＩＣ１４の効果を評価するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイの結果を示す。初代ヒト小膠細胞をＩＣ１４または対照ＩｇＧ４抗体を用いて２時間前処理した後、細胞を（Ａ）突然変異体ＴＤＰ−４３（ｍＴＤＰ４３）または（Ｂ）野生型ＴＤＰ−４３（ｗｔＴＤＰ４３）を用いて４８時間刺激した。上清をマルチプレックスサイトカイン分析のために回収した。非処理細胞には抗体もＴＤＰ−４３も与えず、これはサイトカインまたはケモカイン産生の基礎レベルを反映する。発現を相対蛍光単位（ＲＦＵ）として測定し、試料当たり３つのウェルの平均およびＳＥＭとして表す。
【図２Ｂ】図２Ａの説明に同じ。
【００３７】
１．定義
別段の定義がなければ、本明細書において使用される全ての科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと類似するまたは同等の任意の方法および材料を本発明の実施または試験において使用することができるが、好ましい方法および材料を記載する。本発明の目的のために、以下の用語を以下に定義する。
【００３８】
冠詞「ａ」および「ａｎ」は、冠詞の文法的対象物の１つまたは１つより多く（すなわち、少なくとも１つ）を指すために本明細書において使用される。例として、「要素」（ａｎ  ｅｌｅｍｅｎｔ）は、１つの要素または１つより多くの要素を意味する。
【００３９】
本明細書において使用される場合、「および／または」は、関連させて列記した項目のうちの１つまたは複数の任意のおよび全ての可能な組合せの他に、選択的（または）に解釈された場合に組合せの欠如を指しかつ包含する。
【００４０】
「並行的に投与」または「並行して投与する」または「併用投与する」などの用語は、２つもしくはそれより多くの剤を含有する単一の組成物を投与すること、または、別々の組成物としてかつ／もしくは別々の経路により送達される各剤を、同期間にもしくは同時にもしくは全てのそのような剤が単一の組成物として投与された場合に得られるものと効果上の結果が同等である短い充分な期間内に逐次的に投与することを指す。「同時に」は、剤が実質的に同じ時点で投与されることを意味し、これは望ましくは、同じ配合物中で一緒に為される。「同期間に」は、剤が近い時点において投与されることを意味し、例えば、１つの剤は別の剤より前または後の約１分以内から約１日以内までに投与される。任意の同期間が有用である。しかしながら、多くの場合、同時に投与されない場合、剤は、約１分から約８時間以内、好適には、約１〜約４時間以内までに投与される。同期間に投与される場合、剤は、好適には、対象の同じ部位に投与される。「同じ部位」という用語は、正確に同じ位置を含むが、約０．５〜約１５センチメートル以内、好ましくは、約０．５〜約５センチメートル以内であり得る。本明細書において使用される「別々に」という用語は、剤がある間隔で、例えば、おおよそ１日から数週または数ヶ月の間隔で、投与されることを意味する。剤はいずれの順序で投与されてもよい。本明細書において使用される「逐次的に」という用語は、剤が順次、例えば、数分、数時間、数日または数週の間隔で、投与されることを意味する。適切な場合、剤は定期的な繰返しサイクルで投与され得る。
【００４１】
「ＡＬＳ」、「ＭＮＤ」および「ルー・ゲーリッグ病」という用語は、同じ状態を指すために本明細書において交換可能に使用され得る。家族性ＡＬＳおよび弧発性ＡＬＳのいずれも、主題とする方法により治療することができまたはその発症もしくは進行を遅延させることができる。ＡＬＳの全ての形態が本明細書において想定される。
【００４２】
「アゴニスト」という用語は、それが結合する受容体を刺激するリガンドを指す。古典的な定義によるアゴニストは、オルソステリックアゴニスト、アロステリックアゴニスト、インバースアゴニストまたはコアゴニストのいずれであっても、受容体に結合し、その受容体の状態を変化させかつ生物学的作用を結果としてもたらす特性を有し、生物学的作用としては、直接的なものであれ間接的なものであれ、化学的または物理的なシグナル伝達カスケードを活性化させて、細胞の挙動、物理学的または生物学的状態における定義され得る変化を結果としてもたらすことが挙げられる。結果として、アゴニズムは、生物学的作用を生じさせるアゴニストの特性として定義される。本発明の状況において、ＣＤ１４アゴニストは、例えば、損傷関連分子パターン（ＤＡＭＰ）または病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）分子およびＬＰＳのような、細胞の表面上のｍＣＤ１４または循環中のｓＣＤ１４に結合することにより炎症促進応答を開始させる任意のアゴニストを含む。ＤＡＭＰの非限定的な例としては、ＳＯＤ１、ＴＤＰ−４３、熱ショックタンパク質ファミリーのメンバーの他に、ＨＭＧＢ１、Ｓ１００Ａ、Ｓ１００Ａ９、Ｓ１００Ｂ、α−シヌクレイン、クロモグラニン、循環ＤＮＡおよびＲＮＡ、アミロイドおよび突然変異の結果として生じかつ細胞の表面上のｍＣＤ１４または循環中のｓＣＤ１４に結合することにより炎症促進応答を開始させる任意の他のミスフォールディングしたタンパク質が挙げられる。ＰＡＭＰの非限定的な例としては、ＬＰＳ、他のペプチドグリカンおよびグラム陽性菌のリポタイコ酸、マイコバクテリアのリポアラビノマンナンおよびウイルスエンベロープタンパク質が挙げられる。
【００４３】
「アンタゴニスト抗体」という用語は最も広い意味において使用され、抗体が結合する抗原（例えば、ＣＤ１４）の生物学的活性を阻害しまたは減少させる抗体を含む。例えば、アンタゴニスト抗体は、受容体（例えば、ＣＤ１４）とリガンド（例えば、ＤＡＭＰまたはＰＡＭＰ）との相互作用を部分的にもしくは完全に遮断することができ、または受容体の三次構造の変化もしくは下方調節に起因して相互作用を実質的に減少させ得る。したがって、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、ＣＤ１４に結合しかつＣＤ１４アゴニスト活性を任意の意味のある程度で（有意にそうするものを含めて）遮断し、阻害し、無化し、アンタゴナイズし、抑制し、減少させまたは低減させる抗体を包含し、上記の作用としては、例えば、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）シグナル伝達経路（例えば、ＴＬＲ４シグナル伝達経路）およびＴＩＲ−ドメイン含有アダプター誘導ＩＦＮ−β（ＴＲＩＦ）経路のような下流の経路の活性化、またはＣＤ１４リガンド（例えば、ＤＡＭＰまたはＰＡＭＰ）によるＣＤ１４結合への細胞応答（例えば、炎症促進性サイトカインなどの炎症促進性メディエーターの産生）の惹起が挙げられる。
【００４４】
本明細書において「抗体」という用語は最も広い意味において使用され、具体的には、天然に存在する抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異的抗体（例えば、二重特異性抗体）、抗体断片、または、所望の免疫相互作用性を呈する限り、任意の他の抗原結合分子をカバーする。天然に存在する「抗体」は、ジスルフィド結合により相互接続された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含む免疫グロブリンをその範囲内に含む。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書においてＶＨと略記される）および重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、特定のＣＨドメイン（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３）を含む。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書においてＶＬと略記される）および軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬを含む。ＶＨおよびＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称されるより保存された領域が挿入された、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域にさらに分割することができる。各ＶＨおよびＶＬは３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成され、これらはアミノ末端からカルボキシ末端へと、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４という順序で並んでいる。抗体の定常領域は、宿主組織または因子、例えば、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）および古典的補体システムの第１成分（Ｃ１ｑ）への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。抗体は、任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）、それらのサブクラスまたは改変型（例えば、Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５Ａ二重突然変異を有するＩｇＧ１アイソタイプ（ＩｇＧ１−ＬＡＬＡ））であり得る。抗体は、任意の種の抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体またはヒト抗体であり得る。他の実施形態では、抗体は、ホモマー重鎖抗体（例えば、ラクダ科動物抗体）であり、これは、第１の定常領域ドメイン（ＣＨ１）を欠くが、それ以外にはインタクトな重鎖を保持し、抗原結合ドメインを通じて抗原に結合することができる。抗体−モジュラー認識ドメイン（ＭＲＤ）融合物中の重鎖および軽鎖の可変領域は、目的の抗原と相互作用する機能的な結合ドメインを含有する。
【００４５】
本明細書において使用される「可変ドメイン」（軽鎖の可変ドメイン（ＶＬ）、重鎖の可変ドメイン（ＶＨ））は、抗体の抗原への結合に直接的に関与する軽鎖ドメインおよび重鎖ドメインのペアのそれぞれを表す。可変軽鎖および重鎖ドメインは同じ一般構造を有し、各ドメインは、３つのＣＤＲまたは「超可変領域」により接続された、その配列が広く保存された４つのＦＲを含む。ＦＲはβ−シートコンホメーションをとり、ＣＤＲは、β−シート構造を接続するループを形成し得る。各鎖におけるＣＤＲは、ＦＲにより三次元構造が保持され、他の鎖からのＣＤＲと共に抗原結合部位を形成する。
【００４６】
「抗原結合部分」という用語は、本明細書において使用される場合、一般に抗原結合に関与する抗体のアミノ酸残基を指し、一般にＣＤＲからのアミノ酸残基を含む。したがって、「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」（「超可変領域」とも称される）は、抗原結合部位の形成に寄与する三次元ループ構造を形成する抗体の軽鎖および重鎖のアミノ酸配列を指すために本明細書において交換可能に使用される。重鎖および軽鎖の各可変領域において３つのＣＤＲがあり、これらは各可変領域について、「ＣＤＲ１」、「ＣＤＲ２」、および「ＣＤＲ３」と称される。本明細書において使用される「ＣＤＲセット」という用語は、抗原に結合する単一の可変領域中に存在する３つのＣＤＲの群を指す。これらのＣＤＲの正確な境界は、異なるシステムにしたがって異なる定義が為されている。Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ  （Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，  Ｂｅｔｈｅｓｄａ，  Ｍｄ．  （１９８７）および（１９９１））により記載されたシステムは、抗体の任意の可変領域に適用可能な明瞭な残基ナンバリングシステムを提供するだけでなく、３つのＣＤＲを定義する精密な残基の境界も提供する。これらのＣＤＲは、「Ｋａｂａｔ  ＣＤＲ」と称され得る。Ｃｈｏｔｈｉａおよび共同研究者ら（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ，  １９８７．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  １９６：  ９０１−９１７；  Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８９．  Ｎａｔｕｒｅ  ３４２：  ８７７−８８３）は、Ｋａｂａｔ  ＣＤＲ内のある特定の下位部分は、アミノ酸配列のレベルで大きな多様性を有するにもかかわらず、ほぼ同一のペプチド骨格コンホメーションをとることを発見した。これらの下位部分は、「Ｌ１」、「Ｌ２」、および「Ｌ３」、または「Ｈ１」、「Ｈ２」、および「Ｈ３」と称され、「Ｌ」および「Ｈ」はそれぞれ軽鎖および重鎖領域を示す。これらの領域は、「Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ」と称されることがあり、Ｋａｂａｔ  ＣＤＲと重なり合う境界を有する。Ｋａｂａｔ  ＣＤＲと重なり合うＣＤＲを定義する他の境界がＰａｄｌａｎ（１９９５．  ＦＡＳＥＢ  Ｊ．  ９：  １３３−１３９）およびＭａｃＣａｌｌｕｍ（１９９６．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２６２（５）：  ７３２−７４５）により記載されている。また他のＣＤＲの境界定義は、これらのシステムの１つに厳格に従わないことがあるが、それでもなおＫａｂａｔ  ＣＤＲと重なり合い、但し、特定の残基もしくは残基の群またはさらにはＣＤＲ全体が抗原結合に有意に影響しないという予測または実験上の発見に照らして、それらはより短いまたはより長いものであり得る。
【００４７】
本明細書において使用される場合、「フレームワーク領域」または「ＦＲ」という用語は、可変領域からＣＤＲを除いた残りの配列を指す。したがって、抗体の軽鎖および重鎖可変ドメインは、Ｎ末端からＣ末端に、ドメインＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、およびＦＲ４を含む。ＣＤＲおよびＦＲは、典型的に、Ｋａｂａｔ，  Ｅ．  Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，  ５ｔｈ  ｅｄ．，  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，  Ｂｅｔｈｅｓｄａ，  Ｍｄ．  （１９９１）の標準的な定義および／または「超可変ループ」からのそれらの残基にしたがって決定される。
【００４８】
本明細書において使用される場合、「軽鎖可変領域」（「ＶＬ」）および「重鎖可変領域」（ＶＨ）という用語は、各抗体について異なる一次アミノ酸配列を有するそれぞれ軽鎖および重鎖のＮ末端部分の領域またはドメインを指す。抗体の可変領域は、典型的に、軽鎖および重鎖のアミノ末端ドメインからなり、それらはフォールディングして一緒になって、抗原のための三次元結合部位を形成する。構造的類似性に基づいて、例えばＫａｂａｔデータベースに記載されるように、ＶＨおよびＶＬのいくつものサブタイプが定義されている。
【００４９】
「キメラ抗体」という用語は、１つの種からの重鎖および軽鎖可変領域配列ならびに別の種からの定常領域配列を含む抗体、例えば、ヒト定常領域に連結されたマウス重鎖および軽鎖可変領域を有する抗体を指す。
【００５０】
「ヒト化」型の非ヒト（例えば、齧歯動物）抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小の配列を含有するキメラ抗体である。ほとんどの部分について、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域の残基が、所望の特異性、親和性、および能力を有するマウス、ラット、ウサギまたは非ヒト霊長動物のような非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域からの残基により置き換えられたヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の例では、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）の残基は、対応する非ヒト残基により置き換えられる。したがって、ヒト化抗体のＦＲおよびＣＤＲは、親（すなわち、ドナー）配列に精密に対応する必要はなく、例えば、ドナー抗体のＣＤＲまたはコンセンサスフレームワークは、少なくとも１つのアミノ酸残基の置換、挿入、および／または欠失により突然変異誘発されて、その部位においてＣＤＲまたはＦＲは、ドナー抗体またはコンセンサスフレームワークのいずれかに対応しないものであってもよい。しかしながら、典型的に、そのような突然変異は、大規模なものでなく、一般に、抗原への結合に関与する「鍵となる残基」を回避する。通常、少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、最も好ましくは少なくとも９５％のヒト化抗体残基は、親のＦＲおよびＣＤＲ配列の残基に対応する。本明細書において使用される場合、「コンセンサスフレームワーク」という用語は、コンセンサス免疫グロブリン配列中のフレームワーク領域を指す。本明細書において使用される場合、「コンセンサス免疫グロブリン配列」という用語は、関連する免疫グロブリン配列のファミリーにおいて最も頻繁に存在するアミノ酸（またはヌクレオチド）から形成された配列を指す（例えば、Ｗｉｎｎａｋｅｒ，  Ｆｒｏｍ  Ｇｅｎｅｓ  ｔｏ  Ｃｌｏｎｅｓ  （Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ，  Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，  １９８７）を参照）。「コンセンサス免疫グロブリン配列」は、したがって、「コンセンサスフレームワーク領域」および／または「コンセンサスＣＤＲ」を含み得る。免疫グロブリンのファミリーにおいて、コンセンサス配列中の各位置は、該ファミリーにおけるその位置において最も頻繁に存在するアミノ酸により占められる。２つのアミノ酸が同じ頻度で存在する場合、いずれかをコンセンサス配列に含めることができる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つの、典型的に２つの、可変ドメインの実質的に全てを含み、該可変ドメインでは、超可変ループの全てまたは実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応しかつＦＲの全てまたは実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体はまた、任意選択的に、典型的にヒト免疫グロブリンのものである、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分を含む。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９８６．  Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５），  Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８．  Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９）およびＰｒｅｓｔａ（１９９２．  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐ．  Ｓｔｒｕｃｔ．  Ｂｉｏｌ．  ２：５９３−５９６）を参照。ヒト化抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＥなどの免疫グロブリンの任意のクラス、ならびに以下に限定されないがＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４などの任意のアイソタイプから選択され得る。ヒト化抗体は、１つより多くのクラスまたはアイソタイプからの配列を含むことができ、かつ特定の定常ドメインは、当該技術分野において周知の技術を使用して所望のエフェクター機能を最適化するように選択され得る。本明細書において使用される場合、「鍵となる残基」という用語は、抗体、特にヒト化抗体の結合特異性および／または親和性に対してより大きな影響力を有する可変領域内のある特定の残基を指す。鍵となる残基としては、以下：ＣＤＲに隣接する残基、潜在的なグリコシル化部位（Ｎ−またはＯ−グリコシル化部位のいずれかであり得る）、希少な残基、抗原と相互作用することができる残基、ＣＤＲと相互作用することができる残基、カノニカルな残基、重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間の接触する残基、Ｖｅｒｎｉｅｒゾーン内の残基、および可変重鎖ＣＤＲ１のＣｈｏｔｈｉａの定義と第１の重鎖フレームワークのＫａｂａｔの定義との間で重なり合う領域中の残基のうちの１つまたは複数が挙げられるがこれらに限定されない。
【００５１】
本明細書において使用される場合、「Ｖｅｒｎｉｅｒ」ゾーンは、ＦｏｏｔｅおよびＷｉｎｔｅｒ（１９９２．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２４：  ４８７−４９９）に記載されるように、ＣＤＲ構造を調整して、抗原へのフィットを微調整し得るフレームワーク残基のサブセットを指す。Ｖｅｒｎｉｅｒゾーンの残基は、ＣＤＲの基礎となる層を形成し、ＣＤＲの構造および抗体の親和性に対して影響を及ぼし得る。
【００５２】
本明細書において使用される場合、「カノニカル」な残基という用語は、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．（１９８７．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  １９６：  ９０１−９１７；  １９９２．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２２７：  ７９９−８１７；いずれも参照することにより本明細書に組み込まれる）により定義されるように、特定のカノニカルなＣＤＲ構造を定義するＣＤＲまたはフレームワーク中の残基を指す。Ｃｈｏｔｈｉａらによれば、多くの抗体のＣＤＲの不可欠な部分は、アミノ酸配列のレベルでの大きな多様性にもかかわらず、ほぼ同一のペプチド骨格コンファメーション（ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎｓ）を有する。各カノニカルな構造は主に、ループを形成するアミノ酸残基の連続するセグメントについてペプチド骨格のねじれ角のセットを特定する。
【００５３】
本明細書において使用される場合、「ドナー」および「ドナー抗体」という用語は、「アクセプター抗体」に１つまたは複数のＣＤＲを提供する抗体を指す。一部の実施形態では、ドナー抗体は、ＦＲが得られるまたはＦＲの由来となる抗体とは異なる種からの抗体である。ヒト化抗体の文脈において、「ドナー抗体」という用語は、１つまたは複数のＣＤＲを提供する非ヒト抗体を指す。
【００５４】
本明細書において使用される場合、「アクセプター」および「アクセプター抗体」という用語は、ＦＲの１つまたは複数のアミノ酸配列の少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または１００％を提供する抗体を指す。一部の実施形態では、「アクセプター」という用語は、定常領域を提供する抗体アミノ酸配列を指す。他の実施形態では、「アクセプター」という用語は、ＦＲおよび定常領域の１つまたは複数を提供する抗体アミノ酸配列を指す。特定の実施形態では、「アクセプター」という用語は、ＦＲの１つまたは複数のアミノ酸配列の少なくとも８０％、好ましくは、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または１００％を提供するヒト抗体アミノ酸配列を指す。この実施形態によれば、アクセプターは、ヒト抗体の１つまたは複数の特定の位置に存在しない少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、最低４、少なくとも５、または少なくとも１０のアミノ酸残基を含有し得る。アクセプターフレームワーク領域および／またはアクセプター定常領域は、例えば、生殖細胞系列抗体遺伝子、成熟抗体遺伝子、機能的抗体（例えば、当該技術分野において周知の抗体、開発中の抗体、または市販の抗体）に由来し得るか、またはそれから得られ得る。
【００５５】
「ヒト抗体」という用語は、本明細書において使用される場合、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変および定常領域を有する抗体を含むことを意図する。本発明のヒト抗体は、例えばＣＤＲ中、特にＣＤＲ３中の、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列によりコードされないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのランダムもしくは部位特異的突然変異生成によりまたはｉｎ  ｖｉｖｏでの体細胞突然変異により導入される突然変異）を含み得る。しかしながら、「ヒト抗体」という用語は、本明細書において使用される場合、マウスのような別の哺乳動物種の生殖細胞系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列にグラフトされた抗体を含むことは意図しない。
【００５６】
「重鎖可変領域ＣＤＲ１」および「Ｈ−ＣＤＲ１」という用語は交換可能に使用され、「重鎖可変領域ＣＤＲ２」および「Ｈ−ＣＤＲ２」という用語、「重鎖可変領域ＣＤＲ３」および「Ｈ−ＣＤＲ３」という用語、「軽鎖可変領域ＣＤＲ１」および「Ｌ−ＣＤＲ１」という用語、「軽鎖可変領域ＣＤＲ２」および「Ｌ−ＣＤＲ２」という用語ならびに「軽鎖可変領域ＣＤＲ３」および「Ｌ−ＣＤＲ３」抗体断片という用語も同様である。本明細書の全体を通じて、相補性決定領域（「ＣＤＲ」）は、それ以外に特定しなければＫａｂａｔの定義にしたがって定義される。Ｋａｂａｔの定義は、抗体中の残基をナンバリングするための標準であり、典型的に、ＣＤＲ領域を同定するために使用される（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，  （１９９１），  ５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  ＮＩＨ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．  ９１−３２４２）。
【００５７】
抗原結合は、インタクトな抗体の「断片」または「抗原結合断片」により行われ得る。本明細書において、両方の用語は交換可能に使用される。抗体の「抗体断片」という用語に包含される結合断片の例としては、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片であるＦａｂ断片；ヒンジ領域におけるジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片；ＶＨドメインからなる単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８９．  Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；ならびに単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。
【００５８】
「単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）」は、ＶＬおよびＶＨ領域が対形成して一価分子（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として公知；例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８８．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；およびＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８８．  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ８５：５８７９−５８８３を参照）を形成する単一のタンパク質鎖である。２つのドメインＶＬおよびＶＨは別々の遺伝子によりコードされるが、組換え法を使用して、それらを単一のタンパク質鎖とすることを可能とする人工的なペプチドリンカーにより、それらを連結させることができる。そのような単鎖抗体は、１つまたは複数の抗原結合部分を含む。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来技術を使用して得られ、断片は、インタクトな抗体と同じ方法で有用性についてスクリーニングされる。
【００５９】
「モノクローナル抗体」という用語ならびに「ＭＡｂ」および「ｍＡｂ」という略語は、本明細書において使用される場合、実質的に均質な抗体集団から得られた抗体を指し、すなわち、集団を構成する個々の抗体は、微量で存在し得る起こり得る天然に存在する突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原を対象とする。さらには、異なる決定因子（エピトープ）を対象とする異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各ｍＡｂは、抗原上の単一の決定因子を対象とする。「モノクローナル（の）」という修飾語は、任意の特定の方法による抗体の製造を必要とするものと解されるべきではない。モノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマなどの抗体産生細胞の単一のクローンにより産生され得る。「ハイブリドーマ」という用語は、一般に、培養された新生物性リンパ球と親細胞の特定の免疫潜在能力を示すプライムされたＢまたはＴリンパ球との細胞融合の産物を指す。
【００６０】
目的の抗原（例えば、ＣＤ１４）に「結合する」抗体は、抗原を発現する細胞または組織の標的化において抗体が治療剤として有用であるような充分な親和性で抗原に結合し、かつ他のタンパク質と有意に交差反応しない抗体である。そのような実施形態では、「非標的」タンパク質への抗体の結合の程度は、例えば、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）分析、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、免疫沈降または放射性免疫沈降（ＲＩＡ）による決定で、その特定の標的タンパク質への抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子の結合の約１０％未満である。したがって、それが結合するＣＤ１４をアンタゴナイズする抗体は、好適には、炎症促進性サイトカイン／ケモカインなどの炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させる。標的分子への抗体の結合に関して、特定のポリペプチド標的上の特定のポリペプチドまたはエピトープへの「特異的結合」またはそれに「特異的に結合する」または「特異的」という用語は、測定できる程度に非特異的相互作用とは異なる結合を意味する。特異的結合は、例えば、一般に結合活性を有しない類似の構造の分子である対照分子の結合と比較して分子の結合を決定することにより測定することができる。例えば、特異的結合は、標的、例えば過剰量の非標識の標的への類似する対照分子との競合により決定することができる。この場合、プローブへの標識された標的の結合が過剰な非標識の標的により競合的に阻害される場合、特異的結合が指し示される。抗体が結合する抗原の特定の領域は、典型的に「エピトープ」と称される。「エピトープ」という用語は、抗体もしくはＴ細胞受容体により特異的に認識されるか、またはそれ以外に分子と相互作用する抗原上の部位を広く含む。一般に、エピトープは、アミノ酸または炭水化物または糖側鎖のような分子の活性表面グルーピングのものであり、一般に、特定の三次元の構造的特徴の他に、特定の電荷的特徴を有し得る。当業者により理解されるように、抗体が特異的に結合できる実質的に全てのものがエピトープであり得る。
【００６１】
本明細書において使用される「細胞」という用語は、ｍＣＤ１４を含みかつ炎症促進性メディエーター（例えば、サイトカイン）を産生するＣＮＳの外側に存在する任意の哺乳動物細胞を指す。非限定的な例は、免疫細胞、上皮細胞、骨芽細胞、線維芽細胞、および平滑筋細胞である。
【００６２】
本明細書の全体を通じて、そうでないことを文脈が必要としなければ、「含む」（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）、「含む」（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）および「含む」（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）という語は、記載したステップもしくは要素またはステップもしくは要素の群を含むが、いかなる他のステップもしくは要素またはステップもしくは要素の群を排除しないことを含意するものと理解される。したがって、「含む」（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）などの用語の使用は、列記された要素は必要または必須であるが、他の要素は任意選択的であり、存在してもよいし、存在しなくてもよいことを指し示す。「からなる」は、「からなる」という語句に後続するもの全てを含み、かつそれに限定されることを意味する。したがって、「からなる」という語句は、列記された要素は必要または必須であり、かつ他の要素は存在し得ないことを指し示す。「から本質的になる」は、該語句の後に列記されたあらゆる要素を含み、かつ列記された要素について本開示において特定した活性または作用に干渉も寄与もしない他の要素に限定されることを意味する。したがって、「から本質的になる」という語句は、列記された要素は必要または必須であるが、他の要素は任意選択的であり、かつ列記された要素の活性または作用に影響するか否かに応じて存在してもよいか、もしくは存在し得ないことを指し示す。
【００６３】
本明細書において使用される「認知症」への言及は、正常な老化から予測され得るものを超えて認知機能（すなわち、思考を処理する能力）が劣化する症候群に属する任意の疾患を指す。本発明をいずれか１つの疾患に限定するものではないが、認知症の例としては、ＡＤ、レビー小体型認知症、すなわちレビー小体を伴う認知症（ＤＬＢ）およびパーキンソン病型認知症、血管性認知症および全側頭型（Ｆｒｏｎｔｏｔｅｍｐｅｒｏｌ）認知症（ＦＴＤ）が挙げられる。
【００６４】
状態を治療する文脈における「有効量」は、単一の用量または一連のものの部分のいずれかとしての、そのような治療または予防を必要とする個体への、その状態の、症状を招くことの予防、そのような症状の阻止、および／または既存の症状の治療のために効果的な量の剤または組成物の投与を意味する。有効量は、治療される個体の年齢、健康および身体条件ならびに疾患の症状が見られるかどうか、治療される個体の分類群、組成物の配合、医学的状態の評価、および他の関連因子に応じて異なる。最適な投薬スケジュールは、対象の身体における薬物の蓄積の測定から算出され得る。最適な投与量は、個々の対象における相対的な効力に応じて異なることがあり、一般に、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏの動物モデルにおいて効果的であることが見出されるＥＣ５０値に基づいて推定され得る。当業者は、最適な投与量、投薬方法および繰返し率を容易に決定することができる。量は、常用の試験を通じて決定され得る比較的広範な範囲に入ることが予想される。
【００６５】
「ハイブリダイゼーション」は、相補的なヌクレオチド配列がペア形成してＤＮＡ−ＤＮＡハイブリッドまたはＤＮＡ−ＲＮＡハイブリッドを生じることを表すために本明細書において使用される。相補的塩基配列は、塩基対形成の規則により関連する配列である。ＤＮＡでは、ＡはＴとペア形成し、ＣはＧとペア形成する。ＲＮＡでは、ＵはＡとペア形成し、ＣはＧとペア形成する。これに関して、本明細書において使用される「マッチ」および「ミスマッチ」という用語は、相補的な核酸鎖中のペア形成するヌクレオチドのハイブリダイゼーション潜在能力を指す。上記した古典的なＡ−ＴおよびＧ−Ｃ塩基対のようなマッチしたヌクレオチドは効率的にハイブリダイズする。ミスマッチは、効率的にハイブリダイズしないヌクレオチドの他の組合せである。本発明では、ペア形成の好ましい機構は、水素結合を伴い、これは、オリゴマー化合物の鎖の相補的なヌクレオシドまたはヌクレオチド塩基（核酸塩基）間のワトソン−クリック、フーグスティーンまたは反転フーグスティーン水素結合であり得る。例えば、アデニンおよびチミンは相補的な核酸塩基であり、水素結合の形成を通じてペア形成する。ハイブリダイゼーションは、当業者に公知のように様々な状況下で起こり得る。
【００６６】
本明細書において使用される場合、「免疫細胞」という用語は、ＣＮＳの外側に存在する免疫系に属する細胞を指す。免疫細胞としては、造血起源の細胞、例えば、以下に限定されないが、Ｔリンパ球（Ｔ細胞）、Ｂリンパ球（Ｂ細胞）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、顆粒球、好中球、マクロファージ、単球、樹状細胞、および上記のいずれかの特殊な形態、例えば、形質細胞性樹状細胞、ランゲルハンス細胞、血漿細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、Ｔヘルパー細胞、および細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）が挙げられる。
【００６７】
本明細書における「免疫相互作用性」およびその文法的等価物への言及は、特に、分子の１つが免疫系の成分であるか、またはそれを模倣する場合に、分子間の任意の相互作用、反応、または他の形態の会合への言及を含む。
【００６８】
本明細書において使用される細胞による「炎症促進性メディエーターの産生」に関する「阻害する」（ｉｎｈｉｂｉｔ）、「阻害する」（ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ）、「減少させる」（ｄｅｃｒｅａｓｅ）または「減少させる」（ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ）などの用語は、末梢細胞により産生される炎症促進性メディエーターのレベルまたは量の少なくとも小さいが測定可能な低減を指す。実施形態では、細胞による炎症促進性メディエーターの産生は、非処理の対照に対して少なくとも２０％阻害されまたは減少し、さらなる実施形態では、阻害または減少は少なくとも５０％であり、いっそうさらなる実施形態では、阻害または減少は少なくとも７０％であり、実施形態では、阻害または減少は少なくとも８０％である。炎症促進性メディエーターの産生のそのような低減は、ｉｎ  ｖｉｖｏの実施形態において炎症性メディエーターカスケードの有害な効果を低減させることができる。
【００６９】
好適なｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ、ＲＴ−ＰＣＲ）を使用して、末梢細胞による炎症促進性メディエーターの産生の阻害または減少におけるＣＤ１４アンタゴニスト抗体の有効性を評価することができる。例えば、競合的ＲＴ−ＰＣＲ技術を使用して、細胞内から得られるサイトカインｍＲＮＡのレベルを測定することができ、細胞から放出された発現されたサイトカインのレベルを、例えば、特定のサイトカインに特異的に結合する１つまたは複数のモノクローナル抗体を使用するサンドイッチＥＬＩＳＡにより測定することができる。ｉｎ  ｖｉｖｏのスクリーニングもまた、当該技術分野において周知の手順に従うことにより行うことができる。例えば、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体を動物モデル（例えば、マウス）に投与し、血液を回収して様々なサイトカインのレベルを評価する。当業者は、サイトカイン産生の測定のために利用可能な技術に充分に精通している。結果に基づいて、適切な投与量範囲および全身投与経路もまた決定され得る。
【００７０】
「単離された」は、その天然の状態において通常それと共にある成分を実質的にまたは本質的に含まない材料を意味する。
【００７１】
「リガンド」という用語は、本明細書において使用される場合、受容体に結合することができる任意の分子を指す。
【００７２】
本明細書において使用される「運動ニューロン疾患（ＭＮＤ）」という語句は、運動ニューロンを選択的に破壊する神経学的障害を指す。
【００７３】
「神経変性疾患」という語句は、進行性の神経系機能障害により特徴付けられる疾患を意味する。神経変性疾患は、多くの異なる病因を有する中枢または末梢神経系の疾患の雑多な群を含む。そのような状態は、限定されないが、遺伝性、毒性または代謝プロセスに二次的なものであってよく、感染の結果としてもたらされるものであってよい。神経変性状態は、年齢に関連するかまたは慢性であり得る進行性の状態である。そのような状態は、脳の比較的特定の領域またはニューロンの特定の集団の異常により特徴付けられ得る。異なる神経変性状態において影響される特定の細胞群は、典型的に、状態の臨床的表現型を決定する。特に、神経変性状態は、特定の影響された中枢または末梢神経系構造の萎縮と関連付けられ得る。
【００７４】
例示的な神経変性疾患または状態としては、ルー・ゲーリッグ病としても公知の筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、原発性側索硬化症（ＰＬＳ）、進行性筋萎縮症（ＰＭＡ）、進行性球麻痺（ＰＢＰ）および仮性球麻痺などの運動ニューロン疾患（ＭＮＤ）が挙げられるがこれらに限定されない。他の例示的な神経変性疾患または状態としては、アルツハイマー病、パーキンソン病様症候群、レビー小体型認知症（ＤＬＢおよびＰＤＤ）、血管性認知症、前頭側頭型認知症、中脳辺縁系認知症、痙性対麻痺を伴う家族性認知症およびＡＩＤＳ関連認知症のような認知症が挙げられる。
【００７５】
他の例示的な神経変性疾患としては、パーキンソン病、脊髄筋萎縮、遺伝型の脊髄性筋萎縮症、シャルコー・マリー・トゥース障害、ケネディー障害およびポストポリオ症候群  多発性硬化症、びまん性大脳皮質萎縮、ピック病、視床変性症、ハンチントン舞踏病、皮質線条体脊髄変性症、皮質脳底神経節変性症、大脳小脳変性症、ポリグルコサン小体病、シャイ・ドレーガー症候群、オリーブ橋小脳萎縮症、進行性核上麻痺、変形性筋ジストニア、ハラーホルデン・スパッツ病、メージ症候群、家族性振戦、ジル・ド・ラ・トゥレット症候群、有棘赤血球舞踏病、フリードライヒ運動失調症、ホームズ型家族性皮質小脳萎縮症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病、遺伝性筋萎縮症、痙性対麻痺、腓骨筋萎縮症、肥厚性間質性多発ニューロパチー、多発神経炎型遺伝性失調症、視神経症が挙げられる。当業者は、疾患病理に寄与する基礎となる炎症性成分が本発明の方法にしたがって処置され得るこれらおよび他の軽度、中等度または重度の神経変性状態を理解する。
【００７６】
混合型認知症、すなわち、２つまたはそれより多くの疾患の組合せであって、その少なくとも１つが認知症であるものを人々は有することが一般的である。例えば、一部の人々は、アルツハイマー病および血管性認知症の両方を有し、ＦＴＤに罹患した少数の人々はまた、運動ニューロン疾患（ＦＴＤ／ＭＮＤ）（筋萎縮性側索硬化症を伴うＦＴＤまたはＦＴＤ／ＡＬＳと呼ばれることがある）を発症する。したがって、本明細書において使用される「神経変性疾患」への言及は、１つまたは複数の神経変性疾患を有するかまたはそれを発症するリスクがあると診断された対象への言及であることが理解されるべきである。
【００７７】
本明細書において交換可能に使用される「患者」、「対象」、または「個体」という用語は、神経変性疾患を有すると診断されたか、または神経変性疾患を発症する増加した可能性を有すると同定された任意の対象、特に脊椎動物対象、よりいっそう具体的には哺乳動物対象を指す。患者は健康であってよく、または、以下に関連しないが筋肉疲労または記憶喪失のような神経変性疾患の事前の徴候を示していてもよい。あるいは、対象は、疾患に対する遺伝的素因を有し得る。
【００７８】
「対象」は一般にヒト対象であるが、神経変性疾患および状態の発症または進行の治療はまた、ウマ運動ニューロン疾患についてのウマの治療、イヌ脊髄性筋萎縮症についてのイヌの治療および動物研究の試みなどにおいて重要であり得る。それゆえ、本明細書における「患者」、「対象」または「個体」への言及は、ヒトおよび非ヒト哺乳動物、例えば、以下に限定されないが、ウマ、イヌおよびネコのような伴侶動物、ならびにマウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウサギ、ブタおよび非ヒト霊長動物のような実験動物を含む。
【００７９】
本明細書において使用される場合、「全身投与」または「全身投与される」（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ  ｓｙｓｔｅｍｉｃａｌｌｙ）または「全身投与される」（ｓｙｓｔｅｍｉｃａｌｌｙ  ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ）という用語は、中枢神経系の外側において対象中に剤を導入することを意味する。全身投与は、脊椎または脳への直接的な投与以外の任意の投与経路を包含する。そのため、髄腔内および硬膜外投与の他に、頭蓋内注射またはインプラント挿入は、「全身投与」または「全身投与される」という用語の範囲内ではないことは明らかである。全身投与は、治療効果がＣＮＳにおいて起こることを不可能にしないことが理解されるであろう。
【００８０】
本発明において有用な医薬組成物は、例えば、錠剤、液体、カプセル、または粉末などの任意の許容される形態で経口的に；静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下または非経口注射により；経皮拡散または電気泳動により；およびミニポンプまたは他の埋込み型持続放出デバイスもしくは配合物により、全身投与され得る。一部の実施形態によれば、全身投与は、腹腔内、静脈内、皮下および鼻腔内投与、ならびにこれらの組合せからなる群から選択される経路により実行される。
【００８１】
本明細書において使用される「末梢」への言及は、例えば、循環系（例えば、心臓血管系およびリンパ系）および末梢神経系などの、ｍＣＤ１４を発現する細胞、または循環性ｓＣＤ１４が見出される身体の任意の部分（ＣＮＳの部分ではない）を含む。
【００８２】
「薬学的に許容される担体」は、生物学的にもそれ以外にも望ましくないものではない材料を含む製薬担体を意味し、すなわち、材料は、いかなるまたは実体的な有害反応を引き起こすことなく選択された活性剤と共に対象に投与され得る。担体は、賦形剤ならびに希釈剤、界面活性剤、着色剤、湿潤剤、乳化剤、ｐＨ緩衝剤、防腐剤、およびトランスフェクション剤のような他の添加物を含み得る。
【００８３】
同様に、本明細書において提供される化合物の「薬理学的に許容される」塩、エステル、アミド、プロドラッグまたは誘導体は、生物学的にもそれ以外にも望ましくないものではない塩、エステル、アミド、プロドラッグまたは誘導体である。
【００８４】
「ポリヌクレオチド」、「遺伝材料」、「遺伝形態」、「核酸」および「ヌクレオチド配列」という用語は、当業者により容易に理解されるように、ＲＮＡ、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、合成形態および混合ポリマー、センスおよびアンチセンス鎖の両方を含み、化学的もしくは生化学的に改変されていてもよく、または非天然もしくは誘導体ヌクレオチド塩基を含有してもよい。
【００８５】
「炎症促進性メディエーター」という用語は、炎症に有利に働く免疫調節剤を意味する。そのような剤としては、ケモカイン、インターロイキン（ＩＬ）、リンホカイン、および腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）のようなサイトカインの他に、成長因子が挙げられる。特定の実施形態では、炎症促進性メディエーターは「炎症促進性サイトカイン」である。典型的に、炎症促進性サイトカインとしては、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、およびＴＮＦ−αが挙げられ、これらは概ね早期応答に関与する。他の炎症促進性メディエーターとしては、ＬＩＦ、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−α、ＯＳＭ、ＣＮＴＦ、ＴＧＦ−β、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＷＥＡＫ、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−８、ＩＬ−１６、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−３１およびＩＬ−３２が挙げられる（Ｔａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００８．  Ｃｅｌｌ  １３２：９００；  Ｃｅｌｌ  １３２：５００，  Ｃｅｌｌ  １３２：３２４）。炎症促進性メディエーターは、内因性発熱物質（ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＩＬ−１７、ＴＮＦ−α）として作用することがあり、マクロファージおよび間葉細胞（線維芽細胞、上皮細胞および内皮細胞など）の両方による二次メディエーターおよび炎症促進性サイトカインの合成を上方調節することがあり、急性期タンパク質の産生を刺激することがあり、または炎症細胞を誘引することがある。特定の実施形態では、「炎症促進性サイトカイン」という用語は、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１α、ＩＬ−６、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１β、ＩＬ−８、ＩＬ−１７およびＩＬ−１８に関する。
【００８６】
「受容体」という用語は、「リガンド」と称される生物活性分子に結合する細胞付随タンパク質を表す。この相互作用は、細胞に対するリガンドの効果を媒介する。一般に、受容体へのリガンドの結合は、受容体のコンホメーション変化を結果としてもたらし、それが細胞の表面上または細胞内部において受容体と他の分子との相互作用を引き起こし、次いでそれが細胞の代謝の変化に繋がる。多くの場合に受容体−リガンド相互作用に連結される代謝事象としては、遺伝子転写、リン酸化、脱リン酸化、サイクリックＡＭＰ産生の増加、細胞内カルシウムの動員、膜脂質の動員、細胞接着、イノシトール脂質の加水分解、リン脂質の加水分解および細胞経路のモジュレーション（例えば、１つまたは複数の炎症促進性メディエーターの産生の刺激または阻害）が挙げられる。
【００８７】
本明細書において使用される「配列同一性」という用語は、配列が比較のウインドウにわたってヌクレオチド毎またはアミノ酸毎に同一である程度を指す。したがって、「配列同一性のパーセンテージ」は、２つの最適にアライメントされた配列を比較のウインドウにわたって比較すること、同一の核酸塩基（例えば、Ａ、Ｔ、Ｃ、Ｇ、Ｉ）または同一のアミノ酸残基（例えば、Ａｌａ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、ＣｙｓおよびＭｅｔ）が両方の配列において存在する位置の数を決定して、マッチした位置の数を得ること、マッチした位置の数を比較のウインドウにおける位置の総数（すなわち、ウインドウサイズ）で割ること、および結果に１００を掛けて配列同一性のパーセンテージを得ることにより算出される。本発明の目的のために、「配列同一性」は、適切な方法により算出された「マッチパーセンテージ」を意味するものと理解される。例えば、配列同一性解析は、ソフトウェアに付随する参照マニュアルにおいて使用されるような標準的デフォルトを使用してＤＮＡＳＩＳコンピュータープログラム（ｗｉｎｄｏｗｓ用のバージョン２．５；Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｃｏ．，  Ｌｔｄ．、Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡから入手可能）を使用して実行され得る。
【００８８】
「類似性」は、同一であるか、または表１に定義されるような保存的置換を構成するアミノ酸の数のパーセンテージを指す。
【表１】
2020517740.tif 000002
【００８９】
類似性は、ＧＡＰ（Ｄｅｖｅｒａｕｘ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８４．  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  １２，  ３８７−３９５）のような配列比較プログラムを使用して決定することができる。このようにして、本明細書に記載されるものに対して類似のまたは実質的に異なる長さの配列を、アライメントにギャップを挿入することにより比較することができ、そのようなギャップは、例えば、ＧＡＰにより使用される比較アルゴリズムにより決定される。
【００９０】
２つまたはそれより多くのポリヌクレオチドまたはポリペプチドの間の配列の関係性を記載するために使用される用語としては、「参照配列」、「比較ウインドウ」、「配列同一性」、「配列同一性のパーセンテージ」および「実質的な同一性」が挙げられる。「参照配列」は、ヌクレオチドおよびアミノ酸残基を含めて、少なくとも１２個であるが、頻繁に１５〜１８個、多くの場合少なくとも２５個のモノマー単位の長さである。２つのポリヌクレオチドは、（１）２つのポリヌクレオチド間で類似の配列（すなわち、完全なポリヌクレオチド配列の一部のみ）、および（２）２つのポリヌクレオチド間で異なる配列をそれぞれ含み得るので、２つ（または2つそれより多くの）ポリヌクレオチドの間の配列比較は、典型的に、２つのポリヌクレオチドの配列を「比較ウインドウ」にわたって比較して、配列類似度の局所領域を同定および比較することにより行われる。「比較ウインドウ」は、２つの配列が最適にアライメントされた後に同じ数の連続する位置の参照配列に対して配列が比較される少なくとも６個、通常約５０〜約１００個、さらに通常には約１００〜約１５０個の連続する位置の概念上のセグメントを指す。比較ウインドウは、２つの配列の最適なアライメントのために参照配列（付加または欠失を含まない）と比較して約２０％またはそれ未満の付加または欠失（すなわち、ギャップ）を含み得る。比較ウインドウをアライメントするための配列の最適なアライメントは、コンピューターにより実装されたアルゴリズム（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ７．０、Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ、５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒｉｖｅ  Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ、ＵＳＡに含まれるＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ、およびＴＦＡＳＴＡ）によりまたは検査および選択される様々な方法のいずれかにより生成される最良のアライメント（すなわち、比較ウインドウにわたって最も高いパーセンテージの相同性を結果としてもたらす）により実行することができる。例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９７．  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  ２５：３３８９により開示されるようなＢＬＡＳＴファミリーのプログラムも参照することができる。配列解析の詳細な議論は、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，”  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  Ｉｎｃ，  １９９４−１９９８，  Ｃｈａｐｔｅｒ  １５のＵｎｉｔ  １９．３に見出すことができる。
【００９１】
本明細書において使用される「ストリンジェンシー」は、ハイブリダイゼーションの間の温度およびイオン強度条件、ならびにある特定の有機溶媒の存在または非存在を指す。ストリンジェンシーが高い程、配列間に観察される相補性の程度が高くなる。本明細書において使用される「ストリンジェントな条件」は、高い割合の相補的塩基を有する、好ましくは正確な相補性を有するポリヌクレオチドのみがハイブリダイズする温度およびイオン条件を指す。必要とされるストリンジェンシーは、ヌクレオチド配列依存的であり、ハイブリダイゼーションの間に存在する様々な成分に依存し、ヌクレオチドアナログが使用される時に大きく変化する。一般に、ストリンジェントな条件は、定義されたイオン強度およびｐＨにおける特定の配列についての熱的融点（Ｔｍ）より約１０℃〜２０℃低くなるように選択される。Ｔｍは、標的配列の５０％が相補的なプローブにハイブリダイズする（定義されたイオン強度およびｐＨの下での）温度である。ポリヌクレオチドは、少なくとも低いストリンジェンシー条件下、好ましくは少なくとも中間的なストリンジェンシー条件下、より好ましくは高いストリンジェンシー条件下で、標的配列にハイブリダイズすることが理解されるであろう。本明細書における低いストリンジェンシー条件への言及は、４２℃でのハイブリダイゼーションのために少なくとも約１％ｖ／ｖから少なくとも約１５％ｖ／ｖのホルムアミドおよび少なくとも約１Ｍから少なくとも約２Ｍの塩、ならびに４２℃での洗浄のために少なくとも約１Ｍから少なくとも約２Ｍの塩を含み、かつこれらを包含する。低いストリンジェンシー条件はまた、６５℃でのハイブリダイゼーションのために１％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５ＭのＮａＨＰＯ４（ｐＨ７．２）、７％のＳＤＳ、および室温での洗浄のために（ｉ）２×ＳＳＣ、０．１％のＳＤＳ、または（ｉｉ）０．５％のＢＳＡ、１ｍＭのＥＤＴＡ、４０ｍＭのＮａＨＰＯ４（ｐＨ７．２）、５％のＳＤＳを含み得る。中間的なストリンジェンシー条件は、４２℃でのハイブリダイゼーションのために少なくとも約１６％ｖ／ｖから少なくとも約３０％ｖ／ｖのホルムアミドおよび少なくとも約０．５Ｍから少なくとも約０．９Ｍの塩、ならびに４２℃での洗浄のために少なくとも約０．５Ｍから少なくとも約０．９Ｍの塩を含み、かつ包含する。中間的なストリンジェンシー条件はまた、６５℃でのハイブリダイゼーションのために１％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５ＭのＮａＨＰＯ４（ｐＨ７．２）、７％のＳＤＳ、および４２℃での洗浄のために（ｉ）２×ＳＳＣ、０．１％のＳＤＳ、または（ｉｉ）０．５％のＢＳＡ、１ｍＭのＥＤＴＡ、４０ｍＭのＮａＨＰＯ４（ｐＨ７．２）、５％のＳＤＳを含み得る。高いストリンジェンシー条件は、４２℃でのハイブリダイゼーションのために少なくとも約３１％ｖ／ｖから少なくとも約５０％ｖ／ｖのホルムアミドおよび少なくとも約０．０１Ｍから少なくとも約０．１５Ｍの塩、ならびに４２℃での洗浄のために少なくとも約０．０１Ｍから少なくとも約０．１５Ｍの塩を含み、かつ包含する。高いストリンジェンシー条件はまた、６５℃でのハ��ブリダイゼーションのために１％のＢＳＡ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５ＭのＮａＨＰＯ４（ｐＨ７．２）、７％のＳＤＳ、および６５℃より高い温度での洗浄のために（ｉ）０．２×ＳＳＣ、０．１％のＳＤＳ、または（ｉｉ）０．５％のＢＳＡ、１ｍＭのＥＤＴＡ、４０ｍＭのＮａＨＰＯ４（ｐＨ７．２）、１％のＳＤＳを含み得る。高いストリンジェンシー条件の一実施形態は、約４５℃での６×ＳＳＣ中のハイブリダイズの後、６５℃での０．２×ＳＳＣ、０．１％のＳＤＳ中での１回または複数回の洗浄を含む。非常に高いストリンジェンシー条件の一実施形態は、６５℃での０．５Ｍのリン酸ナトリウム、７％のＳＤＳでのハイブリダイズの後、６５℃の０．２×ＳＳＣ、１％のＳＤＳでの１回または複数回の洗浄を含む。他のストリンジェントな条件は当該技術分野において周知である。当業者は、様々な因子を操作して、ハイブリダイゼーションの特異性を最適化できることを認識するであろう。最終の洗浄のストリンジェンシーの最適化は、高い程度のハイブリダイゼーションを確実にするために役立ち得る。詳細な例について、ＣＵＲＲＥＮＴ  ＰＲＯＴＯＣＯＬＳ  ＩＮ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ（上掲）の２．１０．１〜２．１０．１６頁およびＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＣＬＯＮＩＮＧ．  Ａ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ（Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｓ．）（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ  １９８９）の１．１０１〜１．１０４節を参照。
【００９２】
本明細書において使用される場合、神経変性疾患の「症状」への言及は、疾患を指し示すとみなされる身体的または精神的特徴である。非限定的なＭＮＤ媒介性の疾患症状としては、進行性筋萎縮、麻痺、痙縮、反射異常亢進、および他の症状、例えば、嚥下困難、脚弱症、不明瞭な発語、歩行障害、顔面脱力、呼吸変化および筋痙攣が挙げられる。非限定的な認知症疾患症状としては、最近の会話、名前または事象を思い出すことの困難、無関心および鬱病（早期症状）、コミュニケーション障害、判断力低下、見当識障害、錯乱、挙動変化ならびに発話、嚥下および歩行困難（後期症状）が挙げられる。神経変性疾患を指し示し得るまたは神経変性疾患と関連付けられ得る他の症状の例としては、例えば、幻覚、睡眠障害、運動症状および神経遮断薬過敏性が挙げられる。典型的に、対象は、疾患および個々の対象に応じて１つまたはいくつもの症状を示す。いずれの症状が特定の神経変性疾患を指し示すとみなされるかの決定は、充分に当業者の技術的範囲内である。
【００９３】
本明細書において使用される場合、「治療」および「治療する」などの用語は、処置を必要とする対象、すなわち、神経変性疾患を有するか、または神経変性疾患を有すると診断されるか、または神経変性疾患を発症するリスクがある対象において、所望の薬理学的および／または生理学的効果を得ることを指す。「治療」は、
（ａ）神経変性疾患の発症および／もしくは進行を遅延させること；
（ｂ）神経変性疾患の症状を改善させること；
（ｃ）神経変性疾患もしくはその症状を抑制すること；ならびに／または
（ｄ）生活の質を向上もしくは長期化させること
を意味する。「治療」、「治療する」（ｔｒｅａｔ）または「治療する」（ｔｒｅａｔｉｎｇ）への言及は、対象を治癒させることまたは疾患進行を無期限に予防することを必ずしも意味しない。対象は最終的に神経変性疾患に屈するかもしれないが、疾患または状態の発症が遅延されるので、治療しないよりも長い期間にわたり生活の質が延長される。
【００９４】
「治療」の成功の徴候としては、寛解（ａｂａｔｅｍｅｎｔ）のような任意の客観的または主観的パラメーター；寛解（ｒｅｍｉｓｓｉｏｎ）；患者にとってより許容できる記憶または状態の減退；変性もしくは衰退もしくは病気の悪化の速度の緩慢化；悪化の最終時点の消耗性をより低くすること；または対象の身体的もしくは精神的健康の改善が挙げられる。症状の治療または改善は、身体検査、神経学的検査、および／または精神医学的評価の結果などの、客観的または主観的パラメーターに基づき得る。
【００９５】
本明細書において使用される場合、遺伝子の名称への下線またはイタリック体の適用は、そのタンパク質産物とは対照的に遺伝子を指し示し、タンパク質産物は、いかなる下線もイタリック体も存在しない遺伝子の名称により指し示される。例えば、「ＣＤ１４」は、ＣＤ１４遺伝子を意味する一方、「ＣＤ１４」は、「ＣＤ１４」遺伝子の転写および翻訳および／または選択的スプライシングから生成されるタンパク質産物を指し示す。
【００９６】
本明細書に記載される各実施形態は、そうでないことを具体的に記載しない限り、適宜変更の上で、それぞれのおよびあらゆる実施形態に適用される。
【００９７】
２．神経変性疾患の発症もしくは進行またはその症状を治療するための組成物および方法
本発明は、神経変性疾患の発症もしくは進行、またはその症状を治療するためのＣＤ１４アンタゴニスト抗体を含む方法および組成物を提供する。
【００９８】
２．１  ＣＤ１４アンタゴニスト抗体
本発明は、ＣＤ１４（例えば、ｍＣＤ１４またはｓＣＤ１４）に結合してＣＤ１４へのＤＡＭＰもしくはＰＡＭＰの結合を遮断する、かつ／または、ＣＤ１４に結合して、炎症促進性サイトカインの産生などの炎症促進性メディエーターの産生を結果としてもたらすＣＤ１４アゴニスト媒介性の応答を阻害しもしくは減少させる、任意のＣＤ１４アンタゴニスト抗体を想定する。一部の実施形態では、本発明のＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、ＣＤ１４アゴニスト、好適にはＤＡＭＰまたはＰＡＭＰのＣＤ１４への結合を阻害し、したがって、炎症促進性サイトカインの産生を阻害しまたは減少させる。このタイプの実例では、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、ヒトＣＤ１４のアミノ酸７からアミノ酸１４までの領域の少なくとも一部分に含まれるエピトープに結合する３Ｃ１０抗体（ｖａｎ  Ｖｏｏｈｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８３．  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  １５８：  １２６−１４５；  Ｊｕａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７０（２９）：  １７２３７−１７２４２）、ＣＤ１４のアミノ酸５７からアミノ酸６４までの領域の少なくとも一部分に含まれるエピトープに結合するＭＥＭ−１８抗体（Ｂａｚｉｌ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８６．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １６（１２）：１５８３−１５８９；  Ｊｕａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２７０（１０）：  ５２１９−５２２４）、４Ｃ１抗体（Ａｄａｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９９．  Ｊ．  Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ  Ｒｅｓ．  ５：  １３９−１４６；  Ｔａｓａｋａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｅｌｌ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．；  ２００３．  ２９（２）：２５２−２５８）の他に、ＬＰＳの結合を阻害して炎症促進性サイトカインの産生を抑制する２８Ｃ５および２３Ｇ４抗体、ならびにＬＰＳの結合を部分的に阻害して炎症促進性サイトカインの産生を抑制する１８Ｅ１２抗体（Ｌｅｔｕｒｃｑ  ｅｔ  ａｌ．の米国特許第５，８２０，８５８号明細書、同第６，４４４，２０６号明細書および同第７，３２６，５６９号明細書）から選択される。一部の実施形態では、本発明のＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、ＴＬＲ４のようなＴＬＲへのＣＤ１４の結合を阻害し、それによりＣＤ１４アゴニスト媒介性の応答を遮断し、その実例としては、国際公開ＷＯ２００２／４２３３３号パンフレットに開示されるＦ１０２４抗体が挙げられる。ＣＤ１４アンタゴニスト抗体に関する上記の参考文献のそれぞれは、参照することによりその全体が本明細書に組み込まれる。ＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、全長免疫グロブリン抗体、またはインタクトな抗体の抗原結合断片であってよく、その代表的な例としては、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、ＶＨドメインからなる単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８９．  Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）、および単離されたＣＤＲが挙げられる。好適には、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、キメラ、ヒト化またはヒト抗体である。
【００９９】
一部の実施形態では、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、米国特許第５，８２０，８５８号明細書に開示される抗体から選択される：
【０１００】
（１）配列：
ＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣ  ＲＡＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ  ＷＹＱＱＫＡＧＱＰＰＫＳＳＩＹ  ＲＡＡＮＬＥＳ  ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＦＣ  ＱＱＳＹＥＤＰＷＴ  ＦＧＧＧＴＫＬＧＮＱ［配列番号１］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（３Ｃ１０  ＶＬ）；および
配列：ＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳ  ＳＹＡＭＳ  ＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡ  ＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰＤＮＶＫＧ  ＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＩＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲ  ＧＹＹＤＹＨＹ  ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ［配列番号２］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（３Ｃ１０  ＶＨ）
を含む、抗体；
【０１０１】
（２）配列：ＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣ  ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨ  ＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹ  ＲＡＳＮＬＱＳ  ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＣＣ  ＱＱＳＮＥＤＰＴＴ  ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ［配列番号３］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（２８Ｃ５  ＶＬ）；および
配列：ＬＱＱＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＴＶＴＧＹＳＩＴ  ＳＤＳＡＷＮ  ＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧ  ＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ  ＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＶＲ  ＧＬＲＦＡＹ  ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ［配列番号４］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（２８Ｃ５  ＶＨ）
を含む、抗体；ならびに
【０１０２】
（３）配列：ＱＴＰＳＳＬＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＳＣ  ＲＡＳＱＤＩＫＮＹＬＮ  ＷＹＱＱＰＧＧＴＶＫＶＬＩＹ  ＹＴＳＲＬＨＳ  ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＳＬＴＩＳＮＬＥＱＥＤＦＡＴＹＦＣ  ＱＲＧＤＴＬＰＷＴ  ＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ［配列番号５］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（１８Ｅ１２  ＶＬ）；および
配列：ＬＥＳＧＰＧＬＶＡＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴ  ＮＹＤＩＳ  ＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧ  ＶＩＷＴＳＧＧＴＮＹＮＳＡＦＭＳ  ＲＬＳＩＴＫＤＮＳＥＳＱＶＦＬＫＭＮＧＬＱＴＤＤＴＧＩＹＹＣＶＲ  ＧＤＧＮＦＹＬＹＮＦＤＹ  ＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ［配列番号６］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（１８Ｅ１２  ＶＨ）
を含む、抗体。
【０１０３】
上記の抗体のＶＬおよびＶＨ  ＣＤＲ配列を含む抗体もまた想定され、その代表的な実施形態としては以下が挙げられる：
【０１０４】
（１）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ［配列番号７］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＲＡＡＮＬＥＳ［配列番号８］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＱＳＹＥＤＰＷＴ［配列番号９］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＳＹＡＭＳ［配列番号１０］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰＤＮＶＫＧ［配列番号１１］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＹＹＤＹＨＹ［配列番号１２］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体；
【０１０５】
（２）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨ［配列番号１３］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＲＡＳＮＬＱＳ［配列番号１４］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＱＳＮＥＤＰＴＴ［配列番号１５］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＳＤＳＡＷＮ［配列番号１６］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ［配列番号１７］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＬＲＦＡＹ［配列番号１８］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体；ならびに
【０１０６】
（３）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＱＤＩＫＮＹＬＮ［配列番号１９］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＹＴＳＲＬＨＳ［配列番号２０］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＲＧＤＴＬＰＷＴ［配列番号２１］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＮＹＤＩＳ［配列番号２２］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＶＩＷＴＳＧＧＴＮＹＮＳＡＦＭＳ［配列番号２３］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＤＧＮＦＹＬＹＮＦＤＹ［配列番号２４］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体。
【０１０７】
一部の実施形態では、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体はヒト化されている。このタイプの実例では、ヒト化されたＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、好適には、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体（例えば、上記されるＣＤ１４アンタゴニスト抗体の１つ）に対応するドナーＣＤＲセット、およびヒトアクセプターフレームワークを含む。ヒトアクセプターフレームワークは、以下：ＣＤＲに隣接する残基；グリコシル化部位の残基；希少な残基；カノニカルな残基；重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間の接触する残基；Ｖｅｒｎｉｅｒゾーン内の残基；およびＣｈｏｔｈｉａの定義のＶＨ  ＣＤＲ１とＫａｂａｔの定義の第１の重鎖フレームワークとの間で重なり合う領域中の残基からなる群から選択される鍵となる残基においてヒト生殖細胞系列アクセプターフレームワークと比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を含み得る。ヒト化ｍＡｂを製造するための技術は、当該技術分野において周知である（例えば、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８６．  Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：  ５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．  １９８８．  Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８８．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：  １５３４−１５３６；Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９２．  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８９：  ４２８５−４２８９；Ｓａｎｄｈｕ，  ＪＳ．，  １９９２．  Ｃｒｉｔ．  Ｒｅｖ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  １２：  ４３７−４６２、およびＳｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９３．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １５０：  ２８４４−２８５７を参照）。キメラまたはマウスモノクローナル抗体は、マウス免疫グロブリンの重鎖および軽鎖の可変鎖からのマウスＣＤＲをヒト抗体の対応する可変ドメインに移すことによりヒト化され得る。キメラモノクローナル抗体中のマウスフレームワーク領域（ＦＲ）もまた、ヒトＦＲ配列により置き換えられる。マウスＣＤＲをヒトＦＲに単純に移すことは、多くの場合、抗体親和性の低減またはさらには喪失を結果としてもたらすので、マウス抗体の元々の親和性を復元するために追加の改変が必要とされ得る。これは、ＦＲ領域中の１つまたは複数のヒト残基をそれらのマウス対応物により置換して、そのエピトープに対して良好な結合親和性を有する抗体を得ることにより達成され得る。例えば、Ｔｅｍｐｅｓｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：２６６−２７１）およびＶｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８、上掲）を参照。一般に、マウス対応物とは異なりかつ１つまたは複数のＣＤＲアミノ酸残基に近接してまたは接触して位置するヒトＦＲアミノ酸残基は、置換のための候補である。
【０１０８】
好ましい実施形態では、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、ＩＣ１４抗体（Ａｘｔｅｌｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１．  Ｊ．  Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ  Ｒｅｓ．  ７：  ３１０−３１４；および米国特許出願第２００６／０１２１５７４号明細書、参照することによりこれらの全体が本明細書に組み込まれる）またはその抗原結合断片である。ＩＣ１４抗体は、ヒトＣＤ１４に特異的に結合するキメラ（マウス／ヒト）モノクローナル抗体である。この抗体のマウス親抗体は、上記の２８Ｃ５である（Ｌｅｔｕｒｃｑ  ｅｔ  ａｌ．の特許第５，８２０，８５８号明細書、同第６，４４４，２０６号明細書および同第７，３２６，５６９号明細書、ならびにＬｅｔｕｒｃｑ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９６．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ９８：  １５３３−１５３８を参照）。ＩＣ１４抗体は、ＶＬドメインおよびＶＨドメインを含み：
【０１０９】
ＶＬドメインは、アミノ酸配列：
ＭＥＴＤＴＩＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＱＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ［配列番号２５］
を含み；かつ
【０１１０】
ＶＨドメインは、アミノ酸配列：
ＭＫＶＬＳＬＬＹＬＬＴＡＩＰＧＩＬＳＤＶＱＬＱＱＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＴＶＴＧＹＳＩＴＳＤＳＡＷＮＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＶＲＧＬＲＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ［配列番号２６］
を含む。
【０１１１】
２．２  スクリーニング方法
本発明はまた、神経変性疾患の発症もしくは進行またはその症状の治療において使用するために好適なＣＤ１４のアンタゴニスト抗体の同定方法を提供する。これらの方法は、一般に、被験物質がＣＤ１４を直接的にアンタゴナイズすることができるかどうかを決定することを含む。例えば、方法は、被験物質がＣＤ１４の量またはアゴニスト活性を阻害しまたは減少させることができるかどうかを決定することを伴ってよく、ＣＤ１４の量またはアゴニスト活性を阻害しまたは減少させる能力は、被験物質が、本明細書に記載される神経変性疾患の発症もしくは進行またはその症状の治療において使用するために好適であり得ることを指し示す。一部の実施形態では、被験物質を、ＣＤ１４、またはその表面上にＣＤ１４を発現する細胞、またはＣＤ１４が発現される核酸配列と、好適には、ＤＡＭＰまたはＰＡＭＰのようなＣＤ１４アゴニストの存在下で、接触させ、対照と比較した時の、アゴニストの存在下でのＣＤ１４の量またはアゴニスト活性の減少は、被験物質がＣＤ１４に結合してＣＤ１４を直接的にアンタゴナイズすることを指し示す。ＣＤ１４アゴニスト活性の減少または阻害は、例えば、ＴＬＲシグナル伝達経路（例えば、ＴＬＲ４シグナル伝達経路）およびＴＲＩＦ経路のような下流の経路の活性化、または細胞応答（例えば、炎症促進性サイトカインなどの炎症促進性メディエーターの産生）の惹起を阻害し、または減少させることを含む。一実施形態では、対象中のｍＣＤ１４を発現する末梢細胞またはｓＣＤ１４へのアンタゴニスト抗体の結合は、疾患病理と関連付けられる１つまたは複数の炎症促進性サイトカインの産生を阻害しまたは減少させる。
【０１１２】
本発明のスクリーニング方法は、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏで実行され得る。特に、被験物質をＣＤ１４またはその表面上にＣＤ１４を発現する細胞（例えば、免疫細胞）と接触させるステップは、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏで実行され得る。本発明のスクリーニング方法は、細胞ベースの系または無細胞系において実行され得る。例えば、本発明のスクリーニング方法は、その表面上にＣＤ１４を発現する細胞を被験物質と接触させるステップおよび被験物質との細胞の接触がＣＤ１４の量またはアゴニスト活性の減少に繋がるかどうかを決定するステップを含み得る。
【０１１３】
そのような細胞ベースのアッセイでは、ＣＤ１４および／もしくは被験物質は宿主細胞に内因性であってもよく、宿主細胞もしくは組織中に導入されてもよく、発現構築物もしくはベクターの発現を引き起こすもしくは可能とすることにより宿主細胞もしくは組織中に導入されてもよく、または細胞中の内因性遺伝子からの発現を刺激しもしくは活性化させることにより宿主細胞中に導入されてもよい。そのような細胞ベースの方法では、ＣＤ１４の活性の量は、該物質が、細胞中のＣＤ１４発現の調節もしくは細胞内のＣＤ１４タンパク質の不安定化などを通じて細胞中のＣＤ１４の量を変化させるかどうか、または細胞のＣＤ１４アゴニスト活性を変化させることを決定するために、被験物質の存在下または非存在下で評価され得る。被験物質の存在下でのより低いＣＤ１４アゴニスト活性または細胞表面上のＣＤ１４の量の減少の存在は、被験物質が、神経変性疾患またはその症状を有する個体の治療において本発明にしたがって使用するために好適なＣＤ１４のアンタゴニストであり得ることを指し示す。
【０１１４】
一実施形態では、そのような細胞ベースのアッセイは、治療される患者に由来する細胞または組織に対してｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏにおいて実行され得る。したがって、被験物質がその対象の細胞中のＣＤ１４の活性または量を減少させることができるか否かが決定され得る。一実施形態では、細胞は幹細胞またはマクロファージである。
【０１１５】
好ましい実施形態では、方法は、被験物質が、別の細胞成分、好適にはＣＤ１４の結合パートナー、例えば、分泌されるか（例えば、ＭＤ２）または細胞膜上に位置する（例えば、ＴＬＲ４）ＣＤ１４結合パートナーへの実質的または検出可能な結合を欠いているかどうかを決定し、それにより、被験物質がＣＤ１４の特異的アンタゴニストであることを決定することをさらに含む。このタイプの非限定的な例では、ＤＡＭＰまたはＰＡＭＰのようなＣＤ１４アゴニストの存在下で、被験物質を、（１）その表面上にＣＤ１４を発現する野生型細胞（例えば、マクロファージのような免疫細胞）、および（２）ＣＤ１４陰性細胞（例えば、（１）と同じであるが、ＣＤ１４遺伝子の機能の喪失を有する免疫細胞）と接触させる。被験物質が野生型細胞のＣＤ１４アゴニスト活性を阻害するが、ＣＤ１４陰性細胞のＣＤ１４アゴニスト活性を阻害しない場合、これは、被験物質がＣＤ１４特異的アンタゴニストであることを指し示す。このタイプの細胞は、日常的手順または動物を使用して構築され得る。
【０１１６】
他の実施形態では、本発明のスクリーニング方法は、無細胞アッセイを使用し得る。例えば、ＣＤ１４は、無細胞環境中に存在し得る。好適な無細胞アッセイは、細胞抽出物中で実行され得る。例えば、本発明の方法の接触ステップは、ＣＤ１４および／または被験物質を発現し、産生しまたはそれ以外に含有し得る細胞から得られる抽出物中で実行され得る。ＣＤ１４を含む無細胞系は、被験物質のような本発明の方法の他の成分と共にインキュベートされ得る。
【０１１７】
本発明の方法の接触ステップは、様々な成分のインキュベーションを含み得る。そのようなインキュベーションは、典型的に４℃〜４０℃の任意の好適な温度において行われ得る。インキュベーション期間は、最適な活性のために選択され得るが、迅速なハイスループットスクリーニングを促進するためにも最適化され得る。接触および任意選択のインキュベーションステップ後に、主題とする方法は、未結合の成分を除去する洗浄ステップをさらに含んでよく、そのような洗浄ステップは、一般に、検出の間にバックグラウンドシグナルを生じさせる標識、例えば、放射性または蛍光標識された非特異的結合成分を除去するために必要とされる場合に用いられる。
【０１１８】
細胞ベースまたは無細胞アッセイ系におけるインキュベーションは、マイクロタイタープレート（例えば、９６ウェルプレートまたは他のマイクロウェルプレート）中で行われ得る。さらに、インキュベーションは、（例えば、ハイスループットスクリーニングのために）自動化された様式で行われ得る。
【０１１９】
本発明のスクリーニング方法は、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて実行され得る。例えば、スクリーニング方法は、動物モデルにおいて実行され得る。そのようなｉｎ  ｖｉｖｏモデルにおいて、被験物質の効果は、循環（例えば、血液）中、または肝臓、腎臓もしくは心臓のような他の臓器中で評価され得る。好適には、動物は、マウスまたはラットのような非ヒト動物である。そのようなモデルは、被験物質のｉｎ  ｖｉｖｏでの効果を評価するために使用され得る。例えば、そのようなモデルは、被験物質がｉｎ  ｖｉｖｏにおいてＣＤ１４の活性または量を減少させることができるかどうかを評価するために使用され得る。そのような方法において、ＣＤ１４の量および／またはアゴニスト活性が評価され得る。
【０１２０】
被験物質が任意の望ましくない副作用を有するかどうかを決定するためにｉｎ  ｖｉｖｏモデルを使用することもできる。例えば、本発明の方法は、被験物質が特異的であるかどうかを決定するために、ＣＤ１４に対する被験物質の効果を他の受容体または細胞成分（例えば、ＭＤ２およびＴＬＲ４のようなＣＤ１４結合パートナー）に対するその効果と比較することができる。ＭＮＤのｉｎ  ｖｉｖｏ動物モデルは当業者に周知である。
【０１２１】
本明細書に記載されるｉｎ  ｖｉｖｏモデル、または本明細書に記載される細胞ベースもしくは無細胞アッセイモデルのようなｉｎ  ｖｉｔｒｏモデルにおいて、ＣＤ１４に対する被験物質の効果は、ＭＤ２およびＴＬＲ４のようなＣＤ１４結合パートナーなどの細胞成分に対する同じ物質の効果と比較され得る。上記で議論したように、本明細書に記載される治療および予防方法において使用するための望ましいＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、ＣＤ１４を特異的にアンタゴナイズする抗体であり得る。本発明のスクリーニング方法は、したがって、被験物質が１つまたは複数の他のそのような細胞成分の活性または量に対して何らかの効果を有するかどうかを評価する追加のステップを含み得る。そのような方法では、被験物質は、ＣＤ１４の活性または量を減少させるが、ＭＤ２およびＴＬＲ４のようなＣＤ１４結合パートナーなどの１つまたは複数の他の細胞成分の活性または量を減少させない、有意に減少させない、有意に減少させない、変化させない、または結衣に変化させないことが判明した場合に、好適なＣＤ１４アンタゴニスト抗体として同定され得る。
【０１２２】
本明細書に記載されるスクリーニング方法では、被験物質の存在下でのより低いＣＤ１４アゴニスト活性またはＣＤ１４の量の減少の存在は、被験物質が、個体において神経変性疾患の発症もしくは進行またはその症状を治療するために本発明にしたがって使用するための好適なＣＤ１４のアンタゴニスト抗体であり得ることを指し示す。
【０１２３】
ＣＤ１４のアンタゴニストである被験物質は、被験物質の存在下で、被験物質の非存在下と比較して、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７５％、もしくは少なくとも８５％またはより大きいＣＤ１４の活性またはレベルの減少を結果としてもたらし得る。ＣＤ１４のアンタゴニストである被験物質は、被験物質の存在下で、ＣＤ１４のアゴニスト活性またはレベルがもはや検出できないようなＣＤ１４アゴニスト活性またはレベルにおける減少を結果としてもたらし得る。そのような減少は、試験されている試料中に見られてよく、または例えば、方法が動物モデルにおいて実行される場合、特に、循環または肝臓、腎臓もしくは心臓のような他の臓器のような動物からの組織中に見られてよい。
【０１２４】
ＣＤ１４のアンタゴニストである被験物質は、好ましくは、上記されるようなＣＤ１４の特異的アンタゴニストである。しかしながら、これは、ＣＤ１４の特異的アンタゴニストにオフターゲットアンタゴニスト活性が完全に存在しないことを意味しない。これに関して、ＣＤ１４の特異的アンタゴニストは、他の細胞成分に対するごくわずかなまたは微小な直接的な結合および効果を有してよく、それにより、非ＣＤ１４細胞成分の活性、シグナル伝達または発現のアンタゴニズムは、ＣＤ１４の活性、シグナル伝達または発現に対するその物質の直接的な結合および効果の１５％未満、１０％未満、５％未満、１％未満、または０．１％未満である。
【０１２５】
ＣＤ１４のレベルまたは量は、ＣＤ１４遺伝子の発現を評価することにより測定され得る。遺伝子発現は、ｍＲＮＡ産生もしくはレベルまたはタンパク質産生もしくはレベルを調べることにより評価され得る。ｍＲＮＡおよびタンパク質のような発現産物は、当該技術分野において公知の方法により同定または定量化され得る。そのような方法は、目的のｍＲＮＡを特異的に同定するためにハイブリダイゼーションを利用し得る。例えば、そのような方法は、ＰＣＲまたはリアルタイムＰＣＲアプローチを伴い得る。目的のタンパク質を同定または定量化する方法は、そのタンパク質に結合する抗体の使用を伴い得る。例えば、そのような方法は、ウエスタンブロッティングを伴い得る。ＣＤ１４遺伝子発現の調節は、被験物質の存在下および非存在下において比較され得る。したがって、被験物質の非存在下で見られるレベルと比較してＣＤ１４遺伝子発現を減少させる被験物質が同定され得る。そのような被験物質は、本発明によるＣＤ１４の好適なアンタゴニストであり得る。
【０１２６】
スクリーニング方法は、ＣＤ１４のアゴニスト活性を評価し得る。例えば、そのような方法は、末梢血単核細胞を使用して実行され得る。そのような細胞は、例えばＬＰＳを用いた刺激への応答でＩＬ−１α、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７およびＩＬ−８のようなサイトカインを産生する。スクリーニング方法は、したがって、末梢血単核細胞を被験物質または担体と合わせることおよびＬＰＳを加えることを含み得る。次いで、細胞は、サイトカインのような炎症促進性メディエーターの産生を可能とする長さの期間（例えば、２４時間）にわたりインキュベートされ得る。次いで、その期間中に細胞により産生されるＩＬ−１α、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７およびＩＬ−８のようなサイトカインのレベルが評価され得る。被験物質が抗ＣＤ１４特性を有する場合、そのようなサイトカインの産生は、担体処理細胞と比較して低減されるはずである。
【０１２７】
被験物質が請求項の方法において使用するために好適であることを確認するためにさらなる試験を実行することもできる。例えば、上述したように、ＣＤ１４の好適なアンタゴニスト抗体は、炎症促進性メディエーター産生の有害な帰結（一般的にサイトカインストームとも称される）を低減させることができるはずである。本発明のスクリーニング方法は、したがって、炎症促進性メディエーターのそのような産生を伴う動物（例えば、ＡＬＳを有する動物）において被験物質の効果を評価することおよびその効果を被験物質の非存在下で見られる効果と比較することを伴う、上記で議論したもののようなさらなるステップを組み込み得る。好適なＣＤ１４アンタゴニストは、試験動物において神経変性疾患の効果の少なくとも一部を改善することができる。
【０１２８】
２．３  補助的な抗神経変性剤
指し示したように、本発明による化合物は、単独でまたは他の剤（本明細書において「補助的な抗神経変性剤」と称されることもある）と組み合わせて投与されてよく、他の剤としては、特に、本発明の他の化合物または直接的なＣＤ１４アンタゴニストではなくかつそれ以外に神経変性疾患もしくはその症状の発症もしくは進行の治療のために有用であるとして開示される化合物が挙げられる。ルー・ゲーリッグ病としても公知である筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、原発性側索硬化症、進行性筋萎縮症、仮性球麻痺、進行性球麻痺および下位運動ニューロン疾患などのＭＮＤについて、本明細書において想定される補助的な抗神経変性剤の非限定的な例としては、リルゾール（Ｍｉｌｌｅｒ  ＲＧ  ｅｔ  ａｌ．  Ｔｈｅ  Ｃｏｃｈｒａｎｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  ｏｆ  Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｒｅｖｉｅｗｓ．  ３：  ＣＤ００１４４７に開示されている）；ＣＤ４０とＣＤ４０リガンドとの相互作用を遮断する剤、例えば、ＣＤ４０および／またはＣＤ４０リガンドに特異的に結合する抗体（例えば、ＡＴ−１５０２）、および抗炎症剤、例えば、補体経路の遮断剤、例えば、Ｃ５ａ受容体アゴニスト（例えば、ＰＭＸ２０５またはエクリズマブ（Ｊ．Ｄ．  ｅｔ  ａｌ，  （２０１７）  Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  １７４（８））が挙げられる。ＭＮＤに対する併用療法において使用され得る他の剤の非限定的な例としては、ＮｕｒＯｗｎ幹細胞療法（ＢｒａｉｎＳｔｏｒｍ  Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＧＭ６０４、ラジカバ（ラジカット）、マシチニブ、メマンチンまたはチラセムチブが挙げられる。ＬＢＤ、ＦＴＤまたはＡＤのような認知症について、本明細書において想定される例示的な補助的な抗神経変性剤は、コリンエステラーゼ阻害剤（例えば、ドネペジル（アリセプト）、リバスチグミン（イクセロン）およびガランタミン（レミニールおよびラザダイン）である。ＡＤについて想定される例示的な補助的な抗神経変性剤としては、例えば、アリセプト、ラザダイン、ナメンダ、イクセロンおよびナムザリックから選択される承認された治療剤が挙げられるがこれらに限定されない。本明細書に記載されるＣＤ１４アンタゴニスト抗体との併用療法において使用するための適切な補助的な抗神経変性剤の選択は、充分に当業者の技術的範囲内である。
【０１２９】
補助的な抗神経変性剤は、それらの追加的活性または神経変性疾患（例えば、ＭＮＤおよび認知症）の治療プロファイルのために、およびある特定の例では、本発明の化合物と組み合わせた相乗効果のために、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体と組み合わせて使用され得る。
【０１３０】
併用療法が所望される場合、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、補助剤と別々に、同時にまたは逐次的に投与される。一部の実施形態では、これは、両方のタイプの配合物を含む単一の組成物もしくは薬理学的配合物を全身投与することにより、または１つの組成物がＣＤ１４アンタゴニスト抗体を含みかつ他方が補助剤を含む２つの別々の組成物もしくは配合物を同時に投与することにより達成され得る。他の実施形態では、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体を用いる治療は、数分から数日の範囲内の間隔で補助剤を用いる治療に先行または後続し得る。
【０１３１】
ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が補助剤とは別々に適用される実施形態では、一般に、各送達の時点の間に長い期間が過ぎないようにすることにより、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が依然として、補助剤を用いての末梢細胞（例えば、以下に限定されないがマクロファージ、単球、樹状細胞またはＴ細胞のような免疫細胞）による炎症促進性メディエーターの産生の阻害または減少などの、ＣＤ１４媒介性の効果の阻害に対する併用効果、特に、疾患またはその症状の発症を後退させまたは阻害する対象の能力を維持しまたは増進させるための併用効果を有利に発揮できることが確実になる。
【０１３２】
一部の状況では、互いに約１〜１２時間以内に、より好適には、互いに約２〜６時間以内に、両方のモダリティーを投与することができる。一部の状況では、治療のための期間を大幅に延ばすことが望ましいことがあるが、各々の投与の間に数時間（２、３、４、５、６または７）から数日（１、２、３、４、５、６、７または８）が経過する。特定の実施形態では、補助剤は、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体の投与の前に投与される。
【０１３３】
補助剤がＣＤ１４アンタゴニスト抗体とは別々に投与される実施形態では、神経変性剤および治療される疾患またはその症状に応じて、補助剤をＣＤ１４アンタゴニスト抗体のために使用される投与方法とは異なる方法により投与することができ、例えば、補助剤は全身投与またはＣＮＳに直接的に投与されてもよいことが理解されるであろう。
【０１３４】
ＣＤ１４アンタゴニスト抗体または補助剤のいずれかの１回より多くの投与が所望されると想定することができる。以下に例示されるように、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体を「Ａ」、補助剤を「Ｂ」として様々な組合せが用いられ得る：
【０１３５】
Ａ／Ｂ／Ａ  Ｂ／Ａ／Ｂ  Ｂ／Ｂ／Ａ  Ａ／Ａ／Ｂ  Ｂ／Ａ／Ａ  Ａ／Ｂ／Ｂ  Ｂ／Ｂ／Ｂ／Ａ  Ｂ／Ｂ／Ａ／Ｂ  Ａ／Ａ／Ｂ／Ｂ  Ａ／Ｂ／Ａ／Ｂ  Ａ／Ｂ／Ｂ／Ａ  Ｂ／Ｂ／Ａ／Ａ  Ｂ／Ａ／Ｂ／Ａ  Ｂ／Ａ／Ａ／Ｂ  Ｂ／Ｂ／Ｂ／Ａ  Ａ／Ａ／Ａ／Ｂ  Ｂ／Ａ／Ａ／Ａ  Ａ／Ｂ／Ａ／Ａ  Ａ／Ａ／Ｂ／Ａ  Ａ／Ｂ／Ｂ／Ｂ  Ｂ／Ａ／Ｂ／Ｂ  Ｂ／Ｂ／Ａ／Ｂ。
【０１３６】
２つまたはそれより多くの治療剤が「併せて」または「並行して」対象に投与される場合、それらは、単一の組成物中で同時に、または別々の組成物中で同時に、または別々の組成物中で分離した時点において投与され得る。
【０１３７】
主題とする方法はまた、錠剤、経口溶液、パッチもしくは静脈注射または他の非経口投与方式を介するもののような他の医療的介入を補足され得る、またはそれと組み合わせて実施され得る。例えば、ＡＬＳのような肺機能の減少に繋がった神経変性疾患において、介入は、非侵襲的換気デバイスのような機械的なものであってよく、または呼吸困難を和らげるために薬物が使用されてよい。主題とする方法はまた、理学療法、言語聴覚療法、精神療法、作業療法が挙げられるがこれらに限定されない非医学的療法と組み合わせて実施され得る。
【０１３８】
２．４  組成物
本明細書に記載されるように、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体の使用は、単独であっても補助的な抗神経変性剤との組合せであっても、ｍＣＤ１４を発現する細胞への結合によりまたはｓＣＤ１４への結合を介して、末梢細胞からの炎症促進性サイトカインなどの炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させることができ、その産生の続発症を低減させることができ、より具体的には、神経変性疾患の発症または進行およびそれらの症状を治療することができる。
【０１３９】
ＣＤ１４アンタゴニスト抗体および任意選択的に補助的な抗神経変性剤は、それら単独でまたは薬学的に許容される担体と共に投与され得る。
【０１４０】
本明細書に記載される方法において使用するために、ＣＤ１４アンタゴニスト抗体は、１つまたは複数の薬学的に許容される担体、安定化剤または賦形剤（担体）を使用して従来の方法で配合されてよく、それにより、当該技術分野、特に、タンパク質活性剤に関して当該技術分野において公知であるような医薬組成物が形成される。担体は、組成物の他の成分と適合性でありかつそのレシピエント（例えば、患者）に対して有害でないという意味で「許容される」。好適な担体は、典型的に、生理食塩水またはエタノール  グリセロールもしくはプロピレングリコールのようなポリオールを含む。
【０１４１】
抗体は、中性または塩形態として配合され得る。薬学的に許容される塩としては、酸付加塩（遊離アミノ基と共に形成される）が挙げられ、これは、塩酸もしくはリン酸のような無機酸、または酢酸、シュウ酸、酒石酸およびマレイン酸のような有機酸と共に形成される。遊離カルボキシル基と共に形成された塩はまた、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、または水酸化第二鉄のような無機塩基、およびイソプロピルアミン、トリメチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジンおよびプロカインのような有機塩基に由来し得る。
【０１４２】
組成物は、好適には、静脈内、筋肉内、皮下、または腹腔内投与などの全身投与のために配合されてよく、好都合には、レシピエントの血液と好ましくは等張の、抗体の無菌の水溶液を含む。そのような配合物は、典型的に、塩化ナトリウム、およびグリシンなどのような生理学的に適合性の物質を含有し、かつ生理的条件と適合性の緩衝化されたｐＨを有する水中に固体活性成分を溶解させて水溶液を製造し、かつ前記溶液を無菌とすることにより調製される。これらは、単位または複数用量容器、例えば、密閉されたアンプルまたはバイアル中に調製され得る。
【０１４３】
組成物は、例えば、ポリエチレングリコール、タンパク質、サッカリド（例えば、トレハロース）、アミノ酸、無機酸およびこれらの混合物のような安定化剤を組み込んでいてもよい。安定化剤は、適切な濃度およびｐＨの水溶液中で使用される。水溶液のｐＨは、５．０〜９．０の範囲内、好ましくは６〜８の範囲内に調整される。抗体の配合において、抗吸着剤が使用され得る。他の好適な賦形剤としては、典型的に、アスコルビン酸のような酸化防止剤を挙げることができる。組成物は、制御放出調製物として配合されてよく、これは、タンパク質を複合体化させるまたは吸収するポリマーの使用を通じて達成され得る。制御放出配合物のための適切なポリマーとしては、例えば、ポリエステル、ポリアミノ酸、ポリビニル、ピロリドン、エチレンビニルアセテート、およびメチルセルロースが挙げられる。制御放出のための別の可能な方法は、ポリエステル、ポリアミノ酸、ハイドロゲル、ポリ（乳酸）またはエチレンビニルアセテートコポリマーのようなポリマー材料の粒子中に抗体を組み込むことである。あるいは、ポリマー粒子中にこれらの剤を組み込む代わりに、例えば、コアセルベーション技術もしくは界面重合により調製されるマイクロカプセル中、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースもしくはゼラチン−マイクロカプセルおよびポリ（メチルメタシレート（ｍｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｙｌａｔｅ））マイクロカプセル、またはコロイド薬物送達システム中、例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子、およびナノカプセル、またはマクロエマルション中にこれらの材料を捕捉させることが可能である。
【０１４４】
ＣＤ１４アンタゴニスト抗体および任意選択的に補助的な抗神経変性剤はまた、エアロゾルの形態で気道に直接的に投与され得る。エアロゾルとして使用するために、溶液または懸濁液中の本発明の阻害剤は、従来のアジュバントと共に、好適な噴射剤、例えば、プロパン、ブタン、またはイソブタンのような炭化水素噴射剤と共に加圧エアロゾル容器中にパッケージ化され得る。本発明の材料はまた、ネブライザーまたはアトマイザーにおけるように非加圧形態において投与され得る。
【０１４５】
当業者は、配合物は、それらの意図する用途、すなわち投与経路にしたがって慣行的に設計されることを認識するであろう。
【０１４６】
３．治療方法
本発明は、神経変性疾患を有するかまたは神経変性疾患を発症するリスクがある（もしくは罹患しやすい）対象を治療する治療方法を提供する。これらの方法は、それらの範囲内に、ヒト、および動物（例えば、獣医学的応用）における神経変性疾患の発症または進行の他に、そのような疾患と関連付けられる症状の治療を含む。そのような疾患としては、例えば、ＡＬＳ、ＰＬＳ、ＰＭＡ、進行性球麻痺（ＰＢＰ）および仮性球麻痺から選択されるＭＮＤが挙げられる。そのような疾患としてはまた、例えば、アルツハイマー病、レビー小体型認知症（ＤＬＢおよびＰＤＤ）、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）および血管性認知症から選択される認知症が挙げられる。
【０１４７】
本発明は、対象に本発明のＣＤ１４アンタゴニスト抗体、および任意選択的に補助的な抗神経変性剤を全身投与することによる対象において神経変性疾患の発症もしくは進行またはその症状を治療する方法を想定する。ＣＤ１４アンタゴニスト抗体、および任意選択的に補助的な抗神経変性剤（本明細書において「治療剤」と称されることもある）は、疾患と関連付けられる症状の軽減のような意図する目的を対象において達成するために「有効量」で投与され得る。患者に投与される治療剤の用量は、神経変性疾患と関連付けられる少なくとも１つの症状の低減のような有益な応答を対象において経時的に達成するために充分であるべきである。
【０１４８】
一実施形態では、疾患はＭＮＤであり、かつ、進行性筋萎縮、麻痺、痙縮、反射異常亢進、呼吸機能ならびに嚥下困難、脚弱症、構音障害、不明瞭な発語、歩行障害、顔面脱力および筋痙攣のような他の症状から選択される少なくとも１つの症状が低減される。一実施形態では、疾患は認知症であり、かつ、記憶喪失；鬱病、コミュニケーション障害、判断力低下、見当識障害、錯乱、挙動変化、運動症状、幻覚、神経遮断薬過敏性ならびに発話、嚥下および歩行困難から選択される少なくとも１つの症状が低減される。
【０１４９】
投与される治療剤の量または投与頻度は、対象の年齢、性別、体重および全般的健康状態を含めて、治療される対象に依存し得る。これに関して、投与のための治療剤の正確な量は、医師の判断に依存する。当業者は、常用の実験により、所望の治療アウトカムのために本発明の医薬組成物中に含ませるべき、本明細書に記載されるＣＤ１４アンタゴニスト抗体、および任意選択的に補助的な抗神経変性剤の効果的な非毒性の量を決定することができる。
【０１５０】
一部の実施形態では、治療剤の「有効量」は、意図する目的を達成するために効果的な量で活性成分が含有される量である。より具体的には、治療有効量は、１つまたは複数の炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させて、神経変性疾患（例えば、ＡＬＳまたはＡＤ）の症状を治療して、治療されている対象の生存を長期化させるために効果的な活性成分（ＣＤ１４アンタゴニスト）の量を意味する。治療有効量の決定は、特に本明細書において提供される詳細な開示に照らして、充分に当業者の能力の範囲内である。
【０１５１】
神経変性疾患を有するまたは神経変性疾患のリスクがある対象としては、疾患重篤度の１つもしくは複数のバイオマーカーを有するか、または神経変性疾患を発症しやすいことを指し示す患者が挙げられる。一実施形態では、疾患はＭＮＤであり、かつ、バイオマーカーは、例えば、ＳＯＤ１、ＴＤＰ−４３、ＦＵＳ、Ｃ９ＯＲＦ７２、ＡＬＳ２、ＡＬＳ４、ＡＬＳ８、ＮＥＫ１、ＵＢＱＬＮ２、ＶＣＰ、ＳＥＴＸ、ＡＮＧ、ＰＦＮ１、ＭＡＴＲ３、ＣＨＣＨＤ１０、ＴＵＢＡ４Ａ、ＴＢＫ１、Ｃ２１ｏｒｆ２およびＯＰＴＮまたはこれらの発現産物のうちの１つまたは複数から選択される。この実施形態では、神経変性疾患のマーカーの存在は、好適には、生体試料におけるマーカー遺伝子の発現産物の存在もしくは過剰発現および／またはマーカー遺伝子（例えば、ＳＯＤ１、ＴＤＰ−４３、ＦＵＳ、Ｃ９ＯＲＦ７２、ＡＬＳ２、ＡＬＳ４、ＡＬＳ８、ＮＥＫ１、ＵＢＱＬＮ２、ＶＣＰ、ＳＥＴＸ、ＡＮＧ、ＰＦＮ１、ＭＡＴＲ３、ＣＨＣＨＤ１０、ＴＵＢＡ４Ａ、ＴＢＫ１、Ｃ２１ｏｒｆ２およびＯＰＴＮ  ｍＲＮＡまたはポリペプチド）における突然変異の存在を検出することにより決定される。ＭＮＤについての一部の実施形態では、ＴＤＰ−４３陽性封入物の細胞質沈着の存在ならびに／またはニューロフィラメントの血清および／もしくはＣＳＦレベルの上昇もまた決定され得る。
【０１５２】
別の実施形態では、疾患は、アルツハイマー病、ＦＴＤ  ＬＢＤ（ＤＬＢおよびＰＤＤ）および血管性認知症などの認知症であり、かつ、マーカーは、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）ならびにプレセニリン１および２をコードする遺伝子における突然変異、アポリポタンパク質Ｅ（ＡＰＯＥ）遺伝子のε４、２および３アレル（ＡＰＯＥ−ε４、ＡＰＯＥ−ε２、ＡＰＯＥ−ε３）における突然変異、Ｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｏｎ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｃｅｌｌｓ  ２（ＴＲＥＭ２）遺伝子、ＭＡＰＴ遺伝子、ＰＧＲＮ遺伝子とも呼ばれるＧＲＮ遺伝子、ＴＡＲＤＢＰ遺伝子、ＶＣＰ遺伝子およびＣＨＭＰ２Ｂ遺伝子における突然変異のうちの１つまたは複数から選択される。α−シヌクレイン、Ｓ１００Ａ９およびＳ１００Ｂ、クロモグラニン、循環ＤＮＡ、熱ショックタンパク質およびアミロイドの血清および／またはＣＳＦレベルの上昇もまた決定され得る。
【０１５３】
他の実施形態では、神経変性疾患のリスクがある対象はまた、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中の疾患と関連付けられる炎症促進性サイトカイン、例えば、ＴＮＦ、ＩＬ−１−α、ＩＬ−６、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１β、ＩＬ−８、ＩＬ−１８、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、ＩＬ−１７、ケモカイン、ＣＤ１４高発現単球および炎症性メディエーターｍＲＮＡ転写物のうちの１つまたは複数のレベルの上昇の存在を決定することにより同定され得る。一実施形態では、疾患はＭＮＤであり、かつ、サイトカインは、ＩＬ−６またはＩＬ−１７のうちの１つまたは複数から選択される。一実施形態では、疾患は認知症であり、かつ、サイトカインは、ＩＬ−１、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αから選択される。
【０１５４】
疾患を有するまたは疾患のリスクがある対象を同定するために神経変性疾患の任意の公知のバイオマーカーが使用され得ることが理解されるであろう。
【０１５５】
予防剤の投与は、神経変性疾患に特徴的な症状の発現の前に行うことができ、それにより、疾患は阻害されまたは代替的にはその進行が遅延される。
【０１５６】
本発明が容易に理解され、実施上の効果がもたらされ得るように、特定の好ましい実施形態を以下の非限定的な実施例によりこれより記載する。
【実施例】
【０１５７】
実施例１
モノクローナル抗体ＩＣ１４を全身投与することによるＭＮＤを有する患者の治療および予防
実験の設計
家族性または弧発性ＭＮＤ（Ａｗａｊｉ−Ｓｈｉｍａ  Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓにより臨床的に可能性がある、可能性が高い、または確定的であると定義される）を有し、インフォームドコンセントの３年以内にＭＮＤの最初の症状を呈しており、かつ１８歳から７５歳までの年齢の１０人の患者を集める。
【０１５８】
投薬レジメン
患者を盲検でＩＣ１４の２つの用量レジメンの１つを与えられるように割り当て、全ての用量は、２時間の期間にわたり注入としてＩＶ送達される：
・最初の３人の患者について、試験１日目に２ｍｇ／ｋｇの投与量の後、試験３〜５日目に１日１回１ｍｇ／ｋｇの合計で４用量のＩＣ１４。
・その後の７人の患者について、試験１日目に４ｍｇ／ｋｇの投与量の後、試験２〜４日目に１日１回２ｍｇ／ｋｇの合計で４用量のＩＣ１４。
【０１５９】
試験への参加は、試験薬物の最後の用量の２８日後まで続ける。
【０１６０】
剤形：
３０ｍＬのバイアル中に５ｍｇ／ｍＬ（送達される２５ｍＬ中に１２５ｍｇ）のＩＣ１４を含有する無菌のガラスバイアル。静脈内に２時間にわたり注入される注射用の２５０ｍＬの無菌の通常の生理食塩水中に試験薬物を調製する。
【０１６１】
試験のエンドポイント：
試験の第１のエンドポイントは、ＩＣ１４の安全性、忍容性および免疫原性がないことである。ＩＣ１４の安全性および忍容性は、治療に帰せられる毒性および有害事象を調べることにより決定される。安全性のパラメーターは、病歴および身体検査、バイタルサイン、有害事象、および実験室の所見（Ｃｈｅｍ−２０、ＣＢＣ、血小板数、凝固試験）からの臨床徴候および症状の評価を含む。免疫原性試験では、ＩＣ１４に対する抗体を測定する。
【０１６２】
第２のエンドポイントは以下の通りである：
・開始用量の投与後のピーク血清ＩＣ１４濃度、治療の経過後のピーク血清および脳脊髄液（ＣＳＦ）濃度ならびに開始用量の投与後および治療の経過後の血清ＩＣ１４濃度対時間曲線下面積（ＡＵＣ）。
・Ｒｅｖｉｓｅｄ  Ａｍｙｏｔｒｏｐｈｉｃ  Ｌａｔｅｒａｌ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｒａｔｉｎｇ  Ｓｃａｌｅ（ＡＬＳＦＲＳ−Ｒ）による疾患重篤度、座った状態での努力肺活量（ＦＶＣ）および他のＲＦＴパラメーターならびに鼻吸気圧（ＳＮＰ）試験による呼吸機能における治療に関連する変化。
・ＡＬＳ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ−Ｒｅｖｉｓｅｄ（ＡＬＳＳＱＯＬ−Ｒ）スコアによる生活の質およびＥｄｉｎｂｕｒｇｈ  Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ａｎｄ  Ｂｅｈａｖｉｏｕｒａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（ＥＣＡＳ）スコアによる認知機能における治療に関連する変化。
・ＣＲＰ、ＩＬ−６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１βならびにニューロフィラメント重鎖および軽鎖を含む疾患バイオマーカープロファイルにおける治療に関連する変化。
【０１６３】
試料収集および患者の評価：
試料を表２に詳述されるように患者から回収する：
【表２】
2020517740.tif 000003
【０１６４】
データ解析
トランス活性化応答エレメント（ＴＡＲ）−ＤＮＡ結合タンパク質（ＴＤＰ）−４３およびニューロフィラメントの血漿濃度などのＭＮＤバイオマーカーを測定する。血清およびＣＳＦニューロフィラメントを評価してもよい。
【０１６５】
そのうちの１つまたは複数が評価される他の可能性があるバイオマーカーとしては、ＣＲＰ、ＳＯＤ１、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１７、ケモカイン、ＣＤ１４高発現単球および末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中の炎症性メディエーターｍＲＮＡ転写物が挙げられる。血清およびＣＳＦを炎症性遺伝子活性化を阻害する能力についてｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて評価する。
【０１６６】
ベースラインおよび試験薬物の用量１および用量４の直後に単球上のＣＤ１４の飽和および循環性ｓＣＤ１４のレベルを測定することにより薬力学的評価を行う。ベースライン；用量１の直後および６および２２時間後；用量４の前および直後および２４時間後；ならびにウォッシュアウト時に血清中のＩＣ１４の薬物動態測定を行う。ベースライン、ＩＣ１４の第４の用量後およびウォッシュアウトの間にＣＳＦ中のＩＣ１４の薬物動態測定を行う。
【０１６７】
試験への参加を試験薬物の最後の用量の２８日後まで続ける。試験への参加は、合計３２〜３３日間およびスクリーニング評価のための最長４週間とする。
【０１６８】
最初の試験薬物投与の開始時点（試験１日目）からの連続する暦日として試験日を定義する。最初の試験薬物投与の開始時点（試験１日目）から約２４時間間隔（または最初に投与される３人の患者について第１の用量と第２の用量との間の４８時間の間隔）で試験薬物を投与する。
【０１６９】
ＭＮＤ患者の血液およびＣＳＦ中のＩＣ１４の薬力学および薬物動態に関する情報を収集し、これは以下を含む：
・ベースライン、開始用量の投与後のピークおよびウォッシュアウトの血清ＩＣ１４濃度、ならびにベースライン、治療の経過後のピークおよびウォッシュアウトの血清および脳脊髄液（ＣＳＦ）濃度。
・開始用量の投与後および治療の経過後の血清ＩＣ１４濃度対時間曲線下面積（ＡＵＣ）。
・循環性単球ＣＤ１４受容体結合およびｓＣＤ１４±ｓＣＤ１４−ＳＴ（プレセプシン）レベルをベースライン、ならびに用量１および用量４の後に算出する。
【０１７０】
免疫細胞、炎症性サイトカインおよびケモカインのレベルなどの末梢血およびＣＳＦ中の疾患バイオマーカープロファイルにおける治療に関連する変化ならびにニューロフィラメント（ＮＦ）重鎖および軽鎖レベルなどの他のバイオマーカーの変化に関する情報。
【０１７１】
化合物
試験薬物ＩＣ１４はＩｍｐｌｉｃｉｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｔｄ．（Ｑｕｅｅｎｓｌａｎｄ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ）により供給される。ＩＣ１４は、ヒトＣＤ１４に対する組換えキメラ（マウス／ヒト）モノクローナル抗体である。マウス親抗体は、２８Ｃ５と称される抗体である。ＩＣ１４は、チャイニーズハムスター卵巣細胞からＬ２Ｈ２γ４免疫グロブリンとして分泌される。
【０１７２】
結果
ＩＣ１４の全用量、すなわち、試験１日目に４ｍｇ／ｋｇの後、試験２〜４日目に１日１回２ｍｇ／ｋｇの合計で４用量の投薬を与えられた単一の患者について結果を得た。上記のように、ベースラインならびに試験４および８日目に腰椎穿刺を行い、ＣＳＦを回収した。ＩＬ−１７およびＩＬ−１βのレベルをマルチプレックス分析により測定し、ニューロフィラメント軽鎖（ＮＦＬ）のレベルをＥＬＩＳＡにより測定した。図１に示すように、ＩＣ１４を用いた治療は、８日目のＣＳＦにおいて炎症性マーカーＩＬ−１７およびＩＬ−１βのレベルの減少、そしてまた、疾患のマーカーであるＮＦＬの減少を結果としてもたらした。ＩＬ−１７およびＩＬ−１βは、ＡＬＳ／ＭＮＤ患者およびＡＬＳ／ＭＮＤ疾患モデルの両方において疾患と関連付けられている一方（Ｒｅｎｔｚｏｓ  ｅｔ  ａｌ．  （２０１０）  Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｌ．  Ｓｃａｎｄ．  １２２，  ４２５−９；Ｆｉａｌａ  ｅｔ  ａｌ．  （２０１０）  Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ７，  ７６；  Ｍｅｉｓｓｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  （２０１０）  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  １０７，  １３０４６−１３０５０；ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｍｅｅｒ  ＆  Ｓｉｍｏｎ．  （２０１０）  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．  Ｓ．  Ａ．  １０７，  １２７４１−２；およびＺｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．  （２０１５）  Ｅｘｐ．  Ｎｅｕｒｏｌ．  ２７３，  ２４−３５）、ＮＦＬは神経変性のマーカーとして記載されている。ＭＮＤを有する対象に全身送達された時にＣＳＦ中のこれらの分子のレベルをモジュレ―トするＩＣ１４の能力は、静脈内ＩＣ１４治療は、ＡＬＳ／ＭＮＤを推進する神経炎症プロセスの抑制において治療的有用性を有することを指し示す。
【０１７３】
実施例２
初代ヒト小膠細胞のＴＤＰ−４３推進性の活性化のＩＣ１４による阻害
脳および脊髄における免疫応答は、主に、防御の第一線として作用しかつＡＬＳなどの神経変性疾患を推進する神経炎症応答の開始および持続において鍵となる役割を果たす小膠細胞により媒介される（Ｓａｌｔｅｒ  ＆  Ｓｔｅｖｅｎｓ  （２０１７）  Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．  ２３，  １０１８−１０２７）。
【０１７４】
ＳＯＤ１およびＴＤＰ−４３は、ＡＬＳに関与する細胞内タンパク質である。マウス小膠細胞を使用するｉｎ  ｖｉｔｒｏの系により、両方のタンパク質は、損傷関連分子パターン（ＤＡＭＰ）として作用して、小膠細胞を活性化させ、炎症促進性サイトカインを誘導し、かつ神経毒性を促進できることが実証されている。これらの応答はＴＬＲおよびＮＬＲＰ３シグナル伝達を利用し、ＤＡＭＰ推進性の活性化は、ＴＬＲ２、ＴＬＲ４またはＣＤ１４に対する抗体を遮断することにより阻害され（Ｚｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．  （２０１０）  Ｇｌｉａ  ５８，  ２３１−２４３；およびＺｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．  （２０１５）  Ｅｘｐ．  Ｎｅｕｒｏｌ．  ２７３，  ２４−３５）、神経炎症の阻害におけるＣＤ１４の遮断についての役割を指し示す。
【０１７５】
初代ヒト小膠細胞の増殖のための組織培養系を使用して、ＤＡＭＰ  ＴＤＰ−４３はヒト小膠細胞を活性化させるかどうかを決定し、それにより、この活性化プロセスの炎症性リードアウトを同定しかつこの活性化を阻害するＩＣ１４の能力を評価した。
【０１７６】
材料および方法
試薬
ＩＣ１４はＩｍｐｌｉｃｉｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｔｄ（ＩＣ１４−３、ロット１−ＦＩＮ−０７７９）により提供され、このＧＭＰ抗体の活性および安定性を安定性試験により確認した。ＩＣ１４の対照として、アイソタイプ対照ヒトＩｇＧ４抗体をＡｕｓｔｒａｌｉａｎ  Ｂｉｏｓｅａｒｃｈ（Ｕｌｔｒａ−ＬＥＡＦ（商標）  Ｐｕｒｉｆｉｅｄ  Ｈｕｍａｎ  ＩｇＧ４  Ｉｓｏｔｙｐｅ、カタログ＃４０３４０２）から得た。
【０１７７】
野生型および突然変異体（Ｑ３３１Ｋ）の両方の形態のＥ．ｃｏｌｉ中で製造された組換えＴＤＰ−４３は、Ａｓｓｏｃｉａｔｅ  Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ  Ｊｕｌｉｅ  Ａｔｋｉｎｓ、Ｍａｃｑｕａｒｉｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙにより提供された。
【０１７８】
小膠細胞の培養
初代ヒト小膠細胞の培養物は、Ｇｕｉｌｌｅｍｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  Ｒｅｓ．  （１９９７）  ４９，  ５７６−５９１）により記載されるプロトコールの改変を使用して確立した。簡潔に述べれば、インフォームドコンセントを得た後の治療的中絶後に回収した１４〜１９週齢の流産胎児から胎児ヒト脳組織を回収した（Ｈｕｍａｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｅｔｈｉｃｓ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｆ  Ｍａｃｑｕａｒｉｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙにより承認された；ＨＲＥＣ  ５２０１６００７１９）。１グラムのこの材料を２４ウェル組織培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）の２４ウェルに外科的解剖により等分割し、１０％の熱不活性化ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）を含むＤＭＥＭ中、３７℃で５％のＣＯ2において５日間培養した。２分間のトリプシン処理ステップの後に、ＤＭＥＭ＋ＦＣＳを用いて中和することにより、プレートに付着した小膠細胞を残して非小膠細胞を除去した。小膠細胞を処理の前にさらに４８時間培養した。
【０１７９】
小膠細胞の刺激
以下の濃度のＩＣ１４または対照ＩｇＧ４  ｍＡｂ抗体のいずれかを用いて２時間、１週齢初代小膠細胞培養物を前処理した：非処理；１μｇ／ｍｌ、１００ｎｇ／ｍｌまたは１０ｎｇ／ｍｌの最終濃度のＩＣ１４；１μｇ／ｍｌ、１００ｎｇ／ｍｌ、または１０ｎｇ／ｍｌの最終濃度の対照ＩｇＧ４。
【０１８０】
次いで、野生型または突然変異体ＴＤＰ−４３を５００ｎｇ／ｍｌの最終濃度まで加えた。対照ウェルにはＴＤＰ−４３を与えなかった。
【０１８１】
１０％の熱不活性化ＦＣＳを含むＤＭＥＭ中３７℃、５％のＣＯ2中で４８時間、培養物をインキュベートした。上清をマルチプレックスサイトカイン分析のために回収し、６５プレックスサイトカインおよびケモカインアレイ（Ｈｕｍａｎ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ／Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ６５−Ｐｌｅｘ  Ｐａｎｅｌ、Ｅｖｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｌｇａｒｙ、Ａｌｂｅｒｔａ）を使用し、キヌレニン経路代謝物のプロファイリングのために３連で分析した。
【０１８２】
結果
サイトカイン／ケモカイン誘導
いかなる外的な刺激も存在しない状況で、初代ヒト小膠細胞は、ＡＬＳを有する患者の循環中またはＣＳＦ中に同定されている多くのものを含む広範なサイトカインおよびケモカインを産生した（図２）。これらの分子の大部分は低いレベルで発現されたが、家族性および弧発性の両方のＭＮＤの患者において突然変異していることが示されており、かつ炎症誘発特性を有する（Ｚｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．  （２０１５）  Ｅｘｐ．  Ｎｅｕｒｏｌ．  ２７３，  ２４−３５）と記載されているタンパク質である野生型または突然変異体ＴＤＰ−４３（Ｑ３３１Ｋ）のいずれかを用いて刺激した時に有意な上方調節を示した。Ｚｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．の観察と合致して、小膠細胞を活性化させる野生型または突然変異体ＴＤＰ−４３の能力において最小の差異が検出された。産生されたサイトカインおよびケモカインとしては、炎症促進性サイトカインＴＮＦα、ＩＬ１αおよびＩＬ−１２ｐ４０の他に、炎症の部位への炎症細胞の誘引を促進する役割を果たすケモカインＣＸＣＬ１０、およびＣＣＬ５が挙げられる（図２ＡおよびＢ）。したがって、ＴＤＰ−４３は、小膠細胞の活性化、炎症性メディエーターの局在化された産生およびニューロン損傷の部位への炎症細胞のその後の誘引によりＡＬＳにおいて運動ニューロン損傷の開始および持続をさせ得る。
【０１８３】
アイソタイプ対照抗体を用いた小膠細胞培養物の前処理は、このＴＤＰ−４３推進性のサイトカイン産生に対して効果を有しなかった。ＩＣ１４を含めることにより、ＴＮＦα、ＩＬ−１α、ＩＬ１２ｐ４０およびＣＸＣＬ１０の阻害などの、野生型および突然変異体の両方のＴＤＰ−４３推進性のサイトカインおよびケモカイン産生の用量依存的な阻害が結果としてもたらされた（図２ＡおよびＢ）。多数のこれらの被分析物についてＴＤＰ−４３刺激後の発現レベルは、標準曲線の範囲を超えて上昇し（例えば、ＴＮＦα、ＣＸＣＬ１０）、発現レベルの正確な特徴付けは不可能であった。それにもかかわらず、サイトカインまたはケモカイン産生の阻害がこれらの極端な条件下で検出され、ＩＣ１４は、より生理学的なＤＡＭＰ推進性の刺激性条件を利用するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイにおいて有効であり得ることを示唆した。
【０１８４】
本明細書において参照されるあらゆる特許、特許出願、および刊行物の開示は、参照することによりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０１８５】
本明細書におけるあらゆる参考文献の参照は、そのような参考文献が本出願の「先行技術」として利用可能であると認めるものと解されるべきではない。
【０１８６】
本明細書の全体を通じた目的は、任意の一実施形態または特徴の特定の集まりに本発明を限定することなく本発明の好ましい実施形態を記載することであった。当業者は、したがって、本開示に照らして、本発明の範囲から離れることなく例示された特定の実施形態において様々な改変および変更を行い得ることを理解する。全てのそのような改変および変更は、添付の特許請求の範囲に含まれることが意図される。
【図１】
2020517740.tif 000004
【図２Ａ】
2020517740.tif 000005
【図２Ｂ】
2020517740.tif 000006
【配列表】
2020517740000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成31年2月18日(2019.2.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
神経変性疾患を有する対象の末梢において哺乳動物細胞からの炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させる方法であって、膜結合型ＣＤ１４（ｍＣＤ１４）または可溶性ＣＤ１４（ｓＣＤ１４）を、末梢細胞からの炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させるために充分な量のＣＤ１４アンタゴニスト抗体と接触させることを含む、からなるまたはから本質的になる、方法。
【請求項２】
対象において神経変性疾患の発症もしくは進行またはその症状を治療する方法であって、有効量のＣＤ１４アンタゴニスト抗体を前記対象に全身投与することを含む、からなるまたはから本質的になる、方法。
【請求項３】
神経変性疾患の発症または進行を治療するためのＣＤ１４アンタゴニスト抗体の使用であって、前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が全身投与される、使用。
【請求項４】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、前記適用のための医薬として製造されたものである、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、前記対象において末梢細胞による１つまたは複数の炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させる、請求項２〜４のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項６】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体がｍＣＤ１４およびｓＣＤ１４の両方に結合する、請求項５に記載の方法または使用。
【請求項７】
前記末梢細胞が免疫細胞である、請求項１、請求項５または請求項６に記載の方法または使用。
【請求項８】
前記免疫細胞が、単球、マクロファージ、樹状細胞またはＴ細胞から選択される、請求項７に記載の方法または使用。
【請求項９】
前記炎症促進性メディエーターが、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１（ＩＬ−１）−α、ＩＬ−６、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１β、ＩＬ−８、ＩＬ−１７およびＩＬ−１８のうちの１つまたは複数から選択されるサイトカインである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項１０】
好適には前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体の投与の前に、前記対象が神経変性疾患を有するかまたは神経変性疾患を発症するリスクがあることを同定することをさらに含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項１１】
前記神経変性疾患または障害が、ＭＮＤまたは認知症から選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項１２】
前記ＭＮＤが、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、原発性側索硬化症（ＰＬＳ）、進行性筋萎縮症（ＰＭＡ）、進行性球麻痺（ＰＢＰ）、仮性球麻痺からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法または使用。
【請求項１３】
前記ＭＮＤがＡＬＳである、請求項１２に記載の方法または使用。
【請求項１４】
前記認知症が、アルツハイマー病、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）および血管性認知症からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法または使用。
【請求項１５】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、
（１）配列：
ＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨＷＹＱＱＫＡＧＱＰＰＫＳＳＩＹＲＡＡＮＬＥＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＦＣＱＱＳＹＥＤＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＧＮＱ［配列番号１］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（３Ｃ１０  ＶＬ）；および
配列：
ＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＡＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰＤＮＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＩＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＧＹＹＤＹＨＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ［配列番号２］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（３Ｃ１０  ＶＨ）
を含む、抗体；
（２）配列：
ＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＱＳ  ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＣＣＱＱＳＮＥＤＰＴＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ［配列番号３］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（２８Ｃ５  ＶＬ）；および
配列：
ＬＱＱＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＴＶＴＧＹＳＩＴＳＤＳＡＷＮＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＶＲＧＬＲＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ［配列番号４］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（２８Ｃ５  ＶＨ）
を含む、抗体；ならびに
（３）配列：
ＱＴＰＳＳＬＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＳＣＲＡＳＱＤＩＫＮＹＬＮＷＹＱＱＰＧＧＴＶＫＶＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＳＬＴＩＳＮＬＥＱＥＤＦＡＴＹＦＣＱＲＧＤＴＬＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ［配列番号５］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（１８Ｅ１２  ＶＬ）；および
配列：
ＬＥＳＧＰＧＬＶＡＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＤＩＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＴＳＧＧＴＮＹＮＳＡＦＭＳＲＬＳＩＴＫＤＮＳＥＳＱＶＦＬＫＭＮＧＬＱＴＤＤＴＧＩＹＹＣＶＲＧＤＧＮＦＹＬＹＮＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ［配列番号６］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（１８Ｅ１２  ＶＨ）
を含む、抗体
から選択される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項１６】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、請求項１５に定義される上記の抗体のＶＬおよびＶＨ  ＣＤＲ配列を含む、からなるまたはから本質的になる、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項１７】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、
（１）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ［配列番号７］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＲＡＡＮＬＥＳ［配列番号８］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＱＳＹＥＤＰＷＴ［配列番号９］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＳＹＡＭＳ［配列番号１０］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰＤＮＶＫＧ［配列番号１１］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＹＹＤＹＨＹ［配列番号１２］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体；
（２）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨ［配列番号１３］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＲＡＳＮＬＱＳ［配列番号１４］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＱＳＮＥＤＰＴＴ［配列番号１５］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＳＤＳＡＷＮ［配列番号１６］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ［配列番号１７］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＬＲＦＡＹ［配列番号１８］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体；ならびに
（３）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＱＤＩＫＮＹＬＮ［配列番号１９］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＹＴＳＲＬＨＳ［配列番号２０］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＲＧＤＴＬＰＷＴ［配列番号２１］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＮＹＤＩＳ［配列番号２２］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＶＩＷＴＳＧＧＴＮＹＮＳＡＦＭＳ［配列番号２３］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＤＧＮＦＹＬＹＮＦＤＹ［配列番号２４］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体
から選択される、請求項１６に記載の方法または使用。
【請求項１８】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体がヒト化されている、請求項１７に記載の方法または使用。
【請求項１９】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体がＶＬドメインおよびＶＨドメインを含み、
前記ＶＬドメインが、アミノ酸配列：
ＭＥＴＤＴＩＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＱＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ［配列番号２５］
を含み、かつ
前記ＶＨドメインが、アミノ酸配列：
ＭＫＶＬＳＬＬＹＬＬＴＡＩＰＧＩＬＳＤＶＱＬＱＱＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＴＶＴＧＹＳＩＴＳＤＳＡＷＮＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＶＲＧＬＲＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ［配列番号２６］
を含む、
請求項１８に記載の方法または使用。
【請求項２０】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、ＩＣ１４、またはその抗原結合断片である、請求項１９に記載の方法または使用。
【請求項２１】
前記ＣＤ１４アンタゴニストが、前記神経変性疾患または前記その症状を治療する１つまたは複数の補助的な抗神経変性剤と組み合わせて投与される、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法または使用。
【請求項２２】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体および前記補助的な抗神経変性剤が、同時にまたは逐次的に投与される、請求項２１に記載の方法または使用。
【請求項２３】
前記補助的な抗神経変性剤が抗炎症剤である、請求項２１または２２に記載の方法または使用。
【請求項２４】
前記抗炎症剤が補体経路阻害剤である、請求項２３に記載の方法または使用。
【請求項２５】
前記補体経路阻害剤がＣ５ａ阻害剤である、請求項２４に記載の方法または使用。
【請求項２６】
前記Ｃ５ａ阻害剤がＰＭＸ２０５またはエクリズマブである、請求項２５に記載の方法または使用。
【請求項２７】
前記補助的な抗神経変性剤が、ＣＤ４０とＣＤ４０リガンドとの相互作用を遮断する剤である、請求項２１または２２に記載の方法または使用。
【請求項２８】
前記剤が、ＣＤ４０および／またはＣＤ４０リガンドに特異的に結合する抗体である、請求項２７に記載の方法または使用。
【請求項２９】
前記抗体がＡＴ−１５０２である、請求項２８に記載の方法または使用。
【請求項３０】
前記補助的な抗神経変性剤がリルゾールまたはエダラボンである、請求項２１に記載の使用方法。
【請求項３１】
神経変性疾患の進行もしくは発症、またはその症状を治療するための医薬組成物であって、薬学的に許容される担体または希釈剤と共にＣＤ１４アンタゴニスト抗体を含み、からなりまたはから本質的になり、前記組成物が全身投与のために配合されている、組成物。
【請求項３２】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、ｓＣＤ１４およびｍＣＤ１４の両方に結合し、かつ、対象において末梢細胞による１つまたは複数の炎症促進性メディエーターの産生を阻害しまたは減少させる、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記細胞が免疫細胞である、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記免疫細胞が、単球、マクロファージ、樹状細胞またはＴ細胞から選択される、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記炎症促進性メディエーターが、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１（ＩＬ−１）−α、ＩＬ−６、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−β、ＩＬ−１β、ＩＬ−８、ＩＬ−１７およびＩＬ−１８のうちの１つまたは複数から選択されるサイトカインである、請求項３２〜３４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
好適には前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体の投与の前に、対象が神経変性疾患を有するかまたは神経変性疾患を発症するリスクがあることを同定することをさらに含む、請求項３１〜３３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記神経変性疾患または障害が、ＭＮＤまたは認知症から選択される、請求項３１〜３６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
前記ＭＮＤが、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、原発性側索硬化症（ＰＬＳ）、進行性筋萎縮症（ＰＭＡ）、進行性球麻痺（ＰＢＰ）、仮性球麻痺からなる群から選択される、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記ＭＮＤがＡＬＳである、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記認知症が、アルツハイマー病、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）および血管性認知症からなる群から選択される、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、
（１）配列：
ＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨＷＹＱＱＫＡＧＱＰＰＫＳＳＩＹＲＡＡＮＬＥＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＦＣＱＱＳＹＥＤＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＧＮＱ［配列番号１］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（３Ｃ１０  ＶＬ）；および
配列：
ＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＡＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰＤＮＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＩＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＧＹＹＤＹＨＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ［配列番号２］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（３Ｃ１０  ＶＨ）
を含む、抗体；
（２）配列：
ＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＱＳ  ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＣＣＱＱＳＮＥＤＰＴＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ［配列番号３］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（２８Ｃ５  ＶＬ）；および
配列：
ＬＱＱＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＴＶＴＧＹＳＩＴＳＤＳＡＷＮＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＶＲＧＬＲＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ［配列番号４］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（２８Ｃ５  ＶＨ）
を含む、抗体；ならびに
（３）配列：
ＱＴＰＳＳＬＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＳＣＲＡＳＱＤＩＫＮＹＬＮＷＹＱＱＰＧＧＴＶＫＶＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＳＬＴＩＳＮＬＥＱＥＤＦＡＴＹＦＣＱＲＧＤＴＬＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ［配列番号５］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＬドメイン（１８Ｅ１２  ＶＬ）；および
配列：
ＬＥＳＧＰＧＬＶＡＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＮＹＤＩＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＴＳＧＧＴＮＹＮＳＡＦＭＳＲＬＳＩＴＫＤＮＳＥＳＱＶＦＬＫＭＮＧＬＱＴＤＤＴＧＩＹＹＣＶＲＧＤＧＮＦＹＬＹＮＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ［配列番号６］
を含む、からなるまたはから本質的になるＶＨドメイン（１８Ｅ１２  ＶＨ）
を含む、抗体
から選択される、請求項３１〜４０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、請求項４１に定義される上記の抗体のＶＬおよびＶＨ  ＣＤＲ配列を含む、からなるまたはから本質的になる、請求項３１〜４０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、
（１）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ［配列番号７］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＲＡＡＮＬＥＳ［配列番号８］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＱＳＹＥＤＰＷＴ［配列番号９］（３Ｃ１０  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＳＹＡＭＳ［配列番号１０］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰＤＮＶＫＧ［配列番号１１］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＹＹＤＹＨＹ［配列番号１２］（３Ｃ１０  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体；
（２）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨ［配列番号１３］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＲＡＳＮＬＱＳ［配列番号１４］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＱＳＮＥＤＰＴＴ［配列番号１５］（２８Ｃ５  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＳＤＳＡＷＮ［配列番号１６］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ［配列番号１７］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＬＲＦＡＹ［配列番号１８］（２８Ｃ５  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体；ならびに
（３）ａ）Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含み、Ｌ−ＣＤＲ１が配列ＲＡＳＱＤＩＫＮＹＬＮ［配列番号１９］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ１）を含み；Ｌ−ＣＤＲ２が配列ＹＴＳＲＬＨＳ［配列番号２０］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｌ−ＣＤＲ３が配列ＱＲＧＤＴＬＰＷＴ［配列番号２１］（１８Ｅ１２  Ｌ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＬドメイン、またはその抗原結合断片；およびｂ）Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含み、Ｈ−ＣＤＲ１が配列ＮＹＤＩＳ［配列番号２２］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ１）を含み；Ｈ−ＣＤＲ２が配列ＶＩＷＴＳＧＧＴＮＹＮＳＡＦＭＳ［配列番号２３］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ２）を含み；かつ、Ｈ−ＣＤＲ３が配列ＧＤＧＮＦＹＬＹＮＦＤＹ［配列番号２４］（１８Ｅ１２  Ｈ−ＣＤＲ３）を含む、抗体ＶＨドメイン、またはその抗原結合断片を含む、抗体
から選択される、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体がヒト化されている、請求項４３に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体がＶＬドメインおよびＶＨドメインを含み、
前記ＶＬドメインが、アミノ酸配列：
ＭＥＴＤＴＩＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＶＮＳＦＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＱＳＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＤＤＶＡＴＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ［配列番号２５］
を含み、かつ
前記ＶＨドメインが、アミノ酸配列：
ＭＫＶＬＳＬＬＹＬＬＴＡＩＰＧＩＬＳＤＶＱＬＱＱＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＴＶＴＧＹＳＩＴＳＤＳＡＷＮＷＩＲＱＦＰＧＮＲＬＥＷＭＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＦＦＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＶＲＧＬＲＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ［配列番号２６］
を含む、
請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記ＣＤ１４アンタゴニスト抗体が、ＩＣ１４、またはその抗原結合断片である、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
前記医薬組成物が、補助的な抗神経変性剤をさらに含み、前記補助剤が、前記疾患またはその症状を治療する、請求項３１〜４６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
前記補助的な抗神経変性剤が抗炎症剤である、請求項４７に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
前記抗炎症剤が補体阻害剤である、請求項４８に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
前記補体阻害剤がＣ５ａ阻害剤である、請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
前記Ｃ５ａ阻害剤がＰＭＸ２０５またはエクリズマブである、請求項５０に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
前記補助的な抗神経変性剤が、ＣＤ４０とＣＤ４０リガンドとの相互作用を遮断する剤である、請求項４７に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
前記剤が、ＣＤ４０および／またはＣＤ４０リガンドに特異的に結合する抗体である、請求項５２に記載の医薬組成物。
【請求項５４】
前記抗体がＡＴ−１５０２である、請求項５３に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
前記補助的な抗神経変性剤がリルゾールまたはエダラボンである、請求項４７に記載の医薬組成物。
【国際調査報告】
2020517740.tif 000007
2020517740.tif 000008
2020517740.tif 000009
2020517740.tif 000010
2020517740.tif 000011
2020517740.tif 000012