(57)【要約】  本発明は、ブルクホルデリア・セパシア複合体（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａ  ｃｏｍｐｌｅｘ）（ＢＣＣ）およびステノトロフォモナス・マルトフィリア（Ｓ．マルトフィリア）株から選択される病原体によって引き起こされるバクテリア感染症の治療に使用するためのＮ−アセチルシステインに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリアから選択される感受性株（ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ  ｓｔｒａｉｎ）の増殖の阻害または抑制および／または死滅させるのに使用するための、Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）。
【請求項２】
ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）から選択される病原体の感受性株によって引き起こされる、バクテリア感染症の治療に使用するためのＮＡＣ。
【請求項３】
下部呼吸器系（ｌｏｗｅｒ  ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｓｙｓｔｅｍ）にも影響を及ぼす慢性疾患に罹患している個体において、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）から選択される病原体の感受性株によって少なくとも部分的に引き起こされる肺増悪（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｅｘａｃｅｒｂａｔｉｏｎｓ）の発現（ｅｐｉｓｏｄｅｓ）の治療に使用するためのＮＡＣ。
【請求項４】
慢性疾患が、嚢胞性線維症、または慢性閉塞性肺疾患である、請求項３に記載のＮＡＣ。
【請求項５】
慢性疾患に罹患している個体が、免疫不全（ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ）および／または入院患者である、請求項４に記載のＮＡＣ。
【請求項６】
下部呼吸器系にも影響を及ぼす慢性疾患に罹患している個体において、ＢＣＣおよび／またはＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）バイオフィルムの形成を阻害することによって肺定着（ｌｕｎｇ  ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ）を防止するのに使用されるＮＡＣ。
【請求項７】
慢性疾患が、嚢胞性線維症、または慢性閉塞性肺疾患である、請求項６に記載のＮＡＣ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、増殖の阻害または抑制および／またはバークホルデリア・セパシア複合体（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａ  ｃｏｍｐｌｅｘ、以下、ＢＣＣ）及びステノトロホモナス・マルトフィリア（以下、Ｓ．マルトフィリア）から選択される病原体（ｐａｔｈｏｇｅｎ）の感受性株の死滅に使用するための、Ｎ−アセチルシステイン（以下ＮＡＣ）に関する。
【０００２】
より具体的には、本発明は、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）株から選択される病原体（ｐａｔｈｏｇｅｎ）によって、少なくとも部分的に引き起こされる疾患の治療に使用するためのＮＡＣに関する。
【０００３】
発明の背景
ＢＣＣは健康な人には医学的リスクがほとんどない。 
しかし、免疫系が弱くなったり、慢性の肺疾患、特に嚢胞性線維症（ｃｙｓｔｉｃ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ）を患っている人の気道は、ＢＣＣ感染症にかかりやすくなる。
ＢＣＣによる感染は、例えば、嚢胞性線維症患者において、肺機能の低下を加速させる肺増悪（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｅｘａｃｅｒｂａｔｉｏｎｓ）を引き起こす可能性がある。
【０００４】
慢性定着菌群（ｃｏｌｏｎｉｚｅｒ）として、ＢＣＣはまた、慢性閉塞性肺疾患（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ）や慢性肉芽腫性疾患（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｕｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）などの嚢胞性線維症以外の肺疾患患者に感染症を引き起こす可能性がある。
Ｓ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）感染症は、主に、衰弱し（ｄｅｂｉｌｉｔａｔｅｄ）、免疫抑制された個体に起こるが、しかしこれに、限定されない。
Ｓ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）は、一般的に、ヒトの気道感染症に関連している。例えば、Ｓ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）は、慢性閉塞性肺疾患および嚢胞性線維症の肺増悪を引き起こす可能性がある。
【０００５】
ＢＣＣも、Ｓ．マルトフィリアも、多剤耐性表現型（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ）およびバイオフィルムを形成する能力を特徴とする。
この特徴のために、それらは、数カ月または数年継続し、そして、現在の抗生物質治療戦略によって根絶することは困難または不可能である、免疫系の弱体化または慢性肺疾患、特に嚢胞性線維症を有する個体における慢性肺定着（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｌｕｎｇ  ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ）の原因である。
【０００６】
発明の要約
本出願人は、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）感染の発生が、例えば嚢胞性線維症および慢性閉塞性肺疾患などの下部呼吸器系にも影響を及ぼす慢性疾患に罹患している個体のすでに易感染性の（ｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ）臨床状態を、さらに悪化させる肺増悪の発現（ｅｐｉｓｏｄｅｓ）をもたらし得ると認識した。
したがって、本出願人は、例えば、嚢胞性線維症および慢性閉塞性肺疾患のような下部呼吸器系にも影響を及ぼす慢性疾患に罹患している個体において、少なくとも部分的に肺増悪の発現（ｅｐｉｓｏｄｅｓ）を引き起こす、ＢＣＣおよび／またはＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）感染症の治療の問題に直面した。
長期にわたる試験および実験の後、出願人は、驚くべきことに、ＮＡＣが、一定数のＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）の臨床分離株に対して、抗菌活性を発揮し、殺バクテリア効果さえも齎すことができることを見出した。
さらに驚くべきことに、ＮＡＣは、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）のインビトロバイオフィルムモデルにおいて、抗バイオフィルム活性を有することが見出された。
したがって、ＮＡＣは、ＢＣＣおよび／またはＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）感染症の治療に有用な治療ツールとして考えられ、したがって、上述の患者のように、非常に易感染性の（ｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ）臨床像を有する患者の状態改善に寄与する。
ＢＣＣおよび／またはＳ．マルトフィリアバイオフィルムの形成を阻害することにおけるＮＡＣの能力は、特に、例えば嚢胞性線維症および慢性閉塞性肺疾患などの下部呼吸器系にも影響を及ぼす慢性疾患に罹患している個体において、これらの病原体による肺定着を予防することにもまた、潜在的用途を想定する。
【０００７】
発明の詳細な説明
ＮＡＣは、アミノ酸Ｌ−システインおよび還元型グルタチオン（ＧＳＨ）の両方のアセチル化前駆体である。
歴史的に、それは、アセトアミノフェンの過量投与による解毒剤として、およびフリーラジカルの酸化損傷によって特徴付けられる疾患の潜在的な治療として、慢性呼吸器疾患の範囲の粘性または肥厚した気道粘液を有する患者における、胸部理学療法と組み合わせた粘液溶解剤として用いられてきた。
驚くべきことに、本発明によれば、例えば、嚢胞性線維症および慢性閉塞性肺疾患のような下部呼吸器系にも影響を及ぼす慢性疾患に罹患している個体において、既に、易感染性の（ｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ）臨床状態を悪化させて、少なくとも部分的に肺増悪の発現（ｅｐｉｓｏｄｅｓ）の原因として知られている、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）の感受性株の増殖の阻害又は抑制および／または死滅にも、ＮＡＣが効果的であるということを、出願人は、今、見出した。
従って、本発明の目的は、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）から選択される病原体の増殖の阻害または抑制および／または感受性株の死滅における使用のためのＮＡＣである。
【０００８】
本発明の別の目的は、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）から選択される病原体の感受性株によって引き起こされるバクテリア感染症の治療に使用するためのＮＡＣである。
本発明のさらなる目的は、例えば、嚢胞性線維症および慢性閉塞性肺疾患などの下部気道系にも影響を与える慢性疾患に罹患している個体における、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）から選択される病原体の感受性株によって少なくとも部分的に引き起こされる肺増悪の発現（ｅｐｉｓｏｄｅｓ）の治療に使用するためのＮＡＣである。
【０００９】
本発明の特定の局面において、上記のような慢性疾患を患っている個体は、免疫不全および／または入院患者である。
別の局面において、本発明は、特に、例えば嚢胞性線維症および慢性閉塞性肺疾患などの下部気道系にも影響を及ぼす慢性疾患に罹患している個体において、ＢＣＣおよび／またはＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）のバイオフィルムの形成を阻害するのに使用することによって、肺定着（ｌｕｎｇ  ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ）を防止するのに使用するＮＡＣに関する。
【００１０】
本発明によれば、用語「個体」または「患者」は、哺乳動物種の一員、好ましくはヒトを指すために互換的に使用される。
本発明によれば、用語「抗バクテリア」は、増殖を阻害し、抑制し、および／またはそれらを死滅することによって、バクテリアの有害な影響を減らすことを意味する。
本発明によれば、用語「殺バクテリア（ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ）」は、バクテリアに対して破壊的な死滅作用（ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｋｉｌｌｉｎｇ  ａｃｔｉｏｎ）を有することを意味する。
本発明によれば、「バクテリア感染」は、微生物集団の存在が、宿主哺乳動物に損傷を与えているあらゆる状況を指す。
したがって、個体は、個体の体内または上に過剰な数の微生物集団が存在する場合、または微生物集団の存在の影響が個体の細胞または他の組織に損傷を与えている場合に、微生物感染症に「罹患して」います。
【００１１】
本発明によれば、用語「増悪」は、疾患の重症度またはその徴候もしくは症状のいずれかにおける増加を指す。
特に、肺増悪は、日々の変動を超え、投薬の変化を招き、そして、しばしば罹患率、入院、死亡を引き起こし、および、健康に関連するＱＯＬに強く影響する、患者の呼吸器症状の急激な悪化の断続的な発現（ｅｐｉｓｏｄｅｓ）で特定することができる。
【００１２】
本発明によれば、「治療する」または「治療すること」という用語は、下部呼吸器系にも影響を及ぼす慢性疾患を患っている個体において、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）の感受性株によって引き起こされる、バクテリア感染の程度、強度、範囲、またはそれに起因するその関連症状の減少、減少、軽減、制限、または緩和を指す。
【００１３】
ＮＡＣは市販されており、そしてまた当該分野で公知の方法によって合成され得る。
１以上の賦形剤からなる医薬用途に適した担体と一緒に、本発明に従って使用するためのＮＡＣを含む医薬組成物もまた本発明の範囲に包含される。
本発明によれば、「担体」という用語は、ＮＡＣを適切なインビボまたはインビトロ部位に送達するためのビヒクルとして適切な任意の物質を含む。
本発明によれば、「賦形剤」という用語は、活性成分の投与をさらに容易にするために医薬組成物に添加される任意の不活性物質を含む。
経口、非経口（皮下、筋肉内または静脈内）および吸入経路を含む、任意の適切な投与経路を本発明の組成物に使用することができる。
本発明によれば、「経口」または「経口」という用語は、吸収が、口、胃、小腸、および口腔粘膜の小血管の領域のうちの１つまたは複数の体の領域で生じる、口からの体内への導入を指す。 
【００１４】
経口投与用のＮＡＣ製剤の非限定的な例としては、例えば、個体による経口摂取のための、錠剤、コーティング錠、顆粒剤、丸剤、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、懸濁剤などが挙げられる。
経口投与に適した担体は当技術分野において周知である。
非経口投与の場合、ＮＡＣは、水溶液で、例えば生理学的に適合性の緩衝液または生理学的塩緩衝液で製剤化することができる。
注射用製剤は、例えばアンプルの単位剤形で、または必要に応じて添加された保存料を含む複数回投与用容器で提供されてもよい。
吸入経路による投与のために、ＮＡＣは典型的には水溶液で処方され、そしてプラスチックまたはガラス製の従来のネブライザーを使用することによって細かい噴霧（ｎｅｂｕｌａｅ）として都合よく送達され得、その結果、最適量の適切な範囲の粒径が患者に提供される。
ＮＡＣはまた、気管内または粘膜投与による下部気道への直接注入によって投与され得る。あるいは、ＮＡＣの直接注入は、肺内エアロゾル化器または超小型エアロゾル化器（ｓｕｂ−ｍｉｎｉａｔｕｒｅ  ａｅｒｏｓｏｌｉｚｅｒ）を用いて実行されてもよい。
【００１５】
本発明の医薬組成物は、当技術分野において周知の方法に従って、従来の方法で製造することができる。
本発明による好ましい医薬組成物は錠剤およびバイアルである。
本発明に従って使用するためのＮＡＣの量は、投与経路、選択された組成物の種類、個々の患者の特徴、治療の期間および同時治療の性質に応じて変わり得る。
例えば、有効量のＮＡＣは、例えば、嚢胞性線維症および慢性閉塞性肺疾患などの下部呼吸器系にも影響を及ぼす慢性疾患を患っている個体において、バクテリア感染またはＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）の感受性株によって引き起こされる関連する症状の程度、強度、範囲、の減少、減少、軽減、制限、または緩和を齎すことができる。
特定の態様では、有効量のＮＡＣは、例えば、嚢胞性線維症および慢性閉塞性肺疾患のような下部呼吸器系にも影響を及ぼす慢性疾患に罹患している個体において、頻度、期間を低減でき、また、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）の感受性株によって、少なくとも部分的に引き起こされる肺増悪の発現（ｅｐｉｓｏｄｅ）の重症度を軽減し、軽減し、または低減でき、および／または前記発現（ｅｐｉｓｏｄｅ）の症状が改善するまでの時間を短縮できる。
一実施形態によれば、ＮＡＣの有効量は、単回投与またはさらに反復投与で投与される１００〜５８００ｍｇ／日の間で変動し得る。
好ましくは、ＮＡＣの有効量は、１００〜４６００ｍｇ／日の間で変動し得る。
異なる適応症のためのＮＡＣを含有する異なる剤形は、欧州連合および米国で市販されている。
ＮＡＣを含む医薬組成物は、例えばイタリアではＦＬＵＩＭＵＣＩＬ（登録商標）の商標で販売されている。
具体的な組成、投与経路、および投与量は、患者の状態を考慮して、個々の医師によって選択され得る。
本発明をよりよく説明するために、以下の非限定的な実施例をここに示す。 
【００１６】
実施例
材料／方法：１６のＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）および１６のＢＣＣ（すなわち、Ｂ．ｃｅｐａｃｉａ、Ｂ．ｃｅｎｏｃｅｐａｃｉａ、Ｂ．ｍｕｌｔｉｖｏｒａｎｓ、Ｂ．ｍｅｔａｌｌｉｃａ、Ｂ．ｓｅｍｉｎａｌｉｓ、Ｂ．ｓｔａｂｌｅｉｓ）臨床分離株に対するＮＡＣの最小阻止濃度（ＭＩＣ）を、微量液体希釈法（ｂｒｏｔｈ  ｍｉｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ）により、決定した。
１６ｍｇ／ｍｌのＭＩＣを示す８つの選択された株（４つのＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）および４つのＢＣＣ分離株）を用いて、ＮＡＣの抗菌活性および抗バイオフィルム活性をさらに調べた。
【００１７】
増殖曲線における、最小発育阻止濃度以下の（ｓｕｂ−ＭＩＣ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ）（すなわち、４および８ｍｇ／ｍｌ）効果をモニターすることによって、および、最小殺菌時間アッセイ（ｔｉｍｅ−ｋｉｌｌ  ａｓｓａｙｓ）（１６および３２ｍｇ／ｍｌで）を行うことによって抗菌活性を評価した。
バイオフィルム形成（４、８および１６ｍｇ／ｍｌ）を阻害することにおける、ＮＡＣの能力を、ＭＢＥＣハイスループットアッセイを用いて調べ、そして生細胞数（ＶＣＣ）によって評価した。
結果：ＮＡＣのＭＩＣは、それぞれ、９のＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）分離株および７のＢＣＣの分離株について、１６ｍｇ／ｍｌであり、残りのものについては３２ｍｇ／ｍｌであった。
最小発育阻止濃度以下（ｓｕｂ−ＭＩＣ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ）では、ＮＡＣは、試験したすべての分離株の増殖を遅らせた。
【００１８】
最小殺菌時間アッセイ（ｔｉｍｅ−ｋｉｌｌ  ａｓｓａｙｓ）において、３２ｍｇ／ｍｌのＮＡＣは、１つのＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）および１つのＢＣＣ分離株に対して殺バクテリア性であり（すなわち、３  ｌｏｇより上のバクテリア接種源（ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｉｎｏｃｕｌｕｍ）の減少を引き起こした）、そして、三つの追加の分離株（２つのＳ．マルトフィリアおよび１つのＢＣＣ）で、１．１〜１．７  ｌｏｇ  ＣＦＵ／ｍｌの範囲の減少を構成した（ａｃｃｏｕｎｔｅｄ  ｆｏｒ）。一方、＜１  ｌｏｇ  ＣＦＵ／ｍｌの減少が残りで観察された。
Ｓ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）とＢＣＣのバイオフィルム増加は、それぞれ、６．７〜７．１  ｌｏｇ  ＣＦＵ／ｐｅｇ、５．１〜６．６  ｌｏｇ  ＣＦＵ／ｐｅｇの範囲であった。
【００１９】
ＮＡＣは、すべてのＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）と２つのＢＣＣ分離株で、用量依存的にバイオフィルム形成を阻害することがわかった。対照と比較して、Δｌｏｇ  ＣＦＵ／ｐｅｇは、ＮＡＣ８ｍｇ／ｍｌおよびＮＡＣ１６ｍｇ／ｍｌで、それぞれ、０．７５から３．８  ｌｏｇ  ＣＦＵ／ｐｅｇおよび２．５から５．８  ｌｏｇ  ＣＦＵ／ｐｅｇの範囲であった。
【００２０】
結論として、ＮＡＣは、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）株に対して、固有の抗菌活性を示した。
さらに、１６ｍｇ／ｍｌ以上のＮＡＣ濃度で増殖を抑制し、そして、最小発育阻止濃度以下（ｓｕｂ−ＭＩＣ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ）では、増殖速度を低下させることに加えて、ＮＡＣはまた、ＢＣＣおよびＳ．マルトフィリア（Ｓ．ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）に対してある程度の殺バクテリア活性、時々、殺バクテリア効果（すなわち、３  ｌｏｇより上のバクテリア接種源の減少として、従来定義されていた）を発揮することがわかった。
驚くべきことに、ＮＡＣはまた、これらの病原体によるバイオフィルム形成を阻止するのに有望な有効性を示した。
【国際調査報告】
2020502096.tif 000002
2020502096.tif 000003
2020502096.tif 000004