(57)【要約】  本発明の第１の態様は、式（Ｉ）の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルに関し、・Ｂは、１又は２以上のＲ１０基で置換されていてもよい飽和又は部分不飽和の単環式又は二環式複素環基であり、＊Ｘは、ＳＯ２、ＣＯ２、ＣＯ、ＣＯＮＲ１１及び（ＣＲ１２Ｒ１３）ｐから選択される。前記化合物は、ＰＡＩＣＳを阻害することができ、増殖性障害の治療において有用である。さらなる態様は、医薬組成物、治療的使用、及び式（Ｉ）の化合物を調製するための方法に関する。    【化１】2020514260.tif 000115
2020514260.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステル
【化１】
2020514260.tif 000104
（式中、
Ｂは、１又は２以上のＲ１０基で置換されていてもよく、１又は２以上のＣＯ基を含有してもよい飽和又は部分不飽和の単環式又は二環式複素環基であり、
Ｘは、ＳＯ２、ＣＯ２、ＣＯ、ＣＯＮＲ１１、ＮＲ１１ＣＯ及び（ＣＲ１２Ｒ１３）ｐから選択され、
各Ｒ１は、ハロゲン、ＯＲ１４、ＳＲ１４及びＲ１４から独立に選択され、
Ｒ２は、Ｈ及びアルキルから選択され、
Ｒ３は、Ｈ、アルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ＮＲ２４Ｒ２５及びＲ２６から選択される１又は２以上の置換基で置換されていてもよく、又は
Ｒ２及びＲ３は、それらが結合している窒素と一緒に連結されて、Ｏ、Ｎ及びＳから選択される１又は２以上のさらなるヘテロ原子を含有してもよく、１又は２以上のＲ２７基で置換されていてもよい、飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ４及びＲ５は、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｓＯＲ１５及び（ＣＨ２）ｔＮＲ１６Ｒ１７から独立に選択されるか、又は
Ｒ４及びＲ５のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ６及びＲ７は、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｕＯＲ１８及び（ＣＨ２）ｖＮＲ１９Ｒ２０から独立に選択されるか、又は
Ｒ６及びＲ７のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ８及びＲ９は、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｗＯＲ２１及び（ＣＨ２）ｘＮＲ２２Ｒ２３から独立に選択されるか、又は
Ｒ８及びＲ９のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しているか、又は
Ｒ８及びＲ９のうちの一方は、Ｒ４及びＲ５のうちの１つと連結されて環式基を形成しており、
Ｒ１０は、アルキル、ＯＨ、ハロゲン、アルコキシ、ＣＯ２−アルキル、ＣＯＯＨ、ＣＯ−アルキル及びＣＮから選択され、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキルであり、
Ｒ１４、Ｒ２６及びＲ２７はそれぞれ独立に、アルキルであり、
ｍ、ｑ及びｒはそれぞれ独立に、ｍ＋ｑ＋ｒの和が２、３又は４となるように０、１又は２であり、
ｎは、１、２、３及び４から選択される整数であり、
ｐは、０、１及び２から選択される整数であり、
ｓ、ｔ、ｕ、ｖ、ｗ及びｘはそれぞれ独立に、０、１、２、３又は４である）。
【請求項２】
Ｂが、１又は２以上のＲ１０基で置換されていてもよい単環式の５又は６員飽和又は部分不飽和複素環基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
各Ｒ４及びＲ５が、Ｈ及びアルキルから独立に選択されるか、又は
Ｒ４及びＲ５のうちの一方がＨ又はアルキルであり、他方が、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ６及びＲ７が、Ｈ及びアルキルから独立に選択されるか、又は
Ｒ６及びＲ７のうちの一方がＨ又はアルキルであり、他方が、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ８及びＲ９が、Ｈ及びアルキルから独立に選択されるか、又は
Ｒ８及びＲ９のうちの一方がＨ又はアルキルであり、他方が、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成している、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
式（Ｉｂ）の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルである、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物
【化２】
2020514260.tif 000105
（式中、Ｙ及びＺは両方ともＮであるか、又はＹ及びＺのうちの一方はＮであり、他方はＣＨであり、
Ｒ１−９、Ｘ、ｍ、ｑ及びｒは、請求項１で定義されている通りである）。
【請求項５】
Ｙ及びＺが両方ともＮである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１が、Ｂｒ、Ｉ、Ｃｌ、ＯＭｅ、ＳＭｅ及びＭｅ、好ましくはＢｒ、Ｃｌ及びＳＭｅから選択される、請求項１〜５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
Ｘが、ＣＯ２又はＳＯ２である、請求項１〜６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２が、Ｈ、メチル、エチル及びイソプロピルから選択され、
Ｒ３が、メチル、エチル、イソプロピル及びシクロプロピルから選択される、請求項１〜７のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２及びＲ３が、それらが結合している窒素と一緒に連結されて、５又は６員飽和複素環基、好ましくはピロリジニル基を形成している、請求項１〜７のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
ｍが１又は２であり、
ｑが、１又は２、より好ましくは１であり、
ｒが０であり、
Ｒ８及びＲ９がそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキル、より好ましくはＨであり、
Ｒ６及びＲ７がそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキル、より好ましくはＨである、請求項１〜９のいずれかに記載の化合物。
【請求項１１】
ｍが１であり、
ｑが１又は２であり、
ｒが０であり、
Ｒ８及びＲ９のうちの一方がＨ又はアルキルであり、他方が、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ６及びＲ７が独立に、Ｈ又はアルキルである、請求項１〜８のいずれかに記載の化合物。
【請求項１２】
ｍが１であり、
ｑが１であり、
ｒが、１又は２、好ましくは１であり、
Ｒ８及びＲ９がそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキル、より好ましくはＨであり、
Ｒ６及びＲ７のうちの一方がＨ又はアルキルであり、他方が、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
Ｒ４及びＲ５がそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキル、より好ましくはＨである、請求項１〜８のいずれかに記載の化合物。
【請求項１３】
以下の化合物、
【表１】
2020514260.tif 000106
2020514260.tif 000107
2020514260.tif 000108
2020514260.tif 000109
2020514260.tif 000110
2020514260.tif 000111
2020514260.tif 000112
2020514260.tif 000113
並びに薬学的に許容されるそれらの塩及びエステルから選択される、請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物、及び薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１５】
第２の治療剤をさらに含む、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
医療において使用するための、請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物。
【請求項１７】
増殖性障害の治療又は予防において使用するための、請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物。
【請求項１８】
増殖性障害を治療又は予防するための医薬の調製における、請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１９】
それを必要としている対象において増殖性障害を治療又は予防する方法であって、治療有効量の請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物を前記対象に投与するステップを含む、前記方法。
【請求項２０】
転移を治療又は予防するための医薬の調製における、請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項２１】
それを必要としている対象において転移を治療又は予防する方法であって、治療有効量の請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物を前記対象に投与するステップを含む、前記方法。
【請求項２２】
異常なＰＡＩＣＳ活性及び／又は異常なＰＡＩＣＳ発現によって引き起こされる、それに関連する、又はそれを伴う障害の予防又は治療において使用するための、請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物。
【請求項２３】
ＰＡＩＣＳの阻害によって軽減される疾患状態を有する対象を治療する方法であって、治療有効量の請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物を前記対象に投与するステップを含む、前記方法。
【請求項２４】
ＰＡＩＣＳを阻害可能なさらなる候補化合物を同定するためのアッセイにおける、請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項２５】
請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物及びさらなる治療剤を含む組み合わせ。
【請求項２６】
請求項５で定義されている式（Ｉ）の化合物を調製するための方法であって、
【化３】
2020514260.tif 000114
（ｉ）式（II）の中間体（式中、Ｒ１は請求項１で定義されている通りである）を調製するステップ、
（ii）前記式（II）の中間体を、請求項５で定義されている式（Ｉｂ）の化合物に変換するステップ
を含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＰＡＩＣＳを阻害可能な置換オキサゾール誘導体に関する。この化合物は、がんなどの増殖性障害を含む様々な障害の治療に適用される。
【背景技術】
【０００２】
ホスホリボシルアミノイミダゾールカルボキシラーゼ、ホスホリボシルアミノイミダゾールスクシノカルボキサミドシンテターゼ（ＰＡＩＣＳ，phosphoribosylaminoimidazole carboxylase, phosphoribosylaminoimidazole succinocarboxamide synthetase）は、デノボプリン経路（de novo purine pathway）の第６及び第７ステップを触媒する二機能性の４６ｋＤの酵素である（図１を参照されたい）。
【０００３】
ＰＡＩＣＳは、ＡＴＰ依存性反応において５−アミノイミダゾールリボヌクレオチド（ＡＩＲ，5-aminoimidazole ribonucleotide）を４−カルボキシ−５−アミノイミダゾールリボヌクレオチド（ＣＡＩＲ，4-carboxy-5-aminoimidazole ribonucleotide）に変換した後、カルボキシル化反応において４−（Ｎ−スクシニルカルボキサミド）−５−アミノイミダゾールリボヌクレオチド（ＳＡＩＣＡＲ，4-(N-succinylcarboxamide)-5-aminoimidazole ribonucleotide）を最終的に生成する（図２を参照されたい）。この反応系列は、ホスホリボシルピロリン酸（ＰＲＰＰ，phosphoribosyl pyrophosphate）からＡＭＰ及びＧＭＰ産生のための基質を形成するヌクレオチドであるイノシトール一リン酸（ＩＭＰ，inositol monophosphate）を生成する全体の反応に絡んでいる。急速に分裂するがん細胞は非形質転換細胞と比較して高い生合成要件を有するため、葉酸、ピリミジン及びプリン生合成経路の阻害は、がん化学療法として好ましい薬物標的であることが分かっている。
【０００４】
最近の文献では、注目の高まっているがん治療薬の新規な標的としてＰＡＩＣＳが脚光を浴びている。ＰＡＩＣＳは抗アポトーシスがん遺伝子として同定され、ＰＡＩＣＳ  ｓｈＲＮＡタンパク質ノックダウンは、インビトロでのメラノーマ細胞株の増殖を減少させた。さらに、異種移植片モデルにおけるＰＡＩＣＳノックダウン細胞の皮下注射は、腫瘍増殖の速度を顕著に減少させた（Eissmann et al., PLoS One, 2013 May 22;8(5):e64873）。
【０００５】
ＰＡＩＣＳ発現は肺がんにおいて顕著に上方制御され、さらに発現レベルは患者集団の予後と関連していた。すなわち、ＰＡＩＣＳの発現増加は、より悪性の性質（more aggressive nature）の腫瘍と関連付けられた。肺がんＰＡＩＣＳノックダウン細胞を用いて実施された異種移植片モデルでは、数週間後に、腫瘍体積及び重量が顕著に減少した（Goswami et al., Oncotarget, 2015 Sep 15;6(27):23445-61）。ＰＡＩＣＳ過剰発現はまた、広範囲の他の腫瘍タイプとも関連していた。
【０００６】
さらなる研究では、ＰＡＩＣＳが予後不良前立腺がんにとっても有用なバイオマーカーである可能性があり、良性前立腺肥大症サンプルと比べて前立腺がん及び重度の去勢抵抗型において発現の増大が認められることが示された（Barfeld et al., Oncotarget, 2015 May 20;6(14):12587-602）。
【０００７】
がん治療薬のための潜在的な標的としてＰＡＩＣＳが出現してきた近年の間に、ＰＡＩＣＳ遺伝子は、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ，triple negative breast cancer）患者における予後不良と強く関連する９遺伝子発現シグネチャーの一部として過剰発現されることが研究によって実証されている。これらの遺伝子のうちのいずれか１つの実験的ノックダウンは、インビトロ及びインビボでのがん細胞増殖及び転移に対して著しい阻害作用を有した。特に、ＰＡＩＣＳ発現のｓｈＲＮＡ阻害は、マウスの乳腺脂肪体中に乳がん細胞を同所注入した場合に原発腫瘍の増殖を強力に低下させた。高転移性ヒト乳がん細胞においてＰＡＩＣＳ発現を下方制御することにより、免疫不全マウスに静脈内注入された場合にこれらの細胞が肺に転移を形成する能力は消失した。注目すべきことに、この高度に予測的な遺伝子発現シグネチャーは、乳がん患者において、診察室で現在使用されている遺伝子発現シグネチャー、MammaPrint（登録商標）又はOncotypeDX（登録商標）とほぼ同等の予後予測能（prognostic power）を有する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第８４／０３５６４号パンフレット
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Eissmann et al., PLoS One, 2013 May 22;8(5):e64873
【非特許文献２】Goswami et al., Oncotarget, 2015 Sep 15;6(27):23445-61
【非特許文献３】Barfeld et al., Oncotarget, 2015 May 20;6(14):12587-602
【非特許文献４】Fingl et al, 1975, In: The Pharmacological Basis of Therapeutics, chapter 1, page 1
【非特許文献５】the Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd Edition,(1994), Edited by A Wade and PJ Weller
【非特許文献６】Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit. 1985)
【非特許文献７】Berge et al, J Pharm Sci, 66, 1-19(1977)
【非特許文献８】'Advanced Organic Chemistry', 3rdedition, ed. March, J., John Wiley and Sons, New York, 1985
【非特許文献９】Sander and Joung, 2014
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、ＰＡＩＣＳの小分子阻害剤を提供しようとするものである。好ましい態様において、本発明は、ＳＡＩＣＡＲシンテターゼドメインを標的化するＰＡＩＣＳの小分子阻害剤を提供しようとするものである。そのような小分子阻害剤は、がんなどの増殖性障害の治療において潜在的な治療的用途を有する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の第１の態様は、式（Ｉ）の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルに関する
【００１２】
【化１】
2020514260.tif 000003
【００１３】
（式中、
Ｂは、１又は２以上のＲ１０基で置換されていてもよく、１又は２以上のＣＯ基を含有してもよい飽和又は部分不飽和の単環式又は二環式複素環基であり、
Ｘは、ＳＯ２、ＣＯ２、ＣＯ、ＣＯＮＲ１１、ＮＲ１１ＣＯ及び（ＣＲ１２Ｒ１３）ｐから選択され、
各Ｒ１は、ハロゲン、ＯＲ１４、ＳＲ１４及びＲ１４から独立に選択され、
Ｒ２は、Ｈ及びアルキルから選択され、
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルから選択され、そのそれぞれは、ＮＲ２４Ｒ２５及びＲ２６から選択される１又は２以上の置換基で置換されていてもよく、又は
Ｒ２及びＲ３は、それらが結合している窒素と一緒に連結されて、Ｏ、Ｎ及びＳから選択される１又は２以上のさらなるヘテロ原子を含有してもよく、１又は２以上のＲ２７基で置換されていてもよい、飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ４及びＲ５は、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｓＯＲ１５及び（ＣＨ２）ｔＮＲ１６Ｒ１７から独立に選択されるか、又は
Ｒ４及びＲ５のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ６及びＲ７は、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｕＯＲ１８及び（ＣＨ２）ｖＮＲ１９Ｒ２０から独立に選択されるか、又は
Ｒ６及びＲ７のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ８及びＲ９は、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｗＯＲ２１及び（ＣＨ２）ｘＮＲ２２Ｒ２３から独立に選択されるか、又は
Ｒ８及びＲ９のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しているか、又は
Ｒ８及びＲ９のうちの一方は、Ｒ４及びＲ５のうちの１つと連結されて環式基を形成しており、
Ｒ１０は、アルキル、ＯＨ、ハロゲン、アルコキシ、ＣＯ２−アルキル、ＣＯＯＨ、ＣＯ−アルキル及びＣＮから選択され、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキルであり、
Ｒ１４、Ｒ２６及びＲ２７はそれぞれ独立に、アルキルであり、
ｍ、ｑ及びｒはそれぞれ独立に、ｍ＋ｑ＋ｒの和が２、３又は４となるように０、１又は２であり、
ｎは、１、２、３及び４から選択される整数であり、
ｐは、０、１及び２から選択される整数であり、
ｓ、ｔ、ｕ、ｖ、ｗ及びｘはそれぞれ独立に、０、１、２、３又は４である）。
【００１４】
本発明の第２の態様は、上記の少なくとも１つの化合物、及び薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤を含む医薬組成物に関する。
【００１５】
本発明の第３の態様は、医療において使用するための上記の化合物に関する。
【００１６】
本発明の第４の態様は、増殖性障害の治療において使用するための上記の化合物に関する。
【００１７】
本発明の第５の態様は、増殖性障害の治療又は予防のための医薬の調製における上記の化合物の使用に関する。
【００１８】
本発明の第６の態様は、それを必要としている対象において増殖性障害を治療する方法であって、治療有効量の上記の化合物を対象に投与するステップを含む、方法に関する。
【００１９】
本発明の第７の態様は、ＰＡＩＣＳの阻害によって軽減される疾患状態を有する対象を治療する方法であって、治療有効量の上記の化合物を対象に投与するステップを含む、方法に関する。
【００２０】
本発明の第８の態様は、ＰＡＩＣＳを阻害可能なさらなる候補化合物を同定するためのアッセイにおける上記の化合物の使用に関する。
【００２１】
本発明の第９の態様は、上記の化合物及び第２の治療剤を含む組み合わせに関する。
【００２２】
本発明の第１０の態様は、本明細書に記載の化合物を調製するための方法に関する。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本発明は、ＰＡＩＣＳを阻害可能な置換オキサゾール誘導体に関する。
【００２４】
「アルキル」は、本明細書において、直鎖状又は分岐状アルキルラジカル、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシルと定義される。好ましくは、アルキル基は、Ｃ１−１２アルキル基、より好ましくは、Ｃ１−６アルキル基、さらにより好ましくはＣ１−４アルキル基である。
【００２５】
「シクロアルキル」は、本明細書において、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル若しくはシクロヘプチルなどの単環式アルキル環、又はノルボルナンなどの縮合二環式環系と定義される。好ましくは、シクロアルキル基は、Ｃ３−８シクロアルキル基、より好ましくはＣ３−６シクロアルキル基である。
【００２６】
「ハロゲン」は、本明細書において、クロロ、フルオロ、ブロモ又はヨードと定義される。
【００２７】
本発明の化合物はＢ基を含み、これは飽和又は部分不飽和の単環式又は二環式複素環基である。
【００２８】
本明細書で使用される場合、「複素環基」という用語は、本明細書において、１又は２以上のヘテロ原子（これらは同じであっても又は異なってもよい）、例えば、酸素、窒素又は硫黄などを含む環状脂肪族基と定義され、この基は環中に１又は２以上の−（ＣＯ）−基が介入していてもよい。好ましくは、複素環基は、Ｃ３−Ｃ７ヘテロシクロアルキル基、より好ましくはＣ３−Ｃ６ヘテロシクロアルキル基である。あるいは、ヘテロシクロアルキル基は、Ｃ４−Ｃ７ヘテロシクロアルキル、より好ましくはＣ４−Ｃ６ヘテロシクロアルキルである。
【００２９】
好ましくは、複素環基Ｂは飽和している。しかしながら、ある特定の実施態様では、複素環基は、部分的に不飽和となるような１又は２以上の二重結合を含有し得る。
【００３０】
好ましくは、複素環基Ｂは、単環式飽和複素環基である。特に好ましい単環式飽和複素環基は、ピペラジニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル及びテトラヒドロピラニルを含むがこれらに限定されない。
【００３１】
より好ましくは、複素環基Ｂは、ピペラジニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル及びピロリジニルから選択される。さらにより好ましくは、複素環基Ｂは、ピペラジニル、ピペリジニル及びピロリジニルから選択される。
【００３２】
好ましい一実施形態において、複素環基Ｂは、１又は２以上のＲ１０基で、好ましくは１つのＲ１０基で置換されている。別の好ましい実施形態において、複素環基Ｂは、置換されていない。
【００３３】
好ましい一実施形態において、複素環基Ｂは、１又は２以上のＣＯ基、好ましくは１つのＣＯ基を含有する。
【００３４】
好ましくは、
−  Ｒ６及びＲ７のうちの一方がＨ又はアルキル（より好ましくはメチル）であり、他方が、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成している、又は
−  Ｒ８及びＲ９のうちの一方がＨ又はアルキル（より好ましくはメチル）であり、他方が、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成している、又は
−  Ｒ４及びＲ５のうちの一方がＨ又はアルキル（より好ましくはメチル）であり、他方が、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成している、場合、
飽和複素環基は、４、５又は６員複素環基、より好ましくは、５又は６員複素環基、さらにより好ましくは、ピロリジニル又はピペリジニル基である。
【００３５】
本発明の好ましい一実施形態において、Ｂは、１又は２以上のＣＯ基を含有していてもよく、１又は２以上のＲ１０基で置換されていてもよい、単環式の５又は６員飽和又は部分不飽和複素環基である。
【００３６】
本発明の好ましい一実施形態において、Ｂは、１又は２以上のＲ１０基で置換されていてもよい単環式の５又は６員飽和又は部分不飽和複素環基である。
【００３７】
特に好ましい一実施形態において、Ｂは、それぞれが１又は２以上のＲ１０基で置換されていてもよい、ピペラジニル基又はピペリジニル基である。
【００３８】
別の特に好ましい実施形態において、Ｂは、それぞれの基に関してメチレン基の１つがＣＯ基で置き換えられている、ピペラジニル基又はピペリジニル基である。
【００３９】
本発明の好ましい一実施形態において、
各Ｒ４及びＲ５は、Ｈ及びアルキルから独立に選択されるか、又は
Ｒ４及びＲ５のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成している。
【００４０】
本発明の好ましい一実施形態において、
各Ｒ６及びＲ７は、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｕＯＲ１８及び（ＣＨ２）ｖＮＲ１９Ｒ２０から独立に選択されるか、又はＲ６及びＲ７のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成している。
【００４１】
本発明の好ましい一実施形態において、
各Ｒ８及びＲ９は、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｗＯＲ２１及び（ＣＨ２）ｘＮＲ２２Ｒ２３から独立に選択されるか、又はＲ８及びＲ９のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成している。
【００４２】
本発明の好ましい一実施形態において、
各Ｒ４及びＲ５は、Ｈ及びアルキルから独立に選択されるか、又は
Ｒ４及びＲ５のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ６及びＲ７は、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｕＯＲ１８及び（ＣＨ２）ｖＮＲ１９Ｒ２０から独立に選択されるか、又はＲ６及びＲ７のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ８及びＲ９は、Ｈ、アルキル、（ＣＨ２）ｗＯＲ２１及び（ＣＨ２）ｘＮＲ２２Ｒ２３から独立に選択されるか、又はＲ８及びＲ９のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成している。
【００４３】
本発明の好ましい一実施形態において、化合物は、式（Ｉｂ）の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルである
【００４４】
【化２】
2020514260.tif 000004
【００４５】
（式中、Ｙ及びＺは両方ともＮであるか、又はＹ及びＺのうちの一方はＮであり、他方はＣＨであり、
Ｒ１−９、Ｘ、ｍ、ｑ及びｒは、上記で定義された通りである）。
【００４６】
好ましい一実施形態において、Ｙ及びＺは両方ともＮである。
【００４７】
好ましい一実施形態において、Ｒ１は、Ｂｒ、Ｉ、Ｃｌ、ＯＭｅ、ＳＭｅ及びＭｅから選択される。より好ましくは、Ｒ１は、Ｂｒ、Ｃｌ及びＳＭｅから選択される。
【００４８】
好ましい一実施形態において、Ｘは、ＣＯ２又はＳＯ２であり、より好ましくはＳＯ２である。
【００４９】
好ましい一実施形態において、Ｒ２は、Ｈ、メチル、エチル及びイソプロピルから選択され、Ｒ３は、メチル、エチル、イソプロピル及びシクロプロピルから選択される。
【００５０】
好ましい一実施形態において、Ｒ２及びＲ３は、それらが結合している窒素と一緒に連結されて、５又は６員飽和複素環基、好ましくはピロリジニル基を形成している。
【００５１】
好ましい一実施形態において、
ｍは、１又は２であり、
ｑは、１又は２、より好ましくは１であり、
ｒは０であり、
Ｒ８及びＲ９はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキル、より好ましくはＨであり、
Ｒ６及びＲ７はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキル、より好ましくはＨである。
【００５２】
別の好ましい実施形態において、
ｍは１であり、
ｑは１又は２であり、
ｒは０であり、
Ｒ８及びＲ９のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
各Ｒ６及びＲ７は独立に、Ｈ又はアルキルである。
【００５３】
別の好ましい実施形態において、
ｍは１であり、
ｑは１であり、
ｒは、１又は２、好ましくは１であり、
Ｒ８及びＲ９はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキル、より好ましくはＨであり、
Ｒ６及びＲ７のうちの一方はＨ又はアルキルであり、他方は、Ｒ３に連結されて飽和複素環基を形成しており、
Ｒ４及びＲ５はそれぞれ独立に、Ｈ又はアルキル、より好ましくはＨである。
非常に好ましい一実施形態において、本発明の化合物は、下記の表に示す化合物：
【００５４】
【表１】
2020514260.tif 000005
2020514260.tif 000006
2020514260.tif 000007
2020514260.tif 000008
2020514260.tif 000009
2020514260.tif 000010
2020514260.tif 000011
2020514260.tif 000012
【００５５】
並びに薬学的に許容されるこれらの塩及びエステルから選択される。
【００５６】
さらに非常に好ましい一実施形態において、化合物は、２１、２３、２４、２５、５４、５５、６７、６９及び７０から選択される。
【００５７】
治療的用途
本発明のさらなる一態様は、医療において使用するための上記の化合物に関する。
【００５８】
本発明の別の態様は、増殖性障害の治療において使用するための上記の化合物に関する。
【００５９】
「増殖性障害」という用語は、本明細書において、細胞周期の調節を必要とする任意の障害、例えば再狭窄及び心筋症などの心血管障害、糸球体腎炎及びリウマチ性関節炎などの自己免疫障害、乾癬などの皮膚障害、抗炎症性、抗真菌、抗寄生虫障害、例えばマラリア、肺気腫及び脱毛症などを含む広範な意味で使用される。これらの障害において、本発明の化合物は、必要に応じて、アポトーシスを誘導するか、又は所望の細胞内の均衡状態を維持することができる。
【００６０】
好ましい一実施形態において、本発明は、転移を予防又は低減するのに使用するための上記の化合物に関する。よって、好ましい一実施形態において、化合物は、転移性がん、例えば、がん原発部位から離れた部位での続発性悪性増殖を予防又は軽減又は治療するのに使用するためのものである。
【００６１】
別の好ましい実施形態において、本発明は、細胞増殖を阻止するのに使用するための上記の化合物に関する。
【００６２】
好ましい一実施形態において、増殖性障害はがん又は白血病である。好ましくは、がんは、任意の病期の固形がんから選択される。別の好ましい実施形態において、がんは末期であり、転移巣を有する。
【００６３】
好ましくは、がんは、転移を伴う又は伴わない乳がん、結腸がん、前立腺がん、メラノーマ、膀胱がん、膵臓がん、頭頸部がん及び卵巣がん、並びに血液がん、例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ，acute myeloid leukemia）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ，chronic lymphocytic leukemia）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ，acute lymphocytic leukemia）、多発性骨髄腫（ＭＭ，multiple myeloma）並びに非ホジキンリンパ腫などから選択される。
【００６４】
好ましい一実施形態において、増殖性障害は、乳がん、結腸がん、肺がん、メラノーマ及び前立腺がんから選択される。出願人による研究により、ＰＡＩＣＳ  ｍＲＮＡがこれらの腫瘍タイプにおいて上方制御されることが示された。
【００６５】
特に好ましい一実施形態において、増殖性障害は乳がんである。より好ましくは、増殖性障害は、転移性乳がん又はトリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ，triple negative breast cancer）である。トリプルネガティブ乳がんとは、エストロゲン受容体（ＥＲ，estrogen receptor）、プロゲステロン受容体（ＰＲ，progesterone receptor）又はＨｅｒ２／ｎｅｕの遺伝子を発現しない任意の乳がんのことをいう。これにより、大部分の化学療法はこれらの３つの受容体のうちの１つを標的としていることから治療がより困難であり、そのためトリプルネガティブがんは多くの場合、併用療法を必要とする。
【００６６】
別の態様は、増殖性障害、例えば、がん又は白血病の治療又は予防のための医薬の調製における上記の化合物の使用に関する。
【００６７】
別の態様は、それを必要としている対象において増殖性障害を治療する方法であって、治療有効量の上記の化合物を対象に投与するステップを含む、方法に関する。
【００６８】
好ましくは、化合物は、ＰＡＩＣＳを阻害するために十分な量で投与される。
【００６９】
別の態様は、生物学的標的に対する何らかの異常な活性によって引き起こされる、それに関連した、又はそれを伴う障害の予防又は治療において使用するための本発明の化合物であって、標的がＰＡＩＣＳである、化合物に関する。
【００７０】
さらに別の態様は、生物学的標的に対する何らかの異常な活性によって引き起こされる、それに関連した、又はそれを伴う障害の予防又は治療のための医薬の調製における本発明の化合物の使用であって、標的がＰＡＩＣＳである、使用に関する。
【００７１】
本発明の別の態様は、ＰＡＩＣＳ関連疾患又は障害を治療する方法に関する。本発明の本態様による方法は、本明細書において前述されている通り、それを必要としている対象に治療有効量の本発明の化合物を、それ自体を、又はより好ましくは本明細書において下記で詳述されているように、例えば、薬学的に許容される担体と混合した医薬組成物の一部として、投与することによって達成される。
【００７２】
本発明のさらに別の態様は、ＰＡＩＣＳの阻害によって軽減される疾患状態を有する哺乳動物を治療する方法であって、哺乳動物に治療有効量の本発明による化合物を投与するステップを含む、方法に関する。
【００７３】
好ましくは、対象は、哺乳動物、より好ましくはヒトである。
【００７４】
「方法」という用語は、化学、薬理学、生物学、生化学及び医学分野の専門家に公知であるか、又は公知のやり方、手段、技術及び手順から該専門家によって容易に開発される、やり方、手段、技術及び手順を含むがこれらに限定されない、所定の作業を達成するためのやり方、手段、技術及び手順を指す。
【００７５】
本明細書において使用される「投与すること」という用語は、直接、すなわち、ＰＡＩＣＳそのものと相互作用することによって、又は間接的に、すなわち、ＰＡＩＣＳの触媒活性が依存している別の分子と相互作用することによって、化合物がＰＡＩＣＳの酵素活性に影響を及ぼすことができるように、本発明の化合物とＰＡＩＣＳを一緒にするための方法を指す。本明細書で使用される場合、投与は、インビトロで、すなわち試験管中で、又はインビボで、すなわち、生体の細胞若しくは組織において、達成することができる。
【００７６】
本明細書において、「治療すること」という用語は、疾患若しくは障害の進行を抑止する、実質的に阻害する、遅らせる若しくは反転すること、疾患若しくは障害の臨床症状を実質的に緩和すること又は疾患若しくは障害の臨床症状の出現を実質的に予防することを含む。
【００７７】
本明細書において、「予防すること」という用語は、生物がそもそも障害又は疾患にかかるのを妨げるための方法を指す。
【００７８】
「治療有効量」という用語は、治療している疾患又は障害の症状の１又は２以上をある程度和らげるであろう、投与される化合物の量を指す。
【００７９】
本発明で使用される任意の化合物に関して、本明細書で治療有効用量とも称される治療有効量は、初めに細胞培養アッセイから推定することができる。例えば、用量は、細胞培養において決定されるＩＣ５０又はＩＣ１００を含む血中濃度範囲を達成するように動物モデルにおいて処方することができる。そのような情報を使用して、ヒトにおいて有用な用量をより正確に決定することができる。初期投与量はまた、インビボデータからも推定することができる。これらの初期ガイドラインを用いれば、当業者はヒトにおける有効投与量を決定することができるであろう。
【００８０】
さらに、本明細書に記載の化合物の毒性及び治療有効性は、細胞培養物又は実験動物において、標準的な薬学的手順によって、例えば、ＬＤ５０及びＥＤ５０を決定することによって決定することができる。毒性効果と治療効果との間の用量比は治療指数であり、ＬＤ５０とＥＤ５０の比として表すことができる。高い治療係数を示す化合物が好ましい。これらの細胞培養物アッセイ及び動物試験から得られたデータは、ヒトにおいて使用するために毒性ではない投薬量範囲を処方するのに使用することができる。そのような化合物の投与量は、好ましくは、毒性がほとんど又は全くないＥＤ５０を含む血中濃度の範囲内にある。投与量は、用いられる剤形及び利用される投与経路に応じてこの範囲内で異なり得る。正確な処方、投与経路及び投与量は、患者の状態を考慮して個々の医師が選択することができる。（例えば、Fingl et al, 1975, In: The Pharmacological Basis of Therapeutics, chapter 1, page 1を参照されたい）。
【００８１】
投与量及び間隔は、治療効果を維持するのに十分な活性化合物の血漿レベルを提供するように、個々に調整することができる。経口投与での通常の患者投与量は、約５０〜２０００ｍｇ／ｋｇ／日、一般に約１００〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは約１５０〜７００ｍｇ／ｋｇ／日、最も好ましくは約２５０〜５００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。好ましくは、治療有効血清レベルは、１日に複数用量を投与することによって達成されるであろう。局所投与される又は選択的に取り込まれる場合、薬物の有効な局所的濃度は血漿濃度に関連しない可能性がある。当業者は、過度の実験を行うことなく治療有効局所投与量を最適化することができる。
【００８２】
本明細書で使用される場合、「ＰＡＩＣＳ関連疾患又は障害」は、不適切な若しくは異常なＰＡＩＣＳ活性又は過剰活性によって特徴付けられる疾患又は障害を指す。不適切な又は異常な活性は、（ｉ）通常はそのタンパク質を発現しない細胞での発現；（ii）好ましくない細胞増殖、分化及び／若しくは成長をもたらす発現増加；又は（iii）好ましくない細胞増殖、分化及び／若しくは成長の低減をもたらす発現減少のいずれかを指す。ＰＡＩＣＳの過剰活性は、ＰＡＩＣＳをコードしている遺伝子の増幅又はあるレベルのＰＡＩＣＳ活性の生成のいずれかを指し、これは、細胞増殖、分化及び／若しくは成長障害と相関し得る（すなわち、ＰＡＩＣＳのレベルが増加するにつれて、細胞障害の症状の１又は２以上の重症度が増加する）。過剰活性はまた、リガンド結合に関与するタンパク質の断片の欠失などの変異の結果としての、リガンド非依存的な又は構成的な活性化の結果でもあり得る。
【００８３】
よって、本発明は、ＰＡＩＣＳを阻害することが望ましい疾患を治療するための医薬を製造するための、本明細書で定義されている化合物の使用をさらに提供する。そのような疾患は、がん又は白血病などの増殖性障害を含む。
【００８４】
医薬組成物
本発明による使用のために、本明細書に記載の化合物又は生理学的に許容される塩、エステル若しくは他の生理学的に機能的なその誘導体は、化合物又は生理学的に許容される塩、エステル若しくは他の生理学的に機能的なその誘導体を、１又は２以上の薬学的に許容される担体並びに任意に他の治療薬及び／又は予防成分と一緒に含む、医薬製剤として提供されてもよい。担体は、製剤の他の成分と適合性であり、かつその受容者にとって有害でないという意味で許容可能でなければならない。医薬組成物は、医学及び獣医学においてヒト又は動物で使用するためのものであり得る。
【００８５】
本明細書に記載の医薬組成物の様々な異なる形態のためのそのような適切な賦形剤の例は、the Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd Edition,(1994), Edited by A Wade and PJ Wellerにおいて見出すことができる。
【００８６】
治療的使用のための許容できる担体又は希釈剤は製薬分野においてよく知られており、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit. 1985)に記載されている。
【００８７】
適切な担体の例としては、ラクトース、デンプン、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、ソルビトールなどが挙げられる。適切な希釈剤の例としては、エタノール、グリセロール及び水が挙げられる。
【００８８】
医薬担体、賦形剤又は希釈剤の選択は、意図される投与経路及び標準的な製薬実務に関して選択することができる。医薬組成物は、担体、賦形剤若しくは希釈剤として又はそれに加えて、任意の適切な結合剤、滑沢剤、懸濁化剤、コーティング剤、可溶化剤、緩衝剤、着香剤、表面活性剤、増粘剤、防腐剤（酸化防止剤を含む）など、及び製剤を意図される受容者の血液と等張にする目的で含まれる物質を含み得る。
【００８９】
適切な結合剤の例としては、デンプン、ゼラチン、天然糖、例えばグルコースなど、無水ラクトース、易流動性（free-flow）ラクトース、ベータ−ラクトース、コーンシロップ、天然及び合成ゴム、例えば、アラビアゴム、トラガカント又はアルギン酸ナトリウムなど、カルボキシメチルセルロース並びにポリエチレングリコールが挙げられる。
【００９０】
適切な滑沢剤の例としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。
防腐剤、安定剤、染料及びさらには着香料が、医薬組成物中に提供されてもよい。防腐剤の例としては、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸及びｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルが挙げられる。酸化防止剤及び懸濁化剤もまた使用されてもよい。
【００９１】
医薬製剤は、経口、局所（経皮、頬側及び舌下を含む）、直腸内又は非経口（皮下、皮内、筋肉内及び静脈内を含む）、例えば吸入による経鼻及び経肺投与に適切なものを含む。製剤は、適切な場合、別個の投薬単位において好都合に提供されてもよく、製薬分野においてよく知られている方法のいずれかによって調製されてもよい。全ての方法は、活性化合物を、液体担体又は微粉化された固体担体又は両方と関連させ、次いで、必要であれば生成物を所望の製剤に成形するステップを含む。
【００９２】
担体が固体である経口投与に適切な医薬製剤は、最も好ましくは、それぞれ所定量の活性化合物を含有するユニットドーズ製剤、例えば、大形丸剤（bolus）、カプセル剤又は錠剤などとして提供される。錠剤は、任意に１又は２以上の補助的成分とともに、圧縮又は成形によって製造することができる。圧縮錠剤は、適切な装置において、結合剤、滑沢剤、不活性な希釈剤、潤滑剤（lubricating agent）、表面活性剤又は分散剤と任意に混合した、粉末又は顆粒などの易流動性形態の活性化合物を圧縮することによって調製することができる。成形錠剤（moulded tablet）は、活性化合物を不活性な液体希釈剤とともに成形することによって製造することができる。錠剤は任意に、コーティングされていてもよく、コーティングされていない場合、任意に割線が入っていてもよい。カプセル剤は、活性化合物を単独で又は１若しくは２以上の補助的成分と混合して、カプセルシェル中に充填し、次いで、それらを通常通り密封することによって調製することができる。カシェ剤は、カプセル剤と類似しており、活性化合物が任意の補助的成分と一緒にライスペーパー薬袋中に密封されている。活性化合物はまた、分散性顆粒剤として製剤化してもよく、これは、例えば、投与前に水中に懸濁させてもよく、又は食品の上に振りかけてもよい。顆粒剤は、例えば、サシェ中に包装されていてもよい。担体が液体である経口投与のために適した製剤は、水性若しくは非水性の液体中の液剤若しくは懸濁剤として、又は水中油型液体乳剤として提供されてもよい。
【００９３】
経口投与用の製剤は、制御放出剤形、例えば、活性化合物が適当な放出制御マトリックス中に製剤化されている、又は適切な放出制御フィルムでコーティングされている、錠剤を含む。そのような製剤は、予防的使用のために特に好都合であり得る。
【００９４】
担体が固体である直腸内投与に適切な医薬製剤は、最も好ましくは、ユニットドーズ坐剤として提供される。適切な担体は、カカオ脂及び当技術分野において一般に使用される他の物質を含む。坐剤は、活性化合物を軟化又は融解させた担体と混合し、続いて型の中で冷却及び成形することによって好都合に形成することができる。非経口投与に適切な医薬製剤は、水性又は油性の媒体中の活性化合物の無菌液剤又は懸濁化剤を含む。
【００９５】
注射用製剤は、ボーラス注射又は持続注入用に適合させることができる。そのような製剤は、好都合には、使用するために必要とされるまで、製剤を導入した後に密封したユニットドーズ又はマルチドーズ容器中に提供される。あるいは、活性化合物は、使用前に無菌のパイロジェンフリー水などの適切な媒体で構成される粉末形態であってもよい。
【００９６】
活性化合物はまた、長時間作用性デポー製剤（depot preparation）として製剤化してもよく、これは、筋肉内注射によって、又は、例えば皮下又は筋肉内の移植によって投与することができる。デポー製剤は、例えば、適切なポリマー若しくは疎水性の材料、又はイオン交換樹脂を含んでもよい。そのような長時間作用性製剤は、予防的使用のために特に好都合である。
【００９７】
口腔前庭を介した経肺投与に適切な製剤は、受容者の気管支樹内で、活性化合物を含有し、０．５〜７ミクロンの範囲の直径を有することが望ましい粒子が送達されるように提供される。
【００９８】
１つの可能性として、そのような製剤は、吸入デバイスで使用するための、適切には例えばゼラチンの、貫通可能なカプセルにおいて、又は代替として、活性化合物、適切な液体又は気体噴射剤、及び任意に、界面活性剤及び／又は固体希釈剤などの他の成分を含む自己噴射製剤（self-propelling formulation）として提供されてもよい、微粉砕された粉末の形態である。適切な液体噴射剤としては、プロパン及びクロロフルオロカーボンが挙げられ、適切な気体噴射剤としては二酸化炭素が挙げられる。自己噴射製剤はまた、活性化合物が溶液剤又は懸濁化剤の液滴の形態で吐出される場合にも用いられてもよい。
【００９９】
そのような自己噴射製剤は当技術分野において公知のものと同様であり、確立された手順によって調製することができる。適切には、自己噴射製剤は、所望の噴霧特性を有する手動で操作可能なバルブ又は自動的に機能するバルブのいずれかを備えた容器において提供され、有利には、バルブは、１回操作する毎に一定体積、例えば、２５〜１００マイクロリットルを送達する定量タイプのものである。
【０１００】
さらなる可能性として、活性化合物は、加速空気流又は超音波撹拌を用いて吸入のための微細な液滴ミストを生成するアトマイザー又はネブライザーにおいて使用するための溶液又は懸濁液の形態であってもよい。
【０１０１】
経鼻投与に適切な製剤は、経肺投与に関して上記されているものと概してほぼ同等の製剤を含む。吐出される場合、そのような製剤は、鼻腔内での保持を可能とするように望ましくは１０〜２００ミクロンの範囲内の粒子直径を有するべきであり、これは、適宜、適切な粒子直径の粉末を使用すること又は適当なバルブを選択することによって達成され得る。他の適切な製剤としては、鼻の近くに保持した容器から鼻腔を通して急速吸入することによって投与するための２０〜５００ミクロンの範囲内の粒子直径を有する粗粉末、及び水性又は油性の溶液又は懸濁液中に０．２〜５％ｗ／ｖの活性化合物を含む点鼻剤が挙げられる。
【０１０２】
薬学的に許容される担体は、当業者によく知られており、０．１Ｍ、好ましくは０．０５Ｍリン酸塩緩衝液又は０．８％食塩水を含むがこれらに限定されない。加えて、そのような薬学的に許容される担体は、水性又は非水性の溶液、懸濁液、及びエマルションであってもよい。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、及びオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルである。水性担体は、水、食塩水及び緩衝媒質を含むアルコール／水溶液、エマルション又は懸濁液を含む。非経口媒体は、塩化ナトリウム溶液、リンガーデキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸リンガー又は固定油を含む。例えば、抗菌物質、酸化防止剤、キレート剤、不活性ガスなどの防腐剤及び他の添加物もまた存在してもよい。
【０１０３】
局所用製剤に適切な製剤は、例えば、ゲル剤、クリーム剤又は軟膏剤として提供され得る。そのような製剤は、例えば創傷又は潰瘍に、創傷若しくは潰瘍の表面上に直接塗布して、又は治療する領域に及びその領域を覆うようにつけることができる包帯、ガーゼ、メッシュなどの適切な支持体上に保持して、適用することができる。
【０１０４】
治療する部位、例えば創傷又は潰瘍上に直接噴霧する又は振りかけることができる液体又は粉末製剤もまた提供されてもよい。あるいは、包帯、ガーゼ、メッシュなどの担体に製剤を噴霧し又は振りかけ、次いで、治療する部位に適用することができる。
【０１０５】
本発明のさらなる態様によれば、上記の医薬組成物又は動物用組成物を調製するための方法であって、例えば混合によって、活性化合物を担体と関連させるステップを含む、方法が提供される。
【０１０６】
一般に、製剤は、活性薬剤を、液体担体又は微粉化された固体担体又は両方と均一かつ完全に関連させること、及び次に、必要であれば、生成物を成形することによって調製される。本発明は、一般式（Ｉ）の化合物を、薬学的又は獣医学的に許容される担体又は媒体と一緒にする又は関連させるステップを含む、医薬組成物を調製するための方法に及ぶ。
【０１０７】
塩／エステル
本発明の化合物は、塩又はエステル、特に、薬学的及び獣医学的に許容される塩又はエステルとして存在することができる。
【０１０８】
本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、適切なそれらの酸付加又は塩基塩を含む。適切な医薬用塩（pharmaceutical salt）についての概説は、Berge et al, J Pharm Sci, 66, 1-19(1977)において見出すことができる。塩は、例えば、強無機酸、例えば無機酸、例えばハロゲン化水素酸、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩及びヨウ化水素酸塩など、硫酸、リン酸、硫酸塩（sulfate）、重硫酸塩（bisulfate）、ヘミ硫酸塩（hemisulfate）、チオシアン酸塩（thiocyanate）、過硫酸塩（persulfate）及びスルホン酸を用いて；強有機カルボン酸、例えば、置換されていない若しくは置換されている（例えばハロゲンで）炭素原子１〜４個のアルカンカルボン酸、例えば酢酸などを用いて；飽和若しくは不飽和ジカルボン酸、例えばシュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸若しくはテトラフタル酸を用いて；ヒドロキシカルボン酸、例えばアスコルビン酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、若しくはクエン酸を用いて；アミノ酸、例えばアスパラギン酸若しくはグルタミン酸を用いて；安息香酸を用いて；又は有機スルホン酸、例えば、置換されていない若しくは置換されている（例えば、ハロゲンで）（Ｃ１−Ｃ４）アルキル−若しくはアリール−スルホン酸、例えば、メタン若しくはｐ−トルエンスルホン酸などを用いて形成される。薬学的に又は獣医学的に許容されない塩であっても、中間体として有益であることがある。
【０１０９】
好ましい塩としては、例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、乳酸塩、グルコン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、パントテン酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、酪酸塩、ジグルコン酸塩、シクロペンタン酸塩（cyclopentanate）、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、シュウ酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、ニコチン酸塩、パルモエート（palmoate）、ペクチン酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩（proprionate）、酒石酸塩、ラクトビオン酸塩、ピボレート（pivolate）、ショウノウ酸塩、ウンデカン酸塩及びコハク酸塩；有機スルホン酸、例えば、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸塩及びｐ−トルエンスルホン酸塩など；並びに無機酸、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、ヘミ硫酸塩、チオシアン酸塩、過硫酸塩、リン酸及びスルホン酸などが挙げられる。
【０１１０】
エステルは、エステル化されている官能基に応じて、有機酸又はアルコール／水酸化物のいずれかを使用して、形成される。有機酸としては、カルボン酸、例えば、置換されていない若しくは置換されている（例えば、ハロゲンで）炭素原子１〜１２個のアルカンカルボン酸、例えば酢酸など；飽和若しくは不飽和ジカルボン酸、例えばシュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸若しくはテトラフタル酸；ヒドロキシカルボン酸、例えば、アスコルビン酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、若しくはクエン酸；アミノ酸、例えば、アスパラギン酸若しくはグルタミン酸；安息香酸；又は有機スルホン酸、例えば、置換されていない若しくは置換されている（例えば、ハロゲンで）（Ｃ１−Ｃ４）アルキル−若しくはアリール−スルホン酸、例えば、メタン若しくはｐ−トルエンスルホン酸などが挙げられる。適切な水酸化物としては、無機水酸化物、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化アルミニウムなどが挙げられる。アルコールとしては、置換されていなくても又は置換されていてもよい（例えばハロゲンで）炭素原子１〜１２個のアルカンアルコールが挙げられる。
【０１１１】
鏡像異性体／互変異性体
前で論じた本発明の全ての態様において、本発明は、適当な場合、本発明の化合物の全ての鏡像異性体、ジアステレオ異性体及び互変異性体を含む。当業者は、光学的特性（１又は２以上のキラル炭素原子）又は互変異性的特徴を有する化合物を認識するであろう。対応する鏡像異性体及び／又は互変異性体は、当技術分野で知られている方法によって単離／調製することができる。
【０１１２】
鏡像異性体は、そのキラル中心の絶対配置によって特徴付けられ、Cahn、Ingold及びPrelogのＲ及びＳ配列規則によって表される。そのような規則は、当技術分野においてよく知られている（例えば、'Advanced Organic Chemistry', 3rd edition, ed. March, J., John Wiley and Sons, New York, 1985を参照されたい）。
【０１１３】
キラル中心を含有する本発明の化合物は、ラセミ混合物、鏡像異性体濃縮した混合物として使用されてもよく、又はラセミ混合物を、よく知られている技術を使用して分離してもよく、個々の鏡像異性体を単独で使用してもよい。
【０１１４】
立体及び幾何異性体
本発明の化合物の一部は立体異性体及び／又は幾何異性体として存在してもよく、例えば、これらは、１又は２以上の不斉中心及び／又は幾何中心を有してもよく、そのため、２つ以上の立体異性体形態及び／又は幾何学的形態で存在してもよい。本発明は、それらの阻害剤の個々の立体異性体及び幾何異性体並びにそれらの混合物の全ての使用を企図する。特許請求の範囲で使用されている用語は、これらの形態が適当な機能的活性（必ずしも同程度でなくても）を保持するという条件で、前記形態を包含する。
【０１１５】
同位体変形形態（ISOTOPIC VARIATIONS）
本発明はまた、薬剤又はそれらの薬学的に許容される塩の全ての適切な同位体変形形態を含む。本発明の薬剤又はそれらの薬学的に許容される塩の同位体変形形態は、少なくとも１個の原子が、同じ原子番号を有するが自然界で通常見出される原子質量とは異なる原子質量を有する原子で置き換えられているものと定義される。薬剤及びそれらの薬学的に許容される塩に組み込むことができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素及び塩素の同位体、それぞれ例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ及び３６Ｃｌなどが挙げられる。薬剤及びそれらの薬学的に許容される塩のある特定の同位体変形形態、例えば、３Ｈ又は１４Ｃなどの放射性同位体が組み込まれているものは、薬物及び／又は基質組織分布試験において有用である。トリチウム化した、すなわち、３Ｈ、及び炭素−１４、すなわち、１４Ｃ同位体は、それらの調製の容易さ及び検出可能性のため、特に好ましい。さらに、重水素、すなわち２Ｈなどの同位体による置換は、より高い代謝安定性、例えばインビボ半減期の増加又は必要な投与量の減少の結果として生じる、ある特定の治療上の利点をもたらすことができ、したがって、いくつかの環境において好ましい場合がある。例えば、本発明は、任意の水素原子が重水素原子で置き換えられた一般式（Ｉ）の化合物を含む。本発明の薬剤の同位体変形形態及び本発明のそれらの薬学的に許容される塩は一般に、適切な試薬の適当な同位体変形形態を使用して通常の手順によって調製することができる。
【０１１６】
プロドラッグ
本発明はさらに、プロドラッグ形態の本発明の化合物、すなわち、一般式（Ｉ）による活性な親薬物をインビボで放出する共有結合した化合物を含む。そのようなプロドラッグは一般に、１又は２以上の適切な基が、ヒト又は哺乳動物対象に投与したときにその改変が復元し得るように改変されている本発明の化合物である。通常は、そのような対象中に天然に存在する酵素によって復元は行われるが、インビボで復元させるために第２の薬剤をそのようなプロドラッグと一緒に投与することも可能である。そのような改変の例としては、エステラーゼなどによって復元が行われ得るエステル（例えば、上記されているもののいずれか）が挙げられる。他のそのような系は、当業者に十分理解されるであろう。
【０１１７】
溶媒和物
本発明はまた、本発明の化合物の溶媒和物形態も含む。特許請求の範囲で使用されている用語は、これらの形態を包含する。
【０１１８】
多形体
本発明はさらに、それらの様々な結晶形態、多形体形態及び水和（無水）形態の本発明の化合物に関する。化合物は、そのような化合物の化学合成において使用した溶媒から精製及び又は単離する方法をわずかに変えることによって、そのような形態のいずれかで単離できるということが医薬品業界内で十分に立証されている。
【０１１９】
投与
本発明の医薬組成物は、直腸内、鼻内、気管支内、局所（頬側及び舌下を含む）、膣内又は非経口（皮下、筋肉内、静脈内、動脈内及び皮内を含む）、腹腔内又は髄腔内投与に適合させることができる。好ましくは製剤は、経口投与製剤である。製剤は、好都合には、単位投与形態、すなわち、ユニットドーズ、又はユニットドーズの複数若しくは部分単位（sub-unit）を含有する別個の部分の形態で、提供することができる。例として、製剤は、錠剤及び持続性放出カプセル剤の形態であってもよく、製薬分野においてよく知られている任意の方法によって調製することができる。
【０１２０】
本発明における経口投与用の製剤は、所定量の活性薬剤をそれぞれ含有する別個の単位、例えば、カプセル剤、カプセル剤（gellules）、滴剤、カシェ剤、丸剤若しくは錠剤などとして；散剤若しくは顆粒剤として；水性液体若しくは非水性液体中の活性薬剤の液剤、乳剤若しくは懸濁剤として；又は水中油型液体乳剤若しくは油中水型液体乳剤として；又は大形丸剤などとして提供されてもよい。好ましくは、これらの組成物は、１用量当たり１〜２５０ｍｇ、より好ましくは１０〜１００ｍｇの活性成分を含有する。
【０１２１】
経口投与用の組成物（例えば錠剤及びカプセル剤）に関して、「許容される担体」は、一般的な賦形剤などの媒体、例えば結合剤、例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピル−メチルセルロース、スクロース及びデンプン；充填剤及び担体、例えばコーンスターチ、ゼラチン、ラクトース、スクロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、リン酸二カルシウム、塩化ナトリウム及びアルギン酸；並びに滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム及び他のステアリン酸金属塩、ステアリン酸グリセロール、ステアリン酸、シリコーンオイル、タルク蝋、油及びコロイド状シリカなどを含む。ペパーミント、冬緑油、チェリー香味物質などの着香剤もまた使用することができる。剤形を容易に識別可能にするために着色剤を添加することが望ましい場合がある。錠剤は、当技術分野においてよく知られている方法によってコーティングすることもできる。
【０１２２】
錠剤は、任意に１又は２以上の補助的成分とともに、圧縮又は成形によって製造することができる。圧縮錠剤は、適切な装置において、任意に、結合剤、滑沢剤、不活性な希釈剤、防腐剤、表面活性剤又は分散剤と混合した粉末又は顆粒などの易流動性（free flowing）形態の活性薬剤を圧縮することによって調製することができる。成形錠剤は、適切な装置において、不活性な液体希釈剤で湿らせた粉末化された化合物の混合物を成形することによって製造することができる。錠剤は任意に、コーティングされていても又は割線入りであってもよく、活性薬剤の徐放又は制御放出をもたらすように製剤化されてもよい。
【０１２３】
経口投与のために適切な他の製剤としては、風味を付けた基剤、通常はスクロース及びアラビアゴム又はトラガカント中に活性薬剤を含む薬用キャンディー剤；ゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアラビアゴムなどの不活性基剤中に活性薬剤を含むトローチ剤；並びに適当な液体担体中に活性薬剤を含む口内洗浄剤が挙げられる。
【０１２４】
他の投与形態は、静脈内、動脈内、髄腔内、皮下、皮内、腹腔内又は筋肉内に注射することができ、無菌の又は滅菌可能な溶液から調製される、液剤又は乳剤を含む。注射可能な形態は典型的には、１用量当たり１０〜１０００ｍｇ、好ましくは１０〜２５０ｍｇの活性成分を含有する。
【０１２５】
本発明の医薬組成物はまた、坐剤、ペッサリー、懸濁剤、乳剤、ローション剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、噴霧剤、液剤又は散布粉剤の形態であってもよい。
【０１２６】
経皮投与の代替手段は、皮膚貼付剤の使用によるものである。例えば、活性成分を、ポリエチレングリコールの水性エマルション又は流動パラフィンからなるクリーム剤中に組み込むことができる。活性成分はまた、必要とされ得るような安定剤及び防腐剤と一緒に、白蝋又は白色ワセリン基剤からなる軟膏剤中に１重量％〜１０重量％の濃度で組み込むこともできる。
【０１２７】
投与量
当業者は、過度の実験を行うことなく、対象に投与するための本発明の組成物の１つの適当な用量を容易に決定することができる。典型的には、医師は、個々の患者にとって最も適切となるであろう実際の投与量を決定し、これは、用いる特定の化合物の活性、代謝安定性及びその化合物の作用の長さ、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与の様式及び回数、排泄速度、配合薬物、特定の状態の重症度、並びに治療法を受けている個体を含む様々な因子に応じて決まるであろう。本明細書で開示されている投与量は、平均的な症例の例示である。当然ながら、より高い又は低い投薬量範囲が妥当である個々の事例も可能であり、そのような事例も本発明の範囲内である。
【０１２８】
本発明によれば、有効量の一般式（Ｉ）の化合物を投与してＰＡＩＣＳを阻害することができる。当然ながら、この投与量は、化合物の投与の種類に応じてさらに変更されるであろう。例えば、急性期治療のための「有効量」を達成するためには、一般式（Ｉ）の化合物の非経口投与が好ましい。水若しくは生理食塩水中５％デキストロース中の化合物の静脈内注入、又は適切な賦形剤を用いた同様の製剤が最も有効であるが、筋肉内ボーラス注射もまた有用である。典型的には、非経口用量は、キナーゼを阻害するために有効な濃度で血漿中の薬物の濃度を維持するような形で、約０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．１〜２０ｍｇ／ｋｇであるであろう。化合物は、約０．４〜約４００ｍｇ／ｋｇ／日の１日総用量を達成するレベルで１日に１〜４回投与され得る。治療上有効な本発明化合物の正確な量、及びそのような化合物が最も有利に投与される経路は、薬剤の血中レベルを、治療効果を有するために必要とされる濃度と比較することによって、当業者により容易に決定される。
【０１２９】
本発明の化合物はまた、薬物の濃度が、本明細書で開示されている治療指標の１又は２以上を達成するために十分であるような形で、患者に経口投与することができる。典型的には、化合物を含有する医薬組成物は、患者の状態に適合するように、約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇの経口用量で投与される。好ましくは経口用量は約０．５〜約２０ｍｇ／ｋｇであろう。
【０１３０】
本発明に従って本発明の化合物を投与する場合、許容できない毒性作用は予期されない。良好なバイオアベイラビリティを有し得る本発明の化合物をいくつかの生物学的アッセイのうちの１つにおいて試験して、所与の薬理作用を有するために必要とされる化合物の濃度を決定することができる。
【０１３１】
組み合わせ
特に好ましい実施形態において、本発明の１又は２以上の化合物は、１又は２以上の他の活性薬剤、例えば、市販されている既存の薬物と併用して投与される。そのような場合、本発明の化合物は、１又は２以上の他の活性薬剤と連続的に、同時に又は逐次的に投与することができる。
【０１３２】
薬物は一般に、併用して使用される場合、より有効である。特に、併用療法は、主要毒性の重複、作用機序及び耐性機序を回避するために望ましい。さらに、大部分の薬物をそれらの最大耐量で、そのような用量の時間間隔を最小にして投与することもまた望ましい。化学療法薬を併用する主な利点は、併用により、生化学的相互作用による相加効果又は予想される相乗効果を促進することができ、さらに耐性の出現を減少させる又は遅らせることができることである。
【０１３３】
特定の障害の治療において有益であることが公知である又は推測される薬剤と一緒に試験化合物の阻害活性を試験することによって、有益な組み合わせを提案することができる。例えば、本発明は、化合物と併用した場合に抗がん活性に対して相加的及び相乗的な活性を促進する化合物を同定するためのアッセイにおける、上記の化合物の使用に関する。好ましくは、アッセイは、ハイスループットのセルベース表現型スクリーニングである。この手順はまた、薬剤を投与する順序、すなわち送達前、送達と同時、又は送達後、を決定するためにも使用することができる。そのようなスケジューリングは、本発明において同定される全ての活性薬剤の特徴であり得る。
【０１３４】
アッセイ
本発明のさらなる態様は、ＰＡＩＣＳを阻害可能なさらなる候補化合物を同定するためのアッセイにおける上記の化合物の使用に関する。
好ましくは、候補化合物は、ＰＡＩＣＳを選択的に阻害することができる。
【０１３５】
好ましくは、アッセイは競合的結合アッセイである。
【０１３６】
より好ましくは、競合的結合アッセイは、本発明の化合物をＰＡＩＣＳと、及び候補化合物と接触させること、及び本発明による化合物とＰＡＩＣＳとの間の相互作用の変化を検出することを含む。
好ましくは、候補化合物は、本発明の化合物の通常のＳＡＲ改変によって作製される。
【０１３７】
本明細書で使用される場合、「通常のＳＡＲ改変」という用語は、化学的誘導体化によって所与の化合物を変えるための当技術分野で知られている標準的な方法を指す。
【０１３８】
よって、一態様では、同定された化合物は、他の化合物を開発するためのモデル（例えば、鋳型）としての役割を果たし得る。そのような試験において用いられる化合物は、溶液中で遊離状態であっても、固体支持体に固定されていても、細胞表面上に保持されていても、又は細胞内に位置していてもよい。化合物と試験されている薬剤との間の結合複合体の活性又は形成の消失が測定され得る。
【０１３９】
本発明のアッセイは、多数の薬剤が試験されるスクリーニングであってもよい。一態様では、本発明のアッセイ方法はハイスループットスクリーニングである。
【０１４０】
本発明はまた、ある化合物に結合可能な中和抗体が、ある化合物に対する結合に関して試験化合物と特異的に競合する、競合的薬物スクリーニングアッセイの使用も企図する。
【０１４１】
スクリーニングのための別の技術は、物質に対する適切な結合親和性を有する薬剤のハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ，high throughput screening）を提供し、国際公開第８４／０３５６４号パンフレットで詳細に記載されている方法に基づいている。
【０１４２】
本発明のアッセイ方法は、試験化合物の小規模及び大規模スクリーニングの両方にとって、並びに定量分析において、適切であろうことが予期される。
【０１４３】
好ましくは、競合的結合アッセイは、本発明の化合物をキナーゼと、前記キナーゼの既知の基質の存在下で接触させること、及び前記キナーゼと前記既知の基質との間の相互作用の何らかの変化を検出することを含む。
【０１４４】
本発明のさらなる態様は、ＰＡＩＣＳに対するリガンドの結合を検出する方法であって、
（ｉ）前記キナーゼの既知の基質の存在下でリガンドをＰＡＩＣＳと接触させるステップ、
（ii）前記ＰＡＩＣＳと前記既知の基質との相互作用の何らかの変化を検出するステップ、
を含み、前記リガンドが本発明の化合物である、方法を提供する。
【０１４５】
本発明の一態様は、
（ａ）本明細書で前述されているアッセイ方法を実施するステップ、
（ｂ）リガンド結合ドメインに結合することができる１又は２以上のリガンドを同定するステップ、及び
（ｃ）ある量の前記１又は２以上のリガンドを調製するステップ
を含む方法に関する。
【０１４６】
本発明の別の態様は、
（ａ）本明細書で前述されているアッセイ方法を実施するステップ、
（ｂ）リガンド結合ドメインに結合することができる１又は２以上のリガンドを同定するステップ、及び
（ｃ）前記１又は２以上のリガンドを含む医薬組成物を調製するステップ
を含む方法を提供する。
【０１４７】
本発明の別の態様は、
（ａ）本明細書で前述されているアッセイ方法を実施するステップ、
（ｂ）リガンド結合ドメインに結合することができる１又は２以上のリガンドを同定するステップ、
（ｃ）リガンド結合ドメインに結合することができる前記１又は２以上のリガンドを改変するステップ、
（ｄ）本明細書で前述されているアッセイ方法を実施するステップ、
（ｅ）任意に、前記１又は２以上のリガンドを含む医薬組成物を調製するステップ
を含む方法を提供する。
【０１４８】
本発明はまた、本明細書で前述されている方法によって同定されるリガンドにも関する。
【０１４９】
本発明のさらに別の態様は、本明細書で前述されている方法によって同定されるリガンドを含む医薬組成物に関する。
【０１５０】
本発明の別の態様は、本明細書で前述されている１又は２以上の障害の治療において使用するための医薬組成物の調製における、本明細書で前述されている方法によって同定されるリガンドの使用に関する。
【０１５１】
上記の方法を使用して、１又は２以上のキナーゼの阻害剤として有用なリガンドについてスクリーニングすることができる。
【０１５２】
一般式（Ｉ）の化合物は、検査室ツール及び治療剤の両方として有用である。検査室において、本発明のある特定の化合物は、一般に「ターゲットバリデーション」と称されるプロセスである、既知の又は新たに発見されたタンパク質が、疾患状態が確立又は進行する間に決定的な又は少なくとも重要な生化学的機能に寄与するかどうかを確定するのに有用である。
【０１５３】
合成
本発明の別の態様は、Ｙ及びＺが両方ともＮである、本明細書で定義されている式（Ｉｂ）の化合物を調製するための方法であって、
【０１５４】
【化３】
2020514260.tif 000013
【０１５５】
（ｉ）Ｒ１が本明細書の上記で定義されている通りである式（II）の中間体を調製するステップ、
（ii）前記式（II）の中間体を式（Ｉｂ）の化合物に変換するステップ
を含む、方法に関する。
【０１５６】
以下の非限定的な例として、以下の図面を参照して、本発明をさらに説明する。
【図面の簡単な説明】
【０１５７】
【図１】ホスホリボシルアミノイミダゾールカルボキシラーゼ、ホスホリボシルアミノイミダゾールスクシノカルボキサミドシンテターゼのドメイン、及びデノボプリン生合成におけるその役割を示す図である。
【図２】ヒトＰＡＩＣＳによって触媒される反応を示す図である。
【図３】Ｔｒａｎｓｃｒｅｅｎｅｒ  ＦＩアッセイ原理を示す図である。
【図４】異種移植片モデル（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１−Ｄｌｕｘ異種移植片モデル）における化合物６９の効果を示す図であり、試験日数に対する腫瘍体積を示す図である。
【図５】異なる実験群（ＷＴ、対照１、ＫＤ３及びＫＤ１４）において測定した平均腫瘍重量（ｍｇ）を示す図である。
【図６】漿尿膜（ＣＡＭ）モデルにおけるＰＡＩＣＳ  ＣＲＩＳＰＲ  ＫＤ  ＭＤＡ２３１細胞増殖の評価における、各群についての腫瘍の代表的なイメージ（１群当たり３腫瘍）である。ＭＤＡ２３１改変細胞のＰＡＩＣＳ  ＣＲＩＳＰＲ  ＫＤクローン（ＫＤ３及びＫＤ１４）は、野生型及び対照改変ＭＤＡ２３１細胞と比較して、腫瘍発育の顕著な低減を示した。［実施例］
【０１５８】
材料及び方法
クロマトグラフィー
Agilent社製の装置を使用して分取高速液体クロマトグラフィーを行った。クロマトグラフィーが、直列に接続された多波長ＵＶ検出器（Agilent社により製造されたG1365B）及びMM-ES＋APCI質量分析計（Agilent社により製造されたG-1956A）によってモニタリングされ、適当な基準が満たされる場合、自動化フラクションコレクター（Agilent社により製造されたG1364B）によって試料が回収されるように装置を構成した。収集は、ＵＶ又は質量分析の任意の組み合わせによって作動させることができ、時間に基づくことができる。分離プロセスのための典型的な条件は以下の通りである：クロマトグラフィーカラムはXbridge C-18（１９×１００ｍｍ）であった；４０ｍｌ／分の流量で７分間にわたって勾配を行った（開始時勾配：１０％ＭｅＯＨ及び９０％水、終了時勾配：１００％ＭｅＯＨ及び０％水；バッファーとして：０．１％ギ酸、０．１％水酸化アンモニウム又は０．１％ＴＦＡのいずれかを水に添加した）。例えば開始時又は終了時の溶媒組成を変えること、溶媒又はバッファーを変更すること、ランタイムを変えること、流量及び／又はクロマトグラフィーカラムを変えることによって、それぞれの特定の化合物に関して条件を変更することが必要であるか又は望ましい可能性があることが、当業者によって理解されるはずである。フラッシュクロマトグラフィーは、シリカゲルクロマトグラフィーのことを指し、SP4若しくはIsolera 4 MPLCシステム（Biotage社製）及び充填済みシリカゲルカートリッジ（Biotage社より供給）を使用して、又は代替として通常のガラスカラムクロマトグラフィーを使用して行った。
【０１５９】
分析方法
１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ，Nuclear Magnetic Resonance）スペクトルは、典型的には、別途明記されていない限りｒｔ付近で、記載の溶媒においてECX400分光計（JEOL社製）を使用して記録した。全ての場合において、ＮＭＲデータは、提案されている構造と一致した。特徴的な化学シフト（δ）は、主要ピークの名称として通常の略語：例えばｓ、一重線；ｄ、二重線；ｔ、三重線；ｑ、四重線；ｄｄ、二重二重線；ｂｒ、幅広線を使用して、１００万分率で記載する。
【０１６０】
分析用ＬＣＭＳは、典型的には、C-18 Xbridgeカラムと一緒にAgilent HPLC機器を使用して行った（３．５μｍ、４．６×３０ｍｍ、開始時勾配：１０％有機相及び９０％水、終了時勾配：有機及び０％水；バッファーとして：０．１％水酸化アンモニウム又は０．１％ＴＦＡのいずれかを水に添加した）。有機溶媒は、アセトニトリル又はＭｅＯＨのいずれかであった。２５４及び２１０ｎｍでのＵＶ検出とともに３ｍＬ／分の流量を使用した。質量スペクトルは、MM-ES＋APCI質量分析計（G-1956A、Agilent社製）を使用して記録した。
【０１６１】
化合物調製
出発材料の調製が記載されていない場合、これらは市販されているか、文献において公知であるか、又は当業者が標準的な手順を使用して容易に入手可能である。化合物がより先行する実施例又は中間体と同様に調製されると示されている場合、反応時間、試薬の当量数、溶媒、濃度及び温度はそれぞれの特定の反応に関して変更できること、並びに異なる後処理又は精製技術を用いることが必要であるか又は望ましいことがあることが当業者に理解されるであろう。
【０１６２】
マイクロ波照射を使用して反応を行う場合、使用されるマイクロ波は、Biotage社により提供されるInitiator 60である。一定温度を維持するために、供給される実際の出力は反応の過程で異なる。
【０１６３】
一部の水素化は、ThalesNano社製のH-Cube（登録商標）Continuous-flow Hydrogenation Reactorを使用して行われた。触媒は、「CatCarts」カートリッジとしてThalesNano社から供給される。圧力、流量、温度及びカートリッジは、実験の部において示す。設備は、製造業者の操作手順に従って使用した。反応混合物の反復サイクルを行い、場合によっては、反応の収率を向上させるためにサイクル間でカートリッジを交換することが必要であるか又は望ましい場合があることを当業者は理解するであろう。
【０１６４】
略語
いくつかの一般的な略語のリストを下記に示す。記載されていない他の略語が使用されている場合、当業者はこれらを理解するであろう。
ＡｃＯＨ＝酢酸
ＢＯＣ＝ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＣＤＩ＝１，１’−カルボニルジイミダゾール
Ｃｓ２ＣＯ３＝炭酸セシウム
ＤＣＭ＝ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ＝Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
ＥｔＯＨ＝エタノール
ＨＡＴＵ＝Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＬＣＭＳ＝液体クロマトグラフィー質量分析
ＬｉＣｌ＝塩化リチウム
ＭｅＯＨ＝メタノール
ＮａＨＣＯ３＝重炭酸ナトリウム
Ｎａ２ＳＯ４＝硫酸ナトリウム
ＮＭＰ＝Ｎ−メチルピロリジノン
Ｐｅｔエーテル＝４０／６０石油エーテル
Ｐｄ２（ｄｂａ）３＝トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）
ｒｔ＝室温
ＳＣＸ＝強カチオン交換
ＴＥＡ＝トリエチルアミン
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
Ｘａｎｔｐｈｏｓ＝４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン
【０１６５】
本発明の選択された化合物の合成を以下に説明する。
【０１６６】
【化４】
2020514260.tif 000014
【０１６７】
１−（４−ブロモ−３−ニトロフェニル）ピペラジン（２）
【０１６８】
【化５】
2020514260.tif 000015
【０１６９】
１−（３−ニトロフェニル）ピペラジン１（４．５ｇ、２１．７ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（１００ｍＬ）中溶液に、臭素（３．４７ｇ、２１．７ｍｍｏｌ）をｒｔで添加し、６０℃で１６時間撹拌した。反応混合物をｒｔまで冷却し、析出した固体を濾過し、水（２×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥して化合物２（４．５ｇ）を橙色の粗製固形物として得た；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝２８６／２８８［Ｍ＋Ｈ］＋。粗製固形物は、そのまま次のステップに用いた。
【０１７０】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−３−ニトロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（３）
【０１７１】
【化６】
2020514260.tif 000016
【０１７２】
１−（４−ブロモ−３−ニトロフェニル）ピペラジン２（４．５ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４０ｍＬ）中溶液に、ＴＥＡ（４．７ｇ、４７．２ｍｍｏｌ）、続いて二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５．１ｇ、２３．６ｍｍｏｌ）をｒｔで添加し、１６時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮した。粗製化合物を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１００〜２００メッシュ、１０％ＥｔＯＡｃ／ｐｅｔエーテルで溶出）によって精製し、化合物３（４．５ｇ、７５％）を黄色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ  ７．５４（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，３Ｈ）、７．３０（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．９３（ｄｄ，Ｊ＝９．３，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．６１〜３．５７（ｍ，４Ｈ）、３．２２〜３．１９（ｍ，４Ｈ）、１．４８（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝２８６／２８８［（Ｍ−ＢＯＣ）＋Ｈ］＋。
【０１７３】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（４）
【０１７４】
【化７】
2020514260.tif 000017
【０１７５】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−３−ニトロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート３（４．５ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４０ｍＬ）及び水（８ｍＬ）中溶液に、鉄粉末（１．９５ｇ、３５．０ｍｍｏｌ）をｒｔで添加し、５０℃まで加熱した。次いで塩化アンモニウム（３．７ｇ、７０．０ｍｍｏｌ）を５０℃で添加し、７０℃で２時間撹拌を続けた。反応混合物をｒｔまで冷却し、水（２０ｍＬ）を添加した。混合物を、セライトのパッドを通して濾過し、濾液をＥｔＯＡｃ（２×４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、真空濃縮した。粗製化合物を、ｎ−ペンタンと一緒に研和することによって精製し、化合物４（３．５ｇ、８５％）をオフホワイト色の固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ  ７．２５（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、６．３１（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．２４（ｄｄ，Ｊ＝８．７，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．１０（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、３．５６〜３．５３（ｍ，４Ｈ）、３．０８〜３．０５（ｍ，４Ｈ）、１．４８（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝３５６／３５８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７６】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（２−アミノオキサゾール−４−カルボキサミド）−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（５）
【０１７７】
【化８】
2020514260.tif 000018
【０１７８】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート４（３．５ｇ、９．８３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中溶液に、２−アミノオキサゾール−４−カルボン酸（５．０ｇ、３９．３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１４．９ｇ、３９．３ｍｍｏｌ）、続いてＤＩＰＥＡ（３．８ｇ、２９．５ｍｍｏｌ）をｒｔで添加し、１６時間撹拌した。氷冷水（５０ｍＬ）を添加し、撹拌を１０分間続けた。析出物を濾過し、乾燥し、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１００−２００メッシュ、５０％ＥｔＯＡｃ／Ｐｅｔエーテルで溶出）によって精製して、化合物５（２．５ｇ、５５％）を淡黄色の固体として得た；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４６６／４６８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７９】
２−アミノ−Ｎ−（２−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）フェニル）オキサゾール−４−カルボキサミド（６）
【０１８０】
【化９】
2020514260.tif 000019
【０１８１】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（２−アミノオキサゾール−４−カルボキサミド）−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート５（０．５ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液に、ＴＦＡ（５ｍＬ）をｒｔで添加し、反応物を２時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、得られた残渣を水（１０ｍＬ）中に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を用いて塩基性化した。析出物を濾過し、乾燥し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液と一緒に研和することによって精製して、化合物６（０．３２ｇ、８２％）をオフホワイト色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１３（ｓ，１Ｈ）、８．７６（ｂｒ，ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．５２（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｓ，２Ｈ）、６．７８（ｄｄ，Ｊ＝８．７，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．３４（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、３．２３（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝３６６／３６８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８２】
同様の手順を用いて以下の中間体を調製した：
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７）
【０１８３】
【化１０】
2020514260.tif 000020
【０１８４】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１３（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．３１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７３（ｂｒ  ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．０９〜３．００（ｍ，４Ｈ）、２．８２（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：３２２／３２４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８５】
【化１１】
2020514260.tif 000021
【０１８６】
ｔｅｒｔ−ブチル４−［４−（メチルスルファニル）−３−ニトロフェニル］ピペラジン−１−カルボキシレート（９）
【０１８７】
【化１２】
2020514260.tif 000022
【０１８８】
ｔｅｒｔ−ブチルピペラジン−１−カルボキシレート（０．５６ｇ、３．００ｍｍｏｌ）、４−ブロモ−１−（メチルスルファニル）−２−ニトロベンゼン８（７５０ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（II）（５４ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（２１０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及びＣｓ２ＣＯ３（２ｇ、６．１０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）中で合わせ、１１０℃で３時間撹拌した。反応混合物を、シリカプラグを通して濾過し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水で（３×１００ｍＬ）、次いで、飽和ＬｉＣｌ（ａｑ）溶液（３×１５ｍＬ）で洗浄した。有機物を乾燥し、真空濃縮し、０〜１４％ＥｔＯＡｃ／Ｐｅｔエーテルで溶出するBiotage Isoleraによって精製し、化合物９（０．７８ｇ、７３％）を橙色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ７．６３（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．４５〜７．３９（ｍ，２Ｈ）、３．５０〜３．４２（ｍ，４Ｈ）、３．２２〜３．１６（ｍ，４Ｈ）、２．４７（ｓ，３Ｈ）、１．４１（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：３５４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８９】
ｔｅｒｔ−ブチル４−［３−アミノ−４−（メチルスルファニル）フェニル］ピペラジン−１−カルボキシレート（１０）
【０１９０】
【化１３】
2020514260.tif 000023
【０１９１】
ｔｅｒｔ−ブチル４−［４−（メチルスルファニル）−３−ニトロフェニル］ピペラジン−１−カルボキシレート９（５５０ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（７０ｍＬ）及びＥｔＯＨ（４０ｍＬ）中に溶解し、１０％Ｐｄ／ＣとともにH-cubeを使用して３０℃で水素化した。このプロセスを繰り返し、溶出液を真空濃縮し、残渣をIsolute-SCXカートリッジによって精製し、化合物１０（５１０ｍｇ、１００％）を茶色の固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ７．０９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、６．２８（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．１８（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．１５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、３．４６〜３．３８（ｍ，４Ｈ）、３．１３〜２．９９（ｍ，４Ｈ）、２．１７（ｓ，３Ｈ）、１．４１（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：３２４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９２】
ｔｅｒｔ−ブチル４−［３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−（メチルスルファニル）フェニル］ピペラジン−１−カルボキシレート（１１）
【０１９３】
【化１４】
2020514260.tif 000024
【０１９４】
２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−カルボン酸（０．２７ｇ、２．１１ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．８２ｇ、２．１１ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（２．２０ｍＬ、１２．６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−［３−アミノ−４−（メチルスルファニル）フェニル］ピペラジン−１−カルボキシレート１０（６８０ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）に添加し、反応混合物をｒｔで１８時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）と水（５０ｍＬ）に分配した。有機層を水（２×５０ｍＬ）、飽和ＬｉＣｌ（ａｑ）（３×１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、真空濃縮し、カラムクロマトグラフィー（１０〜１００％ＥｔＯＡｃ／Ｐｅｔエーテルで溶出）によって精製し、化合物１１（０．４０ｇ、４４％）を茶色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．６６（ｓ，１Ｈ）８．０９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）８．０４（ｓ，１Ｈ）７．４２（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）７．１５（ｓ，２Ｈ）６．７３（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）３．４１〜３．５０（ｍ，４Ｈ）３．０９〜３．１８（ｍ，４Ｈ）２．３０（ｓ，３Ｈ）１．４１（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４３４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９５】
２−アミノ−Ｎ−［２−（メチルスルファニル）−５−（ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（１２）
【０１９６】
【化１５】
2020514260.tif 000025
【０１９７】
ｔｅｒｔ−ブチル４−［３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−（メチルスルファニル）フェニル］ピペラジン−１−カルボキシレート１１（０．４０ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４ｍＬ）中溶液に、ＴＦＡ（４ｍＬ）をｒｔで添加し、反応物を２時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、次いで、Isolute-SCXカートリッジを使用して精製し、化合物１２（２７０ｍｇ、８８％）を橙色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．６７（ｓ，１Ｈ）、８．０８（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、８．０３（ｓ，１Ｈ）、７．３９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．６９（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３４（ｓ，１Ｈ）、３．１０〜３．０２（ｍ，４Ｈ）、２．８７〜２．７６（ｍ，４Ｈ）、２．２９（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：３３４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９８】
【化１６】
2020514260.tif 000026
【０１９９】
２−アミノ−Ｎ−（２−ブロモ−５−｛４−［（３−クロロプロピル）スルホニル］ピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（１３）
ＤＭＦ（１２０ｍＬ）中の２−アミノ−Ｎ−（２−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）フェニル）オキサゾール−４−カルボキサミド６（１２ｇ、３２．９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、３−クロロプロパン−１−スルホニルクロリド（７．９７ｍＬ、６５．８ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（１３．７ｍＬ、９８．０ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、ｒｔで６時間撹拌した。反応混合物を冷水（２００ｍＬ）中に注ぎ、固体を濾過し、乾燥して、化合物１３（１２ｇ、７２％）を淡黄色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．９１（ｓ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７６〜６．６３（ｍ，１Ｈ）、３．７５（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．３４〜３．３１（ｍ，２Ｈ）、３．２５〜３．１７（ｍ，６Ｈ）、３．１８〜３．１１（ｍ，２Ｈ）、２．１８〜２．１１（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝５０６／５０８／５１０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２００】
同様の手順を用いて以下の中間体を調製した：
２−アミノ−Ｎ−（２−クロロ−５−｛４−［（３−クロロプロピル）スルホニル］ピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（１４）
【０２０１】
【化１７】
2020514260.tif 000027
【０２０２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７９（ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．７４（ｓ，２Ｈ）、３．３４〜３．３０（ｍ，４Ｈ）、３．２６〜３．１９（ｍ，６Ｈ）、２．１７〜２．１０（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４６２／４６４／４６６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０３】
２−アミノ−Ｎ−（２−ブロモ−５−｛４−［（３−クロロ−２−メチルプロピル）スルホニル］ピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（１５）
【０２０４】
【化１８】
2020514260.tif 000028
【０２０５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．７３（ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．３３〜３．２７（ｍ，４Ｈ）、３．２７〜３．１９（ｍ，５Ｈ）、３．０２（ｄｄ，Ｊ＝１４．２，７．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．４５〜２．３５（ｍ，１Ｈ）、１．１５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５２０／５２２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０６】
【化１９】
2020514260.tif 000029
【０２０７】
２−アミノ−Ｎ−｛２−ブロモ−５−［４−（エテニルスルホニル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（１６）
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド６（１ｇ、２．７３ｍｍｏｌ）及びＴＥＡ（１．１４ｍＬ、８．１９ｍｍｏｌ）を０℃でＤＭＦ（１０ｍＬ）中で合わせた。反応物を０℃で５分間撹拌し、次いで、２−クロロエタンスルホニルクロリド（０．２８ｍＬ、２．７３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を５時間にわたってｒｔまで温めた。次いで混合物をＥｔＯＡｃと飽和ＬｉＣｌ（ａｑ）とに分配し、相分離カートリッジを用いて有機層を回収し、真空濃縮した。粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（０〜６０％ＥｔＯＡｃ／Ｐｅｔエーテル勾配で溶出）によって精製して、所望の生成物１６（０．２２ｇ、１８％）を得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９７（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、６．８６（ｄｄ，Ｊ＝１６．５，１０．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．２２（ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．１５（ｄ，Ｊ＝１６．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．２８〜３．２２（ｍ，４Ｈ）、３．２０〜３．１４（ｍ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４５６／４５８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０８】
同様の手順を用いて以下の中間体を調製した：
２−アミノ−Ｎ−｛２−クロロ−５−［４−（エテニルスルホニル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（１７）
【０２０９】
【化２０】
2020514260.tif 000030
【０２１０】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０８〜８．０６（ｍ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、６．８７（ｄｄ，Ｊ＝１６．５，１０．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．７９（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．２４〜６．１３（ｍ，２Ｈ）、３．２５（ｄｄ，Ｊ＝６．２，３．０Ｈｚ，４Ｈ）、３．２１〜３．１３（ｍ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４１２／４１４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１１】
【化２１】
2020514260.tif 000031
【０２１２】
アゼチジン−３−イルメチル４−（３−（２−アミノオキサゾール−４−カルボキサミド）−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１９）
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル３−（ヒドロキシメチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（８１５ｍｇ、４．３５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＣＤＩ（１．１４ｇ、４．３５ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、３０分間撹拌した。２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド７（７００ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）及びＴＥＡ（０．６ｍＬ、４．３５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機物をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮した。カラムクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ／Ｐｅｔエーテルで溶出）による精製により、化合物１８（５００ｍｇ、４４％）を茶色固体として得た；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５３５／５３７［Ｍ＋Ｈ］＋。これをＤＣＭ（１０ｍＬ）中に再溶解し、ＴＦＡ（３ｍＬ）で０℃で処理し、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮した。得られた残渣を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）溶液（１０ｍＬ）を用いて０℃で塩基性化し、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機物をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮した。ＤＣＭ（３×５ｍＬ）を残渣に添加し、結果として生じた固体を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥して、１９（２５０ｍｇ、６２％）を茶色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｍ，１Ｈ）、７．３４（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、６．７８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．１１（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．６３（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．５１（ｍ，４Ｈ）、３．３２（ｍ，４Ｈ）、３．１３（ｍ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４３５／４３７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１３】
（１−メチルアゼチジン−３−イル）メチル４−（３−（２−アミノオキサゾール−４−カルボキサミド）−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２０）
【０２１４】
【化２２】
2020514260.tif 000032
【０２１５】
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中のアゼチジン−３−イルメチル４−（３−（２−アミノオキサゾール−４−カルボキサミド）−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート１９（２００ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、３０％ホルムアルデヒド（ａｑ）（２０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及び塩化亜鉛（１８８ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、ｒｔで２時間撹拌した。次いでシアノ水素化ホウ素ナトリウム（８６ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）溶液（５ｍＬ）で塩基性化し、真空濃縮した。得られた残渣をＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中に溶解し、セライトを通して濾過し、濾液を真空濃縮した。分取ＨＰＬＣによる精製により、２０（２５ｍｇ、１２％）をオフホワイト色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．３４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、６．７８〜６．７５（ｍ，１Ｈ）、４．１２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、３．５２（ｍ，４Ｈ）、３．２２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、３．１３（ｍ，４Ｈ）、２．８７（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．６２〜２．５９（ｍ，１Ｈ）、２．１７（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４４９／４５１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１６】
同様の手順を用いて中間体６、７又は１２から以下の実施例を調製した：
２−（シクロプロピルアミノ）エチル４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２１）
【０２１７】
【化２３】
2020514260.tif 000033
【０２１８】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、６．７３（ｄｄ，Ｊ＝２．９，９．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．０８（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．５２（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、３．１５（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，４Ｈ）、２．８５（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．１７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、０．４０（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，２Ｈ）、０．２６（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）＝４９３／４９５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２１９】
アゼチジン−３−イル４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２２）
【０２２０】
【化２４】
2020514260.tif 000034
【０２２１】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７７（ｄｄ，Ｊ＝２．８，９．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．０７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３．６５〜３．４２（ｍ，９Ｈ）、３．１５（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４２１／４２３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２２】
２−（ジメチルアミノ）エチル４−（３−（２−アミノオキサゾール−４−カルボキサミド）−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２３）
【０２２３】
【化２５】
2020514260.tif 000035
【０２２４】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．０９（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９７（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．４６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３（ｓ，２Ｈ）、６．７１（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．１０（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）、３．５０（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、３．１３（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、２．４７（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｓ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４８１／４８３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２５】
３−（ジメチルアミノ）プロピル４−（３−（２−アミノオキサゾール−４−カルボキサミド）−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２４）
【０２２６】
【化２６】
2020514260.tif 000036
【０２２７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．０９（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３（ｓ，２Ｈ）、６．７２（ｄｄ，Ｊ＝２．８，９．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．０４（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）、３．５１（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、３．１４（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，４Ｈ）、２．２６（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．１２（ｓ，６Ｈ）、１．７４〜１．６７（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４９５／４９７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２２８】
２−（メチルアミノ）エチル４−（３−（２−アミノオキサゾール−４−カルボキサミド）−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２５）
【０２２９】
【化２７】
2020514260.tif 000037
【０２３０】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．４７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３（ｓ，２Ｈ）、６．７３（ｄｄ，Ｊ＝９．０，２．８Ｈｚ，１Ｈ）、４．０５（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）、３．５２（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、３．１５（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，４Ｈ）、２．６９（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）、２．２９（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）＝４６７／４６９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３１】
３−（ジメチルアミノ）プロピル−４−［３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−（メチルスルファニル）フェニル］ピペラジン−１−カルボキシレート（２６）
【０２３２】
【化２８】
2020514260.tif 000038
【０２３３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．６６（ｓ，１Ｈ）、８．０９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、８．０４（ｓ，１Ｈ）、７．４３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、６．７３（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．０４（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．５５〜３．４４（ｍ，４Ｈ）、３．１９〜３．１２（ｍ，４Ｈ）、２．４３〜２．３６（ｍ，２Ｈ）、２．３０（ｓ，３Ｈ）、２．２２（ｓ，６Ｈ）、１．７９〜１．７１（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４６３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３４】
２−（ジメチルアミノ）エチル４−［３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−（メチルスルファニル）フェニル］ピペラジン−１−カルボキシレート（２７）
【０２３５】
【化２９】
2020514260.tif 000039
【０２３６】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．６６（ｓ，１Ｈ）、８．０９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、８．０４（ｓ，１Ｈ）、７．４３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７３（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．０４（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．５５〜３．４５（ｍ，４Ｈ）、３．１９〜３．１２（ｍ，４Ｈ）、２．４０（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、２．３０（ｓ，３Ｈ）２．２２（ｓ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４４９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３７】
１−メチルアゼチジン−３−イル４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２８）
【０２３８】
【化３０】
2020514260.tif 000040
【０２３９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９７（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３（ｓ，２Ｈ）、６．７２（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．８３（五重線，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．５８〜３．４６（ｍ，６Ｈ）、３．１８〜３．１１（ｍ，４Ｈ）、２．９６〜２．９０（ｍ，２Ｈ）、２．２４（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）＝４７９／４８１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４０】
３−（ジメチルアミノ）プロピル４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（２９）
【０２４１】
【化３１】
2020514260.tif 000041
【０２４２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７８（ｄｄ，Ｊ＝９．０，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．０５（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．５１（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、３．１８〜３．１０（ｍ，４Ｈ）、２．３４（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．１８（ｓ，６Ｈ）、１．７３（五重線，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４５１／４５３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４３】
１−メチルピロリジン−３−イル４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（３０）
【０２４４】
【化３２】
2020514260.tif 000042
【０２４５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、６．７７（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、５．０３〜４．９９（ｍ，１Ｈ）、３．５１〜３．４８（ｍ，４Ｈ）、３．１４〜３．１１（ｍ，４Ｈ）、２．６８〜２．４８（ｍ，３Ｈ）、２．２８〜２．１５（ｍ，５Ｈ）、１．７６〜１．６６（ｍ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４４９／４５１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４６】
２−（メチルアミノ）エチル４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（３１）
【０２４７】
【化３３】
2020514260.tif 000043
【０２４８】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｓ，２Ｈ）、６．７７（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．０５（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）、３．５２（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、３．１７〜３．１０（ｍ，４Ｈ）、２．６８（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）、２．２９（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）＝４２３／４２５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４９】
ピロリジン−３−イル４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（３２）
【０２５０】
【化３４】
2020514260.tif 000044
【０２５１】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７７（ｄｄ，Ｊ＝６．０，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．０７（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．４９（ｓ，４Ｈ）、３．１２（ｓ，４Ｈ）２．９４〜２．８０（ｍ，２Ｈ）、２．７５〜２．４９（ｍ，２Ｈ）、１．９２〜１．８５（ｍ，１Ｈ）、１．７０〜１．６６（ｍ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４３５／４３７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２５２】
２−（ジメチルアミノ）エチル４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（３３）
【０２５３】
【化３５】
2020514260.tif 000045
【０２５４】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７７（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．１０（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）、３．５１（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、３．１７〜３．０９（ｍ，４Ｈ）、２．４７（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、２．１７（ｓ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４３７／４３９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２５５】
１−メチルアゼチジン−３−イル４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（３４）
【０２５６】
【化３６】
2020514260.tif 000046
【０２５７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７７（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．８５〜４．８２（ｍ，１Ｈ）、３．５６〜３．５１（ｍ，６Ｈ）、３．１５〜３．１２（ｍ，４Ｈ）、２．５０〜２．４９（ｍ，２Ｈ）、２．２４（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４３５／４３７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２５８】
２−（シクロプロピルアミノ）エチル４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（３５）
【０２５９】
【化３７】
2020514260.tif 000047
【０２６０】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｓ，２Ｈ）、６．７７（ｄｄ，Ｊ＝９．３，２．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．０６（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）、３．５２（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、３．１７〜３．０９（ｍ，４Ｈ）、２．７９（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．３３（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．１０（ｔｔ，Ｊ＝６．７，３．５Ｈｚ，１Ｈ）、０．３８〜０．３１（ｍ，２Ｈ）、０．２２〜０．１５（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４４９／４５１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６１】
【化３８】
2020514260.tif 000048
【０２６２】
ベンジル４−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アゼチジン−３−イル）メチル）−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（３７）
【０２６３】
【化３９】
2020514260.tif 000049
【０２６４】
ベンジル３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（１０ｇ、４２．７ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（８０ｍＬ）中溶液に、６０％水素化ナトリウム（４．２５ｇ、１０６ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、１時間撹拌した。次いで、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（メチルスルホニルオキシ）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート３６（１６．９ｇ、６３．８ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（２０ｍＬ）中溶液を１５分間にわたってゆっくりと添加し、０℃で３０分間撹拌し、次いで、ｒｔまで温め、１６時間撹拌した。反応混合物を氷水（５００ｍＬ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮した。カラムクロマトグラフィー（６０％ＥｔＯＡｃ／Ｐｅｔエーテルで溶出）による精製により、３７（２．５ｇ）を白色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ  ７．３５（ｓ，５Ｈ）、５．１５（ｓ，２Ｈ）、４．１５（ｓ，２Ｈ）、３．９９（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）、３．７２〜３．６４（ｍ，６Ｈ）、３．３５（ｍ，２Ｈ）、２．９０〜２．８２（ｍ，１Ｈ）、１．４２（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４０４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６５】
ｔｅｒｔ−ブチル３−（（２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（３８）
【０２６６】
【化４０】
2020514260.tif 000050
【０２６７】
ベンジル４−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アゼチジン−３−イル）メチル）−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート３７（２．５ｇ、６．２０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（５００ｍｇ）をＮ２雰囲気下で添加した。反応混合物を水素バルーン下で水素化し、ｒｔで４時間撹拌した。反応混合物を、セライトパッドを通して濾過し、ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空濃縮して、化合物３８（１．５ｇ、８９％）を黒色のゴム状固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ  ４．００（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）、３．７１〜３．６７（ｍ，３Ｈ）、３．５２（ｍ，２Ｈ）、３．３１（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）、３．０７（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．８６〜２．８２（ｍ，１Ｈ）、１．４３（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：２７０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２６８】
ｔｅｒｔ−ブチル３−（（４−（４−ブロモ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニル）−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（３９）
【０２６９】
【化４１】
2020514260.tif 000051
【０２７０】
密封されたチューブ中で、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−ヨードフェニルカルバメート（１．０ｇ、２．５１ｍｍｏｌ）の、１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１．６３ｇ、５．０１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル３−（（２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート３８（８１１ｍｇ、３．０１ｍｍｏｌ）及びＸａｎｔｐｈｏｓ（１４５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）中の脱気した溶液に、ＰＤ２（ｄｂａ）３（１１４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をｒｔで添加し、再び１０分間脱気した（アルゴン）。反応混合物を１００℃で１６時間加熱した。反応混合物をｒｔまで冷却し、セライトを通して濾過し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空濃縮した。カラムクロマトグラフィー（６０％ＥｔＯＡｃ／Ｐｅｔエーテルで溶出）による精製により、３９（８００ｍｇ、５９％）をゴム状の液体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ  ７．８３（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．９８（ｓ，１Ｈ）、６．４０〜６．３７（ｍ，１Ｈ）、４．１４（ｍ，１Ｈ）、４．０１（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）、３．９９（ｓ，２Ｈ）、３．７２〜３．６８（ｍ，３Ｈ）、３．４７（ｓ，４Ｈ）、２．８８〜２．８５（ｍ，１Ｈ）、１．５４（ｓ，９Ｈ）、１．４３（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５３９／５４１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７１】
ｔｅｒｔ−ブチル３−（（４−（３−アミノ−４−ブロモフェニル）−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート（４１）
【０２７２】
【化４２】
2020514260.tif 000052
【０２７３】
ｔｅｒｔ−ブチル３−（（４−（４−ブロモ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニル）−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート３９（８００ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液に、ＴＦＡ（５ｍＬ）を０℃で添加し、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合を真空濃縮して、化合物４０をＴＦＡ塩（８００ｍｇ、粗製）としてゴム状の液体として得た。
【０２７４】
４０（８００ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に、ＴＥＡ（０．８ｍＬ  ５．６５ｍｍｏｌ）及び二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４６２ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、次いで、カラムクロマトグラフィー（７０％ＥｔＯＡｃ／Ｐｅｔエーテルで溶出）によって精製し、化合物４１（２００ｍｇ、２ステップにわたって３０％）を淡黄色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ７．１４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．３３（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．１４〜６．１１（ｍ，１Ｈ）、５．０９（ｓ，２Ｈ）、３．８７（ｍ，２Ｈ）、３．６７（ｓ，２Ｈ）、３．５７（ｍ，４Ｈ）、３．３８〜３．３６（ｍ，４Ｈ）、２．８２〜２．７２（ｍ，１Ｈ）、１．３７（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４３９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７５】
２−アミノ−Ｎ−（２−ブロモ−５−｛４−［（１−メチルアゼチジン−３−イル）メチル］−３−オキソピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（４４）
【０２７６】
【化４３】
2020514260.tif 000053
【０２７７】
ｔｅｒｔ−ブチル３−（（４−（３−アミノ−４−ブロモフェニル）−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）アゼチジン−１−カルボキシレート４１（２００ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、２−アミノオキサゾール−４−カルボン酸（２０４ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（６０７ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３ｍＬ、１．５９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）中で０℃で合わせ、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、固体を濾過し、ジエチルエーテル（５ｍＬ）で洗浄し、乾燥して、化合物４２（２００ｍｇ、粗製）を茶色の固体として得た。これをＤＣＭ（３ｍＬ）中に再溶解し、ＴＦＡ（１ｍＬ）で０℃で処理し、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、得られた残渣をＤＣＭ（２×１０ｍＬ）と共蒸留し、乾燥して、化合物４３（２００ｍｇ、粗製）をゴム状の液体として得た。
【０２７８】
４３（２００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）中溶液を、３０％ホルムアルデヒド（ａｑ）（０．０８ｍＬ、０．８６ｍｍｏｌ）及び酢酸ナトリウム（１０９ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）で０℃で処理し、ｒｔで１時間撹拌した。次いでシアノ水素化ホウ素ナトリウム（８３ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（２５ｍＬ）中に溶解し、濾過し、乾燥した。得られた残渣を、分取ＨＰＬＣによって精製し、４４（２２ｍｇ、３ステップにわたって１０％）を淡黄色の固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９３（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４７（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｓ，２Ｈ）、６．６９（ｄｄ，Ｊ＝８．７，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．７７（ｓ，２Ｈ）、３．５４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、３．４３（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、３．２２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．７９（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．５９〜２．５４（ｍ，１Ｈ）、２．１５（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４６３／４６５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２７９】
同様の手順を用いて以下の実施例を調製した：
２−アミノ−Ｎ−（２−ブロモ−５−｛４−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−３−オキソピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（４５）
【０２８０】
【化４４】
2020514260.tif 000054
【０２８１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９３（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．４７（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３（ｓ，２Ｈ）、６．７１〜６．６８（ｍ，１Ｈ）、３．７６（ｓ，２Ｈ）、３．４８〜３．４４（ｍ，６Ｈ）、２．３９（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．１６（ｓ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４５１／４５３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８２】
２−アミノ−Ｎ−（２−クロロ−５−｛４−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−オキソピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（４６）
【０２８３】
【化４５】
2020514260.tif 000055
【０２８４】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９６（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．１７（ｓ，２Ｈ）、６．７７（ｍ，１Ｈ）、３．７８（ｓ，２Ｈ）、３．４７（ｓ，４Ｈ）、３．３８（ｍ，２Ｈ）、２．２３（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．１５（ｓ，６Ｈ）、１．６９〜１．６２（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４２１／４２３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２８５】
【化４６】
2020514260.tif 000056
【０２８６】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（４−（４−クロロ−３−ニトロフェニル）ピペラジン−１−イルスルホニル）エチルカルバメート（５０）
【０２８７】
【化４７】
2020514260.tif 000057
【０２８８】
１−（４−クロロ−３−ニトロフェニル）ピペラジン（３．０ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液に、ＴＥＡ（２．５ｇ、２４．９ｍｍｏｌ）、続いてベンジル２−（クロロスルホニル）エチルカルバメート４７（１５ｇ、粗製）を０℃で添加し、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２×１００ｍＬ）で抽出した。有機物を水（２×５０ｍＬ）、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮した。カラムクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／Ｐｅｔエーテルで溶出）による精製により化合物４８（２ｇ）を純粋でない淡黄色の液体として得た。これを、精製を行わずに次のステップに用いた。
ＡｃＯＨ（６ｍＬ）中の３０％臭化水素中の４８（２ｇ、４．１４ｍｍｏｌ）の溶液を、ｒｔで６時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮した。得られた残渣を、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）（２０ｍＬ）を用いて塩基性化し、ＥｔＯＡｃ（２×２５ｍＬ）で抽出した。有機物をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、真空濃縮して、粗生成物４９（１ｇ）を黄色の液体として得た。
４９（１ｇ、２．８７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液を、ＴＥＡ（０．８ｍＬ、５．７６ｍｍｏｌ）及び二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（６８９ｍｇ、３．１６ｍｍｏｌ）を用いて０℃で処理し、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を水（２５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機物をブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、真空濃縮して、化合物５０（７５０ｍｇ、粗製）を黄色の液体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ  ７．４０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．０４〜７．０１（ｍ，１Ｈ）、３．６１（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）、３．４５（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ）、３．３２（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ）；３．１６（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）、１．４４（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：３９３［（Ｍ−５６）＋Ｈ］＋。粗製化合物は、精製を行わずにそのまま次のステップに用いた。
【０２８９】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（４−（３−アミノ−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−イルスルホニル）エチルカルバメート（５１）
【０２９０】
【化４８】
2020514260.tif 000058
【０２９１】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（４−（４−クロロ−３−ニトロフェニル）ピペラジン−１−イルスルホニル）エチルカルバメート５０（７５０ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）、ＮＨ４Ｃｌ（５５２ｍｇ、１０．０ｍｍｏｌ）及び鉄（２６６ｍｇ、５．０１ｍｍｏｌ）を、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）／Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）中で合わせた。反応混合物を８０℃で６時間加熱し、次いで冷まし、セライトを通して濾過し、ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空濃縮した。得られた残渣を水（２０ｍＬ）で希釈し、１０分間撹拌した。結果として生じる固体を濾過し、水で洗浄し、真空乾燥して、化合物５１（３００ｍｇ、４３％）を茶色の固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ７．０１〜６．９５（ｍ，２Ｈ）、６．３８（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、６．２２〜６．１９（ｍ，１Ｈ）、５．１４（ｓ，２Ｈ）、３．３１〜３．２５（ｍ，６Ｈ）、３．２０〜３．１０（ｍ，６Ｈ）、１．３７（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４１９／４２１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９２】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（４−（３−（２−アミノオキサゾール−４−カルボキサミド）−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−イルスルホニル）エチルカルバメート（５２）
【０２９３】
【化４９】
2020514260.tif 000059
【０２９４】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（４−（３−アミノ−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−イルスルホニル）エチルカルバメート５１（３００ｍｇ、０．７１７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）中溶液に、２−アミノオキサゾール−４−カルボン酸（２２９ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（６８１ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．３ｍＬ、１．７９ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、ｒｔで１６時間撹拌した。反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、固体を濾過し、真空乾燥して、化合物５２（１５０ｍｇ、３９％）を茶色の固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．０６〜８．０１（ｍ，２Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｓ，２Ｈ）、６．９６（ｍ，１Ｈ）、６．８１〜６．７７（ｍ，１Ｈ）、３．３１〜３．１７（ｍ，１２Ｈ）、１．３６（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５２９／５３１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９５】
２−アミノ−Ｎ−（５−（４−（２−アミノエチルスルホニル）ピペラジン−１−イル）−２−クロロフェニル）オキサゾール−４−カルボキサミド（５３）
【０２９６】
【化５０】
2020514260.tif 000060
【０２９７】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（４−（３−（２−アミノオキサゾール−４−カルボキサミド）−４−クロロフェニル）ピペラジン−１−イルスルホニル）エチルカルバメート５２（１５０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍＬ）中溶液に、ＴＦＡ（１ｍＬ）を０℃で添加し、次いで、反応混合物をｒｔで１６時間撹拌した。混合物を真空濃縮し、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）（５ｍＬ）を用いて０℃で塩基性化し、１０分間撹拌した。結果として生じた固体を濾過し、水、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）、ｎ−ペンタン（５ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥して、５３（３５ｍｇ、２９％）をオフホワイト色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）７．３５（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｓ，２Ｈ）、６．８１〜６．７７（ｍ，１Ｈ）、３．３１（ｍ，４Ｈ）、３．２３（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，４Ｈ）、３．１４（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．９２（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４２９／４３１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９８】
【化５１】
2020514260.tif 000061
【０２９９】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［２−（ジメチルアミノ）エチル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（５４）
ＴＨＦ（１ｍＬ）中の２−アミノ−Ｎ−｛２−ブロモ−５−［４−（エテニルスルホニル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド１６（６０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）及び２Ｍジメチルアミンを合わせ、Biotageマイクロ波反応器において１００℃で３０分間、次いで１２０℃で３０分間照射した。さらにＴＨＦ（０．５ｍＬ）中２Ｍジメチルアミンを添加し、反応物を１２０℃で３０分間照射した。反応混合物を真空濃縮し、次いで、分取ＨＰＬＣで精製して、化合物５４（５ｍｇ、８％）を白色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３４〜３．３１（ｍ，６Ｈ）、３．２７〜３．２０（ｍ，４Ｈ）、２．６５〜２．６０（ｍ，２Ｈ）、２．１６（ｓ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５０１／５０３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３００】
同様の手順を用いて、以下の実施例を中間体１６又は１７から調製した：
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［２−（メチルアミノ）エチル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（５５）
【０３０１】
【化５２】
2020514260.tif 000062
【０３０２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．３２〜３．２９（ｍ，５Ｈ）、３．２７〜３．１８（ｍ，６Ｈ）、２．８６〜２．８１（ｍ，２Ｈ）、２．２７（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４８７／４８９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０３】
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［２−（メチルアミノ）エチル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（５６）
【０３０４】
【化５３】
2020514260.tif 000063
【０３０５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３４〜３．３０（ｍ，５Ｈ）、３．２６〜３．１６（ｍ，６Ｈ）、２．８４（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．２７（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４４３／４４５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０６】
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［２−（ジメチルアミノ）エチル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（５７）
【０３０７】
【化５４】
2020514260.tif 000064
【０３０８】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３５〜３．２９（ｍ，６Ｈ）、３．２８〜３．１８（ｍ，４Ｈ）、２．６８〜２．５６（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｓ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４５７／４５９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０９】
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［２−（シクロプロピルアミノ）エチル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（５８）
【０３１０】
【化５５】
2020514260.tif 000065
【０３１１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．８０（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３６〜３．２７（ｍ，４Ｈ）、３．２６〜３．１９（ｍ，６Ｈ）、３．００〜２．９０（ｍ，２Ｈ）、２．３９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、２．１９〜２．０１（ｍ，１Ｈ）、０．３６（ｄｄ，Ｊ＝６．９，４．６Ｈｚ，２Ｈ）、０．２１（ｄｔ，Ｊ＝６．９，４．６Ｈｚ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４６９／４７１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３１２】
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（５９）
【０３１３】
【化５６】
2020514260.tif 000066
【０３１４】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０２（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７９（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３６〜３．２８（ｍ，６Ｈ）、３．２７〜３．２４（ｍ，４Ｈ）、２．６５（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、２．４６〜２．３４（ｍ，４Ｈ）、２．３１〜２．１８（ｍ，４Ｈ）、２．０９（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５１２／５１４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３１５】
２−アミノ−Ｎ−（２−クロロ−５−｛４−［（２−｛［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミノ｝エチル）スルホニル］ピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（６０）
【０３１６】
【化５７】
2020514260.tif 000067
【０３１７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７９（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３７〜３．２７（ｍ，５Ｈ）、３．２６〜３．１９（ｍ，６Ｈ）、２．９２〜２．８７（ｍ，２Ｈ）、２．５９〜２．５５（ｍ，２Ｈ）、２．２８〜２．２４（ｍ，２Ｈ）、２．１１（ｓ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５００／５０２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３１８】
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［２−（プロパン−２−イルアミノ）エチル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（６１）
【０３１９】
【化５８】
2020514260.tif 000068
【０３２０】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７９（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３４〜３．３０（ｍ，４Ｈ）、３．２６〜３．１６（ｍ，６Ｈ）、２．９０〜２．８４（ｍ，２Ｈ）、２．７７〜２．６５（ｍ，１Ｈ）、１．６９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、０．９５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４７１／４７３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２１】
２−アミノ−Ｎ−｛２−クロロ−５−［４−（｛２−［（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ］エチル｝スルホニル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（６２）
【０３２２】
【化５９】
2020514260.tif 000069
【０３２３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７９（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３９〜３．２８（ｍ，４Ｈ）、３．２８〜３．１５（ｍ，６Ｈ）、２．９４〜２．８３（ｍ，２Ｈ）２．７４〜２．６０（ｍ，２Ｈ）、２．４１〜２．２５（ｍ，１Ｈ）、２．１１（ｓ，３Ｈ）、１．９２〜１．６２（ｍ，５Ｈ）、１．３３〜１．００（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５２６／５２８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２４】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［２−（プロパン−２−イルアミノ）エチル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（６３）
【０３２５】
【化６０】
2020514260.tif 000070
【０３２６】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．３４〜３．３０（ｍ，４Ｈ）、３．２６〜３．１７（ｍ，６Ｈ）、２．８８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．７５〜２．６７（ｍ，１Ｈ）、１．８０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、０．９５（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５１５／５１７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２７】
２−アミノ−Ｎ−｛２−ブロモ−５−［４−（｛２−［（１−メチルピペリジン−４−イル）アミノ］エチル｝スルホニル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（６４）
【０３２８】
【化６１】
2020514260.tif 000071
【０３２９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３７〜３．２７（ｍ，４Ｈ）、３．２７〜３．１６（ｍ，６Ｈ）、２．８９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．７０〜２．６１（ｍ，２Ｈ）、２．３８〜２．３０（ｍ，１Ｈ）、２．１１（ｓ，３Ｈ）、１．９５〜１．７７（ｍ，３Ｈ）、１．７７〜１．６６（ｍ，２Ｈ）、１．２４〜１．１３（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５７０／５７２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３３０】
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［２−（エチルアミノ）エチル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（６５）
【０３３１】
【化６２】
2020514260.tif 000072
【０３３２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．８０（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３４〜３．３１（ｍ，４Ｈ）、３．２６〜３．１７（ｍ，６Ｈ）、２．８８（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、２．５２（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、１．８２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、０．９８（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４５７／４５９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３３３】
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［２−（プロピルアミノ）エチル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（６６）
【０３３４】
【化６３】
2020514260.tif 000073
【０３３５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７９（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３８〜３．２９（ｍ，４Ｈ）、３．２７〜３．１６（ｍ，６Ｈ）、２．８７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．４９〜２．４２（ｍ，３Ｈ）、１．４５〜１．３２（ｍ，２Ｈ）、０．８５（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４７１／４７３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３３６】
【化６４】
2020514260.tif 000074
【０３３７】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［３−（ピロリジン−１−イル）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（６７）
２−アミノ−Ｎ−（２−ブロモ−５−｛４−［（３−クロロプロピル）スルホニル］ピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド１３（９０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（２７ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びピロリジン（４４．５μＬ、０．３３ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（２ｍＬ）中に溶解した。反応混合物を、Biotageマイクロ波反応器において１４０℃で４５分間照射した。混合物を真空濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（高ｐＨバッファー）で精製して、生成物６７を白色固体（１２ｍｇ、１３％）として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．３１（ｍ，６Ｈ）、３．２４（ｍ，６Ｈ）、３．１８〜３．１１（ｍ，４Ｈ）、１．９５〜１．８５（ｍ，２Ｈ）、１．８２〜１．６６（ｍ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝５４１／５４３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３３８】
同様の手順を用いて以下の実施例を中間体１３、１４又は１５から調製した：
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［３−（ジメチルアミノ）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（６８）
【０３３９】
【化６５】
2020514260.tif 000075
【０３４０】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１７（ｓ，２Ｈ）、６．８０（ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．３３〜３．２８（ｍ，４Ｈ）、３．２６〜３．２０（ｍ，２Ｈ）、３．１２〜３．０７（ｍ，２Ｈ）、２．３８〜２．３１（ｍ，２Ｈ）、２．１５（ｓ，６Ｈ）、１．８５〜１．７８（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝４７１／４７３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３４１】
２−アミノ−Ｎ−（２−ブロモ−５−（４−（３−（ジメチルアミノ）プロピルスルホニル）ピペラジン−１−イル）フェニル）オキサゾール−４−カルボキサミド（６９）
【０３４２】
【化６６】
2020514260.tif 000076
【０３４３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０３（ｓ，１Ｈ）、７．９５（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．４５（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１１（ｓ，２Ｈ）、６．７１（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．２８〜３．２３（ｍ，７Ｈ）、３．２３〜３．１５（ｍ，２Ｈ）、３．０７〜３．０１（ｍ，２Ｈ）、２．２６（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．１０（ｓ，６Ｈ）、１．８０〜１．７２（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：（ｍ／ｚ）＝５１５／５１７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３４４】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［３−（エチルアミノ）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７０）
【０３４５】
【化６７】
2020514260.tif 000077
【０３４６】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３．３４〜３．２７（ｍ，４Ｈ）、３．２６〜３．２１（ｍ，４Ｈ）、３．１６〜３．０８（ｍ，２Ｈ）、２．５７（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．５４〜２．４６（ｍ，２Ｈ）、１．９１〜１．６７（ｍ，２Ｈ）、０．９９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５１５／５１７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３４７】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［２−メチル−３−（ピロリジン−１−イル）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７１）
【０３４８】
【化６８】
2020514260.tif 000078
【０３４９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．３０〜３．２２（ｍ，１０Ｈ）、２．８６（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、２．４７〜２．３５（ｍ，３Ｈ）、２．２９〜２．０６（ｍ，２Ｈ）、１．６９（ｂｒ  ｓ，４Ｈ）、１．１３〜１．０５（ｍ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５５５／５５７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３５０】
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［３−（プロパン−２−イルアミノ）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７２）
【０３５１】
【化６９】
2020514260.tif 000079
【０３５２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．３０（ｓ，４Ｈ）、３．２６〜３．２０（ｍ，４Ｈ）、３．１７〜３．０９（ｍ，２Ｈ）、２．６７〜２．６１（ｍ，１Ｈ）、２．５７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、１．８１〜１．７４（ｍ，２Ｈ）、１．５６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、０．９４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４８５／４８７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３５３】
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［３−（メチルアミノ）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７３）
【０３５４】
【化７０】
2020514260.tif 000080
【０３５５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．４４〜３．２７（ｍ，５Ｈ）、３．２７〜３．２０（ｍ，４Ｈ）、３．１９〜３．０８（ｍ，２Ｈ）、２．６１（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．２９（ｓ，３Ｈ）、１．９０〜１．７９（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４５７／４５９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３５６】
２−アミノ−Ｎ−［２−クロロ−５−（４−｛［３−（エチルアミノ）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７４）
【０３５７】
【化７１】
2020514260.tif 000081
【０３５８】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．０１（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．３４〜３．２７（ｍ，５Ｈ）、３．２７〜３．２０（ｍ，４Ｈ）、３．１６〜３．０８（ｍ，２Ｈ）、２．５７（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．５３〜２．４６（ｍ，２Ｈ）、１．８８〜１．６９（ｍ，２Ｈ）、０．９８（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４７１／４７３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３５９】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［３−（メチルアミノ）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７５）
【０３６０】
【化７２】
2020514260.tif 000082
【０３６１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．４１〜３．２６（ｍ，５Ｈ）、３．２３（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，４Ｈ）、３．１５〜３．０６（ｍ，２Ｈ）、２．５４（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．２４（ｓ，３Ｈ）、１．８３〜１．７６（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５０１／５０３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３６２】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［３−（プロパン−２−イルアミノ）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７６）
【０３６３】
【化７３】
2020514260.tif 000083
【０３６４】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３３〜３．２７（ｍ，５Ｈ）、３．２７〜３．２１（ｍ，４Ｈ）、３．１５〜３．０９（ｍ，２Ｈ）、２．６９〜２．６２（ｍ，１Ｈ）、２．５７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、１．８１〜１．７４（ｍ，２Ｈ）、０．９９〜０．９０（ｍ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５２９／５３１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３６５】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［３−（ジエチルアミノ）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７７）
【０３６６】
【化７４】
2020514260.tif 000084
【０３６７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．３３〜３．２９（ｍ，４Ｈ）、３．２５〜３．２２（ｍ，４Ｈ）、３．１３〜３．０９（ｍ，２Ｈ）、２．６１〜２．３８（ｍ，６Ｈ）、１．８０（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、０．９７（ｂｒ  ｓ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５４３／５４５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３６８】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［２−メチル−３−（メチルアミノ）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７８）
【０３６９】
【化７５】
2020514260.tif 000085
【０３７０】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．４３〜３．１９（ｍ，１０Ｈ）、２．８５〜２．７４（ｍ，１Ｈ）、２．４６〜２．３９（ｍ，２Ｈ）、２．２６（ｓ，３Ｈ）、２．２０〜２．０７（ｍ，１Ｈ）、１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５１５／５１７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３７１】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［３−（エチルアミノ）−２−メチルプロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（７９）
【０３７２】
【化７６】
2020514260.tif 000086
【０３７３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３７〜３．２０（ｍ，１２Ｈ）、２．７９（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，８．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．５６〜２．４２（ｍ，２Ｈ）、２．１４〜２．０３（ｍ，１Ｈ）、１．０４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）、０．９９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５２９／５３１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３７４】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［２−メチル−３−（プロパン−２−イルアミノ）プロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（８０）
【０３７５】
【化７７】
2020514260.tif 000087
【０３７６】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝８．７，３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．３２〜３．２２（ｍ，１０Ｈ）、２．８０（ｄｄ，Ｊ＝１４．２，８．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．７１〜２．５９（ｍ，１Ｈ）、２．４９〜２．３８（ｍ，２Ｈ）、２．１０〜１．９９（ｍ，１Ｈ）、１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）、０．９８〜０．９３（ｍ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５４３／５４５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３７７】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［３−（ジエチルアミノ）−２−メチルプロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（８１）
【０３７８】
【化７８】
2020514260.tif 000088
【０３７９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．３２〜３．２１（ｍ，１１Ｈ）、２．８０（ｄｄ，Ｊ＝１４．０，８．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．４９〜２．３６（ｍ，２Ｈ）、２．２８〜２．１７（ｍ，２Ｈ）、２．１２〜２．０４（ｍ，１Ｈ）、１．０４（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）、０．９３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５５７／５５９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３８０】
２−アミノ−Ｎ−［２−ブロモ−５−（４−｛［３−（ジメチルアミノ）−２−メチルプロピル］スルホニル｝ピペラジン−１−イル）フェニル］−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（８２）
【０３８１】
【化７９】
2020514260.tif 000089
【０３８２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７５（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．３０〜３．２０（ｍ，１０Ｈ）、２．８９〜２．７３（ｍ，１Ｈ）、２．２９〜１．９２（ｍ，８Ｈ）、１．０５（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５２９／５３１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３８３】
【化８０】
2020514260.tif 000090
【０３８４】
ｔｅｒｔ−ブチル−４−｛［４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−イル］スルホニル｝ピペリジン−１−カルボキシレート（８３）
【０３８５】
【化８１】
2020514260.tif 000091
【０３８６】
中間体６（５００ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の０℃のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、ＴＥＡ（０．５７ｍＬ、１．６４ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチル４−（クロロスルホニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３５９ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物をｒｔまで温め、２時間撹拌した。次いでこれを水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで希釈し、ＬｉＣｌ溶液を添加した。有機層を分離し、真空蒸発させ、８３（５８８ｍｇ、７０％）を黄色の粉末として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７４（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．０５〜３．９７（ｍ，２Ｈ）、３．４９〜３．４２（ｍ，１Ｈ）、３．４２〜３．３６（ｍ，４Ｈ）、３．２２〜３．１６（ｍ，４Ｈ）、２．８４〜２．６８（ｍ，２Ｈ）、２．００〜１．９４（ｍ，２Ｈ）、１．４９〜１．４０（ｍ，２Ｈ）、１．３７（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：６１３／６１５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３８７】
２−アミノ−Ｎ−｛２−ブロモ−５−［４−（ピペリジン−４−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（８４）
【０３８８】
【化８２】
2020514260.tif 000092
【０３８９】
ｔｅｒｔ−ブチル４−｛［４−（３−｛［（２−アミノ−１，３−オキサゾール−４−イル）カルボニル］アミノ｝−４−ブロモフェニル）ピペラジン−１−イル］スルホニル｝ピペリジン−１−カルボキシレート８３（０．５８ｇ、０．９５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液に、ＴＦＡ（５ｍＬ）をｒｔで添加し、反応物を２時間撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）溶液を残渣に添加した。得られた析出物を濾過して、化合物８４（０．３７ｇ、７６％）を固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７４（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．５８〜３．２５（ｍ，６Ｈ）、３．２９〜３．１０（ｍ，６Ｈ）、２．７３〜２．６３（ｍ，２Ｈ）、２．０３〜１．９４（ｍ，２Ｈ）、１．６８〜１．５６（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５１３／５１５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３９０】
２−アミノ−Ｎ−（２−ブロモ−５−｛４−［（１−メチルピペリジン−４−イル）スルホニル］ピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（８５）
【０３９１】
【化８３】
2020514260.tif 000093
【０３９２】
ＡｃＯＨ（１７μＬ、０．２９ｍｍｏｌ）、ホルムアルデヒド（１０μＬ、０．１３ｍｍｏｌ）及びナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（６１ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の８４（７５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）に添加し、ｒｔで１８時間撹拌した。反応を飽和ＮａＨＣＯ３（ａｑ）溶液でクエンチし、ＤＣＭで抽出した。有機物を乾燥し、次いで、分取ＨＰＬＣで精製して、８５（１２ｍｇ、１６％）を白色固体として得た；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５（ｓ，２Ｈ）、６．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．４３〜３．３５（ｍ，４Ｈ）、３．２１〜３．１７（ｍ，４Ｈ）、３．１６〜３．０９（ｍ，１Ｈ）、２．９０〜２．７５（ｍ，２Ｈ）、２．１４（ｓ，３Ｈ）、１．９８〜１．７８（ｍ，４Ｈ）、１．６９〜１．５２（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５２７／５２９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３９３】
同様の手順を用いて以下の実施例を調製した：
２−アミノ−Ｎ−｛２−クロロ−５−［４−（ピペリジン−４−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（８６）
【０３９４】
【化８４】
2020514260.tif 000094
【０３９５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７９（ｄｄ，Ｊ＝８．７，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．４３〜３．３６（ｍ，５Ｈ）、３．３１〜３．２１（ｍ，１Ｈ）、３．２０〜３．１５（ｍ，４Ｈ）、３．００〜２．９５（ｍ，２Ｈ）、２．４８〜２．３９（ｍ，２Ｈ）、１．８８〜１．８３（ｍ，２Ｈ）、１．５１〜１．４４（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４６９／４７１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３９６】
２−アミノ−Ｎ−（２−クロロ−５−｛４−［（１−メチルピペリジン−４−イル）スルホニル］ピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（８７）
【０３９７】
【化８５】
2020514260.tif 000095
【０３９８】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１５（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７９（ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．４２〜３．３６（ｍ，４Ｈ）、３．２７〜３．１１（ｍ，５Ｈ）、３．０２〜２．８２（ｍ，２Ｈ）、２．２０（ｂｒ  ｓ，３Ｈ）、２．０９〜１．８６（ｍ，４Ｈ）、１．７０〜１．５８（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４８３／４８５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３９９】
２−アミノ−Ｎ−｛２−ブロモ−５−［４−（ピロリジン−３−イルスルホニル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（８８）
【０４００】
【化８６】
2020514260.tif 000096
【０４０１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．０９（ｓ，１Ｈ）、８．０６（ｓ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７４（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．７８〜３．６７（ｍ，１Ｈ）、３．４０〜３．２８（ｍ，４Ｈ）、３．２５〜３．１５（ｍ，５Ｈ）、３．１０（ｄｄ，Ｊ＝１１．９，８．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．９６（ｄｄ，Ｊ＝１１．９，６．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．８５〜２．６９（ｍ，２Ｈ）、２．０７〜１．９７（ｍ，１Ｈ）、１．９３〜１．８４（ｍ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４９９／５０１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０４０２】
２−アミノ−Ｎ−（２−ブロモ−５−｛４−［（１−メチルピロリジン−３−イル）スルホニル］ピペラジン−１−イル｝フェニル）−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド（８９）
【０４０３】
【化８７】
2020514260.tif 000097
【０４０４】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．１０（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，２Ｈ）、６．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．９，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．９６〜３．８８（ｍ，１Ｈ）、３．３６〜３．３３（ｍ，４Ｈ）、３．２１〜３．１６（ｍ，４Ｈ）、２．８５〜２．８０（ｍ，１Ｈ）、２．６３（ｄｄ，Ｊ＝１０．１，６．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．５３〜２．４６（ｍ，２Ｈ）、２．２４（ｓ，３Ｈ）、２．１６〜２．０８（ｍ，１Ｈ）、２．０６〜１．９８（ｍ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５１３／５１５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０４０５】
ＰＡＩＣＳ  ２Ｄ細胞増殖アッセイ
細胞培養
ＬＭ２及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳がん細胞株の凍結クライオバイアルストックを解凍し、T175フラスコ中で１０％ウシ胎児血清（10500-064、Invitrogen社）を添加した４．５ｇ／ＬグルコースＤＭＥＭ（31966-047、Invitrogen社）においてコンフルエントまで培養した。加湿したインキュベーター内で３７℃において５％ＣＯ２で細胞をインキュベートした。
【０４０６】
１日目−細胞播種
ＰＢＳ（10010-056、Invitrogen社）で洗浄することによってT175フラスコから細胞を回収し、Accutase（A6964、Sigma Aldrich社）を用いて解離させた。これに続いて遠心分離（１２００ｒｐｍ、５分）を行い、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（15140-122、Invitrogen社）を含有する培地１０ｍｌ中に細胞を再懸濁した。自動セルカウンター（Cellometer）を用いたトリパンブルー排除法によって細胞を計数し、４０，０００／ｍｌの濃度まで希釈した。次いで１０００細胞を、２５μｌの体積で３８４ウェル白色壁プレート（Corning社、3707）中に播種した。プレートを３７℃において５％ＣＯ２で終夜インキュベートした。
【０４０７】
２日目−化合物添加
２４時間後、HP D300 Digital Dispenser（Hewlett Packard社）を使用してアッセイプレート上にＰＡＩＣＳ化合物を添加した。１０ｍＭストックを使用し、最終的な最大濃度１００μＭの１０点濃度応答曲線（ＣＲＣ，concentration response curve）  １／２  ｌｏｇ希釈系列として分配した。各プレート上に対照を添加した：陽性対照はスタウロスポリンＣＲＣ（１００μＭストックを最終的な最大濃度１μＭの１０点ＣＲＣ  １／２  ｌｏｇ希釈系列として分配した）及びＰＡＩＣＳ化合物MRT00211919（１０ｍＭストックを最終的な最大濃度１００μＭの１０点ＣＲＣ  １／２  ｌｏｇ希釈系列として分配した）を含んでいた；スタウロスポリンの高対照（０．１μＭ（LM2）、０．３１６μＭ（MDA-MB-231）FAC）及び１％ＤＭＳＯを含有する培地の低対照。次いで標準化のために、全プレートにわたって最終濃度１％のＤＭＳＯを添加した。化合物添加の後、アッセイプレートを３７℃において５％ＣＯ２で７２時間インキュベートした。
【０４０８】
５日目−細胞毒性及び細胞生存可能性アッセイ
７２時間のインキュベーション後、各アッセイプレートにおいて死滅した細胞及び生存可能な細胞を測定した。製造業者の多重化プロトコールに従ってCellTox（商標）Green Cytotoxicity Assayキット（G8743、Promega社）を使用して、蛍光ＤＮＡ染色によって細胞毒性を評価した。細胞膜完全性が障害されることにより色素が到達してＤＮＡが染色され、死細胞の定量が可能となる。細胞生存可能性は、製造業者のプロトコールに従ってCellTiter-Glo（登録商標）Luminescent Cell Viability Assayキット（G7572、Promega社）を使用して、ＡＴＰ定量後に決定した。溶解した細胞から放出されたＡＴＰにより、ウェル中に存在する細胞の数に比例したシグナルが生成される。全ての終点読取りは、PheraSTAR Plus（BMG Labtech社）を使用して実施した。データは、対照に対する生存可能な細胞％及び死細胞％として表す（２連の曲線の平均±ＳＥＭ）。
【０４０９】
ＰＡＩＣＳ活性を測定するための生化学的アッセイ
アッセイ原理：
生化学的アッセイを使用して、ＡＩＲ／ＣＡＩＲ平衡後の、ＰＡＩＣＳ  ＳＡＩＣＡＲシンテターゼに媒介されるＣＡＩＲ、アスパラギン酸及びＡＴＰからＳＡＩＣＡＲ、ＡＤＰ及び無機リン酸（Ｐｉ）への変換を測定した（図３を参照されたい）。これは、Bellbrook LabのTranscreener ADP2FIアッセイを使用して、反応中に生成したＡＤＰを検出することによって達成した。蛍光強度の増大は、ＰＡＩＣＳ活性の量と直接比例する。
【０４１０】
Transcreener ADP2 FIアッセイは、ＡＤＰの直接免疫検出を用いるホモジニアスな競合的置換蛍光強度アッセイ（homogeneous competitive displacement fluorescence intensity assay）である。ＡＤＰによるトレーサーの置換は、励起５９０ｎｍ及び発光６１７ｎｍでの蛍光を増大させる（図３）。
【０４１１】
方法：
塩基性バッファー中のＷＴ完全長ＰＡＩＣＳ  ５μｌ（最終アッセイ濃度、ｆａｃ、２．５ｎＭ）を、黒色のノンバインディング３８４ウェルプレート（Corning社 #3575）、カラム１〜２２に添加した。５μｌの塩基性バッファーをカラム２３と２４に添加した（陰性対照）。研究代表者の研究室（Steve Firestine）からの３１．９μＭのＰＡＩＣＳストック。塩基性バッファーは、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８）及び０．５ｍＭのＥＤＴＡ（ｆａｃ）を含有していた。
【０４１２】
１ウェル当たり１μｌの１００％ＤＭＳＯ中の化合物を添加し、又は１μｌの１００％ＤＭＳＯを陽性対照（カラム１＋２）及び陰性対照（カラム２３＋２４）に添加した。１ｍＭ又は３０μＭのいずれかの化合物の最終的なアッセイ最大濃度を、プレート内で２連で１／２  ｌｏｇ希釈で連続的に希釈した（１つはウェル３〜１２にわたる、もう１つは１３〜２２にわたる１０点濃度応答曲線）。ＰＡＩＣＳ酵素と一緒にｒｔで３０分間、化合物をプレインキュベートした。
【０４１３】
２μｌのＣＡＩＲを（ｆａｃ  １０μＭ）、２５ｍＭのＭｇＣｌ２及び５０ｍＭのＫＨＣＯ３（ｆａｃ）を加えた塩基性バッファー中、全てのウェルに添加した。Steve Firestineの研究室のＣＡＩＲストック５０ｍＭ。ＡＩＲ−ＣＡＩＲ平衡のための１時間ＲＴインキュベーション。ＮＢ：平衡中に約５０％のＣＡＩＲが脱カルボキシルされたため、５μＭがシンテターゼ反応用に残存する。
【０４１４】
２μｌのＡＴＰ／アスパラギン酸（ｆａｃ  ３０μＭ／１８０μＭ）を、反応バッファー中、全てのウェルに添加した。適当なレベルのＡＴＰ代謝回転のための３０分間ＲＴインキュベーション。反応バッファーは、１０ｍＭのＤＴＴ、０．０１％のＢＳＡ及び０．０１％のBrij35（ｆａｃ）を加えた塩基性バッファーを含有していた。
【０４１５】
１０μｌのＡＤＰ検出試薬を全てのウェルに添加した（使用説明書通り、Transcreener ADP2 FIキット、BellBrook Labs #3013-10K）。ｒｔで１時間インキュベーションして抗体を平衡化させた。Tecan Safire2を使用して蛍光強度を決定した（５９０ｎｍでの励起、６１７ｎｍでの発光）。
【０４１６】
選択された本発明の化合物についての上記のアッセイの結果を、表１に示している。
【０４１７】
ＰＡＩＣＳ生化学的活性ＩＣ５０
Ａ≦１０ｎＭ；Ｂ＝１０〜２５ｎＭ；Ｃ＝２５〜１００ｎＭ；Ｄ≧１００ｎＭ；ｎｔ：試験せず
【０４１８】
ＰＡＩＣＳ  ２Ｄ細胞増殖活性ＥＣ５０
Ａ≦１００ｎＭ；Ｂ＝１００〜２５０ｎＭ；Ｃ＝２５０〜５００ｎＭ；Ｄ＝５００〜１０００ｎＭ
【０４１９】
【表２】
2020514260.tif 000098
2020514260.tif 000099
2020514260.tif 000100
【０４２０】
ＣＲＩＳＰＲ編集
Ｃａｓ９ヌクレアーゼに媒介される遺伝子編集（Sander and Joung, 2014）は、ヒトＰＡＩＣＳ遺伝子（アクセッション番号：NM_006452）中のエクソン３を標的化するＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡガイド配列（TACGAATTGTTAGACAGTCC、PAM：AGG）を使用して実施した。
安定な細胞クローンを単離し、ＤＮＡ配列決定により遺伝子破壊を確認し、ウェスタンブロッティングによってＰＡＩＣＳ細胞タンパク質の発現がないことを確認した。
【０４２１】
２Ｄ細胞増殖アッセイにおいて化合物の小集団を野生型ＬＭ２及びＣＲＩＳＰＲ編集したＬＭ２に対して試験して、ＰＡＩＣＳに媒介される作用によって細胞分化能（cellular potency）がどの程度促進されるかを立証した。データを表２に示す：試験した化合物はＣＲＩＳＰＲ編集細胞に対する作用を有さず、オンターゲット効果がＰＡＩＣＳ媒介性であることを裏付けた。
【０４２２】
【表３】
2020514260.tif 000101
【０４２３】
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１−Ｄｌｕｘ異種移植片モデルにおける化合物６９の評価
プロトコール：
マウスの乳腺脂肪体に、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１  Ｄｌｕｘ細胞を移植した。腫瘍が約１００〜２００ｍｍ３の平均体積に達したら、マウスを試験薬剤（化合物６９）、標準治療対照薬剤であるドセタキセル又は媒体対照で処理した。電子キャリパーを使用して２〜３日毎に腫瘍を測定し、式０．５（Ｌ×Ｗ２）を使用して腫瘍体積を推定した。処理を２週間続けた。毎日マウスを観察し、体重を測定した。
マウス：
ＭＦ−１（HsdOla:MF１-Foxn1nu）
雌  ５〜８週齢
１群当たりｎ＝１２
細胞：
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１  Ｄｌｕｘ（生物発光ＭＤＡ−ＭＤ−２３１バリアント）
移植部位：乳腺脂肪体（１：１マトリゲル／ＰＢＳ）
群：
媒体（１０％ＤＭＳＯ）
化合物６９（経口２５ｍｇ／ｋｇ  １日２回）
ドセタキセル（ＩＶ５ｍｇ／ｋｇ  １週間に２回）
【０４２４】
結果
ＰＡＩＣＳ阻害剤（２５ｍｇ／ｋｇ  ｂｉｄ）で処理したマウスは、原発腫瘍の成長の統計学的に有意な低減を示した。結果を図４に示している。
【０４２５】
漿尿膜（ＣＡＭ）モデルにおけるＰＡＩＣＳ  ＣＲＩＳＰＲ  ＫＤ  ＭＤＡ２３１細胞の増殖の評価
プロトコール：
白色レグホン受精卵を３７．５℃において相対湿度で９日間インキュベートした。Ｅ９において、漿尿膜（ＣＡＭ，chorioallantoic membrane）を、卵殻に気室に通じる小さい穴をあけることによって剥離させ、ＣＡＭの上の卵殻において１ｃｍ２の開口部を切り取った。２×１０６のＭＤＡ２３１細胞を卵のＣＡＭ上に添加した（群は以下を含んでいた：野生型ＭＤＡ２３１細胞；ＣＲＩＳＰＲ  ＫＤ対照細胞；ＰＡＩＣＳ  ＣＲＩＳＰＲ  ＫＤクローン３細胞；及びＰＡＩＣＳ  ＣＲＩＳＰＲ  ＫＤクローン１４細胞）。Ｅ１８で、腫瘍を含むＣＡＭの上部を取り除き、ＰＦＡ４％中に移した。ＰＦＡ中で４８時間後、腫瘍をＰＢＳ中で３回洗浄し、正常なＣＡＭ組織から腫瘍を慎重に切り取った。次いで腫瘍の重量を測り、４つの群、Ｔｕｎ及びＰＡＩＣＳ  ＣＲＩＳＰＲ  ＫＤ（ＫＤクローン３及び１４）、並びに野生型ＭＤＡ２３１細胞及び対照ＣＲＩＳＰＲ細胞に関するデータに対して一元配置分散分析を行った。表３は、この試験に関する群を示している。
【０４２６】
【表４】
2020514260.tif 000102
【０４２７】
結果
表４は、Ｅ１８での各実験群についての腫瘍重量（ｍｇ）の平均値、ＳＤ、ＳＥＭ及びｐ値を示す（ｎは、試験の終了時に生存していた卵の数である）。異なる実験群において測定した平均腫瘍重量（ｍｇ）を図５に示している。
【０４２８】
【表５】
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【０４２９】
ＭＤＡ２３１改変細胞のＰＡＩＣＳ  ＣＲＩＳＰＲ  ＫＤクローン（ＫＤ３及びＫＤ１４）は、野生型及び対照改変ＭＤＡ２３１細胞と比較して、腫瘍発育の顕著な低減を示した。図６を参照されたい。
【０４３０】
本発明の範囲及び精神から逸脱することなく、本発明の記述された態様の様々な変更形態及び変形形態が、当業者には明らかであろう。特定の好ましい実施形態に関連して本発明を記述してきたが、特許請求されている本発明は、そのような特定の実施形態に不当に限定されないことが理解されるべきである。実際に、関連分野の当業者に明らかな、記述されている本発明の実施方法の様々な変更形態は、以下の特許請求の範囲内であることが意図されている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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