(57)【要約】  心不全、心臓血管疾患、がん、神経変性障害、ウイルス感染症、細菌感染症、肝臓疾患、炎症、および他の疾患の処置において有用である、ＳＥＲＣＡ２ａのＳＵＭＯ化を増強し得るＳＵＭＯアクチベーターを提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
2020528058.tif 000067
またはその薬学的に許容される塩
［式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、水素、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、およびジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノからそれぞれ独立に選択され；
各Ｒ５は、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、およびジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノから独立に選択され；
ｎは、０、１、２、または３であり；
Ｒ６は、Ｒ６ａ−Ｃ（Ｏ）−およびＲ６ｂ−Ｃ１〜４アルキレン−Ｏ−から選択され；
Ｒ６ａは、Ｃ３〜７シクロアルキル、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル、フェニル、およびＣ１〜６ヘテロアリールから選択され、これらはそれぞれ、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、およびジ−Ｃ１〜３-アルキルアミノから選択される１、２、３、または４個の置換基によって置換されていてもよく；
Ｒ６ｂは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃＲｄ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＮＲａＣ（Ｏ）Ｒｂ、−ＮＲａＳ（Ｏ）２Ｒｂ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＯＲａ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｄ、−ＮＲａＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｄ、Ｃ３〜７シクロアルキル、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル、フェニル、およびＣ１〜６ヘテロアリールから選択され、前記Ｃ３〜７シクロアルキル、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル、フェニル、およびＣ１〜６ヘテロアリールは、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、およびジ−Ｃ１〜３〜アルキルアミノから選択される１、２、３、または４個の置換基によって置換されていてもよく；
各Ｒａ、Ｒｃ、およびＲｄは、水素、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ３〜７シクロアルキル、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル、フェニル、およびＣ１〜６ヘテロアリールから独立に選択され；前記Ｃ１〜４アルキル、Ｃ３〜７シクロアルキル、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル、フェニル、およびＣ１〜６ヘテロアリールはそれぞれ、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、およびジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから選択される１、２、３、または４個の置換基によって置換されていてもよく；
各Ｒｂは、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ３〜７シクロアルキル、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル、フェニル、およびＣ１〜６ヘテロアリールから独立に選択され；これらはそれぞれ、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、およびジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立に選択される１、２、３、または４個の置換基によって置換されていてもよい］。
【請求項２】
Ｒ４が、ＯＣＨ３であり、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３が、水素である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
式ＩＩの化合物：
【化２】
2020528058.tif 000068
またはその薬学的に許容される塩
［式中、
Ａｒは、１、２、３、４、または５個の独立に選択されるＲ１ａ基で置換されていてもよいフェニルであり；
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ４は、水素、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、およびジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノからそれぞれ独立に選択され；前記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、およびＣ１〜６アルキルカルボニルはそれぞれ、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、およびジ−Ｃ１〜３−アルキルアミノから独立に選択される１、２、または３個の基で置換されていてもよく；
各Ｒ１ａは、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜７シクロアルキル−Ｃ１〜３アルキレン、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル−Ｃ１〜３アルキレン、フェニル−Ｃ１〜３アルキレン、Ｃ１〜６ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキレン、Ｃ３〜７シクロアルキル、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル、フェニル、Ｃ１〜６ヘテロアリール、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、およびジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノから独立に選択され；前記Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜７シクロアルキル−Ｃ１〜３アルキレン、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル−Ｃ１〜３アルキレン、フェニル−Ｃ１〜３アルキレン、Ｃ１〜６ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキレン、Ｃ３〜７シクロアルキル、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル、フェニル、Ｃ１〜６ヘテロアリール、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、およびＣ１〜６アルキルカルボニルはそれぞれ、Ｒ１ｂ基から独立に選択される１、２、または３個の基で置換されていてもよく；
各Ｒ１ｂ基は、ハロ、ＣＮ、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜７シクロアルキル−Ｃ１〜３アルキレン、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル−Ｃ１〜３アルキレン、フェニル−Ｃ１〜３アルキレン、Ｃ１〜６ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキレン、Ｃ３〜７シクロアルキル、Ｃ２〜６ヘテロシクロアルキル、フェニル、Ｃ１〜６ヘテロアリール、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルコキシ、アミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４−アルキルアミノ、カルボキシ、カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルバミル、ジ（Ｃ１〜４アルキル）カルバミル、Ｃ１〜６アルキルカルボニル、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１〜６アルキルスルホニル、Ｃ１〜６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルスルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニル、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニル、アミノスルホニルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノスルホニルアミノ、およびジ−Ｃ１〜４アルキルアミノスルホニルアミノから独立に選択される］。
【請求項４】
本明細書に記載のとおりの化合物（本明細書に記載の具体的な実施例、詳細には、実施例３ａ、３ｂ、３ｃ、８ａ、８ｂ、１２ａ、１２ｂ、１２ｃ、１２ｄ、１５ａ、１５ｂ、１５ｃ、１５ｄ、１６ａ、１６ｂ、１６ｃ、１６ｄ、１６ｅ、１８ａ、１８ｂ、１８ｃ、１８ｄ、１８ｅ、１８ｆ、２０ａ、２０ｂ、２０ｃ、２０ｄ、２０ｅ、２０ｆ、２６、２７、３１ａ、および３１ｂのいずれかを含む）、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【請求項６】
それを必要とする患者において心不全、心臓肥大、心筋炎、心筋梗塞、虚血、心不整脈、血管破裂、心不整脈、弁膜症、拡張機能障害、高血圧、がん、神経変性障害、ウイルス感染症、細菌感染症、肝臓疾患、または炎症を処置する方法であって、前記患者に、治療有効量の、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法。
【請求項７】
前記心不全が、鬱血性心不全（ＣＨＦ）、慢性心不全、および虚血性心不全から選択される、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、心不全、心臓血管疾患、がん、神経変性障害、ウイルス感染症、細菌感染症、肝臓疾患、炎症、および他の疾患の処置において有用である、ＳＥＲＣＡ２ａのＳＵＭＯ化を増強し得るＳＵＭＯアクチベーターに関する。
【背景技術】
【０００２】
心不全（ＨＦ）はいまだに、欧米諸国では主要な死因の１つであり、ＨＦのための新たな治療剤の開発が試みられている。病的ストレス下にある心筋細胞における分子シグナル伝達についての理解の最近の重要な進歩によって、心疾患を処置するための、特に、細胞内側に固有の標的を調節するための種々のアプローチ法が示唆されている。カルシウム輸送ＡＴＰアーゼＡＴＰ２Ａ２（ＳＥＲＣＡ２ａ）は、興奮収縮連関中にＣａ２＋再取り込みを担うＡＴＰアーゼである。心不全の特徴は、ＳＥＲＣＡ２ａの発現の減少および活性の低下から生じるＣａ２＋取り込みの障害である。この結果、遺伝子導入よるＳＥＲＣＡ２ａ発現の復旧は、動物モデルおよび心不全患者の心機能の改善に有効であり得る。心筋細胞におけるＳＥＲＣＡ２ａのレベルおよび活性は、ＳＵＭＯ化と名付けられた、低分子ユビキチン様修飾因子１型（ＳＵＭＯ  Ｉ）が媒介するユニークな翻訳後修飾（ＰＴＭ）によって調節されることが見い出された（Kho C, Lee A, Jeong D, Oh JG, Chaanine AH, Kizana E, Park WJ, Hajjar RJ, “SUMO1-dependent modulation of SERCA2a in heart failure”, Nature 2011 Sep 7;477(7366):601-5）。ＳＥＲＣＡ２ａは、２つの特異的な部位、リシン４８０および５８５で、ＳＵＭＯ１によってＳＵＭＯ化される。心不全では、ＳＵＭＯ１の、およびＳＥＲＣＡ２ａ自体のＳＵＭＯ化のレベルが著しく低下した。心不全を有するマウスにおいて、アデノ関連ウイルス媒介遺伝子送達によるＳＵＭＯ１の復旧は、ＳＥＲＣＡ２ａのタンパク質量を維持し、かつ心機能を顕著に改善した。この作用は、ＳＥＲＣＡ２Ａ遺伝子送達に匹敵した。ＳＵＭＯ１はＳＥＲＣＡ２ａの安定性およびＡＴＰアーゼ活性を増強することが判明しているので、その減少は、ＳＥＲＣＡ２ａのさらなる機能障害および機能障害のさらなる悪化をもたらす。さらに、遺伝子導入および遺伝子療法による機能実験の増加によって、ＳＵＭＯ１遺伝子療法は、収縮機能を奪還し、かつ心不全のモデルにおいて死亡率を改善することが示された。この結果、ＨＦを処置するために有用である、ＳＥＲＣＡ２ａのＳＵＭＯ化を増加させる新たな小分子の開発が必要とされている。
【０００３】
さらに、ＳＵＭＯ化の誘導は、がん（Kira Bettermann, Martin Benesch, Serge Weis, Johannes Haybaeck. SUMOylation in carcinogenesis. Cancer Letters (2012) 316, 113-125）、ハンチントン病などの神経変性障害（Steffan, J.S. et al. SUMO modification of Huntingtin and Huntington’s disease pathology. Science (2004) 304, 100-104）、パーキンソン病（Dorval, V., Fraser, P.E. Small ubiquitin-like modifier (SUMO) modification of natively unfolded proteins tau and a-synuclein. J. Biol. Chem. (2006) 281, 9919-9924）、アルツハイマー病（Zhang, Y.Q. and Sarge, K.D. Sumoylation of amyloid precursor protein negatively regulates Ab aggregate levels. (2008) Biochem. Biophys. Res. Commun. 374, 673-678）、および筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）（Fei, E. et al. SUMO-1 modification increases human SOD1 stability and aggregation. Biochem. Biophys. Res. Commun. (2006) 347, 406-412）、ウイルスおよび細菌感染症（Bekes M, Drag M. Trojan horse strategies used by pathogens to influence the small ubiquitin-like modifier (SUMO) system of host eukaryotic cells.  J Innate Immun.  (2012) 4, 159-67）、肝臓疾患（Guo WH, Yuan LH, Xiao ZH, Liu D, Zhang JX. Overexpression of SUMO-1 in hepatocellular carcinoma: a latent target for diagnosis and therapy of hepatoma. J Cancer Res Clin Oncol. (2011) 137, 533-41）、ならびに炎症（Pascual G, Fong AL, Ogawa S, Gamliel A, Li AC, Perissi V, Rose DW, Willson TM, Rosenfeld MG, Glass CK. A SUMOylation-dependent pathway mediates transrepression of inflammatory response genes by PPAR-gamma. Nature (2005) 437, 759-63）の処置にも関係している。
【発明の概要】
【０００４】
この結果、ＨＦを処置するために有用である、ＳＥＲＣＡ２ａのＳＵＭＯ化を増加させる新たな小分子の開発が必要とされている。本出願は、この必要性などに対処するものである。
【０００５】
本出願は、ＳＵＭＯアクチベーターとして有用である本明細書に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【０００６】
本出願はさらに、それを必要とする患者において心不全、心臓肥大、心筋炎、心筋梗塞、虚血、心不整脈、血管破裂、心不整脈、弁膜症、拡張機能障害、高血圧、がん、神経変性障害、ウイルス感染症、細菌感染症、肝臓疾患、または炎症を処置する方法であって、前記患者に、治療有効量の本明細書に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法を提供する。
【０００７】
本出願はまた、患者に、ＳＥＲＣＡ２ａを含むアデノ関連ベクター（ＡＡＶ）を投与することをさらに含む方法を提供する。
【０００８】
本出願はさらに、細胞を、ＳＵＭＯ１を活性化するために有効な量の本明細書に記載の化合物、塩、または組成物と接触させることを含む、ＳＵＭＯ１を活性化する方法を提供する。
【０００９】
本出願はさらに、本明細書に記載の方法のいずれかにおいて使用するための、本明細書に記載のとおりの化合物または塩を提供する。
【００１０】
本出願はさらに、本明細書に記載の方法のいずれかにおいて使用するための医薬品を製造するための本明細書に記載のとおりの化合物または塩の使用を提供する。
【００１１】
本出願はさらに、本明細書に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩のいずれかと、少なくとも１種の薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本出願は、ＳＵＭＯアクチベーターとして有用である本明細書に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。本出願はさらに、それを必要とする患者において心不全、心臓肥大、心筋炎、心筋梗塞、虚血、心不整脈、血管破裂、心不整脈、弁膜症、拡張機能障害、高血圧、がん、神経変性障害、ウイルス感染症、細菌感染症、肝臓疾患、または炎症を処置する方法であって、前記患者に、治療有効量の本明細書に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む方法を提供する。
【００１３】
一部の実施形態では、心不全は、鬱血性心不全（ＣＨＦ）、慢性心不全、および虚血性心不全から選択される。
【００１４】
がんには、これに限定されないが、乳房、卵巣、前立腺、肺、腎臓、胃、結腸、精巣、頭頚部、膵臓、脳などの固形腫瘍、黒色腫、および組織器官の他の腫瘍、ならびに急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、Ｔ細胞リンパ球性白血病、およびＢ細胞リンパ腫を含むリンパ腫および白血病などの血液細胞のがんが含まれる。
【００１５】
炎症性障害には、これに限定されないが、皮膚移植片拒絶を含む移植拒絶；関節炎、関節リウマチ、変形性関節症および骨吸収の増加に関連する骨疾患を含む関節の慢性炎症性障害；回腸炎、潰瘍性大腸炎、バレット症候群、およびクローン病などの炎症性腸疾患；喘息、成人呼吸窮迫症候群、および慢性閉塞性気道疾患などの炎症性肺障害；角膜ジストロフィ、トラコーマ、オンコセルカ症、ブドウ膜炎、交感性眼炎および眼内炎を含む眼の炎症性障害；歯肉炎および歯周炎を含む歯肉の慢性炎症性障害；結核；ハンセン病；尿毒症性合併症、糸球体腎炎およびネフローゼを含む腎臓の炎症性疾患；硬化性皮膚炎、乾癬および湿疹を含む皮膚の炎症障害；神経系の慢性脱髄疾患、多発性硬化症、ＡＩＤＳ関連神経変性およびアルツハイマー病、感染性髄膜炎、脳脊髄炎、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症およびウイルス性または自己免疫脳炎を含む中枢神経系の炎症性疾患；自己免疫障害、免疫複合体脈管炎、全身性狼瘡および紅斑性狼瘡；全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）；ならびに心筋症、虚血性心疾患高コレステロール血症、アテローム硬化症などの心臓の炎症性疾患；さらには、子癇前症を含む重大な炎症性成分を含む様々な他の疾患；慢性肝不全、脳および脊髄外傷、およびがんが含まれる。グラム陽性もしくはグラム陰性ショック、出血性もしくはアナフィラキシーショック、または炎症誘発性サイトカインに応答してがん化学療法によって誘導されるショック、例えば、炎症誘発性サイトカインと関連するショックによって例示される身体の全身炎症も存在し得る。そのようなショックは、例えば、がん化学療法において使用される化学療法剤によって誘導され得る。
【００１６】
神経変性障害には、これに限定されないが、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、および筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）が含まれる。
【００１７】
ウイルス感染症には、これに限定されないが、肝炎ウイルス（例えば、ＢまたはＣ型肝炎）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ライノウイルス、帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、単純ヘルペスウイルス（例えば、ＨＳＶ−１またはＨＳＶ−２）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ワクシニアウイルス、インフルエンザウイルス、脳炎ウイルス、ハンタウイルス、アルボウイルス、西ナイルウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エプスタイン−バーウイルス、および呼吸系発疹ウイルスによる感染症が含まれる。
【００１８】
肝臓疾患には、これに限定されないが、肝硬変、アルコール性肝硬変、脂肪肝、中毒性肝臓疾患、ならびに急性および慢性肝炎が含まれる。
【００１９】
本明細書に記載の化合物は、ＳＵＭＯ１を活性化し得る。したがって、本出願はさらに、ＳＵＭＯ１を活性化する方法であって、細胞を、ＳＵＭＯ１を活性化するために有効な量の本明細書に記載の化合物、塩、または組成物と接触させることを含む方法を提供する。接触は、インビボまたはインビトロで行われてよい。さらなる実施形態では、本出願の化合物は、ＳＵＭＯ１を活性化するために有効な量の本明細書に記載の化合物、塩、または組成物を投与することによって、活性化を必要とする個体においてＳＵＭＯ１を活性化するために使用することができる。
【００２０】
本出願はさらに、本明細書に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩のいずれかと、少なくとも１種の薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００２１】
本出願はさらに、本明細書に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩のいずれかを提供する。
【００２２】
さらに、明確にするために別々の実施形態の文脈で記載されている本発明のある特定の特徴が、組み合わされて単一の実施形態で提供されてもよいことが認められる（ただし、その実施形態は、多数項引用形式で記載されている場合と同様に組み合わされることが意図されている）。逆に、簡潔にするために単一の実施形態の文脈で記載されている本発明の様々な特徴が、別々に、または任意の適切な部分的組み合わせで提供されてもよい。
【００２３】
本明細書に記載の化合物は、非対称であり得る（例えば、１つまたは複数の立体中心を有する）。別段に示されていない限り、鏡像異性体およびジアステレオ異性体などのすべての立体異性体が意図されている。非対称置換炭素原子を含有する本発明の化合物は、光学的に活性な形態またはラセミ体で単離することができる。ラセミ混合物の分割によるか、または立体選択的合成による方法など、光学的に不活性な出発物質から光学的に活性な形態を調製する方法は、当技術分野で公知である。オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合などの多くの幾何異性体も本明細書に記載の化合物には存在し得、そのような安定な異性体がすべて、本発明では企図される。本発明の化合物のｃｉｓおよびｔｒａｎｓ幾何異性体が記載されており、異性体の混合物として、または分離された異性体型として単離することができる。
【００２４】
本出願の化合物はまた、互変異性型を含む。互変異性形態は、隣接する二重結合との単結合の交換とともに、随伴するプロトンの移動から生じる。互変異性型は、同じ実験式と総電荷を有する異性体のプロトン化状態であるプロトトロピック互変異性体も含む。プロトトロピック互変異性体の例には、ケトン−エノール対、アミド−イミド酸対、ラクタム−ラクチム対、エナミン−イミン対、ならびにプロトンが複素環系の２つ以上の位置を占め得る環状形態、例えば、１Ｈ−および３Ｈ−イミダゾール、１Ｈ−、２Ｈ−および４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、１Ｈ−および２Ｈ−イソインドール、ならびに１Ｈ−および２Ｈ−ピラゾールが含まれる。互変異性型は平衡にあってもよいし、適切な置換によって一方の形態に立体的に固定されていてもよい。
【００２５】
本出願の化合物はまた、中間体または最終化合物で生じる原子の同位体をすべて含み得る。同位体には、同じ原子番号を有するが、質量数が異なる原子が含まれる。例えば、水素の同位体には、トリチウムおよびジュウテリウムが含まれる。
【００２６】
本明細書で使用する場合の「化合物」という用語は、記載の構造のすべての立体異性体、幾何異性体、互変異性体、および同位体を含むことが意図されている。名前または構造によって一方の特定の互変異性型として本明細書で同定されている化合物は、別段に指定されていない限り、他方の互変異性型を含むことが意図されている。
【００２７】
化合物、およびその薬学的に許容される塩はすべて、水および溶媒などの他の物質と一緒に存在してもよいし（例えば、水和物および溶媒和物）、または単離されてもよい。
【００２８】
一部の実施形態では、本出願の化合物、またはその塩は実質的に単離されている。「実質的に単離されている」とは、その化合物が、形成または検出された環境から少なくとも部分的に、または実質的に分離されていることを意味する。部分的分離には例えば、本出願の化合物が富化された組成物も含まれ得る。実質的分離には、本出願の化合物、またはその塩を少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、少なくとも約８０重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、少なくとも約９７重量％、または少なくとも約９９重量％含有する組成物が含まれ得る。化合物およびそれらの塩を単離するための方法は、当技術分野でルーチン的である。
【００２９】
「薬学的に許容される」という語句は本明細書では、適正な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症を伴うことなく、合理的なベネフィット／リスク比に見合ってヒトおよび動物の組織と接触させて使用するために適している化合物、物質、組成物、および／または剤形を指すために使用される。
【００３０】
本出願はまた、本明細書に記載の化合物の薬学的に許容される塩を含む。本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される塩」は、親化合物が、既存の酸または塩基部分をその塩形態に変換することによって修飾されている開示の化合物の誘導体を指す。薬学的に許容される塩の例には、これに限定されないが、アミンなどの塩基性残基の無機または有機酸塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリまたは有機塩などが含まれる。本出願の薬学的に許容される塩には、例えば、非毒性無機または有機酸から形成される親化合物の従来の非毒性塩が含まれる。本出願の薬学的に許容される塩は、従来の化学的方法によって塩基性または酸性部分を含有する親化合物から合成され得る。一般的に、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を水中もしくは有機溶媒中、またはそれら２種の混合物中で化学量論的量の適切な塩基または酸と反応させることによって、そのような塩を調製することができる；一般的に、エーテル、酢酸エチル、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、イソ−プロパノール、またはブタノール）またはアセトニトリル（ＡＣＮ）などの非水性媒体が好ましい。適切な塩のリストは、それぞれその全体が参照によって本明細書に援用されるRemington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418およびJournal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977)において見い出される。
【００３１】
組み合わせ療法
一部の実施形態では、本出願の化合物、またはその薬学的に許容される塩は、がんおよび／または神経障害などの疾患を処置するための別の治療剤と組み合わせて使用することができる。例えば、追加の作用物質は、本出願の化合物によって処置される疾患または状態を処置するために有用と当技術分野において承認されている治療剤であってよい。追加の作用物質はまた、治療用組成物に有利な特性を付与する作用物質（例えば、組成物の粘度に影響を及ぼす作用物質）であってよい。
【００３２】
本発明によって企図される組み合わせ療法は、例えば、単一の医薬製剤での本出願の化合物、またはその薬学的に許容される塩、および追加の作用物質の投与、さらには、別々の医薬製剤での本出願の化合物、またはその薬学的に許容される塩、および追加の作用物質の投与を含む。言い換えると、同時投与は、両方の作用物質の組み合わせの有益効果が得られるように、少なくとも２種の作用物質を対象に投与することを意味することとする。例えば、作用物質を同時に、またはある期間にわたって逐次的に投与することもできる。
【００３３】
追加の治療剤は、本明細書に記載の方法の病態を処置するために有用な任意の治療剤であってよい。追加の治療剤を同時に、または逐次的に投与することができる。別の実施形態では、方法はさらに、患者に、ＳＥＲＣＡ２ａを含むウイルス発現ベクターを投与することを含む。一部の実施形態では、方法はさらに、患者に、ＳＥＲＣＡ２ａを含むアデノ関連ベクター（ＡＡＶ）を投与することを含む。例えば、本方法で有用なベクターには、これに限定されないが、その全体が参照によって本明細書に援用される米国特許出願公開第２０１１／０２５６１０１号に記載のものが含まれる。
【００３４】
一実施形態では、ＳＥＲＣＡ２を、細胞への移動を媒介するウイルスベクターに組み込む。別法では、レトロウイルス、ウシ乳頭腫ウイルス、アデノウイルスベクター、レンチウイルスベクター、ワクシニアウイルス、ポリオーマウイルス、または感染性ウイルスを使用してもよい。同様に、これに限定されないが、潅流などによるＤＮＡの直接的な送達、裸のＤＮＡトランスフェクション、リポソーム媒介トランスフェクション、カプセル封入、および受容体媒介細胞内取り込み作用が含まれる非ウイルス方法を使用することもできる。これらの技法は当業者に周知であり、その詳細は本発明の核心ではなく、したがって、本明細書において排他的に詳述する必要はない。例えば、ウイルスベクターを肺細胞の形質導入のために使用して、治療的に有意なポリヌクレオチドを細胞に送達する。ウイルスは、受容体媒介細胞内取り込み作用などの特異的な手段によって、またはピノサイトーシスなどの非特異的手段によって細胞内部へのアクセスを獲得し得る。
【００３５】
本出願の実行は、当技術分野の技能の範囲内であるウイルス学、免疫学、微生物学、分子生物学および組み換えＤＮＡ技術の従来の方法を使用することができ、その多くを、例示を目的として下に記載する。そのような技術は、文献において十分に説明されている。例えば、Sambrook, et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd Edition, 1989); Maniatis et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual (1982); DNA Cloning: A Practical Approach, vol. I & II (D. Glover, ed.); Oligonucleotide Synthesis (N. Gait, ed., 1984); Nucleic Acid Hybridization (B. Hames & S. Higgins, eds., 1985); Transcription and Translation (B. Hames & S. Higgins, eds., 1984); Animal Cell Culture (R. Freshney, ed., 1986); Perbal, A Practical Guide to Molecular Cloning (1984)を参照されたい。
【００３６】
医薬製剤および剤形
医薬品として使用する場合、本出願の化合物を医薬組成物の形態で投与することができる。これらの組成物を医薬分野で周知の手法で調製することができ、かつ様々な経路によって、局所または全身処置が望ましいかどうか、かつ処置される面積に応じて投与することができる。投与経路には、これに限定されないが、肺（例えば、ネブライザーによるものを含む粉末剤またはエアゾールの吸入または吹送によるもの；気管内または鼻腔内）、経口または非経口が含まれる。非経口投与には、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内筋肉内もしくは注射もしくは注入；または頭蓋内、例えば、髄腔内もしくは脳室内投与が含まれる。非経口投与は、単一のボーラス用量の形態であってもよいし、または例えば、連続潅流ポンプによってもよい。局所投与用の医薬組成物および製剤には、経皮貼付剤、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、ドロップ剤、坐剤、スプレー剤、液剤および粉末剤が含まれ得る。従来の医薬担体、水性、粉末または油性基剤、増粘剤などが必要または望ましいこともある。
【００３７】
本出願はまた、活性成分として、本出願の化合物またはその薬学的に許容される塩を１種または複数の薬学的に許容される担体（賦形剤）と組み合わせて含有する医薬組成物を含む。一部の実施形態では、組成物は局所投与に適している。本出願の組成物の作製では、活性成分は典型的には、賦形剤と混合される、賦形剤によって希釈される、または例えば、カプセル、サシェ、紙、または他の容器の形態などの担体内に封入される。賦形剤が希釈剤として働く場合、これは、活性成分のためのビヒクル、担体または媒体として作用する固体、半固体、または液体物質であってもよい。したがって、組成物は、錠剤、丸剤、散剤、ロゼンジ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤、エアゾール剤（固体として、または液体媒体中で）、例えば最高１０重量％の活性化合物を含有する軟膏剤、軟および硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、滅菌注射用液剤、ならびに滅菌包装散剤の形態であってよい。
【００３８】
製剤の調製では、他の成分と組み合わせる前に、活性化合物を粉砕して、適切な粒径を得ることができる。活性化合物が実質的に不溶性である場合、２００メッシュ未満の粒径に粉砕することができる。活性化合物が実質的に水溶性である場合、粒径を粉砕によって調整して、製剤中で実質的に均一な分布、例えば、約４０メッシュを得ることができる。
【００３９】
本出願の化合物を、湿式粉砕などの公知の粉砕手順を使用して粉砕して、錠剤形成および他の製剤の種類に適した粒径を得ることができる。本出願の化合物の微粉（ナノ微粒子）調製は当技術分野で公知のプロセスによって調製することができ、例えば、国際出願ＷＯ２００２／０００１９６を参照されたい。
【００４０】
適切な賦形剤の一部の例には、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップ、およびメチルセルロースが含まれる。製剤は加えて、タルク、ステアリン酸マグネシウム、および鉱油などの滑沢剤；湿潤剤；乳化剤および懸濁化剤；安息香酸メチルおよび−プロピルヒドロキシなどの保存剤；甘味剤；ならびに香味剤を含んでよい。当技術分野で公知の手順を使用することによって、患者への投与後に活性成分の急速、持続性または遅延放出をもたらすように、本出願の組成物を製剤化することができる。
【００４１】
組成物は単位剤形で製剤化することができ、その際、各投薬は、活性成分約５〜約１０００ｍｇ（１ｇ）、より一般には約１００〜約５００ｍｇを含有する。「単位剤形」という用語は、ヒト対象および他の哺乳動物用の単位投薬量として適した物理的に別個の単位を指し、その際、各単位は、適切な医薬品賦形剤に関連して所望の治療効果が生じるように計算された所定の量の活性物質を含有する。
【００４２】
一部の実施形態では、本出願の組成物は、活性成分の約５〜約５０ｍｇを含有する。当業者は、これが、活性成分約５〜約１０、約１０〜約１５、約１５〜約２０、約２０〜約２５、約２５〜約３０、約３０〜約３５、約３５〜約４０、約４０〜約４５、または約４５〜約５０ｍｇを含有する組成物で具体化されることを認めるであろう。
【００４３】
一部の実施形態では、本出願の組成物は、活性成分約５０〜約５００ｍｇを含有する。当業者は、これが、活性成分約５０〜約１００、約１００〜約１５０、約１５０〜約２００、約２００〜約２５０、約２５０〜約３００、約３５０〜約４００、または約４５０〜約５００ｍｇを含有する組成物で具体化されることを認めるであろう。
【００４４】
一部の実施形態では、本出願の組成物は、活性成分約５００〜約１０００ｍｇを含有する。当業者は、これが、活性成分約５００〜約５５０、約５５０〜約６００、約６００〜約６５０、約６５０〜約７００、約７００〜約７５０、約７５０〜約８００、約８００〜約８５０、約８５０〜約９００、約９００〜約９５０、または約９５０〜約１０００ｍｇを含有する組成物で具体化されることを認めるであろう。
【００４５】
本明細書に記載の化合物の同様の投薬量を、本出願の方法および使用において使用することができる。
【００４６】
活性化合物は、幅広い投薬量範囲にわたって有効であり得、一般的に、薬学的有効量で投与され得る。しかしながら、実際に投与される化合物の量は通常、医師によって、処置を受ける状態、選択された投与経路、投与される実際の化合物、個々の患者の年齢、体重、および応答、患者の症状の重症度などを含む関連状況に従って決定されることは理解されるであろう。
【００４７】
錠剤などの固体組成物を調製するために、主な活性成分を医薬品賦形剤と混合して、本出願の化合物の均質な混合物を含有する固体予備処方組成物を形成する。これらの予備処方組成物を均質と称する場合、活性成分は典型的には、組成物全体に均一に分散しているので、その組成物を、錠剤、丸剤およびカプセル剤などの等しく有効な単位剤形に容易に細分化することができる。次いで、この固体予備処方物を、例えば、本出願の活性成分約０．１〜約１０００ｍｇを含有する上記の種類の単位剤形に細分化する。
【００４８】
本出願の錠剤または丸剤は、長時間作用の利点をもたらす剤形を得るためにコーティングされているか、または別段に配合されていてよい。例えば、錠剤または丸剤は、内側投薬および外側投薬成分を含んでよく、その際、後者は、前者の上にある包膜の形態である。この２つの成分は、胃での分解に耐えるために役立ち、かつ内側成分が無傷で十二指腸へと進むか、その放出の遅延を可能にする腸溶層によって分離されていてよい。様々な物質をそのような腸溶層またはコーティングのために使用することができ、その際、そのような材料には、多数のポリマー酸、ならびにポリマー酸とシェラック、セチルアルコール、および酢酸セルロースなどの物質との混合物が含まれる。
【００４９】
本出願の化合物および組成物が経口または注射による投与のために組み込まれる液体形態には、水性液剤、適切に香味剤添加されたシロップ剤、水性または油性懸濁剤、および綿実油、ゴマ油、ヤシ油、またはラッカセイ油などの食用油を含む香味剤添加された乳剤、さらにはエリキシル剤ならびに同様の薬剤ビヒクルが含まれる。
【００５０】
吸入または吹送のための組成物には、薬学的に許容される水性もしくは有機溶媒、またはその混合物中の液剤および懸濁剤、ならびに粉末剤が含まれる。液体または固体組成物は、上記のとおりの適切な薬学的に許容される賦形剤を含有してよい。一部の実施形態では、組成物を局所または全身作用のために経口または経鼻呼吸経路によって投与する。組成物を不活性ガスの使用によってネブライズすることができる。ネブライズされた溶液をネブライズ装置から直接呼吸してもよいし、またはネブライズ装置をフェイスマスク、テント、または間欠的陽圧人工呼吸器に取り付けることができる。液剤、懸濁剤、または粉末剤組成物を、製剤を適切な手法で送達するデバイスから、経口または経鼻投与することができる。
【００５１】
患者に投与される化合物または組成物の量は、投与されているもの、予防または治療などの投与の目的、患者の状態、投与の手法などに応じて変化し得る。治療適用では、組成物を、既に疾患に罹患している患者に、疾患の症状およびその合併症を治癒させる、または少なくとも部分的に停止させるために十分な量で投与することができる。有効な用量は、処置を受ける疾患状態、さらには、担当医の判断によって疾患の重症度、患者の年齢、体重および全身状態などの因子に応じて左右される。
【００５２】
患者に投与される組成物は、上記の医薬組成物の形態であってよい。これらの組成物を慣用の減菌技法によって滅菌してもよいし、または滅菌濾過してもよい。水溶液をそのまま使用するために包装してもよいし、または凍結乾燥してもよく、その際、凍結乾燥製剤は、投与前に滅菌水性担体と組み合わされる。化合物製剤のｐＨは典型的には、３〜１１、より好ましくは５〜９、最も好ましくは７〜８である。上述の賦形剤、担体、または安定剤のうちのいくつかの使用が薬学的塩の形成をもたらすであろうことは理解されるであろう。
【００５３】
本出願の化合物の治療的投薬量は、例えば、処置が成される特定の使用、化合物の投与手法、患者の健康および状態、ならびに処方医の判断に従って変動し得る。医薬組成物中の本出願の化合物の割合または濃度は、投薬量、化学的特徴（例えば、疎水性）、および投与経路を含むいくつかの因子に応じて変動し得る。例えば、本出願の化合物を、非経口投与用に化合物約０．１〜約１０％ｗ／ｖを含有する水性生理学的緩衝液中で提供することができる。いくつかの典型的な用量範囲は、１日当たり約１□ｇ／ｋｇ体重〜約１ｇ／ｋｇ体重である。一部の実施形態では、用量範囲は、１日当たり約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重である。投薬量は、疾患または障害の種類および進行程度、特定の患者の全体的な健康状態、選択された化合物の相対的な生物学的有効性、賦形剤の配合、ならびにその投与経路などの変数に依存し得る。有効用量は、インビトロまたは動物モデル試験系に由来する用量反応曲線から外挿することができる。
【００５４】
合成
その塩を含む本出願の化合物は、公知の有機合成技法を使用して調製することができ、多数の可能な合成経路のいずれかに従って、例えば、実施例セクションに記載の方法に類似の方法によって合成することができる。
【００５５】
本出願の化合物を調製するための反応は、有機合成の当業者であれば容易に選択することができる適切な溶媒中で実施することができる。適切な溶媒は、反応が実施される温度、例えば、溶媒の凍結温度から溶媒の沸騰温度までの範囲であり得る温度で、出発物質（反応物）、中間体、または生成物と実質的に非反応性であり得る。所与の反応を、１種の溶媒または１種よりも多い溶媒の混合物中で実施することができる。特定の反応ステップに応じて、当業者であれば、特定の反応ステップに適切な溶媒を選択することができる。
【００５６】
本出願の化合物の調製は、様々な化学基の保護および脱保護を伴い得る。当業者であれば、保護および脱保護の必要性、ならびに適切な保護基の選択を容易に決定することができる。保護基の化学は、例えば、その全体が参照によって本明細書に援用されるT. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., Wiley & Sons, Inc., New York (1999)において見い出すことができる。
【００５７】
反応を、当技術分野で公知の任意の適切な方法に従ってモニターすることができる。例えば、生成物の形成を、核磁気共鳴分光法（例えば、１Ｈまたは１３Ｃ）、赤外分光法、分光測光法（例えば、可視ＵＶ）、質量分析法などの分光学的手段によって、または高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、液体クロマトグラフィー−質量分析（ＬＣＭＳ）、もしくは薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）などのクロマトグラフィーによる方法によってモニターすることができる。
【００５８】
ラセミ混合物の分割または立体選択的合成による方法など、光学的に不活性な出発物質から光学的に活性な形態を調製する方法は、当技術分野で公知である。オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合などの多くの幾何異性体も本明細書に記載の化合物には存在し得、そのような安定な異性体がすべて、本出願では企図される。本出願の化合物のｃｉｓおよびｔｒａｎｓ幾何異性体が記載されており、異性体の混合物として、または分離された異性体型として単離することができる。
【００５９】
化合物のラセミ混合物の分割は、当技術分野で公知の多数の方法のいずれかによって実施することができる。方法例には、光学的に活性で塩を形成する有機酸であるキラル分割酸を使用する分別再結晶化が含まれる。分別再結晶化方法のための適切な分割剤は、例えば、酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸のＤおよびＬ型などの光学的に活性な酸、またはβ−カンファースルホン酸などの様々な光学的に活性なカンファースルホン酸である。分別結晶化方法に適した他の分割剤には、α−メチルベンジルアミンの立体異性的に純粋な型（例えば、ＳおよびＲ型、またはジアステレオマーとして純粋な型）、２−フェニルグリシノール、ノルエフェドリン、エフェドリン、Ｎ−メチルエフェドリン、シクロヘキシルエチルアミン、１，２−ジアミノシクロヘキサンなどが含まれる。
【００６０】
ラセミ混合物の分割は、光学的に活性な分割剤（例えば、ジニトロベンゾイルフェニルグリシン）を充填されたカラムでの溶離によって実施することもできる。当業者であれば、適切な溶離溶媒組成物を決定することができる。
【００６１】
キット
本出願はまた、治療有効量の本出願の化合物を含む医薬組成物を収容する１個または複数の容器を含む、例えば本明細書に記載の病態のいずれかの処置または予防において有用な医薬キットを含む。当業者には容易に分かるように、そのようなキットはさらに、所望の場合には、例えば、１種または複数の薬学的に許容される担体を含む容器、追加の容器などの様々な従来の医薬キット構成成分の１つまたは複数を含んでもよい。投与される成分量、投与のための指針、および／または成分を混合するための指針を示す挿入物、またはラベルのいずれかとしての説明書も、キットに含まれてよい。
【００６２】
物質および方法
抗体およびトランスフェクション
免疫ブロット法および免疫沈降（ＩＰ）では、次の抗体を使用する：ポリクローナル抗ＳＥＲＣＡ２ａ（２１ｔｈ  ｃｅｎｔｕｒｙ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｉｎｃ．）、モノクローナル抗ＧＡＰＤＨ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．  Ｇ８７９５）、モノクローナル抗ＳＵＭＯ１（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃ．、  ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．４９３０）、抗マウスホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃ．、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．３２４３０）、および抗ウサギＨＲＰ（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃ．、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．３２４６０）。ＹＦＰ標識ＳＵＭＯｌ、ｐｃＤＮＡ３．０−ＳＥＲＣＡ２ａ、およびＨＡ標識Ｕｂｃ９プラスミドをトランスフェクションのために使用する。プラスミドＤＮＡを大腸菌（Escherichia coli）株ＤＨ５ａで増幅し、市販の精製キット（Ｑｉａｇｅｎ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．１２２６３）を使用することによって抽出する。精製プラスミドを滅菌ＴＥバッファー（ｌ０ｍＭトリス−ＨＣＩおよび１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．６）中に再懸濁する。最高純度の調製物（Ａ２６０／Ａ２８０＞１．８）のみをトランスフェクションのために使用する。１μｇの各プラスミドをトランスフェクションのために使用する。ＨＥＫ−２９３細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．ＣＲＬ−１８７３）を３７℃で、５％ＣＯ２加湿雰囲気下で、１０％ウシ胎児血清（ＳＡＦＣ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．１２１０７）およびペニシリン１００ｉ．ｕ／ｍｌおよびストレプトマイシン１００μｇ／ｍｌを含有するダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ、Ｃｅｌｌｇｒｏ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．１０−０  １３−ＣＭ）中で成長させる。ＨＥＫ−２９３細胞を６０ｍｍ培養皿あたり３〜５×１０５細胞の密度で、ＤＭＥＭ中で播種する。細胞を、表示の発現プラスミドを含むＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．１１６６８）を使用して一過性にトランスフェクションする。２４時間後に、細胞を小分子またはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．Ｄ２６５０）のいずれかで処理する。
【００６３】
心筋細胞単離
カルシウム寛容な成体ラット心室筋細胞（ＡＲＶＭ）は、雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（２５０〜３００ｇ）の心臓から得る。心臓を切除し、標準的な酵素技法で潅流する。ＡＲＶＭを、ラミニン２μｇ／ｃｍ２でプレコーティングされたマルチチャンバープレートまたは培養皿に、１０５細胞／ｃｍ２の密度で、１０ｍｍｏｌ／ｌ  ＨＥＰＥＳ、３．７ｍｇ／ｍｌ  ＮａＨＣＯ３、１ｍｇ／ｍｌグルコース、０．１１ｍｇ／ｍｌピルビン酸ナトリウム、２ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン、２ｍｍｏｌ／ｌ  Ｌ−カミチン（camitine）、５ｍｍｏｌ／ｌクレアチン、５ｍｍｏｌ／ｌタウリン、１％ペニシリン−ストレプトマイシン、および１％ゲンタマイシンを補充されているＬ−グルタミン不含のＤＭＥＭ中でプレーティングする。単離後に、細胞を１時間にわたって沈降させる。培養を３７℃で、５％ＣＯ２−９５％空気の雰囲気中でインキュベートする。培養物が十分に洗浄されるまで、新鮮な培地を穏やかに添加して、培地が流し出されているようにする。静止状態にある棒状心筋細胞のみをＩｏｎＯｐｔｉｘ実験のために選択する。
【００６４】
化合物例
各化合物を１０μＭで添加する。ＤＭＳＯを対照として使用する。３７℃での２４時間後に、ＳＥＲＣＡ２ａ  ＳＵＭＯ化および機能性分析を決定する。
【００６５】
細胞画像
化合物の細胞透過性および潜在的活性を、ＹＦＰ−ＳＵＭＯ１を追跡することによって検査する。ＹＦＰ−ＳＵＭＯＩおよびｐｃＤＮＡ３．０−ＳＥＲＣＡ２ａを発現するＨＥＫ−２９３細胞を１０μＭ  ＤＭＳＯまたは１０μＭ小分子のいずれかと共に２４時間にわたって３７℃でインキュベートする。蛍光シグナルを蛍光顕微鏡法によってモニターする。ＨＡ標識Ｕｂｃ９発現細胞を陽性対照として役立てる。
【００６６】
細胞短縮／再延長（re-lengthening）
ＡＲＶＭの機械的特性を、ＩｏｎＯｐｔｉｘ  ＭｙｏＣａｍ（登録商標）システム（ＩｏｎＯｐｔｉｘ、Ｍｉｌｔｏｎ、ＭＡ）を使用して評価する。簡略には、細胞を、倒立顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ、ＩＸ−７０）のステージ上に載せたＷａｒｎｅｒチャンバーに入れ、１３１ｍＭ  ＮａＣｌ、４ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｈ、１ｍＭ  ＭｇＣｈ、１０ｍＭグルコース、および１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４を含有するバッファーで表面灌流する（３０℃で１ｍｌ／分）。ＡＲＶＭを、閾値上電圧で、かつ０．５Ｈｚの周波数で磁界刺激する。ＩｏｎＯｐｔｉｘ  ＭｙｏＣａｍカメラを使用すると、研究しているＡＲＶＭがコンピューターモニター上に示される。ＳｏｆｔＥｄｇｅソフトウェア（ＩｏｎＯｐｔｉｘ）を使用して、短縮および再延長中の細胞長さの変化を捕捉する。
【００６７】
細胞内蛍光測定
ＡＲＶＭをＯｌｙｍｐｕｓ  ＩＸ−７０倒立顕微鏡上のチャンバーに入れ、Ｆｌｕｏｒ４０倍オイル対物レンズを通して画像化する。ＡＲＶＭを、７５Ｗランプが放射する光に曝露し、３６０または３８０ｎｍフィルター（帯域幅は±１５ｎｍである）のいずれかに通過させるが、その間、０．５Ｈｚで刺激して収縮させる。最初に３６０ｎｍで０．５秒間にわたって、次いで、３８０ｎｍで記録プロトコルの持続期間にわたって細胞を照明した後に、蛍光発光を光電子増倍管によって４８０から５２０ｎｍの間で検出する（サンプリングレート３３３Ｈｚ）。３６０ｎｍ励起スキャンをプロトコルの終了時に繰り返し、細胞内Ｃａ２＋濃度（（Ｃａ２＋］ｉ）の定性的変化を２つの波長での蛍光強度の比から推測する。
【００６８】
免疫ブロット法
小分子処理またはＤＭＳＯ処理された細胞または免疫沈着物のいずれかからの等量のタンパク質を７．５％ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分解し、ニトロセルロース膜（Ｂｉｏ−Ｒａｄ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．１６２−０１１２）に移す。膜を１時間、室温で、ＴＢＳＴ（１０ｍＭ  トリス−ＨＣＩ、１５０ｍＭ  ＮａＣＩ、および０．０５％ｔｗｅｅｎ−２０、ｐＨ８．０）中５％脱脂乳（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃ．、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．９９９９）でブロックする。ブロットを特異的一次抗体と共に４℃で終夜インキュベートする。次いで、ブロットを１０分間、それぞれＴＢＳＴで５回洗浄し、１時間にわたって、ＨＲＰコンジュゲートした二次抗体と共に、５％脱脂乳を含むＴＢＳＴ中でインキュベートする。５回のＴＢＳＴ洗浄後に、タンパク質バンドを強化化学発光（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃ．、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．３２１３２）で可視化し、Ｘ線フィルム（Ｄｅｎｖｉｌｌｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｃ．、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．Ｅ３０１２）に曝露する。ＧＡＰＤＨ発現は内部対照をもたらした。
【００６９】
ＳＥＲＣＡ２ａ  ＳＵＭＯ化アッセイ
トランスフェクション（４８時間）後に、ＨＥＫ−２９３細胞をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、Ｃｅｌｌｇｒｏ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．２１−０４０−ＣＭ）で２回すすぎ、１０ｍＭ  Ｎ−エチルマレイミド（ＮＥＭ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．Ｎ３８７６）およびホスファターゼ阻害剤カクテル（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｍｉｎｉ  Ｔａｂｌｅｔ、Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．１１８３６１５３００１）を含む１％Ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ−４０溶解バッファー（Ｂｏｓｔｏｎ  Ｂｉｏｐｒｏｄｕｃｔｓ、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．ＢＰ−１１９）中で溶解させる。タンパク質２ｍｇを抗ＳＥＲＣＡ２ａ抗体と終夜、４℃で、溶解バッファー中で混合する。事前洗浄したプロテインＡ−Ｓｅｐａｒｏｓｅビーズ（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃ．、ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．２０３３３）を各サンプルに添加し、１時間、４℃で、穏やかに揺動させながらインキュベートする。免疫複合体を溶解バッファーで３回洗浄し、遠心分離によって１２０００ｘｇで１０秒間にわたって沈澱させる。免疫複合体をＳＤＳサンプルバッファーに再懸濁し、免疫ブロット法に掛ける。免疫沈降のための対照を、一次沈降抗体のものと同等の抗ウサギＩｇＧを使用して行う。免疫沈降で使用する全細胞溶解産物のうちの１０パーセントを、その後の免疫ブロット法のために装填する。
【００７０】
統計
２または３回行われる実験からデータを得、値を平均±標準偏差（ＳＤ）として表す。ｐ値を分散分析、続いて、スチューデントｔ検定によって計算した。データ群の間の差異は、ｐ＜０．０５の場合に、統計的に有意と判断する。
【実施例】
【００７１】
スキーム１  類似体３の合成
【００７２】
【化１】
2020528058.tif 000002
試薬および条件：ａ）ＰＯＣｌ３、９０℃、１２時間；ｂ）Ｋ２ＣＯ３、Ｈ２Ｏ２／Ｈ２Ｏ、ＤＭＳＯ、室温、１２時間。
スキーム１には、Ｎ１０６類似体３ａ〜ｃの合成を示しており、１，３，４−オキサジアゾール環を、ＰＯＣｌ３中で安息香酸１ａ，ｂとヒドラジンカルボキサミド２との間でＮ，Ｎ−ジアシル−ヒドラジンをシクロ脱水することによって構築した。［１］類似体３ｃは、Ｈ２Ｏ２／Ｈ２Ｏ／Ｋ２ＣＯ３の存在下で３ｂを加水分解することによって得た。
【００７３】
スキーム２  類似体７および８の合成
【００７４】
【化２】
2020528058.tif 000003
試薬および条件：ａ）ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、６０℃、２時間；ｂ）ピリジン、ＴｓＣｌ、ＤＭＦ、７０℃、２時間；ｃ）ＳＥＭＣｌ、ＤＩＰＥＡ、ＣＨ２Ｃｌ２、０℃、２時間。
スキーム２には、類似体７および８の合成を概説している。Ｎ，Ｎ−ジアシル−ヒドラジン６ａ〜ｃを、イソチオシアナト４［２］とヒドラジンカルボキサミド５ａ〜ｃ［３］との間の付加によって合成した。ＴｓＣｌ／ピリジンの存在下での６ａ〜ｃの分子内環化によって、所望の１，３，４−オキサジアゾール７ａ〜ｃ［４］を得、次いで、ＳＥＭＣｌによってアミン７ｂ〜ｃをＳＥＭ保護して、化合物８ａ〜ｂを得た。
【００７５】
スキーム３  類似体１２の合成
【００７６】
【化３】
2020528058.tif 000004
試薬および条件：ａ）Ｐｄ／Ｃ、Ｈ２、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ、１２時間；ｂ）ＲＢｒ、Ｃｓ２ＣＯ３、ＣＨ３ＣＮ、室温、１２時間；ｃ）ＨＣｌ／ジオキサン、ＣＨ２Ｃｌ２、室温、１時間；ｄ）ＰＯＣｌ３、ＣＨ３ＣＮ、７０℃、１２時間。
スキーム３には、類似体１２ａ〜ｄの合成が示されている。Ｈ２雰囲気下でＰｄ／Ｃによって触媒される８ａの水素化によってベンジル基を除去して、フェノール９を得［５］、次いで、ブロモアルカン１０ａ〜ｃでアルキル化して、化合物１１ａ〜ｃを得、続いて、ＨＣｌ／ジオキサン中で保護基ＳＥＭを除去して［６］、対応する化合物１２ａ〜ｃを生成する。ＰＯＣｌ３中でアミド１２ｃを脱水して、ニトリル１２ｄを得る。
【００７７】
スキーム４  類似体１５の合成
【００７８】
【化４】
2020528058.tif 000005
試薬および条件：ａ）ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、室温、１時間；ｂ）１４、ＤＩＰＥＡ、ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、室温、１時間。
一連のアミド類似体１５ａ〜ｄをスキーム４に示されているとおりに合成した。ＮａＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨによるメチルエステル１２ａの加水分解によって、対応する酸１３を得、次いで、これをＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡの存在下で様々なアミンとカップリングさせて、アミド１５ａ〜ｄを得た。
【００７９】
スキーム５  類似体１６の合成
【００８０】
【化５】
2020528058.tif 000006
試薬および条件：１６ａでは：ａ）Ａｃ２Ｏ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、１時間；１６ｂでは：ｂ）（ＭｅＳＯ２）２Ｏ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、室温、１時間；１６ｃでは：ｃ）ＰｈＳＯ２Ｃｌ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、室温、１時間；１６ｄでは：ｄ）ＣＨ２Ｏ、ＮａＢＨ３ＣＮ、ＭｅＯＨ、室温、１２時間；１６ｅでは：ｅ）ＰｈＣＯ２Ｈ、ＤＩＰＥＡ、ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、室温、１時間。
スキーム５には、類似体１６ａ〜ｅの合成が概説されている。無水酢酸によって１２ｂをアシル化してアセテート１６ａを得、ＤＭＦ中でメタンスルホン酸無水物によって１２ｂをメシル化して１６ｂを得、フェニルスルホニルクロリドで１２ｂをスルホニル化して化合物１６ｃを得；次いで、１２ｂとアルデヒドとの間の一連の還元的アミノ化によって１６ｄを形成し、最後に、ＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡの存在下で安息香酸とカップリングさせることによって１２ｂをアミド化して、生成物１６ｅを得る。
【００８１】
ＴＢ０１Ｂ類似体：
スキーム６  類似体１８の合成
【００８２】
【化６】
2020528058.tif 000007
試薬および条件：ａ）ＰＯＣｌ３、９０℃、１２時間；ｂ）Ｋ２ＣＯ３、Ｈ２Ｏ２／Ｈ２Ｏ、ＤＭＳＯ、室温、１２時間。
一連の類似体１８ａ〜ｆをスキーム６に示されているとおりに合成した。３ａ〜ｃのための前の方法に従って、１８ａ〜ｄを、ＰＯＣｌ３中で安息香酸１７ａ〜ｄとヒドラジンカルボキサミド２との間で形成したＮ，Ｎ−ジアシル−ヒドラジン中間体をシクロ脱水することによって合成した。次いで、１８ｂ〜ｃをＨ２Ｏ２／Ｋ２ＣＯ３／Ｈ２Ｏによる加水分解に掛けて、アミド１８ｅ〜ｆを生成した［７］。
【００８３】
スキーム７  類似体２０の合成
【００８４】
【化７】
2020528058.tif 000008
試薬および条件：ａ）ＬｉＯＨ、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、室温、５時間；ｂ）アミン、ＭｅＯＨ、５０℃、２０時間；ｃ）アミン、ＨＢＴＵ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、室温、４時間。
スキーム７には、類似体２０ａ〜ｆの合成を示した。２０ａ〜ｄを、１８ａを対応するアミンで直接的に加アンモニア分解することによって合成した。１８ａをＬｉＯＨ／ＭｅＯＨで加水分解してアリール酸１９を得、これを、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡの存在下で対応するアミンとカップリングさせてアミド２０ｅ〜ｆを得た。
【００８５】
スキーム８  類似体２４および２５の合成
【００８６】
【化８】
2020528058.tif 000009
試薬および条件：ａ）ｉ）ＴＣＤＩ、ＣＨ３ＣＮ、室温、２時間、次いで、７０℃、１６時間；ｉｉ）ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ、７０℃、２時間；ｂ）ピリジン、ＴｓＣｌ、７０℃、２時間；ｃ）ＢＢｒ３、−５０−室温、１６時間。
スキーム８には、類似体２４および２５の合成を示した。７ａ〜ｃの前の合成と同様に、化合物２４を３ステップ反応によって合成した：第一級アミン２１をＴＣＤＩによってイソチオシアナトに変換し、続いて、ヒドラジン２２を付加して、対応するヒドラジンカルボチオアミド２３を得、次いで、ＴｓＣｌ／ピリジンの存在下で分子内縮合／環化して、所望の生成物２４を得た。次いで、ＢＢｒ３を使用することによって２４を脱メチルして、類似体２５を得た。［８］
【００８７】
スキーム９  類似体２６および２７の合成
【００８８】
【化９】
2020528058.tif 000010
試薬および条件：ａ）ＣｕＣＮ，ＮＭＰ、１２０℃、２時間；ｂ）ＮａＯＨ、Ｈ２Ｏ２、ＤＭＳＯ、６０℃、２時間。
スキーム９には、類似体２６および２７の合成が示されている。ブロモアリール８ｂを、ＣｕＣＮをＮＭＰ中、高温下で使用することによってニトリル２６に変換したが、その際、反応中に保護基が失われた。次いで、化合物２６をＨ２Ｏ２による加水分解に掛けて、アミド２７を得た。
【００８９】
スキーム１０  ３１  ＴＢ０１ＢおよびＮ１０６の合成の最適化
【００９０】
【化１０】
2020528058.tif 000011
試薬および条件：ａ）（ＣＯＣｌ）２、ＤＭＦ、ＣＨ２Ｃｌ２、室温、１時間；ｂ）ピリジン、ジオキサン、５０℃、１２時間；ｃ）Ｔｆ２Ｏ、ＣＨ２Ｃｌ２、４０℃、２４時間。
スキーム１０に示されているとおり、２種の活性な類似体３１ａ〜ｂを合成する改善された経路を開発した。安息香酸２８ａ〜ｂを、ＤＭＦによって触媒して塩化オキサリルを使用することによって、アシル塩化物２９ａ〜ｂに変換し、次いで、ヒドラジンカルボキサミド２によってアミド化して化合物３０ａ〜ｂを得た。トリフルオロメチルスルホン酸無水物の存在下、ジクロロメタン中でＮ，Ｎ’−ジアシル−ヒドラジン３０ａ〜ｂを分子内シクロ脱水して、所望の生成物３１ａ〜ｂを収率９０％で得る［９］。
【００９１】
実験セクション：
無水溶媒中の反応は、火炎乾燥またはオーブン乾燥したガラス器具中で実施した。特記されていない限り、反応を磁気撹拌し、気圧下で行った。空気不安定な試薬および溶液はシリンジを介して移動させ、ゴム隔膜を介して反応容器に導入した。固体はＡｒの陽圧下で導入した。室温（ｒｔ）以外の温度は；別段に示されていない限り、浴温度を指す。商業的に入手した溶媒および試薬はすべて、受け取ったままで使用した。すべての水性反応、ワークアップのために、かつすべての水溶液の調製のために、脱イオン水を使用した。「真空中で濃縮した」という語句は、可変真空ポンプに取り付けられたビュッヒロータリーエバポレーターを用いて、続いて、恒量までポンピング（＜１Ｔｏｒｒ）することによって溶媒を除去することを指す。プロトンおよび炭素核磁気共鳴（化）スペクトルをＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ６００（６００ＭＨｚ）で得た。化学シフトはｐｐｍ（δ）で報告する。１Ｈ  ＮＭＲデータは、次のように報告する：化学シフト（多重性、結合定数（Ｈｚ）、水素の数）。それに応じて、多重性が示される：ｓ（一重項）、ｄ（二重項）、ｄｄ（二重二重項）、ｄｄｄ（二重項の二重二重項）、ｄｔ（三重項の二重項）、ｔｔ（三重項の三重項）、ｄｑ（四重項の二重項）、ｔ（三重項）、ｑ（四重項）、ｐ（五重項）、ｍ（多重項）。高分解能質量スペクトル（ＬＣＭＳ）を、Ａｇｉｌｅｎｔ  １２００  Ｓｅｒｉｅｓ  Ｒａｐｉｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  ＬＣ／ＭＳを使用して得た。クロマトグラフィーを、Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  ＩＳＣＯ  ＲｅｄｉＳｅｐ順相（４０〜６０ミクロン）シリカゲル使い捨てフラッシュカラムを使用し、Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  ＩＳＣＯ  Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ  Ｒｆ精製システムを使用することによって行った。ＵＶ−ｖｉｓ１５９  Ｇｉｌｓｏｎ検出器、Ｇｉｌｓｏｎ  ３２２ポンプに連結しているＧｉｌｓｏｎ  ２７１リキッドハンドラーを使用することによって、かつＬｕｎａ  １０μｍ  Ｃ１８（２）１００Ａ  ＡＸＩＡ  Ｐａｃｋｅｄカラム１００×２１．２ｍｍを用いて、分取逆相クロマトグラフィーを実施した。移動相：２０ｍＬ／分の流速で、Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）中５％〜９０％ＣＨ３ＣＮの直線勾配。
【００９２】
【化１１】
2020528058.tif 000012
Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド（２）：ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中のアミン４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１ｇ、５．５５ｍｍｏｌ、１当量）およびピリジン（０．８ｍＬ、１．５当量）の溶液に、クロロギ酸フェニル（０．９６ｇ、１．１当量）を０℃でゆっくり添加し、混合物を室温で６時間撹拌し、次いで、濃縮し、ＦＣＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、２：１）によって精製して、生成物フェニル（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）カルバメートを得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 7.44-7.41 (m, 3H), 7.30-7.26 (m, 2H), 7.24-7.22 (m, 2H), 6.91-6.89 (d, 1H), 3.99 (s, 3H).
Ｃ１５Ｈ１２Ｎ２Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、計算値：３０１．０６３９、実測値［Ｍ＋Ｈ］＋：３０１．０６４４。ジオキサン（２０ｍＬ）中の、上で得た生成物フェニル（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）カルバメートにヒドラジン（５ｍＬ、５当量）を添加し、混合物を６０℃で１０時間撹拌した。室温に冷却した後に、懸濁液混合物を濾過し、ケーキをＣＨ２Ｃｌ２で洗浄して、生成物Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド２を白色の固体（０．７８ｇ、２ステップで６０％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 7.43-7.42 (d, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.93-6.92 (d, 1H), 3.88 (s, 3H). Ｃ９Ｈ１０Ｎ４Ｏ２ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：２３９．０５９６；実測値［Ｍ＋Ｈ］＋：２３９．０５９８。
【００９３】
【化１２】
2020528058.tif 000013
５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（３ａ）：ＰＯＣｌ３（１０ｍＬ）中の４−メトキシ−２−メチル安息香酸１ａ（０．３ｇ、１．８１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を９０℃で、Ａｒ下で１時間撹拌し、次いで、室温に冷却し、Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド２（０．４３ｇ、１当量）を添加した。混合物を４０時間、９０℃でＡｒ下で撹拌した。室温に冷却した後に、反応混合物を高真空下で濃縮した。残渣をＥｔ３Ｎで処理し、次いで、濃縮し、水で洗浄し、ＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、２：１）に掛けて、生成物を薄ピンク色の固体５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン３ａ（６６ｍｇ、１０％）として得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 7.92-7.91 (d, 1H), 7.22-7.19 (t, 1H), 7.16-7.15 (d, 1H), 6.89-6.88 (d, 1H), 6.86-6.84 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 2.75 (s, 3H) ; 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ 164.1, 160.7, 160.1, 145.6, 139.6, 129.7, 124.2, 116.5, 115.6, 113.5, 111.0, 107.6, 55.3, 54.8, 22.1; Ｃ１８Ｈ１６Ｎ４Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３６９．１０１６；実測値［Ｍ＋Ｈ］＋；３６９．１０２１。
【００９４】
【化１３】
2020528058.tif 000014
２−メトキシ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾニトリル（３ｂ）：ＰＯＣｌ３（１０ｍＬ）中の３−シアノ−４−メトキシ安息香酸１ｂ（０．３ｇ、１．６９４ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を９０℃で、Ａｒ下で１時間撹拌し、次いで、室温に冷却し、Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド２（０．４１ｇ、１当量）を添加した。混合物を４０時間、９０℃で、Ａｒ下で撹拌した。室温に冷却した後に、反応混合物を高真空下で濃縮した。残渣をＥｔ３Ｎで処理し、次いで、濃縮し、水で洗浄し、ＦＣＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、２０：１）に掛けて、生成物を薄灰色の固体２−メトキシ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾニトリル３ｂ（５０ｍｇ、１０％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 8.20 (s, 1H), 8.15-8.14 (d, 1H), 7.47-7.45 (d, 1H), 7.36-7.34 (d, 1H), 7.20-7.17 (t, 1H), 6.88-6.87 (d, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.41 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ 173.0, 163.4, 162.7, 156.3, 147.2, 136.7, 132.7, 131.4, 128.3, 124.3, 116.2, 115.2, 114.3, 113.2, 107.9, 101.4, 56.9, 55.2; Ｃ１８Ｈ１３Ｎ５Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３８０．０８１２；実測値［Ｍ＋Ｈ］＋：３８０．０８２１。
【００９５】
【化１４】
2020528058.tif 000015
２−メトキシ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド（１１）：ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中の２−メトキシ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾニトリル３ｂ（１０ｍｇ、０．０２６４ｍｍｏｌ、１当量）およびＫ２ＣＯ３（８ｍｇ、２当量）の溶液にＨ２Ｏ２（水中８Ｍ、０．０２ｍＬ、５当量）を添加し、ＬＣ／ＭＳが変換の完了を示すまで、混合物を室温で１２時間撹拌した。反応の完了後に、混合物を濾過し、高真空下で濃縮し、残渣を水で洗浄し、高真空下で乾燥して、生成物２−メトキシ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド３ｃを薄黄色の固体（７ｍｇ、６０％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 8.32 (s, 1H), 8.03-8.01 (d, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.42-7.41 (d, 1H), 7.34-7.33 (d, 1H), 7.20 (t, 1H), 7.07-7.06 (d, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.94 (s, 3H); Ｃ１８Ｈ１５Ｎ５Ｏ４ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３９８．０９１８；実測値［Ｍ＋Ｈ］＋：３９８．０９２８。
【００９６】
【化１５】
2020528058.tif 000016
２−イソチオシアナト−４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール（４）：ＣＨ３ＣＮ（２００ｍＬ）中の４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１０．８ｇ、６０．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＣＤＩ（１１．２ｇ、６３．０ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。添加後に、混合物を２時間、室温で撹拌し、次いで、７０℃に加熱し、終夜、Ｎ２下で撹拌した。室温に冷却した後に、懸濁液を濾過した。濾過ケーキをＣＨ３ＣＮで洗浄し、収集し、真空下で乾燥して、所望の生成物２−イソチオシアナト−４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール４（１５．０ｇ、１００％）を得た。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋２２３
【００９７】
【化１６】
2020528058.tif 000017
５−メトキシピコリノヒドラジド（５ａ）：ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の５−メトキシピコリン酸（３００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（５１６ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）、ＢｏｃＮＨＮＨ２（３９７ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（９１２ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１６時間、室温で撹拌した。濃縮した後に、残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによって、ＰＥ／ＥＡ（１／１）で溶離して精製して、所望の生成物ｔｅｒｔ−ブチル２−（５−メトキシピコリノイル）ヒドラジンカルボキシレート（５００ｍｇ、９３％）を得た。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋２６８
【００９８】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の化合物ｔｅｒｔ−ブチル２−（５−メトキシピコリノイル）ヒドラジンカルボキシラート（５００ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌ／ジオキサン（２０ｍＬ）を滴下添加した。添加の後に、懸濁液を２時間、室温で撹拌した。混合物を濃縮乾固して、所望の生成物５−メトキシピコリノヒドラジド５ａ（４００ｍｇ）を得た。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋１６８
【００９９】
【化１７】
2020528058.tif 000018
４−（ベンジルオキシ）ベンゾヒドラジド（５ｂ）：アセトン（３００ｍＬ）中の４−ヒドロキシ安息香酸メチル（２５．０ｇ、０．１６４ｍｏｌ）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（４５．３ｇ、０．３２８ｍｏｌ）を少しずつ、続いて、ＢｎＢｒ（２８．１ｇ、０．１６４ｍｏｌ）を滴下添加した。添加の後に、得られた混合物を５時間還流させた。室温に冷却した後に、混合物をセライトのパッドを通して濾過し、濾過ケーキをＥＡで洗浄した。次いで、合わせた濾液を蒸発させた。次いで、残渣をＭＴＢＥ（３００ｍＬ）で希釈し、ブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固して、所望の生成物４−（ベンジルオキシ）安息香酸メチル（３８．５ｇ、収率９７％）を得た。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋２４３
【０１００】
ＭｅＯＨ（３００ｍＬ）中の４−（ベンジルオキシ）安息香酸メチル（４０．０ｇ、０．１６５ｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２Ｈ４．Ｈ２Ｏ（８０％、３００ｍＬ）を添加した。得られた溶液を終夜還流した。室温に冷却した後に、混合物を濃縮した。得られた固体をＥＡ（１０００ｍＬ）に溶解し、ブライン（２×３００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固して、所望の生成物４−（ベンジルオキシ）ベンゾヒドラジド５ｂ（３５．０ｇ、８７．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋２４３
【０１０１】
【化１８】
2020528058.tif 000019
２−ブロモ−４−クロロベンゾヒドラジド（５ｃ）：ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中の２−ブロモ−４−クロロ安息香酸メチル（Ｉｎ−２７、５．０ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２Ｈ４．Ｈ２Ｏ（８０％、５０ｍＬ）を添加した。得られた溶液を、ＴＬＣがＳＭの消費を示すまで６０℃で１時間加熱した。濃縮の後に、得られた固体をＥＡ（１００ｍＬ）に溶解し、ブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４脱水し、濃縮乾固して、所望の生成物２−ブロモ−４−クロロベンゾヒドラジド５ｃ（２．８ｇ、５６％）を得た。1H NMR (300 MHz，DMSO-d6): δ 9.58 (s, 1H), 7.80 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.52 (dd, J=8.1 Hz, J=2.1 Hz, 1H), 7.38 (d, J=8.1 Hz, 1H), 4.49 (s, 2H). ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋２５１；
【０１０２】
【化１９】
2020528058.tif 000020
Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−５−（５−メトキシピリジン−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（７ａ）：ＤＭＦ（５ｍＬ）中の５−メトキシピコリノヒドラジド５ａ（１５０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（３１０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）および２−イソチオシアナト−４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール４（１３３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を２時間、７０℃に加熱した。ＴＬＣは、所望の生成物Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−２−（５−メトキシピコリノイル）ヒドラジンカルボチオアミド６ａが形成したことを示した。室温に冷却した後に、ピリジン（１４２ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）およびＴｓＣｌ（１７２ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を２時間、７０℃に加熱した。反応溶液を濾過し、濾液を濃縮し、分取ＴＬＣによって精製して、化合物Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−５−（５−メトキシピリジン−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン７ａを得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.45 (s, 1H), 8.44-8.08 (d, 1H), 7.61-7.57 (dd, 1H), 7.45-7.42 (d, 1H), 7.26-7.20 (t, 1H), 7.10-7.07 (d, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.93 (s, 3H). Ｃ１６Ｈ１３Ｎ５Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３５６．０８０９、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３５６．０８０９。
【０１０３】
【化２０】
2020528058.tif 000021
５−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（７ｂ）：ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中の２−イソチオシアナト−４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール４（粗製物１５．０ｇ、６０．０ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（２１ｍＬ、１５．５ｇ、１２０．０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。懸濁液は均質かつ茶色になった。次いで、４−（ベンジルオキシ）ベンゾヒドラジド５ｂ（１５．３ｇ、６３．０ｍｍｏｌ）を少しずつ添加し、得られた溶液を２時間、７０℃に加熱した。ＬＣＭＳは、出発物質が完全に消費され、所望の生成物２−（４−（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボチオアミド６ｂが形成したことを示した。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋４３１；室温に冷却した後に、ピリジン（１４．２ｇ、１８０．０ｍｍｏｌ）およびＴｓＣｌ（１７．２ｇ、９０．０ｍｍｏｌ）を少しずつ添加し、溶液を２時間、７０℃に加熱した。上の溶液を真空下で濃縮した。残渣をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）に添加し、１０分間撹拌した。得られた懸濁液を濾過した。濾過ケーキをＭｅＯＨ、ＥＡおよびＴＢＭＥで順に洗浄した。濾過ケーキを収集し、乾燥して所望の生成物５−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン７ｂ（９．０ｇ、収率３５％）を得た。Ｃ２３Ｈ１８Ｎ４Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４３１．１１７０、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：。
【０１０４】
【化２１】
2020528058.tif 000022
５−（２−ブロモ−４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（７ｃ）：ＤＭＦ（４ｍＬ）中の２−ブロモ−４−クロロベンゾヒドラジド５ｃ（２００ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、２−イソチオシアナト−４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール４（１７８ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２０６ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を添加した。懸濁液は、直ちに均質になった。得られた溶液を２時間、７０℃に加熱した。ＬＣＭＳは、所望の生成物２−（２−ブロモ−４−クロロベンゾイル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボチオアミドが形成したことを示した。室温に冷却した後に、ピリジン（１９０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）およびＴｓＣｌ（２２９ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を２時間、７０℃に加熱した。反応溶液を濾過し、濾液をそのまま、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、生成物５−（２−ブロモ−４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン７ｃを得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.03-8.02 (d, 1H), 7.94-7.91(d, 1H), 7.70-7.66 (dd, 1H), 7.46-7.43 (d, 1H), 7.27-7.21 (t, 1H), 7.11-7.08 (d, 1H), 3.94 (s, 3H). Ｃ１６Ｈ１０ＢｒＣｌＮ４Ｏ２ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４３６．９４６６、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４３６．９４６９。
【０１０５】
【化２２】
2020528058.tif 000023
５−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−Ｎ−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（８ａ）：０℃に冷却したＤＣＭ（２００ｍＬ）中の５−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン７ｂ（８．０ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（４．８ｇ、３７．２ｍｍｏｌ）を滴下添加し、続いて、ＤＣＭ（３０ｍＬ）中のＳＥＭ−Ｃｌ（３．７ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）を滴下添加した。添加の後に、得られた溶液を２時間、０℃で撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をＥＡ（３００ｍＬ）に溶解し、ブライン（３×１００ｍＬ）で洗浄し、ＮＲｃＲｄ，−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃＲ２ＳＯ４、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、粗生成物５−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−Ｎ−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン８ａ（粗製物９．０ｇ、収率８６．５％）を得た。Ｃ２９Ｈ３２Ｎ４Ｏ４ＳＳｉでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］：５６１．１９８４での計算値、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：５６１。
【０１０６】
【化２３】
2020528058.tif 000024
５−（２−ブロモ−４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−Ｎ−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（８ｂ）：０℃で冷却したＤＣＭ（３０ｍＬ）中の５−（２−ブロモ−４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン７ｃ（１．０ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（４４２ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）を滴下添加し、続いて、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＳＥＭ−Ｃｌ（４１９ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を滴下添加した。添加後に、得られた溶液を２時間、０℃で撹拌した。ＴＬＣは、反応の完了を示す。濃縮後に、残渣をＥＡ（１００ｍＬ）に溶解し、ブライン（３×３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固して、粗生成物５−（２−ブロモ−４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−Ｎ−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン８ｂ（８００ｍｇ、収率６１％）を得た。Ｃ２２Ｈ２４ＢｒＣｌＮ４Ｏ３ＳＳｉでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：５６８．５６８０、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：５６９。
【０１０７】
【化２４】
2020528058.tif 000025
４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノール（９）：ＴＨＦ／ＭｅＯＨの混合溶液（１０００ｍＬ、Ｖ／Ｖ＝１／１）中の５−（４−（ベンジルオキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−Ｎ−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン８ａ（粗製物９．０ｇ、１６．１ｍｍｏｌ）の溶液に、湿潤Ｐｄ／Ｃ（５０ｇ）を添加した。混合物を脱気し、Ｈ２で複数回パージし、次いで、終夜、Ｈ２（バルーン）下で撹拌した。反応が完了した後に、混合物を、セライトのパッドを通して濾過し、濾過ケーキをＤＣＭ／ＭｅＯＨの混合溶液（１０００ｍＬ、Ｖ／Ｖ＝１／１）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮乾固して、所望の生成物４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノール９（粗製物４．２ｇ、収率５５．６％）を得た。Ｃ２２Ｈ２６Ｎ４Ｏ４ＳＳｉでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４７１．１５１４、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４７１。
【０１０８】
【化２５】
2020528058.tif 000026
メチル２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセテート（１１ａ）：ＣＨ３ＣＮ（１００ｍＬ）中の４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノール９（粗製物２．５ｇ、５．３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（３．５ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）を、続いて、２−ブロモ酢酸メチル（０．９８ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を滴下添加した。添加後に、得られた懸濁液を終夜、室温で撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をＥＡ（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）との間で分配した。有機層をブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固して、粗生成物メチル２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセテート１１ａ（粗製物２．８ｇ、収率９７％）を得た。Ｃ２５Ｈ３０Ｎ４Ｏ６ＳＳｉでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：５４３．１７２５、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：５４３。
【０１０９】
【化２６】
2020528058.tif 000027
メチル２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセテート（１２ａ）：ＤＣＭ（３０ｍＬ）中のメチル２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセテート１１ａ（粗製物２．８ｇ、５．２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌ／ジオキサン（３０ｍＬ）の溶液を滴下添加した。添加後に、得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。懸濁液を濾過した。濾過ケーキをＤＣＭで洗浄し、収集し、真空下で乾燥して、所望の生成物化合物メチル２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセテート１２ａ（１．２ｇ、５６％）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.89-7.86 (d, 2H), 7.44-7.41(d, 1H), 7.24-7.19 (t, 1H), 7.14-7.07 (m, 3H), 4.91 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.72 (s, 3H). Ｃ１９Ｈ１６Ｎ４Ｏ５ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４１３．０９１１、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４１３．０９２０。
【０１１０】
【化２７】
2020528058.tif 000028
５−（４−（２−アミノエトキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（１２ｂ）：ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノール９（粗製物２．５ｇ、５．３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（３．５ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）を、続いて、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモエチルカルバメート（１．４ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を添加した。添加後に、得られた混合物を終夜、室温で撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をＥＡ（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）との間で分配した。有機層をブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固して、粗生成物ｔｅｒｔ−ブチル（２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）エチル）カルバメート１１ｂを得た。
【０１１１】
次いで、粗製のｔｅｒｔ−ブチル（２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）エチル）カルバメート１１ｂをＤＣＭ／ＭｅＯＨの混合溶液（３０ｍＬ、Ｖ／Ｖ＝１０／１）に溶解し、ＨＣｌ／ジオキサン（３０ｍＬ）を滴下添加した。溶液を１時間、室温で撹拌した。懸濁液を濾過した。濾過ケーキを収集し、乾燥して、化合物５−（４−（２−アミノエトキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン１２ｂ（２ステップで１．１ｇ、５０％）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.94-7.91(d, 2H), 7.44-7.41 (d, 1H), 7.25-7.20 (t, 1H), 7.19-7.16 (d, 2H), 7.10-7.08 (d, 1H), 4.28-4.24 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.28-3.27 (m, 2H). Ｃ１８Ｈ１７Ｎ５Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３８４．１１２２、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３８４．１１３０。
【０１１２】
【化２８】
2020528058.tif 000029
２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトアミド（１２ｃ）：ＣＨ３ＣＮ（２０ｍＬ）中の化合物４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノール９（粗製物５００ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（６９１ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）を、続いて、２−ブロモアセトニトリル（１５３ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を滴下添加した。添加後に、得られた溶液を２時間、室温で撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をＥＡ（５０ｍＬ）と水（２０ｍＬ）との間で分配した。有機層をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固して、粗生成物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトニトリル１１ｃを得た。
【０１１３】
次いで、粗製の２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトニトリル１１ｃをＤＣＭ（１０ｍＬ）に入れ、ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ）を滴下添加した。得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。混合物を濃縮した。得られた残渣にＨ２Ｏ（１０ｍＬ）を添加し、ＮａＨＣＯ３でｐＨ約４まで塩基性にし、ＥＡ（２×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、濃縮し、分取ＴＬＣで精製して、所望の生成物化合物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトアミド１２ｃ（３０．１ｍｇ）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.90-7.87(d, 2H), 7.43-7.41 (d, 2H), 7.24-7.19 (t, 1H), 7.14-7.11 (d, 2H), 7.09-7.06 (d, 1H), 4.53 (s, 2H), 3.94 (s, 3H). Ｃ１８Ｈ１５Ｎ５Ｏ４ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３９８．０９１５、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３９８．０９２０。
【０１１４】
【化２９】
2020528058.tif 000030
２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトニトリル（１２ｄ）：ＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中の化合物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトアミド１２ｃ（粗製物３００ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＰＯＣｌ３（２３３ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を７０℃で終夜撹拌した。室温に冷却した後に、混合物を濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の生成物化合物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトニトリル１２ｄ（２２．４ｍｇ）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.97-7.94(d, 2H), 7.44-7.42 (d, 1H), 7.28-7.25 (d, 2H), 7.25-7.20 (t, 1H), 7.10-7.07 (d, 1H), 5.28 (s, 2H), 3.94 (s, 3H). Ｃ１８Ｈ１３Ｎ５Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３８０．０８０９、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３８０．０８０９。
【０１１５】
【化３０】
2020528058.tif 000031
２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）酢酸（１３）：ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３ｍＬ、Ｖ／Ｖ＝４／１）中の化合物メチル２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセテート１２ａ（粗製物１５０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＯＨ（４４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。溶液を２Ｎ  ＨＣｌでｐＨ約３まで酸性化し、分取ＴＬＣで精製して、６９．２ｍｇの純粋な生成物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）酢酸１３を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 13.07 (br, 2H), 7.89-7.86(d, 2H), 7.44-7.41 (d, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.19-7.07 (m, 3H), 4.79 (s, 2H), 3.95 (s, 3H). Ｃ１８Ｈ１４Ｎ４Ｏ５ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３９９．０７５５、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３９９．０７６３。
【０１１６】
【化３１】
2020528058.tif 000032
２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（１５ａ）：ＤＭＦ（３ｍＬ）中の化合物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）酢酸１３（粗製物１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１４６ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）、ジメチルアミン（０．５７ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１７３ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。濾過後に、濾液を分取ＴＬＣによって精製して、純粋な生成物化合物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド１５ａを得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.87-7.84(d, 2H), 7.44-7.41 (d, 1H), 7.25-7.19 (t, 1H), 7.10-7.07 (m, 3H), 4.93 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.01 (s, 3H), 2.86 (s, 3H). Ｃ２０Ｈ１９Ｎ５Ｏ４ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４２６．１２２８、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４２６．１２３８。
【０１１７】
【化３２】
2020528058.tif 000033
Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトアミド（１５ｂ）：ＤＭＦ（３ｍＬ）中の化合物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）酢酸１３（粗製物１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１４６ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）、Ｎ１，Ｎ１−ジメチルエタン−１，２−ジアミン（０．５７ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１７３ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。濾過後に、濾液を分取ＴＬＣによって精製して、純粋な生成物化合物Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトアミド１５ｂを得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.34 (brs, 1H), 8.41-8.37 (t, 1H), 7.93-7.90 (d, 2H), 7.44-7.41 (d, 1H), 7.25-7.20 (t, 1H),  7.18-7.16 (d, 2H), 7.10-7.07 (d, 1H), 4.62 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.51-3.47 (m, 2H), 3.20 (m, 2H).2.83 (s, 6H). Ｃ２２Ｈ２４Ｎ６Ｏ４ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４６９．１６５０、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４６９．１６５２。
【０１１８】
【化３３】
2020528058.tif 000034
Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトアミド（１５ｃ）：ＤＭＦ（３ｍＬ）中の化合物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）酢酸１３（粗製物１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１４６ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）、２−アミノエタノール（０．５７ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１７３ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。濾過後に、濾液を分取ＴＬＣによって精製して、純粋な生成物化合物Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）アセトアミド１５ｃを得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.09 (t, 1H), 7.91-7.88 (d, 2H), 7.44-7.41 (d, 1H), 7.25-7.19 (t, 1H), 7.16-7.13 (d, 2H), 7.10-7.07 (d, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.44-3.42 (t, 2H), 3.23-3.21 (q, 2H). Ｃ２０Ｈ１９Ｎ５Ｏ５ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４４２．１１７７、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４４２．１１８８。
【０１１９】
【化３４】
2020528058.tif 000035
２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）−１−モルホリノエタノン（１５ｄ）：ＤＭＦ（３ｍＬ）中の化合物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）酢酸１３（粗製物１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１４６ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）、モルホリン（０．５７ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１７３ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。濾過後に、濾液を分取ＴＬＣによって精製して、純粋な生成物化合物２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）−１−モルホリノエタノン１５ｄを得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.88-7.85 (d, 2H), 7.44-7.41 (d, 1H), 7.25-7.19 (t, 1H), 7.12-7.07 (m, 3H), 4.96 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.62-3.58 (m, 4H), 3.47(m, 4H). Ｃ２２Ｈ２１Ｎ５Ｏ５ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４６８．１３４３、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４６８．１３４５。
【０１２０】
【化３５】
2020528058.tif 000036
Ｎ−（２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）エチル）アセトアミド（１６ａ）：ＤＭＦ（３ｍＬ）中の化合物５−（４−（２−アミノエトキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン１２ｂ（粗製物１５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１５１ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）およびＡｃ２Ｏ（５１ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。濾過後に、濾液を分取ＴＬＣによって精製して、純粋な生成物化合物Ｎ−（２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）エチル）アセトアミド１６ａ（１２ｍｇ）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.96-7.93 (d, 2H), 7.32-7.22 (m, 2H), 7.14-7.11 (d, 2H), 7.08-7.05 (d, 1H), 4.15-4.14 (t, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.61 (t, 2H), 1.99 (s, 3H). Ｃ２０Ｈ１９Ｎ５Ｏ４ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４２６．１２２８、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４２６．１２３４。
【０１２１】
【化３６】
2020528058.tif 000037
Ｎ−（２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）エチル）メタンスルホンアミド（１６ｂ）：ＤＭＦ（３ｍＬ）中の化合物５−（４−（２−アミノエトキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン１２ｂ（粗製物１５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１５１ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）および（ＭｅＳＯ２）２Ｏ（８７ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。濾過後に、濾液を分取ＴＬＣによって精製して、純粋な化合物Ｎ−（２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）エチル）メタンスルホンアミド１６ｂ（２２ｍｇ）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 13.04 (brs, 1H), 7.90-7.87 (d, 2H), 7.44-7.41 (d, 1H), 7.33-7.30 (t, 1H), 7.25-7.19 (t, 1H), 7.15-7.12 (d, 2H), 7.09-7.07 (d, 1H), 4.15-4.11 (t, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.38-3.36 (m, 2H), 2.96 (s, 3H). Ｃ１９Ｈ１９Ｎ５Ｏ５Ｓ２でのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４６２．０８９８、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４６２．０９０２。
【０１２２】
【化３７】
2020528058.tif 000038
Ｎ−（２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）エチル）ベンゼンスルホンアミド（１６ｃ）：ＤＭＦ（３ｍＬ）中の化合物５−（４−（２−アミノエトキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン１２ｂ（粗製物１５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１５１ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）およびＰｈＳＯ２Ｃｌ（８８ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。濾過後に、濾液を分取ＴＬＣによって２回精製して、純粋な化合物Ｎ−（２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）エチル）ベンゼンスルホンアミド１６ｃ（２９ｍｇ）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 13.04 (brs, 1H), 8.00-7.97 (t, 1H), 7.87-7.85(m, 4H), 7.65-7.57 (m, 3H), 7.44-7.41 (d, 1H), 7.25-7.20 (t, 1H), 7.10-7.07 (d, 1H), 7.04-7.01 (d, 2H), 4.05-4.03 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.20-3.18 (m, 2H). Ｃ２４Ｈ２１Ｎ５Ｏ５Ｓ２でのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：５２４．１０５４、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：５２４．１０４８。
【０１２３】
【化３８】
2020528058.tif 000039
５−（４−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（１６ｄ）：ＭｅＯＨ（４ｍＬ）中の化合物５−（４−（２−アミノエトキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン１２ｂ（粗製物１５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡを添加して、ｐＨ約７に調整した。次いで、ＣＨ２Ｏ（０．５ｍＬ）、１滴のＡｃＯＨおよびＮａＢＨ３ＣＮ（１２１ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を順番に添加した。得られた溶液を終夜、室温で撹拌した。濾過後に、濾液を分取ＴＬＣによって精製して、純粋な化合物５−（４−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン１６ｄ（３１ｍｇ）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.02-7.99 (d, 2H), 7.32-7.21 (m, 4H), 7.08-7.06 (d, 1H), 4.48-4.46 (t, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.68-3.65 (t, 2H), 3.03 (s, 6H). Ｃ２０Ｈ２１Ｎ５Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４１２．１４３５、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４１２．１４３６。
【０１２４】
【化３９】
2020528058.tif 000040
Ｎ−（２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）エチル）ベンズアミド（１６ｅ）：ＤＭＦ（３ｍＬ）中の化合物５−（４−（２−アミノエトキシ）フェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン１２ｂ（粗製物１５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１５１ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）、ＰｈＣＯ２Ｈ（６１ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１９０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を１時間、室温で撹拌した。濾過後に、濾液を分取ＴＬＣによって精製して、化合物１２（３０ｍｇ、純度９３％）を得、これをさらに、分取ＴＬＣによって精製して、純粋な化合物Ｎ−（２−（４−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェノキシ）エチル）ベンズアミド１６ｅ（１６ｍｇ）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.72 (t, 1H), 7.89-7.86 (d, 4H), 7.53-7.41 (m, 4H), 7.24-7.14 (m, 3H), 7.09-7.06 (d, 1H), 4.24-4.21 (t, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.68-3.67 (m, 2H). Ｃ２５Ｈ２１Ｎ５Ｏ４ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４８８．１３８４、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４８８．１３９４。
【０１２５】
【化４０】
2020528058.tif 000041
４−クロロ−３−（メトキシカルボニル）安息香酸（１７ａ）の合成：ＭｅＯＨ（６０ｍＬ）中の２−クロロ−５−メチル安息香酸（５ｇ、２９．３１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に濃Ｈ２ＳＯ４（１ｍＬ）を添加し、混合物を２０時間還流した。次いで、室温に冷却し、濃縮してＭｅＯＨの大部分を除去し、残渣を水で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮し、ＦＣＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１０：１）によって精製して、生成物メチル２−クロロ−５−メチルベンゾエートを灰色の固体として得た。ＣＣｌ４（６０ｍＬ）中の、上で得られたメチル２−クロロ−５−メチルベンゾエートの溶液にＮＢＳ（１３ｇ、２．５当量）および過酸化ベンゾイル（５ｍｏｌ％、０．４ｇ）を添加し、混合物を還流状態で４８時間撹拌し、次いで、室温に冷却し、濾過し、濾液を収集し、濃縮した。粗生成物をＥｔ２Ｏで希釈し、再び濾過し、濾液を収集し、濃縮し、これを精製せずに、次のステップのために使用した。
【０１２６】
アセトン（５０ｍＬ）中の粗生成物の溶液に、ＡｇＮＯ３（１１ｇ、２．１当量、水中６ｍＬ）を添加し、混合物を５０℃で２時間撹拌した。次いで、濾過し、濾液を収集し、濃縮して、粗生成物メチル２−クロロ−５−ホルミルベンゾエートを得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 10.04 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.16-8.15 (d, 1H), 7.62-7.60 (d, 1H), 4.00 (s, 3H).
【０１２７】
ＴＨＦ／ｔＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ／６０ｍＬ／１６ｍＬ）中のメチル２−クロロ−５−ホルミルベンゾエート（２ｇ、１０．０７ｍｍｏｌ、１当量）、ＮａＨ２ＰＯ４（１．１当量、１．４ｇ）、２−メチル−２−ブテン（１Ｍ、ＴＨＦ中、５．６ｍＬ）の溶液に、ＮａＣｌＯ２（４．５ｇ、５当量）を室温でゆっくり添加し、混合物をさらに３時間撹拌した。次いで、ＨＣｌ（１Ｍ）をｐＨ約３まで添加し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を濃縮して、生成物４−クロロ−３−（メトキシカルボニル）安息香酸１７ａを白色の固体として得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 8.59 (s, 1H), 8.16-8.15 (d, 1H), 7.62-7.60 (d, 1H), 3.99 (s, 3H); Ｃ９Ｈ７Ｏ４ＣｌでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：２１５．０１０６；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値２１５．０１０４。
【０１２８】
【化４１】
2020528058.tif 000042
４−クロロ−５−シアノ−２−メチル安息香酸（１７ｂ）の合成：濃Ｈ２ＳＯ４（３０ｍＬ）中の４−クロロ−２−メチル安息香酸（２ｇ、１１．７２ｍｍｏｌ、１当量）の混合物に、ＮＩＳ（２．９ｇ、１．１当量）を０℃でＡｒ下で添加し、混合物を氷浴温度で４時間撹拌した。濾過後に、ケーキを水で洗浄し、高真空下で乾燥して、粗生成物４−クロロ−５−ヨード−２−メチル安息香酸を淡灰色の固体として得た。得られた粗生成物４−クロロ−５−ヨード−２−メチル安息香酸をＭｅＯＨ（６０ｍＬ）に溶解し、次いで、濃Ｈ２ＳＯ４（１ｍＬ）を添加し、混合物を１２時間還流した。次いで、室温に冷却し、濃縮して、大部分のＭｅＯＨを除去し、残渣を水で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮し、ＦＣＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１０：１）によって精製して、生成物メチル４−クロロ−５−ヨード−２−メチルベンゾエートを灰色の固体３．３ｇ（２ステップで９２％）として得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 8.39 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 2.54 (s, 3H). Ｃ９Ｈ８ＣｌＩＯ２でのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３１０．９３３１；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値３１０．９３２８。
【０１２９】
ＤＭＦ（４ｍＬ）中のメチル４−クロロ−５−ヨード−２−メチルベンゾエート（２．２ｇ、７．０５８ｍｍｏｌ、１当量）およびＣｕＣＮ（０．７ｇ、１．１当量）の懸濁液を１１０℃で、２０時間、Ａｒ下で撹拌した。室温に冷却し、濾過した後に、濾液を高真空下で濃縮し、残渣をＦＣＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１０：１）によって精製して、生成物メチル４−クロロ−５−シアノ−２−メチルベンゾエートを白色の固体１．４８ｇ（１００％）として得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 8.26 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.68 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ 164.8, 146.9, 139.3, 135.8, 132.6, 128.3, 114.8, 110.5, 52.1, 21.6. Ｃ１０Ｈ８ＣｌＮＯ２でのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：２１０．０３１７；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：２１０．０３２０。
【０１３０】
ＭｅＯＨ／ＴＨＦ（１：１、５０ｍＬ）中のメチル４−クロロ−５−シアノ−２−メチルベンゾエート（１．０ｇ、４．７７ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＬｉＯＨ（２Ｍ、Ｈ２Ｏ中、３当量、７．２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１２時間撹拌した。反応の完了後に、混合物を濃縮して、揮発性溶媒を除去した。残渣をＨＣｌ（１Ｍ、ｐＨ＝１）によって酸性化し、沈澱物を収集し、Ｈ２Ｏで洗浄し、高真空下で乾燥して、生成物４−クロロ−５−シアノ−２−メチル安息香酸１７ｂを白色の固体として得た。生成物を高真空下で乾燥し、さらに精製せずに次のステップのために使用した。
【０１３１】
【化４２】
2020528058.tif 000043
４−クロロ−３−シアノ−２−メチル安息香酸（１７ｃ）の合成：Ｈ２Ｏ（３００ｍＬ）中の３−ヒドロキシ−２−メチル安息香酸（２５ｇ、０．１６４４ｍｏｌ、１当量）の懸濁液に、ＮａＯＨ（３Ｍ、６２ｍＬ、１．１当量）を添加し、溶液を氷浴中で０℃に冷却し、次いで、ＮａＣｌＯの水溶液（漂白剤、１０〜１５％、１．５当量、１８５ｍＬ）を、追加の漏斗を介して１時間で０℃で添加した。添加が完了したら、混合物をさらに１０分間撹拌し、次いで、ＨＣｌ（３Ｍ、１００ｍＬ、１．８当量）を一度に添加し、形成した懸濁液を１時間撹拌し、次いで、濾過した。ケーキを水で洗浄して、生成物を淡ピンク色の固体として得、これをさらに、Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン（３：１）から再結晶化させて、生成物４−クロロ−３−ヒドロキシ−２−メチル安息香酸を淡色の固体として得た。Ｃ８Ｈ７Ｏ３ＣｌでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：１８７．０１５７；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：１８７．０１５９。
【０１３２】
ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の４−クロロ−３−ヒドロキシ−２−メチル安息香酸（１０ｇ、５３．７６ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に濃Ｈ２ＳＯ４（２ｍＬ）を添加し、混合物を１０時間還流した。次いで、室温に冷却し、濃縮して大部分のＭｅＯＨを除去し、残渣を水で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮し、ＦＣＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１０：１）によって精製して、生成物メチル４−クロロ−３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾエートを灰色の固体として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 12.94 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 7.28-7.24 (q, 2H), 2.39 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ 168.5, 151.2, 131.3, 128.2, 126.4, 124.0, 121.7, 13.7; Ｃ９Ｈ９Ｏ３ＣｌでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：２０１．０３１３；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：２０１．０３１９。
【０１３３】
ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中のメチル４−クロロ−３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾエート（４．６４ｇ、２３．１９７ｍｍｏｌ、１当量）およびトリエチルアミン（８．１ｍＬ、２．５当量）の溶液を氷浴で０℃に冷却し、次いで、Ｔｆ２Ｏ（９ｇ、１．３当量）をゆっくり添加し、混合物を室温までゆっくり加温し、３時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、ＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１０：１）によって精製して、生成物メチル４−クロロ−２−メチル−３−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）ベンゾエートを白色の固体（５．４ｇ、７１％）として得た。Ｃ１０Ｈ８ＣｌＦ３Ｏ５ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３３２．９８０６；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３３２．９８０７。
【０１３４】
無水ＤＭＦ（５０ｍＬ）中のメチル４−クロロ−２−メチル−３−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）ベンゾエート（５．４ｇ、１６．２７ｍｍｏｌ、１当量）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１ｇ、５ｍｏｌ％）およびＺｎ（ＣＮ）２（１．３ｇ、０．６５当量）の混合物を１００℃でＡｒ下で１２時間撹拌した。次いで、室温に冷却し、溶媒を高真空下で除去した。残渣をＥｔ２Ｏで抽出し、有機層を分離し、濃縮し、ＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１５：１）によって精製して、所望の生成物メチル４−クロロ−３−シアノ−２−メチルベンゾエート（１．３ｇ、４０％）を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 8.05-8.04 (d, 1H), 7.44-7.43 (d, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.86 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ 165.4, 145.7, 140.4, 134.6, 128.9, 126.7, 115.6, 114.3, 52.1, 19.5. Ｃ１０Ｈ８ＣｌＮＯ２でのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：２１０．０３１７；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：２１０．０３１６。
【０１３５】
ＭｅＯＨ／ＴＨＦ（１：１、５０ｍＬ）中のメチル４−クロロ−３−シアノ−２−メチルベンゾエート（１．３ｇ、６．２２ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＬｉＯＨ（２Ｍ、Ｈ２Ｏ中、１５ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１２時間撹拌した。反応の完了後に、混合物を濃縮して、揮発性溶媒を除去した。残渣をＨＣｌ（１Ｍ、ｐＨ＝１）によって酸性化し、沈澱物を収集し、Ｈ２Ｏで洗浄し、高真空下で乾燥して、生成物４−クロロ−３−シアノ−２−メチル安息香酸１７ｃを白色の固体として得た。Ｃ９Ｈ６ＣｌＮＯ２でのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：１９６．０１６０；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：１９６．０１６５。
【０１３６】
【化４３】
2020528058.tif 000044
メチル２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾエート（１８ａ）：ＰＯＣｌ３（１０ｍＬ）中の４−クロロ−３−（メトキシカルボニル）安息香酸１７ａ（０．５ｇ、２．３３ｍｍｏｌ、１当量）およびＮ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド２（０．５６ｇ、１当量）の混合物を９０℃でＡｒ下で１２時間撹拌した。室温に冷却した後に、反応混合物を氷に注ぎ、混合物を室温までゆっくり加温し、濾過した。ケーキを収集し、水で洗浄し、ＦＣＣ（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、２：１）に掛けて、生成物を黄色の固体として得、これをさらに、ＭｅＯＨから再結晶化させて、薄ピンク色の固体メチル２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾエート１８ａ（０．１ｇ、１０．３％）を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 8.55 (s, 1H), 8.11-8.09 (d, 1H), 7.62-7.60 (d, 1H), 7.26-7.23 (t, 1H), 7.19-7.17 (d, 1H), 6.93-6.91 (d, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 3.51 (s, 1H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ165.2, 164.6, 158.1, 145.6, 136.0, 131.5, 130.1, 129.1, 128.7, 124.5, 122.7, 113.6, 107.7, 55.4, 52.2. Ｃ１８Ｈ１３Ｎ４Ｏ４ＣｌＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４１７．０４１９；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４１７．０４１８。
【０１３７】
【化４４】
2020528058.tif 000045
２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−４−メチルベンゾニトリル（１８ｂ）：ＰＯＣｌ３（１０ｍＬ）中の４−クロロ−５−シアノ−２−メチル安息香酸１７ｂ（０．３ｇ、１．５４ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を９０℃でＡｒ下で１時間撹拌し、次いで、室温に冷却し、Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド２（０．３８ｇ、１当量）を添加した。混合物を１２時間、９０℃でＡｒ下で撹拌した。室温に冷却した後に、反応混合物を真空下で濃縮した。残渣をＥｔ３Ｎで処理し、次いで、濃縮し、水で洗浄し、ＦＣＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、２０：１）に掛けて、生成物を薄灰色の固体２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−４−メチルベンゾニトリル１８ｂ（０．１３ｇ、２１％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-CDCl3): δ 8.28 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.26-7.25 (t, 1H), 7.20-7.19 (d, 1H), 6.94-6.93 (d, 1H), 4.01 (s, 3H), 2.85 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, d6-CDCl3): δ 157.7, 144.7, 136.4, 133.3, 132.9, 123.9, 123.4, 115.4, 114.5, 110.1, 108.9, 56.0, 21.7; Ｃ１８Ｈ１２ＣｌＮ５Ｏ２ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３９８．０４７３；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３９８．０４７９。
【０１３８】
【化４５】
2020528058.tif 000046
６−クロロ−３−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−２−メチルベンゾニトリル（１８ｃ）：ＰＯＣｌ３（１０ｍＬ）中の４−クロロ−３−シアノ−２−メチル安息香酸１７ｃ（０．３ｇ、１．５４ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を９０℃でＡｒ下で１時間撹拌し、次いで、室温に冷却し、Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド２（０．３８ｇ、１当量）を添加した。混合物を１２時間、９０℃でＡｒ下で撹拌した。室温に冷却した後に、反応混合物を高真空下で濃縮した。残渣をＥｔ３Ｎで処理し、次いで、濃縮し、水で洗浄し、ＦＣＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、２０：１）に掛けて、生成物を薄灰色の固体６−クロロ−３−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−２−メチルベンゾニトリル１８ｃ（０．１５ｇ、２４％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 8.10-8.08 (d, 1H), 7.70-7.68 (d, 1H), 7.36-7.35 (d, 1H), 7.21-7.18 (t, 1H), 7.04-7.03 (d, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.87 (s, 3H);13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ 157.9, 142.9, 137.5, 133.1, 127.8, 123.8, 123.4, 114.9, 114.7, 114.4, 108.7, 55.9, 20.2; Ｃ１８Ｈ１２ＣｌＮ５Ｏ２ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３９８．０４７３；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３９８．０４７８。
【０１３９】
【化４６】
2020528058.tif 000047
２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾニトリル（１８ｄ）：ＰＯＣｌ３（１０ｍＬ）中の４−クロロ−３−シアノ安息香酸１７ｄ（０．３ｇ、１．６５７ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を９０℃でＡｒ下で1時間撹拌し、次いで、室温に冷却し、Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド２（０．４ｇ、１当量）を添加した。混合物を１２時間、９０℃でＡｒ下で撹拌した。室温に冷却した後に、反応混合物を高真空下で濃縮した。残渣をＥｔ３Ｎで処理し、次いで、濃縮し、水で洗浄し、ＦＣＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、２０：１）に掛けて、生成物を薄灰色の固体２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾニトリル１８ｄ（０．１５ｇ、２４％）として得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.45 (s, 1H), 8.44-8.23 (dd, 1H), 7.96-7.93 (d, 1H), 7.46-7.43 (d, 1H), 7.27-7.21 (t, 1H), 7.12-7.09 (d, 1H), 3.95 (s, 3H). Ｃ１７Ｈ１０ＣｌＮ５Ｏ２ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３８４．０３１４、［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３８４．０３２０。
【０１４０】
【化４７】
2020528058.tif 000048
２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−４−メチルベンズアミド（１８ｅ）：ＤＭＳＯ（２ｍＬ）中の２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−４−メチルベンゾニトリル１８ｂ（４０ｍｇ、０．１０１ｍｍｏｌ、１当量）およびＫ２ＣＯ３（２８ｍｇ、２当量）の溶液にＨ２Ｏ２（水中８Ｍ、０．１ｍＬ、５当量）を添加し、混合物を、ＬＣ／ＭＳが変換の完了を示すまで室温で１２時間撹拌した。反応の完了後に、混合物を濾過し、高真空下で濃縮し、残渣を水で洗浄し、高真空下で乾燥して、生成物２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−４−メチルベンズアミド１８ｅを薄黄色の固体（２５ｍｇ、６０％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 8.01 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.24-7.22 (d, 1H), 6.90-6.87 (t, 1H), 6.76-6.75 (d, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.66 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ 167.5, 166.7, 155.6, 149.6, 141.9, 138.7, 134.6, 133.9, 132.3, 130.0, 127.0, 123.2, 119.6, 113.1, 107.0, 55.6, 21.3; Ｃ１８Ｈ１４ＣｌＮ５Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４１６．０５７９；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４１６．０５７４。
【０１４１】
【化４８】
2020528058.tif 000049
６−クロロ−３−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−２−メチルベンズアミド（１８ｆ）：ＤＭＳＯ（２ｍＬ）中の６−クロロ−３−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−２−メチルベンゾニトリル１８ｃ（４０ｍｇ、０．１０１ｍｍｏｌ、１当量）およびＫ２ＣＯ３（２８ｍｇ、２当量）の溶液にＨ２Ｏ２（水中８Ｍ、０．１ｍＬ、５当量）を添加し、混合物を、ＬＣ／ＭＳが変換の完了を示すまで室温で１２時間撹拌した。反応の完了後に、混合物を濾過し、高真空下で濃縮し、残渣を水で洗浄し、高真空下で乾燥して、生成物６−クロロ−３−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−２−メチルベンズアミド１８ｆを薄黄色の固体（３７ｍｇ、９０％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 8.07 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.76-7.75 (d, 1H), 7.47-7.46 (d, 1H), 7.23-7.22 (d, 1H), 6.88-6.86 (t, 1H), 6.75-6.74 (d, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.62 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ 167.9, 166.8, 155.8, 149.6, 141.9, 139.5, 134.1, 134.0, 129.8, 128.1, 126.9, 123.9, 119.5, 113.1, 107.1, 55.6, 18.4; Ｃ１８Ｈ１４ＣｌＮ５Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４１６．０５７９；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４１６．０５７８。
【０１４２】
【化４９】
2020528058.tif 000050
２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）安息香酸（１９）：ＭｅＯＨ中のメチル２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾエート１８ａ（４０ｍｇ、０．０９６１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＬｉＯＨ（２０ｍｇ、５当量）を添加し、混合物を室温で１２時間撹拌した。次いで、濃縮して大部分の溶媒を除去し、ＴＦＡ（６０ｍｇ、５当量）を添加し、次いで、混合物を濃縮乾固し、ＭｅＯＨで希釈し、沈殿物を収集し、高真空下で乾燥して、生成物２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）安息香酸１９を白色の固体（２９ｍｇ、７５％）として得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 13.50 (br. 1H), 8.27 (s, 1H), 8.02-8.01 (d, 1H), 7.73-7.72 (d, 1H), 7.41-7.40 (d, 1H), 7.22-7.19 (t, 1H), 6.07-6.06 (d, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 3.16 (s, 1H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ 165.7, 165.2, 158.2, 146.0, 134.1, 132.1, 131.9, 129.1, 127.7, 126.9, 126.6, 123.8, 123.2, 114.5, 108.9, 55.9; Ｃ１８Ｈ１３Ｎ４Ｏ４ＣｌＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４０３．０２６３；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４０３．０２６５。
【０１４３】
【化５０】
2020528058.tif 000051
２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−Ｎ−メチルベンズアミド（２０ａ）：メタノール（２ｍｌ）中のメチル２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾエート１８ａ（２０ｍｇ、０．０４８１ｍｍｏｌ、１当量）およびメチルアミン（０．２ｍＬ、水中４０％、＞２０当量）の溶液を２０時間、５０℃で撹拌し、反応の完了後に、混合物を濃縮し、ＦＣＣ（ＣＨ２Ｃｌ２中５〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、生成物２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−Ｎ−メチルベンズアミド２０ａをオフホワイト色の固体（１６ｍｇ、収率７６％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 8.57-8.56 (d, 1H), 7.98-7.96 (dd, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.71-7.70 (d, 1H), 7.45-7.43 (d, 1H), 7.24-7.22 (t, 1H), 7.10-7.08 (d, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.80 (d, 3H); 13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ 165.7, 158.4, 137.7, 132.4, 130.8, 127.5, 125.6, 123.8, 123.1, 114.6, 108.9, 56.0, 26.0; Ｃ１８Ｈ１４Ｎ５Ｏ３ＳＣｌでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４１６．０５７９；［Ｍ＋Ｈ］＋実測値：４１６．０５８３。
【０１４４】
【化５１】
2020528058.tif 000052
２−クロロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド（２０ｂ）：メタノール（２ｍｌ）中のメチル２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾエート１８ａ（２０ｍｇ、０．０４８１ｍｍｏｌ、１当量）およびエタノールアミン（０．１ｇ、２０当量）の溶液を２０時間、５０℃で撹拌し、反応の完了後に、混合物を濃縮し、ＦＣＣ（ＣＨ２Ｃｌ２中１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、生成物２−クロロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド２０ｂを黄色の固体（２１ｍｇ、収率１００％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 8.62 (s, 1H), 7.87(s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.63-7.62 (d, 1H), 7.25-7.24 (d, 1H), 6.92-6.90 (t, 1H), 6.78-6.77 (d, 1H), 3.54 (m, 2H), 3.32 (m, 2H); 13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ 167.2, 166.8, 165.7, 155.4, 149.5, 141.0, 137.6, 133.6, 130.8, 130.5, 126.5, 124.8, 124.2, 119.9, 113.1, 106.9, 59.6, 55.5, 42.0; Ｃ１９Ｈ１６Ｎ５Ｏ４ＳＣｌでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４４６．０６８５；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４４６．０６８２。
【０１４５】
【化５２】
2020528058.tif 000053
２−クロロ−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド（２０ｃ）：メタノール（２ｍｌ）中のメチル２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾエート１８ａ（２０ｍｇ、０．０４８１ｍｍｏｌ、１当量）およびアミン２８８（０．１ｍＬｇ、２０当量）の溶液を２０時間、５０℃で撹拌し、反応の完了後に、混合物を濃縮し、ＦＣＣ（ＣＨ２Ｃｌ２中５％〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、生成物２−クロロ−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド２０ｃを黄色の固体（２２ｍｇ、収率９２％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 8.72 (s, 1H), 7.94-7.93 (d, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.67-7.66 (d, 1H), 7.38-7.37 (d, 1H), 7.14-7.12 (t, 1H), 7.00-6.99 (d, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.46 (m, 2H), 2.70 (m, 2H), 2.42 (s, 6H); 13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ 165.8, 165.6, 157.5, 147.0, 137.5, 131.9, 130.8, 127.3, 125.4, 123.4, 122.7, 114.2, 108.4, 57.3, 55.9, 44.5, 36.6; Ｃ２１Ｈ２１Ｎ６Ｏ３ＳＣｌでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４７３．１１５７；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４７３．１１６６。
【０１４６】
【化５３】
2020528058.tif 000054
２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド（２０ｄ）：ＤＭＳＯ（１０ｍｌ）中のメチル２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾエート１８ａ（０．２ｇ、０．４８１ｍｍｏｌ、１当量）および水酸化アンモニウム（５ｍＬ、＞２０当量）の溶液を６時間、室温で撹拌し、反応の完了後に、混合物を水で希釈し、沈澱物を収集し、水で洗浄して、生成物２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド２０ｄを淡色の固体（０．１７７ｇ、収率９２％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 8.06(s, 1H), 7.89-7.88 (d, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.64-7.62 (d, 1H), 7.27-7.25 (d, 1H), 6.96-6.90 (t, 1H), 6.81-6.79 (d, 1H), 3.87 (s, 3H); Ｃ１７Ｈ１２ＣｌＮ５Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４０２．０４１９；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４０２．０４２５。
【０１４７】
【化５４】
2020528058.tif 000055
２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド（２０ｅ）：ＤＭＦ（１ｍＬ）中の２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）安息香酸１９（２０ｍｇ、０．０４９７ｍｍｏｌ、１当量）の溶液にＨＢＴＵ（３０ｍｇ、１．５当量）、ＤＩＰＥＡ（０．０４ｍＬ、３当量）およびジメチルアミン（ＴＨＦ中２Ｍ、０．０４ｍＬ、１．５当量）を室温で添加し、混合物を４時間、室温で撹拌した。混合物を濃縮し、ＦＣＣ（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２、２：９８）によって精製して、固体生成物２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド２０ｅ（１７ｍｇ、８０％）を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 8.03 (s, 1H), 7.98 (m, 2H), 7.54-7.53 (d, 1H), 7.23-7.21 (t, 1H), 7.17-7.16 (d, 1H), 6.90-6.89 (d, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.92 (s, 3H), 2.81 (s ,3H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ166.9, 165.1, 162.1, 158.3, 145.6, 136.7, 132.6, 129.9, 127.0, 124.9, 124.4, 123.3, 113.6, 107.7, 55.4, 37.7, 34.3; Ｃ１９Ｈ１６Ｎ５Ｏ３ＳＣｌでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４３０．０７３５；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４３０．０７４５。
【０１４８】
【化５５】
2020528058.tif 000056
（２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル）（モルホリノ）メタノン（２０ｆ）：ＤＭＦ（１ｍＬ）中の２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）安息香酸６（２０ｍｇ、０．０４９７ｍｍｏｌ、１当量）の溶液にＨＢＴＵ（３０ｍｇ、１．５当量）、ＤＩＰＥＡ（０．０４ｍＬ、３当量）およびモルホリン（７ｍｇ、１．５当量）を室温で添加し、混合物を４時間、室温で撹拌した。混合物を濃縮し、ＦＣＣ（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２、２：９８）によって精製して、固体生成物（２−クロロ−５−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）フェニル）（モルホリノ）メタノン２０ｆ（１５ｍｇ、６５％）を得た。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): δ 8.03 (s, 1H), 8.01-7.99 (d, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.56-7.55 (d, 1H), 7.24-7.22 (t, 1H), 7.18-7.17 (d, 1H), 6.91-6.90 (d, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.91-3.82 (m, 4H), 3.71-3.64 (m, 2H), 3.34-3.29 (m, 2H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ 165.4, 165.2, 162.1, 145.6, 135.7, 132.5, 130.1, 128.5, 127.3, 125.8, 124.9, 124.5, 123.4, 113.6, 107.7, 66.3, 55.4, 46.7, 41.7; Ｃ１９Ｈ１６Ｎ５Ｏ３ＳＣｌでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４３０．０８４１；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：４３０．０８４５。
【０１４９】
【化５６】
2020528058.tif 000057
４−メトキシチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−アミン（２１）：約２０℃で冷却したＡｃＯＨ（１００ｍＬ）中の２−メトキシピリジン−３−アミン（１０．０ｇ、８０．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＳＣＮ（１３．１ｇ、１６１ｍｍｏｌ）を少しずつ添加し、続いて、ＡｃＯＨ（２０ｍＬ）中のＢｒ２（４．１ｍＬ、８０．６ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加した。添加後に、懸濁液を４時間、室温で撹拌した。次いで、反応混合物を氷水（２００ｍＬ）に注ぎ入れ、Ｎａ２ＣＯ３でｐＨ＝９まで塩基性にした。次いで、得られた混合物をＥＡ（３×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和Ｎａ２ＳＯ３水溶液（１００ｍＬ）、ブライン（２×２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮した。粗生成物をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによって、ＰＥ／ＥＡ（１／２）で溶離して精製して、所望の生成物４−メトキシチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−アミン２１（６．２ｇ、４２％）を得た。ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋１８２。1H NMR (300 MHz，DMSO-d6): δ 7.09 (d, J=7.8 Hz, 1H), 6.93 (d, J=7.8 Hz, 1H), 5.53 (s, 2H), 3.90 (s, 3H). Ｃ７Ｈ７Ｎ３ＯＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：１８２．０３８０；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値。
【０１５０】
【化５７】
2020528058.tif 000058
４−クロロベンゾヒドラジド（２２）：ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中の４−クロロ安息香酸メチル（５．０ｇ、２９．３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２Ｈ４．Ｈ２Ｏ（８０％、５０ｍＬ）を添加した。得られた溶液を１時間、６０℃で加熱した。濃縮後に、得られた固体をＥＡ（１５０ｍＬ）に溶解し、ブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固して、所望の生成物４−クロロベンゾヒドラジド２２（３．２ｇ、６４％）を得た。1H NMR (300 MHz，DMSO-d6): δ 9.83 (s, 1H),7.85-7.81 (dd, 2h), 7.54-7.51 (dd, 2H), 4.50 (s, 2H). Ｃ７Ｈ７ＣｌＮ２ＯでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値；実測値［Ｍ＋Ｈ］＋：１７１。
【０１５１】
【化５８】
2020528058.tif 000059
５−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（２４）：ＣＨ３ＣＮ（３ｍＬ）中の４−メトキシチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−アミン２１（１００ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の溶液にＴＣＤＩ（１０７ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を添加した。添加後に、混合物を２時間、室温で撹拌し、次いで、７０℃に加熱し、１６時間、Ｎ２下で撹拌した。室温に冷却した後に、溶液を濃縮し、残渣をＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解した。上の溶液に、４−クロロベンゾヒドラジド２２（１０２ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１５５ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を２時間、７０℃に加熱した。ＴＬＣは、反応が十分に進行したことを示した。室温に冷却した後に、ピリジン（１３０ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）およびＴｓＣｌ（１５７ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を２時間、７０℃に加熱した。室温に冷却した後に、反応溶液を濾過し、濾液を濃縮し、分取ＴＬＣによって精製して、化合物５−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン２４を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 10.49 (brs, 1H), 8.52-8.49 (d, 1H), 7.92-7.89 (d, 2H), 7.69-7.66 (d, 2H), 7.43-7.40 (d, 1H), 4.03 (s, 3H). Ｃ１５Ｈ１０ＣｌＮ５Ｏ２ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３６０．０３１４；実測値［Ｍ＋Ｈ］＋：３６０．０３２０。
【０１５２】
【化５９】
2020528058.tif 000060
２−（（５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）アミノ）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−４−オール（２５）：−５０℃で冷却されたＤＣＭ（２０ｍＬ）中の化合物５−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン２４（２００ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＭ中のＢＢｒ３の溶液（２．２ｍＬ、１．０Ｍ／ＤＣＭ、２．２ｍｍｏｌ）を滴下添加した。添加の後に、得られた溶液を室温に加温し、１６時間撹拌した。反応物を０℃に冷却し、Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）でクエンチした。得られた混合物を濃縮し、分取ＴＬＣによって精製して、化合物２−（（５−（４−クロロフェニル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）アミノ）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−４−オール２５を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.26 (d, 1H), 7.92-7.89 (d, 2H), 7.69-7.66 (d, 2H), 7.07 (d, 1H). Ｃ１４Ｈ８ＣｌＮ５Ｏ２ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３４６．０１５７；実測値［Ｍ＋Ｈ］＋：３４６．０１６３。
【０１５３】
【化６０】
2020528058.tif 000061
５−クロロ−２−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾニトリル（２６）：ＮＭＰ（３ｍＬ）中の５−（２−ブロモ−４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−Ｎ−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン８ｂ（１４０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣｕＣＮ（４５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を添加した。添加の後に、得られた混合物を２時間、１２０℃で、Ｎ２下で撹拌した。ＬＣＭＳは、所望のＭＳを示す。反応混合物を室温に冷却し、水で希釈し、濾過し、暗色の固体をＨ２Ｏ、ＭｅＯＨ、ＤＭＳＯで洗浄した。固体をさらに、分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物５−クロロ−２−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾニトリル２６を得た。Ｃ１７Ｈ１０ＣｌＮ５Ｏ２ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３８４．０３１４；実測値［Ｍ＋Ｈ］＋：３８４．０３１９。
【０１５４】
【化６１】
2020528058.tif 000062
５−クロロ−２−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド（２７）：ＤＭＳＯ（５ｍＬ）中の化合物５−クロロ−２−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンゾニトリル２６（３００ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｈ２Ｏ２（１ｍＬ）を滴下添加し、続いて、ＮａＯＨ（９４ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）を添加した。添加の後に、得られた混合物を２時間、６０℃で撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ＤＭＳＯ（５ｍＬ）で希釈した。濾過後に、濾液をそのまま分取ＨＰＬＣによって精製して、化合物５−クロロ−２−（５−（（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）アミノ）−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド２７（１５ｍｇ）を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.46-8.44 (d, 1H), 7.95-7.94 (d, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.51-7.48 (d, 1H), 7.25-7.19 (t, 1H), 7.00-6.97 (d, 1H), 3.91 (s, 3H). Ｃ１７Ｈ１２ＣｌＮ５Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：４０２．０４１９；実測値［Ｍ＋Ｈ］＋：４０２．０４１９。
【０１５５】
【化６２】
2020528058.tif 000063
２−（４−クロロベンゾイル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド（３０ａ）：ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中の４−クロロ安息香酸２８ａ（１ｇ、６．４１ｍｍｏｌ、１当量）およびＤＭＦ（２滴）の溶液に、塩化オキシリル（ＣＯＣｌ）２（１ｇ、１．２当量）を室温で滴下添加したが、その際、水浴を用いて、内部温度を室温で維持し、添加の完了後に、混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、蒸発させて、いずれの揮発性物質も除去し、粗生成物４−クロロベンゾイルクロリド２９ａをいずれの精製もせずに、次のステップのために使用した。
【０１５６】
上で得られた４−クロロベンゾイルクロリド２９ａをジオキサン（５０ｍＬ）に溶解し、次いで、ヒドラジンＮ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド２６８（１．６ｇ、１当量）を添加し、続いて、ピリジン（１ｇ、２当量）を添加した。混合物全体を２０時間、５０℃で撹拌し、次いで、室温に冷却し、濃縮して、いずれの揮発性物質も除去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ×３）で洗浄して、生成物２−（４−クロロベンゾイル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド３０ａを白色の固体（２ｇ、２ステップで８５％）を得た。Ｃ１６Ｈ１３ＣｌＮ４Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３７７．０４６７；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３７７．０４８５。
【０１５７】
【化６３】
2020528058.tif 000064
Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−２−（４−メトキシベンゾイル）ヒドラジンカルボキサミド（３０ｂ）：ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中の４−メトキシ安息香酸２８ｂ（１ｇ、６．５８ｍｍｏｌ、１当量）およびＤＭＦ（２滴）の溶液に、塩化オキシリル（ＣＯＣｌ）２（１ｇ、１．２当量）を室温で滴下添加したが、その際、水浴を用いて、内部温度を室温で維持し、添加の完了後に、混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、蒸発させて、いずれの揮発性物質も除去し、粗生成物４−メトキシベンゾイルクロリド２９ｂをいずれの精製もせずに、次のステップのために使用した。
【０１５８】
上で得られた４−メトキシベンゾイルクロリド２９ｂをジオキサン（５０ｍＬ）に溶解し、次いで、ヒドラジンＮ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド２（１．６ｇ、１当量）を添加し、続いて、ピリジン（１ｇ、２当量）を添加した。混合物全体を２０時間、５０℃で撹拌し、次いで、室温に冷却し、濃縮して、いずれの揮発性物質も除去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ×３）で洗浄して、生成物Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−２−（４−メトキシベンゾイル）ヒドラジンカルボキサミド３０ｂを白色の固体（２ｇ、２ステップで８５％）として得た。Ｃ１７Ｈ１６Ｎ４Ｏ４ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３７３．０９６２；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３７３．０９６３。
【０１５９】
【化６４】
2020528058.tif 000065
５−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（３１ａ）：ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）中の２−（４−クロロベンゾイル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド３０ａ（２ｇ、５．３２ｍｍｏｌ、１当量）の懸濁液に、Ｔｆ２Ｏ（４．６ｇ、３当量）を室温でゆっくり添加した。次いで、混合物を２４時間、４０℃で撹拌した。室温に冷却した後に、反応物を濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ、２回）で洗浄した。ケーキを高真空下で２４時間乾燥して、生成物５−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン３１ａ（１．７１ｇ、９０％）を得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 7.94-7.93 (d, 2H), 7.63-7.62 (d, 2H), 7.43-7.41 (d, 1H), 7.23-7.20 (t, 1H), 7.08-7.07 (d, 1H), 3.94 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ 158.8, 135.6, 129.4, 127.4, 123.8, 123.1, 114.5, 108.9, 56.0; Ｃ１６Ｈ１１ＣｌＮ４Ｏ２ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３５９．０３６１；［Ｍ＋Ｈ］＋での実測値：３５９．０３６３。
【０１６０】
【化６５】
2020528058.tif 000066
Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−５−（４−メトキシフェニル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン（１４）：ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）中のＮ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−２−（４−メトキシベンゾイル）ヒドラジンカルボキサミド１３（２ｇ、７．３５ｍｍｏｌ、１当量）の懸濁液に、Ｔｆ２Ｏ（４．６ｇ、３当量）を室温でゆっくり添加した。次いで、混合物を２４時間、４０℃で撹拌した。室温に冷却した後に、反応物を濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ、２回）で洗浄した。ケーキを高真空下で２４時間乾燥して、生成物Ｎ−（４−メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−５−（４−メトキシフェニル）−１，３，４−オキサジアゾール−２−アミン１４を淡白色の固体（１．７ｇ、９０％）として得た。1H-NMR (600 MHz, d6-DMSO): δ 7.89-7.87 (d, 2H), 7.44-7.43 (d, 1H), 7.25-7.22 (t, 1H), 7.13-7.11 (d, 2H), 7.09-7.08 (d, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.84 (s, 3H) ; 13C NMR (125 MHz, d6-DMSO): δ 165.0, 163.7, 161.5, 159.4, 146.1, 141.9, 127.5, 127.3, 127.1, 126.6, 124.0, 116.3, 114.8, 114.6, 108.9, 56.0, 55.4; Ｃ１７Ｈ１４Ｎ４Ｏ３ＳでのＬＣＭＳ（ＴＯＦ−ＥＳＩ）、［Ｍ＋Ｈ］での計算値：３５５．０８５７；［Ｍ＋Ｈ］＋での計算値：３５５．０８６０。
【国際調査報告】
2020528058.tif 000069