(57)【要約】本発明は、眼表面の免疫関連疾患の治療に有用なリフィテグラスト製剤を提供する。本明細書において提供する製剤および方法は、前眼部組織の治療に特に有用である。本発明は、特に、対象において眼表面の免疫関連疾患を治療する方法を提供する。一部の実施形態では、本発明の方法は、１．７５ｍｇ用量のリフィテグラストについて眼の前眼部組織において約５１９０ｎｇ／ｍＬを超えるリフィテグラスト最大濃度（Ｃｍａｘ）を提供する製剤で、有効量のリフィテグラストまたは薬学的に許容されるその塩を対象の眼に局所投与することを含み得る。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象において眼表面の免疫関連疾患を治療する方法であって、１．７５ｍｇ用量のリフィテグラストについて眼の前眼部組織において約５１９０ｎｇ／ｍＬを超えるリフィテグラスト最大濃度（Ｃｍａｘ）を提供する製剤で、有効量のリフィテグラストまたは薬学的に許容されるその塩を前記対象の前記眼に局所投与することを含む方法。
【請求項２】
前記免疫関連の障害が、ドライアイ疾患（ＤＥＤ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記前眼部組織が、前記眼の（眼瞼／眼球）結膜、角膜および／または（前）強膜部組織を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
リフィテグラストが、約０．２５〜約１時間以内に前記眼の前記前眼部組織においてＣｍａｘを提供する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記リフィテグラストＣｍａｘが、前記眼の前記前眼部組織において約５１９０〜約１４２００ｎｇ／ｍＬの範囲内である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記製剤が、（眼瞼）結膜において約９６２０ｎｇ／ｍＬを超えるかまたはそれに等しいリフィテグラストＣｍａｘを提供する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記製剤が、角膜において約５１９０ｎｇ／ｍＬを超えるかまたはそれに等しいリフィテグラストＣｍａｘを提供する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記製剤が、（前）強膜において約５８７０ｎｇ／ｍＬを超えるかまたはそれに等しいリフィテグラストＣｍａｘを提供する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記製剤が、（眼球）結膜において約９３７０ｎｇ／ｍＬを超えるかまたはそれに等しいリフィテグラストＣｍａｘを提供する、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記製剤が、前記眼の後部組織において約８２６ｎｇ／ｍＬ未満またはそれに等しいリフィテグラストＣｍａｘを提供する、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記後部組織が、（後）強膜組織である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記Ｃｍａｘが、ウサギの眼において提供される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記製剤を１日２回投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記製剤を約１２時間間隔で投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
リフィテグラストまたは薬学的に許容されるその塩を含む眼科製剤であって、対象の眼に局所投与した後に、１．７５ｍｇ用量のリフィテグラストについて前記眼の前眼部組織において約５１９０ｎｇ／ｍＬを超えるリフィテグラスト最大濃度（Ｃｍａｘ）を提供する、眼科製剤。
【請求項１６】
前記薬学的に許容される塩が、ナトリウム塩である、請求項１５に記載の眼科製剤。
【請求項１７】
５重量％のリフィテグラストを含む、請求項１５に記載の眼科製剤。
【請求項１８】
チオ硫酸塩五水和物を含む、請求項１５に記載の眼科製剤。
【請求項１９】
エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含む、請求項１５に記載の眼科製剤。
【請求項２０】
塩化ナトリウム、無水二塩基性リン酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）およびチオ硫酸ナトリウム五水和物を含む、請求項１５に記載の眼科製剤。
【請求項２１】
６．９のｐＨを有する、請求項１５に記載の眼科製剤。
【請求項２２】
７．３５のｐＨを有する、請求項１５に記載の眼科製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１６年１２月１６日に出願された米国仮特許出願番号第６２／４３５，４４９号に基づく優先権を主張しており、この仮特許出願は、その全体が参考として本明細書によって援用される。
【０００２】
発明の分野
本発明は、眼表面の免疫関連疾患（例えばドライアイ疾患）の治療に有用なリフィテグラスト（ｌｉｆｉｔｅｇｒａｓｔ）製剤を提供する。本明細書において提供する製剤および方法は、前眼部組織、特に、結膜および角膜の治療に特に有用である。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
ドライアイ疾患（ＤＥＤ：ｄｒｙ  ｅｙｅ  ｄｉｓｅａｓｅ）は、表面組織損傷および涙生成障害を伴う眼障害であり、臨床診療において通常遭遇するものである（Ｏｃｕｌ．  Ｓｕｒｆ．、２００７年、５巻：９３〜１０７頁）。ＤＥＤの病因は複雑であるが、ＤＥＤの発病における顕著な因子として慢性炎症を支持する強固な証拠がある（Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  Ｖｉｓ．  Ｓｃｉ．、２０００年、４１巻：１３５６〜１３６３頁；Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  Ｖｉｓ．  Ｓｃｉ．、２０１２年、５３巻：５４４３〜５４５０頁；Ｏｃｕｌ．  Ｓｕｒｆ．、２００５年、３巻：Ｓ１６１〜Ｓ１６４頁）。一部の研究は、炎症メディエーターがＤＥＤを有する患者の眼表面組織において、特に角膜上皮および結膜上皮において見いだされ得ることを示している（Ｏｃｕｌ．  Ｓｕｒｆ．、２００５年、３巻：Ｓ１６１〜Ｓ１６４頁；Ａｒｃｈ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．、２００６年、１２４巻：７１０〜７１６頁；Ａｍ．  Ｊ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．、２００９年、１４７巻：１９８〜２０５頁）。
【０００４】
リフィテグラスト（Ｘｉｉｄｒａ（商標））は、ＤＥＤの徴候および症状の治療について米国食品医薬品局によって最近承認された新規小分子リンパ球機能関連抗原１（ＬＦＡ−１）アンタゴニストである（ＦＤＡ  ａｐｐｒｏｖｅｓ  ｎｅｗ  ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｄｒｙ  ｅｙｅ  ｄｉｓｅａｓｅ．  Ｓｉｌｖｅｒ  Ｓｐｒｉｎｇ、ＭＤ：  ＵＳ  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ；２０１６年７月１２日、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｎｅｗｓｅｖｅｎｔｓ／ｎｅｗｓｒｏｏｍ／ｐｒｅｓｓａｎｎｏｕｎｃｅｍｅｎｔｓ／ｕｃｍ５１０７２０．ｈｔｍ；２０１６年７月１２日にアクセス済み）。リフィテグラストの作用機構の現在の理解は、それが、インテグリンＬＦＡ−１と細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ−１）との間の相互作用をブロックし、それによって炎症細胞活性化および遊走を防止することによってＤＥＤと関連付けられるＴ細胞媒介炎症を減少するというものである（Ｐｆｌｕｇｆｅｌｄｅｒ，  Ｓ．  Ｃ．ら、Ｊ．  Ｏｃｕｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｈｅｒ．、ｄｏｉ：１０．１０８９／ｊｏｐ．２０１６．０１０５；Ｐｅｒｅｚ  Ｖ．Ｌ．ら、Ｏｃｕｌ．  Ｓｕｒｆ．、２０１６年、１４巻：２０７〜２１５頁）。リフィテグラストは、各眼に１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．；約１２時間間隔）適用される５．０％点眼液として投与される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｏｃｕｌ．  Ｓｕｒｆ．、２００７年、５巻：９３〜１０７頁
【非特許文献２】Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  Ｖｉｓ．  Ｓｃｉ．、２０００年、４１巻：１３５６〜１３６３頁
【非特許文献３】Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  Ｖｉｓ．  Ｓｃｉ．、２０１２年、５３巻：５４４３〜５４５０頁
【非特許文献４】Ｏｃｕｌ．  Ｓｕｒｆ．、２００５年、３巻：Ｓ１６１〜Ｓ１６４頁
【非特許文献５】Ｏｃｕｌ．  Ｓｕｒｆ．、２００５年、３巻：Ｓ１６１〜Ｓ１６４頁
【非特許文献６】Ａｒｃｈ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．、２００６年、１２４巻：７１０〜７１６頁
【非特許文献７】Ａｍ．  Ｊ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．、２００９年、１４７巻：１９８〜２０５頁
【非特許文献８】Ｐｆｌｕｇｆｅｌｄｅｒ，  Ｓ．  Ｃ．ら、Ｊ．  Ｏｃｕｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｈｅｒ．、ｄｏｉ：１０．１０８９／ｊｏｐ．２０１６．０１０５
【非特許文献９】Ｐｅｒｅｚ  Ｖ．Ｌ．ら、Ｏｃｕｌ．  Ｓｕｒｆ．、２０１６年、１４巻：２０７〜２１５頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
有利な薬物動態特性および眼組織分布を有する眼科製剤が、現在必要とされている。本明細書において説明する組成物および方法は、これらおよび他の目的を対象とする。
【０００７】
発明の要旨
本発明は、特に、対象において眼表面の免疫関連疾患を治療する方法を提供する。一部の実施形態では、本発明の方法は、１．７５ｍｇ用量のリフィテグラストについて眼の前眼部組織において約５１９０ｎｇ／ｍＬを超えるリフィテグラスト最大濃度（Ｃｍａｘ）を提供する製剤で、有効量のリフィテグラストまたは薬学的に許容されるその塩を対象の眼に局所投与することを含む。
【０００８】
本方法は、慢性炎症関連疾患、例えばドライアイ疾患（ＤＥＤ）を治療するために特に有用であり、有利に眼の（眼瞼／眼球）結膜、角膜および／または（前）強膜部組織を含む前部組織を標的にする。
【０００９】
製剤は、約０．２５〜約１時間以内に眼の前眼部組織においてリフィテグラストＣｍａｘを達成し得る。リフィテグラストＣｍａｘは、眼の前眼部組織において約５１９０〜約１４２００ｎｇ／ｍＬの範囲内であり得る（例えば（眼瞼）結膜において約９６２０ｎｇ／ｍＬ、角膜において約５１９０ｎｇ／ｍＬ、（前）強膜において約５８７０ｎｇ／ｍＬおよび（眼球）結膜において約９３７０ｎｇ／ｍＬを超えるかまたはそれに等しいリフィテグラストＣｍａｘ）。低レベルの（例えば約８２６ｎｇ／ｍＬ未満またはそれに等しい）リフィテグラストは、眼の後部組織において見られる。本方法は、製剤を１日２回、約１２時間間隔で投与することを含む。
【００１０】
本発明は、リフィテグラストまたは薬学的に許容されるその塩を含む眼科製剤であって、対象の眼に製剤を局所投与した後に、１．７５ｍｇ用量のリフィテグラストについて眼の前眼部組織において約５１９０ｎｇ／ｍＬを超えるリフィテグラスト最大濃度（Ｃｍａｘ）が提供される、眼科製剤をさらに提供する。
【００１１】
薬学的に許容される塩は、ナトリウム塩を含む。眼科製剤は、様々な濃度の（例えば５．０重量％の）リフィテグラストを含む場合があり、他の賦形剤、例えば塩化ナトリウム、無水二塩基性リン酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ：ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）およびチオ硫酸ナトリウム五水和物を含んでもよい。製剤は、有用なｐＨ、例えば約６．９〜約７．３５のｐＨで調製してもよい。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、５日目の有色（ｐｉｇｍｅｎｔｅｄ）雌ウサギの眼組織および血漿におけるリフィテグラストの平均（標準偏差［ＳＤ］）濃度のプロットを示すグラフである。製剤＃１：前部組織（Ａ）、後部組織および血漿（Ｂ）；製剤＃２：前部組織（Ｃ）、後部組織および血漿（Ｄ）。データは、濃度が両方の製剤について１０ｎｇ／ｇ未満であったレンズの濃度を除外している。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
詳細な説明
本明細書において説明する通り、本発明者らは、広範な調査後、眼科使用のためのリフィテグラストの局所投与に特に十分に適合した眼科製剤および方法を発見した。製剤は、安定であり、耐容性良好であり、眼の表面上、および／または眼内の部位を含む標的部位に治療有効量のリフィテグラストを送達することができる。驚くべきことに、製剤は、前眼部組織、特に結膜および角膜に局在化するリフィテグラストを提供し、後部組織および血漿においては低濃度である。本明細書において提供するデータおよび開示は、リフィテグラストが、オフターゲット全身または眼球作用の可能性が限定されている一方で、眼科使用（例えばＤＥＤ治療）のために有益な眼表面組織に達するように製剤化され得ることを示唆する。
【００１４】
本発明を、特定の実施例によってより詳細に説明する。以下の実施例は、例示の目的のために提供し、いかなる様式においても本発明を限定するとは意図しない。当業者は容易に、本質的に同じ結果を産出する、変更または改変され得る様々な重要でないパラメータを認識する。
【実施例】
【００１５】
（実施例１）
有色ウサギにおける反復眼用量投与後のリフィテグラストの眼分布および薬物動態。
この実験においては、有色雌ウサギを、リフィテグラストの２つの製剤（＃１および＃２）のうちの１つを連続５日間受容するように割り当てた。各処置群は、２５匹のウサギからなった。動物は、１．７５ｍｇ／眼／用量（３５μＬ／眼／用量）の標的用量レベルで、各眼においてリフィテグラストの単一の局所眼用量をｂ．ｉ．ｄ．（研究５日目を除いて）、約１２時間間隔（±１時間）で受容した。研究５日目は、動物に午前中のみ投薬した。処置群１および２は、別々の日に投薬した。研究の生存部分は、２０１４年５月に行った。この研究は、ＡＲＶＯ  Ｓｔａｔｅｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌｓ  ｉｎ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ａｎｄ  Ｖｉｓｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈを遵守し、研究中のすべての手技は、Ａｎｉｍａｌ  Ｗｅｌｆａｒｅ  Ａｃｔ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ（９  ＣＦＲ  ３）に従った。
【００１６】
試験動物
Ｃｏｖａｎｃｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｄｅｎｖｅｒ、ＰＡ、ＵＳＡ）からの５０匹のニュージーランドレッド／ホワイトＦ１交雑種雌ウサギを、研究において使用した。動物を、用量投与前に１３日間、研究条件に順応させた。投薬時に、動物は、体重３１７７〜４２７１ｇであり、少なくとも６ヶ月齢であった。動物は、研究全体を通して、吊り下げステンレススチールケージ内で個々に、食餌および水は自由に摂取させ、１２時間明／１２時間暗周期下で飼った。動物は、ランダム化しなかったが、健康全般および投与前眼科検査の結果に基づいて動物番号を割り当てた。研究動物が健康であり、処置前に眼所見を有しないことを確実にするために、眼科検査は、認定専門獣医学眼科医によって、Ｋｏｗａ手持ち細隙灯生体顕微鏡および集光レンズを伴う倒像検眼鏡を使用して基線（投薬前）で１回実行した。
【００１７】
用量調製および製剤
（分析データによって確認された）臨床材料を代表し得る研究のための製剤は、Ｃｏｖａｎｃｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．で調製した。各製剤において、リフィテグラストを、攪拌しながら用量媒体に添加し、塩酸（ＨＣｌ）および／または水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）によりｐＨ調製した。透明溶液が得られるまで製剤を攪拌し、０．２２μｍフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（登録商標）Ｍｉｌｌｅｘ−ＧＶ、０．２２μｍ、Ｄｕｒａｐｏｒｅ（登録商標）ＰＶＤＦ）により濾過し、約５℃で保存した。製剤の分析は、Ａｌｍａｃ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓｏｕｄｅｒｔｏｎ、ＰＡ、ＵＳＡによって実行し、製剤＃１および＃２について、それぞれ、濃度は４９．４および４９．３ｍｇ／ｍＬと測定した。
【００１８】
製剤＃１：用量媒体は、注射用滅菌水、塩化ナトリウム、無水二塩基性リン酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）およびチオ硫酸ナトリウム五水和物からなり、ＨＣｌで７．３０のｐＨに調節した。リフィテグラスト（５０ｍｇ／ｍＬ）の添加後、ｐＨを６．９０に調節した。
【００１９】
製剤＃２：用量媒体は、注射用滅菌水、塩化ナトリウム、無水二塩基性リン酸ナトリウムおよびチオ硫酸ナトリウム五水和物からなった。リフィテグラスト（５０ｍｇ／ｍＬ）の添加後、製剤のｐＨを７．３５に調節した。
【００２０】
用量投与
リフィテグラストの局所眼用量（３５μＬ／眼／用量）を、結膜との接触を確実にするために較正容積式マイクロピペットにより眼の結膜嚢に投与した。最初に右眼に投薬し、収集時間（以下）は、第２の（左）眼の投薬時間に基づいた。用量投与前に動物を絶食させなかった。
【００２１】
組織収集
動物を、ペントバルビタールナトリウムにより安楽死させ、研究５日目の最後の投薬の０．２５、０．５、１、３および８時間後の時点当たり１群当たり５匹の動物から血液および眼組織を収集した。血液（約５ｍＬ）を、抗凝固薬であるエチレンジアミン四酢酸三カリウム（Ｋ３ＥＤＴＡ）を含有する管に収集した。血液を遠心分離して、血漿を得た。凍結収集技術を使用して以下の眼組織：眼房水、（眼球および眼瞼）結膜、脈絡膜−網膜色素上皮（脈絡膜−ＲＰＥ）、角膜、虹彩−毛様体、レンズ、視神経、網膜、（前および後）強膜および硝子体液を収集した。血漿および眼組織を、約−７０℃で保存した。
【００２２】
液体クロマトグラフィータンデム質量分析
確証された液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）法によって、ウサギ血漿および多数の眼マトリックス中のリフィテグラスト濃度を測定した（分析は、ＩＣＯＮ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ、ＬＬＣ、Ｗｈｉｔｅｓｂｏｒｏ、ＮＹ、ＵＳＡで実行した）。本方法は、代理マトリックスとしてウサギ血漿を使用する、ウサギ眼房水および硝子体液の分析に適した。Ｓｈｉｍａｄｚｕ高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）システムと連結したＳｃｉｅｘ  ＡＰＩ−５０００（商標）質量分析器（ＳＣＩＥＸ、Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用してＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を実行した。クロマトグラフィー分離は、Ｗａｔｅｒｓ  ＳｙｍｍｅｔｒｙＳｈｉｅｌｄ（商標）ＲＰ１８  ＨＰＬＣカラム、２．１×５０ｍｍ、３．５μｍ（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ、ＵＳＡ）上で、移動相勾配により達成した。質量分析器は、ターボイオンスプレイ（ポジティブイオン）モードで操作し、使用した解像度設定は、両方の四極子Ｑ１およびＱ２の単位であった。リフィテグラストの定量の最低値は、０．５００ｎｇ／組織であった（標準曲線範囲は、０．５〜１００ｎｇ／試料であった）。
【００２３】
データ分析
平均組織および血漿リフィテグラスト濃度データに、非区画分析（Ｇｉｂａｌｄｉ  Ｍ、Ｐｅｒｒｉｅｒ  Ｄ．、Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ．、第２版、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｄｅｋｋｅｒ；１９８２年）を適用した。ＰＫ分析は、可能な場合は、眼組織および血漿中の最大濃度（Ｃｍａｘ）、Ｃｍａｘまでの時間（ｔｍａｘ）、時間０から最後の測定可能な時点まで（ＡＵＣ０−ｔ）の濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）および排出相半減期（ｔ１／２）の決定を含んだ。ＰＫ分析は、Ｐｈｏｅｎｉｘ（登録商標）ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）（６．２版；Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用して実行した。名目上の用量および試料採取時間を使用した。定量下限未満（ＢＬＱ：適宜、０．５００ｎｇ／ｍＬ未満または０．５００ｎｇ／試料未満）の濃度値は、０として処理した。試料のうちの３分の２が所与の時点でＢＬＱであった場合、平均値は、記述統計量においては「計算せず」として報告し、ＰＫ分析においては０として処理した。
【００２４】
結果
すべての動物（ｎ＝５０）は、投薬前に正常な眼科検査を有した。製剤＃１を受容する動物（ｎ＝２５）については、平均（標準偏差［ＳＤ］）体重は３７１０（２６０）ｇであり、平均（ＳＤ）用量は０．９３５（０．０６３２）ｍｇ／ｋｇであった。製剤＃２を受容する動物（ｎ＝２５）については、平均（ＳＤ）体重は３６１０（２４２）ｇであり、平均（ＳＤ）用量は０．９５９（０．０６５８）ｍｇ／ｋｇであった。両方の製剤は、耐容性良好であり、研究期間中、臨床安全性観察は行わなかった。
【００２５】
各製剤の眼組織および血漿についてのリフィテグラストのＰＫパラメータを、表１に要約する。血漿および眼組織についてのＣｍａｘおよびＡＵＣ０−８（０〜８時間のＡＵＣ）値は概して、製剤＃１と＃２との間で同様であった。いずれかの製剤の投与後のリフィテグラストの曝露（ＡＵＣ０−８によって査定される）は、（眼瞼）結膜において最も高く、次に降順で角膜、（前）強膜、（眼球）結膜、（後）強膜、虹彩−毛様体、眼房水および脈絡膜−ＲＰＥであった。リフィテグラストの濃度は、前眼表面組織において最も高く、（眼瞼および眼球）結膜および角膜についてのＣｍａｘは、製剤＃１について５９３０〜１４２００ｎｇ／ｇおよび製剤＃２について５１９０〜９６２０ｎｇ／ｇに及んだ。これらの組織についてのＡＵＣ０−８は、製剤＃１および＃２について、それぞれ、１３４００〜３０８００ｎｇ・ｈ／ｇおよび１２０００〜３６６００ｎｇ・ｈ／ｇに及んだ。虹彩−毛様体、眼房水および脈絡膜−ＲＰＥにおけるリフィテグラストのＣｍａｘは、製剤＃１について７９〜１９０ｎｇ／ｇおよび製剤＃２について４５．９〜１９５ｎｇ／ｇに及んだ。これらの組織におけるＡＵＣ０−８は、製剤＃１について５３０〜１１３０ｎｇ・ｈ／ｇおよび製剤＃２について２３１〜７７８ｎｇ・ｈ／ｇであった。
【００２６】
強膜については、リフィテグラストの曝露は、前部組織に対して後部組織において有意に低かった。リフィテグラストのＣｍａｘは、製剤＃１および＃２について、それぞれ、前強膜において１１２００および５８７０ｎｇ／ｇ、ならびに後強膜において８２６および３６９ｎｇ／ｇであった。リフィテグラストのＡＵＣ０−８は、製剤＃１および＃２について、それぞれ、前強膜において１７５００および１１２００ｎｇ・ｈ／ｇ、ならびに後強膜において２３６０および１５７０ｎｇ・ｈ／ｇであった。両方の製剤について視神経、網膜および硝子体液において、限定的な測定可能濃度のリフィテグラストが観察された。これらの組織における平均Ｃｍａｘは、ＢＬＱ〜３６ｎｇ／ｇに及び、これは前眼組織において観察された平均Ｃｍａｘより有意に低かった。視神経、網膜および硝子体液におけるＡＵＣ０−８は、測定可能データが不十分であったために計算できず、このことは、眼の背部への分布は、非常に限定的であったことを示唆した。
【００２７】
濃度はまた、レンズにおいて非常に低く、製剤＃１についてＣｍａｘ＝３．８５ｎｇ／ｇおよびＡＵＣ０−８＝５．４４ｎｇ・ｈ／ｇであり、製剤＃２についてＣｍａｘ＝０．７９４ｎｇ／ｇ（ＡＵＣ０−８は計算せず）であった。すべての組織にわたり、ｔｍａｘは概して、０．２５〜１時間であり、局所眼投与後の迅速な吸収を示した。明確な排出相がないために、ほとんどの眼組織におけるｔ１／２の見積もりは計算できなかったが、（眼球）結膜においては、ｔ１／２は２．０２時間（製剤＃１）であり、（前）強膜においては、ｔ１／２は製剤＃１および＃２について、それぞれ、１．９７および２．３２時間であった。５日目の投薬後８時間にわたる前眼部組織（図Ａ、図Ｃ；レンズを除く）および後眼部組織（図Ｂ、図Ｄ）におけるリフィテグラストの平均濃度を、図１に示す。
【００２８】
５回のｂ．ｉ．ｄ．投薬後に、低血漿レベルのリフィテグラストが観察された（製剤＃１および＃２について、それぞれ、１７．４および９．５２ｎｇ／ｍＬのＣｍａｘ値、１１．２および１６．４ｎｇ・ｈ／ｇのＡＵＣ０−８値）。製剤＃１の局所眼投薬後、０．２５時間（ｔｍａｘ）以内にリフィテグラストは最大血漿濃度に達し、０．８５０時間の血漿ｔ１／２値で低下した。明確な排出相がないために、製剤＃２についての血漿中のｔ１／２は、計算できなかった（図Ｂ、図Ｄ）。
【表１】
2020502118.tif 000003
【００２９】
上記データに基づいて、有色ウサギにおける１日２回５日間のリフィテグラストの眼投与後、リフィテグラストの分布および曝露は概して、前眼部組織、特に、結膜および角膜において最も高いことが観察され、一方で、後部組織においては、低濃度のリフィテグラストが観察された。リフィテグラストは、結膜および角膜においてＴ細胞浸潤および炎症が観察されている眼表面障害であるＤＥＤの治療に指示されている（Ｏｃｕｌ．  Ｓｕｒｆ．、２００５年；３巻：Ｓ１６１〜Ｓ１６４頁；Ａｒｃｈ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．、２００６年；１２４巻：７１０〜７１６頁；Ａｍ．  Ｊ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．、２００９年；１４７巻：１９８〜２０５頁；Ｓｔｅｒｎ  Ｍ．Ｅ．ら、Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  Ｖｉｓ．  Ｓｃｉ．、２００２年；４３巻：２６０９〜２６１４頁）。したがって、これらの組織におけるリフィテグラストの優勢な分布は、ドライアイの徴候および症状に対する臨床的効果によって支持される、意図される作用部位に十分に対応する（Ｈｏｌｌａｎｄ  Ｅ．Ｊ．ら、Ｃｕｒｒ．  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｏｐｉｎ．、２０１６年；３２巻：１７５９〜１７６５頁；Ｈｏｌｌａｎｄ  Ｅ．Ｊ．ら、Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ．、ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｏｐｈｔｈａ．２０１６．０９．０２５）。
【００３０】
分布プロファイルは、後眼部組織におけるオフターゲット効果の可能性が低いことをさらに示す。リフィテグラストの血漿濃度はまた、健康なボランティアにおけるフェーズＩ研究（Ｓｅｍｂａ  Ｃ．Ｐ．ら、Ｊ．  Ｏｃｕｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｈｅｒ．、２０１１年；２７巻：９９〜１０４頁）および１年安全性研究のサブ集団ＳＯＮＡＴＡ（Ｄｏｎｎｅｎｆｅｌｄ  Ｅ．Ｄ．ら、Ｃｏｒｎｅａ．、２０１６年；３５巻：７４１〜７４８頁）において以前に観察された通り、顕著に低く、血漿ｔ１／２は、短かった（０．８５０時間）。これらのデータは、リフィテグラストによる全身性副作用についての可能性が限定的であることを示す。これらの観察結果と一致して、臨床試験におけるリフィテグラストの安全性プロファイルは、この薬物が概して耐容性良好であることを示し、全身毒性の示唆を伴わなかった（Ｓｈｅｐｐａｒｄ  Ｊ．Ｄ．ら、Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ、２０１４年；１２１巻：４７５〜４８３頁；Ｔａｕｂｅｒ  Ｊら、Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ；２０１５年；１２２巻：２４２３〜２４３１頁；Ｈｏｌｌａｎｄ  Ｅ．Ｊ．ら、Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ．、ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｏｐｈｔｈａ．２０１６．０９．０２５）。追加の留意点は、本研究において決定した眼組織排出半減期（ｔ１／２）（例えば眼球結膜について約２時間）は、承認されたリフィテグラストの１日２回の投薬を支持することである（ＦＤＡ  ａｐｐｒｏｖｅｓ  ｎｅｗ  ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｄｒｙ  ｅｙｅ  ｄｉｓｅａｓｅ．  Ｓｉｌｖｅｒ  Ｓｐｒｉｎｇ、ＭＤ：  ＵＳ  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ；２０１６年７月１２日、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｎｅｗｓｅｖｅｎｔｓ／ｎｅｗｓｒｏｏｍ／ｐｒｅｓｓａｎｎｏｕｎｃｅｍｅｎｔｓ／ｕｃｍ５１０７２０．ｈｔｍ；２０１６年７月１２日にアクセス済み。）。投薬間隔は、眼組織から薬物を排出するのに必要とされる時間と比較して長いので、薬物蓄積についての可能性は限定的である。血漿および眼組織におけるリフィテグラストの分布および曝露は、製剤間で同等であり、両方の製剤は、耐容性良好であり、臨床関連安全性観察結果を伴わなかった。
【００３１】
ウサギの眼は、局所薬物送達を実行するのに十分大きく（Ｓｈｏｒｔ  Ｂ．Ｇ．ら、Ｔｏｘｉｃｏｌ．  Ｐａｔｈｏｌ．、２００８年；３６巻：４９〜６２頁）、ヒトの眼に匹敵する大きさであるので、ウサギは、眼分布を評価するために使用される最も一般的な種である。メラニンがこの薬物の分布に影響を及ぼす可能性を考慮することによって（Ｄｕｒａｉｒａｊ  Ｃら、Ｅｘｐ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓ．、２０１２年；９８巻：２３〜２７頁）、ヒトとの比較性を増大させるために、交雑種ニュージーランドレッド／ホワイトＦ１の有色ウサギを使用した。私たちの研究は、結膜および角膜と比較して虹彩−毛様体における比較的低いリフィテグラスト濃度を発見し、このことは、リフィテグラストが、メラニン結合について比較的低い可能性を有することを示した。
【００３２】
リフィテグラストの以前の治験眼ＰＫ研究は、放射標識を使用してラット（Ｒａｏ  Ｖ．Ｒ．ら、Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ．、２０１０年；５１巻：５１９８〜５２０４頁）およびイヌ（Ｍｕｒｐｈｙ  ＣＪら、Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ．、２０１１年；５２巻：３１７４〜３１８０頁）において行われた。私たちの研究と一致して、イヌにおいて局所投与３０分後に、放射能濃度は前部組織（眼球結膜、眼瞼結膜および角膜）において最も高いことが分かった（Ｍｕｒｐｈｙ  ＣＪら、Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ．、２０１１年；５２巻：３１７４〜３１８０頁）。ラットにおいて同様に、投薬後０．５時間での放射能は、結膜および角膜において最も高かった（Ｒａｏ  Ｖ．Ｒ．ら、Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ．、２０１０年；５１巻：５１９８〜５２０４頁）。私たちの発見に反して、Ｒａｏら（Ｒａｏ  Ｖ．Ｒ．ら、Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ．、２０１０年；５１巻：５１９８〜５２０４頁）は、虹彩−毛様体に対して角膜において同等の放射能を観察した。不確実ではあるが、推定的説明は、前眼房深度を含むげっ歯類とウサギとの間の眼解剖学的構造における差である（Ｖｅｚｉｎａ  Ｍ．ら  Ａｓｓｅｓｓｉｎｇ  Ｏｃｕｌａｒ  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  ｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ；２０１３年：１〜２１頁）。
【００３３】
本明細書において説明するものに加えて、本発明の様々な改変は、上記の説明から当業者に明らかである。そのような改変はまた、付属の特許請求の範囲内に入ると意図される。すべての特許、特許出願および非特許文献を含む本出願において引用する各参考文献は、その全体を参照により本明細書に組み込む。
【図１】
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【国際調査報告】
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