(57)【要約】【課題】生分解性高分子微粒子、特に、生分解性高分子の多孔性微粒子を製造する方法及びそれにより製造される生分解性高分子微粒子、特に、生分解性高分子の多孔性微粒子が提供される。【解決手段】本発明に係る生分解性高分子微粒子の製造方法は、１）生分解性高分子を有機溶媒に溶解して、分散相を形成する工程；２）工程１）で形成された分散相に圧力を加え、分散相にＳＰＧ膜（シラス多孔質ガラス膜）の気孔を通過させ、界面活性剤を含む連続相内でエマルションを形成する工程；及び、３）工程２）で形成されたエマルションから有機溶媒を除去して、微粒子を形成する工程；を含むことを特徴とする。【選択図】なし
2020530865.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１）生分解性高分子を有機溶媒に溶解して、分散相を形成する工程；
２）工程１）で形成された分散相に圧力を加え、分散相にＳＰＧ膜（シラス多孔質ガラス膜）の気孔を通過させ、界面活性剤を含む連続相内でエマルションを形成する工程；及び、
３）工程２）で形成されたエマルションから有機溶媒を除去して、微粒子を形成する工程；
を含む生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項２】
微粒子が、以下の特性ｉ）及びｉｉ）を満たす請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法：
ｉ）球状（ｓｐｈｅｒｉｃａｌ）；
ｉｉ）粒径１０〜２００μｍ。
【請求項３】
分散相が、多孔性微粒子を形成するポロゲン（ｐｏｒｏｇｅｎ）をさらに含む請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項４】
多孔性微粒子が、以下の特性ｉ）〜ｉｖ）を満たす請求項３に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法：
ｉ）球状（ｓｐｈｅｒｉｃａｌ）；
ｉｉ）粒径１０〜２００μｍ；
ｉｉｉ）気孔径０．１〜２０μｍ；
ｉｖ）多孔率１０〜５０％。
【請求項５】
前記微粒子が、２０μｍより大きいｄ10、１００μｍより小さいｄ90を有する請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項６】
微粒子が、１より小さいスパン値を有する請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項７】
ＳＰＧ膜が、１０〜３０μｍ範囲の気孔を有する請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項８】
分散相に加えられる圧力が、０．１〜１０ｋＰａ範囲である請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項９】
界面活性剤の濃度が、０．５〜５重量％範囲である請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項１０】
分散相に溶解する生分解性高分子の濃度が、５〜２０重量％範囲である請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項１１】
連続相が１００〜５００ｒｐｍ範囲の速度で撹拌される請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項１２】
生分解性高分子が、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（カプロラクトン）、乳酸−グリコール酸共重合体、ジオキサノン−カプロラクトン共重合体、乳酸−カプロラクトン共重合体、これらの誘導体及びこれらの共重合体からなる群から選ばれる１種以上である請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項１３】
生分解性高分子が、１０，０００〜１,０００，０００ｇ／ｍｏｌの範囲の数平均分子量（Ｍｎ）を有する請求項１に記載の生分解性高分子微粒子の製造方法。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法により製造された生分解性高分子微粒子。
【請求項１５】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法により生分解性高分子微粒子を製造する工程；及び
生分解性高分子微粒子を一つ以上の生体適合性キャリアと混合する工程；
を含む高分子フィラーの製造方法。
【請求項１６】
請求項１４に記載の生分解性高分子微粒子；及び
一つ以上の生体適合性キャリア；
を含む高分子フィラー。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生分解性高分子微粒子の製造に関し、より具体的には、生分解性高分子微粒子、特に、生分解性高分子の多孔性微粒子を製造する方法及びそれにより製造される生分解性高分子微粒子、特に、生分解性高分子の多孔性微粒子に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
生分解性高分子微粒子は、生体内で分解される性質を有しており、その性質を利用することで、成形外科用フィラーのような体内インプラントやＤＤＳ（Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ）分野で薬物送達用キャリアとして広く使用されている。最近、成形外科用フィラー市場では第４世代フィラーである生分解性高分子フィラーが注目されている。ポリ乳酸やポリカプロラクトンなどの生分解性高分子は、微粒子の形で製造され、生分解性高分子の分解によって生成されたしわを修復する組織修復用材料として使用されている。
【０００３】
生分解性高分子フィラーの原料として使用するための微粒子は、少なくとも２０μｍの直径を有することが好ましい。これは、生体に存在するマクロファージの貪食作用を避けるためである。直径が２０μｍより小さい場合、微粒子は、マクロファージに取り込まれ、コラーゲンを生成する前に分解される。直径が２０μｍ以上のとき、微粒子はマクロファージの貪食作用を回避しながら、生体内での異物反応を引き起こし、コラーゲン生成を促進する可能性がある。反面、直径が５０μｍより大きいとき、注射針を通過できず、針の詰まりが発生する可能性がある。さらに、微粒子が無定形の場合、微粒子同士が凝集し、注射針の詰まりが引き起こされる可能性がある。従って、成形外科用フィラーの原料として使用される生分解性高分子微粒子は、球状であり、大きさが２０〜５０μｍであることが好ましい。現在市場で入手可能な生分解性高分子フィラーは、全て多孔性であり、微粒子の分散維持のための担体と混合され、バイアル又はプレフィルドシリンジ形態で販売されている。ヒアルロン酸系フィラーとは異なり、生分解性高分子充填剤は、外科処置直後の短時間でのキャリアの吸収によりボリュームが減少し、共に注入された生分解性高分子のボリュームのみが残るという短所がある。
【０００４】
特許文献１は、注射注入が容易な多孔性微粒子フィラーシステムに関する。しかし、それにより製造された微粒子は、１００〜５,０００μｍの範囲の粒径を有することを特徴とするため、顔面適用のためのフィラーとして使用できず、微粒子の表面は滑らかではない。特許文献２は、多孔性微粒子状態の組織修復用生分解性高分子を含むフィラーとして使用するための注射剤の製造方法及びその装置を開示している。しかし、それにより製造された粒子のサイズが均一ではなく、粒子の形状は球状でない無定形である。
【０００５】
生分解性高分子微粒子を製造する方法では、Ｗ／Ｏ／ＷとＯ／Ｗ／Ｏエマルションを製造し、それらの物理化学的な性質を利用することが一般的であり、ホモジナイザー（ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ）やマイクロ流体（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ）などの乳化装置が持続的に開発されている。しかし、ホモジナイザーを使用する場合、生産工程は単純であるが、粒径分布が広くなり、多孔性微粒子の場合、気孔サイズが均一ではなく、１０μｍを超える気孔が大量に生成される短所がある。マイクロ流体を使用する場合、粒径分布は狭いが、大量生産が困難であり、工業規模への適用は難しい問題がある。
【０００６】
日本で開発されたＳＰＧ膜（シラス多孔質ガラス膜）を用いて微粒子を製造する方法が知られている。この方法により、均一な粒径を有する微粒子を製造できる。さらに、この方法は、微粒子の大量生産が可能であるため、産業上利用可能であることが知られている。特許文献３は、ＳＰＧ膜を用いて金属ナノ粒子を製造し、特許文献４は、ＳＰＧ膜を用いてトナー粒子を製造している。しかし、これらの文献は、生分解性高分子でない金属やカーボンブラック、ワックスなどのモノマーを使用しており、組織修復用材料又は薬物送達のキャリアとして使用することができない。
【０００７】
従って、組織修復材料又は薬物送達用のキャリアとして使用でき、工業的な大量生産が可能な生分解性高分子材料の微粒子を調製する技術を確立する必要がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】韓国  特許  第１１４２２３４号
【特許文献２】韓国  特許  第１６８５３１２号
【特許文献３】韓国  特許  第１３０２９０２号
【特許文献４】韓国  特許  第１３６９９５２号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の第１の目的は、組織修復用材料又は薬物送達用キャリアとして使用でき、工業的大量生産が可能な生分解性高分子材料の微粒子の製造方法を提供することである。
本発明の第２の目的は、前記微粒子製造方法によって製造される生分解性高分子微粒子を提供することである。
本発明の第３の目的は、前記微粒子を用いて高分子フィラーを製造する方法を提供することである。
本発明の第４の目的は、前記微粒子を含む高分子フィラーを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の第１側面は
１）生分解性高分子を有機溶媒に溶解して、分散相を形成する工程；
２）工程１）で形成された分散相に圧力を加え、分散相にＳＰＧ膜（シラス多孔質ガラス膜）の気孔を通過させ、界面活性剤を含む連続相内でエマルションを形成する工程；及び、
３）工程２）で形成されたエマルションから有機溶媒を除去して、微粒子を形成する工程；
を含む生分解性高分子微粒子の製造方法に関するものである。
【００１１】
本発明の第２側面は、前記微粒子の製造方法によって製造された生分解性高分子微粒子に関する。
【００１２】
本発明の第３側面は、
前記方法によって生分解性高分子微粒子を製造する工程；及び
生分解性高分子微粒子を一つ以上の生体適合性キャリアと混合する工程；
を含む高分子フィラーの製造方法に関する。
【００１３】
本発明の第４側面は、
前記生分解性高分子微粒子；及び、
一つ以上の生体適合性キャリア；
を含む、高分子フィラーに関する。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、組織修復用材料又は薬物送達用キャリアとして使用でき、工業的大量生産可能な生分解性高分子材料の微粒子製造技術を提供することができる。特に、従来の生分解性高分子微粒子に多孔性を付与し、小さな粒径及び粒径分布が狭い、即ち、均一な大きさの微粒子を安定して生産することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】実施例１により製造された生分解性高分子多孔性微粒子の走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）写真である。
【図２】比較例１により製造された生分解性高分子多孔性微粒子の走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）写真である。
【図３】実施例１により製造された生分解性高分子多孔性微粒子の粒径と分布を示す図である。
【図４】比較例１により製造された生分解性高分子多孔性微粒子の粒径と分布を示す図である。
【図５】実施例１によりＳＰＧ膜を用いて多孔性微粒子を製造するための装置の模式図である。
【図６】実施例１で用いられたＳＰＧ膜の走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）写真である。
【図７】本発明の実施例４で製造された高分子フィラーと比較例２のフィラーとをラットに注入した後、注入部位をＤＳＬＲ（Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｌｅｎｓ  Ｒｅｆｌｅｘ）カメラで撮影した写真である。
【図８】本発明の実施例４で製造された高分子フィラーと比較例２のフィラーをラットに注入した後、注入部位を３次元撮影した写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の一実施形態では、生分解性高分子微粒子は、以下の特性ｉ）及びｉｉ）を満たすことができる：
ｉ）球状（ｓｐｈｅｒｉｃａｌ）；
ｉｉ）粒径１０〜２００μｍ。
【００１７】
好ましくは、前記高分子微粒子の粒径は、注射できるように使用される注射針の直径よりも小さく、好ましくは、患者の痛みを引き起こさず、触感で感じないように粒子の形状は実質的に球状である。一実施形態では、前記生分解性高分子微粒子の粒子サイズ（粒径）は、通常的に２００μｍ以下であってもよく、生体組織内でマクロファージに取り込まれないように１０μｍ以上の粒径を有することが好ましい。好ましい実施形態では、微粒子は、１０〜１００μｍ未満、より好ましくは１０〜８０μｍ、より好ましくは１０〜５０μｍ、最も好ましくは２０〜４０μｍの直径を有することができる。
【００１８】
本発明の実施形態では、分散相が、多孔性微粒子を形成するようにポロゲン（ｐｏｒｏｇｅｎ）をさらに含むことができる。好ましい実施形態では、有機溶媒に溶解したポロゲンの濃度は、１〜１０重量％範囲であってもよい。ポロゲンの濃度が１重量％未満の場合、気孔が十分に形成されないことがあり、１０重量％を超えると、過剰な気孔形成のため、多孔性微粒子自体の物理的強度が弱くなり、細胞が気孔に浸透する可能性がある。
【００１９】
好ましい実施形態では、多孔性微粒子は、韓国特許出願第２０１６−０１６９３０９号に記載された特性を有するものであり、韓国特許出願第２０１６−０１６９３０９号はその全部が本明細書で参照として引用される。例えば、多孔性微粒子は、以下の特性ｉ）〜ｉｖ）を満たすことができる：
ｉ）球状（ｓｐｈｅｒｉｃａｌ）；
ｉｉ）粒径１０〜２００μｍ；
ｉｉｉ）気孔径０．１〜２０μｍ；
ｉｖ）多孔率１０〜５０％。
【００２０】
一実施形態では、粒度分布の標準として、生分解性高分子の多孔性微粒子は、２０μｍより大きいｄ10、１００μｍより小さいｄ90、好ましくは２０μｍより大きいｄ10、６０μｍより小さいｄ90、より好ましくは２５μｍより大きいｄ10、４０μｍより小さいｄ90である。
【００２１】
また、一実施形態では、生分解性高分子の多孔性微粒子は、１未満、好ましくは０．８未満、より好ましくは０．６未満の粒子の均一な分布を示すスパン値を有しなければならない。スパン値は、粒度分布が広くなると大きくなり、粒度分布が狭くなると０に近くなる。スパン値は、下記数式により計算される：
スパン値＝（Ｄ90−Ｄ10）／Ｄ50
［Ｄ10、Ｄ50、Ｄ90の定義：粒子の累積分布で最大値のそれぞれ１０％、５０％、９０％に対応する値であり、サイズに応じて相対的に累積される粒子の量を曲線で表す粒度分布曲線を測定及び図式化し、１０個のフラクションに分割したとき、それぞれ１／１０、５／１０、９／１０に対応する粒子のサイズを求めて表したもの］
【００２２】
本発明の実施形態による多孔性微粒子は、多孔率に応じて、同じ質量対比より大きなボリュームを有することができる。一実施形態では、前記生分解性高分子の多孔性微粒子の多孔率は、５〜５０％、好ましくは１０〜５０％、より好ましくは１０〜３０％であってもよい。
【００２３】
本発明において、「多孔率」は下記数式により得られる。
多孔率＝（多孔性高分子微粒子のボリューム−非多孔性高分子微粒子のボリューム）／多孔性高分子微粒子のボリューム×１００
【００２４】
本発明による生分解性高分子の多孔性微粒子の気孔径（直径）は、０．１〜２０μｍ、好ましくは０．１〜１０μｍ、より好ましくは１〜１０μｍであってもよい。
【００２５】
本発明の一実施形態において、ＳＰＧ膜乳化法を適用することにより、生分解性高分子の微粒子、特に多孔性微粒子を製造することを特徴とする。図５に、本発明の実施例１によるＳＰＧ膜を使用して多孔性微粒子を製造するための装置を概略的に示すが、本発明の範囲はこれにより制限されない。
【００２６】
本発明の実施形態において、有機溶媒に溶解する生分解性高分子の濃度は、好ましくは５〜２０重量％、特に１０〜２０重量％、より特に１０〜１５重量％範囲である。生分解性高分子の濃度が５重量％より低い場合、分散相の濃度が低くなり、粘度が低下し、ＳＰＧ膜を通過するときに均一なサイズのエマルションを生成することが困難になる虞がある。生分解性高分子の濃度が２０重量％を超えると、分散相の濃度が高くなり粘度が高くなり、ＳＰＧ膜を通過するときに均一なサイズのエマルションではない糸状の高分子が形成される虞がある。
【００２７】
本発明の実施形態において、ＳＰＧ膜は、１０〜３０μｍ、特に１０〜２０μｍ、より特に１５〜２０μｍ範囲の気孔を有することができる。ＳＰＧ膜の気孔径が１０μｍより小さい場合、形成される多孔性微粒子の平均サイズは２０μｍよりも小さいため、マクロファージに取り込まれ得る。ＳＰＧ膜の気孔径が３０μｍより大きい場合、形成される多孔性微粒子の平均サイズは５０μｍよりも大きいため、注射針の詰まりが生じる可能性がある。図６は、本発明の実施例で使用されるＳＰＧ膜の走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）写真を示すが、本発明の範囲はそれにより制限されない。
【００２８】
本発明の実施形態において、分散相に加えられる圧力は、０．１〜１０ｋＰａ、特に１〜１０ｋＰａ、より特に２〜７ｋＰａの範囲であってもよい。圧力が０．１ｋＰａより低い場合、分散相がＳＰＧ膜を通過できず、エマルションが生成されない可能性がある。圧力が１０ｋＰａより高い場合、分散相がＳＰＧ膜を通過する速度が速すぎるため、均一なサイズのエマルションではない糸状の高分子が形成される可能性がある。
【００２９】
本発明の実施形態において、界面活性剤が０．５〜５重量％、特に０．５〜３重量％、より特に１〜３重量％範囲の濃度を有することができる。界面活性剤の濃度が０．５重量％より低い場合、不均一なサイズの多孔性微粒子が生成される可能性がある。界面活性剤の濃度が５重量％より高い場合、多孔性微粒子が不均一な気孔径で形成される可能性がある。一実施形態では、界面活性剤は、ポリビニルアルコール、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリソルベート、ポリエチレングリコール及びそれらの組み合わせから選ぶことができる。好ましくは、ポリビニルアルコールを使用することができる。
【００３０】
本発明の実施形態において、連続相は、１００〜５００ｒｐｍ、特に１００〜３００ｒｐｍ、より特に１００〜２５０ｒｐｍの範囲の速度で撹拌することができる。撹拌速度が１００ｒｐｍより低い場合、エマルションはＳＰＧ膜上で結露し、落下せずにその上で結露が大きくなるため、平均粒径が５０μｍより大きい多孔性微粒子が形成されることがある。撹拌速度が５００ｒｐｍより高い場合、ＳＰＧ膜のエマルションの結露が早くなり過ぎるため、平均粒径が２０μｍより小さい多孔性微粒子が形成されることがある。
【００３１】
好ましい実施形態において、前記の特定範囲の生分解性高分子の濃度、ＳＰＧ膜の気孔径、分散相に加えられる圧力及び連続相中の界面活性剤の濃度の２以上、特に全ての組み合わせ、及びそれに加えて、連続相の撹拌速度の組み合わせを使用することが可能である。
【００３２】
本発明の実施形態において、生分解性高分子は、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（カプロラクトン）、乳酸−グリコール酸共重合体、ジオキサノン−カプロラクトン共重合体、乳酸−カプロラクトン共重合体、それらの誘導体及びそれらの共重合体からなる群から選ばれる１種以上であってもよい。好ましくは、ポリ（乳酸）又はポリ（カプロラクトン）、特に好ましくはポリ（カプロラクトン）である。
【００３３】
本発明の実施形態において、生分解性高分子は、１０，０００〜１,０００，０００ｇ／ｍｏｌの数平均分子量（Ｍｎ）を有することができる。より好ましくは１０，０００〜１００，０００ｇ／ｍｏｌの範囲であってもよい。
【００３４】
本発明の実施形態によれば、高分子フィラーに含まれる生分解性高分子の多孔性微粒子の量は、通常的に高分子フィラー１００重量％に対して、１０〜５０重量％であってもよく、より具体的には１０〜３０重量％であってもよく、所望の注射部位の所望のボリューム効果に従って調節することができる。
【００３５】
本発明の一実施形態による高分子フィラーは、一つ以上の生体適合性キャリアをさらに含むことができる。このようなキャリアは、注射後、通常１日〜６カ月以内に体内に吸収される。
【００３６】
一実施形態で、前記生体適合性キャリアとして、カルボキシメチルセルロース、ヒアルロン酸、デキストラン、コラーゲン及びそれらの組み合わせから選ばれるものを使用することができる。
【００３７】
本発明の高分子フィラーに含まれる生体適合性キャリアの量は、通常的に高分子フィラー１００重量％に対して、５０〜９０重量％、より具体的には７０〜９０重量％であってもよい。
【００３８】
前記生体適合性キャリアには、前記成分の他に、注射剤に通常含まれる添加剤成分、例えば、グリセリンなどの潤滑剤、リン酸緩衝液などがさらに含まれ得る。
【００３９】
本発明の実施形態による高分子フィラーは、好ましくは注射剤であってもよい。本発明の実施形態による高分子フィラーの注射剤は、滅菌注射器又は滅菌バイアルに入れて提供することができ、前処理を必要としないため、使用便宜性が高く、注入後、１００％が生体組織内に異物を残さずに一定期間生分解されるため安全であり、動物由来の物質を一切含まないためアレルギー反応を起こさない。
【００４０】
また、本発明の実施形態による高分子フィラーは、従来の高分子製品（例えば、高分子割合が３０％）と比較して、同じ量の高分子でより大きなボリューム効果を示し、キャリアが吸収されてもボリューム効果を維持することができる。従って、本発明の実施形態による高分子フィラーは、シワ改善、顔面成形処置又はボディー成形処置に好適に使用することができる。
【００４１】
以下の実施例により本発明をさらに詳細に説明する。しかし、以下の実施例は、本発明を例示することのみ意図しており、いかなる形でも本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【００４２】
実施例１
分散相として、数平均分子量４５，０００のポリ（カプロラクトン）（ＰＣＬ）５ｇとテトラデカン１ｇを塩化メチレン１００ｇに溶解した。１５μｍの気孔を持つＳＰＧ膜（図６参照）をＳＰＧ膜乳化装置に結合した。製造された分散相を、ＳＰＧ膜を通して２ｋＰａの窒素圧下で連続相（２重量％のポリビニルアルコール水溶液）に注入した。この時点で、ポリビニルアルコール水溶液を２５０ｒｐｍの速度で撹拌し、注入完了後、混合物を２４時間連続して撹拌した（図５参照）。製造された多孔性ＰＣＬ微粒子を５００ｍＬの蒸溜水中で２時間撹拌して、残留ポリビニルアルコールを洗い流し、微粒子を遠心分離機で回収し、エチルアルコール５００ｍＬで２時間洗浄して、残留テトラデカンと塩化メチレンを除去した。洗浄後、多孔性ＰＣＬ微粒子を真空乾燥機で４８時間乾燥して、残留エチルアルコールを除去した。
【００４３】
実施例２
分散相として、数平均分子量５０，０００のポリ（カプロラクトン）（ＰＣＬ）１ｇとテトラデカン０．２ｇを塩化メチレン２０ｇに溶解した。１５μｍの気孔を持つＳＰＧ膜（図６参照）をＳＰＧ膜乳化装置に結合した。製造された分散相を、ＳＰＧ膜を通して２ｋＰａの窒素圧下で連続相（２重量％ポリビニルアルコール水溶液）に注入した。この時点で、ポリビニルアルコール水溶液を２５０ｒｐｍの速度で撹拌し、注入完了後、混合物を２４時間連続して撹拌した（図５参照）。製造された多孔性ＰＣＬ微粒子（多孔率：１０％）を５００ｍＬの蒸溜水中で２時間撹拌して、残留ポリビニルアルコールを洗い流し、微粒子を遠心分離機で回収し、エチルアルコール５００ｍＬで２時間洗浄して、残留テトラデカンと塩化メチレンを除去した。洗浄後、多孔性ＰＣＬ微粒子を真空乾燥機で４８時間乾燥して、残留エチルアルコールを除去した。
【００４４】
実施例３
分散相として、数平均分子量５０，０００のポリ（カプロラクトン）（ＰＣＬ）１ｇとテトラデカン０．３ｇを塩化メチレン２０ｇに溶解した。１５μｍの気孔を持つＳＰＧ膜（図６参照）をＳＰＧ膜乳化装置に結合した。製造された分散相を、ＳＰＧ膜を通して２ｋＰａの窒素圧下で連続相（２重量％ポリビニルアルコール水溶液）に注入した。この時点で、ポリビニルアルコール水溶液を２５０ｒｐｍの速度で撹拌し、注入完了後、混合物を２４時間連続して撹拌した（図５参照）。製造された多孔性ＰＣＬ微粒子（多孔率：２０％）を５００ｍＬの蒸溜水中で２時間撹拌して、残留ポリビニルアルコールを洗い流し、微粒子を遠心分離機で回収し、エチルアルコール５００ｍＬで２時間洗浄して、残留テトラデカンと塩化メチレンを除去した。洗浄後、多孔性ＰＣＬ微粒子を真空乾燥機で４８時間乾燥して、残留エチルアルコールを除去した。
【００４５】
比較例１
分散相を２重量％ポリビニルアルコール水溶液にホモジナイザー（Ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ）を使用して４０００ｒｐｍの速度で撹拌しながら迅速に供給し、１分間撹拌した後、２５０ｒｐｍの速度で２４時間撹拌したことを除いて、実施例１と実質的に同じ手順に従って多孔性ＰＣＬ微粒子を製造した。
【００４６】
実験例１
実施例１で得られた多孔性ＰＣＬ微粒子と比較例１により得られた多孔性ＰＣＬ微粒子を走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）で観察した。その結果をそれぞれ図１及び図２に示した。これらの図から確認できるように、ＳＰＧ膜乳化法を使用する本発明により、ホモジナイザーを使用する場合と比較して、より小さなサイズ及び狭い粒度分布、即ち、均一な粒径を有する多孔性微粒子を得ることができた。
【００４７】
実験例２
実施例１で得られた多孔性ＰＣＬ微粒子と比較例１で得られた多孔性ＰＣＬ微粒子の粒度分布を粒度分析器で観察した。その結果をそれぞれ図３及び図４に示した。これらの図から確認できるように、実施例１で得られた多孔性ＰＣＬ微粒子は、比較例１で得られた多孔性ＰＣＬ微粒子と比較して、著しく狭い粒度分布、即ち、均一な粒径を有していた。粒度分布分析の結果を表１に示した。
【００４８】
【表１】
2020530865.tif 000003
【００４９】
１）Ｃ．Ｖ．（変動係数）：標準偏差を平均で割った値、及び相対分散の程度を測定するための標準。計算値が０に近いほど、平均して粒子が存在し、散布度が小さいということを意味する。
【００５０】
実施例４〜６
前記実施例１〜３でそれぞれ製造された生分解性高分子の多孔性微粒子を、カルボキシメチルセルロース３重量％とグリセリン２７重量％及びリン酸緩衝液７０重量％から製造されたキャリアと混合することにより、実施例４〜６の高分子フィラー製剤をそれぞれ製造した。このとき、混合比は混合物１００重量％基準として、多孔性微粒子３０重量％、キャリア７０重量％であった。
【００５１】
比較例２及び３
比較例２としては、ＰＣＬ原料として使用する市販の顔面用フィラー（Ｅｌｌａｎｓｅ（登録商標））を購入して使用した。比較例３としては、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）を原料として使用する市販の顔面用フィラー（Ｓｃｕｌｐｔｒａ（登録商標））を購入して使用した。
【００５２】
実験例３
実施例４〜６及び比較例２及び３の各製剤をシリンジに充填後、無毛マウスの背中に２００μＬを注射した。注射部位のサイズを測定し、一定の時間で継続的にサイズの変化を測定した。その結果を表２に示した。また、実施例４の高分子フィラーと比較例２の高分子フィラーをマウスに注入した。２週間、注入部位をＤＳＬＲ（Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｌｅｎｓ  Ｒｅｆｌｅｘ）カメラで撮影した写真を図７に示し、注入部位を３次元撮影した写真を図８に示した。
下記表２に示すように、本発明による生分解性高分子の多孔性微粒子を含むフィラー製剤は、処置後の初期ボリューム減少が一時留守区改善されたことを確認することができる。
【００５３】
【表２】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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