(57)【要約】プログラム死−１（ＰＤ−１）に特異的に結合する抗体を含む製剤及びかかる製剤を作製する方法が本明細書に提供される。【選択図】図１Ａ
2020512359.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体またはその抗原結合断片を含む薬学的製剤であって、前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域及び配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体によって認識されるヒトＰＤ−１のエピトープに結合するか、または
（ｂ）ヒトＰＤ−１への結合について配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域及び配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体と競合する、前記薬学的製剤。
【請求項２】
ＰＤ−１に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む薬学的製剤であって、前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）表１に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つの軽鎖可変領域（ＶＬ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ、及び／または
（ｂ）表２に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つの重鎖可変領域（ＶＨ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含む、前記薬学的製剤。
【請求項３】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）表３に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つの軽鎖可変領域（ＶＬ）フレームワーク１（ＦＲ１）、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４をさらに含むＶＬ、及び／または
（ｂ）表４に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つの重鎖可変領域（ＶＨ）フレームワーク１（ＦＲ１）、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４をさらに含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項４】
前記ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３が、それぞれ、配列番号１、２、及び３のアミノ酸配列を含み、前記ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３が、それぞれ、配列番号４、５、及び６のアミノ酸配列を含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項５】
前記ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３が、それぞれ、配列番号７、２、及び３のアミノ酸配列を含み、前記ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３が、それぞれ、配列番号４、５、及び６のアミノ酸配列を含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項６】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項７】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項８】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項９】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項１０】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項１１】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項１２】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び
（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項１３】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び
（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項１４】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び
（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項１５】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項１６】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項１７】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項１８】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び
（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項１９】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び
（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項２０】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び
（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項２に記載の薬学的製剤。
【請求項２１】
前記抗体またはその抗原結合断片が、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域またはその変異体を含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項２２】
前記抗体またはその抗原結合断片が、ヒトＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ  Ｆｃ領域を含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項２３】
前記抗体またはその抗原結合断片が、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域またはその変異体を含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項２４】
前記抗体またはその抗原結合断片が、ヒトＩｇＧ４Ｐ  Ｆｃ領域を含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項２５】
前記抗体またはその抗原結合断片が、ヒトＩｇＧ４ＰＥ  Ｆｃ領域を含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項２６】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号３６〜４０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖Ｆｃ領域を含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項２７】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号４１のアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域をさらに含む、請求項２６に記載の薬学的製剤。
【請求項２８】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域、及び
（ｂ）配列番号３６〜４０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖Ｆｃ領域を含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項２９】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項３０】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号３２のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項３１】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び
（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項３２】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項３３】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び
（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項３４】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号３４のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項３５】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び
（ｂ）配列番号３４のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項３６】
前記抗体またはその抗原結合断片が、配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項３７】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び
（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項３８】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内の残基１００〜１０９のうちの少なくとも１つに結合する、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項３９】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内の残基１００〜１０５のうちの少なくとも１つに結合する、請求項３８に記載の薬学的製剤。
【請求項４０】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される少なくとも１つの残基に結合する、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項４１】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項４２】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＴ５１に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項４３】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＳ５７に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項４４】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＬ１００に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項４５】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ１０２に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項４６】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＧ１０３に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項４７】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＲ１０４に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項４８】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＤ１０５に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項４９】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＨ１０７に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項５０】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＳ１０９に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項５１】
ＰＤ−１に結合すると、前記抗体または抗原結合断片が、配列番号４２のアミノ酸配列内のＧ１０３及びＲ１０４に結合する、請求項４０に記載の薬学的製剤。
【請求項５２】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）Ｔ細胞活性を減弱させる、及び／または
（ｂ）Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現を低下させる、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項５３】
前記抗体またはその抗原結合断片が、ヒトＰＤ−１及び／またはサルＰＤ−１に特異的に結合するが、齧歯類ＰＤ−１には特異的に結合しない、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項５４】
前記抗体またはその抗原結合断片が、減弱したＡＤＣＣ活性及び／または減弱したＣＤＣ活性を有する、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項５５】
前記Ｔ細胞活性の減弱が、ヒトＰＢＭＣまたは全血試料で生じる、請求項５２に記載の薬学的製剤。
【請求項５６】
前記Ｔ細胞活性の減弱が、サイトカイン産生の阻害によって測定される、請求項５２または５５に記載の薬学的製剤。
【請求項５７】
前記抗体またはその抗原結合断片によって阻害される前記サイトカインが、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦ−α、及び／またはＩＦＮ−γを含む、請求項５６に記載の薬学的製剤。
【請求項５８】
前記Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下が、
（ａ）前記抗体またはその抗原結合断片での処理の早ければ４時間後に生じる、及び／または
（ｂ）サイトカイン阻害と同時であるか、またはそれに先行する、請求項５２に記載の薬学的製剤。
【請求項５９】
精製ヒトＰＤ−１への結合のＫＤが、約１００ｐＭ〜約１０ｎＭであり、細胞表面上に発現したヒトＰＤ−１及び細胞表面上に発現したサルＰＤ−１への結合のＫＤが、約１００ｐＭ〜約１０ｎＭである、請求項５３に記載の薬学的製剤。
【請求項６０】
Ｔ細胞活性を減弱させるためのＥＣ５０が、約１ｐＭ〜約１０ｐＭ、約１０ｐＭ〜約１００ｐＭ、約１００ｐＭ〜約１ｎＭ、約１ｎＭ〜約１０ｎＭ、または約１０ｎＭ〜約１００ｎＭである、請求項５６に記載の薬学的製剤。
【請求項６１】
Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントが、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％である、請求項５６に記載の薬学的製剤。
【請求項６２】
ＰＤ−１発現の最大低下パーセントが、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％である、請求項５２または５８に記載の薬学的製剤。
【請求項６３】
前記抗体が、モノクローナル抗体である、請求項１〜６２のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項６４】
前記抗体が、ヒト化抗体、ヒト抗体、またはキメラ抗体である、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項６５】
前記ヒト化抗体が、脱免疫化抗体または複合ヒト抗体である、請求項６４に記載の薬学的製剤。
【請求項６６】
前記抗体またはその抗原結合断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、または抗体断片から形成される多重特異性抗体である、請求項１〜６５のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項６７】
前記抗体またはその抗原結合断片が、薬剤にコンジュゲートする、請求項１〜６６のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項６８】
前記薬剤が、放射性同位体、金属キレート剤、酵素、蛍光化合物、生物発光化合物、及び化学発光化合物からなる群から選択される、請求項６７に記載の薬学的製剤。
【請求項６９】
緩衝液系をさらに含む、請求項１〜６８のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項７０】
前記緩衝液系が、酢酸緩衝液、コハク酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、及びクエン酸緩衝液からなる群から選択される、請求項６９に記載の薬学的製剤。
【請求項７１】
前記緩衝液系が、酢酸緩衝液である、請求項７０に記載の薬学的製剤。
【請求項７２】
前記緩衝液系が、コハク酸緩衝液である、請求項７０に記載の薬学的製剤。
【請求項７３】
前記緩衝液系が、ヒスチジン緩衝液である、請求項７０に記載の薬学的製剤。
【請求項７４】
前記緩衝液系が、クエン酸緩衝液である、請求項７０に記載の薬学的製剤。
【請求項７５】
前記緩衝液系の濃度が、０．１ｍＭ〜１Ｍの範囲内である、請求項１〜６９のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項７６】
前記緩衝液系の濃度が、１ｍＭ〜１００ｍＭの範囲内である、請求項７５に記載の薬学的製剤。
【請求項７７】
前記緩衝液系の濃度が、１０ｍＭである、請求項７６に記載の薬学的製剤。
【請求項７８】
前記緩衝液系のｐＨが、ｐＨ４〜６．５の範囲内である、請求項１〜７７のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項７９】
前記緩衝液系のｐＨが、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内である、請求項７８に記載の薬学的製剤。
【請求項８０】
前記緩衝液系のｐＨが、ｐＨ５．２である、請求項７９に記載の薬学的製剤。
【請求項８１】
ポリオールをさらに含む、請求項１〜８０のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項８２】
前記ポリオールが、糖、糖アルコール、及び糖酸からなる群から選択される、請求項８１に記載の薬学的製剤。
【請求項８３】
前記ポリオールが、糖である、請求項８２に記載の薬学的製剤。
【請求項８４】
前記糖が、スクロースである、請求項８３に記載の薬学的製剤。
【請求項８５】
前記スクロースの濃度が、５〜１０ｗ／ｖ％の範囲内である、請求項８４に記載の薬学的製剤。
【請求項８６】
前記スクロースの濃度が、８．５ｗ／ｖ％である、請求項８５に記載の薬学的製剤。
【請求項８７】
界面活性剤をさらに含む、請求項１〜８６のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項８８】
前記界面活性剤が、ポリソルベート−２０である、請求項８７に記載の薬学的製剤。
【請求項８９】
前記界面活性剤が、ポリソルベート−８０である、請求項８７に記載の薬学的製剤。
【請求項９０】
前記ポリソルベート−８０の濃度が、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％の範囲内である、請求項８９に記載の薬学的製剤。
【請求項９１】
前記ポリソルベート−８０の濃度が、０．００５ｗ／ｖ％である、請求項９０に記載の薬学的製剤。
【請求項９２】
ＰＤ−１に結合する抗体またはその抗原結合断片、１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含む、薬学的製剤。
【請求項９３】
前記抗体またはその抗原結合断片が、
（ａ）表１に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つの軽鎖可変領域（ＶＬ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ、及び／または
（ｂ）表２に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つの重鎖可変領域（ＶＨ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含む、請求項９２に記載の薬学的製剤。
【請求項９４】
前記薬学的製剤が、−７０℃±１０℃で保管された場合、少なくとも１２ヶ月間にわたって安定している、請求項１〜９３のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項９５】
前記薬学的製剤が、５℃±３℃で保管された場合、少なくとも６ヶ月間にわたって安定している、請求項１〜９３のいずれか一項に記載の薬学的製剤。
【請求項９６】
請求項１〜９５のいずれか一項に記載の薬学的製剤を作製する方法であって、
（ａ）細胞を培地で培養することであって、前記細胞が、前記抗体またはその抗原結合断片の重鎖、軽鎖、または重鎖及び軽鎖の両方をコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上のポリヌクレオチドを含む、前記培養することと、
（ｂ）前記培地を収集することと、
（ｃ）前記培地を一連の精製ステップに供することと、を含む、前記方法。
【請求項９７】
前記精製ステップが、
（ａ）親和性クロマトグラフィー、
（ｂ）ウイルス不活性化、
（ｃ）イオン交換クロマトグラフィー、
（ｄ）ウイルス濾過、及び
（ｅ）限外濾過／透析濾過を含む、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
前記親和性クロマトグラフィーが、タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーである、請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
前記イオン交換クロマトグラフィーが、陰イオン交換クロマトグラフィーである、請求項９７に記載の方法。
【請求項１００】
前記ウイルス不活性化ステップが、低ｐＨウイルス不活性化ステップである、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０１】
製剤化ステップをさらに含む、請求項９６〜１００のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１．関連出願の相互参照
本出願は、内容がその全体として参照により組み込まれる２０１７年３月２９日に出願された米国第６２／４７８，５２４号の利益を主張するものである。
【０００２】
２．分野
ヒトプログラム死−１（ＰＤ−１）に特異的に結合する抗体を含む製剤及びその製剤を作製する方法が本明細書に提供される。
【発明の概要】
【０００３】
３．要約
原薬は、通常、多様かつ特殊化された薬学的機能を果たす１つ以上の他の薬剤と組み合わせて製剤の一部として投与される。様々な種類の剤形が、薬学的賦形剤を選択的に使用して作製され得る。薬学的賦形剤は、様々な機能を有し、多くの異なる方法で、例えば、可溶化、希釈、増粘化、安定化、保存、着色、風味付け等で薬学的製剤に寄与している。活性原薬を製剤化する際に一般に考慮される特性には、剤形の生物学的利用能、製造の容易さ、投与の容易さ、及び安定性が含まれる。製剤化される活性原薬の多様な特性のため、剤形は、有利な物理的及び薬学的特性を達成するために、典型的には、その活性原薬に独自に調整された薬学的賦形剤を必要とする。
【０００４】
本開示は、ＰＤ−１に結合する抗体等の結合タンパク質を含む、ＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１、配列番号４３）に結合するタンパク質を含む製剤を提供する。抗体を含むかかる結合タンパク質は、ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１断片、及び／またはＰＤ−１エピトープに結合し得る。抗体を含むかかる結合タンパク質は、アゴニスト（例えば、ＰＤ−１リガンド様シグナル伝達を誘発する）であり得る。いくつかの実施形態では、結合タンパク質は、ＰＤ−１（例えば、非遮断抗体）との相互作用についてＰＤ−１リガンド（例えば、ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２）と競合しない。
【０００５】
本開示は、ある特定の実施形態では、（ｉ）ヒトＰＤ−１に結合し、（ｉｉ）ＰＤ−１リガンド様シグナル伝達を誘発し、かつ（ｉｉｉ）ＰＤ−１との相互作用についてＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２と競合しない結合タンパク質（その抗体または断片を含む）を含む製剤も提供する。
【０００６】
ＰＤ−１に結合する抗体等の結合タンパク質を含む、ＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１、配列番号４３）に結合するタンパク質を含む製剤を作製する方法も本明細書に提供される。
【０００７】
本明細書に提供される様々な製剤のいくつかの実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗ＰＤ−１抗体）は、６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）または６つ未満のＣＤＲを含む。他の実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗ＰＤ−１抗体）は、重鎖可変領域（ＶＨ）ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、軽鎖可変領域（ＶＬ）ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＣＤＲを含む。ある特定の実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗ＰＤ−１抗体）は、本明細書に記載のＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６と指定されるモノクローナル抗体またはそのヒト化変異形のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗ＰＤ−１抗体）は、ヒト免疫グロブリンアミノ酸配列またはその変異形のスキャフォールド領域またはフレームワーク領域（ＦＲ）（ＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、ＶＨ  ＦＲ４、ＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及び／またはＶＬ  ＦＲ４を含む）をさらに含む。
【０００８】
いくつかの実施形態では、製剤は、配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域及び配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体によって認識されるヒトＰＤ−１のエピトープに結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０００９】
他の実施形態では、製剤は、ヒトＰＤ−１への結合について配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域及び配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む抗体と競合する抗体またはその抗体断片を含む。
【００１０】
いくつかの実施形態では、製剤は、表１に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００１１】
他の実施形態では、製剤は、表２に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００１２】
他の実施形態では、製剤は、
（ａ）表３に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４を含むＶＬ、及び
（ｂ）表４に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００１３】
ある特定の実施形態では、製剤の抗体またはその抗原結合断片のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、２、及び３のアミノ酸配列を含み、製剤の抗体またはその抗原結合断片のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４、５、及び６のアミノ酸配列を含む。
【００１４】
さらに別の実施形態では、製剤の抗体またはその抗原結合断片のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号７、２、及び３のアミノ酸配列を含み、製剤の抗体またはその抗原結合断片のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４、５、及び６のアミノ酸配列を含む。
【００１５】
別の実施形態では、製剤は、配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、アミノ酸配列は、１つ以上のその保存的修飾を含む。
【００１６】
ある特定の実施形態では、製剤は、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、アミノ酸配列は、１つ以上のその保存的修飾を含む。
【００１７】
いくつかの実施形態では、製剤は、配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、アミノ酸配列は、１つ以上のその保存的修飾を含む。
【００１８】
ある特定の実施形態では、製剤は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、アミノ酸配列は、１つ以上のその保存的修飾を含む。
【００１９】
他の実施形態では、製剤は、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、アミノ酸配列は、１つ以上のその保存的修飾を含む。
【００２０】
別の実施形態では、製剤は、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、アミノ酸配列は、１つ以上のその保存的修飾を含む。
【００２１】
ある特定の実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００２２】
いくつかの実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００２３】
他の実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び（ｂ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００２４】
一実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び（ｂ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００２５】
別の実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び（ｂ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００２６】
ある特定の実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び（ｂ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００２７】
いくつかの実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００２８】
他の実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００２９】
ある特定の実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ、及び（ｂ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨを含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００３０】
いくつかの実施形態では、ＶＬのアミノ酸配列は、１つ以上のその保存的修飾を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨのアミノ酸配列は、１つ以上のその保存的修飾を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬ及びＶＨのアミノ酸配列は、１つ以上のその保存的修飾を含む。
【００３１】
いくつかの実施形態では、製剤は、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、製剤は、変異形ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む抗体を含む。
【００３２】
一実施形態では、製剤は、ヒトＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ  Ｆｃ領域を含む抗体を含む。
【００３３】
いくつかの実施形態では、製剤は、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、製剤は、変異形ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域を含む抗体を含む。
【００３４】
別の実施形態では、製剤は、ヒトＩｇＧ４Ｐ  Ｆｃ領域を含む抗体を含む。
【００３５】
なお別の実施形態では、製剤は、ヒトＩｇＧ４ＰＥ  Ｆｃ領域を含む抗体を含む。
【００３６】
いくつかの実施形態では、製剤は、配列番号４１のアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域をさらに含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００３７】
他の実施形態では、製剤は、配列番号３６〜４０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖Ｆｃ領域をさらに含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００３８】
さらに別の実施形態では、製剤は、配列番号４１のアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域及び配列番号３６〜４０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖Ｆｃ領域をさらに含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００３９】
いくつかの実施形態では、製剤は、配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００４０】
別の実施形態では、製剤は、配列番号３２のアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００４１】
他の実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び（ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００４２】
ある特定の実施形態では、製剤は、配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００４３】
他の実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００４４】
一実施形態では、製剤は、配列番号３４のアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００４５】
さらに別の実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び（ｂ）配列番号３４のアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００４６】
いくつかの実施形態では、製剤は、配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００４７】
他の実施形態では、製剤は、（ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖、及び（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００４８】
ある特定の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内の残基１００〜１０９のうちの少なくとも１つに結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００４９】
いくつかの実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内の残基１００〜１０５のうちの少なくとも１つに結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５０】
特定の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される少なくとも１つの残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５１】
いくつかの実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される２つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５２】
他の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される３つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５３】
ある特定の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される４つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５４】
一実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される５つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５５】
別の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される６つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５６】
さらに別の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される７つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５７】
なお別の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される８つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５８】
ある特定の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される９つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００５９】
他の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群からの１０個全ての残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００６０】
一実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００６１】
別の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＴ５１に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００６２】
特定の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＳ５７に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００６３】
具体的な一実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＬ１００に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００６４】
いくつかの実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ１０２に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００６５】
他の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＧ１０３に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００６６】
別の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＲ１０４に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００６７】
さらに別の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＧ１０３及びＲ１０４に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００６８】
なお別の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＤ１０５に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００６９】
いくつかの実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＨ１０７に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００７０】
ある特定の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＳ１０９に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００７１】
一実施形態では、ヒトＰＤ−１のエピトープは、ＰＤ−Ｌ１結合部位とは別個である。別の実施形態では、ヒトＰＤ−１のエピトープは、ＰＤ−Ｌ２結合部位とは別個である。具体的な実施形態では、ヒトＰＤ−１のエピトープは、ＰＤ−Ｌ１結合部位及びＰＤ−Ｌ２結合部位のいずれとも別個である。
【００７２】
ある実施形態では、製剤は、ヒトＰＤ−１及び／またはサルＰＤ−１（例えば、カニクイザル）に特異的に結合するが、齧歯類ＰＤ−１には特異的に結合しない抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００７３】
ある特定の実施形態では、製剤は、減弱した抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）活性を有する抗体またはその抗原結合断片を含む。他の実施形態では、製剤は、減弱した補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）活性を有する抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、減弱したＡＤＣＣ活性及び／または減弱したＣＤＣ活性を有する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【００７４】
一態様では、ヒトＰＤ−１のエピトープに結合する抗体またはその抗原結合断片を含む製剤が本明細書に提供され、その抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）Ｔ細胞活性を減弱させる、及び／または（ｂ）Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現を低下させる。
【００７５】
一実施形態では、製剤は、Ｔ細胞活性を減弱させる抗体を含む。別の実施形態では、製剤は、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現を低下させる抗体を含む。
【００７６】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、Ｔ細胞エフェクター機能によって測定される。
【００７７】
ある特定の実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＴ細胞活性の減弱は、ヒトＰＢＭＣまたは全血試料で生じる。
【００７８】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、サイトカイン産生の阻害によって測定される。
【００７９】
他の実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によって阻害されるサイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、及び／またはＩＦＮ−γを含む。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、及びＴＮＦ−αからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−６である。別の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１２である。いくつかの他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７である。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２２である。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２３である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦである。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＦＮ−γである。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＴＮＦ−αである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＬ−１７である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＦＮ−γである。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７及びＩＦＮ−γである。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、及びＩＦＮ−γである。上述のサイトカインのうちの２つ、３つ、またはそれ以上の他の組み合わせも企図される。
【００８０】
ある特定の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間後に生じる。別の実施形態では、低下は、接触の早ければ６時間後に生じる。さらに別の実施形態では、低下は、接触の早ければ８時間後に生じる。なお別の実施形態では、低下は、接触の早ければ１０時間後に生じる。一実施形態では、低下は、接触の早ければ１２時間後に生じる。別の実施形態では、低下は、接触の早ければ１４時間後に生じる。さらに別の実施形態では、低下は、接触の早ければ１６時間後に生じる。なお別の実施形態では、低下は、接触の早ければ１８時間後に生じる。一実施形態では、低下は、接触の早ければ２０時間後に生じる。別の実施形態では、低下は、接触の早ければ２２時間後に生じる。さらに別の実施形態では、低下は、接触の早ければ２４時間後に生じる。いくつかの実施形態では、接触は、製剤の抗体とである。他の実施形態では、接触は、製剤のその抗原結合断片とである。
【００８１】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、サイトカイン阻害に先行する。一実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ６時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。さらに別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ８時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。なお別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１０時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。一実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１２時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１４時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。さらに別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１６時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。なお別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１８時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。一実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２０時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２２時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。さらに別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２４時間後に生じ、かつサイトカイン阻害に先行する。
【００８２】
他の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、サイトカイン阻害と同時である。一実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ６時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。さらに別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ８時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。なお別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１０時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。一実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１２時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１４時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。さらに別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１６時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。なお別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１８時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。一実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２０時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２２時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。さらに別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２４時間後に生じ、かつサイトカイン阻害と同時である。
【００８３】
さらに他の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、サイトカイン阻害後である。一実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ６時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。さらに別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ８時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。なお別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１０時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。一実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１２時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１４時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。さらに別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１６時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。なお別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１８時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。一実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２０時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２２時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。さらに別の実施形態では、低下は、製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２４時間後に生じ、かつサイトカイン阻害後である。
【００８４】
一実施形態では、精製ヒトＰＤ−１への結合についての製剤の抗体またはその抗原結合断片のＫＤは、約１ｎＭ〜約１００ｎＭである。別の実施形態では、細胞表面上に発現したヒトＰＤ−１への結合についての製剤の抗体またはその抗原結合断片のＫＤは、約１００ｐＭ〜約１０ｎＭである。別の実施形態では、細胞表面上に発現したサルＰＤ−１への結合についての製剤の抗体またはその抗原結合断片のＫＤは、約１００ｐＭ〜約１０ｎＭである。
【００８５】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性を減弱させるための製剤の抗体またはその抗原結合断片のＥＣ５０は、約１ｐＭ〜約１０ｐＭ、約１０ｐＭ〜約１００ｐＭ、約１００ｐＭ〜約１ｎＭ、約１ｎＭ〜約１０ｎＭ、または約１０ｎＭ〜約１００ｎＭである。
【００８６】
他の実施形態では、製剤の抗体またはその抗原結合断片によるＴ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％である。
【００８７】
別の実施形態では、製剤の抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％である。
【００８８】
ある特定の実施形態では、製剤は、モノクローナル抗体である抗体を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、ヒト化抗体、ヒト抗体、またはキメラ抗体である抗体を含む。別の実施形態では、製剤は、脱免疫化抗体または複合ヒト抗体であるヒト化抗体を含む。ある特定の実施形態では、製剤は、ヒト化抗体である抗体を含む。具体的な実施形態では、製剤は、ヒトＰＤ−１に特異的に結合するヒト化抗体である抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化モノクローナル抗体である。
【００８９】
ある特定の実施形態では、製剤は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、ダイアボディ、トリアボディ、またはテトラボディである抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、抗体断片から形成される多重特異性抗体である抗体またはその抗原結合断片を含む。他の実施形態では、製剤は、二重特異性抗体である抗体またはその抗原結合断片を含む。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体断片ではない。
【００９０】
いくつかの実施形態では、製剤は、薬剤にコンジュゲートする抗体またはその抗原結合断片を含む。一実施形態では、薬剤は、放射性同位体、金属キレート剤、酵素、蛍光化合物、生物発光化合物、または化学発光化合物である。
【００９１】
ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、緩衝液を含む。いくつかの実施形態では、緩衝液は、酢酸緩衝液、コハク酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、またはクエン酸緩衝液である。一実施形態では、緩衝液は、酢酸緩衝液である。別の実施形態では、緩衝液は、コハク酸緩衝液である。さらに別の実施形態では、緩衝液は、ヒスチジン緩衝液である。なお別の実施形態では、緩衝液は、クエン酸緩衝液である。
【００９２】
いくつかの実施形態では、緩衝液の濃度は、０．１ｍＭ〜１Ｍである。他の実施形態では、緩衝液の濃度は、１ｍＭ〜１００ｍＭである。他の実施形態では、緩衝液の濃度は、１０ｍＭである。
【００９３】
一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１Ｍの濃度の酢酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。
【００９４】
一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１Ｍの濃度のコハク酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。
【００９５】
一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１Ｍの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。
【００９６】
一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１Ｍの濃度のクエン酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。
【００９７】
ある特定の実施形態では、緩衝液のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内である。いくつかの実施形態では、緩衝液のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内である。他の実施形態では、緩衝液のｐＨは、約５．２である。他の実施形態では、緩衝液のｐＨは、５．２である。一実施形態では、緩衝液は、１０ｍＭ酢酸緩衝液であり、ｐＨは、約５．２である。別の実施形態では、緩衝液は、１０ｍＭコハク酸緩衝液であり、ｐＨは、約５．２である。さらに別の実施形態では、緩衝液は、１０ｍＭヒスチジン緩衝液であり、ｐＨは、約５．２である。なお別の実施形態では、緩衝液は、１０ｍＭクエン酸緩衝液であり、ｐＨは、約５．２である。
【００９８】
ある特定の実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内である。いくつかの実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内である。他の実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２である。他の実施形態では、製剤のｐＨは、５．２である。
【００９９】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、酢酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。
【０１００】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、コハク酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、ヒスチジン緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。
【０１０１】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、クエン酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。
【０１０２】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、界面活性剤をさらに含む。ある特定の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。
【０１０３】
一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０１０４】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、酢酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０１０５】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、コハク酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０１０６】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、ヒスチジン緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０１０７】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、クエン酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ポリオールをさらに含む。ある特定の実施形態では、ポリオールは、糖、糖アルコール、または糖酸である。一実施形態では、ポリオールは、糖である。別の実施形態では、ポリオールは、糖アルコールである。さらに別の実施形態では、ポリオールは、糖酸である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、スクロースである。一実施形態では、スクロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、スクロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マルトースである。一実施形態では、マルトースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マルトースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、トレハロースである。一実施形態では、トレハロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、トレハロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マンニトールである。一実施形態では、マンニトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マンニトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、ソルビトールである。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。
【０１０９】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、酢酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。ある特定の実施形態では、ポリオールは、糖、糖アルコール、または糖酸である。一実施形態では、ポリオールは、糖である。別の実施形態では、ポリオールは、糖アルコールである。さらに別の実施形態では、ポリオールは、糖酸である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、スクロースである。一実施形態では、スクロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、スクロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マルトースである。一実施形態では、マルトースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マルトースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、トレハロースである。一実施形態では、トレハロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、トレハロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マンニトールである。一実施形態では、マンニトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マンニトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、ソルビトールである。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０１１０】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、コハク酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。ある特定の実施形態では、ポリオールは、糖、糖アルコール、または糖酸である。一実施形態では、ポリオールは、糖である。別の実施形態では、ポリオールは、糖アルコールである。さらに別の実施形態では、ポリオールは、糖酸である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、スクロースである。一実施形態では、スクロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、スクロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マルトースである。一実施形態では、マルトースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マルトースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、トレハロースである。一実施形態では、トレハロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、トレハロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マンニトールである。一実施形態では、マンニトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マンニトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、ソルビトールである。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０１１１】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、ヒスチジン緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。ある特定の実施形態では、ポリオールは、糖、糖アルコール、または糖酸である。一実施形態では、ポリオールは、糖である。別の実施形態では、ポリオールは、糖アルコールである。さらに別の実施形態では、ポリオールは、糖酸である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、スクロースである。一実施形態では、スクロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、スクロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マルトースである。一実施形態では、マルトースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マルトースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、トレハロースである。一実施形態では、トレハロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、トレハロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マンニトールである。一実施形態では、マンニトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マンニトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、ソルビトールである。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０１１２】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、クエン酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。ある特定の実施形態では、ポリオールは、糖、糖アルコール、または糖酸である。一実施形態では、ポリオールは、糖である。別の実施形態では、ポリオールは、糖アルコールである。さらに別の実施形態では、ポリオールは、糖酸である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、スクロースである。一実施形態では、スクロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、スクロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マルトースである。一実施形態では、マルトースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マルトースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、トレハロースである。一実施形態では、トレハロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、トレハロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マンニトールである。一実施形態では、マンニトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マンニトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、ソルビトールである。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０１１３】
具体的な実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供され、この製剤は、５．２のｐＨを有し、（ｉ）１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液、（ｉｉ）８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び（ｉｉｉ）０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含む。別の具体的な実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供され、この製剤は、５．２のｐＨを有し、（ｉ）１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液、（ｉｉ）８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び（ｉｉｉ）０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含む。
【０１１４】
本明細書に提供される様々な薬学的製剤のある特定の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤の他の実施形態では、製剤は、ＰＤ−１抗原結合断片を含む。
【０１１５】
本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表１に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表１に記載のＰＤ１ＡＢ−１のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表１に記載のＰＤ１ＡＢ−２のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表１に記載のＰＤ１ＡＢ−３のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表１に記載のＰＤ１ＡＢ−４のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表１に記載のＰＤ１ＡＢ−５のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表１に記載のＰＤ１ＡＢ−６のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬを含むＰＤ−１抗体を含む。
【０１１６】
本明細書に提供される様々な薬学的製剤の他の実施形態では、製剤は、表２に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表２に記載のＰＤ１ＡＢ−１のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表２に記載のＰＤ１ＡＢ−２のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表２に記載のＰＤ１ＡＢ−３のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表２に記載のＰＤ１ＡＢ−４のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表２に記載のＰＤ１ＡＢ−５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、表２に記載のＰＤ１ＡＢ−６のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。
【０１１７】
本明細書に提供される様々な薬学的製剤の他の実施形態では、製剤は、（ａ）表１に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ、及び（ｂ）表２に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤の一実施形態では、製剤は、（ａ）表１に記載のＰＤ１ＡＢ−１のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ、及び（ｂ）表２に記載のＰＤ１ＡＢ−１のうちのいずれか１つのＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤の一実施形態では、製剤は、（ａ）表１に記載のＰＤ１ＡＢ−２のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ、及び（ｂ）表２に記載のＰＤ１ＡＢ−２のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤の一実施形態では、製剤は、（ａ）表１に記載のＰＤ１ＡＢ−３のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ、及び（ｂ）表２に記載のＰＤ１ＡＢ−３のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤の一実施形態では、製剤は、（ａ）表１に記載のＰＤ１ＡＢ−４のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ、及び（ｂ）表２に記載のＰＤ１ＡＢ−４のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤の一実施形態では、製剤は、（ａ）表１に記載のＰＤ１ＡＢ−５のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ、及び（ｂ）表２に記載のＰＤ１ＡＢ−５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤の一実施形態では、製剤は、（ａ）表１に記載のＰＤ１ＡＢ−６のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ、及び（ｂ）表２に記載のＰＤ１ＡＢ−６のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨを含むＰＤ−１抗体を含む。
【０１１８】
本明細書に提供される様々な薬学的製剤のある特定の実施形態では、製剤は、ＰＤ１ＡＢ−１を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、ＰＤ１ＡＢ−２を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤の他の実施形態では、製剤は、ＰＤ１ＡＢ−３を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、ＰＤ１ＡＢ−４を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤の他の実施形態では、製剤は、ＰＤ１ＡＢ−５を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、ＰＤ１ＡＢ−６を含む。ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、ＩｇＧ１抗体であるＰＤ−１抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＩｇＧ１変異形抗体であるＰＤ−１抗体を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３を含む。本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、製剤は、ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐを含む。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、水性薬学的製剤である。
【０１２０】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、安定している。本明細書に提供される薬学的製剤の安定性は、選択された温度で選択された期間にわたって測定され得る。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約３ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約４ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約５ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約６ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約１２ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約１８ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約２４ヶ月間にわたって安定している。上記の期間の中間の値及び範囲、例えば、約３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４ヶ月間も企図される。加えて、上限及び／または下限として上記の値のうちのいずれかの組み合わせを使用する値の範囲が含まれるよう意図される。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、−７０℃で安定している。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、４℃で安定している。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、２５℃で安定している。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、３０℃で安定している。具体的な実施形態では、薬学的製剤は、−７０℃±１０℃で保管された場合、少なくとも１２ヶ月間にわたって安定している。他の実施形態では、薬学的製剤は、５℃±３℃で保管された場合、少なくとも６ヶ月間にわたって安定している。
【０１２１】
本明細書に開示の様々な薬学的製剤を作製する方法がさらに本明細書に提供され、この方法は、（ａ）細胞を培地で培養することであって、細胞が、本明細書に提供される抗体またはその抗原結合断片の重鎖、軽鎖、または重鎖及び軽鎖の両方をコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上のポリヌクレオチドを含む、培養することと、（ｂ）培地を収集することと、（ｃ）培地を一連の精製ステップに供することと、を含む。
【０１２２】
本方法のある特定の実施形態では、精製ステップは、（ｉ）親和性クロマトグラフィー、（ｉｉ）ウイルス不活性化、（ｉｉｉ）イオン交換クロマトグラフィー、（ｉｖ）ウイルス濾過、及び（ｖ）限外濾過／透析濾過を含む。一実施形態では、親和性クロマトグラフィーは、タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーである。別の実施形態では、ウイルス不活性化ステップは、低ｐＨウイルス不活性化ステップである。さらに別の実施形態では、イオン交換クロマトグラフィーは、陰イオン交換クロマトグラフィーである。なお別の実施形態では、親和性クロマトグラフィーは、タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーであり、ウイルス不活性化ステップは、低ｐＨウイルス不活性化ステップであり、イオン交換クロマトグラフィーは、陰イオン交換クロマトグラフィーである。
【０１２３】
本方法のある特定の実施形態では、精製ステップは、（ｉ）タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィー、（ｉｉ）低ｐＨウイルス不活性化ステップ、（ｉｉｉ）陰イオン交換クロマトグラフィー、（ｉｖ）ウイルス濾過ステップ、及び（ｖ）限外濾過／透析濾過を含む。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示の様々な薬学的製剤を作製する方法は、製剤化ステップをさらに含む。
【図面の簡単な説明】
【０１２５】
４．図面の簡単な説明
【図１】図１Ａ〜１Ｂは、Ｔ細胞を減弱させる抗ＰＤ−１抗体（ＰＤ１ＡＢ）が、ＰＤ−１に結合するＰＤ−Ｌ１（ＰＤ−Ｌ１−ＤｙＬ６５０とは、色素ＤｙＬ６５０にコンジュゲートするＰＤ−Ｌ１を意味する）と競合しないことを示す：（Ａ）ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、及びＰＤ１ＡＢ−６、（Ｂ）ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、及びＰＤ１ＡＢ−５。アンタゴニスト抗体であるＭＤＸ  ４Ｈ１は、ＰＤ−１に結合するＰＤ−Ｌ１を遮断する。
【０１２６】
【図２】ＰＤ−１：ＰＤ１ＡＢ−６  Ｆａｂ相互作用部位が、ＰＤ−１：ＰＤ−Ｌ１相互作用部位に対してＰＤ−１の遠位側にあることを示す。
【０１２７】
【図３】ＰＤ１ＡＢ−６  ＦａｂがＰＤ−１  βシートに対して結合し、実質的な相互作用が残基１００〜１０５で構成されたＰＤ−１ループで形成されていることを示す。
【０１２８】
【図４】ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１の重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）ならびにその変異形ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４ＰのＨＣのアミノ酸配列を示す。
【０１２９】
【図５】図５Ａ〜５Ｂは、ＣＨＯ細胞上に発現したカニクイザル（Ａ）またはヒト（Ｂ）ＰＤ−１に対するＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１親和性を示す。
【０１３０】
【図６】ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、アイソタイプ対照、及びヒトＰＤ−Ｌ１  Ｆｃ融合タンパク質（ｈＰＤ−Ｌ１  Ｆｃ）の、ＣＤ４＋Ｔ細胞上にゲートをかけた活性化ヒトＰＢＭＣへの結合を示す。
【０１３１】
【図７】ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、アイソタイプ対照、及びヒトＰＤ−Ｌ１  Ｆｃ融合タンパク質（ｈＰＤ−Ｌ１  Ｆｃ）の、ＣＤ４＋Ｔ細胞上にゲートをかけた活性化カニクイザルＰＢＭＣへの結合を示す。
【０１３２】
【図８】図８Ａ〜８Ｄは、Ｃｉｓｂｉｏ  Ｔａｇ−ｌｉｔｅ（商標）検出を使用した、ＨＥＫ２９３細胞上に発現したＦｃγＲＩ（Ａ）、ＦｃγＲＩＩＩａ（Ｖ１５８）（Ｂ）、またはＦｃγＲＩＩｂ（Ｃ）に結合するＰＤ１ＡＢ−６変異形、及び（Ｄ）ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＩａ（Ｖ１５８）、またはＦｃγＲＩＩｂに結合するＰＤ１ＡＢ−６変異形のＥＣ５０値を示す。
【０１３３】
【図９】図９Ａ〜９Ｃは、ＦＡＣＳを使用した、ＣＨＯ細胞上に発現したＦｃγＲＩＩＩａ（Ｖ１５８）（Ａ）またはＦｃγＲＩ（Ｂ）に結合するＰＤ１ＡＢ−６変異形、及び（Ｃ）ＦｃγＲＩまたはＦｃγＲＩＩＩａに結合するＰＤ−１抗体変異形のＥＣ５０値を示す。
【０１３４】
【図１０】図１０Ａ〜１０Ｂは、４体の個別の健常ドナーのうちの２つの代表：（Ａ）ドナー７及び（Ｂ）ドナー８のＰＤ１ＡＢ−６変異形及び対照ヒトＩｇＧ１  ＦｃのＡＤＣＣ活性を示す。
【０１３５】
【図１１】ＰＤ１ＡＢ−６変異形のＣＤＣ活性を示す。データは、３つの独立した実験：（ｉ）ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１及び抗ヒトＣＤ２０  ＩｇＧ１のＣＤＣ活性、（ｉｉ）ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１及びＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３のＣＤＣ活性、（ｉｉｉ）ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐならびに市販のヒトＩｇＧ４アイソタイプ対照抗体及びヒトＩｇＧ１  Ｆｃタンパク質のＣＤＣ活性の代表である。
【０１３６】
【図１２】刺激後２４時間時点での培養上清中のＩＬ−２レベルによって測定される、ヒトＰＢＭＣアッセイにおけるＰＤ１ＡＢ−６変異形の強力な減弱活性を示す。
【０１３７】
【図１３】ヒト全血アッセイにおけるＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の活性を示す。このグラフは、ＩＦＮ−γ阻害のＥＣ５０を計算するために使用されたドナー４の代表的な曲線を示す。この表は、４体の健常ドナーについてのＰＤ１ＡＢ−６変異形及びＣＴＬＡ４ＩｇでのＩＦＮ−γ阻害のＥＣ５０値を示す。
【０１３８】
【図１４】図１４Ａ〜１４Ｃは、（Ａ）４８時間にわたって抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８で活性化されたヒトＰＢＭＣ中のＣＤ３＋Ｔ細胞におけるアイソタイプ対ＰＤ−１染色、（Ｂ）アイソタイプＩｇＧ１処理ＰＢＭＣ対ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１処理ＰＢＭＣにおけるＰＤ−１発現（検出抗ＰＤ−１抗体はＰＤ１ＡＢ−６によって遮断されない）、ならびに（Ｃ）抗ＣＤ３＋抗ＣＤ２８で活性化された３体の異なるドナー由来のヒトＰＢＭＣ中のＣＤ３＋Ｔ細胞上のＰＤ−１発現、及びアイソタイプＩｇＧ１またはＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１のいずれかの３つの異なる濃度によって決定された、ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１によるＰＤ−１発現の低下を示す。
【０１３９】
【図１５】図１５Ａ〜１５Ｃは、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００での、ＰＤ−１抗原に結合する（Ａ）ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、（Ｂ）ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ、及び（Ｃ）ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３を示す。
【０１４０】
【図１６】ＰＤ１ＡＢ−６変異形の示差走査熱量測定分析を示す。
【０１４１】
【図１７】あるｐＨ範囲にわたる単量体含有量の週変化によって測定された、４０℃でのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３安定性を示す。
【０１４２】
【図１８】一連の緩衝液にわたるＤＬＳ及びＣＨＯ細胞に発現したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３のｐＨによって測定された、４０℃熱応力条件下での８週間にわたるサブミクロン粒径の増加を示す。
【０１４３】
【図１９】一連の緩衝液にわたるＡ３６０及びＣＨＯ細胞に発現したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３のｐＨによって測定された、４０℃熱応力条件下での８週間にわたる濁度の増加率を示す。
【０１４４】
【図２０】あるｐＨ範囲にわたる単量体含有量の週変化によって測定された、５℃でのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３安定性を示す。
【０１４５】
【図２１】図２１Ａ〜２１Ｂは、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬の製造工程の流れ図を図解し、（Ａ）は、上流細胞培養及び収集ステップを示し、（Ｂ）は、下流精製ステップを示す。
【０１４６】
【図２２】１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、及び１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３抗体を含有する製剤試料に対するｐＨ及び界面活性剤濃度（例えば、ＰＳ−８０）の影響についての２アーム（２×２）完全要因モデリングの実験的設計の概略図である。
【０１４７】
【図２３】図２３Ａ〜２３Ｄは、候補製剤中の抗体の単量体、高分子量（ＨＭＷ）種（凝集体）、及び低分子量（ＬＭＷ）種（断片またはクリップ）の分率を定量化するための異なる時点でのサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）の結果を示す。（Ａ）４℃で１２週間保管された後に異なるｐＨ（すなわち、ｐＨ５．２、５．５、及び５．８）に調整した、１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、０．００５ｗ／ｖ％のＰＳ−８０を有する候補抗体製剤のＳＥＣ分析の結果。−８０℃で保管された対照製剤を含めた。左側のパネルは、右側のパネル内の１０と２０との間（溶出時間（分））のより低い領域の拡大図である。４℃で保管された候補製剤中の抗体のＨＭＷの分率（％）の（Ｂ）１２週間以内、（Ｃ）２６週間以内、または（Ｄ）１４ヶ月以内の変化を示す。エラーバーは、内部標準の反復注射の標準偏差であり、方法／組み込みの精度を表す。
【０１４８】
【図２４】図２４Ａ〜２４Ｃは、候補製剤中の抗体の単量体、ＨＭＷ種（凝集体）、及びＬＭＷ種（断片またはクリップ）の分率を定量化するための異なる時点でのＳＥＣの結果を示す。（Ａ）２５℃で１２週間保管された後に異なるｐＨ（すなわち、ｐＨ５．２、５．５、及び５．８）に調整した、１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、０．００５ｗ／ｖ％のＰＳ−８０を有する候補抗体製剤のＳＥＣ分析の結果。−８０℃で保管された対照製剤を含めた。左側のパネルは、右側のパネル内の１０と２０との間（溶出時間（分））のより低い領域の拡大図である。２５℃で保管された候補製剤中の抗体のＨＭＷの分率（％）の（Ｂ）１２週間以内または（Ｃ）２６週間以内の変化を示す。エラーバーは、内部標準の反復注射の標準偏差であり、方法／組み込みの精度を表す。
【０１４９】
【図２５】図２５Ａ〜２５Ｃは、候補製剤中の抗体の単量体、ＨＭＷ種（凝集体）、及びＬＭＷ種（断片またはクリップ）の分率を定量化するための異なる時点でのＳＥＣの結果を示す。（Ａ）４０℃で４週間保管された後に異なるｐＨ（すなわち、ｐＨ５．２、５．５、及び５．８）に調整した、１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、０．００５ｗ／ｖ％のＰＳ−８０を有する候補抗体製剤のＳＥＣ分析の結果。−８０℃で保管された対照製剤を含めた。左側のパネルは、右側のパネル内の１０と２０との間（溶出時間（分））のより低い領域の拡大図である。４０℃で保管された候補製剤中の抗体の（Ｂ）ＨＭＷまたは（Ｃ）ＬＭＷの分率（％）の４週間以内の変化を示す。エラーバーは、内部標準の反復注射の標準偏差であり、方法／組み込みの精度を表す。
【０１５０】
【図２６】候補製剤を５℃、２５℃、または４０℃で４週間保管した後の１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、ならびにＰＳ−８０含有量（０．００５ｗ／ｖ％からの範囲）及びｐＨ値（ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８の範囲）の異なる組み合わせを有する候補抗体製剤のＣＥ−ＳＤＳ分析の結果を示す。各バーは、ＣＥ−ＳＤＳによって検出された候補製剤中の抗体のＬＭＷ分率（％）の定量化を示す。−８０℃で保管された対照製剤を含めた。
【０１５１】
【図２７】候補製剤を４℃で２６週間保管した後の１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、ならびにＰＳ−８０含有量（０．００５ｗ／ｖ％からの範囲）及びｐＨ値（ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８の範囲）の異なる組み合わせを有する候補抗体製剤のＣＥ−ＳＤＳ分析の結果を示す。ＨＭＷ、単量体、及びＬＭＷ分率を表すピークを示す。
【０１５２】
【図２８】図２８Ａ〜２８Ｂは、候補製剤を（Ａ）４℃で１２週間または（Ｂ）２５℃で１２週間保管した後の１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、ならびにＰＳ−８０含有量（０．００５ｗ／ｖ％からの範囲）及びｐＨ値（ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８の範囲）の異なる組み合わせを有する候補抗体製剤のフローイメージング顕微鏡法の結果を示す。２μｍ以上、１０μｍ以上、及び２５μｍ以上の粒径範囲のサブビジブル粒子の密度（カウント／ｍＬ）を示す。
【０１５３】
【図２９】候補製剤を４℃で１２週間及び／または２６週間保管した後の１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、ならびにＰＳ−８０含有量（０．００５ｗ／ｖ％からの範囲）及びｐＨ値（ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８の範囲）の異なる組み合わせを有する候補抗体製剤のフローイメージング顕微鏡法の結果を示す。１０μｍ以上及び２５μｍ以上の粒径範囲のサブビジブル粒子の密度（カウント／ｍＬ）を示す。
【０１５４】
【図３０】図３０Ａ〜３０Ｃは、陽イオン交換クロマトグラフ（ＣＥＸ）を使用して評価された候補製剤中の抗体に対する電荷アイソフォーム分布の結果を示す。（Ａ）ゼロ時点（Ｔ０、すなわち、候補製剤を４℃または２５℃で保管する前）での製剤化された抗体におけるＣＥＸ分析の代表的な結果。それぞれ、製剤化された抗体の主要種、酸性種、及び塩基性種を表す３つのピークを示す。候補製剤を４℃または２５℃で１２週間保管した後の１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、ならびにＰＳ−８０含有量（０．００５ｗ／ｖ％からの範囲）及びｐＨ値（ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８の範囲）の異なる組み合わせを有する候補製剤のＣＥＸ分析によって特定された（Ｂ）主要抗体種（主ピーク）または（Ｃ）酸性抗体種（酸性ピーク）の定量化も示す。０時点でのデータを対照として含める。
【０１５５】
【図３１】候補製剤を４℃で１２週間または２６週間保管した後の１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、ならびにＰＳ−８０含有量（０．００５ｗ／ｖ％からの範囲）及びｐＨ値（ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８の範囲）の異なる組み合わせを有する候補製剤のＣＥＸ分析によって特定された主要抗体種（主ピーク）の定量化を示す。０時点でのデータを対照として含める。
【０１５６】
【図３２】候補製剤を４℃で１２週間または２５℃で１２週間保管した後の１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、ならびにＰＳ−８０含有量（０．００５ｗ／ｖ％からの範囲）及びｐＨ値（ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８の範囲）の異なる組み合わせを有する候補抗体製剤の逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）の代表的な結果を示す。ＨＣ：重鎖、ＬＣ：軽鎖。
【０１５７】
【図３３】図３３Ａ〜３３Ｂは、製剤試料中の抗体のＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）分析の結果を示す。（Ａ）４０℃で４週間保管された（左）及び０時点での（右）候補製剤の代表的なＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）アッセイ結果。（Ｂ）０時点での、または候補製剤を２５℃で４週間、もしくは４０℃で４週間、もしくは４℃で１２週間、もしくは２５℃で１２週間保管した後の１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、ならびにＰＳ−８０含有量（０．００５ｗ／ｖ％からの範囲）及びｐＨ値（ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８の範囲）の異なる組み合わせを有する候補抗体製剤のＫＤ（ｎＭ）値の定量化。
【０１５８】
【図３４】図３４Ａ〜３４Ｂは、ＳＥＣ及びＭＦＩで試験された候補製剤の液体安定性に対する撹拌の影響の結果を示す。（Ａ）候補製剤を４℃で最大２４時間にわたって撹拌した後の１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、０．００１ｗ／ｖ％または０．０１５ｗ／ｖ％のＰＳ−８０を有する候補製剤のＳＥＣ分析の結果。０時間、４時間、８時間、及び２４時間時点でのＨＭＷ分率の定量化を示した。（Ｂ）候補製剤を４℃で２４時間にわたって撹拌した後の１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、０．００１ｗ／ｖ％または０．０１５ｗ／ｖ％のＰＳ−８０を有する候補製剤フローイメージング顕微鏡法の結果。２μｍ以上、１０μｍ以上、及び２５μｍ以上の粒径範囲のサブビジブル粒子の密度（カウント／ｍＬ）を示した。
【０１５９】
【図３５】図３５Ａ〜３５Ｃは、ＳＥＣ及びＭＦＩで試験された候補製剤の液体安定性に対する繰り返し凍結融解サイクルの影響を示す。（Ａ）候補製剤が繰り返しサイクルを経た後の、１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、ならびにＰＳ−８０含有量（０．００５ｗ／ｖ％からの範囲）及びｐＨ値（ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８の範囲）の異なる組み合わせを有する候補製剤のＳＥＣ分析の結果。０回、３回、または５回の凍結融解サイクル後の単量体分率の定量化を示した。（Ｂ）１０μｍ以上及び（Ｃ）２５μｍ以上の粒径範囲のサブビジブル粒子の密度は、候補製剤が５回の凍結融解サイクルを経た後、１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、ならびにＰＳ−８０含有量（０．００５ｗ／ｖ％からの範囲）及びｐＨ値（ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８の範囲）の異なる組み合わせを有する候補製剤のフローイメージング顕微鏡法によって決定された静脈内投与用のＵＳＰ標準をはるかに下回ったままであった。
【発明を実施するための形態】
【０１６０】
５．詳細な説明
ヒト及び／またはカニクイザルＰＤ−１を含むＰＤ−１に結合する抗体等の結合タンパク質の薬学的製剤、ならびにかかる薬学的製剤を作製する方法が本明細書に提供される。
【０１６１】
本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、抗体は、ヒト及び／またはカニクイザルＰＤ−１に結合する。いくつかの実施形態では、ヒト及び／またはカニクイザルＰＤ−１に結合する抗体等の結合タンパク質は、齧歯類ＰＤ−１に結合しない。ある特定の実施形態では、本明細書に開示の抗体を含むＰＤ−１結合タンパク質は、アゴニストである（例えば、ＰＤ−１リガンドの効果を模倣し、ＰＤ−１シグナル伝達を誘発することができる）。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるＰＤ−１に対する抗体等の結合タンパク質は、（ｉ）ヒト及び／またはカニクイザルＰＤ−１に結合し、（ｉｉ）結合についてＰＤ−１リガンド（例えば、ＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２）と競合しない、及び／または（ｉｉｉ）ＰＤ−１シグナル伝達を誘発する。一実施形態では、ＰＤ−１抗体は、ヒトＰＤ−１に結合する。一実施形態では、ＰＤ−１抗体は、カニクイザルＰＤ−１に結合する。一実施形態では、ＰＤ−１抗体は、ヒトＰＤ−１及びカニクイザルＰＤ−１の両方に結合する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１への結合についてＰＤ−Ｌ１と競合しない。他の実施形態では、ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１への結合についてＰＤ−Ｌ２と競合しない。さらに他の実施形態では、ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１への結合についてＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２のいずれとも競合しない。他の実施形態では、ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１シグナル伝達を誘発する。具体的な実施形態では、本明細書に提供されるＰＤ−１抗体は、ヒトＰＤ−１及びカニクイザルＰＤ−１の両方に結合し、ＰＤ−１への結合についてＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２のいずれとも競合せず、ＰＤ−１シグナル伝達を誘発する。いくつかの実施形態では、結合、競合、及び／またはシグナル伝達は、インビトロで、例えば、細胞ベースのアッセイでアッセイされる。他の実施形態では、結合、競合、及び／またはシグナル伝達は、エクスビボで、例えば、Ｔ細胞機能アッセイでアッセイされる。他の実施形態では、結合、競合、及び／またはシグナル伝達は、対象（例えば、ヒト対象）由来の試料を使用してアッセイされる。ある特定の実施形態では、アッセイには、（１）ヒトまたはカニクイザルＰＢＭＣアッセイ（例えば、実施例５．２．１及び５．２．２を参照のこと）、（２）ヒト全血試料アッセイ（例えば、実施例５．２．１を参照のこと）が含まれる。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗ＰＤ−１抗体等の結合タンパク質は、ＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２の天然の生物学的機能と一致する活性を呈する。いくつかの実施形態では、活性は、インビトロで呈される。他の実施形態では、活性は、エクスビボで呈される。
【０１６２】
本明細書に提供される様々な薬学的製剤の具体的な実施形態では、本明細書に提供されるＰＤ−１に結合する抗体等の結合タンパク質は、ＰＤ−１の結合について互いに競合する共通の特徴を共有する。この競合的阻害は、各々の抗体がＰＤ−１の同じ領域（例えば、同じエピトープ）に結合し、それにより同様の効果を行使することを示し得る。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗ＰＤ−１抗体には、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、及び／またはＰＤ１ＡＢ−６に由来するか、またはそれらに基づく抗体等のヒト化抗ＰＤ−１抗体が含まれる。他の実施形態では、本明細書に提供される抗ＰＤ−１抗体は、結合について、ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、及び／またはＰＤ１ＡＢ−６に由来するか、またはそれらに基づく抗体と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、表１〜２に記載のＣＤＲ配列を有する。ある特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ヒトＰＤ−１の特定のドメインまたはエピトープ（例えば、残基１００〜１０５、実施例５．１．４を参照のこと）に結合する。さらに、かかる結合は、領域内の特定のアミノ酸残基（例えば、Ｇ１０３及びＲ１０４、実施例５．１．４を参照のこと）に大いに起因し得、これは、本明細書に提供される抗ＰＤ−１抗体によって認識されるエピトープを含む。総合すると、本明細書に記載の結果は、表１〜２に記載の１つ以上のＣＤＲを有する抗体を含む、ＰＤ１ＡＢ−６に由来するか、またはそれに基づく抗ＰＤ−１抗体について観察された効果が、同じまたは同様のエピトープ特異性（例えば、同じまたは同様のＣＤＲ）を有する本明細書に提供される他の抗ＰＤ−１抗体に対すると推定され得ることを実証する。例えば、例示的なヒト化抗ＰＤ−１抗体についての実施例５．１．２−３、５．１．７−１０、５．２．１−３、及び５．３．１に示される抗体の活性は、本明細書に提供される抗ＰＤ−１抗体の活性及び効果の代表である。
【０１６３】
本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体等の結合タンパク質は、表１〜２に記載の１つ以上のＣＤＲを含む免疫グロブリン可変領域を含み得る。かかる結合タンパク質（例えば、抗ＰＤ−１抗体）において、ＣＤＲは、ＣＤＲ（複数可）の適切な抗原結合特性が達成されるようにＣＤＲ（複数可）を配向する１つ以上のスキャフォールド領域またはフレームワーク領域（ＦＲ）に連結され得る。本明細書に記載の抗ＰＤ−１抗体を含むかかる結合タンパク質は、ＰＤ−１シグナル伝達を誘発し得る。
【０１６４】
５．１  一般的技法
本明細書に記載または参照される技法及び手技には、一般に十分に理解されている、及び／または当業者によって、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（３ｄ  ｅｄ．２００１）、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，２００３）、Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｆｒｏｍ  Ｂｅｎｃｈ  ｔｏ  Ｃｌｉｎｉｃ（Ａｎ  ｅｄ．２００９）、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（Ａｌｂｉｔａｒ  ｅｄ．２０１０）、及びＡｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｖｏｌｓ  １  ａｎｄ  ２（Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｄｕｂｅｌ  ｅｄｓ．，２ｄ  ｅｄ．２０１０）に記載の広く利用されている方法論等の従来の方法論を使用して一般に利用されている技法及び手技が含まれる。
【０１６５】
５．２  専門用語
別途記載されない限り、本明細書で使用される全ての専門的及び科学的用語は、当業者によって一般に理解されている意味と同じ意味を有する。本明細書を解釈する目的のために、以下の用語の説明が適用され、適切である場合、単数形で使用される用語は複数形も含み、逆の場合も同様である。全ての特許、出願、公開出願、及び他の刊行物は、それらの全体が参照により組み込まれる。記載される用語のいずれかの説明が参照により本明細書に組み込まれるいずれかの文書と矛盾する場合、以下に記載される用語の説明が優先されるものとする。
【０１６６】
「プログラム死１」、「プログラム細胞死１」、「タンパク質ＰＤ−１」、「ＰＤ−１」、「ＰＤ−１ポリペプチド」、または「ＰＤ１」という用語は、別途指示されない限り、霊長類（例えば、ヒト及びカニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ  ｍｏｎｋｅｙ）（カニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ））、イヌ、及び齧歯類（例えば、マウス及びラット）等の哺乳動物を含む任意の脊椎動物源由来の任意の天然ポリペプチドを含む、ポリペプチド（「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、本明細書で同義に使用される）を包含する。ある特定の実施形態では、これらの用語には、「関連ＰＤ−１ポリペプチド」（それらのＳＮＰ変異形を含む）が含まれる。「ＰＤ−１」という用語は、「全長」非プロセシングＰＤ−１、ならびに細胞におけるプロセシングから得られるＰＤ−１の任意の形態も包含する。いくつかの実施形態では、ＰＤ１は、配列番号４３のアミノ酸配列を有する。ＧｅｎＢａｎｋ（商標）受入番号Ｕ６４８６３は、別の例示的なヒトＰＤ−１核酸配列を提供する。
【０１６７】
「関連ＰＤ−１ポリペプチド」には、対立遺伝子変異形（例えば、ＳＮＰ変異形）；スプライス変異形；断片；誘導体；置換、欠失、及び挿入変異形；融合ポリペプチド；ならびに種間相同体が含まれ、これらは、ＰＤ−１活性を保持し得る。当業者が理解するであろうように、本明細書に提供される抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、ＰＤ−１抗原、及び／またはＰＤ−１エピトープに結合し得る。「エピトープ」は、より大きいＰＤ−１抗原の一部であり得、これは、より大きいＰＤ−１ポリペプチド断片の一部であり得、これは、次いで、より大きいＰＤ−１ポリペプチドの一部であり得る。ＰＤ−１は、天然形態または変性形態で存在し得る。本明細書に記載のＰＤ−１ポリペプチドは、ヒト組織型または別の源等の様々な源から単離され得るか、または組換え法もしくは合成法によって調製され得る。ＰＤ−１ポリペプチドの相同分子種も当該技術分野で周知である。
【０１６８】
ＰＤ−１ポリペプチド「細胞外ドメイン」または「ＥＣＤ」とは、膜貫通ドメイン及び細胞質ドメインを本質的に含まないＰＤ−１ポリペプチドの形態を指す。例えば、ＰＤ−１ポリペプチドＥＣＤは、１％未満のかかる膜貫通ドメイン及び／または細胞質ドメインを有し得、０．５％未満のかかるドメインを有し得る。
【０１６９】
「ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１」、「ＰＤ１ＡＢ−６  ＩｇＧ１」、「ＰＤ１ＡＢ−６＿ＩｇＧ１」、「ＩｇＧ１＿ＰＤ１ＡＢ−６」、及び「ＩｇＧ１−ＰＤ１ＡＢ−６」という用語は同義に使用され、ＩｇＧ１  Ｆｃ領域を有する抗体ＰＤ１ＡＢ−６を指す。ある特定の実施形態では、抗体ＰＤ１ＡＢ−６は、例えば、図４に示される、軽鎖アミノ酸配列ＬＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１（配列番号３１）及び重鎖アミノ酸配列ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１（配列番号３２）を含む。
【０１７０】
「ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３」、「ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ」、「ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３２２Ａ」、「ＩｇＧ１＿ＰＤ１ＡＢ−６＿Ｋ３２２Ａ」、「ＩｇＧ１＿ＰＤ１ＡＢ−６＿Ｋ３」、「ＩｇＧ１−ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３２２Ａ」、及び「ＩｇＧ１−ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３」という用語は同義に使用され、ＩｇＧ１  Ｆｃ領域にＫ３２２Ａ置換を有するＰＤ１ＡＢ−６変異形を指す。ある特定の実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−６変異形は、例えば、図４に示される、重鎖アミノ酸配列ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ（配列番号３３）を有する。
【０１７１】
「ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ」、「ＩｇＧ４Ｐ＿ＰＤ１ＡＢ−６」、「ＩｇＧ４Ｐ−ＰＤ１ＡＢ−６」、「ＰＤ１ＡＢ−６＿ＩｇＧ４Ｐ」、及び「ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ４Ｐという用語」は同義に使用され、ＩｇＧ４Ｐ  Ｆｃ領域を有するＰＤ１ＡＢ−６変異形を指す。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１抗体変異形は、例えば、図４に示される、重鎖アミノ酸配列ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ４Ｐ（配列番号３４）を有する。
【０１７２】
「ＰＤ１ＡＢ−６−４ＰＥ」、「ＩｇＧ４ＰＥ＿ＰＤ１ＡＢ−６」、「ＩｇＧ４ＰＥ−ＰＤ１ＡＢ−６」、及び「ＰＤ１ＡＢ−６＿ＩｇＧ４ＰＥ」、及び「ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ４ＰＥ」という用語は同義に使用され、ＩｇＧ４ＰＥ重鎖アミノ酸配列ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ４ＰＥ（配列番号３５）を有するＰＤ１ＡＢ−６変異形を指す。
【０１７３】
「ＰＤ−１リガンド」という用語は、例えば、インビボまたはインビトロでＰＤ−１に結合する分子を指す。ＰＤ−１リガンドの非限定的な例には、天然に存在するリガンド、例えば、ＰＤ−１リガンド１（ＰＤ−Ｌ１、別名Ｂ７−Ｈ１またはＣＤ２７４）及びＰＤ−１リガンド２（ＰＤ−Ｌ２、別名Ｂ７−ＤＣまたはＣＤ２７３）、及び人工的に生成されたリガンドが挙げられる。
【０１７４】
「ＰＤ−Ｌ１」及び「ＰＤＬ−１」という用語は本明細書で同義に使用され、ＰＤ−１リガンド１（別名Ｂ７−Ｈ１またはＣＤ２７４）を指す。
【０１７５】
「ＰＤ−１活性」、「ＰＤ−ｌシグナル伝達」、及び「ＰＤ−１リガンド様シグナル伝達」という用語は、本開示のＰＤ−１に結合する抗体等の結合タンパク質に適用される場合、結合タンパク質（例えば、抗体）がＰＤ−１リガンドの結合によって誘発される生物学的効果を模倣または調節し、例えば、インビボでまたはインビトロで、さもなければＰＤ−１へのＰＤ−１リガンド結合に起因するであろう生物学的応答を誘発することを意味する。抗ＰＤ−１抗体、例えば、ＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１）に結合する抗体またはその断片の結合特異性を評価する際に、抗体は、生物学的応答が、野生型ＰＤ−１リガンド標準の活性の５％以上、例えば、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、１２５％、１５０％、１７５％、または２００％以上である場合、生物学的応答を誘発すると見なされる。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体またはＰＤ−１リガンドは、（例えば、プラスチック表面またはビーズに）固定化される。ある特定の実施形態では、抗体は、以下の特性を有する：ＰＤ−１リガンド標準の５％以上の有効性レベルを呈し、ＥＣ５０は、（１）ヒトまたはカニクイザルＰＢＭＣアッセイ（例えば、実施例４．２．１及び４．２．２を参照のこと）、または（２）ヒト全血試料アッセイ（例えば、実施例４．２．１を参照のこと）において、１００ｎＭ以下、例えば、９０ｎＭ、８０ｎＭ、７０ｎＭ、６０ｎＭ、５０ｎＭ、４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、５ｎＭ、２ｎＭ、１ｎＭ、０．５ｎＭ、０．２ｎＭ、または０．１ｎＭである。
【０１７６】
「結合タンパク質」という用語は、ヒト及び／またはカニクイザルＰＤ−１を含むＰＤ−１に結合する部分（例えば、ＣＤＲ等の１つ以上の結合領域）、任意に、結合部分が結合タンパク質のＰＤ−１ポリペプチド、断片、またはエピトープへの結合を促進する立体構造を採用することを可能にするスキャフォールドまたはフレームワーク部分（例えば、１つ以上のスキャフォールドまたはフレームワーク領域）を含むタンパク質を指す。かかる結合タンパク質の例には、抗体、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、組換え抗体、一本鎖抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、ＩｇＤ抗体、ＩｇＥ抗体、ＩｇＭ抗体、ＩｇＧ１抗体、ＩｇＧ２抗体、ＩｇＧ３抗体、またはＩｇＧ４抗体、及びそれらの断片が挙げられる。結合タンパク質は、例えば、グラフト化ＣＤＲまたはＣＤＲ誘導体を有する代替タンパク質スキャフォールドまたは人工スキャフォールドを含み得る。かかるスキャフォールドには、例えば、結合タンパク質の三次元構造を安定化するために導入される突然変異を含む抗体由来スキャフォールド、ならびに、例えば、生体適合性ポリマーを含む完全合成スキャフォールドが含まれるが、これらに限定されない。例えば、Ｋｏｒｎｄｏｒｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ５３（１）：１２１−２９、及びＲｏｑｕｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２０：６３９−５４を参照されたい。加えて、ペプチド抗体ミメティック（「ＰＡＭ」）、ならびにスキャフォールドとしてフィブロネクチン成分を利用する抗体ミメティックに基づくスキャフォールドが使用され得る。本開示との関連で、結合タンパク質は、例えば、解離定数（ＫＤ）が１０−７Ｍ以下である場合、ＰＤ−１に特異的に結合または選択的に結合すると考えられている。いくつかの実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、約１０−７Ｍ〜約１０−１２ＭのＫＤでＰＤ−１に特異的に結合し得る。ある特定の実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、ＫＤが１０−８Ｍ以下であるか、またはＫＤが１０−９Ｍ以下である場合、高親和性でＰＤ−１に特異的に結合し得る。一実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）によって測定される１×１０−９Ｍ〜１０×１０−９ＭのＫＤで精製ヒトＰＤ−１に特異的に結合し得る。別の実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、ＫｉｎＥｘＡ（商標）（Ｓａｐｉｄｙｎｅ，Ｂｏｉｓｅ，ＩＤ）によって測定される０．１×１０−９Ｍ〜１×１０−９ＭのＫＤで精製ヒトＰＤ−１に特異的に結合し得る。さらに別の実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、０．１×１０−９Ｍ〜１０×１０−９ＭのＫＤで、細胞に発現したヒトＰＤ−１に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、０．１×１０−９Ｍ〜１×１０−９ＭのＫＤで、細胞上に発現したヒトＰＤ−１に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、１×１０−９Ｍ〜１０×１０−９ＭのＫＤで、細胞上に発���したヒトＰＤ−１に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、約０．１×１０−９Ｍ、約０．５×１０−９Ｍ、約１×１０−９Ｍ、約５×１０−９Ｍ、約１０×１０−９Ｍ、またはそれらの任意の範囲もしくは区間のＫＤで、細胞上に発現したヒトＰＤ−１に特異的に結合する。なお別の実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、０．１×１０−９Ｍ〜１０×１０−９ＭのＫＤで、細胞上に発現したカニクイザルＰＤ−１に特異的に結合し得る。ある特定の実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、０．１×１０−９Ｍ〜１×１０−９ＭのＫＤで、細胞上に発現したカニクイザルＰＤ−１に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、１×１０−９Ｍ〜１０×１０−９ＭのＫＤで、細胞上に発現したカニクイザルＰＤ−１に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、結合タンパク質（例えば、抗体）は、約０．１×１０−９Ｍ、約０．５×１０−９Ｍ、約１×１０−９Ｍ、約５×１０−９Ｍ、約１０×１０−９Ｍ、またはそれらの任意の範囲もしくは区間のＫＤで、細胞上に発現したカニクイザルＰＤ−１に特異的に結合する。
【０１７７】
「抗体」、「免疫グロブリン」、または「Ｉｇ」という用語は、本明細書で同義に使用され、最も広い意味で使用され、以下に記載されるように、例えば、個別の抗ＰＤ−１モノクローナル抗体（アゴニスト、アンタゴニスト、中和抗体、全長またはインタクトモノクローナル抗体を含む）、ポリエピトープまたはモノエピトープ特異性を有する抗ＰＤ−１抗体組成物、ポリクローナルまたは一価抗体、多価抗体、少なくとも２つのインタクト抗体から形成される多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体（それらが所望の生物学的活性を呈する限り））、一本鎖抗ＰＤ−１抗体、及び抗ＰＤ−１抗体の断片を具体的に包含する。抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、及び／または親和性成熟抗体、ならびに他の種、例えば、マウス及びウサギ等由来の抗体であり得る。「抗体」という用語は、特定の分子抗原に結合することができ、かつ２つの同一のポリペプチド鎖対（各々の対が１つの重鎖（約５０〜７０ｋＤａ）及び１つの軽鎖（約２５ｋＤａ）を有し、各々の鎖の各々のアミノ末端部分が約１００〜約１３０個以上のアミノ酸の可変領域を含み、かつ各々の鎖の各々のカルボキシ末端部分が定常領域を含む）で構成されているポリペプチドの免疫グロブリンクラス内のＢ細胞のポリペプチド産物を含むよう意図されている。例えば、Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ  ｅｄ．，２ｄ  ｅｄ．１９９５）、及びＫｕｂｙ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（３ｄ  ｅｄ．１９９７）を参照されたい。具体的な実施形態では、ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１断片、またはＰＤ−１エピトープ等の特定の分子抗原は、本明細書に提供される抗体によって結合され得る。抗体には、合成抗体、組換え産生抗体、ラクダ化抗体、イントラボディ、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、及び上述のもののうちのいずれかの機能的断片（例えば、ＰＤ−１−結合断片等の抗原結合断片）（断片が由来する抗体の結合活性のいくらかまたは全てを保持する抗体重鎖または軽鎖ポリペプチドの一部分を指す）も含まれるが、これらに限定されない。機能的断片（例えば、ＰＤ−１−結合断片等の抗原結合断片）の非限定的な例には、一本鎖Ｆｖｓ（ｓｃＦｖ）（例えば、単一特異性、二重特異性等を含む）、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、Ｆ（ａｂ）２断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、ジスルフィド連結Ｆｖｓ（ｄｓＦｖ）、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、及びミニボディが挙げられる。具体的には、本明細書に提供される抗体は、免疫グロブリン分子及び免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、例えば、抗原結合ドメイン、またはＰＤ−１抗原（例えば、抗ＰＤ−１抗体の１つ以上のＣＤＲ）に結合する抗原結合部位を含む分子を含む。かかる抗体断片は、例えば、Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９８９）、Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（Ｍｙｅｒｓ  ｅｄ．，１９９５）、Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ  ２２：１８９−２２４、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  ａ���ｄ  Ｓｋｅｒｒａ，１９８９，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．１７８：４９７−５１５、及びＤａｙ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（２ｄ  ｅｄ．１９９０）で見つけることができる。本明細書に提供される抗体は、免疫グロブリン分子の任意のクラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＩｇＡ）または任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）のものであり得る。抗ＰＤ−１抗体は、アゴニスト抗体またはアンタゴニスト抗体であり得る。ＰＤ−１シグナル伝達を誘発する抗体を含むＰＤ−１に対するアゴニスト抗体が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、ＰＤ−１に対するアゴニスト抗体は、ＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合について競合しない。
【０１７８】
本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指し、例えば、その集団に含まれる個別の抗体は、少量で存在し得る可能な天然に存在する突然変異を除いて同一であり、各々のモノクローナル抗体は、典型的には、抗原上の単一のエピトープを認識する。具体的な実施形態では、本明細書で使用される「モノクローナル抗体」は、単一のハイブリドーマまたは他の細胞によって産生される抗体であり、その抗体は、例えば、当該技術分野で既知のＥＬＩＳＡまたは他の抗原結合もしくは競合的結合アッセイによって決定される、ＰＤ−１エピトープにのみ結合する。「モノクローナル」という用語は、その抗体を作製するためのいずれの特定の方法にも限定されない。例えば、本開示で有用なモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９７５，Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５によって最初に説明されたハイブリドーマ方法論によって調製され得るか、または細菌性または真核性動物または植物細胞における組換えＤＮＡ方法を使用して作製され得る（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）。「モノクローナル抗体」は、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−２８及びＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−９７に記載の技法を使用してファージ抗体ライブラリから単離される場合もある。クローン細胞株の他の調製方法及びそれらによって発現するモノクローナル抗体の他の調製方法は、当該技術分野で周知である。例えば、Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，５ｔｈ  ｅｄ．２００２）を参照されたい。モノクローナル抗体を産生する例示的な方法は、本明細書の実施例に提供される。
【０１７９】
本明細書で使用される「ポリクローナル抗体」とは、多くのエピトープを有するタンパク質への免疫原性応答で生成される抗体集団を指し、それ故に、タンパク質内の同じまたは異なるエピトープに向けられた様々な異なる抗体を含む。ポリクローナル抗体を産生するための方法は、当該技術分野で既知である（例えば、Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，５ｔｈ  ｅｄ．２００２）を参照のこと）。
【０１８０】
ペプチドまたはポリペプチドとの関連で、本明細書で使用される「断片」という用語は、全長アミノ酸配列未満のペプチドまたはポリペプチドを指す。かかる断片は、例えば、アミノ末端での切断、カルボキシ末端での切断、及び／またはアミノ酸配列由来の残基（複数可）の内部欠失から生じ得る。断片は、例えば、代替ＲＮＡスプライシングまたはインビボプロテアーゼ活性から生じ得る。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１断片または抗ＰＤ−１抗体断片は、ＰＤ−１ポリペプチドまたは抗ＰＤ−１抗体のアミノ酸配列の少なくとも５個の連続するアミノ酸残基、少なくとも１０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも１５個の連続するアミノ酸残基、少なくとも２０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも２５個の連続するアミノ酸残基、少なくとも３０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも４０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも５０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも６０個の連続するアミノ残基、少なくとも７０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも８０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも９０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも１００個の連続するアミノ酸残基、少なくとも１２５個の連続するアミノ酸残基、少なくとも１５０個の連続するアミノ酸残基、少なくとも１７５個の連続するアミノ酸残基、少なくとも２００個の連続するアミノ酸残基、少なくとも２５０個、少なくとも３００個、少なくとも３５０個、少なくとも４００個、少なくとも４５０個、少なくとも５００個、少なくとも５５０個、少なくとも６００個、少なくとも６５０個、少なくとも７００個、少なくとも７５０個、少なくとも８００個、少なくとも８５０個、少なくとも９００個、または少なくとも９５０個の連続するアミノ酸残基のアミノ酸配列を含むポリペプチドを含む。具体的な実施形態では、ＰＤ−１ポリペプチドまたは抗ＰＤ−１抗体の断片は、ポリペプチドまたは抗体の少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、またはそれ以上の機能を保持する。
【０１８１】
「抗原」とは、抗体が選択的に結合し得る所定の抗原である。標的抗原は、ポリペプチド、炭水化物、核酸、脂質、ハプテン、または他の天然に存在する化合物もしくは合成化合物であり得る。いくつかの実施形態では、標的抗原は、ポリペプチドである。
【０１８２】
「抗原結合断片」、「抗原結合ドメイン」、「抗原結合領域」という用語、及び同様の用語は、抗原と相互作用し、かつ抗原に対するその特異性及び親和性を結合剤に与えるアミノ酸残基（例えば、ＣＤＲ）を含む抗体の一部分を指す。
【０１８３】
「エピトープ」とは、抗体の１つ以上の抗原結合領域に結合することができ、かつ免疫応答を誘発することができる哺乳動物（例えば、ヒト）等の動物において抗原活性または免疫原性活性を有する、単一の抗体分子が結合する抗原分子の表面上の部位、例えば、抗原の表面上の局在化領域、例えば、ＰＤ−１ポリペプチドまたはＰＤ−１ポリペプチド断片である。免疫原性活性を有するエピトープは、動物における抗体応答を誘発するポリペプチドの一部分である。抗原活性を有するエピトープは、例えば、イムノアッセイを含む、当該技術分野で周知の任意の方法によって決定される、抗体が結合するポリペプチドの一部分である。抗原エピトープは、必ずしも免疫原性である必要はない。エピトープは、多くの場合、アミノ酸または糖側鎖等の分子の化学的に活性な表面分類からなり、特定の三次元構造特性、ならびに特定の電荷特性を有する。抗体エピトープは、直鎖状エピトープまたは立体構造エピトープであり得る。直鎖状エピトープは、タンパク質におけるアミノ酸の連続配列によって形成される。立体構造エピトープは、タンパク質配列において連続していないが、タンパク質のその三次元構造へのフォールディング時にまとめられるアミノ酸から形成される。誘発されたエピトープは、タンパク質の三次元構造が変化した立体構造になったときに、例えば、別のタンパク質またはリガンドの活性化または結合後に形成される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１エピトープは、ＰＤ−１ポリペプチドの三次元表面特徴部である。他の実施形態では、ＰＤ−１エピトープは、ＰＤ−１ポリペプチドの直鎖状特徴部である。一般に、抗原は、いくつかまたは多くの異なるエピトープを有し、多くの異なる抗体と反応し得る。
【０１８４】
抗体は、２つの抗体が三次元空間において同一のエピトープ、重複するエピトープ、または隣接するエピトープを認識するときに、参照抗体として「エピトープ」、「本質的に同じエピトープ」、または「同じエピトープ」に結合する。２つの抗体が三次元空間において同一のエピトープ、重複するエピトープ、または隣接するエピトープに結合するかを決定するための最も広く使用されており、かつ迅速な方法は、いくつかの異なる形式で、例えば、標識抗原または標識抗体のいずれかを使用して構成され得る競合アッセイである。いくつかのアッセイでは、抗原は、９６ウェルプレートに固定化されるか、または細胞表面上に発現し、標識抗体の結合を遮断する非標識抗体の能力が、放射性、蛍光、または酵素標識を使用して測定される。
【０１８５】
「エピトープマッピング」とは、それらの標的抗原上の抗体の結合部位、またはエピトープを特定する工程である。「エピトープビニング」とは、抗体が認識するエピトープに基づいてそれらの抗体を分類する工程である。より具体的には、エピトープビニングは、抗体のエピトープ認識特性に基づいてそれらの抗体をクラスタ化するための計算工程と組み合わせて競合アッセイを使用して異なる抗体のエピトープ認識特性を識別し、別個の結合特異性を有する抗体を特定するための方法及びシステムを含む。
【０１８６】
「結合する」または「結合」という用語は、例えば、複合体を形成するため等の、分子間の相互作用を指す。相互作用は、例えば、水素結合、イオン結合、疎水性相互作用、及び／またはファンデルワールス相互作用を含む、非共有相互作用であり得る。複合体は、共有もしくは非共有結合、相互作用、または力によって保持される２つ以上の分子の結合も含み得る。抗体の単一の抗原結合部位とＰＤ−１等の標的分子の単一のエピトープとの間の全非共有相互作用の強度は、そのエピトープに対する抗体または機能的断片の親和性である。抗体の一価抗原への会合速度（ｋｏｎ）に対する解離速度（ｋｏｆｆ）の比率（ｋｏｆｆ／ｋｏｎ）は、親和性に逆相関した解離定数ＫＤである。ＫＤ値が低いほど、抗体の親和性が高い。ＫＤ値は、抗体及び抗原の異なる複合体によって異なり、ｋｏｎ及びｋｏｆｆの両方に依存する。本明細書に提供される抗体の解離定数ＫＤは、本明細書に提供される任意の方法または当業者に周知の任意の他の方法を使用して決定され得る。１つの結合部位の親和性は、必ずしも抗体と抗原との間の相互作用の真の強度を反映しない。多価ＰＤ−１等の複数の繰り返し抗原決定基を含む複合抗原が複数の結合部位を含む抗体と接触すると、１つの部位での抗体の抗原との相互作用は、第２の部位での反応の可能性を高めるであろう。多価抗体と抗原との間のかかる複数の相互作用の強度は、結合力と呼ばれている。抗体の結合力は、その個別の結合部位の親和性よりも良好なその結合能力の基準であり得る。例えば、高結合力は、ＩｇＧよりも低い親和性を有し得る五量体ＩｇＭ抗体で時折見られるように低親和性を補償し得るが、その多価に起因するＩｇＭの高結合力により、それが抗原に効果的に結合することが可能になる。
【０１８７】
「ＰＤ−１に特異的に結合する抗体」、「ＰＤ−１エピトープに特異的に結合する抗体」という用語、及び類似の用語も、本明細書で同義に使用され、ＰＤ−１抗原、または断片、またはエピトープ（例えば、ヒトＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１ポリペプチド、抗原、またはエピトープ）等のＰＤ−１ポリペプチドに特異的に結合する抗体を指す。ＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１）に特異的に結合する抗体は、細胞外ドメインまたはＰＤ−１の細胞外ドメインに由来するペプチドに結合し得る。ＰＤ−１抗原（例えば、ヒトＰＤ−１）に特異的に結合する抗体は、関連抗原（例えば、カニクイザルＰＤ−１）と交差反応し得る。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１抗原に特異的に結合する抗体は、他の抗原と交差反応しない。ＰＤ−１抗原に特異的に結合する抗体は、例えば、イムノアッセイ、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）、または当業者に既知の他の技法によって特定され得る。抗体は、それが、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）及び酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）等の実験的技法を使用して決定される、任意の交差反応性抗原よりもＰＤ−１抗原に高い親和性で結合するときに、ＰＤ−１抗原に特異的に結合する。典型的には、特異的または選択的反応は、少なくとも２倍のバックグラウンドシグナルまたはノイズであり、１０倍超のバックグラウンドであり得る。抗体特異性に関する考察については、例えば、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ３３２−３６（Ｐａｕｌ  ｅｄ．，２ｄ  ｅｄ．１９８９）を参照されたい。「目的とする抗原（例えば、ＰＤ−１等の標的抗原）に結合する」抗体とは、その抗体が抗原を発現する細胞または組織の標的時に治療薬として有用になるように、十分な親和性で抗原に結合し、他のタンパク質と著しく交差反応しない抗体である。かかる実施形態では、抗体の「非標的」タンパク質への結合の程度は、例えば、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）分析またはＲＩＡによって決定される、抗体のその特定の標的タンパク質への結合の約１０％未満であろう。抗体の標的分子への結合に関して、特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド標的上のエピトープへの「特異的結合」、それ「に特異的に結合する」、またはそれ「に特異的な」という用語は、非特異的相互作用とは測定可能に異なる結合を意味する。特異的結合は、例えば、一般に結合活性を有しない同様の構造の分子である対照分子の結合と比較した分子の結合を決定することによって測定され得る。例えば、特異的結合は、標的と同様の対照分子、例えば、過剰な非標識標的との競合によって決定され得る。この場合、標識標的のプローブへの結合が過剰な非標識標的によって競合的に阻害された場合に、特異的結合が示される。「抗ＰＤ−１抗体」または「ＰＤ−１に結合する抗体」という用語には、抗体が、ＰＤ−１の標的時に、例えば、診断薬として有用になるように、十分な親和性でＰＤ−１に結合することができる抗体が含まれる。本明細書で使用される、特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド標的上のエピトープの「特異的結合」、それ「に特異的に結合する」、またはそれ「に特異的な」という用語は、分子が、任意の他のポリペプチドまたはポリペプチドエピトープに���質的に結合することなく、特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド上のエピトープに結合する結合を指す。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗体は、１０ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、１ｎＭ、０．９ｎＭ、０．８ｎＭ、０．７ｎＭ、０．６ｎＭ、０．５ｎＭ、０．４ｎＭ、０．３ｎＭ、０．２ｎＭ、または０．１ｎＭ以下の解離定数（ＫＤ）を有する。ある特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、異なる種由来のＰＤ−１間（例えば、ヒトＰＤ−１とカニクイザルＰＤ−１との間）で保存されているＰＤ−１のエピトープに結合する。
【０１８８】
「競合」という用語は、抗ＰＤ−１抗体（例えば、ＰＤ−１に結合し、標的上の同じエピトープまたは結合部位において競合するアゴニスト抗体及び結合タンパク質）との関連で使用されるとき、研究中の抗体（またはその結合断片）が、参照分子（例えば、参照リガンドまたは参照抗原結合タンパク質、例えば、参照抗体）の共通の抗原（例えば、ＰＤ−１またはその断片）への特異的結合を阻止または阻害するアッセイによって決定される競合を意味する。多数の種類の競合的結合アッセイを使用して、試験抗体がＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１）への結合について参照抗体と競合するかを決定することができる。利用され得るアッセイの例には、固相直接または間接ＲＩＡ、固相直接または間接酵素イムノアッセイ（ＥＩＡ）、サンドイッチ競合アッセイ（例えば、Ｓｔａｈｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ９：２４２−５３を参照のこと）、固相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（例えば、Ｋｉｒｋｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３７：３６１４−１９を参照のこと）、固相直接標識アッセイ、固相直接標識サンドイッチアッセイ（例えば、Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９８８）を参照のこと）、Ｉ−１２５標識を使用した固相直接標識ＲＩＡ（例えば、Ｍｏｒｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２５：７−１５を参照のこと）、及び直接標識ＲＩＡ（Ｍｏｌｄｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：７７−８２）が挙げられる。典型的には、かかるアッセイは、固体表面に結合した精製抗原（例えば、ヒトＰＤ−１等のＰＤ−１）、または非標識試験抗原結合タンパク質（例えば、試験抗ＰＤ−１抗体）もしくは標識参照抗原結合タンパク質（例えば、参照抗ＰＤ−１抗体）のいずれかを有する細胞の使用を伴う。競合的阻害は、試験抗原結合タンパク質の存在下で固体表面または細胞に結合した標識の量を決定することによって測定され得る。通常、試験抗原結合タンパク質は、過剰に存在する。競合アッセイによって特定される抗体（競合抗体）には、参照抗体及び／または抗体の立体障害が生じるように参照によって結合されるエピトープに十分に近位の隣接するエピトープに結合する抗体と同じエピトープに結合する抗体が含まれる。競合的結合を決定するための方法に関するさらなる詳細が本明細書に記載される。通常、競合抗体タンパク質が過剰に存在する場合、競合抗体タンパク質は、参照抗体の共通の抗原への特異的結合を少なくとも３０％、例えば、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、または７５％阻害するであろう。いくつかの事例では、結合は、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上阻害される。
【０１８９】
「単離された」抗体は、細胞もしくは組織源由来の細胞物質もしくは他の夾雑タンパク質及び／または抗体が由来する他の夾雑成分を実質的に含まないか、または化学的に合成されるときに化学的前駆体もしくは他の化学物質を実質的に含まない。「細胞物質を実質的に含まない」という言語には、抗体が単離または組換え産生される細胞の細胞成分から分離される抗体の調製物が含まれる。したがって、細胞物質を実質的に含まない抗体は、約３０％、２５％、２０％、１５％，１０％、５％、または１％未満（乾燥重量で）の異種タンパク質（本明細書で「夾雑タンパク質」とも称される）を有する抗体の調製物が含まれる。ある特定の実施形態では、抗体が組換え産生されると、その抗体は、培養培地を実質的に含まず、例えば、培養培地は、タンパク質調製物の体積の約２０％、１５％、１０％、５％、または１％未満に相当する。ある特定の実施形態では、抗体が化学合成によって産生されると、その抗体は、化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含まず、例えば、その抗体は、タンパク質の合成に関与する化学的前駆体または他の化学物質から分離される。したがって、抗体のかかる調製物は、目的とする抗体以外に、約３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％、または１％（乾燥重量で）未満の化学的前駆体または化合物を有する。夾雑成分には、抗体の治療的使用を妨害するであろう物質も含まれるが、これらに限定されず、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性または非タンパク質性溶質も含まれ得る。ある特定の実施形態では、抗体は、（１）Ｌｏｗｒｙ法（Ｌｏｗｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９５１，Ｊ．Ｂｉｏ．Ｃｈｅｍ．１９３：２６５−７５）によって決定される、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％等の９５重量％超の抗体に精製されるか、（２）スピニングカップシークエネーターを使用してＮ末端もしくは内部アミノ酸配列の少なくとも１５個の残基を得るのに十分な程度に精製されるか、または（３）クマシーブルーもしくはシルバー染色を使用して還元もしくは非還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均質になるまで精製されるであろう。単離された抗体には、組換え細胞内でインサイツの抗体が含まれるが、これは、抗体の天然環境の少なくとも１つの成分が存在しないためである。しなしながら、通常、単離された抗体は、少なくとも１つの精製ステップによって調製されるであろう。具体的な実施形態では、本明細書に提供される抗体は、単離される。
【０１９０】
４鎖抗体ユニットとは、２つの同一の軽鎖（Ｌ）及び２つの同一の重鎖（Ｈ）で構成されたヘテロ四量体糖タンパク質である。ＩｇＧの場合、４鎖ユニットは、一般に、約１５０，０００ダルトンである。各々のＬ鎖が１つの共有ジスルフィド結合によってＨ鎖に結合している一方で、２つのＨ鎖は、Ｈ鎖アイソタイプに応じて１つ以上のジスルフィド結合によって互いに結合している。各々のＨ鎖及びＬ鎖は、規則的に離間した鎖間ジスルフィド架橋も有する。各々のＨ鎖は、Ｎ末端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、続いて、α鎖及びγ鎖の各々の場合は３つの定常ドメイン（ＣＨ）を有し、μ及びεアイソタイプの場合は４つのＣＨドメインを有する。各々のＬ鎖は、Ｎ末端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し、続いて、その他方の端に定常ドメイン（ＣＬ）を有する。ＶＬは、ＶＨと整列しており、ＣＬは、重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）と整列している。特定のアミノ酸残基が軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間に界面を形成すると考えられている。ＶＨとＶＬとの対合により、単一の抗原結合部位が形成される。異なるクラスの抗体の構造及び特性については、例えば、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ７１（Ｓｔｉｔｅｓ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，８ｔｈ  ｅｄ．１９９４）を参照されたい。
【０１９１】
「重鎖」という用語は、抗体に関連して使用されるとき、約５０〜７０ｋＤａのポリペプチド鎖を指し、アミノ末端部分は、約１２０〜１３０個以上のアミノ酸の可変領域を含み、カルボキシ末端部分は、定常領域を含む。定常領域は、重鎖定常領域のアミノ酸配列に基づいて、アルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）、及びミュー（μ）と称される５つの別個のタイプ（例えば、アイソタイプ）のうちの１つであり得る。別個の重鎖は、サイズの点で異なり、α、δ、及びγが、およそ４５０個のアミノ酸を含む一方で、μ及びεは、およそ５５０個のアミノ酸を含む。軽鎖と組み合わせられると、これらの別個のタイプの重鎖は、ＩｇＧの４つのサブクラス、すなわち、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４を含む、それぞれ、抗体の５つの周知のクラス（例えば、アイソタイプ）、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭを生み出す。重鎖は、ヒト重鎖であり得る。
【０１９２】
「軽鎖」という用語は、抗体に関連して使用されるとき、約２５ｋＤａのポリペプチド鎖を指し、アミノ末端部分は、約１００〜約１１０個以上のアミノ酸の可変領域を含み、カルボキシ末端部分は、定常領域を含む。軽鎖の概算長さは、２１１〜２１７アミノ酸長である。定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）またはラムダ（λ）と称される２つの別個のタイプが存在する。軽鎖アミノ酸配列は、当該技術分野で周知である。軽鎖は、ヒト軽鎖であり得る。
【０１９３】
「可変領域」、「可変ドメイン」、「Ｖ領域」、または「Ｖドメイン」という用語は、一般に軽鎖または重鎖のアミノ末端に位置し、重鎖に約１２０〜１３０アミノ酸長及び軽鎖に約１００〜１１０アミノ酸長を有する抗体の軽鎖または重鎖の一部分を指し、各々の特定の抗体のその特定の抗原に対する結合及び特異性に使用される。重鎖の可変領域は、「ＶＨ」と称され得る。軽鎖の可変領域は、「ＶＬ」と称され得る。「可変」という用語は、可変領域のある特定のセグメントが抗体間で配列の点で広範に異なるという事実を指す。Ｖ領域は、抗原結合を媒介し、特定の抗体のその特定の抗原に対する特異性を定義する。しかしながら、可変性は、可変領域の１１０アミノ酸全長にわたって均等に分布していない。その代わりに、Ｖ領域は、各々が約９〜１２アミノ酸長である「超可変領域」と呼ばれるより高い可変性（例えば、極度可変性）のより短い領域によって分離された約１５〜３０個のアミノ酸のフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより低い可変（例えば、比較的不変）ストレッチからなる。重鎖及び軽鎖の可変領域は各々、βシート構造を連結し、ある場合には、βシート構造の一部を形成するループを形成する３つの超可変領域によって連結されたβシート構成を主に採用する４つのＦＲを含む。各々の鎖内の超可変領域は、ＦＲによって近接近して一緒に保持され、他方の鎖由来の超可変領域とともに、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（５ｔｈ  ｅｄ．１９９１）を参照のこと）。定常領域は、抗体の抗原への結合に直接関与しないが、抗体の抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）及び補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）への関与等の様々なエフェクター機能を呈する。可変領域は、異なる抗体間で配列の点で広範に異なる。具体的な実施形態では、可変領域は、ヒト可変領域である。
【０１９４】
「Ｋａｂａｔにおいて見られるような可変領域残基番号付け」または「Ｋａｂａｔにおいて見られるようなアミノ酸位置番号付け」という用語、及びそれらの変形は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）における抗体の編集の重鎖可変領域または軽鎖可変領域に使用される番号付けシステムを指す。この番号付けシステムを使用して、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲもしくはＣＤＲの短縮、またはそれへの挿入に対応するより少ないアミノ酸または追加のアミノ酸を含み得る。例えば、重鎖可変ドメインは、残基５２の後に単一のアミノ酸挿入（Ｋａｂａｔに従う、残基５２ａ）、残基８２の後に３つの挿入された残基（例えば、Ｋａｂａｔに従う、残基８２ａ、８２ｂ、及び８２ｃ等）を含み得る。残基のＫａｂａｔ番号付けは、相同性領域での抗体の配列と「標準の」Ｋａｂａｔによって番号付けされた配列との整列によって所与の抗体について決定され得る。Ｋａｂａｔ番号付けシステムは、一般に、可変ドメイン内の残基（およそ軽鎖の残基１〜１０７及び重鎖の残基１〜１１３）を参照する際に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照））。「ＥＵ番号付けシステム」または「ＥＵインデックス」は、一般に、免疫グロブリン重鎖定常領域内の残基を参照する際に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）に報告されているＥＵインデックス）。「Ｋａｂａｔにおいて見られるようなＥＵインデックス」とは、ヒトＩｇＧ  １  ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。他の番号付けシステムが、例えば、ＡｂＭ、Ｃｈｏｔｈｉａ、Ｃｏｎｔａｃｔ、ＩＭＧＴ、及びＡＨｏｎによって説明されている。
【０１９５】
「ＣＤＲ」とは、免疫グロブリン（Ｉｇまたは抗体）ＶＨ  βシートフレームワークの非フレームワーク領域内の３つの超可変領域（Ｈ１、Ｈ２、もしくはＨ３）のうちの１つ、または抗体ＶＬ  βシートフレームワークの非フレームワーク領域内の３つの超可変領域（Ｌ１、Ｌ２、もしくはＬ３）のうちの１つを指す。したがって、ＣＤＲは、フレームワーク領域配列内に散在する可変領域配列である。ＣＤＲ領域は、当業者に周知であり、例えば、Ｋａｂａｔによって、抗体可変（Ｖ）ドメイン内の最も超可変性の領域として定義されている（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９−１６、Ｋａｂａｔ，１９７８，Ａｄｖ．Ｐｒｏｔ．Ｃｈｅｍ．３２：１−７５）。ＣＤＲ領域配列は、Ｃｈｏｔｈｉａによっても、保存βシートフレームワークの一部ではなく、それ故に異なる立体構造を適応させることができる残基として構造的に定義されている（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，１９８７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−１７）。これらの両方の専門用語は、当該技術分野で十分に認識されている。ＣＤＲ領域配列は、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、及びＩＭＧＴによっても定義されている。正準抗体可変領域内のＣＤＲの位置は、多数の構造の比較によって決定されている（Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２７３：９２７−４８、Ｍｏｒｅａ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０：２６７−７９）。超可変領域内の残基の数が異なる抗体で異なるため、正準位置と比較して追加の残基は、従来、正準可変領域番号付けスキームにおいて残基数の隣にａ、ｂ、ｃ等で番号付けされる（Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照））。かかる命名法は、同様に、当業者に周知である。
【０１９６】
本明細書で使用される「超可変領域」、「ＨＶＲ」、または「ＨＶ」という用語は、配列が超可変である、及び／または構造的に定義されたループを形成する抗体可変領域の領域を指す。一般に、抗体は、６つの超可変領域を含み、３つがＶＨにあり（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）３つがＶＬにある（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。いくつかの超可変領域描写が使用されており、本明細書に包含される。Ｋａｂａｔ相補性決定領域（ＣＤＲ）は、配列可変性に基づき、最も一般に使用されている（例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）を参照のこと）。Ｃｈｏｔｈｉａは、その代わりに、構造的ループの位置を参照する（例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，１９８７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−１７を参照のこと）。Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ−Ｈ１ループの末端は、Ｋａｂａｔ番号付け従来法を使用して番号付けされた場合、ループの長さに応じてＨ３２とＨ３４との間で異なる（これは、Ｋａｂａｔ番号付けスキームがＨ３５Ａ及びＨ３５Ｂに挿入を置くためであり、３５Ａも３５Ｂもいずれも存在しない場合、ループは３２で終わり、３５Ａのみが存在する場合、ループは３３で終わり、３５Ａ及び３５Ｂの両方が存在する場合、ループは３４で終わる）。ＡｂＭ超可変領域は、Ｋａｂａｔ  ＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ構造的ループとの間の妥協案を表し、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用されている（例えば、Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｖｏｌ．２（Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｄｕｂｅｌ  ｅｄｓ．，２ｄ  ｅｄ．２０１０）を参照のこと）。「接触」超可変領域は、利用可能な複合体結晶構造の分析に基づく。これらの超可変領域またはＣＤＲの各々由来の残基が以下に記載される。
【０１９７】
近年、普遍的な番号付けシステムが開発されており、広く採用されている（ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（登録商標））（Ｌａｆｒａｎｃ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７（１）：５５−７７）。ＩＭＧＴは、ヒト及び他の脊椎動物の免疫グロブリン（ＩＧ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、及び主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）を専門とする集中情報システムである。本明細書では、ＣＤＲは、アミノ酸配列及び軽鎖または重鎖内の位置の両方に関して参照される。免疫グロブリン可変ドメインの構造内のＣＤＲの「位置」が種間で保存され、ループと呼ばれる構造に存在するため、構造的特徴に従って可変ドメイン配列を整列させる番号付けシステムを使用して、ＣＤＲ及びフレームワーク残基が容易に特定される。この情報は、１つの種の免疫グロブリンから典型的にはヒト抗体由来のアクセプターフレームワークへのＣＤＲ残基のグラフト化及び置換に使用され得る。追加の番号付けシステム（ＡＨｏｎ）が、Ｈｏｎｅｇｇｅｒ  ａｎｄ  Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，２００１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３０９：６５７−７０によって開発されている。番号付けシステム（例えば、Ｋａｂａｔ番号付け及びＩＭＧＴ一意的番号付けシステムを含む）間の一致は、当業者に周知である（例えば、Ｋａｂａｔ（上記参照）、Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ（上記参照）、Ｍａｒｔｉｎ（上記参照）、Ｌｅｆｒａｎｃ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）を参照のこと）。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムによって定義されている。他の実施形態では、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによって定義されている。ある特定の実施形態では、ＣＤＲは、ＡｂＭ番号付けシステムによって定義されている。他の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａシステムによって定義されている。さらに他の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｏｎｔａｃｔ番号付けシステムによって定義されている。
【表１】
2020512359.tif 000003
【０１９８】
超可変領域は、以下のように「伸長超可変領域」を含み得る：ＶＬにおいて、２４〜３６または２４〜３４（Ｌ１）、４６〜５６または５０〜５６（Ｌ２）、及び８９〜９７または８９〜９６（Ｌ３）、ならびにＶＨにおいて、２６〜３５または２６〜３５Ａ（Ｈ１）、５０〜６５または４９〜６５（Ｈ２）、及び９３〜１０２、９４〜１０２、または９５〜１０２（Ｈ３）。本明細書で使用されるとき、「ＨＶＲ」及び「ＣＤＲ」という用語は同義に使用される。
【０１９９】
「定常領域」または「定常ドメイン」という用語は、抗体の抗原への結合に直接関与しないが、Ｆｃ受容体との相互作用等の様々なエフェクター機能を呈する軽鎖及び重鎖のカルボキシ末端部分を指す。この用語は、抗原結合部位を含む可変領域である免疫グロブリンの他方の部分と比較してより保存されたアミノ酸配列を有する免疫グロブリン分子の一部分を指す。定常領域は、重鎖のＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３領域、ならびに軽鎖のＣＬ領域を含み得る。
【０２００】
「フレームワーク」または「ＦＲ」という用語は、ＣＤＲに隣接する可変領域残基を指す。ＦＲ残基は、例えば、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、ドメイン抗体、ダイアボディ、直鎖状抗体、及び二重特異性抗体に存在する。ＦＲ残基は、超可変領域残基またはＣＤＲ残基以外の可変ドメイン残基である。
【０２０１】
本明細書における「Ｆｃ領域」という用語は、例えば、天然配列Ｆｃ領域、組換えＦｃ領域、及び変異形Ｆｃ領域を含む、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は多種多様であり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、多くの場合、Ｃｙｓ２２６位、またはＰｒｏ２３０位のアミノ酸残基から、そのカルボキシル末端に及ぶと定義される。Ｆｃ領域のＣ末端リジン（ＥＵ番号付けシステムに従う、残基４４７）は、例えば、抗体の産生もしくは精製中に、または抗体の重鎖をコードする核酸を組換え操作することによって除去され得る。したがって、インタクト抗体の組成物は、全てのＫ４４７残基が除去された抗体集団、いずれのＫ４４７残基も除去されていない抗体集団、及びＫ４４７残基を有する抗体とＫ４４７残基を有しない抗体の混合物を有する抗体集団を含み得る。
【０２０２】
「機能的Ｆｃ領域」は、天然配列Ｆｃ領域の「エフェクター機能」を有する。例示的な「エフェクター機能」には、Ｃ１ｑ結合、ＣＤＣ、Ｆｃ受容体結合、ＡＤＣＣ、貪食、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御等が挙げられる。かかるエフェクター機能は、一般に、Ｆｃ領域が結合領域または結合ドメイン（例えば、抗体可変領域またはドメイン）と組み合わせられることを必要とし、開示される様々なアッセイを使用して評価され得る。
【０２０３】
「天然配列Ｆｃ領域」は、天然に見られ、かつヒトによって操作、修飾、及び／または変更（例えば、単離、精製、選択（可変領域配列等の他の配列を含むか、またはそれらと組み合わせて））されていないＦｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。天然配列ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域には、天然配列ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域（非Ａ及びＡアロタイプ）、天然配列ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域、天然配列ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ領域、及び天然配列ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域、ならびにそれらの天然に存在する変異形が含まれる。例えば、天然ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域アミノ酸配列が以下に提供される：
【化１】
2020512359.tif 000004
（配列番号３６、Ｋ３２２が強調されている）。
例示的な天然ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域配列が以下に提供される：
【化２】
2020512359.tif 000005
（配列番号３８、Ｓ２２８及びＬ２３５が強調されている）。
【０２０４】
「変異形Ｆｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾（例えば、置換、付加、または欠失）のため天然配列Ｆｃ領域のアミノ酸配列とは異なるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、変異形Ｆｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域での約１〜約１０個のアミノ酸置換、または約１〜約５個のアミノ酸置換を有する。本明細書における変異形Ｆｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の相同性、またはそれと少なくとも約９０％の相同性、例えば、それと少なくとも約９５％の相同性を有し得る。例えば、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃアミノ酸配列の３２２位の１つのアミノ酸ＫがＡに変化した変異形、ＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ  Ｆｃ領域が以下に提供される：
【化３】
2020512359.tif 000006
（配列番号３７、Ｋ３２２Ａ置換が強調されている）。
ヒトＩｇＧ４  Ｆｃアミノ酸配列の２２８位の１つのアミノ酸ＳがＰに変化した例示的な変異形、ＩｇＧ４Ｐ  Ｆｃ領域が以下に提供される：
【化４】
2020512359.tif 000007
（配列番号３９、Ｓ２２８Ｐ置換が強調されている）。
ヒトＩｇＧ４  Ｆｃアミノ酸配列の２２８位及び２３５位の２つのアミノ酸が変化した例示的な変異形、ＩｇＧ４ＰＥ  Ｆｃ領域が以下に提供される：
【化５】
2020512359.tif 000008
（配列番号４０、Ｓ２２８Ｐ置換及びＬ２３５Ｅ置換が強調されている）。
【０２０５】
「変異形」という用語は、ＰＤ−１または抗ＰＤ−１抗体との関連で使用されるとき、天然配列または修飾されていない配列と比較して１つ以上（例えば、約１〜約２５、約１〜約２０、約１〜約１５、約１〜約１０、または約１〜約５等）のアミノ酸配列置換、欠失、及び／または付加を含むペプチドまたはポリペプチドを指し得る。例えば、ＰＤ−１変異形は、天然ＰＤ−１のアミノ酸配列への１つ以上（例えば、約１〜約２５、約１〜約２０、約１〜約１５、約１〜約１０、または約１〜約５等）の変化に由来し得る。一例として、抗ＰＤ−１抗体の変異形は、天然抗ＰＤ−１抗体または以前に修飾されていない抗ＰＤ−１抗体のアミノ酸配列への１つ以上（例えば、約１〜約２５、約１〜約２０、約１〜約１５、約１〜約１０、または約１〜約５等）の変化に由来し得る。変異形は、対立遺伝子もしくはスプライス変異形等の天然に存在するものであり得るか、または人工的に構築され得る。ポリペプチド変異形は、変異形をコードする対応する核酸分子から調製され得る。具体的な実施形態では、ＰＤ−１変異形または抗ＰＤ−１抗体変異形は、それぞれ、ＰＤ−１または抗ＰＤ−１抗体の機能的活性を少なくとも保持する。具体的な実施形態では、抗ＰＤ−１抗体変異形は、ＰＤ−１に結合する、及び／またはＰＤ−１活性にアンタゴニスト作用を示す。具体的な実施形態では、抗ＰＤ−１抗体変異形は、ＰＤ−１に結合する、及び／またはＰＤ−１活性にアゴニスト作用を示す。ある特定の実施形態では、変異形は、ＰＤ−１または抗ＰＤ−１抗体のＶＨまたはＶＬ領域または小領域、例えば、１つ以上のＣＤＲをコードする核酸分子の単一ヌクレオチド多型（ＳＮＰ）変異形によってコードされる。
【０２０６】
「インタクト」抗体とは、抗原結合部位、ならびにＣＬ及び少なくとも重鎖定常領域ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む抗体である。定常領域には、ヒト定常領域またはそのアミノ酸配列変異形が含まれ得る。ある特定の実施形態では、インタクト抗体は、１つ以上のエフェクター機能を有する。
【０２０７】
「抗体断片」は、インタクト抗体の抗原結合または可変領域等のインタクト抗体の一部分を含む。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片；ダイアボディ及びジ−ダイアボディ（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．９０：６４４４−４８、Ｌｕ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８０：１９６６５−７２、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−３４、ＷＯ９３／１１１６１、ならびに米国特許第５，８３７，２４２号及び同第６，４９２，１２３号を参照のこと）；一本鎖抗体分子（例えば、米国特許第４，９４６，７７８号、同第５，２６０，２０３号、同第５，４８２，８５８号、及び同第５，４７６，７８６号を参照のこと）；二重可変ドメイン抗体（例えば、米国特許第７，６１２，１８１号を参照のこと）；単一可変ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）（例えば、Ｗｏｏｌｖｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ５０：９８−１０１、及びＳｔｒｅｌｔｓｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．１０１：１２４４４−４９を参照のこと）；及び抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２０８】
治療用抗体の「機能的断片」、「結合断片」、または「抗原結合断片」は、インタクト抗体に起因する生物学的機能のうちのいくつかまたは全てではないにせよ少なくとも１つを呈し、その機能は、標的抗原（例えば、ＰＤ−１に結合するＰＤ−１結合断片または断片）への結合を少なくとも含む。
【０２０９】
本明細書で使用される「融合タンパク質」という用語は、抗体のアミノ酸配列及び異種ポリペプチドまたはタンパク質（例えば、通常は抗体（例えば、非抗ＰＤ−１抗原結合抗体）の一部ではないポリペプチドまたはタンパク質）のアミノ酸配列を含むポリペプチドを指す。「融合」という用語は、ＰＤ−１または抗ＰＤ−１抗体との関連で使用されるとき、ペプチドもしくはポリペプチド、またはその断片、変異形、及び／または誘導体の、異種ペプチドまたはポリペプチドとの連結を指す。ある特定の実施形態では、融合タンパク質は、ＰＤ−１または抗ＰＤ−１抗体の生物学的活性を保持する。ある特定の実施形態では、融合タンパク質は、ＰＤ−１抗体ＶＨ領域、ＶＬ領域、ＶＨ  ＣＤＲ（１つ、２つ、もしくは３つのＶＨ  ＣＤＲ）、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ（１つ、２つ、もしくは３つのＶＬ  ＣＤＲ）を含み、融合タンパク質は、ＰＤ−１エピトープ、ＰＤ−１断片、及び／またはＰＤ−１ポリペプチドに結合する。
【０２１０】
「天然」という用語は、核酸分子、ポリペプチド、宿主細胞等の生物学的物質に関連して使用されるとき、天然に見られ、かつヒトによって操作、修飾、及び／または変更（例えば、単離、精製、選択）されていないものを指す。
【０２１１】
本明細書に提供される抗体には、重鎖及び／または軽鎖の一部分が、特定の種に由来するか、または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一であるか、またはそれと相同である一方で、鎖（複数可）の残りの部分が、別の種に由来するか、または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一であるか、またはそれと相同である「キメラ」抗体、ならびにかかる抗体の断片（それらが所望の生物学的活性を呈する限り）が含まれ得る（米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：６８５１−５５を参照のこと）。
【０２１２】
非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態は、天然ＣＤＲ残基が、所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類等の非ヒト種（例えば、ドナー抗体）の対応するＣＤＲ由来の残基によって置換されるヒト免疫グロブリン（例えば、レシピエント抗体）を含むキメラ抗体である。いくつかの事例では、ヒト免疫グロブリンの１つ以上のＦＲ領域残基は、対応する非ヒト残基によって置換される。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体またはドナー抗体には見られない残基を含み得る。これらの修飾は、抗体性能をさらに洗練するために行われる。ヒト化抗体重鎖または軽鎖は、少なくとも１つ以上の可変領域の実質的に全てを含み得、その可変領域では、ＣＤＲの全てまたは実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのＣＤＲに対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のＦＲである。ある特定の実施形態では、ヒト化抗体は、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的には、ヒト免疫グロブリンのＦｃの少なくとも一部分を含むであろう。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−２５、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−２９、Ｐｒｅｓｔａ，１９９２，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−９６、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：４２８５−８９、米国特許第６，８００，７３８号、同第６，７１９，９７１号、同第６，６３９，０５５号、同第６，４０７，２１３号、及び同第６，０５４，２９７号を参照されたい。
【０２１３】
「ヒト抗体」とは、ヒトによって産生される、及び／または本明細書に開示のヒト抗体を作製するための技法のうちのいずれかを使用して作製された抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を具体的に除外する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリ（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：３８１、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１）及び酵母ディスプレイライブラリ（Ｃｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  １：７５５−６８）を含む当該技術分野で既知の様々な技法を使用して産生され得る。Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ７７（１９８５）、Ｂｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（１）：８６−９５、及びｖａｎ  Ｄｉｊｋ  ａｎｄ  ｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ，２００１，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８−７４に記載の方法もヒトモノクローナル抗体の調製に利用可能である。ヒト抗体は、抗原投与に応答してかかる抗体を産生するように修飾されているが、それらの内因性遺伝子座が無効にされているトランスジェニック動物、例えば、マウスに抗原を投与することによって調製され得る（ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術に関して、例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ，１９９５，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６（５）：５６１−６６、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｔａｕｓｓｉｎｇ，１９９７，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８（４）：４５５−５８、ならびに米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号を参照のこと）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術によって生成されたヒト抗体に関して、例えば、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０３：３５５７−６２も参照されたい。
【０２１４】
「親和性成熟」抗体とは、その１つ以上のＨＶＲに１つ以上の改変（例えば、変化、付加、及び／または欠失を含むアミノ酸配列変形）を有し、これらの改変がそれらの改変（複数可）を有しない親抗体と比較して抗原に対する抗体の親和性の改善をもたらす抗体である。親和性成熟抗体は、標的抗原に対してナノモルまたはさらにはピコモルの親和性を有し得る。親和性成熟抗体は、当該技術分野で既知の手技によって産生される。総説については、Ｈｕｄｓｏｎ  ａｎｄ  Ｓｏｕｒｉａｕ，２００３，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ９：１２９−３４、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ，２００５，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３：１１０５−１６、Ｑｕｉｒｏｚ  ａｎｄ  Ｓｉｎｃｌａｉｒ，２０１０，Ｒｅｖｉｓｔａ  Ｉｎｇｅｎｅｒｉａ  Ｂｉｏｍｅｄｉａ  ４：３９−５１を参照されたい。
【０２１５】
「遮断」抗体または「アンタゴニスト」抗体とは、それが結合する抗原の生物学的活性を阻害または低減する抗体である。例えば、遮断抗体またはアンタゴニスト抗体は、抗原の生物学的活性を実質的にまたは完全に阻害する。
【０２１６】
「アゴニスト」抗体とは、応答を誘発する抗体、例えば、目的とするポリペプチド（例えば、ＰＤ−Ｌ１）の機能的活性のうちの少なくとも１つを模倣する抗体である。アゴニスト抗体には、リガンドミメティックである抗体が含まれ、例えば、リガンドが細胞表面受容体に結合し、その結合が細胞間細胞シグナル伝達経路を介して細胞シグナル伝達または活性を誘発し、抗体が同様の細胞シグナル伝達または活性化を誘発する。ＰＤ−１の「アゴニスト」とは、例えば、ＰＤ−１を発現する細胞において、ＰＤ−１の生物学的活性のうちの１つ以上を活性化することができるか、またはさもなければ増大させることができる分子を指す。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１のアゴニスト（例えば、本明細書に記載のアゴニスト抗体）は、例えば、ＰＤ−１タンパク質を発現する細胞の活性化、及び／または細胞シグナル伝達経路を活性化するか、またはさもなければ増大させ、それにより、アゴニストの不在下でのＰＤ−１媒介性生物学的活性と比較して細胞のＰＤ−１媒介性生物学的活性を増大させることによって作用し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ＰＤ−１シグナル伝達を誘発する抗体を含むアゴニスト抗ＰＤ−１抗体である。
【０２１７】
「結合親和性」とは、一般に、分子の単一結合部位（例えば、抗体等の結合タンパク質）とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有相互作用の合計の強度を指す。別途指示されない限り、本明細書で使用されるとき、「結合親和性」とは、結合対のメンバー（例えば、抗体及び抗原）間の１：１の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。結合分子Ｘのその結合パートナーＹに対する親和性は、一般に、解離定数（ＫＤ）によって表され得る。親和性は、本明細書に記載の方法を含む当該技術分野で既知の一般的な方法によって測定され得る。低親和性抗体が、一般に、抗原に緩徐に結合し、迅速に解離する傾向がある一方で、高親和性抗体は、一般に、抗原により速く結合し、結合したままの状態をより長く保つ傾向がある。結合親和性を測定する様々な方法が当該技術分野で既知であり、それらのうちのいずれも本開示の目的のために使用され得る。具体的な例証的実施形態には、以下が含まれる。一実施形態では、「ＫＤ」または「ＫＤ値」は、当該技術分野で既知のアッセイによって、例えば、結合アッセイによって測定され得る。ＫＤは、ＲＩＡで測定され得、例えば、目的とする抗体及びその抗原のＦａｂバージョンで行われ得る（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｊ．Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２９３：８６５−８１）。ＫＤまたはＫＤ値は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）ＴＭ−２０００もしくはＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）ＴＭ−３０００を使用したＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）による表面プラズモン共鳴アッセイを使用することによって、または、例えば、Ｏｃｔｅｔ（登録商標）ＱＫ３８４システムを使用した生物層干渉分光法によっても測定され得る。「ｏｎ速度」または「会合の速度」または「会合速度」または「ｋｏｎ」も、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）ＴＭ−２０００もしくはＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）ＴＭ−３０００、またはＯｃｔｅｔ（登録商標）ＱＫ３８４システムを使用した上述の同じ表面プラズモン共鳴または生物層干渉分光法技法を用いて決定され得る。
【０２１８】
「阻害」または「阻害する」という用語は、本明細書で使用されるとき、部分的（１％、２％、５％、１０％、２０％、２５％、５０％、７５％、９０％、９５％、９９％等）または完全（すなわち、１００％）な阻害を指す。
【０２１９】
「減弱させる」、「減弱」、または「減弱した」という用語は、本明細書で使用されるとき、特性、活性、効果、または値の部分的（１％、２％、５％、１０％、２０％、２５％、５０％、７５％、９０％、９５％、９９％等）または完全（すなわち、１００％）な低減を指す。
【０２２０】
「抗体エフェクター機能」とは、抗体のＦｃ領域（例えば、天然配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列変異形Ｆｃ領域）に起因する生物学的活性を指し、抗体アイソタイプにより異なる。抗体エフェクター機能の例には、Ｃ１ｑ結合、ＣＤＣ、Ｆｃ受容体結合、ＡＤＣＣ、貪食、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御、及びＢ細胞活性化が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２１】
「Ｔ細胞エフェクター機能」とは、細胞傷害Ｔ細胞、Ｔヘルパー細胞、及びメモリＴ細胞を含むが、これらに限定されない、様々な種類のＴ細胞に起因する生物学的活性を指す。Ｔ細胞エフェクター機能の例には、Ｔ細胞増殖の増大、サイトカインの分泌、細胞毒素の放出、膜結合分子の発現、標的細胞の死滅、マクロファージの活性化、及びＢ細胞の活性化が挙げられる。
【０２２２】
「抗体依存性細胞媒介性傷害性」または「ＡＤＣＣ」とは、ある特定の細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、及びマクロファージ）上に存在するＦｃ受容体（ＦｃＲ）上に結合する分泌免疫グロブリンが、これらの細胞傷害性エフェクター細胞が抗原を有する標的細胞に特異的に結合し、続いて、標的細胞を細胞毒素で死滅させることを可能にする細胞傷害性の一形態を指す。抗体は、細胞傷害性細胞を「備え」ており、かかる死滅に絶対的に必要とされる。ＡＤＣＣを媒介するための初代細胞であるＮＫ細胞がＦｃγＲＩＩＩのみを発現する一方で、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上のＦｃＲ発現が既知である（例えば、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，１９９１，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−９２を参照のこと）。目的とする分子のＡＤＣＣ活性を評価するために、インビトロＡＤＣＣアッセイ（例えば、米国特許第５，５００，３６２号及び同第５，８２１，３３７号を参照のこと）が行われ得る。かかるアッセイに有用なエフェクター細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が含まれる。あるいはまたは加えて、目的とする分子のＡＤＣＣ活性は、インビボで、例えば、動物モデルにおいて評価され得る（例えば、Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：６５２−５６を参照のこと）。ＡＤＣＣ活性をほとんどまたは全く有しない抗体が使用のために選択され得る。
【０２２３】
「抗体依存性細胞貪食」または「ＡＤＣＰ」とは、ある特定の貪食性細胞（例えば、好中球、単球、及びマクロファージ）上に存在するＦｃ受容体（ＦｃＲ）上に結合する免疫グロブリンが、これらの貪食性細胞が抗原を有する標的細胞に特異的に結合し、続いて、標的細胞を死滅させることを可能にする際の単球またはマクロファージ媒介性貪食による標的細胞の破壊を指す。目的とする分子のＡＤＣＰ活性を評価するために、インビトロＡＤＣＰアッセイ（例えば、Ｂｒａｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３２３：１６０−７１を参照のこと）が行われ得る。かかるアッセイに有用な貪食性細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、ＰＢＭＣから精製された単球、または単核型に分化したＵ９３７細胞が含まれる。あるいはまたは加えて、目的とする分子のＡＤＣＰ活性は、インビボで、例えば、動物モデルにおいて評価され得る（例えば、Ｗａｌｌａｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４８：１６７−８２を参照のこと）。ＡＤＣＰ活性をほとんどまたは全く有しない抗体が使用のために選択され得る。
【０２２４】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」とは、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を表す。例示的なＦｃＲは、天然配列ヒトＦｃＲである。さらに、例示的なＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（例えば、ガンマ受容体）に結合するものであり、対立遺伝子変異形を含むＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体、ならびにこれらの受容体の選択的にスプライスされた形態を含む。ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）が含まれ、これらは、それらの細胞質ドメインの点で主に異なる同様のアミノ酸配列を有する（例えば、Ｄａｅｒｏｎ，１９９７，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３−３４を参照のこと）。様々なＦｃＲが既知である（例えば、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，１９９１，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−９２、Ｃａｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ  ４：２５−３４、及びｄｅ  Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０−４１を参照のこと）。将来特定されるＦｃＲを含む他のＦｃＲは、本明細書における「ＦｃＲ」という用語に包含される。この用語には、母体ＩｇＧの胎児への移行に関与する新生児受容体ＦｃＲｎも含まれる（例えば、Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９７６，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７−９３、及びＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｅｕ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４２９−３４を参照のこと）。ＦｃＲへの結合が改善または低減された抗体変異形が説明されている（例えば、ＷＯ２０００／４２０７２、米国特許第７，１８３，３８７号、同第７，３３２，５８１号、及び同第７，３３５，７４２号、Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１−６０４を参照のこと）。
【０２２５】
「補体依存性細胞傷害性」または「ＣＤＣ」とは、補体の存在下での標的細胞の溶解を指す。古典的補体経路の活性化は、補体系の第１の成分（Ｃ１ｑ）が（適切なサブクラスの）抗体に結合することによって始まり、それらの抗体がそれらの同族抗原に結合する。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイ（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０２：１６３を参照のこと）が行われ得る。改変されたＦｃ領域アミノ酸配列を有するポリペプチド変異形（変異形Ｆｃ領域を有するポリペプチド）及び増大または低下したＣ１ｑ結合能力を有するポリペプチド変異形が説明されている（例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ１９９９／５１６４２、Ｉｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８−８４を参照のこと）。ＣＤＣ活性をほとんどまたは全く有しない抗体が使用のために選択され得る。
【０２２６】
「同一性」という用語は、配列の整列及び比較によって決定される２つ以上のポリペプチド分子または２つ以上の核酸分子の配列間の関係を指す。参照ポリペプチド配列に対する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」は、配列を整列させ、必要に応じて、最大配列同一性パーセントを得るためにギャップを導入した後の、かついずれの保存的置換も配列同一性の一部とは見なさない、参照ポリペプチド配列のアミノ酸残基と同一の候補配列のアミノ酸残基の割合と定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のための整列は、当該技術分野の技術の範囲内の様々な方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、またはＭＥＧＡＬＩＧＮ（ＤＮＡＳｔａｒ，Ｉｎｃ．）ソフトウェア等の公的に利用可能なコンピュータソフトウェアを使用して達成され得る。当業者であれば、比較される配列の全長にわたる最大整列を達成するのに必要な任意のアルゴリズムを含む、配列を整列させるための適切なパラメータを決定することができる。
【０２２７】
アミノ酸残基／位置の「修飾」とは、出発アミノ酸配列と比較した一次アミノ酸配列の変化を指し、その変化は、該アミノ酸残基／位置を含む配列改変に由来する。例えば、典型的な修飾には、残基の別のアミノ酸での置換（例えば、保存的もしくは非保存的置換）、該残基／位置に隣接する１つ以上の（例えば、一般に、５、４、もしくは３つよりも少ない）アミノ酸の挿入、及び／または該残基／位置の欠失が含まれる。
【０２２８】
ポリペプチドとの関連で、本明細書で使用される「類似体」という用語は、ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体と同様または同一の機能を有するが、必ずしもＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体と同様または同一のアミノ酸配列を含まないか、またはＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体と同様または同一の構造を有するポリペプチドを指す。同様のアミノ酸配列を有するポリペプチドとは、以下のうちの少なくとも１つを満たすポリペプチドを指す：（ａ）本明細書に提供されるＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体のアミノ酸配列と少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を有するポリペプチド、（ｂ）少なくとも５個のアミノ酸残基、少なくとも１０個のアミノ酸残基、少なくとも１５個のアミノ酸残基、少なくとも２０個のアミノ酸残基、少なくとも２５個のアミノ酸残基、少なくとも３０個のアミノ酸残基、少なくとも４０個のアミノ酸残基、少なくとも５０個のアミノ酸残基、少なくとも６０個のアミノ残基、少なくとも７０個のアミノ酸残基、少なくとも８０個のアミノ酸残基、少なくとも９０個のアミノ酸残基、少なくとも１００個のアミノ酸残基、少なくとも１２５個のアミノ酸残基、または少なくとも１５０個のアミノ酸残基のストリンジェントな条件下で本明細書に記載のＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体（またはそのＶＨもしくはＶＬ領域）をコードするヌクレオチド配列にハイブリダイズするヌクレオチド配列によってコードされるポリペプチド（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（２００１）、及びＭａｎｉａｔｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９８２）を参照のこと）、または（ｃ）本明細書に記載のＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体（またはそのＶＨもしくはＶＬ領域）をコードするヌクレオチド配列と少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一のヌクレオチド配列によってコードされるポリペプチド。本明細書に提供されるＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体と同様の構造を有するポリペプチドとは、本明細書に提供されるＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体と同様の二次、三次、または四次構造を有するポリペプチドを指す。ポリペプチドの構造は、Ｘ線結晶解���、核磁気共鳴、及び結晶学的電子顕微鏡法を含むが、これらに限定されない当業者に既知の方法によって決定され得る。
【０２２９】
ポリペプチドとの関連で、本明細書で使用される「誘導体」という用語は、アミノ酸残基置換、欠失、または付加の導入によって改変されたＰＤ−１ポリペプチドに結合するＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗体のアミノ酸配列を含むポリペプチドを指す。本明細書で使用される「誘導体」という用語は、例えば、任意の種類の分子のポリペプチドへの共有結合によって化学修飾されたＰＤ−１ポリペプチドに結合するＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗体も指す。例えば、限定するものではなく、ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体は、例えば、グリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、既知の保護基／遮断基による誘導体化、タンパク質分解的切断、化学的切断、細胞リガンドまたは他のタンパク質等への結合の増大または低下によって化学修飾され得る。誘導体は、結合する分子の種類または位置のいずれかの点で天然に存在するペプチドもしくはポリペプチドまたは出発ペプチドもしくはポリペプチドとは異なる方法で修飾される。誘導体は、ペプチドまたはポリペプチドに天然に存在する１つ以上の化学基の欠失をさらに含む。さらに、ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体の誘導体は、１つ以上の非古典的アミノ酸を含み得る。ポリペプチド誘導体は、本明細書に提供されるＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、または抗ＰＤ−１抗体と同様または同一の機能を有する。
【０２３０】
本明細書で使用される「宿主」という用語は、哺乳動物（例えば、ヒト）等の動物を指す。
【０２３１】
本明細書で使用される「宿主細胞」という用語は、核酸分子でトランスフェクトされ得る特定の対象細胞、及びかかる細胞の子孫または潜在的な子孫を指す。かかる細胞の子孫は、後世に生じ得る突然変異もしくは環境的影響または核酸分子の宿主細胞ゲノムへの組み込みにより、核酸分子でトランスフェクトされた親細胞と同一ではない場合がある。
【０２３２】
「ベクター」という用語は、核酸配列を宿主細胞に導入するために、例えば、本明細書に記載の抗ＰＤ−１抗体をコードする核酸配列を含む、核酸配列を運搬するか、または含むために使用される物質を指す。使用に適用可能なベクターには、例えば、発現ベクター、プラスミド、ファージベクター、ウイルスベクター、エピソーム、及び人工染色体が含まれ、これらは、宿主細胞の染色体への安定した組み込みに作動可能な選択配列またはマーカーを含み得る。さらに、ベクターは、１つ以上の選択可能なマーカー遺伝子及び適切な発現対照配列を含み得る。含まれ得る選択可能なマーカー遺伝子は、例えば、抗生物質もしくは毒素に対する抵抗性を提供するか、栄養要求性欠乏を補完するか、または培養培地には存在しない重要な栄養素を供給する。発現対照配列は、当該技術分野で周知の構成的及び誘導性プロモーター、転写エンハンサー、転写ターミネーター等を含み得る。２つ以上の核酸分子が共発現する（例えば、抗体重鎖及び抗体軽鎖または抗体ＶＨ及び抗体ＶＬの両方）と、両方の核酸分子が、例えば、単一の発現ベクターまたは別個の発現ベクターに挿入され得る。単一ベクター発現の場合、コード核酸は、１つの共通の発現対照配列に操作的に結合し得るか、または１つの誘導性プロモーター及び１つの構成的プロモーター等の異なる発現対照配列に結合し得る。核酸分子の宿主細胞への導入は、当該技術分野で周知の方法を使用して確認され得る。かかる方法には、例えば、ｍＲＮＡのノーザンブロットもしくはポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）増幅、遺伝子産物の発現のための免疫ブロット法、または導入された核酸配列もしくはその対応する遺伝子産物の発現を試験するための他の好適な分析的方法等の核酸分析が含まれる。当業者であれば、核酸分子が所望の産物（例えば、本明細書に記載の抗ＰＤ−１抗体）を産生するのに十分な量で発現することを理解し、発現レベルが当該技術分野で周知の方法を使用して十分な発現を得るように最適化され得ることがさらに理解すされる。
【０２３３】
「単離された核酸」とは、他のゲノムＤＮＡ配列から実質的に分離された核酸、例えば、ＲＮＡ、ＤＮＡ、または混合核酸、ならびに天然配列に生来含まれるリボソーム及びポリメラーゼ等のタンパク質または複合体である。「単離された」核酸分子とは、核酸分子の天然源に存在する他の核酸分子から分離された核酸分子である。さらに、ｃＤＮＡ分子等の「単離された」核酸分子は、他の細胞物質を実質的に含まない場合があるか、または組換え技法によって産生された場合には培養培地を実質的に含まない場合があるか、または化学的に合成された場合には化学的前駆体もしくは他の化学物質を実質的に含まない場合がある。具体的な実施形態では、本明細書に記載の抗体をコードする１つ以上の核酸分子は、単離または精製される。この用語は、核酸配列の天然に存在する環境から除去された核酸配列を包含し、組換えＤＮＡまたはクローニングされたＤＮＡ単離体及び化学的に合成された類似体または異種系によって生物学的に合成された類似体を含む。実質的に純粋な分子は、分子の単離された形態を含み得る。
【０２３４】
本明細書で同義に使用される「ポリヌクレオチド」または「核酸」は、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを指し、ＤＮＡ及びＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾されたヌクレオチドもしくは塩基、及び／またはそれらの類似体、あるいはＤＮＡもしくはＲＮＡポリメラーゼによって、または合成反応によってポリマーに組み込まれ得る任意の基質であり得る。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチド及びそれらの類似体等の修飾されたヌクレオチドを含み得る。本明細書で使用される「オリゴヌクレオチド」とは、一般に約２００ヌクレオチド長未満であるが、必ずしもそうではない、短く、一般に一本鎖の合成ポリヌクレオチドを指す。「オリゴヌクレオチド」及び「ポリヌクレオチド」という用語は、相互排他的ではない。ポリヌクレオチドについての上記の説明は、オリゴヌクレオチドに平等かつ完全に適用可能である。本開示の抗ＰＤ−１抗体を産生する細胞には、親ハイブリドーマ細胞、ならびに抗体をコードする核酸が導入されている細菌及び真核宿主細胞が含まれ得る。好適な宿主細胞が以下に開示される。
【０２３５】
別途指定されない限り、本明細書に開示の任意の一本鎖ポリヌクレオチド配列の左側端は、５’末端であり、二本鎖ポリヌクレオチド配列の左側方向は、５’方向と称される。新生ＲＮＡ転写物の５’〜３’への付加方向は、転写方向と称され、ＲＮＡ転写物の５’末端に対して５’側にあるＲＮＡ転写物と同じ配列を有するＤＮＡ鎖上の配列領域は、「上流配列」と称され、ＲＮＡ転写物の３’末端に対して３’側にあるＲＮＡ転写物と同じ配列を有するＤＮＡ鎖上の配列領域は、「下流配列」と称される。
【０２３６】
「核酸をコードする」という用語またはその文法的等価物は、それが核酸分子に関連して使用されるとき、その天然状態にある核酸分子、またはｍＲＮＡを産生するように転写され得、その後、ポリペプチド及び／またはその断片に翻訳される、当業者に周知の方法によって操作された場合の核酸分子を指す。アンチセンス鎖は、かかる核酸分子の補体であり、コード配列は、それから推定され得る。
【０２３７】
「組換え抗体」という用語は、組換え手段によって調製、発現、作成、または単離された抗体を指す。組換え抗体は、宿主細胞にトランスフェクトされた組換え発現ベクターを使用して発現させた抗体、組換え体から単離された抗体、コンビナトリアル抗体ライブラリ、ヒト免疫グロブリン遺伝子に対してトランスジェニック及び／またはトランス染色体性である動物（例えば、マウスまたはウシ）から単離された抗体（例えば、Ｔａｙｌｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２０：６２８７−９５を参照のこと）、または免疫グロブリン遺伝子配列の他のＤＮＡ配列へのスプライシングを伴う任意の他の手段によって調製され、発現、作成、または単離された抗体であり得る。かかる組換え抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来するものを含む、可変及び定常領域を有し得る（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）を参照のこと）。しかしながら、ある特定の実施形態では、かかる組換え抗体は、インビトロ突然変異生成（または、ヒトＩｇ配列にトランスジェニックな動物が使用される場合、インビボ体細胞突然変異生成）に供され得、それ故に、組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列ＶＨ及びＶＬ配列に由来し、かつそれに関連する一方で、インビボでのヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在しない場合がある配列になる。
【０２３８】
「検出可能なプローブ」という用語は、検出可能なシグナルを提供する組成物を指す。この用語には、検出可能なシグナルをその活性を介して提供する任意のフルオロフォア、発色団、放射標識、酵素、抗体または抗体断片等が含まれるが、それらに限定されない。
【０２３９】
「検出可能な薬剤」という用語は、本明細書に記載の抗ＰＤ−１抗体等の所望の分子の試料または対象における実在または存在を解明するために使用され得る物質を指す。検出可能な薬剤は、可視化することができる物質、または別様に決定及び／または測定することができる（例えば、定量化によって）物質であり得る。
【０２４０】
「診断薬」という用語は、疾患、障害、または状態の診断を助ける、対象に投与される物質を指す。かかる物質を使用して、疾患を引き起こす過程の局在化を明らかにする、突き止める、及び／または明確にすることができる。ある特定の実施形態では、診断薬には、対象に投与された場合または対象由来の試料と接触した場合にＰＤ−１媒介性疾患の診断を助ける、本明細書に記載の抗ＰＤ−１抗体にコンジュゲートする物質が含まれる。
【０２４１】
「組成物」という用語は、特定の成分（例えば、本明細書に提供される抗体）を、任意に、特定の量で含有する産物を包含するよう意図されている。
【０２４２】
本明細書で使用される「担体」には、利用される投薬量及び濃度で曝露される細胞または哺乳動物に非毒性の薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤が含まれる。多くの場合、生理学的に許容される担体は、ｐＨ緩衝水溶液である。生理学的に許容される担体の例には、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、及び他の有機酸緩衝液等の緩衝液；アスコルビン酸を含む抗酸化剤；低分子量（例えば、約１０アミノ酸残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン等のタンパク質；ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、またはリジン等のアミノ酸；グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む、単糖、二糖、及び他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；マンニトールまたはソルビトール等の糖アルコール；ナトリウム等の塩形成対イオン；及び／またはＴＷＥＥＮ（商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、及びＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）等の非イオン性界面活性剤が挙げられる。「担体」という用語は、希釈剤、アジュバント（例えば、フロイントアジュバント（完全もしくは不完全）、賦形剤、またはビヒクルも指し得る。薬学的担体を含むかかる担体は、水等の滅菌液体、及び石油、動物、植物、または合成由来のものを含む油、例えば、ピーナッツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油等であり得る。水は、組成物（例えば、薬学的組成物）が静脈内投与された場合の例示的な担体である。生理食塩水溶液ならびに水性デキストロース及びグリセロール溶液も、特に注射用溶液用に液体担体として利用され得る。好適な賦形剤（例えば、薬学的賦形剤）には、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノール等が含まれる。組成物は、所望の場合、少量の湿潤剤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤も含有し得る。組成物は、溶液、懸濁液、エマルション、錠剤、丸剤、カプセル、粉末剤、徐放製剤等の形態をとり得る。製剤を含む経口組成物は、標準の担体、例えば、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウム等を含み得る。好適な薬学的担体の例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ  ａｎｄ  Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１８ｔｈ  ｅｄ．１９９０）に記載されている。薬学的化合物を含む組成物は、抗ＰＤ−１抗体を、例えば、単離または精製された形態で、好適な量の担体と一緒に含有し得る。
【０２４３】
本明細書で使用される「薬学的に許容される」という用語は、動物、より具体的には、ヒトにおける使用のために、連邦政府もしくは州政府の規制当局に承認されている、または米国薬局方、欧州薬局方、もしくは他の一般に認識されている薬局方に列記されていることを意味する。
【０２４４】
「賦形剤」という用語は、希釈剤、ビヒクル、防腐剤、結合剤、または安定剤として一般に使用されている不活性物質を指し、タンパク質（例えば、血清アルブミン等）、アミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、グリシン、ヒスチジン等）、脂肪酸及びリン脂質（例えば、スルホン酸アルキル、カプリル酸等）、界面活性剤（例えば、ＳＤＳ、ポリソルベート、非イオン性界面活性剤等）、ポリオール（例えば、スクロース、マルトース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール等）を含むが、それらに限定されない。全体として参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ  ａｎｄ  Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１８ｔｈ  ｅｄ．１９９０）も参照されたい。
【０２４５】
「対象」及び「患者」という用語は、同義に使用され得る。本明細書で使用されるとき、ある特定の実施形態では、対象は、非霊長類（例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ネコ、イヌ、ラット等）または霊長類（例えば、サル及びヒト）等の哺乳動物である。具体的な実施形態では、対象は、ヒトである。
【０２４６】
「投与する」または「投与」とは、体外に存在するため、例えば、粘膜、皮内、静脈内、筋肉内送達、及び／または本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の任意の他の物理的送達法によって、患者に、物質（例えば、本明細書に記載の抗ＰＤ−１抗体）を注射するか、または別様に物理的に送達する行為を指す。
【０２４７】
本明細書で使用される「有効量」という用語は、所望の結果をもたらすのに十分な本明細書に提供される抗体または薬学的組成物の量を指す。
【０２４８】
「約」及び「およそ」という用語は、所与の値または範囲の２０％以内、１５％以内、１０％以内、９％以内、８％以内、７％以内、６％以内、５％以内、４％以内、３％以内、２％以内、１％以内、またはそれ以下を意味する。
【０２４９】
「実質的に全て」とは、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％を指す。
【０２５０】
「実質的に同様」または「実質的に同じ」という語句は、２つの数値（例えば、一方が本開示の抗体に関連しており、他方が参照抗体に関連している）間の類似性の程度が十分に高いことを示しており、当業者であれば、これらの２つの値間の差異には、値（例えば、ＫＤ値）によって測定される生物学的特性という脈絡の中で、生物学的及び／または統計的有意性がほとんどまたは全くないと見なすようになるであろう。例えば、２つの値間の差異は、参照抗体についての値の関数として、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１０％未満、または約５％未満であり得る。
【０２５１】
本明細書で使用される「実質的に増加する」、「実質的に減少する」、または「実質的に異なる」という語句は、２つの数値（例えば、一方が本開示の抗体に関連しており、他方が参照抗体に関連している）間の差異の程度が十分に高いことを示しており、当業者であれば、これらの２つの値間の差異が、値によって測定される生物学的特性という脈絡の中で、統計的に有意であると見なすようになるであろう。例えば、該２つの値間の差異は、参照抗体についての値の関数として、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、または約５０％超であり得る。
【０２５２】
５．３  組成物及び組成物を作製する方法
ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、ＰＤ−１ペプチド、またはＰＤ−１エピトープに結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。
【０２５３】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ヒト及び／またはカニクイザルＰＤ−１に結合する抗体を含む。一実施形態では、ＰＤ−１抗体は、ヒトＰＤ−１に結合する。一実施形態では、ＰＤ−１抗体は、カニクイザルＰＤ−１に結合する。一実施形態では、ＰＤ−１抗体は、ヒトＰＤ−１及びカニクイザルＰＤ−１の両方に結合する。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、齧歯類ＰＤ−１に結合しない。
【０２５４】
本明細書に提供される様々な薬学的製剤のいくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）に結合する。ある特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位とは別個であるＰＤ−１のＥＣＤ内のエピトープに結合する。ある特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−Ｌ２結合部位とは別個であるＰＤ−１のＥＣＤ内のエピトープに結合する。ある特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位及びＰＤ−Ｌ２結合部位のいずれとも別個であるＰＤ−１のＥＣＤ内のエピトープに結合する。
【０２５５】
他の実施形態では、薬学的製剤は、本明細書に開示の抗ＰＤ−１抗体のＰＤ−１ポリペプチドへの結合を競合的に遮断する抗体を含む。
【０２５６】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチドへの結合について本明細書に提供される抗ＰＤ−１抗体と競合する抗体を含む。
【０２５７】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１ポリペプチドへの結合を遮断しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１ポリペプチドへの結合を遮断しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１ポリペプチドへの結合を遮断しない抗体を含む。
【０２５８】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチドへの結合についてＰＤ−Ｌ１と競合しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチドへの結合についてＰＤ−Ｌ２と競合しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチドへの結合についてＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２と競合しない抗体を含む。
【０２５９】
ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合を阻害しない抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害しない抗体を含む。具体的な実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害しない抗体を含む。
【０２６０】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、例えば、診断薬または検出可能な薬剤にコンジュゲートまたは組換え融合する抗ＰＤ−１抗体を含む。
【０２６１】
５．３．１  抗ＰＤ−１抗体
一実施形態では、本開示は、本明細書において治療薬として使用され得る抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤を提供する。別の実施形態では、本開示は、本明細書において診断薬として使用され得る抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤を提供する。製剤の例示的な抗体には、改善された親和性または他の特性を有するポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体、及びヘテロコンジュゲート抗体、ならびにそれらの変異形が挙げられる。
【０２６２】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、ＰＤ−１ペプチド、またはＰＤ−１エピトープを含むＰＤ−１に結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、ヒト及び／またはカニクイザルＰＤ−１に結合する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、齧歯類ＰＤ−１（例えば、マウスＰＤ−１）に結合しない抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１に結合する抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、カニクイザルＰＤ−１に結合する抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１及びカニクイザルＰＤ−１に結合する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１に結合し、かつ齧歯類ＰＤ−１（例えば、マウスＰＤ−１）に結合しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、カニクイザルＰＤ−１に結合し、かつ齧歯類ＰＤ−１（例えば、マウスＰＤ−１）に結合しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１に結合し、カニクイザルＰＤ−１に結合し、かつ齧歯類ＰＤ−１（例えば、マウスＰＤ−１）に結合しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１ポリペプチドへの結合を遮断しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１ポリペプチドへの結合を遮断しない。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１ポリペプチドへの結合を遮断しない抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、ＰＤ−１ペプチド、またはＰＤ−１エピトープを含むＰＤ−１に結合するヒト化抗体（例えば、ヒト定常領域を含む）である抗ＰＤ−１抗体を含む。
【０２６３】
ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、表１〜６に示されるアミノ酸配列等の本明細書に提供されるマウスモノクローナル抗体のうちのいずれか１つのＶＨ領域、ＶＬ領域、ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３を含む抗ＰＤ−１抗体を含む。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の単離された抗体またはその機能的断片は、表１〜２に示される（ａ）抗体ＰＤ１ＡＢ−１、（ｂ）抗体ＰＤ１ＡＢ−２、（ｃ）抗体ＰＤ１ＡＢ−３、（ｄ）抗体ＰＤ１ＡＢ−４、（ｅ）抗体ＰＤ１ＡＢ−５、または（ｆ）抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来の１つ、２つ、及び／または３つの重鎖ＣＤＲ、及び／または１つ、２つ、及び／または３つの軽鎖ＣＤＲを含む。
表１．ＶＬ  ＣＤＲアミノ酸配列
【表２】
2020512359.tif 000009
表２．ＶＨ  ＣＤＲアミノ酸配列
【表３】
2020512359.tif 000010
【０２６４】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、６つのＣＤＲ、例えば、表１〜２に特定されるＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３を含むか、またはそれからなる抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、６つ未満のＣＤＲを含み得る抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、表１〜２に特定されるＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのＣＤＲを含むか、またはそれからなる抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、本明細書に記載の（ａ）抗体ＰＤ１ＡＢ−１、（ｂ）抗体ＰＤ１ＡＢ−２、（ｃ）抗体ＰＤ１ＡＢ−３、（ｄ）抗体ＰＤ１ＡＢ−４、（ｅ）抗体ＰＤ１ＡＢ−５、及び（ｆ）抗体ＰＤ１ＡＢ−６からなる群から選択されるモノクローナル抗体のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのＣＤＲを含むか、またはそれからなる抗体を含む。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、表１〜２に特定されるＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３のうちのいずれか１つの１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのＣＤＲを含むか、またはそれからなる抗体を含む。
【０２６５】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、表２に列記される１つ以上（例えば、１つ、２つ、または３つ）のＶＨ  ＣＤＲを含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、表１に列記される１つ以上（例えば、１つ、２つ、または３つ）のＶＬ  ＣＤＲを含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、表２に列記される１つ以上（例えば、１つ、２つ、または３つ）のＶＨ  ＣＤＲ及び表１に列記される１つ以上のＶＬ  ＣＤＲを含む抗体を含む。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、表２に示されるＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（複数可）のうちのいずれか１つから独立して選択されるＶＨ  ＣＤＲ１及び／またはＶＨ  ＣＤＲ２及び／またはＶＨ  ＣＤＲ３を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、配列番号１及び７のうちのいずれか一方のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、表１に示されるＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ３アミノ酸配列のうちのいずれか１つから独立して選択されるＶＬ  ＣＤＲ１及び／またはＶＬ  ＣＤＲ２及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３を含む抗体を含む。
【０２６６】
ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、（１）配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１、（２）配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨ領域、ならびに（１）配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０２６７】
ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、（１）配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１、（２）配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨ領域、ならびに（１）配列番号７のアミノ酸を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０２６８】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、（１）配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１、（２）配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨ領域を含む抗体を含む。
【０２６９】
他の実施形態では、薬学的製剤は、（１）配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０２７０】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、（１）配列番号７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０２７１】
表１〜２に列記される１つ以上（例えば、１つ、２つ、または３つ）のＶＨ  ＣＤＲ及び１つ以上（例えば、１つ、２つ、または３つ）のＶＬ  ＣＤＲを含む抗体を含む薬学的製剤も本明細書に提供される。具体的には、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶ���  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ��ＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、表１〜２に列記されるＶＨ  ＣＤＲ及びＶＬ  ＣＤＲのそれらの任意の組み合わせを含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。
【０２７２】
さらに別の態様では、本明細書に開示のＣＤＲは、関連抗体群に由来するコンセンサス配列（例えば、表１〜２を参照のこと）を含む。本明細書に記載されるとき、「コンセンサス配列」とは、いくつかの配列間で共通の保存アミノ酸及び所与のアミノ酸配列内で異なる可変アミノ酸を有するアミノ酸配列を指す。
【０２７３】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の単離された抗体またはその機能的断片は、表３〜４に示される（ａ）抗体ＰＤ１ＡＢ−１、（ｂ）抗体ＰＤ１ＡＢ−２、（ｃ）抗体ＰＤ１ＡＢ−３、（ｄ）抗体ＰＤ１ＡＢ−４、（ｅ）抗体ＰＤ１ＡＢ−５、または（ｆ）抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来の１つ、２つ、３つ、及び／または４つの重鎖ＦＲ、及び／または１つ、２つ、３つ、及び／または４つの軽鎖ＦＲをさらに含む。
表３．ＶＬ  ＦＲアミノ酸配列
【表４】
2020512359.tif 000011
表４．ＶＨ  ＦＲアミノ酸配列
【表５】
2020512359.tif 000012
【０２７４】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の単離された抗体またはその機能的断片は、表４に示される（ａ）抗体ＰＤ１ＡＢ−１、（ｂ）抗体ＰＤ１ＡＢ−２、（ｃ）抗体ＰＤ１ＡＢ−３、（ｄ）抗体ＰＤ１ＡＢ−４、（ｅ）抗体ＰＤ１ＡＢ−５、または（ｆ）抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来の１つ、２つ、３つ、及び／または４つの重鎖ＦＲをさらに含む。いくつかの実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１由来である。いくつかの実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−２由来である。他の実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−３由来である。ある特定の実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−４由来である。他の実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−５由来である。別の実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来である。
【０２７５】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の単離された抗体またはその機能的断片は、表３に示される（ａ）抗体ＰＤ１ＡＢ−１、（ｂ）抗体ＰＤ１ＡＢ−２、（ｃ）抗体ＰＤ１ＡＢ−３、（ｄ）抗体ＰＤ１ＡＢ−４、（ｅ）抗体ＰＤ１ＡＢ−５、または（ｆ）抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来の１つ、２つ、３つ、及び／または４つの軽鎖ＦＲをさらに含む。いくつかの実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１由来である。いくつかの実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−２由来である。他の実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−３由来である。ある特定の実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−４由来である。他の実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−５由来である。別の実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来である。
【０２７６】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的製剤の抗体またはその断片は、（１）配列番号１９及び２４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１及び２３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的製剤の抗体またはその断片は、（１）配列番号１９のアミノ酸を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的製剤の抗体またはその断片は、（１）配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的製剤の抗体またはその断片は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的製剤の抗体またはその断片は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む。具体的な実施形態では、抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む。
【０２７７】
したがって、いくつかの実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号１９及び２４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１を含むＶＨ領域を含む。一実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１を含むＶＨ領域を含む。一実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１を含むＶＨ領域を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２を含むＶＨ領域を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号２１及び２３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３を含むＶＨ領域を含む。一実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３を含むＶＨ領域を含む。一実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３を含むＶＨ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む。
【０２７８】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的製剤の抗体またはその断片は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６及び１８からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。他の実施形態では、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。
【０２７９】
したがって、いくつかの実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１を含むＶＬ領域を含む。ある特定の実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２を含むＶＬ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号１６及び１８からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３を含むＶＬ領域を含む。一実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３を含むＶＬ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３を含むＶＬ領域を含む。さらに他の実施形態では、薬学的製剤のヒト化抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含むＶＬ領域を含む。
【０２８０】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の薬学的製剤の抗体またはその断片は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号１９及び２４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１及び２３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６及び１８からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。さらに他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。
【０２８１】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体またはその断片は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。さらに他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。
【０２８２】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体またはその断片は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。さらに他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。
【０２８３】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体またはその断片は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。さらに他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。
【０２８４】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体またはその断片は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。さらに他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。
【０２８５】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体またはその断片は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。さらに他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。
【０２８６】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体またはその断片は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。さらに他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。
【０２８７】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体またはその断片は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。さらに他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。
【０２８８】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体またはその断片は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む。他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。さらに他の実施形態では、薬学的製剤の抗体は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む。
【０２８９】
表３〜４に列記される１つ以上（例えば、１つ、２つ、３つ、または４つ）のＶＨ  ＦＲ及び１つ以上（例えば、１つ、２つ、３つ、または４つ）のＶＬ  ＦＲを含む抗体を含む薬学的製剤も本明細書に提供される。具体的には、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、Ｖ��  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、��Ｈ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２
（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、Ｖ���  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配���番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実
施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３��、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を��む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ���（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または
２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１��）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列���号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（���列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２
３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、表３〜４に列記されるＶＨ  ＦＲ（配列番号１９〜２４）及びＶＬ  ＦＲ（配列番号１４〜１８）のそれらの任意の組み合わせを含む抗体を含む。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＶＨ領域またはＶＨドメインを含む抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＶＬ領域またはＶＬドメインを含む抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、（ｉ）ＶＨドメインもしくはＶＨ領域、及び／または（ｉｉ）ＶＬドメインもしくはＶＬ領域の組み合わせを有する。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、表５〜６に記載の配列番号８〜１３からなる群から選択される（ｉ）ＶＨドメインもしくはＶＨ領域、及び／または（ｉｉ）ＶＬドメインもしくはＶＬ領域の組み合わせを有する。なお他の実施形態では、薬学的製剤は、表５〜６に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つの（ｉ）ＶＨドメインもしくはＶＨ領域、及び／または（ｉｉ）ＶＬドメインもしくはＶＬ領域の組み合わせを有する抗体を含む。
【０２９１】
ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、（１）配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１、（２）配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨ領域、ならびに表５に記載の配列番号８〜１０からなる群から選択されるＶＬ領域を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬ領域は、配列番号８のアミノ酸配列を有する。他の実施形態では、ＶＬ領域は、配列番号９のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＶＬ領域は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する。
【０２９２】
他の実施形態では、薬学的製剤は、表６に記載の配列番号１１〜１３からなる群から選択されるＶＨ領域、ならびに（１）配列番号１及び７からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらにいくつかの実施形態では、薬学的製剤は、表６に記載の配列番号１１〜１３からなる群から選択されるＶＨ領域、ならびに（１）配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。なお他の実施形態では、薬学的製剤は、表６に記載の配列番号１１〜１３からなる群から選択されるＶＨ領域、ならびに（１）配列番号７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１１のアミノ酸配列を有するＶＨ領域を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＶＨ領域を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＶＨ領域を含む抗体を含む。
表５．ＶＬドメインアミノ酸配列
【表６】
2020512359.tif 000013
表６．ＶＨドメインアミノ酸配列
【表７】
2020512359.tif 000014
【０２９３】
ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、ＰＤ−１ペプチド、またはＰＤ−１エピトープに結合する抗ＰＤ−１抗体の単離された核酸分子、例えば、免疫グロブリン重鎖、軽鎖、ＶＨ領域、ＶＬ領域、ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３によってコードされる抗体を含む薬学的製剤も本明細書に提供される。抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、及びＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＶＬ領域及びＶＨ領域の例示的な核酸配列が表７〜８に示される。
表７．ＶＬ核酸配列
【表８】
2020512359.tif 000015
2020512359.tif 000016
表８．ＶＨ核酸配列
【表９】
2020512359.tif 000017
2020512359.tif 000018
【０２９４】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−１のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１１のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号８のＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。
【０２９５】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−２のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１１のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号９のＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。
【０２９６】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−３のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１２のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号１０のＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。
【０２９７】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−４のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１２のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号９のＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。
【０２９８】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−５のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１３のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号９のＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。
【０２９９】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−６のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１３のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号８のＶＬアミノ酸配列を有する抗体を含む。
【０３００】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−１のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−１のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−２のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびにＰＤ１ＡＢ−１のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１１のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、配列番号８のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１１のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびに配列番号８のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。
【０３０１】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−２のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−２のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−２のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびにＰＤ１ＡＢ−２のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１１のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、配列番号９のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１１のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびに配列番号９のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。
【０３０２】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−３のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−３のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−３のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびにＰＤ１ＡＢ−３のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１０のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびに配列番号１０のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。
【０３０３】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−４のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−４のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−４のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびにＰＤ１ＡＢ−４のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、配列番号９のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびに配列番号９のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。
【０３０４】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−５のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−５のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−５のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびにＰＤ１ＡＢ−５のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、配列番号９のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびに配列番号９のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。
【０３０５】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−６のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−６のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−６のＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびにＰＤ１ＡＢ−６のＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。他の実施形態では、薬学的製剤は、配列番号８のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、配列番号１３のアミノ酸配列を有するＶＨ領域のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３、ならびに配列番号８のアミノ酸配列を有するＶＬ領域のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を有する抗体を含む。
【０３０６】
ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含み、軽鎖は、以下のアミノ酸配列を有する定常領域を含む：
ＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号４１）。
【０３０７】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含み、重鎖は、以下のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む：
【化６】
2020512359.tif 000019
（配列番号３６、Ｋ３２２が強調されている）。
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含み、重鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含まない。
【０３０８】
ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含み、重鎖は、以下のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ  Ｆｃ領域を含む：
【化７】
2020512359.tif 000020
（配列番号３７、Ｋ３２２Ａ置換が強調されている）。
【０３０９】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含み、重鎖は、以下のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域を含む：
【化８】
2020512359.tif 000021
（配列番号３８、Ｓ２２８及びＬ２３５が強調されている）。
【０３１０】
別の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含み、重鎖は、以下のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ４Ｐ  Ｆｃ領域を含む：
【化９】
2020512359.tif 000022
（配列番号３９、Ｓ２２８Ｐ置換が強調されている）。
【０３１１】
さらに別の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含み、重鎖は、以下のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ４ＰＥ  Ｆｃ領域を含む：
【化１０】
2020512359.tif 000023
（配列番号４０、Ｓ２２８Ｐ置換及びＬ２３５Ｅ置換が強調されている）。
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含み、重鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ４ＰＥ  Ｆｃ領域を含まない。
【０３１２】
なお別の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含み、軽鎖は、配列番号４１のアミノ酸配列を有する定常領域を含み、重鎖は、配列番号３６〜４０からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＦｃ領域を含む。
【０３１３】
ある特定の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に提供される抗体を含み、軽鎖は、以下のアミノ酸配列を含む：
ＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＳＧＱＳＶＬＹＳＳＮＱＫＮＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＨＱＹＬＹＳＷＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号３１、ＬＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１）。
【０３１４】
いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に提供される抗体を含み、重鎖は、以下のアミノ酸配列を含む：
【化１１】
2020512359.tif 000024
（配列番号３２、ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、Ｋ３２２が強調されている）。
【０３１５】
他の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に提供される抗体を含み、重鎖は、以下のアミノ酸配列を含む：
【化１２】
2020512359.tif 000025
（配列番号３３、ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ、Ｋ３２２Ａ置換が強調されている）。
【０３１６】
別の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に提供される抗体を含み、重鎖は、以下のアミノ酸配列を含む：
【化１３】
2020512359.tif 000026
（配列番号３４、ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ４Ｐ、ＩｇＧ４Ｐ  Ｆｃ骨格がイタリック体で表示され、かつ下線が引かれている）。
【０３１７】
さらに別の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に提供される抗体を含み、重鎖は、以下のアミノ酸配列を含む：
【化１４】
2020512359.tif 000027
（配列番号３５、ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ４ＰＥ、ＩｇＧ４ＰＥ  Ｆｃ骨格がイタリック体で表示され、かつ下線が引かれている）。
【０３１８】
特定の一実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に提供される抗体を含み、（ｉ）軽鎖は、配列番号３１のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）重鎖は、配列番号３２のアミノ酸配列を含む。
【０３１９】
別の特定の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に提供される抗体を含み、（ｉ）軽鎖は、配列番号３１のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）重鎖は、配列番号３３のアミノ酸配列を含む。
【０３２０】
さらに別の特定の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に提供される抗体を含み、（ｉ）軽鎖は、配列番号３１のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）重鎖は、配列番号３４のアミノ酸配列を含む。
【０３２１】
なお別の特定の実施形態では、薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合し、かつ軽鎖及び重鎖を含む、本明細書に提供される抗体を含み、（ｉ）軽鎖は、配列番号３１のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）重鎖は、配列番号３５のアミノ酸配列を含む。
【０３２２】
さらに別の態様では、薬学的製剤は、ＰＤ−１への結合について例示される抗体または機能的断片のうちの１つと競合する抗体を含む。かかる抗体は、本明細書に例示される抗体のうちの１つと同じエピトープ、または重複するエピトープにも結合し得る。例示される抗体と同じエピトープと競合するか、またはそれに結合する抗体及び断片は、同様の機能的特性を示すと予想される。例示される抗原結合タンパク質及び断片には、表１〜６のものを含む、本明細書に提供されるＶＨ及びＶＬ領域、ならびにＣＤＲを有するものが含まれる。したがって、具体的な例として、本明細書に提供される薬学的製剤は、（ａ）表１〜２に列記される抗体について列記されるＣＤＲのうちの１、２、３、４、５、または６つ全て、（ｂ）表５〜６に列記される抗体について列記されるＶＨ及びＶＬ領域から選択されるＶＨ及びＶＬ、または（ｃ）表５〜６に列記される抗体について特定されるＶＨ及びＶＬを含む２つの軽鎖及び２つの重鎖を含む抗体と競合するものを含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−１である抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−２である抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−３である抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−４である抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−５である抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−６である抗体を含む。
【０３２３】
別の態様では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１またはカニクイザルＰＤ−１のエピトープを含む領域に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１のアミノ酸残基３３〜１０９を含むヒトＰＤ−１（配列番号４２）の領域に結合する抗体を含む。なお別の態様では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１の特定のエピトープに結合する抗体を含む。
【０３２４】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内の残基１００〜１０９（配列番号４３）のうちの少なくとも１つに結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内の残基１００〜１０５（配列番号４４）のうちの少なくとも１つに結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３２５】
特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される少なくとも１つの残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＬ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される少なくとも１つの残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３２６】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される２つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３２７】
他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される３つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３２８】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される４つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３２９】
一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される５つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３３０】
別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される６つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３３１】
さらに別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される７つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３３２】
なお別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される８つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３３３】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される９つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３３４】
他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群からの１０個全ての残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。
【０３３５】
別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＴ５１に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＳ５７に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。具体的な一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＬ１００に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ１０２に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＧ１０３に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＲ１０４に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。さらに別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＧ１０３及びＲ１０４に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。なお別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＤ１０５に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＨ１０７に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＳ１０９に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。上記のアミノ酸ＰＤ−１結合部位のうちの２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０個、またはそれ以上の任意の組み合わせも企図される。
【０３３６】
一態様では、ＰＤ−１に特異的に結合し、かつＰＤ−１活性及び／または発現を調節することができる（例えば、ＰＤ−１シグナル伝達を活性化する、及び／またはＰＤ−１発現を阻害する）抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ヒトＰＤ−１のＥＣＤに特異的に結合し、かつ少なくとも１つのＰＤ−１活性を活性化する（例えば、部分的に活性化する）（例えば、サイトカイン産生を阻害する）本明細書に提供される抗体であるＰＤ−１アゴニストを含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ヒトＰＤ−１のＥＣＤに特異的に結合し、かつＰＤ−１発現を低下させる本明細書に提供される抗体であるＰＤ−１アゴニストを含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１に特異的に結合し、かつ（ａ）Ｔ細胞活性を減弱させる（例えば、サイトカイン産生の阻害によって決定される）、及び／または（ｂ）細胞内のＰＤ−１発現を低下させる抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１に特異的に結合し、かつ（ａ）Ｔ細胞活性を減弱させる（例えば、サイトカイン産生の阻害によって決定される）、（ｂ）細胞内のＰＤ−１発現を低下させる、及び／または（ｃ）ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２結合を阻害しない抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ、またはそのヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合部位及びＰＤ−Ｌ２結合部位のいずれとも別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合を阻害しない抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。他の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害しない抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害しない抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。
【０３３７】
ＰＤ−１活性は、当該技術分野で既知の活性または当該技術分野に記載の活性等のＰＤ−１の任意の活性に関連し得る。ＰＤ−１活性及びＰＤ−１シグナル伝達は、本明細書で同義に使用される。ある特定の態様では、ＰＤ−１活性は、ＰＤ−１リガンド（例えば、ＰＤ−Ｌ１）のＰＤ−１への結合によって誘発される。ＰＤ−１の発現レベルは、本明細書に記載の方法または当業者に既知の方法（例えば、ウエスタンブロット法、ＥＬＩＳＡ、免疫組織化学、またはフローサイトメトリー）によって評価され得る。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１に特異的に結合し、かつＰＤ−１発現を低下させる抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１に特異的に結合し、かつＴ細胞活性を減弱させる抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１に特異的に結合し、かつサイトカイン産生を阻害する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１に特異的に結合し、かつＰＤ−１シグナル伝達を活性化する（例えば、部分的に活性化する）抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−１、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ、またはそのヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ２結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１結合部位及びＰＤ−Ｌ２結合部位のいずれとも別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合を阻害しない抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害しない抗体を含む。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害しない抗体を含む。
【０３３８】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を減弱させる（例えば、部分的に減弱させる）。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約１０％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約１５％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約２０％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約２５％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約３０％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約３５％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約４０％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約４５％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約５０％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約５５％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約６０％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約６５％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約７０％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約７５％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約８０％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約８５％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約９０％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約９５％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約９８％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約９９％減弱させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約１００％減弱させる。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｔ細胞活性を少なくとも約２５％〜約６５％減弱させ得る（例えば、部分的に減弱させ得る）。具体的な実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、本明細書に記載の方法によって評価される。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、当業者に既知の方法によって評価される。ある特定の実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、いずれの抗ＰＤ−１抗体なしでの刺激の存在下でのＴ細胞活性と比較したものである。ある特定の実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）との刺激の存在下でのＴ細胞活性と比較したものである。Ｔ細胞活性の非限定的な例は、サイトカインの分泌である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、ＩＦＮ−γ、またはそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、及びＴＮＦ−αからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−６である。別の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１２である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７である。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２２である。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２３である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦである。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＦＮ−γである。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＴＮＦ−αである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＬ−１７である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＦＮ−γである。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７及びＩＦＮ−γである。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、及びＩＦＮ−γである。
【０３３９】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞からの）ＩＬ−２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約１０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約１５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約２０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約２５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約３０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約３５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約４０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約４５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約５０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約５５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約６０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約６５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約７０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約７５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約８０％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約８５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約９０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約９５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約９８％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約９９％阻害する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２分泌を少なくとも約２５％または３５％阻害し、任意に約７５％まで阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭｅｓｏＳｃａｌｅ（商標）Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＤ）マルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２分泌は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＩＬ−２分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＩＬ−２分泌と比較して阻害される。
【０３４０】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＩＬ−２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２分泌を阻害する。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、ＭＳＤマルチプレックスアッセイによって評価される。
【０３４１】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞からの）ＩＬ−１７分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約１０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約１５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約２０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約２５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約３０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約３５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約４０％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約４５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約５０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約５５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約６０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約６５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約７０％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約７５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約８０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約８５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約９０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約９５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約９８％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約９９％阻害する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１７分泌を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＩＬ−１７分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＩＬ−１７分泌と比較して阻害される。
【０３４２】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＩＬ−１７分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１７分泌を阻害する。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、ＭＳＤマルチプレックスアッセイによって評価される。
【０３４３】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞からの）ＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約１０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約１５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約２０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約２５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約３０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約３５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約４０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約４５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約５０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約５５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約６０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約６５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約７０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約７５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約８０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約８５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約９０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約９５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約９８％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約９９％阻害する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＦＮ−γ分泌を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＩＦＮ−γ分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＩＦＮ−γ分泌と比較して阻害される。
【０３４４】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−��分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＦＮ−γ分泌を阻害する。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、ＭＳＤマルチプレックスアッセイによって評価される。
【０３４５】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞からの）ＩＬ−１分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約１０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約１５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約２０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約２５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約３０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約３５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約４０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約４５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約５０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約５５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約６０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約６５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約７０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約７５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約８０％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約８５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約９０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約９５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約９８％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約９９％阻害する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１分泌を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１分泌は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＩＬ−１分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＩＬ−１分泌と比較して阻害される。
【０３４６】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＩＬ−１分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１分泌を阻害する。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、ＭＳＤマルチプレックスアッセイによって評価される。
【０３４７】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞からの）ＩＬ−６分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約１０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約１５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約２０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約２５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約３０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約３５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約４０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約４５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約５０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約５５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約６０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約６５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約７０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約７５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約８０％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約８５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約９０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約９５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約９８％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約９９％阻害する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−６分泌を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−６分泌は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＩＬ−６分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＩＬ−６分泌と比較して阻害される。
【０３４８】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＩＬ−６分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−６分泌を阻害する。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、ＭＳＤマルチプレックスアッセイによって評価される。
【０３４９】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞からの）ＩＬ−１２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約１０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約１５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約２０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約２５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約３０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約３５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約４０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約４５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約５０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約５５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約６０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約６５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約７０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約７５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約８０％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約８５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約９０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約９５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約９８％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約９９％阻害する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−１２分泌を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＩＬ−１２分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＩＬ−１２分泌と比較して阻害される。
【０３５０】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＩＬ−１２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−１２分泌を阻害する。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、ＭＳＤマルチプレックスアッセイによって評価される。
【０３５１】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞からの）ＩＬ−２２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約１０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約１５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約２０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約２５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約３０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約３５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約４０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約４５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約５０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約５５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約６０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約６５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約７０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約７５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約８０％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約８５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約９０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約９５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約９８％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約９９％阻害する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２２分泌を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＩＬ−２２分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＩＬ−２２分泌と比較して阻害される。
【０３５２】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＩＬ−２２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２２分泌を阻害する。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、ＭＳＤマルチプレックスアッセイによって評価される。
【０３５３】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞からの）ＩＬ−２３分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約１０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約１５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約２０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約２５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約３０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約３５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約４０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約４５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約５０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約５５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約６０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約６５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約７０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約７５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約８０％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約８５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約９０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約９５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約９８％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約９９％阻害する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＩＬ−２３分泌を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＩＬ−２３分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＩＬ−２３分泌と比較して阻害される。
【０３５４】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＩＬ−２３分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＩＬ−２３分泌を阻害する。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、ＭＳＤマルチプレックスアッセイによって評価される。
【０３５５】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞からの）ＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約１０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約１５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約２０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約２５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約３０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約３５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約４０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約４５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約５０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約５５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約６０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約６５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約７０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約７５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約８０％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約８５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約９０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約９５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約９８％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約９９％阻害する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害する。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＧＭ−ＣＳＦ分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＧＭ−ＣＳＦ分泌と比較して阻害される。
【０３５６】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、ＭＳＤマルチプレックスアッセイによって評価される。
【０３５７】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞からの）ＴＮＦ−α分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約１０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約１５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約２０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約２５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約３０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約３５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約４０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約４５％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約５０％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約５５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約６０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約６５％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約７０％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約７５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約８０％阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約８５％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約９０％阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約９５％阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約９８％阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約９９％阻害する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＴＮＦ−α分泌を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害する。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＴＮＦ−α分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＴＮＦ−α分泌と比較して阻害される。
【０３５８】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＴＮＦ−α分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−��分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＴＮＦ−α分泌を阻害する。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、ＭＳＤマルチプレックスアッセイによって評価される。
【０３５９】
具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１に特異的に結合し、（例えば、細胞、例えば、Ｔ細胞における）ＰＤ−１発現を低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約５％低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約１０％低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約１５％低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約２０％低下させる。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約２５％低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約３０％低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約３５％低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約４０％低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約４５％低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約５０％低下させる。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約５５％低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約６０％低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約６５％低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約７０％低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約７５％低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約８０％低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約８５％低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約９０％低下させる。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約９５％低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約９８％低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約９９％低下させる。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで低下させる。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、当業者に既知の方法（例えば、フローサイトメトリー、ウエスタンブロット法、ノーザンブロット法、またはＲＴ−ＰＣＲ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、フローサイトメトリーによって評価される。別の実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、ウエスタンブロット法によって評価される。さらに別の実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、ノーザンブロット法によって評価される。なお別の実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、ＲＴ−ＰＣＲによって評価される。具体的な実施形態では、ＰＤ−１発現は、抗ＰＤ−１抗体の不在下でのＰＤ−１発現低下と比較して低下する。他の実施形態では、ＰＤ−１発現は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）の存在下でのＰＤ−１発現低下と比較して低下する。
【０３６０】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体（例えば、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体）は、ＰＤ−１発現を低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約５ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約１ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０でＰＤ−１発現を低下させる。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の他の方法（例えば、フローサイトメトリー、ウエスタンブロット法、ノーザンブロット法、またはＲＴ−ＰＣＲ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＥＣ５０は、フローサイトメトリーによって評価される。別の実施形態では、ＥＣ５０は、ウエスタンブロット法によって評価される。さらに別の実施形態では、ＥＣ５０は、ノーザンブロット法によって評価される。なお別の実施形態では、ＥＣ５０は、ＲＴ−ＰＣＲによって評価される。
【０３６１】
ある特定の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間後に生じる。別の実施形態では、低下は、接触の早ければ６時間後に生じる。さらに別の実施形態では、低下は、接触の早ければ８時間後に生じる。なお別の実施形態では、低下は、接触の早ければ１０時間後に生じる。一実施形態では、低下は、接触の早ければ１２時間後に生じる。別の実施形態では、低下は、接触の早ければ１４時間後に生じる。さらに別の実施形態では、低下は、接触の早ければ１６時間後に生じる。なお別の実施形態では、低下は、接触の早ければ１８時間後に生じる。一実施形態では、低下は、接触の早ければ２０時間後に生じる。別の実施形態では、低下は、接触の早ければ２２時間後に生じる。さらに別の実施形態では、低下は、接触の早ければ２４時間後に生じる。いくつかの実施形態では、接触は、抗体とである。他の実施形態では、接触は、その抗原結合断片とである。
【０３６２】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、サイトカイン阻害に先行する。一実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ６時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。さらに別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ８時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。なお別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１０時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。一実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１２時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１４時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。さらに別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１６時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。なお別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１８時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。一実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２０時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２２時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。さらに別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２４時間後に生じ、サイトカイン阻害に先行する。
【０３６３】
他の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、サイトカイン阻害と同時である。一実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ６時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。さらに別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ８時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。なお別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１０時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。一実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１２時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１４時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。さらに別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１６時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。なお別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１８時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。一実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２０時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２２時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。さらに別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２４時間後に生じ、サイトカイン阻害と同時である。
【０３６４】
さらに他の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、サイトカイン阻害後である。一実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ６時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。さらに別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ８時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。なお別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１０時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。一実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１２時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１４時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。さらに別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１６時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。なお別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ１８時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。一実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２０時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２２時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。さらに別の実施形態では、低下は、薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２４時間後に生じ、サイトカイン阻害後である。
【０３６５】
５．３．１．１  ポリクローナル抗体
本開示の薬学的製剤の抗体は、ポリクローナル抗体を含み得る。ポリクローナル抗体を調製する方法は、当業者に既知である。ポリクローナル抗体は、哺乳動物において、例えば、免疫剤及びアジュバント（所望の場合）の１回以上の注射によって産生され得る。典型的には、免疫剤及び／またはアジュバントは、複数回の皮下注射または腹腔内注射によって哺乳動物に注射されるであろう。免疫剤は、ＰＤ−１ポリペプチドまたはその融合タンパク質を含み得る。免疫化される哺乳動物において免疫原性であることが知られているタンパク質に免疫剤をコンジュゲートするか、または哺乳動物をタンパク質及び１つ以上のアジュバントで免疫化することが有用であり得る。かかる免疫原性タンパク質の例には、キーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシチログロブリン、及びダイズトリプシン阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。利用され得るアジュバントの例には、Ｒｉｂｉ、ＣｐＧ、Ｐｏｌｙ  １Ｃ、フロインド完全アジュバント、及びＭＰＬ−ＴＤＭアジュバント（モノホスホリル脂質Ａ、合成ジコリノミコール酸トレハロース）が挙げられる。免疫化プロトコルは、過度の実験なしに当業者によって選択され得る。その後、哺乳動物は採血され得、血清がＰＤ−１抗体力価についてアッセイされる。所望の場合、哺乳動物は、抗体力価が増加するか、または定常に達するまで追加免疫され得る。さらにまたはあるいは、以下に記載されるように、ハイブリドーマからのモノクローナル抗体の融合及び調製のために、リンパ球が免疫化された動物から得られ得る。
【０３６６】
５．３．１．２  モノクローナル抗体
あるいは、本開示の薬学的製剤の抗体は、モノクローナル抗体であり得る。モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９７５，Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５−９７によって最初に説明されたハイブリドーマ法を使用して作製され得るか、または組換えＤＮＡ法によって作製され得る（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）。
【０３６７】
ハイブリドーマ法では、マウスまたは他の適切な宿主動物（ハムスター等）が上述のように免疫化されて、免疫化に使用されるタンパク質に特異的に結合する抗体を産生するか、または産生することができるリンパ球を誘発する。あるいは、リンパ球は、インビトロで免疫化され得る。免疫化後、リンパ球が単離され、その後、ポリエチレングリコール等の好適な融合剤を使用して骨髄腫細胞株と融合して、ハイブリドーマ細胞を形成する（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ５９−１０３（１９８６））。
【０３６８】
このように調製されたハイブリドーマ細胞は、好適な培養培地に播種されて増殖し、この培養培地は、ある特定の実施形態では、融合していない親骨髄腫細胞（別名、融合パートナー）の増殖または生存を阻害する１つ以上の物質を含有する。例えば、親骨髄腫細胞が酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマの選択的培養培地は、典型的には、ＨＧＰＲＴ欠乏細胞の増殖を阻止するヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジン（ＨＡＴ培地）を含むであろう。
【０３６９】
例示的な融合パートナー骨髄腫細胞とは、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による抗体の安定した高レベルの産生を支持し、融合していない親細胞に対して選択する選択的培地に感受性を示すものである。例示的な骨髄腫細胞株とは、マウス骨髄腫株、例えば、ＳＰ−２及び誘導体、例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から入手可能なＸ６３−Ａｇ８−６５３細胞、ならびにＳａｌｋ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）から入手可能なＭＯＰＣ−２１及びＭＰＣ−１１マウス腫瘍に由来するものである。ヒト骨髄腫及びマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株も、ヒトモノクローナル抗体の産生について記載されている（Ｋｏｚｂｏｒ，１９８４，Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３３：３００１−０５、及びＢｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ５１−６３（１９８７））。
【０３７０】
ハイブリドーマ細胞が増殖している培養培地は、抗原に向けられたモノクローナル抗体の産生についてアッセイされる。ハイブリドーマ細胞によって産生されたモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降によって、またはＲＩＡもしくはＥＬＩＳＡ等のインビトロ結合アッセイによって決定される。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８０，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０７：２２０−３９に記載のスキャッチャード分析によって決定され得る。
【０３７１】
所望の特異性、親和性、及び／または活性を有する抗体を産生するハイブリドーマ細胞が特定されると、クローンが限界希釈手技によってサブクローニングされ、標準の方法によって増殖される（Ｇｏｄｉｎｇ（上記参照））。この目的に好適な培養培地には、例えば、ＤＭＥＭまたはＲＰＭＩ−１６４０培地が含まれる。加えて、ハイブリドーマ細胞は、例えば、その細胞のマウスへの腹腔内注射によって、動物における腹水腫瘍としてインビボで増殖し得る。
【０３７２】
サブクローンによって分泌されたモノクローナル抗体は、例えば、親和性クロマトグラフィー（例えば、タンパク質Ａまたはタンパク質Ｇ−セファロースを使用して）またはイオン交換クロマトグラフィー、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析等の従来の抗体精製手技によって、培養培地、腹水、または血清から好適に分離される。
【０３７３】
モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手技を使用して（例えば、マウス抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離及び配列決定される。ハイブリドーマ細胞は、かかるＤＮＡの源としての役割を果たし得る。単離されると、ＤＮＡが発現ベクター中に入れられる場合があり、それらは、その後、別様に抗体タンパク質を産生しないＥ．ｃｏｌｉ細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、または骨髄腫細胞等の宿主細胞中にトランスフェクトされて、組換え宿主細胞におけるモノクローナル抗体の合成が得られる。抗体をコードするＤＮＡの細菌における組換え発現についての総説には、Ｓｋｅｒｒａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：２５６−６２及びＰｌｕｃｋｔｈｕｎ，１９９２，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖｓ．１３０：１５１−８８が挙げられる。
【０３７４】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１エピトープに結合する薬学的製剤の抗体は、（１）ストリンジェントな条件下（例えば、約４５℃の６倍塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）中でのフィルター結合ＤＮＡへのハイブリダイゼーション、続いて、約５０〜６５℃の０．２倍ＳＳＣ／０．１％ＳＤＳ中での１回以上の洗浄）、高ストリンジェントな条件下（例えば、約４５℃の６倍ＳＳＣ中でのフィルター結合核酸へのハイブリダイゼーション、続いて、約６８℃の０．１倍ＳＳＣ／０．２％ＳＤＳ中での１回以上の洗浄）、または当業者に既知の他のストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で、本明細書に記載のＶＨ及び／またはＶＬドメインのうちのいずれか１つをコードするヌクレオチド配列の補体にハイブリダイズするヌクレオチド配列によってコードされるＶＨドメインのアミノ酸配列及び／またはＶＬドメインのアミノ酸配列を含む。例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｖｏｌ．Ｉ，６．３．１−６．３．６  ａｎｄ  ２．１０．３（Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，１９８９）を参照されたい。
【０３７５】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１エピトープに結合する薬学的製剤の抗体は、ストリンジェントな条件下（例えば、約４５℃の６倍ＳＳＣ中でのフィルター結合ＤＮＡへのハイブリダイゼーション、続いて、約５０〜６５℃の０．２倍ＳＳＣ／０．１％ＳＤＳ中での１回以上の洗浄）、高ストリンジェントな条件下（例えば、約４５℃の６倍ＳＳＣ中でのフィルター結合核酸へのハイブリダイゼーション、続いて、約６８℃の０．１倍ＳＳＣ／０．２％ＳＤＳ中での１回以上の洗浄）、または当業者に既知の他のストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）を参照のこと）で、表１〜２に示されるＶＨ  ＣＤＲ及び／またはＶＬ  ＣＤＲのうちのいずれか１つをコードするヌクレオチド配列の補体にハイブリダイズするヌクレオチド配列によってコードされるＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸配列またはＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含む。
【０３７６】
さらなる一実施形態では、薬学的製剤のモノクローナル抗体または抗体断片は、例えば、Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｈａｇｅ  Ｄｉｓｐｌａｙ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ａｎｄ  Ａｉｔｋｅｎ  ｅｄｓ．，２００２）に記載の技法を使用して生成される抗体ファージライブラリから単離され得る。原則として、合成抗体クローンは、ファージコートタンパク質と融合した抗体可変領域（Ｆｖ）の様々な断片をディスプレイするファージを含むファージライブラリをスクリーニングすることによって選択される。かかるファージライブラリは、所望の抗原に対してスクリーニングされる。所望の抗原に結合することができるＦｖ断片を発現するクローンは、抗原に吸着し、それ故に、ライブラリ内の非結合クローンから分離される。その後、結合クローンは、抗原から溶出し、追加の抗原吸着／溶出サイクルによってさらに富化され得る。
【０３７７】
可変ドメインは、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２：４３３−５５に記載されるように、ＶＨ及びＶＬが短い可動性ペプチドを介して共有結合される一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片として、またはそれらが各々定常ドメインと融合して非共有的に相互作用するＦａｂ断片としてのいずれかで、ファージ上に機能的にディスプレイされ得る。
【０３７８】
ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーは、ＰＣＲによって別個にクローニングされ、ファージライブラリ内でランダムに組換えられ得、その後、これは、Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）に記載されるように、抗原結合クローンについて検索され得る。免疫化源由来のライブラリは、ハイブリドーマの構築を必要とすることなく、高親和性抗体を免疫原に提供する。あるいは、天然レパートリーは、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，ＥＭＢＯ  Ｊ  １２：７２５−３４によって説明されるように、いずれの免疫化なしで、単一のヒト抗体源を広範囲の非自己抗原に、かつ自己抗原にも提供するようにクローニングされ得る。最後に、天然ライブラリは、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，１９９２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：３８１−８８によって説明されるように、幹細胞から再配置されていないＶ遺伝子セグメントをクローニングすることによって、かつランダム配列を含むＰＣＲプライマーを使用することによっても合成的に作製されて、高度可変ＣＤＲ３領域をコードし、インビトロでの再配置を達成することができる。
【０３７９】
ライブラリのスクリーニングは、当該技術分野で既知の様々な技法によって達成され得る。例えば、ＰＤ−１（例えば、ＰＤ−１ポリペプチド、断片、またはエピトープ）は、吸着プレートのウェルを被覆するために使用され得るか、吸着プレートに固定された宿主細胞上に発現し得るか、または細胞選別に使用され得るか、ストレプトアビジン被覆ビーズでの捕捉のためにビオチンにコンジュゲートし得るか、またはディスプレイライブラリをパニングするための任意の他の方法で使用され得る。遅い解離速度（例えば、良好な結合親和性）を有する抗体の選択は、Ｂａｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ８：３０９−１４及びＷＯ９２／０９６９０に記載の長時間洗浄及び一価ファージディスプレイの使用によって、かつＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１０：７７９−８３に記載の抗原の低被覆密度の使用によって促進され得る。
【０３８０】
薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、目的とするファージクローンの選択に好適な抗原スクリーニング手技を設計し、続いて、目的とするファージクローン及びＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）に記載の好適な定常領域（例えば、Ｆｃ）配列由来の、ＶＨ及び／またはＶＬ配列（例えば、Ｆｖ配列）、またはＶＨ及びＶＬ配列由来の様々なＣＤＲ配列を使用して全長抗ＰＤ−１抗体クローンを構築することによって得られ得る。
【０３８１】
別の実施形態では、薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、Ｂｏｗｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．１０８：２０４５５−６０に記載の方法、例えば、ＳＨＭ−ＸＨＬ（商標）プラットフォーム（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用することによって生成される。簡潔には、この手法では、出発ライブラリとして哺乳類細胞株（例えば、ＨＥＫ２９３）にＩｇＧの完全ヒトライブラリが構築される。標的ペプチドまたはエピトープに結合する免疫グロブリンをディスプレイする哺乳類細胞が選択され（例えば、ＦＡＣＳ選別によって）、その後、活性化誘発シチジンデアミナーゼ（ＡＩＤ）誘発体細胞超突然変異がインビトロで再現されて、最初に選択された抗体プールの多様性が拡大する。哺乳類細胞表面ディスプレイとインビトロ体細胞超突然変異とのカップリングによる数回の親和性成熟ラウンド後、高親和性で高特異性の抗ＰＤ−１抗体が生成される。抗体ライブラリを生成する、及び／または抗体親和性成熟をもたらすために使用され得るさらなる方法が、例えば、その各々は参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第８，６８５，８９７号及び同第８，６０３，９３０号、ならびに米国公開第２０１４／０１７０７０５号、同第２０１４／００９４３９２号、同第２０１２／００２８３０１号、同第２０１１／０１８３８５５号、及び同第２００９／００７５３７８号に開示されている。
【０３８２】
５．３．１．３  抗体断片
本開示は、ＰＤ−１に結合する抗体及び抗体断片を含む薬学的製剤を提供する。ある特定の状況では、全抗体ではなく抗体断片を使用する利点が存在する。より小さいサイズの断片により、迅速なクリアランスが可能になり、細胞、組織、または臓器へのアクセスの改善がもたらされ得る。ある特定の抗体断片の総説については、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．９：１２９−３４を参照されたい。
【０３８３】
抗体断片を産生するための様々な技法が開発されている。従来、これらの断片は、インタクト抗体のタンパク質分解から得られていた（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４：１０７−１７、及びＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：８１−８３を参照のこと）。しかしながら、これらの断片は、現在、組換え宿主細胞によって直接産生することができる。Ｆａｂ、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ抗体断片は全て、Ｅ．ｃｏｌｉまたは酵母細胞に発現し、それから分泌され得るため、大量のこれらの断片の容易な産生が可能になる。抗体断片は、上述の抗体ファージライブラリから単離され得る。あるいは、Ｆａｂ’−ＳＨ断片は、Ｅ．ｃｏｌｉから直接回収され、化学的にカップリングされて、Ｆ（ａｂ’）２断片を形成することができる（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３−６７）。別のアプローチに従って、Ｆ（ａｂ’）２断片は、組換え宿主細胞培養物から直接単離され得る。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含む延長されたインビボ半減期を有するＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片が、例えば、米国特許第５，８６９，０４６号に記載されている。抗体断片を産生するための他の技法は、当業者には明らかであろう。ある特定の実施形態では、抗体は、一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）である（例えば、ＷＯ９３／１６１８５、米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号を参照のこと）。Ｆｖ及びｓｃＦｖは、定常領域を欠くインタクト結合部位を有し、それ故に、それらは、インビボでの使用中の非特異的結合の低減に好適であり得る。ｓｃＦｖ融合タンパク質は、ｓｃＦｖのアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかでのエフェクタータンパク質の融合をもたらすように構築され得る（例えば、Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ  ｅｄ．（上記参照）を参照のこと）。抗体断片は、例えば、上述の参考文献に記載される「直鎖状抗体」でもあり得る。かかる直鎖状抗体は、単一特異性または多重特異性、例えば、二重特異性であり得る。
【０３８４】
より小さい抗体由来結合構造は、単一可変ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）とも命名されている別個の可変ドメイン（Ｖドメイン）である。ある特定の種類の生物、ラクダ科動物及び軟骨魚は、それらの免疫系の一部としてＦｃ等価ドメイン構造に組み込まれた高親和性単一Ｖ様ドメインを有する（Ｗｏｏｌｖｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ５０：９８−１０１、及びＳｔｒｅｌｔｓｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．１０１：１２４４４−４９）。Ｖ様ドメイン（ラクダ科動物ではＶｈＨ、サメではＶ−ＮＡＲと呼ばれる）は、典型的には、長い表面ループをディスプレイし、これにより、標的抗原の空洞の貫通が可能になる。それらはまた、疎水性表面パッチをマスクすることによって単離されたＶＨドメインを安定化する。
【０３８５】
これらのＶｈＨ及びＶ−ＮＡＲドメインは、ｓｄＡｂを操作するために使用されている。ヒトＶドメイン変異形は、ファージライブラリ及び安定した高結合ＶＬ及びＶＨ由来ドメインをもたらしている他のアプローチの選択を使用して設計されている。
【０３８６】
本明細書に提供される薬学的製剤の抗体には、免疫グロブリン分子及び免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、例えば、ＰＤ−１エピトープに結合する抗原結合部位を含む分子が含まれるが、これらに限定されない。本明細書に提供される免疫グロブリン分子は、免疫グロブリン分子の任意のクラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＩｇＡ）または任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）のものであり得る。
【０３８７】
薬学的製剤の抗体の変異形及び誘導体には、ＰＤ−１エピトープに結合する能力を保持する抗体機能的断片が含まれる。例示的な機能的断片には、Ｆａｂ断片（例えば、抗原結合ドメインを含み、ジスルフィド結合によって架橋された軽鎖と重鎖の一部を含む抗体断片）；Ｆａｂ’（例えば、ヒンジ領域を介してＦａｂ及び重鎖の追加部分を含む単一抗原結合ドメインを含む抗体断片）；Ｆ（ａｂ’）２（例えば、重鎖のヒンジ領域における鎖間ジスルフィド結合によって連結された２つのＦａｂ’分子；Ｆａｂ’分子は同じまたは異なるエピトープに向けられ得る）；二重特異性Ｆａｂ（例えば、各々が異なるエピトープに向けられ得る２つの抗原結合ドメインを有するＦａｂ分子）；可変領域を含む一本鎖、別名、ｓｃＦｖ（例えば、１０〜２５個のアミノ酸の鎖によって一緒に結合された抗体の単一軽鎖及び重鎖の可変抗原結合決定領域）；ジスルフィド結合Ｆｖ、またはｄｓＦｖ（例えば、ジスルフィド結合によって一緒に結合された抗体の単一軽鎖及び重鎖の可変抗原結合決定領域）；ラクダ化ＶＨ（例えば、抗体の単一重鎖の可変抗原結合決定領域（ＶＨ界面のいくつかのアミノ酸が天然に存在するラクダ抗体の重鎖に見られるものである））；二重特異性ｓｃＦｖ（例えば、各々が異なるエピトープに向けられ得る２つの抗原結合ドメインを有するｓｃＦｖまたはｄｓＦｖ分子）；ダイアボディ（例えば、第１のｓｃＦｖのＶＨドメインが第２のｓｃＦｖのＶＬドメインと会合し、かつ第１のｓｃＦｖのＶＬドメインが第２のｓｃＦｖのＶＨドメインと会合したときに形成される二量体化ｓｃＦｖ；ダイアボディの２つの抗原結合領域が同じまたは異なるエピトープに向けられ得る）；ならびにトリアボディ（例えば、ダイアボディと同様の方法で形成されるが、３つの抗原結合ドメインが単一複合体中に作成される三量体化ｓｃＦｖ；３つの抗原結合ドメインが同じまたは異なるエピトープに向けられ得る）が挙げられる。
【０３８８】
５．３．１．４  ヒト化抗体
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ヒト及び／またはカニクイザルＰＤ−１を含むＰＤ−１に結合するヒト化抗体であり得る。例えば、本開示の薬学的製剤のヒト化抗体は、表１〜２に示される１つ以上のＣＤＲを含み得る。非ヒト抗体をヒト化するための様々な方法が当該技術分野で既知である。例えば、ヒト化抗体は、非ヒトである源からその中へと導入される１つ以上のアミノ酸残基を有し得る。これらの非ヒトアミノ酸残基は、多くの場合、典型的には「移入」可変ドメインから得られる「移入」残基と称される。ヒト化は、例えば、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−２５、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−２７、及びＶｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−３６）の方法に従って、超可変領域配列をヒト抗体の対応する配列に置換することによって行われ得る。
【０３８９】
ある場合には、薬学的製剤のヒト化抗体は、親非ヒト抗体（例えば、齧歯類）の６つのＣＤＲのアミノ酸配列がヒト抗体フレームワーク上にグラフト化されたＣＤＲグラフト化によって構築される。例えば、Ｐａｄｌａｎらは、ＣＤＲ内の残基の３分の１のみが実際に抗原と接触すると決定し、これらを「特異性決定残基」またはＳＤＲと命名した（Ｐａｄｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，ＦＡＳＥＢＪ．９：１３３−３９）。ＳＤＲグラフト化の技法では、ＳＤＲ残基のみがヒト抗体フレームワーク上にグラフト化される（例えば、Ｋａｓｈｍｉｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：２５−３４を参照のこと）。
【０３９０】
ヒト化抗体の作製に使用される軽及び重の両方のヒト可変ドメインの選択は、抗原性を低減させるのに重要であり得る。例えば、いわゆる「最良適合」法に従って、非ヒト（例えば、齧歯類）抗体の可変ドメインの配列が既知のヒト可変ドメイン配列の全ライブラリに対してスクリーニングされる。齧歯類の配列に最も近いヒト配列が、ヒト化抗体のヒトフレームワークとして選択され得る（Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６−３０８、及びＣｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−１７）。別の方法は、軽鎖または重鎖の特定の下位群の全てのヒト抗体のコンセンサス配列に由来する特定のフレームワークを使用する。同じフレームワークが、いくつかの異なるヒト化抗体に使用され得る（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：４２８５−８９、及びＰｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３−３２）。ある場合には、フレームワークは、最も大量に存在するヒトサブクラスであるＶＬ６下位群Ｉ（ＶＬ６Ｉ）及びＶＨ下位群ＩＩＩ（ＶＨＩＩＩ）のコンセンサス配列に由来する。別の方法では、ヒト生殖系列遺伝子は、フレームワーク領域の源として使用される。
【０３９１】
超ヒト化と呼ばれるＣＤＲの比較に基づく代替パラダイムでは、ＦＲ相同性は無関係である。この方法は、非ヒト配列と機能的ヒト生殖系列遺伝子レパートリーとの比較からなる。その後、マウス配列と同じまたは密に関連した正準構造をコードする遺伝子が選択される。次に、正準構造を非ヒト抗体と共有する遺伝子内で、ＣＤＲ内で最も高い相同性を有するものがＦＲドナーとして選択される。最後に、非ヒトＣＤＲがこれらのＦＲ上にグラフト化される（例えば、Ｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：１１１９−２５を参照のこと）。
【０３９２】
薬学的製剤の抗体が抗原に対するそれらの親和性及び他の好ましい生物学的特性を保持してヒト化されることがさらに一般に望ましい。この目標を達成するために、一方法に従って、ヒト化抗体は、親配列及びヒト化配列の三次元モデルを使用して親配列及び様々な概念的ヒト化産物を分析する工程によって調製される。三次元免疫グロブリンモデルが一般に利用可能であり、当業者によく知られている。選択された候補免疫グロブリン配列の可能な三次元立体配座構造を図解及びディスプレイするコンピュータプログラムが利用可能である。これらには、例えば、ＷＡＭ（Ｗｈｉｔｅｌｅｇｇ  ａｎｄ  Ｒｅｅｓ，２０００，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．１３：８１９−２４）、Ｍｏｄｅｌｌｅｒ（Ｓａｌｉ  ａｎｄ  Ｂｌｕｎｄｅｌｌ，１９９３，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２３４：７７９−８１５）、及びＳｗｉｓｓ  ＰＤＢ  Ｖｉｅｗｅｒ（Ｇｕｅｘ  ａｎｄ  Ｐｅｉｔｓｃｈ，１９９７，Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ  １８：２７１４−２３）が含まれる。これらのディスプレイの検査により、候補免疫グロブリン配列の機能における残基の可能性のある役割の分析、例えば、候補免疫グロブリンのその抗原に結合する能力に影響を及ぼす残基の分析が可能になる。このような方法で、ＦＲ残基がレシピエント及び移入配列から選択され、組み合わせられ得、標的抗原（複数可）に対する増大した親和性等の所望の抗体特性が達成されるようになる。一般に、超可変領域残基は、抗原結合への影響に直接かつ最も実質的に関与する。
【０３９３】
抗体ヒト化の別の方法は、ヒトストリング含有量（ＨＳＣ）と命名されている抗体のヒトらしさの測定基準に基づく。この方法は、マウス配列をヒト生殖系列遺伝子のレパートリーと比較し、その差異がＨＳＣとしてスコア化される。その後、標的配列が、全体的同一性尺度を使用するのではなくそのＨＳＣを最大化することによってヒト化されて、複数の多様なヒト化変異形が生成される（Ｌａｚａｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４４：１９８６−９８）。
【０３９４】
上述の方法に加えて、経験的方法を使用して、ヒト化抗体を生成及び選択することができる。これらの方法には、ヒト化変異形の大規模ライブラリの生成、及び富化技術またはハイスループットスクリーニング技法を使用した最良クローンの選択に基づくものが含まれる。抗体変異形は、ファージ、リボソーム、及び酵母ディスプレイライブラリから単離され得、細菌コロニースクリーニングによっても単離され得る（例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ，２００５，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３：１１０５−１６、Ｄｕｆｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２４：５２３−２９、Ｆｅｌｄｈａｕｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２１：１６３−７０、及びＳｃｈｌａｐｓｃｈｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．１７：８４７−６０を参照のこと）。
【０３９５】
ＦＲライブラリアプローチでは、一群の残基変異形がＦＲ内の特定の位置に導入され、続いて、ライブラリがスクリーニングされて、グラフト化ＣＤＲを最良に支持するＦＲが選択される。置換される残基は、ＣＤＲ構造に寄与する可能性があると特定された「バーニア」残基（例えば、Ｆｏｏｔｅ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，１９９２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：４８７−９９を参照のこと）のうちのいくつかもしくは全て、またはＢａｃａらによって特定されたより限定された一組の標的残基（１９９７，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−８４）由来のものを含み得る。
【０３９６】
ＦＲシャフリングでは、選択された残基変異形のコンビナトリアルライブラリを作成する代わりに、全ＦＲが非ヒトＣＤＲと組み合わせられる（例えば、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：４３−６０を参照のこと）。これらのライブラリが、最初にＶＬをヒト化し、続いて、ＶＨをヒト化する二段階工程で、結合についてスクリーニングされ得る。あるいは、一段階ＦＲシャフリング工程が使用され得る。結果として得られた抗体は増強された発現、増大した親和性、及び熱安定性を含む改善された生化学的及び物理化学的特性を呈したため、かかる工程が二段階スクリーニングよりも効率的であると示されている（例えば、Ｄａｍｓｃｈｒｏｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４４：３０４９−６０を参照のこと）。
【０３９７】
「ヒューマニアリング（ｈｕｍａｎｅｅｒｉｎｇ）」法は、必須の最小特異性決定基（ＭＳＤ）の実験的特定に基づき、非ヒト断片のヒトＦＲのライブラリへの順次置換及び結合の評価に基づく。これは、非ヒトＶＨ及びＶＬ鎖のＣＤＲ３の領域から始まり、ＶＨ及びＶＬの両方のＣＤＲ１及びＣＤＲ２を含む非ヒト抗体の他の領域をヒトＦＲに漸進的に置換する。この方法論は、典型的には、エピトープ保持、及び別個のヒトＶセグメントＣＤＲを有する複数のサブクラス由来の抗体の特定をもたらす。ヒューマニアリングにより、ヒト生殖系列遺伝子抗体と９１〜９６％相同の抗体の単離が可能になる（例えば、Ａｌｆｅｎｉｔｏ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｈｅａｌｔｈｔｅｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ’ｓ  Ｔｈｉｒｄ  Ａｎｎｕａｌ  ＰＥＧＳ，Ｔｈｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｓｕｍｍｉｔ，２００７を参照のこと）。
【０３９８】
「ヒト操作」法は、それでもなお最初の非ヒト抗体の望ましい結合特性を保持するヒトにおいて低減した免疫原性を有する修飾された抗体を産生するように、特定の変化を抗体のアミノ酸配列に加えることによって、マウスまたはキメラ抗体または抗体断片等の非ヒト抗体または抗体断片を改変することを伴う。一般に、この技法は、非ヒト（例えば、マウス）抗体のアミノ酸残基を、「低リスク」残基、「中程度リスク」残基、または「高リスク」残基に分類することを伴う。この分類は、置換が結果として得られた抗体のフォールディングに影響を及ぼすであろうリスクに対して（例えば、ヒトにおける免疫原性のために）特定の置換を行う予測利点を評価する全体的リスク／報酬計算を使用して行われる。非ヒト（例えば、マウス）抗体配列の所与の位置で置換される特定のヒトアミノ酸残基（例えば、低リスクまたは中程度リスク）は、非ヒト抗体の可変領域由来のアミノ酸配列を特定のヒト抗体配列またはコンセンサスヒト抗体配列の対応する領域と整列させることによって選択され得る。非ヒト配列内の低リスク位置または中程度リスク位置のアミノ酸残基は、その整列に従ってヒト抗体配列内の対応する残基に置換され得る。ヒト操作されたタンパク質を作製するための技法が、Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ７：８０５−１４、米国特許第５，７６６，８８６号、同第５，７７０，１９６号、同第５，８２１，１２３号、及び同第５，８６９，６１９号、ならびにＰＣＴ公開第ＷＯ９３／１１７９４号により詳細に記載されている。
【０３９９】
５．３．１．５  ヒト抗体
薬学的製剤のヒト抗ＰＤ−１抗体は、ヒト由来ファージディスプレイライブラリから選択されるＦｖクローン可変ドメイン配列（複数可）を既知のヒト定常ドメイン配列（複数可）と組み合わせることによって構築され得る。あるいは、本開示の薬学的製剤のヒトモノクローナル抗ＰＤ−１抗体は、ハイブリドーマ法によって作製され得る。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫及びマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株は、例えば、Ｋｏｚｂｏｒ，１９８４，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３３：３００１−０５、Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ５１−６３（１９８７）、及びＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：８６−９５によって説明されている。
【０４００】
免疫化時に、内因性免疫グロブリン産生の不在下でヒト抗体の全レパートリーを産生することができるトランスジェニック動物（例えば、マウス）を産生することも可能である。ヒト抗体レパートリーを発現するトランスジェニックマウスが、多種多様の潜在的な薬物標的に対する高親和性ヒト配列モノクローナル抗体を生成するために使用されている（例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ，Ａ．，１９９５，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６（５）：５６１−６６、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｔａｕｓｓｉｎｇ，１９９７，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８（４）：４５５−５８、米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号、ならびにＬｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３：１１１７−２５を参照のこと）。
【０４０１】
あるいは、ヒト抗体は、標的抗原に向けられた抗体を産生するヒトＢリンパ球の不死化によって調製され得る（例えば、かかるＢリンパ球は、個体から回収され得るか、またはインビトロで免疫化されている場合がある）（例えば、Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ（１９８５）、Ｂｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（１）：８６−９５；及び米国特許第５，７５０，３７３号を参照のこと）。
【０４０２】
ヒト抗体を非ヒト抗体、例えば、齧歯類抗体から得るために、遺伝子シャフリングも使用され得、ヒト抗体は、出発非ヒト抗体と同様の親和性及び特異性を有する。「エピトープインプリンティング」または「ガイド選択」とも呼ばれるこの方法に従って、本明細書に記載のファージディスプレイ技法によって得られた非ヒト抗体断片の重鎖可変領域または軽鎖可変領域のいずれかが、ヒトＶドメイン遺伝子のレパートリーで置換され、非ヒト鎖／ヒト鎖ｓｃＦｖまたはＦａｂキメラ集団を作成する。抗原での選択により、非ヒト鎖／ヒト鎖キメラｓｃＦｖまたはＦａｂの単離がもたらされ、ヒト鎖は、一次ファージディスプレイクローンにおける対応する非ヒト鎖の除去時に破壊された抗原結合部位を回復させる（例えば、エピトープがヒト鎖パートナーの選択をガイド（インプリント）する）。この工程が残りの非ヒト鎖を置換するために繰り返されると、ヒト抗体が得られる（例えば、ＰＣＴ第ＷＯ９３／０６２１３号、及びＯｓｂｏｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：６１−６８を参照のこと）。ＣＤＲグラフト化による非ヒト抗体の伝統的なヒト化とは異なり、この技法は、非ヒト起源のＦＲまたはＣＤＲ残基を有しない完全なヒト抗体を提供する。細胞表面抗原に対するマウス抗体をヒト化するためのガイド選択の例には、卵巣癌細胞上に存在する葉酸結合タンパク質（例えば、Ｆｉｇｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５８：９９１−９６を参照のこと）及び肝細胞癌上に高度に発現したＣＤ１４７（例えば、Ｂａｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．４：１３７４−８０を参照のこと）が挙げられる。
【０４０３】
ガイド選択アプローチの潜在的不利点は、一方の抗体鎖のシャフリングが他方を不変に保っている間にエピトープドリフトを引き起こし得ることである。非ヒト抗体によって認識されるエピトープを維持するために、ＣＤＲ保持が適用され得る（例えば、Ｋｌｉｍｋａ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ．８３：２５２−６０、及びＢｅｉｂｏｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９６：８３３−４９を参照のこと）。この方法では、非ヒトＶＨ  ＣＤＲ３が通常保持され、このＣＤＲが抗原結合部位の中心にあり得、かつ抗原認識に最も重要な抗体の領域であり得るためである。しかしながら、いくつかの事例では、非ヒト抗体のＶＨ  ＣＤＲ３及びＶＬ  ＣＤＲ３、ならびにＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ１が保持され得る。
【０４０４】
５．３．１．６  二重特異性抗体
少なくとも２つの異なる抗原に対する結合特異性を有するモノクローナル抗体である二重特異性抗体を含む薬学的製剤も本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、ヒトまたはヒト化抗体である。ある特定の実施形態では、結合特異性のうちの一方は、ＰＤ−１に対するものであり、他方は、任意の他の抗原に対するものである。いくつかの実施形態では、結合特異性のうちの一方は、ＰＤ−１に対するものであり、他方は、ＰＤ−１を発現する細胞上に発現した別の表面抗原に対するものである。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、ＰＤ−１の２つの異なるエピトープに結合し得る。二重特異性抗体は、全長抗体または抗体断片（例えば、Ｆ（ａｂ’）２二重特異性抗体）として調製され得る。
【０４０５】
二重特異性抗体を作製するための方法は当該技術分野で既知であり、例えば、２つの重鎖が異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の共発現によるものである（例えば、Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，１９８３，Ｎａｔｕｒｅ  ３０５：５３７−４０を参照のこと）。二重特異性抗体を生成するさらなる詳細については、例えば、Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ  ｅｄ．，２０１１）を参照されたい。
【０４０６】
５．３．１．７  多価抗体
多価抗体は、抗体が結合する抗原を発現する細胞によって二価抗体よりも速く内部移行（及び／または異化）され得る。本開示の薬学的製剤の抗体は、抗体のポリペプチド鎖をコードする核酸の組換え発現によって容易に産生され得る、３つ以上の抗原結合部位を有する（ＩｇＭクラスのもの以外の）多価抗体（例えば、四価抗体）であり得る。多価抗体は、二量体化ドメイン及び３つ以上の抗原結合部位を含み得る。ある特定の実施形態では、二量体化ドメインは、Ｆｃ領域またはヒンジ領域を含む（またはそれからなる）。このシナリオでは、抗体は、Ｆｃ領域及びＦｃ領域のアミノ末端側に３つ以上の抗原結合部位を含む。ある特定の実施形態では、多価抗体は、３〜約８つの抗原結合部位を含む（またはそれからなる）。かかる一実施形態では、多価抗体は、４つの抗原結合部位を含む（またはそれからなる）。多価抗体は、少なくとも１つのポリペプチド鎖（例えば、２つのポリペプチド鎖）を含み、ポリペプチド鎖（複数可）は、２つ以上の可変ドメインを含む。例えば、ポリペプチド鎖（複数可）は、ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−（Ｘ２）ｎ−Ｆｃを含み得、式中、ＶＤ１は、第１の可変ドメインであり、ＶＤ２は、第２の可変ドメインであり、Ｆｃは、Ｆｃ領域の１つのポリペプチド鎖であり、Ｘ１及びＸ２は、アミノ酸またはポリペプチドを表し、ｎは、０または１である。例えば、ポリペプチド鎖（複数可）は、ＶＨ−ＣＨ１−可動性リンカー−ＶＨ−ＣＨ１−Ｆｃ領域鎖、またはＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１−Ｆｃ領域鎖を含み得る。本明細書における多価抗体は、少なくとも２つ（例えば、４つ）の軽鎖可変ドメインポリペプチドをさらに含み得る。本明細書における多価抗体は、例えば、約２〜約８つの軽鎖可変ドメインポリペプチドを含み得る。本明細書で企図される軽鎖可変ドメインポリペプチドは、軽鎖可変ドメインを含み、任意に、ＣＬドメインをさらに含む。
【０４０７】
５．３．１．８  Ｆｃ操作
本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体をＦｃ操作によって修飾することが望ましくあり得る。ある特定の実施形態では、抗体のＦｃ領域に対する修飾により、抗体のエフェクター機能の低下または排除がもたらされる。ある特定の実施形態では、エフェクター機能は、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、及び／またはＣＤＣである。いくつかの実施形態では、エフェクター機能は、ＡＤＣＣである。他の実施形態では、エフェクター機能は、ＡＤＣＰである。他の実施形態では、エフェクター機能は、ＣＤＣである。一実施形態では、エフェクター機能は、ＡＤＣＣ及びＡＤＣＰである。一実施形態では、エフェクター機能は、ＡＤＣＣ及びＣＤＣである。一実施形態では、エフェクター機能は、ＡＤＣＰ及びＣＤＣである。一実施形態では、エフェクター機能は、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、及びＣＤＣである。これは、１つ以上のアミノ酸置換を抗体のＦｃ領域に導入することによって達成され得る。例えば、２３３〜２３６位のＩｇＧ２残基、ならびに３２７、３３０、及び３３１位のＩｇＧ４残基を使用したヒトＩｇＧ１への置換が、ＡＤＣＣ及びＣＤＣを大いに低減することが示された（例えば、Ａｒｍｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９（８）：２６１３−２４、及びＳｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６（９）：６５９１−６０４を参照のこと）。他のＦｃ変異形が本明細書の他の箇所で提供される。
【０４０８】
薬学的製剤の抗体の血清半減期を延長するために、例えば、米国特許第５，７３９，２７７号に記載されるように、サルベージ受容体結合エピトープを抗体（特に抗体断片）に組み込むことができる。「サルベージ受容体結合エピトープ」という用語は、ＩｇＧ分子のインビボ血清半減期の延長に関与するＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）のＦｃ領域のエピトープを指す。
【０４０９】
５．３．１．９  代替結合剤
本開示は、本明細書に開示の抗ＰＤ−１抗体と同じエピトープに特異的に結合する非免疫グロブリン結合剤を含む薬学的製剤を包含する。いくつかの実施形態では、非免疫グロブリン結合剤は、競合的結合アッセイにおいて本開示の抗ＰＤ−１抗体を置換するか、またはそれによって置換される薬剤と特定される。これらの代替結合剤には、例えば、当該技術分野で既知の操作されたタンパク質スキャフォールドのうちのいずれかが含まれ得る。かかるスキャフォールドは、表１〜２に示される１つ以上のＣＤＲを含み得る。かかるスキャフォールドには、例えば、リガンド結合部位を形成する４つの超可変ループを支持する強固なベータ−バレルを特徴とするタンパク質構造であるリポカリンスキャフォールドに基づくアンチカリンが含まれる。新規の結合特異性は、機能的ディスプレイ及びガイド選択と組み合わされた、ループ領域における標的ランダム突然変異生成によって操作され得る（例えば、Ｓｋｅｒｒａ，２００８，ＦＥＢＳＪ．２７５：２６７７−８３を参照のこと）。他の好適なスキャフォールドには、例えば、アドネクチン、またはヒトフィブロネクチンＩＩＩの第１０の細胞外ドメインに基づくモノボディ（例えば、Ｋｏｉｄｅ  ａｎｄ  Ｋｏｉｄｅ，２００７，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３５２：９５−１０９を参照のこと）、ブドウ球菌性タンパク質ＡのＺドメインに基づくアフィボディ（例えば、Ｎｙｇｒｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，ＦＥＢＳＪ．２７５：２６６８−７６を参照のこと）、アンキリン反復タンパク質に基づくＤＡＲＰｉｎ（例えば、Ｓｔｕｍｐｐ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｄｒｕｇ．Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ  １３：６９５−７０１を参照のこと）、ヒトＦｙｎタンパク質キナーゼのＳＨ３ドメインに基づくフィノマー（例えば、Ｇｒａｂｕｌｏｖｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８２：３１９６−２０４を参照のこと）、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ  ａｃｉｄｏｌａｒｉｕｓ由来のＳａｃ７ｄに基づくアフィチン（例えば、Ｋｒｅｈｅｎｂｒｉｎｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３８３：１０５８−６８を参照のこと）、ヒトｙ−Ｂ−クリスタリンに基づくアフィリン（例えば、Ｅｂｅｒｓｂａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３７２：１７２−８５を参照のこと）、膜受容体タンパク質のＡドメインに基づくアビマー（例えば、Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３：１５５６−６１を参照のこと）、システインに富むノッチンペプチド（例えば、Ｋｏｌｍａｒ，２００８，ＦＥＢＳＪ．２７５：２６８４−９０を参照のこと）、及び操作されたＫｕｎｉｔｚ型阻害剤（例えば、Ｎｉｘｏｎ  ａｎｄ  Ｗｏｏｄ，２００６，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ．Ｄｉｓｃｏｖ．Ｄｅｖ．９：２６１−６８を参照のこと）が含まれ得る。総説については、例えば、Ｇｅｂａｕｅｒ  ａｎｄ  Ｓｋｅｒｒａ，２００９，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１３：２４５−５５を参照されたい。
【０４１０】
５．３．２  抗体変異形
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＰＤ−１に結合する抗体のアミノ酸配列修飾（複数可）が企図される。例えば、抗体の結合親和性及び／または他の生物学的特性（特異性、熱安定性、発現レベル、エフェクター機能、グリコシル化、低減した免疫原性、または溶解性を含むが、これらに限定されない）を改善することが望ましくあり得る。したがって、本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体に加えて、抗ＰＤ−１抗体変異形が調製され得ることが企図される。例えば、抗ＰＤ−１抗体変異形は、適切なヌクレオチド変化をコードＤＮＡに導入することによって、及び／または所望の抗体またはポリペプチドを合成することによって調製され得る。アミノ酸変化を理解する当業者であれば、抗ＰＤ−１抗体の翻訳後プロセスを改変することができ、例えば、グリコシル化部位の数もしくは位置を変化させるか、または膜固着特性を改変することができる。
【０４１１】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、例えば、任意の種類の分子の抗体への共有結合によって化学修飾され得る。抗体誘導体には、例えば、グリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、既知の保護基／遮断基による誘導体化、化学的切断、タンパク質分解的切断、細胞リガンドまたは他のタンパク質への結合等の増大または低下によって化学修飾された抗体が含まれ得る。さらに、抗体は、１つ以上の非古典的アミノ酸を含み得る。
【０４１２】
変形は、天然配列抗体またはポリペプチドと比較してアミノ酸配列の変化をもたらす抗体またはポリペプチドをコードする１つ以上のコドンの置換、欠失、または挿入であり得る。アミノ酸置換は、同様の構造的及び／または化学的特性を有する１つのアミノ酸の別のアミノ酸での置換、例えば、ロイシンのセリンでの置換、例えば、保存的アミノ酸置換の結果であり得る。挿入または欠失は、任意に、約１〜５つのアミノ酸の範囲であり得る。ある特定の実施形態では、置換、欠失、または挿入は、最初の分子と比較して２５個未満のアミノ酸置換、２０個未満のアミノ酸置換、１５個未満のアミノ酸置換、１０個未満のアミノ酸置換、５個未満のアミノ酸置換、４個未満のアミノ酸置換、３個未満のアミノ酸置換、または２個未満のアミノ酸置換を含む。具体的な実施形態では、置換は、１つ以上の予測される非必須アミノ酸残基に加えられる保存的アミノ酸置換である。許容される変形は、アミノ酸の挿入、欠失、または置換をその配列に系統的に加えることによって、かつ結果として得られた変異形を全長または成熟天然配列によって呈される活性について試験することによって決定され得る。
【０４１３】
アミノ酸配列挿入には、長さ１残基から１００以上の残基を含むポリペプチドに及ぶアミノ末端及び／またはカルボキシル末端融合、ならびに単一または複数のアミノ酸残基の配列内挿入が含まれる。末端挿入の例には、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入的変異形には、抗体のＮ末端もしくはＣ末端の酵素（例えば、抗体指向性酵素プロドラッグ療法のため）または抗体の血清半減期を延長するポリペプチドとの融合が含まれる。
【０４１４】
抗体の生物学的特性の実質的な修飾は、（ａ）置換領域におけるポリペプチド骨格の構造、例えば、シートもしくはらせん状立体構造、（ｂ）標的部位での分子の電荷もしくは疎水性、または（ｃ）側鎖のバルクの維持に対するそれらの影響の点で著しく異なる置換を選択することによって達成される。あるいは、それらの特性を維持するか、またはそれを著しく変化させないように、保存的（例えば、同様の特性及び／または側鎖を有するアミノ酸基内）置換が加えられ得る。アミノ酸は、それらの側鎖の特性の類似性に従って群分けされ得る（例えば、Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ７３−７５（２ｄ  ｅｄ．１９７５）を参照のこと）：（１）非極性：Ａｌａ（Ａ）、Ｖａｌ（Ｖ）、Ｌｅｕ（Ｌ）、Ｉｌｅ（Ｉ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｒｐ（Ｗ）、Ｍｅｔ（Ｍ）、（２）非荷電極性：Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｔｈｒ（Ｔ）、Ｃｙｓ（Ｃ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、Ａｓｎ（Ｎ）、Ｇｌｎ（Ｑ）、（３）酸性：Ａｓｐ（Ｄ）、Ｇｌｕ（Ｅ）、及び（４）塩基性：Ｌｙｓ（Ｋ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｈｉｓ（Ｈ）。
【０４１５】
あるいは、天然に存在する残基は、共通の側鎖特性に基づいて群分けされ得る：（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ、（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、及び（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【０４１６】
非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーを別のクラスと交換することを伴う。かかる置換残基は、保存的置換部位に、または残りの（非保存）部位に導入され得る。したがって、一実施形態では、ＰＤ−１エピトープに結合する抗体またはその断片は、本明細書に提供される薬学的製剤のマウスモノクローナル抗体のアミノ酸配列と少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。一実施形態では、ＰＤ−１エピトープに結合する抗体またはその断片は、表１〜６に示されるアミノ酸配列と少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。さらに別の実施形態では、ＰＤ−１エピトープに結合する抗体またはその断片は、表２に示されるＶＨ  ＣＤＲアミノ酸配列及び／または表１に示されるＶＬ  ＣＤＲアミノ酸配列と少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一のＶＨ  ＣＤＲ及び／またはＶＬ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む。これらの変形は、オリゴヌクレオチド媒介性（部位特異的）突然変異生成、アラニンスキャニング、及びＰＣＲ突然変異生成等の当該技術分野で既知の方法を使用して作製され得る。部位特異的突然変異生成（例えば、Ｃａｒｔｅｒ，１９８６，ＢｉｏｃｈｅｍＪ．２３７：１−７、及びＺｏｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８２，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１０：６４８７−５００を参照のこと）、カセット突然変異生成（例えば、Ｗｅｌｌｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｇｅｎｅ  ３４：３１５−２３を参照のこと）、または他の既知の技法をクローニングされたＤＮＡに行って、抗ＰＤ−１抗体変異形ＤＮＡを産生することができる。
【０４１７】
抗ＰＤ−１抗体の適切な立体構造の維持に関与しない任意のシステイン残基が、例えば、アラニンまたはセリン等の別のアミノ酸に置換されて、分子の酸化安定性を改善し、異常な架橋を阻止することもできる。逆に、システイン結合（複数可）が抗ＰＤ−１抗体に付加されて、その安定性を改善することができる（例えば、抗体がＦｖ断片等の抗体断片である場合）。
【０４１８】
いくつかの実施形態では、本開示の薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体分子は、「脱免疫化」抗体である。「脱免疫化」抗ＰＤ−１抗体とは、１つ以上の改変をそのアミノ酸配列に有し、それぞれの最初の非脱免疫化抗体と比較して抗体の免疫原性の低減をもたらすヒト化またはキメラ抗ＰＤ−１抗体に由来する抗体である。かかる抗体変異体を生成するための手技のうちの１つは、抗体分子のＴ細胞エピトープの特定及び除去を伴う。第１のステップでは、抗体分子の免疫原性は、当該技術分野で既知のいくつかの方法によって、例えば、Ｔ細胞エピトープのインビトロ決定またはかかるエピトープのインシリコ予測によって決定され得る。Ｔ細胞エピトープ機能に重要な残基が特定されると、突然変異が作製されて、免疫原性を除去し、抗体活性を保持することができる。総説については、例えば、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ５２５：４０５−２３を参照されたい。
【０４１９】
５．３．２．１  インビトロ親和性成熟
いくつかの実施形態では、親抗体と比較して改善された特性、例えば、親和性、安定性、または発現レベルを有する本明細書に提供される薬学的製剤の抗体変異形は、インビトロ親和性成熟によって調製され得る。天然のプロトタイプと同様に、インビトロ親和性成熟は、突然変異及び選択の原理に基づく。抗体のライブラリは、生物（例えば、ファージ、細菌、酵母、もしくは哺乳類細胞）の表面上に、またはそれらをコードするｍＲＮＡもしくはＤＮＡと会合（例えば、共有もしくは非共有）してのいずれかで、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、またはＶドメイン断片としてディスプレイされる。ディスプレイされた抗体の親和性選択により、抗体をコードする遺伝情報を持つ生物または複合体の単離が可能になる。ファージディスプレイ等のディスプレイ法を使用した２回または３回の突然変異及び選択ラウンドにより、通常、低ナノモル範囲の親和性を有する抗体断片がもたらされる。親和性成熟抗体は、標的抗原に対してナノモルまたはさらにはピコモルの親和性を有し得る。
【０４２０】
ファージディスプレイは、抗体をディスプレイ及び選択するための広く知られている方法である。抗体は、バクテリオファージコートタンパク質との融合物としてＦｄまたはＭ１３バクテリオファージの表面上にディスプレイされる。選択は、「パニング」と称される工程である、抗原を曝露してファージディスプレイ抗体がそれらの標的に結合することを可能にすることを伴う。抗原に結合したファージが回収され、そのファージを使用して、細菌を感染させてさらなる選択ラウンドのためにファージを産生する。総説については、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ，２００２，Ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１７８：１−３７、及びＢｒａｄｂｕｒｙ  ａｎｄ  Ｍａｒｋｓ，２００４，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２９０：２９−４９を参照されたい。
【０４２１】
酵母ディスプレイ系（例えば、Ｂｏｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１５：５５３−５７、及びＣｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｎａｔ．Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  １：７５５−６８を参照のこと）では、抗体は、重鎖及び軽鎖が可動性リンカーによって連結される一本鎖可変融合物（ｓｃＦｖ）としてディスプレイされ得る。ｓｃＦｖは、酵母凝集素タンパク質Ａｇａ２ｐの接着サブユニットと融合し、Ａｇａ１ｐへのジスルフィド結合によって酵母細胞壁に結合する。Ａｇａ２ｐを介したタンパク質のディスプレイは、タンパク質を細胞表面から突出させ、酵母細胞壁上の他の分子との潜在的相互作用を最小限に抑える。磁気分離及びフローサイトメトリーを使用して、ライブラリをスクリーニングして、改善された親和性または安定性を有する抗体を選択する。目的とする可溶性抗原への結合は、ビオチン化抗原及びフルオロフォアにコンジュゲートするストレプトアビジン等の二次試薬での酵母の標識によって決定される。抗体の表面発現の変化は、血球凝集素またはｓｃＦｖに隣接するｃ−Ｍｙｃエピトープタグのいずれかの免疫蛍光標識によって測定され得る。発現がディスプレイされたタンパク質の安定性と相関することが示されており、それ故に、抗体は、改善された安定性、ならびに親和性について選択され得る（例えば、Ｓｈｕｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９２：９４９−５６を参照のこと）。酵母ディスプレイの付加的利点は、ディスプレイされたタンパク質が小胞体シャペロン及び品質管理機構を利用して真核酵母細胞の小胞体中でフォールディングされることである。成熟が完了すると、酵母の表面上にディスプレイされている間に抗体親和性が好都合に「滴定され」、各々のクローンの発現及び精製の必要を排除する。酵母表面ディスプレイの理論的限界は、他のディスプレイ法よりも潜在的に小さい機能的ライブラリのサイズであるが、近年のアプローチは、酵母細胞の交配系を使用して、サイズが１０１４であると推定されるコンビナトリアル多様性を作り出している（例えば、米国特許公開第２００３／０１８６３７４号、及びＢｌａｉｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｇｅｎｅ  ３４２：２１１−１８を参照のこと）。
【０４２２】
リボソームディスプレイでは、抗体−リボソーム−ｍＲＮＡ（ＡＲＭ）複合体が無細胞系において選択のために生成される。抗体の特定のライブラリをコードするＤＮＡライブラリは、終止コドンを欠くスペーサー配列と遺伝的に融合する。このスペーサー配列は、翻訳されると、ペプチジルｔＲＮＡに依然として結合したままであり、リボソームトンネルを占有し、それ故に、目的とするタンパク質がリボソームから突き出てフォールディングすることが可能になる。結果として得られたｍＲＮＡ、リボソーム、及びタンパク質の複合体は、表面結合リガンドに結合することができ、リガンドでの親和性捕捉による抗体及びそれをコードするｍＲＮＡの同時単離が可能になる。その後、リボソーム結合ｍＲＮＡは、逆転写されてｃＤＮＡになり、次いで、突然変異生成を経て、次の選択ラウンドに使用され得る（例えば、Ｆｕｋｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３４：ｅ１２７を参照のこと）。ｍＲＮＡディスプレイでは、抗体とｍＲＮＡとの間の共有結が、アダプター分子としてピューロマイシンを使用して達成される（Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９８：３７５０−５５）。
【０４２３】
これらの方法が完全にインビトロで行われるため、これらの方法は、他の選択技術に優る２つの主な利点を提供する。第一に、ライブラリの多様性が、細菌細胞の形質転換効率によってではなく、試験管内に存在するリボソーム及び異なるｍＲＮＡ分子の数のみによって制限されることである。第二に、いずれのライブラリも任意の多様化ステップ後に形質転換される必要がないため、ランダム突然変異が、例えば、非プルーフリーディングポリメラーゼによって、各々の選択ラウンド後に容易に導入され得ることである。
【０４２４】
哺乳類細胞ディスプレイ系（例えば、Ｂｏｗｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．１０８：２０４５５−６０を参照のこと）では、ＩｇＧの完全ヒトライブラリが、事前組換えＤ（Ｊ）領域に連結される生殖系列配列Ｖ配列セグメントに基づいて構築される。重鎖及び軽鎖の全長Ｖ領域は、ヒト重鎖及び軽鎖定常領域と会合し、哺乳類細胞株（例えば、ＨＥＫ２９３）中にトランスフェクトされる。トランスフェクトされたライブラリが拡大され、ストレプトアビジン（ＳＡ）結合磁気ビーズに対する数回の陰性選択ラウンドに供され、続いて、ビオチン化標的タンパク質、ペプチド断片、またはエピトープで被覆されたＳＡ結合磁気ビーズに対する１回の陽性選択ラウンドに供される。陽性選択された細胞が増殖され、その後、複数回のＦＡＣＳラウンドによって選別されて、標的タンパク質、ペプチド断片、またはエピトープに特異的に結合する抗体をディスプレイする単一細胞クローンが単離される。これらの単一細胞クローン由来の重鎖及び軽鎖対が、さらなる成熟のためにＡＩＤで再トランスフェクトされる。数回の哺乳類細胞ディスプレイラウンド後、ＡＩＤ誘発体細胞超突然変異と相まって、高特異性、高親和性の抗体が生成される。
【０４２５】
多様性は、標的とされる方法で、またはランダム導入によって、抗体ライブラリのＣＤＲまたは全Ｖ遺伝子にも導入され得る。前者のアプローチには、高レベルもしくは低レベルの突然変異生成によって抗体の全てのＣＤＲを順次標的とすること、または単離された体細胞超突然変異ホットスポット（例えば、Ｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８０：６０７−１７を参照のこと）もしくは実験に基づいてまたは構造的理由により親和性に影響を及ぼす疑いのある残基を標的とすることが含まれる。具体的な実施形態では、体細胞超突然変異は、例えば、ＳＨＭ−ＸＥＬ（商標）プラットフォーム（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して、ＡＩＤ誘発体細胞超突然変異によって行われる。ランダム突然変異は、Ｅ．ｃｏｌｉミューテーター株、ＤＮＡポリメラーゼでのエラープローン複製（例えば、Ｈａｗｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９−９６を参照のこと）、またはＲＮＡレプリカーゼを使用して、全Ｖ遺伝子全体に導入され得る。多様性は、ＤＮＡシャフリングまたは同様の技法（例えば、Ｌｕ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８：４３４９６−５０７、米国特許第５，５６５，３３２号及び同第６，９８９，２５０号を参照のこと）による天然に多様性のある領域の置換によっても導入され得る。代替の技法は、フレームワーク領域残基に伸長している超可変ループを標的とするか（例えば、Ｂｏｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４８：６９９−７０９を参照のこと）、ＣＤＲにおけるループの欠失及び挿入を利用するか、またはハイブリダイゼーションに基づく多様化（例えば、米国特許公開第２００４／０００５７０９号を参照のこと）を使用する。ＣＤＲにおける多様性を生じさせるさらなる方法が、例えば、米国特許第７，９８５，８４０号に開示されている。抗体ライブラリを生成する、及び／または抗体親和性成熟をもたらすために使用され得るさらなる方法が、例えば、各々が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第８，６８５，８９７号及び同第８，６０３，９３０号、ならびに米国公開第２０１４／０１７０７０５号、同第２０１４／００９４３９２号、同第２０１２／００２８３０１号、同第２０１１／０１８３８５５号、及び同第２００９／００７５３７８号に開示されている。
【０４２６】
ライブラリのスクリーニングは、当該技術分野で既知の様々な技法によって達成され得る。例えば、ＰＤ−１は、固体支持体、カラム、ピン、またはセルロース／ポリ（フッ化ビニリデン）膜／他のフィルターに固定化され得るか、吸着プレートに固定された宿主細胞上に発現し得るか、または細胞選別に使用され得るか、またはストレプトアビジン被覆ビーズでの捕捉のためにビオチンにコンジュゲートし得るか、またはディスプレイライブラリをパニングするための任意の他の方法で使用され得る。
【０４２７】
インビトロ親和性成熟法の総説については、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ，２００５，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２３：１１０５−１６、Ｑｕｉｒｏｚ  ａｎｄ  Ｓｉｎｃｌａｉｒ，２０１０，Ｒｅｖｉｓｔａ  Ｉｎｇｅｎｅｒｉａ  Ｂｉｏｍｅｄｉａ  ４：３９−５１、及びそれらに記載の参考文献を参照されたい。
【０４２８】
５．３．２．２  抗ＰＤ−１抗体の修飾
本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体の共有結合修飾は、本開示の範囲内に含まれる。共有結合修飾には、抗ＰＤ−１抗体の標的とされたアミノ酸残基を、抗ＰＤ−１抗体の選択された側鎖またはＮ末端もしくはＣ末端残基と反応することができる有機誘導体化剤と反応させることが含まれる。他の修飾には、それぞれ、グルタミニル残基及びアスパラギニル残基の対応するグルタミル残基及びアスパルチル残基への脱アミド化、プロリン及びリジンの水酸化、セリルまたはトレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リジン、アルギニン、及びヒスチジン側鎖のα−アミノ基のメチル化（例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ７９−８６（１９８３）を参照のこと）、Ｎ末端アミンのアセチル化、ならびに任意のＣ末端カルボキシル基のアミド化が含まれる。
【０４２９】
本開示の範囲内に含まれる抗ＰＤ−１抗体の他の種類の共有結合修飾には、抗体またはポリペプチドの天然グリコシル化パターンを改変させること（例えば、Ｂｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．９：４８２−５０１、及びＷａｌｓｈ，２０１０，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ  １５：７７３−８０を参照のこと）と、抗体を、例えば、米国特許第４，６４０，８３５号、同第４，４９６，６８９号、同第４，３０１，１４４号、同第４，６７０，４１７号、同第４，７９１，１９２号、または同第４，１７９，３３７号に記載の方法で、様々な非タンパク質性ポリマー、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、またはポリオキシアルキレンのうちの１つに結合することが含まれる。
【０４３０】
本開示の薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、別の異種ポリペプチドまたはアミノ酸配列、例えば、エピトープタグ（例えば、Ｔｅｒｐｅ，２００３，Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６０：５２３−３３を参照のこと）またはＩｇＧ分子のＦｃ領域（例えば、Ａｒｕｆｆｏ，Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｆｕｓｉｏｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ２２１−４２（Ｃｈａｍｏｗ  ａｎｄ  Ａｓｈｋｅｎａｚｉ  ｅｄｓ．，１９９９）を参照のこと）と融合した抗ＰＤ−１抗体を含むキメラ分子を形成するようにも修飾され得る。
【０４３１】
ＰＤ−１抗原及び異種ポリペプチドに結合する本明細書に提供される薬学的製剤の抗体を含む融合タンパク質も本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、抗体が融合する異種ポリペプチドは、ＰＤ−１が細胞表面に発現した細胞への抗体の標的に有用である。
【０４３２】
ＰＤ−１抗原に結合する抗体パネルも本明細書に提供される。具体的な実施形態では、抗体パネルは、異なる会合速度、異なる解離速度、ＰＤ−１抗原に対する異なる親和性、及び／またはＰＤ−１抗原に対する異なる特異性を有する。いくつかの実施形態では、パネルは、約１０、約２５、約５０、約７５、約１００、約１２５、約１５０、約１７５、約２００、約２５０、約３００、約３５０、約４００、約４５０、約５００、約５５０、約６００、約６５０、約７００、約７５０、約８００、約８５０、約９００、約９５０、もしくは約１０００個の抗体またはそれ以上の抗体を含むか、またはそれらからなる。抗体パネルは、ＥＬＩＳＡ等のアッセイのために、例えば、９６ウェルまたは３８４ウェルプレートで使用され得る。
【０４３３】
５．３．３  抗ＰＤ−１抗体の調製
本明細書に提供される薬学的製剤の抗ＰＤ−１抗体は、抗ＰＤ−１抗体をコードする核酸を含むベクターで形質転換されるか、またはそれでトランスフェクトされた細胞を培養することによって産生され得る。本開示の抗体のポリペプチド成分をコードするポリヌクレオチド配列は、標準の組換え技法を使用して得られ得る。所望のポリヌクレオチド配列は、ハイブリドーマ細胞等の抗体産生細胞から単離及び配列決定され得る。あるいは、ポリヌクレオチドは、ヌクレオチド合成器またはＰＣＲ技法を使用して合成され得る。得られた時点で、ポリペプチドをコードする配列は、宿主細胞で異種ポリヌクレオチドを複製及び発現することができる組換えベクターに挿入される。利用可能であり、当該技術分野で既知の多くのベクターが、本開示の目的のために使用され得る。適切なベクターの選択は、ベクターに挿入される核酸のサイズ、及びベクターで形質転換される特定の宿主細胞に主に依存するであろう。本開示の抗体を発現させるのに好適な宿主細胞には、古細菌及び真正細菌等の原核生物（グラム陰性またはグラム陽性生物を含む）、糸状菌または酵母等の真核微生物、昆虫または植物細胞等の無脊椎動物細胞、及び哺乳類宿主細胞株等の脊椎動物細胞が含まれる。宿主細胞は、上述の発現ベクターで形質転換され、プロモーターを誘発するか、形質転換体を選択するか、または所望の配列をコードする遺伝子を増幅するのに適切に修飾された従来の栄養素培地で培養される。宿主細胞によって産生された抗体は、当該技術分野で既知の標準のタンパク質精製法を使用して精製される。
【０４３４】
ベクター構築、発現、及び精製を含む抗体を産生するための方法が、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ：Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｉｎ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ：Ｆｒｏｍ  ＰＣＲ  ｔｏ  ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ２０３−５２（ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，１９９６）、Ｋｗｏｎｇ  ａｎｄ  Ｒａｄｅｒ，Ｅ．ｃｏｌｉ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｆａｂ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ，ｉｎ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ（２００９）、Ｔａｃｈｉｂａｎａ  ａｎｄ  Ｔａｋｅｋｏｓｈｉ，Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｆａｂ  Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｅｓｃｈｅｒｉｓｃｈｉａ  ｃｏｌｉ，ｉｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ（Ａｌ−Ｒｕｂｅａｉ  ｅｄ．，２０１１）、及びＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｆｒｏｍ  Ｂｅｎｃｈ  ｔｏ  Ｃｌｉｎｉｃ（Ａｎ  ｅｄ．，２００９）にさらに記載されている。
【０４３５】
言うまでもなく、抗ＰＤ−１抗体を調製するための当該技術分野で周知の代替法が利用され得ることが企図される。例えば、適切なアミノ酸配列、またはその一部分が、固相技法を使用した直接ペプチド合成（例えば、Ｓｔｅｗａｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９６９）、及びＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，１９６３，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９−５４を参照のこと）によって産生され得る。インビトロタンパク質合成が、手動技法を使用して、または自動で行われ得る。抗ＰＤ−１抗体の様々な部分が別個に化学的に合成され、化学的方法または酵素的方法を使用して組み合わせられて、所望の抗ＰＤ−１抗体を産生することができる。あるいは、抗体は、例えば、米国特許第５，５４５，８０７号及び同第５，８２７，６９０号に開示されるように、抗体を発現するように操作されたトランスジェニック動物の細胞または乳等の体液から精製され得る。
【０４３６】
５．３．４  イムノコンジュゲート
本開示は、合成リンカーによって１つ以上の非抗体薬剤に共有結合した本開示の抗ＰＤ−１抗体のうちのいずれか１つを含むコンジュゲートを含む薬学的製剤も提供する。
【０４３７】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、例えば、診断分子または検出可能な分子にコンジュゲートまたは組換え融合する。コンジュゲートまたは組換え融合した抗体は、例えば、ＰＤ−１媒介性疾患の発生、発症、進行、及び／または重症度の監視または予後診断に有用であり得る。
【０４３８】
かかる診断及び検出は、例えば、抗体を、様々な酵素（西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼ等であるが、これらに限定されない）、補欠分子族（ストレプトアビジン／ビオチンまたはアビジン／ビオチン等であるが、これらに限定されない）、蛍光物質（ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、塩化ダンシル、またはフィコエリトリン等であるが、これらに限定されない）、発光物質（ルミノール等であるが、これに限定されない）、生物発光物質（ルシフェラーゼ、ルシフェリン、またはエクオリン等であるが、これらに限定されない）、化学発光物質（アクリジニウム系化合物またはＨＡＬＯＴＡＧ等であるが、これらに限定されない）、放射性物質（ヨウ素（１３１Ｉ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、及び１２１Ｉ）、炭素（１４Ｃ）、硫黄（３５Ｓ）、トリチウム（３Ｈ）、インジウム（１１５Ｉｎ、１１３Ｉｎ、１１２Ｉｎ、及び１１１Ｉｎ）、テクネチウム（９９Ｔｃ）、タリウム（２０１Ｔｉ）、ガリウム（６８Ｇａ及び６７Ｇａ）、パラジウム（１０３Ｐｄ）、モリブデン（９９Ｍｏ）、キセノン（１３３Ｘｅ）、フッ素（１８Ｆ）、１５３Ｓｍ、１７７Ｌｕ、１５９Ｇｄ、１４９Ｐｍ、１４０Ｌａ、１７５Ｙｂ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、４７Ｓｃ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１４２Ｐｒ、１０５Ｒｈ、９７Ｒｕ、６８Ｇｅ、５７Ｃｏ、６５Ｚｎ、８５Ｓｒ、３２Ｐ、１５３Ｇｄ、１６９Ｙｂ、５１Ｃｒ、５４Ｍｎ、７５Ｓｅ、１１３Ｓｎ、または１１７Ｓｎ等であるが、これらに限定されない）、陽電子放出金属（様々な陽電子放出断層撮影法を使用して）、及び非放射性常磁性金属イオンを含むが、これらに限定されない検出可能な物質にカップリングすることによって達成され得る。
【０４３９】
異種タンパク質またはポリペプチド（またはその断片、例えば、約１０、約２０、約３０、約４０、約５０、約６０、約７０、約８０、約９０、または約１００個のアミノ酸のポリペプチド）に組換え融合または化学的にコンジュゲート（共有または非共有コンジュゲーション）して融合タンパク質を生成する抗体、ならびにその使用も本明細書に提供される。具体的には、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体の抗原結合断片（例えば、Ｆａｂ断片、Ｆｃ断片、Ｆｖ断片、Ｆ（ａｂ）２断片、ＶＨドメイン、ＶＨ  ＣＤＲ、ＶＬドメイン、またはＶＬ  ＣＤＲ）、及び異種タンパク質、ポリペプチド、またはペプチドを含む融合タンパク質が本明細書に提供される。一実施形態では、抗体が融合する異種タンパク質、ポリペプチド、またはペプチドは、ＰＤ−１を発現する細胞等の特定の細胞型への抗体の標的に有用である。例えば、特定の細胞型によって発現した細胞表面受容体に結合する抗体は、本明細書に提供される薬学的製剤の修飾抗体と融合するか、またはそれにコンジュゲートし得る。
【０４４０】
さらに、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ペプチド等のマーカーまたは「タグ」配列と融合して、精製を容易にすることができる。具体的な実施形態では、マーカーまたはタグアミノ酸配列は、とりわけ、ｐＱＥベクターに提供されるタグ（例えば、ＱＩＡＧＥＮ，Ｉｎｃ．を参照のこと）等のヘキサヒスチジンペプチドであり、これらの多くは市販されている。例えば、Ｇｅｎｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：８２１−２４に記載されるように、ヘキサヒスチジンは、融合タンパク質の好都合な精製を提供する。精製に有用な他のペプチドタグには、インフルエンザ血球凝集素タンパク質に由来するエピトープに対応する血球凝集素（「ＨＡ」）タグ（Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，Ｃｅｌｌ  ３７：７６７−７８）、及び「ＦＬＡＧ」タグが含まれるが、これらに限定されない。
【０４４１】
ある部分（ポリペプチドを含む）を抗体と融合させるか、またはそれにコンジュゲートさせるための方法は既知である（例えば、Ａｒｎｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｉｍｍｕｎｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ２４３−５６（Ｒｅｉｓｆｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，１９８５）、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，ｉｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ６２３−５３（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，２ｄ  ｅｄ．１９８７）、Ｔｈｏｒｐｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｏｆ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ  Ｒｅｖｉｅｗ，ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ４７５−５０６（Ｐｉｎｃｈｅｒａ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，１９８５）、Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ３０３−１６（Ｂａｌｄｗｉｎ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，１９８５）、Ｔｈｏｒｐｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９８２，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．６２：１１９−５８、米国特許第５，３３６，６０３号、同第５，６２２，９２９号、同第５，３５９，０４６号、同第５，３４９，０５３号、同第５，４４７，８５１号、同第５，７２３，１２５号、同第５，７８３，１８１号、同第５，９０８，６２６号、同第５，８４４，０９５号、及び同第５，１１２，９４６号、ＥＰ３０７，４３４、ＥＰ３６７，１６６、ＥＰ３９４，８２７、ＰＣＴ公開第ＷＯ９１／０６５７０号、同第ＷＯ９６／０４３８８号、同第ＷＯ９６／２２０２４号、同第ＷＯ９７／３４６３１号、及び同第ＷＯ９９／０４８１３号、Ａｓｈｋｅｎａｚｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８８：１０５３５−３９、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ，３３１：８４−８６、Ｚｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：５５９０−６００、ならびにＶｉｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：１１３３７−４１を参照のこと）。
【０４４２】
融合タンパク質は、例えば、遺伝子シャフリング、モチーフシャフリング、エクソンシャフリング、及び／またはコドンシャフリング（集合的に「ＤＮＡシャフリング」と称される）技法によって生成され得る。ＤＮＡシャフリングを利用して、例えば、より高い親和性及びより遅い解離速度を有する抗体を含む、本明細書に提供される抗ＰＤ−１抗体の活性を改変することができる（例えば、米国特許第５，６０５，７９３号、同第５，８１１，２３８号、同第５，８３０，７２１号、同第５，８３４，２５２号、及び同第５，８３７，４５８号、Ｐａｔｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８：７２４−３３、Ｈａｒａｙａｍａ，１９９８，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６（２）：７６−８２、Ｈａｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２８７：２６５−７６、ならびにＬｏｒｅｎｚｏ  ａｎｄ  Ｂｌａｓｃｏ，１９９８，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ２４（２）：３０８−１３を参照のこと）。抗体、またはコードされた抗体は、組換え前のエラープローンＰＣＲによるランダム突然変異生成、ランダムヌクレオチド挿入、または他の方法に供されることによって改変され得る。本明細書に提供される薬学的製剤の抗体をコードするポリヌクレオチドは、１つ以上の異種分子の１つ以上の成分、モチーフ、区分、部分、ドメイン、断片等で組換えられ得る。
【０４４３】
本明細書に提供される薬学的製剤の抗体を第２の抗体にコンジュゲートして、例えば、米国特許第４，６７６，９８０号に記載の抗体ヘテロコンジュゲートを形成することもできる。
【０４４４】
本明細書に提供されるＰＤ−１に結合する抗体は、標的抗原のイムノアッセイまたは精製に特に有用な固体支持体に結合する場合もある。かかる固体支持体には、ガラス、セルロース、ポリアクリルアミド、ナイロン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、またはポリプロピレンが含まれるが、これらに限定されない。
【０４４５】
リンカーは、細胞におけるコンジュゲートされた薬剤の放出を容易にする「切断可能なリンカー」であり得るが、切断不可能なリンカーも本明細書で企図される。本開示のコンジュゲートで使用するためのリンカーには、酸不安定性リンカー（例えば、ヒドラゾンリンカー）、ジスルフィド含有リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー（例えば、アミノ酸、例えば、バリン及び／またはシトルリンを含むペプチドリンカー、例えば、シトルリン−バリンまたはフェニルアラニン−リジン等）、光解離性リンカー、ジメチルリンカー（例えば、Ｃｈａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５２：１２７−３１；及び米国特許第５，２０８，０２０号を参照のこと）、チオエーテルリンカー、または多剤輸送体媒介性抵抗性を回避するように設計された親水性リンカー（例えば、Ｋｏｖｔｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．７０：２５２８−３７を参照のこと）が含まれるが、これらに限定されない。
【０４４６】
抗体薬剤コンジュゲートは、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ−ＥＭＣＳ、スルホ−ＧＭＢＳ、スルホ−ＫＭＵＳ、スルホ−ＭＢＳ、スルホ−ＳＩＡＢ、スルホ−ＳＭＣＣ、スルホ−ＳＭＰＢ、及びＳＶＳＢ（安息香酸スクシンイミジル−（４−ビニルスルホン））等の様々な二機能性タンパク質カップリング剤を使用して作製され得る。本開示は、抗体薬剤コンジュゲートが当該技術分野で開示されている任意の好適な方法（例えば、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ（Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ  ｅｄ．，２ｄ  ｅｄ．２００８）を参照のこと）を使用して調製され得ることをさらに企図する。
【０４４７】
従来の抗体薬剤コンジュゲーション戦略は、Ｌｙｓ残基のε−アミノ基またはＣｙｓ残基のチオール基を伴うランダムコンジュゲーション化学反応に基づいており、異質性コンジュゲートがもたらされる。近年開発された技法により、抗体に対する部位特異的コンジュゲーションが可能になり、均一な装填がもたらされ、抗原結合または薬物動態が改変されたコンジュゲート部分集団が回避される。これらには、反応性チオール基を提供し、かつ免疫グロブリンフォールディング及び会合を妨害することも抗原結合を改変することもない重鎖及び軽鎖上の位置のシステイン置換を含む「チオマブ」の操作が含まれる（例えば、Ｊｕｎｕｔｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．３３２：４１−５２、及びＪｕｎｕｔｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２６：９２５−３２を参照のこと）。別の方法では、終止コドンＵＧＡを終結からセレノシステイン挿入へと再コードすることによってセレノシステインが抗体配列に共翻訳的に挿入されて、他の天然アミノ酸の存在下でのセレノシステインの求核セレノール基における部位特異的共有結合的コンジュゲーションが可能になる（例えば、Ｈｏｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０５：１２４５１−５６、及びＨｏｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４８（５０）：１２０４７−５７を参照のこと）。
【０４４８】
５．４  抗体及び組成物の使用法
対象における（ａ）Ｔ細胞活性を減弱させる、及び／または（ｂ）ＰＤ−１発現を低下させる方法が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法は、対象の細胞におけるＰＤ−１発現を低下させる。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法は、対象におけるＴ細胞活性を減弱させる。Ｔ細胞活性の非限定的な例は、サイトカインの分泌である。ある特定の実施形態では、サイトカインの分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、及びＴＮＦ−αからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、ＩＦＮ−γ、またはそれらの任意の組み合わせである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７である。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＦＮ−γである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＬ−１７である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＦＮ−γである。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７及びＩＦＮ−γである。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、及びＩＦＮ−γである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−６である。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１２である。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２２である。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２３である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦである。他の実施形態では、サイトカインは、ＴＮＦ−αである。上述のサイトカインのうちの２つ、３つ、またはそれ以上の他の組み合わせも企図される。
【０４４９】
一実施形態では、ＩＬ−２の分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７の分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。さらに別の実施形態では、Ｔ細胞活性を減弱させる方法は、ＩＦＮ−γの分泌を阻害する方法である。
【０４５０】
一態様では、Ｔ細胞を本明細書に提供される薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させることを含む、Ｔ細胞の活性を減弱させる方法が本明細書に提供される。他の実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約１０％である。別の実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約２０％である。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約３０％である。一実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約４０％である。別の実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約４５％である。他の実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約５０％である。一実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約５５％である。別の実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約６０％である。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約６５％である。他の実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約７０％である。別の実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約７５％である。一実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約８０％である。他の実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約８５％である。別の実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約９０％である。一実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約９５％である。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の最大減弱パーセントは、少なくとも約１００％である。
【０４５１】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、サイトカインの産生の調節によって測定される。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、サイトカインの分泌の調節によって測定される。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、サイトカインの発現の調節によって測定される。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、サイトカインの産生の阻害によって測定される。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、サイトカインの分泌の阻害によって測定される。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、サイトカインの発現の阻害によって測定される。ある特定の実施形態では、サイトカイン産生（例えば、サイトカインタンパク質産生）が調節される。ある特定の実施形態では、サイトカイン分泌（例えば、サイトカインタンパク質分泌）が調節される。他の実施形態では、サイトカイン発現（例えば、サイトカイン遺伝子発現）が調節される。いくつかの実施形態では、調節は、サイトカインの減少、阻害、または下方制御である。他の実施形態では、調節は、サイトカインの増加または上方制御である。ある特定の実施形態では、サイトカイン産生（例えば、サイトカインタンパク質産生）が阻害される。ある特定の実施形態では、サイトカイン分泌（例えば、サイトカインタンパク質分泌）が阻害される。他の実施形態では、サイトカイン発現（例えば、サイトカイン遺伝子発現）が阻害される。ある特定の実施形態では、細胞からのサイトカイン産生が調節される。ある特定の実施形態では、細胞からのサイトカイン分泌が調節される。ある特定の実施形態では、細胞からのサイトカイン発現が調節される。ある特定の実施形態では、細胞からのサイトカイン産生が阻害される。ある特定の実施形態では、細胞からのサイトカイン分泌が阻害される。ある特定の実施形態では、細胞からのサイトカイン発現が阻害される。ある特定の実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、細胞は、Ｔ細胞ではない。
【０４５２】
いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、ＩＦＮ−γ、またはそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。一実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２である。別の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＦＮ−γである。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＬ−１７である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＦＮ−γである。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７及びＩＦＮ−γである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、及びＩＦＮ−γである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、及びＴＮＦ−αからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−６である。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１２である。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２２である。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２３である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦである。他の実施形態では、サイトカインは、ＴＮＦ−αである。上述のサイトカインのうちの２つ、３つ、またはそれ以上の他の組み合わせも企図される。
【０４５３】
いくつかの実施形態では、サイトカイン産生の阻害は、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下と同時である。いくつかの実施形態では、サイトカイン産生の阻害の前に、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下が先行する。いくつかの実施形態では、サイトカイン産生の阻害は、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下に先行する。一実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間後に生じる。
【０４５４】
一態様では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞におけるＰＤ−１活性及び／または発現を調節する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。一実施形態では、ＰＤ−１活性が調節される。別の実施形態では、ＰＤ−１発現が調節される。他の実施形態では、ＰＤ−１活性及びＰＤ−１発現の両方が調節される。一実施形態では、ＰＤ−１シグナル伝達が活性化される。別の実施形態では、ＰＤ−１発現が阻害される。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−１アゴニストである。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ヒトＰＤ−１に特異的に結合し、少なくとも１つのＰＤ−１活性を活性化（例えば、部分的に活性化）するか、または別様に調節する。具体的な実施形態では、少なくとも１つのＰＤ−１活性は、サイトカイン産生の阻害である。ある特定の実施形態では、ＰＤ−１に特異的に結合する抗体は、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ、またはそのヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ２結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位及びＰＤ−Ｌ２結合部位のいずれとも別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。他の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。具体的な実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合もＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合も、抗体によって阻害されない。
【０４５５】
別の態様では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞におけるＰＤ−１発現を低下させる方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、本明細書に提供されるＰＤ−１アゴニストである。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ２結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位及びＰＤ−Ｌ２結合部位のいずれとも別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。他の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。具体的な実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合もＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合も、抗体によって阻害されない。
【０４５６】
別の態様では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞におけるＴ細胞活性を減弱させ、かつＰＤ−１発現を低下する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、サイトカイン産生の阻害である。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ２結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位及びＰＤ−Ｌ２結合部位のいずれとも別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。他の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。具体的な実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合もＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合も、抗体によって阻害されない。
【０４５７】
ＰＤ−１活性は、当該技術分野で既知の活性または当該技術分野に記載の活性等のＰＤ−１の任意の活性に関連し得る。ＰＤ−１活性及びＰＤ−１シグナル伝達は、本明細書で同義に使用される。ある特定の態様では、ＰＤ−１活性は、ＰＤ−１リガンド（例えば、ＰＤ−Ｌ１）のＰＤ−１への結合によって誘発される。ＰＤ−１の発現レベルは、本明細書に記載の方法または当業者に既知の方法（例えば、ウエスタンブロット法、ＥＬＩＳＡ、免疫組織化学、またはフローサイトメトリー）によって評価され得る。
【０４５８】
細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞におけるサイトカイン産生を阻害する方法も本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＰＤ−１のＥＣＤに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ２結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位及びＰＤ−Ｌ２結合部位のいずれとも別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。他の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。具体的な実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合もＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合も、抗体によって阻害されない。
【０４５９】
細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞におけるＰＤ−１シグナル伝達を活性化する方法も本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＰＤ−１のＥＣＤに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ２結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位及びＰＤ−Ｌ２結合部位のいずれとも別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。他の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。具体的な実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合もＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合も、抗体によって阻害されない。一実施形態では、ＰＤ−１シグナル伝達は、部分的に活性化される。
【０４６０】
一態様では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、Ｔ細胞活性を減弱させる方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＰＤ−１のＥＣＤに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ２結合部位とは別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、抗体は、ＰＤ−Ｌ１結合部位及びＰＤ−Ｌ２結合部位のいずれとも別個であるヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープに特異的に結合する。ある特定の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。他の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合は、抗体によって阻害されない。具体的な実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合もＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合も、抗体によって阻害されない。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約１０％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約１５％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約２０％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約２５％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約３０％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約３５％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約４０％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約４５％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約５０％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約５５％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約６０％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約６５％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約７０％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約７５％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約８０％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約８５％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約９０％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約９５％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約９８％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約９９％減弱する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約１００％減弱する。ある特定の実施形態では、Ｔ細胞活性は、少なくとも約２５％〜約６５％減弱する。具体的な実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、本明細書に記載の方法によって評価される。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、当業者に既知の方法によって評価される。ある特定の実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、抗ＰＤ−１抗体と接触しない細胞におけるＴ細胞活性と比較したものである。ある特定の実施形態では、Ｔ細胞活性の減弱は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触するＴ細胞活性と比較したものである。
【０４６１】
Ｔ細胞活性の非限定的な例は、サイトカインの分泌である。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、及びＴＮＦ−αからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、ＩＦＮ−γ、またはそれらの任意の組み合わせである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７である。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＦＮ−γである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＬ−１７である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＦＮ−γである。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７及びＩＦＮ−γである。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、及びＩＦＮ−γである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−６である。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１２である。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２２である。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２３である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦである。他の実施形態では、サイトカインは、ＴＮＦ−αである。上述のサイトカインのうちの２つ、３つ、またはそれ以上の他の組み合わせも企図される。
【０４６２】
ある特定の実施形態では、サイトカイン分泌は、サイトカイン産生の阻害の結果として阻害される。他の実施形態では、サイトカイン分泌は、サイトカイン発現の阻害の結果として阻害される。
【０４６３】
具体的な実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのサイトカイン分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、及びＴＮＦ−αからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、ＩＦＮ−γ、またはそれらの任意の組み合わせである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７である。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＦＮ−γである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＬ−１７である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２及びＩＦＮ−γである。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７及びＩＦＮ−γである。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、及びＩＦＮ−γである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−６である。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１２である。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２２である。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２３である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦである。他の実施形態では、サイトカインは、ＴＮＦ−αである。上述のサイトカインのうちの２つ、３つ、またはそれ以上の他の組み合わせも企図される。
【０４６４】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのＩＬ−２分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４６５】
一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約１０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約１５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約２０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約２５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約３５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約４０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約４５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約５５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約６０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約６５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約７０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約７５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約８０％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約８５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約９０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約９５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約９８％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約９９％阻害される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−２分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−２分泌と比較して阻害される。
【０４６６】
ある特定の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２分泌は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−２分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−２分泌と比較して阻害される。
【０４６７】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのＩＬ−１７分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４６８】
一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約１０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約１５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約２０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約２５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約３５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約４０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約４５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約５５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約６０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約６５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約７０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約７５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約８０％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約８５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約９０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約９５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約９８％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約９９％阻害される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−１７分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞におけるＩＬ−１７分泌と比較して阻害される。
【０４６９】
ある特定の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−１７分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１７分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−１７分泌と比較して阻害される。
【０４７０】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのＩＦＮ−γ分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４７１】
一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約１０％阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約１５％阻害される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約２０％阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約２５％阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約３５％阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約４０％阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約４５％阻害される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約５５％阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約６０％阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約６５％阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約７０％阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約７５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約８０％阻害される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約８５％阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約９０％阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約９５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約９８％阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約９９％阻害される。具体的な実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＦＮ−γ分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＦＮ−γ分泌と比較して阻害される。
【０４７２】
ある特定の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＦＮ−γ分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＦＮ−γ分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＦＮ−γ分泌と比較して阻害される。
【０４７３】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのＩＬ−１分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４７４】
一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約１０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約１５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約２０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約２５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約３５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約４０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約４５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約５５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約６０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約６５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約７０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約７５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約８０％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約８５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約９０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約９５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約９８％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約９９％阻害される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−１分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−１分泌と比較して阻害される。
【０４７５】
ある特定の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１分泌は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−１分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−１分泌と比較して阻害される。
【０４７６】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのＩＬ−６分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４７７】
一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約１０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約１５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約２０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約２５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約３５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約４０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約４５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約５５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約６０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約６５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約７０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約７５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約８０％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約８５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約９０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約９５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約９８％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約９９％阻害される。具体的な実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭｅｓｏＳｃａｌｅ（商標）Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＤ）マルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−６分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−６分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−６分泌と比較して阻害される。
【０４７８】
ある特定の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−６分泌は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−６分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−６分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−６分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−６分泌と比較して阻害される。
【０４７９】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのＩＬ−１２分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４８０】
一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約１０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約１５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約２０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約２５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約３５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約４０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約４５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約５５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約６０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約６５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約７０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約７５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約８０％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約８５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約９０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約９５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約９８％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約９９％阻害される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−１２分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞におけるＩＬ−１２分泌と比較して阻害される。
【０４８１】
ある特定の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−１２分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−１２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞におけるＩＬ−１２分泌と比較して阻害される。
【０４８２】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのＩＬ−２２分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４８３】
一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約１０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約１５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約２０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約２５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約３５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約４０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約４５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約５５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約６０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約６５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約７０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約７５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約８０％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約８５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約９０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約９５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約９８％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約９９％阻害される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−２２分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−２２分泌と比較して阻害される。
【０４８４】
ある特定の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−２２分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−２２分泌と比較して阻害される。
【０４８５】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのＩＬ−２３分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４８６】
一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約１０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約１５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約２０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約２５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約３５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約４０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約４５％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約５５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約６０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約６５％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約７０％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約７５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約８０％阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約８５％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約９０％阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約９５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約９８％阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約９９％阻害される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−２３分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−２３分泌と比較して阻害される。
【０４８７】
ある特定の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＩＬ−２３分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２３分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＩＬ−２３分泌と比較して阻害される。
【０４８８】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのＧＭ−ＣＳＦ分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４８９】
一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約１０％阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約１５％阻害される。他の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約２０％阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約２５％阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約３５％阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約４０％阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約４５％阻害される。他の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約５５％阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約６０％阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約６５％阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約７０％阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約７５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約８０％阻害される。他の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約８５％阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約９０％阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約９５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約９８％阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約９９％阻害される。具体的な実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭｅｓｏＳｃａｌｅ（商標）Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＤ）マルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＧＭ−ＣＳＦ分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＧＭ−ＣＳＦ分泌と比較して阻害される。
【０４９０】
ある特定の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＧＭ−ＣＳＦ分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＧＭ−ＣＳＦ分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＩＬ−２分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＧＭ−ＣＳＦ分泌と比較して阻害される。
【０４９１】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞からのＴＮＦ−α分泌を阻害する方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４９２】
一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約１０％阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約１５％阻害される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約２０％阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約２５％阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約３０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約３５％阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約４０％阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約４５％阻害される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約５０％阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約５５％阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約６０％阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約６５％阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約７０％阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約７５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約８０％阻害される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約８５％阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約９０％阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約９５％阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約９８％阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約９９％阻害される。具体的な実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌の阻害は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌の阻害は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＴＮＦ−α分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＴＮＦ−α分泌と比較して阻害される。
【０４９３】
ある特定の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、最大約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約５０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約４０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約３０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約２０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約１０ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約０．７５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約０．５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約０．１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約０．０５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約０．０１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。別の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約０．００５ｎＭのＥＣ５０で阻害される。一実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、少なくとも約０．００１ｎＭのＥＣ５０で阻害される。いくつかの実施形態では、ＥＣ５０は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＥＣ５０は、当業者に既知の方法（例えば、ＭＳＤマルチプレックスアッセイ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞からのＴＮＦ−α分泌と比較して阻害される。他の実施形態では、ＴＮＦ−α分泌は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞からのＴＮＦ−α分泌と比較して阻害される。
【０４９４】
いくつかの実施形態では、細胞を、本明細書に提供されるＰＤ−１（例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤまたはヒトＰＤ−１のＥＣＤのエピトープ）に特異的に結合する抗体と接触させることを含む、細胞におけるＰＤ−１発現を低下させる方法が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある特定の実施形態では、細胞は、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させられる。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つ、またはその抗原結合断片、または抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、もしくはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つのＣＤＲを含む抗体である。
【０４９５】
一実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約５％低下する。一実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約１０％低下する。別の実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約１５％低下する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約２０％低下する。他の実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約２５％低下する。別の実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約３０％低下する。一実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約３５％低下する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約４０％低下する。別の実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約４５％低下する。一実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約５０％低下する。他の実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約５５％低下する。別の実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約６０％低下する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約６５％低下する。一実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約７０％低下する。別の実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約７５％低下する。一実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約８０％低下する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約８５％低下する。別の実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約９０％低下する。他の実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約９５％低下する。一実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約９８％低下する。別の実施形態では、ＰＤ−１発現は、少なくとも約９９％低下する。具体的な実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、ＰＤ−１に特異的に結合し、ＰＤ−１発現を少なくとも約２５％または３５％、任意に約７５％まで低下させる。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、本明細書に記載の方法によって評価される。他の実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、当業者に既知の方法（例えば、フローサイトメトリー、ウエスタンブロット法、ノーザンブロット法、またはＲＴ−ＰＣＲ）によって評価される。具体的な実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、フローサイトメトリーによって評価される。別の実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、ウエスタンブロット法によって評価される。さらに別の実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、ノーザンブロット法によって評価される。なお別の実施形態では、ＰＤ−１発現の低下は、ＲＴ−ＰＣＲによって評価される。具体的な実施形態では、ＰＤ−１発現は、抗ＰＤ−１抗体と接触していない細胞におけるＰＤ−１発現と比較して低下する。他の実施形態では、ＰＤ−１発現は、非関連抗体（例えば、ＰＤ−１に特異的に結合しない抗体）と接触した細胞におけるＰＤ−１発現と比較して低下する。
【０４９６】
一実施形態では、Ｔ細胞を、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体またはその抗原結合断片の有効量と接触させることを含む、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現を低下させる方法が本明細書に提供される。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約１０％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約２０％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約３０％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約４０％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約４５％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約５０％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約５５％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約６０％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約６５％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約７０％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約７５％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約８０％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約８５％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約９０％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約９５％である。一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片によるＰＤ−１発現の最大低下パーセントは、少なくとも約１００％である。
【０４９７】
ある特定の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間後に生じる。他の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ４時間、６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、または２２時間後に生じる。一実施形態では、低下は、接触の早ければ４時間後に生じる。一実施形態では、低下は、接触の早ければ６時間後に生じる。別の実施形態では、低下は、接触の早ければ８時間後に生じる。他の実施形態では、低下は、接触の早ければ１０時間後に生じる。いくつかの実施形態では、低下は、接触の早ければ１２時間後に生じる。一実施形態では、低下は、接触の早ければ１４時間後に生じる。別の実施形態では、低下は、接触の早ければ１６時間後に生じる。いくつかの実施形態では、低下は、接触の早ければ１８時間後に生じる。他の実施形態では、低下は、接触の早ければ２０時間後に生じる。他の実施形態では、低下は、接触の早ければ２２時間後に生じる。さらに他の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、抗体またはその抗原結合断片との接触の早ければ２４時間後に生じる。
【０４９８】
一実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、サイトカイン阻害に先行する。別の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下は、サイトカイン阻害と同時である。さらに別の実施形態では、Ｔ細胞表面上のＰＤ−１発現の低下の前に、サイトカイン阻害が先行する。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−１７、ＩＦＮ−γ、またはそれらの任意の組み合わせである。一実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２である。別の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１７である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＦＮ−γである。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、及びＴＮＦ−αからなる群から選択される。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１である。他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−６である。さらに他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−１２である。なお他の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２２である。ある特定の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２３である。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦである。他の実施形態では、サイトカインは、ＴＮＦ−αである。上述のサイトカインのうちの２つ、３つ、またはそれ以上の他の組み合わせも企図される。
【０４９９】
他の態様では、本開示の抗ＰＤ−１抗体及びその断片は、生物学的試料中のＰＤ−１の存在の検出に有用である。かかる抗ＰＤ−１抗体には、ヒト及び／またはカニクイザルＰＤ−１に結合するが、ＰＤ−１シグナル伝達活性を誘発しないものが含まれ得る。本明細書で使用される「検出すること」という用語は、定量的または質的検出を包含する。ある特定の実施形態では、生物学的試料は、体液、細胞、または組織を含む。
【０５００】
５．５  薬学的組成物
一態様では、本開示は、本開示の少なくとも１つの抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的組成物をさらに提供する。いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、１）抗ＰＤ−１抗体、及び２）薬学的に許容される担体を含む。
【０５０１】
抗体を含む薬学的組成物は、所望の純度を有する抗体を、水溶液の形態で、または凍結乾燥もしくは他の乾燥形態で、任意の生理学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１８ｔｈ  ｅｄ．１９８０）を参照のこと）と混合することによって、保管のために調製される。
【０５０２】
本開示の抗体は、標的細胞／組織への送達に好適な任意の形態で、例えば、マイクロカプセルまたはマクロエマルションとして（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ（上記参照）、Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １０：１４６−６１、Ｍａｌｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ．Ｄｅｌｉｖ．４：１４１−５１）、徐放製剤として（Ｐｕｔｎｅｙ  ａｎｄ  Ｂｕｒｋｅ，１９９８，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６：１５３−５７）、またはリポソームで（Ｍａｃｌｅａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｎｃｏｌ．１１：３２５−３２、Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ，２００６，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．８：３９−４５）製剤化され得る。
【０５０３】
本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、例えば、コアセルベーション技法または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン−マイクロカプセル及びポリ−（メチルメタシレート）マイクロカプセル内で、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子、及びナノカプセル）内でまたはマクロエマルション内で封入される場合もある。かかる技法は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ（上記参照）に開示されている。
【０５０４】
リポソーム、微粒子、マイクロカプセル内へのカプセル封入、抗体を発現することができる組換え細胞、受容体媒介性エンドサイトーシス（例えば、Ｗｕ  ａｎｄ  Ｗｕ，１９８７，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：４４２９−３２を参照のこと）、レトロウイルスベクターまたは他のベクターの一部としての核酸の構築等を含むが、これらに限定されない、様々な組成物及び送達系が既知であり、本明細書に記載のＰＤ−１に結合する抗体と使用され得る。別の実施形態では、組成物は、放出制御系または徐放系として提供され得る。一実施形態では、ポンプを使用して、放出制御または徐放を達成することができる（例えば、Ｌａｎｇｅｒ（上記参照）、Ｓｅｆｔｏｎ，１９８７，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．１４：２０１−４０、Ｂｕｃｈｗａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８０，Ｓｕｒｇｅｒｙ  ８８：５０７−１６、ａｎｄ  Ｓａｕｄｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５６９−７４を参照のこと）。別の実施形態では、ポリマー材料を使用して、予防薬もしくは治療薬（例えば、本明細書に記載のＰＤ−１に結合する抗体）または本発明の組成物の放出制御または徐放を達成することができる（例えば、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ（Ｌａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｗｉｓｅ  ｅｄｓ．，１９７４）、Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，Ｄｒｕｇ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ（Ｓｍｏｌｅｎ  ａｎｄ  Ｂａｌｌ  ｅｄｓ．，１９８４）、Ｒａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｐｅｐｐａｓ，１９８３，Ｊ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．２３：６１−１２６、Ｌｅｖｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２８：１９０−９２、Ｄｕｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５：３５１−５６、Ｈｏｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７１：１０５−１２、米国特許第５，６７９，３７７号、同第５，９１６，５９７号、同第５，９１２，０１５号、同第５，９８９，４６３号、及び同第５，１２８，３２６号、ＰＣＴ公開第ＷＯ９９／１５１５４号及び同第ＷＯ９９／２０２５３号を参照のこと）。徐放製剤に使用されるポリマーの例には、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（エチレン−コ−ビニルアセテート）、ポリ（メタクリル酸）、ポリグリコリド（ＰＬＧ）、ポリ無水物、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリアクリルアミド、ポリ（エチレングリコール）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、及びポリオルトエステルが挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、徐放製剤に使用されるポリマーは、不活性であり、浸出性不純物を含まず、保管時に安定しており、滅菌性であり、生分解性である。
【０５０５】
さらに別の実施形態では、放出制御系または徐放系は、特定の標的組織、例えば、鼻腔または肺に近接して配置され得、それ故に、全身用量のほんのわずかしか必要としない（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ，Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｖｏｌ．２，１１５−３８（１９８４）を参照のこと）。放出制御系は、例えば、Ｌａｎｇｅｒ，１９９０，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−３３によって論じられている。当業者に既知の任意の技法を使用して、本明細書に記載のＰＤ−１に結合する１つ以上の抗体を含む徐放製剤を産生することができる（例えば、米国特許第４，５２６，９３８号、ＰＣＴ公開第ＷＯ９１／０５５４８号及び同第ＷＯ９６／２０６９８号、Ｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ＆  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ３９：１７９−８９、Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，ＰＤＡＪ．ｏｆ  Ｐｈａｒｍａ．Ｓｃｉ．＆Ｔｅｃｈ．５０：３７２−９７、Ｃｌｅｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｐｒｏ．Ｉｎｔ’ｌ．Ｓｙｍｐ．Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌ．Ｂｉｏａｃｔ．Ｍａｔｅｒ．２４：８５３−５４、ならびにＬａｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｐｒｏｃ．Ｉｎｔ’ｌ．Ｓｙｍｐ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌ．Ｂｉｏａｃｔ．Ｍａｔｅｒ．２４：７５９−６０を参照のこと）。
【０５０６】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、ＰＤ−１ペプチド、またはＰＤ−１エピトープを含むＰＤ−１に結合する抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ヒト及び／またはカニクイザルＰＤ−１に結合する抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、齧歯類ＰＤ−１（例えば、マウスＰＤ−１）に結合しない抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１に結合する抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、カニクイザルＰＤ−１に結合する抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１及びカニクイザルＰＤ−１に結合する抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１に結合し、かつ齧歯類ＰＤ−１（例えば、マウスＰＤ−１）に結合しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、カニクイザルＰＤ−１に結合し、かつ齧歯類ＰＤ−１（例えば、マウスＰＤ−１）に結合しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１に結合し、カニクイザルＰＤ−１に結合し、かつ齧歯類ＰＤ−１（例えば、マウスＰＤ−１）に結合しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１ポリペプチドへの結合を遮断しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１ポリペプチドへの結合を遮断しない抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１ポリペプチドへの結合を遮断しない抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド断片、ＰＤ−１ペプチド、またはＰＤ−１エピトープを含むＰＤ−１に結合するヒト化抗体（例えば、ヒト定常領域を含む）である抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表１〜６に示されるアミノ酸配列等の本明細書に提供される薬学的製剤のマウスモノクローナル抗体のうちのいずれか１つのＶＨ領域、ＶＬ領域、ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３を含む抗体を含む。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の単離された抗体またはその機能的断片は、表１〜２に示される（ａ）抗体ＰＤ１ＡＢ−１、（ｂ）抗体ＰＤ１ＡＢ−２、（ｃ）抗体ＰＤ１ＡＢ−３、（ｄ）抗体ＰＤ１ＡＢ−４、（ｅ）抗体ＰＤ１ＡＢ−５、または（ｆ）抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来の１つ、２つ、及び／または３つの重鎖ＣＤＲ、及び／または１つ、２つ、及び／または３つの軽鎖ＣＤＲを含む。
【０５０７】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、６つのＣＤＲ、例えば、表１〜２に特定されるＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３を含むか、またはそれからなる抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、６つ未満のＣＤＲを含み得る抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表１〜２に特定されるＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのＣＤＲを含むか、またはそれからなる抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、本明細書に記載の（ａ）抗体ＰＤ１ＡＢ−１、（ｂ）抗体ＰＤ１ＡＢ−２、（ｃ）抗体ＰＤ１ＡＢ−３、（ｄ）抗体ＰＤ１ＡＢ−４、（ｅ）抗体ＰＤ１ＡＢ−５、及び（ｆ）抗体ＰＤ１ＡＢ−６からなる群から選択されるモノクローナル抗体のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３からなる群から選択される１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのＣＤＲを含むか、またはそれからなる抗体を含む。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表１〜２に特定されるＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３のうちのいずれかの１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのＣＤＲを含むか、またはそれからなる抗体を含む。
【０５０８】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表２に列記される１つ以上（例えば、１つ、２つ、または３つ）のＶＨ  ＣＤＲを含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表１に列記される１つ以上（例えば、１つ、２つ、または３つ）のＶＬ  ＣＤＲを含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表２に列記される１つ以上（例えば、１つ、２つ、または３つ）のＶＨ  ＣＤＲ及び表１に列記される１つ以上のＶＬ  ＣＤＲを含む抗体を含む。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表２に示されるＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３アミノ酸配列（複数可）のうちのいずれか１つから独立して選択されるＶＨ  ＣＤＲ１及び／またはＶＨ  ＣＤＲ２及び／またはＶＨ  ＣＤＲ３を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１及び７のうちのいずれか一方のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表１に示されるＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ３アミノ酸配列のうちのいずれか１つから独立して選択されるＶＬ  ＣＤＲ１及び／またはＶＬ  ＣＤＲ２及び／またはＶＬ  ＣＤＲ３を含む抗体を含む。
【０５０９】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１、（２）配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨ領域、ならびに（１）配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１、（２）配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨ領域、ならびに（１）配列番号７のアミノ酸を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１、（２）配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５１０】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表１〜２に列記される１つ以上（例えば、１つ、２つ、または３つ）のＶＨ  ＣＤＲ及び１つ以上（例えば、１つ、２つ、または３つ）のＶＬ  ＣＤＲを含む抗体を含む。特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、Ｖ��  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番���５）、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ１（配列番号４）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ２（配列番号５）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＣＤＲ３（配列番号６）、ＶＬ  ＣＤＲ１（配列番号１または７）、ＶＬ  ＣＤＲ２（配列番号２）、及びＶＬ  ＣＤＲ３（配列番号３）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表１〜２に列記されるＶＨ  ＣＤＲ及びＶＬ  ＣＤＲのそれらの任意の組み合わせを含む抗体を含む。
【０５１１】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、関連抗体群に由来するコンセンサス配列（例えば、表１〜２を参照のこと）を含む本明細書に開示のＣＤＲを含む抗体を含む。
【０５１２】
他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表３〜４に示される（ａ）抗体ＰＤ１ＡＢ−１、（ｂ）抗体ＰＤ１ＡＢ−２、（ｃ）抗体ＰＤ１ＡＢ−３、（ｄ）抗体ＰＤ１ＡＢ−４、（ｅ）抗体ＰＤ１ＡＢ−５、または（ｆ）抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来の１つ、２つ、３つ、及び／または４つの重鎖ＦＲ、及び／または１つ、２つ、３つ、及び／または４つの軽鎖ＦＲをさらに含む抗体（またはその機能的断片）を含む。
【０５１３】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表４に示される（ａ）抗体ＰＤ１ＡＢ−１、（ｂ）抗体ＰＤ１ＡＢ−２、（ｃ）抗体ＰＤ１ＡＢ−３、（ｄ）抗体ＰＤ１ＡＢ−４、（ｅ）抗体ＰＤ１ＡＢ−５、または（ｆ）抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来の１つ、２つ、３つ、及び／または４つの重鎖ＦＲをさらに含む抗体（またはその機能的断片）を含む。いくつかの実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１由来である。いくつかの実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−２由来である。他の実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−３由来である。ある特定の実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−４由来である。他の実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−５由来である。別の実施形態では、抗体重鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来である。
【０５１４】
他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表３に示される（ａ）抗体ＰＤ１ＡＢ−１、（ｂ）抗体ＰＤ１ＡＢ−２、（ｃ）抗体ＰＤ１ＡＢ−３、（ｄ）抗体ＰＤ１ＡＢ−４、（ｅ）抗体ＰＤ１ＡＢ−５、または（ｆ）抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来の１つ、２つ、３つ、及び／または４つの軽鎖ＦＲをさらに含む抗体（またはその機能的断片）を含む。いくつかの実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−１由来である。いくつかの実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−２由来である。他の実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−３由来である。ある特定の実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−４由来である。他の実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−５由来である。別の実施形態では、抗体軽鎖ＦＲ（複数可）は、抗体ＰＤ１ＡＢ−６由来である。
【０５１５】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号１９及び２４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１及び２３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号１９のアミノ酸を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含む抗体を含む。具体的な実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む抗体を含む。
【０５１６】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１９及び２４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１を含むＶＨ領域を含むヒト化抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１を含むＶＨ領域を含むヒト化抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１を含むＶＨ領域を含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２を含むＶＨ領域を含むヒト化抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号２１及び２３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３を含むＶＨ領域を含むヒト化抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３を含むＶＨ領域を含むヒト化抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３を含むＶＨ領域を含むヒト化抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含むＶＨ領域を含むヒト化抗体を含む。
【０５１７】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６及び１８からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５１８】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１を含むＶＬ領域を含むヒト化抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２を含むＶＬ領域を含むヒト化抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１６及び１８からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３を含むＶＬ領域を含むヒト化抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３を含むＶＬ領域を含むヒト化抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３を含むＶＬ領域を含むヒト化抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含むＶＬ領域を含むヒト化抗体を含む。
【０５１９】
他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む抗体を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号１９及び２４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１及び２３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６及び１８からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５２０】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む抗体を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５２１】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む抗体を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５２２】
他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む抗体を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５２３】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む抗体を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５２４】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む抗体を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５２５】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む抗体を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５２６】
他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む抗体を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５２７】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ領域及びＶＬ領域を含む抗体を含み、ＶＨ領域は、（１）配列番号２４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ１、（２）配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ２、（３）配列番号２３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号２２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＦＲ４を含み、ＶＬ領域は、（１）配列番号１４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ１、（２）配列番号１５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ２、（３）配列番号１８のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ３、及び／または（４）配列番号１７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＦＲ４を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、上記のＶＨ  ＦＲ１、ＶＨ  ＦＲ２、ＶＨ  ＦＲ３、及びＶＨ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＨ領域、ならびに上記のＶＬ  ＦＲ１、ＶＬ  ＦＲ２、ＶＬ  ＦＲ３、及びＶＬ  ＦＲ４の４つ全てを含むＶＬ領域を含む抗体を含む。
【０５２８】
本明細書に提供される薬学的製剤は、ある特定の実施形態では、表３〜４に列記される１つ以上（例えば、１つ、２つ、３つ、または４つ）のＶＨ  ＦＲ及び１つ以上（例えば、１つ、２つ、３つ、または４つ）のＶＬ  ＦＲを含む抗体を含む。具体的には、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ��（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に���供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９
または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤���、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１��）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列
番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、Ｖ���  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  
ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  Ｆ��３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、���明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ
４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列��号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ１（配列番号１９または２４）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ  ＦＲ２（配列番号２０）、ＶＨ  ＦＲ３（配列番号２１または２３）、ＶＨ  ＦＲ４（配列番号２２）、ＶＬ  ＦＲ１（配列番号１４）、ＶＬ  ＦＲ２（配列番号１５）、ＶＬ  ＦＲ３（配列番号１６または１８）、及びＶＬ  ＦＲ４（配列番号１７）を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表３〜４に列記されるＶＨ  ＦＲ（配列番号１９〜２４）及びＶＬ  ＦＲ（配列番号１４〜１８）のそれらの任意の組み合わせを含む抗体を含む。
【０５２９】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＨ領域またはＶＨドメインを含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＶＬ領域またはＶＬドメインを含む抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（ｉ）ＶＨドメインもしくはＶＨ領域、及び／または（ｉｉ）ＶＬドメインもしくはＶＬ領域の組み合わせを含む抗体を含む。薬学的製剤中の抗体の例示的なＶＨ領域、ＶＨドメイン、ＶＬ領域、及びＶＬドメインは、本明細書の他の箇所に記載される。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表５〜６に記載の配列番号８〜１３からなる群から選択される（ｉ）ＶＨドメインもしくはＶＨ領域、及び／または（ｉｉ）ＶＬドメインもしくはＶＬ領域の組み合わせを含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤の抗体は、表５〜６に記載の抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６のうちのいずれか１つの（ｉ）ＶＨドメインもしくはＶＨ領域、及び／または（ｉｉ）ＶＬドメインもしくはＶＬ領域の組み合わせを有する。
【０５３０】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、（１）配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１、（２）配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含むＶＨ領域、ならびに表５に記載の配列番号８〜１０からなる群から選択されるＶＬ領域を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、ＶＬ領域は、配列番号８のアミノ酸配列を有する。他の実施形態では、ＶＬ領域は、配列番号９のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＶＬ領域は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する。
【０５３１】
他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表６に記載の配列番号１１〜１３からなる群から選択されるＶＨ領域、ならびに（１）配列番号１及び７からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表６に記載の配列番号１１〜１３からなる群から選択されるＶＨ領域、ならびに（１）配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、表６に記載の配列番号１１〜１３からなる群から選択されるＶＨ領域、ならびに（１）配列番号７のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、（２）配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び（３）配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含むＶＬ領域を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号１１のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号１２のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号１３のアミノ酸配列を有する。
【０５３２】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−１のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１１のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号８のＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−２のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１１のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号９のＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−３のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１２のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号１０のＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−４のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１２のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号９のＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−５のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１３のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号９のＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ１ＡＢ−６のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、配列番号１３のＶＨアミノ酸配列、及び配列番号８のＶＬアミノ酸配列を含む抗体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含むＰＤ−１ポリペプチド（例えば、ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のＥＣＤ）に特異的に結合する抗体を含み、軽鎖は、配列番号４１のアミノ酸配列を有する定常領域を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含むみ、重鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含まない。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号３７のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ  Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号３８のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号３９のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ４Ｐ  Ｆｃ領域を含む。さらに別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は��軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ４ＰＥ  Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ４ＰＥ  Ｆｃ領域を含まない。なお別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、配列番号４１のアミノ酸配列を有する定常領域を含み、重鎖は、配列番号３６〜４０からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＦｃ領域を含む。
【０５３３】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、軽鎖は、配列番号３１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号３２のアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号３３のアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号３４のアミノ酸配列を含む。さらに別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、重鎖は、配列番号３５のアミノ酸配列を含む。特定の一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、（ｉ）軽鎖は、配列番号３１のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）重鎖は、配列番号３２のアミノ酸配列を含む。別の特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、（ｉ）軽鎖は、配列番号３１のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）重鎖は、配列番号３３のアミノ酸配列を含む。さらに別の特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、（ｉ）軽鎖は、配列番号３１のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）重鎖は、配列番号３４のアミノ酸配列を含む。なお別の特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、軽鎖及び重鎖を含む抗体を含み、（ｉ）軽鎖は、配列番号３１のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）重鎖は、配列番号３５のアミノ酸配列を含む。
【０５３４】
さらに別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、本明細書に提供されるＰＤ−１への結合について例示される抗体または機能的断片のうちの１つと競合する抗体を含む。かかる抗体は、本明細書に例示される抗体のうちの１つと同じエピトープ、または重複するエピトープにも結合し得る。例示される抗体と同じエピトープと競合するか、またはそれに結合する抗体及び断片は、同様の機能的特性を示すと予想される。例示される抗原結合タンパク質及び断片には、表１〜６のものを含む、本明細書に提供されるＶＨ及びＶＬ領域、ならびにＣＤＲを有するものが含まれる。したがって、具体的な例として、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗体は、（ａ）表１〜２に列記される抗体について列記されるＣＤＲのうちの１、２、３、４、５、または６つ全て、（ｂ）表５〜６に列記される抗体について列記されるＶＨ及びＶＬ領域から選択されるＶＨ及びＶＬ、または（ｃ）表５〜６に列記される抗体について特定されるＶＨ及びＶＬを含む２つの軽鎖及び２つの重鎖を含む抗体と競合するものを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＰＤ１ＡＢ−１である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＰＤ１ＡＢ−２である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＰＤ１ＡＢ−３である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＰＤ１ＡＢ−４である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＰＤ１ＡＢ−５である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＰＤ１ＡＢ−６である。
【０５３５】
したがって、抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６である抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−１である抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−２である抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−３である抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−４である抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−５である抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−６である抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。抗ＰＤ−１抗体の抗原結合断片を含む薬学的製剤も本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、抗原結合断片は、ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６抗体の断片である。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−１の断片である抗ＰＤ−１抗体断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−２の断片である抗ＰＤ−１抗体断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−３の断片である抗ＰＤ−１抗体断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−４の断片である抗ＰＤ−１抗体断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−５の断片である抗ＰＤ−１抗体断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−６の断片である抗ＰＤ−１抗体断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−１のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−１のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−１のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含み、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−１のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−２のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−２のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−２のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含み、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−２のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−３のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−３のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−３のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含み、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−３のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−４のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−４のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−４のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含み、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−４のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−５のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−５のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含み、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−６のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−６のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、ＰＤ１ＡＢ−６のＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２、及びＶＬ  ＣＤＲ３を含み、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、ＰＤ１ＡＢ−６のＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、及びＶＨ  ＣＤＲ３を含む。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、配列番号８のアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、配列番号１３のアミノ酸配列を含む。さらに別の実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＬは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、本明細書に提供される薬学的製剤中の抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合断片のＶＨは、配列番号１３のアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、配列番号４１のアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域を含む抗ＰＤ−１抗体、またはその抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。さらに別の実施形態では、配列番号３７のアミノ酸配列を含む重鎖定常領域を含む抗ＰＤ−１抗体、またはその抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。なお別の実施形態では、配列番号４１のアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域及び配列番号３７のアミノ酸配列を含む重鎖定常領域を含む抗ＰＤ−１抗体、またはその抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む抗ＰＤ−１抗体、またはその抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。別の実施形態では、配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗ＰＤ−１抗体、またはその抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。さらに別の実施形態では、配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖及び配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖を含む抗ＰＤ−１抗体、またはその抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。ある特定の実施形態では、ヒトＩｇＧ１定常領域を含む抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。具体的な実施形態では、Ｋ３２２Ａ置換を含むＩｇＧ１定常領域を含む抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。一実施形態では、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３（ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３２２Ａ）である抗ＰＤ−１抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供される。
【０５３６】
さらに別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ヒトＰＤ−１またはカニクイザルＰＤ−１のエピトープを含む領域に結合する本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片を含む。例えば、いくつかの実施形態では、薬学的製剤の抗体は、ヒトＰＤ−１のアミノ酸残基３３〜１０９を含むヒトＰＤ−１（配列番号４２）の領域に結合する。なお別の態様では、薬学的製剤の抗体は、ヒトＰＤ−１の特定のエピトープに結合する。
【０５３７】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内の残基１００〜１０９（配列番号４３）のうちの少なくとも１つに結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内の残基１００〜１０５（配列番号４４）のうちの少なくとも１つに結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される少なくとも１つの残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＬ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される少なくとも１つの残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される２つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される３つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される４つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される５つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される６つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。さらに別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される７つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。なお別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される８つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群から選択される９つ以上の残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３、Ｔ５１、Ｓ５７、Ｌ１００、Ｎ１０２、Ｇ１０３、Ｒ１０４、Ｄ１０５、Ｈ１０７、及びＳ１０９からなる群からの１０個全ての残基に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ３３に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＴ５１に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＳ５７に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。具体的な一実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＬ１００に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＮ１０２に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。他の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＧ１０３に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＲ１０４に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。さらに別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＧ１０３及びＲ１０４に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。なお別の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＤ１０５に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＨ１０７に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、ＰＤ−１に結合すると、配列番号４２のアミノ酸配列内のＳ１０９に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。上記のアミノ酸ＰＤ−１結合部位のうちの２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０個、またはそれ以上の任意の組み合わせも企図される。
【０５３８】
本明細書に提供される製剤の抗体は、様々な緩衝液中で製剤化され得る。ある特定の実施形態では、抗体は、酢酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、コハク酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、及びアルギニン緩衝液からなる群から選択される緩衝液中で製剤化される。いくつかの実施形態では、抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化される。他の実施形態では、抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化される。ある特定の実施形態では、抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化される。別の実施形態では、抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化される。いくつかの実施形態では、抗体は、リン酸緩衝液中で製剤化される。他の実施形態では、抗体は、アルギニン緩衝液中で製剤化される。いくつかの実施形態では、抗体は、酢酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、コハク酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、及びアルギニン緩衝液からなる群から選択される２つ以上の緩衝液中で製剤化される。ある特定の実施形態では、抗体は、酢酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、コハク酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、及びアルギニン緩衝液からなる群から選択される２つの緩衝液の混合物中で製剤化される。２つの緩衝液の例示的な混合物には、ヒスチジン−アルギニン緩衝液、リン酸−クエン酸緩衝液、及びヒスチジン−酢酸緩衝液等が含まれるが、これらに限定されない。
【０５３９】
本明細書に提供される抗体は、広範囲のｐＨ値で製剤化され得る。いくつかの実施形態では、緩衝液のｐＨは、１．０〜１４．０の範囲である。他の実施形態では、緩衝液のｐＨは、４．０〜６．５の範囲である。さらに他の実施形態では、緩衝液のｐＨは、４．７〜５．７の範囲である。さらに他の実施形態では、緩衝液のｐＨは、５．２〜５．８の範囲である。一実施形態では、緩衝液のｐＨは、約５．０である。別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、約５．２である。さらに別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、約５．５である。さらに別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、約５．６である。さらに別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、約５．８である。なお別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、約６．０である。別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、約６．５である。一実施形態では、緩衝液のｐＨは、５．０である。別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、５．２である。さらに別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、５．５である。さらに別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、５．６である。さらに別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、５．８である。なお別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、６．０である。別の実施形態では、緩衝液のｐＨは、６．５である。
【０５４０】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され得、緩衝液のｐＨは、約５．０である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．２である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．５である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．６である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．８である。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約６．０である。なお他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約６．５である。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され得、緩衝液のｐＨは、５．０である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．２である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．５である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．６である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．８である。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、６．０である。なお他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、酢酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、６．５である。
【０５４１】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．０である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．２である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．５である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．６である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．８である。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約６．０である。なお他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約６．５である。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．０である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．２である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．５である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．６である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．８である。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、６．０である。なお他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、ヒスチジン緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、６．５である。
【０５４２】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．０である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．２である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．５である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．６である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．８である。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約６．０である。なお他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約６．５である。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．０である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．２である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．５である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．６である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．８である。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、６．０である。なお他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、コハク酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、６．５である。
【０５４３】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．０である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．２である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．５である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．６である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約５．８である。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約６．０である。なお他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、約６．５である。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．０である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．２である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．５である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．６である。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、５．８である。さらに他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、６．０である。なお他の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、クエン酸緩衝液中で製剤化され、緩衝液のｐＨは、６．５である。
【０５４４】
他の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．３ｍＭ、０．４ｍＭ、０．５ｍＭ、０．６ｍＭ、０．７ｍＭ、０．８ｍＭ、０．９ｍＭ、１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１２．５ｍＭ、１５ｍＭ、１７．５ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭ、３５ｍＭ、４０ｍＭ、５０ｍＭ、６０ｍＭ、７０ｍＭ、８０ｍＭ、９０ｍＭ、１００ｍＭ、１５０ｍＭ、２００ｍＭ、３００ｍＭ、４００ｍＭ、５００ｍＭ、１Ｍ、またはそれ以上の本明細書に提供される緩衝液を含有する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．１〜０．５ｍＭ、０．５〜１ｍＭ、１〜５ｍＭ、５〜１０ｍＭ、１０〜５０ｍＭ、５０〜１００ｍＭ、１００〜５００ｍＭ、５００ｍＭ〜１Ｍ、またはそれ以上の本明細書に提供される緩衝液を含有する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．１ｍＭ〜１Ｍの本明細書に提供される緩衝液を含有する。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１〜１００ｍＭの本明細書に提供される緩衝液を含有する。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１０ｍＭの本明細書に提供される緩衝液を含有する。
【０５４５】
一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１Ｍの濃度の酢酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。
【０５４６】
一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１Ｍの濃度のコハク酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。
【０５４７】
一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１Ｍの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。
【０５４８】
一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１Ｍの濃度のクエン酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、０．１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１００ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤は、１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。別の実施形態では、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。
【０５４９】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、酢酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。
【０５５０】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、コハク酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。
【０５５１】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、ヒスチジン緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。
【０５５２】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、クエン酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。
【０５５３】
本明細書に提供される薬学的製剤の様々な実施形態では、製剤は、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、及びポリソルベート８０を含むが、これらに限定されない界面活性剤をさらに含む。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート２０である。別の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート４０である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート６０である。別の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００１ｗ／ｖ％、０．００２ｗ／ｖ％、０．００３ｗ／ｖ％、０．００４ｗ／ｖ％、０．００５ｗ／ｖ％、０．００６ｗ／ｖ％、０．００７ｗ／ｖ％、０．００８ｗ／ｖ％、０．００９ｗ／ｖ％、０．０１ｗ／ｖ％、０．０１５ｗ／ｖ％、０．０２ｗ／ｖ％、０．０２５ｗ／ｖ％、０．０３ｗ／ｖ％、０．０３５ｗ／ｖ％、０．０４ｗ／ｖ％、０．０４５ｗ／ｖ％、０．０５ｗ／ｖ％、０．０５５ｗ／ｖ％、０．０６ｗ／ｖ％、０．０６５ｗ／ｖ％、０．０７ｗ／ｖ％、０．０７５ｗ／ｖ％、０．０８ｗ／ｖ％、０．０８５ｗ／ｖ％、０．０９ｗ／ｖ％、０．０９５ｗ／ｖ％、０．１ｗ／ｖ％、０．１５ｗ／ｖ％、０．２ｗ／ｖ％、０．３ｗ／ｖ％、０．４ｗ／ｖ％、０．５ｗ／ｖ％、またはそれ以上のポリソルベート２０を含有する。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００１〜０．００５ｗ／ｖ％、０．００５〜０．０１ｗ／ｖ％、０．０１〜０．０５ｗ／ｖ％、０．０５〜０．１ｗ／ｖ％、０．１〜０．５ｗ／ｖ％、またはそれ以上のポリソルベート２０を含有する。具体的な一実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート２０を含有する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００１ｗ／ｖ％、０．００２ｗ／ｖ％、０．００３ｗ／ｖ％、０．００４ｗ／ｖ％、０．００５ｗ／ｖ％、０．００６ｗ／ｖ％、０．００７ｗ／ｖ％、０．００８ｗ／ｖ％、０．００９ｗ／ｖ％、０．０１ｗ／ｖ％、０．０１５ｗ／ｖ％、０．０２ｗ／ｖ％、０．０２５ｗ／ｖ％、０．０３ｗ／ｖ％、０．０３５ｗ／ｖ％、０．０４ｗ／ｖ％、０．０４５ｗ／ｖ％、０．０５ｗ／ｖ％、０．０５５ｗ／ｖ％、０．０６ｗ／ｖ％、０．０６５ｗ／ｖ％、０．０７ｗ／ｖ％、０．０７５ｗ／ｖ％、０．０８ｗ／ｖ％、０．０８５ｗ／ｖ％、０．０９ｗ／ｖ％、０．０９５ｗ／ｖ％、０．１ｗ／ｖ％、０．１５ｗ／ｖ％、０．２ｗ／ｖ％、０．３ｗ／ｖ％、０．４ｗ／ｖ％、０．５ｗ／ｖ％、またはそれ以上のポリソルベート４０を含有する。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００１〜０．００５ｗ／ｖ％、０．００５〜０．０１ｗ／ｖ％、０．０１〜０．０５ｗ／ｖ％、０．０５〜０．１ｗ／ｖ％、０．１〜０．５ｗ／ｖ％、またはそれ以上のポリソルベート４０を含有する。具体的な一実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート４０を含有する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００１ｗ／ｖ％、０．００２ｗ／ｖ％、０．００３ｗ／ｖ％、０．００４ｗ／ｖ％、０．００５ｗ／ｖ％、０．００６ｗ／ｖ％、０．００７ｗ／ｖ％、０．００８ｗ／ｖ％、０．００９ｗ／ｖ％、０．０１ｗ／ｖ％、０．０１５ｗ／ｖ％、０．０２ｗ／ｖ％、０．０２５ｗ／ｖ％、０．０３ｗ／ｖ％、０．０３５ｗ／ｖ％、０．０４ｗ／ｖ％、０．０４５ｗ／ｖ％、０．０５ｗ／ｖ％、０．０５５ｗ／ｖ％、０．０６ｗ／ｖ％、０．０６５ｗ／ｖ％、０．０７ｗ／ｖ％、０．０７５ｗ／ｖ％、０．０８ｗ／ｖ％、０．０８５ｗ／ｖ％、０．０９ｗ／ｖ％、０．０９５ｗ／ｖ％、０．１ｗ／ｖ％、０．１５ｗ／ｖ％、０．２ｗ／ｖ％、０．３ｗ／ｖ％、０．４ｗ／ｖ％、０．５ｗ／ｖ％、またはそれ以上のポリソルベート６０を含有する。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００１〜０．００５ｗ／ｖ％、０．００５〜０．０１ｗ／ｖ％、０．０１〜０．０５ｗ／ｖ％、０．０５〜０．１ｗ／ｖ％、０．１〜０．５ｗ／ｖ％、またはそれ以上のポリソルベート６０を含有する。具体的な一実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート６０を含有する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００１ｗ／ｖ％、０．００２ｗ／ｖ％、０．００３ｗ／ｖ％、０．００４ｗ／ｖ％、０．００５ｗ／ｖ％、０．００６ｗ／ｖ％、０．００７ｗ／ｖ％、０．００８ｗ／ｖ％、０．００９ｗ／ｖ％、０．０１ｗ／ｖ％、０．０１５ｗ／ｖ％、０．０２ｗ／ｖ％、０．０２５ｗ／ｖ％、０．０３ｗ／ｖ％、０．０３５ｗ／ｖ％、０．０４ｗ／ｖ％、０．０４５ｗ／ｖ％、０．０５ｗ／ｖ％、０．０５５ｗ／ｖ％、０．０６ｗ／ｖ％、０．０６５ｗ／ｖ％、０．０７ｗ／ｖ％、０．０７５ｗ／ｖ％、０．０８ｗ／ｖ％、０．０８５ｗ／ｖ％、０．０９ｗ／ｖ％、０．０９５ｗ／ｖ％、０．１ｗ／ｖ％、０．１５ｗ／ｖ％、０．２ｗ／ｖ％、０．３ｗ／ｖ％、０．４ｗ／ｖ％、０．５ｗ／ｖ％、またはそれ以上のポリソルベート８０を含有する。他の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００１〜０．００５ｗ／ｖ％、０．００５〜０．０１ｗ／ｖ％、０．０１〜０．０５ｗ／ｖ％、０．０５〜０．１ｗ／ｖ％、０．１〜０．５ｗ／ｖ％、またはそれ以上のポリソルベート８０を含有する。具体的な一実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する。
【０５５４】
一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０５５５】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液を含む。一実施形態では、酢酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０５５６】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液を含む。一実施形態では、コハク酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０５５７】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液を含む。一実施形態では、ヒスチジン緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０５５８】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、及び（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液を含む。一実施形態では、クエン酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０５５９】
本明細書に提供される薬学的製剤の様々な実施形態では、製剤は、ポリオールをさらに含む。いくつかの実施形態では、ポリオールは、糖、糖アルコール、及び糖酸からなる群から選択される。一実施形態では、ポリオールは、糖である。別の実施形態では、ポリオールは、糖アルコールである。さらに別の実施形態では、ポリオールは、糖酸である。ポリオールの非限定的な例には、スクロース、マルトース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール等が挙げられる。具体的な一実施形態では、ポリオールは、スクロースである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１ｗ／ｖ％、２ｗ／ｖ％、３ｗ／ｖ％、４ｗ／ｖ％、５ｗ／ｖ％、６ｗ／ｖ％、７ｗ／ｖ％、８ｗ／ｖ％、９ｗ／ｖ％、１０ｗ／ｖ％、１２．５ｗ／ｖ％、１５ｗ／ｖ％、１７．５ｗ／ｖ％、２０ｗ／ｖ％、２５ｗ／ｖ％、３０ｗ／ｖ％、３５ｗ／ｖ％、４０ｗ／ｖ％、５０ｗ／ｖ％、またはそれ以上のスクロースを含有する。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１〜５ｗ／ｖ％、５〜１０ｗ／ｖ％、１０〜１５ｗ／ｖ％、１５〜２０ｗ／ｖ％、２０〜２５ｗ／ｖ％、２５〜３０ｗ／ｖ％、３０〜３５ｗ／ｖ％、３５〜４０ｗ／ｖ％、４０〜４５ｗ／ｖ％、４５〜５０ｗ／ｖ％、またはそれ以上のスクロースを含有する。一実施形態では、スクロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、スクロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マルトースである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１ｗ／ｖ％、２ｗ／ｖ％、３ｗ／ｖ％、４ｗ／ｖ％、５ｗ／ｖ％、６ｗ／ｖ％、７ｗ／ｖ％、８ｗ／ｖ％、９ｗ／ｖ％、１０ｗ／ｖ％、１２．５ｗ／ｖ％、１５ｗ／ｖ％、１７．５ｗ／ｖ％、２０ｗ／ｖ％、２５ｗ／ｖ％、３０ｗ／ｖ％、３５ｗ／ｖ％、４０ｗ／ｖ％、５０ｗ／ｖ％、またはそれ以上のマルトースを含有する。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１〜５ｗ／ｖ％、５〜１０ｗ／ｖ％、１０〜１５ｗ／ｖ％、１５〜２０ｗ／ｖ％、２０〜２５ｗ／ｖ％、２５〜３０ｗ／ｖ％、３０〜３５ｗ／ｖ％、３５〜４０ｗ／ｖ％、４０〜４５ｗ／ｖ％、４５〜５０ｗ／ｖ％、またはそれ以上のマルトースを含有する。一実施形態では、マルトースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マルトースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、トレハロースである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１ｗ／ｖ％、２ｗ／ｖ％、３ｗ／ｖ％、４ｗ／ｖ％、５ｗ／ｖ％、６ｗ／ｖ％、７ｗ／ｖ％、８ｗ／ｖ％、９ｗ／ｖ％、１０ｗ／ｖ％、１２．５ｗ／ｖ％、１５ｗ／ｖ％、１７．５ｗ／ｖ％、２０ｗ／ｖ％、２５ｗ／ｖ％、３０ｗ／ｖ％、３５ｗ／ｖ％、４０ｗ／ｖ％、５０ｗ／ｖ％、またはそれ以上のトレハロースを含有する。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１〜５ｗ／ｖ％、５〜１０ｗ／ｖ％、１０〜１５ｗ／ｖ％、１５〜２０ｗ／ｖ％、２０〜２５ｗ／ｖ％、２５〜３０ｗ／ｖ％、３０〜３５ｗ／ｖ％、３５〜４０ｗ／ｖ％、４０〜４５ｗ／ｖ％、４５〜５０ｗ／ｖ％、またはそれ以上のトレハロースを含有する。一実施形態では、トレハロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、トレハロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マンニトールである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１ｗ／ｖ％、２ｗ／ｖ％、３ｗ／ｖ％、４ｗ／ｖ％、５ｗ／ｖ％、６ｗ／ｖ％、７ｗ／ｖ％、８ｗ／ｖ％、９ｗ／ｖ％、１０ｗ／ｖ％、１２．５ｗ／ｖ％、１５ｗ／ｖ％、１７．５ｗ／ｖ％、２０ｗ／ｖ％、２５ｗ／ｖ％、３０ｗ／ｖ％、３５ｗ／ｖ％、４０ｗ／ｖ％、５０ｗ／ｖ％、またはそれ以上のマンニトールを含有する。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１〜５ｗ／ｖ％、５〜１０ｗ／ｖ％、１０〜１５ｗ／ｖ％、１５〜２０ｗ／ｖ％、２０〜２５ｗ／ｖ％、２５〜３０ｗ／ｖ％、３０〜３５ｗ／ｖ％、３５〜４０ｗ／ｖ％、４０〜４５ｗ／ｖ％、４５〜５０ｗ／ｖ％、またはそれ以上のマンニトールを含有する。一実施形態では、マンニトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マンニトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、ソルビトールである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１ｗ／ｖ％、２ｗ／ｖ％、３ｗ／ｖ％、４ｗ／ｖ％、５ｗ／ｖ％、６ｗ／ｖ％、７ｗ／ｖ％、８ｗ／ｖ％、９ｗ／ｖ％、１０ｗ／ｖ％、１２．５ｗ／ｖ％、１５ｗ／ｖ％、１７．５ｗ／ｖ％、２０ｗ／ｖ％、２５ｗ／ｖ％、３０ｗ／ｖ％、３５ｗ／ｖ％、４０ｗ／ｖ％、５０ｗ／ｖ％、またはそれ以上のソルビトールを含有する。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１〜５ｗ／ｖ％、５〜１０ｗ／ｖ％、１０〜１５ｗ／ｖ％、１５〜２０ｗ／ｖ％、２０〜２５ｗ／ｖ％、２５〜３０ｗ／ｖ％、３０〜３５ｗ／ｖ％、３５〜４０ｗ／ｖ％、４０〜４５ｗ／ｖ％、４５〜５０ｗ／ｖ％、またはそれ以上のソルビトールを含有する。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。
【０５６０】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度の酢酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、酢酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。ある特定の実施形態では、ポリオールは、糖、糖アルコール、または糖酸である。一実施形態では、ポリオールは、糖である。別の実施形態では、ポリオールは、糖アルコールである。さらに別の実施形態では、ポリオールは、糖酸である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、スクロースである。一実施形態では、スクロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、スクロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マルトースである。一実施形態では、マルトースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マルトースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、トレハロースである。一実施形態では、トレハロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、トレハロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マンニトールである。一実施形態では、マンニトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マンニトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、ソルビトールである。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０５６１】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）コハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のコハク酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、コハク酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。ある特定の実施形態では、ポリオールは、糖、糖アルコール、または糖酸である。一実施形態では、ポリオールは、糖である。別の実施形態では、ポリオールは、糖アルコールである。さらに別の実施形態では、ポリオールは、糖酸である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、スクロースである。一実施形態では、スクロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、スクロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マルトースである。一実施形態では、マルトースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マルトースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、トレハロースである。一実施形態では、トレハロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、トレハロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マンニトールである。一実施形態では、マンニトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マンニトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、ソルビトールである。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０５６２】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）ヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、ヒスチジン緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。ある特定の実施形態では、ポリオールは、糖、糖アルコール、または糖酸である。一実施形態では、ポリオールは、糖である。別の実施形態では、ポリオールは、糖アルコールである。さらに別の実施形態では、ポリオールは、糖酸である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、スクロースである。一実施形態では、スクロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、スクロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マルトースである。一実施形態では、マルトースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マルトースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、トレハロースである。一実施形態では、トレハロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、トレハロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マンニトールである。一実施形態では、マンニトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マンニトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、ソルビトールである。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０５６３】
一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４〜６．５の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ４．７〜５．７の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、ｐＨ５．２〜５．８の範囲内であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、約５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）クエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）５ｍＭ〜１５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、製剤のｐＨは、５．２であり、製剤は、（ｉ）本明細書に提供されるＰＤ−１抗体または抗原結合断片、（ｉｉ）界面活性剤、（ｉｉｉ）１０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、及び（ｉｖ）ポリオールを含む。一実施形態では、クエン酸緩衝液は、製剤中に存在する唯一の緩衝液である。ある特定の実施形態では、ポリオールは、糖、糖アルコール、または糖酸である。一実施形態では、ポリオールは、糖である。別の実施形態では、ポリオールは、糖アルコールである。さらに別の実施形態では、ポリオールは、糖酸である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、スクロースである。一実施形態では、スクロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、スクロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マルトースである。一実施形態では、マルトースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マルトースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マルトースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、トレハロースである。一実施形態では、トレハロースの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、トレハロースの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、トレハロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、マンニトールである。一実施形態では、マンニトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、マンニトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、マンニトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。具体的な一実施形態では、ポリオールは、ソルビトールである。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、５〜１０ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ソルビトールの濃度は、８〜９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、９ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、約８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、ソルビトールの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。別の実施形態では、スクロースの濃度は、８．５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベートである。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−２０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−４０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−６０である。一実施形態では、ポリソルベートは、ポリソルベート−８０である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、界面活性剤の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−２０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−４０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−６０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００１〜０．０１ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５〜０．０１５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．０５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、約０．００５ｗ／ｖ％である。一実施形態では、ポリソルベート−８０の濃度は、０．００５ｗ／ｖ％である。
【０５６４】
具体的な実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供され、この製剤は、５．２のｐＨを有し、（ｉ）１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液、（ｉｉ）８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び（ｉｉｉ）０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含む。別の具体的な実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供され、この製剤は、５．２のｐＨを有し、（ｉ）１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液、（ｉｉ）８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び（ｉｉｉ）０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含む。
【０５６５】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬ、３ｍｇ／ｍＬ、４ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、７ｍｇ／ｍＬ、８ｍｇ／ｍＬ、９ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、１２．５ｍｇ／ｍＬ、１５ｍｇ／ｍＬ、１７．５ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ、２５ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ、３５／ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、６０ｍｇ／ｍＬ、７０ｍｇ／ｍＬ、８０ｍｇ／ｍＬ、９０ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ、１２５ｍｇ／ｍＬ、１５０ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍＬ、２５０ｍｇ／ｍＬ、３００ｍｇ／ｍＬ、４００ｍｇ／ｍＬ、５００ｍｇ／ｍＬ、またはそれ以上の抗体を含有する。
【０５６６】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する。一実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−１、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する。別の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−２、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する。さらに別の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−３、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する。なお別の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−４、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する。一実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−５、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する。別の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する。さらに別の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する。なお別の実施形態では、本明細書に提供される抗体の製剤は、１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する。
【０５６７】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、水性薬学的製剤である。
【０５６８】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、好適な容器（例えば、バイアル）にアリコートされ、保管のために密封される。一実施形態では、０．１ｍＬ、０．１５ｍＬ、０．２ｍＬ、０．２５ｍＬ、０．３ｍＬ、０．３５ｍＬ、０．４ｍＬ、０．４５ｍＬ、０．５ｍＬ、０．５５ｍＬ、０．６ｍＬ、０．６５ｍＬ、０．７ｍＬ、０．７５ｍＬ、０．８ｍＬ、０．８５ｍＬ、０．９ｍＬ、０．９５ｍＬ、１ｍＬ、２ｍＬ、５ｍＬ、またはそれ以上の製剤化された抗体がアリコートされる。
【０５６９】
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される様々な薬学的製剤は、安定している。本明細書に提供される薬学的製剤の安定性は、選択された温度で選択された期間にわたって測定され得る。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約４週間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約１２週間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約２６週間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約１４ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約３ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約４ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約５ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約６ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約１２ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約１８ヶ月間にわたって安定している。一実施形態では、液体製剤中の抗体は、液体形態で少なくとも約２４ヶ月間にわたって安定している。上記の期間の中間の値及び範囲、例えば、約３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４ヶ月間も企図される。加えて、上限及び／または下限として上記の値のうちのいずれかの組み合わせを使用する値の範囲が含まれるよう意図される。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、−７０℃で安定している。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、４℃で安定している。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、２５℃で安定している。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、３０℃で安定している。いくつかの実施形態では、薬学的製剤は、４０℃で安定している。
【０５７０】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、５±３℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、またはそれ以上にわたって安定したままである。別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、−２０±５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１８ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって安定したままである。さらに別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、−７０±１０℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１８ヶ月間、２４ヶ月間、３０ヶ月間、３６ヶ月間、４８ヶ月間、またはそれ以上にわたって安定したままである。さらに別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、−８０℃／５℃で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０回、またはそれ以上の一日凍結融解サイクル後に安定したままである。なお別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、５℃で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０日間、またはそれ以上にわたって連続してボルテックスした後に安定したままである。なお別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、５℃±３℃で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４時間、またはそれ以上にわたって連続してボルテックスした後に安定したままである。なお別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で、４、８、２４時間、またはそれ以上にわたって連続してボルテックスした後に安定したままである。具体的な実施形態では、薬学的製剤は、−７０℃±１０℃で保管された場合、少なくとも１２ヶ月間にわたって安定している。他の実施形態では、薬学的製剤は、５℃±３℃で保管された場合、少なくとも６ヶ月間にわたって安定している。
【０５７１】
−８０℃／５℃で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０回、またはそれ以上の一日凍結融解サイクル。なお別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、５℃で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０日間、またはそれ以上にわたって連続してボルテックスした後に安定したままである。具体的な実施形態では、薬学的製剤は、−７０℃±１０℃で保管された場合、少なくとも１２ヶ月間にわたって安定している。他の実施形態では、薬学的製剤は、５℃±３℃で保管された場合、少なくとも６ヶ月間にわたって安定している。
【０５７２】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、５±３℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって単量体形態で実質的に残存する。別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５±５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって安定したままである。別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０±５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月  ２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって安定したままである。
【０５７３】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって単量体形態で実質的に残存する。一実施形態では、抗体の単量体形態は、製剤中の総タンパク質の合計５０〜６０ｗ／ｗ％、６０〜７０ｗ／ｗ％、７０〜８０ｗ／ｗ％、８０〜８５ｗ／ｗ％、８５〜９０ｗ／ｗ％、９０〜９５ｗ／ｗ％、または９５〜１００ｗ／ｗ％になる。一実施形態では、抗体の単量体形態は、製剤中の総タンパク質の合計約５０ｗ／ｗ％超、６０ｗ／ｗ％超、７０ｗ／ｗ％超、８０ｗ／ｗ％超、８５ｗ／ｗ％超、９０ｗ／ｗ％超、９１ｗ／ｗ％超、９２ｗ／ｗ％超、９３ｗ／ｗ％超、９４ｗ／ｗ％超、９５ｗ／ｗ％超、９６ｗ／ｗ％超、９７ｗ／ｗ％超、９８ｗ／ｗ％超、または９９ｗ／ｗ％超になる。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１２週間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の９０ｗ／ｗ％超、９１ｗ／ｗ％超、９２ｗ／ｗ％超、９３ｗ／ｗ％超、９４ｗ／ｗ％超、９５ｗ／ｗ％超、９６ｗ／ｗ％超、９７ｗ／ｗ％超、９８ｗ／ｗ％超、または９９ｗ／ｗ％超である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１２週間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の９８〜９９ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で２６週間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の９０ｗ／ｗ％超、９１ｗ／ｗ％超、９２ｗ／ｗ％超、９３ｗ／ｗ％超、９４ｗ／ｗ％超、９５ｗ／ｗ％超、９６ｗ／ｗ％超、９７ｗ／ｗ％超、９８ｗ／ｗ％超、または９９ｗ／ｗ％超である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で２６週間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の９８〜９９ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１４ヶ月間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、１４ヶ月の終わりに、製剤中の総タンパク質の９０ｗ／ｗ％超、９１ｗ／ｗ％超、９２ｗ／ｗ％超、９３ｗ／ｗ％超、９４ｗ／ｗ％超、９５ｗ／ｗ％超、９６ｗ／ｗ％超、９７ｗ／ｗ％超、９８ｗ／ｗ％超、または９９ｗ／ｗ％超である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１４ヶ月間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、１４ヶ月の終わりに、製剤中の総タンパク質の９８〜９９ｗ／ｗ％の範囲である。
【０５７４】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって単量体形態で実質的に残存する。一実施形態では、抗体の単量体形態は、製剤中の総タンパク質の合計５０〜６０ｗ／ｗ％、６０〜７０ｗ／ｗ％、７０〜８０ｗ／ｗ％、８０〜８５ｗ／ｗ％、８５〜９０ｗ／ｗ％、９０〜９５ｗ／ｗ％、または９５〜１００ｗ／ｗ％になる。一実施形態では、抗体の単量体形態は、製剤中の総タンパク質の合計約５０ｗ／ｗ％超、６０ｗ／ｗ％超、７０ｗ／ｗ％超、８０ｗ／ｗ％超、８５ｗ／ｗ％超、９０ｗ／ｗ％超、９１ｗ／ｗ％超、９２ｗ／ｗ％超、９３ｗ／ｗ％超、９４ｗ／ｗ％超、９５ｗ／ｗ％超、９６ｗ／ｗ％超、９７ｗ／ｗ％超、９８ｗ／ｗ％超、または９９ｗ／ｗ％超になる。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で１２週間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の９０ｗ／ｗ％超、９１ｗ／ｗ％超、９２ｗ／ｗ％超、９３ｗ／ｗ％超、９４ｗ／ｗ％超、９５ｗ／ｗ％超、９６ｗ／ｗ％超、９７ｗ／ｗ％超、９８ｗ／ｗ％超、または９９ｗ／ｗ％超である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で１２週間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の９６〜９９ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で２６週間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の９０ｗ／ｗ％超、９１ｗ／ｗ％超、９２ｗ／ｗ％超、９３ｗ／ｗ％超、９４ｗ／ｗ％超、９５ｗ／ｗ％超、９６ｗ／ｗ％超、９７ｗ／ｗ％超、９８ｗ／ｗ％超、または９９ｗ／ｗ％超である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で２６週間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の９６〜９９ｗ／ｗ％の範囲である。
【０５７５】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって単量体形態で実質的に残存する。一実施形態では、抗体の単量体形態は、製剤中の総タンパク質の合計５０〜６０ｗ／ｗ％、６０〜７０ｗ／ｗ％、７０〜８０ｗ／ｗ％、８０〜８５ｗ／ｗ％、８５〜９０ｗ／ｗ％、９０〜９５ｗ／ｗ％、または９５〜１００ｗ／ｗ％になる。一実施形態では、抗体の単量体形態は、製剤中の総タンパク質の合計約５０ｗ／ｗ％超、６０ｗ／ｗ％超、７０ｗ／ｗ％超、８０ｗ／ｗ％超、８５ｗ／ｗ％超、９０ｗ／ｗ％超、９１ｗ／ｗ％超、９２ｗ／ｗ％超、９３ｗ／ｗ％超、９４ｗ／ｗ％超、９５ｗ／ｗ％超、９６ｗ／ｗ％超、９７ｗ／ｗ％超、９８ｗ／ｗ％超、または９９ｗ／ｗ％超になる。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で４週間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、４週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の９０ｗ／ｗ％超、９１ｗ／ｗ％超、９２ｗ／ｗ％超、９３ｗ／ｗ％超、９４ｗ／ｗ％超、９５ｗ／ｗ％超、９６ｗ／ｗ％超、９７ｗ／ｗ％超、９８ｗ／ｗ％超、または９９ｗ／ｗ％超である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で４週間にわたって単量体形態で実質的に残存し、抗体の単量体形態は、４週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の９２〜９５ｗ／ｗ％の範囲である。
【０５７６】
具体的な実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供され、製剤は、５．２のｐＨを有し、（ｉ）１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液、（ｉｉ）８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び（ｉｉｉ）０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含み、４℃で１４ヶ月間保管した後、ＰＤ−１に結合する抗体の単量体形態は、薬学的製剤中の総タンパク質の９８〜９９ｗ／ｗ％の範囲である。別の具体的な実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供され、製剤は、５．２のｐＨを有し、（ｉ）１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液、（ｉｉ）８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び（ｉｉｉ）０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含み、４℃で１４ヶ月間保管した後、ＰＤ−１に結合する抗体の単量体形態は、薬学的製剤中の総タンパク質の９８〜９９ｗ／ｗ％の範囲である。
【０５７７】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、５±３℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の凝集ＨＭＷ種しか形成しない。別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５±５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の凝集ＨＭＷ種しか形成しない。別の実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０±５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月  ２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の凝集ＨＭＷ種しか形成しない。
【０５７８】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の凝集ＨＭＷ種しか形成しない。一実施形態では、抗体のＨＭＷ種は、製剤中の総タンパク質の合計１０ｗ／ｗ％未満、９ｗ／ｗ％未満、８ｗ／ｗ％未満、７ｗ／ｗ％未満、６ｗ／ｗ％未満、５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満になる。一実施形態では、抗体のＨＭＷ種は、合計０〜０．０５ｗ／ｗ％、０．０５〜０．１ｗ／ｗ％、０．１〜０．５ｗ／ｗ％、０．５〜１ｗ／ｗ％、１〜１．５ｗ／ｗ％、１．５〜２ｗ／ｗ％、２〜２．５ｗ／ｗ％、２．５〜３ｗ／ｗ％、３〜３．５ｗ／ｗ％、３．５〜４ｗ／ｗ％、４〜４．５ｗ／ｗ％、４．５〜５ｗ／ｗ％、５〜５．５ｗ／ｗ％、５．５〜６ｗ／ｗ％、６〜６．５ｗ／ｗ％、６．５〜７ｗ／ｗ％、７〜７．５ｗ／ｗ％、７．５〜８ｗ／ｗ％、８〜８．５ｗ／ｗ％、８．５〜９ｗ／ｗ％、９〜９．５ｗ／ｗ％、９．５〜１０ｗ／ｗ％になる。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１２週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１２週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１〜２ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１２週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１．３〜１．６ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で２６週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で２６週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１〜２ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で２６週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１．４〜１．７ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１４ヶ月間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、１４ヶ月の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１４ヶ月間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、１４ヶ月の終わりに、製剤中の総タンパク質の１〜２ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１４ヶ月間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、１４ヶ月の終わりに、製剤中の総タンパク質の１．３〜１．７ｗ／ｗ％の範囲である。
【０５７９】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の凝集ＨＭＷ種しか形成しない。一実施形態では、抗体のＨＭＷ種は、製剤中の総タンパク質の合計１０ｗ／ｗ％未満、９ｗ／ｗ％未満、８ｗ／ｗ％未満、７ｗ／ｗ％未満、６ｗ／ｗ％未満、５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満になる。一実施形態では、抗体のＨＭＷ種は、合計０〜０．０５ｗ／ｗ％、０．０５〜０．１ｗ／ｗ％、０．１〜０．５ｗ／ｗ％、０．５〜１ｗ／ｗ％、１〜１．５ｗ／ｗ％、１．５〜２ｗ／ｗ％、２〜２．５ｗ／ｗ％、２．５〜３ｗ／ｗ％、３〜３．５ｗ／ｗ％、３．５〜４ｗ／ｗ％、４〜４．５ｗ／ｗ％、４．５〜５ｗ／ｗ％、５〜５．５ｗ／ｗ％、５．５〜６ｗ／ｗ％、６〜６．５ｗ／ｗ％、６．５〜７ｗ／ｗ％、７〜７．５ｗ／ｗ％、７．５〜８ｗ／ｗ％、８〜８．５ｗ／ｗ％、８．５〜９ｗ／ｗ％、９〜９．５ｗ／ｗ％、９．５〜１０ｗ／ｗ％になる。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で１２週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で１２週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１〜２ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で１２週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１．５〜２ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で２６週間にわたって、微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で２６週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１〜３ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で２６週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、２６週間の終わりに製剤中の総タンパク質の１．６〜２．２ｗ／ｗ％の範囲である。
【０５８０】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の凝集ＨＭＷ種しか形成しない。一実施形態では、抗体のＨＭＷ種は、製剤中の総タンパク質の合計１０ｗ／ｗ％未満、９ｗ／ｗ％未満、８ｗ／ｗ％未満、７ｗ／ｗ％未満、６ｗ／ｗ％未満、５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満になる。一実施形態では、抗体のＨＭＷ種は、合計０〜０．０５ｗ／ｗ％、０．０５〜０．１ｗ／ｗ％、０．１〜０．５ｗ／ｗ％、０．５〜１ｗ／ｗ％、１〜１．５ｗ／ｗ％、１．５〜２ｗ／ｗ％、２〜２．５ｗ／ｗ％、２．５〜３ｗ／ｗ％、３〜３．５ｗ／ｗ％、３．５〜４ｗ／ｗ％、４〜４．５ｗ／ｗ％、４．５〜５ｗ／ｗ％、５〜５．５ｗ／ｗ％、５．５〜６ｗ／ｗ％、６〜６．５ｗ／ｗ％、６．５〜７ｗ／ｗ％、７〜７．５ｗ／ｗ％、７．５〜８ｗ／ｗ％、８〜８．５ｗ／ｗ％、８．５〜９ｗ／ｗ％、９〜９．５ｗ／ｗ％、９．５〜１０ｗ／ｗ％になる。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で４週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、４週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で４週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、４週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１〜３ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で４週間にわたって微量の凝集ＨＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＨＭＷ種は、４週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１．８〜２．３ｗ／ｗ％の範囲である。
【０５８１】
具体的な実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供され、製剤は、５．２のｐＨを有し、（ｉ）１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液、（ｉｉ）８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び（ｉｉｉ）０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含み、４℃で１４ヶ月間保管した後、ＰＤ−１に結合する抗体のＨＭＷ種は、薬学的製剤中の総タンパク質の２ｗ／ｗ％未満である。別の具体的な実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供され、製剤は、５．２のｐＨを有し、（ｉ）１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液、（ｉｉ）８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び（ｉｉｉ）０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含み、４℃で１４ヶ月間保管した後、ＰＤ−１に結合する抗体のＨＭＷ種は、薬学的製剤中の総タンパク質の２ｗ／ｗ％未満である。
【０５８２】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、５±３℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成しない。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５±５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成しない。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０±５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成しない。
【０５８３】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成しない。一実施形態では、抗体のＬＭＷ種は、製剤中の総タンパク質の合計１０ｗ／ｗ％未満、９ｗ／ｗ％未満、８ｗ／ｗ％未満、７ｗ／ｗ％未満、６ｗ／ｗ％未満、５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満になる。一実施形態では、抗体のＬＭＷ種は、合計０〜０．０５ｗ／ｗ％、０．０５〜０．１ｗ／ｗ％、０．１〜０．５ｗ／ｗ％、０．５〜１ｗ／ｗ％、１〜１．５ｗ／ｗ％、１．５〜２ｗ／ｗ％、２〜２．５ｗ／ｗ％、２．５〜３ｗ／ｗ％、３〜３．５ｗ／ｗ％、３．５〜４ｗ／ｗ％、４〜４．５ｗ／ｗ％、４．５〜５ｗ／ｗ％、５〜５．５ｗ／ｗ％、５．５〜６ｗ／ｗ％、６〜６．５ｗ／ｗ％、６．５〜７ｗ／ｗ％、７〜７．５ｗ／ｗ％、７．５〜８ｗ／ｗ％、８〜８．５ｗ／ｗ％、８．５〜９ｗ／ｗ％、９〜９．５ｗ／ｗ％、９．５〜１０ｗ／ｗ％になる。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１２週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１２週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の０〜０．０２ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で１２週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の０．０２ｗ／ｗ％である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で２６週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で２６週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の０〜０．０２ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４℃で２６週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の０．０２ｗ／ｗ％である。
【０５８４】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成しない。一実施形態では、抗体のＬＭＷ種は、製剤中の総タンパク質の合計１０ｗ／ｗ％未満、９ｗ／ｗ％未満、８ｗ／ｗ％未満、７ｗ／ｗ％未満、６ｗ／ｗ％未満、５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満になる。一実施形態では、抗体のＬＭＷ種は、合計０〜０．０５ｗ／ｗ％、０．０５〜０．１ｗ／ｗ％、０．１〜０．５ｗ／ｗ％、０．５〜１ｗ／ｗ％、１〜１．５ｗ／ｗ％、１．５〜２ｗ／ｗ％、２〜２．５ｗ／ｗ％、２．５〜３ｗ／ｗ％、３〜３．５ｗ／ｗ％、３．５〜４ｗ／ｗ％、４〜４．５ｗ／ｗ％、４．５〜５ｗ／ｗ％、５〜５．５ｗ／ｗ％、５．５〜６ｗ／ｗ％、６〜６．５ｗ／ｗ％、６．５〜７ｗ／ｗ％、７〜７．５ｗ／ｗ％、７．５〜８ｗ／ｗ％、８〜８．５ｗ／ｗ％、８．５〜９ｗ／ｗ％、９〜９．５ｗ／ｗ％、９．５〜１０ｗ／ｗ％になる。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で１２週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で１２週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１〜２ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で１２週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、１２週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の１．４〜１．８ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、２５℃で２６週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、２６週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。
【０５８５】
一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって、微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成しない。一実施形態では、抗体のＬＭＷ種は、製剤中の総タンパク質の合計１０ｗ／ｗ％未満、９ｗ／ｗ％未満、８ｗ／ｗ％未満、７ｗ／ｗ％未満、６ｗ／ｗ％未満、５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満になる。一実施形態では、抗体のＬＭＷ種は、合計０〜０．０５ｗ／ｗ％、０．０５〜０．１ｗ／ｗ％、０．１〜０．５ｗ／ｗ％、０．５〜１ｗ／ｗ％、１〜１．５ｗ／ｗ％、１．５〜２ｗ／ｗ％、２〜２．５ｗ／ｗ％、２．５〜３ｗ／ｗ％、３〜３．５ｗ／ｗ％、３．５〜４ｗ／ｗ％、４〜４．５ｗ／ｗ％、４．５〜５ｗ／ｗ％、５〜５．５ｗ／ｗ％、５．５〜６ｗ／ｗ％、６〜６．５ｗ／ｗ％、６．５〜７ｗ／ｗ％、７〜７．５ｗ／ｗ％、７．５〜８ｗ／ｗ％、８〜８．５ｗ／ｗ％、８．５〜９ｗ／ｗ％、９〜９．５ｗ／ｗ％、９．５〜１０ｗ／ｗ％になる。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で４週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、４週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の５ｗ／ｗ％未満、４ｗ／ｗ％未満、３ｗ／ｗ％未満、２ｗ／ｗ％未満、１ｗ／ｗ％未満、０．５ｗ／ｗ％未満、０．４ｗ／ｗ％未満、０．３ｗ／ｗ％未満、０．２ｗ／ｗ％未満、０．１ｗ／ｗ％未満である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で４週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、４週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の３〜５ｗ／ｗ％の範囲である。一実施形態では、本明細書に提供される製剤化された抗体は、４０℃で４週間にわたって微量の断片化（クリップ）ＬＭＷ種しか形成せず、抗体の微量のＬＭＷ種は、４週間の終わりに、製剤中の総タンパク質の３．７〜４．８ｗ／ｗ％の範囲である。
【０５８６】
一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、５±３℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって保管した後、安定したままであり、静脈内投与のための米国薬局方（ＵＳＰ）基準を満たす密度のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、２５±５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって保管した後、安定したままであり、静脈内投与のための米国薬局方（ＵＳＰ）基準を満たす密度のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、４０±５℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって保管した後、安定したままであり、静脈内投与のための米国薬局方（ＵＳＰ）基準を満たす密度のサブビジブル粒子を有する。
【０５８７】
一実施形態では、本明細書に提供される薬学的製剤は、４℃で、１週間、２週間、４週間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、２６週間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間、１４ヶ月間、２４ヶ月間、またはそれ以上にわたって保管した後、静脈内投与のためのＵＳＰ基準を満たす密度のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、薬学的製剤は、約５０，０００カウント／ｍＬ未満、４０，０００カウント／ｍＬ未満、３０，０００カウント／ｍＬ未満、２５，０００カウント／ｍＬ未満、２０，０００カウント／ｍＬ未満、１５，０００カウント／ｍＬ未満、１０，０００カウント／ｍＬ未満、５，０００カウント／ｍＬ未満、２，５００カウント／ｍＬ未満、２，０００カウント／ｍＬ未満、１，５００カウント／ｍＬ未満、または１，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、薬学的製剤は、約６，０００カウント／ｍＬ未満、５，０００カウント／ｍＬ未満、４，０００カウント／ｍＬ未満、３，０００カウント／ｍＬ未満、２，０００カウント／ｍＬ未満、１，０００カウント／ｍＬ未満、９００カウント／ｍＬ未満、８００カウント／ｍＬ未満、７００カウント／ｍＬ未満、６００カウント／ｍＬ未満、５００カウント／ｍＬ未満、４００カウント／ｍＬ未満、３００カウント／ｍＬ未満、２００カウント／ｍＬ未満、または１００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、薬学的製剤は、約６００カウント／ｍＬ未満、５００カウント／ｍＬ未満、４００カウント／ｍＬ未満、３００カウント／ｍＬ未満、２００カウント／ｍＬ未満、１００カウント／ｍＬ未満、または５０カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。
【０５８８】
一実施形態では、４℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約２５，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約２０，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約１，０００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約５００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約２００カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約１５０カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約２０，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子、及び約５００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子、及び約１５０カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。
【０５８９】
一実施形態では、４℃で２６週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約１０，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で２６週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約８，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で２６週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約１，０００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で２６週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約５００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で２６週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約２００カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で２６週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約１５０カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、４℃で２６週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約８，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子、及び約５００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子、及び約１５０カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。
【０５９０】
一実施形態では、２５℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約３０，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、２５℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約２８，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、２５℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約５，０００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、２５℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約２，０００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、２５℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約２，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、２５℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約１，２００カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。一実施形態では、２５℃で１２週間保管した後の本明細書に提供される薬学的製剤は、約２８，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子、及び約２，０００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子、及び約１，２００カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。
【０５９１】
具体的な実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗体を含む薬学的製剤が本明細書に提供され、製剤は、５．２のｐＨを有し、（ｉ）１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液、（ｉｉ）８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び（ｉｉｉ）０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含み、４℃で２６週間保管した後、薬学的製剤は、約８，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子、及び約５００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子、及び約１５０カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。別の具体的な実施形態では、ＰＤ−１に結合する抗原結合断片を含む薬学的製剤が本明細書に提供され、製剤は、５．２のｐＨを有し、（ｉ）１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液、（ｉｉ）８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び（ｉｉｉ）０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含み、４℃で２６週間保管した後、薬学的製剤は、約８，０００カウント／ｍＬ未満の密度の２μｍ以上のサブビジブル粒子、及び約５００カウント／ｍＬ未満の密度の１０μｍ以上のサブビジブル粒子、及び約１５０カウント／ｍＬ未満の密度の２５μｍ以上のサブビジブル粒子を有する。
【０５９２】
４．６  薬学的製剤を作製する方法
別の態様では、本明細書に開示の様々な薬学的製剤を作製する方法も提供される。
【０５９３】
ある特定の実施形態では、本明細書に開示の様々な薬学的製剤を作製する方法は、（ａ）細胞を培地で培養することであって、細胞が、本明細書に提供される抗体またはその抗原結合断片の重鎖、軽鎖、または重鎖及び軽鎖の両方をコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上のポリヌクレオチドを含む、培養することと、（ｂ）培地を収集することと、（ｃ）培地を一連の精製ステップに供することと、を含む。
【０５９４】
本明細書で使用される細胞は、当業者がタンパク質産生（例えば、抗体産生）に使用する任意の細胞型であり得る。ある特定の実施形態では、細胞は、ＣＨＯ細胞である。他の実施形態では、細胞は、ＨＥＫ２９３細胞である。本明細書で使用される培地は、任意の好適な栄養補助剤を含む、使用される特定の細胞（例えば、ＣＨＯ細胞）に好適な任意の細胞培養培地であり得る。
【０５９５】
本方法のある特定の実施形態では、精製ステップは、（ｉ）親和性クロマトグラフィー、（ｉｉ）ウイルス不活性化、（ｉｉｉ）イオン交換クロマトグラフィー、（ｉｖ）ウイルス濾過、及び（ｖ）限外濾過／透析濾過を含む。
【０５９６】
一実施形態では、親和性クロマトグラフィーは、タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーである。別の実施形態では、ウイルス不活性化ステップは、低ｐＨウイルス不活性化ステップである。さらに別の実施形態では、イオン交換クロマトグラフィーは、陰イオン交換クロマトグラフィーである。一実施形態では、親和性クロマトグラフィーは、タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーであり、ウイルス不活性化ステップは、低ｐＨウイルス不活性化ステップである。別の実施形態では、ウイルス不活性化ステップは、低ｐＨウイルス不活性化ステップであり、イオン交換クロマトグラフィーは、陰イオン交換クロマトグラフィーである。さらに別の実施形態では、親和性クロマトグラフィーは、タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーであり、イオン交換クロマトグラフィーは、陰イオン交換クロマトグラフィーである。なお別の実施形態では、親和性クロマトグラフィーは、タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーであり、ウイルス不活性化ステップは、低ｐＨウイルス不活性化ステップであり、イオン交換クロマトグラフィーは、陰イオン交換クロマトグラフィーである。したがって、本方法の具体的な実施形態では、精製ステップは、（ｉ）タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィー、（ｉｉ）低ｐＨウイルス不活性化ステップ、（ｉｉｉ）陰イオン交換クロマトグラフィー、（ｉｖ）ウイルス濾過ステップ、及び（ｖ）限外濾過／透析濾過を含む。
【０５９７】
別の実施形態では、親和性クロマトグラフィーは、タンパク質Ｇ親和性クロマトグラフィーである。さらに別の実施形態では、ウイルス不活性化ステップは、溶媒／洗剤不活性化、低温殺菌、またはＵＶ不活性化、またはそれらの組み合わせであり得る。なお別の実施形態では、陰イオン交換クロマトグラフィーは、ＱまたはＤＥＡＥ等の市販の任意の陰イオン交換培地であり得る。さらに別の実施形態では、陰イオン交換クロマトグラフィーは、マルチモーダル陰イオン交換クロマトグラフィーである。
【０５９８】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示の様々な薬学的製剤を作製する方法は、製剤化ステップをさらに含む。
したがって、一実施形態では、本明細書に開示の様々な薬学的製剤を作製する方法は、（ａ）細胞を培地で培養することであって、細胞が、本明細書に提供される抗体またはその抗原結合断片の重鎖、軽鎖、または重鎖及び軽鎖の両方をコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上のポリヌクレオチドを含む、培養することと、（ｂ）培地を収集することと、（ｃ）培地を一連の精製ステップに供することであって、精製ステップが、（ｉ）タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィー、（ｉｉ）低ｐＨウイルス不活性化ステップ、（ｉｉｉ）陰イオン交換クロマトグラフィー、（ｉｖ）ウイルス濾過ステップ、及び（ｖ）限外濾過／透析濾過を含む、供することと、（ｄ）限外濾過／透析濾過ステップからの保持液を製剤化することと、を含む。
【０５９９】
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての専門的及び科学的用語は、本発明が属する当業者によって一般に理解されている意味と同じ意味を有する。本明細書に記載のものと同様または同等の方法及び材料が本発明の実施または試験で使用され得るが、好適な方法及び材料が本明細書に記載される。
【０６００】
本明細書に引用される全ての出願、刊行物、特許、及び他の参考文献、ＧｅｎＢａｎｋ引用及びＡＴＣＣ引用は、それらの全体が参照により組み込まれる。矛盾する場合、定義を含めて本明細書が優先される。
【０６０１】
本明細書で使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎｄ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が別途明確に示さない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「１つのペプチド配列」への言及は、複数のかかる配列を含むといった具合である。
【０６０２】
本明細書で使用されるとき、数値は、多くの場合、本文書全体を通して範囲形式で提示される。範囲形式の使用は、単に利便さ及び簡潔さのためであり、文脈が別途明確に示さない限り、本発明の範囲に対する柔軟性のない制限と解釈されるべきではない。したがって、範囲の使用は、文脈が別途明確に示さない限り、全ての可能な部分範囲、その範囲内の全ての個別の数値、ならびにかかる範囲内の整数を含む全ての数値または数範囲及び範囲内の値または整数の分数を明確に含む。この解釈は、範囲の幅にかかわらず、かつ本特許文書全体を通して、全ての文脈に適用される。したがって、例えば、９０〜１００％の範囲への言及は、９１〜９９％、９２〜９８％、９３〜９５％、９１〜９８％、９１〜９７％、９１〜９６％、９１〜９５％、９１〜９４％、９１〜９３％を含むといった具合である。９０〜１００％の範囲への言及は、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９５％、９７％等、ならびに９１．１％、９１．２％、９１．３％、９１．４％、９１．５％等、９２．１％、９２．２％、９２．３％、９２．４％、９２．５％等も含むといった具合である。
【０６０３】
加えて、１〜３、３〜５、５〜１０、１０〜２０、２０〜３０、３０〜４０、４０〜５０、５０〜６０、６０〜７０、７０〜８０、８０〜９０、９０〜１００、１００〜１１０、１１０〜１２０、１２０〜１３０、１３０〜１４０、１４０〜１５０、１５０〜１６０、１６０〜１７０、１７０〜１８０、１８０〜１９０、１９０〜２００、２００〜２２５、２２５〜２５０の範囲への言及は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０等を含む。さらなる例では、２５〜２５０、２５０〜５００、５００〜１，０００、１，０００〜２，５００、２，５００〜５，０００、５，０００〜２５，０００、２５，０００〜５０，０００の範囲への言及は、かかる値内のまたはかかる値を包含する任意の数値または範囲、例えば、２５、２６、２７、２８、２９・・・２５０、２５１、２５２、２５３、２５４・・・５００、５０１、５０２、５０３、５０４・・・等を含む。
【０６０４】
また、本明細書で使用されるとき、一連の範囲が本文書全体を通して開示される。一連の範囲の使用は、別の範囲を提供するために上限範囲及び下限範囲の組み合わせを含む。この解釈は、範囲の幅にかかわらず、かつ本特許文書全体を通して全ての文脈に適用される。したがって、例えば、５〜１０、１０〜２０、２０〜３０、３０〜４０、４０〜５０、５０〜７５、７５〜１００、１００〜１５０等の一連の範囲への言及は、５〜２０、５〜３０、５〜４０、５〜５０、５〜７５、５〜１００、５〜１５０、及び１０〜３０、１０〜４０、１０〜５０、１０〜７５、１０〜１００、１０〜１５０、及び２０〜４０、２０〜５０、２０〜７５、２０〜１００、２０〜１５０等の範囲を含むといった具合である。
【０６０５】
簡潔さのために、ある特定の略語が本明細書で使用される。一例は、アミノ酸残基を表すための単一文字略語である。アミノ酸及びそれらの対応する３つの文字及び単一文字略語は、以下の通りである。
【表１０】
2020512359.tif 000028
【０６０６】
本発明は、概して、多数の実施形態を説明するために肯定的言語を使用して本明細書に開示される。本発明は、物質または材料、方法ステップ及び条件、プロトコル、手技、アッセイまたは分析等の特定の主題が全体的または部分的に除外される実施形態も具体的に含む。したがって、本発明は本発明が含まないものに関して概して本明細書に表現されていないが、本発明に明確に含まれていない態様は、それにもかかわらず本明細書に開示される。
【０６０７】
本発明のいくつかの実施形態が説明されている。それにもかかわらず、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく様々な修正が加えられ得ることが理解されるであろう。したがって、以下の実施例は、特許請求の範囲に記載の発明の範囲を例証するよう意図されており、それを限定するようには意図されていない。
【実施例】
【０６０８】
本節（すなわち、第５節）の実施例は、限定するためではなく、例証として提供されている。
【０６０９】
６．１  実施例１：抗ＰＤ−１抗体の生成
６．１．１  抗ＰＤ−１抗体の生成
親ＰＤ−１−ＩｇＧ１  ｍＡｂを、ヒトＰＤ−１細胞外ドメイン（ＥＣＤ）抗原またはＣＨＯ−ｈＰＤ−１トランスフェクト細胞を使用してマウス免疫化法によって最初に生成した。ハイブリドーマプールの初期特徴付けにより、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）によって測定された可溶性抗原に対する約６ｎＭのＫＤを有する抗ヒトＰＤ−１抗体、ＰＤ−Ｌ１非遮断抗体、及びＰＤ−Ｌ２非遮断抗体（データ示さず）を産生するＰＤ１Ｓｕｂ１と指定されるサブクローンを特定した。ＰＤ１Ｓｕｂ１ハイブリドーマ由来のマウスＶＨ及びＶＬ遺伝子を配列決定し、最も近いＪ領域（それぞれ、ＩｇＨ  Ｊ６及びＩｇκＪ２）を利用して最も相同のヒトＶＨ及びＶＬフレームワーク遺伝子（それぞれ、ＩｇＨ１−ｆ及びＶκ４−１）のヒトγ１及びκ定常領域へのヒトＣＤＲグラフト化に使用した。ヒト生殖系列ＨＧ１  ＶＨ及びＶＬ領域のみでは、マウスＣＤＲ３セグメントをヒトＶＨ及びＶＬフレームワーク生殖系列遺伝子、それぞれ、ＩｇＨ  １−ｆ及びＶκ４−１に入れた。
【０６１０】
安定したＡＩＤ（活性化誘発デアミナーゼ）を有するＤｅｃｉｄｕｏｕｓ（商標）構築物におけるＣＤＲグラフト化ＨＧ１抗体または生殖系列ＨＧ１抗体のいずれかを発現する安定したＨＥＫ−２９３ｃ１８細胞株を、ＳＨＭ−ＸＥＬ（商標）親和性成熟プラットフォーム（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）での使用のために生成した。抗体可変ドメインにおける遺伝的多様性のインサイツ生成により、より高い親和性を有する親抗体の変異形を発現する細胞を得た。これらを、単量体または二量体ｈＰＤ−１を使用してフローサイトメトリーによって単離した。複数回の親和性精製及び選択ラウンドにより、６個のコリドー及び４５個のクローンを得た。追加の「インシリコＳＨＭ」事象に加えてこれらのクローンのサンガー及びディープ配列決定により、富化突然変異をＶＨＣＤＲ及びＶＬＣＤＲに組み込む部位特異的突然変異生成ラウンドがもたらされた。最も高い親和性結合を有する１２個の変異タンパク質を、ＰＤ−１への結合速度について、かつＣＨＯ細胞表面上に発現した全長ＰＤ−１への結合について、さらに生化学的に、生物物理学的に特徴付けた。精製抗体の機能的特徴付けを、２つのアッセイで行った：細胞表面ＰＤ−１への結合におけるＰＤ−Ｌ１競合、及び活性化ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞の再活性化からのＩＬ−２産生における阻害活性。
【０６１１】
これらの方法に基づいて、表９に示されるように、抗ＰＤ−１抗体ＰＤ１ＡＢ−１、ＰＤ１ＡＢ−２、ＰＤ１ＡＢ−３、ＰＤ１ＡＢ−４、ＰＤ１ＡＢ−５、またはＰＤ１ＡＢ−６を生成した。
表９．抗ＰＤ−１抗体の特徴付け
【表１１】
2020512359.tif 000029
【０６１２】
６．１．２  ヒトＰＢＭＣまたはヒト全血におけるＣＤ４＋再活性化アッセイ
ＰＤ−１発現を、３７℃で４８時間のＰＨＡ活性化によって白血球減少系（ＬＲＳ）から単離したヒトＰＢＭＣで誘発した。ＣＤ４＋Ｔ細胞を、ＣＤ４単離キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用してＰＢＭＣから精製し、抗ＣＤ３抗体または抗ＣＤ３抗体＋滴定抗ＰＤ−１抗体もしくはｈＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体を固定化した９６ウェル上に再プレーティングした。上清を、ＩＬ−２、ＩＦＮ−γ、及びＩＬ−１７サイトカイン決定のために２４時間及び４８時間時点で収集した。６つ全ての抗ＰＤ−１クローンは、表１０に示されるように、ＩＬ−２の場合、２０〜３６ｎＭの範囲、ＩＦＮ−γの場合、３４〜５８ｎＭの範囲、及びＩＬ−１７の場合、２７〜４１ｎＭの範囲に及ぶ、同様の阻害ＥＣ５０を示した。
表１０．ＰＢＭＣ再活性化アッセイにおける６つの主要な抗体のＴ細胞活性減弱の比較
【表１２】
2020512359.tif 000030
【０６１３】
その後、特定のＴ細胞機能の阻害を、ヒト全血マトリックスにおいて評価した。新たに採血してヘパリン化したヒト血液を、抗ＣＤ３抗体または抗ＣＤ３抗体＋滴定抗ＰＤ−１抗体もしくはｈＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体を固定化したウェル上にプレーティングした。２４時間及び４８時間時点で収集した血漿を、ＩＬ−２（２４時間）及びＩＦＮ−γ／ＩＬ−１７（４８時間）について測定した。３つの他の試験した抗体クローンと比較して、ＰＤ１ＡＢ−６は、表１１に示されるように、特異的ＩＬ−２（ＥＣ５０  ４．０＋０．９ｎＭ、ｎ＝４）、ＩＦＮ−γ（ＥＣ５０  ４．１＋２．２ｎＭ、ｎ＝２）、及びＩＬ−１７（ＥＣ５０  ３．６＋１．２ｎＭ、ｎ＝３）阻害において２〜３倍の効力増加を示した。
表１１．全血アッセイにおける４つの主要な分子のＴ細胞活性減弱の比較
【表１３】
2020512359.tif 000031
【０６１４】
６．１．３  細胞ベースのリガンド結合アッセイ
リガンド競合を評価するために、細胞結合アッセイを実行して、特定した６つの抗体クローンを評価した。簡潔には、片対数濃度１００ｎＭ〜１００ｐＭの個別の抗体クローンを１０ｎＭのＤｙＬ６５０−ＰＤ−Ｌ１と予混合した後、氷上で４５分間にわたってヒトＰＤ−１−ＣＨＯ細胞（２×１０５細胞）に添加した。その後、細胞を洗浄した後、ＤｙＬ６５０−ＰＤ−Ｌ１結合をＢＤ  ＦＡＣＳＡｒｒａｙ（商標）で分析し、アイソタイプ対照抗体と比較した蛍光強度中央値を各々の濃度でプロットした。図１Ａ〜１Ｂに示されるように、ＰＤ１ＡＢ−６、ならびに親クローンＰＤ１ＡＢ−１を含む他の５つのクローンは、ＤｙＬ６５０−ＰＤ−Ｌ１結合に対する有意な競合を示さず、最大１００ｎＭであった。対照的に、ＭＤＸ  ４Ｈ１（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）、アンタゴニスト、リガンド遮断、ＰＤ−１抗体は、標識ＰＤ−Ｌ１結合を用量依存的に遮断し、約５〜１０ｎＭの結合ＥＣ５０をもたらした。
【０６１５】
６．１．４  エピトープマッピング
ＰＤ−１エピトープを、１．８Å分解能でヒトＰＤ−１細胞外ドメインと複合体を形成したＰＤ１ＡＢ−６  Ｆａｂの結晶構造を解くことによって決定した。ＰＤ−１：ＰＤ１ＡＢ−６  Ｆａｂ相互作用部位は、ＰＤ−１：ＰＤ−Ｌ１相互作用部位に対してＰＤ−１の遠位側で生じ（図２）、ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ１ＡＢ−６がＰＤ−１結合について競合しないという観察と一致する。ＰＤ１ＡＢ−６  ＦａｂがＰＤ−１  βシートに対して結合し、実質的な相互作用が残基１００〜１０５で構成されたＰＤ−１ループで形成されている（図３）。ＰＤ−１におけるＲ１０４は、Ｆａｂ  ＣＤＲ  Ｈ１における残基との複数の極性相互作用に関与する。隣接する残基Ｇ１０３もＦａｂと堅固な極性相互作用を生み出す。Ｒ１０４もＧ１０３もいずれもマウスＰＤ−１で突然変異し（それぞれ、ヒスチジン及びアルギニン）、ＰＤ１ＡＢ−６のマウスＰＤ−１への結合の欠如についての構造的論理的根拠を提供する。ＰＤ−１と相互作用するＰＤ１ＡＢ−６  Ｆａｂ領域は、ＣＤＲ  Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｌ１、及びＬ２である。ＰＤ−１：ＰＤ１ＡＢ−６  Ｆａｂ相互作用の原子詳細を表１２に記載する。ＰＤ−１エピトープと相互作用するＨＣ残基及びＬＣ残基を記載する。略語は、以下の通りである。ＨＢ−水素結合、ＨＹＤ−疎水性相互作用、ＩＯＮ−イオン相互作用。
表１２．ＰＤ１ＡＢ−６：ＰＤ−１相互作用の原子詳細
【表１４】
2020512359.tif 000032
【０６１６】
６．１．５  ＰＤ１ＡＢ−６の変異形の生成
ＰＤ１ＡＢ−６  ＩｇＧ１抗体（ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１）及びＦｃ修飾ＩｇＧ４ＰＥ抗体（ＰＤ１ＡＢ−６−４ＰＥ）を生成した。ＰＤ１ＡＢ−６−４ＰＥを、著しく低いＦｃ媒介性エフェクター機能を有するように設計した。ＣＨ領域であるγ４は、２つの非標準アミノ酸置換Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ｅを含む（ＥＵ番号付けシステム、Ｋａｂａｔ  ａｎｄ  Ｗｕ  １９９１）。ＩｇＧ４のヒンジにおける一般的なアミノ酸タイプであるセリン２２８を、ＩｇＧ４ではあまり一般的に観察されないアミノ酸タイプであり、かつＩｇＧ１で高度に保存されたアミノ酸であるプロリンに変化させた。この変化により、「半抗体」のレベルが著しく低下し、これは、ＩｇＧ４−サブクラス抗体の産生において一般的に観察される。Ｆｃγ受容体との重鎖相互作用に関与する重要なアミノ酸のうちの１つであるロイシン２３５をグルタミン酸に変化させた。Ｌ２３５Ｅ置換により、γ４鎖のＦｃγＲに対する相互作用が著しく低下し、ＰＤ−１発現正常細胞のＡＤＣＣ及びＦｃ受容体媒介性排除を排除した。加えて、γ４重鎖による補体結合の生来の欠如により、ＰＤ１ＡＢ−６−４ＰＥ分子がＣＤＣ機能を欠いた状態にする。２つの他の変異形を、ＣＤＣを低減させるためにＣ１ｑに対する結合親和性を最低限に抑えるように生成した（図４）。ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３を生成するために、ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１におけるリジン３２２をアラニンで置換した。Ｋ３２２Ａ置換がヒトＩｇＧ１  Ｆｃを有するキメラ抗体であるリツキシマブでのＣ１ｑ結合を抑制することが報告されている（Ｉｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４（８）：４１７８−８４）。ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐを、ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１のＦｃ骨格をＳ２２８Ｐ置換でＩｇＧ４のＦｃ骨格に変換することによって生成した。ＩｇＧ４のヒンジにおける一般的なアミノ酸タイプであるセリン２２８を、ＩｇＧ４ではあまり一般的に観察されないアミノ酸タイプであり、かつＩｇＧ１で高度に保存されたアミノ酸であるプロリンに変化させた。この変化により、半抗体のレベルが著しく低下し、これは、ＩｇＧ４−サブクラス抗体の産生において頻繁に観察される。ＩｇＧ４抗体が減弱したＡＤＣＣ及びＣＤＣ機能を有することが報告されている（Ｏｖｅｒｄｉｊｋ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８９（７）：３４３０−３８）。可変領域を変化させることなく、全ての変化をＣＨ領域で行った。ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１の重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を、それぞれ、ＬＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１及びＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１とラベル付けした（図４）。２つの重鎖変異形には、ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ及びＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ４Ｐが含まれる。軽鎖ＬＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１を３つの個別の重鎖と対合して、それぞれ、ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３、及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐを生成する。
【０６１７】
６．１．６  細胞株の開発及び一過性トランスフェクションからの抗体の製造
６．１．６．１  重鎖及び軽鎖の分子クローニング
ＩｇＧ  ＬＣ発現ベクターｐＦＵＳＥ２ｓｓ−ＣＬＩｇ−ｈｋ及びＩｇＧ  ＨＣ発現ベクター  ｐＦＵＳＥｓｓ−ＣＨＩｇ−ｈＧ１をＩｎｖｉｖｏＧｅｎ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）から購入した。
【０６１８】
ＬＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１をコードするアミノ酸配列（図４）を、哺乳類細胞におけるタンパク質発現のためのコドン最適化遺伝子配列に変換した。制限酵素部位である５’末端のＥｃｏＲＩ及び３’末端のＮｈｅＩを最適化遺伝子に付加した。ＥｃｏＲＩ部位及びＮｈｅＩ部位を有する最適化ＬＣ遺伝子を合成して、挿入断片を産生した。ＩｇＧ  ＬＣ発現ベクターｐＦＵＳＥ２ｓｓ−ＣＬＩｇ−ｈｋをＥｃｏＲＩ及びＮｈｅＩで消化し、およそ３．５ｋｂのｐＦＵＳＥ２ｓｓ−ＣＬＩｇ−ｈｋ−ＥｃｏＲＩ／ＮｈｅＩ断片を産生した。挿入断片をｐＦＵＳＥ２ｓｓ−ＣＬＩｇ−ｈｋ−ＥｃｏＲＩ／ＮｈｅＩ断片にライゲートし、ｐＦＵＳＥ２ｓｓ−ＣＬＩｇ−ｈｋ−ＬＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１であるｐＪＳ−１を産生した。
【０６１９】
ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ、またはＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ４Ｐをコードするアミノ酸配列（図４）を、哺乳類細胞におけるタンパク質発現のためのコドン最適化遺伝子配列に変換した。終止コドン（ｐＦＵＳＥｓｓ−ＣＨＩｇ−ｈＧ１におけるＨＣ配列の３’末端の後）から３’末端のＨｐａＩまでの定常領域である５’末端の制限酵素部位ＥｃｏＲＩを付加した。ＥｃｏＲＩ部位及びＨｐａＩ部位を有する最適化遺伝子を合成して、それぞれ、ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ、及びＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ４Ｐをコードする遺伝子を含む挿入断片を産生した。ＩｇＧ  ＨＣ発現ベクターｐＦＵＳＥｓｓ−ＣＨＩｇ−ｈＧ１をＥｃｏＲＩ及びＨｐａＩで消化し、およそ３．４ｋｂのｐＦＵＳＥｓｓ−ＣＨＩｇ−ｈＧ１−ＥｃｏＲＩ／ＨｐａＩ断片を産生した。挿入断片をｐＦＵＳＥｓｓ−ＣＨＩｇ−ｈＧ１−ＥｃｏＲＩ／ＨｐａＩ断片にライゲートし、それぞれ、ｐＦＵＳＥｓｓ−ＣＨＩｇ−ｈＧ１−ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、ｐＦＵＳＥｓｓ−ＣＨＩｇ−ｈＧ１−ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１−Ｋ３２２Ａ、及びｐＦＵＳＥｓｓ−ＣＨＩｇ−ｈＧ１−ＨＣ＿ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ４Ｐである、ｐＪＳ−２、ｐＪＳ−３、及びｐＪＳ−１２を産生した。
【０６２０】
６．１．６．２  タンパク質産生
ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３、及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐの３つ全ての変異形を、インビトロ及びインビボ有効性研究のために、振盪フラスコ内で、実験室規模で製造した。非ＧＬＰ毒物研究及びさらなる特徴付けのためのＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ及びＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３抗体を、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）製のＦｒｅｅＳｔｙｌｅ（商標）ＭＡＸ  ＣＨＯ発現系及びＥｘｐｉ２９３（商標）発現系を使用して５０Ｌのバイオリアクター（５０Ｌの撹拌槽及び５０Ｌのウェーブバッグ）内で製造した。ＦｒｅｅＳｔｙｌｅ（商標）ＭＡＸ  ＣＨＯ発現系を、製造業者の標準プロトコルを使用したＣＨＯ−Ｓ細胞の一過性トランスフェクションに使用した。Ｅｘｐｉ２９３（商標）発現系を、製造業者の標準プロトコルを使用したＥｘｐｉ２９３細胞の一過性トランスフェクションに使用した。３：２比の軽鎖：重鎖を、トランスフェクション中、１Ｌの培養物当たり１ｍｇでＤＮＡ混合物に使用した。細胞を５０Ｌのバイオリアクター（３７℃）内に５０万細胞／ｍＬで播種し、一晩増殖させて１００万細胞／ｍＬにした。その後、細胞を、製造業者の標準プロトコルを使用してトランスフェクトした。トランスフェクション後１日目に、１ｍＭ酪酸ナトリウム＋１ｖ／ｖ％フィード培地（Ｙｅａｓｔｏｌａｔｅ，ＣＨＯ  ＣＤ  ＥｆｆｉｃｉｅｎｔＦｅｅｄ（商標）Ａ，Ｇｌｕｔａｍａｘ  ａｎｄ  Ｇｌｕｃｏｓｅ）をバイオリアクターに添加し、温度を３２℃に下げた。４０Ｌの細胞＋添加物を５０Ｌの撹拌槽に播種し、２５Ｌの細胞＋添加物を５０Ｌのウェーブバイオリアクターに播種した。細胞生存率及び力価を毎日監視し、細胞生存率が５０％未満に下がったときにバッチを収集した。Ｖｉ−Ｃｅｌｌ（商標）機器を生存率分析に使用し、抗ヒトＩｇＧセンサーを装備したＯｃｔｅｔ  ＲＥＤを、精製抗体を標準曲線に使用した力価分析に使用した。細胞及び上清を、ＧＥ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓのデプス濾過及び滅菌カラムを使用して収集し、ＵＬＴＡ  Ｐｒｉｍｅ  ＧＦ  ５μｍカプセル、続いて、ＵＬＴＡ  Ｐｕｒｅ  ＨＣ  ０．６／０．２μｍ滅菌カプセルをデプス濾過に使用した。浄化した上清を、クロスフロー濾過を使用して５〜８倍に濃縮し、５０ＫｄカットオフＫｖｉｃｋ（商標）Ｌａｂ  ＳＣＵ（ＧＥ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）をＴＦＦに使用した。収集時に得た各々のアイソタイプの力価及び最大細胞密度を表１３に示す。
表１３．フィードバッチバイオリアクター（５０Ｌ）における生産性
【表１５】
2020512359.tif 000033
【０６２１】
６．１．６．３  タンパク質精製
産生した材料の精製を、タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィー及び低ｐＨウイルス不活性化を含む一連の下流精製ステップ、続いて、ＩＥＸ相互作用（Ｃａｐｔｏ（商標）Ａｄｈｅｒｅ  ＆  Ｃａｐｔｏ（商標）ＳＰ  ＩｍｐＲｅｓ）クロマトグラフィーステップを用いて行った。精製抗体を、（１０ｍＭのコハク酸（ｐＨ５．５）、９％のスクロース、０．０５％のＰＳ２０）緩衝液に対する緩衝液交換によってバルク製剤化し、０．２μｍフィルターを通して濾過し、アリコートする。
【０６２２】
タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーを、産物を捕捉し、かつ工程関連不純物を除去するように設計されたＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲｅ（商標）を用いて行った。その後のウイルス不活性化ステップを酸性条件下（４５分間にわたってｐＨ３．４±０．１）で行い、続いて、不活性化プールをｐＨ５．５±０．１に条件付けした。ウイルス不活性化後、陰イオン交換体を、Ｃａｐｔｏ（商標）Ａｄｈｅｒｅを使用した中間研磨ステップに貫流モードで使用して、凝集体、ＤＮＡ、宿主細胞タンパク質、及び内毒素等の不純物を除去した。産物プールをｐＨ６．５±０．１に条件付けし、伝導率を次の工程ステップ前に２ｍＳ／ｃｍに下げた。陽イオン交換体Ｃａｐｔｏ（商標）ＳＰ  ＩｍｐＲｅｓを研磨ステップとして使用し、産物を１０ｍＳ／ｃｍで分解した。その後、抗体をストック溶液（１０ｍＭのコハク酸、９％のスクロース、０．０５％のＰＳ２０、ｐＨ５．５）中で緩衝液交換し、２０ｍｇ／ｍＬに濃縮した。その後、産物プールを０．２μｍフィルターに通して濾過し、アリコートした。
【０６２３】
６．１．７  細胞ベースのＰＤ−１結合アッセイ
ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１結合を、ヒトＰＤ−１及びカニクイザルＰＤ−１を発現するＣＨＯ細胞（図５Ａ〜５Ｂ）、ならびに初代ヒトＰＢＭＣ（図６）及びカニクイザルＰＢＭＣ（図７）で評価した。
【０６２４】
ヒトＰＤ−１及びカニクイザルＰＤ−１を発現するＣＨＯ細胞を、４℃で３０分間にわたって様々な濃度の非標識ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１抗体でインキュベートし、洗浄し、４℃で３０分間にわたって抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）で染色した。ヒトＩｇＧ１  Ｆｃを、陰性対照として使用した。ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１は、ＣＨＯ細胞上に発現したヒトＰＤ−１に０．４ｎＭのＥＣ５０で結合し、ＣＨＯ細胞上に発現したカニクイザルＰＤ−１に０．８ｎＭのＥＣ５０で結合する（図５Ａ〜５Ｂ）。
【０６２５】
ヒトＰＢＭＣを１μｇ／ｍＬのプレート結合抗ＣＤ３で３日間にわたって活性化して、Ｔ細胞におけるＰＤ−１発現を誘発した。細胞を４℃で３０分間にわたって様々な濃度の非標識ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１抗体でインキュベートし、洗浄し、４℃で３０分間にわたって抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）で染色した。ヒトＩｇＧ１  Ｆｃを、陰性対照として使用した。幾何学的ＭＦＩをＣＤ４＋Ｔ細胞で決定した。２体のヒト健常ドナーのうちの一方のデータを図６に示す。
【０６２６】
カニクイザルＰＢＭＣを１μｇ／ｍＬの抗カニクイザルＣＤ３／ＣＤ２８で２日間にわたって活性化して、Ｔ細胞におけるＰＤ−１発現を誘発した。細胞を４℃で３０分間にわたって様々な濃度の非標識ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１抗体でインキュベートし、洗浄し、４℃で３０分間にわたって抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で染色した。ヒトＩｇＧ１  Ｆｃを、陰性対照として使用した。幾何学的ＭＦＩをＣＤ４＋Ｔ細胞で決定した。２体のカニクイザルドナーのうちの一方のデータを図７に示す。
【０６２７】
６．１．８  Ｆｃ受容体結合アッセイ
変異形生成の目的を確認するために、すなわち、低下したＦｃγＲ媒介性エフェクター機能、ＦｃγＲのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ変異形への結合を２つの方法論で分析した。第一に、結合を、Ｃｉｓｂｉｏ  Ｔａｇ−ｌｉｔｅ（登録商標）検出を使用した置換ＦｃγＲアッセイで試験した（図８Ａ〜８Ｄ）。テルビウム（Ｔｂ）ドナー色素で事前に標識された特定のＦｃγＲ（ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＩａ、またはＦｃγＲＩＩｂ）を発現するように操作されたＨＥＫ２９３細胞を、基準対照、またはＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３、及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ抗体と１００００ｎＭ〜０．１ｐＭの範囲の対数濃度で混合した。その後、第２のヒト−ｈＩｇＧ−ｄ２（アクセプター）を添加して、受容体結合について競合させた。Ｔｂ−ｄ２近接によって生成された蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）シグナルの検出を測定し、ＰＤ１ＡＢ−６変異形結合ＦｃγＲに反比例する。図８Ａ〜８Ｄに示されるように、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３変異形は、ＡＤＣＣ活性に関与するＮＫ細胞における低親和性受容体であるＦｃγＲＩＩＩａ（ＣＤ１６）への結合の低下を示した。ＦｃγＲＩ（顆粒球、樹状細胞（ＤＣ）、または単球上に発現した）への結合は、親ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１分子と同様であった。
【０６２８】
第二に、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３変異形及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ変異形の両方をＦＡＣＳベースの結合アッセイで試験した（図９Ａ〜９Ｃ）。簡潔には、ＦｃγＲＩ−ＣＨＯまたはＦｃγＲＩＩＩａＶ１５８−ＣＨＯ発現細胞株を分離し、洗浄した後、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３変異形及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ変異形と氷上で１時間にわたって異なる濃度で混合した。ＰＤ１ＡＢ−６変異形結合細胞を、氷上でさらにｌ時間にわたって標識ＰＥコンジュゲートＦ（ａｂ’）２ヤギ抗ヒト二次抗体で検出し、洗浄し、固定した後、ＦＡＣＳで分析し、平均蛍光強度を各々の濃度でプロットした。ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ変異形は、それぞれ、ＦｃγＲＩ株及びＦｃγＲＩＩＩａ株に対して著しく高い結合ＥＣ５０（１５倍超及び２１倍超）に戻った（図９Ａ〜９Ｃ）。
【０６２９】
６．１．９  インビトロＡＤＣＣアッセイ
ＡＤＣＣを誘発するＰＤ１ＡＢ−６変異形の能力を、健常ドナー由来のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞及びＰＤ−１発現標的細胞を伴う共培養アッセイで評価した。ＰＤ１ＡＢ−６変異形で事前に処理した標的細胞（ＮＣＩ−ＯＣＩ−Ｌｙ３）を活性化ＮＫ細胞と４時間にわたって共培養した。上清ＬＤＨ濃度を使用して、特異的溶解を計算した。ＥＣ５０（ｎＭ）を、Ｐｒｉｓｍを使用して計算した。エラーバーは、三連実験を表す。データは、４体の個別の健常ドナーのうちの２つの代表である。図１０Ａ〜１０Ｂに示されるように、ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１の滴定が用量依存的ＡＤＣＣを誘発した一方で、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３は、ＡＤＣＣ活性の低減を示した。
【０６３０】
６．１．１０  インビトロＣＤＣアッセイ
ＣＤＣを誘発するＰＤ１ＡＢ−６変異形の能力を、ＰＤ−１発現ＣＤ２０＋ＮＣＩ−ＯＣＩ−Ｌｙ３細胞を使用して評価した。抗体で事前に処理した標的細胞（ＮＣＩ−ＯＣＩ−Ｌｙ３）を、５％ウサギ補体を補充した無血清培地で４時間にわたって培養した。細胞溶解を、ＦＡＣＳによって７−ＡＡＤ＋細胞で決定した。データは、３つの独立した実験：（ｉ）ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１及び抗ＣＤ２０  ＩｇＧ１のＣＤＣ活性、（ｉｉ）ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１及びＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３のＣＤＣ活性、（ｉｉｉ）ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ及び市販のマウス抗ＰＤ−１  ＩｇＧ１抗体のＣＤＣ活性の代表である。図１１に示されるように、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３は、一貫してＣＤＣを誘発しなかった（ｎ＝３）。親ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１及びＰＤ１ＡＢ−６−４ＰもＣＤＣを誘発しなかった。これは、抗ＣＤ２０  ＩｇＧ１が５％ウサギ補体の存在下でＮＣＩ−ＯＣＩ−Ｌｙ３細胞に用量依存的ＣＤＣを繰り返し誘発したため、補体死滅に対する標的細胞株の抵抗性のためではなかった。
【０６３１】
６．２  実施例２：活性アッセイ
６．２．１  ヒトＴ細胞活性化アッセイ
Ｔ細胞エフェクター機能の阻害についてのＰＤ１ＡＢ−６変異形の機能的評価を２つの方法で行った。一方のアッセイでは、末梢血単核細胞を事前に活性化してＰＤ−１を発現させ、可溶性ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の存在下で再刺激した（図１２）。健常ドナー由来の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）をマイトジェンＰＨＡで４８時間にわたって事前に活性化して、ＰＤ−１発現を増加させた。その後、これらの細胞を、１００ｎＭ〜０．１ｎＭの範囲の最終濃度にわたって、希釈したＰＤ１ＡＢ−６変異形の存在下で、抗ＣＤ３コンジュゲートＤｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）を使用して再刺激した。Ｔ細胞活性化を、刺激後２４時間時点での培養上清中のＩＬ−２レベルを使用して測定した。図１２に示されるように、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及び２つの他の変異形は、このアッセイにおいて５〜２５ｎＭのＥＣ５０で強力なＴ細胞阻害活性を示した。
【０６３２】
第２のアッセイを、Ｔ細胞機能を阻害する際にＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の直接エクスビボ測定に使用した（図１３）。これを、新鮮なヒト全血を抗ＣＤ３＋／−ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３と共被覆した９６ウェルプレートに直接プレーティングし、ＩＬ−１７及びＩＦＮ−γレベルをＴ細胞活性化の読み出しとして測定することによって行った。ＣＴＬＡ４Ｉｇ（Ｏｒｅｎｃｉａ（登録商標））をこれらのアッセイで陽性対照として使用し、ヒトＩｇＧ  Ｆｃ断片を陰性対照として使用した。図１３に示されるように、全体的に、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３は、ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐよりも有効性が良好である傾向があった。陰性対照ｈＩｇＧ  Ｆｃは、１００ｎＭ超のＥＣ５０で活性を示さなかった。
【０６３３】
６．２．２  カニクイザル交差反応アッセイ
主要なＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３との機能的カニクイザル交差反応の決定を、ヒト試料と同様に、示される抗カニクイザルＣＤ３、ＣＤ２８、及びＰＤ１ＡＢ−６変異形で活性化した新たに単離したカニクイザルＰＢＭＣを使用して行った。ＣＴＬＡ４Ｉｇをこれらのアッセイで陽性対照として使用し、ｈＩｇＧ１  Ｆｃを陰性対照として使用した。培養上清を、カニクイザルＩＬ−２  ＭＳＤアッセイを使用したサイトカイン決定のために４８時間後に除去した。表１４に示されるように、これらのアッセイは、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３がカニクイザルＴ細胞サイトカイン分泌を陽性対照ＣＴＬＡ４Ｉｇに匹敵するレベルまで減弱させ、活性がヒトアッセイで見られる活性に匹敵したことを実証した。
表１４．カニクイザルＰＢＭＣアッセイにおけるＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３活性
【表１６】
2020512359.tif 000034
【０６３４】
６．２．３  インビトロ作用機構
ＣＤ３及びＣＤ４等のＴ細胞表面分子に結合するいくつかの抗体は、シグナル伝達及びそれらの分子のその後の表面発現の低下をもたらす。ＰＤ１ＡＢ−６抗体がＰＤ−１を介してアゴニストシグナルを提供するように設計されているため、インビトロでのＰＤ１ＡＢ−６処理後のＰＤ−１発現を評価することが目的であった。
【０６３５】
６．２．３．１  ＰＤ１ＡＢ−６処理後の低下したＰＤ−１発現
異なるドナー由来のヒトＰＢＭＣを、様々な濃度の可溶性対照ＩｇＧ１またはＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１を有する１μｇ／ｍＬプレート結合抗ＣＤ３＋０．２５μｇ／ｍＬプレート結合抗ＣＤ２８で活性化した。４時間〜７２時間インキュベートした後、細胞をＣＤ３、ＣＤ４５ＲＯ、及びＰＤ−１で染色して、Ｔ細胞におけるＰＤ−１発現を評価した。図１４Ａ〜１４Ｃは、４８時間のＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１処理後のヒトＣＤ３＋Ｔ細胞におけるＰＤ−１の発現の低下を示す。ＰＤ−１発現の分析は、ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１処理がＴ細胞表面のＰＤ−１発現の低下をもたらしたことを示した（図１４Ａ〜１４Ｂでは１体のドナーの代表的なヒストグラム、図１４Ｃでは３体のドナー及び様々な抗体濃度にわたる４８時間時点での平均蛍光強度の分析）。ＰＤ−１低下は、ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１とのインキュベーションの早ければ４時間後に見られた。表面ＰＤ−１発現の低下は、ＰＤ−１を介するＰＤ１ＡＢ−６誘発性シグナル伝達のためである可能性が高く、Ｔ細胞受容体シグナル伝達で観察された機構と同様の機構を介した（Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １２（２）：１６１−７０）。
【０６３６】
６．３  実施例３：ＰＤ１ＡＢ−６変異形の物理化学的特徴付け
アミノ酸配列に基づくＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ変異形の理論的分子量、等電点、及び吸光係数を表１５に提供する。分子量は、抗体のアミノ酸部分のみを表し、グリコシル化及び化学修飾に関連した質量は含まない。
表１５．ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐの理論的物理化学的特性
【表１７】
2020512359.tif 000035
【０６３７】
６．３．１  ＵＶスペクトル
ＰＤ−１抗体変異形のＵＶスペクトルをＮａｎｏＤｒｏｐ（商標）２０００ｃ  ＵＶ−Ｖｉｓ分光光度計（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で測定し、典型的なタンパク質吸収スペクトルを示した。
【０６３８】
６．３．２  タンパク質濃度
Ａ２８０による濃度：抗体のタンパク質濃度を、ＮａｎｏＤｒｏｐ（商標）２０００ｃ  ＵＶ−Ｖｉｓ分光光度計を使用して波長２８０ｎｍでの吸収（Ａ２８０）によって測定した。１．５８ｍＬ／ｍｇ／ｃｍの値をモル吸光係数に使用した。
【０６３９】
ＢＣＡによる濃度：また、抗体のタンパク質濃度を、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ製のＢＣＡ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ（カタログ番号２３２５０）で標準プロトコルを使用して測定した。ＢＳＡを、０．１〜１ｍｇ／ｍＬの範囲の標準タンパク質として使用した。Ａ２８０によって測定された濃度は、ＢＣＡアッセイによって測定された濃度と十分一致している。
【０６４０】
６．３．３  ＳＤＳ−ＰＡＧＥによる特徴付け
標準の還元及び非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル電気泳動及びキャピラリー電気泳動を、ＨＥＫ２９３細胞に発現し、かつ非ＧＬＰ毒物研究で使用したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ原薬材料上で行った。さらに、還元及び非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル電気泳動及びキャピラリー電気泳動を、ＣＨＯ細胞に発現したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ材料上で行った。いずれの変異形でも著しい凝集または断片化は観察されなかった。重鎖も軽鎖もいずれもインタクトであることが分かった。ＨＥＫ２９３細胞及びＣＨＯ細胞で発現した材料で有意差は観察されなかった（データ示さず）。
【０６４１】
６．３．４  サイズ排除クロマトグラフィーによる特徴付け
産生を通じて、非ＧＬＰ毒物原薬において、かつ製剤及び安定性試験中に、ＳＥＣを使用して、２つの変異形の単量体、高分子量種（ＨＭＷＳまたは凝集体）、及び低分子量種（断片のＬＭＷＳ）の分率を定量化した。ＥＢＤ  ＳＥＣプラットフォーム法を使用した。ピークの同一性を、インライン多角光散乱検出器を使用して確認した。ＨＥＫ２９３細胞に発現し、かつ非ＧＬＰ毒物研究で使用したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ原薬材料のＳＥＣ結果を表１６に列記する。ＣＨＯ細胞に発現した２つの変異形の結果も比較のために列記する。表１６に提示されるデータは、非ＧＬＰ毒物研究で使用したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３が２．５パーセントのＨＭＷＳパーセントを有することを示す。ＭＡｂのうちのいずれでもＬＭＷＳは検出されなかった。ＨＥＫに発現したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３とＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐとの間に初期ＳＥＣプロファイルの有意差はない。ＣＨＯ細胞に発現した材料で観察されたＨＭＷＳのわずかな増加は、最終製剤化中の材料の取扱いによるものである。
表１６．ＰＤ１ＡＢ−６  ＭＡｂ変異形のＳＥＣ−ＨＰＬＣプロファイル
【表１８】
2020512359.tif 000036
＊ＮＤ＝検出されず
【０６４２】
６．３．５  質量分析
還元した抗体由来のインタクト重鎖及び軽鎖の質量スペクトルを測定した。抗体をＰＮＧａｓｅで処理し、その後、室温で１２０分間にわたる２０ｍＭのＴＣＥＰインキュベーションで還元した。Ｐｉｅｒｃｅ（登録商標）Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ  Ｒｅｍｏｖａｌ  Ｓｐｉｎ  Ｃｏｌｕｍｎを使用してポリソルベート２０を試料から除去し、Ａｇｉｌｅｎｔ  ４２００  ＥＳＩ−ＴＯＦを使用して試料をＬＣ／ＭＳで実行した。２つの変異形の質量を表１７に示す。
表１７．ＰＤ１ＡＢ−６変異形の測定された分子量
【表１９】
2020512359.tif 000037
【０６４３】
６．３．６  等電点電気泳動
等電点（ｐＩ）を決定するための等電点電気泳動（ＩＥＦ）を、標準のゲルベースの方法を使用して、ＨＥＫ２９３細胞に発現し、かつ非ＧＬＰ毒物研究で使用したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ原薬材料について行った。さらに、ＩＥＦをＣＨＯ細胞に発現した材料上で行った。ＨＥＫ２９３及びＣＨＯに発現したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の測定されたｐＩは、それぞれ、７．８及び７．８である（データ示さず）。これらの結果は、６．３以下のｐＨでＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３を製剤化することができたことを示唆する。
【０６４４】
比較のために、ＨＥＫ２９３及びＣＨＯに発現したＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐの測定されたｐＩは、それぞれ、７．５及び７．６である（データ示さず）。
【０６４５】
６．３．７  Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）結合分析
精製ＰＤ１ＡＢ−６変異形抗体を、捕捉法を使用してヒトＰＤ１抗原への結合についてＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００で分析した。Ｆｃ特異的抗ヒトＩｇＧをＦｃ２に固定化し、Ｆｃ１を基準チャネルとしてブランクのまま残した。精製ＰＤ１抗体を抗ヒトＩｇＧに捕捉し、内部産生されたヒトＰＤ１抗原（ＰＤ１＿００２）を、１００ｎＭ〜２００ｐＭの２倍希釈系列を使用して両方のチャネル上に流して、結合速度を決定した。使用したＰＤ−１は、封入体としてＥ．Ｃｏｌｉに発現し、かつリフォールディングされたヒトＰＤ−１（残基３２〜１６０）の細胞外ドメインであった。表面を、３Ｍ塩化マグネシウムを使用して各々の抗原濃度間で再生した。ＰＤ１ＡＢ−６−ＩｇＧ１、ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ、及びＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の結合速度、ならびにｋｏｎ値、ｋｏｆｆ値、及びＫＤ値の例を図１５Ａ〜１５Ｃに示す。３つ全ての変異形は、ＰＤ−１抗原と同様の会合速度及び解離速度を有し、１９〜２２ｎＭという同等のＫＤ値であった。
【０６４６】
６．３．８  示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）
示差走査熱量測定法を行って、２ｍｇ／ｍＬの抗体濃度で１０ｍＭのコハク酸緩衝液（ｐＨ５．５）、９％のスクロース、０．０５％のポリソルベート２０中でＮａｎｏＤＳＣ（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）を使用して、ＨＥＫ２９３及びＣＨＯ細胞に発現したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐの融点を決定した（図１６）。ＣＨＯに発現した野生型ＩｇＧ１を、比較のために２５ｍＭのＮａＣｌを含有する２５ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）中で試験した。３つの融解転移が全てのＰＤ１ＡＢ−６変異形で観察された。変異形のＦａｂ  Ｔｍは、７６〜７９℃の範囲である。ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３のＦａｂ  Ｔｍは７９℃であり、高い熱安定性を示し、野生型の熱安定性と同様である（表１８）。ＨＥＫ２９３及びＣＨＯ細胞に発現したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３のＴｍ間に有意差はない。
表１８．示差走査熱量測定法によって測定されたＰＤ１ＡＢ−６  ＭＡｂの転移温度
【表２０】
2020512359.tif 000038
＊ＮＡ＝該当なし（試験実行せず）
【０６４７】
６．３．９  内毒素
内毒素を、ＬＡＬ  ｂａｓｅｄ  Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｅｎｄｏｓａｆｅ（登録商標）−ＰＴＳ（商標）を使用して測定した。使用した全ての抗体は、０．０５ＥＵ／ｍｇ未満の内毒素レベルを有した。具体的には、非ＧＬＰカニクイザル毒性研究に使用した抗体は、０．０３ＥＵ／ｍｇの内毒素レベルを有した。
【０６４８】
６．３．１０  溶解性
ＰｒｏＢｉｏＧｅｎ  ＡＧ（Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）でＣＨＯ細胞に発現させたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐのおよその溶解性を、限外濾過によって決定した。１０ｍＭのコハク酸緩衝液（ｐＨ５．５〜６．０）、９％のスクロース中のＭＡｂ試料を、５０ＫＤのＰＥＳ膜を使用して遠心分離によって濃縮した。ＣＨＯ細胞に発現した試料の見かけの溶解性は、２７０ｍｇ／ｍＬ以上であった。ＰｒｏＢｉｏＧｅｎで発現した試料の見かけの溶解性は、１７０ｍｇ／ｍＬ以上であった。これらの結果は、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の溶解性が皮下（ＳＣ）製剤に好適であることを示す。
【０６４９】
６．３．１１  粘度／注射能力
高タンパク質濃度で増加した粘度は、ＳＣ投与を対象とした製剤の潜在的な問題である。一般に、許容される最大製品粘度は、２０ｃＰである。ＣＨＯ細胞に発現したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ試料の粘度を、ｍＶＲＯＣ（ＲｈｅｏＳｅｎｓｅ，Ｓａｎ  Ｒａｍｏｓ，ＣＡ）マイクロ流体チップベースの方法を使用して決定した。試料粘度を、１０ｍＭのコハク酸緩衝液（ｐＨ５．５〜６．０）、９％のスクロース中１７５ｍｇ／ｍＬのＭＡｂ濃度で測定した。ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の粘度は、１５〜１７ｃＰであった。これらの結果は、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３が、最大１７５ｍｇ／ｍＬの濃度での、１ｍＬ体積、流量６ｍＬ／分、１ｍＬシリンジ、及び２７ｇ１／２インチ針の標準ＳＣ送達条件を使用した投与に好適であることを示す。
【０６５０】
比較のために、ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐの粘度は、同じ濃度で２０〜２２ｃＰであった。
【０６５１】
６．３．１２  浸透圧
ＰｒｏＢｉｏＧｅｎでＣＨＯ細胞に発現し、かつ高タンパク質濃度で製剤化したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ試料の浸透圧を、凝固点降下法によって決定した。試験した製剤は、１０ｍＭのコハク酸緩衝液（ｐＨ５．５）、９％のスクロース中１００ｍｇ／ｍＬまたは１７５ｍｇ／ｍＬのタンパク質を含有した。ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の浸透圧は、１００ｍｇ／ｍＬ製剤の場合、３７９ｍＯｓｍ／ｋｇであり、１７５ｍｇ／ｍＬ製剤の場合、３８８ｍＯｓｍ／ｋｇであった。これらの結果は、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３が、ＳＣ投与に許容される浸透圧を有する高濃度で製剤化され得ることを示す。比較のために、ＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐの浸透圧は、１００ｍｇ／ｍＬ製剤の場合、３８７ｍＯｓｍ／ｋｇであり、１７５ｍｇ／ｍＬ製剤の場合、３９６ｍＯｓｍ／ｋｇであった。
【０６５２】
６．４  実施例４：予備製剤及び予備安定性研究
６．４．１  予備安定性及び予備製剤の要約
熱応力及び物理的応力（撹拌及び凍結融解）研究をＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ上で行い、長期保管及び取扱い責任を評価及び比較した。
【０６５３】
初期熱応力試験を、ｐＨ５．０、５．５、６．０、または６．５のコハク酸緩衝液中でＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ（ＨＥＫ２９３）の製剤上で行った。その後、より広範の熱応力試験を、同じｐＨ範囲の４つの異なる緩衝液中でＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３（ＣＨＯ）及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ（ＣＨＯ）の製剤上で行った。試験した緩衝液は、ｐＨ５．０、５．５、または６．０の酢酸緩衝液、ｐＨ５．０、５．５、６．０、または６．５のヒスチジン緩衝液、ｐＨ５．０、５．５、６．０、または６．５のコハク酸緩衝液、及びｐＨ５．０、５．５、６．０、または６．５のクエン酸緩衝液であった。全ての製剤は、２０ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの緩衝液、９％のスクロース、及び０．０５％のポリソルベート２０を含有した。これらの製剤を調製するために、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐを濃縮し、ｐＨ６．０で９％のスクロースを含有するこれらの４つの緩衝液の各々中で限外濾過によって緩衝液交換し、続いて、ポリソルベート２０を添加し、ＨＣｌ及び／またはＮａＯＨを使用してｐＨを調整して、所望の最終製剤ｐＨを得た。
【０６５４】
全ての研究において、製剤化した抗体の０．２５〜０．３５ｍＬを２ｃｃのＵＳＰ１型ホウケイ酸ガラスバイアル内に充填し、ＦｌｕｒｏＴｅｃ（商標）被覆栓で栓をし、密封した。試料を、様々な時点で、ＳＥＣによる凝集、波長３６０ｎｍでの吸収（Ａ３６０）による濁度、目視観察による可視微粒子、光学顕微鏡法によるサブビジブル微粒子、及び動的光散乱によるサブミクロン微粒子についてアッセイした。
【０６５５】
６．４．２  熱応力
熱応力研究において、バイアルを４０℃で保持し、対照は５℃で保持した。ＳＥＣデータに基づいて、４０℃及び５℃での単量体分解率を計算し、比較した。４０℃で最大８週間保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の分解率を図１７にプロットしており、５．５〜６．５の最適ｐＨ範囲を示す。サブミクロン粒径及び濁度の測定は、一般に、ＳＥＣ結果を確認する（図１８及び１９）。全ての製剤は、５℃で１２週間にわたって安定したままである（図２０）。ｐＨ５．５のコハク酸緩衝液は、２０ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤の場合、５℃で１年を超える予想保管安定性を提供する。
【０６５６】
６．４．３  凍結融解
初期凍結融解研究において、ＨＥＫ２９３及びＣＨＯ細胞に発現し、かつ１０ｍＭのコハク酸緩衝液またはヒスチジン緩衝液（ｐＨ５．５〜６．０）、９％のスクロース、及び０．００５〜０．０５％のポリソルベート２０中１０〜２０ｍｇ／ｍＬで製剤化したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ原薬の試料を、−８０℃／５℃で２回または３回の一日凍結融解サイクルに供した。これらの研究は、変異形の凝集状態に変化を示さなかった（表１９）。
表１９．−８０℃／５℃での一日凍結融解サイクル前及び後の異なる緩衝液中で製剤化したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐの単量体含有量
【表２１】
2020512359.tif 000039
【０６５７】
さらなる凍結融解研究を、ＰｒｏＢｉｏＧｅｎでＣＨＯ細胞に発現した１００ｍｇ／ｍＬ及び１７０ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３及びＰＤ１ＡＢ−６−４Ｐ原薬を含有する試料上で行った。これらの試料を、１０ｍＭのコハク酸緩衝液（ｐＨ５．５）、９％のスクロース、０．０５％のポリソルベート２０中で製剤化した。試料を−８０℃／５℃で３回の一日凍結融解サイクルに供した。両方の変異形は、繰り返し凍結融解サイクルで凝集状態に変化を示さない（表１９）。これらのデータは、最大１７０ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３を含有する凍結液体製剤がＧＬＰ毒物及びＦＩＨ研究に実現可能であることを示唆する。
【０６５８】
６．４．４  撹拌
本研究では、２０ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭのコハク酸緩衝液（ｐＨ５．５〜６．０）、９％のスクロース、及び０．００５〜０．０５％のポリソルベート２０を含有する試料を、５℃で最大７日間にわたって連続してボルテックスで撹拌した。これらの試料のうちのいずれにも著しい分解及び／または断片化は観察されなかった。これらの結果は、ＳＣ投与に許容される量の界面活性剤を使用してＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の製剤化を成功させることができることを示す。
【０６５９】
６．４．５  浸透圧
異なる製剤中で製剤化したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の浸透圧を決定した。製剤Ａは、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０中１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３を含有した。製剤Ｂは、１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、９ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０中１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３を含有した。ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３の浸透圧は、製剤Ａの場合、３４５ｍＯｓｍ／ｋｇであり、製剤Ｂの場合、３９９ｍＯｓｍ／ｋｇであった。結果として、ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３を、製剤Ａ（１０ｍＭの酢酸緩衝液（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０中１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３）として製剤化した。
【０６６０】
５．５  実施例５：原薬及び製剤の製造工程
原薬を、８．５ｗ／ｖ％のスクロース及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．２）中１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３濃度でバルク製剤化した。上流細胞培養及び収集ステップの流れ図を図２１Ａに提供し、下流精製ステップの流れ図を図２１Ｂに提供する。
【０６６１】
製造工程は、１つのマスターセルバンク（ＭＣＢ）バイアルの融解から始まった。ＭＣＢバイアルの内容物を成長培地に分散させ、遠心分離した。上清を処分し、細胞を２５０ｍＬの振盪フラスコに移した。細胞を振盪フラスコ内で３回の継代培養にわたって増殖させた。温度、ＣＯ２、及び撹拌を監視及び制御した。細胞計数及び生存率を各々の継代培養時点で測定した。細胞が標的細胞密度に達したときに、さらなる増殖のために、細胞懸濁液を使用して、５０Ｌの細胞培養バッグに接種した。
【０６６２】
振盪フラスコからプールした細胞懸濁液を、成長培地を含有する５０Ｌの細胞培養バッグに移した。温度、揺動角度、及びガス流を監視し、細胞計数及び生存率を毎日測定した。細胞が標的細胞密度に達したときに、細胞懸濁液を使用して、２５０Ｌの使い捨てバイオリアクターに接種した。
【０６６３】
細胞懸濁液を、成長培地を含有する２５０Ｌの使い捨てバイオリアクターに移した。バイオリアクターをフィードバッチモードで作動させ、自動制御システムを使用して、温度、ｐＨ、撹拌、及び溶存酸素濃度を監視及び制御した。細胞計数及び生存率を毎日測定した。細胞培養物に３日目から収集前日まで毎日フィードし、グルコース及び消泡溶液を必要に応じて添加した。細胞生存率が６０％以下に下がったときまたは１４日目のいずれか早い方で、収集を開始した。
【０６６４】
２５０Ｌのバイオリアクターを収集し、細胞及び残屑をデプス濾過及び０．２μｍ膜濾過によって除去した。フィルターを２０ｍＭリン酸ナトリウム及び１５０ｍＭ塩化ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）で洗い流して、最大量の産物を収集することを確実にした。バルク収集物を２００Ｌの収集バッグにアリコートし（０．２μｍの膜濾過）、産物濃度及び内毒素試験のために試料採取し、下流工程に移して、加工されていないバルクからＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬を精製した。
【０６６５】
上流収集からのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３バルク原薬の精製は、タンパク質Ａ親和性（ＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲｅ（商標））クロマトグラフィー及び低ｐＨウイルス不活性化、続いて、マルチモーダル陰イオン交換クロマトグラフィー（Ｃａｐｔｏ（商標）ａｄｈｅｒｅ）を含む一連のステップからなった。
【０６６６】
最初に、バッチモードで作動させたＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲｅ（商標）樹脂カラムを２０ｍＭリン酸ナトリウム／１５０ｍＭ塩化ナトリウム系緩衝液（ｐＨ７．０）で平衡化し、その後、浄化した収集物を装填した。装填（最大３０ｇ／Ｌ樹脂）後、カラムを、最初に３カラム体積（ＣＶ）の２０ｍＭリン酸ナトリウム／１５０ｍＭ塩化ナトリウム系緩衝液（ｐＨ７．０）で洗浄し、続いて、５ＣＶの１００ｍＭクエン酸ナトリウム系緩衝液（ｐＨ６．２）で洗浄した。産物を１００ｍＭクエン酸ナトリウム系緩衝液（ｐＨ３．７５）でカラムから溶出し、さらなる加工のために濾過した。
【０６６７】
次に、５００ｍＭクエン酸系緩衝液を、３．７±０．１のｐＨに達するまで撹拌しながらプールしたＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲｅ（商標）溶出液に添加した。低ｐＨ保持ステップを周囲温度で行った。５５〜６５分間の標的ウイルス不活性化保持期間後、５００ｍＭトリス系緩衝液を添加することによって材料のｐＨをｐＨ５．０±０．２に調整した。ウイルス不活性化材料をデプス濾過して、工程関連不純物をさらに除去した（最大濾過体積２５０Ｌ／ｍ２）。さらに加工する前に、濾液を０．２／０．１μｍフィルターに通過させた。
【０６６８】
その後、０．１Ｍクエン酸ナトリウム、１Ｍ塩化ナトリウム系緩衝液（ｐＨ５．０）を添加して、濾液を０．１Ｍ塩化ナトリウムの最終塩濃度に条件付けした後、マルチモーダル陰イオン交換クロマトグラフィーによって精製した。貫流モードで作動させたＣａｐｔｏ（商標）ａｄｈｅｒｅマルチモーダル陰イオン交換クロマトグラフィーカラムを１００ｍＭクエン酸ナトリウム／１００ｍＭ塩化ナトリウム系緩衝液（ｐＨ５．０）で平衡化した。装填中に貫流産物を収集した。装填（最大５０ｇ／Ｌ樹脂）後、残りの産物を２ＣＶの１００ｍＭクエン酸ナトリウム／１００ｍＭ塩化ナトリウム系緩衝液（ｐＨ５．０）でカラムから溶出した。溶出した産物画分を貫流産物画分とプールした。プールした全産物を０．２／０．１μｍフィルターに通過させた。
【０６６９】
その後、精製した原薬を、０．２／０．１μｍプレフィルター及び２つの１  ｍ２  Ｐｌａｎｏｖａ（商標）２０Ｎフィルターからなるナノ濾過に供した。ウイルス濾過（最大装填１６０Ｌ／ｍ２、最大圧力９８ｋＰａ）の終了時に、フィルタートレインを１００ｍＭクエン酸ナトリウム、１００ｍＭ塩化ナトリウム系緩衝液（ｐＨ５．０）ですすいだ。
【０６７０】
ウイルス濾液を濃縮し、３０ｋＤａの接線流濾過（ＴＦＦ）カセットフィルターを使用した限外濾過及び透析濾過（ＵＦ／ＤＦ）によって製剤化した。ウイルス濾液を、８．５ｗ／ｖ％のスクロースを含有する１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．８）に対して透析濾過（７倍以上）した。ＤＦ保持液を限外濾過によって１５０ｇ／Ｌに濃縮し、透析濾過緩衝液を用いて１１３〜１３８ｇ／Ｌにさらに希釈した。
【０６７１】
その後、ＵＦ／ＤＦ保持液を、８．５％のスクロース及び２％のポリソルベート８０を含有する１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．８）を使用して、１２５ｇ／ＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３濃度で、８．５ｗ／ｖ％のスクロース及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート８０を含有する１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．２）に製剤化した。
【０６７２】
製剤化したバルク溶液を０．２μｍ滅菌グレードフィルターに通して濾過し、滅菌培地ボトルにアリコートした。製剤化したバルク原薬（ＦＢＤＳ）を出荷及び最終製品化前に−７０℃±１０℃で凍結保管して、製剤を作製した。
【０６７３】
ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３注射物を、ＦＢＤＳを４ｍＬのＵＳＰＩ型（または現地同等の）ガラスバイアル内に最終製品化することによって製造した。各々のバイアルを１３ｍｍブチルゴム栓で栓をし、密封した。ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３注射物は、８．５ｗ／ｖ％のスクロース及び０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート−８０を含有する１０ｍＭの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．２）中１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３からなった。バイアルを１．４９ｇの標的充填重量（１．４ｍＬと同等）になるように充填して、１．２ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３を各々の使い捨てバイアルから引き出すことができることを確実にした。
【０６７４】
製剤の製造中にいずれの賦形剤も添加しなかった。製剤の製造中の原薬を最小限にしか操作しなかったため、同様の物理化学的及び生物学的特性を原薬及び製剤が共有した（データ示さず）。
【０６７５】
５．６  実施例６：原薬のバッチ分析及び安定性研究
ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬の２つの異なるバッチ（バッチＡ：ＧＬＰ毒性、及びバッチＢ：第１段階ＧＭＰ）を、長期（−７０℃±１０℃）、加速（−２０℃±５℃）、応力（５℃±３℃）、及び他の条件（２５℃／６０％ＲＨ）を含む様々な保管条件で安定性試験に供した。
【０６７６】
バッチＡ原薬の試料は最大６ヶ月間保管されており、バッチＢの試料は最大３ヶ月間保管されている。−７０℃、−２０℃、及び５℃で保管したＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬の全ての安定性結果（表２０〜２２及び２４〜２６）は許容基準を満たし、保管に著しい変化を示さなかった。２５℃／６０％ＲＨ試料で得た結果（表２３及び２７）は、保管条件を考慮すると、予想外ではなかった。ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（非還元）によって測定された単量体含有量は減少し、低分子量種は増加し、ＣＩＥＸによって測定された荷電変異形は、主ピークでの低下、ならびに酸性変異形及び塩基性変異形の両方での増加を示した。利用可能な安定性データに基づいて、−７０℃±１０℃の推奨保管条件で保管した場合、少なくとも１２ヶ月の有効期間がＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬に与えられている。
表２０．−７０℃±１０℃で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＡの安定性データ
【表２２】
2020512359.tif 000040
2020512359.tif 000041
表２１．−２０℃±５℃で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＡの安定性データ
【表２３】
2020512359.tif 000042
2020512359.tif 000043
2020512359.tif 000044
表２２．５℃±３℃で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＡの安定性データ
【表２４】
2020512359.tif 000045
表２３．２５℃／６０％ＲＨで保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＡの安定性データ
【表２５】
2020512359.tif 000046
表２４．−７０℃±１０℃で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＢの安定性データ
【表２６】
2020512359.tif 000047
2020512359.tif 000048
表２５．−２０℃±５℃で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＢの安定性データ
【表２７】
2020512359.tif 000049
2020512359.tif 000050
表２６．５℃±３℃で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＢの安定性データ
【表２８】
2020512359.tif 000051
表２７．２５℃／６０％ＲＨで保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３原薬（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＢの安定性データ
【表２９】
2020512359.tif 000052
2020512359.tif 000053
【０６７７】
５．７  実施例７：製剤のバッチ分析及び安定性研究
ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤の２つの異なるバッチ（バッチＡ及びバッチＢ）を、長期（５℃±３℃、直立及び反転）、加速（２５℃／６０％ＲＨ、直立及び反転）、及び他の条件（−２０℃、直立）を含む様々な保管条件で安定性試験に供した。
【０６７８】
ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３注射物開発バッチＡ（毒物研究に使用した原薬で作製したもの）の試料を、−２０℃（直立）、５℃（直立及び反転）、及び２５℃／６０％ＲＨ（直立及び反転）で最大３ヶ月間保管した。結果を表２８〜３２に示す。全ての試験結果は、許容基準を満たし、これらの保管条件下で見かけの傾向は観察されなかった。
【０６７９】
ＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３注射物臨床的バッチＢの試料を、５℃（直立及び反転）及び２５℃／６０％ＲＨ（直立及び反転）で最大１ヶ月間保管した。結果を表３３〜３６に示す。全ての試験結果は、許容基準を満たし、これらの保管条件下で見かけの傾向は観察されなかった。
【０６８０】
３ヶ月間の利用可能な安定性データに基づいて、５℃の推奨保管条件で保管した場合、少なくとも６ヶ月の有効期間がＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３注射物に与えられた。
表２８．５℃±３℃、直立で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＡの安定性データ
【表３０】
2020512359.tif 000054
2020512359.tif 000055
表２９．５℃±３℃、反転で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＡの安定性データ
【表３１】
2020512359.tif 000056
2020512359.tif 000057
表３０．２５℃±２℃／６０±５％ＲＨ、直立で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＡの安定性データ
【表３２】
2020512359.tif 000058
2020512359.tif 000059
表３１．２５℃±２℃／６０±５％ＲＨ、反転で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＡの安定性データ
【表３３】
2020512359.tif 000060
2020512359.tif 000061
2020512359.tif 000062
表３２．−２０℃±５℃で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＡの安定性データ
【表３４】
2020512359.tif 000063
2020512359.tif 000064
表３３．５℃±３℃、直立で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＢの安定性データ
【表３５】
2020512359.tif 000065
2020512359.tif 000066
表３４．５℃±３℃、反転で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＢの安定性データ
【表３６】
2020512359.tif 000067
2020512359.tif 000068
表３５．２５℃±２℃／６０±５％ＲＨ、直立で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＢの安定性データ
【表３７】
2020512359.tif 000069
2020512359.tif 000070
2020512359.tif 000071
表３６．２５℃±２℃／６０±５％ＲＨ、反転で保管されたＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３製剤（１２５ｍｇ／ｍＬ）バッチＢの安定性データ
【表３８】
2020512359.tif 000072
2020512359.tif 000073
【０６８１】
５．８  実施例８：製剤液体安定性研究
プラットフォームモノクローナル抗体製剤の頑強性を試験するために、２アーム（２×２）完全要因分析を行って、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、９ｗ／ｖ％のスクロース、及び１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３抗体を含有する製剤試料に対するｐＨ及び界面活性剤濃度（例えば、ＰＳ−８０）の影響及び双方向相互作用をモデル化した。
【０６８２】
異なるｐＨ及び界面活性剤含有量を有する製剤試料を、４℃、２５℃、４０℃での温度応力、順次凍結融解サイクル（Ｆ／Ｔサイクル）、及び／または撹拌を含む様々な応力条件に供した。その後、様々な応力条件下での製剤の安定性を、ＳＥＣ、キャピラリー電気泳動（ＣＥ）、フローイメージング顕微鏡法（ＭＦＩ）、陽イオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）、液体クロマトグラフ（ＬＣ）、及びＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）アッセイを使用して試験した。さらに、安定性研究中、製剤試料のｐＨ、浸透圧、及び粘度を監視した。この研究を通じて、濁度及び／または他の変則性についての製剤試料の目視試験を行った。
【０６８３】
５．８．１  候補製剤中の抗体の凝集及びクリップ（断片化）に対する保管温度の影響
候補製剤中の抗体分子の凝集及びクリップ（断片化）に対する保管温度の影響を試験した。７つの候補製剤（Ｆ−１〜Ｆ−７）を試験した。以下の表３７に示されるように、全ての候補製剤が、１２５ｍｇ／ｍＬのＰＤ１ＡＢ−６−Ｋ３抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、及び９ｗ／ｖ％のスクロースを含有し、各々、ｐＨ及び界面活性剤（ＰＳ−８０）含有量の異なる組み合わせを含有した。具体的には、０．００５ｗ／ｖ％〜０．０１５ｗ／ｖ％の範囲の界面活性剤含有量を試験し、ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８のｐＨ範囲を試験した。
表３７：候補製剤
【表３９】
2020512359.tif 000074
【０６８４】
各々の候補製剤の試料を、４℃、２５℃、及び４０℃で維持した。その後、試料をＳＥＣによって異なる時点で分析して、候補製剤中の抗体の単量体、ＨＭＷ種（凝集体）、及びＬＭＷ種（断片またはクリップ）の分率を定量化した。
【０６８５】
ＳＥＣ分析について、ＥＢＤ  ＳＥＣプラットフォーム法を使用した。ピークの同一性を、インライン多角光散乱検出器を使用して確認した。具体的には、以下のプロトコルに従った：
カラム：ＴＳＫ  Ｇ３０００ＳＷｘｌ、７．８ｍｍ  ＩＤ×３０ｃｍ、５μＭ（Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）
移動相：１００ｍＭリン酸カリウム、２５０ｍＭ塩化カリウム、ｐＨ６．８
流量：０．５ｍＬ／分
検出：２１５ｎｍ及び２８０ｎｍ
持続時間：３０分間
カラム温度：周囲温度
装填：未希釈２０μｇ以上
【０６８６】
図２３Ａは、４℃で１２週間保管した後の候補製剤Ｆ−１、Ｆ−３、及びＦ−６のＳＥＣ結果を示す。候補製剤のピークを、−８０℃で保管した標準対照のピークと比較した。図２３Ｂ〜２３Ｄは、４℃で最大１４ヶ月間保管された後の候補製剤Ｆ−１、Ｆ−２、Ｆ−４、Ｆ−６、及びＦ−７中の抗体のＨＭＷ種の分率の定量化を示す。
【０６８７】
図２３Ａに示されるように、４℃で１２週間保管した後、ＨＭＷ種及びＬＭＷ種の量はわずかに増加した。具体的には、ＬＭＷ種は、約０．０２％増加した。ＨＭＷ種の定量化を図２３Ｂにプロットした。
【０６８８】
図２３Ｂ〜２３Ｄに示されるように、４℃で１２週間の保管後、候補製剤のＨＭＷの分率は、約１．３％〜約１．６％の範囲であり、４℃で２６週間の保管後、候補製剤のＨＭＷ分率は、約１．４％〜約１．７％の範囲であり、４℃で１４ヶ月間の保管後、候補製剤のＨＭＷ分率は、約１．３％〜約１．７％の範囲であった。したがって、４℃で長期の保管は、抗体のＨＭＷ分率を著しく変化させなかった。さらに、より低いｐＨを有する製剤は、より高いｐＨを有する製剤と比較して、より少ないＨＭＷ種を有する傾向があった（この傾向は０時点でも存在した）。ＨＭＷ種形成に対するＰＳ−８０含有量の明らかな影響は観察されなかった。
【０６８９】
図２４Ａは、２５℃で１２週間保管した後の候補製剤Ｆ−１、Ｆ−３、及びＦ−６のＳＥＣ結果を示す。候補製剤のピークを、−８０℃で保管された標準対照のピークと比較した。図２４Ｂ〜２４Ｃは、２５℃で最大２６週間保管した後の候補製剤Ｆ−１、Ｆ−２、Ｆ−４、Ｆ−６、及びＦ−７中の抗体のＨＭＷ種の分率の定量化を示す。
【０６９０】
図２４Ａに示されるように、２５℃で１２週間保管した後、ＨＭＷ種及びＬＷＭ種の量はいずれも増加した。ＬＭＷ種は、０．５９％（−８０℃対照）〜約１．４２％（ｐＨ５．２）、約１．５３（ｐＨ５．５）、及び約１．７７（ｐＨ５．８）に成長した。ＨＭＷ種の定量化を図２４Ｂにプロットした。
【０６９１】
図２４Ｂ及び図２４Ｃに示されるように、２５℃で１２週間の保管後、候補製剤のＨＭＷ分率は、約１．５％〜約２％の範囲であり、４℃で２６週間の保管後、候補製剤のＨＭＷ分率は、約１．６％〜約２．２％の範囲であった。したがって、２５℃での長期の保管は、抗体のより多くのＨＭＷ種の形成をもたらした。この場合もやはり、より低いｐＨを有する製剤は、より高いｐＨを有する製剤と比較して、より少ないＨＭＷ種及びＬＭＷ種を有する傾向があった。ＨＭＷ種形成に対するＰＳ−８０含有量の明らかな影響は観察されなかった。
【０６９２】
図２５Ａは、４０℃で４週間保管した後の候補製剤Ｆ−１、Ｆ−３、及びＦ−６のＳＥＣ結果を示す。候補製剤のピークを、−８０℃で保管された標準対照のピークと比較した。図２５Ｂ及び図２５Ｃは、それぞれ、４０℃で４週間保管した後の候補製剤Ｆ−１、Ｆ−２、Ｆ−４、Ｆ−６、及びＦ−７中の抗体のＨＭＷ分率及びＬＭＷ分率の定量化を示す。
【０６９３】
図２５Ａに示されるように、４０℃で４週間保管した後、候補製剤試料中のＨＭＷ分率及びＬＭＷ分率の両方が増加した。ＨＭＷ分率及びＬＭＷ分率の定量化を、それぞれ、図２５Ｂ及び図２５Ｃに示した。示されるように、４０℃で４週間の保管後、候補製剤のＨＭＷ分率は、約１．８％〜約２．３％の範囲であり、候補製剤のＬＭＷ分率は、約３．７５％〜約４．７５％の範囲であった。この場合もやはり、より低いｐＨを有する製剤は、より高いｐＨを有する製剤と比較して、より少ないＨＭＷ種及びＬＭＷ種を有する傾向があった。ＨＭＷ種及びＬＭＷ種形成に対するＰＳ−８０含有量の明らかな影響は観察されなかった。最後に、この実験で観察されたクリップパターンは、４０℃で保管された他のＩｇＧ１モノクローナル抗体の典型であり、これは、ヒンジ領域における抗体の切断を表す可能性が高い。この実験では、クリップの観察は、ある程度ピーク広幅化により不明瞭になっている場合がある。
【０６９４】
次に、ＳＥＣ分析に加えて、キャピラリー電気泳動−ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ−ＳＤＳ）法を使用して、ＬＭＷ種を監視した。簡潔には、この非還元ＣＥ−ＳＤＳ法は、ヨードアセトアミド（ＩＡＭ）の存在下での変性条件下でそれらの流体力学的サイズの差異に基づいてタンパク質種を分離した。タンパク質種は、電気泳動前に陰イオン性洗剤であるＳＤＳに結合した。結果として得られた負に帯電したＳＤＳ−タンパク質複合体を、ＳＤＳゲル緩衝液を充填した未処理のフューズドシリカキャピラリーに動電学的に注入した。電圧をキャピラリーにわたって印加し、その電圧下で、ＳＤＳ被覆タンパク質を、親水性ポリマーゲル溶液中での遊走の差異によって分離した。タンパク質を、それらがキャピラリーの注入端からウィンドウを通過したときにフォトダイオードアレイ（ＰＤＡ）検出器を用いて検出し、ＵＶ検出によって可視化した。
【０６９５】
図２６は、候補製剤を５℃、２５℃、または４０℃で４週間保管した後にＣＥ−ＳＤＳアッセイによって特定された、候補製剤Ｆ−１、Ｆ−２、Ｆ−４〜Ｆ−７中のＬＭＷ分率の定量化を示す。候補製剤中のＬＭＷ分率の定量化を、−８０℃で保管された対照製剤の定量化と比較した。
【０６９６】
図２６に示されるように、ＣＥＳ分析結果と一致して、５℃で４週間の保管では、候補製剤中の抗体の著しいクリップはもたらされず、２５℃で４週間の保管では、抗体のＬＭＷ断片の量をわずかに増加させ、４０℃で４週間の保管では、ＬＭＷ断片の量を明らかに増加させた。さらに、４０℃で保管された群でより顕著に示されるように、より低いｐＨの製剤は、より高いｐＨ値を有する製剤と比較して、温度によって誘発される抗体クリップ（断片化）により高い耐性を示す傾向があった。
【０６９７】
注目すべきことに、少なくともいくつかの実験群では、ＣＥ−ＳＤＳアッセイによって定量化されたＬＭＷ種の割合は、ＳＥＣアッセイによって定量化されたＬＭＷ種の割合よりもわずかに高かった。この差異は、ＣＥ−ＳＤＳアッセイの試料調製工程に起因する可能性が高く、工程中にさらなる抗体クリップを誘発した可能性があった。より合理的な比較は、図２６に示されるように、候補製剤のＣＥ−ＳＤＳ結果と対照製剤のＣＥ−ＳＤＳ結果との比較であるべきである。
【０６９８】
図２７は、候補製剤Ｆ−１、Ｆ−２、Ｆ−４〜Ｆ−７を４℃で２６週間保管した後の候補製剤のＣＥ−ＳＤＳ分析の結果を示す。抗体のＨＭＷ、単量体、及びＬＭＷ分率を表すピーク、ならびに例示的な定量化結果をこの図に示している。全ての候補製剤中の全ての分率の定量化を表３８に要約した。候補製剤Ｆ−１のゼロ時点（温度処理前）での定量化を対照として含めた。
表３８：ＣＥ−ＳＤＳの定量化（４℃で２６週間のデータ）。
【表４０】
2020512359.tif 000075
【０６９９】
上記の結果に示されるように、４℃で２６週間の保管では、Ｆ−１（Ｔ０）試料と比較して、候補製剤のうちのいずれにおいてもＨＭＷ分率もＬＭＷ分率もいずれも著しく増加せず、抗体は、４℃での保管中、試験したｐＨ範囲ｐＨ５．２〜ｐＨ５．８、及び試験したＰＳ−８０含有量範囲０．００５ｗ／ｖ％〜０．０１５ｗ／ｖ％で、単量体形態で安定したままであったことを示す。この場合もやはり、ＳＥＣアッセイと比較したＣＥ−ＳＤＳアッセイで観察されたＬＭＷ割合及びＨＭＷ割合の増加は、ＣＥ−ＳＤＳアッセイの試料調製工程中に導入された人為的影響に起因する可能性が高かった。
【０７００】
５．８．２  候補製剤のサブビジブル粒子密度に対する保管温度の影響
候補製剤中のサブビジブル粒子密度に対する保管温度の影響を試験した。具体的には、フローイメージング顕微鏡法を行って、液体製剤の単位体積当たりのサブビジブル粒子の数を決定した。実験を、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒの粒子カウント標準及びＤｕｋｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃの１０μｍ粒径標準を使用したＭｏｄｅｌ  ５２００  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｉｍｐｌｅ  Ｍｉｃｒｏ−Ｆｌｏｗ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ｓｙｓｔｅｍ（ＭＦＩ（商標）、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）を使用して行った。試料をＭｉｌｌｉ−Ｑ水で１０倍希釈（１００μＬの候補製剤を９００μＬのＭｉｌｌｉ−Ｑ水に入れる）し、５×０．２μＬシップスに装填した。各々の実験を３〜５回繰り返し、結果として平均を得た。
【０７０１】
図２８Ａ及び図２８Ｂは、それぞれ、候補製剤を４℃及び２５℃で１２週間保管した後の、フローイメージング顕微鏡法によって決定された候補製剤Ｆ−１、Ｆ−２、Ｆ−４〜Ｆ−７中のサブビジブル粒子密度を示す。２μｍ以上、１０μｍ以上、及び２５μｍ以上の粒径範囲のサブビジブル粒子を計数した。限られた試料体積（１００μＬをＭｉｌｌｉ−Ｑ水中１：１０で希釈）のため、ある程度のエラーがこの分析で観察された。これらの特徴におけるエラーバーは、３つの２００μＬ測定結果の標準偏差を示す。
【０７０２】
これらの図に示されるように、１０μｍ以上及び２５μｍ以上の粒径範囲のサブビジブル粒子密度は、それぞれ、６，０００及び６００カウント／ミリリットル（ｍＬ）以下であり、静脈内投与用のＵＳＰ標準をはるかに下回った。２μｍ以上の粒径範囲のサブビジブル粒子の場合、概して、より高いｐＨと比較して、より低いｐＨを有する候補製剤中にはより少ない粒子が存在した。
【０７０３】
図２９は、候補製剤を４℃で２６週間保管した後の、フローイメージング顕微鏡法によって決定された候補製剤Ｆ−１、Ｆ−２、Ｆ−４〜Ｆ−７中のサブビジブル粒子密度を示す。１０μｍ以上及び２５μｍ以上の粒径範囲のサブビジブル粒子を計数した。限られた試料体積のため、反復を含めなかった。各々のバーは、単一の測定結果からの粒子カウントを示す。
【０７０４】
図２９に示されるように、１２週間を超える４℃での長時間の保管は、少なくとも最大２６週目の終わりまで候補製剤中のサブビジブル粒子を著しく増加させなかった。具体的には、２６週目の終わりに、１０μｍ以上または２５μｍ以上の粒径範囲のサブビジブル粒子は、依然として静脈内投与用のＵＳＰ標準をはるかに下回った。
【０７０５】
５．８．３  候補製剤中の抗体の電荷アイソフォーム分布に対する保管温度の影響
候補製剤Ｆ−１、Ｆ−２、Ｆ−４〜Ｆ−７中の抗体に対する電荷アイソフォーム分布を、陽イオン交換クロマトグラフ（ＣＥＸ）を使用して評価した。以下のプロトコルをＣＥＸ分析に使用した：
カラム：ＰｒｏＰａｃ  ＷＣＸ−１０、生物分析的４×２５０ｍｍ
移動相Ａ：１．２ｍＭトリス、０．７５ｍＭイミダゾール、５．８ｍＭピペラジン、ｐＨ５．５（０．５倍）
移動相Ｂ：１．２ｍＭトリス、０．７５ｍＭイミダゾール、５．８ｍＭピペラジン、ｐＨ９．５（０．５倍）
流量：１．０ｍＬ／分
検出：２１５ｎｍ及び２８０ｎｍ
持続時間：５０分間
カラム温度：３０℃
装填：未希釈２０μｇ以上
勾配：
【表４１】
2020512359.tif 000076
【０７０６】
図３０Ａに示されるように、ゼロ時点で（Ｔ０、すなわち、候補製剤を４℃または２５℃で保管する前）、抗体は、１つの形態（主要種）で主に存在した。さらに、比較的少量の抗体が、酸性種または塩基性種として存在した。さらに、図３０Ｂに示される定量化によれば、主要種は、Ｔ０で製剤中の全抗体の約７６．５ｗ／ｗ％に値し、酸性種は、Ｔ０で製剤中の全抗体の約１４．６ｗ／ｗ％に値し、塩基性種は、Ｔ０で製剤中の全抗体の約８．９ｗ／ｗ％に値した。
【０７０７】
図３０Ｂ及び図３０Ｃに示されるように、Ｔ０試料と比較して、４℃で１２週間保管された製剤試料中の電荷種の分布に著しい変化はなかった。その一方で、２５℃で１２週間保管した後、主要種のうちのいくつかは酸性種に切り替わった。さらに、より低いｐＨを有する候補製剤は、より高いｐＨを有する候補製剤と比較して、化学修飾により高い抵抗性を示す傾向があった。抗体の化学修飾に対する候補製剤のＰＳ−８０含有量の明らかな影響は、この実験では観察されなかった。
【０７０８】
ＣＥＸ分析も４℃で２６週間保管された試料上で行った。図３１に示されるように、４℃で１２週間の保管と２６週間の保管との間では、主要種の割合に明らかな差異は観察されなかった。
【０７０９】
５．８．４  候補製剤中の抗体の化学的安定性に対する保管温度の影響
候補製剤Ｆ−１、Ｆ−２、Ｆ−４〜Ｆ−７中の抗体の安定性を、ＲＰ−ＨＰＬＣを使用して評価した。具体的には、製剤化した抗体を以下に記載されるように還元した。抗体を５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）中で１ｍｇ／ｍＬに希釈し、最終濃度４Ｍの塩酸グアニジンにした。１．０Ｍジチオスレイトール（ＤＴＴ、Ｓｉｇｍａ）溶液を添加して、最終濃度１００ｍＭにし、反応混合物を５５℃で３０分間置いた。タンパク質溶液を室温まで冷却した。ＰＮＧａｓｅＦも使用して、１単位：２０ｍｇの酵素：抗体比で、３７℃で４時間にわたってインキュベートすることによって、グリカンを除去した。
【０７１０】
ＲＰ−ＨＰＬＣを、Ａｇｉｌｅｎｔ  １２００  ＨＰＬＣシステム上で行った。移動相は、溶媒Ａとして０．１１％トリフルオロ酢酸（Ｔｈｅｒｍｏ）を有する水、及び溶媒Ｂとして０．０９％トリフルオロ酢酸を有するアセトニトリル（Ｂｕｒｄｉｃｋ  ＆  Ｊａｃｋｓｏｎ）を含んだ。Ａｇｉｌｅｎｔ  ＰＬＲＰ−Ｓカラム（４．６×１５０ｍｍ、粒径３ｍｍ、細孔径３００Åのカラム）を、Ａｇｉｌｅｎｔ  ６２１０  ＭＳＤ  ＴＯＦ質量分析計を用いたＲＰ−ＨＰＬＣ飛行時間（ＴＯＦ）質量分光（ＭＳ）分析に使用した。カラム溶出液を２１５ｎｍでのＵＶ検出によって分析し、その後、ＴＯＦ質量分析計にインラインで向けた。初期移動相は、５分間にわたって２５％溶媒Ｂであり、その後、２５〜３５％溶媒Ｂに毎分２．５％溶媒Ｂの二段階勾配をつけ、続いて、３５〜４５％溶媒Ｂに毎分０．６２５％溶媒Ｂの第２の勾配をつけた。分離を７５℃で０．３ｍＬ／分の流量で行った。
【表４２】
2020512359.tif 000077
【０７１１】
図３２に示されるように、候補製剤は、−８０℃で保管された対照製剤と比較して、４℃で１２週間の保管後に検出可能な変化を示さなかった。候補製剤は、２５℃で１２週間の保管後に著しい変化を示さなかった。いずれの温度でも新たなピークは観察されなかった。さらに、異なる候補製剤の性能は、両方の温度下で互いに非常に似ていた。
【０７１２】
５．８．５  候補製剤中の抗体の結合活性に対する保管温度の影響
製剤試料中の抗体の結合親和性を、捕捉法を使用してヒトＰＤ１抗原への結合についてＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００で分析した。具体的には、タンパク質Ａまたは抗ヒトＩｇＧを表面に固定化した。製剤試料中のＰＤ１抗体を、１０μＬ／分の流量で６０秒間にわたって表面上に流すことによって捕捉した。内部産生されたヒトＰＤ１抗原を、０．３〜２００ｎＭの範囲の濃度で、３０μＬ／分の流量で３００秒間にわたって表面上に流して、結合速度を決定した。解離を、溶出溶液を３０μＬ／分の流量で６００秒間にわたって表面上に流すことによって決定した。表面を、３Ｍ塩化マグネシウムを３０μＬ／分の流量で６０秒間にわたって表面上に流すことによって各々の抗原濃度間で再生した。適合は、１：１モデルに対してであった。
【０７１３】
図３３Ａの左側のパネルは、候補製剤を４０℃で４週間保管した後の、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）アッセイによって決定された候補製剤Ｆ−４（ｐＨ５．５、０．０１％のＰＳ−８０）中の抗体とヒトＰＤ１抗原との間の代表的な会合／解離速度を示す。右側のパネルは、Ｔ０での同じ製剤の結果を示す。
【０７１４】
さらに、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）アッセイによって決定されたように、会合速度（Ｋａ）は、１．６４×１０５〜１．７３×１０５の範囲（標準偏差１．１３％）であり、解離速度（Ｋｄ）は、４．３７×１０−３〜４．５５×１０−３の範囲（標準偏差０．９２％）であり、平衡解離定数ＫＤは、２５．４〜２７．２ｎＭの範囲（標準偏差１．３７％）であった。
【０７１５】
図３３Ｂは、Ｔ０での、または候補製剤を２５℃で４週間、もしくは４０℃で４週間、もしくは４℃で１２週間、もしくは２５℃で１２週間保管した後の、候補抗体製剤Ｆ−１、Ｆ−２、Ｆ−４〜Ｆ７のＫＤ（ｎＭ）値の定量化結果を示す。異なる保管条件または異なる候補製剤間にわたって抗体結合活性の著しい差異は観察されなかった。
【０７１６】
５．８．６  候補製剤中の抗体の凝集及びサブビジブル粒子形成に対する撹拌の影響
候補製剤の液体安定性に対する撹拌の影響をＳＥＣ及びＭＦＩで試験した。具体的には、１２５ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ５．２）、８．５ｗ／ｖ％のスクロース、０．００１ｗ／ｖ％または０．０１５ｗ／ｖ％のＰＳ−８０を有する０．９ｍＬの候補製剤を、４℃で最大２４時間にわたってベンチトップボルテックス上の２ｍＬのバイアル内で振盪した。２、８、及び２４時間撹拌した後、候補製剤のアリコートをＳＥＣ及び／またはＭＦＩによって分析した。結果を図３４Ａ及び図３４Ｂにプロットした。
【０７１７】
図３４Ａ及び図３４Ｂに示されるように、ＨＭＷ分率及び２μｍ以上の粒径範囲の粒子の密度の両方での増加が、０．０１５％のＰＳ−８０を含有する製剤試料で観察された。０．００１％のＰＳ−８０を含有する製剤試料については明らかな変化は観察されなかった。さらに、特に０．０１５％のＰＳ−８０試料で著しい起泡が撹拌後に観察された。
【０７１８】
５．８．７  候補製剤中の抗体の凝集及びサブビジブル粒子形成に対する凍結融解サイクルの影響
候補製剤の液体安定性に対する繰り返し凍結融解サイクルの影響をＳＥＣ及びＭＦＩで試験した。具体的には、各々の候補製剤Ｆ１、Ｆ−２、及びＦ４〜Ｆ７の２００μＬのアリコートをＦｉｓｈｅｒのネジ蓋付き管内に入れ、−８０℃の冷凍庫内に一晩置いて、凍結させた。凍結させた試料を完全に融解するまで室温で融解した。最大５回の凍結融解サイクルを行った。結果を図３５Ａ〜３５Ｃにプロットした。
【０７１９】
図３５Ａに示されるように、３回または５回の凍結融解サイクル後に候補製剤のうちのいずれでも単量体抗体分率に著しい差異は観察されなかった。図３５Ｂ及び図３５Ｃに示されるように、１０μｍ以上及び２５μｍ以上の粒径範囲のサブビジブル粒子の密度は、静脈内投与用のＵＳＰ標準をはるかに下回ったままであった。
【０７２０】
５．８．７  目視観察、ｐＨ、浸透圧、及び粘度
さらに、安定性研究中、製剤試料のｐＨ、浸透圧、及び粘度を監視した。この研究を通じて、濁度及び／または他の変則性についての製剤試料の目視試験を行った。データを以下の表３９〜４２に要約した。示されるように、４℃または２５℃で３ヶ月間保管した後、可視粒子は検出されなかった。全ての候補製剤の粘度は、４ｃＰ未満であった。ｐＨ値は安定したままであり、標的に近い状態のままであった。浸透圧は、製剤中９ｗ／ｖ％のスクロースを使用したときにわずかに高かった。８．５ｗ／ｖ％のスクロースでの製剤化は、浸透圧を約３４５ｍＯｓｍまで低下させた。
表３９：目視観察
【表４３】
2020512359.tif 000078
表４０：粘度
【表４４】
2020512359.tif 000079
表４１：ｐＨ
【表４５】
2020512359.tif 000080
表４２：浸透圧
【表４６】
2020512359.tif 000081
【０７２１】
７．配列表
本明細書は、配列表のコンピュータ可読形式（ＣＲＦ）コピーとともに出願されている。２０１８年３月２７日に作成され、５０，９１６バイトのサイズの１０６２４−３８６−２２８＿ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔという名前のＣＲＦは、配列表の紙コピーと同一であり、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【図１】
2020512359.tif 000082
【図２】
2020512359.tif 000083
【図３】
2020512359.tif 000084
【図４】
2020512359.tif 000085
【図５】
2020512359.tif 000086
【図６】
2020512359.tif 000087
【図７】
2020512359.tif 000088
【図８−０１】
2020512359.tif 000089
【図８−０２】
2020512359.tif 000090
【図９Ａ−９Ｂ】
2020512359.tif 000091
【図９Ｃ】
2020512359.tif 000092
【図１０】
2020512359.tif 000093
【図１１】
2020512359.tif 000094
【図１２】
2020512359.tif 000095
【図１３】
2020512359.tif 000096
【図１４】
2020512359.tif 000097
【図１５Ａ−１５Ｃ】
2020512359.tif 000098
【図１６】
2020512359.tif 000099
【図１７】
2020512359.tif 000100
【図１８】
2020512359.tif 000101
【図１９】
2020512359.tif 000102
【図２０】
2020512359.tif 000103
【図２１】
2020512359.tif 000104
【図２２】
2020512359.tif 000105
【図２３Ａ】
2020512359.tif 000106
【図２３Ｂ】
2020512359.tif 000107
【図２３Ｃ】
2020512359.tif 000108
【図２３Ｄ】
2020512359.tif 000109
【図２４Ａ】
2020512359.tif 000110
【図２４Ｂ】
2020512359.tif 000111
【図２４Ｃ】
2020512359.tif 000112
【図２５Ａ】
2020512359.tif 000113
【図２５Ｂ】
2020512359.tif 000114
【図２５Ｃ】
2020512359.tif 000115
【図２６】
2020512359.tif 000116
【図２７】
2020512359.tif 000117
【図２８Ａ】
2020512359.tif 000118
【図２８Ｂ】
2020512359.tif 000119
【図２９】
2020512359.tif 000120
【図３０Ａ】
2020512359.tif 000121
【図３０Ｂ】
2020512359.tif 000122
【図３０Ｃ】
2020512359.tif 000123
【図３１】
2020512359.tif 000124
【図３２】
2020512359.tif 000125
【図３３Ａ】
2020512359.tif 000126
【図３３Ｂ】
2020512359.tif 000127
【図３４Ａ】
2020512359.tif 000128
【図３４Ｂ】
2020512359.tif 000129
【図３５Ａ】
2020512359.tif 000130
【図３５Ｂ】
2020512359.tif 000131
【図３５Ｃ】
2020512359.tif 000132
【手続補正書】
【提出日】令和2年1月29日(2020.1.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2020512359000001.app
【国際調査報告】
2020512359.tif 000133
2020512359.tif 000134
2020512359.tif 000135