(57)【要約】  本開示は、炭酸脱水酵素IX阻害剤の組成物および方法に関する。本開示は、炭酸脱水酵素IX阻害剤の標的化複合体にも関する。本開示はまた、疾患を治療する方法および疾患の造影のための炭酸脱水酵素IX阻害剤の標的化複合体の使用に関する。
2020531509.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：B-L-A
[式中、
Bは、式：
【化１】
2020531509.tif 000080
(式中、
各RAは、H、ハロゲン、-OR1、-OC(O)R1、-OC(O)NR1R2、-OS(O)R1、-OS(O)2R1、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-S(O)NR1R2、-S(O)2NR1R2、-OS(O)NR1R2、-OS(O)2NR1R2、-NR1R2、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR2、-NR1C(O)NR1R2、-NR1S(O)R2、-NR1S(O)2R2、-NR1S(O)NR1R2、-NR1S(O)2NR1R2、-C(O)R1、-C(O)OR1、および-C(O)NR1R2からなる群から独立して選択され；
RBは、-OR3、-SR3、-NR3R4、-S(O)2R3、-NR4C(O)R3または-NR4C(O)NR3R4であり；
R3は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニルであり、それぞれ独立して、-N(R5)-*、-N(R5)-C1-C6アルキル-N(R6)-*、-OC(O)-*、-OC(O)N(R5)-*、-C(O)-*、-C(O)O-*、および-C(O)N(R5)-*からなる群から選択される1つの置換基で置換され；およびC1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニル中の残りの各水素原子は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニル、ハロゲン、-OR1、-OC(O)R1、-OC(O)NR1R2、-OS(O)R1、-OS(O)2R1、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-S(O)NR1R2、-S(O)2NR1R2、-OS(O)NR1R2、-OS(O)2NR1R2、-NR1R2、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR2、-NR1C(O)NR1R2、-NR1S(O)R2、-NR1S(O)2R2、-NR1S(O)NR1R2、-NR1S(O)2NR1R2、-C(O)R1、-C(O)OR1、および-C(O)NR1R2によって任意に置換され；
各R1、R2、R4、R5およびR6は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、およびC3-C9シクロアルキルからなる群から独立して選択される)
で示される炭酸脱水酵素IXの結合リガンドであり；
Lは、任意のリンカーであり；
Aは、治療薬または造影剤であり；
mは、1〜5の整数であり；および
*は、LまたはAへの結合点を表す]
で示される複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
炭酸脱水酵素IXリガンドが、式：
【化２】
2020531509.tif 000081
[式中、
RBは、-OR3、-SR3、-NR3R4、-S(O)2R3、-NR4C(O)R3または-NR4C(O)NR3R4であり；
R3は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニルであり、それぞれ独立して、-NR5-*、-N(R5)-C1-C6アルキル-N(R6)-*、-OC(O)-*、-OC(O)N(R5)-*、-C(O)-*、-C(O)O-*、および-C(O)N(R5)-*からなる群から選択される1つの置換基で置換され；
各R1、R2、R4、R5およびR6は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、およびC3-C9シクロアルキルからなる群から独立して選択され；および
*は、LまたはAへの結合点を表す]
である、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
炭酸脱水酵素IXリガンドが、
【化３】
2020531509.tif 000082
または
【化４】
2020531509.tif 000083
[式中、*は、複合体の残りの部分への結合点を表す]
である、請求項２に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
リンカーが、-C(O)(C1-C12アルキル)C(O)-、-NH-C1-C12アルキル-NH-、-N(C1-C6アルキル)-C1-C12アルキル-N(C1-C6アルキル)-、-C(O)CH2CH2(OCH2CH2)qNH-、-C(O)CH2CH2(OCH2CH2)qN(C1-C6アルキル)-、-(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-、-NH(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-、および-N(C1-C6アルキル)(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-からなる群から選択される部分を含み；qが、1〜40の整数である、請求項３に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
リンカーが、少なくとも1つのアミノ酸を含む、請求項３に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
リンカーが、3-アミノアラニン、アスパラギン酸、システイン、およびアルギニンからなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸を含む、請求項３に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
リンカーが、放出可能なリンカーを含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
リンカーが、ジスルフィド部分を含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
リンカーが、ヒドラジン部分を含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
リンカーが、式：
【化５】
2020531509.tif 000084
【化６】
2020531509.tif 000085
[式中、
各R7およびR8は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキル中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各Xは独立して、C1-C6アルキルまたはC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)であり、ここで、C1-C6アルキルおよびC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各R9、R10、R11およびR12は、H、C1-C7アルキル、C2-C7アルケニル、C2-C7アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、および5〜7員のヘテロアリールからなる群から独立して選択され；および
各*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるリンカー部分を含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
式：
【化７】
2020531509.tif 000086
[式中、*は、複合体の残りの部分への結合点を表す]
を含む、請求項３に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
式：
【化８】
2020531509.tif 000087
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
を含む、請求項３に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
式：
【化９】
2020531509.tif 000088
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
を含む、請求項３に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
アミノ酸配列：3-アミノアラニン-Asp-Cysを有するリンカー部分を含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩、
【請求項１５】
アミノ酸配列：Asp-Arg-Asp-3-アミノアラニン-Asp-Cysを有するリンカー部分を含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１６】
qが、2である、請求項４に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１７】
qが、4である、請求項４に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１８】
Aが、造影剤である、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１９】
Aが、フルオレセイン色素である、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２０】
Aが、式：
【化１０】
2020531509.tif 000089
または
【化１１】
2020531509.tif 000090
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるフルオレセイン色素である、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２１】
【化１２】
2020531509.tif 000091
、
【化１３】
2020531509.tif 000092
および
【化１４】
2020531509.tif 000093
からなる群から選択される、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２２】
Aが、放射性造影剤である、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２３】
Aが、キレート基に配位した金属の放射性同位体を含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２４】
放射性金属が、111In、99mTc、64Cu、67Cu、67Ga、および68Gaからなる群から選択される、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２５】
放射性金属が、64Cuである、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２６】
DOTA、NOTA、TETA、DOTAGA、NODAGA、DTPA、PCTA、およびNETAのラジカルからなる群から選択されるキレート基を含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２７】
NODAGAのラジカルであるキレート基を含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２８】
式：
【化１５】
2020531509.tif 000094
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるキレート基を含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２９】
式：
【化１６】
2020531509.tif 000095
を含む、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３０】
Aが、治療薬である、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３１】
治療薬が、チューブリシンである、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３２】
【化１７】
2020531509.tif 000096
または
【化１８】
2020531509.tif 000097
からなる群から選択される、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３３】
治療薬が、メイタンシンである、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３４】
式：
【化１９】
2020531509.tif 000098
を有する、請求項１に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３５】
a．有効量の式：B-L-A
[式中、
Bは、式：
【化２０】
2020531509.tif 000099
(式中、
各RAは、H、ハロゲン、-OR1、-OC(O)R1、-OC(O)NR1R2、-OS(O)R1、-OS(O)2R1、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-S(O)NR1R2、-S(O)2NR1R2、-OS(O)NR1R2、-OS(O)2NR1R2、-NR1R2、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR2、-NR1C(O)NR1R2、-NR1S(O)R2、-NR1S(O)2R2、-NR1S(O)NR1R2、-NR1S(O)2NR1R2、-C(O)R1、-C(O)OR1、および-C(O)NR1R2からなる群から独立して選択され；
RBは、-OR3、-SR3、-NR3R4、-S(O)2R3、-NR4C(O)R3または-NR4C(O)NR3R4であり；
R3は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニルであり、それぞれ独立して、-NR5-*、-N(R5)-C1-C6アルキル-N(R6)-*、-OC(O)-*、-OC(O)N(R5)-*、-C(O)-*、-C(O)O-*、および-C(O)N(R5)-*からなる群から選択される1つの置換基で置換され；
各R1、R2、R4、R5およびR6は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、およびC3-C9シクロアルキルからなる群から独立して選択される)
で示される炭酸脱水酵素IXの結合リガンドであり；
Lは、任意のリンカーであり；
Aは、治療薬または造影剤であり；
mは、1〜5の整数であり；および
*は、LまたはAへの結合点を表す]
で示される複合体を対象に投与することを含む、対象における細胞の集団を造影する方法。
【請求項３６】
炭酸脱水酵素IXリガンドが、式：
【化２１】
2020531509.tif 000100
[式中、
RBは、-OR3、-SR3、-NR3R4、-S(O)2R3、-NR4C(O)R3または-NR4C(O)NR3R4であり；
R3は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニルであり、それぞれ独立して、-NR5-*、-N(R5)-C1-C6アルキル-N(R6)-*、-OC(O)-*、-OC(O)N(R5)-*、-C(O)-*、-C(O)O-*、および-C(O)N(R5)-*からなる群から選択される1つの置換基で置換され；
各R1、R2、R4、R5およびR6は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、およびC3-C9シクロアルキルからなる群から独立して選択され；および
*は、LまたはAへの結合点を表す]
である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
炭酸脱水酵素IXリガンドが、
【化２２】
2020531509.tif 000101
または
【化２３】
2020531509.tif 000102
[式中、*は、複合体の残りの部分への結合点を表す]
である、請求項３６に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３８】
リンカーが、-C(O)(C1-C12アルキル)C(O)-、-NH-C1-C12アルキル-NH-、-N(C1-C6アルキル)-C1-C12アルキル-N(C1-C6アルキル)-、-C(O)CH2CH2(OCH2CH2)qNH-、-C(O)CH2CH2(OCH2CH2)qN(C1-C6アルキル)-、-(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-、-NH(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-、および-N(C1-C6アルキル)(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-からなる群から選択される部分を含み；qが、1〜40の整数である、請求項３７に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３９】
リンカーが、少なくとも1つのアミノ酸を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４０】
リンカーが、3-アミノアラニン、アスパラギン酸、システイン、およびアルギニンからなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４１】
リンカーが、放出可能なリンカーを含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４２】
リンカーが、ジスルフィドリンカー部分を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４３】
リンカーが、ヒドラジンリンカー部分を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４４】
リンカーが、式：
【化２４】
2020531509.tif 000103
【化２５】
2020531509.tif 000104
[式中、
各R7およびR8は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキル中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各Xは独立して、C1-C6アルキルまたはC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)であり、ここで、C1-C6アルキルおよびC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各R9、R10、R11およびR12は、H、C1-C7アルキル、C2-C7アルケニル、C2-C7アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、および5〜7員のヘテロアリールからなる群から独立して選択され；および
各*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるリンカー部分を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４５】
式：
【化２６】
2020531509.tif 000105
[式中、*は、複合体の残りの部分への結合点を表す]
を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４６】
式：
【化２７】
2020531509.tif 000106
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４７】
式：
【化２８】
2020531509.tif 000107
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４８】
アミノ酸配列：3-アミノアラニン-Asp-Cysを有するリンカー部分を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩、
【請求項４９】
アミノ酸配列：Asp-Arg-Asp-3-アミノアラニン-Asp-Cysを有するリンカー部分を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５０】
qが、2である、請求項３８に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５１】
qが、4である、請求項３８に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５２】
Aが、造影剤である、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５３】
Aが、フルオレセイン色素である、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５４】
Aが、式：
【化２９】
2020531509.tif 000108
または
【化３０】
2020531509.tif 000109
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるフルオレセイン色素である、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５５】
複合体が、
【化３１】
2020531509.tif 000110
、
【化３２】
2020531509.tif 000111
および
【化３３】
2020531509.tif 000112
、またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項３５に記載の方法。
【請求項５６】
Aが、放射性造影剤である、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５７】
Aが、キレート基に配位した金属の放射性同位体を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５８】
放射性金属が、111In、99mTc、64Cu、67Cu、67Ga、および68Gaからなる群から選択される、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５９】
放射性金属が、64Cuである、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６０】
DOTA、NOTA、TETA、DOTAGA、NODAGA、DTPA、PCTA、およびNETAのラジカルからなる群から選択されるキレート基を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６１】
NODAGAのラジカルであるキレート基を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６２】
式：
【化３４】
2020531509.tif 000113
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるキレート基を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６３】
式：
【化３５】
2020531509.tif 000114
を含む、請求項３５に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６４】
請求項１〜３４のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩、および任意に、少なくとも1つの薬学的に許容される賦形剤を含む組成物。
【請求項６５】
対象における細胞の集団を造影する方法における使用のための請求項１〜２９のいずれか1つに記載の複合体。
【請求項６６】
方法が、細胞を造影するのに有効な量の複合体を対象に投与することを含む、請求項６５に記載の複合体。
【請求項６７】
対象における細胞の集団を造影するのに有用な薬剤の製造における、請求項１〜２９のいずれか1つに記載の複合体の使用。
【請求項６８】
方法が、細胞を造影するのに有効な量の複合体を対象に投与することを含む、請求項６７に記載の使用。
【請求項６９】
治療有効量の請求項１〜１７または３０〜３４のいずれか1つに記載の複合体を対象に投与することを含む、対象のがんを治療する方法。
【請求項７０】
対象のがんを治療する方法における使用のための、請求項１〜１７または３０〜３４のいずれか1つに記載の複合体。
【請求項７１】
対象のがんを治療するのに有用な薬剤の製造における、請求項１〜１７または３０〜３４のいずれか1つに記載の複合体の使用。
【請求項７２】
a．細胞を請求項１〜２９のいずれか1つに記載の複合体に接触させて、標識細胞を提供すること；およびb．蛍光光源または適当な検出器によって標識細胞を可視化すること；を含む、インビトロで細胞の集団を造影する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、米国特許法119条(e)の下に、2017年8月22日出願の米国仮出願第62/548,670号に対する優先権を主張し、この出願の開示の全体は、参照することにより本出願に包含される。
分野
本開示は、炭酸脱水酵素IX阻害剤の組成物および方法に関する。本開示は、炭酸脱水酵素IX阻害剤の標的化複合体にも関する。本開示はまた、疾患を治療する方法および疾患の画像化のための炭酸脱水酵素IX阻害剤の標的化複合体の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
微小環境は、腫瘍内のがん細胞の表現型に大きく影響を及ぼす。そのような微小環境効果の1つは、腫瘍内に存在する血管系の形成不良による低酸素である(たとえば、Noman MZ、Hasmim M、Messai Y、Terry S、Kieda C、Janji B、Chouaib S. Hypoxia：a key player in anti-tumor immune response. A review in the Theme：Cellular Responses to Hypoxia. Am J Physiol Cell Physiol. 2015、309(1)：C569-C579を参照)。研究では、すべての遺伝子の1%〜1.5%が低酸素によって調節されていることが示されている(Harris AL. Hypoxia- a key regulatory factor in tumour growth. Nat Rev Cancer. 2002. 2(1)：38-47)。驚くことではないが、低酸素のがん細胞は、著しく異なるパターンの遺伝子発現を示す。これらの変化は、低酸素の微小環境にある場合、化学療法薬に対する感受性の違いにつながる可能性があり、その結果、がんの攻撃性および再発の増加を引き起こす可能性がある(Yamada S、Utsunomiya T、Morine Y、Imura S、Ikemoto T、Arakawa Y、Kanamoto M、Iwahashi S、Saito Y、Takasu C、Ishikawa D、Shimada M. Expressions of hypoxia-inducible factor-1 and epithelial cell adhesion molecule are linked with aggressive local recurrence of hepatocellular)。
【０００３】
低酸素の効果により、選択的造影のために活用するがん特異的低酸素マーカーを同定する努力がなされている。そのようなマーカーの1つである炭酸脱水酵素IX(本明細書ではCA IXとも称する)は、低酸素誘導因子1(HIF-1)の活性化によって発現する。CA IXは、通常、二酸化炭素の可逆的水和を触媒する亜鉛を含む金属タンパク質グループのメンバーである(CO2 + H2O ⇔ HCO3- + H+)。CA IXは、CO2水和反応にとって最も活性なCAの1つであり、配列類似性に基づく4つのドメインを含む：N末端プロテオグリカン様(PG)ドメイン、CA触媒ドメイン、膜貫通セグメント(TM)、および細胞質内(IC)部分。CA IXは、肺がん、結腸直腸がん、胃がん、膵臓がん、乳がん、子宮頸がん、膀胱がん、卵巣がん、脳がん、頭頸部がん、口腔がんなどの多くのがんにおいて発現する。さらに、構成的HIF-1活性化を引き起こすVHL遺伝子の変異により、腎臓の明細胞がんなどのがんは、CA IXを基礎レベルの150倍までアップレギュレートすることが示されている。しかしながら、正常な細胞では、CA IXは、胃および胆嚢の上皮細胞でのみ発現し、そこでは、触媒的に不活性であると思われる。
【０００４】
CA IXは、造影剤の特異的送達の優れた標的として宣伝されているため、低酸素腫瘍を画像化するために低分子複合体および抗体複合体の両方が作成されている。たとえば、CA IX特異的リガンドは、結腸がん、腎がん、子宮頸がんのマウス異種移植モデルの造影に使用されている。CA IX特異抗体は、明細胞腎がんのヒト患者に加えて、明細胞腎がん、頭頸部がん、結腸がん、および子宮頸がんのマウス異種移植モデルのイメージングに使用されている。
【０００５】
さらに、CA IXを標的とする造影剤に向けて多くの努力がなされている一方で、逆に、CA IXを発現するがんに対する治療薬に向かう研究はほとんど行われていない。CA IX標的療法のいくつかの報告には、治療用放射性核種で直接標識された抗CA IX抗体(Muselaers CH、Oosterwijk E、Bos DL、Oyen WJ、Mulders PF、Boerman OC. Optimizaing lutetium 177-anti-carbonic anhydrase IX radioimmunotherapy in an intraperitoneal clear cell renal cell carcinoma xenograft model. Mol Imaging. 2014. 13：1-7)、またはリポソームを含む薬物と複合体化された抗CA IX抗体(Wong BC、Zhang H、Qin L、Chen H、Fang C、Lu A、Yang Z. Carbonic anhydrase IX-directed immunoliposomes for targeted drug delivery to human lung cancer cells in vitro. Drug Des Devel Ther. 2014、8：993-1001)の使用が含まれる。我々の知る限り、インビボマウス異種移植モデルでは、非常に強力な抗がん剤に直接複合体化された小分子CA IXリガンドの有効性は、報告されていない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
小分子複合体は、主にPETと蛍光を使用して低酸素腫瘍を画像化するが、さらに選択的な造影剤の開発が必要である。さらに、CA IX標的化治療薬の開発にはまだ満たされていない必要性がある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
概要
いくつかの実施態様では、本開示は、治療薬および造影剤からなる群から選択される少なくとも1つの作用剤にリンカーを介して共有結合したCA IXリガンドを含む複合体；またはその薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施態様では、本開示は、治療薬および造影剤からなる群から選択される少なくとも1つの作用剤に共有結合したCA IXリガンドを含む複合体；またはその薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施態様では、本開示は、式：B-L-A[式中、Bは炭酸脱水酵素IXの結合リガンドであり、Lは任意のリンカーであり、およびAは治療薬または造影剤である]で示される複合体を提供する。これらの実施態様のいくつかの態様では、CA IXリガンドは、アリールスルホンアミド含有化合物である。
【０００８】
他の実施態様では、本開示は、a．少なくとも1つの造影剤にリンカーを介して共有結合したCA IXリガンドを含む有効量の複合体を対象に投与すること；を含む、対象における細胞の集団を造影する方法を提供する。
【０００９】
他の実施態様では、本開示は、a．有効量の式：B-L-A[式中、Bは炭酸脱水酵素IXの結合リガンドであり、Lは任意のリンカーであり、およびAは治療薬または造影剤である]で示される複合体を対象に投与すること；を含む、対象における細胞の集団を造影する方法を提供する。これらの実施態様のいくつかの態様では、CA IXリガンドは、アリールスルホンアミド含有化合物である。これらの実施態様のいくつかの態様では、CA IXリガンドは、式：
【化１】
2020531509.tif 000003
[式中、RA、RBおよびmは、本明細書で定義されるとおりである]
で示される。
【００１０】
他の実施態様では、本開示は、本明細書に記載の複合体またはその薬学的に許容される塩、および任意に、少なくとも1つの薬学的に許容される賦形剤を含む組成物を提供する。
【００１１】
他の実施態様では、本開示は、対象における細胞の集団を造影する方法における使用のための本明細書に記載の複合体を提供する。これらの実施態様のいくつかの態様では、方法は、細胞を造影するのに有効な量の複合体を対象に投与することを含む。
【００１２】
他の実施態様では、本開示は、対象における細胞の集団を造影するのに有用な薬剤の製造における本明細書に記載の複合体の使用を提供する。これらの実施態様のいくつかの態様では、方法は、細胞を造影するのに有効な量の複合体を対象に投与することを含む。
【００１３】
他の実施態様では、本開示は、a．有効量の本明細書に記載の複合体；またはその薬学的に許容される塩を対象に投与すること；を含む、対象のがんを治療する方法を提供する。他の実施態様では、方法は、b．造影することによって治療するための患者を同定すること；をさらに含む。これらの実施態様のいくつかの態様では、造影は、c．有効量の複合体を患者に投与すること(ここで、作用剤は本明細書に記載の造影剤である)；およびd．CA IX発現がんを有するとして患者を認定すること；を含む。これらの実施態様のいくつかの態様では、がんは、肺がん、結腸直腸がん、胃がん、膵臓がん、乳がん、子宮頸がん、膀胱がん、卵巣がん、脳がん、頭頸部がん、口腔がんおよび腎がんからなる群から選択される。
【００１４】
他の実施態様では、本開示は、対象のがんを治療するための方法における使用のための本明細書に記載の複合体を提供する。これらの実施態様のいくつかの態様では、方法は、がんを治療するのに有効な量の複合体を対象に投与することを含む。これらの実施態様のいくつかの態様では、がんは、肺がん、結腸直腸がん、胃がん、膵臓がん、乳がん、子宮頸がん、膀胱がん、卵巣がん、脳がん、頭頸部がん、口腔がんおよび腎がんからなる群から選択される。
【００１５】
他の実施態様では、本開示は、対象のがんの治療に有用な薬剤の製造における本明細書に記載の複合体の使用を提供する。これらの実施態様のいくつかの態様では、方法は、がんを治療するのに有効な量の複合体を対象に投与することを含む。これらの実施態様のいくつかの態様では、がんは、肺がん、結腸直腸がん、胃がん、膵臓がん、乳がん、子宮頸がん、膀胱がん、卵巣がん、脳がん、頭頸部がん、口腔がんおよび腎がんからなる群から選択される。
【００１６】
いくつかの実施態様では、本開示は、本明細書に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩、および任意に、少なくとも1つの薬学的に許容される賦形剤を含む組成物を提供する。
【００１７】
いくつかの実施態様では、本開示は、a．本開示の複合体、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与して、CA IXタンパク質を発現する細胞に結合した複合体を提供すること；b．近赤外波長光による照射によって細胞に結合した複合体を照射すること；およびc．発光波長にて細胞から放出された光を検出すること；を含む、対象における細胞の集団を造影する方法を提供する。
【００１８】
いくつかの実施態様では、本開示は、a．本開示の複合体、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与して、CA IXタンパク質を発現する細胞に結合した複合体を提供すること；およびb．近赤外波長光による照射によって細胞に結合した複合体を可視化すること；を含む、対象における細胞の集団を造影する方法を提供する。
【００１９】
いくつかの実施態様では、本開示は、a．本開示の複合体、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与して、CA IXタンパク質を発現するがん細胞に結合した複合体を提供すること；b．近赤外波長光によってがん細胞に結合した複合体を照射すること；およびc．発光波長にてがん細胞から放出された光を検出すること；を含む、対象のがんを造影する方法を提供する。これらの実施態様のいくつかの態様では、がんは、肺がん、結腸直腸がん、胃がん、膵臓がん、乳がん、子宮頸がん、膀胱がん、卵巣がん、脳がん、頭頸部がん、口腔がんおよび腎がんからなる群から選択される。
【００２０】
いくつかの実施態様では、本開示は、a．本開示の複合体、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与して、CA IXタンパク質を発現するがん細胞に結合した複合体を提供すること；およびb．近赤外波長光による照射によってがん細胞に結合した複合体を可視化すること；を含む、対象のがんを造影する方法を提供する。これらの実施態様のいくつかの態様では、がんは、肺がん、結腸直腸がん、胃がん、膵臓がん、乳がん、子宮頸がん、膀胱がん、卵巣がん、脳がん、頭頸部がん、口腔がんおよび腎がんからなる群から選択される。
【００２１】
他の実施態様では、本開示は、患者のがんを造影する方法における使用のための本開示の複合体、またはその薬学的に許容される塩を提供する。これらの実施態様のいくつかの態様では、方法は、a．複合体、またはその薬学的に許容される塩を患者に投与して、CA IXタンパク質を発現する細胞に結合した複合体を提供すること；およびb．近赤外波長光による照射によって細胞に結合した複合体を可視化すること；を含む。これらの実施態様のいくつかの態様では、方法は、a．本開示の複合体、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与して、CA IXタンパク質を発現するがん細胞に結合した複合体を提供すること；b．近赤外波長光によってがん細胞に結合した複合体を照射すること；およびc．発光波長にてがん細胞から放出された光を検出すること；を含む。これらの実施態様のいくつかの態様では、がんは、肺がん、結腸直腸がん、胃がん、膵臓がん、乳がん、子宮頸がん、膀胱がん、卵巣がん、脳がん、頭頸部がん、口腔がんおよび腎がんからなる群から選択される。
【００２２】
いくつかの実施態様では、本開示は、患者のがんを造影するのに有用な薬剤の製造における、本開示の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。これらの実施態様のいくつかの態様では、方法は、a．複合体、またはその薬学的に許容される塩を患者に投与して、CA IXタンパク質を発現する細胞に結合した複合体を提供すること；およびb．近赤外波長光による照射によって細胞に結合した複合体を可視化すること；を含む。これらの実施態様のいくつかの態様では、方法は、a．本開示の複合体、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与して、CA IXタンパク質を発現するがん細胞に結合した複合体を提供すること；b．近赤外波長光によってがん細胞に結合した複合体を照射すること；およびc．発光波長にてがん細胞から放出された光を検出すること；を含む。これらの実施態様のいくつかの態様では、がんは、肺がん、結腸直腸がん、胃がん、膵臓がん、乳がん、子宮頸がん、膀胱がん、卵巣がん、脳がん、頭頸部がん、口腔がんおよび腎がんからなる群から選択される。
【００２３】
いくつかの実施態様では、本開示は、a．細胞を本開示の複合体に接触させて、標識細胞を提供すること；およびb．蛍光光源によって標識細胞を可視化すること；を含む、インビトロで細胞の集団を造影する方法を提供する。いくつかの実施態様では、本開示は、a．細胞を本開示の複合体に接触させて、標識細胞を提供すること、b．近赤外波長光によって細胞に結合した複合体を照射すること；およびc．発光波長にて細胞から放出された光を検出すること；を含む、インビトロで細胞の集団を造影する方法を提供する。
【００２４】
いくつかの実施態様では、本開示は、a．本開示の複合体、またはその薬学的に許容される塩を対象に投与して、CA IXタンパク質を発現する細胞に結合した複合体を提供すること；b．複合体に結合した放射性核種を検出すること；を含む、対象における細胞の集団を造影する方法を提供する。
【００２５】
本発明の実施態様は、以下の列挙された条項によってさらに説明される。本明細書に記載の実施態様のいずれもが、実施態様が互いに矛盾しない範囲で、本明細書に記載の任意の他の実施態様に関連して使用することができることが理解されるであろう。
【００２６】
1．式：B-L-A
[式中、
Bは、式：
【化２】
2020531509.tif 000004
(式中、
各RAは、H、ハロゲン、-OR1、-OC(O)R1、-OC(O)NR1R2、-OS(O)R1、-OS(O)2R1、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-S(O)NR1R2、-S(O)2NR1R2、-OS(O)NR1R2、-OS(O)2NR1R2、-NR1R2、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR2、-NR1C(O)NR1R2、-NR1S(O)R2、-NR1S(O)2R2、-NR1S(O)NR1R2、-NR1S(O)2NR1R2、-C(O)R1、-C(O)OR1、および-C(O)NR1R2からなる群から独立して選択され；
RBは、-OR3、-SR3、-NR3R4、-S(O)2R3、-NR4C(O)R3または-NR4C(O)NR3R4であり；
R3は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニルであり、それぞれ独立して、-N(R5)-*、-N(R5)-C1-C6アルキル-N(R6)-*、-OC(O)-*、-OC(O)N(R5)-*、-C(O)-*、-C(O)O-*、および-C(O)N(R5)-*からなる群から選択される1つの置換基で置換され；およびC1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニル中の残りの各水素原子は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニル、ハロゲン、-OR1、-OC(O)R1、-OC(O)NR1R2、-OS(O)R1、-OS(O)2R1、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-S(O)NR1R2、-S(O)2NR1R2、-OS(O)NR1R2、-OS(O)2NR1R2、-NR1R2、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR2、-NR1C(O)NR1R2、-NR1S(O)R2、-NR1S(O)2R2、-NR1S(O)NR1R2、-NR1S(O)2NR1R2、-C(O)R1、-C(O)OR1、および-C(O)NR1R2によって任意に置換され；
各R1、R2、R4、R5およびR6は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、およびC3-C9シクロアルキルからなる群から独立して選択される)
で示される炭酸脱水酵素IXの結合リガンドであり；
Lは、任意のリンカーであり；
Aは、治療薬または造影剤であり；
mは、1〜5の整数であり；および
*は、LまたはAへの結合点を表す]
で示される複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００２７】
2．炭酸脱水酵素IXリガンドが、式：
【化３】
2020531509.tif 000005
[式中、
RBは、-OR3、-SR3、-NR3R4、-S(O)2R3、-NR4C(O)R3または-NR4C(O)NR3R4であり；
R3は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニルであり、それぞれ独立して、-NR5-*、-N(R5)-C1-C6アルキル-N(R6)-*、-OC(O)-*、-OC(O)N(R5)-*、-C(O)-*、-C(O)O-*、および-C(O)N(R5)-*からなる群から選択される1つの置換基で置換され；
各R1、R2、R4、R5およびR6は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、およびC3-C9シクロアルキルからなる群から独立して選択され；および
*は、LまたはAへの結合点を表す]
である、項1に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００２８】
3．炭酸脱水酵素IXリガンドが、
【化４】
2020531509.tif 000006
または
【化５】
2020531509.tif 000007
[式中、*は、複合体の残りの部分への結合点を表す]
である、項1または2に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００２９】
4．リンカーが、-C(O)(C1-C12アルキル)C(O)-、-NH-C1-C12アルキル-NH-、-N(C1-C6アルキル)-C1-C12アルキル-N(C1-C6アルキル)-、-C(O)CH2CH2(OCH2CH2)qNH-、-C(O)CH2CH2(OCH2CH2)qN(C1-C6アルキル)-、-(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-、-NH(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-、および-N(C1-C6アルキル)(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-からなる群から選択される部分を含み；qが、1〜40の整数である、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００３０】
5．リンカーが、少なくとも1つのアミノ酸を含む、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
6．リンカーが、3-アミノアラニン、アスパラギン酸、システイン、およびアルギニンからなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸を含む、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
7．リンカーが、放出可能なリンカーを含む、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
8．リンカーが、ジスルフィド部分を含む、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
9．リンカーが、ヒドラジン部分を含む、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００３１】
10．リンカーが、式：
【化６】
2020531509.tif 000008
【化７】
2020531509.tif 000009
[式中、
各R7およびR8は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキルからなる群から独立して選択され、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキル中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各Xは独立して、C1-C6アルキルまたはC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)であり、C1-C6アルキルおよびC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各R9、R10、R11およびR12は、H、C1-C7アルキル、C2-C7アルケニル、C2-C7アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、および5〜7員のヘテロアリールからなる群から独立して選択され；および
各*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるリンカー部分を含む、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００３２】
11．式：
【化８】
2020531509.tif 000010
[式中、*は、複合体の残りの部分への結合点を表す]
を含む、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
12．式：
【化９】
2020531509.tif 000011
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
を含む、項1〜10のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
13．式：
【化１０】
2020531509.tif 000012
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
項1〜10のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００３３】
14．アミノ酸配列：3-アミノアラニン-Asp-Cysを有するリンカー部分を含む、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
15．アミノ酸配列：Asp-Arg-Asp-3-アミノアラニン-Asp-Cysを有するリンカー部分を含む、項1〜13のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
16．qが、2である、項4〜15のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
17．qが、4である、項4〜15のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
18．Aが、造影剤である、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
19．Aが、フルオレセイン色素である、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００３４】
20．Aが、式：
【化１１】
2020531509.tif 000013
または
【化１２】
2020531509.tif 000014
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるフルオレセイン色素である、前記項のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
21．
【化１３】
2020531509.tif 000015
、
【化１４】
2020531509.tif 000016
、および
【化１５】
2020531509.tif 000017
からなる群から選択される、項1に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００３５】
22．Aが、放射性造影剤である、項1-18のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
23．Aが、キレート基に配位した金属の放射性同位体を含む、項1-18のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
24．放射性金属が、111In、99mTc、64Cu、67Cu、67Ga、および68Gaからなる群から選択される、項1-18、22、または23のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
25．放射性金属が、64Cuである、項1-18、または22-24のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
26．DOTA、NOTA、TETA、DOTAGA、NODAGA、DTPA、PCTA、およびNETAのラジカルからなる群から選択されるキレート基を含む、項1-18、または22-25のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
27．NODAGAのラジカルであるキレート基を含む、項1-18、または22-26のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００３６】
28．式：
【化１６】
2020531509.tif 000018
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるキレート基を含む、項1-18、または22-27のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
29．式：
【化１７】
2020531509.tif 000019
を含む、項1-18、または22-28のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
30．Aが、治療薬である、項1〜17のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
31．治療薬が、チューブリシンである、項1〜17のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００３７】
32．
【化１８】
2020531509.tif 000020
または
【化１９】
2020531509.tif 000021
からなる群から選択される、項1に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
33．治療薬が、メイタンシンである、項1〜17のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
34．式：
【化２０】
2020531509.tif 000022
を有する、項1に記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩。
【００３８】
35．a．有効量の式：B-L-A
[式中、
Bは、式：
【化２１】
2020531509.tif 000023
(式中、
各RAは、H、ハロゲン、-OR1、-OC(O)R1、-OC(O)NR1R2、-OS(O)R1、-OS(O)2R1、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-S(O)NR1R2、-S(O)2NR1R2、-OS(O)NR1R2、-OS(O)2NR1R2、-NR1R2、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR2、-NR1C(O)NR1R2、-NR1S(O)R2、-NR1S(O)2R2、-NR1S(O)NR1R2、-NR1S(O)2NR1R2、-C(O)R1、-C(O)OR1、および-C(O)NR1R2からなる群から独立して選択され；
RBは、-OR3、-SR3、-NR3R4、-S(O)2R3、-NR4C(O)R3または-NR4C(O)NR3R4であり；
R3は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニルであり、それぞれ独立して、-NR5-*、-N(R5)-C1-C6アルキル-N(R6)-*、-OC(O)-*、-OC(O)N(R5)-*、-C(O)-*、-C(O)O-*、および-C(O)N(R5)-*からなる群から選択される1つの置換基で置換され；
各R1、R2、R4、R5およびR6は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、およびC3-C9シクロアルキルからなる群から独立して選択される)
で示される炭酸脱水酵素IXの結合リガンドであり；
Lは、任意のリンカーであり；
Aは、治療薬または造影剤であり；
mは、1〜5の整数であり；および
*は、LまたはAへの結合点を表す]
で示される複合体を対象に投与することを含む、対象における細胞の集団を造影する方法。
【００３９】
36．炭酸脱水酵素IXリガンドが、式：
【化２２】
2020531509.tif 000024
[式中、
RBは、-OR3、-SR3、-NR3R4、-S(O)2R3、-NR4C(O)R3または-NR4C(O)NR3R4であり；
R3は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニルであり、それぞれ独立して、-NR5-*、-N(R5)-C1-C6アルキル-N(R6)-*、-OC(O)-*、-OC(O)N(R5)-*、-C(O)-*、-C(O)O-*、および-C(O)N(R5)-*からなる群から選択される1つの置換基で置換され；
各R1、R2、R4、R5およびR6は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、およびC3-C9シクロアルキルからなる群から独立して選択され；および
*は、LまたはAへの結合点を表す]
である、項35に記載の方法。
【００４０】
37．炭酸脱水酵素IXリガンドが、
【化２３】
2020531509.tif 000025
または
【化２４】
2020531509.tif 000026
[式中、*は、複合体の残りの部分への結合点を表す]
である、項35または36に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【００４１】
38．リンカーが、-C(O)(C1-C12アルキル)C(O)-、-NH-C1-C12アルキル-NH-、-N(C1-C6アルキル)-C1-C12アルキル-N(C1-C6アルキル)-、-C(O)CH2CH2(OCH2CH2)qNH-、-C(O)CH2CH2(OCH2CH2)qN(C1-C6アルキル)-、-(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-、-NH(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-、および-N(C1-C6アルキル)(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-からなる群から選択される部分を含み；qが、1〜40の整数である、項35〜37のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【００４２】
39．リンカーが、少なくとも1つのアミノ酸を含む、項35〜38のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
40．リンカーが、3-アミノアラニン、アスパラギン酸、システイン、およびアルギニンからなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸を含む、項35〜39のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
41．リンカーが、放出可能なリンカーを含む、項35〜40のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
42．リンカーが、ジスルフィドリンカー部分を含む、項35〜41のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
43．リンカーが、ヒドラジンリンカー部分を含む、項35〜42のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【００４３】
44．リンカーが、式：
【化２５】
2020531509.tif 000027
【化２６】
2020531509.tif 000028
[式中、
各R7およびR8は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキルからなる群から独立して選択され、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキル中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各Xは独立して、C1-C6アルキルまたはC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)であり、C1-C6アルキルおよびC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各R9、R10、R11およびR12は、H、C1-C7アルキル、C2-C7アルケニル、C2-C7アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、および5〜7員のヘテロアリールからなる群から独立して選択され；および
各*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるリンカー部分を含む、項35〜43のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【００４４】
45．式：
【化２７】
2020531509.tif 000029
[式中、*は、複合体の残りの部分への結合点を表す]
を含む、項35〜44のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
46．式：
【化２８】
2020531509.tif 000030
を含む、
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
項35〜44のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
47．式：
【化２９】
2020531509.tif 000031
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
を含む、項35〜44のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【００４５】
48．アミノ酸配列：3-アミノアラニン-Asp-Cysを有するリンカー部分を含む、項35〜47のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩、
49．アミノ酸配列：Asp-Arg-Asp-3-アミノアラニン-Asp-Cysを有するリンカー部分を含む、項35〜48のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
50．qが、2である、項38に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
51．qが、4である、項38に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
52．Aが、造影剤である、項35〜51のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
53．Aが、フルオレセイン色素である、項35〜52のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【００４６】
54．Aが、式：
【化３０】
2020531509.tif 000032
または
【化３１】
2020531509.tif 000033
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるフルオレセイン色素である、35〜53項のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
55．複合体が、
【化３２】
2020531509.tif 000034
、
【化３３】
2020531509.tif 000035
および
【化３４】
2020531509.tif 000036
、またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、項35に記載の方法。
【００４７】
56．Aが、放射性造影剤である、項35〜52のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
57．Aが、キレート基に配位した金属の放射性同位体を含む、項35〜52、または56のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
58．放射性金属が、111In、99mTc、64Cu、67Cu、67Ga、および68Gaからなる群から選択される、項35〜52、56または57のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
59．放射性金属が、64Cuである、項35〜52、または56〜58のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
60．DOTA、NOTA、TETA、DOTAGA、NODAGA、DTPA、PCTA、およびNETAのラジカルからなる群から選択されるキレート基を含む、項35〜52、または56〜59のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
61．NODAGAのラジカルであるキレート基を含む、項35〜52、または56〜60のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【００４８】
62．式：
【化３５】
2020531509.tif 000037
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるキレート基を含む、項35〜52、または56〜61のいずれか1つに記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
63．式：
【化３６】
2020531509.tif 000038
を含む、項35に記載の方法、またはその薬学的に許容される塩。
【００４９】
64．項1〜34のいずれか1つに記載の複合体、またはその薬学的に許容される塩、および任意に、少なくとも1つの薬学的に許容される賦形剤を含む組成物。
65．対象における細胞の集団を造影する方法における使用のための項1〜29のいずれか1つに記載の複合体
66．方法が、細胞を造影するのに有効な量の複合体を対象に投与することを含む、項65に記載の複合体。
67．対象における細胞の集団を造影するのに有用な薬剤の製造における、項1〜29のいずれか1つに記載の複合体の使用。
68．方法が、細胞を造影するのに有効な量の複合体を対象に投与することを含む、項67に記載の使用。
69．治療有効量の項1〜17または30〜34のいずれか1つに記載の複合体を対象に投与することを含む、対象のがんを治療する方法。
70．対象のがんを治療する方法における使用のための、項1〜17または30〜34のいずれか1つに記載の複合体。
71．対象のがんを治療するのに有用な薬剤の製造における、項1〜17または30〜34のいずれか1つに記載の複合体の使用。
72．a．細胞を項1〜29のいずれか1つに記載の複合体に接触させて、標識細胞を提供すること；およびb．蛍光光源または適当な検出器によって標識細胞を可視化すること；を含む、インビトロで細胞の集団を造影する方法。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
【図１Ａ−Ｆ】図1A-Fは、細胞の画像を示し、図1AおよびBが、25nM FBSA-PEG2-FITC複合体である複合体5の白色光および蛍光共焦点顕微鏡法であり；図1CおよびDが、競合対照である25 nM FITC複合体5＋100倍過剰のCAIX阻害剤(化合物3、3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパン酸)の白色光および蛍光共焦点顕微鏡法を示し；図1EおよびFが、SKRC52細胞のみの白色光および蛍光共焦点顕微鏡法を示す；ここで、FITC複合体5が、過剰の非結合阻害剤の存在下で細胞に結合し、競合したことは、特異的受容体-特異的結合イベントを示す。
【図２】HEK293-CA9細胞におけるCAIX FITC複合体5、7、および9の結合親和性を示し、PEG2リンカーが、17.94 nMにて結合親和性を有することを示す。(●)複合体5、KD = 17.94 nM；(黒三角)複合体7、KD = 55.2 nM；(黒菱形)複合体9、KD = 215.7 nM。
【図３】SKRC52細胞におけるCAIX FITC複合体5、7、および9の結合親和性を示し、PEG2リンカーが、1.28 nMにて結合親和性を有することを示す。(●)複合体5、KD = 1.28 nM；(黒三角)複合体7、KD = 4.57 nM；(黒菱形)複合体9、KD = 40.89 nM。
【図４】HT-29細胞におけるCAIX FITC複合体5の結合親和性を示し、該複合体5が、100倍過剰の非結合阻害剤の存在下で細胞に結合し、競合したことが、特異的受容体-特異的結合イベントを示すことを示す。(▼)競合(競合)；(●)複合体5、KD = 4.553 nM。
【図５】HEK293-CA9細胞におけるCAIX FITC複合体7の結合親和性を示し、該複合体5が、100倍過剰の非結合阻害剤の存在下で細胞に結合し、競合したことが、特異的受容体-特異的結合イベントを示すことを示す。(黒三角)競合；(●)複合体7、KD = 55.2 nM。
【図６】低酸素の有無下でのSKRC52細胞におけるCAIX FITC複合体5の結合親和性を示し、これは、低酸素が存在するかどうかに関らず、複合体5がCAIXに結合することを示す。(●)酸素正常 SKRC52、4.57 nM；(黒三角)低酸素 SKRC52、KD = 4.72 nM。
【図７】A549細胞におけるCAIX FITC複合体5の結合親和性を示す。(▼)競合；(●)複合体5、KD = 6.044 nM。
【図８】さまざまな濃度の複合体14が、HEKまたはHEK-CA9細胞とともに4時間インキュベートされた、複合体14のインビトロ細胞毒性を示す。洗浄後、細胞を66-72時間インキュベートし、3H-チミジン取り込みを介してそれらの生存能力を決定した。(●)HEK293-CA9；(黒三角)HEK293。
【図９】SKRC52細胞における放射性標識複合体17のインビトロ結合を示す。(●)複合体17、KD = 5.87 nM；(■)競合。
【図１０】A549細胞における放射性標識複合体17のインビトロ結合を示す。(●)複合体17、KD = 6.04 nM；(■)競合。
【図１１】HT-29異種移植片(複合体12のグループで、n=3および競合グループで、n=2)における複合体12(TIW)のインビボ有効性を示し、ここで、競合グループは、100倍過剰の化合物3で処置され、非処置対照では増殖するが、2 umol/kgの複合体12で処置されたマウスは、腫瘍縮小を示す。(●)複合体12；(■)競合。
【図１２】複合体12で処置されたHT-29異種移植マウスの全体重を示し、処置開始から6日目における体重減少が10パーセント以下であったことを示す。競合グループは、100倍過剰の化合物3で処置された(複合体12のグループで、n=3および競合グループで、n=2)。
【図１３】HT-29異種移植片における複合体14のインビボでの用量漸増効果を示す(各用量で、n=1)。腫瘍消失後、1つの追加用量でマウスを処置し、最後の処置は、マウス1、2、3、および4/5に対して、それぞれ6、8、12および14日目であり、用量2、1.5、および1 μmole/kgのすべてが腫瘍を縮小したが、1μmole/kgでは、16日目に腫瘍再出現が開始された。マウス用量レベル：(●)2 μmole/kg；(■)1.5 μmole/kg；(黒三角)1 μmole/kg；(▼)0.5 μmole/kg；(黒菱形)0.25 μmole/kg。
【図１４】さまざまな用量の複合体14で処置されたHT-29異種移植マウスの全体重を示す(各用量で、n=1)。複合体14の最大用量は、依然として、複合体12(図12)と比較して、体重の喪失を示したが、他の用量は、許容できる体重プロファイルを示す。マウス用量レベル：(●)2 μmole/kg；(■)1.5 μmole/kg；(黒三角)1 μmole/kg；(▼)0.5 μmole/kg；(黒菱形)0.25 μmole/kg。
【図１５】HT-29異種移植片における複合体14のインビボ有効性を示す(各用量で、n=5)。処置は、1.25 μmole/kgの複合体14で、および競合グループ(1.25 μmole/kgの複合体14＋100倍過剰の化合物14)で3週間、TIWで投与された。競合グループおよび腫瘍のみのグループを、研究の人道的ガイドラインに従って16日目に安楽死させた。処置グループは、安定した腫瘍退縮および処置中止までの安定した疾患を示した。(●)複合体14；(■)競合；(黒三角)腫瘍のみ。
【図１６】1.25 μmole/kgの複合体14で、および競合グループ(1.25 μmole/kgの複合体14＋100倍過剰の化合物14)で処置されたHT-29異種移植マウスの全体重を示す。(●)複合体14；(■)競合；(黒三角)腫瘍のみ。
【図１７】A549異種移植片における複合体14のインビボ有効性を示す。処置は、1.25 μmole/kgの複合体14で、および競合グループ(1.25 μmole/kgの複合体14＋100倍過剰の化合物15)で3週間、TIWで投与された。競合グループおよび腫瘍のみのグループを、研究の人道的ガイドラインに従って16日目に安楽死させた。処置グループは、安定した腫瘍退縮および処置中止までの安定した疾患を示した。(●)複合体14；(■)競合。
【図１８】1.25 μmole/kgの複合体14で、および競合グループ(1.25 μmole/kgの複合体14＋100倍過剰の化合物15)で処置されたA549異種移植マウスの全体重を示す。(●)複合体14；(■)競合。
【図１９】A549異種移植片を有するマウスにおける放射性標識複合体17の生体内分布の経時的研究を示す。注射後の各時点について、左バー = 腫瘍；中央バー = 胃；右バー = 腎臓。
【図２０】A549異種移植モデルにおける放射性標識複合体17の生体内分布の経時的研究を示す。グラフに示される各組織タイプについて、左バー = 複合体17；右バー = 競合。
【図２１】SKRC52異種移植モデルにおける放射性標識複合体17の生体内分布の経時的研究を示す。グラフに示される各組織タイプについて、左バー = 複合体17；右バー = 競合。
【図２２】HT29異種移植モデルにおける放射性標識複合体17の生体内分布を示す。
【図２３Ａ−２３Ｂ】SKRC52異種移植モデルにおける放射性標識複合体17のPET/CTを示す。図23Aは、全身マウス。図23Bは、摘出物。
【図２４】A549異種移植モデルにおける放射性標識複合体17のPET/CTを示す。
【発明を実施するための形態】
【００５１】
定義
本明細書で使用する用語「アルキル」は、任意に分岐し、1〜20個の炭素原子を含む、炭素原子の鎖を包含する。特定の実施態様では、アルキルが、有利には、C1-C12、C1-C10、C1-C9、C1-C8、C1-C7、C1-C6、およびC1-C4などの限定された長さでありうることがさらに理解されるべきである。例示的には、C1-C8、C1-C7、C1-C6、およびC1-C4などのこのような特に限定された長さのアルキル基を、「低級アルキル」と呼ぶことができる。例示的なアルキル基として、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、2-ペンチル、3-ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。アルキルは、置換または非置換であってもよい。典型的な置換基として、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環式、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、シアノ、ハロ、カルボニル、オキソ、(=O)、チオカルボニル、O-カルバミル、N-カルバミル、O-チオカルバミル、N-チオカルバミル、C-アミド、N-アミド、C-カルボキシ、O-カルボキシ、ニトロ、およびアミノ、または本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載されるものが挙げられる。「アルキル」が、上記の基などの他の基と組み合わせて、官能化アルキルを形成してもよいことが理解されるであろう。例として、本明細書に記載の「アルキル」基と「カルボキシ」基の組み合わせは、「カルボキシアルキル」基と呼ばれてもよい。他の非限定的例として、ヒドロキシアルキル、アミノアルキルなどが挙げられる。
【００５２】
本明細書で使用する用語「アルケニル」は、任意に分岐し、2〜20個の炭素原子を含み、少なくとも1つの炭素-炭素二重結合(すなわち、C=C)を含む、炭素原子の鎖を包含する。特定の実施態様では、アルケニルは、有利には、C2-C12、C2-C9、C2-C8、C2-C7、C2-C6、およびC2-C4などの限定された長さでありうることが理解されるであろう。例示的には、C2-C8、C2-C7、C2-C6、およびC2-C4などのこのような特に限定された長さのアルケニル基を、低級アルケニルと呼ぶことができる。アルキルについて記載されるように、または本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載されるように、アルケニルは、非置換であるか、または置換されてもよい。例示的なアルケニル基として、エテニル、1-プロペニル、2-プロペニル、1-、2-、または3-ブテニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５３】
本明細書で使用する用語「アルキニル」は、任意に分岐し、2〜20個の炭素原子を含み、少なくとも1つの炭素-炭素三重結合(すなわち、C≡C)を含む、炭素原子の鎖を包含する。特定の実施態様では、アルキニルは、有利には、C2-C12、C2-C9、C2-C8、C2-C7、C2-C6、およびC2-C4などの限定された長さでありうることが理解されるであろう。例示的には、C2-C8、C2-C7、C2-C6、およびC2-C4などのこのような特に限定された長さのアルキニル基を、低級アルキニルと呼ぶことができる。アルキルについて記載されるように、または本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載されるように、アルキニルは、非置換であるか、または置換されてもよい。例示的なアルケニル基として、エチニル、1-プロピニル、2-プロピニル、1-、2-、または3-ブチニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５４】
本明細書で使用する用語「アリール」は、完全共役π電子系を有する6〜12個の炭素原子からなる、すべて炭素の単環式または縮合環多環式基を意味する。特定の実施態様では、アリールは、有利には、C6-C10アリールなどの限定された大きさでありうることが理解されるであろう。例示的なアリール基として、フェニル、ナフタレニルおよびアントラセニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキルについて記載されるように、または本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載されるように、アリー基は、非置換であるか、または置換されてもよい。
【００５５】
本明細書で使用する用語「シクロアルキル」は、3〜15員のすべて炭素の単環式環、すべて炭素の5員/6員または6員/6員の縮合二環式環、または多環式縮合環(「縮合」環系は、系中の各環が、系中の他の環それぞれと、隣接する対の炭素原子を共有することを意味する)基を意味し、1つ以上の環は、1つ以上の二重結合を含んでもよいが、シクロアルキルは、完全共役π電子系を含まない。特定の実施態様では、シクロアルキルは、有利には、C3-C13、C3-C6、C3-C6およびC4-C6などの限定された長さでありうることが理解されるであろう。アルキルについて記載されるように、または本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載されるように、シクロアルキルは、非置換であるか、または置換されてもよい。例示的なシクロアルキル基として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、アダマンチル、ノルボルニル、ノルボルネニル、9H-フルオレン-9-イルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５６】
本明細書で使用する用語「ヘテロシクロアルキル」は、3〜12個の環原子を有する単環式または縮合環基であって、少なくとも1つの環原子が、窒素、酸素またはイオウなどのヘテロ原子であり、残りの環原子が、炭素原子である基を意味する。ヘテロシクロアルキルは、任意に、1、2、3または4個のヘテロ原子を含んでもよい。ヘテロシクロアルキルはまた、窒素への二重結合などの1つ以上の二重結合(たとえば、C=NまたはN=Nなど)を有してもよいた、完全共役π電子系は含まない。特定の実施態様では、ヘテロシクロアルキルは、有利には、3〜7員のヘテロシクロアルキル、5〜7員のヘテロシクロアルキルなどの限定された大きさでありうることが理解されるであろう。アルキルについて記載されるように、または本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載されるように、ヘテロシクロアルキルは、非置換であるか、または置換されてもよい。例示的な ヘテロシクロアルキル基として、オキシラニル、チアナリル、アゼチジニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、ピロリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、1,4-ジオキサニル、モルホリニル、1,4-ジチアニル、ピペラジニル、オキセパニル、3,4-ジヒドロ-2H-ピラニル、5,6-ジヒドロ-2H-ピラニル、2H-ピラニル、1,2,3,4-テトラヒドロピリジニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５７】
本明細書で使用する用語「ヘテロアリール」は、5〜12個の環原子からなる単環式または縮合環基であって、窒素、酸素およびイオいうから選択される1、2、3または4個の環ヘテロ原子を含み、残りの環原子が、炭素原子であり、また、完全共役π電子系を有する基を意味する。特定の実施態様では、ヘテロアリールは、有利には、3〜9員のヘテロアリール、3〜7員のヘテロアリール、5〜7員のヘテロアリール、5〜9員のヘテロリールなどの限定された大きさでありうることが理解されるであろう。アルキルについて記載されるように、または本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載されるように、ヘテロアリールは、非置換であるか、または置換されてもよい。例示的な ヘテロアリール基として、ピロリル、フラニル、チオフェニル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、テトラゾリル、トリアジニル、ピラジニル、テトラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、チエニル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンズイソチアゾリル、インドリル、およびカルバゾロイルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
本明細書で使用する「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は、-OH基を意味する。
【００５９】
本明細書で使用する「アルコキシ」は、-O-(アルキル)または-O-(非置換シクロアルキル)基の両方を意味する。代表的な例として、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６０】
本明細書で使用する「アリールオキシ」は、-O-アリールまたは-O-ヘテロアリール基を意味する。代表的な例として、フェノキシ、ピリジニルオキシ、フラニルオキシ、チエニルオキシ、ピリミジニルオキシ、ピラジニルオキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６１】
本明細書で使用する「メルカプト」は、-SH基を意味する。
【００６２】
本明細書で使用する「アルキルチオ」は、-S-(アルキル)または-S-(非置換シクロアルキル)基を意味する。代表的な例として、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、シクロプロピルチオ、シクロブチルチオ、シクロペンチルチオ、シクロヘキシルチオなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６３】
本明細書で使用する「アリールチオ」は、-S-アリールまたは-S-ヘテロアリール基を意味する。代表的な例として、フェニルチオ、ピリジニルチオ、フラニルチオ、チエニルチオ、ピリミジニルチオなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６４】
本明細書で使用する「ハロ」または「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
【００６５】
本明細書で使用する「トリハロメチル」は、トリフルオロメチル基などの3個のハロ置換基を有するメチル基を意味する。
【００６６】
本明細書で使用する「シアノ」は、-CN基を意味する。
【００６７】
本明細書で使用する「スルフィニル」は、-S(O)R”基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基であるか、またはR”は、ヒドロキシル基であってもよい)を意味する。
【００６８】
本明細書で使用する「スルホニル」は、-S(O)2R”基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基であるか、またはR”は、ヒドロキシル基であってもよい)を意味する。
【００６９】
本明細書で使用する「S-スルホンアミド」は、-S(O)2NR”R”基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基である)を意味する。
【００７０】
本明細書で使用する「N-スルホンアミド」は、-NR”S(O)2R”基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基である)を意味する。
【００７１】
本明細書で使用する「O-カルバミル」は、-OC(O)NR”R”基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基である)を意味する。
【００７２】
本明細書で使用する「N-カルバミル」は、R”OC(O)NR”-基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基である)を意味する。
【００７３】
本明細書で使用する「O-チオカルバミル」は、-OC(S)NR”R”基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基である)を意味する。
【００７４】
本明細書で使用する「N-チオカルバミル」は、R”OC(S)NR”-基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基である)を意味する。
【００７５】
本明細書で使用する「アミノ」は、-NR”R”基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基である)を意味する。
【００７６】
本明細書で使用する「C-アミド」は、-C(O)NR”R”基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基である)を意味する。
【００７７】
本明細書で使用する「N-アミド」は、R”C(O)NR”-基(ここで、R”は、本明細書で提供されるさまざまな実施態様にて記載される任意のR基である)を意味する。
【００７８】
本明細書で使用する「ニトロ」は、-NO2基を意味する。
【００７９】
本明細書で使用する「結合」は、共有結合を意味する。
【００８０】
本明細書で使用する「任意の」または「任意に」は、後で記載されるイベントまたは状況が、発生する可能性はあるが、発生する必要はないこと、および該記載には、イベントまたは状況が発生する場合と発生しない場合が含まれることを意味する。たとえば、「アルキル基で任意に置換された複素環基」は、アルキルが、存在する可能性はあるが、存在する必要はないことを意味し、該記載は、複素環基がアルキル基で置換される状況および複素環基がアルキル基で置換されない状況を包含する。
【００８１】
本明細書で使用する「独立して」は、後で記載されるイベントまたは状況が、他の類似のイベントまたは状況と比較して、それ自体で読み取られるべきであることを意味する。たとえば、数個の等価な水素基が、該状況において記載されるもう1つの基によって任意に置換される状況において、「独立して、任意に」は、該基上の水素原子のいずれもが、もう1つの基によって置換されてもよく、水素原子のそれぞれを交換する基が、同一もしくは異なってもよいことを意味する。あるいは、たとえば、すべてが一組の可能なことから選択されるうる複数の基が存在する場合、「独立して」の使用は、該基のそれぞれが、任意の他の基とは離れて、一組の可能なことから選択されるうること、および状況において選択された該基が、同一もしくは異なってもよいことを意味する。
【００８２】
本明細書で使用する「アミノ酸」(別称、「AA」)は、アミノ基および酸基に共有的に結合したアルファ炭素原子を含む任意の分子を意味する。酸基は、カルボキシル基を包含してもよい。「アミノ酸」は、式：
【化３７】
2020531509.tif 000039
[式中、R'は、側基であり、Φは、少なくとも3個の炭素原子を含む]
の1つを有する分子を含んでもよい。「アミノ酸」は、D-アミノ酸およびL-アミノ酸型などの立体異性体を含む。例示的なアミノ酸基として、リシン(Lys)、アスパラギン(Asn)、トレオニン(Thr)、セリン(Ser)、イソロイシン(Ile)、メチオニン(Met)、プロリン(Pro)、ヒスチジン(His)、グルタミン(Gln)、アルギニン(Arg )、グリシン(Gly)、アスパラギン酸(Asp)、グルタミン酸(Glu)、アラニン(Ala)、バリン(Val)、フェニルアラニン(Phe)、ロイシン(Leu)、チロシン(Tyr)、システイン(Cys)、 トリプトファン(Trp)、ホスホセリン(PSER)、スルホシステイン、アルギノコハク酸(ASA)、ヒドロキシプロリン、ホスホエタノールアミン(PEA)、サルコシン(SARC)、タウリン(TAU)、カルノシン(CARN)、シトルリン(CIT)、アンセリン(ANS)、1,3-メチル-ヒスチジン(ME-HIS)、アルファ-アミノ-アジピン酸(AAA)、ベータ-アラニン(BALA)、エタノールアミン(ETN)、ガンマ-アミノ-酪酸(GABA)、ベータ-アミノ-イソ酪酸(BAIA)、アルファ-アミノ-酪酸(BABA)、L-アロ-シスタチオニン(シスタチオニン-A；CYSTA-A)、L-シスタチオニン(シスタチオニン-B； CYSTA-B)、シスチン、アロ-イソロイシン(ALLO-ILE)、DL-ヒドロキシリシン(ヒドロキシリシン(I))、DL-アロ-ヒドロキシルリシン(ヒドロキシルリシン(2))、オルニチン(ORN)、ホモシスチン(HCY)、およびそれらの誘導体などの20種類の内因性ヒトアミノ酸およびそれらの誘導体、が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書に記載の実施態様に関連して、アミノ酸は、それらのアルファ-アミノおよびカルボキシ官能基(すなわち、ペプチド結合配置にて)を介して、またはそれらの側鎖官能基(グルタミン酸の側鎖カルボキシ基など)およびそれらのアルファ-アミノまたはカルボキシ官能基のいずれかを介して、本明細書に記載の複合体の他の部分に共有的に結合することができる。本明細書に記載の複合体に関連して使用される場合、アミノ酸は、それらが組み込まれる複合体中で両性イオンとして存在することができる。
【００８３】
本明細書で使用する「プロドラッグ」は、オキサゾリジンの加水分解などの通常の代謝過程を通して次に薬理学的に活性な形態に変換されうる薬理学的に不活性な形態で対象に投与することができる化合物を意味する。プロドラッグが活性薬物に変換されうる代謝過程として、1つ以上の自発的化学反応、酵素触媒化学反応、および/またはその他の代謝化学反応あるいはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されないことが理解されるであろう。さまざまな代謝過程が当技術分野で知られており、本明細書に記載のプロドラッグが活性薬物に変換される代謝過程は非限定的であることが理解されるであろう。プロドラッグは、対象に治療効果をもたらす薬物の前駆体化合物でありうる。
【００８４】
本明細書で使用する用語「治療有効量」は、限定的ではないが、治療中の病気または障害の症状の緩和などの、研究者、獣医、医師または他の臨床医が求めている生物学的または医学的反応を、対象(すなわち、組織系、動物またはヒト)に引き起こす薬物または医薬品の量を意味する。1つの態様では、治療的有効量は、あらゆる医学的治療に適用可能な合理的なベネフィットリスク比で、疾患または疾患の症状を治療または緩和する活性物質の量である。もう1つの態様では、治療有効量は、通常の代謝過程を介して変換されると、求められている対象における生物学的または医学的反応を引き起こすことができる活性薬物の量を生成する不活性プロドラッグの量である。
【００８５】
また、単剤療法または併用療法を意味する用量は、1つ以上の本明細書に記載の複合体の投与中に発生しうる、あらゆる毒性、またはその他の望ましくない副作用に関して有利に選択されることも理解される。さらに、本明細書に記載の併用療法は、このような毒性またはその他の望ましくない副作用を示す複合体をより低い用量で投与することを可能にし、そのようなより低い用量は、毒性の閾値より下であるか、またはそうでない場合、治療域において併用療法の不在下で投与されるよりも低い量である。
【００８６】
本明細書で使用する「投与」には、本明細書に記載の複合体および組成物を宿主動物に導入するすべての手段が含まれ、経口(po)、静脈内(iv)、筋肉内(im)、皮下(sc)、経皮、吸入、頬内、眼、舌下、膣内、直腸などが挙げられるが、これらに限定されない。本明細書に記載の複合体および組成物は、従来の非毒性の薬学的に許容される担体、アジュバント、および/またはビヒクルを含む単位剤形および/または製剤で投与することができる。
【００８７】
本明細書で使用する「医薬組成物」または「組成物」は、本明細書に記載の1つ以上の複合体、または薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物と、薬学的に許容される賦形剤などの他の化学成分との混合物を意味する。医薬組成物の目的は、対象への複合体の投与を促進することである。記載されている複合体の送達に適した医薬組成物およびそれらの製造方法は、当業者には容易に明らかであろう。このような組成物およびそれらの製造方法は、たとえば、「Remington's Pharmaceutical Sciences」、19th Edition(Mack Publishing Company、1995)に見出すことができる。
【００８８】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用する単数形「a」、「an」および「the」は、文脈がそうでないことを明確に示さない限り、複数への言及を包含する。
【００８９】
特に定義されない限り、本明細書で使用するすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する当該技術分野の当業者に一般的に理解されているものと同じ意味を有する。本明細書に記載されているものと同様または等価な任意の方法、デバイス、および材料を、本発明の実施または試験に使用することができるが、好ましい方法、デバイス、および材料について、これから説明する。
【００９０】
詳細な記載
本明細書に記載の出願人の開示によれば、上記の要約で提供された番号付き条項の実施態様、またはそれらの任意の組み合わせは、本特許出願の詳細な記載セクションに記載された実施態様のいずれかとの組み合わせを企図している。
【００９１】
上記および以下の各実施態様では、式が、複合体の薬学的に許容されるすべての塩だけでなく、複合体式のあらゆる水和物および/または溶媒和物も包含し、表すことが理解されるべきである。ヒドロキシ、アミノなどの基などの特定の官能基は、複合体のさまざまな物理的形態で、水および/またはさまざまな溶媒との複合体および/または配位複合体を形成することが理解される。したがって、上記の式は、このようなさまざまな水和物および/または溶媒和物を含み、表すと理解されるべきである。複合体の式の水和物および/または溶媒和物だけでなく、また、複合体の式の非水和物および/または非溶媒和物も、そのような式によって記載されることも理解されるべきである。
【００９２】
いくつかの実施態様では、本開示は、式：B-L-A[式中、Bは炭酸脱水酵素IXの結合リガンドであり、Lは任意のリンカーであり、およびAは治療薬または造影剤である]の複合体を提供する。
【００９３】
本開示に関連して有用なCA IXリガンドは、構造によって特に限定されないことが理解されるであろう。有用なCA IX阻害剤は、CA IX阻害剤、CA IXアゴニスト、またはCA IXアンタゴニストなど、CA IXに対する結合親和性を示す任意の薬物または化合物でありうる。これらの実施態様のいくつかの態様では、CA IXリガンドは、 is anアリールスルホンアミド含有化合物である。これらの実施態様のいくつかの態様では、CA IXリガンドは、式：
【化３８】
2020531509.tif 000040
[式中、
各RAは、H、ハロゲン、-OR1、-OC(O)R1、-OC(O)NR1R2、-OS(O)R1、-OS(O)2R1、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-S(O)NR1R2、-S(O)2NR1R2、-OS(O)NR1R2、-OS(O)2NR1R2、-NR1R2、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR2、-NR1C(O)NR1R2、-NR1S(O)R2、-NR1S(O)2R2、-NR1S(O)NR1R2、-NR1S(O)2NR1R2、-C(O)R1、-C(O)OR1、および-C(O)NR1R2からなる群から独立して選択され；
RBは、-OR3、-SR3、-NR3R4、-S(O)2R3、-NR4C(O)R3または-NR4C(O)NR3R4であり；
R3は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニルであり、それぞれ独立して、-NR5-*、-NR5(CH2)m2N(R6)-*、-OC(O)-*、-OC(O)N(R5)-*、-C(O)-*、-C(O)O-*、および-C(O)N(R5)-*からなる群から選択される1つの置換基で置換され；
各R1、R2、R4、R5およびR6は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、およびC3-C9シクロアルキルからなる群から独立して選択され；
Lは、任意のリンカーであり；
Aは、治療薬または造影剤であり；
mは、1〜5の整数であり；および
*は、複合体の残りの部分への結合点を表す]
である。
【００９４】
いくつかの実施態様では、各RAは、ハロゲン、-S(O)2NR1R2、および-NR1R2からなる群から選択される。いくつかの実施態様では、1つのRAは、-S(O)2NR1R2である。いくつかの実施態様では、1つのRAは、-S(O)2NR1R2であり、ここで、R1およびR2は、Hである。いくつかの実施態様では、1つのRAは、-NR1R2である。いくつかの実施態様では、1つのRAは、-NR1R2であり、ここで、R1は、Hであり、およびR2は、C3-C9シクロアルキルである。いくつかの実施態様では、1つのRAは、-NR1R2であり、ここで、R1は、Hであり、およびR2は、C3-C9シクロオクチルである。いくつかの実施態様では、1つのRAは、-S(O)2NR1R2であり、および1つのRAは、-NR1R2である。いくつかの実施態様では、1つのRAは、-S(O)2NR1R2であり、ここで、R1およびR2は、Hであり、および1つのRAは、-NR1R2であり、ここで、R1は、Hであり、およびR2は、C3-C9シクロアルキルである。いくつかの実施態様では、1つのRAは、-S(O)2NR1R2であり、ここで、R1およびR2は、Hであり、および1つのRAは、-NR1R2であり、ここで、R1は、Hであり、およびR2は、シクロオクチルである。いくつかの実施態様では、CA IXリガンドは、式：
【化３９】
2020531509.tif 000041
[式中、各RA、RB、R1およびR2は、本明細書で定義されるとおりである]
である。いくつかの実施態様では、R1およびR2は、Hである。
【００９５】
いくつかの実施態様では、CA IXリガンドは、式：
【化４０】
2020531509.tif 000042
[式中、各RB、R1およびR2は、本明細書で定義されるとおりである]
である。いくつかの実施態様では、R1は、Hであり、およびR2は、シクロオクチルである。
【００９６】
いくつかの実施態様では、RBは、-S(O)2R3である。いくつかの実施態様では、RBは、-S(O)2R3であり、および1つのRAは、-S(O)2NR1R2である。いくつかの実施態様では、RBは、-S(O)2R3であり、1つのRAは、-S(O)2NR1R2であり、および1つのRAは、-NR1R2である。いくつかの実施態様では、RBは、-S(O)2R3、1つのRAは、-S(O)2NR1R2R1であり、ここで、R1およびR2は、Hであり、および1つのRAは、-NR1R2であり、ここで、R1は、Hであり、およびR2は、C3-C9シクロアルキルである。いくつかの実施態様では、CA IXリガンドは、式：
【化４１】
2020531509.tif 000043
[式中、各RA、RB、R1およびR2は、本明細書で定義されるとおりである]
である。
【００９７】
いくつかの実施態様では、CA IXリガンドは、式：
【化４２】
2020531509.tif 000044
[式中、R1、R2およびR3は、本明細書で定義されるとおりである]
である。いくつかの実施態様では、CA IXリガンドは、式：
【化４３】
2020531509.tif 000045
[式中、R3は、本明細書で定義されるとおりである]
である。
【００９８】
いくつかの実施態様では、R3は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニルであり、それぞれ独立して、-NR5-*、-NR5(CH2)m2N(R6)-*、-OC(O)-*、-OC(O)N(R5)-*、-C(O)-*、-C(O)O-*、および-C(O)N(R5)-*からなる群から選択される1つの置換基で置換され；およびC1-C10アルキル、C2-C10アルケニルまたはフェニル中の残りの各水素原子は独立して、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニル、ハロゲン、-OR1、-OC(O)R1、-OC(O)NR1R2、-OS(O)R1、-OS(O)2R1、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-S(O)NR1R2、-S(O)2NR1R2、-OS(O)NR1R2、-OS(O)2NR1R2、-NR1R2、-NR1C(O)R1、-NR1C(O)OR2、-NR1C(O)NR1R2、-NR1S(O)R2、-NR1S(O)2R2、-NR1S(O)NR1R2、-NR1S(O)2NR1R2、-C(O)R1、-C(O)OR1、および-C(O)NR1R2によって任意に置換される。いくつかの実施態様では、R3は、-C(O)N(R5)-*および-C(O)-*(ここで、R5は、本明細書で定義されるとおりであり、*は、複合体の残りの部分への結合点を表す)からなる群から選択される1つの置換基で置換されたC1-C10アルキルである。
【００９９】
本開示に関連して有用なリンカーは、構造によって特に限定されないことが理解されるであろう。リンカーは、長さが約2〜約100原子の任意のリンカーでありえ、CA IXリガンドを薬剤に共有結合させるC、N、OおよびSなどの元素で構成されうる。いくつかの実施態様では、リンカーは、原子のリンカー鎖方向の長さが10〜75原子の任意のリンカーである。いくつかの実施態様では、リンカーは、原子のリンカー鎖方向の長さが15〜60原子の任意のリンカーである。鎖中の原子数に関してリンカーの長さについて本明細書で提供される範囲は、5、10、15、20、25、35、45、60、75、80、および100などの2と100の間の任意の境界数を含むことができることが理解されるであろう。いくつかの実施態様では、リンカーは、5Å〜約100Åの長さの任意のリンカーでありうる。いくつかの実施態様では、リンカーは、5Å〜約50Åの長さの任意のリンカーでありうる。いくつかの実施態様では、リンカーは、5Å〜約40Åの長さの任意のリンカーでありうる。いくつかの実施態様では、リンカーは、5Å〜約25Åの長さの任意のリンカーでありうる。リンカーの長さについて本明細書で提供される範囲は、5と100の間の任意の境界数を含むことができることが理解されるであろう。
【０１００】
いくつかの実施態様では、リンカーは、放出可能なリンカーを含み、ここで、用語「放出可能なリンカー」は、pH不安定、酸不安定、塩基不安定、酸化不安定、代謝不安定、生化学不安定、または酵素不安定結合などの、生理的条件下で切断されうる少なくとも1つの結合を含むリンカーを意味する。結合破壊をもたらすそのような生理的条件は、必ずしも生物学的または代謝過程を含む必要はなく、代わりに、たとえば、生理的pHでの加水分解反応など、または細胞質pHよりも低いpHを有するエンドソームなどの細胞小器官への区画化の結果としての、標準的な化学反応を包含しうる。いくつかの実施態様では、放出可能なリンカーは、ジスルフィド結合を含む。いくつかの実施態様では、リンカーは、ジスルフィドリンカー部分を含む。いくつかの実施態様では、リンカーは、ヒドラジンリンカー部分を含む。
【０１０１】
いくつかの実施態様では、放出可能なリンカーは、式：
【化４４】
2020531509.tif 000046
または
【化４５】
2020531509.tif 000047
[式中、
各R7およびR8は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキルからなる群から独立して選択され、ここで、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキル中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各Xは独立して、C1-C6アルキルまたはC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)であり、ここで、C1-C6アルキルおよびC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各R9、R10、R11およびR12は、H、C1-C7アルキル、C2-C7アルケニル、C2-C7アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、および5〜7員のヘテロアリールからなる群から独立して選択され；および
各*は、複合体の残りの部分へ共有結合を表す]
を有する部分を含む。いくつかの実施態様では、各R7およびR8は、Hである。いくつかの実施態様では、Xは、C1-C6アルキルである。
【０１０２】
いくつかの実施態様では、リンカーは、式：
【化４６】
2020531509.tif 000048
[式中、
R7およびR8はそれぞれ独立して、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキルからなる群から選択され、ここで、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキル中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各Xは独立して、C1-C6アルキルまたはC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)であり、ここで、C1-C6アルキルおよびC6-C10アリール-(C1-C6アルキル)中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR9、-OC(O)R9、-OC(O)NR9R10、-OS(O)R9、-OS(O)2R9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-S(O)NR9R10、-S(O)2NR9R10、-OS(O)NR9R10、-OS(O)2NR9R10、-NR9R10、-NR9C(O)R10、-NR9C(O)OR10、-NR9C(O)NR11R12、-NR9S(O)R10、-NR9S(O)2R10、-NR9S(O)NR11R12、-NR9S(O)2NR11R12、-C(O)R9、-C(O)OR9または-C(O)NR9R10によって任意に置換され；
各R9、R10、R11およびR12は、H、C1-C7アルキル、C2-C7アルケニル、C2-C7アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、および5〜7員のヘテロアリールからなる群から独立して選択され；および
各*は、複合体の残りの部分へ共有結合を表す]
を有する部分を含む。いくつかの実施態様では、各R7およびR8は、Hである。いくつかの実施態様では、Xは、C1-C6アルキルである。
【０１０３】
いくつかの実施態様では、リンカーは、1つ以上のスペーサーリンカー部分を含みうる。本開示の複合体に含まれるスペーサーリンカー部分が、構造に特に限定されないことが理解されるであろう。いくつかの実施態様では、リンカーは、アルキル鎖部分、エーテル部分(たとえば、PEG)、長鎖アミン部分、アミノ酸鎖部分、ヒドラジン部分など、およびそれらの組み合わせなどの単純な基を含む。いくつかの実施態様では、本開示に関連して有用なリンカーは、-C(O)(C1-C12アルキル)C(O)-、-NH-C1-C12アルキル-NH-、-N(C1-C6アルキル)-C1-C12アルキル-N(C1-C6アルキル)-、-C(O)CH2CH2(OCH2CH2)qNH-、-C(O)CH2CH2(OCH2CH2)qN(C1-C6アルキル)-、-(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-、-NH(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-、および-N(C1-C6アルキル)(CH2CH2O)qCH2CH2C(O)-からなる群から選択される少なくとも1つの部分を含み
；ここで、qは、1〜40の整数である。いくつかの実施態様では、qは、2である。いくつかの実施態様では、qは、4である。いくつかの実施態様では、qは、6である。いくつかの実施態様では、qは、20である。qの値が、特に限定されず、1〜約40の間の任意の値でありうることが理解されるであろう。いくつかの実施態様では、リンカーは、アミノ酸の鎖を含みうる。いくつかの実施態様では、リンカーは、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチドまたはヘキサペプチドを含みうる。いくつかの実施態様では、リンカーは、天然に存在するアミノ酸を含みうる。いくつかの実施態様では、リンカーは、非天然アミノ酸を含みうる。いくつかの実施態様では、リンカーは、3-アミノアラニン、アスパラギン酸、システイン、およびアルギニンからなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸を含む。いくつかの実施態様では、リンカーは、アミノ酸配列：3-アミノ-アラニン-Asp-Cysを有する部分を含む。いくつかの実施態様では、リンカーは、アミノ酸配列：Asp-Arg-Asp-3-アミノ-アラニン-Asp-Cysを有する部分を含む。
【０１０４】
いくつかの実施態様では、リンカーは、式：
【化４７】
2020531509.tif 000049
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
を有する複合体の部分を含む。
【０１０５】
本明細書に記載の複合体のいずれかに関連して使用される薬剤は、薬学的に活性な化合物などの、細胞機能を調節またはそうでなければ変更することができる任意の分子(たとえば、治療薬)、あるいは可視化された細胞または組織についての測定可能なシグナルを提供することができる任意の分子(たとえば、造影剤)でありうる。
【０１０６】
治療薬として使用するのに適した分子として、ペプチド、オリゴペプチド、レトロインベルソオリゴペプチド、タンパク質、少なくとも1つの非ペプチド結合が、ペプチド結合を置き換えるタンパク質類似体、アポタンパク質、糖タンパク質、酵素、補酵素、酵素阻害剤、アミノ酸およびそれらの誘導体、受容体およびその他の膜タンパク質；抗原およびそれに対する抗体；ハプテンおよびそれに対する抗体；ホルモン、脂質、リン脂質、リポソーム；微小管阻害剤などの細胞毒性剤；抗生物質；鎮痛薬；気管支拡張剤；ベータ遮断薬；抗菌剤；降圧剤；抗不整脈薬、強心配糖体、抗狭心症薬および血管拡張薬などの心血管薬；覚せい剤、向精神薬、抗躁薬、および抑制薬などの中枢神経系薬；抗ウイルス剤；抗ヒスタミン剤；化学療法剤などの抗がん剤；精神安定剤；抗うつ剤；H-2アンタゴニスト；抗けいれん剤；制吐剤；プロスタグランジンおよびプロスタグランジン類似体；筋弛緩薬；抗炎症物質；覚せい剤；充血除去剤；制吐剤；利尿薬；鎮痙薬；抗喘息薬；抗パーキンソン剤；去痰薬；鎮咳薬；粘液溶解薬；ならびにミネラルおよび栄養添加物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０７】
いくつかの実施態様では、治療薬は、チューブリシンでありうる。天然のチューブリシンは、一般に、N-メチルピペコリン酸(Mep)、イソロイシン(Ile)、ツブバリン(Tuv)と呼ばれる非天然アミノ酸、およびツブチロシン(Tut、チロシンの類似体)と呼ばれる非天然アミノ酸またはツブフェニルアラニン(Tup、フェニルアラニンの類似体)と呼ばれる非天然アミノ酸のいずれかからなる直鎖テトラペプチドである。
【０１０８】
いくつかの実施態様では、治療薬は、式：
【化４８】
2020531509.tif 000050
[式中、
R1a、R3a、R3a'およびR3a''はそれぞれ独立して、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキルからなる群から選択され、ここで、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルおよびC3-C6シクロアルキル中の各水素原子は独立して、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、-OR13a、-OC(O)R13a、-OC(O)NR13aR13a'、-OS(O)R13a、-OS(O)2R13a、-SR13a、-SC(O)R13a、-S(O)R13a、-S(O)2R13a、-S(O)2OR13a、-S(O)NR13aR13a'、-S(O)2NR13aR13a'、-OS(O)NR13aR13a'、-OS(O)2NR13aR13a'、-NR13aR13a'、-NR13aC(O)R14a、-NR13aC(O)OR14a、-NR13aC(O)NR14aR14a'、-NR13aS(O)R14a、-NR13aS(O)2R14a、-NR13aS(O)NR13aR14a'、-NR13aS(O)2NR14aR14a'、-P(O)(OR13a)2、-C(O)R13a、-C(O)OR13aまたは-C(O)NR13aR13a'によって任意に置換され；
R2a、R4aおよびR12aはそれぞれ独立して、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルからなる群から選択され；
R5aおよびR6aはそれぞれ独立して、H、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、-OR15a、-SR15aおよび-NR15aR15a'からなる群から選択され、ここで、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニルおよびC2-C6アルキニル中の各水素原子は独立して、ハロゲン、-OR16a、-SR16a、-NR16aR16a'、-C(O)R16a、-C(O)OR16aまたは-C(O)NR16aR16a'によって任意に置換され；あるいはR5aおよびR6aは、それらが結合する炭素原子と一緒になって、-C(O)-を形成し；
各R7a、R8a、R9a、R10aおよびR11aは、H、ハロゲン、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、-CN、-NO2、-NCO、-OR17a、-SR17a、-S(O)2OR17a、-NR17aR17a'、-P(O)(OR17a)2、-C(O)R17a、-C(O)OR17aおよび-C(O)NR17aR17a'からなる群から独立して選択され、ここで、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニルおよびC2-C6アルキニル中の各水素原子は独立して、ハロゲン、-OR18a、-SR18a、-NR18aR18a'、-C(O)R18a、-C(O)OR18aまたは-C(O)NR18aR18a'によって任意に置換され；
各R13a、R13a'、R14a、R14a'、R15a、R15a'、R16a、R16a'、R17aおよびR17a'は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリールおよび5〜7員のヘテロアリールからなる群から独立して選択され、ここで、子C1-C7アルキル、C2-C7アルケニル、C2-C7アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、または5〜7員のヘテロアリール中の各水素原は独立して、ハロゲン、-OH、-SH、-NH2または-CO2Hによって任意に置換され；
各R18aおよびR18a'は、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール-C(O)R19a、-P(O)(OR19a)2、および-S(O)2OR19aからなる群から独立して選択され；
各R19aは独立して、H、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニル、C3-C6シクロアルキル、3〜7員のヘテロシクロアルキル、C6-C10アリールおよび5〜7員のヘテロアリールから選択され；
aは、1、2または3であり；および
*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるテトラペプチドである。
【０１０９】
いくつかの実施態様では、治療薬は、式：
【化４９】
2020531509.tif 000051
[式中、R1a、R2a、R3a、R3a'、R3a'',R4a、R5a、R7a、R8a、R9a、R10a、R11aおよびR12aは、本明細書に記載のとおりであり、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示される。
【０１１０】
もう1つの実施態様では、治療薬は、以下の一般式：
【化５０】
2020531509.tif 000052
[式中、R9aおよびR13aは、本明細書に記載のとおりであり、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示される天然に存在するチューブリシン、またはその類似体もしくは誘導体でありうる。
【０１１１】
前記チューブリシンのそれぞれの複合体は、本明細書に記載される。
【０１１２】
いくつかの実施態様では、治療薬は、以下の一般式：
【化５１】
2020531509.tif 000053
[式中、
【表１】
2020531509.tif 000054
、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示される天然に存在するチューブリシンでありうる。
【０１１３】
いくつかの実施態様では、治療薬は、メイタンシノールおよびメイタンシノール類似体などのメイタンシノイドである。メイタンシノイドは、微小管形成を阻害する化合物であり、哺乳類細胞に対して非常に有毒である。適切なメイタンシノール類似体の例には、修飾芳香環を有するものおよび他の位置に修飾を有するものが含まれる。そのようなメイタンシノイドは、たとえば、米国特許第4,256,746号、第4,294,757号、第4,307,016号、第4,313,946号、第4,315,929号、第4,322,348号、第4,331,598号、第4,361,650号、第4,362,663号、第4,364,866号、第4,424,219号、第4,371,533号、第4,450,254号、第5,475,092号、第5,585,499号、第5,846,545号、および第6,333,410号に記載されている。
【０１１４】
修飾芳香環を有するメイタンシノール類似体の例として、C-19-デクロロ(米国特許第4,256,746号)、C-20-ヒドロキシ(またはC-20-デメチル)+/-C-19-デクロロ(米国特許第4,361,650号および第4,307,016号)、およびC-20-デメトキシ、C-20-アシルオキシ(-OCOR)、+/-デクロロ(米国特許第4,294,757号)が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１５】
芳香環以外の部分の修飾を有するメイタンシノール類似体の例として、C-9-SH(米国特許第4,424,219号)、C-14-アルコキシメチル(デメトキシ/CH2OR)(米国特許第4,331,598号)、C-14-ヒドロキシメチルまたはアシルオキシメチル(CH2OHまたはCH2OAc)(米国特許第4,450,254号)、C-15-ヒドロキシ/アシルオキシ(米国特許第4,364,866号)、C-15-メトキシ(米国特許第4,313,946号および第4,315,929号)、C-18-N-デメチル(米国特許第4,362,663号および第4,322,348号)、および4,5-デオキシ(米国特許第4,371,533号)が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１６】
いくつかの実施態様では、複合体は、細胞毒性剤として、N2'-デアセチル-N2'-(3-メルカプト-1-オキソプロピル)-メイタンシンとしても知られるチオール含有メイタンシノイドDM1を含む。DM1の構造は、式(I)：
【化５２】
2020531509.tif 000055
(I)
で表される。
【０１１７】
いくつかの実施態様では、複合体は、細胞毒性剤として、N2'-デアセチル-N2'-(4-メチル-4-メルカプト-1-オキソペンチル)-メイタンシンとしても知られるチオール含有メイタンシノイドDM4を含む。DM1の構造は、式(II)：
【化５３】
2020531509.tif 000056
(II)
で表される。
【０１１８】
本開示に関連して、イオウ原子を有する炭素原子上にモノまたはジアルキル置換を有する、チオールおよびジスルフィド含有メイタンシノイドなどの他のメイタンシンを使用してもよい。特に好ましいのは、C-3位に、(a)C-14ヒドロキシメチル、C-15ヒドロキシ、またはC-20デスメチル官能基、および(b)ヒンダードスルフヒドリル基を有するアシル基(ここで、チオール官能基を有するアシル基の炭素原子は、1つまたは2つの置換基を有し、該置換基は、CH3、C2H5、1〜10個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖アルキルまたはアルケニル、3〜10個の炭素原子を有する環式アルキルもしくはアルケニル、フェニル、置換フェニル、または複素環式芳香族またはヘテロシクロアルキルラジカルであり、さらに、ここで、1つの置換基はHであり得、ここで、アシル基は、カルボニル官能基とイオウ原子の間の少なくとも3個の炭素原子の直鎖長さを有する)をもつアシル化アミノ酸側鎖を有するメイタンシノイドである。
【０１１９】
本発明に関連して使用するためのさらなるメイタンシンとして、式(III)：
【化５４】
2020531509.tif 000057
(III)
[式中、
Y'は、(CR1bR2b)p(CR3b=CR4b)p1C=Cp2Ap3(CR5bP6b)p4Dp5(CR7b=CR8b)p6(C=C)p7Bp8(CR9bR10b)p9CR11bR12bSZを表し、
A、B、Dはそれぞれ独立して、C3-C9-シクロアルキルまたはC3-C9-シクロアルケニル、C6-C10アリール、5〜7員のヘテロアリール、または5〜7員のヘテラリオ環式(heteraliocyclic)であり、
ここで、R1b、R2b、R3b、R4b、R5b、R6b、R7b、R8b、R9b、R10b、R11bおよびR12bのそれぞれは独立して、H、C1-C6アルキル、C1-C6アルケニル、C6-C10アリール、または5〜7員のヘテロアリール、または5〜7員のヘテラリオ環式(heteraliocyclic)であり、
ここで、p1、p2、p3、p4、p5、p6、p7、p8、およびp9はそれぞれ独立して、ゼロまたは1〜5の整数であり、ただそ。少なくとも2つのp1、p2、p3、p4、p5、p6、p7、p8、およびp9は、どの時点においてもゼロではない]
で示される化合物が挙げられる。
【０１２０】
造影剤として有用な適切な分子として、フルオレセイン色素、ローダミン色素、近赤外色素などの色素、および当技術分野で知られている放射性核種キレート剤などのSPECT造影剤が挙げられるが、これらに限定されない。ローダミン色素の例として、5-カルボキシテトラメチルローダミン(5-TAMRA)、ローダミンB、ローダミン6G、TRITC、テキサスレッド、ローダミン123、スルホローダミン101などが挙げられるが、これらに限定されない。ローダミン色素の例として、フルオレセイン、5-アミノ-フルオレセイン、6-アミノ-フルオレセイン、フルオレセインイソシアネート(FITC)、フルオレセイン-5-マレイミド、NHS-フルオレセイン、オレゴングリーン、東京グリーン、シンガポールグリーン、フィラデルフィアグリーンなどが挙げられるが、これらに限定されない。近赤外色素の例として、S-0456が挙げられる。放射性核種キレート剤の例として、WO03/092742に記載されているものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２１】
いくつかの実施態様では、Aは、式：
【化５５】
2020531509.tif 000058
または
【化５６】
2020531509.tif 000059
[式中、*は、複合体の残りの部分への共有結合を表す]
で示されるフルオレセイン色素である。
【０１２２】
他の実施態様では、本明細書に記載の適切な造影剤として、キレート基に配位した少なくとも1つの金属の放射性同位体(別名、放射性核種)を含む、放射線造影剤などのPETまたはSPECT造影剤などが挙げられるが、これらに限定されない。例示的な放射性金属同位体として、テクネチウム、レニウム、ガリウム、ガドリニウム、インジウム、銅などの同位体が挙げられる。いくつかの実施態様では、適切な放射性核種として、111In、99mTc、64Cu、67Cu、67Ga、68Gaなどが挙げられるが、これらに限定されない。本開示に関連して有用なキレート基として、1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1,4,7,10-テトラ酢酸(DOTA)、1,4,7-トリアザシクロノナン-1,4,7-トリ酢酸(NOTA)、1,4,8,11-テトラアザシクロテトラデカン-1,4,8,11-テトラ酢酸(TETA)、2-(4,7,10-トリス(カルボキシメチル)-1,4,7,10-テトラアザシクロドデカン-1-イル)ペンタン二酸(DOTAGA)、2-(4,7-ビス(カルボキシメチル)-1,4,7-トリアゾナン-1-イル)ペンタン二酸(NODAGA)、ジエチレントリアミンペンタ酢酸(DTPA)、2,2',2''-(3,6,9-トリアザ-1-(2,6)-ピリジンアシクロデカファン-3,6,9-トリイル)トリ酢酸(PCTA)、2,2'-((2-(4,7-ビス(カルボキシメチル)-1,4,7-トリアゾナン-1-イル)エチル)アザンジイル)ジ酢酸(NETA)などのラジカルが挙げられるが、これらに限定されない。放射性核種造影剤の追加の実例は、米国特許番号9193763に記載されており、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。
【０１２３】
1つの実施態様では、本明細書に記載の方法は、「対象」としてヒトの臨床医学および獣医学適用の両方に使用することができる。したがって、「対象」は、本明細書に記載の複合体を投与されることが可能であり、ヒト(「患者」)でありえ、あるいは、獣医適用の場合は、実験室、農業、家畜、または野生動物でありうる。1つの態様では、対象は、ヒト患者、げっ歯類(たとえば、マウス、ラット、ハムスターなど)などの実験動物、ウサギ、サル、チンパンジー、イヌ、ネコおよびウサギなどの家畜、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギなどの農業動物、およびクマ、パンダ、ライオン、トラ、ヒョウ、ゾウ、シマウマ、キリン、ゴリラ、イルカ、およびクジラなどの飼育下の野生動物でありうる。
【０１２４】
さまざまな実施態様では、本明細書に記載のがんは、良性腫瘍および悪性腫瘍を含む、腫瘍形成性のがん細胞集団でありうるか、またはがんは、非腫瘍形成性でありうる。がんは、自発的に、または患者の生殖細胞系列に存在する変異または体細胞変異などのプロセスによって、あるいはがんは、化学的に、ウイルス的に、または放射線によって誘発されうる。本明細書に記載の発明に適用可能ながんとして、がん腫、肉腫、リンパ腫、黒色腫、中皮腫、鼻咽頭がん、白血病、腺がん、および骨髄腫が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２５】
いくつかの態様では、がんは、肺がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭部がん、頸部がん、皮膚黒色腫、眼内黒色腫、子宮がん、卵巣がん、子宮内膜がん、平滑筋肉腫、直腸がん、胃がん、大腸がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵管がん、子宮内膜のがん、子宮頸がん、膣がん、外陰がん、ホジキン病、食道がん、小腸がん、内分泌系のがん、甲状腺のがん、副甲状腺のがん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、副腎のがん、軟部組織の肉腫、尿道のがん、陰茎のがん、前立腺がん、慢性白血病、急性白血病、リンパ球性リンパ腫、胸膜中皮腫、膀胱がん、バーキットリンパ腫、尿管がん、腎臓のがん、腎細胞がん、腎盂のがん、中枢神経系(CNS)の新生物、原発性CNSリンパ腫、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、胆管がん、ヒュルトレ細胞甲状腺がんまたは胃食道接合部の腺がんでありうる。
【０１２６】
いくつかの実施態様では、本開示は、標的化NIR造影に関し、ここで、本開示の複合体は、CA IXタンパク質を発現する細胞および組織の選択的造影を提供する。本開示の複合体に関連して使用されるインビトロまたはインビボ造影法は、特に限定されず、当該技術分野で知られている従来のインビトロまたはインビボ造影法のいずれでもよいことが理解されるであろう。さらに、当該技術分野で知られているこのような造影法は、Nikon 90iなどの蛍光顕微鏡システム、キャリパーIVIS Lumina II造影ステーション(カメラ、ISOON5160 Andor Nikonカメラなどに接続されていることが多い)などのインビボ蛍光造影システムを含むが、これらに限定されない、当技術分野で知られている任意の機器またはアッセイキットを使用して実行することができる。
【０１２７】
いくつかの実施態様では、本開示は、インビトロまたはインビボのいずれかで、細胞または組織の集団の造影法を提供する。このようなインビトロ法は、当該技術分野で知られている任意の方法によって行うことができることが理解されるであろう。いくつかの実施態様では、本明細書に記載のインビトロ造影法は、a．細胞の集団を本開示の複合体に接触させて、CA IXタンパク質を発現している細胞に結合した複合体を提供すること；およびb．近赤外波長光による照射によって細胞に結合した複合体を可視化すること；を含みうる。近赤外波長光による照射によって細胞に結合した複合体を可視化することが、励起波長での照射および発光波長での検出を含みうることが理解されるであろう。したがって、いくつかの実施態様では、本明細書に記載のインビトロ造影法は、a．細胞の集団を本開示の複合体に接触させて、CA IXタンパク質を発現している細胞に結合した複合体を提供すること；b．近赤外波長光によってCA IXタンパク質を発現している細胞に結合した複合体を照射すること；およびc．発光波長にてがん細胞から放出された光を検出すること；を含みうる。
【０１２８】
いくつかの実施態様では、本明細書に記載の方法にしたがって、がん性腫瘍などの組織を造影することができる。たとえば、いくつかの実施態様では、本明細書に記載のインビボ造影法は、a．本開示の複合体、またはその薬学的に許容される塩を患者に投与して、CA IXタンパク質を発現している細胞に結合した複合体を提供すること；およびb．近赤外波長光による照射によってCA IXタンパク質を発現している細胞に結合した複合体を可視化すること；を含みうる。近赤外波長光による照射によって細胞に結合した複合体を可視化することが、励起波長での照射および発光波長での検出を含みうることが理解されるであろう。したがって、いくつかの実施態様では、本明細書に記載のインビボ造影法は、a．本開示の複合体、またはその薬学的に許容される塩を患者に投与して、CA IXタンパク質を発現している細胞に結合した複合体を提供すること；b．近赤外波長光によってCA IXタンパク質を発現している細胞に結合した複合体を照射すること；およびc．発光波長にてがん細胞から放出された光を検出すること；を含みうる。近赤外波長光による照射によって細胞に結合した複合体を可視化することが、いずれかの既知のNIR造影技術(診断またはその他)または当該技術分野で知られている機器を使用して実行することができることが理解されるであろう。
【０１２９】
本明細書に記載の造影法に関連して使用される光の波長は、約600 nm〜約2500 nmの範囲などの近赤外波長領域内でありうる。このような波長は、さまざまな波長(複数)または単一の波長でありうる。いくつかの実施態様では、励起波長は、約600 nm〜約2500 nmの範囲内でありうる。いくつかの実施態様では、励起波長は、約600 nm〜約900 nmの範囲内でありうる。いくつかの実施態様では、励起波長は、約700 nm〜約750 nmの範囲内でありうる。いくつかの実施態様では、励起波長は、約745 nmでありうる。いくつかの実施態様では、発光波長は、約600 nm〜約2500 nmの範囲内でありうる。いくつかの実施態様では、発光波長は、約750 nm〜約900 nmの範囲内でありうる。いくつかの実施態様では、発光波長は、約750 nm〜約790 nmの範囲内でありうる。いくつかの実施態様では、発光波長は、約790 nmでありうる。いくつかの実施態様では、発光波長は、ICG(インドシアニングリーン色素としても知られる)の発光波長でありうる。
【０１３０】
本明細書に記載の方法の他の実施態様では、本明細書に記載の複合体の薬学的に許容される塩が、提供される。本明細書に記載の複合体の薬学的に許容される塩として、その酸付加塩および塩基塩が挙げられる。
【０１３１】
適切な酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。例示的な例として、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩/炭酸塩、重硫酸塩/硫酸塩、ホウ酸塩、カンシル酸塩、クエン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、塩酸塩/塩化物、臭化水素酸塩/臭化物、ヨウ化水素酸塩/ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフチル酸塩、2-ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロチン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩/リン酸水素塩/リン酸二水素塩、サッカリン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トシレートおよびトリフルオロ酢酸塩が挙げられる。
【０１３２】
本明細書に記載の複合体に適切な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。例示的な例として、アルギニン塩、ベンザチン塩、カルシウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、ジオールアミン塩、グリシン塩、リシン塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、オラミン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、トロメタミン塩および亜鉛塩が挙げられる。たとえば、ヘミ硫酸塩およびヘミカルシウム塩などの、酸および塩基のヘミ塩も形成されうる。
【０１３３】
本明細書に記載のがんのタイプ、投与経路および/または複合体を局所もしくは全身投与するかどうかに応じて、約1 μg/kg〜約1 g/kgの範囲内の用量などの広範囲にわたる許容用量が本明細書において企図される。他の実施態様では、約0.001 μmol/kg〜約1 μmol/kgの範囲内の用量が使用されうる。投薬は、単回であるか、または分割されてよく、q.d.、b.i.d.、t.i.d.、または隔日、隔週(b.i.w.)、週に1回、週に4回、月に1回、四半期に1回などの広範囲のプロトコルにしたがって投与されうる。これらの場合のそれぞれにおいて、本明細書に記載の治療有効量は、投与の例に対応するか、あるいは、投与プロトコルによって決定される、合計の1日用量、週用量、月用量、または四半期用量に対応することが理解される。
【０１３４】
本明細書に記載の複合体を投与するための効果的な投与計画を使用することができる。たとえば、本明細書に記載の複合体を、単回投与として投与することができ、あるいは、用量を分割し、毎日の複数用量投与計画として投与することができる。さらに、変則的(staggered)投与計画、たとえば、1週間当たり1日〜5日間の処置を、毎日処置の代替として使用することができ、本明細書に記載の方法の目的のために、そのような断続的または変則的1日投与計画は、すべて毎日処置と同等であるとみなされ、企図される。1つの例示的実施態様では、患者は、がんを治療するために本明細書に記載の複合体の複数回注射で処置される。1つの実施態様では、患者は、たとえば、12〜72時間間隔または48〜72時間間隔で、本明細書に記載の複合体を複数回(約2〜約50回が好ましい)注射される。本明細書に記載の複合体の追加の注射を、最初の注射の後、数日または数か月の間隔で患者に投与することができ、追加の注射は、がんの再発を防止することができる。
【０１３５】
1つの実施態様では、本明細書に記載の複合体を、1つ以上の薬学的に許容される担体を伴う製剤として投与してもよい。担体は、賦形剤でありうる。担体の選択は、特定の投与様式、溶解性および安定性に対する担体の効果、および剤形の性質などの要因に大きく依存する。本明細書に記載の複合体の送達に適した医薬組成物およびそれらの製造方法は、当業者には容易に明らかであろう。そのような組成物およびそれらの製造方法は、たとえば、Remington：The Science & Practice of Pharmacy、21th Edition(Lippincott Williams & Wilkins、2005)に見出され、これは、参照により本願に組み込まれる。
【０１３６】
1つの例示的態様では、薬学的に許容される担体は、生理的に適合する、任意およびすべての溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤など、ならびにそれらの組み合わせを包含する。いくつかの実施態様では、担体は、非経口投与に適している。薬学的に許容される担体は、滅菌水溶液または分散液、および滅菌注射液または分散液の即時調剤用の滅菌粉末を包含する。補足的活性化合物も、本発明の組成物に配合することができる。
【０１３７】
さまざまな実施態様では、液体製剤は、懸濁液および溶液を包含してもよい。このような製剤は、担体、たとえば、水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロースまたは適切な油、および1つ以上の乳化剤および/または懸濁剤を含んでもよい。液体製剤は、固体の再構成によって製造されてもよい。
【０１３８】
1つの実施態様では、水性懸濁液は、適切な賦形剤と組み合わせて活性物質を含んでもよい。このような賦形剤は、懸濁剤、たとえば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアカシアゴム；天然のホスファチド、たとえば、レシチンであってもよい分散剤または湿潤剤；アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、たとえば、ステアリン酸ポリオキシエチレン；エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、たとえば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール；エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールから誘導された部分エステルとの縮合生成物、たとえば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール；またはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導された部分エステルとの縮合生成物、たとえば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン；である。水性懸濁液は、1つ以上の保存剤、たとえば、アスコルビン酸、エチル安息香酸、n-プロピル安息香酸、またはp-ヒドロキシ安息香酸；または1つ以上の着色剤を含んでもよい。
【０１３９】
1つの例示的実施態様では、水の添加による水性懸濁液の製造に適した分散性粉末および顆粒は、分散剤または湿潤剤、懸濁剤および1つ以上の防腐剤と混合した活性成分を提供する。追加の賦形剤、たとえば、着色剤が存在してもよい。
【０１４０】
他の実施態様では、等張剤、たとえば、糖類、マンニトール、ソルビトールなどのポリアルコール、または塩化ナトリウムを、組成物に含めることができる。注射用組成物の長期吸収は、組成物に吸収を遅らせる薬剤、たとえば、モノステアリン酸塩およびゼラチンを含めることによりもたらされうる。
【０１４１】
経口投与のための例示的な形式として、錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、シロップ剤などが挙げられる。
【０１４２】
1つの態様では、本明細書に記載の複合体は、血流、筋肉、または内臓器官に直接投与することができる。このような非経口投与用の適切な経路として、静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、硬膜外、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、腫瘍内、筋肉内および皮下送達が挙げられる。非経口投与に適した手段として、針(マイクロニードルを含む)注射器、無針注射器および輸液技術が挙げられる。
【０１４３】
1つの例示的態様では、非経口製剤は、典型的には、塩などの担体または賦形剤、炭水化物および緩衝剤(pH3〜9にてが好ましい)を含んでもよい水溶液であるが、いくつかの適用については、それらは、滅菌非水性溶液として、または滅菌、発熱物質を含まない水などの適切な媒体と組み合わせて使用される乾燥形態として製剤されるのがより適切でありうる。他の実施態様では、本明細書に記載の液体製剤のいずれも、本明細書に記載の複合体の非経口投与に適合させることができる。たとえば、無菌条件下での凍結乾燥による、無菌条件下での非経口製剤の製造は、当業者に周知の標準的な製薬技術を使用して容易に達成することができる。
1つの実施態様では、非経口製剤の製造に使用される本明細書に記載の複合体の溶解度は、溶解度増強剤の組み込みなどの適切な製剤技術の使用により増加する場合がある。
【０１４４】
さまざまな実施形態において、非経口投与用の製剤は、即時放出および/または調節放出用に製剤化することができる。1つの例示的態様では、本発明の活性剤(すなわち、本明細書に記載の複合体)は、徐放性製剤、たとえば、徐放性ポリマーを含む組成物で投与することができる。活性剤は、インプラントおよびマイクロカプセル化送達システムを含む放出制御製剤などの急速な放出に対して複合体を保護する担体とともに製造することができる。酢酸エチレンビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、ポリ乳酸およびポリ乳酸/ポリグリコール酸共重合体(PGLA)などの生分解性、生体適合性ポリマーを使用することができる。そのような製剤の製造方法は、一般に当業者に知られている。もう1つの実施態様では、本明細書に記載の複合体または該複合体を含む組成物は、必要に応じて継続的に投与してもよい。
【０１４５】
1つの実施態様では、キットが提供される。本明細書に記載の活性複合体の組み合わせが投与される場合、2つ以上の医薬組成物を、組成物の連続投与または共投与に適したキットの形態で組み合わせることができる。このようなキットは、2つ以上の個別の医薬組成物で構成され、そのうちの少なくとも1つには、本明細書に記載の複合体および組成物を個別に保持する手段(容器、分割ボトル、または分割箔パケットなど)が含まれる。もう1つの実施態様では、患者の選択および/または治療のための本明細書に記載の複合体の使用に関する指示を提供するラベルを有する容器内の1つ以上の本明細書に記載の複合体を含む組成物が、提供される。
【０１４６】
1つの実施態様では、滅菌注射液は、必要な量の活性剤を適切な溶媒に、必要に応じて、上記の成分の1つまたは組み合わせのいずれかを加えた後、ろ過滅菌することにより製造することができる。典型的には、分散液は、複合体を、分散媒と上記の追加成分を含む滅菌ビヒクルに組み込むことにより製造される。滅菌注射液の製造のための滅菌粉末の場合、好ましい製造方法は、真空乾燥および凍結乾燥であり、これにより、活性成分の粉末＋以前に滅菌ろ過したその溶液からの任意の追加の所望の成分が得られるか、または成分を一緒に滅菌ろ過することができる。
【０１４７】
組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、リポソーム、または高い薬物濃度に適したその他の規則的構造として製剤することができる。担体は、たとえば、水、エタノール、ポリオール(たとえば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポポリエチレングリコールなど)、およびそれらの適切な混合物を含む溶媒または分散媒でありうる。1つの実施態様では、適切な流動性は、たとえば、レシチンなどのコーティングの使用、分散の場合は必要な粒子サイズの維持、および界面活性剤の使用により維持することができる。
【０１４８】
本明細書に記載の複合体には、1つ以上のキラル中心が含まれる場合があり、またはそうでなければ複数の立体異性体として存在する可能性がある。したがって、本発明には、エナンチオマー、ジアステレオマー、およびエナンチオマーまたはジアステレオマーが濃縮された混合物などの、純粋な立体異性体ならびに立体異性体の混合物が含まれることを理解すべきである。本明細書に記載の複合体は、幾何異性体として存在する場合がある。したがって、本発明には、純粋な幾何異性体または幾何異性体の混合物が含まれることを理解すべきである。
【０１４９】
本明細書に記載の複合体は、非溶媒和形態、ならびに水和形態などの溶媒和形態で存在しうることが理解される。一般に、溶媒和形態は、非溶媒和形態と等価であり、本発明の範囲内に含まれる。本明細書に記載の複合体は、複数の結晶形または非晶形で存在することもできる。一般に、すべての物理的形態は、本発明によって企図される使用に対して等価であり、本発明の範囲内にあることが意図される。
【０１５０】
もう1つの実施態様では、本明細書に記載の複合体の組成物および/または投与用剤形は、少なくとも約90%、または約95%、または約96%、または約97%、または約98%、または約99%、または約99.5%の純度で、本明細書に記載の複合体から製造される。もう1つの実施態様では、本明細書に記載の複合体の組成物および/または投与用剤形は、少なくとも90%、または少なくとも95%、または少なくとも96%、または少なくとも97%、または少なくとも98%、または少なくとも99%、または少なくとも99.5%の純度で、本明細書に記載の複合体から製造される。
【０１５１】
実施例
以下のデータは、リガンドを標的とする炭酸脱水酵素の治療的用途および放射性造影用途を示唆することができる。リガンド(FBSA、スキーム1、化合物3)は、Daumantas Matulisらによって開発された(J. Med. Chem. 2014、57、9435-9446)。
【０１５２】
本明細書に記載のように、データは、PEG2リンカーまたはその変異体の長さが、見かけの結合親和性に寄与しうることを示唆する。いくつかのデータは、チューブリシン複合体(複合体12、(FBSA-PEG2- チューブリシンB)および複合体14、親水性リンカーを有するFBSA-チューブリシンB複合体)などのFBSA標的化に基づく小分子治療複合体の設計も示唆しうる。
【０１５３】
略語
本明細書に記載の実施例は、当業者に知られている以下の略語によって記載される材料などであるが、これらに限定されない材料を使用する：
【表２】
2020531509.tif 000060
【表３】
2020531509.tif 000061
【実施例１】
【０１５４】
炭酸脱水酵素の合成
【化５７】
2020531509.tif 000062
スキーム1：FBSA、化合物3、高親和性炭酸脱水酵素小分子標的化リガンドの合成
【０１５５】
【化５８】
2020531509.tif 000063
ペンタフルオロベンセンスルホンアミド1の合成
テトラヒドロフラン中のペンタフルオロベンゼンスルホニルクロリド(2.60mL)の混合物を、氷/NaCl冷却浴を用いて-10℃に冷却した。次いで、メタノール/エタノール(6.00mL)中の3.5Mアンモニアを滴下した。次いで、反応物を室温まで温め、3.5時間撹拌した。次いで、溶媒を真空除去し、水中で再結晶させた。収量：2.7404 g、MP：153.2-154.8℃(Lit：156℃)、IR(cm-1)：3343.00(-NH2、Asym)、3264(-NH2、Sym)
【実施例２】
【０１５６】
【化５９】
2020531509.tif 000064
3-((2,3,5,6-テトラフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパン酸、2の合成
ペンタフルオロベンセンスルホンアミド(950.4mg)、トリエチルアミン(1.400mL)および3-メルカプトプロパン酸(368μL)を撹拌メタノール溶液(40mL)に加えた。次いで、反応物を24時間還流し、次いで、真空乾燥した。次いで、得られる残渣を、それぞれ酢酸：水の2：1混合物に溶解した。次いで、この混合物を70℃に加熱し、加えた過酸化物の総体積が10mLになるまで、30%過酸化水素を2時間毎に2mLずつ加えた。次いで、反応物を、合計24時間70℃にて撹拌した。酢酸を真空除去し、得られる沈殿をろ過し、水で洗浄した。収量：0.5679g、LC-MS(M+H2O)：383.0
【０１５７】
参考文献：Robson、P.；Smith、T. A.；Stephens、R.；Tatlow、J. C.、691. Aromatic polyfluoro-compounds. Part XIII. Derivatives of penta- and 2,3,5,6-tetra-fluorothiophenol. Journal of the Chemical Society(Resumed)1963、(0)、3692-3703. 
【実施例３】
【０１５８】
【化６０】
2020531509.tif 000065
3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパン酸、3の合成
化合物2(400mg)を、DMSO(2mL)に溶解し、次いで、シクロオクチルアミン(2当量)を加え、反応混合物を室温にて24時間撹拌した。反応物に水および濃塩化アンモニウムを加えて反応を停止した。得られる沈殿を酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥した。次いで、抽出物をシリカで乾燥し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。収量：0.1662g、LC-MS(M+1)：473.2。
【実施例４】
【０１５９】
【化６１】
2020531509.tif 000066
(3-(2-(2-(3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパノイル)システイン、4の合成
以下の固相法によって、化合物4を合成した。H-Cys(Trt)-2-クロロトリチル樹脂(100 mg、0.64 mmole/g)を、3 mLのジクロロメタン(DCM)、次いで、3 mLのジメチルホルムアミド(DMF)で膨潤させた。DMF中で樹脂を膨潤させた後、DMF(3 mL)中の3-[2-[2-(9H-フルオレン-9-イルメトキシカルボニルアミノ)エトキシ]エトキシ]プロパン酸(51.1 mg、0.128 mmoles)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(60.8 mg、0.16 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.056 ml、0.32 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングした後、次いで、樹脂を、3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。ピペリジン溶液(20%DMF溶液、3 x 5 ml)でfmocを除去し、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。DMF中の3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパン酸(33.3mg、0.074 mmoles)、HATU(24.3 mg、0.064 mmoles)およびDIPEA(0.034 ml、0.192 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングし、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。化合物4を、トリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：H2O：エタンジチオール(95：2.5：2.5：2.5)の混合物を用いて樹脂から切断し、真空濃縮した。濃縮生成物をジエチルエーテル中で沈殿させ、真空乾燥した。粗複合体を、逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜100% B、30分で]によって精製して、生成物を透明油状物で得た(54%)。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C27H41F3N4O10S3についての計算値、734.19；実測値、735.2。
【０１６０】
2-(((1-(3-カルボキシ-4-(6-ヒドロキシ-3-オキソ-3H-キサンテン-9-イル)フェニル)-2,5-ジオキソピロリジン-3-イル)チオ)メチル)-16-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)-4,14-ジオキソ-7,10-ジオキサ-3,13-ジアザヘキサデカン酸、5の合成
DMF(1 mL)中の化合物4(5 mg、0.0068 mmoles)の溶液に、フルオレセイン-5-マレイミド(3.2 mg、0.0075 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.006 ml、0.034 mmoles)を加え、室温にて1時間撹拌した。粗反応混合物を、逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜100% B、30分で]で精製して、生成物を黄色粉末で得た(61%)。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C51H54F3N5O17S3についての計算値、1161.26；実測値、1162.2。
【実施例５】
【０１６１】
【化６２】
2020531509.tif 000067
(2R,5S,8S)-8-アミノ-5-(カルボキシメチル)-29-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)-2-(メルカプトメチル)-4,7,11,27-テトラオキソ-14,17,20,23-テトラオキサ-3,6,10,26-テトラアザノナコサン酸、6の合成
以下の固相法によって、化合物6を合成した。H-Cys(Trt)-2-クロロトリチル樹脂(100 mg、0.64 mmole/g)を、3 mLのジクロロメタン(DCM)、次いで、3 mLのジメチルホルムアミド(DMF)で膨潤させた。DMF中で樹脂を膨潤させた後、DMF(3 mL)中のFmoc-Asp(tBu)-OH(52.7 mg、0.128 mmoles)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(60.8 mg、0.16 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.056 ml、0.32 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングした後、次いで、樹脂を、3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。ピペリジン溶液(20%DMF溶液、3 x 5 ml)でfmocを除去し、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。DMF(3 mL)中のBoc-DAP(Fmoc)-OH(54.6 mg、0.128 mmoles)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(60.8 mg、0.16 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.056 ml、0.32 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングし、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。ピペリジン溶液(20%DMF溶液、3 x 5 ml)でfmocを除去し、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。DMF中の3-[2-[2-[2-[2-(9H-フルオレン-9-イルメトキシカルボニルアミノ)エトキシ]エトキシ]エトキシ]エトキシ]プロパン酸(62.4 mg、0.128 mmoles)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(60.8 mg、0.16 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.056 ml、0.32 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングし、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。ピペリジン溶液(20%DMF溶液、3 x 5 ml)でfmocを除去し、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。DMF中の3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパン酸(33.3mg、0.074 mmoles)、HATU(24.3 mg、0.064 mmoles)およびDIPEA(0.034 ml、0.192 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングし、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。化合物3を、トリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：H2O：エタンジチオール(95：2.5：2.5：2.5)の混合物を用いて樹脂から切断し、真空濃縮した。濃縮生成物をジエチルエーテル中で沈殿させ、真空乾燥した。粗化合物6を、逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜100% B、30分で]によって精製して、生成物を透明油状物で得た(62%)。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C38H60F3N7O16S3についての計算値、1023.32；実測値、1024.3。
【０１６２】
5-(3-(((2R,5S,8S)-8-アミノ-2-カルボキシ-5-(カルボキシメチル)-29-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)-4,7,11,27-テトラオキソ-14,17,20,23-テトラオキサ-3,6,10,26-テトラアザノナコシル)チオ)-2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)-2-(6-ヒドロキシ-3-オキソ-3H-キサンテン-9-イル)安息香酸、7の合成
DMF(1 mL)中の化合物6(2 mg、0.002 mmoles)の溶液に、フルオレセイン-5-マレイミド(0.85 mg、0.002 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.002 ml、0.01 mmoles)を加え、室温にて1時間撹拌した。粗反応混合物を逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜100% B、30分で]で精製して、複合体7を黄色粉末で得た(76%)。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C62H73F3N8O23S3についての計算値、1450.39；実測値、1451.3。
【実施例６】
【０１６３】
【化６３】
2020531509.tif 000068
tert-ブチル(2-(3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパンアミド)エチル)カルバメート、8の合成
DMF(2 ml)中の3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパン酸(20 mg、0.042 mmoles)の溶液に、tert-ブチル(2-アミノエチル)カルバメート(7.40 mg、0.0462 mmoles)を加え、アルゴン下、室温にて10分間撹拌した。次いで、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(16 mg、0.042 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.022 ml、0.126 mmoles)を加えた。反応物を1時間撹拌した後、水(10 ml)を加えて反応を停止し、酢酸エチル(3 x 25 ml)で抽出した。有機層を合わせ、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を真空濃縮し、粗混合物を、10%メタノール/ジクロロメタンを用いるシリカゲルで精製して、化合物8を無色油状物で得た(21.4 mg、83%)。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C24H37F3N4O7S2についての計算値、614.21；実測値、615.2。
【実施例７】
【０１６４】
【化６４】
2020531509.tif 000069
5-(3-(2-(3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパンアミド)エチル)チオウレイド)-2-(6-ヒドロキシ-3-オキソ-3H-キサンテン-9-イル)安息香酸、9の合成
化合物8(10 mg、0.008 mmoles)のtert-ブチルオキシカルボニル保護基を、30分間のTFA/DCMの混合物(20%、2 ml)処理により除去した。TFA/DCM混合物を真空除去し、生成物を精製せずに次に用いた。脱保護した化合物5を含むバイアルに、DMF(1 ml)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.007 ml、0.04 mmoles)を加え、5分間撹拌した後、フルオレセイン-5-マレイミド(3.8 mg、0.0088 mmoles)を加え、さらに1時間撹拌した。粗混合物を後処理なしで、逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜100% B、30分で]によって精製して、生成物を黄色粉末で得た(76%)。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C40H40F3N5O10S3についての計算値、903.19；実測値、904.2。
【実施例８】
【０１６５】
【化６５】
2020531509.tif 000070
(2R,5S,8S)-8-アミノ-5-(カルボキシメチル)-23-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)-2-(メルカプトメチル)-4,7,11,21-テトラオキソ-14,17-ジオキサ-3,6,10,20-テトラアザトリコサン酸、10の合成
以下の固相法によって、化合物10を合成した。H-Cys(Trt)-2-クロロトリチル樹脂(100 mg、0.64 mmole/g)を、3 mLのジクロロメタン(DCM)、次いで、3 mLのジメチルホルムアミド(DMF)で膨潤させた。DMF中で樹脂を膨潤させた後、DMF(3 mL)中のFmoc-Asp(tBu)-OH(52.7 mg、0.128 mmoles)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(60.8 mg、0.16 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.056 ml、0.32 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングした後、次いで、樹脂を、3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。ピペリジン溶液(20%DMF溶液、3 x 5 ml)でfmocを除去し、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。DMF(3 mL)中のBoc-DAP(Fmoc)-OH(54.6 mg、0.128 mmoles)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(60.8 mg、0.16 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.056 ml、0.32 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングし、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。ピペリジン溶液(20%DMF溶液、3 x 5 ml)でfmocを除去し、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。DMF中のfmoc-9-アミノ-4,7-ジオキサノナン酸(51.12 mg、0.128 mmoles)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(60.8 mg、0.16 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.056 ml、0.32 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングし、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。ピペリジン溶液(20%DMF溶液、3 x 5 ml)でfmocを除去し、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。DMF中の3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパン酸(33.3mg、0.074 mmoles)、HATU(24.3 mg、0.064 mmoles)およびDIPEA(0.034 ml、0.192 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングし、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。化合物10を、トリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：H2O：エタンジチオール(95：2.5：2.5：2.5)の混合物を用いて樹脂から切断し、真空濃縮した。濃縮生成物をジエチルエーテル中で沈殿させ、真空乾燥した。粗複合体を、逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜100% B、30分で]によって精製して、生成物を透明油状物で得た(62%)。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C34H52F3N7O14S3についての計算値、935.27；実測値、935.2。化合物10が、複合体12の前駆体として使用することができるか、または99mTcのキレーターとしても使用することができ、そして、複合体10としてSPECT/CT造影用途に使用することができることに注意してください。
【実施例９】
【０１６６】
【化６６】
2020531509.tif 000071
(3R,5S,16R,19S)-1-(2-((1R,3R)-1-アセトキシ-3-((2S,3S)-N-((ブチリルオキシ)メチル)-3-メチル-2-(1-メチルピペリジン-2-カルボキシアミド)ペンタンアミド)-4-メチルペンチル)チアゾール-4-イル)-19-((S)-16-アミノ-1-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-17-アミド)-16-カルボキシ-3-(4-ヒドロキシべンジル)-5-メチル-1,6,9,18-テトラオキソ-10-オキサ-13,14-ジチア-2,7,8,17-テトラアザヘニコサン-21-酸(-oic acid)、12の合成
蒸留水中の飽和重炭酸ナトリウムの溶液(10 mL)を、30分間アルゴンで継続的にバブリングした。化合物9(1.5 mg、0.0016 mmol)を、アルゴンパージしたHPLCグレードの水(2.0 mL)に溶解し、アルゴンパージ重炭酸ナトリウムを用いて反応混合物のpHを7に上昇させた。次いで、THF(0.5 mL)中の、ENDOCYTEによって供給されたジスルフィド活性化-チューブリシンBの溶液(化合物11、1.86 mg、0.018 mmol)を、反応混合物に加えた。分析的LCMSを用いて反応の進行をモニターし、30分間撹拌した後、反応が完了したことが分かった。複合体12を、逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜100% B、30分で]で精製して、必要な生成物を得た。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C79H119F3N14O25S5についての計算値、1881.70；実測値、1881.5。
【実施例１０】
【０１６７】
【化６７】
2020531509.tif 000072
(2R,5S,8S)-8-アミノ-5,12-ビス(カルボキシメチル)-18-(3-(2-(2-(3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパンアミド)-15-(3-グアニジノプロピル)-2-(メルカプトメチル)-4,7,11,14,17-ペンタオキソ-3,6,10,13,16-ペンタアザイコサンジオン酸、13の合成
以下の固相法によって、化合物13を合成した。H-Cys(Trt)-2-クロロトリチル樹脂(100 mg、0.64 mmole/g)を、3 mLのジクロロメタン(DCM)、次いで、3 mLのジメチルホルムアミド(DMF)で膨潤させた。DMF中で樹脂を膨潤させた後、DMF(3 mL)中のFmoc-Asp(tBu)-OH(52.7 mg、0.128 mmoles)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(60.8 mg、0.16 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.056 ml、0.32 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングした後、次いで、樹脂を、3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。ピペリジン溶液(20%DMF溶液、3 x 5 ml)でfmocを除去し、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。DMF(3 mL)中のBoc-DAP(Fmoc)-OH(54.6 mg、0.128 mmoles)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(60.8 mg、0.16 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.056 ml、0.32 mmoles)の溶液を加えた。残りの手順についても同じプロトコルに従った。化合物13を、トリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：H2O：エタンジチオール(95：2.5：2.5：2.5)の混合物を用いて樹脂から切断し、真空濃縮した。濃縮生成物をジエチルエーテル中で沈殿させ、真空乾燥した。粗複合体を、逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜100% B、30分で]によって精製して、生成物を透明油状物で得た(62%)。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C48H74F3N13O21S3についての計算値、1322.42；実測値、1322.38。化合物13が、複合体14の前駆体として機能するばかりでなく、それじたい99mTcのキレーターとしても設計され、そして、複合体13としてSPECT/CT造影用途に使用することができることに注意してください。
【実施例１１】
【０１６８】
【化６８】
2020531509.tif 000073
(2R,5S,8S)-2-((11S,13R)-15-(2-((1R,3R)-1-アセトキシ-3-((2S,3S)-N-((ブチリルオキシ)メチル)-3-メチル-2-(1-メチルピペリジン-2-カルボキシアミド)ペンタンアミド)-4-メチルペンチル)チアゾール-4-イル)-13-(4-ヒドロキシべンジル)-11-メチル-7,10,15-トリオキソ-6-オキサ-2,3-ジチア-8,9,14-トリアザペンタデシル)-8-アミノ-5,12-ビス(カルボキシメチル)-18-(3-(2-(2-(3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパンアミド)-15-(3-グアニジノプロピル)-4,7,11,14,17-ペンタオキソ-3,6,10,13,16-ペンタアザイコサンジオン酸、14の合成
蒸留水中の飽和重炭酸ナトリウムの溶液(10 mL)を、30分間アルゴンで継続的にバブリングした。化合物13(1.2 mg、0.0009 mmol)を、アルゴンパージしたHPLCグレードの水(2.0 mL)に溶解し、アルゴンパージ重炭酸ナトリウムを用いて反応混合物のpHを7に上昇させた。次いで、THF(0.5 mL)中の、ENDOCYTEによって供給されたジスルフィド活性化-チューブリシンBの溶液(化合物11、1.27 mg、0.0012 mmol)を、反応混合物に加えた。分析的LCMSを用いて反応の進行をモニターし、30分間撹拌した後、反応が完了したことが分かった。複合体14を、逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜100% B、30分で]で精製して、必要な生成物を得た。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C93H141F3N20O3S5についての計算値、2267.86；実測値、1134.57(ハーフ・マス)。
【実施例１２】
【０１６９】
【化６９】
2020531509.tif 000074
((2S)-2-アミノ-3-(3-カルボキシ-2-(2-(3-カルボキシ-2-(3-(2-(2-(3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパンアミド)プロパンアミド)-5-グアニジノペンタンアミド)プロパンアミド)プロパノイル)-L-アスパラギン酸、15の合成
以下の固相法によって、化合物15を合成した。H-Cys(Trt)-2-クロロトリチル樹脂(100 mg、0.64 mmole/g)を、3 mLのジクロロメタン(DCM)、次いで、3 mLのジメチルホルムアミド(DMF)で膨潤させた。DMF中で樹脂を膨潤させた後、DMF(3 mL)中のBoc-DAP(Fmoc)-OH(54.6 mg、0.128 mmoles)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシド ヘキサフルオロホスフェート(60.8 mg、0.16 mmoles)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.056 ml、0.32 mmoles)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングした後、次いで、樹脂を、3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。ピペリジン溶液(20%DMF溶液、3 x 5 ml)でfmocを除去し、樹脂を3 mLのDMFで3回、3 mLのi-PrOHで3回洗浄した。他の残基は、同じ化学量論を使用して追加された。化合物15を、トリフルオロ酢酸：トリイソプロピルシラン：H2O：エタンジチオール(95：2.5：2.5：2.5)の混合物を用いて樹脂から切断し、真空濃縮した。濃縮生成物をジエチルエーテル中で沈殿させ、真空乾燥した。粗複合体を、逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜100% B、30分で]によって精製して、生成物を透明油状物で得た(62%)。LRMS-LC/MS(m/z)：[M + H]+ C45H69F3N12O20S2についての計算値、1219.41；実測値、1219.09。化合物15が、競合実験で複合体14の競合体として機能することに注意してください。
【実施例１３】
【０１７０】
【化７０】
2020531509.tif 000075
N-(2-アミノエチル)-3-(2-(2-(3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパンアミド(16)
以下の固相法によって、N-(2-アミノエチル)-3-(2-(2-(3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパンアミドを合成した。1,2-ジアミノエタントリチルポリスチレン樹脂(100 mg、1.7 mmol/g)を、DMF(3 mL)およびDCM(3 mL)で膨潤させた後、DMF(3 mL)中の1-(9H-フルオレン-9-イル)-3-オキソ-2,7,10-トリオキサ-4-アザトリデカン-13-酸(-oic acid)(136 mg、0.34 mmol)、HATU(162 mg、0.43 mmol)およびDIPEA(0.09 mL、0.51 mmol)の溶液を加えた。反応混合物をアルゴンで2時間バブリングし、次いで、樹脂をDMF(3 x 3 mL)およびDCM(3 x 3 mL)で洗浄した。ピペリジン溶液(20%DMF溶液、3 x 5 ml)でfmocを除去し、樹脂をDMF(3 x 3 mL)およびDCM(3 x 3 mL)で洗浄した。DMF中の-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパン酸(179 mg、0.425 mmol)、HATU(162 mg、0.43 mmol)およびDIPEA(0.09 mL、0.51 mmol)の溶液を加えた。アルゴンで2時間バブリングし、次いで、樹脂をDMF(3 x 3 mL)およびDCM(3 x 3 mL)で洗浄した。N-(2-アミノエチル)-3-(2-(2-(3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパンアミドを、TFA：TIPS：H2O：EDTカクテル(95：2.5：2.5：2.5)を用いて樹脂から切断し、真空濃縮した。濃縮生成物をジエチルエーテル中で沈殿させ、真空乾燥した。粗複合体を、逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜40% B、30分で]によって精製して、生成物を白色固体で得た。LRMS-LC/MS(m/z)：674.3 [M + H]+。
【実施例１４】
【０１７１】
【化７１】
2020531509.tif 000076
2,2'-(7-(21-カルボキシ-1-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)-3,13,18-トリオキソ-7,10-ジオキサ-4,14,17-トリアザヘニコサン-21-イル)-1,4,7-トリアゾナン-1,4-ジイル)二酢酸
DMF(1 mL)中のN-(2-アミノエチル)-3-(2-(2-(3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパンアミド(3 mg、0.003 mmol)の溶液に、2,2'-(7-(1-カルボキシ-4-((2,4-ジオキソピロリジン-1-イル)オキシ)-4-オキソブチル)-1,4,7-トリアゾナン-1,4-ジイル)二酢酸(NODAGA-NHS、1.4 mg、0.009 mmol)およびDIPEA(0.0016 mL、0.034 mmol)を加え、室温にて1時間撹拌した。粗反応混合物を逆相HPLC [A = 2 mM酢酸アンモニウム緩衝液(pH 7.0)、B = CH3CN、溶媒勾配：0% B〜20% B、30分で]で精製して、生成物である複合体17を白色粉末で得た(収率83%)。LRMS-LC/MS(m/z)：1031.5 [M + H]+。
【実施例１５】
【０１７２】
64Cuによる複合体17の放射性標識のための一般的手順
放射性標識は、酢酸ナトリウム緩衝液(pH 10.5)中の50倍過剰の複合体17と混合し、使用前に最低15分間室温にてインキュベートすることにより、0.1N HCl中の64CuCl2を使用して行った。キレート化の放射化学的純度を評価するために、Laura AcademiaソフトウェアとC18カラムを備えたLabLogic Flow-RAM radio-HPLC検出器を備えたAgilent 1260 Infinity IIを使用して、次の方法で溶液を分析した：溶媒A = 0.1% TFA、溶媒B = ACN、溶媒勾配：0% B〜100% B、15分で]。放射化学的純度が>95％であることを確認した後、放射性標識複合体を適切な溶媒(インビトロ実験用の細胞培養培地)および(PBS、pH 7.4、インビボ実験用)に希釈した後、精製せずに使用した。
【０１７３】
【表４】
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第1表：銅-64によるFBSA-NODAGAの例示的キレート化条件
【０１７４】
インビトロ実験
細胞株および細胞培養
A549、HT29、およびSKRC52細胞を、10%加熱不活化ウシ胎児血清および1%ペニシリンストレプトマイシンを含むRPMI-1640培地を使用して、加湿5%CO2雰囲気で37℃にて培養した。
【実施例１６】
【０１７５】
FBSA-PEG2-FITC複合体、複合体5の蛍光顕微鏡検査
転移性ヒト腎細胞がん(SKRC52)細胞(105個)をチャンバー付きカバーガラスプレートに播種し、24時間(hr)でコンフルエンスまで増殖させた。使用済み培地を、10%ウシ胎児血清アルブミンを含む新鮮な培地および25 nM濃度のFITC複合体である複合体5単独または該色素複合体＋100倍過剰のCAIX阻害剤(化合物3、3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパン酸)と置き換えた。37℃にて1時間インキュベートした後、細胞を1 mLの培地で2回すすいで未結合の蛍光を除去し、0.5 mlの新鮮なインキュベーション培地をウェルに加えた。画像は、共焦点顕微鏡(FV 1000、オリンパス)を使用して取得した。結果を図1に示す。FITC複合体5は細胞に結合し、過剰な非複合阻害剤の存在下で競合し、特定の受容体特異的結合イベントを示した。
【実施例１７】
【０１７６】
CAIX FITC複合体の結合親和性測定の一般的な手順
CAIXをトランスフェクトさせたHEK293、SKRC52、HT29、またはA549細胞(0.25 x 106)を、100倍過剰のCAIX阻害剤3-((2-(シクロオクチルアミノ)-3,5,6-トリフルオロ-4-スルファモイルフェニル)スルホニル)プロパン酸)の存在下または不在下で、濃度を増加させるCAIX FITC複合体を含む0.3 mLの新鮮なDMEM培地とともに1.5 ml遠心チューブに入れた。25℃にて1時間インキュベートした後、細胞を1 mLの培地で2回すすいだ。細胞を96ウェルプレートに移し、フローサイトメトリー(BD Accuri C6、BD Biosciences)を使用して平均蛍光強度(MFI)を読み取った。見かけのKDは、GraphPad Prism 4を使用してFITC複合体の濃度に対してMFIをプロットすることによって計算された。低酸素実験のために、細胞を、低酸素チャンバー内で24〜48時間、1%酸素、5%二酸化炭素、および94%窒素を含む雰囲気下でインキュベートした。CAIX FITCの結合親和性の結果を第2表に示す。
【０１７７】
【表５】
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第2表：CAIXをトランスフェクトさせたHEK293またはSKRC52におけるCAIX FITC複合体の結合親和性
【実施例１８】
【０１７８】
3H-チミジン取り込みアッセイによるインビトロ細胞毒性測定の一般的な手順
HT-29細胞をアミンコート24ウェルプレートに播種し、単層を形成させた。各ウェルの使用済み培地を、さまざまな濃度の複合体12を含む新鮮な培地(0.5 mL)と交換した。37℃にて2時間インキュベートした後、細胞を新鮮な培地で3回すすぎ、次いで、新鮮な培地で37℃にてさらに66時間インキュベートした。各ウェルの使用済み培地を3H-チミジン(1 μCi/ml)を含む新鮮な培地(0.5 mL)と再度交換し、細胞をさらに4時間インキュベートした。細胞を培地で3回洗浄した後、0.5 mLの0.25 M NaOHに溶解した。次いで、シンチレーションカウンター(PACKARD、PACKARD INSTRUMENT COMPANY)を使用して細胞関連放射能をカウントすることにより、チミジンの取り込みを決定した。IC50値を、Graph Pad Prism 4およびTABLECURVE 2Dソフトウェアを使用して、3H-チミジン取り込みのパーセント対ログ濃度のプロットから導き出した。結果は、図8に示され、複合体のIC50が、5.045 nMであったことを示す。
【実施例１９】
【０１７９】
放射性標識複合体17のインビトロ結合親和性
SKRC52、HT29、A549細胞(〜0.25 x 106)を24ウェルプレートに播種し、一晩増殖させた。実施例17で調製したように、濃度を増加させた放射性標識複合体17を含む新鮮な培地を、100倍過剰のFBSA競合化合物の存在下または不在下で、加えた。すべての濃度が、二重または三重に試験された。25℃にて1時間インキュベートした後、細胞をPBS(3 x 0.5 mL)で洗浄した。各ウェルに0.5M NaOHを加えた。10分後、0.45 mLのNaOHを除去し、γカウンター(Packard、Packard Instrument Company)で放射能を測定した。見かけの結合親和性を、GraphPad Prism 4を使用して放射性標識複合体の濃度に対する結合放射能をプロットすることにより計算した。
【０１８０】
図9および10に見られるように、放射性標識された17の見かけの結合親和性は、SKRC52およびA549細胞を低いnM値(SKRC52ではKD = 5.87 nM、およびA549ではKD = 6.04 nM)として用いて確立され、約75 nMで飽和に達した。競合対照(標識されていないFBSA-COOHである競合リガンドを100倍過剰にして、濃度を増加させた放射性標識複合体17で処理した細胞)は、結合放射能が著しく少ないことを示した。理論に縛られることなく、放射性標識された17の細胞への結合は受容体特異的イベントであったようである。
【０１８１】
インビボ実験
畜産
無胸腺nu/nuマウスを、Harlan Laboratories(ENVIGO)から購入し、標準的な12時間の明暗サイクルで無菌環境に収容し、通常のげっ歯類用飼料で維持した。すべての動物の手順は、国立衛生研究所のガイドラインに従って、PURDUE動物管理使用委員会によって承認された。
【実施例２０】
【０１８２】
HT29異種移植腫瘍におけるチューブリシン複合体12のインビボ効果
細胞(HT-29細胞(4.25 × 106))を5〜6週齢の雌性nu/nuマウスの肩に皮下注射した。腫瘍をノギスで週3回、垂直2方向に測定し、0.5 x L x W2(ここで、Lは、最長軸(ミリメートル)、Wは、Lに対して垂直な軸(ミリメートル)である)としてその体積を計算した。皮下腫瘍の体積が、約100〜275 mm3に達したときに、複合体12の投与を開始した。投与溶液を生理食塩水で調製し、0.22 μmフィルターでろ過した。溶液は、尾静脈注射または腹腔内投与により投与された。各マウスは、注射あたり2 μmol/kgの複合体12を受けた。2日ごとに注射を行い、同時にマウスの体重を測定した。結果を図11−12に示す。図11に示されるように、処置マウスは腫瘍成長を停止し、本開示の時点で異種移植片は縮小過程にある。すべての場合において、巨視的毒性は観察されず、この投与レベルで10%未満の体重減少が観察された(図12)。
【０１８３】
図13−16に示されるように、複合体12の代わりに複合体14を用いて、同様の実験を行った。HT-29細胞の代わりに複合体14を用いて、A549細胞で同様の実験を実行った(図17および18)。
【実施例２１】
【０１８４】
マウス異種移植モデルにおける放射性標識17の全身造影および体内分布
SKRC52、HT29、またはA549細胞(マウス当たり、〜3 x 106細胞)を、雌性無胸腺nu/nuマウスの肩に皮下注射した。腫瘍の増殖を2つの垂直方向で測定し、腫瘍の体積を0.5 x L x W2(ここで、ミリメートル単位で、Lは、最長軸およびWは、Lに対して垂直な軸である)として計算した。腫瘍の体積が最小で500 mm3に達したとき、動物に尾静脈注射により、PBS中の放射性標識複合体17(250μCi)(100μL、pH 7.4)を注入した。全身画像を取得するために、マウスをイソフルランで麻酔し、CCDカメラおよびコダック分子造影ソフトウェア(バージョン4.0)を組み合わせたKodak Imaging Station(In-Vivo FX、Eastman Kodak Company)で、腎臓をシールドして、画像を取得した。X線画像は、次のパラメーターを用いて取得した：放射性同位体照明源、3分の収集時間、f-ストップ = 4、焦点面= 5、FOV = 160、ビニング= 8。白色光画像は、次のパラメーターを用いて取得した：白色光透光照明光源、0.175秒の収集時間、f-ストップ= 16、焦点面= 5、FOV = 160、ビニングなし。全身画像を取得した後、マウスをCO2窒息で犠牲にし、剖検後、組織を事前に計量したγカウンターチューブに入れた。組織および注入された用量のフラクションの放射能をγ-カウンター(Packard、Packard Instrument Company)で測定した。1分当たりのカウント(CPM)値を、減衰時間に対して補正し、結果を、湿組織のグラム当たりの注入用量の割合(% ID/g)として計算した。
【０１８５】
250μCiの放射性標識複合体17を、A549細胞株由来の異種移植片を有するマウスの尾静脈に注射した。第3表に示すさまざまな時点で、組織をマウスから切除し(時点当たり、n = 1)、秤量し、ガンマカウンターで放射能を定量した。銅-64は、36%の量で511 keVにてガンマ線を放出するので、ガンマ検出法を使用することができる。結果を図19に示す。
【表６】
2020531509.tif 000079
第3表：A549異種移植片における放射性標識複合体17の時間経過研究における腫瘍対組織比
【０１８６】
第3表に見られるように、最初は複合体の取り込みは胃と腎臓において非常に高かった。注射の6時間後、腫瘍は、胃および腎臓よりも高い組織取り込みを示し始めた。最高の腫瘍対組織比は、9時間にて示された。テストされた他のすべての時間において、腫瘍は、このより高い取り込みを維持した。
【０１８７】
注射後18時間における、放射性標識された複合体17の全組織体内分布を図20に示す。この実験は、6時間から18時間の間の組織摂取値が大幅に変化しないことを確認した後、主として物流的容易さ(logistical ease)のために18時間にて行われた。高い腫瘍の取り込みは18時間にて維持され、最も重要なことは、競合マウス(250μCiの放射性標識複合体17＋100倍モル過剰の競合分子を同時注入したマウス)が、腫瘍部位において非競合マウスよりもはるかに低い放射カウントを有することである。理論に縛られることなく、これは放射性標識複合体17が、受容体媒介様式で、腫瘍細胞に特異的に結合することを示す。
【０１８８】
図21および図22は、注射の18時間後のSKRC52およびHT29異種移植片を用いるこれらの実験からの生体内分布データを示す。SKRC52実験は、腫瘍における放射能が受容体媒介性であることを示す競合対照を用いて行われた。HT29異種移植片は、競合対照でテストされなかった。HT29細胞は、細胞表面ではるかに少ないCAIX受容体を発現するため、腫瘍対組織のバックグラウンド比は、18時間ではあまり良好ではない。
【０１８９】
図23Aおよび23Bは、放射性標識された17を注射した後のCAIX陽性異種移植片を有するマウスの全身画像を示す。特に、放射性標識複合体17を250μCi注入し、注入から5時間後に麻酔したマウスの全身画像を取得した後、SKRC52異種移植片を有するマウスで実施した競合実験を示す。図23Aに示す実験の場合、標的化PET造影複合体を注射したマウスは、腫瘍部位にて鮮やかな取り込みを示した。しかしながら、250μCiの放射性標識複合体17のを複合した100倍過剰の競合リガンド(FBSA-COOH)を注射した左に示す2匹のマウスは、この画像で選択した閾値では腫瘍の取り込みを示さない。腫瘍は、マウスから切除され、図23Bに示されるが、標的化マウスは、腫瘍取り込みにおいて、競合マウスよりも高い腫瘍取り込みを示す。
【０１９０】
放射性標識複合体17の有効性は、上記の方法を使用し、全身画像を取得する他の腫瘍モデルでにおいても示された。たとえば、図24に示されるように、標的化マウスは、競合マウスよりもはるかに高い腫瘍取り込みを示す。このデータは、HT29異種移植片を有するマウスにおいても実証された(データは示さず)。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
2020531509.tif 000116
【図１Ｃ】
2020531509.tif 000117
【図１Ｄ】
2020531509.tif 000118
【図１Ｅ】
2020531509.tif 000119
【図１Ｆ】
2020531509.tif 000120
【図２】
2020531509.tif 000121
【図３】
2020531509.tif 000122
【図４】
2020531509.tif 000123
【図５】
2020531509.tif 000124
【図６】
2020531509.tif 000125
【図７】
2020531509.tif 000126
【図８】
2020531509.tif 000127
【図９】
2020531509.tif 000128
【図１０】
2020531509.tif 000129
【図１１】
2020531509.tif 000130
【図１２】
2020531509.tif 000131
【図１３】
2020531509.tif 000132
【図１４】
2020531509.tif 000133
【図１５】
2020531509.tif 000134
【図１６】
2020531509.tif 000135
【図１７】
2020531509.tif 000136
【図１８】
2020531509.tif 000137
【図１９】
2020531509.tif 000138
【図２０】
2020531509.tif 000139
【図２１】
2020531509.tif 000140
【図２２】
2020531509.tif 000141
【図２３Ａ】
2020531509.tif 000142
【図２３Ｂ】
2020531509.tif 000143
【図２４】
2020531509.tif 000144
【国際調査報告】
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