(57)【要約】  モンテルカストまたはその溶媒和物の医薬的に許容される塩と、（ａ）少なくとも１つのイガイ接着タンパク質またはその誘導体、および（ｂ）モンテルカスト、またはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物を含む、組み合わせ製品と、を含む、医薬製剤が提供される。製剤および組み合わせ製品は、創傷、熱傷、乾癬、にきび、およびアトピー性皮膚炎を含む、炎症、炎症性障害、および／または炎症を特徴とする状態の治療のための直接局所投与に特に有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
局所投与に好適な、適合された、ならびに／または包装および提示された医薬製剤であって、モンテルカスト、またはその溶媒和物の医薬的に許容される塩を、医薬的に許容される局所アジュバント、希釈剤、または担体との混合物において含む、製剤。
【請求項２】
クリームまたは軟膏の形態である、請求項１に記載の製剤。
【請求項３】
ポリエチレングリコールをさらに含む、請求項１または請求項２に記載の製剤。
【請求項４】
前記ポリエチレングリコールが、ポリエチレングリコール４００である、請求項３に記載の製剤。
【請求項５】
（ａ）少なくとも１つのイガイ接着タンパク質またはその誘導体と、
（ｂ）モンテルカスト、またはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物と、を含む、組み合わせ製品。
【請求項６】
少なくとも１つのイガイ接着タンパク質またはその誘導体を含む医薬製剤と、モンテルカスト、またはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物と、医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体と、を含む、請求項５に記載の組み合わせ製品。
【請求項７】
（Ａ）少なくとも１つのイガイ接着タンパク質またはその誘導体を、医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体との混合物において含む、医薬製剤と、
（Ｂ）モンテルカスト、またはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物を、医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体との混合物において含む、医薬製剤と、の構成要素を含む、パーツキットを含み、
構成要素（Ａ）および（Ｂ）が、他方と組み合わされた投与に好適である形態で各々提供される、請求項５に記載の組み合わせ製品。
【請求項８】
請求項７に定義されるパーツキットを作製する方法であって、構成要素（Ａ）を構成要素（Ｂ）と関連付けて、したがって前記２つの構成要素を互いに組み合わされた投与に好適なものにすることを含む、方法。
【請求項９】
（Ｉ）請求項７に定義される構成要素（Ａ）および（Ｂ）のうちの１つを、
（ＩＩ）その構成要素を前記２つの構成要素のうちの他方と組み合わせて使用するための指示書と共に含む、パーツキット。
【請求項１０】
構成要素（Ａ）および（Ｂ）が、炎症性障害の治療における逐次的な、別個の、および／または同時の使用に好適である、請求項７または請求項９に記載のパーツキット。
【請求項１１】
前記少なくとも１つのイガイ接着タンパク質が、ｍｅｆｐ−１、ｍｅｆｐ−２、ｍｅｆｐ−３、ｍｅｆｐ−４、ｍｅｆｐ−５、ｍｅｆｐ−６、およびそれらの組み合わせの群から選択される、請求項５〜７、９、または１０のいずれか１項に定義される組み合わせ製品。
【請求項１２】
前記少なくとも１つのイガイ接着タンパク質が、ｍｅｆｐ−１を含む、請求項１１に定義される組み合わせ製品。
【請求項１３】
配列Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｈｙｐ−Ｔｈｒ−ＤＯＰＡ−Ｌｙｓのペプチドであるイガイ接着タンパク質の誘導体、またはその塩を含む、請求項５〜７、９または１０のいずれか１項に定義される組み合わせ製品。
【請求項１４】
炎症、炎症性障害、および／または炎症を特徴とする障害もしくは状態の治療のための薬剤の製造のための、請求項１〜４のいずれか１項に定義される製剤、または請求項５〜７もしくは９〜１３のいずれか１項に定義される組み合わせ製品の使用。
【請求項１５】
炎症、炎症性障害、および／または炎症を特徴とする障害もしくは状態の治療における使用のための、請求項１〜４のいずれか１項に定義される製剤、または請求項５〜７もしくは９〜１３のいずれか１項に定義される組み合わせ製品。
【請求項１６】
炎症、炎症性障害、および／または炎症を特徴とする障害もしくは状態の治療方法であって、請求項１〜４のいずれか１項に定義される製剤、または請求項５〜７もしくは９〜１３のいずれか１項に定義される組み合わせ製品の、そのような治療を必要とする患者への投与を含む、方法。
【請求項１７】
前記炎症性障害が、乾癬、にきび、湿疹、および皮膚炎から選択される、請求項１４に記載の使用、請求項１５に記載の使用のための製剤、もしくは組み合わせ製品、または請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記皮膚炎が、アトピー性皮膚炎またはステロイド依存性皮膚炎である、請求項１７に記載の使用、使用のための製剤、使用のための組み合わせ製品、または方法。
【請求項１９】
前記炎症を特徴とする状態または障害が、創傷または熱傷である、請求項１４に記載の使用、請求項１５に記載の使用のための製剤、もしくは組み合わせ製品、または請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
前記創傷が、擦過傷、引っ掻き傷、切開、裂傷、皮膚穿刺、剥離、打撲傷、瘢痕もしくは水疱、または上記のうちのいずれかに関連するかゆみである、請求項１９に記載の使用、使用のための製剤、使用のための組み合わせ製品、または方法。
【請求項２１】
前記炎症、炎症性障害、および／または炎症を特徴とする状態が、炎症部位への直接局所投与によって治療される、請求項１４に記載の使用、請求項１５に記載の使用のための、製剤、もしくは組み合わせ製品、または請求項１６に記載の方法。
【請求項２２】
皮膚への前記投与である、請求項２１に記載の使用、使用のための製剤、使用のための組み合わせ製品、または方法。
【請求項２３】
粘膜表面への前記投与である、請求項２１に記載の使用、使用のための製剤、使用のための組み合わせ製品、または方法。
【請求項２４】
メラニン色素沈着に関連する障害の抑制のための薬剤の製造のための、請求項１〜４のいずれか１項に定義される製剤、または請求項５〜７もしくは９〜１３のいずれか１項に定義される組み合わせ製品の使用。
【請求項２５】
前記障害が、肝斑、そばかす、メラノーシス、頬部発疹、メラノーマを伴う皮膚がん、または日光への曝露もしくは皮膚疾患によって引き起こされる色素沈着症である、請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
前記障害が、皮膚への直接局所投与によって治療される、請求項２４または請求項２５に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規の医薬の組み合わせ、ならびに新規の医薬用途および組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症は、典型的には、例えば、微生物、特定の抗原、損傷細胞、または物理的および／もしくは化学的因子の侵入に対する局所的な組織応答として特徴付けられる。炎症反応は通常、有害物質および損傷した組織の両方を破壊、希釈、または隔離し、組織の治癒を開始する保護機構である。
【０００３】
炎症は、物理的な外傷、感染、何らかの慢性疾患（例えば、関節リウマチなどの乾癬および自己免疫疾患）、ならびに／または外部刺激に対する化学的および／もしくは生理学的反応（例えば、アレルギー反応の一部）に起因する場合がある。炎症性メディエータが血流と局所血管の拡張を増加させ、発赤と熱、体液の滲出を引き起こし、しばしば局所的な腫脹、炎症領域への白血球遊走、および疼痛をもたらす、一連の複雑な事象が関与する場合がある。
【０００４】
多くの状態／障害は、異常な組織損傷炎症によって特徴付けられ、および／またはそれによって引き起こされる。そのような状態は典型的に、免疫防御機構の活性化によって特徴付けられ、宿主にとって有益というよりもより有害である効果をもたらし、一般に、種々の程度の、組織の発赤または充血、腫脹、高体温、疼痛、かゆみ、細胞死、組織破壊、細胞増殖、および／または機能喪失に関連している。例には、炎症性腸疾患、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬、糸球体腎炎、および移植拒絶が含まれる。
【０００５】
典型的には、一連の複雑な事象は、局所血管の拡張による血流の増加、発赤と熱、白血球と血漿の血管外遊出などの炎症性変化を引き起こし、しばしば局所的な腫脹、感覚神経の活性化（一部の組織で疼痛をもたらす）、および機能の喪失をもたらす。これらの炎症性変化は、好中球、単球、マクロファージ、およびリンパ球などの細胞が、血管作用性アミン、サイトカイン、補体因子、および活性酸素種などの炎症性メディエータと共に含まれる細胞および生化学的事象のカスケードによって引き起こされる。
【０００６】
とりわけ、炎症は、創傷治癒プロセスにおいて重要な役割を果たす。したがって、傷および熱傷は、炎症が関連する状態として分類することができる。当該技術分野における従来的な考え方は、創傷治癒の進行に有害であるため、開放創に抗炎症薬を直接適用すべきではないというものである。
【０００７】
Ｍｙｔｉｌｕｓ  ｅｄｕｌｉｓの足のタンパク質（ｍｅｆｐ）としても知られるイガイ接着タンパク質（ＭＡＰ）は、Ｍｙｔｉｌｕｓ  ｅｄｕｌｉｓ、Ｍｙｔｉｌｕｓ  ｃｏｒｕｓｃｕｓ、およびＰｅｒｎａ  ｖｉｒｉｄｉｓなどの海洋貝類によって分泌されるタンパク質である。接着タンパク質は、イガイによって、それが産生および保管されている足糸腺から分泌される。岩などの固体の表面だけでなく、金属、木材、ガラスなどの他の固体物体の表面に分泌されると、イガイを固体物体に固定する防水結合が形成される。イガイは、典型的には、群で、沿岸のサンゴ礁または船の底に接着する。結合は信じられないほど強力であり、沿岸水域の波の影響に抵抗する能力を有している。
【０００８】
Ｍｙｔｉｌｕｓ  ｅｄｕｌｉｓ、Ｍｙｔｉｌｕｓ  ｇａｌｌｏｐｒｏｖｉｎｃｉａｌｉｓ、Ｍｙｔｉｌｕｓ  ｃａｌｉｆｏｒｎｉａｓ、およびＰｅｒｎａ  ｖｉｒｉｄｉｓの研究により、これまでのところ、イガイに由来する１１種類の別個の接着タンパク質サブタイプが同定されている：ｍｆｐ−１（しばしば「ｍｅｆｐ−１」と称されることがあり、以下では同義的に使用される）、ｍｆｐ−２／ｍｅｆｐ−２、ｍｆｐ−３／ｍｅｆｐ−３、ｍｆｐ−４／ｍｅｆｐ−４、ｍｆｐ−５／ｍｅｆｐ−５、ｍｆｐ−６／ｍｅｆｐ−６；コラーゲンｐｒｅ−ＣＯＬ−Ｐ、ｐｒｅ−ＣＯＬ−Ｄ、ｐｒｅ−ＣＯＬ−ＮＧ、および、イガイの足のマトリックスタンパク質ＰＴＭＰ（近位糸状部マトリックスタンパク質）とＤＴＭＰ（遠位近位糸状部マトリックスタンパク質）。例えば、Ｚｈｕ  ｅｔ  ａｌ，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｍａｒｉｎｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，３２，５６０（２０１４）、およびＧａｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｈｕｉ  Ａｇｒ．Ｓｃｉ．，３９，１９８６０（２０１１））を参照されたい。
【０００９】
そのサブタイプを含むすべてのイガイ接着タンパク質は、以下を含むという点で２つの構造特性を有している：（１）リジンは、タンパク質が（ＮＨ２末端により）高い正電荷負荷を運ぶようにする、（２）３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（ＤＯＰＡ、ドーパミン）、そのカテコール部分は、強力な共有結合の形成をもたらし、その結果、イガイ接着タンパク質が固体表面に結合する能力を担う。
【００１０】
イガイの接着タンパク質生成物に基づく製品は、現在、限られた数の分野で使用されている（組織接着剤としての微小細胞接着、ならびに創傷および熱傷の治療を含む）。市販の製品は、イガイ接着タンパク質の溶液として直接使用されるか、または使用前に溶解するための凍結乾燥粉末として保存される。
【００１１】
モンテルカストは、季節性アレルギーの症状の維持治療および予防のために胃腸管に経口投与される経口活性非ステロイド性免疫調節化合物である（例えば、Ｈｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，８，８３９（２０１４）を参照されたい）。主に、気道のシステイナル（ｃｙｓｔｅｉｎａｌ）ロイコトリエン受容体ＣｙｓＬＴ１に対するロイコトリエンＤ４（ならびにロイコトリエンＣ４およびＥ４）の作用を遮断することにより作用する。
【００１２】
様々な他の炎症性疾患の治療におけるその潜在的使用は文献に記載されているが、出願人の知る限り、モンテルカストは、炎症を治療するために、局所的に、例えば、皮膚に投与されたことはない。
【００１３】
さらに、出願人の知る限り、例えば、炎症を治療するための、具体的にはイガイ接着タンパク質とモンテルカストを含む組み合わせ製品の使用は、先行技術では具体的には開示されていない。
【発明の概要】
【００１４】
本発明の第１の態様によれば、
（ａ）少なくとも１つのイガイ接着タンパク質またはその誘導体、例えばその医薬的に許容される誘導体と、
（ｂ）モンテルカスト、またはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物と、を含む、組み合わせ製品が提供され、
この組み合わせ製品は、以下「本発明による組み合わせ製品」と称される。
【００１５】
本発明の文脈において、「イガイ接着タンパク質」という用語は、本明細書で言及されるもの、好ましくはＭｙｔｉｌｕｓ  ｅｄｕｌｉｓ（ムラサキイガイ）を含むイガイ種に由来し得る任意の接着タンパク質を含む。
【００１６】
したがって、この用語には、コラーゲンｐｒｅ−ＣＯＬ−Ｐ、ｐｒｅ−ＣＯＬ−Ｄおよびｐｒｅ−ＣＯＬ−ＮＧ、イガイの足のマトリックスタンパク質ＰＴＭＰおよびＤＴＭＰ、より好ましくは、ｍｅｆｐ−２、ｍｅｆｐ−３、ｍｅｆｐ−４、ｍｅｆｐ−５、ｍｅｆｐ−６、特にｍｅｆｐ−１などのｍｆｐｓまたはｍｅｆｐｓ、ｍｅｆｐｓなどのこれらのタンパク質の混合物または組み合わせなど、イガイに由来するまたは由来する可能性がある、すべてのサブタイプを含む全長タンパク質が含まれる。上述のＭＡＰサブタイプの混合物／組み合わせは、本発明に従ってＭＡＰ「構成要素」として提供され得るが、主要なＭＡＰサブタイプ（例えば、ｍｅｆｐ−１）の純度は、任意のそのような混合物の全量の少なくとも２５重量％であることが好ましい。
【００１７】
本発明の組み合わせ製品の必須要素である少なくとも１つのイガイ接着タンパク質は、以後、少なくとも１つの「ＭＡＰ」と称される。イガイ接着タンパク質は、以下、集合的または別個に「ＭＡＰ」と称される。
【００１８】
天然に存在するＭＡＰを抽出、調製、分離、および精製する既知の方法は、例えば混合吸着クロマトグラフィー（中国特許第ＺＬ２００７１０１７９４９１．０号を参照されたい）、カルボキシメチルイオン交換クロマトグラフィー（中国特許第ＺＬ２００７１０１７９４９２．５号を参照されたい）、および／または塩析および透析（中国特許第ＺＬ２００９１００８７５６７．６号）を使用できる。ＭＡＰの商用ソースには、ＵＳＵＮ  Ｂｉｏ  Ｃｏ．（中国、ＭＡＰ  ＭｅｄｉｃａｌＤｅｖｉｃｅ（登録商標）として販売）、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（米国）、Ｋｏｌｌｏｄｉｓ（韓国）、およびＢｉｏｐｏｌｙｍｅｒ（スウェーデン）が含まれる。代替的に、ＭＡＰは、既知の組換えＤＮＡ法を使用して生成されてもよい。
【００１９】
ＭＡＰの誘導体には、皮膚バリアまたは粘膜表面などの生体膜を通してのより容易な浸透を可能にし得る、低分子量製品（例えば、約５００Ｄａ〜約２，０００（例えば、約８００などの約１，２００）Ｄａの範囲の分子量を有する）などの単離された医薬的に許容される誘導体が含まれる。そのような誘導体には、天然に存在するＭＡＰで同定された配列と同じ、または（例えばマイナーな）バリアントであるアミノ酸配列を含む他の化合物も含まれる可能性があり、化学的および／または生物学的プロセス（例えば、天然に存在するＭＡＰの化学修飾、または直接合成）によって合成できる。「天然に存在するＭＡＰで同定されたアミノ酸配列の（例えばマイナーな）バリアント」とは、関連する天然に存在するＭＡＰの必要な特性に測定可能な程度の悪影響を与えない配列のバリエーションを意味する。
【００２０】
ＭＡＰの誘導体には、配列Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｈｙｐ−Ｔｈｒ−ＤＯＰＡ−Ｌｙｓのデカペプチド（Ｗａｉｔｅ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ａｄｈｅｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ａｄｈｅｓｉｖｅｓ，７，９（１９８７）を参照されたい）である、「ＭＡＰペプチド」およびその塩（例えばカチオン塩）が含まれる。ＭＡＰペプチドは、天然に存在するＭＡＰの低分子量誘導体として誘導および／または単離され得るか、または合成され得、例えば、Ｙａｍａｍｏｔｏ  ｉｎＪ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１，６１３（１９８７）に記載されるようにできる。Ｄａｌｓｉｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１２５，４２５３（２００３）も参照されたい。
【００２１】
そのようなＭＡＰの誘導体は、本発明による組み合わせ製品単独で、または１つ以上の他のこのような誘導体、および／もしくは１つ以上の上述の全長ＭＡＰと組み合わせて使用することができる。
【００２２】
言及され得るモンテルカストの医薬的に許容される塩には、酸付加塩および塩基付加塩が含まれる。そのような塩は、従来の手段によって、例えば、活性成分と、１当量以上の適切な酸または塩基とを、任意選択的に、塩が不溶である溶媒中または媒体中で反応させ、次いで、標準的な技法を使用して（例えば、真空下、凍結乾燥、または濾過によって）、該溶媒または該媒体を除去することによって形成されてもよい。塩はまた、例えば適切なイオン交換樹脂を使用して、塩の形態の活性成分の対イオンを別の対イオンと交換することによって、調製されてもよい。
【００２３】
好ましい塩には、例えば、塩酸塩、重硫酸塩、マレイン酸塩、メシレート、トシレート、カルシウムおよびマグネシウムなどのアルカリ土類金属塩、またはナトリウムおよびカリウム塩などのアルカリ金属塩が含まれる。モンテルカストの好ましい塩には、ナトリウム塩およびジシクロヘキシルアミン塩が含まれる。
【００２４】
モンテルカストは、エナンチオマー的に濃縮された形態で使用され得る。「エナンチオマー的に濃縮された」とは、一方の異性体が他方よりも大きな割合で存在する、モンテルカストのエナンチオマーのいずれかの混合物を意味する。例えば、９０％を超える光学純度（鏡像体過剰率；ｅ．ｅ．）を有するモンテルカストのエナンチオマーを使用できる。
【００２５】
本発明による組み合わせ製品は、モンテルカスト、またはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物と組み合わされた少なくとも１つのＭＡＰまたはその（例えば、医薬的に許容される）誘導体の投与を提供し、したがって、それらの製剤のうちの少なくとも１つはＭＡＰ／誘導体を含み、少なくとも１つは、モンテルカスト／塩／溶媒和物を含む別個の製剤として提供され得るか、または組み合わせ製剤として提供（すなわち製剤化）され得る（すなわちＭＡＰ／誘導体およびモンテルカスト／塩／溶媒和物を含む単一製剤として提供される）。
【００２６】
したがって、
（１）少なくとも１つのＭＡＰもしくはその誘導体と、モンテルカスト、またはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物と、医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体と、を含む、医薬製剤（この製剤は以下「組み合わせ製剤」と称される）と、
（２）以下の構成要素：
（Ａ）少なくとも１つのイガイＭＡＰまたはその誘導体を、医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体との混合物において含む医薬製剤と、
（Ｂ）モンテルカスト、またはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物を、医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体との混合物において含む医薬製剤と、を含む、パーツキットと、がさらに提供され、
構成要素（Ａ）および（Ｂ）が、他方と組み合わされた投与に好適である形態で各々提供される。
【００２７】
本発明のさらなる態様によれば、上記で定義されたパーツキットを作製する方法であって、上記で定義された構成要素（Ａ）を上記で定義された構成要素（Ｂ）と関連付けて、したがって２つの構成要素を互いに組み合わされた投与に好適なものにすることを含む、方法が提供される。
【００２８】
２つの構成要素を互いに「関連付ける」ことにより、パーツキットの構成要素（Ａ）および（Ｂ）は次のようなものとできる。
（ｉ）別個の製剤（すなわち、互いに独立して）として提供され、その後、組み合わせ療法において、互いに組み合わせての使用のために一緒にされるか、または
（ｉｉ）組み合わせ療法において互いに組み合わせて使用するための「組み合わせパック」の別個の構成要素として一緒に包装され提供される。
【００２９】
したがって、
（Ｉ）本明細書に定義される構成要素（Ａ）および（Ｂ）のうちの１つを、
（ＩＩ）その構成要素を２つの構成要素のうちの他方と組み合わせて使用するための指示書と共に含む、パーツキットがさらに提供される。
【００３０】
本明細書に記載のパーツキットは、繰り返し投与を提供するために、適切な量／用量のＭＡＰ／誘導体を含む１つを超える製剤、および／または適切な量／用量のモンテルカスト／塩／溶媒和物を含む１つを超える製剤を含み得る。２つ以上の製剤（活性化合物のいずれかを含む）が存在する場合、そのような製剤は、いずれかの化合物の用量、化学的組成、および／または物理的形態に関して、同じであってもよいし、異なっていてもよい。
【００３１】
本明細書に記載のパーツキットに関して、「〜と組み合わされた投与」により、ＭＡＰ（またはその誘導体）およびモンテルカスト（またはその塩／溶媒和物）を含むそれぞれの製剤が、関連する状態の治療の過程にわたって、逐次的に、別個に、および／または同時に投与されることを含む。
【００３２】
したがって、本発明による組み合わせ製品に関連して、「〜と組み合わされた投与」という用語は、関連する状態の治療の過程にわたって、組み合わせ製品の２つの構成要素（ＭＡＰおよびモンテルカスト）が一緒に、または時間的に十分に近接して、同一の治療の過程にわたって、ＭＡＰを含む製剤、またはモンテルカストを含む製剤のいずれかが単独で、他方の成分を含まずに投与される（任意選択的に、繰り返しで）場合よりも、患者に対する、より大きい有益な効果を可能にするように投与される（任意選択的に、繰り返しで）ことを含む。併用が、特定の状態の治療に関して、かつその治療過程にわたって、より大きい有益な効果を提供するかどうかの決定は、治療または予防される状態に依存することになるが、当業者によって慣習的に達成され得る。
【００３３】
さらに、本発明によるパーツキットの文脈において、「〜と組み合わされた」という用語は、２つの製剤のうちの一方または他方が、他方の構成要素の投与の前、後、および／または同時に投与され得る（任意選択的に、繰り返して）ことを含む。この文脈で使用されるとき、「同時に投与される」および「〜と同時に投与される」という用語は、関連するＭＡＰおよびモンテルカストの個々の用量が互いに４８時間（例えば２４時間）以内に投与されることを含む。
【００３４】
本発明による組み合わせ製品は、炎症の治療において有用性を見出す。「炎症の治療」は、原因にかかわらず身体の任意の器官（軟部組織、関節、神経、血管系、内臓器官、特に粘膜表面、特に皮膚を含む）における炎症の治療を含み、そしてまた、そのようなすべての炎症性障害もしくは状態、および／または炎症を特徴とする（例えば、症状として）障害もしくは状態を含む。
【００３５】
炎症状態は、免疫防御機構の活性化を特徴とする可能性があり（および典型的にそうであり）、宿主にとって有益というよりも有害な効果をもたらす。そのような状態は一般に、種々の程度の、組織の発赤もしくは充血、腫脹、高体温、疼痛（うずきを含む）、体液の滲出、かゆみ（掻痒症）、細胞死および組織破壊、細胞増殖、ならびに／または機能喪失に関連している。
【００３６】
言及され得る炎症性疾患には、動脈炎、糖尿病、メタボリックシンドローム、酒さ、喘息およびアレルギー、強直性脊椎炎、慢性閉塞性肺疾患、痛風性関節炎、炎症性腸疾患（クローン病および潰瘍性大腸炎など）、多発性硬化症、変形性関節症、膵炎、前立腺炎、乾癬性関節炎、関節リウマチ、腱炎、滑液包炎、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデス、ブドウ膜炎、じんましん、血管炎、肥満細胞症、糖尿病性血管合併症、片頭痛、アテローム性動脈硬化症、および関連する心血管障害が含まれる。具体的に言及され得る疾患状態は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）である。
【００３７】
より特に言及され得る炎症状態には、感染（ウイルス感染および／もしくは細菌感染など）に起因する炎症など、皮膚または粘膜（口腔、鼻、眼、膣、子宮頸部、および／もしくは肛門直腸の粘膜、特に口腔または鼻の粘膜を含む）の炎症、またはアレルギー／アトピー性状態（鼻炎、咽頭炎、歯周炎、歯肉炎、眼球乾燥症、結膜炎、皮膚炎、じんましん（じんましん）、および食物アレルギーなど）、ならびにヘルペス、薬疹、多形性光疹、日焼け、皮膚がんの初期症状（紅斑のような皮膚病変）、病的脱毛（皮膚移植後を含む）、化学発疹、乾癬、多形性紅斑、毛包炎、湿疹、および外耳炎などの他の炎症状態が含まれる。
【００３８】
より具体的には、本発明による組み合わせ製品は、炎症を特徴とする特定の状態、および／または炎症が関連している特定の状態を治療するために使用され得る。そのような状態には、創傷（擦り傷（引っ掻き傷）、（手術の切開を含む）切開、裂傷、刺し傷、剥離、紫斑、および瘢痕化を含む）、火傷（皮膚移植などの、熱傷後の手術に起因する炎症を含む）、、ならびに痔疾などの他の状態が含まれ得る。
【００３９】
皮膚または粘膜の創傷は、膜表面の内部または外部の物理的損傷から生じるか、またはそれによって引き起こされる可能性がある（すなわち、根本的な生理学的障害の症状である）。
【００４０】
物理的（例えば、「開放」）創は、鋭利な物体（切り傷、切開、刺し傷）または鈍い物体／機械的力（裂傷、擦過傷、剥離）、物理的打撃（紫斑）、熱または化学物質（熱傷および水疱）、紫外線（日焼け）、寒さ（しもやけまたは凍傷）によって引き起こされる場合がある。創傷は表在性（表皮および／もしくは真皮のみの損傷）、または全層創傷（表皮および／または真皮の下の損傷）であり得る。深刻な場合には、筋肉、骨、関節、さらには内臓器官などの皮下および／または粘膜下組織が損傷を受ける可能性がある。
【００４１】
本発明の組み合わせ製品は、創傷自体および治癒プロセスに関連する炎症、疼痛（うずきを含む）、および／または掻痒症（かゆみ）を治療するだけでなく、創傷からの体液の滲出、感染のリスクの予防にも使用することができ、瘢痕およびメラニン色素沈着などの炎症および／または創傷治癒プロセスに起因する生理学的反応の予防にも使用することができる。
【００４２】
瘢痕は、炎症および／または創傷治癒の結果であり、そのような炎症／治癒の結果である線維性組織の形成の一般的な用語である。
【００４３】
本発明の組み合わせ製品はまた、炎症および／または創傷治癒に起因するメラニン色素沈着の産生の抑制に有用であり得る。本発明の組み合わせ製品はまた、メラニン色素沈着に関連する障害、例えば、肝斑、そばかす、メラノーシス、頬部発疹、および他の色素沈着症、メラノーマを伴う皮膚がん、および日光への曝露によって引き起こされる色素沈着症、またはにきびのような皮膚疾患などの抑制に有用であり得る。
【００４４】
創傷は、疾患または障害の結果として生じる場合もある。そのようなものには、水疱、ならびに／または皮膚および粘膜の潰瘍が含まれ得る。これらは、しばしば長続きし、治療が困難である一般的な症状である。皮膚組織は、しばしば損傷、除去、液化、感染、および／または壊死することがある。潰瘍は、特に感染した場合、治癒するのが困難であり、費用がかかり、健康に二次的な結果をもたらす可能性がある。また、患者に大きな心理的ストレスと経済的損失をもたらし、全般的な幸福と生活の質の両方に影響を与える可能性がある。
【００４５】
代替的に、本発明による組み合わせ製品が特に有用である炎症性皮膚状態または疾患には、乾癬、にきび、湿疹、および皮膚炎、特にアレルギー性／アトピー性皮膚炎が含まれる。
【００４６】
乾癬は、慢性の炎症性皮膚疾患であり、再発する傾向がある（一部の患者は生涯治癒しないことがある）。乾癬の臨床症状には、主に紅斑および鱗屑が含まれる。これは、全身に発生する可能性があるが、頭皮および手足でより一般的に観察される。
【００４７】
にきびは、濾胞性（毛包脂腺ユニット）慢性の炎症性皮膚疾患であり、その発生は、皮脂過多、毛包脂腺管の閉塞（閉鎖面皰と開放面皰を含む）、細菌感染および炎症反応などの主な要因と密接に関連し、若年期に発生する傾向があり、顔面の多形性の皮膚病変を特徴とする。したがって、にきびという用語には、通常のにきびおよびにきび酒さ（すなわち、赤鼻）が含まれる。
【００４８】
湿疹は、様々な内的および外的要因によって引き起こされる強いかゆみを伴う皮膚の炎症反応である。急性、亜急性、および慢性の３つの段階がある。急性期には滲出液が生成される傾向があるが、慢性期には浸潤および肥大が含まれる。皮膚病変は、しばしばかゆみを伴い、容易に再発する。
【００４９】
皮膚炎は、粗さ、発赤、かゆみ、湿疹、および乾燥を特徴とする、一般的な皮膚疾患である。皮膚炎によって引き起こされる小さなしこり、難治性潰瘍、色素斑は、すぐに治療しないと、基底細胞がん、扁平上皮がん、悪性黒色腫に発展する可能性がある。皮膚炎は、物質（接触性皮膚炎）またはアレルギー（アレルギー性／アトピー性皮膚炎）を含む、様々な内部および外部の感染性または非感染性の要因によって引き起こされる可能性がある。また、脂漏性皮膚炎（脂漏性湿疹）およびすべての形態のステロイド依存性皮膚炎（光線過敏性脂漏、口周囲皮膚炎、酒さ様皮膚炎、ステロイド酒さ、ステロイド誘発酒さ、ｉａｔｒｏｓａｃｅａ、ステロイド皮膚炎様酒さ、局所コルチコステロイド誘発性酒さ様皮膚炎、より具体的には、局所コルチコステロイドによる長期治療（非制御使用、乱用または誤用を含む）後の顔面野における、紅潮、紅斑、毛細血管拡張、萎縮、丘疹および／または膿疱を特徴とする、顔面コルチコステロイド依存性皮膚炎（ＦＣＡＤ）または顔面コルチコステロイド依存性皮膚炎（ＦＣＤＤ）（例えば、Ｘｉａｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，４２，６９７（２０１５）、およびＬｕ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｌｉｎ．  Ｅｘｐ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，３５，６１８（２００９）を参照されたい））も含まれる。
【００５０】
本発明による組み合わせ製品は、本明細書で一般的および具体的に言及したものを含む様々な状態によって引き起こされる紅斑、発赤および腫脹、浮腫、水疱、および水疱性類天疱瘡の緩和に肯定的な効果を有し、皮下組織液の滲出を阻害し、およびそのような炎症状態によって引き起こされるかゆみおよび疼痛を抑制する可能性が見出された。
【００５１】
言及される可能性のある他の炎症状態には以下が含まれる：
（ａ）口腔粘膜炎、アフタ性潰瘍、中耳炎、喉頭炎、気管炎、食道炎、胃炎、腸炎、および全腸炎（細菌性赤痢、慢性アメーバ性赤痢、住血吸虫症、非特異的潰瘍性大腸炎、および局所腸炎を含む）、子宮頸管炎および子宮内膜炎、子宮内膜炎、吸入傷害などによって引き起こされる炎症、ならびにがんに関連する粘膜の炎症、および口腔、鼻咽頭、耳、喉、気管、胃腸管、子宮頸部などの粘膜表面に影響を及ぼす、感染（例えば、風邪もしくはインフルエンザなどのウイルス感染）などの粘膜炎症。
（ｂ）例えば、骨折、骨および関節の化膿性感染症、リウマチ性骨疾患による炎症、ならびに化膿性骨髄炎（急性、慢性、限局性、硬化性、外傷後）、化膿性関節炎、骨腫瘍（骨腫、類骨骨腫、軟骨腫）、骨嚢胞、破骨細胞腫、原発性骨肉腫（骨肉腫、軟骨肉腫、骨線維肉腫、ユーイング肉腫、非ホジキンリンパ腫、骨髄腫、脊索腫）、転移性骨腫瘍、骨の腫瘍様病変（骨嚢胞、動脈瘤骨嚢胞、好酸球性肉芽腫、線維性形成異常）、ならびにリウマチ性関節炎に関連する整形外科の炎症。
（ｃ）末梢多発神経炎、顔面神経炎、末梢神経炎、皮下神経炎、尺骨神経炎、肋間神経炎などの神経炎症。
（ｄ）筋炎、靭帯炎、腱炎、嚢胞炎、リンパ節炎、腺窩炎、扁桃炎、滑膜炎、筋膜炎などの、皮下および粘膜下の軟部組織の炎症、ならびに筋肉、靭帯、筋膜、腱、滑膜、脂肪、関節嚢、およびリンパ組織の損傷、挫傷、または裂傷によって引き起こされる軟部組織の炎症。
（ｅ）アレルギー性白血球破砕性血管炎、アレルギー性皮膚血管炎、結節性多発動脈炎、血栓性血管炎、肉芽腫性血管炎、リンパ球性血管炎、血液組成の異常を伴う血管炎、およびリウマチ性血管炎などの血管炎症、ならびにアレルギー性白血球破砕性血管炎、結節性多発動脈炎、血栓性血管炎、肉芽腫性血管炎、リンパ球性血管炎、血液組成の異常を伴う血管炎、およびリウマチ性血管炎によって引き起こされる血管がんに関連する血管炎症。
（ｆ）心膜炎、心筋炎、心内膜炎、肺炎、肝炎、脾炎、腎炎膵炎、膀胱炎、卵巣炎、前立腺炎および胃潰瘍の治療を含むが、これらに限定されない、心臓、胃、腸、肺、肝臓、脾臓、腎臓、膵臓、膀胱、卵巣、および前立腺などの内臓器官の炎症。
【００５２】
本発明のさらなる態様によれば、炎症、炎症性障害、および／または炎症を特徴とする障害／状態（例えば、症状として）の治療方法が提供され、この方法は、本発明による組み合わせ製品の、そのような治療を必要とする患者への投与を含む。
【００５３】
誤解を避けるために、本発明の文脈において、「治療」、「療法」、および「治療法」という用語は、治療を必要とする患者の治療的または緩和的治療、ならびに炎症および／または炎症性疾患の影響を受けやすい患者の、予防的治療および／または診断を含む。
【００５４】
「患者」には、爬虫類、および好ましくは哺乳類（特にヒト）の患者が含まれる。
【００５５】
本発明によれば、ＭＡＰ／誘導体およびモンテルカスト／塩／溶媒和物は、好ましくは局所的または全身的に、例えば、経口、静脈内、または動脈内（血管内および他の血管周囲装置／剤形（例えば、ステント）を含む）、筋肉内、皮膚、皮下、経粘膜（例えば、舌下もしくは頬側）、直腸、膣内、経皮、経鼻、肺（例えば、気管もしくは気管支）、局所、または医薬的に許容される剤形の化合物を含む医薬製剤の形態の任意の他の非経口経路で投与される。吸入（例えば、鼻腔内）による投与は、治療される状態が鼻炎または気道のウイルス感染（風邪、インフルエンザ）に起因する炎症である場合に特に有用である。肺投与は、治療される症状がＣＯＰＤの場合に特に有用である。局所投与形態は、例えば、粉末エアロゾルを使用することにより、またはネブライザーなどの適切な霧化技術または装置を使用する水性ミストにより、活性成分を含むスプレーを作成することにより強化され得る。
【００５６】
ＭＡＰおよびその誘導体の好ましい送達形態には、適切な（例えば、医薬的に許容される）ビヒクルおよび／または市販の製剤での炎症部位への局所的送達が含まれるが、経口、静脈内、皮膚もしくは皮下、鼻腔内、筋肉内、または腹腔内送達もまた含み得る。言及され得るモンテルカスト／塩／溶媒和物の送達形態には、既知の医薬的に許容されるおよび／または市販の製剤での経口送達が含まれるが、静脈内、皮膚もしくは皮下、鼻腔内、筋肉内、または腹腔内送達、ならびに適切な（例えば医薬的に許容される）ビヒクルでの炎症部位への局所投与もまた含み得る。
【００５７】
ＭＡＰ／誘導体およびモンテルカストは一般に、意図する投与経路および標準的な薬務を考慮して選択することができる医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体との混合物において１つ以上の（例えば、医薬）製剤の形態で一緒にまたは別個に投与される。そのような医薬的に許容される担体は、活性化合物に対して化学的に不活性であり得、使用条件下で有害な副作用または毒性を有しないものであり得る。そのような医薬的に許容される担体は、組み合わせ製剤で一緒に投与されるか、またはパーツキットの形態で投与されるかにかかわらず、いずれかの活性成分の即時放出または調節放出も付与し得る。
【００５８】
適切な医薬製剤は、市販されているか、または文献、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ（２０１２）、およびＭａｒｔｉｎｄａｌｅ−Ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，３８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ（２０１４）、ならびにそこで参照されている文書に記載されている技術に従って調製でき、すべての文書の関連する開示は、参照により本明細書に組み込まれる。さもなければ、適切な製剤の調製、ならびに特にＭＡＰ／誘導体およびモンテルカスト／塩／溶媒和物の両方を含む組み合わせ製剤は、通常の技術を使用して当業者によって非発明的に達成され得る。
【００５９】
有効成分（ＭＡＰ（例えばＭｅｆｐ−１）およびその誘導体、ならびにモンテルカストなど）は、エマルジョン、懸濁液、および／もしくは溶液（例えば（任意選択的に）緩衝化された水性製剤（例えば、溶液）、例えば、生理食塩水含有製剤（例えば、溶液）、リン酸塩含有製剤（例えば、溶液）、酢酸塩含有製剤（例えば、溶液）、ホウ酸塩含有製剤（例えば、溶液））などの水性製剤（溶液など）、または凍結乾燥粉末の形態であってよい可能性がある。
【００６０】
代替的に、有効成分を適切な賦形剤と組み合わせて以下を調製することもできる：
・ゲル製剤（これに関する適切なゲルマトリックス材料には、セルロース誘導体、カルボマーおよびアルギン酸塩、トラミカンガム、ゼラチン、ペクチン、カラギーナン、ジェランガム、デンプン、キサンタンガム、カチオン性グアーガム、寒天、非セルロース多糖類、ビニルポリマー、アクリル樹脂、ポリビニルアルコール、カルボキシポリマー、特に、ヒアルロン酸が含まれる）、
・ローション（凝縮物、これに関する適切なマトリックス材料には、セルロース誘導体、グリセリン、非セルロース多糖類、種々の分子量のポリエチレングリコール、およびプロパンジオールが含まれる）、
・ペーストまたは軟膏（これに関する適切なペーストマトリックス材料には、グリセリン、ワセリン、パラフィン、種々の分子量のポリエチレングリコールなどが含まれる）、
・クリームまたは発泡体（これに関する適切な賦形剤（例えば、発泡剤）には、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ゼラチン、種々の分子量のポリエチレングリコール、ドデシル硫酸ナトリウム、脂肪アルコールポリオキシエチレンエーテルスルホン酸ナトリウム、コーングルテン粉末、およびアクリルアミドが含まれる）、
・粉末エアロゾル（これに関する適切な賦形剤には、マンニトール、グリシン、デキストリン、デキストロース、スクロース、ラクトース、ソルビトール、およびポリソルベートが含まれる）、ならびに／または
・経口用または吸入用の液体（エアロゾル）スプレー（これに関する適切な賦形剤には、ヒアルロン酸などの粘度調整剤、乳化剤、緩衝剤、アルコール、水、保存剤、甘味料、香料が含まれる）。
【００６１】
グリセロール、グリセリン、ポリエチレングリコール、トレハロース、グリセロール、ワセリン、パラフィン油、ヒアルロン酸、およびその塩（例えば、ナトリウムおよびカリウム塩）、オクタン酸／カプリン酸トリグリセリドなどの保湿剤、ならびに／またはビタミンおよびグルタチオンなどの酸化防止剤、ならびに／または酸、塩基、およびｐＨ緩衝液などのｐＨ調整剤も、必要に応じてそのような製剤に含まれてもよい。さらに、ヘキサデカノール（セチルアルコール）、脂肪酸（例えば、ステアリン酸）、ドデシル硫酸ナトリウム（ラウリル硫酸ナトリウム）、ソルビタンエステル（例えば、ステアリン酸ソルビタン、オレイン酸ソルビタンなど）モノアシルグリセリル（モノステアリン酸グリセリンなど）、ポリエトキシ化アルコール、ポリビニルアルコール、ポリオールエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、エトキシ化脂肪酸エステル、ポリオキシルグリセリド、ラウリルジメチルアミンオキシド、胆汁酸塩（例えば、デオキシコール酸ナトリウム、コール酸ナトリウム）、リン脂質、Ｎ，Ｎ−ジメチルドデシルアミン−Ｎ−オキシド、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロマイド、ポロキサマー、レシチン、ステロール（例えばコレステロール）、糖エステル、ポリソルベートなどの界面活性剤／乳化剤、フェノキシエタノール、エチルヘキシグリセリンなどの保存剤、ならびに、アクリロイルジメチルタウレート／ＶＰコポリマーなどの増粘剤が含まれてもよい。特に、ステアリン酸、モノステアリン酸グリセリル、ヘキサデカノール、ステアリン酸ソルビタン、セチルアルコール、オクタン酸／カプリン酸グリセリドなどが、特にクリーム製剤に含まれてもよい。
【００６２】
モンテルカストおよびその塩は、約６２〜約２２，０００（例えば、ＰＥＧ１５０、ＰＥＧ、２００、ＰＥＧ３５０、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ８００、ＰＥＧ１０００、ＰＥＧ２０００、ＰＥＧ３３５０、ＰＥＧ４０００、ＰＥＧ６０００）のいずれかの分子量であり得る、種々の分子量のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と一緒に製剤化することによって、クリーム、ローション、ワックス、または特に軟膏として局所使用するために、有利に製剤化できる。モンテルカストは最初に、ＰＥＧ２００、またはより具体的にはＰＥＧ４００などの低分子量ＰＥＧに溶解され得、これに対し、より高分子量のＰＥＧ（例えば、ＰＥＧ１０００、ＰＥＧ３３５０、ＰＥＧ４０００、もしくはＰＥＧ６０００）、低級アルキルアルコール（例えば、エタノール）もしくは水、および／または上に挙げたものなどの他の成分を含む他の賦形剤が溶解され得る。
【００６３】
モンテルカストはそのようなＰＥＧベースの溶媒に容易に溶解して、主に水性製剤（例えば、非常に少量のエタノールを含む水）で観察され、皮膚または粘膜を刺激する可能性があるより高いｐＨ（ｐＨ９．５）ではなく、より低いｐＨ（例えばｐＨ  ５．９〜７．５）のクリームおよび軟膏を作製することができるということを予想外に見出した。モンテルカストはこの方法で可溶化でき、驚くほど安定し（すなわち酸化しにくい）、より許容できる／皮膚／粘膜への刺激が少ないｐＨを有する、クリームまたは軟膏に製剤化することができ、水に溶解するとき、ＭＡＰのものと近くなる。
【００６４】
有効成分（ＭＡＰ（例えば、Ｍｅｆｐ−１）およびその誘導体、およびモンテルカストも）、ならびにそれらを含む（例えば、医薬）製剤（例えば、上述のような、水溶液、ゲル、クリーム、軟膏、ローション／凝縮物、発泡体および／またはペースト）は、適切なマトリックス材料とさらに組み合わせて、皮膚または粘膜表面などの生物学的表面に適用するための包帯または治療パッチを調製することもできる。したがって、そのような製剤は、ガーゼ、不織布、または絹紙などのマトリックス材料に含浸するために使用されてもよい。代替的に、治療パッチは、例えば、バンドエイド、顔面マスク、アイマスク、ハンドマスク、フットマスクなどであってもよい。
【００６５】
そのような包帯を創傷に適用する際に使用するためにワセリンを使用してもよいが、ワセリンを使用する必要なく、上記のＰＥＧベースの軟膏をマトリックス材料と組み合わせて包帯を調製できることもわかった。
【００６６】
有効成分（ＭＡＰ（例えば、Ｍｅｆｐ−１）およびその誘導体、ならびにモンテルカストも）はまた、血小板型増殖因子（血小板由来増殖因子、ＰＤＧＦを含む）、骨肉腫由来増殖因子（ＯＤＧＦ）、表皮増殖因子（ＥＧＦ）、形質転換増殖因子（ＴＧＦαおよびＴＧＦβ）、線維芽細胞増殖因子（αＦＧＦ、βＦＧＦ）、インスリン様増殖因子（ＩＧＦ−Ｉ、ＩＧＦ−ＩＩ）、神経増殖因子（ＮＧＦ）、インターロイキン型増殖因子（ＩＬ−１、ＩＬ−１、ＩＬ−３）、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、およびコロニー刺激因子（ＣＳＦ）から選択される１つ以上の成長因子による療法と組み合わせることもできる。
【００６７】
有効成分の投与は、連続的または断続的であり得る。投与形態は、投与のタイミングおよび頻度によっても決定され得るが、炎症の治療的治療の場合、状態の重症度にも依存する。
【００６８】
障害、および治療される患者、ならびに投与経路に応じて、活性成分は、様々な治療有効用量で治療を必要とする患者へ投与され得る。
【００６９】
同様に、製剤中の活性成分の量は、治療される状態の重症度および患者に依存するが、当業者によって決定され得る。
【００７０】
有効成分の適切な用量には、Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ  −  Ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，  ３８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ  （２０１４）およびそこに言及されている文書などの医学文献で言及されているものを含み、すべての文書の関連する開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００７１】
いずれにせよ、開業医または他の当業者は、状態の重症度および投与経路に応じて、個々の患者に最も好適な実際の投与量を日常的に決定することができるだろう。上述の投与量は、平均の場合の例であり、当然のことながら、より高いまたはより低い投与量範囲が妥当である個々の事例があり得、それらも本発明の範囲内に含まれる。
【００７２】
経口投与および局所投与は、１日１回から４回投与することができる。
【００７３】
使用される製剤が上述のような組み合わせ製剤またはパーツキットであるかどうかに関係なく、水溶液製品中のＭＡＰおよびその誘導体の適切な濃度は、約０．０１（例えば約０．１）〜約１５．０（例えば約１．５）ｍｇ／ｍＬであり得、適切なｐＨ値は約１．０〜約７．０（例えば約３．０〜約６．５）の範囲であり得る。このような水溶液の適切な商業的供給源には、ＵＳＵＮ  Ｂｉｏ  Ｃｏ．，  Ｊｉａｎｇｙｉｎ，  Ｊｉａｎｇｓｕ  Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，  Ｃｈｉｎａが含まれる。
【００７４】
ＭＡＰおよびその誘導体の適切な局所投与量は、約０．１〜約５０μｇ／治療領域のｃｍ２の範囲であり、例えば、約１〜約２０μｇ／治療領域のｃｍ２の範囲であり、約２〜約１０μｇ／治療領域のｃｍ２の範囲、例えば、約５μｇ／治療領域のｃｍ２を含む。
【００７５】
使用される製剤が上述の組み合わせ製剤または部品キットであるかどうかにかかわりなく、水溶液製品中のモンテルカストの適切な濃度は遊離塩基として計算して０．１〜１０ｍｇ／ｍＬの範囲であり得、そのような溶液の適切なｐＨ値は約５．０（例えば約７．０）〜約１１．０（例えば約５．５（例えば、約８．０）〜約１０．０、例えば約ｐＨ９．０または約５．５〜約７．５）であり得る。
【００７６】
モンテルカストおよびその塩／溶媒和物の適切な局所用量は、すべての場合において遊離塩基として計算して、約０．０１〜約５０（約２０、例えば約１７．５、約１０を含む）μｇ／治療領域のｃｍ２、例えば、約０．０５（例えば、約０．１、約０．５を含む）〜約１７．５、約１０、例えば約７．５、例えば約５）μｇ／治療領域のｃｍ２の範囲である。
【００７７】
本発明のさらなる態様によれば、モンテルカストまたはその溶媒和物の医薬的に許容される塩を含む医薬（例えば、液体または（例えば、水性）溶液ベースの）製剤が提供され、この製剤は、（ａ）局所投与（例えば、粘膜、もしくは、好ましくは皮膚）、ならびに／または（ｂ）炎症、炎症性障害、および／もしくは炎症を特徴とする状態の治療に好適であり、適合され、および／または包装される。同様に、そのような製剤の直接局所投与（例えば、粘膜または、好ましくは皮膚への）によって、炎症、炎症性障害、および／または炎症を特徴とする状態（例えば症状）の治療に使用するためのそのような製剤が提供される。
【００７８】
本発明のこの態様に関して、疑念を避けるために、モンテルカストを含む局所製剤は、上述で言及され、定義され、または記載される、炎症のありとあらゆる治療、あらゆる炎症性障害の治療、および／または炎症を特徴とするありとあらゆる状態において使用することができる。同様に、言及され得るモンテルカスト（組み合わせを含む）を含む局所製剤には、上述で言及、定義、または記載されたもののすべてが含まれる。上述の関連する開示のいずれかおよびすべては、本発明のこの態様と組み合わせて参照により本明細書に組み込まれる。
【００７９】
それにもかかわらず、モンテルカストまたはその医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物を含む局所（例えば、液体または（例えば水性）溶液ベースの）製剤は、創傷回復に特に有用であることが見出されており、疼痛（うずきを含む）、特に創傷自体および創傷治癒プロセスに関連する掻痒症／かゆみを軽減する可能性がある。また、そのような局所モンテルカスト製剤は、特に急性炎症段階、例えば熱傷または創傷を負った後の最初の４８時間中に、創傷からの体液の滲出を予防および／または抑制するのに特に有用であることも見出された。これにより、感染のリスクおよび他の生理学的反応が予防される。我々は、加えて、そのような局所モンテルカスト製剤が、創傷または他のものに関連する、瘢痕化およびメラニン色素沈着（上記参照）の予防および／または抑制に特に有用であることを見出した。
【００８０】
使用される製剤が上述の組み合わせ製剤または部品キットであるかどうかにかかわりなく、言及し得るモンテルカストの適切な経口用量は、１日あたり、約０．２５ｍｇ〜約６００ｍｇ、例えば約０．４ｍｇ〜約２００ｍｇ、好ましくは約５ｍｇ〜約１００ｍｇ、例えば約７ｍｇ（例えば約８ｍｇ）〜約２５ｍｇ（例えば約１２ｍｇ）の範囲である。
【００８１】
いずれにせよ、いずれかの活性成分に関して、哺乳動物、特にヒトに投与される用量は、本発明の文脈において、妥当な時間枠（上述のように）にわたって哺乳動物の治療応答をもたらすのに十分でなければならない。当業者は、正確な用量および組成ならびに最も適切な送達レジメンの選択が、とりわけ製剤の薬理学的特性、治療される状態の性質および重症度、およびレシピエントの体調と精神状態、ならびに治療を受ける患者の年齢、状態、体重、性別および反応、および疾患の病期／重症度、ならびに患者間の遺伝的差異によっても影響されることを認識するであろう。
【００８２】
「約」という用語が、本明細書中で、量、例えば、有効成分の濃度および／または用量、分子量、またはｐＨの文脈において使用される場合はいつでも、そのような変数は近似値であり、したがって本明細書で指定された数値から±１０％、例えば±５％、好ましくは±２％（例えば、±１％）変動し得ることが理解されるであろう。この点において、「約１０％」という用語は、例えば数１０について±１０％、すなわち９％〜１１％を意味する。
【００８３】
１つ以上のＭＡＰまたはその誘導体とモンテルカストの組み合わせは、生物学的および／または臨床試験で明確な相乗効果を実証することができる。
【００８４】
本明細書に記載される組み合わせ製品／方法は、局所環境で通常経口投与される抗炎症薬モンテルカストの投与を可能にするという利点を有し得る。
【００８５】
本明細書に記載された、組み合わせ製剤／方法は、上述の状態の治療において、炎症性障害または他の治療に使用するための先行技術で公知である類似の方法（治療）と比較して、医師および／もしくは患者にとって便利であり、効果的であり、毒性が低く、広範囲の活性を有し、強力であり、少ない副作用であり得るという利点を有し得るか、またはその方法（治療）を上回る他の有用な薬理学的特性を有し得る。
【００８６】
本発明を以下の実施例により説明する。
【図面の簡単な説明】
【００８７】
【図１】図１および図２はそれぞれ様々な試験化合物で試験した、実施例１および２による、マウスに誘発された空気嚢からの滲出液から得られた様々な炎症マーカーのＥＬＩＳＡ試験結果を示す。
【図２】図１および図２はそれぞれ様々な試験化合物で試験した、実施例１および２による、マウスに誘発された空気嚢からの滲出液から得られた様々な炎症マーカーのＥＬＩＳＡ試験結果を示す。
【図３】様々な試験化合物で処理されたラットに誘発された第三度熱傷の経時的な治癒の熱傷スコアを示す。
【図４】図４および図５は実施例４および５による、マウスに誘発された空気嚢からの滲出液から得られた様々な炎症マーカーのＥＬＩＳＡ試験結果を示す。
【図５】図４および図５は実施例４および５による、マウスに誘発された空気嚢からの滲出液から得られた様々な炎症マーカーのＥＬＩＳＡ試験結果を示す。
【図６】実施例６の急性創傷モデルにおける創傷治癒に対するモンテルカストの効果を示す。
【図７】実施例６のモデルの試料中の創傷ヒドロキシプロリン含有量を示す。
【図８】実施例７の糖尿病性創傷モデルにおける創傷治癒に対するモンテルカストの効果を示す。
【図９】実施例７のモデルの６日目の試料中の創傷アスキュラー（ａｓｃｕｌａｒ）内皮増殖因子含有量（ｐｇ／ｇ）を示す。
【図１０】は、実施例７のモデルの６日目および１２日目の試料中の組織病理学的分析の結果を示す。
【図１１】実施例１６のインビボラットモデルでの熱傷創傷治癒に対する局所適用モンテルカストの効果を示す。
【図１２】図１２および図１３はモンテルカストが局所的に単独で適用された場合（図１２）およびＭＡＰの初期適用後（図１３）の、同様のインビボラットモデル（実施例１７参照）における無傷の皮膚および熱傷皮膚へのモンテルカストの浸透を示す。
【図１３】図１２および図１３はモンテルカストが局所的に単独で適用された場合（図１２）およびＭＡＰの初期適用後（図１３）の、同様のインビボラットモデル（実施例１７参照）における無傷の皮膚および熱傷皮膚へのモンテルカストの浸透を示す。
【図１４】スルファジアジン銀治療と比較して、第二度熱傷の患者に局所適用されたモンテルカストの効果を示す。
【図１５】メラニンに関連した皮膚の状態（肝斑および頬部発疹）の患者において局所的に適用されたモンテルカストの効果を示す。
【図１６】ステロイド依存性皮膚炎患者において局所的に適用されたモンテルカストの効果を示す。
【実施例】
【００８８】
実施例１
空気嚢モデルＩ
体重２０〜３０ｇの健康な成体雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ  Ｃｖｅｎｓ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｏ．  Ｌｔｄ  （Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ，  Ｊｉａｎｇｓｕ  Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，  Ｃｈｉｎａ）から供給された。実験を行う前に、マウスを標準化された条件下（一定温度または２２±２℃で、１２時間の明暗を交互に繰り返す）で飼育し、約１週間、水を含む標準的なマウス飼料を与えた。
【００８９】
全身麻酔は、腹腔内３％抱水クロラール（Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．，  Ｌｔｄ．，  Ｓｈａｎｇｈａｉ，  Ｃｈｉｎａ）、１ｍＬ／１０ｇ体重）を使用して実施された。滅菌空気注射の１日前に、背部全体の毛を剃り、脱毛した。
【００９０】
空気嚢は、マウスの肩甲骨内領域に滅菌空気（５ｍＬ）を皮下注射することによって生成された。３日後、嚢を維持するために、別の空気（３ｍＬ）の注射が行われた。急性炎症を誘発するために、この最終注射の３日後に、動物は滅菌カラギーナン溶液（ＣＰ  Ｋｅｌｃｏ，Ｔａｉｘｉｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ  Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ；１％、０．５ｍＬ、０．９％の生理食塩水を１０ｍＬ含む攪拌中のビーカーに０．１ｇのカラギーナン粉末を添加することにより作製）の注射を受けた。マウスは、皮下空気嚢へのカラギーナン注射の１時間前および２３時間後に試験試料またはビヒクルで前処理された。動物はカラギーナン注射の２４時間後に屠殺された。
【００９１】
皮膚生検は空気嚢から採取された。生検の一部は、ホルマリン（５０ｍＬの４０％ホルムアルデヒド溶液（Ｎａｎｃｈａｎｇ  Ｒａｉｎ  Ｄｅｗ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｎａｎｃｈａｎｇ，Ｈｕｂｅｉ  Ｐｒｏｖｅｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ）に超純水を総体積５００ｍＬまで添加することにより作製）で固定され、パラフィンワックスへの組織学的包埋、薄切、染色により分析した。
【００９２】
空洞を４ｍＬの滅菌リン酸緩衝溶液（ｐＨ７．４、４ｇのＮａＣｌ、０．１ｇのＫＣｌ、１．７４９ｇのＮａ２ＨＰＯ４、１２Ｈ２Ｏおよび０．１ｇのＫＨ２ＰＯ４を超純水で溶解し、ＨＣｌでｐＨを７．４に調整し、水で総体積５００ｍＬまで希釈して調製された）で洗浄した。
【００９３】
滲出液を採取し、体積を定量化した。細胞の総数は、血球計算盤（ＡＤＶＩＡ  ２１２０  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  Ｓｙｓｔｅｍ，Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｈｅａｌｔｈｉｎｅｅｒｓ）で決定した。浸出液を３０００ｒｐｍで１０分間、４℃で遠心分離し、上清を収集し、組織壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ−１β）、インターロイキン６（ＩＬ−６）、インターロイキン１０（ＩＬ−１０）、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）、および５−ヒドロキシトリプタミン（５−ＨＴ、セロトニン）について、標準ＥＬＩＳＡ試験キット（Ｄａｋｅｗｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｃｏ．，Ｂｅｉｊｉｎｇ，ＣｈｉｎａからのＢｉｏｌｅｇｅｎｄ（商標）またはＡｂｃａｍ（Ｓｈａｎｇｈａｉ）Ｔｒａｄｉｎｇ  Ｃｏ．Ｌｔｄ，ＣｈｉｎａからのＡｂｃａｍ（商標））およびＥＬＩＳＡリーダー（ＳＨ−１０００  Ｈｉｔａｃｈｉ，Ｊａｐａｎ）を使用するＥＬＩＳＡ分析のために−２０℃で保存した。
【００９４】
モデルを検証するためにいくつかの予備実験を行った後、以下の表１に従って試験試料またはビヒクルを投与することによりマウスを処理する実験を実施した。
【００９５】
表１では、ＭＡＰは、以下のように調製されたＭｅｆｐ−１溶液である。ムラサキイガイは、Ｓｈａｎｄｏｎｇ  Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａの沿岸地域で採取された。イガイの足を収集し、小片に切断し、４ｍｏｌ／Ｌの尿素水溶液に５％の酢酸を含む抽出緩衝液中でホモジナイズした。粗抽出物を遠心分離後に収集し、液体クロマトグラフィーで精製した。精製タンパク質（半製品、濃度８ｍｇ／ｍＬ、ＨＰＬＣで測定した純度９１．７２％、ｐＨ４．２）は０℃で保存した。以下で使用した溶液は、表１に記載されている濃度を得るために、この半製品に生理食塩水を加えることにより調製した。モンテルカストナトリウム（「Ｍｏｎ」、ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）およびデキサメタゾン（ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ）は両方とも粉末の形で得られ、表１に記載されている濃度の溶液を得るために超純水に溶解された。表１に記載されているすべての物質は、空気嚢に直接注射することにより局所投与された。
【００９６】
【表１】
2020527134.tif 000002
【００９７】
各群の滲出液の体積と空気嚢壁の重量（±ＳＤ）を以下の表２に示す。
【００９８】
【表２】
2020527134.tif 000003
【００９９】
総細胞数と分類（×１０６／ｍＬ）を以下の表３に示す。
【０１００】
【表３】
2020527134.tif 000004
【０１０１】
組織標本を分析し、炎症スコア、活性スコア（すなわち、病理スライドに示される好中球の数と密度は、炎症の程度を示し、開放創および感染症の場合は感染の程度を示す）、浮腫スコア、および線維化増殖スコアは、次のように推定された。
【０１０２】
ＨＥ染色切片を光学顕微鏡で観察し、知覚炎症レベルに応じてスコア付け（１、２、または３ポイント）した（エリアに散在する炎症細胞が少量のみの場合−１ポイント（軽度）；多くの炎症細胞が観察された場合−２ポイント（中程度）；そして、びまん性浸潤の場合−３ポイント（重度））。全体的な観察後、同様のスコア付けシステムが浮腫レベル（最も重度が３ポイント、軽度が１ポイント）に使用された。好中球のスコアは、炎症細胞に使用される方法と同じ方法論を使用した。
【０１０３】
【表４】
2020527134.tif 000005
【０１０４】
対照群では、嚢壁に少量の散在性炎症性細胞浸潤、まれな好中球浸潤、軽度の浮腫、および軽度の線維組織増殖が見られた。
【０１０５】
モデル群では、嚢壁は、全層に重度の炎症性細胞浸潤（多数の好中球）、重度の間質性浮腫、およびときに線維組織増殖を示した。
【０１０６】
陽性対照群では、嚢壁は軽度から中程度の炎症性細胞浸潤、ときに全層浸潤、重度の間質性浮腫を示し、線維組織形成はなかった。
【０１０７】
ＭＡＰ（１．５ｍｇ）群では、嚢壁は、全層に重度の炎症性細胞浸潤、中程度から重度の間質性浮腫、およびときに線維組織増殖を示した。
【０１０８】
Ｍｏｎ（経口）群では、嚢壁は、中程度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、軽度の間質性浮腫、およびときに線維組織増殖を示した。
【０１０９】
Ｍｏｎ（局所）群では、嚢壁は、中程度から重度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、軽度から中程度の間質性浮腫、および軽度の線維組織増殖を示した。
【０１１０】
ＭＡＰ＋Ｍｏｎ（経口）群では、嚢壁は、中程度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、軽度の間質性浮腫、および明らかな線維組織増殖を示した。
【０１１１】
ＭＡＰ＋Ｍｏｎ（局所）群では、嚢壁は、中程度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、軽度の間質性浮腫、およびときに線維組織増殖を示した。
【０１１２】
ＭＡＰ（０．２５ｍｇ）群では、嚢壁は、中程度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、軽度の間質性浮腫、および軽度の線維組織増殖を示した。
【０１１３】
ＭＡＰ（２．５ｍｇ）群では、嚢壁は、中程度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、明らかな間質性浮腫、およびときに線維組織増殖を示した。
【０１１４】
ＭＡＰ（５ｍｇ）群では、嚢壁は、中程度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、軽度から中程度の間質性浮腫、およびときに線維組織増殖を示した。
【０１１５】
ＭＡＰ（７．５ｍｇ）群では、嚢壁は、中程度の炎症性細胞浸潤を示し、軽度から中程度の好中球浸潤、軽度の間質性浮腫、および軽度の線維組織増殖を示した。
【０１１６】
滲出液のＥＬＩＳＡ試験結果は、検出範囲を下回ったＰＧＥ２および５−ＨＴレベルを示した。ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＩＦＮ−γの結果（±ＳＤ）を以下の表５に示し、図１にグラフで示す（これに関し、その略語を表５に示す）。
【０１１７】
【表５】
2020527134.tif 000006
【０１１８】
実施例２
空気嚢モデルＩＩ
上述の実施例１に記載されたのと同一のプロトコールに従って、マウス（Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｃｅｎｔｒｅ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉａｎｇｓｕ  Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ）を以下の表６に従って試験試料またはビヒクルを投与することにより処理するさらなる比較実験を実施した。
【０１１９】
表６で、「Ｄｅｘ」はデキサメタゾンの略語であり、「Ｄｏｐａｍｉｎｅ」はドーパミン塩酸塩の４ｍｇ／ｍＬ水溶液である（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ａｌａｄｄｉｎ  Ｂｉｏ−Ｃｈｅｍ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）。
【０１２０】
【表６】
2020527134.tif 000007
【０１２１】
各群の滲出液の体積と空気嚢壁の重量（平均±ＳＤ）を以下の表７に示す。
【０１２２】
【表７】
2020527134.tif 000008
【０１２３】
総細胞数と分類（×１０６／ｍＬ）を以下の表８に示す。
【０１２４】
【表８】
2020527134.tif 000009
【０１２５】
組織標本を分析し、炎症スコア、活性スコア、および線維性増殖スコアを上述の実施例１のように推定し、以下の表９に示す。
【０１２６】
【表９】
2020527134.tif 000010
【０１２７】
対照群では、嚢壁に少量のリンパ細胞浸潤、好中球浸潤なし、部分的な軽度から中程度の浮腫、および軽度の線維組織増殖が見られた。
【０１２８】
モデル群では、嚢壁は全層に重度の炎症性細胞浸潤、重度の間質性浮腫を示し、線維組織増殖は見られなかった。
【０１２９】
Ｄｅｘ群では、嚢壁に少量のリンパ細胞浸潤、ときに軽度の好中球浸潤、軽度の間質性浮腫が見られ、線維組織形成は見られなかった。
【０１３０】
Ｄｏｐａｍｉｎｅ群では、嚢壁に多くの炎症性細胞浸潤、軽度から中程度の間質性浮腫が見られ、線維組織増殖は見られなかった。
【０１３１】
ＭＡＰ群では、嚢壁に多くの炎症性細胞浸潤、軽度から中程度の間質性浮腫が見られ、線維組織増殖は見られなかった。
【０１３２】
Ｍｏｎ＋ＭＡＰ群では、嚢壁は中程度の炎症性細胞浸潤、軽度の間質性浮腫を示し、線維組織増殖は見られなかった。
【０１３３】
Ｄｅｘ＋ＭＡＰ群では、嚢壁に少量の散在性リンパ球浸潤、ときに好中球浸潤、軽度の間質性浮腫が見られ、線維組織増殖は見られなかった。
【０１３４】
Ｍｏｎ群では、嚢壁に多くの炎症性細胞浸潤、軽度から中程度の間質性浮腫が見られ、線維組織増殖は見られなかった。
【０１３５】
ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＩＦＮ−γの滲出液のＥＬＩＳＡ試験結果は、常に安定した高い応答を示し、同様の変動傾向を示した。ＩＬ−６およびＩＦＮ−γの結果（±ＳＤ）を以下の表１０に示し、図２にグラフで示す。
【０１３６】
【表１０】
2020527134.tif 000011
【０１３７】
実施例３
熱傷モデル
健康な成体雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットの体重は２００〜３００ｇであり、Ｂｅｉｊｉｎｇ  Ｖｉｔａｌ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．Ｌｔｄ，Ｂｅｉｊｉｎｇ，Ｃｈｉｎａから供給された。
【０１３８】
実験を行う前に、ラットを標準化された条件下（一定温度または２２±２℃で、１２時間の明暗を交互に繰り返す）で飼育し、水を含む標準的なラット飼料を与えた。
【０１３９】
腹腔内注射により投与された３％抱水クロラール（Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）（１ｍＬ／体重１００ｇ）でラットを麻酔した。各ラットの背側幹は、電気かみそりで剃毛し、７０％アルコールスクラブで外科的に準備した。皮膚の表面にかかる圧力を正確に測定できるように、一定温度および一定圧力の熱傷器具（ＹＬＳ−５Ｑ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｈｉｎａ）を使用した。熱傷は、スタイラス（表面積４ｃｍ２）を８０℃に加熱し、１８秒の接触時間で皮膚の表面にスタイラスを当てることにより引き起こされた。操作中に５００グラムの圧力が加えられた。このようにして、各ラットに４つの第２度の浅い熱傷から深い熱傷が作成された。試験化合物またはビヒクルを創傷の表面に適用した。
【０１４０】
ラットは別個のケージに入れたままにしたが、試験期間中は自由に動くようにさせた。最初の処理では、５００μＬの関連溶液を手術の約３〜４時間後（０日目）に適用し、次の７日間は１日に１回適用した。熱傷創傷の肉眼的外観が毎日観察された。写真は４８時間（２日目）、４日目（４日目）、および７日目（７日目）にデジタルカメラで撮影し、創傷治癒を比較した。皮膚病変を以下の基準について評価した：水疱、腫脹、発赤、かさぶた、出血、分泌、肉芽組織、および瘢痕組織。治癒の程度は、創面収縮率（ＷＣＲ）として表された：
ＷＣＲ＝（Ａ０−Ａｔ）／Ａ０×１００％
式中、Ａ０とＡｔは、それぞれ時間ｔの初期領域と創傷領域を指す。
【０１４１】
熱傷の適用後２、４および７日目に、２匹のラットを屠殺し、熱傷した皮膚を切除した。新たに分離した皮膚を、１０％中性緩衝ホルマリン（４％のホルムアルデヒドを含有する）で固定した。これは、組織学的包埋、染色、および免疫組織化学研究に使用された。
【０１４２】
ラットは、以下の表１１に従って試験試料またはビヒクルを投与することにより処理された。投与された溶液は、上述の実施例１に記載されているように実質的に作製された。
【０１４３】
【表１１】
2020527134.tif 000012
【０１４４】
結果
熱傷スコアを以下の表１２に示し、図３に示す。皮膚試料は、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｎａｎｊｉｎｇ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  ｏｆ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈｉｎａに送られた。試料を固定して包埋し、組織切片を切断して染色した。染色された切片を光学顕微鏡で検査し、写真を撮影した。すべての写真は、次の基準に従って解釈され、スコア付けされた。第１度−表皮が損傷し、基質が無傷のままである（スコア１ポイント）表層第２度−表皮が完全に損傷し、乳頭層が損傷した（１．５ポイント）；深い第２度−真皮は網状層まで損傷し、真皮をいくらか保持している（２．５ポイント）；第３度−真皮が完全に損傷し、筋肉および／または骨が影響を受けている（３ポイント）。
【０１４５】
【表１２】
2020527134.tif 000013
【０１４６】
実施例４
空気嚢モデル：局所投与対経口投与
本質的に実施例１に記載されているように実験を実施した（ただし、この場合、Ｃ５７ＢＬ／６マウスはＮａｎｊｉｎｇ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｎａｎｊｉｎｇ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮＢＲＩ）から供給された）。
【０１４７】
以下の表１３に従って試験試料またはビヒクルを投与することによりマウスを処理する実験を実施した。表１３に記載されているすべての物質は、胃内投与されたＭｏｎ（経口）（Ｍｏｎ−Ｏ）を除き、空気嚢に直接注射することにより局所投与された。
【０１４８】
【表１３】
2020527134.tif 000014
【０１４９】
各群の滲出液の体積と空気嚢壁の重量（平均±ＳＤ）を以下の表１４に示す。
【０１５０】
【表１４】
2020527134.tif 000015
【０１５１】
総細胞数と分類（×１０６／ｍＬ）を以下の表１５に示す。
【０１５２】
【表１５】
2020527134.tif 000016
【０１５３】
組織標本を分析し、炎症スコア、活性スコア、浮腫スコア、および線維芽細胞増殖スコアを、大部分、上述の実施例１に記載されるように推定し、以下の表１６に示す。
【０１５４】
【表１６】
2020527134.tif 000017
【０１５５】
対照群では、嚢壁に少量の散在性炎症性細胞浸潤、軽度の浮腫が見られ、明らかな好中球浸潤は見られなかった。
【０１５６】
モデル群では、嚢壁は、全層に中程度から重度の慢性炎症性細胞浸潤、中程度から重度の浮腫、および散在性好中球浸潤を示した。
【０１５７】
陽性対照群では、嚢壁は中程度の慢性炎症性細胞浸潤、中程度の間質性浮腫、および少量の好中球浸潤を示した。
【０１５８】
Ｍｏｎ−Ｏ群では、嚢壁は全層で中程度から重度の慢性炎症性細胞浸潤を示し、中程度から重度の浮腫を示した。
【０１５９】
Ｍｏｎ−Ｔ群では、嚢壁は中程度の慢性炎症性細胞浸潤、軽度から中程度の浮腫、および少量の好中球浸潤を示した。
【０１６０】
ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＩＦＮ−γの滲出液のＥＬＩＳＡ試験結果は、常に安定した高い応答を示し、同様の変動傾向を示した。ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、およびＩＦＮ−γの結果（±ＳＤ）を以下の表１７に示し、図４にグラフで示す。
【０１６１】
【表１７】
2020527134.tif 000018
【０１６２】
実施例５
空気嚢モデル：モンテルカストの組み合わせ
上記の実施例１に記載したのと同じプロトコールに従って、マウス（Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ  Ｃｖｅｎｓ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｏ．  Ｌｔｄ．により供給）を以下の表１８に従って試験試料またはビヒクルを投与することにより処理するさらなる比較実験を実施した。
【０１６３】
【表１８】
2020527134.tif 000019
【０１６４】
各群の滲出液の体積と空気嚢壁の重量（平均±ＳＤ）を以下の表１９に示す。
【０１６５】
【表１９】
2020527134.tif 000020
【０１６６】
総細胞数と分類（×１０６／ｍＬ）を以下の表２０に示す。
【０１６７】
【表２０】
2020527134.tif 000021
【０１６８】
組織標本を分析し、炎症スコア、活性スコア、浮腫スコア、および線維芽細胞増殖スコアを、上述の実施例１に記載されるように推定し、以下の表２１に示す。
【０１６９】
【表２１】
2020527134.tif 000022
【０１７０】
対照群では、嚢壁に少量の散在性炎症性細胞浸潤、まれな好中球浸潤、軽度の浮腫、および軽度の線維組織増殖が見られた。
【０１７１】
モデル群では、嚢壁は、全層に重度の炎症性細胞浸潤（多数の好中球）、重度の間質性浮腫、およびときに線維組織増殖を示した。
【０１７２】
陽性対照群では、嚢壁は軽度から中程度の炎症性細胞浸潤、ときに全層浸潤、重度の間質性浮腫を示し、線維組織形成はなかった。
【０１７３】
ＭＡＰ（１．５ｍｇ）群では、嚢壁は、全層に重度の炎症性細胞浸潤、中程度から重度の間質性浮腫、およびときに線維組織増殖を示した。
【０１７４】
ＭＯＮ−Ｏ群では、嚢壁は、中程度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、軽度の間質性浮腫、およびときに線維組織増殖を示した。
【０１７５】
ＭＯＮ−Ｔ群では、嚢壁は、中程度から重度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、軽度から中程度の間質性浮腫、および軽度の線維組織増殖を示した。
【０１７６】
ＭＭＯ群では、嚢壁は、中程度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、軽度の間質性浮腫、および明らかな線維組織増殖を示した。
【０１７７】
ＭＭＴ群では、嚢壁は、中程度の炎症性細胞浸潤を示し、少量の好中球浸潤、軽度の間質性浮腫、およびときに線維組織増殖を示した。
【０１７８】
滲出液のＥＬＩＳＡ試験結果は、検出範囲を下回ったＰＧＥ２および５−ＨＴレベルを示した。ＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＩＦＮ−γの結果（±ＳＤ）を以下の表２２に示し、図５にグラフで示す。
【０１７９】
【表２２】
2020527134.tif 000023
【０１８０】
実施例６
急性創傷モデル
６〜８週齢の雄のＣ５７ＢＬ／６マウスは、Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ  Ｃｖｅｎｓ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．から供給された。実験を行う前に、マウスを標準化された条件下（一定温度または２２±２℃で、１２時間の明暗を交互に繰り返す）で飼育し、約１週間、水を含む標準的なマウス飼料を与えた。
【０１８１】
全身麻酔は、腹腔内３％抱水クロラール（Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ、１ｍＬ／１０ｇ体重）を使用して実施された。背中の毛を乳児用毛剃り機で剃り、クリームで脱毛した。皮膚領域を拭き取り、７５％アルコールで２回滅菌した。
【０１８２】
直径０．６ｍｍのＥＭＳ皮膚生検パンチ（Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ  ５５０，１５６０  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ  Ｒｏａｄ，Ｈａｔｆｉｅｌｄ，ＰＡ  １９４４０）を使用して、背中の正中線の両側に２つの丸い創傷を作製した。全層の皮膚が除去され、深さが筋膜に達した。傷は縫合せずに開いたままにした。
【０１８３】
０日目〜１２日目まで１日１回、２０μＬ／創傷で異なる薬物を局所投与した。モデル群には同量の生理食塩水が投与された。表２３に示すこの実験では、５４匹のマウスを含む６つの群があった。組換えヒト上皮増殖因子（ｒｈＥＧＦ、Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｈａｏｈａｉ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．Ｌｔｄ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）を購入し、製造者の取扱説明書に従って調製した。凍結乾燥ｒｈＥＧＦ粉末（１０００００ＩＵ／バイアル）を２０ｍＬの生理食塩水に溶解して、５０００ＩＵ／ｍＬ濃度の溶液を作製した。この実験のｒｈＥＧＦの作業用量は１００ＩＵ／創傷であった。モンテルカストナトリウム（「Ｍｏｎ」、ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ，ＭＣＥ  Ｃｈｉｎａ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）は粉末状で得られ、超純水に溶解して表２２に記載の濃度の溶液を得た（Ｌ、Ｍ、およびＨは、それぞれ低、中、高のモンテルカストの用量を示す）。
【０１８４】
【表２３】
2020527134.tif 000024
【０１８５】
薬物投与後に創傷を透明なドレッサーで包んだ。
【０１８６】
０日目から１日おきに創傷ごとに写真を撮影した。写真をコンピューターにスキャンし、ＩｍａｇｅＪ画像分析ソフトウェア（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，  Ｃｈｉｎａ）を使用して創傷領域を計算した。
【０１８７】
治癒していない創傷領域は、元の創傷領域のパーセンテージとして表された。
Ａｔ／Ａ０×１００％、
式中、Ａ０とＡｔはそれぞれ、０日目の初期領域と測定日（時間ｔ）の創傷領域を指す。
【０１８８】
創傷後−創傷した後、３日目、７日目、および１２日目に試料を採取した。マウスを屠殺し、１．８ｃｍ×２．５ｃｍの領域の創傷組織を摘出した。組織の半分を１０％中性緩衝ホルマリン（Ｎａｎｃｈａｎｇ  Ｒａｉｎ  Ｄｅｗ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｎａｎｃｈａｎｇ，Ｈｕｂｅｉ  Ｐｒｏｖｅｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ）で保存し、パラフィンワックスへの組織学的包埋、薄切、染色によって分析した。ＨＥおよびマッソン染色パラフィン切片を光学顕微鏡下で分析した。皮膚再生、線維芽細胞増殖、コラーゲン再生スコア、および炎症スコアが推定された。
【０１８９】
残余の試料は、さらに分析するために−８０℃で保存した。組織を小片に切断し、液体窒素を添加して脆性を高めた。９ｍＬの生理食塩水を１ｇの組織に添加し、Ｔｉｓｓｕｅｌｙｓｅｒ（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｊｉｎｇｘｉｎ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）を使用して５５Ｈｚで６０秒間粉砕した後、８０００ｒｐｍで１０分間、４℃で遠心分離した。
【０１９０】
上清を回収し、抽出したタンパク質を標準ＥＬＩＳＡ試験キットとＥＬＩＳＡリーダー（ＳＨ−１０００  Ｈｉｔａｃｈｉ，Ｊａｐａｎ）を使用するＥＬＩＳＡ分析に使用した。組織壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ−１β）およびインターロイキン６（ＩＬ−６）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、ならびにヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）をアッセイした。ＥＬＩＳＡキットは、Ｂｅｉｊｉｎｇ  ４Ａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．（Ｂｅｉｊｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）から購入した。
【０１９１】
創傷治癒に対するモンテルカストの効果は、以下の表２４、および図６に示されている（数字は、異なる群の様々な時点での残存創傷領域対初期創傷のパーセンテージを示している（±ＳＤ；ｎ＝５）。
【０１９２】
【表２４】
2020527134.tif 000025
【０１９３】
上記のデータは、モンテルカストが創傷治癒に有意な影響を与えたことを示している。４日目では、Ｍｏｎ  Ｈ群の改善率は約３９％であった。
【０１９４】
コラーゲン再生の指標である試料中の創傷ＨＹＰ（μｇ／ｍｇ）含有量は、以下の表２５および図７に示されている。
【０１９５】
【表２５】
2020527134.tif 000026
【０１９６】
実施例７
糖尿病性創傷モデル
上述の実施例６に記載されているプロトコールと本質的に同じプロトコールを使用した同様の実験を、８〜１２週齢の雄ｄｂ／ｄｂマウス（Ｃ５７ＢＬ／ＫｓＪ−ｄｂ／ｄｂ、体重３５〜４５ｇ／マウス、Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ  Ｃｖｅｎｓ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．により供給された）で実施した。
【０１９７】
創傷を作るために、直径０．８ｍｍのＥＭＳ皮膚生検パンチを使用した。
【０１９８】
０日目〜１８日目まで１日１回、２０μＬ／創傷で異なる薬物を局所投与した。モデル群には同量の生理食塩水が投与された。以下の表２６に示すこの実験では、３９匹のマウスを含む３つの群があった。
【０１９９】
【表２６】
2020527134.tif 000027
【０２００】
創傷した後、６日目、１２日目、および１８日目に試料を採取した。
【０２０１】
創傷治癒に対するモンテルカストの効果を図８に示す。
【０２０２】
６日目のＶＥＧＦ含有量（ｐｇ／ｇ）の結果を以下の表２７に示し、図９にグラフで示す。
【０２０３】
【表２７】
2020527134.tif 000028
【０２０４】
結果は、モンテルカストがモデル群のものと比較して、負傷した組織のＶＥＧＦ産生を約７４％増加させたことを示した。
【０２０５】
組織標本を分析し、皮膚再生、線維芽細胞増殖、コラーゲン再生スコア（Ｍａｓｓｏｎスコア）、および炎症スコアを次のように推定した。
【０２０６】
ＨＥおよびマッソン染色切片を光学顕微鏡下で観察し、以下の基準に従ってスコア付けした（１、２、または３ポイント）。皮膚再生スコアは、新たに生成された皮膚で覆われた領域が創傷領域の３分の１以下の場合、１ポイントで、新しく生成された皮膚が創傷領域の３分の１を超えるが３分の２未満の領域を覆っている場合、スコアは２ポイントで、新しく生成された皮膚で覆われた領域が創傷領域の少なくとも３分の２であった場合、スコアは３ポイントであった。
【０２０７】
線維芽細胞の増殖は、次の基準としてスコア付けされた：
【０２０８】
【表２８】
2020527134.tif 000029
【０２０９】
炎症は次の基準としてスコア付けされた：
【０２１０】
【表２９】
2020527134.tif 000030
【０２１１】
Ｍａｓｓｏｎ染色試料のコラーゲン沈着スコア基準は次の通りであった。正常組織と比較した。明確な青色の染色がないものは０ポイントが与えられ、分散したパターンで現れる青い繊維は、１点としてスコア付けされ、より多くの青い繊維が現れた場合、これは２ポイントとしてスコア付けされ、拡散した青色には３ポイントが与えられた。
【０２１２】
組織病理学的分析の結果を図１０に示す。
【０２１３】
結果は、モンテルカストが、特に創傷した後の初期段階で、創傷治癒を促進する効果を有していたことを示した。
【０２１４】
実施例８
モンテルカストクリームＩ
次の成分からなるモンテルカストナトリウムに基づくクリームが作製された：モンテルカストナトリウム（２００ｍｇ、Ａｒｒｏｍａｘ  Ｐｈａｒｍａｔｅｃｈ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ，Ｓｕｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ）、ステアリン酸（２ｇ）、モノステアリン酸グリセリン（２ｇ）、ヘキサデカノール（２ｇ）、グリセリン（５ｇ）および水酸化ナトリウム（０．２５ｇ）（すべてＳｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）、アンモニウムアクリロイルジメチルタウレート／ＶＰコポリマー（０．１３ｇ、Ｃｌａｒｉａｎｔ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ（Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ）Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ）、フェノキシエタノール（０．３ｇ）およびエチルヘキシルグリセリン（０．１ｇ）（両方ともＳｈａｎｇｈａｉ  Ｒａｙｓｏｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）、ならびに精製水（８８．４２ｇ）。
【０２１５】
ステアリン酸、グリセリンモノステアレート、ヘキサデカノールを混合し、混合物が完全に溶けるまで攪拌しながら８５℃に加熱した。
【０２１６】
アンモニウムアクリロイルジメチルタウレート／ＶＰコポリマー、精製水、水酸化ナトリウムを８５℃で攪拌しながら混合して、均質なコロイド懸濁液を形成した。
【０２１７】
次いで、モンテルカストが完全に溶解するまで、モンテルカストナトリウム、グリセリン、フェノキシエタノール、およびエチルヘキシルグリセリンを攪拌しながら混ぜ合わせた。
【０２１８】
共重合体／水混合物をステアリン酸含有混合物に添加し、乳化装置を使用して５分間素早く撹拌することにより乳化した。得られたエマルジョンを５５℃に冷却し、モンテルカスト含有混合物を混合しながら添加した。得られた混合物を室温まで冷却させて、最終製品を得た。
【０２１９】
実施例９
モンテルカストクリームＩＩ
上述の実施例８に記載された手順と同様の手順に従って、第２のクリームを生成した。
【０２２０】
この場合、ステアリン酸（２ｇ）とモノステアリン酸グリセリン（２ｇ）を、混合物が完全に溶けるまで攪拌しながら最初に８５℃に加熱し、次いで、ポリソルベート８０（１ｇ、Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ）およびヒアルロン酸ナトリウム（０．４ｇ、Ｓｈａｎｄｏｎｇ  Ｆｏｃｕｓｃｈｅｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ）を、ヒアルロン酸ナトリウムが完全に膨潤するまで８５℃の精製水と一緒に混合した。
【０２２１】
これらの２つの混合物を混ぜ合わせ、乳化し、攪拌した後、５５℃に冷却し、次いで、同一のモンテルカスト含有混合物（上述の実施例８に記載）を混合しながら添加した。室温まで冷却すると、最終製品が得られた。
【０２２２】
実施例１０
モンテルカストクリームＩＩＩ
上述の実施例８に記載されている手順と同様の手順に従って、第３のクリームを生成した。
【０２２３】
この場合、モノステアリン酸ソルビタン（０．６ｇ）、ポリソルベート８０（１ｇ）、ヘキサデカノール（２ｇ）、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド（５ｇ）、パラフィン油（４ｇ）、モノステアリン酸グリセリル（２ｇ）、およびワセリン（５ｇ）（すべてＳｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ）を混合し、混合物が完全に溶解するまで攪拌しながら８５℃に加熱した。次いで、アクリロイルジメチルタウリンアンモニウム／ＶＰ共重合体（０．１３ｇ）、グリセリン（４ｇ）、トレハロース（０．５ｇ、Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ）を精製水（７０．５ｇ）と一緒に、様々な成分が溶解するまで８５℃で混合した。
【０２２４】
モンテルカストが溶解するまで攪拌しながら、モンテルカストナトリウム（２００ｍｇ）、ポリエチレングリコール２００（４ｇ、Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ）、フェノキシエタノール（０．３ｇ）、およびエチルヘキシルグリセリン（０．１ｇ）を含む第３の混合物を作成した。
【０２２５】
共重合体／水混合物をソルビタンモノステアレート含有混合物に添加し、続いて乳化、撹拌、５５℃まで冷却した。シリコンオイル（０．５ｇ、Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ）を、モンテルカスト含有混合物と共に、混合しながら添加した。室温まで冷却すると、最終製品が得られた。
【０２２６】
実施例１１
モンテルカスト軟膏Ｉ
軟膏は、最初にポリエチレングリコール３３５０（２１．３ｇ、Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ）をポリエチレングリコール４００（５８．５ｇ、Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ）に攪拌しながら６０℃に加熱して溶解することにより作製した。モンテルカストナトリウム（２００ｍｇ）を攪拌しながらポリエチレングリコール４００（２０．０ｇ）に溶解した。
【０２２７】
最初の溶液を４０〜５０℃に冷却した後、そこに２番目の溶液を５〜１０分間攪拌および混合しながら添加した。室温まで冷却すると、最終製品が得られた。
【０２２８】
実施例１２
モンテルカスト軟膏ＩＩ
ポリエチレングリコール４０００（２１．３ｇ、Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ）を同量のポリエチレングリコール４００（５８．５ｇ）に溶解したことを除いて、実施例１１に記載のようにさらなる軟膏を作製した。
【０２２９】
実施例１３
モンテルカストエアロゾル粉末スプレー
モンテルカストナトリウム（２００ｍｇ）をエタノール（７０ｇ、Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ）に添加し、完全に溶解するまで攪拌しながら、エアゾール粉末スプレーベースのものを作製した。
【０２３０】
得られた溶液に多孔質デンプン（２８ｇ、Ｓｉｎｏｐｈａｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｃｏ．Ｌｔｄ）を添加して懸濁液を作製し、続いてエアロゾルスプレーボトルに充填した。
【０２３１】
実施例１４
モンテルカスト包帯
上述の実施例１２に記載のように調製したモンテルカストナトリウム軟膏をガーゼ（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｆａｃｔｏｒｙ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）上に平らなプレートで均一にコーティングし、室温まで冷却することにより、包帯を作成した。
【０２３２】
実施例１５
腫脹性耳モデル
Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ  Ｃｖｅｎｓ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．から供給された６〜８週齢で平均体重１８〜２５ｇの健康なＢＡＬＢ／ｃマウス１２匹を、実験前に約１週間飼育し、世話をした。飼育舎の温度は２５〜２７℃、湿度は７４％で、１２時間の明暗を交互に繰り返し、食料と水を自由に摂取させた。マウスは、表２８に記載されているように、各群に３匹ずつでランダムに４つの群に分けられた。
【０２３３】
【表３０】
2020527134.tif 000031
【０２３４】
モンテウルカストクリーム（Ｍｏｎクリーム）は、上述の実施例８に記載されているクリームである。モンテルカストを混合物に追加して、同じ手順に従ってブランククリームを作成した。デキサメタゾンクリーム（Ｄｅｘクリーム）も同じ手順を使用して作成され、モンテルカストをデキサメタゾン（１６０ｍｇ、Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ａｌａｄｄｉｎ  Ｂｉｏ−Ｃｈｅｍ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．）に置き換えた。
【０２３５】
各マウスの左耳を自己対照として使用した。各マウスの右耳を様々な処理で処理した。最初に２０μＬのキシレン（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ａｌａｄｄｉｎ  Ｂｉｏ−Ｃｈｅｍ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．，  Ｌｔｄ．）を各マウスの右耳の内側と外側の両方に塗布した。約４分後に耳が腫れ始めた。次に、４０μＬの様々なクリームを各群の右耳に塗布した。マウスをケージに戻した。
【０２３６】
マウスは、４０分後に頸部脱臼により屠殺された。左右の耳を切断した。直径８ｍｍのスキンパウチ（ｓｋｉｎ  ｐｏｕｃｈ）（Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈａｔｆｉｅｌｄ，ＰＡ，ＵＳＡ）を使用して、両耳の同じ部位から耳の一部を採取した。重量を記録し、腫脹率を次のように計算した。
腫脹率＝（右耳の重量−左耳の重量）／左耳の重量×１００％
結果を表２９に示す。
【０２３７】
【表３１】
2020527134.tif 000032
【０２３８】
結果は、モンテルカストクリームがマウスの耳のキシレン誘発腫脹を有意に減少させることを示した。その効果は、よく知られている局所抗炎症薬であるデキサメタゾンの効果よりも優れていた。
【０２３９】
実施例１６
ラット熱傷モデルＩ
２５０〜３００ｇの平均体重を持つ６〜８週齢のオスのＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットは、Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ  Ｃｖｅｎｓ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．から供給された。実験を行う前に、ラットを標準化された条件下（一定温度または２２±２℃で、１２時間の明暗を交互に繰り返す）で飼育し、約１週間、水を含む標準的なマウス飼料を与えた。
【０２４０】
自作の型を使用した。竹の一部を取り、その長さに沿って上部１／３を除去した。竹の底に２．５×４．５ｃｍの大きさの楕円形の穴を開けて、ラットの背中が熱湯にさらされるようにした。露出した皮膚の面積は、その全体表面積（ＴＢＳＡ）の約１０〜１３％であった。
ＴＢＳＡ（ｃｍ２）＝Ｋ×Ｗ×２／３
ここで、Ｋは所与の種の補正係数（体重／形状に対する表面積）定数（ラットの場合は９．１）、Ｗはラットの体重（ｇ単位）である。
【０２４１】
ラットの背中の毛を剃った。１０％抱水クロラールを注射して、ラットを麻酔した（３５０ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍＬ／ｋｇ）。
【０２４２】
６匹のラットを３匹のラットの２つの群に分けた。麻酔後、ラットを型の内側に固定した。粘着テープを使用して手足と腹部を固定し、竹を背中にしっかりと取り付けて、穴から皮膚を露出させた。沸騰している１００℃の熱湯を１２秒間ラットの皮膚に当てた。
【０２４３】
その後、モンテルカストクリーム（上述の実施例８に記載のように調製）を試験群の熱傷に投与し、対照群にブランククリーム（有効成分を含まない同じクリーム）を投与した。その後、１日に１回、１０日間処理を行った。
【０２４４】
熱傷の１０日後、試験群の熱傷領域で毛が成長しているのが観察された。対照群の熱傷領域には発毛の兆候はなかった。これを、モンテルカストクリームが熱傷後に皮膚機能を回復するのに役立つことを示している図１１に示す。
【０２４５】
実施例１７
ラット熱傷モデルＩＩ
８匹のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットを４匹の２つの群に分けた。上述の実施例１６に記載されている方法と本質的に同じ方法で、以下の表３０に示す温度および時間で熱湯を適用する（または必要に応じて適用しない）ことにより、熱傷を適用した。
【０２４６】
一方の群では、熱傷直後に、モンテルカストクリーム（のみ、上述の実施例８に記載のように調製したものを熱傷に適用した。１ｇのモンテルカストクリームを各創傷に使用した。他方の群では、熱傷直後に、４．９ｍｇ／ｍＬの濃度のＭＡＰ生理食塩水０．５ｍＬを熱傷創傷の表面に適用した。溶媒が蒸発するまで数分間の短い待機の後、さらに０．５ｍＬの同じＭＡＰ溶液を適用し、これを合計３回繰り返した。この後、同じモンテルカストクリーム１ｇをＭＡＰの頂部に適用した。
【０２４７】
【表３２】
2020527134.tif 000033
【０２４８】
試料は、直径８ｍｍのＥＭＳ皮膚生検パンチを使用して、時間ゼロで各ラットから採取し、その後、熱傷の１、２、３、６、および８時間後に採取した。全層の皮膚を除去し、重量を測定した。
【０２４９】
次いで、組織を小片に切断した。９ｍＬの生理食塩水を１ｇの組織に添加し、Ｔｉｓｓｕｅｌｙｓｅｒを使用して５５Ｈｚで６０秒間粉砕した後、８０００ｒｐｍ、４℃で１０分間遠心分離し、上清をＨＰＬＣ分析用に収集した。
【０２５０】
ＨＰＬＣ条件は次の通りであった。カラム：Ａｎｇｉｌｅｎｔ  ＺＯＲＢＡＸ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ８（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）、緩衝液：Ａ：０．１％ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸、（Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ａｌａｄｄｉｎ  Ｂｉｏ−Ｃｈｅｍ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）水溶液、Ｂ：０．１％ＴＦＡアセトニトリル溶液（Ｍｅｒｃｋ，Ｄａｒｍｓｌａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、勾配：０〜２０分：４９％Ｂ、流速：１ｍＬ／分、検出波長：３８８ｎｍ、試料体積：２０μＬ。
【０２５１】
各試料に含まれるモンテルカストの量を検出し、ピーク面積に基づいて計算した。ピーク面積対モンテルカスト量の標準曲線を計算に使用した。
【０２５２】
熱傷のない無傷の皮膚試料の結果を以下の表３１および図１２に示す。
【０２５３】
【表３３】
2020527134.tif 000034
【０２５４】
結果は、無傷の皮膚では、ＭＭ群の濃度ピークはＭｏｎ群のものよりも１時間遅れていることを示した。これは、ＭＡＰがモンテルカストの皮膚への浸透を遅らせることができることを示した。
【０２５５】
熱傷群の結果を図１３に示した。
【０２５６】
無傷の皮膚と比較して、熱傷後に皮膚が浸透しにくくなったようである。ＭｏｎとＭＭの両方の群で、モンテルカストのピークは２時間で示された。しかしながら、ＭＭ群では、試料に含まれるモンテルカストの量が、Ｍｏｎ群と比較して経時的に有意に減少した。これらの結果は、皮膚の状態に関係なく、ＭＡＰがモンテルカストの浸透を遅らせることができることを裏付けている。
【０２５７】
実施例１８
熱傷患者の浮腫を治療するためのモンテルカストクリームの臨床例
モンテルカストクリームは、上述の実施例８に記載されているのと同じ方法に従って調製された。クリーム中のモンテルカストナトリウムの濃度は５ｍｇ／ｇであった。
【０２５８】
この研究に登録された対象は、頭頸部に第２度の熱傷を負った患者であった（図１４；写真（ａ））。モンテルカストクリームは、熱傷を負ってから２０時間後に開始して、患者の顔の左側に適用された。よく知られている局所熱傷治療である銀スルファジアジン軟膏が、比較として顔の右側に適用された。両方の薬物は、１日２回適用された。
【０２５９】
図１４に示すように、治療の１日後（写真（ｂ））、顔の左側の浮腫は、右側よりも速く、より広範囲に明らかに減少していた。この相対的な改善は、次の数日間（治療後、２日間（写真（ｃ））、３日間（写真（ｄ））、および１４日間（写真（ｅ）））にわたって続いた。
【０２６０】
この実験は、モンテルカストクリームが熱傷の急性炎症段階の浮腫を効果的に治療し、銀スルファジジンよりも効果的であることを示した。
【０２６１】
実施例１９
熱傷瘢痕のかゆみを治療するためのモンテルカストクリームの臨床例
モンテルカストクリーム（５ｍｇ／ｇ濃度のモンテルカストナトリウムを含む）は、上述の実施例８に記載されているのと同じ方法に従って調製された。
【０２６２】
研究に登録された対象は、古い瘢痕のある熱傷患者であった。症状には、疼痛とかゆみを伴う不規則な形状の肥厚性瘢痕が含まれていた。周囲温度の変化または感情的な興奮は、疼痛および／またはかゆみを悪化させることが知られている。
【０２６３】
対象は、傷跡を洗浄した後、朝と夕方にクリームを使用する必要があった。
【０２６４】
登録した対象は全員、最初の使用から８分以内にかゆみが緩和されたと感じ、モンテルカストクリームが熱傷のかゆみの治療に使用できることを示した。
【０２６５】
実施例２０
メラニン関連皮膚疾患を治療するためのモンテルカストクリームの臨床例Ｉ
モンテルカストクリーム（５ｍｇ／ｇ濃度のモンテルカストナトリウムを含む）は、上述の実施例９に記載されているのと同じ方法に従って調製された。
【０２６６】
この研究に登録された対象は、メラニン関連皮膚疾患の患者であった。症状には、熱傷またはにきび発疹後の色素沈着が含まれていた。対象は、洗顔後に、朝と夕方にクリームを使用する必要があった。
【０２６７】
登録対象は全員、２週間の使用後に肌の色が改善したと感じ、モンテルカストクリームがメラニン色素沈着および／またはメラニン関連皮膚疾患の治療に使用できることを実証した。
【０２６８】
実施例２１
メラニン関連皮膚疾患を治療するためのモンテルカストクリームの臨床例ＩＩ
モンテルカストクリーム（５ｍｇ／ｇ濃度のモンテルカストナトリウムを含む）は、上述の実施例９に記載されているのと同じ方法に従って調製された。
【０２６９】
この研究に登録された対象は、メラニン関連皮膚疾患の患者であった。症状には、肝斑および頬部発疹が含まれた。
【０２７０】
最悪の症状の除去を試みるために、レーザー前処理が採用された。対象は、洗顔後に、朝と夕方にクリームを使用する必要があった。
【０２７１】
対象は、２週間の使用の後、２週間後に肌の色が改善したと感じた。これは、顔の両側がレーザー治療前（写真（ａ））、モンテルカストクリームによる治療開始７日後（写真（ｂ））、およびモンテルカストクリームによる治療の１４日後（写真（ｃ））に示されている図１５から見出すことができる。これは、モンテルカストクリームがメラニン色素沈着および／またはメラニン関連皮膚疾患の治療に使用できることを実証する。
【０２７２】
実施例２２
ステロイド依存性皮膚炎を治療するためのモンテルカストクリームの臨床例
モンテルカストクリーム（５ｍｇ／ｇ濃度のモンテルカストナトリウムを含む）は、上述の実施例９に記載されているのと同じ方法に従って調製された。
【０２７３】
この研究に登録された対象は、ステロイド依存性皮膚炎の患者であった。症状には、皮膚発赤、丘疹、かゆみ、腫脹などがあった。
【０２７４】
対象は、洗顔後に、朝と夕方にクリームを使用する必要があった。
【０２７５】
クリームの使用は、５分以内に対象のかゆみを緩和することが観察された。図１６（治療前（写真（ａ））および治療後（写真（ｂ）））から見出せるように、モンテルカストクリームはステロイド依存性皮膚炎の補助療法として使用できる。
【図１】
2020527134.tif 000035
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
2020527134.tif 000043
【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年3月2日(2020.3.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
局所投与に好適な、適合された、および／または包装および提示された医薬製剤の使用であって、創傷または熱傷への製剤の直接局所適用による、皮膚または粘膜の前記創傷または熱傷の治癒または回復のための薬剤の製造のための、モンテルカストまたはその溶媒和物の医薬的に許容される塩を、医薬的に許容される局所アジュバント、希釈剤、または担体との混合物において含む、使用。
【請求項２】
前記創傷が、擦過傷、引っ掻き傷、切開、裂傷、皮膚穿刺、剥離、打撲傷、瘢痕、および水疱からなる群から選択される、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記創傷が、痔疾である、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
前記創傷または熱傷が、熱、化学物質、日焼け、しもやけ、または凍傷によって引き起こされる、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
前記創傷が、疾患または障害の結果である、請求項１に記載の使用。
【請求項６】
前記創傷が、前記皮膚または前記粘膜の潰瘍である、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
前記潰瘍が、胃潰瘍である、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
前記疾患または障害が、潰瘍性大腸炎である、請求項５または請求項６に記載の使用。
【請求項９】
前記疾患または障害が、食道炎または胃炎である、請求項５または請求項６に記載の使用。
【請求項１０】
前記創傷または熱傷が、表皮または真皮へのおよび／またはその下の損傷を含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１１】
前記損傷が、筋肉、骨、関節、および／または内蔵器官への損傷を含む、請求項９に記載の使用。
【請求項１２】
前記製剤が、前記創傷もしくは熱傷、またはそれに関連する治癒プロセスに関連するもしくは疼痛および／またはかゆみをさらに治療する、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１３】
前記製剤が、体液の滲出および／または前記創傷もしくは前記熱傷に起因する感染のリスクをさらに予防し、かつ／または創傷治癒プロセスもしくは熱傷治癒プロセスに起因する生理学的反応をさらに予防する、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１４】
前記生理学的反応が、瘢痕化および／またはメラニン色素沈着を含む、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
前記メラニン色素沈着が、肝斑、そばかす、メラノーシス、頬部発疹、別の色素沈着症、メラノーマを伴う皮膚がん、および／または日光への曝露によって引き起こされる色素沈着症に関連する、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
前記局所投与が、皮膚へのものである、請求項１〜６または１０〜１５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１７】
前記局所投与が、粘膜表面へのものである、請求項１〜９、１２、または１３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１８】
前記製剤が、ゲル、クリーム、または軟膏の形態である、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１９】
前記製剤が、ポリエチレングリコールをさらに含む、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
前記ポリエチレングリコールが、ポリエチレングリコール４００である、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
前記生理学的反応が、瘢痕化を含む、請求項１４に記載の使用。
【請求項２２】
前記局所投与が、粘膜表面への肺投与である、請求項１７または請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
前記肺投与が、気管または気管支による、請求項２２に記載の使用。
【請求項２４】
前記肺投与が、吸入傷害を治療するためである、請求項２２または請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
前記製剤が、吸入のための液体スプレーの形態である、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２６】
前記製剤が、少なくとも１つのイガイ接着タンパク質またはその誘導体をさらに含む、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２７】
前記製剤が、少なくとも１つのイガイ接着タンパク質またはその誘導体を含む医薬製剤を、医薬的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体との混合物においてさらに含むパーツキットの一部であり、前記２つの製剤が、他方と組み合わされた投与に好適である形態で各々提供される、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２８】
前記２つの製剤が、前記創傷または前記熱傷の治療における逐次的な、別個の、および／または同時の使用に好適である、請求項２７に記載の使用。
【請求項２９】
前記少なくとも１つのイガイ接着タンパク質が、ｍｅｆｐ−１、ｍｅｆｐ−２、ｍｅｆｐ−３、ｍｅｆｐ−４、ｍｅｆｐ−５、ｍｅｆｐ−６、およびそれらの組み合わせの群から選択される、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３０】
前記少なくとも１つのイガイ接着タンパク質が、ｍｅｆｐ−１を含む、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
配列Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｈｙｐ−Ｔｈｒ−ＤＯＰＡ−Ｌｙｓのペプチドであるイガイ接着タンパク質の誘導体、またはその塩を含む、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載の使用。
【国際調査報告】
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