(57)【要約】とりわけ、本開示は、設計されたＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、組成物、及びその方法を提供する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド組成物は、一本鎖ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを改善する。とりわけ、本開示は、オリゴヌクレオチドの構造的要素がオリゴヌクレオチドの特性及び活性（たとえば、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）活性、安定性、送達など）に顕著な影響を与え得るという認識を含むものであり、こうした構造的要素は、塩基配列、化学修飾（たとえば、糖の修飾、塩基の修飾、及び／またはヌクレオチド間結合の修飾）またはそのパターン、追加の化学的部分との複合体化、及び／または立体化学［たとえば、骨格キラル中心（キラルヌクレオチド間結合）の立体化学］、及び／またはそのパターンなどである。一部の実施形態では、本開示は、提供されるオリゴヌクレオチド組成物を使用して疾患を治療するための方法を提供し、この治療では、当該オリゴヌクレオチド組成物が使用されることで、たとえば、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンが生じる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｏ１を有する化合物：
Ｙ１−Ｌ１−（Ｚ１０）ｚａ
Ｏ１
または前記化合物の薬学的に許容される塩であって、式中、Ｙ１は、ＡＰＯＣ３を標的とするオリゴヌクレオチドであり、
ｚａは、１、２、または３であり、
Ｌ１は、式Ｌ１１、Ｌ１２、Ｌ１３、Ｌ４３、Ｌ４４、Ｌ４５、Ｌ４６、Ｌ４７、Ｌ４８、Ｌ４９、Ｌ５０、Ｌ５１、Ｌ５２、Ｌ５３またはＬ５４の化合物であり、Ｙ１及びＺ１０との結合位置が示されており、
【化１】
2020522265.tif 000685
2020522265.tif 000686
2020522265.tif 000687
2020522265.tif 000688
2020522265.tif 000689
式中、各Ｔ１は、独立して、存在しないか、アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンであり、ここで、前記アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンの１つ以上の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｑ１は、独立して、存在しないか、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９−、−ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９−、−ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−、−ＮＲ４９Ｃ（Ｏ）ＮＲ４９−、二価のヘテロアリール基、または−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、及び−ＮＲ４９−から選択されるヘテロ原子基（ここで、少なくとも２つの炭素原子が前記ヘテロ原子基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−及び−ＮＲ４９−を任意の他のヘテロ原子基から分離している）、または次式の構造であり、
【化２】
2020522265.tif 000690
ここで、Ｒ５３は−Ｏまたは−ＮＨ−であり、Ｒ５４は−Ｏまたは−Ｓであり、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９ａ）−で置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９ａ）２、−ＯＲ４９ａ、及び−Ｓ（Ｒ４９ａ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
Ｒ５３は、−Ｏまたは−ＮＨであり、
Ｒ５４は、−Ｏまたは−Ｓであり、
各ｎは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０であり、ｎが０より大きい場合、各（Ｔ１−Ｑ１−Ｔ１−Ｑ１）の各Ｔ１及び各Ｑ１は独立して選択され、
各Ｚ１０は、独立して、式Ｚ１２、Ｚ１３、Ｚ１４、Ｚ１５、Ｚ１６、Ｚ１７、Ｚ１８、Ｚ１９、Ｚ２０、もしくはＺ２１の化合物、またはその幾何異性体もしくは位置異性体であり、Ｌ１との結合位置が示されており、
【化３】
2020522265.tif 000691
ここで、各Ｒ４６は、独立して、−ＣＮ、−ＣＨ２−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ２−Ｎ３、−ＣＨ２−ＮＨ２、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５１、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨ２−ＳＨ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、ここで、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｒ５１で任意に置換され、
各Ｒ４７は、独立して、−ＯＨ、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ４８、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、前記テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒ４８で任意に置換され、
各Ｒ４８は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、前記アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ５２）−から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ５２）２、−ＯＲ５２、及び−Ｓ（Ｒ５２）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｒ５１は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ３−Ｃ２０）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ６０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ６０）アルキニル、または−（Ｃ１−Ｃ６０）アルキルであり、ここで、前記シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基または前記アルキルの１〜２０個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ５２は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい、
前記化合物または前記薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｙ１が、少なくとも１５塩基を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３】
Ｙ１の塩基配列が、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列を含むか、もしくはその塩基配列であり、またはＹ１の塩基配列が、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの配列の１５個の連続塩基を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項４】
Ｙ１が、少なくとも１つのホスホジエステルヌクレオチド間結合を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙ１が、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｙ１が、キラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｙ１が、Ｓｐ立体配置にキラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｙ１が、Ｒｐ立体配置にキラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｙ１が、前記キラル制御された修飾ヌクレオチド間結合またはキラル制御されたホスホロチオエートの場合、組成物内で少なくとも７０％のジアステレオ純度を有するリンキラル中心を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙ１が、前記キラル制御された修飾ヌクレオチド間結合またはキラル制御されたホスホロチオエートの場合、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または９９．５％のジアステレオ純度を有するリンキラル中心を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｙ１が、少なくとも１つの糖修飾を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｙ１が、少なくとも１つの塩基修飾を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｙ１が、骨格結合のパターンをさらに含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｙ１が、骨格キラル中心のパターンをさらに含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｙ１が、化学修飾のパターンをさらに含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｙ１が、骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び化学修飾のパターンをさらに含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１７】
前記オリゴヌクレオチドの前記骨格結合のパターン、前記骨格キラル中心のパターン、及び前記化学修飾のパターンが、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンである、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１８】
前記オリゴヌクレオチドの前記骨格結合のパターン、前記骨格キラル中心のパターン、及び前記化学修飾のパターンが、表１Ａに列挙されるオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンであり、Ｙ１の塩基配列が、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列を含むか、もしくはその塩基配列であり、またはＹ１の塩基配列が、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの配列の１５個の連続塩基を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１９】
前記オリゴヌクレオチドが、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性の減少を媒介する能力を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２０】
前記オリゴヌクレオチドが、ＲＮａｓｅ  Ｈ、立体障害及び／またはＲＮＡ干渉によって媒介される機序を介して、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性の減少を媒介する能力を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２１】
各Ｔ１が、独立して、存在しないか、アルキレンであり、ここで、前記アルキレンの１つ以上の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｑ１が、独立して、存在しないか、−Ｃ（Ｏ）、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９、−ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）、または−Ｏ−、及び−ＮＲ４９から選択されるヘテロ原子基であり、ここで、少なくとも２つの炭素原子が、前記ヘテロ原子基−Ｏ−及び−ＮＲ４９を任意の他のヘテロ原子基から分離しており、
各Ｒ４９が、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｎが、独立して、０、１、２、３または４であり、ｎが０より大きい場合、各（Ｔ１−Ｑ１−Ｔ１−Ｑ１）の各Ｔ１及び各Ｑ１は独立して選択され、
各Ｒ４６が、−ＣＨ２−ＯＨであり、
各Ｒ４７が、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８であり、
各Ｒ４８が、独立して、−Ｈ、または−（Ｃ１−Ｃ５）アルキルである、
先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２２】
式Ｏ２を有する化合物：
Ｙ１−Ｌ２−（Ｚ１１）ｚａ
Ｏ２
またはその薬学的に許容可能な塩であって、式中、Ｙ１は、ＡＰＯＣ３を標的とするオリゴヌクレオチドであり、
ｚａは、１、２、または３であり、
Ｌ２は、結合基であり、
Ｚ１１は、式（Ｂ）の化合物であり、Ｌ２との結合位置が示されており、
【化４】
2020522265.tif 000692
各Ｒ４７は、独立して、−ＯＨ、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ４８、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、前記テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒ４８で任意に置換され、
各Ｒ４８は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、前記アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ５２）−から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ５２）２、−ＯＲ５２、及び−Ｓ（Ｒ５２）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９ａ）−で置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９ａ）２、−ＯＲ４９ａ、及び−Ｓ（Ｒ４９ａ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
各Ｒ５２は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい、
前記化合物または前記薬学的に許容される塩。
【請求項２３】
Ｌ２が、式Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ｌ５、Ｌ６、Ｌ７、Ｌ８、Ｌ９、Ｌ１０、Ｌ１１、Ｌ１２、Ｌ１３またはＬ１４の化合物であり、Ｙ１及びＺ１１との結合位置が示されており、
【化５】
2020522265.tif 000693
2020522265.tif 000694
2020522265.tif 000695
式中、各Ｔ１は、独立して、存在しないか、アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンであり、ここで、前記アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンの１つ以上の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｑ１は、独立して、存在しないか、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９−、−ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９−、−ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−、−ＮＲ４９Ｃ（Ｏ）ＮＲ４９−、二価のヘテロアリール基、または−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、及び−ＮＲ４９−から選択されるヘテロ原子基（ここで、少なくとも２つの炭素原子が前記ヘテロ原子基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−及び−ＮＲ４９−を任意の他のヘテロ原子基から分離している）、または次式の構造であり、
【化６】
2020522265.tif 000696
ここで、Ｒ５３は−Ｏまたは−ＮＨであり、Ｒ５４は−Ｏまたは−Ｓであり、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９ａ）−で置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９ａ）２、−ＯＲ４９ａ、及び−Ｓ（Ｒ４９ａ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
Ｒ５３は、−Ｏまたは−ＮＨであり、
Ｒ５４は、−Ｏまたは−Ｓであり、
各ｎは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０であり、ｎが０より大きい場合、各（Ｔ１−Ｑ１−Ｔ１−Ｑ１）の各Ｔ１及び各Ｑ１は独立して選択される、
先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｙ１が、少なくとも１５塩基を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｙ１の塩基配列が、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列を含むか、もしくはその塩基配列であり、またはＹ１の塩基配列が、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの配列の１５個の連続塩基を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｙ１が、少なくとも１つのホスホジエステルヌクレオチド間結合を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｙ１が、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｙ１が、キラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｙ１が、Ｓｐ立体配置にキラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｙ１が、Ｒｐ立体配置にキラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３１】
Ｙ１が、前記キラル制御された修飾ヌクレオチド間結合またはキラル制御されたホスホロチオエートの場合、組成物内で少なくとも７０％のジアステレオ純度を有するリンキラル中心を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｙ１が、前記キラル制御された修飾ヌクレオチド間結合またはキラル制御されたホスホロチオエートの場合、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または９９．５％のジアステレオ純度を有するリンキラル中心を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｙ１が、少なくとも１つの糖修飾を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３４】
Ｙ１が、少なくとも１つの塩基修飾を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３５】
前記オリゴヌクレオチドの前記骨格結合のパターンが、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドの骨格結合のパターンである、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３６】
前記オリゴヌクレオチドの前記骨格キラル中心のパターンが、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドの骨格キラル中心のパターンである、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３７】
前記オリゴヌクレオチドの前記化学修飾のパターンが、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドの化学修飾のパターンである、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３８】
前記オリゴヌクレオチドの前記骨格結合のパターン、前記骨格キラル中心のパターン、及び／または前記化学修飾のパターンが、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンである、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３９】
前記オリゴヌクレオチドの前記骨格結合のパターン、前記骨格キラル中心のパターン、及び前記化学修飾のパターンが、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンである、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項４０】
前記オリゴヌクレオチドの前記骨格結合のパターン、前記骨格キラル中心のパターン、及び前記化学修飾のパターンが、表１Ａに列挙されるオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチドのものであるＹ１の骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンであり、Ｙ１の塩基配列が、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列を含むか、もしくはその塩基配列であり、またはＹ１の塩基配列が、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの配列の１５個の連続塩基を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項４１】
前記オリゴヌクレオチドが、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性の減少を媒介する能力を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項４２】
前記オリゴヌクレオチドが、ＲＮａｓｅ  Ｈ、立体障害及び／またはＲＮＡ干渉によって媒介される機序を介して、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性の減少を媒介する能力を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項４３】
各Ｒ４７が、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８であり、
各Ｒ４８が、独立して、−Ｈ、または−（Ｃ１−Ｃ５）アルキルである、
先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項４４】
各Ｔ１が、独立して、存在しないか、アルキレンであり、ここで、
前記アルキレンの１つ以上の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｑ１が、独立して、存在しないか、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９、ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）、またはＯ、及びＮＲ４９から選択されるヘテロ原子基であり、ここで、少なくとも２つの炭素原子が、前記ヘテロ原子基Ｏ及びＮＲ４９を任意の他のヘテロ原子基から分離しており、
各Ｒ４９が、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｎが、独立して、０、１、２、３または４であり、ｎが０より大きい場合、各（Ｔ１−Ｑ１−Ｔ１−Ｑ１）の各Ｔ１及び各Ｑ１は独立して選択される、
先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項４５】
（ａ）ＡＰＯＣ３を標的とする能力を有するオリゴヌクレオチドと、（ｂ）結合基と、（ｃ）Ｚ１０及びＺ１１から独立して選択される１、２、または３つの部分とを含む化合物を含む、組成物であって、ここで、前記結合基は、前記オリゴヌクレオチドと前記１、２または３つの部分を結合し、式中、
各Ｚ１０は、独立して、式Ｚ１２、Ｚ１３、Ｚ１４、Ｚ１５、Ｚ１６、Ｚ１７、Ｚ１８、Ｚ１９、Ｚ２０、もしくはＺ２１の化合物、またはその幾何異性体もしくは位置異性体であり、Ｌ１との結合位置が示されており、
【化７】
2020522265.tif 000697
ここで、各Ｒ４６は、独立して、−ＣＮ、−ＣＨ２−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ２−Ｎ３、−ＣＨ２−ＮＨ２、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５１、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨ２−ＳＨ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、ここで、前記アリールまたはヘテロアリールは、Ｒ５１で任意に置換され、
各Ｒ４７は、独立して、−ＯＨ、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ４８、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、前記テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒ４８で任意に置換され、
各Ｒ４８は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、前記アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ５２）−から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ５２）２、−ＯＲ５２、及び−Ｓ（Ｒ５２）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｒ５１は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ３−Ｃ２０）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ６０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ６０）アルキニル、または−（Ｃ１−Ｃ６０）アルキルであり、ここで、前記シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基または前記アルキルの１〜２０個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ５２は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９ａ）−で置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９ａ）２、−ＯＲ４９ａ、及び−Ｓ（Ｒ４９ａ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
Ｚ１１は、式（Ｂ）の化合物であり、Ｌ２との結合位置が示されており、
【化８】
2020522265.tif 000698
各Ｒ４７は、独立して、−ＯＨ、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ４８、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、前記テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒ４８で任意に置換され、
各Ｒ４８は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、前記アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ５２）−から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ５２）２、−ＯＲ５２、及び−Ｓ（Ｒ５２）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９ａ）−で置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９ａ）２、−ＯＲ４９ａ、及び−Ｓ（Ｒ４９ａ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
各Ｒ５２は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、前記アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい、
前記組成物。
【請求項４６】
特定のオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドを含む、キラル制御されたＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物であって、前記特定のオリゴヌクレオチド型は、
ａ）共通塩基配列及び長さであって、前記塩基配列は、ＡＰＯＣ３標的遺伝子に相補的である、前記共通塩基配列及び長さ、
ｂ）骨格結合の共通パターン、
ｃ）骨格キラル中心の共通パターンであって、前記骨格キラル中心の共通パターンは、キラル制御されたキラル中心を含む少なくとも１つのヌクレオチド間結合を含む、前記骨格キラル中心の共通パターンによって特徴付けられ、
前記組成物は、前記特定のオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドに関して、同じ共通塩基配列と長さを有するオリゴヌクレオチドの実質的なラセミ調製物と比較して、富化されているという点でキラル制御され、
前記オリゴヌクレオチド組成物は、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性を減少させる能力を有する、
前記組成物。
【請求項４７】
前記オリゴヌクレオチドが、ＲＮａｓｅ  Ｈ、立体障害及び／またはＲＮＡ干渉によって媒介される機序を介して、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性を減少させる能力を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項４８】
先行請求項のいずれか１項に記載の化合物を含む、組成物。
【請求項４９】
一本鎖ＲＮＡｉ剤であるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含む組成物であって、前記一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ＡＰＯＣ３標的ＲＮＡ配列に相補的または実質的に相補的であり、
約１５〜約４９ヌクレオチドの長さを有し、
標的特異的なＲＮＡ干渉を誘導する能力を有し、
前記一本鎖ＲＮＡｉ剤は、少なくとも１つの非天然の塩基、糖、及び／またはヌクレオチド間結合を含み、
前記組成物は、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性を減少させる能力を有する、前記組成物。
【請求項５０】
１つまたは複数の前記オリゴヌクレオチドが、架橋二環式ケタールをさらに含む、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５１】
ＲＣＤが、
【化９】
2020522265.tif 000699
である、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５２】
ＲＣＤが、
【化１０】
2020522265.tif 000700
である、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５３】
ＲＣＤが、ＲＣＤ−Ｈが、
【化１１】
2020522265.tif 000701
2020522265.tif 000702
であるような構造のものである、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５４】
ＲＣＤが、リンカーを介して、１つまたは複数の前記オリゴヌクレオチドに繋がれる、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５５】
前記リンカーが、ＬＭである、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５６】
前記リンカーが、
【化１２】
2020522265.tif 000703
2020522265.tif 000704
、の構造を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５７】
ＲＣＤが、
【化１３】
2020522265.tif 000705
2020522265.tif 000706
2020522265.tif 000707
2020522265.tif 000708
から選択される、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５８】
少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤と混合された、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物を治療有効量で含む、医薬組成物。
【請求項５９】
抗炎症性剤、抗糖尿病剤、及びコレステロール／脂質調整剤からなる群から選択される少なくとも１つの追加の医薬品をさらに含む、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６０】
前記追加の医薬品が、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ−（ＡＣＣ）阻害剤、ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ１（ＤＧＡＴ−１）阻害剤、ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ２（ＤＧＡＴ−２）阻害剤、モノアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ阻害剤、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）−１０阻害剤、ＡＭＰＫ活性化剤、スルホニル尿素、メグリチニド、α−アミラーゼ阻害剤、α−グルコシドヒドロラーゼ阻害剤、α−グルコシダーゼ阻害剤、ＰＰＡＲγアゴニスト、ＰＰＡＲα／γアゴニスト、ビグアニド、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）調節剤、リラグルチド、アルビグルチド、エキセナチド、アルビグルチド、リキシセナチド、デュラグルチド、セマグルチド、タンパク質チロシンホスファターゼ−１Ｂ（ＰＴＰ−１Ｂ）阻害剤、ＳＩＲＴ−１活性化剤、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）阻害剤、インスリン分泌促進剤、脂肪酸酸化阻害剤、Ａ２アンタゴニスト、ｃ−ｊｕｎアミノ末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害剤、グルコキナーゼ活性化剤（ＧＫａ）、インスリン、インスリン模倣剤、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、ＶＰＡＣ２受容体アゴニスト、ＳＧＬＴ２阻害剤、グルカゴン受容体調節剤、ＧＰＲ１１９調節剤、ＦＧＦ２１誘導体もしくはアナログ、ＴＧＲ５受容体調節剤、ＧＰＢＡＲ１受容体調節剤、ＧＰＲ４０アゴニスト、ＧＰＲ１２０調節剤、高親和性ニコチン酸受容体（ＨＭ７４Ａ）活性化剤、ＳＧＬＴ１阻害剤、カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ酵素の阻害剤もしくは調節剤、フルクトース１，６−ジホスファターゼの阻害剤、アルドースレダクターゼの阻害剤、ミネラルコルチコイド受容体阻害剤、ＴＯＲＣ２の阻害剤、ＣＣＲ２及び／またはＣＣＲ５の阻害剤、ＰＫＣアイソフォーム（例えば、ＰＫＣα、ＰＫＣβ、ＰＫＣγ）の阻害剤、脂肪酸シンテターゼの阻害剤、セリンパルミトイルトランスフェラーゼの阻害剤、ＧＰＲ８１、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ４３、ＧＰＲ４１、ＧＰＲ１０５、Ｋｖ１．３、レチノール結合タンパク質４、グルココルチコイド受容体、ソマトスタイン受容体の調節剤、ＰＤＨＫ２もしくはＰＤＨＫ４の阻害剤もしくは調節剤、ＭＡＰ４Ｋ４の阻害剤、ＩＬ１ベータを含むＩＬ１ファミリーの調節剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、スクアレンシンテターゼ阻害剤、フィブラート、胆汁酸隔離剤、ＡＣＡＴ阻害剤、ＭＴＰ阻害剤、リポオキシゲナーゼ阻害剤、コレステロール吸収阻害剤、ＰＣＳＫ９調節剤、コレステリルエステル転移タンパク質阻害剤ならびにＲＸＲアルファの調節剤からなる群から選択される、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６１】
システアミンもしくはその薬学的許容可能な塩、シスタミンもしくはその薬学的許容可能な塩、抗酸化化合物、レシチン、ビタミンＢ複合体、胆汁塩製剤、カンナビノイド−１（ＣＢ１）受容体のアンタゴニスト、カンナビノイド−１（ＣＢ１）受容体のインバースアゴニスト、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体）活性制御剤、ベンゾチアゼピンもしくはベンゾチエピン化合物、タンパク質チロシンホスファターゼＰＴＰＲＵを阻害するＲＮＡアンチセンス構築物、ヘテロ原子結合置換ピペリジン及びその誘導体、ステアロイル補酵素アルファデルタ−９デサチュラーゼを阻害する能力を有するアザシクロペンタン誘導体、アディポネクチンの分泌促進活性もしくは誘導活性を有するアシルアミド化合物、第四級アンモニウム化合物、グラチラマー酢酸塩、ペントラキシンタンパク質、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ｎ−アセチルシステイン、イソフラボン化合物、マクロライド抗生物質、ガレクチン阻害剤、抗体、またはそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの追加の医薬品をさらに含む、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６２】
ヒトにおける、非アルコール性脂肪性肝疾患もしくは非アルコール性脂肪性肝炎の評価スコアリングシステムの重症度の少なくとも１点の減点、非アルコール性脂肪性肝炎活性の血清マーカーレベルの低下、非アルコール性脂肪性肝炎疾患活性の低下、または非アルコール性脂肪性肝炎の医学的結果の低減のための方法であって、そのような減点、低下または低減を必要とするヒトに、それを必要とする患者に対して治療有効量の先行請求項のいずれか１項に記載の組成物を投与するステップを含む、前記方法。
【請求項６３】
ヒトにおける、脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、肝線維症を伴う非アルコール性脂肪性肝炎、肝硬変を伴う非アルコール性脂肪性肝炎、または肝硬変及び肝細胞癌を伴う非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための方法であって、そのような治療を必要とするヒトに、それを必要とする患者に対して治療有効量の先行請求項のいずれか１項に記載の組成物を投与するステップを含む、前記方法。
【請求項６４】
ヒトにおける、高脂血症、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型真性糖尿病、特発性Ｉ型糖尿病（Ｉｂ型）、成人潜在性自己免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ）、早期発症性２型糖尿病（ＥＯＤ）、若年発症性非定型糖尿病（ＹＯＡＤ）、若年発症成人型糖尿病（ＭＯＤＹ）、栄養不良に関連する糖尿病、妊娠糖尿病、冠状動脈性心疾患、虚血性脳卒中、血管形成術後の再狭窄、末梢血管疾患、間欠性跛行、心筋梗塞、脂質異常症、食後脂肪血症、耐糖能異常（ＩＧＴ）の状態、空腹時血漿グルコース障害の状態、代謝性アシドーシス、ケトン症、関節炎、肥満症、骨粗鬆症、高血圧、うっ血性心不全、左心室肥大、末梢性動脈疾患、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、白内障、糖尿病性腎症、糸球体硬化症、慢性腎不全、糖尿病性ニューロパシー、メタボリックシンドローム、Ｘ症候群、月経前症候群、狭心症、血栓症、アテローム性動脈硬化症、一過性脳虚血発作、脳卒中、血管再狭窄、高血糖症、高インスリン血症、高トリグリセリド血症、インスリン抵抗性、グルコース代謝障害、勃起不全、皮膚及び結合組織障害、足部潰瘍及び潰瘍性大腸炎、内皮機能不全及び血管コンプライアンス低下、高アポＢリポタンパク血症、アルツハイマー、統合失調症、認知障害、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、及び過敏性腸症候群、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、または非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を治療するための方法であって、そのような治療を必要とするヒトに、それを必要とする患者に対して治療有効量の先行請求項のいずれか１項に記載の組成物を投与するステップを含む、前記方法。
【請求項６５】
ヒトにおける、脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、肝線維症を伴う非アルコール性脂肪性肝炎、肝硬変を伴う非アルコール性脂肪性肝炎、または肝硬変及び肝細胞癌を伴う非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための方法であって、そのような治療を必要とするヒトに、
ａ．先行請求項のいずれか１項に記載の第１の組成物と、
ｄ．抗炎症性剤、抗糖尿病剤、及びコレステロール／脂質調整剤からなる群から選択される少なくとも１つの追加の医薬品、ならびに少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤を含む第２の組成物とを含む、治療有効量の２つの別個の医薬組成物を投与するステップを含む、前記方法。
【請求項６６】
前記第１の組成物及び前記第２の組成物が、同時に投与される、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６７】
前記第１の組成物及び前記第２の組成物が、逐次的に任意の順で投与される、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６８】
ヒトにおける、門脈圧亢進症、肝タンパク質合成能力、高ビリルビン血症、または脳障害を低減するための方法であって、そのような治療を必要とするヒトに、それを必要とする患者に対して治療有効量の先行請求項のいずれか１項に記載の組成物を投与するステップを含む、前記方法。
【請求項６９】
細胞における、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、活性及び／またはレベルを減少させる方法であって、前記細胞を、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物または組成物と接触させるステップを含む、前記方法。
【請求項７０】
患者における、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、活性及び／またはレベルを減少させる方法であって、細胞を、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物または組成物と接触させるステップを含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１７年６月２日に出願された米国仮特許出願第６２／５１４，７６９号、及び２０１８年５月１１日に出願された米国仮特許出願第６２／６７０，７０２号の優先権を主張し、それら各出願の全体は参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
ＡＰＯＣ３（ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド）を標的とするオリゴヌクレオチドは、さまざまな用途（たとえば、治療用途）において有用である。天然起源の核酸（たとえば、非修飾ＤＮＡまたは非修飾ＲＮＡ）の用途は、たとえば、こうした天然起源の核酸がエンドヌクレアーゼ及びエキソヌクレアーゼによる作用を受けやすいことによって限られたものとなり得る。
【発明の概要】
【０００３】
とりわけ、本開示は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの構造的要素を制御することで、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの特性及び／または活性に顕著な影響を与え得るという認識を含むものであり、こうした構造的要素は、化学修飾（たとえば、糖の修飾、塩基の修飾、及び／またはヌクレオチド間結合の修飾）またはそのパターン、立体化学（たとえば、骨格のキラルヌクレオチド間結合の立体化学）の改変またはそのパターン、及び／または追加の化学的部分（たとえば、脂質部分、標的化部分、炭水化物部分、アシアロ糖タンパク質受容体またはＡＳＧＰＲに結合する部分（たとえば、ＧａｌＮＡｃ部分）など）との複合体化などである。一部の実施形態では、特性及び／または活性としては、限定されないが、ＡＰＯＣ３遺伝子またはその遺伝子産物の発現、活性、またはレベルの減少への関与、誘導が挙げられ、こうした減少は、たとえば、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ干渉）、一本鎖ＲＮＡ干渉（ｓｓＲＮＡｉ）、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウン、翻訳の立体障害などによって媒介される。
【０００４】
前述の全般的な説明及び以下の詳細な説明はいずれも単なる例示及び説明であり、特許請求される発明を限定するものではないことを理解されたい。
【図面の簡単な説明】
【０００５】
【図１Ａ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｂ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｃ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｄ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｅ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｆ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｇ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｈ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｉ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｊ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｋ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図１Ｌ】さまざまなｓｓＲＮＡｉ形式及びハイブリッド形式の模式図を示す。
【図２】さまざまなアンチセンスオリゴヌクレオチド形式の模式図を示す。
【図３Ａ】多量体形式の例を示す。オリゴヌクレオチドを、直接的に、及び／またはリンカーを介して、連結することができる。示されるように、多量体は、同じまたは異なる構造／型のオリゴヌクレオチドモノマーを含み得る。一部の実施形態では、多量体のモノマーは、ｓｓＲＮＡｉ剤である。一部の実施形態では、多量体のモノマーは、ＲＮａｓｅ  Ｈ依存性アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）である。さまざまな位置を介してモノマーを連結することができ、たとえば、５’末端、３’末端、またはこれらの間に介在する位置を介してモノマーを連結することができる。
【図３Ｂ】モノマーを連結して多量体を形成するための化学手法の例を示し、こうしたモノマーは、さまざまな経路を介してその機能を発揮し得る。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
本発明は、以下の本発明の例示的な実施形態の詳細な説明及び当該説明に含まれる実施例を参照することで、より容易に理解され得る。
【０００７】
本発明は、特定の合成方法に限定されず、当然のことながら、当該方法は、多様であり得ることを理解されたい。また、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を記載することのみを目的としており、限定を意図するものではないことも理解されたい。
【０００８】
一部の実施形態では、本開示は、立体化学（具体的には、骨格キラル中心の立体化学）がＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの特性を予想外に改善し得るという認識を含む。安定性を増加させる構造的要素のいくつかは、活性（たとえば、ＲＮＡ干渉）の低下もさせ得るということがこれまでは多く観察されたのとは対照的に、本開示は、立体化学を制御することで、驚くべきことに、活性を顕著に減少させることなく、安定性が増加し得ることを示す。
【０００９】
一部の実施形態では、本開示は、ある特定の５’末端構造を有するオリゴヌクレオチドを提供する。
【００１０】
一部の実施形態では、本開示は、本開示に従って使用すると高い生物学的活性（たとえば、ＲＮＡｉ活性）を有するオリゴヌクレオチドが生成し得る５’末端構造を提供する。
【００１１】
一部の実施形態では、本開示は、さまざまな追加の化学的部分（脂質部分及び／または炭水化物部分など）が、オリゴヌクレオチドに組み込まれると、１つ以上のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド特性（ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物のノックダウンなど）を改善し得るという認識を含む。一部の実施形態では、追加の化学的部分は、任意選択である。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、１つより多い追加の化学的部分を含み得る。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、２つ以上の追加の化学的部分を含み得、追加の化学的部分は、同一のものであるか、もしくは異なるものであるか、または同じカテゴリー（たとえば、標的化部分、炭水化物部分、ＡＳＰＧＲに結合する部分、脂質部分など）のものであるか、もしくは異なるカテゴリーのものである。一部の実施形態では、ある特定の追加の化学的部分は、所望の細胞、組織、及び／または臓器へのオリゴヌクレオチドの送達を促進する。一部の実施形態では、ある特定の追加の化学的部分は、オリゴヌクレオチドの内部移行を促進し、及び／またはオリゴヌクレオチドの安定性を増加させる。
【００１２】
一部の実施形態では、本開示は、ＲＮＡｉ機序に関与し、及び／またはＲＮＡｉ機序を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド（たとえば、ＲＮＡｉ剤）のために、ある特定の提供される構造的要素、技術、及び／または特徴が特に有用であることを示す。しかしながら、いずれにせよ、本開示の教示内容は、いずれかの特定の機序に関与するオリゴヌクレオチド、またはいずれかの特定の機序を介して機能するオリゴヌクレオチドに限定されるものではない。一部の実施形態では、本開示は、任意のオリゴヌクレオチドに関するものであり、こうしたオリゴヌクレオチドは、任意の機序を介して機能し、本明細書に記載の任意の配列、構造、もしくは形式（またはその一部）を含む。一部の実施形態では、本開示は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを提供し、こうしたＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、任意の機序を介して機能し、本明細書に記載の任意の配列、構造、もしくは形式（またはその一部）を含み、こうした配列、構造、もしくは形式（またはその一部）としては、限定されないが、任意の５’末端構造、５’末端領域、第１の領域（限定されないが、シード領域が挙げられる）、第２の領域（限定されないが、ポストシード領域が挙げられる）、ならびに３’末端領域（３’末端ジヌクレオチド及び／または３’末端キャップであり得る）、任意選択の追加の化学的部分（限定されないが、標的化部分、炭水化物部分、ＡＰＧＲと結合する部分、及び脂質部分が挙げられる）、立体化学または立体化学パターン、修飾または修飾パターン、ヌクレオチド間結合またはヌクレオチド間結合パターン、糖（複数可）の修飾または糖の修飾パターン、塩基（複数可）の修飾または塩基の修飾パターンが挙げられる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡｉ機序に関与（例えばＲＮＡｉ機序を誘導）し得る。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ（リボヌクレアーゼＨ）機序に関与し得る。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、翻訳阻害剤として作用し得る（たとえば、翻訳を立体的に遮断し得る）。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、治療用であり得る。
【００１３】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３標的配列は、本明細書に記載のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドが結合する配列である。多くの実施形態では、標的配列は、提供されるオリゴヌクレオチドの配列もしくはそこに存在する連続残基の配列と同一であるか、またはその正確な相補体である（たとえば、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的配列と同一の標的結合配列、または標的配列の正確な相補体である標的結合配列を含む）。一部の実施形態では、標的結合配列は、転写産物（たとえば、ｍＲＮＡ前駆体（ｐｒｅ−ｍＲＮＡ）、ｍＲＮＡなど）の標的配列の正確な相補体である。標的結合配列／標的配列は、所望の活性及び／または特性を有する、提供されるオリゴヌクレオチドに対してさまざまな長さのものであり得る。一部の実施形態では、標的結合配列／標的配列は、５〜５０個の塩基を含む。一部の実施形態では、限定されないが、標的配列及び／またはオリゴヌクレオチド配列の５’末端領域及び／または３’末端領域を含めて、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド（の関連部分）とその標的配列との間の少数の差異／ミスマッチは許容される。多くの実施形態では、標的配列は、標的遺伝子から産生する転写産物（たとえば、ｍＲＮＡ及び／またはｍＲＮＡ前駆体（ｐｒｅ−ｍＲＮＡ））内に存在する。
【００１４】
別段の指定がない限り、配列（限定されないが、塩基配列、ならびに化学パターン、修飾パターン、及び／または立体化学パターンを含む）はすべて、５’から３’の順序で示される。
【００１５】
一部の実施形態では、本開示は、標的に特異的なオリゴヌクレオチドであって、本明細書に開示の任意のオリゴヌクレオチドの塩基配列、または本明細書に開示の任意のオリゴヌクレオチドの塩基配列の少なくとも１５個の連続ヌクレオチドの領域、を有するか、または含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドと関連する組成物及び方法を提供し、当該塩基配列の第１のヌクレオチドまたは当該少なくとも１５個の連続ヌクレオチドの第１のヌクレオチドは、ＴまたはＤＮＡ  Ｔによって任意で置換され得る。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ｓｓＲＮＡｉを誘導する能力を有する。
【００１６】
一部の実施形態では、本開示は、共通塩基配列を有し、１つ以上のヌクレオチド間結合、糖、及び／または塩基修飾を含む第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供する。
【００１７】
一部の実施形態では、ヌクレオチドは、天然のヌクレオチドである。一部の実施形態では、ヌクレオチドは、修飾ヌクレオチドである。一部の実施形態では、ヌクレオチドは、ヌクレオチドアナログである。一部の実施形態では、塩基は、修飾塩基である。一部の実施形態では、塩基は、保護された核酸塩基（オリゴヌクレオチド合成において使用される保護された核酸塩基など）である。一部の実施形態では、塩基は、塩基アナログである。一部の実施形態では、糖は、修飾糖である。一部の実施形態では、糖は、糖アナログである。一部の実施形態では、ヌクレオチド間結合は、修飾ヌクレオチド間結合である。一部の実施形態では、ヌクレオチドは、塩基、糖、及びヌクレオチド間結合を含み、塩基、糖、及びヌクレオチド間結合はそれぞれ、独立して、かつ任意で、天然起源または非天然起源のものである。一部の実施形態では、ヌクレオシドは、塩基及び糖を含み、塩基及び糖はそれぞれ、独立して、かつ任意で、天然起源または非天然起源のものである。ヌクレオチドの非限定的な例としては、ＤＮＡ（２’−デオキシ）ヌクレオチド及びＲＮＡ（２’−ＯＨ）ヌクレオチド、ならびに塩基、糖、及び／またはヌクレオチド間結合に１つ以上の修飾を含むものが挙げられる。糖の非限定的な例としては、リボース及びデオキシリボース、ならびに２’−修飾を有するリボース及びデオキシリボースが挙げられ、こうした２’−修飾としては、限定されないが、２’−Ｆ修飾、ＬＮＡ修飾、２’−ＯＭｅ修飾、及び２’−ＭＯＥ修飾が挙げられる。一部の実施形態では、ヌクレオチド間結合は、本開示に記載の式Ｉの構造を有し得る。一部の実施形態では、ヌクレオチド間結合は、リンを含まないが、２つの天然糖または非天然糖の連結に役立つ部分である。
【００１８】
一部の実施形態では、本開示は、参照条件と比較したときに、ＡＰＯＣ３遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現、活性、及び／またはレベルの減少、一本鎖ＲＮＡ干渉、及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを、より強く誘導するキラル制御されたＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、こうした参照条件は、たとえば、組成物の非存在、または参照組成物（たとえば、同じ塩基配列及び化学修飾を有するオリゴヌクレオチドの立体不規則的な組成物）の存在である。
【００１９】
一部の実施形態では、複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物は、複数のオリゴヌクレオチドがいずれのキラルヌクレオチド間結合においても共通の立体化学を共有しないという点において立体不規則的である。一部の実施形態では、複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物は、複数のオリゴヌクレオチドが１つ以上のキラルヌクレオチド間結合に共通する立体化学を共有するという点においてキラル制御される。一部の実施形態では、キラル制御された第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物は、立体不規則的な第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物と比較して、エンドヌクレアーゼ及びエキソヌクレアーゼに対する感受性が減少している。
【００２０】
一部の実施形態では、組成物は、任意の第１の複数のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド及び／または第２の複数のオリゴヌクレオチドのうちの２つ以上の多量体を含み、第１の複数のオリゴヌクレオチド及び第２の複数のオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを独立して介して、同じまたは異なる標的のノックダウンを独立して誘導することができる。
【００２１】
一部の実施形態では、複数のオリゴヌクレオチド（たとえば、第１の複数のオリゴヌクレオチド）を含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物は、複数のオリゴヌクレオチドが１つ以上のキラルヌクレオチド間結合に独立して共通する立体化学を共有するという点においてキラル制御される。一部の実施形態では、複数のオリゴヌクレオチドは、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２１個、２２個、２３個、２４個、２５個、２６個、２７個、２８個、２９個、３０個、３５個、４０個、４５個、５０個、またはそれ以上のキラルヌクレオチド間結合に共通する立体化学配置を共有し、こうした立体化学配置はそれぞれ、独立してＲｐまたはＳｐである。一部の実施形態では、複数のオリゴヌクレオチドは、それぞれのキラルヌクレオチド間結合に共通する立体化学配置を共有する。一部の実施形態では、キラルヌクレオチド間結合は、組成物における所定レベルのオリゴヌクレオチドが共通の立体化学配置（独立してＲｐまたはＳｐ）を共有する場合、キラル制御されたヌクレオチド間結合と称される。
【００２２】
一部の実施形態では、少なくとも５つのヌクレオチド間結合がキラル制御される。一部の実施形態では、少なくとも１０個のヌクレオチド間結合がキラル制御される。一部の実施形態では、少なくとも１５個のヌクレオチド間結合がキラル制御される。一部の実施形態では、それぞれのキラルヌクレオチド間結合がキラル制御される。
【００２３】
一部の実施形態では、本開示は、第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、当該第１の複数のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、
１）共通塩基配列、
２）骨格結合の共通パターン、及び
３）骨格キラル中心の共通パターン
を共有し、
当該組成物は、組成物中の所定レベルのオリゴヌクレオチドが、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するという点で、単一オリゴヌクレオチドの実質的に純粋な調製物である。
【００２４】
一部の実施形態では、骨格キラル中心の共通パターンは、キラル制御されたキラル中心を含む少なくとも１つのヌクレオチド間結合を含む。
【００２５】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドのレベル及び／またはジアステレオ純度は、分析方法（たとえば、クロマトグラフィー法、分光測定法、分光法、またはそれらの任意の組み合わせ）によって決定することができる。
【００２６】
とりわけ、本開示は、立体不規則的なＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド調製物が、（たとえば、オリゴヌクレオチド鎖内の個々の骨格キラル中心の立体化学構造（または立体化学）が）互いに異なる複数の別々の化学的実体を含むという認識を含む。骨格キラル中心の立体化学が制御されないと、立体不規則的なオリゴヌクレオチド調製物は、オリゴヌクレオチド立体異性体の含有レベルが不確定の非制御組成物となる。こうした立体異性体は、同じ塩基配列及び／または化学修飾を有し得るものの、こうした立体異性体は、少なくともその骨格立体化学が異なるという理由から、異なる化学的実体であり、こうした立体異性体は、本明細書に示されるように、異なる特性（たとえば、ヌクレアーゼ感受性、活性、分布など）を有し得る。一部の実施形態では、特定の立体異性体は、たとえばその塩基配列、その長さ、その骨格結合パターン、及びその骨格キラル中心パターンによって、定義され得る。一部の実施形態では、本開示は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド内の立体化学を制御することで達成される特性及び活性の改善が、化学修飾の使用によって達成されるものと比較してそれに匹敵するまたはさらに良好なものであり得ることを示す。
【００２７】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、５’末端領域、シード領域、ポストシード領域、及び３’末端領域を５’から３’の順序で含み、追加の化学的部分を任意でさらに含む。
【００２８】
一部の実施形態では、５’末端領域は、シード領域に対して５’に位置するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの全部分である。一部の実施形態では、３’末端領域は、ポストシード領域に対して３’に位置するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの全部分である。
【００２９】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’末端基である。
【００３０】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’末端基を含む。
【００３１】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる５’末端領域、５’末端構造、５’末端基、５’末端ヌクレオシド、または５’末端ヌクレオチドを含み得る。
【００３２】
一部の実施形態では、５’末端構造、５’末端領域、５’ヌクレオチド部分、シード領域、ポストシード領域、３’末端ジヌクレオチド、及び／または３’末端キャップは、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意の構造を独立して有する。一部の実施形態では、本明細書に記載されるか、もしくは当該技術分野において知られる、５’末端の任意の構造、及び／または本明細書に記載されるか、もしくは当該技術分野において知られる、５’ヌクレオチド部分の任意の構造、及び／または本明細書に記載されるか、もしくは当該技術分野において知られる、シード領域の任意の構造、及び／または本明細書に記載されるか、もしくは当該技術分野において知られる、ポストシード領域の任意の構造、及び／または本明細書に記載されるか、もしくは当該技術分野において知られる、３’末端ジヌクレオチドの任意の構造、及び／または本明細書に記載されるか、もしくは当該技術分野において知られる、３’末端キャップの任意の構造、を組み合わせることができる。
【００３３】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上のブロックを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上のブロックを含み、ブロックは、１つまたは複数の連続するヌクレオシド、及び／またはヌクレオチド、及び／または糖、または塩基、及び／またはヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、ブロックは、シード領域全体またはその一部を含む。一部の実施形態では、ブロックは、ポストシード領域全体またはその一部を含む。
【００３４】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ブロックマー（ｂｌｏｃｋｍｅｒ）である。
【００３５】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、交互に並ぶブロックを含むアルトマー（ａｌｔｍｅｒ）である。一部の実施形態では、ブロックマーまたはアルトマーは、化学修飾（存在または非存在を含む）によって定義することができ、こうした化学修飾は、たとえば、塩基修飾、糖修飾、ヌクレオチド間結合修飾、立体化学など、またはそのパターンである。
【００３６】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の糖修飾を含む。一部の実施形態では、糖修飾は、２’位に対するものである。一部の実施形態では、糖修飾は、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、及び２’−ＭＯＥから選択される。２’−Ｆは、２’フルオロとも呼ばれる。２’−ＯＭｅは、２’−Ｏ−メチルとも呼ばれる。２’−ＭＯＥは、２’−メトキシエチルまたはＭＯＥとも呼ばれる。
【００３７】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、２’−Ｆを２つのみ含む。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、２’−Ｆを２つのみ含み、これら２つのヌクレオチドは、２番目及び１４番目の位置に存在する。
【００３８】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、２’−Ｆを２つのみ含み、これら２つのヌクレオチドは、２番目及び１４番目の位置に存在し、第１のヌクレオチドは、２’−デオキシである。
【００３９】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、２’−Ｆを２つのみ含み、これら２つのヌクレオチドは、２番目及び１４番目の位置に存在し、第１のヌクレオチドは、２’−デオキシＴである。
【００４０】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、２’−Ｆを２つのみ含み、これら２つのヌクレオチドは、２番目及び１４番目の位置に存在し、第１のヌクレオチドは、２’−デオキシであり、５’末端構造は、−ＯＨである。
【００４１】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、２’−Ｆを２つのみ含み、これら２つのヌクレオチドは、２番目及び１４番目の位置に存在し、第１のヌクレオチドは、２’−デオキシＴであり、５’末端構造は、−ＯＨである。
【００４２】
本明細書の実施形態の一部では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを参照する場合、「第１の」（たとえば、第１のヌクレオチド）は、オリゴヌクレオチドの５’末端を指し、「最後の」または「末端」（たとえば、最後のヌクレオチドまたは末端ヌクレオチド）は、３’末端を指す。
【００４３】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、特定の修飾を有する糖と、修飾を有さない糖または異なる修飾を有する糖と、を交互に含む。一部の実施形態では、特定の修飾を有する糖が、１つ以上のブロックに見られる。
【００４４】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、特定の２’−修飾を有する糖と、独立して、修飾を有さないか、または異なる修飾を有する糖と、を交互に含む１つ以上のブロックを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、２’−Ｆ修飾を有する糖と、独立して、修飾を有さないか、または異なる修飾を有する糖と、を交互に含む１つ以上のブロックを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、２’−ＯＭｅ修飾を有する糖と、独立して、修飾を有さないか、または異なる修飾を有する糖と、を交互に含む１つ以上のブロックを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、２’−ＯＭｅ修飾を有する糖と、２’−Ｆ修飾を有する糖と、を交互に含む１つ以上のブロックを含む。
【００４５】
一部の実施形態では、糖のブロックは、ｆｆ、ｆｆｆｍ、ｆｆｆｍｍ、ｆｆｆｍｍｍ、ｆｆｆｍｍｍｍ、ｆｆｆｍｍｍｍｍ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆｍ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆｍｍ、ｆｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｆｆｍｍｆｆｍｍ、ｆｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｆｍｍｆｆｍｍ、ｆｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｆ、ｍｆｆｍ、ｍｆｆｍｆ、ｍｆｆｍｆｆ、ｍｆｆｍｆｆｍ、ｍｆｆｍｍｆｆｍｍ、ｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｆｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍｍｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｍｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｍｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｍｍｆｍｍｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｍｍｍｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｍｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆｍｍｍｆｍｆｍｍｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｍｍｆｍｍｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｍｍｍｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｍｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｍｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍｆｍ、ｍｆｍｍｍｆｍｆｍｍｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｍｍｆｍｍｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｍｍｆｍｍｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｍｍｍｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｍｆｆｍ、ｍｍｆｆｍｍ、ｍｍｆｆｍｍ、ｍｍｆｆｍｍｆ、ｍｍｆｆｍｍｆｆ、ｍｍｆｆｍｍｆｆｍ、ｍｍｆｆｍｍｆｆｍｍ、ｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｍｍ、ｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｍｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｍｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｍｍｆｍｆｍｆｍｆｍｍｍｆｍ、ｍｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍｆｍｆｍ、ｍｍｍｆｍｆｍｍｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｍｍｆｍｍｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｍｍ、ｍｍｍｍ、ｍｍｍｍｍ、ｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｍｍｍｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｍｍｍｍｍ、ｍｍｍｍｍｍｆｆｍｍｆｍｆｍｆｍｍｍ、ｍｆｍｆ、ｍｆｍｆ、ｍｆｍｆｍｆ、ｆｍｆｍ、ｆｍｆｍｆｍ、ｆｍｆｍｆｍｆ、ｄｆｄｆ、ｄｆｄｆｄｆ、ｄｆｄｆｄｆｄｆ、ｆｄｆｄ、ｆｄｆｄｆｄ、ｆｄｆｄｆｄｆｄ、ｄｆｄｆｍｆｍｆ、ｄｆｍｆｍｆ、ｍｆｄｆｍｆ、またはｄｆｍｆｄｆ、のうちのいずれかの２’−修飾パターンを有するか、または含み、式中、ｍは、２’−ＯＭｅを示し、ｆは、２’−Ｆを示し、ｄは、２’位に置換を有さないことを示す。一部の実施形態では、シード領域及び／またはポストシード領域は、糖修飾のブロックを含み得る。
【００４６】
一部の実施形態では、ブロックは、立体化学ブロックである。一部の実施形態では、ブロックは、当該ブロックの各ヌクレオチド間結合が、Ｒｐであるという点で、Ｒｐブロックである。一部の実施形態では、シード領域ブロックは、Ｒｐブロックである。一部の実施形態では、ポストシード領域ブロックは、Ｒｐブロックである。一部の実施形態では、ブロックは、当該ブロックの各ヌクレオチド間結合が、Ｓｐであるという点で、Ｓｐブロックである。一部の実施形態では、シード領域ブロックは、Ｓｐブロックである。一部の実施形態では、ポストシード領域ブロックは、Ｓｐブロックである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、Ｒｐブロック及びＳｐブロックの両方を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上のＲｐブロックを含むが、Ｓｐブロックは含まない。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上のＳｐブロックを含むが、Ｒｐブロックは含まない。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上のＰＯブロックを含み、ブロックのヌクレオチド間結合はそれぞれ、天然リン酸結合である。
【００４７】
一部の実施形態では、シード領域ブロックは、Ｓｐブロックであり、糖部分はそれぞれ、２’−Ｆ修飾を含む。一部の実施形態では、シード領域ブロックは、Ｓｐブロックであり、ヌクレオチド間結合はそれぞれ、修飾ヌクレオチド間結合であり、糖部分はそれぞれ、２’−Ｆ修飾を含む。一部の実施形態では、シード領域ブロックは、Ｓｐブロックであり、ヌクレオチド間結合はそれぞれ、ホスホロチオエート結合であり、糖部分はそれぞれ、２’−Ｆ修飾を含む。一部の実施形態では、シード領域ブロックは、４つ以上のヌクレオシド単位を含む。一部の実施形態では、ヌクレオシド単位は、ある１つのヌクレオシドである。一部の実施形態では、シード領域ブロックは、５つ以上のヌクレオシド単位を含む。一部の実施形態では、シード領域ブロックは、６つ以上のヌクレオシド単位を含む。一部の実施形態では、シード領域ブロックは、７つ以上のヌクレオシド単位を含む。一部の実施形態では、ポストシード領域ブロックは、Ｓｐブロックであり、糖部分はそれぞれ、２’−Ｆ修飾を含む。一部の実施形態では、ポストシード領域ブロックは、Ｓｐブロックであり、ヌクレオチド間結合はそれぞれ、修飾ヌクレオチド間結合であり、糖部分はそれぞれ、２’−Ｆ修飾を含む。一部の実施形態では、ポストシード領域ブロックは、Ｓｐブロックであり、ヌクレオチド間結合はそれぞれ、ホスホロチオエート結合であり、糖部分はそれぞれ、２’−Ｆ修飾を含む。一部の実施形態では、ポストシード領域ブロックは、４つ以上のヌクレオシド単位を含む。一部の実施形態では、ポストシード領域ブロックは、５つ以上のヌクレオシド単位を含む。一部の実施形態では、ポストシード領域ブロックは、６つ以上のヌクレオシド単位を含む。一部の実施形態では、ポストシード領域ブロックは、７つ以上のヌクレオシド単位を含む。一部の実施形態では、シード領域及び／またはポストシード領域は、ブロックを含み得る。一部の実施形態では、シード領域及び／またはポストシード領域は、立体化学ブロックを含む。
【００４８】
一部の実施形態では、本開示は、第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、当該第１の複数のオリゴヌクレオチドは、
１）共通塩基配列を有し、
２）１つ以上の修飾糖部分及び修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【００４９】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、当該第１の複数のオリゴヌクレオチドは、
１）転写産物における標的配列に相補的な共通塩基配列を有し、
２）１つ以上の修飾糖部分及び修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【００５０】
一部の実施形態では、参照条件は、組成物の非存在である。一部の実施形態では、参照条件は、参照組成物の存在である。参照用の複数のオリゴヌクレオチドを含む参照組成物の例は、本開示に詳細に記載される。一部の実施形態では、参照の複数のオリゴヌクレオチドは、提供される組成物中の第１の複数のオリゴヌクレオチドと比べ、異なる構造的要素（化学修飾、立体化学など）を有する。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドを含む、提供されるオリゴヌクレオチド組成物は、第１の複数のオリゴヌクレオチドが、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１つ以上含むという点においてキラル制御される。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドを含む、提供されるオリゴヌクレオチド組成物は、第１の複数のオリゴヌクレオチドが、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１〜２０個含むという点においてキラル制御される。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、または１５個含む。一部の実施形態では、参照組成物は、同じ化学修飾を有するオリゴヌクレオチドの立体不規則的調製物である。一部の実施形態では、参照組成物は、立体異性体の混合物であり、一方で、提供される組成物は、１つの立体異性体の一本鎖ＲＮＡｉ剤である。一部の実施形態では、参照の複数のオリゴヌクレオチドは、提供される組成物中の第１の複数のオリゴヌクレオチドと同じ塩基配列を有する。一部の実施形態では、参照の複数のオリゴヌクレオチドは、提供される組成物中の第１の複数のオリゴヌクレオチドと同じ化学修飾を有する。一部の実施形態では、参照の複数のオリゴヌクレオチドは、提供される組成物中の第１の複数のオリゴヌクレオチドと同じ糖修飾を有する。一部の実施形態では、参照の複数のオリゴヌクレオチドは、提供される組成物中の第１の複数のオリゴヌクレオチドと同じ塩基修飾を有する。一部の実施形態では、参照の複数のオリゴヌクレオチドは、提供される組成物中の第１の複数のオリゴヌクレオチドと同じヌクレオチド間結合修飾を有する。一部の実施形態では、参照の複数のオリゴヌクレオチドは、提供される組成物中の第１の複数のオリゴヌクレオチドと同じ塩基配列及び同じ化学修飾を有する。一部の実施形態では、参照の複数のオリゴヌクレオチドは、提供される組成物中の第１の複数のオリゴヌクレオチドと同じ立体化学を有するが、異なる化学修飾（たとえば、塩基修飾、糖修飾、ヌクレオチド間結合修飾など）を有する。
【００５１】
一部の実施形態では、本開示は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含む組成物を提供し、オリゴヌクレオチドは、標的ＲＮＡ配列に相補的または実質的に相補的であり、ヌクレオチドの総数で約１５〜約４９の長さを有し、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの非天然の塩基、糖、及び／またはヌクレオチド間結合を含む。
【００５２】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤を含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、標的ＲＮＡ配列に相補的または実質的に相補的であり、ヌクレオチドの総数で約１５〜約４９の長さを有し、標的特異的なＲＮＡ干渉を誘導する能力を有し、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、少なくとも１つの非天然の塩基、糖、及び／またはヌクレオチド間結合を含む。
【００５３】
一部の実施形態では、長さは、ヌクレオチドの総数で１５〜４９、約１７〜約４９、１７〜４９、約１９〜約２９、１９〜２９、約１９〜約２５、１９〜２５、約１９〜約２３、または１９〜２３である。
【００５４】
一部の実施形態では、本開示は、第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、当該第１の複数のオリゴヌクレオチドは、
１）転写産物における標的配列に相補的または実質的に相補的な共通塩基配列を有し、
２）１つ以上の修飾糖部分及び修飾ヌクレオチド間結合を含み、
オリゴヌクレオチド組成物は、それが転写産物と接触すると、組成物の非存在、参照組成物の存在、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される参照条件の下で観察されるものと比較して転写産物のノックダウンが改善するという点において特徴付けられる。
【００５５】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、当該第１の複数のオリゴヌクレオチドは、
１）転写産物における標的配列に相補的な共通塩基配列を有し、
２）１つ以上の修飾糖部分及び修飾ヌクレオチド間結合を含み、
オリゴヌクレオチド組成物は、それがＲＮＡ干渉系において転写産物と接触すると、組成物の非存在、参照組成物の存在、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される参照条件の下で観察されるものと比較して転写産物のＲＮＡｉ介在性ノックダウンが改善するという点において特徴付けられる。
【００５６】
一部の実施形態では、本開示は、第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、第１の複数のオリゴヌクレオチドは、
１）塩基配列、
２）骨格結合のパターン、
３）骨格キラル中心のパターン、及び
４）骨格リン修飾のパターン
によって定義される特定のオリゴヌクレオチド型のものである。
【００５７】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、第１の複数のオリゴヌクレオチドは、
１）塩基配列、
２）骨格結合のパターン、
３）骨格キラル中心のパターン、及び
４）骨格リン修飾のパターン
によって定義される特定のオリゴヌクレオチド型のものである。
【００５８】
一部の実施形態では、本開示は、ある１つのＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型の第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、当該オリゴヌクレオチド型は、
１）塩基配列、
２）骨格結合のパターン、
３）骨格キラル中心のパターン、及び
４）骨格リン修飾のパターン
によって定義され、
当該組成物は、特定のオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドに関して、同じ塩基配列を有するオリゴヌクレオチドの実質的なラセミ調製物と比較して当該組成物が富化されるという点においてキラル制御され、
オリゴヌクレオチド組成物は、それが転写産物と接触すると、組成物の非存在、参照組成物の存在、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される参照条件の下で観察されるものと比較して転写産物のノックダウンが改善するという点において特徴付けられる。
【００５９】
一部の実施形態では、本開示は、ある１つのＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型の第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、当該オリゴヌクレオチド型は、
１）塩基配列、
２）骨格結合のパターン、
３）骨格キラル中心のパターン、及び
４）骨格リン修飾のパターン
によって定義され、
当該組成物は、特定のオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドに関して、同じ塩基配列を有するオリゴヌクレオチドの実質的なラセミ調製物と比較して当該組成物が富化されるという点においてキラル制御され、
オリゴヌクレオチド組成物は、それがＲＮＡ干渉系において転写産物と接触すると、組成物の非存在、参照組成物の存在、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される参照条件の下で観察されるものと比較して転写産物のＲＮＡｉ介在性ノックダウンが改善するという点において特徴付けられる。
【００６０】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、図１に示される形式のいずれかを有するか、または図１に示される形式のいずれかに示される任意の構造的要素を有する。
【００６１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、図１に示される形式のいずれかを有するか、または図１に示される形式のいずれかに示される任意の構造的要素を有する。
【００６２】
とりわけ、本開示は、開示の形式のさまざまなオリゴヌクレオチドが、いくつかの異なる遺伝子のいずれかにおけるいくつかの異なる配列のいずれかに対して標的化されると、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有することを示すデータを提示する。一部の実施形態では、本開示は、開示の形式のさまざまなＲＮＡｉ剤が、多くの異なる遺伝子のいずれかにおける多くの異なる配列のいずれかに対してＲＮＡ干渉を誘導する能力を有することを示すデータを提示する。
【００６３】
一部の実施形態では、本明細書に記載され、及び／または示される構造のいずれかを有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、本明細書に記載され、及び／または示される構造のいずれかを有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する。一部の実施形態では、本明細書に記載され、及び／または示される構造のいずれかを有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意のオリゴヌクレオチドの任意の構造的要素、または本明細書に記載されるか、もしくは図１に示される任意の形式、を含む。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意のオリゴヌクレオチドの任意の構造的要素、または本明細書に記載されるか、もしくは図１に示される任意の形式、を含み、ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意のオリゴヌクレオチドの任意の構造的要素、または本明細書に記載されるか、もしくは図１に示される任意の形式、を含み、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意のオリゴヌクレオチドの任意の構造的要素、または本明細書に記載されるか、もしくは図１に示される任意の形式、を含み、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する。
【００６４】
一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、５’末端構造、５’末端領域、シード領域、ポストシード領域、及び３’末端領域、ならびに任意選択の追加の化学的部分、のうちの任意の１つ以上を含む。一部の実施形態では、シード領域は、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意のシード領域である。一部の実施形態では、ポストシード領域は、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる、シード領域と３’末端領域との間の任意の領域であり得る。一部の実施形態では、３’末端領域は、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意の３’末端領域であり得る。一部の実施形態では、任意の任意選択の追加の化学的部分は、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意の任意選択の追加の化学的部分であり得る。本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意の個々の５’末端構造、５’末端領域、シード領域、ポストシード領域、３’末端領域、及び任意選択の追加の化学的部分を、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意の他の５’末端構造、５’末端領域、シード領域、ポストシード領域、３’末端領域、及び任意選択の追加の化学的部分と独立して組み合わせることができる。一部の実施形態では、非限定的な例として、一本鎖ＲＮＡｉ剤の領域は、５’末端構造、５’末端領域、シード領域、ポストシード領域、シード領域の一部、ポストシード領域の一部、または３’末端ジヌクレオチドである。
【００６５】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの塩基配列は、本明細書に開示の任意のオリゴヌクレオチドの塩基配列からなる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの塩基配列は、本明細書に開示の任意のオリゴヌクレオチドの塩基配列を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの塩基配列は、本明細書に開示の任意のオリゴヌクレオチドの塩基配列の１５個の連続塩基の配列を含む配列を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの塩基配列は、本明細書に開示の任意のオリゴヌクレオチドの塩基配列の、最大で５つのミスマッチを有する２０個の連続塩基の配列を含む配列を含む。
【００６６】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、一本鎖ＲＮＡｉ干渉を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、一本鎖ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、本明細書に開示のオリゴヌクレオチドが標的とする任意の転写産物または遺伝子を標的とする配列を含む。
【００６７】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＡＰＯＣ３を標的とする。
【００６８】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＡＰＯＣ３遺伝子またはその遺伝子産物の活性、レベル、及び／または発現を低減または阻害するために使用することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、遺伝子またはその遺伝子産物の活性、レベル、及び／または発現を低減または阻害するために使用することができ、遺伝子またはその遺伝子産物の異常または過剰な活性、レベル、及び／または発現、遺伝子またはその遺伝子産物における有害な変異、あるいは遺伝子またはその遺伝子産物の異常な組織分布または細胞間分布もしくは細胞内分布は、障害と関係し、障害を引き起こし、及び／または障害と関連する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、遺伝子またはその遺伝子産物の異常または過剰な活性、レベル、及び／または発現、あるいは遺伝子またはその遺伝子産物の異常な分布と関係し、それを引き起こし、及び／またはそれと関連する障害を治療し、及び／または当該障害を治療するための薬剤を製造するために使用することができる。
【００６９】
一部の実施形態では、本開示は、ＡＰＯＣ３を標的とする能力を有し、ＡＰＯＣ３関連障害の治療及び／またはＡＰＯＣ３関連障害の治療物の製造に有用な、本明細書に開示のオリゴヌクレオチドの使用方法に関する。
【００７０】
一部の実施形態では、遺伝子を標的とする能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、標的遺伝子の塩基配列の一部である塩基配列を含むか、または標的遺伝子の塩基配列の一部に相補的もしくは実質的に相補的な塩基配列を含む。一部の実施形態では、一部分の長さは、少なくとも１５塩基である。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の塩基配列は、特定の塩基配列との最大ミスマッチ数が特定数である塩基配列を含むか、または当該塩基配列からなり得る。
【００７１】
一部の実施形態では、ミスマッチは、２つの配列が最大限にアライメント及び比較されるときの塩基配列間または長さ間の差異である。非限定的な例として、一方の配列の特定の位置の塩基と、もう一方の配列の対応位置の塩基と、の間に差異が存在するのであれば、ミスマッチとして数えられる。したがって、たとえば、一方の配列のある１つの位置に特定の塩基（たとえば、Ａ）が存在し、異なる塩基（たとえば、Ｇ、Ｃ、またはＵ）がもう一方の配列の対応位置に存在するのであれば、ミスマッチとして数えられる。たとえば、一方の配列のある１つの位置に塩基（たとえば、Ａ）が存在し、もう一方の対応位置に塩基が存在しないか（たとえば、その位置は、リン酸−糖骨格を含むが、塩基は含まない脱塩基ヌクレオチドである）、またはその位置がスキップされるのであっても、ミスマッチとして数えられる。いずれかの配列（またはセンス鎖もしくはアンチセンス鎖）に一本鎖ニックが存在してもミスマッチとしては数えられないこともあり得、たとえば、一方の配列が５’−ＡＧ−３’という配列を含むが、もう一方の配列がＡとＧとの間に一本鎖ニックを有する５’−ＡＧ−３’という配列を含むのであれば、ミスマッチとしては数えられないことになる。塩基修飾は、一般に、ミスマッチとは見なされず、たとえば、一方の配列がＣを含み、もう一方の配列が同じ位置に修飾Ｃ（たとえば、５ｍＣ）を含むのであれば、ミスマッチとしては数えられないこともあり得る。一部の実施形態では、ミスマッチを数えるという目的では、ＴがＵに置き換わっていてもミスマッチとは見なされず、逆もまた同様である。
【００７２】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、標的配列（たとえば、ｍＲＮＡなどのＲＮＡ）に相補的または完全に相補的もしくは１００％相補的であり、このことは、オリゴヌクレオチドの塩基配列が、標的配列に完全に相補的な（たとえば、ワトソンクリック塩基対形成を介して塩基対形成する）配列とのミスマッチを有さないことを意味する。いかなるの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤については、５’末端ヌクレオチド部分または３’末端ジヌクレオチドが標的と塩基対を形成することは必ずしも必要ではないことを明記する。こうしたものは、ミスマッチであり得る。さらに、アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、少数の内部ミスマッチを有し得るが、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少、及び／またはＮａｓｅＨ介在性ノックダウン及び／またはＲＮＡ干渉、を依然として誘導し得る。ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド（たとえば、アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤）の第１の塩基配列が、標的配列に１００％相補的な参照塩基配列とのミスマッチを有し、その数が少数であれば、第１の塩基配列は、標的配列に実質的に相補的である。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド（たとえば、アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤）は、標的配列に相補的または実質的に相補的な塩基配列を有し得る。一部の実施形態では、相補性は、ワトソンクリック塩基対（グアニン−シトシン及びアデニン−チミン／ウラシル）に基づいて決定され、グアニン、シトシン、アデニン、チミン、ウラシルは、任意かつ独立して修飾され得るが、非修飾の場合に見られるその対形成水素結合パターンを維持する。一部の実施形態では、別の配列に相補的な配列は、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、少なくとも８つ、少なくとも９つ、少なくとも１０個、少なくとも１１個、少なくとも１２個、少なくとも１３個、少なくとも１４個、少なくとも１５個、少なくとも１６個、少なくとも１７個、少なくとも１８個、少なくとも１９個、少なくとも２０個の塩基を含む。
【００７３】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド組成物、またはオリゴヌクレオチド型は、骨格結合の共通パターンを有する。一部の実施形態では、骨格結合の共通パターンは、少なくとも１０個の修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【００７４】
一部の実施形態では、骨格結合の共通パターンは、少なくとも１０個のホスホロチオエート結合を含む。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド組成物、またはオリゴヌクレオチド型は、骨格キラル中心の共通パターンを有する。一部の実施形態では、骨格キラル中心の共通パターンは、Ｓｐ配置のヌクレオチド間結合を少なくとも１つ含む。一部の実施形態では、骨格キラル中心の共通パターンは、Ｓｐ配置のホスホロチオエートであるヌクレオチド間結合を少なくとも１つ含む。一部の実施形態では、提供される組成物中のオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、提供される組成物は、当該組成物が、所定レベルの個々のオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドを含むという点でキラル制御されたＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物であり、ここで、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型は以下により定義される：
１）塩基配列、
２）骨格結合のパターン、
３）骨格キラル中心のパターン、及び
４）骨格リン修飾のパターン。
【００７５】
上述され、当分野に置いて理解されるように、一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列は、当該オリゴヌクレオチド中のヌクレオシド残基の同一性及び／または修飾の状態（たとえば、アデニン、シトシン、グアノシン、チミン、及びウラシルなどの標準的な天然ヌクレオチドと比較した、糖及び／または塩基の構成要素の状態）を指すことができ、及び／またはかかる残基のハイブリダイゼーション特性（すなわち、特定の相補的残基とハイブリダイズする能力）を指すことができる。
【００７６】
一部の実施形態では、特定のオリゴヌクレオチド型は、以下により定義され得る：
１Ａ）塩基同一性、
１Ｂ）塩基修飾のパターン、
１Ｃ）糖修飾のパターン、
２）骨格結合のパターン、
３）骨格キラル中心のパターン、及び
４）骨格リン修飾のパターン。
従って一部の実施形態では、特定のオリゴヌクレオチド型は、同一の塩基を共有し得るが、塩基修飾及び／または糖修飾のそれらのパターンにおいて異なっている。一部の実施形態では、特定のオリゴヌクレオチド型は、同一の塩基及び塩基修飾のパターン（たとえば塩基修飾の不在を含む）を共有し得るが、糖修飾のパターンにおいて異なっていてもよい。
【００７７】
一部の実施形態では、特定のオリゴヌクレオチド型は、同じ塩基配列（長さを含む）、糖及び塩基部分への同じ化学修飾パターン、同じ骨格結合パターン（たとえば、天然リン酸結合、ホスホロチオエート結合、ホスホロチオエートトリエステル結合、及びそれらの組み合わせのパターン）、同じ骨格キラル中心パターン（たとえば、キラルヌクレオチド間結合の立体化学（Ｒｐ／Ｓｐ）パターン）、及び同じ骨格リン修飾パターン（たとえば、ヌクレオチド間リン原子上の修飾パターン（−Ｓ−など）、及び式Ｉの−Ｌ−Ｒ１）を有するという点で化学的に同一である。
【００７８】
とりわけ、本開示は、特性を最適化（たとえば、一本鎖ＲＮＡ干渉、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンなどを改善）するためのオリゴヌクレオチド組成物及び技術を提供する。一部の実施形態では、本開示は、オリゴヌクレオチド及びその組成物の投与と関連する免疫応答を弱めるための方法（すなわち、組成物におけるオリゴヌクレオチドに対する望ましくない免疫応答が、たとえば同等または同一のヌクレオチド配列の参照ヌクレオチド組成物で観察されるものと比較して、低減されるようにオリゴヌクレオチド組成物の投与するもの）を提供する。一部の実施形態では、本開示は、オリゴヌクレオチド及びその組成物による、ある特定のタンパク質への結合を増加させるための方法を提供する。一部の実施形態では、本開示は、オリゴヌクレオチド及びその組成物による、ある特定のタンパク質への結合を増加させるための方法を提供する。一部の実施形態では、本開示は、オリゴヌクレオチド及びその組成物の送達を増進させるための方法を提供する。とりわけ、本開示は、オリゴヌクレオチドをその標的に最適に送達するには、一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドが所望の位置に輸送され得るようにある特定のたんぱく質にオリゴヌクレオチドが結合することと、ある特定のタンパク質からオリゴヌクレオチドが適切に遊離して、その所望の機能（たとえば、その標的とのハイブリダイゼーション、その標的の切断、翻訳の阻害、転写産物プロセッシングの調節など）を発揮し得るようにオリゴヌクレオチドが遊離することと、のバランスが必要であるという認識を含む。本開示に例示されるように、本開示は、とりわけ、化学修飾及び／または立体化学を介してオリゴヌクレオチド特性の改善を達成できるという認識を有する。
【００７９】
一部の実施形態では、本開示は、疾患を治療または予防するための方法を提供し、当該方法は、本明細書に記載のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を対象に投与することを含む。
【００８０】
一部の実施形態では、疾患は、提供される組成物が投与された後に、一本鎖ＲＮＡ干渉を介して標的核酸がノックダウンされることで、治癒、回復、または新たな有益な機能が導入され得る疾患である。
【００８１】
一部の実施形態では、共通配列は、表１Ａから選択される配列を含む。一部の実施形態では、共通配列は、表１Ａから選択される配列である。一部の実施形態では、骨格キラル中心のパターンは、表１Ａに記載されるものから選択される。
【００８２】
一部の実施形態では、本開示は、第１の複数のオリゴヌクレオチドを含む組成物の投与を含む方法を提供し、当該組成物は、複数のオリゴヌクレオチドを含む参照組成物と比較して送達の改善を示し、当該参照組成物に含まれる当該複数のオリゴヌクレオチドはそれぞれ、同様に共通塩基配列を有するが、当該複数のオリゴヌクレオチドは、
この参照の当該複数のオリゴヌクレオチドに含まれる個々のオリゴヌクレオチドの立体化学構造が互いに異なり、及び／または
この参照の当該複数のオリゴヌクレオチドに含まれる少なくともいくつかのオリゴヌクレオチドが、組成物の当該複数のオリゴヌクレオチドが示す構造とは異なる構造を有する
という点において第１の複数のオリゴヌクレオチドとは構造的に異なる。
【００８３】
一部の実施形態では、本開示は、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有し、共通ヌクレオチド配列を有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物の投与方法を提供し、この改善には、
第１の複数のオリゴヌクレオチドを構成するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの投与が、同じ共通ヌクレオチド配列の参照オリゴヌクレオチド組成物と比較して送達が改善することによって特徴付けられるものであること
を含む。
【００８４】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有し、共通ヌクレオチド配列を有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物の投与方法を提供し、この改善には、
第１の複数のオリゴヌクレオチドを構成するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの投与が、同じ共通ヌクレオチド配列の参照オリゴヌクレオチド組成物と比較して送達が改善することによって特徴付けられるものであること
を含む。
【００８５】
一部の実施形態では、本開示は、表（限定されないが、表１Ａを含む）またはその他の箇所で本明細書に開示されるもの、のいずれかから選択されるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの一本鎖ＲＮＡｉ剤を提供する。一部の実施形態では、本開示は、表（限定されないが、表１Ａを含む）またはその他の箇所で本明細書に開示されるもの、のいずれかから選択されるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの一本鎖ＲＮＡｉ剤を提供し、オリゴヌクレオチドは、脂質部分に複合体化される。
【００８６】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、脂質部分を含む。一部の実施形態では、脂質部分は、脂質との複合体化によって組み込まれる。一部の実施形態では、脂質部分は、脂肪酸である。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、脂肪酸に複合体化される。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質をさらに含む。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、９番目または１１番目（５’末端から数えた位置）のヌクレオチドに複合体化された脂質部分を含む。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、塩基において脂肪酸に複合体化される。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質部分を含む。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、９番目または１１番目（５’末端から数えた位置）のヌクレオチドの塩基に複合体化された脂質部分を含む。
【００８７】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、前述の組成物のいずれか１つであって、１つ以上の追加の構成要素をさらに含む組成物である。
【００８８】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ機序とＲＮＡｉ機序との両方を介して標的転写産物（たとえば、ＲＮＡ）を分解する能力を有する。
【００８９】
一部の実施形態では、脂質部分をＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化することによって、当該オリゴヌクレオチドの少なくとも１つの特性が改善される。一部の実施形態では、改善される特性としては、活性の増加（例えば、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導し、及び／または一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導し、及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力の増加）及び／または組織分布の改善が挙げられる。一部の実施形態では、組織は、筋組織である。一部の実施形態では、組織は骨格筋、腓腹筋、三頭筋、心臓または横隔膜である。一部の実施形態では、改善される特性としては、ｈＴＬＲ９アゴニスト活性の低下が挙げられる。一部の実施形態では、改善される特性としては、ｈＴＬＲ９アンタゴニスト活性が挙げられる。一部の実施形態では、改善される特性としては、ｈＴＬＲ９アンタゴニスト活性の上昇が挙げられる。
【００９０】
一般に、本明細書に記載のオリゴヌクレオチド組成物の特性は、任意の適切なアッセイを使用して評価することができる。
【００９１】
当業者であれば、特定のオリゴヌクレオチド組成物に対して適切なアッセイを認識し、及び／または開発することは容易に可能であろう。
【００９２】
定義
本明細書中で使用される場合、他に示されない限り、以下の定義が適用される。本開示の目的に対し、化学元素は、元素の周期律表、ＣＡＳバージョン、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ、第７５版に従って同定される。さらに、有機化学の一般原則は、“Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｏｒｒｅｌｌ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｏｏｋｓ，Ｓａｕｓａｌｉｔｏ：１９９９、及び“Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｅｄ．：Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｂ及びＭａｒｃｈ，Ｊ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：２００１に記載されている。
【００９３】
本明細書中で使用されるとき、「１つの（ａ）」または「１つの（ａｎ）」は、１つ以上を意味し得る。請求項中で使用されるとき、「１つの（ａ）」または「１つの（ａｎ）」という語は、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という語とともに使用される場合には、１つまたはそれ以上を意味し得る。本明細書中で使用されるとき、「別の（ａｎｏｔｈｅｒ）」は、少なくとも２つ目またはそれ以上を意味し得る。
【００９４】
「約」という用語は、該用語が言及する公称値の±１０％、一実施形態では±５％、別の実施形態では±２％の近似値を示す、相対的な用語を指す。本開示の分野では、この程度の近似は、その値がより狭い範囲を要することが明記されていない限り、妥当である。
【００９５】
脂肪族：本明細書で使用される場合には、「脂肪族」は、完全に飽和した、もしくは１つ以上の不飽和単位を含む、直鎖状の（即ち、非分枝状の）または分枝状の、置換または非置換の炭化水素鎖、または完全に飽和した、もしくは１つ以上の不飽和単位（芳香族ではない）を含む、置換または非置換の単環式、二環式または多環式の炭化水素環、またはそれらの組み合わせを意味する。一部の実施形態では、脂肪族基は１〜５０個の脂肪族炭素原子を含む。いくつかの実施形態では、脂肪族基は１〜２０個の脂肪族炭素原子を含む。別の実施形態では、脂肪族基は１〜１０個の脂肪族炭素原子を含む。別の実施形態では、脂肪族基は１〜９個の脂肪族炭素原子を含む。別の実施形態では、脂肪族基は１〜８個の脂肪族炭素原子を含む。別の実施形態では、脂肪族基は１〜７個の脂肪族炭素原子を含む。別の実施形態では、脂肪族基は１〜６個の脂肪族炭素原子を含む。さらに別の実施形態では、脂肪族基は１〜５個の脂肪族炭素原子を含み、さらに他の実施形態では、脂肪族基は１、２、３または４個の脂肪族炭素原子を含む。好適な脂肪族基には、直鎖状のまたは分枝状の、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル基及びそれらのハイブリッド（（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルケニル）アルキル、または（シクロアルキル）アルケニルなど）が含まれるが、これらに限定されない。
【００９６】
アルケニル：本明細書で使用される「アルケニル」は、本明細書で定義されるように１つまたは複数の二重結合を有するアルキル基を指す。
【００９７】
アルキル：本明細書で使用される「アルキル」という用語は、当該技術分野で通常の意味を有し、直鎖アルキル基、分枝鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基、及びシクロアルキル置換アルキル基を含む飽和脂肪族基を含み得る。いくつかの実施形態では、アルキルは１〜１００個の炭素原子を有する。ある特定の実施形態では、直鎖アルキルまたは分枝鎖アルキルはその主鎖中に約１〜２０個（例えば、直鎖の場合はＣ１−Ｃ２０、分枝鎖の場合はＣ２−Ｃ２０）、あるいは約１〜１０個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態では、シクロアルキル環は、環が単環式、二環式または多環式であるその環構造中に約３〜１０個の炭素原子、あるいは環構造中に約５、６または７個の炭素を有する。一部の実施形態では、アルキル基は低級アルキル基であってもよく、低級アルキル基は１〜４個の炭素原子（例えば、直鎖低級アルキルの場合はＣ１−Ｃ４）を含む。
【００９８】
アルキニル：本明細書で使用される「アルキニル」という用語は、本明細書で定義されるように１つまたは複数の三重結合を有するアルキル基を指す。
【００９９】
アンチセンス：本明細書で使用される「アンチセンス」という用語は、標的核酸に対して相補的であるまたは実質的に相補的である塩基配列を有し、該標的核酸にハイブリダイズする能力を有するオリゴヌクレオチドまたは他の核酸の特徴を指す。一部の実施形態では、標的核酸は、標的遺伝子ｍＲＮＡである。一部の実施形態では、ハイブリダイゼーションは、１つの作用、たとえば、標的核酸もしくはその遺伝子産物のレベル、発現もしくは活性の減少にとって必要であるか、またはその結果をもたらす、本明細書で使用される「アンチセンスオリゴヌクレオチド」という用語は、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチドを指す。一部の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的核酸またはその遺伝子産物のレベル、発現または活性の減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ、立体障害及び／またはＲＮＡ干渉に関係する機序を介して、標的核酸またはその遺伝子産物のレベル、発現または活性の減少を誘導する能力を有する。
【０１００】
およそ：本明細書中で使用される場合、数に関連した場合の「およそ」または「約」という用語は、概して、特に明記もしくは特に文脈から明白でない限り、（かかる数が、０％より小さいまたは１００％を越える可能性がある値である場合を除き）当該数のいずれの方向（より大きいまたはより小さい）における、５％、１０％、１５％、または２０％の範囲内の数を含むととらえられる。一部の実施形態では、投与量に関連した場合の「約」という用語の使用は、±５／ｍｇ／ｋｇ／日を意味する。
【０１０１】
アリール：本明細書において使用される場合、単独で、または「アラルキル」、「アラルコキシ」若しくは「アリールオキシアルキル」内のより大きな部分の一部として使用される「アリール」という用語は、総計５〜３０個の環員を有する単環式、二環式、または多環式環系を指し、系内の少なくとも１個の環は芳香族である。いくつかの実施形態では、アリール基は、総計５〜１４個の環員を有する単環式、二環式、または多環式環系であり、系内の少なくとも１個の環は芳香族であり、系中の各環は３〜７個の環員を含む。いくつかの実施形態では、アリール基はビアリール基である。「アリール」は、「アリール環」と互換的に使用され得る。本開示のいくつかの実施形態では、「アリール」は、フェニル、ビフェニル、ナフチル、ビナフチル、アントラシル等を含み、１つまたは複数の置換基を有し得る芳香環系を指すが、これらに限定されない。また、本明細書で使用される「アリール」という用語の範囲内に含まれるのは、芳香環が１個または複数の非芳香環に縮合している基、例えばインダニル、フタルイミジル、ナフチミジル、フェナントリジニル、またはテトラヒドロナフチル等である。
【０１０２】
特徴的な部分：本明細書において使用される場合、タンパク質またはポリペプチドの「特徴的な部分」という表現は、連続的アミノ酸、または連続的アミノ酸の集まりを含む部分であり、それら両方ともがタンパク質またはポリペプチドの特徴である。かかる各連続鎖は、概して、少なくとも２つのアミノ酸を含むであろう。概して、特徴的部分は、上記で特定される配列同一性に加えて、関連無傷タンパク質と少なくとも１つの機能的特徴を共有する部分である。
【０１０３】
特徴的な構造的要素：「特徴的構造要素」または「構造的要素」という用語は、ポリペプチド、低分子、または核酸のファミリーの全メンバーに存在する、明確に異なる構造的要素を指し、ゆえに当該ファミリーのメンバーを定義するために当業者により使用され得る。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の構造的要素としては、限定されないが、５’末端構造、５’末端領域、５’ヌクレオチド部分、シード領域、ポストシード領域、３’末端領域、３’末端ジヌクレオチド、３’キャップ、修飾パターン、骨格における立体化学パターン、追加の化学的部分などが挙げられる。
【０１０４】
同等：「同等」という用語は、得られた結果または観察された現象の比較が可能な、互いに充分に類似した状態または環境の２つ（またはそれ以上）の設定を記載するために、本明細書で使用される。一部の実施形態では、状態または環境の同等な設定は、複数の実質的に同一の特徴、及び１つまたは少数の変更された特徴により特徴付けられる。当業者は、条件の設定は、充分な数と実質的に同一な特性の型により特徴づけられ、当該異なる条件設定または環境設定下で得られた結果と観察された現象における差異が、変更されたそれら特性における変化により引き起こされた、または変化の指標であると合理的に結論づけることが正当化されたときに互いに同等であると認識するであろう。
【０１０５】
脂環式：「脂環式」、「炭素環式」、「カルボシクリル」、「炭素環式ラジカル」、及び「炭素環」という用語は、互換的に使用され、本明細書で使用されるように、３〜３０個の環員を別段の指定がない限り有する、本明細書に記載の、飽和または部分不飽和であるが、非芳香族である環式脂肪族の単環式環系、二環式環系、または多環式環系を指す。脂環式基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロヘプテニル、シクロオクチル、シクロオクテニル、ノルボルニル、アダマンチル、及びシクロオクタジエニルを含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、脂環式基は、３〜６個の炭素を有する。一部の実施形態では、脂環式基は、飽和しており、シクロアルキルである。「脂環式」という用語はまた、１つ若しくは複数の芳香または非芳香環、例えばデカヒドロナフチルまたはテトラヒドロナフチルに縮合している脂肪族環を含むことができる。いくつかの実施形態では、脂環式基は二環式である。いくつかの実施形態では、脂環式基は三環式である。いくつかの実施形態では、脂環式基は多環式である。いくつかの実施形態では、「脂環式」は、完全に飽和している若しくは１つ若しくは複数の不飽和単位を含むが、芳香族ではなく、分子の残りの部分へ単一の結合点を有するＣ３−Ｃ６単環式炭化水素、またはＣ８−Ｃ１０二環式炭化水素もしくはＣ８−Ｃ１０多環式炭化水素、または、完全に飽和している若しくは１つ若しくは複数の不飽和単位を含むが、芳香族ではなく、分子の残りの部分へ単一の結合点を有するＣ９−Ｃ１６多環式炭化水素を指す。
【０１０６】
ヘテロ脂肪族：「ヘテロ脂肪族」という用語は、当技術分野で通常の意味が与えられ、１個以上の炭素原子が独立して１個以上のヘテロ原子（例えば、酸素、窒素、硫黄、ケイ素、リン等）で置換された、本明細書に記載の脂肪族基を指す。一部の実施形態では、Ｃ、ＣＨ、ＣＨ２、及びＣＨ３から選択される１個以上の単位は、独立して１個以上のヘテロ原子（その酸化型及び／または置換型を含む）により置換される。一部の実施形態では、ヘテロ脂肪族基は、ヘテロアルキルである。一部の実施形態では、ヘテロ脂肪族基は、ヘテロアルケニルである。
【０１０７】
ヘテロアルキル：本明細書において使用される場合、「ヘテロアルキル」という用語は、当技術分野で通常の意味が与えられ、１個以上の炭素原子が独立して１個以上のヘテロ原子（例えば、酸素、窒素、硫黄、ケイ素、リン等）で置換された、本明細書に記載の脂肪族基を指す。ヘテロアルキル基の例としては、アルコキシ、ポリ（エチレングリコール）−、アルキル置換アミノ、テトラヒドロフラニル、ピペリジニル、モルホリニル等が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０８】
ヘテロアリール：本明細書において使用される場合、単独で使用される、またはより大きい部分、例えば「ヘテロアラルキル」または「ヘテロアラルコキシ」の一部として使用される「ヘテロアリール」及び「ヘテロａｒ−」という用語は、総計５〜３０個の環員を有する単環式、二環式または多環式環系を指し、系内の少なくとも１個の環は芳香族であり、少なくとも１個の芳香環原子はヘテロ原子である。ヘテロアリール基は、いくつかの実施形態では５〜１０個の環原子（即ち、単環式、二環式または多環式）、いくつかの実施形態では５、６、９、または１０個の環原子を有する基である。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール基は、環状配列中で共有され、及び炭素原子に加えて１〜５個のヘテロ原子を有する、６、１０、または１４個のπ電子を有する。ヘテロアリール基には、チエニル、フラニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、インドリジニル、プリニル、ナフチリジニル及びプテリジニルが含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、ヘテロアリールはヘテロビアリール基、例えばビピリジル等である。本明細書で使用される「ヘテロアリール」及び「ヘテロアラルキル」という用語はまた、ヘテロ芳香環が１個若しくは複数のアリール、脂環式またはヘテロシクリル環に縮合している基を含み、ここでラジカルまたは結合点はヘテロ芳香環上にある。非限定的な例としては、インドリル、イソインドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ジベンゾフラニル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、４Ｈ−キノリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、及びピリド［２，３−ｂ］−１，４−オキサジン−３（４Ｈ）−オンが挙げられる。ヘテロアリール基は、単環式、二環式または多環式であってもよい。「ヘテロアリール」は、「ヘテロアリール環」、「ヘテロアリール基」または「ヘテロ芳香族」という用語と互換的に使用されることができ、これらの用語のいずれかは、置換されていてもよい環を含む。「ヘテロアラルキル」という用語は、ヘテロアリール基で置換されたアルキル基を指し、アルキル部分及びヘテロアリール部分は、独立して置換されていてもよい。
【０１０９】
ヘテロ原子：本明細書において使用される場合、「ヘテロ原子」という用語は、炭素でも水素でもない原子を意味する。いくつかの実施形態では、ヘテロ原子は、（窒素、硫黄、リン、またはケイ素の任意の酸化形態、任意の塩基性窒素または複素環式環の置換可能な窒素の四級化形態（例えば、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリル中のＮ）、（ピロリジニル中の）ＮＨ、または（Ｎ−置換ピロリジニル中の）ＮＲ＋等を含む）酸素、硫黄、窒素、リン、またはケイ素である。
【０１１０】
複素環：本明細書において使用される場合、「複素環」、「ヘテロシクリル」、「複素環式ラジカル」、及び「複素環式環」という用語は、相互交換可能に使用され、飽和または部分不飽和であり、１個以上のヘテロ原子環原子を有する単環式、二環式、または多環式環部分（例えば３〜３０員）を指す。いくつかの実施形態では、ヘテロシクリル基は、炭素原子に加えて１個または複数の、好ましくは上で定義した１〜４個のヘテロ原子を有する飽和または部分不飽和のいずれかの、安定な５員〜７員単環式または７員〜１０員二環式複素環式部分である。複素環の環原子に関して使用される場合、「窒素」という用語は置換された窒素を含む。例として、酸素、硫黄、及び窒素から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する飽和または部分不飽和の環において、窒素は（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリル中の）Ｎ、（ピロリジニルの中の）ＮＨ、または（Ｎ−置換ピロリジニル中の）＋ＮＲであることができる。複素環式環は、安定な構造をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子でそのペンダント基に結合することができ、任意の環原子は置換されていてもよい。このような飽和または部分不飽和複素環式ラジカルの例としては、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピロリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ジアゼピニル、オキサゼピニル、チアゼピニル、モルホリニル、及びキヌクリジニルが挙げられるが、これらに限定されない。「複素環」、「ヘテロシクリル」、「ヘテロシクリル環」、「複素環式基」、「複素環式基」、「複素環式部分」、及び「複素環式ラジカル」という用語は、本明細書では互換的に使用され、また、ヘテロシクリル環が１つ若しくは複数のアリール、ヘテロアリール、または脂環式環、例えばインドリニル、３Ｈ−インドリル、クロマニル、フェナントリジニル、若しくはテトラヒドロキノリニル、に縮合した基を含む。ヘテロシクリル基は、単環式、二環式、または多環式であってもよい。「ヘテロシクリルアルキル」という用語は、ヘテロシクリルで置換されたアルキル基を指し、アルキル部分及びヘテロシクリル部分は、独立して置換されていてもよい。
【０１１１】
低級アルキル：「低級アルキル」という用語は、Ｃ１−４の直線状または分枝状のアルキル基を指す。低級アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、及びｔｅｒｔ−ブチルである。
【０１１２】
低級ハロアルキル：「低級ハロアルキル」という用語は、１つ以上のハロゲン原子で置換されたＣ１−４の直線状または分枝状のアルキル基を指す。
【０１１３】
任意で置換された：本明細書において記載される場合、たとえば本開示のオリゴヌクレオチドは、任意で置換された及び／または置換された部分を含有してもよい。一般に、「置換された」は、「任意に」という用語が前にあるか否かにかかわらず、指定された部分の１つまたは複数の水素が好適な置換基で置換されていることを意味する。特に指示しない限り、「置換されていてもよい」基は、基の各置換可能な位置に好適な置換基を有していてもよく、任意の所定の構造中の２つ以上の位置が特定の基から選択される２つ以上の置換基で置換され得る場合、その置換基はあらゆる位置で同じであってもまたは異なっていてもよい。一部の実施形態では、任意で置換される基は、置換されない。本開示によって想定される置換基の組み合わせは、好ましくは、安定または化学的に実現可能な化合物の形成をもたらす置換基である。本明細書で使用される「安定な」という用語は、化合物の産生、検出、並びに、いくつかの実施形態では、本明細書に開示される１つまたは複数の目的のためのそれらの回収、精製、及び使用を可能にする条件にさらされた場合に、実質的に改変されない化合物を指す。
【０１１４】
置換可能な原子（たとえば、適切な炭素原子）に対する好適な一価置換基は、独立して、ハロゲン；−（ＣＨ２）０−４Ｒｏ；−（ＣＨ２）０−４ＯＲｏ；−Ｏ（ＣＨ２）０−４Ｒｏ、−Ｏ−（ＣＨ２）０−４Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；−（ＣＨ２）０−４ＣＨ（ＯＲｏ）２；Ｒ°で置換されていてもよい−（ＣＨ２）０−４Ｐｈ；Ｒ°で置換されていてもよい−（ＣＨ２）０−４Ｏ（ＣＨ２）０−１Ｐｈ；Ｒ°で置換されていてもよい−ＣＨ＝ＣＨＰｈ；Ｒ°で置換されていてもよい−（ＣＨ２）０−４Ｏ（ＣＨ２）０−１−ピリジル；−ＮＯ２；−ＣＮ；−Ｎ３；−（ＣＨ２）０−４Ｎ（Ｒｏ）２；−（ＣＨ２）０−４Ｎ（Ｒｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒｏ；−Ｎ（Ｒｏ）Ｃ（Ｓ）Ｒｏ；−（ＣＨ２）０−４Ｎ（Ｒｏ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｏ２；−Ｎ（Ｒｏ）Ｃ（Ｓ）ＮＲｏ２；−（ＣＨ２）０−４Ｎ（Ｒｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｏ；−Ｎ（Ｒｏ）Ｎ（Ｒｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒｏ；−Ｎ（Ｒｏ）Ｎ（Ｒｏ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｏ２；−Ｎ（Ｒｏ）Ｎ（Ｒｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＲｏ；−（ＣＨ２）０−４Ｃ（Ｏ）Ｒｏ；−Ｃ（Ｓ）Ｒｏ；−（ＣＨ２）０−４Ｃ（Ｏ）ＯＲｏ；−（ＣＨ２）０−４Ｃ（Ｏ）ＳＲｏ；−（ＣＨ２）０−４Ｃ（Ｏ）ＯＳｉＲｏ３；−（ＣＨ２）０−４ＯＣ（Ｏ）Ｒｏ；−ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）０−４ＳＲ，−ＳＣ（Ｓ）ＳＲ°；−（ＣＨ２）０−４ＳＣ（Ｏ）Ｒｏ；−（ＣＨ２）０−４Ｃ（Ｏ）ＮＲｏ２；−Ｃ（Ｓ）ＮＲｏ２；−Ｃ（Ｓ）ＳＲ°；−ＳＣ（Ｓ）ＳＲ°，−（ＣＨ２）０−４ＯＣ（Ｏ）ＮＲｏ２；−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲｏ）Ｒｏ；−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒｏ；−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒｏ；−Ｃ（ＮＯＲｏ）Ｒｏ；−（ＣＨ２）０−４ＳＳＲｏ；−（ＣＨ２）０−４Ｓ（Ｏ）２Ｒｏ；−（ＣＨ２）０−４Ｓ（Ｏ）２ＯＲｏ；−（ＣＨ２）０−４ＯＳ（Ｏ）２Ｒｏ；−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｏ２；−（ＣＨ２）０−４Ｓ（Ｏ）Ｒｏ；−Ｎ（Ｒｏ）Ｓ（Ｏ）２ＮＲｏ２；−Ｎ（Ｒｏ）Ｓ（Ｏ）２Ｒｏ；−Ｎ（ＯＲｏ）Ｒｏ；−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｏ２；−Ｓｉ（Ｒ）３；−ＯＳｉ（Ｒ）３；−Ｂ（Ｒ）２；−ＯＢ（Ｒ）２；−ＯＢ（ＯＲ）２；−Ｐ（Ｒ）２；−Ｐ（ＯＲ）２；−ＯＰ（Ｒ）２；−ＯＰ（ＯＲ）２；−Ｐ（Ｏ）（Ｒ）２；−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ）２；−ＯＰ（Ｏ）（Ｒ）２；−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ）２；−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ）（ＳＲ）；−ＳＰ（Ｏ）（Ｒ）２；−ＳＰ（Ｏ）（ＯＲ）２；−Ｎ（Ｒ）Ｐ（Ｏ）（Ｒ）２；−Ｎ（Ｒ）Ｐ（Ｏ）（ＯＲ）２；−Ｐ（Ｒ）２［Ｂ（Ｒ）３］；−Ｐ（ＯＲ）２［Ｂ（Ｒ）３］；−ＯＰ（Ｒ）２［Ｂ（Ｒ）３］；−ＯＰ（ＯＲ）２［Ｂ（Ｒ）３］；−（Ｃ１−４直鎖若しくは分枝鎖のアルキレン）Ｏ−Ｎ（Ｒｏ）２；または、−（Ｃ１−４直鎖若しくは分枝鎖のアルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｎ（Ｒｏ）２、（式中、各Ｒｏは、以下に定義されるように置換されていてもよく、独立して、水素、Ｃ１−２０脂肪族、窒素、酸素、硫黄、ケイ素及びリンから独立して選択される１〜５個のヘテロ原子を有するＣ１−２０、ヘテロ脂肪族、−ＣＨ２−（Ｃ６−１４アリール）、−Ｏ（ＣＨ２）０−１（アリール）、（Ｃ６−１４アリール）、−ＣＨ２−（５〜１４員ヘテロアリール環）、窒素、酸素、硫黄、ケイ素及びリンから独立して選択される０〜５個のヘテロ原子を有する５〜２０員の、単環式、二環式、若しくは多環式の��飽和、部分不飽和、若しくはアリール環であり、または、上記定義にかかわらず、独立して出現する２つのｏは、それらの介在する原子と一緒になって、窒素、酸素、硫黄、ケイ素及びリンから独立して選択される０〜５個のヘテロ原子を有する５〜２０員の、単環式、二環式、若しくは多環式の、飽和、部分不飽和、若しくはアリール環を形成し、これらは以下に定義されるように置換されていてもよい）である。
【０１１５】
好適なＲｏ上の一価置換基（または独立して出現する２つのＲ°がその介在する原子と一緒になって形成する環）は、独立して、ハロゲン、−（ＣＨ２）０−２Ｒ●、−（ハロＲ●）、−（ＣＨ２）０−２ＯＨ、−（ＣＨ２）０−２ＯＲ●、−（ＣＨ２）０−２ＣＨ（ＯＲ●）２；−Ｏ（ハロＲ●）、−ＣＮ、−Ｎ３、−（ＣＨ２）０−２Ｃ（Ｏ）Ｒ●、−（ＣＨ２）０−２Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）０−２Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−（ＣＨ２）０−２ＳＲ●、−（ＣＨ２）０−２ＳＨ、−（ＣＨ２）０−２ＮＨ２、−（ＣＨ２）０−２ＮＨＲ●、−（ＣＨ２）０−２ＮＲ●２、−ＮＯ２、−ＳｉＲ●３、−ＯＳｉＲ●３、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ●、−（Ｃ１−４直鎖若しくは分枝鎖のアルキレン）Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、または−ＳＳＲ●、（式中、各Ｒ●は、非置換の、若しくは「ハロ」が前に付く場合には１つ若しくは複数のハロゲンでのみ置換され、及び、独立して、Ｃ１−４脂肪族、−ＣＨ２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ２）０−１Ｐｈ、ならびに窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の、飽和、部分不飽和、若しくはアリール環から選択される）である。Ｒ°の飽和炭素原子上の好適な二価置換基は、＝Ｏ及び＝Ｓを含む。
【０１１６】
好適な二価置換基（たとえば、適切な炭素原子に対するもの）は、独立して、＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮＲ＊２、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）Ｒ＊、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ＊、＝ＮＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ＊、＝ＮＲ＊、＝ＮＯＲ＊、−Ｏ（Ｃ（Ｒ＊２））２−３Ｏ−、または−Ｓ（Ｃ（Ｒ＊２））２−３Ｓ−、（式中、独立して出現する各Ｒ＊は、水素、以下に定義されるように置換されていてもよいＣ１−６脂肪族、ならびに、窒素、酸素、及び硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換の５〜６員の、飽和、部分不飽和、若しくはアリール環から選択される）である。「置換されていてもよい」基の隣接の置換可能な炭素に結合している好適な二価置換基は、−Ｏ（ＣＲ＊２）２−３Ｏ−、（式中、独立して出現する各Ｒ＊は、水素、以下に定義されるように置換されていてもよいＣ１−６脂肪族、ならびに、窒素、酸素、及び硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換の５〜６員の、飽和、部分不飽和、若しくはアリール環から選択される）を含む。
【０１１７】
Ｒ＊の脂肪族基上の好適な置換基は、独立してハロゲン、−Ｒ●、−（ハロＲ●）、−ＯＨ、−ＯＲ●、−Ｏ（ハロＲ●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−ＮＨ２、−ＮＨＲ●、−ＮＲ●２、または−ＮＯ２であり、式中、各Ｒ●は、非置換であるか、または「ハロ」が前に付く場合には１個以上のハロゲンでのみ置換され、及び独立して、Ｃ１−４脂肪族、−ＣＨ２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ２）０−１Ｐｈ、または窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の、飽和、部分不飽和もしくはアリールの環である。
【０１１８】
部分不飽和：本明細書で使用される「部分不飽和」という用語は、少なくとも１つの二重または三重結合を含む部分を指す。「部分不飽和」という用語は、不飽和の複数の部位を有する環を含むことが意図されるが、本明細書に定義されるアリール部分及びヘテロアリール部分のいずれも含むことを意図するものではない。
【０１１９】
ＲＮＡ干渉：本明細書で使用される「ＲＮＡ干渉」または「ＲＮＡｉ」という用語は、ＲＩＳＣ（ＲＮＡ誘導型サイレンシング複合体）が関与する、転写後の標的遺伝子サイレンシングプロセスを指す。報告によれば、より長いｄｓＲＮＡがリボヌクレアーゼＩＩＩ（Ｄｉｃｅｒ）によって切断されて、ｓｉＲＮＡと呼ばれる、より短い断片へと変換されると、ＲＮＡｉのプロセスが天然に生じる。天然に生成するｓｉＲＮＡ（低分子干渉ＲＮＡ）は、典型的には、長さが約２１〜２３ヌクレオチドであり、約１９塩基対の二重鎖及び２つの一本鎖オーバーハングを有し、典型的には、ＲＮＡである。報告によれば、こうしたＲＮＡセグメントは、次に、標的核酸（ｍＲＮＡまたはｍＲＮＡ前駆体（ｐｒｅ−ｍＲＮＡ）など）の分解を誘導する。報告によれば、Ｄｉｃｅｒは、翻訳制御に関与する保存された構造を有する前駆体ＲＮＡから２１ヌクレオチド及び２２ヌクレオチドの小分子ＲＮＡ（ｓｔＲＮＡ）を切り出すことにも関与している。Ｈｕｔｖａｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２００１，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９３，８３４。ＲＮＡｉは、標的配列（たとえば、標的ｍＲＮＡにおけるもの）に相補的または実質的に相補的な配列を含む一本鎖または二本鎖のオリゴヌクレオチドによって媒介され得ることが当業者に知られている。したがって、本開示の実施形態の一部では、本明細書に記載の一本鎖オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡｉ剤として働き得るものであり、一部の実施形態では、本明細書に記載の二本鎖オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡｉ剤として働き得るものである。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ応答には、ＲＮＡ誘導型サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）と一般に称されるエンドヌクレアーゼ複合体が関与し、ＲＩＳＣは、ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖に相補的な一本鎖ｍＲＮＡの切断を誘導する。一部の実施形態では、ＲＩＳＣは、一本鎖ＲＮＡｉ剤として機能し得る提供されるオリゴヌクレオチドに相補的な標的ＲＮＡの切断を誘導する。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ二重鎖ＲＮＡｉ剤またはｓｉＲＮＡ一本鎖ＲＮＡｉ剤のアンチセンス鎖に相補的な領域の中央で標的ＲＮＡの切断が生じる。一部の実施形態では、ＲＩＳＣ経路が関与する機序においてＲＮＡ干渉を誘導し得る一本鎖ＲＮＡｉ剤として働く一本鎖オリゴヌクレオチドによってＲＮＡ干渉が誘導される。
【０１２０】
ＲＮＡｉ剤：本明細書で使用される「ＲＮＡｉ剤」、「ｉＲＮＡ剤」という用語、及び同様のものは、標的遺伝子産物（たとえば、標的遺伝子の転写産物（ｍＲＮＡ前駆体（ｐｒｅ−ｍＲＮＡ）またはｍＲＮＡなど））が発現中の系または発現する系に投与されると、その標的遺伝子産物のレベル及び／または活性（たとえば、翻訳）を低減するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを指す。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、一本鎖オリゴヌクレオチドもしくは二本鎖オリゴヌクレオチドであるか、または一本鎖オリゴヌクレオチドもしくは二本鎖オリゴヌクレオチドを含み得る。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、ｓｉＲＮＡ（短鎖阻害性ＲＮＡ）、ｓｈＲＮＡ（短鎖ヘアピンＲＮＡまたは低分子ヘアピンＲＮＡ）、ｄｓＲＮＡ（二本鎖ＲＮＡ）、マイクロＲＮＡなどとして当該技術分野において認識される構造を有し得る。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、ＲＮＡ標的（たとえば、標的遺伝子の転写産物）に特異的に結合し得る。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、その標的に結合すると、ＲＩＳＣ（ＲＮＡ誘導型サイレンシング複合体）に組み込まれる。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、その標的の分解を誘導し、及び／またはその標的の翻訳を抑制し、こうした誘導及び抑制は、一部の実施形態では、ＲＩＳＣ（ＲＮＡ誘導型サイレンシング複合体）経路が関与する機序を介して生じる。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、ＲＩＳＣ複合体／経路を活性化するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、アンチセンス鎖配列を含む。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、（たとえば、一本鎖オリゴヌクレオチドである）オリゴヌクレオチド鎖を１つのみ含む。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤オリゴヌクレオチドは、センス鎖配列もしくはアンチセンス鎖配列であるか、またはセンス鎖配列もしくはアンチセンス鎖配列を含み得、このことは、Ｓｉｏｕｄ  ２００５  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４８：１０７９−１０９０によって説明されている。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する化合物である。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、「正統な」ｓｉＲＮＡ構造に見られる構造または形式を有し得る。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、「正統な」ｓｉＲＮＡ構造とは異なる構造を有し得る。例を少数挙げるにすぎないが、一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、正統なものと比較して長いかまたは短くあり得、平滑末端を有し得、及び／または１つ以上の修飾、ミスマッチ、ギャップ、及び／またはヌクレオチドの置き換えを含み得る。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、本開示に記載の３’末端キャップを含む。いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、出願人は、一部の実施形態では、３’末端キャップによって、以下の２つの機能の両方が可能になり得ることを提唱する：（１）ＲＮＡ干渉の実現、ならびに（２）活性の持続時間及び／または生物学的半減期の長期化（こうしたことは、たとえば、ＤｉｃｅｒのＰＡＺドメイン及び／または１つ以上のＡｇｏタンパク質のＰＡＺドメインへの結合増加、及び／またはＲＮＡｉ剤の分解（たとえば、ヌクレアーゼ（血清もしくは腸液におけるも��など）によるもの）の低減もしくは阻止、によって達成され得る）。一部の実施形態では、本開示のＲＮＡｉ剤は、標的ｍＲＮＡを標的とする（たとえば、標的ｍＲＮＡに結合、アニーリングなどする）。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤がその標的に曝露されると、標的の活性、レベル、及び／または発現が減少し、たとえば、標的が「ノックダウン」または「ノックアウト」される。具体的には、一部の実施形態では、疾患、障害、及び／または状態が、標的遺伝子の過剰発現及び／または活性亢進によって特徴付けられるものである場合、細胞、組織、または対象にＲＮＡｉ剤を投与することで、活性を正常なレベルに回復させる上で十分であるか、あるいは疾患、障害、及び／または疾患状態、障害状態、及び／または状態の１つ以上の症状または特徴の軽減、寛解、緩和、抑制、予防、発症遅延、重篤度低減、及び／または発症率低減が可能なレベルにまで活性を低減する上で十分なほどに、標的遺伝子がノックダウンされる。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、本明細書に記載の一本鎖ＲＮＡｉ剤であるアンチセンス鎖をセンス鎖と組み合わせて含む二本鎖であり、このアンチセンス鎖は、センス鎖と組み合わさって、ＲＮＡ干渉を誘導できるものである。
【０１２１】
一本鎖ＲＮＡ干渉：本明細書で使用される「一本鎖ＲＮＡｉ」もしくは「一本鎖ＲＮＡ干渉」という表現または同様のものは、一本鎖ＲＮＡｉ剤を、その剤によってＲＮＡｉが誘導されるべき系（たとえば、細胞、組織、臓器、対象など）に投与することによって少なくとも部分的に誘導され、かつＲＩＳＣ経路を必要とする遺伝子サイレンシングのプロセスまたは方法を指す。これらの用語は、「二本鎖ＲＮＡｉ」または「二本鎖ＲＮＡ干渉」と区別するために、ある特定の場合に、本明細書で利用され得るものであり、「二本鎖ＲＮＡｉ」または「二本鎖ＲＮＡ干渉」では、二本鎖ＲＮＡｉ剤が系に投与され、さらにプロセッシングを受け得る結果、たとえば、その２つの鎖のうちの１つがＲＩＳＣに組み込まれることで、たとえば、翻訳の抑制、標的ＲＮＡの切断などが生じる。
【０１２２】
一本鎖ＲＮＡｉ剤：本明細書で使用される「一本鎖ＲＮＡｉ剤」という表現は、ＲＩＳＣ経路を介して一本鎖ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉもしくはｉＲＮＡ）または遺伝子サイレンシングを誘導することができる一本鎖オリゴヌクレオチドを指す。一本鎖ＲＮＡｉ剤は、１つ以上の一本鎖ヌクレオチドのポリマーを含み得る。
【０１２３】
対象：本明細書で使用される「対象」または「被験対象」という用語は、たとえば実験目的、診断目的、予防目的、及び／または治療目的のために、提供される化合物または組成物が本開示に従って投与される任意の生物体を指す。典型的な対象としては、動物（たとえば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、及びヒトなどの哺乳類；昆虫；蠕虫；他など）及び植物が挙げられる。一部の実施形態では、対象は、疾患、障害、及び／または状態に罹患、及び／または感受性があってもよい。
【０１２４】
実質的：本明細書において使用される場合、「実質的」という用語は、対象の特徴または特性の全て、もしくはほとんど全ての範囲または程度を示す定性的状態を指す。第２の配列に実質的に相補的な塩基配列は、第２の配列と同一ではないが、第２の配列とほとんどまたはほぼ同一である。さらに、当生物学分野の当業者であれば、生物学的現象及び化学的現象が、めったに完結まで行かないこと、及び／または完了まで進行しないこと、または絶対的帰結を達成もしくは回避しないことを理解するであろう。従って、「実質的」という用語は、多くの生物学的減少及び／または化学的現象に本来備わる完全性の潜在的欠如を取り込むために、本明細書で使用される。
【０１２５】
罹患している：疾患、障害、及び／または状態を「罹患している」個体は、疾患、障害、及び／または状態の１種以上の症状を有すると診断された、及び／または示している。
【０１２６】
感受性がある：疾患、障害、及び／または状態に対し「感受性がある」個体は、一般社会の個体よりも、当該疾患、障害、及び／または状態を発生させるリスクが高い個体である。一部の実施形態では、疾患、障害、及び／または状態に対し感受性がある個体は、当該疾患、障害、及び／または状態を有すると診断されていなくてもよい。一部の実施形態では、疾患、障害、及び／または状態に対し感受性がある個体は、当該疾患、障害、及び／または状態の症状を示してもよい。一部の実施形態では、疾患、障害、及び／または状態に対し感受性がある個体は、当該疾患、障害、及び／または状態の症状を示さなくてもよい。一部の実施形態では、疾患、障害、及び／または状態に対し感受性がある個体は、当該疾患、障害、及び／または状態を発生させるであろう。一部の実施形態では、疾患、障害、及び／または状態に対し感受性がある個体は、当該疾患、障害、及び／または状態を発生させないであろう。
【０１２７】
全身的：本明細書において使用される場合、「全身的投与」、「全身的に投与された」、「末梢的投与」、及び「末梢的に投与された」という表現は、レシピエントの全身に入るように化合物または組成物を投与することを指す、当該技術分野で理解される意味を有する。
【０１２８】
治療剤：本明細書において使用される場合、「治療剤」という表現は、対象に投与されたとき、治療効果を有する、ならびに／または所望の生物学的作用及び／もしくは薬理学的作用を惹起する任意の剤を指す。一部の実施形態では、治療剤を使用して、疾患、障害、及び／または状態の１つ以上の症状もしくは特徴を、緩和、改善、軽減、阻害、予防、発生遅延、重篤度を低下、及び／または発生率を低下させることができる任意の物質である。
【０１２９】
治療有効量：本明細書において使用される場合、「治療有効量」という語は、治療レジメンの一部として投与されるとき、所望の生物学的応答を惹起する物質（たとえば、治療剤、組成物、及び／または製剤）の量を意味する。一部の実施形態では、物質の治療有効量は、疾患、障害、及び／または状態に罹患する、または感受性のある対象に投与するとき、当該疾患、障害、及び／または状態を治療、診断、予防、及び／または発生を遅延するために十分な量である。当業者により認識されるように、物質の有効量は、所望の生物学的エンドポイント、送達される物質、標的の細胞または組織などの要因に依存して変化し得る。例えば、疾患、障害、及び／または状態を治療するための製剤中の化合物の有効量は、当該疾患、障害、及び／または状態の１つ以上の症状または特徴を、緩和、改善、軽減、阻害、予防、発生遅延、重篤度を低下、及び／または発生率を低下させる量である。一部の実施形態では、治療有効量は、単回投与で投与される。一部の実施形態では、複数の単位用量が、治療有効量を送達するために必要である。
【０１３０】
治療する：本明細書において使用される場合、「治療する」、「治療」または「治療すること」という用語は、疾患、障害、及び／または状態の１つ以上の症状または特徴を、部分的にもしくは完全に、緩和、改善、軽減、阻害、予防、発生遅延、重篤度を低下、及び／または発生率を低下させるために使用される任意の方法を指す。治療は、疾患、障害、及び／または状態の兆候を示さない対象に対して行われる場合がある。一部の実施形態では、たとえば疾患、障害、及び／または状態に関連した病態を発生させるリスクを低下させる目的で、当該疾患、障害、及び／または状態の初期兆候のみを示す対象に投与される場合もある。
【０１３１】
不飽和：本明細書で使用される「不飽和」という用語は、部分が１つまたは複数の不飽和単位を有することを意味する。
【０１３２】
野生型：本明細書において使用される場合、「野生型」という用語は、（突然変異の、疾患性の、改変された等とは対照的に）「正常な」状態または状況において、自然界に存在する構造及び／または活性を有する実体を表す、当該技術分野で理解される意味を有する。当業者であれば、野生型の遺伝子及びポリペプチドが、しばしば、複数の異なる形態（例えば、アレル）で存在することを認識するだろう。
【０１３３】
核酸：本明細書において使用される場合、「核酸」という用語は、任意のヌクレオチド及びそのポリマーを含む。本明細書において使用される場合、「ポリヌクレオチド」という用語は、リボヌクレオチド（ＲＮＡ）またはデオキシリボヌクレオチド（ＤＮＡ）のいずれかの任意の長さのヌクレオチドの多量体型を指す。これらの用語は、当該分子の一次構造を指しており、従って、二本鎖及び一本鎖のＤＮＡ、及び二本鎖及び一本鎖のＲＮＡを含む。これらの用語は、均等物として、限定されないが、メチル化、保護化及び／もしくはキャップ化されたヌクレオチドまたはポリヌクレオチドなどの修飾ヌクレオチド及び／または修飾ポリヌクレオチドから作製されたＲＮＡあるいはＤＮＡいずれかのアナログを含む。当該用語は、ポリリボヌクレオチドまたはオリゴリボヌクレオチド（ＲＮＡ）、及びポリデオキシリボヌクレオチドまたはオリゴデオキシリボヌクレオチド（ＤＮＡ）；核酸塩基及び／もしくは修飾核酸塩基のＮグリコシドまたはＣグリコシドから誘導されたＲＮＡまたはＤＮＡ；糖類及び／または修飾糖類から誘導された核酸；ならびにリン酸架橋及び／もしくは修飾ヌクレオチド間結合から誘導された核酸、を包含する。当該用語は、核酸塩基、修飾核酸塩基、糖類、修飾糖類、リン酸架橋または修飾ヌクレオチド間結合のいずれかの組み合わせを含む核酸を包含する。例としては、限定されないが、リボース部分を含む核酸、デオキシリボース部分を含む核酸、リボース部分とデオキシリボース部分の両方を含む核酸、リボース部分と修飾リボース部分を含む核酸が挙げられる。別段の指定がない限り、接頭語のポリ‐は、２〜約１０，０００個のヌクレオチドモノマー単位を含む核酸を指し、接頭語のオリゴ‐は、２〜約２００個のヌクレオチドモノマー単位を含む核酸を指す。
【０１３４】
ヌクレオチド：本明細書において使用される場合、「ヌクレオチド」という用語は、複素環式塩基、糖、及び１つ以上のヌクレオチド間結合からなるポリヌクレオチドのモノマー単位を指す。天然塩基（グアニン（Ｇ）、アデニン（Ａ）、シトシン（Ｃ）、チミン（Ｔ）、及びウラシル（Ｕ））は、プリンまたはピリミジンの誘導体であるが、天然及び非天然の塩基アナログも含まれると理解すべきである。天然糖は、ペントース（五炭糖）のデオキシリボース（ＤＮＡを形成する）またはリボース（ＲＮＡを形成する）であるが、天然及び非天然の糖アナログも含まれると理解すべきである。ヌクレオチドは、ヌクレオチド間結合を介して結合して、核酸、またはポリヌクレオチドを形成する。多くのヌクレオチド間結合が当分野に公知である（限定されないが、たとえばリン酸塩、ホスホロチオエート、ボラノリン酸塩など）。人工核酸としては、ＰＮＡ（ペプチド核酸）、ホスホトリエステル、ホスホロチオナート、Ｈ−ホスホン酸塩、アミド亜リン酸塩、ボラノリン酸塩、メチルホスホン酸塩、ホスホノ酢酸塩、チオホスホノ酢酸塩、及び本明細書に記載されるものなど、天然核酸のリン酸骨格の他のバリアントが挙げられる。一部の実施形態では、天然のヌクレオチドは、天然起源の塩基、糖、及びヌクレオチド間結合を含む。本明細書で使用される「ヌクレオチド」という用語は、天然または天然起源のヌクレオチドの代わりに使用される構造アナログ（修飾ヌクレオチド及びヌクレオチドアナログなど）も包含する。
【０１３５】
修飾ヌクレオチド：「修飾ヌクレオチド」という用語は、天然のヌクレオチドとは構造的に異なるが、天然のヌクレオチドの少なくとも１つの機能を発揮する能力を有する任意の化学的部分を含む。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチドは、糖、塩基、及び／またはヌクレオチド間結合に修飾を含む。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチドは、修飾糖、修飾核酸塩基、及び／または修飾ヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチドは、ヌクレオチドの少なくとも１つの機能を発揮する能力を有し、こうした機能は、たとえば、少なくとも相補的な塩基配列を含む核酸と塩基対を形成する能力を有するポリマーのサブ単位を形成することである。
【０１３６】
アナログ：「アナログ」という用語は、化学的部分が参照の化学的部分または参照クラスの部分とは構造的に異なるが、そのような参照の化学的部分または参照クラスの部分の少なくとも１つの機能を発揮する能力を有する任意の機能的アナログを意味する。非限定的な例としては、ヌクレオチドアナログは、ヌクレオチドとは構造的に異なるが、ヌクレオチドの少なくとも１つの機能を発揮し、核酸塩基アナログは、核酸塩基とは構造的に異なるが、核酸塩基の少なくとも１つの機能を発揮することなどが挙げられる。
【０１３７】
ヌクレオシド：「ヌクレオシド」という用語は、核酸塩基または修飾核酸塩基が、糖または修飾糖に共有結合される部分を指す。
【０１３８】
修飾ヌクレオシド：「修飾ヌクレオシド」という用語は、天然のヌクレオシドに由来す部分または天然のヌクレオシドと化学的に類似する部分であるが、その部分を天然のヌクレオシドとは異なるものにする化学修飾を含む部分を指す。修飾ヌクレオシドの非限定的な例としては、塩基及び／または糖に修飾を含むものが挙げられる。修飾ヌクレオシドの非限定的な例としては、糖に２’修飾を有するものが挙げられる。修飾ヌクレオシドの非限定的な例としては、脱塩基ヌクレオシド（核酸塩基を欠くもの）も挙げられる。一部の実施形態では、修飾ヌクレオシドは、ヌクレオシドの少なくとも１つの機能を発揮する能力を有し、こうした機能は、たとえば、少なくとも相補的な塩基配列を含む核酸と塩基対を形成する能力を有するポリマーの一部分を形成することである。
【０１３９】
ヌクレオシドアナログ：「ヌクレオシドアナログ」という用語は、天然のヌクレオシドとは化学的に異なるが、ヌクレオシドの少なくとも１つの機能を発揮する能力を有する化学的部分を指す。一部の実施形態では、ヌクレオシドアナログは、糖のアナログ及び／または核酸塩基のアナログを含む。一部の実施形態では、修飾ヌクレオシドは、ヌクレオシドの少なくとも１つの機能を発揮する能力を有し、こうした機能は、たとえば、相補的な塩基配列を含む核酸と塩基対を形成する能力を有するポリマーの一部分を形成することである。
【０１４０】
糖：「糖」という用語は、閉状態及び／または開状態の単糖類または多糖類を指す。一部の実施形態では、糖は、単糖類である。一部の実施形態では、糖は、多糖類である。糖類としては、リボース、デオキシリボース、ペントフラノース、ペントピラノース、及びヘキソピラノース部分を挙げられるが、これらに限定されない。本明細書において使用される場合、「糖」という用語は、たとえばグリコールなど、従来的な糖分子に代わり使用される構造アナログも包含し、そのポリマーは、核酸アナログのグリコール核酸（ＧＮＡ）などの骨格を形成する。本明細書で使用される「糖」という用語は、天然または天然起源のヌクレオチドの代わりに使用される構造アナログ（修飾糖及びヌクレオチド糖など）も包含する。
【０１４１】
修飾糖：「修飾糖」という用語は、糖を置き換えることができる部分を指す。修飾糖は、空間配置、電子状態、または糖の他のなんらかの物理化学的特性を模倣する。
【０１４２】
核酸塩基：「核酸塩基」という用語は、配列特異的な様式で１つの核酸鎖を別の相補的な鎖に結合する水素結合に関与する核酸の部分を指す。もっとも一般的な天然核酸塩基は、アデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）、ウラシル（Ｕ）、シトシン（Ｃ）、及びチミン（Ｔ）である。一部の実施形態では、天然核酸塩基は、修飾されたアデニン、グアニン、ウラシル、シトシン、またはチミンである。一部の実施形態では、天然核酸塩基は、メチル化されたアデニン、グアニン、ウラシル、シトシン、またはチミンである。一部の実施形態では、核酸塩基は、たとえばアデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）、ウラシル（Ｕ）、シトシン（Ｃ）、及びチミン（Ｔ）以外の核酸塩基などの「修飾核酸塩基」である。一部の実施形態では、修飾核酸塩基は、メチル化されたアデニン、グアニン、ウラシル、シトシン、またはチミンである。一部の実施形態では、修飾核酸塩基模倣体は、空間配置、電子状態、または核酸塩基の他のなんらかの物理化学的特性を模倣し、配列特異的な様式で、１つの核酸鎖を別の核酸鎖に結合する水素結合の特性を保持する。一部の実施形態では、修飾核酸塩基は、融解挙動、細胞内酵素による認識、またはオリゴヌクレオチド二重鎖の活性に実質的に影響を及ぼすことなく、５種のすべての天然塩基（ウラシル、チミン、アデニン、シトシン、またはグアニン）と対形成することができる。本明細書で使用される「核酸塩基」という用語は、天然または天然起源のヌクレオチドの代わりに使用される構造アナログ（修飾核酸塩基及び核酸塩基アナログなど）も包含する。
【０１４３】
修飾核酸塩基：「修飾核酸塩基」、「修飾塩基」という用語、及び同様のものは、核酸塩基とは化学的に異なるが、核酸塩基の少なくとも１つの機能を発揮する能力を有する化学的部分を指す。一部の実施形態では、修飾核酸塩基は、修飾を含む核酸塩基である。一部の実施形態では、修飾核酸塩基は、核酸塩基の少なくとも１つの機能を発揮する能力を有し、こうした機能は、たとえば、少なくとも相補的な塩基配列を含む核酸と塩基対を形成する能力を有するポリマーの一部分を形成することである。
【０１４４】
３’末端キャップ：「３’末端キャップ」という用語は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド（たとえば、ＲＮＡｉ剤）の３’末端に結合した非ヌクレオチドの化学的部分を指す。一部の実施形態では、３’末端ジヌクレオチドが３’末端キャップによって置き換えられ得る。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの３’末端キャップは、下記の機能のうちの少なくとも１つの機能を発揮する：オリゴヌクレオチドによって誘導されるＲＮＡ干渉の実現、オリゴヌクレオチドの分解からのオリゴヌクレオチドの保護またはオリゴヌクレオチドの分解量もしくは分解速度の低減（こうした分解は、たとえば、ヌクレアーゼによるものである）、センス鎖のオフターゲット効果の低減、あるいはオリゴヌクレオチドによって誘導されるＲＮＡ干渉の活性、持続時間、または効率の増進。３’末端キャップが「非ヌクレオチド」として記載される場合、３’末端キャップは、ヌクレオチド部分またはオリゴヌクレオチド部分ではなく、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの残りの糖部分に連結されるものであり、この連結は、３’末端キャップをＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド鎖の一部と仮定した場合と同様に行われることが意図される。３’末端キャップのある特定の例は、本明細書に記載される。当業者であれば、当該技術分野に知られる他の３’末端キャップを、本開示に従って利用できることを理解する。
【０１４５】
ブロッキング基：「ブロッキング基」という用語は、官能基の反応性を覆い隠す基を指す。その後、官能基はブロッキング基の除去により覆いを取り払われてもよい。一部の実施形態では、ブロッキング基は、保護基である。
【０１４６】
部分：「部分」という用語は、分子の官能基の特定のセグメントを指す。化学的部分は、分子中に組み込まれた、または分子に付加された、広く認識されている化学的実体である。
【０１４７】
固形支持体：「固形支持体」という用語は、核酸合成を可能とする任意の支持体を指す。一部の実施形態では、当該用語は、ガラスまたはポリマーを指し、それらは核酸を合成するために実施される反応ステップにおいて利用される培地中で不溶性であり、そして誘導体化されて反応基を含む。一部の実施形態では、固形支持体は、高度架橋ポリスチレン（ＨＣＰ：Ｈｉｇｈｌｙ  Ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｅｄ  Ｐｏｌｙｓｔｙｒｅｎｅ）または制御ポアガラス（ＣＰＧ：Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｐｏｒｅ  Ｇｌａｓｓ）である。一部の実施形態では、固形支持体は、制御ポアガラス（ＣＰＧ）である。一部の実施形態では、固形支持体は、制御ポアガラス（ＣＰＧ）と高度架橋ポリスチレン（ＨＣＰ）のハイブリッド支持体である。
【０１４８】
リンカーまたは結合部分：「リンカー」、「結合部分」という用語、及び同様のものは、一方の化学的部分をもう一方に連結する任意の化学的部分を指す。一部の実施形態では、リンカーは、多量体において一方のオリゴヌクレオチドをもう一方のオリゴヌクレオチドに連結する部分である。一部の実施形態では、リンカーは、末端ヌクレオシドと固形支持体との間、または末端ヌクレオシドと別のヌクレオシド、ヌクレオチド、または核酸との間、に任意で配置される部分である。
【０１４９】
遺伝子：本明細書で使用される「遺伝子」、「組換え遺伝子」、及び「遺伝子構築物」という用語は、タンパク質またはその一部をコードするＤＮＡ分子またはＤＮＡ分子の一部を指す。ＤＮＡ分子は、（エクソン配列として）タンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含み得ることに加えて、イントロン配列をさらに含有し得る。本明細書で使用される「イントロン」という用語は、所与の遺伝子に存在するＤＮＡ配列であって、タンパク質に翻訳されず、すべての場合ではないが、場合によってはエクソン間に見られるＤＮＡ配列を指す。１つ以上のプロモーター、エンハンサー、リプレッサー、及び／または他の制御性配列に遺伝子が機能可能なように連結されことで（または遺伝子がこうしたものを含み得ることで）、当該遺伝子の活性または発現が調節されることが望ましくあり得、このことは、当該技術分野においてよく知られている。
【０１５０】
相補的ＤＮＡ：本明細書で使用される「相補的ＤＮＡ」または「ｃＤＮＡ」は、ｍＲＮＡの逆転写によって合成される組換えポリヌクレオチドであって、介在配列（イントロン）が除去されている組換えポリヌクレオチドを含む。
【０１５１】
オリゴヌクレオチド：「オリゴヌクレオチド」という用語は、ヌクレオチドのポリマーまたはオリゴマーを指し、天然及び非天然の核酸塩基、糖、及びヌクレオチド間結合の任意の組み合わせを含有し得る。
【０１５２】
オリゴヌクレオチドは、一本鎖または二本鎖であってもよい。本明細書において使用される場合、「オリゴヌクレオチド鎖」という用語は、一本鎖オリゴヌクレオチドを包含する。一本鎖オリゴヌクレオチドは、二本鎖領域（一本鎖オリゴヌクレオチドの２つの部分によって形成される）を有してもよく、二本鎖オリゴヌクレオチド（２つのオリゴヌクレオチド鎖を含む）は、一本鎖領域を有してもよく、こうした一本鎖領域は、たとえば、２つのオリゴヌクレオチド鎖が互いに相補的ではない領域におけるものである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣが関与しない生化学的機序（限定されないが、遺伝子発現のＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたは立体障害が挙げられる）を介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。オリゴヌクレオチドの例としては、構造遺伝子、制御領域及び終結領域を含む遺伝子、たとえばウイルスＤＮＡまたはプラスミドＤＮＡなどの自己複製系、一本鎖ＲＮＡｉ剤及び二本鎖ＲＮＡｉ剤ならびに他のＲＮＡ干渉試薬（ＲＮＡｉ剤またはｉＲＮＡ剤）、ｓｈＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、マイクロＲＮＡ模倣体、スーパーマイクロＲＮＡ（ｓｕｐｅｒｍｉｒｓ）、アプタマー、抗マイクロＲＮＡ（ａｎｔｉｍｉｒｓ）、アンタゴマイクロＲＮＡ（ａｎｔａｇｏｍｉｒ）、Ｕｌアダプター、三重鎖形成性オリゴヌクレオチド、グアニン四重鎖オリゴヌクレオチド、ＲＮＡアクチベーター、免疫賦活性オリゴヌクレオチド、及びデコイオリゴヌクレオチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１５３】
ＲＮＡ干渉の誘導に有効である二本鎖及び一本鎖のオリゴヌクレオチドは、本明細書中、ＲＮＡｉ剤またはｉＲＮＡ剤とも呼称される。一部の実施形態では、これらのＲＮＡ干渉誘導オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡｉ誘導型サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）として知られる細胞質マルチタンパク質複合体と関連する。多くの実施形態では、二本鎖ＲＮＡｉ剤は充分に長く、それにより内因性分子、たとえばＤｉｃｅｒにより切断されて、より小さなオリゴヌクレオチドが生成され、それらがＲＩＳＣ機序へと入り、標的配列、たとえば、標的ｍＲＮＡ配列のＲＩＳＣ介在性の切断及び／または翻訳抑制に関与することができる。
【０１５４】
本開示のオリゴヌクレオチドは、様々な長さのものであってもよい。特定の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、約２〜約２００ヌクレオチドの長さの範囲であってもよい。様々な関連実施形態では、一本鎖、二本鎖、及び三本鎖のオリゴヌクレオチドは、約４〜約１０ヌクレオチド、約１０〜約５０ヌクレオチド、約２０〜約５０ヌクレオチド、約１５〜約３０ヌクレオチド、または約２０〜約３０ヌクレオチドの長さの範囲であってもよい。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、約１０〜約４０ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、約９〜約３９ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも４ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも５ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも６ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも７ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも８ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも９ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１０ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１１ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１２ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１５ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも２０ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも２５ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも３０ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１８ヌクレオチドの長さの相補二重鎖である。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも２１ヌクレオチドの長さの相補二重鎖である。一部の実施形態では、長さが数えられるヌクレオチドはそれぞれ、アデニン、シトシン、グアノシン、チミン、及びウラシルから選択される任意で置換される核酸塩基を独立して含む。
【０１５５】
ヌクレオチド間結合：本明細書において使用される場合、「ヌクレオチド間結合」という表現は概して、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは核酸のヌクレオシド単位を連結する結合を指す。一部の実施形態では、ヌクレオチド間結合は、天然起源のＤＮＡ分子及びＲＮＡ分子中に見られるホスホジエステル結合（天然リン酸結合）である。一部の実施形態において、「ヌクレオチド間結合」という用語は、修飾ヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、ヌクレオチド間結合は、「修飾ヌクレオチド間結合」であり、ここで、ホスホジエステル結合の各酸素原子は任意で、及び独立して有機部分または無機部分により置き換えられる。一部の実施形態では、かかる有機部分または無機部分は、限定されないが、＝Ｓ、＝Ｓｅ、＝ＮＲ’、−ＳＲ’、−ＳｅＲ’、−Ｎ（Ｒ’）２、Ｂ（Ｒ’）３、−Ｓ−、−Ｓｅ−、及び−Ｎ（Ｒ’）−から選択され、式中、各Ｒ’は、本開示に規定され、記載されるとおりである。一部の実施形態では、ヌクレオチド間結合は、ホスホトリエステル結合、ホスホロチオエートジエステル結合
【化１】
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または修飾ホスホロチオエートトリエステル結合である。
【０１５６】
当業者であれば、ヌクレオチド間結合は、当該結合中の酸性部分または塩基性部分の存在によって、所与のｐＨでアニオンまたはカチオンとして存在し得ることを理解する。
【０１５７】
一部の実施形態では、「全（Ａｌｌ）‐（Ｒｐ）」または「全−（Ｓｐ」は、オリゴヌクレオチドのすべてのキラル結合リン原子が、それぞれ、同じＲｐまたはＳｐの立体配置を有することを示すために使用される。
【０１５８】
オリゴヌクレオチド型：本明細書において使用される場合、「オリゴヌクレオチド型」という表現は、特定の塩基配列、骨格結合パターン（すなわち、ヌクレオチド間結合型のパターン、例えば、リン酸、ホスホロチオエートなど）、骨格キラル中心パターン（すなわち、結合リン立体化学のパターン（Ｒｐ／Ｓｐ））、及び骨格リン修飾のパターン（たとえば、式Ｉの「−ＸＬＲ１」基のパターン）を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを定義するために使用される。一部の実施形態では、共通に指定される「型」のオリゴヌクレオチドは、互いに構造的に同一である。
【０１５９】
当業者であれば、本開示の合成方法が、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド鎖合成を行う間にある程度の制御をもたらし、それにより当該オリゴヌクレオチド鎖の各ヌクレオチド単位が、結合リンで特定の立体化学及び／もしくは結合リンで特定の修飾、ならびに／または特定の塩基、ならびに／または特定の糖を有するようにあらかじめ設計可能及び／または選択可能であることを認識するであろう。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド鎖は、結合リンで特定の組み合わせの立体中心を有するように前もって設計及び／または選択される。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド鎖は、結合リンで特定の組み合わせの修飾を有するように、設計され及び／または決定される。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド鎖は、特定の組み合わせの塩基を有するように、設計され及び／または選択される。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド鎖は、上述の構造特性のうちの１つ以上の特定の組み合わせを有するように、設計及び／または選択される。一部の実施形態では、本開示は、複数のオリゴヌクレオチド分子を含む、またはからなる組成物を提供する（たとえばキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物）。一部の実施形態では、かかる分子のすべてが同じ型の分子である（すなわち、そのような分子はすべて、構造的に互いに同一である）。しかしながら、多くの実施形態では、提供される組成物は異なる型の複数のオリゴヌクレオチドを、典型的には所定の相対量で含む。
【０１６０】
キラル制御：本明細書において使用される場合、「キラル制御」とは、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド内のキラルヌクレオチド間結合中のキラル結合リンの立体化学指定の制御を指す。一部の実施形態では、制御は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの糖部分と塩基部分に無いキラル要素を介して達成される。たとえば一部の実施形態では、制御は、本開示において例示されるように、オリゴヌクレオチド調製の間に１つ以上のキラル補助基を使用して達成され、こうしたキラル補助基は、オリゴヌクレオチド調製の間に使用されるキラルホスホロアミダイトの一部であることが多い。キラル制御とは対照的に、当業者であれば、キラル補助基を使用しない従来的なオリゴヌクレオチド合成では、当該従来的なオリゴヌクレオチド合成を使用してキラルヌクレオチド間結合を形成させた場合に、キラルヌクレオチド間結合で立体化学を制御することができないことを認識する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド内のキラルヌクレオチド間結合におけるそれぞれのキラル結合リンの立体化学指定が制御される。
【０１６１】
キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物：本明細書において使用される場合、「キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物」、「キラル制御された核酸組成物」などの用語は、１）共通塩基配列、２）骨格結合の共通パターン、及び３）骨格リン修飾の共通パターンを共有する複数のオリゴヌクレオチド（または核酸）を含む組成物を指し、ここで、当該複数のオリゴヌクレオチド（または核酸）は、１つ以上のキラルヌクレオチド間結合（キラル制御されたヌクレオチド間結合）で同じ立体化学を共有し、及び当該組成物中の複数のオリゴヌクレオチド（または核酸）のレベルは、前もって決定されている（こうしたことは、たとえば、１つ以上のキラルヌクレオチド間結合を形成するためのキラル制御されたオリゴヌクレオチド調製を介して行われる）。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物におけるすべてのオリゴヌクレオチドの約１％〜１００％（たとえば、約５％〜１００％、約１０％〜１００％、約２０％〜１００％、約３０％〜１００％、約４０％〜１００％、約５０％〜１００％、約６０％〜１００％、約７０％〜１００％、約８０〜１００％、約９０〜１００％、約９５〜１００％、約５０％〜９０％、または約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％、あるいは少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）が当該複数のオリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物における、共通塩基配列を共有するすべてのオリゴヌクレオチドの約１％〜１００％（たとえば、約５％〜１００％、約１０％〜１００％、約２０％〜１００％、約３０％〜１００％、約４０％〜１００％、約５０％〜１００％、約６０％〜１００％、約７０％〜１００％、約８０〜１００％、約９０〜１００％、約９５〜１００％、約５０％〜９０％、または約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％、あるいは少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）が当該複数のオリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物における、共通塩基配列、骨格結合の共通パターン、及び骨格リン修飾の共通パターンを共有するすべてのオリゴヌクレオチドの約１％〜１００％（たとえば、約５％〜１００％、約１０％〜１００％、約２０％〜１００％、約３０％〜１００％、約４０％〜１００％、約５０％〜１００％、約６０％〜１００％、約７０％〜１００％、約８０〜１００％、約９０〜１００％、約９５〜１００％、約５０％〜９０％、または約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％、あるいは少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）が当該複数のオリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、所定レベルは、組成物におけるすべてのオリゴヌクレオチド、あるいは共通塩基配列（たとえば、複数のオリゴヌクレオチドのもの、またはある１つのＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型のもの）を共有する、組成物におけるすべてのオリゴヌクレオチド、あるいは共通塩基配列、骨格結合の共通パターン、及び骨格リン修飾の共通パターンを共有する、組成物におけるすべてのオリゴヌクレオチド、あるいは共通塩基配列、塩基修飾の共通パターン、糖修飾の共通パターン、ヌクレオチド間結合型の共通パターン、及び／またはヌクレオチド間結合修飾の共通パターンを共有する、組成物におけるすべてのオリゴヌクレオチド、の約１％〜１００％（たとえば、約５％〜１００％、約１０％〜１００％、約２０％〜１００％、約３０％〜１００％、約４０％〜１００％、約５０％〜１００％、約６０％〜１００％、約７０％〜１００％、約８０〜１００％、約９０〜１００％、約９５〜１００％、約５０％〜９０％、または約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、もしくは約９９％、あるいは少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）が当該複数のオリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、複数のオリゴヌクレオチドは、１〜５０個（たとえば、約１〜１０個、約１〜２０個、約５〜１０個、約５〜２０個、約１０〜１５個、約１０〜２０個、約１０〜２５個、約１０〜３０個、約または約１つ、約２つ、約３つ、約４つ、約５つ、約６つ、約７つ、約８つ、約９つ、約１０個、約１１個、約１２個、約１３個、約１４個、約１５個、約１６個、約１７個、約１８個、約１９個、もしくは約２０個、または少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、少なくとも８つ、少なくとも９つ、少なくとも１０個、少なくとも１１個、少なくとも１２個、少なくとも１３個、少なくとも１４個、少なくとも１５個、少なくとも１６個、少なくとも１７個、少なくとも１８個、少なくとも１９個、もしくは少なくとも２０個）のキラルヌクレオチド間結合において同じ立体化学を共有する。一部の実施形態では、複数のオリゴヌクレオチドは、キラルヌクレオチド間結合の約１％〜１００％（たとえば、約５％〜１００％、約１０％〜１００％、約２０％〜１００％、約３０％〜１００％、約４０％〜１００％、約５０％〜１００％、約６０％〜１００％、約７０％〜１００％、約８０〜１００％、約９０〜１００％、約９５〜１００％、約５０％〜９０％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、もしくは約１００％、または少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくは少なくとも９９％）において同じ立体化学を共有する。一部の実施形態では、各キラルヌクレオチド間結合は、キラル制御されたヌクレオチド間結合であり、組成物は、完全にキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物である。一部の実施形態では、全てではないキラルヌクレオチド間結合が、キラル制御されたヌクレオチド間結合であり、組成物は、部分的にキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物である。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物は、所定レベルの個々のオリゴヌクレオチド型または核酸型を含む。たとえば一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物は、１つのオリゴヌクレオチド型を含む。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物は、２種以上のオリゴヌクレオチド型を含む。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物は、複数種のオリゴヌクレオチド型を含む。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物は、ある１つのオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドの組成物であり、当該組成物は、当該オリゴヌクレオチド型の複数のオリゴヌクレオチドを所定レベルで含む。
【０１６２】
キラル的に純粋：本明細書において使用される場合、「キラル的に純粋」という表現は、その中のすべてのオリゴヌクレオチドが、結合リンに関して単一のジアステレオマー形態で存在するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、たとえば、一本鎖ＲＮＡｉ剤の相対量を記載するために使用される。
【０１６３】
キラル的に均一：本明細書において使用される場合、「キラル的に均一」という表現は、その中のすべてのヌクレオチド単位が、結合リンで同じ立体化学を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド分子または型を記載するために使用される。たとえば、そのヌクレオチド単位がすべて結合リンでＲｐの立体化学を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、キラル的に均一である。同様に、そのヌクレオチド単位がすべて結合リンでＳｐの立体化学を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、キラル的に均一である。
【０１６４】
所定の：所定の（または前もって決定された）とは、たとえば制御されることなく無作為に発生する、または実現される事とは対照的に、意図的に選択されたことが意味される。当業者であれば、本明細書を読むことで、本開示が、オリゴヌクレオチド組成物に組み込まれる特定の化学及び／または立体化学の選択が可能となる技術を提供し、さらにかかる化学及び／または立体化学の特性を有するオリゴヌクレオチド組成物の調製制御を可能とする技術を提供することを理解するであろう。かかる提供される組成物は、本明細書に記載される場合、「所定」である。あるオリゴヌクレオチドを含有し得る組成物は、特定の化学及び／または立体化学を意図して生成するための制御がなされないプロセスを介してたまたま生成された組成物であり、これは「所定の」組成物ではない。一部の実施形態では、所定の組成物は、（たとえば制御されたプロセスの反復を介して）意図して再生産されることができる組成物である。一部の実施形態では、組成物中の複数のオリゴヌクレオチドの所定レベルとは、当該組成物中の複数のオリゴヌクレオチドの絶対量及び／または相対量（比率、割合など）が制御されていることを意味する。一部の実施形態では、組成物における複数のオリゴヌクレオチドの所定レベルは、キラル制御されたオリゴヌクレオチド調製を介して達成される。
【０１６５】
結合リン：本明細書において定義されるように、「結合リン」という表現は、言及される特定のリン原子が、ヌクレオチド間結合中に存在するリン原子であり、そのリン原子は、天然のＤＮＡ及びＲＮＡ中に存在するヌクレオチド間結合のホスホジエステルリン酸原子に相当することを示すために使用される。一部の実施形態では、結合リン原子は、修飾ヌクレオチド間結合中にあり、ここで、ホスホジエステル結合の各酸素原子は任意で、及び独立して有機部分または無機部分により置き換えられる。一部の実施形態では、結合リン原子は、式ＩのＰＬである。一部の実施形態では、結合リン原子は、キラルである。
【０１６６】
Ｐ−修飾：本明細書において使用される場合、「Ｐ−修飾」という用語は、立体化学的修飾以外の結合リンでの任意の修飾を指す。一部の実施形態では、Ｐ−修飾は、結合リンに共有結合した懸垂部分の付加、置換、または除去を含む。一部の実施形態では、「Ｐ−修飾」は、−Ｘ−Ｌ−Ｒ１であり、式中、Ｘ、Ｌ及びＲ１の各々は独立して本開示に定義され、記載されるとおりである。
【０１６７】
本開示の目的では、化学元素は、元素の周期表、ＣＡＳバージョン、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ，６７ｔｈ  Ｅｄ．，１９８６−８７の内表紙に従って特定される。
【０１６８】
本開示の化合物及び組成物に関し本明細書に記載される方法及び構造は、薬学的に許容可能な酸付加塩または塩基付加塩、ならびにこれら化合物及び組成物のすべての立体異性体にも適用される。
【０１６９】
ある特定の実施形態の詳細説明
合成オリゴヌクレオチドからは、さまざまな用途において有用な分子ツールが得られる。たとえば、オリゴヌクレオチドは、治療用途、診断用途、研究用途、及び新たなナノ材料用途において有用である。天然起源の核酸（たとえば、非修飾ＤＮＡまたは非修飾ＲＮＡ）の用途は、たとえば、こうした天然起源の核酸がエンドヌクレアーゼ及びエキソヌクレアーゼによる作用を受けやすいことによって限られている。したがって、こうした欠点を回避すべくさまざまな合成対応物が開発されている。こうした合成対応物としては、化学修飾（たとえば、塩基修飾、糖修飾、骨格修飾など）を含有する合成オリゴヌクレオチドが挙げられ、こうした化学修飾は、とりわけ、こうした分子の分解感受性を下げ、オリゴヌクレオチドの他の特性を改善するものである。構造的な観点からすれば、ヌクレオチド間リン酸結合を修飾するとキラリティーを導入できることに加えて、オリゴヌクレオチドの骨格を形成するリン原子の配置によって、オリゴヌクレオチドのある特定の特性が影響を受け得る。たとえば、アンチセンスオリゴヌクレオチドの特性（結合アフィニティ、相補的ＲＮＡへの配列特異的結合、ヌクレアーゼに対する安定性など）が、とりわけ、骨格リン原子のキラリティーによって影響を受けることがｉｎ  ｖｉｔｒｏの研究によって示されている。
【０１７０】
とりわけ、本開示は、オリゴヌクレオチドの構造的要素が、特性及び活性（たとえば、標的遺伝子の産物（転写産物及び／またはタンパク質）のレベルを低減するための安定性、特異性、選択性、活性など）に顕著な影響を与え得るという認識を含むものであり、こうした構造的要素は、化学修飾（たとえば、糖の修飾、塩基の修飾、及び／またはヌクレオチド間結合の修飾）またはそのパターン、脂質または他の部分への複合体化、及び／または立体化学［たとえば、骨格キラル中心（キラルヌクレオチド間結合）の立体化学、及び／またはそのパターン］などである。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの特性は、化学修飾（塩基の修飾、糖の修飾、及び／またはヌクレオチド間結合部分の修飾）、化学修飾パターン、立体化学、及び／または立体化学パターンを最適化することによって調整できる。
【０１７１】
一部の実施形態では、本開示は、構造的要素が制御されたオリゴヌクレオチド（化学修飾が制御され、及び／または骨格立体化学パターンが制御されたもの）を含むオリゴヌクレオチド組成物が、予想外の特性及び活性（限定されないが、本明細書に記載ものを含む）を与えることを示す。一部の実施形態では、化学修飾（たとえば、塩基修飾、糖修飾、ヌクレオチド間結合修飾など）またはそのパターンを有するオリゴヌクレオチドを含む、提供される組成物は、特性及び活性が改善されている。そのような改善される特性の非限定的な例としては、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少の誘導、及び／またはＲＮＡ干渉の誘導、及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの誘導、が挙げられる。一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉについての技術（たとえば、オリゴヌクレオチド、組成物、方法など）を提供する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ｓｓＲＮＡｉ剤である。
【０１７２】
一部の実施形態では、ＲＮＡ干渉は、報告によれば、転写後の標的遺伝子サイレンシング技術であり、この標的遺伝子サイレンシング技術では、ＲＩＳＣ（ＲＮＡ誘導型サイレンシング複合体）経路によって媒介される切断を生じさせるためにＲＮＡｉ剤が使用されることで、当該ＲＮＡｉ剤に相補的な配列を含むＲＮＡ（たとえば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）などの遺伝子転写産物）が標的とされる。天然では、報告によれば、長いｄｓＲＮＡ（二本鎖ＲＮＡ）（たとえば、哺乳類細胞に導入される外来ｄｓＲＮＡ）がリボヌクレアーゼＩＩＩ（Ｄｉｃｅｒ）によって切断されて、ｓｉＲＮＡと呼ばれる、より短い断片へと変換されると、ある型のＲＮＡｉが生じる。ｓｉＲＮＡ（低分子干渉ＲＮＡまたは短い阻害性ＲＮＡ）は、典型的には、約２１〜２３ヌクレオチドの長さを有し、約１９塩基対の二重鎖を含む。報告によれば、次に、より小さなＲＮＡセグメントによって標的ｍＲＮＡの分解が媒介される。報告によれば、ＲＮＡｉ応答は、ＲＮＡ誘導型サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）と一般に称されるエンドヌクレアーゼ複合体を特徴付けるものでもあり、ＲＩＳＣは、ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖に相補的な一本鎖ｍＲＮＡの切断を誘導する。報告によれば、ｓｉＲＮＡ二重鎖のアンチセンス鎖に相補的な領域の中央で標的ＲＮＡの切断が生じる。報告によれば、標的転写産物に対してＲＮＡｉ剤を使用すると、遺伝子の活性、レベル、及び／または発現が減少し、たとえば、標的遺伝子または標的配列が「ノックダウン」または「ノックアウト」される。人工ｓｉＲＮＡは、治療用途にも実験用途にも有用である。
【０１７３】
１つの態様では、ＲＮＡ干渉剤は、標的ＲＮＡ配列と相互作用して標的ＲＮＡの切断を誘導する一本鎖ＲＮＡを含む。理論によって拘束されることを望むものではないが、報告によれば、植物及び無脊椎動物細胞に導入された長い二本鎖ＲＮＡは、Ｄｉｃｅｒとして知られるＩＩＩ型エンドヌクレアーゼによる分解を受けてｓｉＲＮＡへと変換される（Ｓｈａｒｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ．２００１，１５：４８５）。報告によれば、Ｄｉｃｅｒ（リボヌクレアーゼＩＩＩ様酵素）は、ｄｓＲＮＡのプロセッシングを行うことで、特徴的な２つの塩基３’オーバーハングを有する１９〜２３塩基対の短い干渉ＲＮＡへとｄｓＲＮＡを変換する（Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎ，ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｎａｔｕｒｅ  ４０９：３６３）。報告によれば、次に、ＲＮＡ誘導型サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）にｓｉＲＮＡが組み込まれ、このＲＩＳＣにおいて、１つ以上のヘリカーゼによってｓｉＲＮＡ二重鎖がほどかれることで、相補的アンチセンス鎖による標的認識のガイドが可能になる（Ｎｙｋａｎｅｎ，ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｃｅｌｌ  １０７：３０９）。ＲＩＳＣ内の１つ以上のエンドヌクレアーゼが、適切な標的ｍＲＮＡに結合すると、標的が切断されてサイレンシングが誘導される（Ｅｌｂａｓｈｉｒ，ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ．１５：１８８）。したがって、１つの態様では、本開示は、ＲＩＳＣ複合体の形成を促進して標的遺伝子のサイレンシングを引き起こす一本鎖ＲＮＡに関する。
【０１７４】
一部の実施形態では、当該技術分野において知られる任意のプロセス、または本開示に従って当業者が考え得る任意のプロセスによって適切なＲＮＡｉ剤を選択することができる。たとえば、選択基準は、下記のステップのうちの１つまたは複数を含み得る：標的遺伝子配列の最初の分析及びＲＮＡｉ剤の設計（この設計では、種（ヒト、カニクイザル、マウスなど）にまたがる配列類似性、及び他の（非標的）遺伝子に対する相違性、が考慮され得る）、ＲＮＡｉ剤のｉｎ  ｖｉｔｒｏでのスクリーニング（たとえば、標的転写産物を発現する細胞において１０ｎＭで行うもの）、細胞におけるＥＣ５０またはＩＣ５０の決定、ＲＮＡｉ剤で処理した細胞の生存率の決定（一部の実施形態では、標的に対するＲＮＡｉ剤によってこうした細胞の生存率が抑制されないことが望まれる）、ヒトＰＢＭＣ（末梢血単核球）を用いた試験（たとえば、ＴＮＦ−アルファのレベルを試験して免疫原性を推定するものであり、この場合、免疫刺激性配列は、通常、あまり望まれない）、ヒト全血アッセイにおける試験（新鮮なヒト血液がＲＮＡｉ剤で処理され、サイトカイン／ケモカイン［たとえば、ＴＮＦ−アルファ（腫瘍壊死因子−アルファ）及び／またはＭＣＰ１（単球走化性タンパク質１）］のレベルが決定され、この場合、免疫刺激性配列は、通常、あまり望まれない）、試験動物における細胞または腫瘍を使用するｉｎ  ｖｉｖｏでの遺伝子ノックダウンの決定、ならびにＲＮＡｉ剤の特定の修飾の最適化。
【０１７５】
報告によれば、いわゆる正統なｓｉＲＮＡ構造は二本鎖ＲＮＡ分子であり、鎖はそれぞれ、約２１ヌクレオチドの長さである。報告によれば、これら２つの鎖は、アンチセンス（または「ガイド」）鎖（標的転写産物における相補的配列を認識し、それに結合する）、及びセンス（または「パッセンジャー」）鎖（アンチセンス鎖に相補的である）である。報告によれば、これらのセンス鎖及びアンチセンス鎖は、大部分が相補的であり、典型的には、両末端に２つのヌクレオチドの３’オーバーハングを２つ形成する。
【０１７６】
報告によれば、正統なｓｉＲＮＡ構造は二本鎖であるが、ＲＮＡｉ剤は一本鎖の場合もあり得る。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、二本鎖ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖に相当するものであり、こうした一本鎖ＲＮＡｉ剤は、対応するパッセンジャー鎖を含まない。
【０１７７】
一方で、一本鎖ＲＮＡｉ剤について試験された構造的要素のすべてが有効というわけでないことが報告されており、報告によれば、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに導入される構造的要素によっては、一本鎖ＲＮＡ干渉活性を妨害し得る。
【０１７８】
一部の実施形態では、本開示は、ＲＮＡｉ剤として有用なオリゴヌクレオチド及び組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤として有用なオリゴヌクレオチド及び組成物を提供する。本開示，とりわけ、ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する新規構造の一本鎖オリゴヌクレオチドを提供する。いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤が二本鎖ＲＮＡｉ剤を上回る利点を有することを明記する。たとえば、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、必要なことは１つの鎖のみの構築であるため、原価が低く抑えられる。さらに、またはあるいは、標的転写産物を標的とするために投与される鎖は１つ（アンチセンス鎖）のみである。ｄｓＲＮＡによって誘導されるオフターゲット効果の源泉は、センス鎖がＲＩＳＣに組み込まれ、望ましくない標的に結合し、それをノックダウンしてしまうことであるが（Ｊａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．２００３  Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２１：６３５−６３７）、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、対応する二本鎖ＲＮＡｉ剤と比較して、誘導するオフターゲット効果が少なくあり得る。さらに、本明細書に開示のいくつかのものを含めて、一本鎖ＲＮＡｉ剤によっては、これまでに二本鎖ＲＮＡｉ剤を用いて標的とすることに成功していない特定の配列を標的とすることができる（たとえば、一本鎖ＲＮＡｉ剤によっては、配列のレベル及び／または配列の産物（転写産物及び／またはタンパク質）のレベルを、二本鎖ＲＮＡｉ剤と比較して、より顕著に低減することができる）。本開示は、とりわけ、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導することができるオリゴヌクレオチドの新規形式（修飾、立体化学、それらの組み合わせなど）を提供する。
【０１７９】
オリゴヌクレオチド
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的産物のレベルの低減を誘導することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子の転写産物のレベルを低減することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子のｍＲＮＡのレベルを低減することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子によってコードされるタンパク質のレベルを低減することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣが関与しない生化学的機序（限定されないが、遺伝子発現のＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたは立体障害が挙げられる）を介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子ｍＲＮＡへの結合後の翻訳の立体的な遮断、及び／またはｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって標的遺伝子またはの遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本開示に従って、本明細書に記載の構造的要素または当該技術分野において知られる構造的要素を１つ以上含み、こうした構造的要素は、たとえば、塩基配列、修飾、立体化学、ヌクレオチド間結合パターン、骨格結合パターン、骨格キラル中心パターン、骨格リン修飾パターン、追加の化学的部分（限定されないが、１つ以上の標的化部分、脂質部分、及び／または炭水化物部分などが挙げられる）、シード領域、ポストシード領域、５’末端構造、５’末端領域、５’ヌクレオチド部分、３’末端領域、３’末端ジヌクレオチド、３’末端キャップなどである。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドのシード領域は、５’末端から数えると、２番目〜８番目のヌクレオチド、２番目〜７番目のヌクレオチド、２番目〜６番目のヌクレオチド、３番目〜８番目のヌクレオチド、３番目〜７番目のヌクレオチド、３番目〜７番目のヌクレオチド、または４番目〜８番目のヌクレオチドもしくは４番目〜７番目ヌクレオチドであるか、あるいはそれを含むものであり、オリゴヌクレオチドのポストシード領域は、シード領域の３’側に直接隣接する領域であり、シード領域と３’末端領域との間に介在する。
【０１８０】
一部の実施形態では、提供される組成物は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含む。一部の実施形態では、提供される組成物は、１つ以上の脂質部分、１つ以上の炭水化物部分（別段の指定がない限り、ヌクレオチド間結合でオリゴヌクレオチド鎖を形成するヌクレオシド単位の糖部分以外のもの）、及び／または１つ以上の標的化構成要素を含む。
【０１８１】
一部の実施形態では、標的配列は、本明細書に記載のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドが結合する配列である。多くの実施形態では、標的配列は、提供されるオリゴヌクレオチドの配列もしくはそこに存在する連続残基の配列と同一であるか、またはその正確な相補体である（たとえば、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的配列と同一の標的結合配列、または標的配列の正確な相補体である標的結合配列を含む）。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド（の関連部分）とその標的配列との間の少数の差異／ミスマッチは許容される。多くの実施形態では、標的配列は、標的遺伝子内に存在する。多くの実施形態では、標的配列は、標的遺伝子から産生する転写産物（たとえば、ｍＲＮＡ及び／またはｍＲＮＡ前駆体（ｐｒｅ−ｍＲＮＡ））内に存在する。
【０１８２】
当該技術分野において知られる多くのものを含めて、さまざまなリンカー、脂質部分、炭水化物部分、及び標的化部分を、本開示に従って利用することができる。一部の実施形態では、脂質部分が標的化部分である。一部の実施形態では、炭水化物部分が標的化部分である。一部の実施形態では、標的化部分は、脂質部分である。一部の実施形態では、標的化部分は、炭水化物部分である。当業者であれば容易に理解することであるが、本開示に記載のものを含めて、さまざまなリンカーを本開示に従って利用することで、２つの部分を連結することができ、たとえば、脂質／炭水化物／標的化構成要素をＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分と連結することができる。当業者であれば容易に理解することであるが、２つの部分を連結するための記載のリンカーは、他の部分の連結にも使用することができ、たとえば、脂質部分とＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分とを連結するためのリンカーは、炭水化物部分または標的部分をＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分と連結するためにも使用することができ、逆もまた同様である。
【０１８３】
一部の実施形態では、本開示は、キラル制御されたオリゴヌクレオチド及びオリゴヌクレオチド組成物を提供する。たとえば一部の実施形態では、提供される組成物は、所定レベルの１個以上の個々のオリゴヌクレオチド型を含有し、ここで、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型は以下により定義される：１）塩基配列；２）骨格結合のパターン；３）骨格キラル中心のパターン；及び４）骨格Ｐ−修飾のパターン。一部の実施形態では、特定のオリゴヌクレオチド型は、１Ａ）塩基同一性；１Ｂ）塩基修飾のパターン；１Ｃ）糖修飾のパターン；２）骨格結合のパターン；３）骨格キラル中心のパターン；及び４）骨格Ｐ−修飾のパターン、により定義されてもよい。一部の実施形態では、同じオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドは、同一である。一部の実施形態では、本開示は、オリゴヌクレオチドのキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供し、組成物は、所定レベルの複数のオリゴヌクレオチドを含み、複数のオリゴヌクレオチドは、共通塩基配列を共有し、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、少なくとも８つ、少なくとも９つ、少なくとも１０個、少なくとも１１個、少なくとも１２個、少なくとも１３個、少なくとも１４個、少なくとも１５個、少なくとも１６個、少なくとも１７個、少なくとも１８個、少なくとも１９個、少なくとも２０個、少なくとも２１個、少なくとも２２個、少なくとも２３個、少なくとも２４個、または少なくとも２５個のキラルヌクレオチド間結合（キラル制御されたヌクレオチド間結合）において同じ配置の結合リンを含む。
【０１８４】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を２〜３０個含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を５〜３０個含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１０〜３０個含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１つ含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を２つ含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を３つ含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を４つ含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を５つ含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を６つ含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を７つ含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を８つ含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を９つ含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１０個含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１１個含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１２個含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１３個含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１４個含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１５個有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１６個有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１７個有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１８個有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を１９個有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されたヌクレオチド間結合を２０個有する。
【０１８５】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ユニマーである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、Ｐ−修飾ユニマーである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ステレオユニマーである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、Ｒｐ立体配置のステレオユニマーである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、Ｓｐ立体配置のステレオユニマーである。
【０１８６】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、アルトマーである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、Ｐ−修飾アルトマーである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ステレオアルトマーである。
【０１８７】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ブロックマーである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、Ｐ−修飾ブロックマーである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ステレオブロックマーである。
【０１８８】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ギャップマーである。
【０１８９】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、スキップマーである。
【０１９０】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ヘミマーである。一部の実施形態では、ヘミマーは、当該オリゴヌクレオチドの残りの部分が有さない構造的特性を保有する配列を５’末端領域または３’末端領域が有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、５’末端領域または３’末端領域は、２〜２０ヌクレオチドを有するか、または含む。一部の実施形態では、構造的特性は、塩基修飾である。一部の実施形態では、構造的特性は、糖修飾である。一部の実施形態では、構造的特性は、Ｐ−修飾である。一部の実施形態では、構造的特性は、キラルヌクレオチド間結合の立体化学である。一部の実施形態では、構造的特性は、塩基修飾、糖修飾、Ｐ−修飾、もしくはキラルヌクレオチド間結合の立体化学、またはそれらの組み合わせであるか、またはこれを含む。一部の実施形態では、ヘミマーは、５’末端領域の糖部分のそれぞれが共通修飾を共有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、ヘミマーは、３’末端領域の糖部分のそれぞれが共通修飾を共有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、５’末端領域または３’末端領域の共通糖修飾は、オリゴヌクレオチドにおける他の糖部分のいずれによっても共有されない。一部の実施形態では、ヘミマーの例は、一方の末端領域に、置換または非置換の２’−Ｏ−アルキル糖修飾ヌクレオシド、二環式糖修飾ヌクレオシド、β−Ｄ−リボヌクレオシドまたはβ−Ｄ−デオキシリボヌクレオシド（例えば、２’−ＭＯＥ修飾ヌクレオシド、及びＬＮＡ（商標）またはＥＮＡ（商標）二環式糖修飾ヌクレオシド）の配列、もう一方の末端領域に、異なる糖部分を有するヌクレオシド（たとえば置換または非置換の２’−Ｏ−アルキル糖修飾ヌクレオシド、二環式糖修飾ヌクレオシドまたは天然型ヌクレオシドなど）の配列を含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ユニマー、アルトマー、ブロックマー、ギャップマー、ヘミマー及びスキップマーのうちの１個以上の組み合わせである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ユニマー、アルトマー、ブロックマー、ギャップマー、及びスキップマーのうちの１個以上の組み合わせである。たとえば一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、アルトマーとギャップマーの両方である。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ギャップマーとスキップマーの両方である。数多くの別のパターンの組み合わせが利用可能であり、それらは、本発明による方法に基づき提供されるオリゴヌクレオチドを合成するために必要とされる構成要素が市販及び／または合成での入手可能性によってのみ限定されることが、化学及び合成分野の当業者により認識されるであろう。一部の実施形態では、ヘミマーの構造は、有益な利益をもたらす。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、５’末端配列に修飾糖部分を含む５’−ヘミマーである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、５’末端配列に修飾２’−糖部分を含む５’−ヘミマーである。
【０１９１】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるヌクレオチドを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の修飾ヌクレオチドを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるヌクレオシドを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の修飾ヌクレオシドを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるＬＮＡを含む。
【０１９２】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換される核酸塩基を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換される天然型核酸塩基を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換される修飾核酸塩基を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の５−メチルシチジン；５−ヒドロキシメチルシチジン、５−ホルミルシトシン、または５−カルボキシルシトシンを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の５−メチルシチジンを含む。
【０１９３】
一部の実施形態では、塩基（ＢＡ）はそれぞれ、独立して、任意で置換または保護されたアデニン、シトシン、グアノシン、チミン、またはウラシル核酸塩基である。当業者であれば理解することであるが、当該技術分野において広く知られるもの（たとえば、オリゴヌクレオチド調製物において使用されるもの（たとえば、ＷＯ／２０１０／０６４１４６、ＷＯ／２０１１／００５７６１、ＷＯ／２０１３／０１２７５８、ＷＯ／２０１４／０１０２５０、ＵＳ２０１３／０１７８６１２、ＷＯ／２０１４／０１２０８１、ＷＯ／２０１５／１０７４２５、ＷＯ２０１７／０１５５５５、及びＷＯ２０１７／０６２８６２に記載の保護された核酸塩基が挙げられ、これらの文献のそれぞれの保護された核酸塩基は、参照によって本明細書に組み込まれる））を含めて、さまざまな保護された核酸塩基を、本開示に従って利用することができる。
【０１９４】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換される糖を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、天然型のＤＮＡ及びＲＮＡ中に存在する１個以上の任意で置換される糖を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるリボースまたはデオキシリボースを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるリボースまたはデオキシリボースを含有し、ここで、当該リボース部分またはデオキシリボース部分のヒドロキシル基の１個以上は任意で、及び独立して、ハロゲン、−Ｎ（Ｒ’）２、−ＯＲ’または−ＳＲ’と置き換えられ、式中、各Ｒ’は独立して、上記に定義され、本明細書に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるデオキシリボースを含有し、ここで、当該デオキシリボースの２’位は任意で、及び独立して、ハロゲン、−Ｎ（Ｒ’）２、−ＯＲ’または−ＳＲ’と置き換えられ、式中、各Ｒ’は独立して、上記に定義され、本明細書に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるデオキシリボースを含有し、ここで、当該デオキシリボースの２’位は任意で、及び独立して、ハロゲンで置換される。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるデオキシリボースを含有し、ここで、当該デオキシリボースの２’位は任意で、及び独立して、１個以上の−Ｆ．ハロゲンで置換される。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるデオキシリボースを含有し、ここで、当該デオキシリボースの２’位は任意で、及び独立して、−ＯＲ’と置換され、式中、各Ｒ’は独立して、上記に定義され、本明細書に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるデオキシリボースを含有し、ここで、当該デオキシリボースの２’位は任意で、及び独立して、−ＯＲ’と置換され、式中、各Ｒ’は独立して、任意で置換されるＣ１−Ｃ６の脂肪族である。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるデオキシリボースを含有し、ここで、当該デオキシリボースの２’位は任意で、及び独立して、−ＯＲ’と置換され、式中、各Ｒ’は独立して、任意で置換されるＣ１−Ｃ６のアルキルである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるデオキシリボースを含有し、ここで、当該デオキシリボースの２’位は任意で、及び独立して、−ＯＭｅで置換される。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以上の任意で置換されるデオキシリボースを含有し、ここで、当該デオキシリボースの２’位は任意で、及び独立して、−Ｏ−メトキシエチルで置換される。
【０１９５】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ハイブリダイズされたオリゴヌクレオチド鎖である。ある特定の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、部分的にハイブリダイズされたオリゴヌクレオチド鎖である。ある特定の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、完全にハイブリダイズされたオリゴヌクレオチド鎖である。ある特定の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、二本鎖オリゴヌクレオチドである。ある特定の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、三本鎖オリゴヌクレオチド（例えば、三重鎖）である。
【０１９６】
一部の実施形態では、ＷＯ２０１２／０３０６８３に記載されるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含む構造のいずれか１個が本開示方法に従い修飾され、そのキラル制御された組成物が生成され得る。たとえば、一部の実施形態では、キラル制御された組成物は、ＷＯ２０１２／０３０６８３または本開示に記載の１つ以上のＰ−修飾を任意で組み込むことによって、キラル結合リン原子のうちの任意の１つ以上の立体化学が制御される。たとえば、一部の実施形態では、ＷＯ２０１２／０３０６８３に記載のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの特定のヌクレオチド単位が、事前に選択されることで、そのヌクレオチド単位の結合リンのキラル制御を伴って得られ、及び／またはそのヌクレオチド単位の結合リンのキラル制御を伴ってＰ−修飾される。
【０１９７】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、核酸アナログを含み、こうした核酸アナログは、たとえば、ＧＮＡ、ＬＮＡ、ＰＮＡ、ＴＮＡ、Ｆ−ＨＮＡ（Ｆ−ＴＨＰまたは３’−フルオロテトラヒドロピラン）、ＭＮＡ（マンニトール核酸、たとえば、Ｌｅｕｍａｎｎ  ２００２  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１０：８４１−８５４）、ＡＮＡ（アニトール（ａｎｉｔｏｌ）核酸）、及びモルホリノである。
【０１９８】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、タンパク質の活性、またはタンパク質発現の阻害もしくは促進を直接または間接的に増加させ、または減少させる能力を有するとして特徴付けられる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、細胞増殖、ウイルス複製、及び／または任意のその他の細胞シグナル伝達過程の制御に有用であるという点で特徴付けられる。
【０１９９】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの５’末端及び／または３’末端が修飾される。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの５’末端及び／または３’末端は、末端キャップ部分を用いて修飾される。末端キャップ部分を含む、かかる修飾の例は、本明細書、及びたとえば米国特許出願公開ＵＳ２００９／００２３６７５Ａ１に記載されるものなど、当分野において詳述される。
【０２００】
一部の実施形態では、１）共通の塩基配列と長さ、２）骨格結合の共通パターン、及び３）骨格キラル中心の共通パターンにより特徴付けられるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドは、同じ化学構造を有する。たとえばそれらは同じ塩基配列、同じヌクレオチド修飾パターン、同じ骨格結合パターン（すなわち、たとえばリン酸、ホスホロチオエートなどのヌクレオチド間結合型のパターン）、同じ骨格キラル中心のパターン（すなわち、結合リン立体化学のパターン（Ｒｐ／Ｓｐ））、及び同じ骨格リン修飾のパターン（たとえば、式Ｉの「−ＸＬＲ１」基のパターン）を有する。
【０２０１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤及びアンチセンスオリゴヌクレオチド
【０２０２】
一部の実施形態では、本開示は、オリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルを低減するオリゴヌクレオチドを提供する。当業者であれば、本開示を読めば、提供されるオリゴヌクレオチドが、一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤として働き得ることを理解するであろう。あるいは、またはさらに、一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ依存性機序、及び／またはＲＮＡ干渉が関与しない別の生化学的機序、を介して働き得る。
【０２０３】
とりわけ、本開示は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに特に望ましく、及び／または有効であり得る、ある特定の構造的属性を定義する。とりわけ、本開示は、ＲＮＡｉ剤として働くＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに特に望ましく、及び／または有効であり得る、ある特定の構造的属性を定義する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＮａｓｅ  Ｈ依存性機序及び／または他の生化学的機序を介して働くＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに特に望ましく、及び／または有効であり得る、ある特定の構造的属性を定義する。一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ｓｓＲＮＡｉ剤（ｓｓＲＮＡｉまたはｓｓＲＮＡｉ剤）に特に望ましく、及び／または有効であり得る、ある特定の構造的属性を定義し、一部のそのような実施形態では、本明細書にさらに後述されるように、そのような構造的属性は、二本鎖ＲＮＡｉ剤（ｄｓＲＮＡｉまたはｄｓＲＮＡｉ剤）の対応鎖に特に望ましく、及び／または有効な構造的属性とは異なり得る。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、一本鎖ＲＮＡｉ剤（たとえば、ＲＩＳＣに組み込まれ得、及び／またはＲＩＳＣ介在性の標的化を誘導もしくは増進し得るもの）である。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチド（たとえば、ＲＮａｓｅ  Ｈに組み込まれ、及び／または標的のＲＮａｓｅ−Ｈ介在性切断を誘導もしくは増進し、及び／または異なる生化学的機序を介して機能し得るもの）である。
【０２０４】
一部の実施形態（いくつかの一本鎖オリゴヌクレオチド実施形態を含む）では、ＲＮＡｉ剤として働くオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ依存性機序を介して働くオリゴヌクレオチドとは異なる構造的属性及び／または機能特性を１つ以上有し得る。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、標的遺伝子ｍＲＮＡへの結合後の翻訳の立体的な遮断、及び／またはｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン（たとえば、スキップ）、によって標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣに依存することなく、機能を発揮するか、またはかなりの割合（たとえば、１０〜１００％、１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、または９０％超）の機能を発揮することができる。
【０２０５】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈによって媒介され、ＲＩＳＣ（ＲＮＡ干渉サイレンシング複合体）によっては媒介されない標的ＲＮＡの切断を誘導するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）である。
【０２０６】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＩＳＣ（ＲＮＡ干渉サイレンシング複合体）によって媒介され、ＲＮａｓｅ  Ｈ酵素によっては媒介されない標的ｍＲＮＡの切断を誘導する一本鎖ＲＮＡｉ（ｓｓＲＮＡｉ）剤である。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈに依存することなく、機能を発揮するか、またはかなりの割合（たとえば、１０〜１００％、１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、または９０％超）の機能を発揮することができる。
【０２０７】
二本鎖ＲＮＡｉ剤もまた、ＲＩＳＣを使用し、ＲＮａｓｅ  Ｈ酵素を使用せずに、標的ｍＲＮＡの切断を誘導することができる。一部の実施形態では、ｓｓＲＮＡｉ剤が単一オリゴヌクレオチド鎖のみを含み、一般に、有意な長さの二本鎖領域を含まないのに対し、ｄｓＲＮＡｉ剤は有意な長さ（たとえば、少なくとも約１５ｂｐ、または「正統な」ｓｉＲＮＡでは約１９ｂｐ）の二本鎖領域を含むという点において、一本鎖ＲＮＡｉ剤は二本鎖ＲＮＡｉ剤と異なる。一部の実施形態では、ｄｓＲＮＡｉは、二本鎖領域（たとえば、「正統な」ｓｉＲＮＡにおけるもの）を形成する２つの別々の相補的な鎖（共有結合では連結されないもの）を含むか、または二本鎖領域（たとえば、ｓｈＲＮＡもしくは短鎖ヘアピンＲＮＡにおけるもの）を一緒に形成する２つの相補的配列を含む長い一本鎖を含む。ｄｓＲＮＡｉの実施形態の一部では、パッセンジャー鎖は、一本鎖ニックを有し、２つの鎖を形成する。一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤が有効であるために必要な配列及び／または構造的要素（化学修飾、立体化学など）が、二本鎖ＲＮＡｉ剤が有効であるために必要なものとは異なり得ることを示す。
【０２０８】
とりわけ、本開示は、二本鎖ＲＮＡｉ剤に適し得るある特定の設計（たとえば、配列及び／または構造的要素）が一本鎖ＲＮＡｉ剤（本明細書に記載の提供される形式の一本鎖ＲＮＡｉ剤を含む）には適し得ず、逆もまた同様であるという認識を含む。一部の実施形態では、本開示は、有効なｓｓＲＮＡｉの設計を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ある特定の塩基配列を、本開示に従って構造的要素（修飾、立体化学、追加の化学的部分、または部分など）と組み合わせると、予想外に高い活性を有するオリゴヌクレオチドが生じ得ることを示し、たとえば、こうしたオリゴヌクレオチドは、ｓｓＲＮＡｉ剤として投与されると、同じ配列を含むが、二本鎖であるオリゴヌクレオチドがｄｓＲＮＡｉ剤として投与されたときと比較すると特に、予想外に高い活性を有する。一部の実施形態では、本開示は、ある特定の塩基配列を、本開示に従って構造的要素（修飾、立体化学、追加の化学的部分、または部分など）と組み合わせると、予想外に高い活性（たとえば、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルを低減する能力）を有するオリゴヌクレオチドが生じ得ることを示す。
【０２０９】
一本鎖ＲＮＡｉ（ｓｓＲＮＡｉ）剤、二本鎖ＲＮＡｉ（ｄｓＲＮＡｉ）剤、及びＲＮａｓｅ  Ｈ依存性アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）の間の構造的及び機能的な差異
【０２１０】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ（ｓｓＲＮＡｉ）剤、二本鎖ＲＮＡｉ（ｄｓＲＮＡｉ）剤、及びＲＮａｓｅ  Ｈ依存性アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）はすべて、剤もしくはオリゴヌクレオチド（またはその一部）が、相補的な（または実質的に相補的な）標的ＲＮＡ（たとえば、ｍＲＮＡまたはｍＲＮＡ前駆体（ｐｒｅ−ｍＲＮＡ））に結合した後、標的ＲＮＡを切断し、及び／または標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルを低減するものである。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、二本鎖であろうと一本鎖であろうと、ＲＩＳＣまたはＲＮＡ干渉サイレンシング複合体（Ａｇｏ−２（アルゴノート−２）酵素を含む）を利用するものである。一部の実施形態では、ＲＮａｓｅ  Ｈ依存性アンチセンスオリゴヌクレオチドは、一本鎖であり、異なる酵素であるＲＮａｓｅ  Ｈを利用するものである。報告によれば、ＲＮａｓｅ  Ｈは、ＲＮＡ：ＤＮＡ二重鎖のＲＮＡ鎖を切断する細胞エンドヌクレアーゼである。米国特許第７，９１９，４７２号を参照のこと。Ｓａｅｔｒｏｍ（２００４  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ２０：３０５５−３０６３）、Ｋｒｅｔｓｃｈｍｅｒ−Ｋａｚｅｍｉ  Ｆａｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００３  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  ３１：４４１７−４４２４）、Ｂｅｒｔｒａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２９６：１０００−１００４）、Ｖｉｃｋｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００３  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８：７１０８）も併せて参照のこと。一部の実施形態では、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導することができるオリゴヌクレオチドとしては、限定されないが、２’−修飾を含まない連続する２’−デオキシヌクレオチド単位の領域からなるもの、または当該領域を含むものが挙げられる。一部の実施形態では、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導することができるオリゴヌクレオチドは、ギャップによって広がったオリゴヌクレオチド、またはギャップマーである。一部の実施形態では、ギャップマーは、内部領域を含んでおり、この内部領域は、ＲＮａｓｅ  Ｈによる切断を支援する複数のヌクレオチドを含み、当該内部領域のヌクレオシドとは化学的に異なる複数のヌクレオチドを有する外部領域の間に位置する。一部の実施形態では、ギャップマーは、１つまたは２つのウィングと隣り合うか、またはそれに隣接する、２’−修飾を含まない２’−デオキシヌクレオチドの区間を含む。一部の実施形態では、ギャップは、ＲＮａｓｅ  Ｈによる対応ＲＮＡ標的の切断を誘導する。一部の実施形態では、ウィングは、ＲＮａｓｅ  Ｈによる切断を誘導しないか、ＲＮａｓｅ  Ｈによる切断の基質としては働かない。ウィングは、長さが異なるものであり得（限定されないが、１〜８ｎｔのものが挙げられる）、さまざまな修飾またはアナログ（限定されないが、２’−修飾（限定されないが、２’−ＯＭｅ及び２’−ＭＯＥが挙げられる）が挙げられる）を含み得る。非限定的な例として、米国特許第９，５５０，９８８号、同第７，９１９，４７２号、同第５，０１３，８３０号、同第５，１４９，７９７号、同第５，２２０，００７号、同第５，２５６，７７５号、同第５，３��６，８７８号、同第５，４０３，７１１号、同第５，４９１，１３３号、同第５，５６５，３５０号、同第５，６２３，０６５号、同第５，６５２，３５５号、同第５，６５２，３５６号、及び同第５，７００，９２２号を参照のこと。一部の実施形態では、そのような修飾またはアナログの１つ以上の存在は、ＲＮａｓｅ  Ｈによる標的の切断の改変（たとえば、増加、減少、または変化）と相関し得る。
【０２１１】
一部の実施形態では、二本鎖ＲＮＡｉ剤は、そのアンチセンス鎖でさえ、ＲＮａｓｅ  Ｈ依存性アンチセンスオリゴヌクレオチドと構造的に異なる。一部の実施形態では、ＲＮａｓｅ  Ｈ依存性アンチセンスオリゴヌクレオチドとｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドとは、５’末端構造に関しても全体的な二重鎖安定性に関しても、正反対の特徴を有するように思われる。
【０２１２】
報告によれば、二本鎖ＲＮＡｉ剤は、Ｄｉｃｅｒ酵素によって細胞において天然に生じ得るものであり、Ｄｉｃｅｒ酵素は、より長いＲＮＡ分子（侵入ウイルスに由来する二本鎖ＲＮＡなど）を切断してｄｓＲＮＡに変換する。ｄｓＲＮＡ剤の正統な構造は、２つのＲＮＡ鎖を含み、それぞれのＲＮＡ鎖が約１９〜２３ｎｔの長さを有し、これら２つのＲＮＡ鎖がアニーリングすることで、約１９〜２１ｂｐの二本鎖領域及び２つの３’ジヌクレオチドオーバーハングが形成される。二本鎖ＲＮＡｉ剤については、報告によれば、二重鎖からセンス鎖がほどかれた後にアンチセンス鎖がＲＩＳＣに組み込まれる。二本鎖ＲＮＡｉ剤がアンチセンス鎖とセンス鎖とに天然に分離されることは別として、一本鎖ＲＮＡｉ剤がヒト細胞において天然に生じるということは報告されていない。
【０２１３】
とりわけ、本開示は、たとえば、有効なｄｓＲＮＡｉ剤のアンチセンス鎖の有効性が当該ｄｓＲＮＡｉ剤と比較して非常に低くあり得ることに加えて、ｓｓＲＮＡｉ剤をｄｓＲＮＡｉ剤として構築（たとえば、センス鎖とのアニーリングによって構築）すると、当該ｓｓＲＮＡｉ剤と比較して有効性が非常に低くなり得るという点において、多くの場合、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、単純に、二本鎖ＲＮＡｉ剤の単離されたアンチセンス鎖というわけではないという教示を提供する。一部の実施形態では、二本鎖ＲＮＡｉ剤と一本鎖ＲＮＡｉ剤とは、多くの顕著な点で異なる。二本鎖ＲＮＡｉ剤の構造的なパラメータは、一本鎖ＲＮＡｉ剤に必ずしも反映されない。
【０２１４】
一部の実施形態では、本開示は、二本鎖ＲＮＡｉ剤に適した標的配列が一本鎖ＲＮＡｉ剤には適し得ず、逆もまた同様であることを教示する。たとえば、少なくともいくつかの場合では、二本鎖ＲＮＡｉ剤の一本鎖バージョンは、非効果的なものであり得る。非限定的な例として、ｄｓＲＮＡｉに由来する配列で構築されたｓｓＲＮＡｉ剤が表４６Ａにいくつか示される。ｄｓＲＮＡｉに基づくこうしたｓｓＲＮＡｉは、一般に、対応するｄｓＲＮＡｉと比較して有効性が低いものであった。
【０２１５】
一部の実施形態では、二本鎖ＲＮＡｉ剤と一本鎖ＲＮＡｉ剤とは、キラル制御されたヌクレオチド間結合の組み込みに対する感受性も異なる。たとえば、Ｍａｔｒａｎｇａ  ｅｔ  ａｌ．（２００５  Ｃｅｌｌ  １２３：６０７−６２０）では、単一のＳｐヌクレオチド間結合（たとえば、単一のＳｐ  ＰＳ）を二本鎖ＲＮＡｉ剤のセンス鎖に導入すると、ＲＩＳＣの構築及びＲＮＡ干渉活性が大幅に減少することが報告された。対照的に、一部の実施形態では、本明細書に示されるデータは、驚くべきことに、Ｓｐヌクレオチド間結合（たとえば、Ｓｐ  ＰＳ）の組み込みが、一本鎖ＲＮＡｉ剤に対して以下の２つの機能を発揮し得ることを示す：（ａ）この組み込みは、ヌクレアーゼに対する安定性を向上させ、（ｂ）この組み込みは、ＲＮＡ干渉活性を妨害しない。例としてのオリゴヌクレオチドの多くが、キラル制御されたヌクレオチド間結合（たとえば、本明細書ではＳｐヌクレオチド間結合またはＳｐ  ＰＳ（ホスホロチオエート）が示される）を１つ以上含む有効な一本鎖ＲＮＡｉ剤として働くことができる。
【０２１６】
あるいは、またはさらに、二本鎖ＲＮＡｉ剤と一本鎖ＲＮＡｉ剤とは、免疫原性が異なり得る。一部の実施形態では、報告によれば、一本鎖ＲＮＡｉ剤によっては、二本鎖ＲＮＡｉ剤と比較して免疫原性が高い。Ｓｉｏｕｄ  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（２００５）３４８，１０７９−１０９０。一部の実施形態では、報告によれば、いくつかの二本鎖ＲＮＡｉ剤は免疫応答を誘導しなかった一方で、対応する一本鎖ＲＮＡｉ剤は免疫応答を誘導した。一部の実施形態では、本開示は、免疫原性が低いオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、そのようなオリゴヌクレオチドをｓｓＲＮＡｉ試薬として利用することができる。
【０２１７】
とりわけ、本開示は、二本鎖ＲＮＡｉ剤から、塩基配列を含めて、一本鎖ＲＮＡｉ剤を得るという、一本鎖ＲＮＡｉ剤のある特定の従来設計は、多くの場合、有効な一本鎖ＲＮＡｉ剤を得ることに失敗するという認識を含む。一部の実施形態では、本開示は、驚くべきことに、有効なＲＮａｓｅ  Ｈ依存性ＡＳＯの塩基配列に由来するｓｓＲＮＡｉ剤から、有効なｓｓＲＮＡｉ剤を得ることができることを示す（表４６Ａを参照のこと）。
【０２１８】
一部の実施形態では、本開示は、有効なＲＮａｓｅ−Ｈ依存性ＡＳＯとして利用できるオリゴヌクレオチドを提供し、当該オリゴヌクレオチドは、２’−修飾を有さない２’−デオキシヌクレオチドの領域を含み、ＲＮＡ配列またはその一部に相補的または実質的に相補的である。一部の実施形態では、領域は、たとえば、ウィングが片側または両側に隣接する約１０ｎｔのコア配列であり得、こうしたウィングは、コアとは化学が異なり、非限定的な例として、２’−修飾またはヌクレオチド間結合修飾を含み得る。
【０２１９】
オリゴヌクレオチド
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣが関与しない生化学的機序（限定されないが、遺伝子発現のＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたは立体障害が挙げられる）を介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子ｍＲＮＡへの結合後の翻訳の立体的な遮断、及び／またはｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって標的遺伝子またはの遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導することができる。
【０２２０】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の構造的要素もしくは形式またはその一部を有する。
【０２２１】
一部の実施形態では、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の構造的要素もしくは形式またはその一部を有する。
【０２２２】
一部の実施形態では、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に開示の任意のオリゴヌクレオチドの形式を有し、こうしたオリゴヌクレオチドは、たとえば、表１Ａまたは図もしくは表に示されるもの、あるいはその他の箇所で本明細書に開示されるものである。
【０２２３】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、図１に示される形式のいずれかを有する。
【０２２４】
本開示は、さまざまな形式のさまざまなオリゴヌクレオチドが、複数の異なる種において、複数の異なる遺伝子の中で、複数の異なる配列のいずれかを標的として、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有することを示すデータを提示する。未掲載ではあるが、開示の形式のｓｓＲＮＡｉ剤の有効性を裏付ける追加のデータが得られた。
【０２２５】
一部の実施形態では、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の構造的要素もしくは形式またはその一部を有する。
【０２２６】
一部の実施形態では、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に開示の任意のオリゴヌクレオチドの形式を有し、こうしたオリゴヌクレオチドは、たとえば、表１Ａまたは図もしくは表に示されるもの、あるいはその他の箇所で本明細書に開示されるものである。
【０２２７】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、図１に示される形式のいずれかを有する。
【０２２８】
本開示は、さまざまな形式のさまざまなオリゴヌクレオチドが、複数の異なる種において、複数の異なる遺伝子の中で、複数の異なる配列のいずれかに対してＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有することを示すデータを提示する。未掲載ではあるが、開示の形式のｓｓＲＮＡｉ剤の有効性を裏付ける追加のデータが得られた。
【０２２９】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の構造的要素もしくは形式またはその一部を有する。
【０２３０】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に開示の任意のオリゴヌクレオチドの形式を有し、こうしたオリゴヌクレオチドは、たとえば、表１Ａまたは図もしくは表に示されるもの、あるいはその他の箇所で本明細書に開示されるものである。
【０２３１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、図１に示される形式のいずれかを有する。
【０２３２】
本開示は、さまざまな形式のさまざまなＲＮＡｉ剤が、複数の異なる遺伝子のいずれかにおいて、複数の異なる配列のいずれかに対してＲＮＡ干渉を誘導する能力を有することを示すデータを提示する。未掲載ではあるが、開示の形式のｓｓＲＮＡｉ剤の有効性を裏付ける追加のデータが得られた。
【０２３３】
一部の実施形態では、ＲＮＡｉの標的は、転写産物である。一部の実施形態では、転写産物は、ｍＲＮＡ前駆体である。一部の実施形態では、転写産物は、成熟ＲＮＡである。一部の実施形態では、転写産物は、ｍＲＮＡである。一部の実施形態では、転写産物は、変異を含む。一部の実施形態では、変異は、フレームシフトである。一部の実施形態では、転写産物は、未成熟な終結コドンを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡｉの標的は、ｍＲＮＡではないＲＮＡである。一部の実施形態では、ＲＮＡｉの標的は、非コードＲＮＡである。一部の実施形態では、ＲＮＡｉの標的は、長鎖非コードＲＮＡである。一部の実施形態では、提供される組成物中の提供されるオリゴヌクレオチド、たとえば第１の複数のオリゴヌクレオチドは、塩基修飾、糖修飾、及び／またはヌクレオチド間結合修飾を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、塩基修飾と糖修飾を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、塩基修飾とヌクレオチド間結合修飾を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、糖修飾とヌクレオチド間結合修飾を含む。一部の実施形態では、提供される組成物は、塩基修飾、糖修飾、及びヌクレオチド間結合修飾を含む。たとえば塩基修飾、糖修飾、ヌクレオチド間結合修飾などの化学修飾の例は、当分野に広く公知であり、本開示に記載される修飾が挙げられるが、これに限定されない。一部の実施形態では、修飾塩基は、置換されたＡ、Ｔ、Ｃ、ＧまたはＵである。一部の実施形態では、糖修飾は、２’−修飾である。一部の実施形態では、２’−修飾は、２−Ｆ修飾である。一部の実施形態では、２’−修飾は、２’−ＯＲ１である。一部の実施形態において、２’−修飾は、２’−ＯＲ１であり、式中、Ｒ１は任意で置換アルキルである。一部の実施形態では、２’−修飾は、２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、２’−修飾は、２’−ＭＯＥである。一部の実施形態では、修飾糖部分は、架橋された二環または多環の環である。一部の実施形態では、修飾糖部分は、５〜２０個の環原子を有する架橋された二環または多環の環であり、式中、１個以上の還原子が任意で、及び独立してヘテロ原子である。環構造の例は当分野に広く公知であり、たとえばＢＮＡ、ＬＮＡなどに見出されるものがある。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾ヌクレオチド間結合と１つ以上の天然リン酸結合の両方を含む。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチド間結合と天然リン酸結合の両方を含むオリゴヌクレオチドと、その組成物は、たとえば活性などの改善された特性を提供する。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチド間結合は、キラルヌクレオチド間結合である。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエート結合である。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチド間結合は、置換ホスホロチオエート結合である。
【０２３４】
とりわけ、本開示は、立体不規則的オリゴヌクレオチド調製物が、たとえばオリゴヌクレオチド鎖内の個々の骨格キラル中心の立体化学構造において、互いに異なる複数の別個の化学的実体を含むという認識を包含する。骨格キラル中心の立体化学の制御が伴わない場合、立体不規則的なオリゴヌクレオチド調製物は、未確定レベルのオリゴヌクレオチド立体異性体を含む、非制御の組成物を提供する。これらの立体異性体は同じ塩基配列を有し得るが、これらの立体異性体は、少なくともそれらの異なる骨格立体化学に起因する異なる化学実体であり、本明細書に示されるように、異なる特性、例えば、活性などを有し得る。特に本開示は、対象のオリゴヌクレオチドの特定の立体異性体であるか、またはそれを含む、新たな組成物を提供する。一部の実施形態では、特定の立体異性体は、たとえばその塩基配列、長さ、骨格結合パターン、及び骨格キラル中心パターンにより規定されてもよい。当分野に置いて理解されるように、一部の実施形態では、塩基配列は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド中のヌクレオシド残基の同一性及び／または修飾の状態（たとえば、アデニン、シトシン、グアノシン、チミン、及びウラシルなどの標準的な天然ヌクレオチドと比較した、糖及び／または塩基の構成要素の状態）を指すことができ、及び／またはかかる残基のハイブリダイゼーション特性（すなわち、特定の相補的残基とハイブリダイズする能力）を指すことができる。一部の実施形態では、本開示は、化学的に同一である個々のオリゴヌクレオチド型の所定レベルのオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供するものであり、たとえばそれらは、同じ塩基配列、同じパターンのヌクレオシド修飾（存在する場合、糖部分及び塩基部分への修飾）、同じパターンの骨格キラル中心、及び同じパターンの骨格リン修飾を有する。本開示は特に、特定のオリゴヌクレオチドの個々の立体異性体が、互いに異なる安定性及び／または活性を示し得ることを示す。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド内に特定のキラル構造を含めること及び／または配置することによって達成される適切な改良は、特定の骨格結合、残基修飾などを使用することによって（たとえば、あるタイプの修飾リン酸塩［たとえば、ホスホロチオエート、置換ホスホロチオエートなど］、糖修飾［たとえば、２’−修飾など］、及び／または塩基修飾［たとえば、メチル化など］の使用することによって）、達成されるものに匹敵するか、またはより優れている場合がある。特に、本開示は、一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの１個以上のその他の特性（たとえば結合パターン、ヌクレオシド修飾パターンなど）の調節／最適化と任意で組み合わせて、骨格キラル中心のパターンを最適化することによって、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの特性（たとえば活性など）を調節することができることを認識している。本開示のさまざまな例によって例示されるように、提供されるキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物は、たとえば一本鎖ＲＮＡ干渉活性の改善、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウン、送達の改善などの改善された特性を示し得る。
【０２３５】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの特性は、立体化学（骨格キラル中心のパターン）及び化学修飾（塩基、糖及び／またはヌクレオチド間結合の修飾）あるいはそのパターンを最適化することによって調節することができる。
【０２３６】
一部の実施形態では、骨格キラル中心の共通パターン（たとえば、一本鎖ＲＮＡｉ剤における骨格キラル中心のパターン）は、ＯＳＯＳＯ、ＯＳＳＳＯ、ＯＳＳＳＯＳ、ＳＯＳＯ、ＳＯＳＯ、ＳＯＳＯＳ、ＳＯＳＯＳＯ、ＳＯＳＯＳＯＳＯ、ＳＯＳＳＳＯ、ＳＳＯＳＳＳＯＳＳ、ＳＳＳＯＳＯＳＳＳ、ＳＳＳＳＯＳＯＳＳＳＳ、ＳＳＳＳＳ、ＳＳＳＳＳＳ、ＳＳＳＳＳＳＳ、ＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＳＳＳＳＳＳＳＳＳ、またはＲＲＲというパターンを含み、式中、Ｓは、Ｓｐ配置のホスホロチオエートを示し、Ｏは、ホスホジエステルを示し、Ｒは、Ｒｐ配置のホスホロチオエートを示す。
【０２３７】
一部の実施形態では、非キラル中心は、ホスホジエステル結合である。一部の実施形態では、Ｓｐ配置のキラル中心は、ホスホロチオエート結合である。一部の実施形態では、非キラル中心は、ホスホジエステル結合である。一部の実施形態では、Ｓｐ配置のキラル中心は、ホスホロチオエート結合である。
【０２３８】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の立体化学パターンを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の立体化学パターンを含み、ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の立体化学パターンを含み、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の立体化学パターンを含み、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の立体化学パターンを含み、ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有し、立体化学パターンは、シード領域及び／またはポストシード領域に存在する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の立体化学パターンを含み、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有し、立体化学パターンは、シード領域及び／またはポストシード領域に存在する。
【０２３９】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の修飾または修飾パターンを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の修飾または修飾パターンを含み、ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の修飾パターンを含み、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の修飾パターンを含み、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の修飾パターンを含み、ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有し、修飾パターンは、シード領域及び／またはポストシード領域に存在する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載の任意の修飾パターンを含み、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有し、修飾パターンは、シード領域及び／またはポストシード領域に存在する。一部の実施形態では、修飾または修飾パターンは、糖の２’位の修飾または修飾パターンである。一部の実施形態では、修飾または修飾パターンは、糖の修飾または修飾パターンであり、こうした糖の修飾または修飾パターンは、たとえば、糖の２’位におけるもの（限定されないが、２’−デオキシ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−ＭＯＥ、及び２’−ＯＲ１（Ｒ１は、任意で置換されるＣ１−６アルキルである）が挙げられる）である。
【０２４０】
一部の実施形態では、本開示は、２’−Ｆ修飾が、とりわけ、一本鎖ＲＮＡ干渉を改善し得ることを示す。一部の実施形態では、本開示は、Ｓｐヌクレオチド間結合が、とりわけ、５’末端及び３’末端に位置すると、オリゴヌクレオチドの安定性を改善し得ることを示す。一部の実施形態では、本開示は、とりわけ、天然リン酸結合及び／またはＲｐヌクレオチド間結合が、系からのオリゴヌクレオチドの除去を改善し得ることを示す。当業者であれば理解することであるが、本開示によるそのような特性を評価するために、当該技術分野において知られるさまざまなアッセイを利用することができる。
【０２４１】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾糖部分を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの糖部分の５％以上が修飾される。
【０２４２】
一部の実施形態では、本開示は、第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、
第１の複数のオリゴヌクレオチドは、同じ塩基配列を有し、
第１の複数のオリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾糖部分を含むか、または１つ以上の天然リン酸結合及び１つ以上の修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０２４３】
一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾糖部分を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾糖部分を含む。
【０２４４】
一部の実施形態では、提供される組成物は、転写産物の一本鎖ＲＮＡ干渉を変化させ、その結果、望ましくない標的及び／または生物学的機能が抑制される。一部の実施形態では、そのような場合、提供される組成物は、ハイブリダイゼーション後に転写産物の切断も誘導することができる。
【０２４５】
一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドはそれぞれ、１つ以上の修飾糖部分及び／または１つ以上の修飾ヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドのそれぞれが含む非修飾糖部分の割合は約９５％以下である。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドのそれぞれが含む非修飾糖部分の割合は約５０％以下である。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドのそれぞれが含む非修飾糖部分の割合は約５％以下である。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドの各糖部分は、独立して修飾される。
【０２４６】
一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドはそれぞれ、２個以上の修飾ヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドはそれぞれ、３個以上の修飾ヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドはそれぞれ、４個以上の修飾ヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドはそれぞれ、５個以上の修飾ヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドはそれぞれ、１０個以上の修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０２４７】
一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドのそれぞれが含む天然リン酸結合の割合は約３０％以下である。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドのそれぞれが含む天然リン酸結合の割合は約２０％以下である。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドのそれぞれが含む天然リン酸結合の割合は約１０％以下である。一部の実施形態では、第１の複数のオリゴヌクレオチドのそれぞれが含む天然リン酸結合の割合は約５％以下である。
【０２４８】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１種以上の同位体の含有レベルが高められる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは標識され、この標識は、たとえば、１種以上の元素（たとえば、水素、炭素、窒素など）の１種以上の同位体によって行われる。一部の実施形態では、提供される組成物中の提供されるオリゴヌクレオチド、たとえば第１の複数のオリゴヌクレオチドは、塩基修飾、糖修飾、及び／またはヌクレオチド間結合修飾を含有し、オリゴヌクレオチドは、重水素の含有レベルが高められる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の位置が重水素で標識される（−１Ｈが−２Ｈで置き換えられる）。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは当該オリゴヌクレオチドに複合体化された任意の部分（たとえば、標的化部分、脂質部分など）の１つ以上の１Ｈが２Ｈで置き換えられる。かかるオリゴヌクレオチドを、本明細書に記載される任意の組成物または方法に使用することができる。
【０２４９】
本発明は、薬学的に許容可能な同位体標識化合物のすべてを含み、こうした化合物においては、同じ原子番号を有するが、天然に通常見られる原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子によって１個以上の原子が置き換えられる。
【０２５０】
本発明の化合物に含めるのに適した同位体の例としては、水素の同位体（２Ｈ及び３Ｈなど）、炭素の同位体（１１Ｃ、１３Ｃ、及び１４Ｃなど）、塩素の同位体（３６Ｃｌなど）、フッ素の同位体（１８Ｆなど）、ヨウ素の同位体（１２３Ｉ、１２４Ｉ、及び１２５Ｉなど）、窒素の同位体（１３Ｎ及び１５Ｎなど）、酸素の同位体（１５Ｏ、１７Ｏ、及び１８Ｏなど）、リンの同位体（３２Ｐなど）、ならびに硫黄の同位体（３５Ｓなど）が挙げられる。
【０２５１】
式（Ｉ）のある特定の同位体標識化合物（たとえば、放射性同位体が組み込まれたもの）は、薬物試験及び／または基質組織分布試験において有用である。放射性同位体である三重水素（すなわち、３Ｈ）及び炭素−１４（すなわち、１４Ｃ）は、その組み込みが容易であり、その検出手段が整っていることを考慮すると、この目的に特に有用である。
【０２５２】
重同位体（重水素（すなわち２Ｈ）など）での置き換えは、代謝安定性の向上（たとえば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の長期化）または必要投与量の低減に起因してある特定の治療利点が生じ得るため、状況によっては好ましくあり得る。
【０２５３】
陽電子放出同位体（１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ、及び１３Ｎなど）での置き換えは、基質の受容体占有を調べるための陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）試験において有用であり得る。
【０２５４】
同位体標識化合物は、一般に、当業者に知られる従来手法によって調製するか、または以前に利用された非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を使用して添付の実施例及び調製事例に記載のものと類似のプロセスによって調製することができる。
【０２５５】
本発明の化合物は、不斉中心またはキラル中心を含有し得ることから、異なる立体異性体で存在し得る。別段の指定がない限り、本発明の化合物のすべての立体異性体及びラセミ混合物を含むその混合物が、本発明の一部を形成することが意図される。さらに、本発明は、全ての幾何異性体及び位置異性体を包含する。たとえば、本発明の化合物が二重結合または縮合環を組み込んでいる場合、そのシス型とトランス型の両方及びその混合物が、本発明の範囲内に含まれる。
【０２５６】
本発明のキラル化合物（及びそのキラル前駆体）は、クロマトグラフィー、典型的には高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）または超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）を使用し、不斉固定相の樹脂上で、０〜５０％、典型的には２〜２０％のイソプロパノール、及び０〜５％のアルキルアミン、典型的には０．１％ジエチルアミン（ＤＥＡ）またはイソプロピルアミンを含有する、炭化水素、典型的にはヘプタンまたはヘキサンからなる移動相を用いることにより、エナンチオマー的に濃縮された形態で得ることができる。溶離液を濃縮すると、濃縮された混合物が得られる。
【０２５７】
ジアステレオマー混合物は、その物理化学的差異に基づいて、当業者に周知の方法によって、例えば、クロマトグラフィー及び／または分別結晶化などによって、個々のジアステレオマーに分離することができる。エナンチオマーは、適切な光学的に活性な化合物（例えば、キラルアルコールまたはモッシャー酸クロリドなどのキラル補助剤）との反応によってエナンチオマー混合物をジアステレオマー混合物に変換し、ジアステレオマーを分離し、個々のジアステレオマーを対応する純粋なエナンチオマーに変換すること（例えば、加水分解すること）によって、分離することができる。エナンチオマーはまた、キラルＨＰＬＣカラムの使用によって分離することもできる。あるいは、光学的に活性な出発物質を使用することによって、光学的に活性な試薬、基質、触媒もしくは溶媒を使用する不斉合成によって、または不斉変換により１つの立体異性体を他の立体異性体に変換することによって、特定の立体異性体を合成することもできる。
【０２５８】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの構造的要素の制御することで、所望の生物学的効果に対して顕著な影響を与えることができ、こうした構造的要素は、化学修飾（たとえば、糖の修飾、塩基の修飾、及び／またはヌクレオチド間結合の修飾）またはそのパターン、立体化学（たとえば、骨格のキラルヌクレオチド間結合の立体化学）の改変またはそのパターン、同じ元素の同位体での原子の置き換え、及び／または追加の化学的部分（たとえば、脂質部分、標的化部分など）との複合体化などである。一部の実施形態では、所望の生物学的効果は、２倍超に増進する。
【０２５９】
一部の実施形態では、所望の生物学的効果は、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少の誘導である。一部の実施形態では、所望の生物学的効果は、一本鎖ＲＮＡ干渉の改善である。一部の実施形態では、所望の生物学的効果は、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの改善である。一部の実施形態では、所望の生物学的効果は、一本鎖ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの改善である。
【０２６０】
一部の実施形態では、本開示は、第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、当該第１の複数のオリゴヌクレオチドは、
１）転写産物における標的配列に相補的な共通塩基配列を有し、
２）１つ以上の修飾糖部分及び修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０２６１】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド組成物は、それが一本鎖ＲＮＡ干渉系において転写産物と接触すると、組成物の非存在、参照組成物の存在、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される参照条件の下で観察されるものと比較して転写産物のＲＮＡｉ介在性ノックダウンが改善するという点において特徴付けられる。
【０２６２】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型は、
１）塩基配列、
２）骨格結合のパターン、
３）骨格キラル中心のパターン、及び
４）骨格リン修飾のパターン
によって定義され、
当該組成物は、特定のオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドに関して、同じ塩基配列を有するオリゴヌクレオチドの実質的なラセミ調製物と比較して当該組成物が富化されるという点においてキラル制御され、
当該オリゴヌクレオチド組成物は、それが一本鎖ＲＮＡ干渉系において転写産物と接触すると、組成物の非存在、参照組成物の存在、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される参照条件の下で観察されるものと比較して転写産物のＲＮＡｉ介在性ノックダウンが改善するという点において特徴付けられる。
【０２６３】
一部の実施形態では、連続ヌクレオシド単位はそれぞれ、独立して、修飾ヌクレオチド間結合の後及び／または前に位置する。一部の実施形態では、連続ヌクレオシド単位はそれぞれ、独立して、ホスホロチオエート結合の後及び／または前に位置する。一部の実施形態では、連続ヌクレオシド単位はそれぞれ、独立して、キラル制御された修飾ヌクレオチド間結合の後及び／または前に位置する。一部の実施形態では、連続ヌクレオシド単位はそれぞれ、独立して、キラル制御されたホスホロチオエート結合の後及び／または前に位置する。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチド間結合は、式Ｉの構造を有する。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチド間結合は、式Ｉ−ａの構造を有する。
【０２６４】
一部の実施形態では、本開示は、所定レベルの第１の複数のオリゴヌクレオチドを含む一本鎖ＲＮＡｉ剤を提供し、
第１の複数のオリゴヌクレオチドは、同じ塩基配列を有し、
第１の複数のオリゴヌクレオチドは、Ｓｐ修飾ヌクレオチド間結合を連続して２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、またはそれ以上含むシード領域と、Ｓｐ修飾ヌクレオチド間結合を連続して２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０個、またはそれ以上含むポストシード領域と、を含む。
【０２６５】
一部の実施形態では、シード領域は、Ｓｐ修飾ヌクレオチド間結合を連続して２つ以上含む。
【０２６６】
一部の実施形態では、修飾ヌクレオチド間結合は、式Ｉの構造を有する。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチド間結合は、式Ｉ−ａの構造を有する。
【０２６７】
本開示に記載されるように、一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド組成物は、それが一本鎖ＲＮＡ干渉系において転写産物と接触すると、組成物の非存在、参照組成物の存在、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される参照条件の下で観察されるものと比較して転写産物のＲＮＡｉ介在性ノックダウンが改善するという点において特徴付けられる。
【０２６８】
一部の実施形態では、本開示は、第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、第１の複数のオリゴヌクレオチドは、
１）共通の塩基配列及び長さ、
２）骨格結合の共通パターン、及び
３）骨格キラル中心の共通パターン
を有することによって定義され、当該組成物は、当該組成物中の所定レベルのオリゴヌクレオチドが、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するという点で、単一オリゴヌクレオチドの実質的に純粋な調製物である。
【０２６９】
一部の実施形態では、共通の塩基配列及び長さは、共有塩基配列と呼称される場合がある。一部の実施形態では、共通塩基配列を有するオリゴヌクレオチドは、同じパターンのたとえば糖修飾、塩基修飾などのヌクレオシド修飾を有してもよい。一部の実施形態では、ヌクレオシド修飾のパターンは、位置と修飾の組み合わせにより表される場合がある。一部の実施形態では、骨格結合のパターンは、それぞれのヌクレオチド間結合の位置及び型（たとえば、リン酸、ホスホロチオエート、置換ホスホロチオエートなど）を含む。ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの骨格キラル中心のパターンは、５’から３’にかけての結合リン立体化学（Ｒｐ／Ｓｐ）の組み合わせによって指定することができる。上に例示さえるように、非キラル結合の位置は、たとえば、骨格結合のパターンから把握され得る。
【０２７０】
当業者に理解されるように、オリゴヌクレオチドの立体不規則的調製物またはラセミ調製物は、多くの場合、いずれのキラル補助基、キラル修飾試薬及び／またはキラル触媒も使用しない、非立体選択的及び／または低立体選択的なヌクレオチドモノマーのカップリングにより調製される。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの実質的にラセミな（またはキラル的に非制御な）調製物において、全てまたは大部分のカップリングステップが、当該カップリングステップは立体選択性の強化をもたらすように特異的に実施されていないという点で、キラル的に制御されていない。オリゴヌクレオチドの実質的にラセミな調製物の例は、当分野に公知のプロセスである、テトラエチルチウラムジスルフィドまたは（ＴＥＴＤ）または３Ｈ−１，２−ベンゾジチオール（ｂｅｎｓｏｄｉｔｈｉｏｌ）−３−オン  １，１−ジオキシド（ＢＤＴＤ）のいずれかを用いた、一般的に使用されるホスホロアミダイトオリゴヌクレオチド合成から、亜リン酸トリエステルを硫化することによる、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの調製物である。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの実質的にラセミな調製物は、実質的にラセミなオリゴヌクレオチド組成物（またはキラル非制御なオリゴヌクレオチド組成物）を提供する。
【０２７１】
当業者に理解されるように、一部の実施形態では、カップリングまたは結合のジアステレオ選択性は、同一または同等の条件下での二量体生成のジアステレオ選択性を介して評価することができ、ここで、当該二量体は、同じ５’−ヌクレオシド及び３’−ヌクレオシドならびにヌクレオチド間結合を有する。
【０２７２】
一部の実施形態では、本開示は、第１の複数のオリゴヌクレオチドのキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供し、当該組成物は、単一オリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドに関して、同じオリゴヌクレオチドの実質的なラセミ調製物と比較して富化されるという点においてキラル制御される。一部の実施形態では、本開示は、第１の複数のオリゴヌクレオチドのキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供し、当該組成物は、単一オリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドに関して、同じオリゴヌクレオチドの実質的なラセミ調製物と比較して富化され、当該単一オリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドは、
１）共通の塩基配列及び長さ、
２）骨格結合の共通パターン、及び
３）骨格キラル中心の共通パターン
を共有する。
【０２７３】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物を提供し、オリゴヌクレオチドは、
１）共通の塩基配列及び長さ、
２）骨格結合の共通パターン、及び
３）骨格キラル中心の共通パターン
によって特徴付けられる特定のオリゴヌクレオチド型のものであり、
当該組成物は、特定のオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドに関して、同じ塩基配列と長さを有するオリゴヌクレオチドの実質的なラセミ調製物と比較して、富化されているという点でキラル制御される。
【０２７４】
一部の実施形態では、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターン及び塩基修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターン及びヌクレオシド修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するオリゴヌクレオチドは、同一の構造を有する。
【０２７５】
一部の実施形態では、あるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターン及び糖修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、あるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターン及び塩基修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、あるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターン及びヌクレオシド修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、あるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドは、同一である。
【０２７６】
一部の実施形態では、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターン及びヌクレオシド修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターン及び糖修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターン及び塩基修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターン及びヌクレオシド修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、共通の塩基配列と長さ、骨格結合の共通パターン、及び骨格キラル中心の共通パターンを有するオリゴヌクレオチドは、同一である。
【０２７７】
一部の実施形態では、提供される組成物中のオリゴヌクレオチドは、骨格リン修飾の共通パターンを有する。一部の実施形態では、共通塩基配列は、あるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型の塩基配列である。一部の実施形態では、提供される組成物は、当該組成物が個々のオリゴヌクレオチド型の第１の複数のオリゴヌクレオチドを所定レベルで含むという点においてキラル制御されたＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物であり、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型は、
１）塩基配列、
２）骨格結合のパターン、
３）骨格キラル中心のパターン、及び
４）骨格リン修飾のパターン
によって定義される。
【０２７８】
上述され、当分野に置いて理解されるように、一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列は、当該オリゴヌクレオチド中のヌクレオシド残基の同一性及び／または修飾の状態（たとえば、アデニン、シトシン、グアノシン、チミン、及びウラシルなどの標準的な天然ヌクレオチドと比較した、糖及び／または塩基の構成要素の状態）を指すことができ、及び／またはかかる残基のハイブリダイゼーション特性（すなわち、特定の相補的残基とハイブリダイズする能力）を指すことができる。
【０２７９】
一部の実施形態では、特定のオリゴヌクレオチド型は、同じ塩基配列（長さを含む）、糖及び塩基部分への同じ化学修飾パターン、同じ骨格結合パターン（たとえば、天然リン酸結合、ホスホロチオエート結合、ホスホロチオエートトリエステル結合、及びそれらの組み合わせのパターン）、同じ骨格キラル中心パターン（たとえば、キラルヌクレオチド間結合の立体化学（Ｒｐ／Ｓｐ）パターン）、及び同じ骨格リン修飾パターン（たとえば、ヌクレオチド間リン原子上の修飾パターン、たとえば式Ｉの−Ｓ−、及び−Ｌ−Ｒ１）を有するという点で化学的に同一である。
【０２８０】
とりわけ、本開示は、オリゴヌクレオチドの構造的要素（たとえば、化学修飾のパターン、骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または骨格リン修飾のパターン）を組み合わせることで、特性（生物活性など）を驚くほど改善できることを認識するものである。
【０２８１】
一部の実施形態では、提供されるキラル制御された（及び／または立体化学的に純粋な）調製物は、ＲＮＡｉ剤オリゴヌクレオチドである。
【０２８２】
一部の実施形態では、提供されるキラル制御された（及び／または立体化学的に純粋な）調製物は、１個以上の修飾された骨格結合、塩基、及び／または糖を含むオリゴヌクレオチドの調製物である。
【０２８３】
一部の実施形態では、提供される組成物は、糖部分で修飾される１つ以上の残基を含むオリゴヌクレオチドを含む。一部の実施形態では、提供される組成物は、糖部分の２’位で修飾される（本明細書において、「２’−修飾」と呼称される）残基を１個以上含むオリゴヌクレオチドを含む。そのような修飾の例は、上述及び本明細書に記載され、２’−ＯＭｅ、２’−ＭＯＥ、２’−ＬＮＡ、２’−Ｆ、ＦＲＮＡ、ＦＡＮＡ、Ｓ−ｃＥｔなどが挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、提供される組成物は、２’−修飾される残基を１個以上含むオリゴヌクレオチドを含む。たとえば、一部の実施形態において、提供されるオリゴヌクレオチドは、２’−Ｏ−メトキシエチル（２’−ＭＯＥ）修飾される残基を１個以上含む。一部の実施形態では、提供される組成物は、任意の２’−修飾を含まないオリゴヌクレオチドを含む。一部の実施形態では、提供される組成物は、任意の２’−ＭＯＥ残基を含まないオリゴヌクレオチドである。すなわち一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＭＯＥ修飾されない。糖修飾の追加例は、本開示に記載される。
【０２８４】
一部の実施形態では、１個以上は、１個である。一部の実施形態では、１個以上は、２個である。一部の実施形態では、１個以上は、３個である。一部の実施形態では、１個以上は、４個である。一部の実施形態では、１個以上は、５個である。一部の実施形態では、１個以上は、６個である。一部の実施形態では、１個以上は、７個である。一部の実施形態では、１個以上は、８個である。一部の実施形態では、１個以上は、９個である。一部の実施形態では、１個以上は、１０個である。一部の実施形態では、１個以上は、少なくとも１個である。一部の実施形態では、１個以上は、少なくとも２個である。一部の実施形態では、１個以上は、少なくとも３個である。一部の実施形態では、１個以上は、少なくとも４個である。一部の実施形態では、１個以上は、少なくとも５個である。一部の実施形態では、１個以上は、少なくとも６個である。一部の実施形態では、１個以上は、少なくとも７個である。一部の実施形態では、１個以上は、少なくとも８個である。一部の実施形態では、１個以上は、少なくとも９個である。一部の実施形態では、１個以上は、少なくとも１０個である。
【０２８５】
一部の実施形態では、２’−修飾のない糖部分は、天然ＤＮＡヌクレオシド中に存在する糖部分である。
【０２８６】
当業者であれば、標的転写産物の様々な領域が、提供される組成物及び方法により標的化され得ることを理解する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの塩基配列は、イントロン配列を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの塩基配列は、エクソン配列を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの塩基配列は、イントロン配列とエクソン配列を含む。
【０２８７】
当業者に理解されるように、提供されるオリゴヌクレオチド及び組成物は特に、非常に多くの核酸ポリマーを標的とすることができる。たとえば一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド及び組成物は、核酸配列の転写産物を標的とすることができ、ここで、オリゴヌクレオチドの共通塩基配列（たとえば、あるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型の塩基配列）は、その転写産物の配列に対し相補的な配列であるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、共通塩基配列は、標的の配列に対し相補的な配列を含む。一部の実施形態では、共通塩基配列は、標的の配列に対し相補的な配列である。一部の実施形態では、共通塩基配列は、標的の配列に対し１００％相補的な配列であるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、共通塩基配列は、標的の配列に対し１００％相補的な配列を含む。一部の実施形態では、共通塩基配列は、標的の配列に対し１００％相補的な配列である。
【０２８８】
Ｉ
【０２８９】
一部の実施形態では、共通塩基配列は、特徴的な配列要素に対し相補的な配列であるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、共通塩基配列は、特徴的な配列要素に対し相補的な配列を含む。一部の実施形態では、共通塩基配列は、特徴的な配列要素に対し相補的な配列である。一部の実施形態では、共通塩基配列は、特徴的な配列要素に対し１００％相補的な配列であるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、共通塩基配列は、特徴的な配列要素に対し１００％相補的な配列を含む。一部の実施形態では、共通塩基配列は、特徴的な配列要素に対し１００％相補的な配列である。本明細書の実施形態の一部では、特徴的な配列要素は、非限定的な例として、シード領域、ポストシード領域、またはシード領域の一部、またはポストシード領域の一部、または３’末端ジヌクレオチドである。
【０２９０】
一部の実施形態では、特徴的な配列要素は、変異を含むか、または変異である。一部の実施形態では、特徴的な配列要素は、変異を含む。一部の実施形態では、特徴的な配列要素は、変異である。一部の実施形態では、特徴的な配列要素は、点変異を含むか、または点変異である。一部の実施形態では、特徴的な配列要素は、点変異を含む。一部の実施形態では、特徴的な配列要素は、点変異である。一部の実施形態では、特徴的な配列要素は、ＳＮＰを含むか、またはＳＮＰである。一部の実施形態では、特徴的な配列要素は、ＳＮＰを含む。一部の実施形態では、特徴的な配列要素は、ＳＮＰである。
【０２９１】
一部の実施形態では、共通塩基配列は、標的配列と１００％マッチし、当該標的配列は、標的配列の類似配列とは１００％マッチしない。
【０２９２】
特に本開示は、塩基配列は、オリゴヌクレオチドの特性に影響を与え得ると認識している。一部の実施形態では、ある塩基配列を有するオリゴヌクレオチドが、たとえばＲＮａｓｅ  Ｈを含む経路を介した標的の抑制に利用されるとき、当該塩基配列は標的の切断パターンに影響を与え得る。たとえば、異なる配列を有する構造的には類似な（すべてのホスホロチオエート結合、すべての立体化学）オリゴヌクレオチドは、異なる切断パターンを有し得る。
【０２９３】
一部の実施形態では、共通塩基配列は、ＳＮＰを含む塩基配列である。
【０２９４】
当業者であれば理解することであるが、提供されるオリゴヌクレオチド組成物及び方法は、当業者に知られるさまざまな用途を有する。提供される組成物の評価方法、ならびにその特性及び用途もまた、当業者によって広く知られ、実践されている。特性、用途、及び／または方法の例としては、限定されないが、ＷＯ／２０１４／０１２０８１及びＷＯ／２０１５／１０７４２５に記載のものが挙げられる。
【０２９５】
一部の実施形態では、キラルヌクレオチド間結合は、式Ｉの構造を有する。一部の実施形態では、キラルヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエートである。一部の実施形態では、提供される組成物の単一のオリゴヌクレオチド中の各キラルヌクレオチド間結合は、式Ｉの構造を有する。一部の実施形態では、提供される組成物の単一のオリゴヌクレオチド中の各キラルヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエートである。
【０２９６】
一部の実施形態では、本開示のオリゴヌクレオチドは、１個以上の修飾糖部分を含む。一部の実施形態では、本開示のオリゴヌクレオチドは、１個以上の修飾塩基部分を含む。当業者には公知であり、及び本開示に記載されるように、様々な修飾を当及び／または部分に導入することができる。たとえば一部の実施形態では、修飾は、ＵＳ９００６１９８、ＷＯ２０１４／０１２０８１、及びＷＯ／２０１５／１０７４２５に記載される修飾であり、それら各々の糖修飾及び塩基修飾は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２９７】
一部の実施形態では、糖修飾は、２’−修飾である。普遍的に使用される２’−修飾としては限定されないが、２’−ＯＲ１が挙げられ、式中、Ｒ１は水素ではない。一部の実施形態では、修飾は２’−ＯＲであり、式中、Ｒは任意で置換される脂肪族である。一部の実施形態では、修飾は、２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、修飾は、２’−Ｏ−ＭＯＥである。一部の実施形態では、本開示は、特定のキラル的に純粋なヌクレオチド間結合の含有及び／または配置は、修飾された骨格結合、塩基、及び／または糖の使用を介して達成されるものに匹敵、またはより優れた安定性の改善をもたらし得ることを示す。一部の実施形態では、提供される組成物の提供される単一オリゴヌクレオチドは、糖上に修飾を有さない。一部の実施形態では、提供される組成物の提供される単一オリゴヌクレオチドは、糖の２’−位置上に修飾を有さない（すなわち、２’−位置の２個の基は、−Ｈ／−Ｈまたは−Ｈ／−ＯＨのいずれかである）。一部の実施形態では、提供される組成物の提供される単一オリゴヌクレオチドは、２’−ＭＯＥ修飾を１個も有さない。
【０２９８】
一部の実施形態では、２’−修飾は、−Ｏ−Ｌ−または−Ｌ−であり、それらは糖部分の２’−炭素を、糖部分の別の炭素に繋げる。一部の実施形態では、２’−修飾は、−Ｏ−Ｌ−または−Ｌ−であり、それらは糖部分の２’−炭素を、糖部分の４’−炭素に繋げる。一部の実施形態では、２’−修飾は、Ｓ−ｃＥｔである。一部の実施形態では、修飾糖部分は、ＬＮＡ部分である。
【０２９９】
一部の実施形態では、２’−修飾は、−Ｆである。一部の実施形態では、２’−修飾は、ＦＡＮＡである。一部の実施形態では、２’−修飾は、ＦＲＮＡである。
【０３００】
一部の実施形態では、糖修飾は、５’−修飾であり、たとえばＲ−５’−Ｍｅ、Ｓ−５’−Ｍｅなどである。
【０３０１】
一部の実施形態では、糖修飾は、糖の環のサイズを変化させる。一部の実施形態では、糖修飾は、ＦＨＮＡ中の糖部分である。
【０３０２】
一部の実施形態では、糖修飾は、糖部分を、別の環式部分または非環式部分と置き換える。このような部分の例は当分野に広く公知であり、限定されないが、モルホリノで（任意でそのホスホロジアミデート結合とともに）使用されるもの、グリコール核酸などが挙げられる。
【０３０３】
一部の実施形態では、ｓｓＲＮＡｉ剤は、図１またはその他の箇所で本明細書に記載される任意の形式の任意のｓｓＲＮＡｉからなる群から選択されるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドであるか、または当該オリゴヌクレオチドを含む。当業者であれば、本明細書を読めば、ｓｓＲＮＡｉ剤と表記される本明細書に記載のオリゴヌクレオチドはいずれも、別の機序（たとえば、アンチセンスオリゴヌクレオチドとしてのもの、ＲＮａｓｅ  Ｈ機序を介してノックダウンを媒介するもの、翻訳を立体的に妨害するもの、または任意の他の生化学的機序）を介して付加的または代替的に機能し得るという可能性を本開示が明確に排除しないことを理解するであろう。
【０３０４】
一部の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は、図２に記載の任意の形式の任意のオリゴヌクレオチドからなる群から選択されるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドであるか、または当該オリゴヌクレオチドを含む。当業者であれば、本明細書を読めば、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）と表記される本明細書に記載のオリゴヌクレオチドはいずれも、別の機序（たとえば、ＲＩＳＣを利用するｓｓＲＮＡｉとしてのもの）を介して付加的または代替的に機能し得るという可能性を本開示が明確に排除しないことを理解するであろう。本開示は、異なる機序（ＲＮａｓｅ  Ｈを利用するもの、翻訳または他の転写後プロセスを立体的に遮断するもの、標的核酸の立体構造を変えるものなど）を介してさまざまなＡＳＯが機能し得ることも明記する。
【０３０５】
一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、ＷＶ−２１１１、ＷＶ−２１１３、ＷＶ−２１１４、ＷＶ−２１４８、ＷＶ−２１４９、ＷＶ−２１５２、ＷＶ−２１５３、ＷＶ−２１５６、ＷＶ−２１５７、ＷＶ−２３８７、ＷＶ−３０６９、ＷＶ−７５２３、ＷＶ−７５２４、ＷＶ−７５２５、ＷＶ−７５２６、ＷＶ−７５２７、ＷＶ−７５２８、及び図１Ｌの形式Ｓ４０〜Ｓ４２のいずれかの任意のオリゴヌクレオチド、または図１の形式３０〜３２、形式６６〜６９、もしくは形式１０１〜１０３のいずれかの任意のオリゴヌクレオチド、からなる群から選択されるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドであるか、または当該オリゴヌクレオチドを含む。当業者であれば、本明細書を読めば、ハイブリッドオリゴヌクレオチドと表記される本明細書に記載のオリゴヌクレオチドはいずれも、別の機序（たとえば、アンチセンスオリゴヌクレオチドとしてのもの、ＲＮａｓｅ  Ｈ機序を介してノックダウンを媒介するもの、翻訳を立体的に妨害するもの、または任意の他の生化学的機序）を介して付加的または代替的に機能し得るという可能性を本開示が明確に排除しないことを理解するであろう。
【０３０６】
キラル制御されたオリゴヌクレオチド、及びキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣが関与しない生化学的機序（限定されないが、遺伝子発現のＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたは立体障害が挙げられる）を介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子ｍＲＮＡへのアニーリング後の翻訳の立体的な遮断、及び／またはｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御される。
【０３０７】
本開示は、粗純度が高いか、またはジアステレオマー純度が高い、キラル制御されたオリゴヌクレオチド及びキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、粗純度が高い、キラル制御されたオリゴヌクレオチド及びキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ジアステレオマー純度が高い、キラル制御されたオリゴヌクレオチド及びキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供する。
【０３０８】
一部の実施形態では、ある１つのオリゴヌクレオチド型のものではないオリゴヌクレオチドが組成物に存在するならば、こうしたオリゴヌクレオチドが、当該オリゴヌクレオチド型の調製プロセスに由来する（場合によっては、ある特定の精製手順の後の）不純物であるという点において、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型の実質的に純粋な調製物である。
【０３０９】
一部の実施形態では、本開示は、キラル結合リンに関し、１個以上のジアステレオマー的に純粋なヌクレオチド間結合を含むオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、式Ｉの構造を有するジアステレオマー的に純粋なヌクレオチド間結合を１個以上含むオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、キラル結合リンに関し、ジアステレオマー的に純粋なヌクレオチド間結合を１個以上含有し、及び１個以上のリン酸ジエステル結合を含むオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では本開示は、式Ｉの構造を有するジアステレオマー的に純粋なヌクレオチド間結合を１個以上、及びリン酸ジエステル結合を１個以上含むオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では本開示は、式Ｉ−ｃの構造を有するジアステレオマー的に純粋なヌクレオチド間結合を１個以上、及びリン酸ジエステル結合を１個以上含むオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態ではかかるオリゴヌクレオチドは、本出願に記載される、立体選択的オリゴヌクレオチド合成を使用することにより調製され、キラル結合リンに関して予め設計されたジアステレオマー的に純粋なヌクレオチド間結合を形成する。ヌクレオチド間結合の例としては、式Ｉの構造を有するものが挙げられ、ヌクレオチド間結合の例は、以下にさらに記載される。
【０３１０】
一部の実施形態では、本開示は、キラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、オリゴヌクレオチド内の個々のヌクレオチド間結合のうちの少なくとも２つが、互いに異なる立体化学及び／または互いに異なるＰ−修飾を有する。
【０３１１】
ヌクレオチド間結合
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣが関与しない生化学的機序（限定されないが、遺伝子発現のＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたは立体障害が挙げられる）を介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子ｍＲＮＡへのアニーリング後の翻訳の立体的な遮断、及び／またはｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意のヌクレオチド間結合を含む。
【０３１２】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンとの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意のヌクレオチド間結合を含み得る。
【０３１３】
ヌクレオチド間結合または非修飾ヌクレオチド間結合の非限定的な例は、ホスホジエステルであり、修飾ヌクレオチド間結合の非限定的な例としては、ホスホジエステルの１つ以上の酸素が、非限定的な例として、硫黄（ホスホロチオエートに見られるもの）、Ｈ、アルキル、または別の部分もしくは酸素ではない元素、によって置き換えられているものが挙げられる。ヌクレオチド間結合の非限定的な例は、リンを含まないが、２つの糖の連結に役立つ部分である。ヌクレオチド間結合の非限定的な例は、リンを含まないが、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの骨格における２つの糖の連結に役立つ部分である。ヌクレオチド、修飾ヌクレオチド、ヌクレオチドアナログ、ヌクレオチド間結合、修飾ヌクレオチド間結合、塩基、修飾塩基、及び塩基アナログ、糖、修飾糖、及び糖アナログ、ならびにヌクレオシド、修飾ヌクレオシド、及びヌクレオシドアナログの非限定的な例は、本明細書にさらに開示される。
【０３１４】
ある特定の実施形態では、ヌクレオチド間結合は、以下の式Ｉの構造を有する：
【化２】
2020522265.tif 000003
式中、各可変部分は、以下に定義され、及び記載されるとおりである。一部の実施形態では、式Ｉの結合は、キラルである。一部の実施形態では、本開示は、式Ｉの修飾ヌクレオチド間結合を１個以上含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、式Ｉの修飾ヌクレオチド間結合を１個以上含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、及びここで、当該オリゴヌクレオチド内の式Ｉの個々のヌクレオチド間結合は、互いに異なるＰ−修飾を有する。一部の実施形態では、本開示は、式Ｉの修飾ヌクレオチド間結合を１つ以上含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、オリゴヌクレオチド内の式Ｉの個々のヌクレオチド間結合は、互いに異なる−Ｘ−Ｌ−Ｒ１を有する。一部の実施形態では、本開示は、式Ｉの修飾ヌクレオチド間結合を１つ以上含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、オリゴヌクレオチド内の式Ｉの個々のヌクレオチド間結合は、互いに異なるＸを有する。一部の実施形態では、本開示は、式Ｉの修飾ヌクレオチド間結合を１つ以上含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、オリゴヌクレオチド内の式Ｉの個々のヌクレオチド間結合は、互いに異なる−Ｌ−Ｒ１を有する。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、特定のオリゴヌクレオチド型のものである提供される組成物におけるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、共通の塩基配列及び長さ、共通の骨格結合パターン、及び共通の骨格キラル中心パターンを有する、提供される組成物におけるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、特定のオリゴヌクレオチド型の組成物であるキラル制御された組成物中のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドであり、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、当該型のオリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、所定レベルの複数のオリゴヌクレオチドを含む提供される組成物中のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドであり、当該複数のオリゴヌクレオチドは、共通塩基配列、共通パターンの骨格結合、及び共通パターンの骨格キラル中心を共有し、及びキラル制御されたオリゴヌクレオチドは、共通塩基配列、共通パターンの骨格結合、及び共通パターンの骨格キラル中心を共有する。
【０３１５】
一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、異なるヌクレオチド間リン結合を含む。
【０３１６】
一部の実施形態では、ホスホロチオエートトリエステル結合は、キラル補助基を含有し、たとえばそれを使用して、反応の立体選択性を制御する。一部の実施形態では、ホスホロチオエートトリエステル結合は、キラル補助基を含まない。一部の実施形態では、ホスホロチオエートトリエステル結合は、対象への投与まで、及び／または対象への投与の間、意図的に維持される。
【０３１７】
一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、固形支持体に結合される。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、固形支持体から切り離される。
【０３１８】
一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、少なくとも１個のリン酸ジエステルヌクレオチド間結合と、少なくとも２個の連続的な修飾ヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、少なくとも１個のリン酸ジエステルヌクレオチド間結合と、少なくとも２個の連続的なホスホロチオエートトリエステルヌクレオチド間結合を含む。
【０３１９】
一部の実施形態では、本開示は、提供される複数のオリゴヌクレオチドからなる、またはこれを含む組成物を提供する（たとえばキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物）。一部の実施形態では、そのような提供されるオリゴヌクレオチドはすべて同じ型のものである。すなわち、すべてが、同じ塩基配列、骨格結合パターン（すなわち、ヌクレオチド間結合型のパターン、例えば、リン酸、ホスホロチオエートなど）、骨格キラル中心パターン（すなわち、結合リン立体化学のパターン（Ｒｐ／Ｓｐ））、及び骨格リン修飾パターン（たとえば、本明細書に開示の式Ｉの「−ＸＬＲ１」基のパターン）を有する。一部の実施形態では、同じオリゴヌクレオチド型のすべてが、同一である。しかしながら多くの実施形態において、提供される組成物は複数のオリゴヌクレオチド型を、典型的には所定の相対量で含む。
【０３２０】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンとの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意のヌクレオチド間結合を含み得る。一部の実施形態では、ＡＳＰＧＲと結合する部分（たとえば、ＧａｌＮＡｃ部分）は、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意のＧａｌＮＡｃまたはそのバリアントもしくは修飾物である。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンとの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるか、または当該技術分野において知られる任意のヌクレオチド間結合を、本明細書に記載の任意の他の構造的要素または修飾と組み合わせて含み得、こうした他の構造的要素または修飾としては、限定されないが、塩基配列もしくはその一部、糖、塩基（核酸塩基）、立体化学もしくはそのパターン、追加の化学的部分（限定されないが、標的化部分、脂質部分、炭水化物部分などが挙げられる）、シード領域、ポストシード領域、５’末端構造、５’末端領域、５’ヌクレオチド部分、３’末端領域、３’末端ジヌクレオチド、３’末端キャップ、長さ、追加の化学的部分（限定されないが、標的化部分、脂質部分、ＧａｌＮＡｃなどが挙げられる）、形式もしくはその任意の構造的要素、及び／または本明細書に記載の任意の他の構造的要素もしくは修飾が挙げられる。一部の実施形態では、本開示は、任意のそのようなオリゴヌクレオチドの多量体に関する。
【０３２１】
一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾ヌクレオチド間リン結合を含む。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドは、たとえば、ホスホロチオエートまたはホスホロチオエートトリエステル結合を含む。
【０３２２】
一部の実施形態では、修飾ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエートである。一部の実施形態では、修飾ヌクレオチド間結合は、たとえば、以下に記載されるものから選択される：ＵＳ２０１１０２９４１２４、ＵＳ２０１２０３１６２２４、ＵＳ２０１４０１９４６１０、ＵＳ２０１５０２１１００６、ＵＳ２０１５０１９７５４０、ＷＯ２０１５１０７４２５、ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４３５４２、及びＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４３５９８、Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２００８  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ４９：６９８４−６９８７。
【０３２３】
ヌクレオチド間結合の非限定的な例としては、当分野に報告されるものなどが挙げられ、限定されないが、以下のいずれかに記載されるものが挙げられる：Ｇｒｙａｚｎｏｖ，Ｓ．；Ｃｈｅｎ，Ｊ．−Ｋ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９４，１１６，３１４３、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９３，５８，２９８３、Ｋｏｓｈｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．１９９８  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ５４：３６０７−３６３０、Ｌａｕｒｉｔｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．２００２  Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．５：５３０−５３１、Ｌａｕｒｉｔｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．２００３  Ｂｉｏｏ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１３：２５３−２５６、Ｍｅｓｍａｅｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．，Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９９４，３３，２２６、Ｐｅｔｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．２００３  ＴＲＥＮＤＳ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．２１：７４−８１、Ｓｃｈｕｌｔｚ  ｅｔ  ａｌ．１９９６  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２４：２９６６、Ｔｓ'ｏ  ｅｔ  ａｌ．Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１９８８，５０７，２２０、及びＶａｓｓｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９２，１１４，４００６。
【０３２４】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、ここで、１個以上のＵが、Ｔと置き換えられる。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、当該配列は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列と５０％を超える同一性を有する。
【０３２５】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列を有するキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または骨格リン修飾のパターンを有する。
【０３２６】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、ここで、１個以上のＴが、Ｕで置換される。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、当該配列は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列と５０％を超える同一性を有する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、当該配列は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列と６０％を超える同一性を有する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、当該配列は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列と７０％を超える同一性を有する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、当該配列は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列と８０％を超える同一性を有する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、当該配列は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列と９０％を超える同一性を有する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、当該配列は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列と９５％を超える同一性を有する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列を有するキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供する。
【０３２７】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、
ここで、少なくとも１つのヌクレオチド間結合は、
【化３】
2020522265.tif 000004
である。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列を含むキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、ここで、各ヌクレオチド間結合は、
【化４】
2020522265.tif 000005
である。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドに見られる配列を有するキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、ここで、少なくとも１つのヌクレオチド間結合は、
【化５】
2020522265.tif 000006
である。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列を有するキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、ここで、各ヌクレオチド間結合は、
【化６】
2020522265.tif 000007
である。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列を有するキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、ここで、各シトシンは任意で、及び独立して、５−メチルシトシンにより置き換えられる。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列を有するキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、ここで、少なくとも１つのシトシンは任意で、及び独立して、５−メチルシトシンにより置き換えられる。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの配列を有するキラル制御されたオリゴヌクレオチドを提供し、ここで、各シトシンは任意で、及び独立して、５−メチルシトシンにより置き換えられる。
【０３２８】
塩基（核酸塩基）
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣが関与しない生化学的機序（限定されないが、遺伝子発現のＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたは立体障害を含む）を介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子ｍＲＮＡへのアニーリング後の翻訳の立体的な遮断、及び／またはｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の核酸塩基を含む。
【０３２９】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド中に存在する核酸塩基は、天然の核酸塩基、または天然核酸塩基から誘導された修飾核酸塩基である。例としては、限定されないが、それぞれのアミノ基がアシル保護基により保護されているウラシル、チミン、アデニン、シトシン、及びグアニンと、フルオロウラシル、２−フルオロシトシン、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、２，６−ジアミノプリン、アザシトシン、疑似イソシトシンや疑似ウラシルなどのピリミジンアナログ、８−置換のプリン、キサンチン、またはヒポキサンチンなどのその他の修飾核酸塩基が挙げられる（最後の２つは、自然分解生成物である）。修飾核酸塩基の例は、Ｃｈｉｕ  ａｎｄ  Ｒａｎａ，ＲＮＡ，２００３，９，１０３４−１０４８，Ｌｉｍｂａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９４，２２，２１８３−２１９６及びＲｅｖａｎｋａｒ  ａｎｄ  Ｒａｏ，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｖｏｌ．７，３１３に記載されている。いくつかの実施形態において、修飾された核酸塩基は、置換されたウラシル、チミン、アデニン、シトシンまたはグアニンである。いくつかの実施形態において、修飾核酸塩基は、例えば、ウラシル、チミン、アデニン、シトシンまたはグアニンの水素結合及び／または塩基対形成に関する、機能的な置き換えである。いくつかの実施形態において、核酸塩基は任意で、置換されたウラシル、チミン、アデニン、シトシン、５−メチルシトシンまたはグアニンである。いくつかの実施形態において、核酸塩基は、ウラシル、チミン、アデニン、シトシン、５−メチルシトシンまたはグアニンである。
【０３３０】
一部の実施形態では、修飾塩基は任意で、置換されたアデニン、シトシン、グアニン、チミンまたはウラシルである。いくつかの実施形態において、修飾核酸塩基は独立して、１つ以上の修飾によって修飾されたアデニン、シトシン、グアニン、チミンまたはウラシルであり、当該修飾により：
（１）核酸塩基は、アシル、ハロゲン、アミノ、アジド、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、カルボキシル、ヒドロキシル、ビオチン、アビジン、ストレプトアビジン、置換シリル、及びこれらの組み合わせから独立して選択される、１個以上の任意で置換される基によって修飾され、
（２）核酸塩基の１個以上の原子が独立して、炭素、窒素または硫黄から選択される異なる原子で置き換えられ、
（３）核酸塩基中の１つ以上の二重結合が、独立して水素化されているか、または
（４）１個以上のアリール環またはヘテロアリール環は独立して核酸塩基に挿入される。
【０３３１】
様々な追加の核酸塩基が当分野で記載されている。
【０３３２】
糖類
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣが関与しない生化学的機序（限定されないが、遺伝子発現のＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたは立体障害を含む）を介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子ｍＲＮＡへのアニーリング後の翻訳の立体的な遮断、及び／またはｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の糖を含む。
【０３３３】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する、提供されるオリゴヌクレオチドは、天然糖部分に加えて、１個以上の修飾糖部分を含む。
【０３３４】
最も普遍的な天然ヌクレオチドは、核酸塩基のアデノシン（Ａ）、シトシン（Ｃ）、グアニン（Ｇ）、及びチミン（Ｔ）またはウラシル（Ｕ）に結合したリボース糖から構成される。また、ヌクレオチド内のリン酸基または結合したリン酸が、糖または修飾された糖のさまざまな位置に結合可能である修飾されたヌクレオチドが企図される。非限定的な例としては、リン酸基または結合リンは、糖または修飾糖の２’’、３’’、４’’または５’’のヒドロキシル部分に結合可能である。本明細書中で記載される修飾核酸塩基を組み込むヌクレオチドもまたこの文脈において予期される。一部の実施形態において、保護されていない−ＯＨ部分を含むヌクレオチドまたは修飾ヌクレオチドが、本開示方法に従い使用される。
【０３３５】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の塩基（核酸塩基）、修飾塩基または塩基アナログを含み得る。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の他の構造的要素または修飾、たとえば、限定されないが、塩基配列もしくはその一部、糖；ヌクレオチド間結合；立体化学もしくはそのパターン；追加の化学的部分、たとえば、限定されないが、標的化部分、脂質部分、ＧａｌＮＡｃ部分など；５’末端構造；５’末端領域；５’ヌクレオチド部分；シード領域；ポストシード領域；３’末端領域；３’末端ジヌクレオチド；３’末端キャップ；糖、塩基もしくはヌクレオチド間結合の修飾パターン；形式もしくはその任意の構造的要素、及び／または本明細書に記載される任意の他の構造的要素もしくは修飾と組み合わせて、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の塩基を含み得、一部の実施形態では、本開示は、任意のそのようなオリゴヌクレオチドの多量体に関する。
【０３３６】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、任意の糖を含み得る。
【０３３７】
様々な追加の糖が当分野で記載されている。
【０３３８】
ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣが関与しない生化学的機序（限定されないが、遺伝子発現のＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたは立体障害を含む）を介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子ｍＲＮＡへのアニーリング後の翻訳の立体的な遮断、及び／またはｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の塩基配列またはその一部を含むことができ、ここで、一部は、少なくとも１５個の連続塩基のスパンまたは１〜５個のミスマッチを有する少なくとも１５個の連続塩基のスパンである。
【０３３９】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の塩基配列を含み得る。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の塩基配列またはその一部を含み得る。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の塩基配列またはその一部を含み得、ここで、一部は、１５個の連続塩基のスパンまたは１〜５個のミスマッチを有する１５個の連続塩基のスパンである。
【０３４０】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の配列は、転写物の標的に対して十分な長さと同一性を有し、標的特異的ＲＮＡ干渉を介在する。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、転写物の標的配列の一部に対し相補的である。
【０３４１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の塩基配列は、標的転写産物の塩基配列に対し相補的である。本明細書で使用されるとき、「標的転写産物配列」、「標的配列」、「標的遺伝子」などは、一次転写産物のＲＮＡプロセシングの産物であるｍＲＮＡを含む、遺伝子の転写中に形成されるｍＲＮＡ分子のヌクレオチド配列の連続部分、たとえば、標的遺伝子を指す。
【０３４２】
本明細書における「相補的」、「完全に相補的」及び「実質的に相補的」という用語は、それらが使用される文脈から理解されるように、一本鎖ＲＮＡｉ剤の鎖と標的配列との間、またはアンチセンスオリゴヌクレオチドと標的配列との間の塩基マッチングに関して使用され得る。一本鎖ＲＮＡｉ剤またはアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは他のオリゴヌクレオチドの鎖は、一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは他のオリゴヌクレオチドの各塩基が、最大限アラインメントされたとき、標的鎖上の連続塩基と塩基対合することができる場合、標的配列の鎖に相補的である。非限定的な例として、標的配列が、たとえば、５’−ＧＣＡＵＡＧＣＧＡＧＣＧＡＧＧＧＡＡＡＡＣ−３’の塩基配列を有する場合、５’ＧＵＵＵＵＣＣＣＵＣＧＣＵＣＧＣＵＡＵＧＣ−３’の塩基配列を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、当該標的配列に相補的または完全に相補的である。当然のことながら、ＵのＴへの置換またはその逆は、相補性の量を変更しないことに留意されたい。
【０３４３】
本明細書で使用されるとき、標的配列に「実質的に相補的」であるポリヌクレオチドは、大部分またはほとんど相補的であるが、１００％相補的ではない。一部の実施形態では、実質的に相補的である配列（たとえば、一本鎖ＲＮＡｉ剤またはアンチセンスオリゴヌクレオチドの鎖）は、標的配列に１００％相補的である配列と比較して１つ、２つ、３つ、４つまたは５つのミスマッチを有する。一本鎖ＲＮＡｉ剤の場合、本開示は、多くの場合、５’末端ヌクレオチド（Ｎ１）が標的配列の相補体と比較してミスマッチを有することに留意する。同様に、一本鎖ＲＮＡｉ剤では、３’末端ジヌクレオチドが、存在する場合には、標的配列の相補体と比較してミスマッチであり得る。非限定的な例として、標的配列が、たとえば、５’−ＧＣＡＵＡＧＣＧＡＧＣＧＡＧＧＧＡＡＡＡＣ−３’の塩基配列を有する場合、５’ＴＵＵＵＵＣＣＣＵＣＧＣＵＣＧＣＵＡＵＴＵ−３’の塩基配列を有する一本鎖ＲＮＡｉ剤は、当該標的配列に実質的に相補的である。
【０３４４】
本開示は、表１Ａ及びその他の箇所において、それぞれが定義された塩基配列を有する、様々な一本鎖ＲＮＡｉ剤及びアンチセンスオリゴヌクレオチド及び他のオリゴヌクレオチドを提示する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意の様々な一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び他のオリゴヌクレオチドの塩基配列であるか、これを含むか、またはその一部を含む塩基配列を有する、任意のオリゴヌクレオチドを包含する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意の様々な一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び他のオリゴヌクレオチドの塩基配列であるか、これを含むか、またはその一部を含む塩基配列を有する、任意のオリゴヌクレオチドを包含し、これは、本明細書に記載される任意の化学修飾、立体化学、形式、構造的特徴（たとえば、オリゴヌクレオチドが一本鎖ＲＮＡｉ剤である場合、５’末端構造、５’末端領域、５’ヌクレオチド部分、シード領域、ポストシード領域、３’末端領域、３’末端ジヌクレオチド、３’末端キャップ、または任意の構造、パターンもしくはその一部）、及び／または任意の他の修飾（たとえば、別の部分、たとえば、標的化部分、炭水化物部分、ＧａｌＮＡｃ部分、脂質部分などとの複合体化；及び／または多量体化）を有する。
【０３４５】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの塩基配列であるか、これを含むか、またはその一部を含む、塩基配列を有する。
【０３４６】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書で列挙される配列のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを開示する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書で列挙される配列のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを開示し、ここで、オリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、列挙される配列のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、一本鎖ＲＮＡｉ剤である。一部の実施形態では、列挙される配列のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するアンチセンスオリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、列挙される配列のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導する。一部の実施形態では、列挙される配列のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の構造（たとえば、本明細書に記載される任意の５’末端構造、５’末端領域、５’ヌクレオチド部分、シード領域、ポストシード領域、３’末端ジヌクレオチド、３’末端キャップ、もしくはこれらの構造のいずれかの任意の一部、または任意の化学、立体化学、追加の化学的部分など）を含む。オリゴヌクレオチドがｓｓＲＮＡｉ剤である場合、配列はＴが先行してもよく（非限定的な例として、２’−デオキシ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＨ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔまたは５’−（Ｓ）−ＰＨ  Ｔ）、または最初の核酸塩基がＴに置き換えられ（非限定的な例として、２’−デオキシ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＨ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔまたは５’−（Ｓ）−ＰＨ  Ｔ）、及び／または３’末端ジヌクレオチド（たとえば、非限定的な例として：ＴＴ、ＵＵ、ＴＵなど）が続く。様々な配列で、ＵをＴで置き換えるか、もしくはその逆を行うことができ、または配列は、Ｕ及びＴの組み合わせを含むことができる。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、約４９、約４５、約４０、約３０、約３５、約２５、約２３以下の長さの総ヌクレオチドを有する。一部の実施形態では、一部は、０〜３個のミスマッチを有する少なくとも１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５の総ヌクレオチドのスパンである。一部の実施形態では、一部は、０〜３個のミスマッチを有する少なくとも１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５の総ヌクレオチドのスパンであり、ここで、ミスマッチが０のスパンは相補的であり、ミスマッチが１以上であるスパンは実質的相補性の非限定的な例である。上に列挙される配列が５’末端でＵから始まる一部の実施形態では、Ｕの削除及び／または別の塩基による置き換えを行うことができる。一部の実施形態では、本開示は、本明細書に開示される任意のオリゴヌクレオチドの塩基配列であるか、これを含むか、またはその���部を含む塩基配列を有し、本明細書に開示される形式または形式の一部を有する、任意のオリゴヌクレオチドを包含する。
【０３４７】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の塩基配列を含み得る。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の塩基配列またはその一部を含み得る。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の塩基配列またはその一部を含み得、ここで、一部は、１５個の連続塩基のスパンまたは１〜５個のミスマッチを有する１５個の連続塩基のスパンである。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の他の構造的要素または修飾、たとえば、限定されないが、糖、塩基；ヌクレオチド間結合；立体化学もしくはそのパターン；追加の化学的部分、たとえば、限定されないが、標的化部分、脂質部分、ＧａｌＮＡｃ部分など；５’末端構造；５’末端領域；５’ヌクレオチド部分；シード領域；ポストシード領域；３’末端領域；３’末端ジヌクレオチド；３’末端キャップ；糖、塩基もしくはヌクレオチド間結合の修飾パターン；形式もしくはその任意の構造的要素、及び／または本明細書に記載される任意の他の構造的要素もしくは修飾と組み合わせて、本明細書に記載される任意の塩基配列またはその一部を含み得、一部の実施形態では、本開示は、任意のそのようなオリゴヌクレオチドの多量体に関する。
【０３４８】
様々な塩基配列を有するオリゴヌクレオチドの非限定的な例が、以下の表１Ａに記載される。
表１Ａ．オリゴヌクレオチド。
ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド。
【表１】
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本開示は、一部の配列が、その長さにより、複数の行に分割されることを注記する。しかしながら、これらの配列は、表１Ａ中のすべてのオリゴヌクレオチドと同様に、一本鎖である（別途記載しない限り）。
表中に列記される部分及び修飾（またはこれらの部分もしくは修飾を含む構築物オリゴヌクレオチドに使用される化合物：
【表２】
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一部の実施形態では、リンカー、たとえば、Ｌ００９、Ｌ０１０などは、糖を置き換えることができ、ヌクレオチド間結合にいずれかの末端で結合している。たとえば、
ＷＶ−９２６６は、．．．＊ｍＡＬ００９＊ｍＵｆＧ＊．．．を含み、これは、５’から３’へ、ホスホロチオエート（＊）、２’−ＯＭｅ（ｍ）が塩基（Ａ）に結合した糖、ホスホジエステル結合（示さず）、Ｌ００９リンカー（Ｌ００９）、ホスホロチオエート（＊）、２’−ＯＭｅがＵの塩基に結合した糖（ｍＵ）、ホスホジエステル結合（示さず）、２’−Ｆ（ｆ）が塩基（Ｇ）に結合した糖及びホスホロチオエートを表す。
ＷＶ−９２６７は、．．．＊ｍＡｆＣ＊Ｌ００９ｆＧ＊．．．を含み、これは、５’から３’へ、ホスホロチオエート（＊）、２’−ＯＭｅ（ｍ）が塩基（Ａ）に結合した糖、ホスホジエステル（示さず）、２’−Ｆ（ｆ）が塩基（Ｃ）に結合した糖、ホスホロチオエート、Ｌ００９リンカー（Ｌ００９）、ホスホジエステル結合（示さず）、２’−Ｆ（ｆ）が塩基（Ｇ）に結合した糖、及びホスホロチオエートを表す。
【表３】
2020522265.tif 000148
一部のオリゴヌクレオチドでは、Ｌ０１０は、塩基に結合した糖を置き換え、Ｌ０１０は、ヌクレオチド間結合にいずれかの末端で結合している。
【表４】
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追加の略語：
【化７】
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【化８】
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ｌｍＵ：
Ｌ００１：−ＮＨ−（ＣＨ２）６−リンカー（Ｃ６リンカー、Ｃ６アミンリンカーまたはＣ６アミノリンカー）であり、例示するように、−ＮＨ−を介してＭｏｄ（存在する場合）に繋がれ（Ｍｏｄがない場合は、−Ｈ、たとえば、ＷＶ−８２４０）、リン酸結合（ＯまたはＰＯ）またはホスホロチオエート結合（ホスホロチオエートがキラル制御されていない場合には＊；またキラル制御され、Ｓｐ立体配置を有する場合にはＳｐ、キラル制御され、Ｒｐ立体配置を有する場合にはＲｐと示され得る）のいずれかを介してオリゴヌクレオチド鎖の５’末端（たとえば、ＷＶ−２４０６）または３’末端に繋がれている。たとえば、ＷＶ−２４０６では、Ｌ００１は、−ＮＨ−を介してＭｏｄ００１に繋がれ（アミド基−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−を形成）、リン酸結合を介してオリゴヌクレオチド鎖に繋がれている（ＯＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸ）；ＷＶ−２４２２では、Ｌ００１は、−ＮＨ−を介してどのＭｏｄにも繋がれていないが、−Ｈに繋がれ、リン酸結合を介してオリゴヌクレオチド鎖に繋がれている（ＯＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸ）。
【化９】
2020522265.tif 000155
リンカーであり、例示するように、そのアミノ基を介してＭｏｄ（存在する場合）に繋がれ（Ｍｏｄがない場合は、−Ｈ、たとえば、ＷＶ−２４２６）、リン酸結合（ＯまたはＰＯ）またはホスホロチオエート結合（ホスホロチオエートがキラル制御されていない場合には＊；またキラル制御され、Ｓｐ立体配置を有する場合にはＳｐ、キラル制御され、Ｒｐ立体配置を有する場合にはＲｐと示され得る）のいずれかを介してオリゴヌクレオチド鎖の５’末端（たとえば、ＷＶ−２４０７）または３’末端（たとえば、ＷＶ−８０７０）に繋がれている。たとえば、ＷＶ−２４０７では、Ｌ００３は、アミノ基を介してＭｏｄ００１に繋がれ（アミド基
【化１０】
2020522265.tif 000156
を形成）、リン酸結合を介してオリゴヌクレオチド鎖の５’末端に繋がれている（ＯＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸ）；ＷＶ−２４２６では、Ｌ００１は、−ＮＨ−を介してどのＭｏｄにも繋がれていないが、−Ｈに繋がれ、リン酸結合を介してオリゴヌクレオチド鎖に繋がれている（ＯＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸ）；ＷＶ−８０７０では、Ｌ００３は、アミノ基を介してＭｏｄ００１に繋がれ（アミド基
【化１１】
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を形成）、リン酸結合を介してオリゴヌクレオチド鎖の３’末端に繋がれている（…ＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＸＯ）。
ｍ：２’−ＯＭｅ
ｍ５：５位のＣにメチルがあるもの（核酸塩基は５−メチルシトシン）
ｍ５Ｃｅｏ：５−メチル２’−メトキシエチルＣ
ＯＭｅ：２’−ＯＭｅ
Ｏ、ＰＯ：ホスホジエステル（リン酸）；末端基（典型的に「ＰＯ」；たとえば、ＷＶ−４２６０：ＰＯＴ＊ｆＣ＊…）または結合、たとえば、リンカーとオリゴヌクレオチド鎖との間の結合、ヌクレオチド間結合などであり得る。
＊、ＰＳ：ホスホロチオエート；末端基（典型的に「ＰＳ」、たとえば、ＷＶ−２６５３：ＰＳＴ＊ｆＡ＊…）または結合、たとえば、リンカーとオリゴヌクレオチド鎖との間の結合、ヌクレオチド間結合などであり得る。
Ｒ、Ｒｐ：Ｒｐ立体配置におけるホスホロチオエート
Ｓ、Ｓｐ：Ｓｐ立体配置におけるホスホロチオエート
Ｘ：立体不規則的ホスホロチオエート
【０３４９】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド組成物は、表１Ａに列記されるまたは本明細書に別途記載される一本鎖ＲＮＡｉ剤である。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの例示的な特性が実証された。
【０３５０】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、図１に例示される形式のいずれかの構造を有する。
【０３５１】
本開示は、一本鎖ＲＮＡ干渉を介在する能力を有するオリゴヌクレオチドの多くの非限定的な例（たとえば、一本鎖ＲＮＡｉ剤）を提示する。実際、実験データ（図示せず）は、想定される様々な一本鎖ＲＮＡｉ剤がＲＮＡ干渉を介在する能力を有することを示した。いくつかの実験では、ＲＮＡ被験基質ＷＶ−２３７２（ＡＰＯＣ３）の使用を含む、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ａｇｏ−２アッセイを使用した。ＲＮＡ被験基質を表すバンドは、オリゴヌクレオチドＷＶ−１３０８及びＷＶ−２４２０の存在下では存在せず、これは、これらのオリゴヌクレオチドが、ＲＮＡ干渉を介在する能力を有する一本鎖ＲＮＡｉ剤であることを示す。残りのレーンは対照である：陰性対照ＡＳＯ  ＷＶ−２１３４の非存在下における基質、陰性対照ＡＳＯ  ＷＶ−２１３４の存在下における基質（ＲＮＡ干渉を介在せず）、被験オリゴヌクレオチドＷＶ−１３０８の非存在下における基質、被験オリゴヌクレオチドＷＶ−２４２０の非存在下における基質、基質単独、基質なしでＷＶ−２１３４追加、及び基質なしでＷＶ−１３０８追加。また、Ｈｅｐ３Ｂ細胞における３’ＲＡＣＥアッセイで、ＡＰＯＣ３  ｍＲＮＡを被験基質として使用して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ａｇｏ−２アッセイを実施した（データ図示せず）。被験オリゴヌクレオチドＷＶ−３０２１の存在下でＡＰＯＣ３  ｍＲＮＡの切断産物が検出され、当該産物は、ＷＶ−３０２１の位置１０と位置１１の間での切断に対応する部位でのｍＲＮＡの切断に対応した。人工的な切断産物も検出された。実験データ（図示せず）は、二重機序のオリゴヌクレオチドＷＶ−２１１１がＲＮａｓｅ  ＨとＲＮＡ干渉の両方によるノックダウンを介在する能力を有することを示した。実験では、いくつかのオリゴヌクレオチドがＲＮＡ干渉を介在する能力を有した。ＲＮＡ被験基質は、ＷＶ−２３７２であった。実験は、被験オリゴヌクレオチドＷＶ−１３０８、ＷＶ−２１１４、ＷＶ−２３８６、及びＷＶ−２３８７の存在下でＲＮＡ被験基質が消失することを示した。これは、これら全てのオリゴヌクレオチドが、ＲＮＡ干渉を介在する一本鎖ＲＮＡｉ剤として機能する能力を有することを示している。残りのレーンは対照である。したがって、実験は、オリゴヌクレオチドＷＶ−１３０８、ＷＶ−２１１４、ＷＶ−２３８６、及びＷＶ−２３８７が全てＲＮＡ干渉を介在できることを示した。したがって、実験は、いくつかの一本鎖ＲＮＡｉ剤（たとえば、ＷＶ−１３０８、ＷＶ−２４２０、ＷＶ−３０２１、ＷＶ−２１１１、ＷＶ−２１１４、ＷＶ−２３８６、及びＷＶ−２３８７）がＲＮＡ干渉を介在できることを示した。本開示は、様々な配列、形式、修飾、５’末端領域、シード領域、ポストシード領域、及び３’末端領域のいずれかを有し、一本鎖ＲＮＡ干渉を介在する能力を有するオリゴヌクレオチドの多くの非限定的な例（たとえば、一本鎖ＲＮＡｉ剤）を提示する。
【０３５２】
オリゴヌクレオチドの形式
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣが関与しない生化学的機序（限定されないが、遺伝子発現のＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたは立体障害を含む）を介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子ｍＲＮＡへのアニーリング後の翻訳の立体的な遮断、及び／またはｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の形式またはその一部またはその構造的要素を有し得る。
【０３５３】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の形式またはその構造的要素を有し得る。
【０３５４】
一部の実施形態では、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の形式またはその構造的要素を有し得る。
【０３５５】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の形式またはその構造的要素を有し得る。
【０３５６】
様々なｓｓＲＮＡｉ形式の追加の非限定的な例は、本明細書に記載される様々な一本鎖ＲＮＡｉ剤によって具体化される。
【０３５７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意の５’末端によって表される、５’末端を含む。
【０３５８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意の５’末端構造または５’末端領域によって表される、５’末端構造または５’末端領域を含む。
【０３５９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意の５’ヌクレオチドによって表される、５’ヌクレオチドを含む。
【０３６０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意の５’ヌクレオシドによって表される、５’ヌクレオシドを含む。
【０３６１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意のシード領域によって表される、シード領域を含む。
【０３６２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意のポストシード領域によって表される、ポストシード領域を含む。
【０３６３】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意のポストシード領域またはその構成要素によって表される、ポストシード領域またはその構成要素を含む。
【０３６４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意の３’末端ジヌクレオチドによって表される、３’末端ジヌクレオチドを含む。
【０３６５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意のシード領域のヌクレオチド間結合のパターンによって表される、ヌクレオチド間結合のパターンを有するシード領域を含む。
【０３６６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意のポストシード領域のヌクレオチド間結合のパターンによって表される、ヌクレオチド間結合のパターンを有するポストシード領域を含む。
【０３６７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意のポストシード領域またはその構成要素のヌクレオチド間結合のパターンによって表される、ヌクレオチド間結合のパターンを有するポストシード領域またはその構成要素を含む。
【０３６８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意の３’末端ジヌクレオチドのヌクレオチド間結合のパターンによって表される、ヌクレオチド間結合のパターンを有する３’末端ジヌクレオチドを含む。
【０３６９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意のシード領域の化学修飾パターンによって表される、化学修飾パターンを有するシード領域を含む。
【０３７０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意のポストシード領域の化学修飾パターンによって表される、化学修飾パターンを有するポストシード領域を含む。
【０３７１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意のポストシード領域またはその構成要素の化学修飾パターンによって表される、化学修飾パターンを有するポストシード領域またはその構成要素を含む。
【０３７２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意の３’末端ジヌクレオチドの化学修飾パターンによって表される、化学修飾パターンを有する３’末端ジヌクレオチドを含む。
【０３７３】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式または本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤もしくは一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意の化学修飾によって表される、化学修飾を含む。
【０３７４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示されるまたは本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意の化学修飾によって表される化学修飾を含み、ここで、化学修飾は、リン酸、リンカー、または標的化部分を含む部分の複合体化である。
【０３７５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、図１に示されるまたは本明細書に記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式の任意の化学修飾によって表される化学修飾を含み、ここで、化学修飾は、リン酸、リンカー、または標的化部分を含む部分の複合体化であり、標的化部分は、ＧａｌＮＡｃ部分を含む。一部の実施形態では、ＧａｌＮＡｃは、保護されたＧａｌＮＡｃまたは脱保護されているＧａｌＮＡｃである。
【０３７６】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、標的遺伝子及び／またはその遺伝子産物の発現、活性及び／またはレベルを減少させる能力を有し、本明細書に記載される任意のオリゴヌクレオチドの形式を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性機序または翻訳の立体障害に関係する機序を介して、標的遺伝子及び／またはその遺伝子産物の発現、活性及び／またはレベルを減少させる能力を有し、本明細書に記載される任意のオリゴヌクレオチドの形式を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性機序または翻訳の立体障害に関係する機序を介して、標的遺伝子及び／またはその遺伝子産物の発現、活性及び／またはレベルを減少させる能力を有し、非対称形式を有する。一部の実施形態では、非対称形式を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、第１のウィング、コア及び第２のウィングを含み、コアは、標的ｍＲＮＡにアニーリングして、ＲＮａｓｅ  Ｈによって認識される構造を形成する能力を有する５つ以上連続する２’−デオキシヌクレオチドの領域を含み、第１及び第２のウィングの構造は異なる。一部の実施形態では、第１及び第２のウィングは、それらの２’−修飾及び／またはヌクレオチド間結合、もしくはヌクレオチド間結合の立体化学のパターンが異なる。
【０３７７】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、標的遺伝子及び／またはその遺伝子産物の発現、活性及び／またはレベルを減少させる能力を有し、中性ヌクレオチド間結合（たとえば、中性骨格）を含む。
【０３７８】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、中性骨格を含む。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、トリアゾール、中性トリアゾール、またはアルキンであるか、またはこれを含む、ヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、核酸（限定されないが、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含む）は、トリアゾール、中性トリアゾール、またはアルキンを含むヌクレオチド間結合を含み、ここで、ヌクレオチド間結合は、立体制御されており、ＲｐまたはＳｐの立体配置である。一部の実施形態では、トリアゾールを含むヌクレオチド間結合は、
【化１２】
2020522265.tif 000158
の式を有する。一部の実施形態では、中性トリアゾールを含むヌクレオチド間結合は、
【化１３】
2020522265.tif 000159
の式を有し、式中、Ｘは、ＯまたはＳである。一部の実施形態では、アルキンを含むヌクレオチド間結合は、
【化１４】
2020522265.tif 000160
の式を有し、式中、Ｘは、ＯまたはＳである。
一部の実施形態では、ヌクレオチド間結合は、環式グアニジンを含む。一部の実施形態では、ヌクレオチド間結合は、環式グアニジンを含み、
【化１５】
2020522265.tif 000161
の構造を有する。一部の実施形態では、中性ヌクレオチド間結合または環式グアニジンを含むヌクレオチド間結合は、立体化学的に制御されている。一部の実施形態では、中性ヌクレオチド間結合は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの活性、送達及び／もしくは安定性、及び／またはＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドがエンドソーム脱出を実施する能力を改善する。
【０３７９】
当業者に認識されるように、いくつかの場合、
【化１６】
2020522265.tif 000162
は、結合位置を示すために使用され得（
【化１７】
2020522265.tif 000163
として）、いくつかの場合、
【化１８】
2020522265.tif 000164
は、立体不規則的結合を示すために使用され得る。
【０３８０】
ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの長さ
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉を介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉またはＲＩＳＣが関与しない生化学的機序（限定されないが、遺伝子発現のＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたは立体障害を含む）を介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子ｍＲＮＡへのアニーリング後の翻訳の立体的な遮断、及び／またはｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、任意の長さを有し得、ここで、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの長さは、オリゴヌクレオチドが標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有するような長さである。
【０３８１】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの長さは、オリゴヌクレオチドが標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有するような長さである。
【０３８２】
一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤の長さは、ＲＮＡｉ剤が配列特異的な様式で特定の標的転写産物のＲＮＡ干渉を誘導する能力を有するような長さである。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤は、標的転写産物を認識するのに十分な同一性の十分な数の核酸塩基を含む。一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤はまた、ＲＮＡｉ干渉を介在するのに適した長さである。
【０３８３】
配列の標的部分は、少なくとも、その位置で、またはその位置近傍で、ｉＲＮＡ誘導切断の基質として機能するのに十分な長さである。たとえば、標的配列は、一般に、約９〜３６ヌクレオチド（「ｎｔ」）の長さ、たとえば、約１５〜３０ヌクレオチドの長さであり、その間の全ての部分範囲を含む。様々な長さの一本鎖ＲＮＡｉ剤の例が、表１Ａに示される。
【０３８４】
図１は、１９〜２５の長さを有する一本鎖ＲＮＡｉ剤の非限定的な例を例示する。これらの長さの各々のいずれかを有する一本鎖ＲＮＡｉ剤を構築し、これらが標的遺伝子をノックダウンする能力があることがわかった。したがって、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、様々な異なる長さのいずれかであり得る。
【０３８５】
１９塩基長であるｓｓＲＮＡｉ剤の形式の非限定的な例としては、図１の形式２０〜２１が挙げられる。
【０３８６】
２０塩基長であるｓｓＲＮＡｉ剤の形式の非限定的な例としては、図１の形式１９が挙げられる。
【０３８７】
一本鎖ＲＮＡｉ剤を含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの５’末端
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの５’末端の構造は、オリゴヌクレオチドが標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの減少を誘導する能力を有するような構造である。
【０３８８】
一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤の５’末端の構造は、ＲＮＡｉ剤が配列特異的な様式で特定の標的転写産物のＲＮＡ干渉を誘導する能力を有するような構造である。
【０３８９】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の５’末端領域、５’末端構造、５’末端基、５’末端ヌクレオシド、または５’末端ヌクレオチドを含み得る。一部の実施形態では、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の５’末端領域、５’末端構造、５’末端基、５’末端ヌクレオシド、または５’末端ヌクレオチドを含み得る。一部の実施形態では、ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の５’末端領域、５’末端構造、５’末端基、５’末端ヌクレオシド、または５’末端ヌクレオチドを含み得る。一部の実施形態では、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の５’末端領域、５’末端構造、５’末端基、５’末端ヌクレオシド、または５’末端ヌクレオチドを含み得る。
【０３９０】
とりわけ、本開示は、任意で追加の特徴と組み合わせた、本開示によるオリゴヌクレオチドの５’末端構造が、予想外の利点を提供することができることを認めるものである。一部の実施形態では、本開示は、オリゴヌクレオチドの１つ以上の特性及び／または活性（たとえば、安定性、活性、製造コストなど）を驚くほど改善することができる５’末端基（天然ＲＮＡに見出されるリボース（または天然ＤＮＡに見出されるデオキシリボース）の５’−ＨＯ−ＣＨ２−に対応する）を提供する。
【０３９１】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの５’−ＯＨ基は、修飾されておらず、すなわち、遊離−ＯＨとして存在する。一部の実施形態では、５’末端基は、５’−ＨＯ−ＣＨ２−である。とりわけ、本開示は、ある特定の活性、たとえば、ＲＮＡｉ活性には、５’リン酸基の存在が必要であるという文献の報告にもかかわらず、遊離５’−ＯＨ基を有する提供されるオリゴヌクレオチドが、５’リン酸（またはその誘導体）基を含むこと以外の点では同一のオリゴヌクレオチドに匹敵する特性及び／または活性（たとえば、ｓｓ−ＲＮＡｉ剤として使用した場合の安定性、ＲＮＡｉ活性など）を達成する能力を有することを示す。
【０３９２】
一部の実施形態では、５’末端基は、リン原子を含まない。一部の実施形態では、５’末端基は、リン酸基、またはその誘導体もしくは生物学的等価体を含まない。一部の実施形態では、５’末端基は、酸性基を含まない。一部の実施形態では、５’末端基は、カルボキシル基を含まない。一部の実施形態では、５’末端は、リン原子もカルボキシル基も含まない。一部の実施形態では、５’末端基は、５’−ＨＯ−ＣＨ２−である。とりわけ、本開示は、５’リン酸またはその誘導体もしくは生物学的等価体を有さない提供されるオリゴヌクレオチドが、驚くべきことに、５’リン酸を有すること以外では同一であるオリゴヌクレオチドに匹敵する活性、たとえば、ＲＮＡｉ経路を介した標的遺伝子のｍＲＮＡレベルのノックダウンを達成する能力を有することを示す。
【０３９３】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドの５’ヌクレオシド単位（糖部分及び核酸塩基部分を含むが、５’ヌクレオシド単位と５’末端から２番目のヌクレオシド単位との間のヌクレオチド間結合は含まない）は、リン酸基、またはその誘導体もしくは生物学的等価体を含まない。一部の実施形態では、５’ヌクレオシド単位は、リン原子を含まない。一部の実施形態では、５’ヌクレオシドは、酸性基を含まない。一部の実施形態では、５’ヌクレオシド単位は、−ＣＯＯＨ基またはその塩形態を含まない。
【０３９４】
一部の実施形態では、５’末端基は、リン酸基、またはその誘導体もしくは生物学的等価体であるか、またはこれを含む。一部の実施形態では、５’ヌクレオシド単位は、リン酸基、またはその誘導体もしくは生物学的等価体である５’基を含む。当業者により認識されるように、そのような基は多くが当分野で公知であり、本開示に従って利用することができる。
【０３９５】
一部の実施形態では、５’末端基は、−ＣＨ２−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−（ＯＨ）またはその塩形態である。
一部の実施形態では、提供される５’ヌクレオシド単位は、
【化１９】
2020522265.tif 000165
の構造またはその塩形態を有する。一部の実施形態では、提供される５’ヌクレオシド単位は、
【化２０】
2020522265.tif 000166
の構造またはその塩形態を有する。一部の実施形態では、Ｘは、Ｏである。一部の実施形態では、Ｘは、Ｓである。一部の実施形態では、ＲＥは、−（Ｒ）−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−Ｓ−Ｈまたはその塩形態である。一部の実施形態では、ＲＥは、−（Ｒ）−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−Ｏ−Ｈまたはその塩形態である。一部の実施形態では、ＲＥは、−（Ｓ）−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−Ｓ−Ｈまたはその塩形態である。一部の実施形態では、ＲＥは、−（Ｓ）−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−Ｏ−Ｈまたはその塩形態である。一部の実施形態では、提供される５’ヌクレオシド単位は、
【化２１】
2020522265.tif 000167
の構造またはその塩形態を有する。一部の実施形態では、提供される５’ヌクレオシド単位は、
【化２２】
2020522265.tif 000168
の構造またはその塩形態を有する。
【０３９６】
当業者により容易に認識されるように、提供される化合物、たとえば、オリゴヌクレオチド、またはその部分構造、たとえば、オリゴヌクレオチドの５’末端構造、ヌクレオチド間結合などは、部分的に、場合によっては主に、たとえば、その中の１つ以上の酸性部分及び／または塩基性部分に起因して、ある特定のｐＨ、たとえば、生理的なｐＨで、１つ以上のその塩形態として存在し得る。一部の実施形態では、提供される５’ヌクレオシド単位は、部分的に、場合によっては主に、１つ以上のその塩形態として存在し得る。たとえば、ｐＨに応じて、
【化２３】
2020522265.tif 000169
は、
【化２４】
2020522265.tif 000170
またはこれらの組み合わせとして存在し得る。特に明記しない限り、提供される化合物または構造が列挙される場合、全ての塩形態が含まれる。
【０３９７】
一部の実施形態では、ＲＥは、−Ｌ−Ｐ（Ｏ）（ＸＲ）２またはその塩形態である。一部の実施形態では、ＲＥは、−Ｌ−Ｐ（Ｏ）（ＸＲ）２またはその塩形態であり、式中、各Ｘは独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または共有結合である。一部の実施形態では、ＲＥは、−Ｌ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ）２またはその塩形態である。一部の実施形態では、ＲＥは、−Ｌ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ）（ＳＲ）またはその塩形態である。一部の実施形態では、ＲＥは、−Ｌ−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ）（Ｒ）またはその塩形態である。一部の実施形態では、Ｌは、共有結合であるか、または任意で置換される二価の直線状もしくは分枝状のＣ１−６脂肪族であり、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｎ（Ｒ’）−と置き換えられる。一部の実施形態では、ＲＥは、−Ｌ−Ｒ５ｓである。一部の実施形態では、ＲＥは、−Ｘ−Ｌ−Ｒである。一部の実施形態では、ＲＥは、
【化２５】
2020522265.tif 000171
である。一部の実施形態では、ＲＥ中のＸは、−Ｃ（Ｒ）２−である。一部の実施形態では、Ｘは、−Ｏ−である。一部の実施形態では、Ｘは、−Ｓ−である。一部の実施形態では、Ｘは、−Ｎ（Ｒ）−である。一部の実施形態では、Ｌは、任意で置換される、二価または多価の
【化２６】
2020522265.tif 000172
基を含む。一部の実施形態では、Ｌは、任意で置換される
【化２７】
2020522265.tif 000173
基を含む。一部の実施形態では、Ｌは、
【化２８】
2020522265.tif 000174
基を含む。一部の実施形態では、Ｒは独立して、−Ｈ、またはＣ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アリル、及びＣ６−１４アリールから選択される、任意で置換される基である。一部の実施形態では、Ｒは、−Ｈである。一部の実施形態では、ＲＥは、任意で置換される
【化２９】
2020522265.tif 000175
である。一部の実施形態では、ＲＥは、
【化３０】
2020522265.tif 000176
である。
【０３９８】
多くのリン酸誘導体及び／または生物学的等価体、ならびに５’ヌクレオシド単位が文献に記載されており、本開示に従って利用することができ、たとえば、いくつかのそのような構造は、たとえば、ＵＳ２０１６−０１９４３４９、ＵＳ２０１６−０１８６１７５、ＵＳ２０１３０３２３８３６などに記載されている。一部の実施形態では、５’末端基ＲＥ、または５’ヌクレオシド単位は、たとえば、Ａｌｌｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．２００５  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４８：９０１−０４；Ｌｉｍａ  ｅｔ  ａｌ．２０１２  Ｃｅｌｌ  １５０：８８３−８９４；Ｐｒａｋａｓｈ  ｅｔ  ａｌ．２０１５  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．４３：２９９３−３０１１；及び／またはＰｒａｋａｓｈ  ｅｔ  ａｌ．２０１６  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２６：２６：２８１７−２８２０（たとえば、Ｔ−ＶＰ、Ｔ−ＰＯなど）に記載されている。
【０３９９】
架橋型のモルホリノ及びシクロヘキセニルのヌクレオチド及びヌクレオシドは、たとえば、米国特許出願公開２０１６−０１８６１７５に記載されており、本開示に従って利用することができる。
【０４００】
可変部分の実施形態の例が、本開示に広く記載されている。２つ以上の可変部分を有する構造について、特に明記しない限り、各可変部分は独立して、本明細書に記載される任意の実施形態であり得る。
【０４０１】
一部の実施形態では、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、または当技術分野で既知の任意の５’末端を含有し得る。
【０４０２】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、または当技術分野で既知の任意の５’末端を含有し得る。
【０４０３】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、または、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、または当技術分野で既知の任意の５’末端を含有し得る。
【０４０４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端は、リン含有部分（例えば、５’末端は、リンを含む）を含む。５’末端がリン含有部分を含むｓｓＲＮＡｉ形式の非限定的な例としては、図１の形式１〜１５、２０〜２１、２３〜３１、８０〜８２、９２〜９５、９７〜１０２、及び１０４〜１０７が挙げられる。
【０４０５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端は、リン含有部分（例えば、５’末端は、リンを含む）を含まない。５’末端がリン含有部分を含まないｓｓＲＮＡｉ形式の非限定的な例としては、図１の形式１６〜１９、２２、３２〜７９、８３〜９１、９６、及び１０３が挙げられる。
【０４０６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端は、リン酸を含む部分、例えば、ホスホジエステル、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、Ｈ−ホスホネート、または、リン酸含有ヌクレオチド間結合と同様もしくは同一の他の部分を含む。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端は、リン酸を含む部分を含むが、これはホスホジエステルではなく、一部の実施形態におけるかかる部分は、リン酸模倣体、修飾されたリン酸、またはリン酸アナログと呼ばれる。
【０４０７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端は、リン酸を含む部分を含まない。
【０４０８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＨ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔ、及び５’−（Ｓ）−ＰＨ  Ｔから選択される構造を有する。
【０４０９】
５’末端構造においてリン含有部分を含む、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、これは、式ＩＶ−ａ（Ｍｏｄ０２２、Ｃ３  ＰＯ及びｎ−プロピルとしても知られる）、ＩＶ−ｂ（Ｍｏｄ０２２＊）、ＩＶ−ｃ（ＰＯＭｏｄ０２３＊）、ＩＶ−ｄ（ＰＳＭｏｄ０２３＊）、及びＩＶ−ｅ（ＰＨＭｏｄ０２３＊）から選択される構造で表される：
【化３１】
2020522265.tif 000177
【０４１０】
５’末端構造においてリン含有部分を含む提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、これは、式ＩＶ−ｆ（ｎ−プロピル、Ｃ３  ＰＯまたはＭｏｄ２２としても知られる）の構造の選択された構造で表される：
【化３２】
2020522265.tif 000178
ｎ−プロピル（Ｍｏｄ０２２）、
式中、５’は、糖の５’炭素への結合点を示す。
【０４１１】
５’末端構造においてリン含有部分を含む提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、これは、以下の構造（Ｃ３  ＰＳまたはＭｏｄ０２２＊としても知られる）の構造の選択された構造で表される：
【化３３】
2020522265.tif 000179
ｎ−プロピル（Ｍｏｄ０２２＊）、
式中、５’は、糖の５’炭素への結合点を示す（例えば、Ｎ１の）。
【０４１２】
５’末端構造においてリン含有部分を含む提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、これは、式ＩＶ−ｇ（ジメチルＣ３もしくはＣ３ジメチルＰＳまたはＭｏｄ０２３＊としても知られる）の構造の選択された構造で表される：
【化３４】
2020522265.tif 000180
ジメチルＣ３（Ｍｏｄ０２３＊）、
式中、５’は、糖の５’炭素への結合点を示す（例えば、Ｎ１の）。
【０４１３】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、５’末端構造を含み、該構造は、ＰＯ（ホスホロジエステル）、式ＩＶ−ｈ；ＰＨ（Ｈ−ホスホネート）、式ＩＶ−ｉ；及びＰＳ（ホスホロチオエート）、式ＩＶ−ｊのいずれかから選択される：
【化３５】
2020522265.tif 000181
５’末端構造においてリン含有部分を含む提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、これは、以下のいずれかから選択される構造で表される：
【化３６】
2020522265.tif 000182
式中、５’は、糖の５’炭素への結合点を示す（例えば、Ｎ１の）。
【０４１４】
一部の実施形態では、式ＩＶ−ａ〜ＩＶ−ｊのいずれかにおけるＰは、ＳｐまたはＲｐ立体配置におけるように立体不規則的または立体規定的である。
【０４１５】
一部の実施形態では、５’末端構造は、以下のいずれかから選択される：リン酸、リン酸アナログ、５’−一リン酸（（ＨＯ）２（Ｏ）Ｐ−Ｏ−５’）、５’−二リン酸（（ＨＯ）２（Ｏ）Ｐ−Ｏ−Ｐ（ＨＯ）（Ｏ）−Ｏ−５’）、５’−三リン酸（（ＨＯ）２（Ｏ）Ｐ−Ｏ−（ＨＯ）（Ｏ）Ｐ−Ｏ−Ｐ（ＨＯ）（Ｏ）−Ｏ−５’）、５’−グアノシンキャップ（７−メチル化または非メチル化）（７ｍ−Ｇ−Ｏ−５’−（ＨＯ）（Ｏ）Ｐ−Ｏ−（ＨＯ）（Ｏ）Ｐ−Ｏ−Ｐ（ＨＯ）（Ｏ）−Ｏ−５’）、５’−アデノシンキャップ（Ａｐｐｐ）、及び任意の修飾または非修飾ヌクレオチドキャップ構造（Ｎ−Ｏ−５’−（ＨＯ）（Ｏ）Ｐ−Ｏ−（ＨＯ）（Ｏ）Ｐ−Ｏ−Ｐ（ＨＯ）（Ｏ）−Ｏ−５’）、５’−モノチオホスフェート（ホスホロチオエート、（ＨＯ）２（Ｓ）Ｐ−Ｏ−５’）、５’−モノジチオホスフェート（ホスホロジチオエート、（ＨＯ）（ＨＳ）（Ｓ）Ｐ−Ｏ−５’）、５’−ホスホロチオレート（（ＨＯ）２（Ｏ）Ｐ−Ｓ−５’）、酸素／硫黄置換一リン酸、二リン酸、及び三リン酸の任意のさらなる組み合わせ（例えば、５’−アルファ−チオ三リン酸、５’−ガンマ−チオ三リン酸等）、５’−ホスホロアミデート（（ＨＯ）２（Ｏ）Ｐ−ＮＨ−５’、（ＨＯ）（ＮＨ２）（Ｏ）Ｐ−Ｏ−５’）、５’−アルキルホスホネート（Ｒ＝アルキル＝メチル、エチル、イソプロピル、プロピル等、例えば、ＲＰ（ＯＨ）（Ｏ）−Ｏ−５’−、（ＯＨ）２（Ｏ）Ｐ−５’−ＣＨ２−）、５’−アルキルエーテルホスホネート（Ｒ＝アルキルエーテル＝メトキシメチル（ＭｅＯＣＨ２−）、エトキシメチル等、例えば、ＲＰ（ＯＨ）（Ｏ）−Ｏ−５’−）。
【０４１６】
一部の実施形態では、リン含有部分を含む５’末端は、それらを含む一本鎖ＲＮＡｉ剤が、ＲＮＡ干渉において活性がより高い場合があるという点で、特別な利点を有し得る。
【０４１７】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−ヌクレオチドまたは修飾された５’−ヌクレオチド、５’−ヌクレオチドアナログ、５’−ヌクレオシドもしくは修飾された５’−ヌクレオシド、または５’−ヌクレオシドアナログの構造を有する。
【０４１８】
一部の実施形態では、５’末端構造は、以下のいずれかの構造を有する：５’−グアノシンキャップ、５’−アデノシンキャップ、５’−モノチオホスフェート、５’−モノジチオホスフェート、５’−ホスホロチオレート、５’−ホスホロアミデート、５’−アルキルホスホネート、及び５’−アルキルエーテルホスホネート、５’−一リン酸、５’−二リン酸、及び５’−三リン酸、５’−三リン酸、一リン酸、二リン酸、または三リン酸の少なくとも１つの酸素原子が硫黄原子で置換されている、当該一リン酸、二リン酸、または三リン酸、５’−アルファ−チオ三リン酸及び５’−ガンマ−チオ三リン酸、アルキルホスホネート、アルキルホスホネートは、式ＲＰ（ＯＨ）（Ｏ）−−Ｏ−５’−または（ＯＨ）２（Ｏ）Ｐ−５’−ＣＨ２−−を有し、式中、ＲはＣ１−Ｃ３アルキルであるもの、アルキルエーテルホスホネート、または式ＲＰ（ＯＨ）（Ｏ）−−Ｏ−５’のアルキルエーテルホスホネート、式中、Ｒはアルキルエーテルである。
【０４１９】
様々な５’−ヌクレオシドが、例えば、米国特許出願第１４／９５９，７１４号、ＵＳ  ２０１６−０１９４３４９  Ａ１として公開、米国特許出願第１４／９８３，９０７号、ＵＳ  ２０１６−０１８６１７５  Ａ１として公開、または米国特許出願第１３／６９６，７９６号、ＵＳ  ２０１３０３２３８３６として公開、に記載されている。
【０４２０】
一部の実施形態では、５’末端構造はビニルホスホネートである。
【０４２１】
ある特定の実施形態では、当該５’末端化合物が式ＶＩＩＩ−ｃを有し、式中、ＧがＦ、ＯＣＨ３、またはＯ（ＣＨ２）２−−ＯＣＨ３であるオリゴマー化合物を提供する。
【０４２２】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔ、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＨ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔ、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔ、及び５’−（Ｓ）−ＰＨ  Ｔから選択される構造を有する。
【０４２３】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔの構造を有する。
【０４２４】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔの構造を有する。
【０４２５】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔの構造を有する。
【０４２６】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＨ  Ｔの構造を有する。
【０４２７】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔの構造を有する。
【０４２８】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔの構造を有する。
【０４２９】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔの構造を有する。
【０４３０】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔの構造を有する。
【０４３１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔの構造を有する。
【０４３２】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｒ）−Ｍｅ  ＰＨ  Ｔの構造を有する。
【０４３３】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＯＨ  Ｔの構造を有する。
【０４３４】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＯ  Ｔの構造を有する。
【０４３５】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＳ  Ｔの構造を有する。
【０４３６】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＨ  Ｔの構造を有する。
【０４３７】
一部の実施形態では、５’末端構造は、５’−（Ｓ）−Ｍｅ  ＰＨ  Ｔの構造を有する。さらに、いくつかの参考文献、例えば、ＥＰ  １５２００２２  Ｂ１、パラグラフ６は、５’リン酸は、ｓｉＲＮＡ二本鎖の標的相補的な鎖（例えば、アンチセンス鎖）で、ＲＩＳＣ活性に必要であることを報告している。米国特許第８，７２９，０３６号、カラム２はまた、５’リン酸が、ＲＮＡ干渉にとって必須であることが報告されることを注記した。米国特許第８，７２９，０３６号、カラム３はまた、５’リン酸が、ＨｅＬａ  Ｓ１００抽出物中で一本鎖アンチセンスｓｉＲＮＡがＲＮＡｉを引き起こすのに必要であることを報告した。しかしながら、本開示は、５’リン酸を含まない様々な一本鎖ＲＮＡｉ剤が、ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有することを示している。
【０４３８】
一部の実施形態では、５’末端は、リン酸含有部分、例えば、Ｔ−ＶＰもしくはＴ−ＰＯ、または、任意の他の適切なＲＮＡｉ剤の５’末端化合物、例えば、Ａｌｌｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．２００５  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４８：９０１−０４、Ｌｉｍａ  ｅｔ  ａｌ．２０１２  Ｃｅｌｌ  １５０：８８３−８９４、Ｐｒａｋａｓｈ  ｅｔ  ａｌ．２０１５  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．４３：２９９３−３０１１、及び／またはＰｒａｋａｓｈ  ｅｔ  ａｌ．２０１６  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２６：２６：２８１７−２８２０に記載のものを含む。
【０４３９】
一部の実施形態では、リン含有部分を含まない５’末端は、当該一本鎖ＲＮＡｉ剤の合成がより容易であり得るという点、及びリン含有部分を分解から保護する必要がない場合があるという点で特別な利点を有し得る。一部の実施形態では、リン含有部分を含まない提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端は、標的細胞内で当該一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端でリン含有部分に結合することができる哺乳類キナーゼの基質の役割を果たすことができる部分を含む。
【０４４０】
一部の実施形態では、５’末端は、リン含有部分を含まない。
【０４４１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシである。
【０４４２】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシＴである。
【０４４３】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシＵである。
【０４４４】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシＡである。
【０４４５】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシＧである。
【０４４６】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシＣである。
【０４４７】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシである。
【０４４８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシＴである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシＵである。
【０４４９】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシＡである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシＧである。
【０４５０】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシＣである。
【０４５１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅである。
【０４５２】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｔである。
【０４５３】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｕである。
【０４５４】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ａである。
【０４５５】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｇである。
【０４５６】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｃである。
【０４５７】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅである。
【０４５８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｔである。
【０４５９】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｕである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ａである。
【０４６０】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｇである。
【０４６１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｃである。
【０４６２】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆである。
【０４６３】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｔである。
【０４６４】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｕである。
【０４６５】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ａである。
【０４６６】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｇである。
【０４６７】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｃである。
【０４６８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆである。
【０４６９】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｔである。
【０４７０】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｕである。
【０４７１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ａである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｇである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端ＯＨを含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｃである。
【０４７２】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシである。
【０４７３】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシ  Ｔである。
【０４７４】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシ  Ｕである。
【０４７５】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシ  Ａである。
【０４７６】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシ  Ｇである。
【０４７７】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシ  Ｃである。
【０４７８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシである。
【０４７９】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシ  Ｔである。
【０４８０】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシ  Ｕである。
【０４８１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシ  Ａである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシ  Ｇである。
【０４８２】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−デオキシ  Ｃである。
【０４８３】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆである。
【０４８４】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｔである。
【０４８５】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｕである。
【０４８６】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ａである。
【０４８７】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｇである。
【０４８８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｃである。
【０４８９】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆである。
【０４９０】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｔである。
【０４９１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｕである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ａである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｇである。
【０４９２】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｃである。
【０４９３】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅである。
【０４９４】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｔである。
【０４９５】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｕである。
【０４９６】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ａである。
【０４９７】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｇである。
【０４９８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｃである。
【０４９９】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｔである。
【０５００】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｕである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ａである。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｇである。
【０５０１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、該一本鎖ＲＮＡｉ剤は５’末端リン酸を含み、第１のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｃである。
【０５０２】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＡＳＰＧＲに結合するさらなる成分を含む。一部の実施形態では、該さらなる成分は、当該オリゴヌクレオチドの５’末端上である。
【０５０３】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、さらなる成分を含み、それは、式（Ｋ）の化合物であるか、または式（Ｋ）の化合物を含む。
【化３７】
2020522265.tif 000183
式中、Ｒは、−ＣＮ、−ＣＨ２−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ２−Ｎ３、−ＣＨ２−ＮＨ２、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨ２−ＳＨ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ、−ＣＨ２−Ｒ、−ＣＨ２−Ｓ−Ｒ、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ）−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−Ｒ、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、ここで、該アリールもしくはヘテロアリールは、Ｒで任意に置換されるか、
あるいは、Ｒは、−Ｚ−Ｘ−Ｙであり、ここで、Ｘは、リンカーまたは薬物送達系であり、Ｙは、存在しないか、または、小分子、アミノ酸配列、核酸配列、抗体、オリゴマー、ポリマー、遺伝子的に誘導された物質、リポソーム、ナノ粒子、染料、蛍光プローブ、もしくはそれらの組み合わせからなる群から選択されるリガンドであり、Ｚは、存在しないか、あるいは、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−、−ＣＨ２−Ｓ−、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｓ（Ｏ）２−、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、ここで、該アリールまたはヘテロアリールは、Ｒで任意に置換され、
Ｒ６２は、−ＯＨ、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、該テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒで任意に置換され、
ここで、Ｒが−ＣＨ２−ＯＨの場合、Ｒは、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、該テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒで任意に置換され、
各Ｒは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、または（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、該アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ）−から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ）２、−ＯＲ、及び−Ｓ（Ｒ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており
各Ｒは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ）−で置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ）２、−ＯＲ、及び−Ｓ（Ｒ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル及びシクロアルキルは、１〜６個のハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒは、独立して、−Ｈ、（Ｃ３−Ｃ２０）シクロアルキル、または（Ｃ１−Ｃ２０）アルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ）−で置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ）２、−ＯＲ、及び−Ｓ（Ｒ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル及びシクロアルキルは、１〜６個のハロ原子で置換されてもよい。
【０５０４】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、さらなる成分を含み、それは、式（Ｍ）の化合物であるか、または式（Ｍ）の化合物を含む。
【化３８】
2020522265.tif 000184
式中、Ｒは、−ＣＮ、−ＣＨ２−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ２−Ｎ３、−ＣＨ２−ＮＨ２、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨ２−ＳＨ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ、−ＣＨ２−Ｒ、−ＣＨ２−Ｓ−Ｒ、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−Ｒ、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ）−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−Ｒ、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、ここで、該アリールもしくはヘテロアリールは、Ｒで任意に置換されるか、
あるいは、Ｒは、−Ｚ−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｙ、−Ｘ−Ｙ、−Ｘ、−Ｙ、または−Ｚ−Ｘであり、ここで、Ｘは、リンカーまたは薬物送達系であり、Ｙは、Ｒであるか、または、小分子、アミノ酸配列、核酸配列、抗体、オリゴマー、ポリマー、遺伝子的に誘導された物質、リポソーム、ナノ粒子、染料、蛍光プローブ、もしくはそれらの組み合わせからなる群から選択されるリガンドであり、Ｚは、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−、−ＣＨ２−Ｓ−、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｓ（Ｏ）２−、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）−、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、ここで、該アリールまたはヘテロアリールは、Ｒで任意に置換され、
Ｒは、−ＯＨ、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ、−Ｎ（Ｒ）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、該テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒで任意に置換され、
ここで、Ｒが−ＣＨ２−ＯＨの場合、Ｒは、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ）２、−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ、Ｎ（Ｒ）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、該テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒで任意に置換され、
各Ｒは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、または（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、該アルキルまたはシクロアルキルの１つ以上の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ）−から独立して選択されるヘテロ原子基で各々置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ）２、−ＯＲ、及び−Ｓ（Ｒ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｒは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ）−から独立して選択されるヘテロ原子基で各々置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ）２、−ＯＲ、及び−Ｓ（Ｒ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒは、独立して、−Ｈ、（Ｃ３−Ｃ２０）シクロアルキル、または（Ｃ１−Ｃ６０）アルキルであり、ここで、該シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基または該アルキルの１〜２０個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ）２、−ＯＲ、及び−Ｓ（Ｒ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒは、独立して、Ｈ、−Ｃ≡ＣＨ、−Ｃ＝ＣＨ２、−ＣＨ３、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ）２、−ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）−（Ｒ）、−Ｓ（Ｏ）２−（Ｒ）、−Ｃ（Ｏ）−ＯＨ、−Ｓ−Ｓ−アリール、−Ｓ−Ｓ−ヘテロアリール、ヘテロシクリル、アリール、またはヘテロアリールであり、ここで、各アリールまたはヘテロアリールは、Ｒで任意に置換される。
【０５０５】
一部の実施形態では、Ｒ６１もしくはＲ７１は、−Ｘ−Ｙであり、及び／またはＲ６２もしくはＲ７２は、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ３である。
【０５０６】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、以下からなる群から選択されるさらなる成分を含む：
ベンジル（４−（（２−（（１−（１−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）エチル）アミノ）−４−オキソブチル）カルバメート、
ベンジル（４−（（１，３−ビス（（１−（１−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）プロパン−２−イル）アミノ）−４−オキソブチル）カルバメート、
ベンジル（４−（（１，３−ビス（（１−（１−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）−２−（（（１−（１−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）メチル）プロパン−２−イル）アミノ）−４−オキソブチル）カルバメート、
Ｎ−（２−（（１−（１−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）エチル）−４−アミノブタンアミド、
４−アミノ−Ｎ−｛１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］プロパン−２−イル｝ブタンアミド、
４−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ブタンアミド、
４−アミノ−Ｎ−［１，３１−ビス（１−｛［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］メチル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−２，６，１０，１４，１８，２２，２６，３０−オクタオキサヘントリアコンタン−１６−イル］ブタンアミド、
４−アミノ−Ｎ−｛１，３１−ビス（１−｛［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］メチル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−１６−［１５−（１−｛［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］メチル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−２，６，１０，１４−テトラオキサペンタデカ−１−イル］−２，６，１０，１４，１８，２２，２６，３０−オクタオキサヘントリアコンタン−１６−イル｝ブタンアミド、
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−［（ヘキシルオキシ）メチル］−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝アセトアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド、
Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−イル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド、化合物、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］−２，２，２−トリフルオロアセトアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］プロパンアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］メタンスルホンアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］−２，２−ジフルオロアセトアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］−３，３，３−トリフルオロプロパンアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］−Ｎ−メチルアセトアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミド、
ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］メチルカルバメート、
（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−４−（メチルアミノ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２，３−ジオール塩酸塩、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（１５−フェニル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−アジド−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（２，５，８，１１−テトラオキサテトラデカ−１３−エン−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（２，５，８，１１−テトラオキサテトラデカ−１３−イン−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−アミノ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（１３−ヒドロキシ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド、
１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−酸、
Ｓ−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝エタンチオエート、
Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−［１３−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝アセトアミド、
Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド、
Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−｛４−［（３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−２−アミノプロポキシ）メチル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド塩酸塩、
６−アジド−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド、
Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）へプタ−６−エンアミド、
Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）へプタ−６−インアミド、
７−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−７−オキソヘプタン酸（ナトリウム塩）、
ベンジル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝カルバメート、
６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド酢酸塩、
Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド、
Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝−６−［（ブロモアセチル）アミノ］ヘキサンアミド、
４−｛［（２Ｒ）−５−（カルバモイルアミノ）−２−｛［（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝アセチル］アミノ｝ペンタノイル］アミノ｝ベンジル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝カルバメート、
Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−３，１９−ジオキソ−１−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−４，２０−ジアザヘキサコサン−２６−アミド、
Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−３，３１−ジオキソ−１−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−オクタオキサ−４，３２−ジアザオクタトリアコンタン−３８−アミド、
Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド、
２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝カルバメート、
Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ヘキサンアミド、
Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝−Ｎ’−（１，３−ジヒドロキシプロパン−２−イル）ヘプタンジアミド、
６−アジド−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝ヘキサンアミド、
６−（ベンジルオキシ）−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝ヘキサンアミド、
（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−１−｛１３−［４−（｛３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−２−（｛６［（６ヒドロキシヘキサノイル）アミノ］ヘキサノイル｝アミノ）プロポキシ｝メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル｝−３−（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−２−イルアセテート、
ベンジル［６−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝アミノ）−６−オキソへキシル］カルバメート、
６−アミノ−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝ヘキサンアミドアセテート、
４−（ベンジルオキシ）−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アミノ−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アミノ−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ブタンアミド、
Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−４−ヒドロキシブタンアミド、及び
Ｎ−（２−｛［６−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソへキシル｝アミノ）−６−オキソへキシル］オキシ｝−１，３−ジオキサン−５−イル）−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド
【０５０７】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、式（Ｎ）のさらなる成分を含む。
【化３９】
2020522265.tif 000185
【０５０８】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、以下から選択されるさらなる成分を含む：
【化４０】
2020522265.tif 000186
2020522265.tif 000187
2020522265.tif 000188
及び
【化４１】
2020522265.tif 000189
【０５０９】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、以下の式のいずれかから選択されるさらなる成分を含む：
【化４２】
2020522265.tif 000190
2020522265.tif 000191
2020522265.tif 000192
2020522265.tif 000193
2020522265.tif 000194
及び
【化４３】
2020522265.tif 000195
【０５１０】
一部の実施形態では、本開示は、式Ｏ１を有する化合物：
Ｙ１−Ｌ１−（Ｚ１０）ｚａ
Ｏ１
または該化合物の薬学的に許容される塩に関し、式中、Ｙ１は、ＡＰＯＣ３を標的とするオリゴヌクレオチドであり、
ｚａは、１、２、または３であり、
Ｌ１は、式Ｌ１１、Ｌ１２、Ｌ１３、Ｌ４３、Ｌ４４、Ｌ４５、Ｌ４６、Ｌ４７、Ｌ４８、Ｌ４９、Ｌ５０、Ｌ５１、Ｌ５２、Ｌ５３またはＬ５４の化合物であり、Ｙ１及びＺ１０との結合位置が示されており、
【化４４】
2020522265.tif 000196
2020522265.tif 000197
2020522265.tif 000198
2020522265.tif 000199
2020522265.tif 000200
2020522265.tif 000201
式中、各Ｔ１は、独立して、存在しないか、アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンであり、ここで、該アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンの１つ以上の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｑ１は、独立して、存在しないか、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９−、−ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９−、−ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−、−ＮＲ４９Ｃ（Ｏ）ＮＲ４９−、二価のヘテロアリール基、または−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、及び−ＮＲ４９−から選択されるヘテロ原子基（ここで、少なくとも２つの炭素原子が該ヘテロ原子基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−及び−ＮＲ４９−を任意の他のヘテロ原子基から分離している）、または次式の構造であり、
【化４５】
2020522265.tif 000202
ここで、Ｒ５３は−Ｏまたは−ＮＨ−であり、Ｒ５４は−Ｏまたは−Ｓであり、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９ａ）−で置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９ａ）２、−ＯＲ４９ａ、及び−Ｓ（Ｒ４９ａ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
Ｒ５３は、−Ｏまたは−ＮＨであり、
Ｒ５４は、−Ｏまたは−Ｓであり、
各ｎは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０であり、ｎが０より大きい場合、各（Ｔ１−Ｑ１−Ｔ１−Ｑ１）の各Ｔ１及び各Ｑ１は独立して選択され、
各Ｚ１０は、独立して、式Ｚ１２、Ｚ１３、Ｚ１４、Ｚ１５、Ｚ１６、Ｚ１７、Ｚ１８、Ｚ１９、Ｚ２０、もしくはＺ２１の化合物、またはその幾何異性体もしくは位置異性体であり、Ｌ１との結合位置が示されており、
【化４６】
2020522265.tif 000203
；
ここで、各Ｒ４６は、独立して、−ＣＮ、−ＣＨ２−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ２−Ｎ３、−ＣＨ２−ＮＨ２、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５１、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨ２−ＳＨ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、ここで、該アリールまたはヘテロアリールは、Ｒ５１で任意に置換され、
各Ｒ４７は、独立して、−ＯＨ、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ４８、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、該テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒ４８で任意に置換され、
各Ｒ４８は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、該アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ５２）−から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ５２）２、−ＯＲ５２、及び−Ｓ（Ｒ５２）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｒ５１は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ３−Ｃ２０）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ６０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ６０）アルキニル、または−（Ｃ１−Ｃ６０）アルキルであり、ここで、該シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基または該アルキルの１〜２０個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ５２は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい。
【０５１１】
一部の実施形態では、Ｙ１は、少なくとも１５塩基を含む。
【０５１２】
一部の実施形態では、Ｙ１の塩基配列は、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列を含むか、もしくは当該塩基配列であり、またはＹ１の塩基配列は、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの配列の１５個の連続塩基を含む。
【０５１３】
一部の実施形態では、Ｙ１は、少なくとも１つのホスホジエステルヌクレオチド間結合を含む。
【０５１４】
一部の実施形態では、Ｙ１は、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０５１５】
一部の実施形態では、Ｙ１は、キラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０５１６】
一部の実施形態では、Ｙ１は、Ｓｐ立体配置にキラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０５１７】
一部の実施形態では、Ｙ１は、Ｒｐ立体配置にキラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０５１８】
一部の実施形態では、Ｙ１は、キラル制御された修飾ヌクレオチド間結合またはキラル制御されたホスホロチオエートの場合、組成物内で少なくとも７０％のジアステレオ純度を有するリンキラル中心を含む。
【０５１９】
一部の実施形態では、Ｙ１は、キラル制御された修飾ヌクレオチド間結合またはキラル制御されたホスホロチオエートの場合、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または９９．５％のジアステレオ純度を有するリンキラル中心を含む。
【０５２０】
一部の実施形態では、Ｙ１は、少なくとも１つの糖修飾を含む。
【０５２１】
一部の実施形態では、Ｙ１は、少なくとも１つの塩基修飾を含む。
【０５２２】
一部の実施形態では、Ｙ１は、骨格結合のパターンをさらに含む。
【０５２３】
一部の実施形態では、Ｙ１は、骨格キラル中心のパターンをさらに含む。
【０５２４】
一部の実施形態では、Ｙ１は、化学修飾のパターンをさらに含む。
【０５２５】
一部の実施形態では、Ｙ１は、骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び化学修飾のパターンをさらに含む。
【０５２６】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び化学修飾のパターンは、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンである。
【０５２７】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び化学修飾のパターンは、表１Ａに列挙されるオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンであり、Ｙ１の塩基配列は、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列を含むか、もしくは当該塩基配列であり、またはＹ１の塩基配列は、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの配列の１５個の連続塩基を含む。
【０５２８】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性の減少を媒介する能力を有する。
【０５２９】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ、立体障害及び／またはＲＮＡ干渉によって媒介される機序を介して、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性の減少を媒介する能力を有する。
【０５３０】
一部の実施形態では、
各Ｔ１は、独立して、存在しないか、アルキレンであり、ここで、該アルキレンの１つ以上の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｑ１は、独立して、存在しないか、−Ｃ（Ｏ）、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９、−ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）、または−Ｏ−、及び−ＮＲ４９から選択されるヘテロ原子基であり、ここで、少なくとも２つの炭素原子が、ヘテロ原子基−Ｏ−及び−ＮＲ４９を任意の他のヘテロ原子基から分離しており、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、該アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｎは、独立して、０、１、２、３または４であり、ｎが０より大きい場合、各（Ｔ１−Ｑ１−Ｔ１−Ｑ１）の各Ｔ１及び各Ｑ１は独立して選択され、
各Ｒ４６は、−ＣＨ２−ＯＨであり、
各Ｒ４７は、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８であり、
各Ｒ４８は、独立して、−Ｈ、または−（Ｃ１−Ｃ５）アルキルである。
【０５３１】
一部の実施形態では、本開示は、式Ｏ２を有する化合物：
Ｙ１−Ｌ２−（Ｚ１１）ｚａ
Ｏ２
またはその薬学的に許容可能な塩に関し、式中、Ｙ１は、ＡＰＯＣ３を標的とするオリゴヌクレオチドであり、
ｚａは、１、２、または３であり、
Ｌ２は、結合基であり；
Ｚ１１は、式（Ｂ）の化合物であり、Ｌ２との結合位置が示されており、
【化４７】
2020522265.tif 000204
各Ｒ４７は、独立して、−ＯＨ、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ４８、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、該テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒ４８で任意に置換され、
各Ｒ４８は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、該アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ５２）−から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ５２）２、−ＯＲ５２、及び−Ｓ（Ｒ５２）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９ａ）−で置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９ａ）２、−ＯＲ４９ａ、及び−Ｓ（Ｒ４９ａ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており；、こで、該アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
各Ｒ５２は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい。
【０５３２】
一部の実施形態では、Ｌ２は、式Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ｌ５、Ｌ６、Ｌ７、Ｌ８、Ｌ９、Ｌ１０、Ｌ１１、Ｌ１２、Ｌ１３またはＬ１４の化合物であり、Ｙ１及びＺ１１との結合位置が示されており、
【化４８】
2020522265.tif 000205
2020522265.tif 000206
2020522265.tif 000207
2020522265.tif 000208
式中、各Ｔ１は、独立して、存在しないか、アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンであり、ここで、該アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンの１つ以上の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｑ１は、独立して、存在しないか、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９−、−ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９−、−ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ２−、−ＮＲ４９Ｃ（Ｏ）ＮＲ４９−、二価のヘテロアリール基、または−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、及び−ＮＲ４９−から選択されるヘテロ原子基（ここで、少なくとも２つの炭素原子が該ヘテロ原子基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−及び−ＮＲ４９−を任意の他のヘテロ原子基から分離している）、または次式の構造であり、
【化４９】
2020522265.tif 000209
ここで、Ｒ５３は−Ｏまたは−ＮＨであり、Ｒ５４は−Ｏまたは−Ｓであり、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９ａ）−で置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９ａ）２、−ＯＲ４９ａ、及び−Ｓ（Ｒ４９ａ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり；
Ｒ５３は、−Ｏまたは−ＮＨであり；
Ｒ５４は、−Ｏまたは−Ｓであり；
各ｎは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０，１１，１２，１３，１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０であり、ｎが０より大きい場合、各（Ｔ１−Ｑ１−Ｔ１−Ｑ１）の各Ｔ１及び各Ｑ１は独立して選択される。
【０５３３】
一部の実施形態では、Ｙ１は、少なくとも１５塩基を含む。
【０５３４】
一部の実施形態では、Ｙ１の塩基配列は、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列を含むか、もしくは当該塩基配列であり、またはＹ１の塩基配列は、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの配列の１５個の連続塩基を含む。
【０５３５】
一部の実施形態では、Ｙ１は、少なくとも１つのホスホジエステルヌクレオチド間結合を含む。
【０５３６】
一部の実施形態では、Ｙ１は、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０５３７】
一部の実施形態では、Ｙ１は、キラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０５３８】
一部の実施形態では、Ｙ１は、Ｓｐ立体配置にキラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０５３９】
一部の実施形態では、Ｙ１は、Ｒｐ立体配置にキラル制御されたホスホロチオエートである、少なくとも１つのキラル制御された修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【０５４０】
一部の実施形態では、Ｙ１は、キラル制御された修飾ヌクレオチド間結合またはキラル制御されたホスホロチオエートの場合、組成物内で少なくとも７０％のジアステレオ純度を有するリンキラル中心を含む。
【０５４１】
一部の実施形態では、Ｙ１は、キラル制御された修飾ヌクレオチド間結合またはキラル制御されたホスホロチオエートの場合、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または９９．５％のジアステレオ純度を有するリンキラル中心を含む。
【０５４２】
一部の実施形態では、Ｙ１は、少なくとも１つの糖修飾を含む。
【０５４３】
一部の実施形態では、Ｙ１は、少なくとも１つの塩基修飾を含む。
【０５４４】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの骨格結合のパターンは、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドの骨格結合のパターンである。
【０５４５】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの骨格キラル中心のパターンは、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドの骨格キラル中心のパターンである。
【０５４６】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの化学修飾のパターンは、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドの化学修飾のパターンである。
【０５４７】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンは、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンである。
【０５４８】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び化学修飾のパターンは、表１Ａに列挙される任意のオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンである。
【０５４９】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドの骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び化学修飾のパターンは、表１Ａに列挙されるオリゴヌクレオチドのオリゴヌクレオチドのものであるＹ１の骨格結合のパターン、骨格キラル中心のパターン、及び／または化学修飾のパターンであり、Ｙ１の塩基配列は、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの塩基配列を含むか、もしくは当該塩基配列であり、またはＹ１の塩基配列は、表１Ａに列挙される任意のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの配列の１５個の連続塩基を含む。
【０５５０】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性の減少を媒介する能力を有する。
【０５５１】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ、立体障害及び／またはＲＮＡ干渉によって媒介される機序を介して、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性の減少を媒介する能力を有する。
【０５５２】
一部の実施形態では、各Ｒ４７は−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８であり、各Ｒ４８は独立して、−Ｈ、または−（Ｃ１−Ｃ５）アルキルである。
【０５５３】
一部の実施形態では、
各Ｔ１は、独立して、存在しないか、アルキレンであり、ここで、
アルキレンの１つ以上の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｑ１は、独立して、存在しないか、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４９、ＮＲ４９−Ｃ（Ｏ）、またはＯ、及びＮＲ４９から選択されるヘテロ原子基であり、ここで、少なくとも２つの炭素原子が、ヘテロ原子基Ｏ及びＮＲ４９を任意の他のヘテロ原子基から分離しており、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、該アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｎは、独立して、０、１、２、３または４であり、ｎが０より大きい場合、各（Ｔ１−Ｑ１−Ｔ１−Ｑ１）の各Ｔ１及び各Ｑ１は独立して選択される。
【０５５４】
一部の実施形態では、本開示は、（ａ）ＡＰＯＣ３を標的とする能力を有するオリゴヌクレオチドと、（ｂ）結合基と、（ｃ）Ｚ１０及びＺ１１から独立して選択される１、２、または３つの部分とを含む、化合物に関し、ここで、該結合基は、該オリゴヌクレオチドと該１、２または３つの部分を結合し、式中、
各Ｚ１０は、独立して、式Ｚ１２、Ｚ１３、Ｚ１４、Ｚ１５、Ｚ１６、Ｚ１７、Ｚ１８、Ｚ１９、Ｚ２０、もしくはＺ２１の化合物、またはその幾何異性体もしくは位置異性体であり、Ｌ１との結合位置が示されており、
【化５０】
2020522265.tif 000210
；
ここで、各Ｒ４６は、独立して、−ＣＮ、−ＣＨ２−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ２−Ｎ３、−ＣＨ２−ＮＨ２、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５１、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨ２−ＳＨ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ５１、−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ５１、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ５２）−Ｒ５１、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、ここで、該アリールまたはヘテロアリールは、Ｒ５１で任意に置換され、
各Ｒ４７は、独立して、−ＯＨ、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ４８、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、該テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒ４８で任意に置換され、
各Ｒ４８は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、該アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ５２）−から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ５２）２、−ＯＲ５２、及び−Ｓ（Ｒ５２）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｒ５１は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ３−Ｃ２０）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ６０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ６０）アルキニル、または−（Ｃ１−Ｃ６０）アルキルであり、ここで、該シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基または該アルキルの１〜２０個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ５２は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９ａ）−で置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９ａ）２、−ＯＲ４９ａ、及び−Ｓ（Ｒ４９ａ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
Ｚ１１は、式（Ｂ）の化合物であり、Ｌ２との結合位置が示されており、
【化５１】
2020522265.tif 000211
各Ｒ４７は、独立して、−ＯＨ、−Ｎ３、−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ４８）２、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ４８、−Ｎ（Ｒ４８）−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ４８、テトラゾール、またはトリアゾールであり、ここで、該テトラゾール及びトリアゾールは、Ｒ４８で任意に置換され、
各Ｒ４８は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキル、ハロ置換−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ１−Ｃ５）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、該アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ５２）−から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ５２）２、−ＯＲ５２、及び−Ｓ（Ｒ５２）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、
各Ｒ４９は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９ａ）−で置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９ａ）２、−ＯＲ４９ａ、及び−Ｓ（Ｒ４９ａ）から選択されるヘテロ原子基で置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各Ｒ４９ａは、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、
４６．各Ｒ５２は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルケニル、−（Ｃ１−Ｃ２０）アルキニル、または−（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルであり、ここで、少なくとも２つの炭素原子で分離された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ２−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ４９）−から独立して選択されるヘテロ原子で各々独立して置き換えられてもよく、該アルキルの−ＣＨ３は、−Ｎ（Ｒ４９）２、−ＯＲ４９、及び−Ｓ（Ｒ４９）から選択されるヘテロ原子基で各々独立して置き換えられてもよく、ここで、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で分離されており、ここで、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい。特定のオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドを含む、キラル制御されたＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド組成物であって、当該特定のオリゴヌクレオチド型は、
ａ）共通塩基配列及び長さであって、当該塩基配列は、ＡＰＯＣ３標的遺伝子に相補的である、当該共通塩基配列及び長さ、
ｂ）骨格結合の共通パターン、
ｃ）骨格キラル中心の共通パターンであって、当該骨格キラル中心の共通パターンは、キラル制御されたキラル中心を含む少なくとも１つのヌクレオチド間結合を含む、当該骨格キラル中心の共通パターン
によって特徴付けられ、
当該組成物は、特定のオリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドに関して、同じ共通塩基配列と長さを有するオリゴヌクレオチドの実質的なラセミ調製物と比較して、富化されているという点でキラル制御され、
当該オリゴヌクレオチド組成物は、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性を減少させる能力を有する、
当該組成物。
【０５５５】
一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ、立体障害及び／またはＲＮＡ干渉によって媒介される機序を介して、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性を減少させる能力を有する。
【０５５６】
一部の実施形態では、本開示は、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物を含む、組成物に関する。
【０５５７】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤であるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含む組成物に関し、当該一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ＡＰＯＣ３標的ＲＮＡ配列に相補的または実質的に相補的であり、
約１５〜約４９ヌクレオチドの長さを有し、
標的特異的なＲＮＡ干渉を誘導する能力を有し、
当該一本鎖ＲＮＡｉ剤は、少なくとも１つの非天然の塩基、糖、及び／またはヌクレオチド間結合を含み、
当該組成物は、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、レベル及び／または活性を減少させる能力を有する。
【０５５８】
一部の実施形態では、１つまたは複数のオリゴヌクレオチドは、架橋二環式ケタールをさらに含む。
【０５５９】
一部の実施形態では、ＲＣＤは、
【化５２】
2020522265.tif 000212
である。
【０５６０】
一部の実施形態では、ＲＣＤは、
【化５３】
2020522265.tif 000213
である。
【０５６１】
一部の実施形態では、ＲＣＤは、ＲＣＤ−Ｈが、
【化５４】
2020522265.tif 000214
であるような構造のものである。
【０５６２】
一部の実施形態では、ＲＣＤは、リンカーを介して、１つまたは複数のオリゴヌクレオチドに繋がれる。
【０５６３】
一部の実施形態では、リンカーは、ＬＭである。
【０５６４】
一部の実施形態では、リンカーは、
【化５５】
2020522265.tif 000215
2020522265.tif 000216
の構造を有する。
【０５６５】
一部の実施形態では、ＲＣＤは、以下から選択される：
【化５６】
2020522265.tif 000217
2020522265.tif 000218
2020522265.tif 000219
【０５６６】
一部の実施形態では、本開示は、少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤と混合された、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物を治療有効量で含む、医薬組成物に関する。
【０５６７】
一部の実施形態では、組成物は、抗炎症性剤、抗糖尿病剤、及びコレステロール／脂質調整剤からなる群から選択される少なくとも１つの追加の医薬品をさらに含む。
【０５６８】
一部の実施形態では、当該追加の医薬品は、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ−（ＡＣＣ）阻害剤、ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ１（ＤＧＡＴ−１）阻害剤、ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ２（ＤＧＡＴ−２）阻害剤、モノアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ阻害剤、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）−１０阻害剤、ＡＭＰＫ活性化剤、スルホニル尿素、メグリチニド、α−アミラーゼ阻害剤、α−グルコシドヒドロラーゼ阻害剤、α−グルコシダーゼ阻害剤、ＰＰＡＲγアゴニスト、ＰＰＡＲα／γアゴニスト、ビグアニド、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）調節剤、リラグルチド、アルビグルチド、エキセナチド、アルビグルチド、リキシセナチド、デュラグルチド、セマグルチド、タンパク質チロシンホスファターゼ−１Ｂ（ＰＴＰ−１Ｂ）阻害剤、ＳＩＲＴ−１活性化剤、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）阻害剤、インスリン分泌促進剤、脂肪酸酸化阻害剤、Ａ２アンタゴニスト、ｃ−ｊｕｎアミノ末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害剤、グルコキナーゼ活性化剤（ＧＫａ）、インスリン、インスリン模倣剤、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、ＶＰＡＣ２受容体アゴニスト、ＳＧＬＴ２阻害剤、グルカゴン受容体調節剤、ＧＰＲ１１９調節剤、ＦＧＦ２１誘導体もしくはアナログ、ＴＧＲ５受容体調節剤、ＧＰＢＡＲ１受容体調節剤、ＧＰＲ４０アゴニスト、ＧＰＲ１２０調節剤、高親和性ニコチン酸受容体（ＨＭ７４Ａ）活性化剤、ＳＧＬＴ１阻害剤、カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ酵素の阻害剤もしくは調節剤、フルクトース１，６−ジホスファターゼの阻害剤、アルドースレダクターゼの阻害剤、ミネラルコルチコイド受容体阻害剤、ＴＯＲＣ２の阻害剤、ＣＣＲ２及び／またはＣＣＲ５の阻害剤、ＰＫＣアイソフォーム（例えば、ＰＫＣα、ＰＫＣβ、ＰＫＣγ）の阻害剤、脂肪酸シンテターゼの阻害剤、セリンパルミトイルトランスフェラーゼの阻害剤、ＧＰＲ８１、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ４３、ＧＰＲ４１、ＧＰＲ１０５、Ｋｖ１．３、レチノール結合タンパク質４、グルココルチコイド受容体、ソマトスタイン受容体の調節剤、ＰＤＨＫ２もしくはＰＤＨＫ４の阻害剤もしくは調節剤、ＭＡＰ４Ｋ４の阻害剤、ＩＬ１ベータを含むＩＬ１ファミリーの調節剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、スクアレンシンテターゼ阻害剤、フィブラート、胆汁酸隔離剤、ＡＣＡＴ阻害剤、ＭＴＰ阻害剤、リポオキシゲナーゼ阻害剤、コエステロール吸収阻害剤、ＰＣＳＫ９調節剤、コレステリルエステル転移タンパク質阻害剤ならびにＲＸＲアルファの調節剤からなる群から選択される。
【０５６９】
一部の実施形態では、組成物は、システアミンもしくはその薬学的許容可能な塩、シスタミンもしくはその薬学的許容可能な塩、抗酸化化合物、レシチン、ビタミンＢ複合体、胆汁塩製剤、カンナビノイド−１（ＣＢ１）受容体のアンタゴニスト、カンナビノイド−１（ＣＢ１）受容体のインバースアゴニスト、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体）活性制御剤、ベンゾチアゼピンもしくはベンゾチエピン化合物、タンパク質チロシンホスファターゼＰＴＰＲＵを阻害するＲＮＡアンチセンス構築物、ヘテロ原子結合置換ピペリジン及びその誘導体、ステアロイル補酵素アルファデルタ−９デサチュラーゼを阻害する能力を有するアザシクロペンタン誘導体、アディポネクチンの分泌促進活性もしくは誘導活性を有するアシルアミド化合物、第四級アンモニウム化合物、グラチラマー酢酸塩、ペントラキシンタンパク質、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ｎ−アセチルシステイン、イソフラボン化合物、マクロライド抗生物質、ガレクチン阻害剤、抗体、またはそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの追加の医薬品をさらに含む。
【０５７０】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトにおける、非アルコール性脂肪性肝疾患もしくは非アルコール性脂肪性肝炎の評価スコアリングシステムの重症度の少なくとも１点の減点、非アルコール性脂肪性肝炎活性の血清マーカーレベルの低下、非アルコール性脂肪性肝炎疾患活性の低下、または非アルコール性脂肪性肝炎の医学的結果の低減のための方法であって、そのような減点、低下または低減を必要とするヒトに、それを必要とする患者に対して治療有効量の先行請求項のいずれか１項に記載の組成物を投与するステップを含む、方法に関する。
【０５７１】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトにおける、脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、肝線維症を伴う非アルコール性脂肪性肝炎、肝硬変を伴う非アルコール性脂肪性肝炎、または肝硬変及び肝細胞癌を伴う非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための方法であって、そのような治療を必要とするヒトに、それを必要とする患者に対して治療有効量の先行請求項のいずれか１項に記載の組成物を投与するステップを含む、方法に関する。
【０５７２】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトにおける、高脂血症、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型真性糖尿病、特発性Ｉ型糖尿病（Ｉｂ型）、成人潜在性自己免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ）、早期発症性２型糖尿病（ＥＯＤ）、若年発症性非定型糖尿病（ＹＯＡＤ）、若年発症成人型糖尿病（ＭＯＤＹ）、栄養不良に関連する糖尿病、妊娠糖尿病、冠状動脈性心疾患、虚血性脳卒中、血管形成術後の再狭窄、末梢血管疾患、間欠性跛行、心筋梗塞、脂質異常症、食後脂肪血症、耐糖能異常（ＩＧＴ）の状態、空腹時血漿グルコース障害の状態、代謝性アシドーシス、ケトン症、関節炎、肥満症、骨粗鬆症、高血圧、うっ血性心不全、左心室肥大、末梢性動脈疾患、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、白内障、糖尿病性腎症、糸球体硬化症、慢性腎不全、糖尿病性ニューロパシー、メタボリックシンドローム、Ｘ症候群、月経前症候群、狭心症、血栓症、アテローム性動脈硬化症、一過性脳虚血発作、脳卒中、血管再狭窄、高血糖症、高インスリン血症、高トリグリセリド血症、インスリン抵抗性、グルコース代謝障害、勃起不全、皮膚及び結合組織障害、足部潰瘍及び潰瘍性大腸炎、内皮機能不全及び血管コンプライアンス低下、高アポＢリポタンパク血症、アルツハイマー、統合失調症、認知障害、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、及び過敏性腸症候群、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、または非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を治療するための方法であって、そのような治療を必要とするヒトに、それを必要とする患者に対して治療有効量の先行請求項のいずれか１項に記載の組成物を投与するステップを含む、方法に関する。
【０５７３】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトにおける、脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、肝線維症を伴う非アルコール性脂肪性肝炎、肝硬変を伴う非アルコール性脂肪性肝炎、または肝硬変及び肝細胞癌を伴う非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための方法であって、そのような治療を必要とするヒトに、
ａ．先行請求項のいずれか１項に記載の第１の組成物と、
ｂ．抗炎症性剤、抗糖尿病剤、及びコレステロール／脂質調整剤からなる群から選択される少なくとも１つの追加の医薬品、ならびに少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤を含む第２の組成物と
を含む、治療有効量の２つの別個の医薬組成物を投与するステップを含む、方法に関する。
【０５７４】
一部の実施形態では、当該第１の組成物及び当該第２の組成物は、同時に投与される。
【０５７５】
一部の実施形態では、当該第１の組成物及び当該第２の組成物は、逐次的に任意の順で投与される。
【０５７６】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトにおける、門脈圧亢進症、肝タンパク質合成能力、高ビリルビン血症、または脳障害を低減するための方法であって、そのような治療を必要とするヒトに、それを必要とする患者に対して治療有効量の先行請求項のいずれか１項に記載の組成物を投与するステップを含む、方法に関する。
【０５７７】
一部の実施形態では、本開示は、細胞における、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、活性及び／またはレベルを減少させる方法であって、当該細胞を、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物または組成物と接触させるステップを含む、方法に関する。
【０５７８】
一部の実施形態では、本開示は、患者における、ＡＰＯＣ３標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現、活性及び／またはレベルを減少させる方法であって、細胞を、先行請求項のいずれか１項に記載の化合物または組成物と接触させるステップを含む、方法に関する。
【０５７９】
一部の実施形態では、本明細書で使用される用語であるＧａｌＮＡｃは、ＧａｌＮＡｃと構造的に同様である、及び／またはＧａｌＮＡｃの少なくとも１つの機能（例えば、ＡＳＰＧＲへの結合）を行う化学物質を指す。
【０５８０】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端は、ＧａｌＮＡｃまたはそのバリアントもしくは誘導体を含む。
【０５８１】
ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端におけるＧａｌＮＡｃ部分（例えば、５’ＧａｌＮＡｃ部分）の非限定的な例が以下に示され、ここで、該５’末端構造は：
【化５７】
2020522265.tif 000220
で表される。
【０５８２】
一部の実施形態では、ＧａｌＮＡｃ部分、例えば、ＧａｌＮＡｃまたはそのバリアントもしくは誘導体は、以下のいずれかに記載されている：Ｍｉｇａｗａ  ｅｔ  ａｌ．２０１６  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２６：２９１４−７、Ｏｓｔｅｒｇａａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．２０１５  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．２６：１４５１−１４５５、Ｐｒａｋａｓｈ  ｅｔ  ａｌ．２０１４  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．４２：８７９６−８８０７、Ｐｒａｋａｓｈ  ｅｔ  ａｌ．２０１６  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５９：２７１８−３３、Ｓｈｅｍｅｓｈ  ｅｔ  ａｌ．２０１６  Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  ５：ｅ３１９、Ｓｔ−Ｐｉｅｒｒｅ  ｅｔ  ａｌ．２０１６  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２４：２３９７−４０９、及び／またはＹｕ  ｅｔ  ａｌ．２０１６  Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  ５：ｅ３１７。
【０５８３】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化された化学物質（例えば、さらなる成分）は、ＡＳＰＧＲに結合する。
【０５８４】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化された化学物質（例えば、さらなる成分）は、ＡＳＰＧＲに結合し、Ｍｏｄ０３１、Ｍｏｄ０３４、Ｍｏｄ０３５、Ｍｏｄ０３６、Ｍｏｄ０３８、Ｍｏｄ０３９、Ｍｏｄ０４０、またはＭｏｄ０４１のいずれかを含む。
【０５８５】
一部の実施形態では、さらなる成分は、Ｍｏｄ０７９、Ｍｏｄ０８０、Ｍｏｄ０８１、Ｍｏｄ０８２、またはＭｏｄ０８３のいずれかであってもよいし、そのいずれかを含んでもよい。一部の実施形態では、さらなる成分は、以下のいずれかであってもよいし、以下のいずれかを含んでもよい：
【化５８】
2020522265.tif 000221
2020522265.tif 000222
2020522265.tif 000223
2020522265.tif 000224
2020522265.tif 000225
2020522265.tif 000226
2020522265.tif 000227
【０５８６】
一部の実施形態では、さらなる成分は、以下であってもよいし、以下を含んでもよい：
【化５９】
2020522265.tif 000228
ここで、Ｍｏｄ０６１は、３つの同一または非同一のオリゴヌクレオチドに複合体化される。
【０５８７】
ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの５’−ヌクレオシドまたは５’−ヌクレオチド
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、ＲＮＡ干渉を介して誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、ＲＮＡ干渉やＲＩＳＣ（ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンもしくは遺伝子発現の立体障害を含むがこれに限定されない）が関与しない生化学的機序を介して誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、標的遺伝子のｍＲＮＡへのアニーリング後の翻訳の立体的な遮断、及び／または、ｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって、誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、もしくは当技術分野で既知の任意の５’−ヌクレオシドまたは任意の５’−ヌクレオチドを含有し得る。
【０５８８】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の該５’−ヌクレオシド、例えば、５’末端のヌクレオシド（例えば、Ｎ１の）は、任意のヌクレオシド、修飾されたヌクレオシド、または当技術分野で既知のユニバーサルヌクレオシドでよい。
【０５８９】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の該５’−ヌクレオシド、例えば、５’末端のヌクレオシド（例えば、Ｎ１の）は、当該塩基における２’修飾を含み得る。
【０５９０】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の該５’末端のヌクレオシド（例えば、Ｎ１の）は、２’−デオキシ（ＤＮＡ）、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、もしくは２’−ＭＯＥ、または逆位ヌクレオシドもしくはヌクレオチドを含み得る。
【０５９１】
当該ｓｓＲＮＡｉ剤の５’末端におけるヌクレオシドが２’−デオキシ（ＤＮＡ）であるｓｓＲＮＡｉ剤形式の非限定的な例としては、図１の形式１〜５、１６〜１８、２２〜２９、３２〜７８、８４〜９３、９７、及び１０３〜１０７が挙げられる。
【０５９２】
当該ｓｓＲＮＡｉ剤の５’末端におけるヌクレオシドが２’−ＦであるｓｓＲＮＡｉ剤形式の非限定的な例としては、図１の形式１１〜１５、１９、７９〜８３、及び９８〜１００が挙げられる。
【０５９３】
当該ｓｓＲＮＡｉ剤の５’末端におけるヌクレオシドが２’−ＯＭｅであるｓｓＲＮＡｉ剤形式の非限定的な例としては、図１の形式６〜１０、２０〜２１、３０〜３１、９４〜９６、及び１０１〜１０２が挙げられる。
【０５９４】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端における核酸塩基（例えば、Ｎ１の）はＴである。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端における核酸塩基（例えば、Ｎ１の）はＵである。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端における核酸塩基（例えば、Ｎ１の）はＡである。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端における核酸塩基（例えば、Ｎ１の）はＧである。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端における核酸塩基（例えば、Ｎ１の）はＣである。
【０５９５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、５’ミスマッチを有し、当該一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端（Ｎ１位）の核酸塩基は、標的転写産物の対応する位置からのミスマッチを有する。当技術分野で報告されているように、５’−ヌクレオシド部分と標的転写産物の対応する位置の相補性は、有効な二本鎖ｓｉＲＮＡに必要ではない。本明細書に記載される一本鎖ＲＮＡｉ剤の様々な例もまた、５’ミスマッチを有し、なおＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する。５’位（Ｎ１）で標的ｍＲＮＡの配列とのミスマッチを有する有効なｓｓＲＮＡｉ剤が構築されている。５’位で標的ｍＲＮＡの配列とのミスマッチを有する有効なｓｓＲＮＡｉ剤が構築されており、該ｓｓＲＮＡｉ剤のＮ１位はＴである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤はＮ１で５’ミスマッチを有し、ここで、Ｎ１の核酸塩基はＴである。
【０５９６】
一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドはＬＮＡである。
【０５９７】
一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドは５’−Ｈ（デオキシ）である。当該５’位のヌクレオシドが５’−Ｈ（デオキシ）である有効なｓｓＲＮＡｉ剤が構築されている。一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドはデオキシＴ、Ａ、Ｇ、またはＣである。一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドはデオキシＴである。一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドはデオキシＡである。一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドは２’−Ｆである。当該５’位のヌクレオシドが２’−Ｆである有効なｓｓＲＮＡｉ剤が構築されている。一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ａである。一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドは２’−Ｆ  Ｇである。一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドは２’−ＯＭｅである。当該５’位のヌクレオシドが２’−ＯＭｅである有効なｓｓＲＮＡｉ剤が構築されている。一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｕである。一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ａである。一部の実施形態では、５’位のヌクレオシドは２’−ＯＭｅ  Ｃである。
【０５９８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤を含めたＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドのシード領域
【０５９９】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、または、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、もしくは当技術分野で既知の任意のシード領域またはその一部もしくは構造的要素を含み得る。
【０６００】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤のシード領域は、転写産物標的への当該ＲＮＡｉ剤の結合に特に重要なＲＮＡｉ剤の部分である。Ｌｉｍ  ｅｔ  ａｌ．２００５  Ｎａｔｕｒｅ  ４３３：７６９−７７３。多くの場合、ＲＮＡｉ剤アンチセンス鎖のシード領域とｍＲＮＡ標的の完全な相補性は、高ＲＮＡｉ活性に必要であると報告されている。例えば、シード領域の６位での単一のミスマッチが、二本鎖ＲＮＡｉ活性を無効にすると報告されている。Ｌｉｍ  ｅｔ  ａｌ．２００５  Ｎａｔｕｒｅ  ４３３：７６９−７７３。対照的に、ｄｓＲＮＡｉのアンチセンス鎖は、シード領域以外、例えば、５’位、ポストシード領域内、及び３’末端ジヌクレオチド内でのミスマッチにはより適すると報告されている。
【０６０１】
一部の実施形態では、該シード領域の各ヌクレオチドは２’−ＯＭｅである。
【０６０２】
一部の実施形態では、該シード領域の各ヌクレオチドは２’−ＯＭｅであり、該ポストシード領域の各ヌクレオチドは２’−ＯＭｅである。
【０６０３】
一部の実施形態では、該シード領域の１つのヌクレオチドは２’−Ｆであり、該シード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅである。
【０６０４】
一部の実施形態では、該シード領域の１つのヌクレオチドは２’−Ｆであり、該シード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅであり、該ポストシード領域の１つのヌクレオチドは２’−Ｆであり、該ポストシード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅである。
【０６０５】
一部の実施形態では、２位（５’末端から数えて）のヌクレオチドは２’−Ｆであり、該シード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅであり、該ポストシード領域の１つのヌクレオチドは２’−Ｆであり、該ポストシード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅである。
【０６０６】
一部の実施形態では、２位（５’末端から数えて）のヌクレオチドは２’−Ｆであり、該シード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅであり、１４位（５’末端から数えて）のヌクレオチドは２’−Ｆであり、該ポストシード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅである。
【０６０７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、任意の数のＮが２’−デオキシ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、及び／または２’−ＯＨである場合があり、及び／または当該糖の２’位に任意の他の修飾を有するシード領域を含む場合があるシード領域を含む。
【０６０８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤のシード領域の様々な非限定的な例を表１Ａ、図、及び本明細書の他の場所に示す。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上のヌクレオチドは独立して２’−Ｆである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上のヌクレオチドは独立して２’−Ｆである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上のヌクレオチドは独立して２’−Ｆである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上のヌクレオチドは独立して２’−Ｆである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の５つ以上のヌクレオチドは独立して２’−Ｆである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の６つ以上のヌクレオチドは独立して２’−Ｆである。
【０６０９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の５つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の６つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、Ｎ２〜Ｎ７のうちの７個は独立して２’−ＯＭｅである。
【０６１０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＭＯＥである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＭＯＥである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＭＯＥである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＭＯＥである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の５つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＭＯＥである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の６つ以上のヌクレオチドは独立して２’−ＭＯＥである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、Ｎ２〜Ｎ７のうちの７個は独立して２’−ＭＯＥである。
【０６１１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上のヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上のヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上のヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上のヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の５つ以上のヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の６つ以上のヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、Ｎ２〜Ｎ７のうちの７個は独立して２’−デオキシである。
【０６１２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−Ｆである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−Ｆである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−Ｆである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−Ｆである。
【０６１３】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−ＯＭｅである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−ＯＭｅである。
【０６１４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−ＭＯＥである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−ＭＯＥである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−ＭＯＥである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−ＭＯＥである。
【０６１５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上の非連続ヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。
【０６１６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つのヌクレオチドは独立して２’−デオキシである。
【０６１７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＯ（ホスホジエステル）である。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＯである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＯである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＯである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の５つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＯである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の６つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＯである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、Ｎ２〜Ｎ７のうちの７個は独立してＰＯである。
【０６１８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＳ（ホスホロチオエート）である。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＳである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＳである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＳである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の５つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＳである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の６つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＰＳである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、Ｎ２〜Ｎ７のうちの７個は独立してＰＳである。
【０６１９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＳｐ（Ｓｐ立体配置のホスホロチオエート）である。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＳｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＳｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＳｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の５つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＳｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の６つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＳｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、Ｎ２〜Ｎ７のうちの７個は独立してＳｐである。
【０６２０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＲｐ（Ｒｐ立体配置のホスホロチオエート）である。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＲｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＲｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＲｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の５つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＲｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の６つ以上のヌクレオチド間結合は独立してＲｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、Ｎ２〜Ｎ７のうちの７個は独立してＲｐである。
【０６２１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＰＯである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＰＯである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＰＯである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＰＯである。
【０６２２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＳｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＳｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＳｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＳｐである。
【０６２３】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＲｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＲｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＲｐである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＲｐである。
【０６２４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の１つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＰＳである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の２つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＰＳである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の３つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＰＳである。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、シード領域の任意の４つ以上の非連続ヌクレオチド間結合は独立してＰＳである。
【０６２５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾のパターンは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式のシード領域におけるヌクレオチドの２’修飾のパターンを含む。
【０６２６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｍｆｍｆｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６２７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｍｆｍｆｍｆを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６２８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆｍｆｍｆを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６２９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｍｆｍｆを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６３０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆｍｆｍｆを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６３１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆｍｆｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６３２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆｍｆｍｆｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６３３】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｍｆｍｆを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６３４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆｍｆｍｆｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６３５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆＭｆｍｆを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅであり、Ｍは２’−ＭＯＥである。
【０６３６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆＭｆｍｆｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅであり、Ｍは２’−ＭＯＥである。
【０６３７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆＭｆｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅであり、Ｍは２’−ＭＯＥである。
【０６３８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆＭｆを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅであり、Ｍは２’−ＭＯＥである。
【０６３９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆｍｆＭｆを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅであり、Ｍは２’−ＭＯＥである。
【０６４０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆｍｆＭｆｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅであり、Ｍは２’−ＭＯＥである。
【０６４１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆｍｆＭを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅであり、Ｍは２’−ＭＯＥである。
【０６４２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆＭｆＭｆを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅであり、Ｍは２’−ＭＯＥである。
【０６４３】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆＭｆＭｆＭを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅであり、Ｍは２’−ＭＯＥである。
【０６４４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆＭｆＭを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅであり、Ｍは２’−ＭＯＥである。
【０６４５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｄｆｄｆｄを含み、ここで、ｄは２’−デオキシであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６４６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｄｆｄｆｄｆを含み、ここで、ｄは２’−デオキシであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６４７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｄｆｄｆｄｆを含み、ここで、ｄは２’−デオキシであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６４８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｄｆｄｆを含み、ここで、ｄは２’−デオキシであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６４９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｆｍｍｍｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６５０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｍｍｍｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６５１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｆｍｍｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６５２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｆｍｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６５３】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｆｍｍｍｍｍｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６５４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｆｆｍｍｍｍｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６５５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｍｍｍを含み、ここで、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６５６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｍｍｍｍを含み、ここで、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６５７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｍｍｍｍｍを含み、ここで、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６５８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、当該ヌクレオチドの２’修飾パターンは、ｍｆｍｆｍを含み、ここで、ｆは２’−Ｆであり、ｍは２’−ＯＭｅである。
【０６５９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、図１に示される任意の一本鎖ＲＮＡｉ形式のシード領域におけるヌクレオチド間結合のパターンを含む。
【０６６０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＸＯＸＯＸＯを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６６１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＸＯＸＯＸＯＸを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６６２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＯＸＯＸＯＸを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６６３】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＸＯＸＯＸを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６６４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＯＸＯＸＯＸを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６６５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＯＸＯＸＯＸＯを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６６６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＯＸＯＸＯを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６６７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＯＸＯＸを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６６８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＸＸＯＸＯＸを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６６９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＸＸＯＸＯＸＯを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６７０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＸＸＯＸＯを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６７１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＸＸＯＸを含み、ここで、Ｘはホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６７２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＯＯＯＯＯＯを含み、ここで、Ｏはホスホジエステルである。
【０６７３】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＯＯＯＯＯを含み、ここで、Ｏはホスホジエステルである。
【０６７４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＯＯＯＯを含み、ここで、Ｏはホスホジエステルである。
【０６７５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＳＯＳＯＳＯＳを含み、ここで、ＳはＳｐ立体配置のホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６７６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＳＯＳＯＳＯＳを含み、ここで、ＳはＳｐ立体配置のホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６７７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＯＳＯＳＯＳを含み、ここで、ＳはＳｐ立体配置のホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６７８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、該シード領域は、Ｓｐ立体配置のホスホロチオエートを含む。
【０６７９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、該シード領域は、Ｓｐ立体配置のホスホロチオエート及びホスホジエステルを含む。
【０６８０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＳＯＳＯＳを含み、ここで、ＳはＳｐ立体配置のホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６８１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＳＯＳＳＳＳを含み、ここで、ＳはＳｐ立体配置のホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６８２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＳＯＳＳＳを含み、ここで、ＳはＳｐ立体配置のホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６８３】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、ＳＯＳＳを含み、ここで、ＳはＳｐ立体配置のホスホロチオエートであり、Ｏはホスホジエステルである。
【０６８４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、図１に示される第１の一本鎖ＲＮＡｉ形式のシード領域におけるヌクレオチド間結合のパターンを含み、当該ヌクレオチドの２’修飾のパターンは、図１に示される第２の一本鎖ＲＮＡｉ形式のシード領域におけるヌクレオチドの２’修飾のパターンを含む。
【０６８５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域を含み、この場合、ヌクレオチド間結合のパターンは、図１に示される第１の一本鎖ＲＮＡｉ形式のシード領域におけるヌクレオチド間結合のパターンを含み、当該ヌクレオチドの２’修飾のパターンは、図１に示される第１の一本鎖ＲＮＡｉ形式のシード領域におけるヌクレオチドの２’修飾のパターンを含む。
【０６８６】
一本鎖ＲＮＡｉ剤を含めたＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドのポストシード領域
【０６８７】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、または、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、もしくは当技術分野で既知の任意のポストシード領域またはその一部もしくは構造的要素を含み得る。
【０６８８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも１つの２’−Ｆ修飾を含むヌクレオチドの配列を含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも２〜２０個の２’−Ｆ修飾を含むヌクレオチドの配列を含む。
【０６８９】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも１つの２’−ＯＭｅの修飾を含むヌクレオチドの配列を含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも２〜２０個の２’−ＯＭｅの修飾を含むヌクレオチドの配列を含む。
【０６９０】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、合わせて少なくとも１つの２’−ＯＭｅ及び／または２’−Ｆの修飾を含むヌクレオチドの配列を含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、合わせて少なくとも２〜２０個の２’−ＯＭｅ及び／または２’−Ｆの修飾を含むヌクレオチドの配列を含む。
【０６９１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、２’−Ｆ及び２’−ＯＭｅの修飾または２’−ＯＭｅ及び２’−Ｆの修飾を有する少なくとも２〜１０個の連続ヌクレオチド対を含む。
【０６９２】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、交互２’修飾のパターンを含み、この場合、該パターンは、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅを含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、交互２’修飾のパターンを含み、この場合、該パターンは、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅを含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、交互２’修飾のパターンを含み、この場合、該パターンは、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅを含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、交互２’修飾のパターンを含み、この場合、該パターンは、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅを含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、交互２’修飾のパターンを含み、この場合、該パターンは、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅを含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、交互２’修飾のパターンを含み、この場合、該パターンは、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅを含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、交互２’修飾のパターンを含み、この場合、該パターンは、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅを含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、交互２’修飾のパターンを含み、この場合、該パターンは、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅを含む。一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、交互２’修飾のパターンを含み、この場合、該パターンは、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍを含む。
【０６９３】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、交互２’修飾のパターンを含み、この場合、該パターンは、ｍｆｍｆ、ｍｆｍｆｍｆ、ｍｆｍｆｍｆｍｆ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆを含み、ここで、ｍは２’−ＯＭｅであり、ｆは２’−Ｆである。
【０６９４】
一部の実施形態では、該シード領域の各ヌクレオチドは２’−ＯＭｅである。
【０６９５】
一部の実施形態では、該シード領域の各ヌクレオチドは２’−ＯＭｅであり、該ポストシード領域の各ヌクレオチドは２’−ＯＭｅである。
【０６９６】
一部の実施形態では、該シード領域の１つのヌクレオチドは２’−Ｆであり、該シード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅである。
【０６９７】
一部の実施形態では、該シード領域の１つのヌクレオチドは２’−Ｆであり、該シード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅであり、該ポストシード領域の１つのヌクレオチドは２’−Ｆであり、該ポストシード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅである。
【０６９８】
一部の実施形態では、２位（５’末端から数えて）のヌクレオチドは２’−Ｆであり、該シード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅであり、該ポストシード領域の１つのヌクレオチドは２’−Ｆであり、該ポストシード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅである。
【０６９９】
一部の実施形態では、２位（５’末端から数えて）のヌクレオチドは２’−Ｆであり、該シード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅであり、１４位（５’末端から数えて）のヌクレオチドは２’−Ｆであり、該ポストシード領域の他のヌクレオチドの各々は２’−ＯＭｅである。
【０７００】
いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、少なくとも一部の例において、２’−Ｆヌクレオチドの数を減らすこと（例えば、それらを２’−ＯＭｅ、２’−デオキシ、または２’−Ｆではない任意の他のヌクレオチドで置き換えること）が、２’−Ｆに関連する潜在毒性を低下させる一方で、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの有効性を認め、また、安定性を認め、または安定性を増加させ得ることを示唆する。
【０７０１】
一部の実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、もしくは９つのホスホロチオエート及び／または少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、もしくは９つのホスホジエステルのヌクレオチド間結合を含む。
【０７０２】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、連続したホスホロチオエートの１つ以上のセット及び／または連続したホスホジエステルの１つ以上のセットを含む。
【０７０３】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかの修飾のパターンを有する糖の範囲を含むポストシード領域を含む：ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍｆｍ、ｍｆｍｆｍ、ｍｆｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｆｍｆｍｆｍｆｍ、ｆｍｆｍｆｍ、及びｆｍｆｍ、ここで、ｍは２’−ＯＭｅであり、ｆは２’−Ｆである。
【０７０４】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかの修飾のパターンを有する糖の範囲を含むポストシード領域を含む：ｄｄｄｆｄｆｄｆｄｆｄｆｄ、ｄｄｄｆｄｆｄｆｄｆｄ、ｄｄｄｆｄｆｄｆｄ、ｄｄｄｆｄｆｄ、及びｄｄｄｆｄ、ここで、ｄは２’−デオキシであり、ｆは２’−Ｆである。
【０７０５】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかの修飾のパターンを有する糖の範囲を含むポストシード領域を含む：ｄｆｄｆｄｆｄｆｄｆｄｆｄ、ｆｄｆｄｆｄｆｄｆｄｆｄ、及びｆｄｆｄｆｄｆｄｆｄ。
【０７０６】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかの修飾のパターンを有する糖の範囲を含むポストシード領域を含む：ｆｄｆｄｆｄｆｄ、ｆｄｆｄｆｄ、及びｆｄｆｄ。
【０７０７】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＸＯＸＯＸＯＸＯＯＯＯ、ＯＸＯＸＯＸＯＯＯＯ、ＸＯＸＯＸＯＸＯＯＯ、ＸＯＸＯＸＯＸＯＯ、ＸＯＸＯＸＯＯＯＯ、ＯＸＯＸＯＸＯＯ、ＸＯＸＯＸＯＯＯ、ＯＸＯＸＯＯＯＯ、ＯＸＯＸＯＯＯ、及びＸＯＸＯＯＯ、ここで、Ｏはホスホジエステルであり、Ｘは立体不規則的ホスホロチオエートである。
【０７０８】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ＯＯＯＯＯＯＯのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む。
【０７０９】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＯＯＯＯＯＯ、ＯＯＯＯＯ、ＯＯＯＯ、及びＯＯＯ。
【０７１０】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＯＯＯＯＯＯＯＯＸＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＯＯＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＯＯＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＯＯＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＯＯＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＯＯＸ、ＯＯＯＯＯＯＯＸＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＸＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＸＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＸＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＸＸＸＸＸＸ、ＯＯＸＸＸＸＸＸ、ＯＸＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＸ、ＯＯＯＯＯＸ、ＯＯＯＯＸ、及びＯＯＯＸ。
【０７１１】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＯＯＯＯＯＯＯＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＯＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＯＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＯＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＯＸＸＸ、ＯＯＯＯＸＸＸＸ、ＯＯＯＯＸＸＸ、ＯＯＯＸＸＸＸＸ、ＯＯＯＸＸＸＸ、及びＯＯＯＸＸＸ。
【０７１２】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、少なくとも１つのキラルヌクレオチド間結合を含むポストシード領域を含む。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、少なくとも１つのキラル制御されたヌクレオチド間結合を含むポストシード領域を含む。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ホスホロチオエートである少なくとも１つのキラル制御されたヌクレオチド間結合を含むポストシード領域を含む。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、Ｓｐ立体配置のホスホロチオエートである少なくとも１つのキラル制御されたヌクレオチド間結合を含むポストシード領域を含む。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、Ｒｐ立体配置のホスホロチオエートである少なくとも１つのキラル制御されたヌクレオチド間結合を含むポストシード領域を含む。
【０７１３】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＯＳＳＳＯＳＳＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＯＳＳＳＯＳＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＯＳＳＳＯＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＯＳＳＳＯＳＳＳＳＳＳＳ、ＯＳＳＳＯＳＳＳＳＳＳ、ＯＳＳＳＯＳＳＳＳＳ、ＯＳＳＳＯＳＳＳＳ、ＯＳＳＳＯＳＳＳ、ＯＳＳＳＯＳＳ、ＯＳＳＳＯＳ、及びＯＳＳＳＯ、ここで、Ｏはホスホジエステルであり、Ｓは、Ｓｐ立体配置のホスホロチオエートである。
【０７１４】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＯＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＯＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳＳＳＳ、ＯＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳＳＳ、ＯＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳＳ、ＯＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳ、ＯＳＯＳＯＳＯＳＳＳ、及びＯＳＯＳＯＳＯＳＳ。
【０７１５】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＯＳＯＳＯＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＳＯＳＯＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＯＳＯＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＳＯＳＳＳＳＳＳＳＳ、及びＯＳＳＳＳＳＳＳＳ。
【０７１６】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳＳＳＳ、ＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳＳＳ、ＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳＳ、ＳＯＳＯＳＯＳＳＳＳ、ＳＯＳＯＳＯＳＳＳ、ＳＳＳＳＳＳＳＳ、ＳＳＳＳＳＳＳ、ＳＳＳＳＳＳ、ＳＳＳＳＳ、ＳＳＳＳ、ＳＳＳ、及びＳＳ。
【０７１７】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＯＳＳＳＳＳＯ、ＯＳＳＳＳＳ、ＯＳＳＳＳ、ＳＳＳＳＳＯ、ＳＳＳＳＯ、及びＳＳＳＯ。
【０７１８】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＳＯＳＯＳＯＳＯＳＯＯＯＯＯＯＳ、ＳＯＳＯＳＯＳＯＳＯＯＯＯＯＯ、ＳＯＳＯＳＯＳＯＳＯＯＯＯＯ、ＳＯＳＯＳＯＳＯＳＯＯＯＯ、ＳＯＳＯＳＯＳＯＳＯＯＯ、及びＳＯＳＯＳＯＳＯＳＯＯ。
【０７１９】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＯＳＯＳＯＳＯＳＯＯＯＯＯＯＳ、ＳＯＳＯＳＯＳＯＯＯＯＯＯＳ、ＯＳＯＳＯＳＯＯＯＯＯＯＳ、ＳＯＳＯＳＯＯＯＯＯＯＳ、ＯＳＯＳＯＯＯＯＯＯＳ、ＳＯＳＯＯＯＯＯＯＳ、及びＯＳＯＯＯＯＯＯＳ。
【０７２０】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＸＯＯＯＸＯＯＸＸＸＸＸ、ＸＯＯＯＸＯＯＸＸＸＸ、ＸＯＯＯＸＯＯＸＸＸ、ＸＯＯＯＸＯＯＸＸ、ＸＯＯＯＸＯＯＸ、ＸＯＯＯＸＯＯ、ＯＯＯＸＯＯＸＸＸＸＸ、ＯＯＸＯＯＸＸＸＸＸ、ＯＸＯＯＸＸＸＸＸ、ＸＯＯＸＸＸＸＸ、及びＯＯＸＸＸＸＸ。
【０７２１】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＸＯＸＯＸＯＸＸＸＸＸＸ、ＸＯＸＯＸＯＸＸＸＸＸ、ＸＯＸＯＸＯＸＸＸＸ、ＸＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＸＯＸＯＸＯＸＸ、ＸＯＸＯＸＯＸ、ＯＸＯＸＯＸＸＸＸＸＸ、ＸＯＸＯＸＸＸＸＸＸ、ＯＸＯＸＸＸＸＸＸ、ＸＯＸＸＸＸＸＸ、及びＯＸＸＸＸＸＸ。
【０７２２】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＸＸＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＸＸＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸ、ＸＸＸＯＯＯＸＯＸＯＸ、ＸＸＸＯＯＯＸＯＸＯ、ＸＸＸＯＯＯＸＯＸ、ＸＸＸＯＯＯＸＯ、ＸＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＯＯＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＯＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＸＯＸＯＸＸＸ、ＸＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸ、ＸＸＯＯＯＸＯＸＯＸ、ＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸ、及びＸＯＯＯＸＯＸＯＸ。
【０７２３】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＸＯＯＯＸＯＸＯ、ＸＯＯＯＸＯＸ、ＸＯＯＯＸＯ、ＯＯＯＸＯＸＯ、ＯＯＯＸＯＸ、及びＯＯＯＸＯ。
【０７２４】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＸＯＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＸＯＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸ、ＸＯＸＯＯＯＸＯＸＯＸ、ＸＯＸＯＯＯＸＯＸＯ、ＸＯＸＯＯＯＸＯＸ、ＸＯＸＯＯＯＸＯ、ＸＯＸＯＯＯＸ、ＯＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＯＯＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＯＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＯＸＯＸＯＸＸＸ、ＯＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸ、ＯＸＯＯＯＸＯＸＯＸ、ＸＯＯＯＸＯＸＯＸＸ、及びＸＯＯＯＸＯＸＯＸ。
【０７２５】
一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下のいずれかのパターンを有するヌクレオチド間結合の区間を含むポストシード領域を含む：ＯＯＯＯＯＯＳ、ＯＯＯＯＯＳＯ、ＯＯＯＯＳＯＯ、ＯＯＯＳＯＯＯ、ＯＯＳＯＯＯＯ、ＯＳＯＯＯＯＯ、及びＳＯＯＯＯＯＯ。
【０７２６】
一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、（ａ）第１の相補的標的ｍＲＮＡ領域にアニーリングする能力を有するシード領域、及び（ｂ）２’−デオキシ領域を含むポストシード領域を含み、この場合、該ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導する能力を有し、該２’−デオキシ領域は、少なくとも５つの連続した２’−デオキシを含む。一部の実施形態では、該２’−デオキシは、ＤＮＡでも修飾ヌクレチド、例えば、２’−デオキシを備えた修飾ヌクレオチドでもよく、この場合、該ＤＮＡまたは修飾ヌクレオチドは、天然の糖及び／または天然の塩基、及び／または修飾塩基、及び／または任意のヌクレオチド間結合を含む。一部の実施形態では、該２’−デオキシ領域は、一続きの連続したヌクレオチドを含み、この場合、各ヌクレオチドは２’−デオキシであり、各ヌクレオチド間結合はホスホロチオエートである。一部の実施形態では、該２’−デオキシ領域は、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、または２１ヌクレオチドの一続きの連続したヌクレオチドを含み、この場合、各ヌクレオチドは２’−デオキシであり、各ヌクレオチド間結合はホスホロチオエートである。
【０７２７】
一本鎖ＲＮＡｉ剤のポストシード領域の非限定的な例として：形式２、７、８、９、１２及び１３（これらは、各々、６つの連続したホスホジエステルのセット、及び６つの連続したホスホジチオエートのセットを含む）、形式３（６つの連続したホスホロジチオエート）、形式４、５及び６、形式１０及び１１；ならびに本明細書に開示される様々な他の一本鎖ＲＮＡｉ剤。
【０７２８】
一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部の実施形態では、ポストシード領域は、最も３’側にミスマッチを含む。
【０７２９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、以下の任意の１つ以上でミスマッチを含み得る：５’位、３’末端ジヌクレオチドの一方または両方、ならびにシード領域と３’末端領域の間の領域の最も３’側。
【０７３０】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、または、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、もしくは当技術分野で既知の任意のポストシード領域またはその一部もしくは構造的要素を含み得る。
【０７３１】
一本鎖ＲＮＡｉ剤を含めたＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの３’末端領域
【０７３２】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、ＲＮＡ干渉を介して誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、ＲＮＡ干渉やＲＩＳＣ（ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンもしくは遺伝子発現の立体障害を含むがこれに限定されない）が関与しない生化学的機序を介して誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、標的遺伝子のｍＲＮＡへのアニーリング後の翻訳の立体的な遮断、及び／または、ｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって、誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、もしくは当技術分野で既知の任意の３’末端領域を含有し得る。
【０７３３】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの３’末端領域は、当該オリゴヌクレオチドが、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有するようなものである。
【０７３４】
一部の実施形態では、ＲＮＡｉ剤の３’末端領域は、当該ＲＮＡｉ剤が、特定の標的転写産物のＲＮＡ干渉を配列特異的に誘導する能力を有するようなものである。
【０７３５】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、または、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、もしくは当技術分野で既知の任意の３’末端領域及び／または３’末端ジヌクレオチド及び／または３’末端キャップを含み得る。一部の実施形態では、３’末端領域は、ＧａｌＮＡｃ部分を含み得る。一部の実施形態では、ＧａｌＮＡｃ部分は、任意のＧａｌＮＡｃ、または本明細書に記載される、もしくは当技術分野で既知のそのバリアント、誘導体、もしくは修飾体である。
【０７３６】
一部の実施形態では、３’末端領域及び／または３’末端ジヌクレオチド及び／または３’末端キャップは、以下の２つの機能を果たす：（ａ）当該オリゴヌクレオチドのエキソ及び／またはエンドヌクレアーゼに対する感受性の低減、ならびに（ｂ）当該オリゴヌクレオチドの機能の許可、この場合、該機能は、ＲＮＡ干渉の誘導、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの誘導、または、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方の誘導である。
【０７３７】
従って、一本鎖ＲＮＡｉ剤の３'末端領域は、３'末端ジヌクレオチド及び／または３'末端キャップを含み得る。
【０７３８】
哺乳類細胞では、Ｄｉｃｅｒは、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）を処理して、各鎖が一本鎖３’オーバーハングで終わる二本鎖領域を含む１９〜２３塩基対のｓｉＲＮＡにすると報告されている。該３’オーバーハングは、１〜４ｎｔ長であり得るが、通常は、３’末端ジヌクレオチドである。Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．２００１  Ｎａｔｕｒｅ  ４０９：３６３、Ｅｌｂａｓｈｉｒ  ｅｔ  ａｌ．２００１  Ｎａｔｕｒｅ  ４１１：４９４−４９８、Ｅｌｂａｓｈｉｒ  ｅｔ  ａｌ．２００１  ＥＭＢＯ  Ｊ．２０：６８７７。これら２つのジヌクレオチドのオーバーハングは、標的特異性には寄与しないと報告されている。それらはしかしながら、当該ｓｉＲＮＡの末端をヌクレアーゼ分解から保護し、時には活性を改善するのに役立つと報告されている。Ｅｌｂａｓｈｉｒ  ｅｔ  ａｌ．２００１  Ｎａｔｕｒｅ  ４１１：４９４−４９８、Ｅｌｂａｓｈｉｒ  ｅｔ  ａｌ．２００１  ＥＭＢＯ  Ｊ．２０：６８７７−６８８８、及びＫｒａｙｎａｃｋ  ｅｔ  ａｌ．２００６  ＲＮＡ  １２：１６３−１７６。従って、機能的二本鎖ＲＮＡｉ剤にとって、３’末端ジヌクレオチドが標的遺伝子配列に相補的な配列を含む必要はないことが報告されている。
【０７３９】
人工二本鎖ＲＮＡｉ剤では、３’の一本鎖ジヌクレオチドのオーバーハングが、他の一本鎖ジヌクレオチド、ヌクレオチド、及び３’末端キャップを含めた様々な部分で実験的に置き換えられたと報告されている。２１量体の３’末端ジヌクレオチドは、多くの場合、ＵＵ、ＴＴ、ｄＴｄＴ、ｓｄＴ、ｄＴｓｄＴ、ｓｄＴｓｄＴ、またはｓｄＴｄＴ等の人工ジヌクレオチドで置き換えられると報告されている。ｓｉＲＮＡの各末端の最大４つのヌクレオチドをデオキシリボヌクレオチドで置き換えることは耐容性良好であると報告されている一方、デオキシリボヌクレオチドでの完全な置換はＲＮＡｉ活性をもたらさない。国際ＰＣＴ公開第ＷＯ  ００／４４９１４号、及びＢｅａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．国際ＰＣＴ公開第ＷＯ  ０１／６８８３６号は、ｓｉＲＮＡが、少なくとも１つの窒素または硫黄のヘテロ原子を含むように、リン酸−糖骨格またはヌクレオシドのいずれかに対する修飾を含んでもよいことを予め報告した。Ｋｒｅｕｔｚｅｒ  ｅｔ  ａｌ．カナダ特許出願第２，３５９，１８０号もまた、二本鎖ＲＮＡ依存性プロテインキナーゼＰＫＲ、具体的には２’−アミノまたは２−Ｏ−メチルヌクレオチド、及び２’−Ｏまたは４’−Ｃメチレン架橋を含むヌクレオチドの活性化に対抗するためにｄｓＲＮＡ構築物で使用するある特定の化学修飾を報告している。さらなる３’末端ヌクレオチドのオーバーハングとしては、ｄＴ（デオキシチミジン）、２’−Ｏ，４’−Ｃ−エチレンチミジン（ｅＴ）、及び２−ヒドロキシエチルホスフェート（ｈｐ）が挙げられる。他の人工３’オーバーハング（３’末端ジヌクレオチド）としては、配列ＡＡ、ＣＣ、ＧＧ、及びＵＧのジヌクレオチドが挙げられる。Ｅｌｂａｓｈｉｒ  ｅｔ  ａｌ．２００１  ＥＭＢＯ  Ｊ．２０：６８７７−６８８８。一部の実施形態では、３’末端ジヌクレオチドはＡＡであると報告されている。
【０７４０】
代替的に、二本鎖ＲＮＡｉ剤では、３’末端ジヌクレオチドの一方または両方は、１９ｂｐの平滑末端二本鎖を形成する２本の１９ｎｔ鎖を含む機能的ｓｉＲＮＡを残して削除する（かつ置き換えない）ことができると報告されている。二本鎖ＲＮＡｉ剤の３’末端ジヌクレオチドを削除しかつ置き換えないと、鎖の末端がヌクレアーゼに対して弱くなり、これを補うため、人工３’末端キャップを加えることができると報告されている。該３’末端キャップは、非ヌクレオチドであると報告されている。それらは、ヌクレオチドのすべての成分（リン酸、糖、及び塩基）を含まないためにヌクレオチドではない。二本鎖ＲＮＡｉ剤のジヌクレオチドのオーバーハングは、時には、３’末端キャップで機能的に置き換えることができ、１つまたは２つの３’末端キャップを備えた平滑末端の１９ｂｐ二本鎖を残し、当該分子をヌクレアーゼから保護することができると報告されている。一般に、３’末端キャップは、該ＲＮＡｉ剤が媒介するＲＮＡ干渉を妨げてはならないと報告されており、多くの３’末端キャップはまた、追加の利点、例えば、ＲＮＡｉ活性の増加及び／またはヌクレアーゼに対する安定性を与える。
【０７４１】
いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本出願は、少なくとも一部の例では、今までに記載された３’末端キャップが、ＰＡＺドメインと相互作用すると理論づけられると報告されていることを注記する。一部の実施形態では、３’末端キャップは、ＰＡＺリガンドであると報告されている。ＷＯ  ２０１５／０５１３６６。報告によれば、Ｄｉｃｅｒは、ＲＮａｓｅＩＩＩ酵素であり、６つの認識可能なドメインからなる。報告によれば、Ｎ末端またはその近傍は、約５５０ａａのＤＥｘＨボックスＲＮＡヘリカーゼドメインであり、この直後は、ＤＵＦ２８３と呼ばれる約１００ａａの保存ドメインであり、Ｃ末端からＤＵＦ２８３ドメインまでがＰＡＺ（Ｐｉｗｉ／Ａｒｇｏｎａｕｔｅ／Ｚｗｉｌｌｅ）ドメインであり、これが一本鎖ジヌクレオチドのオーバーハングを認識する。Ｍｙｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．２００５．ｉｎ  ＲＮＡ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．Ａｐｐａｓａｎｉ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  ＵＫ，ｐ．２９−５４、Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．２００１  Ｎａｔｕｒｅ  ４０９：３６３−３６６、及びＳｃｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２００２  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｌａｎｔ  Ｓｃｉ．７：４８７−４９１、Ｌｉｎｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．２００３  Ｎａｔｕｒｅ  ４２６：４６５−４６９、Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．２００３  Ｎａｔｕｒｅ  Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．１０：１０２６−１０３２、Ｙａｎ  ｅｔ  ａｌ．２００３  Ｎａｔｕｒｅ  ４２６：４６８−４７４、Ｌｉｎｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．２００４  Ｎａｔｕｒｅ  Ｓｔｒｕｃｔ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１  １：５７６−５７７、Ｍａ  ｅｔ  ａｌ．２００４  Ｎａｔｕｒｅ  ４２９：３１８−３２２。報告によれば、ＤｉｃｅｒのＰＡＺドメインは、ＲＮＡに結合し、切断のための触媒ドメインを位置づけることもできる。Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．２００４  Ｃｅｌｌ  １  １８：５７−６８。一部の実施形態では、３’末端キャップは、ＰＡＺドメインと相互作用するＰＡＺリガンドである。
【０７４２】
一部の実施形態では、３’末端キャップは、以下の２つの機能を可能にすることができる：（１）ＲＮＡ干渉を可能にすること、及び（２）活性の持続時間及び／または生物学的半減期を増加させることであって、これは、例えば、ＤｉｃｅｒのＰＡＺドメインへの結合の増加及び／またはＲＮＡｉ剤の分解（例えば、血清もしくは腸液中のもの等のヌクレアーゼによる）の低減もしくは防止によって達成され得る。
【０７４３】
様々な３’末端ジヌクレオチドは、表１Ａに記載されるオリゴヌクレオチドに記載されている。
【０７４４】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、一対の３’末端ヌクレオチドを含む。末端から２番目のヌクレオチドは２’−ＯＭｅであり、５’ヌクレオチドは２’−ＯＭｅである。
【０７４５】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、一対の３’末端ヌクレオチドを含み、末端から２番目のヌクレオチドは２’−デオキシであり、５’ヌクレオチドは２’−ＯＭｅである。この構造の本明細書に開示される一本鎖ＲＮＡｉ剤の非限定的な例としては、図１の形式１０、１１、１３、及び１４；ならびに本明細書に開示される様々な他の一本鎖ＲＮＡｉ剤が挙げられる。
【０７４６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、一対の３’末端ヌクレオチドを含み、末端から２番目のヌクレオチドは２’−デオキシであり、５’ヌクレオチドは２’−ＯＭｅであり、該末端から２番目のヌクレオチドはリンカーを含む。
【０７４７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、一対の３’末端ヌクレオチドを含み、末端から２番目のヌクレオチドはリンカーを含む。
【０７４８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、一対の３’末端ヌクレオチドを含み、末端から２番目のヌクレオチドは２’−デオキシであり、５’ヌクレオチドは２’−ＯＭｅであり、該末端から２番目のヌクレオチドは追加の化学的部分に複合体化されたリンカーを含む。
【０７４９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、一対の３’末端ヌクレオチドを含み、末端から２番目のヌクレオチドは２’−デオキシＴであり、５’ヌクレオチドは２’−ＯＭｅ  Ｕであり、該末端から２番目のヌクレオチドは追加の化学的部分に複合体化されたリンカーを含む。
【０７５０】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、一対の３’末端ヌクレオチドを含み、末端から２番目のヌクレオチドは、標的化部分、脂質部分、炭水化物部分、二環式ケタール、及びＧａｌＮＡｃ部分から選択される追加の化学的部分に複合体化されたリンカーを含む。
【０７５１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、一対の３’末端ヌクレオチドを含み、末端から２番目のヌクレオチドは２’−デオキシであり、５’ヌクレオチドは２’−ＯＭｅであり、該末端から２番目のヌクレオチドは、標的化部分、脂質部分、炭水化物部分、二環式ケタール、及びＧａｌＮＡｃ部分から選択される追加の化学的部分に複合体化されたリンカーを含む。
【０７５２】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、一対の３’末端ヌクレオチドを含み、末端から２番目のヌクレオチドは２’−デオキシＴであり、５’ヌクレオチドは２’−ＯＭｅ  Ｕであり、該末端から２番目のヌクレオチドは、標的化部分、脂質部分、炭水化物部分、二環式ケタール、及びＧａｌＮＡｃ部分から選択される追加の化学的部分に複合体化されたリンカーを含む。
【０７５３】
一部の実施形態では、３’末端領域または３’末端キャップは、ＧＮ３、または、例えば、Ａｌｌｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．２００５  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４８：９０１−０４、Ｌｉｍａ  ｅｔ  ａｌ．２０１２  Ｃｅｌｌ  １５０：８８３−８９４、Ｐｒａｋａｓｈ  ｅｔ  ａｌ．２０１５  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．４３：２９９３−３０１１、及び／またはＰｒａｋａｓｈ  ｅｔ  ａｌ．２０１６  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２６：２６：２８１７−２８２０に記載の任意の他の適切なＲＮＡｉ剤の３’末端領域化合物を含む。
【０７５４】
様々な３’末端キャップが文献に記載されている。
【０７５５】
一般に、３’末端キャップは、３’末端のヌクレオチド間結合に結合される。該３’末端のヌクレオチド間結合は、ホスホジエステル、ホスホロチオエート、ホスホジチオエート、及び本明細書に記載される任意のヌクレオチド間結合から選択され得る。
【０７５６】
提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤用の３’末端キャップは、例えば、本明細書に記載される任意の３’末端キャップから選択され得る。
【０７５７】
一部の実施形態では、３’末端キャップは、２’，３’−環状リン酸、Ｃ３（またはＣ６、Ｃ１７、Ｃ１２）アミノリンカー、チオールリンカー、カルボキシルリンカー、非ヌクレオチドスペーサー（Ｃ３、Ｃ６、Ｃ９、Ｃ１２、脱塩基、トリエチレングリコール、ヘキサエチレングリコール）、ビオチン、及びフルオレセインから選択される。
【０７５８】
一部の実施形態では、３’末端キャップは、Ｃ３、アミノＣ３、Ｃ６、Ｃ８、Ｃ１０、及びＣ１２が挙げられるがこれらに限定されないＷＯ  ２０１５／０５１３６６に記載される任意の３’末端キャップから選択される。一部の実施形態では、３’末端キャップは、米国特許第８，０９７，７１６号、第８，０８４，６００号、第８，３４４，１２８号、第８，４０４，８３１号、及び第８，４０４，８３２号に記載される、トリエチレングリコール、シクロヘキシル（またはＣｙｃｌｏｈｅｘ）、フェニル、ＢＰ（ビフェニル）、アダマンタン、及びリトコール酸（またはリトコール）から選択される。
【０７５９】
提供されるＲＮＡｉ剤に適した様々な機能的３’末端キャップは、例えば、ＥＰ  １５２００２２  Ｂ１、米国特許第８，０９７，７１６号、第８，０８４，６００号、第８，４０４，８３１号、第８，４０４，８３２号、及び第８，３４４，１２８号、ならびにＷＯ  ２０１５／０５１３６６に記載されている。
【０７６０】
さらに、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤で機能する様々な５’末端構造及び３’末端領域ならびにそれらの組み合わせが本明細書に開示されることを注記する。しかしながら、対照的に、多くの５’末端構造及び３’末端キャップ、ならびにそれらの組み合わせは、様々な二本鎖ＲＮＡｉ剤のＲＮＡ干渉能を低減または排除することが以前に報告されていることが知られている。例えば、Ｃｚａｕｄｅｒｎａ  ｅｔ  ａｌ．２００３  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３１：２７０５−２７１６、Ｈａｄｗｉｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２００５，ｐａｇｅｓ  １９４−２０６，ｉｎ  ＲＮＡ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．Ｋ．Ａｐｐａｓａｎｉ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫ、Ｄｅｌｅａｖｅｙ  ｅｔ  ａｌ．２００９  Ｃｕｒｒ．Ｐｒｏｔ．Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ  Ｃｈｅｍ．１６．３．１  −１６．３．２２、Ｔｅｒｒａｚａｓ  ｅｔ  ａｌ．２００９  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３７：３４６−３５３、Ｈａｒｂｏｔｈ  ｅｔ  ａｌ．２００３  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ  １３：８３−１０５、Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．２００３  Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．９：３４７−３５１、米国特許第５，９９８，２０３号、Ｌｉｐａｒｄｉ  ｅｔ  ａｌ．２００１  Ｃｅｌｌ  １０７：２９９−３０７、Ｓｃｈｗａｒｚ  ｅｔ  ａｌ．２００２  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  １０：５３７−５４８、及びＷＯ  ２０１５／０５１３６６を参照されたい。
【０７６１】
二環式ケタール、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドのさらなる任意の構造的要素
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、または当技術分野で既知の任意の構造的要素またはそのパターンを含有し得る。
【０７６２】
二環式ケタール、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化される任意選択の追加の化学的部分
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、ＲＮＡ干渉を介して誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、ＲＮＡ干渉やＲＩＳＣ（ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンもしくは遺伝子発現の立体障害を含むがこれに限定されない）が関与しない生化学的機序を介して誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、ＲＮＡ干渉及び／またはＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介して誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を、標的遺伝子のｍＲＮＡへのアニーリング後の翻訳の立体的な遮断、及び／または、ｍＲＮＡスプライシングの改変もしくは妨害、及び／またはエクソンインクルージョンもしくはエクソンエクスクルージョン、によって、誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的化部分、脂質部分、炭水化物部分、二環式ケタール、ＧａｌＮＡｃ部分等が挙げられるがこれらに限定されない本明細書に記載される、または当技術分野で既知の任意選択の追加の化学的部分を含有し得る。
【０７６３】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、標的化部分、脂質部分、炭水化物部分、二環式ケタール、ＧａｌＮＡｃ部分等が挙げられるがこれらに限定されない本明細書に記載される、または当技術分野で既知の任意選択の追加の化学的部分を含有し得る。
【０７６４】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、または、ＲＮＡ干渉及びＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、標的化部分、脂質部分、炭水化物部分、二環式ケタール、ＧａｌＮＡｃ部分等が挙げられるがこれらに限定されない本明細書に記載される、または当技術分野で既知の任意選択の追加の化学的部分を含有し得る。
【０７６５】
一部の実施形態では、追加の化学的部分は、一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化される。
【０７６６】
ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化される任意選択の追加の化学的部分：標的化部分
【０７６７】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド組成物はさらに、標的化部分（例えば、標的化化合物、薬剤、リガンド、または成分）を含む。標的化部分は、脂質またはＡＰＯＣ３オリゴヌクレチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化されても複合体化されなくてもよい。一部の実施形態では、標的化部分は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化される。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質及び標的化部分の両方に複合体化される。本明細書に記載される場合、一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、提供されるオリゴヌクレオチドである。ゆえに一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド組成物は、脂質とオリゴヌクレオチドに加えて、標的要素をさらに含有する。様々な標的化部分を本開示に従って使用することができる。例えば、脂質、抗体、ペプチド、炭水化物等である。
【０７６８】
標的化部分は、本開示に従う多くの種類の方法によって提供される技術に組み込まれ得る。一部の実施形態では、標的化部分は、提供されるオリゴヌクレオチドと物理的に混合されて提供される組成物を形成する。一部の実施形態では、標的化部分は、オリゴヌクレオチドに化学的に複合体化される。
【０７６９】
一部の実施形態では、提供される組成物は、２つ以上の標的化部分を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、２つ以上の複合体化標的化部分を含む。一部の実施形態では、該２つ以上の複合体化標的化部分は同じである。一部の実施形態では、該２つ以上の複合体化標的化部分は異なる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以下の標的構成要素を含有する。一部の実施形態では、提供される組成物のオリゴヌクレオチドは、異なる型の複合体化標的化部分を含有する。一部の実施形態では、提供される組成物のオリゴヌクレオチドは、同じ型の標的化部分を含有する。
【０７７０】
一部の実施形態では、提供される組成物は、２つ以上の標的化部分を含む。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する提供されるオリゴヌクレオチドは、２つ以上の複合体化標的化部分を含む。一部の実施形態では、該２つ以上の複合体化標的化部分は同じである。一部の実施形態では、該２つ以上の複合体化標的化部分は異なる。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以下の標的構成要素を含有する。一部の実施形態では、提供される組成物のオリゴヌクレオチドは、異なる型の複合体化標的化部分を含有する。一部の実施形態では、提供される組成物のオリゴヌクレオチドは、同じ型の標的化部分を含有する。
【０７７１】
標的化部分は、任意でリンカーを介してオリゴヌクレオチドに複合体化され得る。当分野の様々なタイプのリンカーが、本開示に従い利用され得る。一部の実施形態では、リンカーはリン酸基を含有し、それを例えば、オリゴヌクレオチド合成で使用される化学と類似した化学方法を介した標的化部分の複合体化に使用することができる。一部の実施形態では、リンカーは、アミド基、エステル基、またはエーテル基を含有する。一部の実施形態では、リンカーは、−Ｌ−の構造を有する。標的化部分は、脂質と比較し、同じまたは異なるリンカーのいずれかを介して複合体化され得る。
【０７７２】
標的化部分は、任意でリンカーを介して、様々な適切な位置でオリゴヌクレオチドに複合体化され得る。一部の実施形態では、標的化部分は、５’−ＯＨ基を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化部分は、３’−ＯＨ基を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化部分は、１つ以上の糖部分を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化部分は、１つ以上の塩基を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化部分は、１つ以上のヌクレオチド間結合を介して組み込まれる。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、独立してその５’−ＯＨ、３’−ＯＨ、糖部分、塩基部分、及び／またはヌクレオチド間結合を介して複合体化される複数の複合体化標的化部分を含み得る。標的化部分及び脂質は、同じ位置、近傍の位置、及び／または離れた位置のいずれかで複合体化され得る。一部の実施形態では、標的構成要素は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの一端で複合体化され、脂質は、他方の端で複合体化される。
【０７７３】
一部の実施形態では、提供される組成物はさらに、標的化構成要素または標的化部分を含む。標的化構成要素は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに組み込まれても（標的化部分）組み込まれなくてもよい。一部の実施形態では、標的化構成要素は脂質である。一部の実施形態では、標的化構成要素は炭水化物または二環式ケタールである。一部の実施形態では、標的化構成要素は、本開示に記載される−ＲＬＤである。一部の実施形態では、標的化構成要素は、本開示に記載される−ＲＣＤである。
【０７７４】
標的化構成要素は、本開示に従う多くの種類の方法、例えば、脂質及び炭水化物用に記載されるものによって、提供される技術に組み込まれ得る。一部の実施形態では、標的化構成要素は、提供されるオリゴヌクレオチドと物理的に混合されて、提供される組成物を形成する。一部の実施形態では、標的化構成要素は、オリゴヌクレオチド部分に化学的に複合体化される。
【０７７５】
一部の実施形態では、提供される組成物は、２つ以上の標的化構成要素を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、２つ以上の複合体化標的化構成要素を含む。一部の実施形態では、該２つ以上の複合体化標的化構成要素は同じである。一部の実施形態では、該２つ以上の複合体化標的化構成要素は異なる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以下の標的化構成要素を含有する。一部の実施形態では、提供される組成物のオリゴヌクレオチドは、異なる型の複合体化標的化構成要素を含有する。一部の実施形態では、提供される組成物のオリゴヌクレオチドは、同じ型の標的化構成要素を含有する。
【０７７６】
標的化構成要素は、例えば、脂質及び炭水化物について記載されるように、任意でリンカーを介してオリゴヌクレオチドに複合体化され得る。当分野の様々なタイプのリンカーが、本開示に従い利用され得る。一部の実施形態では、リンカーはリン酸基を含有し、それを例えば、オリゴヌクレオチド合成で使用される化学と類似した化学方法を介した標的化構成要素の複合体化に使用することができる。一部の実施形態では、リンカーは、アミド基、エステル基、またはエーテル基を含有する。一部の実施形態では、リンカーは、−Ｌ−の構造を有する。標的化構成要素は、脂質と比較し、同じまたは異なるリンカーのいずれかを介して複合体化され得る。
【０７７７】
標的化構成要素は、任意でリンカーを介して、様々な適切な位置でオリゴヌクレオチドに複合体化され得る。一部の実施形態では、標的化構成要素は、５’−ＯＨ基を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化構成要素は、３’−ＯＨ基を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化構成要素は、１つ以上の糖部分を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化構成要素は、１つ以上の塩基を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化構成要素は、１つ以上のヌクレオチド間結合を介して組み込まれる。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、独立してその５’−ＯＨ、３’−ＯＨ、糖部分、塩基部分、及び／またはヌクレオチド間結合を介して複合体化される複数の複合体化標的化構成要素を含み得る。標的化構成要素及び脂質は、同じ位置、近傍の位置、及び／または離れた位置のいずれかで複合体化され得る。一部の実施形態では、標的化構成要素は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの一端で複合体化され、脂質は、他方の端で複合体化される。
【０７７８】
一部の実施形態では、標的化構成要素は、標的細胞の表面上のタンパク質と相互作用する。一部の実施形態では、かかる相互作用により、標的細胞内への内在化が促進される。一部の実施形態では、標的化構成要素は、糖部分を含有する。一部の実施形態では、標的化構成要素は、ポリペプチド部分を含有する。一部の実施形態では、標的化構成要素は、抗体を含有する。一部の実施形態では、標的化構成要素は、抗体である。一部の実施形態では、標的化構成要素は、阻害剤を含有する。一部の実施形態では、標的化構成要素は、低分子阻害剤由来の部分である。一部の実施形態では、阻害剤は、標的細胞の表面上のタンパク質の阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、標的細胞の表面上に発現される炭酸脱水酵素阻害剤である。一部の実施形態では、炭酸脱水酵素は、Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、ＸＩＶ、ＸＶまたはＸＶＩである。一部の実施形態では、炭酸脱水酵素は、膜結合型である。一部の実施形態では、炭酸脱水酵素は、ＩＶ、ＩＸ、ＸＩＩまたはＸＩＶである。一部の実施形態では、阻害剤は、ＩＶ、ＩＸ、ＸＩＩ及び／またはＸＩＶに対する阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素ＩＩＩ阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素ＩＶ阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素ＸＩＩ阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素ＸＩＶ阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、スルホンアミド（例えば、Ｓｕｐｕｒａｎ，ＣＴ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒ  ２００８，７，１６８−１８１に記載されるものであり、そのスルホンアミドは参照により本明細書に組み込まれる）を含有するかまたはこれである。一部の実施形態では、阻害剤は、スルホンアミドである。一部の実施形態では、標的細胞は、筋肉細胞である。
【０７７９】
一部の実施形態では、標的化構成要素はＲＴＤであり、ＲＴＤは、本開示に記載されるＲＬＤまたはＲＣＤである。
【０７８０】
一部の実施形態では、標的化構成要素は、本開示に規定され、及び記載されるＲＬＤである。一部の実施形態では、本開示は、ＲＬＤを含有するオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＬＤを含有するオリゴヌクレオチドを含有するオリゴヌクレオチド組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＬＤを含有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含有するオリゴヌクレオチド組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＬＤを含有するオリゴヌクレオチドのキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供する。
【０７８１】
一部の実施形態では、標的化構成要素は、本開示に規定され、及び記載されるＲＣＤである。一部の実施形態では、本開示は、ＲＣＤを含有するオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＣＤを含有するオリゴヌクレオチドを含有するオリゴヌクレオチド組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＣＤを含有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含有するオリゴヌクレオチド組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＣＤを含有するオリゴヌクレオチドのキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供する。
【０７８２】
一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化６０】
2020522265.tif 000229
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化６１】
2020522265.tif 000230
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化６２】
2020522265.tif 000231
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化６３】
2020522265.tif 000232
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化６４】
2020522265.tif 000233
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化６５】
2020522265.tif 000234
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化６６】
2020522265.tif 000235
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化６７】
2020522265.tif 000236
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化６８】
2020522265.tif 000237
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化６９】
2020522265.tif 000238
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化７０】
2020522265.tif 000239
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化７１】
2020522265.tif 000240
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化７２】
2020522265.tif 000241
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化７３】
2020522265.tif 000242
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化７４】
2020522265.tif 000243
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、標的化構成要素であり、脂質部分を含むか、または脂質部分である。一部の実施形態では、ＸはＯである。一部の実施形態では、ＸはＳである。
【０７８３】
一部の実施形態では、本開示は、様々な部分をオリゴヌクレオチド部分に複合体化するための技術（例えば、試薬、方法等）を提供する。一部の実施形態では、本開示は、標的化構成要素をオリゴヌクレオチド部分に複合体化するための技術を提供する。一部の実施形態では、本開示は、複合体化のための標的化構成要素を含有する酸、例えば、ＲＬＤ−ＣＯＯＨを提供する。一部の実施形態では、本開示は、複合体化のためのリンカー、例えば、ＬＭを提供する。当業者であれば、多くの公知で広く実施されている技術を、本開示に従いオリゴヌクレオチド部分との複合体化に利用可能であることを理解する。一部の実施形態では、提供される酸は、
【化７５】
2020522265.tif 000244
である。一部の実施形態では、提供される酸は、
【化７６】
2020522265.tif 000245
である。一部の実施形態では、提供される酸は、
【化７７】
2020522265.tif 000246
である。一部の実施形態では、提供される酸は、
【化７８】
2020522265.tif 000247
である。一部の実施形態では、提供される酸は、脂肪酸であり、これは、標的化構成要素として脂質部分を提供し得る。一部の実施形態では、本開示は、かかる酸を調製するための方法及び試薬を提供する。
【０７８４】
一部の実施形態では、標的化部分は脂質部分であり、例えば、コレステロールまたはその誘導体の部分である（ＲＴＤ−Ｈは、任意で置換されるコレステロールまたはその誘導体である）。
【０７８５】
一部の実施形態では、標的化部分はペプチドである。一部の実施形態では、標的化部分はタンパク質またはそのドメインである。一部の実施形態では、標的化部分は抗体またはその一部である。
【０７８６】
ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化される任意選択の追加の化学的部分：脂質部分
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド組成物はさらに、１つ以上の脂質または脂質部分を含む。一部の実施形態では、脂質は脂質部分である。一部の実施形態では、脂質部分はＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに直接または間接的に複合体化される脂質であるか、またはこれを含む。一部の実施形態では、脂質の複合体化は、１つ以上の予想外の大幅に改善された特性（例えば、活性、毒性、分布、薬物動態等）を達成し得る。当業者が理解するように、様々な炭水化物部分が文献に記載されており、本開示に従って利用され得る。
【０７８７】
脂質部分は、様々な位置、例えば、糖単位、ヌクレオチド間結合単位、核酸塩基単位等で、任意に１つ以上の二価または多価のリンカー（これは、２つ以上の炭水化物部分をオリゴヌクレオチドに連結させるために使用され得る）を介してオリゴヌクレオチドに組み込まれ得る。一部の実施形態では、本開示は、オリゴヌクレオチドへの脂質の組み込みのための技術を提供する。一部の実施形態では、本開示は、脂質部分を、任意に１つ以上のリンカーを介して、核酸塩基単位において、ヌクレオチド間結合及び／または糖単位での組み込みの代替として、及び／またはその追加として、組み込むための技術を提供し、それにより、非常に大きな柔軟性及び／または改良された特性及び／または活性を提供する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、核酸塩基単位において当該オリゴヌクレオチドに組み込まれた少なくとも１つの脂質部分を、任意にリンカーを介して含む。
【０７８８】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、
Ａｃ−［−ＬＭ−（ＲＤ）ａ］ｂ、または［（Ａｃ）ａ−ＬＭ］ｂ−ＲＤ
の構造を有し、
式中、
Ａｃは、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド鎖であり（［Ｈ］ｂ−Ａｃは、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドである）、
ａは、１〜１０００であり、
ｂは、１〜１０００であり、
各ＬＭは、独立してリンカーであり、
各ＲＤは、独立してＲＬＤまたはＲＣＤであり、
ＲＣＤは、Ｃ１−１００脂肪族基ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素、及びケイ素から独立して選択される１〜３０個のヘテロ原子を有するＣ１−１００ヘテロ脂肪族基から選択される、任意で置換される直線状または分枝状の基であり、ここで１つ以上のメチレン単位は、任意に及び独立して、Ｃ１−６アルキレン、Ｃ１−６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｒ’）２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｒ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）−、−Ｐ（ＳＲ’）−、−Ｐ（ＮＲ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］−、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（Ｒ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｒ’）Ｏ−、または−ＯＰ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］Ｏ−で置き換えられ、１つ以上の炭素原子は任意に及び独立して、Ｃｙで置き換えられ、
ＲＬＤは、Ｃ１−１００脂肪族基から選択される、任意で置換される直線状または分枝状の基であり、ここで、１つ以上のメチレン単位は、任意に及び独立して、Ｃ１−６アルキレン、Ｃ１−６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｒ’）２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｒ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）−、−Ｐ（ＳＲ’）−、−Ｐ（ＮＲ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］−、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（Ｒ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｒ’）Ｏ−、または−ＯＰ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］Ｏ−で置き換えられ、１つ以上の炭素原子は任意に及び独立して、Ｃｙで置き換えられ、
ＬＭは、共有結合であるか、または、Ｃ１−１００脂肪族基ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素、及びケイ素から独立して選択される１〜３０個のヘテロ原子を有するＣ１−１００ヘテロ脂肪族基から選択される、任意で置換される二価もしくは多価の直線状もしくは分枝状の基であり、ここで、１つ以上のメチレン単位は、任意に及び独立して、Ｃ１−６アルキレン、Ｃ１−６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｒ’）２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｒ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）−、−Ｐ（ＳＲ’）−、−Ｐ（ＮＲ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］−、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（Ｒ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｒ’）Ｏ−、または−ＯＰ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］Ｏ−で置き換えられ、１つ以上の炭素原子は任意に及び独立して、ＣｙＬで置き換えられ、
ＣｙＬは、Ｃ３−２０脂環式環、Ｃ６−２０アリール環、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する５〜２０員のヘテロアリール環、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素、及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜２０員のヘテロシクリル環から選択される、任意で置換される四価の基であり、
各Ｒ’は、独立して、−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、または−Ｓ（Ｏ）２Ｒであり、
各Ｒは、独立して、−Ｈであるか、またはＣ１−３０脂肪族、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有するＣ１−３０ヘテロ脂肪族、Ｃ６−３０アリール、Ｃ６−３０アリール脂肪族、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有するＣ６−３０アリールヘテロ脂肪族、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する５〜３０員のヘテロアリール、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜３０員のヘテロシクリルから選択される、任意で置換される基であるか、あるいは、
２つのＲ基は、任意に及び独立して、一緒になって共有結合を形成するか、または、
同じ原子上の２つ以上のＲ基は、任意に及び独立して、当該原子と一緒になって、当該原子の他に、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素から独立して選択される０〜１０個のヘテロ原子を有する任意で置換される３〜３０員の単環式、二環式、もしくは多環式環を形成するか、または、
２つ以上の原子上の２つ以上のＲ基は、任意に及び独立して、それらの介在する原子と一緒になって、当該介在する原子の他に、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素から独立して選択される０〜１０個のヘテロ原子を有する任意で置換される３〜３０員の単環式、二環式、もしくは多環式環を形成する。
【０７８９】
一部の実施形態では、ＲＣＤは、炭水化物部分または二環式ケタールである。一部の実施形態では、ＲＣＤは、少なくとも１つの単糖、二糖、または多糖単位を含む。一部の実施形態では、ＲＣＤは、少なくとも１つのＧａｌＮＡｃ部分またはその誘導体を含む。
【０７９０】
一部の実施形態では、ＲＬＤは脂質部分である。一部の実施形態では、ＲＬＤは、１つ以上の任意で置換されるＣ６−２０脂肪族鎖を含む。一部の実施形態では、ＲＬＤは、１つ以上の非置換のＣ６−２０脂肪族鎖を含む。
【０７９１】
一部の実施形態では、少なくとも１つのＬＭは、提供されるオリゴヌクレオチドの糖単位に直接結合される。一部の実施形態では、ＬＭは、糖単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに脂質部分を組み込む。一部の実施形態では、ＬＭは、糖単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに炭水化物部分を組み込む。一部の実施形態では、ＬＭは、糖単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドにＲＬＤ基を組み込む。一部の実施形態では、ＬＭは、糖単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドにＲＣＤ基を組み込む。
【０７９２】
一部の実施形態では、少なくとも１つのＬＭは、提供されるオリゴヌクレオチドのヌクレオチド間結合単位に直接結合される。一部の実施形態では、ＬＭは、ヌクレオチド間結合単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに脂質部分を組み込む。一部の実施形態では、ＬＭは、ヌクレオチド間結合単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに炭水化物部分を組み込む。一部の実施形態では、ＬＭは、ヌクレオチド間結合単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドにＲＬＤ基を組み込む。一部の実施形態では、ＬＭは、ヌクレオチド間結合単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドにＲＣＤ基を組み込む。
【０７９３】
一部の実施形態では、少なくとも１つのＬＭは、提供されるオリゴヌクレオチドの核酸塩基単位に直接結合される。一部の実施形態では、ＬＭは、核酸塩基単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに脂質部分を組み込む。一部の実施形態では、ＬＭは、核酸塩基単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに炭水化物部分を組み込む。一部の実施形態では、ＬＭは、核酸塩基単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドにＲＬＤ基を組み込む。一部の実施形態では、ＬＭは、核酸塩基単位に直接結合し、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドにＲＣＤ基を組み込む。
【０７９４】
一部の実施形態では、［Ｈ］ｂ−Ａｃは、本開示に記載のＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドである。
【０７９５】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドへの脂質の組み込みは、分布及び／または薬物動態を改善する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドへの脂質の組み込みは、Ｃｍａｘ（投与後の薬剤のピーク血漿濃度）、ｔｍａｘ（Ｃｍａｘに到達するまでの時間）、Ｃｍｉｎ（次の投薬が行われる前に薬剤が到達する最低（トラフ）濃度）、排出半減期（薬剤濃度が、その元の値の半分に到達するために必要とされる時間）、消失速度定数（薬剤が身体から除去される速度）、曲線下面積（（単回投与後または定常状態での）濃度−時間曲線の積分）、及びクリアランス（薬剤が除去された、単位時間当たりの血漿量）から選択される１つ以上の薬物動態の測定を改善する。いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、例えば半減期等の薬物動態特性の最適化は、最大化とは識別され得ることを注記する。一部の実施形態では、概して、特定の薬物は、その所望の機能の実行を可能にするのに十分な半減期を有するが、一方でオフターゲット効果及び他の毒性を最小化するためには充分に短いことが望ましいだろう。一部の実施形態では、最適化された半減期は、毒性を最小にしながら、活性を可能にするために充分に長い。長期化された半減期または最大限の半減期は、望ましくない場合がある。
【０７９６】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド組成物はさらに、１つ以上の脂質を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド組成物はさらに、１つ以上の脂肪酸を含む。一部の実施形態では、該脂質は、該組成物中で、提供されるオリゴヌクレオチドに組み込まれ得る。一部の実施形態では、２つ以上の同じまたは異なる脂質が１つのオリゴヌクレオチドに、同じもしくは異なる化学及び／または位置を介して組み込まれ得る。
【０７９７】
多くの脂質が本開示に従って提供される技術で使用され得る。一部の実施形態では、脂質はＲＬＤ基を含む。一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換されるＣ１０−Ｃ８０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基であり、ここで、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ’）２−、及び−Ｃｙ−から選択される任意で置換される基により置き換えられる。一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基であり、ここで、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ’）２−、及び−Ｃｙ−から選択される任意で置換される基により置き換えられる。一部の実施形態では、ＲＬＤは、炭素原子と水素原子からなる炭化水素基である。一部の実施形態では、−Ｃｙ−は、Ｃ３−２０脂環式環、Ｃ６−２０アリール環、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する５〜２０員のヘテロアリール環、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素、及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜２０員のヘテロシクリル環から選択される、任意で置換される二価の基である。
【０７９８】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基であり、ここで、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ’）２−、及び−Ｃｙ−から選択される任意で置換される基により置き換えられる。一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基であり、ここで、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ’）２−、及び−Ｃｙ−から選択される任意で置換される基により置き換えられる。一部の実施形態では、ＲＬＤは、炭素原子と水素原子からなる炭化水素基である。
【０７９９】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換されるＣ１０−Ｃ４０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基であり、ここで、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ’）２−、及び−Ｃｙ−から選択される任意で置換される基により置き換えられる。一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基であり、ここで、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ’）２−、及び−Ｃｙ−から選択される任意で置換される基により置き換えられる。一部の実施形態では、ＲＬＤは、炭素原子と水素原子からなる炭化水素基である。
【０８００】
ＲＬＤの脂肪族基は、様々な適切な長さであってもよい。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ８０である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ７５である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ７０である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ６５である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ６０である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ５０である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ４０である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ３５である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ３０である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ２５である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ２４である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ２３である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ２２である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ２１である。一部の実施形態では、それはＣ１２−Ｃ２２である。一部の実施形態では、それはＣ１３−Ｃ２２である。一部の実施形態では、それはＣ１４−Ｃ２２である。一部の実施形態では、それはＣ１５−Ｃ２２である。一部の実施形態では、それはＣ１６−Ｃ２２である。一部の実施形態では、それはＣ１７−Ｃ２２である。一部の実施形態では、それはＣ１８−Ｃ２２である。一部の実施形態では、それはＣ１０−Ｃ２０である。一部の実施形態では、当該範囲の下限は、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７、またはＣ１８である。一部の実施形態では、当該範囲の上限は、Ｃ１８、Ｃ１９、Ｃ２０、Ｃ２１、Ｃ２２、Ｃ２３、Ｃ２４、Ｃ２５、Ｃ２６、Ｃ２７、Ｃ２８、Ｃ２９、Ｃ３０、Ｃ３５、Ｃ４０、Ｃ４５、Ｃ５０、Ｃ５５、またはＣ６０である。一部の実施形態では、それはＣ１０である。一部の実施形態では、それはＣ１１である。一部の実施形態では、それはＣ１２である。一部の実施形態では、それはＣ１３である。一部の実施形態では、それはＣ１４である。一部の実施形態では、それはＣ１５である。一部の実施形態では、それはＣ１６である。一部の実施形態では、それはＣ１７である。一部の実施形態では、それはＣ１８である。一部の実施形態では、それはＣ１９である。一部の実施形態では、それはＣ２０である。一部の実施形態では、それはＣ２１である。一部の実施形態では、それはＣ２２である。一部の実施形態では、それはＣ２３である。一部の実施形態では、それはＣ２４である。一部の実施形態では、それはＣ２５である。一部の実施形態では、それはＣ３０である。一部の実施形態では、それはＣ３５である。一部の実施形態では、それはＣ４０である。一部の実施形態では、それはＣ４５である。一部の実施形態では、それはＣ５０である。一部の実施形態では、それはＣ５５である。一部の実施形態では、それはＣ６０である。
【０８０１】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以下のＲＬＤ基を含有する。一部の実施形態では、脂質は、２つ以上のＲＬＤ基を含有する。
【０８０２】
一部の実施形態では、脂質は、ＲＬＤ基を含有する部分として、任意でリンカーを介して生物活性剤に複合体化される。一部の実施形態では、脂質は、１つ以下のＲＬＤ基を含有する部分として、任意でリンカーを介して生物活性剤に複合体化される。一部の実施形態では、脂質は、ＲＬＤ基として、任意でリンカーを介して生物活性剤に複合体化される。一部の実施形態では、脂質は、２つ以上のＲＬＤ基を含有する部分として、任意でリンカーを介して生物活性剤に複合体化される。
【０８０３】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ４０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ４０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８０４】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８０５】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で１つ以上のＣ１−４脂肪族基で置換される、Ｃ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で１つ以上のＣ１−４脂肪族基で置換されるＣ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で１つ以上のＣ１−２脂肪族基で置換される、Ｃ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で１つ以上のＣ１−２脂肪族基で置換されるＣ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で１つ以上のメチル基で置換される、Ｃ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で１つ以上のメチル基で置換されるＣ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８０６】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、非置換のＣ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、非置換のＣ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８０７】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以下の任意で置換されるＣ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、２つ以上の任意で置換されるＣ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８０８】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８０９】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８１０】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で１つ以上のＣ１−４脂肪族基で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で１つ以上のＣ１−４脂肪族基で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で１つ以上のＣ１−２脂肪族基で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で１つ以上のＣ１−２脂肪族基で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で１つ以上のメチル基で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で１つ以上のメチル基で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８１１】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、非置換のＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、非置換のＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８１２】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以下の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、２つ以上の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８１３】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ８０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ８０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８１４】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８１５】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で１つ以上のＣ１−４脂肪族基で置換される、Ｃ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で１つ以上のＣ１−４脂肪族基で置換されるＣ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で１つ以上のＣ１−２脂肪族基で置換される、Ｃ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で１つ以上のＣ１−２脂肪族基で置換されるＣ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、任意で１つ以上のメチル基で置換される、Ｃ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、任意で１つ以上のメチル基で置換されるＣ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８１６】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、非置換のＣ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖である。一部の実施形態では、脂質は、非置換のＣ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８１７】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以下の任意で置換されるＣ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、２つ以上の任意で置換されるＣ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８１８】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１０の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１０の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１１の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１１の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１２の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１２の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１３の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１３の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１４の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１４の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１５の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１５の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１６の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１６の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１７の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１７の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１８の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１８の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１９の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ１９の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２０の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２０の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２１の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２１の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２２の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２２の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２３の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２３の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２４の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２４の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２５の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２５の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２６の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２６の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２７の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２７の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２８の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２８の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２９の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ２９の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ３０の飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、Ｃ３０の部分不飽和直線状脂肪族鎖であるか、またはこれを含有する。
【０８１９】
一部の実施形態では、ＲＬＤは、コレステロールまたはその誘導体由来であり、例えば、ＲＬＤ−Ｈは、任意で置換されるコレステロールまたはその誘導体である。
【０８２０】
一部の実施形態では、脂質は、ＲＬＤ−ＯＨの構造を有する。一部の実施形態では、脂質は、ＲＬＤ−Ｃ（Ｏ）ＯＨの構造を有する。一部の実施形態では、ＲＬＤは、
【化７９】
2020522265.tif 000248
である。
一部の実施形態では、脂質は、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、アルファ−リノレン酸、ガンマ−リノレン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡまたはシス−ＤＨＡ）、ツルビナル酸（ｔｕｒｂｉｎａｒｉｃ  ａｃｉｄ）、アラキドン酸、及びジリノレイル（ｄｉｌｉｎｏｌｅｙｌ）である。一部の実施形態では、脂質は、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、アルファ−リノレン酸、ガンマ−リノレン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡまたはシス−ＤＨＡ）、ツルビナル酸、及びジリノレイルである。一部の実施形態では、脂質は、以下の構造を有する：
【化８０】
2020522265.tif 000249
【０８２１】
一部の実施形態では、脂質は、以下のいずれかであるか、いずれかを含有するか、またはいずれかからなる：少なくとも部分的に疎水性または両親媒性の分子、リン脂質、トリグリセリド、ジグリセリド、モノグリセリド、脂溶性ビタミン、ステロール、脂肪及びワックス。一部の実施形態では、脂質は、以下のいずれかである：脂肪酸、グリセロ脂質、グリセロリン脂質、スフィンゴ脂質、ステロール脂質、プレノール脂質、サッカロ脂質（ｓａｃｃｈａｒｏｌｉｐｉｄ）、ポリケチド、及びその他の分子。
【０８２２】
脂質は、本開示に従う多くの形式の方法によって、提供される技術に取り込まれることができる。一部の実施形態では、脂質は、提供されるオリゴヌクレオチドと物理的に混合され、提供される組成物を生成する。一部の実施形態では、脂質は、オリゴヌクレオチド部分と化学的に複合体化される。
【０８２３】
一部の実施形態では、提供される組成物は、２種以上の脂質を含有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、２種以上の複合体化脂質を含有する。一部の実施形態では、２種以上の複合体化脂質は、同一である。一部の実施形態では、２種以上の複合体化脂質は、異なる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１種を超えない脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される組成物のオリゴヌクレオチドは、異なる型の複合体化脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される組成物のオリゴヌクレオチドは、同じ型の脂質を含有する。
【０８２４】
脂質は、任意でリンカーを介して、オリゴヌクレオチドに複合体化され得る。当分野の様々なタイプのリンカーが、本開示に従い利用され得る。一部の実施形態では、リンカーは、本開示に記載されるＬＭである。一部の実施形態では、リンカーはリン酸基を含有し、それを例えば、オリゴヌクレオチド合成で使用される化学と類似した化学方法を介した脂質の複合体化に使用することができる。一部の実施形態では、リンカーは、アミド基、エステル基、またはエーテル基を含有する。
【０８２５】
一部の実施形態では、リンカーは、−ＬＭ−の構造を有する。一部の実施形態では、ＬＭはＬＤである。一部の実施形態では、ＬＤは、
【化８１】
2020522265.tif 000250
の構造を有するＴＤであり、ここで、各可変要素は、独立して、規定され、記載されるとおりである。一部の実施形態では、ＴＤは、式Ｉの構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の５’−Ｏ−を備えたＴＤは、ホスホロチオエート結合（−ＯＰ（Ｏ）（Ｓ−）Ｏ−）を形成する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の５’−Ｏ−を備えたＴＤは、Ｓｐのホスホロチオエート結合を形成する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の５’−Ｏ−を備えたＴＤは、Ｒｐのホスホロチオエート結合を形成する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の５’−Ｏ−を備えたＴＤは、リン酸結合（−ＯＰ（Ｏ）（Ｏ−）Ｏ−）を形成する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の５’−Ｏ−を備えたＴＤは、ホスホロジチオエート結合を形成する。一部の実施形態では、ＬＤは−Ｌ−ＴＤ−である。一部の実施形態では、Ｙは、−Ｌ−に結合し、−Ｚ−は共有結合であるため、Ｐは、オリゴヌクレオチド部分のヒドロキシル基に直接結合する。一部の実施形態では、Ｐは５’末端ヒドロキシル（５’−Ｏ−）に結合し、リン酸基（天然のリン酸結合）またはホスホロチオエート基（ホスホロチオエート結合）を形成する。一部の実施形態では、ホスホロチオエート結合はキラル制御され、ＲｐまたはＳｐのいずれかであってもよい。別段の特定が無い限り、リンカーのキラル中心（例えば、ＴＤ中のＰ）は、立体不規則的であっても、キラル制御されてもよく、及びそれらは、例えば、組成物がキラル制御されているか否かの決定に際して、骨格のキラル中心の一部とはみなされない。一部の実施形態では、ＬＤは−ＮＨ−（ＣＨ２）６−ＴＤ−である。一部の実施形態では、ＬＤは−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）６−ＴＤ−である。
【０８２６】
一部の実施形態では、リンカーは、−Ｌ−の構造を有する。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドへの複合体化後、脂質は、−Ｌ−ＲＬＤの構造を有する部分を形成し、式中、Ｌ及びＲＬＤの各々は独立して本明細書に規定され、記載されるとおりである。
【０８２７】
一部の実施形態では、−Ｌ−は、二価の脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、−Ｌ−は、リン酸基を含有する。一部の実施形態では、−Ｌ−は、ホスホロチオエート基を含有する。一部の実施形態では、−Ｌ−は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｓ−）−の構造を有する。一部の実施形態では、−Ｌ−は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｏ−）−の構造を有する。
【０８２８】
脂質は、任意でリンカーを介して、様々な適切な位置でオリゴヌクレオチドに組み込まれ得る。一部の実施形態では、脂質は、５’−ＯＨ基を介して複合体化される。一部の実施形態では、脂質は、３’−ＯＨ基を介して複合体化される。一部の実施形態では、脂質は、１つ以上の糖部分を介して複合体化される。一部の実施形態では、脂質は、１つ以上の塩基を介して複合体化される。一部の実施形態では、脂質は、１つ以上のヌクレオチド間結合を介して組み込まれる。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、複数の複合体化脂質を含有してもよく、当該複数の複合体化脂質は、独立して、その５’−ＯＨ、３’−ＯＨ、糖部分、塩基部分、及び／またはヌクレオチド間結合を介して複合体化される。
【０８２９】
一部の実施形態では、リンカーは、組成物の２つの部分を結合させる部分である。非限定的な例として、リンカーは、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分を脂質に物理的に結合させる。適切なリンカーの非限定的な例としては、非荷電リンカー、荷電リンカー、アルキルを含有するリンカー、リン酸を含有するリンカー、分枝状リンカー、非分枝状リンカー、少なくとも１つの切断基を含有するリンカー、少なくとも１つの酸化還元切断基を含有するリンカー、少なくとも１つのリン酸系の切断基を含有するリンカー、少なくとも１つの酸切断基を含有するリンカー、少なくとも１つのエステル系切断基を含有するリンカー、少なくとも１つのペプチド系切断基を含有するリンカーが挙げられる。
【０８３０】
一部の実施形態では、脂質は、任意でリンカー部分を介して活性化合物に複合体化される。当業者であれば、本開示に従い活性化合物に脂質を複合体化させるために様々な技術が利用され得ることを認識する。例えば、カルボキシル基を含有する脂質に関し、かかる脂質は、カルボキシル基を介して複合体化され得る。一部の実施形態では、脂質は、−Ｌ−の構造を有するリンカーを介して複合体化され、ここで、Ｌは、式Ｉにおいて規定され、記載されるとおりである。一部の実施形態では、Ｌは、リン酸ジエステル部分または修飾リン酸ジエステル部分を含有する。一部の実施形態では、脂質複合体化により形成される化合物は、（ＲＬＤ−Ｌ−）ａ−（活性化合物）の構造を有し、ここで、ａは１または１よりも大きい整数であり、各ＲＬＤ及びＬは、独立して本明細書に規定され、記載されるとおりである。一部の実施形態では、ａは、１である。一部の実施形態では、ａは、１よりも大きい。一部の実施形態では、ａは、１〜５０である。一部の実施形態では、活性化合物は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドである。例えば、一部の実施形態では、複合体は、以下の構造のいずれかを有する：
【化８２】
2020522265.tif 000251
式中、オリゴは、オリゴヌクレオチドを示す。
【０８３１】
一部の実施形態では、リンカーは、非荷電リンカー、荷電リンカー、アルキルを含有するリンカー、リン酸を含有するリンカー、分枝状リンカー、非分枝状リンカー、少なくとも１つの切断基を含有するリンカー、少なくとも１つの酸化還元切断基を含有するリンカー、少なくとも１つのリン酸系の切断基を含有するリンカー、少なくとも１つの酸切断基を含有するリンカー、少なくとも１つのエステル系切断基を含有するリンカー、及び少なくとも１つのペプチド系切断基を含有するリンカーから選択される。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＭは、−ＬＬＤ−の構造を有する。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＭは、−Ｌ−の構造を有する。一部の実施形態では、リンカーは、式Ｉの結合を含有する。一部の実施形態では、リンカーは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−ＬＩ−であり、式中、ＬＩは、本明細書に記載される式Ｉの構造を有する。一部の実施形態では、リンカーは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＳＲ１）−Ｏ−である。一部の実施形態では、Ｒ１は、−Ｈであり、リンカーは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＳＨ）−Ｏ−であり、一部の条件、例えば、あるｐＨでは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（Ｓ−）−Ｏ−である。一部の実施形態では、リンカーは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−Ｏ−Ｐ（＝Ｓ）（ＳＲ１）−Ｏ−である。一部の実施形態では、Ｒ１は、−Ｈであり、リンカーは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−Ｏ−Ｐ（＝Ｓ）（ＳＨ）−Ｏ−であり、一部の条件、例えば、あるｐＨでは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−Ｏ−Ｐ（＝Ｓ）（Ｓ−）−Ｏ−である。一部の実施形態では、リンカーは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−Ｏ−Ｐ（＝Ｓ）（ＯＲ１）−Ｏ−であり、式中、Ｒ１は、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＮである。一部の実施形態では、リンカーは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ２）６−Ｏ−Ｐ（＝Ｓ）（ＳＲ１）−Ｏ−であり、式中、Ｒ１は、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＮである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、リンカーと連結され、Ｈ−リンカー−オリゴヌクレオチドの構造を形成する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、脂質と複合体化され、脂質−リンカー−オリゴヌクレオチドの構造、例えば、ＲＬＤ−ＬＬＤ−オリゴヌクレオチドを形成する。一部の実施形態では、リンカーの−Ｏ−末端は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに繋がれる。一部の実施形態では、リンカーの−Ｏ−末端は、５’末端オリゴヌクレオチドに繋がれる（−Ｏ−は、５’−ＯＨ中の酸素である）。
【０８３２】
一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＭは、ＰＯ（ホスホジエステル結合）、ＰＳ（ホスホロチオエート結合）、またはＰＳ２（ホスホロジチオエート結合）を含有する。ＰＳリンカーを含む非限定的な例を以下に示す。一部の実施形態では、リンカーは、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−Ｏ−［ホスホジエステル］、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＳＨ）−Ｏ−［ホスホロチオエート］、または−Ｏ−Ｐ（Ｓ）（ＳＨ）−Ｏ−［ホスホロジチオエート］である。一部の実施形態では、リンカーは、以下に図示される、Ｃ６アミノ部分（−ＮＨ−（ＣＨ２）６−）を含有する。一部の実施形態では、リンカーは、ＰＯ、ＰＳ、またはＰＳ２に結合されたＣ６アミノを含有する。一部の実施形態では、リンカーは、ＰＯ、ＰＳ、またはＰＳ２に結合されたＣ６アミノである。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−である。一部の実施形態では、リンカー、例えばＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−であり、ここで、−Ｃ（Ｏ）−は、脂質部分に繋がれ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−はＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分に繋がれる。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−であり、ここで、−Ｃ（Ｏ）−は、脂質部分に繋がれ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−はＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の５’−Ｏ−に繋がれる。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−であり、ここで、−Ｃ（Ｏ）−は、脂質部分に繋がれ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−はＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の３’−Ｏ−に繋がれる。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｏ）（ＳＨ）−である。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｏ）（ＳＨ）−であり、ここで、−Ｃ（Ｏ）−は、脂質部分に繋がれ、−Ｐ（Ｏ）（ＳＨ）−はＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分に繋がれる。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｏ）（ＳＨ）−であり、ここで、−Ｃ（Ｏ）−は、脂質部分に繋がれ、−Ｐ（Ｏ）（ＳＨ）−はＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の５’−Ｏ−に繋がれる。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｏ）（ＳＨ）−であり、ここで、−Ｃ（Ｏ）−は、脂質部分に繋がれ、−Ｐ（Ｏ）（ＳＨ）−はＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の３’−Ｏ−に繋がれる。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｓ）（ＳＨ）−である。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｓ）（ＳＨ）−であり、ここで、−Ｃ（Ｏ）−は、脂質部分に繋がれ、−Ｐ（Ｓ）（ＳＨ）−はＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分に繋がれる。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｓ）（ＳＨ）−であり、ここで、−Ｃ（Ｏ）−は、脂質部分に接続され、−Ｐ（Ｓ）（ＳＨ）−はＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の５’−Ｏ−に繋がれる。一部の実施形態では、リンカー、例えば、ＬＬＤまたはＬは、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−−（ＣＨ２）６−Ｐ（Ｓ）（ＳＨ）−であり、ここで、−Ｃ（Ｏ）−は、脂質部分に接続され、−Ｐ（Ｓ）（ＳＨ）−はＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分の３’−Ｏ−に繋がれる。当業者に認識されるように、あるｐＨでは、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−、−Ｐ（Ｏ）（ＳＨ）−、−Ｐ（Ｓ）（ＳＨ）−はそれぞれ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｓ−）−、−Ｐ（Ｓ）（Ｓ−）−として存在し得る。一部の実施形態では、脂質部分は、ＲＬＤである。
【化８３】
2020522265.tif 000252
【０８３３】
様々な化学及びリンカーを、本開示に従う複合体化に使用することができる。例えば、一部の実施形態では、脂質は、以下に記載の化学、または同様のプロセスを用いて組み込まれる：
【化８４】
2020522265.tif 000253
【０８３４】
一部の実施形態では、脂質は、核酸塩基を介して直接ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに組み込まれる。例えば：
【化８５】
2020522265.tif 000254
。
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、核酸塩基に直接結合した−ＬＭ−ＲＬＤを含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、
【化８６】
2020522265.tif 000255
を含む。一部の実施形態では、リンカー（ＬＭ）は、
【化８７】
2020522265.tif 000256
である。一部の実施形態では、リンカー（ＬＭ）は、
【化８８】
2020522265.tif 000257
である。一部の実施形態では、脂質部分、ＲＬＤは、
【化８９】
2020522265.tif 000258
である。
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、
【化９０】
2020522265.tif 000259
を含む。
【０８３５】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、オリゴヌクレオチド部分に、任意にリンカーを介して繋がれた炭水化物部分を、核酸塩基において含む。一部の実施形態では、該核酸塩基はＴである。一部の実施形態では、対核酸塩基は、保護されたＴである。一部の実施形態では、該核酸塩基は、任意で置換されるＴである。一部の実施形態では、この結合は、Ｔまたは任意で置換されるＴの５−炭素においてである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の−ＬＭ−（ＲＬＤ）ａを含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、核酸塩基に結合された１つ以上の−ＬＭ−（ＲＬＤ）ａを含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化９１】
2020522265.tif 000260
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化９２】
2020522265.tif 000261
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化９３】
2020522265.tif 000262
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化９４】
2020522265.tif 000263
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化９５】
2020522265.tif 000264
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化９６】
2020522265.tif 000265
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化９７】
2020522265.tif 000266
を含み、ここで、ＸはＯまたはＳであり、Ｒ１はＨであり、他の可変要素の各々は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、Ｒ２ｓ及びＲ４ｓは水素である。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化９８】
2020522265.tif 000267
を含み、ここで、ＸはＯまたはＳであり、Ｒ１はＨであり、他の可変要素の各々は独立して、本開示に記載されるとおりである。
【０８３６】
一部の実施形態では、ａは、１である。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、核酸塩基に結合された１つ以上の−ＬＭ−ＲＣＤを含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、該核酸塩基はＴである。一部の実施形態では、対核酸塩基は、保護されたＴである。一部の実施形態では、該核酸塩基は、任意で置換されるＴである。一部の実施形態では、この結合は、Ｔまたは任意で置換されるＴの５−炭素においてである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化９９】
2020522265.tif 000268
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化１００】
2020522265.tif 000269
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化１０１】
2020522265.tif 000270
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化１０２】
2020522265.tif 000271
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化１０３】
2020522265.tif 000272
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化１０４】
2020522265.tif 000273
を含み、ここで、各可変要素は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化１０５】
2020522265.tif 000274
を含み、ここで、ＸはＯまたはＳであり、Ｒ１はＨであり、他の可変要素の各々は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、Ｒ２ｓ及びＲ４ｓは水素である。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の
【化１０６】
2020522265.tif 000275
を含み、ここで、ＸはＯまたはＳであり、Ｒ１はＨであり、他の可変要素の各々は独立して、本開示に記載されるとおりである。
【０８３７】
一部の実施形態では、本開示は、Ｃ１０−Ｃ４０の直線状、飽和もしくは部分不飽和脂肪族鎖を含む、またはＣ１０−Ｃ４０の直線状、飽和もしくは部分不飽和脂肪族鎖である脂質部分を含む、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、１つ以上のＣ１−４脂肪族基で任意に置換されるＣ１０−Ｃ４０の直線状、飽和もしくは部分不飽和脂肪族鎖を含む、または１つ以上のＣ１−４脂肪族基で任意に置換されるＣ１０−Ｃ４０の直線状、飽和もしくは部分不飽和脂肪族鎖である脂質部分を含む、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含む組成物を提供する。
【０８３８】
一部の実施形態では、組成物は、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、アルファ−リノレン酸、ガンマ−リノレン酸、ドコサヘキサエン酸（シス−ＤＨＡ）、ツルビナル酸、アラキドン酸、及びジリノレイルアルコールから選択される化合物の複合体化を介して形成される脂質部分を含むＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含む。
【０８３９】
一部の実施形態では、リンカーは、組成物の２つの部分を結合させる部分である。非限定的な例として、リンカーは、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを脂質に物理的に結合させる。適切なリンカーの非限定的な例としては、非荷電リンカー、荷電リンカー、アルキルを含有するリンカー、リン酸を含有するリンカー、分枝状リンカー、非分枝状リンカー、少なくとも１つの切断基を含有するリンカー、少なくとも１つの酸化還元切断基を含有するリンカー、少なくとも１つのリン酸系の切断基を含有するリンカー、少なくとも１つの酸切断基を含有するリンカー、少なくとも１つのエステル系切断基を含有するリンカー、少なくとも１つのペプチド系切断基を含有するリンカーが挙げられる。一部の実施形態では、リンカーは、非荷電リンカーまたは荷電リンカーである。一部の実施形態では、リンカーはアルキルを含む。
【０８４０】
一部の実施形態では、リンカーはリン酸を含む。様々な実施形態において、リン酸は、架橋酸素（すなわち、リン酸をヌクレオシドに結合する酸素）を、窒素（架橋ホスホロアミデート）、硫黄（架橋ホスホロチオエート）及び炭素（架橋メチレンホスホネート）で置き換えることによって修飾することもできる。この置換は、いずれかの結合酸素または両方の結合酸素で起こり得る。一部の実施形態では、架橋酸素は、ヌクレオシドの３’−酸素であり、炭素との置き換えが行われている。一部の実施形態では、架橋酸素は、ヌクレオシドの５’−酸素であり、窒素との置き換えが行われている。様々な実施形態において、リン酸を含むリンカーは、ホスホロジチオエート、ホスホロアミデート、ボラノホスホノエート、または以下の式（Ｉ）の化合物のうちのいずれか１つ以上を含有する：
【化１０７】
2020522265.tif 000276
（Ｉ）、式中、Ｒ３は、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ２、ＢＨ３、ＣＨ３、Ｃ１−６アルキル、Ｃ６−１０アリール、Ｃ１−６アルコキシ及びＣ６−１０アリール−オキシから選択され、ここで、Ｃ１−６アルキル及びＣ６−１０アリールは、非置換であるか、または任意で独立して、ハロ、ヒドロキシル、及びＮＨ２から独立して選択される１〜３個の基で置換され、及びＲ４は、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＣＨ２から選択される。
【０８４１】
一部の実施形態では、リンカーは、直接結合、または酸素もしくは硫黄等の原子、例えば、ＮＲ１、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＮＨ、ＳＯ、ＳＯ２、ＳＯ２ＮＨ等の単位、または置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニル、ヘテロアリールアルキニル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルキルアリールアルキル、アルキルアリールアルケニル、アルキルアリールアルキニル、アルケニルアリールアルキル、アルケニルアリールアルケニル、アルケニルアリールアルキニル、アルキニルアリールアルキル、アルキニルアリールアルケニル、アルキニルアリールアルキニル、アルキルヘテロアリールアルキル、アルキルヘテロアリールアルケニル、アルキルヘテロアリールアルキニル、アルケニルヘテロアリールアルキル、アルケニルヘテロアリールアルケニル、アルケニルヘテロアリールアルキニル、アルキニルヘテロアリールアルキル、アルキニルヘテロアリールアルケニル、アルキニルヘテロアリールアルキニル、アルキルヘテロシクリルアルキル、アルキルヘテロシクリルアルケニル、アルキルヘテロシクリルアルキニル、アルケニルヘテロシクリルアルキル、アルケニルヘテロシクリルアルケニル、アルケニルヘテロシクリルアルキニル、アルキニルヘテロシクリルアルキル、アルキニルヘテロシクリルアルケニル、アルキニルヘテロシクリルアルキニル、アルキルアリール、アルケニルアリール、アルキニルアリール、アルキルヘテロアリール、アルケニルヘテロアリール、アルキニルヘテロアリール等の原子鎖を含み、ここで、１個以上のメチレンは、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、Ｎ（Ｒ１）２、Ｃ（Ｏ）、切断可能な結合基、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換の複素環で中断または終了されてもよく、ここで、Ｒ１は、水素、アシル、脂肪族または置換脂肪族である。
【０８４２】
一部の実施形態では、リンカーは分枝状リンカーである。一部の実施形態では、分枝状リンカーの分枝点は、少なくとも三価でもよいが、四価、五価もしくは六価の原子、またはこのような複数の原子価を示す基でもよい。一部の実施形態では、分枝点は、−Ｎ、−Ｎ（Ｑ）−Ｃ、−Ｏ−Ｃ、−Ｓ−Ｃ、−ＳＳ−Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｑ）−Ｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｑ）−Ｃ、−Ｎ（Ｑ）Ｃ（Ｏ）−Ｃ、または−Ｎ（Ｑ）Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃであり、ここで、Ｑは独立して、出現ごとにＨであるか、または任意で置換されるアルキルである。他の実施形態において、該分枝点は、グリセロールまたはグリセロール誘導体である。
【０８４３】
１つの実施形態では、リンカーは、少なくとも１つの切断可能な結合基を含む。非限定的な例として、切断可能な結合基は、細胞外で十分安定であり得るが、標的細胞に入ると切断されて、リンカーがともに保持している２つの部分を放出する。非限定的な例として、切断可能な結合基、例えば、ジスルフィド結合は、ｐＨの影響を受けやすい。非限定的な例として、リンカーは、酵素によって切断される能力を有する切断可能な結合基を含み得る。非限定的な例として、リンカーは、ペプチド結合を含んでもよく、これは、例えば肝細胞及び滑膜細胞等、ペプチダーゼが豊富な細胞型を標的にするときに利用することができる。非限定的な例として、切断可能な候補結合基の適合性は、分解剤（または条件）が、該候補結合基を切断する能力を試験することで評価され得る。一部の実施形態では、リンカーは、酸化還元切断可能な結合基、当該リン酸基を分解または加水分解する薬剤によって切断可能なリン酸系の切断可能な結合基を含み、リンカーは、酸で切断可能な結合基、エステル系の切断可能な結合基、及び／またはペプチド系の切断基を含む。
【０８４４】
非限定的な例として、米国特許出願第２０１５０２６５７０８号に記載のリンカーをはじめとする、当分野において報告された任意のリンカーを使用することができる。
【０８４５】
一部の実施形態では、脂質は、本開示に従って、当技術分野で既知の任意の方法を用いてＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化される。
標的化部分
【０８４６】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド組成物はさらに、標的化構成要素または部分を含む。標的化部分は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド部分に複合体化されても複合体化されなくてもよい。一部の実施形態では、標的化部分は、脂質である。一部の実施形態では、標的化部分は、炭水化物または二環式ケタールである。一部の実施形態では、標的化部分は、本開示に記載される−ＲＬＤである。一部の実施形態では、標的化部分は、本開示に記載される−ＲＣＤである。
【０８４７】
標的化部分は、本開示に従って、多くの種類の方法、例えば、脂質及び炭水化物用に記載されるものによって、提供される技術に組み込まれ得る。一部の実施形態では、標的化部分は、提供されるオリゴヌクレオチドと物理的に混合されて、提供される組成物を形成する。一部の実施形態では、標的化部分は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化される。一部の実施形態では、標的化部分は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化されない。
【０８４８】
一部の実施形態では、提供される組成物は、２つ以上の標的化部分を含む。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、２つ以上の複合体化標的化部分を含む。一部の実施形態では、該２つ以上の複合体化標的化部分は同じである。一部の実施形態では、該２つ以上の複合体化標的化部分は異なる。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１個以下の標的化部分を含有する。一部の実施形態では、提供される組成物のオリゴヌクレオチドは、異なる型の複合体化標的化部分を含有する。一部の実施形態では、提供される組成物のオリゴヌクレオチドは、同じ型の標的化部分を含有する。
【０８４９】
標的化部分は、例えば、脂質及び炭水化物について記載されるように、任意でリンカーを介してオリゴヌクレオチドに複合体化され得る。当分野の様々なタイプのリンカーが、本開示に従い利用され得る。一部の実施形態では、リンカーはリン酸基を含有し、それを例えば、オリゴヌクレオチド合成で使用される化学と類似した化学方法を介した標的化部分の複合体化に使用することができる。一部の実施形態では、リンカーは、アミド基、エステル基、またはエーテル基を含有する。一部の実施形態では、リンカーは、−Ｌ−の構造を有する。標的化部分は、脂質と比較し、同じまたは異なるリンカーのいずれかを介して複合体化され得る。
【０８５０】
標的化部分は、任意でリンカーを介して、様々な適切な位置でオリゴヌクレオチドに複合体化され得る。一部の実施形態では、標的化部分は、５’−ＯＨ基を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化部分は、３’−ＯＨ基を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化部分は、１つ以上の糖部分を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化部分は、１つ以上の塩基を介して複合体化される。一部の実施形態では、標的化部分は、１つ以上のヌクレオチド間結合を介して組み込まれる。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、独立してその５’−ＯＨ、３’−ＯＨ、糖部分、塩基部分、及び／またはヌクレオチド間結合を介して複合体化される複数の複合体化標的化部分を含み得る。標的化部分及び脂質は、同じ位置、近傍の位置、及び／または離れた位置のいずれかで複合体化され得る。一部の実施形態では、標的化部分は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドの一端で複合体化され、脂質は、他方の端で複合体化される。
【０８５１】
一部の実施形態では、標的化部分は、標的細胞の表面上のタンパク質と相互作用する。一部の実施形態では、かかる相互作用により、標的細胞内への内在化が促進される。一部の実施形態では、標的化部分は、糖部分を含有する。一部の実施形態では、標的化部分は、ポリペプチド部分を含有する。一部の実施形態では、標的化部分は、抗体を含有する。一部の実施形態では、標的化部分は、抗体である。一部の実施形態では、標的化部分は、阻害剤を含有する。一部の実施形態では、標的化部分は、低分子阻害剤由来の部分である。一部の実施形態では、阻害剤は、標的細胞の表面上のタンパク質の阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、標的細胞の表面上に発現される炭酸脱水酵素阻害剤である。一部の実施形態では、炭酸脱水酵素は、Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、ＸＩＶ、ＸＶまたはＸＶＩである。一部の実施形態では、炭酸脱水酵素は、膜結合型である。一部の実施形態では、炭酸脱水酵素は、ＩＶ、ＩＸ、ＸＩＩまたはＸＩＶである。一部の実施形態では、阻害剤は、ＩＶ、ＩＸ、ＸＩＩ及び／またはＸＩＶに対する阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素ＩＩＩ阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素ＩＶ阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素ＸＩＩ阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、炭酸脱水酵素ＸＩＶ阻害剤である。一部の実施形態では、阻害剤は、スルホンアミド（例えば、Ｓｕｐｕｒａｎ，ＣＴ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒ  ２００８，７，１６８−１８１に記載されるものであり、そのスルホンアミドは参照することにより本明細書に組み込まれる）を含有するか、またはスルホンアミドである。一部の実施形態では、阻害剤は、スルホンアミドである。一部の実施形態では、標的細胞は、筋肉細胞である。
【０８５２】
一部の実施形態では、標的化部分はＲＴＤであり、ＲＴＤは、本開示に記載されるＲＬＤまたはＲＣＤである。
【０８５３】
一部の実施形態では、標的化部分は、本開示に規定され、及び記載されるＲＬＤである。一部の実施形態では、本開示は、ＲＬＤを含有するオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＬＤを含有するオリゴヌクレオチドを含有するオリゴヌクレオチド組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＬＤを含有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含有するオリゴヌクレオチド組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＬＤを含有するオリゴヌクレオチドのキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供する。
【０８５４】
一部の実施形態では、標的化部分は、本開示に規定され、及び記載されるＲＣＤである。一部の実施形態では、本開示は、ＲＣＤを含有するオリゴヌクレオチドを提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＣＤを含有するオリゴヌクレオチドを含有するオリゴヌクレオチド組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＣＤを含有する第１の複数のオリゴヌクレオチドを含有するオリゴヌクレオチド組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＲＣＤを含有するオリゴヌクレオチドのキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供する。
【０８５５】
一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１０８】
2020522265.tif 000277
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１０９】
2020522265.tif 000278
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１１０】
2020522265.tif 000279
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１１１】
2020522265.tif 000280
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１１２】
2020522265.tif 000281
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１１３】
2020522265.tif 000282
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１１４】
2020522265.tif 000283
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１１５】
2020522265.tif 000284
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１１６】
2020522265.tif 000285
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１１７】
2020522265.tif 000286
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１１８】
2020522265.tif 000287
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１１９】
2020522265.tif 000288
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１２０】
2020522265.tif 000289
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１２１】
2020522265.tif 000290
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、
【化１２２】
2020522265.tif 000291
を含むか、またはこれである。一部の実施形態では、ＲＴＤは、標的化部分であり、これは、脂質部分を含むか、または脂質部分である。一部の実施形態では、ＸはＯである。一部の実施形態では、ＸはＳである。
【０８５６】
一部の実施形態では、本開示は、様々な部分をオリゴヌクレオチド部分に複合体化するための技術（例えば、試薬、方法等）を提供する。一部の実施形態では、本開示は、標的化部分をオリゴヌクレオチド部分に複合体化するための技術を提供する。一部の実施形態では、本開示は、複合体化のための標的化部分を含有する酸、例えば、ＲＬＤ−ＣＯＯＨを提供する。一部の実施形態では、本開示は、複合体化のためのリンカー、例えば、ＬＭを提供する。当業者であれば、多くの公知で広く実施されている技術を、本開示に従いオリゴヌクレオチド部分との複合体化に利用可能であることを理解する。一部の実施形態では、提供される酸は、
【化１２３】
2020522265.tif 000292
である。一部の実施形態では、提供される酸は、
【化１２４】
2020522265.tif 000293
である。一部の実施形態では、提供される酸は、
【化１２５】
2020522265.tif 000294
である。一部の実施形態では、提供される酸は、
【化１２６】
2020522265.tif 000295
である。一部の実施形態では、提供される酸は、脂肪酸であり、これは、標的化部分として脂質部分を含み得る。一部の実施形態では、本開示は、かかる酸を調製するための方法及び試薬を提供する。
【０８５７】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される、または当技術分野で既知の任意の脂質を含有し得る。
【０８５８】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の脂質を含有し得る。
【０８５９】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、脂質部分を含有する。一部の実施形態では、脂質部分は、脂質との複合体化によって組み込まれる。一部の実施形態では、脂質は、脂肪酸である。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、脂肪酸に複合体化される。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、シード領域内のヌクレオチドに複合体化された脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ポストシード領域内のヌクレオチドに複合体化された脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、１番目、２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、７番目、８番目、９番目、１０番目、１１番目、１２番目、１３番目、１４番目、１５番目、１６番目、１７番目、１８番目、１９番目、２０番目、２１番目、２２番目、２３番目、２４番目、または２５番目のヌクレオチド（５’末端から数えて）に複合体化された脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、９番目または１１番目のヌクレオチド（５’末端から数えて）に複合体化された脂質を含有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、脂肪酸に塩基で複合体化される。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、９番目または１１番目のヌクレオチド（５’末端から数えて）の塩基に複合体化された脂質を含有する。
【０８６０】
一部の実施形態では、脂肪酸は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０個またはそれ以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、１０個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、１１個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、１２個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、１３個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、１４個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、１５個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、１６個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、１７個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、１８個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、１９個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、２０個以上の炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪酸は、３０個以上の炭素原子を含有する。
【０８６１】
一部の実施形態では、脂質は、パルミチン酸である。一部の実施形態では、脂質は、ステアリン酸またはツルビナル酸である。一部の実施形態では、脂質は、ステアリン酸である。一部の実施形態では、脂質は、ツルビナル酸である。
【０８６２】
一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ８０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基を含有し、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ’）２−、−Ｃｙ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｓ（Ｏ）２−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）−、及び−Ｃ（Ｏ）Ｏ−から選択される、任意で置換される基により置き換えられ、式中、各可変部分は独立して、本明細書に定義及び記載されるとおりである。
【０８６３】
一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８６４】
一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８６５】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以上のＣ１−４脂肪族基で任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８６６】
一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基を含有し、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ’）２−、−Ｃｙ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｓ（Ｏ）２−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）−、及び−Ｃ（Ｏ）Ｏ−から選択される、任意で置換される基により置き換えられ、式中、各可変部分は独立して、本明細書に定義及び記載されるとおりである。
【０８６７】
一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８６８】
一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８６９】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以上のＣ１−４脂肪族基で任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８７０】
一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ４０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基を含有し、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ’）２−、−Ｃｙ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｓ（Ｏ）２−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）−、及び−Ｃ（Ｏ）Ｏ−から選択される、任意で置換される基により置き換えられ、式中、各可変部分は独立して、本明細書に定義及び記載されるとおりである。
【０８７１】
一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８７２】
一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８７３】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以上のＣ１−４脂肪族基で任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８７４】
一部の実施形態では、脂質は、非置換のＣ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８７５】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以下の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８７６】
一部の実施形態では、脂質は、２つ以上の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８７７】
一部の実施形態では、脂質は、非置換のＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８７８】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以下の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８７９】
一部の実施形態では、脂質は、２つ以上の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８８０】
一部の実施形態では、脂質は、非置換のＣ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８８１】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以下の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８８２】
一部の実施形態では、脂質は、２つ以上の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８８３】
一部の実施形態では、脂質は、Ｃ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８８４】
一部の実施形態では、脂質は、Ｃ１０−Ｃ３０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８８５】
一部の実施形態では、脂質は、Ｃ１０−Ｃ２０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８８６】
一部の実施形態では、脂質は、Ｃ１０−Ｃ１６の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８８７】
一部の実施形態では、脂質は、Ｃ１２−Ｃ１６の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８８８】
一部の実施形態では、脂質は、Ｃ１４−Ｃ１６の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８８９】
一部の実施形態では、脂質は、１つ以上のＣ１−４脂肪族基で任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。
【０８９０】
一部の実施形態では、脂質は、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、アルファ−リノレン酸、ガンマ−リノレン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡまたはシス−ＤＨＡ）、ツルビナル酸及びジリノレイルからなる群から選択される。
【０８９１】
一部の実施形態では、脂質は、オリゴヌクレオチドに複合体化されない。
【０８９２】
一部の実施形態では、脂質は、オリゴヌクレオチドに複合体化される。
【０８９３】
一部の実施形態では、脂質は、リンカーにより、オリゴヌクレオチドに複合体化される。一部の実施形態では、リンカーは、−Ｌ−の構造を有する。
【０８９４】
一部の実施形態では、標的化部分がＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化される。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の標的化部分を含有する。一部の実施形態では、標的化部分は、リンカーを介して複合体化される。
【０８９５】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ以上の脂質部分と、１つ以上の標的化部分とを含有する。
【０８９６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質部分を含有し、ここで、脂質は、直線状のＣ１６である。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有し、ここで、脂質は、パルミチン酸である。
【０８９７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、塩基に複合体化された脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有し、ここで、脂質は、塩基に複合体化された直線状のＣ１６である。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有し、ここで、脂質は、塩基に複合体化されたパルミチン酸である。
【０８９８】
一部の実施形態では、本開示は、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物に関し、ここで、組成物は、脂質をさらに含有する。一部の実施形態では、脂質は、ステアリン酸またはツルビナル酸である。一部の実施形態では、脂質は、オリゴヌクレオチドに複合体化される。
【０８９９】
一部の実施形態では、脂質をＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化することにより、オリゴヌクレオチドの少なくとも１つの特性が改善される。一部の実施形態では、その特性は、活性の増加（たとえば、一本鎖ＲＮＡ干渉を介在する能力の増加）、または組織分布の改善である。一部の実施形態では、脂質の複合体化により、活性が改善される。一部の実施形態では、脂質の複合体化により、１つ以上の標的組織への送達が改善される。一部の実施形態では、組織は、筋肉組織である。一部の実施形態では、組織は、骨格筋、腓腹筋、三頭筋、心臓または横隔膜である。
【０９００】
一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ８０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基を含有し、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ）２−、−Ｃｙ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）−、及び−Ｃ（Ｏ）Ｏ−から選択される、任意で置換される基により置き換えられ、式中、各可変部分は独立して、本明細書に定義及び記載されるとおりである。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、１つ以上のＣ１−４脂肪族基で任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基を含有し、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ）２−、−Ｃｙ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）−、及び−Ｃ（Ｏ）Ｏ−から選択される、任意で置換される基により置き換えられ、式中、各可変部分は独立して、本明細書に定義及び記載されるとおりである。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、１つ以上のＣ１−４脂肪族基で任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ４０の飽和脂肪族基または部分不飽和脂肪族基を含有し、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、Ｃ１−Ｃ６アルケニレン、Ｃ１−Ｃ６ヘテロ脂肪族部分、−Ｃ（Ｒ）２−、−Ｃｙ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｓ（Ｏ）２−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）−、及び−Ｃ（Ｏ）Ｏ−から選択される、任意で置換される基により置き換えられ、式中、各可変部分は独立して、本明細書に定義及び記載されるとおりである。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、１つ以上のＣ１−４脂肪族基で任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、非置換のＣ１０−Ｃ８０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、１つ以下の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、２つ以上の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、非置換のＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、１つ以下の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、２つ以上の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、非置換のＣ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、１つ以下の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、２つ以上の任意で置換されるＣ１０−Ｃ６０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、Ｃ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、１つ以上のＣ１−４脂肪族基で任意で置換される、Ｃ１０−Ｃ４０の直線状の飽和脂肪族鎖または部分不飽和脂肪族鎖を含有する。一部の実施形態では、脂質は、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、アルファ−リノレン酸、ガンマ−リノレン酸、ドコサヘキサエン酸（シス−ＤＨＡ）、ツルビナル酸及びジリノレイルからなる群から選択される。一部の実施形態では、脂質は、オリゴヌクレオチドに複合体化されない。一部の実施形態では、脂質は、オリゴヌクレオチドに複合体化される。
【０９０１】
一部の実施形態では、脂質をＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化することにより、オリゴヌクレオチドの少なくとも１つの特性が驚くべくほど改善される。一部の実施形態では、その特性は、活性の増加（たとえば、一本鎖ＲＮＡ干渉を介在する能力の増加）、または組織分布の改善である。一部の実施形態では、組織は、筋肉組織である。一部の実施形態では、組織は、骨格筋、腓腹筋、三頭筋、心臓または横隔膜である。一部の実施形態では、脂質部分を含有するオリゴヌクレオチドは、たとえば、ミセルを形成する。一部の実施形態では、改善される特性の例は、たとえば、図のうちの１つ以上に示される。
【０９０２】
一部の実施形態では、例示的なオリゴヌクレオチドをマウスでアッセイする場合、試験されるオリゴヌクレオチドは、試験量、たとえば、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇなどで、オスのＣ５７ＢＬ／１０ＳｃＳｎＤＭＤｍｄｘマウス（４〜５週齢）に尾静脈を介して静脈内注射される。一部の実施形態では、注射後に、試験時間、たとえば、何日か目、たとえば、２日目、７日目及び／または１４日目などに、組織が採取され、一部の実施形態では、当該組織は、液体窒素中で新鮮凍結され、解析を行うまで−８０℃で保存される。
【０９０３】
本開示に従ってオリゴヌクレオチドレベルを評価するには、様々なアッセイを使用することができる。一部の実施形態では、ハイブリッド−ＥＬＩＳＡを使用し、標準曲線として被験物質の連続希釈を使用して組織中のオリゴヌクレオチドレベルを定量する：たとえば、手順の一例では、無水マレイン酸活性化９６ウェルプレート（Ｐｉｅｒｃｅ社  １５１１０）を、２．５％ＮａＨＣＯ３中、５００ｎＭの捕捉プローブ（Ｇｉｂｃｏ社  ２５０８０−０９４）５０ｌで２時間、３７℃でコーティングした。このプレートを次いでＰＢＳＴ（ＰＢＳ＋０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０）で３回洗浄し、５％無脂肪乳−ＰＢＳＴで１時間、３７℃でブロックした。被験物質のオリゴヌクレオチドをマトリクス内に連続希釈した。全ての試料中のオリゴヌクレオチド量が１００ｎｇ／ｍｌ未満となるように、元の試料と共にこの標準物質を溶解バッファー（４Ｍグアニジン；０．３３％Ｎ−ラウリルサルコシン；２５ｍＭクエン酸ナトリウム；１０ｍＭ  ＤＴＴ）で希釈した。２０ｌの希釈試料を、ＰＢＳＴで希釈した３３３ｎＭの検出プローブ１８０ｌと混合し、次いでＰＣＲ装置（６５℃、１０分、９５℃、１５分、４℃）で変性させた。５０ｌの変性試料を、ブロッキングしたＥＬＩＳＡプレートに３個ずつ分配し、４℃で一晩インキュベートした。ＰＢＳＴで３回洗浄した後、ＰＢＳＴ中の１：２０００のストレプトアビジン−ＡＰをウェルあたり５０ｌ加え、室温で１時間インキュベートした。ＰＢＳＴで十分に洗浄した後、１００ｌのＡｔｔｏＰｈｏｓ（Ｐｒｏｍｅｇａ社、Ｓ１０００）を添加し、暗所で１０分間室温でインキュベートし、プレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅ社、Ｍ５）蛍光チャネル：Ｅｘ４３５ｎｍ、Ｅｍ５５５ｎｍで読み取った。試料中のオリゴヌクレオチドを、４パラメータ回帰分析によって、標準曲線に従い計算した。
【０９０４】
本開示に記載及び実証されるように、一部の実施形態では、脂質複合体化により、標的組織への送達が改善される。一部の実施形態では、脂質の複合体化により、筋肉への送達が改善される。一部の実施形態では、脂質の複合体化は、脂肪酸との複合体化を含有する。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ツルビナル酸と複合体化される。一部の実施形態では、ツルビナル酸との複合体化は、オリゴヌクレオチドの筋肉への送達を改善するのに特に効果的である。
【０９０５】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、血漿及び組織ホモジネートの両方において安定である。
【０９０６】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、位置９または１１（５’末端から数えて）に複合体化された脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有し、ここで、脂質は、位置９または１１（５’末端から数えて）に複合体化された直線状のＣ１６である。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有し、ここで、脂質は、位置９または１１（５’末端から数えて）に複合体化されたパルミチン酸である。
【０９０７】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、位置９または１１（５’末端から数えて）の塩基に複合体化された脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有し、ここで、脂質は、位置９または１１（５’末端から数えて）の塩基に複合体化された直線状のＣ１６である。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有し、ここで、脂質は、位置９または１１（５’末端から数えて）の塩基に複合体化されたパルミチン酸である。
【０９０８】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、位置９または１１（５’末端から数えて）のＵ塩基に複合体化された脂質を含有する。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有し、ここで、脂質は、位置９または１１（５’末端から数えて）のＵ塩基に複合体化された直線状のＣ１６である。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、脂質を含有し、ここで、脂質は、位置９または１１（５’末端から数えて）のＵ塩基に複合体化されたパルミチン酸である。
【０９０９】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉは、ＩｍＵ、または５’−脂質−２’ＯＭｅＵの構造を含有する。
【化１２７】
2020522265.tif 000296
【０９１０】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、任意の追加の化学的部分、たとえば、限定されないが、米国特許第５，６１４，５０３号、同第５，７８０，００９号、同第６，０７４，８６３号、同第６，２５８，５８１号、同第６，４８９，１１７号、同第６，６７７，４４５号、同第６，８２８，４３５号、同第６，８４６，９２１号、同第７，４１６，８４９号、同第７，４９４，９８２号、同第７，９８１，８７１号、同第８，１０６，０２２号、同第８，１４８，３４４号、同第８，３１８，５０８号、同第８，３８９，７０７号、同第８，４５０，４６７号、同第８，５０７，４５５号、同第８，７０３，７３１号、同第８，８２８，９５６号、同第８，９０１，０４６号、同第９，１０７，９０４号、同第９，３５２，０４８号、同第９，３７０，５８１号、同第９，３７０，５８２号、同第９，３８７，２５７号、同第９，３８８，４１５号、同第９，３８８，４１６号、同第９，３９３，３１６号、及び同第９，４０４，１１２号のいずれかに記載される脂質を含有し得る。
【０９１１】
ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化される任意の追加の化学的部分：炭水化物部分または二環式ケタール、たとえば、限定されないが、ＧａｌＮＡｃ部分
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド組成物は、１つ以上の炭水化物もしくは炭水化物部分または二環式ケタール部分を含有する。一部の実施形態では、炭水化物部分は、炭水化物である。一部の実施形態では、炭水化物部分は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに直接的もしくは間接的に複合体化された炭水化物であるか、またはこれを含有する。一部の実施形態では、炭水化物部分は、所望の位置、たとえば、細胞、組織、臓器などへのオリゴヌクレオチドの標的化送達を容易にする。一部の実施形態では、提供される炭水化物部分は、肝臓への送達を容易にする。当業者により認識されるように、様々な炭水化物部分が文献に記載されており、本開示に従って利用することができる。
【０９１２】
炭水化物部分は、１つ以上の二価または多価（２つ以上の炭水化物部分をオリゴヌクレオチドに繋げるために使用され得る）のリンカーを任意に介して、たとえば、糖単位、ヌクレオチド間結合単位、核酸塩基単位などの様々な位置でオリゴヌクレオチドに組み込むことができる。一部の実施形態では、本開示は、炭水化物をオリゴヌクレオチドへ組み込むための技術を提供する。一部の実施形態では、本開示は、１つ以上のリンカーを任意に介して、ヌクレオチド間結合及び／または糖単位での代替の組み込み及び／または追加の組み込みとして、核酸塩基単位に炭水化物部分を組み込むための技術を提供し、これにより、極めて大きな柔軟性及び／または改善された特性及び／または活性を提供する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、リンカーを任意に介して、核酸塩基単位でオリゴヌクレオチドに組み込まれた少なくとも１つの炭水化物部分を含有する。
【０９１３】
一部の実施形態では、リンカーは、ＬＭであり、式中、ＬＭは、共有結合であるか、またはＣ１−１００脂肪族基、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜３０個のヘテロ原子を有するＣ１−１００ヘテロ脂肪族基から選択される、任意で置換される二価もしくは多価の直線状もしくは分枝状の基であり、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−６アルキレン、Ｃ１−６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｒ’）２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｒ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）−、−Ｐ（ＳＲ’）−、−Ｐ（ＮＲ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］−、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（Ｒ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｒ’）Ｏ−、または−ＯＰ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］Ｏ−と置き換えられ；及び１つ以上の炭素原子が任意で、及び独立して、Ｃｙと置き換えられる。一部の実施形態では、ＬＭは、二価である。一部の実施形態では、ＬＭは、多価である。一部の実施形態では、ＬＭは、
【化１２８】
2020522265.tif 000297
であり、式中、ＬＭは、核酸塩基に直接結合され、たとえば、以下のとおりである：
【化１２９】
2020522265.tif 000298
。一部の実施形態では、ＬＭは、
【化１３０】
2020522265.tif 000299
である。
一部の実施形態では、ＬＭは、
【化１３１】
2020522265.tif 000300
である。
一部の実施形態では、ＬＭは、
【化１３２】
2020522265.tif 000301
である。
一部の実施形態では、ＬＭは、
【化１３３】
2020522265.tif 000302
である。
【０９１４】
一部の実施形態では、炭水化物部分または二環式ケタールもしくは二環式ケタール部分は、ＲＣＤであり、式中、ＲＣＤは、Ｃ１−１００脂肪族基、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜３０個のヘテロ原子を有するＣ１−１００ヘテロ脂肪族基から選択される、任意で置換される直線状または分枝状の基であり、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−６アルキレン、Ｃ１−６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｒ’）２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｒ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）−、−Ｐ（ＳＲ’）−、−Ｐ（ＮＲ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］−、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（Ｒ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｒ’）Ｏ−、または−ＯＰ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］Ｏ−と置き換えられ；及び１つ以上の炭素原子が任意で、及び独立して、ＣｙＬと置き換えられる。一部の実施形態では、ＲＣＤは、Ｃ１−１００脂肪族基、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜３０個のヘテロ原子を有するＣ１−１００ヘテロ脂肪族基から選択される、任意で置換される直線状または分枝状の基であり、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−６アルキレン、Ｃ１−６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｒ’）２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｒ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）−、−Ｐ（ＳＲ’）−、−Ｐ（ＮＲ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］−、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（Ｒ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｒ’）Ｏ−、または−ＯＰ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］Ｏ−と置き換えられ；及び１つ以上の炭素原子が独立して、四価の単糖、二糖または多糖部分と置き換えられる。一部の実施形態では、ＲＣＤは、Ｃ１−１００脂肪族基、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜３０個のヘテロ原子を有するＣ１−１００ヘテロ脂肪族基から選択される、任意で置換される直線状または分枝状の基であり、式中、１つ以上のメチレン単位が任意で、及び独立して、Ｃ１−６アルキレン、Ｃ１−６アルケニレン、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｒ’）２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＲ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）−、−Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｏ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＯＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＳＲ’）−、−Ｐ（Ｓ）（Ｒ’）−、−Ｐ（Ｓ）（ＮＲ’）−、−Ｐ（Ｒ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）−、−Ｐ（ＳＲ’）−、−Ｐ（ＮＲ’）−、−Ｐ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］−、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（Ｒ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｏ）（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＯＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＳＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（ＮＲ’）Ｏ−、−ＯＰ（Ｒ’）Ｏ−、または−ＯＰ（ＯＲ’）［Ｂ（Ｒ’）３］Ｏ−と置き換えられ；及び１つ以上の炭素原子が独立して、四価のＧａｌＮａｃ部分、またはＧａｌＮａｃ誘導体の四価部分と置き換えられる。
【０９１５】
一部の実施形態では、ＲＣＤは、任意で置換される
【化１３４】
2020522265.tif 000303
である。一部の実施形態では、Ｒ’は、−Ｃ（Ｏ）Ｒである。一部の実施形態では、ＲＣＤは、単糖部分である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、一価のＧａｌＮａｃ部分である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、
【化１３５】
2020522265.tif 000304
である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、任意で置換される
【化１３６】
2020522265.tif 000305
である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、任意で置換される
【化１３７】
2020522265.tif 000306
である。一部の実施形態では、Ｒ’は、−Ｃ（Ｏ）Ｒである。一部の実施形態では、ＲＣＤは、任意で置換される
【化１３８】
2020522265.tif 000307
である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、二糖部分である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、多糖部分である。
【０９１６】
一部の実施形態では、ＲＣＤは、ＲＧ−Ｌ−の構造を有し、式中、ＲＧは、−Ｈであるか、またはＣ３−Ｃ２０環式脂肪族、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜２０員のヘテロシクリルから選択される、任意で置換される基である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、ＲＧ−Ｌ−の構造を有し、式中、ＲＧは、Ｃ３−Ｃ２０環式脂肪族、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜２０員のヘテロシクリルから選択される、任意で置換される基である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、ＲＧ−Ｌ−の構造を有し、式中、ＲＧは、Ｃ３−Ｃ２０環式脂肪族、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜２０員のヘテロシクリルから選択される、任意で置換される基であり、少なくとも１つのヘテロ原子は、酸素である。一部の実施形態では、ＲＧは置換され、各ＲＧの少なくとも１つの置換基は、酸素原子を介してＲＧに結合される。一部の実施形態では、ＲＧは置換され、各ＲＧの少なくとも１つの置換基は、窒素原子を介してＲＧに結合される。一部の実施形態では、ＲＧは独立して置換され、各ＲＧの各炭素原子は独立して、酸素原子または窒素原子を介して置換基に結合される。一部の実施形態では、ＲＧは独立して置換され、各ＲＧの各炭素原子は独立して、酸素原子または窒素原子を介して置換基に結合される。一部の実施形態では、ＲＧは、１〜１０個の酸素原子を有する、任意で置換される３〜２０員のヘテロシクリルである。一部の実施形態では、ＲＧは、１個の酸素原子を有する、任意で置換される３〜６員のヘテロシクリルである。一部の実施形態では、各ＲＧは独立して、１〜１０個の酸素原子を有する、任意で置換される３〜２０員のヘテロシクリルである。一部の実施形態では、ＲＧは独立して、１個の酸素原子を有する、任意で置換される３〜６員のヘテロシクリルである。一部の実施形態では、ＲＧのヘテロシクリル環の各炭素は独立して、酸素原子または窒素原子に結合される。一部の実施形態では、ＲＧのヘテロシクリル環の２個以上の炭素原子は独立して、酸素原子または窒素原子に結合される。一部の実施形態では、ＲＧのヘテロシクリル環の２個以上の炭素原子は独立して、酸素原子または窒素原子に結合される。一部の実施形態では、ＲＧのヘテロシクリル環の３個以上の炭素原子は独立して、酸素原子または窒素原子に結合される。一部の実施形態では、ＲＧのヘテロシクリル環の４個以上の炭素原子は独立して、酸素原子または窒素原子に結合される。一部の実施形態では、ＲＧのヘテロシクリル環の５個以上の炭素原子は独立して、酸素原子または窒素原子に結合される。一部の実施形態では、ＲＧのヘテロシクリル環の２個以上の炭素原子は独立して、酸素原子に結合される。一部の実施形態では、ＲＧのヘテロシクリル環の３個以上の炭素原子は独立して、酸素原子に結合される。一部の実施形態では、ＲＧのヘテロシクリル環の４個以上の炭素原子は独立して、酸素原子に結合される。一部の実施形態では、ＲＧのヘテロシクリル環の５個以上の炭素原子は独立して、酸素原子に結合される。一部の実施形態では、ＲＧ−Ｈは、−ＣＨＯまたは−Ｃ（Ｏ）−基を含有するＣ３−２０ポリオールである。
【０９１７】
一部の実施形態では、ＲＣＤは、ＲＧ−Ｌ−の構造を有し、式中、ＲＧは、−Ｈであるか、またはＣ３−Ｃ２０環式脂肪族、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜２０員のヘテロシクリルから選択される、置換された基であり、ここで、置換基の１〜２０個は、Ｒ基である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、ＲＧ−Ｌ−の構造を有し、式中、ＲＧは、−Ｈであるか、またはＣ３−Ｃ２０環式脂肪族、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜２０員のヘテロシクリルから選択される、置換された基であり、ここで、置換基の１〜２０個は、−ＯＲ基または−Ｎ（Ｒ）２基である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、ＲＧ−Ｌ−の構造を有し、式中、ＲＧは、−Ｈであるか、またはＣ３−Ｃ２０環式脂肪族、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜２０員のヘテロシクリルから選択される、置換された基であり、ここで、置換基の１〜２０個は、−ＯＨ及び−Ｎ（Ｒ）２である。一部の実施形態では、ＲＣＤは、ＲＧ−Ｌ−の構造を有し、式中、ＲＧは、−Ｈであるか、またはＣ３−Ｃ２０環式脂肪族、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜２０員のヘテロシクリルから選択される、置換された基であり、ここで、置換基の１〜２０個は、−ＯＨ及び−ＮＨＲである。一部の実施形態では、ＲＣＤは、ＲＧ−Ｌ−の構造を有し、式中、ＲＧは、−Ｈであるか、またはＣ３−Ｃ２０環式脂肪族、ならびに酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する３〜２０員のヘテロシクリルから選択される、置換された基であり、ここで、置換基の１〜２０個は、−ＯＨ及び−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒである。
【０９１８】
一部の実施形態では、ＲＧは、酸素、窒素、硫黄、リン、ホウ素及びケイ素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する、置換された３〜２０員のヘテロシクリルである。一部の実施形態では、ＲＧは、酸素及び窒素から独立して選択される１〜１０個のヘテロ原子を有する、置換された３〜２０員のヘテロシクリルである。一部の実施形態では、ＲＧは、１〜１０個の酸素を有する、置換された３〜２０員のヘテロシクリルである。一部の実施形態では、ＲＧは、置換された
【化１３９】
2020522265.tif 000308
または
【化１４０】
2020522265.tif 000309
である。一部の実施形態では、ＲＧは、置換された
【化１４１】
2020522265.tif 000310
である。一部の実施形態では、ＲＧは、置換された
【化１４２】
2020522265.tif 000311
ある。
【０９１９】
一部の実施形態では、ＲＧは、
【化１４３】
2020522265.tif 000312
であり、式中、各可変部分は独立して、本開示に記載されるとおりである。一部の実施形態では、ｔは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である。一部の実施形態では、ｔは、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である。一部の実施形態では、ｔは、少なくとも１である。一部の実施形態では、ｔは、少なくとも２である。一部の実施形態では、ｔは、少なくとも３である。一部の実施形態では、ｔは、少なくとも４である。一部の実施形態では、ｔは、少なくとも５である。一部の実施形態では、ｔは、少なくとも６である。一部の実施形態では、各Ｒ１ｓは独立して、−ＯＲ’または−Ｎ（Ｒ’）２である。一部の実施形態では、各Ｒ’は独立して、−Ｃ（Ｏ）Ｒである。一部の実施形態では、各Ｒ１ｓは独立して、−ＯＲ’または−ＮＨＲ’である。一部の実施形態では、各Ｒ１ｓは独立して、−ＯＨまたは−ＮＨＲ’である。一部の実施形態では、各Ｒ１ｓは独立して、−ＯＨまたは−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒである。一部の実施形態では、環Ａは、任意で置換される
【化１４４】
2020522265.tif 000313
または
【化１４５】
2020522265.tif 000314
である。一部の実施形態では、環Ａは、任意で置換される
【化１４６】
2020522265.tif 000315
である。一部の実施形態では、環Ａは、任意で置換される
【化１４７】
2020522265.tif 000316
である。
【０９２０】
一部の実施形態では、ＲＧは、
【化１４８】
2020522265.tif 000317
であり、式中、各可変部分は独立して、本開示に記載されるとおりである（すなわち、ＲＧ−Ｈは、
【化１４９】
2020522265.tif 000318
である）。一部の実施形態では、Ｒ１ｓ、Ｒ２ｓ、Ｒ３ｓ、Ｒ４ｓ及びＲ５ｓのうちの少なくとも１、２、３、４、５、または６つは独立して、−ＯＲ’または−Ｎ（Ｒ’）２である。一部の実施形態では、Ｒ１ｓ、Ｒ２ｓ、Ｒ３ｓ、Ｒ４ｓ及びＲ５ｓのうちの少なくとも１、２、３、４、５、または６つは独立して、−ＯＲ’または−ＮＨＲ’である。一部の実施形態では、Ｒ１ｓ、Ｒ２ｓ、Ｒ３ｓ、Ｒ４ｓ及びＲ５ｓのうちの少なくとも１、２、３、４、５、または６つは独立して、−ＯＨまたは−ＮＨＲ’である。一部の実施形態では、Ｒ１ｓ、Ｒ２ｓ、Ｒ３ｓ、Ｒ４ｓ及びＲ５ｓのうちの少なくとも１、２、３、４、５、または６つは独立して、−ＯＨまたは−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒである。一部の実施形態では、Ｒ１ｓ、Ｒ２ｓ、Ｒ３ｓ、Ｒ４ｓ及びＲ５ｓのうちの少なくとも１、２、３、４、５、または６つは、−ＯＨである。
【０９２１】
一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の各環炭素原子は独立して、置換される。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の環炭素原子の１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個以下は、置換されない。一部の実施形態では、置換されていない環炭素原子は、１個以下である。一部の実施形態では、置換されていない環炭素原子は、２個以下である。一部の実施形態では、置換されていない環炭素原子は、３個以下である。一部の実施形態では、置換されていない環炭素原子は、４個以下である。一部の実施形態では、置換されていない環炭素原子は、５個以下である。一部の実施形態では、置換されていない環炭素原子は、６個以下である。一部の実施形態では、置換されていない環炭素原子は、７個以下である。一部の実施形態では、置換されていない環炭素原子は、８個以下である。一部の実施形態では、置換されていない環炭素原子は、９個以下である。一部の実施形態では、置換されていない環炭素原子は、１０個以下である。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の環炭素原子の１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個以下は、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されない。一部の実施形態では、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されていない環炭素原子は、１個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されていない環炭素原子は、２個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されていない環炭素原子は、３個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されていない環炭素原子は、４個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されていない環炭素原子は、５個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されていない環炭素原子は、６個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されていない環炭素原子は、７個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されていない環炭素原子は、８個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されていない環炭素原子は、９個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換されていない環炭素原子は、１０個以下である。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の環炭素原子の１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個以下は、−ＯＨで置換されない。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、１個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、２個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、３個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、４個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、５個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、６個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、７個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、８個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、９個以下である。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、１０個以下である。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の環炭素原子の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％パーセントは、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の環炭素原子の１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％以下は、−ＯＨで置換されない。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、１０％以下である。一部の実施形態では、−ＯＨで置換されていない環炭素原子は、２０％以下である。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の各環炭素原子は独立して、置換される。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、少なくとも１個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、少なくとも２個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、少なくとも３個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、少なくとも４個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、少なくとも５個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、少なくとも６個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、少なくとも７個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、少なくとも８個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、少なくとも９個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、少なくとも１０個の環炭素原子が置換される。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも１個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも２個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも３個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも４個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも５個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも６個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも７個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも８個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも９個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも１０個の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも１個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも２個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも３個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも４個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも５個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも６個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも７個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも８個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも９個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも１０個の環炭素原子が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の環炭素原子の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％パーセントは、−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも１０％の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも２０％の環炭素原子が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも３０％が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも４０％が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも５０％が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも６０％が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも７０％が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも８０％が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも９０％が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも９５％が−ＯＨまたは−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、ＲＧの環式脂肪族または複素環式環の環炭素原子の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％は、−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも１０％が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも２０％が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも３０％が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも４０％が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも５０％が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも６０％が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも７０％が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも８０％が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも９０％が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、環炭素原子の少なくとも９５％が−ＯＨで置換される。一部の実施形態では、少なくとも１個の環炭素原子が−Ｎ（Ｒ’）２で置換される。一部の実施形態では、少なくとも１個の環炭素原子が−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒで置換される。一部の実施形態では、少なくとも１個の環炭素原子が−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒで置換され、式中、Ｒは、任意で置換されるＣ１−６脂肪族である。一部の実施形態では、少なくとも１個の環炭素原子が−ＮＨＡｃで置換される。
【０９２２】
一部の実施形態では、ＲＧは、任意で置換される
【化１５０】
2020522265.tif 000319
である。一部の実施形態では、Ｒ’は、−Ｃ（Ｏ）Ｒである。一部の実施形態では、ＲＧは
【化１５１】
2020522265.tif 000320
である。一部の実施形態では、ＲＧは、任意で置換される
【化１５２】
2020522265.tif 000321
である。
【０９２３】
一部の実施形態では、ＲＧは、任意で置換される
【化１５３】
2020522265.tif 000322
である。一部の実施形態では、Ｒ’は、−Ｃ（Ｏ）Ｒである。一部の実施形態では、ＲＧは、任意で置換される
【化１５４】
2020522265.tif 000323
である。
【０９２４】
一部の実施形態では、ＲＣＤ、またはＲＧは、ＲＣＤ−Ｈ、またはＲＧ−Ｈが、
【化１５５】
2020522265.tif 000324
2020522265.tif 000325
2020522265.tif 000326
または
【化１５６】
2020522265.tif 000327
であるような構造のものである。一部の実施形態では、ＲＣＤ、またはＲＧは、ＲＣＤ−Ｈ、またはＲＧ−Ｈがアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）のリガンドであるような構造のものである。様々な他のＡＳＧＰＲリガンドが当分野で公知であり、本開示に従って利用することができる。一部の実施形態では、記載される炭水化物部分は、提供されるオリゴヌクレオチドの肝臓への標的化送達に有用である。
【０９２５】
一部の実施形態では、Ｌは、共有結合である。一部の実施形態では、Ｌは、任意で置換される二価のＣ１−６脂肪族であり、式中、１つ以上のメチレン単位が独立して、及び任意で−Ｏ−と置き換えられる。一部の実施形態では、Ｌは、−Ｏ−ＣＨ２−である。
【０９２６】
一部の実施形態では、ＲＣＤは、ＲＧ−Ｈのオリゴマー部分またはポリマー部分であり、式中、各ＲＧは独立して、本開示に記載されるとおりである。
【０９２７】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の標的化部分を含有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、一本鎖ＲＮＡｉ剤である。
【０９２８】
一部の実施形態では、標的化部分は、アシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）のリガンドである。
【０９２９】
一部の実施形態では、標的化部分は、Ｓａｎｈｕｅｚａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０１７，１３９（９），ｐｐ  ３５２８−３５３６に開示されているアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）のリガンドである。
【０９３０】
一部の実施形態では、標的化部分は、Ｌｉｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．ＵＳ２０１６０２０７９５３に開示されているアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）のリガンドである。
【０９３１】
一部の実施形態では、標的化部分は、Ｌｉｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．ＵＳ２０１６０２０７９５３に開示されている、置換された−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２，３−ジオール誘導体である。
【０９３２】
一部の実施形態では、標的化部分は、Ｌｉｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．ＵＳ２０１５０３２９５５５に開示されているアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）のリガンドである。
【０９３３】
一部の実施形態では、標的化部分は、Ｌｉｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．ＵＳ２０１５０３２９５５５に開示されている、置換された−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２，３−ジオール誘導体である。
【０９３４】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化される追加の化学的部分は、ＧａｌＮＡｃ部分である。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化される追加の化学的部分は、任意の位置で複合体化されるＧａｌＮＡｃ部分である。
【０９３５】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化される追加の化学的部分は、リンカーを介して５’−Ｈ  Ｔに複合体化される、ＧａｌＮＡｃ部分である。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化される追加の化学的部分は、リンカーを介して５’−Ｈ  Ｔに複合体化され、任意の位置で複合体化されるＧａｌＮＡｃ部分である。
【０９３６】
一部の実施形態では、追加の化学的部分は、任意の位置でのＧａＮＣ６Ｔ（ＴＧａＮＣ６Ｔとしても知られ、アミノＣ６リンカーを介したＧａｌＮＡｃ部分の５’Ｈ  Ｔへの複合体化）である。
【０９３７】
一部の実施形態では、追加の化学的部分は、ＧａＮＣ６Ｔ、たとえば、アミノＣ６リンカーを介したＧａｌＮＡｃ部分の５’Ｈ  Ｔへの複合体化である（たとえば、最後から２番目または最後から３番目のヌクレオチドにおけるもの［５’から３’へ数えて］；たとえば、３’末端ジヌクレオチドの５’ヌクレオチド（たとえば、３’末端ジヌクレオチドの５’ヌクレオチドは、３’末端ジヌクレオチドの２つのヌクレオチドのうち、オリゴヌクレオチドの５’末端により近いヌクレオチド）または３’末端ジヌクレオチドの５’ヌクレオチドのすぐ５’側のヌクレオチド：
【化１５７】
2020522265.tif 000328
【０９３８】
いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ＧａｌＮＡｃ部分をオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化するリンカーを含有する。いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ＧａｌＮＡｃ部分をオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化するリンカーを含有し、ここで、リンカーは、糖の２’位に結合している。いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ＧａｌＮＡｃ部分をオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化するリンカーを含有し、ここで、リンカーは、塩基に結合している。いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ＧａｌＮＡｃ部分をオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化するリンカーを含有し、ここで、リンカーは、Ｔ塩基に結合している。いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ＧａｌＮＡｃ部分をオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化するリンカーを含有する。
【０９３９】
一部の実施形態では、ＧａｌＮＡｃ部分に結合しているリンカーは、生体切断可能リンカーである。そのようなリンカーは、ＧａｌＮＡｃ部分の細胞内での除去を可能にし、このため、ＧａｌＮＡｃ部分は、Ａｇｏ−２活性またはＲＮＡ干渉を妨害しない。
【０９４０】
一部の実施形態では、ＧａｌＮＡｃ部分は、最後から２番目または最後から３番目のヌクレオチドでＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に複合体化される。
【０９４１】
一部の実施形態では、ＧａｌＮＡｃ部分は、一本鎖ＲＮＡｉ剤の最後から２番目のヌクレオチド（３’末端ジヌクレオチドのより５’側の位置）、または一本鎖ＲＮＡｉ剤の最後から３番目のヌクレオチド（３’末端ジヌクレオチドのすぐ５’側のヌクレオチド）で複合体化され得る。いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤の最後から２番目または最後から３番目のヌクレオチド（たとえば、３’末端ジヌクレオチドのより５’側の位置）がＡｇｏ−２のポケットに隣接し得、ＧａｌＮＡｃ部分は、当該ポケットへの挿入が可能であり得ることから、ＧａｌＮＡｃ部分は、Ａｇｏ−２活性を妨害しないことを示唆する。いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、ＧａｌＮＡｃ部分が最後から２番目または最後から３番目のヌクレオチドに結合している場合、ＲＮＡｉ活性を可能にするためにＧａｌＮＡｃ部分を切断する必要はなく、そのため、より堅固な非生体切断可能リンカーを使用してＧａｌＮＡｃ部分をオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤に結合させることが許容され得ることを示唆する。したがって、より堅固なリンカーは切断の影響を受けにくく、これにより、ＧａｌＮＡｃ部分によるオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の送達増加の可能性が高くなる。
【０９４２】
一部の実施形態では、ＧａｌＮＡｃ部分は、ＡＭＣ６リンカーを介して結合される。
【０９４３】
一部の実施形態では、ＧａｌＮＡｃ部分は、Ｔ塩基に結合したＡＭＣ６リンカーを介して結合される（ＡＭＣ６Ｔ）。
【０９４４】
一部の実施形態では、ＡＭＣ６Ｔは、以下の構造を有する：
【化１５８】
2020522265.tif 000329
一部の非限定的な例では、ＡＭＣ６Ｔは、最後から２番目または最後から３番目のヌクレオチド［５’から３’へ数えて］のいずれかにあり；たとえば、３’末端ジヌクレオチドの５’ヌクレオチド、または３’末端ジヌクレオチドの５’ヌクレオチドのすぐ５’側のヌクレオチドにある。
【０９４５】
一本鎖ＲＮＡｉ剤のいくつかの実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、最後から２番目または最後から３番目のヌクレオチドにＡＭＣ６Ｔを含有する。
【０９４６】
本明細書に開示されるように、ＧａＮＣ６Ｔは、有効な一本鎖ＲＮＡｉ剤の構成要素である。一部の非限定的な例では、ＧａＮＣ６Ｔは、最後から２番目または最後から３番目のヌクレオチド［５’から３’へ数えて］のいずれかにあり、たとえば、３’末端ジヌクレオチドの５’ヌクレオチド、または３’末端ジヌクレオチドの５’ヌクレオチドのすぐ５’側のヌクレオチドにある。本明細書に開示される一部の非限定的な例では、ＧａＮＣ６Ｔは、ヌクレオチド位置２１のうち２０（５’末端から数えて）、または２５のうち２４（５’末端から数えて）にある。
【０９４７】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、三アンテナ型ＧａｌＮＡｃ酸に複合体化される（たとえば、Ｃ１０、Ｃ３またはトリアジンリンカーを介して）：
【化１５９】
2020522265.tif 000330
これらの構造は、−ＯＡｃ（−Ｏ−アセテート基）を含有するので、保護されたバージョンを表す。一部の実施形態では、Ａｃ基は、当該化合物のオリゴヌクレオチドへの複合体化後の脱保護中に除去される。一部の実施形態では、脱保護は、たとえば、実施例３７Ｂに記載されるように、濃縮水酸化アンモニウムを用いて実施される。これらの構造の脱保護されたバージョンでは、−ＯＡｃは、−ＯＨにより置き換えられる。
【０９４８】
一部の実施形態では、ＧａｌＮＡｃ部分は、５’末端に複合体化される。これらの追加の化学的部分のそれぞれ（Ｃ１２、Ｃ５またはトリアジンリンカーのそれぞれを伴う三アンテナ型ＧａｌＮＡｃ酸）を、ＲＮａｓｅ  Ｈ機序を介して作動する、第ＸＩ因子（ＦＸＩ）を標的とするＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化した。
【０９４９】
いくつかのオリゴヌクレオチドを構築した。各々は、ＲＮａｓｅ  Ｈ機序を介して作動する、第ＸＩ因子（ＦＸＩ）を標的とするＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含有し、Ｃ１２、Ｃ５またはトリアジンリンカーのそれぞれにより、それぞれ異なる三アンテナ型ＧａｌＮＡｃ酸に複合体化されている。三アンテナ型ＧａｌＮＡｃ酸は、オリゴヌクレオチドの肝臓への送達を改善することが実験的に明らかにされた（データ図示せず）。
【０９５０】
一部の実施形態では、本開示は、三アンテナ型ＧａｌＮＡｃ酸に複合体化される任意のオリゴヌクレオチドに関する。一部の実施形態では、本開示は、Ｃ１０、Ｃ３またはトリアジンリンカーを介して、三アンテナ型ＧａｌＮＡｃ酸に複合体化される任意のオリゴヌクレオチドに関する。一部の実施形態では、本開示は、三アンテナ型ＧａｌＮＡｃ酸に複合体化される任意のオリゴヌクレオチドに関し、ここで、オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  ＨまたはＲＮＡ干渉機序によって介在される、標的転写産物のノックダウンを誘導する。一部の実施形態では、本開示は、Ｃ１０、Ｃ３またはトリアジンリンカーを介して、三アンテナ型ＧａｌＮＡｃ酸に複合体化される任意のオリゴヌクレオチドに関し、ここで、オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  ＨまたはＲＮＡ干渉機序によって介在される、標的転写産物のノックダウンを誘導する。
【０９５１】
一部の実施形態では、本開示は、三アンテナ型ＧａｌＮＡｃ酸に複合体化される任意のオリゴヌクレオチドに関し、ここで、オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  ＨまたはＲＮＡ干渉機序によって介在される、標的転写産物のノックダウンを誘導し、このＲＮＡ干渉機序は、１、２またはそれ以上の鎖を含有するＲＮＡｉ剤によって誘導される。一部の実施形態では、本開示は、Ｃ１０、Ｃ３またはトリアジンリンカーを介して、三アンテナ型ＧａｌＮＡｃ酸に複合体化される任意のオリゴヌクレオチドに関し、ここで、オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  ＨまたはＲＮＡ干渉機序によって介在される、標的転写産物のノックダウンを誘導し、このＲＮＡ干渉機序は、１、２またはそれ以上の鎖を含有するＲＮＡｉ剤によって誘導される。
【０９５２】
加えて、本開示は、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有する提供されるオリゴヌクレオチドにおいて、一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’末端の最初のヌクレオチドが、標的転写産物の配列の対応する部分に一致する必要はないことを示す。
【０９５３】
本開示による様々な方法を使用して、一本鎖ＲＮＡ干渉を誘導する能力を有するオリゴヌクレオチドを調製し、特徴付けた。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド組成物は、表１Ａに列挙されるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドタイプの一本鎖ＲＮＡｉ剤である。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド組成物は、図１に例示される形式のいずれかとして列挙されるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドタイプの一本鎖ＲＮＡｉ剤である。
【０９５４】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンとＲＮＡ干渉の両方によって、標的転写産物のノックダウンを誘導する能力を有する。そのようなＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書中、二重機序またはハイブリッドオリゴヌクレオチドと記載される。
【０９５５】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、任意の追加の化学的部分、たとえば、限定されないが、以下のいずれかに記載または参照される任意のＧａｌＮＡｃ部分を含有し得る：５，３８２，５２４、５，４９１，０７５、５，５４５，５５３、５，７０５，３６７、５，７３３，７６５、５，７８６，１８４、５，７９８，２３３、５，８５４，０４２、５，８７１，９９０、５，９４５，３２２、６，１６５，４６９、６，１８７，３１０、６，３４２，３８２、６，４６５，２２０、６，５０３，７４４、６，６９９，７０５、６，７２３，５４５、６，７８０，６２４、６，８２５，０１９、６，９０５，８６７、６，９１１，３３７、７，０２６，１４７、７，０７８，２０７、７，１３８，２５８、７，１６６，７１７、７，１６９，５９３、７，１６９，９１４、７，１８９，８３６、７，１９２，７５６、７，２０２，３５３、７，２０８，３０４、７，２１１，６５７、７，２１７，５４９、７，２２０，８４８、７，２３８，５０９、７，３３８，９３２、７，３７１，８３８、７，３８４，７７１、７，４６２，４７４、７，５９８，０６８、７，６０８，４４２、７，６８２，７８７、７，７２３，０９２、８，０３９，２１８、８，１３７，９４１、８，２６８，５９６、８，８７１，７２３、または９，２２２，０８０。
【０９５６】
二重機序またはハイブリッドオリゴヌクレオチド
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意のオリゴヌクレオチドの構造的要素を含有し得る。
【０９５７】
本明細書に開示されるように、いくつかのオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンとＲＮＡ干渉の両方によって、転写産物標的のノックダウンを誘導する能力を有する。
【０９５８】
本明細書に開示されるように、いくつかのオリゴヌクレオチド（たとえば、限定されないが、二重機序またはハイブリッドオリゴヌクレオチドもしくはハイブリッドＲＮＡｉ剤として本明細書に記載されるもの）は、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンとＲＮＡ干渉の両方によって、転写産物標的のノックダウンを誘導する能力を有する。
【０９５９】
いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、ハイブリッドオリゴヌクレオチドが、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンによってのみノックダウンを誘導する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉によってのみノックダウンを誘導する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドのいずれかに対して、特別な利点を有することができることを示唆する。たとえば、いくつかのハイブリッドオリゴヌクレオチドを同じ細胞内に導入した場合、全てではない一部のハイブリッドオリゴヌクレオチドは、ＲＩＳＣ経路に関与することができ、ＲＩＳＣ経路に関与しないものは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性経路への関与に利用することができる。たとえば、いくつかのハイブリッドオリゴヌクレオチドを同じ細胞内に導入した場合、全てではない一部のハイブリッドオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性経路に関与することができ、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性経路に関与しないものは、ＲＩＳＣ経路への関与に利用することができる。いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、ハイブリッドオリゴヌクレオチドが、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンによってのみノックダウンを誘導する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、またはＲＮＡ干渉によってのみノックダウンを誘導する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドよりも効果的なノックダウンを介在することができることを示唆する。これは、ハイブリッドオリゴヌクレオチドが両方の経路を介してノックダウンを誘導する能力を有するからである。少なくともいくつかの細胞では、ＲＮａｓｅ  Ｈ活性及びＲＮＡ干渉のレベルは、細胞区画ごとに異なり得る。一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンまたはＲＮＡ干渉を介して、様々な細胞区画でノックダウンを誘導することができる。一部の実施形態では、ＲＮａｓｅ  Ｈがオリゴヌクレオチドで飽和している場合、過剰なオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉介在性ノックダウンに利用可能であり得る。一部の実施形態では、Ａｇｏ−２がオリゴヌクレオチドで飽和している場合、過剰なオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンに利用可能であり得る。
【０９６０】
一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを介したノックダウンと、ＲＮＡ干渉を介したノックダウンの両方が可能な構造を含有する。
【０９６１】
報告によれば、ＲＮａｓｅ  ＨとＲＮＡｉは両方とも標的ｍＲＮＡのノックダウンに関与するが、両者は異なる機序を伴う。報告によれば、ＲＮａｓｅ  Ｈは、天然に、一本鎖ＤＮＡ分子に関与し、一本鎖ＤＮＡ分子は、ｍＲＮＡ標的に結合して、翻訳を立体的に妨げること、またはＲＮＡ／ＤＮＡ二重鎖がＲＮａｓｅ  Ｈの基質として作用してｍＲＮＡ標的が切断されることのいずれかによって、発現を低下させる。
【０９６２】
対照的に、報告によれば、ＲＮＡｉは、天然に、二本鎖ＲＮＡ分子に関与し、Ｄｉｃｅｒによって、アンチセンス鎖及びセンス鎖を含み、２つの３’オーバーハングを有する、二本鎖ＲＮＡ分子が天然に生成される。これらの鎖は、二重鎖がほどけて、アンチセンスがアルゴノート２を含むＲＩＳＣ（ＲＮＡ干渉サイレンシング複合体）に組み込まれることで分離する。アンチセンス鎖は、ＲＩＳＣのガイドとして作用し、相補的なｍＲＮＡ標的を識別し、それを切断する。本明細書に示されるように、一本鎖ＲＮＡｉ剤の特定の形式もまた有効であるが、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、Ｄｉｃｅｒによって天然に生成されない。
【０９６３】
報告によれば、ＲＮａｓｅ  Ｈ及びＲＩＳＣは、構造的に異なる２種類の分子を天然に好む。ＲＮａｓｅ  Ｈは、一本鎖ＤＮＡ分子を天然に使用してｍＲＮＡ標的を標的とし、ＤＮＡ／ＲＮＡ二重鎖を形成する。報告によれば、ＲＩＳＣは、一本鎖ＲＮＡアンチセンス鎖を天然に使用してｍＲＮＡ標的を標的とし、ＲＮＡ／ＲＮＡ二重鎖を形成することが報告されている。Ｃｒｏｏｋｅ  ｅｔ  ａｌ．１９９５  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３１２：５９９−６０８；及びＥｌｂａｓｈｉｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ２００１  ４１１：４９４。
【０９６４】
Ｃｒｏｏｋｅ  ｅｔ  ａｌ．１９９５  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３１２：５９９−６０８はまた、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＲＮａｓｅ  Ｈ１を結晶化し、研究したことを報告しており、好ましい基質がＲＮＡ／ＤＮＡ二重鎖であることを報告した。ＤＮＡ鎖では、２’−ＯＭｅ及び２’−Ｆなどの２’−修飾は、ＲＮａｓｅ  Ｈ活性を低下または排除することが報告されている。加えて、ＲＮＡ干渉の場合、ＲＮＡをＤＮＡで完全に置換すると、二本鎖ＲＮＡｉ剤のＲＮＡ干渉活性が消失することが報告されている。Ｅｌｂａｓｈｉｒ  ｅｔ  ａｌ．２００１  ＥＭＢＯ  Ｊ．２０：６８７７−６８８８。したがって、報告によれば、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンには、ＤＮＡ（２’−デオキシ）の区間が必要であることが報告されているのに対し、ＲＮＡ干渉は、ヌクレオチドの区間をＤＮＡ（２’−デオキシ）に置き換えると消失し得る。
【０９６５】
対照的に、本明細書に示されるように、２’−ＯＭｅ及び２’−Ｆ修飾は、一本鎖ＲＮＡｉ剤に極めて好適である。したがって、出願人らは、（ａ）２’−修飾ヌクレオチドを含有するシード領域；及び（ｂ）２’−デオキシ（２’−デオキシ）ヌクレオチドのストレッチを含有するポストシード領域を含有する、いくつかのオリゴヌクレオチドを設計し、構築した。これらは、ＲＮＡｉとＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウン機序の両方を介して機能することが本明細書に示される。
【０９６６】
一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、（ａ）第１の相補的標的ｍＲＮＡ領域にアニーリングし、ＲＮＡ干渉を介在する能力を有するシード領域；及び（ｂ）第２の相補的標的ｍＲＮＡ領域にアニーリングし、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有する２’−デオキシ（２’−デオキシ）領域を含有するポストシード領域を含有する。シード領域は、ＲＮＡまたは修飾ヌクレオチド、たとえば、２’修飾（たとえば、限定されないが、２’−Ｆ、２’−ＯＭｅ及び２’−ＭＯＥ）を含むヌクレオチドを任意選択で含有することができ、ここで、ＲＮＡまたは修飾ヌクレオチドは、天然糖及び／または天然塩基、及び／または修飾塩基、及び／またはヌクレオチド間結合を含有する。
【０９６７】
ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンに有効なＤＮＡ（２’−デオキシ）領域の最小長は、少なくとも一部の例では、約５つの連続的なＤＮＡ（２’−デオキシ）であると報告されており、この最小デオキシ長は、部分的に精製された哺乳類ＲＮａｓｅ  Ｈ酵素を使用したｉｎ  ｖｉｔｒｏでの効率的なＲＮａｓｅ  Ｈ活性化に必要な最小長と相関することが報告されている。Ｍｏｎｉａ  ｅｔ  ａｌ．１９９３  ＪＢＣ  ２６８：１４５１４−１４５２２。
【０９６８】
一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、（ａ）第１の相補的標的ｍＲＮＡ領域にアニーリングする能力を有するシード領域；及び（ｂ）２’−デオキシ領域を含有するポストシード領域を含有し、ここで、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導する能力を有し、２’−デオキシ領域は、少なくとも５つの連続的な２’−デオキシを含有する。一部の実施形態では、２’−デオキシは、ＤＮＡ、または修飾ヌクレオチド、たとえば、２’−デオキシを含む修飾ヌクレオチドであり得、ここで、ＤＮＡまたは修飾ヌクレオチドは、天然糖及び／または天然塩基、及び／または修飾塩基、及び／または任意のヌクレオチド間結合を含有する。一部の実施形態では、２’−デオキシ領域は、連続的なヌクレオチドのストレッチを含有し、ここで、各ヌクレオチドは、２’−デオキシであり、各ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエートである。一部の実施形態では、２’−デオキシ領域は、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０または２１ヌクレオチドの連続的なヌクレオチドのストレッチを含有し、ここで、各ヌクレオチドは、２’−デオキシであり、各ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエートである。
【０９６９】
一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、（ａ）第１の相補的標的ｍＲＮＡ領域にアニーリングする能力を有するシード領域；及び（ｂ）２’−デオキシ領域を含有するポストシード領域を含有し、ここで、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導する能力を有し、２’−デオキシ領域は、少なくとも５つの連続的な２’−デオキシを含有する。一部の実施形態では、２’−デオキシは、ＤＮＡ、または修飾ヌクレオチド、たとえば、２’−デオキシを含む修飾ヌクレオチドであり得、ここで、ＤＮＡまたは修飾ヌクレオチドは、天然糖及び／または天然塩基、及び／または修飾塩基、及び／または任意のヌクレオチド間結合を含有する。一部の実施形態では、２’−デオキシ領域は、連続的なヌクレオチドの区間を含有するか、または当該区間であり、ここで、各ヌクレオチドは、２’−デオキシであり、各ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエートである。一部の実施形態では、２’−デオキシ領域は、連続的なヌクレオチドのストレッチを含有するか、または当該ストレッチであり、ここで、各ヌクレオチドは、２’−デオキシであり、各ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエートである。一部の実施形態では、２’−デオキシ領域は、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０または２１ヌクレオチドの連続的なヌクレオチドのストレッチを含有し、ここで、各ヌクレオチドは、２’−デオキシであり、各ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエートである。
【０９７０】
いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、ＷＯ２０１５／１０７４２５が、ＲＮａｓｅ  Ｈ切断を誘導するアンチセンスオリゴヌクレオチドのホスホロチオエートのキラル中心の配置によって、ＲＮａｓｅ  Ｈによって介在される切断を調節することができることを報告したことを注記する。たとえば、１つのＲｐの両側に少なくとも２つまたは３つのＳｐが位置する配置は、切断パターンを変更することができ、これにより、切断部位の数が減少し、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性切断の部位が制御される。
【０９７１】
一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、（ａ）第１の相補的標的ｍＲＮＡ領域にアニーリングする能力を有するシード領域；及び（ｂ）２’−デオキシ領域を含有するポストシード領域を含有し、ここで、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導する能力を有し、２’−デオキシ領域は、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０または２１ヌクレオチドの連続的なヌクレオチドのストレッチを含有し、ここで、各ヌクレオチドは、２’−デオキシであり、各ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエートである。
【０９７２】
一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、（ａ）第１の相補的標的ｍＲＮＡ領域にアニーリングする能力を有するシード領域；及び（ｂ）２’−デオキシ領域を含有するポストシード領域を含有し、ここで、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導する能力を有し、２’−デオキシ領域は、少なくとも９ヌクレオチドの連続的なヌクレオチドのストレッチを含有し、各ヌクレオチドは、２’−デオキシであり、各ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエートである。
【０９７３】
一部の実施形態では、第１及び第２の相補的標的ｍＲＮＡ領域は、同じ標的ｍＲＮＡの領域である。
【０９７４】
一部の実施形態では、第１及び第２の相補的標的ｍＲＮＡ領域は、異なる標的ｍＲＮＡの領域である。
【０９７５】
ハイブリッドオリゴヌクレオチドのいくつかの実施形態では、シード領域は、相補的標的ｍＲＮＡ領域にアニーリングし、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導する能力を有するＤＮＡ領域を含有する。
【０９７６】
いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、多くの例において、一本鎖ＤＮＡに結合した一本鎖ＲＮＡ標的を、ＲＮａｓｅ  Ｈが切断することを注記する。一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、標的ＲＮＡ転写産物に結合する能力を有する一本鎖２’−デオキシ部分を含有し、ＲＮａｓｅ  Ｈの基質を形成する。一部の実施形態では、ハイブリッドオリゴヌクレオチドは、標的ＲＮＡ転写産物に結合する能力を有する一本鎖２’−デオキシ部分（本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意のヌクレオチド間結合であり得る、ヌクレオチド間結合を含有する）を含有し、ＲＮａｓｅ  Ｈの基質を形成する。
【０９７７】
一本鎖ＲＮＡｉ剤のいくつかの実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも４つの連続的な２’−デオキシを含有するヌクレオチドの配列を含有する。一本鎖ＲＮＡｉ剤のいくつかの実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも５つの連続的な２’−デオキシを含有するヌクレオチドの配列を含有する。一本鎖ＲＮＡｉ剤のいくつかの実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも６つの連続的な２’−デオキシを含有するヌクレオチドの配列を含有する。一本鎖ＲＮＡｉ剤のいくつかの実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも７つの連続的な２’−デオキシを含有するヌクレオチドの配列を含有する。一本鎖ＲＮＡｉ剤のいくつかの実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも８つの連続的な２’−デオキシを含有するヌクレオチドの配列を含有する。一本鎖ＲＮＡｉ剤のいくつかの実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも９つの連続的な２’−デオキシを含有するヌクレオチドの配列を含有する。一本鎖ＲＮＡｉ剤のいくつかの実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも１０〜２０の連続的な２’−デオキシを含有するヌクレオチドの配列を含有する。
【０９７８】
ハイブリッドオリゴヌクレオチドのいくつかの実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも９つの連続的な２’−デオキシを含有する。一本鎖ＲＮＡｉ剤のいくつかの実施形態では、ポストシード領域は、少なくとも１０の連続的な２’−デオキシを含有する。ＲＮＡ干渉またはＲＮａｓｅ  Ｈノックダウンを介在する様々な一本鎖ＲＮＡｉ剤及びアンチセンスオリゴヌクレオチドの能力は、本明細書に記載され、非限定的な例として、図及び表に示される。
【０９７９】
実験データ（図示せず）及び本明細書に別途詳細に記載されるものは、推定二重機序オリゴヌクレオチドが、ＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈノックダウンの両方を介在する能力を有することを実証した。ＲＮＡ干渉は、２つの異なるｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ａｇｏ−２アッセイのいずれかで試験し、ＲＮａｓｅ  Ｈノックダウンは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＲＮａｓｅ  Ｈアッセイで試験した。
【０９８０】
実験には、ＲＮａｓｅ  Ｈアッセイが使用され、陽性対照としてＷＶ−１８６８（ＡＳＯ、ＲＮａｓｅ  Ｈノックダウン機序を介在）、陰性対照としてＷＶ−２１１０（一本鎖ＲＮＡｉ剤）を用いた。ＲＮＡ分子ＷＶ−２３７２は、被験基質として使用される。ＲＮａｓｅ  Ｈアッセイでは、二重機序オリゴヌクレオチドＷＶ−２１１１は、ＲＮａｓｅ  Ｈノックダウンを介在した。
【０９８１】
アレル特異的抑制
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、アレル特異的抑制（またはアレル特異的ノックダウン）を介在する能力を有する。
【０９８２】
一部の実施形態では、いくつかの疾患状態において、患者（たとえば、ヒト患者）は、同じ遺伝子のコピーを２つ含有し得、ここで、一方のコピーは野生型であり（疾患に関連しない）、別の染色体上の他方のコピーは突然変異を有する（疾患に関連する）。一部の実施形態では、野生型アレル及び変異型アレルは、突然変異の特定の配列によって区別することができ、または有害な突然変異以外の配列（たとえば、ＳＮＰ）によって区別することもできる。野生型遺伝子の発現は必要または有益であり得るが、変異型遺伝子の発現は有害または疾患に関連し得るので、変異型と野生型の両方のアレルをノックダウンすることは、時折望ましくないこともある。
【０９８３】
いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、多くの例において、立体制御されたキラルヌクレオチド間結合の導入（立体不規則的キラルヌクレオチド間結合の代わり）が、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドのアレル特異的抑制、安定性、有効性、特異性、送達、及び／またはアルブミン結合を増加させることができることを注記する。
【０９８４】
一部の実施形態では、アレル特異的抑制を介在する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、１つ以上の立体的に純粋なキラルヌクレオチド間結合を含有する。
【０９８５】
一部の実施形態では、アレル特異的抑制を介在する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、１つ以上の立体的に純粋なＳｐ立体配置のキラルヌクレオチド間結合を含有する。
【０９８６】
一部の実施形態では、アレル特異的抑制を介在する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、１つ以上の立体的に純粋なＳｐ立体配置のキラルヌクレオチド間結合、及び１つ以上の立体的に純粋なＲｐ立体配置のキラルヌクレオチド間結合を含有する。
【０９８７】
一部の実施形態では、アレル特異的抑制を介在する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、１つ以上の立体的に純粋なホスホロチオエートを含有する。
【０９８８】
一部の実施形態では、アレル特異的抑制を介在する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、１つ以上の立体的に純粋なＳｐ立体配置のホスホロチオエートを含有する。
【０９８９】
一部の実施形態では、アレル特異的抑制を介在する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、１つ以上の立体的に純粋なＲｐ立体配置のホスホロチオエートを含有する。
【０９９０】
一部の実施形態では、アレル特異的抑制を介在する能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、１つ以上の立体的に純粋なＳｐ立体配置のホスホロチオエート、及び１つ以上の立体的に純粋なＲｐ立体配置のホスホロチオエートを含有する。
【０９９１】
一部の実施形態では、標的遺伝子またはその遺伝子産物のアレル特異的抑制の能力を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される任意の構造または形式を含有し得る。
【０９９２】
オリゴヌクレオチドの多量体
一部の実施形態では、多量体は、以下のうちの２つ以上を含有する：ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、ＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンを誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド、及び／またはまたはＲＮＡ干渉とＲＮａｓｅ  Ｈ介在性ノックダウンの両方を誘導するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意の形式またはその構造的要素を有し得る。
【０９９３】
一部の実施形態では、提供される組成物は、１つ以上の提供されるオリゴヌクレオチド型の組み合わせを含有する。提供される組成物中の提供されるオリゴヌクレオチドの１個以上の型の各々の選択及び量は、当該組成物の使用目的に依存することが、化学及び医薬分野の当業者により、認識されるであろう。すなわち関連技術分野の当業者は、組成物中に含有される提供されるオリゴヌクレオチドの量及び型によって、組成物が全体としてある望ましい特性（例えば、生物学的に好ましい特性、治療上好ましい特性等）を有するように、提供されるキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を設計するであろう。
【０９９４】
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチド型は、ＷＯ／２０１４／０１２０８１及びＷＯ／２０１５／１０７４２５に記載されるものから選択される。これらの各々のオリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド型、オリゴヌクレオチド組成物、及びその方法は、参照により本明細書に組み込まれる。一部の実施形態では、提供されるキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物は、ＷＯ／２０１４／０１２０８１及びＷＯ／２０１５／１０７４２５に記載されるものから選択されるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドを含有する。
【０９９５】
一部の実施形態では、本開示は、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を含有する組成物に関し、ここで、オリゴヌクレオチドの配列は、本明細書に開示される任意のキラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物の配列を含有するか、またはそれからなる。
【０９９６】
一部の実施形態では、本開示は、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を含有する組成物に関し、ここで、オリゴヌクレオチドの配列は、表１Ａに列挙されるまたは本明細書に別途記載される任意の一本鎖ＲＮＡｉ剤組成物の配列を含有するか、またはそれからなる。
【０９９７】
一部の実施形態では、本開示は、オリゴヌクレオチド、たとえば、一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドの多量体を含有する組成物に関し、その少なくとも１つは、本明細書に記載されるような構造、配列または他の特徴を有する。
【０９９８】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドの多量体を含有する組成物に関し、ここで、多量体は、少なくとも約１６ｋＤのサイズである。
【０９９９】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドの多量体を含有する組成物に関し、炭水化物部分、脂質部分、標的化部分、または他の化合物をさらに含有する。
【１０００】
一部の実施形態では、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドの多量体を含有する組成物に関し、炭水化物部分、脂質部分、標的化部分、または他の化合物をさらに含有し、その総重量は、少なくとも約１６ｋＤのサイズである。
【１００１】
一部の実施形態では、多量体は、少なくとも２つの一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドを含有し得る。一部の実施形態では、多量体は、少なくとも３つの一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドを含有し得る。一部の実施形態では、多量体は、少なくとも４つの一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドを含有し得る。一部の実施形態では、多量体は、少なくとも５つの一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドを含有し得る。一部の実施形態では、多量体は、少なくとも６つの一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドを含有し得る。一部の実施形態では、多量体は、少なくとも７つの一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドを含有し得る。一部の実施形態では、多量体は、少なくとも８つの一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドを含有し得る。一部の実施形態では、多量体は、少なくとも９つの一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドを含有し得る。一部の実施形態では、多量体は、少なくとも１０の一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド及び／または他のオリゴヌクレオチドを含有し得る。
【１００２】
いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、オリゴヌクレオチドの多量体化により、リンパ系を介した輸送に十分な総分子量を有する多量体を提供することができることを示唆している。Ｓｕｐｅｒｓａｘｏらは、薬物の分子量とリンパ系に吸収される用量の割合との間には線形関係があり、１６ｋＤより大きい分子量を持つ分子は、皮下注射部位を流れるリンパ系によって主に吸収されることを報告した。Ｓｕｐｅｒｓａｘｏ  ｅｔ  ａｌ．１９９０  Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．７：１６７−９。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、約８ｋＤの分子量を有する。一部の実施形態では、複数のオリゴヌクレオチドを含有する多量体は、少なくとも約１６ｋＤの分子量を有する。
【１００３】
いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、報告によれば、薬物、たとえば、限定されないが、経口アベイラビリティが限られた薬物の送達、または放出プロファイルを調整または拡大する手段として、皮下注射が広く利用されていることを注記する。ＭｃＬｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．２００５  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃ．Ｔｏｄａｙ：Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ２：８９−９６。皮下注射は、皮膚の真皮下にある間質領域への送達をもたらし、薬物はそこから循環系またはリンパ系に入ると報告されており、輸送は、分子量、粒径、電荷、親水性、及び間質内成分との相互作用による影響を受けると報告されている。また、薬物濃度、注射量、イオン強度、粘度、及びｐＨなどの薬物製剤の特徴も全て、皮下注射部位からの拡散に関与することが報告されている。ＭｃＬｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．２００５；Ｐａｎｉａｇｕａ  ｅｔ  ａｌ．２０１２  Ｌｙｍｐｈｏｌｏｇｙ  ４５：１４４−１５３；及びＢａｇｂｙ  ｅｔ  ａｌ．２０１２  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ４：２７６−２９５。
【１００４】
一部の実施形態では、分子量、粒径、電荷、親水性、及び間質内成分との相互作用、薬物濃度、注射量、イオン強度、粘度、及び／またはｐＨのうちの１つ以上の特徴は、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを含有する組成物の有効性、生体利用効率または送達を改善または最大化するように調節される。
【１００５】
上述されるように、１６ｋＤより大きい分子量を持つ分子は、リンパ系によって主に吸収されることが報告されている。Ｓｕｐｅｒｓａｘｏ  ｅｔ  ａｌ．１９９０  Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．７：１６７−９。一部の実施形態では、本開示は、オリゴヌクレオチドの多量体を含有する組成物に関し、ここで、多量体は、少なくとも約１６ｋＤの総分子量を有する。一部の実施形態では、本開示は、２つ以上の異なるタイプまたはサイズのオリゴヌクレオチドの多量体を含有する組成物に関し、ここで、多量体の異なるタイプのうちの１つ以上は、少なくとも約１６ｋＤの総分子量を有する。
【１００６】
一部の実施形態では、多量体の各オリゴヌクレオチドは、同じ標的または異なる標的を標的とすることができる。多量体の各オリゴヌクレオチドが同じ標的または異なる標的を標的とすることができる、一部の実施形態では、多量体の投与を使用して、過剰発現または複数の標的遺伝子に関与する疾患を治療することができる。多量体の各オリゴヌクレオチドが同じ標的または異なる標的を標的とすることができる、一部の実施形態では、多量体の投与を使用して、異なる標的遺伝子の過剰発現に関与する異なる疾患を治療することができる。
【１００７】
一部の実施形態では、多量体の各オリゴヌクレオチドは、同じ標的の同じ配列を標的とすることができる。一部の実施形態では、多量体の各オリゴヌクレオチドは、同じ標的の異なる配列を標的とすることができる。
【１００８】
多量体の非限定的な例は、表８９Ａに示される。
【１００９】
一部の実施形態では、多量体は、互いに直接繋がれた（たとえば結合または直接結合、たとえば共有結合などを介して）、またはリンカーを介して繋がれた２つ以上のオリゴヌクレオチドを含有する。
【１０１０】
本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意のリンカーを使用して、多量体のオリゴヌクレオチドを結合することができる。多量体の構築及び様々なリンカーの使用についての様々なアプローチは、表８９Ｂ及び８９Ｃに例示される。
【１０１１】
いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、少なくとも一部の例では、Ｒｐ立体配置のホスホロチオエートがヌクレアーゼ切断を特に受けやすいことを注記する。多量体タイプ２のいくつかの実施形態では、多量体は、本質的に単一の長いオリゴヌクレオチドであり、ここで、オリゴヌクレオチドは、短いリンカーオリゴヌクレオチドによって繋がれた複数のより短いオリゴヌクレオチドを含有する。多量体タイプ２のいくつかの実施形態では、多量体は、本質的に単一の長いオリゴヌクレオチドであり、ここで、オリゴヌクレオチドは、短いリンカーオリゴヌクレオチドによって繋がれた複数のより短いオリゴヌクレオチドを含有し、短いリンカーオリゴヌクレオチドは、１つ以上のＲｐ立体配置のヌクレオチド間結合を含有する。多量体タイプ２のいくつかの実施形態では、多量体は、本質的に単一の長いオリゴヌクレオチドであり、ここで、オリゴヌクレオチドは、短いリンカーオリゴヌクレオチドによって繋がれた複数のより短いオリゴヌクレオチドを含有し、短いリンカーオリゴヌクレオチドは、１つ以上のＲｐ立体配置のホスホロチオエートを含有する。
【１０１２】
リンカーの非限定的な例としては、以下が挙げられる：切断可能なリンカーまたは生分解性リンカー；切断不可または非生分解性リンカー；Ｒｐ立体配置のキラル中心を含有する１つ以上のヌクレオチド間結合を含有するリンカー；Ｒｐ立体配置のキラルリンを含有する１つ以上のヌクレオチド間結合を含有するリンカー；１つ以上のＲｐ立体配置のホスホロチオエートを含有するリンカー；２つ以上のＲｐ立体配置のホスホロチオエートを含有するリンカー；３つ以上のＲｐ立体配置のホスホロチオエートを含有するリンカー；光切断性リンカー；１−（５−（Ｎ−マレイミドメチル）−２−ニトロフェニル）エタノールＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル；マレイミド部分を含有するリンカー；Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル部分を含有するリンカー；塩基でＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化されるリンカー；ヌクレオチド間結合でＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドに複合体化されるリンカー；糖で複合体化されるリンカー；ホスホジエステル；ホスホトリエステル；メチルホスホネート；Ｐ３’→Ｎ５’ホスホロアミダート；Ｎ３’→Ｐ５’ホスホロアミダート；Ｎ３’→Ｐ５’チオホスホロアミダート；ホスホロチオエート結合；チオ尿素リンカー；米国特許第９，５７２，８９１号に記載されるようなＣ５またはＣ６リンカー；アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、及びヘテロアリールを含有するリンカー；置換されたアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、及びヘテロアリールを含有するリンカー；米国特許第９，５１２，１６３号の式（Ａ）の構造のリンカー；Ｃ１−Ｃ１２ヒドロカルビル鎖を含有するリンカー；ポリエチレングリコールリンカー；ヘキサエチレングリコールリンカー；ヒドロカルビル鎖；置換ヒドロカルビル鎖；以下のうちの１つ以上を含有するリンカー：アルキル、置換または非置換のアルケニル、置換または非置換のアルキニル、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニル、ヘテロアリールアルキニル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロシクリルアルケニル、ヘテロシクリルアルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルキルアリールアルキル、アルキルアリールアルケニル、アルキルアリールアルキニル、アルケニルアリールアルキル、アルケニルアリールアルケニル、アルケニルアリールアルキニル、アルキニルアリールアルキル、アルキニルアリールアルケニル、アルキニルアリールアルキニル、アルキルヘテロアリールアルキル、アルキルヘテロアリールアルケニル、アルキルヘテロアリールアルキニル、アルケニルヘテロアリールアルキル、アルケニルヘテロアリールアルケニル、アルケニルヘテロアリールアルキニル、アルキニルヘテロアリールアルキル、アルキニルヘテロアリールアルケニル、アルキニルヘテロアリールアルキニル、アルキルヘテロシクリルアルキル、アルキルヘテロシクリルアルケニル、アルキルヘテロシクリルアルキニル、アルケニルヘテロシクリルアルキル、アルケニルヘテロシクリルアルケニル、アルケニルヘテロシクリルアルキニル、アルキニルヘテロシクリルアルキル、アルキニルヘテロシクリルアルケニル、アルキニルヘテロシクリルアルキニル、アルキルアリール、アルケニルアリール、アルキニルアリール、アルキルヘテロアリール、アルケニルヘテロアリール、またはアルキニルヘテロアリール；以下から選択されるアミノ酸配列を有するペプチドを含有するリンカー：ＡＬＡＬ、ＡＰＩＳＦＦＥＬＧ、ＦＬ、ＧＦＮ、Ｒ／ＫＸＸ、ＧＲＷＨＴＶＧＬＲＷＥ、ＹＬ、ＧＦ、及びＦＦ（Ｘは、任意のアミノ酸である）；式−（ＣＨ２）ｗＳ−Ｓ（ＣＨ２）ｍ−を含有するリンカー（式中、ｎ及びｍは独立して、０〜１０の整数である）；低ｐＨで不安定な結合を含有するリンカー；アミン、イミン、エステル、安息香酸イミン、アミノエステル、ジオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファゼン、アセタール、ビニルエーテル、ヒドラゾン、アジドメチル−メチルマレイン酸無水物、チオプロピオネート、マスク化エンドソーム溶解剤またはシトラコニル基を含有する、低ｐＨで不安定な結合を含有するリンカー；分枝鎖リンカー；切断剤、例えば、ｐＨ、酸化還元電位または分解分子の存在の影響を受けやすい切断可能リンカー；酸化還元切断可能なリンカー；リン酸塩系の切断可能なリンカー；−−Ｏ−−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−−Ｏ−−、−−Ｏ−−Ｐ（Ｓ）（ＯＨ）−−Ｏ−−、−−Ｏ−−Ｐ（Ｓ）（ＳＨ）−−Ｏ−−、−−Ｓ−−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−−Ｏ−−、−−Ｏ−−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−−Ｓ−−、−−Ｓ−−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−−Ｓ−−、−−Ｏ−−Ｐ（Ｓ）（ＯＨ）−−Ｓ−−、−−Ｓ−−Ｐ（Ｓ）（ＯＨ）−−Ｏ−−、−−Ｏ−−Ｐ（Ｏ）（Ｈ）−−Ｏ−−、−−Ｏ−−Ｐ（Ｓ）（Ｈ）−−Ｏ−−、−−Ｓ−−Ｐ（Ｏ）（Ｈ）−−Ｏ−−、−−Ｓ−−Ｐ（Ｓ）（Ｈ）−−Ｏ−−、−−Ｓ−−Ｐ（Ｏ）（Ｈ）−−Ｓ−−、または−−Ｏ−−Ｐ（Ｓ）（Ｈ）−−Ｓ−−を含有するリン酸塩系の切断可能なリンカー；酸切断可能なリンカー；エステル系リンカー；ペプチド系の切断可能なリンカー；ならびにこれらのリンカーのいずれかを含有する部分。
【１０１３】
一部の実施形態では、リンカーは、標的オリゴヌクレオチドよりも、哺乳類抽出物中のエンドペプチダーゼによる切断を受けやすいポリペプチドを含有する。一部の実施形態では、エンドペプチダーゼは、トリプシン、キモトリプシン、エラスターゼ、テルモリシン、ペプシン、またはエンドペプチダーゼＶ８である。一部の実施形態では、エンドペプチダーゼは、カテプシンＢ、カテプシンＤ、カテプシンＬ、カテプシンＣ、パパイン、カテプシンＳまたはエンドソーム酸性インスリナーゼである。
【１０１４】
オリゴヌクレオチドの多量体化の様々なリンカー及び方法は、非限定的な例として、以下に記載されている：米国特許第９，３７０，５８２号、同第９，３７１，３４８号、同第９，５１２，１６３号、同第９，５７２，８９１号、及び同第６，０３１，０９１号、ならびに国際特許出願公開第ＷＯ１９９８０００４３５号、同第ＷＯ２０１４０４３５４４号、及び同第ＷＯ２０１３０４０４２９号。
【１０１５】
本開示はまた、本明細書に記載されるまたは当分野に公知の任意のリンカーを使用して、１つ以上のオリゴヌクレオチドを互いに結合すること、または１つ以上の部分（非限定的な例として、標的化部分、炭水化物部分、ＧａｌＮＡｃ部分、脂質部分など）を１つ以上のオリゴヌクレオチド（非限定的な例として、エクソンスキッピングを誘導または阻害する能力を有する一本鎖ＲＮＡｉ剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド、二本鎖ＲＮＡｉ剤、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドなど）に結合することができることを注記する。
【１０１６】
オリゴヌクレオチド及び組成物の調製方法の例
提供されるオリゴヌクレオチド及びオリゴヌクレオチド組成物を調製するための方法は、当分野に広く公知であり、たとえば、限定されないが、ＷＯ／２０１０／０６４１４６、ＷＯ／２０１１／００５７６１、ＷＯ／２０１３／０１２７５８、ＷＯ／２０１４／０１０２５０、ＵＳ２０１３／０１７８６１２、ＷＯ／２０１４／０１２０８１、ＷＯ／２０１５／１０７４２５、ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４３５４２、及びＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４３５９８に記載されているものがあり、これらの各々の方法及び試薬は、参照により本明細書に組み込まれる。
【１０１７】
キラル制御されたオリゴヌクレオチド。
一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、標的遺伝子もしくはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有する。一部の実施形態では、提供されるオリゴヌクレオチドは、キラル制御されている。
【１０１８】
一部の実施形態では、本開示は、参照条件［たとえば、組成物の非存在、参照組成物（たとえば、同じ塩基配列、同じ化学修飾などを有するオリゴヌクレオチドの立体不規則的組成物、別の立体異性体などのＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤）の存在、及びそれらの組み合わせ］と比較したとき、標的遺伝子またはその遺伝子産物の発現及び／またはレベルの低下を誘導する能力を有する、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供する。
【１０１９】
一部の実施形態では、本開示は、参照条件［たとえば、組成物の非存在、参照組成物（たとえば、同じ塩基配列、同じ化学修飾などを有するオリゴヌクレオチドの立体不規則的組成物、別の立体異性体などのＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤）の存在、及びそれらの組み合わせ］と比較したとき、一本鎖ＲＮＡ干渉またはＲＮａｓｅ  Ｈを介して転写産物のノックダウンの改善を介在する、キラル制御されたオリゴヌクレオチド組成物を提供する。
【１０２０】
とりわけ、本開示は、１つ以上の特定のヌクレオチド型を含有する、キラル制御されたｓｓＲＮＡｉ剤及びキラル制御された組成物を提供する。一部の実施形態では、「オリゴヌクレオチド型」という文言は、特定の塩基配列、骨格結合パターン、骨格キラル中心パターン、及び骨格リン修飾のパターン（たとえば、「−ＸＬＲ１」基）を有するＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドを定義する。共通に指定される「型」のオリゴヌクレオチドは、塩基配列、骨格結合パターン、骨格キラル中心パターン、及び骨格リン修飾のパターンに関して、互いに構造的に同一である。一部の実施形態では、あるＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチド型のオリゴヌクレオチドは、同一である。
【１０２１】
一部の実施形態では、本開示で提供されるキラル制御されたオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、対応する立体不規則的なオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の混合物の特性とは異なる特性を有する。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、立体不規則的なオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の混合物の脂溶性とは異なる脂溶性を有する。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ＨＰＬＣで異なる保持時間を有する。一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、対応する立体不規則的なオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の混合物のピーク保持時間とは有意に異なるピーク保持時間を有し得る。当分野で一般的に実施されるようなＨＰＬＣを使用したオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の精製中に、特定のキラル制御されたオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、完全にではないにしても、大部分が失われる。当分野で一般的に実施されるようなＨＰＬＣを使用したオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の精製中に、特定のキラル制御されたオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、完全にではないにしても、大部分が失われる。その結果の１つは、立体不規則的なオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の混合物（特定のキラル制御されたオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤）の特定のジアステレオマーがアッセイで試験されないことである。別の結果は、バッチごとに、避けられない機器の誤差及び人為的ミスに起因して、推定上「純粋な」立体不規則的なオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤が、組成物中のジアステレオマーならびにその相対量及び絶対量がバッチごとに異なるという点で、一貫性のない組成を有するということである。本開示に提供される、キラル制御されたオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤及びキラル制御されたオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤組成物は、キラル制御されたオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤が単一のジアステレオマー（ジアステレオ異性体）としてキラル制御される様式で合成され、さらにオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤が所定のレベルの１つ以上の個々のオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の型を含有するので、そのような問題を克服する。
【１０２２】
化学及び合成分野の当業者であれば、本開示の合成方法は、結合リンでの特定の立体化学及び／または結合リンでの特定の修飾、及び／または特定の塩基、及び／または特定の糖を有するように一本鎖ＲＮＡｉ剤の各ヌクレオチド単位を前もって設計及び／または選択することができるように、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の各合成ステップ中において、ある程度の制御を提供することを認識するであろう。一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、ヌクレオチド間結合の結合リンで特定の組み合わせの立体中心を有するように前もって設計及び／または選択される。
【１０２３】
一部の実施形態では、本開示の方法を使用して作製される提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、特定の組み合わせの結合リン修飾を有するように設計及び／または決定される。一部の実施形態では、本開示の方法を使用して作製される提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、特定の組み合わせの塩基を有するように設計及び／または決定される。一部の実施形態では、本開示の方法を使用して作製される提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、特定の組み合わせの糖を有するように設計及び／または決定される。一部の実施形態では、本開示の方法を使用して作製される提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、上述の構造特性のうちの１つ以上の特定の組み合わせを有するように設計及び／または決定される。
【１０２４】
本開示の方法は、高度なキラル制御を呈する。たとえば、本開示の方法は、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤内の一つ一つの結合リンの立体化学的配置の制御を容易にする。一部の実施形態では、本開示の方法は、式Ｉの構造を独立して有する１つ以上の修飾ヌクレオチド間結合を含有する、一本鎖ＲＮＡｉ剤を提供する。
【１０２５】
一部の実施形態では、本開示の方法は、ユニマーである、一本鎖ＲＮＡｉ剤を提供する。一部の実施形態では、本開示の方法は、立体配置Ｒｐのユニマーである、一本鎖ＲＮＡｉ剤を提供する。一部の実施形態では、本開示の方法は、立体配置Ｓｐのユニマーである、一本鎖ＲＮＡｉ剤を提供する。
【１０２６】
一部の実施形態では、本開示の方法は、キラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤組成物、すなわち、所定のレベルの個々の一本鎖ＲＮＡｉ剤の型を含有する一本鎖ＲＮＡｉ剤組成物を提供する。いくつかの実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、１つの一本鎖ＲＮＡｉ剤の型を含有する。いくつかの実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤は、２つ以上の一本鎖ＲＮＡｉ剤の型を含有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤組成物は、複数のオリゴヌクレオチド及び／または一本鎖ＲＮＡｉ剤の型を含有する。本開示に従って作製されたキラル制御されたオリゴヌクレオチド及び一本鎖ＲＮＡｉ剤組成物の例は、本明細書に記載される。
【１０２７】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、キラルヌクレオチド間結合を含有する（たとえば、立体制御されている）。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、立体制御されたキラルヌクレオチド間結合と、立体制御されていないキラルヌクレオチド間結合を含有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、立体制御されたキラルヌクレオチド間結合と、キラルではないヌクレオチド間結合を含有する。立体制御された（キラル制御された）オリゴヌクレオチドの形式の様々な非限定的な例は、表７１Ａ〜表７１Ｃに示される。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ４の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ５の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ６の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ７の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ８の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ９の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１０の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１１の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１２の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１３の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１４の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１５の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１６の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１７の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１８の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ１９の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２０の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２１の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２２の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２３の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２４の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２５の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２６の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２７の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２８の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ２９の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３０の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３１の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３２の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３３の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３４の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３５の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３６の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３７の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３８の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ３９の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ４０の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ４１の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ４２の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ４３の構造を有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドは、形式Ｓ４４の構造を有する。
【１０２８】
一部の実施形態では、本開示の方法は、結合リンの立体配置に関して、キラル的に純粋な組成物を提供する。すなわち、一部の実施形態では、本開示の方法は、オリゴヌクレオチドが、結合リンの立体配置に関して単一のジアステレオマーの形態で組成物中に存在する、組成物を提供する。
【１０２９】
一部の実施形態では、本開示の方法は、結合リンの立体配置に関して、キラル的に均一な組成物を提供する。すなわち、一部の実施形態では、本開示の方法は、組成物中の全てのヌクレオチド単位が、結合リンの立体配置に関して同じ立体化学を有する組成物、たとえば、全てのヌクレオチド単位が結合リンでＲｐ立体配置であるか、または全てのヌクレオチド単位が結合リンでＳｐ立体配置である、組成物を提供する。
【１０３０】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、少なくとも１つのＳｐを含有する（たとえば、Ｓｐ立体配置のキラル中心を有するホスホロチオエートまたは他のヌクレオチド間結合）。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、少なくとも５つのＳｐを含有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、少なくとも１０のＳｐを含有する。一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、少なくとも１５〜２５のＳｐを含有する。
【１０３１】
本明細書に示されるように、１つ以上のＳｐヌクレオチド間結合または１つ以上のＳｐ  ＰＳ（ホスホロチオエート）の組み込みは、一本鎖ＲＮＡｉ剤に対して以下の２つの機能を果たす：（ａ）ヌクレアーゼに対する安定性を高めること；及び（ｂ）ＲＮＡ干渉活性を妨害しないこと。一本鎖ＲＮＡｉ剤及び二本鎖ＲＮＡｉ剤は多くの面で異なるが、本開示は、報告によれば、多くの化学修飾が二本鎖ＲＮＡｉ剤に対して試みられているが、修飾は、（ａ）ヌクレアーゼに対して分子を安定化させること；及び（ｂ）ＲＮＡ干渉活性を可能にすることの両方をもたらさないことを注記する。多くの化学修飾は、一方の機能を果たすが、他方の機能は果たさない。二本鎖ＲＮＡｉ剤のいくつかの化学修飾は、報告によれば、ヌクレアーゼに対して当該分子を安定化させたが、ＲＮＡｉ活性を妨害または消失させた。二本鎖ＲＮＡｉ剤の他の化学修飾は、報告によれば、ＲＮＡｉ活性を妨害しなかったが、ヌクレアーゼに対する当該分子の安定化はなされなかった。たとえば、Ｃｚａｕｄｅｒｎａ  ｅｔ  ａｌ．２００３  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３１：２７０５−２７１６；Ｈａｄｗｉｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２００５，ｐａｇｅｓ  １９４−２０６，ｉｎ  ＲＮＡ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．Ｋ．Ａｐｐａｓａｎｉ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫ；Ｄｅｌｅａｖｅｙ  ｅｔ  ａｌ．２００９  Ｃｕｒｒ．Ｐｒｏｔ．Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ  Ｃｈｅｍ．１６．３．１−１６．３．２２；Ｔｅｒｒａｚａｓ  ｅｔ  ａｌ．２００９  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３７：３４６−３５３；Ｓｃｈｗａｒｚ  ｅｔ  ａｌ．２００２  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  １０：５３７−５４８；及びＬｉｐａｒｄｉ  ｅｔ  ａｌ．２００１  Ｃｅｌｌ  １０７：２９９−３０７を参照のこと。二本鎖ＲＮＡｉ剤の化学修飾のごく少数が両方の機能を果たす能力を有していた。さらに、Ｍａｔｒａｎｇａ  ｅｔ  ａｌ．２００５  Ｃｅｌｌ  １２３：６０７−６２０は、二本鎖ＲＮＡｉ剤のセンス鎖への単一のＳｐヌクレオチド間結合（たとえば、単一のＳｐ  ＰＳ）の導入により、ＲＩＳＣアセンブリ及びＲＮＡ干渉活性が大幅に減少することを示した。このように、単一のＳｐヌクレオチド間結合（たとえば、単一のＳｐ  ＰＳ）による二本鎖ＲＮＡｉ剤の化学修飾は、（ｂ）ＲＮＡ干渉活性を可能にしなかった。したがって、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤へのＳｐヌクレオチド間結合またはＳｐ  ＰＳの組み込みの効果（複数可）を試験するように努めた。本明細書に示されるデータは、驚くべきことに、Ｓｐヌクレオチド間結合またはＳｐ  ＰＳの組み込みが、一本鎖ＲＮＡｉ剤に対して以下の２つの機能を果たすことを示している：（ａ）ヌクレアーゼに対する安定性を高めること、及び（ｂ）ＲＮＡ干渉活性を妨害しないこと。
【１０３２】
表４５に示されるデータに示されるように、ヌクレアーゼに対する一本鎖ＲＮＡｉ剤の安定性は、５’末端及び／または３’末端の立体不規則的ホスホロチオエートをＳｐ立体配置のホスホロチオエートに変換することによって、増大した。安定性の更なる増大は、本明細書に特定されるヌクレアーゼ切断部位の立体不規則的ホスホロチオエートをＳｐ立体配置のホスホロチオエートに変換することによって、得られた。
【１０３３】
いずれの特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、本開示は、Ｓｐ立体配置のホスホロチオエートまたは他のキラルヌクレオチド間結合の組み込みがヌクレアーゼから一本鎖ＲＮＡｉ剤を保護し得ることを示唆している。表４５は、立体不規則的ＡＰＯＣ３一本鎖ＲＮＡｉ剤ＷＶ−２８１７で特定された様々なヌクレアーゼ切断部位を示す。これらの主な切断部位は、２つのピリミジン間にある（５’−Ｕ’Ｕ−３’、５’−Ｕ’Ｕ−３’または５’−Ｔ’Ｕ−３’、式中「’」は切断部位を示す）。追加の主なヌクレアーゼ切断部位は、立体不規則的一本鎖ＲＮＡｉ剤ＷＶ−３２４２で特定した：５’−Ｕ’Ｕ−３’、５’−Ｃ’Ｕ−３’、及び５’−Ｔ’Ｕ−３’。６つの主なヌクレアーゼ切断部位のうち、５つは２つの隣接するピリミジンの間にあり、１つはピリミジンに隣接していた。表４５に示される実験データは、ヌクレアーゼ切断部位のうちの１つ以上をＳｐヌクレオチド間結合（またはＳｐ立体配置のキラルヌクレオチド間結合、たとえば、Ｓｐ  ＰＳまたはＳｐ立体配置のホスホロチオエート）で置き換えると、一本鎖ＲＮＡｉ剤の安定性が大幅に増大したことを示している。
【１０３４】
複数のＳｐヌクレオチド間結合（たとえば、Ｓｐ  ＰＳ）を含有する一本鎖ＲＮＡｉ剤を試験して、ＳｐによりＲＮＡｉ活性が消失するかどうかについても決定した。本開示は、以前の研究では、多くの立体不規則的オリゴヌクレオチドが、立体制御されたバージョンに変換されると、その酵素活性または生物学的活性を低下または完全に失い得ることを示していることを注記する。多くの先に記載されるオリゴヌクレオチドの場合、Ｓｐヌクレオチド間結合の導入は、活性を低下または消失させ得る。
【１０３５】
表４４は、驚くべきことに、安定性の増大に加えて、複数のヌクレオチド間結合（立体不規則的またはホスホジエステル）をＳｐヌクレオチド間結合（たとえば、Ｓｐ  ＰＳ）で置き換えても、一本鎖ＲＮＡｉ剤のＲＮＡ干渉活性は低下または排除されなかったことを示している。これらの結果もまた、報告によれば、立体不規則的オリゴヌクレオチドへのＳｐ  ＰＳの導入は、多くの例において、生物学的活性を低下させることが知られていることから、驚くべきことである。したがって、１つ以上のＳｐヌクレオチド間結合またはＳｐ  ＰＳの導入は、一本鎖ＲＮＡｉ剤の安定性を増大させることと、ＲＮＡｉ活性を低下または消失させないことの両方をもたらした。
【１０３６】
表６９Ａ〜Ｃはまた、驚くべきことに、安定性の増大に加えて、複数のヌクレオチド間結合（立体不規則的またはホスホジエステル）をＳｐヌクレオチド間結合（たとえば、Ｓｐ  ＰＳ）で置き換えると、安定性が増大し、同時に一本鎖ＲＮＡｉ剤のＲＮＡ干渉活性が低下または排除されなかったことを示している。一部の例では、活性が増大した。これらの結果もまた、報告によれば、立体不規則的オリゴヌクレオチドへのＳｐ  ＰＳの導入は、多くの例において、生物学的活性を低下させることが知られていることから、驚くべきことである。したがって、１つ以上のＳｐヌクレオチド間結合またはＳｐ  ＰＳの導入は、一本鎖ＲＮＡｉ剤の安定性を増大させることと、ＲＮＡｉ活性を低下または消失させないことの両方をもたらした。
【１０３７】
いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉは、１つ以上のＳｐヌクレオチド間結合を含有する。いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉは、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’及び／または３’末端に１つ以上のＳｐヌクレオチド間結合を含有する。いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉは、ヌクレアーゼ切断を受けやすい部位に１つ以上のＳｐヌクレオチド間結合を含有する。
【１０３８】
いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉは、１つ以上のＳｐ  ＰＳを含有する。いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉは、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の５’及び／または３’末端に１つ以上のＳｐ  ＰＳを含有する。いくつかの実施形態または一本鎖ＲＮＡｉ剤では、オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉは、ヌクレアーゼ切断を受けやすい部位に１つ以上のＳｐ  ＰＳを含有する。
【１０３９】
とりわけ、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤の立体選択的（立体不規則的またはラセミではない）調製の課題を認識するものである。とりわけ、本開示は、複数の（たとえば、５個、６個、７個、８個、９個または１０個超）のヌクレオチド間結合を含有する一本鎖ＲＮＡｉ剤、特に複数の（たとえば、５個、６個、７個、８個、９個または１０個超）のキラルヌクレオチド間結合を含有する一本鎖ＲＮＡｉ剤の立体選択的調製のための方法及び試薬を提供する。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の立体不規則的調製物またはラセミ調製物において、少なくとも１つのキラルヌクレオチド間結合は、９０：１０、９５：５、９６：４、９７：３、または９８：２未満のジアステレオ選択性で形成される。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の立体選択的調製物またはキラル制御された調製物に関し、各キラルヌクレオチド間結合は、９０：１０、９５：５、９６：４、９７：３、または９８：２超のジアステレオ選択性で形成される。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の立体選択的調製物またはキラル制御された調製物に関し、各キラルヌクレオチド間結合は、９５：５超のジアステレオ選択性で形成される。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の立体選択的調製物またはキラル制御された調製物に関し、各キラルヌクレオチド間結合は、９６：４超のジアステレオ選択性で形成される。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の立体選択的調製物またはキラル制御された調製物に関し、各キラルヌクレオチド間結合は、９７：３超のジアステレオ選択性で形成される。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の立体選択的調製物またはキラル制御された調製物に関し、各キラルヌクレオチド間結合は、９８：２超のジアステレオ選択性で形成される。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤の立体選択的調製物またはキラル制御された調製物に関し、各キラルヌクレオチド間結合は、９９：１超のジアステレオ選択性で形成される。一部の実施形態では、一本鎖ＲＮＡｉ剤中のキラルヌクレオチド間結合のジアステレオ選択性は、たとえば、本質的に同じ、または同等の条件下での二量体形成などのモデル反応を介して測定することができ、この場合において当該二量体は、キラルヌクレオチド間結合と同じヌクレオチド間結合を有し、当該二量体の５’−ヌクレオシドは、キラルヌクレオチド間結合の５’−末端の方向のヌクレオシドと同じであり、及び当該二量体の３’−ヌクレオシドは、キラルヌクレオチド間結合の３’−末端の方向のヌクレオシドと同じである。
【１０４０】
一部の実施形態では、ＡＰＯＣ３オリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤は、複数のオリゴヌクレオチドまたは一本鎖ＲＮＡｉ剤の型を含有するように設計された組成物である。一部の実施形態では、本開示の方法は、キラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤のライブラリの生成を可能にするものであり、これにより、予め選択された量の任意の１つ以上のキラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤の型を、任意の１つ以上の他のキラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤の型と混合して、キラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤組成物を生成することができる。一部の実施形態では、予め選択された量の一本鎖ＲＮＡｉ剤の型は、上記のジアステレオマー純度のいずれか１つを有する組成物である。
【１０４１】
一部の実施形態では、本開示は、キラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤を作製するための方法を提供し、当該方法は、以下のステップを含有する：
（１）カップリング、
（２）キャッピング、
（３）修飾化、
（４）脱ブロッキング、及び
（５）所望の長さが達成されるまでステップ（１）〜（４）の繰り返し。
【１０４２】
提供される方法について記載される場合、「サイクル」という語は、当業者に理解される通常の意味を有する。一部の実施形態では、ステップ（１）〜（４）の一巡がサイクルと称される。
【１０４３】
一部の実施形態では、本開示は、キラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤組成物を作製するための方法を提供し、当該方法は、以下のステップを含有する：
（ａ）ある量の第１のキラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤を提供するステップ；及び
（ｂ）ある量の１つ以上の追加のキラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤を任意で提供するステップ。
【１０４４】
一部の実施形態では、第１のキラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤は、本明細書に記載されるような一本鎖ＲＮＡｉ剤の型である。一部の実施形態では、１つ以上の追加のキラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤は、本明細書に記載されるような１つ以上の一本鎖ＲＮＡｉ剤の型である。
【１０４５】
関連する化学及び合成技術分野の当業者は、本開示の方法を使用して合成した場合、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の構造的変形及び立体化学的配置に対する多様性の度合い及び制御を認識するであろう。たとえば、最初のサイクルが完了した後、後続サイクルについて個々に選択されたヌクレオチド単位を使用して後続サイクルを実施することができ、一部の実施形態では、後続サイクルは、最初のサイクルの核酸塩基及び／または糖とは異なる核酸塩基及び／または糖を含有する。同様に、後続サイクルのカップリングステップで使用されるキラル補助基は、最初のサイクルで使用されるキラル補助基と異なってもよく、これにより、第２のサイクルは、異なる立体化学的配置のリン結合を生成する。一部の実施形態では、新たに形成されたヌクレオチド間結合中の結合リンの立体化学は、立体化学的に純粋なホスホラミダイトを使用して制御される。さらに、後続サイクルの修飾化ステップで使用される修飾試薬は、最初のサイクルまたは前のサイクルで使用される修飾試薬と異なってもよい。この反復的な組み立てアプローチの累積的な効果により、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の各構成要素を構造的及び立体配置的に高度に調整することができる。このアプローチの更なる利点は、キャッピングのステップが「ｎ−１」不純物の形成を最小に抑えることであり、さもなければ、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤、特に長さのより長い一本鎖ＲＮＡｉ剤の単離が極めて困難になるであろう。
【１０４６】
一部の実施形態では、キラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤を作製するための方法のサイクルの例は、本開示に記載されるスキーム例に例示される。一部の実施形態では、キラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤を作製するための方法のサイクルの例は、スキームＩに例示される。一部の実施形態では、
【化１６０】
2020522265.tif 000331
は、固形支持体を表し、場合により、固形支持体に結合している成長するキラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤の一部である。例示されるキラル補助基は、式３−Ｉの構造：
【化１６１】
2020522265.tif 000332
式３−Ｉ
を有し、詳細は、以下に記載される。「キャップ」は、キャッピングステップによって窒素原子に導入される任意の化学的部分であり、一部の実施形態では、アミノ保護基である。当業者は、最初のサイクルでは、開始時に固形支持体に結合しているヌクレオシドは１つのみであり得、サイクル終了は、任意で脱ブロッキングの前に実施することができることを理解する。当業者によって理解されるように、ＢＰＲＯは、一本鎖ＲＮＡｉ剤合成で使用される保護塩基である。スキームＩの上記サイクルの各ステップは、以下にさらに記載される。
スキームＩ．キラル制御された一本鎖ＲＮＡｉ剤の合成。
【化１６２】
2020522265.tif 000333
【１０４７】
固形支持体上での合成
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤の合成は、固相上で実施される。一部の実施形態では、固形支持体上に存在する反応性基は、保護される。一部の実施形態では、固形支持体上に存在する反応性基は、保護されていない。一本鎖ＲＮＡｉ剤の合成中、固形支持体は、数回の合成サイクルで様々な試薬により処理され、個々のヌクレオチド単位を用いて、成長する一本鎖ＲＮＡｉ剤鎖の段階的な伸長が達成される。固形支持体に直接結合している鎖の末端のヌクレオシド単位は、本明細書で使用される場合、「第１のヌクレオシド」と呼ばれる。第１のヌクレオシドは、ＣＰＧ、ポリマーまたは他の固形支持体のいずれかとヌクレオシドとの間に共有結合を有するリンカー部分、すなわち、ジラジカルを介して、固形支持体に結合している。リンカーは、オリゴヌクレオチド鎖を組み立てるために実施される合成サイクル中、そのままの状態で保持され、鎖の組み立て後に切断されて支持体からオリゴヌクレオチドを遊離させる。
【１０４８】
固相核酸合成のための固形支持体としては、たとえば、米国特許第４，６５９，７７４号、同第５，１４１，８１３号、同第４，４５８，０６６号；Ｃａｒｕｔｈｅｒｓの米国特許第４，４１５，７３２号、同第４，４５８，０６６号、同第４，５００，７０７号、同第４，６６８，７７７号、同第４，９７３，６７９号、及び同第５，１３２，４１８号；Ａｎｄｒｕｓらの米国特許第５，０４７，５２４号、同第５，２６２，５３０号；ならびにＫｏｓｔｅｒの米国特許第４，７２５，６７７号（ＲＥ３４，０６９として再発行）に記載されている支持体が挙げられる。一部の実施形態では、固相は、有機ポリマー支持体である。一部の実施形態では、固相は、無機ポリマー支持体である。一部の実施形態では、有機ポリマー支持体は、ポリスチレン、アミノメチルポリスチレン、ポリエチレングリコール−ポリスチレングラフト共重合体、ポリアクリルアミド、ポリメタクリレート、ポリビニルアルコール、高度に架橋したポリマー（ＨＣＰ）、または他の合成ポリマー、セルロース及びデンプンなどの炭水化物もしくは他の高分子炭水化物、または他の有機ポリマー及び任意の共重合体、上記の無機材料もしくは有機材料の複合材料もしくは組み合わせである。一部の実施形態では、無機ポリマー支持体は、シリカ、アルミナ、シリカゲル支持体またはアミノプロピルＣＰＧである制御ポリグラス（ＣＰＧ）である。他の有用な固形支持体としては、フルオラス固形支持体（たとえば、ＷＯ／２００５／０７０８５９を参照のこと）、長鎖アルキルアミン（ＬＣＡＡ）制御多孔質ガラス（ＣＰＧ）固形支持体（たとえば、Ｓ．Ｐ．Ａｄａｍｓ，Ｋ．Ｓ．Ｋａｖｋａ，Ｅ．Ｊ．Ｗｙｋｅｓ，Ｓ．Ｂ．Ｈｏｌｄｅｒ  ａｎｄ  Ｇ．Ｒ．Ｇａｌｌｕｐｐｉ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９８３，１０５，６６１−６６３；Ｇ．Ｒ．Ｇｏｕｇｈ，Ｍ．Ｊ．Ｂｒｕｄｅｎ  ａｎｄ  Ｐ．Ｔ．Ｇｉｌｈａｍ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９８１，２２，４１７７−４１８０を参照のこと）が挙げられる。膜支持体及び高分子膜（たとえば、Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｎｄ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ，ｃｈ  ２１  ｐｐ  １５７−１６２，１９９４，Ｅｄ．Ｒｏｇｅｒ  Ｅｐｔｏｎ及び米国特許第４，９２３，９０１号を参照のこと）もまた、核酸の合成に有用である。膜は、一旦形成したら、核酸合成の使用のために、化学的に官能化することができる。膜への官能基の結合に加えて、いくつかの実施形態では、膜と合成鎖との間の立体障害を最小に抑えるために、膜に結合されるリンカーまたはスペーサー基の使用も用いられる。
【１０４９】
他の好適な固形支持体としては、当分野において一般に公知であり、固相方法での使用に好適なものが挙げられ、たとえば、Ｐｒｉｍｅｒ（商標）２００支持体として販売されているガラスである制御多孔質ガラス（ＣＰＧ）、オキサリル制御多孔質ガラス（たとえば、Ａｌｕｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９１，１９，１５２７を参照のこと）、ＴｅｎｔａＧｅｌ支持体−アミノポリエチレングリコール誘導支持体（たとえば、Ｗｒｉｇｈｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９９３，３４，３３７３を参照のこと）、及びＰｏｒｏｓ−ポリスチレン／ジビニルベンゼンの共重合体が挙げられる。
【１０５０】
表面活性化されたポリマーは、いくつかの固形支持体媒体上における天然核酸及び修飾核酸ならびにタンパク質の合成での使用が実証されている。固体支持体の材料は、どのようなポリマーであってもよく、多孔度が均一で、十分なアミン含有量、及び十分な柔軟性を有して、統合性を失うことなく、付随するどのような操作にも耐えうるものが好ましい。選択される好適な材料の例としては、ナイロン、ポリプロピレン、ポリエステル、ポリテトラフルオロエチレン、ポリスチレン、ポリカーボネート、及びニトロセルロースが挙げられる。研究者の設計に応じて、他の材料を固形支持体として使用することができる。いくつかの設計を考慮すると、たとえば、コーティング金属、特に金または白金が選択され得る（たとえば、米国特許出願公開第２００１００５５７６１号を参照のこと）。一本鎖ＲＮＡｉ剤合成の一実施形態では、たとえば、ヌクレオシドは、ヒドロキシルまたはアミノ残基で官能化された固形支持体に固定化される。あるいは、固形支持体は、トリメトキシトリチル基（ＴＭＴ）などの酸に不安定なトリアルコキシトリチル基を提供するように誘導体化される。理論によって拘束されることを望むものではないが、トリアルコキシトリチル保護基の存在は、ＤＮＡ合成装置で一般的に使用される条件下で、初期の脱トリチル化を可能にすることが予想される。アンモニア水溶液中の一本鎖ＲＮＡｉ剤材料を早く切り離すには、ジグリコートリンカーが任意で支持体上に導入される。
【１０５１】
一部の実施形態では、提供される一本鎖ＲＮＡｉ剤は、別の方法として、５’→３’方向に合成される。一部の実施形態では、核酸は、成長する核酸の５’末端を介して固形支持体に結合されることにより、反応にはその３’基を提示する（すなわち、５’−ヌクレオシドのホスホラミダイトの使用または酵素反応（たとえば、ヌクレオシドの５’−三リン酸を使用したライゲーション及び重合））。５’→３’合成を考慮する場合、本開示の反復ステップは、変わらない（すなわち、キャッピング及びキラルリン上の修飾）。
【１０５２】
結合部分
結合部分またはリンカーは、遊離求核部分を含有する化合物に固形支持体を繋げるために任意で使用される。好適なリンカーは、例えば、固相合成技術において固体支持体を初期ヌクレオシド分子の官能基（例えば、ヒドロキシル基）に結合させるように機能する短分子が知られている。一部の実施形態では、結合部分は、スクシンアミド酸リンカー、またはコハク酸リンカー（−ＣＯ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯ−）、またはオキサリルリンカー（−ＣＯ−ＣＯ−）である。一部の実施形態では、結合部分及びヌクレオシドは、エステル結合を介して一緒に結合される。一部の実施形態では、結合部分及びヌクレオシドは、アミド結合を介して一緒に結合される。一部の実施形態では、結合部分は、ヌクレオシドを別のヌクレオチドまたは核酸に繋げる。好適なリンカーは、たとえば、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  Ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｅｋｓｔｅｉｎ，Ｆ．Ｅｄ．，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．，１９９１，Ｃｈａｐｔｅｒ  １及びＳｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｓｕｐｐｏｒｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｐｏｎ，Ｒ．Ｔ．，Ｃｕｒｒ．Ｐｒｏｔ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｃｈｅｍ．，２０００，３．１．１−３．１．２８に記載されている。
【１０５３】
リンカー部分は、遊離求核部分を含有する化合物を別のヌクレオシド、ヌクレオチド、または核酸に繋げるために使用される。一部の実施形態では、結合部分は、ホスホジエステル結合である。一部の実施形態では、結合部分は、Ｈ−ホスホネ−ト部分である。一部の実施形態では、結合部分は、本明細書に記載されるような修飾リン結合である。一部の実施形態では、オリゴヌクレオチドを固形支持体に結合するために、ユニバーサルリンカー（ＵｎｙＬｉｎｋｅｒ）が使用される（Ｒａｖｉｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇ．Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．，２００８，１２（３），３９９−４１０）。一部の実施形態では、他のユニバーサルリンカーが使用される（Ｐｏｎ，Ｒ．Ｔ．，Ｃｕｒｒ．Ｐｒｏｔ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｃｈｅｍ．，２０００，３．１．１−３．１．２８）。一部の実施形態では、様々な直交するリンカー（ジスルフィドリンカーなど）が使用される（Ｐｏｎ，Ｒ．Ｔ．，Ｃｕｒｒ．Ｐｒｏｔ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｃｈｅｍ．，２０００，３．１．１−３．１．２８）。
【１０５４】
とりわけ、本開示は、一本鎖ＲＮＡｉ剤合成で採用される一連の反応条件に適合するようにリンカーを選択または設計することができることを認識する。一部の実施形態では、補助基は、一本鎖ＲＮＡｉ剤の分解を回避し、脱硫化を回避するために、脱保護の前に選択的に除去される。一部の実施形態では、ＤＰＳＥ基は、Ｆ−イオンによって選択的に除去され得る。一部の実施形態では、本開示は、ＤＰＳＥ脱保護条件下、たとえば、ＭｅＣＮ中０．１Ｍ  ＴＢＡＦ、ＴＨＦまたはＭｅＣＮ中０．５Ｍ  ＨＦ−Ｅｔ３Ｎなどで安定なリンカーを提供する。一部の実施形態では、提供されるリンカーは、ＳＰリンカーである。一部の実施形態では、本開示は、ＳＰリンカーが、ＤＰＳＥ脱保護条件下、たとえば、ＭｅＣＮ中０．１Ｍ  ＴＢＡＦ、ＴＨＦまたはＭｅＣＮ中０．５Ｍ  ＨＦ−Ｅｔ３Ｎなどで安定しており、さらに、たとえば、無水塩基性条件下、たとえば、ＭｅＣＮ中ｏｍ１Ｍ  ＤＢＵで安定であることを示している。
【化１６３】
2020522265.tif 000334
【１０５５】
一部の実施形態では、リンカーの例は、以下のものである：
【化１６４】
2020522265.tif 000335
一部の実施形態では、スクシニルリンカー、Ｑリンカーまたはオキサリルリンカーは、Ｆ−を使用した１つ以上のＤＰＳＥ脱保護条件に対して安定ではない。
【１０５６】
一般的な条件−合成用溶媒
提供されるオリゴヌクレオチドの合成は、一般に、非プロトン性有機溶媒中で実施される。一部の実施形態では、溶媒は、たとえば、アセトニトリルなどのニトリル溶媒である。一部の実施形態では、溶媒は、たとえば、ピリジンなどの塩基性アミン溶媒である。一部の実施形態では、溶媒は、たとえば、テトラヒドロフランなどのエーテル溶媒である。一部の実施形態では、溶媒は、たとえば、ジクロロメタンなどのハロゲン化炭化水素である。一部の実施形態では、溶媒の混合物が使用される。ある特定の実施形態では、溶媒は、上記の種類の溶媒のいずれか１つ以上の混合物である。
【１０５７】
一部の実施形態では、非プロトン性有機溶媒が塩基性でない場合、塩基は、反応ステップに存在する。塩基が存在するいくつかの実施形態では、塩基は、たとえば、ピリジン、キノリン、またはＮ，Ｎ−ジメチルアニリンなどのアミン塩基である。他のアミン塩基の例としては、ピロリジン、ピペリジン、Ｎ−メチルピロリジン、ピリジン、キノリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、またはＮ，Ｎ−ジメチルアニリンが挙げられる。
【１０５８】
一部の実施形態では、塩基は、アミン塩基以外である。
【１０５９】
一部の実施形態では、非プロトン性有機溶媒は、無水である。一部の実施形態では、無水の非プロトン性有機溶媒は、新たに蒸留される。一部の実施形態では、新たに蒸留される無水の非プロトン性有機溶媒は、たとえば、ピリジンなどの塩基性アミン溶媒である。一部の実施形態では、新たに蒸留される無水の非プロトン性有機溶媒は、たとえば、テトラヒドロフランなどのエーテル溶媒である。一部の実施形態では、新たに蒸留される無水の非プロトン性有機溶媒は、たとえば、アセトニトリルなどのニトリル溶媒である。
【１０６０】
キラル試薬／キラル補助基
一部の実施形態では、キラル制御されたオリゴヌクレオチドの生成において立体選択性を与えるために、キラル試薬が使用される。当業者及び本明細書ではキラル補助基とも称される多くの異なるキラル試薬が本開示の方法に従って使用され得る。そのようなキラル試薬の例としては、本明細書ならびに上で引用されたＷａｄａ  Ｉ、ＩＩ及びＩＩＩに記載されている。本開示の一部の実施形態では、キラル試薬は、以下の式のうちの１つの化合物である：
【化１６５】
2020522265.tif 000336
【１０６１】
本明細書で実証されるように、キラルヌクレオチド間結合を調製するために使用される場合、立体選択性を得るために、概ね立体化学的に純粋なキラル試薬が利用される。
【１０６２】
追加のキラル補助基及びその使用は、たとえば、Ｗａｄａ  Ｉ（ＪＰ４３４８０７７；ＷＯ２００５／０１４６０９；ＷＯ２００５／０９２９０９）、Ｗａｄａ  ＩＩ（ＷＯ２０１０／０６４１４６）、Ｗａｄａ  ＩＩＩ（ＷＯ２０１２／０３９４４８）、キラル制御（ＷＯ２０１０／０６４１４６）などに見出すことができる。
【１０６３】
活性化
アキラルなＨ−ホスホネ−ト部分は、第１の活性化試薬で処理されて、第１の中間体を形成する。一実施形態において、第１の活性化試薬は、縮合ステップ中に、反応混合物に添加される。第１の活性化試薬の使用は、反応に使用される溶媒などの反応条件による。第１の活性化試薬の例としては、ホスゲン、クロロギ酸トリクロロメチル、ビス（トリクロロメチル）カーボネート（ＢＴＣ）、塩化オキサリル、Ｐｈ３ＰＣｌ２、（ＰｈＯ）３ＰＣｌ２、Ｎ，Ｎ’−ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（ＢｏｐＣｌ）、１，３−ジメチル−２−（３−ニトロ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）−２−ピロリジン−１−イル−１，３，２−ジアザホスホリジニウムヘキサフルオロホスフェート（ＭＮＴＰ）、または３−ニトロ−１，２，４−トリアゾール−１−イル−トリス（ピロリジン−１−イル）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＮＴＰ）がある。
【１０６４】
アキラルなＨ−ホスホネ−ト部分の例は、上のスキームに示される化合物である。ＤＢＵは、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンを表す。Ｈ＋ＤＢＵは、たとえば、第１級、第２級、第３級または第４級である、アンモニウムイオン、アルキルアンモニウムイオン、複素環式芳香族イミニウムイオン、または複素環式イミニウムイオンであってもよいし、一価の金属イオンであってもよい。
【１０６５】
キラル試薬との反応
第１の活性化ステップの後、活性化されたアキラルなＨ−ホスホネ−ト部分は、キラル試薬と反応する。
【１０６６】
立体特異的な縮合ステップ
キラル中間体は、第２の活性化試薬及びヌクレオシドで処理されて、縮合中間体を形成する。ヌクレオシドは、固形支持体上にあってもよい。第２の活性化試薬の例は、４，５−ジシアノイミダゾール（ＤＣＩ）、４，５−ジクロロイミダゾール、１−フェニルイミダゾリウムトリフレート（ＰｈＩＭＴ）、ベンジミダゾリウムトリフレート（ＢＩＴ）、ベンゾトリアゾール、３−ニトロ−１，２，４−トリアゾール（ＮＴ）、テトラゾール、５−エチルチオテトラゾール（ＥＴＴ）、５−ベンジルチオテトラゾール（ＢＴＴ）、５−（４−ニトロフェニル）テトラゾール、Ｎ−シアノメチルピロリジニウムトリフレート（ＣＭＰＴ）、Ｎ−シアノメチルピペリジニウムトリフレート、Ｎ−シアノメチルジメチルアンモニウムトリフレートである。式Ｚ−Ｖａ（（Ｚ−Ｖｂ）、（Ｚ−Ｖａ’）、または（Ｚ−Ｖｂ’））のキラル中間体は、単量体として単離され得る。通常、Ｚ−Ｖａ（（Ｚ−Ｖｂ）、（Ｚ−Ｖａ’）、または（Ｚ−Ｖｂ’））のキラル中間体は、単離せず、同じポット内で、ヌクレオシドまたは修飾ヌクレオシドとの反応を受けて、縮合中間体であるキラル亜リン酸化合物をもたらす。他の実施形態において、方法が固相合成を介して実施される場合、化合物を含有する固形支持体は、濾過されて、副生成物、不純物、及び／または試薬を取り除く。
【１０６７】
キャッピングステップ
最終的な核酸が二量体よりも大きい場合、未反応の−ＯＨ部分をブロッキング基でキャッピングし、また化合物中のキラル補助基もブロッキング基でキャッピングして、キャッピングされた縮合中間体を形成する。最終的な核酸が二量体である場合、キャッピングステップは、必要ない。
【１０６８】
修飾化ステップ
化合物は、求電子試薬との反応によって修飾される。キャッピングされた縮合中間体は、修飾化ステップが実行され得る。一部の実施形態では、修飾化ステップは、硫黄求電子試薬、セレン求電子試薬またはホウ素化剤を使用して実施される。修飾化ステップの例は、酸化及び硫化のステップである。
【１０６９】
方法のいくつかの実施形態では、硫黄求電子試薬は、以下の式のうちの１つを有する化合物である：
Ｓ８（式Ｚ−Ｂ）、Ｚｚ１−Ｓ−Ｓ−Ｚｚ２、またはＺｚ１−Ｓ−Ｖｚ−Ｚｚ２；
式中、Ｚｚ１及びＺｚ２は独立して、アルキル、アミノアルキル、シクロアルキル、複素環式、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アシル、アミド、イミド、またはチオカルボニルであるか、またはＺｚ１及びＺｚ２は、一緒になって、置換または非置換であり得る、３〜８員の脂環式環または複素環式環を形成し；Ｖｚは、ＳＯ２、Ｏ、またはＮＲｆであり；Ｒｆは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはアリールである。
【１０７０】
追加の硫黄求電子試薬は、当分野で公知である。
【１０７１】
一部の実施形態では、キラル補助基は、修飾化ステップの後、成長するオリゴヌクレオチド鎖から脱落する。一部の実施形態では、キラル補助基は、修飾化ステップの後、ヌクレオチド間リン原子に繋がれたままである。
【１０７２】
方法のいくつかの実施形態では、修飾化ステップは、酸化ステップである。方法のいくつかの実施形態では、修飾化ステップは、本出願に上記される同様の条件を使用する酸化ステップである。一部の実施形態では、酸化ステップは、たとえば、ＪＰ２０１０−２６５３０４Ａ及びＷＯ２０１０／０６４１４６に開示されている。
【１０７３】
鎖伸長サイクル及び脱保護ステップ
キャッピングされた縮合中間体は、成長する核酸鎖の５’末端にあるブロッキング基を除去するために脱ブロッキングされて、化合物をもたらす。化合物は、任意で、鎖伸長サイクルを再開して、縮合中間体、キャッピングされた縮合中間体、修飾されキャッピングされた縮合中間体、及び５’−脱保護され修飾されキャッピングされた中間体を形成することができる。鎖伸長サイクルを少なくとも１巡した後、５’−脱保護され修飾されキャッピングされた中間体は、キラル補助基リガンド及び他の保護基、たとえば、核酸塩基、修飾核酸塩基、糖及び修飾糖の保護基の除去によってさらに脱ブロッキングされて、核酸をもたらす。他の実施形態において、５’−ＯＨ部分を含有するヌクレオシドは、本明細書に記載されるような前の鎖伸長サイクルからの中間体である。さらに他の実施形態において、５’−ＯＨ部分を含有するヌクレオシドは、別の公知の核酸合成方法から得られた中間体である。固形支持体が使用される実施形態では、次いで、リン原子修飾核酸が固形支持体から切断される。ある特定の実施形態では、核酸は、精製を目的として、固形支持体上に結合させたままとし、次いで、精製後に固形支持体から切断される。
【１０７４】
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