(57)【要約】  本発明は、ＲＯＣＫ１及び／またはＲＯＣＫ２の阻害剤に関する。疾患を処置するために有用な、ＲＯＣＫ１及び／またはＲＯＣＫ２を阻害する方法も提供する。【選択図】図１Ａ
2020527585.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉを有する化合物：
【化１】
2020527585.tif 000098
［式中、
Ａは、
【化２】
2020527585.tif 000099
からなる群から選択され、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
Ｒ2は、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、及びヘテロシクリルからなる群から選択され、これらはそれぞれ、非置換であっても、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＯ2Ｃ−、アリール−Ｏ−及びヘテロアリール−Ｏ−からなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく、
別法では、Ｒ1及びＲ2は一緒になって、単環式基または二環式基を形成しており、その際、前記単環式基は、最高２個の環ヘテロ原子を含む４〜７個の環原子を有し、前記二環式基は、最高３個の環ヘテロ原子を含む８〜１０個の環原子を有し、前記単環式基及び二環式基は、非置換であるか、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、アリール及びヘテロアリールからなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
Ｒ5は、Ｈ、低級アルキル及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから選択され、
別法では、Ｒ3及びＲ5は一緒になって、２〜３個の環ヘテロ原子を含む５〜７個の環原子を有する環式基を形成しており、その際、前記環式基は、非置換であるか、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、アリール及びヘテロアリールからなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ａは、０または１であり、
ｂは、０〜２であり、
かつ
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成している］。
【請求項２】
式ＩＩを有する、請求項１に記載の化合物：
【化３】
2020527585.tif 000100
［式中、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
Ｒ2は、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、及びヘテロシクリルからなる群から選択され、これらはそれぞれ、非置換であっても、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＯ2Ｃ−、アリール−Ｏ−及びヘテロアリール−Ｏ−からなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく、
別法では、Ｒ1及びＲ2は一緒になって、単環式基または二環式基を形成しており、その際、前記単環式基は、最高２個の環ヘテロ原子を含む４〜７個の環原子を有し、前記二環式基は、最高３個の環ヘテロ原子を含む８〜１０個の環原子を有し、前記単環式基及び二環式基は、非置換であるか、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、アリール及びヘテロアリールからなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
かつ
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成している］。
【請求項３】
式ＩＩＩを有する、請求項１に記載の化合物：
【化４】
2020527585.tif 000101
［式中、
環Ａは、任意選択で０〜２個の環ヘテロ原子を含有する５員または６員の芳香環であり、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
Ｒ6は、Ｈ、ハロ、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ヒドロキシル、及びカルボキシルからなる群から選択され、
Ｒ7は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、及びＲＣＯＮＲ’−からなる群から選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成しており、かつ
ｍは、１または２である］。
【請求項４】
式ＩＶを有する、請求項１に記載の化合物：
【化５】
2020527585.tif 000102
［式中、
環Ｂは、任意選択で０〜２個の環ヘテロ原子を含有する５員または６員の芳香環であり、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
Ｒ8は、Ｈ、ハロ、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ヒドロキシル及びカルボキシルからなる群から選択され、
Ｒ9は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ及びカルボキシル、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、及びＲＣＯＮＲ’−からなる群から選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成しており、かつ
ｍは、１〜３である］。
【請求項５】
式Ｖを有する、請求項１に記載の化合物：
【化６】
2020527585.tif 000103
［式中、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
各Ｒ21は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＯ2Ｃ−、アリール−Ｏ−及びヘテロアリール−Ｏ−からなる群から独立に選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成しており、かつ
ｎは、０〜３である］。
【請求項６】
式ＶＩを有する、請求項１に記載の化合物：
【化７】
2020527585.tif 000104
［式中、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
各Ｒ22は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＯ2Ｃ−、アリール−Ｏ−及びヘテロアリール−Ｏ−から独立に選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成している］。
【請求項７】
式ＶＩＩを有する、請求項１に記載の化合物：
【化８】
2020527585.tif 000105
［式中、
環Ａは、任意選択で０〜２個の環ヘテロ原子を含有する５員または６員の芳香環であり、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
Ｒ6は、Ｈ、ハロ、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ヒドロキシル、及びカルボキシルからなる群から選択され、
Ｒ7は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、及びＲＣＯＮＲ’−からなる群から選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成しており、かつ
ｍは、１または２である］。
【請求項８】
式Ｘを有する、請求項１に記載の化合物：
【化９】
2020527585.tif 000106
［式中、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
各Ｒ22は、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、及びＣ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシからなる群から独立に選択され、かつ
ｎは、０〜３である］。
【請求項９】
対象において線維化障害を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む前記方法。
【請求項１０】
前記線維化障害が、嚢胞性及び特発性肺線維症を含む肺線維症、放射線誘導肺損傷、硬変を含む肝臓線維症、動脈線維症を含む心臓線維症、心内膜心筋線維症、陳旧性心筋梗塞、動脈スティフネス、アテローム硬化症、再狭窄、関節線維化、クローン病、骨髄線維症、ペーロニー病、腎性全身性線維症、進行性塊状線維症、後腹膜線維症、強皮症／全身性硬化症、縦隔線維症、ケロイド及び肥厚性瘢痕、グリア性瘢痕、または腎線維症からなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
対象において中枢神経系障害を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む前記方法。
【請求項１２】
前記中枢神経系障害が、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、バッテン病、認知症、脊髄性筋萎縮症、運動ニューロン疾患、脊髄小脳失調、急性もしくは慢性疼痛、認知症、神経変性、脊髄損傷、脳血管痙攣または多発性硬化症からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
対象において緑内障を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む前記方法。
【請求項１４】
対象において炎症を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＲＯＣＫ１及び／またはＲＯＣＫ２の阻害剤に関する。疾患を処置するために有用な、ＲＯＣＫ１及び／またはＲＯＣＫ２を阻害する方法も提供する。
【背景技術】
【０００２】
Ｒｈｏ関連コイルドコイル含有プロテインキナーゼ（ＲＯＣＫ）は、セリン／トレオニンキナーゼファミリーのメンバーである。２種のアイソフォーム、ＲＯＣＫ１及びＲＯＣＫ２が同定されている。アイソフォームは両方とも、Ｒｈｏ  ＧＴＰアーゼのＧＴＰ結合型によって活性化され、活性化されると、様々な下流基質をリン酸化する。ＲＯＣＫは、平滑筋細胞収縮、細胞増殖、接着及び遊走を含む多数の細胞プロセスにおいて重要な役割を果たす。したがって、ＲＯＣＫ阻害剤は、例えば、喘息、がん、勃起機能不全、緑内障、インスリン抵抗性、腎不全、肺高血圧、神経変性、及び骨粗鬆症を含む広範囲の様々な病的状態において潜在的な治療適用可能性を有する。
【０００３】
ＲＯＣＫは、細胞骨格動態及び細胞運動性の重要な細胞内調節因子である。Ｒｈｏキナーゼはリン酸化を介して、例えば、ミオシン軽鎖、ミオシン軽鎖ホスファターゼ結合サブユニット及びＬＩＭキナーゼ２を含む、ＲｈｏＡのいくつかの下流標的を調節する。これらの基質は、アクチンフィラメントの組織化及び収縮性を調節する。平滑筋細胞では、ＲＯＣＫは、カルシウム増感及び平滑筋収縮を媒介する。ＲＯＣＫの阻害によって、５−ＨＴ及びフェニレフリンアゴニスト誘導性筋肉収縮が遮断される。非平滑筋細胞に導入されると、ＲＯＣＫはストレスファイバーの形成を誘導し、ＲｈｏＡによって媒介される細胞形質転換に必要とされる。ＲＯＣＫは、限定されないが、細胞接着、細胞運動性及び遊走、成長制御、細胞収縮、及び細胞質分裂を含む様々な細胞プロセスに関係している。ＲＯＣＫは、Ｎａ／Ｈ交換輸送系活性化、ストレスファイバー形成、アデュシン活性化、及び生理的プロセス、例えば、血管狭窄、気管支平滑筋収縮、血管平滑筋及び内皮細胞増殖、血小板凝集などにも関与している。
【０００４】
動物モデルにおけるＲＯＣＫ活性の阻害は、ヒト疾患を処置するためにＲｈｏキナーゼを阻害することのいくつかの利点を示している。これらには、心臓血管疾患、例えば、高血圧、アテローム硬化症、再狭窄、心臓肥大、高眼圧、脳虚血、脳血管痙攣、陰茎勃起機能不全、中枢神経系障害、例えば、神経変性及び脊髄損傷、ならびに新形成のモデルが含まれる。ＲＯＣＫ活性の阻害は、腫瘍細胞の増殖及び転移、血管新生、動脈血栓性障害、例えば、血小板凝集及び白血球凝集、喘息、眼内圧の調節、及び骨吸収を阻害することが示されている。患者においてＲＯＣＫ活性を阻害することは、クモ膜下出血後の脳血管痙攣及び虚血の制御、眼内圧の低下、小柱網組織の弛緩による眼房水流出の増大、視神経への血流の改善、ならびに健康なガングリオン細胞の保護について利点を有する。
【０００５】
ＣＮＳにおけるＲＯＣＫの活性に焦点を当てている、かなりの量のインビボデータが作成されている。ＲＯＣＫ経路の異常な活性化が中枢神経系の多くの障害において記録されている。例えば、軸索成長及びシナプス可塑性は、アクチン細胞骨格の構造調節に左右される。Ｒｈｏ−ＲＯＣＫカスケードは、シナプス可塑性において、樹状突起の形態形成及び安定性の両方において、さらには成長円錐の運動性及び崩壊において中心的な役割を有する。加えて、複数の軸索成長阻害分子がニューロンのＲｈｏＡ／ＲＯＣＫに集中するので、これは、ＣＮＳ障害に介入するための魅力的な経路となっている。
【０００６】
Ｎｏｇｏ受容体（ＮｇＲ）（ＬＩＮＧＯ−１を含む他の複合体メンバーも）及びそれらのリガンドはおそらく、最も良好に特徴づけられていて、かつ効力のある神経突起伸長の阻害剤である。ミエリン関連阻害剤による受容体活性化の下流における最初期の事象のいくつかは、ＲｈｏＡ及びＲＯＣＫの上方制御である。これらの事象は、収縮性の上昇をもたらし、成熟ニューロンにおける軸索成長に対して強い阻害作用を有する。したがって、このシグナルカスケードを阻害することができることで、脊髄及び視神経の損傷において非常に有望な治療戦略が得られる。ハンチントン病及びアルツハイマー（ＡＤ）病などの神経変性状態も、ＮｇＲシグナル伝達の阻害に応答するとして調査されている。ＮｇＲファミリーメンバーがＡＰＰプロセシングと関連するだけではなく、ＮｇＲ及びＮｏｇｏの細胞内局在もＡＤ脳では変化する。
【０００７】
高齢者の認知症の最も一般的な原因であるアルツハイマー病（ＡＤ）は進行性神経変性障害であり、これは、記憶障害を含む多くの認知機能の漸進的低下と関与する（Ｓｅｌｋｏｅ，２００１）。ＡＤ病態では、シナプスの喪失が一般的に観察され、ＡＤにおけるシナプス機能不全の顕著な特徴である（Ｔａｎｚｉ  ａｎｄ  Ｂｅｒｔｒａｍ，２００５）。オリゴマー化β−アミロイドペプチドが、シナプス可塑性の喪失及び神経回路網機能不全に関係しているとされている。シナプス可塑性は、樹状突起スパインにおけるアクチン細胞骨格の構造調節に左右される。Ｒｈｏ−ＲＯＣＫカスケードは、シナプス可塑性において、樹状突起の形態形成及び安定性の両方において、さらには成長円錐の運動性及び崩壊において中心的な役割を有する（Ｇｏｖｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００５；Ｌｉｎｓｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｌｏｕｃｋｓ，２００８）。いくつかの研究が、ＲＯＣＫキナーゼが毒性β−アミロイドペプチドの生成を誘導し得ること、さらに、ＲＯＣＫの阻害で毒性ペプチドプロセシングを阻害することができることを実証している。フィードフォワード機構において、βアミロイドはＲｈｏ  ＧＴＰアーゼ活性を上昇させ、これが、ＲＯＣＫ活性化を介して、神経突起伸長及びシナプス形成を阻害する（Ｐｅｔｒａｔｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００８）。したがって、ＲＯＣＫ阻害剤は、ＡＤにおいてシナプス及びニューロンの変性を予防する、さらには再生プロセスを促進する可能性を持ち得る。Ｈｅｒｓｋｏｗｉｔｚ  ｅｔ  ａｌ．による最近の研究は、ＲＯＣＫのノックダウンがａβレベルを低下させることを示した。これらの効果は、アルツハイマー病（ＡＤ）の有効な処置を提供するためには高ＲＯＣＫ選択的阻害剤が必要であることを実証している。ＢＡＣＥ−１分布及びリソソームへのアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）輸送の変化によって、ＡＤのためのＲＯＣＫ阻害の使用を実証しようと、モデル化合物、ＳＲ３６７７がＡＤのげっ歯類モデルにおいて試験された。ＳＲ３６７７は、その不十分な経口ＰＫ特性（５％Ｆ及び１時間未満の半減期）及び脳透過の欠如の理由で海馬への直接的な軟膜内（ｉ．ｐ．）注射の後に、ｓＡＰＰβを減少させる有望な効果を有した。
【０００８】
ハンチントン病（ＨＤ）は、精神医学的障害、運動障害、及び認知症によって特徴づけられる破壊的で、処置不可能で、主に遺伝性の神経変性疾患である。ハンチンチン遺伝子の産物であるＨｔｔタンパク質のミスフォールディング及び凝集が、ＨＤ病理をもたらす（Ｓｈａｏ  ａｎｄ  Ｄｉａｍｏｎｄ，２００７）。ＨＤを処置するために、非常に小数の機構ベースの治療リード物質が開発されている。科学的調査はまだ進行中であるが、いく筋もの証拠が、ＲＯＣＫ阻害がＨＤのための有効な処置となり得ることを示唆している。ＨＤのマウスモデルでは、ＲＯＣＫ阻害は、可溶性Ｈｔｔレベルを有意に低下させ、凝集物形成、神経突起退縮を逆転させ、かつ神経細胞死に対して防御的であった（Ｄｅｙｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００９；Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００９）。Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａにおける研究において、同様の結果が得られ、そこでは、ＲＯＣＫの阻害によって、Ｈｔｔ凝集が制御された（Ｓｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００８ａ；Ｓｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００８ｂ）。ＲＯＣＫシグナル伝達経路は、ＨＤのための有望な治療標的である。
【０００９】
ＲＯＣＫシグナル伝達は、パーキンソン病及び筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＤ）にも関係づけられている。例えば、Ｔｏｎｇｅｓ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（２０１２）．“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｈｏ  ｋｉｎａｓｅ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｏｆ  ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ  ｎｅｕｒｏｎｓ  ａｎｄ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ａｘｏｎａｌ  ｌｏｓｓ  ｉｎ  ａ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．”    Ｂｒａｉｎ．  １３５（１１）：３３５５−７０を参照されたい。
【００１０】
ＲＯＣＫは、ミオシン軽鎖（ＭＬＣ、トレオニン１８及びセリン１９で）及びミオシン軽鎖ホスファターゼ（ＭＹＰＴ１、トレオニン８５３で）を含む複数の下流基質をリン酸化して、球状Ｇ−アクチンから線維状Ｆ−アクチンへの重合を駆動し、かつアクトミオシン収縮機構をアセンブルする。この経路がいくつかのＣＮＳ障害、例えば、脊髄損傷、卒中、及びＡＤの病因に寄与し得ることが認められている。成人ＣＮＳでは、損傷を受けた軸索は、ミエリン関連軸索成長阻害因子の存在によって、不十分にしか再生しない。ミエリン関連阻害因子、例えば、ミエリン関連糖タンパク質（ＭＡＧ）、Ｎｏｇｏ、オリゴデンドロサイト−ミエリン糖タンパク質（ＯＭｇｐ）及び反発性ガイダンス分子（ＲＧＭ）が、損傷を受けた脳及び脊髄における軸索再生を制限する。様々なミエリン関連阻害因子に共通する機構は、それらがすべて、Ｒｈｏ及びその下流エフェクターキナーゼＲＯＣＫを活性化して、神経突起伸長を阻害することである。
【００１１】
小分子によるＲｈｏ／ＲＯＣＫ経路の遮断は、中枢神経系（ＣＮＳ）障害における望ましい戦略である。しかしながら、血液脳関門（ＢＢＢ）が、脳ホメオスターシスにおいて重大な役割を果たしつつも、多くの小分子阻害剤の透過を著しく妨げる。ＣＮＳ疾患を処置するための選択的かつ強力な阻害剤の開発に対する関心は高まりつつあるので、ＲＯＣＫ１及び／またはＲＯＣＫ２の阻害剤、特に血液脳関門を通過するものが緊急に必要とされている。
【発明の概要】
【００１２】
一態様では、本発明は、式Ｉの化合物：
【化１】
2020527585.tif 000003
を提供し、
式中、
Ａは、
【化２】
2020527585.tif 000004
からなる群から選択され、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
Ｒ2は、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、及びヘテロシクリルからなる群から選択され、これらはそれぞれ、非置換であっても、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＯ2Ｃ−、アリール−Ｏ−及びヘテロアリール−Ｏ−からなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく、
別法では、Ｒ1及びＲ2は一緒になって、単環式基または二環式基を形成しており、その際、当該単環式基は、最高２個の環ヘテロ原子を含む４〜７個の環原子を有し、当該二環式基は、最高３個の環ヘテロ原子を含む８〜１０個の環原子を有し、当該単環式基及び二環式基は、非置換であるか、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、アリール及びヘテロアリールからなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
Ｒ5は、Ｈ、低級アルキル及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから選択され、
別法では、Ｒ3及びＲ5は一緒になって、２〜３個の環ヘテロ原子を含む５〜７個の環原子を有する環式基を形成しており、その際、当該環式基は、非置換であるか、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、アリール及びヘテロアリールからなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ａは、０または１であり、
ｂは、０〜２であり、
かつ
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成している。
【００１３】
本発明は、本発明の化合物と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を含む。
【００１４】
本発明は、実質的に純粋な本発明の化合物及びその薬学的に許容される塩、立体異性体、または水和物と、薬学的に許容される担体とを含む組成物を含む。
【００１５】
一態様では、本発明は、有効量の１種または複数の式Ｉの化合物を投与することを含む、哺乳類においてＲＯＣＫを阻害する方法を提供する。本発明は、疾患に罹患している患者を処置する方法であって、そのような処置を必要とする患者に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。ある特定のこのような実施形態では、式Ｉの化合物は、ＲＯＣＫ２を阻害する。ある特定のこのような実施形態では、式Ｉの化合物は、ＲＯＣＫ２を選択的に阻害する。本発明に従って処置される非限定的疾患及び状態には、中枢神経系障害、例えば、神経変性及び脊髄損傷、心臓血管疾患、例えば、高血圧、アテローム硬化症、再狭窄、心臓肥大、高眼圧、脳虚血、脳血管痙攣、陰茎勃起機能不全、動脈血栓性障害、例えば、血小板凝集及び白血球凝集、喘息、眼内圧の調節、ならびに骨吸収が含まれる。新形成では、ＲＯＣＫの阻害は、腫瘍細胞の増殖及び転移、ならびに血管新生を阻害する。
【００１６】
本発明は、対象において中枢神経系障害を処置する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。中枢神経系障害には、限定ではないが、神経変性または脊髄損傷、さらにはハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、または多発性硬化症が含まれる。
【００１７】
本発明は、対象において自己免疫障害を処置する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。自己免疫障害には、限定ではないが、関節リウマチ、（多発性硬化症）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ；狼瘡）、乾癬、クローン病、アトピー性皮膚炎、湿疹、または移植片対宿主疾患（ＧＶＨＤ）が含まれる。
【００１８】
本発明は、対象において心臓血管障害を処置する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。心臓血管障害には、限定ではないが、高血圧、アテローム硬化症、狭心症、動脈閉塞、末梢動脈疾患、末梢循環障害、脳海綿状血管腫、再狭窄、心臓肥大、高眼圧、脳虚血、脳血管痙攣、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）または勃起機能不全が含まれる。
【００１９】
本発明は、対象において炎症を処置する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。炎症には、限定ではないが、喘息、心臓血管炎症、腎臓炎症または動脈硬化症が含まれる。
【００２０】
本発明は、対象において動脈血栓性障害を処置する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。動脈血栓性障害の非限定的例は、血小板凝集、または白血球凝集である。
【００２１】
本発明は、対象において線維化障害を処置する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。線維化障害の非限定的例は、嚢胞性及び特発性肺線維症を含む肺線維症、放射線誘導性肺損傷、硬変を含む肝臓線維症、動脈線維症を含む心臓線維症、心内膜心筋線維症、陳旧性心筋梗塞、動脈スティフネス、アテローム硬化症、再狭窄、関節線維化、クローン病、骨髄線維症、ペーロニー病、腎性全身性線維症、進行性塊状線維症、後腹膜線維症（ｒｅｔｒｏｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ  ｃａｖｉｔｙ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ）、強皮症／全身性硬化症、縦隔線維症、ケロイド及び肥厚性瘢痕、グリア性瘢痕、または腎線維症である。
【００２２】
本発明は、上皮性安定性を維持する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００２３】
本発明は、対象において緑内障を処置する、または対象において眼内圧を調節する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。緑内障の非限定的例には、原発性開放隅角緑内障、急性閉塞隅角緑内障、色素性緑内障、血管新生緑内障、先天性緑内障、正常眼圧緑内障、または続発性緑内障が含まれる。
【００２４】
本発明は、対象において新生物疾患を処置する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。新生物疾患には、限定ではないが、リンパ腫、癌腫、白血病、肉腫、または芽細胞腫、例えば、扁平上皮細胞癌、小細胞肺癌、下垂体癌、食道癌、神経膠星状細胞腫、軟部組織肉腫、非小細胞肺癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌、膵臓癌、神経膠芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞癌、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、脳癌、子宮内膜癌、精巣癌、胆管癌、胆嚢癌、胃癌、黒色腫、または頭頚部癌が含まれる。
【００２５】
本発明はまた、対象において代謝症候群、インスリン抵抗性、インスリン過剰血症、２型糖尿病、またはグルコース不耐性を処置する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００２６】
さらに、本発明は、対象において骨粗鬆症を処置する、または骨形成を促進する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００２７】
本発明は、血管由来成分を有する眼障害を処置する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉの化合物及び血管新生阻害剤を投与することを含む方法を提供する。そのような眼障害の非限定的例には、加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）、虹彩血管新生、ブドウ膜炎、血管新生緑内障、または未熟児網膜炎（ＲＯＰ）が含まれる。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１Ａ】代表的なＺ’−Ｌｙｔｅアッセイの結果である。本発明のＲＯＣＫ阻害剤は、ＲＯＣＫの両方のアイソフォームに対して、１桁という低いナノモル値の効力を示す。
【図１Ｂ】Ａ７Ｒ５インセルＥＬＩＳＡアッセイである。Ａ７Ｒ５細胞を化合物の９ポイントの２倍系列希釈物で処理し、ｐｐＭｌｃ（Ｔ１８／Ｓ１９）レベルを決定して、化合物の細胞ＩＣ50値を計算した。代表的な本発明の化合物は、細胞において、２００ｎＭ未満のＩＣ50を示した。
【図１Ｃ】ＲＯＣＫ阻害剤を、ＡＣＴＡ２−プロモーター駆動性ルシフェラーゼレポーター細胞アッセイによって効果的に順位づけることができた。ＡＣＴＡ２−プロモーター駆動性ルシフェラーゼを安定発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞を９６ウェルプレートでコンフルエンスまでプレーティングし、ＴＧＦβ１と組み合わせた化合物の９ポイントの系列希釈物で２４時間にわたって処理した。ルシフェラーゼ活性を測定し、化合物のＩＣ50を計算した。本発明の代表的な化合物は、２００ｎＭ未満のＩＣ50を示した。
【図１Ｄ】実施例２の化合物で１２０分間にわたって処理した後のｐｐＭｌｃ（Ｔ１８／Ｓ１９）及びｐＭＹＰＴ（Ｔ８５３）レベルを可視化するためのＳＶＥＣ４−１０細胞溶解産物のウェスタンブロットを示している。ＳＶＥＣ４−１０細胞を化合物で処理し、リン酸化タンパク質をウェスタンブロット法によって可視化した。代表的な化合物は、ＲＯＣＫ標的ＭＬＣ及びＭＹＰＴ１リン酸化を１１０ｎＭで効率的に遮断した。
【図２Ａ】ＲＯＣＫ阻害剤は、培養物中のヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞において、神経突起伸長を用量依存的に促進する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞をインビトロで、ＲＯＣＫ阻害剤を伴って、または伴わずに３日間にわたって培養した。
【図２Ｂ】ＲＯＣＫ阻害剤は、培養物中のヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞において、神経突起伸長を用量依存的に促進する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞をインビトロで、ＲＯＣＫ阻害剤を伴って、または伴わずに３日間にわたって培養した。
【図２Ｃ】ＲＯＣＫ阻害剤は、神経細胞分化及び成熟を増強する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞を１４日間にわたって培養した。ＲＯＣＫ阻害剤は、成熟神経細胞マーカーのベータＩＩＩチューブリン発現を有意に助長し、神経突起伸長を改善した。代表画像。
【図２Ｄ】ＲＯＣＫ阻害剤は、神経細胞分化及び成熟を増強する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞を１４日間にわたって培養した。ＲＯＣＫ阻害剤は、成熟神経細胞マーカーのベータＩＩＩチューブリン発現を有意に助長し、神経突起伸長を改善した。神経突起長さの定量化。
【図２Ｅ】ＲＯＣＫ阻害剤は、神経突起伸長に対する硫酸コンドロイチンプロテオグリカン（ＣＳＰＧ）の阻害作用を遮断する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞を０．３ｍｇ／ｍｌのＣＳＰＧでコーティングされたプレート上で３日間にわたって培養した。神経突起長さをＩｎｃｕＣｙｔｅ  ＮｅｕｒｏＴｒａｃｋ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｍｏｄｕｌｅによって定量化した。７２時間時点での統計的解析をＡＮＯＶＡによって行った。代表画像。
【図２Ｆ】ＲＯＣＫ阻害剤は、神経突起伸長に対する硫酸コンドロイチンプロテオグリカン（ＣＳＰＧ）の阻害作用を遮断する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞を０．３ｍｇ／ｍｌのＣＳＰＧでコーティングされたプレート上で３日間にわたって培養した。神経突起長さをＩｎｃｕＣｙｔｅ  ＮｅｕｒｏＴｒａｃｋ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｍｏｄｕｌｅによって定量化した。７２時間時点についての統計的解析をＡＮＯＶＡによって行った。神経突起長さの時間経過。
【図２Ｇ】ＲＯＣＫ阻害剤は、神経突起伸長に対する硫酸コンドロイチンプロテオグリカン（ＣＳＰＧ）の阻害作用を遮断する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞を０．３ｍｇ／ｍｌのＣＳＰＧでコーティングされたプレート上で３日間にわたって培養した。神経突起長さをＩｎｃｕＣｙｔｅ  ＮｅｕｒｏＴｒａｃｋ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｍｏｄｕｌｅによって定量化した。７２時間時点についての統計的解析をＡＮＯＶＡによって行った。処理７２時間目の神経突起長さの定量化。
【図３Ａ】ＲＯＣＫ阻害剤は神経細胞をＡβ１−４２誘導細胞死から防御する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞をＲＯＣＫ阻害剤と共に３０分間にわたってプレインキュベートし、その後、１０．５μＭのＡβ１−４２に暴露した。ＩｎｃｕＣｙｔｅアネキシンＶ  Ｒｅｄ試薬を培養培地に添加して、細胞アポトーシスを標識した。神経突起長さ及び全アネキシンＶ陽性面積をＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｓ３ソフトウェアによって解析した。化合物と組み合わせて、または組み合わせずにＡβ１−４２で処理したヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞の代表画像。
【図３Ｂ】ＲＯＣＫ阻害剤は神経細胞をＡβ１−４２誘導細胞死から防御する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞をＲＯＣＫ阻害剤と共に３０分間にわたってプレインキュベートし、その後、１０．５μＭのＡβ１−４２に暴露した。ＩｎｃｕＣｙｔｅアネキシンＶ  Ｒｅｄ試薬を培養培地に添加して、細胞アポトーシスを標識した。神経突起長さ及び全アネキシンＶ陽性面積をＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｓ３ソフトウェアによって解析した。全アネキシンＶ陽性面積の時間経過。
【図３Ｃ】ＲＯＣＫ阻害剤は神経細胞をＡβ１−４２誘導細胞死から防御する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞をＲＯＣＫ阻害剤と共に３０分間にわたってプレインキュベートし、その後、１０．５μＭのＡβ１−４２に暴露した。ＩｎｃｕＣｙｔｅアネキシンＶ  Ｒｅｄ試薬を培養培地に添加して、細胞アポトーシスを標識した。神経突起長さ及び全アネキシンＶ陽性面積をＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｓ３ソフトウェアによって解析した。神経突起長さの時間経過。
【図３Ｄ】ＲＯＣＫ阻害剤は神経細胞をＡβ１−４２誘導細胞死から防御する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞をＲＯＣＫ阻害剤と共に３０分間にわたってプレインキュベートし、その後、１０．５μＭのＡβ１−４２に暴露した。ＩｎｃｕＣｙｔｅアネキシンＶ  Ｒｅｄ試薬を培養培地に添加して、細胞アポトーシスを標識した。神経突起長さ及び全アネキシンｖ陽性面積をＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｓ３ソフトウェアによって解析した。全アネキシンｖ陽性面積の用量応答。
【図３Ｅ】ＲＯＣＫ阻害剤は神経細胞をＡβ１−４２誘導細胞死から防御する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞をＲＯＣＫ阻害剤と共に３０分間にわたってプレインキュベートし、その後、１０．５μＭのＡβ１−４２に暴露した。ＩｎｃｕＣｙｔｅアネキシンＶ  Ｒｅｄ試薬を培養培地に添加して、細胞アポトーシスを標識した。神経突起長さ及び全アネキシンｖ陽性面積をＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｓ３ソフトウェアによって解析した。神経突起長さの用量応答定量化。
【図４Ａ】ＲＯＣＫ阻害剤は、ＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞細胞株におけるＴＧＦβ１誘導線維化遺伝子発現を減少させた。ＮＩＨ３Ｔ３細胞をＴＯＣＫ阻害剤の存在下または非存在下で、ＴＧＦβ１で２４時間にわたって処理し、ｍＲＮＡ発現をＴａｑｍａｎ  ｑＰＣＲによって定量化した。αＳＭＡ。
【図４Ｂ】ＲＯＣＫ阻害剤は、ＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞細胞株におけるＴＧＦβ１誘導線維化遺伝子発現を減少させた。ＮＩＨ３Ｔ３細胞をＴＯＣＫ阻害剤の存在下または非存在下で、ＴＧＦβ１で２４時間にわたって処理し、ｍＲＮＡ発現をＴａｑｍａｎ  ｑＰＣＲによって定量化した。ＣＴＧＦ。
【図４Ｃ】ＲＯＣＫ阻害剤は、ＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞細胞株におけるＴＧＦβ１誘導線維化遺伝子発現を減少させた。ＮＩＨ３Ｔ３細胞をＴＯＣＫ阻害剤の存在下または非存在下で、ＴＧＦβ１で２４時間にわたって処理し、ｍＲＮＡ発現をＴａｑｍａｎ  ｑＰＣＲによって定量化した。ＣＣＮ１  ｍＲＮＡ。
【図４Ｄ】ＲＯＣＫ阻害剤は、ＴＧＦβ１誘導ＣＣＮ１分泌を阻害した。ＣＣＤ１８Ｌｕヒト肺線維芽細胞をＲＯＣＫ阻害剤で処理し、ＴＧＦβ１で４０時間にわたって刺激し、その後、分泌されたＣＣＮ１のレベルをＥＬＩＳＡ法で測定した。
【図５Ａ】ＲＯＣＫ阻害剤は、肺線維症のマウスモデルにおいて活性である。ブレオマイシン誘導性肺損傷モデルにおける、ＲＯＣＫ阻害剤で２１日間にわたって処置した後のマウスの肺の線維化を可視化するためにマッソン三色染色で染色された肺切片の代表画像。
【図５Ｂ−１】肺線維症のインビボモデルにおけるＲＯＣＫ阻害剤のプラスの活性の定量。実施例２の化合物で処置されたブレオマイシン肺線維症モデルのマウスの肺から得られたアシュクロフト線維化指数（Ａｓｈｃｒｏｆｔ  ｆｉｂｒｏｔｉｃ  ｉｎｄｉｃｅｓ）。肺線維症のインビボモデルにおけるＲＯＣＫ阻害剤のプラスの活性の定量。実施例２の化合物で処置されたブレオマイシン肺線維症モデルのマウスの肺から得られたα−平滑筋アクチン（αＳＭＡ）陽性面積パーセンテージ及び気管支肺胞洗浄液中の全白血球数。
【図５Ｂ−２】肺線維症のインビボモデルにおけるＲＯＣＫ阻害剤のプラスの活性の定量。実施例２の化合物で処置されたブレオマイシン肺線維症モデルのマウスの肺から得られたアシュクロフト線維化指数（Ａｓｈｃｒｏｆｔ  ｆｉｂｒｏｔｉｃ  ｉｎｄｉｃｅｓ）。肺線維症のインビボモデルにおけるＲＯＣＫ阻害剤のプラスの活性の定量。実施例２の化合物で処置されたブレオマイシン肺線維症モデルのマウスの肺から得られたα−平滑筋アクチン（αＳＭＡ）陽性面積パーセンテージ及び気管支肺胞洗浄液中の全白血球数。
【図６Ａ】ＲＯＣＫ阻害剤は、肺線維症のマウスモデルにおいて治療活性である。ブレオマイシン誘導肺損傷モデルにおける、ＲＯＣＫ阻害剤で治療処置した後のマウスの肺の線維化を可視化するためにマッソン三色染色で染色された肺切片の代表画像。
【図６Ｂ】ブレオマイシン誘導性肺損傷モデルにおけるＲＯＣＫ阻害剤処置及びビヒクル処置マウスからの画像の組織病理学的分析における線維化指数の低下の定量。
【図７Ａ】ＲＯＣＫ阻害は、マウスにおけるヒスタミン誘導血管透過性モデルで内皮バリア機能を安定化させる。対照化合物（サルブタモール）と比較した、ＲＯＣＫ阻害剤処置及びビヒクル処置マウスの皮膚でヒスタミンによって誘導されたエバンスブルー色素血管外遊出の代表画像。ＲＯＣＫ阻害剤は、ヒスタミン注射の１時間前に投与された化合物の単回投与後に、血管バリア安定化を誘導する。
【図７Ｂ】ヒスタミン注射による毛細血管漏出の誘導後のＲＯＣＫ阻害剤処置マウスの皮膚におけるスポット面積サイズ及びエバンスブルー色素量の減少の定量。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
ＲＯＣＫ阻害剤
本発明による化合物には、式Ｉを有する化合物：
【化３】
2020527585.tif 000005
が含まれ、
式中、
Ａは、
【化４】
2020527585.tif 000006
からなる群から選択され、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
Ｒ2は、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、及びヘテロシクリルからなる群から選択され、これらはそれぞれ、非置換であっても、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＯ2Ｃ−、アリール−Ｏ−及びヘテロアリール−Ｏ−からなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく、
別法では、Ｒ1及びＲ2は一緒になって、単環式基または二環式基を形成しており、その際、当該単環式基は、最高２個の環ヘテロ原子を含む４〜７個の環原子を有し、当該二環式基は、最高３個の環ヘテロ原子を含む８〜１０個の環原子を有し、当該単環式基及び二環式基は、非置換であるか、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、アリール及びヘテロアリールからなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
Ｒ5は、Ｈ、低級アルキル及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから選択され、
別法では、Ｒ3及びＲ5は一緒になって、２〜３個の環ヘテロ原子を含む５〜７個の環原子を有する環式基を形成しており、その際、当該環式基は、非置換であるか、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、アリール及びヘテロアリールからなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、
ａは、０または１であり、
ｂは、０〜２であり、
かつ
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成している。
【００３０】
本発明のある特定の実施形態では、式ＩＩの化合物：
【化５】
2020527585.tif 000007
を提供し、
式中、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
Ｒ2は、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、及びヘテロシクリルからなる群から選択され、これらはそれぞれ、非置換であっても、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＯ2Ｃ−、アリール−Ｏ−及びヘテロアリール−Ｏ−からなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく、
別法では、Ｒ1及びＲ2は一緒になって、単環式基または二環式基を形成しており、その際、当該単環式基は、最高２個の環ヘテロ原子を含む４〜７個の環原子を有し、当該二環式基は、最高３個の環ヘテロ原子を含む８〜１０個の環原子を有し、当該単環式基及び二環式基は、非置換であるか、または任意選択で、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、アリール及びヘテロアリールからなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
かつ
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成している。
【００３１】
本発明のある特定の実施形態では、式ＩＩＩの化合物：
【化６】
2020527585.tif 000008
を提供し、
式中、
環Ａは、任意選択で０〜２個の環ヘテロ原子を含有する５員または６員の芳香環であり、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
Ｒ6は、Ｈ、ハロ、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ヒドロキシル、及びカルボキシルからなる群から選択され、
Ｒ7は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、及びＲＣＯＮＲ’−からなる群から選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成しており、かつ
ｍは、１または２である。
【００３２】
本発明のある特定の実施形態では、式ＩＶの化合物：
【化７】
2020527585.tif 000009
を提供し、
式中、
環Ｂは、任意選択で０〜２個の環ヘテロ原子を含有する５員または６員の芳香環であり、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
Ｒ8は、Ｈ、ハロ、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ヒドロキシル及びカルボキシルからなる群から選択され、
Ｒ9は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ及びカルボキシル、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、及びＲＣＯＮＲ’−からなる群から選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成しており、かつ
ｍは、１〜３である。
【００３３】
本発明のある特定の実施形態では、式Ｖの化合物：
【化８】
2020527585.tif 000010
を提供し、
式中、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
各Ｒ21は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＯ2Ｃ−、アリール−Ｏ−及びヘテロアリール−Ｏ−からなる群から独立に選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成しており、かつ
ｎは、０〜３である。
【００３４】
本発明のある特定の実施形態では、式ＶＩの化合物：
【化９】
2020527585.tif 000011
を提供し、
式中、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
各Ｒ22は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＯ2Ｃ−、アリール−Ｏ−及びヘテロアリール−Ｏ−から独立に選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成している。
【００３５】
本発明のある特定の実施形態では、式ＶＩＩの化合物：
【化１０】
2020527585.tif 000012
を提供し、
式中、
環Ａは、任意選択で０〜２個の環ヘテロ原子を含有する５員または６員の芳香環であり、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
Ｒ6は、Ｈ、ハロ、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ヒドロキシル、及びカルボキシルからなる群から選択され、
Ｒ7は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、及びＲＣＯＮＲ’−からなる群から選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成しており、かつ
ｍは、１または２である。
【００３６】
本発明のある特定の実施形態では、式ＶＩＩＩの化合物：
【化１１】
2020527585.tif 000013
を提供し、
式中、
環Ｂは、任意選択で０〜２個の環ヘテロ原子を含有する５員または６員の芳香環であり、
Ｒ3は、Ｈ、低級アルキル、置換低級アルキル、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−から選択され、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
Ｒ8は、Ｈ、ハロ、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ヒドロキシル及びカルボキシルからなる群から選択され、
Ｒ9は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ及びカルボキシル、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、及びＲＣＯＮＲ’−からなる群から選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ３〜Ｃ６シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成しており、かつ
ｍは、１〜３である。
【００３７】
本発明のある特定の実施形態では、式ＩＸの化合物：
【化１２】
2020527585.tif 000014
を提供し、
式中、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
Ｒ4は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−、及びＲＲ’Ｎ−（Ｃ2~4アルキル）−Ｏ−からなる群から選択され、
ｂは、０〜２であり、
各Ｒ21は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシ、カルボキシル、ＲＲ’Ｎ−、ＲＲ’ＮＣＯ−、ＲＣＯＮＨ−、ＲＣＯＮＲ’−、ＲＯ2Ｃ−、アリール−Ｏ−及びヘテロアリール−Ｏ−からなる群から独立に選択され、
各Ｒ及びＲ’は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択されるか、または別法では、Ｒ及びＲ’は一緒になって、５〜６員の複素環式環を形成しており、かつ
ｎは、０〜３である。
【００３８】
本発明のある特定の実施形態では、式Ｘの化合物：
【化１３】
2020527585.tif 000015
を提供し、
式中、
Ｒ1は、低級アルキル、置換低級アルキル、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル、Ｒ10Ｒ11Ｎ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｒ10Ｏ（ＣＲ12Ｒ13）c−、Ｗ（ＣＲ12Ｒ13）d−及びＲ10Ｒ11Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲ12Ｒ13）c−からなる群から選択され、
各Ｒ10は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ11は、Ｈ、低級アルキル、及びＣ3〜Ｃ6シクロアルキルから独立に選択され、
各Ｒ12は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
各Ｒ13は、Ｈ及び低級アルキルから独立に選択され、
加えて、または別法では、同じ炭素原子に結合しているＲ12及びＲ13は一緒になって、Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル基を形成していてもよく、
Ｗは、１〜３個の環ヘテロ原子を有する３〜７員の複素環式環であり、
ｃは、２〜４であり、
ｄは、１〜４であり、
各Ｒ22は、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、Ｃ1〜Ｃ3ペルフルオロアルキル、及びＣ1〜Ｃ3ペルフルオロアルコキシからなる群から独立に選択され、かつ
ｎは、０〜３である。
【００３９】
式Ｉ〜Ｘについての好ましい実施形態では、Ｒ1は、低級アルキルまたは置換低級アルキルであるように選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ3アルキルであり、よりいっそう好ましくは、Ｒ1は、メチルまたはエチルである。
【００４０】
「アルキル」という用語は、直鎖アルキル基、分枝鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基、及びシクロアルキル置換アルキル基を含む飽和脂肪族基のラジカルを指す。好ましい実施形態では、直鎖または分枝鎖アルキルは、その主鎖中に８個以下の炭素原子を（例えば、直鎖ではＣ１〜Ｃ８、分枝鎖ではＣ３〜Ｃ８分枝鎖）、より好ましくは６個以下を有する。同様に、好ましいシクロアルキルは、それらの環構造中に３〜８個の炭素原子を有し、より好ましくは、環構造中に３〜６個の炭素を有する。
【００４１】
炭素の数が別段に指定されていない限り、本明細書で使用する場合の「低級アルキル」は、上記で定義したとおりであるが、１〜４個の炭素、より好ましくは１〜３個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。好ましい実施形態では、アルキルとして本明細書に示されている置換基は、低級アルキルである。低級アルキル基には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロプロピル及びシクロブチルが含まれる。
【００４２】
「シクロアルキル」という用語は、環中に３〜８個の炭素を有する飽和炭素環式基を指す。シクロアルキル基には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが含まれる。
【００４３】
「置換アルキル」という用語は、上記で定義したとおりで、かつ１〜３個の置換基を有するアルキル基を指す。置換基は、ハロ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ、シアノ、ペルフルオロ低級アルキル、ペルフルオロ低級アルコキシ及びカルボキシルからなる群から選択される。
【００４４】
「置換低級アルキル」は、上記で定義したとおりで、かつ１〜３個の置換基を有する低級アルキル基を指す。置換基は、ハロ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、ペルフルオロ低級アルキル、ペルフルオロ低級アルコキシ及びカルボキシルからなる群から選択される。
【００４５】
「置換Ｃ3〜Ｃ6シクロアルキル」などの「置換シクロアルキル」は、上記で定義したとおりで、かつ１〜３個の置換基を有するシクロアルキル基を指す。置換基は、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、ペルフルオロ低級アルキル、ペルフルオロ低級アルコキシ及びカルボキシルからなる群から選択される。
【００４６】
本明細書で使用する場合、「ハロゲン」または「ハロ」という用語は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒまたは−Ｉ、好ましくはＦ、ＣｌまたはＢｒを示している。
【００４７】
本明細書で使用する場合の「アルコキシル」または「アルコキシ」という用語は、酸素原子を介して結合している上記で定義したとおりのアルキル基を指す。代表的なアルコキシル基には、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが含まれる。「低級アルコキシ」という用語は、低級アルキルが酸素原子を介して結合しているアルコキシ置換基を指し、その際、「低級アルキル」部分は、上記で定義したとおりである。
【００４８】
「アミン」及び「アミノ」という用語は、非置換及び置換アミンの両方、例えば、一般式：
【化１４】
2020527585.tif 000016
によって表され得る部分を指し、
式中、Ｒ及びＲ’は、Ｈ及び低級アルキルからそれぞれ独立に選択される。
【００４９】
本明細書で使用する場合の「アリール」という用語には、０〜４個のヘテロ原子を含んでもよい５員及び６員の単環式芳香族基、例えば、ベンゼン、ピレン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、トリアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン及びピリミジンなどが含まれる。環構造中にヘテロ原子を有するそれらのアリール基は、「アリール複素環」または「ヘテロアリール」基と称されることもある。芳香環は、上記のとおりのような置換基で、１つまたは複数の環位置で置換されていてもよい。「アリール」という用語にはまた、２個以上の炭素が２つの隣接する環で共有されている２つ以上の環式環（この環は「縮合環」である）を有し、環の少なくとも１つが芳香族である多環式環系が含まれる。
【００５０】
本明細書で使用する場合の「アラルキル」という用語は、アリール基で置換されているアルキル基を指す。好ましくは、アルキル基は、上記のとおりの低級アルキルである。
【００５１】
「複素環」または「ヘテロシクリル」という用語は、４〜７個の環原子を有し、かつ１〜３個の環ヘテロ原子を含む非芳香族複素環を指す。
【００５２】
本明細書で使用する場合の「ヘテロ原子」という用語は、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、窒素、酸素、及び硫黄である。最も好ましいのは、窒素及び酸素である。
【００５３】
本明細書で使用する場合、いずれかの構造において１回よりも多く存在する場合の各表現、例えば、アルキル、ｍ、ｎ、Ｒ1、Ｒ2などの定義は、同じ構造中の他の箇所でのその定義から独立していることが意図されている。
【００５４】
「置換」または「で置換されている」は、そのような置換が、置換される原子及び置換基の許容される原子価に従っていること、及びその置換が安定な化合物、例えば、再配列、環化、除去などによって、自発的な変換を受けることのない安定な化合物をもたらすことという暗黙の条件を含むことは理解されるであろう。
【００５５】
本明細書で使用する場合、「置換（置換されている）」という用語は、有機化合物のすべての許容可能な置換基を含むことが企図されている。幅広い態様で、許容可能な置換基には、有機化合物の非環式及び環式、分枝及び非分枝、炭素環式及び複素環式、芳香族及び非芳香族置換基が含まれる。置換基の実例には、例えば、本明細書に上記のものが含まれる。許容可能な置換基は、適切な有機化合物について、１個または複数、及び同じでも、または異なってもよい。本発明の目的では、窒素などのヘテロ原子は、ヘテロ原子の原子価を満たす、水素置換基及び／または本明細書に記載の有機化合物の任意の許容可能な置換基を有してもよい。本発明が、有機化合物の許容可能な置換基によって限定されることは何ら意図されていない。
【００５６】
本明細書で使用する場合の「保護基」という表現は、潜在的に反応性な官能基を望ましくない化学的変換から防御する一時的な置換基を意味する。そのような保護基の例には、カルボン酸のエステル、アルコールのシリルエーテル、ならびにそれぞれアルデヒド及びケトンのアセタール及びケタールが含まれる。保護基化学の分野は調査されてきた（Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．；Ｗｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２ｎｄ  ｅｄ．；Ｗｉｌｅｙ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９１）。
【００５７】
ある特定の本発明の化合物は、特に幾何学的または立体異性体型で存在することがある。本発明は、本発明の範囲内に該当するようなｃｉｓ及びｔｒａｎｓ異性体、Ｒ及びＳ鏡像異性体、ジアステレオマー、（Ｄ）異性体、（Ｌ）異性体、そのラセミ混合物、及び他のその混合物を含む、そのような化合物すべてを企図する。追加の非対称炭素原子が、アルキル基などの置換基中に存在してもよい。そのような異性体のすべて、さらにはその混合物が本発明に含まれる。本発明はまた、化合物では原子の同位体、例えば、水素ではジュウテリウムなどの置換を企図する。
【００５８】
一態様では、本発明は、ＲＯＣＫの阻害剤である式Ｉ〜Ｘの化合物を提供する。ＲＯＣＫは、２つの型で、すなわち、ＲＯＣＫ１（ＲＯＣＫβ；ｐ１６０−ＲＯＣＫ）及びＲＯＣＫ２（ＲＯＣＫα）で存在する。一部の実施形態では、式Ｉ〜Ｘの化合物は、ＲＯＣＫ１を選択的に阻害する。一部の実施形態では、式Ｉ〜Ｘの化合物は、ＲＯＣＫ２を選択的に阻害する。一部の実施形態では、式Ｉ〜Ｘの化合物は、ＲＯＣＫ１及びＲＯＣＫ２の阻害に関して非選択的である。本発明の文脈では、選択的とは、その阻害剤が他のキナーゼでのＩＣ50と比較した場合に、ある１種のキナーゼについて少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、または少なくとも２５倍低いＩＣ50を示すことを意味する。
【００５９】
キナーゼ阻害を決定する方法は、当技術分野で公知である。例えば、試験化合物の酵素のキナーゼ活性及び阻害能力は、基質の酵素特異定リン酸化を測定することによって決定され得る。市販のアッセイ及びキットが利用可能であり、使用することができる。例えば、キナーゼ阻害は、ＩＭＡＰ（登録商標）アッセイ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して決定され得る。このアッセイ方法は、蛍光標識されたペプチド基質の使用を伴う。目的のキナーゼによる標識ペプチドのリン酸化は、ホスホ基と三価金属との間の特異的高親和性相互作用を介して、三価金属ベースのナノ粒子へのペプチドの結合を促進する。ナノ粒子への近接は、蛍光偏光の増加をもたらす。キナーゼ阻害剤によるキナーゼの阻害は基質のリン酸化を阻止し、それによって、ナノ粒子への蛍光標識基質の結合を制限する。そのようなアッセイは、マイクロウェルアッセイフォーマットと適合し得て、多数の化合物のＩＣ50を同時に決定することを可能にする。
【００６０】
疾患を処置する方法
本発明の一態様では、疾患に罹患している患者を処置する方法であって、そのような処置を必要とする患者に、治療有効量の本発明の化合物を投与することを含む方法を提供する。本明細書で使用する場合の「治療有効量」という語句は、動物の細胞の少なくとも部分集団において多少の所望の治療効果を、何らかの医学的処置に適用可能な合理的なベネフィット／リスク比、例えば、何らかの医学的処置に適用可能な合理的な副作用で生じさせるために有効である本発明の化合物、物質、または化合物を含む組成物の量を意味する。
【００６１】
ＣＮＳ障害
式Ｉ〜Ｘの化合物は、有効な血液脳関門（ＢＢＢ）透過、及び中枢神経系の組織への分布を示す。したがって、本発明の化合物は、中枢神経系障害、さらには、ＢＢＢを通過する能力から利益を受けるある種の眼障害などの障害の処置に有用である。そのような障害は、限定ではないが、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、バッテン病、認知症、脊髄性筋萎縮症、運動ニューロン疾患、脊髄小脳失調、急性または慢性疼痛、認知症、神経変性、脊髄損傷、脳血管痙攣または多発性硬化症を含む、神経変性または神経組織の物理的損傷に関与し得る。
【００６２】
心臓血管
ＲＯＣＫ及び／またはＲＯＣＫ媒介性リン酸化を阻害する本発明の化合物は、ＲＯＣＫ機能が関与する心臓血管及び非心臓血管疾患、例えば、高血圧、肺高血圧、アテローム硬化症、再狭窄、虚血性心疾患、心臓肥大、高眼圧、網膜障害、虚血性疾患、脳虚血、脳血管痙攣、陰茎勃起機能不全、末梢循環障害、末梢動脈閉塞疾患、緑内障（例えば、眼内圧の調節）、肺線維症、肝線維症、腎線維症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、成人呼吸窮迫症候群、中枢神経系障害、例えば、神経変性及び脊髄損傷に罹患している患者を処置するために有用である。さらに、本発明のＲＯＣＫ阻害剤は、血小板凝集及び白血球凝集などの動脈血栓性障害、ならびに骨吸収を処置するために使用することができる。
【００６３】
本発明の一実施形態では、化合物を、脳海綿状血管腫（ＣＣＭ）を処置するために使用する。ＣＣＭは、漏出性拡張毛細血管の密集からなる血管病変であり、発作及び卒中を含む中枢神経系（ＣＮＳ）障害と関連している。血管完全性の喪失は、ＲｈｏＡの活性化及びＲＯＣＫの活性化に関与して、細胞骨格安定性の変化及び血管透過性の上昇をもたらすと考えられる。本発明の化合物は、ＲＯＣＫ活性化を阻害し、かつ血管内皮機能を再生する。
【００６４】
緑内障
本発明の一実施形態では、式Ｉ〜Ｘの化合物を、緑内障を処置するために使用する。２種の最も一般的な原発性開放隅角緑内障及び急性閉塞隅角緑内障は、高い眼圧によって特徴づけられる。色素性緑内障及び先天性緑内障も、流体流出の減少及び高い眼内圧（ＩＯＰ）によって特徴づけられる。正常眼圧緑内障は、別の機構、特に視神経への不十分な血流によると考えられている。続発性緑内障は、損傷、感染、炎症、腫瘍または白内障から生じ得、またステロイドの長期使用、全身性高血圧、糖尿病性網膜症、及び網膜中心静脈閉塞症とも関連する。血管新生成分を有する緑内障は、ＲＯＣＫ阻害剤に加えて、血管新生阻害剤の投与から利益を受け得る。
【００６５】
炎症
本発明は、対象において炎症を処置する方法であって、対象に、治療有効量の式Ｉ〜Ｘの化合物を投与することを含む方法を提供する。炎症には、限定ではないが、喘息、心臓血管炎症、腎臓炎症、アテローム硬化症及び動脈硬化症、ならびに敗血症が含まれる。本発明の方法によって処置され得る他の炎症性状態には、線維化状態（例えば、特発性肺線維症、ＮＡＳＨ、強皮症、全身性硬化症、及び硬変を含む）が含まれる。
【００６６】
自己免疫障害
本発明は、対象において自己免疫障害を処置する方法であって、対象に治療有効量の式Ｉ〜Ｘの化合物を投与することを含む方法を提供する。自己免疫障害には、限定ではないが、関節リウマチ、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ；狼瘡）、乾癬、クローン病、アトピー性皮膚炎、湿疹、または移植片対宿主疾患（ＧＶＨＤ）、急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、急性壊死性出血性白質脳炎、アジソン病、無ガンマグロブリン血症、円形脱毛症、アミロイドーシス、強直性脊椎炎、抗ＧＢＭ／抗ＴＢＭ腎炎、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性血管性浮腫、自己免疫性再生不良性貧血、自己免疫性自律神経障害、自己免疫性肝炎、自己免疫性高脂血症、自己免疫性免疫不全、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、自己免疫性心筋炎、自己免疫性卵巣炎、自己免疫性膵炎、自己免疫性網膜障害、自己免疫性血小板減少性紫斑病（ＡＴＰ）、自己免疫性甲状腺疾患、自己免疫性蕁麻疹、軸索及び神経ニューロパチー、バロー病、ベーチェット病、水疱性類天疱瘡、心筋症、キャッスルマン病、セリアック病、シャガス病、慢性疲労症候群、慢性炎症性脱髄性多発性神経障害（ＣＩＤＰ）、慢性再発性多巣性骨髄炎（Ｃｈｒｏｎｉｃ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ  ｍｕｌｔｉｆｏｃａｌ  ｏｓｔｏｍｙｅｌｉｔｉｓ）（ＣＲＭＯ）、チャーグ−ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡／良性粘膜類天疱瘡、クローン病、コーガン症候群、寒冷凝集素症、先天性心ブロック、コクサッキー心筋炎、ＣＲＥＳＴ病、本態性混合型クリオグロブリン血症、脱髄性神経障害、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、ドヴィック病（視神経脊髄炎）、円板状紅斑性狼瘡、ドレスラー症候群、子宮内膜症、好酸球性食道炎、好酸球性筋膜炎、結節性紅斑、実験的アレルギー性脳脊髄炎、エヴァンス症候群、線維筋痛症、線維化性肺胞隔炎、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎）、巨細胞性心筋炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、多発血管炎性肉芽腫症（ＧＰＡ）（以前はヴェグナー肉芽腫症と呼ばれていた）、グレーブス病、ギラン−バレー症候群、橋本脳症、橋本甲状腺炎、溶血性貧血、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、妊娠性疱疹、低ガンマグロブリン血症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ＩｇＡ腎障害、ＩｇＧ４関連硬化性疾患、免疫調節性リポタンパク質、封入体筋炎、間質性膀胱炎、若年性関節炎、若年性糖尿病（１型糖尿病）、若年性筋炎、川崎症候群、ランバート−イートン症候群、白血球破砕性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、木質性結膜炎、線状ＩｇＡ病（ＬＡＤ）、ループス（ＳＬＥ）、ライム病、慢性メニエール病、顕微鏡的多発性血管炎、混合結合組織病（ＭＣＴＤ）、モーレン潰瘍、ムッハ−ハーベルマン病、多発性硬化症、重症筋無力症、筋炎、ナルコレプシー、視神経脊髄炎（ドヴィック病）、好中球減少症、眼瘢痕性類天疱瘡、視神経炎、回帰性リウマチ、ＰＡＮＤＡＳ（小児自己免疫性溶連菌関連性精神神経障害）、腫瘍随伴性小脳変性症、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、パリーロンバーグ症候群、パーソネージ−ターナー症候群（Ｐａｒｓｏｎｎａｇｅ−Ｔｕｒｎｅｒ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、扁平部炎（周辺性ブドウ膜炎）、天疱瘡、末梢神経障害、静脈周囲脳脊髄炎、悪性貧血、ＰＯＥＭＳ症候群、結���性多発性動脈炎、Ｉ型、ＩＩ型、及びＩＩＩ型多腺性自己免疫症候群、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎、心筋梗塞後症候群、心膜切開後症候群、プロゲステロン皮膚炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、乾癬、乾癬性関節炎、特発性肺線維症、壊疽性膿皮症、赤芽球癆、レイノー現象、反応性関節炎、反射性交感神経性ジストロフィー、ライター症候群、再発性多発性軟骨炎、レストレスレッグ症候群、後腹膜線維症、リウマチ熱、関節リウマチ、サルコイドーシス、シュミット症候群、強膜炎、強皮症、シェーグレン症候群、精子及び精巣の自己免疫、全身硬直症候群、亜急性細菌性心内膜炎（ＳＢＥ）、スザック症候群、交感性眼炎、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、トローザ−ハント症候群、横断性脊髄炎、１型糖尿病、潰瘍性大腸炎、未分化結合組織疾患（ＵＣＴＤ）、ブドウ膜炎、脈管炎、小水疱水疱性皮膚疾患、ならびに白斑が含まれる。
【００６７】
本発明によれば、ＲＯＣＫ阻害によるＴｈ１７（ＩＬ−１７分泌）細胞の標的化は、ヒトにおいて、限定されないが、自己免疫障害、例えば、ＲＡ、ＭＳ、ＳＬＥ、乾癬、及びクローン病、及びＧＶＨＤを含むＴｈ１７細胞媒介性疾患をするための方法を提供する。本発明の一実施形態では、ＲＯＣＫ阻害剤は、式Ｉ〜Ｘの化合物である。
【００６８】
新生物疾患
本発明のＲＯＣＫ阻害剤は、腫瘍細胞の増殖及び転移、ならびに血管新生を阻害し、新生物疾患を処置するために有用である。新生物疾患には、異常または無制御の細胞分裂に起因する任意の悪性増殖または腫瘍が含まれ、それらは、リンパ系または血流を介して身体の他の部分に展開し得る。新生物疾患には、限定ではないが、リンパ腫（通常は悪性であるリンパ組織の新生物）、癌腫（上皮性組織に由来する何らかの悪性腫瘍）、白血病（白血球の異常な増殖によって特徴づけられる造血組織の悪性新生物）、肉腫（結合組織（骨または筋肉など）から生じる通常悪性の腫瘍）、及び芽細胞腫（前駆体細胞における悪性病変）が含まれる。非限定的例には、扁平上皮細胞癌、小細胞肺癌、下垂体癌、食道癌、神経膠星状細胞腫、軟部組織肉腫、非小細胞肺癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌、膵臓癌、神経膠芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞癌、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、脳癌、子宮内膜癌、精巣癌、胆管癌、胆嚢癌、胃癌、黒色腫、及び様々な種類の頭頚部癌が含まれる。
【００６９】
インスリン抵抗性
本発明の一実施形態では、ＲＯＣＫ阻害剤を、インスリン抵抗性を減少させる、もしくは予防する、またはインスリン感受性を回復させるために使用する。したがって、一実施形態では、本発明の化合物を、インスリン依存型グルコース取り込みを促進する、または回復させるために使用する。本発明の別の実施形態では、本発明のＲＯＣＫ阻害剤を、耐糖能を促進する、または回復させるために使用する。本発明の別の実施形態では、本発明のＲＯＣＫ阻害剤を、代謝症候群を処置するために使用する。別の実施形態では、本発明のＲＯＣＫ阻害剤を、インスリン過剰血症を減少させる、または予防するために使用する。本発明の一実施形態では、ＲＯＣＫ阻害剤を、糖尿病（特に２型糖尿病）を処置するために使用する。本発明のＲＯＣＫ阻害剤を、血管平滑筋細胞（ＶＳＭＣ）のインスリン媒介性弛緩を促進する、または回復させるために使用することもできる。
【００７０】
血管新生
本発明は、血管由来成分を伴う疾患及び障害を処置するための方法及び化合物を提供する。本発明によれば、ある特定の実施形態では、そのような疾患及び障害を、対象に有効量のＲＯＣＫ阻害剤を投与することによって処置する。本発明によれば、そのような疾患及び障害は、有効量のｒｈｏキナーゼ阻害剤及び有効量の血管新生阻害剤を投与することによって処置することもできる。本発明によれば、血管由来成分を有する眼疾患及び障害をこの手法で処置する。一実施形態では、本発明は、「乾燥」及び「滲出」型で生じる加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）を処置する方法を提供する。ＡＭＤの「滲出」型は、異常な血管成長（血管新生）による視力喪失をもたらす。これらの網膜血管からの出血、漏出、及び瘢痕化は最終的に、光受容体に対する不可逆的損傷をもたらす。乾燥型は網膜色素上皮層の萎縮から生じており、これは、目の中心部分にある光受容体（杆状体及び錐状体）の喪失によって視力喪失をもたらす。別の実施形態では、本発明は、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）を処置する方法を提供する。脈絡膜血管新生は、新たな血管が脈絡膜でブルッフ膜を介して成長し、網膜下腔に侵入するプロセスであり、他の原因の中でも、加齢黄斑変性、近視及び眼外傷の症状である。別の実施形態では、本発明は、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）を処置する方法を提供する。別の実施形態では、本発明は、網膜分枝静脈閉塞症（ＢＲＶＯ）または網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）に続発する黄斑浮腫を処置する方法を提供する。他の実施形態では、処置を受ける疾患には、限定ではないが、感染性及び非感染性の網膜血管新生、感染性及び非感染性の角膜血管新生、虹彩血管新生、ブドウ膜炎、血管新生緑内障、及び未熟児網膜炎（ＲＯＰ）が含まれる。処置方法は、角膜移植後の角膜血管新生を回避するため、または柵状織切除手術における創傷治癒プロセスを調節するためなど、予防的であってよい。これらの疾患及び障害は、血管由来成分を有すると特徴づけられ得る。本発明によれば、そのような障害を、ＲＯＣＫ阻害剤、及び血管新生阻害剤を投与することによって処置する。
【００７１】
したがって、このような一実施形態では、疾患または障害はＡＭＤであり、ＡＭＤの処置を必要とする対象に、ＡＭＤを処置するために有効な量のＲＯＣＫ阻害剤を投与する。別の実施形態では、対象に、ＲＯＣＫ阻害剤及び血管新生阻害剤を、ＡＭＤを処置するために有効な量で投与する。一部の実施形態では、血管新生阻害剤は、ＶＥＧＦＲ２アンタゴニストである。ある特定のこのような実施形態では、ＶＥＧＦＲ２アンタゴニストは、ＶＥＧＦに結合する。他のそのような実施形態では、ＶＥＧＦＲ２アンタゴニストは、ＶＥＧＦＲ２に結合する。そのようなＶＥＧＦＲ２結合阻害剤には、限定されないが、抗体及びそのＶＥＧＦＲ２結合断片を含む、ＶＥＧＦＲ２の細胞外ドメインに結合する作用物質、ならびにＶＥＧＦＲ２の細胞内ドメインと相互作用し、かつＶＥＧＦＲ２依存性シグナル伝達の活性化を遮断する作用物質が含まれる。ＶＥＧＦＲ２アンタゴニストにはさらに、他の細胞構成要素と相互作用してＶＥＧＦＲ２依存性シグナル伝達を遮断する作用物質が含まれる。本発明の他の実施形態では、上記で示されているような血管由来成分を有する他の眼疾患及び障害を同様に処置する。
【００７２】
本発明によれば、ＲＯＣＫ阻害剤及び血管新生阻害剤を、対象に、過剰な血管新生によって特徴づけられる病的状態を処置または予防するために有効な量で投与する。例えば、血管新生及び／または炎症を伴うそのような状態には、アテローム硬化症、関節リウマチ（ＲＡ）、血管腫、血管線維腫、及び乾癬が含まれる。血管由来疾患の他の非限定的例は、未熟児網膜症（水晶体後方線維増殖）、角膜移植片拒絶、屈折手術の合併症に関連する角膜血管新生、コンタクトレンズ合併症に関連する角膜血管新生、翼状片及び再発性翼状片に関連する角膜血管新生、角膜潰瘍疾患、及び非特異的眼表面疾患、インスリン依存型糖尿病、多発性硬化症、重症筋無力症、クローン病、自己免疫性腎炎、原発性胆汁性肝硬変、急性膵臓炎、同種異色片拒絶、アレルギー性炎症、接触皮膚炎及び遅延型超過敏反応、炎症性腸疾患、敗血症性ショック、骨粗鬆症、変形性関節症、ニューロン炎症によって誘導される認知障害、オスラー−ウェーバー症候群、再狭窄（ｒｅｓｔｉｎｏｓｉｓ）、ならびにサイトメガロウイルス感染症を含む真菌、寄生虫及びウイルス感染症である。
【００７３】
本発明は、汎ＲＯＣＫ阻害剤（すなわち、ＲＯＣＫ１及びＲＯＣＫ２を阻害する化合物）を提供する。ある研究によって、ＲＯＣＫ２が非腫瘍肝臓と比較して肝細胞癌で過剰発現されることが多い一方で、ＲＯＣＫ１発現は変わらないことが観察された。ＲＯＣＫ２選択的阻害剤での処置から利益を受け得る他のがんには、限定されないが、結腸及び膀胱癌が含まれる。対照的に、ＲＯＣＫ１発現レベルは、乳腫瘍においてより高いことが観察されている。任意のがんを、ＲＯＣＫ１及び／またはＲＯＣＫ２の過剰発現が存在するかどうかを決定するために試験し、それに応じて処置することができる。ある特定の状況では、ＲＯＣＫ１及びＲＯＣＫ２アイソフォームは、ある特定の下流標的の調節において類似性を示し、どちらのアイソフォームも優勢ではないと考えられる。そのような場合、汎ＲＯＣＫ阻害剤が好ましいことがある。
【００７４】
他の作用物質との組み合わせ
本発明の化合物を有利に、第２の作用物質と共に、それを必要とする患者に投与することができる。ＲＯＣＫ阻害剤を第２の作用物質と共に投与する場合、ＲＯＣＫ阻害剤及び第２の作用物質を順次に、または付随的に投与することができる。順次に、とは、一方の作用物質をある期間にわたって投与し、続いて、他の作用物質を投与するが、それは、第１の作用物質の投与の後であってよいことを意味する。作用物質を順次に投与する場合、一方の作用物質のレベルは、第２の作用物質が投与されるときに治療上有効なレベルで維持されていなくてもよく、逆も同様である。付随的に、とは、第１及び第２の作用物質を、作用物質が同時には投与されないが、両方の作用物質が実質的に治療上有効なレベルで維持されるスケジュールに従って投与することを意味する。各作用物質を単回または複数回投与で投与することができ、用量を、限定ではないが、１日２回、毎日、毎週、２週ごと、及び毎月を含む任意のスケジュールで投与することができる。
【００７５】
本発明はまた、補助投与（ａｄｊｕｎｃｔｉｖｅ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）を含む。補助投与は、疾患または疾患症状を処置するために既に投与されている第１の作用物質に加えて、第２の作用物質が患者に投与されることを意味する。一部の実施形態では、補助投与は、第２の作用物質を、第１の作用物質の投与が疾患または疾患症状を十分に処置しなかった患者に投与することを伴う。他の実施形態では、補助投与は、第２の作用物質を、その疾患が第１の作用物質の投与によって効果的に処置されているが、補助処置がその処置結果を改善することが予測される患者に投与することを伴う。一部の実施形態では、第１及び第２の作用物質の投与の効果は相乗的である。一部の実施形態では、第１及び第２の作用物質の投与は、単独でのいずれかの作用物質の投与と比較して、再発を予防する、または再発までの時間を長期化する。一部の実施形態では、第１及び第２の作用物質の投与は、第１及び第２の作用物質の投薬量及び／または投与頻度の減少を可能にする。
【００７６】
本発明の化合物と組み合わせて投与することができる抗炎症薬及び免疫抑制薬には、ステロイド薬、例えば、グルココルチコイド（例えば、デキサメタゾン）、ＦＫ５０６（タクロリムス）、シクロスポリン、フィンゴリモド、インターフェロン、例えば、ＩＦＮβまたはＩＦＮγ、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）結合タンパク質、例えば、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、エタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ）、またはアダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ）、ミコフェノール酸、ＭＭＦ、メトトレキサート、ＮＳＡＩＤ、スタチン、シロリムス／テムシロリムス／エベロリムス、アバタセプト（Ｏｒｅｎｃｉａ）、アナキンラ（Ｋｉｎｅｒｅｔ）、セルトリズマブ（Ｃｉｍｚｉａ）、ゴリムマブ（Ｓｉｍｐｏｎｉ）、イキセキズマブ（Ｔａｌｔｚ）、ナタリズマブ（Ｔｙｓａｂｒｉ）、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ）、セクキヌマブ（Ｃｏｓｅｎｔｙｘ）、トシリズマブ（アクテムラ）、ウステキヌマブ（Ｓｔｅｌａｒａ）、ベドリズマブ（Ｅｎｔｙｖｉｏ）、バシリキシマブ（Ｓｉｍｕｌｅｃｔ）、ダクリズマブ（Ｚｉｎｂｒｙｔａ）、ムロモナブ（Ｏｒｔｈｏｃｌｏｎｅ  ＯＫＴ３）、Ｊａｋａｆｉ（ルクソリチニブ）、Ｘｅｌｊａｎｚ（Ｔｏｆａｃｉｔｎｉｂ）、及びＯｔｅｚｌａ（アプレミラスト）が含まれる。
【００７７】
本発明の一実施形態では、本発明のＲＯＣＫ阻害剤及び抗腫瘍薬を、それを必要とする対象に投与する。別の実施形態では、本発明のＲＯＣＫ阻害剤及び血管新生阻害剤を、それを必要とする対象に投与する。別の実施形態では、本発明のＲＯＣＫ阻害剤及び抗炎症薬を、それを必要とする対象に投与する。また別の実施形態では、本発明のＲＯＣＫ阻害剤及び免疫抑制薬を投与する。第２の作用物質は、限定ではないが、小分子、抗体もしくはその抗原結合断片、または放射線であってよい。
【００７８】
抗新生物作用物質には、限定ではないが、細胞傷害性化学療法薬、標的化小分子及び生物学的分子、及び放射線が含まれる。本発明のＲＯＣＫ阻害剤に加えて、腫瘍を処置するために投与することができる化合物及び作用物質には、次が含まれる：イリノテカン、エトポシド、カンプトテシン、５−フルオロウラシル、ヒドロキシ尿素、タモキシフェン、パクリタキセル、カプシタビン、カルボプラチン、シスプラチン、ブレオマイシン、ダクトマイシン（ｄａｃｔｏｍｙｃｉｎ）、ゲムシタビン、ドキソルビシン、ダノルビシン（ｄａｎｏｒｕｂｉｃｉｎ）、シクロフォスファミド、及び体外（例えば、体外照射療法（ＥＢＲＴ））または体内（例えば、小線源療法（ＢＴ））であってよい放射線療法。
【００７９】
標的化小分子及び生物学的分子には、限定ではないが、シグナル伝達経路の成分の阻害剤、例えば、チロシンキナーゼのモジュレーター及び受容体チロシンキナーゼの阻害剤、ならびに腫瘍特異的抗原に結合する作用物質が含まれる。例には、ゲフィチニブ、エルロチニブ、及びセツキシマブを含む上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害剤、ＨＥＲ２の阻害剤（例えば、トラスツズマブ、トラスツズマブエムタンシン（トラスツズマブ−ＤＭ１；Ｔ−ＤＭ１）及びペルツズマブ）、抗ＶＥＧＦ抗体及び断片（例えば、ベバシズマブ）、ＣＤ２０を阻害する抗体（例えば、リツキシマブ、イブリツモマブ）、抗ＶＥＧＦＲ抗体（例えば、ラムシルマブ（ＩＭＣ−１１２１Ｂ）、ＩＭＣ−１Ｃ１１、及びＣＤＰ７９１）、抗ＰＤＧＦＲ抗体、及びイマチニブが含まれる。小分子キナーゼ阻害剤は、１種の特定のチロシンキナーゼに特異的であってもよいし、または２種以上のキナーゼの阻害剤であってもよい。例えば、化合物Ｎ−（３，４−ジクロロ−２−フルオロフェニル）−７−（｛［（３ａＲ，６ａＳ）−２−メチルオクタヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロル−５−イル］メチル｝オキシ）−６−（メチルオキシ）キナゾリン−４−アミン（ＸＬ６４７、ＥＸＥＬ−７６４７及びＫＤ−０１９としても公知）は、ＥＧＦＲ、ＥｐｈＢ４、ＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ）、Ｆｌｔ４（ＶＥＧＦＲ３）及びＥｒｂＢ２を含む複数の受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）のインビトロ阻害剤であり、また、ある特定のＴＫＩに対する腫瘍の非応答性をもたらす経路に関与するＳＲＣキナーゼの阻害剤である。
【００８０】
ダサチニブ（ＢＭＳ−３５４８２５；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）は、別の経口で生物学的に利用可能なＡＴＰ部位競合的Ｓｒｃ阻害剤である。ダサタニブ（Ｄａｓａｔａｎｉｂ）は、Ｂｃｒ−Ａｂｌ（慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）またはフィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）急性リンパ芽急性白血病（ＡＬＬ）を有する患者において使用するためにＦＤＡによって認可済み）、さらにはｃ−Ｋｉｔ、ＰＤＧＦＲ、ｃ−ＦＭＳ、ＥｐｈＡ２、及びＳｒｃファミリーキナーゼをも標的とする。Ｓｒｃ及びＢｃｒ−Ａｂｌの経口チロシンキナーゼ阻害剤の他の２種は、ボスチニブ（ＳＫＩ−６０６）及びサラカチニブ（ＡＺＤ０５３０）である。
【００８１】
本発明によれば、血管新生阻害剤を本発明の化合物と併せて、対象に投与することができる。血管新生阻害剤には、新たな血管の成長を阻害する任意の物質が含まれる。例えば、血管新生阻害剤には、本明細書に開示の抗体を含む、ＶＥＧＦ、ＰｌＧＦ、及びＶＥＧＦ受容体のアンタゴニストが含まれる。ＶＥＧＦアンタゴニストは、細胞におけるＶＥＧＦと関連する機能を減少させる、または遮断する。ＶＥＧＦアンタゴニストは、ＶＥＧＦに結合して、その受容体への結合を遮断することによってＶＥＧＦに対して作用し得る、及び／またはＶＥＧＦ媒介性シグナル伝達に関係する別の細胞成分に対して作用し得る。同様に、ＶＥＧＦＲ２アンタゴニストは、ＶＥＧＦＲ２への結合及びリガンド結合の遮断またはＶＥＧＦＲ２基質との相互作用によってＶＥＧＦＲ２媒介性シグナル伝達を減少させる、もしくは遮断する、または別の細胞成分に作用してＶＥＧＦＲ２媒介性シグナル伝達を減少させる、または遮断する作用物質である。したがって、血管新生阻害剤には、抗ＶＥＧＦＲ２抗体、ならびに限定ではないが、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２、ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦＲ−β、ニューロピリン−１（ＮＲＰ１）、及び補体のアンタゴニストが含まれる。
【００８２】
血管新生阻害剤には、例えば、ＶＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＶＥＧＦもしくはＰＤＧＦ受容体のリガンド、または補体によって媒介されるシグナル伝達を遮断する細胞内作用物質が含まれる。血管新生阻害剤を阻害する細胞内作用物質には、限定ではないが、次が含まれる。スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ；ＳＵ１１２４８）は、ＶＥＧＦＲ１−ＶＥＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲα及びＰＤＧＦＲβ、幹細胞因子受容体（ｃＫＩＴ）、Ｆｌｔ−３、及びコロニー刺激因子−１受容体（ＣＳＦ−１Ｒ）の汎特異的小分子阻害剤である。アキシチニブ（ＡＧ０１３７３６；Ｉｎｌｙｔａ）は、ＶＥＧＦＲ−１−ＶＥＧＦＲ−３、ＰＤＧＦＲ、及びｃＫＩＴを阻害する別の小分子チロシンキナーゼ阻害剤である。セジラニブ（ＡＺＤ２１７１）は、ＶＥＧＦＲ−１−ＶＥＧＦＲ−３、ＰＤＧＦＲβ、及びｃＫＩＴの阻害剤である。ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ）は、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、及びＲａｆキナーゼを含む数種のチロシンプロテインキナーゼの別の小分子阻害剤である。パゾパニブ（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ；（ＧＷ７８６０３４）は、ＶＥＧＦＲ−１、−２及び−３、ｃＫＩＴ及びＰＤＧＦＲを阻害する。ホレチニブ（ＧＳＫ１３６３０８９；ＸＬ８８０）は、ＶＥＧＦＲ２及びＭＥＴを阻害する。ＣＰ−５４７６３２は、ＶＥＧＦＲ−２及び塩基性線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）キナーゼの強力な阻害剤である。Ｅ−３８１０（（６−（７−（（１−アミノシクロプロピル）メトキシ）−６−メトキシキノリン−４−イルオキシ）−Ｎ−メチル−１−ナフタミド）は、ナノモル範囲でＶＥＧＦＲ−１、−２、及び−３ならびにＦＧＦＲ−１及び−２キナーゼを阻害する。ブリバニブ（ＢＭＳ−５８２６６４）は、ＦＧＦ受容体シグナル伝達も阻害するＶＥＧＦＲ−２阻害剤である。ＣＴ−３２２（アドネクチン）は、ヒトフィブロネクチンドメインに基づく小タンパク質であり、ＶＥＧＦＲ２に結合して、その活性化を阻害する。バンデタニブ（Ｃａｐｒｅｌａｓ；Ｚａｃｔｉｍａ；ＺＤ６４７４）は、ＶＥＧＦＲ２、ＥＧＦＲ、及びＲＥＴチロシンキナーゼの阻害剤である。Ｘ−８２（Ｘｃｏｖｅｒｙ）は、成長因子受容体ＶＥＧＦＲ及びＰＤＧＦＲを介するシグナル伝達の小分子インドリノン阻害剤である。
【００８３】
医薬組成物
一態様では、本発明は、１種または複数の医薬品添加剤と一緒に製剤化された治療有効量の式Ｉ〜Ｘの化合物のうちの１種または複数を含む薬学的に許容される組成物を提供する。下記のとおり、本発明の医薬組成物は、（１）経口投与（例えば、飲薬（水性または非水性液剤または懸濁剤）、錠剤、例えば、頬側、舌下、及び全身吸収を目的としたもの、ボーラス剤、散剤、顆粒剤、舌に適用するためのペースト剤）、（２）例えば、皮下、筋肉内、静脈内または硬膜外注射による非経口投与（例えば、滅菌液剤もしくは懸濁剤、または持続放出製剤として）、（３）局所塗布（例えば、皮膚に施与されるクリーム剤、軟膏剤、または制御放出貼付剤もしくは噴霧剤として）、（４）膣内または直腸内（例えば、膣坐剤、クリーム剤またはフォーム剤として）、（５）舌下、（６）眼内、（７）経皮、または（８）経鼻のために適合されたものを含めて、固体または液体で投与するために特別に製剤化することができる。
【００８４】
「薬学的に許容される」という表現は本明細書では、適正な医学的判断の範囲内で、合理的なベネフィット／リスク比に見合った毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症で、ヒト及び動物の組織と接触させて使用するために適している化合物、物質、組成物、及び／または剤形を指すために使用される。
【００８５】
本明細書で使用する場合の「薬学的に許容される担体」という表現は、本化合物をある器官、または身体の一部から別の器官、または別の体の一部に運搬または輸送することに関わる、薬学的に許容される物質、組成物またはビヒクル、例えば、液体または固体増量剤、希釈剤、添加剤、製造助剤（例えば、滑沢剤、タルクマグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは亜鉛、またはステアリン酸（ｓｔｅｒｉｃ  ａｃｉｄ））、または溶媒封入剤（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｎｇ  ｍａｔｅｒｉａｌ）を意味する。各担体は、製剤の他の成分と適合性があるという意味で「許容され」なければならず、患者に有害であってはならない。薬学的に許容される担体として役立ち得る物質の一部の例には、（１）ラクトース、グルコース及びスクロースなどの糖、（２）トウモロコシデンプン及びバレイショデンプンなどのデンプン、（３）セルロース、ならびにカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース及び酢酸セルロースなどのセルロースの誘導体、（４）トラガント末、（５）麦芽、（６）ゼラチン、（７）タルク、（８）カカオバター及び坐剤ろうなどの添加剤、（９）ラッカセイ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリブ油、トウモロコシ油及びダイズ油などの油、（１０）プロピレングリコールなどのグリコール、（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトール及びポリエチレングリコールなどのポリオール、（１２）オレイン酸エチル及びラウリン酸エチルなどのエステル、（１３）寒天、（１４）水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウムなどの緩衝剤、（１５）アルギン酸、（１６）発熱物質不含水、（１７）等張性生理食塩水、（１８）リンゲル液、（１９）エチルアルコール、（２０）ｐＨ緩衝溶液、（２１）ポリエステル、ポリカーボネート及び／またはポリ無水物、ならびに（２２）医薬製剤で用いられる、他の非毒性で適合性の物質が含まれる。
【００８６】
上に提示したとおり、本化合物のある特定の実施形態は、アミノまたはアルキルアミノなどの塩基性官能基を含んでもよく、したがって、薬学的に許容される酸で薬学的に許容される塩を形成することができる。これに関する「薬学的に許容される塩」という用語は、本発明の化合物の相対的に非毒性、無機及び有機酸付加塩を指す。これらの塩は、投与ビヒクル中もしくは剤形製造プロセスにおいて、または本発明の精製化合物を遊離塩基形態で、適切な有機または無機酸と別に反応させ、そうして形成した塩をその後の精製中に単離することによって、その場で調製することができる。代表的な塩には、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプト酸塩、ラクトビオン酸塩、及びラウリルスルホン酸塩などが含まれる（例えば、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９７７）”Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：１−１９”を参照されたい）。
【００８７】
本化合物の薬学的に許容される塩には、例えば非毒性有機もしくは無機酸からの化合物の従来の非毒性塩または第四級アンモニウム塩が含まれる。例えば、そのような従来の非毒性塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸から誘導される塩；及び酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パルミチン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イソチオン酸などの有機酸から調製される塩が含まれる。
【００８８】
他の場合では、本発明の化合物は１個または複数の酸性官能基を含有してよく、したがって、薬学的に許容される塩基と共に薬学的に許容される塩を形成することができる。これらの例において、「薬学的に許容される塩」という用語は、本発明の化合物の相対的に非毒性の無機及び有機塩基付加塩を指す。これらの塩も同様に、投与ビヒクル中もしくは剤形製造プロセスにおいて、または精製化合物を遊離塩基形態で、薬学的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩もしくは重炭酸塩などの適切な塩基と、アンモニアと、または薬学的に許容される有機第一級、第二級もしくは第三級アミンと別に反応させることによって、その場で調製することができる。代表的なアルカリ金属またはアルカリ土類金属塩には、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、及びアルミニウム塩などが含まれる。塩基付加塩を形成するために有用な代表的な有機アミンには、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどが含まれる（例えば、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．、前出を参照されたい）。
【００８９】
ラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウムなどの湿潤剤、乳化剤及び滑沢剤、さらには着色剤、剥離剤、コーティング剤、甘味・香味及び芳香剤、防腐剤ならびに抗酸化剤も、組成物中に存在してよい。
【００９０】
薬学的に許容される抗酸化剤の例には、（１）アスコルビン酸、塩酸システイン、硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤、（２）パルミチン酸アスコルビル、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ−トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤、及び（３）クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート化剤が含まれる。
【００９１】
本発明の製剤には、経口、経鼻、局所（頬側及び舌下を含む）、直腸、膣内、及び／または非経口的投与に好適な製剤が含まれる。これらの製剤を、単位剤形で好都合に提示することができ、また薬学の分野で周知の任意の方法によって調製することができる。単一剤形を作製するために担体物質と組み合わせることができる活性成分の量は、処置を受ける宿主、特定の投与様式に応じて変化する。単一剤形を作製するために担体物質と組み合わせることができる活性成分の量は一般的に、治療効果をもたらす化合物の量である。一般的に、１００％のうち、この量は活性成分約０．１％〜約９９％、好ましくは約５％〜約７０％、最も好ましくは約１０％〜約３０％の範囲である。
【００９２】
ある特定の実施形態では、本発明の製剤は、シクロデキストリン、セルロース、リポソーム、ミセル形成剤、例えば胆汁酸、ならびにポリマー担体、例えば、ポリエステル及びポリ無水物からなる群から選択される添加剤；ならびに本発明の化合物を含む。ある特定の実施形態では、上述の製剤は、本発明の化合物を経口で生物学的に利用可能にする。
【００９３】
これらの製剤または組成物の調製方法は、本発明の化合物を担体、及び任意選択で１種または複数の副成分と混合するステップを含む。一般に、製剤は、本発明の化合物を液状担体もしくは微粉固体担体、またはその両方と均一かつ密接に混合し、次いで必要な場合には、生成物を成形することによって調製される。
【００９４】
経口投与に適した本発明の製剤は、カプセル剤、カシェ剤、丸剤、錠剤、ロゼンジ剤、散剤、顆粒剤、または水性液体もしくは非水液体中の液剤もしくは懸濁剤の形態で、または水中油型もしくは油中水型液体乳剤として、またはエリキシル剤もしくはシロップ剤として、またはトローチ剤（ゼラチン及びグリセリン、もしくはスクロース及びアラビアゴムなどの不活性基剤を使用）として、及び／または口内洗剤としてであってよく、それぞれ所定量の本発明の化合物を活性成分として含有する。本発明の化合物はまた、ボーラス剤、舐剤またはペースト剤として投与されてもよい。
【００９５】
経口投与用の本発明の固体剤形（カプセル剤、錠剤、丸剤、糖剤、散剤、顆粒剤、トローチ剤など）では、活性成分を、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸ニカルシウムなど、及び／または以下のいずれかなどの薬学的に許容される担体を含む１種または複数の薬学的に許容される添加剤と混合する：（１）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、及び／またはケイ酸などの充填剤及び増量剤、（２）例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース及び／またはアラビアゴムなどの結合剤、（３）グリセロールなどの保湿剤、（４）寒天、炭酸カルシウム、バレイショまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定のケイ酸塩、及び炭酸ナトリウムなどの崩壊剤、（５）パラフィンなどの溶解遅延剤、（６）第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤ならびにポロキサマー及びラウリル硫酸ナトリウムなどの界面活性剤、（７）例えばセチルアルコール、グリセロールモノステアラート、及び非イオン界面活性剤などの湿潤剤、（８）カオリン及びベントナイト粘土などの吸収剤、（９）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸、及びこれらの混合物などの滑沢剤、（１０）着色剤、ならびに（１１）クロスポビドンまたはエチルセルロースなどの放出制御剤。カプセル剤、錠剤及び丸剤の場合、医薬組成物はさらに緩衝剤を含んでもよい。そのような添加剤をラクトースまたは乳糖、さらには高分子量ポリエチレングリコールなどとして使用して、同様の種類の固体組成物をソフト及びハードゼラチンカプセル内の充填剤として用いてもよい。
【００９６】
錠剤を、任意選択で１種または複数の副成分と共に圧縮または成形することによって作製してもよい。圧縮錠剤は結合剤（例えば、ゼラチンもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、界面活性または分散剤を使用して調製してもよい。好適な機械で、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を成形することによって、湿製錠剤を作製してもよい。
【００９７】
本発明の医薬組成物の錠剤、ならびに糖衣錠、カプセル剤、丸剤及び顆粒剤などの他の固体剤形は任意選択で割線を入れても、または腸溶コーティング及び医薬分野で周知の、他のコーティングなどのコーティング及びシェルと共に調製してもよい。これらの剤形はまた例えば、所望の放出プロファイルを得るために様々な割合のヒドロキシプロピルメチルセルロースを使用して、また他のポリマーマトリックス、リポソーム及び／または微粒子を使用して、剤形中の活性成分の徐放または制御放出を得るために製剤化してもよい。急速放出、例えば凍結乾燥のために、これらを製剤化してもよい。これらを、例えば細菌保留フィルターによる濾過によって、または使用直前に滅菌水、もしくは他のいくつかの滅菌注射用媒体中に溶解可能な、滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことによって滅菌してもよい。これらの組成物は任意選択で、不透明化剤を含有してもよく、かつ活性成分（複数可）を消化管のある特定の部分だけで、またはそこで優先的に、任意選択で遅れて放出する組成物であってもよい。使用することができる埋め込み組成物の例には、高分子物質及びろうが含まれる。活性成分は、適切ならば、上記の添加剤の１種または複数を含むマイクロカプセル形態であってもよい。
【００９８】
本発明の化合物を経口投与するための液体剤形には、薬学的に許容される乳剤、マイクロエマルジョン剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤及びエリキシル剤が含まれる。活性成分に加えて、液体剤形は、例えば水または他の溶媒などの当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、オリブ油、ヒマシ油及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ソルビタンポリエチレングリコール及びソルビタン脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物などの可溶化剤ならびに乳化剤を含んでもよい。
【００９９】
希釈剤の他に、経口組成物はまた、湿潤剤、乳化剤及び懸濁化剤、甘味、香味、着色、芳香及び防腐剤などの追加の添加剤を含んでもよい。
【０１００】
懸濁剤は、活性化合物に加えて、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天及びトラガント、ならびにこれらの混合物などの懸濁化剤を含有してもよい。
【０１０１】
直腸または膣内投与用の本発明の医薬組成物の製剤は坐剤として提示されてもよく、その製剤は、本発明の１種または複数の化合物を、例えば、室温では固体であるが体温では液体であり、したがって直腸または膣腔内で溶解して活性化合物を放出するカカオバター、ポリエチレングリコール、坐剤ワックスまたはサリチル酸塩を含む１種または複数の適切な非刺激性添加剤または担体と混合することによって調製してもよい。
【０１０２】
膣内投与に適切な本発明の製剤には、適切であることが当技術分野で既知である、そのような担体を含有するペッサリー剤、タンポン剤、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤またはスプレー製剤も含まれる。
【０１０３】
本発明の化合物の局所または経皮投与用の剤形には、散剤、噴霧剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、液剤、貼付剤及び吸入剤が含まれる。活性化合物を、滅菌状態下で、薬学的に許容される担体と、及び必要とされ得る任意の防腐剤、緩衝剤、または噴射剤と混合してもよい。
【０１０４】
軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤及びゲル剤は、本発明の活性化合物に加えて、動物性及び植物性脂肪、油、ろう、パラフィン、デンプン、トラガント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクならびに酸化亜鉛、またはこれらの混合物などの添加剤を含有してもよい。
【０１０５】
散剤及び噴霧剤は、本発明の化合物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム及びポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物などの添加剤を含有することができる。噴霧剤は加えて、クロロフルオロ炭化水素、ならびにブタン及びプロパンなどの揮発性非置換炭化水素などの従来の噴射剤を含有することができる。
【０１０６】
経皮貼付剤は、本発明の化合物の身体への制御送達が得られるという追加の利点を有する。そのような剤形は、化合物を適切な媒体中に溶解または分散させることによって作製することができる。皮膚を通過しての化合物の流量を増大させるために、吸収促進剤を使用することもできる。そのような流れの速度は、速度制御膜を用意するか、またはポリマーマトリックスもしくはゲル中で化合物を分散させるか、いずれかによって制御することができる。
【０１０７】
眼科製剤、眼軟膏剤、散剤、液剤などもまた、本発明の範囲であることが企図される。
【０１０８】
非経口投与に適切な本発明の医薬組成物は、使用直前に滅菌注射用液剤または分散剤に再構成され得る、１種または複数の薬学的に許容される滅菌等張水溶液もしくは非水溶液、分散液、懸濁液もしくはエマルジョン、または滅菌粉末と組み合わせた１種または複数の本発明の化合物を含み、これらは糖、アルコール、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、製剤を意図されたレシピエントの血液と等張性にする溶質、懸濁化剤または増粘剤を含有し得る。
【０１０９】
本発明の医薬組成物中で使用され得る適切な水性及び非水性担体の例には、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、及びこれらの適切な混合物、オリブ油などの植物油、ならびにオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが含まれる。例えばレシチンなどのコーティング材料の使用によって、分散剤の場合には必要な粒径の維持によって、及び界面活性剤の使用によって、適正な流動性を維持することができる。
【０１１０】
これらの組成物はまた、防腐剤、湿潤剤、乳化剤及び分散剤などの追加の添加剤を含有してもよい。様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などを含有することによって、本化合物での微生物の活動の阻止を確実にすることができる。組成物中に糖、塩化ナトリウムなどの等張化剤が含まれることが望ましいこともある。加えて、注射可能な医薬形態の吸収を長引かせることは、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンなど、吸収を遅延させる薬剤を含有することによってもたらされる。
【０１１１】
場合によっては、薬物の効果を長引かせるために、皮下または筋肉注射からの薬物の吸収を遅らせることが望ましい。このことは、水に難溶性の結晶性または非晶質物質の液体懸濁液の使用によって達成され得る。次いで、薬物の吸収速度はその溶解速度に依存し、さらにこれは、結晶サイズ及び結晶形に依存し得る。別法では、非経口投与される薬物の形態の吸収遅延は、薬物を油性ビヒクル中に溶解または懸濁させることによって達成される。
【０１１２】
注射可能なデポー剤形態は、本化合物のマイクロカプセル基質を、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中で形成することによって作製される。ポリマーに対する薬物の割合、及び使用する特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）及びポリ（無水物）が含まれる。デポー注射製剤は、薬物を体内組織と適合性のリポソームまたはマイクロエマルジョン中に封入することによっても調製される。
【０１１３】
本発明の化合物を医薬品としてヒト及び動物に投与する場合、そのままで、または薬学的に許容される担体と組み合わせて、例えば０．１〜９９％（より好ましくは、１０〜３０％）の活性成分を含有する医薬組成物として投与することができる。
【０１１４】
投与経路及び用量
本発明の製剤は経口、非経口、局所、または直腸投与することができる。これらはもちろん、各投与経路に適切な形態で投与される。例えば、これらを錠剤またはカプセル剤形態で、注射で、吸入で、目薬で、軟膏剤で、坐剤などによって投与する；注射、注入または吸入によって投与する；ローションまたは軟膏剤によって局所投与する；及び坐剤によって直腸投与する。経口投与が好ましい。
【０１１５】
本発明で使用する場合の「非経口的投与」及び「非経口で投与される」という表現は、腸内及び局所投与以外の、通常は注射による投与様式を意味し、それには、限定ではないが、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経皮気管内、皮下、表皮下、関節内、被膜下、クモ膜下、髄腔内及び胸骨内注射及び注入が含まれる。
【０１１６】
本発明で使用する場合の「全身投与」、「全身に投与される」「末梢投与」及び「末梢に投与される」という表現は、患者の系に入り、したがって代謝及び他の同様のプロセスを受けるような、中枢神経系に直接入る以外の化合物、薬物または他の物質の投与（例えば皮下投与）を意味する。
【０１１７】
これらの化合物を治療のために、経口、経鼻（例えば噴霧剤によって）、直腸、膣内、非経口、槽内、ならびに散剤、軟膏剤または滴剤による（頬側及び舌下投与を含む）局所投与を含む任意の適切な投与経路でヒト及び他の動物に投与してもよい。
【０１１８】
選択された投与経路に関わらず、適切な水和形態で使用され得る本発明の化合物、及び／または本発明の医薬組成物は、当業者に既知の従来の方法によって、薬学的に許容される剤形に製剤化される。
【０１１９】
本発明の医薬組成物中の活性成分の実際の投薬量レベルは、特定の患者、組成、及び投与様式で、患者に有毒でなく、所望の治療反応を達成するために有効な活性成分の量を得るために変化し得る。
【０１２０】
選択される投薬量レベルは、使用される本発明の特定の化合物、またはそのエステル、塩もしくはアミドの活性、投与経路、投与時間、使用される特定の化合物の排泄または代謝速度、吸収速度及び程度、処置の持続期間、使用される特定の化合物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物及び／または物質、治療を受ける患者の年齢、性別、体重、状態、全身健康ならびに以前の病歴、ならびに医療当業者に周知の同様の因子などを含む様々な因子に依存するであろう。
【０１２１】
当技術分野で通常の技能を有する医師または獣医師は、必要な医薬組成物の有効量を容易に決定し、処方することができる。例えば、医師または獣医師は、医薬組成物中で用いられる本発明の化合物の用量を、所望の治療効果を得るために必要な量よりも低いレベルで開始し、所望の効果が得られるまで投薬量を徐々に増加させることができる。
【０１２２】
一般に、本発明の化合物の適切な１日用量は、治療効果をもたらすために有効な最低用量である化合物の量である。そのような有効用量は一般的に、上記の要因に依存する。一般的に、表示された鎮痛効果のために使用される場合、患者への本発明の化合物の経口、静脈内、脳室内及び皮下用量は１日あたり、体重１ｋｇあたり約０．０００１〜約１００ｍｇの範囲で変動する。
【０１２３】
ある特定の実施形態では、用量の化合物または組成物を対象に毎日、１日おき、２日おき、３日おき、週１回、週２回、週３回、または２週ごとに１回投与する。所望の場合には、活性化合物の有効な１日用量を、１日を通じて適切な間隔で２回、３回、４回、５回、６回またはそれ以上に分けて投与する下位投与として、また任意選択で、単位剤形で投与してもよい。一部の実施形態では、用量（複数回）の化合物または組成物を２日、３日、５日、７日、１４日、または２１日間にわたって投与する。ある特定の実施形態では、用量の化合物または組成物を１ヶ月、１．５ヶ月、２ヶ月、２．５ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月間またはそれ以上にわたって投与する。
【０１２４】
上記の投与スケジュールは、例示説明を目的として提供するにすぎず、限定的とみなされるべきではない。当業者は、あらゆる用量が本発明の範囲内にあることを容易に理解するであろう。
【０１２５】
この処置を受ける患者は、霊長類、特にヒト、ならびにウマ、ウシ、ブタ及びヒツジなどの他の哺乳類；ならびに一般的な家禽及びペットを含む、必要な任意の動物である。
【０１２６】
本発明の方法で使用するための化合物は、そのままで、または薬学的に許容される担体と混合して投与することができ、かつペニシリン、セファロスポリン、アミノグリコシド及びグリコペプチドなどの抗微生物剤と併せて投与することもできる。したがって併用療法には、最初に投与した製剤の治療効果が、後続の製剤が投与されるときに完全に消失していない方法で、活性化合物を順次に、同時に、及び別々に投与することが含まれる。
【０１２７】
本発明の活性化合物を動物飼料に添加することは、有効量で活性化合物を含む適切な飼料プレミックスを調製し、そのプレミックスを完成飼料に組み込むことによって好ましくは達成される。
【０１２８】
別法では、活性成分を含有する中間体濃縮物または飼料サプリメントを、飼料にブレンドすることができる。そのような飼料プレミックス及び完成飼料を調製して投与する方法は参照図書に記載されている（“Ａｐｐｌｉｅｄ  Ａｎｉｍａｌ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ”，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｄｍａｎ  ａｎｄ  ＣＯ．，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９６９年、または“Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ  Ｆｅｅｄｓ  ａｎｄ  Ｆｅｅｄｉｎｇ”Ｏ  ａｎｄ  Ｂ  ｂｏｏｋｓ，Ｃｏｒｖａｌｌｉｓ，Ｏｒｅ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９７７年など）。
【０１２９】
親油性（水不溶性）医薬品の生物学的利用能を向上させるために、マイクロ乳化技術を使用してもよい。例には、Ｔｒｉｍｅｔｒｉｎｅ（Ｄｏｒｄｕｎｏｏ，Ｓ．Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，１７（１２），１６８５−１７１３，１９９１）及びＲＥＶ  ５９０１（Ｓｈｅｅｎ，Ｐ．Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  ８０（７），７１２−７１４，１９９１）が含まれる。とりわけマイクロ乳化は、循環系の代わりにリンパ系への吸収を優先的に誘導し、それによって肝臓をバイパスし、肝胆循環における化合物の破壊を防止することによって、生物学的利用能の増強をもたらす。
【０１３０】
制御放出
本発明の製剤の放出特性は、封入材料、封入された薬物の濃度、及び放出調整剤の存在に依存する。例えば、胃においてなどの低ｐＨでのみ、または腸においてなどの高いｐＨでのみ放出するｐＨ感受性コーティングを使用して、放出をｐＨ依存的に操作することができる。胃を通過し終えるまで放出が生じることを防ぐため、腸溶コーティングを使用することができる。胃で最初の放出を得て、続いて腸で後の放出を得るために、異なった材料の中に封入されたシアナミドの多層コーティングまたは混合物を使用することができる。塩または細孔形成剤を含ませることによって放出を操作することもでき、これらは水の取り込みまたはカプセル剤からの拡散によって薬物の放出を増加させることができる。薬物の溶解度を変更する添加剤も、放出速度を制御するために使用することができる。マトリックスの分解またはマトリックスからの放出を高める作用物質もまた、組み込むことができる。これらを、化合物に応じて、薬物に添加することも、分離相として（すなわち、微粒子として）添加することも、またはポリマー相と共溶解させることもできる。分解促進剤の種類には、硫酸アンモニウム及び塩化アンモニウムなどの無機塩、クエン酸、安息香酸、及びアスコルビン酸などの有機酸、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、炭酸亜鉛、及び水酸化亜鉛などの無機塩基、ならびに硫酸プロタミン、スペルミン、コリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、及びトリエタノールアミンなどの有機塩基、ならびにＴｗｅｅｎ（登録商標）及びＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）などの界面活性剤が含まれる。マトリックスに微細構造を加える細孔形成剤（すなわち、無機塩及び糖などの水溶性化合物）を微粒子として添加する。範囲は１〜３０％（ｗ／ｗポリマー）の間でなければならない。
【０１３１】
消化管内での粒子の滞留時間を変更することで、取り込みも操作することができる。これは、例えば粘膜接着性ポリマーで粒子をコーティングする、またはそのポリマーを封入材料として選択することによって達成することができる。例には、キトサン、セルロース、特にポリアクリラートなどの遊離カルボキシル基を有する大部分のポリマーが含まれる（本発明で使用する場合、ポリアクリラートは、アクリラート基、ならびにシアノアクリラート及びメタクリラートなどの変性アクリレート基を含むポリマーを指す）。
【０１３２】
当業者であれば本明細書に開示の発明の原則内で変形形態を作成することができ、そのような変更形態も本発明の範囲内に含まれるべきことが意図されていることは理解及び予期されるべきである。次の実施例で本発明をさらに例示説明するが、それらは、本発明の範囲を何かしら制限するものとは解釈されるべきではない。本明細書に引用されている参照文献はすべて、それらの全体が参照によって本明細書に援用される。
【実施例】
【０１３３】
実施例１
すべての溶媒及び試薬を商業的に入手し、入手したまま使用した。1Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ装置（３００ＭＨｚまたは４００ＭＨｚ）で、特記されている重水素化溶媒中で記録した。化学シフトはｐｐｍで示され、結合定数はヘルツである。最終化合物はすべて、２２０〜４００メッシュシリカゲルを使用するフラッシュクロマトグラフィー、または逆相ＨＰＬＣによって溶媒としてＣＨ3ＣＮ／水を用いて精製した。薄層クロマトグラフィーをシリカゲル６０Ｆ−２５４（０．２５ｎｍ厚）プレート上で行った。可視化をＵＶ光及び／またはエタノール中１０％リンモリブデン酸で達成した。基準（低解像度）質量スペクトルをＷａｔｅｒｓ  ＬＣＴまたはＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ＡＰＩ  ３０００質量分析計のいずれかで得た。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）はＷａｔｅｒｓ  ＬＣＴまたはＡｇｉｌｅｎｔ  ＴＯＦ質量分析計のいずれかで得た。他のＬＣ−ＭＳ実験はすべて、Ａｇｉｌｅｎｔシングル四重極質量分析計に連結したＡｇｉｌｅｎｔ  １１００ＨＰＬＣで行った。化合物純度をＬＣ−ＭＳによって２３０ｎＭ及び２５４ｎＭ波長で決定した。本明細書に報告する最終化合物はすべて、９５％以上の純度を有する。
【０１３４】
一般手順Ａ
【化１５】
2020527585.tif 000017
ＥＤＣＩカップリング：一般構造式１の化合物（１当量）、ＥＤＣＩ（１当量）、ＨＯＢｔ（０．２当量）及びＤＩＥＡ（２当量）をＤＭＦに溶解させ、２５℃で５分間にわたって撹拌した。次いで、混合物に、アミン（１当量）を添加した。混合物を２５℃で１６時間にわたって撹拌した。混合物を水に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、残渣を得た。残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、一般構造式２の化合物を得た。
【０１３５】
ＨＡＴＵカップリング：一般構造式１の化合物（１当量）、ＨＡＴＵ（１．２５当量）及びＤＩＰＥＡ（１．５当量）をＤＭＦに溶解させ、２３℃で１５分間にわたって撹拌した。１Ｈ−インダゾール−５−アミン（１当量）を反応混合物に導入し、溶液を２３℃でさらに１６時間にわたって撹拌し続けた。反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して粗製の物質を得、これをシリカゲル上で精製して、所望の一般構造式２の化合物を得た。
【０１３６】
Ｂｏｃ脱保護：一般構造式２の化合物をＤＣＭに溶解させ、ジオキサン中４ＮのＨＣｌをその溶液に導入した。反応混合物を２３℃で１時間にわたって撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、粗製の反応混合物を得、これを逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の一般構造式３の化合物を得た。
【０１３７】
ベンジル基除去：一般構造式２の化合物（１当量）及び濃ＨＣｌ（１．２当量）をＭｅＯＨに溶解させ、１０％脱水Ｐｄ／Ｃを添加した。反応混合物をＨ2（１気圧）の雰囲気下で、５０℃で５時間にわたって撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、粗生成物を得、これを逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、所望の一般構造式３の化合物を得た。
【０１３８】
一般手順Ｂ
【化１６】
2020527585.tif 000018
一般構造式４の化合物（１当量）をＣＣｌ4に溶解させ、ＡＩＢＮ（０．１当量）を、続いてＮＢＳ（１．２当量）を室温で添加した。反応温度を６０℃に上げ、撹拌を１６時間にわたって継続した。反応混合物を濾別し、溶媒を減圧下で除去した。粗製の物質５を次のステップで、追加で精製せずに使用した。
【０１３９】
ＴＨＦ中の一般構造式５の化合物（１当量）及びアルキルアミン（２当量）を７０℃で１６時間にわたって撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、物質をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、一般構造式６の化合物を得た。
【０１４０】
ＮａＯＨ（２当量）を、ＭｅＯＨ／Ｈ2Ｏ混合物中に溶解した一般構造式６の化合物（１当量）を含有する反応容器に導入した。反応物を２０℃で１６時間にわたって撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。粗製の残渣を水（１０ｍＬ）に溶解させ、ｐＨ＝８になるまで６ＮのＨＣｌで慎重に中和した。懸濁液を濾過し、固体を収集し、乾燥させて、一般構造式７の化合物を得た。
【０１４１】
一般構造式７の化合物（１当量）、ＨＡＴＵ（１．２５当量）及びＤＩＰＥＡ（２当量）をＤＭＦに溶解させ、２０℃で１５分間にわたって撹拌した。１Ｈ−インダゾール−５−アミン（１当量）を反応混合物に導入し、２０℃で１５．８時間にわたって撹拌した。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の反応混合物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、一般構造式８の化合物を得た。
【０１４２】
実施例２
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化１７】
2020527585.tif 000019
反応を一般プロトコルＡに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（７７％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．０９  （ｂｒｓ，  １Ｈ），  ８．２０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０８−７．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．２３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３０  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３３７．０  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１４３】
実施例３
（Ｒ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化１８】
2020527585.tif 000020
反応を一般プロトコルＡに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（７７％）として得た。鏡像異性体をＳＦＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈカラム）によって分離した。移動相：ＣＯ2中の０．１％ＮＨ4ＯＨ含有５５％ＥｔＯＨ、流速７０ｇ／分。1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．０９  （ｂｒｓ，  １Ｈ），  ８．２０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０８−７．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．２３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３０  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３３７．０  （Ｍ＋Ｈ）+．［α］D  ＝  ＋１０２．３  （ｃ  ＝  ０．５，  ＣＨ3ＯＨ，  ２５℃）。
【０１４４】
実施例４
（Ｓ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化１９】
2020527585.tif 000021
反応を一般プロトコルＡに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（７７％）として得た。鏡像異性体をＳＦＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈカラム）によって分離した。移動相：ＣＯ2中の０．１％ＮＨ4ＯＨ含有５５％ＥｔＯＨ、流速７０ｇ／分。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．０９  （ｂｒｓ，  １Ｈ），  ８．２０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０８−７．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．２３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３０  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３３７．０  （Ｍ＋Ｈ）+．  ［α］Ｄ  ＝  −９７．２  （ｃ  ＝  ０．５，  ＣＨ3ＯＨ，  ２５℃）．
【０１４５】
実施例５
２−（４−クロロフェニル）−２−（メチルアミノ）−Ｎ−（４−（ピリジン−４−イル）フェニル）アセトアミド
【化２０】
2020527585.tif 000022
反応を一般プロトコルＢに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、２−（４−クロロフェニル）−２−（メチルアミノ）−Ｎ−（４−（ピリジン−４−イル）フェニル）アセトアミドアセトアミドを黄色の固体（２４％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １１．０６  （ｓ，  １Ｈ），  ９．６２  （ｂｒｓ，  ２Ｈ），  ８．７８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．９６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．７７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６２  （ｓ，  ４Ｈ），  ５．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ２．５５  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３５２．０  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１４６】
実施例６
２−（４−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）−Ｎ−（４−（ピリジン−４−イル）フェニル）アセトアミド
【化２１】
2020527585.tif 000023
反応を一般プロトコルＢに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、２−（４−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）−Ｎ−（４−（ピリジン−４−イル）フェニル）アセトアミドをオフホワイト色の固体（１６％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．９３  （ｓ，  １Ｈ），  ９．６６−９．２７  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．７７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．９６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．７８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．０８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．０３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６７  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３４８．０  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１４７】
実施例７
２−（メチルアミノ）−Ｎ−（４−（ピリジン−４−イル）フェニル）−２−（ｐ−トリル）アセトアミド
【化２２】
2020527585.tif 000024
反応を一般プロトコルＢに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、２−（メチルアミノ）−Ｎ−（４−（ピリジン−４−イル）フェニル）−２−（ｐ−トリル）アセトアミドを白色の固体（２８％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．２５  （ｂｒｓ，  １Ｈ），  ８．５９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ４．４，  １．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．３２  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８１−７．７６  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．６８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ４．４，  １．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．２８  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３３２．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１４８】
実施例８
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（２−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化２３】
2020527585.tif 000025
反応を一般プロトコルＢに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（２−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（３２％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  ９．９８  （ｂｒｓ，  １Ｈ），  ８．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．５８  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８２  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３３  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３３７．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１４９】
実施例９
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化２４】
2020527585.tif 000026
反応を一般プロトコルＢに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（３２％）として得た。1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．６０  （ｓ，  １Ｈ），  ９．４６−９．３０  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．０１  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５９−７．５０  （ｍ，  ６Ｈ），  ７．０７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．９５−４．９４  （ｍ，  １Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．５４  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３３７．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１５０】
実施例１０
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチルアミノ）−２−（４−メトキシフェニル）アセトアミド
【化２５】
2020527585.tif 000027
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチルアミノ）−２−（４−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（１６％）として得た。1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．５５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９３  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５９−７．５１  （ｍ，  ６Ｈ），  ７．０４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．７７  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．９８−２．８３  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３５１．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１５１】
実施例１１
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）アセトアミド
【化２６】
2020527585.tif 000028
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）アセトアミドを白色の固体（８％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．４４  （ｓ，  １Ｈ），  ２．６２−２．５４  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．２８  （ｓ，  ３Ｈ），  １．０９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３３５．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１５２】
実施例１２
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチルアミノ）−２−（４−フルオロフェニル）アセトアミド
【化２７】
2020527585.tif 000029
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）アセトアミドを白色の固体（２０％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．７６  （ｓ，  １Ｈ），  ９．５３−９．４７  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．０１  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６９−７．６０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５９−７．５３  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．３７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．８，  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．１４  （ｓ，  １Ｈ），  ２．９６−２．８３  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３３９．０  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１５３】
実施例１３
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチルアミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化２８】
2020527585.tif 000030
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチルアミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドをピンク色の固体（２０％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．０９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０８−７．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８６−６．８４  （ｍ，  １  Ｈ），  ４．３３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．５６−２．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  １．０８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３５１．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１５４】
実施例１４
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（メチルアミノ）−２−（ｍ−トリル）アセトアミド
【化２９】
2020527585.tif 000031
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（メチルアミノ）−２−（ｍ−トリル）アセトアミドを白色の固体（１４％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．０５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６３−７．６１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５４−７．５２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．２９−７．０９  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．１０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ２．３１  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．２８  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３２１．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１５５】
実施例１５
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチルアミノ）−２−（３−フルオロフェニル）アセトアミド
【化３０】
2020527585.tif 000032
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチルアミノ）−２−（３−フルオロフェニル）アセトアミドを白色の固体（２０％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６１−７．５９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５５−７．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４３−７．３１  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．１４−７．０９  （ｍ，  １Ｈ），  ４．４０  （ｓ，  １Ｈ），  ２．５６−２．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  １．０７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３３９．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１５６】
実施例１６
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−クロロフェニル）−２−（エチルアミノ）アセトアミド
【化３１】
2020527585.tif 000033
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−クロロフェニル）−２−（エチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（６％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２−７．５３  （ｍ，  ５Ｈ），  ７．４５−７．３４  （ｍ，  ３Ｈ），  ４．３９  （ｓ，  １Ｈ），  ２．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  １．０７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３５５．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１５７】
実施例１７
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−クロロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化３２】
2020527585.tif 000034
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−クロロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（８％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２−７．６０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５４−７．４９  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４３−７．４１  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２８  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３４１．０  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１５８】
実施例１８
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化３３】
2020527585.tif 000035
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（２３％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６３−７．６０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５５−７．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４３−７．３１  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．１５−７．１０  （ｍ，  １Ｈ），  ４．３０  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２９  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３２５．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１５９】
実施例１９
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化３４】
2020527585.tif 000036
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドをオフホワイト色の固体（２５％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２０  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２−７．５０  （ｍ，  ６Ｈ），  ７．２１−７．１７  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．２７  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２９  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３２５．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１６０】
実施例２０
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−クロロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化３５】
2020527585.tif 000037
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−クロロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドをオフホワイト色の固体（３％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．３３  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６３−７．６１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５６−７．５３  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．４５−７．３４  （ｍ，  ３Ｈ），  ４．２６  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２８  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３４１．０  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１６１】
実施例２１
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（メチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）アセトアミド
【化３６】
2020527585.tif 000038
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（メチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）アセトアミドを黄色の油状物（１２％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １２．８８  （ｓ，  １Ｈ），  １０．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６３−７．６１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５４−７．５２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．３５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２８  （ｓ，  ６Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３２１．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１６２】
実施例２２
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−クロロフェニル）−２−（エチルアミノ）アセトアミド
【化３７】
2020527585.tif 000039
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−クロロフェニル）−２−（エチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（６％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６１−７．５０  （ｍ，  ６Ｈ），  ７．４３−７．４１  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．３８  （ｓ，  １Ｈ），  ２．５７−２．５４  （ｍ，  ２Ｈ），  １．０７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３５５．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１６３】
実施例２３
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化３８】
2020527585.tif 000040
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（５％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １２．８６  （ｓ，  １Ｈ），  １０．０３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３２  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６７  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２５  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３５３．２  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１６４】
実施例２４
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−（ｄｉフルオロメトキシ）フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化３９】
2020527585.tif 000041
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドをオフホワイト色の固体（１８％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２−７．６０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５５−７．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４４−７．０５  （ｍ，  ５Ｈ），  ４．２８  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２９  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３７３．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１６５】
実施例２５
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化４０】
2020527585.tif 000042
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（１２％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６１−７．５３  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０６−７．０３  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８７−６．８４  （ｍ，  １Ｈ），  ４．４０  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．２４  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３８１．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１６６】
実施例２６
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（メチルアミノ）エチル）アミノ）アセトアミド
【化４１】
2020527585.tif 000043
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（メチルアミノ）エチル）アミノ）アセトアミドを白色の固体（２９％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．４９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９１  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５８−７．５２  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．３１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１０−７．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．９２−６．８９  （ｍ，  １Ｈ），  ４．４３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８１  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．１４−３．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９２−２．８１  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．７１  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３８０．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１６７】
実施例２７
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（メチルアミノ）−２−（２−メチルベンゾ［ｄ］チアゾール−６−イル）アセトアミド
【化４２】
2020527585.tif 000044
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（メチルアミノ）−２−（２−メチルベンゾ［ｄ］チアゾール−６−イル）アセトアミドを白色の固体（６％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．３４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．００−７．９４  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．６３−７．５４  （ｍ，  ５Ｈ），  ４．６７  （ｓ，  １Ｈ），  ２．８１  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．４０  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３７８．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１６８】
実施例２８
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−（ジメチルアミノ）フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化４３】
2020527585.tif 000045
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−（ジメチルアミノ）フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを黄色の固体（１７％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９８  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２−７．５１  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．１５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．８７  （ｓ，  １Ｈ），  ６．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．６６−６．６３  （ｍ，  １Ｈ），  ４．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ２．８９  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．３２  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３５０．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１６９】
実施例２９
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（２−メトキシピリジン−４−イル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化４４】
2020527585.tif 000046
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（２−メトキシピリジン−４−イル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（２％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９８  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６１−７．５２  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．０７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ４．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．２８  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３３８．２  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１７０】
実施例３０
メチル３−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）ベンゾアート
【化４５】
2020527585.tif 000047
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、メチル３−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）ベンゾアートを白色の固体（１５％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．７１  （ｓ，  １Ｈ），  ９．６５−９．５１  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．８６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５９−７．５２  （ｍ，  ４Ｈ），  ５．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．５４  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３６５．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１７１】
実施例３１
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化４６】
2020527585.tif 000048
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、メチルＮ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−（ジメチルアミノ）フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（４％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ７．９０  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５７−７．５０  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．３０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ２．９１  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．３７  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３５０．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１７２】
実施例３２
３−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）安息香酸
【化４７】
2020527585.tif 000049
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、３−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）安息香酸を白色の固体（１５％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９８  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．８６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．４７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３３  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２９  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３５１．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１７３】
実施例３３
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化４８】
2020527585.tif 000050
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（８％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ７．９３  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．８９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５８−７．５４  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．３３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．１２  （ｓ，  １Ｈ），  ２．６９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．５７  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３６１．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１７４】
実施例３４
メチル４−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）ベンゾアート
【化４９】
2020527585.tif 000051
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、メチル４−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）ベンゾアートをオフホワイト色の固体（１１％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．１７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ６．８，  ２．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．９２  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．７４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５８−７．５３  （ｍ，  ４Ｈ），  ５．０７  （ｓ，  １Ｈ），  ３．９２  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．７０  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３６５．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１７５】
実施例３５
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（２−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−６−イル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化５０】
2020527585.tif 000052
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（２−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−６−イル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを黄色の油状物（４％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．９２  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．８６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  １．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５９−７．５２  （ｍ，  ４Ｈ），  ５．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ２．８４  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．７１  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３６１．２  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１７６】
実施例３６
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（３−メトキシプロピル）アミノ）アセトアミド
【化５１】
2020527585.tif 000053
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（３−メトキシプロピル）アミノ）アセトアミドをオフホワイト色の固体（２１％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．５５  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．７２−７．６５  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２６−７．２５  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．５１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．３５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．３０−３．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．０３−１．９８  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３９５．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１７７】
実施例３７
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−エトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化５２】
2020527585.tif 000054
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−エトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（８％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １２．８９  （ｓ，  １Ｈ），  １０．０９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１２  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０４−７．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４８−３．４１  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．６６−２．６３  （ｍ，  ２Ｈ），  １．１１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３９５．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１７８】
実施例３８
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（３−（ジメチルアミノ）プロピル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化５３】
2020527585.tif 000055
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（３−（ジメチルアミノ）プロピル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドをオフホワイト色の固体（４％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ７．９３  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６０−７．５３  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．３０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０９−７．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．９０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３４  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８２  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６８−２．６１  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．４８−２．４２  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．３０  （ｓ，  ６Ｈ），  １．８３−１．７４  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４０８．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１７９】
実施例３９
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−（ジメチルアミノ）−２−オキソエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化５４】
2020527585.tif 000056
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−（ジメチルアミノ）−２−オキソエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（７％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １２．８７  （ｂｒｓ，  １Ｈ），  １０．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０６−７．０３  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３８  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．３８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．８７  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．８４  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４０８．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１８０】
実施例４０
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−イソプロポキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化５５】
2020527585.tif 000057
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−イソプロポキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（２８％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．０３  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６１−７．５５  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２３−７．２０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．１０−７．０７  （ｍ，  １Ｈ），  ５．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．７４−３．７０  （ｍ，  ３Ｈ），  ３．２１−３．１３  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ６．４，  ３．２  Ｈｚ，  ６Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４０９．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１８１】
実施例４１
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−アミノ−２−オキソエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化５６】
2020527585.tif 000058
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−アミノ−２−オキソエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（６％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２２  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２−７．５３  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．２８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１２−７．０１  （ｍ，  ３Ｈ），  ６．８７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３４  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．０４  （ｓ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３８０．２  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１８２】
実施例４２
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（３−（メチルアミノ）−プロピル）アミノ）アセトアミド
【化５７】
2020527585.tif 000059
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−アミノ−２−オキソエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（６％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．８１  （ｓ，  １Ｈ），  ９．７０  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．６５  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５６  （ｓ，  ４Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２２−７．１９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  １．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．１１  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．９６−２．９０  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．５４  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．０３−１．９６  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３９４．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１８３】
実施例４３
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（１−メトキシ−２−メチルプロパン−２−イル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化５８】
2020527585.tif 000060
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（１−メトキシ−２−メチルプロパン−２−イル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（１７％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．６０  （ｓ，  １Ｈ），  ９．２３−９．１９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５８−７．５２  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２１−７．１９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．８，  ２．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．２２  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４２−３．３５  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．１７  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３３  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３１  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４０９．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１８４】
実施例４４
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）アミノ）アセトアミド
【化５９】
2020527585.tif 000061
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）アミノ）アセトアミドを黄色の固体（３％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ７．９５  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５９−７．５３  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１８−７．１７  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．１６−７．１０  （ｍ，  １Ｈ），  ５．１２  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８４  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６８  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．７９  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３９４．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１８５】
実施例４５
２−（（（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル）アミノ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化６０】
2020527585.tif 000062
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、２−（（（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル）アミノ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（１％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．５８  （ｓ，  １Ｈ），  ９．７７  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．７０  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２０−７．１７  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ４．０１  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４０３．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１８６】
実施例４６
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチル（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化６１】
2020527585.tif 000063
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（エチル（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（１９％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  アセトン−ｄ6）  δ  １１．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０１  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．７３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．４７−７．４３  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．３７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１１−７．０９  （ｍ，  １Ｈ），  ６．０３−６．０１  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９３−３．８０  （ｍ，  ５Ｈ），  ３．７４−３．５３  （ｍ，  ３Ｈ），  ３．４２  （ｍ，  ４Ｈ），  １．４４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４０９．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１８７】
実施例４７
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）（メチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化６２】
2020527585.tif 000064
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）（メチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドをオフホワイト色の固体（２４％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  アセトン−ｄ6）  δ  １０．８５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０１  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．７１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．４６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．３３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．８０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．９５−３．９２  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．８７  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．７２−３．６０  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．４２  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．０６  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３９５．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１８８】
実施例４８
Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化６３】
2020527585.tif 000065
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドをオフホワイト色の固体（１３％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  ９．９４  （ｓ，  １Ｈ），  ９．９２  （ｓ，  １Ｈ），  ９．６６  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．０７  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．８７  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４６−７．３９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．２３−７．１９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ６．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．３６  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４４−４．３５  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６６−３．６４  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．６３−３．４９  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．３１  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．０７−３．００  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．７６  （ｓ，  ６Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４８６．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１８９】
実施例４９
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−メチルアセトアミド
【化６４】
2020527585.tif 000066
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−メチルアセトアミドを黄色の固体（１５％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  Ｄ2Ｏ）  δ  ８．０７  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．４８  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．２７−７．２３  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．９５  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．６８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．２８  （ｓ，  １Ｈ），  ５．０２  （ｓ，  １Ｈ），  ３．６１  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．５２  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．３０  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．２４  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．１５−３．１１  （ｍ，  １Ｈ），  ３．０２−２．９７  （ｍ，  １Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３９５．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１９０】
実施例５０
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−モルホリノエチル）アミノ）アセトアミド
【化６５】
2020527585.tif 000067
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−モルホリノエチル）アミノ）アセトアミドを白色の固体（３８％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．７２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５９−７．５７  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２１−７．１７  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０７−７．０４  （ｍ，  １Ｈ），  ５．０９  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７９  （ｍ，  ７Ｈ），  ３．３１−３．１２  （ｍ，  ８Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４３６．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１９１】
実施例５１
Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）（メチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化６６】
2020527585.tif 000068
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）（メチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを黄色の固体（３１％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  Ｄ2Ｏ）  δ  ８．０４  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５６−７．４８  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．１９−７．１４  （ｍ，  ４Ｈ），  ５．２７  （ｓ，  １Ｈ），  ４．２３−４．２１  （ｍ，  １Ｈ），  ４．１１−４．１０  （ｍ，  １Ｈ），  ３．８０  （ｍ，  ５Ｈ），  ３．５０  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．３３  （ｍ，  ４Ｈ），  ３．１９−３．１６  （ｍ，  １Ｈ），  ２．８２−２．６２  （ｍ，  ９Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ５００．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１９２】
実施例５２
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）アミノ）アセトアミド
【化６７】
2020527585.tif 000069
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）アミノ）アセトアミドを白色の固体（３５％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＯＳ−ｄ6）  δ  １０．６４  （ｓ，  １Ｈ），  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５７  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０，  １Ｈ），  ７．１９−７．１６  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０５−  ７．０３  （ｍ，  １Ｈ），  ５．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４４−３．２７  （ｍ，  ８Ｈ），  １．９４  （ｍ，  ４Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４２０．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１９３】
実施例５３
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（１−（メトキシメチル）シクロプロピル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化６８】
2020527585.tif 000070
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（１−（メトキシメチル）シクロプロピル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドをオフホワイト色の固体（２７％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＯＳ−ｄ6）  δ  １０．６５  （ｂｒｓ，  １Ｈ），  ９．５８  （ｂｒｓ，  １Ｈ），  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６２−７．５２  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２４−７．１５  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０８−７．０２  （ｍ，  １Ｈ），  ５．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．３７  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．２３  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２３−２．２１  （ｍ，  １Ｈ），  １．０２−０．９１  （ｍ，  １Ｈ），  ０．８９−０．７６  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４０７．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１９４】
実施例５４
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）エチル）アミノ）アセトアミド
【化６９】
2020527585.tif 000071
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）エチル）アミノ）アセトアミドをオフホワイト色の固体（６％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＯＳ−ｄ6）  δ  １２．８６  （ｓ，  １Ｈ），  １０．０６  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６０−７．５２  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．２６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０５−７．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．２，  １．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．１０−４．０３  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６９  （  ｔ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６８  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４４９．２  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１９５】
実施例５５
Ｎ−（３−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化７０】
2020527585.tif 000072
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（３−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを黄色の固体（２１％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＯＳ−ｄ6）  δ  １０．９７  （ｓ，  １Ｈ），  ９．６４  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．００  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．７０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．２，  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  ２．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２４−７．１９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０６−７．０３  （ｍ，  １Ｈ），  ５．１４  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６４−３．５７  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．２９  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．０９−３．００  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３９９．２  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１９６】
実施例５６
Ｎ−（３−メトキシ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化７１】
2020527585.tif 000073
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（３−メトキシ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを黄色の固体（１７％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＯＳ−ｄ6）  δ  １０．７９  （ｓ，  １Ｈ），  ９．６２  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３２  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２６−７．２１  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．０６−７．０２  （ｍ，  １Ｈ），  ５．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８４  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６４−３．５９  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．３０  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．０９−３．００  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４１１．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１９７】
実施例５７
Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−（ジメチルアミノ）エチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化７２】
2020527585.tif 000074
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−（ジメチルアミノ）エチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（４１％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＯＳ−ｄ6）  δ  １０．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０５−７．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３４  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６５−２．５１  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．３０  （ｓ，  ６Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３９４．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０１９８】
実施例５８
（Ｒ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化７３】
2020527585.tif 000075
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、（Ｒ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（１２％）として得た。鏡像異性体をＳＦＣ（ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳカラム）（移動相：ＣＯ2中の０．１％ＮＨ4ＯＨ含有４０％ＥｔＯＨ、流速７０ｇ／分）によって分離して、所望の化合物をエナンチオマ純度９９％で得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６１−７．５３  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０６−７．０３  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８７−６．８４  （ｍ，  １Ｈ），  ４．４０  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．２４  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３８１．３  （Ｍ＋Ｈ）+．［α］25°C D＝＋１１４  （ＭｅＯＨ中でｃ＝０．２）．
【０１９９】
実施例５９
（Ｓ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化７４】
2020527585.tif 000076
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（１２％）として得た。鏡像異性体をＳＦＣ（ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳカラム）（移動相：ＣＯ2中の０．１％ＮＨ4ＯＨ含有４０％ＥｔＯＨ、流速７０ｇ／分）によって分離して、所望の化合物をエナンチオマ純度９９％で得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６１−７．５３  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ４．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０６−７．０３  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８７−６．８４  （ｍ，  １Ｈ），  ４．４０  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．２４  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３８１．３  （Ｍ＋Ｈ）+．（Ｓ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−メトキシエチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド。［α］25°C D＝−１０３．５  （ＭｅＯＨ中でｃ＝０．２）。
【０２００】
実施例６０
（Ｓ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−（ジメチルアミノ）エチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化７５】
2020527585.tif 000077
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−（ジメチルアミノ）エチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（４１％）として得た。鏡像異性体をＳＦＣ（ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳカラム）（移動相：ＣＯ2中の０．１％ＮＨ4ＯＨ含有５０％ＥｔＯＨ、流速７０ｇ／分）によって分離して、所望の化合物をエナンチオマ純度９９％で得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＯＳ−ｄ6）  δ  １０．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０５−７．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３４  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６５−２．５１  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．３０  （ｓ，  ６Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３９４．３  （Ｍ＋Ｈ）+．［α］25°CD＝＋９５．７  （ＭｅＯＨ中でｃ＝０．２）。
【０２０１】
実施例６１
（Ｒ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−（ジメチルアミノ）エチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミド
【化７６】
2020527585.tif 000078
反応を一般手順Ｂに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、（Ｒ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（（２−（ジメチルアミノ）エチル）アミノ）−２−（３−メトキシフェニル）アセトアミドを白色の固体（４１％）として得た。鏡像異性体をＳＦＣ（ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＳカラム）（移動相：ＣＯ2中の０．１％ＮＨ4ＯＨ含有５０％ＥｔＯＨ、流速７０ｇ／分）によって分離して、所望の化合物をエナンチオマ純度９９％で得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＯＳ−ｄ6）  δ  １０．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０５−７．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３４  （ｓ，  １Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６５−２．５１  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．３０  （ｓ，  ６Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３９４．３  （Ｍ＋Ｈ）+．［α］25°CD＝−９２．８  （ＭｅＯＨ中のｃ＝０．２）。
【０２０２】
実施例６２
（Ｒ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（メチルアミノ）エチル）アミノ）アセトアミド
【化７７】
2020527585.tif 000079
ステップ１：化合物ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）−（１−（３−メトキシフェニル）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）カルバマートをＥｔＯＨ（０．１５Ｍ）に溶解させ、パラ−トルエンスルホン酸（２当量）を添加した。溶液を２０時間にわたって１５℃で撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ3でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機画分をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（３−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）カルバマートを黄色の固体として収率９２％で得た。鏡像異性体をＳＦＣ（ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＯＤカラム）（移動相：ＣＯ2中の０．１％ＮＨ4ＯＨ含有４５％ＥｔＯＨ、流速７０ｇ／分）によって分離して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−（２−（（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（３−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル）−（メチル）カルバマートをエナンチオマ純度９９％で得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＯＳ−ｄ6）  δ  δ  １２．８４  （ｓ，  １Ｈ），  １０．１９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０４  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．７１−７．４９  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．３７−７．３３  （ｍ，  １Ｈ），  ７．０３−６．８９  （ｍ，  ３Ｈ），  ６．０２−５．３３  （ｍ，  １Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４２−２．７０  （ｍ，  ７Ｈ），  １．５５−１．２５  （ｍ，  １８Ｈ）．
【０２０３】
ステップ２：化合物ｔｅｒｔ−ブチル（Ｒ）−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（３−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）カルバマートをジクロロメタンに溶解させ、ジオキサン中４ＮのＨＣｌを添加した。反応混合物を室温で４時間にわたって撹拌し、減圧下で濃縮した。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、（Ｒ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（メチルアミノ）エチル）アミノ）アセトアミドを白色の固体（１２％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  δ  ８．５１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９１  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５８−７．５１  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．３１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０９−７．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．９１−６．８９  （ｍ，  １Ｈ），  ４．４２  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８１  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．１４−３．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９２−２．８２  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．７２  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３８０．４  （Ｍ＋Ｈ）+．［α］25°CD＝  −８６．０２（ＭｅＯＨ中で０．５）。
【０２０４】
実施例６３
（Ｓ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（メチルアミノ）エチル）アミノ）アセトアミド
【化７８】
2020527585.tif 000080
ステップ１：化合物ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（１−（３−メトキシフェニル）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）カルバマートをＥｔＯＨ（０．１５Ｍ）に溶解させ、パラ−トルエンスルホン酸（２当量）を添加した。溶液を２０時間にわたって１５℃で撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ3でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機画分をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（３−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）カルバマートを黄色の固体として収率９２％で得た。鏡像異性体をＳＦＣ（ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＯＤカラム）（移動相：ＣＯ2中の０．１％ＮＨ4ＯＨ含有４５％ＥｔＯＨ、流速７０ｇ／分）によって分離して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（２−（（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（３−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル）（メチル）カルバマートをエナンチオマ純度９９％で得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＯＳ−ｄ6）  δ  δ  １２．８４  （ｓ，  １Ｈ），  １０．１９  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０４  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．７１−７．４９  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．３７−７．３３  （ｍ，  １Ｈ），  ７．０３−６．８９  （ｍ，  ３Ｈ），  ６．０２−５．３３  （ｍ，  １Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４２−２．７０  （ｍ，  ７Ｈ），  １．５５−１．２５  （ｍ，  １８Ｈ）．［α］25°CD＝−９２．８  （ＭｅＯＨ中でｃ＝０．２）
【０２０５】
ステップ２：化合物ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−（２−（（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（３−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル）（メチル）カルバマートをジクロロメタンに溶解させ、ジオキサン中４ＮのＨＣｌを添加した。反応混合物を室温で４時間にわたって撹拌し、減圧下で濃縮した。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（（２−（メチルアミノ）エチル）アミノ）アセトアミドを白色の固体（１２％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．５１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９１  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５８−７．５１  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．３１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０９−７．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．９１−６．８９  （ｍ，  １Ｈ），  ４．４２  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８１  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．１４−３．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９２−２．８２  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．７２  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３８０．４  （Ｍ＋Ｈ）+．［α］25°CD＝  ＋８２．４３  （ＭｅＯＨ中で０．７）．
【０２０６】
実施例６４
（Ｓ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−クロロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化７９】
2020527585.tif 000081
ステップ１：ＣｂｚＮＨ2（３当量）をｎ−プロピルアルコールに溶解させた。０．４Ｎ  ＮａＯＨ（３当量）をその溶液に添加し、続いて、次亜塩素酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０５当量）を一度に添加した。５分後に、ｎ−プロピルアルコール中の（ＤＨＱ）2ＰＨＡＬ（０．０５当量）の溶液を反応混合物に一度に添加した。ｎ−プロピルアルコール中の化合物ｐ−クロロスチレン（１当量）の溶液を一度に添加し、続いて、Ｋ2ＯｓＯ2（ＯＨ）4（０．０３当量）を添加した。薄緑色の溶液を２０℃で１時間にわたって撹拌した。Ｎａ2ＳＯ3の飽和溶液を反応混合物に添加し、混合物を２０℃で１０分間にわたって撹拌した。有機層を分離し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（ＴＦＡ条件）によって精製し，  凍結乾燥させて、化合物ベンジル（Ｓ）−（１−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）カルバマート（６２％、９４．９％ｅｅ）を白色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ3）  δ  ７．３４−７．３１  （ｍ，  ７Ｈ），  ７．２８−７．２２  （ｍ，  ２Ｈ），  ５．６４  （ｓ，  １Ｈ），  ５．１３−５．０５  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．８０  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８６−３．７８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．２４  （ｍ，  １Ｈ）．
【０２０７】
ステップ２：ＤＭＦ中の化合物（Ｓ）−（１−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）カルバマート（１当量）及びイミダゾール（２当量）の混合物に、ＴＢＳＣｌ（１．５当量）を一度に、３０℃にて窒素下で添加した。混合物を３０℃で１時間にわたって撹拌した。混合物を水に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１５／１）によって精製して、ベンジル（Ｓ）−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（４−クロロフェニル）エチル）カルバマート（９５％、８９．３％ｅｅ）を無色の油状物として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ3）  δ  ７．３８−７．２５  （ｍ，  ９Ｈ），  ５．５９  （ｓ，  １Ｈ），  ５．１６−５．０７  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．７７  （ｓ，  １Ｈ），  ３．９５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．０，  ４．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．７５  （ｍ，  １Ｈ），  ０．８９  （ｓ，  ９Ｈ），  −０．０３  （ｓ，  ３Ｈ），  −０．０６  （ｓ，  ３Ｈ）．
【０２０８】
ステップ３：ＤＭＦ中の化合物（Ｓ）−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（４−クロロフェニル）エチル）カルバマート（１当量）の溶液に、ＮａＨ（２当量）を少量ずつ、０℃にて窒素下で加えた。混合物を０℃で１０分間にわたって撹拌し、次いで、ＤＭＦ中のＭｅＩ（１．５当量）の溶液を混合物に滴下添加した。混合物を２０℃に加温し、５０分間にわたって撹拌した。混合物をＮＨ4Ｃｌの飽和溶液に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。混合物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２０／１）によって精製して、ベンジル（Ｓ）−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（４−クロロフェニル）エチル）（メチル）カルバマート（９３％、９４．４％ｅｅ）を無色の油状物として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ3）  δ  ７．３６−７．１９  （ｍ，  ９Ｈ），  ５．３７−５．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ５．１９−５．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．０５  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．８０  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．８８  （ｓ，  ９Ｈ），  ０．０７  （ｓ，  ６Ｈ）．
【０２０９】
ステップ４：ＭｅＯＨ／Ｈ2Ｏ（７：３）中の化合物（Ｓ）−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（４−クロロフェニル）エチル）（メチル）カルバマート（１当量）の混合物に、ＫＨＳＯ4（４当量）を一度に２０℃でＮ2下で添加した。水を反応混合物に添加し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２／１）によって精製して、化合物ベンジル（Ｓ）−（１−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）（メチル）カルバマート（９９％、９４％ｅｅ）を無色の油状物として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ3）  δ  ７．３６−７．２０  （ｍ，  ９Ｈ），  ５．３３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ６．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．２０  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．１７−４．０７  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．７８  （ｓ，  ３Ｈ）．
【０２１０】
ステップ５：飽和ＫＨ2ＰＯ4及びＭｅＣＮ中に０℃で溶解させた化合物（Ｓ）−（１−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）（メチル）カルバマート（１当量）の溶液。ＮａＣｌＯ2（２当量）及びＴＥＭＰＯ（０．２当量）を反応混合物に０〜５℃で添加し、続いて、ＮａＣｌＯ（２当量）を０〜５℃にてＮ2下で滴下添加した。混合物は深紫色になり、反応混合物を１０〜１５℃で２時間にわたって撹拌した。反応混合物をＨ2Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１／１、０／１）によって精製して、化合物（Ｓ）−２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）−２−（４−クロロフェニル）酢酸（９５％  ９４％ｅｅ）を黄色の油状物として得た。
【０２１１】
ステップ６：ＴＨＦ中の化合物（Ｓ）−２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）−（メチル）アミノ）−２−（４−クロロフェニル）酢酸（１当量）及び化合物４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アニリン（１．１当量）の混合物に、ＤＭＴ−ＭＭ（１．０５）を一度に、１０℃で、Ｎ2下で添加した。混合物を２０℃で３時間にわたって撹拌した。水を添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２：１）によって精製して、化合物ベンジル（（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）−（メチル）カルバマート（５９％、８６％ｅｅ）を黄色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ3）  δ  ７．７５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４０−７．３１  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．２８−７．１８  （ｍ，  ９Ｈ），  ５．８８  （ｓ，  １Ｈ），  ５．４１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．８，  ２．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．１６−５．０９  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．０５−４．００  （ｍ，  １Ｈ），  ３．６８−３．４１（ｍ，  １Ｈ），  ２．８０  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．０９−２．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  １．６６−１．５３  （ｍ，  ４Ｈ）．
【０２１２】
ステップ７：ＭｅＣＮ中の化合物（（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）（メチル）カルバマート（１当量）の溶液に、ＴＭＳＩ（８当量）を０℃にてＮ2下で添加した。Ｈ2Ｏを添加し、混合物を石油エーテルで抽出した。水相を分取ＨＰＬＣ（ＦＡ条件）によって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−クロロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド（９％、８７．５％ｅｅ）を白色の粉末として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．０８  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２０  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９８  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６１−７．４２  （ｍ，  ８Ｈ），  ４．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２７  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３４１．０  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２１３】
実施例６５
（Ｒ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−クロロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化８０】
2020527585.tif 000082
ステップ１：ＣｂｚＮＨ2（３当量）をｎ−プロピルアルコールに溶解させた。０．４Ｎ  ＮａＯＨ（３当量）をその溶液に添加し、続いて、次亜塩素酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０５当量）を一度に添加した。５分後に、ｎ−プロピルアルコール中の（ＤＨＱＤ）2ＰＨＡＬ（０．０５当量）の溶液を反応混合物に一度に添加した。ｎ−プロピルアルコール中の化合物ｐ−クロロスチレン（１当量）の溶液を一度に添加し、続いて、Ｋ2ＯｓＯ2（ＯＨ）4（０．０３当量）を添加した。薄緑色の溶液を２０℃で１時間にわたって撹拌した。Ｎａ2ＳＯ3の飽和溶液を反応混合物に添加し、混合物を２０℃で１０分間にわたって撹拌した。有機層を分離し、水相をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（ＴＦＡ条件）によって精製し、凍結乾燥させて、化合物ベンジル（Ｒ）−（１−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）カルバマート（７１％、９４．５％ｅｅ）を白色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  ７．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３９−７．１０  （ｍ，  ９Ｈ），  ５．０５−４．９７  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．８７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．６２−４．５６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．５８−３．４８  （ｍ，  ２Ｈ）．
【０２１４】
ステップ２：ＤＭＦ中の化合物（Ｒ）−（１−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）カルバマート（１当量）及びイミダゾール（２当量）の混合物に、ＴＢＳＣｌ（１．５当量）を一度に、３０℃にて窒素下で添加した。混合物を３０℃で１時間にわたって撹拌した。混合物を水に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１５／１）によって精製して、ベンジル（Ｒ）−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（４−クロロフェニル）エチル）カルバマート（７１％、９０％ｅｅ）を無色の油状物として得た。
【０２１５】
ステップ３：ＤＭＦ中の化合物（Ｒ）−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（４−クロロフェニル）エチル）カルバマート（１当量）の溶液に、ＮａＨ（２当量）を少量ずつ、０℃にて窒素下で添加した。混合物を０℃で１０分間にわたって撹拌し、次いで、ＤＭＦ中のＭｅＩ（１．５当量）の溶液を混合物に滴下添加した。混合物を２０℃に加温し、５０分間にわたって撹拌した。混合物をＮＨ4Ｃｌの飽和溶液に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。混合物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２０／１）によって精製して、ベンジル（Ｒ）−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（４−クロロフェニル）エチル）（メチル）カルバマート（７５％、９３％ｅｅ）を無色の油状物として得た。
【０２１６】
ステップ４：ＭｅＯＨ／Ｈ2Ｏ（７：３）中の化合物（Ｒ）−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）−１−（４−クロロフェニル）エチル）（メチル）カルバマート（１当量）の混合物に、ＫＨＳＯ4（４当量）を一度に２０℃にてＮ2下で添加した。水を反応混合物に添加し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２／１）によって精製して、化合物ベンジル（Ｒ）−（１−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）（メチル）カルバマート（９１％、９２％ｅｅ）を無色の油状物として得た。
【０２１７】
ステップ５：飽和ＫＨ2ＰＯ4及びＭｅＣＮ中に０℃で溶解させた化合物（Ｒ）−（１−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）（メチル）カルバマート（１当量）の溶液。ＮａＣｌＯ2（２当量）及びＴＥＭＰＯ（０．２当量）を反応混合物に０〜５℃で添加し、続いて、ＮａＣｌＯ（２当量）を０〜５℃にてＮ2下で滴下添加した。混合物は深紫色になり、反応混合物を１０〜１５℃で２時間にわたって撹拌した。反応混合物をＨ2Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１／１、０／１）によって精製して、化合物（Ｒ）−２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）−（メチル）アミノ）−２−（４−クロロフェニル）酢酸（９４％ｅｅ）を黄色の油状物として得た。
【０２１８】
ステップ６：ＴＨＦ中の化合物（Ｒ）−２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）−２−（４−クロロフェニル）酢酸（１当量）及び化合物４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アニリン（１．１当量）の混合物に、ＤＭＴ−ＭＭ（１．０５）を一度に、１０℃にてＮ2下で添加した。混合物を２０℃で３時間にわたって撹拌した。水を添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２：１）によって精製して、化合物ベンジル（（１Ｒ）−１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）（メチル）カルバマート（８３％、８７％ｅｅ）を黄色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ3）  δ  ７．７５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４０−７．３１  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．２８−７．１８  （ｍ，  ９Ｈ），  ５．８８  （ｓ，  １Ｈ），  ５．４１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．８，  ２．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．１６−５．０９  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．０５−４．００  （ｍ，  １Ｈ），  ３．６８−３．４１（ｍ，  １Ｈ），  ２．８０  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．０９−２．０４  （ｍ，  ２Ｈ），  １．６６−１．５３  （ｍ，  ４Ｈ）．
【０２１９】
ステップ７：ＭｅＣＮ中の化合物（（１Ｒ）−１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）（メチル）カルバマート（１当量）の溶液に、ＴＭＳＩ（８当量）を０℃で、Ｎ2下で添加した。Ｈ2Ｏを添加し、混合物を石油エーテルで抽出した。水相を分取ＨＰＬＣ（ＦＡ条件）によって精製して、（Ｒ）−Ｎ−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（４−クロロフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド（２８％、８７％ｅｅ）を白色の粉末として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９８  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．５９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ４Ｈ），  ７．５４−７．４９  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．４４−７．４２  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．３２  （ｓ，  １Ｈ），  ２．３０  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３４１．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２２０】
実施例６６
Ｎ−（２−フルオロ−５−メトキシ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化８１】
2020527585.tif 000083
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（２−フルオロ−５−メトキシ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを黄色の油状物（１％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １２．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ９．９１  （ｂｒｓ，  １Ｈ），  ８．０７  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．７４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５８  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０４−７．０１  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．２，  １．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．２８  （ｓ，  １Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３１  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３８５．２  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２２１】
実施例６７
３−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルベンズアミド
【化８２】
2020527585.tif 000084
ステップ１：ＭｅＯＨ及び水中の化合物メチル３−（１−（（４−メトキシベンジル）（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）ベンゾアート（１当量）の溶液に、ＮａＯＨ（２当量）を添加した。混合物を真空下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（ＦＡ条件）によって精製して、化合物３−（１−（（４−メトキシベンジル）（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）安息香酸（５８％）をオフホワイト色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２７  （ｓ，  １Ｈ），  ８．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９５−７．９０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６３−７．５５  （ｍ，  ５Ｈ），  ７．２７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．８９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．３８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．４，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．９２  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．６Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．７３  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６６−３．６３  （ｍ，  １Ｈ），  ３．５１−３．４２  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．１６−２．０９  （ｍ，  ４Ｈ），  １．９４  （ｓ，  ２Ｈ），  １．６９−１．６５  （ｍ，  １Ｈ），  １．５８−１．５４  （ｍ，  ２Ｈ）．
【０２２２】
ステップ２：ＣＨ3ＣＮ中の化合物３−（１−（（４−メトキシベンジル）（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）安息香酸（１当量）、メチルアミン（１当量））の溶液に、Ｔ3Ｐ（１．５当量）、ＤＩＰＥＡ（１．５当量）を２０℃で添加した。混合物を８０℃に加熱し、１５時間にわたって撹拌した。反応混合物をＨ2Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物３−（１−（（４−メトキシベンジル）（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）−Ｎ−メチルベンズアミドを白色の固体として得た。
【０２２３】
ステップ３：ＴＦＡ中の化合物３−（１−（（４−メトキシベンジル）（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）−Ｎ−メチルベンズアミドの混合物を７５℃で１６時間にわたって撹拌した。混合物を真空下で濃縮して、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（ＴＦＡ条件）によって精製して、３−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルベンズアミドを白色の固体（４３％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．６９  （ｓ，  １Ｈ），  ９．６１−９．４７  （ｍ，  ２Ｈ），  ８．５６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１２  （ｓ，  １Ｈ），  ８．０１  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．９３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６３−７．５４  （ｍ，  ５Ｈ），  ５．０９  （ｓ，  １Ｈ），  ２．８１  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．５３  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３６４．４  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２２４】
実施例６８
４−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）安息香酸
【化８３】
2020527585.tif 000085
ステップ１：ＴＦＡ中の化合物メチル４−（１−（（４−メトキシベンジル）−（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）ベンゾアート（１当量）の混合物を７０℃で１１２時間にわたって撹拌した。反応混合物をＭｅＯＨで希釈し、減圧下で濃縮して残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（ＴＦＡ条件）によって精製して、化合物メチル４−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）ベンゾアート（１９％）をオフホワイト色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．１７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ６．８，  ２．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．９２  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．７４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５８−７．５３  （ｍ，  ４Ｈ），  ５．０７  （ｓ，  １Ｈ），  ３．９２  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．７０  （ｓ，  ３Ｈ）．
【０２２５】
ステップ２：ＭｅＯＨ及びＨ2Ｏ中の化合物メチル４−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）ベンゾアート（１当量）の溶液に、ＮａＯＨ（３当量）を添加した。混合物を３０℃で１６時間にわたって撹拌した。混合物を１ＮのＨＣｌでｐＨ＝５まで酸性化した。得られた混合物を分取ＨＰＬＣ（ＦＡ条件）によって精製して、４−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）安息香酸（、１８％）を白色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．２７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９８  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．９０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６５−７．５０  （ｍ，  ６Ｈ），  ４．３０  （ｓ，  １Ｈ），  ２．２８  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３５１．１  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２２６】
実施例６９
４−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルベンズアミド
【化８４】
2020527585.tif 000086
ステップ１：ＭｅＯＨ及びＨ2Ｏ中の化合物メチル４−（１−（（４−メトキシベンジル）−（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）ベンゾアート（１当量）の溶液に、ＮａＯＨ（２当量）を添加した。混合物を３５℃で３６時間にわたって撹拌した。反応混合物をＨ2Ｏで希釈した。得られた溶液を分取ＨＰＬＣ（ＦＡ条件）によって精製して、化合物４−（１−（（４−メトキシベンジル）（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）安息香酸（７０％、純度９８％）を白色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １２．９２  （ｓ，  １Ｈ），  １０．１９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．８８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６５−７．６０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５９−７．５２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．２８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．３８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １０．０，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．３３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．９４−３．９２  （ｍ，  １Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．６８−３．５８  （ｍ，  １Ｈ），  ３．５４−３．４０  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．１８−２．０３  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．００−１．８７  （ｍ，  ２Ｈ），  １．７５−１．６１  （ｍ，  １Ｈ），  １．５９−１．４８  （ｍ，  ２Ｈ）．
【０２２７】
ステップ２：ＭｅＣＮ中の化合物４−（１−（（４−メトキシベンジル）（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）安息香酸（１当量）の溶液に、Ｔ3Ｐ（１．５当量）、ＭｅＮＨ2（２．５当量）及びＤＩＰＥＡ（４当量）を添加した。混合物を３０℃で３６時間にわたって撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、Ｈ2Ｏを添加することによって１５℃でクエンチした。得られた混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物４−（１−（（４−メトキシベンジル）（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）−Ｎ−メチルベンズアミド（９８％、純度８７％）を白色の固体として得た。
【０２２８】
ステップ３：ＴＨＦ及びＭｅＯＨ中の化合物４−（１−（（４−メトキシベンジル）（メチル）アミノ）−２−オキソ−２−（（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）エチル）−Ｎ−メチルベンズアミド（１当量）の溶液に、脱水Ｐｄ／Ｃ（０．１当量）及びＨＣｌ（２当量）を添加した。混合物を５０℃で２時間にわたって、Ｈ2（１気圧）の雰囲気下で撹拌した。混合物を室温に冷却し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（ＦＡ条件）によって精製して、４−（２−（（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）アミノ）−１−（メチルアミノ）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチルベンズアミド（純度９８％）を白色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １０．１３  （ｓ，  １Ｈ），  ８．４４−８．３６  （ｍ，  １Ｈ），  ８．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９８  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．８０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６３−７．５８  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．５７−７．５１  （ｍ，  ４Ｈ），  ４．３０  （ｓ，  １Ｈ），  ２．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．４  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ２．２９  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ３６４．３（Ｍ＋Ｈ）+．
【０２２９】
実施例７０
Ｎ−（２−（３−（ジメチルアミノ）プロポキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化８５】
2020527585.tif 000087
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（２−（３−（ジメチルアミノ）プロポキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（１３％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．０４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．３０−７．２３  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０３−  ７．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  ０．８Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．２０  （ｓ，  １Ｈ），  ４．１６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６２−２．５８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．４５  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３０  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．０７−２．００  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４５６．４  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２３０】
実施例７１
Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化８６】
2020527585.tif 000088
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（３７％）として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．５２  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．０４−８．０  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２４−７．１９  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．８，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．４３  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４４−４．４１  （ｍ，  １Ｈ），  ４．２７−４．２５  （ｍ，  １Ｈ），  ３．８４  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．４１−３．３６  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．８１  （ｓ，  ６Ｈ），  ２．６５  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４４２．４  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２３１】
実施例７２
（Ｒ）−Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化８７】
2020527585.tif 000089
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（３７％）として得た。鏡像異性体をＳＦＣ（ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤカラム）（移動相：ＣＯ2中の０．１％ＮＨ4ＯＨ含有５５％ＥｔＯＨ５％、流速７０ｇ／分）によって分離して、（Ｒ）−Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドをエナンチオマ純度９９％で得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １１．０５  （ｓ，  １Ｈ），  １０．５９  （ｓ，  １Ｈ），  ９．９８−９．９６  （ｍ，  １Ｈ），  ９．７２−９．６９  （ｍ，  １Ｈ），  ８．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．９４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４３−７．３４  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．０４−７．０１  （ｍ，  １Ｈ），  ６．０５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．４７−４．３４  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．５８−３．４９  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．８３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．２，  ５．２  Ｈｚ，  ６Ｈ），  ２．４８  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４４２．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２３２】
実施例７３
（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド
【化８８】
2020527585.tif 000090
反応を一般手順Ａに従って行った。最終残渣を逆相分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドを白色の固体（３７％）として得た。鏡像異性体をＳＦＣ（ＤＡＩＣＥＬ  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤカラム）（移動相：ＣＯ2中の０．１％ＮＨ4ＯＨ含有５５％ＥｔＯＨ、流速７０ｇ／分）によって分離して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−５−フルオロ−４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−２−（３−メトキシフェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミドをエナンチオマ純度９９％で得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  １１．０５  （ｓ，  １Ｈ），  １０．５９  （ｓ，  １Ｈ），  ９．９７−９．９４  （ｍ，  １Ｈ），  ９．７１−９．６８  （ｍ，  １Ｈ），  ８．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．９４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４３−７．３６  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．０４−７．０２  （ｍ，  １Ｈ），  ６．０５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．４８−４．３４  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．５８−３．４７  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．８３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．２，  ５．２  Ｈｚ，  ６Ｈ），  ２．４８  （ｓ，  ３Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４４２．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２３３】
実施例７４
１−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−４−（シクロプロピルメチル）−３−（３−メトキシフェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン
【化８９】
2020527585.tif 000091
ステップ１：ジオキサン中の化合物ベンジル２−（３−メトキシフェニル）−３−オキソ−１，４−ジアゼパン−１−カルボキシラート（１当量）及び化合物４−（４−ヨードフェニル）−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（１当量）の混合物に、Ｃｓ2ＣＯ3（４当量）及びキサントホス−Ｐｄ−Ｇ３（０．０５当量）を２０℃にてＮ2下で添加した。混合物を１００℃で１６時間にわたって撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２／１、１／１）によって精製して、化合物ベンジル２−（３−メトキシフェニル）−３−オキソ−４−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−１−カルボキシラート（２５％）を黄色の油状物として得た。
【０２３４】
ステップ２：ＭｅＯＨ中の化合物ベンジル２−（３−メトキシフェニル）−３−オキソ−４−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−１−カルボキシラート（１当量）の溶液に、脱水Ｐｄ／Ｃ（０．１当量）をＮ2下で添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ2で複数回パージした。混合物をＨ2（１５ｐｓｉ）下で２０℃で４時間にわたって撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（ＦＡ条件）によって精製して、化合物３−（３−メトキシフェニル）−１−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（６７％）を白色の固体として得た。
【０２３５】
ステップ３：ＭｅＯＨ中の化合物３−（３−メトキシフェニル）−１−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（１当量）及びアルデヒド（２当量）の混合物に、ＴＥＡ（３）を一度に２５℃にてＮ2下で添加した。混合物を２５℃で３０分間にわたって撹拌した。ＮａＢＨ（ＯＡｃ）3（４当量）を反応物に添加し、反応混合物を２５℃で４時間にわたって撹拌した。混合物を水に注ぎ入れ、ＥｔＡＯｃで抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２／１、１／１）によって精製して、化合物４−（シクロプロピルメチル）−３−（３−メトキシフェニル）−１−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（３２％）を無色の油状物として得た。
【０２３６】
ステップ４：ＤＣＭ中の化合物４−（シクロプロピルメチル）−３−（３−メトキシフェニル）−１−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（１当量）の混合物に、ＴＦＡを０℃にてＮ2下で添加した。混合物を０℃で１０分間にわたって撹拌し、反応混合物を２５℃に加温した。反応混合物を２５℃で０．５時間にわたって撹拌した。反応混合物を減圧下にて４５℃で濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、１−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−４−（シクロプロピルメチル）−３−（３−メトキシフェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（７％）をオフホワイト色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ７．９９  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６９−７．６５  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３４−７．３０  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．２６−７．２４  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．８，  １．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．７３  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４０  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９９−３．８３  （ｍ，  ６Ｈ），  ３．３８−３．３２  （ｍ，  １Ｈ），  ３．３１−３．２０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．３８  （ｍ，  ２Ｈ），  １．１５−１．１０  （ｍ，  １Ｈ），  ０．７８−０．７３  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．３８−０．３４  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４１７．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２３７】
実施例７５
１−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−４−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−３−（３−メトキシフェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン
【化９０】
2020527585.tif 000092
ステップ１：ＭｅＯＨ中の化合物３−（３−メトキシフェニル）−１−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（１当量）及びアルデヒド（２当量）の混合物に、ＴＥＡ（３）を一度に２５℃にてＮ2下で添加した。混合物を２５℃で３０分間にわたって撹拌した。ＮａＢＨ（ＯＡｃ）3（４当量）を反応物に添加し、反応混合物を２５℃で４時間にわたって撹拌した。混合物を水に注ぎ入れ、ＥｔＡＯｃで抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２／１、１／１）によって精製して、化合物４−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−３−（３−メトキシフェニル）−１−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（１３％）を無色の油状物として得た。
【０２３８】
ステップ２：ＤＣＭ中の化合物４−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−３−（３−メトキシフェニル）−１−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（１当量）の混合物に、ＴＦＡを０℃にてＮ2下で添加した。混合物を０℃で１０分間にわたって撹拌し、反応混合物を２５℃に加温した。反応混合物を２５℃で０．５時間にわたって撹拌した。反応混合物を減圧下にて４５℃で濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、１−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−４−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−３−（３−メトキシフェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（４０％）を黄色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１９−７．１５  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．９８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．０６  （ｓ，  １Ｈ），  ３．９３−３．８６  （ｍ，  ４Ｈ），  ３．７７−３．７３  （ｍ，  １Ｈ），  ３．４８−３．３５  （ｍ，  ４Ｈ），  ３．２２−３．１４  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９４  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．８７  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１９−２．１７  （ｍ，  １Ｈ），  １．７７  （ｍ，  １Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４３４．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２３９】
実施例７６
１−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−３−（３−メトキシフェニル）−４−（２−（メチルアミノ）エチル）−１，４−ジアゼパン−２−オン
【化９１】
2020527585.tif 000093
ステップ１：ＭｅＯＨ中の化合物３−（３−メトキシフェニル）−１−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（１当量）及びアルデヒド（２当量）の混合物に、ＴＥＡ（３）を一度に、２５℃にてＮ2下で添加した。混合物を２５℃で３０分間にわたって撹拌した。ＮａＢＨ（ＯＡｃ）3（４当量）を反応物に添加し、反応混合物を２５℃で４時間にわたって撹拌した。混合物を水に注ぎ入れ、ＥｔＡＯｃで抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝２／１、１／１）によって精製して、化合物ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（３−メトキシフェニル）−３−オキソ−４−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−１−イル）エチル）（メチル）カルバマート（７７％）をオフホワイト色の油状物として得た。
【０２４０】
ステップ２：ＤＣＭ中の化合物ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（３−メトキシフェニル）−３−オキソ−４−（４−（１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−１，４−ジアゼパン−１−イル）エチル）（メチル）カルバマート（１当量）の混合物に、ＴＦＡを０℃にてＮ2下で添加した。混合物を０℃で１０分間にわたって撹拌し、反応混合物を２５℃に加温した。反応混合物を２５℃で０．５時間にわたって撹拌した。反応混合物を減圧下にて４５℃で濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、１１−（４−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェニル）−３−（３−メトキシフェニル）−４−（２−（メチルアミノ）エチル）−１，４−ジアゼパン−２−オン（６６％）を白色の固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤ3ＯＤ）  δ  ８．００  （ｓ，  ２Ｈ），  ７．６７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．４０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１６−７．１３  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．６７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  ２．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．０３  （ｓ，  １Ｈ），  ３．９０−３．８７  （ｍ，  １Ｈ），  ３．８４  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．７３−３．６６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．３９−３．３４  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２３−３．０８  （ｍ，  ５Ｈ），  ２．７３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１７−２．１４  （ｍ，  １Ｈ），  １．７１−１．６８  （ｍ，  １Ｈ）．  ＭＳ  （ＥＳ＋）  ｍ／ｅ  ４２０．３  （Ｍ＋Ｈ）+．
【０２４１】
実施例７７
インビトロでの化合物のＲＯＣＫ阻害活性の決定（Ｚ’ｌｙｔｅアッセイ）：組換えＲＯＣＫ１（アミノ酸１〜５３５）及びＲＯＣＫ２（アミノ酸１〜５５２）タンパク質をＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入した。化合物の活性をＺ’−ｌｙｔｅキナーゼキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって測定し、ＩＣ50を計算した。
【０２４２】
実施例７８
Ａ７Ｒ５細胞での化合物のＲＯＣＫ阻害活性の決定：ラット大動脈平滑筋細胞株Ａ７Ｒ５細胞を、ウシ胎児血清１０％を含むＤＭＥＭ培地中で維持し、処理した。細胞を５，０００細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートに２４時間にわたって播種し、その後、試験化合物で９０分処理した。次いで、細胞を固定し、Ｉｎ−Ｃｅｌｌ  ＥＬＩＳＡ  Ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔマニュアル（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）に従って処理した。
【０２４３】
実施例７９
ＮＩＨ３Ｔ３細胞Ａｃｔａ２−プロモーター由来ルシフェラーゼアッセイ：ヒトＡＣＴＡ２遺伝子プロモーター（−１０００−１ｂｐ）によって駆動されるルシフェラーゼレポーターを安定発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞株を確立した（ＮＩＨ３Ｔ３−Ａｃｔａ２−ルシフェラーゼ）。細胞をコンフルエンスまでプレーティングし、試験化合物及びＴＧＦβ１で２４時間にわたって処理した。次いで、細胞を溶解させ、ルシフェラーゼ活性を、Ａｃｔｉｖｅ  Ｍｏｔｉｆ製のＬｉｇｈｔＳｗｉｔｃｈルシフェラーゼキットを用いて測定した。
【０２４４】
実施例８０
ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞（ＯＰＣ）の解凍及び増殖。凍結保存されたヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃａｔ．Ｎｏ．ＣＳ２０４４９６）を回収し、マルトリゲル（ＢＤ  Ｃａｔ．Ｎｏ．３５６３２４）コーティングされたＴ−２５フラスコで、ＯＰＣ／ニューロン基本培地、Ｎ２１培地補充物、組換えヒトｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ−ＡＡ及びＮＴ−３を含有する増殖培地中で培養した。細胞が８０％コンフルエントに達したときに、Ａｃｃｕｔａｓｅ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ＳＣＲ００５）３ｍｌを通過細胞に対して１：４比で施与した。継代培養細胞を増殖培地中で維持して増殖させた。
【０２４５】
実施例８１
２４ウェル及び９６ウェルプレートでのヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞の自発分化。プレートを１０μｇ／ｍｌのポリ−Ｌ−オルニチン（Ｓｉｇｍａ  Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｐ４９５７）で終夜、室温でコーティングする。ポリ−Ｌ−オルニチン溶液を除去し、プレートを１×ＰＢＳですすぎ、１０μｇ／ｍｌのラミニン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃａｔ．Ｎｏ．ＣＣ０９５）を添加し、３７℃で少なくとも２時間にわたってインキュベートする。細胞を、コーティングされたプレート上に培養培地中で播種し、終夜、付着させる。翌日、培養培地を除去し、ＯＰＣ／ニューロン基礎培地及びＮ２１培地補充物のみを含有する新たに調製された自発分化培地に取り換えた。１４日間の培養で、分化培地を３〜４日ごとに取り換えた。細胞を画像化し、神経突起長さをＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｓ３  Ｌｉｖｅ  Ｃｅｌｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍによって４時間ごとに解析した。１４日間の分化の後に、細胞を４％パラホルムアルデヒドによって固定し、ＤＡＰＩ及びニューロン特異的β−ＩＩＩチューブリン抗体（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＮＬ１１９５Ｒ）で染色した。
【０２４６】
実施例８２
９６ウェルプレートにおけるヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞での硫酸コンドロイチンプロテオグリカン（ＣＳＰＧ）アッセイ。１０μｇ／ｍｌのポリ−Ｌ−オルニチンと共に終夜インキュベートした後に、９６ウェルプレートを、０．３μｇ／ｍｌのＣＳＰＧ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  ＣＣ１１７）と組み合わせた１０μｇ／ｍｌのラミニンのウェル混合溶液で少なくとも２時間にわたって室温でコーティングした。細胞を、コーティングされたプレート上に１ウェルあたり６，０００細胞の密度で、増殖培地中で播種した。翌日、増殖培地を、試験化合物を含有する新鮮な自発分化培地と取り換えた。細胞を画像化し、神経突起長さをＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｓ３  Ｌｉｖｅ  Ｃｅｌｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍによって４時間ごとに解析した。
【０２４７】
実施例８３
９６ウェルプレートにおけるヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞でのＡβ１−４２誘導性細胞死アッセイ。細胞を、ポリ−Ｌ−オルニチン及びラミニンコーティングされたプレート上に、１ウェルあたり８，０００細胞の密度で播種し、３日目まで増殖培地中で維持し、次いで、培地を、試験化合物及びＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ａｎｎｅｘｉｎ  Ｖ  Ｒｅｄ試薬（１：２００希釈）（Ｅｓｓｅｎ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃａｔ．Ｎｏ．４６４１）を含有する新鮮な自発分化培地に取り換えた。３７℃での３０分のプレインキュベーション期間の後に、１０．５μＭのＡβ１−４２（Ｂａｃｈｅｍ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｎｏ．Ｈ−８１４６）を直接、前処理溶液に添加した。神経突起長さ及び総Ａｎｎｅｘｉｎ  Ｖ陽性面積をＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｓ３  Ｌｉｖｅ  Ｃｅｌｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍによって２時間ごとに解析した。
【０２４８】
実施例８４
マウスにおけるブレオマイシン誘導性肺線維症（治療的投与）：雄のＣ５７Ｂ／Ｌ６マウスを７日以上にわたって飼育して順応させた。順応期間後に、動物を処置群に無作為に割り当てた。０日目に、マウスに、吸入によって５％イソフルランで１０〜１５分間にわたって麻酔をかけ、次いで、マウスの前歯を、固定された動物用手術台に取りつけられたワイヤに掛けた。生理食塩水またはブレオマイシン溶液５０μＬを気管内点滴によって投与した。処置群のマウスに、滅菌生理食塩水中の塩酸ブレオマイシン（ＢＬＭ）２．０Ｕ／ｋｇ（ｍｇ／ｋｇ）を気管内点滴した。ブレオマイシン投与後７日目に、ビヒクル群の動物の半数をと殺して、処置開始時の線維化レベルの基線を確立した。正常対照群のマウスには、生理食塩水を経口で１日１回、７日目から２０日目まで投与した。処置群マウスには、化合物を１日１回、７日目から２０日目まで経口投与した。２０日目に、最後の投与の２〜３時間後に、すべてのマウスをと殺した。肺を、気管カニューレを介して、１％ＢＳＡ及び０．６ｍＭ  ＥＤＴＡを含有するＰＢＳ０．８ｍＬで穏やかに潅注した。潅注後に、肺組織を各動物から収集した。肺組織を３つの部分に分割した。右部分の大葉を１０％中性ホルマリンでパラフィン包埋及び組織病理学のために固定した。右部分の残りの葉をスナップ凍結させ、タンパク質溶解産物を標的エンゲージメント分析（ｔａｒｇｅｔ  ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ  ａｎａｌｙｓｉｓ）のために調製した。
【０２４９】
実施例８５
マウスにおけるブレオマイシン誘導性肺線維症（予防的投与）：研究開始前に、雄のＣ５７Ｂ／Ｌ６マウスに耳標を付け、秤量した。処置群の動物をブレオマイシン投与前の−１日目に、及びブレオマイシン投与後のその後のすべての日に化合物で処置した。０日目に、疾患群の動物に、１．５Ｕ／ｋｇ用量のブレオマイシンを、口咽頭経路を介して投与した。非ブレオマイシン対照群に、滅菌生理食塩水を投与した。試験終了まで、動物を毎日、詳細にモニターした。ブレオマイシン投与後の２１日目に、すべての動物を安楽死させ、血液、肺、及び気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）液を収集した。血液サンプルを血漿調製のために使用した。全白血球をＢＡＬ液でカウントし、肺を１０％中性緩衝ホルマリン中で組織病理学的分析のために固定した。
【０２５０】
実施例８６
マウスにおけるヒスタミン誘導血管透過性モデル：７〜８週齢の雌のＢａｌｂ／ｃマウスを少なくとも３日間順応させ、各群に無作為に割り当てた。動物に１％エバンスブルーを１００μｌ／マウスの用量で静脈内注射した。１０分後に、疾患群の動物にＰＢＳ２０μｌ中のヒスタミン１μｇを背部で皮内投与し、投与から２０分後にと殺した。ＰＢＳ２０μｌを、偽対照群の動物の背部に皮内注射した。それに応じて、ビヒクル及び試験物を強制経口投与によって投与した。陽性対照であるサルブタモールをエバンスブルーの１５分前に投与した。ヒスタミンの暴露から２０分後に、動物を安楽死させた。次いで、皮膚を反転させ、病変の直径を測定した。病変の面積を計算し、平方ミリメートルで表した。直径を測定した後に、エバンスブルー色素を皮膚組織から抽出し、光学密度を測定した。データは、スパイクエバンスブルー標準曲線に対して計算される。
【０２５１】
実施例８７
ＲＯＣＫ阻害剤は、インビトロ及び細胞においてＲＯＣＫキナーゼ活性を強力に阻害した。Ａ７Ｒ５インセルＥｌｉｓａアッセイによって測定されたとおり、本発明の化合物は細胞中のＲＯＣＫを阻害した。Ａ７Ｒ５細胞を化合物の９ポイントの２倍系列希釈物で処理し、ｐｐＭｌｃ（Ｔ１８／Ｓ１９）レベルを決定して、化合物の細胞ＩＣ50値を計算した。結果を下の表１に示す。
【表１】
2020527585.tif 000094
【０２５２】
下の表２は、本発明の化合物でのインビトロ及び細胞内ＲＯＣＫ阻害を示している。化合物の活性をＺ’−ｌｙｔｅキナーゼキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって測定した。１μＭ化合物処理で得られたキナーゼ活性値をＤＭＳＯ対照値に対して正規化することによって、阻害パーセント率を計算した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを、化合物処理の９ポイントの系列希釈物から収集されたキナーゼ活性データと共に用いて、ＩＣ50を計算した。Ａ７Ｒ５細胞及びＮＩＨ３Ｔ３（Ａｃｔａ２−Ｌｕｃ）細胞におけるＲＯＣＫ阻害を上記のとおり行った。
【表２−１】
2020527585.tif 000095
【表２−２】
2020527585.tif 000096
【０２５３】
本発明の化合物は、２−アミノ基の上にアルキル置換基（任意選択で置換されている）を有し（すなわち、Ｒ1がアルキルなどである）、このことが、この位置に第一級アミノ基を有する化合物と比べて、特に２位の低級アルキルアミン（すなわち、Ｒ1が低級アルキルである）では、細胞内ＲＯＣＫ活性の増強と関連している。
【０２５４】
実施例８８
ＲＯＣＫ阻害剤は血液脳関門を通過した。
選択されたＲＯＣＫ阻害剤の脳及び血漿中濃度をマウスにおいて、ＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳによって、２．５ｍｇ／ｋｇの静脈内薬物投与後１５分目及び２時間目に評価した。結果を下の表３に示す。
【表３】
2020527585.tif 000097
【０２５５】
本発明のＲＯＣＫ阻害剤は、インビトロ及び細胞内でＲＯＣＫキナーゼ活性を強力に阻害した。
【０２５６】
図１Ａに示されているとおり、Ｚ’−Ｌｙｔｅキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって測定されたとおり、本発明の化合物は２０ナノモル未満の濃度で、インビトロでＲＯＣＫの両方のアイソフォームの活性を強力に阻害した。化合物処置で得られたキナーゼ活性値をＤＭＳＯ対照値に対して正規化し、次いで、式、［ＤＭＳＯ−（化合物／ＤＭＳＯ）］×１００％に当てはめることによって、阻害パーセント率を計算した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアの非線形回帰曲線フィット関数を、化合物処理の９ポイントの２倍系列希釈物で測定されたキナーゼ活性データと共に用いて、ＩＣ50を計算した。
【０２５７】
Ａ７Ｒ５インセルＥＬＩＳＡアッセイを行って、試験物のＲＯＣＫ阻害を決定した。Ａ７Ｒ５細胞を化合物の９ポイントの２倍系列希釈物で処理し、ｐｐＭｌｃ（Ｔ１８／Ｓ１９）レベルを決定して、化合物の細胞ＩＣ50値を計算した。本発明の化合物は、２００ｎＭ未満のＩＣ50の活性を示した。図１Ｂを参照されたい。Ａ７Ｒ５細胞を化合物の９ポイントの２倍系列希釈物で処理し、ｐｐＭｌｃ（Ｔ１８／Ｓ１９）レベルを決定して、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアの非線形回帰曲線フィット関数を用いて化合物の細胞ＩＣ50値を計算した。
【０２５８】
ＲＯＣＫ阻害剤は、ＡＣＴＡ２−プロモーター駆動性ルシフェラーゼレポーター細胞アッセイによって、効果的に順位付けすることができる。ＡＣＴＡ２−プロモーター駆動性ルシフェラーゼを安定発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞を適用して、細胞におけるＲＯＣＫ化合物の機能性ＩＣ50を測定した。細胞を９６ウェルプレートにコンフルエンスまでプレーティングし、ＴＧＦβ１と組み合わせた化合物の９ポイントの系列希釈物で２４時間にわたって処理した。ルシフェラーゼ活性を測定し、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアの非線形回帰曲線フィット関数を用いて化合物のＩＣ50を計算した。本発明の化合物は細胞において、２００ｎＭ未満のＩＣ50を示した。図１Ｃを参照されたい。
【０２５９】
化合物ＲＯＣＫ活性を追加の細胞型で試験した。Ｓｖｅｃ４−１０マウス内皮細胞を実施例２の化合物で１２０分間にわたって処理し、ｐｐＭｌｃ（Ｔ１８／Ｓ１９）及びｐＭｙｐｔ（Ｔ８５３）レベルをウェスタンブロット法によって可視化した。実施例２は１１０ｎＭで、ＲＯＣＫ標的のＭＬＣ及びＭＹＰＴ１のリン酸化を効率的に遮断した。図１Ｄを参照されたい。
【０２６０】
実施例８９
ＲＯＣＫ阻害剤は神経突起伸長及びニューロン分化を促進する
ニューロンの発達は、細胞骨格の調節の高度な協調を必要とする。ＲｈｏＡ／ＲＯＣＫ経路の活性化は、アクチン線維流動の上昇及びアクチン解重合の減少などの細胞骨格の変化をもたらし、最終的に、成長円錐の退縮をもたらし、次いでこれが、神経突起成長及び伸長を抑制する。ここで本発明者らは、ＲＯＣＫ阻害剤が、ニューロン新芽形成及び神経突起伸長を用量依存的に促進することを示す。図２Ａ、Ｂは、実施例２及び実施例１７の化合物が様々な濃度で、ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞の培養において神経突起長さを有意に増加させることを実証している。実施例２及び実施例１７はまた、ニューロンの分化及び成熟を促進する。図２Ｃ、Ｄを参照されたい。
【０２６１】
ＲＯＣＫ阻害剤は、神経突起伸長に対する硫酸コンドロイチンプロテオグリカン（ＣＳＰＧ）の阻害作用を遮断する。成熟哺乳類ＣＮＳニューロンは、外傷性損傷または神経変性後に自発再生することはない。この再生の欠如の原因は、成熟ニューロン及び抑制性組織環境の両方の低い固有再生能力に帰せられている。適切な環境における主な障害は、反応性星状細胞によって分泌される硫酸コンドロイチンプロテオグリカン（ＣＳＰＧ）及びオリゴデンドロサイトによって産生されるミエリン関連阻害因子である。これらの神経膠細胞由来成長阻害分子は、ニューロン損傷後に上方制御され、ＲｈｏＡ／ＲＯＣＫシグナル伝達経路の下流に集中し、神経再生を遮断する。再生の促進には、組織環境からの成長阻害因子を不活性化することが必要である。本明細書で本発明者らは、Ｒｈｏ／ＲＯＣＫ経路を遮断することによって、神経突起伸長に対するＣＳＰＧの阻害作用によるグリア成長阻害因子シグナルを逆転させたことを示す。図２Ｅは、３日目の代表写真を示している。図２Ｆ及び２Ｇに示されているとおり、１μＭ及び３μＭの実施例２及び実施例１７は両方とも、ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞において、０．３ｍｇ／ｍｌのＣＳＰＧによって媒介された神経突起伸長の停止を有意に中和する。７２時間時点での統計的解析をＡＮＯＶＡによって行った。
【０２６２】
実施例９０
ＲＯＣＫ阻害剤は、神経細胞をＡβ１−４２誘導性細胞死から防御する。
神経再生の促進に加えて、ＲＯＣＫ阻害剤は、神経保護効果を発揮し、ニューロンの生存を長期化することが報告されている。ここで本発明者らは、Ａβ１−４２に対するＲＯＣＫ阻害剤の神経保護効果を試験する。ヒトオリゴデンドロサイト／ニューロン前駆細胞をＲＯＣＫ阻害剤と共に３０分間にわたってプレインキュベートし、その後、１０．５μＭ  Ａβ１−４２に暴露した。ＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ａｎｎｅｘｉｎ  Ｖ  Ｒｅｄ試薬を培養培地に添加して、細胞アポトーシスを標識した。ＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｓ３によって写真を撮影し、全Ａｎｎｅｘｉｎ  Ｖ陽性面積をＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｓ３ベースソフトウェアによって分析した。代表写真が図３Ａに示された。神経突起長さをＩｎｃｕＣｙｔｅ  ＮｅｕｒｏＴｒａｃｋ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｍｏｄｕｌｅによって定量化した。図３Ｂ及び３Ｃを参照されたい。図３Ｅ及び３Ｆは、Ａｎｎｅｘｉｎ  Ｖ面積及び神経突起長さの２４時間時点での統計解析を示しており、これは、３μＭの実施例２及び実施例１７がＡβ１−４２誘導性細胞死を有意に防御すること、及び３μＭの実施例１７がＡβ１−４２の存在下で神経突起伸長を促進したことを示している。
【０２６３】
実施例９１
本発明のＲＯＣＫ阻害剤は向線維化遺伝子発現を抑制した
線維芽細胞によるα−平滑筋アクチン（αＳＭＡ、またはＡｃｔａ２）の発現は、線維芽細胞から、さらに向線維化性筋線維芽細胞への分化転換を示す重要なマーカーであり、これは、線維形成因子の発現の増大によって例示される。ＴＧＦβシグナル伝達を含む、そのような向線維化因子は、αＳＭＡの発現をもたらし、筋線維芽細胞分化、増殖及び生存の持続に寄与する。図４Ａに示されているとおり、ＴＧＦβ１誘導のαＳＭＡ発現は、ＲＯＣＫ阻害剤によって有意に低下した。ＮＩＨ３Ｔ３細胞をＲＯＣＫ阻害剤と組み合わせたＴＧＦβ１で２４時間にわたって処理し、ｍＲＮＡ発現をＴａｑｍａｎ  ｑＰＣＲによって定量化した。
【０２６４】
αＳＭＡの発現に加えて、ＩＰＦ患者の肺から単離された筋線維芽細胞は、老化特性を示す。それらはアポトーシスに対して抵抗性があり、かつ代謝が高度に活性であり、大量のＥＣＭタンパク質を持続的に産生して線維症発症を駆動する。ＣＣＮ１（またはＣＹＲ６１）及びＣＴＧＦは、これらのクラスのタンパク質に属する。ＴＧＦβ誘導下でのＲＯＣＫ阻害剤でのヒト肺線維芽細胞の処理は、ＣＴＧＦ及びＣＣＮ１の発現を著しく阻害した。図４Ｂ及びＣを参照されたい。分泌ＣＣＮ１タンパク質もまた、ＲＯＣＫ阻害によって減少し、図４Ｄにおいて示されているとおりの細胞培養培地ＥＬＩＳＡアッセイによって実証された。ＣＣＤ１８Ｌｕ線維芽細胞を、ＴＧＦβと組み合わせたＲＯＣＫ阻害剤で４０時間にわたって処理した。ＣＣＮ１含分を、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ製のヒトＣＣＮ１  ＥＬＩＳＡキットを使用して測定した。これらの結果は、ＲＯＣＫ阻害剤が線維化状態下で筋線維芽細胞の生存促進性、老化促進性（ｐｒｏ−ｓｅｎｅｓｃｅｎｔ）シグナルを抑制し得たことを示唆している。
【０２６５】
実施例９２
ＲＯＣＫ阻害剤は、マウスでのブレオマイシン誘導性肺線維症モデルにおいて複数の線維化指数の低下において有効である
本発明のＲＯＣＫ阻害剤の強い抗線維化細胞活性に基づき、インビボ状況において線維化を軽減するそのような阻害剤の能力を、ブレオマイシン誘導性肺線維症を含む線維化疾患の複数のマウスモデルにおいて評価した。ブレオマイシンの気管内点滴の後に、マウスにＲＯＣＫ阻害剤を３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇまたは３０ｍｇ／ｋｇのいずれかの用量で経口投与した。対照動物には、ビヒクルのみを同じ１日１回投与スケジュールで投与した。処置の２０日後に、動物をと殺し、肺を除去し、秤量し、組織病理学的評価のために固定した。図５Ａは、各処置群からの１０倍対物レンズでのマッソン三色染色肺切片の代表画像を示している。処置群では、線維化組織形成（矢印の根元部分）、肥大肺胞中隔及び結節様形成（矢印）がまだ存在したが、すべて、ブレオマイシン誘導性対照と比較して重症度は低かった。（Ｂ＝細気管支）。このモデルにおいて、すべてのＲＯＣＫ阻害剤が肺構造及びコラーゲン沈着を用量依存的に改善した。１０ｍｇ／ｋｇ以上の用量を投与されたマウスは、明らかで、統計学的に有意な改善を示した。
【０２６６】
全肺線維化、α−平滑筋アクチン（αＳＭＡ）陽性面積パーセンテージ及び気管支肺胞洗浄液中の全白血球数の改善を、Ａｓｈｃｏｆｔスコア基準をそれぞれ組織病理画像、ＩＨＣ定量化及び流量血球計算法に適用することによって定量した。より低い群平均線維化指数、αＳＭＡ陽性面積及び気管支肺胞洗浄液中の全白血球数によって示されるとおり、１０ｍｇ／ｋｇ以上のＲＯＣＫ阻害剤の投与によって、ビヒクル処置対照と比較して、線維化がかなり少なくなり、炎症性白血球浸潤がより低くなった。図５Ｂを参照されたい。
【０２６７】
実施例９３
マウスでのブレオマイシン誘導性肺線維症モデルにおいて治療的に投与すると、ＲＯＣＫ阻害は、線維化スコアの低下に有効である
肺組織損傷を、及びその後に、肺の線維化を誘導する気管内ブレオマイシン点滴の後に、治療的投与設定で肺線維化を減弱させるＲＯＣＫ阻害剤の活性をブレオマイシン誘導性モデルで評価した。処置開始前に線維化を確立することを可能にしたブレオマイシン点滴から７日後に、マウスを化合物またはビヒクル対照で処置した。すべてのマウスを２０日目にと殺し、肺を収集した。右肺の大葉を１０％中性ホルマリンで固定し、切片にし、マッソン三色染色で染色した。より少ないコラーゲン含分及びマッソン三色染色スコアの低下によって証拠付けられたとおり、明らかな抗線維化効果が１０ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇのＲＯＣＫ阻害剤処置群で観察された。図６Ａを参照されたい。
【０２６８】
全肺線維化の改善を対照及び処置群の各動物について定量した。図６Ｂを参照されたい。個々のマウスからの肺のマッソン三色染色切片が群平均、及び平均の標準誤差（ＳＥＭ）で示されている。正常な対照マウスのスコアは０であった。実施例２の化合物で処置されたマウスの肺のコラーゲン量は有意に低かった。
【０２６９】
実施例９４
ＲＯＣＫ阻害は、マウスでのヒスタミン誘導血管透過性モデルにおいて内皮バリア機能を安定化させる
器官上皮細胞が受ける損傷に加えて、線維化疾患では、損傷は内皮細胞にも生じて、内皮バリアの不安定化及び毛細血管漏出をもたらし、これらの両方が、線維化組織の特徴である。ＲＯＣＫシグナル伝達経路は、損傷を受けた内皮細胞で上方制御され、さらなるバリア不安定化及び血管漏出につながる。血管漏出の誘導におけるＲＯＣＫの関与によって、本発明者らは、ＲＯＣＫ阻害剤の投与がインビボにおいてそのような血管バリア機能を安定化させ得ると仮定することができた。本発明者らは、マウスでのヒスタミン誘導皮膚血管漏出のモデルにおいて、単回用量投与後に、遮断性ＲＯＣＫ阻害剤活性の有効性を試験した。このモデルでは、ヒスタミンの皮内注射が、ヒスタミン投与部位でエバンスブルー色素の血管外遊出を迅速に誘導した。ヒスタミン注射の１時間前に実施例２のＲＯＣＫ阻害剤を投与することによって、ヒスタミンによって誘導される血管透過が用量依存的に遮断されたが、これは、抗線維化活性に加えて、本発明のＲＯＣＫ阻害を誘導性血管透過性と関連する疾患において利用することもできるであろうことを示唆した。図７Ａは、ヒスタミンによって誘導されたエバンスブルー色素血管外遊出の代表画像を示している。
【０２７０】
全皮膚スポット面積及び皮膚を透過したエバンスブルー色素の量の両方を計算することによって、化合物有効性の程度を定量した。ヒスタミンに暴露した２０分後に、動物を安楽死させ、病変直径を測定した。病変の面積を計算し、平方ミリメートルで表した。直径を測定した後に、エバンスブルー色素を皮膚組織から抽出し、光学密度を測定した。データを再び、スパイクエバンスブルー標準曲線に対して計算する。**ｐ＜０．０１（ビヒクル群に対して；一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてダネット事後検定を使用）。図７Ｂを参照されたい。
【０２７１】
文献一覧：
Ｄｅｙｔｓ，Ｃ．，Ｇａｌａｎ−Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ，Ｂ．，Ｍａｒｔｉｎ，Ｅ．，Ｂｏｕｖｅｙｒｏｎ，Ｎ．，Ｒｏｚｅ，Ｅ．，Ｃｈａｒｖｉｎ，Ｄ．，Ｃａｂｏｃｈｅ，Ｊ．，ａｎｄ  Ｂｅｔｕｉｎｇ，Ｓ．（２００９）．Ｄｏｐａｍｉｎｅ  Ｄ２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｓ  ＰｏｌｙＱ−Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｍｏｕｓｅ  ｓｔｒｉａｔａｌ  ｎｅｕｒｏｎ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｖｉａ  Ｒｈｏ／ＲＯＣＫ−ＩＩ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ４，ｅ８２８７．
Ｇｏｖｅｋ，Ｅ．Ｅ．，Ｎｅｗｅｙ，Ｓ．Ｅ．，ａｎｄ  Ｖａｎ  Ａｅｌｓｔ，Ｌ．（２００５）．Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒｈｏ  ＧＴＰａｓｅｓ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ  １９，１−４９．
Ｌｉ，Ｍ．，Ｈｕａｎｇ，Ｙ．，Ｍａ，Ａ．Ａ．，Ｌｉｎ，Ｅ．，ａｎｄ  Ｄｉａｍｏｎｄ，Ｍ．Ｉ．（２００９）．Ｙ−２７６３２  ｉｍｐｒｏｖｅｓ  ｒｏｔａｒｏｄ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ａｎｄ  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  ｌｅｖｅｌｓ  ｉｎ  Ｒ６／２  ｍｉｃｅ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ｄｉｓ  ３６，４１３−４２０．
Ｌｉｎｓｅｍａｎ，Ｄ．Ａ．，ａｎｄ  Ｌｏｕｃｋｓ，Ｆ．Ａ．（２００８）．Ｄｉｖｅｒｓｅ  ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  Ｒｈｏ  ｆａｍｉｌｙ  ＧＴＰａｓｅｓ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ｓｕｒｖｉｖａｌ，ａｎｄ  ｄｅａｔｈ．Ｆｒｏｎｔ  Ｂｉｏｓｃｉ  １３，６５７−６７６．
Ｐｅｔｒａｔｏｓ，Ｓ．，Ｌｉ，Ｑ．Ｘ．，Ｇｅｏｒｇｅ，Ａ．Ｊ．，Ｈｏｕ，Ｘ．，Ｋｅｒｒ，Ｍ．Ｌ．，Ｕｎａｂｉａ，Ｓ．Ｅ．，Ｈａｔｚｉｎｉｓｉｒｉｏｕ，Ｉ．，Ｍａｋｓｅｌ，Ｄ．，Ａｇｕｉｌａｒ，Ｍ．Ｉ．，ａｎｄ  Ｓｍａｌｌ，Ｄ．Ｈ．（２００８）．Ｔｈｅ  ｂｅｔａ−ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｉｎｃｒｅａｓｅｓ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ＣＲＭＰ−２  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  ａ  Ｒｈｏ−ＧＴＰ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｂｒａｉｎ  １３１，９０−１０８．
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Ｓｈａｏ，Ｊ．，Ｗｅｌｃｈ，Ｗ．Ｊ．，ａｎｄ  Ｄｉａｍｏｎｄ，Ｍ．Ｉ．（２００８ａ）．ＲＯＣＫ  ａｎｄ  ＰＲＫ−２  ｍｅｄｉａｔｅ  ｔｈｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｙ−２７６３２  ｏｎ  ｐｏｌｙｇｌｕｔａｍｉｎｅ  ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ．ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ  ５８２，１６３７−１６４２．
Ｓｈａｏ，Ｊ．，Ｗｅｌｃｈ，Ｗ．Ｊ．，Ｄｉｐｒｏｓｐｅｒｏ，Ｎ．Ａ．，ａｎｄ  Ｄｉａｍｏｎｄ，Ｍ．Ｉ．（２００８ｂ）．Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｆｉｌｉｎ  ｂｙ  ＲＯＣＫ１  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｐｏｌｙｇｌｕｔａｍｉｎｅ  ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ．Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２８，５１９６−５２０８．
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【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図２Ｅ】
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【図２Ｆ】
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【図２Ｇ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ−１】
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【図５Ｂ−２】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【国際調査報告】
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