(57)【要約】本発明は、２’−スピロチエタンヌクレオシドと、そのリン酸塩及びプロドラッグと、それらの薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、特に、フラビウイルス科ファミリー及び／又はアルファウイルス属に属するウイルスに起因するウイルス感染の予防及び／又は治療における薬剤としてのこうした化合物の使用と、に関する。本発明は、更に、化合物の医薬組成物又は配合製剤、並びに、より好ましくは、フラビウイルス科ファミリー及び／又はアルファウイルス属に属するウイルスによって引き起こされるウイルス感染の予防又は治療のための薬剤として使用するための組成物又は製剤に関する。本発明はまた、化合物の調製プロセスにも関する。2020531536.tif 000071【化１】
2020531536.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物
【化１】
2020531536.tif 000062
又はその立体異性体であって、式中、
塩基は（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、（Ｂ−３ａ）、（Ｂ−３ｂ）、（Ｂ−４）、及び（Ｂ−５）からなる群から選択され、
【化２】
2020531536.tif 000063
式中、Ｒは、水素又はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３は、水素、ハロ、メチル、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２Ｆ、及びＮ３；
又はその一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、若しくはプロドラッグ；
又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物からなる群から選択される、式（Ｉ）の化合物又はその立体異性体。
【請求項２】
式（Ｉ’）を有し、
【化３】
2020531536.tif 000064
式中、
Ｒ１は、水素、
【化４】
2020531536.tif 000065
、式（ａ−１）の基、式（ａ−２）の基、式（ａ−３）の基、及び式（ａ−４）の基からなる群から選択され；
【化５】
2020531536.tif 000066
式中、
Ｒ４及びＲ７はそれぞれ独立して、水素、フェニル、ナフチル、キノリニル、イソキノリニル、及びピリジルからなる群から選択され、これらのそれぞれが、任意選択的に、それぞれ独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ１６Ｒ１６’からなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換されるか、或いは
Ｒ４及びＲ７は、それぞれ独立して、任意選択的に、その窒素原子において、Ｃ１〜Ｃ６アルキル若しくはＣ１〜Ｃ６アルキルオキシカルボニルで、及び／又は任意の利用可能な炭素原子において、それぞれ独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ１７Ｒ１７’からなる群から選択される１、２、若しくは３個の置換基で置換されるインドリルであり；
Ｒ５、Ｒ５’、Ｒ１０及びＲ１０’は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、及びフェニルからなる群から選択されるか、或いは
Ｒ５及びＲ５’、又はＲ１０及びＲ１０’は、それらが結合している炭素原子と共に、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルカンジイル又は１個の酸素原子を含有する３〜７員環の複素環を形成し；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、式中、フェニル、又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立してヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ１８Ｒ１８’からなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換され；
Ｒ８は−ＯＲ１９又は−ＮＲ２０Ｒ２０’であり；
Ｒ９は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ−Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、式中、フェニル、又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立してハロ、及びＣ１〜Ｃ６アルキルオキシからなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換され；
Ｒ１１は、水素、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、式中、フェニル、又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立して、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ２３Ｒ２３’からなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換され；
Ｒ１９は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、オキセタニル、（Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、及び−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
Ｒ２０は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、及びＣ３〜Ｃ７シクロアルキルからなる群から選択され；Ｒ２０’は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、及び（Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択されるか；或いは
−ＮＲ２０Ｒ２０’は共にアゼチジニル、ピロリジニル、又はピペリジニル環を形成し、そのそれぞれが、任意選択的に、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルオキシ、及び（Ｃ＝Ｏ）−ＯＲ２１からなる群で置換され得、式中、Ｒ２１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、式中、フェニル、又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立して、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ２２Ｒ２２’からなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換され；
Ｒ２は水素又は式（ｂ）の基であり、
【化６】
2020531536.tif 000067
式中、
Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、
式中、フェニル、又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立してハロ、及びＣ１〜Ｃ６アルキルオキシからなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換され；又は
Ｒ１及びＲ２は、結合して式（ｃ−１）又は（ｃ−２）の二価ラジカルを形成し、
【化７】
2020531536.tif 000068
式中、
Ｒ１３及びＲ１３’はそれぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、及びフェニルからなる群から選択されるか；或いは
Ｒ１３及びＲ１３’は、それらが結合している炭素原子と共に、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルカンジイル又は１個の酸素原子を含有する３〜７員環の複素環を形成し；
Ｒ１４は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、式中、フェニル、又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立してヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ２４Ｒ２４’からなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換され；
Ｒ１５は−ＯＲ２５又は−ＮＲ２６Ｒ２６’であり；式中、
Ｒ２５は、水素；Ｃ１〜Ｃ６アルキル；それぞれ独立してフェニル、ナフチル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、ヒドロキシル、及びＣ１〜Ｃ６アルキルオキシからなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換されたＣ１〜Ｃ３アルキル；Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル；（Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−；−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル；−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ６アルキル；１個の酸素原子を含有する３〜７員環の複素環、並びにＡｒからなる群から選択され；
Ａｒは、フェニル、ナフチル、キノリニル、イソキノリニル、及びピリジルからなる群から選択され、これらのそれぞれが、任意選択的に、それぞれ独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ２７Ｒ２７’からなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換されるか、或いは、
Ａｒは、任意選択的に、その窒素原子において、Ｃ１〜Ｃ６アルキル若しくはＣ１〜Ｃ６アルキルオキシカルボニルで、及び／又は任意の利用可能な炭素原子において、それぞれ独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ２８Ｒ２８’からなる群から選択される１、２、若しくは３個の置換基で置換されたインドリルであり；
Ｒ２６は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、及びＣ３〜Ｃ７シクロアルキルからなる群から選択され；Ｒ２６’は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、及び（Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択されるか；或いは
−ＮＲ２６Ｒ２６’は共にアゼチジニル、ピロリジニル、又はピペリジニル環を形成し、そのそれぞれが、任意選択的に、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルオキシ、及び（Ｃ＝Ｏ）−ＯＲ２７からなる群で置換され得、式中、Ｒ２７は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、式中、フェニル、又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立して、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ２９Ｒ２９’からなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換され；
Ｒ１６、Ｒ１６’、Ｒ１７、Ｒ１７’、Ｒ１８、Ｒ１８’、Ｒ２２、Ｒ２２’、Ｒ２３、Ｒ２３’、Ｒ２４、Ｒ２４’、Ｒ２７、Ｒ２７’、Ｒ２８、Ｒ２８’、Ｒ２９、及びＲ２９’は、それぞれ独立して、水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
Ｒ３は、水素、ハロ、メチル、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２Ｆ、及びＮ３からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１は、水素、
【化８】
2020531536.tif 000069
、式（ａ−１）の基、式（ａ−２）の基、及び式（ａ−３）の基からなる群から選択され、式中
Ｒ４及びＲ７は、それぞれ独立してフェニル又はナフチルであり、これらのそれぞれが、任意選択的に、それぞれ独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ１６Ｒ１６’からなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換され、式中、Ｒ１６及びＲ１６’はそれぞれ独立して水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキルから選択されるか；或いはＲ４及びＲ７はそれぞれ独立してインドリルであり；
Ｒ５及びＲ５’はそれぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、及びフェニルからなる群から選択されるか；或いはＲ５及びＲ５’は、それらが結合している炭素原子と共にＣ３〜Ｃ７シクロアルカンジイルを形成し；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され；
Ｒ８は−ＯＲ１９又は−ＮＲ２０Ｒ２０’であり；式中Ｒ１９はＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ２０は水素であり、Ｒ２０’はＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ９はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は水素又は式（ｂ）の基であり、式中Ｒ１２はＣ１〜Ｃ６アルキルであるか；或いは、
Ｒ１及びＲ２は、結合して式（ｃ−１）又は（ｃ−２）の二価ラジカルを形成し、式中、
Ｒ１３及びＲ１３’はそれぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、及びフェニルからなる群から選択されるか；或いはＲ１３及びＲ１３’は、それらが結合している炭素原子と共にＣ３〜Ｃ７シクロアルカンジイルを形成し；
Ｒ１４は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され；
Ｒ１５は−ＯＲ２５又は−ＮＲ２６Ｒ２６’であり、式中、Ｒ２５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル；フェニル；Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル；並びにそれぞれ独立してフェニル、ナフチル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、ヒドロキシル、及びＣ１〜Ｃ６アルキルオキシからなる群から選択される１、２、又は３個の置換基で置換されたＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択され；Ｒ２６は水素であり；Ｒ２６’はＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１は、
水素、
【化９】
2020531536.tif 000070
、及び式（ａ−１）の基からなる群から選択される
か、或いは、Ｒ１及びＲ２は、結合して式（ｃ−２）の二価ラジカルを形成する、請求項２又は３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ４はフェニル、ハロフェニル、ジＣ１〜Ｃ４アルキルフェニル、又はナフチルであり；
Ｒ５及びＲ５’はそれぞれ独立して水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、又はフェニルであり；
Ｒ６はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ１５は−ＯＲ２５であり、式中Ｒ２５はＣ１〜Ｃ６アルキル、若しくはフェニルで置換したＣ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルキルオキシ、又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルである、請求項２〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
塩基は（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、又は（Ｂ−３ａ）であり、Ｒ３は、水素、ハロ、及びＮ３からなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
治療有効量、特に抗ウイルス有効量の、請求項１〜６のいずれか一項で定義される式（Ｉ）の化合物、及び薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物。
【請求項８】
薬学的に許容可能な担体が、治療有効量、特に抗ウイルス有効量の、請求項１〜６のいずれか一項で定義される式（Ｉ）の化合物と密に混合されることを特徴とする、請求項７に記載の医薬組成物を調製するためのプロセス。
【請求項９】
薬剤として使用するための、請求項１〜６のいずれか一項で定義される化合物、又は請求項７で定義される医薬組成物。
【請求項１０】
フラビウイルス科ウイルス感染の治療若しくは予防、及び／又はアルファウイルス感染の治療若しくは予防に使用するための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項７で定義される医薬組成物。
【請求項１１】
ＨＣＶ及び／又はデングウイルスの阻害剤として使用するための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項７で定義される医薬組成物。
【請求項１２】
チクングンヤウイルス及び／又はシンドビスウイルス及び／又はセムリキ森林ウイルスの阻害剤として使用するための、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項７で定義される医薬組成物。
【請求項１３】
抗フラビウイルス科及び／又は抗アルファウイルス有効量の、請求項１〜６のいずれか一項で定義される式（Ｉ）の化合物を投与することを含む、フラビウイルス科及び／若しくはアルファウイルスに感染しているか、又はフラビウイルス科及び／若しくはアルファウイルスに感染するリスクのある温血動物、特にヒトを治療する方法。
【請求項１４】
フラビウイルス科ウイルス感染の治療若しくは予防及び／又はアルファウイルス感染の治療若しくは予防における、同時、個別、又は逐次的使用のための配合製剤としての、請求項１〜６のいずれか一項で定義される式（Ｉ）の化合物、及び追加の医薬品、特に追加の抗ウイルス剤を含む製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、２’−スピロチエタンヌクレオシドと、そのリン酸塩及びプロドラッグと、それらの薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、特に、フラビウイルス科ファミリー及び／又はアルファウイルス属に属するウイルスに起因するウイルス感染の予防及び／又は治療における薬剤としてのこうした化合物の使用と、に関する。本発明は、更に、化合物の医薬組成物又は配合製剤、並びに、より好ましくは、フラビウイルス科ファミリー及び／又はアルファウイルス属に属するウイルスによって引き起こされるウイルス感染の予防又は治療のための薬剤として使用するための組成物又は製剤に関する。本発明は、更に、この化合物の調製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）は、フラビウイルス科ファミリーのヘパシウイルス属に属する、エンベロープを有する一本鎖のプラスセンスＲＮＡウイルスである。このウイルスは、ウイルスの複製に必須であるＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＲｄＲｐ）であるＮＳ５Ｂをコードする。初期ウイルス感染後、感染した個体の大半は慢性肝炎を発症し、これが肝線維症へと進行して、末期肝疾患である肝硬変、及びＨＣＣ（肝細胞癌）をもたらして、肝移植の主な原因となる場合がある。ＨＣＶは、地理的に異なって分布している６種類の主な遺伝子型、及び５０種を超える亜型に分類される。遺伝子型１は、欧州及び米国内で優勢な遺伝子型である。ＨＣＶの広範な遺伝子異質性は重要な診断的及び臨床的意味を有しており、おそらくワクチン開発における困難さ、及び現在の治療法に対する応答の欠如を説明するものである。
【０００３】
ＨＣＶの伝播は、汚染された血液又は血液製品との接触、例えば輸血後又は静脈内薬物使用を介して生じ得る。血液スクリーニングに用いられる診断試験の導入により、輸血後ＨＣＶ発生率の下方傾向がもたらされている。しかしながら、末期肝疾患への遅い進行を考慮すると、既存の感染症は、重大な医学的及び経済的負担を数十年間もたらし続けるであろう。
【０００４】
ＮＳ５Ｂポリメラーゼは、ＨＣＶ  ＲＮＡゲノムの複製に必須である。この酵素は、医薬品化学者の間で大きな関心を集めている。ＮＳ５Ｂのヌクレオシド阻害剤及び非ヌクレオシド阻害剤はともに既知である。ヌクレオシド阻害剤は、連鎖停止剤として、若しくは競合阻害剤として、又はその両方として作用し得る。活性となるためには、ヌクレオシド阻害剤は細胞に吸収されて、インビボで三リン酸塩に変換される必要がある。この三リン酸塩への変換は通常、細胞キナーゼにより媒介されるため、潜在的なヌクレオシドポリメラーゼ阻害剤に対しては追加の構造的要求がなされる。
【０００５】
節足動物媒介ウイルスは、いくつかの最重要の新興及び再興感染症の原因物質であり、重大な地球的規模の公衆衛生問題を引き起こす。
【０００６】
これらのウイルスのうちの１つが、ヤブカ属蚊によって伝染されるフラビウイルスのデングウイルスであり、これはデング熱、デング出血熱、及びデングショック症候群などの重篤且つ致死的な疾患を引き起こし得る。デングウイルスは、いわゆるＤＥＮＶ−１、−２、−３、及び−４の、４種の異なるが密接に関連する血清型に分類され得る。デング熱は、世界のほとんどの熱帯及び亜熱帯地域、主に都市部及び準都市部に特有である。世界保健機関（ＷＨＯ）によれば、２５億人がＤＥＮＶ感染の危険にさらされており、そのうちの１０億人が小児である（ＷＨＯ、２００２）。毎年、世界で、推定５千万〜１億例のデング熱［ＤＦ］、５０万例の重症デング疾患（すなわち、デング出血熱［ＤＨＦ］及びデングショック症候群［ＤＳＳ］）、及び２０，０００人を超える死者が発生している。ＤＨＦは、流行地における小児の入院及び死亡の主な要因となっている。要するに、デング熱はアルボウイルス疾患の最も一般的な原因である。ラテンアメリカ、東南アジア、及び西太平洋の国々（ブラジル、プエルトリコ、ベネズエラ、カンボジア、インドネシア、ベトナム、タイなど）における近年の大規模集団発生のために、過去数年に亘りデング症例数は著しく増加している。デング熱は新しい地域に広がっているため、この疾患の症例数が増加しているだけでなく、その集団発生がより深刻化する傾向にある。
【０００７】
デングウイルス感染に関連する疾患の予防及び／又は防除のために使用可能な方法は、現在のところ、ベクターを防除するための蚊の根絶戦略のみである。デングウイルスに対するワクチンの開発が進められているが、多くの困難がある。こうした困難には、ウイルスの抗体依存性感染増強（ＡＤＥ）と呼ばれる現象の存在が含まれる。
【０００８】
１種の血清型による一次感染によって、その血清型に対する生涯にわたる免疫が得られるが、他の３種の血清型のうちの１種による二次感染に対しては、部分的で一過性の保護しか得られない。他の血清型に感染すると、既存の異種抗体は、新たに感染したデングウイルスと複合体を形成するが、その病原体を中和することはない。むしろ、細胞へのウイルスの侵入が促進され、それによりウイルスの無制御な複製が起こり、ピークウイルス価がより高くなると考えられる。一次感染及び二次感染の両方において、より高いウイルス価はより重症のデング疾患に関連する。母親由来抗体は授乳によって容易に乳児に移行し得るため、これは、小児の方が成人より重症デング疾患に冒されやすい理由の１つであり得る。
【０００９】
高頻度発症地域とも称される２種以上の血清型が同時に広まった地域では、二次感染の危険性が増大するために重症デング疾患の危険性が著しく高い。更に、今日、デング熱ウイルス感染を治療又は予防するための特定の抗ウイルス剤を入手することはできない。
【００１０】
その他の節足動物媒介ウイルスとしては、トガウイルス科ファミリーに属するアルファウイルス属が挙げられる。この属におけるウイルスは、熱病から、重篤な多発性関節炎から、脳炎までにわたる疾患の原因となる。一種のアルファウイルスであるチクングンヤウイルス（ＣＨＩＫＶ）は、重篤な罹患率を伴う近年の集団発生を引き起こした（Ｐｉａｌｏｕｘ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  ２００７；７：３１９−２７）。
【００１１】
ＣＨＩＫＶは蚊媒介性のウイルス性疾患であり、１９５２〜１９５３年にヒト及び蚊の両方から初めて分離された。それ以来、数多くのＣＨＩＫＶの再興がアフリカ及びアジアで報告されている。２００５〜２００６年前後に爆発的な集団発生が南アジア及び東南アジア、インド洋諸島、アフリカ、並びに北イタリアで起こった。例えば、２００６年前後の爆発的集団発生では、インド国で１４０万の症例が報告され、Ｒｅｕｎｉｏｎ（フランス国）では７７５，０００人の住民のうち２６６，０００人が感染し、イタリア国では約３００の症例が報告された。死亡率は約０．１％であるものの、これは、数ヶ月、又は更には数年間続く場合のある、激しい苦痛を伴う関節炎様の症状を引き起こす。フランス国及びイタリア国における近年の集団発生は、これが欧州及び世界の他の地域に対する脅威となる可能性があり得ることを示す。
【００１２】
ＣＨＩＫＶは、感染したＡ．アルボピクタス（Ａ  ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ）及びＡ．エジプティ（Ａ  ａｅｇｙｐｔｉ）蚊による刺傷を介してヒトに伝染する。チクングンヤウイルス感染後は平均で２〜４日間の潜伏期間があり、それに続いて高熱、発疹、頭痛、背痛、筋肉痛、及び関節痛などの病徴が起こる。例えば出血熱、結膜炎、光恐怖症、肝炎、及び口内炎などの、チクングンヤ感染の重篤な臨床的兆候も起こり得る。脳炎、熱性発作、髄膜症候群、及び急性脳症などの神経学的兆候も報告されている。
【００１３】
ＣＨＩＫＶは、約１２ｋｂのヌクレオチドのゲノムを含む、エンベロープを有するプラスセンスの一本鎖ＲＮＡウイルスである。ＣＨＩＫＶのゲノムは：５’ｃａｐ−ｎｓＰ１−ｎｓＰ２−ｎｓＰ３−ｎｓＰ４−（結合領域）−Ｃ−Ｅ３−Ｅ２−６ｋ−Ｅ１−ポリ（Ａ）−３’として組織化され、式中、第１の４つのタンパク質（ｎｓＰ１−４）は非構造的タンパク質であり、構造的タンパク質はカプシド（Ｃ）及びエンベロープタンパク質（Ｅ）である。
【００１４】
アフリカ、アジア、及びインド洋諸島で分離されたＣＨＩＫＶ間に明確な血清型の違いは存在しない。Ｅ１遺伝子配列に基づく系統発生解析は、ＣＨＩＫＶを、アジア系、東／中央／南アフリカ（ＥＣＳＡ）系、及び西アフリカ系の３つの遺伝子型（系統）に分類することができる。アジア系遺伝子型は、ＥＣＳＡ及び西アフリカ系遺伝子型とはそれぞれ約５％及び約１５％のヌクレオチド量が異なっていた。アフリカ系遺伝子型（ＥＣＳＡ対西アフリカ系）は、約１５％不一致であった。３つの遺伝子型間のアミノ酸同一性は、９５．２〜９９．８％で変化した。
【００１５】
現在、動物、より具体的にはヒトをＣＨＩＫＶ感染から予防及び治療するための認可されたワクチン及び抗ウイルス剤は存在しない。したがって、治療は単に症候性であり、これは非ステロイド系抗炎症剤に基づく。チクングンヤウイルスと戦うワクチンの欠如、その更なる拡散、及び全世界にわたる感染を理由として、チクングンヤウイルス感染を予防及び治療するための小化学分子を開発する高い医学的必要性が存在する。同様に、現在、その他のアルファウイルス、具体的にはシンドビスウイルス及びセムリキ森林ウイルスと戦うために利用可能な治療は存在しない。したがって、上記のウイルスによる感染を予防及び治療するための小化学分子を開発する医学的必要性が存在する。
【００１６】
更に、動物、より具体的にはヒトにおけるウイルス感染を予防又は治療するため、並びに特にフラビウイルス、より具体的にはＨＣＶ及びデングウイルスにより引き起こされるウイルス感染のための治療物質に対する、満たされていない大きな医学的必要性が依然として存在する。国際公開第２０１２／０７５１４０号パンフレットは、Ｃ型肝炎ウイルス又はデングウイルスに感染した対象を治療するのに有用な２’−スピロ−ヌクレオシド及びその誘導体を開示している。国際公開第２０１６／０７３７５６号パンフレットは、ＨＣＶによって引き起こされた感染を治療又は予防するための重水素化されたウリジンヌクレオシド誘導体を開示している。しかしながら、また、ソホスブビルとの組み合わせに基づくものなどのＨＣＶ治療のための多くの抗ＨＣＶ療法、及び臨床試験を受けている新規な直接作用抗ウイルス治療法が利用可能であるにもかかわらず、有利な特性を有する代替的な治療薬及び／又は治療法に対する必要性が依然として存在する。例えば、耐性への高い遺伝的バリア、広範な遺伝子型カバレッジ、好都合な副作用及び安全性プロフィール、並びに／又はより短い治療期間；更に、抗ウイルス力が良好であり、副作用が無いか若しくは低レベルであり、複数のデングウイルス血清型に対する広範な抗菌力スペクトラムを備え、低毒性であり、且つ／又は良好な薬物動態的若しくは力学的特性を備える化合物が強く求められる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、フラビウイルス科ウイルス、具体的にはＨＣＶ及び／若しくはデングウイルス、並びに／又はアルファウイルス、具体的にはチクングンヤウイルス及び／若しくはシンドビスウイルス及び／若しくはセムリキ森林ウイルスに対する活性を有する、２’−スピロチエタンヌクレオシド、並びにその一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、及びプロドラッグ、並びにその薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物を提供する。
したがって、本発明の一態様は、全ての可能なその立体異性体を含む、式（Ｉ）のスピロチエタンヌクレオシドを提供し、
【化１】
2020531536.tif 000003
式中、
塩基は（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、（Ｂ−３ａ）、（Ｂ−３ｂ）、（Ｂ−４）、及び（Ｂ−５）からなる群から選択され、
【化２】
2020531536.tif 000004
式中、Ｒは、水素又はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３は、水素、ハロ、メチル、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２Ｆ、及びＮ３、
並びにその一リン酸塩、二リン酸塩、三リン酸塩、及びプロドラッグ、
並びにその薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物からなる群から選択される。
【００１８】
本発明は、更に、治療有効量、具体的には抗ウイルス有効量の式（Ｉ）の化合物、又はその立体異性体、又はそのリン酸塩（すなわち、一リン酸塩、二リン酸塩、若しくは三リン酸塩）若しくはプロドラッグ、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物、及び薬学的に許容可能な担体又は賦形剤を含む医薬組成物に関する。
【００１９】
更に、本発明は、薬剤として使用するための、具体的にはフラビウイルス科ウイルス感染、具体的にはＣ型肝炎及び／若しくはデングウイルス感染の治療若しくは予防、並びに／又はアルファウイルス感染、具体的にはチクングンヤウイルス及び／若しくはシンドビスウイルス及び／若しくはセムリキ森林ウイルス感染の治療若しくは予防に使用するための、式（Ｉ）の化合物、又はその立体異性体、又はそのリン酸塩（すなわち、一リン酸塩、二リン酸塩、若しくは三リン酸塩）若しくはプロドラッグ、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物に関する。
【００２０】
更に、本発明は、フラビウイルス科ウイルス感染、具体的にはＣ型肝炎及び／若しくはデングウイルス感染の治療若しくは予防、並びに／又はアルファウイルス感染、具体的にはチクングンヤウイルス及び／若しくはシンドビスウイルス及び／若しくはセムリキ森林ウイルス感染の治療若しくは予防に使用するための更なる抗ウイルス剤と組み合わせた、式（Ｉ）の化合物、又はその立体異性体、又はそのリン酸塩（すなわち、一リン酸塩、二リン酸塩、若しくは三リン酸塩）若しくはプロドラッグ、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物の使用に関する。
【００２１】
更に、本発明は、薬学的に許容可能な担体が、治療有効量、具体的には抗ウイルス有効量の式（Ｉ）の化合物、又はその立体異性体、又はそのリン酸塩（すなわち、一リン酸塩、二リン酸塩、若しくは三リン酸塩）若しくはプロドラッグ、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物と密に混合されることを特徴とする、本発明の医薬組成物を調製するためのプロセスに関する。
【００２２】
本発明は、更に、フラビウイルス科ウイルス感染、具体的にはＣ型肝炎及び／若しくはデングウイルス感染の治療若しくは予防における、並びに／又はアルファウイルス感染、具体的にはチクングンヤウイルス及び／若しくはシンドビスウイルス及び／若しくはセムリキ森林ウイルス感染の治療若しくは予防における、同時、個別、又は逐次的な使用のための配合製剤としての、式（Ｉ）の化合物、又はその立体異性体、又はそのリン酸塩（すなわち、一リン酸塩、二リン酸塩、若しくは三リン酸塩）若しくはプロドラッグ、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物、及び追加的な医薬品、具体的には追加的な抗ウイルス剤を含む生成物に関する。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本明細書で使用する時、用語「約」は、当業者に既知の意味を有する。特定の実施形態では、用語「約」が省略されている場合があり、正確な量が意味される。他の実施形態では、用語「約」は、用語「約」に続く数字が、前述の数値の±１５％、又は±１０％、又は±５％、又は±１％の範囲内であることを意味する。
【００２４】
本明細書で使用する時、基又は基の一部としての「Ｃ１〜４アルキル」は、例えばメチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、１−ブチル、２−ブチル、２−メチル−１−プロピル、２−メチル−２−プロピルなどの、１〜４個の炭素原子を有する飽和の直鎖又は分岐鎖炭化水素ラジカルを定義する。「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」はＣ１〜Ｃ４アルキルラジカル、及び、例えば１−ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、１−ヘキシル、２−ヘキシル、２−メチル−１−ブチル、２−メチル−１−ペンチル、２−エチル−１−ブチル、３−メチル−２−ペンチルなどといった、５又は６個の炭素原子を有するその高級同族体を包含する。Ｃ１〜Ｃ６アルキルの中でも関心の対象は、Ｃ１〜Ｃ４アルキルである。「Ｃ１〜Ｃ１０アルキル」は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルラジカル、及び、例えば、ヘプチル、２−ヘプチル、３−ヘプチル、２−メチルヘキシル、オクチル、２−オクチル、３−オクチル、ノニル、２−ノニル、３−ノニル、２−ブチルペンチル、デシル、２−デシルなどといった、７、８、９、又は１０個の炭素原子を有するその高級同族体を包含する。Ｃ１〜Ｃ１０アルキルの中でも関心の対象は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｃ１〜Ｃ２アルキルはメチル及びエチルを定義する。
【００２５】
「Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ」は、ラジカル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキルを意味し、Ｃ１〜Ｃ６アルキルは上記で定義したとおりである。Ｃ１〜Ｃ６アルコキシの例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、又はイソプロポキシである。
【００２６】
「Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル」としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びシクロヘプチルが挙げられる。関心の対象は、シクロプロピル及びシクロブチルである。
【００２７】
基、又は基の一部としての用語「Ｃ２〜Ｃ６アルケニル」は、例えば、１−プロペニル、２−プロペニル（又はアリル）、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、２−メチル−２−プロペニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、２−メチル−２−ブテニル、２−メチル−２−ペンテニルなどといった、飽和炭素−炭素結合及び少なくとも１つの二重結合を有し、２〜６個の炭素原子を有する、直鎖及び分岐鎖の炭化水素ラジカルを定義する。Ｃ２〜Ｃ６アルケニルの中でも関心の対象は、Ｃ３−Ｃ６アルケニル、特にＣ３−Ｃ４アルケニルである。Ｃ２−Ｃ６アルケニル、特にＣ３〜Ｃ６アルケニル又はＣ３−Ｃ４アルケニルの中でも関心の対象は、１つの二重結合を有するラジカルである。
【００２８】
用語「ハロ」又は「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨード、特にフルオロ及びクロロの総称である。
【００２９】
一実施形態では、用語「フェニル−Ｃ１−Ｃ６アルキル」はベンジルである。
【００３０】
本明細書で使用する時、用語「（＝Ｏ）」又は「オキソ」は、炭素原子に結合している場合、カルボニル部分を形成する。原子は、その原子の結合価が許容する場合にのみ、オキソ基で置換できることに留意するべきである。
【００３１】
当業者であれば、特に１個の酸素原子を含有する３〜７員環の複素環は、飽和環であり、任意の利用可能な炭素原子を介して式（Ｉ）の分子の残部と結合され得ることを理解するであろう。１個の酸素原子を含有する３〜７員環の複素環は、具体的には３、４、５、又は６員環である。非限定的な例としては、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニルなどが挙げられる。
【００３２】
本明細書で使用する時、用語「リン酸塩（ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ）」又は「リン酸塩（ａ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）」は、特に明記しない限り、一般には、本明細書で使用される式（Ｉ）の化合物、又はその亜群の一リン酸エステル、二リン酸エステル、及び／又は三リン酸エステルを指し、すなわち、これは以下の群を指す。
【化３】
2020531536.tif 000005
【００３３】
本発明の化合物は、本明細書ではその中性形態で表されており、生体系内に存在し、また当業者に既知である荷電形態もまた本開示の範囲内に含まれることは明白であろう。
【００３４】
本発明の化合物の用語「プロドラッグ」は、生体系に投与されると、生体内変換又は化学変換（例えば、自然発生的化学反応、酵素触媒化学反応、及び／又は代謝化学反応）の結果として、所望の薬理作用、すなわち抗ウイルス活性を有する生物学的活性剤を生成する任意の化合物を含む。理想的には、プロドラッグは薬理学的に不活性である。プロドラッグに関する一般的な情報は、例えばＢｕｎｄｅｇａａｒｄ，Ｈ．の「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」（ｐ．１〜９２，Ｅｌｅｓｅｖｉｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ−Ｏｘｆｏｒｄ（１９８５））中に見出すことができる。
【００３５】
抗ウイルスヌクレオシドの場合、ウイルスポリメラーゼ酵素の実際の阻害を誘発する同化産物はヌクレオシド５’−三リン酸塩である。ヌクレオシド、その一リン酸塩、二リン酸塩、及び三リン酸塩は、直接インビボ投与には適さない場合がある。例えば、ヌクレオシドの第１のリン酸化工程、すなわち、ヌクレオシド５’−一リン酸塩の形成工程は、通常は最も繊細であり、この第１の工程を迂回することで、高濃度の三リン酸塩を産生することに成功してきた。ヌクレオシドの塩基及びリボースの修飾によって、抗ウイルス剤の分野において成功したプロドラッグの形成戦略がもたらされ、例えば、ヌクレオシド５’−一リン酸塩のプロドラッグは、生体利用効率、及び親ヌクレオシドから活性ヌクレオシド５’−三リン酸塩へのインビボリン酸化反応の乏しさなどの問題を克服し、薬剤物質を標的器官に送達した。多くのヌクレオチドプロドラッグが、ＨＩＶ、ＨＣＶ、ＨＢＶ、ヘルペスウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、エプスタイン−バーウイルス、及びサイトメガロウイルスなどのウイルス性疾患の治療のために開発され、承認されてきた。
【００３６】
したがって、いくつかのプロドラッグ形成戦略が抗ウイルス剤の分野で利用可能であり、また当業者に既知である。こうしたプロドラッグ戦略は、例えば、その全容が参照により本願に援用される、Ｊｏｎｅｓ  ＲＪ  ａｎｄ  Ｂｉｓｃｈｏｆｂｅｒｇｅｒ  Ｎ，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １９９５，２７，１〜１７；Ｓｏｆｉａ，ＭＪ，Ａｎｔｉｖｉｒ  Ｃｈｅｍ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ２０１１，２２，２３〜４９；Ｂｏｂｅｃｋ  ＤＲ  ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ２０１０，１５，９３５〜９５０；Ｓｏｆｉａ  ＭＪ，Ａｄｖ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ２０１３，６７，３９〜７３；Ｓｃｈｕｌｔｚ  Ｃ，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００３，１１，８８５〜８９８；Ｐｅｒｔｕｓａｔｉ  Ｆ  ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｉｖｉｒ  Ｃｈｅｍ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ２０１２，２２，１８１〜２０３；Ｓｏｆｉａ  ＭＪ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２０１２，５５（６），２４８１〜２５３１；Ｃｏａｔｓ  ＳＪ  ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ  ２０１４，１０２，１１９〜１４７；Ｍｅｉｅｒ  Ｃ  ａｎｄ  Ｂａｌｚａｒｉｎｉ  Ｊ，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ  ２００６，７１（２−３），２８２〜２９２で精査されてきた。
【００３７】
プロドラッグは、化合物上に存在する官能基を、かかるプロドラッグが対象に投与された際に修飾された官能基がインビボで切断されるように修飾することによって調製され得る。この修飾は、典型的には、プロドラッグ置換基を有する親化合物を合成することによって達成される。一般に、プロドラッグは本発明の化合物を含み、ヒドロキシル、アミノ、又はリン酸基が修飾される。特定の実施形態では、本明細書でより詳細に説明するように、プロドラッグは３’−及び／又は５’−プロドラッグである。
【００３８】
本発明のヌクレオシド誘導体がアルコール又はアミノ官能基を、特に３’−及び／又は５’−中心に含有する場合、プロドラッグは、アルコール基及び／又はアミノ基中で水素原子を置換することによって形成されるエステルを含み得る。
【００３９】
アルコール官能基の場合、アルコール基の水素原子は、例えば、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイルオキシメチル、１−（Ｃ１−Ｃ６アルカノイルオキシ）エチル、Ｓ−アシル−２−チオエチルエステル（ＳＡＴＥ）、１−メチル−１−（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ）エチル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニルオキシメチル、Ｎ−Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニルアミノメチル、スクシノイル、α−アミノＣ１−Ｃ４アルキル、α−アミノＣ１−Ｃ４アルキレン−アリール、アリールアシル、及びα−アミノアシル、若しくはα−アミノアシル−α−アミノアシル（ここで、各α−アミノアシル基は、独立して、天然に存在するＬ−アミノ酸から選択される）、又はグリコシル（ヘミアセタール形態の炭水化物のヒドロキシル基除去によって得られるラジカル）などの基によって置換され得る。
【００４０】
アミノ官能基の場合、アミノ基の水素原子は、例えば、Ｒｘ−カルボニル−、ＲｘＯ−カルボニル−、ＲｘＲｘ１Ｎ−カルボニル（式中Ｒｘ及びＲｘ１はそれぞれ独立してＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、ベンジル、天然α−アミノアシルである）、−Ｃ（ＯＨ）Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｘ２（式中Ｒｘ２はＨである）、Ｃ１−Ｃ６アルキル又はベンジル、−Ｃ（ＯＲｘ２）Ｒｘ３（式中Ｒｘ２はＣ１−Ｃ４アルキルであり、Ｒｘ３はＣ１−Ｃ６アルキルである）；カルボキシＣ１−Ｃ６アルキル；ＮＨＣ１−Ｃ４アルキル；ＮＨ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）（Ｃ１−Ｃ６アルキル）Ｃ１−Ｃ４アルキル；−Ｃ（Ｒｘ４）Ｒｘ５（式中Ｒｘ４はＨ又はメチルであり、Ｒｘ５はＮＨ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）モルホリノである）、Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）（Ｃ１−Ｃ６アルキル）モルホリノ、ピペリジン−１−イル、ピロリジン−１−イルなどといった基によって置換され得る。
したがって、ヌクレオシドプロドラッグの特定の例としては、５’及び／又は３’カルボン酸エステルを形成するもの、例えば、アルキルカルボン酸エステル及びその誘導体、例えばアミノ酸エステルが挙げられるが、これらに限定されず、例としては、５’−Ｏ−イソ酪酸エステル、３’，５’−ジ−Ｏ−イソ酪酸エステル、ピバロイルオキシメチルエステル、アセトキシメチルエステル、フタリジルエステル、インダニル及びメトキシメチルエステル、Ｏ−バリニルエステルなどが挙げられるがこれらに限定されない。
【００４１】
ウイルスポリメラーゼを阻害するために、ヌクレオシドプロドラッグは、細胞内でその５’−三リン酸塩誘導体へと変換されなければならない。場合によっては、ヌクレオシド又はヌクレオシドプロドラッグは、リン酸化キナーゼのうちの１つ以上に対しては劣った基質であり得、且つ／又は細胞アッセイのセットアップにおいて過剰に安定であり得るため、活性は細胞アッセイでは表示されない場合がある。既に述べたように、大半の場合、第１のキナーゼによる一リン酸塩の形成が最も問題となる工程である。５’−一リン酸ヌクレオシドのプロドラッグは、この第１のリン酸化工程を迂回して成功裏に送達され、高い細胞内濃度の活性三リン酸塩をもたらした。或いは又は更に、３’−一リン酸ヌクレオシドのプロドラッグが形成されてもよい。抗ウイルス剤としてヌクレオチドプロドラッグ、具体的には３’−及び／又は５’−モノホシェート（ｍｏｎｏｐｈｏｓｈａｔｅ）ヌクレオシドプロドラッグ、より具体的には５’−モノホシェートヌクレオシドプロドラッグを提供するいくつかの戦略が存在し、且つ当業者に既知である。ヌクレオチドプロドラッグの例としては、ホスホルアミデート、リン酸塩、環状１−アリール−１，３−プロパニルホスフェートエステル（ＨｅｐＤｉｒｅｃｔ）及び環状サリチルアルコール変異体（ｃｙｃｌｏＳａｌ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４２】
ホスホルアミデートは、アミノ酸及びアリールオキシエステルで誘導体化されたリン酸基からなる。このアプローチの変形は、例えば、アリールオキシエステルを他のエステル、例えば、置換アルキルエステル、特にＳ−アシル−２−チオエチルエステル誘導体などと置換することを伴う。他の変形は、アミデート結合において２つのアミド結合アミノ酸（ジアミデート）、又は単純アミン、例えばベンジルアミノ又はアシルオキシエチルアミノを伴う。
【００４３】
リン酸塩としては、例えば、ピバロイルオキシメチル（ＰＯＭ）又はアルコキシカルボニルオキシメチル（ＰＯＣ）鎖を組み込んだリン酸塩、アリールリン酸エステル、及び脂質リン酸エステル、例えばオクタデシルオキシエチル又はヘキサデシルオキシプロピルリン酸塩が挙げられる。
【００４４】
好ましくは、プロドラッグは５’−ホスホルアミデート又は５’−リン酸塩であるが、ホスホルアミデート及びリン酸塩は、代替的に又は追加的に、３’−中心において形成されてもよい。あるいは、環状リン酸エステル又はホスホルアミデートは、３’−ＯＨ基と５’−ＯＨ基との間に架橋を形成して、３’，５’−環状リン酸塩ヌクレオチド、例えば環状一リン酸塩を形成することもできる。こうした環状リン酸エステル又はホスホルアミデートは、ＳＡＴＥ（３’，５’−環状ホスホン酸塩、ＳＡＴＥ）、ピバロイルオキシメチル（ピバロイルオキシメチル環状リン酸塩（ｐｉｖａｌｏｙｌｏｘｙｍｅｔｈｙｌ  ｃｙｃｌｉｃ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ））、炭酸塩（環状リン酸エステル炭酸塩（ｃａｒｂｏｎａｔｅ  ｃｙｃｌｉｃ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｅｓｔｅｒｓ））、及び単純アルキルエステル基の組み込みなどの、ホスホルアミデート及びリン酸塩に関連して上記で論じたものなどの誘導体も含むことができる。
【００４５】
分子部分上のラジカル（例えばフェニル上の置換基）の位置が特定されない場合、又はこれが浮遊結合（ｆｌｏａｔｉｎｇ  ｂｏｎｄ）によって表される場合、こうしたラジカルは、得られる構造が化学的に安定である限り、こうした分子部分の任意の原子上に位置することができる。任意の可変物（ｖａｒｉａｂｌｅ）が分子内に２回以上存在する場合、各々の定義は独立している。
【００４６】
当業者は、用語「任意選択的に置換される」は、「任意選択的に置換される」を用いる表現中で示される原子又はラジカルは、置換されていても置換されていなくてもよいことを意味する（これはそれぞれ置換又は非置換を意味する）と理解するであろう。
【００４７】
本明細書で使用する時、「対象」という用語は、治療、観察又は実験の目標であるか又は目標であってきた温血動物、好ましくは哺乳動物（例えば、ネコ、イヌ、霊長類、又はヒト）、より好ましくはヒトを指す。
【００４８】
本明細書で使用する時、用語「治療有効量」は、研究者、獣医、医師又は他の臨床医により求められる、治療対象の疾病又は疾患の症状の緩和又は反転を含む生体学的反応又は医薬反応を、組織系、動物又はヒト内で誘発する活性化合物又は医薬品の量を意味する。
【００４９】
用語「組成物」は、特定の成分を特定の量で含む生成物、並びに特定の成分の特定の量での組み合わせから直接的又は間接的に生じる任意の生成物を包含することが意図される。
【００５０】
本明細書で使用する時、用語「治療」は、疾患の進行を遅延、妨害、阻止、又は停止させ得る全てのプロセスを指すことが意図されるが、必ずしも全ての症状の完全な排除を示すものではない。
【００５１】
本明細書で、用語「式（Ｉ）の化合物」若しくは「本発明の化合物」、又は同様の用語が使用される場合は、常に、式（Ｉ）、特に式（Ｉ’）の化合物（その可能な立体化学的異性体を含む）、並びにそれらの薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物を含むことが意味される。
【００５２】
本明細書で使用する時、実線でのみ示され、実線くさび結合、若しくはハッシュくさび結合（ｈａｓｈｅｄ  ｗｅｄｇｅｄ  ｂｏｎｄｓ）では示されない結合を含む、又は或いは１つ以上の原子の周囲で特定の構成（例えばＲ、Ｓ）を有するものとして示される、任意の化学式は、各可能な立体異性体、又は２つ以上の立体異性体の混合物を意図する。
【００５３】
本明細書に記載する化合物及び中間体の純粋な立体異性体は、上記の化合物又は中間体の同一の基本分子構造の他のエナンチオマー又はジアステレオマー形態を実質的に含まない異性体と定義される。特に、用語「立体異性体的に純粋な」は、少なくとも８０％の立体異性体過剰（即ち、最小で９０％の１つの異性体及び最大で１０％の他の可能な異性体）から最大で１００％の立体異性体過剰（即ち、１００％の１つの異性体、及び他の異性体なし）を有する化合物又は中間体、より具体的には９０％〜最大１００％の立体異性体過剰を有する、更により具体的には９４％〜最大１００％の立体異性体過剰を有する、最も具体的には９７％〜最大１００％、又は９８％〜最大１００％の立体異性体過剰を有する化合物又は中間体に関する。用語「エナンチオマー的に純粋な」及び「ジアステレオマー的に純粋な」は、同様に理解するべきであるが、それぞれ、問題となっている混合物のエナンチオマー的過剰、ジアステレオマー的過剰が考慮される。
【００５４】
本発明の化合物及び中間体の純粋な立体異性体は、当該技術分野で既知の手順を適用することにより得ることができる。例えば、エナンチオマーは、光学的に活性な酸又は塩基を用いてそれらのジアステレオマー塩を選択的に結晶化することによって互いに分離され得る。光学活性な酸の例は、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸及びカンファースルホン酸である。代替的に、エナンチオマーは、キラル固定層を用いたクロマトグラフィ法によって分離することができる。上記の純粋な立体化学的異性形態は、適切な出発物質の対応する純粋な立体化学的異性体から誘導することもできるが、但し、反応は、立体特異的に起こるものとする。好ましくは、特定の立体異性体が所望される場合、上記の化合物は立体特異的な調製方法によって合成される。これらの方法は、有利には、エナンチオマー的に純粋な出発物質を使用するであろう。
【００５５】
式（Ｉ）の化合物のジアステレオマーラセミ体は、従来の方法によって個別に得ることができる。有利に使用され得る適切な物理的分離方法は、例えば、選択的結晶化及びクロマトグラフィ、例えばカラムクロマトグラフィである。
【００５６】
薬学的に許容可能な付加塩には、式（Ｉ）、特に式（Ｉ’）の化合物の治療効果のある非毒性の酸及び塩基、並びにそのリン酸塩（すなわち一リン酸塩、二リン酸塩、又は三リン酸塩）の付加塩形態が含まれる。
【００５７】
薬学的に許容可能な酸付加塩は、塩基の形態をそのような適切な酸で処理することにより都合よく得ることができる。適切な酸は、例えば、ハロゲン化水素酸、例えば塩酸若しくは臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、及び同様の酸等の無機酸；又は例えば、酢酸、プロピオン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸（即ちエタン二酸）、マロン酸、コハク酸（即ちブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸（即ちヒドロキシルブタン二酸）、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸、及び同様の酸等の有機酸を含む。逆に、上記の塩形態は、適切な塩基で処理することによって遊離塩基形態に変換することができる。
【００５８】
酸性プロトンを含む式（Ｉ）、特に式（Ｉ’）の化合物はまた、適切な有機塩基及び無機塩基による処理によって、それらの非毒性金属又はアミン付加塩の形態に変換され得る。適切な塩基塩形態として、例えば、アンモニウム塩、アルカリ及びアルカリ土類金属塩（例えばリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等）、有機塩基との塩、例えばベンザチン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミン塩、並びにアルギニン、リシン等のアミノ酸との塩が挙げられる。
【００５９】
用語「溶媒和物」は、式（Ｉ）、特に式（Ｉ’）の化合物、並びにそのリン酸塩（すなわち一リン酸塩、二リン酸塩、又は三リン酸塩）、プロドラッグ、及び塩が形成可能な任意の薬学的に許容可能な溶媒和物を網羅する。こうした溶媒和物は、例えば水和物、アルコラート、例えばエタノラート、プロパノラート等である。
【００６０】
式（Ｉ）、特に式（Ｉ’）の化合物の一部は、その互変異性体でも存在し得る。例えば、アミド（−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−）基の互変異性体は、イミノアルコール（−Ｃ（ＯＨ）＝Ｎ−）であり、これは芳香族性を有する環内で安定な状態となり得る。ウリジン塩基は、そのような形態の一例である。そのような形態は、本明細書で表される構造式には明白に示されないが、本発明の範囲内に含まれることを意図する。
【００６１】
本発明はまた、原子の１つ以上が、一般に天然に見出されるものとは異なる同位体で置換されている、式（Ｉ）、又は式（Ｉ）の任意の亜群、特に式（Ｉ’）の同位体標識化合物も含む。こうした同位体の例としては、２Ｈ及び３Ｈなどの水素；１１Ｃ、１３Ｃ、及び１４Ｃなどの炭素；１３Ｎ及び１５Ｎなどの窒素；１５Ｏ、１７Ｏ、及び１８Ｏなどの酸素；３１Ｐ及び３２Ｐなどのリン；３５Ｓなどの硫黄；１８Ｆなどのフッ素；３６Ｃｌなどの塩素；７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、及び８２Ｂｒなどの臭素；並びに１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、及び１３１Ｉなどのヨウ素の同位体が挙げられる。本発明の同位体標識化合物は、適切な同位体標識試薬若しくは出発物質を使用することにより本明細書に記載したものと類似したプロセスによって、又は当該技術分野で既知の技術によって調製することができる。同位体標識化合物に含まれる同位体の選択は、化合物の特定の用途に依存する。例えば、組織分布アッセイの場合、３Ｈ又は１４Ｃ等の放射性同位体が組み込まれる。放射線イメージング用途の場合、１１Ｃ、１８Ｆ、１３Ｎ、又は１５Ｏなどの陽電子放射同位体が有用になる。重水素を組み込むことによってより高い代謝的安定性が提供され、例えば化合物のインビボ半減期の向上又は投与必要量の低減がもたらされ得る。
【００６２】
特定の実施形態では、本発明は、以下の式（Ｉ’）を有する式（Ｉ）の化合物と：
【化４】
2020531536.tif 000006
その立体異性体であって、式中、
塩基は（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、（Ｂ−３ａ）、（Ｂ−３ｂ）、（Ｂ−４）、及び（Ｂ−５）からなる群から選択され、
【化５】
2020531536.tif 000007
式中、Ｒは、水素又はＣ１〜６アルキルであり；
Ｒ１は水素、
【化６】
2020531536.tif 000008
式（ａ−１）の基、式（ａ−２）の基、式（ａ−３）の基、及び式（ａ−４）の基からなる群から選択され；
【化７】
2020531536.tif 000009
式中、
Ｒ４及びＲ７は、それぞれ独立して水素、フェニル、ナフチル、キノリニル、イソキノリニル、及びピリジルからなる群から選択され、そのそれぞれが任意選択的に、１、２、又は３つの置換基で置換され、それぞれが独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ１６Ｒ１６’からなる群から選択されるか、或いは、
Ｒ４及びＲ７は、それぞれ、任意選択的に、その窒素原子においてＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ１〜Ｃ６アルキルオキシカルボニルで置換された、且つ／又は任意の利用可能な炭素原子において、それぞれが独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ１７Ｒ１７’からなる群から選択される１、２、若しくは３つの置換基で置換されたインドリルであり；
Ｒ５、Ｒ５’、Ｒ１０、及びＲ１０’は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、及びフェニルからなる群から選択されるか、或いは、
Ｒ５及びＲ５’又はＲ１０、及びＲ１０’は、それらが結合している炭素原子と共にＣ３〜Ｃ７シクロアルカンジイル、又は１個の酸素原子を含有する３〜７員環の複素環を形成し；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、フェニル又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立してヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ１８Ｒ１８’からなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換され；
Ｒ８は−ＯＲ１９又は−ＮＲ２０Ｒ２０’であり；
Ｒ９は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、フェニル又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的にそれぞれ独立してハロ及びＣ１〜Ｃ６アルキルオキシからなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換され；
Ｒ１１は、水素、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、フェニル又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立してヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ２３Ｒ２３’からなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換され；
Ｒ１９は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、オキセタニル、（Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−、−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル、及び−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＯＣ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
Ｒ２０は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、及びＣ３〜Ｃ７シクロアルキルからなる群から選択され；且つＲ２０’はＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、及び（Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択されるか、或いは
−ＮＲ２０Ｒ２０’は共にアゼチジニル、ピロリジニル、又はピペリジニル環を形成し、そのそれぞれが、任意選択的に、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルオキシ、及び（Ｃ＝Ｏ）−ＯＲ２１からなる群で置換されてもよく、Ｒ２１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、フェニル又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立してヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ２２Ｒ２２’からなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換され；
Ｒ２は水素、又は式（ｂ）の基であり、
【化８】
2020531536.tif 000010
式中、
Ｒ１２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、フェニル又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的にそれぞれ独立してハロ及びＣ１〜Ｃ６アルキルオキシからなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換されるか；或いは
Ｒ１及びＲ２は結合して、式（ｃ−１）又は（ｃ−２）の二価ラジカルを形成し、
【化９】
2020531536.tif 000011
式中、
Ｒ１３及びＲ１３’は、それぞれ独立して水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、及びフェニルからなる群から選択されるか；或いは
Ｒ１３及びＲ１３’は、それらが結合している炭素原子と共に、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルカンジイル、又は１個の酸素原子を含有する３〜７員環の複素環を形成し；
Ｒ１４は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、フェニル又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立してヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ２４Ｒ２４’からなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換され；
Ｒ１５は−ＯＲ２５又は−ＮＲ２６Ｒ２６’であり、式中、
Ｒ２５は、水素；Ｃ１〜Ｃ６アルキル；それぞれ独立して、フェニル、ナフチル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、ヒドロキシル、及びＣ１〜Ｃ６アルキルオキシからなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換されたＣ１〜Ｃ３アルキル；Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル；（Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル−；−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）Ｃ１〜Ｃ６アルキル；−ＣＨ２−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）ＯＣ１〜Ｃ６アルキル−；１個の酸素原子を含有する３〜７員環の複素環；並びにＡｒからなる群から選択され；
Ａｒは、フェニル、ナフチル、キノリニル、イソキノリニル、及びピリジルからなる群から選択され、そのそれぞれが任意選択的に、１、２、又は３つの置換基で置換され、それぞれが独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ２７Ｒ２７’からなる群から選択されるか；或いは、
Ａｒは、任意選択的に、その窒素原子においてＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ１〜Ｃ６アルキルオキシカルボニルで置換された、且つ／又は任意の利用可能な炭素原子において、それぞれが独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ２８Ｒ２８’からなる群から選択される１、２、若しくは３つの置換基で置換されたインドリルであり；
Ｒ２６は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、及びＣ３〜Ｃ７シクロアルキルからなる群から選択され；且つＲ２６’はＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、及び（Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ）Ｃ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択されるか、或いは
−ＮＲ２６Ｒ２６’は共にアゼチジニル、ピロリジニル、又はピペリジニル環を形成し、そのそれぞれが、任意選択的に、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルオキシ、及び（Ｃ＝Ｏ）−ＯＲ２７からなる群で置換されてもよく、Ｒ２７は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、フェニル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され、フェニル又はフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−中のフェニル部分は、任意選択的に、それぞれ独立してヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ２９Ｒ２９’からなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換され；
Ｒ１６、Ｒ１６’、Ｒ１７、Ｒ１７’、Ｒ１８、Ｒ１８’、Ｒ２２、Ｒ２２’、Ｒ２３、Ｒ２３’、Ｒ２４、Ｒ２４’、Ｒ２７、Ｒ２７’、Ｒ２８、Ｒ２８’、Ｒ２９、及びＲ２９’はそれぞれ水素及びＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され；
Ｒ３は、水素、ハロ、メチル、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２Ｆ、及びＮ３からなる群から選択される、立体異性体と；
その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【００６３】
基−ＮＨ−Ｃ（Ｒ５）（Ｒ５’）−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＮＨ−Ｃ（Ｒ１３）（Ｒ１３’）−Ｃ（＝Ｏ）−は、アミノ酸残基を形成し得、これとしては天然及び非天然アミノ酸残基が挙げられる。関心の対象となるのはアラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、及びジメチルグリシン（Ｄｍｇ）である。Ｒ５’又はＲ１３’が水素であるアミノ酸残基も関心の対象である。後者の例で、Ｒ５’／１３’が水素以外である場合、アミノ酸残基はキラル中心を有し、不斉炭素原子における構成は、Ｌ−アミノ酸のそれであり得る。例としては、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、α−アミノ酪酸（ＡＢＡ（２−アミノ酪酸又はエチルグリシンとも称される））、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、及びフェニルグリシン（Ｐｈｇ）残基、特にＬ−Ａｌａ、Ｌ−Ｖａｌ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｌ−ＡＢＡ、Ｌ−Ｐｈｅ、及びＬ−Ｐｈｇが挙げられる。Ｒ５及びＲ５’又はＲ１３及びＲ１３’が、それらが結合している炭素原子と共にＣ３〜Ｃ７シクロアルカンジイルを形成するアミノ酸残基の例は、１，１−シクロプロピルアミノ酸である。同様に、それぞれ（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ２１又は（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ２７で置換されたピロリジニル環を形成する基−ＮＲ２０Ｒ２０’又は−ＮＲ２６Ｒ２６’、特に、
【化１０】
2020531536.tif 000012
は、プロリン残基、好ましくはＬ−プロリン残基を形成する。
【００６４】
式（Ｉ）の化合物の亜群は、Ｒ１が式（ａ−１）の基である本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物、又は式（Ｉ’）の化合物の亜群である。
【化１１】
2020531536.tif 000013
式（Ｉ）の化合物の亜群は、
（ａ）Ｒ４が、任意選択的に、それぞれが独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ１６Ｒ１６’から選択される１、２、若しくは３つの置換基で置換されるフェニルであるか、又はＲ４が、任意選択的に、ハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、若しくはＣ１〜Ｃ６アルコキシで置換されるナフチルであるか、又はＲ４がインドリルであり；
（ｂ）Ｒ４が、任意選択的に、それぞれが独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ１６Ｒ１６’から選択される１、２、若しくは３つの置換基で置換されるフェニルであるか、又はＲ４がナフチルであるか、又はＲ４がインドリルであり；
（ｃ）Ｒ４が、任意選択的に、それぞれが独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ１６Ｒ１６’から選択される１若しくは２つの置換基で置換されるフェニルであるか、又はＲ４がナフチルであるか、又はＲ４がインドリルであり；
（ｄ）Ｒ４が、任意選択的に、それぞれが独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ３〜Ｃ６アルケニル、及びＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択される１若しくは２つの置換基で置換されるフェニルであるか、又はＲ４がナフチルであり；
（ｅ）Ｒ４が、任意選択的に、ハロ、又は１若しくは２つのＣ１〜Ｃ６アルキルラジカルで置換されるフェニルであるか、又はＲ４がナフチルであり；
（ｆ）Ｒ４がフェニル、ハロフェニル、ジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルフェニル、又はナフチルであり；
（ｇ）Ｒ４がフェニルであり；
（ｈ）Ｒ４がナフチルである、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物、又は式（Ｉ’）の化合物の亜群である。
【００６５】
式（Ｉ）の化合物の亜群は、
（ａ）Ｒ５がメチルでありＲ５’がメチルであるか；又は
（ｂ）Ｒ５が水素であり、Ｒ５’がフェニル若しくはＣ１〜Ｃ６アルキル、特にＣ１〜Ｃ４アルキル、例えばメチル、エチル、イソプロピル、若しくはイソブチルである、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物又は式（Ｉ’）の化合物の亜群である。式（Ｉ）の化合物の亜群は、
【化１２】
2020531536.tif 000014
部分がグリシル、ジメチルグリシル、α−アミノブチリル、フェニルグリシン、イソロイシル、アラニル、フェニルアラニル、又はバリルである（それぞれＧｌｙ、Ｄｍｇ、ＡＢＡ、Ｐｈｇ、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、又はＶａｌ；特にＬ−ＡＢＡ、Ｌ−Ｐｈｇ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｌ−Ａｌａ、Ｌ−Ｐｈｅ、又はＬ−Ｖａｌ）、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物、又は式（Ｉ’）の化合物の亜群である。
【００６６】
式（Ｉ）の化合物の亜群は、Ｒ５が水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、若しくはフェニルであり、Ｒ５’が水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、若しくはフェニルである、本明細書で定義される、式（Ｉ’）の化合物、又は式（Ｉ’）の化合物の亜群である。
【００６７】
式（Ｉ）の化合物の亜群は、
【化１３】
2020531536.tif 000015
部分が構造
【化１４】
2020531536.tif 000016
を有し、式中Ｒ５が水素であり、Ｒ５’が水素、フェニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジルであるか、又は
Ｒ５が水素であり、Ｒ５’が水素、若しくはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ５が水素であり、Ｒ５’がＣ１〜Ｃ２アルキルであり、
Ｒ５が水素であり、Ｒ５’がメチルである、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物、又は式（Ｉ’）の化合物の亜群である。
【００６８】
一実施形態では、Ｒ５及びＲ５’は、それらが結合している炭素原子と共に、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルカンジイルを形成するか；又は特にＣ３〜Ｃ４シクロアルカンジイルを形成するか、又は特にシクロプロピリデンを形成する。
【００６９】
式（Ｉ）の化合物の亜群は、
（ａ）Ｒ６が、任意選択的に、それぞれ独立してヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、及びＮＲ１８Ｒ１８’から選択される１、２、又は３つの置換基で置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、又はフェニルであり、Ｒ１８が水素であり、Ｒ１８’が水素、若しくはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
（ｂ）Ｒ６がＣ１〜Ｃ６アルキル又はベンジルであり；
（ｃ）Ｒ６が、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり；
（ｄ）Ｒ６が、Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり；
（ｅ）Ｒ６が、メチル、エチル、又はｔ−ブチルであり；
（ｆ）Ｒ６が、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキルである、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物、又は式（Ｉ’）の化合物の亜群の化合物である。
【００７０】
式（Ｉ）の化合物の亜群は、
Ｒ４がフェニル、ハロフェニル、ジ−Ｃ１〜Ｃ４アルキルフェニル、又はナフチルであり；
Ｒ５及びＲ５’がそれぞれ独立して水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、又はフェニルであり；
Ｒ６がＣ１〜Ｃ６アルキルである、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物、又は式（Ｉ’）の化合物の亜群の化合物である。
【００７１】
式（Ｉ）の化合物の亜群は、Ｒ１及びＲ２が結合して（ｃ−２）の二価ラジカルを形成する、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物、又は式（Ｉ’）の化合物の亜群であり、
【化１５】
2020531536.tif 000017
式中、
Ｒ１５は−ＯＲ２５であり、式中、Ｒ２５は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、並びにそれぞれ独立して、フェニル、ナフチル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、ヒドロキシル、及びＣ１〜Ｃ６アルキルオキシからなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換されたＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択される。別の実施形態では、Ｒ２５はＣ１〜Ｃ６アルキル、若しくはフェニルで置換したＣ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルキルオキシ、又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルである。更なる実施形態では、Ｒ２５はＣ３〜Ｃ７シクロアルキル、より具体的にはシクロペンチルである。更なる実施形態では、Ｒ２５はＣ２〜Ｃ４アルキル、より具体的にはｉ−プロピルである。
【００７２】
特定の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物であって、式中、
Ｒ１は、水素、
【化１６】
2020531536.tif 000018
式（ａ−１）の基、式（ａ−２）の基、及び式（ａ−３）の基からなる群から選択され、式中、
Ｒ４及びＲ７はそれぞれ独立してフェニル又はナフチルであり、そのそれぞれが任意選択的に、それぞれが独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ１６Ｒ１６’からなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換され、Ｒ１６及びＲ１６’はそれぞれ独立して水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキルから選択されるか；或いはＲ４及びＲ７はそれぞれ独立してインドリルであり；
Ｒ５及びＲ５’は、それぞれ独立して水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、及びフェニルからなる群から選択されるか；或いはＲ５及びＲ５’は、それらが結合している炭素原子と共にＣ３〜Ｃ７シクロアルカンジイルを形成し；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され；
Ｒ８は、−ＯＲ１９又は−ＮＲ２０Ｒ２０’であり、式中Ｒ１９はＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ２０は水素であり、Ｒ２０’はＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ９はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は水素又は式（ｂ）の基であり、式中Ｒ１２はＣ１〜Ｃ６アルキルであるか；或いは
Ｒ１及びＲ２は結合して、式（ｃ−１）又は（ｃ−２）の二価ラジカルを形成し、式中、
Ｒ１３及びＲ１３’は、それぞれ独立して水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、及びフェニルからなる群から選択されるか；或いはＲ１３及びＲ１３’は、それらが結合している炭素原子と共にＣ３〜Ｃ７シクロアルカンジイルを形成し；
Ｒ１４は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され；
Ｒ１５は−ＯＲ２５又は−ＮＲ２６Ｒ２６’であり、式中、Ｒ２５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、並びに、それぞれ独立して、フェニル、ナフチル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、ヒドロキシル、及び、Ｃ１〜Ｃ６アルキルオキシからなる群から選択される、１、２、又は３つの置換基で置換されたＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択され；Ｒ２６は水素であり；Ｒ２６’は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルである、化合物と、
その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【００７３】
別の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物を提供し、式中、
塩基は（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、及び（Ｂ−３ａ）からなる群から選択され、
Ｒ３は、水素、ハロ、及びＮ３からなる群から選択される。
【００７４】
特定の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物であって、式中、
塩基は（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、及び（Ｂ−３ａ）からなる群から選択され；
Ｒ１は、水素、
【化１７】
2020531536.tif 000019
式（ａ−１）の基、式（ａ−２）の基、及び式（ａ−３）の基からなる群から選択され、式中、
Ｒ４及びＲ７はそれぞれ独立してフェニル又はナフチルであり、そのそれぞれが任意選択的に、それぞれが独立してハロ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ヒドロキシ、及びＮＲ１６Ｒ１６’からなる群から選択される１、２、又は３つの置換基で置換され、Ｒ１６及びＲ１６’はそれぞれ独立して水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキルから選択されるか；或いはＲ４及びＲ７はそれぞれ独立してインドリルであり；
Ｒ５及びＲ５’は、それぞれ独立して水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、及びフェニルからなる群から選択されるか；或いはＲ５及びＲ５’は、それらが結合している炭素原子と共にＣ３〜Ｃ７シクロアルカンジイルを形成し；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され；
Ｒ８は、−ＯＲ１９又は−ＮＲ２０Ｒ２０’であり、式中Ｒ１９はＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ２０は水素であり、Ｒ２０’はＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ９はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は水素又は式（ｂ）の基であり、式中Ｒ１２はＣ１〜Ｃ６アルキルであるか；或いは
Ｒ１及びＲ２は結合して、式（ｃ−１）又は（ｃ−２）の二価ラジカルを形成し、式中、
Ｒ１３及びＲ１３’は、それぞれ独立して水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ベンジル、及びフェニルからなる群から選択されるか；或いはＲ１３及びＲ１３’は、それらが結合している炭素原子と共にＣ３〜Ｃ７シクロアルカンジイルを形成し；
Ｒ１４は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、及びフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルキル−からなる群から選択され；
Ｒ１５は−ＯＲ２５又は−ＮＲ２６Ｒ２６’であり、式中、Ｒ２５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、フェニル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、並びに、それぞれ独立して、フェニル、ナフチル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、ヒドロキシル、及び、Ｃ１〜Ｃ６アルキルオキシからなる群から選択される、１、２、又は３つの置換基で置換されたＣ１〜Ｃ３アルキルからなる群から選択され；Ｒ２６は水素であり；Ｒ２６’は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、ハロ、及びＮ３からなる群から選択される、化合物と、
その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【００７５】
更なる実施形態では、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物であって、式中、
塩基は（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、及び（Ｂ−３ａ）からなる群から選択され；
Ｒ１は、水素、
【化１８】
2020531536.tif 000020
式（ａ−１）の基、式（ａ−２）の基、及び式（ａ−３）の基からなる群から選択され；式中、
Ｒ４及びＲ７はそれぞれ独立してフェニル又はナフチルであり、そのそれぞれが任意選択的に１つのハロ置換基で置換され；
Ｒ５及びＲ５’は、それぞれ独立して水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
Ｒ６はＣ１〜Ｃ１０アルキルであり；
Ｒ８は、−ＯＲ１９又は−ＮＲ２０Ｒ２０’であり、式中Ｒ１９はＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ２０は水素であり、Ｒ２０’はＣ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ９はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は水素又は式（ｂ）の基であり、式中Ｒ１２はＣ１〜Ｃ６アルキルであるか；或いは
Ｒ１及びＲ２は結合して、式（ｃ−１）又は（ｃ−２）の二価ラジカルを形成し、式中、
Ｒ１３及びＲ１３’は、それぞれ独立して水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
Ｒ１４はＣ１〜Ｃ１０アルキルであり；
Ｒ１５は−ＯＲ２５又は−ＮＲ２６Ｒ２６’であり、式中、Ｒ２５は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、及びＣ３〜Ｃ７シクロアルキルからなる群から選択され；Ｒ２６は水素であり；Ｒ２６’は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、ハロ、及びＮ３からなる群から選択される、化合物と、
その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【００７６】
別の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物であって、式中、
塩基は（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、及び（Ｂ−３ａ）からなる群から選択され；
Ｒ１は、水素、
【化１９】
2020531536.tif 000021
式（ａ−１）の基、式（ａ−２）の基、及び式（ａ−３）の基からなる群から選択され；式中、
Ｒ４及びＲ７は、それぞれ任意選択的に１つのハロ置換基で置換されるフェニルであり；
Ｒ５及びＲ５’は、それぞれ独立して水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
Ｒ６はＣ１〜Ｃ１０アルキルであり；
Ｒ８は−ＯＲ１９であり、式中Ｒ１９はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ９はＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は水素又は式（ｂ）の基であり、式中Ｒ１２はＣ１〜Ｃ６アルキルであるか；或いは
Ｒ１及びＲ２は結合して、式（ｃ−２）の二価ラジカルを形成し、式中、
Ｒ１３及びＲ１３’は、それぞれ独立して水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
Ｒ１４はＣ１〜Ｃ１０アルキルであり；
Ｒ１５は−ＯＲ２５又は−ＮＲ２６Ｒ２６’であり、式中、Ｒ２５はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり、Ｒ２６は水素であり、Ｒ２６’はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり；
Ｒ３は、水素、ハロ、及びＮ３からなる群から選択される、化合物と、
その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【００７７】
更なる一実施形態では、本発明は、本明細書で定義される通りの式（Ｉ’）の化合物を提供し、式中、Ｒ１は、
水素、
【化２０】
2020531536.tif 000022
及び式（ａ−１）の基からなる群から選択され
るか、或いはＲ１及びＲ２は結合して、式（ｃ−２）の二価ラジカルを形成する。
【００７８】
別の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物であって、式中、
塩基は（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、及び（Ｂ−３ａ）からなる群から選択され；
Ｒ１は、
【化２１】
2020531536.tif 000023
又は式（ａ−１）の基であり、式中、
Ｒ４は、任意選択的に１つのハロ置換基で置換されるフェニルであり；
Ｒ５及びＲ５’は、それぞれ独立して水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキル、特にメチルからなる群から選択され；
Ｒ６はＣ１〜Ｃ１０アルキル、特にｉ−プロピル又はｎ−ブチルであり；
Ｒ２は水素であり；且つ
Ｒ３は、水素、ハロ、特にフルオロ、及びＮ３からなる群から選択される、化合物と、
その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【００７９】
別の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物であって、式中、
塩基は（Ｂ−１）であり；Ｒ１は式（ａ−１）の基であり；Ｒ２は水素であり；Ｒ３は水素又はＮ３であるか；或いは
塩基は（Ｂ−２）であり；Ｒ１は水素又は式（ａ−１）の基であり；Ｒ２は水素であり；Ｒ３はハロ、特にフルオロであり；式中、
Ｒ４は、任意選択的に１つのハロ置換基で置換されるフェニルであり、
Ｒ５及びＲ５’は、それぞれ独立して水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキル、特にメチルからなる群から選択され；
Ｒ６はＣ１〜Ｃ１０アルキル、特にｉ−プロピルである、化合物と、
その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【００８０】
別の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物であって、式中、
塩基は（Ｂ−１）であり；
Ｒ１は式（ａ−１）の基であり、式中、
Ｒ４は、任意選択的に１つのハロ置換基で置換されるフェニルであり、
Ｒ５及びＲ５’は、それぞれ独立して水素、及びＣ１〜Ｃ６アルキル、特にメチルからなる群から選択され；
Ｒ６はＣ１〜Ｃ１０アルキル、特にｉ−プロピル又はｎ−ブチルであり；
Ｒ２は水素であり；
Ｒ３は、水素又はハロ、特にフルオロである、化合物と、
その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【００８１】
別の実施形態では、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物であって、式中、
塩基は（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、及び（Ｂ−３ａ）からなる群から選択され；
Ｒ１は、
【化２２】
2020531536.tif 000024
であり、Ｒ２は水素であり、Ｒ３は水素、ハロ、特にフルオロ、及びＮ３からなる群から選択される、化合物と、
その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【００８２】
関心の対象は、「実施例」の項で言及された化合物７、９、１２、１７、２２、３１、及び４５、若しくは９、１７、２２、２３、２５、２７、３１、３４、３９、４５、又は３５及び５８〜６３、並びにこれらの化合物の薬学的に許容可能な酸付加塩である。特に関心の対象は、化合物７、９、１２、１７、２２、２３、２５、２７、３１、３５、３９、４４、４５、５７、及び５８〜６３（これらの化合物の遊離形態（すなわち、非塩形態）で、又はその薬学的に許容可能な酸付加塩としてのいずれかで）である。
【００８３】
式（Ｉ）、特に式（Ｉ’）の化合物は、数個のキラリティーの中心を、特に炭素原子１’、２’、３’及び４’において有する。これらの炭素原子における立体化学は固定されているが、化合物は、各キラル中心において、少なくとも７５％、好ましくは少なくとも９０％、例えば９５％又は９８％過剰のエナンチオマー純度を示し得る。
【化２３】
2020531536.tif 000025
【００８４】
キラリティーは、Ｒ１が（ａ−１）であるものなどの置換基中にも存在し得、
【化２４】
2020531536.tif 000026
これは、炭素を持つＲ５において（ここでＲ５とＲ５’とは異なる）、及びリン原子においてキラリティーを有し得る。リン中心は、ＲＰ若しくはＳＰ、又は、ラセミ体を含むこうした立体異性体の混合物として示されてもよい。キラルリン中心及びキラル炭素原子から生じるジアステレオ異性体も存在し得る。式（Ｉ）、特に式（Ｉ’）の化合物は、１’、３’、４’、及び５’位に確定した立体配置を有するが、２’−位、又は例えば存在する場合はホスホルアミデート基のリン原子においては有さずに示される。こうした化合物の絶対立体配置は、例えばＸ線回折若しくはＮＭＲ、及び／又は既知の立体化学の出発物質からの推定等の、当該技術分野で既知の方法を用いて決定することができる。本発明による医薬組成物は、特定の式（Ｉ）又は（Ｉ’）の化合物の示される立体異性体の立体異性的に純粋な形態を含むことが好ましい。
【００８５】
特定の実施形態では、本明細書で定義される式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉａ）を有する。
【化２５】
2020531536.tif 000027
【００８６】
特定の実施形態では、本明細書で定義される式（Ｉ’）の化合物は、式（Ｉａ’）を有する。
【化２６】
2020531536.tif 000028
【００８７】
特定の実施形態では、本発明の化合物は、更に、
【化２７】
2020531536.tif 000029
特に、
【化２８】
2020531536.tif 000030
の構造式の５’−三リン酸エステルの薬学的に許容可能な塩、並びに５’−二リン酸エステル及び５’−一リン酸エステル誘導体の薬学的に許容可能な塩を含むことが意図され、式中、塩基Ｒ２及びＲ３は本明細書で定義されるとおりであり、具体的には、Ｒ２は水素である。
【００８８】
一般合成方法
スキーム１
一般的に、本明細書ではそれぞれ式（Ｉ’−ａ１）又は（Ｉ’−ａ２）の化合物と称される、Ｒ１がホスホルアミデート又はリン酸塩である、本発明の範囲による式（Ｉ）、特に式（Ｉ’）の化合物は、以下の反応スキーム１に従って調製することができる。上記のスキームでは、全ての可変要素は本発明の範囲に従って定義される。
【化２９】
2020531536.tif 000031
【００８９】
スキーム１においては、以下の反応条件が適用される。
（ｉ）：ピリジンを用いて前処理し、続いて得られた生成物を、例えばメチルイミダゾールなどの好適な塩基の存在下で、例えば乾燥ジクロロメタンなどの好適な溶媒中で濃縮及び懸濁して、例えば室温などの好適な温度で、好適なホスホルアミドクロリデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｏｃｈｌｏｒｉｄａｔｅ）又はホスホクロリデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｃｈｌｏｒｉｄａｔｅ）と反応させる。
【００９０】
式（ＩＩ）の化合物は、例えば、適切なホスホルアミドクロリデート又はホスホクロリデートとの反応後にそれから保護基が切断され得る、例えば式（１）の化合物などの脱保護ヌクレオシド（スキーム４）、又は例えば式（１７）の化合物などの保護ヌクレオシド（スキーム４）であり得る。
【００９１】
スキーム２
スキーム１中で参照されるホスホルアミドクロリデート又はホスホクロリデート試薬は、市販されているか、又は当業者に既知の手順で合成可能であるかのいずれかであり、例えば、工程（ｉ）で言及される好適なホスホルアミドクロリデートの合成は、ＤＩＰＥＡなどの塩基の存在下で式（ＩＩＩ）のアルコールをＰＯＣｌ３と反応させ、二塩化ホスホリル（ＩＶ）を得て、これを更に式（Ｖ）のアミノ酸と反応させて所望のホスホルアミドクロリデート（ＶＩ）を産生することにより調製可能である。
【化３０】
2020531536.tif 000032
【００９２】
スキーム３
Ｒ２及びＲ３が水素であり、塩基がウラシルである、本明細書では（１）と称される式（ＩＩ）の中間化合物は、以下の反応スキーム３に従って調製可能であり、ここでＰＭＢはｐ−メトキシベンジルを意味し、Ｍｓはメタンスルホニルを意味する。
【化３１】
2020531536.tif 000033
【００９３】
スキーム３においては、以下の反応条件が適用される。
（ｉ）例えば室温などの好適な温度での例えばＴＨＦなどの好適な溶媒中の（４−メトキシフェニル）メタンチオール；混合物を例えばＫＨＭＤＳ又はＮａＨなどの好適な塩基の存在下で例えば−４０℃などの好適な温度に冷却；カラムクロマトグラフィ
（ｉｉ）例えば水素化アルミニウムリチウムなどの好適な還元剤の存在下、例えばジエチルエーテルなどの好適な溶媒中、例えば０℃などの好適な温度で；
（ｉｉｉ）例えばメシルなどの脱離基の形成に好適な条件下、例えば室温などの好適な温度で、例えばピリジンなどの好適な塩基／溶媒系の存在下で、塩化メタンスルホニルなどの好適な薬剤との反応によって；
（ｉｖ）ＰＭＢ保護基を切断するのに好適な反応条件下、例えば０℃などの好適な温度で、例えばフェノールなどの好適な溶媒の存在下で、例えばトリフルオロ酢酸などの好適な酸の存在下で、例えば酢酸水銀（ＩＩ）などの好適な試薬との反応によって；
（ｖ）例えば水素化ナトリウムなどの好適な塩基の存在下で、室温などの好適な温度で、テトラヒドロフランなどの好適な溶媒中で；
（ｖｉ）例えば室温などの好適な温度で、続いて５０℃で反応を完了させるのに十分な期間、例えば式（６）の化合物を、例えばメタノールなどの好適な溶媒中で、例えばフッ化アンモニウムなどのフッ化物の供給源に供することなどによる、アルコール保護基を切断するのに好適な条件下で。
【００９４】
スキーム４
あるいは、本明細書では式（１１）、（１８）、及び（１７）の化合物と称される、Ｒ３が水素又はフルオロであり、Ｒ１及びＲ２が水素であり、塩基がウラシル、シトシン、又は例えばジメトキシトリチル保護基（ＤＭＴ）で保護されたシトシンなどの保護シトシンである、式（ＩＩ）の中間化合物を、以下の反応スキーム４に従って調製することもできる。
【化３２】
2020531536.tif 000034
【００９５】
スキーム４においては、以下の反応条件が適用される。
（ｉ）室温などの好適な温度で、テトラヒドロフランなどの好適な溶媒中で、トリフェニルホスフィン及びピリジンなどの好適な塩基の存在下でのヨウ素との反応により；
（ｉｉ）還流などの好適な温度で、例えばメタノールなどの好適な溶媒中で、例えばナトリウムメトキシドなどの好適な塩基との反応により；
（ｉｉｉ）例えば−１５℃などの好適な温度で、例えばアセトニトリルとテトラヒドロフランとの混合物などの好適な溶媒中、トリエチルアミン三フッ化水素酸塩、続いて、Ｎ−ヨードスクシンイミドとの反応により、続いて、０℃、続いて室温などの好適な温度で、例えばトリエチルアミンなどの塩基の存在下で、４−（ジメチルアミノ）ピリジンなどの触媒の存在下で、塩化ベンゾイルとの反応により；
（ｉｖ）例えば１２０℃などの好適な温度で、ジメチルホルムアミドなどの好適な溶媒中で、例えば１５−クラウン−５などの錯化剤の存在下でのナトリウムベンゾエートとの反応により；
（ｖ）例えば室温などの好適な温度で、例えばメタノールなどの好適な溶媒中で、例えば式（１０）の化合物をアンモニアに晒すことなどによる、アルコール保護基を切断するのに好適な条件下で；
（ｖｉ）例えば０℃などの好適な温度で、続いて室温にして、例えばトルエンなどの好適な溶媒中で、例えばピリジンなどの好適な塩基の存在下で、例えば無水イソ酪酸と反応させることなどによる、保護アルコールを形成するのに好適な条件下で；
（ｖｉｉ）〜（ｖｉｉｉ）：例えば室温などの好適な温度で、トリエチルアミンなどの好適な塩基及び４−（ジメチルアミン）ピリジンなどの触媒の存在下で、例えば２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリドなどの好適な試薬と反応させることにより、続いてアンモニアと反応させることにより；
（ｉｘ）例えば室温などの好適な温度で、例えばメタノールなどの好適な溶媒中で、例えば式（１０）の化合物をアンモニアに晒すことなどによる、アルコール保護基を切断するのに好適な条件下で；
（ｘ）；例えば室温などの好適な温度で、例えばジクロロメタンなどの好適な溶媒中で、例えば４−（ジメチルアミノ）ピリジンなどの触媒の存在下で、例えばトリエチルアミンなどの塩基の存在下で、反応を完了させるのに十分な期間、１，３−ジクロロ−１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサンと反応させることにより、続いて激しく攪拌してアンモニアと反応させることにより；
（ｘｉ）：例えば室温などの好適な温度で、例えばジクロロメタンなどの好適な溶媒中で、硝酸銀及び２，３，５−トリメチルピリジンの存在下で、例えば４，４’−（クロロ（フェニル）メチレン）ビス（メトキシベンゼン）などの保護基剤と反応させることにより；
（ｘｉｉ）：例えば室温などの好適な温度で、反応を完了させるのに十分な期間、例えば、式（１６）の化合物を、例えばテトラヒドロフランなどの好適な溶媒中で、例えばＴＢＡＦなどのフッ化物の供給源に供することなどによる、アルコール保護基を切断するのに好適な条件下で；
（ｘｉｉｉ）：例えば室温などの好適な温度で、例えばジクロロメタンなどの好適な溶媒中で、例えば、式（１７）の化合物を、例えばトリフルオロ酢酸などの酸に供することなどによる、アミノ保護基を切断するのに好適な条件下で；
（ｘｉｖ）：例えば室温などの好適な温度で、トリエチルアミンなどの好適な塩基及び４−（ジメチルアミン）ピリジンなどの触媒の存在下で、例えば２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリドなどの好適な試薬と反応させることにより、続いてアンモニアと反応させることにより；
（ｘｖ）：例えば室温などの好適な温度で、例えばメタノールなどの好適な溶媒中で、例えば式（１９）の化合物をアンモニアに晒すことなどによる、アルコール保護基を切断するのに好適な条件下で。
【００９６】
スキーム５
あるいは、本明細書では式（２２）の化合物と称される、Ｒ３がアジドであり、塩基がウラシルである式（ＩＩ）の中間化合物（式中、ＰＧ及びＰＧ’が例えばベンゾイルなどの好適なアルコール保護基を表す）を、以下の反応スキーム５に従って調製することができる。
【化３３】
2020531536.tif 000035
【００９７】
スキーム５においては、以下の反応条件が適用される。
（ｉ）室温などの好適な温度で、ＴＨＦなどの好適な溶媒中で、Ｎ−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジエチルエタンアミニウムクロリド及びＮＭＭの存在下で、反応を完了させるのに十分な期間、アジ化ナトリウムと反応させることにより、続いて室温などの好適な温度で、約５時間などの十分な期間、テトラヒドロフランなどの好適な溶媒中にヨウ素を添加することにより、続いてガスの発生が観察されなくなるまでＮ−アセチル−システインを添加し、且つ飽和水性Ｎａ２Ｓ２Ｏ３を添加することにより；
（ｉｉ）例えば０℃などの好適な温度で、例えばＴＨＦなどの好適な溶媒中で、例えばＥｔ３Ｎなどの好適な塩基、及びＤＭＰなどの触媒の存在下で、例えば塩化ベンゾイルと反応させ、続いて室温にすることなどによる、保護アルコールを形成するのに好適な条件下で；
（ｉｉｉ）例えば１２０℃などの好適な温度で例えばＤＭＦなどの好適な溶媒中で、１５−クラウン−５などの錯化剤の存在下で、例えば１２時間などの、反応を完了させるのに十分な期間、例えばナトリウムベンゾエートと反応させることなどによる、保護アルコールを形成するのに好適な条件下で；
（ｉｖ）例えば室温などの好適な温度で、例えばメタノールなどの好適な溶媒中で、例えば式（２２）の化合物をアンモニアに晒すことなどによる、アルコール保護基を切断するのに好適な条件下で。
【００９８】
続いて、化合物２２は、例えば、上記のスキーム４で説明されるものと類似する手順に従って、異なる塩基を有するヌクレオシドへの更なる官能基の相互変換に供されてもよい。
【００９９】
スキーム６
本明細書では式（Ｉ’−ａ３）の化合物と称される、Ｒ１及びＲ２が結合して環状リン酸塩又はホスホルアミデートタイプの基又はその誘導体を形成する、式（Ｉ）又は（Ｉ’）の化合物を、以下の反応スキーム６に従って調製することができる。
【化３４】
2020531536.tif 000036
【０１００】
スキーム６においては、以下の反応条件が適用される。
（ｉ）ピリジンを用いて前処理し、続いて得られた生成物を、室温などの好適な温度で、ＤＣＭなどの好適な溶媒中で、適切なホスホクロリデート又はホスホルアミドクロリデートを用いて、反応を完了させるのに十分な期間Ｎ−メチルイミダゾールと反応させることにより、続いて、例えば室温などの好適な温度で、例えばＴＨＦなどの好適な溶媒の存在下で、反応を完了させるのに十分な期間、ｔＢｕＯＫなどの好適な塩基を用いて処理することにより、濃縮及び処理する。
【０１０１】
ホスホクロリデート又はホスホルアミドクロリデート試薬は、市販されているか、又は当業者に既知の手順で合成可能であるかのいずれかである。
【０１０２】
スキーム７
あるいは、本明細書では式（２４）の化合物と称される、Ｒ２、Ｒ３が水素であり、塩基がグアニンである、式（ＩＩ）の中間化合物を、以下の反応スキーム７に従って調製することができる。
【化３５】
2020531536.tif 000037
【０１０３】
スキーム７においては、以下の反応条件が適用される。
（ｉ）例えば室温などの好適な温度で、例えばＤＭＦなどの好適な溶媒中で、例えばイミダゾールなどの塩基の存在下で、反応を完了させるのに十分な期間、グアノシンを１，３−ジクロロ−１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサンと反応させることにより；
（ｉｉ）例えば０℃などの好適な温度で、ＤＣＭなどの好適な溶媒中で、デス・マーチン・ペルヨージナンと反応させることにより；
（ｉｉｉ）室温などの好適な温度で、２０℃などの好適な溶媒中で、好適なアルキルトリフェニルホスファニリデンアセテートと反応させることにより；
（ｉｖ）例えば室温などの好適な温度で、例えばＴＨＦなどの好適な溶媒中の（４−メトキシフェニル）メタンチオールと反応させ；続いて例えばＫＨＭＤＳなどの好適な塩基の存在下で、例えば−４０℃などの好適な温度に冷却することにより；
（ｖ）室温などの好適な温度で、ピリジンなどの好適な溶媒中で、無水イソ酪酸と反応させることにより、続いてＴＥＡを添加して、最終的に、反応を完了させるのに十分な時間、温度を例えば８０℃に上昇させることにより；
（ｖｉ）例えば水素化アルミニウムリチウムなどの好適な還元剤の存在下、例えばＴＨＦなどの好適な溶媒中、例えば０℃、続いて室温などの好適な温度で；
（ｖｉｉ）例えばメシルなどの脱離基の形成に好適な条件下、例えば室温などの好適な温度で、例えばピリジンなどの好適な塩基／溶媒系の存在下で、塩化メタンスルホニルなどの好適な薬剤との反応によって；
（ｖｉｉｉ）ＰＭＢ保護基を切断するのに好適な反応条件下で、例えば０℃などの好適な温度で、過剰フェノールの存在下で、溶媒として用いられる例えばトリフルオロ酢酸などの好適な酸の存在下で、例えば酢酸水銀（ＩＩ）などの好適な試薬を用いた反応によって、続いて０℃で１，４−ジメルカプトブタン−２，３−ジオールを添加することによって；
（ｉｘ）例えば水素化ナトリウムなどの好適な塩基の存在下で、室温などの好適な温度で、テトラヒドロフランなどの好適な溶媒中で；
（ｘ）例えば室温などの好適な温度で、例えばメタノールなどの好適な溶媒中で、例えば式（３２）の化合物をアンモニアで処理することなどによる、アミノ保護基を切断するのに好適な条件下で；
（ｘｉ）例えば室温などの好適な温度で、続いて５０℃で反応を完了させるのに十分な期間、例えば式（３３）の化合物を、例えばメタノールなどの好適な溶媒中で、例えばフッ化アンモニウムなどのフッ化物の供給源に供することなどによる、アルコール保護基を切断するのに好適な条件下で。
【０１０４】
スキーム８
あるいは、本明細書では式（４２）の化合物と称される、Ｒ２、Ｒ３が水素であり、塩基がアデニンである、式（ＩＩ）の中間化合物を、以下の反応スキーム８に従って調製することができる。
【化３６】
2020531536.tif 000038
【０１０５】
スキーム８においては、以下の反応条件が適用される。
（ｉ）例えば室温などの好適な温度で、例えばＤＭＦなどの好適な溶媒中で、例えばイミダゾールなどの塩基の存在下で、反応を完了させるのに十分な期間、アデノシンを１，３−ジクロロ−１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサンと反応させることにより；
（ｉｉ）室温などの好適な温度で、ピリジンなどの好適な溶媒中で、ＴＭＳなどの好適な酸素保護基を用いて、アミン基は、パラメトキシベンゾイル基などの好適な保護基を用いて保護されることにより。
（ｉｉｉ）例えば０℃などの好適な温度で、ＤＣＭなどの好適な溶媒中で、デス・マーチン・ペルヨージナンと反応させることにより；
（ｉｖ）室温などの好適な温度で、２０℃などの好適な溶媒中で、好適なアルキルトリフェニルホスファニリデンアセテートと反応させることにより；
（ｖ）例えば室温などの好適な温度で、例えばＴＨＦなどの好適な溶媒中で、３−メルカプトプロパンニトリルと反応させ；続いて例えばＮａＨなどの好適な塩基の存在下で、例えば０℃などの好適な温度に冷却することにより；
（ｖｉ）例えば水素化アルミニウムリチウムなどの好適な還元剤の存在下、例えばＴＨＦなどの好適な溶媒中、例えば−６０℃などの好適な温度で；
（ｖｉｉ）例えばメシルなどの脱離基の形成に好適な条件下で、例えば室温などの好適な温度で、例えばピリジンなどの好適な塩基／溶媒系の存在下で、続いて、−７８℃などの好適な温度で、テトラヒドロフランなどの好適な溶媒中で、例えばテルブトキシドカリウムなどの好適な塩基の存在下で、塩化メタンスルホニルなどの好適な薬剤を用いた反応によって；
（ｖｉｉｉ）例えば室温などの好適な温度で、反応を完了させるのに十分な期間、例えば、式（４０）の化合物を、例えばメタノールなどの好適な溶媒中で、例えばフッ化アンモニウムなどのフッ化物の供給源に供することなどによる、アルコール保護基を切断するのに好適な条件下で；
（ｉｘ）例えば７０℃などの好適な温度で、例えばメタノールなどの好適な溶媒中で、例えば式（４１）の化合物をアンモニアで処理することなどによる、アミノ保護基を切断するのに好適な条件下で；
【０１０６】
薬効薬理
本発明の化合物は、フラビウイルス科ウイルス及び／又はアルファウイルス、特にＨＣＶ、デング、及び／若しくは、チクングンヤウイルス、並びに／又はシンドビスウイルス、並びに／又はセムリキ森林ウイルスに対する活性を示すことが判明した。
したがって、一実施形態では、本発明は、ＨＣＶ感染の治療又は予防（又は治療若しくは予防のための薬剤の製造）に使用するための、式（Ｉ）の化合物と、そのリン酸塩及びプロドラッグと、その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。後者としては、肝硬変に繋がる進行性肝線維症、炎症及び壊死、末期肝疾患、並びにＨＣＣが挙げられる。
【０１０７】
式（Ｉ）の化合物のＨＣＶに対するインビトロ抗ウイルス活性は、Ｌｏｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８５：１１０〜１１３に基づき、Ｋｒｉｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ７５：４６１４−４６２４によって説明される更なる修正を加えて（参照により本明細書に組み込まれる）、細胞ＨＣＶレプリコン系中で試験可能であり、これは実施例の項で更に例示される。このモデルは、ＨＣＶに関する完全な感染モデルではないが、最もロバスト性があり且つ有効な、現在入手可能なＨＣＶ  ＲＮＡ自己複製モデルとして広く受け入れられている。ＨＣＶレプリコンモデルにおいて、ＨＣＶ機能と特異的に干渉する化合物を、細胞傷害性又は細胞分裂停止効果を付与する化合物と区別し、その結果、ＨＣＶ  ＲＮＡの低下、又は関連したレポーター酵素濃度の低下をもたらすことが重要であることは理解されるであろう。例えば、レサズリン等の蛍光発生酸化還元色素を使用したミトコンドリア酵素の活性に基づく細胞毒性の評価に関する分野におけるアッセイが既知である。更に、蛍ルシフェラーゼ等の、関連したレポーター遺伝子活性の非選択的阻害の評価のための細胞カウンタースクリーニングが存在する。適切な細胞タイプは、ルシフェラーゼレポーター遺伝子を用いた安定なトランスフェクションにより装備され得、当該遺伝子の発現は構成的に活性な遺伝子プロモーターに依存し、またそのような細胞は、非選択的阻害剤を排除するためのカウンタースクリーンとして使用することができる。
【０１０８】
更なる実施形態では、本発明は、デングウイルス感染の治療又は予防（又は治療若しくは予防のための薬剤の製造）に使用するための、式（Ｉ）の化合物と、そのリン酸塩及びプロドラッグと、その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【０１０９】
更に別の実施形態では、本発明は、チクングンヤ及び／又はシンドビス及び／又はセムリキ森林ウイルス感染の治療又は予防（又は治療若しくは予防のための薬剤の製造）に使用するための、式（Ｉ）の化合物と、そのリン酸塩及びプロドラッグと、その薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物と、を提供する。
【０１１０】
その抗ウイルス特性のために、任意の可能な立体異性体、並びにそのリン酸塩及びプロドラッグ、並びにその薬学的に許容可能な塩及び溶媒和物を含む式（Ｉ）の化合物は、フラビウイルス科ウイルス及び／又はアルファウイルスに感染した温血動物、特にヒトの治療、並びにフラビウイルス科ウイルス及び／又はアルファウイルス感染の予防に有用となり得る。従って、本発明の化合物は、医薬、特にフラビウイルス科ウイルス及び／又はアルファウイルスの抗ウイルス薬又はウイルス阻害医薬として使用されてもよい。本発明はまた、フラビウイルス科ウイルス及び／又はアルファウイルス感染の治療又は予防のための薬剤の製造における本発明の化合物の使用に関する。更なる態様では、本発明は、フラビウイルス科ウイルス及び／若しくはアルファウイルスに感染した、又はフラビウイルス科ウイルス及び／若しくはアルファウイルスに感染するリスクのある、温血動物、特にヒトを治療するための方法に関し、上記の方法は、抗フラビウイルス科ウイルス及び／又は抗アルファウイルス有効量の、本明細書で特定される式（Ｉ）の化合物を投与することを含む。上記の医薬としての使用又は治療法は、フラビウイルス科ウイルス及び／若しくはアルファウイルスに感染した対象に、又はフラビウイルス科ウイルス及び／若しくはアルファウイルスに感染しやすい対象に、フラビウイルス科ウイルス及び／又はアルファウイルス感染に付随する疾患と戦うのに有効な量を全身投与することを含む。
【０１１１】
特定の一実施形態では、フラビウイルスは、Ｃ型肝炎ウイルス及びデングウイルスから選択される。更なる実施形態では、フラビウイルスはＣ型肝炎ウイルスである。別の実施形態では、フラビウイルスはデングウイルスである。別の実施形態では、アルファウイルスは、チクングンヤウイルス及びシンドビスウイルス及びセムリキ森林ウイルスから選択され、特にはチクングンヤウイルスである。
【０１１２】
更なる態様では、本発明は、治療有効量、特に抗ウイルス有効量の本明細書で特定される式（Ｉ）の化合物と、薬学的に許容可能な担体と、を含む医薬組成物に関する。上記の組成物は、１％〜５０％、又は１０％〜４０％の式（Ｉ）の化合物を含有してもよく、組成物の残部は上記の担体である。本文脈において、治療有効量、特に抗ウイルス有効量とは、フラビウイルス及び／又はアルファウイルス感染に対する予防法において、感染した対象又は感染するリスクのある対象中でフラビウイルス及び／又はアルファウイルスを阻害して、フラビウイルス及び／又はアルファウイルス感染を安定化又は低減させるように作用するのに十分な量である。尚更なる態様では、本発明は、本明細書で特定される医薬組成物の調製プロセスに関し、プロセスは、薬学的に許容可能な担体を、治療有効量、特に抗ウイルス有効量の本明細書で特定される式（Ｉ）の化合物と密に混合することを含む。
【０１１３】
式（Ｉ）又はその任意の亜群の化合物は、投与目的のために様々な医薬形態で処方され得る。適切な組成物としては、全身投与薬物に通常使用される全ての組成物を挙げることができる。本発明の医薬組成物を調製するために、活性成分としての、任意選択的に付加塩形態又は金属錯体である、有効量の特定の化合物を、薬学的に許容可能な担体と組み合わせて密な混合物とし、この担体は、投与のために所望される製剤の形態に応じて、非常に様々な形態を取り得る。これらの医薬組成物は、特に、経口投与、経直腸投与、経皮投与、又は腸管外注射による投与に好適な単一剤形であることが望ましい。例えば、組成物を経口剤形に調製する際に、例えば、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、及び液剤などの経口液体製剤の場合には、水、グリコール、油、及びアルコールなど；又は散剤、丸剤、カプセル剤、及び錠剤の場合には、デンプン、糖、カオリン、滑沢剤、結合剤、及び崩壊剤などの固体担体など、通常の医薬媒体のいずれかが使用され得る。錠剤及びカプセル剤は、投与におけるその容易さのために、最も有益な経口単位剤形であり、この場合は、固形の医薬担体が明らかに用いられる。腸管外組成物の場合、担体は、通常、少なくとも大部分で滅菌水を含むことになるが、例えば溶解性を助ける他の成分が含まれてもよい。例えば、担体が生理食塩水、グルコース溶液、又は生理食塩水とグルコース溶液との混合物を含む注射用溶液を調製することができる。注射用懸濁剤も調製することができ、その場合は適切な液体担体及び懸濁化剤などが使用され得る。使用直前に液状の製剤に変換されるように意図された固体状の製剤も含まれる。経皮投与に好適な組成物においては、担体は、任意の性質を持った好適な添加剤を低比率で任意選択的に組み合わせた、浸透促進剤及び／又は好適な湿潤剤を任意選択的に含むが、これらの添加剤は、皮膚に重大な有害作用をもたらさない。本発明の化合物はまた、任意の当該技術分野で知られている送達系を使用して、液剤、懸濁剤、又はドライパウダーの形態で、経口吸入又はガス注入を介して投与されてもよい。
【０１１４】
投与を容易にし、投与量を均一にするために、前述の医薬組成物を単位剤形に製剤化することは特に有利である。本明細書で使用される単位剤形とは、単位投与量として好適な物理的に個別の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と共同して所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性成分を含有する。このような単位剤形の例としては、錠剤（分割錠又はコーティング錠を含む）、カプセル剤、丸剤、坐剤、散剤小包、オブラート剤、及び注射用の溶液剤又は懸濁剤等、並びにそれらを複数に分割したものがある。
【０１１５】
一般に、抗ウイルスに有効な一日量は、約１〜約２００ｍｇ／ｋｇ、又は約５〜約１７５ｍｇ／ｋｇ、又は約１０〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、又は約２０〜約１００ｍｇ／ｋｇ、又は約５０〜約７５ｍｇ／ｋｇ体重であろうと想定される。平均の一日用量は、これらの一日量を約７０で乗算することにより得ることができる。必要な用量を２、３又は４以上の分割用量として、一日の間に適切な間隔をおいて投与することが適切な場合がある。上記のサブ用量は、例えば単位剤形当たり約１〜約５０００ｍｇ、又は約５０〜約３０００ｍｇ、又は約１００〜約１０００ｍｇ、又は約２００〜約６００ｍｇ、又は約１００〜約４００ｍｇの活性成分を含む単位剤形として処方されてもよい。
【実施例】
【０１１６】
本発明の化合物を調製するためのいくつかの方法を以下の実施例で説明する。別段の断りがない限り、出発物質は、全て市販業者から入手し、更に精製することなく使用した。
【０１１７】
以下、用語「ＫＨＭＤＳ」はヘキサメチルジシラジドカリウムを意味し、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを意味し、「ＥＡ」又は「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルを意味し、「ＰＥ」は石油エーテルを意味し、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸を意味し、「ＭｅＯＨ」はメタノールを意味し、「ＴＩＰＳＣｌ」は塩化トリイソプロピルシリルを意味し、「ＤＣＭ」はジクロロメタンを意味し、「ＴＢＡＦ」はフッ化テトラブチルアンモニウムを意味し、「ｐｒｅｐ」は分取（ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ）を意味し、「ＨＰＬＣ」は高速液体クロマトグラフィを意味し、「ＴＰＰ」はトリフェニルホスフィンを意味し、「ＮＭＩ」はＮ−メチルイミダゾールを意味し、「ＮａＯＭｅ」はナトリウムメトキシドを意味し、「ＣＡＮ」又は「ＭｅＣＮ」はアセトニトリルを意味し、「ＮＩＳ」はＮ−ヨードスクシンイミドを意味し、「ＤＭＡＰ」は４−ジメチルアミノピリジンを意味し、「ＴＰＳＣｌ」は２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニルクロリドを意味し、「ＤＩＰＥＡ」はＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを意味し、「ＤＢＵ」は１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンを意味し、「ＮＭＭ」は４−メチルモルホリンを意味し、「ＭＳ」は質量分析を意味し、「ＥＳ」はエレクトロスプレーを意味し、「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホキシドを意味し、「ＤＭＰ」はデス・マーチン・ペルヨージナンを意味し、「ＴＥＡ」はトリメチルアミンを意味し、「ＲＴ」は室温を意味し、「ＬＣ−ＭＳ」は液体クロマトグラフィ質量分析を意味し、「ＭｓＣｌ」は塩化メタンスルホニル（又はメシル）を意味する。
【０１１８】
ＬＣ−ＭＳ分析を、以下の方法のうちのいずれか１つを用いて実施した。ＮＭＲデータをＢｒｕｋｅｒ製４００ＭＨｚ分光計で記録した。
予備ＨＰＬＣによる精製を、以下の方法に従って実施した。
方法Ａ：固定相：Ｕｐｔｉｓｐｈｅｒｅ  Ｃ１８  ＯＤＢ−１０μｍ、２００ｇ、５ｃｍ、移動相：０．２５％ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、ＣＨ３ＣＮ
方法Ｂ：固定相：ＲＰ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＢＤ−１０μｍ、３０×１５０ｍｍ；移動相：０．２５％ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、ＣＨ３ＣＮ
方法Ｃ：固定相：ＲＰ  ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＢＤ−１０μｍ、３０ｘ１５０ｍｍ；移動相：０．２５％ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、ＣＨ３ＣＮ
方法Ｄ：固定相：ＲＰ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＤＢ−５μｍ、３０ｘ２５０ｍｍ；移動相：０．２５％ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、ＭｅＯＨ
【０１１９】
以下のスキームは、例示のみを意味し、範囲を限定するものでは決してない。
【０１２０】
スキーム１：１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン７の合成
【化３７】
2020531536.tif 000039
【０１２１】
工程１：ＴＨＦ（５Ｌ）中のエチル２−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−８−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−（（４−メトキシベンジル）チオ）テトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９−イル）アセテート２ｂ（４−メトキシフェニル）メタンチオール（ＣＡＳ［２５８−６０−２２］）（６９．４ｇ、４５０．６ｍｍｏｌ）の合成物を２０℃の窒素下で攪拌した。
混合物を−４０℃に冷却し、続いてＫＨＭＤＳ（１Ｍ、４９５．７ｍＬ、４９５．７ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた白色粘性液体を３０分間攪拌し、続いてＴＨＦ（１Ｌ）中の中間体１（２５０ｇ、４５０．６ｍｍｏｌ）を−４０℃で添加した。反応混合物を徐々に２０℃まで温めてから２時間攪拌した。１ＮのＨＣｌ（２Ｌ）水溶液を添加して反応混合物をクエンチし、続いてＥｔＯＡｃで抽出した（２ｘ２Ｌ）。有機層を、重炭酸ナトリウム水溶液（２Ｌ）、ブライン（２Ｌ）で連続的に洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、蒸発させた。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝２０／１〜３／１）で精製し、無色油としての化合物２ｂを産生した（１５９ｇ、５０％）。
ｍ／ｚ＝７１０（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ  ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．２６（ｓ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．２８（ｓ，１Ｈ），５．６６−５．６３（ｍ，１Ｈ），５．３４−５．３０（ｍ，１Ｈ），４．４１−４．２３（ｍ，１Ｈ），４．１９−４．０４（ｍ，５Ｈ），３．８０−３．７８（ｍ，４Ｈ），３．２３−３．１９（ｍ，１Ｈ），２．９２（ｄ，Ｊ＝１６．４Ｈｚ，１Ｈ），１．３０−０．８６（ｍ，５１Ｈ）。
【０１２２】
工程２：１−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−９−（２−ヒドロキシエチル）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−（（４−メトキシベンジル）チオ）テトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−８−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン３の合成
０℃の窒素下で水素化アルミニウムリチウム（４ｇ、１０５ｍｍｌ）をジエチルエーテル（１．５Ｌ）中に懸濁させ、続いてエーテル（２００ｍＬ）中の中間体２ｂ（５０ｇ、７０ｍｍｏｌ）を０℃で徐々に添加した。得られた白色混濁液を２０℃で１６時間攪拌した。１ＮのＨＣｌ（１Ｌ）水溶液を添加して反応混合物をクエンチし、続いてＥｔＯＡｃで抽出した（２ｘ１Ｌ）。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ蒸発させた。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１〜１／１）で精製し、無色油としての化合物３を産生した（２７．８ｇ、６０％）。
ｍ／ｚ＝６６８（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ  ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．７８（ｓ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），７．３０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），５．７３（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），４．３６−３．９１（ｍ，１２Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），２．２３−２．２０（ｍ，２Ｈ），１．７８−１．７３（ｍ，１Ｈ），１．１１−０．９７（ｍ，３０Ｈ）。
【０１２３】
工程３：２−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−８−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−（（４−メトキシベンジル）チオ）テトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９−イル）メタンスルホン酸エチル４の合成
２５℃の窒素下で中間体３（５０ｇ、７５ｍｍｏｌ）をピリジン（５００ｍＬ）に溶解させ、続いて２５℃で塩化メシル（１２．８ｇ、１１２．５ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。得られた黄色溶液を２５℃で１６時間攪拌した。１ＮのＨＣｌ（１Ｌ）水溶液を添加して反応混合物をクエンチし、続いてＥｔＯＡｃで抽出した（２ｘ１Ｌ）。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ蒸発させた。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１〜１／１）で精製し、無色油としての化合物４を産生した（４３ｇ、７８％）。
ｍ／ｚ＝７４６（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．５６（ｓ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．８７−６．８５（ｍ，２Ｈ），６．２７（ｓ，１Ｈ），５．７７−５．７４（ｍ，１Ｈ），４．５５−４．５３（ｍ，２Ｈ），４．３８−４．０２（ｍ，８Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），２．９５（ｓ，３Ｈ），２．２８−２．２１（ｍ，１Ｈ），１．１２−１．０１（ｍ，３１Ｈ）。
【０１２４】
工程４：２−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−８−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−メルカプトテトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９−イル）メタンスルホン酸エチル５の合成
２５℃のＴＦＡ（２５０ｍＬ）中の中間体４（６２ｇ、８３．２ｍｍｏｌ）に、酢酸水銀（５３ｇ、１６６．４ｍｍｏｌ）及びフェノール（３９．１ｇ、４１６ｍｍｏｌ）を０℃で徐々に添加した。得られた暗赤色溶液を０℃で１時間攪拌した。１，４−ジメルカプトブタン−２，３−ジオール（２５．６ｇ、１６６．４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。得られた混合物を１０分間攪拌し、続いてｃｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、酢酸エチル（１Ｌ）で洗浄した。重炭酸ナトリウム水溶液を添加することによってｐＨを７に調整した。得られた混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、ＥｔＯＡｃで抽出した（２ｘ１Ｌ）。有機層を、２５℃でＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ蒸発させて、褐色油としての中間体５（６４ｇ、粗生成物）を得た。
【０１２５】
工程５：１−（（２’Ｒ，６ａＲ，８Ｒ，９ａＲ）−２，２，４，４−テトライソプロピルテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９，２’−チエタン］−８−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン６の合成
２０℃の窒素下で中間体５（５７ｇ、９１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５００ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を０℃で攪拌し、続いて水素化ナトリウム（３．６ｇ、１３５ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。反応混合物を２０℃で１６時間攪拌した。１ＮのＨＣｌ（１Ｌ）水溶液を添加して反応混合物をクエンチし、続いてＥｔＯＡｃで抽出した（２ｘ１Ｌ）。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ蒸発させた。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１〜５／１）で精製し、無色油としての化合物６を産生した（１８．３ｇ、４６％、２工程）。
ｍ／ｚ＝５２９（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．５５（ｓ，１Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．５８（ｓ，１Ｈ），５．６９（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），４．２０−４．１７（ｍ，１Ｈ），４．０５−３．９６（ｍ，２Ｈ），３．５４−３．５１（ｍ，１Ｈ），３．３３−３．３２（ｍ，１Ｈ），２．９６−２．８７（ｍ，２Ｈ），２．８５−２．６９（ｍ，１Ｈ），１．１７−０．９８（ｍ，３０Ｈ）。
【０１２６】
工程６：１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン７の合成
２０℃の窒素下で中間体６（５０ｇ、９４．５ｍｍｏｌ）をメタノール（５００ｍＬ）に溶解させた。フッ化アンモニウム（１０．５ｇ、２８３．６ｍｍｏｌ）を２０℃で添加した。反応混合物を５０℃で１６時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却させ、続いて減圧下で溶媒を除去した。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：１００／１〜１０／１）で精製し、白色固体として７を産生した（１１．２ｇ、４２％）。
ｍ／ｚ＝２８７（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．００（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ），６．３９（ｓ，１Ｈ），５．６８（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），５．６１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．２２（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９２−３．８９（ｍ，１Ｈ），３．７２−３．７１（ｍ，１Ｈ），３．５９−３．５７（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），３．１２−２．９４（ｍ，１Ｈ），２．８５−２．８１（ｍ，２Ｈ），２．４７−２．４４（ｍ，１Ｈ）。
【０１２７】
スキーム２：（２Ｓ）−イソプロピル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート９の合成
【化３８】
2020531536.tif 000040
【０１２８】
工程１：（２Ｓ）−イソプロピル２−（（クロロ（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート８の合成
ジクロロメタン（５０ｍＬ）中（Ｓ）−イソプロピル２−アミノプロパン酸塩酸塩（５ｇ、２９．８ｍｍｏｌ）の溶液に、２０℃でフェニルホスホロジクロリデート（４．４５ｇ、２９．８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を−７８℃に冷却してから、ジイソプロピルエチルアミン（１０．４ｍＬ、５９．６ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を−７８℃で１時間攪拌してから、反応の温度を２０℃に上げた。１時間後、減圧下で溶媒を除去した。
【０１２９】
乾燥Ｅｔ２Ｏ（約５０ｍｌ）を添加し、形成された沈殿物を濾別して、窒素下で乾燥Ｅｔ２Ｏを用いて２回洗浄した。濾液を乾燥するまで蒸発させ、黄色の無色油８（８．３２ｇ）を得、これを乾燥テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中１Ｍ溶液として−２０℃の冷凍庫に貯蔵した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ１．２４−１．３１（ｍ，６Ｈ），１．５０（ｄｄ，Ｊ＝７．０，２．１Ｈｚ，３Ｈ），４．０６−４．２０（ｍ，１Ｈ），４．２３−４．４１（ｍ，１Ｈ），５．０２−５．１４（ｍ，１Ｈ），７．１９−７．３０（ｍ，３Ｈ），７．３４−７．４１（ｍ，２Ｈ）。
【０１３０】
工程２：（２Ｓ）−イソプロピル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート９の合成
化合物７（５００ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を乾燥ピリジン（１５ｍＬ）中に溶解させ、室温で１時間攪拌して、続いて乾燥するまで蒸発させた。
【０１３１】
得られた沈殿物を乾燥ジクロロメタン（１５ｍＬ）中に懸濁させ、メチルイミダゾール（１．３ｍＬ、１７．４ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた溶液を、窒素下、乾燥ＴＨＦ中のホスホクロリデート８（２．６２ｍＬ、２．６２ｍｍｏｌ）１Ｍ溶液で処理した。反応混合物を２０℃で１６時間攪拌し、ＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、１ＭのＨＣｌ水溶液で洗浄した（３ｘ２０ｍＬ）。組み合わせられた水層をＤＣＭ（３０ｍＬ）を用いて抽出した。組み合わせられた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮させた。残滓をカラムクロマトグラフィ（勾配ＤＣＭ／ＭｅＯＨ１〜１０％）によって精製し、白色発泡体として９を産生した（１００ｍｇ、１２％）。
ｍ／ｚ＝５５６（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ１．１８−１．２６（ｍ，６Ｈ），１．３０−１．３８（ｍ，２Ｈ），２．６２（ｓ，１Ｈ），２．６６−２．９０（ｍ，２Ｈ），３．０１（ｔｄ，Ｊ＝８．７，５．６Ｈｚ，１Ｈ），３．１４−３．２２（ｍ，１Ｈ），３．４６−３．６３（ｍ，１Ｈ），３．７０（ｓ，１Ｈ），３．８５−４．０４（ｍ，３Ｈ），４．３２−４．５４（ｍ，２Ｈ），４．９７−５．０７（ｍ，１Ｈ），５．５９−５．６５（ｍ，１Ｈ），６．５０−６．５５（ｍ，１Ｈ），７．１５−７．２５（ｍ，３Ｈ），７．３０−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．４６−７．５５（ｍ，１Ｈ），９．０７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１３２】
スキーム３：４−アミノ−１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン１２の合成
【化３９】
2020531536.tif 000041
【０１３３】
工程１：（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−（（イソブチリルオキシ）メチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−８−イルイソブチレート１０の合成
化合物７（１ｇ、３．５ｍｍｏｌ）をトルエンによって２回蒸発させてから、乾燥ピリジン中に溶解させて、溶液を窒素下で０℃に冷却した。得られた溶液に無水イソ酪酸（２．９ｍＬ、１７．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０℃で終夜攪拌した。
【０１３４】
ＭｅＯＨを用いて反応混合物をクエンチし、これを２０℃で１時間攪拌した。揮発性物質を真空下で蒸発させ、粗生成物をカラムクロマトグラフィ（勾配ヘプタン及びＥｔＯＡｃ１〜３０％）によって精製して、白色固体として１０（１．１６ｇ、７７％）を産生した。
ｍ／ｚ＝４２７（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ  ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．０６−１．２４（ｍ，１２Ｈ），２．５２−２．６０（ｍ，１Ｈ），２．６７−２．９２（ｍ，５Ｈ），３．９８−４．０３（ｍ，１Ｈ），４．１８−４．２８（ｍ，２Ｈ），５．３７（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），５．７３（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．１９（ｓ，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），１１．５７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１３５】
工程２：（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−（（イソブチリルオキシ）メチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−８−イルイソブチレート１１の合成
２０℃の乾燥ＤＣＭ（５０ｍＬ）中の、中間体１０（１ｇ、２．３４５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（５７．２９ｍｇ、０．４６９ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（０．４８９ｍＬ、３．５２ｍｍｏｌ）の混合物に、ＴＩＰＳＣｌ（１．０６５ｇ、３．５１７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、２０℃の窒素下で３時間攪拌した。アンモニア（４．８ｍＬ、２．４３ｍｍｏｌ、０．５Ｍ、ＴＨＦ中）を添加して、反応混合物を２０℃で終夜激しく攪拌した。
【０１３６】
反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）で希釈して、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（５０ｍＬ）を添加した。２つの層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２（３×２５ｍＬ）で抽出した。組み合わせられた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾別し、減圧下で濃縮した。
【０１３７】
残滓をカラムクロマトグラフィ（（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ９：１）／ＤＣＭ、０〜１００％）によって精製して、白色固体として中間体１１を産生した（１．１６ｇ、７８％）。
ｍ／ｚ＝４２６（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．０７−１．１３（ｍ，６Ｈ），１．１６−１．２０（ｍ，３Ｈ），１．２３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），２．５７（ｄｔ，Ｊ＝１３．９，７．０Ｈｚ，１Ｈ），２．６１−２．７５（ｍ，１Ｈ），２．７８−２．８９（ｍ，２Ｈ），３．９３−３．９９（ｍ，１Ｈ），４．１９−４．２８（ｍ，２Ｈ），５．３５（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），５．８３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），６．３０（ｓ，１Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）
【０１３８】
工程３：４−アミノ−１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン１２の合成
中間体１１（５８８ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）をメタノール／アンモニアの溶液（７Ｎ）（２５ｍＬ）に溶解させた。反応混合物を２０℃で１６時間攪拌した。溶媒を除去し、方法Ｄを用いて残滓をｐｒｅｐ  ＨＰＬＣによって精製した。
【０１３９】
有機溶媒を４０℃で除去し、水層を凍結乾燥して、白色固体として１２を産生した（２５０ｍｇ、６５％）。
ｍ／ｚ＝２８６（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．３４−２．４５（ｍ，１Ｈ），２．６９−２．８４（ｍ，２Ｈ），３．０８−３．１６（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．３２（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），３．５９（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ），３．７５（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．１７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．５５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．６９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），６．５０（ｓ，１Ｈ），７．１７（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝２３．８Ｈｚ，２Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１４０】
スキーム４：（２Ｓ）−イソプロピル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート１７の合成
【化４０】
2020531536.tif 000042
【０１４１】
工程１：４−アミノ−１−（（２’Ｒ，６ａＲ，８Ｒ，９ａＲ）−２，２，４，４−テトライソプロピルテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９，２’−チエタン］−８−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン１３の合成
２０℃の乾燥ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の、中間体６（１．６ｇ、３．０２６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（７３．９ｍｇ、０．６０５ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（０．６３１ｍＬ、４．５ｍｍｏｌ）の混合物に、ＴＩＰＳＣｌ（１．３７ｇ、４．５３ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、２０℃の窒素下で終夜攪拌した。続いてアンモニア（６０ｍＬ、３０．２５ｍｍｏｌ、０．５Ｍ、ＴＨＦ中）を添加して、反応混合物を２０℃で３時間激しく攪拌した。反応混合物をジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈して、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（１００ｍＬ）を添加した。２つの層を分離し、水層をジクロロメタン（３ｘ３０ｍＬ）で抽出し、組み合わせられた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾別し、減圧下で濃縮した。
【０１４２】
残滓をカラムクロマトグラフィ（（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ９：１）／ＤＣＭ、０〜１００％）によって精製して、白色発泡体として１３を産生した（１．１２ｇ、７０％）。
ｍ／ｚ＝５２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４３】
工程２：４−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メチル）アミノ）−１−（（２’Ｒ，６ａＲ，８Ｒ，９ａＲ）−２，２，４，４−テトライソプロピルテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９，２’−チエタン］−８−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン１４の合成
中間体１３（１．１２ｇ、２．１２ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、続いて２，３，５−トリメチルピリジン（２．２６ｍＬ、１７．４ｍｍｏｌ）、硝酸銀（６．３４ｇ、３７．３４ｍｍｏｌ）、及び４，４’−（クロロ（フェニル）メチレン）ビス（メトキシベンゼン）（２．１５ｇ、６．３６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた明橙黄色懸濁液を２０℃で２時間攪拌した。
【０１４４】
続いて、反応混合物をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）でクエンチした。反応混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５０ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタンを用いて抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させて、黄色発泡体としての１４を得た（１．６５ｇ、９３％）。
ｍ／ｚ＝８３１（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４５】
工程３：４−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メチル）アミノ）−１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン１５の合成
ＴＢＡＦ（１Ｍ、ＴＨＦ中）［４２９−４１−４］（１．９８７ｍＬ、１Ｍ、１．９８７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ［１０９−９９−９］（５０ｍＬ）中の中間体１４（１．６５ｇ、１．９８７ｍｍｏｌ）（粗生成物）の溶液に添加した。得られた混合物を、２０℃のＮ２下で２時間攪拌した。
【０１４６】
混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈して、水（１００ｍＬ）に注ぎ、続いてＥｔＯＡｃで抽出した（３ｘ２５ｍＬ）。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を除去した。得られた残滓をジクロロメタン及びメタノール（１００／０〜９５／５）を用いたカラムクロマトグラフィによって精製し、褐色固体としての１５を産生した（１ｇ、８５％）。
ｍ／ｚ＝５８８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４７】
工程４：（２Ｓ）−イソプロピル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−５−（４−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メチル）アミノ）−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート１６の合成
中間体１５（７００ｍｇ、０．９５３ｍｍｏｌ）を乾燥ピリジン（５ｍＬ）中に溶解させ、室温で１時間攪拌し、続いて乾燥するまで蒸発させた。得られた発泡体を乾燥ジクロロメタン（５０ｍＬ）中に懸濁させ、メチルイミダゾール（０．４７５ｍＬ、６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を、窒素下、（２Ｓ）−イソプロピル２−（（クロロ（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート８（１．７８ｍＬ、１．７８ｍｍｏｌ、１Ｍ溶液、乾燥ＴＨＦ中）で処理した。
【０１４８】
反応混合物を２０℃で終夜攪拌し、続いてジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈して、水（１００ｍＬ）に注ぎ、ｐＨ＝４になるまでＨＣｌ  １Ｍ水溶液を添加することによって得られた混合物を酸性化した。水層をジクロロメタンで抽出した。組み合わせられた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮させた。残滓をカラムクロマトグラフィ（勾配ＤＣＭ／ＭｅＯＨ１〜１０％）によって精製し、１６を産生した（１１０ｍｇ、１７％）。
ｍ／ｚ＝８５８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４９】
工程５：（２Ｓ）−イソプロピル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート１７の合成
中間体１６（１１０ｍｇ、０．１２８ｍｍｏｌ）を２０℃でジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、続いて２，２，２−トリフルオロ酢酸（０．１ｍＬ、１．２８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を２０℃で３時間攪拌した。
【０１５０】
反応混合物をメタノール（１０ｍＬ）でクエンチし、ジクロロメタン（２５ｍＬ）で希釈し、混合物を３０分間攪拌した。明橙黄色溶液は黄色となった。反応混合物をＮａ２ＣＯ３の水溶液で塩基性化し（ｐＨ＝８になるまで）、混合物を３０分間攪拌した。２つの層を分離し、水層をジクロロメタン（３ｘ１５ｍＬ）で抽出した。組み合わせられた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾別し、減圧下で濃縮して黄色油を得た。これを方法Ｄを用いたｐｒｅｐ  ＨＰＬＣによって精製して、白色粉末としての化合物１７を産生した（３９ｍｇ、５３％）。
ｍ／ｚ＝５５５（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ１．１７−１．２９（ｍ，７Ｈ），１．３６（ｓ，３Ｈ），２．６６−２．８６（ｍ，２Ｈ），２．８７−２．９９（ｍ，１Ｈ），３．２３−３．３６（ｍ，１Ｈ），３．４５−３．５４（ｍ，１Ｈ），３．５５−３．７２（ｍ，１Ｈ），３．７８−４．０７（ｍ，３Ｈ），４．３１−４．４５（ｍ，１Ｈ），４．４６−４．５６（ｍ，１Ｈ），４．９０−５．０９（ｍ，１Ｈ），５．５８−５．８１（ｍ，１Ｈ），６．５９−６．７７（ｍ，１Ｈ），７．１２−７．２５（ｍ，３Ｈ），７．２９−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．５４−７．６９（ｍ，１Ｈ）。
【０１５１】
スキーム５：１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン２２の合成
【化４１】
2020531536.tif 000043
【０１５２】
工程１：１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン７の合成
ＴＨＦ（３００ｍＬ）中の中間体６（１５ｇ、２８．３６５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＢＡＦ（５６．７ｍＬ、５６．７ｍｍｏｌ、１Ｍ、ＴＨＦ中）を添加した。得られた混合物を、Ｎ２雰囲気下、室温で２時間攪拌した。その後、溶媒を蒸発させ、方法Ａを用いたＰｒｅｐ  ＨＰＬＣによって粗生成物を精製して、白色粉末としての中間体７を産生した（７ｇ、８６％）。
ＭＳ（ＥＳ−）：２８５．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．４４−２．４９（ｍ，１Ｈ），２．７８−２．９０（ｍ，２Ｈ），２．９９−３．０９（ｍ，１Ｈ），３．３９−３．４５（ｍ，１Ｈ），３．５９（ｄｄ，Ｊ＝１２．４，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．７４（ｄｄ，Ｊ＝１２．４，２．１Ｈｚ，１Ｈ），３．９２（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），５．２３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．６２（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），５．６８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．４０（ｓ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），１１．４０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１５３】
工程２：１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−（ヨードメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン１８の合成
室温で、ヨウ素（６．６４９ｇ、２６．１９６ｍｍｏｌ）及びＴＰＰ（６．８７１ｇ、２６．１９６ｍｍｏｌ）を、ＮＭＩ（６．９６ｍＬ、１．０３ｇ／ｍＬ、８７．３１８ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ（２００ｍＬ、０．８８６ｇ／ｍＬ、２４５７．４６２ｍｍｏｌ）中の中間体７（５ｇ、１７．４６４ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加した。反応混合物をＮ２雰囲気下で４時間攪拌した。反応混合物をＮａ２Ｓ２Ｏ３の飽和溶液でクエンチし、濃縮し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈した。有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物を、溶離剤としてヘプタン／ＥｔＯＡｃを用いたクロマトグラフィカラムによって精製し、中間体１８（８０％）及びトリフェニルホスフィンオキシド（２０％）を含有する白色固体（６ｇ）を得た。
ＭＳ（ＥＳ−）：３９５．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．５５−２．６７（ｍ，１Ｈ），２．６８−２．８０（ｍ，１Ｈ），２．８５−２．９５（ｍ，２Ｈ），３．３５−３．４７（ｍ，２Ｈ），３．５０−３．６０（ｍ，１Ｈ），３．８１（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），５．６６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ），６．３３（ｓ，１Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），１１．５０（ｓ，１Ｈ）。
【０１５４】
工程３：１−（（４Ｒ，５Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−メチレン−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン１９
中間体１８（６ｇ）を含有する混合物をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中で懸濁させた。ＮａＯＭｅ（３０％、ＭｅＯＨ中）（１４．０２２ｍＬ、５．４Ｍ、７５．７１８ｍｍｏｌ）を懸濁液に添加した。得られた混合物を還流状態で２．５時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、Ｄｅｃａｌｉｔｅ（登録商標）の小型パッドで濾過した。濾液を、方法Ａを用いたｐｒｅｐ  ＨＰＬＣによって精製した。画分を凍結乾燥させて、白色固体としての中間体１９を提供した（２．６ｇ、２工程で５５％）。
ＭＳ（ＥＳ−）：２６７．０
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．５４−２．６８（ｍ，１Ｈ），２．７２−２．８４（ｍ，１Ｈ），２．９１（ｔｄ，Ｊ＝８．５，５．７Ｈｚ，１Ｈ），２．９４−３．０５（ｍ，１Ｈ），４．２６（ｓ，１Ｈ），４．４５（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ），５．６６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．０６（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），６．５１（ｓ，１Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），１１．５４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１５５】
工程４：（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−７−（ヨードメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−８−イルベンゾエート２０の合成
中間体１９（１ｇ、３．７ｍｍｏｌ）をＡＣＮ（２０ｍＬ）及びＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解させ、得られた混合物をＮ２雰囲気下で−１５℃に冷却し、続いて５ｍＬのＡＣＮ中のトリエチルアミン三フッ化水素酸塩（０．６ｍＬ、０．９８９ｇ／ｍＬ、３．７ｍｍｏｌ）を滴下し、続いてＮＩＳ（１ｇ、４．４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた反応混合物を−１５℃のＮ２雰囲気下で１時間攪拌した。その後、Ｅｔ３Ｎ（２．６ｍＬ、０．７２８ｇ／ｍＬ、１８．６ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（９．１０７ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加した。反応混合物を４０ｍＬのＴＨＦで希釈し、続いて０℃で塩化ベンゾイル（０．４３３ｍＬ、１．２１１ｇ／ｍＬ、３．７ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温まで温めて３時間攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、ブライン、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３の飽和溶液で連続的に洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、カラムクロマトグラフィ（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）によって精製し、明黄色固体としての中間体２０を得た（１．２ｇ、収率６２％）。
ＭＳ（ＥＳ−）：５１６．８；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．８０（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），２．９３（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），３．０４−３．２０（ｍ，１Ｈ），３．５０−３．７７（ｍ，２Ｈ），５．７８（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），６．０４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．５９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．６３（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），７．７０−７．９８（ｍ，１Ｈ），８．１８（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），１１．６５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１５６】
工程５：（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−８−（ベンゾイルオキシ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メチルベンゾエート２１の合成
中間体２０（１．２ｇ、２．３ｍｍｏｌ）、ナトリウムベンゾエート（１．７ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）、及び１５−クラウン−５（４．６ｍＬ、１．１１ｇ／ｍＬ、２３．２ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下でＤＭＦ（５０ｍＬ）に懸濁させた。反応混合物を１２０℃で１８時間攪拌した。その後、反応混合物を４５−５０℃まで冷却し、続いてＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈してから濾過した。有機層を、ブライン、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３の飽和溶液で連続的に洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒を除去し、粗生成物をカラムクロマトグラフィ（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ：１００／１００〜５０／５０）で精製して、明黄色固体としての中間体２１を得た（７００ｍｇ、５９％）。
ＭＳ（ＥＳ−）：５１１．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ２．７６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），２．８９−２．９５（ｍ，１Ｈ），３．１１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．１７−３．３０（ｍ，１Ｈ），４．５４（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，５．７Ｈｚ，１Ｈ），４．７２（ｄｄ，Ｊ＝１２．２，８．７Ｈｚ，１Ｈ），５．５３−５．６４（ｍ，１Ｈ），５．９２（ｓ，１Ｈ），６．５８−６．７９（ｍ，１Ｈ），７．２８（ｓ，１Ｈ），７．３３−７．４２（ｍ，２Ｈ），７．４７−７．５４（ｍ，２Ｈ），７．５４−７．５９（ｍ，１Ｈ），７．６５（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１５７】
工程６：１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン２２の合成
中間体２１（７００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）をＮＨ３（７Ｍ、ＭｅＯＨ中）（２００ｍＬ）で可溶化し、室温で終夜攪拌した。溶媒を除去し、固体をＥｔ２Ｏ中で粉砕し、化合物２２（２６９ｍｇ、６５％）を得た。
ＭＳ（ＥＳ−）：３０３．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．３２−２．４５（ｍ，１Ｈ），２．８３（ｂｒ  ｄｄ，Ｊ＝８．４，４．０Ｈｚ，１Ｈ），２．８８−３．０３（ｍ，１Ｈ），３．０８−３．２０（ｍ，１Ｈ），３．５１−３．６７（ｍ，２Ｈ），４．０８（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１９．４Ｈｚ，１Ｈ），５．６７（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），５．７５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．９３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．７１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．６５（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），１１．５３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１５８】
スキーム６：（２Ｓ）−イソプロピル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート２３の合成
【化４２】
2020531536.tif 000044
【０１５９】
化合物２２（１００ｍｇ、０．３２９ｍｍｏｌ）を乾燥ピリジン（５ｍＬ）に溶解させ、溶媒を減圧下で除去した。得られた発泡体をジクロロメタン（５ｍＬ）及びＮ−メチルイミダゾール（０．１３１ｍＬ、１．０３ｇ／ｍＬ、１．６４３ｍｍｏｌ）中で可溶化した。室温のＮ２雰囲気下で、この混合物に、中間体８（０．５ｍＬ、１Ｍ、０．５ｍｍｏｌ）を滴下した。５時間攪拌した後、もう１つの等量の中間体８を添加した。終夜攪拌した後、２０ｍＬの冷水と２０ｍＬのジクロロメタンとの混合物で反応混合物をクエンチした。得られた混合物を、ｐＨ＝４になるまでＨＣｌ  １Ｍで酸性化し、ジクロロメタンで抽出した（３ｘ５０ｍＬ）。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、化合物を含む４００ｍｇの発泡体を得た。精製は、方法Ｂを用いるＰｒｅｐ  ＨＰＬＣによって実施して、２３を産生した（４４ｍｇ、収率２３％）。
ＭＳ（ＥＳ−）：５７２．１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．１５（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，６Ｈ），１．２１（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，７．３Ｈｚ，３Ｈ），２．５３−２．６４（ｍ，１Ｈ），２．８２−２．９７（ｍ，２Ｈ），３．０５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．７２−３．８５（ｍ，１Ｈ），４．１４−４．３４（ｍ，３Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝１２．５，６．３Ｈｚ，１Ｈ），５．５８（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．０２−６．１９（ｍ，２Ｈ），６．６７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．１４−７．２５（ｍ，３Ｈ），７．３７（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，３Ｈ），１０．８６−１１．８２（ｍ，１Ｈ）。
【０１６０】
スキーム７：（２Ｒ）−ブチル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート２５の合成
【化４３】
2020531536.tif 000045
【０１６１】
工程１：（２Ｓ）−ブチル２−（（クロロ（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート２４の合成
（Ｓ）−１−ブトキシ−１−オキソプロパン−２−アミニウム（２ｇ、１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）中で可溶化して−７８℃に冷却した。この混合物に、Ｎ２雰囲気下で、フェニルホスホロジクロリデート（１．６ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を徐々に添加し、続いてＤＩＰＥＡ（３．９ｍＬ、０．７４２ｇ／ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を１時間攪拌し、続いて室温まで温め、２時間攪拌した。その後、溶媒を除去した。乾燥Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を窒素下で添加し、得られた混合物を濾過し、濾液を窒素流減圧下で濃縮し、無色油として中間体２４を得た（２．８７７ｇ、収率８２％）。この油を、乾燥テトラヒドロフラン中１Ｍ溶液として−２０℃の冷凍庫に貯蔵した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ０．９４（ｔｄ，Ｊ＝７．４，５．４Ｈｚ，３Ｈ），１．３３−１．４５（ｍ，２Ｈ），１．４９−１．５４（ｍ，３Ｈ），１．５９−１．７０（ｍ，２Ｈ），４．０９−４．２６（ｍ，３Ｈ），４．５３−４．６７（ｍ，１Ｈ），７．２０−７．３０（ｍ，３Ｈ），７．３３−７．４１（ｍ，２Ｈ）。
【０１６２】
工程２：（２Ｓ）−ブチル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート２５の合成
化合物２２（１００ｍｇ、０．３２９ｍｍｏｌ）をピリジン（５ｍＬ）に溶解させ、溶媒を減圧下で除去した。得られた発泡体をジクロロメタン（５ｍＬ）及びＮ−メチルイミダゾール（０．１３１ｍＬ、１．６４３ｍｍｏｌ）中で可溶化した。室温のＮ２雰囲気下で、得られた混合物に、中間体２４（０．６５７ｍＬ、１Ｍ、０．６５７ｍｍｏｌ）を滴下した。５時間攪拌した後、中間体２４の別の等価物を添加し、混合物を終夜攪拌し、２０ｍＬの冷水と２０ｍＬのジクロロメタンとの混合物で反応混合物をクエンチした。得られた混合物を、ｐＨ＝４になるまでＨＣｌ  １Ｍで酸性化し、ジクロロメタンで抽出した（３ｘ５０ｍＬ）。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、化合物を含む３００ｍｇの発泡体を得た。精製は、方法Ｂを用いるＰｒｅｐ  ＨＰＬＣによって実施して、２５を産生した（３２．６ｍｇ、収率１７％）。
ＭＳ（ＥＳ−）：５８６．１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ０．８５（ｔｄ，Ｊ＝７．４，２．６Ｈｚ，３Ｈ），１．２２（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，７．３Ｈｚ，３Ｈ），１．２５−１．３３（ｍ，２Ｈ），１．４７−１．５４（ｍ，２Ｈ），２．５２−２．６２（ｍ，１Ｈ），２．８８（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），３．０５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．８３（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ），４．００（ｑｄ，Ｊ＝６．４，２．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２２（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，３Ｈ），５．５７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．１３（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．６０−６．７３（ｍ，１Ｈ），７．２０（ｂｒ  ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，３Ｈ），７．３３−７．４０（ｍ，３Ｈ），１１．００−１１．６１（ｍ，１Ｈ）。
【０１６３】
スキーム８：４−アミノ−１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン２７の合成
【化４４】
2020531536.tif 000046
【０１６４】
工程１：（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−（（ベンゾイルオキシ）メチル）−７−フルオロ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−８−イルベンゾエート２６の合成
中間体２１（６００ｍｇ、１．１７１ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２８．６ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）、及びＥｔ３Ｎ（０．２４４ｍＬ、０．７２８ｇ／ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（６０ｍＬ）中で可溶化した。得られた混合物に、ＴＰＳＣｌ（５３２ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２０時間攪拌した。その後、ＮＨ３（０．５Ｍ、ＴＨＦ中）（６０ｍＬ）を反応混合物に添加した。得られた反応混合物を３時間攪拌した。反応混合物を、ジクロロメタン（６０ｍＬ）とＮａＨＣＯ３と飽和溶液との混合物に注いだ。水層をジクロロメタン（３ｘ６０ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、カラムクロマトグラフィ（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ：１００／０〜５０／５０）上で精製して中間体２６（３５０ｍｇ、５８％）を得た。
ＭＳ（ＥＳ−）：５１０．０
【０１６５】
工程２：４−アミノ−１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン２７の合成
中間体２６（１５０ｍｇ、０．２９３ｍｍｏｌ）を室温のＮＨ３（７Ｍ、ＭｅＯＨ中）（５０ｍＬ）中で５時間攪拌した。溶媒を除去し、方法Ｃを用いたＰｒｅｐ  ＨＰＬＣによって粗生成物を精製して化合物２７を産生した（５４．８ｍｇ、６２％）。
ＭＳ（ＥＳ−）：３０２．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．３５（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．２，８．６，４．０Ｈｚ，１Ｈ），２．７４−２．９３（ｍ，２Ｈ），３．１６−３．２２（ｍ，１Ｈ），３．５６−３．６８（ｍ，２Ｈ），４．０５（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝２１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），５．７３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），６．７９（ｓ，１Ｈ），７．１１（ｓ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１６６】
スキーム９：（２Ｓ）−イソプロピル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート３１の合成
【化４５】
2020531536.tif 000047
【０１６７】
工程１：（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−８−（ベンゾイルオキシ）−５−（４−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メチル）アミノ）−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メチルベンゾエート２８の合成
中間体２６（６００ｍｇ、１．１７２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解した。得られた混合物に、４，４’−（クロロ（フェニル）メチレン）ビス（メトキシベンゼン）（１．２ｇ、３．５ｍｍｏｌ）、硝酸銀（３．４ｇ、２０ｍｍｏｌ）、及び２，３，５−トリメチルピリジン（１．２ｍＬ、０．９３１ｇ／ｍＬ、９．６ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物をＮ２雰囲気下で２時間攪拌した。その後、反応混合物を、ジクロロメタン（２０ｍＬ）と冷水（５０ｍＬ）との混合物に注いだ。水層をジクロロメタン（３ｘ２５ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、カラムクロマトグラフィ（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ：１００／０〜７０／３０）上で精製して、白色固体として中間体２８（４７０ｍｇ、４９％）を得た。
ＭＳ（ＥＳ−）：８１２．２
【０１６８】
工程２：４−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メチル）アミノ）−１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン２９の合成
中間体２８（４７０ｍｇ、０．５７７ｍｍｏｌ）をＮＨ３（７Ｍ、ＭｅＯＨ中）（１５０ｍＬ、７Ｍ、１０５０ｍｍｏｌ）で可溶化し、室温で２時間攪拌した。溶媒を除去し、粗生成物をＥｔ２Ｏ中で粉砕し、白色固体として中間体２９（３１０ｍｇ、８７％）を得た。
ＭＳ（ＥＳ−）：６０４．３
【０１６９】
工程３：（２Ｓ）−イソプロピル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−５−（４−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メチル）アミノ）−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート３０の合成
中間体２９（３１０ｍｇ、０．５１２ｍｍｏｌ）をピリジンに溶解させ、溶媒を減圧下で除去して発泡体を得た。この発泡体をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＮＭＩ（０．２０４ｍＬ、１．０３ｇ／ｍＬ、２．５５９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、室温のＮ２雰囲気下で５分間攪拌した。混合物にイソプロピル（２Ｓ）−２−［［クロロ（フェノキシ）ホスホリル］アミノ］プロパノエート８（１．０２４ｍＬ、１Ｍ、１．０２４ｍｍｏｌ）を徐々に添加して、得られた混合物を６時間攪拌した。反応混合物を冷水（５０ｍＬ）とＤＣＭ（５０ｍＬ）との混合物に注ぎ、ＨＣｌ  １Ｍの水溶液でｐＨ＝４になるまで酸性化させた。水層をＤＣＭで抽出した（３ｘ５０ｍＬ）。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。得られた粗生成物を、方法Ｂを用いたｐｒｅｐ  ＨＰＬＣによって精製した。得られた画分を凍結乾燥して中間体３０（１００ｍｇ、２２％）を提供した。
ＭＳ（ＥＳ−）：８７３．２
【０１７０】
工程４：（２Ｓ）−イソプロピル２−（（（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）アミノ）プロパノエート３１の合成
ＴＦＡ（０．０８７５ｍＬ、１．４９ｇ／ｍＬ、１．１４３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）中の中間体１９（１００ｍｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）の溶液に室温で添加した。得られた混合物を、Ｎ２雰囲気下、室温で１時間攪拌した。反応混合物をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に注ぎ、続いて溶媒を蒸発させた。粗生成物を、方法Ｂを用いたｐｒｅｐ  ＨＰＬＣによって精製した。得られた画分を凍結乾燥して化合物３１（２０ｍｇ、３１％）を提供した。
ＭＳ（ＥＳ−）：５７１．３；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．１２−１．１７（ｍ，６Ｈ），１．１８−１．２４（ｍ，３Ｈ），２．２６−２．３８（ｍ，１Ｈ），２．８３（ｓ，２Ｈ），３．０６−３．１８（ｍ，１Ｈ），３．７３−３．８５（ｍ，１Ｈ），４．０１−４．２９（ｍ，３Ｈ），４．８５（ｔｄ，Ｊ＝６．３，２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．７０（ｄｄ，Ｊ＝７．５，４．０Ｈｚ，１Ｈ），６．１２（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），７．１６−７．２４（ｍ，３Ｈ），７．３２−７．４０（ｍ，４Ｈ），７．４８−７．６５（ｍ，１Ｈ）。
【０１７１】
スキーム１０：１−（（２’Ｒ，４ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−２−（シクロペンチルオキシ）−４ａ−フルオロ−２−オキシドテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−７，２’−チエタン］−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン３５の合成
【化４６】
2020531536.tif 000048
【０１７２】
工程１：２−クロロフェニルシクロペンチルホスホクロリデート３２の合成
シクロペンタノール（１．０９６ｍＬ、０．７８６ｇ／ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）中で可溶化させ、−７８℃に冷却した。この混合物に、２−クロロフェニル−ジクロロホスフェート（１．６４ｍＬ、１．４９ｇ／ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＤＩＰＥＡ（１．７２ｍＬ、０．７５ｇ／ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応混合物を、−７８℃から室温までのＮ２雰囲気下で２０時間攪拌した。溶液をそのまま工程２で使用した。
【０１７３】
工程２：２−クロロフェニルシクロペンチル（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メチル）ホスフェート３４の合成
中間体２２（２８４ｍｇ、０．９３３ｍｍｏｌ）をピリジン（５ｍＬ）に溶解させ、溶媒を減圧下で除去して発泡体を得た。発泡体を、室温のＮ２雰囲気下でＤＣＭ（１０ｍＬ）及びＮＭＩ（０．３７２ｍＬ、１．０３ｇ／ｍＬ、４．６６６ｍｍｏｌ）に溶解させた。この混合物に、中間体３２（２．２４ｍＬ、０．５Ｍ、１．１２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。６時間後、反応混合物を、ＤＣＭ（２０ｍＬ）と冷水（２０ｍＬ）との混合物に連続的に注ぎ、ｐＨ＝４になるまでＨＣｌ  １Ｍ水溶液で酸性化させ、ＤＣＭで抽出した（３ｘ５０ｍＬ）。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濃縮し、粗生成物を、溶離剤としてＤＣＭ／ＭｅＯＨを用いたカラムクロマトグラフィによって精製して、白色固体としての中間体３４（３５０ｍｇ、６７％）を得た。
ＭＳ（ＥＳ−）：５６１．１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．５１−１．７１（ｍ，４Ｈ），１．７７（ｄｔ，Ｊ＝７．３，３．９Ｈｚ，４Ｈ），２．５６−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．８３−２．９４（ｍ，２Ｈ），２．９４−３．０４（ｍ，１Ｈ），４．２６−４．４８（ｍ，３Ｈ），５．００（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ），５．５６−５．６４（ｍ，１Ｈ），６．１３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．６２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．２２−７．２８（ｍ，１Ｈ），７．３２−７．５２（ｍ，３Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），１１．５５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１７４】
工程３：１−（（２’Ｒ，４ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−２−（シクロペンチルオキシ）−４ａ−フルオロ−２−オキシドテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−７，２’−チエタン］−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン３５の合成
中間体３４（３００ｍｇ、０．５３３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（７ｍＬ）中に可溶化させ、室温のＮ２雰囲気下でｔＢｕＯＫ（１１９．６ｍｇ、１．０６６ｍｍｏｌ）を添加した。６時間後、反応混合物を、冷水（２０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）との混合物に連続的に注ぎ、ｐＨ＝３になるまでＨＣｌ  １Ｍ水溶液で酸性化させ、ＥｔＯＡｃで抽出した（３ｘ５０ｍＬ）。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濃縮し、方法Ｂを用いたｐｒｅｐ  ＨＰＬＣによって粗生成物を精製した。得られた画分を凍結乾燥して３５（４６．３ｍｇ、２０％）を提供した。
ＭＳ（ＥＳ−）：４３３．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．６１（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），１．７４（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），１．８８（ｂｒ  ｓ，４Ｈ），２．６７−２．９０（ｍ，１Ｈ），２．９６（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ），２．９８−３．０９（ｍ，２Ｈ），４．２６−４．３９（ｍ，１Ｈ），４．５５−４．７１（ｍ，１Ｈ），５．００（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．４６（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１９．８Ｈｚ，１Ｈ），５．７８（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），６．３９（ｓ，１Ｈ），８．０２（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），１１．６２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１７５】
スキーム１１：４−クロロフェニル（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メチル）イソプロピルホスフェート３７の合成
【化４７】
2020531536.tif 000049
【０１７６】
１−クロロ−４−ジクロロホスホリルオキシ−ベンゼン（１．６２８ｍＬ、１．５０８ｇ／ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２５ｍＬ）に溶解させ、混合物をＮ２雰囲気下で−１５℃に冷却した。この混合物に、イソプロパノール（０．７６５ｍＬ、０．７８６ｇ／ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を徐々に添加し、続いてＤＩＰＥＡ（１．７２３ｍＬ、０．７５ｇ／ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を−１５℃から室温まで２０時間攪拌してその場で試薬（３６）を得た。
【０１７７】
化合物２２（１００ｍｇ、０．３２９ｍｍｏｌ）をピリジン（５ｍＬ）に溶解させ、溶媒を減圧下で除去した。この発泡体をＤＣＭ（５ｍＬ）中に置き、ＮＭＩ（０．１３１ｍＬ、１．０３ｇ／ｍＬ、１．６４３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で５分間攪拌した。３６（１．２３２ｍＬ、０．４Ｍ、０．４９３ｍｍｏｌ）を含有する混合物を添加して、反応混合物を室温のＮ２雰囲気下で４時間攪拌した。反応混合物を、冷水（２０ｍＬ）とＤＣＭ（２０ｍＬ）との混合物に注いだ。水層をＤＣＭで抽出した（３ｘ５０ｍＬ）。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。得られた粗生成物を、方法Ｅを用いたＰｒｅｐ  ＨＰＬＣによって精製した。得られた画分を凍結乾燥して、白色固体としての化合物３７（５０ｍｇ、収率２８％）を提供した。
ＭＳ（ＥＳ−）：５３５．１；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．２７（ｄｄ，Ｊ＝９．０，６．１Ｈｚ，６Ｈ），２．５３−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．８２−２．９４（ｍ，２Ｈ），２．９４−３．０４（ｍ，１Ｈ），４．２２−４．４３（ｍ，３Ｈ），４．７０（ｄｑｄ，Ｊ＝１２．６，６．３，６．３，６．３，１．８Ｈｚ，１Ｈ），５．６２（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．１１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．６１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．２０−７．２７（ｍ，２Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，３Ｈ），１１．５０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１７８】
スキーム１２：１−（（２Ｒ，２’Ｒ，４ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−２−（シクロブチルアミノ）−４ａ−フルオロ−２−オキシドテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−７，２’−チエタン］−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン４０ａ、及び１−（（２Ｓ，２’Ｒ，４ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−２−（シクロブチルアミノ）−４ａ−フルオロ−２−オキシドテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−７，２’−チエタン］−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン４０ｂの合成
【化４８】
2020531536.tif 000050
【０１７９】
工程１：４−クロロフェニルシクロブチルホスホルアミドクロリデート３８の合成
シクロブタンアミン（５ｍＬ、０．８３ｇ／ｍＬ、５８．３５ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（５０ｍＬ、１．３２６ｇ／ｍＬ、７８０．６２２ｍｍｏｌ）に溶解させ、得られた混合物を−７８℃で１０分間攪拌し、続いて４−クロロフェニルホスホロジクロリデート（９．４９７ｍＬ、１．５０８ｇ／ｍＬ、５８．３５ｍｍｏｌ）を滴下した（白色沈殿物）。得られた混合物を−７８℃で１０分間攪拌し、続いてＤＩＰＥＡ［７０８７−６８−５］（１１．１８ｍＬ、０．７４２ｇ／ｍＬ、６４．１８５ｍｍｏｌ）を滴下し、透明な溶液が生じた。得られた混合物を−７８℃で２時間攪拌し、次に室温で２時間攪拌した。減圧下で溶媒を除去した。
【０１８０】
乾燥Ｅｔ２Ｏ（約５０ｍＬ）を添加し、形成された沈殿物を濾別して、窒素流下で乾燥Ｅｔ２Ｏを用いて２回洗浄した。濾液を乾燥するまで蒸発させ、黄色の無色油（１８．７ｇ）を分離した。これをＴＨＦ（６６．８ｍＬ）に溶解させ、ＴＨＦ中の中間体３８の１Ｍ溶液として−１８℃の冷凍庫に保管した。
【０１８１】
工程２：４−クロロフェニル（（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−フルオロ−８−ヒドロキシ−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−７−イル）メチル）シクロブチルホスホルアミデート３９の合成
出発物質（４００ｍｇ、１．３１４ｍｍｏｌ）をピリジン（１０ｍＬ）中に溶解させ、室温で３０時間攪拌し、続いて乾燥するまで蒸発させた。
【０１８２】
乾燥ジクロロメタン（５０ｍＬ、１．３２６ｇ／ｍＬ、７８０．６２２ｍｍｏｌ）中のヌクレオシド２２（４００ｍｇ、１．３１４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、２２が全て溶解するまでメチルイミダゾール（１０７９．２６８ｍｇ、１３．１４５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を、アルゴン雰囲気下、乾燥ＴＨＦ中のホスホクロリデート３８（５５２．２６６ｍｇ、１．９７２ｍｍｏｌ）１Ｍ溶液で処理した。反応混合物を室温で終夜攪拌し、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）に注いだ。ｐＨ＝４になるまでＨＣｌ  １Ｍ溶液を添加することによって得られた混合物を酸性化した。得られた混合物をジクロロメタンで抽出し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濃縮した。残滓をカラムクロマトグラフィによって精製して、白色固体として３９を産生した（４３０ｍｇ、３８％）。
ｍ／ｚ＝５４９（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．３２−１．５６（ｍ，２Ｈ），１．７２−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．９７−２．１４（ｍ，２Ｈ），２．５４−２．６５（ｍ，１Ｈ），２．７９−２．９５（ｍ，２Ｈ），２．９６−３．１１（ｍ，１Ｈ），３．４７−３．６６（ｍ，１Ｈ），４．０８−４．３５（ｍ，３Ｈ），５．５３−５．６７（ｍ，１Ｈ），５．９２−６．１８（ｍ，２Ｈ），６．５８−６．７３（ｍ，１Ｈ），７．１５−７．２８（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．６１（ｍ，３Ｈ），１１．３８−１１．６２（ｍ，１Ｈ）
【０１８３】
工程３：１−（（２Ｒ，２’Ｒ，４ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−２−（シクロブチルアミノ）−４ａ−フルオロ−２−オキシドテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−７，２’−チエタン］−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン４０ａ、及び１−（（２Ｓ，２’Ｒ，４ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−２−（シクロブチルアミノ）−４ａ−フルオロ−２−オキシドテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｄ］［１，３，２］ジオキサホスフィニン−７，２’−チエタン］−６−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン４０ｂの合成
中間体３９（１３０ｍｇ、０．２３７ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（５ｍＬ、１．０９２ｇ／ｍＬ、６９．８７９ｍｍｏｌ）に溶解させ、室温で、テルブトキシドカリウム（０．０３９９ｇ、０．３５６ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物を室温で終夜攪拌した。これを、ＨＰＬＣを用いて精製した。水層を凍結乾燥し、化合物を白色粉末４０ａ（２２．８ｍｇ、２３％）及び４０ｂ（１８ｍｇ、１８％）として分離した。ｍ／ｚ＝４２０（Ｍ＋Ｈ）＋；１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，アセトン，−１１℃）δｐｐｍ１．５０−１．６６（ｍ，４Ｈ），２．０４−２．０７（ｍ，４Ｈ），２．２０−２．２６（ｍ，２Ｈ），２．３２−２．４０（ｍ，２Ｈ），２．８６（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．１，８．７，４．７Ｈｚ，１Ｈ），２．９４−３．０４（ｍ，３Ｈ），３．０４−３．２２（ｍ，４Ｈ），３．６９−３．８１（ｍ，２Ｈ），４．３８−４．４７（ｍ，２Ｈ），４．５２（ｄｄｄ，Ｊ＝２２．２，１２．０，９．４Ｈｚ，１Ｈ），４．８３（ｄｄ，Ｊ＝３１．０，１１．３Ｈｚ，１Ｈ），４．９６（ｄ，Ｊ＝１８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．４９（ｂｒ  ｄｄ，Ｊ＝１５．０，９．８Ｈｚ，１Ｈ），５．５５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，９．９Ｈｚ，１Ｈ），５．６１（ｄｄ，Ｊ＝１９．９，１．９Ｈｚ，１Ｈ），５．７３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），５．８３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．２５（ｓ，１Ｈ），７．０５（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），８．０２（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）
【０１８４】
スキーム１３：１−［（４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ，８Ｒ）−６−アジド−５−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）−７−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−８−イル］ピリミジン−２，４−ジオン４４の合成
【化４９】
2020531536.tif 000051
【０１８５】
工程１：１−（（４Ｒ，５Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−メチレン−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン１９の合成
中間体１８（５．２９ｇ、１３．３５２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５０ｍＬ）に可溶化させ、６０℃のＴＨＦ（１００ｍＬ）中ＤＢＵ（３．１７４ｍＬ、１．０１９ｇ／ｍＬ、２１．２４５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に１時間かけて滴下した。得られた混合物を６０℃で５時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却し、水（２００ｍＬ）に注いだ。１ＭのＨＣｌ溶液で混合物をｐＨ＝４になるまで酸性化させた。ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）を用いて有機層を３回抽出し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、乾燥するまで濃縮した。固体をＤＣＭ中で粉砕し、濾過して、白色固体として中間体１９を得た（２．６８ｇ、収率７５％）。
ＭＳ（ＥＳ−）：２６７．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．５４−２．６８（ｍ，１Ｈ），２．７２−２．８４（ｍ，１Ｈ），２．９１（ｔｄ，Ｊ＝８．５，５．７Ｈｚ，１Ｈ），２．９４−３．０５（ｍ，１Ｈ），４．２６（ｓ，１Ｈ），４．４５（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ），５．６６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．０６（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），６．５１（ｓ，１Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），１１．５４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１８６】
工程２：１−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−７−アジド−８−ヒドロキシ−７−（ヨードメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン４１の合成
Ｎ−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジエチルエタンアミニウムクロリド（ＢｎＥｔ３ＮＣｌ）（４．５８５ｇ、２０．１２７ｍｍｏｌ）及びアジドナトリウム（ＮａＮ３）（１．３０８ｇ、２０．１２７ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（３０ｍＬ）中に懸濁させ、１６時間攪拌した。混合物を、ＴＨＦ（６０ｍＬ）中の中間体１９（９００ｍｇ、３．３５５ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（５．４ｍＬ、０．９１７ｇ／ｍＬ、４８．９５６ｍｍｏｌ）の溶液に濾過した。反応混合物を０℃に冷却して、ＴＨＦ（１８ｍＬ）中のヨウ素（５．１１ｇ、２０．１２７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で５時間攪拌した。Ｎ−アセチル−システイン（２ｇ）を、ガスが発生しなくなるまで混合物に添加した。飽和水性Ｎａ２Ｓ２Ｏ３を、明黄色溶液が発生するまで混合物に添加した。溶液を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）中で希釈した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させた。溶媒を除去し、溶離剤としてヘプタン／ＥｔＯＡｃを用いたカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して、中間体４１（１．４９ｇ、収率９９％）を得た。
ＭＳ（ＥＳ−）：４３６．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．５２−２．６１（ｍ，１Ｈ），２．７６−２．９８（ｍ，３Ｈ），３．７５（ｓ，２Ｈ），４．３４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．６８（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．４７（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４３−７．５７（ｍ，１Ｈ），１１．５７（ｓ，１Ｈ）。
【０１８７】
工程３：（４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ，８Ｒ）−７−アジド５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−７−（ヨードメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−８−イルベンゾエート４２の合成
中間体４１（１．４９ｇ、３．４０８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（４５ｍＬ）に溶解し、混合物を０℃に冷却した。Ｅｔ３Ｎ（２．３６８ｍＬ、０．７２８ｇ／ｍＬ、１７．０４ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（８．３２７ｍｇ、０．０６８２ｍｍｏｌ）を混合物に添加し、続いて塩化ベンゾイル（０．４７５ｍＬ、１．２１１ｇ／ｍＬ、４．０８９ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で１．５時間攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中で希釈した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させて濃縮した。溶離剤としてヘプタン／ＥｔＯＡｃを用いたカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製して、白色発泡体として中間体４２を得た（１．５ｇ、収率８１％）。
ＭＳ（ＥＳ−）：５４０．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．７３−２．８４（ｍ，２Ｈ），２．８４−２．９４（ｍ，１Ｈ），３．０２−３．１２（ｍ，１Ｈ），３．７９（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），３．９２（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），５．７７（ｄｄ，Ｊ＝８．０，２．１Ｈｚ，１Ｈ），６．０２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．５０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．６３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．７２−７．８５（ｍ，２Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），１１．６３（ｓ，１Ｈ）。
【０１８８】
工程４：［（４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ，８Ｒ）−６−アジド−５−ベンゾイルオキシ−８−（２，４−ジオキソピリミジン−１−イル）−７−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−６−イル］メチルベンゾエート４３の合成
中間体４２（１．５ｇ、２．７７１ｍｍｏｌ）及びＢｚＯＮａ（１．９９７ｇ、１３．８５５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（８０ｍＬ）中に懸濁させ、続いて１５−クラウン−５（５．４９９ｍＬ、１．１１ｇ／ｍＬ、２７．７１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１２０℃で終夜攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中で希釈し、Ｄｅｃａｌｉｔｅの小型床上で濾過し、水で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を除去した。溶離剤としてヘプタン／ＥｔＯＡｃを用いたカラムクロマトグラフィによって粗生成物を精製し、ＬＣ−ＭＳで測定して純度６３％の明黄色固体として中間体４３を得た（７００ｍｇ、収率４７％）。化合物をそのまま使用した。
ＭＳ（ＥＳ−）：５３４．１
【０１８９】
工程５：（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−７−アジド−７−（（ベンゾイルオキシ）メチル）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−８−イルベンゾエート４４の合成
中間体４３（７００ｍｇ、１．３０７ｍｍｏｌ）をＮＨ３（７Ｍ、ＭｅＯＨ中）（１５０ｍＬ、７Ｍ、１０５０ｍｍｏｌ）に溶解し、混合物を室温で終夜攪拌した。反応混合物を乾燥するまで濃縮し、固体をＥｔ２Ｏ中で粉砕して、明黄色固体として１−［（４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ，８Ｒ）−６−アジド−５−ヒドロキシ−６−（ヒドロキシメチル）−７−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−８−イル］ピリミジン−２，４−ジオン４４（３６０ｍｇ、収率８４％）を得た。
ＭＳ（ＥＳ−）：３２６．０；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．３８−２．４８（ｍ，１Ｈ），２．７８−２．９２（ｍ，２Ｈ），３．０２−３．１０（ｍ，１Ｈ），３．６９−３．７８（ｍ，２Ｈ），４．１１（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），５．６７（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），５．７６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．９３（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），６．６０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），１１．３１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１９０】
スキーム１４：イソプロピル（２Ｒ）−２−［［［（４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ，８Ｒ）−６−アジド−８−（２，４−ジオキソピリミジン−１−イル）−５−ヒドロキシ−７−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−６−イル］メトキシ−フェノキシ−ホスホリル］アミノ］プロパノエート４５の合成
【化５０】
2020531536.tif 000052
【０１９１】
中間体４４（２００ｍｇ、０．６１１ｍｍｏｌ）を乾燥ピリジン（５ｍＬ）に溶解させ、溶媒を減圧下で除去して発泡体を得た。発泡体をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解させ、（０．２４４ｍＬ、１．０３ｇ／ｍＬ、３．０５５ｍｍｏｌ）のＮ−メチルイミダゾールを添加した。反応混合物を、室温のＮ２雰囲気下で５分間攪拌した。イソプロピル（２Ｒ）−２−［［クロロ（フェノキシ）ホスホリル］アミノ］プロパノエート８（１Ｍ、ＴＨＦ中）（０．９１７ｍＬ、１Ｍ、０．９１７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温のＮ２雰囲気下で２０時間攪拌した。反応混合物を、冷水（２０ｍＬ）及びＤＣＭ（２０ｍＬ）に注いだ。水層をＤＣＭで抽出した（３ｘ５０ｍＬ）。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。得られた粗生成物を、方法Ｅを用いたＰｒｅｐ  ＨＰＬＣによって精製した。得られた画分を凍結乾燥して、イソプロピル（２Ｒ）−２−［［［（４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ，８Ｒ）−６−アジド−８−（２，４−ジオキソピリミジン−１−イル）−５−ヒドロキシ−７−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−６−イル］メトキシ−フェノキシ−ホスホリル］アミノ］プロパノエート４５（８０ｍｇ、収率２２％）を提供した。
ＭＳ（ＥＳ−）：５９５．２；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．１４（ｄｄ，Ｊ＝６．２，２．４Ｈｚ，６Ｈ），１．２２（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ），２．５２−２．６０（ｍ，１Ｈ），２．８０−２．９０（ｍ，２Ｈ），２．９５−３．０４（ｍ，１Ｈ），３．７２−３．８４（ｍ，１Ｈ），４．２１−４．３８（ｍ，３Ｈ），４．８４（ｑｕｉｎｄ，Ｊ＝６．３，６．３，６．３，６．３，４．０Ｈｚ，１Ｈ），５．６０（ｄｄ，Ｊ＝７．９，３．３Ｈｚ，１Ｈ），６．０６−６．２２（ｍ，２Ｈ），６．４９−６．６２（ｍ，１Ｈ），７．１５−７．２４（ｍ，３Ｈ），７．３３−７．４０（ｍ，２Ｈ），７．４７（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），１１．５２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）。
【０１９２】
スキーム１５：２−アミノ−９−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）−１Ｈ−プリン−６（９Ｈ）−オン５７の合成
【化５１】
2020531536.tif 000053
【０１９３】
工程１：２−アミノ−９−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＳ）−９−ヒドロキシ−２，２，４，４−テトライソプロピルテトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−８−イル）−１Ｈ−プリン−６（９Ｈ）−オン４７の合成
中間体４６（１００ｇ、３５３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）及びＴＩＰＳＣｌ（１３３．６ｇ、４２３．６ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ）を室温でＤＭＦ（５００ｍＬ）に溶解した。２０℃でイミダゾール（７２．１ｇ、１ｍｏｌ、３ｅｑ）を一度に添加した。得られた溶液を、室温の窒素下で１６時間攪拌した。反応混合物を氷水（２００ｍＬ）中に注ぎ込んだ。得られた沈殿物を濾過し、水で数回洗浄して、真空下で乾燥させた。化合物４７（１３３ｇ、粗生成物）を白色固体として回収した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：５２６
【０１９４】
工程２：２−アミノ−９−（（６ａＲ，８Ｒ，９ａＲ）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−オキソテトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−８−イル）−１Ｈ−プリン−６（９Ｈ）−オン４８の合成
中間体４７（５０ｇ、９５．２ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を、２０℃の窒素下でＤＣＭ（５００ｍＬ）中に溶解した。ＤＭＰ（８０ｇ、１９０ｍｍｏｌ、２ｅｑ）を０℃で添加した。得られた混合物を２０℃の窒素下で１６時間攪拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３の水溶液（１００ｍＬ）及びＮａ２ＳＯ３の水溶液（１００ｍＬ）に注いだ。
固体を濾別し、濾液をＤＣＭで抽出し（２ｘ１００ｍＬ）、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で濃縮して、暗赤色固体として化合物４８（７０ｇ、粗生成物）を産生した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：５２４
【０１９５】
工程３：（Ｚ）−エチル２−（（６ａＲ，８Ｒ，９ａＳ）−８−（２−アミノ−６−オキソ−１Ｈ−プリン−９（６Ｈ）−イル）−２，２，４，４−テトライソプロピル−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９（６ａＨ，８Ｈ，９ａＨ）−イリデン）アセテート４９の合成
中間体４８（７０ｇ、１３３．８ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を、２０℃の窒素下でＤＣＭ（１Ｌ）中に溶解した。
【０１９６】
エチル２−（トリフェニル−ホスファニリデン）アセテート（３２．６ｇ、９３．７ｍｏｌ、０．７ｅｑ）を２０℃で一度に添加した。得られた混合物を２０℃の窒素下で１６時間攪拌した。
【０１９７】
反応混合物を濾過し、濃縮して、残滓をカラムクロマトグラフィ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００／１〜２０：１）によって精製して、白色固体として化合物４９（３９ｇ、粗生成物）を産生した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：５９５
【０１９８】
工程４：エチル２−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−８−（２−アミノ−６−オキソ−１Ｈ−プリン−９（６Ｈ）−イル）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−（（４−メトキシベンジル）チオ）テトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９−イル）アセテート５０の合成
（４−メトキシフェニル）メタンチオール（３８．４ｇ、２４９．２ｍｍｏｌ、３．７ｅｑ）を２０℃でＴＨＦ（５００ｍＬ）に溶解した。得られた溶液を−４０℃で冷却し、続いてＫＨＭＤＳ（１Ｍ、７４．１ｍＬ、１．１ｅｑ）を−４０℃で滴下した。添加中、黄色の溶液は徐々に白色の粘性液体に転じた。添加後、反応混合物を０．５時間攪拌し、続いてＴＨＦ（１Ｌ）に溶解した中間体４９（４０ｇ、６７．３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を、−４０℃で溶液に滴下した。反応混合物を徐々に２０℃まで温め、続いて２時間攪拌し続けた。反応混合物を、連続的に、水性ＨＣｌ（２００ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し（２ｘ２００ｍＬ）、有機層を水性ＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）及びブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で蒸発させた。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１００／０〜９５／５）で精製して、無色油として化合物５０（１２．５ｇ、粗生成物）を産生した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：７４９
【０１９９】
工程５：エチル２−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−８−（２−イソブチルアミド−６−オキソ−１Ｈ−プリン−９（６Ｈ）−イル）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−（（４−メトキシベンジル）チオ）テトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９−イル）アセテート５１の合成
中間体５０（２５ｇ、３３．４ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を２０℃でピリジン（２００ｍＬ）に溶解し、続いて無水イソ酪酸（１５．８ｇ、１００ｍｍｏｌ、３ｅｑ）を添加した。得られた混合物を２０℃で攪拌し、続いてＴＥＡ（１６．９ｇ、１６７．１ｍｍｏｌ、５ｅｑ）を徐々に添加した。続いて反応混合物を８０℃で２時間攪拌し、続いて室温まで冷却して、ＮＨ４Ｃｌ（２００ｍＬ）の水溶液を添加することによりクエンチした。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（２ｘ２００ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で蒸発させた。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１〜１／１）で精製し、褐色油としての化合物５１（１１．８ｇ、粗生成物）を産生した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：８１９
【０２００】
工程６：合成Ｎ−（９−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−９−（２−ヒドロキシエチル）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−（（４−メトキシベンジル）チオ）テトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−８−イル）−６−オキソ−６，９−ジヒドロ−１Ｈ−プリン−２−イル）イソブチルアミド５２
２０℃の窒素下で中間体５１（３ｇ、３．６ｍｍｏｌ、１ｅｑ）をＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解させた。得られた溶液を０℃に冷却し、続いて０℃でＬｉＡｌＨ４（４１７．４ｍｇ、１１ｍｍｏｌ、３ｅｑ）を徐々に添加した。反応混合物を２０℃で１時間攪拌した。反応を、連続的に、水性ＨＣｌ（３０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し（２ｘ３０ｍＬ）、水性ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）及びブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空中で蒸発させた。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１００／１〜５０／１）により精製した。化合物５２（２４０ｍｇ、１０％収率）を黄色固体として分離した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：７７７
【０２０１】
工程７：２−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−８−（２−イソブチルアミド−６−オキソ−１Ｈ−プリン−９（６Ｈ）−イル）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−（（４−メトキシベンジル）チオ）テトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９−イル）メタンスルホン酸エチル５３の合成
２０℃で中間体５２（１．６ｇ、２ｍｍｏｌ、１ｅｑ）をピリジン（２０ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を０℃に冷却し、続いてＭｓＣｌ（０．３５ｇ、３ｍｍｏｌ、１．５ｅｑ）を徐々に添加した。続いて、得られた混合物を２０℃で１２時間攪拌した。反応混合物を、連続的に、水（１０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し（２ｘ１０ｍＬ）、有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を蒸発させた。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１００／１〜３０／１）で精製し、黄色油としての化合物５３（１．６ｇ、９０％収率）を産生した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：８５４
【０２０２】
工程８：２−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−８−（２−イソブチルアミド−６−オキソ−１Ｈ−プリン−９（６Ｈ）−イル）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−メルカプトテトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９−イル）メタンスルホン酸エチル５４の合成
２５℃の窒素下で中間体５３（１．６ｇ、１．８ｍｍｏｌ、１ｅｑ）をＴＦＡ（１．５ｍＬ）に溶解させた。得られた溶液を０℃に冷却し、続いて酢酸水銀（Ｈｇ（ＯＡｃ）２）（１．１ｇ、３．７ｍｍｏｌ、２ｅｑ）及びフェノール（０．８７ｇ、９．３ｍｍｏｌ、５ｅｑ）を徐々に添加した。得られた暗赤色溶液を０℃で１時間攪拌した。続いて、１，４−ジメルカプトブタン−２，３−ジオール（ＤＴＴ）（０．５７ｇ、３．７ｍｍｏｌ、２ｅｑ）を０℃で添加した。
【０２０３】
得られた混合物を１０分間攪拌し、ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で洗浄した。
【０２０４】
有機層を水と混合し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液を添加して溶液のｐＨをｐＨ約７に調整した。得られた混合物を、連続的に、ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、ＥｔＯＡｃで抽出して（２ｘ３０ｍＬ）、２５℃の真空中で蒸発させた。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１〜３０：１）で精製し、褐色油としての化合物５４（２ｇ、粗生成物）を産生した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：７３４
【０２０５】
工程９：Ｎ−（６−オキソ−９−（（２’Ｒ，６ａＲ，８Ｒ，９ａＲ）−２，２，４，４−テトライソプロピルテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９，２’−チエタン］−８−イル）−６，９−ジヒドロ−１Ｈ−プリン−２−イル）イソブチルアミド５５の合成
２０℃で中間体５４（２ｇ、２．７ｍｍｏｌ、１ｅｑ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を０℃に冷却し、続いて０℃でＮａＨ（０．１６ｇ、４ｍｍｏｌ、１．５ｅｑ）を徐々に添加した。反応混合物（白色混濁液）を２０℃で１６時間攪拌した。混合物を氷水溶液に注ぎ、続いてＨＣｌ  １Ｍ水溶液（２０ｍＬ）でクエンチした。得られた混合物を、連続的に、ＥｔＯＡｃ（２ｘ２０ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、蒸発させた。得られた残滓をカラムクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：１００／０〜９５／５）で精製し、黄色油としての化合物５５（２００ｍｇ、９．５％収率／２工程）を産生した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：６３７
【０２０６】
工程１０：２−アミノ−９−（（２’Ｒ，６ａＲ，８Ｒ，９ａＲ）−２，２，４，４−テトライソプロピルテトラヒドロスピロ［フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９，２’−チエタン］−８−イル）−１Ｈ−プリン−６（９Ｈ）−オン５６の合成
中間体５５（１６０ｍｇ、２５０．８ｕｍｏｌ、１ｅｑ）を窒素下で封管中に配置し、２０℃でＭｅＯＨ／ＮＨ３（４ｍＬ）を添加した。得られた溶液を１１０℃で１６時間攪拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、黄色油としての化合物１６（１２０ｍｇ、粗生成物）を産生した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：５６８
【０２０７】
工程１１：２−アミノ−９−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）−１Ｈ−プリン−６（９Ｈ）−オン５７の合成
中間体５６（１２０ｍｇ、２１１μｍｏｌ、１ｅｑ）を２０℃の窒素下でＭｅＯＨ（５ｍＬ）中に溶解させ、続いてＮＨ４Ｆ（２３．５ｍｇ、６３３μｍｏｌ、３ｅｑ）を添加した。反応混合物を５０℃で１６時間攪拌し、続いてこれを濃縮した。得られた残滓をｐｒｅｐ  ＨＰＬＣで精製して、白色固体としての化合物５７を産生した（２０ｍｇ、２９％収率）。
ＭＳ（ＥＳ＋）：３２６；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ７．９３（ｓ，１Ｈ），６．１９（ｓ，１Ｈ），４．４３（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），３．７６−３．７４（ｍ，２Ｈ），３．７４−３．７３（ｍ，１Ｈ），３．６７−３．６５（ｍ，１Ｈ），２．９０−２．８７（ｍ，２Ｈ），２．７６−２．７３（ｍ，１Ｈ）。
【０２０８】
スキーム１６：（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−５−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−８−オール６７の合成
【化５２】
2020531536.tif 000054
【０２０９】
工程１：（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＳ）−８−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−２，２，４，４−テトライソプロピルテトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９−オール５８
室温の乾燥ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のアデノシン（２０ｇ、７４．８３８ｍｍｏｌ）とイミダゾール（７．６４２ｇ、１１２．２５７ｍｍｏｌ）との溶液に、窒素雰囲気下で１，３−ジクロロ−１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサン（２６．３３５ｍＬ、０．９８６ｇ／ｍＬ、８２．３２２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２時間攪拌した。
【０２１０】
混合物を、氷と水との混合物（２００ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した（２ｘ３００ｍＬ）。有機層を、連続的にブラインで洗浄し（４ｘ３００ｍＬ）、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、白色発泡体としての粗生成物中間体５８（４１．３ｇ）を得、これをそのまま次の工程で使用した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．０１−１．０９（ｍ，２８Ｈ），３．９１−３．９６（ｍ，１Ｈ），４．００（ｄｔ，Ｊ＝８．５，２．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０４（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５２（ｔ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，１Ｈ），４．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．５，５．２Ｈｚ，１Ｈ），５．５９（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），５．８７（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），７．２９（ｓ，２Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ）
ＭＳ（ＥＳ＋）：５６０．３，
【０２１１】
工程２：Ｎ−（９−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＳ）−９−ヒドロキシ−２，２，４，４−テトライソプロピルテトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−８−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）−４−メトキシ−Ｎ−（４−メトキシベンゾイル）ベンズアミド５９
乾燥ピリジン（１５０ｍＬ）中の粗生成物中間体５８（２０．５ｇ、３６．１９４ｍｍｏｌ）の溶液に、２０℃の窒素雰囲気下でＴＭＳＣｌ（１９．４３ｍＬ、０．８５ｇ／ｍＬ、１５２．０１５ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１時間３０分攪拌した後、パラメトキシベンゾイルクロリド（２４．６９８ｇ、１４４．７７６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で終夜攪拌した。反応混合物を氷浴で冷却して１０ｍＬの水を添加した。５分後、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（２００ｍＬ）を添加し、混合物を４０℃で終夜攪拌した。
【０２１２】
得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した（３ｘ５００ｍＬ）。有機層を連続的に組み合わせ、ＨＣｌ  １Ｍ水溶液（２ｘ５００ｍＬ）、ブライン（３ｘ５００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色固体としての粗生成物中間体５９（３９．１８ｇ）を得た。
ＭＳ（ＥＳ＋）：７７８．５，
【０２１３】
工程３：４−メトキシ−Ｎ−（４−メトキシベンゾイル）−Ｎ−（９−（（６ａＲ，８Ｒ，９ａＲ）−２，２，４，４−テトライソプロピル−９−オキソテトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−８−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド６０
乾燥ジクロロメタン（４００ｍＬ）中の粗生成物中間体５９（３８．５ｇ、３５．３８１ｍｍｏｌ）の溶液に、室温の窒素雰囲気下でデス・マーチン・ペルヨージナン（４５．０２１ｇ、１０６．１４４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で終夜攪拌した。
【０２１４】
次に、ジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、水（２００ｍＬ）で洗浄し、水層をＤＣＭ（２００ｍＬ）で抽出した。有機層を連続的に組み合わせ、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液（２００ｍＬ）、ブライン（２×２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。
【０２１５】
粗生成物残滓をシリカゲルクロマトグラフィカラム（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ、１０／０〜６／４）で精製して、白色発泡体としての中間体６０を得た（１７．１１ｇ、２２．０４ｍｍｏｌ、３工程で６３％）。中間体６０は、ケトン、及びケトン水和物として得られ、そのどちらも以下のウィッティヒ反応において反応性である。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ０．９９−１．１９（ｍ，２８Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，６Ｈ），３．８２−３．８５（ｍ，１Ｈ），３．９５−４．０６（ｍ，２Ｈ），５．３６（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ），６．３２（ｓ，１Ｈ），６．９８−７．０３（ｍ，４Ｈ），７．７１−７．７６（ｍ，４Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｓ，１Ｈ）
ＭＳ（ＥＳ＋）：７７６．３，
【０２１６】
工程４：エチル２−（（６ａＲ，８Ｒ，９ａＳ）−２，２，４，４−テトライソプロピル−８−（６−（４−メトキシ−Ｎ−（４−メトキシベンゾイル）ベンズアミド）−９Ｈ−プリン−９−イル）ジヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９（８Ｈ）−イリデン）アセテート６１
Ｍｅ−ＴＨＦ（２５０ｍＬ）中のトリエチルホスホノアセテートの溶液（４．４０４ｍＬ、１．１３ｇ／ｍＬ、２２．１９７ｍｍｏｌ）に、ｔｅｒｔ−ブトキシドカリウム（２．８７４ｇ、２５．６１２ｍｍｏｌ）を−１０℃〜−５℃で添加し、混合物を３０分間攪拌した。この混合物に、Ｍｅ−ＴＨＦ（２５０ｍＬ）中の中間体６０（１３．２５ｇ、１７．０７５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下し、これを室温まで温め、１時間攪拌した。
【０２１７】
水を添加し（１００ｍＬ）、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した（３ｘ２００ｍＬ）。有機層を組み合わせ、ブラインで洗浄し（２×２００ｍＬ）、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残滓をＤＣＭ中に溶解させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（ｈｅｐｔ／ＥｔＯＡｃ、９／１〜６／４）によって精製して、白色発泡体としての中間体６１を得た（１３．０３ｇ、１５．４ｍｍｏｌ、Ｚ／Ｅ混合物、９０％）。
Ｚ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．００−１．２８（ｍ，３１Ｈ），３．７３−３．８６（ｍ，６Ｈ），３．９６−４．１９（ｍ，５Ｈ），５．７５−５．８２（ｍ，１Ｈ），５．９８−６．０５（ｍ，１Ｈ），６．９４−７．０４（ｍ，５Ｈ），７．７０−７．７８（ｍ，４Ｈ），８．６５（ｓ，１Ｈ），８．６６−８．７０（ｍ，１Ｈ）
Ｅ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．００−１．３０（ｍ，３１Ｈ），３．７４−３．８５（ｍ，６Ｈ），３．９４−４．１８（ｍ，５Ｈ），５．７５−５．７９（ｍ，１Ｈ），６．０２（ｔ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９７−７．０２（ｍ，５Ｈ），７．７１−７．７６（ｍ，４Ｈ），８．６４（ｓ，１Ｈ），８．６８（ｓ，１Ｈ）
ＭＳ（ＥＳ＋）：８４６．５，
【０２１８】
工程５：エチル２−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−９−（（２−シアノエチル）チオ）−２，２，４，４−テトライソプロピル−８−（６−（４−メトキシベンズアミド）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９−イル）アセテート６２
乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の３−メルカプトプロピオノニトリル（３．６０５ｇ、４１．３６６ｍｍｏｌ）の溶液にＮａＨ（鉱油中６０％分散体）（１．９８５ｇ、４９．６４ｍｍｏｌ）を０℃の窒素雰囲気下で添加し、混合物を３０分間攪拌した。この混合物に０℃で中間体６１（７ｇ、８．２７３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃で２時間攪拌した。
【０２１９】
反応混合物を、ＮＨ４Ｃｌ及び氷の飽和水溶液（１００ｍＬ）に徐々に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、ｐＨ７になるまでＨＣｌ  １Ｍ水溶液を添加した。２つの層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（２ｘ１００ｍＬ）。有機層を連続的に組み合わせ、ブラインで洗浄し（２ｘ１００ｍＬ）、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。
【０２２０】
粗生成物残滓をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ、１０／０〜６／４）で精製して、白色発泡体としての中間体６２を得た（１．４３ｇ、１．７８９ｍｍｏｌ、２２％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ０．９８−１．２９（ｍ，３１Ｈ），２．８１−３．００（ｍ，４Ｈ），３．２３（ｍ，２Ｈ），３．５４−３．７７（ｍ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），３．９４−４．１３（ｍ，２Ｈ），４．３０（ｂｒ  ｄｄ，Ｊ＝７．９，２．６Ｈｚ，１Ｈ），５．７２（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．４１（ｓ，１Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），８．０３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ），８．６８（ｓ，１Ｈ），１１．０７（ｓ，１Ｈ）
ＭＳ（ＥＳ＋）：７９９．７，
【０２２１】
工程６：Ｎ−（９−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−９−（（２−シアノエチル）チオ）−９−（２−ヒドロキシエチル）−２，２，４，４−テトライソプロピルテトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−８−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）−４−メトキシベンズアミド６３
乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の中間体６２（１．４３ｇ、１．７８９ｍｍｏｌ）の溶液に、−６０℃の窒素雰囲気下でＬＡＨ（１Ｍ、ＴＨＦ中）（８．９４７ｍＬ、８．９４７ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を−６０℃で終夜攪拌した。
【０２２２】
ＮＨ４Ｃｌの飽和水溶液（３０ｍＬ）を−６０℃で反応混合物に滴下した。続いて、得られた混合物を徐々に加熱して室温まで戻し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を添加した。２つの層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（２ｘ５０ｍＬ）。有機層を連続的に組み合わせ、ブラインで洗浄し（２ｘ８０ｍＬ）、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。
【０２２３】
粗生成物残滓をカラムクロマトグラフィ（Ｈｅｐｔ／ＥｔＯＡｃ、１／９〜０／１０）で精製して、やや黄色の発泡体としての中間体６３を得た（２８５ｍｇ、０．３７６ｍｍｏｌ、２１％）。
ＭＳ（ＥＳ＋）：７５７．７，
【０２２４】
工程７：２−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−９−（（２−シアノエチル）チオ）−２，２，４，４−テトライソプロピル−８−（６−（４−メトキシベンズアミド）−９Ｈ−プリン−９−イル）テトラヒドロ−６Ｈ−フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９−イル）メタンスルホン酸エチル６４
乾燥ピリジン（１５ｍＬ）中の中間体６３（４２７ｍｇ、０．５６４ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＭｓＣｌ（０．０６５７ｍＬ、１．４７５ｇ／ｍＬ、０．８４６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温の窒素雰囲気下で１時間攪拌した。
【０２２５】
溶媒を蒸発させ、得られた残滓を酢酸エチル（１０ｍＬ）に溶解させ、続いてＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（１０ｍＬ）で洗浄した。水層を酢酸エチルで抽出した（２ｘ１０ｍＬ）。組み合わせられた有機層を連続的にブライン（２ｘ１０ｍＬ）で洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ濾過し、濃縮して、粗生成物の黄色発泡体としての中間体６４を得（４７１ｍｇ）、これは不安定なため、すぐに次の工程のために使用した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：８３５．５，
【０２２６】
工程８：４−メトキシ−Ｎ−（９−（（６ａＲ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ）−２，２，４，４−テトライソプロピルジヒドロ−６Ｈ，８Ｈ−スピロ［フロ［３，２−ｆ］［１，３，５，２，４］トリオキサジシロシン−９，２’−チエタン］−８−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）ベンズアミド６５
−７８℃の窒素雰囲気下、乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）中の粗生成物中間体６４（４７１ｍｇ、０．５６４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（１．１２８ｍＬ、１Ｍ、１．１２８ｍｍｏｌ）中のＫＯｔＢｕの冷溶液を滴下した。得られた混合物を−７８℃で１０分間攪拌した。
【０２２７】
−７８℃でＮＨ４Ｃｌの飽和水溶液（５ｍＬ）を注ぐことによって反応混合物をクエンチし、混合物を徐々に室温まで温めた。ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を添加し、２つの層を分離し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ２０ｍＬ）を用いて水層を抽出した。有機層を連続的に組み合わせ、ブラインで洗浄し（２０ｍＬ）、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗生成物の中間体６５（３８０ｍｇ）を得た。粗生成物は６５を含有し、６５は５’位において加水分解した。両方の中間体が次の工程で同じように反応した。
ＭＳ（ＥＳ＋）：６８６．５，
【０２２８】
工程９：Ｎ−（９−（（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−８−ヒドロキシ−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−５−イル）−９Ｈ−プリン−６−イル）−４−メトキシベンズアミド６６
室温の窒素雰囲気下で、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の粗生成物中間体６５（３８０ｍｇ、０．５５４ｍｍｏｌ）の溶液にフッ化アンモニウム（０．２０５ｇ、５．５３９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で終夜攪拌した。
【０２２９】
得られた混合物を水（２０ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈した。２つの層を分離し、水層をＥｔＯＡｃを用いて抽出した（３ｘ２０ｍＬ）。有機層を連続的に組み合わせ、ブラインで洗浄し（２０ｍＬ）、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。
【０２３０】
粗生成物の残滓をカラムクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１％〜６％）によって精製して、白色発泡体としての中間体６６を得た（１４０ｍｇ、０．２７８ｍｇ、純度８８％、３工程で５０％）。
ＭＳ（ＥＳ＋）：４４４．３，
【０２３１】
工程１０：（４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ，８Ｒ）−５−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−７−（ヒドロキシメチル）−６−オキサ−１−チアスピロ［３．４］オクタン−８−オール６７
中間体６６（１４０ｍｇ、０．２７８ｍｍｏｌ）をＮＨ３（７Ｍ、ＭｅＯＨ中）（１５ｍＬ、７Ｍ、１０５ｍｍｏｌ）に溶解し、反応混合物を７０℃で１０時間攪拌した。
【０２３２】
得られた混合物を蒸発させ、残滓をカラムクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＮＨ３（７Ｍ、ＭｅＯＨ中）、３％〜９％）によって精製し、白色粉末としての純生成物を得た（７７．１ｍｇ、０．２４９ｍｍｏｌ、９０％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．２８（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．５，８．７，５．６Ｈｚ，１Ｈ），２．６８（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．４，８．５，６．８Ｈｚ，１Ｈ），２．８２−２．９２（ｍ，２Ｈ），３．５５（ｄｔ，Ｊ＝７．６，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６４（ｄｔ，Ｊ＝１２．３，４．４Ｈｚ，１Ｈ），３．７２−３．８２（ｍ，１Ｈ），４．３２（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），５．２３（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），５．７０−５．７７（ｍ，１Ｈ），６．５５（ｓ，１Ｈ），７．３２（ｓ，２Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ）
１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１９．１１（ｓ，１Ｃ），３０．１５（ｓ，１Ｃ），５９．４８（ｓ，１Ｃ），６０．８６（ｓ，１Ｃ），７２．１７（ｓ，１Ｃ），８２．３１（ｓ，１Ｃ），９１．３２（ｓ，１Ｃ），１１８．５６（ｓ，１Ｃ），１３８．６８（ｓ，１Ｃ），１４９．３４（ｓ，１Ｃ），１５２．７５（ｓ，１Ｃ），１５６．０５（ｓ，１Ｃ）
ＭＳ（ＥＳ＋）：３１０．２，
【０２３３】
ヌクレオシド５’−三リン酸塩の合成
乾燥ヌクレオシド（０．０５ｍｍｏｌ）ＰＯ（ＯＭｅ）３（０．７ｍＬ）に溶解させ、Ｎ−メチルイミダゾール（０．００９ｍＬ、０．１１ｍｍｏｌ）、続いてＰＯＣｌ３（０．００９ｍＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を２０〜４０分間室温に維持した。反応をＬＣＭＳによって制御し、対応するヌクレオシド５’−一リン酸塩の外観によって監視した。反応の完了後、ピロリン酸塩のテトラブチルアンモニウム塩（１５０ｍｇ）、続いてＤＭＦ（０．５ｍＬ）を添加して、均質な溶液を得た。周囲温度で１．５時間後、反応を水（１０ｍＬ）で希釈して、Ｑ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅを備えるカラムＨｉＬｏａｄ  １６／１０に搭載した。分離は、５０ｍＭのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．５）中で０〜１ＮのＮａＣｌ直線勾配中に実施した。三リン酸塩を７５〜８０％Ｂで溶出させた。対応する画分を濃縮した。脱塩は、Ｓｙｎｅｒｇｙ４ミクロンＨｙｄｒｏ−ＲＰカラム（Ｐｈｅｎｏｍｉｎｅｘ）上のＲＰ  ＨＰＬＣによって達成された。５０ｍＭの酢酸トリエチルアンモニウム緩衝液（ｐＨ７．５）中におけるメタノールの０〜３０％の直線勾配を溶出に用いた。対応する画分を、組み合わせ、濃縮し、且つ３回凍結乾燥して、過度の緩衝液を除去した。
【０２３４】
【表１】
2020531536.tif 000055
【０２３５】
生物学的実施例
レプリコンアッセイ
式（Ｉ）の化合物の、ＨＣＶに対する活性を細胞アッセイ中で検査した。このアッセイを用いて、式（Ｉ）の化合物が、ＨＣＶレプリコンとしても既知のＨＣＶ機能性細胞複製細胞ラインを阻害することを示した。細胞アッセイは、多標的スクリーニング戦略における、Ｋｒｉｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ７５：４６１４−４６２４に記載される修正を含む、Ｌｏｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｖｏｌ．２８５  ｐｐ．１１０−１１３に記載されるバイシストロニック発現コンストラクトに基づいた。
【０２３６】
基本的に、方法は以下の通りであった。アッセイは安定にトランスフェクトされた細胞ラインＨｕｈ−７  ｌｕｃ／ｎｅｏ（以下、Ｈｕｈ−Ｌｕｃと称する）を使用した。この細胞ラインは、脳心筋炎ウイルス（ＥＭＣＶ）からの内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）から翻訳されたＨＣＶタイプ１ｂの野生型ＮＳ３−ＮＳ５Ｂ領域、先行するレポーター部分（ＦｆＬ−ルシフェラーゼ）、及び選択可能なマーカー部分（ｎｅｏＲ、ネオマイシンホスホトランスフェラーゼ）を含むバイシストロニックな発現コンストラクトをコードするＲＮＡを有する。このコンストラクトは、ＨＣＶ遺伝子型１ｂからの５’及び３’ＮＴＲｓ（非翻訳領域）が隣接する。Ｇ４１８（ｎｅｏＲ）の存在下でのレプリコン細胞の連続培養は、ＨＣＶ  ＲＮＡの複製に依存する。とりわけルシフェラーゼをコードする、自律的に且つ高いレベルで複製するＨＣＶ−ＲＮＡを発現する、安定にトランスフェクトされたレプリコン細胞を、抗ウイルス化合物のスクリーニングに使用した。
【０２３７】
レプリコン細胞を、様々な濃度で添加された試験及び対照化合物の存在下、３８４ウェルプレート内に播種した。３日間のインキュベーション後、ルシフェラーゼ活性をアッセイすることにより（標準的なルシフェラーゼアッセイ基質及び試薬、並びにＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＶｉｅｗＬｕｘ（商標）ｕｌｔｒａＨＴＳマイクロプレートイメージャを使用して）ＨＣＶ複製を測定した。対照培地中のレプリコン細胞は、任意の阻害剤の不在下で高いルシフェラーゼ発現を有する。ルシフェラーゼ活性に対する化合物の阻害活性を、Ｈｕｈ−Ｌｕｃ細胞上で監視し、各試験化合物に関する用量応答曲線を可能にした。続いてＥＣ５０値を計算し、これは、検出されるルシフェラーゼ活性のレベルを５０％低下させるのに必要な、又はより詳細には、遺伝的に連鎖するＨＣＶレプリコンＲＮＡが複製する能力を低下させるのに必要な、化合物の量を表す。
【０２３８】
Ｖｅｒｏ及びＨｕｈ−７細胞中のＤＥＮＶ−２／１６６８１／ｅＧＦＰに対する抗ウイルス活性
方法
ＤＥＮＶ−２／１６６８１／ｅＧＦＰに対する化合物の抗ウイルス活性を表現型の抗ウイルスアッセイで測定し、これはウイルス量の尺度であるｅＧＦＰの読出し値を含む（ＴＶ−ＷＩ−０３４７６及びＴＶ−ＷＩ−０５６０１）。同時に、化合物の細胞毒性を、ＡＴＰＬｉｔｅ（商標）（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を用いて測定した。化合物の細胞特異的活性を除外するため、アッセイを２つの異なる細胞ライン（Ｖｅｒｏ及びＨｕｈ−７）で実施した。
プラスミドｐＦＫ−ＤＶｓ−Ｇ２Ａのインビトロ転写されたＲＮＡ（Ｐｒｏｆ．Ｒ．Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙから購入；図１）を、Ｈｕｈ−７細胞（ヒト肝細胞癌細胞；Ｐｒｏｆ．Ｒ．Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒの好意により提供される）（ＴＶ−ＷＩ−０４２４７）にトランスフェクトすることによって、ＤＥＮＶ−２／１６６８１／ｅＧＦＰを生成した。
【０２３９】
要約すると、２，５００個のＶｅｒｏ細胞（アフリカミドリザルの腎細胞；Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ［ＥＣＡＣＣ］，Ｐｏｒｔｏｎ  Ｄｏｗｎ，ＵＫ；カタログ番号８４１１３００１）又はＨｕｈ−７細胞を、９倍に段階希釈された試験化合物を含む３８４ウェルプレートに接種した。３７℃で２４時間インキュベートした後、Ｖｅｒｏ及びＨｕｈ−７細胞を、それぞれ１及び５の感染多重度（ＭＯＩ）でＤＥＮＶ−２／１６６８１／ｅＧＦＰに感染させた。３７℃で３日間インキュベートした後、レーザー顕微鏡で細胞中のｅＧＦＰ発現を測定することによってウイルス複製を定量化した。細胞対照をｅＧＦＰ信号のベースライン（すなわち０％信号）として用いて、未処理のＤＥＮＶ感染細胞（ウイルス対照）に対する、化合物で処理されたＤＥＮＶ感染細胞のｅＧＦＰ発現の５０％を阻害する濃度として、５０％の有効濃度（ＥＣ５０）が定義された。同じ方法で、９０％の有効濃度（ＥＣ９０）が計算された。
【０２４０】
同時に、化合物（５０％の細胞毒性濃度［ＣＣ５０］及び９０％の細胞毒性濃度［ＣＣ９０］の細胞毒性を、ＡＴＰｌｉｔｅ細胞生死判別ルミネセンスアッセイ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて評価した。この目的のため、一旦ｅＧＦＰの読出しが実施されたら、供給者の指示に従いＡＴＰｌｉｔｅをウェルに添加し、生存細胞数に直接関連する尺度であるルミネセンスを測定した。ＣＣ５０を、放射光のベースラインとしての媒質対照（すなわち０％信号）を用いて、未処理のＤＥＮＶ感染細胞（ウイルス対照）と比較した、化合物で処理されたＤＥＮＶ感染細胞中の発光信号の５０％阻害濃度として決定した。
【０２４１】
デングウイルスポリメラーゼ阻害アッセイ
デングウイルスＮＳ５ポリメラーゼドメイン（ＤＥＮＶｐｏｌ、血清型２、ニューギニアＣ株）の酵素活性を、トリチウム化ＮＭＰの酸不溶性ＲＮＡ生成物への取り込みとして測定する。ＤＥＮＶｐｏｌアッセイ反応には、組み換え酵素、ヘテロポリメリックＲＮＡ、約０．５μＣｉのトリチウム化ＮＴＰ、０．３３μＭの競合するコールドＮＴＰ、４０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、３ｍＭのジチオスレイトール、及び２ｍＭのＭｇＣｌ２が含まれる。標準反応を、阻害剤の濃度を増加させながら３０℃で３時間インキュベートする。反応終了時、ＲＮＡを１０％ＴＣＡにより沈殿させ、酸不溶性ＲＮＡ生成物を、サイズ排除９６ウェルプレート上で濾過する。プレートを洗浄した後に、シンチレーション液を加え、放射能標識ＲＮＡ生成物を、Ｔｒｉｌｕｘ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンターを用いて標準的手順に従い検出する。データを非線形回帰（シグモイド）にフィットさせることによって、酵素触媒率が５０％低下した化合物濃度（ＩＣ５０）を計算する。
【０２４２】
ＣＨＩＫＶに対するアッセイの原理及び方法
チクングンヤウイルス（ＣＨＩＫＶ）に対するヌクレオシド類似体の抗ウイルス活性を、細胞ベースの高性能ＣＰＥ（細胞変性効果）阻害アッセイを用いて試験した。このアッセイでは、ＣＨＩＫＶ株Ｓ２７及びＨｕｈ７細胞（ヒト肝癌細胞株）を用いた。試験化合物を、９点４倍段階希釈中で調製し、３８４ウェルプレートに播種した。続いて、各ウェルに８０００細胞／ウェルの濃度及び０．２５ＭＯＩ（感染多重度）のＣＨＩＫＶを追加した。プレートを、３７℃／５％ＣＯ２で２日間インキュベートした。試験化合物の抗ウイルス活性を、試験化合物によりウイルスＣＰＥから保護された生細胞中のＡＴＰレベルを測定するＡＴＰＬｉｔｅ（商標）１ステップキット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を追加することによって測定した。並行して、ウイルス感染が存在しない試験化合物の細胞毒性を測定した。表示測定値はルミネセンスである。
【０２４３】
結果
表１Ａは、ＨＣＶ、ＤＶ、及びＣＨＩＫＶ、並びに細胞毒性に対する得られた抗ウイルスデータを示す。
【０２４４】
【表２】
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【０２４５】
【表３】
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【０２４６】
【表４】
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【０２４７】
【表５】
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【０２４８】
【表６】
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【０２４９】
表１Ｃは、スピロオキセタン誘導体に関して得られたデータと比較した、ＨＣＶ及びＣＨＩＫＶに対する得られた本発明の化合物の抗ウイルスデータを示す。データは、本発明の化合物（表１Ｃの最初の２つの列）は、スピロオキセタン誘導体（表１Ｃの最後の２つの列）と比較してＨＣＶ及びＣＨＩＫＶに対してより活性であることを明らかに示す。
【０２５０】
【表７】
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【国際調査報告】
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