(57)【要約】本発明は、概して、少なくとも２つの異なる治療薬を投与することを含む、がんを治療するための併用療法に関する。併用療法の成分及び併用療法の使用方法が提供される。
2020524677.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんを治療する方法であって：（Ａ）有効成分として、成分Ｉ、又はそのプロドラッグ、誘導体、又は薬学的に許容される塩を含む第１の成分；及び（Ｂ）有効成分として、成分ＩＩ、又はそのプロドラッグ、誘導体、又は薬学的に許容される塩を含む第２の成分を投与することを含み、
成分Ｉは、標的化部分に結合した有効成分又はそのプロドラッグを含むコンジュゲートであり、前記有効成分はチューブリン阻害剤又はそのプロドラッグを含み、
成分ＩＩは成分Ｉとは異なる、方法。
【請求項２】
成分Ｉの標的化部分は、ガネテスピブ又はその互変異性体、アナログ、又は誘導体である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
成分Ｉの有効成分は、ＳＮ−３８又はそのアナログ又は誘導体である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
成分Ｉは、
【化１】
2020524677.tif 000007
の構造を有するコンジュゲート１である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
成分ＩＩはチェックポイント阻害剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
成分ＩＩはＣＴＬＡ−４アンタゴニストを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
成分ＩＩはＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１／２チェックポイント経路を遮断する、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
成分ＩＩはＰＤ−１アンタゴニストを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
成分ＩＩはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
成分ＩＩは５ＦＵ及び／又はロイコボリンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
成分Ｉはコンジュゲート１であり、成分ＩＩはＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、ＰＤ−１アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト、ＥＺＨ阻害剤、及び５ＦＵ及び／又はロイコボリンからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
成分Ｉは成分ＩＩの前に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
成分ＩＩは成分Ｉの前に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
がんは、肺がん、乳がん、大腸がん、卵巣がん、膵臓がん、大腸がん、膀胱がん、前立腺がん、子宮頸がん、腎臓がん、白血病、中枢神経系がん、骨髄腫、及び黒色腫からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
がんは膵臓がんである、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
がんは肺がんである、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
がんは大腸がんである、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、がんを治療するための併用療法に関する。
【背景技術】
【０００２】
化学療法は非常に進歩しているが、現在利用可能な治療剤及び治療法は満足のいくものではなく、化学療法で治療された病気（がんなど）と診断された大多数の患者の予後は依然として不十分である。多くの場合、化学療法の適用可能性及び／又は有効性、ならびに潜在的に毒性のある部分（ｍｏｉｅｔｉｅｓ）を利用する他の療法及び診断は、望ましくない副作用によって制限される。
【０００３】
多くの病気や障害は、特定の種類の細胞に特定のタンパク質が高レベルで存在することを特徴としている。場合によっては、これらの高レベルのタンパク質の存在は過剰発現によって引き起こされる。歴史的に、これらのタンパク質のいくつかは、治療用分子の有用な標的であるか、病気の検出のためのバイオマーカーとして使用されてきた。有用な治療標的として認識されている過剰発現細胞内タンパク質の１つの分類は、熱ショックタンパク質として知られている。
【０００４】
熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）は、温度上昇ならびに他の環境ストレス、例えば紫外線、栄養欠乏、及び酸素欠乏などに応答して上方制御されるタンパク質の一分類である。ＨＳＰには、他の細胞タンパク質（クライアントタンパク質と呼ばれる）に対するシャペロンとして機能し、適切なフォールディング及び修復を促進し、ミスフォールディングされたクライアントタンパク質のリフォールディングを助けるなど、多くの既知の機能がある。ＨＳＰにはいくつかの既知のファミリーがあり、それぞれが独自のクライアントタンパク質のセットを持っている。Ｈｓｐ９０は最も豊富なＨＳＰファミリーの１つであり、ストレス下にない細胞のタンパク質の約１〜２％を占め、ストレス下の細胞では約４〜６％に増加する。
【０００５】
Ｈｓｐ９０を阻害すると、ユビキチンプロテアソーム経路を介してそのクライアントタンパク質が分解される。他のシャペロンタンパク質とは異なり、Ｈｓｐ９０のクライアントタンパク質は、主にシグナル伝達に関与するタンパク質キナーゼ又は転写因子であり、そのクライアントタンパク質の多くはがんの進行に関与することが示されている。Ｈｓｐ９０は、正常な真核細胞の生存に必要であることが突然変異解析により示されている。しかし、Ｈｓｐ９０は多くの腫瘍タイプで過剰発現しており、これはがん細胞の生存に重要な役割を果たしている可能性があり、がん細胞は正常細胞よりもＨｓｐ９０の阻害に対してより感受性が高い可能性があることを示している。例えば、がん細胞は通常、フォールディングがＨｓｐ９０に依存する多数の変異及び過剰発現腫瘍性タンパク質を有する。さらに、低酸素、栄養欠乏、アシドーシスなどにより、腫瘍の環境は通常過酷であるため、腫瘍細胞は生存のために特にＨｓｐ９０に依存している可能性がある。さらに、Ｈｓｐ９０の阻害は、多くの腫瘍性タンパク質ならびにホルモン受容体、転写因子の同時阻害を引き起こすため、抗がん剤の魅力的な標的である。上記の点から、Ｈｓｐ９０は、ガネテスピブ、ＡＵＹ−９２２、及びＩＰＩ−５０４などのＨｓｐ９０阻害剤（Ｈｓｐ９０ｉ）化合物を含めて、医薬品開発の魅力的な標的となってきた。同時に、当初期待されていたこれらの化合物のうちのいくつか、例えばゲルダナマイシンなどは、それらの化合物の毒性プロファイルのために進捗が遅れてきた。これまでに開発されたＨｓｐ９０ｉ化合物は、抗がん剤として大いに期待されていると考えられるが、がん細胞におけるＨｓｐ９０の遍在性を活用する他の方法は、これまで未開拓のままであった。したがって、特定の疾患又は障害に関連する細胞で過剰発現されるＨｓｐ９０などのタンパク質を選択的に標的とする治療分子の必要性が存在する。
【発明の概要】
【０００６】
本開示は、がんなどの過剰増殖性疾患を有する患者を治療する方法に関し、その方法は患者に：（Ａ）有効成分として、成分Ｉ、又はその薬学的に許容される塩を含む第１の成分；及び（Ｂ）有効成分として、成分ＩＩ、又はその薬学的に許容される塩を含む第２の成分を投与することを含み、前記有効成分の量は、その組合せが前記過剰増殖性疾患の治療において治療上有効となるような量である。成分Ｉは、熱ショックタンパク質９０（ＨＳＰ９０）を標的とするコンジュゲートを含んでもよい。
【０００７】
本開示はさらに、以下を含む組成物に関する：（Ａ）有効成分として、成分Ｉ、又はその薬学的に許容される塩を含む第１の成分；及び（Ｂ）有効成分として、成分Ｉ、又はその薬学的に許容される塩を含む第２の成分。
【０００８】
本開示はまた、以下を含むキットに関する：（Ａ）有効成分として、成分Ｉ、又はその薬学的に許容される塩を含む第１の成分；及び（Ｂ）有効成分として、成分ＩＩ、又はその薬学的に許容される塩を含む第２の成分。
【０００９】
さらに、本開示は、成分Ｉ、又はその薬学的に許容される塩、及び成分ＩＩ、又はその薬学的に許容される塩の、過剰増殖性疾患を治療するための使用に関する。
本開示のさらなる態様は、過剰増殖性疾患の治療薬の調製のための、成分Ｉ、又はその薬学的に許容される塩、及び成分ＩＩ、又はその薬学的に許容される塩の使用である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】実施例５に記載されるように、ビヒクル対照、コンジュゲート１単独、タラゾパリブ単独、及びタラゾパリブと組み合わせたコンジュゲート１での治療後の平均腫瘍体積を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本開示は、がんなどの過剰増殖性疾患を治療するための少なくとも２つの異なる治療薬の併用療法に関する。異なる治療薬はそれぞれ、併用療法の「成分」と呼ばれる。本発明の併用療法は、様々な種類のがんの治療において非常に効果的であり、単独で投与される各成分の活性と比較して増強された効果を示す。本明細書で使用する「併用療法」又は「併用治療」又は「組み合わせて」という用語は、少なくとも２つの異なる治療薬による同時又は並行治療の任意の形態を指す。過剰増殖性疾患には、制御されない細胞増殖を特徴とする疾患又は病気が含まれる。
【００１２】
併用療法の成分は、同時に、連続して、又は任意の順序で投与され得る。これらの成分は、異なる用量で、異なる投与頻度で、又は異なる経路を介して、適切なように投与することができる。
【００１３】
本明細書で使用する「同時に投与される」という用語は具体的には限定されず、併用療法の成分が実質的に同時に、例えば、混合物として、又は直後の順番で投与されることを意味する。
【００１４】
本明細書で使用する「連続投与」という用語は具体的には限定されず、併用療法の成分が同時にではなく、次々に、又は特定の時間間隔でグループに分けて投与されることを意味する。時間間隔は、併用療法の成分のそれぞれの投与間で同じでも異なっていてもよく、例えば、２分〜９６時間、１〜７日、又は１、２又は３週間の範囲から選択することができる。一般に、投与間の時間間隔は、数分から数時間の範囲、例えば２分〜７２時間、３０分〜２４時間、又は１〜１２時間の範囲であり得る。さらなる例には、２４〜９６時間、１２〜３６時間、８〜２４時間、及び６〜１２時間の範囲の時間間隔が含まれる。いくつかの実施形態では、成分Ｉは成分ＩＩの前に投与される。いくつかの実施形態では、成分ＩＩは成分Ｉの前に投与される。
【００１５】
各成分のモル比は特に限定されない。例えば、２つの成分が組成物中で組み合わされる場合、２つの成分間のモル比は、１：５００〜５００：１、又は１：１００〜１００：１、又は１：５０〜５０：１、又は１：２０〜２０：１、又は１：５〜５：１の範囲、又は１：１であり得る。組成物中に２つ以上の成分が組み合わされる場合、同様のモル比が適用される。各成分は、独立して、組成物の約１％〜１０％、又は約１０％〜約２０％、又は約２０％〜約３０％、又は約３０％〜４０％、又は約４０％〜約５０％、又は約５０％〜６０％、又は約６０％〜７０％、又は約７０％〜８０％、又は約８０％〜９０％、又は約９０％〜９９％の所定のモル重量パーセントを含むことができる。
【００１６】
Ｉ．併用療法の成分
本開示の一態様は、がんなどの過剰増殖性疾患を有する対象を治療する併用療法であって、患者に：（Ａ）有効成分として、成分Ｉ（又は化合物Ｉ）、又はそのプロドラッグ、誘導体、又は薬学的に許容される塩を含む第１の成分；及び（Ｂ）有効成分として、成分ＩＩ（又は化合物ＩＩ）、又はそのプロドラッグ、誘導体、又は薬学的に許容される塩を含む第２の成分を投与することを含み、前記有効成分の量は、その組合せが前記過剰増殖性疾患の治療において治療上有効となるような量である併用療法を提供する。
【００１７】
いくつかの実施形態において、成分Ｉは、標的化部分に結合した有効成分又はそのプロドラッグを含む小分子コンジュゲートであり、標的化部分は熱ショックタンパク質９０（ＨＳＰ９０）に結合する。
【００１８】
成分ＩＩは成分Ｉとは異なる。いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、がんを治療する治療薬、例えばチェックポイント阻害剤を含む。チェックポイント阻害剤は、本明細書で使用する場合、腫瘍微小環境における免疫抑制シグナルを遮断する有効成分を指す。いくつかの実施形態において、有効成分は、エフェクター免疫細胞に対する阻害シグナルに拮抗し又はそれを低減し得る共阻害チェックポイント分子（例えば、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ１、ＰＤ−Ｌ１）に特異的な拮抗剤であってもよい。いくつかの実施形態において、有効成分は、免疫抑制酵素（例えば、ＡＲＧ及びＩＤＯ）及びサイトカイン（例えばＩＬ−１０）、ケモカイン、及び腫瘍微小環境内の他の可溶性因子（例えば、ＴＧＦ−β及びＶＥＧＦ）の活性を阻害し低下させることができる阻害剤であり得る。
【００１９】
本明細書で使用する「小分子」という用語は、分子量が２０００ｇ／ｍｏｌ未満、１５００ｇ／ｍｏｌ未満、１０００ｇ／ｍｏｌ未満、８００ｇ／ｍｏｌ未満、又は５００ｇ／ｍｏｌ未満の有機分子を指す。小分子は非ポリマー性及び／又は非オリゴマー性である。
【００２０】
本明細書で使用する「標的化部分」という用語は、特定の場所に結合又は局在化する部分を指す。上記部分は、例えば、タンパク質、核酸、核酸アナログ、炭水化物、又は小分子であり得る。上記場所は、組織、特定の細胞種、又は細胞内区画であり得る。いくつかの実施形態では、標的化部分は、タンパク質などの選択された分子に特異的に結合することができる。
【００２１】
いくつかの場合において、コンジュゲートは、約５０，０００Ｄａ未満、約４０，０００Ｄａ未満、約３０，０００Ｄａ未満、約２０，０００Ｄａ未満、約１５，０００Ｄａ未満、約１０，０００Ｄａ未満、約８，０００Ｄａ、約５，０００Ｄａ未満、又は約３，０００Ｄａ未満の分子量を有し得る。いくつかの場合において、コンジュゲートは、約１，０００Ｄａ〜約５０，０００Ｄａ、約１，０００Ｄａ〜約４０，０００Ｄａ、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約３０，０００Ｄａ、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約５０，０００Ｄａ、約１，０００Ｄａ〜約２０，０００Ｄａ、いくつかの実施形態では約１，０００〜約１５，０００Ｄａ、一部の実施形態では約１，０００Ｄａ〜約１０，０００Ｄａ、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約８，０００Ｄａ、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約５，０００Ｄａ、及びいくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約３，０００Ｄａの分子量を有し得る。コンジュゲートの分子量は、コンジュゲートの式の各原子の原子量に各原子の数を乗じた合計として計算することができる。また、質量分析、ＮＭＲ、クロマトグラフィー、光散乱、粘度、及び／又は当技術分野で知られている他の方法によって測定することもできる。分子量の単位は、ｇ／ｍｏｌ、ダルトン（Ｄａ）、又は原子質量単位（ａｍｕ）であってもよく、１ｇ／ｍｏｌ＝１Ｄａ＝１ａｍｕであることは、当技術分野で知られている。
【００２２】
成分Ｉ及び成分ＩＩは、同時に、連続して、又は任意の順序で投与することができる。それらは、異なる用量で、異なる投与頻度で、又は異なる経路を介して、適切なように投与することができる。
【００２３】
成分Ｉ
いくつかの実施形態において、成分Ｉは、標的化部分に結合した有効成分又はそのプロドラッグを含むコンジュゲートであり、標的化部分は、ＨＳＰ９０などの熱ショックタンパク質に結合する。標的化部分は、ガネテスピブ、ゲルダナマイシン（タネスピマイシン）、ＩＰＩ−４９３、マクベシン、トリプテリン、タネスピマイシン、１７−ＡＡＧ（アルベスピマイシン）、ＫＦ−５５８２３、ラジシコール、ＫＦ−５８３３３、ＫＦ−５８３３２、１７−ＤＭＡＧ、ＩＰＩ−５０４、ＢＩＩＢ−０２１、ＢＩＩＢ−０２８、ＰＵ−Ｈ６４、ＰＵ−Ｈ７１、ＰＵ−ＤＺ８、ＰＵ−ＨＺ１５１、ＳＮＸ−２１１２、ＳＮＸ−２３２１、ＳＮＸ−５４２２、ＳＮＸ−７０８１、ＳＮＸ−８８９１、ＳＮＸ−０７２３、ＳＡＲ−５６７５３０、ＡＢＩ−２８７、ＡＢＩ−３２８、ＡＴ−１３３８７、ＮＳＣ−１１３４９７、ＰＦ−３８２３８６３、ＰＦ−４４７０２９６、ＥＣ−１０２、ＥＣ−１５４、ＡＲＱ−２５０−ＲＰ、ＢＣ−２７４、ＶＥＲ−５０５８９、ＫＷ−２４７８、ＢＨＩ−００１、ＡＵＹ−９２２、ＥＭＤ−６１４６８４、ＥＭＤ−６８３６７１、ＸＬ−８８８、ＶＥＲ−５１０４７、ＫＯＳ−２４８４、ＫＯＳ−２５３９、ＣＵＤＣ−３０５、ＭＰＣ−３１００、ＣＨ−５１６４８４０、ＰＵ−ＤＺ１３、ＰＵ−ＨＺ１５１、ＰＵ−ＤＺ１３、ＶＥＲ−８２５７６、ＶＥＲ−８２１６０、ＶＥＲ−８２５７６、ＶＥＲ−８２１６０、ＮＸＤ−３０００１、ＮＶＰ−ＨＳＰ９９０、ＳＳＴ−０２０１ＣＬ１、ＳＳＴ−０１１５ＡＡ１、ＳＳＴ−０２２１ＡＡ１、ＳＳＴ−０２２３ＡＡ１、ノボビオシン、ヘルビンマイシンＡ、ラジシコール、ＣＣＴ０１８０５９、ＰＵ−Ｈ７１、セラストロール、又はそれらの互変異性体、アナログ、又は誘導体から選択され得る。
【００２４】
いくつかの例では、成分Ｉは有効成分として、ＳＮ−３８又はイリノテカン、レナリドミド、ボリノスタット、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、アビラテロン、ベンダムスチン、クリゾチニブ、ドキソルビシン、ペメトレキセド、フルベストラント、トポテカン、血管破壊剤（ＶＤＡ）、又はそれらのフラグメント、誘導体又はアナログを含む。
【００２５】
いくつかの例では、成分Ｉは、２０１３年４月１６日に出願されたＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ１３／３６７８３（ＷＯ２０１３／１５８６４４）の任意のコンジュゲートであってもよく、その内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【００２６】
一例では、成分Ｉは、ガネテスピブ又はその互変異性体を標的化部分として含み、ＳＮ−３８を有効成分として含むコンジュゲートである。成分Ｉは、下記の構造を有するコンジュゲート１であってもよい：
【００２７】
【化１】
2020524677.tif 000003
【００２８】
（（Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−３，１４−ジオキソ−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−９−イル４−（２−（５−（３−（２，４−ジヒドロキシ−５−イソプロピルフェニル）−５−ヒドロキシ−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イル）−１Ｈ−インドール−１−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート）又はその互変異性体。
【００２９】
コンジュゲート１は、市販のトポイソメラーゼＩ阻害剤であるイリノテカンの活性代謝物であるＳＮ−３８に切断可能なリンカーを介して結合させたガネテスピブで構成される、注射可能な合成小分子薬物コンジュゲートである。このコンジュゲートは、ＨＳＰ９０の増強された腫瘍標的化及び優先的な腫瘍貯留特性を活用してＳＮ−３８を送達し、広範な前臨床抗腫瘍活性をもたらす。
【００３０】
成分ＩＩ
いくつかの実施形態では、成分ＩＩは、成分Ｉとは異なるがんを治療する治療薬を含む。
【００３１】
いくつかの実施形態では、成分ＩＩは化学療法剤であり得る。いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、前立腺がん、乳がん、非小細胞肺がん（大細胞肺がん）、小細胞肺がん、又は卵巣がんを治療するために使用される化学療法薬であり得る。
【００３２】
いくつかの例では、成分ＩＩはポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤であり得る。いくつかのがんはＢＲＣＡ１レベルが高く、ＰＡＲＰ阻害に反応しない。ＨＳＰ９０結合成分ＩはＤＮＡ損傷効果を有してもよく、細胞をＰＡＲＰ阻害に対して感受性にさせ得る。ＰＡＲＰ阻害剤の非限定的な例には、タラゾパリブ（ＢＭＮ−６７３）、オラパリブ（ＡＺＤ−２２８１）、ニラパリブ（ＭＫ−４８２７）、イニパリブ（ＢＳＩ２０１）、ベリパリブ（ＡＢＴ−８８８）、ルカパリブ（ＡＧ０１４６９９、ＰＦ−０１３６７３３８）、又はＣＥＰ９７２２が含まれる。
【００３３】
【化２】
2020524677.tif 000004
【００３４】
いくつかの実施形態では、成分ＩＩは、がん患者に支持療法を提供し、及び／又は成分Ｉの副作用を軽減し得る。いくつかの実施形態では、成分ＩＩはがん症状緩和薬である。上記症状緩和薬は、下痢や、化学療法又は放射線療法の副作用を軽減し得る。症状緩和薬の非限定的な例には、オクトレオチド又はランレオチド；インターフェロン、シポヘプタジン（ｃｙｐｏｈｅｐｔａｄｉｎｅ）又は他の抗ヒスタミン薬；及び／又は、カルチノイド症候群の症状緩和薬、例えばテロトリスタット又はテロトリスタットエチプレート（ＬＸ１０３２、Ｌｅｘｉｃｏｎ（商標））が含まれる。
【００３５】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ロイコボリン（フォリン酸）、イリノテカン、又はオキサリプラチン、又はそれらの誘導体又は任意の組合せであってもよい。
【００３６】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩはチェックポイント阻害剤であり得る。腫瘍細胞は、それらが免疫監視から逃れるのを助ける免疫抑制微小環境を誘発することができる。腫瘍微小環境における免疫抑制は、内因性の免疫抑制メカニズムによって誘発されるか、腫瘍によって直接誘発される。併用療法の成分ＩＩは、腫瘍微小環境におけるこのような免疫抑制シグナルを遮断するチェックポイント阻害剤を含む。
【００３７】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、エフェクター免疫細胞（例えば、細胞傷害性Ｔ細胞及びナチュラルキラー細胞）に対する阻害シグナルに拮抗し又はそれを低減することができる共阻害チェックポイント分子に特異的な拮抗剤であり得る。
【００３８】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、免疫抑制酵素（例えば、ＡＲＧ及びＩＤＯ）及びサイトカイン（例えばＩＬ−１０）、ケモカイン及び腫瘍微小環境内の他の可溶性因子（例えば、ＴＧＦ−β及びＶＥＧＦ）の活性を阻害及び低下させることができる阻害剤であり得る。
【００３９】
腫瘍微小環境
腫瘍細胞を排除するための適応免疫応答では、細胞傷害性Ｔ細胞の活性化には、特定の抗原からの一次シグナル（すなわち、最初のシグナル）及び１つ以上の共刺激シグナル（すなわち、二次シグナル）の両方が必要である。抗原提示細胞（ＡＰＣ、例えば樹状細胞（ＤＣ））は腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）を処理し、ＴＡＡ（すなわちエピトープ）に由来する抗原性ペプチドをペプチド／ＭＨＣ分子（クラスＩ／ＩＩ）（ｐ／ＭＨＣ）複合体として細胞表面に提示し、Ｔ細胞は、ｐ／ＭＨＣ複合体を認識するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を介してＴＡＡを担持したＡＰＣに結合する。このライゲーションは、がん特異的な細胞傷害性Ｔ細胞を活性化する一次シグナルである。さらに、二次共刺激シグナルが、Ｔ細胞上の共刺激受容体及びＡＰＣ上のそれらのリガンド（又は共受容体）によって提供される。共刺激受容体とそのリガンドとの間の相互作用は、Ｔ細胞の活性化を調節し、その活性を高めることができる。ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、及びＯＸ４０は、それぞれＡＰＣ上のＢ７−１／２（ＣＤ８０／ＣＤ８６）、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７Ｌ）、及びＯＸ−４０Ｌに結合する、Ｔ細胞上のよく研究された共刺激受容体である。通常の状況では、過剰なＴ細胞の増殖を防ぎ、免疫のバランスをとるために、共抑制シグナル（ＣＴＬＡ−４など）が活性化Ｔ細胞によって誘導及び発現され、ＡＰＣ上のＢ７リガンドへの結合においてＣＤ２８と競合する。これにより、通常の状況でＴ細胞の反応を緩和できる。しかし、がんによっては、腫瘍細胞及び腫瘍微小環境に浸潤している制御性Ｔ細胞がＣＴＬＡ−４を恒常的に発現し得る。この共阻害シグナルは、共刺激シグナルを抑制し、したがって、抗がん免疫応答を激減させる。腫瘍細胞によるこの免疫抑制メカニズムは、免疫チェックポイント又はチェックポイント経路と呼ばれる。
【００４０】
ＣＴＬＡ−４シグナルに加えて、活性化Ｔ細胞に別の抑制性受容体ＰＤ−１（プログラムドデス１）を発現するように誘導することもできる。通常の状況では、免疫応答が進行すると、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔリンパ球はこれらの抑制性チェックポイント受容体（例えばＰＤ−１）の発現を上方制御する。炎症症状はＩＦＮ放出を促し、これは末梢組織でＰＤ−１リガンドであるＰＤ−Ｌ１（Ｂ７−Ｈ１としても知られている）及びＰＤ−Ｌ２（Ｂ７−ＤＣとしても知られている）の発現を上方制御し、自己免疫を防ぐために免疫寛容を維持する。ヒトのがんの多くは、腫瘍微小環境でＰＤ−Ｌ１を発現することが実証されている（例えば、Ｚｏｕ及びＣｈｅｎ、ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  Ｂ７−ｆａｍｉｌｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｕｍｏｒ  ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ．２００８，Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、８：４６７−４７７）。ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１の相互作用は、腫瘍微小環境と非常に活発であり、Ｔ細胞の活性化を阻害する。
【００４１】
腫瘍微小環境における他の同定された共抑制シグナルには、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＢＴＬＡ、ＣＤ１６０、ＣＤ２００Ｒ、ＴＩＧＩＴ、ＫＬＲＧ−１、ＫＩＲ、ＣＤ２４４／２Ｂ４、ＶＩＳＴＡ及びＡｒａ２Ｒが含まれる。
【００４２】
さらに、腫瘍微小環境は、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、骨髄由来免疫抑制細胞（ＭＤＳＣ）及び腫瘍随伴マクロファージ（ＴＡＭ）；可溶性因子、例えばインターロイキン６（ＩＬ−６）、ＩＬ−１０、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）などの抑制要素を含んでいる。ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、及びＶＥＧＦが抗がん免疫応答の発生を打ち消す重要なメカニズムは、樹状細胞（ＤＣ）の分化、成熟、トラフィキング、及び抗原提示の阻害によるものである（Ｇａｂｒｉｌｏｖｉｃｈ  Ｄ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ｏｆ  ｔｕｍｏｕｒ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ−ｃｅｌｌ  ｄｅｆｅｃｔｓ、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００４、４：９４１−９５２）。
【００４３】
制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）：ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ細胞は、胸腺由来のリンパ球の特有の集団である。フォークヘッドボックス転写因子（Ｆｏｘｐ３）でマークされたＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ細胞は、自己寛容の維持に重要な役割を果たし、自己免疫を抑制し、臓器移植及び腫瘍免疫における免疫応答を調節する。腫瘍の発達は、しばしばＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇ細胞を腫瘍領域に引き付ける。腫瘍浸潤制御性Ｔ細胞は、ＩＬ−１０やＴＧＦβなどの抑制性サイトカインを分泌して、自己免疫及び慢性炎症反応を抑制し、腫瘍の免疫寛容を維持する（Ｕｎｉｔｔら、Ｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｅ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ：ｔｈｅ  Ｔ−ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｃｅｌｌｓ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２００５；４１（４）：７２２−７３０）。
【００４４】
骨髄由来免疫抑制細胞（ＭＤＳＣ）：ＭＤＳＣは不均質な細胞のグループであり、悪性腫瘍関連炎症の特徴として、及びがんにおけるＴ細胞抑制を誘導する主要なメディエーターとして見なすことができる。ＭＤＳＣは多くの悪性領域に見られ、表現型によって顆粒球（Ｇ−ＭＤＳＣ）及び単球（Ｍｏ−ＭＤＳＣ）のサブグループに分類される。ＭＤＳＣはＴ制御性細胞を誘導し、Ｔ細胞耐性を生成することができる。さらに、ＭＤＳＣはＴＦＧ−β及びＩＬ−１０を分泌し、ＩＦＮ−γ又は活性化Ｔ細胞の存在下で一酸化窒素（ＮＯ）を生成する。
【００４５】
腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）：末梢血単球に由来するＴＡＭは、腫瘍微小環境からの異なるシグナルに対して異なる機能を示す多機能細胞である。腫瘍微小環境に関連する細胞型の中で、腫瘍の進行に最も影響を与えるのはＴＡＭである。腫瘍細胞外マトリックス、無酸素環境及び腫瘍細胞から分泌されるサイトカインなどの微小環境刺激に応答して、マクロファージはＭ１（古典的）又はＭ２（代替）活性化を受ける。ほとんどの悪性腫瘍において、ＴＡＭはＭ２マクロファージの表現型を有する。
【００４６】
別の免疫抑制メカニズムは、インドールアミン−２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）酵素によるトリプトファンの異化に関連している。局所免疫抑制は、腫瘍微小環境内及びセンチネルリンパ節（ＳＬＮ）内の悪性細胞によって誘発される能動的なプロセスである（Ｇａｊｅｗｓｋｉら、Ｉｍｍｕｎｅ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｕｍｏｒ  ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ、２００６；２９（３）：２３３−２４０；及びＺｏｕ  Ｗ．、Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｎｅｔｗｏｒｋｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｕｍｏｒ  ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｒｅｌｅｖａｎｃｅ、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ、２００５；５（４）：２６３−２７４）。研究は、局所的免疫抑制に関与する要素の一部として、腫瘍流入領域リンパ節内でＴ細胞受容体ゼータサブユニット（ＴＣＲ）が下方制御され、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）が上方制御されることを示している。
【００４７】
浸潤制御性免疫細胞により仲介される抑制効果に加えて、腫瘍細胞自体も細胞傷害性Ｔ細胞の活性化及び機能を積極的に阻害する多くの分子を分泌することができる。
一部の腫瘍では、ＣＤ２８などのＴ細胞上の共刺激受容体の関与がない状況でのＴＣＲライゲーションに起因するＴ細胞内因性のアネルギー及び枯渇が一般的である。
【００４８】
本開示において、併用療法の成分ＩＩは、１つ以上の免疫抑制機構を阻害し、腫瘍細胞を排除するためのがん特異的免疫応答を増強する。
チェックポイント阻害剤
いくつかの実施形態では、成分ＩＩは、チェックポイント経路を遮断する活性剤などのチェックポイント阻害剤を含む。
【００４９】
適応免疫応答中、細胞傷害性Ｔ細胞の活性化は、抗原提示細胞上の抗原ペプチド／ＭＨＣ分子複合体とＴ細胞上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）との間の一次シグナルによって媒介される。二次共刺激シグナルも、活性Ｔ細胞にとって重要である。二次シグナルの非存在下での抗原提示は、Ｔ細胞、例えばＣＤ４＋Ｔヘルパー細胞を活性化するのに十分ではない。よく知られている共刺激シグナルには、Ｔ細胞上の共刺激受容体ＣＤ２８と、抗原提示細胞（ＡＰＣ）上のそのリガンドＢ７−１／ＣＤ８０及びＢ７−２／ＣＤ８６が関与する。Ｂ７−１／２とＣＤ２８との相互作用は、抗原特異的なＴ細胞増殖及びサイトカイン産生を増強する。免疫応答を厳密に制御するために、Ｔ細胞はＣＴＬＡ−４（抗細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４）も発現する。ＣＴＬＡ−４は、Ｔ細胞上の受容体ＣＤ２８を介したＣＤ８０及びＣＤ８６媒介共刺激の共阻害競合物質であり、Ｔ細胞の活性化及び機能を効果的に阻害することができる。ＣＤ２８がＡＰＣ表面のＢ７−１／２と相互作用すると、ＣＴＬＡ−４発現がしばしば誘導される。ＣＴＬＡ−４は、共刺激受容体ＣＤ２８よりも共刺激リガンドＢ７−１／２（ＣＤ８０／ＣＤ８６）への結合親和性が高いため、ＣＤ２８とＢ７−１／２との間の相互作用を活性化するＴ細胞から、ＣＴＬＡ−４とＢ７−１／２との間の阻害性シグナル伝達へとバランスを変化させることで、Ｔ細胞活性化の抑制をもたらす。ＣＴＬＡ−４の上方制御は、主にリンパ節でのＴ細胞の初期活性化中である。
【００５０】
ＣＴＬＡ−４に特異的に結合する抗体は、この抑制チェックポイントを阻害するために使用されている。抗ＣＴＬＡ−４ＩｇＧ１ヒト化抗体：イピリムマブはＣＴＬＡ−４に結合し、ＣＤ２８／Ｂ７刺激シグナル伝達の阻害を防ぐ。これらはリンパ器官でのＴ細胞の活性化の閾値を下げることができ、腫瘍微小環境内のＴ制御性細胞を枯渇させることもできる（Ｓｉｍｐｓｏｎら、Ｆｃ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ−ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｃｏ−ｄｅｆｉｎｅｓ  ｔｈｅ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ａｎｔｉ−ＣＴＬＡ−４  ｔｈｅｒａｐｙ  ａｇａｉｎｓｔ  ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｊ  Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、２０１３、２１０：１６９５−１７１０）。イピリムマブは、最近、転移性黒色腫患者の治療薬として米国食品医薬品局によって承認された。
【００５１】
いくつかの実施形態では、本開示の併用療法の成分ＩＩは、ＣＴＬＡ−４と高い親和性で結合し、Ｂ７−１／２（ＣＤ８０／８６）とＣＴＬＡ−４との相互作用を防ぐことができるＣＴＬＡ−４に対する拮抗剤、例えば、抗体、抗体の機能的フラグメント、ポリペプチド、又はポリペプチドの機能的フラグメント、又はペプチドなどを含んでもよい。一例において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、アンタゴニスト抗体、又はその機能的フラグメントである。適切な抗ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト抗体には、限定するものではないが、抗ＣＴＬＡ−４抗体、ヒト抗ＣＴＬＡ−４抗体、哺乳動物抗ＣＴＬＡ−４抗体、ヒト化抗ＣＴＬＡ−４抗体、モノクローナル抗ＣＴＬＡ−４抗体、ポリクローナル抗ＣＴＬＡ−４抗体、キメラ抗ＣＴＬＡ−４抗体、ＭＤＸ−０１０（イピリムマブ）、トレメリムマブ（完全ヒト化）、抗ＣＤ２８抗体、抗ＣＴＬＡ−４アドネクチン、抗ＣＴＬＡ−４ドメイン抗体、一本鎖抗ＣＴＬＡ−４抗体フラグメント、重鎖抗ＣＴＬＡ−４フラグメント、軽鎖抗ＣＴＬＡ−４フラグメント、及び米国特許第８，７４８，８１５；８，５２９，９０２；８，３１８，９１６；８，０１７，１１４；７，７４４，８７５；７，６０５，２３８；７，４６５，４４６；７，１０９，００３；７，１３２，２８１；６，９８４，７２０；６，６８２，７３６；６，２０７，１５６；５，９７７，３１８号；及び欧州特許第ＥＰ１２１２４２２Ｂ１号；及び米国特許出願公開第ＵＳ２００２／００３９５８１及びＵＳ２００２／０８６０１４号；及びＨｕｒｗｉｔｚら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１９９８、９５（１７）：１００６７−１００７１に開示されている抗体が含まれ、それぞれの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００５２】
追加の抗ＣＴＬＡ−４拮抗剤には、限定するものではないが、ＣＴＬＡ−４がリガンドＣＤ８０／８６に結合する能力を妨害することができる任意の阻害剤が含まれる。
抑制性チェックポイント受容体ＰＤ−１（プログラムドデス−１）は、活性化Ｔ細胞上に発現し、通常は上皮細胞、内皮細胞、及び免疫細胞（例えば、ＤＣ、マクロファージ及びＢ細胞）上に発現するプログラムドデスリガンド１及び２（ＰＤ−Ｌ１、Ｂ７−Ｈ１、ＣＤ２７４としても知られている）及びＰＤ−Ｌ２（Ｂ７−ＤＣ、ＣＤ２７３としても知られている）によるライゲーションの後、Ｔ細胞の抑制及びアポトーシスを誘導することができる。ＰＤ−１は主に腫瘍組織を含む末梢組織のエフェクター期にＴ細胞機能を調節する。ＰＤ−１は、活性化Ｔ細胞に加え、Ｂ細胞及び骨髄細胞上に発現している。多くのヒト腫瘍細胞はＰＤ−Ｌ１を発現し、この調節機能を乗っ取って細胞傷害性Ｔリンパ球による免疫認識と破壊を回避することができる。腫瘍関連ＰＤ−Ｌ１はエフェクターＴ細胞のアポトーシスを誘導することが示されており、がんによる免疫回避に寄与すると考えられている。
【００５３】
ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１免疫チェックポイントは、複数の腫瘍タイプ、例えば黒色腫に関与していると考えられる。ＰＤ−Ｌ１は、腫瘍細胞に免疫逃避を提供するだけでなく、活性化されたＴ細胞のアポトーシススイッチをオンにする。この相互作用をブロックする治療法の有望な臨床活性が、いくつかの腫瘍タイプで実証されている。
【００５４】
成分ＩＩは、アンタゴニストペプチド／抗体及び可溶性ＰＤ−Ｌ１／２リガンドを含むＰＤ−１経路を遮断する活性剤を含む。そのような活性剤の非限定的な例を表１に挙げる。
【００５５】
【表１】
2020524677.tif 000005
【００５６】
本開示によれば、成分ＩＩは、ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１／２阻害性チェックポイント経路に対する拮抗剤を含む。一実施形態では、拮抗剤は、高い親和性でＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１／Ｌ２に特異的に結合するアンタゴニスト抗体、又はその機能的フラグメントであり得る。ＰＤ−１抗体は、米国特許第：８，７７９，１０５；８，１６８，７５７；８，００８，４４９；７，４８８，８０２；６，８０８，７１０号；及びＰＣＴ公開番号：ＷＯ２０１２／１４５４９３に教示されている抗体であってもよく、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。高い親和性でＰＤ−Ｌ１に特異的に結合することができる抗体は、米国特許第：８，５５２，１５４；８，２１７，１４９；７，９４３，７４３；７，６３５，７５７号；米国特許出願公開第２００９／０３１７３６８号、及びＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１１／０６６３８９及びＷＯ２０１２／１４５４９３に開示されているものであってもよく、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。いくつかの例では、成分ＩＩは、米国特許第８，００８，４４９号に開示されている１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、５Ｃ４（ニボルマブ又はＢＭＳ−９３６５５８としても知られている）、４Ａ１１、７Ｄ３及び５Ｆ４；ＡＭＰ−２２４、ピジリズマブ（ＣＴ−０１１）、及びペムブロリズマブから選択される抗体を含む。他の例では、抗ＰＤ−１抗体は、ヒトモノクローナル抗ＰＤ−１抗体のバリアント、例えば、米国特許出願公開第２０１５／１２５４６３号に開示されているような、特定のＶＨ／ＶＬペアリングからのＶＨ配列が構造的に類似したＶＨ配列に置換されたか、又は特定のＶＨ／ＶＬペアリングからのＶＬ配列が構造的に類似したＶＬ配列に置換された「混合及び適合化」抗体バリアントであってもよく、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００５７】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、高い親和性でＰＤ−Ｌ１に結合し、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１／２間の相互作用を妨害する拮抗抗体を含む。そのような抗体には、限定するものではないが、米国特許第７，９４３、７４３号（その内容は、参照によりその全体が組み込まれる）に開示された３Ｇ１０、１２Ａ４（ＢＭＳ−９３６５５９とも呼ばれる）、１０Ａ５、５Ｆ８、１０Ｈ１０、１Ｂ１２、７Ｈ１、１１Ｅ６、１２Ｂ７、及び１３Ｇ４、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ４７３６、及びＭＳＢ００１０７１８が含まれる。別の例では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒトモノクローナル抗ＰＤ−Ｌ１抗体のバリアント、例えば、米国特許出願公開第２０１５／１２５４６３号に開示されているような、特定のＶＨ／ＶＬペアリングからのＶＨ配列が構造的に類似したＶＨ配列に置換されたか、又は特定のＶＨ／ＶＬペアリングからのＶＬ配列が構造的に類似したＶＬ配列に置換された「混合及び適合化」抗体バリアントであってもよく、その内容は、参照によりその全体が組み込まれる。
【００５８】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、高い親和性でＰＤ−Ｌ２に結合し、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１／２間の相互作用を妨害する拮抗抗体を含む。例示的な抗ＰＤ−Ｌ２抗体には、限定するものではないが、Ｒｏｚａｌｉらによって教示された抗体（Ｒｏｚａｌｉら、Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  Ｄｅａｔｈ  Ｌｉｇａｎｄ  ２  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、２０１２、第２０１２巻（２０１２年）、記事ＩＤ６５６３４０）、及び米国特許第８，５５２，１５４号（その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に開示されているヒト抗ＰＤ−Ｌ２抗体が含まれ得る。
【００５９】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２により誘導される免疫抑制シグナルを阻害する化合物、例えば、Ｓａｓｉｋｕｍａｒら（Ａｕｒｉｇｅｎｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｅｃｈ．）の米国特許第９２３３９４０号、ＳａｓｉｋｕｍａｒらのＷＯ２０１５０３３３０３に開示されている環状ペプチドミメティック化合物；ＳａｓｉｋｕｍａｒらのＷＯ２０１５０３６９２７に開示されている免疫調節ペプチドミメティック化合物；ＧｏｖｉｎｄａｎらのＵＳ２０１５００７３０２に開示されている１，２，４−オキサジアゾール誘導体；ＳａｓｉｋｕｍａｒらのＷＯ２０１５０３３３０１に開示されている１，３，４−オキサジアゾール及び１，３，４−チアジアゾール化合物；又は、ＳａｓｉｋｕｍａｒらのＷＯ２０１５０４４９００に開示されている式（Ｉ）のペプチド誘導体の治療的免疫調節化合物及び誘導体又は医薬用塩又は式（Ｉ）のペプチド誘導体の立体異性体を含み、その各々の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００６０】
他の実施形態において、成分ＩＩは、ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２リガンドの両方に結合親和性を有する抗体、例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１４／０２２７５８に開示されている抗ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２抗体の単剤を含み、その内容は、参照によりその全体が組み込まれる。
【００６１】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、抗ＰＤ−１抗体、ＰＤ−Ｌ１抗体及びＰＤ−Ｌ２抗体から選択される２つ以上の抗体を含む。一例において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体及び抗ＰＤ−Ｌ２抗体は、リンカーを介して単一のコンジュゲートに含まれてもよい。
【００６２】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１／２媒介性の負のシグナル伝達を同時に遮断することができる調節剤を含む。この調節剤は非抗体剤であってもよい。いくつかの態様では、非抗体剤は、ＰＤ−Ｌ１タンパク質、可溶性ＰＤ−Ｌ１フラグメント、バリアント、及びそれらの融合タンパク質であってもよい。非抗体剤は、ＰＤ−Ｌ２タンパク質、可溶性ＰＤ−Ｌ２フラグメント、バリアント、及びそれらの融合タンパク質であってもよい。ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２ポリペプチド、融合タンパク質、及び可溶性フラグメントは、Ｔ細胞においてＰＤ−１を通して生じる阻害性シグナル伝達を、ＰＤ−１の内因性リガンド（すなわち、内因性ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２）がＰＤ−１と相互作用するのを防止することにより阻害又は低減することができる。加えて、非抗体剤は、可溶性ＰＤ−１フラグメントであってもよく、ＰＤ−１のリガンドに結合してＴ細胞上の内因性ＰＤ−１受容体への結合を妨げるＰＤ−１融合タンパク質であってもよい。一例では、ＰＤ−Ｌ２融合タンパク質はＢ７−ＤＣ−Ｉｇであり、ＰＤ−１融合タンパク質はＰＤ−１−Ｉｇである。別の例において、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２可溶性フラグメントは、それぞれＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２の細胞外ドメインである。一実施形態において、成分ＩＩは、米国特許出願公開第２０１３／０１７１９９号に開示されている非抗体剤を含み、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００６３】
ＣＴＬＡ−４及びＰＤ−１に加えて、他の既知の免疫抑制チェックポイントには、ＴＩＭ−３（Ｔ細胞免疫グロブリン及びムチンドメイン含有分子３）、ＬＡＧ−３（リンパ球活性化遺伝子−３、ＣＤ２２３としても知られている）、ＢＴＬＡ（Ｂ及びＴリンパ球アテニュエーター）、ＣＤ２００Ｒ、ＫＲＬＧ−１、２Ｂ４（ＣＤ２４４）、ＣＤ１６０、ＫＩＲ（キラー免疫グロブリン受容体）、ＴＩＧＩＴ（免疫グロブリン及びＩＴＩＭドメインを持つＴ細胞免疫受容体）、ＶＩＳＴＡ（Ｔ細胞活性化のＶドメイン免疫グロブリン抑制因子）及びＡ２ａＲ（Ａ２ａアデノシン受容体）が含まれる（Ｎｇｉｏｗら、Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ  ｆｏｒ  ＴＩＭ３  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、２０１１、７１（２１）：６５６７−６５７１；Ｌｉｕら、Ｉｍｍｕｎｅ−ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＶＩＳＴＡ  ａｎｄ  ＰＤ−１  ｎｏｎｒｅｄｕｎｄａｎｔｌｙ  ｒｅｇｕｌａｔｅ  ｍｕｒｉｎｅ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ、ＰＮＡＳ、２０１５、１１２（２１）：６６８２−６６８７；及びＢａｉｔｓｃｈら、Ｅｘｔｅｎｄｅｄ  Ｃｏ−Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｂｙ  Ｈｕｍａｎ  ＣＤ８  Ｔ−Ｃｅｌｌｓ  Ｄｅｐｅｎｄｉｎｇ  ｏｎ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ、Ａｎｔｉｇｅｎ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ａｎａｔｏｍｉｃａｌ  Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ．２０１２、Ｐｌｏｓ  Ｏｎｅ、７（２）：ｅ３０８５２）。Ｔ細胞活性化を同様に調節するこれらの分子は、がん免疫療法の標的として評価されている。
【００６４】
ＴＩＭ−３は、ＩＦＮ−γ分泌Ｔヘルパー１（Ｔｈ１／Ｔｃ１）細胞に恒常的に発現する膜貫通タンパク質であり（Ｍｏｎｎｅｙら、Ｔｈ１−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｃｅｌｌ  ｓｕｒｆａｃｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｉｍ−３  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｓｅｖｅｒｉｔｙ  ｏｆ  ａｎ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎａｔｕｒｅ．２００２、４１５：５３６−５４１）、同様に、ＤＣ、単球、ＣＤ８＋Ｔ細胞、及びその他のリンパ球サブセットでも発現している。ＴＩＭ−３は、エフェクターＴｈ１／Ｔｃ１細胞応答を下方制御し、そのリガンドガレクチン−９に結合することでＴｈ１細胞の細胞死を誘導し、末梢性寛容も誘導する阻害分子である（Ｆｏｕｒｃａｄｅら、Ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｉｍ−３  ａｎｄ  ＰＤ−１  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｔｕｍｏｒ  ａｎｔｉｇｅｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃＣＤ８＋Ｔ  ｃｅｌｌ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｊ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２０１０；２０７：２１７５−２１８６）。ＴＩＭ−３をブロックすると、がんワクチンの有効性を高めることができる（Ｌｅｅら、Ｔｈｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ  ａｎｄ  ｍｕｃｉｎ  ｄｏｍａｉｎ  ３（Ｔｉｍ−３）ｐａｔｈｗａｙ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ｔｈｅ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ  ｖａｃｃｉｎｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ、２０１０、４０２：８８−９３）。
【００６５】
腫瘍微小環境の低酸素から生成された細胞外アデノシンは、様々な免疫細胞及び内皮細胞に発現するＡ２ａ受容体に結合することが示されている。免疫細胞でのＡ２ａＲの活性化は、免疫抑制性サイトカイン（例えば、ＴＧＦ−β、ＩＬ−１０）の産生の増加、代替免疫チェックポイント経路受容体（例えば、ＰＤ−１、ＬＡＧ−３）の上方制御、制御性Ｔ細胞表現型に至らせるＣＤ４＋Ｔ細胞でのＦＯＸＰ３発現の増加、及びエフェクターＴ細胞アネルギーの誘起を誘導する。Ｂｅａｖｉｓらは、Ａ２ａＲ遮断がエフェクターＴ細胞機能を改善し、転移を抑制することを実証した（Ｂｅａｖｉｓら、Ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｏｆ  Ａ２Ａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｐｏｔｅｎｔｌｙ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｔｈｅ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ｏｆ  ＣＤ７３＋  ｔｕｍｏｒｓ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ、２０１３、１１０：１４７１１−１４７１６）。Ａ２ａＲ阻害シグナルを遮断するために、ＳＣＨ５８２６１、ＳＹＮ１１５、ＺＭ２４１３６５及びＦＳＰＴＰを含むがこれらに限定されないいくつかのＡ２ａＲ阻害剤が使用される（Ｌｅｏｎｅら、Ａ２ａＲ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ：Ｎｅｘｔ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ、Ｃｏｍｐｕｔ  Ｓｔｒｕｃｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｊ２０１５、１３：２６５−２７２）。
【００６６】
ＬＡＧ−３は、活性化ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞、γδＴ細胞のサブセット、ＮＫ細胞及び制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）に発現するＩ型膜貫通タンパク質であり、免疫応答を負に調節できる（Ｊｈａら、Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ｇｅｎｅ−３（ＬＡＧ−３）Ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ  Ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｌｙ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ、ＰＬｏｓ  Ｏｎｅ、２０１４、９（８）：ｅｌ０４４８４）。ＬＡＧ−３は、Ｔ細胞受容体誘発性カルシウムフラックスを阻害することにより、Ｔ細胞の増殖を負に制御することで、メモリーＴ細胞プールのサイズを制御する。ＬＡＧ−３シグナル伝達は自己免疫応答のＣＤ４＋制御性Ｔ細胞抑制に重要であり、ＬＡＧ−３はＣＤ８＋Ｔ細胞への直接的な影響を介して自己及び腫瘍抗原に対する寛容を維持する。最近の研究は、ＰＤ−１及びＬＡＧ−３の両方の遮断が自己免疫のマウスモデルで免疫細胞の活性化を引き起こす可能性があることを示し、これは、ＬＡＧ−３がチェックポイント遮断のもう１つの重要な潜在的標的となり得ることを支持している。
【００６７】
ＩｇスーパーファミリーのメンバーであるＢＴＬＡは、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）のメンバーであるＨＶＥＭ（ヘルペスウイルス侵入メディエーター、ＴＮＦＲＳＦ１４又はＣＤ２７０としても知られている）に結合する（Ｗａｔａｎａｂｅら、ＢＴＬＡ  ｉｓ  ａ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｗｉｔｈ  ｓｉｍｉｌａｒｉｔｉｅｓ  ｔｏ  ＣＴＬＡ−４  ａｎｄ  ＰＤ−１  Ｎａｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００３、４６７０−６７９。ＨＶＥＭはＴ細胞上に発現している（例えばＣＤ８＋Ｔ細胞）。ＨＶＥＭ−ＢＴＬＡ経路は、Ｔ細胞の増殖の制御に抑制的役割を果たす（Ｗａｎｇら、Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ  ｅｎｔｒｙ  ｍｅｄｉａｔｏｒ  ａｓ  ａ  ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒ  ｏｆ  Ｔ  ｃｅｌｌ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．、２００５、１１５：７４−７７）。ＣＤ１６０は、ＨＶＥＭのもう１つのリガンドである。ＣＤ１６０／ＨＶＥＭの共阻害シグナルは、ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞の活性化を阻害できる（Ｃａｉら、ＣＤ１６０  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ＣＤ４＋Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ  ｅｎｔｒｙ  ｍｅｄｉａｔｏｒ．Ｎａｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００８；９：１７６−１８５）。
【００６８】
ＣＤ２００Ｒは、骨髄細胞に発現するＣＤ２００の受容体である。ＣＤ２００（ＯＸ２）は、多くの細胞で高度に発現される膜糖タンパク質である。研究により、ＣＤ２００とＣＤ２００Ｒの相互作用が、骨髄由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）の数を増加させ得ることが示された（Ｈｏｌｍａｎｎｏｖａら、ＣＤ２００／ＣＤ２００Ｒ  ｐａｉｒｅｄ  ｐｏｔｅｎｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ  ｉｍｍｕｎｅ  ａｎｄ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ；ＰａｒｔＩ：ＣＤ２００／ＣＤ２００Ｒ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ａｃｔａ  Ｍｅｄｉｃａ（Ｈｒａｄｅｃ  Ｋｒａｌｏｖｅ）２０１２、５５（１）：１２−１７；及びＧｏｒｃｚｙｎｓｋｉ、ＣＤ２００  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｓ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇ、２００５、６（５）：４８３−４８８）。
【００６９】
ＴＩＧＩＴは、腫瘍浸潤Ｔ細胞に高度に発現する共阻害受容体である。腫瘍微小環境では、ＴＩＧＩＴはシス型のＴ細胞上の共刺激分子であるＣＤ２２６と相互作用するため、ＣＤ２２６の二量体化を妨害する。この阻害効果は、抗腫瘍応用及び他のＣＤ８＋Ｔ細胞依存性応答を決定的に制限する可能性がある（Ｊｏｈｎｓｔｏｎｅら、Ｔｈｅ  ｉｍｍｕｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒ  ＴＩＧＩＴ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｎｄ  ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ＣＤ８（＋）Ｔ  ｃｅｌｌ  ｅｆｆｅｃｔｅｒ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ、Ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌ、２０１４、２６（６）：９２３−９３７）。
【００７０】
ＫＩＲは、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ）上に発現する細胞表面タンパク質のファミリーである。それらは、あらゆる細胞タイプで発現されるＭＨＣクラスＩ分子と相互作用することにより、これらの細胞の殺傷機能を調節し、ウイルス感染細胞又は腫瘍細胞の検出を可能にする。ほとんどのＫＩＲは抑制性であり、これはこれらによるＭＨＣ分子の認識がＮＫ細胞の細胞傷害活性を抑制することを意味する（Ｉｖａｒｓｓｏｎら、Ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ｋｉｌｌｅｒ  ｃｅｌｌ  Ｉｇ−ｌｉｋｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｎ  ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  ｄｉｓｅａｓｅ、Ｆｒｏｎｔｉｅｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕ．２０１４、５：１−９）。
【００７１】
Ｔ細胞の活性化に影響を与える追加の共阻害シグナルには、限定するものではないが、ＫＬＲＧ−１、２Ｂ４（ＣＤ２４４とも呼ばれる）、及びＶＩＳＴＡが含まれる（Ｌｉｎｅｓら、ＶＩＳＴＡ  ｉｓ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｂｒｏａｄ−ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｓ．、２０１４、２（６）：５１０−５１７）。
【００７２】
本開示によれば、成分ＩＩは、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３（ＣＤ２２３）、ＢＴＬＡ、ＣＤ１６０、ＣＤ２００Ｒ、ＴＩＧＩＴ、ＫＲＬＧ−１、ＫＩＲ、２Ｂ４（ＣＤ２４４）、ＶＩＳＴＡ、Ａ２ａＲ、及びその他の免疫チェックポイントから選択される共阻害分子のアンタゴニスト又は阻害剤を含む。いくつかの態様において、アンタゴニスト剤は、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３（ＣＤ２２３）、ＢＴＬＡ、ＣＤ１６０、ＣＤ２００Ｒ、ＴＩＧＩＴ、ＫＲＬＧ−１、ＫＩＲ、２Ｂ４（ＣＤ２４４）、ＶＩＳＴＡ及びＡ２ａＲから選択される共阻害チェックポイント分子に対するアンタゴニスト抗体又はその機能的フラグメントであってもよい。
【００７３】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、ＬＡＧ−３（ＣＤ２２３）に特異的な拮抗抗体及び／又はその機能的フラグメントを含む。このような拮抗抗体は、ＬＡＧ−３（ＣＤ２２３）に特異的に結合し、腫瘍における制御性Ｔ細胞を阻害する。一例において、それは、米国特許第９，００５，６２９及び８，５５１，４８１号に開示されている拮抗性抗ＬＡＧ−３（ＣＤ２２３）抗体であってもよい。成分ＩＩはまた、米国特許第９，００５，６２９及び８，５５１，４８１号（それぞれの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に開示された方法を用いて同定された、ＣＤ２２３の機能に不可欠なＬＡＧ−３（ＣＤ２２３）細胞質ドメインのアミノ酸モチーフＫＩＥＥＬＥに結合する任意の阻害剤を含んでもよい。ＬＡＧ−３（ＣＤ２２３）に特異的な他の拮抗抗体には、米国特許出願公開第２０１３００５２６４２号に開示されている抗体が含まれてもよく、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００７４】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、ＴＩＭ−３に特異的な拮抗抗体及び／又はその機能的フラグメントを含む。そのような拮抗抗体は、ＴＩＭ−３に特異的に結合し、腫瘍細胞などのＴＩＭ−３発現細胞内に内在化して、腫瘍細胞を殺す。他の態様において、ＴＩＭ−３の細胞外ドメインに特異的に結合するＴＩＭ−３特異的抗体は、例えば抗体の非存在下での増殖と比較して、結合時にＴＩＭ−３発現細胞の増殖を阻害し、Ｔ細胞活性化、エフェクター機能、又は腫瘍部位へのトラフィキングを促進することができる。一例では、拮抗性抗ＴＩＭ−３抗体は、米国特許第８，８４１，４１８；８，７０９，４１２；８，６９７，０６９；８，６４７，６２３；８，５８６，０３８；及び８，５５２，１５６号に開示されている任意の抗体から選択することができ、これらのそれぞれの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００７５】
加えて、拮抗性のＴＩＭ−３特異的抗体は、米国特許第８，６９７，０６９；８，１０１，１７６；及び７，４７０，４２８号に開示されているようなモノクローナル抗体８Ｂ．２Ｃ１２、２５Ｆ．１Ｄ６であってもよく、これらのそれぞれの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００７６】
他の実施形態において、成分ＩＩは、ガレクチン−９に特異的に結合してＴＩＭ−３へのその結合を中和することができる作用剤を含み、その作用剤には、ＰＣＴ公開番号２０１５／０１３３８９（その内容は、参照によりその全体が組み込まれる）に開示された中和抗体が含まれる。
【００７７】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、米国特許第８，２４７，５３７；８，５８０，２５９号に開示されている抗体及び抗体の抗原結合部分、米国特許第８，５６３，６９４号の完全ヒトモノクローナル抗体、及び米国特許第８，１８８，２３２号のＢＴＬＡブロッキング抗体を含むがこれらに限定されない、ＢＴＬＡに特異的な拮抗抗体、及び／又はその機能的フラグメントを含み、これらのそれぞれの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００７８】
ＢＴＬＡ及びその受容体ＨＶＥＭを阻害できる他のさらなる拮抗剤には、ＰＣＴ公開番号：２０１４／１８４３６０；２０１４／１８３８８５；２０１０／００６０７１及び２００７／０１０６９２に開示された作用剤が含まれ、これらのそれぞれの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００７９】
特定の実施形態において、成分ＩＩは、ＫＩＲに特異的な拮抗抗体、及び／又はその機能的フラグメント、例えば、Ｂｅｎｓｏｎら（Ａ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｔｉ−ＫＩＲ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ＩＰＨ２１０１  ａｎｄ  ｌｅｎａｌｉｄｏｍｉｄｅ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｒｅｌａｐｓｅｄ／ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｍｙｅｌｏｍａ，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２０１５年５月２１日、ｐｉｉ：ｃｌｉｎｃａｎｒｅｓ．０３０４．２０１５）によって教示されたＩＰＨ２１０１を含み、その内容は、参照によりその全体が組み込まれる。
【００８０】
他の実施形態では、アンタゴニスト剤は、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３（ＣＤ２２３）、ＢＴＬＡ、ＣＤ１６０、ＣＤ２００Ｒ、ＴＩＧＩＴ、ＫＲＬＧ−１、ＫＩＲ、２Ｂ４（ＣＤ２４４）、ＶＩＳＴＡ及びＡ２ａＲから選択される共阻害チェックポイント分子の阻害機能を阻害できる任意の化合物であり得る。
【００８１】
いくつかの例では、アンタゴニスト剤は、ＬＡＧ−３−Ｉｇ融合タンパク質（ＩＭＰ３２１）などの非抗体阻害剤（Ｒｏｍａｎｏら、Ｊ  ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、２０１４、１２：９７）、及びＢＴＬＡ）／ＣＤ１６０−ＨＶＥＭ）経路のアンタゴニストである単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）−１糖タンパク質Ｄ（ｇＤ）（Ｌａｓａｒｏら、Ｍｏｌ  Ｔｈｅｒ．２０１１；１９（９）：１７２７−１７３６）であってもよい。
【００８２】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、二重特異性又は多重特異性の作用剤を含む。本明細書で使用する「二重特異性作用剤」及び「多重特異性作用剤」という用語は、２つの標的又は複数の標的に同時に結合できる任意の作用剤を指す。いくつかの態様において、二重特異性作用剤は、第１の標的に結合する第１のペプチド配列及び第２の異なる標的に結合する第２のペプチド配列を有する二重特異性ペプチド剤であり得る。２つの異なる標的は、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１  ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３（ＣＤ２２３）、ＢＴＬＡ、ＣＤ１６０、ＣＤ２００Ｒ、ＴＩＧＩＴ、ＫＲＬＧ−１、ＫＩＲ、２Ｂ４（ＣＤ２４４）、ＶＩＳＴＡ及びＡ２ａＲから選択される２つの異なる抑制チェックポイント分子であってもよい。二重特異性ペプチド剤の非限定的な例は、二重特異性抗体又はその抗原結合フラグメントである。同様に、多重特異性作用剤は、２つ以上の標的に結合するための２つ以上の特異的結合配列ドメインを有する多重ペプチド特異性作用剤であってもよい。例えば、多重特異性ポリペプチドは、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、又はそれ以上の標的に結合することができる。多重特異性ペプチド剤の非限定的な例は、多重特異性抗体又はその抗原結合フラグメントである。
【００８３】
一例では、そのような二重特異性作用剤は、米国特許出願公開第２０１３／０１５６７７４号に開示されているようなＴＩＭ−３及びＰＤ−１を標的とする二重特異性ポリペプチド抗体バリアントであり、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００８４】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、１つのコンジュゲート中のリンカーを介して連結された１つ、２つ又は複数のチェックポイントアンタゴニスト／阻害剤を有するコンジュゲートを含む。
【００８５】
いくつかの実施形態において、成分ＩＩは、チェックポイント受容体に結合してそれを阻害する任意の作用剤を含む。チェックポイント受容体は、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＣＤ２８、誘導性Ｔ細胞共刺激因子（ＩＣＯＳ）、Ｂ及びＴリンパ球アテニュエーター（ＢＴＬＡ）、キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）、リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ３）、ＣＤ１３７、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ４０Ｌ、Ｔ細胞膜タンパク質３（ＴＩＭ３）、及びアデノシンＡ２ａ受容体（Ａ２ａＲ）からなる群から選択される。
【００８６】
一例では、成分ＩＩはＣＴＬＡ−４アンタゴニストを含む。
別の例では、成分ＩＩはＰＤ−１アンタゴニストを含む。
さらに別の例では、成分ＩＩはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストを含む。
【００８７】
Ｚｅｓｔｅホモログエンハンサー（ＥＺＨ）阻害剤
Ｓｃｈｌａｆｅｎファミリーメンバー１１（ＳＬＦＮ１１）はＤＮＡ修復欠損に関与するタンパク質であり、ＤＮＡ修復タンパク質と相互作用することが示されている。前臨床データに基づくと、これは、イリノテカンを含むＤＮＡ損傷剤に対する感受性の潜在的なマーカーである。ＳＬＦＮ１１の喪失は、エピジェネティックなサイレンシングを介して発生する可能性があり、このサイレンシングは、ＤＮＡ損傷を引き起こす化学療法に対する耐性を引き起こす可能性がある。カルボプラチン／シスプラチンに耐性の卵巣がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）及び乳がん細胞株では、ＳＬＦＮ１１遺伝子座はメチル化によってサイレンシングされる。また、このタンパク質を発現する細胞でＳＬＦＮ１１がノックダウンされると、以前は白金製剤に感受性であった細胞の耐性が増加することが分かっている。臨床の場では、白金製剤での生存率が低いＮＳＣＬＣ及び卵巣がん患者の一部は、ＳＬＦＮ１１遺伝子座のサイレンシングを示した。化学療法抵抗性のがん患者のＳＬＦＮ１１発現を増加及び／又は回復させることが望ましい。
【００８８】
Ｚｅｓｔｅホモログエンハンサー（ＥＺＨ）タンパク質はＳＬＦＮ１１サイレンシングに関与することが示されている。ＥＺＨはヒストンメチラーゼであり、遺伝子の転写を抑制しており、がん細胞で過剰発現及び／又は過剰に活性化する可能性がある。シスプラチン／エトポシドに耐性であるように開発されたＳＣＬＣ前臨床モデルは、感受性モデルと比較してＳＬＦＮ１１の下方制御を示し、化学療法抵抗性細胞株におけるＥＺＨ阻害剤による治療は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏで感受性を回復させることができる。ＥＺＨ阻害剤と組み合わせた化学療法薬は、がん細胞の化学療法抵抗性を防ぐ可能性がある。
【００８９】
いくつかの実施形態において、併用療法の成分Ｉはコンジュゲート１であり、併用療法の成分ＩＩはＥＺＨ阻害剤である。任意のＥＺＨ阻害剤、例えばＥＺＨ１及び２阻害剤ならびにデュアルインヒビターを、成分ＩＩとして使用することができる。ＥＺＨ阻害剤の非限定的な例には、ＥＰＺ０１１９８９（遊離塩基ＣＡＳ番号１５９８３８３−４０−４）、ＥＰＺ００５６８７（ＣＡＳ番号１３９６７７２−２６−１）、ＧＳＫ１２６（ＣＡＳ番号１３４６５７４−５７−９）、ＧＳＫ３４３（ＣＡＳ番号１３４６７０４−３３−３）、ＧＳＫ５０３（ＣＡＳ番号１３４６５７２−６３−１）、タゼメトスタット（ＥＰＺ−６４３８、ＣＡＳ番号１４０３２５４−９９−８）、３−デアザネプラノシンＡ（ＤＺＮｅＰ、ＨＣｌ塩ＣＡＳ番号１２０９６４−４５−６）、ＥＩｌ（ＣＡＳ番号１４１８３０８−２７−６）、ＣＰＩ−３６０（ＣＡＳ番号１８０２１７５−０６−９）、ＣＰＩ−１６９（ＣＡＳ番号１４５０６５５−７６−１）、ＪＱ−ＥＺ−０５（ＪＱＥＺ５、ＣＡＳ番号１９１３２５２−０４−６）、ＰＦ−０６７２６３０４（ＣＡＳ番号１６１６２８７−８２−１）、ＵＮＣ１９９９（ＣＡＳ番号１４３１６１２−２３−５）、及びＵＮＣ２４００（ＣＡＳ番号１４３３２００−４９−７）が含まれる。
【００９０】
製剤及び投与
本開示の併用療法における各成分は、以下のために１つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤を使用して製剤化することができる：（１）安定性を向上させる；（２）持続放出又は遅延放出を許容する（例えば、モノマレイミドのデポ製剤から）；（３）生体内分布を変更する（例えば、モノマレイミド化合物を特定の組織又は細胞タイプに向ける）；（４）ｉｎ  ｖｉｖｏでモノマレイミド化合物の放出プロファイルを変更する。成分Ｉ及び成分ＩＩは、それぞれ異なる組成物で投与することができる。
【００９１】
賦形剤の非限定的な例には、ありとあらゆる溶媒、分散媒、希釈剤、又は他の液体ビヒクル、分散又は懸濁助剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤又は乳化剤、及び防腐剤が含まれる。賦形剤には、限定するものではないが、リピドイド、リポソーム、脂質ナノ粒子、ポリマー、リポプレックス、コアシェルナノ粒子、ペプチド、タンパク質、ヒアルロニダーゼ、ナノ粒子模倣物及びそれらの組合せも含まれる。したがって、各成分の製剤は、それぞれが有効成分の安定性を一緒に増加させる量の１つ又は複数の賦形剤を含むことができる。
【００９２】
ＲｅｍｉｎｇｔｏｎのＴｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２１版、Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ，２００６；その全体が参照により本明細書に組み込まれる）には、医薬組成物の製剤化に使用される様々な賦形剤及びその調製のための既知の技術が開示されている。望ましくない生物学的効果を生じるか、他の態様で医薬組成物の他の成分と有害な様式で相互作用するなどして、従来の賦形剤媒体が物質又はその誘導体と適合しない場合を除き、その使用は本開示の範囲内にあると考えられる。
【００９３】
本発明による医薬組成物中の有効成分、薬学的に許容される賦形剤、及び／又は任意の追加成分の相対量は、治療される対象の固有性、大きさ、及び／又は状態、さらには組成物が投与される経路に応じて変動し得る。例として、組成物は、０．１％〜１００％、例えば０．５〜５０％、１〜３０％、５〜８０％、少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の有効成分を含むことができる。
【００９４】
いくつかの実施形態では、薬学的に許容される賦形剤は、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％純粋である。いくつかの実施形態において、賦形剤は、ヒトでの使用及び獣医学的使用について承認されている。いくつかの実施形態では、賦形剤は米国食品医薬品局によって承認されている。いくつかの実施形態では、賦形剤は医薬品グレードである。いくつかの実施形態において、賦形剤は、米国薬局方（ＵＳＰ）、欧州薬局方（ＥＰ）、英国薬局方、及び／又は国際薬局方の基準を満たす。
【００９５】
いくつかの実施形態において、コンジュゲート１は医薬組成物として患者に投与され、医薬組成物は約４．０〜約５．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、約４．０〜約４．８のｐＨを有する酢酸緩衝液（酢酸ナトリウム及び酢酸）を含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、マンニトール及びヒドロキシステアリン酸ポリオキシル１５をさらに含む。
【００９６】
一実施形態において、コンジュゲート１を投与するための注射用溶液の組成物が提供される。溶液は、コンジュゲート１、マンニトール、ヒドロキシステアリン酸ポリオキシル１５、及び酢酸緩衝水溶液を含む。組成物は静脈内（ＩＶ）注入されてもよい。
【００９７】
粒子
いくつかの実施形態において、併用療法の少なくとも１つの成分は、ポリマー粒子、脂質粒子、無機粒子、又はそれらの組合せ（例えば、脂質安定化ポリマー粒子）などの粒子に製剤化される。いくつかの実施形態において、粒子は固体ポリマー子粒子であるか、ポリマーマトリックスを含む。粒子は、本明細書に記載のポリマー又はその誘導体もしくはコポリマーのいずれを含んでもよい。粒子は一般に１つ以上の生体適合性ポリマーを含む。ポリマーは生分解性ポリマーであり得る。ポリマーは、疎水性ポリマー、親水性ポリマー、又は両親媒性ポリマーであり得る。いくつかの実施形態では、粒子は、追加の標的化部分が結合した１つ又は複数のポリマーを含む。
【００９８】
併用療法の成分は、２０１３年１２月３０日に出願されたＢｉｌｏｄｅａｕらの国際公開第２０１４／１０６２０８号に開示された任意の粒子を用いて製剤化することができ、その内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００９９】
粒子のサイズは、目的の用途に合わせて調節することができる。粒子はナノ粒子でもマイクロ粒子でもよい。粒子は、約１０ｎｍ〜約１０ミクロン、約１０ｎｍ〜約１ミクロン、約１０ｎｍ〜約５００ｎｍ、約２０ｎｍ〜約５００ｎｍ、又は約２５ｎｍ〜約２５０ｎｍの直径を有することができる。いくつかの実施形態において、粒子は、約２５ｎｍ〜約２５０ｎｍの直径を有するナノ粒子である。複数の粒子はある範囲にわたるサイズを有することが当業者によって理解され、直径は粒度分布のメジアン径であると理解される。
【０１００】
いくつかの実施形態において、粒子中の併用療法の成分の重量パーセントは、少なくとも約０．０５％、０．１％、０．５％、１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、又は５０％であり、粒子の成分の重量パーセントの合計は１００％である。いくつかの実施形態において、粒子中の成分の重量パーセントは、約０．５％〜約１０％、又は約１０％〜約２０％、又は約２０％〜約３０％、又は約３０％〜約４０％、又は約４０％〜約５０％、又は約５０％〜約６０％、又は約６０％〜約７０％、又は約７０％〜約８０％、又は約８０％〜約９０％、又は約９０％〜約９９％であり、粒子の全ての成分の重量パーセントの合計は１００％である。
【０１０１】
投与
併用療法の成分は、治療的に有効な結果をもたらす任意の経路で投与することができる。これらには、限定するものではないが、経腸、胃腸、硬膜外、経口、経皮、硬膜外（ｅｐｉｄｕｒａｌ，ｐｅｒｉｄｕｒａｌ）、脳内（大脳内へ）、脳室内（大脳室内へ）、皮膚上（皮膚への塗布）、皮内、（皮膚自体の中へ）、皮下（皮膚の下）、経鼻投与（鼻を通して）、静脈内（静脈の中へ）、動脈内（動脈の中へ）、筋肉内（筋肉の中へ）、心臓内（心臓の中へ）、骨内注入（骨髄の中へ）、髄腔内（脊柱管内へ）、腹腔内、（腹膜内への注入又は注射）、膀胱内注入、硝子体内、（眼を通して）、海綿体内注射、（陰茎の基部へ）、膣内投与、子宮内、羊膜外投与、経皮（全身分布のための無傷の皮膚を介した拡散）、経粘膜（粘膜を介した拡散）、インサフレーション（スノーティング）、舌下、陰唇下、浣腸、点眼（結膜の上）、又は点耳が含まれる。特定の実施形態において、組成物は、それらが血液脳関門、血管関門、又は他の上皮関門を通過することを可能にする方法で投与され得る。
【０１０２】
本明細書に記載の製剤は、それを必要とする患者への投与に適した医薬担体中に有効量の成分を含む。製剤は、非経口的に（例えば、注射又は注入により）投与されてもよい。製剤又はその変更物は、経腸的、局所的（例えば、眼へ）、又は肺投与を含む任意の方法で投与されてもよい。いくつかの実施形態では、製剤は局所投与される。
【０１０３】
投与量
各成分について患者が必要とする正確な量は、対象の種、年齢、及び全身状態、疾患の重症度、個々の組成物、その投与様式、その作用様式等に応じて、対象ごとに異なる。
【０１０４】
併用療法の成分は、典型的には、投与の容易さ及び投与量の均一性のために投与単位形態で製剤化される。しかしながら、本発明の組成物の総１日使用量は、主治医により妥当な医学的判断の範囲内で決定され得ることが理解されるであろう。特定の患者に対する特定の治療的に有効な、予防的に有効な、又は適切な用量レベルは、治療中の疾患及び疾患の重症度を含む様々な要因；使用される特定の化合物の活性；採用された特定の組成物；患者の年齢、体重、一般的な健康状態、性別及び食事；投与時間、投与経路、及び使用される特定の化合物の排泄速度；治療期間の長さ；使用される特定の化合物と組み合わせて又は同時に使用される薬物；及び医学分野で周知の類似の要因に依存する。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、本開示による併用療法の成分は、所望の治療効果、診断効果、予防効果、又は画像化効果を得るために、１日に対象の体重当たり約０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、又は約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇを送達するのに十分な用量レベルで、１日に１回以上投与されてもよい。
【０１０６】
所望の用量は、１日３回、１日２回、１日１回、１日おき、３日ごと、毎週、２週間ごと、３週間ごと、又は４週間ごとに送達され得る。いくつかの実施形態において、所望の用量は、複数回の投与（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又はそれ以上の回数の投与）を使用して送達され得る。複数回の投与が採用される場合、本明細書に記載のような分割投与レジメンが使用され得る。
【０１０７】
成分の濃度は、医薬組成物中、約０．０１ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約２５ｍｇ／ｍＬ、約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬ、又は約１ｍｇ／ｍＬ〜約５ｍｇ／ｍＬであってもよい。
【０１０８】
本明細書で使用する「分割用量」は、単一単位用量又は総１日用量を２回以上の用量に分割すること、例えば、単一単位用量の２回以上の投与である。本明細書で使用する場合、「単一単位用量」は、１用量／一回／単一経路／単一接触点、すなわち単一投与事象で投与される任意の治療薬の用量である。本明細書で使用する場合、「総１日用量」は、２４時間の期間に与えられる又は処方される量である。単回投与として投与してもよい。一実施形態では、本発明のモノマレイミド化合物は、分割用量で対象に投与される。モノマレイミド化合物は、緩衝液のみ又は本明細書に記載の製剤で製剤化されてもよい。
【０１０９】
対象は、１週間、２週間、３週間、４週間、１ヵ月、２ヵ月、３ヵ月、４ヵ月、５ヵ月、６ヵ月、７ヵ月、８ヵ月、９ヵ月、１０ヵ月、１１ヵ月、１年、又は所定の節目（例えば、９０％、９５％、又は９９％を超えるＴＧＩ％）に到達するまでなどの任意の適切な長さで併用療法を受けることができる。
【０１１０】
ＩＩ．併用療法の使用方法
本開示の一態様は、がんなどの過剰増殖性疾患を有する対象を治療する方法を提供し、この方法は、少なくとも２つの別個の治療薬の併用療法を含む。いくつかの実施形態において、この方法は、患者に：（Ａ）有効成分として、成分Ｉ、又はそのプロドラッグ、誘導体、又は薬学的に許容される塩を含む第１の成分；及び（Ｂ）有効成分として、成分ＩＩ、又はそのプロドラッグ、誘導体、又は薬学的に許容される塩を含む第２の成分を投与することを含む。
【０１１１】
本開示によれば、がんは、腫瘍、例えば固形腫瘍又は任意の新生物によって特徴付けられ得る。いくつかの実施形態では、がんは固形腫瘍である。大きな薬物分子は、固形腫瘍への浸透が制限されている。大きな薬物分子の浸透は遅い。一方、小分子コンジュゲートなどの小分子は、固形腫瘍に迅速かつより深く浸透することができる。薬物の浸透深度に関して、大きい分子は薬物動態においてより長続きするが、浸透は浅くなる。
【０１１２】
いくつかの実施形態において、併用療法はがん及び／又は腫瘍の成長を阻害する。併用療法はまた、細胞増殖、侵襲性、及び／又は転移を含めて減少させる可能性があり、それによってそれらをがんの治療に有用にする。
【０１１３】
いくつかの実施形態では、併用療法は、腫瘍又はがんの成長を防止するために、及び／又は腫瘍又はがんの転移を防止するために使用され得る。いくつかの実施形態において、併用療法は、がんを縮小又は破壊するために使用され得る。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、併用療法は、がん細胞の増殖を阻害するのに有用である。いくつかの実施形態において、併用療法は、細胞増殖の阻害、例えば、細胞増殖の速度の阻害、細胞増殖の防止、及び／又は細胞死の誘導に有用である。一般に、併用療法は、がん細胞の細胞増殖を阻害するか、又はがん細胞の増殖を阻害及び／又は細胞死を誘導することができる。いくつかの実施形態において、細胞増殖は、本開示の併用療法での治療後、治療なしの細胞と比較して少なくとも約２５％、約５０％、約７５％、又は約９０％減少する。いくつかの実施形態では、細胞周期停止マーカーであるリン酸化ヒストンＨ３（ＰＨ３又はＰＨＨ３）は、治療なしの細胞と比較して、併用療法での治療後に少なくとも約５０％、約７５％、約１００％、約２００％、約４００％又は約６００％増加する。いくつかの実施形態では、細胞アポトーシスマーカーである切断カスパーゼ−３（ＣＣ３）は、治療なしの細胞と比較して、併用療法での治療後に少なくとも５０％、約７５％、約１００％、約２００％、約４００％又は約６００％増加する。
【０１１５】
さらに、いくつかの実施形態において、併用療法は、複数種の腫瘍において腫瘍増殖の阻害に有効であり、これはサイズの正味値（重量、表面積又は体積）として測定するか、経時的な増殖率として測定するかを問わない。
【０１１６】
いくつかの実施形態において、併用療法による治療後、腫瘍のサイズは約６０％以上減少する。いくつかの実施形態では、腫瘍のサイズは、重量、及び／又は面積及び／又は体積の測定で少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約１００％減少する。
【０１１７】
いくつかの実施形態において、併用療法を受ける対象の腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）は、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、又は９９％であり得る。
本開示の併用療法により治療可能ながんは、一般に哺乳動物で発生する。哺乳動物には、例えば、ヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ウサギ、フェレット、モルモット、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、及びウシが含まれる。様々な実施形態において、がんは、肺がん、乳がん、例えば、突然変異体ＢＲＣＡ１及び／又は突然変異型ＢＲＣＡ２乳がん、非ＢＲＣＡ関連乳がん、大腸がん、卵巣がん、膵臓がん、大腸がん、膀胱がん、前立腺がん、子宮頸がん、腎臓がん、白血病、中枢神経系がん、骨髄腫、及び黒色腫である。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、がんは、神経内分泌がん、例えば、限定するものではないが、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）、副腎髄質腫瘍（例えば、褐色細胞腫、神経芽細胞腫、神経節腫、又は傍神経節腫）、膵・消化管神経内分泌腫瘍（例えば、カルチノイド、ガストリノーマ、グルカゴノーマ、血管作動性腸管ポリペプチド分泌腫瘍、膵ポリペプチド分泌腫瘍、非機能性胃腸膵腫瘍）、甲状腺髄様癌、皮膚のメルケル細胞腫瘍、下垂体腺腫、及び膵臓がんである。いくつかの実施形態では、神経内分泌がんは、原発性神経内分泌がんである。いくつかの実施形態では、神経内分泌がんは神経内分泌転移である。神経内分泌転移は、対象の肝臓、肺、骨、又は脳にある場合がある。特定の実施形態では、がんは、脳がん、ヒト肺がん、卵巣がん、膵臓がん又は大腸がんである。
【０１１９】
一実施形態において、本開示の併用療法は、小細胞肺がんを治療するために使用される。肺がんの患者の約１２％〜１５％は小細胞肺がんを有する。転移性小細胞肺がんの生存率は低い。生存率は診断後５年で５％未満である。米国の小細胞肺がんの発生率は約２６Ｋ〜３０Ｋである。これらの患者のうち、約４０％〜８０％がＳＳＴＲ２陽性である。
【０１２０】
一実施形態において、本開示の併用療法は、組織学的に証明された局所進行性又は転移性の高グレード神経内分泌がん（ＮＥＣ）を有する患者を治療するために使用される。いくつかの実施形態では、患者は、未知の原発部位又は任意の肺外部位の小細胞及び大細胞の神経内分泌がんを有していてもよい。いくつかの実施形態では、Ｋｉ−６７＞３０％の場合、患者は十分に分化したＧ３神経内分泌腫瘍を有する場合がある。いくつかの実施形態において、小細胞又は大細胞組織学の場合、患者は前立腺の神経内分泌前立腺がん（デノボ又は治療下で発現）を有し得る。いくつかの実施形態において、患者は、グレードの高い（小細胞又は大細胞）ＮＥＣ成分が元のサンプル又はその後の生検の５０％を超える場合、混合腫瘍、例えば、複合型腺神経内分泌癌（ＭＡＮＥＣ）又は混合扁平上皮又は腺房細胞ＮＥＣを有し得る。いくつかの実施形態において、患者は去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）を有してもよい。
【０１２１】
併用療法の成分の特徴は、生物に対する毒性が比較的低くありながら、阻害の効力、例えば、腫瘍の成長を遅らせ又は止める効力を維持している点である。本明細書で使用する「毒性」とは、物質又は組成物が細胞、組織生物又は細胞環境に対して有害又は有毒となる能力を指す。低毒性とは、物質又は組成物が細胞、組織生物、又は細胞環境に対して有害又は有毒となる能力が低いことを指す。そのような低下した又は低い毒性は、標準的な尺度と、治療と、又は治療の欠如と比較したものであり得る。例えば、有効成分としてＳＮ−３８を含むコンジュゲート１は、単独で投与されたＳＮ−３８よりも毒性が低い。
【０１２２】
毒性が、体重の１５％を超える、２０％を超える、又は３０％を超える体重減少として示される場合、毒性は対象の体重減少と比較してさらに測定することができる。嗜眠や全身倦怠感を含む患者の症状の測定基準など、他の毒性の測定基準でも測定できる。好中球減少、血小板減少、白血球（ＷＢＣ）数、完全血球（ＣＢＣ）数も毒性の指標となる場合がある。毒性の薬理学的指標には、アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ／ＡＬＴ）レベルの上昇、神経毒性、腎障害、ＧＩ障害などが含まれる。一実施形態では、本開示の併用療法は、対象の体重の大きな変化を引き起こさない。対象の体重減少は、本開示の併用療法による治療後、約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、又は約５％未満である。別の実施形態において、本開示の併用療法は、対象のＡＳＴ／ＡＬＴレベルの大きな増加を引き起こさない。対象のＡＳＴ又はＡＬＴレベルは、本開示の併用療法による治療後、約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、又は約５％未満増加する。さらに別の実施形態では、本開示の併用療法は、本開示の併用療法による治療後、対象のＣＢＣ又はＷＢＣカウントの大きな変化を引き起こさない。対象のＣＢＣ又はＷＢＣレベルは、本開示の併用療法による治療後、約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、又は約５％未満減少する。
【０１２３】
ＩＩＩ．キット及びデバイス
本開示の一態様は、本発明の方法を好都合に及び／又は効果的に実施するための様々なキット及びデバイスを提供する。通常、キットは、ユーザが対象の複数の治療を実行できるように、及び／又は複数の実験を実行できるようにするのに十分な量及び／又は数の成分を含む。
【０１２４】
一実施形態では、本発明は、少なくとも２つの異なる治療薬を含む、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏで腫瘍細胞増殖を阻害するためのキットを提供する。いくつかの実施形態において、腫瘍細胞増殖を阻害するためのキットは：（Ａ）有効成分として、成分Ｉ、又はそのプロドラッグ、誘導体、又は薬学的に許容される塩を含む第１の成分；及び（Ｂ）有効成分として、成分ＩＩ、又はそのプロドラッグ、誘導体、又は薬学的に許容される塩を含む第２の成分を含む。
【０１２５】
キットは、製剤組成物を形成するための包装及び説明書及び／又は送達剤をさらに含んでもよい。送達剤は、生理食塩水、緩衝液、又は本明細書に開示の任意の送達剤を含んでもよい。各作用剤の量は、一貫性があり再現可能な高濃度生理食塩水又は単純な緩衝液製剤を可能にするために変更されてもよい。作用剤はまた、ある期間にわたって及び／又は様々な条件下で併用療法の成分の安定性を高めるために変更することができる。
【０１２６】
本開示は、併用療法の成分を組み込むことができるデバイスを提供する。これらのデバイスは、ヒト患者など、それを必要とする対象に即座に送達するために利用可能な安定した製剤を含む。いくつかの実施形態において、対象はがんを有する。
【０１２７】
デバイスの非限定的な例には、ポンプ、カテーテル、針、経皮パッチ、加圧式嗅覚器官送達（ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ  ｏｌｆａｃｔｏｒｙ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ）デバイス、イオン導入デバイス、多層マイクロ流体デバイスが含まれる。デバイスは、単一、複数、又は分割投与レジメンに従って併用療法の成分を送達するために使用されてもよい。デバイスは、生体組織全体、皮内、皮下、又は筋肉内に併用療法の成分を送達するために使用されてもよい。
【０１２８】
ＩＶ．定義
本明細書で使用する「化合物」という用語は、描かれた構造のすべての立体異性体、幾何異性体、互変異性体、及び同位体を含むことを意味する。本願において、化合物はコンジュゲートと互換可能に使用される。したがって、本明細書で使用されるコンジュゲートも、描かれた構造のすべての立体異性体、幾何異性体、互変異性体、及び同位体を含むことを意味する。
【０１２９】
本明細書に記載される化合物は、非対称であり得る（例えば、１つ以上のキラル中心を有する）。エナンチオマー及びジアステレオマーなどのすべての立体異性体は、特に明記しない限り意図されている。非対称的に置換された炭素原子を含む本開示の化合物は、光学的に活性な形態又はラセミ形態で単離することができる。光学活性出発物質から光学活性体を調製する方法は、ラセミ混合物の分割や立体選択的合成などによることが、当技術分野で知られている。オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合などの多くの幾何異性体も本明細書に記載の化合物に存在する可能性があり、そのような安定な異性体はすべて本開示で考慮される。本開示の化合物のシス及びトランス幾何異性体が記載されており、異性体の混合物として、又は分離された異性体として単離され得る。
【０１３０】
本開示の化合物は、互変異性形態も含む。互変異性体は、単結合と隣接する二重結合との交換と、それに伴うプロトンの移動により生じる。互変異性体には、同じ実験式と総電荷を持つ異性体のプロトン化状態であるプロトトロピック互変異性体が含まれる。プロトトロピック互変異性体の例には、ケトン−エノールペア、アミド−イミド酸ペア、ラクタム−ラクチムペア、アミド−イミド酸ペア、エナミン−イミンペア、及びプロトンが複素環系の２つ以上の位置を占めることができる環状型、例えば、１Ｈ−及び３Ｈ−イミダゾール、１Ｈ−、２Ｈ−及び４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、１Ｈ−及び２Ｈ−イソインドール、及び１Ｈ−及び２Ｈ−ピラゾールが含まれる。互変異性型は平衡状態にあるか、適切な置換により立体的に１つの型に固定される。
【０１３１】
本開示の化合物は、中間化合物又は最終化合物に生じる原子の同位体もすべて含む。「同位体」とは、原子番号は同じであるが、原子核内の中性子の数が異なるために質量数が異なる原子を指す。例えば、水素の同位体にはトリチウム及びデューテリウムが含まれる。
【０１３２】
本開示の化合物及び塩は、通常の方法により、溶媒和物及び水和物を形成するために溶媒又は水分子と組み合わせて調製することができる。
本明細書で使用する「対象」又は「患者」という用語は、例えば、実験、治療、診断、及び／又は予防目的で併用療法を投与することができる任意の生物を指す。典型的な対象には、動物が含まれる（例えば、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ、イヌ、ネコ、ハムスター、ラマ、非ヒト霊長類、及びヒトなどの哺乳類）。
【０１３３】
本明細書で使用する「治療」又は「予防」という用語は、疾患、障害、及び／又は状態になる要素を持っているが、まだその疾患、障害、及び／又は状態を有するとは診断されていない動物に疾患、障害、又は状態が発生するのを予防すること；疾患、障害又は状態を阻止すること、例えばその進行を妨げること；及び疾患、障害、又は状態を緩和すること、例えば、疾患、障害、及び／又は状態の退行を引き起こすことを含み得る。疾患、障害、又は状態の治療には、根底にある病態生理が影響を受けない場合でも、特定の疾患、障害、又は状態の少なくとも１つの症状を改善すること（例えば、鎮痛剤の投与により、そのような薬剤は痛みの原因を治療しなくとも、対象の痛みに対処すること）が含まれ得る。
【０１３４】
本明細書で使用する「標的」は、標的化構築物が結合する部位を意味する。標的は、ｉｎ  ｖｉｖｏ又はｉｎ  ｖｉｔｒｏのいずれかであり得る。特定の実施形態において、標的は、白血病又は腫瘍（例えば、脳、肺（小細胞及び非小細胞）、卵巣、前立腺、乳房及び結腸、ならびに他のがん腫及び肉腫の腫瘍）に見られるがん細胞であり得る。さらに他の実施形態において、標的は、ハプテン、エピトープ、受容体、ｄｓＤＮＡフラグメント、炭水化物又は酵素などの、標的化部分又はリガンドが結合する分子構造を指し得る。標的は、組織の一種、例えば、神経組織、腸組織、膵臓組織、肝臓、腎臓、前立腺、卵巣、肺、骨髄、又は乳房組織であり得る。
【０１３５】
併用療法の標的として役立ち得る「標的細胞」は、一般に動物細胞、例えば哺乳動物細胞である。本方法は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏすなわち細胞培養における細胞、又はｉｎ  ｖｉｖｏの、動物組織の一部を形成するか又は動物組織に存在する生細胞の細胞機能を改変するために使用され得る。したがって、標的細胞には、例えば、血液、リンパ組織、口腔及び咽頭粘膜などの消化管の内側を覆う細胞、小腸の絨毛を形成する細胞、大腸の内側を覆う細胞、動物の呼吸器系（鼻腔／肺）の内側を覆う細胞（本発明の吸入により接触し得る）、真皮／表皮細胞、膣及び直腸の細胞、胎盤の細胞を含む内臓の細胞、及びいわゆる血液／脳関門などが含まれ得る。一般に、標的細胞は少なくとも１種類のＳＳＴＲを発現する。いくつかの実施形態において、標的細胞は、ＳＳＴＲを発現し、本明細書に記載のコンジュゲートにより標的化され、コンジュゲートの有効成分の放出により影響を受ける細胞の近くにある細胞であり得る。例えば、腫瘍の近くにあるＳＳＴＲを発現する血管が標的であり、その部位で放出される有効成分が腫瘍に影響を及ぼしてもよい。
【０１３６】
「治療効果」という用語は当技術分野で認識されており、動物、特に哺乳動物、より具体的にはヒトにおける、薬理活性物質によって引き起こされる局所的又は全身的効果を指す。したがって、この用語は、動物、例えばヒトの望ましい身体的又は精神的発達及び状態の強化における疾患、障害又は状態の診断、治療、緩和、治療又は予防での使用を意図した任意の物質を意味する。
【０１３７】
「調節」という用語は、当技術分野で認識されており、応答の上方制御（すなわち、活性化又は刺激）、下方制御（すなわち、阻害又は抑制）、あるいはこれら２つを組み合わせて又は別々に指す。調節は、通常、治療された対象の内的又は外的ベースライン又は基準と比較される。
【０１３８】
本明細書で互換的に使用される「十分な」及び「有効な」という用語は、１つ又は複数の所望の結果を達成するのに必要な量（例えば、質量、体積、用量、濃度、及び／又は期間）を指す。「治療有効量」は、少なくとも１つの症状又は特定の状態又は障害の測定可能な改善又は予防に影響を与えるか、平均余命の測定可能な向上をもたらすか、又は患者の生活の質を全般的に改善するのに必要な少なくとも最低濃度である。したがって、治療有効量は、特定の生物活性分子及び治療される特定の状態又は障害に依存する。抗体などの多くの有効成分の治療有効量は、当技術分野で知られている。例えば、特定の障害を治療するための、本明細書に記載の化合物及び組成物の治療有効量は、医師などの熟練した当業者の技能の範囲内の技術によって決定され得る。
【０１３９】
本明細書で互換的に使用される「生物活性剤」及び「有効成分」という用語は、体内で局所的又は全身的に作用する生理学的又は薬理学的に活性な物質を含むが、これらに限定されない。生物活性剤は、疾患または病気の治療（例えば治療薬）、予防（例えば予防薬）、診断（例えば診断薬）、治癒又は緩和に使用される物質であるか、身体の構造又は機能に影響を与える物質であるか、あるいは、所定の生理学的環境に置かれた後に生物学的に活性になるか、より活性になるプロドラッグである。
【０１４０】
「プロドラッグ」という用語は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及び／又はｉｎ  ｖｉｖｏで生物学的に活性な形態に変換される有機小分子、ペプチド、核酸又はタンパク質を含む作用剤を指す。プロドラッグは、状況によっては親化合物（活性化合物）よりも投与しやすいため、有用である。例えば、親化合物はそうではないのに対し、プロドラッグは経口投与によって生物学的に利用可能になる場合がある。プロドラッグはまた、親薬物と比較して医薬組成物への改善された溶解性を有し得る。プロドラッグは親よりも毒性が低い場合もある。プロドラッグは、酵素プロセスや代謝加水分解などの様々なメカニズムによって親薬物に変換され得る。Ｈａｒｐｅｒ，Ｎ．Ｊ．（１９６２）Ｄｒｕｇ  Ｌａｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｊｕｃｋｅｒ，ｅｄ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４：２２１−２９４；Ｍｏｒｏｚｏｗｉｃｈら（１９７７）Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｔｏ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｉｎ  Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ  ｅｄ．Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｓ，ＡＰｈＡ；  Ａｃａｄ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．；Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ，ｅｄ．（１９７７）Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｔｈｅｏｒｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，ＡＰｈＡ；Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，ｅｄ．（１９８５）Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ；Ｗａｎｇら（１９９９）Ｐｒｏｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇ，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ．５（４）：２６５−２８７；Ｐａｕｌｅｔｔｉら（１９９７）Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ：Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．２７：２３５−２５６；Ｍｉｚｅｎら（１９９８）．Ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｅｓｔｅｒｓ  ａｓ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ｏｒａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  β−Ｌａｃｔａｍ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１１：３４５−３６５；Ｇａｉｇｎａｕｌｔら（１９９６）Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  Ｉ．Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｐｒａｃｔ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．６７１−６９６；Ｍ．Ａｓｇｈａｒｎｅｊａｄ（２０００）．Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ  Ｏｒａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｖｉａ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，ｉｎ  Ｇ．Ｌ．Ａｍｉｄｏｎ，Ｐ．Ｉ．Ｌｅｅ  ａｎｄ  Ｅ．Ｍ．Ｔｏｐｐ，Ｅｄｓ．，Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ｐ．１８５−２１８；Ｂａｌａｎｔら（１９９０）Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｖｉａ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｒｏｕｔｅｓ  ｏｆ  ａｄｍｉｎｉ��ｔｒａｔｉｏｎ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．，１５（２）：１４３−５３；Ｂａｌｉｍａｎｅ  ａｎｄ  Ｓｉｎｋｏ（１９９９）．Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｏｒａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．，３９（１−３）：１８３−２０９；Ｂｒｏｗｎｅ（１９９７）．Ｆｏｓｐｈｅｎｙｔｏｉｎ（Ｃｅｒｅｂｙｘ），Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０（１）：１−１２；Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（１９７９）．Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ−−ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ  ｔｏ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｔｈｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ，Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．Ｃｈｅｍｉ．８６（１）：１−３９；Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，ｅｄ．（１９８５）Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｅｌｓｅｖｉｅｒ；Ｆｌｅｉｓｈｅｒら（１９９６）Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｏｒａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ：ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ  ｏｖｅｒｃｏｍｅ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．１９（２）：１１５−１３０；Ｆｌｅｉｓｈｅｒら（１９８５）Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｂｙ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｅｎｚｙｍｅ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１１２：３６０−８１；Ｆａｒｑｕｈａｒ  Ｄら（１９８３）Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，７２（３）：３２４−３２５；Ｈａｎ，Ｈ．Ｋ．ら（２０００）Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｄｅｓｉｇｎ  ｔｏ  ｏｐｔｉｍｉｚｅ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ，ＡＡＰＳ  ＰｈａｒｍＳｃｉ．，２（１）：Ｅ６；Ｓａｄｚｕｋａ  Ｙ．（２０００）Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｌｉｐｏｓｏｍｅ  ａｎｄ  ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｔｏ  ａｃｔｉｖｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．，１（１）：３１−４８；Ｄ．Ｍ．Ｌａｍｂｅｒｔ（２０００）Ｒａｔｉｏｎａｌｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｌｉｐｉｄｓ  ａｓ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｃａｒｒｉｅｒｓ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１１  Ｓｕｐｐｌ．２：Ｓ１５−２７；Ｗａｎｇ，Ｗ．ら（１９９９）Ｐｒｏｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇｓ．Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，５（４）：２６５−８７．
本明細書で使用する「生体適合性」という用語は、一般にレシピエントに無毒であり、レシピエントに重大な悪影響を引き起こさない物質をその代謝産物又は分解生成物とともに指す。一般的には、生体適合性物質は、患者に投与された場合に大きな炎症反応又は免疫反応を誘発しない物質である。
【０１４１】
本明細書で使用する「生分解性」という用語は、一般に、生理学的条件下で対象によって代謝、排除、又は排泄されることが可能な、より小さい単位又は化学種に分解又は侵食される物質を指す。分解時間は、組成及び形態に依存する。分解時間は数時間から数週間になる場合がある。
【０１４２】
本明細書で使用する「薬学的に許容される」という用語は、妥当な医学的判断の範囲内で、過度な毒性、刺激、アレルギー反応、又は合理的な利益／リスク比に見合う他の問題又は合併症を伴わず、米国食品医薬品局などの機関のガイドラインに従って、ヒト及び動物の組織と接触させて使用するのに適した化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を指す。本明細書で使用する「薬学的に許容される担体」は、ｉｎ  ｖｉｖｏでの組成物の送達を促進する医薬製剤のすべての成分を指す。薬学的に許容される担体には、限定するものではないが、希釈剤、防腐剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、膨張剤、充填剤、安定剤、及びそれらの組合せが含まれる。
【０１４３】
本明細書で使用する「分子量」という用語は、一般に、物質の質量又は平均質量を指す。ポリマー又はオリゴマーの場合、分子量はバルクポリマーの相対平均鎖長又は相対鎖質量を指す。実際には、ポリマー及びオリゴマーの分子量は、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）又はキャピラリー粘度測定などの様々な方法で推定又は特性評価することができる。ＧＰＣ分子量は、数平均分子量（Ｍｎ）に対して重量平均分子量（Ｍｗ）として報告される。キャピラリー粘度計は、濃度、温度、及び溶媒条件の特定のセットを使用して希釈ポリマー溶液から決定される固有粘度として分子量の推定値を提供する。
【０１４４】
本明細書で使用する「小分子」という用語は、一般に、分子量が２０００ｇ／ｍｏｌ未満、１５００ｇ／ｍｏｌ未満、１０００ｇ／ｍｏｌ未満、８００ｇ／ｍｏｌ未満、又は５００ｇ／ｍｏｌ未満の有機分子を指す。小分子は非ポリマー性及び／又は非オリゴマー性である。
【０１４５】
「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」という用語は、一般にアミノ酸残基のポリマーを指す。本明細書で使用する場合、この用語は、１つ又は複数のアミノ酸が化学的類似体又は対応する天然アミノ酸の修飾された誘導体であるか、又は非天然アミノ酸であるアミノ酸ポリマーにも適用される。本明細書で一般的に使用する「タンパク質」という用語は、ペプチド結合によって互いに連結されたアミノ酸のポリマーであって、その鎖長が三次及び／又は四次構造を生成するのに十分なポリペプチドを形成するポリマーを指す。「タンパク質」という用語は、定義により小さなペプチドを除外し、その小さなペプチドとは、タンパク質と見なされるために必要な高次構造を欠くものである。
【０１４６】
用語「核酸」、「ポリヌクレオチド」、及び「オリゴヌクレオチド」は、直鎖又は環状形態の、ならびに一本鎖又は二本鎖のいずれかの形のデオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチドポリマーを指すために互換可能に使用される。これらの用語は、ポリマーの長さに関して制限するものとして解釈されるべきではない。これらの用語は、天然ヌクレオチドの既知のアナログ、ならびに塩基、糖及び／又はリン酸部分で修飾されたヌクレオチド（例えば、ホスホロチオエート骨格）を包含することができる。一般に、特に明記しない限り、特定のヌクレオチドのアナログは同じ塩基対合特異性を有する。すなわち、ＡのアナログはＴと塩基対を形成する。用語「核酸」は、少なくとも２つの塩基−糖−リン酸モノマー単位のストリングを指す技術用語である。ヌクレオチドは、核酸ポリマーのモノマー単位である。この用語には、メッセンジャーＲＮＡ、アンチセンス、プラスミドＤＮＡ、プラスミドＤＮＡの一部、又はウイルス由来の遺伝物質の形のデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）及びリボ核酸（ＲＮＡ）が含まれる。アンチセンス核酸は、ＤＮＡ及び／又はＲＮＡ配列の発現に干渉するポリヌクレオチドである。核酸という用語は、少なくとも２つの塩基−糖−リン酸の組合せのストリングを指す。天然の核酸はリン酸骨格を有する。人工核酸は、他の種類の骨格を含む場合があるが、天然の核酸と同じ塩基を含む。この用語には、ＰＮＡ（ペプチド核酸）、ホスホロチオエート、及び天然核酸のリン酸骨格の他のバリアントも含まれる。
【０１４７】
本明細書で使用する「リンカー」という用語は、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄など）を含んでもよい炭素鎖を指し、長さは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０原子長であり得る。リンカーは、水素原子、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、ハロゲン、アリール、複素環、芳香族複素環、シアノ、アミド、カルバモイル、カルボン酸、エステル、チオエーテル、アルキルチオエーテル、チオール、及びウレイド基を含むがこれらに限定されない様々な置換基で置換されてもよい。当業者は、これらの基のそれぞれもまた置換され得ることを認識するであろう。リンカーの例には、限定するものではないが、ｐＨ感受性リンカー、プロテアーゼ切断性ペプチドリンカー、ヌクレアーゼ感受性核酸リンカー、リパーゼ感受性脂質リンカー、グリコシダーゼ感受性炭水化物リンカー、低酸素感受性リンカー、光切断性リンカー、熱不安定性リンカー、酵素切断性リンカー（例えば、エステラーゼ切断性リンカー）、超音波感受性リンカー、及びＸ線切断性リンカーが含まれる。
【０１４８】
「薬学的に許容される塩」という用語は、本組成物で使用される化合物に存在し得る酸性又は塩基性基の塩を指す。本組成物に含まれる本質的に塩基性の化合物は、様々な無機酸及び有機酸と様々な塩を形成することができる。そのような塩基性化合物の薬学的に許容される酸付加塩を調製するために使用可能な酸は、非毒性の酸付加塩、すなわち、硫酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチジン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩、サッカレート、ホルメート、ベンゾエート、グルタメート、メタンスルホネート、エタンスルホネート、ベンゼンスルホネート、ｐ−トルエンスルホネート及びパモエート（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエート））塩を含むがこれらに限定されない薬理学的に許容される陰イオンを含む塩を形成するものである。アミノ部分を含む本組成物に含まれる化合物は、上記の酸に加えて、様々なアミノ酸と薬学的に許容される塩を形成し得る。本組成物に含まれる本質的に酸性の化合物は、様々な薬理学的に許容可能なカチオンと塩基性塩を形成することができる。そのような塩の例には、アルカリ金属又はアルカリ土類金属塩、及び特にカルシウム、マグネシウム、ナトリウム、リチウム、亜鉛、カリウム、及び鉄の塩が含まれる。
【０１４９】
本明細書に記載の化合物が酸付加塩として得られる場合、遊離塩基は酸性塩の溶液を塩基性にすることにより得ることができる。反対に、生成物が遊離塩基である場合、塩基性化合物から酸付加塩を調製するための従来の手順に従って、適切な有機溶媒に遊離塩基を溶解し、溶液を酸で処理することにより、付加塩、特に薬学的に許容される付加塩を生成することができる。当業者は、非毒性の薬学的に許容される付加塩を調製するために使用できる様々な合成方法論を認識するであろう。
【０１５０】
薬学的に許容される塩は、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、２，２−ジクロロ酢酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、２−オキソグルタル酸、４−アセトアミド安息香酸、４−アミノサリチル酸、酢酸、アジピン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウ酸、ショウノウ−１０−スルホン酸、カプリン酸（デカン酸）、カプロン酸（ヘキサン酸）、カプリル酸（オクタン酸）、炭酸、ケイ皮酸、クエン酸、サイクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、プロピオン酸、ピログルタミン酸、サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、チオシアン酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、ウンデシレン酸から選択される酸に由来し得る。
【０１５１】
「生物学的に利用可能」という用語は、当技術分野で認識されており、それが投与された対象又は患者がそれを吸収し、取り込み、又は他の態様で生理学的に利用できるようにする、本発明の形態又は投与量の一部を指す。
【０１５２】
以下の実施例は、本発明を説明することを意図するものであり、限定することを意図するものではないことが理解されよう。本開示を読めば、当業者には、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく、前述の説明及び例の様々な他の例及び変更例が明らかであり、そのようなすべての例又は変更例は添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図される。本明細書で参照されるすべての刊行物及び特許は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１５３】
実施例
実施例１：コンジュゲート１の合成及びＨＰＬＣ分析
いくつかの実施形態において、成分Ｉは、標的化部分に結合した有効成分又はそのプロドラッグを含むコンジュゲートであり、標的化部分はＨＳＰ９０に結合する。ＨＳＰ９０標的化コンジュゲートの合成及びＨＰＬＣ分析は、２０１３年４月１６日に出願されたＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ１３／３６７８３（ＷＯ２０１３／１５８６４４）の実施例１、６、８、１−２９に開示された方法で実施することができ、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。特に、コンジュゲート１又はその薬学的に許容される塩は、ＰＣＴ／ＵＳ１３／３６７８３の実施例６に従って調製することができる。
【０１５４】
実施例２：コンジュゲート１での治療後の免疫細胞集団の評価
Ｐａｎ０２同所性マウスモデル（膵臓がんシンジェニックマウスモデル）における免疫細胞の変化の評価が行われる。この研究では、マウスの免疫細胞の変化を広くプロファイリングすることにより、免疫細胞の変化の幅広い調査を行う。例えば、免疫細胞の数がカウントされる。
【０１５５】
コンジュゲート１での治療後に生検が行われる。がん細胞間の間質に分散した腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）が、２人の訓練された組織病理学者によって独立に評価される。
Ｔ細胞上の免疫チェックポイント受容体及び腫瘍随伴マクロファージ（ＴＡＭ）上の同族リガンドの発現を分析する。例えば、コンジュゲート１処理時のＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞上のＣＴＬＡ−４発現、ＰＤ−１発現を分析する。
【０１５６】
処理されたマウスのケモカイン及びサイトカインも測定される。
実施例３：チェックポイント阻害剤と組み合わせたコンジュゲート１の抗腫瘍効果
このｉｎ  ｖｉｖｏ試験の目的は、膵臓がんのＰａｎ０２同所性マウスモデルにおけるチェックポイント阻害剤と組み合わせたコンジュゲート１の抗腫瘍効果を評価することであった。
【０１５７】
マウスは以下のグループに分けられる：１．ビヒクルでの処理；２．コンジュゲート１での処理；３．ＰＤ−１ブロッキング抗体での処理；４．ＰＤ−Ｌ１抗体での処理；５．コンジュゲート１及びＰＤ−１ブロッキング抗体での処理；及び６．コンジュゲート１及びＰＤ−Ｌ１ブロッキング抗体での処理。マウスの体重（ＢＷ）及び健康状態をモニタリングする。腫瘍体積を測定し、腫瘍成長阻害を決定する。
【０１５８】
実施例４：５ＦＵ及びロイコボリンと組み合わせたコンジュゲート１の抗腫瘍効果
このｉｎ  ｖｉｖｏ試験の目的は、ＨＴ−２９大腸がん（ＣＲＣ）モデル及び／又は他のＣＲＣモデルにおける５ＦＵ及びロイコボリン（ＬＶ）と組み合わせたコンジュゲート１の抗腫瘍効果を評価することであった。
【０１５９】
マウスは以下のグループに分けられる：
１）ビヒクルでの処理；
２）コンジュゲート１での処理；
３）５ＦＵ及びＬＶでの処理；及び
４）５ＦＵ及びＬＶと組み合わせたコンジュゲート１での処理。
【０１６０】
陽性対照には以下が含まれる：
５）５ＦＵ及びＬＶと組み合わせたイリノテカンでの処理；及び
６）イリノテカン単独での処理。
【０１６１】
マウスの体重（ＢＷ）及び健康状態をモニタリングする。腫瘍体積を測定し、腫瘍成長阻害を決定する。
実施例５：タラゾパリブと組み合わせたコンジュゲート１の抗腫瘍効果
ＮＣＩ−Ｈ６９（小細胞肺がん）腫瘍を有するマウスを以下で処理した。
【０１６２】
１）ビヒクル対象；
２）１２．５ｍｐｋ（ｍｇ／ｋｇ）のコンジュゲート１を静脈内投与（ＩＶ）で週に１度；
３）０．３３ｍｐｋのタラゾパリブを経口投与（ＰＯ）で４日間毎日投薬／３日間の休薬；
４）１２．５ｍｐｋのコンジュゲート１をＩＶで週に１度、及びコンジュゲート１投与の２４時間後に、０．３３ｍｐｋのタラゾパリブを４日間毎日投薬／３日間の休薬を開始。
【０１６３】
腫瘍体積を、治療後３日目、８日目、１０日目、１３日目、及び１６日目に測定した。図１及び下の表に示すように、コンジュゲート１処理単独及びタラゾパリブ処理単独と比較して、併用療法では統計的に有意な有効性の改善が観察された。
【０１６４】
【表２】
2020524677.tif 000006
【０１６５】
同様の研究では、コンジュゲート１及びタラゾパリブの併用治療は、ＨＴ−２９大腸がん（ＣＲＣ）モデル及びその他のＣＲＣモデルを保有するマウスで研究される。
別の同様の研究では、コンジュゲート１及びベリパリブの併用治療がマウスモデルで評価される。
【０１６６】
本発明の範囲は、上記の説明に限定されるものではなく、添付の特許請求の範囲に記載されたものである。
特許請求の範囲において、「１つ」、「その」などの冠詞は、反対の指示がない限り、又は文脈から明白でない限り、１つ又は複数を意味する場合がある。グループのうちの１つ又は複数のメンバー間に「又は」を含む請求項又は説明は、提示された製品又は方法にそのグループメンバーの１つ、２つ以上、又はすべてが存在し、採用され、又は他の態様で関係する場合、反対の指示がない限り、又は文脈から明白でない限り、充足すると見なされる。本発明は、提示された製品又は方法に、グループの厳密に１つのメンバーが存在し、採用され、又は他の態様で関係する実施形態を含む。本発明は、提示された製品又は方法に、グループメンバーのうちの２つ以上又はすべてが存在し、採用され、又は他の態様で関係する実施形態を含む。
【０１６７】
さらに留意点として、「含む」という用語はオープンであることを意図しており、追加の要素又はステップを含めることを許容するが必須とはしない。「含む」という用語が本明細書で使用される場合、「からなる」という用語も結果として包含され、開示される。
【０１６８】
範囲が提示されている場合、端点が含まれる。さらに、別様に指定されているか、文脈上及び当業者の理解からそうでないことが明白でない限り、範囲として表される値は、文脈が別段の定めをしない限り、本明細書の異なる実施形態において述べられた範囲内の、その範囲の下限の単位の１０分の１までの任意の特定の値又は下位範囲をとることができることを理解されたい。
【０１６９】
加えて、先行技術に含まれる本発明の特定の実施形態は、請求項のいずれか１つ以上から明示的に除外され得ることを理解されたい。そのような実施形態は、当業者に知られているとみなされるため、本明細書で明示的に除外が示されていなくても、除外することができる。本発明の組成物の特定の実施形態は、先行技術の存在に関係するか否かにかかわらず、任意の理由で、１つ以上の請求項から除外することができる。
【０１７０】
引用に明示的に記載されていない場合でも、引用されたすべての情報源、例えば、参考文献、出版物、データベース、データベースエントリ、及びここに引用された技術は、参照により本願に組み込まれる。引用された情報源と本願の記述が矛盾する場合、本願の記述が優先するものとする。
【０１７１】
セクション及び表の見出しは、限定することを意図したものではない。
【図１】
2020524677.tif 000008
【国際調査報告】
2020524677.tif 000009