(57)【要約】  本開示は、Ｃ５ａ受容体のモジュレーターである、式（Ｉ）2020522483.tif 000078の化合物又はその医薬的に許容される塩を提供する。さらに、Ｃ５ａに起因する病理学的活性化に関連する疾患または障害の治療を含む医薬組成物および使用方法、並びに非医薬的用途も提供する。
2020522483.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2020522483.tif 000064
（式中、
環の頂点Ａ1は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ（Ｏ）及びＣ（Ｒ4）からなる群より選択され；
環の頂点Ａ2は、Ｎ、ＣＨ、及びＣ（Ｒ4）からなる群より選択され；
環の頂点Ａ3、Ａ4、Ａ5及びＡ6の各々は、独立に、ＣＨ及びＣ（Ｒ4）からなる群より選択され；
破線付きの結合の各々は、独立して単結合又は二重結合を示し；
Ｒ1は、−Ｃ1-8アルキレン ヘテロアリール、−Ｃ1-8アルキレン−Ｃ6-10アリール、Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8ハロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ3-6シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ1aＲ1b、−ＳＯ2−Ｃ6-10アリール、−ＳＯ2−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−Ｃ3-6シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン Ｃ3-6シクロアルキル及びＣＯ2Ｒ1a（式中、ヘテロシクロアルキルは、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する４〜８員環であり、ヘテロアリール基は、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する５〜１０員環である）からなる群より選択され；
Ｒ1a及びＲ1bは、各々独立に、水素、Ｃ1-8アルキル、及びＣ1-8ハロアルキルからなる群より選択され；
Ｒ1は、場合により１〜５個のＲ5置換基で置換され；
Ｒ2a及びＲ2eは、各々独立に、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、ＣＮ、及びハロゲンからなる群より選択され；
Ｒ2b、Ｒ2c、及びＲ2dは、各々独立に、水素、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、シアノ、及びハロゲンからなる群より選択され；
各Ｒ3は、独立にＣ1-6アルキル、Ｃ1-6ハロアルキル、ハロゲン及びヒドロキシルからなる群より選択され、そして場合により同じ炭素原子に結合する２個のＲ3基が結合してオキソ（＝Ｏ）を形成するか又は３−５員シクロアルキル環を形成し；
各Ｒ4は、独立に、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ1-6ヒドロキシアルキル、Ｃ1-6ハロアルキル、Ｃ1-6ハロアルコキシ、−Ｏ−Ｃ1-6ハロアルキル、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−ＮＲ4aＲ4b、−ＣＯＮＲ4aＲ4b、−ＣＯ2Ｒ4a、−ＣＯＲ4a、-ＯＣ（Ｏ）ＮＲ4aＲ4b、−ＮＲ4aＣ（Ｏ）Ｒ4b、−ＮＲ4aＣ（Ｏ）2Ｒ4b、及びＮＲ4a−Ｃ（Ｏ）ＮＲ4aＲ4bからなる群より選択され；
各Ｒ4a及びＲ4bは、独立に、水素、Ｃ1-4アルキル、及びＣ1-4ハロアルキルからなる群より選択され；
各Ｒ5は、独立に、Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8アルコキシ、Ｃ1-8ハロアルキル、Ｃ1-8ハロアルコキシ、Ｃ1-8ヒドロキシアルキル、−Ｃ1-8アルキレン−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ1-8アルキレン−Ｃ3-6シクロアルキル、Ｃ3-6シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロゲン、ＯＨ、Ｃ2-8アルケニル、Ｃ2-8アルキニル、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ5a、−ＮＲ5bＣ（Ｏ）Ｒ5a、−ＣＯＮＲ5aＲ5b、−ＮＲ5aＲ5b、−Ｃ1-8アルキレン-ＮＲ5aＲ5b、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキレン−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキレン−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、-ＯＣ（Ｏ）ＮＲ5aＲ5b、−ＮＲ5aＣ（Ｏ）2Ｒ5b、-ＮＲ5a−Ｃ（Ｏ）ＮＲ5bＲ5b、及びＣＯ2Ｒ5a（式中、ヘテロシクロアルキル基は、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する４〜８員環である）からなる群より選択され；
各Ｒ5a及びＲ5bは、独立に水素、Ｃ1-8アルキル、及びＣ1-8ハロアルキルからなる群より選択される、又は、Ｒ5a及びＲ5bが同じ窒素原子に結合する場合、それらは該窒素原子に結合しＮ、Ｏ又はＳより選択される０〜１個の追加のヘテロ原子を環の頂点として有する５又は６員環を形成し；かつ
下付き文字ｎは、０、１、２又は３である）
の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、以下
【化２】
2020522483.tif 000065
からなる群より選択される二環式ヘテロアリール
（式中、ｍは０、１、２又は３であり；そしてＲ4置換基は、二環式ヘテロアリールの任意の適切な炭素環の頂点に結合してもよい）である、請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項３】
環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、以下の構造
【化３】
2020522483.tif 000066
により表される二環式ヘテロアリール
（式中、ｍは０、１、２、又は３であり；そしてＲ4置換基は、二環式ヘテロアリールの任意の適切な炭素環の頂点に結合してもよい）である、請求項１又は２に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項４】
各Ｒ4は、独立に、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-6ヒドロキシアルキル、ハロゲン、シアノ、及び−ＣＯ2Ｒ4aからなる群より選択され；そしてＲ4置換基は、二環式ヘテロアリールの任意の適切な炭素環の頂点に結合してもよい、請求項１又は３に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項５】
環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、以下
【化４】
2020522483.tif 000067
からなる群より選択される二環式ヘテロアリールである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項６】
環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、以下
【化５】
2020522483.tif 000068
からなる群より選択される二環式ヘテロアリールである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項７】
Ｒ1は、−Ｃ1-8アルキレン ヘテロアリール、−Ｃ1-8アルキレン Ｃ6-10アリール、Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8ハロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ3-8シクロアルキル、 Ｃ（Ｏ）ＮＲ1aＲ1b、−ＳＯ2−Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−Ｃ6-10アリール、及び ＣＯ2Ｒ1a（式中、ヘテロシクロアルキルは、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する４〜８員環であり；上記ヘテロアリール基は、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する５〜１０員環であり；かつＲ1a及びＲ1bは、各々独立に、水素、Ｃ1-8アルキル、及びＣ1-8ハロアルキルからなる群より選択される）からなる群より選択され；そして
Ｒ1は、場合により１〜５個のＲ5置換基で置換される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項８】
各Ｒ5は、独立にＣ1-8アルキル、Ｃ1-8アルコキシ、Ｃ1-8ハロアルキル、Ｃ1-8ハロアルコキシ、Ｃ1-8ヒドロキシアルキル、Ｃ3-6シクロアルキル、ハロゲン、ＯＨ、−ＮＲ5aＲ5b、及びＣＯ2Ｒ5a（式中、各Ｒ5a及びＲ5bは、独立に水素、Ｃ1-8アルキル、及びＣ1-8ハロアルキルからなる群より選択される）からなる群より選択される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項９】
Ｒ1は、場合により１〜３個のＲ5で置換される−ＣＨ2−フェニルである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｒ1は、１又は２個のＲ5で置換される−ＣＨ2−フェニル（式中、各Ｒ5は、独立にＣ1-4ハロアルキルである）である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１１】
Ｒ1は、１又は２個のＣＦ3で置換される−ＣＨ2−フェニルである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１２】
Ｒ1は、以下
【化６】
2020522483.tif 000069
からなる群より選択される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１３】
Ｒ1は、
【化７】
2020522483.tif 000070
である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１４】
Ｒ2b、Ｒ2c、及びＲ2dは各々Ｈである、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１５】
Ｒ2a及びＲ2eは、各々独立にＣ1-6アルキル及びＣ1-6ハロアルキルからなる群より選択される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１６】
Ｒ2a及びＲ2eは、各々独立にＣ1-6アルキルである、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１７】
Ｒ2a及びＲ2eは、各々独立にメチル及びエチルからなる群より選択される、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１８】
Ｒ2a及びＲ2eは、いずれもメチルであるか又はいずれもエチルである、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１９】
【化８】
2020522483.tif 000071
は、以下
【化９】
2020522483.tif 000072
からなる群より選択される、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２０】
ｎは、０、１又は２である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２１】
各Ｒ3は、独立にＣ1-4アルキルである、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２２】
【化１０】
2020522483.tif 000073
は、以下
【化１１】
2020522483.tif 000074
からなる群より選択される、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２３】
式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）：
【化１２】
2020522483.tif 000075
により表される構造を有する、請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２４】
式（Ｉｄ）、（Ｉｅ）、又は（Ｉｆ）：
【化１３】
2020522483.tif 000076
（式中、ｍは０、１又は２であり；Ｒ4置換基は、二環式ヘテロアリールの任意の適切な炭素環の頂点に結合してもよく；そしてｐは、０、１又は２である）により表される構造を有する、請求項２に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２５】
式（Ｉｇ）又は（Ｉｈ）：
【化１４】
2020522483.tif 000077
（式中、ｍは、０、１又は２であり、そしてＲ4置換基は、インドールヘテロアリールの任意の適切な炭素環の頂点に結合してもよい）
により表される構造を有する、請求項２に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２６】
前記化合物は、表３における＋＋又は＋＋＋活性を有する化合物の群より選択される、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２７】
請求項１〜２６のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩、及び医薬的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２８】
１又は複数の追加の治療剤を更に含む、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記１又は複数の追加の治療剤は、コルチコステロイド、ステロイド、免疫抑制剤、ＣＤ２０阻害剤からなる群より選択される、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記１又は複数の追加の治療剤は、オビヌツズマブ、リツキシマブ、オクレリズマブ、シクロホスファミド、プレドニゾン、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン酢酸エステル、コルチゾン酢酸エステル、チクソコルトールピバル酸エステル、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール、モメタゾン、アムシノニド、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ハルシノニド、ベタメタゾン、ベタメタゾンリン酸エステルナトリウム、デキサメタゾン、デキサメタゾンリン酸エステルナトリウム、フルオコルトロン、ヒドロコルチゾン−１７−吉草酸エステル、ハロメタゾン、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、ベクロメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、プレドニカルバート、クロベタゾン−１７−酪酸エステル、クロベタゾール−１７−プロピオン酸エステル、カプロン酸フルオコルトロン、ピバル酸フルオコルトロン、酢酸フルプレドニデン、ヒドロコルチゾン−１７−酪酸エステル、ヒドロコルチゾン−１７−アセポン酸エステル、ヒドロコルチゾン−１７−ブテプラート及びシクレソニドからなる群より選択される、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
Ｃ５ａに起因する病的活性化に関連する疾患又は障害に罹患しているか又は感受性が強い哺乳動物を治療する方法であって、
哺乳動物に治療的有効量の請求項１〜２６のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩あるいは請求項２７〜３０のいずれか１項に記載の医薬組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項３２】
哺乳動物の白血球にＣ５ａ調節量の請求項１〜２６のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩を接触させることを含む、Ｃ５ａによる細胞走化性を阻害する方法。
【請求項３３】
前記疾患又は障害は、炎症性疾患又は障害、心血管又は脳血管障害、自己免疫疾患、あるいは腫瘍性疾患又は障害である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記疾患又は障害は、好中球減少、好中球増加、Ｃ３−糸球体症、Ｃ３−糸球体腎炎、ＩＩ型膜性増殖性糸球体腎炎（ｄｅｎｓｅ  ｄｅｐｏｓｉｔ  ｄｉｓｅａｓｅ）、膜性増殖性糸球体腎炎、川崎病、溶血性尿毒症症候群、非定型溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）、組織移植片拒絶、移植臓器の超急性拒絶、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、ループス糸球体腎炎、血管炎、ＡＮＣＡ関連血管炎、ウェゲナー肉芽腫症、顕微鏡的多発血管炎、自己免疫性溶血及び血小板減少状態、免疫血管炎、移植片対宿主疾患、ループス腎症、ヘイマン腎炎、膜性腎炎、糸球体腎炎、及びＩＧＡ腎症からなる群より選択される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
前記疾患又は障害は、黒色腫、肺がん、リンパ腫、肉腫、癌腫、線維肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、血管肉腫、リンパ管肉腫、滑膜腫、中皮腫、髄膜腫、白血病、リンパ腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、扁平上皮癌腫、基底細胞癌腫、腺癌、乳頭癌、嚢胞腺癌、気管支癌、腎細胞癌、肝細胞癌、移行上皮癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性癌、ウィルムス腫瘍、多形性腺腫、肝細胞乳頭腫、尿細管腺腫、嚢胞腺腫、乳頭腫、腺腫、平滑筋腫、横紋筋腫、血管腫、リンパ管腫、骨腫、軟骨腫、脂肪腫及び線維腫からなる群より選択される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３６】
ヒトに治療的有効量の１又は複数の追加の治療剤を投与することを更に含む、請求項３１〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記１又は複数の追加の治療剤は、コルチコステロイド、ステロイド、免疫抑制剤、及びＣＤ２０阻害剤からなる群より選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記１又は複数の追加の治療剤は、オビヌツズマブ、リツキシマブ、オクレリズマブ、シクロホスファミド、プレドニゾン、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン酢酸エステル、コルチゾン酢酸エステル、チクソコルトールピバル酸エステル、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール、モメタゾン、アムシノニド、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ハルシノニド、ベタメタゾン、ベタメタゾンリン酸エステルナトリウム、デキサメタゾン、デキサメタゾンリン酸エステルナトリウム、フルオコルトロン、ヒドロコルチゾン−１７−吉草酸エステル、ハロメタゾン、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、ベクロメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、プレドニカルバート、クロベタゾン−１７−酪酸エステル、クロベタゾール−１７−プロピオン酸エステル、カプロン酸フルオコルトロン、ピバル酸フルオコルトロン、酢酸フルプレドニデン、ヒドロコルチゾン−１７−酪酸エステル、ヒドロコルチゾン−１７−アセポン酸エステル、ヒドロコルチゾン−１７−ブテプラート、シクレソニド及びプレドニカルバートからなる群より選択される、請求項３６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許法第１１９条（ｅ）の定めにより２０１７年５月３１日に提出された米国仮出願第６２／５１３，０２５号の利益を主張する。
【０００２】
連邦政府による資金提供を受けた研究開発の下でなされた発明の権利に関する声明
該当なし
【０００３】
コンパクトディスクに提出された「配列表」、表、またはコンピュータープログラムリストの付録への参照
該当なし
【背景技術】
【０００４】
補体系は、免疫複合体のクリアランス、並びに感染病原体、外来抗原、ウイルス感染細胞、及び腫瘍細胞に対する免疫応答において中心的な役割を果たす。補体系の不適切又は過剰な活性化は、重度の炎症とその結果生じる組織破壊に起因して、有害な結果をもたらす、場合によっては生命を脅かす結果すらもたらす可能性がある。これらの結果は、敗血症性ショック、心筋及び腸虚血／再灌流障害、移植片拒絶反応、臓器不全、腎炎、病的炎症、並びに自己免疫障害を含むさまざまな障害で臨床的に現れる。
【０００５】
補体系は、通常血清中に不活性状態で存在するタンパク質のグループで構成されている。補体系の活性化は、主に３つの異なる経路、すなわち古典的経路と、代替経路と、レクチン経路を包含する（Ｖ．Ｍ．Ｈｏｌｅｒｓ，Ｉｎ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｅｄ．Ｒ．Ｒ．Ｒｉｃｈ，Ｍｏｓｂｙ  Ｐｒｅｓｓ；１９９６，３６３−３９１）：１）古典的経路はカルシウム／マグネシウム依存性カスケードであり、通常、抗原−抗体複合体の形成によって活性化される。その経路はまた、リガンドと複合体を形成したＣ反応性タンパク質の結合やグラム陰性菌を含む多くの病原体によって、抗体に非依存的に活性化されうる。２）代替経路はマグネシウム依存性カスケードであり、ある種の感受性表面（ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ  ｓｕｒｆａｃｅｓ）（例えば酵母及び細菌の細胞壁多糖類並びにある種の生体高分子材料）へのＣ３の沈着及び活性化によって活性化される。３）レクチン経路は、古典的経路に共通するマンノース結合レクチンの初期結合と、それに続くＣ２及びＣ４の活性化を必要とする（Ｍａｔｓｕｓｈｉｔａ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７６：１４９７−１５０２（１９９２）；Ｓｕａｎｋｒａｔａｙ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：３００６−３０１３（１９９８））。
【０００６】
補体経路の活性化は、補体タンパク質の生物学的に活性な断片、例えばＣ３ａ、Ｃ４ａ及びＣ５ａアナフィラトキシン、並びにＣ５ｂ−９膜侵襲複合体（ＭＡＣ）を生み出し、これらはすべて、白血球の走化性に影響を及ぼすこと、マクロファージ、好中球、血小板、マスト細胞、及び内皮細胞を活性化すること、及び血管透過性、細胞溶解、及び組織損傷を増加させることによって炎症反応を媒介する。
【０００７】
補体Ｃ５ａは補体系の最も強力な炎症誘発性メディエーターの１つである。（アナフィラキシーＣ５ａペプチドは、Ｃ３ａよりもモルベースで１００倍強力な炎症反応を誘発する。）Ｃ５ａは、Ｃ５の活性型（１９０ｋＤ、分子量）である。Ｃ５ａはヒト血清中に約８０μｇ／ｍｌで存在する（Ｋｏｈｌｅｒ，Ｐ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９９：１２１１−１２１６（１９６７））。Ｃ５ａは２つのポリペプチド鎖αとβで構成され、それぞれおおよその分子量が１１５ｋＤと７５ｋＤである（Ｔａｃｋ，Ｂ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １８：１４９０−１４９７（１９７９））。Ｃ５は一本鎖プロ分子として生合成され、プロセッシングと分泌の間に、酵素的に二本鎖構造に切断される。切断後、２つの鎖は少なくとも１つのジスルフィド結合及び非共有相互作用によって結合する（Ｏｏｉ，Ｙ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２４：２４９４−２４９８（１９８０））。
【０００８】
Ｃ５は補体経路の活性化中にＣ５ａ及びＣ５ｂ断片に切断される。Ｃ５活性化に関与する転換酵素は、古典的経路についてはＣ４ｂ、Ｃ２ａ、及びＣ３ｂのマルチサブユニット複合体であり、代替経路については（Ｃ３ｂ）2、Ｂｂ、及びＰのマルチサブユニット複合体である（Ｇｏｌｄｌｕｓｔ，Ｍ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１３：９９８−１００７（１９７４）；Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ，Ｒ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７５：３９４８−３９５２（１９７８））。Ｃ５は、α鎖の７４−７５位（Ａｒｇ−Ｌｅｕ）の切断によって活性化される。活性化後、α鎖のアミノ末端部分から１１．２ｋＤ、７４アミノ酸のペプチドＣ５ａが放出される。Ｃ５ａとＣ３ａはともに、好中球及び単球の強力な刺激因子である（Ｓｃｈｉｎｄｌｅｒ，Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  ７６：１６３１−１６３８（１９９０）；Ｈａｅｆｆｎｅｒ−Ｃａｖａｉｌｌｏｎ，Ｎ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３８：７９４−７００（１９８７）；Ｃａｖａｉｌｌｏｎ，Ｊ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：２５３−２５７（１９９０））。
【０００９】
アナフィラトキシン（ａｎａｐｈｙｌａｔｏｘｉｃ）特性に加えて、Ｃ５ａは好中球（Ｗａｒｄ，Ｐ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０２：９３−９９（１９６９））、好酸球（Ｋａｙ，Ａ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：９６９−９７６（１９７３））、好塩基球（Ｌｅｔｔ−Ｂｒｏｗｎ，Ｍ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：２４６−２５２  １９７６））、及び単球（Ｓｎｙｄｅｒｍａｎ，Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１３８：３８７−３９０（１９７１））の走化性遊走を誘導する。Ｃ５ａとＣ５ｂ−９はともに、内皮細胞を活性化して、組織の炎症と損傷を媒介する活性化白血球の隔離に不可欠な接着分子を発現させる（Ｆｏｒｅｍａｎ，Ｋ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９４：１１４７−１１５５（１９９４）；Ｆｏｒｅｍａｎ，Ｋ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ２０：１−９（１９９６）；Ｒｏｌｌｉｎｓ，Ｓ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ６９：１９５９−１９６７（２０００））。Ｃ５ａはまた、平滑筋収縮を引き起こすこと、血管透過性を高めること、好塩基球及び肥満細胞の脱顆粒を誘発すること、並びにリソソームプロテアーゼ及び酸化フリーラジカルの放出を誘発することによって炎症反応を媒介する（Ｇｅｒａｒｄ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２：７７５−８０８（１９９４））。さらにＣ５ａは、肝臓の急性期遺伝子発現を調節し、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−８、プロスタグランジン、及びロイコトリエンの産生を増加させることによって、免疫応答全体を増強する（Ｌａｍｂｒｉｓ，Ｊ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎ：Ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍ  ｉｎ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｖｏｌａｎａｋｉｓ，Ｊ．Ｅ．ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．８３−１１８）。
【００１０】
Ｃ５ａのアナフィラキシー効果と走化性効果は、Ｃ５ａ受容体との相互作用を通して媒介されると考えられている。ヒトＣ５ａ受容体（Ｃ５ａＲ）は、５２ｋＤの膜結合Ｇタンパク質共役受容体であり、好中球、単球、好塩基球、好酸球、肝細胞、肺平滑筋及び内皮細胞、並びに腎糸球体組織に発現している（Ｖａｎ−Ｅｐｐｓ，Ｄ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３２：２８６２−２８６７（１９８４）；Ｈａｖｉｌａｎｄ，Ｄ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：１８６１−１８６９（１９９５）；Ｗｅｔｓｅｌ，Ｒ．Ａ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｆｆ．４４：１８３−１８７（１９９５）；Ｂｕｃｈｎｅｒ，Ｒ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：３０８−３１５（１９９５）；Ｃｈｅｎｏｗｅｔｈ，Ｄ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７５：３９４３−３９４７（１９７８）；Ｚｗｉｒｎｅｒ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３６：８７７−８８４（１９９９））。Ｃ５ａＲのリガンド結合部位は複雑であり、少なくとも２つの物理的に分離可能な結合ドメインからなる。１つはＣ５ａアミノ末端（アミノ酸１−２０）及びジスルフィド結合コア（アミノ酸２１−６１）に結合し、一方で２つ目はＣ５ａカルボキシ末端（アミノ酸６２−７４）に結合する（Ｗｅｔｓｅｌ，Ｒ．Ａ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：４８−５３（１９９５））。
【００１１】
Ｃ５ａは炎症や組織損傷に重要な役割を果たす。心肺バイパス及び血液透析では、ヒトの血液が人工心肺又は腎臓透析装置の人工表面と接触すると、代替補体経路の活性化の結果として、Ｃ５ａが形成される（Ｈｏｗａｒｄ，Ｒ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｓｕｒｇ．１２３：１４９６−１５０１（１９８８）；Ｋｉｒｋｌｉｎ，Ｊ．Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．８６：８４５−８５７（１９８３）；Ｃｒａｄｄｏｃｋ，Ｐ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２９６：７６９−７７４（１９７７））。Ｃ５ａは、毛細血管透過性及び浮腫、気管支収縮、肺血管収縮、白血球及び血小板の活性化、並びに組織、特に肺への浸潤の増加を引き起こす（Ｃｚｅｒｍａｋ，Ｂ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ．６４：４０−４８（１９９８））。抗Ｃ５ａモノクローナル抗体の投与が、心肺バイパス及び心筋保護（ｃａｒｄｉｏｐｌｅｇｉａ）によって誘導される冠動脈内皮機能不全を減少させることが示された（Ｔｏｆｕｋｕｊｉ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．１１６：１０６０−１０６８（１９９８））。
【００１２】
Ｃ５ａはまた、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、多臓器不全（ＭＯＦ）にも関与する（Ｈａｃｋ，Ｃ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．１９８９：８６：２０−２６；Ｈａｍｍｅｒｓｃｈｍｉｄｔ  ＤＥ  ｅｔ  ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ  １９８０；１：９４７−９４９；Ｈｅｉｄｅｍａｎ  Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｔｒａｕｍａ  １９８４；４：１０３８−１０４３；Ｍａｒｃ，ＭＭ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００４：３１：２１６−２１９）。Ｃ５ａは、２つの重要な炎症誘発性サイトカイン、ＴＮＦ−αとＩＬ−１の単球産生を増強する。Ｃ５ａは、敗血症性ショックの動物モデルにおいて、組織損傷、特に肺損傷の発生に重要な役割を果たすことも示されている（Ｓｍｅｄｅｇａｒｄ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１９８９；１３５：４８９−４９７；Ｍａｒｋｕｓ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，ＦＡＳＥＢ  Ｊｏｕｒｎａｌ（２００１），１５：５６８−５７０）。ラット、ブタ、及び非ヒト霊長類を用いた敗血症モデルでは、エンドトキシン又は大腸菌で処理する前に抗Ｃ５ａ抗体を動物に投与することは、組織損傷及びＩＬ−６の産生を減少させる結果になった（Ｓｍｅｄｅｇａｒｄ，Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１３５：４８９−４９７（１９８９）；Ｈｏｐｋｅｎ，Ｕ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６：１１０３−１１０９（１９９６）；Ｓｔｅｖｅｎｓ，Ｊ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７７：１８１２−１８１６（１９８６））。さらに重要なことには、ラットの敗血症の盲腸結紮／穿刺モデルにおいて、抗Ｃ５ａポリクローナル抗体によるＣ５ａの遮断が、生存率を有意に上げることが示されている（Ｃｚｅｒｍａｋ，Ｂ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．５：７８８−７９２（１９９９））。このモデルは、ヒトの敗血症の臨床症状の多くの側面を共有する（Ｐａｒｋｅｒ，Ｓ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｓｕｒｇ．８８：２２−３０（２００１））。同じ敗血症モデルで、抗Ｃ５ａ抗体は胸腺細胞のアポトーシスを抑制し（Ｇｕｏ，Ｒ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０６：１２７１−１２８０（２０００））、ＭＯＦを防止することが示された（Ｈｕｂｅｒ−Ｌａｎｇ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：１１９３−１１９９（２００１））。抗Ｃ５ａ抗体はまた、ラットの肺損傷のコブラ毒因子モデル及び免疫複合体誘発肺損傷でも保護的であった（Ｍｕｌｌｉｇａｎ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９８：５０３−５１２（１９９６））。免疫複合体によって媒介される肺損傷でのＣ５ａの重要性は、後にマウスで確認された（Ｂｏｚｉｃ，Ｃ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６：１１０３−１１０９（１９９６））。
【００１３】
Ｃ５ａは、心筋虚血再灌流障害の主要なメディエーターであることがわかっている。補体の枯渇は、マウスの心筋梗塞サイズを縮小させ（Ｗｅｉｓｍａｎ，Ｈ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１４６−１５１（１９９０））、抗Ｃ５ａ抗体による治療は後肢虚血再灌流のラットモデルの損傷を減少させた（Ｂｌｅｓｓ，Ｎ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７６：Ｌ５７−Ｌ６３（１９９９））。心筋梗塞中の再灌流障害は、モノクローナル抗Ｃ５ａ  ＩｇＧで再治療されたブタでも著しく減少した（Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，Ｅ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２６８：Ｈ４４８−Ｈ４５７（１９９５））。組換えヒトＣ５ａＲアンタゴニストは、外科的血行再建のブタモデルで梗塞サイズを縮小する（Ｒｉｌｅｙ，Ｒ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．１２０：３５０−３５８（２０００））。
【００１４】
Ｃ５ａ駆動（ｄｒｉｖｅｎ）好中球はまた、多くの水疱性疾患（例えば水疱性類天疱瘡、尋常性天疱瘡、及び落葉状天疱瘡）の一因となる。これらは、皮膚及び粘膜の表皮下空間に現れる無菌水疱によって臨床的に特徴付けられる慢性及び再発性炎症性障害である。皮膚基底膜に位置するケラチノサイトに対する自己抗体は、下にある基底膜（ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ  ｂａｓｅｍｅｎｔ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）からの表皮基底ケラチノサイトの剥離の根底にあると考えられている一方で、水疱は真皮上層と水疱腔内の両方での好中球の蓄積をも特徴とする。実験モデルでは、好中球の減少又は補体の（完全若しくはＣ５選択的）欠損は、高い自己抗体価の存在下でも、表皮下水疱の形成を阻害することができる。
【００１５】
補体レベルは、関節リウマチ（Ｊｏｓｅ，Ｐ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．４９：７４７−７５２（１９９０）；Ｇｒａｎｔ，Ｅ．Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ｏｆ  Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９６（１１）：１４６１−１４７１，（２００２））、ループス腎炎（Ｂａｏ，Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，３５（８），２４９６−２５０６，（２００５））、及び全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）（Ｐｏｒｃｅｌ，Ｊ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．７４：２８３−２８８（１９９５））の患者で上昇している。Ｃ５ａレベルは、疾患状態の重症度と相関している。マウス及びラットのコラーゲン誘発関節炎は、ヒトの関節リウマチ性疾患に似ている。Ｃ５ａ受容体を欠くマウスは、モノクローナル抗コラーゲン抗体の注射によって誘発される関節炎からの完全な保護を示した（Ｂａｎｄａ，Ｎ．Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，１７１：２１０９−２１１５）。したがって、Ｃ５ａ及び／又はＣ５ａ受容体（Ｃ５ａＲ）の阻害は、これらの慢性疾患の治療に有用でありうる。
【００１６】
補体系は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の患者で活性化されていると考えられており、疾患発症機序に関与すると考えられている。活性化された補体生成物が、ＩＢＤ患者の表面上皮細胞の内腔面、並びに粘膜筋板及び粘膜下血管で見られた（Ｗｏｏｄｒｕｆｆ，Ｔ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，１７１：５５１４−５５２０）。
【００１７】
Ｃ５ａＲの発現は、炎症を起こしたヒト中枢神経系の反応性アストロサイト、ミクログリア、及び内皮細胞で増加（ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄ）する（Ｇａｓｑｕｅ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５０：３１−４１（１９９７））。Ｃ５ａは、アルツハイマー病（Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．１０５：１２４−１３０（２０００）；Ｏ’Ｂａｒｒ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．（２０００）１０５：８７−９４；Ｆａｒｋａｓ，Ｉ．，ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２００３）１７０：５７６４−５７７１）や、パーキンソン病、ピック病、伝染性海綿状脳症などの神経変性疾患に関与している可能性がある。ニューロンのＣ５ａＲの活性化はアポトーシスを誘発することがある（Ｆａｒｋａｓ  Ｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９８；５０７：６７９−６８７）。したがって、Ｃ５ａ及び／又はＣ５ａＲの阻害は、神経変性疾患の治療にも有用である可能性がある。
【００１８】
Ｃ５ａの産生がアトピー性皮膚炎（Ｎｅｕｂｅｒ，Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ７３：８３−８７，（１９９１））及び慢性蕁麻疹（Ｋａｐｌａｎ，Ａ．Ｐ．，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１４；４６５−４７４，（２００４））に関連する炎症を悪化させるという証拠がいくつかある。
【００１９】
今日では、乾癬はＴ細胞を介する疾患であることが知られている（Ｇｏｔｔｌｉｅｂ，Ｅ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１：４４２−４４７（１９９５））。しかし、好中球とマスト細胞も発病機序に関与している可能性がある（Ｔｅｒｕｉ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．９：１−１０；２０００）；Ｗｅｒｆｅｌ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｒｅｓ．２８９：８３−８６（１９９７））。角質層の下の好中球の蓄積は、乾癬プラークの強い炎症部位（ｈｉｇｈｌｙ  ｉｎｆｌａｍｅｄ  ａｒｅａｓ）で観察され、乾癬病変（鱗屑）抽出物は非常に高いレベルのＣ５ａを含み、好中球に対する強力な走化性活性を示し、この現象はＣ５ａ抗体の添加によって抑制することができる。Ｔ細胞と好中球は、Ｃ５ａによって化学誘引される（Ｎａｔａｆ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６２：４０１８−４０２３（１９９９）；Ｔｓｕｊｉ，Ｒ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６５：１５８８−１５９８（２０００）；Ｃａｖａｉｌｌｏｎ，Ｊ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：２５３−２５７（１９９０））。さらにくわえて、皮膚紅斑性狼瘡（ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｕｓ）の病変から単離された形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）においてＣ５ａＲの発現が示されており、これらの細胞はＣ５ａに対する走化性挙動を呈することが示されており、ｐＤＣ上のＣ５ａＲの遮断が、ＳＬＥと乾癬のいずれでも炎症を起こしている皮膚へのｐＤＣ浸潤を低減するのに有効である可能性を示唆している。したがって、Ｃ５ａは乾癬の治療の重要な治療標的でありうる。
【００２０】
免疫グロブリンＧ含有免疫複合体（ＩＣ）は、全身性エリテマトーデスや、関節リウマチ、シェーグレン病、グッドパスチャー症候群、過敏性肺炎などの多くの自己免疫障害の病態生理に寄与する（Ｍａｄａｉｏ，Ｍ．Ｐ．，Ｓｅｍｉｎ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１９：４８−５６（１９９９）；Ｋｏｒｇａｎｏｗ，Ａ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １０：４５１−４５９（１９９９）；Ｂｏｌｔｅｎ，Ｗ．Ｋ．，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．５０：１７５４−１７６０（１９９６）；Ａｎｄｏ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｕｌｍ．Ｍｅｄ．３：３９１−３９９（１９９７））。これらの疾患は非常に不均一であり、一般に、次の器官の１又は複数を冒す。皮膚、血管、関節、腎臓、心臓、肺、神経系、及び肝臓（肝硬変及び肝線維症を含む）。これらのＩＣ疾患における炎症反応の古典的な動物モデルは、多形核細胞の浸潤、出血、及び血漿滲出を特徴とするアルサス反応である（Ａｒｔｈｕｓ，Ｍ．，Ｃ．Ｒ．Ｓｏｃ．Ｂｉｏｌ．５５：８１７−８２４（１９０３））。最近の研究は、Ｃ５ａＲ欠損マウスは、ＩＣによって誘発される組織損傷から保護されていることを示している（Ｋｏｈｌ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３６：８９３−９０３（１９９９）；Ｂａｕｍａｎｎ，Ｕ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：１０６５−１０７０（２０００））。その結果は、小さいペプチドの抗Ｃ５ａＲアンタゴニストがＩＣ沈着によって引き起こされる炎症反応を阻害するという観察結果と一致する（Ｓｔｒａｃｈａｎ，Ａ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：６５６０−６５６５（２０００））。Ｃ５ａは、その受容体とともに、ＩＣ疾患の発病機序に重要な役割を果す。Ｃ５ａ及びＣ５ａＲの阻害剤は、これらの疾患の治療に役立ちうる。
【００２１】
関連技術の説明
非ペプチドをベースとするＣ５ａ受容体アンタゴニストは、ラットのエンドトキシンショックの治療（Ｓｔｒａｃｈａｍ，Ａ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２０００），１６４（１２）：６５６０−６５６５）及びラットモデルでのＩＢＤの治療（Ｗｏｏｄｒｕｆｆ，Ｔ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，１７１：５５１４−５５２０））に有効であると報告されている。さらに、非ペプチドをベースとするＣ５ａ受容体モジュレーターは、Ｎｅｕｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（例えば国際公開第２００４／０４３９２５号パンフレット、国際公開第２００４／０１８４６０号パンフレット、国際公開第２００５／００７０８７号パンフレット、国際公開第０３／０８２８２６号パンフレット、国際公開第０３／０８８２８号パンフレット、国際公開第０２／４９９９３号パンフレット、国際公開第０３／０８４５２４号パンフレット）；Ｄｏｍｐｅ  Ｓ．Ｐ．Ａ．（国際公開第０２／０２９１８７号パンフレット）；クイーンズランド大学（Ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｑｕｅｅｎｌａｎｄ）（国際公開第２００４／１００９７５号パンフレット）；及びＣｈｅｍｏＣｅｎｔｒｙｘ（国際公開第２０１０／０７５２５７号パンフレット）による特許文献にも記載されている。
【００２２】
文献には、特に自己免疫性及び炎症性の疾患及び障害において、Ｃ５ａのレベルの増加が多くの疾患及び障害に関係しているという実験的証拠が相当数ある。したがって、アナフィラトキシン活性の増加に関連する病原性の事象、例えば走化性を阻害するのに有用なＣ５ａ受容体（Ｃ５ａＲ）の新しい小有機分子モジュレーター、例えばアゴニスト、好ましくはアンタゴニスト、部分アゴニストが当該技術分野で依然として必要である。本発明は、この必要性及び他の必要性を満たす。
【発明の概要】
【００２３】
１の態様では、本発明は、
式（Ｉ）
【化１】
2020522483.tif 000003
（式中、
環の頂点Ａ1は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ（Ｏ）及びＣ（Ｒ4）からなる群より選択され；
環の頂点Ａ2は、Ｎ、ＣＨ、及びＣ（Ｒ4）からなる群より選択され；
環の頂点Ａ3、Ａ4、Ａ5及びＡ6の各々は、独立に、ＣＨ及びＣ（Ｒ4）からなる群より選択され；
破線付きの結合の各々は、独立して単結合又は二重結合を示し；
Ｒ1は、−Ｃ1-8アルキレン ヘテロアリール、−Ｃ1-8アルキレン−Ｃ6-10アリール、Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8ハロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ3-6シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ1aＲ1b、−ＳＯ2−Ｃ6-10アリール、−ＳＯ2−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−Ｃ3-6シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン Ｃ3-6シクロアルキル及びＣＯ2Ｒ1a（式中、ヘテロシクロアルキルは、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する４〜８員環であり、ヘテロアリール基は、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する５〜１０員環である）からなる群より選択され；
Ｒ1a及びＲ1bは、各々独立に、水素、Ｃ1-8アルキル、及びＣ1-8ハロアルキルからなる群より選択され；
Ｒ1は、場合により１〜５個のＲ5置換基で置換され；
Ｒ2a及びＲ2eは、各々独立に、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、ＣＮ、及びハロゲンからなる群より選択され；
Ｒ2b、Ｒ2c、及びＲ2dは、各々独立に、水素、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、シアノ、及びハロゲンからなる群より選択され；
各Ｒ3は、独立にＣ1-6アルキル、Ｃ1-6ハロアルキル、ハロゲン及びヒドロキシルからなる群より選択され、そして場合により同じ炭素原子に結合する２個のＲ3基が結合してオキソ（＝Ｏ）を形成するか又は３−５員シクロアルキル環を形成し；
各Ｒ4は、独立に、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ1-6ヒドロキシアルキル、Ｃ1-6ハロアルキル、Ｃ1-6ハロアルコキシ、−Ｏ−Ｃ1-6ハロアルキル、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−ＮＲ4aＲ4b、−ＣＯＮＲ4aＲ4b、−ＣＯ2Ｒ4a、−ＣＯＲ4a、-ＯＣ（Ｏ）ＮＲ4aＲ4b、−ＮＲ4aＣ（Ｏ）Ｒ4b、−ＮＲ4aＣ（Ｏ）2Ｒ4b、及びＮＲ4a−Ｃ（Ｏ）ＮＲ4aＲ4bからなる群より選択され；
各Ｒ4a及びＲ4bは、独立に、水素、Ｃ1-4アルキル、及びＣ1-4ハロアルキルからなる群より選択され；
各Ｒ5は、独立に、Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8アルコキシ、Ｃ1-8ハロアルキル、Ｃ1-8ハロアルコキシ、Ｃ1-8ヒドロキシアルキル、−Ｃ1-8アルキレン−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ1-8アルキレン−Ｃ3-6シクロアルキル、Ｃ3-6シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロゲン、ＯＨ、Ｃ2-8アルケニル、Ｃ2-8アルキニル、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ5a、−ＮＲ5bＣ（Ｏ）Ｒ5a、−ＣＯＮＲ5aＲ5b、−ＮＲ5aＲ5b、−Ｃ1-8アルキレン-ＮＲ5aＲ5b、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキレン−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキレン−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、-ＯＣ（Ｏ）ＮＲ5aＲ5b、−ＮＲ5aＣ（Ｏ）2Ｒ5b、-ＮＲ5a−Ｃ（Ｏ）ＮＲ5bＲ5b、及びＣＯ2Ｒ5a（式中、ヘテロシクロアルキル基は、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する４〜８員環である）からなる群より選択され；
各Ｒ5a及びＲ5bは、独立に水素、Ｃ1-8アルキル、及びＣ1-8ハロアルキルからなる群より選択される、又は、Ｒ5a及びＲ5bが同じ窒素原子に結合する場合、  それらは該窒素原子に結合しＮ、Ｏ又はＳより選択される０〜１個の追加のヘテロ原子を環の頂点として有する５又は６員環を形成し；かつ
下付き文字ｎは、０、１、２又は３である）
の化合物又はその医薬的に許容される塩を提供する。
【００２４】
本発明はさらに、本明細書で提供される化合物に加えて、これらの化合物の１つまたは複数を含む医薬組成物、ならびに主にＣ５ａシグナル伝達活性に関連する疾患を治療する治療方法におけるこれらの化合物の使用方法を提供する。
【００２５】
さらに別の態様では、本発明は、個体の疾患を診断する方法を提供する。
【００２６】
これらの方法では、本明細書で提供される化合物を標識された形態で対象に投与し、続いてＣ５ａＲの存在もしくは不存在、および／またはＣ５ａＲ受容体を発現する細胞の局在を決定する画像診断を行う。関連する態様において、疾患を診断する方法は、組織または血液試料を本明細書で提供される標識化合物と接触させ、試料中のＣ５ａＲの存在、不存在、量、または局在を決定することにより実施される。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
Ｉ．略語と定義
「アルキル」という用語は、単独で又は別の置換基の一部として、別段の記載がない限り、指定された炭素原子数を有する直鎖又は分岐鎖炭化水素ラジカルを意味する（すなわち、Ｃ1−8は１〜８個の炭素を意味する）。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチルなどが挙げられる。「アルケニル」という用語は、１又は複数の二重結合を有する不飽和アルキル基を指す。同様に、「アルキニル」という用語は、１又は複数の三重結合を有する不飽和アルキル基を指す。そのような不飽和アルキル基の例としては、ビニル、２−プロペニル、クロチル、２−イソペンテニル、２−（ブタジエニル）、イソブテニル、２，４−ペンタジエニル、３−（１，４−ペンタジエニル）、エチニル、１−及び３−プロピニル、３−ブチニル、並びにより高級な同族体及び異性体が挙げられる。「シクロアルキル」という用語は、指定された数の環原子（例えばＣ3-6シクロアルキル）を有し、完全に飽和しているか、又は環頂点間に１つ以下（ｎｏ  ｍｏｒｅ  ｔｈａｎ  ｏｎｅ）の二重結合を有する炭化水素環を指す。「シクロアルキル」は、例えば、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、ビシクロ［２．２．２］オクタンなどの二環式及び多環式炭化水素環を指すことも意味する。「ヘテロシクロアルキル」という用語は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜５個のヘテロ原子を含むシクロアルキル基を指し、窒素及び硫黄原子は場合により酸化され、窒素原子は場合により四級化される。ヘテロシクロアルキルは、単環式、二環式又は多環式環系でありうる。ヘテロシクロアルキル基の非限定的な例としては、ピロリジン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、ブチロラクタム、バレロラクタム、イミダゾリジノン、ヒダントイン、ジオキソラン、フタルイミド、ピペリジン、１，４−ジオキサン、モルホリン、チオモルホリン、チオモルホリン−Ｓ−オキシド、チオモルホリン−Ｓ，Ｓ−オキシド、ピペラジン、ピラン、ピリドン、３−ピロリン、チオピラン、ピロン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、キヌクリジンなどが挙げられる。ヘテロシクロアルキル基は、環炭素又はヘテロ原子を介して分子の他の部分に結合することができる。
【００２８】
「アルキレン」という用語は、単独で又は別の置換基の一部として、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−で例示されるように、アルカンに由来する二価のラジカルを意味する。典型的には、アルキル（又はアルキレン）基は１〜２４個の炭素原子を有することになり、本発明では１０個以下の炭素原子を有する基が好ましい。「低級アルキル」又は「低級アルキレン」は、一般に４個又はそれより少ない炭素原子を有する短鎖アルキル又はアルキレン基である。同様に、「アルケニレン」及び「アルキニレン」は、それぞれ二重結合又は三重結合を有する「アルキレン」の不飽和形態を指す。
【００２９】
「ヘテロアルキル」という用語は、単独で又は別の用語と組み合わせて、別段の記載がない限り、記述された数の炭素原子、並びにＯ、Ｎ、Ｓｉ及びＳからなる群から選択される１〜３個のヘテロ原子からなる安定した直鎖若しくは分枝鎖、又は環状炭化水素ラジカル、又はそれらの組み合わせを意味し、ここで、窒素及び硫黄原子は場合により酸化されてもよく、窒素ヘテロ原子は場合により四級化されてもよい。ヘテロ原子Ｏ、Ｎ及びＳは、ヘテロアルキル基の任意の内部位置に配置されうる。ヘテロ原子Ｓｉは、アルキル基が分子の他の部分に結合する位置を含む、ヘテロアルキル基の任意の位置に配置されうる。例としては、−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＮＨ−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ（ＣＨ3）−ＣＨ3、−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ2−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＨ2，−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｓ（Ｏ）2−ＣＨ3、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｏ−ＣＨ3、−Ｓｉ（ＣＨ3）3、−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｎ−ＯＣＨ3、及び−ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ3）−ＣＨ3が挙げられる。例えば−ＣＨ2−ＮＨ−ＯＣＨ3及び−ＣＨ2−Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ3）3など、最大２個のヘテロ原子が連続しうる。同様に、「ヘテロアルケニル」及び「ヘテロアルキニル」という用語は、単独で又は別の用語と組み合わせて、別段の記載がない限り、記述された数の炭素を含有し、Ｏ、Ｎ、Ｓｉ、及びＳからなる群より選択される１〜３個のヘテロ原子を有するアルケニル基又はアルキニル基をそれぞれ意味し、ここで、窒素及び硫黄原子は場合により酸化されてもよく、窒素ヘテロ原子は場合により四級化されてもよい。ヘテロ原子Ｏ、Ｎ及びＳは、ヘテロアルキル基の任意の内部位置に配置されうる。
【００３０】
「ヘテロアルキレン」という用語は、単独で又は別の置換基の一部として、−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ2ＣＨ2−及び−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＮＨ−ＣＨ2−、Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ、ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（Ｈ）ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2−及びＳ−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃで例示されるように、ヘテロアルキルに由来する飽和又は不飽和又は多価不飽和の二価のラジカルを意味する。ヘテロアルキレン基の場合、ヘテロ原子は鎖末端の一方又は両方を占めることもある（例えばアルキレンオキシ、アルキレンジオキシ、アルキレンアミノ、アルキレンジアミノなど）。
【００３１】
「アルコキシ」、「アルキルアミノ」、「アルキルチオ」（又はチオアルコキシ）という用語は、それらの従来の意味で使用され、それぞれ酸素原子、アミノ基、又は硫黄原子を介して分子の他の部分に結合するアルキル基を指す。さらに、ジアルキルアミノ基の場合、アルキル部分は同じであることも異なっていることもでき、結合して、それぞれが結合している窒素原子と３〜７員環を形成することもできる。したがって、ＮＲaＲbとして表される基は、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、アゼチジニルなどを含むことを意味する。
【００３２】
「ヒドロキシアルキル」という用語は、その従来の意味で使用され、少なくとも１つのヒドロキシル基で置換された分枝又は直鎖アルキル基を指す。ヒドロキシル基は、アルキル基のどの位置にあってもよい。例えば、「Ｃ1-4ヒドロキシルアルキル」という用語は、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、ヒドロキシイソプロピルなどを含むことを意味する。
【００３３】
「ハロ」又は「ハロゲン」という用語は、単独で又は別の置換基の一部として、別段の記載がない限り、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を意味する。さらに、「ハロアルキル」などの用語は、モノハロアルキル及びポリハロアルキルを含むことを意味する。例えば、「Ｃ1−4ハロアルキル」という用語は、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピルなどを含むことを意味する。
【００３４】
「アリール」という用語は、別段の記載がない限り、単環又は互いに縮合若しくは共有結合している複数の環（最大３つの環）でありうる多不飽和、典型的には芳香族炭化水素基を意味する。「ヘテロアリール」という用語は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１〜５個のヘテロ原子を含有するアリール基（又は環）を指し、窒素及び硫黄原子は場合により酸化され、窒素原子は場合により四級化される。ヘテロアリール基は、ヘテロ原子を通して分子の他の部分に結合することができる。アリール基の非限定的な例としては、フェニル、ナフチル及びビフェニルが挙げられ、ヘテロアリール基の非限定的な例としては、ピリジル、ピリダジニル、ピラジニル、ピリミンジニル、トリアジニル、キノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、フタラジニル、ベンゾトリアジニル、プリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾピラゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、イソベンゾフリル、イソインドリル、インドリジニル、ベンゾトリアジニル、チエノピリジニル、チエノピリミジニル、ピラゾロピリミジニル、ピロロピリジル、イミダゾピリジン、ベンゾチアキソリル（ｂｅｎｚｏｔｈｉａｘｏｌｙｌ）、ベンゾフランイル、ベンゾチエンイル、インドリル、キノリル、イソキノリル、イソチオクロメン、ピラゾリル、インダゾリル、プテリジニル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアジアゾリル、ピロリル、チアゾリル、フリル、チエニルなどが挙げられる。上記のアリール及びヘテロアリール環系のそれぞれの置換基は、下記の許容される置換基の群から選択される。
【００３５】
「医薬的に許容される塩」という用語は、本明細書に記載の化合物に見られる特定の置換基に応じて、比較的非毒性の酸又は塩基で調製される活性化合物の塩を含むことを意味する。本発明の化合物が比較的酸性の官能基を含有する場合、そのような化合物の中性形態を、無溶媒又は適切な不活性溶媒中で充分な量の所望の塩基と接触させることによって塩基付加塩を得ることができる。医薬的に許容される無機塩基に由来する塩の例としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（ｍａｎｇａｎｉｃ）、マンガン（ｍａｎｇａｎｏｕｓ）、カリウム、ナトリウム、亜鉛のものなどが挙げられる。医薬的に許容される有機塩基に由来する塩としては、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペラジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの置換アミン、環状アミン、天然アミンなどを含む第一級、第二級、及び第三級アミンの塩が挙げられる。本発明の化合物が比較的塩基性の官能基を含油する場合、そのような化合物の中性形態を、無溶媒又は適切な不活性溶媒中で充分な量の所望の酸と接触させることによって酸付加塩を得ることができる。医薬的に許容される酸付加塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、一水素炭酸、リン酸、一水素リン酸、二水素リン酸、硫酸、一水素硫酸、ヨウ化水素酸、又は、亜リン酸のような無機酸に由来するもの、並びに酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸のような比較的非毒性の有機酸に由来する塩が挙げられる。また、アルギン酸塩などのアミノ酸の塩、及びグルクロン酸又はガラクツリン酸などのような有機酸の塩も挙げられる（例えば、Ｂｅｒｇｅ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７７，６６，１−１９を参照されたい）。本発明のある種の化合物は、化合物を塩基付加塩又は酸付加塩のいずれかに変換することを可能にする塩基性及び酸性官能基の両方を含有する。
【００３６】
化合物の中性型は、塩を塩基又は酸と接触させ、従来の方法で親化合物を単離することによって再生することができる。化合物の親型（ｐａｒｅｎｔ  ｆｏｒｍ）は、極性溶媒への溶解性などのある種の物理的特性においてさまざまな塩形態とは異なるが、その他の点では塩は本発明の目的のための化合物の親型（ｐａｒｅｎｔ  ｆｏｒｍ）と同等である。
【００３７】
塩形態にくわえて、本発明はプロドラッグ形態の化合物を提供する。本明細書に記載の化合物のプロドラッグは、生理学的条件下で化学変化を容易に受けて本発明の化合物を形成する化合物である。さらに、プロドラッグは、生体外（ｅｘ  ｖｉｖｏ）環境で化学的又は生化学的方法により本発明の化合物に変換することができる。例えば、プロドラッグは、適切な酵素又は化学試薬とともに経皮パッチリザーバー（ｐａｔｃｈ  ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）に入れると、ゆっくりと本発明の化合物に変換することができる。
【００３８】
本発明のある種の化合物は、非溶媒和形態並びに水和形態を含む溶媒和形態で存在することができる。一般に、溶媒和形態は非溶媒和形態と同等であり、本発明の範囲内に包含されることが意図されている。本発明のある種の化合物は、複数の結晶形態又は非晶質形態で存在することができる。一般に、すべての物理的形態は、本発明によって企図される使用に対して同等であり、本発明の範囲内にあることが意図されている。
【００３９】
本発明のある種の化合物は、不斉炭素原子（光学中心）又は二重結合を有する。ラセミ体、ジアステレオマー、幾何異性体、位置異性体、及び個々の異性体（例えば別個の鏡像異性体）はすべて、本発明の範囲内に包含されることが意図されている。本発明の化合物はまた、そのような化合物を構成する原子の１又は複数で不自然な割合の原子同位体を含有しうる。例えば、化合物は、例えばトリチウム（3Ｈ）、ヨウ素−１２５（125Ｉ）又は炭素−１４（14Ｃ）などの放射性同位体で放射性標識することができる。本発明の化合物の同位体変形はすべて、放射性であるかどうかにかかわらず、本発明の範囲内に包含されることが意図されている。
【００４０】
本明細書で使用される場合、本明細書に記載のいずれの化学構造の単結合、二重結合、又は三重結合と交差する下記波線
【化２】
2020522483.tif 000004
は、単結合、二重結合、又は三重結合の、分子の残りへの点結合（ｐｏｉｎｔ  ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ）を表す。
【００４１】
ＩＩ．実施形態の説明
Ａ．化合物
１の態様では、本発明は、
式（Ｉ）
【化３】
2020522483.tif 000005
（式中、
環の頂点Ａ1は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ（Ｏ）及びＣ（Ｒ4）からなる群より選択され；
環の頂点Ａ2は、Ｎ、ＣＨ、及びＣ（Ｒ4）からなる群より選択され；
環の頂点Ａ3、Ａ4、Ａ5及びＡ6の各々は、独立に、ＣＨ及びＣ（Ｒ4）からなる群より選択され；
破線付きの結合の各々は、独立して単結合又は二重結合を示し；
Ｒ1は、−Ｃ1-8アルキレン ヘテロアリール、−Ｃ1-8アルキレン−Ｃ6-10アリール、Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8ハロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ3-6シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ1aＲ1b、−ＳＯ2−Ｃ6-10アリール、−ＳＯ2−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−Ｃ3-6シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン ヘテロシクロアルキル、−Ｃ（Ｏ） Ｃ1-8アルキレン Ｃ3-6シクロアルキル及びＣＯ2Ｒ1a（式中、ヘテロシクロアルキルは、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する４〜８員環であり、ヘテロアリール基は、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する５〜１０員環である）からなる群より選択され；
Ｒ1a及びＲ1bは、各々独立に、水素、Ｃ1-8アルキル、及びＣ1-8ハロアルキルからなる群より選択され；
Ｒ1は、場合により１〜５個のＲ5置換基で置換され；
Ｒ2a及びＲ2eは、各々独立に、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、ＣＮ、及びハロゲンからなる群より選択され；
Ｒ2b、Ｒ2c、及びＲ2dは、各々独立に、水素、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｏ−Ｃ1-6ハロアルキル、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、シアノ、及びハロゲンからなる群より選択され；
各Ｒ3は、独立にＣ1-6アルキル、Ｃ1-6ハロアルキル、ハロゲン及びヒドロキシルからなる群より選択され、そして場合により同じ炭素原子に結合する２個のＲ3基が結合してオキソ（＝Ｏ）を形成するか又は３−５員シクロアルキル環を形成し；
各Ｒ4は、独立に、Ｃ1-6アルキル、Ｃ1-6アルコキシ、Ｃ1-6ヒドロキシアルキル、Ｃ1-6ハロアルキル、Ｃ1-6ハロアルコキシ、−Ｏ−Ｃ1-6ハロアルキル、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキル−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−ＮＲ4aＲ4b、−ＣＯＮＲ4aＲ4b、−ＣＯ2Ｒ4a、−ＣＯＲ4a、-ＯＣ（Ｏ）ＮＲ4aＲ4b、−ＮＲ4aＣ（Ｏ）Ｒ4b、−ＮＲ4aＣ（Ｏ）2Ｒ4b、及びＮＲ4a−Ｃ（Ｏ）ＮＲ4aＲ4bからなる群より選択され；
各Ｒ4a及びＲ4bは、独立に、水素、Ｃ1-4アルキル、及びＣ1-4ハロアルキルからなる群より選択され；
各Ｒ5は、独立に、Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8アルコキシ、Ｃ1-8ハロアルキル、Ｃ1-8ハロアルコキシ、Ｃ1-8ヒドロキシアルキル、−Ｃ1-8アルキレン−ヘテロシクロアルキル、−Ｃ1-8アルキレン−Ｃ3-6シクロアルキル、Ｃ3-6シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロゲン、ＯＨ、Ｃ2-8アルケニル、Ｃ2-8アルキニル、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ5a、−ＮＲ5bＣ（Ｏ）Ｒ5a、−ＣＯＮＲ5aＲ5b、−ＮＲ5aＲ5b、−Ｃ1-8アルキレン-ＮＲ5aＲ5b、−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキレン−Ｏ−Ｃ1-6アルキル、−Ｃ1-6アルキレン−Ｓ−Ｃ1-6アルキル、-ＯＣ（Ｏ）ＮＲ5aＲ5b、−ＮＲ5aＣ（Ｏ）2Ｒ5b、-ＮＲ5a−Ｃ（Ｏ）ＮＲ5bＲ5b、及びＣＯ2Ｒ5a（式中、ヘテロシクロアルキル基は、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する４〜８員環である）からなる群より選択され；
各Ｒ5a及びＲ5bは、独立に水素、Ｃ1-8アルキル、及びＣ1-8ハロアルキルからなる群より選択される、又は、Ｒ5a及びＲ5bが同じ窒素原子に結合する場合、  それらは該窒素原子に結合しＮ、Ｏ又はＳより選択される０〜１個の追加のヘテロ原子を環の頂点として有する５又は６員環を形成し；かつ
下付き文字ｎは、０、１、２又は３である）
の化合物又はその医薬的に許容される塩を提供する。
【００４２】
環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分に着目し、いくつかの実施形態では、環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、以下
【化４】
2020522483.tif 000006
からなる群より選択される二環式ヘテロアリール
（式中、ｍは０、１、２又は３であり；そして、存在する場合、Ｒ4置換基は、二環式ヘテロアリールの任意の適切な炭素環の頂点に結合する）
である。
【００４３】
いくつかの実施形態では、環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、以下
【化５】
2020522483.tif 000007
（式中、ｍは、０、１、２、又は３であり；Ｒ4置換基は、二環式ヘテロアリールの任意の適切な炭素環の頂点に結合していてもよい）
である。
【００４４】
いくつかの実施形態では、各Ｒ4は、独立に、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-6ヒドロキシアルキル、ハロゲン、シアノ、及び−ＣＯ2Ｒ4aであり；ここで、Ｒ4aは上記で定義したとおりであり、そして、Ｒ4置換基は、二環式ヘテロアリールの任意の適切な炭素環の頂点に結合してもよい。
【００４５】
当業者は、Ａ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分の特定の炭素原子をＲ4で置換できないことを認識するであろう。例えば、二環式ヘテロアリール部分（すなわち、Ａ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分）を分子の残りの部分に結合する炭素原子、および縮合二環式ヘテロアリール部分における両方の環系のメンバーである炭素原子（すなわち、ベンゼンと５員環系の両方の環の頂点である２つの炭素原子）をＲ4で置換できない。というのは、追加の置換基は、これらの炭素原子の原子価を超えるためである。
【００４６】
いくつかの実施形態では、環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、以下
【化６】
2020522483.tif 000008
からなる群より選択される。
【００４７】
いくつかの実施形態では、環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、以下
【化７】
2020522483.tif 000009
からなる群より選択される。
【００４８】
Ｒ1および任意の置換基Ｒ5に目を向けると、いくつかの実施形態では、Ｒ1は、、−Ｃ1-8アルキレン−ヘテロアリール、−Ｃ1-8アルキレン−Ｃ6-10アリール、Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8ハロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ）−ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ3-8シクロアルキル、 Ｃ（Ｏ）ＮＲ1aＲ1b、−ＳＯ2−Ｃ6-10アリール、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ1-8アルキレン−Ｏ−Ｃ6-10アリール、又は ＣＯ2Ｒ1a（式中、Ｒ1aおよびＲ1bおよびヘテロシクロアルキル及びヘテロアリールは上記で定義したとおりであり、そしてＲ1は、場合により１〜５個のＲ5置換基で置換される）である。
【００４９】
いくつかの実施形態では、Ｒ1またはＲ5のヘテロシクロアルキル基は、Ｎ、Ｏ、およびＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する４〜６員環である。いくつかの実施形態では、Ｒ1またはＲ5のヘテロシクロアルキル基は、Ｎ、Ｏ及びＳより選択される１〜３個のヘテロ原子を環の頂点として有する５又は６員の芳香環である。いくつかの実施形態では、Ｒ1のＣ6-10アリール基はフェニルである。
【００５０】
いくつかの実施形態では、Ｒ1は、場合により１〜３個のＲ5で置換される−ＣＨ2−フェニルである。
【００５１】
いくつかの実施形態では、各Ｒ5は、独立して、Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8アルコキシ、Ｃ1-8ハロアルキル、Ｃ1-8ハロアルコキシ、Ｃ1-8ヒドロキシアルキル、Ｃ3-6シクロアルキル、ハロゲン、ＯＨ、−ＮＲ5aＲ5b、又はＣＯ2Ｒ5a（式中、各Ｒ5a及びＲ5bは、独立して水素、Ｃ1-8アルキル、及びＣ1-8ハロアルキルからなる群より選択される）である。
【００５２】
いくつかの実施形態では、Ｒ1は、１又は２個のＲ5で置換される−ＣＨ2−フェニル（式中、各Ｒ5は、独立してＣ1-4ハロアルキルである）である。
【００５３】
いくつかの実施形態では、Ｒ1は、１又は２個のＣＦ3で置換される−ＣＨ2−フェニルである。
【００５４】
いくつかの実施形態では、Ｒ1は、
【化８】
2020522483.tif 000010
からなる群より選択される。
【００５５】
いくつかの実施形態では、Ｒ1は、
【化９】
2020522483.tif 000011
である。
【００５６】
式Ｉと置換基Ｒ2a、Ｒ2b、Ｒ2c、Ｒ2d、及びＲ2eに戻り、いくつかの実施形態では、Ｒ2a及びＲ2eは、各々独立にＣ1-6アルキル、Ｃ1-6ハロアルキル、Ｃ1-6アルコキシ、−Ｏ−Ｃ1-6ハロアルキル、又はハロゲンである。いくつかの実施形態では、Ｒ2b、Ｒ2c、及びＲ2dは、独立にＨ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4ハロアルキル、又はハロゲンである。
【００５７】
いくつかの実施形態では、Ｒ2b、Ｒ2c、及びＲ2dは各々Ｈである。
【００５８】
いくつかの実施形態では、Ｒ2a及びＲ2eは、各々独立にＣ1-6アルキル又はＣ1-6ハロアルキルである。
【００５９】
いくつかの実施形態では、Ｒ2a及びＲ2eは、各々独立にメチル又はエチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ2a及びＲ2eは、いずれもメチルであるか又はいずれもエチルである。
【００６０】
いくつかの実施形態では、
【化１０】
2020522483.tif 000012
で表される式Ｉの部分は、
【化１１】
2020522483.tif 000013
である。
【００６１】
式Ｉの各Ｒ3は、いくつかの実施形態では、独立してＣ1-6アルキル、Ｃ1-6ハロアルキル、又はハロゲンである。いくつかの実施形態では、各Ｒ3は、独立してＣ1-4アルキルである。
【００６２】
いくつかの実施形態では、Ｒ3の添字であるｎは０、１、又は２である。いくつかの実施形態では、ｎは０である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。
【００６３】
いくつかの実施形態では、
【化１２】
2020522483.tif 000014
で表される式Ｉの部分は、
【化１３】
2020522483.tif 000015
である。
【００６４】
いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）：
【化１４】
2020522483.tif 000016
により表される。
【００６５】
式（Ｉ）の化合物が式（Ｉａ）により表される実施形態では、Ｒ1、Ｒ3、ｎ、Ｒ2a、Ｒ2e、および環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、式（Ｉ）について上記で定義したとおりである。
【００６６】
式（Ｉ）の化合物が式（Ｉｂ）により表される実施形態では、Ｒ1、Ｒ2a、Ｒ2e、および環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、式（Ｉ）について上記で定義したとおりである。
【００６７】
式（Ｉ）の化合物が式（Ｉｃ）により表される実施形態では、Ｒ1および環の頂点としてＡ1、Ａ2、Ａ3、Ａ4、Ａ5、及びＡ6を有する環部分は、式（Ｉ）について上記で定義したとおりである。
【００６８】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉｄ）、（Ｉｅ）又は（Ｉｆ）．：
【化１５】
2020522483.tif 000017
により表される。
【００６９】
式（Ｉ）の化合物が式（Ｉｄ）により表される実施形態では、Ｒ1、Ｒ4、ｍ、Ｒ2a、及びＲ2eは、式（Ｉ）について上記で定義したとおりである。
【００７０】
式（Ｉ）の化合物が式（Ｉｅ）により表される実施形態ではＲ1、Ｒ4、及びｍは、式（Ｉ）について上記で定義したとおりである。
【００７１】
式（Ｉ）の化合物が式（Ｉｆ）により表される実施形態では、Ｒ5、Ｒ4、及びｍは、式（Ｉ）について上記で定義したとおりであり、ｐは０、１又は２である。
【００７２】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉｇ）又は（Ｉｈ）：
【化１６】
2020522483.tif 000018
により表される。
【００７３】
式（Ｉ）の化合物が式（Ｉｇ）又は（Ｉｈ）により表される実施形態では、Ｒ4  ａｎｄ  ｍは、式（Ｉ）について上記で定義したとおりである。
【００７４】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、実施例に記載されている化合物である。
【００７５】
化合物の調製
本発明のある種の化合物は、本文書の実施例の項に記載の方法に従って調製することができる。さらに、本発明の化合物の調製に有用なある種の中間化合物の合成も記載されている。
【００７６】
Ｂ．医薬組成物
上記の化合物にくわえて、ヒト及び動物のＣ５ａ活性を調節するための組成物は、典型的には、医薬担体又は希釈剤を含有する。
【００７７】
本明細書で使用される場合、「組成物」という用語は、指定量の指定成分を含む生成物、及び指定量の指定成分の組み合わせから直接的又は間接的に得られる生成物を包含することが意図されている。「医薬的に許容される」とは、担体、希釈剤、又は賦形剤が製剤の他の成分と相溶性でなければならず、そのレシピエントに有害であってはならないことを意味する。
【００７８】
本発明の化合物の投与のための医薬組成物は、単位剤形で好都合に提供でき、薬学及び薬物送達の分野で周知のいずれかの方法によって調製することができる。すべての方法は、有効成分を、１又は複数の副成分を構成する担体と結合させるステップが含んでいる。一般に、医薬組成物は、有効成分を液体担体又は微粉化した固体担体又はその両方と均一かつ密接に結合させること、及び必要に応じて製品を所望の製剤に成形することによって調製される。医薬組成物には、疾患の過程又は状態に望ましい効果をもたらすのに充分な量の活性のある対象化合物が含まれる。
【００７９】
有効成分を含有する医薬組成物は、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性又は油性懸濁液、分散性粉末又は顆粒、乳剤及び米国特許出願公開第２００２／００１２６８０号明細書に記載されているような自己乳化剤（ｓｅｌｆ  ｅｍｕｌｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ）、硬カプセル又は軟カプセル、シロップ、エリキシル、溶液、口腔内パッチ、経口ゲル、チューインガム、チュアブル錠、発泡性粉末、並びに発泡性錠剤などの経口使用に適した形態であることができる。経口使用を目的とする組成物は、医薬組成物製造の技術分野で既知の任意の方法に従って調製でき、そのような組成物は、医薬として洗練されて味のよい（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ｅｌｅｇａｎｔ  ａｎｄ  ｐａｌａｔａｂｌｅ）製剤をもたらすために、甘味料、香料、着色剤、酸化防止剤からなる群より選択される１又は複数の薬剤を含有することができる。錠剤は、錠剤の製造に適した非毒性の医薬的に許容される賦形剤と混合した有効成分を含む。これらの賦形剤は、例えば、セルロースや、二酸化ケイ素、酸化アルミニウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、グルコース、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤；造粒剤及び崩壊剤、例えばコーンスターチ又はアルギン酸；結合剤、例えばＰＶＰ、セルロース、ＰＥＧ、デンプン、ゼラチン、又はアカシア；及び潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、又はタルクである。錠剤はコーティングされていなくてもよく、又は消化管での崩壊及び吸収を遅らせ、それにより長期間にわたって持続作用をもたらす既知の技術によって腸溶コーティング若しくはその他のコーティングが施されていてもよい。例えば、グリセリルモノステアレート又はグリセリルジステアレートなどの時間遅延材料を使用してもよい。それらはまた、米国特許第４，２５６，１０８号明細書、同第４，１６６，４５２号明細書、同第４，２６５，８７４号明細書に記載の技術によってコーティングされて制御放出用の浸透性治療錠剤（ｏｓｍｏｔｉｃ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｂｌｅｔｓ）を形成することができる。
【００８０】
経口用製剤はまた、有効成分が不活性固体希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、若しくはカオリンと混合された硬ゼラチンカプセルとして、又は有効成分が水若しくは油性溶媒、例えば落花生油、流動パラフィン、若しくはオリーブ油と混合された軟ゼラチンカプセルとしても提供することができる。さらに、乳剤は油などの非水混和性成分を用いて調製し、モノジグリセリド、ＰＥＧエステルなどの界面活性剤で安定化することができる。
【００８１】
水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合した活性物質を含有する。そのような賦形剤は、懸濁剤、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム、及びアカシアゴムであり、分散剤又は湿潤剤は、天然のホスファチド、例えばレシチン、又はアルキレンオキシドと脂肪酸の縮合生成物、例えばポリオキシエチレンステアレート、又はエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール、又はポリオキシエチレンソルビトールモノオレエートなどのエチレンオキシドと、脂肪酸とヘキシトールに由来する部分エステルとの縮合生成物、又はエチレンオキシドと、脂肪酸とヘキシトール無水物に由来する部分エステルとの縮合生成物、例えばポリエチレンソルビタンモノオレエートであることができる。水性懸濁液はまた、１又は複数の保存剤、例えば、エチル又はｎ−プロピル、ｐ−ヒドロキシベンゾエート、１又は複数の着色剤、１又は複数の香料、及びスクロースやサッカリンなどの１又は複数の甘味剤を含有しうる。
【００８２】
油性懸濁剤は、有効成分を、植物油、例えば落花生油、オリーブ油、ゴマ油、若しくはココナッツ油、又は流動パラフィンなどの鉱油に懸濁することによって製剤化することができる。油性懸濁剤は、増粘剤、例えば蜜蝋、固形パラフィン、又はセチルアルコールを含有しうる。上記のものなどの甘味剤及び香料を加えて、味のよい経口調整物を形成することができる。これらの組成物は、アスコルビン酸などの酸化防止剤を添加することによって保存することができる。
【００８３】
水の添加による水性懸濁液の調製に適した分散性粉末及び顆粒では、分散剤又は湿潤剤、懸濁剤、及び１又は複数の保存剤と混ざって、有効成分がもたらされる。適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤は、すでに上で言及したものによって例示されている。追加の賦形剤、例えば甘味剤、香料、及び着色剤が存在してもよい。
【００８４】
本発明の医薬組成物は、水中油型乳剤の形態であってもよい。油相は、植物油、例えばオリーブ油又は落花生油、又は鉱油、例えば流動パラフィン又はこれらの混合物でありうる。適切な乳化剤は、天然ゴム、例えばアカシアゴム又はトラガカントゴム、天然のホスファチド、例えば大豆、レシチン、及び脂肪酸とヘキシトール無水物に由来するエステル又は部分エステル、例えばソルビタンモノオレエート、並びに前記部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートでありうる。乳剤はまた、甘味剤及び香料を含有してもよい。
【００８５】
シロップ剤とエリキシル剤は、甘味剤、例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、又はショ糖で製剤化することができる。そのような製剤はまた、粘滑剤、保存剤、並びに香料及び着色剤も含んでもよい。経口液剤は、例えばシクロデキストリン、ＰＥＧ、及び界面活性剤と組み合わせて調製することができる。
【００８６】
医薬組成物は、無菌の注射可能な水性又は油性懸濁剤の形態でありうる。この懸濁液は、上で言及されてきた適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤を使用して、既知の技術に従って製剤化されうる。無菌の注射可能な調製物は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤又は溶媒、例えば１，３−ブタンジオールの溶液中の無菌の注射可能な溶液又は懸濁液でありうる。使用可能な許容される溶媒（ｖｅｈｉｃｌｅｓ）及び溶媒（ｓｏｌｖｅｎｔｓ）には、水、リンゲル液、及び等張性塩化ナトリウム溶液がある。くわえて、無菌の固定油が溶媒又は懸濁媒として従来から使用されている。この目的のために、合成モノ又はジグリセリドを含む無刺激固定油を使用することができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は注射剤の調製に使用される。
【００８７】
本発明の化合物はまた、薬物の直腸投与用の坐剤の形態で投与することもできる。これらの組成物は、薬物を、常温では固体であるが直腸温度では液体であり、したがって直腸で溶けて薬物を放出することになる適切な非刺激性賦形剤と混合することによって調製することができる。そのような材料としては、カカオバターとポリエチレングリコールが挙げられる。くわえて、化合物は、溶液又は軟膏による眼内送達によって投与することができる。さらに、主題化合物の経皮送達は、イオン導入パッチなどによって達成することができる。局所使用には、本発明の化合物を含有するクリーム、軟膏、ゼリー、溶液、又は懸濁剤などが使用される。本明細書で使用される場合、局所適用は、洗口液及びうがい薬の使用も含むことを意味する。
【００８８】
本発明の化合物はまた、標的化可能な薬物担体として適切なポリマーである担体と結合させることもできる。そのようなポリマーとしては、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシ−プロピル−メタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチル−アスパルトアミド−フェノール、又はパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリジンが含まれうる。さらに、本発明の化合物は、薬物の制御放出を達成するのに有用な生分解性ポリマーの類である担体、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸のコポリマー、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、及びヒドロゲルの架橋又は両親媒性ブロックコポリマーに結合することができる。ポリマー及び半透性ポリマーマトリックスは、バルブ、ステント、チューブ、プロステーシスなどの成形品に形成されてもよい。本発明の一実施形態では、本発明の化合物は、ステント又はステントグラフトデバイスとして形成されるポリマー又は半透性ポリマーマトリックスに結合される。
【００８９】
本開示の医薬組成物は、１又は複数の追加の治療剤とともに製剤化することができる。１又は複数の追加の治療剤としては、コルチコステロイド、ステロイド、免疫抑制剤、又はＣＤ２０阻害剤を挙げることができる。いくつかの実施形態では、１又は複数の追加の治療剤としては、オビヌツズマブ、リツキシマブ、オクレリズマブ、シクロホスファミド、プレドニゾン、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン酢酸エステル、コルチゾン酢酸エステル、チクソコルトールピバル酸エステル、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール、モメタゾン、アムシノニド、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ハルシノニド、ベタメタゾン、ベタメタゾンリン酸エステルナトリウム、デキサメタゾン、デキサメタゾンリン酸エステルナトリウム、フルオコルトロン、ヒドロコルチゾン−１７−吉草酸エステル、ハロメタゾン、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、ベクロメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、プレドニカルバート、クロベタゾン−１７−酪酸エステル、クロベタゾール−１７−プロピオン酸エステル、カプロン酸フルオコルトロン、ピバル酸フルオコルトロン、酢酸フルプレドニデン、ヒドロコルチゾン−１７−酪酸エステル、ヒドロコルチゾン−１７−アセポン酸エステル、ヒドロコルチゾン−１７−ブテプラート、シクレソニド、及びプレドニカルバートが挙げられる。併用療法のさらなる考察は、本願の「使用方法」の項に記載されている。
【００９０】
Ｃ．使用方法
本発明の化合物は、インビトロ及び生体内の両方のさまざまな状況において、Ｃ５ａ受容体のアゴニスト、（好ましくは）アンタゴニスト、部分アゴニスト、インバースアゴニストとして使用することができる。一実施形態では、本発明の化合物は、インビトロ又は生体内でＣ５ａ受容体へのＣ５ａ受容体リガンド（例えばＣ５ａ）の結合を阻害するのに使用できるＣ５ａＲアンタゴニストである。一般に、そのような方法は、水溶液中のＣ５ａ受容体リガンドの存在下で、又はそうでなければリガンドのＣ５ａ受容体への結合に適した条件下で、Ｃ５ａ受容体を充分な量の１又は複数のＣ５ａ受容体モジュレーターと接触させるステップを含む。Ｃ５ａ受容体は、懸濁液（例えば単離された膜又は細胞調製物）、培養又は単離された細胞、又は組織若しくは器官に存在しうる。
【００９１】
好ましくは、受容体と接触するＣ５ａ受容体モジュレーターの量は、例えば本明細書に記載の放射性リガンド結合アッセイ、カルシウム動員アッセイ、又は走化性アッセイを使用して測定した場合、インビトロにおいてＣ５ａのＣ５ａ受容体への結合を阻害するのに十分であるべきである。
【００９２】
本発明の一実施形態では、本発明のＣ５ａモジュレーターは、例えば、（インビトロ又は生体内のいずれかで）本発明の１又は複数の化合物をＣ５ａ受容体と、モジュレーターの受容体への結合に適した条件下で接触させることによって、Ｃ５ａ受容体のシグナル伝達活性を調節、好ましくは阻害するために使用される。受容体は、溶液は若しくは懸濁液中、培養若しくは単離細胞調製物中、又は患者内に存在しうる。シグナル伝達活性の調節は、カルシウムイオンカルシウム動員に対する効果を検出すること、又はＣ５ａ受容体を介する化学走性に対する効果を検出することによって評価することができる。一般に、Ｃ５ａモジュレーターの有効量は、カルシウム動員アッセイでインビトロのＣ５ａ受容体シグナル伝達活性を調節する、又は遊走アッセイでＣ５ａ受容体を介する細胞走化性を調節するのに充分な量である。
【００９３】
本発明の化合物を使用して、インビトロ走化性アッセイにおいてＣ５ａ受容体を介する細胞走化性、好ましくは白血球（例えば好中球）走化性を阻害する場合、そのような方法は、白血球（特に霊長類白血球、とりわけヒト白血球）を１又は複数の本発明の化合物と接触させることを含む。好ましくは、濃度は、インビトロ走化性アッセイで白血球の走化性を阻害するのに十分であり、その結果対照アッセイで観察される走化性のレベルは、上記のように、本発明の化合物が加えられたアッセイで観察されるレベルよりも著しく高い。
【００９４】
別の実施形態では、本発明の化合物はさらに、Ｃ５ａ受容体調節に反応する病気に罹患している患者を治療するために使用することができる。本明細書で使用される場合、「治療する」又は「治療」という用語は、疾患修飾性治療と対症療法の両方を包含し、どちらも予防的（すなわち、症状の発症前に、予防、遅延、又は症状の重症度を軽減するため）又は治療的（すなわち、症状の発症後に、症状の重症度及び／又は期間を減らすため）でありうる。本明細書で使用される場合、Ｃ５ａ受容体活性の調節がＣ５ａ受容体の不適切な活性の減少をもたらす場合、病気は「Ｃ５ａ受容体調節に反応する」とみなされる。本明細書で使用される場合、「患者」という用語は、本明細書に記載の投薬を受けている霊長類（特にヒト）、飼いならされたコンパニオンアニマル（ｄｏｍｅｓｔｉｃａｔｅｄ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ  ａｎｉｍａｌｓ）（犬、猫、馬など）及び家畜（牛、豚、羊など）を含む。
【００９５】
Ｃ５ａ調節によって治療できる病気
自己免疫疾患−−例えば、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ギランバレー症候群、膵炎、ループス腎炎、ループス糸球体腎炎、乾癬、クローン病、血管炎、過敏性腸症候群、皮膚筋炎、多発性硬化症、気管支喘息、ＩＩ型膜性増殖性糸球体腎炎（緻密沈着症）、天疱瘡、類天疱瘡、強皮症、重症筋無力症、自己免疫性溶血及び血小板減少状態、グッドパスチャー症候群（及び関連する糸球体腎炎及び肺出血）、Ｃ３−糸球体症、Ｃ３−糸球体腎炎、膜性増殖性糸球体腎炎、川崎病、ＩＧｓ腎症、免疫血管炎、組織移植片拒絶、移植片対宿主疾患、移植臓器の超急性拒絶など。
【００９６】
炎症性障害及び関連する病気−−例えば、好中球減少、敗血症、敗血症性ショック、アルツハイマー病、多発性硬化症、好中球増加、脳卒中、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、重度の火傷に伴う炎症、肺損傷、虚血再灌流障害、変形性関節症、急性（成人）急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性肺閉塞性障害（ＣＯＰＤ）、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、アトピー性皮膚炎、乾癬、慢性蕁麻疹及び多臓器不全症候群（ＭＯＤＳ）、溶血性尿毒症症候群、非典型溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）。さらに、インスリン依存性糖尿病（糖尿病性網膜症を含む）、ループス腎症、ヘイマン腎炎、膜性腎炎及び他の形態の糸球体腎炎、接触過敏反応、並びに例えば血液の体外循環の間に（例えば血液透析の間若しくは人工心肺を介して、例えば冠状動脈バイパス移植や心臓弁置換などの血管手術に関連して）、又は他の人工血管若しくは容器表面（例えば心室補助装置、人工の機械の心臓（ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ  ｈｅａｒｔ  ｍａｃｈｉｎｅｓ）、輸血チューブ、血液保存バッグ、血漿交換、血小板アフェレシスなど）との接触に関連して生じるような、補体活性化を引き起こしうる血液の人工表面の接触に起因する炎症に関連する病的続発症も含まれる。また、固形臓器移植を含む移植に起因するものなどの虚血／再灌流障害、及び虚血再灌流障害や、虚血性大腸炎、心虚血などの症候群も含まれる。本発明の化合物は、加齢黄斑変性の治療にも有用でありうる（Ｈａｇｅｍａｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｐ．Ｎ．Ａ．Ｓ．１０２：７２２７−７２３２，２００５）。
【００９７】
心血管及び脳血管障害−−例えば、心筋梗塞、冠動脈血栓症、血管閉塞、術後血管再閉塞、アテローム性動脈硬化症、外傷性中枢神経系損傷、及び虚血性心疾患。一実施形態において、本発明の化合物の有効量は、心筋梗塞又は血栓症のリスクがある患者（すなわち、限定されないが、肥満、喫煙、高血圧、高コレステロール血症、心筋梗塞又は血栓症の既往歴又は遺伝的病歴などの心筋梗塞又は血栓症について認識されている危険因子を１又は複数有する患者）に、心筋梗塞又は血栓症のリスクを減らすために投与することができる。
【００９８】
腫瘍性疾患又は障害−−例えば、黒色腫、肺がん、リンパ腫、肉腫、癌腫、線維肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、血管肉腫、リンパ管肉腫、滑膜腫、中皮腫、髄膜腫、白血病、リンパ腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、扁平上皮癌腫、基底細胞癌腫、腺癌、乳頭癌、嚢胞腺癌、気管支癌、腎細胞癌、肝細胞癌、移行上皮癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性癌、ウィルムス腫瘍、多形性腺腫、肝細胞乳頭腫、尿細管腺腫、嚢胞腺腫、乳頭腫、腺腫、平滑筋腫、横紋筋腫、血管腫、リンパ管腫、骨腫、軟骨腫、脂肪腫及び線維腫。
【００９９】
血管炎の疾患−−血管炎疾患は血管の炎症を特徴とする。白血球の浸潤は血管壁の破壊につながり、補体経路は白血球の遊走の開始及び炎症部位に現れる結果として生じる損傷において大きな役割を果たすと考えられている（Ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｂａｌｌ  ａｎｄ  Ｂｒｉｄｇｅｓ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，ｐｐ  ４７−５３，２００８）。本発明で提供される化合物は、白血球破砕性血管炎、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連血管炎、免疫血管炎ウェゲナー肉芽腫症、顕微鏡的多発血管炎、チャーグ・ストラウス症候群、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、結節性多発性炎、急速進行性糸球体腎炎（ＲＰＧＮ）、クリオグロブリン血症、巨細胞性動脈炎（ＧＣＡ）、ベーチェット病、高安動脈炎（ＴＡＫ）の治療に使用することができる。
【０１００】
ＨＩＶ感染症とエイズ−−本明細書で提供されるＣ５ａ受容体モジュレーターは、ＨＩＶ感染の抑制、エイズの進行の遅延、又は症状若しくはＨＩＶ感染及びエイズの重症度の軽減に使用することができる。
【０１０１】
神経変性障害及び関連疾患−−さらなる態様の範囲内で、本明細書で提供されるＣ５ａアンタゴニストは、心肺バイパス手術及び関連手順に関連するアルツハイマー病、多発性硬化症、及び認知機能低下の治療に使用することができる。
【０１０２】
本発明の一実施形態では、本発明の化合物は、敗血症（及び関連障害）、ＣＯＰＤ、関節リウマチ、ループス腎炎、及び多発性硬化症からなる群より選択される疾患の治療に使用することができる。
【０１０３】
一般に、本明細書で提供される治療法は、患者に本明細書で提供される１又は複数の化合物の有効量を投与することを含む。適した患者には、本明細書で特定される障害又は疾患に罹患している又は罹患しやすい（すなわち予防的治療）患者が含まれる。本明細書に記載の治療に向いた典型的な患者としては、哺乳動物、特に霊長類、特にヒトが挙げられる。他の適した患者としては、イヌ、ネコ、ウマなどの飼いならされたコンパニオンアニマル、又はウシ、ブタ、ヒツジなどの家畜動物が挙げられる。
【０１０４】
一般に、本明細書で提供される治療法は、患者に本明細書で提供される１又は複数の化合物の有効量を投与することを含む。好ましい実施形態では、本発明の化合物は、患者（例えばヒト）に経口的又は局所的に投与されることが好ましい。有効量は、Ｃ５ａ受容体活性を調節するのに充分な量及び／又は患者によって示される症状を軽減若しくは緩和するのに充分な量でありうる。好ましくは、投与量は、インビトロで白血球（例えば好中球）走化性を検出可能な程度に阻害するのに十分に高い化合物（又は化合物がプロドラッグの場合、その活性代謝物）の血漿濃度を得るのに十分である。治療レジメンは、使用される化合物と治療される特定の病気によって異なりうる。ほとんどの障害の治療の場合、１日４回又はそれより少ない投与の頻度が好ましい。一般に、１日２回の投与レジメンがより好ましく、１日１回の投与が特に好ましい。しかし、特定の患者の具体的な投与量レベル及び治療レジメンは、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄率、薬物の組み合わせ（すなわち患者に投与されている他の薬物）、及び治療を受けている特定の疾患の重症度、並びに処方医の判断を含むさまざまな要因に依存することになることが理解されるであろう。一般に、効果的な治療を提供するのに充分な最小投与量の使用が好ましい。患者は一般に、治療又は予防される病気に適した医学的又は獣医学的基準を用いて、治療有効性についてモニターされる。
【０１０５】
１日あたり体重１キログラムにつき約０．１ｍｇ〜約１４０ｍｇ程度の投与量レベルは、病原性Ｃ５ａ活性を伴う病気の治療又は予防に有用である（１日あたりヒト患者１人につき約０．５ｍｇ〜約７ｇ）。単一の剤形を製造するために担体材料と組み合わせることができる有効成分の量は、治療される宿主及び特定の投与様式に応じて変わることになる。一般に、投与単位形態は約１ｍｇ〜約５００ｍｇの有効成分を含むことになる。経口投与、経皮投与、静脈内投与、又は皮下投与された化合物については、５ｎｇ（ナノグラム）／ｍｌ〜１０μｇ（マイクログラム）／ｍｌ血清の血清濃度を達成するのに充分な量の化合物が投与されることが好ましく、より好ましくは２０ｎｇ〜１μｇ／ｍｌ血清の血清濃度を達成するのに充分な化合物が投与され、最も好ましくは５０ｎｇ／ｍｌ〜２００ｎｇ／ｍｌ血清の血清濃度を達成するのに充分な化合物が投与されるべきである。滑膜への直接注射（関節炎の治療）の場合、約１マイクロモルの局所濃度を達成するのに充分な化合物が投与されるべきである。
【０１０６】
投与の頻度も、使用される化合物と治療される特定の疾患に応じ異なりうる。しかし、ほとんどの障害の治療には、１日４回、１日３回、又はそれよりも少ない投与レジメンが好ましく、１日１回又は１日２回の投与レジメンが特に好ましい。ただし、特定の患者の具体的な投与量レベルは、使用される特有の化合物の活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄率、薬物の組み合わせ（すなわち患者に投与されている他の薬物）、治療を受けている特定の疾患の重症度、及び処方医の判断を含む他の要因に依存することになる。
【０１０７】
併用療法
現在開示されている化合物は、本発明の化合物及び組成物が有用である疾患又は病気の治療、予防、抑制、又は寛解に使用される１又は複数の追加の治療剤と組み合わせて使用することができる。そのような１又は複数の追加の治療剤は、そのために一般的に使用される経路及び量で、本発明の化合物又は組成物と、同時に又は連続して投与されうる。本発明の化合物又は組成物が１又は複数の他の薬物と同時に使用される場合、本発明の化合物又は組成物にくわえて、そのような他の薬物を含有する医薬組成物が好ましい。したがって、本発明の医薬組成物には、本発明の化合物又は組成物にくわえて、１又は複数の他の有効成分又は治療剤も含有するものが含まれる。
【０１０８】
個別に投与されるか、又は同じ医薬組成物で投与される、本発明の化合物又は組成物と組み合わせることができる１又は複数の追加の治療剤の例としては、限定されないが、以下が挙げられる。（ａ）ＶＬＡ−４アンタゴニスト；（ｂ）ステロイドとコルチコステロイド、例えば、ベクロメタゾン、ベタメタゾン（ベタメタゾンリン酸エステルナトリウム、吉草酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾンを含む）、プレドニゾン、プレニソロン、メチルプレドニゾロン、モメタゾン、デキサメタゾン（デキサメタゾンリン酸エステルナトリウムを含む）、フルチカゾン、コルチゾン（コルチゾン酢酸エステルを含む）ヒドロコルチゾン（ヒドロコルチゾン酢酸エステル、ヒドロコルチゾン−１７−吉草酸エステル、ヒドロコルチゾン−１７−酪酸エステル、ヒドロコルチゾン−１７−アセポン酸エステル、ヒドロコルチゾン−１７−ブテプラートを含む）、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド（フルオシノロンアセトニドを含む）、トリアムシノロン（トリアムシノロンアセトニド及びトリアムシノロンアルコールを含む）、チクソコルトール（チクソコルトールピバル酸エステルを含む）フルオコルトロン（カプロン酸フルオコルトロン及びピバル酸フルオコルトロンを含む）、アムシノニド、ハルシノニド、ハロメタゾン、酢酸フルプレドニデン、サルメテロール、サルメテロール、サルブタモール、シクレソニド、フォルメテロール、アルクロメタゾン（ジプロピオン酸アルクロメタゾンを含む）、プレドニカルバート、クロベタゾン（クロベタゾン−１７−ブトレートを含む）、クロベタゾール（クロベタゾール−１７−プロピオン酸エステルを含む）；（ｃ）免疫抑制剤、例えば、シクロスポリン（シクロスポリンＡ、Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅ（登録商標）、Ｎｅｏｒａｌ（登録商標））、タクロリムス（ＦＫ−５０６、Ｐｒｏｇｒａｆ（登録商標））、ラパマイシン（シロリムス、Ｒａｐａｍｕｎｅ（登録商標））と他のＦＫ−５０６タイプ免疫抑制剤、及びミコフェノール酸エステル（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌａｔｅ）、例えばミコフェノール酸モフェチル（セルセプト８）；（ｄ）抗ヒスタミン薬（Ｈ１−ヒスタミンアンタゴニスト）、例えば、ブロモフェニラミン、クロルフェニラミン、デキスクロイフェニラミン、トリプロリジン、クレマスチン、ジフェンヒドラミン、ジフェニルピラリン、トリペレナミン、ヒドロキシジン、メトジラジン、プロメタジン、トリメプラジン、アザタジン、シプロヘプタジン、アンタゾリン、フェニラミンピリラミン、アステミゾール、テルフェナジン、ロラタジン、セチリジン、フェキソフェナジン、デスカルボエトキシロラタジンなど；（ｅ）非ステロイド性抗喘息薬（例えば、テルブタリン、メタプロテレノール、フェノテロール、イソエタリン、アルブテロール、ビトルテロール、及びピルブテロール）、テオフィリン、クロモリンナトリウム、アトロピン、臭化イプラトロピウム、ロイコトリエンアンタゴニスト（例えば、ザフムルカスト、モンテルカスト、プランルカスト、イラルカスト、ポビルカスト、及びＳＫＢ−１０６，２０３）、ロイコトリエン生合成阻害剤（ジロートン、ＢＡＹ−１００５）；（ｆ）非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、例えば、プロピオン酸誘導体（例えば、アルミノプロフェン、ベノキサプロフェン、ブクロクス酸、カルプロフェン、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドプロフェン、ケトプロフェン、ミロプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピルプロフェン、プラノプロフェン、スプロフェン、チアプロフェン酸、及びチオキサプロフェン）、酢酸誘導体（例えば、インドメタシン、アセメタシン、アルクロフェナク、クリダナク、ジクロフェナク、フェンクロフェナク、フェンクロジン酸、フェンチアザック、フロフェナク、イブフェナク、イソキセパック、オックスピナック、スリンダク、チオピナック、トルメチン、ジドメタシン、及びゾメピラク）、フェナム酸誘導体（例えば、フルフェナム酸、メクロフェナム酸、メフェナム酸、ニフルム酸、及びトルフェナム酸）、ビフェニルカルボン酸誘導体（例えば、ジフルニサル及びフルフェニサル）、オキシカム（例えば、イソキシカム、ピロキシカム、スドキシカム、及びテノキシカン）、サリチレート（例えば、アセチルサリチル酸及びスルファサラジン）、並びにピラゾロン（例えば、アパゾン、ベズピペリロン、フェプラゾン、モフェブタゾン、オキシフェンブタゾン、及びフェニルブタゾン）；（ｇ）セレコキシブ（Ｃｅｌｅｂｒｅｘ（登録商標））やロフェコキシブ（Ｖｉｏｘｘ（登録商標））などのシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）阻害剤；（ｈ）ホスホジエステラーゼＩＶ型（ＰＤＥ  ＩＶ）の阻害剤；（ｉ）オーラノフィンやオーロチオグルコースなどの金化合物；（ｊ）エタネルセプト（エンブレル１０）；（ｋ）シクロホスファミド；（ｌ）オルソクローン（ＯＫＴ３）や、ダクリズマブ（Ｚｅｎａｐａｘ（登録商標））、バシリキシマブ（Ｓｉｍｕｌｅｃｔ（登録商標））、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標））などの抗体療法；（ｍ）オビヌツズマブや、リツキシマブ、オクレリズマブなどのＣＤ２０を標的とする抗体療法；（ｎ）化学療法剤、例えば、アントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン（ダウノマイシン；ルビドマイシン）、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、及びバルルビシン）、ミトキサントロン、並びにピキサントロン；白金をベースとする薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、サトラプラチン、ピコプラチン、ネダプラチン、トリプラチン、及びリポプラチン）；４−ヒドロキシタモキシフェン（アフィモキシフェン）やＮ−デスメチル−４−ヒドロキシタモキシフェン（ｅｎｄｏｘｉｆｅｎ）などのタモキシフェンとその代謝物；パクリタキセル（タキソール）やドセタキセルなどのタキサン；アルキル化剤（例えば、メクロレタミン（ＨＮ２）や、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン（Ｌ−サルコリシン）、クロランブシルなどのナイトロジェンマスタード）；エチレンイミンとメチルメラミン（例えば、ヘキサメチルメラミン、チオテパ、ブスルファンなどのスルホン酸アルキル、カルムスチン（ＢＣＮＵ）や、ロムスチン（ＣＣＮＬＪ）、セムスチン（メチル−ＣＣＮ−Ｕ）、ストレプトゾシン（ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｅｉｎ）（ストレプトゾトシン）などのニトロソ尿素、及���デカルバジン（ＤＴＩＣ；ジメチルトリアゼノイミダゾールカルボキサミドなどのトリアゼン））；代謝拮抗剤（例えば、メトトレキサート（アメトプテリン）などの葉酸アナログ、フルオロウラシル（５−フルオロウラシル；５−ＦＵ）や、フロクスウリジン（フルオロデオキシウリジン；ＦＵｄＲ）、シタラビン（シトシンアラビノシド）などのピリミジンアナログ、及びメルカプトプリン（６−メルカプトプリン；６−ＭＰ）、チオグアニン（６−チオグアニン；６−ＴＧ）、ペントスタチン（２’−デオキシコフォニシン）などのプリンアナログと関連阻害剤）；（ｏ）ケモカイン受容体の他のアンタゴニスト、特にＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ７、ＣＸ３ＣＲ１、及びＣＸＣＲ６。
【０１０９】
治療される疾患又は障害は、どの追加の治療剤又は複数の治療剤が、本発明の化合物と組み合わせて最も適切に投与されるかを決定することになり、そのような決定は当業者によってなされうる。
【０１１０】
本発明の化合物の第２の活性成分に対する重量比は変えることができ、各成分の有効投与量に依存することになる。一般に、それぞれの有効投与量が使用されることになる。したがって、例えば、本発明の化合物をＮＳＡＩＤと組み合わせる場合、本発明の化合物のＮＳＡＩＤに対する重量比は一般に約１０００：１〜約１：１０００、好ましくは約２００：１〜約１：２００の範囲をとることになる。一般に、本発明の化合物と他の有効成分との組み合わせも前述の範囲内であることになるが、いずれの場合にも、各有効成分の有効投与量が使用されるべきである。
【０１１１】
非医薬品用途
本発明の別の態様では、本発明の化合物は、さまざまな非医薬のインビトロ及び生体内の用途で使用することができる。例えば、本発明の化合物を標識し、Ｃ５ａ受容体（細胞調製物又は組織切片試料）の検出及び局在確認のためのプローブとして使用することができる。本発明の化合物はまた、Ｃ５ａ受容体活性のアッセイにおける陽性対照として、すなわち、候補薬剤のＣ５ａ受容体への結合能力を決定するための標準として、又は陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）イメージング用若しくは単一光子放射コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）用の放射性トレーサーとして使用することができる。そのような方法は、生きている被験者のＣ５ａ受容体の特徴付けに使用することができる。たとえば、Ｃ５ａ受容体モジュレーターは、さまざまな既知の技術のいずれか（例えばトリチウムなどの放射性核種での放射性標識）を使用して標識し、適切なインキュベーション時間（例えば最初に結合の経時変化をアッセイすることよって決定）、試料とともにインキュベーションすることができる。インキュベーションの後、未結合の化合物が（例えば洗浄などによって）除去され、使用される標識に適したいずれかの方法を用いて結合化合物が検出される（例えば、放射性標識化合物にはオートラジオグラフィー又はシンチレーション測定。発光基と蛍光基を検出するのには分光法を使用することができる）。対照として、標識化合物及びより多くの（例えば１０倍多い）量の非標識化合物を含むマッチングした（ｍａｔｃｈｅｄ）試料を同じ方法で処理することができる。対照よりも試験試料に多く量の検出可能な標識が残っていることは、試料中にＣ５ａ受容体が存在することを示す。培養細胞又は組織試料のＣ５ａ受容体の受容体オートラジオグラフィー（受容体マッピング）を含む検出アッセイは、Ｋｕｈａｒ  ｉｎ  ｓｅｃｔｉｏｎｓ  ８．１．１  ｔｏ  ８．１．９  ｏｆ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（１９９８）Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋによって記載されるように行うことができる。
【０１１２】
本明細書で提供される化合物はまた、さまざまな周知の細胞分離方法で使用することができる。例えば、モジュレーターを、インビトロでＣ５ａ受容体を固定することによって単離する（例えば受容体発現細胞を単離する）ための親和性リガンドとして使用するために、組織培養プレート又は他の支持体の内面に結合することができる。１つの好ましい用途では、フルオレセインなどの蛍光マーカーに結合したモジュレーターを細胞と接触させ、次いで細胞を蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）によって分析（又は単離）する。
【実施例】
【０１１３】
Ｉ．実施例
以下の例は説明のために提供され、特許請求される発明を限定するものではない。
【０１１４】
以下で使用する試薬及び溶媒は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（米国ウィスコンシン州ミルウォーキー）などの商業的な供給元から入手することができる。1Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ  Ｍｅｒｃｕｒｙ  ４００ＭＨｚ  ＮＭＲ分光計で記録した。ＴＭＳと相対的に重要なピークが形成され、多重度（ｓ、シングレット；ｄ、ダブレット；ｔ、トリプレット；ｑ、カルテット；ｍ、マルチプレット）及びプロトン数の順で表に示される。質量分析の結果は、電荷に対する質量の比率として報告され、その後に（括弧内で）各イオンの相対存在量が続く。実施例では、最も一般的な原子同位体を含有するＭ＋Ｈ（又は前述のようにＭ−Ｈ）イオンの単一のｍ／ｅ値が報告されている。同位体パターンは、すべての場合において予想される式に対応する。エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）質量分析は、ＨＰ１１００  ＨＰＬＣを試料送達に使用して、ヒューレット・パッカードＭＳＤエレクトロスプレー質量分析計で行った。ふつうは分析物をメタノールに０．１ｍｇ／ｍＬで溶かし、１マイクロリットルを送達溶媒とともに質量分析計に注入し、１００〜１５００ダルトンでスキャンした。化合物はすべて、送達溶媒として１％ギ酸を含むアセトニトリル／水を使用してポジティブＥＳＩモードで分析することができた。また、以下に示す化合物は、送達系としてアセトニトリル／水中の２ｍＭ  ＮＨ4ＯＡｃを使用してネガティブＥＳＩモードでも分析することができた。
【０１１５】
以下の略称が、実施例及び本発明の明細書全体を通して使用される。
ＥｔＯＨ：エタノール
ＥｔＯＮａ：ナトリウムエトキシド
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＭｅＯＨ：メタノール
【０１１６】
本発明の範囲内の化合物は、当業者に公知のさまざまな反応を用いて、以下に記載するように合成することができる。また、当業者であれば、代替方法を用いて本発明の標的化合物を合成できること、及び本文書の本文内に記載の方法が網羅的ではないが、対象の化合物に広く適用可能で実用的な経路を提供することを認識するであろう。
【０１１７】
本特許で請求されある種の分子は、さまざまなエナンチオマー及びジアステレオマーの形で存在する可能性があり、これらの化合物のすべてのそのような変形が特許請求される。
【０１１８】
本書で重要な化合物を合成するために使用される実験手順の詳細な記載は、それら化合物を特定する物理データ及びそれら化合物に関連する構造描写によって記載される分子をもたらす。
【０１１９】
また当業者であれば、有機化学の標準的なワークアップ手順の間に、酸及び塩基が頻繁に使用されることがわかるであろう。本特許に記載の実験手順の間に、親化合物の塩が必要な固有の酸性度又は塩基性度を有する場合、それらの塩が生成されることがある。
【０１２０】
実施例１
中間体６−フルオロ−７−メトキシ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドールの合成
【化１７】
2020522483.tif 000019
工程ａ：ＴＨＦ中のビニルマグネシウムブロミド溶液（１．０Ｍ、７０ｍＬ、７０ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（７０ｍＬ）中の４−ブロモ−２−フルオロ−６−ニトロアニソール（５．０ｇ、２０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ2下にて−５０℃で加えた。反応混合物を同じ温度で撹拌し、１．５時間かけて−３０℃まで温めた。反応混合物を飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液でクエンチし、１時間かけて室温まで温めた。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜１００％ＥｔＯＡｃ）で精製して、４−ブロモ−６−フルオロ−７−メトキシ−１Ｈ−インドールを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ9Ｈ8ＢｒＦＮＯ［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値２４３．９、実測値２４３．９
【０１２１】
工程ｂ：ジオキサン（１６ｍＬ）中の、４−ブロモ−６−フルオロ−７−メトキシ−１Ｈ−インドール（９００ｍｇ、３．６８ｍｍｏｌ）と、ビス（ピナコラト）ジボロン（１．２１ｇ、４．８ｍｍｏｌ）と、ＫＯＡｃ（１．０８ｇ、１１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（４００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ2で２分間脱気し、１００℃で２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、セライトに通して濾過した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜１００％ＥｔＯＡｃ）で精製して、６−フルオロ−７−メトキシ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドールを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ15Ｈ20ＢＦＮＯ3［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値２９２．１、実測値２９２．１
【０１２２】
実施例２
４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−６−フルオロ−７−メトキシ−１Ｈ−インドールの合成
【化１８】
2020522483.tif 000020
工程ａ：９０ｍＬの濃塩酸の入った２５０ｍＬフラスコに、２，６−ジエチルアニリン（１０ｇ、６７ｍｍｏｌ）を磁気攪拌しながら加えた。得られた混合物を３０分間撹拌し、内部温度が−５℃に達するまで氷塩浴で冷やした。内部温度を５℃未満に維持しながら、亜硝酸ナトリウム（５．５ｇ、８０ｍｍｏｌ）の水溶液（６０ｍＬ）を上記混合物にゆっくりと加えた。
【０１２３】
それとは別に、塩化スズ（ＩＩ）二水和物（３１．６ｇ、１４０ｍｍｏｌ）を、濃塩酸（６０ｍＬ）の入った５００ｍＬの三ツ口丸底フラスコに機械的に攪拌しながら加えた。次いで、得られた溶液を氷浴で冷やした。
【０１２４】
次いで、ジアゾニウムスラリーを、激しく攪拌した冷塩化スズ溶液の入った５００ｍＬフラスコに濾過した。９０分後、反応混合物を５００ｍＬ三角フラスコに移し、フラスコを水（２０ｍＬ）とクロロホルム（８ｍＬ）で洗い流した。合わせた混合物を室温で一晩撹拌した。液体をデカントして、湿った固体を得た。固体を真空下で１日乾燥させ、次いでメカニカルスターラー備えた５００ｍＬの三ツ口丸底フラスコに移し、エーテル（１８０ｍＬ）とともに撹拌した。得られた混合物を氷浴で冷やし、内部温度を１２℃未満に維持しながら、１０Ｎ  ＮａＯＨ溶液（３０ｍＬ）を混合物にゆっくりと加えた。添加後、混合物を氷上に２時間静置した。エーテル層を５００ｍＬフラスコにデカントし、塩化水素ガスの流れを攪拌したエーテル溶液に通気した。得られた沈殿物を濾過によって集めて、（２，６−ジエチルフェニル）ヒドラジン塩酸塩を得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ10Ｈ17Ｎ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値１６５．１、実測値１６５．１
【０１２５】
工程ｂ：ピリジン（４ｍＬ、４９．５ｍｍｏｌ）を、（２，６−ジエチルフェニル）ヒドラジン塩酸塩（５ｇ、２４．９１ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−シアノ−２，２−ジメチル−３−オキソピロリジン−１−カルボキシレート（５ｇ、２０．９８ｍｍｏｌ）と、ＥｔＯＨ（６０ｍＬ）の混合物に、２５０ｍＬ丸底フラスコ内で磁気攪拌下にて加えた。得られた混合物を７０℃で２４時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、クエン酸水溶液、ＮａＨＣＯ3水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシクロヘキサンから晶出させ、ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ‐２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−カルボキシレートを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ22Ｈ33Ｎ4Ｏ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値３８５．２、実測値３８５．２
【０１２６】
Ｔｅｒｔ−亜硝酸ブチル（０．５ｍＬ、３．８ｍｍｏｌ）を室温で、ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ‐２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−カルボキシレート（１ｇ、２．６ｍｍｏｌ）と、ジヨードメタン（１．５ｍＬ、１８．６ｍｍｏｌ）と、ＭｅＣＮ（１５ｍＬ）の混合物に、１００ｍＬ丸底フラスコ内で磁気攪拌下にてゆっくりと加えた。得られた混合物を４５℃で３時間撹拌した後、トルエンで希釈し、飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液／ＮＨ4ＯＨ（３：１）、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の２〜２５％ＥｔＯＡｃ）で精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−カルボキシレートを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ22Ｈ31ＩＮ3Ｏ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値４９６．１、実測値４９６．２
【０１２７】
工程ｃ：上記ｔｅｒｔ−ブチル２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−カルボキシレートをジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶かし、ジオキサン中のＨＣｌ（４Ｎ、５ｍＬ）を入れた。得られた混合物を室温で１２時間攪拌した。完了次第、溶媒を真空下で蒸発させて、２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール塩酸塩を得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ17Ｈ23ＩＮ3［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値３９６．１、実測値３９６．２
【０１２８】
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３ｍＬ、１．７３ｍｍｏｌ）を、１，２−ジクロロエタン（１０ｍＬ）中の、２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール塩酸塩（６８０ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）と２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド（８００ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、磁気攪拌下で加えた。室温で１０分間攪拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）3（８００ｍｇ、３．７７ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。得られた混合物を４５℃で２時間撹拌した。室温まで冷やした後、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＨＣＯ3水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の２〜２５％ＥｔＯＡｃ）で精製して、５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾールを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ26Ｈ27Ｆ6ＩＮ3［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値６２２．１、実測値６２２．１
【０１２９】
工程ｄ：ジオキサン（６ｍＬ）と水（１ｍＬ）中の、５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール（２５０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）と、６−フルオロ−７−メトキシ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）と、Ｋ2ＣＯ3（４４５ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（５０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ2で２分間脱気し、Ｎ2下にて１００℃で２．５時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＨＣＯ3水溶液で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の３〜３５％ＥｔＯＡｃ）と、それに続くＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ、含１％ＴＦＡ）で精製して、４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−６−フルオロ−７−メトキシ−１Ｈ−インドールを得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ８．３７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），７．０７−７．３３（ｍ，４Ｈ），６．４１（ｄｄ，Ｊ＝２．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ），６．３３（ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１４（ｓ，２Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），３．７０（ｓ，２Ｈ），２．２３−２．３７（ｍ，４Ｈ），１．５５（ｓ，６Ｈ），１．０２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，６Ｈ）。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ35Ｈ34Ｆ7Ｎ4Ｏ［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値６５９．２、実測値６５９．２
【０１３０】
実施例３
３−クロロ−４−（２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−５−（２−（トリフルオロメチル）ベンジル）−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドールの合成
【化１９】
2020522483.tif 000021
工程ａ：ジオキサン（１５ｍＬ）中の、４−ブロモ−７−フルオロ−１Ｈ−インドール（１．００ｇ、４．６７ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（１．３１ｇ、５．１４ｍｍｏｌ）とＫＯＡｃ（１．１５ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（４１６ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ2で２分間脱気し、１００℃で２時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷やし、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトに通して濾過した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜３０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、７−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドールを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ14Ｈ18ＢＦＮＯ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値２６２．１、実測値２６２．１
【０１３１】
工程ｂ：ジオキサン（１０ｍＬ）と水（２ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−カルボキシレート（５４０ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）と、７−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（３５０ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）と、Ｋ2ＣＯ3（８３０ｍｇ、６．７８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（２００ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ2で２分間脱気し、Ｎ2下にて１００℃で２時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷やし、ＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＨＣＯ3水溶液で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の５〜２５％ＥｔＯＡｃ）で精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−（７−フルオロ−１Ｈ−インドール−４−イル）−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−カルボキシレートを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ30Ｈ36ＦＮ4Ｏ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値５０３．２、実測値５０３．３
【０１３２】
工程ｃ：上記ｔｅｒｔ−ブチル２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−（７−フルオロ−１Ｈ−インドール−４−イル）−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−カルボキシレート（２００ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶かし、Ｎ−クロロスクシンイミド（１００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を入れた。得られた混合物を室温で１２時間攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｎａ2Ｓ2Ｏ3水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の２〜２５％ＥｔＯＡｃ）で精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（３−クロロ−７−フルオロ−１Ｈ−インドール−４−イル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−カルボキシレートを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ30Ｈ33ＣｌＦＮ4Ｏ2［Ｍ−Ｈ］-のｍ／ｚ計算値５３５．２、実測値５３５．２
【０１３３】
上記ｔｅｒｔ−ブチル３−（３−クロロ−７−フルオロ−１Ｈ−インドール−４−イル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−カルボキシレートをジクロロメタン（６ｍＬ）に溶かし、ジオキサン中のＨＣｌ（４Ｎ、５ｍＬ）を入れた。得られた混合物を室温で１２時間撹拌した。反応が完了した後、溶媒を真空下で蒸発させて、３−クロロ−４−（２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドール塩酸塩を得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ25Ｈ27ＣｌＦＮ4［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値４３７．２、実測値４３７．２
【０１３４】
工程ｄ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）を、１，２−ジクロロエタン（６ｍＬ）中の、３−クロロ−４−（２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドール塩酸塩（７５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）と２−トリフルオロメチルベンズアルデヒド（１２０ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）の懸濁液に、磁気攪拌下で加えた。室温で１０分間攪拌した後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）3（１５０ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を反応混合物に加えた。得られた混合物を４０℃で１時間撹拌し、次いで室温まで冷やし、ＥｔＯＡｃで希釈し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を分取ＴＬＣ（ヘキサン中の４０％ＥｔＯＡｃ）と、それに続くＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ、含１％ＴＦＡ）で精製して、３−クロロ−４−（２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−５−（２−（トリフルオロメチル）ベンジル）−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドールを得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ７．９２−７．９９（ｍ，１Ｈ），７．５２−７．６６（ｍ，２Ｈ），７．３４−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．２４−７．２９（ｍ，２Ｈ），６．９４−６．９８（ｍ，１Ｈ），６．６６（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１０．８Ｈｚ，１Ｈ），６．５０（ｄｄ，Ｊ＝４．５，８．２Ｈｚ，１Ｈ），４．８８（ｂｒ，１Ｈ），４．０９（ｓ，２Ｈ），３．８２（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），３．４３（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），２．５３（ｄｑ，Ｊ＝７．５，１５Ｈｚ，１Ｈ），２．３７−２．４６（ｍ，２Ｈ），２．０７（ｄｑ，Ｊ＝７．５，１５Ｈｚ，１Ｈ），１．５４（ｓ，３Ｈ），１．５１（ｓ，３Ｈ），１．３３（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ），０．７６（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ33Ｈ32ＣｌＦ4Ｎ4［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値５９５．２、実測値５９５．２
【０１３５】
実施例４
４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドールの合成
【化２０】
2020522483.tif 000022
ジオキサン（６ｍＬ）と水（１ｍＬ）中の、５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−３−ヨード−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール（２００ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）と、７−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（１５０ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）と、Ｋ2ＣＯ3（２７６ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）と、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（６０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下にて１００℃で５時間撹拌した。混合物を室温まで冷やし、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトのプラグに通して濾過した。濾液を集め、真空下で濃縮し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜５０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドールを得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ８．４４（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｍ，２Ｈ），７．０７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），６．６１（ｍ，１Ｈ），６．４７（ｍ，２Ｈ），４．１５（ｓ，２Ｈ），３．７１（ｓ，２Ｈ），２．３７（ｍ，２Ｈ），２．２２（ｍ，２Ｈ），１．５６（ｓ，６Ｈ），１．００（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，６Ｈ）。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ34Ｈ32Ｆ7Ｎ4［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値６２９．２、実測値６２９．２
【０１３６】
実施例５
４−（５−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドールの合成
【化２１】
2020522483.tif 000023
工程ａ：ＤＣＭ（３０ｍＬ）中の、２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール塩酸塩（２．２０ｇ、５．１ｍｍｏｌ）と、３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド（１．８５ｇ、７．６ｍｍｏｌ）と、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）3（３．２４ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）と、ｉＰｒＮＥｔ2（０．８４ｍＬ、５．１ｍｍｏｌ）と、酢酸（０．４９ｍＬ、７．６ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１．５時間撹拌した。次いで、その混合物をＮａＨＣＯ3水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜３０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、５−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾールを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ26Ｈ27ＦＩＮ3［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値６２２．１、実測値６２２．１
【０１３７】
工程ｂ：ジオキサン（１２ｍＬ）と水（１．５ｍＬ）中の、５−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール（１．５０ｇ、２．４ｍｍｏｌ）と、７−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（８１７ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ）と、Ｋ2ＣＯ3（０．８３０ｇ、６．０ｍｍｏｌ）と、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（３０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下にて１００℃で２時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷やし、ＥｔＯＡｃとＮａＨＣＯ3水溶液に分けた。有機層を分離し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜５０％ＥｔＯＡｃ）と、それに続くＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ、含１％ＴＦＡ）で精製して、４−（５−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドールを得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ８．４８（ｓ，１Ｈ），７．９２（ｓ，２Ｈ），７．１４（ｓ，１Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝７．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０７（ｄｄ，Ｊ＝７．６，７．６Ｈｚ，２Ｈ），６．６１（ｍ，１Ｈ），６．４７（ｍ，２Ｈ），４．０３（ｓ，２Ｈ），３．６５（ｓ，２Ｈ），２．３７（ｍ，２Ｈ），２．２２（ｍ，２Ｈ），１．５６（ｓ，６Ｈ），１．００（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，６Ｈ）。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ34Ｈ32Ｆ7Ｎ4［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値６２９．２、実測値６２９．２
【０１３８】
実施例６
中間体メチル４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレートの合成
【化２２】
2020522483.tif 000024
工程ａ：ジオキサン（８ｍＬ）中の、メチル４−ブロモ−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート（３００ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）と、ビス（ピナコラト）ジボロン（３３０ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）と、ＫＯＡｃ（２９０ｍｇ、２．９６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（１００ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ2で２分間脱気し、１００℃で１時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、セライトに通して濾過した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の５〜３０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、メチル４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレートを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ16Ｈ21ＢＮＯ4［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値３０２．２、実測値３０２．２
【０１３９】
実施例７
（４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−１Ｈ−インドール−７−イル）メタノールの合成
【化２３】
2020522483.tif 000025
工程ａ：ジオキサン（４ｍＬ）と水（０．７ｍＬ）中の、５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール（１００ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）と、メチル４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート（７８ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）と、Ｋ2ＣＯ3（１５０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）と、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（９０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ2下にて１００℃で２時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷やし、ＥｔＯＡｃとＮａＨＣＯ3水溶液に分けた。有機層を分離し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜４０％ＥｔＯＡｃ）精製して、メチル４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレートを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ36Ｈ35Ｆ6Ｎ4Ｏ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値６６９．３、実測値６６９．３
【０１４０】
工程ｂ：ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中のメチル４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート（２５ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で、エーテル中のＬｉＡｌＨ4（１．０Ｍ、０．２０ｍＬ、０．２０ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。０℃で１時間後、反応混合物を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃとＮａＨＣＯ3水溶液に分けた。有機層を分離し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をＨＰＬＣ（ヘキサン中のＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ、含１％ＴＦＡ）と、それに続くシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（０〜６０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、（４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−１Ｈ−インドール−７−イル）メタノールを得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ８．９９（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｍ，２Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），６．７０（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．４９（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．４８（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），４．９２（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），４．１５（ｓ，２Ｈ），３．７２（ｓ，２Ｈ），２．３９（ｍ，２Ｈ），２．２６（ｍ，２Ｈ），１．８３（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），１．５６（ｓ，６Ｈ），１．０２（ｔ，Ｊ＝７．６，６Ｈ）。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ35Ｈ35Ｆ6Ｎ4Ｏ［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値６４１．３、実測値６４１．３
【０１４１】
実施例８
中間体３，３，３−トリフルオロ−２，２−ジメチルプロパノイルクロライドの合成
【化２４】
2020522483.tif 000026
ＤＣＭ（６．７ｍＬ）中の、３，３，３−トリフルオロ−２，２−ジメチルプロパン酸（０．３１２ｇ、２．０ｍｍｏｌ）と、塩化オキサリル（０．１７ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）と、ＤＭＦ（２滴）の混合物を、室温で３０分間撹拌した。３，３，３−トリフルオロ−２，２−ジメチルプロパノイルクロライドを含有する反応混合物を、さらに精製することなく、直接次のステップで使用した。
【０１４２】
実施例９
４−（２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−５−（３，３，３−トリフルオロ−２，２−ジメチルプロピル）−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドールの合成
【化２５】
2020522483.tif 000027
工程ａ：ＤＣＭ（３ｍＬ）中の、４−（２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドール塩酸塩（７８ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）と、３，３，３−トリフルオロ−２，２−ジメチルプロパノイルクロライド（〜２ｍｍｏｌ）と、ＮＥｔ3（０．１３ｍＬ、０．８９ｍｍｏｌ）の混合物を、１時間室温で攪拌した。次いで混合物をＥｔＯＡｃとＮａＨＣＯ3水溶液に分けた。有機層を分離し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０〜１５％ＥｔＯＡｃ）で精製して、１−（２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−（７−フルオロ−１Ｈ−インドール−４−イル）−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−イル）−３，３，３−トリフルオロ−２，２−ジメチルプロパン−１−オンを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ30Ｈ33Ｆ4Ｎ4Ｏ［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値５４１．３、実測値５４１．２
【０１４３】
工程ｂ：ＴＨＦ（２ｍＬ）中の１−（２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−（７−フルオロ−１Ｈ−インドール−４−イル）−６，６−ジメチル−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（４Ｈ）−イル）−３，３，３−トリフルオロ−２，２−ジメチルプロパン−１−オン（３５ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＭ中のＤＩＢＡＬ−Ｈ（１．０Ｍ、１．５ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。室温で１時間後、反応混合物をＮａＨＣＯ3水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃとＮａＨＣＯ3水溶液に分けた。有機層を分離し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０〜１０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、４−（２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−５−（３，３，３−トリフルオロ−２，２−ジメチルプロピル）−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−７−フルオロ−１Ｈ−インドールを得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ８．４９（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｄｄ，Ｊ＝２．４，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｄｄ，Ｊ＝８．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），６．６３（ｍ，１Ｈ），６．５６（ｍ，１Ｈ），６．４７（ｍ，１Ｈ），３．９３（ｓ，２Ｈ），２．８４（ｓ，２Ｈ），２．３５（ｍ，２Ｈ），２．２０（ｍ，２Ｈ），１．４１（ｓ，６Ｈ），１．１９（ｓ，６Ｈ），０．９８（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，６Ｈ）。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ30Ｈ35Ｆ4Ｎ4［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値５２７．３、実測値５２７．２
【０１４４】
実施例１０
４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−３−フルオロ−１Ｈ−インドールの合成
【化２６】
2020522483.tif 000028
工程ａ：ジオキサン（５ｍＬ）中の、４−ブロモ−３−フルオロ−１Ｈ−インドール（２４０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）と、ビス（ピナコラト）ジボロン（４２０ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）と、ＫＯＡｃ（３２０ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（１４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ2で２分間脱気し、９０℃で２時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜１００％ＥｔＯＡｃ）で精製して、３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドールを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ14Ｈ18ＢＦＮＯ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値２６２．１、実測値２６１．２
【０１４５】
工程ｂ：ジオキサン（６ｍＬ）と水（１ｍＬ）中の、５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール（７４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）と、３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（６４ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）と、Ｋ2ＣＯ3（１６９ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（４９ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ2で２分間脱気し、Ｎ2下にて９０℃で１６時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜３０％ＭＴＢＥ）と、それに続くＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ、含１％ＴＦＡ）と分取ＴＬＣ（トルエン中のＥｔＯＡｃ）で精製して、４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−３−フルオロ−１Ｈ−インドールを得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ８．２５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８９−７．９４（ｍ，２Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄｄ，Ｊ＝８．０，２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０９−７．１５（ｍ，３Ｈ），６．８５（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．５１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．１９（ｓ，２Ｈ），３．６５（ｓ，２Ｈ），２．１９−２．５０（ｍ，４Ｈ），１．５４（ｓ，６Ｈ），０．８７−１．２１（ｍ，６Ｈ）。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ34Ｈ32Ｆ7Ｎ4［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値６２９．３、実測値６２９．３
【０１４６】
実施例１１
４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−３−メチル−１Ｈ−インドールの合成
【化２７】
2020522483.tif 000029
工程ａ：ジオキサン（６ｍＬ）中の、４−ブロモ−３−メチル−１Ｈ−インドール（２４０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）と、ビス（ピナコラト）ジボロン（９１０ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）と、ＫＯＡｃ（７１０ｍｇ、７．２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（２９０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２分間脱気（Ｎ2）し、９０℃で４時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜２５％ＭＴＢＥ）で精製して、３−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドールを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ15Ｈ21ＢＮＯ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値２５８．２、実測値２５８．１
【０１４７】
工程ｂ：ジオキサン（６ｍＬ）と水（１ｍＬ）中の、５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−３−ヨード−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール（６５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）と、３−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（１２７ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）と、Ｋ2ＣＯ3（２５６ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（５１ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ2で２分間脱気し、Ｎ2下にて９０℃で２時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜１００％ＭＴＢＥ）と、それに続くＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ、含１％ＴＦＡ）と分取ＴＬＣ（ヘキサン中の４０％アセトン）で精製して、４−（５−（２，４−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）−２−（２，６−ジエチルフェニル）−６，６−ジメチル−２，４，５，６−テトラヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−３−イル）−３−メチル−１Ｈ−インドールを得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ８．２５−８．１８（ｍ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２９−７．１７（ｍ，３Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９７−６．９０（ｍ，１Ｈ），６．７７（ｄｄ，Ｊ＝８．２，７．３Ｈｚ，１Ｈ），６．４４（ｄｄ，Ｊ＝７．４，０．９Ｈｚ，１Ｈ），４．２５−４．１０（ｍ，２Ｈ），３．６６（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），３．５１（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），２．２８−２．５８（ｍ，３Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．００−２．１１（ｍ，１Ｈ），１．５５（ｓ，３Ｈ），１．５３（ｓ，３Ｈ），１．３４（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ），０．７７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ35Ｈ35Ｆ6Ｎ4［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値６２５．３、実測値６２５．３
【０１４８】
実施例１２
ｔｅｒｔ−ブチル２−（２，６−ジメチルフェニル）−３−（１Ｈ−インドール−５−イル）−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５−カルボキシレートの合成
【化２８】
2020522483.tif 000030
工程ａ：ｔｅｒｔ−ブチル３−シアノ−４−オキソ−ピロリジン−１−カルボキシレート（１９．５ｇ、９２．５４ｍｍｏｌ）と（２，６−ジメチルフェニル）ヒドラジン塩酸塩（１６ｇ、９２．６５ｍｍｏｌ）に、ＥｔＯＨ（１６０ｍＬ）とＡｃＯＨ（４０ｍＬ）を加えた。得られた懸濁液を５０℃で一晩撹拌した。完了次第、反応混合物を１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し（２×１００ｍＬ）、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、真空下で濃縮した。次いで、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の５０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ‐２−（２，６−ジメチルフェニル）−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５−カルボキシレートを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ18Ｈ25Ｎ4Ｏ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値３２９．２、実測値３２９．２
【０１４９】
工程ｂ：亜硝酸イソアミル（１１．７４ｍＬ、８７．５ｍｍｏｌ）を室温で、ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ‐２−（２，６−ジメチルフェニル）−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５−カルボキシレート（１４．３５ｇ、４３．７５ｍｍｏｌ）と、ジヨードメタン（１４ｍＬ、１７５ｍｍｏｌ）と、ＭｅＣＮ（１８０ｍＬ）の混合物にゆっくりと加えた。得られた反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の３０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−（２，６−ジメチルフェニル）−３−ヨード−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５−カルボキシレートを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ18Ｈ23ＩＮ3Ｏ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値４４０．１、実測値４４０．２
【０１５０】
工程ｃ：ジオキサン（８ｍＬ）と水（２ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル２−（２，６−ジメチルフェニル）−３−ヨード−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５−カルボキシレート（８７８ｍｇ、２ｍｍｏｌ）と、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール（７２９ｍｇ、３ｍｍｏｌ）と、Ｎａ2ＣＯ3（５３０ｇ、５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタンとのＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2複合体（１６３ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ2で２分間脱気し、９０℃で２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、セライトに通して濾過した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中の０〜１００％ＥｔＯＡｃ）で精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−（２，６−ジメチルフェニル）−３−（１Ｈ−インドール−５−イル）−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５−カルボキシレートを得た。ＭＳ：（ＥＳ）Ｃ26Ｈ29Ｎ4Ｏ2［Ｍ＋Ｈ］+のｍ／ｚ計算値４２９．２、実測値４２９．２
【０１５１】
実施例１３
以下の表１及び表２の化合物を、上記の方法を用いて調製した。記載化合物それぞれの特性データ（ＭＳ及び／又はＮＭＲ）を示す。
【表１−１】
2020522483.tif 000031
【表１−２】
2020522483.tif 000032
【表１−３】
2020522483.tif 000033
【表１−４】
2020522483.tif 000034
【表１−５】
2020522483.tif 000035
【表１−６】
2020522483.tif 000036
【表１−７】
2020522483.tif 000037
【表１−８】
2020522483.tif 000038
【表１−９】
2020522483.tif 000039
【表１−１０】
2020522483.tif 000040
【表１−１１】
2020522483.tif 000041
【表１−１２】
2020522483.tif 000042
【表１−１３】
2020522483.tif 000043
【表１−１４】
2020522483.tif 000044
【表１−１５】
2020522483.tif 000045
【表２−１】
2020522483.tif 000046
【表２−２】
2020522483.tif 000047
【表２−３】
2020522483.tif 000048
【表２−４】
2020522483.tif 000049
【表２−５】
2020522483.tif 000050
【表２−６】
2020522483.tif 000051
【表２−７】
2020522483.tif 000052
【０１５２】
実施例１４
この実施例は、本発明の特定の化合物に関連する生体活性の評価を示す。
【０１５３】
材料と方法
Ａ．細胞
１．Ｃ５ａ受容体発現細胞
ａ）Ｕ９３７細胞
Ｕ９３７細胞は、Ｃ５ａＲを発現する単球細胞株で、ＡＴＣＣ（バージニア州）から入手可能である。これらの細胞は、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１．５ｇ／Ｌ重炭酸ナトリウム、４．５ｇ／Ｌグルコース、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、及び１０％ＦＢＳを補ったＲＰＭＩ−１６４０培地の懸濁液として培養した。細胞を５％ＣＯ2／９５％空気、湿度１００％、３７℃で増殖させ、１：６で週２回継代培養し（細胞を１×１０5〜２×１０6細胞／ｍＬの密度範囲で培養）、１×１０6細胞／ｍＬで採取した。アッセイの前に、細胞を０．５ｍＭのサイクリックＡＭＰ（シグマ、オハイオ州）で一晩処理し、使用前に１回洗浄する。ｃＡＭＰで処理したＵ９３７細胞を、Ｃ５ａＲリガンド結合及び機能アッセイに使用することができる。
【０１５４】
ｂ）単離ヒト好中球
場合により、化合物の活性をアッセイするのにヒト又はマウスの好中球を使用することができる。好中球は、密度分離と遠心分離を用いて新鮮なヒト血液から単離することができる。簡潔に言えば、全血を等量の３％デキストランとインキュベートし、４５分間分離させる。分離後、１番上の層を１５ｍｌのフィコール（血液懸濁液３０ｍｌ毎にフィコール１５ｍｌ）の上に重ね、ブレーキを使わずに４００×ｇで３０分間遠心分離する。次いで、チューブの底のペレットを分離し、ＰｈａｒｍＬｙｓｅ  ＲＢＣ  Ｌｙｓｉｓ  Ｂｕｆｆｅｒ（ＢＤバイオサイエンス、サンノゼ、カリフォルニア州）に再懸濁した後、試料をブレーキ付きで、４００×ｇで１０分間再度遠心分離する。残りの細胞ペレットを必要に応じて再懸濁し、単離好中球から成る。
【０１５５】
Ｂ．アッセイ
１．Ｃ５ａＲリガンド結合の阻害
Ｃ５ａＲを発現するｃＡＭＰ処理Ｕ９３７細胞を遠心分離し、アッセイバッファー（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．１、１４０ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ2、５ｍＭ  ＭｇＣｌ2、０．１％ウシ血清アルブミン）に３×１０6細胞／ｍＬの濃度に再懸濁した。結合アッセイを次のようにセットアップした。０．１ｍＬの細胞を、５ｍＬの化合物が入ったアッセイプレートに加えて、スクリーニング（又は化合物ＩＣ50決定の投与量反応の一部）用に各化合物の最終濃度を〜２〜１０μＭにした。次に、アッセイバッファーで〜５０ｐＭの最終濃度に希釈し、１ウェルあたり〜３０，０００ｃｐｍを生じる０．１ｍＬの125Ｉ標識Ｃ５ａ（パーキンエルマーライフサイエンス、マサチューセッツ州ボストンから入手）を加え、プレートを密封し、振盪台上で４℃にて約３時間インキュベートした。反応物を、真空セルハーベスター（パッカード・インスツルメンツ；コネチカット州メリデン）で、０．３％ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）溶液にあらかじめ浸したＧＦ／Ｂガラスフィルター上に吸引した。シンチレーション液（４０μｌ；Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ  ２０、パッカード・インスツルメンツ）を各ウェルに加え、プレートを密封し、放射能をＴｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンター（パッカード・インスツルメンツ）で測定した。希釈液のみ（総カウント用）又は過剰なＣ５ａ（１μｇ／  ｍＬ、非特異的結合用）のいずれかが入った対照ウェルを用いて、化合物の総阻害率を計算した。ＧｒａｐｈＰａｄ，Ｉｎｃ．（カリフォルニア州サンディエゴ）のコンピュータープログラムＰｒｉｓｍを使用して、ＩＣ50値を計算した。ＩＣ50値は、放射性標識Ｃ５ａの受容体への結合を５０％減少させるのに必要な濃度である（リガンド結合及び他の機能アッセイのさらなる説明については、Ｄａｉｒａｇｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２１５６９−２１５７４（１９９９）、Ｐｅｎｆｏｌｄ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．９６：９８３９−９８４４（１９９９）、及びＤａｉｒａｇｈｉ，ｅｔ  ａｌ，．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：２８２０６−２８２０９（１９９７）を参照されたい）。
【０１５６】
２．カルシウム動員
場合により、細胞内のカルシウムの流れを阻害する能力について化合物をさらにアッセイすることができる。カルシウムの細胞内貯蔵の放出を検出するために、細胞（例えばｃＡＭＰで刺激したＵ９３７又は好中球）を細胞培地中の３μＭのＩＮＤＯ−１ＡＭ色素（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ；オレゴン州ユージーン）と室温で４５分間インキュベートし、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄する。ＩＮＤＯ−１ＡＭを入れた後、細胞をフラックスバッファー（ｆｌｕｘ  ｂｕｆｆｅｒ）（ハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ）と１％ＦＢＳ）に再懸濁する。カルシウム動員は、Ｐｈｏｔｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ分光光度計（Ｐｈｏｔｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ；ニュージャージー州）を使用して、３５０ｎｍで励起し、４００ｎｍと４９０ｎｍでの蛍光発光を２つ同時に記録して測定する。相対的な細胞内カルシウムレベルは、４００ｎｍ／４９０ｎｍの発光比として表される。実験は、それぞれ２ｍＬのフラックスバッファー（ｆｌｕｘ  ｂｕｆｆｅｒ）中に１０6個の細胞が入ったキュベットで、３７℃で絶えず混合しながら行う。ケモカインリガンドは、１〜１００ｎＭの範囲で使用することができる。放出比を経時的にプロットする（典型的には２〜３分）。候補リガンドブロッキング化合物（最大１０μＭ）を１０秒で加え、続いてケモカイン（すなわちＣ５ａ；Ｒ＆Ｄシステムズ；ミネソタ州ミネアポリス）を６０秒で、対照ケモカイン（すなわちＳＤＦ−１α；Ｒ＆Ｄシステムズ；ミネソタ州ミネアポリス）を１５０秒で加える。
【０１５７】
３．走化性アッセイ
場合により、細胞の走化性を阻害する能力について化合物をさらにアッセイすることができる。走化性アッセイは、９６ウェルの走化性チャンバー（Ｎｅｕｒｏｐｒｏｂｅ、メリーランド州ゲーサーズバーグ）で、５μｍの細孔のポリカーボネート、ポリビニルピロリドン被覆フィルターを使用し、走化性バッファー（ハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ）と１％ＦＢＳ）を使用して行う。Ｃ５ａＲリガンド（すなわちＣ５ａ、Ｒ＆Ｄシステムズ；ミネソタ州ミネアポリス）を使用して、Ｃ５ａＲによって媒介される遊走の、化合物によって媒介される阻害を評価する。他のケモカイン（すなわちＳＤＦ−１α；Ｒ＆Ｄシステムズ；ミネソタ州ミネアポリス）を特異性対照として使用する。下部チャンバーに、２９μｌのケモカイン（すなわち０．０３ｎＭのＣ５ａ）とさまざまな量の化合物を入れ、上部チャンバーには、２０μｌ中に１００，０００個のＵ９３７又は好中球細胞が入っている。チャンバーを３７℃で１．５時間インキュベートし、下部チャンバー内の細胞数を、１ウェルあたり５つの高倍率視野における直接細胞カウントによって、又は核酸含量を測定する蛍光色素法であるＣｙＱｕａｎｔアッセイ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）と顕微鏡観察によってのいずれかで定量する。
【０１５８】
Ｃ．Ｃ５ａＲの阻害剤の同定
１．アッセイ
Ｃ５ａ受容体がリガンドに結合するのを阻止する小さい有機分子を評価するには、細胞表面にＣ５ａＲを発現する細胞（例えばｃＡＭＰ刺激Ｕ９３７細胞又は単離ヒト好中球）に結合する放射性リガンド（すなわちＣ５ａ）を検出するアッセイを採用した。競合的であろうとなかろうと、結合を阻害した化合物については、阻害されていない対照と比較して、より少ない放射能カウントが観察される。
【０１５９】
同数の細胞をプレートの各ウェルに加えた。次いで細胞を放射標識Ｃ５ａとインキュベートした。細胞を洗浄することによって非結合リガンドを除去し、放射性カウントを定量することによって結合リガンドを決定した。いずれの有機化合物もなしでインキュベートした細胞は総カウントを示し、細胞を非標識リガンド及び標識リガンドとインキュベートすることによって非特異的結合を決定した。阻害率を次式から求めた。
％阻害＝（１−［（試料ｃｐｍ）−（非特異ｃｐｍ）］／［（総ｃｐｍ）−（非特異ｃｐｍ）］）×１００
【０１６０】
２．投与量反応曲線
Ｃ５ａＲに対する候補化合物の親和性を確認し、リガンド結合を阻害するその化合物の能力を確認するために、１×１０-10〜１×１０-4Ｍの化合物濃度範囲で阻害活性を滴定した。アッセイでは、化合物の量を変化させ、一方で細胞数とリガンド濃度を一定に保った。
【０１６１】
Ｄ．生体内有効性モデル
対象の化合物は、動物モデルでの化合物の有効性を決定することによって、Ｃ５ａによって媒介される病気の治療における潜在的な有効性について評価することができる。下記のモデルにくわえて、対象の化合物を研究するための他の適切な動物モデルは、Ｍｉｚｕｎｏ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ（２００５），１４（７），８０７−８２１にあり、その文献は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１６２】
１．Ｃ５ａ誘発白血球減少症のモデル
ａ）ヒトＣ５ａＲノックインマウスモデルにおけるＣ５ａ誘発白血球減少症
動物モデルでの本発明の化合物の有効性を調べるために、標準的な技術を使用して組換えマウスを作製でき、マウスＣ５ａＲをコードする遺伝子配列を、ヒトＣ５ａＲをコードする配列に置き換えてｈＣ５ａＲ−ＫＩマウスを作り出す。このマウスにおいて、ｈＣ５ａの投与は、血液白血球と結合する血管壁上の接着分子の増加（ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ）をもたらし、白血球が血流から隔離される。動物に２０μｇ／ｋｇのｈＣ５ａを投与し、１分後に、標準的な手法で白血球を末梢血で定量する。本発明の化合物のさまざまな投与量でのマウスの前処理は、ｈＣ５ａ誘発性白血球減少症をほぼ完全に阻止することができる。
【０１６３】
ｂ）Ｃ５ａ誘発白血球減少症のカニクイザルモデルモデル
非ヒト霊長類モデルでの本発明の化合物の有効性を調べるために、Ｃ５ａ誘発白血球減少症をカニクイザルモデルで分析する。このモデルにおいて、ｈＣ５ａの投与は、血液白血球と結合する血管壁上の接着分子の増加（ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ）をもたらし、白血球が血流から隔離される。動物に１０μｇ／ｋｇのｈＣ５ａを投与し、１分後に、白血球を末梢血で定量する。
【０１６４】
ＡＮＣＡ誘発血管炎のマウスモデル
０日目に、ｈＣ５ａＲ−ＫＩマウスにミエロペルオキシダーゼに対する精製抗体を５０ｍｇ／ｋｇで静脈内注射する（Ｘｉａｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１０：９５５−９６３（２００２））。マウスに本発明の化合物又は溶媒の毎日の経口一日投与量を７日間さらに投与し、次いでマウスを犠牲にし、組織学的検査のために腎臓を採る。腎臓切片の分析は、溶媒投与動物と比較して、糸球体の半月体病変及び壊死病変の数及び重症度が有意に低下することを示しうる。
【０１６５】
２．脈絡膜血管新生のマウスモデル
加齢黄斑変性（ＡＭＤ）の治療での本発明の化合物の有効性を調べるには、ｈＣ５ａＲ−ＫＩマウスの眼のブルッフ膜をレーザー光凝固で破裂する（Ｎｏｚｉｋａ  ｅｔ  ａｌ，ＰＮＡＳ    １０３：２３２８−２３３３（２００６））。マウスを、溶媒又は本発明の化合物の毎日の経口又は適切な硝子体内投与量で１〜２週間治療する。レーザーによって誘発された損傷と血管新生の修復は、組織学的検査と血管造影によって評価する。
【０１６６】
３．関節リウマチモデル
ａ）破壊性の関節炎症のウサギモデル
細菌膜成分リポ多糖（ＬＰＳ）の関節内注射に対するウサギの炎症反応の抑制に対する候補化合物の効果を調べるには、破壊性関節炎症のウサギモデルを使用する。この研究デザインは、関節炎で見られる破壊性の関節炎を模倣している。ＬＰＳの関節内注射は、サイトカインとケモカインの放出を特徴とする急性炎症反応を引き起こし、その多くは関節リウマチの関節で確認されている。これらの走化性メディエーターの上昇に応えて滑液及び滑膜で白血球の著しい増加が起こる。ケモカイン受容体の選択的アンタゴニストは、このモデルにおいて有効性を示している（Ｐｏｄｏｌｉｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９（１１）：６４３５−６４４４（２００２）を参照されたい）。
【０１６７】
ウサギのＬＰＳ研究は、基本的にＰｏｄｏｌｉｎら、同上（ｉｂｉｄ．）、に記載のように行われ、雌ニュージーランドウサギ（約２キログラム）の片方の膝に、溶媒のみ（１％ＤＭＳＯを含むリン酸緩衝生理食塩水）又は候補化合物（投与量１＝５０μＭ若しくは投与量２＝１００μＭ）を、ＬＰＳ（１０ｎｇ）とともに総量１．０ｍＬで関節内投与する。ＬＰＳ注射の１６時間後、膝を洗浄し、細胞を数える。治療の有益な効果は、滑膜炎症の組織病理学的評価によって決定する。炎症スコアが組織病理学的評価に使用される：１−最小、２−軽度、３−中等度、４−中等度から顕著（ｍａｒｋｅｄ）。
【０１６８】
ｂ）コラーゲン誘発関節炎のラットモデルでの化合物の評価
関節炎に誘発された臨床的な足首の腫れに対する候補化合物の効果を評価するには、１７日間のＩＩ型コラーゲン関節炎発症試験を行う。ラットコラーゲン関節炎は、多数の抗関節炎薬の前臨床試験に広く使用されている多発性関節炎の実験モデルである（Ｔｒｅｎｔｈａｍ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．１４６（３）：８５７−８６８（１９７７），Ｂｅｎｄｅｌｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃ  Ｐａｔｈｏｌ．  ２７：１３４−１４２（１９９９），Ｂｅｎｄｅｌｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．４２：４９８−５０６（１９９９）を参照されたい）。このモデルの特徴は、強力で容易に測定可能な多関節炎症、パンヌス形成に関連した顕著な軟骨破壊、並びに軽度から中等度の骨吸収及び骨膜骨増殖の信頼できる発症及び進行である。
【０１６９】
雌のルイスラット（約０．２キログラム）にイソフルランで麻酔をかけ、この１７日間の試験の０日目と６日目に、尾の付け根と背部２箇所に２ｍｇ／ｍＬのウシＩＩコラーゲンを含有するフロイント不完全アジュバントを注射する。候補化合物は、有効な投与量で０日目から１７日目まで皮下投与する。足首関節の直径のノギス測定を行い、関節の腫れの軽減を有効性の尺度とする。
【０１７０】
４．敗血症のラットモデル
敗血症様疾患に関連する全身性炎症反応の抑制に対する対象化合物の効果を調べるには、敗血症の盲腸結紮穿刺（ＣＬＰ）ラットモデルを使用する。ラットＣＬＰ研究は、本質的にＦｕｊｉｍｕｒａ  Ｎ，ｅｔ  ａｌ．（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２０００；１６１：４４０−４４６）に記載のように行う。ここで簡潔に説明すると、体重２００〜２５０ｇの雌雄両方のウィスターアルビノラットを実験前に１２時間絶食させる。動物を通常の１２時間の明暗サイクルに保ち、実験の１２時間前まで標準的なラットの餌を与える。次いで動物を４つの群、（ｉ）２つの偽手術群と（ｉｉ）２つのＣＬＰ群に分ける。これらの２つの群（つまり（ｉ）と（ｉｉ））をそれぞれ、溶媒対照群と試験化合物群に分ける。敗血症はＣＬＰ法によって誘発する。短時間の麻酔下で、最小限の切開を用いて正中線開腹術を行い、盲腸を回盲弁のすぐ下に３−０シルクで結紮し、腸の連続性を維持する。盲腸の対腸間膜（ａｎｔｉｍｅｓｉｎｔｅｒｉｃ）表面に、１ｃｍ離れた２箇所で１８ゲージの針で穴を開け、糞便が押し出されるまで盲腸を軽く絞る。その後、腸を腹部に戻し、切開部を閉じる。手術の終わりに、生理食塩水を３ｍｌ／１００ｇ体重で皮下投与して、すべてのラットを蘇生させる。術後、ラットに食物を与えないが、犠牲にするまで次の１６時間、水は自由に摂取させる。偽手術群には開腹術を施し、盲腸は処置する（ｍａｎｉｐｕｌａｔｅｄ）が、結紮も穿孔もしない。治療の有益な効果は、組織及び臓器の組織病理学的採点法、並びに肝機能、腎機能、及び脂質過酸化のいくつかの重要な指標の測定によって測定する。肝機能を検査するには、アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）及びアラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）を測定する。腎機能を評価するのに、血中尿素窒素及びクレアチニン濃度を調べる。ＴＮＦ−αやＩＬ−１ベータなどの炎症誘発性サイトカインも、血清レベルについてＥＬＩＳＡで分析する。
【０１７１】
５．実験的ループス腎炎のマウスＳＬＥモデル
対象の化合物が全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）に及ぼす影響を調べるには、ＭＲＬ／ｌｐｒマウスＳＬＥモデルを使用する。ＭＲＬ／Ｍｐ−Ｔｍｆｒｓｆ６lpr/lpr系統（ＭＲＬ／ｌｐｒ）は、一般的に使用されるヒトＳＬＥのマウスモデルである。このモデルで化合物の有効性を試験するために、雄のＭＲＬ／ｌｐｒマウスを１３週齢で、対照群とＣ５ａＲアンタゴニスト群に均等に分ける。次いで化合物又は溶媒を、次の６週間にわたって浸透圧ポンプを介して動物に投与し、被覆（ｃｏｖｅｒａｇｅ）を維持し、動物へのストレスの影響を最小限に抑える。血清と尿の試料を、疾患の発症と進行の６週間の間に隔週で採取する。これらのマウスの少数では、糸球体硬化症が発症し、腎不全で動物が死に至る。腎不全の指標として死亡を追跡することは、測定基準の１つであり、治療の成功は通常、試験群のなかでの突然死の発症を遅延させる結果をもたらすことになる。くわえて、腎疾患の存在と重大さを、血中尿素窒素（ＢＵＮ）とアルブミン尿の測定によって継続的に監視することもできる。さらに、組織及び臓器を１９週目に採取し、組織病理学及び免疫組織化学検査に供し、組織損傷及び細胞浸潤に基づいて点数付けした。
【０１７２】
６．ＣＯＰＤのラットモデル
げっ歯類モデルでの煙誘発気道炎症は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）での化合物の有効性を評価するのに使用することができる。ケモカインの選択的アンタゴニストは、このモデルにおいて有効性を示している（Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２８８  Ｌ５１４−Ｌ５２２，（２００５）を参照されたい）。ＣＯＰＤの急性ラットモデルは、Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎらに記載のように行う。対象の化合物は、経口若しくはＩＶ投与によって全身投与するか、又は噴霧化合物で局所的に投与する。雄のスプラーグ・ドーリーラット（３５０〜４００ｇ）をＰｅｒｓｐｅｘチャンバーに入れ、ポンプを介して吸い込んだタバコの煙に曝す（３０秒ごとに５０ｍＬ、合間に新鮮な空気を入れる）。ラットを合計３２分間曝露する。ラットは、最初の曝露の最大で７日後に犠牲にする。治療の有益な効果を、炎症細胞浸潤の減少、ケモカイン及びサイトカインレベルの減少によって評価する。
【０１７３】
慢性モデルでは、マウス又はラットを最大１２か月間、毎日タバコの煙に曝露する。化合物は１日１回の経口投与で全身投与されるか、又はもしかすると噴霧化合物を介して局所投与される。急性モデル（Ｓｔｅｖｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．）で観察された炎症にくわえて、動物は、（平均肺胞径の増加によって示される）肺気腫などのヒトＣＯＰＤに見られるものと類似する他の病理及びを肺化学の変化も呈することがある（Ｍａｒｔｏｒａｎａ  ｅｔ  ａｌ，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．１７２（７）：８４８−５３．を参照されたい）。
【０１７４】
７．多発性硬化症のマウスＥＡＥモデル
実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）はヒト多発性硬化症のモデルである。モデルの変形が文献報告されており、この分野でよく知られている。典型的なプロトコルでは、Ｃ５７ＢＬ／６（チャールズ・リバー・ラボラトリーズ）マウスをＥＡＥモデルに使用する。マウスを、４ｍｇ／ｍｌの結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）（シグマアルドリッチ）を含有する完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）に乳化させた２００μｇのミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質（ＭＯＧ）３５−５５（Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）で皮下注射によって０日目に免疫する。さらに、０日目と２日目に、動物に２００ｎｇの百日咳毒素（カルビオケム）を静脈内投与する。臨床スコアは０〜５の尺度に基づき、０、疾患の徴候なし；１、尾の弛緩；２、後肢の脱力；３、後肢麻痺；４、前肢の脱力又は麻痺；５、瀕死の状態（ｍｏｒｉｂｕｎｄ）。評価対象化合物の投与は、０日目（予防）又は７日目（治療、疾患の組織学的証拠はあるが臨床症状を示す動物はほとんどいない）に開始し、それらの活性及び薬物動態特性に適切な濃度、例えば１００ｍｇ／ｋｇで１日１回又はそれより多く、皮下投与することができる。化合物の有効性は、重症度の比較（溶媒と比較した、化合物の存在下での最大平均臨床スコア）によって、又は脊髄から単離されるマクロファージ（Ｆ４／８０陽性）の数の減少を測定することによって評価することができる。脊髄単核細胞は、不連続パーコール勾配によって単離することができる。細胞は、ラット抗マウスＦ４／８０−ＰＥ又はラットＩｇＧ２ｂ−ＰＥ（Ｃａｌｔａｇ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を使用して染色し、試料１つあたり１０μｌのポリビーズ（Ｐｏｌｙｂｅａｄｓ）（Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してＦＡＣＳ分析で定量することができる。
【０１７５】
８．腎移植のマウスモデル
移植モデルはマウスで行うことができ、例えば、Ｃ５７ＢＬ／６マウスからＢＡＬＢ／ｃマウスへの同種腎移植のモデルは、Ｆａｉｋａｈ  Ｇｕｅｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ，ＪＡＳＮ  Ｅｘｐｒｅｓｓ，Ａｕｇ  ２７ｔｈ，２００８に記載されている。簡潔に言えば、マウスに麻酔をかけ、左ドナーの腎臓を大動脈のカフ及び腎静脈に小さな大静脈カフで付着させ、尿管を一塊切で除去する。レシピエントの左腎摘出術の後、血管カフを、自己腎血管より下の位置で、レシピエントの腹部大動脈及び大静脈にそれぞれ吻合する。尿管は膀胱に直接吻合する。冷虚血時間は６０分、温虚血時間は３０分である。右の生来の腎臓は、同種移植の時点か、又は長期生存研究用に移植後４日目に摘出することができる。拒絶反応の兆候について、マウスの全身の健康状態を監視する。動物の化合物治療は、手術前又は移植直後に、例えば１日１回の皮下注射によって開始することができる。マウスの腎機能と生存を調べる。血清クレアチニンレベルは、自動化された方法（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ａｎａｌｙｚｅｒ、クレーフェルト、ドイツ）で測定する。
【０１７６】
９．虚血／再灌流のマウスモデル
虚血／再灌流障害のマウスモデルは、Ｘｉｕｆｅｎ  Ｚｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ，Ｖｏｌ  １７３：４，Ｏｃｔ，２００８に記載のように行うことができる。簡潔に言えば、６〜８週齢のＣＤ１マウスに麻酔をかけ、手術中の温かさを維持するために加熱パッドの上に置く。腹部切開後、腎茎を鈍的剥離し、微小血管クランプを左腎茎に２５〜３０分間置く。虚血後、クランプを右腎臓とともに外し、切開部を縫合し、動物を回復させる。腎臓の健康状態の指標としての血清クレアチニン及びＢＵＮの分析用に採血する。代替的に、動物の生存を経時的に監視する。化合物は手術前及び／又は手術後に動物に投与でき、血清クレアチニン、ＢＵＮ、又は動物の生存に対する効果を化合物の有効性の指標として用いる。
【０１７７】
１０．腫瘍増殖のマウスモデル
６〜１６週齢のＣ５７ＢＬ／６マウスの右又は左後側腹部に１×１０5個のＴＣ−１細胞（ＡＴＣＣ、バージニア州）を皮下注射する。細胞注入の約２週間後から、マウスを死亡させるのに必要な腫瘍サイズになるまで、２〜４日ごとにノギスで腫瘍を測定する。犠牲時に、動物を完全な剖検に供し、脾臓と腫瘍を取り出す。切除した腫瘍を測定し、重量を量る。化合物は、腫瘍注射の前及び／又は後に投与され、腫瘍増殖の遅延又は抑制を用いて化合物の有効性を評価することができる。
【０１７８】
以下の表３に、本明細書に記載の代表的な化合物の構造と活性を示す。本明細書に記載の走化性アッセイにおける阻害に関して、活性を次のように規定する（実施例１４Ｂ  ３）：＋、５００ｎＭ≦ＩＣ５０；＋＋、５０ｎＭ≦ＩＣ５０＜５００ｎＭ；＋＋＋、５ｎＭ≦ＩＣ５０＜５０ｎＭ；及び＋＋＋＋、ＩＣ５０＜５ｎＭ。
【表３−１】
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【表３−２】
2020522483.tif 000054
【表３−３】
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【表３−４】
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【表３−５】
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【表３−６】
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【表３−７】
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【表３−８】
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【表３−９】
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【表３−１０】
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【表３−１１】
2020522483.tif 000063
【０１７９】
本明細書では本発明の特定の実施形態を説明しているが、説明を読むと開示された実施形態の変形が当業者に明らかになりうる。当業者は必要に応じてそのような変形を使用しうることが予想されている。したがって、本発明が本明細書で具体的に記載されているものとは別の方法で実施されること、並びに本発明が適用法で許可される添付の特許請求の範囲に列挙される主題の修正及び等価物をすべて含むことが意図されている。さらにそのうえ、そのすべての可能な変形における上記要素の任意の組み合わせは、本明細書で別段の指示がない限り、又は文脈によって明らかに矛盾しない限り、本発明に包含される。
【０１８０】
本明細書で引用したすべての刊行物、特許出願、アクセッション番号、及びその他の参考文献は、個々の刊行物又は特許出願が具体的かつ個別に参照により組み込まれることが示されている場合と同様に、参照により本明細書に組み込まれる。
【国際調査報告】
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