(57)【要約】  無乳糖の脱脂乳、部分脱脂乳および全乳を調製するためのプロセスであって、該プロセスは、以下のステップ：１）低温殺菌および脱脂、２）ラクターゼ酵素による該脱脂乳の酵素的加水分解、３）加水分解された脱脂乳の精密濾過、そして、精密濾過保持物（ＲＭＦ）および精密濾過通過物（ＰＭＦ）の獲得、４）ＰＭＦの限外濾過、そして、限外濾過保持物（ＲＵＦ）および限外濾過通過物（ＰＵＦ）の獲得、５）ＰＵＦの第一のナノ濾過、そして、第一のナノ濾過保持物（ＲＮＦ１）および第一のナノ濾過通過物（ＰＮＦ１）の獲得、６）ＰＮＦ１の第二のナノ濾過、そして、第二のナノ濾過保持物（ＲＮＦ２）および第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）の獲得、ならびに、７）最終ステップ：先のステップの１以上に由来する１以上の画分を混合することによる無乳糖乳の獲得、を含み、そしてそれは、以下の：（Ｉ）ステップ５）の第一のナノ濾過が、４００〜６００Ｄａの範囲に及ぶ分画分子量を有する膜によって実施され、かつ、第二のナノ濾過が、１５０〜２５０Ｄａの範囲に及ぶ分画分子量を有する膜によって実施され、ならびに（ＩＩ）最終ステップ７）が、少なくともＲＵＦ、ＲＮＦ１およびＰＮＦ２を含む組成物を混合することによって実施されること、を特徴とする。
2020503898.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
無乳糖乳を調製するためのプロセスであって、以下のステップ：
１）低温殺菌および脱脂、そして、脱脂乳とクリームの獲得、
２）ラクターゼ酵素による該脱脂乳の酵素的加水分解、
３）該加水分解された脱脂乳の精密濾過（ＭＦ）、そして、精密濾過保持物（ＲＭＦ）および精密濾過通過物（ＰＭＦ）の獲得、
４）ＰＭＦの限外濾過、そして、限外濾過保持物（ＲＵＦ）および限外濾過通過物（ＰＵＦ）の獲得、
５）ＰＵＦの第一のナノ濾過、そして、第一のナノ濾過保持物（ＲＮＦ１）および第一のナノ濾過通過物（ＰＮＦ１）の獲得、
６）ＰＮＦ１の第二のナノ濾過、そして、第二のナノ濾過保持物（ＲＮＦ２）および第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）の獲得、ならびに
７）先のステップの１以上に由来する１以上の前記画分を組み合せることによる無乳糖乳の獲得、
を含み、ここで：
（Ｉ）ステップ５）の第一のナノ濾過が、４００〜６００Ｄａの分子サイズを有する膜により実施され、かつ、ステップ６）の第二のナノ濾過が、１５０〜２５０Ｄａの分子サイズを有する膜により実施され、および
（ＩＩ）最終ステップ７）が、以下の：
限外濾過保持物（ＲＵＦ）、第一のナノ濾過保持物（ＲＮＦ１）および第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）、
を含む組成物を混合することによって実施される、
プロセス。
【請求項２】
以下の：
ａ．透析濾過ステップ
ｂ．逆浸透ステップ
ｃ．クロマトグラフィーステップ
の中から選択される少なくとも１つのステップを含む、請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
透析濾過ステップａ．を含み、ここで、第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）が、透析液として使用され、かつ、第一のナノ濾過または限外濾過（ＵＦ）に投入され、そして、ステップ７の混合物の成分が、本発明（ＵＦ、ＲＮＦ１、ＰＮＦ２）のプロセスの成分と依然として同じままである、請求項２に記載のプロセス。
【請求項４】
単回ステップとして、逆浸透（ＯＩ）を含み、ここで、第二のナノ濾過保持物（ＲＮＦ２）が、他の目的に使用され得る逆浸透保持物（ＲＯＩ）中に濃縮され、かつ、関連通過物（ＰＯＩ）が、実質的に水を含有しており、そしてそれが、ステップ７）で使用される混合物の更なる成分である、請求項２に記載のプロセス。
【請求項５】
前記プロセスが、クロマトグラフィーステップｃ．を含むとき、該プロセスはまた、逆浸透ステップｂ．も含み、そしてそれが、前記ステップｃの上流で実施されても、または下流で実施されてもよい、請求項２に記載のプロセス。
【請求項６】
ステップｂ．がステップｃ．の上流にあるとき、逆浸透保持物（ＲＯＩ）は、クロマトグラフィー用カラムに投入され、そして、第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）の一部で溶出され、それにより、２つのクロマトグラフィー画分ＥＳおよびＥＺが得られ、ここで、第一の画分はミネラル塩を含んでおり、および第二の画分は糖を含んでおり、そして、生理的食塩水溶出液（ＥＳ）が、ステップ７の成分のうちの１つである、請求項５に記載のプロセス。
【請求項７】
ステップｂ．がステップｃ．の川下にあるとき、第二のナノ濾過保持物（ＲＮＦ２）は、クロマトグラフィー用カラムに直接投入され、そして、ＰＮＦ２の一部で溶出されて、２つのクロマトグラフィー画分ＥＳ’およびＥＺ’が形成され、ここで、ＥＳ’を逆浸透に供して、生理的食塩水保持物（ＲＯＩＳ）ならびに通過物（ＰＯＩ’）を得、さらに、この場合、最終ステップ７）の混合物は、更なる画分としてＲＯＩＳおよびＰＯＩ’を含み、糖を含む溶出液ＥＺ’を、同様にして逆浸透によって濃縮して、他の用途が意図されるＲＯＩＺ保持物を得、さらに、ＰＯＩ’通過物の追加部分が最終ステップ７）に使用できる、請求項５に記載のプロセス。
【請求項８】
ステップ１）で得られたクリームの酵素的加水分解に関するステップ２’）を含み、それにより、ステップ７）で使用される更なる画分を構成する加水分解クリームを得る、請求項１〜７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９】
前記第一のナノ濾過ステップ５）および６）が、６〜１０のＶＣＲを用いて実施される、請求項１〜７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１０】
前記最終産物を、濃度および／または乾燥に供するか、あるいは、当業者に知られている技術に従って乳製品に加工するための原料として使用する、請求項１〜７のいずれか一項に記載のプロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、０．０１％未満の残留乳糖含有量を有し、特に甘味に関して、出発乳に匹敵する官能プロフィルを有し、かつ、外部からの材料および水を加えることのない無乳糖乳、特に、標準的または高タンパク質乳を調製するためのプロセスについて言及する。
【背景技術】
【０００２】
技術水準
ラクトース不耐症が乳および新鮮な乳製品の消費の減少をもたらす広範囲、かつ、増加中の現象であることは、知られている。結果として、低乳糖あるいは無乳糖含有量を有する乳および新鮮な乳製品に対する需要拡大が存在する。現在、大部分の無乳糖または低乳糖乳およびその誘導体は、二糖乳糖を、４．６〜４．９％ｗ／ｖの量で乳中に天然に存在している２つの単糖：グルコースおよびガラクトース、に分離するラクターゼを使用した酵素的加水分解によって得られる。生産プロセスにおいて、ラクターゼは、乳の熱処理プロセスの前、および／または形態変化の前に使用されてもよく、またはＥＳＬもしくはＵＨＴ乳の場合では、精密濾過酵素の無菌添加によって加熱処理の後であってもよい。しかしながら、２つの単糖が１つ乳糖に比べて甘味力が強いので、乳マトリックス内における２つの単糖の存在は、無乳糖乳を出発乳より甘くする。この乳の顕著な甘味は、消費者によって常に受け入れられるというわけではなく、その結果、この産物に関心がある人々の一部は、その購入を控えている。この傾向は、必然的に食事からの乳および新鮮な乳製品の排除につながり、これにより、健康的な食事に重要な主要栄養素および微量栄養素の一日摂取量の低下をもたらす。
【０００３】
この問題を解決するためには、すべての消費者の期待を満たすように、低乳糖および／または無乳糖含有量を有する乳およびその誘導体は、それらの本来の官能プロフィルを維持することが、そのため不可欠である。
【０００４】
このために、カスケードを使用することが多い、膜技術を利用した乳からの乳糖の様々な除去技術が知られている。現在知られているプロセスは、全乳または部分脱脂乳もしくは脱脂乳から開始し、そして、膜分離の前に最初の熱処理を提供する。これは、出発乳の１もしくは複数の画分を得ることを可能にし、次に酵素的加水分解に供される、最終産物を得るために単純に水で希釈されるか、または再構成されることを可能にする。膜分離技術は、食品および乳製品分野で知られており、かつ、しばらくの間、適用されてきた。膜技術の使用はまた、より大きい分子、特にタンパク質から、小さい分子（糖、ミネラル塩、ビタミン、アミノ酸およびオリゴペプチド）を分離するために有用、かつ、有効でもある。これらの技術は、出発マトリックスの物理状態における変化の相を必要としないので、結果的に低エネルギー消費につながる。使用した膜は、半透過性であり、無機物または高分子の性質を有し、かつ、細孔サイズが異なり、そしてそれが、分画分子量に基づく成分の分離を主に決定する。逆浸透（ＯＩ）は、溶質を濃縮するために通常使用され、限外濾過（ＵＦ）および精密濾過（ＭＦ）は、浮遊物質を分画するのに使用されるが、ナノ濾過（ＮＦ）は濃縮および溶質の分画に使用される。酪農産業では、多くの主要成分と微量成分を含有する乳マトリックスが膜分離を受けるのに非常に適しているので、膜の使用は広範囲にわたる。
【０００５】
ＷＯ００／４５６４３では、甘味が出発乳と同等である低乳糖含有量（＜０．２％）を有する乳を得るためのプロセスを説明している。その成分が標準化された乳は、１：１の乳糖：タンパク質比を得るために外部からの水を使用することによって、ＵＦおよび透析濾過（ＤＦ）を受ける。そのプロセスは、出発マトリックスおよび／またはその濃縮物に粉末タンパク質を加えることによって、タンパク質含有量のできる限りの増加（３．８〜４．０％、あるいはそれ以上）を提供する。それに続いて、残留乳糖が、酵素的に加水分解され（ラクターゼ）、こうして得られた産物が、熱で処理され、そして、包装される。このプロセスの重要な点は、最終産物に対して重要な栄養学的および官能的影響を与える乳糖以外の成分（ミネラル塩、ビタミンなど）の損失、ならびに相当量の外部からの水の使用によって説明される。
【０００６】
ＷＯ０３／０９４６２３は、それにより第一の保持物および通過物を得、得られた通過物のナノ濾過がそのあとに続き、それによりＮＦ保持物（主に乳糖から成る）およびＮＦ通過物（主にミネラル塩から成る）を得る、限外濾過プロセスによる完全な無乳糖乳の製造を説明している。そのＮＦ通過物は、次に逆浸透にかけられ、それにより、別の保持物および別の通過物を生じる。次に、ＵＦ保持物は、ＯＩ保持物に加えられて、ミルキーベースを形成し、そしてそれが、酵素的に加水分解され、そして、外部からの水が加えられる。最終産物は無乳糖乳である。そのプロセスはまた、結果的に出発乳の外部からのホエー由来粉末ミネラル塩の見込まれる添加も提供する。このプロセスの制限は、外部からの水およびミネラル塩の使用と並んで、ＮＦ保持物中の本来の乳汁成分の相当量の損失である。
【０００７】
ＵＳ２００９／００９２７３１ Ａ１では、以下のステップを含む、好ましくは、水の添加を伴わない、無乳糖乳（＜０．５０〜０．０１％）を調製するためのプロセスを説明している：
ａ）出発乳のＵＦ、それにより第一のＵＦ保持物および通過物を得；
ｂ）ＵＦ通過物のＮＦ、それにより第一のＮＦ保持物および通過物を得；
ｃ）第一のＵＦ保持物を第二のＮＦ通過物と混合し；
ｄ）出発乳に匹敵する味、ならびにカルシウムおよびタンパク質含有量を有する完成無乳糖産物を得るために、ステップｃ）からの混合物中に存在する残留乳糖の加水分解。
【０００８】
前述のプロセスは、１回だけのＵＦと１回だけのＮＦ、乳の加熱処理および包装直前の、プロセスの終わりのみの残留乳糖の酵素的加水分解を伴って、そして、最終産物を得るための水の添加を推測的に排除していない。
【０００９】
低乳糖乳および誘導体の製造に関連する公開特許の大部分では、最終的な熱処理および包装前に、酵素的脱乳糖化が最終産物に対して実施される。しかしながら、いくつかの既知の脱乳糖化プロセスにおいて、乳糖の酵素的加水分解が、膜分離ステップの上流で実施される。
【００１０】
例えば、ＷＯ２０１０／０２３３６２では、以下のステップを含む、低乳糖含有量（＜０．５％）を有する乳を調製するためのプロセスを説明している：
ａ）出発原料（それ自体または濃縮した、乳、ホエーまたはその混合物）におけるラクトース加水分解およびＵＦ処理、それにより保持物および通過物を得；
ｂ）ＵＦ通過物をＮＦに供し、それにより、もう一度保持物および通過物を得；
ｃ）任意選択で、ステップａ）および／またはｂ）から得た少なくとも１つの画分を、タンパク質、糖、ミネラル塩をうまく分離するために、更なる膜分離（ＮＦ、ＤＦおよび／またはＯＩ）、留去および／またはクロマトグラフィー分離に供し；
【００１１】
ｄ）所望の組成物および甘味度を有する、最終産物を、基本的に（しかしながら、ＤＦにおいて、総透析容量の５０％まで認められる）水の添加なしに、ステップ（ａ）で得られた１もしくは複数の画分、および／またはステップ（ｂ）で得られた１もしくは複数の画分、ならびにステップ（ｃ）で得られた１もしくは複数の画分の可能性のある追加から再構成し；
ｅ）任意選択で、ステップｄ）で得られた産物を、濃縮物または粉末に濃縮する。
【００１２】
ステップａ）では、濾過膜として限外濾過膜が使用されるのが好ましいが、ステップｂ）は、ナノ濾過を含めた、いくつかの膜濾過ステップを提供し得る。
【００１３】
どのような場合でも、本発明に提供されるナノ濾過は、標準的な分画分子量（約２００Ｄａ）を有する膜によって実施される。
【００１４】
このプロセスによる第一のナノ濾過の保持物は、取り除かれる。
【００１５】
最終産物は、低乳糖乳ベースドリンクであり、そして、見込まれる好適なココア添加を可能にする。
【００１６】
Ｗ０２００９０４３８７７は、以下のステップを含むプロセスを開示する：
ａ）０．１重量％〜多くても３重量％の値に乳糖含有量を低減する、場合により、天然の含有量〜０の間の脂肪含有量に標準化された、未加工または事前に熱処理された乳に含有される乳糖の酵素的加水分解；
ｂ）加水分解された糖を含む通過物および限外濾過保持物を得るための、前ステップからの乳の少なくとも１回の限外濾過ステップ；
【００１７】
ｃ）ナノ濾過の終わりに、グルコースおよびガラクトースが豊富な保持物および対応する通過物を得るための、限外濾過プラントの下流である少なくとも１回のナノ濾過ステップ；
ｄ）ナノ濾過通過物の、限外濾過保持物との混合；
ｅ）所望の最終産物に応じた糖の最終含有量を得るための、ステップｄ）からの混合物への水の添加。
【００１８】
そのプロセスがより多くのナノ濾過を企図した場合であっても、実際には、１回だけが、２００Ｄａの標準的な分画分子量を有する膜を用いて実施される。このプロセスの疑う余地のない不都合は、出発乳のものと同じ桁のタンパク質およびミネラル塩の正確な濃度を得るためには、多量の飲料水が加えられなければならないということである。
【００１９】
本発明の目的は、既知の組成の前記画分から開始して、その官能特性、特に、甘味度が対応する乳糖を含む乳のものと類似している通常または高タンパク質完全無乳糖乳（＜０．０１％の乳糖残留）の配合物を可能にする革新的な多ステップ乳分画プロセスを提供することである。
【００２０】
最後に、本発明の更なる目的は、そこでは酵素的加水分解が分画の上流で実施される脱乳糖化プロセスであり、そしてそれは、前述の既知のプロセスの不利益を伴わないで、かつ、特に、出発乳に対して外部からの材料、より一層特に水の添加を提供しない。
【発明の概要】
【００２１】
本出願人は、今ここで、前述の目的の達成のためのプロセスを発明した。
このプロセスは、以下の：
１）脱脂乳とクリームを得るための出発乳の低温殺菌および脱脂、
２）該脱脂乳の酵素的加水分解、
３）加水分解された脱脂乳の精密濾過、そして、精密濾過保持物（ＲＭＦ）および精密濾過通過物（ＰＭＦ）の獲得、
【００２２】
４）ＰＭＦの限外濾過、そして、限外濾過保持物（ＲＵＦ）および限外濾過通過物（ＰＵＦ）の獲得、
５）ＰＵＦの第一のナノ濾過、そして、第一のナノ濾過保持物（ＲＮＦ１）および第一のナノ濾過通過物（ＰＮＦ１）の獲得、
６）ＰＮＦ１の第二のナノ濾過、そして、第二のナノ濾過保持物（ＲＮＦ２）および第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）の獲得、ならびに、
【００２３】
７）最終ステップ：先のステップの１以上に由来する１以上の画分を混合することによる無乳糖乳の獲得、
を含み、そしてそれは、以下の：
（Ｉ）ステップ５）の第一のナノ濾過が、４００〜６００Ｄａの範囲に及ぶ分画分子量を有する膜によって実施され、かつ、第二のナノ濾過が、１５０〜２５０Ｄａの範囲に及ぶ分画分子量を有する膜によって実施され、ならびに
（ＩＩ）最終ステップ７）が、少なくとも以下の：限外濾過保持物（ＲＵＦ）、第一のナノ濾過保持物（ＲＮＦ１）および第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）、を含む組成物を混合することによって実施されること、
を特徴とする。
【００２４】
本出願人は、単糖に対する低い排除率を特徴とする、いわゆる「広範な」ナノ濾過ステップ（ＮＦ１）における膜の使用が、通過物から大量の糖を取り除き、その一方で、多価の塩および大部分のリボフラビンを保持することを可能にするので、非常に有用、かつ、革新的であることがわかった。
【００２５】
以下のステップ（ＮＦ２）は、いわゆる、古典的な「狭い」ナノ濾過を表すが、その目的は、第二のナノ濾過保持物中の糖の大部分の濃縮であり、そしてそれは、その後除去されるのに対して、一価の塩および単糖の残留量しか含有していない水相を構成する通過物を回収する。
【００２６】
所望であれば、ステップ７）で得られた無乳糖乳は、当業者に知られている技術に従って、濃縮されても、および／または乾燥させても、あるいは、乳製品に形態変化させてもよい。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】本発明のプロセスの好ましい実施形態を、ブロックダイアグラムとして表す。
【図２】本発明のプロセスの好ましい実施形態を、ブロックダイアグラムとして表す。特に、本発明のプロセスの最終ステップの好ましい実施形態を表し、そしてそこでは、特に、第二のナノ濾過保持物が、前述の画分内に含まれている塩を最も大量に回収するためにさらに処理される。
【図３】本発明のプロセスの好ましい実施形態を、ブロックダイアグラムとして表す。特に、本発明のプロセスの最終ステップの好ましい実施形態を表し、そしてそこでは、特に、第二のナノ濾過保持物が、前述の画分内に含まれている塩を最も大量に回収するためにさらに処理される。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明の詳細な説明
本発明の目的に関して、乳糖の酵素的加水分解とは、事前に低温殺菌した脱脂乳およびクリームに対して、ラクターゼ酵素（例えば、ＭＡＸＩＬＡＴ ＬＧｉ−ＤＳＭ、ＮＯＬＡ ＦＩＴ−Chr.Hansen、ＬＡＣＴＯＺＹＭ ＰＵＲＥ−Novozymes）によって実施される加水分解を意味する。
【００２９】
本発明の目的に関して、ＶＣＲ（体積濃度比）とは、各濾過ステップに投入された産物の量と、得られた保持物の量の間の体積比を意味し、その一方で、ＭＣＲは、質量による同じ比を意味する。
【００３０】
先に報告されたように、本出願人は、そのため、０．０１％より低い乳糖含有量を有し、高い栄養価を有し、同じ非無乳糖乳のうちの１つに匹敵する官能プロフィルを有し、乳に対して外部からの成分を使用しない乳の見込まれる配合物および製造を見出した。
【００３１】
本発明のプロセスの好ましい実施形態によると、プロセスは、以下の更なるステップ：
ａ．透析濾過ステップ、
ｂ．逆浸透ステップ、
ｃ．クロマトグラフィーステップ、
のうちの少なくとも１つを含み得る。
【００３２】
本発明のプロセスが透析濾過ステップを含むとき、第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）は、透析液（diafluid）として使用され、第一のナノ濾過に投入される。別の好ましい形態では、同じ透析液が、限外濾過ステップ（ＵＦ）に投入される。この場合、ステップ７）の混合物の成分は、それらを透析濾過したとしても、本発明のプロセス（ＲＵＦ、ＲＮＦ１、ＰＮＦ２）と同じように維持される。本発明のプロセスが更なるステップとして逆浸透（ＯＩ）だけを含むとき、第二のナノ濾過保持物は、他の目的のために使用可能なＯＩ保持物で濃縮され、水によって実質的に構成された通過物を生じさせ、そしてそれは、本発明のプロセスのステップ７）で言及される混合物の更なる成分になり得る。
【００３３】
図１は、透析濾過ステップと逆浸透ステップの両方を含む本発明の２つの代替実施形態を示す。ＰＮＦ２液が透析液として一部使用され、限外濾過（破線）または第一のナノ濾過（実線）に投入されるという事実によって２つの実施形態は異なる。
【００３４】
本発明のプロセスがクロマトグラフィーステップを含むとき、これは好ましくは逆浸透ステップに関連し、そしてそれは、該クロマトグラフィーの上流であっても、または下流であってもよい。
【００３５】
図２に示されている第一の場合では、逆浸透保持物（ＲＯＩ）がクロマトグラフィー用カラムに投入され、そして、ＯＩ通過物および第二のナノ濾過通過物部分（ＰＮＦ２）で溶出される。これは、２つのクロマトグラフィー画分（ＥＳおよびＥＺ）を取得することを可能にし、ここで、第一のものがミネラル塩を含み、および第二のものが糖を含む。この場合、溶出液生理的食塩水（ＥＳ）が、本発明のプロセスのステップ７）の成分の１つである。
【００３６】
図３に示されている第二の場合では、第二のナノ濾過保持物（ＲＮＦ２）が、クロマトグラフィー用カラムに直接投入され、ＰＮＦ２部分で溶出されて、２つのクロマトグラフィー分画（ＥＳ’およびＥＺ’）を構成する。ＥＳ’画分を逆浸透ステップに供して、塩を含んだ保持物（ＲＯＩＳ）ならびに通過物（ＰＯＩ’）を得た。この場合、本発明のプロセスの最終ステップ７）もまた、ＲＯＩＳおよびＰＯＩ’を含む。
【００３７】
所望であれば、次いで、ＥＺ’画分もまた、ＯＩに供して、糖を含む保持物（ＲＯＩＺ）ならびに通過物（ＰＯＩ’）を得ることができる。この後者は、本発明のプロセスの最終ステップ７）で使用され得る。
【００３８】
本発明のプロセスは、好ましくは以下のステップを含む：
１）低温殺菌とそれと同時の、生乳の４０％脂質クリームおよび脱脂乳への分離；
２）低温殺菌かつ脱脂乳の酵素的加水分解、それにより脱脂乳を得；
２’）加水分解されたクリームを得るための、ステップ１）で得られたクリームの任意選択の酵素的加水分解；
３）ステップ２）からの脱脂乳の精密濾過、それにより、取り除かれ得る保持物（ＲＭＦ）および精密濾過通過物（ＰＭＦ）を得；
【００３９】
４）限外濾過通過物（ＰＵＦ）および限外濾過保持物（ＲＵＦ）を得るための精密濾過通過物（ＰＭＦ）の限外濾過；
５）ステップ４）からの限外濾過通過物（ＰＵＦ）を、膜が４００〜６００Ｄａの範囲に及ぶ分画分子量を有している第一のナノ濾過に供し、それにより、第一のナノ濾過保持物（ＲＮＦ１）および第一のナノ濾過（ＰＮＦ１）を得；
６）第一のナノ濾過通過物（ＰＮＦ１）を、１５０〜２００Ｄａの分画分子量を有する第二のナノ濾過に供し、それにより、取り除かれる第二のナノ濾過保持物（ＲＮＦ２）と、第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）を得；
【００４０】
７）以下の：限外濾過保持物（ＲＵＦ）、第一のナノ濾過保持物（ＲＮＦ１）および第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）、そして、場合により、部分脱脂されたか、または全乳を得るための特定の量で、先の任意選択のステップ２’）からの加水分解されたクリーム（実施例２を参照）、を含む組成物を混合することによる最終乳の獲得。
【００４１】
上記画分以外に、最終産物はまた、前述のステップａ）、ｂ）およびｃ）からの液体画分を含んでもよい。
【００４２】
本発明のプロセス対象は、工業生産に好適であり、特に大規模において好ましい。所望であれば、ステップ７）で得られる産物は、当業者に知られている技術に従って、濃縮および／または乾燥させても、または乳製品に形態変化させてもよい。
本発明のプロセスのいくつかの好ましい作動条件が、以下に報告されている。
【００４３】
本発明のプロセスを実施するための好ましい作動条件
ステップ１
本発明のプロセス対象のステップ１）では、全乳を、殺菌および脱脂に供し、それにより、当業者に知られているように、第一の２つの画分：低温殺菌脱脂乳および４０％脂質クリームを製造する。前記画分は、４℃±２℃に冷やされ、そして、保存される。
【００４４】
ステップ２
０．０１％未満の最終乳糖濃度を得るために、ラクターゼ酵素（としては、ＭＡＸＩＬＡＴ ＬＧｉ−ＤＳＭ、ＮＯＬＡ ＦＩＴ−Chr.Hansen、ＬＡＣＴＯＺＹＭ ＰＵＲＥ−Novozymes）が、好ましくは、２〜６ｇ／ｌの濃度にて、低温殺菌脱脂乳に加えられ、そして、＋２℃〜＋６℃の温度にて１８〜２５時間静置される。本発明のプロセス対象の変形では、特に精密濾過通過物に対する以下のステップ後でさえ、乳糖加水分解が、同じ手順および同じ結果で実施され得る。
【００４５】
ステップ３
加水分解された低温殺菌脱脂乳は、１０℃〜６０℃、好ましくは４０℃〜６０℃の温度にて、１．４μｍのセラミック膜により精密濾過される。ＶＣＲは、好ましくは１００〜２００の範囲に及ぶ。
【００４６】
広く知られているとおり（F.Lipnizki "Cross Flow Membrane Applications in the Food Industry" Chapter 1 pp 1-7 "Membranes for food Applications”; 2010 Wiley-VCH Bosch Str.12.69469; I. Pafylias et al., "Microfiltration of milk with ceramic membranes", pp. 141-146, Food research International Vol.29, No.2, 1996.）、食品産業、特に酪農産業における精密濾過膜の細孔径は、１．４μｍの前述の値を有する。実際には、このサイズだけが、精密濾過に投入される乳の組成物を変更することなく、乳中に天然に存在しているすべての微粒子、すなわち、微生物や体細胞を取り除くことを可能にする。
【００４７】
ステップ４
精密濾過通過物は、好ましくは１０℃〜６０℃、より好ましくは４０℃〜６０℃の温度での、５，０００〜３０，０００ＤａのＭＷＣＯを有する（例えば、Microdyn-Nadir Spira-cel IS UH030 4040 C1, Osmonics Desal PW 4040 C30, Trisep 4040 UF10 QSF）、好ましくは渦巻き形の重合体膜による、限外濾過ステップに移る。ＶＣＲは、好ましくは２〜５、より好ましくは３．５〜４．５の範囲に及ぶ。吸入圧は、好ましくは一定であり、より好ましくは４．１〜４．４ｂａｒである。
すべての乳タンパク質を含有している、そうして得られたＵＦ保持物は、４℃±２℃に冷やされ、そして、保存される。
【００４８】
ステップ５
ＵＦ通過物は、好ましくは１０℃〜５０℃、より好ましくは８℃〜２０℃の温度にて、好ましくは５〜１０のＶＣＲを有する、好ましくは４００〜６００ＤａのＭＷＣＯの渦巻き形の重合体膜（例えば、Trisep TurboClean 4040-N2F3T9, membrane XN45）を用いて作動する第一のナノ濾過ステップ（ＮＦ１）に投入される。前述のように、出願人は、単糖に対する低い排除率を特徴とする「広範な」ナノ濾過膜の使用は、それが通過物から大量の糖を取り除くことを可能にする一方で、多価の塩およびリボフラビンの大部分を保持するので、非常に有用、かつ、革新的であることを見出した。
ＮＦ１保持物は、４℃±２℃に冷やされ、そして、保存される。
【００４９】
ステップ６
ＮＦ１通過物は、好ましくは５〜１０のＶＣＲを有する、好ましくは１５０〜２５０ＤａのＭＷＣＯの渦巻き形の重合体膜（例えば、Desal DK 4040 F1020, or Trisep 4040 TS or Osmonics-Desal Vinopro NF4040C35）を用いて作動する、第二のナノ濾過ステップ（ＮＦ２）に直接投入される。このステップは、その目的が糖の濃縮である一方で、通過物、すなわち、残留量の一価の塩および単糖だけを含む水相を回収することを可能にする、古典的な「狭い」ナノ濾過に当たる。出発脱脂乳の体積の５〜１０％を構成している、ＮＦ２保持物は、スクロースの部分の代わりに他の加糖乳製品の配合物に使用できる。両方のナノ濾過ステップは、好ましくは、制御された、かつ、一定の温度にて、好ましくは１０℃〜５０℃、より好ましくは、８℃〜２０℃にて作動する。吸入圧は、好ましくは８から６０ｂａｒへと上昇している。保持物とＮＦ２通過物との両方が、４℃±２℃に冷やされ、そして、保存される。
【００５０】
任意選択のステップ
ステップａ）：透析濾過
前述のように、出願人はまた、この目的のために、水ではなく、第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）および、場合により、同様に、逆浸透通過物（ＰＯＩ）を各ステップに関して同じＶＣＲに達するまで使用して、限外濾過保持物（ＲＵＦ）または第一のナノ濾過（ＲＮＦ１）の一方に対して、透析濾過プロセスを適用することが可能であることを見出した。このように、ＲＮＦ２中の糖濃度の増大が得られる。
【００５１】
ステップｂ）：逆浸透
ＮＦ２保持物を、ＶＣＲ≧２を有する、１０〜１００ＤａのＭＷＣＯの膜（例えば、Osmonics-Desal Vinocon R01 4040C30, Dow-FILMTEC FT30）を用いて、６℃〜５０℃の温度にて作動する、その後の逆浸透（ＯＩ）に供する。これは、（塩と糖の濃縮物である）逆浸透保持物（ＲＯＩ）、および（通常、最終的な乳配合物のＰＮＦ２として使用される）逆浸透通過物（ＰＯＩ）を得ることを可能にする。
【００５２】
ステップｃ）：クロマトグラフィー下流の逆浸透
出発乳の本来の塩の回収を改善するために、出願人はまた、クロマトグラフィー技術を使用することが可能であることも見出した。あらゆる細菌増殖を最小限にするために４℃〜６５℃、好ましくは１０℃以下または６０℃以上の温度にて恒温化した、正当にＭＨＳＭを用いてあらかじめ調整した陽イオン樹脂（例えば、DIAION UNK 532, Mitsubishi Chemical）を充填したクロマトグラフィーカラムに、逆浸透保持物（ＲＯＩ）が投入され、そして、逆浸透通過物（ＰＯＩ）で溶出され、さらに、割当てにより（pro quota）第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）で溶出されて、第一の画分がミネラル塩を基本的に含有し（ＥＳ）、そして、第二の画分がグルコースおよびガラクトースを含有する（ＥＺ）２つの画分を得ることができる。第一の溶出液（ＥＳ）は、最終的な乳配合物に使用できる。
【００５３】
ステップｃ）：クロマトグラフィー上流の逆浸透
あるいは、上述のとおり平衡化および恒温化されたクロマトグラフィー用カラムに、第二のナノ濾過保持物（ＲＮＦ２）が直接投入され、そして、溶出液として第二のナノ濾過通過物（ＰＮＦ２）の一部が使用されて、それにより、塩を含んでいる第一の溶出液（ＥＳ’）、および糖を含んでいる第二の溶出液（ＥＺ’）が得られる。
【００５４】
先の得られた画分は、逆浸透によって別々に濃縮され、２回の別個の浸透の通過物は、クロマトグラフィー用カラムの溶出のために一部再利用されても、またはステップ７）に投入されてもよい。塩の溶出は、電気伝導率測定によって継続的に観察され、そして一方、糖の溶出は、屈折分析によって観察される。
塩を含んだ保持物（ＲＯＩＳ）は、ステップ７）に投入される。
【００５５】
ステップ７）
ステップ７）における最終的な乳の配合は、ＲＵＦ、ＲＮＦ１およびＰＮＦ２、そして任意選択で、好ましくはＰＯＩ、ＰＯＩ’、ＥＳ、ＥＳ’、ＲＯＩＳの中から選択される画分を混合することによって実施されて、所望の組成物を得る。それにより得られた最終的な乳は、次に、熱処理（低温殺菌、高温殺菌（high pasteurization）、ＵＨＴ処理）に供され、そして、所望のとおり包装される。所望であれば、産物は、濃縮および／または乾燥に供されても、あるいは、当業者に知られている技術に従って、乳製品に加工するために使用されてもよい。
【００５６】
本発明による無乳糖乳を調製するためのプロセスに関するいくつかの実施例が、説明のために与えられているが、限定を目的としたものではない。
【実施例】
【００５７】
実施例番号１：高温殺菌した無乳糖ＥＳＬ部分脱脂乳の調製
生乳を低温殺菌および遠心分離に供し、それにより、脱脂乳および４０％脂質クリームを得た。
【００５８】
クリームを、低温殺菌し、そして４〜６℃に冷やし；ラクターゼ（ＭＡＸＩＬＡＴ ＬＧｉ−ＤＳＭ、０．７％）の添加後に、４〜６℃の温度にて１８時間以内に、乳糖をグルコースおよびガラクトースへと完全に加水分解した。このように、４０％脂質の低温殺菌した加水分解クリームを得て、もっと後で最終産物の配合物に使用した。
【００５９】
４〜６℃の温度に冷やした脱脂乳を、４．５ｇ／ｌの濃度でラクターゼと共に加え、それにより、１８時間後に、乳糖の完全な加水分解（残留乳糖＜０．０１％）を得た。
【００６０】
無乳糖脱脂乳（ＨＳＭ）を、次に、４５℃の温度まで加熱し、そして、１．４μｍのセラミック膜プラント（ＶＣＲ＝２００）により精密濾過した。
【００６１】
それにより得られた精密濾過通過物（すなわち、精密濾過された、無乳糖の脱脂乳ＭＨＳＭ）を、３０，０００ＤａのＭＷＣＯを有する（Microdyn-Nadir Spira-cel IS UH030 4040 C1）渦巻き形の重合体膜システムによる、次の限外濾過ステップに直接送る。
【００６２】
ＭＨＳＭのすべてのタンパク質成分を含有している、限外濾過保持物（ＲＵＦ）を、４〜６℃に冷やし、そして、最終産物の配合のためにそれを使用するまで、その温度にて保存した。
【００６３】
限外濾過通過物（ＰＵＦ）を、代わりに１０℃に冷やし、そして、１０のＶＣＲを有する、４００〜６００ＤａのＭＷＣＯ（Trisep TurboClean 4040-N2F3T9, membrane XN45）の、渦巻き形の重合体膜システムによって実施される、その後のナノ濾過ステップ（ＮＦ１）に投入した。
【００６４】
リボフラビンおよび多価の塩が豊富な第一のナノ濾過保持物（ＲＮＦ１）を、４〜６℃に冷やし、そして、最終産物の配合のためにそれを使用するまでその温度にて保存した。
【００６５】
次に、第一のナノ濾過通過物（ＰＮＦ１）を、常に１０℃の温度にて、１０のＶＣＲに達するまで、好ましくは２００ＤａのＭＷＣＯ（Desal DK 4040 F1020）の、渦巻き形の重合体膜を用いて作動する第二のナノ濾過に供した。
【００６６】
単糖および一価の塩が豊富な、第二のナノ濾過保持物（ＲＮＦ２）を得、そしてそれを、４〜６℃に冷やし、そして、他の用途に送った一方、冷却後に、対応する通過物を、最終産物の配合のためにそれを使用するまで４〜６℃にて保存した。
【００６７】
最終産物の配合を、（最終産物のうちの１つの横に個々の画分の組成も示している）表１で示した割合に従って加水分解クリーム、ＲＵＦ、ＲＮＦ１およびＰＮＦ２を混合することによって実施した。すべてのパーセンテージを、Ｍ／Ｍで表した。
【００６８】
配合物を、プラント（ＡＰＶ−ＡＮ ＳＰＸ Ｂｒａｎｄ）における超高温殺菌法（ultra-pasteurization）および無菌充填に供して、コールドチェインで保存および流通されるべき無乳糖の高温殺菌ＥＳＬ部分脱脂乳を得た。
【００６９】
表１．加水分解クリーム、ＵＦ、ＮＦ保持物および第二のナノ濾過通過物からの無乳糖部分脱脂乳の組成
【表１】
2020503898.tif 000003
【００７０】
実施例番号２：無乳糖ＵＨＴ全乳の調製
生乳を低温殺菌および遠心分離に供し、それにより、脱脂乳および４０％脂質クリームを得た。
【００７１】
クリームを、低温殺菌し、そして４℃に冷やし；ラクターゼ（ＭＡＸＩＬＡＴ ＬＧｉ−ＤＳＭ、０．７％）の添加後に、４℃の温度にて２４時間以内に、乳糖をグルコースおよびガラクトースへと完全に加水分解した。これが、もっと後で最終産物の配合物に使用する４０％脂質の低温殺菌した加水分解クリームを得ることを可能にする。
【００７２】
脱脂乳を、５０℃まで加熱し、そして、１．４μｍのセラミック膜プラント（ＶＣＲ＝２００）により精密濾過した。
【００７３】
精密濾過通過物を、４℃に冷やし、そして、０．０１％未満の乳糖残留含有量を得るまで、２．１ｇ／ｌの濃度でのラクターゼ（ＭＡＸＩＬＡＴ ＬＧｉ−ＤＳＭ）の添加によって、２４時間、同じ加水分解温度に供した。それにより得られた精密濾過した無乳糖の加水分解脱脂乳（ＭＨＳＭ）を、５０℃まで加熱した後に、渦巻き形の重合体膜システム（Microdyn-Nadir Spira-cel IS UH030 4040 C1）（ＭＷＣＯ＝３０ｋＤａ；ＶＣＲ＝４．５）による、その後の限外濾過ステップに移した。
【００７４】
ＭＨＳＭのすべてのタンパク質成分を含有しているＲＵＦを、４℃に冷やし、そして、最終産物の配合のためにそれを使用するまで、この温度にて保存した。
【００７５】
ＰＵＦを、代わりに１０℃に冷やし、そして、１０．２のＶＣＲに達するまで一定温度にて作動させる、４００〜６００ＤａのＭＷＣＯ（Trisep TurboClean 4040-N2F3T9, membrane XN45）の、渦巻き形の重合体膜システムによって実施される、その後のナノ濾過ステップに投入した。
【００７６】
リボフラビンおよび多価の塩が豊富なＲＮＦ１を、４℃に冷やし、そして、最終産物の配合のためにそれを使用するまで、この温度にて保存した。
【００７７】
ＰＮＦ１を、続いて、常に１０℃の温度にて、１０のＶＣＲに達するまで、渦巻き形の重合体膜システム（Ge-WATER-DK-4040 C30）による第二のナノ濾過に供した。
冷却後に、ＰＮＦ２を、最終産物の配合のためのその使用まで４℃にて保存した。
【００７８】
単糖および一価の塩が豊富なＲＮＦ２を、１０℃に冷やし、そして、４”膜タイプＲＯ３８４０を備えたＳＷタイプＴＰＥプラントによる、その後の逆浸透（ＯＩ）ステップに投入し、そして、ＶＣＲ＝２まで加工した。次に、逆浸透保持物を、４℃に冷やし、そして、他の用途に送った一方で、冷却後に、対応する通過物（ＰＯＩ）を、最終産物の配合のためのその使用まで４℃にて保存した。
【００７９】
最終産物の配合を、（最終産物のうちの１つの横に個々の画分の組成も示している）表２で示した割合に従って加水分解クリーム、ＲＵＦ、ＲＮＦ１、ＰＮＦ２およびＰＯＩを混合することによって実施した。すべてのパーセンテージを、Ｍ／Ｍで表した。
【００８０】
配合物を、プラント（ＡＰＶ−ＡＮ ＳＰＸ Ｂｒａｎｄ）におけるＵＨＴ処理および無菌充填に供して、室温で保存および流通されるべき無乳糖の無菌ＵＨＴ全乳を得た。
【００８１】
表２．加水分解クリーム、ＵＦおよびＮＦ保持物、第二のナノ濾過および逆浸透通過物から開始した無乳糖全乳の組成
【表２】
2020503898.tif 000004
【００８２】
実施例番号３：無乳糖の高タンパク質高温殺菌ＥＳＬ脱脂乳の調製
生乳を低温殺菌および遠心分離に供し、それにより、脱脂乳および４０％脂質クリームを得た。
【００８３】
４℃の温度に冷やした脱脂乳に、４．５ｇ／ｌの濃度のラクターゼ（ＭＡＸＩＬＡＴ ＬＧｉ−ＤＳＭ）を加え、それにより、乳糖の完全な加水分解を１２時間以内に得た（残留乳糖＜０．０１％）。
【００８４】
次に、無乳糖脱脂乳を、５０℃まで加熱し、そして、１．４μｍのセラミック膜プラント（ＶＣＲ＝２００）により精密濾過した。それにより得られた精密濾過通過物（精密濾過した、無乳糖の脱脂乳ＭＨＳＭ）を、渦巻き形の重合体膜プラント（Microdyn-Nadir Spira-cel IS UH030 4040 C1）（ＭＷＣＯ＝３０ｋＤａ；ＶＣＲ＝４．５）による、次の限外濾過ステップに直接送った。
【００８５】
ＭＨＳＭのすべてのタンパク質成分を含有しているＲＵＦを、４℃に冷やし、そして、最終産物の配合のためにそれを使用するまで、この温度にて保存した。
【００８６】
ＰＵＦを、代わりに１０℃に冷やし、そして、１０．２のＶＣＲに達するまで一定温度にて作動させる、４００〜６００ＤａのＭＷＣＯ（Trisep TurboClean 4040-N2F3T9, membrane XN45）の、渦巻き形の重合体膜システムによって実施される、その後のナノ濾過ステップ（ＮＦ１）に投入した。
【００８７】
リボフラビンおよび多価の塩が豊富なＲＮＦ１を、４℃に冷やし、そして、最終産物の配合のためにそれを使用するまで、この温度にて保存した。
【００８８】
ＰＮＦ１を、続いて、２０℃の温度にて、最高９．９のＶＣＲまで、１５０〜２５０ＤａのＭＷＣＯの渦巻き形の重合体膜システム（Desal DK 4040 F1020）による第二のナノ濾過に供した。
冷却後に、ＰＮＦ２を、最終産物の配合のためのその使用まで４℃にて保存した。
【００８９】
単糖および一価の塩が豊富なＲＮＦ２を、１０℃に冷やし、そして、４”のＲＯ３８４０膜を備えたＳＷタイプＴＰＥプラントによる、その後の逆浸透（ＯＩ）ステップに投入し、そして、ＶＣＲ＝２に達するまで加工した。次に、ＲＯＩを、４℃に冷やし、そして、他の用途に送った一方で、冷却後に、対応する通過物を、最終産物の配合のためのその使用まで４℃にて保存した。
【００９０】
最終産物の配合を、（最終産物のうちの１つの横に個々の画分の組成も示している）表３で示した割合に従ってＲＵＦ、ＲＮＦ１、ＰＮＦ２およびＰＯＩを混合することによって実施した。すべてのパーセンテージを、Ｍ／Ｍで表した。
【００９１】
配合物を、プラント（ＡＰＶ−ＡＮ ＳＰＸ Ｂｒａｎｄ）における超高温殺菌法および無菌充填に供して、コールドチェインで保存および流通されるべき無乳糖の高タンパク質高温殺菌ＥＳＬ脱脂乳を得た。
【００９２】
表３．加水分解クリーム、ＵＦおよびＮＦ保持物、第二のナノ濾過および逆浸透通過物からの無乳糖高タンパク質脱脂乳の組成
【表３】
2020503898.tif 000005
【００９３】
実施例番号４：無乳糖高温殺菌ＥＳＬ部分脱脂乳の調製
生乳を低温殺菌および遠心分離に供し、それにより、脱脂乳および４０％脂質クリームを得た。
【００９４】
クリームを、低温殺菌し、そして４℃に冷やし；ラクターゼ（ＭＡＸＩＬＡＴ ＬＧｉ−ＤＳＭ、０．７％）の添加後に、４℃の温度にて２４時間以内に、乳糖をグルコースおよびガラクトースへと完全に加水分解した。これが、もっと後で最終産物の配合物に使用する４０％脂質の低温殺菌した加水分解クリームを得ることを可能にする。
【００９５】
脱脂乳を、５０℃まで加熱し、そして、１．４μｍのセラミック膜プラント（ＶＣＲ＝２００）により精密濾過した。精密濾過通過物を、４℃に冷やし、そして、０．０１％未満の残留乳糖含有量を得るまで、ラクターゼ（ＭＡＸＩＬＡＴ ＬＧｉ−ＤＳＭ）の添加によって、同じ温度にて２４時間、加水分解に供した。それにより得られた精密濾過した無乳糖の加水分解脱脂乳（ＭＨＳＭ）を、５０℃まで加熱した後に、渦巻き形の重合体膜システム（Microdyn-Nadir Spira-cel IS UH030 4040 C1）（ＭＷＣＯ＝３０ｋＤａ；ＶＣＲ＝４．５）による、その後の限外濾過ステップに移した。
【００９６】
ＭＨＳＭのすべてのタンパク質成分を含有しているＲＵＦを、４℃に冷やし、そして、最終産物の配合のためにそれを使用するまで、この温度にて保存した。
【００９７】
ＵＦ通過物を、代わりに１０℃に冷やし、そして、１０のＶＣＲに達するまで一定温度にて作動させる、４００〜６００ＤａのＭＷＣＯ（Trisep TurboClean 4040-N2F3T9, membrane XN45）の、渦巻き形の重合体膜システムによって実施される、その後のナノ濾過ステップ（ＮＦ１）に投入した。
【００９８】
リボフラビンおよび多価の塩が豊富なＲＮＦ１を、４℃に冷やし、そして、最終産物の配合のためにそれを使用するまで、この温度にて保存した。
【００９９】
ＰＮＦ１を、続いて、２０℃の温度にて、１０のＶＣＲに達するまで、１５０〜２５０ＤａのＭＷＣＯの渦巻き形の重合体膜システム（Ge-WATER-DK-4040 C30）による第二のナノ濾過に供した。
【０１００】
透析濾過を実施するために、ＰＮＦ２を、ここでは透析液として使用し、それをＲＮＦ１の体積量に関して二倍量で混合した。それにより得られた新しい画分を、ＲＮＦ１およびＲＮＦ２、ならびにＰＮＦ２通過物に関してほぼ同じ原体積を達成できるＶＣＲを適用して、前述の手順に続いて連続した２回のナノ濾過に供する。
【０１０１】
透析濾過プロセス由来の２つの透析容量も含有するＰＮＦ２を、冷却ごに、最終産物の配合のためのその使用まで４℃にて保存した。
【０１０２】
単糖および一価の塩が豊富なＲＮＦ２を、１０℃に冷やし、そして、４”のＲＯ３８４０膜を備えたＳＷタイプＴＰＥプラントによる、その後の逆浸透（ＯＩ）ステップに投入し、そして、ＶＣＲ＝２に達するまで加工した。次に、ＲＯＩを、４℃に冷やし、そして、他の用途に送った一方で、冷却後に、対応する通過物（ＰＯＩ）を、最終産物の配合のためのその使用まで４℃にて保存した。
【０１０３】
最終産物の配合を、（最終産物のうちの１つの横に使用した個々の画分の組成も示している）表４で示した割合に従って加水分解クリーム、ＲＵＦ、透析濾過ＲＮＦ１、ＰＮＦ２およびＰＯＩを混合することによって実施した。すべてのパーセンテージを、Ｍ／Ｍで表した。
【０１０４】
配合物を、プラント（ＡＰＶ−ＡＮ ＳＰＸ Ｂｒａｎｄ）におけるＵＨＴ処理および無菌充填に供して、室温で保存および流通されるべき無乳糖の無菌ＵＨＴ部分脱脂乳を得た。
【０１０５】
表４．加水分解クリーム、ＵＦおよびＮＦ保持物、第二のナノ濾過および逆浸透通過物からの無乳糖部分脱脂乳の組成
【表４】
2020503898.tif 000006
【０１０６】
実施例番号５：無乳糖ＵＨＴ脱脂乳の調製
生乳を低温殺菌および遠心分離に供し、それにより、脱脂乳および４０％脂質クリームを得た。
【０１０７】
４℃の温度に冷やした脱脂乳に、４．５ｇ／ｌの濃度でラクターゼ（ＭＡＸＩＬＡＴ ＬＧｉ）を加えて、乳糖の完全な加水分解を１２時間以内に得た（残留乳糖＜０．０１％）。
【０１０８】
次に、無乳糖脱脂乳を、５０℃まで加熱し、そして、１．４μｍのセラミック膜プラント（ＶＣＲ＝２００）により精密濾過した。それにより得られた精密濾過通過物（精密濾過した、無乳糖の脱脂乳ＭＨＳＭ）を、ＶＣＲ＝４．５に達するまでの、３０，０００ＤａのＭＷＣＯの渦巻き形の重合体膜システム（Microdyn-Nadir Spira-cel IS UH030 4040 C1）による、次の限外濾過ステップに直接送った。
【０１０９】
ＭＨＳＭのすべてのタンパク質成分を含有しているＲＵＦを、４℃に冷やし、そして、その後の透析濾過ステップのためにそれを使用するまで、この温度にて保存した。
【０１１０】
ＰＵＦを、代わりに１０℃に冷やし、そして、１０．２のＶＣＲに達するまで一定温度にて作動させる、４００〜６００ＤａのＭＷＣＯ（Trisep TurboClean 4040-N2F3T9, membrane XN45）の、渦巻き形の重合体膜システムによって実施される、その後のナノ濾過ステップ（ＮＦ１）に投入した。
【０１１１】
リボフラビンおよび多価の塩が豊富なＲＮＦ１を、４℃に冷やし、そして、最終産物の配合のためにそれを使用するまで、この温度にて保存した。
【０１１２】
ＰＮＦ１を、続いて、常に２０℃の温度にて、１０のＶＣＲに達するまで、１５０〜２５０ＤａのＭＷＣＯの渦巻き形の重合体膜システム（Desal DK 4040 F1020）による第二のナノ濾過に供した。
冷却後に、ＰＮＦ２を、最終産物の配合のためのその使用まで４℃にて保存した。
【０１１３】
単糖および一価の塩が豊富なＲＮＦ２を、１０℃に冷やし、そして次に、糖からミネラル塩を分離するために、クロマトグラフィーによって加工した。クロマトグラフィー分離を、１０℃の温度にて、脱脂乳で事前に平衡化し、そして、脱イオン水で洗浄した陽イオン樹脂（DIAION UNK 532, Mitsubishi Chemical）を充填したカラムにより実施した。ＮＦ２通過物を、溶出液として使用した。乳のミネラル塩を含有している第一画分を、４”のＲＯ３８４０膜を備えたＳＷタイプＴＰＥプラントによる、その後の逆浸透（ＯＩ）ステップに投入し、そして、ＶＣＲ＝１０に達するまで加工した。保持物（ＲＯＩＳ）および逆浸透通過物（ＰＯＩ’）を、冷却後に、最終産物の配合のためのその利用まで４℃にて保存した。
【０１１４】
最終産物の配合を、（最終産物のうちの１つの横に個々の画分の組成も示している）表５で示した割合に従ってＲＵＦ、ＲＮＦ１、ＰＮＦ２、ＲＯＩＳおよびＰＯＩ’を混合することによって実施した。すべてのパーセンテージを、Ｍ／Ｍで表した。
【０１１５】
配合物を、ＡＰＶ−ＡＮ ＳＰＸ ＢｒａｎｄにおけるＵＨＴ処理および無菌充填に供して、室温で保存および流通されるべき無乳糖の殺菌済みＵＨＴ脱脂乳を得た。
【０１１６】
表５．ＵＦおよびＮＦ保持物、第二のナノ濾過通過物、ＯＩによって濃縮したクロマトグラフィー生理的食塩水溶出液からの無乳糖脱脂乳の組成
【表５】
2020503898.tif 000007
【図１】
2020503898.tif 000008
【図２】
2020503898.tif 000009
【図３】
2020503898.tif 000010
【国際調査報告】
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2020503898.tif 000012
2020503898.tif 000013