(57)【要約】ヒトまたは他の動物対象における血管新生または病的もしくは異常な血管の発達を阻害するためのペプチド組成物および方法。
2020524163.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
Ｙ−Ｘ−Ｚ
を有するアミノ酸配列からなるか、またはそれらを含むペプチドを含む物質の組成物であって、
式中、
Ｙ＝Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｃｙｓ（酸）、Ｇ、またはＤであり、
Ｘ＝Ｇ、Ａ、Ｃｙｓ（酸）、Ｒ、Ｇ、Ｄ、またはＥであり、
Ｚ＝Ｃｙｓ（酸）、Ｇ、Ｃ、Ｒ、Ｄ、Ｎ、またはＥである、
組成物。
【請求項２】
前記アミノ酸配列が、Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ペプチドが、Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記ペプチドが、Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
前記ペプチドが、Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）−Ｇ−Ｇ−Ｇ−Ｄ−Ｇを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
前記ペプチドが、シクロ−｛Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）−Ｆ−Ｎ−Ｍｅ−Ｖ｝を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項７】
前記アミノ酸配列が、Ｒ−Ａ−Ｃｙｓ（酸）である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記アミノ酸配列が、Ｒ−Ｇ−システインである、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記アミノ酸配列が、Ｒ−Ｃｙｓ（酸）−Ｇである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記アミノ酸配列が、Ｃｙｓ（酸）−Ｒ−Ｇである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記アミノ酸配列が、Ｃｙｓ（酸）−Ｇ−Ｒである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
前記アミノ酸配列が、Ｒ−Ｇ−Ｄである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記ペプチドが、シクロ−｛Ｒ−Ｇ−Ｄ−Ｄ−Ｆ−ＮＭｅ−Ｖ｝を含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記アミノ酸配列が、Ｈ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記アミノ酸配列が、Ｒ−Ｇ−Ｎである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
前記アミノ酸配列が、Ｄ−Ｇ−Ｒである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１７】
前記アミノ酸配列が、Ｒ−Ｄ−Ｇである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】
前記アミノ酸配列が、Ｒ−Ａ−Ｅである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１９】
前記アミノ酸配列が、Ｋ−Ｇ−Ｄである、請求項１に記載の組成物。
【請求項２０】
前記ペプチドが塩を含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
前記塩が、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、および塩酸塩形態から選択される、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
タウリンをさらに含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２３】
タウリンと組み合わせてＧ−Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）−Ｔ−Ｐまたはその塩を含む、組成物。
【請求項２４】
血管新生または病的もしくは異常な血管の発達の阻害を必要とするヒトまたは動物対象において血管新生または病的もしくは異常な血管の発達を阻害するための方法であって、前記対象に治療有効量の請求項１〜１９のいずれか一項に記載の組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項２５】
前記組成物がタウリンをさらに含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記方法が、眼内の血管新生または病的もしくは異常な血管の発達を阻害するために実施される、請求項２４または２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記方法が、糖尿病性網膜症、血管新生性加齢性黄斑変性症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、鎌状赤血球網膜症、網膜静脈閉塞症、虚血誘発性網膜症、および眼の炎症性疾患から選択される疾患または障害を治療するために実施される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記方法が、眼の外側の病的または異常な血管の血管新生発達を阻害するために実施される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
前記方法が、血管新生腫瘍の成長または転移を阻害するために実施される、請求項２８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本特許出願は、２０１７年６月１９日に出願された、「Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ」と題する米国仮特許出願第６２／５２１，９８４号の優先権を主張するものであり、この仮出願の全開示内容は、参照により明確に本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、一般的に生物学および医学の分野に関し、より具体的には、ペプチド組成物およびそれらの使用方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
３７  ＣＦＲ  １．７１（ｅ）に準拠して、本特許文書は、著作権保護の対象となる材料を含んでおり、本特許文書の所有者は、すべての著作権をいかなるものでも保有する。
本特許出願を通して、アミノ酸は、以下の名称、３文字コード、および１文字コードを用いて、互換的に参照され得る：
【０００４】
【表１】
2020524163.tif 000003
【０００５】
出願人は、多数のインテグリンを阻害し、かつ有意な抗血管新生、抗炎症、神経保護および他の効果を有することが示されている合成オリゴペプチドグリシニル−アルギニル−グリシニル−システイン酸（酸）−スレオニル−プロリン（ＡＬＧ−１００１またはＬｕｍｉｎａｔｅ（登録商標）、Ａｌｌｅｇｒｏ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃｓ、ＬＬＣ）を開発している。眼へ投与された場合、ＡＬＧ−１００１は、硝子体索切断（ｖｉｔｒｅｏｌｙｓｉｓ）、後部硝子体網膜剥離（ＰＶＤ）を引き起こし、滲出型黄斑変性症（ＷＭＤ）、非滲出型黄斑変性症（ＤＭＤ）、糖尿病性網膜症（ＰＤＲ）、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）、および硝子体黄斑牽引（ＶＭＴ）などの眼疾患の治療に使用可能である。ＡＬＧ−１００１および関連化合物に関するさらなる情報は、「Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題する米国特許第９，０１８，３５２号、「Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ａｄｈｅｓｉｏｎ  ｏｒ  Ｄｉｒｅｃｔｉｎｇ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  ｔｏ  ＲＧＤ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｓｉｔｅｓ」と題する第９，８７２，８８６号、および「Ｉｎｔｅｇｒｉｎ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｕｓｅ」と題する第９，８９６，４８０号、ならびに出願中の「Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｎｄ  Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」と題する米国特許出願第１５／８７４，８１４号において見出され、かかる特許および特許出願の全開示内容は、参照により明確に本明細書に組み込まれる。
【０００６】
下記するように、出願人は、多数の追加の新規ペプチドを合成し、かつ初期試験を実施し、その多くは、インビボ試験において治療効果を示す。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明に従って、ペプチド化合物、およびヒトまたは動物対象において病的または異常な血管の発達の血管新生を阻害するための方法が提供される。
本発明の一態様に従って、式：
Ｙ−Ｘ−Ｚ
を有するアミノ酸配列からなるか、またはそれらを含むペプチドを含む物質の組成物であって、
式中：
Ｙ＝Ｒ、Ｈ、Ｋ、Ｃｙｓ（酸）、Ｇ、またはＤであり、
Ｘ＝Ｇ、Ａ、Ｃｙｓ（酸）、Ｒ、Ｇ、Ｄ、またはＥであり、
Ｚ＝Ｃｙｓ（酸）、Ｇ、Ｃ、Ｒ、Ｄ、Ｎ、またはＥである、組成物が提供される。かかるペプチドは、アミノ酸配列；Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）、Ｒ−Ｒ−Ｃｙｓ、Ｒ−Ｃｙｓ酸）−Ｇ、Ｃｙｓ（酸）−Ｒ−Ｇ、Ｃｙｓ（酸）−Ｇ−Ｒ、Ｒ−Ｇ−Ｄ、Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）．Ｈ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）、Ｒ−Ｇ−Ｎ、Ｄ−Ｇ−Ｒ、Ｒ−Ｄ−Ｇ、Ｒ−Ａ−Ｅ、Ｋ−Ｇ−Ｄ、Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）−Ｇ−Ｇ−Ｇ−Ｄ−Ｇ、シクロ−｛Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）−Ｆ−Ｎ−Ｍｅ−Ｖ｝、Ｒ−Ａ−Ｃｙｓ（酸）、Ｒ−Ｇ−Ｃ、Ｋ−Ｇ−Ｄ、Ｃｙｓ（酸）−Ｒ−Ｇ、Ｃｙｓ（酸）−Ｇ−Ｒ、シクロ−｛Ｒ−Ｇ−Ｄ−Ｄ−Ｆ−ＮＭｅ−Ｖ｝、Ｈ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）、およびそれらの塩を含むか、またはそれらからなり得る。可能な塩は、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩（ＴＦＡ）、および塩酸塩を含むが、これらに限定されない。かかるペプチドは、少なくとも、ヒトまたは動物対象において病的または異常な血管の発達の血管新生を阻害するために有用である。
【０００８】
さらに本発明に従って、本発明のペプチド、または合成オリゴペプチドグリシニル−アルギニル−グリシニル−システイン酸（酸）−スレオニル−プロリンは、タウリンと組み合わされ、病的または異常な血管の発達の血管新生を阻害する目的のためにヒトまたは動物対象へ投与されてもよい。
【０００９】
さらになお本発明に従って、病的または異常な血管の発達の血管新生の阻害を必要とするヒトまたは動物対象において病的または異常な血管の発達の血管新生を阻害するための方法であって、かかる対象に治療有効量の上記で要約したようなペプチドを含む組成物を投与する工程を含む方法が提供される。いくつかの場合では、かかる方法は、血管新生または病的または異常な血管の発達が生じる眼の疾患または障害を治療するために実施され得る。かかる眼の疾患または障害は、糖尿病性網膜症、血管新生性加齢性黄斑変性症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、鎌状赤血球網膜症、網膜静脈閉塞症、虚血誘発性網膜症、および特定の眼の炎症性疾患を含むが、必ずしもこれらに限定される必要はない。
【００１０】
さらになお本発明に従って、ヒトまたは動物対象の眼の外側の場所において血管新生または病的または異常な血管の発達を阻害するための方法が提供される。いくつかの場合では、かかる方法は、血管新生腫瘍の成長または転移を阻害するために実施され得る。
【００１１】
本発明のなおさらなる態様および詳細は、本明細書で下記に示される詳細な説明および実施例を読むことで理解されよう。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）（試験化合物第１４）または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図２】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｃｙｓ（試験化合物第３）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図３】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（試験化合物第１／陽性対照）、Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ（試験化合物第２３）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図４】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｃｙｓ（酸）（試験化合物第３）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図５】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（試験化合物第４）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図６】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（マスクされた）（試験化合物第１）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図７】Ｌｙｓ−Ｇｌｙｓ−Ａｓｐ（試験化合物第２０）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図８】Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）（試験化合物第１４）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図９】Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）（試験化合物第６）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図１０】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、Ａｒｇ−Ｃｙｓ（酸）−Ｇｌｙ（試験化合物第５）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図１１】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）酢酸塩（試験化合物第２）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＣＮＶマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図１２】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）酢酸塩（試験化合物第２）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図１３】Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（試験化合物第１７）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図１４】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（試験化合物第１５）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図１５】Ａｒｇ−Ｃｙｓ（酸）−Ｇｌｙ（試験化合物第１８）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図１６】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ（試験化合物第７）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図１７】Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ（試験化合物第１９）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図１８】Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）−Ａｒｇ（試験化合物第１１）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図１９】Ｃｙｓ（酸）−Ａｌａ−Ａｒｇ（試験化合物第１０）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図２０】Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ（試験化合物第２２）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図２１】Ｃｙｓ（酸）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（試験化合物第８）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図２２】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ（試験化合物第１６）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図２３】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、シクロ−｛Ｒ−Ｇ−Ｄ−Ｄ−Ｆ−ＮＭｅ−Ｖ｝（試験化合物第１３）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図２４】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、シクロ−｛Ｒ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）−Ｆ−Ｎ−Ｍｅ−Ｖ｝（試験化合物第１２）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図２５】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、Ｃｙｓ（酸）−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（試験化合物第９）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図２６】Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）（試験化合物第１４）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【図２７】Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡ（陽性対照）、タウリン（試験化合物第２５）、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）．ＴＦＡ＋タウリン（試験化合物第２４）、または対照ペプチド（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ）のいずれかを用いて治療した後の、ＲＯＰマウス眼における網膜新生血管領域の棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下の詳細な説明およびそれが参照する添付の図面は、必ずしも本発明のすべての実施例または実施形態を記載する必要はなく、いくつかの実施例または実施形態を記載することが意図される。記載される実施形態は、すべての点において、単に説明的であり、限定的ではないことが考慮される。本発明の詳細な説明および添付の図面の内容は、本発明の範囲をいかなるようにも限定するものではない。
【００１４】
糖尿病性網膜症、血管新生性加齢性黄斑変性症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、鎌状赤血球網膜症、網膜静脈閉塞症、虚血誘発性網膜症、特定の眼の炎症性疾患、および血管新生腫瘍の成長または転移を含む、多数の疾患および障害は、血管新生または病的または異常な血管の発達を引き起こすことが知られている。出願人は、下記するように、抗血管新生マウスＲＯＰモデルにおいて活性があることが示されている多数の化合物を見出した。これに基づき、かかる化合物は、上記した疾患および障害を含むがこれらに限定されない、血管新生または病的もしくは異常な血管の発達を引き起こすことが知られている疾患および障害の治療において潜在的に有用である。
【００１５】
各試験化合物を、注射用に、０．０８ｍｇ／１００μＬの塩化ナトリウムおよび０．００５ｍｇ／１００μＬのクエン酸三ナトリウムを含有する滅菌水中で調製し、ペプチドの濃度は、２．０ｍｇ／１００μＬの濃度、およびｐＨ＝２．７であり、滅菌濾過により、滅菌バイアル中に分配した。タウリン試験化合物をＳｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  ｃｏｍｐａｎｙから入手し、これは、＞９９％の純度であり、以前に記載されたのと同じ方法で調製し、３．０ｍｇ／１００μＬの濃度を有した。２．０ｍｇ／１００μＬのＲ−Ｇ−Ｃｙｓ（酸）＋３．０ｍｇ／１００μＬのタウリンを、上記と同じ方法で調製した。
【００１６】
虚血誘発性網膜血管新生に対する活性について試験化合物をスクリーニングするために、マウスの未熟児網膜症（ＲＯＰ）の十分に確立したモデルを用いた。Ｃ５７ＢＩ／６マウスの同腹子を、出生後（Ｐ）７日目に７５％の酸素中に置き、（Ｐ）１２日目に室内空気へと戻した。子らは、１群あたり４〜１０匹の動物の治療群へと無作為に割り当てた。子らは以下のように治療された。治療用の眼は、２０マイクログラムの試験化合物を含有する１．０マイクロリットルの溶液の硝子体内注射により治療された。
【００１７】
出生後１７日目、硝子体内注射の５日後に、動物を犠牲にし、網膜をフラットマウントし、各網膜中の血管新生領域を蛍光デキストラン画像分析により測定した。
出願人は、トリペプチドＲ−Ｇ−システイン酸（酸）をオリゴペプチドグリシニル−アルギニル−グリシニル−システイン酸（酸）−スレオニル−プロリン（ＡＬＧ−１００１またはＬｕｍｉｎａｔｅ（登録商標）、Ａｌｌｅｇｒｏ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃｓ、ＬＬＣ）のインテグリン結合モチーフとして同定した。Ｒ−Ｇ−システイン酸（酸）トリペプチド（試験化合物第１および第２）のトリフルオロ酢酸塩（ＴＦＡ）および酢酸塩を、上記したようなＲＯＰマウスモデル、ならびにＬａｍｂｅｒｔ、Ｖら、Ｌａｓｅｒ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｃｈｏｒｏｉｄａｌ  Ｎｅｏｖａｓｃａｒｉｚａｔｉｏｎ  Ｍｏｄｅｌ  ｔｏ  Ｓｔｕｄｙ  Ａｇｅ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｍａｃｕｌａｒ  Ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ、Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、８；２１９７−２２１１（２０１３）により一般的に記載されているようなレーザー光凝固により誘発された脈絡膜新生血管のマウスモデル（「ＣＮＶマウスモデル」）の両方において試験した。「対照」群に割り当てられた動物は、不活性であることが知られているＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（対照ペプチド）の硝子体内注射により治療された。実験のいくつかには、さらなる「陽性対照」群が含まれた。「陽性対照」群に割り当てられた動物は、活性であることが知られているＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（酸）ＴＦＡの硝子体内注射により治療された。
【００１８】
以下の表１は、試験した用量での各試験化合物の血管新生阻害効果を要約したものである。各場合において、具体的に「ＣＮＶ」と記されている２つの表エントリを除き、データはＲＯＰマウスモデルを用いて得られた。「ＣＮＶ」と記されている表エントリのもののみ、ＣＮＶマウスモデルから得られたデータを示す。表１で要約された試験結果を示す棒グラフはまた、図１〜２７として本明細書で提供される。図で示される場合、試験実施者が各試験化合物の正体または構造を知ることがないように、試験は盲検様式で実施された。
【００１９】
【表２】
2020524163.tif 000004
【００２０】
試験化合物のいくつかでは、ＧＲＧＣｙｓ（酸）ＴＰ（ＡＬＧ−１００１）中の結合モチーフＲＧＣｙｓ（酸）トリペプチドのアミノ酸配列は再編成され、および／または他の塩基性、酸性、および中性アミノ酸で置換された。上記で要約したＲＯＰおよびＣＮＶ試験の結果に基づくと、結果は、ＧＲＧＣｙｓ（酸）ＴＰペプチド（ＡＬＧ−１００１／Ｌｕｍｉｎａｔｅ）中のアルギニン、アラニン、およびシステイン酸の存在、特に、Ｒ−Ｇ−ＣｙｓおよびＲ−Ａ−Ｃｙｓの配列が、血管新生の抑制において重要な役割を果たしていることを示している。さらに、アルギニンの存在下で、中性アミノ酸によるシステイン酸（酸）の置換は、これらの実験において強力な抑制効果を示した。
【００２１】
【化１】
2020524163.tif 000005
【００２２】
式中、
Ｙ＝Ｒ＊、Ｈ、Ｋ、Ｃｙｓ（酸）、Ｇ、またはＤであり、
Ｘ＝Ｇ＊、Ａ、Ｃｙｓ（酸）、Ｒ、Ｇ、Ｄ、またはＥであり、
Ｚ＝Ｃｙｓ＊、Ｇ、システイン、Ｒ、Ｄ、Ｎ、またはＥである。
【００２３】
＊は、陽性対照として使用されたＧＲＧＣｙｓ（酸）ＴＰ（ＡＬＧ−１００１）中のトリペプチドのＲＧＣｙｓ（酸）結合モチーフの構成要素を示す。
本明細書で示された初期データに基づくと、Ｒ−Ｇ−システイン酸結合モチーフに対してなされた特定の変化に関して、特定の構造／活性の関係が示唆される。例えば、Ｒ−Ｇ−システイン酸（酸）結合モチーフのアミノ酸Ｒ（すなわち、Ｙ構成要素）が塩基性アミノ酸または酸性アミノ酸により置換される場合、ペプチドの抗血管新生効果は軽減し、一方で、結合モチーフ中のアルギニンの存在下では、構成要素Ｙとしてのアスパラギン酸は、ペプチドの抗血管新生効果を促進するようだ。
【００２４】
Ｒ−Ｇ−システイン酸結合モチーフのアミノ酸Ｇ（すなわち、Ｘ構成要素）が塩基性または酸性アミノ酸により置換される場合、ペプチドの抗血管新生効果は減少する。しかし、アルギニン（強い水素結合）の存在下では、疎水性相互作用（アラニンおよびアスパラギン酸）についての２つの炭素長スペースは、ペプチドの抗血管新生効果に影響を与えないだろう。
【００２５】
Ｒ−Ｇ−システイン酸（酸）結合モチーフのＣｙｓ（酸）（すなわち、Ｚ構成要素）が中性アミノ酸により置換される場合、ペプチドの血管新生阻害活性は増大するが、一方で、酸性または塩基性アミノ酸によるＺ構成要素の置換は、血管新生阻害活性の減少を引き起こす。
【００２６】
すべては、オリゴペプチドグリシニル−アルギニル−グリシニル−システイン酸（酸）−スレオニル−プロリン（ＡＬＧ−１００１またはＬｕｍｉｎａｔｅ（登録商標）、Ａｌｌｅｇｒｏ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃｓ、ＬＬＣ）のＲ−Ｇ−システイン酸（酸）は血管新生の抑制のために重要であることを示している。また、グリシニル−アルギニル−グリシニル−システイン酸（酸）−スレオニル−プロリン（ＡＬＧ−１００１）１部に対するタウリン３部の付加は、血管新生抑制活性を促進する。
【００２７】
本発明は本発明の特定の実施例または実施形態を参照して本明細書で上記のように記載されてきたが、本発明の意図する精神および範囲から逸脱することなく、様々な付加、欠失、改変、および修飾が記載された実施例および実施形態に対してなされてもよいことが理解されるべきである。別に特定されない限り、またはその意図する用途に不適切となる実施形態または実施例を生み出さない限り、例えば、ある実施形態または実施例の任意の要素、工程、メンバー、構成要素、組成物、反応物質、部数、または部分は、別の実施形態または実施例に組み込まれてもよく、または別の実施形態または実施例と共に使用されてもよい。また、方法またはプロセスの工程が特定の順序で記載されているか、または列挙されている場合、別に特定されない限り、またはその意図する用途に不適切となる方法またはプロセスを生み出さない限り、そのかかる工程の順序は変更されてもよい。さらに、本明細書で記載された任意の発明または実施例の要素、工程、メンバー、構成要素、組成物、反応物質、部数、または部分は、別に注記されない限り、場合により存在してもよく、または任意の他の要素、工程、メンバー、構成要素、組成物、反応物質、部数、または部分の不在下、もしくは実質的な不在下で利用されてもよい。すべての合理的な付加、欠失、修飾、および改変は、記載された実施例および実施形態の等価物とみなされ、以下の特許請求の範囲内に含まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【国際調査報告】
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