(57)【要約】  癌を有する患者に：（ａ）４−１ＢＢ作動薬；（ｂ）ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬；及び／又は（ｃ）トル様受容体作動薬を投与する方法、並びに関連する組成物、キット及び組成物が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌を有する対象に、４−１ＢＢ作動薬並びに少なくとも１つのＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びトル様受容体作動薬を投与することを含む投与の方法。
【請求項２】
前記４−１ＢＢ作動薬、前記ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び前記トル様受容体作動薬の各々が投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記４−１ＢＢ作動薬及び前記ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が投与される、請求項１〜２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４】
前記４−１ＢＢ作動薬及び前記トル様受容体作動薬が投与される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記４−１ＢＢ作動薬、前記トル様受容体作動薬及び／又は前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の各々が、実質的に同時に投与される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記４−１ＢＢ作動薬が、前記トル様受容体作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つと別々に投与される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記４−１ＢＢ作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の各々が、実質的に同時に投与される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記４−１ＢＢ作動薬及び前記トル様受容体作動薬の各々が、実質的に同時に投与される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記トル様受容体作動薬が、前記４−１ＢＢ作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つと別々に投与される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記４−１ＢＢ作動薬が前記対象に全身的に投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記４−１ＢＢ作動薬が前記対象の静脈内に投与される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記４−１ＢＢ作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が、同じ製剤において投与される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記トル様受容体作動薬が前記対象における癌組織に直接投与される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記トル様受容体作動薬が前記対象の固形癌に直接投与される、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記トル様受容体作動薬が、腫瘍内注射及び腫瘍周囲注射から選択される方法によって投与される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が前記対象に全身的に投与される、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が前記対象の静脈内に投与される、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記４−１ＢＢ作動薬が、前記４−１ＢＢ受容体に選択的に結合する抗体である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記４−１ＢＢ作動薬が抗ＣＤ１３７抗体である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記４−１ＢＢ作動薬がウレルマブ及びウトミルマブから選択される、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が、マルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２、（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２、及び（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）６ａｖｇインターロイキン−２から選択される、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＴＬＲ作動薬が、ＴＬＲ−７作動薬、ＴＬＲ−８作動薬又はＴＬＲ−７／８作動薬である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記ＴＬＲ作動薬が、Ｒ８４８、イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８、及び化合物１〜１６のいずれか１つから選択される、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記癌が固形癌である、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記癌が、乳癌、卵巣癌、結腸癌、前立腺癌、骨癌、結腸直腸癌、胃癌、リンパ腫、悪性黒色腫、肝癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、膵癌、甲状腺癌、腎癌、胆管癌、脳癌、子宮頸癌、上顎洞癌、膀胱癌、食道癌、ホジキン病及び副腎皮質癌から選択される、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
４−１ＢＢ作動薬並びにＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びトル様受容体作動薬の少なくとも１つの投与が、免疫系の活性化を促進するのに有効である、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
４−１ＢＢ作動薬並びにＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びトル様受容体作動薬の少なくとも１つの投与が、ＣＤ８  Ｔ細胞、ＣＤ１１ｃ＋及びＣＤ８＋樹状細胞、並びに好中球の少なくとも１つの活性化を促進するのに有効である、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
４−１ＢＢ作動薬並びにＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びトル様受容体作動薬の少なくとも１つの投与が、制御性Ｔ細胞、マクロファージ、及び単球を抑制するのに有効である、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
４−１ＢＢ作動薬並びにＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びトル様受容体の少なくとも１つの投与が、前記癌に対してアブスコパル効果をもたらすのに有効である、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
４−１ＢＢ作動薬；
（ｉ）トル様受容体作動薬及び（ｉｉ）ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つ；並びに
癌を有する対象へのそれらの投与のための説明書を含むキット。
【請求項３１】
前記４−１ＢＢ作動薬が、全身投与のために製剤化される、請求項３０に記載のキット。
【請求項３２】
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が、全身投与のために製剤化される、請求項３０又は３１に記載のキット。
【請求項３３】
前記４−１ＢＢ作動薬又は前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つが、静脈内投与のために製剤化される、請求項３０〜３２のいずれか一項に記載のキット。
【請求項３４】
前記キットが、単一の製剤において製剤化された少なくとも前記４−１ＢＢ作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬を含む、請求項３０〜３３のいずれか一項に記載のキット。
【請求項３５】
前記キットが、（ｉ）単一の製剤において製剤化された前記４−１ＢＢ作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、並びに（ｉｉ）別々の製剤において製剤化された前記トル様受容体作動薬を含む、請求項３０〜３４のいずれか一項に記載のキット。
【請求項３６】
前記４−１ＢＢ作動薬、前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又は前記ＴＬＲ作動薬の各々が、水性希釈剤中での再構成に好適な固体形態である、請求項３０〜３５のいずれか一項に記載のキット。
【請求項３７】
前記トル様受容体作動薬が前記対象における癌組織への直接的な投与のために製剤化される、請求項３０〜３６のいずれか一項に記載のキット。
【請求項３８】
前記トル様受容体作動薬が腫瘍内注射又は腫瘍周囲注射のために製剤化される、請求項３０〜３７のいずれか一項に記載のキット。
【請求項３９】
前記４−１ＢＢ作動薬が、抗ＣＤ１３７抗体、ウレルマブ及びウトミルマブから選択される、請求項３０〜３８のいずれか一項に記載のキット。
【請求項４０】
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が、マルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２、（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２、及び（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）６ａｖｇインターロイキン−２から選択される、請求項３０〜３９のいずれか一項に記載のキット。
【請求項４１】
前記ＴＬＲ作動薬が、Ｒ８４８、イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８、及び化合物１〜１６のいずれか１つから選択される、請求項３０〜４０のいずれか一項に記載のキット。
【請求項４２】
療法における使用のための４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
【請求項４３】
癌の治療における使用のための、請求項４２に記載の４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
【請求項４４】
固形癌の治療における使用のための、請求項４２〜４３のいずれか一項に記載の４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
【請求項４５】
前記ＴＬＲ作動薬が、Ｒ８４８又は化合物１〜１６のいずれかである、請求項４２〜４４のいずれかに記載の４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
【請求項４６】
前記ＴＬＲ作動薬が、Ｒ８４８、イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８、又は４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８である、請求項４２〜４５のいずれかに記載の４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
【請求項４７】
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が、マルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２、（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２、及び（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）６ａｖｇインターロイキン−２から選択される、請求項４２〜４６のいずれかに記載の４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、米国特許法第１１９条（ｅ）のもと、２０１７年５月５日に出願された米国仮特許出願第６２／５０２，０５１号、及び２０１７年５月２日に出願された米国仮特許出願第６２／５００，４８６号の優先権の利益を主張するものであり、これらの仮特許出願の内容は参照により全体として本明細書に援用される。
【０００２】
本明細書で開示されるのは、（とりわけ）ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と組み合わせた４−１ＢＢ受容体作動薬、及び／又はトル様受容体（ＴＬＲ）作動薬を含む組成物、関連の製剤、系並びにキット、療法薬併用、治療の方法、並びに組成物を作製する方法である。本願はまた、癌免疫療法の分野に関し、且つ例えば、４−１ＢＢ受容体作動薬と長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び／又はトル様（ＴＬＲ）受容体作動薬とを併用して個体に投与することによる癌を有する個体の治療を含む。
【背景技術】
【０００３】
４−１ＢＢ受容体は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体ファミリーのメンバーである。この受容体はまた、リンパ球活性化（ＩＬＡ）及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー９（ＴＮＦＲＳＦ９）によって誘導されるＣＤ１３７、ＣＤｗ１３７として同定される。４−１ＢＢは、Ｔリンパ球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、樹状細胞、顆粒球、及びマスト細胞によって発現される３９ｋＤａの膜貫通タンパク質である。そのリガンド４−１ＢＢＬに結合すると、４−１ＢＢは、ＮＦ−κＢ、ｃ−Ｊｕｎ及びｐ３８の下流の経路の活性化を介して、ＣＤ４及びＣＤ８  Ｔ細胞の両方に共刺激性のシグナルをもたらす。４−１ＢＢ受容体は、免疫応答を調節するのに重要であると考えられる。（Ａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  １９９８  Ｊａｎ；１８（１）：５５８−５６５．Ｊａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，２４２，６１３−６２０（１９９８），ａｒｔｉｃｌｅ  ｎｏ．ＲＣ９７８０１６．）。いくつかの４−１ＢＢ受容体作動薬は、それらの抗腫瘍特性について、例えば、ＣＤ２０に結合する抗体（Ｔｈａｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇｓ  ｉｎ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ，Ｂｏｌｏｇｎａ，Ｉｔａｌｙ，Ｍａｙ  ９−１１，２０１６，ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ  Ｍａｙ  １０，２０１６）、ＣＣＲ４に結合する抗体（Ｐｆｉｚｅｒ  ｐｒｅｓｓ  ｒｅｌｅａｓｅ，Ｐｆｉｚｅｒ  Ａｎｄ  Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｉｒｉｎ  Ｔｏ  Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｅ  Ｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ−Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  Ｓｔｕｄｙ，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ２９，２０１４）、ＰＤ−１に結合する抗体（Ｐｆｉｚｅｒ  ｐｒｅｓｓ  ｒｅｌｅａｓｅ，Ｐｆｉｚｅｒ  Ｐｒｅｓｅｎｔｓ  Ｄａｔａ  ｆｒｏｍ  Ｐｈａｓｅ  １ｂ  Ｔｒｉａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇ  Ｕｔｏｍｉｌｕｍａｂ（ａ  ４−１ＢＢ  ａｇｏｎｉｓｔ）  ｉｎ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ａ  Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，Ｊｕｎｅ  ４，２０１６）、及びＯＸ４０に結合する抗体（Ｐｆｉｚｅｒ  ｐｒｅｓｓ  ｒｅｌｅａｓｅ，Ｐｆｉｚｅｒ  ｔｏ  Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｅ  ｗｉｔｈ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｔｏ  Ｓｔｕｄｙ  Ｔｈｒｅｅ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｃａｎｃｅｒｓ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  １４，２０１６）と組み合わせて調査されてきた。いくつかの他の４−１ＢＢ併用癌療法が調査されてきた。（例えば、Ｂａｒｔｋｏｗｉａｋ  ａｎｄ  Ｃｕｒｒａｎ，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２０１５，５，１１７，０８  Ｊｕｎｅ  ２０１５を参照されたい）。
【０００４】
ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬の投与は、適応免疫系を標的化することによってある種の癌に罹患している患者に有益であると示唆された。このような投与は、ＣＤ８＋記憶Ｔ細胞を増加させながら制御性Ｔ細胞の免疫抑制効果を低減して、それにより癌細胞を消失させる患者自身の免疫系を動員すると予想される。例えば、Ｃｈａｒｙｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＡＣＲ  ２０１３，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ＃４８２を参照されたい。
【０００５】
ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬の投与を介する癌の治療における癌患者の免疫系の動員（直接的に免疫を活性化することができる）を、場合によっては、例えば、追加の薬剤の投与によってさらに増強することができる。しかしながら、２種以上の免疫調節物質を投与することによって腫瘍に対する細胞傷害性免疫応答を活性化しようとする場合、多数の課題が生じる。例えば、場合によっては、第２の免疫調節薬の投与は、実際には、単剤として（即ち、単剤療法として）投与される場合には強力な抗腫瘍応答を促進する第１の免疫調節薬の細胞障害効果を増強する代わりに、細胞障害効果を減弱又は抑制する可能性がある。癌免疫療法において、有効な抗腫瘍応答を実現するための免疫刺激と免疫抑制との間の好ましいバランスの達成は、特に複数の活性薬剤を投与する場合には重大な課題となる。
【０００６】
適応免疫系を標的化する他に、自然免疫系の刺激因子もまた、癌を治療するために投与されてもよい。例えば、トル様受容体（ＴＬＲ）は、それらの強力な免疫刺激能のために、調査されてきた。ＴＬＲは、主として、自然免疫系の部門に属する細胞、即ち、樹状細胞（ＤＣ）及び単球によって発現される。ＴＬＲはいくつかの型の腫瘍において機能的に発現されるが、それらが作用して、発癌に対して正及び負の効果の両方を発揮することができる。ＴＬＲは、種々の感染性生物によって発現される病原菌関連分子パターン（ＰＡＭＰ）を検知する、高度に保存された生殖系列にコードされるパターン認識受容体のファミリーを含む。ＴＬＲは、病原菌及び腫瘍によって発現される抗原に対して、自然免疫系を誘発し、適応免疫を増強する。少なくとも１３種の様々なＴＬＲが哺乳動物において同定されている（Ｚｈａｏ，Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｆｏｒ  ＩｍｍｕｎｏＴｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  ２０１４，２：１２）。ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、及びＴＬＲ１０は細胞表面上で発現するが、ＴＬＲ３、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、及びＴＬＲ９は、細胞内部のエンドソーム膜上に位置する（Ｋａｃｚａｎｏｗｓｋａ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ  Ｂｉｏｌ．２０１３  Ｊｕｎ；９３（６）：８４７−８６３）。ＴＬＲは、病原菌及び病原菌関連分子パターン（ＰＡＭＰ）と呼ばれる悪性細胞由来分子を検知するセンサーであり、それらがＴＬＲに結合すると、樹状細胞（ＤＣ）及びマクロファージなどの他の抗原提示細胞において炎症性サイトカインの産生をもたらす（ＮＦ）−κＢ並びにＩ型インターフェロン経路を誘発する。ＴＬＲは、ＤＣ成熟の刺激、抗原取り込み及び抗原提示、並びにＣＤ４＋細胞の分化並びに制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の制御において極めて重要である。
【０００７】
ＴＬＲ−７、ＴＬＲ−８、及びＴＬＲ−９は、それらの核酸モチーフの認識及びエンドソーム区画内での発現において類似している（Ｚｈａｏ，Ｇ．，２０１４、同個所）。合成及び天然のヌクレオシドの両方であるいくつかのリガンドが、ＴＬＲ７及び／又はＴＬＲ８リガンドとして特徴付けられてきた。ＴＬＲ７受容体又はＴＬＲ８受容体によるこれらのヌクレオシドリガンドの認識により、炎症性サイトカイン、ケモカイン、及びＩ型インターフェロン（ＩＦＮ）の誘導、並びに共刺激分子の上方制御が極点に達する細胞内経路が活性化される。ＴＬＲは、病原菌関連分子パターンの認識に関与するロイシンリッチリピートで構成される外部ドメイン、及び下流のシグナル伝達に必要であるトル／インターロイキン−１受容体（ＴＩＲ）ドメインと呼ばれる細胞質ドメインによって特徴付けられるＩ型膜タンパク質である。ＴＬＲ７及びＴＬＲ８は密接に関係しており、細胞内エンドソームでのそれらの所在及びリガンドを共有している。ＴＬＲ７又はＴＬＲ８によるリガンドの認識に続いて、ＴＬＲドメイン含有アダプター分子であるミエロイド系分化初期応答遺伝子８８（ＭｙＤ８８）の動員が起こる。ＴＬＲ７／８及びＭｙＤ８８の会合が、インターロイキン−１受容体関連キナーゼファミリーのメンバーの動員を刺激し、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）及びＩκＢキナーゼ（ＩＫＫ）複合体の下流での活性化を引き起こす。ＴＬＲ７及びＴＬＲ８のトル様受容体作動薬はマクロファージを活性化し、またいくつかの例では、腫瘍環境を腫瘍促進性環境から腫瘍抑制性（炎症性）環境へと変化させることができる。
【０００８】
ＤＣ、単球、マクロファージ、線維芽細胞、及びヒトケラチノサイトなどのいくつかの細胞型を活性化し、アポトーシスを誘導し、免疫原性の増大、並びに細胞傷害性Ｔ細胞リンパ球及び化学療法により媒介される殺傷に対する感作の増大を引き起こすことができるそれらの潜在的な能力を考慮すれば、ＴＬＲリガンドは、有効な抗腫瘍免疫応答を引き起こす潜在力を有する免疫応答調節剤の部類であると見なされる。さらに、ＴＬＲ８リガンドは、ＣＤ８＋Ｔｒｅｇ細胞の抑制性の機能を逆転させることが示されている（Ｋｉｎｉｗａ  Ｙ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２００７；１３：６９４７−５８）。さらに、ＴＬＲ８リガンドの適用は、腫瘍環境を腫瘍促進性から腫瘍抑制性に変える腫瘍浸潤性Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇ細胞の誘導をもたらした（Ａｎｚ  Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１５；７５：４４８３−９３）。他方では、ＴＬＲ活性化は、特定の例において、腫瘍細胞の増殖、侵襲性、及び／又は生存にとって有利であることが示されている（例えば、Ｂｏｈｎｈｏｒｓｔ  Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ  ２００６；２０：１１３８−１１４４；及びＪｅｇｏ  Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ  ２００６；２０：１１３０−１１３７を参照されたい）。ある種のＴＬＲ７／８作動薬はまた、免疫抑制及び自己免疫疾患を誘発することが示されている（Ｃｈｉ  Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２０１７；８：３０４）。
【０００９】
ＴＬＲ作動薬はそれらの抗腫瘍特性について調査されてきたが、概して、大部分のＴＬＲ作動薬は癌治療法として期待した成果をあげていない。このような低迷は、免疫抑制性因子の誘導がＴＬＲ作動薬誘導性炎症を弱める機構によって説明され得ると仮定されてきた。（Ｌｕ，Ｈ．Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｍａｒｃｈ  ２０１４，５，８３）。例えば、ＴＬＲ作動薬は、樹状細胞上のＣＤ８０、ＣＤ８６、及びＣＤ４０などの共刺激分子、並びに免疫応答を方向づけするＴＮＦ−α及びＩＬ−１２などの炎症性サイトカインの誘導を介した免疫刺激効果を有する。しかしながら、ＴＬＲ作動薬はまた、例えば、ＩＬ−１０、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、及びＰＤ−１を含む、これら全ては抗腫瘍免疫を抑制することが可能ないくつかの免疫抑制性因子を誘導することによって、免疫抑制効果を有する（Ｌｕ，Ｈ．，２０１４、同個所）。従って、両方の成分が有利に相互作用して治療効果を増強する免疫療法的併用に達しようとするには、顕著な課題が存在している。
【００１０】
上述のように、今日まで様々なプラットフォームを包含する有効な癌免疫療法の開発における多大な試行が存在しているが、例えば、癌を治療するための新たなより有効な免疫療法による治療レジメンを特定及び提供することが依然として必要とされている。本開示はこの及び他の必要性に対処しようとするものである。
いくつかの態様及び実施形態が、本明細書に記載される。そのため、本明細書に記載される特徴及び実施形態の各々は、たとえ明示的に述べられないとしても、反対に述べられない限り、任意の他の態様、実施形態又は特徴若しくは特徴の組み合わせに適用可能である（が適用可能である必要はない）ことを意味する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  １９９８  Ｊａｎ；１８（１）：５５８−５６５．
【非特許文献２】Ｊａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，２４２，６１３−６２０（１９９８），ａｒｔｉｃｌｅ  ｎｏ．ＲＣ９７８０１６．
【非特許文献３】Ｔｈａｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇｓ  ｉｎ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ，Ｂｏｌｏｇｎａ，Ｉｔａｌｙ，Ｍａｙ  ９−１１，２０１６，ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ  Ｍａｙ  １０，２０１６
【非特許文献４】Ｐｆｉｚｅｒ  ｐｒｅｓｓ  ｒｅｌｅａｓｅ，Ｐｆｉｚｅｒ  Ａｎｄ  Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｉｒｉｎ  Ｔｏ  Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｅ  Ｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ−Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  Ｓｔｕｄｙ，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ２９，２０１４
【非特許文献５】Ｐｆｉｚｅｒ  ｐｒｅｓｓ  ｒｅｌｅａｓｅ，Ｐｆｉｚｅｒ  Ｐｒｅｓｅｎｔｓ  Ｄａｔａ  ｆｒｏｍ  Ｐｈａｓｅ  １ｂ  Ｔｒｉａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇ  Ｕｔｏｍｉｌｕｍａｂ（ａ  ４−１ＢＢ  ａｇｏｎｉｓｔ）  ｉｎ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ａ  Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，Ｊｕｎｅ  ４，２０１６
【非特許文献６】Ｐｆｉｚｅｒ  ｐｒｅｓｓ  ｒｅｌｅａｓｅ，Ｐｆｉｚｅｒ  ｔｏ  Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｅ  ｗｉｔｈ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｔｏ  Ｓｔｕｄｙ  Ｔｈｒｅｅ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｃａｎｃｅｒｓ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  １４，２０１６
【非特許文献７】Ｂａｒｔｋｏｗｉａｋ  ａｎｄ  Ｃｕｒｒａｎ，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２０１５，５，１１７，０８  Ｊｕｎｅ  ２０１５
【非特許文献８】Ｃｈａｒｙｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＡＣＲ  ２０１３，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ＃４８２
【非特許文献９】Ｚｈａｏ，Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｆｏｒ  ＩｍｍｕｎｏＴｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  ２０１４，２：１２
【非特許文献１０】Ｋａｃｚａｎｏｗｓｋａ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ  Ｂｉｏｌ．２０１３  Ｊｕｎ；９３（６）：８４７−８６３
【非特許文献１１】Ｋｉｎｉｗａ  Ｙ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２００７；１３：６９４７−５８
【非特許文献１２】Ａｎｚ  Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１５；７５：４４８３−９３
【非特許文献１３】Ｂｏｈｎｈｏｒｓｔ  Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ  ２００６；２０：１１３８−１１４４
【非特許文献１４】Ｊｅｇｏ  Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ  ２００６；２０：１１３０−１１３７
【非特許文献１５】Ｃｈｉ  Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２０１７；８：３０４
【非特許文献１６】Ｌｕ，Ｈ．Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｍａｒｃｈ  ２０１４，５，８３
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
第１の態様において、それぞれ本明細書により詳細に記載される４−１ＢＢ作動薬とＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び／又はＴＬＲ作動薬とを併用して癌を有する対象に投与することを含む方法が本明細書に提供される。ある実施形態において、その併用は、免疫系の活性化を促進することができるが（例えば、ＣＤ８  Ｔ細胞、ＣＤ１１ｃ＋及びＣＤ８＋樹状細胞、並びに好中球の促進を通して）、一方でまた、免疫抑制を克服する（例えば、制御性Ｔ細胞、マクロファージ、及び単球の抑制にもかかわらず）。
【００１３】
別の態様において、癌を有する対象に４−１ＢＢ作動薬及びＴＬＲ作動薬を投与することを含む方法が本明細書に提供される。
【００１４】
別の態様において、４−１ＢＢ作動薬及びＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬を、癌を有する対象に投与することを含む方法が本明細書に提供される。
【００１５】
別の態様において、４−１ＢＢ作動薬、ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及びＴＬＲ作動薬を、癌を有する対象に投与することを含む方法が本明細書に提供される。
【００１６】
明確にしておくと、投与順序に関して、４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬、及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、同時に又は連続的に、並びに任意の順序で、並びに同一及び／又は異なる投与経路により、それぞれ免疫調節量で投与することができる。さらに、治療は、単一の治療サイクルを含み得、又は複数の治療サイクル（即ち、２回以上）を含み得る。追加の治療サイクルは、４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬、及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の各々の投与、又はそのサブセットの投与を含んでもよく、本開示はこれに関して限定されるものではない。
【００１７】
前述の態様のいずれか１つに関する１つ以上の実施形態において、ＴＬＲ作動薬は局所的に投与される。加えて、前述の態様のいずれか１つ以上に関する１つ以上の実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は非経口的に投与される。さらに、前述の態様のいずれか１つ以上に関する１つ以上のさらなる実施形態において、４−１ＢＢ作動薬は非経口的に投与される。１つ以上の関連実施形態において、ＴＬＲ作動薬は、腫瘍部位に直接投与される。いくつかの適用可能な実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、同時に又はさらには単一の製剤の成分として投与される。
【００１８】
前述の態様のいずれか１つ以上に関する１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬、例えば、ＴＬＲ７／８作動薬のマルチアームポリマーコンジュゲート及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、互いに別個に投与される。さらに１つ以上の別の実施形態において、ＴＬＲ作動薬は、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び４−１ＢＢ作動薬の投与前に対象に投与される。１つ以上の代替実施形態において、ＴＬＲ作動薬は治療の１日目に投与され、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び／又は４−１ＢＢ作動薬は治療の１〜４日目のいずれか１日に投与される。例えば、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び４−１ＢＢ作動薬は、１、２、３、又は４日目のいずれか１日に投与される。いくつかの実施形態において、４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び／又はＴＬＲ作動薬は一緒に投与される。
【００１９】
前述の態様のいずれか１つ以上に関する１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、互いに同時に投与される。例えば、１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、治療の１日目に投与される。いくつかの実施形態において、４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、同じ製剤において投与される。
【００２０】
前述の態様のいずれか１つ以上に関する１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及びＴＬＲ作動薬は、互いに同時に投与される。例えば、１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及びＴＬＲ作動薬は、治療の１日目に投与される。１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及びＴＬＲ作動薬は、同じ製剤において投与される。
【００２１】
前述の態様のいずれか１つ以上に関する１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、互いに同時に投与される。例えば、１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、治療の１日目に投与される。１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、同じ製剤において投与される。
【００２２】
好ましい実施形態において、対象はヒト対象である。
【００２３】
１つ以上のさらなる実施形態において、癌は固形癌である。例えば癌は、乳癌、卵巣癌、結腸癌、前立腺癌、骨癌、結腸直腸癌、胃癌、リンパ腫、悪性黒色腫、肝癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、膵癌、甲状腺癌、腎癌、胆管癌、脳癌、子宮頸癌、上顎洞癌、膀胱癌、食道癌、ホジキン病及び副腎皮質癌からなる群から選択される。
【００２４】
一部の実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、ポリエチレングリコールに放出可能に共有結合しているアルデスロイキンを含む。さらに一部のさらなる実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、４、５及び６つのポリエチレングリコールポリマーに放出可能に共有結合しているアルデスロイキンを含む。さらに一部の別の実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、平均約６つのポリエチレングリコールポリマーに放出可能に共有結合しているアルデスロイキンを含む。１つ以上のさらなる実施形態において、アルデスロイキンに放出可能に共有結合しているポリエチレングリコールポリマーは、分枝状である。さらに１つ以上の特定の実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、例えば（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２などの、マルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２である。さらに１つ以上のさらなる実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）６ａｖｇインターロイキン−２である。
【００２５】
前述の態様又は実施形態のいずれか１つ以上に関するさらに一部の別の実施形態において、ＴＬＲ作動薬は、ＴＬＲ７作動薬又はＴＬＲ８作動薬である。１つ以上の実施形態において、ＴＬＲ作動薬はＴＬＲ７作動薬である。さらに１つ以上の代替実施形態において、ＴＬＲ作動薬はＴＬＲ８作動薬である。一部の実施形態において、ＴＬＲ作動薬は、長時間作用型ＴＬＲ７作動薬又は長時間作用型ＴＬＲ８作動薬（例えば、マルチアームポリマーで修飾されたＴＬＲ７作動薬又はＴＬＲ８作動薬）などの長時間作用型ＴＬＲ作動薬である。
【００２６】
さらに一部のさらなる実施形態において、長時間作用型ＴＬＲ作動薬は、ＴＬＲ７／８作動薬などのＴＬＲ作動薬のマルチアーム水溶性ポリマーコンジュゲートである。さらに１つ以上の別の実施形態において、マルチアーム水溶性ポリマーは、ＴＬＲ作動薬、例えば、ＴＬＲ７／８作動薬に安定的に共有結合している。
【００２７】
１つ以上の代替実施形態において、マルチアーム水溶性ポリマーは、ＴＬＲ作動薬に放出可能に共有結合している。さらに１つ以上の特定の実施形態において、長時間作用型ＴＬＲ作動薬は、４つのポリマーアームのそれぞれの末端で、任意選択的に介在スペーサ又はリンカー部分を介して、安定的に又は放出可能に共有結合しているＴＬＲ作動薬分子を有する４−ａｒｍ−ペンタエリトリトリル系ポリエチレングリコールコンジュゲートである。ＴＬＲ作動薬に関するいくつかの実施形態において、ＴＬＲ作動薬は、イミキモド又はレシキモドである。さらにいくつかの別の実施形態において、ＴＬＲ作動薬はレシキモドである。１つ以上の特定の実施形態において、ＴＬＲ作動薬は、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８である。
【００２８】
前述の態様又は実施形態のいずれか１つ以上に関するさらにいくつかの別の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬は抗体である。前述の態様又は実施形態のいずれか１つ以上に関するさらにいくつかの別の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬はヒトモノクローナル抗体である。１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬は、ＰＲＳ−３４２（Ｐｉｅｒｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＰＲＳ−３４３（Ｐｉｅｒｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＥＵ−１０１（Ｅｕｔｉｌｅｘ  Ｃｏ．）、ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３、ＢＭＳ）、又はウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６、Ｐｆｉｚｅｒ）である。１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬は、ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３、ＢＭＳ）又はウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６、Ｐｆｉｚｅｒ）である。
【００２９】
いくつかの実施形態において、併用療法は、４−１ＢＢ作動薬及び４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８又は（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２の投与を含む。いくつかの別の実施形態において、併用療法は、４−１ＢＢ作動薬と４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８及び（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２を併用した投与を含む。いくつかの別の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬はウレルマブである。さらにいくつかのさらなる実施形態において、４−１ＢＢ作動薬はウトミルマブである。
【００３０】
投与する方法のいずれか１つ以上の態様のいくつかの実施形態において、投与は、対象においてアブスコパル効果をもたらすのに有効である。
【００３１】
さらに別の態様において、癌を有する対象の治療における使用に関する説明書が添付された、Ｔ細胞刺激量の４−１ＢＢ作動薬及びＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬並びに／又は自然免疫活性化量のＴＬＲ作動薬を含むキットが提供される。
【００３２】
さらに別の態様において、癌を有する対象の治療における使用に関する説明書が添付された、ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びＴ細胞刺激量の４−１ＢＢ作動薬を含むキットが提供される。
【００３３】
さらに別の態様において、癌を有する対象の治療における使用に関する説明書が添付された、Ｔ細胞刺激量の４−１ＢＢ作動薬及び自然免疫活性化量のＴＬＲ作動薬を含むキットが提供される。
【００３４】
キットの１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び／又はＴＬＲ作動薬とは対象への投与のための単一の組成物中に含まれ、単一の組成物は場合により、薬学的に許容可能な賦形剤を含む。キットの１つ以上の別の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、対象への投与のための単一の組成物中に含まれ、キットは任意選択的にさらに、ＴＬＲ作動薬を含む追加の別々の組成物を、即ち対象への投与のために含み、各別々の組成物は、任意選択的に、１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤を含む。
【００３５】
キットの一部の代替的実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬の各々は別個の容器中に提供され、キットはＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の各々を別個に対象に投与するための説明書を含む。
【００３６】
キットのいくつかの実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬の各々は固体形態である。１つ以上の関連実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＴＬＲ作動薬の各々は、水性希釈剤中での再構成に好適な固体形態である。
【００３７】
さらに１つ以上の別の実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬との各々は薬学的に許容可能な賦形剤を各々含む別個の組成物内に含まれる。
【００３８】
さらなる態様及び実施形態は、以下の詳細な説明及び特許請求の範囲に記載される。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
定義
本開示のある特徴を記載し、及び特許請求するにあたり、特に記載のない限り以下に記載する定義に従い以下の用語を使用することになる。
【００４０】
本明細書で使用する場合、単数形の冠詞「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」には、文脈的にそうではないとはっきり示されている場合以外は、複数の指示も含まれる。
【００４１】
「水溶性の非ペプチド性ポリマー（ｗａｔｅｒ−ｓｏｌｕｂｌｅ，ｎｏｎ−ｐｅｐｔｉｄｉｃ  ｐｏｌｙｍｅｒ）」という用語は、室温で水の中に、少なくとも３５％（重量）が可溶性である、好ましくは７０％（重量）を超えて、そしてより好ましくは９５％（重量）を超えて溶解するようなポリマーを指している。典型的には、未濾過の「水溶性の（ｗａｔｅｒ−ｓｏｌｕｂｌｅ）」のポリマーの水性調製物が、濾過した後の同一の溶液で透過される光の量の少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも９５％の透過率を示す。しかしながら、その水溶性のポリマーが、水中へ少なくとも９５％（重量）溶解するか、又は水に完全に溶解するのが、最も好ましい。「非ペプチド性（ｎｏｎ−ｐｅｐｔｉｄｉｃ）」であるということに関しては、ポリマーが３５％（重量）未満のアミノ酸残基しか有していない場合に、そのポリマーは非ペプチド性である。
【００４２】
用語「単量体」、「単量体サブユニット」及び「単量体ユニット」は、本明細書では同義的に使用され、ポリマーの基本構造単位の１つを指す。ホモポリマーの場合、単一の繰り返し構造単位がポリマーを形成する。コポリマーの場合、２つ以上の構造単位が−あるパターンで又はランダムに−繰り返すことでポリマーを形成する。好ましいポリマーはホモポリマーである。水溶性非ペプチドポリマーは、連続的に結合された１つ以上の単量体を含んで単量体の鎖を形成する。そのポリマーは、単一のモノマーから形成されるタイプ（即ち、ホモポリマーである）から、又は２種若しくは３種のモノマーのタイプ（即ち、コポリマーである）から形成させることができる。
【００４３】
「ポリマー（ｐｏｌｙｍｅｒ）」という用語は、本明細書で使用するとき、約２個〜約４０００個以上、例えば約２個〜約２０００個のモノマーを含む分子である。特異的なポリマーとしては、例えば直鎖状、分岐状、又はフォーク状のような各種の形状を有するものが挙げられるが、それについては、以下においてさらに詳しく説明する。
【００４４】
「ＰＥＧ」又は「ポリエチレングリコール」は、本明細書で使用されるとき、任意の水溶性ポリ（エチレンオキシド）を包含することが意図される。特に指示されない限り、「ＰＥＧポリマー」又は任意のポリエチレングリコールは、実質的に全ての（好ましくは全ての）単量体サブユニットがエチレンオキシドサブユニットであるものであり、しかしながらポリマーは、例えばコンジュゲーション用に、個別のエンドキャッピング部分又は官能基を含有してもよい。ＰＥＧポリマーは、１つ以上の末端酸素が例えば合成変換中に置換されたか否かに応じて、以下の２つの構造のうちの一方を含み得る：−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−又は−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−１ＣＨ２ＣＨ２−。前述のとおり、ＰＥＧポリマーについては、変量（ｎ）（即ち、繰り返し単位の数）は約２〜２０００、又は約２〜４０００の範囲であり、末端基及びＰＥＧ全体の構造は様々であり得る。ＰＥＧが、例えば、小分子又はプロテインに結合するための官能基をさらに含む場合には、その官能基は、ＰＥＧポリマーに共有結合的に結合されたときには、その結果として、酸素−酸素結合（−Ｏ−Ｏ−、ペルオキシド結合）を形成することはない。
【００４５】
「エンドキャップト（ｅｎｄ−ｃａｐｐｅｄ）」又は「ターミナリーキャップト（ｔｅｒｍｉｎａｌｌｙ  ｃａｐｐｅｄ）」という用語は、本明細書においては、相互に交換可能に使用され、エンドキャッピング部分を有するポリマーの、ターミナル又はエンドポイントを指している。そのエンドキャッピング部分には、典型的には、ヒドロキシ基、又はＣ１〜２０アルコキシ基、又はアルカアリールオキシ基が含まれるが、それが必須という訳ではない。従って、エンドキャッピング部分の例としては、アルコキシ（例えば、メトキシ及びエトキシ）、ベンジルオキシ、さらにはアリール、ヘテロアリール、シクロ、ヘテロシクロなどが挙げられる。それに加えて、前述のものそれぞれの、飽和、不飽和、置換及び非置換の形態も考えられる。さらには、そのエンドキャッピング基が、シランであるということもまた可能である。そのエンドキャッピング基に、検出可能なラベルが含まれているのも、有利となりうる。そのポリマーが、検出可能なラベルを含むエンドキャッピング基を有している場合には、関心の対象となっているポリマー及び／又はそのポリマーが結合されている部分（例えば、活性薬剤）の量や位置を、適切な検出器を使用することにより、調べることができる。そのようなラベルとしては、以下のものが挙げられる（それらに限定される訳ではない）：蛍光剤、化学発光剤、酵素のラベリングに使用される部分、比色分析用部分（例えば、色素）、金属イオン、放射性部分など。適切な検出器としては、光度計、フィルム、分光計などが挙げられる。それに加えて、エンドキャッピング基には、ターゲティング部分が含まれていてもよい。
【００４６】
「ターゲティング部分（ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｍｏｉｅｔｙ）」という用語は、そのコンジュゲートをターゲティング領域に局在化させるのに役立つ、例えば細胞の中に入れたり、受容体と結合したりするのに役立つような分子構造を指している。ターゲティング部分としては、好ましくは以下のものが挙げられる：ビタミン、抗体、抗原、受容体、ＤＮＡ、ＲＮＡ、シアリルＬｅｗｉｓ  Ｘ抗原、ヒアルロン酸、糖類、細胞特異性レクチン、ステロイド若しくはステロイド誘導体、ＲＧＤペプチド、細胞表面受容体のためのリガンド、血清成分、又は各種の細胞内若しくは細胞外受容体を対象としたコンビナトリアル分子。ターゲティング部分に、脂質又はリン脂質が含まれていてもよい。リン脂質の例としては以下のものが挙げられるが、これらに限定される訳ではない：ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、及びホスファチジルエタノールアミン。これらの脂質は、ミセル又はリポソームなどの形態であってよい。ターゲティング部分には、検出可能なラベルをさらに含んでいてもよいし、或いはその代わりに、検出可能なラベルを、ターゲティング部分として役立ててもよい。ポリマーコンジュゲートが、検出可能なラベルを含むターゲティング基を有している場合、ポリマー、及び／又はそれに対してそのポリマーがコンジュゲートされた部分（例えば、活性薬剤）の量及び／又は分布／位置を、適切な検出器を用いて測定することができる。そのようなラベルとしては、以下のものが挙げられる（それらに限定される訳ではない）：蛍光剤、化学発光剤、酵素のラベリングに使用される部分、比色分析（例えば、色素）、金属イオン、放射性部分、金の微粒子、量子ドットなど。
【００４７】
水溶性ポリマー、例えばＰＥＧに関する分子量は、数平均分子量又は重量平均分子量のいずれかとして表現することができる。特に示されない限り、本明細書の分子量への全ての言及は重量平均分子量を指す。分子量決定の両方、数平均及び重量平均は、ゲル浸透クロマトグラフィー又は他の液体クロマトグラフィー技術（例えばゲル透過クロマトグラフィー）を使用して計測することができる。分子量値を計測する他の方法、例えば数平均分子量を決定するための末端基分析の使用若しくは束一性特性（例えば凝固点降下、沸点上昇、又は浸透圧）の計測又は重量平均分子量を決定するための光散乱技術、超遠心、ＭＡＬＤＩ  ＴＯＦ若しくは粘度測定を使用することもできる。ＰＥＧポリマーは、典型的には、多分散性（即ちポリマーの数平均分子量及び重量平均分子量は等しくない）であり、好ましくは約１．２未満、より好ましくは約１．１５未満、いっそうより好ましくは約１．１０未満、さらによりいっそうより好ましくは約１．０５未満、最も好ましくは約１．０３未満の低多分散性値を有する。
【００４８】
ポリマーの形状又は全体構造に関連して、「分岐状の（ｂｒａｎｃｈｅｄ）」という用語は、分岐点から延びている２本以上のポリマーの「アーム（ａｒｍ）」又は鎖を有するポリマーを指している。
【００４９】
ポリマーの形状又は全体構造に関連して、「フォーク状の（ｆｏｒｋｅｄ）」という用語は、分岐点から（典型的には、１個又は２個以上の原子を介して）延びている２個以上の官能基を有するポリマーを指している。
【００５０】
「分岐点（ｂｒａｎｃｈ  ｐｏｉｎｔ）」という用語は、直鎖状の構造から、その点で、ポリマーが分岐状又はフォーク状となって１本又は複数の追加のアームとなる、１個又はそれ以上の原子を含む、分岐点（ｂｉｆｕｒｃａｔｉｏｎ  ｐｏｉｎｔ）を指している。
【００５１】
「反応性（ｒｅａｃｔｉｖｅ）」又は「活性化された（ａｃｔｉｖａｔｅｄ）」という用語は、有機合成の通常の条件下で、容易に、或いは実用的な速度で反応する、官能基を指している。このものは、全く反応しないか、或いは、反応させるためには、強力な触媒や、非実用的な反応条件を必要とするような基（即ち「非反応性（ｎｏｎｒｅａｃｔｉｖｅ）」又は「不活性（ｉｎｅｒｔ）」な基）とは対照的である。
【００５２】
反応混合物中の分子の上に存在する官能基に関連して、「容易には反応しない（ｎｏｔ  ｒｅａｄｉｌｙ  ｒｅａｃｔｉｖｅ）」という用語は、その基が、その反応混合物の中で所望の反応を起こさせるのに有効な条件下でも、ほとんど反応せずに留まることを示している。
【００５３】
「保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  ｇｒｏｕｐ）」は、ある種の条件下で、ある分子の中の特に化学反応性の高い官能系の反応を、防止又は遮断するような部分である。保護するべき化学的反応性の基、さらには採用される反応条件、並びに、その分子の中にそれ以外に存在している反応性の基又は保護基に応じて、その保護基を変えるのがよい。保護することが可能な官能基の例を挙げれば、カルボン酸基、アミノ基、ヒドロキシル基、チオール基、カルボニル基などである。代表的な保護基としては、以下のものが挙げられる：カルボン酸のためには、エステル（例えば、ｐ−メトキシベンジルエステル）、アミド、及びヒドラジド；アミノ基のためには、カルバメート（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）及びアミド；ヒドロキシル基のためには、エーテル及びエステル；チオール基のためには、チオエーテル及びチオエステル；カルボニル基のためには、アセタール及びケタール；など。そのような保護基は、当業者には公知であって、例えば次の文献に記載されている：Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９、及びその中で引用されている文献。
【００５４】
「保護された形（ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ  ｆｏｒｍ）」にある官能基とは、保護基を担持している官能基を指している。本明細書で使用するとき、「官能基（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｇｒｏｕｐ）」又はそれの各種の同義語には、それらの保護された形も包含される。
【００５５】
「放出可能な結合（ｒｅｌｅａｓａｂｌｅ  ｌｉｎｋａｇｅ）」という用語は、生理学的条件下でも解離する、比較的不安定な結合であって、その解離は、各種異なった機構のいずれかによって起こさせることができる。放出可能な結合の例の１つのタイプは、例えば生理学的条件下で、加水分解可能な、即ち水との反応で解離する（即ち、加水分解される）結合であって、例えば芳香族アミド結合のようなアミド結合の加水分解である。結合が、水の中で加水分解される傾向は、２個の原子をつないでいる結合の一般的なタイプだけではなく、それらの原子に付着している置換基にも依存する。加水分解的に不安定、即ち弱い、例示的な結合としては以下のものが挙げられるが、これらに限定される訳ではない：カルボン酸エステル、リン酸エステル、無水物、アセタール、ケタール、アシルオキシアルキルエーテル、イミン、オルトエステル、ペプチド、オリゴヌクレオチド、チオエステル、及びカーボネート。放出可能な結合としてはさらに、酵素的に放出可能な結合も挙げられるが、ここで「酵素的に放出可能な結合（ｅｎｚｙｍａｔｉｃａｌｌｙ  ｒｅｌｅａｓａｂｌｅ  ｌｉｎｋａｇｅ）」という用語は、１種又は複数の酵素によって解離される結合基を意味している。放出機構のさらなるタイプとしては、１，６−ベンジル脱離、β−脱離などが挙げられるが、これらに限定される訳ではない。ある種の結合が、安定であるか、或いは放出可能であるかを考える場合、そのような特性解析は、分子の全体構造、又は実体構造の範囲内で考えるべきである。ある種の場合においては、放出可能な結合を含むポリマーコンジュゲートは、プロドラッグとも呼ばれ、その場合、インビボで（即ち、生理学的条件下で）その放出可能な結合が解離して、その親薬物が放出される（又は活性薬剤に放出可能に付着されているポリマー部分の数に依存して、最終的には放出される）。共有結合的な「放出可能な（ｒｅｌｅａｓａｂｌｅ）」結合は、例えば、有効成分例えばインターロイキン−２又はＴＬＲ作動薬例えばレシキモド（別名、Ｒ８４８）に共有結合的に結合されている、水溶性ポリマー例えばポリエチレングリコールの場合においては、生理学的条件下で解離し、それにより有効成分の部分から水溶性ポリマーを放出若しくは切り離すか、又は水溶性のポリマーから有効成分を切り離すようなものである。
【００５６】
「安定な」結合（ｌｉｎｋａｇｅ）又は結合（ｂｏｎｄ）は、水中で（例えば、生理学的条件下）実質的に安定な化学結合、即ち、長期間にわたり生理学的条件下でいかなる認め得る程度の加水分解も受けない結合を指す。加水分解に安定な結合の例としては、限定はされないが、一般的に以下が挙げられ得る：炭素−炭素結合（例えば脂肪族鎖中の）、エーテル類、アミド類、ウレタン類、アミン類など。概して、安定な結合は、生理学的条件下で１日約１〜２％未満の加水分解速度を呈するものである。代表的な化学結合の加水分解速度は、多くの標準的な化学テキストブックを参照することができる。
【００５７】
「ＴＬＲ７／８作動薬」（又は、「ＴＬＲ作動薬」）は、トル様受容体７及び／又はトル様受容体８に対する作動薬である、各種の化合物である。
【００５８】
「４−１ＢＢ作動薬」は、４−１ＢＢ受容体の作動薬である任意の化合物（低分子、リガンド、又は抗体など）である。
【００５９】
「実質的に（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ、又はｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ）」という用語は、ほぼ全部又は完全ということを意味していて、例えば所定の量に対して、９５％以上、より好ましくは９７％以上、さらにより好ましくは９８％以上、なおより好ましくは９９％以上、さらになおより好ましくは９９．９％以上であり、最も好ましくは９９．９９％以上である。
【００６０】
「アルキル（ａｌｋｙｌ）」という用語は、長さ方向に約１〜２０個の原子が配列されている炭化水素鎖を指している。そのような炭化水素鎖は、（必ずという訳ではないが）好ましくは飽和していて、分岐鎖であっても、直鎖であってもよい。アルキル基の例としては、以下のものが挙げられる：メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、２−メチルブチル、イソプロピル、３−メチルペンチルなど。本明細書で使用するとき、「アルキル」には、シクロアルキルも含まれるが、その場合３個以上の炭素原子が対象となっている。「アルケニル（ａｌｋｅｎｙｌ）」基は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む、２〜２０個の炭素原子を有するアルキル基である。
【００６１】
「置換された（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ）アルキル」又は「置換されたＣｑ〜ｒアルキル」（ここで、ｑ及びｒは、そのアルキル基の中に含まれる炭素原子の範囲を特定している整数である）という用語は、以下のものによって置換された、上記のアルキル基を表している：１個、２個、又は３個の、ハロ原子（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、Ｃ１〜７アルキル（例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチルなど）、Ｃ１〜７アルコキシ、Ｃ１〜７アシルオキシ、Ｃ３〜７ヘテロシクリル、アミノ、フェノキシ、ニトロ、カルボキシ、アシル、シアノなど。置換されたアルキル基は、同一又は異なった置換基を用いて、１回、２回、又は３回置換されていてもよい。
【００６２】
「低級（ｌｏｗｅｒ）アルキル」という用語は、１〜７個の炭素原子を含むアルキル基を指しており、直鎖又は分岐鎖であってよく、例えば、メチル、エチル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチルである。
【００６３】
「低級（ｌｏｗｅｒ）アルケニル」という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する２〜６個の炭素原子の低級アルキル基を指している。
【００６４】
「非干渉（ｎｏｎ−ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ）置換基」とは、分子の中にあって、典型的には、その分子の中に含まれている他の官能基とは反応しない基である。
【００６５】
「アルコキシ（ａｌｋｏｘｙ）」という用語は、−Ｏ−Ｒ基を指しているが、ここでＲは、アルキル又は置換されたアルキル、好ましくはＣ１〜Ｃ２０アルキル（例えば、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシなど）、好ましくはＣ１〜Ｃ７アルキルである。
【００６６】
「アリール（ａｒｙｌ）」という用語は、１４個までの炭素原子を有する芳香族基を意味している。アリール基としては、フェニル、ナフチル、ビフェニル、フェナントレニル、ナフタレニルなどが挙げられる。「置換されたフェニル」及び「置換されたアリール」という用語は、それぞれ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アルキル（例えば、Ｃ１〜６アルキル）、アルコキシ（例えば、Ｃ１〜６アルコキシ）、ベンジルオキシ、カルボキシ、アリールなどから選択された１個、２個、３個、４個、又は５個で置換された（例えば、１−２、１−３、又は１−４置換基）のフェニル基及びアリール基を表している。
【００６７】
本明細書で記載される塩基性反応物又は酸性反応物としては、中性、荷電性、及び任意の対応するその塩形態が挙げられる。
【００６８】
例に挙げたコンジュゲート、有効成分、又は、本明細書に記載されたような、その他の好適に適合することが可能な化学部分には、適用可能である限りにおいて、それらの類似体、異性体、多形、溶媒和化合物、及び薬学的に許容される塩の形も包含されているものとする。
【００６９】
「薬理学的有効量」、「生理的有効量」、及び「治療有効量」という用語は、本明細書においては相互に交換可能に使用され、血流において、又は目標としている組織において、活性薬剤及び／又はコンジュゲートの所望のレベルを与えるのに必要とされる、活性薬剤、例えばポリマーコンジュゲートの量を意味している。正確な量は、例えば、具体的な活性薬剤、その組成物の成分及び物理的特性、意図している患者の母集団、患者の事情など、多くの因子に依存する可能性があるが、当業熟練者であれば、本明細書において提供される情報及び、関連の文献から入手可能な情報に基づいて、容易に決めることができるであろう。例えば、（連続的に又は同時に）投与されるときの化合物、又は１つ以上の化合物の組み合わせの治療有効量は、所望の生物学的又は医学的応答を誘発する、例えば、癌細胞を破壊するか、又は対象における癌の進行を減速させるか若しくは抑える量である。本用語はまた、例えば、有益な効果をもたらす併用投与の際に、標的細胞における特定の所望の応答を誘導することになる化合物の用量にも適用する。ある実施形態において、併用効果は相加的である。ある実施形態において、併用効果は相乗的である。さらに、本併用療法の場合、４−ＢＢ作動薬、例えばマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２などの長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬の各々の量は、「治療量未満の量」、即ち、単独で投与される際のそのような化合物の治療有効量未満において使用され得ることが当業者に認識されるであろう。
【００７０】
併用療法又は「〜との併用による」は、特定の障害又は病態を治療する２種以上の治療剤の使用を指す。「〜との併用による」によって、治療剤は、同時に投与される必要があり、且つ／又は送達のために合わせて製剤化される必要があることを意味することを意図するものではないが、これらの送達方法は本開示の範囲内にある。治療剤は、１つ以上の他の追加薬と同時に、それの前に、又はそれの後に投与され得る。併用療法における治療剤はまた、休止期（例えば、治療剤がスケジュールのうちの一定の日に投与されない）がある場合又はない場合における、投与スケジュールの変更に基づいて投与され得る。別の治療剤「との併用による」治療剤の投与としては、２種以上の薬剤の連続的及び同時の投与が挙げられるが、これらに限定されない。概して、各治療剤は、特定の薬剤のために決定された用量及び／又は時間スケジュールで投与される。
【００７１】
「薬学的に許容可能な賦形剤」又は「薬学的に許容可能な担体」は、本明細書に記載される組成物中に含まれ得る成分であって、患者に重大な有害毒性効果を引き起こさない成分を指す。
【００７２】
用語「患者」、又は「対象」は、本明細書で使用されるとき、本明細書に提供されるとおりの化合物又は組成物又は併用の投与により予防又は治療することのできる病態、例えば癌に罹患している又はそれに罹り易い生物を指し、ヒト及び動物の両方が含まれる。対象には、限定されるものではないが、哺乳動物（例えばマウス、サル、ウマ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコなど）が含まれ、好ましくはヒトである。
【００７３】
「場合による（ｏｐｔｉｏｎａｌ）」又は「場合によっては（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）」という用語は、その後に記述されている状況が、必ずしも起きる必要がないということを意味していて、そのため、その記述には、その状況が起きる場合と、それが起きない場合との両方が含まれている。
【００７４】
「小分子（ｓｍａｌｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ）」という用語は、本明細書で使用するとき、典型的には、約１０００未満の分子量の有機化合物を指している。
【００７５】
概要
本明細書に記載される組成物、系、キット、併用及び方法は、自然免疫系の活性化が可能な新規の潜在的に安全であり且つ非常に有効な抗癌療法を統合する、薬剤設計におけるいくつかの革新的な進歩及び治療の理論的根拠を取り入れている。
【００７６】
単一の免疫療法剤を含む現在の抗腫瘍戦略に関連する欠点、例えば、高い全身暴露並びに関連する毒性及び／又は最適以下の腫瘍溶解効果などの少なくとも一部に対処するための試行において、組成物、系、併用並びに自然免疫活性化量（例えば、Ｔ細胞刺激量）の４−１ＢＢ作動薬、並びにＴＬＲ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬のうちの少なくとも１つを、癌を有する対象に投与することを含む方法が本明細書に提供される。本開示は、少なくとも一部には、（ｉ）４−１ＢＢ作動薬及び少なくともＴＬＲ作動薬若しくは長時間作用型ＩＬ−２Ｒ作動薬、より具体的にはＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、又は（ｉｉ）４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬、及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒ作動薬、より具体的にはＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬を含む驚くほど有利な療法薬併用の発見に基づく。
【００７７】
Ｉｌ−２は、アルファ（ＩＬ２Ｒα、ＣＤ２５）、ベータ（ＩＬ２Ｒβ、ＣＤ１２２）及び共通のガンマ鎖受容体（γｃ’ＣＤ１３２）を含有する受容体シグナリング複合体を通じて免疫細胞増殖及び活性化を刺激する。高用量において、ＩＬ２はヘテロ二量体ＩＬ２Ｒβγ受容体に結合し、腫瘍殺傷ＣＤ８＋メモリーエフェクターＴ（ＣＤ８Ｔ）細胞の所望の拡大をもたらす。しかしながら、ＩＬ２はそのヘテロ三量体受容体ＩＬ２Ｒαβγにもより大きな親和性で結合し、それが免疫抑制ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）を拡大し、それが癌免疫療法についての不所望な効果をもたらし得る。従って、（ｉ）ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬、特に長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬、又は（ｉｉ）ＴＬＲ作動薬、例えばＴＬＲ７／８作動薬、又は（ｉ）両方、即ち、ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬、特に長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬及びＴＬＲ作動薬、例えばＴＬＲ７／８作動薬と４−１ＢＢ作動薬の投与を併用する治療モダリティが本明細書に提供される。理論により拘束されるものではないが、免疫抑制Ｔｒｅｇの活性化を担うＩＬ２Ｒαサブユニットと相互作用する領域をマスクする（即ちその活性を抑制し、又は減衰させる）長時間作用型ＩＬ−２化合物、即ち長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬と選択的に併用し、且つ／又は抗原提示細胞の成熟及びＴ細胞プライミングの作用機序を有するＴＬＲ作動薬と選択的に併用するときに、Ｔ細胞の活性を刺激することが可能な４−１ＢＢ作動薬を利用することにより、優れた治療有効性を達成することができると考えられ、それは本開示及び裏付けの実施例から明らかになる。実際に、代表的な実施例において、前述の併用により驚異的なアブスコパル効果がもたらされ、その結果、全ての腫瘍、つまり４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬の少なくとも１つが直接投与された腫瘍（第１の腫瘍）、並びに４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬の少なくとも１つが直接投与されなかった腫瘍（第２の腫瘍）の両方において、有効性が観察された。
【００７８】
本明細書に提供される併用療法は、少なくとも一部には、本明細書に記載されるＴＬＲ７／８作動薬及び例えばマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２などの長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬の併用に応答するマウス腫瘍モデルにおける免疫系の先行研究の結果として生まれたが、ここで、マルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２に応答して体内で増殖する大部分のＴ細胞が、マクロファージ及び樹状細胞などの骨髄系細胞と通常は関連する表面タンパク質ＣＤ１１ｃの発現を獲得することが観察された。これらの細胞は、Ｔ細胞とは機能的にも、発達的にも非常に異なっており、例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬であるマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２の直接的な標的ではない。ＣＤ１１ｃ表面タンパク質発現のこの認識はさらに、特定の免疫細胞型と関連する種々の細胞型に特異的な細胞表面タンパク質の存在量をスコア化するフローサイトメトリー分析を使用することによって支持された。この知見、即ち、表面タンパク質ＣＤ１１ｃを発現するＴ細胞は偶然発見されたが、それはＴ細胞分析において、ＣＤ１１ｃタンパク質の検出がほとんど使用されず、ＣＤ１１ｃタンパク質が従来これらの細胞と関連付けられていないためである。
【００７９】
例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬である、マルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２とは異なり、本明細書に記載されるものなどのＴＬＲ作動薬、例えば、例示的なＴＬＲ７／８作動薬である４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８は、ＣＤ１１ｃタンパク質を発現する細胞型を直接的に標的化し、そのため、併用治療の分析及び評価は、長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬からもたらされるＴ細胞並びにＴＬＲ７／８作動薬によって標的化されるマクロファージ及び樹状細胞の両方についての同一性マーカーを含んだ。この組み合わされた分析により、同じ状況における長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬及びＴＬＲ７／８作動薬の標的細胞集団の両方についての細胞表面タンパク質マーカーの可視化が可能になり、ＣＤ８  Ｔ細胞上のＣＤ１１ｃタンパク質発現を予期せずに明らかにした。
【００８０】
長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬、及びＴＬＲ７／８作動薬と併用した長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬の両方によるＣＤ８  Ｔ細胞上のＣＤ１１ｃタンパク質発現の誘導のこの認識は、４−１ＢＢを介するＴ細胞刺激のために開発された非天然の作動薬が、長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬及び／又はＴＬＲ作動薬に誘導される癌細胞を攻撃するＴ細胞を増強することになるかどうかの問いをもたらした。本明細書で提供されるとおり、長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬及び／又はＴＬＲ作動薬と併用されるときの４−１ＢＢ作動薬の投与もまた、長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬及びＴＬＲ作動薬に誘導される癌細胞を攻撃するＴ細胞を増強し、それにより治療の有効性を増大させることが発見された。
【００８１】
４−１ＢＢ作動薬
４−１ＢＢは、活性化後のＣＤ８  Ｔ細胞、活性化ＣＤ４ヘルパーＴ細胞、Ｂ細胞、制御性Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞などを含む造血系列のいくつかの細胞上で発現される（Ｂａｒｔｋｏｗｉａｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｏｎｃｏｌ．Ｖｏｌ．５，ａｒｔｉｃｌｅ  １１７，２０１５）。４−１ＢＢ作動薬療法は、自然免疫及び獲得免疫部門の両方で多様な免疫エフェクター応答を誘発する。応答のうち最も強力なものが、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞を刺激して増殖させ、それらのエフェクターとしての潜在力をインターフェロンガンマ産生及びいくつかのグランザイムの発現の増加を通して増大させる。ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞もまた刺激されて、炎症性サイトカインを増殖させ、且つ産生し得る（Ｂａｒｔｋｏｗｉａｋ、同個所）。
【００８２】
本明細書で提供される組成物、系又は併用は、少なくとも１つの４−１ＢＢ作動薬を含む。本明細書で提供される治療方法は、即ち、自然免疫応答を刺激するための４−１ＢＢ作動薬を投与することを含む。４−１ＢＢ作動薬の投与は、例えば、Ｔ細胞増殖、ＩＬ−２分泌、生存、及び／又は細胞溶解活性を増強するのに有効である。
【００８３】
種々の４−１ＢＢ作動薬を、本明細書に記載される組成物、系、併用及び方法に従って利用し、且つ／又は投与することができ、本明細書の組成物、系、併用及び方法は、これに関して限定されるものではない。理論により拘束されるものではないが、良好なアウトカムは、ＩＬ−２経路により（即ち、４−１ＢＢ作動薬とＴＬＲ作動薬及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬の共投与により）達成して、４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬の補完性並びに作用機序に起因して所望のＴ細胞応答を刺激することができると考えられる。
【００８４】
例示的な４−１ＢＢ作動薬としては、例えば、ＰＲＳ−３４２（ＨＥＲ２標的抗体を有するＣＤ１３７特異的アンチカリン、Ｐｉｅｒｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＰＲＳ−３４３（ＨＥＲ２標的抗体に遺伝的に結合した作動薬のＣＤ１３７標的アンチカリン、Ｐｉｅｒｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＥＵ−１０１（Ｅｕｔｉｌｅｘ  Ｃｏ．）、ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３、ＢＭＳ）、又はウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６、Ｐｆｉｚｅｒ）が挙げられるが、これらに限定されない。１つ以上の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬は、ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３、ＢＭＳ）又はウトミルマブ（ＰＦ−０５０８２５６６、Ｐｆｉｚｅｒ）であり、いずれか又は両方が、本明細書に提供される三重及び二重の療法治療法において４−１ＢＢ作動薬として併用投与され得る。
【００８５】
いくつかの実施形態において、薬理学的有効量は、約０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜５００ｍｇ／ｋｇ体重の間、１〜１００ｍｇ／ｋｇ、３〜５０ｍｇ／ｋｇ、３〜３０ｍｇ／ｋｇ又は３〜１５ｍｇ／ｋｇであり得る。いくつかの実施形態において、０．５ｍｇ／ｋｇ体重未満の用量は、長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬、長時間作用型ＴＬＲ７／８作動薬のいずれかと併用投与されるとき、又は前述の両方と併用投与されるときに有効であり得る。
【００８６】
実施例１９に示されるとおり、４−１ＢＢ作動薬、例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬、即ち、マルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２、及び長時間作用型ＴＬＲ７／８作動薬の併用投与は、単剤の４−１ＢＢ作動薬及び例示的なＴＬＲ７／８作動薬と組み合わされたマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２の両方による免疫療法と比較したとき、マウスＣＴ−２６結腸腫瘍モデルにおいて生存を増加させるのに有効であった。例示的な動物モデルにおいて、１０μｇ用量の４−１ＢＢ作動薬を含む併用療法は、１００％の生存をもたらした。特に、本実施例では、高用量の４−１ＢＢ作動薬（１００μｇ）は、７５％の生存をもたらした。従って、低用量の４−１ＢＢ作動薬を含む併用療法は、高用量の４−１ＢＢ作動薬より良好な有効性を示した。これらの結果は、１０μｇ用量は２５％の生存をもたらしたが、１００μｇ用量は１００％の生存をもたらした４−１ＢＢ作動薬を利用する単剤試験とは対照的である。いくつかの実施形態において、併用療法は低用量の４−１ＢＢ作動薬を可能にするが、これは４−１ＢＢ抗体作動薬が用量制限肝臓炎症を引き起こすことを示したため重要である（Ｂａｒｔｋｏｗｉａｋ、同個所）。
【００８７】
実施例２０に示されるとおり、例示的な４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬であるマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２の併用投与は、低用量、即ち１０μｇ用量の４−１ＢＢ作動薬を提供する治療が１００％の生存をもたらしたように、同様の結果をもたらした。
【００８８】
トル様受容体（ＴＬＲ）作動薬
本明細書に提供される組成物、系、併用及び治療方法は、１つ以上の実施形態において、即ち自然免疫応答を刺激するためのＴＬＲ作動薬を含み得る。ＴＬＲ作動薬の投与は、例えば、自然免疫、骨髄系細胞応答を活性化し、且つ腫瘍抗原提示を増加させるために有効である。概して、ＴＬＲ作動薬は、局所感染を模倣することによって、腫瘍中において腫瘍抑制性微小環境を作出することができる。
【００８９】
様々なＴＬＲ作動薬を、組成物、系又は併用において使用することができるか；又は本明細書に記載される方法に従って投与することができ、本開示はこれに関して限定されるものではない。理論により拘束されるものではないが、良好なアウトカムは、ＩＬ−２経路により（即ち、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬を伴うか又は伴わないＴＬＲ作動薬の共投与により）達成して、４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬（及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬）の補完性並びに作用機序に起因して所望のＴ細胞応答を刺激することができると考えられる。
【００９０】
ＴＬＲ作動薬は、いくつかの好ましい実施形態において、例えば水溶性ポリマーコンジュゲートの形態における長時間作用型、好ましくは、ＴＬＲ７／８作動薬のマルチアームポリエチレングリコールポリマー（ＰＥＧ）コンジュゲートなどのマルチアーム水溶性ポリマーコンジュゲートである。ＴＬＲ作動薬の例示的なマルチアームポリマーコンジュゲートは、ＰＣＴ出願番号第ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０１３１９９９号に記載され、その内容は参照により全体として本明細書に明示的に援用される。
【００９１】
いくつかの実施形態において、ＴＬＲ作動薬は、トル様受容体（「ＴＬＲ」）作動薬化合物、即ちＴＬＲ７／８作動薬（ＴＬＲ７、ＴＬＲ８受容体又は両方の作動薬）のマルチアームポリマーコンジュゲートである。いくつかの特定の実施形態において、マルチアームポリマーコンジュゲートは、式Ｉ：
【化１】
2020518610.tif 000002
に従う構造を有する
（式中、ＲがＱと一緒になって、それぞれ３〜約５０個のヒドロキシル、チオール、又はアミノ基を担持するポリオール、ポリチオール、又はポリアミンの残基であり；各Ｑは、独立して、酸素、硫黄及び−ＮＨ（例えば、それぞれポリオール、ポリチオール、又はポリアミンの酸素、硫黄又は窒素原子に相当する）から選択されるリンカーであり；各ＰＯＬＹは、独立して、例えばポリエチレングリコールなどの水溶性非ペプチド性ポリマーであり；各Ｘｒは、独立して、結合を含むスペーサ部分であり；ｑは、３〜約５０の正の整数であり；且つ各ＴＬＲ７／８  ＡＧは、トル様受容体７／８作動薬であり、式Ｉはまた、その薬学的に許容可能な塩を包含する）。以下に論じられるのは、式Ｉのマルチアームポリマーコンジュゲートの様々な成分の各々である。
【００９２】
式Ｉに関しては、１つ又は複数の実施態様においては、そのポリオール、ポリチオール又はポリアミンの残基である、「Ｒ」は、このマルチアームポリマーに関連する場合、約３〜約１５０個の炭素原子（例えば、約３〜約５０個の炭素原子）を有する、有機ラジカル含有部分である。いくつかの好ましい実施態様においては、Ｒは、Ｑと組み合わさって、即ち（Ｒ−Ｑ）ｑとして取り上げれば、これは、ポリオール、ポリアミン又はポリチオールのコア分子（ｃｏｒｅ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ）であって、３〜約２５個の炭素原子、又は３〜約１０個の炭素原子、例えば３、４、５、６、７、８、９、又は１０個の炭素原子が含まれている。その残基には、Ｑで定義されたものに加えて、１個のさらなるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｓ、又はＮ）が含まれていてもよい。ポリオール（又はポリアミン又はポリチオール）に関連して、「残基（ｒｅｓｉｄｕｅ）」という用語は、その親分子から、その末端の１個又は複数の水素原子を取り去って、ＰＯＬＹを付着させるのに適した有機ラジカルを与えたものを意味している。
【００９３】
先にも説明したように、ポリオール、ポリチオール又はポリアミンの残基、（Ｒ−Ｑ）ｑは、本明細書において提供されるマルチアームコンジュゲートのための、枝分かれの基本を形成するものであって、相当するポリオール、ポリチオール又はポリアミンに由来している。１つ又は複数の実施態様においては、その相当するポリオール、ポリチオール、又はポリアミンは、それぞれ、ポリマーを付着させるのに利用することができる、少なくとも３個のヒドロキシル基、チオール基、又はアミノ基を担持している。「ポリオール（ｐｏｌｙｏｌ）」は、３個以上のヒドロキシル基を含む分子である。「ポリチオール（ｐｏｌｙｔｈｉｏｌ）」は、３個以上のチオール基を含む分子である。「ポリアミン（ｐｏｌｙａｍｉｎｅ）」は、３個以上のアミノ基を含む分子である。
【００９４】
１つ又は複数の実施態様においては、そのポリオール、ポリアミン、又はポリチオールには、典型的には、それぞれ、３〜約２５個のヒドロキシル基、又はアミノ基、又はチオール基、例えばそれぞれ３〜約１０個（即ち、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個）のヒドロキシル基、アミノ基、又はチオール基、好ましくはそれぞれ、３〜約８個（即ち、３、４、５、６、７、又は８個）のヒドロキシル基、アミノ基、又はチオール基が含まれる。１つ又は複数の実施態様においては、それぞれのヒドロキシル基、チオール基、又はアミノ基の間の原子の数は、変化するであろうが、それぞれのヒドロキシル基、チオール基、又はアミノ基の間に、約１〜約２０個（例えば、１〜約５個）の、間に挟まる原子例えば炭素原子の長さが、一例として挙げられる。間に挟まるコア原子とその長さについて言えば、−ＣＨ２−は、１個の介在原子の長さと考えられるし、−ＣＨ２ＣＨ２−は、２個の原子の長さと考えられる。
【００９５】
ポリオール及びポリアミンの例では、それぞれ、（ラジカル）−（ＯＨ）ｑ及び（ラジカル）−（ＮＨ２）ｑ構造を有しているが、ここで（ラジカル）は、有機含有ラジカルに相当し、ｑは、３〜約５０の正の整数である。先に述べたように、式Ｉにおける変数「Ｑ」は、Ｒと組み合わさって、典型的には、本明細書に記載されたようなコアの有機ラジカルの残基を表しているということに、注目されたい。即ち、ポリオール、ポリチオール、及びポリマーアミンと、特に名前で記述したときに、これらの分子は、マルチアームポリマー含有構造の中に取り込まれるより前のそれらの形で参照されている（即ち、それらの親分子として参照されている）。即ち、好ましい有機コア分子を、特に名前で記述したときに、そのコア分子は、例えば、１個又は複数のプロトンを除去した後のそれらのラジカルの形態というよりは、その前駆体の形態で記述されている。そのため、例えば、その有機コアラジカルがペンタエリスリトールから誘導されたとすると、その前駆体ポリオールは、構造Ｃ（ＣＨ２ＯＨ）４を有しているが、その有機コアラジカルは、Ｑと組み合わさって、Ｃ（ＣＨ２Ｏ−）４に相当する（ここで、Ｑは、Ｏである）。従って、例えば、式Ｉのコンジュゲートで、Ｑと組み合わさったＲが、ポリオールの、ペンタエリスリトールＣ（ＣＨ２ＯＨ）４の残基であり、Ｑと組み合わさった残基Ｒが、「Ｃ（ＣＨ２Ｏ−）４」に相当して、それにより、マルチアームポリマーコンジュゲートの中の「ｑ個の」ポリマーアームのそれぞれが、ペンタエリスリトールコア即ち残基のそれぞれの酸素原子から伸びていることになるであろう。
【００９６】
ポリオールの例としては、１〜１０個の炭素原子及び３〜１０個のヒドロキシル基を有する脂肪族ポリオール、例えば、トリヒドロキシアルカン、テトラヒドロキシアルカン、ポリヒドロキシアルキルエーテル、ポリヒドロキシアルキルポリエーテルなどが挙げられる。脂環式ポリオールとしては、以下のような、直鎖状又は閉環糖類、及び糖アルコールが挙げられる：マンニトール、ソルビトール、イノシトール、キシリトール、クエブラキトール、トレイトール、アラビトール、エリスリトール、アドニトール、ズルシトール、ファコース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、ラムノース、ガラクトース、グルコース、フルクトース、ソルボース、マンノース、ピラノース、アルトロース、タロース、タギトース、ピラノシド、スクロース、ラクトース、マルトースなど。脂肪族ポリオールの追加の例としては、グルコース、リボース、マンノース、ガラクトース、及び関連の立体異性体の誘導体が挙げられる。芳香族ポリオールを使用することも可能であり、例えば以下のものが挙げられる：１，１，１−トリス（４’−ヒドロキシフェニル）アルカン、例えば１，１，１−トリス（４−ヒドロキシフェニル）エタン、２，６−ビス（ヒドロキシアルキル）クレゾールなど。使用することが可能なその他のコアポリオールとしては、以下のものが挙げられる：ポリヒドロキシクラウンエーテル、シクロデキストリン、デキストリン、及びその他の炭水化物（例えば、単糖類、オリゴサッカライド、及び多糖類、デンプン、並びにアミラーゼ）。
【００９７】
ポリオールの例としては、以下のものが挙げられる：グリセロール、トリメチロールプロパン、ペンタエリスリトール、ジペンタエリスリトール、トリペンタエリスリトール、グリセロールのエトキシル化した形、トリメチロールプロパン、ペンタエリスリトール、ジペンタエリスリトール、トリペンタエリスリトール。さらに、好ましいのは、還元糖類例えば、ソルビトール及びグリセロール、オリゴマー例えば、ジグリセロール、トリグリセロール、ヘキサグリセロールなどである。２１個の利用可能なヒドロキシル基を有している、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを使用して、２１本アームのポリマーを合成することができる。それらに加えて、平均して２４個のヒドロキシル基を有するポリグリセロールもまた、ポリオールの例として挙げることができる。
【００９８】
ポリアミンの例としては、以下のものが挙げられる：脂肪族ポリアミン例えば、ジエチレントリアミン、Ｎ，Ｎ’，Ｎ”−トリメチルジエチレントリアミン、ペンタメチルジエチレントリアミン、トリエチレンテトラアミン、テトラエチレンペンタアミン、ペンタエチレンヘキサアミン、ジプロピレントリアミン、トリプロピレンテトラアミン、ビス−（３−アミノプロピル）−アミン、ビス−（３−アミノプロピル）−メチルアミン、及びＮ，Ｎ−ジメチル−ジプロピレン−トリアミン。使用することが可能な天然由来のポリアミンとしては、プトレッシン、スペルミジン、及びスペルミンが挙げられる。使用するのに適した、多くの好適なペンタアミン、テトラアミン、オリゴアミン、及びペンタアミジン類似体が、Ｂａｃｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，４６（１）（２００２）：５５〜６１に記載されている（参照することにより、本明細書に取り入れたものとする）。
【００９９】
以下に示したのは、ポリオールの残基に相当する、説明のための構造である（それぞれの構造は、対応するヒドロキシル基から誘導された酸素原子（「Ｏ」）を用いて示されているが、それぞれポリチオール又はポリアミンの相当する残基を示すには、それぞれの「Ｏ」を、硫黄（「Ｓ」）又はＮＨと置きかえることが可能である）。ここで注意すべきは、以下で示す残基は、以下に示した酸素原子（又はその他の適切なヘテロ原子）の数に相当する数のアームを有するマルチアームポリマーコンジュゲートを得るための、Ｑと組み合わさったＲに相当する、式Ｉのコンジュゲートの観点から理解するということである。
【化２】
2020518610.tif 000003
式中、ｍは、０〜４０の正の整数［例えば、０〜１０、例えば、０〜５（即ち、０、１、２、３、４、５その他）］である。
【０１００】
マルチアームポリマーＴＬＲ７／８作動薬コンジュゲートには、水溶性の、非ペプチド性ポリマーが含まれる。広く各種のポリマーを使用することが可能であり、本明細書において提供される構造は、水溶性のポリマーのタイプ（例えば、ポリエチレンオキシドか、ポリオキサゾリンか）又はサイズ（例えば、サイズが、２〜４，０００個のモノマー）に関する限定を受けるものではない。
【０１０１】
タイプに関しては、その水溶性の、非ペプチド性ポリマーは、モノマーの一連の繰り返しと理解するべきであるが、ここで、そのモノマーのタイプが、その水溶性の、非ペプチド性ポリマーのタイプを規定している。モノマーの例としては、以下のものが挙げられるが、これらの限定される訳ではない：アルキレンオキシド、例えばエチレンオキシド又はプロピレンオキシド；オレフィン系アルコール、例えばビニルアルコール、１−プロペノール又は２−プロペノール；ビニルピロリドン；ヒドロキシアルキルメタクリルアミド及びヒドロキシアルキルメタクリレート（ここで、それぞれの場合において、アルキルは、好ましくはメチルである）；α−ヒドロキシ酸、例えば乳酸又はグリコール酸；ホスファゼン、オキサゾリン、炭水化物、例えば単糖類、アルジトール例えば、マンニトール；並びにＮ−アクリロイルモルホリン。１つ又は複数の実施態様においては、その水溶性の、非ペプチド性ポリマーが、この群から選択される２種のモノマーからのコポリマーであるか、又はより好ましくは、この群から選択される１種のモノマーからのホモポリマーである。コポリマーに関して言えば、それにはブロックコポリマーも含まれるが、コポリマーの中の２種のモノマーのタイプが、同一のモノマータイプ、例えば、２種のアルキレンオキシド、例えば、エチレンオキシドとプロピレンオキシドであってもよい。
【０１０２】
サイズに関しては、その水溶性の、非ペプチド性ポリマーは、比較的小さくてもよいし、或いは、その水溶性の、非ペプチド性ポリマーが比較的大きくてもよい。
【０１０３】
式ＩのＰＯＬＹ、即ちそれぞれのポリマーアームに関連して言えば、比較的小さな水溶性の、非ペプチド性ポリマーが存在しているような実施態様においては、分子量の例としては、次の値が挙げられる：約２０００ダルトン未満；約１５００ダルトン未満；約１４５０ダルトン未満；約１４００ダルトン未満；約１３５０ダルトン未満；約１３００ダルトン未満；約１２５０ダルトン未満；約１２００ダルトン未満；約１１５０ダルトン未満；約１１００ダルトン未満；約１０５０ダルトン未満；約１０００ダルトン未満；約９５０ダルトン未満；約９００ダルトン未満；約８５０ダルトン未満；約８００ダルトン未満；約７５０ダルトン未満；約７００ダルトン未満；約６５０ダルトン未満；約６００ダルトン未満；約５５０ダルトン未満；約５００ダルトン未満；約４５０ダルトン未満；約４００ダルトン未満；約３５０ダルトン未満；約３００ダルトン未満；約２５０ダルトン未満；約２００ダルトン未満；そして約１００ダルトン未満。比較的小さな水溶性の、非ペプチド性ポリマーでの範囲の例としては、次の範囲が挙げられる：約１００〜約１４００ダルトン；約１００〜約１２００ダルトン；約１００〜約８００ダルトン；約１００〜約５００ダルトン；約１００〜約４００ダルトン；約２００〜約５００ダルトン；約２００〜約４００ダルトン；約７５〜１０００ダルトン；及び約７５〜約７５０ダルトン。
【０１０４】
比較的小さな水溶性の、非ペプチド性ポリマー（「ＰＯＬＹ」）では、モノマーの数は、典型的には、次の範囲の１つ又は複数の範囲に入る：１〜約３０（両端を含む）の間；約２〜約２５の間；約２〜約２０の間；約２〜約１５の間；約２〜約１２の間；約２〜約１０の間。ある種の例においては、そのポリマー（及びそれに相当するコンジュゲート）の中で、直列になっているモノマーの数は、１、２、３、４、５、６、７、又は８の内の１つである。追加の実施態様においては、そのポリマー（及びそれに相当するコンジュゲート）には、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０個のモノマーが含まれる。なおもさらなる実施態様においては、それぞれのポリマー「アーム」の中のポリマー部分（及びそれに相当するコンジュゲート）は、直列に、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０個のモノマーを有している。従って、例えば、その水溶性の、非ペプチド性ポリマーアームが、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−を含んでいる場合、「ｎ」は整数であり、いくつかの実施態様においては、以下の数から選択される：１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、及び３０。そして、次の範囲の１つ又は複数の中に入ることができる：約１〜約２５の間；約１〜約２０の間；約１〜約１５の間；約１〜約１２の間；約１〜約１０の間。
【０１０５】
コンジュゲートの中の水溶性の、非ペプチド性ポリマー全体の分子量が、比較的大きい場合（例えば、２，０００ダルトンより大）、その全体の分子量は、２，０００ダルトン〜約１５０，０００ダルトンの範囲内に入ることができる。しかしながら、範囲の例としては、次の範囲の分子量が挙げられる：約３，０００ダルトン〜約１２０，０００ダルトンの範囲；約５，０００ダルトン〜約１１０，０００ダルトンの範囲；５，０００ダルトンより大から〜約１００，０００ダルトンの範囲内、約６，０００ダルトン〜約９０，０００ダルトンの範囲、約１０，０００ダルトン〜約８５，０００ダルトンの範囲、１０，０００ダルトンより大から〜約８５，０００ダルトンの範囲、約２０，０００ダルトン〜約８５，０００ダルトンの範囲、約５３，０００ダルトン〜約８５，０００ダルトンの範囲、約２５，０００ダルトン〜約１２０，０００ダルトンの範囲、約２９，０００ダルトン〜約１２０，０００ダルトンの範囲、約３５，０００ダルトン〜約１２０，０００ダルトンの範囲、そして約４０，０００ダルトン〜約１２０，０００ダルトンの範囲。
【０１０６】
式Ｉの中のポリマーアーム「ＰＯＬＹ」のそれぞれに関連する比較的大きな水溶性の、非ペプチド性ポリマーの分子量の例としては、次のものが挙げられる：約５００ダルトン、約７５０ダルトン、約１，０００ダルトン、約１５００ダルトン、約２，０００ダルトン、約２，２００ダルトン、約２，５００ダルトン、約３，０００ダルトン、約４，０００ダルトン、約４，４００ダルトン、約４，５００ダルトン、約５，０００ダルトン、約５，５００ダルトン、約６，０００ダルトン、約７，０００ダルトン、約７，５００ダルトン、約８，０００ダルトン、約９，０００ダルトン、約１０，０００ダルトン、約１１，０００ダルトン、約１２，０００ダルトン、約１３，０００ダルトン、約１４，０００ダルトン、約１５，０００ダルトン、及び約２０，０００ダルトン。
【０１０７】
マルチアームコンジュゲートのポリマー部分全体に関連する、比較的大きな水溶性の、非ペプチド性ポリマーの分子量の例としては、例えば、次のものが挙げられる：約２０，０００ダルトン、２２，５００ダルトン、約２５，０００ダルトン、約３０，０００ダルトン、約３５，０００ダルトン、約４０，０００ダルトン、約４５，０００ダルトン、約５０，０００ダルトン、約５５，０００ダルトン、約６０，０００ダルトン、約６５，０００ダルトン、約７０，０００ダルトン、及び約７５，０００ダルトン。上述のいずれかの合計分子量を有する水溶性の、非ペプチド性ポリマーの分岐状のタイプのものも、ポリマーアームのそれぞれにおいて使用することが可能で、多重分岐のコンジュゲートで得られる。
【０１０８】
従って、使用される水溶性の、非ペプチド性ポリマーが比較的に小さいか、或いは大きいかには関係なく、その水溶性の、非ペプチド性ポリマーがポリ（エチレンオキシド）の場合には、そのポリマーには、多くの数の（ＯＣＨ２ＣＨ２）モノマー［或いは、（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）モノマー、ＰＥＧの定義の仕方に依存する］が含まれるであろう。本明細書の記述を通して、繰り返し単位の数は、「（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ」における、下付文字「ｎ」によって認識される。従って、（ｎ）の値は、典型的には、次の範囲の１つ又は複数の中に入る：２〜約３４００、約１００〜約２３００、約１００〜約２２７０、約１３６〜約２０５０、約２２５〜約１９３０、約４５０〜約１９３０、約１２００〜約１９３０、約５６８〜約２７２７、約６６０〜約２７３０、約７９５〜約２７３０、約７９５〜約２７３０、約９０９〜約２７３０、及び約１，２００〜約１，９００。分子量が公知であるようなポリマーなら、いかなるものであっても、そのポリマーの全重量平均分子量を、その繰り返しモノマーの分子量で割り算することによって、繰り返し単位の数（即ち、「ｎ」）を求めることができる。
【０１０９】
マルチアームの水溶性の、非ペプチド性ポリマーに関しては、これらのポリマーは、典型的には、３本以上の、識別可能な水溶性の、非ペプチド性ポリマーアーム又はセグメントを含んでいる。他にも利点はあるものの、マルチアームの水溶性の、非ペプチド性ポリマーは、それぞれのアームが、ＴＬＲ７／８作動薬に対して共有結合的な結合をする性能を有しているので、例えば、それに付着した単一のＴＬＲ７／８作動薬を有する直鎖状のポリマーに比較して、より大きな薬物的特性を与える可能性を有している。１つ以上の好ましい実施形態において、マルチアーム水溶性ポリマーは、４つのポリマーアーム、例えば、それぞれＸｒを介してＴＬＲ７／８作動薬に結合したＰＥＧアームを有する。
【０１１０】
式Ｉに関連して、一般的には、ＰＯＬＹをＴＬＲ７／８作動薬に共有結合的に結合している結合含有スペーサ部分（ｌｉｎｋａｇｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｓｐａｃｅｒ  ｍｏｉｅｔｙ）が、生物学的に適切なｐＨで、加水分解的及び／又は酵素的に、安定であったり、或いは放出可能であったりすることができる。即ち、いくつかの実施態様においては、Ｘｒが、加水分解的に安定な結合である。さらにいくつかの他の実施態様においては、Ｘｒが、放出可能な結合を含んでいる。
【０１１１】
先に記述したように、安定な結合というのは、患者に投薬した後で、インビボでは、明らかな解離を起こさないものである。この点に関しては、安定な結合は当業者には公知である。それに加えて、ある結合が、本明細書において提供されるコンジュゲートに関連して、安定な結合として役立つかどうかは、実験を通して試験することができる（例えば、提案された安定な結合を有するコンジュゲートを患者に投与し、解離の指標を得るために一定時間おきに採血して、例えば、クロマトグラフィーその他適切な方法を用いて試験する）。
【０１１２】
マルチアームコンジュゲートのいくつかの実施態様においては、その結合含有スペーサ部分に、ＴＬＲ７／８作動薬と水溶性の、非ペプチド性ポリマーとの間に挟み込ませた放出可能な結合が含まれる。従って、放出可能な結合とは、患者に投与した後、インビボで解離し、それにより、そのポリマーアームから、ＴＬＲ７／８作動薬化合物（又は、例えば小さな分子標識を備えた、それの少し変性された形）が放出されるような結合である。この点に関しては、放出可能な結合は当業者には公知である。それに加えて、ある結合が、本明細書において提供されるマルチアームコンジュゲートに関連して、本来的に放出可能であるかどうかは、実験を通して試験することができる（例えば、提案された放出可能な結合を有するコンジュゲートを患者に投与し、解離の指標を得るために一定時間おきに採血して、例えば、クロマトグラフィーその他適切な方法を用いて試験する）。いくつかの好ましい実施態様においては、ＴＬＲ７／８作動薬のマルチアームポリマーコンジュゲートには、放出可能な結合が含まれる、即ち、Ｘｒに放出可能な結合が含まれる。
【０１１３】
例えば、ＴＬＲ７／８作動薬のマルチアームポリマーコンジュゲートの中に含まれている結合基の放出可能特性の評価は、インビトロで、各種のタイムポイントで採取したサンプルについて、人からのヘパリン化したプール血漿（ｐＨ、７．２〜７．４）を用いて、コンジュゲートサンプルを３７℃でインキュベーションしてから、決めることができるが、この場合、サンプルは直ちに凍結し、後に、例えば、各種適切な検出及び定量方法、例えばＬＣ−ＭＳを使用して、サンプルの分析及び定量を実施する。次いで、みかけの変換半減期（ｔ１／２，ａｐｐ）を、コンジュゲートの、その最初の名目インキュベーション濃度からの変換が、ＴＬＲ７／８作動薬の放出のみに起因するという仮定に基づいて計算するが、ここで、約３００時間以下のｔ１／２であれば、放出可能な結合又は放出可能なコンジュゲートであることの指標であると考えることができる。
【０１１４】
本明細書において提供されるコンジュゲートに関連して使用される放出可能な結合の例としては、以下のものが挙げられるが、これらに限定される訳ではない：アミド、チオエーテル、カルバメート、エステル、カーボネート、尿素、及び酵素で開裂させることが可能なペプチド結合（ＴＬＲ７／８作動薬化合物の構造及びリンカー構造全体に依存する）。場合によっては、ある結合又は結合（ｂｏｎｄ  ｏｒ  ｌｉｎｋａｇｅ）が、単独で考えると、一般的には、本来的に「放出可能（ｒｅｌｅａｓａｂｌｅ）」又は「解離可能（ｃｌｅａｖａｂｌｅ）」であるとは考えられないこともあるが、しかしながら、それが共有結合的に結合されている分子的実体の構造と組み合わせると、例えば、イミダゾキノリン構造を有するＴＬＲ７／８作動薬化合物のような場合、そのような結合は、例えばベータ−脱離、アミド加水分解などのような特殊な放出メカニズムのために、放出可能となり得る。例えば、チオエーテル、アミド、カルバメート、エステル、カーボネート、尿素などは、β−脱離反応又は加水分解を介して解離することができる（酵素の協調の存在下又は非存在下で、例えば、エステルは、そのエステルがエステラーゼにより解離されるかどうかには関係なく、放出可能な結合として機能することができる）。
【０１１５】
放出可能な結合を含むＴＬＲ７／８作動薬のマルチアームポリマーコンジュゲートは、放出の結果が、未変性の親分子の放出となるような場合には、多くの場合プロドラッグとして分類されるが、その理由は、それらが、投与された後で（即ち、生理学的条件下で）、共有結合的に結合されたＴＬＲ７／８作動薬化合物を放出するからである。一般的には、本明細書に記載されたマルチアームポリマーレシキモド（Ｒ−８４８）コンジュゲートには、レシキモドへと放出可能な結合が含まれている。
【０１１６】
酵素で開裂させることが可能なペプチド結合に関しては、そのスペーサ部分には、意図された患者の母集団の中に存在している酵素のための基質として知られている、一連のアミノ酸の１個又は複数を含むことができる。この場合においては、患者に投与すると、そのコンジュゲートの中に含まれている、酵素で開裂させることが可能なペプチド結合の、酵素的に誘発された解離によって、ＴＬＲ７／８作動薬（又は、解離によって形成される、比較的小さな分子の破片即ち「タグ（ｔａｇ）」を伴うＴＬＲ７／８作動薬）が放出されるであろう。所定の患者の母集団の中で、酵素的解離の影響を受けやすいペプチド結合の例は、例えば、米国特許出願公開第２００５／００７９１５５号明細書に記載されており、実験的に求めることもまた可能である。
【０１１７】
Ｘｒに関連しては、その結合含有スペーサ部分には、いくつかの例示的なアミノ酸、例えばベータ−アラニン、グリシン、Ｌ−アラニン、Ｌ−バリン、ロイシン、ジメチルグリシンなどのいずれかが含まれていてもよい。いくつかの実施態様においては、Ｘｒには、前述のアミノ酸のいずれか１種又は複数に対して、そのアミノ基を介して共有結合的に結合されたカルボキシメチル（「ＣＭ」）基、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−が含まれるが、ここで、その末端のカルボキシ基が、そのＴＬＲ７／８作動薬のアミノ基に共有結合的に結合されて、アミド結合を与えており、それが、いくつかの実施態様においては、放出可能となっている。
【０１１８】
いくつかの実施態様においては、その結合含有スペーサ部分の「Ｘｒ」が、式ＩＩで表される：
〜［Ｘ１］ａ−［Ｌｒ］ｂ−Ｘ２〜
（式ＩＩ）
ここで、「ａ」は、ゼロ又は１であり（即ち、ゼロは、「Ｘ１」が存在しないことを表し、そして１は、それが存在していることを示している）；「ｂ」は、ゼロ又は１であり（即ち、ゼロは、「Ｌｒ」が存在しないことを表し、そして１は、それが存在していることを示している）；Ｘ１が存在している場合には、それがスペーサであり；Ｌｒが存在している場合には、それが結合基であり；そして、Ｘ２は、ＴＬＲ７／８作動薬に共有結合的に直接に結合された官能基である。
【０１１９】
ａ及びｂがいずれもゼロであるような、式ＩＩの場合においては、その結合含有スペーサがＸ２、マルチアームポリマーの残りの部分（例えば、ポリマーアーム、ＰＯＬＹ）に対してＴＬＲ７／８作動薬を共有結合的に結合している官能基で構成されているということは、理解されるであろう。そのような場合においては、その結合含有スペーサには、官能基Ｘ２のみが含まれており、ＴＬＲ７／８作動薬と水溶性の、非ペプチド性ポリマーとの間には、他の原子は一切含まれない。典型的には、Ｘ２には、それに対してマルチアームポリマーが共有結合的に結合されている、未変性のＴＬＲ７／８作動薬の単一又は複数の原子が含まれている。例えば、ＴＬＲ７／８作動薬のアミノ基のところで付着が起きているのなら、典型的には、そのアミノ基が、Ｘ２の部分を構成している。
【０１２０】
ａ及びｂのいずれか、又は両方が１であるような、式ＩＩの場合においては、その結合含有スペーサには、Ｘ２を構成しているものとは異なる、１個又は複数の追加の原子が含まれるということは理解されるであろう。Ｘ１及びＬｒの非限定的な例としては、以下のものが挙げられる（右から左へと、左から右への、いずれも考えられる）：−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ２−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）−ＣＨ２−、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、二価のシクロアルキル基、−Ｎ（Ｒ６）−（ここで、Ｒ６は、Ｈ又は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、及び置換されたアリール、並びに前述の１種又は複数の組み合わせからなる群より選択される有機ラジカルである）。さらなるスペーサ及び結合としては、以下のものが挙げられる：アシルアミノ、アシル、アリールオキシ、１〜５（両端を含む）個の炭素原子を含むアルキレンブリッジ、アルキルアミノ、約２〜４（両端を含む）個の炭素原子を有するジアルキルアミノ、ピペリジノ、ピロリジノ、Ｎ−（低級アルキル）−２−ピペリジル、モルホリノ、１−ピペリジニル、４−（低級アルキル）−１−ピペリジニル、４−（ヒドロキシル−低級アルキル）−１−ピペリジニル、４−（メトキシ−低級アルキル）−１−ピペリジニル、フルオレニル、及びグアニジン。本明細書の記述の目的では、しかしながら、一群の原子が、ポリマーセグメントに直に隣接している場合には、それらはスペーサとはみなさず、それらの群の原子は、ポリマーにおけるモノマーと同じであって、そのためその群は、ポリマー鎖の単なる延長を表しているだけのことである。
【０１２１】
スペーサ及び／又は結合が存在している場合には、それらは、典型的には、とは言え必ずという訳ではないが、本来的に直鎖状である。それに加えて、スペーサ及び／又は結合は、典型的には、とは言え必ずという訳ではないが、加水分解的に安定であり、及び／又は、酵素的に安定である。１つ又は複数の実施態様においては、スペーサ又は結合が存在している場合、それらは、約１２原子未満（例えば、約１０原子未満、約８原子未満、及び約５原子未満）の鎖長を有している。特定のスペーサ又は結合の長さの判定に関しては、本明細書においては、長さは、単一の鎖の原子の数と定義される（置換基は数えない）。例えば、次のＲ−ＰＯＬＹ−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−ＴＬＲ７／８作動薬のような尿素結合は、３原子（−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）の鎖長を有していると考える。
【０１２２】
式ＩＩに関連して、Ｘ１を存在させる場合、その特定の例としては、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−（本明細書においては、カルボキシメチルと呼ばれる）が挙げられる。
【０１２３】
Ｘ２の例としては、以下のものが挙げられる：−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ここで、ＮＨは、ＴＬＲ７／８作動薬への付着点であって、共有結合的な結合をさせる前の未変性のＴＬＲ作動薬の一部を形成している）；−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ここで、ＮＨは、ＴＬＲ７／８作動薬への付着点であって、共有結合的な結合をさせる前の未変性のＴＬＲ作動薬の一部を形成している）；−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）（ここで、そのカルボニル炭素は、ＴＬＲ７／８作動薬への付着点を示し、共有結合的な結合をさせる前の未変性のＴＬＲ作動薬の一部を形成している）、並びに−ＮＨ（ここで、その窒素原子は、ＴＬＲ７／８作動薬への付着点を示し、共有結合的な結合をさせる前の未変性のＴＬＲ作動薬の一部を形成している）。
【０１２４】
Ｌｒの例としては、以下のものが挙げられる：−（ＣＲｘＲｙ）ｚ−、及び−ＮＨ（ＣＲｘＲｙ）ｚ−（ここでそれぞれのＲｘ及びＲｙは、独立して、水素、低級アルキル、ハロ（Ｘ）、及びハロ−置換された低級アルキルから選択され、そしてｚは、１〜６の整数、例えば、１、２、３、４、５、及び６から選択される）。低級アルキルの例としては、以下のものが挙げられる：メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ペンチル、及びヘキシル。ハロ基の例は、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨードである。Ｌｒ基を説明する例としては、例えば、以下のものが挙げられる：−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨＦ−、−ＣＨＣＨ３−、−ＣＨＣＨ（ＣＨ３）２−、−ＣＨＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２−、−Ｃ（ＣＨ３）２−、−ＮＨＣＨ２−、−ＮＨＣＨ２ＣＨ２−、−ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−−ＮＨＣＨ２ＣＨＦ−、−ＮＨＣＨＣＨ３−、−ＮＨＣＨＣＨ（ＣＨ３）２−、−ＮＨＣＨＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２−、及び−ＮＨＣ（ＣＨ３）２−。さらなる構造も、本明細書において提供される。
【０１２５】
１つ以上の実施形態において、ＴＬＲ７／８作動薬、例えば、マルチアーム水溶性ポリマーＴＬＲ作動薬コンジュゲートである長時間作用型ＴＬＲ７／８作動薬は、約３〜約５０個のポリマーアームを有し、より典型的には、水溶性ポリマー部分が安定的に又は放出可能に共有結合している中央のコア分子（例えば、典型的には、ポリオール、ポリチオール又はポリアミン）から延びる約３〜約１０個のポリマーアームを有することになる（例えば、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の水溶性ポリマーアームを有することになる）。典型的には、中央のコアから延びる水溶性ポリマーアームは、中央のコアに対して安定的に共有結合している。例示的なポリオールコア分子としては、例えば、グリセロール、トリメチロールプロパン、ソルビトール又はペンタエリスリトールなどの還元糖、及びヘキサグリセロールなどのグリセロールオリゴマーが挙げられる。典型的には、必ずしもそうではないが、マルチアーム水溶性ポリマーコンジュゲートは、各ポリマーアームの末端で共有結合したＴＬＲ作動薬を有することになる。
【０１２６】
ここで話題を、式ＩのＴＬＲ７／８作動薬に転じると、ＴＬＲ７／８作動薬は、トル様受容体７及び／又はトル様受容体８に対する作動薬である、各種の化合物である。ＴＬＲ７／８作動薬が、小分子の作動薬であるのが好ましい。構造的な分類の例としては、グアノシン含有化合物及びイミダゾキノリンが挙げられる。例示的なＴＬＲ作動薬としては、限定されるものではないが、例えば、ＴＬＲ−７又はＴＬＲ−８作動薬が挙げられる。
【０１２７】
代表的なＴＬＲ作動薬としては、例えば、テルラトリモド（３Ｍ−０５２、３Ｍ；ＭＥＤＩ−９７９７、ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、レシキモド（Ｒ８４８；Ｓ−２８４６３、３Ｍから入手可能）、イミキモド（Ｒ８３７；Ｓ−２６３０８）、Ｓ−２８６９０（イミダゾキノリン、３Ｍ）、Ｎ−［４−（４−アミノ−２−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）ブチル−］メタンスルホンアミド（３Ｍ−００１、３Ｍ）、（８５２Ａ、３Ｍ；ＰＦ−４８７８６９１、Ｐｆｉｚｅｒ）、ベシミューン（ＴＭＸ−１０１、Ｔｅｌｏｒｍｅｄｉｘ  ＳＡ）、エサトリモド（ＧＳ−９６２０、Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＡＮＡ−７７３（Ａｎａｄｙｓ）、２−（３−（（（３−（６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）プロピル）（３−モルホリノプロピル）アミノ）メチル）フェニル）酢酸メチル（ＡＺＤ８８４８、Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）、ＣＬ０９７、Ｒ８４８の水溶性誘導体（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）、チアゾールキノロン誘導体（ＣＬ０５７；３Ｍ−００２、３Ｍ）、３Ｍ−００３（イミダゾキノリン、３Ｍ）、ＴＭＸ−２０２（Ｔｅｌｏｒｍｅｄｉｘ  ＳＡ）、ＴＭＸ−３０２（Ｔｅｌｏｒｍｅｄｉｘ  ＳＡ）、ＴＭＸ−３０６（Ｔｅｌｏｒｍｅｄｉｘ  ＳＡ）、９−ベンジル−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）アデニン（ＩＶ１３６、Ｐｆｉｚｅｒ）、ＩＶ２０９、３Ｍ−０１１（３Ｍ）、−ブチルアミノ−８−ヒドロキシ−９−（６−メチルピリジン−３−イルメチル）アデニン（ＳＭ−２７６００１）、３−［（６−アミノ−２−ブトキシ−７，８−ジヒドロ−８−オキソ−９Ｈ−プリン−９−イル）メチル］ベンゼン酢酸メチル（ＳＭ−３２４４０５）、（ＳＭ−３６０３２０）、４−アミノ−１−ベンジル−６−トリフルオロメチル−１，３−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−オン（ＰＦ−４１７１４５５、Ｐｆｉｚｅｒ）、ＣｐＧ、ＣｐＲ、ｓｓＲＮＡ、ＢＨＭＡ、２−（３−（（（３−（６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）プロピル）（３−（ジメチルアミノ）プロピル）アミノ）メチル）フェニル）酢酸メチル（ＡＺ１２４４１９７０、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、及び２−（３−（（（３−（６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７Ｈ−プリン−９（８Ｈ）−イル）プロピル）（３−（ジメチルアミノ）プロピル）アミノ）フェニル）酢酸（ＡＺ１２４４３９８８、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）が挙げられる。
【０１２８】
例えば、１つ以上の実施形態において、ＴＬＲ７／８作動薬は、以下のものから選択することができる：４−（（６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）−９Ｈ−プリン−９−イル）−メチル）−Ｎ−（２０−アジド−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサイコシル）ベンズアミド；３−（１−（１−（４−（（６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）−９Ｈ−プリン−９−イル）メチル）フェニル）−１−オキソ−５，８，１１，１４，１７，２０−ヘキサオキサ−２−アザドコサン−２２−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾル−４−イル）プロパン酸；４−（（６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）−９Ｈ−プリン−９−イル）−メチル）−Ｎ−（２０−アミノ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサイコシル）ベンズアミド；４−（（６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）−９Ｈ−プリン−９−イル）メチル）−Ｎ−（３２−アジド−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサ−イル）メチル）−Ｎ−（３２−アジド−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサドトリアコンチル）ベンズアミド；３−（１−（１−（４−（（６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）−９Ｈ−３−（１−（１−（４−（（６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）−９Ｈプリン−９−イル）メチル）フェニル）−１−オキソ−５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２−デカオキサ−２−アザテトラトリアコンタン−３４−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾル−４−イル）−プロパン酸；４−（（６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）−９Ｈ−プリン−９−イル）メチル）−Ｎ−（３２−アミノ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサドトリアコンチル）−ベンズアミド；４−（（６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）−９Ｈ−プリン−９−イル）メチル）−Ｎ−（５９−アミノ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７−ノナデカオキサノナペンタコンチル）ベンズアミド；Ｎ−［４−（４−アミノ−２−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５ｃ］キノリン−１−イル）ブチル］メタンスルホンアミド；［８−（３−（ピロリジン−１−イルメチル）ベンジル）−４−アミノ−２−ブトキシ−７，８−ジヒドロプテリジン−６（５Ｈ）−オン］；［２−（４−（（６−アミノ−２−（２−メトキシエトキシ）−８−オキソ−７Ｈ−プリン−９（８Ｈ）−イル）メチル）ベンズアミド）エチル２，３−ビス（ドデカノイルオキシ）プロピルホスフェート］；［１−（４−（（６−アミノ−２−（２−メトキシエトキシ）−８−オキソ−７Ｈ−プリン−９（８Ｈ）−イル）メチル）フェニル）−１−オキソ−５，８，１１，１４，１７，２０−ヘキサオキサ−２−アザトリコサン−２３−オイック酸］；［９−ベンジル−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）アデニン；メチル２−（３−｛［６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７Ｈ−プリン−９（８Ｈ）−イル］メチル｝フェニル）アセテート、ＳＭ−３２４４０６：２−（３−｛［６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７Ｈ−プリン−９（８Ｈ）−イル］メチル｝フェニル）酢酸；メチル２−（３−（（（３−（６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７Ｈ−プリン−９（８Ｈ）−イル）プロピル）（３−（ジメチルアミノ）プロピル）アミノ）フェニル）アセテート；２−（３−（（（３−（６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７Ｈ−プリン−９（８Ｈ）−イル）プロピル）（３−（ジメチルアミノ）プロピル）アミノ）フェニル）。
【０１２９】
式Ｉのいくつかの特定の実施形態において、ＴＬＲ７／８作動薬は、テルラトリモド（３Ｍ−０５２、３Ｍ；ＭＥＤＩ−９１９７、ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、レシキモド（Ｒ８４８；Ｓ−２８４６３、３Ｍから入手可能）、イミキモド（Ｒ８３７；Ｓ−２６３０８）、Ｓ−２８６９０（イミダゾキノリン、３Ｍ）、Ｎ−［４−（４−アミノ−２−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）ブチル−］メタンスルホンアミド（３Ｍ−００１、８５２Ａ、３Ｍ；ＰＦ−４８７８６９１、Ｐｆｉｚｅｒ）、ベシミューン（ＴＭＸ−１０１、Ｔｅｌｏｒｍｅｄｉｘ  ＳＡ）、ベサトリモド（ＧＳ−９６２０、Ｇｉｌｅａｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＡＮＡ−７７３（Ａｎａｄｙｓ）、２−（３−（（（３−（６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）プロピル）（３−モルホリノプロピル）アミノ）メチル）フェニル）酢酸メチル（ＡＺＤ８８４８、Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）、ＣＬ０９７、Ｒ８４８の水溶性誘導体（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）、３−［（６−アミノ−２−ブトキシ−７，８−ジヒドロ−８−オキソ−９Ｈ−プリン−９−イル）メチル］ベンゼン酢酸メチル（ＳＭ−３２４４０５）、２−（３−（（（３−（６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）プロピル）（３−（ジメチルアミノ）プロピル）アミノ）メチル）フェニル）酢酸メチル（ＡＺ１２４４１９７０、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＧＳＫ２２４５０５３（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＳＺ−１０１、４−［６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）プリン−９−イルメチル］ベンズアルデヒド（ＵＣ−１Ｖ１５０、Ｕ．Ｃ．Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ）、９−ベンジル−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）アデニン（ＳＭ３６０３２０、１Ｖ１３６、Ｐｆｉｚｅｒ）、ＶＴＸ−１４６３及びＶＴＸ−２３３７（ＶｅｎｔｉＲｘ）である。さらにいくつかの他の実施態様においては、そのＴＬＲ７／８作動薬が、（Ｎ−［４−（４−アミノ−２−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５ｃ］キノリン−１−イル）ブチル］メタンスルホンアミド、又は［８−（３−（ピロリジン−１−イルメチル）ベンジル）−４−アミノ−２−ブトキシ−７，８−ジヒドロプテリジン−６（５Ｈ）−オン］である。
【０１３０】
ある種の好ましい実施態様においては、そのＴＬＲ７／８作動薬が、イミダゾキノリン化合物である。イミダゾキノリンの例としては、例えば米国特許第５，３８９，６４０号明細書に記載されているような、例えば、１−置換、２−置換の１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］−キノリン−４−アミン化合物が挙げられる。そのような化合物としては、以下のものが挙げられる：４−アミノ−７−クロロ−アルファ、アルファ−ジメチル−２−エトキシメチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−エタノール；４−アミノ−アルファ，アルファ−ジメチル−２−ヒドロキシメチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−エタノール；４−アミノ−アルファ，アルファ−ジメチル−２−メトキシメチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−エタノール；２−エトキシメチル−１−（３−メトキシプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン；及び１−（２−メトキシエチル）−２−メトキシメチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン。
【０１３１】
１つ又は複数の好ましい実施態様においては、そのＴＬＲ７／８作動薬が、レシキモド（Ｒ−８４８）又はイミキモド（１−イソブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン）、又はそれらの誘導体である。１つ又は複数の特定の実施態様においては、そのＴＬＲ７／８作動薬が、イミキモドである。
【化３】
2020518610.tif 000004
【０１３２】
さらにある種の他の特定の実施態様においては、そのＴＬＲ７／８作動薬が、レシキモドである。
【化４】
2020518610.tif 000005
【０１３３】
ＴＬＲ７／８作動薬のマルチアームポリマーに対する共有結合的結合は、ＴＬＲ７／８作動薬化合物の上に、各種適切な官能基又は原子を付着させることで実施することができる。マルチアームポリマーへの付着に適した官能基の例としては、アミノ、ヒドロキシル、カルボキシ、及びチオールなどが挙げられる。ある種の好ましい実施態様においては、イミキモドに対する共有結合的な結合が、芳香族の−ＮＨ２基で実施される。他の好ましい実施態様においては、レシキモドに対する共有結合的な結合が、芳香族の−ＮＨ２基で実施される。構造の例については、以下において示す。
【０１３４】
本明細書に記載されたコンジュゲートは、各種の方法で調製することが可能であるが、そのような合成例は、以下の実施例で示す。
【０１３５】
実施例において、マルチアームポリマーＴＬＲ７／８作動薬コンジュゲートは、ＴＬＲ７／８作動薬にマルチアーム水溶性非ペプチド性反応性ポリマーを共有結合させることを含む方法によって作製される。多くのＴＬＲ７／８作動薬は、商業的に得ても、当業者に知られる方法によって合成されてもよい。
【０１３６】
ＴＬＲ７／８作動薬のマルチアームポリマーコンジュゲートのいくつかの特徴が好ましく、以下において記述されるそれらの特徴のそれぞれが、個々に、且つ明確に組み合わせとして、考慮されるべきである。いくつかの好ましい実施態様においては、中央のコアから延びているポリマーアームのそれぞれが、同一である。即ち、例えば式Ｉに関連していて言えば、Ｒから延びている、それぞれのＱ、ＰＯＬＹ、Ｘｒ、及びＴＬＲ７／８作動薬が、同じである。ある種の好ましい実施態様においては、ｑが４である。他の好ましい実施態様においては、そのマルチアームポリマーコンジュゲートに、ペンタエリスリトールのコアが含まれる。さらにいくつかのさらなる実施態様においては、そのＴＬＲ７／８作動薬が、レシキモドである。さらにいくつかの追加の実施態様においては、ＰＯＬＹがポリエチレングリコールであり、ＰＯＬＹ−Ｘｒには、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−アミノ酸−が含まれるが、ここでそのアミノ酸は、ベータ−アラニン、グリシン、Ｌ−アラニン、Ｌ−バリン、ロイシン、Ｈ２ＮＣＨ２ＣＨＦＣＯＯＨ、及びジメチルグリシンから選択され、そしてそれらのアミノ酸のアミノ基は、カルボニル基に直接結合されている。前述のさらにいくつかのさらなる実施態様においては、そのアミノ酸がグリシンである。さらにいくつかのさらなる実施態様においては、そのマルチアームポリマーコンジュゲートが化合物６である。
【０１３７】
他の利点の中で、本明細書において提供されるマルチアームポリマーＴＬＲ７／８コンジュゲートによって、例えば、腫瘍部位に対してコンジュゲートを局所投与することが可能になるが、その場合、そのコンジュゲートは、その腫瘍部位に滞留中に、局所的に抗腫瘍免疫を優先的に開始させるのに有効である。マルチアームコンジュゲートの構築が、特定のＴＬＲ７／８作動薬、付着化学反応（ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ  ｃｈｅｍｉｓｉｔｒｙ）、及び投与モードとあいまって、コンジュゲートの、腫瘍の内部での滞留時間がより長くなり、そして腫瘍抗原提示及びＴ細胞刺激を増大させるのに有効となる（即ち、ＣＤ８Ｔ細胞プライミングを向上させる結果となる）、即ち、自然免疫応答を誘発する結果を得るのに有効であり、しかも、活性が局所化されているために、有毒性副作用が最小限に抑えられる。
【０１３８】
先に述べたように特徴を有する代表的なコンジュゲートを、以下に示す。例えば、コンジュゲートが、式ＩＩＩ、又はそれらの薬学的に許容される塩、又はそれらの立体異性体、で定義されるような構造を有していてよい：
【化５】
2020518610.tif 000006
［式中、Ｌは、−（ＣＨ２）ｍ−、−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｍ−，−ＣＨＦ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｍ−、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｍ−、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ３）２）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｍ−、−（ＣＨ２）ｍ−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｍ−、−Ｃ（ＣＨ３）２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｍ−、単結合、又は−ＮＨ−（ＣＨ２）ｍ−であり；それぞれのｍは、独立して、１〜５の整数（両端を含む）であり；それぞれのｎは、独立して、４０〜３５０の整数（両端を含む）であり；Ｒ１は、水素又は−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３であり；そしてＲ２は、水素又はヒドロキシルである］。
【０１３９】
式ＩＩＩの具体的なコンジュゲートにおいては、Ｌは，例えば、以下のものから選択される：−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨＦ−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ３）２）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（ＣＨ３）２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、単結合、及び−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−。
【０１４０】
式ＩＩＩのいくつかの特異的な実施態様を以下に示す。
【０１４１】
例えば、いくつかの実施態様においては、それぞれのｎが、独立して、１００〜２５０の整数（両端を含む）である。
【０１４２】
式ＩＩＩのいくつかのコンジュゲートにおいては、Ｒ１が水素であり、そしてＲ２も水素である。
【０１４３】
１つ以上の実施形態において、ＴＬＲ７／８作動薬は、４つのポリマーアームのそれぞれの末端で安定的に又は放出可能に共有結合しているレシキモド又はイミキモドなどのＴＬＲ作動薬分子を有する、２０，０００ダルトンの４−ａｒｍ−ペンタエリトリトリル系ポリエチレングリコールコンジュゲートである。さらに１つ以上の実施形態において、ＴＬＲ７／８作動薬分子はレシキモドである。
【０１４４】
ある実施形態において、長時間作用型ＴＬＲ作動薬は、４つのポリマーアームのそれぞれの末端で放出可能に共有結合しているレシキモド（Ｒ８４８）を有する４−ａｒｍ−ペンタエリトリトリル系ポリエチレングリコールコンジュゲートであり、以下の構造を有する。
【化６】
2020518610.tif 000007
【０１４５】
前述のＴＬＲ作動薬マルチアームポリマーコンジュゲートは、本明細書で「４−ａｒｍ−ＰＥＧ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８」と称され、Ｎ−は、ＴＬＲ作動薬分子Ｒ８４８のアミノ基への結合を示し；その調製は実施例３において記載される。
【０１４６】
特定のマルチアームコンジュゲートは、以下のような構造を有している。即ち、いくつかの実施態様においては、マルチアームポリマーコンジュゲート（例えば、長時間作用型ＴＬＲ作動薬）が、化合物１〜１０又は１２〜１６、又はそれらの薬学的に許容される塩若しくは立体異性体のいずれかの構造を有している：
【化７】
2020518610.tif 000008
【化８】
2020518610.tif 000009
【化９】
2020518610.tif 000010
【０１４７】
ある実施形態において、ＴＬＲ作動薬は、下に示される構造を有する化合物１１であり、ｎは、本明細書で記載される繰り返し単位の任意の好適な数である。
【化１０】
2020518610.tif 000011
【０１４８】
さらにいくつかの他の好ましい実施形態において、ＴＬＲ作動薬化合物は、下に示される構造を有する化合物６であり、ｎは、本明細書で記載される繰り返し単位の任意の好適な数である。
【化１１】
2020518610.tif 000012
【０１４９】
化合物１〜１０又は１２〜１６のいくつかの実施形態において、化合物の全体のマルチアームＰＥＧ部分は、約１０，０００ダルトンの重量平均分子量を有する。化合物１〜１０又は１２〜１６のさらにいくつかの他の実施形態において、化合物の全体のマルチアームＰＥＧ部分は、約２０，０００ダルトンの重量平均分子量を有する。化合物１〜１０又は１２〜１６のさらにいくつかの他の実施形態において、化合物の全体のマルチアームＰＥＧ部分は、約３０，０００ダルトンの重量平均分子量を有する。化合物１〜１０又は１２〜１６のさらにいくつかの追加の実施形態において、化合物の全体のマルチアームＰＥＧ部分は、約４０，０００ダルトンの重量平均分子量を有する。化合物１〜１０又は１２〜１６のいくつかの好ましい実施形態において、化合物の全体のマルチアームＰＥＧ部分は、約２０，０００ダルトンの重量平均分子量を有する。
【０１５０】
いくつかの実施態様においては、化学的な変換（即ち、ＴＬＲ７／８作動薬に対する共有結合的なカップリング）が不完全だったり、収率が１００％未満になったり、及び／又は化学合成の際に日常的に遭遇するその他の避けがたい複雑化が起きたりするので、マルチアームポリマーコンジュゲートを含む例示組成物には、「ｑ個」の数のポリマーアームのそれぞれに対して付着したＴＬＲ７／８作動薬化合物が、理想よりは少ない数しか含まれないことになるであろう。そのような数は、典型的には、ポリマー担持度（ｄｅｇｒｅｅ  ｏｆ  ｐｏｌｙｍｅｒ  ｌｏａｄｉｎｇ）と呼ばれていて、この場合、担持度１００％とは、「ｑ個」のポリマーアームのそれぞれの末端にＴＬＲ７／８作動薬化合物が共有結合的に結合されているような、完全な担持を表している。例えば、一例として、「４−ａｒｍ−ＰＥＧ」コンジュゲートは、４本アームのコンジュゲートを含む混合物として特徴付けることが可能であるが、ここで、その組成物の中の４本アームコンジュゲートの少なくとも５０面積パーセント（ａ／ａ、ＨＰＬＣによる測定）が、ＴＬＲ７／８作動薬に対してコンジュゲートされた４本のアームのそれぞれを有している。「４−ａｒｍ−ＰＥＧ」コンジュゲートの例を含むさらなる組成物の例では、４本アームコンジュゲートを含む組成物を特徴とすることができるが、ここで、その組成物の４本アームコンジュゲートの、少なくとも６５〜９０、７０〜８５、又は７０〜７５面積パーセント（ａ／ａ、ＨＰＬＣによる測定）が、ＴＬＲ７／８作動薬にコンジュゲートされた４本のアームのそれぞれを有している。
【０１５１】
それらのコンジュゲートは、それ自体で、又は薬学的に許容される塩の形態で投与することが可能であるが、本明細書の中で、いずれか１つ又は複数のマルチアームポリマーコンジュゲートを参照した場合には、その薬学的に許容される塩が含まれることが意図されている。本明細書に記載されたようなコンジュゲートの塩を使用するならば、それは、薬理学的及び薬学的、いずれでも許容されるものでなければならない。そのような薬理学的及び薬学的に許容される塩は、文献に詳述されている標準的な方法を用いて、コンジュゲートを、有機酸又は無機酸と反応させることによって調製することができる。有用な塩の例としては、以下の酸を用いて調製したものが挙げられるが、それらに限定される訳ではない：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、マロン酸、コハク酸、ナフタレン−２−スルホン酸、及びベンゼンスルホン酸、トリフルオロ酢酸など。さらに、薬学的に許容される塩は、カルボン酸基のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の塩、例えば、ナトリウム、カリウム、又はカルシウム塩として調製することができる。
【０１５２】
コンジュゲート、特にコンジュゲートのＴＬＲ７／８作動薬の部分には、１個又は複数のキラル中心が含まれていてもよい。それらの中に含まれているそれぞれのキラル中心については、当該の（ｉｎｓｔａｎｔ）化合物及び構造物には、それぞれの光学異性体、さらには光学活性な形態の各種の組み合わせ又は比率のもの、例えば、単一の光学活性な鏡像異性体、又は複数の鏡像異性体の各種組み合わせ又は比率のもの（例えば、スカレミック混合物及びラセミ混合物）が包含されることが意図されている。
【０１５３】
本明細書において提供されるのはさらに、本明細書において記載されるようなＴＬＲ７／８作動薬のマルチアームポリマーコンジュゲートを含む医薬製剤及び組成物である。１つ以上の実施形態において、マルチアームＴＬＲ７／８作動薬コンジュゲートそのものは、固体の形態（例えば、沈殿物）にあるであろう。
【０１５４】
ＴＬＲ作動薬は、任意の好適な投与経路、例えば皮内、静脈内、皮下、節内、リンパ管内、腫瘍内投与などにより投与することができる。本方法の１つ以上の特定の実施形態において、ＴＬＲ作動薬は、例えば、対象における自然免疫を活性化するのに有効な量で注射により腫瘍に直接投与される。
【０１５５】
長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬
本明細書に記載される方法、製剤、系、キット、組成物、併用などはさらに、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の投与を含み得る。これに関連して、本開示は、その作動薬が同じインビトロモデルにおけるＩＬ−２Ｒαβへの結合親和性よりも少なくとも５倍高い（より好ましくは少なくとも１０倍高い）ＩＬ−２Ｒβへのインビトロ結合親和性を呈し、ＩＬ−２よりも少なくとも１０倍有効なインビボ半減期（ＩＬ−２のインビボ消失に基づく半減期）を有する限り、いかなる特定の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬にも限定されない。例として、ＩＬ−２に対する結合親和性を基準として計測することが可能である。これに関連して、実施例１に言及される例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬であるマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２（本明細書で「ＲＳＬＡＩＬ−２」としても称される）は、ＩＬ−２と比べてＩＬ−２Ｒαβへの親和性において約６０倍の低下を呈するが、ＩＬ−２Ｒβへの親和性はＩＬ−２と比べて約５倍の低下に過ぎない。
【０１５６】
長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の非限定的な例が国際公開第２０１２／０６５０８６号パンフレット及び国際公開第２０１５／１２５１５９号パンフレットに記載されている。例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は本願の実施例１に言及されるマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２（「ＲＳＬＡＩＬ−２」）であり、放出可能ＰＥＧは下記のとおりの２，７，９置換フルオレンをベースとし、ポリ（エチレングリコール）鎖は、フルオレン環上の２及び７位からアミド結合（フルオレン−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）、及びフルオレン環の９位にメチレン基（−ＣＨ２−）により結合しているカルバメート窒素原子への結合によるＩＬ−２（インターロイキン−２）への放出可能な共有結合により延在している。これに関連して、ＲＳＬＡＩＬ−２は、以下の式：
【化１２】
2020518610.tif 000013
（式中、ＩＬ−２はインターロイキン−２（例えば、アルデスロイキンなど）である）に包含される、その薬学的に許容可能な塩を含む化合物を含む組成物であり、「ｎ」は独立して約３〜約４０００の整数である。ＲＳＬＡＩＬ−２はまた、２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２とも称される。
【０１５７】
１つ以上の実施形態において、上記の２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２組成物は、１０％以下（モル量基準）、好ましくは５％以下（モル量基準）の以下の式
【化１３】
2020518610.tif 000014
（式中、ＩＬはインターロイキン−２であり、（ｎ）（ＩＬ−２に結合しているポリエチレングリコール部分の数を指す）は、１、２、３、７及び＞７からなる群から選択される整数である）及びその薬学的に許容可能な塩によって包含される化合物を含有する。
【０１５８】
さらにいくつかの別の実施形態において、ＲＳＬＡＩＬ−２はＩＬ−２（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）６ａｖｇインターロイキン−２とも称される）に結合している平均約６つのポリエチレングリコール部分を有する。いくつかの別の実施形態において、ＲＳＬＡＩＬ−２は、一般に、不活性プロドラッグ、即ち投与時に不活性であると見なされ、インビボでのポリエチレングリコール部分の徐放により、腫瘍部位における持続濃度を達成するために有効なインターロイキン−２の活性コンジュゲート形態を提供する。
【０１５９】
本節における構造に関して、各「ｎ」についての代表的な範囲としては、例えば、約４０〜約５５０の整数、又は約６０〜約５００の整数、又は約１１３〜約４００、若しくは２００〜３００の整数が挙げられる。ある実施形態において、ポリエチレングリコール鎖の各々における「ｎ」は、約２２７（即ち、中央のフルオレニルコアから延びる各ポリエチレングリコール鎖は、全体の分岐ＰＥＧ部分の重量平均分子量が約２０，０００ダルトンであるように、約１０，０００ダルトンの重量平均分子量を有する）であり、即ち、本明細書でマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２又は（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２と称され、以下に示されるとおりの構造を有する。
【化１４】
2020518610.tif 000015
【０１６０】
ＲＳＬＡＩＬ−２のさらなる例示的な組成物は、分子の全てのポリマー部分が約２５０ダルトン〜約９０，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量を有する上記の式に係る化合物を含む。さらなる好適な範囲としては、約１，０００ダルトン〜約６０，０００ダルトンから選択される範囲、約５，０００ダルトン〜約６０，０００ダルトンの範囲、約１０，０００ダルトン〜約５５，０００ダルトンの範囲、約１５，０００ダルトン〜約５０，０００ダルトンの範囲、及び約２０，０００ダルトン〜約５０，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量が挙げられる。
【０１６１】
ポリエチレングリコールポリマー部分のさらなる例示的な重量平均分子量としては、約２００ダルトン、約３００ダルトン、約４００ダルトン、約５００ダルトン、約６００ダルトン、約７００ダルトン、約７５０ダルトン、約８００ダルトン、約９００ダルトン、約１，０００ダルトン、約１，５００ダルトン、約２，０００ダルトン、約２，２００ダルトン、約２，５００ダルトン、約３，０００ダルトン、約４，０００ダルトン、約４，４００ダルトン、約４，５００ダルトン、約５，０００ダルトン、約５，５００ダルトン、約６，０００ダルトン、約７，０００ダルトン、約７，５００ダルトン、約８，０００ダルトン、約９，０００ダルトン、約１０，０００ダルトン、約１１，０００ダルトン、約１２，０００ダルトン、約１３，０００ダルトン、約１４，０００ダルトン、約１５，０００ダルトン、約２０，０００ダルトン、約２２，５００ダルトン、約２５，０００ダルトン、約３０，０００ダルトン、約３５，０００ダルトン、約４０，０００ダルトン、約４５，０００ダルトン、約５０，０００ダルトン、約５５，０００ダルトン、約６０，０００ダルトン、約６５，０００ダルトン、約７０，０００ダルトン、及び約７５，０００ダルトンが挙げられる。いくつかの実施形態において、ポリエチレングリコールポリマーの重量平均分子量は約２０，０００ダルトンである。
【０１６２】
上記のとおり、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、（ＴＬＲ作動薬の場合と同様に）薬学的に許容可能な塩の形態であり得る。典型的には、かかる塩は薬学的に許容可能な酸又は酸等価物との反応によって形成される。これに関連して用語「薬学的に許容可能な塩」は、概して、比較的非毒性の無機酸及び有機酸付加塩を指し得る。これらの塩は、投与媒体又は剤形製造過程においてインサイチューで、又は別途本明細書に記載されるとおりの長時間作用型インターロイキン−２を好適な有機酸又は無機酸と反応させて、そのようにして形成された塩を単離することにより調製し得る。代表的な塩としては、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩（ｎａｐｔｈｙｌａｔｅ）、シュウ酸塩、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、及びラウリルスルホン酸塩などが挙げられる。（例えば、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９７７）「薬学的塩（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ）」，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：１−１９を参照のこと）。従って、記載されるとおりの塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸に由来してもよく；又は酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パルミチン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸（ｓａｌｉｃｙｃｌｉｃ）、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸（ｉｓｏｔｈｉｏｎｉｃ）などの有機酸から調製されてもよい。
【０１６３】
前述のＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬に関して、用語「ＩＬ−２」は、本明細書で使用されるとき、ヒトＩＬ−２活性を有する部分を指す。用語、「残基」は、ＩＬ−２の残基の文脈では、上記の式に示されるとおり、ＩＬ−２分子のうち１つ以上の共有結合部位においてポリエチレングリコールなどのポリマー剤との共有結合後に残る部分を意味する。非修飾ＩＬ−２がポリエチレングリコールなどのポリマーに結合すると、その１つ以上のポリマーとの連結に付随する１つ以上の共有結合の存在によってＩＬ−２は僅かに変化することが理解されるであろう。この僅かに変化した形態の、別の分子に結合したＩＬ−２は、ある場合には、ＩＬ−２の「残基」と称され得る。
【０１６４】
例えば、国際公開第２０１２／０６５０８６号パンフレットに記載される配列番号１〜４のいずれか一つに対応するアミノ酸配列を有するタンパク質が、それらと実質的に相同な任意のタンパク質又はポリペプチドと同様に、例示的ＩＬ−２タンパク質である。用語の実質的に相同とは、特定の対象配列、例えば突然変異配列が１つ以上の置換、欠失、又は付加だけ参照配列と異なるが、その正味の効果は参照配列と対象配列との間に有害な機能的相違をもたらさないものであることを意味する。本明細書の目的上、９５パーセントより高い相同性、等価な生物学的活性（必須ではないが等価な生物学的活性強度）、及び等価な発現特性を有する配列が、実質的に相同と見なされる。相同性を決定する目的上、成熟配列のトランケーションは無視しなければならない。本明細書で使用されるとき、用語「ＩＬ−２」には、例えば部位特異的突然変異誘発によるとおり意図的に修飾されるか、又は突然変異を通じて偶発的に修飾されたタンパク質が含まれる。これらの用語にはまた、１〜６つのさらなるグリコシル化部位を有する類似体、タンパク質のカルボキシ端側末端に少なくとも１つのさらなるアミノ酸を有する類似体であって、そのさらなる１つ以上のアミノ酸が少なくとも１つのグリコシル化部位を含む類似体、及び少なくとも１つのグリコシル化部位を含むアミノ酸配列を有する類似体も含まれる。この用語には、天然の部分及び組換え生成された部分の両方が含まれる。加えて、ＩＬ−２は、ヒト供給源、動物供給源、及び植物供給源に由来し得る。１つの例示的ＩＬ−２は、アルデスロイキンと称される組換えＩＬ−２である。
【０１６５】
化合物の放射標識、そのインビボ投与、及びそのクリアランスの決定が関わるものなどの従来手法を用いて、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬であると提案される化合物が「長時間作用型」であるかどうかを決定してもよい。本明細書における目的上、ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の性質は、典型的には、マウスにおいて評価しようとする作動薬の投与後の様々な時点でフローサイトメトリーを用いてリンパ球のＳＴＡＴ５リン酸化を計測することにより決定される。参考として、ＩＬ−２では約２４時間までにシグナルが失われるが、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬についてはそれより長い期間持続する。例示として、ＲＳＬＡＩＬ−２の組成物についてシグナルは数日間持続する。
【０１６６】
ここで本明細書に記載される長時間作用型作動薬のＩＬ−２Ｒβバイアスを考慮して、実施例２は、ＲＳＬＡＩＬ−２の例示的組成物についての受容体バイアスに関連するインビトロ及びインビボデータの両方を提供する。実施例２に記載されるとおり、マウス黒色腫腫瘍モデルにおいて、ＩＬ−２と比較した場合のＲＳＬＡＩＬ−２についてのＣＤ８／制御性Ｔ細胞の比は、ＩＬ２受容体アルファと比べたＩＬ−２受容体ベータの優先的な活性化を裏付ける。例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、例えばＲＳＬＡＩＬ−２は、例えばＴｒｅｇと比べてエフェクターＣＤ８＋Ｔ及びＮＫ細胞を優先的に活性化させ、拡大するために有効である。
【０１６７】
さらに、代表的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、例えばＲＳＬＡＩＬ−２は、ＩＬ−２と比べて増加した腫瘍曝露、好ましくは有意に増強された腫瘍曝露、例えばＩＬ−２の等価物について正規化した場合、少なくとも５０倍増加した曝露、又は少なくとも１００倍増加した曝露、又は少なくとも２００倍増加した曝露、又は少なくとも３００倍増加した曝露、又は少なくとも４００倍増加した曝露、又は少なくとも５００倍増加した曝露を提供する。
【０１６８】
方法、組成物、及びキット
本明細書に記載される方法、併用、組成物、製剤、系及びキットによれば、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬はＩＬ−２Ｒβ活性化量で提供される。当業者は、どのくらいの所与の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬がＩＬ−２Ｒβにおける臨床的に有意味なアゴニスト活性をもたらすのに十分であるかを決定することができる。例えば、当業者は文献を参照してもよく、及び／又は一連の漸増量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬を投与して、どの１つ以上の量がＩＬ−２Ｒβの臨床的に有意味なアゴニスト活性をもたらすかを決定してもよい。或いは、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の活性化量を、上記に記載され、且つ当技術分野で知られるインビボＳＴＡＴ５リン酸化アッセイを用いて決定してもよく（投与後にインビボで決定する）、ここではピーク時点でＮＫ細胞の１０％を上回るＳＴＡＴ５リン酸化を誘導するのに十分な量が活性化量と見なされる。
【０１６９】
しかしながら、１つ以上の例において、ＩＬ−２Ｒβ活性化量は、タンパク質の量で表現される以下の範囲の１つ以上により包含される量である：約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ；約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約７５ｍｇ／ｋｇ；約０．０２ｍｇ／ｋｇ〜約６０ｍｇ／ｋｇ；約０．０３ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ；約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇ；約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ；約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ；約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇ；約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ；約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇ；約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇ。いくつかの実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、０．７ｍｇ／ｋｇ以下の用量において投与される。特定の例示的な投与量範囲には、例えば約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、又は約０．２ｍｇ／ｋｇ〜約７ｍｇ／ｋｇ又は約０．２ｍｇ／ｋｇ〜約０．７ｍｇ／ｋｇ未満が含まれる。
【０１７０】
ある実施形態において、ある用量の本明細書で提供される組成物及び方法において使用される長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬であるマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２が、３週間に１回投与される。
【０１７１】
ある追加の実施形態において、本明細書で提供される組成物、併用及び方法において使用される長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬であるマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２の量は、約０．０００５〜０．３ｍｇ／ｋｇ；約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．３ｍｇ／ｋｇ；約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．２５ｍｇ／ｋｇ；約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．１５ｍｇ／ｋｇ；約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．０５ｍｇ／ｋｇ；約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．０１ｍｇ／ｋｇ；約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．００８ｍｇ／ｋｇ；約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．００５ｍｇ／ｋｇ；約０．００２ｍｇ／ｋｇ〜約０．００５ｍｇ／ｋｇ；約０．００２ｍｇ／ｋｇ〜約０．００４ｍｇ／ｋｇである。
【０１７２】
いくつかの実施形態において、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬であるマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２は、０．００３ｍｇ／ｋｇ以下の用量において投与される。ある実施形態において、投与量範囲には、例えば約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．０１ｍｇ／ｋｇ、又は約０．００２ｍｇ／ｋｇ〜約０．００８ｍｇ／ｋｇ又は約０．００２ｍｇ／ｋｇ〜約０．００６ｍｇ／ｋｇ未満が含まれる。ある実施形態において、ある用量の本明細書で提供される組成物及び方法において使用される長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬であるマルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２が、３週間に１回投与される。
【０１７３】
確認のために言えば、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬に関して、活性化の量及び程度は大きく異なり得、４−１ＢＢ作動薬単独又はＴＬＲ作動薬との併用投与と合わせた場合になおも有効であり得る。即ち、ＩＬ−２Ｒβでごく最小限の作動薬活性を十分に長期間にわたり呈する長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の量は、４−１ＢＢ作動薬及び、任意選択的にＴＬＲ作動薬と投与する場合、本明細書に記載される方法、組成物、及びキットが臨床的に意味のある応答を可能とする限り、なおも長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬であり得る。いくつかの例では、（例えば）相乗的相互作用及び応答に起因して、４−１ＢＢ作動薬及び、任意選択的にＴＬＲ作動薬（例えば、長時間作用型ＴＬＲ作動薬）の投与を伴う場合、ＩＬ−２Ｒβの作動薬活性は最小限だけ要求され得る。同様に、本明細書に記載される併用において使用される場合の４−１ＢＢ作動薬及び／又はＴＬＲ作動薬の投与量は、薬剤が単独で投与される場合に「治療量未満」の用量であると考えられ得るが、しかしながら、本明細書において提供されるとおりの二峰性又は三峰性の治療戦略の一部として使用する場合、そのような用量は、臨床的に意味のある応答をもたらし得る。
【０１７４】
本明細書に記載される治療方法は、患者ケアを監督する臨床医がその治療方法を有効であると見なす限り継続され得る。治療方法が有効であることの指標となる非限定的パラメータには、以下のいずれか１つ以上が含まれる：腫瘍縮小（重量及び／又は容積の点で）；個別の腫瘍コロニーの数の減少；腫瘍消失；及び無進行生存。腫瘍サイズの変化は、任意の好適な方法、例えばイメージングにより決定することができる。様々な診断イメージングモダリティ、例えばコンピュータ断層撮影（ＣＴスキャン）、二重エネルギーＣＤＴ、陽電子放出断層撮影及びＭＲＩを用いてもよい。
【０１７５】
投与すべきＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の実際の用量、並びに本明細書に記載される方法、組成物、製剤、系、及びキットに関連する投与レジメンは、対象の年齢、体重、及び全身状態並びに治療下の病態の種類及び重症度（例えば、治療下の癌の進行）、医療専門家の判断、並びに投与すべき特定のＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬に応じて異なる。治療有効量は当業者に公知であり、且つ／若しくは関連の参考テキスト及び文献に記載されているか、又は決めることができる。一般に、治療有効量の４−１ＢＢ作動薬又はＴＬＲ７／８作動薬（活性分子を基準として）は約０．００１ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲であり、好ましくは０．０１ｍｇ／日〜７５０ｍｇ／日の用量、より好ましくは０．１０ｍｇ／日〜５００ｍｇ／日の用量である。
【０１７６】
４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬（繰り返しになるが、好ましくは、医薬品の一部として提供される）のいずれかの単位投与量を、臨床医の判断、患者の必要性などに応じて種々の投与スケジュールで投与してもよい。特定の投与スケジュールは、当業者に公知であるか、又は通例の方法を用いて実験的に決定してもよい。例示的な投与スケジュールとしては、限定されるものではないが、１日に５回、１日に４回、１日に３回、１日に２回、１日に１回、１週間に３回、１週間に２回、１週間に１回、１ヶ月に２回、１ヶ月に１回、及びこれらの任意の組み合わせが挙げられる。一旦臨床エンドポイントが達成されたら、組成物の投与は中止される。
【０１７７】
ＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の投与頻度及びスケジュールに関して、当業者は適切な頻度を決定することが可能であろう。例えば臨床医は、治療サイクルにおいて、ＴＬＲ作動薬を単一用量として又は例えば数日間若しくは数週間の過程にわたる一連の用量のいずれかで投与することを決定することができる。このことは、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬についても同様である。ＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の各々は、他方のＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の投与の前、それと共に、又はその後に投与され得る。
【０１７８】
４−１ＢＢ作動薬は、ＴＬＲ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬のいずれか又は両方と一緒に又は別々に投与され得ると理解されよう。実施形態において、４−１ＢＢ作動薬は、ＴＬＲ作動薬又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬のいずれかと一緒に投与され得るが、他方のＴＬＲ作動薬又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬とは別々に投与され得る。いくつかの実施形態において、４−１ＢＢ作動薬は、ＴＬＲ作動薬及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の各々と別々に（投与されているもの又は両方に応じて）投与される。両方が含まれる場合、ＴＬＲ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は一緒に投与され得ると理解されよう。１つの特定の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、同時に又は一緒に（同じ製剤又は別々の製剤のいずれかにおいて）投与される。４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は任意の順序で投与され得ると理解されよう。さらに、４−１ＢＢ作動薬、ＴＬＲ作動薬及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬のいずれか又は全ての投与は、必要に応じて分、時間、又は日によって分けられ得る。
【０１７９】
いくつかの治療レジメンにおいて、ＴＬＲ作動薬は、治療の開始時に単一用量として投与される。長時間投与作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び／又は４−１ＢＢ作動薬は、ＴＬＲ作動薬と同時に、又はＴＬＲ作動薬の投与の前、又はＴＬＲ作動薬の投与後のいずれかで投与される。例えば、一部の治療モダリティにおいて、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び／又は４−１ＢＢ作動薬は、ＴＬＲ作動薬投与の（前又は後の）７日以内に（例えば１、２、３、４、５、６、又は７日目のいずれか１日に）投与し、１日目は、治療の開始を示す。一部の治療レジメンにおいて、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び／又は４−１ＢＢ作動薬は、ＴＬＲ作動薬投与の４日以内、例えば１、２、３、又は４日目のいずれか１日に投与される。ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の長時間作用性質に基づき、このような化合物は、典型的には、比較的低頻度で（例えば３週間に１回、２週間に１回、８〜１０日に１回、週に１回など）投与される。
【０１８０】
治療過程に関連する例示的な時間の長さには、約１週間；約２週間；約３週間；約４週間；約５週間；約６週間；約７週間；約８週間；約９週間；約１０週間；約１１週間；約１２週間；約１３週間；約１４週間；約１５週間；約１６週間；約１７週間；約１８週間；約１９週間；約２０週間；約２１週間；約２２週間；約２３週間；約２４週間；約７ヵ月；約８ヵ月；約９ヵ月；約１０ヵ月；約１１ヵ月；約１２ヵ月；約１３ヵ月；約１４ヵ月；約１５ヵ月；約１６ヵ月；約１７ヵ月；約１８ヵ月；約１９ヵ月；約２０ヵ月；約２１ヵ月；約２２ヵ月；約２３ヵ月；約２４ヵ月；約３０ヵ月；約３年；約４年；約５年が含まれる。
【０１８１】
本明細書に記載される治療方法は、患者ケアを監督する臨床医がその治療方法を有効であると見なす限り継続され得る。治療方法が有効であることの指標となる非限定的なパラメータには、以下の１つ以上が含まれ得る：腫瘍縮小（重量及び／又は容積及び／又は外観の点で）；個別の腫瘍コロニーの数の減少；腫瘍消失；無進行生存；好適な腫瘍マーカーによる適切な応答（該当する場合）、ＮＫ（ナチュラルキラー）細胞数の増加、Ｔ細胞数の増加、メモリーＴ細胞数の増加、セントラルメモリーＴ細胞数の増加、制御性Ｔ細胞、例えばＣＤ４＋Ｔｒｅｇ、ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ、及びＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇの数の低下。
【０１８２】
本明細書に提供される方法は、（特に）癌を有する患者の治療に有用である。例えば、患者は、ＴＬＲ作動薬単独による治療、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬単独による治療、４−１ＢＢ作動薬単独による治療、並びにＴＬＲ作動アゴニスト、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の併用に対して応答性であり得るが、併用に対してより応答性である。別の例として、患者は４−１ＢＢ作動薬、又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬／ＴＬＲ作動薬に対して非応答性であり得るが、併用に対して応答性である。さらに別の例として、患者は、単独で投与される場合にはＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬のいずれかに対して非応答性であり得るが、併用に対して応答性である。実施形態において、癌を治療する方法は、４−１ＢＢ作動薬並びにＴＬＲ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つを含む１つ以上の医薬組成物を患者に投与することを含む。一実施形態において、固形癌などの癌の治療に有用である医薬の調製における本明細書で記載される１つ以上の医薬組成物の使用が本明細書に提供される。
【０１８３】
例えばＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の投与は、典型的には注射によるものである。経口、肺内、鼻内、頬側、直腸、舌下、経皮、腫瘍内及び非経口など、他の投与方法もまた企図される。本明細書で使用されるとき、用語「非経口」には、皮下、静脈内、動脈内、腫瘍内、リンパ管内、腹腔内、心臓内、くも膜下腔内、及び筋肉内注射、並びに点滴注射が含まれる。上記のとおり、ＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、別々に投与され得る。或いは、初回用量として、又は治療過程全体にわたり、又は投与レジメンの様々な段階においてＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の投与が同時であることが所望される場合（及びＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が互いに及び所与の製剤中で適合する）、単一剤形／製剤の投与（例えば全ての免疫学的成分を含有する静脈内製剤の静脈内投与）により同時投与を実現してもよい。当業者はルーチンの試験を通じて、そのような成分が互いに及び所与の製剤中で適合するかどうかを決定することができる。
【０１８４】
本明細書に記載される療法薬併用、即ち、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、並びに／又はＴＬＲ作動薬は、１つ以上の組成物又は製剤の形態で提供され得る。４−１ＢＢ作動薬並びに長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬の少なくとも１つは、同じ組成物において提供され得ると理解されよう。他の実施形態において、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、並びに／又はＴＬＲ作動薬はそれぞれ、別々の組成物において提供され得る。一般に、組成物は、薬学的賦形剤と組み合わせて、４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬の１つ以上を含む。本明細書に記載される組成物は、固体の形態又は液体の形態であり得る。
【０１８５】
医薬品添加物の例としては、以下のものからなる群より選択されるものが挙げられるが、これらに限定される訳ではない：炭水化物、無機塩、抗菌剤、抗酸化剤、界面活性剤、緩衝剤、酸、塩基、及びそれらの組み合わせ。
【０１８６】
炭水化物例えば、糖、変性糖例えば、アルジトール、アルドン酸、エステル化糖、及び／又は糖のポリマーを、医薬品添加物として存在させることができる。具体的な炭水化物系医薬品添加物としては、例えば以下のものが挙げられる：単糖類例えば、フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、Ｄ−マンノース、ソルボースなど；二糖類例えば、ラクトース、スクロース、トレハロース、セロビオースなど；多糖類例えば、ラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキストラン、デンプンなど；並びにアルジトール例えば、マンニトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトール、ソルビトール、ミオイノシトールなど。
【０１８７】
医薬品添加物としてはさらに、以下のものも挙げられる：無機塩又は緩衝剤、例えば、クエン酸、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム、硝酸カリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、及びそれらの組み合わせ。
【０１８８】
その製剤にはさらに、微生物の生育を防止又は阻止するための抗菌剤が含まれていてもよい。適切な抗菌剤の例を非限定的に挙げれば、以下のものである：塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、塩化セチルピリジニウム、クロロブタノール、フェノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、チメロサール、及びそれらの組み合わせ。
【０１８９】
同様に、製剤の中に抗酸化剤を存在させることも可能である。抗酸化剤は、酸化を防止するために使用され、それによって、その製剤の中のコンジュゲート又はその他の成分の劣化を防止する。好適な抗酸化剤としては、例えば、以下のものが挙げられる：パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、次亜リン酸、モノチオグリセロール、没食子酸プロピル、重亜硫酸ナトリウム、ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、及びそれらの組み合わせ。
【０１９０】
医薬品添加物として、界面活性剤を存在させてもよい。界面活性剤の例としては、以下のものが挙げられる：ポリソルベート例えば、「Ｔｗｅｅｎ２０」及び「Ｔｗｅｅｎ８０」、並びにプルロニック例えば、Ｆ６８及びＦ８８（いずれも、ＢＡＳＦ，Ｍｏｕｎｔ  Ｏｌｉｖｅ，ＮＪから入手可能）；ソルビタンエステル；脂質例えば、リン脂質例えばレシチン及びその他のホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、脂肪酸及び脂肪族エステル；ステロイド例えば、コレステロール；並びにキレート化剤例えば、ＥＤＴＡ、亜鉛、及びその他のそのような適切なカチオン。
【０１９１】
その製剤の中には、医薬品添加物として、薬学的に許容される酸又は塩基が存在していてもよい。使用することが可能な酸の非限定的な例としては、以下のものからなる群より選択されるものが挙げられる：塩酸、酢酸、リン酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、ギ酸、トリクロロ酢酸、硝酸、過塩素酸、リン酸、硫酸、フマル酸、及びそれらの組み合わせ。好適な塩基の例としては、次のものからなる群より選択される塩基が挙げられるが、これらに限定される訳ではない：水酸化ナトリウム、酢酸ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウム、酢酸アンモニウム、酢酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸ナトリウム、ギ酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、フマル酸カリウム、及びそれらの組み合わせ。
【０１９２】
その他の薬学的添加物及び／又は本開示に従った組成物、及び関連の製剤のための方法で使用するのに適した添加物は、例えば以下の文献に見出すことができる：”Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，２２ｎｄ  Ｅｄ．；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：”Ｔｈｅ  Ｅｓｓｅｎｔｉａｌｓ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ（２００９）”；及び”Ｐｈｙｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ”（２０１７）；及び”Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ”，７ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ。
【０１９３】
組成物中における４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬の量は、いくつかの因子に依存して変化するであろうが、その組成物を単位投与量容器の中に保存したときに、治療有効量となるようにするのが最善であろう。治療有効量は、臨床的に所望のエンドポイントに達するのに必要な量を求める目的で、４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬の量を増やしながら、繰り返し投与することによって、実験的に求めてもよい。
【０１９４】
その組成物の中の、各種個々の医薬品添加物の量は、その医薬品添加物の活性、及びその組成物の具体的な必要性に応じて、変化するであろう。各種個々の医薬品添加物の最適量は、ルーチン的な実験によって決められる、即ち、医薬品添加物を（低から高までの範囲の）各種の量で含む組成物を調製し、その安定性及びその他のパラメータを確認し、次いで、顕著な有害効果がなく、最適な性能が達成される範囲を決定する。
【０１９５】
しかしながら、組成物の中には、医薬品添加物を、一般的には約１重量％〜約９９重量％、好ましくは約５重量％〜９８重量％、より好ましくは約１５〜９５重量％の医薬品添加物の量で、最も好ましくは３０重量％未満の濃度で存在させるであろう。
【０１９６】
医薬組成物は、任意の数の形態をとることができ、組成物はこれに関して限定されるものではない。例示的な製剤は、錠剤、カプレット、カプセル、ゲルキャップ、トローチ、分散体、懸濁液、溶液、エリキシル剤、シロップ剤、舐剤、経皮貼付剤、噴霧剤、坐剤、及び散剤などの経口投与に好適な形態であり得る。好ましい実施形態において、組成物は腫瘍内投与に好適な形態である。
【０１９７】
経口投与形態としては、錠剤、カプレット、カプセル、ゲルキャップ、懸濁液、溶液、エリキシル剤、及びシロップ剤が挙げられ、また、任意選択的に被包される複数の顆粒剤、ビーズ、散剤又は粒剤を含んでもよい。このような投与形態は、製剤分野の当業者に知られる従来の方法を使用して作製され、関連文献に記載されている。
【０１９８】
例えば、錠剤及びカプレットは、標準的な錠剤加工手順及び装置を用いて製造することができる。本明細書で記載されるコンジュゲートを含有する錠剤又はカプレットを作製する際は、直接打錠法及び直接顆粒化法が一般的に好ましい。４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬に加えて、本錠剤及びカプレットは通常、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、充填剤、安定剤、界面活性剤、着色剤、流動化剤などの不活性の薬学的に許容可能な担体材料を含有することになる。結合剤を使用して、錠剤に凝集性の性質を付与し、従って、確実に錠剤がそのまま維持される。好適な結合剤材料としては、限定されるものではないが、澱粉（トウモロコシ澱粉及びアルファ化澱粉を含む）、ゼラチン、糖（スクロース、グルコース、デキストロース、及びラクトースを含む）、ポリエチレングリコール、ワックス、並びに天然ゴム及び合成ゴム、例えば、アカシアアルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系ポリマー（ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、微結晶セルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースなど）、並びにビーガムが挙げられる。潤滑剤を使用して、錠剤製造を容易にして、粉末の流動を促進し、圧力が軽減される際の粒子キャッピング（即ち、粒子破砕）を防止する。有用な潤滑剤は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、及びステアリン酸である。崩壊剤を使用して、錠剤の崩壊を容易にし、崩壊剤は通常、澱粉、粘土、セルロース、アルギン、ゴム、又は架橋ポリマーである。充填剤としては、例えば、二酸化ケイ素、二酸化チタン、アルミナ、タルク、カオリン、粉末セルロース、及び微結晶セルロースなどの材料、並びにマンニトール、尿素、スクロース、ラクトース、デキストロース、塩化ナトリウム、及びソルビトールなどの可溶性材料が挙げられる。当技術分野でよく知られるとおり、安定剤を使用して、一例として酸化反応を含む薬剤分解反応を阻害するか、又は遅らせる。
【０１９９】
カプセルはまた、好ましい経口投与形態であり、この場合、４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬を含有する組成物は、液体又はゲル（例えば、ゲルキャップの場合）又は固体（顆粒剤、ビーズ、散剤若しくは粒剤などの微粒子を含む）の形態で被包され得る。好適なカプセルとしては、硬質カプセル及び軟質カプセルが挙げられ、通常、ゼラチン、澱粉、又はセルロース系材料で作製される。二部分から成る硬質ゼラチンカプセルは、ゼラチンバンドなどで密閉されることが好ましい。
【０２００】
実質的に乾燥形態（粉末又はケーキの形態であり得る凍結乾燥物又は沈殿物として）の非経口製剤、及び液体であり、且つ非経口製剤の乾燥形態を再構成する工程を要する注射用に作製された製剤が挙げられる。注射前に固体組成物を再構成するための好適な希釈剤の例としては、注射用静菌水、５％デキストロース水溶液、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル溶液、生理食塩水、滅菌水、脱イオン水、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２０１】
いくつかの場合において、非経口投与を目的とした組成物は、非水溶液、懸濁液、又はエマルジョンの形態をとることができ、通常、滅菌済みである。非水性溶媒又はビヒクルの例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油及びトウモロコシ油などの植物油、ゼラチン、並びにオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルである。
【０２０２】
本明細書で記載される非経口製剤はまた、保存剤、湿潤剤、乳化剤、及び分散剤などのアジュバントを含有してもよい。製剤は、滅菌剤、細菌を保持するフィルターを通したろ過、放射線照射、又は加熱を組み入れることによって滅菌される。
【０２０３】
組成物又は製剤はまた、従来の経皮貼付剤又は他の経皮的な送達システムを用いて皮膚を通して投与してもよく、ここで、４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬は、皮膚に貼られる薬物送達デバイスとして機能する積層構造内に含有される。このような構造において、４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬は、層、又は裏地の上部の下地となる「レザバー」に含有される。積層構造は、単一のレザバーを含有してもよいし、複数のレザバーを含有してもよい。
【０２０４】
４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬はまた、直腸投与用の坐剤に製剤化されてもよい。坐剤に関して、４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬を、コカバター（カカオ脂）、ポリエチレングリコール、グリセリンゼラチン、脂肪酸、及びこれらの組み合わせなどの（例えば、室温で固体を維持するが、体温で軟化するか、融解するか、又は溶解する賦形剤）である坐剤のベース材料と混合する。坐剤は、例えば、以下の工程（必ずしも提示される順序ではない）：坐剤のベース材料を融解して溶解物を形成する工程；４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬を組み込む工程（坐剤のベース材料の融解の前又は後のいずれか）；溶解物を鋳型に注ぐ工程；溶解物を冷却して（例えば、溶解物を含有する鋳型を室温環境に置く）、それにより坐剤を形成する工程；及び鋳型から坐剤を取り外す工程を実施することによって作製してもよい。
【０２０５】
いくつかの好ましい実施形態において、４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬の少なくとも１つを含む少なくとも１つの組み合わせ及び／又は組成物は、腫瘍内に投与される（例えば、腫瘍に直接投与される（例えば、注射によって））。このような投与により、例えばＴＬＲ７／８作動薬の体循環への、また、放出可能な結合を含むコンジュゲートの場合は腫瘍それ自体への遅延放出を伴い、腫瘍中においてＴＬＲ７／８作動薬の高い濃度が達成される。ＴＬＲ７／８作動薬のマルチアームポリマーコンジュゲートの腫瘍内投与のための例示的な製剤は、ｐＨ７．４のＮａ／Ｋリン酸塩緩衝液を含む。
【０２０６】
いくつかの実施形態において、４−１ＢＢ作動薬、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又はＴＬＲ作動薬を含む組成物はさらに、好適な送達ビヒクルに組み込まれてもよい。このような送達ビヒクルは、コンジュゲートの制御放出及び／又は連続放出を実現し得、且つ標的化部分としても機能し得る。送達ビヒクルの非限定的な例としては、アジュバント、合成アジュバント、マイクロカプセル、微小粒子、リポソーム、及び酵母細胞壁粒子が挙げられる。酵母細胞壁は、様々に処理されてタンパク質成分、グルカン、又はマンナン層を除去される場合があり、全グルカン粒子（ＷＧＰ）、酵母β−グルカンマンナン粒子（ＹＧＭＰ）、酵母グルカン粒子（ＹＧＰ）、ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）酵母細胞粒子（ＹＣＰ）と称される。Ｓ．セレビシエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）及びロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）種などの酵母細胞が好ましいが；任意の酵母細胞が使用されてもよい。これらの酵母細胞は、流体力学的体積に関して異なる特性を示し、それらの内容物を放出し得る標的器官も異なる。これらの粒子の製造及び特徴付けの方法は、米国特許第５，７４１，４９５号明細書、同第４，８１０，６４６号明細書、同第４，９９２，５４０号明細書、同第５，０２８，７０３号明細書、同第５，６０７，６７７号明細書並びに米国特許出願公開第２００５／０２８１７８１号明細書及び同第２００８／００４４４３８号明細書に記載されている。
【０２０７】
本明細書に記載される療法薬併用、即ち、４−１ＢＢ作動薬及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、並びに／又はＴＬＲ作動薬は、キットの形態で提供してもよい。上記のとおり、成分は、単一の組成物中に、任意選択により、１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤を伴って含めてもよいし、別個の容器中で提供してもよく、キットは、典型的には、使用説明書を含む。好適な薬学的に許容可能な賦形剤には、例えばＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，７ｔｈｅｄ．，Ｒｏｗｅ，Ｒ．Ｃ．，Ｅｄ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２０１２に記載のものが含まれる。キット成分、例えばＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬とを含む組成物は、液体又は固体形態のいずれかであり得る。ある実施形態において、ＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬は、固体形態である。代表的な固体形態は、例えば約５重量パーセント未満の水、又は好ましくは２重量パーセント未満の水を含有する固体乾燥形態であるものである。固体形態は、一般に水性希釈剤中での再構成に好適である。
【０２０８】
本明細書に提供される４−１ＢＢ作動薬並びにＴＬＲ作動薬（例えば、ＴＬＲ７／８作動薬）のマルチアームポリマーコンジュゲート及び長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つを、例えば癌を有する患者などの４−１ＢＢ作動薬並びにＴＬＲ作動薬（例えば、ＴＬＲ７／８作動薬）のマルチアームポリマーコンジュゲート及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つに応答する病態に罹患している患者に投与するための方法も提供される。本方法は、（好ましくは、医薬品の一部として提供される）治療有効量の組成物又は組成物（複数）を投与する工程を含む。
【０２０９】
ここに記載した方法、キット及び関連組成物は、本明細書に記載される方法により治癒又は予防し得る任意の病態、例えば癌に罹患している患者の治療に使用することができる。実施形態において、癌は固形癌である。例示的病態は、癌、例えば軟部肉腫、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵癌、脳癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、精巣癌、肺癌、小細胞肺癌、脳癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫（進行性及び／又は転移性を含む）、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、及び白血病である。一部の特定の実施形態において、治療すべき癌は、固形癌、例えば乳癌、卵巣癌、結腸癌、前立腺癌、骨癌、結腸直腸癌、尿路上皮癌、胃癌、リンパ腫、悪性黒色腫、肝癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、膵癌、甲状腺癌、腎癌、胆管癌、脳癌、子宮頸癌、上顎洞癌、膀胱癌、食道癌、メルケル細胞癌、ホジキン病及び副腎皮質癌などである。いくつかの実施形態において、癌は、局所的に進行しているか、又は転移性の固形悪性腫瘍である。
【０２１０】
本方法、キット及び組成物は、単剤としてのＴＬＲ作動薬、４−１ＢＢ作動薬、及び／又は長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の投与の治療効力の増強に有用である。増強された応答は、治療の間、単一の治療ラウンド後、２〜３つの治療サイクル後など任意の好適な時点において、及び多数の好適な方法のいずれか、例として、腫瘍の縮小（部分奏効）、即ち腫瘍サイズ又は容積の評価、腫瘍の消失、疾患進行の低下（癌は進行していない）、及び１つ以上の腫瘍試験マーカーの分析により適宜評価することができる。特に有効な治療は、５０％の最大腫瘍成長において評価する場合）、少なくとも５日、又は少なくとも１０日、又は少なくとも１２日、又は少なくとも１５日だけ、又は少なくとも２０日だけ、又は少なくとも３０日以上だけ生存期間を延長する。
【０２１１】
本明細書に提供される方法、キット、組成物などは、治療を受ける対象における腫瘍成長又はサイズ（又は容積）の低下にも有用である。例えば一部の実施形態において、１つ以上の治療サイクルは、腫瘍サイズを治療前の腫瘍サイズと比較する場合に約２５％だけ、又は約３０％だけ、又は約４０％だけ、又は約５０％だけ、又はさらには約６０％だけ、又は約７０％以上だけ、例えば、約９０％以上だけ低下させるために有効である。
【実施例】
【０２１２】
前述の説明並びに以下の例は例示を意図するもので、本明細書で提供される本発明の範囲を限定する意図はないことが理解されるべきである。本発明が関係する技術分野の当業者には、本発明の範囲内の他の態様、利点及び変形例が明らかであろう。
【０２１３】
材料及び方法
アルデスロイキンのものと同一のアミノ酸配列を有する組換えヒトＩＬ−２をクローニングし、発現させ、使用して本明細書でＲＳＬＡＩＬ−２と称される例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒαβバイアス作動薬を調製した。
【０２１４】
ＲＳＬＡＩＬ−２は、国際公開第２０１５／１２５１５９号パンフレットの実施例１の手順に従うと得ることが可能な組成物を指し、概してマルチＰＥＧ化形態のＩＬ−２を含む組成物であって、ここでコンジュゲートの形成に用いられるＰＥＧ試薬の結合は投与後に遊離可能である。
【０２１５】
４−ａｒｍ−２０ｋＤ−ＰＥＧ−ＳＣＭは、構造：
【化１５】
2020518610.tif 000016
に相当する。
【０２１６】
Ｒ８４８（レシキモド）は、以下の構造を有する（遊離塩基として示される）。
【化１６】
2020518610.tif 000017
【０２１７】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋＤ−ＳＣＭ及び４−ａｒｍ−ＰＥＧ４０ｋＤ−ＳＣＭは、国際公開第２０１０／０１９２３３Ａ１号パンフレットの実施例３に従って、合成することができる。
【０２１８】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋＤ−ＢＡは、国際公開第２０１０／０１９２３３Ａ１号パンフレットの実施例１に従って、合成することができる。
【０２１９】
ｍＰＥＧ５ｋＤ−ＳＣは、ＮＯＦ  Ａｍｅｒｉｃａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｉｒｖｉｎｅ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡ）から入手可能である。
【０２２０】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋＤ−ＳＣは、Ｂｉｏｃｈｅｍｐｅｇ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｃ．（Ｗａｔｅｒｔｏｗｎ、Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ、ＵＳＡ）から入手可能である。
【０２２１】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋＤ−ＮＣＯは、ＪｅｎＫｅｍ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｐｌａｎｏ、Ｔｅｘａｓ、ＵＳＡ）から入手可能である。
【０２２２】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋＤ−アミンは、Ｌａｙｓｏｎ  Ｂｉｏ（Ａｒａｂ、Ａｌａｂａｍａ、ＵＳＡ）から入手可能である。
【０２２３】
ＬＯＢ１２．３は、マウス４−１ＢＢと反応する抗ＣＤ１３７抗体である。ＬＯＢ１２．３抗体は、免疫チェックポイント阻害剤と併用投与されるときにインビボでの４−１ＢＢシグナリングを刺激し、且つ腫瘍成長を遅らせることが示されたアゴニスト抗体である。ＬＯＢ１２．３は、Ｂｉｏ  Ｘ  Ｃｅｌｌ（Ｗｅｓｔ  Ｌｅｂａｎｏｎ、Ｎｅｗ  Ｈａｍｐｓｈｉｒｅ、ＵＳＡ）から入手可能である。
【０２２４】
実施例に記載されている、全ての非ＰＥＧ化学反応剤は、特に断らない限り、市場で入手可能である。水溶性のポリマー反応剤の製剤は、特に断らない限り、文献記載の当業者公知の方法を使用して調製することが可能であるか、或いは、市販している供給源から入手することが可能である。
【０２２５】
実施例１
ｍＰＥＧ２−Ｃ２−Ｆｍｏｃ−２０ｋＤ−ＮＨＳとｒＩＬ−２の反応
１．４４ｍｇ／ｍｌの精製ｒＩＬ−２（１０６．４ｍＬ）を第１の容器に入れ、続いて５３．６ｍＬの製剤化緩衝液（１０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ４．５、５％トレハロース）を加えた。ｐＨを測ると４．６２であり、温度を測ると２１．２℃であった。ＰＥＧ試薬のＣ２−ＰＥＧ２−ＦＭＯＣ−ＮＨＳ−２０Ｋ（国際公開第２００６／１３８５７２号パンフレットに記載されるとおり利用可能）（１３．１ｇ）を第２の容器に入れ、続いて７３．３ｍＬの２ｍＭ  ＨＣｌを加えた。得られた溶液を手動で２５分間かき混ぜた。第１の容器にホウ酸ナトリウム（０．５Ｍ、ｐＨ９．８）を加えてｐＨを約９．１に上昇させ、次にＰＥＧ試薬が入った第２の容器の内容物を１〜２分間かけて第１の容器に加えた。次に８．１ｍＬの２ｍＭ  ＨＣｌを第２の容器に入れることによってリンスステップを行い、第１の容器に内容物を加えた。コンジュゲーション反応では、最終的なｒＩＬ−２濃度は０．６ｍｇ／ｍＬであり、ホウ酸ナトリウム濃度は１２０ｍＭであり、ｐＨは９．１±０．２であり、温度は２０〜２２℃であった。試薬の活性（置換レベル）を調整した後のＰＥＧ試薬とｒＩＬ−２とのモル比は３５：１であった。コンジュゲーション反応を３０分間進行させ、７５ｍＬの２Ｎ酢酸の添加による酸性化反応（ｐＨをほぼ４に降下させる）により停止させた。生成物を上記のとおりイオン交換クロマトグラフィーにより精製して主として４ｍｅｒ、５ｍｅｒ及び６ｍｅｒ（ｒ−ＩＬ−２に放出可能に共有結合しているＰＥＧ試薬の数を指す（８ｍｅｒ及びそれより高度なＰＥＧ化は、クロマトグラフィーに関連する洗浄ステップの間に取り除かれた）の組成物を提供した。この組成物は、本明細書で「ＲＳＬＡＩＬ−２」と称され、より特定すると２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２と称される。
【０２２６】
実施例２
ＲＳＬＡＩＬ−２の受容体バイアス及び関連免疫療法特性
ＩＬ−２受容体に対する結合親和性及び免疫刺激プロファイルに関連する受容体バイアス：ＲＳＬＡＩＬ−２のＩＬ−２Ｒα及びＩＬ−２Ｒβへの親和性を表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ−１００）により直接計測し、臨床的に利用可能なＩＬ−２（アルデスロイキン）と比較した。ＥＤＣ／ＮＨＳ化学を使用して抗ヒト抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）をＣＭ−５センサーチップの表面に結合させた。次にヒトＩＬ−２Ｒα−Ｆｃ又はＩＬ−２Ｒβ−Ｆｃ融合タンパク質のいずれかをこの表面にわたって捕捉リガンドとして使用した。酢酸塩緩衝液ｐＨ４．５に、５ｍＭから始まるＲＳＡＩＬ−２及びその活性ＩＬ−２コンジュゲート代謝産物（１−ＰＥＧ及び２−ＰＥＧ−ＩＬ−２）の段階希釈物を作成した。これらの希釈物をリガンドに５分間結合させて、結合した反応単位（ＲＵ）を濃度に対してプロットし、ＥＣ５０値を決定した。各ＩＬ−２受容体サブタイプに対する各アイソフォームの親和性をＩＬ−２と比べた倍数変化として計算した。
【０２２７】
ＲＳＬＡＩＬ−２のインビトロ結合及び活性化プロファイルは、ＰＥＧ化がアルデスロイキンと比べてＩＬ２とＩＬ２Ｒαとの相互作用を妨害することを示唆し；これらの効果がインビボで免疫細胞サブタイプのプロファイルをバイアスするかどうかを決定するための調査を実施した。ＲＳＬＡＩＬ−２又はＩＬ２のいずれかの投与後の腫瘍中のＣＤ８Ｔ及びＴｒｅｇ細胞の数は、ＩＬ２の多面的効果がＩＬ２／ＩＬ２Ｒα界面におけるポリ（エチレングリコール）（ＲＳＬＡＩＬ−２中として）へのＩＬ２のコンジュゲーションに起因してシフトしたかどうかの重要な尺度である。この課題に対処するため、皮下Ｂ１６Ｆ１０マウス黒色腫腫瘍を担持するマウスを単一用量のＲＳＬＡＩＬ−２又は５回用量のアルデスロイキンにより治療し、腫瘍微小環境中の免疫細胞をフローサイトメトリーにより定量した。
【０２２８】
アルデスロイキン治療マウスの腫瘍中で総及びメモリーＣＤ８細胞は腫瘍浸潤リンパ球の割合として増加し；しかしながら、これらの効果は一過的であり、ビヒクルと比べて５日目に有意性を達成した。対照的に、有意な（Ｐ＜０．０５）及び持続される総及びメモリーＣＤ８Ｔ細胞刺激は単一ＲＳＬＡＩＬ−２投与後に達成され、メモリーＣＤ８（７日目）及び総ＣＤ８（７及び１０日目）の割合がアルデスロイキンと比べて優れていた。ＲＳＬＡＩＬ−２及びアルデスロイキン治療の両方は、治療開始５及び７日後に増加した活性化ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞をもたらしたが、この効果は１０日目までに縮小した。腫瘍浸潤リンパ球のＣＤ４細胞の割合は、５日目にビヒクルと比べてＲＳＬＡＩＬ−２治療後に縮小した。１０日目、ＲＳＬＡＩＬ−２は、ビヒクル及びアルデスロイキンと比較して少数のＣＤ４細胞割合をもたらした。ＣＤ４細胞集団を、Ｔｒｅｇ集団を定義するＦｏｘＰ３＋サブセットについてさらに分析した。ＲＳＬＡＩＬ−２投与は全ての時点においてＴｒｅｇの割合を低下させ、ＰＥＧ鎖から生じるＩＬ２Ｒαサブユニットへの接近の低下と一致した。対照的に、アルデスロイキンによるＴｒｅｇ低下は穏やかであり、５日目に有意性を達成した。ＣＤ８Ｔ細胞の増加及びＴｒｅｇの低下は、７日目までに腫瘍中のＣＤ８／Ｔｒｅｇ比の顕著な上昇をもたらした。ＲＳＬＡＩＬ−２、アルデスロイキン、及びビヒクルについてのＣＤ８／Ｔｒｅｇの比はそれぞれ４４９、１８、及び４であり、ＲＳＬＡＩＬ−２についてのＩＬ２受容体アルファと比べたＩＬ２受容体ベータの優先的な活性化を裏付けた。
【０２２９】
免疫組織化学染色を実施し、ＣＤ８Ｔ細胞は数が増加しただけでなく、腫瘍細胞が散在したことを裏付けた。これらの結果は、ＲＳＬＡＩＬ−２が、腫瘍中のＴｒｅｇの等しい刺激なしで非修飾ＩＬ−２（アルデスロイキン）について見られるものよりもロバストなインビボメモリーエフェクターＣＤ８Ｔ細胞応答を誘導するために有効であることを示し、インビトロＩＬ２Ｒβ選択的結合プロファイルと一致する。即ち、ＲＳＬＡＩＬ−２はＴｒｅｇと比べてエフェクターＣＤ８＋Ｔ及びＮＫ細胞を優先的に活性化させ、拡大するために有効である。
【０２３０】
実施例３
例示的な長時間作用型ＴＬＲ作動薬、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８（レシキモド）の合成
【化１７】
2020518610.tif 000018
２０℃で、４−ａｒｍ−２０ｋ−ＰＥＧ−ＳＣＭ（５．０ｇ、１．０ｍｍｏｌのＳＣＭ）及びＲ８４８（３７７ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を、脱水したＤＭＦ（２５ｍＬ）の中に溶解させた。その反応溶液を、５０℃で１８時間撹拌した。その反応溶液を、１リットルのエチルエーテルの中に撹拌しながら注いだ。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）（３００ｍＬ）の中に加え、その懸濁液を６０℃まで加熱すると、透明な溶液が生成した。その溶液を、撹拌しながら冷却して、室温とした。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。ＩＰＡの中へ沈殿させることによる精製をもう一度繰り返し、その後で、高真空中で一夜かけて乾燥させると、純粋なコンジュゲートが白色の固形物として得られた（４．２４ｇ、５．１重量％のＲ８４８担持）。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ  ９．４（ブロード，０．９Ｈ），８．２２−８．１４（ｔ，１．８Ｈ），７．６１（ｄｄｄ，Ｊ＝８．３，７．０，１．３Ｈｚ，０．９Ｈ），７．４９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．２，７．０，１．４Ｈｚ，０．９Ｈ），４．９４（ｓ，１．８Ｈ），４．８０（ｓ，１．８Ｈ），３．７−３．９（ｍ，４６０Ｈ），１．３２（ｓ，５．１Ｈ），１．２５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２．７Ｈ）．
【０２３１】
実施例４
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−β−アラニン−Ｎ−Ｒ８４８（化合物２）の合成
【化１８】
2020518610.tif 000019
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化１９】
2020518610.tif 000020
【０２３２】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−β−アラニン：
ベータ−アラニン（７．１００ｇ、１０当量）及び重炭酸ナトリウム（６．７２０ｇ、１０当量）を、脱イオン水（８００ｍＬ）の中に加え、その混合物を撹拌して、透明な溶液を形成させた。その溶液の中に、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭ（４０．０２０ｇ、１当量）を加えた。その反応溶液を、室温で３時間撹拌した。その溶液の中に５ＮのＨＣｌを加えて、ｐＨを４．０に調節した。ジクロロメタン（１５０ｍＬ）を用いて２回、その溶液を抽出し、その有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥させた。フリットを通過させることによって、固形物を除去した。その濾液を濃縮して５０ｍＬとし、次いで、５００ｍＬのエチルエーテルを加えて、沈殿を起こさせた。濾過により、反応生成物（３５．０５０ｇ、収率８７％）が白色の粉体として得られ、高真空下で一夜かけて乾燥させた。
【０２３３】
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ３．９８（ｓ，７．１１Ｈ），３．６４（ｔ，７．１１Ｈ），３．５８−  ３．３３（ｍ，１８１８Ｈ），３．２７（ｓ，７．９０Ｈ），２．４０（ｔ，７．１１Ｈ）．
【化２０】
2020518610.tif 000021
【０２３４】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−β−アラニン−Ｎ−Ｒ８４８：
２０℃で、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−β−アラニン（４．０１２ｇ、０．８ｍｍｏｌの−ＣＯＯＨ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（２１６ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（３０７ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２０７ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２５ｍＬ）の中に溶解させた。その混合物を、室温で３０分間撹拌した。Ｒ８４８（３０２ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）を加え、その反応溶液を２０℃で２４時間撹拌した。その反応溶液を、１リットルのエチルエーテルの中に、撹拌しながら加えた。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、イソプロピルアルコール（３００ｍＬ）の中に加え、その懸濁液を加熱して６０℃とすると、透明な溶液が生成した。その溶液を、撹拌しながら冷却して、室温とした。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。イソプロピルアルコールの中へ沈殿させることによる精製をもう一度繰り返し、その後で、高真空中で一夜かけて乾燥させると、純粋なコンジュゲートが白色の固形物（３．８６０ｇ、５．６％（ｗ／ｗ）のＲ８４８担持）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．８２（ｓ，３．５６Ｈ），８．１７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，４．４９Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，４．０２Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，４．１７Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，７．５５Ｈ），４．９３（ｓ，８．３９Ｈ），４．７９（ｓ，９．０Ｈ），３．９９（ｓ，７．６０Ｈ），３．８０−３．４４（ｍ，１８１８Ｈ），１．３３（ｓ）及び１．２６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）（合計３４．１８Ｈ）．
【０２３５】
実施例５
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＢＡ−Ｎ−Ｒ８４８（化合物３）の合成
【化２１】
2020518610.tif 000022
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化２２】
2020518610.tif 000023
【０２３６】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＢＡ−Ｎ−Ｒ８４８：
２０℃で、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＢＡ（４．０２０ｇ、０．８ｍｍｏｌの−ＣＯＯＨ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（２１６ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（３０７ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２０７ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１５ｍＬ）の中に溶解させた。その混合物を、室温で３０分間撹拌した。Ｒ８４８（３０２ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）を加え、その反応溶液を２０℃で２４時間撹拌した。その反応溶液を、１リットルのエチルエーテルの中に、撹拌しながら加えた。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、イソプロピルアルコール（３００ｍＬ）の中に加え、その懸濁液を加熱して６０℃とすると、透明な溶液が生成した。その溶液を、撹拌しながら冷却して、室温とした。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。イソプロピルアルコールの中へ沈殿させることによる精製をもう一度繰り返し、その後で、高真空中で一夜かけて乾燥させると、純粋なコンジュゲートが白色の固形物（３．８０５ｇ、５．２％（ｗ／ｗ）のＲ８４８担持）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．１６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，３．４５Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，３．４３Ｈ），７．５９（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３．６３Ｈ），７．４７（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３．７１Ｈ），４．９１及び４．７８（ｓ，１５．８６Ｈ），３．７７−３．４０（ｍ，１８１８Ｈ），２．１０（ｔ，７．３０Ｈ），１．３３（ｓ）及び１．２６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）（合計３１．３４Ｈ）．
【０２３７】
実施例６
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−α−（Ｒ）−フルオロ−プロパンアミド−Ｎ−Ｒ８４８（化合物４）の合成
【化２３】
2020518610.tif 000024
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化２４】
2020518610.tif 000025
【０２３８】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−α−（Ｒ）−フルオロ−プロパン酸：
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭ（５．１４０ｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（５０ｍＬ）の中に溶解させた。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）の中に、（Ｒ）−３−アミノ−２−フルオロ−プロパン酸（４４０ｍｇ、４．１１ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（４１６ｍｇ、４．１１ｍｍｏｌ）を加えて、懸濁液を生成させた。その懸濁液を、ＤＣＭ溶液中の４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭに加えた。その反応液を、２０℃で１０日間撹拌してから、水（２００ｍＬ）で希釈した。ジクロロメタン（３×１００ｍＬ）を用いて、その水溶液を抽出した。有機相を合わせて、無水硫酸マグネシウムを用いて乾燥させ、濾過した。その濾液を濃縮して５０ｍＬとし、それをエチルエーテル（１リットル）の中に加えて、沈殿物を生成させた。その沈殿物を濾過によって捕集し、それを高真空下で乾燥させると、４．６３８ｇの白色の固形物である、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−α−（Ｒ）−フルオロ−プロパン酸が、７０％の置換度で得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．４９（ｓ，２．７７Ｈ），５．０２（ｄ，Ｊ＝４８．５Ｈｚ，２．７７Ｈ），４．１５（ｓ，３．９５Ｈ），３．６５（ｂｒ，１８１８Ｈ），３．１１（ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２．９２Ｈ），１．３５（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３．９５Ｈ）．
【化２５】
2020518610.tif 000026
【０２３９】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−α−（Ｒ）−フルオロ−プロパンアミド−Ｎ−Ｒ８４８：
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−α−（Ｒ）−Ｆ−プロパン酸（２．００４ｇ、０．４ｍｍｏｌのＣＯＯＨ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２０７ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（１５３ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、及びヒドロキシベンゾトリアゾール（１０８ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）を、脱水したジクロロメタン（１５ｍＬ）の中に溶解させた。３０分かけて、Ｒ８４８（１１３ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を加えた。その反応溶液を、２０℃で１８時間撹拌した。その反応溶液を、１リットルのエチルエーテルの中に撹拌しながら加えた。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、イソプロピルアルコール（３００ｍＬ）の中に加え、その懸濁液を加熱して６０℃とすると、透明な溶液が生成した。その溶液を、撹拌しながら冷却して、室温とした。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。イソプロピルアルコールの中へ沈殿させることによる精製をもう一度繰り返し、その後で、高真空中で一夜かけて乾燥させると、白色の固形物として、純粋なコンジュゲート（１．６０２ｇ、４．１（ｗ／ｗ）％のＲ８４８担持）が得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．１７（ｓ，５．５３Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝５７．７Ｈｚ，６．７２Ｈ），４．９２（ｓ，４．７４Ｈ），４．７９（ｓ，４．７４Ｈ），３．６２（ｂｒ，１８１８Ｈ），１．５−１．０（ｂｒ．，３０．０Ｈ）．
【０２４０】
実施例７
４−ａｒｍ−ＰＥＧ４０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８（化合物５）の合成
【化２６】
2020518610.tif 000027
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化２７】
2020518610.tif 000028
【０２４１】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ４０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８：
４−ａｒｍ−ＰＥＧ４０ｋ−ＳＣＭ（４．４１０ｇ、０．４４ｍｍｏｌのＳＣＭ）を、脱水したジクロロメタン（３３ｍＬ）の中に溶解させた。室温で、Ｒ８４８（１１６ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を加えた。そのようにして得られた混合物の溶液を、室温で４日間撹拌した。その反応混合物を濃縮して、溶媒を除去した。上述と同じようにして、イソプロピルアルコール（３００ｍＬ）を用いて、その残分を２回、再結晶させると、４．２６２ｇの反応生成物が白色の固形物として得られた。ＮＭＲ分析によると、その反応生成物には、２．０％（ｗ／ｗ）のＲ８４８が含まれていた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．１６（ｍ，５．４Ｈ），７．５８（ｔ，２．８Ｈ），７．４７（ｔ，２．８Ｈ），４．９２−４．７０（ｍ，１０．６Ｈ），４．０７（ｓ，１．５Ｈ），３．８８−３．４５（ｍ，３６３６Ｈ），１．２３（ｓ）及び１．２１（ｔ）（合計２３．６Ｈ）．
【０２４２】
実施例８
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８（化合物６）の合成
【化２８】
2020518610.tif 000029
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化２９】
2020518610.tif 000030
【０２４３】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン：
グリシン（６．００３ｇ、１０当量）及び重炭酸ナトリウム（６．７２０ｇ、１０当量）を、脱イオン水（８００ｍＬ）の中に加え、その溶液を、透明になるまで撹拌した。その溶液の中に、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭ（４０．０２０ｇ、１当量）を加えた。その反応溶液を、室温で３時間撹拌した。その溶液の中に５ＮのＨＣｌ溶液を加えて、ｐＨを４．０に調節した。ジクロロメタン（２×１５０ｍＬ）を用いて、その溶液を抽出した。有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥させた。フリットを通過させることによって、固形物を除去した。その濾液を濃縮して５０ｍＬとし、次いで、５００ｍＬのエチルエーテルを加えて、沈殿物を得た。濾過により、反応生成物が、白色の固体の粉体（３５．０５０ｇ）として得られ、高真空下、一夜かけて乾燥させた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ４．０１（ｄ，７．１Ｈ），３．９９（ｓ，７．１Ｈ），３．７４−３．４８（ｍ，１８１８Ｈ），３．３５（ｓ，７．１Ｈ）．
【化３０】
2020518610.tif 000031
【０２４４】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８：
２０℃で、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン（２．５２０ｇ、０．５ｍｍｏｌのＣＯＯＨ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（１３５ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（１９２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５８ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１５ｍＬ）の中に溶解させた。その混合物を、２０℃で３０分間撹拌した。Ｒ８４８（１８９ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を加えた。その反応溶液を、２０℃で１８時間撹拌した。その反応溶液を、１リットルのエチルエーテルの中に、撹拌しながら注いだ。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、イソプロピルアルコール（３００ｍＬ）の中に加え、その懸濁液を加熱して６０℃とすると、透明な溶液が生成した。その溶液を、撹拌しながら冷却して、室温とした。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。イソプロピルアルコールの中へ沈殿させることによる精製をもう一度繰り返し、その後で、高真空中で一夜かけて乾燥させると、純粋なコンジュゲートが白色の固形物（１．８２３ｇ、５．１％（ｗ／ｗ）のＲ８４８担持）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．９７（ｓ，３．５６Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，３．５２Ｈ），８．１６−８．１１（ｍ，２．７７Ｈ），７．８１（ｓ，２．９２Ｈ），７．６３（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３．０６Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３．４８Ｈ），４．９８（ｄ，Ｊ＝３９．６Ｈｚ，１３．３２Ｈ），４．８１（ｓ，６．６４Ｈ），４．１３（ｓ，６．２０Ｈ），３．６５（ｓ，１８１８Ｈ），１．３４（ｓ，２３．６３Ｈ），１．２７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１０．５９Ｈ）．
【０２４５】
実施例９
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−（Ｌ）−アラニン−Ｎ−Ｒ８４８（化合物７）の合成
【化３１】
2020518610.tif 000032
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化３２】
2020518610.tif 000033
【０２４６】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｌ−アラニン：
Ｌ−アラニン（７．１００ｇ、１０当量）及び重炭酸ナトリウム（６．７２０ｇ、１０当量）を、脱イオン水（８００ｍＬ）の中に加え、その溶液を、透明になるまで撹拌した。次いで、その溶液の中に、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭ（４０．０３０ｇ、１当量）を加えた。その反応溶液を、２０℃で３時間撹拌した。その溶液の中に５ＮのＨＣｌ溶液を加えて、ｐＨを４．０に調節した。ジクロロメタン（２×１５０ｍＬ）を用いて、その溶液を抽出した。有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥させた。フリットを通過させることによって、固形物を除去した。その濾液を濃縮して５０ｍＬとし、次いで、５００ｍＬのエチルエーテルを加えて、沈殿物を得た。濾過により、反応生成物（３５．０１２ｇ、収率８７％）が白色の固体粉体として得られ、高真空中、一夜かけて乾燥させた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ４．４２（ｍ，３．５６Ｈ），３．８５（ｓ，７．１１Ｈ），３．５８−  ３．３３（ｍ，１８１８Ｈ），３．２７（ｓ，７．９０Ｈ），１．３０（ｄ，１０．２８Ｈ）．
【化３３】
2020518610.tif 000034
【０２４７】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｌ−アラニン−Ｎ−Ｒ８４８：
２０℃で、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｌ−アラニン（２．５００ｇ、０．５ｍｍｏｌのＣＯＯＨ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（１９２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、及びヒドロキシベンゾトリアゾール（１３５ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を、脱水したジクロロメタン（１５ｍＬ）の中に溶解させた。３０分かけて、Ｒ８４８（１８９ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を加えた。その反応溶液を、２０℃で１８時間撹拌した。その反応溶液を、１リットルのエチルエーテルの中に撹拌しながら注いだ。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、イソプロピルアルコール（３００ｍＬ）の中に加え、その懸濁液を加熱して６０℃とすると、透明な溶液が生成した。その溶液を、撹拌しながら冷却して、室温とした。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。イソプロピルアルコールの中へ沈殿させることによる精製をもう一度繰り返し、その後で、高真空中で一夜かけて乾燥させると、白色の固形物として、純粋なコンジュゲート（１．７０２ｇ、４．２％（ｗ／ｗ）のＲ８４８担持）が得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．１４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，５．１４Ｈ），７．６９−７．５４（ｍ，３．９５Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２．３７Ｈ），４．９０（ｓ，４．７４Ｈ），４．７８（ｓ，４．７４Ｈ），３．６２（ｂｒ，１８１８Ｈ），１．６０（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，５．９３Ｈ），１．３９（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，５．９３Ｈ），１．３６−１．２７（ｍ，２１．７３Ｈ），１．２４（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１５．８０Ｈ）．
【０２４８】
実施例１０
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−（Ｌ）−バリン−Ｎ−Ｒ８４８（化合物８）の合成
【化３４】
2020518610.tif 000035
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化３５】
2020518610.tif 000036
【０２４９】
Ｂｏｃ−バリン−Ｒ８４８：
１−（４−アミノ−２−（エトキシメチル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−オール（Ｒ８４８）（２３７．５ｍｇ、０．７５５ｍｍｏｌ）を、脱水したＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）の中に溶解させた。Ｂｏｃ−Ｌ−バリン（２６３．４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１８７．４ｍｇ、１．５３４ｍｍｏｌ）を加えた。Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（２３６．１ｍｇ、１．２３２ｍｍｏｌ）を加えた。そのようにして得られた混合物を、室温で３時間撹拌した。水を加えて、その反応を停止させた。塩水を加えた。酢酸エチル（２×５０ｍＬ）を用いて、その混合物を抽出した。それらの有機溶液を合わせて、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮乾固させた。その残分を、シリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーを用い、１〜１０％のメタノール／ジクロロメタンを使用して精製すると、反応生成物（３９４．７ｍｇ）が白色の固形物として得られた。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．９９（ｂｒ．，１Ｈ），８．１５−８．１１（ｍ，２Ｈ），７．５８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｍ，１Ｈ），４．８９（ｂｒ，２Ｈ），４．７７（ｓ，２Ｈ），３．６３（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．２７（ｍ，１Ｈ），２．４５（ｂｒ，１Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），１．３１（ｂｒ，６Ｈ），１．２２（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），１．１４（ｂｒ，３Ｈ），０．９３（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５１４（ＭＨ＋／ｚ）．
【０２５０】
バリン−Ｒ８４８・ｎＴＦＡ塩：
【化３６】
2020518610.tif 000037
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（（２−（エトキシメチル）−１−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート（Ｂｏｃ−バリン−Ｒ８４８）（３７７．０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３０ｍＬ）の中に溶解させ、そしてトリフルオロ酢酸（３ｍＬ、３８．８ｍｍｏｌ）を加えた。そのようにして得られた混合物を、室温で３．５時間撹拌した。その混合物を濃縮して、溶媒を除去した。その残分を、高真空下で乾燥させると、反応生成物（６７８．５ｍｇ）がＴＦＡ塩として得られた。
ＬＣ−ＭＳ：４１４（ＭＨ＋／ｚ）。
【０２５１】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−バリン−Ｎ−Ｒ８４８
【化３７】
2020518610.tif 000038
脱水したジクロロメタン（２０ｍＬ）中の４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭ（４．１７０ｇ、０．７４ｍｍｏｌのＳＣＭ）の溶液を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）中のバリン−Ｒ８４８・ｎＴＦＡ（約０．７３４ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（０．３ｍＬ、２．１５ｍｍｏｌ）との混合物に、室温で加えた。ジクロロメタン（約１０ｍＬ）を使用して、バイアル中で、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭの残分を溶解させて、その反応混合物に加えた。トリエチルアミン（０．１５ｍＬ、１．０７６ｍｍｏｌ）を加えた。そのようにして得られた混合物を、室温で２３時間撹拌した。その反応混合物を濃縮して、溶媒を除去した。イソプロピルアルコール（２７５ｍＬ）を用いてその残分を再結晶させた。エチルエーテルを用いてその固形物を洗浄し、高真空下で一夜かけて乾燥させると、４．０５３ｇの反応生成物が白色の固形物として得られた。薬物の担持率（ｄｒｕｇ  ｌｏａｄｉｎｇ）は、４．３％（ｗ／ｗ）であった。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．９９（ｂｒ），８．１０−８．０９（ｍ，６Ｈ），７．５４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），７．４７（ｄ，３Ｈ）．７．４２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），４．８４０（ｂｒ，６Ｈ），４．７１２（ｓ，６Ｈ），４．０７−３．９５（ｍ，６Ｈ），３．７２−３．４２（ｍ，１８１８Ｈ），３．３９（ｍ，３Ｈ），２．４１（ｂｒ，６Ｈ），１．３６（ｂｒ，１８Ｈ），１．１６（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，９Ｈ），１．１２（ｍ，９Ｈ），０．９２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，９Ｈ）．
【０２５２】
実施例１１
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−（Ｌ）−ロイシン−Ｎ−Ｒ８４８（化合物９）の合成
【化３８】
2020518610.tif 000039
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化３９】
2020518610.tif 000040
【０２５３】
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｒ８４８：
１−（４−アミノ−２−（エトキシメチル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−オール（Ｒ８４８）（４２１．８ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）の中に溶解させた。Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（５０１．４ｍｇ、２．２０７ｍｍｏｌ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（３４４．６ｍｇ、２．８２ｍｍｏｌ）を加えた。Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（４３８．２ｍｇ、２．２８６ｍｍｏｌ）を加えた。そのようにして得られた混合物を、室温で１８時間撹拌した。水を加えて、その反応を停止させた。塩水を加えた。酢酸エチル（２×５０ｍＬ）を用いて、その混合物を抽出した。それらの有機溶液を合わせて、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、そして濃縮乾固させた。その残分を、シリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーを用い、１〜１０％のメタノール／ジクロロメタンを使用して精製すると、４９４ｍｇの反応生成物が白色の固形物として、７０％の収率で得られた。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ９．０３（ｂｒ，１Ｈ），８．１６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．１７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），５．２６（ｍ，１Ｈ），４．８５（ｂｒ，２Ｈ），４．７７（ｓ，２Ｈ），３．６３（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．２６（ｍ，１Ｈ），１．８９（ｍ，２Ｈ），１．６９（ｓ，３Ｈ），１．５６（ｍ，１Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ），１．３１（ｂｒ，３Ｈ），１．２２（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），１．０８（ｂｒ，３Ｈ），０．９４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５２８（ＭＨ＋／ｚ）．
【化４０】
2020518610.tif 000041
【０２５４】
Ｌｅｕ−Ｒ８４８・ｎＴＦＡ塩：
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１−（（２−（エトキシメチル）−１−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−イル）アミノ）−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イル）カルバメート（Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｒ８４８）（４９４ｍｇ、０．９３６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）の中に溶解させ、そしてトリフルオロ酢酸（３ｍＬ、３８．８ｍｍｏｌ）を加えた。そのようにして得られた混合物を、室温で４時間撹拌した。その混合物を濃縮して、溶媒を除去した。その残分を、高真空下で乾燥させると、反応生成物（８９５．７ｍｇ）がＴＦＡ塩として得られた。
ＬＣ−ＭＳ：４２８（ＭＨ＋／ｚ）。
【化４１】
2020518610.tif 000042
【０２５５】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｌ−ロイシン−Ｒ８４８：
脱水したジクロロメタン（３０ｍＬ）中、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭ（５．２００ｇ、０．９６ｍｍｏｌのＳＣＭ）の溶液を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）中、Ｒ８４８−Ｌｅｕ−ＮＨ２・ｎＴＦＡ（約０．９３６ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で加えた。ジクロロメタン（約１０ｍＬ）を使用して、バイアル中で、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭの残分を溶解させて、それを、その反応混合物に加えた。トリエチルアミン（０．３５ｍＬ、２．５１ｍｍｏｌ）を加えた。そのようにして得られた混合物を、室温で３５分間撹拌した。トリエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．７９ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を、室温で１９時間撹拌した。その反応混合物を濃縮して、溶媒を除去した。イソプロピルアルコール（２７５ｍＬ）を用いてその残分を再結晶させた。エチルエーテルを用いてその固形物を洗浄し、高真空下で一夜かけて乾燥させると、５．１２ｇの白色の固形物が反応生成物として得られた。薬物の担持率は、４％（ｗ／ｗ）であった。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．０９−８．０８（ｍ，５．５Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２．７５Ｈ），７．４０（ｍ，５．５Ｈ）．４．８５（ｂｒ，５．５Ｈ），４．７０（ｓ，５．５Ｈ），４．０２−３．９１（ｍ，５．５Ｈ），３．７０−３．３２（ｍ，１８１８Ｈ），１．８１（ｍ，２．７５Ｈ），１．７２（ｂｒ，２．７５Ｈ），１．６３（ｍ，２．７５Ｈ），１．２２（ｍ，１６．５Ｈ），１．１２（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，８．２５Ｈ），０．９５（ｂｒ，８．２５Ｈ），０．８６（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，８．２５Ｈ）．
【０２５６】
実施例１２
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−α，α−ジメチル−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８の合成（化合物１０）
【化４２】
2020518610.tif 000043
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化４３】
2020518610.tif 000044
【０２５７】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−α，α−ジメチル−グリシン：
２−アミノ−２−メチルプロパン酸（２．８９０ｇ、２８ｍｍｏｌ）及び重炭酸ナトリウム（２．３５２ｇ、２８ｍｍｏｌ）を水（４０ｍＬ）の中に溶解させた。４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭ（７．０ｇ、１．４ｍｍｏｌのＳＣＭ）を数回に分けて加えた。その反応混合物を、２０℃で１８時間撹拌した。１ＭのＨＣｌ塩（４２ｍＬ）を用いて、その反応液を中和してｐＨ４．７とした。塩化ナトリウムを用いてその反応混合物を飽和させ、ジクロロメタン（３×１００ｍＬ）を用いて抽出した。無水硫酸マグネシウム上で有機相を乾燥させ、濃縮した。イソプロピルアルコール（５００ｍＬ）を用いて残分を再結晶させると、４．７１０ｇの、白色の固形物、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋＣＭ−α，α−ジメチル−グリシンが、８０％の置換度で得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ７．４５（ｓ，３．５６Ｈ），４．１５（ｓ，２．７７Ｈ），３．９７（ｓ，２．７７Ｈ），３．６４（ｂｒ，１８１８Ｈ），３．４１（ｓ，７．９０Ｈ），１．６２（ｓ，１９．３６Ｈ）．
【化４４】
2020518610.tif 000045
【０２５８】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−α，α−ジメチル−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８：
２０℃で、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋＣＭ−α，α−ジメチル−グリシン（２．０００ｇ、０．４３ｍｍｏｌのＣＯＯＨ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（１５３ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）、及びヒドロキシベンゾトリアゾール（１０８ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）を、脱水したジクロロメタン（１５ｍＬ）の中に溶解させた。３０分かけて、Ｒ８４８（１３８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を加えた。その反応溶液を、２０℃で１８時間撹拌した。その反応溶液を、１リットルのエチルエーテルの中に撹拌しながら注いだ。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、イソプロピルアルコール（３００ｍＬ）の中に加え、その懸濁液を加熱して６０℃とすると、透明な溶液が生成した。その溶液を、撹拌しながら冷却して、室温とした。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。イソプロピルアルコールの中へ沈殿させることによる精製をもう一度繰り返し、その後で、高真空中で一夜かけて乾燥させると、白色の固形物として、純粋なコンジュゲート（１．８１９ｇ、４．７％（ｗ／ｗ）Ｒ８４８担持）が得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ９．７１（ｓ，３．９５Ｈ），８．２９−８．０３（ｍ，３．９５Ｈ），７．５７（ｓ，３．９５Ｈ），７．４５（ｓ，３．９５Ｈ），４．８３（ｄ，Ｊ＝６６．８Ｈｚ，１１．８５Ｈ），３．６１（ｂｒ，１８１８Ｈ），２．５０（ｓ，７．９０Ｈ），１．７６（ｓ，１１．８５Ｈ），１．４２（ｓ，３．９５Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ＝３４．３Ｈｚ，２７．６５Ｈ）．
【０２５９】
実施例１３
ｍＰＥＧ５ｋ−カルバメート−Ｎ−Ｒ８４８（化合物１１）の合成
【化４５】
2020518610.tif 000046
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化４６】
2020518610.tif 000047
【０２６０】
ｍＰＥＧ５ｋ−カルバメート−Ｎ−Ｒ８４８：
５０℃で、ｍＰＥＧ５ｋ−ＳＣ（２．５００ｇ、０．５ｍｍｏｌ）、Ｒ８４８（２３６ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を、脱水したＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）の中に溶解させた。その反応溶液を、５０℃で１８時間撹拌した。その反応溶液を、１リットルのエチルエーテルの中に撹拌しながら加えた。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、イソプロピルアルコール（３００ｍＬ）の中に加え、その懸濁液を加熱して６０℃とすると、透明な溶液が生成した。その溶液を、撹拌しながら冷却して、室温とした。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。イソプロピルアルコールの中へ沈殿させることによる精製をもう一度繰り返し、その後で、高真空中で一夜かけて乾燥させると、白色の固形物として、純粋なコンジュゲート（２．３３８ｇ、４．５％（ｗ／ｗ）のＲ８４８担持）が得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．１８（ｓ，０．７７Ｈ），８．１３（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．３Ｈｚ，０．７８Ｈ），７．５９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．４，７．０，１．３Ｈｚ，０．８２Ｈ），７．４９−７．４４（ｍ，０．８２Ｈ），４．９１（ｓ，１．７Ｈ），４．７８（ｓ，１．７Ｈ），４．４３（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．６３（ｂｒ，５７４Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），１．３２（ｓ，５Ｈ），１．２５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）．
【０２６１】
実施例１４
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−カルバメート−Ｎ−Ｒ８４８（化合物１２）の合成
【化４７】
2020518610.tif 000048
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化４８】
2020518610.tif 000049
【０２６２】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−カルバメート−Ｎ−Ｒ８４８：
５０℃で、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣ（５．０ｇ、１．０ｍｍｏｌのＳＣＭ）及びＲ８４８（３７７ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を、脱水した１，２−ジクロロエタン（２５ｍＬ）の中に溶解させた。その溶液の中に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２９ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を加えた。その反応溶液を、５０℃で１８時間撹拌した。その反応溶液を、１リットルのエチルエーテルの中に撹拌しながら加えた。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、イソプロピルアルコール（３００ｍＬ）の中に加え、その懸濁液を加熱して６０℃とすると、透明な溶液が生成した。その溶液を、撹拌しながら冷却して、室温とした。沈殿物が生成したので、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。イソプロピルアルコールの中へ沈殿させることによる精製をもう一度繰り返し、その後で、高真空中で一夜かけて乾燥させると、白色の固形物として、純粋なコンジュゲート（４．２４０ｇ、４．５％（ｗ／ｗ）のＲ８４８担持）が得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．１６（ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，５．９３Ｈ），７．６１（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，３．１６Ｈ），７．４８（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，３．１６Ｈ），４．９３（ｓ，２．９６Ｈ），４．８０（ｓ，５．９３Ｈ），４．４５（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２．９６Ｈ），３．８２（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２．９６Ｈ），３．７９（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，５．９３Ｈ），３．６５（ｂｒ，１８１８Ｈ），３．４２（ｓ，３．１６Ｈ），１．３３（ｓ，１９．７５Ｈ），１．２６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，７．９０Ｈ）．
【０２６３】
実施例１５
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−尿素−Ｎ−Ｒ８４８（化合物１３）の合成
【化４９】
2020518610.tif 000050
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化５０】
2020518610.tif 000051
【０２６４】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−尿素−Ｎ−Ｒ８４８：
５０℃で、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−イソシアネート（１．０ｇ、０．２ｍｍｏｌのＮＣＯ）及びＲ８４８（６９．２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を、脱水した１，２−ジクロロエタン（１０ｍＬ）の中に溶解させた。その反応溶液を、５０℃で１８時間撹拌した。その反応溶液を、０．５リットルのエチルエーテルの中に撹拌しながら注いだ。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、イソプロピルアルコール（２５０ｍＬ）の中に加え、その懸濁液を加熱して６０℃とすると、透明な溶液が生成した。その溶液を、撹拌しながら冷却して、室温とした。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。イソプロピルアルコールの中へ沈殿させることによる精製をもう一度繰り返し、その後で、高真空中で一夜かけて乾燥させると、白色の固形物（９３８ｍｇ、４．７％（ｗ／ｗ）のＲ８４８担持）として、純粋なコンジュゲートが得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １０．３０（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３．５６Ｈ），８．１７−８．０９（ｍ，７．１１Ｈ），７．９４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，３．５６Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３．５６Ｈ），７．４３（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３．５６Ｈ），４．９２（ｓ，７．５１Ｈ），４．７７（ｓ，７．５１Ｈ），３．６３（ｂｒ，１８１８Ｈ），１．３２（ｓ，２３．７０Ｈ），１．２４（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１０．６７Ｈ）．
【０２６５】
実施例１６
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−イミキモド（化合物１４）の合成
【化５１】
2020518610.tif 000052
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化５２】
2020518610.tif 000053
【０２６６】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−イミキモド：
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭ（６．７８９ｇ、１．２ｍｍｏｌのＳＣＭ）を脱水したジクロロメタン（３３ｍＬ）の中に溶解させ、次いで、室温で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０ｍＬ）中のイミキモド（３５９．７ｍｇ、１．４５２ｍｍｏｌ）の懸濁液に加えた。ジクロロメタン（約１０ｍＬ）を使用して、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＳＣＭの残分を溶解させて、その反応混合物に加えた。そのようにして得られた混合物を、室温で３日間撹拌した。ジクロロメタン（１０ｍＬ）を加えた。その混合物を、室温でもう１日撹拌した。その反応混合物を濃縮して、溶媒を除去した。その残分を、イソプロピルアルコールを用いて２回再結晶させると、４．８６１２ｇの反応生成物が白色の固形物として得られた。薬物の担持率は、３．９％（ｗ／ｗ）であった。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ９．５５（ｂｒ，２．５Ｈ），８．０２６（ｍ，３．２Ｈ），７．８５３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３．３Ｈ），７．７２０（ｓ，３．３Ｈ），７．４５０（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３．３Ｈ），７．３７１（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３．３Ｈ），４．３０−４．１８（ｍ，１３．２６Ｈ），３．４７１（ｍ，１８１８Ｈ），２．１９０（ｍ，３．１Ｈ），０．８７７及び０．９８６（２ｓ，２０．４Ｈ）．
【０２６７】
実施例１７
４−ａｒｍ−ＰＥＧ４０ｋ−ＣＭ−Ｎ−イミキモド（化合物１５）の合成
【化５３】
2020518610.tif 000054
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化５４】
2020518610.tif 000055
【０２６８】
４−ａｒｍ−ＰＥＧ４０ｋ−ＣＭ−Ｎ−イミキモド：
４−ａｒｍ−ＰＥＧ４０ｋ−ＳＣＭ（５．１１０ｇ、０．５１ｍｍｏｌのＳＣＭ）を脱水したジクロロメタン（３３ｍＬ）の中に溶解させ、室温で、イミキモド（１４８ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）を加えた。そのようにして得られた懸濁液を、室温で４日間撹拌すると、透明な溶液が生成した。その反応混合物を濃縮して、溶媒を除去した。上述と同じようにして、イソプロピルアルコール（２５０ｍＬ）を用いて、その残分を２回、再結晶させると、４．６０９ｇの反応生成物が白色の固形物として得られた。ＮＭＲ分析では、その反応生成物には、１．８％（ｗ／ｗ）のイミキモドが含まれていた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ８．２１（ｄ，３．０６Ｈ），８．０２（ｄ，３．０６Ｈ），７．８５（ｓ，３．１５Ｈ），７．６３（ｔ，３．３４Ｈ），７．５３（ｔ，３．１７Ｈ），４．３４（ｄ，６．２１Ｈ），３．８９−３．４３（ｍ，３６３６Ｈ），１．０３（ｓ，１８．０９Ｈ）．
【０２６９】
実施例１８
４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−４−（（６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）−９Ｈ−プリン−９−イル）メチル）−ベンズアミド（化合物１６）の合成
【化５５】
2020518610.tif 000056
タイトル化合物を、以下の反応スキームに従って合成した。
【化５６】
2020518610.tif 000057
【０２７０】
２０℃で、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−アミン（１．５００ｇ、０．３ｍｍｏｌのアミン）をジクロロメタン（３ｍＬ）の中に溶解させた。その溶液を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１１６ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム−３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（１３７ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、及び４−（（６−アミノ−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシエトキシ）−９Ｈ−プリン−９−イル）メチル）安息香酸（１０８ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を含む、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）の溶液の中に加えた。その反応混合物を、２０℃で１８時間撹拌した。その反応溶液を、０．３リットルのエチルエーテルの中に撹拌しながら加えた。生成した沈殿物を、濾過によって捕集し、エチルエーテル（５０ｍＬ）を用いて洗浄した。そのようにして得られた固形物を、フラッシュクロマトグレフィーにより、ジクロロメタン中１０〜３０％のメタノールを用いて精製した。その反応生成物を、２０ｍＬｍのジクロロメタンの中に溶解させ、濾過した。その濾液を濃縮し、もう一度エチルエーテルの中で沈殿させると、純粋なコンジュゲート３００ｍｇが、白色の固形物として得られた（薬物の担持率、６．０％（ｗ／ｗ））。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ９．２６（ｓ，３．９５Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，７．９０Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，７．９０Ｈ），５．６７（ｓ，７．９０Ｈ），５．０４（ｓ，７．９０Ｈ），４．４２（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，７．９０Ｈ），３．６６（ｂｒ，１８１８Ｈ）．
【０２７１】
実施例１９
インビボ試験：マウスＣＴ−２６結腸腫瘍モデルにおけるＲＳＬＡＩＬ−２及びＴＬＲ作動薬並びに４−１ＢＢ作動薬の投与
マウスＣＴ−２６結腸腫瘍モデルにおいて、単剤の４−１ＢＢ作動薬及びＴＬＲ作動薬と組み合わせたＲＳＬＡＩＬ−２による免疫療法と比較した場合の例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬であるＲＳＬＡＩＬ−２、及び例示的な長時間作用型ＴＬＲ作動薬（４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８）並びに例示的な４−１ＢＢ作動薬（抗ＣＤ１３７抗体ＬＯＢ１２．３）の併用の抗腫瘍応答を評価並びに比較するための試験を実施した。
【０２７２】
インビボモデル：使用されたマウスは、各側腹部に移植された２００万個のＣＴ２６腫瘍細胞を有する約１０週齢の雌Ｂａｌｂ／ｃ系統であった。細胞を１０日間腫瘍に成熟させて、１００〜１５０ｍｍ３の容積に達した。
【０２７３】
投与：４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８を、２つの腫瘍のうちの１つ（第１の腫瘍）の腫瘍内又は腫瘍周囲に（即ち、直接的に）４０μｌ量で投与した。第２の反対側の腫瘍は、ＴＬＲ作動薬である（４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８）により直接的に治療されなかった。ＲＳＬＡＩＬ−２を０．８ｍｇ／ｋｇで静脈内注射により全身的に投与した。ＣＤ１３７作動薬は、腹腔内注射により全身的に投与された。
【０２７４】
標識された群：「ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８」：マウスは、腫瘍サイズが１００〜１５０ｍｍ３である最初の投与日（投与０日目）に２０μｇの４ａｒｍ−２０ｋＰＥＧ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８を腫瘍内／腫瘍周囲に投与された。同じマウスはまた、４日目及び１３日目に０．８ｍｇ／ｋｇの用量でＲＳＬＡＩＬ−２を静脈内に投与された（即ち、それらは投与０日目から４日後に開始して９日ごとに、合計で２回投与された）。
【０２７５】
標識された群「１００μｇ  ＣＤ１３７作動薬」：マウスは、１００〜１５０ｍｍ３の範囲の腫瘍サイズである最初の投与日（投与０日目）で始めて、さらに５日目及び１０日目に投与され、合計３回１００μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与された。
【０２７６】
標識された群「１０μｇ  ＣＤ１３７作動薬」：マウスは、１００〜１５０ｍｍ３の範囲の腫瘍サイズである最初の投与日（投与０日目）で始めて、さらに５日目及び１０日目に投与され、合計３回１０μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与された。
【０２７７】
標識された群「１００μｇ  ＣＤ１３７作動薬＋ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８」：マウスは、１００〜１５０ｍｍ３の範囲の腫瘍サイズである最初の投与日（投与０日目）で始めて、さらに５日目及び１０日目に投与され、合計３回１００μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与された。同じマウスが、腫瘍サイズが１００〜１５０ｍｍ３である最初の投与日（投与０日目）に２０μｇの４−ａｒｍ−２０ｋＰＥＧ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８を腫瘍内／腫瘍周囲に投与された。同じマウスはまた、４日目及び１３日目に０．８ｍｇ／ｋｇの用量でＲＳＬＡＩＬ−２を静脈内に投与された（即ち、それらは投与０日目の後、４日目に開始して９日おきに合計で２用量投与された）。
【０２７８】
標識された群「１０μｇ  ＣＤ１３７作動薬＋ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８」：マウスは、１００〜１５０ｍｍ３の範囲の腫瘍サイズである最初の投与日（投与０日目）で始めて、さらに５日目及び１０日目に投与され、合計３回１０μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与された。同じマウスが、腫瘍サイズが１００〜１５０ｍｍ３である最初の投与日（投与０日目）に２０μｇの４−ａｒｍ−２０ｋＰＥＧ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８を腫瘍内／腫瘍周囲に投与された。同じマウスはまた、４日目に０．８ｍｇ／ｋｇの用量でＲＳＬＡＩＬ−２を静脈内に投与された（即ち、それらは投与０日目の後、４日目に開始して９日おきに合計で２用量投与された）。
【０２７９】
標識された群「ビヒクル」：マウスは、１００〜１５０ｍｍ３の範囲の腫瘍サイズである最初の投与日（投与０日目）に４０μｌのハンクス緩衝生理食塩水（４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８のビヒクル）を腫瘍内／腫瘍周囲に投与された。同じマウスはまた、４日目及び１３日目にＲＳＬＡＩＬ−２のビヒクルを静脈内に投与された（投与４日目から開始して９日ごとに、合計で２回の投与）。
【０２８０】
測定：腫瘍容積を、１週間に３回のキャリパー測定によって収集し、式：Ｌ×Ｗ２／２（式中、Ｌは腫瘍の長さであり、Ｗは腫瘍の幅である）によって算出した。
【０２８１】
結果：データは表１において提供される。結果は、同じ用量レベルでのＣＤ１３７作動薬単剤療法及び効果の乏しいＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８の二重の併用と比較した場合、低い方の１０μｇＣＤ１３７作動薬用量レベルでの三重の併用について劇的であり、即ち、ＲＳＬＡＩＬ−２及び４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８及びＣＤ１３７作動薬の三重の併用投与は、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８が注射により直接投与された第１の腫瘍を根絶するのに有効であっただけでなく、第２の腫瘍を根絶するのにも有効であった。完全な腫瘍退縮後の２１日の期間を通じて、腫瘍の再生は観察されなかった。さらに、低い方の１０μｇのＣＤ１３７作動薬用量レベルによる三重の併用療法群については１００％が生存したままであったが、「１０μｇ  ＣＤ１３７作動薬」単剤療法群及び「ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８」群においては、４２日目までに２５％の生存へと減少した。「１００μｇ  ＣＤ１３７作動薬」群は単剤療法として８９％の生存率を示したが、ＲＳＬＡＩＬ−２及び４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８と１００μｇのＣＤ１３７作動薬用量レベルの三重の併用は、１５日目までに「１００μｇ  ＣＤ１３７作動薬＋ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８」群において７５％へと毒性に関連する生存の減少をもたらした。
【０２８２】
【表１】
2020518610.tif 000058
【０２８３】
生存割合は以下のとおりに提供される：
０％≦＋＜２５％
２５％≦＋＋＜５０％
５０％≦＋＋＋＜７５％
７５％≦＋＋＋＋＜１００％
【０２８４】
１０μｇのＣＤ１３７作動薬による単剤療法は、投与開始後４２日目の実験終了までに当該動物のうち２５％のみの生存をもたらした。生存している動物の２５％のうち全てが完全奏功を有し、治療された側の腫瘍及び治療されていない側の腫瘍の両方が消失した。
【０２８５】
１００μｇのＣＤ１３７作動薬による単剤療法は、投与の開始後４２日目の試験終了までに当該動物のうち８７．５％の生存をもたらした。生存群における全ての動物は、完全奏功を有し、両方の腫瘍が根絶された。
【０２８６】
ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８による二重の薬剤治療は、投与の開始後４２日目の試験終了までに当該動物のうち１２．５％の生存をもたらした。生存群における全ての動物は、完全奏功を有し、両方の腫瘍が根絶された。
【０２８７】
１００μｇのＣＤ１３７作動薬＋ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８による三重の薬剤治療は、投与の開始後４２日目の試験終了までに当該動物のうち８７．５％の生存をもたらした。生存群における全ての動物は、完全奏功を有し、両方の腫瘍が根絶された。
【０２８８】
最も特記されることとして、１０μｇのＣＤ１３７作動薬＋ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８による三重の併用治療は、投与の開始後４２日目の試験終了までに当該動物のうち１００％の生存をもたらした。生存群における全ての動物は、完全奏功を有し、両方の腫瘍が根絶された。際だったことに、第１及び第２の腫瘍の両方が、治療の期間を通じて消失した。即ち、予想に反して、低用量１０μｇのＣＤ１３７作動薬及びＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８による併用治療は、等価用量のＣＤ１３７作動薬の単剤及び有効量未満のＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８による二重の併用による免疫療法治療モダリティと比較して有意な改善であるだけでなく（少なくとも４２日目まで１００％の生存の三重の併用免疫液療法に対して、それぞれ４２日目で１０％と２０％の生存）、第１の腫瘍（ＴＬＲ作動薬で注射される）及び第２の腫瘍（ＴＬＲ作動薬の直接的な注射なし、第１の腫瘍部位から離れている）の両方の完全な根絶ももたらした。
【０２８９】
ビヒクル群は生存している動物がいなかった。全ての動物は、治療開始後１１日目と２２日目の間で極限の腫瘍容積に達したため試験から取り除かれた。
【０２９０】
実施例２０
インビボ試験：マウスＣＴ−２６結腸腫瘍モデルにおけるＲＳＬＡＩＬ−２及び４−１ＢＢ作動薬の投与
マウスＣＴ−２６結腸腫瘍モデルにおいて、単剤の４−１ＢＢ作動薬による免疫療法と比較した場合の例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬であるＲＳＬＡＩＬ−２、及び例示的な４−１ＢＢ作動薬（抗ＣＤ１３７抗体ＬＯＢ１２．３）の併用の抗腫瘍応答を評価並びに比較するための試験を実施した。
【０２９１】
インビボモデル：使用されたマウスは、各側腹部に移植された２００万個のＣＴ２６腫瘍細胞を有する約１０週齢の雌Ｂａｌｂ／ｃ系統であった。細胞を１０日間腫瘍に成熟させて、１００〜１５０ｍｍ３の容積に達した。
【０２９２】
ＲＳＬＡＩＬ−２を０．８ｍｇ／ｋｇで静脈内注射により全身的に投与した。ＣＤ１３７作動薬は、腹腔内注射により全身的に投与した。
【０２９３】
標識された群「１００μｇ  ＣＤ１３７作動薬」：マウスは、１００〜１５０ｍｍ３の範囲の腫瘍サイズである最初の投与日（投与０日目）で始めて、さらに５日目及び１０日目に投与され、合計３回１００μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与された。
【０２９４】
標識された群「１０μｇ  ＣＤ１３７作動薬」：マウスは、１００〜１５０ｍｍ３の範囲の腫瘍サイズである最初の投与日（投与０日目）で始めて、さらに５日目及び１０日目に投与され、合計３回１０μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与された。
【０２９５】
標識された群「１００μｇ  ＣＤ１３７作動薬＋ＲＳＬＡＩＬ−２」：マウスは、１００〜１５０ｍｍ３の範囲の腫瘍サイズである最初の投与日（投与０日目）で始めて、さらに５日目及び１０日目に投与され、合計３回１００μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与された。同じマウスはまた、４日目及び１３日目に０．８ｍｇ／ｋｇの用量でＲＳＬＡＩＬ−２を静脈内に投与された（即ち、それらは投与０日目の後、４日目に開始して９日おきに合計で２用量投与された）。
【０２９６】
標識された群「ビヒクル」マウスは、１００〜１５０ｍｍ３の範囲の腫瘍サイズである最初の投与日（投与０日目）に４０μｌのハンクス緩衝生理食塩水（４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８のビヒクル）を腫瘍内／腫瘍周囲に投与された。同じマウスはまた、４日目及び１３日目にＲＳＬＡＩＬ−２のビヒクルを静脈内に投与された（投与４日目から開始して９日ごとに、合計で２用量の投与）。
【０２９７】
測定：腫瘍容積を、１週間に２〜３回のキャリパー測定によって収集し、式：Ｌ×Ｗ２／２（式中、Ｌは腫瘍の長さであり、Ｗは腫瘍の幅である）によって算出した。
【０２９８】
結果：データは表２において提供される。
【０２９９】
【表２】
2020518610.tif 000059
【０３００】
生存割合は以下のとおりに提供される：
０％≦＋＜２５％
２５％≦＋＋＜５０％
５０％≦＋＋＋＜７５％
７５％≦＋＋＋＋＜１００％
【０３０１】
１０μｇのＣＤ１３７作動薬による単剤療法は、投与開始後４２日目の実験終了までに当該動物のうち２５％のみの生存をもたらした。生存している動物の２５％のうち全てが完全奏功を有し、治療された側の腫瘍及び治療されていない側の腫瘍の両方が消失した。
【０３０２】
１００μｇのＣＤ１３７作動薬による単剤療法は、投与の開始後４２日目の試験終了までに当該動物のうち８７．５％の生存をもたらした。生存群における全ての動物は、完全奏功を有し、両方の腫瘍が根絶された。
【０３０３】
最も特記されることとして、１０μｇのＣＤ１３７作動薬＋ＲＳＬＡＩＬ−２による二重の併用治療は、投与の開始後４２日目の試験終了までに当該動物のうち１００％の生存をもたらした。生存群における全ての動物は、完全奏功を有し、両方の腫瘍が根絶された。際だったことに、第１及び第２の腫瘍の両方が、治療の期間を通じて消失した。即ち、予想に反して、低用量の１０μｇのＣＤ１３７作動薬及びＲＳＬＡＩＬ−２による併用治療は、等価用量のＣＤ１３７作動薬の単剤（４２日目で２５％生存）と比較して、有意な改善であるだけではない。
【０３０４】
実施例２１
マウスＣＴ−２６結腸腫瘍モデルにおけるＲＳＬＡＩＬ−２及びＴＬＲ作動薬並びに４−１ＢＢ作動薬の投与
マウスＣＴ−２６結腸腫瘍モデルにおいて、単剤の４−１ＢＢ作動薬及びＴＬＲ作動薬と組み合わせたＲＳＬＡＩＬ−２による免疫療法と比較した場合の例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬であるＲＳＬＡＩＬ−２、及び例示的な長時間作用型ＴＬＲ作動薬（４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８）並びに４−１ＢＢ作動薬（抗ＣＤ１３７抗体ＬＯＢ１２．３）の併用の抗腫瘍応答を評価並びに比較するための試験を実施する。
【０３０５】
インビボモデル：約１０週齢の雌Ｂａｌｂ／ｃ系統マウスは、各側腹部に移植されたＣＴ−２６腫瘍細胞と共に使用される。細胞を腫瘍に成熟させて（例えば、１０日間）、好適な容積（例えば、１００〜１５０ｍｍ３の容積）に達する。
【０３０６】
投与：４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８は、適切な用量（例えば、４０μｌの量）で２つの腫瘍のうちの１つ（第１の腫瘍）に対して腫瘍内又は腫瘍周囲に（即ち、直接的に）投与される。第２の反対側の腫瘍は、ＴＬＲ作動薬（４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８）により直接的に治療されなくてもよい。ＲＳＬＡＩＬ−２は（例えば、０．８ｍｇ／ｋｇで）静脈内注射により全身的に投与される。ＣＤ１３７作動薬は、腹腔内注射により全身的に投与される。
【０３０７】
標識された群：「ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８」：マウスは、適切な腫瘍サイズ（例えば１００〜１５０ｍｍ３）である最初の投与日（投与０日目）に４−ａｒｍ−２０ｋＰＥＧ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８（例えば、２０μｇ）を腫瘍内／腫瘍周囲に投与される。同じマウスはまた、適切な用量（例えば、４日目及び１３日目に０．８ｍｇ／ｋｇの合計２用量の投与）でＲＳＬＡＩＬ−２を静脈内に投与される。
【０３０８】
標識された群「１００μｇ  ＣＤ１３７作動薬」：マウスは、適切な腫瘍サイズ（例えば、１００〜１５０ｍｍ３の範囲）である最初の投与日（投与０日目）で始めて、任意選択によりさらなる日（例えば、５日目及び１０日目）において適切な合計回数（例えば、３回）で、１００μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与される。
【０３０９】
標識された群「１０μｇ  ＣＤ１３７作動薬」：マウスは、適切な腫瘍サイズ（例えば、１００〜１５０ｍｍ３の範囲）である最初の投与日（投与０日目）で始めて、任意選択によりさらなる日（例えば、５日目及び１０日目）において適切な合計回数（例えば、３回）で、１０μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与される。
【０３１０】
標識された群「１００μｇ  ＣＤ１３７作動薬＋ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８」：マウスは、適切な腫瘍サイズ（例えば、１００〜１５０ｍｍ３の範囲）である最初の投与日（投与０日目）で始めて、任意選択によりさらなる日（例えば、５日目及び１０日目）に投与され、適切な合計回数（例えば、合計３回）で、１００μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与される。同じマウスは、適切な腫瘍サイズ（例えば１００〜１５０ｍｍ３）である最初の投与日（投与０日目）に適切な用量の４−ａｒｍ−２０ｋＰＥＧ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８（例えば、２０μｇ）を腫瘍内／腫瘍周囲に投与される。同じマウスはまた、適切な用量（例えば、別々の日に０．８ｍｇ／ｋｇ）でＲＳＬＡＩＬ−２を静脈内に投与される。
【０３１１】
標識された群「１０μｇ  ＣＤ１３７作動薬＋ＲＳＬＡＩＬ−２＋４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８」：マウスは、適切な腫瘍サイズ（例えば、１００〜１５０ｍｍ３の範囲）である最初の投与日（投与０日目）で始めて、任意選択によりさらなる日（例えば、５日目及び１０日目）に投与され、適切な回数（例えば、合計３回）で、１０μｇのＣＤ１３７作動薬を腹腔内に投与される。同じマウスは、適切な腫瘍サイズ（例えば１００〜１５０ｍｍ３）である最初の投与日（投与０日目）に適切な量の４−ａｒｍ−２０ｋＰＥＧ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８（例えば、２０μｇ）を腫瘍内／腫瘍周囲に投与される。同じマウスはまた、適切な回数の投与（例えば、４日目及び９日ごとに）について適切な用量（例えば、０．８ｍｇ／ｋｇ）でＲＳＬＡＩＬ−２を静脈内に投与される。
【０３１２】
標識された群「ビヒクル」マウスは、適切な腫瘍サイズ（例えば、１００〜１５０ｍｍ３の範囲）である最初の投与日（投与０日目）に４０μｌのハンクス緩衝生理食塩水（４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８のビヒクル）を腫瘍内／腫瘍周囲に投与される。同じマウスはまた、適切な日（例えば、投与４日目から開始して９日ごとに、４日目及び１３日目の合計２用量の投与）にＲＳＬＡＩＬ−２のビヒクルを静脈内に投与される。
【０３１３】
測定：腫瘍容積を、１週間に２〜３回のキャリパー測定によって収集し、式：Ｌ×Ｗ２／２（式中、Ｌは腫瘍の長さであり、Ｗは腫瘍の幅である）によって算出する。
【０３１４】
参照による援用
本明細書において参照される全ての論文、書籍、特許、特許公報及び他の刊行物は、全体として参照により援用される。本明細書の教示と参照によって援用される技術との間に不一致が生じた場合、その教示の意味及び本明細書の定義が（特に本明細書に添付される特許請求の範囲で用いられる用語に関して）優先するものとする。例えば、本願及び参照によって援用される刊行物が同じ用語を別様に定義する場合、定義が載せられている文書の教示の範囲内でその用語の定義が維持されるものとする。
【０３１５】
本発明は、例えば以下を提供する。
（項目１）
癌を有する対象に、４−１ＢＢ作動薬並びに少なくともＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びトル様受容体作動薬を投与することを含む投与の方法。
（項目２）
前記４−１ＢＢ作動薬、前記ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び前記トル様受容体作動薬の各々が投与される、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記４−１ＢＢ作動薬及び前記ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が投与される、項目１〜２のいずれか一項に記載の方法。
（項目４）
前記４−１ＢＢ作動薬及び前記トル様受容体作動薬が投与される、項目１〜３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５）
前記４−１ＢＢ作動薬、前記トル様受容体作動薬及び／又は前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の各々が、実質的に同時に投与される、項目１〜４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６）
前記４−１ＢＢ作動薬が、前記トル様受容体作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つと別々に投与される、項目１〜５のいずれか一項に記載の方法。
（項目７）
前記４−１ＢＢ作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の各々が、実質的に同時に投与される、項目１〜６のいずれか一項に記載の方法。
（項目８）
前記４−１ＢＢ作動薬及び前記トル様受容体作動薬の各々が、実質的に同時に投与される、項目１〜７のいずれか一項に記載の方法。
（項目９）
前記トル様受容体作動薬が、前記４−１ＢＢ作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つと別々に投与される、項目１〜８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０）
前記４−１ＢＢ作動薬が前記対象に全身的に投与される、項目１〜９のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１）
前記４−１ＢＢ作動薬が前記対象の静脈内に投与される、項目１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
（項目１２）
前記４−１ＢＢ作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が、同じ製剤において投与される、項目１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３）
前記トル様受容体作動薬が前記対象における癌組織に直接投与される、項目１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４）
前記トル様受容体作動薬が前記対象の固形癌に直接投与される、項目１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５）
前記トル様受容体作動薬が、腫瘍内注射及び腫瘍周囲注射から選択される方法によって投与される、項目１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が前記対象に全身的に投与される、項目１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が前記対象の静脈内に投与される、項目１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
（項目１８）
前記４−１ＢＢ作動薬が、前記４−１ＢＢ受容体に選択的に結合する抗体である、項目１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１９）
前記４−１ＢＢ作動薬が抗ＣＤ１３７抗体である、項目１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
（項目２０）
前記４−１ＢＢ作動薬がウレルマブ及びウトミルマブから選択される、項目１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が、マルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２、（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２、及び（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）６ａｖｇインターロイキン−２から選択される、項目１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
前記ＴＬＲ作動薬が、ＴＬＲ−７作動薬、ＴＬＲ−８作動薬又はＴＬＲ−７／８作動薬である、項目１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
（項目２３）
前記ＴＬＲ作動薬が、Ｒ８４８、イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８、及び化合物１〜１６のいずれか１つから選択される、項目１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２４）
前記癌が固形癌である、項目１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２５）
前記癌が、乳癌、卵巣癌、結腸癌、前立腺癌、骨癌、結腸直腸癌、胃癌、リンパ腫、悪性黒色腫、肝癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、膵癌、甲状腺癌、腎癌、胆管癌、脳癌、子宮頸癌、上顎洞癌、膀胱癌、食道癌、ホジキン病及び副腎皮質癌から選択される、項目１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
（項目２６）
前記４−１ＢＢ作動薬並びにＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びトル様受容体作動薬の少なくとも１つの投与が、免疫系の活性化を促進するのに有効である、項目１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
（項目２７）
前記４−１ＢＢ作動薬並びにＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びトル様受容体作動薬の少なくとも１つの投与が、ＣＤ８  Ｔ細胞、ＣＤ１１ｃ＋及びＣＤ８＋樹状細胞、並びに好中球の少なくとも１つの活性化を促進するのに有効である、項目１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
（項目２８）
前記４−１ＢＢ作動薬並びにＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びトル様受容体作動薬の少なくとも１つの投与が、制御性Ｔ細胞、マクロファージ、及び単球を抑制するのに有効である、項目１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
（項目２９）
前記４−１ＢＢ作動薬並びにＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及びトル様受容体の少なくとも１つの投与が、前記癌に対してアブスコパル効果をもたらすのに有効である、項目１〜２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３０）
４−１ＢＢ作動薬；
（ｉ）トル様受容体作動薬及び（ｉｉ）ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つ；並びに
癌を有する対象へのそれらの投与のための説明書を含むキット。
（項目３１）
前記４−１ＢＢ作動薬が、全身投与のために製剤化される、項目３０に記載のキット。
（項目３２）
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が、全身投与のために製剤化される、項目３０又は３１に記載のキット。
（項目３３）
前記４−１ＢＢ作動薬又は前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬の少なくとも１つが、静脈内投与のために製剤化される、項目３０〜３２のいずれか一項に記載のキット。
（項目３４）
前記キットが、単一の製剤において製剤化された少なくとも前記４−１ＢＢ作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬を含む、項目３０〜３３のいずれか一項に記載のキット。
（項目３５）
前記キットが、（ｉ）単一の製剤において製剤化された前記４−１ＢＢ作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、並びに（ｉｉ）別々の製剤において製剤化された前記トル様受容体作動薬を含む、項目３０〜３４のいずれか一項に記載のキット。
（項目３６）
前記４−１ＢＢ作動薬、前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬、及び／又は前記ＴＬＲ作動薬の各々が、水性希釈剤中での再構成に好適な固体形態である、項目３０〜３５のいずれか一項に記載のキット。
（項目３７）
前記トル様受容体作動薬が前記対象における癌組織への直接的な投与のために製剤化される、項目３０〜３６のいずれか一項に記載のキット。
（項目３８）
前記トル様受容体作動薬が腫瘍内注射又は腫瘍周囲注射のために製剤化される、項目３０〜３７のいずれか一項に記載のキット。
（項目３９）
前記４１ＢＢ作動薬が、抗ＣＤ１３７抗体、ウレルマブ及びウトミルマブから選択される、項目３０〜３８のいずれか一項に記載のキット。
（項目４０）
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が、マルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２、（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２、及び（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）６ａｖｇインターロイキン−２から選択される、項目３０〜３９のいずれか一項に記載のキット。
（項目４１）
前記ＴＬＲ作動薬が、Ｒ８４８、イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８、及び化合物１〜１６のいずれか１つから選択される、項目３０〜４０のいずれか一項に記載のキット。
（項目４２）
療法における使用のための４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
（項目４３）
癌の治療における使用のための、項目４２に記載の４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
（項目４４）
固形癌の治療における使用のための、項目４２〜４３のいずれか一項に記載の４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
（項目４５）
前記ＴＬＲ作動薬が、Ｒ８４８又は化合物１〜１６のいずれかである、項目４２〜４４のいずれかに記載の４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
（項目４６）
前記ＴＬＲ作動薬が、Ｒ８４８、イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−イミキモド、４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−Ｎ−Ｒ８４８、又は４−ａｒｍ−ＰＥＧ２０ｋ−ＣＭ−グリシン−Ｎ−Ｒ８４８である、項目４２〜４５のいずれかに記載の４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
（項目４７）
前記長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬が、マルチ（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）インターロイキン−２、（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ１０ｋＤ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）４〜６インターロイキン−２、及び（２，７−（ビス−メトキシＰＥＧ−カルボキシアミド）（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルＮ−カルバメート）６ａｖｇインターロイキン−２から選択される、項目４２〜４６のいずれかに記載の４−１ＢＢ作動薬並びに（ｉ）長時間作用型ＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬及び（ｉｉ）トル様受容体作動薬の少なくとも１つ。
【国際調査報告】
2020518610.tif 000060
2020518610.tif 000061