(57)【要約】本発明の態様は、高濃縮製剤として投与された場合の、注入部位での低分子（例えば、ジアゼパム）沈殿の問題に対する解決策を提供する製剤に関する。ある局面において、製剤は、非水性製剤中に少なくとも1つの界面活性剤を含み、これは、低分子沈殿を防ぎ、かつ、体循環中への吸収を増大させることによって薬物のバイオアベイラビリティを改善する。2020522502.tif 000011
2020522502.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
(a)生体適合性の非水性溶媒；および
(b)該非水性溶媒中で可溶化された低分子薬物またはその塩；および
(c)対象へ注入された場合の該低分子薬物の沈殿を軽減する、1%〜30% w/wの界面活性剤
を含む、非経口注入のための安定な沈殿抵抗性製剤。
【請求項２】
界面活性剤が、0.5:1〜4:1、または1:1〜2:1の界面活性剤:低分子薬物のモル比で存在する、請求項1記載の製剤。
【請求項３】
界面活性剤が、デオキシコール酸ナトリウム、ポリソルベート80、ポリソルベート20、ドデシルマルトシド、ドデシル硫酸ナトリウム、テトラデシル硫酸ナトリウム、アルコールエトキシレート、アルキルジメチルアミンオキシド、またはアルキルベタインである、請求項1記載の製剤。
【請求項４】
液体製剤が10重量%未満の水分含有量を含む、請求項1記載の製剤。
【請求項５】
非経口注入される液体製剤の量が3 mLまたはそれ未満である、請求項1記載の製剤。
【請求項６】
製剤を投薬するための装置内にさらに含まれる、請求項1記載の製剤。
【請求項７】
装置が、シリンジ、ペン型注入装置、オートインジェクター装置、外部ポンプもしくは植え込み可能ポンプ、または灌流バッグである、請求項6記載の製剤。
【請求項８】
生体適合性の非水性溶媒が、非プロトン性極性溶媒、安息香酸アルキルもしくは安息香酸アリール溶媒、脂質溶媒、プロトン性溶媒、またはそれらの混合物である、請求項1〜7のいずれか一項記載の製剤。
【請求項９】
ジメチルスルホキシド(DMSO)、ジメチルホルムアミド(DMF)、酢酸エチル、n-メチルピロリドン(NMP)、ジメチルアセトアミド(DMA)、炭酸プロピレン、またはそれらの混合物である、非プロトン性極性溶媒
を含む、請求項8記載の製剤。
【請求項１０】
非プロトン性極性溶媒が、DMSO、NMP、またはそれらの混合物である、請求項9記載の製剤。
【請求項１１】
安息香酸エチル、安息香酸ベンジル、またはそれらの混合物である、安息香酸アリールまたは安息香酸アルキル溶媒
を含む、請求項8記載の製剤。
【請求項１２】
液体製剤が10重量%未満の水分含有量を含む、請求項1〜7のいずれか一項記載の製剤。
【請求項１３】
液体製剤が0.5 mg/mL〜750 mg/mLの低分子薬物を含む、請求項1〜7のいずれか一項記載の製剤。
【請求項１４】
非経口注入される液体製剤の量が1μL〜10μLである、請求項1〜7のいずれか一項記載の製剤。
【請求項１５】
非経口注入される液体製剤の量が10μL〜100μLである、請求項1〜7のいずれか一項記載の製剤。
【請求項１６】
非経口注入される液体製剤の量が100μL〜1 mLである、請求項1〜7のいずれか一項記載の製剤。
【請求項１７】
低分子薬物がベンゾジアゼピンである、請求項1〜7のいずれか一項記載の製剤。
【請求項１８】
ベンゾジアゼピンがジアゼパムである、請求項17記載の製剤。
【請求項１９】
液体製剤が25 mg/mL〜300 mg/mLのベンゾジアゼピンを含む、請求項17記載の製剤。
【請求項２０】
溶媒がDMSO、NMP、またはそれらの混合物である、請求項11記載の製剤。
【請求項２１】
その必要がある対象に請求項1〜20のいずれか一項記載の製剤を投与する方法であって、該対象に該製剤を非経口注入する段階を含む、方法。
【請求項２２】
注入が非経口注入または皮内注入によるものである、請求項21記載の方法。
【請求項２３】
製剤が投与前に希釈されない、請求項21記載の方法。
【請求項２４】
状態を処置または予防するための方法であって、その必要がある対象に、該状態を処置または予防するのに有効な量の請求項1〜20のいずれか一項記載の製剤を非経口投与する段階を含む、方法。
【請求項２５】
不安、筋痙攣、または発作を処置または予防するための方法であって、その必要がある対象に、ベンゾジアゼピンを含む請求項1記載の製剤を非経口投与する段階を含む、方法。
【請求項２６】
液体製剤を投薬するための装置内に、注入可能量をさらに含む、請求項25記載の方法。
【請求項２７】
装置が、シリンジ、ペン型注入装置、オートインジェクター装置、外部ポンプもしくは植え込み可能ポンプ、または灌流バッグである、請求項26記載の方法。
【請求項２８】
液体製剤が25 mg/mL〜300 mg/mLのベンゾジアゼピンを含む、請求項25記載の方法。
【請求項２９】
ベンゾジアゼピンがジアゼパムである、請求項25記載の方法。
【請求項３０】
非経口注入される液体製剤の量が1μL〜10μLである、請求項25記載の方法。
【請求項３１】
非経口注入される液体製剤の量が10μL〜100μLである、請求項25記載の方法。
【請求項３２】
非経口注入される液体製剤の量が100μL〜1 mLである、請求項25記載の方法。
【請求項３３】
液体製剤が投与前に希釈されない、請求項25記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、参照によりその全体が本明細書に組み入れられる、2017年6月2日に提出された米国特許仮出願第62/514,474号に対する優先権を主張する。
【０００２】
A．発明の分野
本発明は、概して、薬学的製剤、より具体的には、改善された溶解度、安定性、およびバイオアベイラビリティを有する低分子薬物の治療用製剤、ならびに、様々な疾患、状態、および障害を処置するためにそのような薬学的製剤を用いる方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
B．関連技術の説明
多くの低分子薬物が経口で生物学的に利用可能であるが、薬物の経口でのバイオアベイラビリティが不十分である状況、患者が経口で薬物を受け入れることができない状況、またはより迅速な薬物作用発現を必要とする状況では、非経口注入もまた用いられる。例えば、てんかん発作の救急処置のためのベンゾジアゼピンの投与、アレルギー反応に対するカテコラミンの投与、および偏頭痛の処置のための「トリプタン類」の投与は、経口投与が効率的ではないかまたは推奨されない状況を表し、このため、薬物を、経口ではない経路、多くの場合非経口投与によって投与しなければならない。
【０００４】
低分子薬物を含む製剤を調製するために標準的に行われるのは、非経口注入のための水溶液を開発することである。主な理由は、ヒトの体の大部分が、血漿を含む水で構成されており、水性環境であるためである。従って、薬物が到達することが意図される環境と適合性である薬物製剤を投与することは当然の傾向である。しかし、いくつかの低分子薬物は、そのような水性環境では限られた溶解度および不良な安定性を有する。この問題は、水溶液中の低分子薬物をより有効に可溶化して安定化させるために、製剤中へ共溶媒および／または安定化剤を含めることによって、少なくとも部分的に解決されている。
【０００５】
低分子薬物の非経口注入に関連する問題のいくつかの例が、ジアゼパムに関して認められうる。この薬物は、てんかん発作の救急処置のために用いられるが、その不良な水溶性により使用が妨げられている。このため、現在利用可能な救急処置は、直腸ゲルからなる。また、共溶媒を有する水性製剤に基づく大量（3 mLまで）の筋肉内注射剤を開発する試みも行われている（ジアゼパムの低い溶解度が理由で、より多い量が必要である）。しかし、痙攣を起こしている患者に深部へ大量の筋肉内注射剤を送達することが難しいために、かつそのような大きい投与量に関連する疼痛のために、この薬物の開発は制限されている。
【０００６】
さらに、水性環境における低分子薬物の安定性の問題により、現在の製品はしばしば、注入前に水性担体中での再構成を必要とする凍結乾燥粉末として販売されている。これによって、薬物のより長い保存期間が可能となる。いくつかの製品はなおも、注入前に、滅菌水、リン酸緩衝液、または等張食塩水によるさらなる希釈を必要とする液体として販売されている。
【０００７】
治療関連ベンゾジアゼピン薬（例えば、ジアゼパム）の限られた水溶性に起因して、これらの薬物を非水性組成物として製剤化する以前の試みがあった。例えば、米国特許第8,946,208号（Castileら）（特許文献1）は、低分子薬物（例えば、ジアゼパム）が、プロピレングリコールならびにN-メチルピロリドン(NMP)およびジメチルスルホキシド(DMSO)を含む群より選択される1つの追加の非水性溶媒を含む非水性ビヒクル中に溶解されている、鼻腔内投与のための組成物を記載している。Castileらによって記載された鼻腔内投与のための薬学的組成物は高濃縮であり得、200 mg/mLまでの範囲のジアゼパム濃度を引用する例、および50 mg/mL濃度に関する好ましい態様を伴う。Castileらによって記載された鼻腔スプレー製剤は、患者へ投与される場合に薬物によって遭遇される不良な水溶性の問題、具体的には、高濃縮注射製剤のような製剤が患者へ投与される場合に生じる低いバイオアベイラビリティの問題に取り組んでいない。
【０００８】
別の例は、米国特許第9,125,805号（特許‘805）（特許文献2）に記載されるような非経口注入のための非水性低分子組成物である。特許‘805は、DMSOおよびNMPを含む、非水性溶媒中に可溶化された濃縮ジアゼパム製剤（例えば、50および100 mg/mL溶液）を含む組成物を開示し、加速保存条件（40℃/75%相対湿度）下で優れた長期間安定性を示す例を伴う。しかし、これらの製剤は、薬学的に関連する容器閉鎖系（例えば、バイアル、プレ充填シリンジ）中に保存される場合に優れた長期間安定性を示し得る一方、それらは、注入部位での薬物の沈殿をもたらす、生理的pHでのジアゼパムの極端に低い水溶性に起因して、患者へ注入される場合に不十分なバイオアベイラビリティを示す。
【０００９】
本出願に記載される技術は、多くの低分子薬物の不良な水溶性および安定性の問題を解決し、非プロトン性極性溶媒を使用する注射剤の開発を可能にした、ゼリス  ファーマシューティカルズ（例えば、特許‘805）による以前の発見に基礎を置く。しかし、これらの製剤は、バイアルおよびプレ充填シリンジ中での優れた長期間保存安定性と合わせて、ジアゼパム（≧50 mg/mL）のような難水溶性薬物の優れた溶解性を有したが、注入後の医薬品有効成分(API)のバイオアベイラビリティは、注入部位での薬物の沈殿に起因して最小限であった。
【００１０】
従って、患者へ非経口投与される場合に高濃縮製剤の改善されたバイオアベイラビリティを提供しながら、ベンゾジアゼピンを含む低分子の不良な水溶性および安定性に取り組む、製剤についての必要性が残っている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】米国特許第8,946,208号
【特許文献２】米国特許第9,125,805号
【発明の概要】
【００１２】
概要
高濃縮製剤として投与された場合の、注入部位での低分子（例えば、ジアゼパム）沈殿の問題は、非水性製剤中に少なくとも1つの界面活性剤を含めることによって解決され、これは、低分子沈殿を防ぎ、かつ、体循環中への吸収を増大させることによって薬物のバイオアベイラビリティを改善する。本発明は、上述したような治療応用において低分子薬物を使用する際に直面する現在の問題に対する解決策を提供する。この解決策は、非水性環境において低分子薬物を可溶化および安定化すること、ならびに、可溶化された薬物を、投与前の再構成および／または希釈段階の必要性なしに、次に非経口投与により患者に直接注入することを前提とする。製剤は、液体剤形でありうる。製剤は、調製後、長期間にわたって保存することができ（注入用装置の中であっても）、現在の製品において認められる再構成または希釈段階を伴うことなく、対象（例えばヒト）に直接注入することができる。実際、この解決策は、広く行われている業界標準に沿うものではない。この点に関して、本発明者らの解決策によって、より安定な薬物環境が得られ、処置を必要とする対象に、生命を救う薬物を提供するためのより効率的でより効果的な手法が得られる。重要なことに、本発明者らの発見は、ジアゼパムのように、水性環境において不良なまたは限定的な安定性および溶解性を有する多種の低分子薬物を送達するために広く応用可能である。
【００１３】
本出願に記載される非水性ビヒクルは、広範囲の薬物化合物の皮内送達のための薬学的組成物を調製するために適している。本明細書を考慮すると、当業者は、特定の非プロトン性極性溶媒系が特定の薬物と組み合わせての使用に適しているかどうかを決定することができる。例えば、これは、ビヒクル中の薬物化合物の溶解度を測定することによって行うことができる。溶解度は、ビヒクルへ過剰量の薬物を添加し、混合物を室温で24時間撹拌することによって試験することができる。不溶解薬物を、次いで、濾過または遠心分離によって除去し、溶液を、高性能液体クロマトグラフィー(HPLC)のような適切な分析法によって溶解薬物含有量についてアッセイする。
【００１４】
理論によって束縛されることを望まないが、非プロトン性極性溶媒製剤中における界面活性剤の使用は、患者へ注入された場合の高濃縮低分子（例えば、ベンゾジアゼピン）製剤の沈殿を防ぐことによって、バイオアベイラビリティを改善すると考えられる。具体的には、界面活性剤がジアゼパムのような薬物をミセル中に封入することによって溶解度を改善し、その結果、水性環境中へ注入されると、界面活性剤が、注入部位から離れてのジアゼパムの拡散を促進し、迅速な吸収およびより大きなバイオアベイラビリティを可能にすると考えられる。界面活性剤を使用せずに高濃縮ジアゼパム製剤を生理的pHで水性環境中へ注入する場合、ジアゼパムは部分的に沈殿し、徐々に再可溶化され、吸収される。
【００１５】
本発明のある態様は、非経口注入のための安定な沈殿抵抗性製剤に関する。製剤は、(a)生体適合性の非水性溶媒；(b)非水性溶媒中で可溶化された低分子薬物またはその塩；および(c) 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15%〜16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30% w/w（その間の全ての値および範囲を含む）の界面活性剤を含むことができ、ここで、界面活性剤は、対象へ注入された場合の低分子薬物の沈殿を軽減する。ある局面において、界面活性剤は、0.5:1〜4:1、または1:1〜2:1の界面活性剤:低分子薬物のモル比で存在する。界面活性剤は、デオキシコール酸ナトリウム、ポリソルベート80、ポリソルベート20、ドデシルマルトシド、ドデシル硫酸ナトリウム、テトラデシル硫酸ナトリウム、アルコールエトキシレート、アルキルジメチルアミンオキシド、またはアルキルベタインであり得る。ある局面において、液体製剤は、10、9、8、7、6、5、4、3、2、または1重量%未満の水分含有量を含む。非経口注入される液体製剤の量が3 mLまたはそれ未満である、請求項1記載の製剤。製剤は、製剤を投薬するための装置内に含まれ得る。ある局面において、装置は、シリンジ、ペン型注入装置、オートインジェクター装置、外部ポンプもしくは植え込み可能ポンプ、または灌流バッグである。生体適合性の非水性溶媒は、非プロトン性極性溶媒、安息香酸アルキルもしくは安息香酸アリール溶媒、脂質溶媒、プロトン性溶媒、またはそれらの混合物であり得る。ある局面において、製剤は非プロトン性極性溶媒を含み、ここで、非プロトン性極性溶媒は、ジメチルスルホキシド(DMSO)、ジメチルホルムアミド(DMF)、酢酸エチル、n-メチルピロリドン(NMP)、ジメチルアセトアミド(DMA)、炭酸プロピレン、またはそれらの混合物である。特定の局面において、非プロトン性極性溶媒は、DMSO、NMP、またはそれらの混合物である。製剤はまた、安息香酸アリールまたは安息香酸アルキル溶媒を含むことができ、ここで、安息香酸アリールまたは安息香酸アルキル溶媒は、安息香酸エチル、安息香酸ベンジル、またはそれらの混合物である。製剤は、0.5、5、10、20、40、80、160、320 mg/mL〜350、400、450、500、550、600、650、700、750 mg/mL（その間の全ての値および範囲を含む）の低分子薬物を含むことができる。ある局面において、非経口注入される液体製剤の量は、1μL〜10μL、10μL〜100μL、または100μL〜1 mLである。ある局面において、低分子薬物はベンゾジアゼピンである。特定の局面において、ベンゾジアゼピンはジアゼパムである。製剤は、25、50、75、100、125、150 mg/mL〜175、200、225、250、275、300 mg/mL（その間の全ての値および範囲を含む）のベンゾジアゼピンを含むことができる。溶媒は、DMSO、NMP、またはそれらの混合物であり得るが、これらに限定されない。
【００１６】
ある態様は、その必要がある対象に本発明の製剤を投与する方法であって、該対象に該製剤を非経口注入する段階を含む、方法に関する。ある局面において、注入は非経口注入または皮内注入によるものである。ある局面において、製剤は投与前に希釈されない。
【００１７】
本発明のさらに他の態様は、その必要がある対象に、状態を処置または予防するのに有効な量の低分子薬物を有する特許請求される発明の製剤を非経口投与することによって、状態を処置または予防するための方法に関する。
【００１８】
ある局面は、不安、筋痙攣、または発作を処置または予防するための方法であって、その必要がある対象にベンゾジアゼピン製剤を非経口投与する段階を含む、方法に関する。方法は、製剤を投薬するための装置内にある注入可能量の製剤を投与する段階を含むことができる。装置は、シリンジ、ペン型注入装置、オートインジェクター装置、外部ポンプもしくは植え込み可能ポンプ、または灌流バッグであり得る。ある局面において、液体製剤は25 mg/mL〜300 mg/mLのベンゾジアゼピンを含む。特定の局面において、ベンゾジアゼピンはジアゼパムである。非経口注入される液体製剤の量は、1μL〜10μL、10μL〜100μL、または100μL〜1 mLであり得る。ある局面において、液体製剤は投与前に希釈されない。
【００１９】
用語「ベンゾジアゼピン」は、本明細書において使用される場合、ベンゼン環がジアゼピン環と縮合されている二環式コア単位を含有する化合物のクラスを指す。ベンゾジアゼピンは、中枢神経系に作用し、鎮静、不安の減少、筋弛緩、および抗痙攣作用を引き起こす、広く使用される親油性薬物である。ベンゾジアゼピンの非限定的な例としては、ジアゼパム、クロナゼパム、ロラゼパム、アルプラゾラム、ミダゾラム、およびテマゼパムが挙げられる。
【００２０】
用語「界面活性剤」は、本明細書において使用される場合、系の表面および／または界面上へ吸着し、表面または界面自由エネルギーおよび表面または界面張力を変化させ得る、表面活性剤を指す。界面活性剤の非限定的な機能としては、湿潤剤、乳化剤、分散剤、および懸濁化剤としての使用が挙げられる。界面活性剤は、「尾部」と呼ばれる無極性（疎水性）領域および「頭部」と呼ばれる極性（親水性）領域の両方を有する特徴的な構造を保有する単量体両親媒性分子である。界面活性剤分子の疎水性尾部は、一般に、不飽和もしくは飽和炭化水素鎖または複素環もしくは芳香環系から構成される。界面活性剤分子の親水性頭部は、極性であり、界面活性剤の極性頭部中に存在する電荷基に依存して、それらは、非イオン性、陽イオン性、陰イオン性、または双性イオン性（両性）のいずれかとして分類され得る。分子がその頭部上に電荷基を有しない場合、界面活性剤は非イオン性である。極性頭部上の電荷基が正である場合、分子は陽イオン性界面活性剤であり、一方、陰イオン性界面活性剤は、分子の極性頭部上に負電荷基を有する。双性イオン性（または両性）界面活性剤は、正荷電基または負荷電基の両方を保有し、そして、溶液のpHに依存して、陽イオン性界面活性剤または陰イオン性界面活性剤のいずれかとして存在することができる。陰イオン性界面活性剤の例としては、カルボン酸イオン、リン酸イオン、硫酸イオンおよびスルホン酸イオンが挙げられるが、これらに限定されない。陰イオン性界面活性剤の非限定的な例は、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)、およびテトラデシル硫酸ナトリウム(STS)である。陽イオン性界面活性剤の非限定的な例としては、アルキルピリジニウムクロリドおよびアルキルトリメチルアンモニウムブロミドが挙げられる。非イオン性界面活性剤の例としては、アルコールエトキシレートが挙げられるが、これらに限定されず、一方、双性イオン性界面活性剤の非限定的な例としては、アルキルジメチルアミンオキシドおよびアルキルベタインが挙げられる。
【００２１】
用語「溶解」は、本明細書において使用される場合、気体、固体、または液体状態の材料が、溶媒の、溶質、すなわち溶解された成分となり、溶媒中の気体、液体、または固体の溶液を形成する、プロセスを指す。ある局面において、治療剤または賦形剤、例えば、イオン化安定化賦形剤は、その溶解限度（solubility limited）までの量で存在するか、または完全に可溶化されている。用語「溶解する」は、気体、液体、または固体が溶媒中へ組み込まれて溶液を形成することを指す。
【００２２】
用語「賦形剤」は、本明細書において使用される場合、安定化、増量、または最終投薬形態中の活性成分に対する治療増強の付与、例えば、薬物吸収の促進、粘度の低減、溶解性の増強、張度の調節、注入部位の不快感の軽減、凝固点の降下、または安定性の増強の目的のために含まれる、薬剤の活性成分または治療成分と共に製剤化される天然または合成物質（活性成分ではない成分）を指す。賦形剤はまた、インビトロ安定性を助けること、例えば、期待される保存寿命にわたる変性または凝集の防止に加えて、粉末流動性または非粘着性を促進することによってなど、該当する活性物質の取り扱いを助けるために、製造プロセスにおいて有用であり得る。
【００２３】
本発明の文脈における「低分子薬物」は、対象に所望の、有益な、および／または薬理学的な効果をもたらすことができる生物活性化合物（およびその塩）である。これらの「低分子薬物」は、有機または無機化合物である。それゆえ、本発明の文脈における低分子薬物はポリマー化合物ではない。典型的に、低分子薬物は、およそ1000ダルトン未満の分子量を有する。ある低分子薬物は、それらが水の存在下でいっそう不安定であるという点において「水分感受性」である。同様に、低分子薬物に関して用いることができる塩も、当業者に公知であり、無機酸、有機酸、無機塩基、または有機塩基との塩を含む。
【００２４】
本明細書において使用される場合、「阻害する」、または「減少する」、またはこれらの用語の任意の変化形は、所望の結果を達成するための任意の測定可能な減少または完全な阻害を含む。
【００２５】
本明細書において使用される場合、「有効な」、または「処置する」、または「予防する」、またはこれらの用語の任意の変化形は、所望の、予想される、または意図される結果を達成するために適切であることを意味する。
【００２６】
本明細書において使用される場合、「化学的安定性」は、治療剤を参照する場合、酸化および／または加水分解および／または断片化および／または他の化学分解経路などの化学的経路によって産生される分解産物の許容可能な割合を指す。具体的には、意図される保存温度（例えば、室温）で製品を1年間保存した後に、または25℃で60%の相対湿度（RH）で製品を1年間保存した後に、または40℃で75%の相対湿度で製品を1ヶ月間、好ましくは3ヶ月間保存した後に、形成される分解産物が約20%以下である場合、製剤は化学的に安定であると見なされる。いくつかの態様において、化学的に安定な製剤は、意図される保存温度で製品を長期間保存した後に形成される分解産物が、20%未満、15%未満、10%未満、5%未満、4%未満、3%未満、2%未満、または1%未満である。
【００２７】
本明細書において使用される場合、「物理的安定性」は、治療剤を参照する場合、形成される不溶性沈殿物および／または他の凝集体（例えば、二量体、三量体、およびより大きな形態）の許容可能な割合を指す。具体的には、意図される保存温度（例えば、室温）で製品を1年間保存した後に、または25℃で60%の相対湿度で製品を1年間保存した後に、または40℃で75%の相対湿度で製品を1ヶ月間、好ましくは3ヶ月間保存した後に、形成される凝集体が約15%以下である場合、製剤は物理的に安定であると見なされる。いくつかの態様において、物理的に安定な製剤は、意図される保存温度で製品を長期間保存した後に形成される凝集体が、15%未満、10%未満、5%未満、4%未満、3%未満、2%未満、または1%未満である。
【００２８】
本明細書において使用される場合、「安定な製剤」は、室温で2ヶ月間保存した後に少なくとも約65%の治療剤（例えば、ペプチドまたはその塩）が化学的および物理的に安定のままである製剤を指す。特に好ましい製剤は、これらの保存条件下で少なくとも約80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、または99%の化学的および物理的に安定な治療剤が残っている製剤である。特別に好ましい安定な製剤は、滅菌放射線（例えば、γ、β、または電子線）照射後に分解を示さない製剤である。
【００２９】
本明細書において使用される場合、「非経口投与」は、消化管以外の経路を介しての患者への治療剤の投与（消化管によらない任意の投与）を指す。
【００３０】
本明細書において使用される場合、「非経口注入」とは、ヒトなどの動物の皮膚または粘膜の1つまたは複数の層の下へのまたは層を通しての注入による治療剤（例えば、ペプチドまたは低分子）の投与を指す。標準的な非経口注入は、動物、例えばヒトの皮下、筋肉内、または皮内領域に行われる。これらの深い位置が標的とされるのは、ほとんどの治療剤を送達するために必要な注入量、例えば、0.1〜3.0 cc（mL）に適合させるために、浅い皮膚部位と比較して、組織がより容易に拡大するからである。
【００３１】
用語「皮内」は、表皮、真皮または皮下皮膚層中への投与を包含する。
【００３２】
本明細書において使用される場合、用語「非プロトン性極性溶媒」は、酸性水素を含まず、従って、水素結合ドナーとして作用しない極性溶媒を指す。非プロトン性極性溶媒としては、ジメチルスルホキシド（DMSO）、ジメチルホルムアミド（DMF）、酢酸エチル、n-メチルピロリドン（NMP）、ジメチルアセトアミド（DMA）、および炭酸プロピレンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３３】
本明細書において使用される場合、用語「非プロトン性極性溶媒系」は、溶媒が、単一の非プロトン性極性溶媒（例えば、ニートDMSO）、または2つ以上の非プロトン性極性溶媒の混合物（例えば、DMSOとNMPの混合物）である、溶液を指す。
【００３４】
本明細書において使用される場合、「残留水分」は、製造業者／供給業者による調製後の薬物粉末中の残留水分を指し得る。典型的な粉末は、しばしば、10% (w/w)までの範囲の残留水分含有量を有する。これらの粉末が非プロトン性極性溶媒系中に溶解される場合、粉末中の残留水分は製剤中に組み込まれる。さらに、非プロトン性極性溶媒も一定のレベルの残留水分を含有し得る。例えば、USP等級DMSOの新たに開封されたボトルは、典型的に、最大0.1% (w/w)の水分を含有する。残留水分は「添加水分」とは異なり、ここで、例えば、共溶媒として役立つために、または非プロトン性極性溶媒系の凝固点を降下させるために、水が製剤へ故意に添加される。水分はまた、イオン化安定化賦形剤の添加中に（例えば、水性ストック溶液（例えば、1 N HCl）からの鉱酸の添加を通して）製剤中へ導入され得る。調製直後の製剤中の「全水分」（特に明記しない限り、% w/w）は、残留水分および添加水分の両方からの寄与に起因する。
【００３５】
特許請求の範囲および／または明細書において「含む」という用語に関連して用いられる場合の「1つ（a）」または「1つ（an）」という用語の使用は、「1つ」を意味しうるが、同様に「1つまたは複数」、「少なくとも1つ」、および「1つまたは1つより多い」という意味とも矛盾しない。
【００３６】
「含む(comprising)」（ならびに「含む（comprise）」および「含む（comprises）」などの「含む」の任意の形）、「有する(having)」（ならびに「有する（have）」および「有する（has）」などの「有する」の任意の形）、「含む(including)」（ならびに「含む（includes）」および「含む（include）」などの「含む」の任意の形）、または「含有する(containing)」（ならびに「含有する（contains）」および「含有する（contain）」などの「含有する」の任意の形）という用語は、全てを含むかまたは非制限的であり、追加の、列挙されていない要素または方法の段階を除外しない。
【００３７】
「約」または「およそ」または「実質的に変わらない」という用語は、当業者によって理解される意味に近いことと定義され、1つの非制限的な態様において、この用語は、10%以内、好ましくは5%以内、より好ましくは1%以内、および最も好ましくは0.5%以内であると定義される。さらに、「実質的に非水性」とは、水が重量または体積で5%、4%、3%、2%、1%未満、またはそれより少ないことを意味する。
【００３８】
本明細書において使用される場合、「薬学的に許容される」成分、賦形剤、または構成要素は、妥当な利益／リスク比に釣り合って、過度の有害な副作用（毒性、刺激、およびアレルギー反応などの）を有することなく、ヒトおよび／または動物と共に用いるために適した成分、賦形剤、または構成要素である。
【００３９】
本明細書において使用される場合、「薬学的に許容される担体」は、ヒトなどの哺乳動物に本発明の薬物化合物を送達するための薬学的に許容される溶媒、懸濁化剤、または媒体を意味する。
【００４０】
本発明の他の目的、特色、および利点は、以下の詳細な説明から明らかとなるであろう。しかし、詳細な説明および例は、本発明の具体的な態様を示しているが、単なる例として示されると理解すべきである。加えて、本発明の主旨および範囲における変更および改変は、本発明の詳細な説明から当業者に明らかとなることが企図される。本発明の他の態様は本出願の全体にわたって議論される。本発明の一局面に関して議論される任意の態様は、同様に本発明の他の局面に当てはまり、その逆も正しい。本明細書に記載される各態様は、本発明の全ての局面に適用可能である本発明の態様であることが理解される。本明細書に議論される任意の態様は、本発明の任意の方法または組成物に関して実施され得、その逆も正しいことが意図される。さらに、本発明の組成物およびキットは、本発明の方法を達成するために使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
下記の図面は、本明細書の一部を形成し、本発明の特定の局面をさらに示すために含まれる。本発明は、本明細書に提示される明細書態様の詳細な説明と組み合わせてこれらの図面の1つまたは複数を参照することにより、よりよく理解され得る。
【００４２】
【図１】数回の凍結解凍サイクルを通しての、DMSO中に溶解されたジアゼパムの安定性を示す。
【図２】Diastat（登録商標）市販製剤と比較してのDMSO製剤中のジアゼパムの薬物動態プロファイルを示す。
【図３】HospiraのIM製剤と比較しての、10% (w/v) SDSを含有するDMSO製剤中のジアゼパムおよびノルジアゼパムの薬物動態プロファイルを示す。
【図４】ジアゼパム投与後のミニブタ中のジアゼパム血漿濃度。
【図５】75℃での20日間保存後のジアゼパム残存パーセント。
【図６】種々の保存条件下での30日間保存後のジアゼパム残存パーセント。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
説明
以下の議論は本発明の様々な態様に関する。用語「発明」は、特定の態様を指す、またはそうでなければ本開示の範囲を限定するようには意図されない。これらの態様のうちの1つまたは複数が好ましい場合があるが、開示される態様は、特許請求の範囲を含む、開示の範囲を限定するものとして、解釈される、またはそうでなければ使用されるべきでない。さらに、当業者は、以下の説明は広い適用を有し、いかなる態様の議論もその態様の例示に過ぎないように意図され、特許請求の範囲を含む、開示の範囲が、その態様に限定されることを暗示するようには意図されないことを理解するだろう。
【００４４】
A．低分子薬物
ベンゾジアゼピンに加えて、本発明の文脈において用いることができる他の非制限的な低分子薬物には、エピネフリン、ナロキソン、ナルトレキソン、レミフェンタニル、ガナキソロン、フェンフルラミン、ブリバラセタム、アポモルフィン、カルビドパ、レボドパ、ジヒドロエルゴタミン、レボチロキシン、ヘミン、パロノセトロン、スマトリプタン、アプレピタント、ノバントロン、低分子化学療法剤（例えば、ミトキサントロン）、低分子コルチコステロイド（例えば、メチルプレドニゾロン）、低分子免疫抑制剤（例えば、アザチオプリン、クラドリビン、シクロホスファミド、メトトレキサート）、低分子抗炎症剤（例えば、サリチル酸、アセチルサリチル酸、ジフルニサル、コリンマグネシウムトリサリチル酸、サリチラート、ベノリラート、フルフェナム酸、メフェナム酸、メクロフェナム酸、トリフルム酸（triflumic acid）、ジクロフェナク、フェンクロフェナク、アルクロフェナク、フェンチアザク、イブプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、フェンブフェン、スプロフェン、インドプロフェン、チアプロフェン酸、ベノキサプロフェン、ピルプロフェン、トルメチン、ゾメピラック、クロピナック、インドメタシン、スリンダク、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、アザプロパゾン、フェプラゾン、ピロキシカム、イソキシカム）、神経障害を処置するために用いられる低分子（例えば、シメチジン、ラニチジン、ファモチジン、ニザチジン、タクリン、ドネピジル、メトリホナート、リバスチグミン、セレギレン（selegilene）、イミプラミン、フルオキセチン、オランザピン、セルチンドール、リスペリドン、パリペリドン、アリピプラゾール、バルプロ酸セミナトリウム、ガバペンチン、カルバマゼピン、トピラメート、フェニロイン（phenyloin）、ハロペリドール）、および癌を処置するために用いられる低分子（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、パクリタキセル、ドセタキセル、シスプラチン、イリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、テモゾロミド、イマチニブ、ボルテゾミブ）、スタチン（例えば、アトルバスタチン、アムロジピン、ロスバスタチン、シタグリプチン、シンバスタチン、フルバスタチン、ピタバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン）、および他のタキサン誘導体が挙げられる。特定の態様において、用いることができる低分子は、結核を処置する低分子（例えば、リファンピシン）、低分子抗真菌剤（例えば、フルコナゾール）、低分子抗不安剤および低分子抗痙攣剤（例えば、ロラゼパム）、低分子抗コリン作動薬（例えば、アトロピン）、低分子β-アゴニスト薬（例えば、硫酸アルブテロール）、低分子肥満細胞安定化剤、およびアレルギーを処置するために用いられる低分子薬物（例えば、クロモリンナトリウム）、低分子麻酔剤および低分子抗不整脈剤（例えば、リドカイン）、低分子抗生物質（例えば、トブラマイシン、シプロフロキサシン）、低分子抗偏頭痛剤（例えば、スマトリプタン）、および低分子抗ヒスタミン剤（例えば、ジフェンヒドラミン）を含む。さらに、投与製剤中の低分子薬物の量は、現在許容される量、対象／患者の必要性、およびその他に応じて変化しうる。
【００４５】
生体適合性の非水性溶媒に関して、例には、非プロトン性極性溶媒、安息香酸アルキルもしくは安息香酸アリール溶媒、脂質溶媒、プロトン性溶媒、またはそれらの混合物が挙げられる。非プロトン性極性溶媒の非制限的な例には、ジメチルスルホキシド（DMSO）、ジメチルホルムアミド（DMF）、酢酸エチル、n-メチルピロリドン（NMP）、ジメチルアセトアミド（DMA）、炭酸プロピレン、またはそれらの混合物が挙げられる。しかし、いくつかの例において、本発明の製剤は、上記の溶媒を含める必要はない（すなわち、他の溶媒を用いることができる）。1つの例において、例えば、製剤は、非水性非プロトン性極性溶媒を含まず、および／または非水性プロトン性溶媒（例えば、ポリエチレングリコール（PEG）、プロピレングリコール（PG）、ポリビニルピロリドン（PVP）、メトキシプロピレングリコール（MPEG）、グリセロール、グリコフロール、およびそれらの混合物）を含まない。先に示したように、低分子薬物の溶解度の増加によって、より容易でより痛みを伴わない非経口投与を提供する少量の投与量（ひいては、小さい保存装置および容器）が得られうる。安息香酸アリールまたは安息香酸アルキル溶媒の非制限的な例には、安息香酸メチル、安息香酸エチル、安息香酸プロピル、RがC12〜15アルキル基である安息香酸C12〜C15アルキル、RがC16〜17脂肪アルコール基である安息香酸C16〜17アルキル、および安息香酸ベンジルが挙げられる。脂質の非制限的な例は、グリセロールと酢酸のトリエステルであるトリアセチンである。プロトン性溶媒の非制限的な例には、ポリエチレングリコール（PEG）、プロピレングリコール（PG）、ポリビニルピロリドン（PVP）、メトキシプロピレングリコール（MPEG）、グリセロール、グリコフロール、またはそれらの混合物が挙げられる。ある局面において、製剤は共溶媒を含まないが、他の局面において、製剤は共溶媒を含みうる。1つの例において、製剤は、1種の／1種のみの生体適合性の非水性溶媒（すなわち、未希釈または純粋型）を含みうる。他の局面において、製剤は、2種、3種、4種、またはそれより多くの生体適合性の非水性溶媒の混合物を含む。なおさらなる局面において、製剤は、非水性溶媒中の低分子薬物の溶解を助けるかまたは溶解度を増加させることができる、共溶媒、塩、および他の成分を除外しうる。例として、製剤は、低分子薬物と非水性溶媒（または非水性溶媒の混合物）からなりうるか、または本質的に低分子薬物と非水性溶媒（または非水性溶媒の混合物）からなり得、それでもなお非経口投与によって対象に直接注入されうる（「から本質的になる」は、本文章の文脈において、非水性溶媒または非水性溶媒の混合物における薬物の溶解度を増加させうる他の成分を除外することを意味し、例えば、注入可能製剤をさらに保存するために保存剤を含めることができる）。
【００４６】
さらに、本発明の製剤は、非水性または実質的に非水性でありうる（例えば、重量で10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%未満の、またはそれより少ない、全水分（即ち、製剤が最初に調製されたときの製剤中に存在する水分））。いくつかの例において、低分子薬物は、非水性溶媒中で可溶化される前に、緩衝液の存在下で予め乾燥されている。以下に説明するように、このことは、低分子薬物の安定性を増加させることができる。いくつかの例において、乾燥低分子薬物は、水性緩衝液の存在下での低分子薬物のpHにほぼ等しいpH記憶を有し、そのため、生体適合性の非水性溶媒中で可溶化される低分子薬物のpHは、緩衝液の存在下での低分子薬物のpHにほぼ等しくなる。記憶されたpHは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、もしくはそれより高いpHであり得、あるいは1〜3、2〜4、3〜5、4〜6、5〜7、6〜8、7〜9、8〜10、もしくは9〜11の範囲でありうる。ある局面において、緩衝液は、非揮発性緩衝液である（その非制限的な例には、グリシン緩衝液、クエン酸緩衝液、またはリン酸緩衝液、またはそれらの混合物が挙げられる）。他の例において、緩衝液は、揮発性緩衝液でありうる。さらに、低分子薬物の水分含有量は、w/wで5%、4%、3%、2%、1%、0.5%未満、またはそれ未満でありうる。
【００４７】
ある局面において、製剤は、0.5 mg/mL〜約300 mg/mL、10 mg/mL〜50 mg/mL、20 mg/mL〜50 mg/mL、5 mg/mL〜15 mg/mL、または0.5 mg/mL〜2 mg/mLの低分子薬物を含む。いくつかの例において、低分子薬物の量は、400、500、600、700、800、900、1000、2000、または3000 mg/mLまたはそれより多い量でありうる。本発明の製剤の独自の局面の1つは、製剤が、薬物の高含有量を有しうるが、それでも製剤の投与量は比較的低くなりうる点である（例えば、0.1μL、1μL、10μL、20μL、50μL、75μL、100μL、200μL、300μL、400μL、500μL、600μL、700μL、800μL、900μL、1 mL、2 mL、または3 mL、または必要に応じてそれより多い量（例えば、4、5、6、7、8、9、10 mL、またはそれより多い））。ある例において、非経口注入される液体製剤の量は、3 mLまたはそれ未満（例えば、3、2.5、2、1.5、1、0.5、0.1 mLまたはそれ未満）であるか、または0.1μL〜3 mL、または0.1μL〜1μL、または1μL〜10μL、または10μL〜1 mL、または0.1μL〜2.5 mLまたは0.1μL〜2 mL、または0.1μL〜1.5 mL、または0.1μL〜1 mL、または0.1μL〜0.5 mL、または0.1μL〜0.1 mLである。本発明の製剤の別の独自の局面は、必要に応じて製剤を再構成または希釈する必要なく、それを容器または装置の中に含めて保存することができ、かつ直ちに非経口注入を行う準備が整いうる点である。装置は、シリンジ、ペン型注入装置、オートインジェクター装置、製剤をポンプで送るまたは投与することができる装置（例えば、自動または非自動の外部ポンプ、植え込み型ポンプ等）、または灌流バッグでありうる。同様に、追加の成分／薬学的賦形剤も製剤において用いることが企図され、その非制限的な例には、抗酸化剤（例には、アスコルビン酸、システイン、メチオニン、モノチオグリセロール、チオ硫酸ナトリウム、亜硫酸塩、BHT、BHA、パルミチン酸アスコルビル、没食子酸プロピル、またはビタミンEが挙げられる）、キレート剤（例には、EDTA、EGTA、酒石酸、グリセリン、またはクエン酸が挙げられる）、または保存剤（例には、アルキルアルコール、ベンジルアルコール、メチルパラベン、またはプロピルパラベン、またはそれらの混合物が挙げられる）が挙げられる。製剤は、液体剤形、半固体剤形、またはゲル剤形でありうる。以下に考察するように、製剤は、所望の粘度範囲（1つの非制限的な例において、そのような範囲は0.5〜15 cpsでありうる）を有しうる。製剤は、製剤を室温で2ヶ月間保存した場合に、製剤中の低分子薬物の少なくとも65%が化学的および物理的に安定なままであるか、または製剤を室温で2ヶ月間保存した場合に、製剤中の治療剤の少なくとも80%が化学的および物理的に安定なままである製剤でありうる。
【００４８】
本発明の1つの特定の局面において、ジアゼパムまたはその塩と、少なくとも1つの界面活性剤と、生体適合性の非水性溶媒とを含む非経口注入のための安定な液体製剤であって、ジアゼパムおよび界面活性剤が非水性溶媒中で可溶化され、調製時の製剤の全水分含有量が5% w/w未満であり、非経口注入される製剤の量が50μL〜1000μL、またはそのあいだの任意の範囲（例えば、75μL、100μL、150μL、200μL、300μL、400μL、500μL、600μL、700μL、800μL、900μL等）である製剤が開示される。さらなる局面において、製剤は追加の賦形剤を含むことができる。先に説明したように、そのような製剤は、密封シリンジ、密封ペン型注入装置、密封オートインジェクター装置、またはポンプより選択される容器に含まれうる。同様に、先に説明したように、ジアゼパムは、非水性溶媒中で可溶化される前に、緩衝液の存在下で乾燥させることができる。これにより、乾燥ジアゼパムには、水性緩衝液の存在下でのジアゼパムのpHにほぼ等しいpH記憶が提供され得、そのため、生体適合性の非水性溶媒中で可溶化されるジアゼパムのpHは、水性緩衝液（例えば、グリシン緩衝液、クエン酸緩衝液、またはリン酸緩衝液、またはそれらの混合物などの上記の非揮発性緩衝液）の存在下でのジアゼパムのpHにほぼ等しくなる。
【００４９】
なおさらに、本発明の製剤は、界面活性剤に加えて1つまたは複数の他の賦形剤を含むことができる。いくつかの態様において、他の賦形剤は、糖類、デンプン、糖アルコール、抗酸化剤、キレート剤、ポリマー、および保存剤より選択される。好適な糖類賦形剤の例としては、トレハロース、グルコース、スクロースなどが挙げられるが、これらに限定されない。安定化賦形剤についての好適なデンプンの例としては、ヒドロキシエチルデンプン(HES)が挙げられるが、これに限定されない。好適な糖アルコール（ポリオールとも呼ばれる）の例としては、マンニトールおよびソルビトールが挙げられるが、これらに限定されない。好適な抗酸化剤の例としては、アスコルビン酸、システイン、メチオニン、モノチオグリセロール、チオ硫酸ナトリウム、亜硫酸塩、BHT、BHA、パルミチン酸アスコルビル、没食子酸プロピル、N-アセチル-L-システイン(NAC)、およびビタミンEが挙げられるが、これらに限定されない。好適なキレート剤の例としては、EDTA、EDTA二ナトリウム塩（エデト酸二ナトリウム）、酒石酸およびその塩、グリセリン、ならびにクエン酸およびその塩が挙げられるが、これらに限定されない。好適な無機塩の例としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、硫酸カルシウム、および硫酸マグネシウムが挙げられる。好適な保存剤の例としては、ベンジルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、およびそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。追加の製剤成分としては、局所麻酔薬、例えば、リドカインまたはプロカインが挙げられる。いくつかの態様において、追加の安定化賦形剤は、約0.05% (w/v)〜約60% (w/v)、約1% (w/v)〜約50% (w/v)、約1% (w/v)〜約40% (w/v)、約1% (w/v)〜約30% (w/v)、約1% (w/v)〜約20% (w/v)、約5% (w/v)〜約60% (w/v)、約5% (w/v)〜約50% (w/v)、約5% (w/v)〜約40% (w/v)、約5% (w/v)〜約30% (w/v)、約5% (w/v)〜約20% (w/v)、約10% (w/v)〜約60% (w/v)、約10% (w/v)〜約50% (w/v)、約10% (w/v)〜約40% (w/v)、約10% (w/v)〜約30% (w/v)、または約10% (w/v)〜約20% (w/v)の範囲の量で製剤中に存在する。いくつかの態様において、追加の安定化賦形剤は、約、多くとも、または少なくとも0.1、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、または60% (w/v)である量で製剤中に存在する。
【００５０】
B．製造方法
ある態様において、本発明はまた、薬学的に許容される溶媒；界面活性剤；担体；可溶化剤；乳化剤；保存剤；および／または他の賦形剤のうちの1つまたは複数と共に低分子薬物を含む組成物を製剤化する方法を提供する。そのような組成物は、有効量の少なくとも1つの低分子薬物を含有し得る。従って、医薬の薬学的組成物の調製における1つまたは複数の低分子薬物の使用も含まれる。薬学的調製物のための許容される製剤成分は、用いられる投薬量および濃度でレシピエントに対して無毒である。製剤成分は、投与部位に許容される濃度で存在する。インビボ投与のために使用される薬学的組成物は典型的に無菌である。滅菌は、滅菌濾過膜を通しての濾過によって達成され得る。
【００５１】
いったん本発明の薬学的組成物が製剤化されると、それは溶液として無菌バイアル中に保存され得る。そのような製剤は使用準備済の形態で保存され得る。薬学的組成物を製剤化するために使用される成分は、好ましくは高純度のものであり、潜在的に有害な汚染物質を実質的に含まない（例えば、少なくともNational Food (NF)グレード、一般に少なくとも分析グレード、より典型的には少なくとも医薬品グレード）。さらに、インビボ使用に意図される組成物は、通常、無菌である。
【００５２】
治療有効用量は、当業者によって容易に決定され、疾患の重症度および経過、患者の健康および処置に対する反応、患者の年齢、体重、身長、性別、既往歴、ならびに処置する医師の判断に依存する。
【００５３】
本発明の他の態様は、薬物（例えば、ベンゾジアゼピン）および界面活性剤（および任意の他の追加の賦形剤）をDMSO中に溶解する段階（溶解の順序は重要である場合があり、重要でない場合もある）を含む、低分子薬物（例えば、ベンゾジアゼピン薬）を安定して製剤化する方法に関する。
【００５４】
C．処置方法
本発明のさらなる局面において、状態、疾患、障害等を処置または予防するための方法であって、その必要がある対象に、該状態、疾患、障害等を処置または予防するのに有効な量の本発明の製剤を投与する段階を含む、方法が開示される。治療剤（例えば、低分子）の任意の好適な投薬量が、本発明の方法において投与され得る。治療用製剤を構成する低分子に応じて、使用は、それらが認可される適応症によって調整されるだろう。
【００５５】
非限定的な例として、ジアゼパムのようなベンゾジアゼピンは、不安障害の症状についての短期緩和または不安障害の管理に適応される。適応症はまた、振戦、切迫（impeding）または急性振戦せん妄、幻覚症、および急性興奮を含む、急性アルコール離脱の症状の緩和、ならびに骨格筋痙攣の緩和のための補助薬としての使用を含む。さらなる適応症は、てんかん重積症、および重篤な反復または痙攣発作を含む。注入用ジアゼパムはまた、増加した発作活動の発作を制御するためにジアゼパムの不連続使用を必要とし得る、AEDの安定したレジメンにおける、てんかんを有する選択される患者の管理において使用され得る。
【００５６】
投与される投薬量は、当然、特定の化合物、塩、または組み合わせの薬理学的特徴；対象の年齢、健康、または体重；症状の性質および程度；薬物および患者の代謝の特徴、併用処置の種類；処置の頻度；または所望の効果などの公知の要因に応じて変化すると考えられる。ある局面において、てんかん発作は、有効量のジアゼパムを含む本明細書に記載される製剤を投与することによって処置することができる。
【００５７】
ジアゼパムのようなベンゾジアゼピンは、発作の処置におけるそれらの使用については周知であるが、発作の予防にも使用することができる。発作の発生を排除するための予防的／予防手段としてのベンゾジアゼピンの使用を記載している一つの報告された例は、熱性発作の予防のためのジアゼパムの使用である。Shinnar et al., Pediatric Epilepsy: Diagnosis and Therapy, Chapter 19, Febrile Seizures, 2007, 3:293-301（本明細書以下において「Shinnar」）は、熱性発作を予防するために発熱時に、しかし発作の発症前に、ジアゼパムを投与することができることを教示している。Shinnarは以下のように述べている：「熱性てんかん重積症は熱性発作の5%しか示さないにもかかわらず、小児てんかん重積症の全てのエピソードのうちのおよそ4分の1、2歳においてはてんかん重積症の症例の3分の2超を占める」（Shinnar、第293頁）。「熱性発作の処置への2つの異なるアプローチが、熱性発作の認められている即時および長期的リスクに基づいて開発された。1つのアプローチは、熱性発作は有害であり、てんかんの発症をもたらし得るという古い考えに基づき；このアプローチは、薬剤での断続的処置または長期間処置のいずれかを使用することによって、熱性発作を予防することを目的としている。第2のアプローチは、熱性発作は良性であるという疫学データに基づき；唯一の関心は、てんかん重積症を予防するために熱性発作を食い止めることに焦点を合わせる」（Shinnar、第297頁、強調を追加した）。「一般に熱性疾患の発症時に経口的にまたは直腸に提供される、ジアゼパムは、熱性発作の可能性を低減させる、統計的に有意な、しかし臨床的には中程度の、能力を実証した（Shinnar、第298頁、強調を追加した）。
【００５８】
Knudsen, Archives of Disease in Childhood, 1985 Vol. 60, pp. 1045 - 1049（本明細書以下において「Knudsen」）は、非経口的に投与されるジアゼパムが、有効な予防的発作制御を提供し、高および中間リスク小児における再発の発生率を低下させることを教示している。Knudsenは以下のように述べている：「我々の最近の研究は、短期ジアゼパム予防処置が、39%についての18ヶ月再発率を12%へ低減させ、従って全てのさらなる熱性痙攣のうちの3分の2を予防したことを示した。層化は、未処置小児における著しく広い範囲の再発率、発熱時でのジアゼパム予防処置に応答しての一様に低い再発率、および、リスク軽減の点での、予防処置の効能におけるかなりの差を示した」（Knudson、第1048頁、強調を追加した）。
【００５９】
先行技術に記載されるように、非経口的に投与されるジアゼパム、例えば、商品名Diastat（登録商標）で販売される市販のジアゼパムは、発作の予防のために投与される。
【００６０】
D．投与方法
同様に、その必要がある対象に製剤を非経口投与することによって、本発明の製剤を投与する方法も開示される。投与は、製剤を再構成および／または希釈する必要なく行うことができる。さらに、投与は、シリンジ、ペン型注入装置、オートインジェクター装置、ポンプ、または灌流バッグによって行うことができる。同様に、製剤を、前記シリンジ、ペン型注入装置、オートインジェクター装置、ポンプ、または灌流バッグにおいて保存することができ、それらを直ちに用いることができる（この場合も、製剤を再構成および／または希釈する必要なく）。さらに、および先に示したように、投与される製剤の量は、必要に応じて、1μL、10μL、20μL、50μL、75μL、100μL、200μL、300μL、400μL、500μL、600μL、700μL、800μL、900μL、1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL、6 mL、7 mL、8 mL、9mL、または10 mL、またはそれより多い量の範囲でありうる。ある局面において、製剤は、室温（およそ20〜25℃）で少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、または12ヶ月間保存した場合に低分子薬物が安定で可溶化されたままである（すなわち、低分子薬物の合着または結晶化がない）製剤である。
【実施例】
【００６１】
E．実施例
以下の実施例ならびに図は、本発明のある態様を示すために含まれる。実施例または図に開示される技術は、本発明の実施において十分に機能することが本発明者らによって発見された技術を示し、従って、その実施についての様式を構成すると考えられ得ることが、当業者によって認識されるべきである。しかし、当業者は、本開示を考慮して、多くの変更が、本発明の精神および範囲を逸脱することなく、開示される具体的な態様において成され、依然として同様のまたは類似した結果を得ることができることを認識する。
【００６２】
本開示のいくつかの態様を、具体的な例によってより詳細に記述する。以下の実施例は、説明目的のために提供され、本発明をいかなる手法でも制限しないことが意図される。例えば、当業者は、重要でない多様なパラメータを変化させるかまたは修飾することができ、それでも本質的に同じ結果を生じることを容易に認識するであろう。
【００６３】
実施例1
この実施例において、1% (w/v)または2% (w/v)デオキシコール酸ナトリウム(SDC)(CAS 302-95-4)を、ジメチルスルホキシド(DMSO)(CAS 67-68-5)単独、または5% (v/v)ベンジルアルコール(BA)(CAS 100-51-6)を含有するDMSO中に溶解し、続いて、100 mg/mLの濃度までジアゼパム(CAS 439-14-5)を溶解した。逆相高性能液体クロマトグラフィー(RP-HPLC)と合わされた抗沈殿アッセイを使用して、ジアゼパム製剤を、ジアゼパム沈殿を防ぐそれらの能力についてスクリーニングした。
【００６４】
ジアゼパム製剤をスクリーニングするために使用した抗沈殿アッセイは、製剤溶媒の50x希釈となるように、ジアゼパムを模擬細胞外液(SEF)中へ希釈することからなった。SEFは、0.7 mM塩化マグネシウム(CAS 7786-30-3)、1.2 mM塩化カルシウム(CAS 10043-52-4)、2.0 mM塩化カリウム(CAS 7447-40-7)、2.0 mMリン酸一カリウム(CAS 7778-77-0)、0.5 mM硫酸ナトリウム(CAS 7757-82-6)、104 mM塩化ナトリウム(CAS 7440-23-5)、および28.3 mM炭酸水素ナトリウム(CAS 144-55-8)からなった。ジアゼパム製剤をSEF中へ希釈した後、サンプルを数回反転することによって混合し、サンプルを10分間平衡化させた。沈殿物を遠心分離によって収集し、可溶性ジアゼパム含有量をRP-HPLCによって上澄み中において測定した。上澄み中のより大きな溶解度は、皮下投与後の注入部位から離れてのジアゼパムのよりよい溶解につながると予想される。
【００６５】
可溶性ジアゼパムを決定するために使用したRP-HPLC法は、20% (v/v) 3.2 mMギ酸アンモニウム(CAS 540-69-2)および80% (v/v)メタノール(CAS 67-56-1)からなる移動相を用いる無勾配法であった。C18カラム(Luna（商標）, Phenomenex, 3.9 mm I.D. x 150 mm長さ, 5ミクロン粒度)を、カラム温度40℃、流量0.6 mL/分、サンプル注入量5-μL、および検出波長230-nmで使用した。
【００６６】
SDCを含有するサンプル製剤は、抗沈殿アッセイにおいてジアゼパム回収を有意に改善した（表1）。SDCを有さないサンプルは、製剤へのBAの添加有りまたは無しで、それぞれ、11.4%および9.1%のジアゼパム回収を有した。1% (w/v) SDCを製剤へ添加することは、ジアゼパム回収を2.6倍改善し、2% (w/v) SDCは回収を4.1倍改善した。抗沈殿アッセイおよびRP-HPLCを使用して測定された可溶性ジアゼパムの回収における改善は、皮下投与後の注入部位からのジアゼパムの溶解の改善およびジアゼパム沈殿の防止につながると予想される。従って、溶解の改善は、迅速な吸収および遅い排泄を伴うより望ましい薬物動態プロファイルをもたらすと予想される。
【００６７】
（表１）DMSO中においてデオキシコール酸ナトリウムを用いて調製されたジアゼパム製剤は、SEF中におけるジアゼパム沈殿を防いだ。
2020522502.tif 000003
【００６８】
実施例2
この実施例において、1%、10%、20%、または30% (v/v)ポリソルベート80 (PS80)(CAS 9005-65-5)を、5% (v/v) BAを有するDMSO中へ分散し、続いて、ジアゼパムを50、75または100 mg/mLの濃度で溶解した。PS80を含有するジアゼパム製剤を、抗沈殿アッセイ、続いてのRP-HPLCを使用して、ジアゼパム沈殿を防ぐそれらの能力についてスクリーニングした（上記実施例1において詳述される通り）。
【００６９】
PS80を含有するサンプル製剤は、抗沈殿アッセイにおいてジアゼパム回収を有意に改善する（表2）。ジアゼパムを5% BAおよび漸増濃度のPS80 (最大30% (v/v))を有するDMSO中へ100 mg/mLで溶解させた場合、最高濃度のPS80が最良のジアゼパム回収をもたらした。30% (v/v) PS80はジアゼパム回収を7.9倍改善した。ジアゼパムを5% (v/v) BAおよび漸増濃度のPS80 (最大30% (v/v))を有するDMSO中へ75 mg/mLで溶解させた場合、最高濃度のPS80が最良のジアゼパム回収をもたらした。30パーセントPS80はジアゼパム回収を8.4倍改善した。同様に、ジアゼパムをDMSOおよび5% (v/v) BAおよび20% (v/v) PS80中へ50 mg/mLで溶解させた場合、ジアゼパム回収は8.8倍改善された。
【００７０】
表2中のデータは、固定濃度のジアゼパム（50、75または100 mg/mLのいずれか）では、回収可能なジアゼパムのパーセントはPS80濃度と共に増加することを示す。データは、SEF中におけるジアゼパム溶解度を最大化する、PS80およびジアゼパム間の最適比があることを示している。PS80の場合、ジアゼパムおよびPS80の約1:1モル比がSEF中における沈殿を防ぐ。
【００７１】
（表２）DMSO中においてPS80を用いて調製されたジアゼパム製剤は、SEF中におけるジアゼパム沈殿を防いだ。
2020522502.tif 000004
【００７２】
実施例3
この実施例において、1%、5%、10%、または17.7% (w/v)のドデシルマルトシド(DM)(CAS 69227-93-6)を、5% (v/v) BA)を有するDMSOに溶解し、続いて、ジアゼパムを50、75または100 mg/mLの濃度で溶解した。DMを含有するジアゼパム製剤を、抗沈殿アッセイおよびRP-HPLCを使用して、ジアゼパム沈殿を防ぐそれらの能力についてスクリーニングした（上記実施例1において詳述される通り）。
【００７３】
DMを用いて調製された製剤についてのジアゼパム回収パーセントデータを表3に示す。各濃度のジアゼパム(50、75または100 mg/mL)について、漸増濃度のDMは、製剤がSEF中へ希釈された場合に可溶性のままであったジアゼパムのパーセントを増加させた。例えば、5% BAおよび17.7% (w/v) DMを有するDMSO中へ50 mg/mLで溶解されたジアゼパムは、SEF中においてほぼ100%のジアゼパム溶解度を有した。PS80と同様に、表3中のデータは、ジアゼパム沈殿を防ぐ理想的な比率があることを示唆しており、この実施例において、DM対ジアゼパムの比は約2:1である。
【００７４】
（表３）DMSO中においてDMを用いて調製されたジアゼパム製剤は、SEF中におけるジアゼパム沈殿を防いだ。
2020522502.tif 000005
【００７５】
実施例4
この実施例において、0%または2 % (v/v)のポリソルベート20 (PS20)(CAS 9005-64-5)を、5% (v/v) BAを有するDMSO中へ、または5% (v/v) BAおよび5% (v/v) NMPを有するDMSO中へ分散し、続いて、ジアゼパムを100 mg/mLの薬物濃度で溶解した。PS20を含有するジアゼパム製剤を、抗沈殿アッセイおよびRP-HPLCを使用して、ジアゼパム沈殿を防ぐそれらの能力についてスクリーニングした（上記実施例1において詳述される通り）。
【００７６】
PS20を含有するジアゼパム製剤は、抗沈殿アッセイにおいてジアゼパム回収を有意に改善した（表4）。1% (v/v) PS20を含めることは、賦形剤を有さない製剤と比較して、ジアゼパム沈殿を防ぐためには不十分であった。しかし、2% (v/v) PS20を含めることは、ジアゼパム回収を2.9倍改善した。PS20および5% (v/v) NMPを含有するジアゼパム製剤は、NMPを有さないものと比べて、ジアゼパム沈殿の防止の点で有意により有効であった。製剤中の1% (v/v) PS20および5% (v/v) NMPはジアゼパム回収を4.1倍改善し、2% (v/v) PS20および5% (v/v) NMPを含めることは回収を5.4倍改善した。
【００７７】
（表４）DMSO中においてPS20を用いて調製されたジアゼパム製剤は、SEF中におけるジアゼパム沈殿を防いだ。
2020522502.tif 000006
【００７８】
実施例5
この実施例において、10% (w/v)またはそれ未満のドデシル硫酸ナトリウム(SDS) (CAS 151-21-3)を、5% (v/v) BAを有するDMSO中に溶解し、続いて、ジアゼパムを50、75または100 mg/mLの濃度で溶解した。SDSを含有するジアゼパム製剤を、抗沈殿アッセイおよびRP-HPLCを使用して、ジアゼパム沈殿を防ぐそれらの能力についてスクリーニングした（上記実施例1において詳述される通り）。
【００７９】
SDSを用いて調製された製剤をSEF中へ希釈した後のジアゼパム回収パーセントデータを、表5に示す。各濃度のジアゼパム(50、75、または100 mg/mL)について、漸増濃度のSDSは、SEF中へ希釈された場合に可溶性のままであったジアゼパムのパーセントを増加させた。100 mg/mLのジアゼパムを5% (v/v) BAおよび10% (w/v) SDSを有するDMSO中へ溶解し、SEF中に希釈した場合、回収されるジアゼパムの量は、SDSを有さないDMSOおよび5% (v/v) BA中のジアゼパムと比べて、8.2倍改善された。ジアゼパムの濃度を減少させるにつれて、SEF中へ希釈された場合にジアゼパム溶解度を維持するために必要とされるSDSの量も減少した。表5中のデータは、ジアゼパム沈殿を防ぐ理想的な比率があることを示唆しており、この実施例において、SDS対ジアゼパムのモル比は約1:1であった。
【００８０】
（表５）DMSO中においてSDSを用いて調製されたジアゼパム製剤は、SEF中におけるジアゼパム沈殿を防いだ。
2020522502.tif 000007
【００８１】
実施例6
DMSOおよび5% (v/v) BA（かつ種々の界面活性剤を含む）中に調製されたジアゼパム製剤(100 mg/mL)を、13 mm FluroTec（登録商標）栓(West Pharmaceuticals製の、フルオロカーボンフィルムでコーティングされたゴム栓)で2 mL CZバイアル(Crystal-Zenith, West Pharmaceuticals, PA, USA)中に密封し、40℃/75%相対湿度で90日間保存した。ジアゼパム製剤を、また、DMSO中の2% (v/v) PS20、5% (v/v) BA、および5% (v/v) NMPを用いて調製した。密封されたCZバイアルを、安定性研究のためにホイルパウチ中にパッケージした。全ての製剤を、DMSO (5% (v/v) BAを含有する)中に溶解された100 mg/mLジアゼパムと比較した。製剤の安定性を、下記表6においてジアゼパム残存パーセント(±標準偏差)として示す。
【００８２】
（表６）様々な賦形剤を有するDMSO中に溶解されたジアゼパムの、40℃/75%相対湿度での安定性。安定性データはN=3の反復実験についてのジアゼパムピークの平均(±標準偏差)%純度として与えられる。
2020522502.tif 000008
【００８３】
DMSO-BA溶媒系（追加の賦形剤無し）中に溶解されたジアゼパムは、40℃および75%相対湿度で保存した場合に最初の30日でジアゼパム純度の4.2%減少を経験し、しかし研究期間にわたって約95%のままであった。10% (v/v) PS80、10% (w/v) SDS、および2% (v/v) PS20の賦形剤を用いて調製されたジアゼパム製剤は、90日の研究の終了時に97.1%以上もの残存ジアゼパムピーク純度を示した。これらの製剤は、DMSOおよび5% (v/v)ベンジルアルコール（追加の賦形剤無し）中のジアゼパムと比較して、増強された安定性を示した。2% (v/v) PS20および5% (v/v) NMPを用いて調製されたジアゼパム製剤は、添加される賦形剤無しのDMSO-BA溶媒系で観察されたものに匹敵する安定性を示した。最後に、2% (w/v) SDCを用いて調製されたジアゼパム製剤は、90日の安定性研究の終了時に91%の残存ジアゼパムピーク純度を有した。
【００８４】
実施例7
DMSO-BA溶媒系中におけるジアゼパム製剤の安定性を、40凍結解凍サイクルを通して研究した。上述したように、ジアゼパム(100 mg/mL)を、5% (v/v) BAを含有するDMSO中へ溶解し、13 mm FluroTec（商標）栓で2 mL CZバイアル中に密封した。ジアゼパム製剤の3つのバイアルをアルミホイルパウチ中に密封し、-20℃フリーザー中に2時間保存した。保存後、パウチを室温に置き、2時間かけて解凍させた。このプロセスを1日当たり3凍結解凍サイクルのペースで繰り返し、3番目の凍結サイクルは一晩放置した。数日間の凍結解凍サイクル後、2μLのジアゼパム製剤をRP-HPLCによる分析のために取り出した。図1に示されるデータは、5凍結解凍サイクル間隔でのジアゼパム残存パーセント±標準偏差を示す。
【００８５】
ジアゼパムの有意な減少は20凍結解凍サイクル後に測定されなかった。しかし、25サイクル後、ジアゼパム残存パーセントは、凍結前サンプル（バー0, p＜0.05）とは有意に異なった。5凍結解凍サイクルの各連続間隔と共に、ジアゼパム残存パーセントは減少した。40サイクル後、81.7±0.5%のジアゼパム残存があった。
【００８６】
実施例8
この実施例において、いくつかのジアゼパム-DMSO製剤（賦形剤有りおよび無し）の薬物動態(PK)プロファイルをラットモデルにおいて評価した。8〜10週齢かつ275〜325グラムの成体雄性Sprauge-Dawleyラット(HillTop Lab Animals, Inc., Scottsdale, PA)において、1群当たり少なくともラット5匹で、研究を行った。ラットをステンレス鋼ケージ中に個々に収容し、尾へ適用された油性マーカーより数によって識別した。ラットを順化中に1日2回観察し、異常な健康所見があれば記録した。動物に、順化期間の中、標準齧歯動物餌および水を供給したが、研究開始前に一晩絶食させた。動物を研究前に1週間順化させた。
【００８７】
薬物動態研究についての試験物を表7に記載する。研究は、2つの市販のジアゼパム製剤を比較物として含有した−Diastat（登録商標）直腸ジアゼパム(Valeant Pharmaceuticals)およびHospiraの筋肉内(IM)ジアゼパム製剤。ラットを研究開始前に計量し、3.5 mg/kgの試験用量を正確に投与した。群1においてDiastatを直腸に投薬し、群2においてジアゼパムのIM注射を後大腿筋に施した。群3〜6において、4つの試験製剤のうちの1つを使用してジアゼパムを肩甲骨間領域に皮下投薬(SC)した。全血サンプルを、時間0 (投薬前)、10、20、30、45、60、および120分で頸静脈を介して各ラットから、K2 EDTAを有するバイアル中に収集した。全血サンプルを遠心分離し（3000 rpm, 15分間）、血漿を採取した。血漿サンプルを、将来のジアゼパムおよびノルジアゼパム分析のために-70℃で凍結した。
【００８８】
（表７）薬物動態研究においてラットへ投与された試験物および投薬量
2020522502.tif 000009
【００８９】
ラット血漿サンプルを、内部標準としてジアゼパム-d5およびノルジアゼパム-d5を使用するLC/MSによってジアゼパムおよびノルジアゼパム濃度についてアッセイした。各25μLサンプルへ、25 ng/mLジアゼパム-d5/ノルジアゼパム-d5溶液25μLおよび水0.2 mLを添加した。サンプルをボルテックスで撹拌し、Evolute（登録商標）ABN SPEプレート(固相抽出, Biotage, Charlotte, NC)を使用して抽出し、メタノールで溶出し、窒素下にておよそ40℃で乾燥させた。乾燥残渣を500μLの1:1メタノール:水で再構成し、ボルテックスによって混合した。逆相超高性能液体クロマトグラフィー(RP-UPLC)および質量分析(MS)法を使用し、ジアゼパムおよびノルジアゼパムを測定した。勾配法は、移動相として60:40 (% v/v)アセトニトリル:水中の0.1%ギ酸を用いるクロマトグラフィーカラム(Waters Atlantis dC-18, 3μm, 2.1 x 50 mm)を利用する。分析物検出を、アッセイのために280 nmで紫外線検出器および0.25 mL/分の流量でアイデンティティー確認のために質量分析計を利用して行った。得られたデータをng/mLで表した。ジアゼパムおよびノルジアゼパム血漿濃度データを、Microsoft Excelについてのメニュー形式のアドインプログラムである、PKSolver Softwareを使用して解析した。
【００９０】
Diastat（登録商標）直腸ジアゼパム、2% (w/v) SDCを有するDMSOおよび5% (v/v) BA中のジアゼパム、DMSO単独中のジアゼパム、ならびに2% (v/v) PS20を有するDMSOおよび5% (v/v) BA中のジアゼパムについての、ジアゼパム血漿濃度プロファイル(平均値±SEM)を図2に示す。Diastat（登録商標）群は、10分でのTmaxを有し、Cmaxは約200 ng/mLであり、残りの110分間にわたって血漿濃度の急激な下落があった。DMSO単独中のジアゼパムは、10分でのTmaxを有し、Cmaxは約70 ng/mLであった。Diastatとは異なり、DMSO単独中のジアゼパムは、残りの110分間にわたって約50 ng/mLでジアゼパム血漿濃度を維持した。この群（および他のDMSO群）において観察された排泄期の欠如は、注入部位での部分的なジアゼパム沈殿、続いての遅い吸収に起因すると考えられる。DMSO中ジアゼパム製剤へ2% (v/v) PS20を添加することは、10分でジアゼパム血漿濃度上昇をもたらしたが、部分的な用量沈殿および遅い吸収に起因して、Tmax (110 ng/mL)は120分で生じた(Cmax)。DMSO中ジアゼパム製剤へ2% (w/v) SDCを添加することは、注入後10分でジアゼパム血漿濃度上昇をもたらしたが、遅延したTmax (約110 ng/mL)が注入後60分で生じた(Cmax)。全体として、DMSO中ジアゼパム製剤への賦形剤の添加は、注入後10分においてDMSO単独中のジアゼパムと比較して、ジアゼパム血漿濃度を追加的に増加させた。
【００９１】
ジアゼパムの筋肉内注射剤(Hospira IM)、ならびに10% (w/v) SDSを有するDMSOおよび5% (v/v) BA中ジアゼパム製剤の、ジアゼパム(DZ)およびノルジアゼパム(NDZ)組み合わせPKプロファイル(平均値±SEM)を、図3に示す。ジアゼパムおよびその代謝産物であるノルジアゼパムは両方とも、薬力学活性を有し、臨床的に関連する。市販の比較物およびDMSOベースの製剤は両方とも、30分でのTmaxを有し、Cmaxは、それぞれ、424 ng/mLおよび396 ng/mLであった。群間のCmaxの差は統計的に等価であった(p=0.3123)。まとめると、図2および図3は、賦形剤の賢明な選択が、ジアゼパムPKプロファイルを調節し、迅速なまたは遅延した／遅い吸収のいずれかを促進することができることを示している。
【００９２】
実施例9
この実施例において、皮下および筋肉内注射後のDMSOおよび30% (w/v)ポリソルベート80中のジアゼパムの薬物動態(PK)プロファイルを、Gottingenミニブタモデルにおいて評価した。10〜12キログラムの体重の雌性ミニブタ(Xenometrics, Stilwell, KS)において、1群当たりミニブタ3匹で（2つの群）、研究を行った。動物を研究前に2週間順化させた。動物に、投与間に2週間のウォッシュアウト期間をおいた。ミニブタをステンレス鋼ケージ中に個々に収容し、ケージ上のプラカードによって数によって識別した。ミニブタを研究中に1日2回観察し、異常な健康所見があれば記録した。動物を、研究開始前一晩、用量投与後4時間、絶食させた。
【００９３】
PK研究についての試験物を表8に記載する。試験は、2つの市販のジアゼパム製剤を比較物として含有した−Diastat（登録商標）直腸(PR)ジアゼパム(Valeant Pharmaceuticals)およびHospiraの筋肉内(IM)ジアゼパム製剤。ミニブタを研究開始前に計量し、1.0 mg/kgの試験用量を正確に投与した。群1においてDiastatを直腸に投薬し、群2においてHospiraのジアゼパムのIM注射を後大腿筋に施した。群3にはジアゼパム試験製剤の皮下投与を耳の後ろに施し、一方、群4には同じ製剤の筋肉内投与を後大腿に施した。同じ群の動物が2回の筋肉内投与を受けないように、動物に投薬した。全血サンプルを、用量投与後の時間0 (投薬前)、0.017、0.083、0.167、0.25、0.5、0.75、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、および24.0時間で頸静脈を介して各ミニブタから、K2 EDTAを有するバイアル中に収集した。全血サンプルを遠心分離し(3000 rpm, 15分間)、血漿を収集した。血漿サンプルを将来のジアゼパム分析のために-70℃で凍結した。
【００９４】
（表８）薬物動態研究においてミニブタへ投与された試験物および投薬量
2020522502.tif 000010
【００９５】
ミニブタ血漿サンプルを、内部標準としてジアゼパム-d5を使用するLC/MSによってジアゼパム濃度についてアッセイした。各20μLサンプルまたは標準へ、500μLのTrizma塩基緩衝液を添加し、続いて1分間ボルテックスで混合した。混合後、600μLの酢酸エチルを各サンプルへ添加し、反転によって40回混合した。600μLのこの溶液を新しい収集チューブへ移し、窒素下にて60℃で乾燥させた。乾燥生成物を100μLの再構成溶液(1 mMギ酸アンモニウムおよび65/35 (%v/v)メタノール/水中0.1%ギ酸)中において再構成し、続いて1分間ボルテックスで混合した。逆相高性能液体クロマトグラフィー(RP-HPLC)および質量分析(MS)法を使用し、ジアゼパム含有量を測定した。勾配はクロマトグラフィーカラム(Waters ACE（登録商標）C18, 3μm, 4.6 x 30 mm)を利用し、移動相Aは1 mMギ酸アンモニウムおよび65/35 (v/v)メタノール/水中0.1%ギ酸であり、移動相Bは90/10 (v/v)メタノール/水中1%酢酸であった。ジアゼパム検出を、アッセイのために280 nmで紫外線検出器および0.25 mL/分の流量でアイデンティティー確認のために質量分析計を利用して行った。得られたデータをng/mLで表した。
【００９６】
筋肉内(IM)もしくは皮下(SC)注射によって投与された30%ポリソルベート80 (30% (w/v) PS80)を有するDMSO中の100 mg/mLジアゼパム、筋肉内注射によって投与されたHospiraのジアゼパム、およびDiastat（登録商標）直腸ジアゼパムについての、ジアゼパム血漿濃度プロファイル(平均値±SEM)を図4に示す。Diastat（登録商標）群は、10分でのTmaxを有し、Cmaxは約271 ng/mLであり、続いて、研究の最初の5時間にわたって血漿濃度の急激な下落があった。Hospiraジアゼパム群もまた、10分でのTmaxおよび425.3 ng/mLのCmaxを有し、続いて、Diastat直腸ゲルほど急激ではなかったが、血漿濃度の急激な下落があった。IM注射によって投与された30% PS80を有するDMSO中のジアゼパム製剤は、45分でのTmax、391.3 ng/mLのCmax、およびHospiraのIM投与と一致した排泄プロファイルを有した。DMSOおよび30% (w/v) PS80中のジアゼパムのSC投与は、3つのピーク血漿濃度を生じさせ、202.0 ng/mLの真のCmaxは4.0時間で生じた。投与経路に応じて、30% (w/v)ポリソルベート80を有するDMSO中のジアゼパムの薬物動態プロファイルおよびピーク血漿濃度は、迅速な発現または持続した体循環を有することができる。
【００９７】
実施例10
30% (w/v) ポリソルベート80を有するDMSO中のジアゼパムの安定性を、75℃で20日間ガラスバイアル中にて保存した場合において研究した。ジアゼパム(100 mg/mL)を、30% (w/v)ポリソルベート80を含有するDMSO中へ溶解し、20 mm FluroTec（商標）栓および20 mmフリップオフシールで10 mLホウケイ酸ガラスバイアル中へ密封した。バイアルを75℃で保存し、3つのバイアルを5、12、および20日目に引き抜いた。各バイアル中のジアゼパム残存パーセントをRP-HPLCによって決定した。図5中のデータは、ジアゼパム残存パーセント±標準偏差を示す。
【００９８】
75℃での保存の5および12日後、ジアゼパム残存パーセントは、初期（時間ゼロ）測定値と有意には異ならなかった(p=0.431)。しかし、75℃での保存の8追加日後（20日目）、ジアゼパムのパーセントはおよそ6.5%減少した(106.98%から99.99%へ, p=0.001)。75℃での保存の後のジアゼパム残存パーセントの減少にもかかわらず、結果は、100 mg/mLでのジアゼパムは、30%ポリソルベート80 (w/v)を有するDMSO中において安定していることを示している。
【００９９】
実施例11
30% (w/v)ポリソルベート80を有するDMSO中のジアゼパムの安定性を、4〜8℃、25℃かつ60%相対湿度、30℃、および40℃かつ75%相対湿度でガラスバイアル中にて保存した場合において研究した。ジアゼパム(100 mg/mL)を、30% (w/v)ポリソルベート80を含有するDMSO中へ溶解し、20 mm FluroTec（商標）栓および20 mmフリップオフシールで10 mLホウケイ酸ガラスバイアル中へ密封した。バイアルを上述の保存条件下にて3つ組で保存した。各バイアル中のジアゼパム残存パーセントを、30日間の保存後にRP-HPLCによって決定した。図6中のデータは、ジアゼパム残存パーセント±標準偏差を示す。
【０１００】
初期ジアゼパム含有量は、時間ゼロでのRP-HPLCによる測定値であり、「初期」と標識された下部バーによってグラフで示される。どの保存条件（4〜8℃、25℃/60% RH、30℃、および40℃/75% RH）でもジアゼパム残存パーセントは100%であり、30日間の保存後にジアゼパムの減少がなかったことを示している。
【図１】
2020522502.tif 000012
【図２】
2020522502.tif 000013
【図３】
2020522502.tif 000014
【図４】
2020522502.tif 000015
【図５】
2020522502.tif 000016
【図６】
2020522502.tif 000017
【国際調査報告】
2020522502.tif 000018
2020522502.tif 000019
2020522502.tif 000020
2020522502.tif 000021