(57)【要約】本明細書では、抗グルココルチコイド誘発性腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体とコロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）に結合する抗体の組み合わせ、または、抗ＧＩＴＲ抗体とプログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ−１）を結合する抗体の組み合わせで癌を治療する方法を提供する。
2020512357.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）抗体および抗グルココルチコイド誘発性ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体を対象に投与することを含む、対象の癌を治療する方法であって、
前記抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、方法。
【請求項２】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、並びに、
ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
抗ＧＩＴＲ抗体が、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、
（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、
（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体がヒト化抗体であるか、またはＦａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ’、および（Ｆａｂ’）２から選択される、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が、同時にまたは連続して投与される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が、毎週１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、または５週間に１回投与される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、０．１、０．３、０．５、１、２、３、４、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、２週間ごとまたは３週間ごとに１、２、３、または４ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記癌は、非小細胞肺癌、黒色腫、頭頸部の扁平上皮癌、卵巣癌、膵臓癌、腎細胞癌、肝細胞癌、膀胱癌、悪性神経膠腫、大腸癌、子宮内膜癌から選択される、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記癌は、手術、化学療法、および放射線療法のうちの１つまたは複数から選択される治療後に再発性または進行性である、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、ＣＳＦ１およびＩＬ−３４の両方のＣＳＦ１Ｒへの結合を遮断する、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、インビトロでリガンド誘導性ＣＳＦ１Ｒリン酸化を阻害する、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が相乗効果をもたらす、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が、マウス異種移植片または同系癌モデルにおける腫瘍成長の相乗的阻害をもたらす、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記方法が、少なくとも１つの化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
対象に抗プログラム細胞死１（ＰＤ−１）抗体および抗グルココルチコイド誘発ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体を投与することを含む、対象の癌を治療する方法であって、
抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、方法。
【請求項１７】
前記抗ＰＤ−１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号１００の配列を含む重鎖および配列番号１０２の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１０５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１０７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１０９の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１１２の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１１４の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号１１６の配列を含む軽鎖と、を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む抗体、並びに、
ｃ）配列番号１００および配列番号１０１の配列を含む重鎖および配列番号１０２および配列番号１０３の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記抗ＧＩＴＲ抗体は、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、
（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、
（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記抗ＰＤ−１抗体がヒト化抗体であるか、またはＦａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ’、および（Ｆａｂ’）２から選択される、請求項１６〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
前記抗ＰＤ−１抗体はニボルマブである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記抗ＰＤ−１抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が同時にまたは連続して投与される、請求項１６から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記抗ＰＤ−１抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が、毎週１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、または５週間に１回投与される、請求項１６から２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記抗ＰＤ−１抗体が、０．５、１、２、３、４、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１６から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記抗ＰＤ−１抗体がニボルマブであり、該ニボルマブが２週間ごとに３ｍｇ／ｋｇの用量で、または２週間ごとに２４０ｍｇの均一用量で投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記癌は、非小細胞肺癌、黒色腫、頭頸部の扁平上皮癌、卵巣癌、膵臓癌、腎細胞癌、肝細胞癌、膀胱癌、悪性神経膠腫、大腸癌、子宮内膜癌から選択される、請求項１６から２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記癌は、手術、化学療法、および放射線療法のうちの１つまたは複数から選択される治療後に再発性または進行性である、請求項１６から２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記抗ＰＤ−１抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が相乗効果をもたらす、請求項１６から２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記抗ＰＤ−１抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が、マウス異種移植片または同系癌モデルにおける腫瘍成長の相乗的阻害をもたらす、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記方法が、少なくとも１つの化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項１６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
対象が以前にＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤療法を受けたことがある、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
対象がＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤の不十分な応答者であるか、少なくとも２回の投与後にＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤に対して不応性である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
請求項１〜３１のいずれか一項に記載の癌を治療する方法で使用するための抗ＧＩＴＲ抗体を含む組成物であって、
抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、組成物。
【請求項３３】
請求項１から３１のいずれか一項に記載のステップおよび／または条件に従って対象の癌を治療するための薬剤の調製のための抗ＧＩＴＲ抗体の使用であって、
抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、使用。
【請求項３４】
請求項１〜１５、３０、または３１のいずれか一項に記載の癌を治療する方法で使用するための抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体を含む組成物であって、
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、
ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択され、
抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、組成物。
【請求項３５】
請求項１〜１５、３０、または３１のいずれか一項に記載のステップおよび／または条件に従って対象の癌を治療するための薬剤の調製のための、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体を含む組成物の使用であって、
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、
ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択され、
抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、使用。
【請求項３６】
請求項１６〜３１のいずれか一項に記載の癌を治療する方法で使用するための抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＰＤ−１抗体を含む組成物であって、
前記抗ＰＤ−１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号１００の配列を含む重鎖および配列番号１０２の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１０５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１０７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１０９の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１１２の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１１４の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号１１６の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、並びに、
ｃ）配列番号１００および配列番号１０１の配列を含む重鎖および配列番号１０２および配列番号１０３の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択され、
抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、組成物。
【請求項３７】
請求項１６〜３１のいずれか一項に記載のステップおよび／または条件に従って対象の癌を治療するための薬剤を調製するための、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＰＤ−１抗体を含む組成物の使用であって、
前記抗ＰＤ−１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号１００の配列を含む重鎖および配列番号１０２の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１０５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１０７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１０９の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１１２の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１１４の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号１１６の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、
ｃ）配列番号１００および配列番号１０１の配列を含む重鎖および配列番号１０２および配列番号１０３の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択され、
抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、使用。
【請求項３８】
前記組成物が少なくとも１つの化学療法剤をさらに含む、請求項３２、３４、または３６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３９】
前記治療が、少なくとも１つの化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項３３、３５、または３７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項４０】
対象における膵臓癌の治療方法であって、対象に抗コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）抗体および抗グルココルチコイド誘発ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体を投与することを含む方法であって、
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、並びに、
ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される、方法。
【請求項４１】
対象に抗コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）抗体および抗グルココルチコイド誘発ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体を投与することを含む、対象における膵臓癌の治療方法であって、
抗ＧＩＴＲ抗体が、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、
（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、
（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである、方法。
【請求項４２】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、並びに、
ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体がヒト化抗体であるか、またはＦａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ’、および（Ｆａｂ’）２から選択される、請求項４０〜４２のいずれかに記載の方法。
【請求項４４】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が同時にまたは連続して投与される、請求項４０から４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が、毎週１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、または５週間に１回投与される、請求項４０〜４４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、０．１、０．３、０．５、１、２、３、４、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項４０から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、２週間ごとまたは３週間ごとに１、２、３、または４ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、ＣＳＦ１およびＩＬ−３４の両方のＣＳＦ１Ｒへの結合を遮断する、請求項４０から４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体がリガンド誘導ＣＳＦ１Ｒリン酸化をインビトロで阻害する、請求項４０から４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が相乗効果をもたらす、請求項４０から４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が、マウス異種移植片または同系膵臓癌モデルにおける腫瘍成長の相乗的阻害をもたらす、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記方法が、少なくとも１つの化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項４０から５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記少なくとも１つの化学療法剤が、ゲムシタビン、ナブ−パクリタキセル、ロイコボリン（フォリン酸）、５−フルオロウラシル、イリノテカン、およびオキサリプラチンから選択される、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
少なくとも１つの化学療法剤が、（ａ）ゲムシタビン、（ｂ）ゲムシタビンおよびナブパクリタキセル、および（ｃ）ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸ（フォリフィノックス）から選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
少なくとも１つの化学療法剤がゲムシタビンである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記方法が、抗ＰＤ−１抗体を投与することをさらに含む、請求項４０〜５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記抗ＰＤ−１抗体は、
ａ）配列番号１００の配列を含む重鎖および配列番号１０２の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１０５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１０７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１０９の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１１２の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１１４の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号１１６の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、並びに、
ｃ）配列番号１００および配列番号１０１の配列を含む重鎖および配列番号１０２および配列番号１０３の配列を含む軽鎖を含む抗体、
から選択される、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
対象の膵臓癌を治療する方法であって、対象に抗コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）抗体、抗グルココルチコイド誘発ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体、並びに、ゲムシタビン、ナブ−パクリタキセル、ロイコボリン（フォリン酸）、５−フルオロウラシル、イリノテカン、およびオキサリプラチンから選択される少なくとも１つの化学療法剤を投与することを含む方法。
【請求項５９】
前記少なくとも１つの化学療法剤が、（ａ）ゲムシタビン、（ｂ）ゲムシタビンおよびナブ−パクリタキセル、並びに（ｃ）ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸから選択される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記少なくとも１つの化学療法剤がゲムシタビンである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、請求項５８から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６２】
抗ＧＩＴＲ抗体が、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、
（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、
（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、並びに、
ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される、請求項５８から６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
抗ＰＤ−１抗体を投与することをさらに含む、請求項５８から６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６５】
前記抗ＰＤ−１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号１００の配列を含む重鎖および配列番号１０２の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１０５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１０７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１０９の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１１２の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１１４の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号１１６の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、並びに、
ｃ）配列番号１００および配列番号１０１の配列を含む重鎖および配列番号１０２および配列番号１０３の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
請求項４０〜６５のいずれか一項に記載の膵臓癌を治療する方法で使用するための抗ＧＩＴＲ抗体を含む組成物。
【請求項６７】
抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、請求項６６に記載の組成物。
【請求項６８】
抗ＧＩＴＲ抗体が、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、
（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、
（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである、請求項６７に記載の組成物。
【請求項６９】
請求項４０〜６８のいずれか一項に記載のステップおよび／または状態に従って対象の膵臓癌を治療するための薬剤の調製のための、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体を含む組成物の使用。
【請求項７０】
請求項６９の使用であって、
抗ＧＩＴＲ抗体は、
ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、
ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、
ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、
ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、
ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、使用。
【請求項７１】
請求項７０の使用であって、
抗ＧＩＴＲ抗体が、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、
（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、
（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、
（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである、使用。
【請求項７２】
請求項６９〜７１のいずれか一項に記載の使用であって、
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、
ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、
ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、並びに、
ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される、使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、いくつかの実施形態では、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）に結合する抗体と組み合わせて、またはプログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ−１）に結合する抗体と組み合わせて、グルココルチコイド誘発腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）関連タンパク質（ＧＩＴＲ）に結合するポリペプチドで癌を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
グルココルチコイド誘発腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）関連タンパク質（ＧＩＴＲ）（ＴＮＦＲＳＦ１８、ＣＤ３５７、またはＡＩＴＲとしても知られる）は、タンパク質の腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーのメンバーである。ＧＩＴＲのＧＩＴＲリガンド（ＧＩＴＲＬ、ＴＮＦＳＦ１８としても知られている）への結合は、ＮＦ−κＢ活性化を特徴とする経路を含む、受容体の三量体化と下流のシグナル伝達経路の活性化を誘導する。ＧＩＴＲは特定の制御性Ｔ細胞の表面に高度に発現しているが、従来のＴ細胞サブセットでは低レベルで発現している。特定の刺激によるＴ細胞の活性化は、制御性Ｔ細胞およびエフェクターＴ細胞の特定の集団におけるＧＩＴＲの発現の増加につながる。ＧＩＴＲは、従来のＴ細胞に共刺激シグナルを提供して、抗原に対するＴ細胞の応答を高める。ＧＩＴＲは、制御性Ｔ細胞による抑制を調節するとも考えられている。例えば、ＧＩＴＲの活性化は、Ｔｒｅｇ系統の安定性を低下させたり、Ｔｒｅｇ抑制活性を直接阻害したり、Ｔｒｅｇを介した抑制に対するエフェクターＴ細胞の感受性を低下させたりする。ＧＩＴＲ機能に関連するレビューについては、例えば、S. Ronchetti et al., J. Immunol. Res., pp. 1-17 (2015); D. A. Knee et al., Eur. J. Cancer, 67: 1-10 (2016) を参照されたい。
【０００３】
コロニー刺激因子１受容体（本明細書ではＣＳＦ１Ｒと呼ばれる；当技術分野ではＦＭＳ、ＦＩＭ２、Ｃ−ＦＭＳ、Ｍ−ＣＳＦ受容体、およびＣＤ１１５とも呼ばれる）は、Ｎ末端細胞外ドメイン（ＥＣＤ）とチロシンキナーゼ活性を持つＣ末端細胞内ドメインを持つシングルパス膜貫通受容体である。ＣＳＦ１またはＣＳＦ１Ｒへのインターロイキン３４リガンド（ここではＩＬ−３４と呼ぶ；Lin et al., Science 320: 807-11 (2008)）のリガンド結合は、受容体の二量体化、ＣＳＦ１Ｒタンパク質チロシンキナーゼ活性の上方制御、ＣＳＦ１Ｒチロシン残基のリン酸化、および下流シグナル伝達イベントをもたらす。ＣＳＦ１またはＩＬ−３４によるＣＳＦ１Ｒの活性化は、単球およびマクロファージのほか、破骨細胞、樹状細胞、ミクログリアなどの他の単球細胞系統の輸送、生存、増殖、分化をもたらす。
【０００４】
多くの腫瘍細胞または腫瘍間質細胞は、ＣＳＦ１Ｒを介して単球／マクロファージ細胞を活性化するＣＳＦ１を産生することがわかっている。腫瘍内のＣＳＦ１のレベルは、腫瘍内の腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）のレベルと相関することが示されている。ＴＡＭのレベルが高いと、大多数の癌の患者の予後不良と相関することがわかっている。さらに、ＣＳＦ１は、たとえばマウスのヒト乳癌異種移植片において、腫瘍の成長と転移への進行を促進することがわかっている。例えば、Paulus et al., Cancer Res. 66: 4349-56 (2006)を参照されたい。さらに、ＣＳＦ１Ｒは、骨転移における溶骨性骨破壊において役割を果たす。例えば、Ohno et al., Mol. Cancer Ther. 5: 2634-43 (2006) を参照されたい。ＴＡＭは、免疫抑制性サイトカインの放出およびＴ細胞阻害性表面タンパク質の発現を通じて抗腫瘍Ｔ細胞エフェクター機能を抑制することにより、部分的に腫瘍成長を促進する。
【発明の概要】
【０００５】
癌の遺伝的変化は、抗腫瘍免疫を媒介できる多様な抗原セットを提供する。Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を介した抗原認識は、活性化シグナルと抑制シグナルのバランスによって調節されるＴ細胞応答を開始する。抑制シグナル、または「免疫チェックポイント」は、自己免疫を防ぐことにより正常組織で重要な役割を果たす。免疫チェックポイントタンパク質のアップレギュレーションにより、癌は抗腫瘍免疫を回避できる。臨床癌免疫療法の焦点となっている特定の免疫チェックポイントタンパク質は、プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ−１）である。単独療法として使用するための抗ＰＤ−１抗体は現在、多くの異なるタイプの癌の治療薬として臨床試験で研究されており、例えば、転移性黒色腫の治療のために別の免疫チェックポイントタンパク質ＣＴＬＡ−４に対する抗体との組み合わせで承認されている。本発明は、癌治療における特定の抗ＧＩＴＲポリペプチドと特定の抗ＰＤ−１抗体または特定の抗ＣＳＦ１Ｒ抗体との組み合わせに関する。
【０００６】
本開示は、例えば、抗コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）抗体および抗グルココルチコイド誘発ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体を対象に投与することを含む、対象の癌を治療する方法を含む。例えば、本開示は、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体を対象に投与することを含む、対象の癌を治療する方法であって、前記抗ＧＩＴＲ抗体は、ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、方法を含む。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体が、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである。
【０００７】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）を含む重鎖、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１を含む軽鎖、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む抗体、ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される。いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体がヒト化抗体であるか、またはＦａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ’、および（Ｆａｂ’）２から選択される。いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、ＣＳＦ１およびＩＬ−３４の両方のＣＳＦ１Ｒへの結合を遮断する。いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、インビトロでリガンド誘導性ＣＳＦ１Ｒリン酸化を阻害する。
【０００８】
いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が、同時にまたは連続して投与される。いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が、毎週１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、または５週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、０．１、０．３、０．５、１、２、３、４、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、２週間ごとまたは３週間ごとに１、２、３、または４ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【０００９】
いくつかの実施形態では、前記癌は、非小細胞肺癌、黒色腫、頭頸部の扁平上皮癌、卵巣癌、膵臓癌、腎細胞癌、肝細胞癌、膀胱癌、悪性神経膠腫、大腸癌、子宮内膜癌から選択される。いくつかの実施形態では、前記癌は、手術、化学療法、および放射線療法のうちの１つまたは複数から選択される治療後に再発性または進行性である。いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が相乗効果をもたらす。いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が、マウス異種移植片または同系癌モデルにおける腫瘍成長の相乗的阻害をもたらす。いくつかの実施形態では、前記方法が、少なくとも１つの化学療法剤を投与することをさらに含む。
【００１０】
また、本開示は、対象に抗プログラム細胞死１（ＰＤ−１）抗体および抗グルココルチコイド誘発ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体を投与することを含む、対象の癌を治療する方法であって、抗ＧＩＴＲ抗体は、ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、方法を含む。いくつかの実施形態では、前記抗ＧＩＴＲ抗体は、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである。
【００１１】
いくつかの実施形態では、前記抗ＰＤ−１Ｒ抗体は、ａ）配列番号１００の配列を含む重鎖および配列番号１０２の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１０５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１０７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１０９の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１１２の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１１４の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号１１６の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、ｃ）配列番号１００および配列番号１０１の配列を含む重鎖および配列番号１０２および配列番号１０３の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される。いくつかの実施形態では、前記抗ＰＤ−１抗体がヒト化抗体であるか、またはＦａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ’、および（Ｆａｂ’）２から選択される。いくつかの実施形態では、前記抗ＰＤ−１抗体はニボルマブである。
【００１２】
いくつかの実施形態では、前記抗ＰＤ−１抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が同時にまたは連続して投与される。いくつかの実施形態では、前記抗ＰＤ−１抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が、毎週１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、または５週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、前記抗ＰＤ−１抗体が、０．５、１、２、３、４、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかのそのような実施形態では、前記抗ＰＤ−１抗体がニボルマブであり、該ニボルマブが２週間ごとに３ｍｇ／ｋｇの用量で、または２週間ごとに２４０ｍｇの均一用量で投与される。
【００１３】
いくつかの実施形態では、前記癌は、非小細胞肺癌、黒色腫、頭頸部の扁平上皮癌、卵巣癌、膵臓癌、腎細胞癌、肝細胞癌、膀胱癌、悪性神経膠腫、大腸癌、子宮内膜癌から選択される。いくつかの実施形態では、前記癌は、手術、化学療法、および放射線療法のうちの１つまたは複数から選択される治療後に再発性または進行性である。いくつかの実施形態では、前記抗ＰＤ−１抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が相乗効果をもたらす。いくつかの実施形態では、前記抗ＰＤ−１抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が、マウス異種移植片または同系癌モデルにおける腫瘍成長の相乗的阻害をもたらす。
【００１４】
いくつかの実施形態では、対象が以前にＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤療法を受けたことがある。いくつかの実施形態では、対象がＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤の不十分な応答者であるか、少なくとも２回の投与後にＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤に対して不応性である。いくつかの実施形態では、前記方法が、少なくとも１つの化学療法剤を投与することをさらに含む。
【００１５】
本開示は、さらに、上記のもののような癌を治療する方法で使用するための抗ＧＩＴＲ抗体を含む組成物であって、抗ＧＩＴＲ抗体は、ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、組成物を含む。前記組成物のいくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される。上記組成物のいくつかでは、前記組成物が少なくとも１つの化学療法剤をさらに含む。
【００１６】
また、本開示は、請求項１６〜３１のいずれか一項に記載の癌を治療する方法で使用するための抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＰＤ−１抗体を含む組成物であって、前記抗ＰＤ−１Ｒ抗体は、ａ）配列番号１００の配列を含む重鎖および配列番号１０２の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１０５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１０７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１０９の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１１２の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１１４の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号１１６の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、ｃ）配列番号１００および配列番号１０１の配列を含む重鎖および配列番号１０２および配列番号１０３の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択され、抗ＧＩＴＲ抗体は、ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、組成物を含む。上記組成物のいくつかでは、前記組成物が少なくとも１つの化学療法剤をさらに含む。
【００１７】
本開示は、さらに、例えば、上記治療方法のいずれか１つに記載のステップおよび／または条件に従って対象の癌を治療するための薬剤を調製するための、抗ＧＩＴＲ抗体の使用であって、抗ＧＩＴＲ抗体は、ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、使用を含む。いくつかのこのような使用では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される。いくつかの実施形態では、前記治療が少なくとも１つの化学療法剤をさらに含む。
【００１８】
また、本開示は、例えば、上記治療方法のいずれか１つに記載のステップおよび／または条件に従って対象の癌を治療するための薬剤の調製のための、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＰＤ−１抗体を含む組成物の使用であって、抗ＰＤ−１抗体はａ）配列番号１００の配列を含む重鎖および配列番号１０２の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１０５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１０７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１０９の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１１２の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１１４の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号１１６の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、ｃ）配列番号１００および配列番号１０１の配列を含む重鎖および配列番号１０２および配列番号１０３の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択され、抗ＧＩＴＲ抗体は、ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、並びに、ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される、使用を含む。いくつかの実施形態では、前記治療が少なくとも１つの化学療法剤をさらに含む。
【００１９】
また、本開示は、対象における膵臓癌の治療方法であって、対象に抗コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）抗体および抗グルココルチコイド誘発ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体を投与することを含む方法であって、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖、並びに、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖、を含む抗体、ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される、方法を含む。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される。
【００２０】
また、本開示は、対象に抗コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）抗体および抗グルココルチコイド誘発ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体を投与することを含む、対象における膵臓癌の治療方法であって、抗ＧＩＴＲ抗体が、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである、方法を含む。いくつかのそのような方法では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される。
【００２１】
上記膵臓癌の治療方法のいずれかでは、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体がヒト化抗体であるか、またはＦａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ’、および（Ｆａｂ’）２から選択される。いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が同時にまたは連続して投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体が、毎週１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、または５週間に１回投与される。いくつかの実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、０．１、０．３、０．５、１、２、３、４、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかのこのような実施形態では、前記抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、２週間ごとまたは３週間ごとに１、２、３、または４ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が、ＣＳＦ１およびＩＬ−３４の両方のＣＳＦ１Ｒへの結合を遮断する。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体がリガンド誘導ＣＳＦ１Ｒリン酸化をインビトロで阻害する。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が相乗効果をもたらす。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＧＩＴＲ抗体の投与が、マウス異種移植片または同系膵臓癌モデルにおける腫瘍成長の相乗的阻害をもたらす。いくつかの実施形態では、前記方法が、少なくとも１つの化学療法剤を投与することをさらに含む。いくつかのそのような実施形態では、前記少なくとも１つの化学療法剤が、ゲムシタビン、ナブ−パクリタキセル、ロイコボリン（フォリン酸）、５−フルオロウラシル、イリノテカン、およびオキサリプラチンから選択される。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの化学療法剤が、（ａ）ゲムシタビン、（ｂ）ゲムシタビンおよびナブ−パクリタキセル、および（ｃ）ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸから選択される。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの化学療法剤がゲムシタビンである。
【００２２】
前記膵臓癌の治療方法のいくつかの実施形態では、前記方法が、抗ＰＤ−１抗体を投与することをさらに含む。いくつかの場合には、前記抗ＰＤ−１抗体は、ａ）配列番号１００の配列を含む重鎖および配列番号１０２の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１０５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１０７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１０９の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１１２の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１１４の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号１１６の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、ｃ）配列番号１００および配列番号１０１の配列を含む重鎖および配列番号１０２および配列番号１０３の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される。
【００２３】
また、本開示は、対象の膵臓癌を治療する方法であって、対象に抗コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）抗体、抗グルココルチコイド誘発ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）抗体、並びに、ゲムシタビン、ナブ−パクリタキセル、ロイコボリン（フォリン酸）、５−フルオロウラシル、イリノテカン、およびオキサリプラチンから選択される少なくとも１つの化学療法剤を投与することを含む方法を包含する。いくつかの実施形態では、前記少なくとも１つの化学療法剤が、（ａ）ゲムシタビン、（ｂ）ゲムシタビンおよびナブ−パクリタキセル、並びに（ｃ）ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸ（フォリフィノックス）から選択される。いくつかの実施形態では、前記少なくとも１つの化学療法剤がゲムシタビンである。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体が、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配���番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される。いくつかの場合には、本方法は、抗ＰＤ−１抗体を投与することをさらに含む。そして、このような実施形態のいくつかでは、前記抗ＰＤ−１Ｒ抗体は、ａ）配列番号１００の配列を含む重鎖および配列番号１０２の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１０５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）を含む重鎖、配列番号１０７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、配列番号１０９の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３、配列番号１１２の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１を含む軽鎖、配列番号１１４の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号１１６の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む抗体、ｃ）配列番号１００および配列番号１０１の配列を含む重鎖および配列番号１０２および配列番号１０３の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される。
【００２４】
本開示は、上記の膵臓癌治療方法のいずれか１つに従って膵臓癌を治療する方法で使用するための抗ＧＩＴＲ抗体を含む組成物をさらに企図する。いくつかの組成物の実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体が、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである。
【００２５】
本開示は、上記の膵臓癌治療方法のいずれか１つのステップおよび／または条件に従って対象の膵臓癌を治療するための薬剤の調製のための抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体を含む組成物の使用をさらに企図する。そのようないくつかの使用の実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含む、ＧＩＴＲ結合ドメイン（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を含む抗体、ｂ）配列番号１１９の配列を含む、ＧＩＴＲ−ＢＤを含む抗体、ｃ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは、配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｄ）構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有するポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子であって、（ｉ）ＧＩＴＲ−ＢＤは配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、（ｉｉ）リンカーはポリペプチドであり、（ｉｉｉ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり、（ｉｖ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃポリペプチドであるもの、ｅ）配列番号１１８の配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子、から選択される。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体が、構造（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃを有する四価分子であって、（ｉ）前記ＧＩＴＲ−ＢＤは、（ａ）配列番号１２０の配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１の配列を含むＣＤＲ２、および配列番号１２２の配列を含むＣＤＲ３、または（ｂ）配列番号１１９の配列を含み、（ｉｉ）前記リンカーは、配列番号１３４〜１４０から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｉｉ）前記ヒンジは、配列番号１２９〜１３３から選択される配列を含むポリペプチドであり、（ｉｖ）前記Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択される配列を含む免疫グロブリンＦｃポリペプチドである。いくつかのそのような使用では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ａ）配列番号３９の配列を含む重鎖および配列番号４６の配列を含む軽鎖を含む抗体、ｂ）配列番号１５の配列を含む重鎖（ＨＣ）相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１６の配列を含むＨＣ ＣＤＲ２、および配列番号１７の配列を含むＨＣ ＣＤＲ３を含む重鎖と、配列番号１８の配列を含む軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ１、配列番号１９の配列を含むＬＣ ＣＤＲ２、および配列番号２０の配列を含むＬＣ ＣＤＲ３を含む軽鎖と、を含む抗体、ｃ）配列番号５３の配列を含む重鎖および配列番号６０の配列を含む軽鎖を含む抗体、から選択される。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１Ａ】図１Ａは、抗ＣＳＦ１Ｒヒト化抗体ｈｕＡｂ１〜ｈｕＡｂ１６のそれぞれのヒト化重鎖可変領域のアライメントを示す。四角で囲まれた残基は、対応するマウス残基に戻されたヒトアクセプター配列のアミノ酸である。
【図１Ｂ】図１Ｂは、抗ＣＳＦ１Ｒヒト化抗体ｈｕＡｂ１〜ｈｕＡｂ１６のそれぞれのヒト化重鎖可変領域のアライメントを示す。四角で囲まれた残基は、対応するマウス残基に戻されたヒトアクセプター配列のアミノ酸である。
【図１Ｃ】図１Ｃは、抗ＣＳＦ１Ｒヒト化抗体ｈｕＡｂ１〜ｈｕＡｂ１６のそれぞれのヒト化重鎖可変領域のアライメントを示す。四角で囲まれた残基は、対応するマウス残基に戻されたヒトアクセプター配列のアミノ酸である。
【図２Ａ】図２Ａは、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体ｈｕＡｂ１〜ｈｕＡｂ１６のそれぞれのヒト化軽鎖可変領域のアライメントを示す。四角で囲まれたアミノ酸は、対応するマウス残基に戻されたヒトアクセプター配列の残基である。
【図２Ｂ】図２Ｂは、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体ｈｕＡｂ１〜ｈｕＡｂ１６のそれぞれのヒト化軽鎖可変領域のアライメントを示す。四角で囲まれたアミノ酸は、対応するマウス残基に戻されたヒトアクセプター配列の残基である。
【図２Ｃ】図２Ｃは、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体ｈｕＡｂ１〜ｈｕＡｂ１６のそれぞれのヒト化軽鎖可変領域のアライメントを示す。四角で囲まれたアミノ酸は、対応するマウス残基に戻されたヒトアクセプター配列の残基である。
【図３】図３Ａ〜図３Ｇは、いくつかの異なる例示的な抗ＧＩＴＲ抗体アーキテクチャの概略図を提供する。
【図４】図４Ａは、マウスＩｇＧ２ａ対照抗体、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体、抗ＧＩＴＲ抗体、および抗ＣＳＦ１Ｒと抗ＧＩＴＲの組み合わせの存在下でのＭＣ３８マウス腫瘍モデルにおける腫瘍体積の変化を示す。図４Ｂは、ＭＣ３８腫瘍モデルにおける接種後２４日目のＩｇＧ２ａ対照、抗ＣＳＦ１Ｒ、抗ＧＩＴＲ、および抗ＣＳＦ１Ｒ／抗ＧＩＴＲ群の個々のマウスの腫瘍体積を示す。２４日目の腫瘍体積は、抗ＣＳＦ１Ｒグループ（Ｐ＝０．００２９）または抗ＧＩＴＲグループ（Ｐ＝０．０３７６）と比較して、抗ＣＳＦ１Ｒ／抗ＧＩＴＲグループで有意に低かった。
【図５】図５Ａ〜図５Ｄは、マウスＩｇＧ２ａ対照（図５Ａ）、野生型マウスＦｃ ＩｇＧ２ａ配列を有する四価抗ＧＩＴＲ抗体（四価ラマＣ０６−ｍＩｇＧ２ａ、図５Ｂ）、Ｆｃ機能を低下させることを目的とした変異マウスＦｃ ＩｇＧ２ａ配列を有する四価抗ＧＩＴＲ抗体（四価ラマＣ０６−ｍＩｇＧ２ａ Ｆｃサイレント、図５Ｃ）、および、抗ＰＤ−１抗体（図５Ｄ）を与えられた個々のマウスのマウスＭＣ３８腫瘍モデルにおける接種後の日数における腫瘍体積の変化を示す。図５Ｅは、抗ＰＤ−１抗体および抗ＧＩＴＲ抗体と野生型マウスＦｃ（四価ラマＣ０６−ｍＩｇＧ２ａ＋抗ＰＤ−１）との組み合わせを付与された個々のマウスの接種後の腫瘍体積の変化を示す。図５Ｆは、抗ＰＤ−１抗体および抗ＧＩＴＲ抗体と変異マウスＦｃ（四価ラマＣ０６−ｍＩｇＧ２ａＦｃサイレント＋抗ＰＤ−１）の組み合わせを付与された個々のマウスの接種後の腫瘍体積の変化を示す。
【図６】図６は、ＩｇＧ対照、抗ＧＩＴＲ抗体とゲムシタビン（ＧＥＭ）の組み合わせ、または抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体、およびＧＥＭの組み合わせを含む接種後１３日目（下向き矢印は投与を示す）に治療を開始した後、ＫＲａｓＧ１２Ｄ／ｐ５３−／−マウス膵管腺癌（ＰＤＡＣ）細胞を外科的に接種したＣ５７ＢＬ／６マウスの生存率を示す。以下の実施例３でさらに検討するように、抗ＧＩＴＲ抗体およびＧＥＭによる治療は、ＩｇＧ対照と比較してＰＤＡＣ腫瘍保有マウスの生存を２６日と比較して中央値３４日まで有意に増加させた（ｐ＜０．００１）。しかし、抗ＧＩＴＲおよび抗ＣＳＦ１Ｒ抗体とＧＥＭの組み合わせで治療した動物の生存率は有意に高く、中央値は４０日間で、抗ＧＩＴＲプラスＧＥＭグループと比較してｐ＜０．０５、ＩｇＧ対照グループと比較してｐ＜０．０００１であった。Ｐ値は、個々の治療グループを比較するログランク（マンテルコックス（Mantel-Cox））検定を使用して計算された。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
いくつかの実施形態では、本開示は、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＰＤ−１抗体を用いた併用療法に感受性の可能性がある腫瘍を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体を用いた併用療法に感受性の可能性がある腫瘍を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＰＤ−１抗体、および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の３つすべてとの併用療法に感受性があり得る腫瘍を治療する方法を提供する。場合によっては、ＣＳＦ１Ｒを発現する腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）とＰＤ−１を発現するＣＤ８＋Ｔ細胞の両方を有する腫瘍は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１単剤療法に耐性があるが、上記の併用療法のいずれかに感受性がある場合がある。
【００２８】
ここで使用されているセクションの見出しは、組織的な目的のためだけのものであり、説明されている主題を限定するものとして解釈されるべきではありません。特許出願および刊行物を含む、本明細書で引用されたすべての参考文献は、あらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００２９】
定義
特に定義されない限り、本発明に関連して使用される科学用語および技術用語は、当業者によって一般に理解される意味を有するものとする。さらに、文脈で特に必要とされない限り、単数形の用語は複数形を含み、複数形の用語は単数形を含むものとする。
【００３０】
組換えＤＮＡ、オリゴヌクレオチド合成、組織培養および形質転換（例えば、エレクトロポレーション、リポフェクション）、酵素反応、および精製技術に関連して使用される例示的な技術は、当技術分野で知られている。多くのそのような技術および手順は、中でも、例えば、Sambrook et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989)) に記載されている。加えて、化学合成、化学分析、医薬品の調製、製剤化、送達、および患者の治療のための例示的な技術も当技術分野で知られている。
【００３１】
本願では、「または」の使用は、特に明記しない限り「および／または」を意味する。複数の従属請求項の文脈において、「または」の使用は、代替案のみで複数の先行する独立または従属請求項を指す。また、「要素」または「コンポーネント」などの用語は、特に明記しない限り、１つのユニットを含む要素とコンポーネント、および複数のサブユニットを含む要素とコンポーネントの両方を包含する。
【００３２】
本明細書に記載されているように、あらゆる濃度範囲、パーセンテージ範囲、比率範囲、または整数範囲は、特に明記しない限り、列挙された範囲内の任意の整数の値と、必要に応じてその分数（整数の１０分の１および１００分の１など）を含むと理解される。
【００３３】
単位、接頭辞、および記号は、国際単位系（ＳＩ）の承認済みフォームで示されている。数値範囲には、範囲を定義する数値が含まれる。本明細書で提供される見出しは、本開示の様々な態様を限定するものではなく、全体として本明細書を参照することにより得ることができる。したがって、すぐ下に定義されている用語は、明細書全体を参照することでより完全に定義されている。
【００３４】
本開示に従って利用される場合、以下の用語は、特に明記しない限り、以下の意味を有すると理解されるものとする。
【００３５】
「投与する」とは、当業者に公知の様々な方法および送達システムのいずれかを使用して、治療薬を含む組成物を対象に物理的に導入することを指す。本明細書に開示される抗体の投与経路には、静脈内、筋肉内、皮下、腹腔内、脊髄、または例えば注射または注入による他の非経口投与経路が含まれる。本明細書で使用される「非経口投与」という語句は、通常は注射による、経腸および局所投与以外の投与様式を意味し、限定されないが、静脈内投与、筋肉内、動脈内、くも膜下腔内、リンパ管内、病変内、腫瘍内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨内注射、および注入、並びに、生体内エレクトロポレーションを含む。非腸管外経路には、局所、表皮または粘膜投与経路、例えば、経口、鼻腔内、膣内、直腸内、舌下または局所投与が含まれる。投与は、例えば、１回、複数回、および／または１つ以上の長期間にわたって実行することもできる。
【００３６】
「核酸分子」および「ポリヌクレオチド」という用語は互換的に使用される場合があり、ヌクレオチドのポリマーを指す。そのようなヌクレオチドのポリマーは、天然および／または非天然のヌクレオチドを含むことができ、ＤＮＡ、ＲＮＡ、およびＰＮＡを含むがこれらに限定されない。「核酸配列」とは、核酸分子またはポリヌクレオチドを含むヌクレオチドの線形配列を指す。
【００３７】
用語「ポリペプチド」および「タンパク質」は、アミノ酸残基のポリマーを指すために交換可能に使用され、最小の長さに限定されない。そのようなアミノ酸残基のポリマーは、天然または非天然のアミノ酸残基を含んでもよく、アミノ酸残基のペプチド、オリゴペプチド、二量体、三量体、および多量体が含まれるが、これらに限定されない。全長タンパク質とその断片の両方が定義に含まれる。また、この用語には、ポリペプチドの発現後修飾、例えば、グリコシル化、シアリル化、アセチル化、リン酸化なども含まれる。さらに、本発明の目的のために、「ポリペプチド」は、タンパク質が所望の活性を維持する限り、天然配列への欠失、付加、および置換（本質的に保存的）などの修飾を含むタンパク質を指す。これらの修飾は、部位特異的突然変異誘発によるように意図的な場合もあれば、タンパク質を産生する宿主の突然変異またはＰＣＲ増幅によるエラーなどによる偶発的な場合もある。
【００３８】
本明細書で使用される場合、特定のアミノ酸配列が、例えば、特定の参照配列と少なくとも９５％同一であるかどうかは、例えばコンピュータープログラムを使用して決定され得る。特定の配列が、たとえば参照配列と９５％同一であるかどうかを判断する場合、参照アミノ酸配列の全長にわたって同一性のパーセンテージが計算される。
【００３９】
「ＧＩＴＲ」という用語は、本明細書では、特に明記しない限り（すなわち、「マウスＧＩＴＲ」またはＧＩＴＲフラグメントもしくはドメインなど）、完全長の成熟したヒトＧＩＴＲタンパク質を指す。
【００４０】
「抗ＧＩＴＲ抗体」という用語は、本明細書では、ＧＩＴＲに結合し、それによってＧＩＴＲシグナル伝達を活性化するアゴニストとして作用する抗体分子を指す。例えば、いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、ＧＩＴＲとそのリガンドＧＩＴＲＬとの間の結合をブロックし得る。
【００４１】
本明細書のいくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は「融合」ポリペプチドを含む。「融合」ポリペプチドは、例えば、ある種の単一ドメイン抗体または抗体重鎖可変領域、および異なる種のＦｃポリペプチドまたは他の抗体定常領域のような、アミノ酸配列が本来結合されない２つの異なるポリペプチド分子からのアミノ酸配列を結合することにより形成され得るキメラポリペプチド分子を示す。
【００４２】
「ＣＳＦ１Ｒ」という用語は、「ＣＳＦ１Ｒ」という用語は、特に明記しない限り、本明細書では、Ｎ末端リーダー配列の有無にかかわらず、Ｎ末端ＥＣＤ、膜貫通ドメイン、および細胞内チロシンキナーゼドメインを含む完全長ヒトＣＳＦ１Ｒを指す（すなわち「マウスＣＳＦ１Ｒ」）。
【００４３】
「抗ＣＳＦ１Ｒ抗体」という用語は、ＣＳＦ１Ｒに結合し、それによりＣＳＦ１ＲのそのリガンドＣＳＦ１およびＩＬ−３４の一方または両方への結合をブロックする抗体分子を指す。
【００４４】
「プログラム細胞死タンパク質１」という用語と「ＰＤ−１」および「ＰＤ１」という略語は、ＣＤ２８ファミリーに属する免疫抑制受容体である完全長の成熟ヒトＰＤ−１タンパク質を指す。
【００４５】
用語「プログラム細胞死１リガンド１」すなわち「ＰＤ−Ｌ１」（ＰＤ−Ｌ１；Ｂ７ホモログ−１；Ｂ７−Ｈ１；またはＣＤ２７４）「プログラム細胞死リガンド２」（ＰＤ−Ｌ２、Ｂ７−ＤＣ、またはＣＤ２７３）は、ＰＤ−１に結合するとＴ細胞活性化とサイトカイン分泌をダウンレギュレートするＰＤ−１の２つの細胞表面糖タンパク質リガンドである。本明細書で使用される「ＰＤ−Ｌ１」という用語は、特に明記しない限り、完全長の成熟したヒトＰＤ−Ｌ１を指す。
【００４６】
「細胞傷害性Ｔリンパ球抗原−４」（ＣＴＬＡ−４）は、ＣＤ２８ファミリーに属する免疫抑制受容体を指す。ＣＴＬＡ−４は、ｉｎ  ｖｉｖｏでＴ細胞にのみ発現し、２つのリガンドＣＤ８０およびＣＤ８６（それぞれＢ７−１およびＢ７−２とも呼ばれる）に結合する。本明細書で使用される「ＣＴＬＡ−４」という用語は、特に明記しない限り、完全長の成熟ヒトＣＴＬＡ−４を指す。
【００４７】
「抗ＰＤ−１抗体」または「抗ＰＤ１抗体」という用語は、ＰＤ−１に結合し、それによってＰＤ−１および／またはＰＤ−Ｌ１シグナル伝達を阻害する抗体を指す。いくつかの実施形態では、抗体はＰＤ−１に結合し、ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害する。
【００４８】
用語「ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤」は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１シグナル伝達経路を破壊する部分を指す。いくつかの実施形態では、阻害剤は、ＰＤ−１および／またはＰＤ−Ｌ１に結合することによりＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１シグナル伝達経路を阻害する。いくつかの実施形態では、阻害剤はＰＤ−Ｌ２にも結合する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤は、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２への結合を阻害する。
【００４９】
本明細書で使用する場合、抗体は、その標的ＧＩＴＲ、ＣＳＦ１Ｒ、またはＰＤ−１のそのリガンドの１つまたは複数への「結合をブロック」し、標的とリガンド間の相互作用を阻害する能力を有することを意味する。（例えば、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の場合はＣＳＦ１ＲとＣＳＦ１および／またはＩＬ−３４の間、または抗ＰＤ−１抗体の場合はＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２の間）。そのような阻害は、例えば、抗体とリガンドの標的タンパク質上の結合部位の重複のため、および／またはリガンド親和性等を変更する抗体結合により誘導される立体配座変化のため、リガンド結合との直接干渉を含む任意のメカニズムを通じて起こり得る。「機能的」と呼ばれる抗体および抗体断片は、そのような特性を持つことを特徴としている。
【００５０】
本明細書で使用される「抗体」という用語は、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）の少なくとも相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む分子を指し、分子は抗原に結合することができる。抗体という用語は、少なくとも重鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３ならびに軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む分子も指し、分子は抗原に結合することができる。抗体という用語には、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、および（Ｆａｂ’）２など、抗原に結合できる断片も含まれる。抗体という用語には、キメラ抗体、ヒト化抗体、およびマウス、ヒト、カニクイザル、ラマ、ラクダなどのさまざまな種の抗体も含まれる。この用語には、二価または四価抗体などの多価抗体も含まれる。多価抗体には、例えば、複数の抗原結合（ＣＤＲ含有）ドメイン、および２つ以上のポリペプチド鎖を含む単一のポリペプチド鎖が含まれ、それぞれが１つ以上の抗原結合ドメインを含み、そのような２つ以上のポリペプチド鎖は、例えば、ジスルフィド結合または他の共有または非共有相互作用を形成できるヒンジ領域を介して互いに関連している。
【００５１】
本明細書で使用される「単一ドメイン抗体」または「ｓｄＡｂ」という用語は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む単一の抗原結合ドメイン配列を含む抗体分子またはその抗原結合断片を指し、ｓｄＡｂは抗原に結合することができる。単一ドメイン抗体は、ラマ、ラクダ、アルパカなどのヒトコブラクダ種、または魚種に由来する。あるいは、単一ドメイン抗体は、選択法などの実験室的手法によって取得され得る。いくつかの実施形態では、ｓｄＡｂはヒト化されてもよい。いくつかの実施形態では、ｓｄＡｂはキメラ抗体または多価抗体の一部を含んでもよい。
【００５２】
本明細書で使用される「重鎖可変領域」という用語は、重鎖ＣＤＲ１、フレームワーク（ＦＲ）２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、およびＣＤＲ３を含む領域を指す。いくつかの実施形態では、重鎖可変領域は、ＦＲ１の少なくとも一部および／またはＦＲ４の少なくとも一部も含む。いくつかの実施形態では、重鎖ＣＤＲ１はＫａｂａｔ残基２６から３５に対応し、重鎖ＣＤＲ２はＫａｂａｔ残基５０から６５に対応し、重鎖ＣＤＲ３はＫａｂａｔ残基９５から１０２に対応する。例えば、Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest (1987 and 1991, NIH, Bethesda, Md.)、および図１を参照されたい。いくつかの実施形態では、重鎖ＣＤＲ１はＫａｂａｔ残基３１から３５に対応し、重鎖ＣＤＲ２はＫａｂａｔ残基５０から６５に対応し、重鎖ＣＤＲ３はＫａｂａｔ残基９５から１０２に対応する。同上を参照されたい。
【００５３】
本明細書で使用される「重鎖定常領域」という用語は、少なくとも３つの重鎖定常ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３を含む領域を指す。非限定的な例示的な重鎖定常領域には、γ、δ、およびαが含まれる。非限定的な例示的な重鎖定常領域には、εおよびμも含まれる。各重鎖定常領域は抗体アイソタイプに対応している。例えば、γ定常領域を含む抗体はＩｇＧ抗体であり、δ定常領域を含む抗体はＩｇＤ抗体であり、α定常領域を含む抗体はＩｇＡ抗体である。さらに、μ定常領域を含む抗体はＩｇＭ抗体であり、ε定常領域を含む抗体はＩｇＥ抗体である。特定のアイソタイプは、さらにサブクラスに分類できる。例えば、ＩｇＧ抗体には、ＩｇＧ１（γ１定常領域を含む）、ＩｇＧ２（γ２定常領域を含む）、ＩｇＧ３（γ３定常領域を含む）、およびＩｇＧ４（γ４定常領域を含む）抗体が含まれるが、これらに限定されず；ＩｇＡ抗体には、ＩｇＡ１（α１定常領域を含む）およびＩｇＡ２（α２定常領域を含む）抗体が含まれるが、これらに限定されず；ＩｇＭ抗体には、ＩｇＭ１およびＩｇＭ２が含まれるが、これらに限定されない。
【００５４】
本明細書で使用する用語「重鎖」（略称ＨＣ）は、リーダー配列を含むまたは含まない、少なくとも重鎖可変領域を含むポリペプチドを指す。いくつかの実施形態では、重鎖は、重鎖定常領域の少なくとも一部を含む。本明細書で使用される「全長重鎖」という用語は、リーダー配列の有無にかかわらず、重鎖可変領域および重鎖定常領域を含むポリペプチドを指す。
【００５５】
本明細書で使用される「軽鎖可変領域」という用語は、軽鎖ＣＤＲ１、フレームワーク（ＦＲ）２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、およびＣＤＲ３を含む領域を指す。いくつかの実施形態では、軽鎖可変領域はＦＲ１および／またはＦＲ４も含む。いくつかの実施形態では、軽鎖ＣＤＲ１はＫａｂａｔ残基２４〜３４に対応し、軽鎖ＣＤＲ２はＫａｂａｔ残基５０〜５６に対応し、軽鎖ＣＤＲ３はＫａｂａｔ残基８９〜９７に対応する。例えば、Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest (1987 and 1991, NIH, Bethesda, Md.)、および図１を参照されたい。
【００５６】
明細書で使用される「軽鎖定常領域」という用語は、軽鎖定常ドメインＣＬを含む領域を指す。非限定的な例示的な軽鎖定常領域には、λおよびκが含まれる。
【００５７】
本明細書で使用される「軽鎖」（ＬＣと略す）という用語は、リーダー配列の有無にかかわらず、少なくとも軽鎖可変領域を含むポリペプチドを指す。いくつかの実施形態では、軽鎖は、軽鎖定常領域の少なくとも一部を含む。本明細書で使用される「完全長軽鎖」という用語は、リーダー配列の有無にかかわらず、軽鎖可変領域および軽鎖定常領域を含むポリペプチドを指す。
【００５８】
本明細書で使用される「キメラ抗体」は、第１の種（マウス、ラット、カニクイザルなど）由来の少なくとも１つの可変領域、および第２の種（ヒト、カニクイザルなど）由来の少なくとも１つの定常領域を含む抗体を指す。いくつかの実施形態では、キメラ抗体は、少なくとも１つのマウス可変領域および少なくとも１つのヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態では、キメラ抗体は、少なくとも１つのカニクイザル可変領域および少なくとも１つのヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態では、キメラ抗体は、少なくとも１つのラット可変領域および少なくとも１つのマウス定常領域を含む。いくつかの実施形態では、キメラ抗体の可変領域のすべてが第１の種に由来し、キメラ抗体の定常領域のすべてが第２の種に由来する。
【００５９】
本明細書で使用される「ヒト化抗体」は、非ヒト可変領域のフレームワーク領域の少なくとも１つのアミノ酸がヒト可変領域の対応するアミノ酸で置換されている抗体を指す。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、少なくとも１つのヒト定常領域またはその断片を含む。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、ｓｄＡｂ、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、（Ｆａｂ’）２などである。
【００６０】
本明細書で使用される「ＣＤＲ移植抗体」は、第１（非ヒト）種の相補性決定領域（ＣＤＲ）が第２（ヒト）種のフレームワーク領域（ＦＲ）に移植されたヒト化抗体を指す。
【００６１】
本明細書で使用される「ヒト抗体」とは、ヒトで産生される抗体、ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）などのヒト免疫グロブリン遺伝子を含む非ヒト動物で産生される抗体、およびファージディスプレイなどのインビトロ法を使用して選択される抗体を指し、ここで、抗体レパートリーは、ヒト免疫グロブリン配列に基づく。
【００６２】
本明細書で使用される「多価（multivalent）」または「多価（polyvalent）」抗体という用語は、２つ（「二価」）または４つ（「四価」）の抗原結合ドメインなど、２つ以上の抗原結合ドメインを含む抗体を互換的に指す。いくつかの実施形態では、２つ以上の抗原結合ドメインはアミノ酸配列が同一であってもよい。他の実施形態では、抗原結合ドメインはアミノ酸配列が異なっていてもよい。いくつかの実施形態では、多価抗体は２つ以上のｓｄＡｂ可変領域を含むが、いくつかの実施形態では、多価抗体は２つ以上の重鎖および軽鎖可変領域のセットを含む。
【００６３】
「リーダー配列」という用語は、哺乳動物細胞からのポリペプチドの分泌を促進するポリペプチドのＮ末端に位置するアミノ酸残基の配列を指す。リーダー配列は、哺乳動物細胞からポリペプチドが排出されると切断され、成熟タンパク質を形成する場合がある。リーダー配列は、天然のものでも合成のものでもよく、それらが結合しているタンパク質に対して異種でも相同でもよい。例示的なリーダー配列には、抗体リーダー配列、例えば、それぞれヒト軽鎖リーダー配列および重鎖リーダー配列に対応する配列番号３および４のアミノ酸配列が含まれるが、これらに限定されない。非限定的な例示的リーダー配列には、異種タンパク質由来のリーダー配列も含まれる。いくつかの実施形態では、抗体はリーダー配列を欠いている。いくつかの実施形態では、抗体は、天然の抗体リーダー配列および異種リーダー配列から選択され得る少なくとも１つのリーダー配列を含む。
【００６４】
本明細書で使用される「単離された」という用語は、天然に典型的に見られる成分の少なくともいくつかから分離された分子を指す。例えば、ポリペプチドは、それが産生された細胞の成分の少なくともいくつかから分離される場合、「単離された」と記載される。ポリペプチドが発現後に細胞によって分泌される場合、ポリペプチドを含む上清を、ポリペプチドを産生した細胞から物理的に分離することは、ポリペプチドを「単離する」と見なされる。同様に、ポリヌクレオチドは、それが通常自然に見られるより大きなポリヌクレオチド（例えば、ＤＮＡポリヌクレオチドの場合、ゲノムＤＮＡまたはミトコンドリアＤＮＡなど）の一部ではない場合、または、例えばＲＮＡポリヌクレオチドの場合、それが産生された細胞の成分の少なくともいくつかから分離されている場合、「単離された」と記載される。したがって、宿主細胞内のベクターに含まれるＤＮＡポリヌクレオチドは、そのポリヌクレオチドが自然にそのベクターに見られない限り、「単離された」と記載される場合がある。
【００６５】
「上昇したレベル」という用語は、本明細書に記載の癌または他の状態に苦しんでいない個人（複数を含む）などの対照の同じ組織と比較して、対象の特定の組織におけるタンパク質のより高いレベルを意味する。レベルの上昇は、タンパク質の発現の増加、安定性の増加、分解の減少、分泌の増加、クリアランスの減少などのメカニズムの結果である可能性がある。
【００６６】
特定の組織におけるタンパク質のレベルの文脈における「低減する（reduce）」または「低減する（reduces）」という用語は、対象の特定の組織におけるタンパク質のレベルを少なくとも１０％低下させることを意味する。
【００６７】
「耐性」という用語は、治療薬に対する耐性の文脈で使用される場合、過去の標準用量の治療薬に対する対象の反応と比較して、または、治療薬の標準用量と同様の障害を持つ同様の対象の予想される反応と比較して、治療薬の標準用量に対する反応の減少または反応の欠如を意味する。したがって、いくつかの実施形態では、対象は以前に治療薬を与えられていないが、対象は治療薬に耐性がある場合があり、または対象は１つ以上の以前の機会に薬剤に応答した後に治療薬に耐性を生じる場合がある。
【００６８】
「対象」および「患者」という用語は、本明細書では互換的に使用され、ヒトを指す。いくつかの実施形態では、げっ歯類、サル、ネコ、イヌ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、哺乳類実験動物、哺乳類農場動物、哺乳類スポーツ動物、および哺乳類ペットを含むがこれらに限定されない他の哺乳類を治療する方法、も提供される。
【００６９】
本明細書で使用される「サンプル」という用語は、例えば、物理的、生化学的、化学的および／または生理学的特性に基づいて、特性決定、定量、および／または同定される細胞および／または他の分子実体を含む対象から得られるまたは由来する組成物を指す。例示的なサンプルは組織サンプルである。
【００７０】
「組織サンプル」という用語は、対象の組織から得られた類似の細胞の集まりを指す。組織サンプルの供給源は、新鮮な、凍結された、および／または保存された臓器または組織サンプルからの固形組織、または生検または吸引物；血液または血液成分；脳脊髄液、羊水、腹水、滑液、または間質液などの体液；対象の妊娠または発達の任意の時点からの細胞、であり得る。組織サンプルはまた、初代細胞または培養細胞または細胞株であってもよい。任意で、組織サンプルは、疾患組織／器官、例えば腫瘍生検または滑膜生検組織サンプルから得られる。組織サンプルは、防腐剤、抗凝固剤、緩衝剤、固定剤、栄養素、抗生物質など、自然界で自然に組織と混合されない化合物を含むこととしてもよい。本明細書で使用される「対照サンプル」または「対照組織」は、対象が治療される疾患に罹患していないことが知られている、または信じられている源から得られたサンプル、細胞、または組織を指す。
【００７１】
本明細書の目的のために、組織サンプルの「セクション」は、組織の薄いスライスまたは固形組織サンプルから切り取られた細胞など、組織サンプルの一部または断片を意味する。
【００７２】
「癌」という用語は、本明細書では、異常に高いレベルの増殖および成長を示す細胞群を指すために使用される。癌は良性（良性腫瘍とも呼ばれる）、前悪性、または悪性の場合がある。癌細胞は、固形癌細胞または白血病癌細胞であり得る。用語「癌成長」は、本明細書において、癌のサイズまたは程度の対応する増加をもたらす癌を含む細胞または複数の細胞による増殖または成長を指すために使用される。
【００７３】
癌の例には、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病が含まれるが、これらに限定されない。そのような癌のより具体的な非限定的な例には、扁平上皮癌、小細胞肺癌、下垂体癌、食道癌、星状細胞腫、軟部肉腫、非小細胞肺癌（扁平上皮非小細胞肺癌を含む）、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝癌、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎癌、腎細胞癌、肝癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、脳癌、子宮内膜癌、精巣癌、胆管癌、胆嚢癌、胃癌、黒色腫、およびさまざまな種類の頭頸部癌（頭頸部の扁平上皮癌を含む）が含まれる。
【００７４】
「再発癌」という用語は、以前の治療レジメン、その後の、癌を検出できなかった期間、腫瘍が縮小した期間、疾患が安定した期間、または癌が寛解期にあると見なされた期間の後に再発した癌を指す。
【００７５】
「進行性癌」という用語は、治療レジメンの開始以来、サイズまたは腫瘍の拡がりが増大している癌である。特定の実施形態では、進行性癌は、治療レジメンの開始以来、サイズまたは腫瘍の広がりが少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、または少なくとも５０％増加した癌である。
【００７６】
治療に関する用語「有効」および「有効性」には、薬理学的有効性と生理学的安全性の両方が含まれる。薬理学的有効性とは、患者の癌の退縮を促進する薬剤の性能を指す。生理学的安全性とは、毒性のレベル、または薬物の投与に起因する細胞、器官、および／または生物レベルでの他の有害な生理学的効果（悪影響）を指す。
【００７７】
「癌の退縮を促進する」とは、有効量の薬物を単独で、または別の抗癌剤と組み合わせて投与し、腫瘍の成長またはサイズの減少、腫瘍の壊死、少なくとも１つの疾患症状の重症度の低下、病気の症状のない期間の頻度と持続の増加、または病気の苦痛による障害（impairment）または障害（disability）の予防をもたらすことを意味する。
【００７８】
腫瘍の治療の例として、治療有効量の抗癌剤は、細胞成長を阻害し、腫瘍成長を阻害し、または腫瘍サイズを、未治療の被験者、ベースライン、または特定の実施形態では、標準治療で治療された患者と比較して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、または、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約１００％縮小し得る。
【００７９】
本明細書で使用する「治療」とは、例えば、目的が標的の病的状態または障害を遅くする（軽減する）ことである、並びに、例えば、目的が状態または障害の再発を抑制することである治療的処置を指す。特定の実施形態では、「治療」という用語は、患者の疾患の治療薬のあらゆる投与または適用を網羅し、疾患または疾患の進行を阻害または遅延させること；例えば、回帰を引き起こし、失われた、欠落した、または欠陥のある機能を復元または修復することにより、病気を部分的または完全に軽減すること；非効率的なプロセスを刺激すること；または病気のプラトーの重症度を低下させることを含む。
【００８０】
「治療」という用語には、表現型の特徴の重症度を減らすこと、および/またはその特徴の発生率、程度、または可能性を減らすことも含まれる。治療を必要とする人には、すでに障害を患っている人、ならびに障害の再発のリスクがある人、または障害の再発を予防または遅延させる人が含まれる。
【００８１】
１つ以上のさらなる治療薬「と組み合わせた」治療薬の投与には、同時（simultaneous）（同時（concurrent））投与および任意の順序での連続（consecutive）（連続（sequential））投与が含まれる。例えば、本明細書における「同時」投与は、同じ日に、例えば単一の診療所、外来患者、または病院訪問中に２つ以上の薬剤を投与することを含む。本明細書の「連続（consecutive）」または「連続（sequential）」投与は、異なる日に2つ以上の薬剤を投与することを意味する。
【００８２】
「薬学的に許容される担体」とは、無毒の固体、半固体、または液体の充填剤、希釈剤、カプセル化材料、製剤補助剤、すなわち、対象への投与用の「医薬組成物」を一緒に含む治療薬とともに使用するための、当技術分野で従来の担体を指す。薬学的に許容される担体は、使用される用量および濃度でレシピエントに対して無毒であり、製剤の他の成分と適合性がある。薬学的に許容される担体は、使用される製剤に適している。例えば、治療薬が経口投与される場合、担体はゲルカプセルであってもよい。治療薬を皮下投与する場合、担体は理想的には皮膚に対して刺激性がなく、注射部位の反応を引き起こさない。
【００８３】
抗ＧＩＴＲ抗体
本明細書の抗ＧＩＴＲ抗体はＧＩＴＲに結合し、それによりＧＩＴＲシグナル伝達機能を活性化する。抗ＧＩＴＲ抗体はＧＩＴＲに結合し、それにより、例えばＮＦ−κＢ応答の活性化によりＧＩＴＲシグナル伝達機能を活性化する。これは、国際公開第２０１７／０１５６２３号の実施例５に記載されているように、ＮＦ−κＢ駆動レポーターである分泌型アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）の産生をモニターするシステムを使用してアッセイできる。本明細書に記載されているように、ＮＦ−κＢ駆動ＳＥＡＰレポーター遺伝子（Invivogen, San Diego, CA, USAから入手）を含むＨＥＫ２９３細胞株にＧＩＴＲを安定的にトランスフェクトし、その後、細胞株を滴定用量の抗ＧＩＴＲ抗体とともに３７℃で一晩インキュベートした。各用量でのＳＥＡＰレポーター遺伝子発現は、６５０ナノメートルでの光学密度の変化を監視することにより、発色基質の加水分解により細胞培養上清で定量化された。抗体の添加によるバックグラウンドを超えるこのアッセイでのＳＥＡＰ産生の増加は、抗体がＧＩＴＲシグナル伝達機能を活性化することを示す。ＮＦ−κＢの活性化は、結合した抗体によるＧＩＴＲの三量体化により起こると考えられている。
【００８４】
いくつかの実施形態では、本明細書の抗ＧＩＴＲ抗体は、以下の特性：
（ａ）ＧＩＴＲのＫＤが１０ｎＭ未満のＧＩＴＲ結合ドメインを含む；
（ｂ）ヒトおよびカニクイザルの両方のＧＩＴＲに結合する；
（ｃ）ＧＩＴＲとそのリガンドＧＩＴＲＬ間の結合をブロックする；
（ｄ）Ｔ調節（Ｔｒｅｇ）細胞の抑制効果も阻害しながら、抗腫瘍反応を共刺激する；のうちの１つ以上を有し得る。
【００８５】
いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、ＧＩＴＲに特異的に結合する少なくとも１つのポリペプチドを含み得る。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、例えば単一ドメイン抗体に由来する３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む少なくとも１つのＧＩＴＲ結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＧＩＴＲ結合ドメインは、配列番号１２０のアミノ酸配列を含む相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１２１のアミノ酸配列を含む相補性決定領域２（ＣＤＲ２）、および配列番号１２２のアミノ酸配列を含む相補性決定領域３（ＣＤＲ３）を含む。いくつかの実施形態では、抗体は多価（polyvalent）（または多価（multivalent））であり、上記のＣＤＲセットを備えた２つ以上のそのようなＧＩＴＲ結合ドメインを含む。
【００８６】
いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、少なくとも１つのＧＩＴＲ結合ドメインを含む少なくとも１つのポリペプチドを含み、ＧＩＴＲ結合ドメインは、配列番号１１９のアミノ酸配列、または、配列番号１１９と少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である配列を含む、２つ、３つ、または４つのＧＩＴＲ結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、列抗ＧＩＴＲ抗体は、配列番号１１９のアミノ酸配列、または、配列番号１１９と少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である配列を含む、２、３、または４つのＧＩＴＲ結合ドメインを含む少なくとも１つのポリペプチドを含む。
【００８７】
いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、ヒトＩｇＧ Ｆｃなどのヒト定常領域に融合した２つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む多価融合タンパク質を含む。いくつかのそのような実施形態では、２つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインは直列（タンデム）に並んでいる。いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲ結合ドメインは単一ドメイン抗体に由来し、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲ結合ドメインの少なくとも１つまたはすべては、配列番号１２０のアミノ酸配列を含む相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１２１のアミノ酸配列を含む相補性決定領域２（ＣＤＲ２）、および配列番号１２２のアミノ酸配列を含む相補性決定領域３（ＣＤＲ３）を含む。いくつかのこのような実施形態では、ヒトＩｇＧ Ｆｃは、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４である。いくつかの実施形態では、多価融合タンパク質は、それぞれがヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４ Ｆｃから選択されるヒトＩｇＧ Ｆｃに融合した上記のＣＤＲセットを伴う、２つ、３つ、または４つのＧＩＴＲ結合ドメインをタンデムに含む。
【００８８】
いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、ヒトＩｇＧ Ｆｃ、例えばヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４ Ｆｃなどのヒト定常領域に融合した２つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインを含む多価融合タンパク質を含む。いくつかのそのような実施形態では、２つ以上のＧＩＴＲ結合ドメインは直列に並んでいる。いくつかのそのような実施形態では、ＧＩＴＲ結合ドメインの少なくとも１つまたはすべてが、配列番号１１９のアミノ酸配列、または配列番号１１９と少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％同一の配列を含む。いくつかのこのような実施形態では、ヒト定常領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４ ＦｃなどのヒトＩｇＧ Ｆｃである。いくつかの実施形態では、多価融合タンパク質は、それぞれがヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４から選択されるヒトＩｇＧ Ｆｃに融合された配列番号１９のアミノ酸配列を含む、２つ、３つ、または４つのＧＩＴＲ結合ドメインを直列に含む。
【００８９】
四価分子
いくつかのの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、構造：（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃ、を有する融合タンパク質の２つのコピーを含む四価分子を含み、（ａ）ＧＩＴＲ−ＢＤは（ｉ）配列番号１２０のアミノ酸配列を含む相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号１２１のアミノ酸配列を含む相補性決定領域２（ＣＤＲ２）、および配列番号１２２のアミノ酸配列を含む相補性決定領域３（ＣＤＲ３）を含む、または（ｉｉ）配列番号１１９のアミノ酸配列、または配列番号１１９と少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一である配列を含むＧＩＴＲ結合ドメインであり；（ｂ）リンカーはリンカーポリペプチドであり；（ｃ）ヒンジは、免疫グロブリンのヒンジ領域に由来するポリペプチドであり；（ｄ）Ｆｃは免疫グロブリンＦｃ領域ポリペプチドである。
【００９０】
四価分子の融合タンパク質がヒンジを含むいくつかの実施形態では、ヒンジは配列番号７、８、または９のアミノ酸配列を含む。例えば、ヒンジは、ＥＰＫＳＳＤＫＴＨＴＣＰＰＣのアミノ酸配列（配列番号１２９）を含む修飾ＩｇＧ１ヒンジを含んでもよく、軽鎖のＣ末端システインとジスルフィド結合を形成するＣｙｓ２２０はセリン、例えばＣｙｓ２２０Ｓｅｒ（Ｃ２２０Ｓ）に変異している。他の実施形態では、融合タンパク質は、アミノ酸配列ＤＫＴＨＴＣＰＰＣ（配列番号１３０）を含むヒンジを含んでもよい。いくつかの実施形態では、ヒンジは、例えば、鎖交換を防止または低減するために修飾されたＩｇＧ４からのヒンジを含み、例えば、Ｓｅｒ２２８がＰｒｏ（Ｓ２２８Ｐ）に変異したアミノ酸配列ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣ（配列番号１３１）を含む。
【００９１】
四価分子の融合タンパク質がリンカーを含むいくつかの実施形態では、リンカーは、ＧＧ、ＧＧＧ、および配列番号１３４〜１４０のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号１３４および１３８から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、四価分子の融合タンパク質は、配列番号１３０を含むヒンジおよび配列番号１３４または１３８を含むリンカーを有する。
【００９２】
四価分子の融合タンパク質がＦｃを含むいくつかの実施形態では、Ｆｃは、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４ ＦｃなどのヒトＦｃである。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１２３〜１２８のうちの１つと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、配列番号１２３などのヒトＩｇＧ１アミノ酸配列を含む。
【００９３】
例示的な四価分子を図３Ａおよび３Ｂに示す。例えば、図３Ａは、（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃアーキテクチャを有する例示的な四価分子を示し、Ｆｃ分子はＣＨ２およびＣＨ３ドメインを含む。例えば、図３Ｂは、代替（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−ヒンジ−Ｆｃ−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）アーキテクチャを示す。図３Ｃおよび３Ｄは、これら２つの４価分子に関連する構造を持つ６価分子、すなわち、図３Ｃの（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−ヒンジ−Ｆｃ、および図３Ｄの（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）−リンカー−、ヒンジ−Ｆｃ−リンカー−（ＧＩＴＲ−ＢＤ）を示す。図３Ｅ〜３Ｇは、異なるＧＩＴＲ結合ドメインを有する例示的な４価および６価分子を示す。
【００９４】
いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一である配列を含むポリペプチドの２つのコピーを含む四価分子である。
【００９５】
Ｆｃ領域
前述の実施形態のいずれかにおいて、Ｆｃは、配列番号１２３〜１２８から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１２３〜１２８の１つと少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％同一である配列を含み得る。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、配列番号１２３などのヒトＩｇＧ１アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃは配列番号１２３のアミノ酸配列を含むが、位置Ａｓｎ２９７（配列表に示される配列において四角で囲んだ）がフコシル化を阻害するように改変されている。いくつかの実施形態では、ＦｃはヒトＩｇＧ１ Ｆｃであるが、位置Ｌｅｕ２３５、Ｌｅｕ２３６、およびＧｌｙ２３７の１つ以上が他のアミノ酸に修飾されている（配列表に示される配列において四角で囲んだ）。いくつかの実施形態では、ＦｃはＬｙｓ４４７を欠くヒトＩｇＧ１ Ｆｃを含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、例えば配列番号１２４で提供されるように、Ｇｌｕ２３３、Ｌｅｕ２３４、またはＬｅｕ２３５の１つ以上でアミノ酸を欠くヒトＩｇＧ１ Ｆｃである。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ、例えば配列番号１２５を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、改変された、例えばＡｓｎ２９７（配列表において四角で囲んだ）で変異した、またはＬｙｓ４４７を欠くヒトＩｇＧ２ Ｆｃを含む。いくつかの実施形態では、ＦｃはヒトＩｇＧ３ Ｆｃ、例えば配列番号１２６を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、改変された、例えばＡｓｎ２９７で変異した、位置４３５にＡｒｇからＨｉｓへの置換を含む（両方とも配列表において四角で囲んだ）、またはＬｙｓ４４７を欠くヒトＩｇＧ３Ｆｃを含む。いくつかの実施形態では、ＦｃはヒトＩｇＧ４ Ｆｃ、例えば配列番号１２７または１２８を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、修飾された、例えば、位置Ｌｅｕ２３５またはＡｓｎ２９７（両方とも配列表において四角で囲んだ）で変異した、またはＬｙｓ４４７を欠くヒトＩｇＧ４ Ｆｃを含む。
【００９６】
いくつかの実施形態では、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域は、ＦｃＲｎ結合を増強するために修飾される。ＦｃＲｎへの結合を強化する可能性のあるＦｃ変異の例は、Ｍｅｔ２５２Ｔｙｒ、Ｓｅｒ２５４Ｔｈｒ、Ｔｈｒ２５６Ｇｌｕ（それぞれＭ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ）（Kabat numbering, Dall’Acqua et al 2006, J. Biol Chem Vol. 281(33) 23514−23524）、Ｍｅｔ４２８ＬｅｕおよびＡｓｎ４３４Ｓｅｒ（Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ）（Zalevsky et al 2010 Nature Biotech、Vol. 28（2）157-159）、またはＭｅｔ２５２Ｉｌｅ、Ｔｈｒ２５６Ａｓｐ、Ｍｅｔ４２８Ｌｅｕ（それぞれＭ２５２Ｉ、Ｔ２５６Ｄ、Ｍ４２８Ｌ）である（Kabat et alのＥＵインデックス 1991 Sequences of Proteins of Immunological Interest）。
【００９７】
いくつかの実施形態では、変異Ｆｃは、以下の置換も含み得る：Ｋａｂａｔナンバリングシステムを使用するＭｅｔ２５２ＴｙｒおよびＭｅｔ４２８Ｌｅｕ（Ｍ２５２Ｙ、Ｍ４２８Ｌ）。
【００９８】
いくつかの実施形態では、例えば、Natsume et al., 2008 Cancer Res, 68(10): 3863-72; Idusogie et al., 2001 J Immunol, 166(4): 2571-5; Moore et al., 2010 mAbs, 2(2): 181-189; Lazar et al., 2006 PNAS, 103(11): 4005−4010, Shields et al., 2001 JBC, 276(9): 6591−6604; Stavenhagen et al., 2007 Cancer Res, 67(18): 8882-8890; Stavenhagen et al., 2008 Advan. Enzyme Regul., 48: 152-164; Alegre et al, 1992 J Immunol, 148: 3461-3468; Reviewed in Kaneko and Niwa, 2011 Biodrugs, 25(1):1-11に記載されているアミノ酸修飾のように、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域を改変して、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）および／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を変更してもよい。ＡＤＣＣを増強する可能性のある突然変異の例には、Ｓｅｒ２３９およびＩｌｅ３３２、例えばＳｅｒ２３９ＡｓｐおよびＩｌｅ３３２Ｇｌｕ（Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ）での修飾が含まれる。ＣＤＣを増強する可能性のある変異の例には、Ｌｙｓ３２６およびＧｌｕ３３３での修飾が含まれる。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、これらの位置の一方または両方、例えば、Ｋａｂａｔナンバリングシステムを使用してＬｙｓ３２６Ａｌａおよび／またはＧｌｕ３３３Ａｌａ（Ｋ３２６ＡおよびＥ３３３Ａ）で修飾される。
【００９９】
いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体化を誘導するために、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域を修飾してもよい。例えば、Ｔｈｒ３６６のＣＨ３ドメイン内にアミノ酸修飾があり、Ｔｙｐ（Ｔ３６６Ｗ）などのより嵩の高いアミノ酸で置換された場合、位置がＴｈｒ３６６、Ｌｅｕ３６８、およびＴｙｒ４０７、例えばそれぞれＳｅｒ、Ａｌａ、およびＶａｌ（Ｔ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ）のより嵩の低いアミノ酸へのアミノ酸修飾を有する第２のＣＨ３ドメインと優先的に対合することができる。例えば、ＣＨ３ドメインのさらなる変更には、反対側のＣＨ３ドメインでＳｅｒ３５４をＣｙｓ（Ｓ３５４Ｃ）に、Ｙ３４９をＣｙｓ（Ｙ３４９Ｃ）に変更することが含まれる（Reviewed in Carter, 2001 Journal of Immunological Methods, 248: 7−15）。
【０１００】
いくつかの実施形態では、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域は、Ｆｃドメインの二量体化を防止または低減するために修飾される。例えば、残基Ｔｈｒ３６６は荷電残基、例えばＴｈｒ３６６Ｌｙｓ、Ｔｈｒ３６６Ａｒｇ、Ｔｈｒ３６６Ａｓｐ、またはＴｈｒ３６６Ｇｌｕ（それぞれＴ３６６Ｋ、Ｔ３６６Ｒ、Ｔ３６６Ｄ、またはＴ３６６Ｅ）で置換することができ、場合によってはＣＨ３−ＣＨ３の二量体化を防ぐことができる。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、Ｆｃ受容体結合を低減するためにＬｅｕ２３４（Ｌ２３４）、Ｌｅｕ２３５（Ｌ２３５）、Ａｓｐ２６５（Ｄ２６５）、Ａｓｐ２７０（Ｄ２７０）、Ｓｅｒ２９８（Ｓ２９８）、Ａｓｎ２９７（Ｎ２９７）、Ａｓｎ３２５（Ｎ３２５）、またはＡｌａ３２７（Ａ３２７）の位置の１つ以上で変更され得る。例えば、Ｌｅｕ２３４Ａｌａ（Ｌ２３４Ａ）、Ｌｅｕ２３５Ａｌａ（Ｌ２３５Ａ）、Ａｓｐ２６５Ａｓｎ（Ｄ２６５Ｎ）、Ａｓｐ２７０Ａｓｎ（Ｄ２７０Ｎ）、Ｓｅｒ２９８Ａｓｎ（Ｓ２９８Ｎ）、Ａｓｎ２９７Ａｌａ（Ｎ２９７Ａ）、Ａｓｎ３２５Ｇｌｕ（Ｎ３２５Ｅ）、またはＡｌａ３２７Ｓｅｒ（Ａ３２７Ｓ）。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域内の修飾は、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合への影響を最小限に抑えながら、Ｆｃ受容体−γ受容体への結合を低減し得る。
【０１０２】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、ヒト化抗体、キメラ抗体、マウス抗体、ヒト抗体、および本明細書で検討される重鎖および／または軽鎖ＣＤＲを含む抗体が含まれるが、これらに限定されない。
【０１０３】
一部の実施形態では、例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、例えば、ＷＯ２０１３／１３２０４４、ＷＯ２００９／０２６３０３、ＷＯ２０１１／１４０２４９、およびＷＯ２００９／１１２２４５に開示されている抗体種が含まれる。例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、例えば、ＲＧ７１５５（ＷＯ２０１３／１３２０４４を参照）およびＡＭＧ−８２０（ＷＯ２００９／０２６３０３を参照）が含まれる。したがって、例えば、いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体はＲＧ７１５５の重鎖および軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＲＧ７１５５の重鎖および軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＲＧ７１５５の重鎖および軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体はＲＧ７１５５である。例えば、いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体はＡＭＧ−８２０の重鎖および軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＡＭＧ−８２０の重鎖および軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＡＭＧ−８２０の重鎖および軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体はＡＭＧ−８２０である。
【０１０４】
例示的なヒト化抗体
いくつかの実施形態では、ＣＳＦ１Ｒに結合するヒト化抗体が提供される。ヒト化抗体は、抗体治療薬に対する免疫反応をもたらし、治療薬の有効性を低下させる非ヒト抗体に対するヒト免疫応答（ヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答など）を低減または排除する可能性があるため、治療分子として有用である。
【０１０５】
非限定的な例示的なヒト化抗体には、本明細書に記載のｈｕＡｂ１からｈｕＡｂ１６が含まれる。非限定的な例示的ヒト化抗体には、ｈｕＡｂ１からｈｕＡｂ１６から選択される抗体の重鎖可変領域および／またはｈｕＡｂ１からｈｕＡｂ１６から選択される抗体の軽鎖可変領域を含む抗体も含まれる。非限定的な例示的なヒト化抗体には、配列番号３９から４５から選択される重鎖可変領域および／または配列番号４６から５２から選択される軽鎖可変領域を含む抗体が含まれる。例示的なヒト化抗体には、これらに限定されないが、０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、および／または軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むヒト化抗体も含まれる。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３並びに／または軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。非限定的な例示的なヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、配列番号１５、１６、および１７、配列番号２１、２２、および２３、並びに、配列番号２７、２８、および２９から選択される重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のセットを含む抗体が含まれる。非限定的な例示的なヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、配列番号１８、１９、および２０、配列番号２４、２５、および２６、並びに、配列番号３０、３１、および３２から選択される軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のセットを含む抗体も含まれる。
【０１０７】
非限定的な例示的なヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、表１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のセットを含む抗体が含まれる（配列番号を示す；配列については表８を参照）。表１の各行は、例示的な抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、並びに、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を示している。
【０１０８】
表１：重鎖および軽鎖ＣＤＲ
【表１】
2020512357.tif 000003
【０１０９】
さらなる例示的なヒト化抗体
いくつかの実施形態では、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、配列番号９、１１、１３、および３９〜４５から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む重鎖を含み、抗体はＣＳＦ１Ｒに結合する。いくつかの実施形態では、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、配列番号１０、１２、１４、および４６〜５２から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む軽鎖を含み、抗体はＣＳＦ１Ｒに結合する。いくつかの実施形態では、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、配列番号９、１１、１３、および３９〜４５から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む重鎖、および、配列番号１０、１２、１４、および４６〜５２から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む軽鎖を含み、抗体はＣＳＦ１Ｒに結合する。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書で検討されるＣＤＲの少なくとも１つを含む。つまり、いくつかの実施形態では、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ１、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ２、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ３、本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ１、本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ２、および本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ３から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む。さらに、いくつかの実施形態では、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書で検討されるＣＤＲに基づく少なくとも１つの突然変異ＣＤＲを含み、突然変異ＣＤＲは、本明細書で検討されるＣＤＲと比較して１、２、３、または４アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。当業者は、特定のＣＤＲ配列について１つ以上の適切な保存的アミノ酸置換を選択することができ、適切な保存的アミノ酸置換は、突然変異ＣＤＲを含む抗体の結合特性を著しく変えるとは予測されない。
【０１１１】
例示的なヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、ＣＳＦ１Ｒへの結合について本明細書に記載の抗体と競合する抗体も含まれる。したがって、いくつかの実施形態では、ＣＳＦ１Ｒへの結合について、Ｆａｂ０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体と競合するヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体、並びに、それらのＦａｂの二価（すなわち、２つの重鎖と２つの軽鎖を有する）抗体バージョンが提供される。
【０１１２】
例示的なヒト化抗体定常領域
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のヒト化抗体は、１つまたは複数のヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態では、ヒト重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＧ、およびＩｇＤから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態では、ヒト軽鎖定常領域は、κおよびλから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のヒト化抗体は、ヒトＩｇＧ定常領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のヒト化抗体は、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかのそのような実施形態では、本明細書に記載のヒト化抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域にＳ２４１Ｐ突然変異（カバット番号付け）を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のヒト化抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域およびヒトκ軽鎖を含む。
【０１１３】
重鎖定常領域の選択により、抗体が生体内でエフェクター機能を持つかどうかを決定できる。そのようなエフェクター機能は、いくつかの実施形態では、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）および／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を含み、抗体が結合している細胞の死滅をもたらし得る。いくつかの癌の治療法を含むいくつかの治療法では、例えば、腫瘍の維持または成長を支える細胞に抗体が結合する場合、細胞を死滅さることが望ましい場合がある。腫瘍の維持または成長を支持し得る例示的な細胞には、腫瘍細胞自体、腫瘍への脈管構造の動員を補助する細胞、および腫瘍の成長または生存をサポートまたは促進するリガンド、成長因子、またはカウンター受容体を提供する細胞が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましい場合、ヒトＩｇＧ１重鎖またはヒトＩｇＧ３重鎖を含む抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が選択される。
【０１１４】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、任意の方法によりヒト化され得る。ヒト化の非限定的な例示的方法には、例えば、米国特許第５，５３０，１０１号；第５，５８５，０８９号；第５，６９３，７６１号；第５，６９３，７６２号；第６，１８０，３７０号；Jones et al., Nature 321: 522-525 (1986);Riechmann et al., Nature 332: 323-27 (1988);Verhoeyen et al., Science 239: 1534-36 (1988);および米国特許出願公開第２００９／０１３６５００号に記載されている方法が含まれる。
【０１１５】
上記のように、ヒト化抗体は、非ヒト可変領域のフレームワーク領域の少なくとも１つのアミノ酸が、ヒトフレームワーク領域の対応する位置からのアミノ酸で置換されている抗体である。いくつかの実施形態では、非ヒト可変領域のフレームワーク領域内で、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１５、または少なくとも２０のアミノ酸が、１つ以上のヒトフレームワーク領域の１つ以上の対応する位置からのアミノ酸で置換される。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、置換に使用される対応するヒトアミノ酸のいくつかは、異なるヒト免疫グロブリン遺伝子のフレームワーク領域からのものである。つまり、このようないくつかの実施形態では、１つ以上の非ヒトアミノ酸は、第１のヒト抗体のヒトフレームワーク領域からの対応するアミノ酸で置換されるか、または第１のヒト免疫グロブリン遺伝子によってコードされてもよく、１つ以上の非ヒトアミノ酸は、第２のヒト抗体のヒトフレームワーク領域からの対応するアミノ酸で置換されるか、または第２のヒト免疫グロブリン遺伝子によってコードされてもよく、１つ以上の非ヒトアミノ酸は、第３のヒト抗体のヒトフレームワーク領域からの対応するアミノ酸で置換されるか、または第３のヒト免疫グロブリン遺伝子によってコードされてもよい。さらに、いくつかの実施形態では、単一のフレームワーク領域、例えばＦＲ２の置換に使用される対応するヒトアミノ酸のすべては、同じヒトフレームワークに由来する必要はない。しかし、いくつかの実施形態では、置換に使用される対応するヒトアミノ酸はすべて、同じヒト抗体由来であるか、または同じヒト免疫グロブリン遺伝子によってコードされている。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、１つ以上のフレームワーク領域全体を対応するヒトフレームワーク領域で置き換えることによりヒト化される。いくつかの実施形態では、置換される非ヒトフレームワーク領域に対して最高レベルの相同性を有するヒトフレームワーク領域が選択される。いくつかの実施形態では、そのようなヒト化抗体はＣＤＲ移植抗体である。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、ＣＤＲ移植に続いて、１つ以上のフレームワークアミノ酸は、マウスフレームワーク領域の対応するアミノ酸に戻される。そのような「復帰突然変異」は、いくつかの実施形態では、１つ以上のＣＤＲの構造に寄与すると思われる、および／または抗原接触に関与している可能性があり、および／または抗体の全体的な構造的完全性に関与しているように見える、１つまたは複数のマウスフレームワークアミノ酸を保持するために作成される。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ移植後、抗体のフレームワーク領域に対して、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下、１、またはゼロのバックミューテーションが行われる。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、ヒト化抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ヒト重鎖定常領域および／またはヒト軽鎖定常領域も含む。
【０１２０】
例示的なキメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体はキメラ抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、少なくとも１つの非ヒト可変領域および少なくとも１つのヒト定常領域を含む。いくつかのそのような実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の可変領域のすべてが非ヒト可変領域であり、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の定常領域のすべてがヒト定常領域である。いくつかの実施形態では、キメラ抗体の１つまたは複数の可変領域はマウス可変領域である。キメラ抗体のヒト定常領域は、もしあれば、それが置き換える非ヒト定常領域と同じアイソタイプである必要はない。キメラ抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；およびMorrison et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-55 (1984)に記載される。
【０１２１】
非限定的な例示的なキメラ抗体には、０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体の重鎖および／または軽鎖可変領域を含むキメラ抗体が含まれる。追加の非限定的な例示的なキメラ抗体には、０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、および／または軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むキメラ抗体が含まれる。
【０１２２】
非限定的な例示的なキメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、以下の重鎖および軽鎖可変領域の対を含む抗体が含まれる：配列番号９および１０、配列番号１１および１２、並びに配列番号１３および１４。
【０１２３】
非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、上記の表１に示される重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のセットを含む抗体が含まれる。
【０１２４】
さらなる例示的なキメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体
いくつかの実施形態では、キメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、配列番号９、１１、１３、および３９〜４５から選択された配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む重鎖を含み、抗体はＣＳＦ１Ｒに結合する。いくつかの実施形態では、キメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は配列番号１０、１２、１４、および４６〜５２から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む軽鎖を含み、抗体はＣＳＦ１Ｒに結合する。いくつかの実施形態では、キメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、配列番号９、１１、１３、および３９〜４５から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む重鎖、および配列番号１０、１２、１４、および４６〜５２から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む軽鎖、を含み、抗体はＣＳＦ１Ｒに結合する。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、キメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書で検討されるＣＤＲの少なくとも１つを含む。すなわち、いくつかの実施形態では、キメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ１、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ２、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ３、本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ１、本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ２、および本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ３から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む。さらに、いくつかの実施形態では、キメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書で検討されるＣＤＲに基づく少なくとも１つの突然変異ＣＤＲを含み、突然変異ＣＤＲは、本明細書で検討されるＣＤＲと比較して１、２、３、または４アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。当業者は、特定のＣＤＲ配列について１つ以上の適切な保存的アミノ酸置換を選択することができ、適切な保存的アミノ酸置換は、突然変異ＣＤＲを含む抗体の結合特性を著しく変えるとは予測されない。
【０１２６】
例示的なキメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、ＣＳＦ１Ｒへの結合について本明細書に記載の抗体と競合するキメラ抗体も含まれる。したがって、いくつかの実施形態では、ＣＳＦ１Ｒへの結合をＦａｂ０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体と競合するキメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体、およびそれらのＦａｂの二価（すなわち、２つの重鎖および２つの軽鎖を有する）抗体バージョンが提供される。
【０１２７】
例示的な抗ＣＳＦ１Ｒキメラ抗体定常領域
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のキメラ抗体は、１つまたは複数のヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態では、ヒト重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＧ、およびＩｇＤから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態では、ヒト軽鎖定常領域は、κおよびλから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のキメラ抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４定常領域などのヒトＩｇＧ定常領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のキメラ抗体は、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかのそのような実施形態では、本明細書に記載のキメラ抗体は、Ｓ２４１Ｐ変異を有するヒトＩｇＧ４定常領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のキメラ抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域およびヒトκ軽鎖を含む。
【０１２８】
上記のように、エフェクター機能が望ましいかどうかは、抗体を対象とする特定の治療方法に依存する。したがって、いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましい場合、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域またはヒトＩｇＧ３重鎖定常領域を含むキメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が選択される。いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましくない場合、ヒトＩｇＧ４またはＩｇＧ２重鎖定常領域を含むキメラ抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が選択される。
【０１２９】
例示的な抗ＣＳＦ１Ｒヒト抗体
ヒト抗体は、任意の適切な方法で作成できる。非限定的な例示的方法には、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を含むトランスジェニックマウスにおけるヒト抗体の作製が含まれる。例えば、Jakobovits et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 2551-55 (1993); Jakobovits et al., Nature 362: 255-8 (1993); Lonberg et al., Nature 368: 856-9 (1994);並びに、米国特許第５，５４５，８０７号；第６，７１３，６１０号；第６，６７３，９８６号；第６，１６２，９６３号；第５，５４５，８０７号；第６，３００，１２９号；第６，２５５，４５８号；第５，８７７，３９７号；第５，８７４，２９９号；および第５，５４５，８０６号を参照されたい。
【０１３０】
非限定的な例示的方法には、ファージディスプレイライブラリーを使用してヒト抗体を作製することも含まれる。例えば、Hoogenboom et al., J. Mol. Biol. 227: 381-8 (1992); Marks et al., J. Mol. Biol. 222: 581-97 (1991);および国際公開第９９／１０４９４号を参照されたい。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、ヒト抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、配列番号１の配列を有するポリペプチドに結合する。例示的なヒト抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、ＣＳＦ１Ｒへの結合について本明細書に記載の抗体と競合する抗体も含まれる。したがって、いくつかの実施形態では、ＣＳＦ１Ｒへの結合について、Ｆａｂ０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体と競合するヒト抗ＣＳＦ１Ｒ抗体、並びに、それらのＦａｂの二価（すなわち、２つの重鎖および２つの軽鎖を有する）抗体バージョンが提供される。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、ヒト抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、１つ以上のヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態では、ヒト重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＧ、およびＩｇＤから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態では、ヒト軽鎖定常領域は、κおよびλから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のヒト抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４定常領域などのヒトＩｇＧ定常領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のヒト抗体は、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかのそのような実施形態では、本明細書に記載のヒト抗体は、Ｓ２４１Ｐ変異を有するヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のヒト抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域およびヒトκ軽鎖を含む。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましい場合、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域またはヒトＩｇＧ３重鎖定常領域を含むヒト抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が選択される。いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましくない場合、ヒトＩｇＧ４またはＩｇＧ２重鎖定常領域を含むヒト抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が選択される。
【０１３４】
追加の例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体
例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、例えば、本明細書に記載の１つ以上のＣＤＲ配列を含むマウス、ヒト化、ヒト、キメラ、および操作された抗体も含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書に記載の重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書に記載の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書に記載の重鎖可変領域および本明細書に記載の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書に記載の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３と、本明細書に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３とを含む。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、Ｆａｂ０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体の重鎖可変領域を含む。非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、ヒト化抗体ｈｕＡｂ１〜ｈｕＡｂ１６から選択される抗体の重鎖可変領域を含む抗体も含まれる。非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、配列番号９、１１、１３、および３９〜４５から選択される配列を含む重鎖可変領域を含む抗体が含まれる。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、Ｆａｂ０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体の軽鎖可変領域を含む。非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、ヒト化抗体ｈｕＡｂ１からｈｕＡｂ１６から選択される抗体の軽鎖可変領域を含む抗体も含まれる。非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、配列番号１０、１２、１４、および４６〜５２から選択される配列を含む軽鎖可変領域を含む抗体が含まれる。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、Ｆａｂ０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む。非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、ヒト化抗体ｈｕＡｂ１〜ｈｕＡｂ１６から選択される抗体の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む抗体も含まれる。非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、以下の重鎖可変領域と軽鎖可変領域のペア：配列番号：９および１０；配列番号：１１および１２；並びに、配列番号１３および１４；配列番号３９および４０；配列番号：４１および４２；配列番号４３および４４；配列番号４５および４６；配列番号４７および４８；配列番号：４９および５０；並びに、配列番号：５１および５２を含む抗体が含まれる。非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、以下の重鎖および軽鎖のペア：配列番号３３および３４；配列番号：３５および３６；並びに、配列番号３７および３８を含む抗体も含まれる。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、Ｆａｂ０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、配列番号１５、１６、および１７、配列番号２１、２２、および２３、並びに、配列番号２７、２８、および２９から選択される重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のセットを含む抗体が含まれる。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、Ｆａｂ０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、配列番号１８、１９、および２０；配列番号２４、２５、および２６；並びに、配列番号３０、３１、および３２から選択される軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のセットを含む抗体が含まれる。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、Ｆａｂ０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、並びに、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。
【０１４１】
非限定的な例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、上記の表１に示される重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、並びに、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のセットを含む抗体が含まれる。
【０１４２】
さらなる例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、配列番号９、１１、１３、および３９〜４５から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む重鎖を含み、抗体はＣＳＦ１Ｒに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、配列番号１０、１２、１４、および４６〜５２から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む軽鎖を含み、抗体はＣＳＦ１Ｒに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、配列番号９、１１、１３、および３９〜４５から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む重鎖、並びに、配列番号１０、１２、１４、および４６〜５２から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む軽鎖を含み、抗体はＣＳＦ１Ｒに結合する。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書で検討されるＣＤＲの少なくとも１つを含む。すなわち、いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ１、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ２、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ３、本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ１、本明細書で検討されるＣＤＲ２、および本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ３から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む。さらに、いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、本明細書で検討されるＣＤＲに基づく少なくとも１つの突然変異ＣＤＲを含み、突然変異ＣＤＲは、本明細書で検討されるＣＤＲに対して１、２、３、または４アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。当業者は、特定のＣＤＲ配列について１つ以上の適切な保存的アミノ酸置換を選択することができ、適切な保存的アミノ酸置換は、突然変異ＣＤＲを含む抗体の結合特性を著しく変えるとは予測されない。
【０１４４】
例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、ＣＳＦ１Ｒへの結合について本明細書に記載の抗体と競合する抗体も含まれる。したがって、いくつかの実施形態では、ＣＳＦ１Ｒへの結合をＦａｂ０３０１、０３０２、および０３１１から選択される抗体と競合する抗ＣＳＦ１Ｒ抗体、およびそれらのＦａｂの二価（すなわち、２つの重鎖と２つの軽鎖を有する）抗体バージョンが提供される。
【０１４５】
例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体定常領域
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、１つまたは複数のヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態では、ヒト重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＧ、およびＩｇＤから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態では、ヒト軽鎖定常領域は、κおよびλから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４定常領域などのヒトＩｇＧ定常領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかのそのような実施形態では、本明細書に記載の抗体は、Ｓ２４１Ｐ変異を有するヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域およびヒトκ軽鎖を含む。
【０１４６】
上記のように、エフェクター機能が望ましいかどうかは、抗体を対象とする特定の治療方法に依存する。したがって、いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましい場合、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域またはヒトＩｇＧ３重鎖定常領域を含む抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が選択される。いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましくない場合、ヒトＩｇＧ４またはＩｇＧ２重鎖定常領域を含む抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が選択される。
【０１４７】
例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ重鎖可変領域
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖可変領域が提供される。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖可変領域は、マウス可変領域、ヒト可変領域、またはヒト化可変領域である。
【０１４８】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖可変領域は、重鎖ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、およびＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖可変領域は、重鎖ＦＲ１および／またはＦＲ４をさらに含む。非限定的な例示的重鎖可変領域には、配列番号９、１１、１３、および３９〜４５から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域が含まれるが、これらに限定されない。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖可変領域は、配列番号１５、２１、および２７から選択される配列を含むＣＤＲ１を含む。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖可変領域は、配列番号１６、２２、および２８から選択される配列を含むＣＤＲ２を含む。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖可変領域は、配列番号１７、２３、および２９から選択される配列を含むＣＤＲ３を含む。
【０１５２】
非限定的な例示的な重鎖可変領域には、配列番号１５、１６、および１７；配列番号２１、２２、および２３；並びに、配列番号２７、２８、および２９から選択されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のセットを含む重鎖可変領域が含まれるが、これらに限定されない。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖は、配列番号９、１１、１３、および３９から４５から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含み、重鎖は軽鎖と共に、ＣＳＦ１Ｒに結合する抗体を形成することができる。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖は、本明細書で検討されるＣＤＲの少なくとも１つを含む。すなわち、いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖は、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ１、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ２、および本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ３から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む。さらに、いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体重鎖は、本明細書で検討されるＣＤＲに基づく少なくとも１つの突然変異ＣＤＲを含み、突然変異ＣＤＲは、本明細書で検討されるＣＤＲと比較して１、２、３、または４アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。当業者は、特定のＣＤＲ配列に対して１つ以上の適切な保存的アミノ酸置換を選択することができ、適切な保存的アミノ酸置換は、突然変異ＣＤＲを含む重鎖の結合特性を著しく変えると予測されない。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、重鎖は重鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態では、重鎖はヒト重鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態では、ヒト重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＧ、およびＩｇＤから選択されるアイソタイプのものである。いくつかの実施形態では、ヒト重鎖定常領域はＩｇＧ定常領域である。いくつかの実施形態では、重鎖はヒトｉｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかのこのような実施形態では、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域はＳ２４１Ｐ突然変異を含む。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、エフェクター機能が望ましい場合、重鎖はヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ３重鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター機能があまり望ましくない場合、重鎖はヒトＩｇＧ４またはＩｇＧ２重鎖定常領域を含む。
【０１５７】
例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ軽鎖可変領域
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖可変領域が提供される。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖可変領域は、マウス可変領域、ヒト可変領域、またはヒト化可変領域である。
【０１５８】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖可変領域は、軽鎖ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、およびＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖可変領域は、軽鎖ＦＲ１および／またはＦＲ４をさらに含む。非限定的な例示的な軽鎖可変領域には、配列番号１０、１２、１４、および４６〜５２から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域が含まれる。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖可変領域は、配列番号１８、２４および３０から選択される配列を含むＣＤＲ１を含む。
【０１６０】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖可変領域は、配列番号１９、２５、および３１から選択される配列を含むＣＤＲ２を含む。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖可変領域は、配列番号２０、２６、および３２から選択される配列を含むＣＤＲ３を含む。
【０１６２】
非限定的な例示的な軽鎖可変領域には、配列番号１８、１９、および２０、配列番号２４、２５、および２６、並びに、配列番号３０、３１、および３２から選択されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のセットを含む軽鎖可変領域が含まれるが、これらに限定されない。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖は、配列番号１０、１２、１４、および４６から５２から選択される配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含み、軽鎖は、重鎖とともに、ＣＳＦ１Ｒに結合する抗体を形成することができる。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖は、本明細書で検討されるＣＤＲの少なくとも１つを含む。すなわち、いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖は、本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ１、本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ２、および本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ３から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む。さらに、いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体軽鎖は、本明細書で検討されるＣＤＲに基づく少なくとも１つの突然変異ＣＤＲを含み、突然変異ＣＤＲは、本明細書で検討されるＣＤＲと比較して１、２、３、または４アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。当業者は、特定のＣＤＲ配列に対して１つまたは複数の適切な保存的アミノ酸置換を選択することができ、適切な保存的アミノ酸置換は、突然変異ＣＤＲを含む軽鎖の結合特性を著しく変えるとは予測されない。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、軽鎖はヒト軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態では、ヒト軽鎖定常領域は、ヒトκおよびヒトλ軽鎖定常領域から選択される。
【０１６６】
例示的な追加のＣＳＦ１Ｒ抗体および結合分子
一部の実施形態では、他の抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が使用される。いくつかの実施形態では、例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、例えば、ＷＯ２０１３／１３２０４４、ＷＯ２００９／０２６３０３、ＷＯ２０１１／１４０２４９、およびＷＯ２００９／１１２２４５に開示されている抗体種が含まれる。例示的な抗ＣＳＦ１Ｒ抗体には、例えば、ＲＧ７１５５（ＷＯ２０１３／１３２０４４を参照）およびＡＭＧ−８２０（ＷＯ２００９／０２６３０３を参照）が含まれる。したがって、例えば、いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体はＲＧ７１５５の重鎖および軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＲＧ７１５５の重鎖および軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＲＧ７１５５の重鎖および軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体はＲＧ７１５５である。例えば、いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体はＡＭＧ−８２０の重鎖および軽鎖ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＡＭＧ−８２０の重鎖および軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＡＭＧ−８２０の重鎖および軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体はＡＭＧ−８２０である。
【０１６７】
他の種類の抗体分子には、抗カリン、アドネクチン、アンキリンリピートなどの非標準的な足場を含む分子が含まれるが、これらに限定されない。例えば、Hosse et al., Prot. Sci. 15:14 (2006); Fiedler, M. and Skerra, A., “Non-Antibody Scaffolds,” pp.467-499 in Handbook of Therapeutic Antibodies, Dubel, S., ed., Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2007を参照されたい。
【０１６８】
抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の例示的な特性
いくつかの実施形態では、上記の構造を有する抗体は、１ｎＭ未満の結合親和性（ＫＤ）でＣＳＦ１Ｒに結合し、ＣＳＦ１および／またはＩＬ−３４のＣＳＦ１Ｒへの結合をブロックし、ＣＳＦ１および／またはＩＬ−３４によって誘導されるＣＳＦ１Ｒリン酸化を阻害する。
【０１６９】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＣＳＦ１Ｒの細胞外ドメイン（ＣＳＦ１Ｒ−ＥＣＤ）に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、１ｎＭ未満、０．５ｎＭ未満、０．１ｎＭ未満、または０．０５ｎＭ未満のＣＳＦ１Ｒに対する結合親和性（ＫＤ）を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、０．０１から１ｎＭの間、０．０１から０．５ｎＭの間、０．０１から０．１ｎＭの間、０．０１から０．０５ｎＭの間、または０．０２から０．０５ｎＭの間のＫＤを有する。
【０１７０】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＣＳＦ１およびＩＬ−３４の両方のＣＳＦ１Ｒへの結合を遮断する。いくつかの実施形態では、例えば、あらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第８，２０６，７１５号の実施例７に記載のアッセイを使用して、ＣＳＦ１ＲへのリガンドのＣＳＦ１Ｒへの検出可能な結合の量を少なくとも５０％減少させる場合、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体はＣＳＦ１Ｒへのリガンド結合をブロックする。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＣＳＦ１Ｒへのリガンドの検出可能な結合の量を少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％減少させる。いくつかのそのような実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、リガンド結合を少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％等ブロックすると言われている。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、リガンド誘導性ＣＳＦ１Ｒリン酸化を阻害する。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＣＳＦ１誘発ＣＳＦ１Ｒリン酸化を阻害する。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＩＬ−３４誘発ＣＳＦ１Ｒリン酸化を阻害する。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、ＣＳＦ１誘発性およびＩＬ−３４誘発性の両方のＣＳＦ１Ｒリン酸化を阻害する。いくつかの実施形態では、抗体は、例えば、あらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第８，２０６，７１５号、実施例６に記載のアッセイを使用して、検出可能なリガンド誘導ＣＳＦ１Ｒリン酸化の量を少なくとも５０％減少させる場合、「リガンド誘導ＣＳＦ１Ｒリン酸化を阻害する」と考えられる。いくつかの実施形態では、抗体は、検出可能なリガンド誘導性ＣＳＦ１Ｒリン酸化の量を少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％減少させる。いくつかのそのような実施形態では、抗体は、リガンド誘導性ＣＳＦ１Ｒリン酸化を少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％など阻害すると言われている。
【０１７２】
いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＳＦ１および／またはＩＬ−３４の存在下で単球増殖および／または生存応答を阻害する。いくつかの実施形態では、例えば、あらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第８，２０６，７１５号、実施例１０に記載のアッセイを使用して、ＣＳＦ１および／またはＩＬ−３４の存在下で単球増殖および／または生存応答の量を少なくとも５０％減少させる場合、抗体は「単球の増殖および／または生存応答を阻害する」と考えられる。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＳＦ１および／またはＩＬ−３４の存在下での単球増殖および／または生存応答の量を少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％減少させる。いくつかのこのような実施形態では、抗体は、単球増殖および／または生存応答を少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％等阻害すると言われている。
【０１７３】
例示的な抗ＰＤ−１抗体
ＰＤ−１は、活性化されたＴおよびＢ細胞によって発現される重要な免疫チェックポイント受容体であり、免疫抑制を媒介する。ＰＤ−１は、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ−４、ＩＣＯＳ、ＰＤ−１、およびＢＴＬＡを含むＣＤ２８受容体ファミリーのメンバーである。ＰＤ−１の２つの細胞表面糖タンパク質リガンド、プログラム細胞死リガンド（Programmed Death Ligand）−１（ＰＤ−Ｌ１）およびプログラム細胞死リガンド−２（ＰＤ−Ｌ２）が特定されており、これらは抗原提示細胞および多くのヒト癌で発現しており、ＰＤ−１に結合するとＴ細胞の活性化とサイトカイン分泌をダウンレギュレートすることが示されている。ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の阻害は、前臨床モデルにおける強力な抗腫瘍活性を媒介する。
【０１７４】
高い親和性でＰＤ−１に特異的に結合するヒトモノクローナル抗体（ＨｕＭＡｂｓ）は、米国特許第８，００８，４４９号に開示されている。他の抗ＰＤ−１モノクローナル抗体（ｍＡｂｓ）は、例えば、米国特許第６，８０８，７１０号、第７，４８８，８０２号、第８，１６８，７５７号および第８，３５４，５０９号、ならびにＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１２／１４５４９３に記載されている。米国特許第８，００８，４４９号に開示されている各抗ＰＤ−１ ＨｕＭＡｂは、以下：（ａ）Ｂｉａｃｏｒｅバイオセンサーシステムを使用した表面プラズモン共鳴によって決定されるように、１ｘ１０−７Ｍ以下のＫＤでヒトＰＤ−１に結合する；（ｂ）ヒトＣＤ２８、ＣＴＬＡ−４またはＩＣＯＳに実質的に結合しない；（ｃ）混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイでＴ細胞の増殖を増加させる；（ｄ）ＭＬＲアッセイでインターフェロン−γ産生を増加させる；（ｅ）ＭＬＲアッセイでＩＬ−２分泌を増加させる；（ｆ）ヒトＰＤ−１とカニクイザルＰＤ−１の両方に結合する；（ｇ）ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合を阻害する；（ｈ）抗原特異的記憶応答を刺激する；（ｉ）Ａｂ応答を刺激する；および／または（ｊ）ｉｎ  ｖｉｖｏで腫瘍細胞の成長を阻害する、の特徴の１つ以上を示すことが実証されている。本発明で使用可能な抗ＰＤ−１抗体には、例えば、ＰＤ−１に特異的に結合し、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つまたは少なくとも５つの前述の特徴を示す、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）が含まれる。
【０１７５】
例示的な抗ＰＤ−１抗体には、例えば、本明細書に記載のＣＤＲ配列の１つまたは複数を含むマウス、ヒト化、ヒト、キメラ、および改変抗体も含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、本明細書に記載の重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、本明細書に記載の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、本明細書に記載の重鎖可変領域および本明細書に記載の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、本明細書に記載される、例えば、配列番号１０５、１０７、および１０９を含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、例えば、配列番号１１２、１１４、および１１６を含む、本明細書に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、本明細書に記載される、例えば、配列番号１０５、１０７、および１０９を含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含み、本明細書に記載される、例えば、配列番号１１２、１１４、および１１６を含む、本明細書に記載の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、それぞれ配列番号１０５、１０７、および１０９を含む重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、それぞれ配列番号１１２、１１４、および１１６を含む軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１００を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１０２を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１００を含む重鎖可変領域および配列番号１０２を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１０１を含む重鎖定常領域および／または配列番号１０３を含む軽鎖定常領域を含む。
【０１７７】
さらなる例示的な抗ＰＤ−１抗体
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１００と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む重鎖を含み、抗体はＰＤ−１に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１０２と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である、可変領域配列を含む軽鎖を含み、抗体はＰＤ−１に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、配列番号１００と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む重鎖を含み、配列番号１０２と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である可変領域配列を含む軽鎖を含み、抗体はＰＤ−１に結合する。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、本明細書で検討されるＣＤＲのうちの少なくとも１つを含む。つまり、いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ１、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ２、本明細書で検討される重鎖ＣＤＲ３、本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ１、本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ２、および本明細書で検討される軽鎖ＣＤＲ３から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む。さらに、いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、本明細書で検討されるＣＤＲに基づく少なくとも１つの突然変異ＣＤＲを含み、突然変異ＣＤＲは、本明細書で検討されるＣＤＲに対して１、２、３、または４アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。当業者は、特定のＣＤＲ配列について１つ以上の適切な保存的アミノ酸置換を選択することができ、適切な保存的アミノ酸置換は、突然変異ＣＤＲを含む抗体の結合特性を著しく変えるとは予測されない。
【０１７９】
一実施形態では、抗ＰＤ−１ Ａｂはニボルマブである。ニボルマブ（「Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）」とも呼ばれる。以前は５Ｃ４、ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ−１１０６、またはＯＮＯ−４５３８と呼ばれていたが、完全ヒトＩｇＧ４（Ｓ２２８Ｐ）（ＥＵ番号；Ｓ２２８ＰはＫａｂａｔ番号でＳ２４１Ｐである）抗ＰＤ−１抗体であり、ＰＤ−１リガンド（ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２）との相互作用を選択的に防止し、それによって抗腫瘍Ｔ細胞機能のダウンレギュレーションをブロックする（米国特許第８，００８，４４９号;Wang et al., 2014 Cancer Immunol Res. 2(9):846-56）。
【０１８０】
別の実施形態では、抗ＰＤ−１ Ａｂはペンブロリズマブである。ペンブロリズマブ（「Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）」、ランブロリズマブ、およびＭＫ−３４７５とも呼ばれる）は、ヒト化モノクローナルＩｇＧ４抗ＰＤ−１抗体である。ペンブロリズマブは、例えば、米国特許第８，９００，５８７号に記載されており、www（ドット）cancer（ドット）gov（スラッシュ）drugdictionary？cdrid = 695789（最終アクセス日：２０１７年３月２７日）も参照されたい。ペンブロリズマブは、再発または難治性黒色腫の治療薬としてＦＤＡにより承認されている。
【０１８１】
他の実施形態では、抗ＰＤ−１ ＡｂはＭＥＤＩ０６０８である（以前のＡＭＰ−５１４）。ＭＥＤＩ０６０８は、例えば、米国特許第８，６０９，０８９号に記載されており、www（ドット）cancer（ドット）gov（スラッシュ）drugdictionary？cdrid = 756047（最終アクセス日：２０１７年３月２７日）
【０１８２】
開示された方法で使用可能な抗ＰＤ−１ Ａｂには、ヒトＰＤ−１に特異的に結合し、ヒトＰＤ−１への結合についてニボルマブと交差競合する単離されたＡｂも含まれる（例えば、米国特許第８，００８，４４９号；ＷＯ２０１３／１７３２２３）。抗原への結合に関して交差競合するＡｂの能力は、これらのＡｂが抗原の同じエピトープ領域に結合し、他の交差競合Ａｂのその特定のエピトープ領域への結合を立体的に妨げることを示す。これらの交差競合Ａｂは、ＰＤ−１の同じエピトープ領域に結合するため、ニボルマブの機能特性と同様の機能特性を持つと予想される。交差競合Ａｂは、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）分析、ＥＬＩＳＡアッセイ、フローサイトメトリーなどの標準ＰＤ−１結合アッセイでニボルマブと交差競合する能力に基づいて容易に特定できる（例えば、ＷＯ２０１３／１７３２２３を参照）。
【０１８３】
特定の実施形態では、ニボルマブとヒトＰＤ−１への結合、またはニボルマブと同じＰＤ−１のエピトープ領域との結合について交差競合するＡｂはｍＡｂである。ヒト対象への投与のために、これらの交差競合ＡｂはキメラＡｂであってもよく、またはヒト化またはヒトＡｂであってもよい。
【０１８４】
開示された発明の方法で使用可能な抗ＰＤ−１抗体は、以下の（ｉ）Ｆａｂフラグメント、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価フラグメント；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ヒンジ領域のジスルフィドブリッジで連結された２つのＦａｂフラグメントを含む二価フラグメント；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；（ｉｖ）Ａｂの単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖフラグメントのような上記抗体の抗原結合部分も含む。
【０１８５】
例示的な抗体またはポリペプチドコンジュゲート
いくつかの実施形態では、本明細書の抗体は、標識および／または細胞傷害剤に結合している。本明細書で使用される場合、標識は、抗体またはポリペプチドの検出を促進するおよび／または抗体またはポリペプチドが結合する分子の検出を促進する部分である。非限定的な例示的標識には、放射性同位体、蛍光基、酵素基、化学発光基、ビオチン、エピトープタグ、金属結合タグなどが含まれるが、これらに限定されない。当業者は、意図する用途に従って適切なラベルを選択することができる。
【０１８６】
本明細書で使用される場合、細胞傷害剤は、１つ以上の細胞の増殖能力を低下させる部分である。例えば、細胞がアポトーシスを起こすか、そうでなければ細胞が死ぬ、細胞が細胞周期を進行できない、および/または分裂しない、細胞が分化するなどの理由で、細胞が増殖できなくなると、細胞の増殖能力が低下する。非限定的な例示的な細胞傷害剤には、放射性同位元素、毒素、および化学療法剤が含まれるが、これらに限定されない。当業者は、意図する用途に応じて適切な細胞毒性を選択することができる。
【０１８７】
いくつかの実施形態では、標識および／または細胞傷害剤は、インビトロで化学的方法を使用して抗体に結合される。結合の非限定的な例示的化学的方法は、当技術分野で公知であり、例えば、Thermo Scientific Life Science Research Produces（旧Pierce; Rockford、IL）、プロザイム（カリフォルニア州ヘイワード）、ＳＡＣＲＩ抗体サービス（カルガリー、カナダ）、ＡｂＤセロテック（ローリー、ノースカロライナ州）などから市販されているサービス、方法および/または試薬を含む。いくつかの実施形態では、標識および／または細胞毒性剤がポリペプチドである場合、標識および／または細胞毒性剤を少なくとも１つの抗体またはポリペプチド鎖を有する同じ発現ベクターから発現させて、抗体またはポリペプチド分子に融合した標識および／または細胞毒性剤を含むポリペプチドを産生できる。
【０１８８】
例示的なリーダー配列
一部の分泌タンパク質が大量に発現および分泌するためには、異種タンパク質由来のリーダー配列が望ましい場合がある。いくつかの実施形態では、リーダー配列は、それぞれ軽鎖および重鎖リーダー配列である配列番号３および４から選択される。いくつかの実施形態では、異種リーダー配列を使用することは、分泌プロセス中にＥＲにおいてリーダー配列が除去されるため、得られる成熟ポリペプチドが変化しないままであり得るという点で有利であり得る。一部のタンパク質を発現および分泌するには、異種リーダー配列の追加が必要になる場合がある。
【０１８９】
特定の例示的なリーダー配列の配列は、例えば、シンガポール国立大学生化学部が管理するオンラインのリーダー配列データベースに記載されている。
Choo et al., BMC Bioinformatics, 6: 249 (2005);およびＰＣＴ公開番号ＷＯ２００６／０８１４３０を参照されたい。
【０１９０】
治療組成物および方法
癌の治療方法
いくつかの実施形態では、有効量の抗ＧＩＴＲ抗体および（ｉ）有効量の抗ＣＳＦ１Ｒ抗体または（ｉｉ）有効量の抗ＰＤ−１抗体のいずれかを投与することを含む、癌を治療する方法が提供される。いくつかの実施形態では、有効量の抗ＧＩＴＲ抗体ならびに有効量の各抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および抗ＰＤ−１抗体を投与することを含む、癌を治療する方法が提供される。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体ならびに抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および／または抗ＰＤ−１抗体は同時に投与される。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体ならびに抗ＣＳＦ１Ｒ抗体および／または抗ＰＤ−１抗体は連続的に投与される。本明細書の治療実施形態の各方法では、本開示の前のセクションで説明した抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体、および／または抗ＰＤ−１抗体のいずれかを投与することができる。
【０１９１】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体または抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の投与の前に、少なくとも１回、少なくとも２回、少なくとも３回の投与、少なくとも５回の投与、または少なくとも１０回の抗ＧＩＴＲ抗体が投与される。いくつかの実施形態では、少なくとも１回、少なくとも２回、少なくとも３回の投与、少なくとも５回の投与、または少なくとも１０回の抗ＰＤ−１抗体または抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の投与は、抗ＧＩＴＲ抗体の投与前に投与される。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体の最後の用量は、抗ＰＤ−１抗体または抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の初回投与前に、少なくとも１、２、３、５、または１０日、または１、２、３、５、１２、または２４週間投与される。他のいくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体または抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の最後の用量は、抗ＧＩＴＲ抗体の最初の投与前に、少なくとも１、２、３、５日もしくは１０日、または１、２、３、５、１２、もしくは２４週間投与されまる。いくつかの実施形態では、対象は、抗ＰＤ−１抗体療法または抗ＣＳＦ１Ｒ抗体療法を受けたか、または受けており、治療計画に抗ＧＩＴＲ抗体が追加される。他の実施形態において、対象は、抗ＧＩＴＲ抗体療法を受けたか、または受けているところであり、抗ＰＤ−１抗体療法または抗ＣＳＦ１Ｒ抗体療法が治療計画に追加される。
【０１９２】
抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体、および抗ＰＤ−１抗体のそれぞれが投与されるいくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体の投与の前に、少なくとも１回、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも５回、または少なくとも１０回の抗ＣＳＦ１Ｒ抗体を投与する。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の投与の前に、少なくとも１回、少なくとも２回、少なくとも３回の投与、少なくとも５回の投与、または少なくとも１０回の抗ＰＤ−１抗体が投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の最後の用量は、抗ＰＤ−１抗体の最初の投与前に、少なくとも１、２、３、５、もしくは１０日、または１、２、３、５、１２、もしくは２４週間投与される。いくつかの他の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体の最終用量は、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の最初の投与の前に、少なくとも１、２、３、５、もしくは１０日、または１、２、３、５、１２、もしくは２４週間投与される。いくつかの実施形態では、対象は、抗ＰＤ−１抗体療法を受けているか、受けているところであり、抗ＧＩＴＲ抗体療法および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体が治療計画に追加される。他の実施形態において、対象は、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体療法を受けており、または受けているところであり、抗ＰＤ−１抗体療法および抗ＧＩＴＲ抗体療法が治療計画に追加される。
【０１９３】
いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体と、抗ＰＤ−１抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体のいずれかまたは両方の組み合わせが、癌治療に使用される。いくつかの実施形態では、癌は、扁平上皮癌、小細胞肺癌、下垂体癌、食道癌、星細胞腫、軟部肉腫、非小細胞肺癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝癌、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、腎癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、脳癌、子宮内膜癌、精巣癌、胆管癌、胆嚢癌、胃癌、黒色腫、およびさまざまな種類の頭頸部癌から選択される。いくつかの実施形態では、肺癌は非小細胞肺癌または肺扁平上皮癌である。いくつかの実施形態では、白血病は、急性骨髄性白血病または慢性リンパ性白血病である。いくつかの実施形態では、乳癌は乳房浸潤癌である。いくつかの実施形態では、卵巣癌は卵巣漿液性嚢胞腺癌である。いくつかの実施形態では、腎癌は腎臓の腎明細胞癌である。いくつかの実施形態では、結腸癌は結腸腺癌である。いくつかの実施形態では、膀胱癌は膀胱尿路上皮癌である。いくつかの実施形態では、癌は膀胱癌、子宮頸癌（扁平上皮子宮頸癌など）、頭頸部扁平上皮癌、直腸腺癌、非小細胞肺癌、子宮内膜癌、前立腺腺癌、結腸癌、卵巣癌（漿液性上皮性卵巣癌など）、および黒色腫から選択される。
【０１９４】
いくつかの実施形態では、対象は以前にＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤による治療を受けている。いくつかのそのような場合、対象はＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤による治療に抵抗性があった。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、対象は、抗ＰＤ−１抗体の不十分なレスポンダー（応答者）である（すなわち、抗ＰＤ−１抗体による治療に対して難治性であった）。抗ＰＤ−１抗体が不十分なレスポンダーである対象は、以前に抗ＰＤ−１抗体に応答した可能性があるが、抗ＰＤ−１抗体に対する反応性が低下したか、対象が抗ＰＤ−１抗体に反応しなかった可能性がある。抗ＰＤ−１抗体に対する不適切な反応は、抗ＰＤ−１抗体の標準用量後に改善すると予想される症状の側面が改善しないことを意味し、および／または改善は、標準用量を超えて投与された場合にのみ発生する。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体の不十分なレスポンダーは、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも６週間、または少なくとも１２週間、標準用量を投与した後に、抗ＰＤ−１抗体に対する不十分な応答を経験したことがある、または経験している。「標準」用量は医療専門家によって決定され、対象の年齢、体重、健康履歴、疾患の重症度、投与頻度などに依存する場合がある。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体の不十分なレスポンダーは、抗ＰＤ−１抗体および／または抗ＰＤ−Ｌ１抗体に対する不十分な応答を経験したことがある、または経験している。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体の不十分なレスポンダーは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体などの異なるタイプのＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤に対する不十分な応答を経験したことがある、または経験している。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体の不十分なレスポンダーは、ニボルマブおよびペンブロリズマブから選択される抗ＰＤ−１抗体に対する不十分な応答を経験したことがある、または経験している。
【０１９５】
いくつかの実施形態では、有効量の抗ＧＩＴＲ抗体および有効量の抗ＣＳＦ１Ｒ抗体を投与することを含む、膵臓癌を治療する方法が提供される。いくつかの実施形態では、有効量の抗ＰＤ−１抗体も投与される。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は同時に投与される。一部の実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は連続して投与される。これらの治療方法のいずれにおいても、本開示の前述のセクションに記載されている抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体のいずれか、および任意で抗ＰＤ−１抗体を投与することができる。
【０１９６】
いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体（および場合により抗ＰＤ−１抗体）または抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＰＤ−１抗体は、１つ以上の化学療法剤とともに投与され得る。いくつかのそのような実施形態では、化学療法剤は、ゲムシタビン、ナブ−パクリタキセル、ロイコボリン（フォリン酸）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、イリノテカン、およびオキサリプラチンから選択される。いくつかのそのような実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体（および場合により抗ＰＤ−１抗体）は、ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸとともに投与され、これは、ロイコボリン、５−ＦＵ、イリノテカン（リポソームイリノテカン注射など）、およびオキサリプラチンの組み合わせを含む化学療法レジメンである。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ（および任意で抗ＰＤ−１抗体）または抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＰＤ−１抗体は、ゲムシタビンベースの化学療法とともに投与され得る。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ（および任意に抗ＰＤ−１抗体）または抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＰＤ−１抗体は、（ａ）ゲムシタビン、（ｂ）ゲムシタビンおよびナブ−パクリタキセル、並びに（ｃ）フォルフィリノックス（ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸ）から選択される少なくとも１つの薬剤とともに投与することができる。いくつかのそのような実施形態では、少なくとも１つの薬剤はゲムシタビンである。
【０１９７】
膵臓癌を治療するためのいくつかの実施形態では、例えば、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体（および任意で抗ＰＤ−１抗体）は、１つまたは複数の化学療法剤とともに投与され得る。膵臓癌を治療するためのいくつかのそのような実施形態では、化学療法剤は、ゲムシタビン、ナブ−パクリタキセル、ロイコボリン、５−ＦＵ）、イリノテカン、およびオキサリプラチンから選択される。いくつかのそのような実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体（および任意に抗ＰＤ−１抗体）は、フォルフィリノックスとともに投与され、これは、ロイコボリン、５−ＦＵ、イリノテカン（リポソームイリノテカン注射など）、およびオキサリプラチンの組み合わせを含む化学療法レジメンである。膵臓癌を治療するためのいくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体（および任意に抗ＰＤ−１抗体）をゲムシタビンベースの化学療法とともに投与することができる。膵臓癌を治療するためのいくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体（および任意に抗ＰＤ１抗体）を、（ａ）ゲムシタビン、（ｂ）ゲムシタビンおよびナブ−パクリタキセル、並びに（ｃ）フォルフィリノックスから選択される少なくとも１つの薬剤とともに投与することができる。膵臓癌を治療するためのいくつかのそのような実施形態では、少なくとも１つの薬剤はゲムシタビンである。
【０１９８】
投与経路、担体、および投与量
様々な実施形態では、ポリペプチドまたは抗体は、経口、動脈内、非経口、鼻腔内、静脈内、筋肉内、心臓内、脳室内、気管内、頬側、直腸、腹腔内、皮内、局所、経皮、および髄腔内、あるいは、移植または吸入によるものを含むがこれらに限定されない様々な経路によってインビボで投与され得る。主題の組成物は、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、溶液、坐剤、浣腸、注射、吸入剤、エアロゾルを含むがこれらに限定されない、固体、半固体、液体、または気体の形態の製剤に製剤化することができる。
【０１９９】
様々な実施形態において、抗体および他のポリペプチドを含む組成物は、多種多様な薬学的に許容される担体を含む製剤で提供される（例えば、Gennaro, Remington: The Science and Practice of Pharmacy with Facts and Comparisons: Drugfacts Plus, 20th ed. (2003); Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th ed., Lippencott Williams and Wilkins (2004); Kibbe et al., Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3rd ed., Pharmaceutical Press (2000) を参照されたい。）。ビヒクル、アジュバント、および希釈剤を含む、さまざまな薬学的に許容される担体が利用可能である。さらに、ｐＨ調整剤および緩衝剤、張度調整剤、安定剤、湿潤剤などの様々な薬学的に許容される補助物質も利用可能である。非限定的な例示的担体には、生理食塩水、緩衝生理食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノール、およびそれらの組み合わせが含まれる。
【０２００】
さまざまな実施形態において、抗体および他のポリペプチドを含む組成物は、植物または他の油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸のエステル、またはプロピレングリコールなどの水性または非水性溶媒に溶解、懸濁、または乳化することによる皮下投与を含む、注射用に処方されてもよく、必要に応じて、可溶化剤、等張剤、懸濁剤、乳化剤、安定剤、防腐剤などの従来の添加剤を使用する。様々な実施形態では、組成物は、例えば、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などの加圧許容噴射剤を使用して、吸入用に製剤化することができる。組成物は、様々な実施形態において、生分解性または非生分解性ポリマーなどを用いて、徐放性マイクロカプセルに製剤化することもできる。非限定的な例示的な生分解性製剤には、ポリ乳酸−グリコール酸ポリマーが含まれる。非限定的な例示的な非生分解性製剤には、ポリグリセリン脂肪酸エステルが含まれる。そのような製剤を作製する特定の方法は、例えば、ＥＰ１１２５５８４Ａ１に記載されている。
【０２０１】
それぞれが抗体または抗体の組み合わせの１つまたは複数の用量を含む１つまたは複数の容器を含む医薬パックおよびキットも提供される。いくつかの実施形態では、単位投与量が提供され、ここで、単位投与量は、抗体または抗体の組み合わせを含む組成物の所定量を含み、１つまたは複数の追加の薬剤を含む。いくつかの実施形態では、そのような単位投与量は、例えば注射用の使い捨て充填済みシリンジで、またはキットとして供給される。様々な実施形態では、単位用量に含まれる組成物は、生理食塩水、ショ糖などを含んでもよく、リン酸などの緩衝液、および／または安定かつ有効なｐＨ範囲内で製剤化される。あるいは、いくつかの実施形態では、組成物は、適切な液体、例えば滅菌水を添加すると再構成され得る凍結乾燥粉末として提供され得る。いくつかの実施形態では、組成物は、スクロースおよびアルギニンを含むがこれらに限定されないタンパク質凝集を阻害する１つまたは複数の物質を含む。いくつかの実施形態では、本発明の組成物はヘパリンおよび／またはプロテオグリカンを含む。
【０２０２】
医薬組成物は、特定の適応症の治療に有効な量で投与される。治療的有効量は、典型的には、治療される対象の体重、彼または彼女の身体的または健康状態、治療される状態の広さ、または治療される対象の年齢に依存する。
【０２０３】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０ｍｇ／ｋｇなどの０．５〜１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、１、２、３、または４ｍｇ／ｋｇなどの１〜４ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、毎週、２週間ごと、３週間ごと、または４週間ごとに投与され得る。例えば、抗ＰＤ−１抗体がニボルマブを含むいくつかの実施形態では、ニボルマブは３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され得る。いくつかのこのような実施形態では、ニボルマブは、毎週、２週間ごと、３週間ごと、または４週間ごとに、３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され得る。いくつかのこのような実施形態では、ニボルマブは２週間ごとに３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され得る。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、０．３、０．５、１、２、３、４、５、または１０ｍｇ／ｋｇなど、０．３〜１０ｍｇ／ｋｇ、０．５〜１０ｍｇ／ｋｇ、０．５〜５ｍｇ／ｋｇ、または１〜５ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、毎週、２週間ごと、３週間ごと、または４週間ごとに投与され得る。いくつかの実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、２週間ごとに１、２、３、または４ｍｇ／ｋｇで投与され得る。
【０２０５】
特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体または抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の用量は、医薬組成物中の固定用量である。他の実施形態では、本発明の方法は、均一用量（患者の体重に関係なく患者に与えられる用量）で使用することができる。例えば、抗ＰＤ−１抗体ニボルマブの定用量は２４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブは２週間ごとに２４０ｍｇで投与され得る。例えば、抗ＰＤ−１抗体ペンブロリズマブの均一投与量は２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、ペンブロリズマブは、３週間ごとに２００ｍｇで投与され得る。
【０２０６】
単剤療法の承認された治療用量よりも有意に低い抗ＣＳＦ１Ｒ抗体または抗ＰＤ−１抗体の投与量は、治療量以下とみなすことができる。特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体が、０．１、０．３、０．５、１、２、３、４、または５ｍｇ／ｋｇの用量で、２週間に１回、３週間に１回、または４週間に１回投与される。特定の実施形態では、０．１、０．３、０．５、１、２、３、４、５、または１０ｍｇ／ｋｇの用量で、２週間に１回、３週間に１回、または４週間に１回、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体を投与した。上記の用量の一部またはすべては、同じ抗体を用いた単剤療法で承認された治療用量と比較した場合、治療量以下の用量とみなされる。
【０２０７】
特定の実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＰＤ−１抗体および／または抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、単一の組成物として処方される。他の実施形態では、それらは異なる組成物として別々に処方される。一部の実施形態では、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体または抗ＧＩＴＲ抗体または抗ＰＤ−１抗体の用量は固定用量である。特定の実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体または抗ＰＤ−１抗体の用量は、体重に関係なく患者に投与される均一用量である。
【０２０８】
他の治療法との組み合わせ
抗体は単独で、または他の治療モードで投与される。それらは、他の治療モード、例えば手術、化学療法、放射線療法、または別の治療用抗体などの生物製剤の投与の前、実質的に同時に、または後に提供されてもよい。いくつかの実施形態では、癌は、外科手術、化学療法、および放射線療法、またはそれらの組み合わせから選択される療法後に再発または進行している。
【０２０９】
免疫刺激剤との組み合わせ
いくつかの実施形態では、本明細書の組み合わせ治療は、少なくとも１つの免疫刺激剤とさらに組み合わせられ得る。本明細書で使用される「免疫刺激剤」という用語は、共刺激分子を含む免疫刺激分子のアゴニストとして作用することにより、または、共抑制分子を含む免疫抑制分子のアンタゴニストとして作用することにより、免疫系を刺激する分子を指す。免疫刺激剤は、生物学的化合物または小分子化合物であり得る。生物学的免疫刺激剤の例には、例えば受容体−リガンド結合、ワクチンおよびサイトカインを遮断する、抗体、抗体断片、受容体またはリガンドポリペプチドの断片が含まれるが、これらに限定されない。
【０２１０】
いくつかの実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、共刺激分子を含む免疫刺激分子のアゴニストを含み、一方、いくつかの実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、共阻害分子を含む免疫阻害分子のアンタゴニストを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、Ｔ細胞などの免疫細胞上に見出される共刺激分子を含む免疫刺激分子のアゴニストを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、Ｔ細胞などの免疫細胞上に見出される共阻害分子を含む免疫阻害分子のアンタゴニストを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、ＮＫ細胞などの自然免疫に関与する細胞に見られる共刺激分子を含む免疫刺激分子のアゴニストを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、ＮＫ細胞などの自然免疫に関与する細胞上に見出される共阻害分子を含む免疫阻害分子のアンタゴニストを含む。いくつかの実施形態では、この組み合わせは、治療対象の抗原特異的Ｔ細胞応答を増強し、および／または対象の自然免疫応答を増強する。
【０２１１】
特定の実施形態では、免疫刺激剤は、免疫グロブリンスーパーファミリー（ＩｇＳＦ）のメンバーである刺激分子または阻害分子を標的とする。例えば、免疫刺激剤は、ポリペプチドのＢ７ファミリーの別のメンバーを標的とする（または特異的に結合する）薬剤であり得る。免疫刺激剤は、膜結合リガンドのＴＮＦファミリーのメンバー、またはＴＮＦファミリーのメンバーに特異的に結合する共刺激または共阻害受容体を標的とするまたは結合する薬剤であり得る。本明細書の免疫刺激剤の標的となり得る例示的なＴＮＦおよびＴＮＦＲファミリーメンバーには、ＣＤ４０およびＣＤ４０Ｌ、ＯＸ−４０、ＯＸ−４０Ｌ、ＧＩＴＲＬ、ＣＤ７０、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ３０、ＣＤ３０Ｌ、４−１ＢＢＬ、ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）、ＴＲＡＩＬ／Ａｐｏ２−Ｌ、ＴＲＡＩＬＲ１／ＤＲ４、ＴＲＡＩＬＲ２／ＤＲ５、ＴＲＡＩＬＲ３、ＴＲＡＩＬＲ４、ＯＰＧ、ＲＡＮＫ、ＲＡＮＫＬ、ＴＷＥＡＫＲ／Ｆｎ１４、ＴＷＥＡＫ、ＢＡＦＦＲ、ＥＤＡＲ、ＸＥＤＡＲ、ＴＡＣＩ、ＡＰＲＩＬ、ＢＣＭＡ、ＬＴβＲ、ＬＩＧＨＴ、ＤｃＲ３、ＨＶＥＭ、ＶＥＧＩ／ＴＬ１Ａ、ＴＲＡＭＰ／ＤＲ３、ＥＤＡＲ、ＥＤＡ１、ＸＥＤＡＲ、ＥＤＡ２、ＴＮＦＲ１、リンホトキシンα／ＴＮＦβ、ＴＮＦＲ２、ＴＮＦα、ＬＴβＲ、リンホトキシンα１β２、ＦＡＳ、ＦＡＳＬ、ＲＥＬＴ、ＤＲ６、ＴＲＯＹ、およびＮＧＦＲが含まれる。
【０２１２】
いくつかの実施形態では、免疫刺激剤は、（ｉ）Ｔ細胞活性化を阻害するタンパク質のアンタゴニスト（例えば、免疫チェックポイント阻害剤）例えば、ＣＴＬＡ４（例えば、抗ＣＴＬＡ４抗体、例えば、ＹＥＲＶＯＹ（イピリムマブ）またはトレメリムマブ）、ＬＡＧ−３（例えば、抗ＬＡＧ−３抗体、例えばＢＭＳ−９８６０１６（ＷＯ１０／１９５７０、ＷＯ１４／０８２１８）、またはＩＭＰ−７３１またはＩＭＰ−３２１（ＷＯ０８／１３２６０１、ＷＯ０９／４４２７３）、ＴＩＭ３、ガレクチン９、ＣＥＡＣＡＭ−１、ＢＴＬＡ、ＣＤ６９、ガレクチン−１、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１１３、ＧＰＲ５６、ＶＩＳＴＡ、Ｂ７−Ｈ３（例えば、ＭＧＡ２７１（ＷＯ１１／１０９４００））、Ｂ７−Ｈ４、２Ｂ４、ＣＤ４８、ＧＡＲＰ、ＰＤ１Ｈ、ＬＡＩＲ１、ＴＩＭ−１、ＴＩＭ−４、およびＩＬＴ４などを含んでいてもよく、および／または（ｉｉ）Ｔ細胞活性化を刺激するタンパク質のアゴニスト、例えば、Ｂ７−２、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）（例えば、ウレルマブやＰＦ−０５０８２５６６（ＷＯ１２／３２４３３）などのＣＤ１３７アゴニスト抗体）、４−１ＢＢＬ、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳ−Ｌ、ＯＸ４０（例えば、ＯＸ４０アゴニスト抗体、例えばＭＥＤＩ−６３８３、ＭＥＤＩ−６４６９またはＭＯＸＲ０９１６（ＲＧ７８８８、ＷＯ０６／０２９８７９））、ＯＸ４０Ｌ、ＧＩＴＲＬ、ＣＤ７０、ＣＤ２７（例えば、バルリルマブ（ＣＤＸ−１１２７）などのアゴニストＣＤ２７抗体）、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＤＲ３およびＣＤ２８Ｈなどを含んでいてもよい。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞活性化を刺激するタンパク質のアゴニストは抗体である。
【０２１３】
いくつかの実施形態では、免疫刺激剤は、Ｔ細胞活性化を阻害する薬剤、またはＴ細胞活性化を阻害するサイトカインのアンタゴニスト（例えば、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、ＶＥＧＦ、および他の免疫抑制性サイトカイン）を含み得、いくつかの実施形態では、免疫刺激剤は、Ｔ細胞の活性化を刺激する、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１およびＩＦＮα（例えば、サイトカイン自体）などのサイトカインのアゴニストである薬剤を含んでもよい。ＴＧＦ−β阻害剤には、例えばＧＣ１００８、ＬＹ２１５７２９９、ＴＥＷ７１９７およびＩＭＣ−ＴＲ１が含まれる。いくつかの実施形態では、免疫刺激剤は、ＣＸＣＲ２（例えば、ＭＫ−７１２３）、ＣＸＣＲ４（例えば、ＡＭＤ３１００）、ＣＣＲ２、またはＣＣＲ４（モガムリズマブ）などのケモカインのアンタゴニストを含み得る。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト、例えば、ＴＬＲ２／４アゴニスト（例えば、バチルスカルメットゲリン）、ＴＬＲ７アゴニスト（例えば、ヒルトンまたはイミキモド）、ＴＬＲ７／８アゴニスト（例えば、レシキモド）またはＴＬＲ９アゴニスト（例えば、ＣｐＧ７９０９）を含む。
【０２１４】
いくつかの実施形態では、免疫刺激剤は、ＮＫ細胞上の阻害性受容体のアンタゴニストまたはＮＫ細胞上の活性化受容体のアゴニストを含み得る。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、ＫＩＲのアンタゴニスト、例えば、抗体リリルマブである。
【０２１５】
免疫刺激剤には、腫瘍抗原提示を増強する薬剤、例えば、樹状細胞ワクチン、ＧＭ−ＣＳＦ分泌細胞ワクチン、ＣｐＧオリゴヌクレオチド、およびイミキモド、または腫瘍細胞の免疫原性を増強する療法（例えば、アントラサイクリン）も含まれ得る。
【０２１６】
免疫刺激剤には、メソセリン標的ワクチンなどの特定のワクチン、またはＣＲＳ−２０７などの弱毒化リステリア癌ワクチンも含まれる場合がある。
【０２１７】
免疫刺激剤は、ＣＤ２５に特異的に結合する薬剤など、Ｔｒｅｇ細胞を枯渇または遮断する薬剤も含み得る。
【０２１８】
免疫刺激剤は、インドールアミンジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、ジオキシゲナーゼ、アルギナーゼ、または一酸化窒素合成酵素などの代謝酵素を阻害する薬剤も含み得る。ＩＤＯアンタゴニストには、例えば、ＩＮＣＢ−０２４３６０（ＷＯ２００６／１２２１５０、ＷＯ０７／７５５９８、ＷＯ０８／３６６５３、ＷＯ０８／３６６４２）、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９（ＷＯ０９／７３６２０、ＷＯ０９／１１５６６５２、ＷＯ１１／５６６５２、ＷＯ１２／１４２２３７）およびＦ００１２８７が含まれる。
【０２１９】
免疫刺激剤は、アデノシンの形成を阻害する薬剤またはアデノシンＡ２Ａ受容体を阻害する薬剤も含み得る。
【０２２０】
免疫刺激剤は、Ｔ細胞のアネルギーまたは消耗を逆転／防止する薬剤、および腫瘍部位での自然免疫活性化および／または炎症を引き起こす薬剤も含み得る。
【０２２１】
治療の組み合わせは、免疫経路の複数の要素をターゲットとするコンビナトリアルアプローチで、例えば、以下：腫瘍抗原の提示を促進する少なくとも１つの薬剤（例えば、樹状細胞ワクチン、ＧＭ−ＣＳＦ分泌細胞ワクチン、ＣｐＧオリゴヌクレオチド、イミキモド）；例えば、ＣＴＬＡ４経路を阻害し、および／またはＴｒｅｇまたは他の免疫抑制細胞を枯渇または遮断することにより、負の免疫調節を阻害する少なくとも１つの薬剤；例えば、ＣＤ−１３７および／またはＯＸ−４０経路を刺激し、および／またはＴ細胞エフェクター機能を刺激するアゴニストを用いて、正の免疫調節を刺激する療法；抗腫瘍Ｔ細胞の頻度を全身的に増加させる少なくとも１つの薬剤；例えば、ＣＤ２５のアンタゴニスト（例えば、ダクリズマブ）を使用して、またはエクスビボでの抗ＣＤ２５ビーズの枯渇により、腫瘍中のＴｒｅｇなどのＴｒｅｇを枯渇または阻害する療法；腫瘍内のサプレッサー骨髄細胞の機能に影響を与える少なくとも１つの薬剤；腫瘍細胞（アントラサイクリンなど）の免疫原性を高める治療法；遺伝的に改変された細胞、例えばキメラ抗原受容体によって改変された細胞（ＣＡＲ−Ｔ療法）を含む養子Ｔ細胞またはＮＫ細胞移入；インドールアミンジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、ジオキシゲナーゼ、アルギナーゼまたは一酸化窒素合成酵素などの代謝酵素を阻害する少なくとも１つの薬剤；Ｔ細胞アネルギーまたは消耗を逆転／予防する少なくとも１つの薬剤；腫瘍部位で自然免疫活性化および/または炎症を引き起こす治療法；免疫刺激性サイトカインの投与または免疫抑制性サイトカインの遮断；の１つ以上をさらに組み合わせることもできる。
【０２２２】
例えば、少なくとも１つの免疫刺激剤は、正の共刺激受容体を連結する１つ以上のアゴニスト剤；腫瘍微小環境内の明確な免疫抑制経路を克服する拮抗薬など、阻害性受容体を介したシグナル伝達を減衰させる１つまたは複数の拮抗薬（遮断薬）；Ｔ細胞などの抗腫瘍免疫細胞の頻度を全身的に増加させ、（例えば、ＣＤ２５を阻害することにより）Ｔｒｅｇを枯渇または阻害する１つまたは複数の薬剤；ＩＤＯなどの代謝酵素を阻害する１つまたは複数の薬剤；Ｔ細胞アネルギーまたは消耗を逆転／防止する１つまたは複数の薬剤；並びに、腫瘍部位で自然免疫活性化および／または炎症を引き起こす１つまたは複数の薬剤；を含み得る。
【０２２３】
一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、ＰＤ−１抗体以外のＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤を含む。例えば、いくつかの実施形態では、免疫刺激剤はＰＤ−Ｌ１結合抗体を含む。抗ＧＩＴＲ抗体と抗ＣＳＦ１Ｒ抗体との併用治療に関するいくつかの実施形態では、免疫刺激剤は抗ＰＤ−１抗体を含まない。抗ＧＩＴＲ抗体と抗ＣＳＦ１Ｒ抗体との併用治療に関するいくつかの実施形態では、免疫刺激剤はＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤を含まない。抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体による併用治療に関連するいくつかの実施形態では、免疫刺激剤はＣＳＦ１Ｒに結合する分子を含まない。抗ＧＩＴＲ抗体および抗ＰＤ−１抗体による併用治療に関連するいくつかの実施形態では、免疫刺激剤は、ＣＳＦ１Ｒに結合する分子を含まない。抗ＧＩＴＲ抗体と抗ＰＤ−１抗体による併用治療に関するいくつかの実施形態では、免疫刺激剤はＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤を含まない。本明細書のいくつかの実施形態では、免疫刺激剤は、ＧＩＴＲに結合する分子を含まない。
【０２２４】
その他の併用療法
本明細書で検討されるように、癌の治療のために、化学療法剤、成長阻害剤、抗血管新生剤および／または抗新生物組成物などの１つまたは複数の追加の抗癌剤と組み合わせて抗体を投与することができる。本発明の抗体と組み合わせて使用できる化学療法剤、成長阻害剤、抗血管新生剤、抗癌剤、および抗新生物組成物の非限定的な例は以下の通りである。
【０２２５】
「化学療法剤」は、癌の治療に有用な化合物である。化学療法剤の例には、チオテパおよびシトキサン（Cytoxan）（登録商標）シクロホスファミドなどのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファンなどのアルキルスルホン酸塩；ベンゾドパ、カルボコン、メトレドパ、ウレドパなどのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミドおよびトリメチルオロメラミンを含むエチレンイミンおよびメチルアメラミン；アセトゲニン（特にブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシンおよびビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特にクリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン（eleutherobin）;パンクラチスタチン; サルコジクチン; スポンギスタチン;クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミン、メルファラン、ノベムビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード;カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムヌスチンなどのニトロソ尿素（nitrosurea）;エジイン抗生物質などの抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンガンマ１ＩおよびカリケアマイシンオメガＩ１（例えば、Agnew, Chem Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994) を参照されたい。）;ダイネミシンＡを含むダイネミシン；クロドロネートなどのビスホスホネート;エスペラマイシン;並びに、ネオカルチノスタチン発色団および関連する発色タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オートラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、アドリアマイシン（登録商標）ドキソルビシン（モルホリノドキソルビシン、シアノモルホリノドキソルビシン、２−ピロリノドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポチロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン；メトトレキサートや５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝拮抗剤；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロク��ウリジンなどのピリミジン類似体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎；フロリン酸などの葉酸補充剤；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート（edatraxate）；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルホルニチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシンおよびアンサミトシンなどのメイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール；ニトラレリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（JHS Natural Products, Eugene, OR）;ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’、２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特にＴ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡおよびアンギジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトララクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、タキソール（登録商標）パクリタキセル（Bristol- Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.）、アブラキサン（登録商標）クレモホールフリー、パクリタキセルのアルブミン工学ナノ粒子製剤（American  Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Illinois）、およびタキソテール（登録商標）ドキセタキセル（Rhone- Poulenc Rorer, Antony, France）、クロランブシル；ジェムザール（登録商標）ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチンなどの白金類似体；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ナベルビン（登録商標）ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；イリノテカン（カンプトサール、ＣＰＴ−１１）（５−ＦＵとロイコボリンによるイリノテカンの治療レジメンを含む）；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルヒロニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；カペシタビン；コンブレタスタチン；ロイコボリン（ＬＶ）；オキサリプラチン治療レジメン（ＦＯＬＦＯＸ）を含むオキサリプラチン；ＰＫＣ−α、Ｒａｆ、Ｈ−Ｒａｓ、ＥＧＦＲの阻害剤（例、エルロチニブ（タルセバ（登録商標））；並びに、細胞増殖を減少させるＶＥＧＦ−Ａおよび上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体、が含まれるが、これらに限定されない。
【０２２６】
さらなる非限定的な例示的な化学療法剤には、抗エストロゲンおよび選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）などの癌に対するホルモン作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、タモキシフェン、（ノルバデックス（登録商標）タモキシフェンを含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびフェアストン（登録商標）トレミフェン、副腎でのエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、Ｍｅｇａｓｅ（登録商標）メゲストロールアセテート、アロマシン（登録商標）エキセメスタン、フォルメスタニー、ファドロゾール、Ｒｉｖｉｓｏｒ（登録商標）ボロゾール、Ｆｅｍａｒａ（登録商標）レトロゾール、アリミデックス（登録商標）アナストロゾール、およびフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリンなどの抗アンドロゲン；トロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ）；アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、異常な細胞増殖に関与するシグナル伝達経路の遺伝子の発現を阻害するもの、例えば、ＰＫＣ−α、ラルフ、およびＨ−Ｒａｓ；ＶＥＧＦ発現阻害剤（Ａｎｇｉｏｚｙｍｅ（登録商標）リボザイムなど）およびＨＥＲ２発現阻害剤などのリボザイム；Ａｌｌｏｖｅｃｔｉｎ（登録商標）ワクチン、ロイベクチン（登録商標）ワクチン、Ｖａｘｉｄ（登録商標）ワクチンなどの遺伝子治療ワクチンなどのワクチン；プロロイキン（登録商標）ｒＩＬ−２；ルルトテカン（登録商標）トポイソメラーゼ１阻害剤；アバレリックス（登録商標）ｒｍＲＨ；並びに、上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体が含まれる。
【０２２７】
いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＣＳＦ１Ｒおよび／または抗ＰＤ−１抗体は、ゲムシタビンを含むまたはゲムシタビンおよびナブ−パクリタキセルを含む１つまたは複数の化学療法剤が投与されるゲムシタビンベースの化学療法とともにさらに投与されてもよい。いくつかのそのような実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＣＳＦ１Ｒおよび／または抗ＰＤ−１抗体は、ゲムシタビン、ナブ−パクリタキセル、ロイコボリン（フォリン酸）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、イリノテカン、およびオキサリプラチンから選択される少なくとも１つの化学療法剤とともに投与され得る。ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸは、ロイコボリン、５−ＦＵ、イリノテカン（リポソームイリノテカン注射など）、およびオキサリプラチンを含む化学療法レジメンである。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＣＳＦ１Ｒおよび／または抗ＰＤ−１抗体は、ゲムシタビンに基づく化学療法とともにさらに投与され得る。いくつかの実施形態では、抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＣＳＦ１Ｒおよび／または抗ＰＤ−１抗体は、（ａ）ゲムシタビン、（ｂ）ゲムシタビンおよびナブ−パクリタキセル、並びに（ｃ）ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸから選択される少なくとも１つの薬剤とともにさらに投与され得る。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの薬剤はゲムシタビンである。いくつかのこのような実施形態では、治療される癌は膵臓癌である。
【０２２８】
「抗血管新生剤」または「血管新生阻害剤」とは、血管新生、脈管形成、または望ましくない血管透過性を直接的または間接的に阻害する、低分子量物質、ポリヌクレオチド（例えば、阻害性ＲＮＡ（ＲＮＡｉまたはｓｉＲＮＡ）を含む。）、ポリペプチド、単離タンパク質、組換えタンパク質、抗体、またはそれらの結合体または融合タンパク質を指す。抗血管新生剤には、血管新生因子またはその受容体の血管新生活性を結合および遮断する薬剤が含まれることを理解されたい。例えば、抗血管新生剤は、血管新生剤に対する抗体または他のアンタゴニストであり、例えば、ＶＥＧＦ−Ａに対する抗体（例えば、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）））またはＶＥＧＦ−Ａ受容体（例えば、ＫＤＲ受容体またはＦｌｔ−１受容体）、Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）（メシル酸イマチニブ）などの抗ＰＤＧＦＲ阻害剤、ＶＥＧＦ受容体シグナル伝達を遮断する小分子（例えば、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２８４、ＳＵ６６６８、Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標）／ＳＵ１１２４８（リンゴ酸スニチニブ）、ＡＭＧ７０６、または、例えば、国際特許出願ＷＯ２００４／１１３３０４に記載のもの）である。抗血管新生剤には、天然の血管新生阻害剤、例えば、アンジオスタチン、エンドスタチンなども含まれる。例えば、Klagsbrun and D’Amore (1991) Annu. Rev. Physiol. 53:217-39; Streit and Detmar (2003) Oncogene 22:3172-3179 （例えば、悪性黒色腫の抗血管新生療法をリストにした表3）; Ferrara & Alitalo (1999) Nature Medicine 5(12):1359-1364; Tonini et al. (2003) Oncogene 22:6549-6556 （例えば、既知の抗血管新生因子をリストした表2）; および、 Sato (2003) Int. J. Clin. Oncol. 8:200-206（例えば、臨床試験で使用される抗血管新生薬をリストした表1）を参照されたい。
【０２２９】
本明細書で使用される「成長阻害剤」は、インビトロまたはインビボのいずれかで細胞（ＶＥＧＦを発現する細胞など）の成長を阻害する化合物または組成物を指す。したがって、成長阻害剤は、Ｓ期の細胞（ＶＥＧＦを発現する細胞など）の割合を有意に減少させるものであり得る。成長阻害剤の例には、Ｇ１停止およびＭ期停止を誘発する薬剤など、細胞周期の進行をブロックする薬剤（Ｓ期以外の場所で）が含まれるが、これらに限定されない。古典的なＭ期遮断薬には、ビンカ（ビンクリスチンおよびビンブラスチン）、タキサン、およびドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシド、およびブレオマイシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤が含まれる。Ｇ１を停止するエージェント、例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシル、ａｒａ−ＣなどのＤＮＡアルキル化剤などのＳ期停止にも波及する。詳細については、Murakamiらによる、Mendelsohn and Israel, eds., The Molecular Basis of Cancer, Chapter 1,タイトル"Cell cycle regulation, oncogenes, and antineoplastic drugs" (W.B. Saunders, Philadelphia, 1995) の例えば１３ページで見ることができる。タキサン（パクリタキセルとドセタキセル）は、両方ともイチイの木に由来する抗癌剤である。ヨーロッパイチイ由来のドセタキセル（タキソテール（登録商標）、ローヌプーランローラー）は、パクリタキセル（タキソール（登録商標）、ブリストル・マイヤーズスクイブ）の半合成類似体である。パクリタキセルとドセタキセルは、チューブリン二量体からの微小管の集合を促進し、解重合を防ぐことで微小管を安定化し、細胞の有糸分裂を阻害する。
【０２３０】
「抗腫瘍性組成物」という用語は、少なくとも１つの活性治療薬を含む癌の治療に有用な組成物を指す。治療薬の例には、これらに限定されないが、例えば、化学療法剤、成長阻害剤、細胞傷害剤、放射線療法で使用される薬剤、抗血管新生剤、癌免疫療法剤、アポトーシス剤、抗チューブリン剤、および抗ＨＥＲ−２抗体、抗ＣＤ２０抗体など、癌を治療する他の薬剤、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）アンタゴニスト（例えば、チロシンキナーゼ阻害剤）、ＨＥＲ１／ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））、血小板由来成長因子阻害剤（例えば、Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）（メシル酸イマチニブ））、ＣＯＸ−２阻害剤（例：セレコキシブ）、インターフェロン、サイトカイン、次の１つ以上の標的、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４、ＰＤＧＦＲ−ベータ、ＢｌｙＳ、ＡＰＲＩＬ、ＢＣＭＡ、またはＶＥＧＦ受容体に結合するアンタゴニスト（例：中和抗体）、および他の生物活性剤および有機化学剤などを含む。それらの組み合わせも本発明に含まれる。
【０２３１】
実施例
以下に説明する例は、本発明の単なる例示を意図したものであり、いかなる意味でも本発明を限定するものとみなされるべきではない。これらの例は、以下の実験がすべてまたは実行された唯一の実験であることを表すものではない。使用された数値（量、温度など）に関して正確性を確保するための努力がなされているが、いくつかの実験誤差と偏差を考慮する必要がある。特に明記しない限り、部は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏であり、圧力は大気圧または大気圧に近い。
【０２３２】
実施例１：抗ＣＳＦ１Ｒ抗体と抗ＧＩＴＲ抗体の併用療法は、いずれかの治療薬単独よりもｉｎ  ｖｉｖｏでの腫瘍成長を抑制する
７週齢の雌Ｃ５７Ｂｌ／６マウス（Charles River Laboratories, Hollister, CA）を１週間順化させた。マウス結腸直腸癌細胞株ＭＣ３８を、マウスの右脇腹の皮下に０．５×１０６細胞／１００μｌ／マウスで移植した。接種の前に、細胞を１０％熱不活化胎児ウシ血清（ＦＢＳ）、２ｍＭ Ｌ−グルタミンを補充したＲＰＭＩ−１６４０培地で３回まで継代培養した。細胞は、５％ＣＯ２の加湿雰囲気で、３７℃で増殖させた。８０〜８５％のコンフルエンスに達したら、細胞を収集し、無血清ＲＰＭＩ−１６４０とマトリゲルの１：１混合物に、１ミリリットルあたり５×１０６細胞で再懸濁した。
【０２３３】
腫瘍成長のために細胞移植後、マウスを週２回モニターした。腫瘍の測定では、ノギスを使用して各腫瘍の長さと幅を測定し、次の式に従って体積を計算した：腫瘍体積（ｍｍ３）＝（幅（ｍｍ）×長さ（ｍｍ）２）／２。接種後７日目に、すべての腫瘍を測定し、外れ値を除外し、マウスを治療グループにランダムに割り当てた。抗ＣＳＦ１Ｒ治療のために、７日目から開始して、毎週３０ｍｇ／ｋｇのマウスＩｇＧ１を含むＨｕＡｂ１に基づくマウス代用抗体をマウスに投与した。抗ＧＩＴＲ治療では、１０日目にマウス代用抗ＧＩＴＲ抗体を２．５ｍｇ／ｋｇで１回投与した。この抗体は、野生型マウスＩｇＧ２ａ Ｆｃ領域に結合された２つのラマｓｄＡｂ由来ＧＩＴＲ結合ドメインをそれぞれ含む２つのポリペプチドを含む四価分子である。（そのような四価分子の代表的な構造については、図３Ａを参照されたい。）対照として、マウスにマウスＩｇＧ２ａ（Bioxcell, Clone C1.18.4）を３０ｍｇ／ｋｇで毎週投与し、７日目から始めた。治療薬は腹腔内（ｉ．ｐ．）注射により投与された。７日目の平均腫瘍体積は約１１０ｍｍ３であった。
【０２３４】
腫瘍の体積が動物の体重の１０％または約２０００ｍｍ３を超えるまで、腫瘍は少なくとも週に２回測定され続けた。腫瘍サイズの変化は、動物にＭＣ３８細胞を接種した日に対する個々の腫瘍をグラフ化することにより示される。図４Ｂに示すように、抗ＣＳＦ１Ｒと抗ＧＩＴＲの組み合わせは、すべてのグループを組み合わせグループと比較する一元配置分散分析で評価した場合、抗ＣＳＦ１Ｒまたは抗ＧＩＴＲ単独と比較してＭＣ３８腫瘍体積を有意に減少させた。さらに、マウスＩｇＧ２ａコントロールと比較して一元配置分散分析で評価した場合、抗ＣＳＦ１Ｒ、抗ＧＩＴＲ、またはその組み合わせによる治療は、腫瘍成長を有意に減少させた（ｐ＜０．０５）（図４Ａ）。
【０２３５】
実施例２：抗ＧＩＴＲ抗体と抗ＰＤ−１抗体との併用療法は、いずれかの治療薬単独よりもｉｎ  ｖｉｖｏでの腫瘍成長を抑制する
７週齢の雌Ｃ５７Ｂｌ／６マウスをCharles River Laboratories（Hollister, CA）から購入し、試験開始前の１週間順化させた。マウス結腸直腸癌細胞株ＭＣ３８を、マウスの右脇腹の皮下に０．５×１０６細胞／１００μｌ／マウスで移植した。接種の前に、細胞を１０％熱不活化胎児ウシ血清（ＦＢＳ）、２ｍＭ Ｌ−グルタミンを補充したＲＰＭＩ−１６４０培地で３回まで継代培養した。細胞は、５％ＣＯ２の加湿雰囲気で、３７℃で成長させた。８０〜８５％のコンフルエンスに達したら、細胞を収集し、無血清ＲＰＭＩ−１６４０とマトリゲルの１：１混合物に、５×１０６細胞／ｍＬで再懸濁した。
【０２３６】
腫瘍成長に関し、細胞移植後に、マウスを週２回モニターした。腫瘍の測定では、ノギスを使用して各腫瘍の長さと幅を測定し、次の式に従って体積を計算した：腫瘍体積（ｍｍ３）＝（幅（ｍｍ）×長さ（ｍｍ）２）／２。接種後９日目に、すべての腫瘍を測定し、外れ値を除外し、マウスを治療グループにランダムに割り当てた。
【０２３７】
抗ＧＩＴＲ治療の場合、２つの異なる抗体：上記の実施例１に記載されている野生型マウスＩｇＧ２ａ Ｆｃ（ＷＴ Ｆｃ）を有する四価抗ＧＩＴＲ抗体、または、ＷＴ Ｆｃ抗体と同じ構造を持つが、Ｆｃエフェクター機能を排除するように設計されたＮ２９７ＧおよびＤ２６５Ａ置換を含むマウスＩｇＧ２ａ Ｆｃ（Ｆｃ Ｓｉｌｅｎｔ）を有する四価抗ＧＩＴＲ抗体がテストされた。９日目にＷＴ ＦｃまたはＦｃサイレント抗ＧＩＴＲ抗体のいずれかをマウスに１回投与した（ＷＴ Ｆｃについては０．５ｍｇ／ｋｇ、Ｆｃサイレントについては２．５ｍｇ／ｋｇ）。抗ＰＤ−１治療については、９日目と１３日目に、Ｆｃエフェクター機能を排除することを目的としたＮ２９７Ａ置換のマウスＩｇＧ２ａ Ｆｃを含む抗体ＲＭＰＩ−１４を５ｍｇ／ｋｇでマウスに投与した。対照として、マウスに、マウスＩｇＧ２ａ（Bioxcell, Clone C1.18.4）を５ｍｇ／ｋｇで９日目および１３日目に毎週投与した。治療薬は腹腔内（ｉ．ｐ．）注射により投与された。９日目の平均腫瘍体積は約１９０ｍｍ３であった。腫瘍の体積が動物の体重の１０％または約２０００ｍｍ３を超えるまで、腫瘍は少なくとも週に２回測定され続けた。腫瘍サイズの変化は、動物にＭＣ３８細胞を接種した日に対する個々の腫瘍体積をグラフ化することにより示される。
【０２３８】
治療動物の３０％（１０匹中３匹）で完全な腫瘍退縮をもたらした抗ＰＤ−１治療単独と比較して、抗ＧＩＴＲ（ＷＴ Ｆｃ）と抗ＰＤ−１の組み合わせにより、治療動物の１００％（１０匹中１０匹のマウス）で腫瘍が完全に退縮した。抗ＧＩＴＲ（Ｆｃ Ｓｉｌｅｎｔ）と抗ＰＤ−１の組み合わせにより、治療動物の６０％（１０匹中６匹）で腫瘍が完全に退縮した。（図５Ａ〜５Ｆ参照。）
【０２３９】
抗ＧＩＴＲ（Ｆｃ Ｓｉｌｅｎｔ）抗体はＦｃエフェクター機能を欠いているが、これらの実験では抗ＰＤ−１と組み合わせて非常に強力であり、これは、四価分子が三量体化して細胞表面ＧＩＴＲを刺激する能力による可能性がある。
【０２４０】
実施例３：マウス膵管腺癌細胞（ＰＤＡＣ）モデルにおける抗ＣＳＦ１Ｒ抗体の有無による抗ＧＩＴＲ抗体とゲムシタビンの併用療法
８週齢の雌Ｃ５７Ｂｌ／６マウスをCharles River Laboratoriesから購入し、研究開始前に最大２週間順化させた。ＫｒａｓＧ１２Ｄ／ｐ５３−／−トランスジェニックマウス由来のマウス膵管腺癌細胞（ＰＤＡＣ）系統を、マウスの膵臓に０．２５×１０６細胞／５０μｌ／マウスで外科的に移植した。接種の前に、１０％の熱で不活化された胎児ウシ血清（ＦＢＳ）を追加したＤＭＥＭ培地で細胞を３回以下で継代培養した。細胞は、５％ＣＯ２の加湿雰囲気で、３７℃で増殖させた。８０〜８５％のコンフルエンスに達したら、細胞を収集し、１ミリリットルあたり５×１０６細胞のマトリゲルを含む冷却したＰＢＳに再懸濁した。
【０２４１】
腫瘍成長のために細胞移植後、マウスを週２回モニターした。膵臓腫瘍の相対的なサイズを評価するために、マウスを少なくとも週に２回軽く触診した。１３日目に、すべての腫瘍が評価され、マウスは治療グループにランダムに割り当てられ、グループあたり１５匹のマウスが使用された：ＩｇＧ対照抗体で処理した対照グループ；抗ＧＩＴＲ抗体（実施例１に記載）およびゲムシタビン（ＧＥＭ）で治療されたグループ；および抗ＧＩＴＲ抗体、ゲムシタビン（ＧＥＭ）、および抗ＣＳＦ１Ｒ抗体（実施例１に記載）で治療されたグループ。抗ＧＩＴＲ抗体は１３日目に２．５ｍｇ／ｋｇで１回投与され；ＧＥＭは１３日目から週２回５０ｍｇ／ｋｇで投与され；抗ＣＳＦ１Ｒ抗体は、１３日目から３０ｍｇ／ｋｇで毎週投与された。腫瘍は、治療開始から２０日間、少なくとも週に２回評価され続けた。
【０２４２】
治療の影響は、選択されたグループの実験中の動物の生存率をグラフ化することで示される。（図６）抗ＧＩＴＲ抗体とＧＥＭによる治療は、ＩｇＧコントロールと比較してＰＤＡＣ腫瘍保有マウスの生存率を有意に増加させた（ｐ＝０．０００４の２６日と比較して３４日）。抗ＧＩＴＲ、抗ＣＳＦ１Ｒ、およびＧＥＭの組み合わせで治療された動物で生存率の最大の向上が観察され、抗ＧＩＴＲ＋ＧＥＭグループと比較してｐ＜０．０５、ＩｇＧ対照グループと比較してｐ＜０．０００１であった。このグループは、動物の生存期間の中央値が４０日間で、抗ＧＩＴＲ／ＧＥＭグループと比較してｐ＝０．０２７５、対照グループと比較してｐ＜０．０００１を示した。Ｐ値は、個々の治療グループを比較するログランク（Log-rank）（マンテルコックス（Mantel-Cox））検定を使用して計算された。
【０２４３】
配列表
以下の表は、ここで説明する特定の配列を提供する。特に明記しない限り、すべてのポリペプチドおよび抗体配列はリーダー配列なしで示される。
配列および説明
【０２４４】
【表２−１】
2020512357.tif 000004
【表２−２】
2020512357.tif 000005
【表２−３】
2020512357.tif 000006
【表２−４】
2020512357.tif 000007
【表２−５】
2020512357.tif 000008
【表２−６】
2020512357.tif 000009
【表２−７】
2020512357.tif 000010
【表２−８】
2020512357.tif 000011
【表２−９】
2020512357.tif 000012
【表２−１０】
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【表２−１１】
2020512357.tif 000014
【表２−１２】
2020512357.tif 000015
【表２−１３】
2020512357.tif 000016
【図１Ａ】
2020512357.tif 000017
【図１Ｂ】
2020512357.tif 000018
【図１Ｃ】
2020512357.tif 000019
【図２Ａ】
2020512357.tif 000020
【図２Ｂ】
2020512357.tif 000021
【図２Ｃ】
2020512357.tif 000022
【図３−１】
2020512357.tif 000023
【図３−２】
2020512357.tif 000024
【図４】
2020512357.tif 000025
【図５−１】
2020512357.tif 000026
【図５−２】
2020512357.tif 000027
【図６】
2020512357.tif 000028
【配列表】
2020512357000001.app
【国際調査報告】
2020512357.tif 000029
2020512357.tif 000030
2020512357.tif 000031
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