(57)【要約】免疫応答を増大させるためのＴｏｌｌ様レセプター−７および−８アゴニストとしての式（Ｊ）のアルキル鎖修飾１Ｈ−イミダゾキノリン化合物またはその塩を開示する。これらの化合物を含む薬学的組成物を作製する方法も提供する。本開示はまた、被験体の、感染症およびがんなどの疾患の処置のための、これらの化合物およびこれらの化合物を含む薬学的組成物の使用方法を記載する。本開示は、両方のレセプターに対してバランスの取れた生物活性を示す強力なＴＬＲ７／８アゴニストであるアルキル鎖修飾１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン誘導体を提供する。
2020531530.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｊ）：
【化２０】
2020531530.tif 000047
［式中、
Ｒ０は、１〜４個のハロゲン原子により必要に応じて置換されたＣ４〜Ｃ２１ヒドロカルビルであり；
Ｘは、−ＮＨ−または−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり；
Ｒ１は、Ｃ３〜Ｃ６アルキル、−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａ、−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂ、または−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃであり；ここで、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルであり；Ｒ１ｃはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり；ｐは１または２であり；
Ｒ２はＮＨＲ２ａであり；ここで、Ｒ２ａは、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、またはメチルであり；
各Ｒ３は、独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ７アルキレン）−ＮＨ２、または−ＣＨ２−フェニレン−ＣＨ２ＮＨ２であり；
ｑは、０、１、２、３、または４であり；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルである］の化合物またはその塩であって、
但し、前記化合物が、２−ブチル−１−（４−（（ヘキサデシルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン；Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）パルミトアミド；またはＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）ペンタ−４−インアミド以外である、化合物またはその塩。
【請求項２】
Ｒ０がＣ４〜Ｃ１４ヒドロカルビルである、請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項３】
Ｘが−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−である、請求項１または２に記載の化合物またはその塩。
【請求項４】
Ｘが−ＮＨ−である、請求項１または２に記載の化合物またはその塩。
【請求項５】
Ｒ０は、分枝Ｃ４〜Ｃ１４アルキル、−（ＣＨ２）ｚ（Ｃ（ＣＨ３）２）ＲＡ、または−（ＣＨ２）ｍＲＡであり；ｍは、０、１、２、または３であり；ｚは、１または２であり；ＲＡは、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキレン、およびハロゲンからなる群より独立して選択される１〜４個の基により必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ８シクロアルキルである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項６】
Ｒ０が分枝Ｃ４〜Ｃ１４アルキルである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項７】
Ｒ０が−（ＣＨ２）ｍＲＡである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項８】
ｍが２である、請求項７に記載の化合物またはその塩。
【請求項９】
Ｒ０が−（ＣＨ２）ｚ（Ｃ（ＣＨ３）２）ＲＡである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１０】
ｚが１である、請求項９に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１】
ＲＡが、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２】
ＲＡが、メチル、メチレン、およびハロゲンからなる群より独立して選択される１〜３個の基により必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３】
ｍが１または２である、請求項５に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４】
ＲＡがＣ３〜Ｃ８シクロアルキルである、請求項１３に記載の化合物またはその塩。
【請求項１５】
ＲＡが、メチルおよびメチレンからなる群より独立して選択される１〜３個の基により必要に応じて置換されたシクロプロピルである、請求項１３または１４に記載の化合物またはその塩。
【請求項１６】
ｍが０であり、ＲＡが、メチルおよびメチレンからなる群より独立して選択される１〜３個の基により必要に応じて置換されたシクロヘキシルである、請求項５に記載の化合物またはその塩。
【請求項１７】
Ｒ０が、
【化２１】
2020531530.tif 000048
からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項１８】
前記化合物が、表１中の化合物番号６３−３３〜６３−３６および６３−３８〜６３−４９からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項１９】
式（Ｋ）：
【化２２】
2020531530.tif 000049
［式中、
ｎは、４〜２１の整数であり；
Ｘは、−ＮＨ−または−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり；
Ｒ１は、Ｃ３〜Ｃ６アルキル、−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａ、−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂ、または−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃであり；ここで、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルであり；Ｒ１ｃはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり；ｐは１または２であり；
Ｒ２はＮＨＲ２ａであり；ここで、Ｒ２ａは、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、またはメチルであり；
各Ｒ３は、独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ７アルキレン）−ＮＨ２、または−ＣＨ２−フェニレン−ＣＨ２ＮＨ２であり；
ｑは、０、１、２、３、または４であり；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルである］の化合物またはその塩であって、
但し、前記化合物が、２−ブチル−１−（４−（（ヘキサデシルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンまたはＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）パルミトアミド以外である、化合物またはその塩。
【請求項２０】
Ｘが−ＮＨ−である、請求項１９に記載の化合物またはその塩。
【請求項２１】
ｎは、４〜１５の整数である、請求項１９または２０に記載の化合物またはその塩。
【請求項２２】
ｎが、４、５、６、または７である、請求項１９〜２１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項２３】
Ｘが−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−である、請求項１９に記載の化合物またはその塩。
【請求項２４】
ｎが、１１、１２、１３、または１４である、請求項２３に記載の化合物またはその塩。
【請求項２５】
Ｒ１がＣ３〜Ｃ６アルキルである、請求項１９〜２４のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項２６】
Ｒ１がｎ−ブチルである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｒ１が−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａである、請求項１９〜２４のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項２８】
Ｒ１が−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂである、請求項１９〜２４のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項２９】
Ｒ１が−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃである、請求項１９〜２４のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項３０】
Ｒ２がＮＨ２である、請求項１９〜２９のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項３１】
ｑが０である、請求項１９〜３０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項３２】
ｑが１であり、Ｒ３がＣ１〜Ｃ８アルキルである、請求項１９〜３０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項３３】
Ｒ４ａおよびＲ４ｂの各々がＨである、請求項１９〜３２のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項３４】
前記化合物が、表１中の化合物番号６３−０１〜６３−３０からなる群より選択される、請求項１９に記載の化合物またはその塩。
【請求項３５】
（ｉ）請求項１〜３４のいずれか１項に記載の化合物またはその塩；および（ｉｉ）薬学的に許容され得る賦形剤を含む薬学的組成物。
【請求項３６】
抗原をさらに含む、請求項３５に記載の薬学的組成物。
【請求項３７】
前記薬学的に許容され得る賦形剤が油を含む、請求項３５または３６に記載の薬学的組成物。
【請求項３８】
前記薬学的組成物がスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョンである、請求項３５〜３７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項３９】
前記薬学的組成物がリポソーム製剤である、請求項３５または３６に記載の薬学的組成物。
【請求項４０】
免疫応答の刺激を必要とする哺乳動物被験体において免疫応答を刺激する方法であって、前記哺乳動物被験体に、前記哺乳動物被験体における前記免疫応答を刺激するのに十分な量の請求項３５〜３９のいずれか１項に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項４１】
抗原特異的抗体応答の誘導を必要とする哺乳動物被験体において抗原特異的抗体応答を誘導する方法であって、前記哺乳動物被験体に、前記哺乳動物被験体における前記抗原特異的抗体応答および／または抗原特異的Ｔ細胞応答を誘導するのに十分な量の請求項３５〜３９のいずれか１項に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項４２】
感染症の処置を必要とする哺乳動物被験体において感染症を処置する方法であって、前記哺乳動物被験体に、前記哺乳動物被験体における前記感染症を処置するのに十分な量の請求項３５〜３９のいずれか１項に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項４３】
感染症の予防を必要とする哺乳動物被験体において感染症を予防する方法であって、前記哺乳動物被験体に、前記哺乳動物被験体における前記感染症を予防するのに十分な量の請求項３５〜３９のいずれか１項に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項４４】
ＩｇＥ関連障害の処置を必要とする哺乳動物被験体においてＩｇＥ関連障害を処置する方法であって、前記哺乳動物被験体に、前記哺乳動物被験体における前記ＩｇＥ関連障害を処置するのに十分な量の請求項３５〜３９のいずれか１項に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項４５】
ＩｇＥ関連障害の予防を必要とする哺乳動物被験体においてＩｇＥ関連障害を予防する方法であって、前記哺乳動物被験体に、前記哺乳動物被験体における前記ＩｇＥ関連障害を予防するのに十分な量の請求項３５〜３９のいずれか１項に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項４６】
がんの処置を必要とする哺乳動物被験体においてがんを処置する方法であって、前記哺乳動物被験体に、前記哺乳動物被験体におけるがんを処置するのに十分な量の請求項３５〜３９のいずれか１項に記載の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項４７】
前記薬学的組成物が腫瘍内注射によって投与される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
有効量の第２の治療剤を前記被験体に投与する工程をさらに含む、請求項４６または４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記第２の治療剤が化学療法剤である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記第２の治療剤が、阻害性免疫チェックポイント分子のアンタゴニストである、請求項４８に記載の方法。
【請求項５１】
前記第２の治療剤がエピジェネティック調節剤である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５２】
前記第２の治療剤が免疫原性細胞死の誘導物質である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５３】
前記阻害性免疫チェックポイント分子が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ−４（ＣＤ１５２）、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＴＩＧＩＴ、ＩＬ−１０、およびＴＧＦ−ベータからなる群より選択される、請求項５０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１７年８月２２日に出願の米国特許仮出願第６２／５４８，８４８号（その開示全体が本明細書中で参考として援用される）の優先権および利益を主張する。
【０００２】
発明の分野
本開示は、免疫応答を増大させるためのアルキル鎖修飾イミダゾキノリンＴＬＲ７／８アゴニスト化合物に関する。本開示はまた、アルキル鎖修飾イミダゾキノリン化合物を含む薬学的組成物、その調製方法、免疫応答を刺激する方法、ならびに被験体の疾患（例えば、感染症およびがん）の処置における薬学的組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
Ｔｏｌｌ様レセプター（ＴＬＲ）は、病原体関連分子パターンと呼ばれる病原体に由来し、かつ病原体に固有の構造が保存された分子を認識する膜貫通タンパク質のファミリーである。こうして、ＴＬＲは、哺乳動物免疫系において侵入する病原体の存在を検出する病原体関連分子パターンの最前線のセンサーとして機能する（Ｔａｋｅｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ａｋｉｒａ  ２０１０  Ｃｅｌｌ  １４０：８０５−８２０）。センチネル免疫細胞におけるＴＬＲの会合により、選択されたサイトカイン（例えば、タイプＩインターフェロン）の生合成、共刺激分子の誘導、および抗原提示能力の向上を引き起こす。これらは、自然免疫応答および獲得免疫応答を活性化する重要な分子機序である。したがって、ＴＬＲのアゴニストおよびアンタゴニストは、免疫応答の調節で用いられる。ＴＬＲアゴニストは、典型的には、免疫応答を刺激するために使用されるのに対して、ＴＬＲアンタゴニストは、典型的には、免疫応答を阻害するために用いられる（Ｇｏｓｕ  ｅｔ  ａｌ  ２０１２  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １７：１３５０３−１３５２９）。
【０００４】
ヒトゲノムは、１０種の公知のＴＬＲを含み、これらのうちのＴＬＲ３、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、およびＴＬＲ９が核酸およびその分解産物を感知する。ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、およびＴＬＲ９の分布は細胞のエンドリソソーム内区画に制限され、これらは免疫系の細胞中に優先的に発現される。活性化された二量体レセプターの立体配置では、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８は、それぞれ、１つのリガンド結合部位では一本鎖ＲＮＡを認識し、第２のリガンド結合部位ではリボヌクレオシド分解産物であるグアノシンおよびウリジン（ならびに関連構造モチーフを有する小分子リガンド）を認識する（Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ  ２０１６  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ４５：７３７−７４８；Ｔａｎｊｉ  ｅｔ  ａｌ  ２０１５  Ｎａｔ  Ｓｔｒｕｃｔ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２２：１０９−１１５）。形質細胞様樹状細胞におけるＴＬＲ７会合により、獲得免疫応答の制御において不可欠な機能を果たすインターフェロン−α／βを誘導する（Ｂａｏ  ａｎｄ  Ｌｉｕ  ２０１３  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｅｌｌ  ４：４０−５２）。骨髄系樹状細胞、単球、および単球由来樹状細胞におけるＴＬＲ８の会合により、腫瘍壊死因子−α、インターロイキン−１２、およびＩＬ−１８の産生の増加を特徴とする卓越した炎症促進性サイトカインプロフィールが誘導される（Ｅｉｇｅｎｂｒｏｄ  ｅｔ  ａｌ  ２０１５  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９５：１０９２−１０９９）。したがって、単球および樹状細胞の実質的に全ての主要タイプがＴＬＲ７およびＴＬＲ８のアゴニストによって活性化されて有効性の高い抗原提示細胞になり、それにより、自然免疫応答および獲得免疫応答を有効に促進することができる。ほとんどの抗原提示細胞型はこれら２つのレセプターのうちの１つのみを発現するので、ＴＬＲ７レセプターおよびＴＬＲ８レセプターの両方に対して強力なアゴニスト生物活性を有する小分子は、これらのＴＬＲのうちの１つのみに特異的なアゴニストよりも潜在的に有効な免疫アジュバントである。したがって、バランスのとれた二重生物活性を有するＴＬＲ７／ＴＬＲ８（ＴＬＲ７／８）小分子アゴニストは、より広い範囲の抗原提示細胞および他の重要な免疫細胞型（形質細胞様樹状細胞および骨髄系樹状細胞、単球、ならびにＢ細胞が含まれる）において自然免疫応答を引き起こすであろう（ｖａｎ  Ｈａｒｅｎ  ｅｔ  ａｌ  ２０１６  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９７：４４１３−４４２４；Ｇａｎａｐａｔｈｉ  ｅｔ  ａｌ  ２０１５  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  １０：ｅ０１３４６４０）。かかる強力な二重ＴＬＲ７／８アゴニストはまた、がんにおける有効な抗腫瘍免疫応答の刺激で有効であり得る（Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ  ２０１４  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９３：４７２２−４７３１；Ｓａｂａｄｏ  ｅｔ  ａｌ  ２０１５  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｒｅｓ  ３：２７８−２８７；Ｓｐｉｎｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ  ２０１６  Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌ  ５：ｅ１２３０５７８；Ｐａｔｉｌ  ｅｔ  ａｌ  ２０１６  Ｍｉｎｉ  Ｒｅｖ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  １６：３０９−３２２）。
【０００５】
いくつかの小分子構造クラスは、グアノシン／ウリジンリガンド結合部位で相互作用し、種々のＴＬＲ７および／またはＴＬＲ８アゴニスト生物活性レベルを有することが公知であり（例えば、Ｌｕ  ｅｔ  ａｌ  ２０１２  Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  １８：４９９−５０９；米国特許第５，４４６，１５３号，同第６，１９４，４２５号，同第６，１１０，９２９号，および同第７，１９９，１３１号を参照のこと）、この小分子には、ＴＬＲ７アゴニストまたは二重ＴＬＲ７／８アゴニストである１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンの誘導体が含まれる（例えば、Ｖａｓｉｌａｋｏｓ  ａｎｄ  Ｔｏｍａｉ  ２０１３  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  １２：８０９−８１９；米国特許第４，６８９，３３８号を参照のこと）。１つのかかる１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンは、１−イソブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（イミキモド）（１９９７年に光線性角化症、表在性基底細胞癌、および陰部疣贅の処置について承認され、その後に基底細胞癌の処置について承認されたＴＬＲ７特異的アゴニスト）である（例えば、Ｈｅｍｍｉ  ｅｔ  ａｌ  ２００２  Ｎａｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ３：１９６−２００を参照のこと）。１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンは、選択的なＴＬＲ７またはＴＬＲ８のアゴニスト活性を示すものもあれば、二重ＴＬＲ７／８アゴニスト活性を示すものもある。例えば、１−ベンジル−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンは、ＴＬＲ８に対する生物活性がわずかなＴＬＲ７アゴニストであることが見いだされた（Ｓｈｕｋｌａ  ｅｔ  ａｌ  ２０１０  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ５３：４４５０−４４６５）。対照的に、２−プロピル［１，３］チアゾロ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンは、ＴＬＲ７に対する活性がわずかなＴＬＲ８アゴニストであることが見いだされた（Ｇｏｒｄｅｎ  ｅｔ  ａｌ  ２００５  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １７４：１２５９−１２６８）。１−（４−アミノメチルベンジル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（ＩＭＤＱ）および１−（３−アミノメチルベンジル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（メタ−ＩＭＤＱ）は、両方のレセプターに対して強力なアゴニスト活性を有する二重ＴＬＲ７／８アゴニストであることが見いだされた（例えば、Ｓｈｕｋｌａ  ｅｔ  ａｌ  ２０１０  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ５３：４４５０−４４６５；Ｓｈｕｋｌａ  ｅｔ  ａｌ  ２０１０  Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ  １０：６３８４−６３８６；米国特許第８，７２８，４８６号；米国特許第９，４４１，００５号を参照のこと）。
しかし、皮下投与、腫瘍内投与、または筋肉内投与後の可溶性１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンベースのＴＬＲ７／８アゴニストが全身に急速に分布することが、患者に非常に有毒であることが実証されている（例えば、Ｖａｓｉｌａｋｏｓ  ｅｔ  ａｌ  ２０１３  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  １２：８０９−８１９；Ｓａｖａｇｅ  ｅｔ  ａｌ  １９９６  Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  ７４：１４８２−１４８６；Ｐｏｃｋｒｏｓ  ｅｔ  ａｌ  ２００７  Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ  ４７：１７４−１８２を参照のこと）。脾臓および肝臓の細胞におけるＴＬＲの活性化によって全身免疫系が活性化すると血清炎症促進性サイトカインレベルが増加し、それによりインフルエンザ様症状および他の有害事象が引き起こされることが、これらの化合物のヒト治療薬としての使用を局所投与経路に制限させている。したがって、強力かつバランスの取れたＴＬＲ７／８アゴニスト活性を有し、かつ薬学的組成物が注射部位での化合物の保持を促進することが可能な生理化学的性質も有する小分子治療剤が依然として必要である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許第５，４４６，１５３号
【特許文献２】米国特許第６，１９４，４２５号
【特許文献３】米国特許第７，１９９，１３１号
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｔａｋｅｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ａｋｉｒａ  ２０１０  Ｃｅｌｌ  １４０：８０５−８２０
【非特許文献２】Ｇｏｓｕ  ｅｔ  ａｌ  ２０１２  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １７：１３５０３−１３５２９
【非特許文献３】Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ  ２０１６  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ４５：７３７−７４８
【非特許文献４】Ｔａｎｊｉ  ｅｔ  ａｌ  ２０１５  Ｎａｔ  Ｓｔｒｕｃｔ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２２：１０９−１１５
【非特許文献５】Ｂａｏ  ａｎｄ  Ｌｉｕ  ２０１３  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｅｌｌ  ４：４０−５２
【非特許文献６】Ｅｉｇｅｎｂｒｏｄ  ｅｔ  ａｌ  ２０１５  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９５：１０９２−１０９９
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本開示は、両方のレセプターに対してバランスの取れた生物活性を示す強力なＴＬＲ７／８アゴニストであるアルキル鎖修飾１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン誘導体を提供する。１つの態様において、式（Ｊ）：
【化１】
2020531530.tif 000003
［式中、
Ｒ０は、１〜４個のハロゲン原子により必要に応じて置換されたＣ４〜Ｃ２１ヒドロカルビルであり；
Ｘは、−ＮＨ−または−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり；
Ｒ１は、Ｃ３〜Ｃ６アルキル、−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａ、−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂ、または−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃであり；ここで、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルであり；Ｒ１ｃはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり；ｐは１または２であり；
Ｒ２はＮＨＲ２ａであり；ここで、Ｒ２ａは、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、またはメチルであり；
各Ｒ３は、独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ７アルキレン）−ＮＨ２、または−ＣＨ２−フェニレン−ＣＨ２ＮＨ２であり；
ｑは、０、１、２、３、または４であり；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルである］の化合物またはその塩であって、
但し、前記化合物が、２−ブチル−１−（４−（（ヘキサデシルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−３２）；Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）パルミトアミド（化合物番号６３−３１）；またはＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）ペンタ−４−インアミド（化合物番号６３−３７）以外である、化合物またはその塩が提供される。
いくつかの実施形態において、Ｒ０はＣ４〜Ｃ１４ヒドロカルビルである。
【０００９】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−である。いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ−である。
【００１０】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は、分枝Ｃ４〜Ｃ１４アルキル、−（ＣＨ２）ｚ（Ｃ（ＣＨ３）２）ＲＡ、または−（ＣＨ２）ｍＲＡであり；ｍは、０、１、２、または３であり；ｚは、１または２であり；ＲＡは、Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびＣ１〜Ｃ４アルキレンからなる群より独立して選択される１〜４個の基により必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ８シクロアルキルである。
【００１１】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は分枝Ｃ４〜Ｃ１４アルキルである。
【００１２】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｍＲＡである。一つのバリエーションにおいて、ｍは１または２であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである。
【００１３】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｚ（Ｃ（ＣＨ３）２）ＲＡである。一つのバリエーションにおいて、ｚは１であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである。
【００１４】
いくつかの実施形態において、ＲＡはＣ３〜Ｃ８シクロアルキルである。
【００１５】
いくつかの実施形態において、ＲＡは、メチルおよびメチレンからなる群より独立して選択される１〜３個の基により必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである。一つのバリエーションにおいて、ｍは１または２である。
【００１６】
いくつかの実施形態において、ＲＡは、メチルおよびメチレンからなる群より独立して選択される１〜３個の基により必要に応じて置換されたシクロプロピルであり、ｍは１または２である。
【００１７】
いくつかの実施形態において、ｍは０または１であり、ＲＡは、メチルおよびメチレンからなる群より独立して選択される１〜３個の基により必要に応じて置換されたシクロヘキシルである。
【００１８】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は、以下からなる群より選択される：
【化２】
2020531530.tif 000004
【００１９】
いくつかの実施形態において、Ｒ１はＣ３〜Ｃ６アルキル（例えば、ｎ−ブチル）である。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａ（例えば、ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３）である。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂ（例えば、ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ３）である。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃである。一つのバリエーションにおいて、Ｒ１ｃはシクロプロピルである。
【００２０】
いくつかの実施形態において、Ｒ２はＮＨ２である。
【００２１】
いくつかの実施形態において、ｑは０である。いくつかの実施形態において、ｑは１であり、Ｒ３はＣ１〜Ｃ８アルキルである。
【００２２】
いくつかの実施形態において、Ｒ４ａおよびＲ４ｂの各々はＨである。
【００２３】
いくつかの実施形態において、化合物は、表１中の化合物番号６３−３３〜６３−３６および６３−３８〜６３−４９またはその塩からなる群より選択される。
【００２４】
別の態様において、式（Ｋ）：
【化３】
2020531530.tif 000005
［式中、
ｎは、４〜２１の整数であり；
Ｘは、−ＮＨ−または−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり；
Ｒ１は、Ｃ３〜Ｃ６アルキル、−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａ、−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂ、または−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃであり；ここで、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルであり；Ｒ１ｃはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり；ｐは１または２であり；
Ｒ２はＮＨＲ２ａであり；ここで、Ｒ２ａは、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、またはメチルであり；
各Ｒ３は、独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ７アルキレン）−ＮＨ２、または−ＣＨ２−フェニレン−ＣＨ２ＮＨ２であり；
ｑは、０、１、２、３、または４であり；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルである］の化合物またはその塩であって、
但し、前記化合物が、２−ブチル−１−（４−（（ヘキサデシルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−３２）またはＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）パルミトアミド（化合物番号６３−３１）以外である、化合物またはその塩が提供される。
【００２５】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ−である。一つのバリエーションにおいて、ｎは、４〜１５の整数である。一つのバリエーションにおいて、ｎは、４、５、６、または７である。
【００２６】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−である。一つのバリエーションにおいて、ｎは、１１、１２、１３、または１４である。
【００２７】
いくつかの実施形態において、Ｒ１はＣ３〜Ｃ６アルキル（例えば、ｎ−ブチル）である。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａ（例えば、ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３）である。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂ（例えば、ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ３）である。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃである。いくつかの実施形態において、Ｒ１ｃはシクロプロピルである。
【００２８】
いくつかの実施形態において、Ｒ２はＮＨ２である。
【００２９】
いくつかの実施形態において、ｑは０である。いくつかの実施形態において、ｑは１であり、Ｒ３はＣ１〜Ｃ８アルキルである。
【００３０】
いくつかの実施形態において、Ｒ４ａおよびＲ４ｂの各々はＨである。
【００３１】
いくつかの実施形態において、化合物は、表１中の化合物番号６３−０１〜６３−３０またはその塩からなる群より選択される。
【００３２】
（ｉ）式（Ｊ）または（Ｋ）の化合物および（ｉｉ）１またはそれを超える薬学的に許容され得る賦形剤を含む薬学的組成物をさらに提供する。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、抗原をさらに含む。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、ＵＳＰグレードの油および有機改変因子（例えば、９５％ゴマ油／５％エタノール）を含む薬学的に許容され得る賦形剤から構成される。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、水中油型ナノエマルジョンまたはリポソーム製剤を可能にする薬学的に許容され得る賦形剤から構成され、その例は当業者に公知である。いくつかの実施形態において、薬学的組成物には、抗原（単数または複数）（腫瘍関連抗原またはネオ抗原が挙げられるが、これらに限定されない）の混合物を含むことができる。
【００３３】
本開示はまた、免疫応答の刺激を必要とする哺乳動物被験体において免疫応答を刺激する方法であって、哺乳動物被験体に、哺乳動物被験体における免疫応答を刺激するのに十分な量、頻度、および時間枠で上記の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法を提供する。１つの態様において、免疫応答は、局所免疫応答である。別の態様において、免疫応答は全身免疫応答である。
【００３４】
本開示はまた、ヒト患者などの哺乳動物被験体における上記の薬学的組成物の複数の使用方法を提供する。１つの態様において、がんの処置を必要とする哺乳動物被験体においてがんを処置する方法であって、哺乳動物被験体に、哺乳動物被験体におけるがんの処置に十分な量の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法を提供する。方法の別の態様において、腫瘍内送達は、少なくとも１つの腫瘍病変への薬学的組成物の注射を含む。方法の１つの態様において、有効量の第２の治療剤が、被検体にさらに投与される。ある特定の実施形態において、第２の治療剤は、化学療法剤、エピジェネティック調節剤、免疫原性細胞死の誘導物質、または阻害性免疫チェックポイント分子のアンタゴニストである。別の態様において、抗原特異的抗体応答の誘導を必要とする哺乳動物被験体において抗原特異的抗体応答を誘導する方法であって、哺乳動物被験体に、哺乳動物被験体における抗原特異的抗体応答および／または抗原特異的Ｔ細胞応答を誘導するのに十分な量の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法を提供する。１つの態様において、感染症の処置または予防を必要とする哺乳動物被験体において感染症を処置または予防する方法であって、哺乳動物被験体に、哺乳動物被験体における感染症を処置または予防するのに十分な量の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法を提供する。１つの態様において、哺乳動物被験体におけるＩｇＥ関連障害を処置または予防する方法であって、哺乳動物被験体におけるＩｇＥ関連障害を処置または予防するのに十分な量の薬学的組成物を投与する工程を含む、方法を提供する。
【００３５】
本発明の薬学的組成物ならびに感染症および／またはがんの処置で用いるための説明書を含むキットも本発明で提供する。感染症および／またはがんの処置で用いるキットの製造方法も提供する。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】図１Ａ〜Ｂは、実施例Ｂ３に記載の野生型マウスへの化合物番号６３−００（黒色のバー）、６３−１７（白色のバー）、および６３−１０（灰色のバー）の注射による単回皮下投与後のＩＬ−６（図１Ａ）およびＩＬ−１２ｐ４０（図１Ｂ）の血清レベルの経時変化を示す。群のサイズ＝３、＋／−平均値の標準誤差。
【００３７】
【図２−１】図２Ａ〜Ｃは、実施例Ｂ４に記載の化合物番号６３−１８（図２Ａ）、６３−３３（図２Ｂ）、または６３−１０（図２Ｃ）の反復腫瘍内投与後の同系ＣＴ２６腫瘍保有野生型マウスの腫瘍成長阻害を示す。動物に、記載のように、ビヒクルコントロール（＿＿●＿＿）、２０μｇの化合物（＿＿■＿＿）、５μｇの化合物（−−■−−）、０．５μｇ化合物（−−■−−）、または５０μｇのＴＬＲ９アゴニストポジティブコントロール（＿＿◆＿＿）のいずれかを投与した。群のサイズ＝コントロールについては５、実験条件については８、＋／−平均値の標準誤差。
【図２−２】図２Ａ〜Ｃは、実施例Ｂ４に記載の化合物番号６３−１８（図２Ａ）、６３−３３（図２Ｂ）、または６３−１０（図２Ｃ）の反復腫瘍内投与後の同系ＣＴ２６腫瘍保有野生型マウスの腫瘍成長阻害を示す。動物に、記載のように、ビヒクルコントロール（＿＿●＿＿）、２０μｇの化合物（＿＿■＿＿）、５μｇの化合物（−−■−−）、０．５μｇ化合物（−−■−−）、または５０μｇのＴＬＲ９アゴニストポジティブコントロール（＿＿◆＿＿）のいずれかを投与した。群のサイズ＝コントロールについては５、実験条件については８、＋／−平均値の標準誤差。
【００３８】
【図３】図３Ａ〜Ｂは、実施例Ｂ５に記載のスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョンのビヒクルコントロール（＿＿●＿＿）、５０ｎｇの化合物番号６３−１０を含むスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョン（＿＿■＿＿）、または５０ｎｇの化合物番号６３−１０＋５０，０００ｎｇのＡＨ−１クラスＩＩペプチドを含むスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョン（＿＿□＿＿）から構成される薬学的組成物の反復腫瘍内投与後のＣＴ２６腫瘍保有野生型マウスの注射された腫瘍（図３Ａ）および遠位腫瘍（図３Ｂ）における経時的な腫瘍成長阻害を示す。実験８、１２、１６、および２０日目に記載のように動物に投与した。群のサイズ＝コントロールおよび全ての実験条件について８、データを、平均腫瘍容積（単位ｍｍ３）＋／−平均値の標準誤差として表す。２７日目の注射した腫瘍または２３日目の遠位腫瘍の群間の腫瘍容積の相違を、Ｋｒｕｓｋａｌｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定およびその後の特定の群ペアの比較のためのＤｕｎｎの事後検定を使用して解析した。ｎｓはＰ≧０．０５０を示し；＊はＰ≦０．０５０を示す。
【００３９】
【図４】図４Ａ〜Ｂは、実施例Ｂ６に記載のリン酸緩衝生理食塩水のビヒクルコントロール（＿＿●＿＿）、リン酸緩衝生理食塩水のビヒクルコントロールの２５０μｇの抗ＰＤ−１抗体との組み合わせ（＿＿○＿＿）、９５％ゴマ油／５％エタノール（ｖ／ｖ）中の５，０００ｎｇの化合物番号６３−１０の２５０μｇの抗ＰＤ−１抗体との組み合わせ（＿＿■＿＿）、９５％ゴマ油／５％エタノール（ｖ／ｖ）中の５，０００ｎｇの化合物番号６３−３３の２５０μｇの抗ＰＤ−１抗体との組み合わせ（＿＿▲＿＿）、またはリン酸緩衝生理食塩水中の５，０００ｎｇの化合物番号６３−００の２５０μｇの抗ＰＤ−１抗体との組み合わせ（＿＿▼＿＿）から構成される薬学的組成物の実験１４日目における単回腫瘍内投与後のＣＴ２６腫瘍保有野生型マウスの注射された腫瘍（図４Ａ）および遠位腫瘍（図４Ｂ）における経時的な腫瘍成長阻害を示す。抗ＰＤ−１組み合わせを用いた全ての実験群について、抗ＰＤ−１処置を、実験１２、１５、１９、２２、２６日目に腹腔内に行った。群のサイズ＝コントロールおよび全ての実験条件について１０匹、データを、平均腫瘍容積（単位ｍｍ３）＋／−平均値の標準誤差として表す。実験２９日目の群間の腫瘍容積の相違を、Ｋｒｕｓｋａｌｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定およびその後の特定の群ペアの比較のためのＤｕｎｎの事後検定を使用して解析した。ｎｓはＰ≧０．０５０を示し；＊はＰ≦０．０５０を示し；＊＊はＰ≦０．０１０を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
本開示は、ＴＬＲ７／８の両方のレセプターに対してバランスの取れた生物活性を示し、かつ薬学的組成物が注射部位での化合物の保持を促進することが可能な生理化学的性質を有する強力なＴＬＲ７／８アゴニストであるアルキル鎖修飾１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン誘導体に関する。本開示はまた、アルキル鎖修飾１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン化合物を含む薬学的組成物およびその調製方法、免疫応答を刺激するための薬学的組成物の使用、ならびに被験体の疾患（例えば、感染症およびがん）の処置方法に関する。
Ｉ．一般的な方法および定義
【００４１】
本開示の実施には、別段の指示がない限り、当該分野の技術の範囲内にある有機化学、分析化学、分子生物学、微生物学、細胞生物学、生化学、および免疫学の従来の技術を使用するであろう。かかる技術は、文献に十分に記載されており、例えば、以下を参照のこと：Ｆｉｅｓｅｒｓ’Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｈｏ，ｅｄ．，Ｗｉｌｅｙ，２０１６）；Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｋａｔｒｉｔｓｋｙ  ａｎｄ  Ｔａｙｌｏｒ，ｅｄｓ．，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，２００４）；Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｖｅｒｓｉｏｎ  １−８（Ｔｒｏｓｔ  ａｎｄ  Ｆｌｅｍｍｉｎｇ，ｅｄｓ．，Ｐｅｒｍａｇｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，１９９１）；Ｂｅｉｌｓｔｅｉｎｓ  Ｈａｎｄｂｕｃｈ  ｄｅｒ  Ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ，４（Ａｕｆｌａｇｅ，ｅｄ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，１９３４）；Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ，ｓｉｘｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，Ｗｉｌｅｙ−Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，２０１０）；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｂｏｎｉｆａｃｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９６（２０１４年の補遺を含む））；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｃｏｌｉｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９１（２０１４年の補遺を含む））；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９８７（２０１４年の補遺を含む））；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，ｔｈｉｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ａｎｄ  Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２００１）；およびＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，ｆｏｕｒｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２０１２）。
【００４２】
用語「個体」および「被験体」は、哺乳動物を指す。「哺乳動物」としては、ヒト、非ヒト霊長類（例えば、サル）、家畜、競技用動物（例えば、ウマ）、げっ歯類（例えば、マウスおよびラット）、およびペット（例えば、イヌおよびネコ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４３】
用語「抗原」は、抗体またはＴ細胞抗原レセプターによって特異的に認識され、結合される物質を指す。抗原は、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、糖タンパク質、多糖、複合糖質、糖、ガングリオシド、脂質およびリン脂質；それらの一部ならびにそれらの組み合わせを含み得る。抗原は、本開示の組成物中に存在する場合、合成の抗原であり得るか、または天然から単離された抗原であり得る。本開示の方法における投与に適した抗原には、抗原特異的Ｂ細胞応答または抗原特異的Ｔ細胞応答を誘発することができる任意の分子が含まれる。ハプテンは、「抗原」の範囲内に含められる。「ハプテン」は、それ自身は免疫原性ではないが、一般により大きい免疫原性分子に結合体化された場合に免疫原性となる、低分子量化合物である。
【００４４】
「ポリペプチド抗原」は、精製された天然のペプチド、合成ペプチド、操作されたペプチド、組換えペプチド、粗ペプチド抽出物、または部分的に精製されたもしくは未精製の活性な状態のペプチド（弱毒化または不活性化されたウイルス、微生物または細胞の一部であるペプチドなど）あるいはそのようなペプチドのフラグメントを含み得る。ポリペプチド抗原は、好ましくは、少なくとも６アミノ酸残基長、好ましくは、８〜１８００アミノ酸長、より好ましくは、９〜１０００アミノ酸長または１０〜１００アミノ酸長である。同様に、いくつかの実施形態において、そのポリペプチドは、約９〜約２０００、約９〜約１０００、約９〜約１００または約９〜約６０アミノ酸長である。いくつかの実施形態において、そのポリペプチドは、少なくとも（下限）９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０または９０アミノ酸長である。いくつかの実施形態において、そのポリペプチドは、多くとも（上限）１０００、９００、８００、７００、６００、５００、４００、３００、２５０、２００、１５０、１００、５０、または２５アミノ酸長である。いくつかの実施形態において、ポリペプチド抗原は、９〜３５アミノ酸長である。
【００４５】
本明細書中で使用される場合、用語「免疫原性」は、適切な条件下で哺乳動物被験体に投与されたとき獲得免疫応答を誘発する作用物質（例えば、ポリペプチド抗原）を指す。その免疫応答は、Ｂ細胞（液性）応答および／またはＴ細胞（細胞性）媒介応答であり得る。
【００４６】
「アジュバント」は、抗原などの免疫原性の作用物質と混合された場合に、その混合物に曝露されたレシピエントにおいてその作用物質に対する免疫応答を非特異的に増大または増強する物質を指す。
【００４７】
用語「アゴニスト」は、最も広い意味において使用され、レセプターを介したシグナル伝達を活性化する任意の分子を含む。例えば、ＴＬＲ７アゴニストはＴｏｌｌ様レセプター７タンパク質に結合してＴＬＲ７−シグナル伝達経路を活性化し；ＴＬＲ８アゴニストはＴｏｌｌ様レセプター８タンパク質に結合してＴＬＲ８−シグナル伝達経路を活性化する。二重ＴＬＲ７／８アゴニストはＴｏｌｌ様レセプター７タンパク質およびＴｏｌｌ様レセプター８タンパク質の両方に結合してＴＬＲ７−シグナル伝達経路およびＴＬＲ８−シグナル伝達経路の両方を活性化する。
【００４８】
応答またはパラメータの「刺激」は、作用因子または分子以外、その他の点で同じ条件と比べたとき、あるいは、別の条件（例えば、ＴＬＲアゴニストの非存在下と比べたときのＴＬＲアゴニストの存在下におけるＴＬＲシグナル伝達の増大）と比べた場合に、その応答またはパラメータを誘発および／または増大することを含む。例えば、免疫応答の「刺激」は、応答の増大を意味する。
【００４９】
本明細書中に開示される作用物質の「有効量」は、具体的に述べられる目的を果たすために十分な量である。「有効量」は、述べられる目的に対して経験的かつ慣用的な様式で決定され得る。作用物質の「有効量」または「十分な量」は、所望の生物学的効果（有益な臨床結果を含む有益な結果など）をもたらすために適切な量である。用語「治療有効量」は、被験体（例えば、ヒトなどの哺乳動物）における疾患または障害を「処置する」のに有効な、作用物質（例えば、ＴＬＲ調節剤）の量を指す。
【００５０】
疾患を「処置する」または疾患の「処置」という用語は、その疾患の徴候または症状を軽減することを目指して個体（ヒトまたはそれ以外の個体）に１またはそれを超える薬物を投与することを含み得るプロトコールを実行することを指す。したがって、「処置する」または「処置」は、徴候または症状の完全な軽減を必要とせず、治癒を必要とせず、かつ具体的には、個体に緩和効果を及ぼすだけのプロトコールを含む。本明細書中で使用される場合、また、当該分野において十分に理解されているように、「処置」は、臨床結果を含む有益な結果または所望の結果を得るためのアプローチである。有益な臨床結果または所望の臨床結果としては、検出可能であるか検出不可能であるかを問わず、１またはそれを超える症状の軽減または回復、疾患の程度の低下、安定化された（すなわち、悪化していてない）疾患状態、疾患の広がりの防止、疾患の進行の遅延または減速、疾患状態の回復または緩和、および緩解（部分的であるか全体的であるかを問わない）が挙げられるがこれらに限定されない。「処置」は、処置を受けていない個体の予想される生存と比べたときの、生存の延長も意味し得る。
【００５１】
疾患または障害を「緩和する」は、予想される無処置の結果と比べて、疾患または障害の程度および／もしくは望ましくない臨床症状が和らぐこと、ならびに／または疾患もしくは障害の進行の時間経過が減速することを意味する。特に、アレルギーの文脈において、アレルゲン（複数可）に対してＴｈ１免疫応答が刺激されたときに緩和し得る。さらに、緩和は、必ずしも１回の投与によって生じるわけではないが、連続した回数の投与で生じることが多い。したがって、応答または障害を緩和するのに十分な量を、１回または複数回投与してよい。
【００５２】
本明細書中で使用される「アルキル」は、飽和した直鎖（すなわち、非分枝）または分枝の一価炭化水素鎖またはその組み合わせを指す。特定のアルキル基は、指定した数の炭素原子を有するアルキル基（例えば、１〜２０個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ２０アルキル」）、１〜１０個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ１０」アルキル）、１〜８個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ８アルキル」）、１〜６個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」）、２〜６個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ６アルキル」）、または１〜４個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ４アルキル」）を有するアルキル基）である。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、例えば、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、およびｎ−オクチルのホモログおよび異性体などの基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５３】
本明細書中で使用される「アルケニル」は、少なくとも１つのオレフィン性不飽和部位を有する（すなわち、少なくとも１つの式Ｃ＝Ｃ部分を有する）不飽和の直鎖（すなわち、非分枝）または分枝の一価炭化水素鎖またはその組み合わせを指す。特定のアルケニル基は、指定した数の炭素原子を有するアルケニル基（例えば、２〜２０個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ２０アルケニル」）、２〜１０個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ１０」アルケニル）、２〜８個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ８アルケニル」）、２〜６個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ６アルケニル」）、または２〜４個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ４アルケニル」）を有するアルケニル基）である。アルケニル基は、「シス」立体配置または「トランス」立体配置、あるいは、「Ｅ」立体配置または「Ｚ」立体配置であり得る。アルケニル基の例としては、エテニル（またはビニル）、プロパ−１−エニル、プロパ−２−エニル（またはアリル）、２−メチルプロパ−１−エニル、ブタ−１−エニル、ブタ−２−エニル、ブタ−３−エニル、ブタ−１，３−ジエニル、２−メチルブタ−１，３−ジエニル、そのホモログ、および異性体などの基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５４】
本明細書中で使用される「アルキニル」は、少なくとも１つのアセチレン性不飽和部位を有する（すなわち、少なくとも１つの式Ｃ≡Ｃ部分を有する）不飽和の直鎖（すなわち、非分枝）または分枝の一価炭化水素鎖またはその組み合わせを指す。特定のアルキニル基は、指定した数の炭素原子を有するアルキニル基（例えば、２〜２０個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ２０アルキニル」）、２〜１０個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル」）、２〜８個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ８アルキニル」）、２〜６個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ６アルキニル」）、または２〜４個の炭素原子（「Ｃ２〜Ｃ４アルキニル」）を有するアルキニル基）である。アルキニル基の例としては、エチニル（またはアセチルレニル）、プロパ−１−イニル、プロパ−２−イニル（またはプロパルギル）、ブタ−１−イニル、ブタ−２−イニル、ブタ−３−イニル、そのホモログ、および異性体などの基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５５】
本明細書中で使用される「アルキレン」は、アルキルと同一であるが二価である残基を指す。特定のアルキレン基は、１〜６個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ６アルキレン」）、１〜５個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ５アルキレン」）、１〜４個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ４アルキレン」）、または１〜３個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ３アルキレン」）を有するアルキレン基である。アルキレン基の例としては、メチレン（−ＣＨ２−または＝ＣＨ２）、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−または＝ＣＨＣＨ３）、プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−または＝ＣＨＣＨ２ＣＨ３）、およびブチレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−または＝ＣＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）などの基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５６】
本明細書中で使用される「シクロアルキル」は、非芳香族の、飽和または不飽和の一価の環式炭化水素構造を指す。特定のシクロアルキル基は、指定した数の環状（すなわち、環）炭素原子を有するシクロアルキル基（例えば、３〜１２個の環状炭素原子を有するシクロアルキル基（「Ｃ３〜Ｃ１２シクロアルキル」））である。好ましいシクロアルキルは、３〜８個の環状炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル」）または３〜６個の環状炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル」）を有する環式炭化水素である。シクロアルキルは、１つの環（シクロヘキシルなど）または複数の環（アダマンチルなど）からなることができるが、アリール基は除外される。１つを超える環を含むシクロアルキルは、縮合、スピロ、架橋、またはその組み合わせであり得る。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−シクロヘキセニル、３−シクロヘキセニル、シクロヘプチル、およびノルボルニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５７】
本明細書中で使用される「シクロアルキレン」は、シクロアルキルと同一であるが二価である残基を指す。特定のシクロアルキレン基は、３〜１２個の環状炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ１２シクロアルキレン」）、３〜８個の環状炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキレン」）、または３〜６個の環状炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキレン」）を有するシクロアルキレン基である。シクロアルキレン基の例としては、シクロプロピレン、シクロブチレン、シクロペンチレン、シクロヘキシレン、１，２−シクロヘキセニレン、１，３−シクロヘキセニレン、１，４−シクロヘキセニレン、シクロヘプチル、およびノルボルニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。本明細書中で使用される「ヒドロカルビル」は、完全飽和、一価不飽和、または多価不飽和であってよく、指定された炭素原子数（すなわち、Ｃ１〜Ｃ２０は、１〜２０個の炭素原子を意味する）を有する、非芳香族炭化水素からの水素原子の除去によって形成された一価の基を指し、これを含む。ヒドロカルビル基は、１またはそれを超える直鎖、分枝、環式の部分、またはその組み合わせを含み得る。アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、およびシクロアルキル基は、ヒドロカルビル基の特定の部分集合である。ヒドロカルビル基はまた、１またはそれを超えるシクロアルキル基によりさらに置換されたアルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基；ならびに／あるいはアルキル基、アルケニル基、および／またはアルキニル基のうちの１またはそれより多くによりさらに置換されたシクロアルキル基も含み得る。ヒドロカルビル基を、１またはそれを超える位置で、１またはそれを超えるハロゲン原子（塩素またはフッ素など）により置換することができる。ヒドロカルビル基の例としては、例えば、以下：
【化４】
2020531530.tif 000006
などの基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
本明細書中で使用される「アリール」は、単環（例えば、フェニル）または複数の縮合した環（例えば、ナフチルまたはアントリル）（ここで、縮合環のうちの１またはそれを超える環は芳香族でなくてよい）を有する不飽和の芳香族炭素環基を指す。特定のアリール基は、６〜１４個の環状（すなわち、環）炭素原子を有するアリール基（「Ｃ６〜Ｃ１４アリール」）である。１を超える環を有し、少なくとも１つの環が非芳香族であるアリール基を、芳香環の位置または非芳香環の位置のいずれかで親構造に結合することができる。一つのバリエーションにおいて、１を超える環を有し、少なくとも１つの環が非芳香族であるアリール基は、芳香環の位置で親構造に結合される。アリールの例としては、フェニル、ナフチル、１−ナフチル、および２−ナフチルなどの基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５９】
本明細書中で使用される「アリーレン」は、アリールと同一であるが二価である残基を指す。特定のアリーレン基は、６〜１４個の環状炭素原子を有するアリーレン基（「Ｃ６〜Ｃ１４アリーレン」）である。アリーレンの例としては、フェニレン、ｏ−フェニレン（すなわち、１，２−フェニレン）、ｍ−フェニレン（すなわち、１，３−フェニレン）、ｐ−フェニレン（すなわち、１，４−フェニレン）、ナフチレン、１，２−ナフチレン、１，２−ナフチレン、および１，４−ナフチレンなどの基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６０】
「ハロ」または「ハロゲン」は、原子番号９〜８５の１７族の元素を指す。好ましいハロ基としては、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードが挙げられる。残基が１を超えるハロゲンで置換される場合、この残基を、ハロゲン部分の付着数に対応する接頭辞を使用して言及することができる。例えば、ジハロアリール、ジハロアルキル、およびトリハロアリールなどは、２個（「ジ」）または３個（「トリ」）のハロ基で置換されたアリールおよびアルキルを指し（ここで、ハロは、同一のハロであり得るが、必ずしも同一でなくてよい）；したがって、４−クロロ−３−フルオロフェニルは、ジハロアリールの範囲内にある。各水素がハロ基で置き換えられたアルキル基は、「ペルハロアルキル」と呼ばれる。好ましいペルハロアルキル基は、トリフルオロアルキル（−ＣＦ３）である。同様に、「ペルハロアルコキシ」は、アルコキシ基のアルキル部分を構成している炭化水素中の各Ｈがハロゲンで置き換わったアルコキシ基を指す。ペルハロアルコキシ基の例は、トリフルオロメトキシ（−ＯＣＦ３）である。
【００６１】
「アミノ」は、−ＮＨ２基を指す。
【００６２】
「置換アミノ」は、−ＮＲ’Ｒ’’基を指し、ここで、Ｒ’およびＲ’’は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルからなる群より独立して選択され、但し、Ｒ’およびＲ’’のうちの少なくとも１つが水素ではない。
【００６３】
「必要に応じて置換された」は、別段の指定が無い限り、ある基が、非置換であっても、その基について列挙した１またはそれを超える（例えば、１、２、３、４、または５個の）置換基により置換されてもよいことを意味し、この置換基は同一であっても異なっていてもよい。１つの実施形態では、必要に応じて置換された基は、１個の置換基を有する。別の実施形態において、必要に応じて置換された基は、２個の置換基を有する。別の実施形態において、必要に応じて置換された基は、３個の置換基を有する。別の実施形態において、必要に応じて置換された基は、４個の置換基を有する。いくつかの実施形態において、必要に応じて置換された基は、１〜２、１〜３、１〜４、または１〜５個の置換基を有する。
【００６４】
「有機改変因子」は、別段の指定が無い限り、有機化合物を溶解するために典型的に使用される溶媒群のうちの１つを意味する。この群は、酢酸、アセトン、アニソール、１−ブタノール、２−ブタノール、酢酸ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、クメン、ジメチルスルホキシド、エタノール、酢酸エチル、エチルエーテル、ギ酸エチル、ギ酸、ヘプタン、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、３−メチル−１−ブタノール、メチルエチルケトン（ｍｅｔｈｙｌｅｎｔｈｙｌｋｅｔｏｎｅ）、メチルイソブチルケトン、２−メチル−１−プロパノール、ペンタン、１−ペンタノール、１−プロパノール、２−プロパノール（イソプロパノール）、酢酸プロピル、およびその組み合わせを含み得るが、これらに限定されない。
【００６５】
本明細書中の本開示に加えて、用語「置換された」は、指定された基またはラジカルを修飾するために使用される場合、指定された基またはラジカルの１またはそれを超える水素原子が、各々相互に独立して、本明細書中に定義の同一または異なる置換基で置き換えられることも意味し得る。いくつかの実施形態において、置換される基は、１、２、３、または４個の置換基、１、２、もしくは３個の置換基、１もしくは２個の置換基、または１個の置換基を有する。
【００６６】
元素の特定の同位体が式中に示されない限り、本発明は、本明細書中に開示の化合物の全ての同位体置換体（ｉｓｏｔｏｐｏｌｏｇｕｅ）（例えば、化合物の重水素化誘導体（Ｈが２Ｈ、すなわち、Ｄであり得る）など）を含む。同位体置換体は、構造中の任意の位置または全ての位置が同位体に置換され得るか、原子が構造中の任意の位置または全ての位置に天然存在度で存在し得る。
【００６７】
明確にするために個別の実施形態の文脈で記載された本発明の一定の特徴を単一の実施形態に組み合わせて提供することもできると認識される。逆に、簡潔にするために単一の実施形態の文脈で記載された本発明の種々の特徴を、個別に提供するか、任意の適切なサブコンビネーションで提供することもできる。変数によって表した化学基に関する実施形態の全ての組み合わせが本発明に具体的に含まれ、この組み合わせは、かかる組み合わせが安定な化合物（すなわち、単離し、特徴づけ、生物学的活性について試験することができる化合物）である化合物を包含する程度まで、各々の組み合わせおよびあらゆる組み合わせがまるで個別かつ明確に開示されているかのように本明細書中に開示される。さらに、かかる変数を記載している実施形態に列挙した化学基の全てのサブコンビネーションも、本発明に具体的に含まれ、このサブコンビネーションは、化学基のかかる各々のサブコンビネーションおよびあらゆるサブコンビネーションがまるで個別かつ明確に本明細書中に開示されているかのように本明細書中に開示される。
【００６８】
本明細書中に「〜を含む」と記載した態様および実施形態には実施形態「からなる」および「から本質的になる」が含まれると理解される。
【００６９】
本明細書中および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」には、別段の指示がなく、文脈から明らかでない限り、複数形が含まれる。
【００７０】
別段の指示が明確に無い限り、用語「約」は、値を決定するために使用されるデバイスまたは方法の標準偏差または標準誤差を値が含むことを示すために使用される。本明細書中の値またはパラメータに対する「約」の言及は、前述の値またはパラメータ自体に関する実施形態を含む（そして記載する）。例えば、「約Ｘ」に関する記載には、「Ｘ」の記載が含まれる。
ＩＩ．化合物
【００７１】
１つの態様において、式（Ｊ）：
【化５】
2020531530.tif 000007
［式中、
Ｒ０は、１〜４個のハロゲン原子により必要に応じて置換されたＣ４〜Ｃ２１ヒドロカルビルであり；
Ｘは、−ＮＨ−または−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり；
Ｒ１は、Ｃ３〜Ｃ６アルキル、−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａ、−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂ、または−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃであり；ここで、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルであり；Ｒ１ｃはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり；ｐは１または２であり；
Ｒ２はＮＨＲ２ａであり；ここで、Ｒ２ａは、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、またはメチルであり；
各Ｒ３は、独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ７アルキレン）−ＮＨ２、または−ＣＨ２−フェニレン−ＣＨ２ＮＨ２であり；
ｑは、０、１、２、３、または４であり；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルである］の化合物またはその塩であって、
但し、前記化合物が、２−ブチル−１−（４−（（ヘキサデシルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−３２）；Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）パルミトアミド（化合物番号６３−３１）；またはＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）ペンタ−４−インアミド（化合物番号６３−３７）以外である、化合物またはその塩が提供される。
【００７２】
いくつかの実施形態において、Ｒ０はＣ４〜Ｃ２１ヒドロカルビルである。いくつかの実施形態において、Ｒ０はＣ４〜Ｃ１４ヒドロカルビルである。いくつかの実施形態において、Ｒ０はＣ５〜Ｃ１０ヒドロカルビルである。いくつかの実施形態において、Ｒ０はＣ１０〜Ｃ１４ヒドロカルビルである。いくつかの実施形態において、Ｒ０はＣ５〜Ｃ７ヒドロカルビルである。
【００７３】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−である。別の実施形態において、Ｘは−ＮＨ−である。
【００７４】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は、分枝Ｃ４〜Ｃ１４アルキルまたは−（ＣＨ２）ｍＲＡであり；ｍは、０、１、２、または３であり；ＲＡは、Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびＣ１〜Ｃ４アルキレンからなる群より独立して選択される１〜４個の基により必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ８シクロアルキルである。
【００７５】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は分枝Ｃ４〜Ｃ１４アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ０は分枝Ｃ５〜Ｃ１０アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ０は分枝Ｃ１０〜Ｃ１４アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ０は分枝Ｃ５〜Ｃ７アルキルである。
【００７６】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｍＲＡである。一つのバリエーションにおいて、ｍは１または２であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである。別のバリエーションにおいて、ｍは０であり、ＲＡは、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルである。
【００７７】
いくつかの実施形態において、ＲＡはＣ３〜Ｃ８シクロアルキルである。
【００７８】
いくつかの実施形態において、ＲＡは、メチルおよびメチレンからなる群より独立して選択される１〜３個の基により必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである。一つのバリエーションにおいて、ｍは１または２である。
【００７９】
いくつかの実施形態において、ＲＡは、メチルおよびメチレンからなる群より独立して選択される１〜３個の基により必要に応じて置換されたシクロプロピルであり、ｍは１または２である。
【００８０】
いくつかの実施形態において、ｍは０または１であり、ＲＡは、メチルおよびメチレンからなる群より独立して選択される１〜３個の基により必要に応じて置換されたシクロヘキシルである。
【００８１】
いくつかの実施形態において、ＲＡは、１〜４個のハロゲン原子により必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである。いくつかの実施形態において、ＲＡは、１〜３個の塩素原子またはフッ素原子により必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである。いくつかの実施形態において、ＲＡは、１〜２個の塩素原子またはフッ素原子により必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキルである。いくつかの実施形態において、ＲＡは、１〜２個のフッ素原子により必要に応じて置換されたシクロブチルである。一つのバリエーションにおいて、ｍは１である。
【００８２】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｚ（Ｃ（ＣＨ３）２）ＲＡである。一つのバリエーションにおいて、ｚは１または２であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである。一つのバリエーションにおいて、ｚは１であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである。
【００８３】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は、以下からなる群より選択される：
【化６】
2020531530.tif 000008
【００８４】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は、以下からなる群より選択される：
【化７】
2020531530.tif 000009
【化８】
2020531530.tif 000010
【００８５】
いくつかの実施形態において、Ｒ０は、以下からなる群より選択される：
【化９】
2020531530.tif 000011
【００８６】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ−であり、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｍＲＡであり、ｍは２であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである。
【００８７】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ−であり、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｚ（Ｃ（ＣＨ３）２）ＲＡであり、ｚは１であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである。
【００８８】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ−であり、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｍＲＡであり、ｍは０であり、ＲＡは、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルである。
【００８９】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｍＲＡであり、ｍは１であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである。
【００９０】
いくつかの実施形態において、Ｒ１はＣ３〜Ｃ６アルキル（例えば、ｎ−ブチル）である。いくつかの実施形態において、Ｒ１は、プロピル、ブチル、ペンチル、またはヘキシルである。いくつかの好ましい実施形態において、Ｒ１はｎ−ブチルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１はｎ−ペンチルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａ（例えば、ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３）である。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂ（例えば、ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ３）である。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃである。一つのバリエーションにおいて、Ｒ１ｃはシクロプロピルである。
【００９１】
いくつかの実施形態において、Ｒ２はＮＨＲ２ａであり、ここで、Ｒ２ａは、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、またはメチルである。いくつかの実施形態において、Ｒ２はＮＨ２である。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、ＮＨＯＨ、ＮＨＮＨ２、またはＮＨＣＨ３である。
【００９２】
いくつかの実施形態において、Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ４ａおよびＲ４ｂの各々はＨである。
【００９３】
いくつかの実施形態において、１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンコアのフェニル部分は、非置換である（すなわち、ｑは０である）。いくつかの実施形態において、１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンコアのフェニル部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ７アルキレン）−ＮＨ２、および−ＣＨ２−フェニレン−ＣＨ２ＮＨ２からなる群より独立して選択される１、２、３、または４個の置換基により置換されている。いくつかの実施形態において、ｑは１であり、Ｒ３はＣ１〜Ｃ８アルキルである。
【００９４】
存在する場合、式（Ｊ）について記載のＸおよびＲ０の各々およびあらゆるバリエーションを、各々およびあらゆる組み合わせを具体的かつ個別に記載しているのと同じように、式（Ｊ）について記載のＲ１、ｐ、Ｒ２、ｑ、Ｒ３、Ｒ４ａ、およびＲ４ｂの各々およびあらゆるバリエーションと組み合わせることができることが意図され、理解される。
【００９５】
いくつかの実施形態において、式（Ｊ）の化合物は、式（Ｊ−１）：
【化１０】
2020531530.tif 000012
（式中、Ｒ０はＣ４〜Ｃ２１ヒドロカルビルである）の化合物またはその塩である。いくつかの実施形態において、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｍＲＡである。一つのバリエーションにおいて、ｍは１または２であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルである。一つのバリエーションにおいて、ｍは２であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである。別のバリエーションにおいて、ｍは０であり、ＲＡは、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルである。いくつかの実施形態において、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｚ（Ｃ（ＣＨ３）２）ＲＡである。一つのバリエーションにおいて、ｚは１であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、またはシクロペンチルである。いくつかの実施形態において、ＲＡは、メチル、メチレン、およびハロゲンからなる群より独立して選択される１〜４個の基により必要に応じて置換される。
【００９６】
いくつかの実施形態において、式（Ｊ）の化合物は、式（Ｊ−２）：
【化１１】
2020531530.tif 000013
（式中、Ｒ０はＣ４〜Ｃ２１ヒドロカルビルである）の化合物またはその塩であり、但し、前述の化合物は、Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）ペンタ−４−インアミド（化合物番号６３−３７）以外である。いくつかの実施形態において、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｍＲＡである。一つのバリエーションにおいて、ｍは１または２であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルである。一つのバリエーションにおいて、ｍは１であり、ＲＡはシクロプロピルである。
【００９７】
別の態様において、式（Ｋ）：
【化１２】
2020531530.tif 000014
［式中、
ｎは、４〜２１の整数であり；
Ｘは、−ＮＨ−または−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり；
Ｒ１は、Ｃ３〜Ｃ６アルキル、−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａ、−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂ、または−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃであり；ここで、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、独立して、Ｃ１〜Ｃ３アルキルであり；Ｒ１ｃはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり；ｐは１または２であり；
Ｒ２はＮＨＲ２ａであり；ここで、Ｒ２ａは、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、またはメチルであり；
各Ｒ３は、独立して、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ７アルキレン）−ＮＨ２、または−ＣＨ２−フェニレン−ＣＨ２ＮＨ２であり；
ｑは、０、１、２、３、または４であり；
Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルである］の化合物またはその塩であって、
但し、前記化合物が、２−ブチル−１−（４−（（ヘキサデシルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−３２）またはＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）パルミトアミド（化合物番号６３−３１）以外である、化合物またはその塩が提供される。
【００９８】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ−である。いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−である。
【００９９】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ−であり、ｎは、４〜１５の整数である。いくつかの好ましい実施形態において、Ｘは−ＮＨ−であり、ｎは、４〜１２の整数である。いくつかの好ましい実施形態において、Ｘは−ＮＨ−であり、ｎは、４、５、６、または７である。いくつかの実施形態において、ｎは、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５である。
【０１００】
いくつかの実施形態において、Ｘは−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり、ｎは、４〜１４の整数である。いくつかの好ましい実施形態において、Ｘは−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり、ｎは、１１、１２、１３、または１４である。いくつかの実施形態において、ｎは、４、５、６、７、８、９、または１０である。
【０１０１】
いくつかの実施形態において、Ｒ１はＣ３〜Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１は、プロピル、ブチル、ペンチル、またはヘキシルである。いくつかの好ましい実施形態において、Ｒ１はｎ−ブチルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１はｎ−ペンチルである。
【０１０２】
いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＯＲ１ａであり、ここで、ｐは１または２であり、Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ３アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３である。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＮＨＲ１ｂであり、ここで、Ｒ１ｂはＣ１〜Ｃ３アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１は−ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ３である。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｐＲ１ｃであり、ここで、ｐは１または２であり、Ｒ１ｃは、シクロプロピルまたはシクロブチルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１は、−ＣＨ２−シクロプロピルまたは−ＣＨ２ＣＨ２−シクロプロピルである。
【０１０５】
いくつかの実施形態において、Ｒ２はＮＨＲ２ａであり、ここで、Ｒ２ａは、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、またはメチルである。いくつかの好ましい実施形態において、Ｒ２はＮＨ２である。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、ＮＨＯＨ、ＮＨＮＨ２、またはＮＨＣＨ３である。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンコアのフェニル部分は、非置換である（すなわち、ｑは０である）。いくつかの実施形態において、１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンコアのフェニル部分は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ７アルキレン）−ＮＨ２、および−ＣＨ２−フェニレン−ＣＨ２ＮＨ２からなる群より独立して選択される１、２、３、または４個の置換基により置換されている。いくつかの実施形態において、ｑは１であり、Ｒ３はＣ１〜Ｃ８アルキルである。
【０１０７】
いくつかの実施形態において、Ｒ４ａおよびＲ４ｂは、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ８アルキルである。いくつかの好ましい実施形態において、Ｒ４ａおよびＲ４ｂの各々はＨである。
【０１０８】
存在する場合、式（Ｋ）について記載のＸおよびｎの各々およびあらゆるバリエーションを、各々およびあらゆる組み合わせを具体的かつ個別に記載しているのと同じように、式（Ｋ）について記載のＲ１、Ｒ２、ｑ、Ｒ３、Ｒ４ａ、およびＲ４ｂの各々およびあらゆるバリエーションと組み合わせることができることが意図され、理解される。例えば、いくつかの実施形態において、Ｒ１はＣ３〜Ｃ６アルキル（例えば、ｎ−ブチル）であり、Ｒ２はＮＨ２であり、ｑは０であり、Ｘは−ＮＨ−であり、ｎは、４、５、６、または７である。いくつかの実施形態において、Ｒ１はＣ３〜Ｃ６アルキル（例えば、ｎ−ブチル）であり、Ｒ２はＮＨ２であり、ｑは０であり、Ｘは−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり、ｎは、１１、１２、１３、または１４である。
【０１０９】
いくつかの実施形態において、式（Ｋ）の化合物は、式（Ｋ−１）：
【化１３】
2020531530.tif 000015
（式中、Ｒ’’は直鎖Ｃ４〜Ｃ２１アルキルである）の化合物またはその塩であり、但し、前述の化合物は、２−ブチル−１−（４−（（ヘキサデシルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−３２）以外である。いくつかの実施形態において、Ｒ’’は直鎖Ｃ４〜Ｃ１５アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ’’は直鎖Ｃ４〜Ｃ７アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ’’は直鎖Ｃ８〜Ｃ１５アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ’’は直鎖Ｃ１７〜Ｃ２１アルキルである。
【０１１０】
いくつかの実施形態において、式（Ｋ）の化合物は、式（Ｋ−２）：
【化１４】
2020531530.tif 000016
（式中、Ｒは直鎖Ｃ４〜Ｃ２１アルキルである）の化合物またはその塩であり、但し、前述の化合物は、Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）パルミトアミド（化合物番号６３−３１）以外である。いくつかの実施形態において、Ｒは直鎖Ｃ４〜Ｃ１４アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒは直鎖Ｃ１１〜Ｃ１４アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒは直鎖Ｃ４〜Ｃ１０アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒは直鎖Ｃ１６〜Ｃ２１アルキルである。
【０１１１】
本発明の代表的な化合物を、表１に列挙する。
【表１−１】
2020531530.tif 000017
【表１−２】
2020531530.tif 000018
【表１−３】
2020531530.tif 000019
【表１−４】
2020531530.tif 000020
【表１−５】
2020531530.tif 000021
【表１−６】
2020531530.tif 000022
【表１−７】
2020531530.tif 000023
【表１−８】
2020531530.tif 000024
【表１−９】
2020531530.tif 000025
【表１−１０】
2020531530.tif 000026
【表１−１１】
2020531530.tif 000027
【表１−１２】
2020531530.tif 000028
【表１−１３】
2020531530.tif 000029
【表１−１４】
2020531530.tif 000030
【０１１２】
さらなる化合物を、表２に列挙する。
【表２−１】
2020531530.tif 000031
【表２−２】
2020531530.tif 000032
【０１１３】
いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、表２に列挙した化合物を除外する。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、表１中の化合物番号６３−０１〜６３−３０、６３−３３〜６３−３６、および６３−３８〜６３−４９から選択される化合物またはその塩を提供する。いくつかの実施形態において、化合物は、表１中の化合物番号６３−０１〜６３−３０のうちの１またはそれより多く、またはその塩からなる群より選択される。いくつかの実施形態において、化合物は、表１中の化合物番号６３−３３〜６３−３６および６３−３８〜６３−４９のうちの１またはそれより多く、またはその塩からなる群より選択される。
【０１１５】
本発明はまた、本明細書中で言及した化合物の全ての塩（薬学的に許容され得る塩など）を含む。本発明はまた、記載の化合物の任意のまたは全ての立体化学形態（任意の鏡像異性体またはジアステレオマー形態、および任意の互変異性体または他の形態が含まれる）を含む。立体化学が化学構造または化学名に明確に示されない限り、前述の構造または名称は、示した化合物の全ての可能な立体異性体を包含することを意図する。さらに、特定の立体化学形態を示す場合、他の立体化学形態も本発明に含まれると理解される。化合物の全ての形態（化合物の結晶形態または非結晶形態など）も本発明に含まれる。本発明の化合物を含む組成物（化合物の特定の立体化学形態を含む実質的に純粋な化合物の組成物など）も意図される。化合物のラセミ混合物、非ラセミ混合物、鏡像異性体富化混合物、および鏡像異性体の不均一（ｓｃａｌｅｍｉｃ）混合物が含まれるように、任意の比の本発明の化合物の混合物（任意の比の本発明の化合物の２またはそれを超える立体化学形態の混合物が含まれる）を含む組成物も本発明に含まれる。
【０１１６】
本開示の化合物は、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８の両方のレセプターに対してバランスの取れた生物活性を示す強力なＴＬＲ７／８アゴニストであり、かつ生理化学的性質（疎水性の増加など）を有する。ＴＬＲ７およびＴＬＲ８の両レセプターに対して強力なアゴニスト生物活性を有する化合物は、これらのＴＬＲのうちの１つのみに特異的なアゴニストより潜在的に有効な免疫アジュバントであり、広範な抗原提示細胞および他の重要な免疫細胞型（形質細胞様樹状細胞および骨髄系樹状細胞、単球、およびＢ細胞が含まれる）における自然免疫応答を促進するであろう（例えば、Ｖａｓｉｌａｋｏｓ  ｅｔ  ａｌ  ２０１３  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  １２：８０９−８１９を参照のこと）。疎水性の増加などの生理化学的性質を有する化合物は、油系処方アプローチに適合し、かつ薬学的組成物が注射部位での化合物の保持を促進することが可能であることが公知である。
【０１１７】
いくつかの実施形態において、式（Ｊ）または（Ｋ）の化合物は、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８の両方を活性化することができる。いくつかの実施形態において、式（Ｊ）または（Ｋ）の化合物は、ＴＬＲ７については約２００ｎＭまたはそれ未満のＥＣ５０、ＴＬＲ８については約２０００ｎＭまたはそれ未満のＥＣ５０を有し、ここで、ＥＣ５０値は、実施例Ｂ１に記載のとおりである。いくつかの実施形態において、式（Ｊ）または（Ｋ）の化合物は、ＴＬＲ７については約５０ｎＭまたはそれ未満のＥＣ５０、ＴＬＲ８については約１０００ｎＭまたはそれ未満のＥＣ５０を有する。いくつかの実施形態において、式（Ｊ）または（Ｋ）の化合物は、ＴＬＲ７については約２００ｎＭ、約１７５ｎＭ、約１５０ｎＭ、約１２５ｎＭ、約１００ｎＭ、約７５ｎＭ、約５０ｎＭ、約４０ｎＭ、約３０ｎＭ、約２０ｎＭ、約１０ｎＭ、約８ｎＭ、約６ｎＭ、約５ｎＭ、約４ｎＭ、約３ｎＭ、約２ｎＭ、約１ｎＭ、または約０．５ｎＭのＥＣ５０；およびＴＬＲ８については約２０００ｎＭ、１５００ｎＭ、１０００ｎＭ、９００ｎＭ、８００ｎＭ、７００ｎＭ、６００ｎＭ、５００ｎＭ、４００ｎＭ、３００ｎＭ、２００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１０ｎＭ、５ｎＭ、１ｎＭ、または０．５ｎＭのＥＣ５０を有する。
【０１１８】
式（Ｊ−１）または（Ｋ−１）の化合物は、１−（４−（アミノメチル）ベンジル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（ＩＭＤＱ）のＮ−アルキル誘導体であり；一方で、式（Ｊ−２）または（Ｋ−２）の化合物は、ＩＭＤＱのＮ−アシル誘導体である。ＩＭＤＱ（化合物番号６３−００）は、ＴＬＲ７レセプターおよびＴＬＲ８レセプターの両方に強力なインビトロ活性を示す（例えば、米国特許第８，７２８，４８６号および同第９，４４１，００５号を参照のこと）。本発明の化合物のベンジルアミンでのアルキル鎖修飾により疎水性が増大し、それにより、薬学的組成物による注射部位での化合物の保持の促進が可能である。しかし、炭素鎖長が増加したアルキル鎖誘導体の疎水性が有意に増加し得る一方で（例えば、分配係数またはｃＬｏｇＰの計算によって評価した場合）、これらの誘導体はまた、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８の両方に対するアゴニスト効力が減少し得るか、前述の２つのレセプターのうちの１つに対する生物活性が選択的に減少し得る。例えば、Ｎ−オクタデカノイル誘導体（化合物番号６３−１３）は、同一のインビトロヒト免疫細胞生物活性アッセイにおいて、その同類の親ＩＭＤＱよりもＴＬＲ７に対する効力は１／４０未満であり、ＴＬＲ８に対する効力は１／２６未満である。予想外には、ＩＭＤＱのＮ−テトラデカノイル誘導体（化合物番号６３−１０）は、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８に対する効力がそれぞれＩＭＤＱのたった１／２および１／２．４である。これらのデータは、アルキル鎖が最適な長さであると強力でバランスの取れたＴＬＲ７／８アゴニスト生物活性が得られ、また、薬学的組成物に組み込まれる疎水性の増加により注射部位での化合物の保持が促進されることを実証している。
【０１１９】
式（Ｊ−１）または（Ｋ−１）の化合物は、１−（４−（アミノメチル）ベンジル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（ＩＭＤＱ）のＮ−アルキル誘導体である。炭素鎖長が増加したアルキル鎖誘導体の疎水性が増加し得る一方で（例えば、分配係数またはｃＬｏｇＰの計算によって評価した場合）、これらの誘導体はまた、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８の両方に対するアゴニスト効力が減少し得るか、前述の２つのレセプターのうちの１つに対する生物活性が選択的に減少し得る。例えば、４−オクタデシルアミノ誘導体（化合物番号６３−２９）は、同一のインビトロヒト免疫細胞生物活性アッセイにおいて、その同類の親ＩＭＤＱよりもＴＬＲ７に対する効力は１／１９未満であり、ＴＬＲ８に対する効力は１／１２未満である（例えば、実施例Ｂ１を参照のこと）。興味深いことに、４−ペンチルアミノ誘導体（化合物番号６３−１７）は、ＩＭＤＱよりＴＬＲ７に対する効力は１／２しか低くなく、ＴＬＲ８に対する効力は２倍であるが、疎水性は化合物番号６３−２９より有意に低い。予想外には、４−（２−シクロプロピルエチル）アミノ誘導体（化合物番号６３−３３）は、ＩＭＤＱよりＴＬＲ７に対する効力は１／４しか低くなく、ＴＬＲ８に対する効力は２．９倍であり、直鎖５炭素バリアント（化合物番号６３−１７）と比較して、ｃＬｏｇＰが増大している。これらのデータは、アルキル鎖が最適な長さであると強力でバランスの取れたＴＬＲ７／８アゴニスト生物活性が得られ、また、薬学的組成物に組み込まれ得る疎水性の増加により注射部位での化合物の保持が促進されることを実証している。
【０１２０】
バランスの取れた二重効力を有するＴＬＲ７／８アゴニスト小分子はまた、単一の薬学的有効成分を合成して特徴付けることが可能であり、それにより、より低価格でのＧＭＰの製造を容易にし、制御経路を簡潔かつ予想可能にすることができる。
【０１２１】
式（Ｊ）の化合物を、スキーム１に従い、そして／または当該分野で公知の方法を使用して合成することができる。
スキーム１
【化１５】
2020531530.tif 000033
（式中、Ｒ１、Ｒ２、ｑ、およびＲ３は、式（Ｊ）について定義のとおりであり、ＲおよびＲ０は、ヒドロカルビル基である）。
【０１２２】
Ｘが−ＮＨ−であり、Ｒ０が−（ＣＨ２）ｍＲＡであり、ｍは１または２であり、ＲＡは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルである、式（Ｊ）の好ましい化合物を、以下のカルボン酸を使用して調製することができる：シクロプロパンカルボン酸、シクロプロピル酢酸、シクロブタンカルボン酸、シクロブチル酢酸、シクロペンタンカルボン酸、シクロペンチル酢酸、シクロヘキサンカルボン酸、およびシクロヘキサン酢酸。Ｘが−ＮＨ−であり、Ｒ０が−（ＣＨ２）ｍＲＡであり、ｍは、１、２、または３であり、ＲＡは、シクロプロピル、２−メチルシクロプロピル、２，２，−ジメチルシクロプロピル、１−メチルシクロプロピル、１−メチルシクロブチル、３−メチルシクロブチル、または３−フルオロシクロブチルである、式（Ｊ）の好ましい化合物を、以下のカルボン酸を使用して調製することができる：シクロプロパンカルボン酸、２−メチルシクロプロパンカルボン酸、２，２−ジメチルシクロプロパンカルボン酸、１−メチルシクロプロパンカルボン酸、１−メチルシクロブタンカルボン酸、３−メチルシクロブタンカルボン酸、または３−フルオロシクロブタンカルボン酸。Ｘが−ＮＨ−であり、Ｒ０が−（ＣＨ２）（Ｃ（ＣＨ３）２）ＲＡであり、ＲＡはシクロプロピルまたはシクロブチルである、式（Ｊ）の好ましい化合物を、以下のカルボン酸を使用して調製することができる：シクロプロパンカルボン酸またはシクロブタンカルボン酸。代表的な化合物番号６３−３３の合成スキームの詳細な説明を、実施例Ｓ３に見出すことができる。
【０１２３】
いくつかの実施形態において、Ｒ１は、Ｃ３〜Ｃ６アルキル（例えば、ｎ−ブチル）であり、Ｒ２はＮＨ２であり、Ｘは−ＮＨ−であり、Ｒ０は−（ＣＨ２）ｍＲＡであり、ｍは０であり、ＲＡはシクロアルキルである場合、化合物を、スキーム１−２にしたがって合成する。Ｒ１がｎ−ブチルであり、Ｒ２がＮＨ２であり、Ｘが−ＮＨ−であり、Ｒ０が−（ＣＨ２）ｍＲＡであり、ｍは０であり、ＲＡはシクロヘキシルである、式（Ｊ）の化合物（化合物番号６３−４９）を、実施例Ｓ１０に記載の合成にしたがって調製する。
スキーム１−２
【化１６】
2020531530.tif 000034
（式中、Ｒ１、ｑ、およびＲ３は、式（Ｊ）について定義のとおりであり、Ｒはシクロアルキル基である）。
【０１２４】
式（Ｋ）の化合物を、スキーム２にしたがって、そして／または当該分野で公知の方法を使用して合成することができる。
スキーム２
【化１７】
2020531530.tif 000035
（式中、Ｒ１、Ｒ２、ｑ、およびＲ３は、式（Ｋ）について定義のとおりであり、ＲおよびＲ’’は直鎖アルキル基である。
【０１２５】
Ｘが−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−であり、ｎが４〜２１の整数であり、但し、化合物がＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）パルミトアミド（化合物番号６３−３１）以外である、式（Ｋ）の好ましい化合物を、以下のカルボン酸を使用して調製することができる；ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸（ｈｅｐｔａｏｎｉｃ）、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、トリデカン酸、テトラデカン酸、ペンタデカン酸、ヘキサデカン酸、ヘプタデカン酸、オクタデカン酸、ノナデカン酸、イコサン酸、ヘンエイコサン酸、およびドコサン酸。代表的な化合物番号６３−１０および６３−１７の合成スキームの詳細な説明を、実施例Ｓ１およびＳ２にそれぞれ見出すことができる。
【０１２６】
いくつかの実施形態において、Ｒ１は、Ｃ３〜Ｃ６アルキル（例えば、ｎ−ブチル）であり、Ｒ２はＮＨ２であり、ｑは０である場合、化合物を、スキーム３または４にしたがって合成する。化合物番号６３−００（スキーム３および４中の出発化合物）の調製に有用な各反応工程のより詳細な説明については、例えば、米国特許第８，７２８，４８６号および同第９，４４１，００５号を参照のこと。
スキーム３
【化１８】
2020531530.tif 000036
（式中、ＲおよびＲ０はヒドロカルビル基である）
スキーム４
【化１９】
2020531530.tif 000037
（式中、ＲおよびＲ’’は直鎖アルキル基である）。
【０１２７】
当業者は、他の合成経路（種々の溶媒、触媒、還元剤、温度、反応時間、および大気条件が含まれる）を使用して、本発明に記載の範囲の化合物を合成することができることを認識するであろう。
【０１２８】
従来の分離および精製の方法および技術を使用して、本発明の化合物を単離することができる。技術としては、異なるマトリックス（例えば、Ｃ１８、Ｃ８、Ｃ４などを参照のこと）を使用した高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）、典型的な吸着剤（例えば、シリカゲル、活性炭、アルミナ、およびゼオライトなどを参照のこと）を使用したクロマトグラフィ、再結晶、および差分抽出法（例えば、液体−液体および固相など）が挙げられ得る。
ＩＩＩ．薬学的組成物
【０１２９】
本開示のアルキル鎖修飾１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンＴＬＲ７／８アゴニストを含む薬学的組成物も提供する。薬学的組成物は、慣用的には、１またはそれを超える薬学的に許容され得る賦形剤を含む。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、抗原をさらに含む。本開示の薬学的組成物は、好ましくは、無菌であり、好ましくは本質的に内毒素を含まない。
賦形剤
【０１３０】
本開示の薬学的に許容され得る賦形剤としては、例えば、油、脂質、溶媒、増量剤、界面活性剤、緩衝剤、張度調整剤、および防腐剤が挙げられる（例えば、Ｐｒａｍａｎｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ  ２０１３  Ｐｈａｒｍａ  Ｔｉｍｅｓ  ４５：６５−７７を参照のこと）。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、溶媒、増量剤、緩衝剤、および張度調整剤のうちの１つまたは複数として機能する賦形剤を含む（例えば、生理食塩水中の塩化ナトリウムは水性ビヒクルおよび張度調整剤の両方としての機能を果たし得る）。本開示の薬学的組成物は、非経口投与経路に適切であり、場合によっては、腫瘍内投与が優先される。ある特定の実施形態において、本開示の薬学的組成物は、腸内投与を意図しない。
【０１３１】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、非経口投与を可能にするためおよび注射部位での化合物の保持を促進するためにＴＬＲ７／８アゴニスト化合物を可溶化するための油ベースの賦形剤を含む。油ベースの賦形剤の非限定的な例は当業者に公知であり、医薬品グレードのゴマ油、ダイズ油、ヒマシ油、トウモロコシ油、綿実油、ピーナッツ油、ミグリオール（登録商標）、およびスクアレンオイルなどが含まれる。これらの油を、クロマトグラフィプロセスによって精製または不純物を除去して極性不純物レベルを低下させることができ、それにより、一貫した性質および不純物プロフィールを有する米国薬局方−国民医薬品集／日本薬局方／欧州薬局方グレードの生成物を生成することができる。
【０１３２】
いくつかの実施形態において、ＴＬＲ７／８アゴニスト化合物を、最初に１００％エタノール賦形剤に溶解し、次いで、油への化合物の可溶化を容易にするために油で最終濃度２〜２０％エタノールに希釈する。使用に適切なエタノールは、水または変性剤を含まないエタノール（例えば、２００プルーフのエタノール、ＵＳＰグレードの脱水アルコールなどを参照のこと）である。
【０１３３】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、防腐剤を含む。適切な防腐剤としては、例えば、抗菌剤および抗酸化剤が挙げられる。好ましい実施形態において、薬学的組成物を、滅菌条件下で調製して単回使用の容器に入れるため、抗菌剤を含める必要はない。当業者は、着色、匂い、または過酸化物形成を防止するために使用される医薬品グレードの抗酸化剤（ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、第三ブチルヒドロキノン（ＴＢＨＱ）、ビタミンＥ、および没食子酸プロピルなどが挙げられるが、これらに限定されない）を、これらの油ベースの製剤に添加することができると認識するであろう。ある特定の実施形態において、５℃〜４０℃の温度で保存した場合に、１年間までの期間油ベースの製剤の安定性を確保するための製剤中の抗酸化剤の添加濃度は、少なくとも１０ｐｐｍ、５０ｐｐｍ、１００ｐｐｍ、３００ｐｐｍ、５００ｐｐｍ、および１０００ｐｐｍまでである。
【０１３４】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、水中油型ナノエマルジョン（例えば、Ｄｏｗｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ  ２０１７  ＪＣＩ  Ｉｎｓｉｇｈｔ  ２：ｅ９１０２０を参照のこと）またはリポソームベースの製剤（例えば、ＶａｎＨｏｅｖｅｎ  ｅｔ  ａｌ  ２０１７  Ｓｃｉ  Ｒｅｐ  ７：４６４２６を参照のこと）を含む。水中油型ナノエマルジョンベースの薬学的組成物を例証している１つの実施形態において、式（Ｊ）または（Ｋ）のＴＬＲ７／８アゴニスト化合物を、リン脂質（例えば、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ｒａｃ−グリセロール）；１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；およびＬ−α−ホスファチジルコリンなど）、トリグリセリドベースの油（例えば、ゴマ油、ダイズ油、ヒマシ油、トウモロコシ油、綿実油、ピーナッツ油、ミグリオール（登録商標）、およびスクアレンオイルなどを参照のこと）、および必要に応じて有機改変因子（例えば、エタノール）から構成される油相に溶解する。次に、適切な緩衝液、等張剤、乳化剤、および必要に応じて防腐剤を含む水相を油相に添加し、粗エマルジョンを、５〜１０分間の高剪断混合（例えば、Ｐｏｌｙｔｒｏｎ（登録商標））によって形成する。最後に、平均直径１００〜１５０ｎｍの範囲（動的光散乱によって評価）および分散度指数０．１〜０．２の範囲の粒子を含むナノエマルジョンを、高剪断ホモジナイザー（例えば、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ  Ｍ１１０Ｐを参照のこと）を３０，０００ｐｓｉで１０〜１５回通過させることによって粗エマルジョンを処理することによって形成する。
【０１３５】
リポソームベースの薬学的組成物を例証している別の実施形態において、式（Ｊ）または（Ｋ）のＴＬＲ７／８アゴニスト化合物を、有機改変因子ならびに脂質テール長が様々な電荷を持たない、正電荷、負電荷、およびＰＥＧ化されたリン脂質と、コレステロールとを種々の比で（リポソームの所望の生理化学的性質に依存する）使用したリン脂質の適切な混合物に溶解する。次いで、有機溶媒を、ロータリーエバポレーターを使用して除去し、脂質／化合物薄膜を製剤が目視可能な粒子を持たない半透明な状態になるまで、水性緩衝液に再溶解する。最後に、得られた多重膜リポソームを、高剪断均質化または膜押出機（例えば、Ｌｉｐｅｘ（登録商標））のいずれかを使用して、平均直径１００〜１５０ｎｍの範囲（動的光散乱によって評価）および分散度指数０．１〜０．２の範囲の単層リポソームに加工する。これらの例は非限定的であり、当業者は、水中油型ナノエマルジョンおよびリポソームベースの薬学的組成物をいくつかの異なる方法のうちのいずれかによって形成することができることを認識するであろう（例えば、Ｂｒｉｔｏ  ｅｔ  ａｌ  ２０１３  Ｓｅｍｉｎａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２５：１３０−１４５を参照のこと）。
【０１３６】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は増量剤を含む。増量剤は、薬学的組成物を投与前に凍結乾燥させなければならない場合に特に有用である。いくつかの実施形態において、増量剤は、フリーズドライおよび／または保存中の活性な作用物質の安定化および分解の防止を補助する凍結乾燥保護剤である。適切な増量剤は、糖類（単糖、二糖、および多糖）（スクロース、ラクトース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール（ｓｏｒｂｉｔａｌ）、グルコース、およびラフィノースなど）である。
【０１３７】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、緩衝剤を含む。緩衝剤は、加工中、貯蔵中および必要に応じて再構成中の活性な作用物質の分解を阻害するようにｐＨを制御する。適切な緩衝剤としては、例えば、酢酸塩、クエン酸塩、リン酸塩または硫酸塩を含む塩が挙げられる。他の適切な緩衝剤としては、例えば、アミノ酸（例えば、アルギニン、グリシン、ヒスチジンおよびリジンなど）が挙げられる。緩衝剤は、塩酸または水酸化ナトリウムをさらに含み得る。いくつかの実施形態において、緩衝剤は、組成物のｐＨを４〜９の範囲内で維持する。いくつかの実施形態において、そのｐＨは、（下限）４、５、６、７、または８より高い。いくつかの実施形態において、そのｐＨは、（上限）９、８、７、６、または５未満である。すなわち、そのｐＨは、下限が上限より小さい、約４．０〜９．０の範囲内である。
【０１３８】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、張度調整剤を含む。適切な張度調整剤としては、例えば、デキストロース、グリセロール、塩化ナトリウム、グリセリンおよびマンニトールが挙げられる。
抗原
【０１３９】
１つの態様において、本開示は、抗原を含む薬学的組成物を提供する。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、アルキル鎖修飾１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンＴＬＲ７／８アゴニスト、１またはそれを超える賦形剤、および抗原を含む。これらの実施形態のいくつかにおいて、抗原はタンパク質抗原である。これらの実施形態のいくつかにおいて、抗原は、好ましくは担体タンパク質に共有結合性に付着した多糖抗原である。いくつかの実施形態において、抗原は、微生物抗原、アレルゲン、または腫瘍関連抗原である。いくつかの実施形態において、抗原は、ウイルス抗原、原生動物抗原、細菌抗原、または真菌抗原である。いくつかの実施形態において、腫瘍抗原は、自己抗原またはネオ抗原である。
【０１４０】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、ウイルス抗原、細菌抗原、真菌抗原、および寄生虫抗原からなる群より選択される微生物抗原を含む。いくつかの実施形態において、微生物抗原は、非ヒトの哺乳動物被験体において感染症を引き起こす微生物に由来する。いくつかの実施形態において、微生物抗原は、ヒト被験体において感染症を引き起こす微生物に由来する。いくつかの実施形態において、感染症は、ウイルス、細菌、真菌、または寄生原生動物により引き起こされる。適切な微生物抗原としては、例えば、アデノウイルスタイプ４、アデノウイルスタイプ７、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ（炭疽）、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ（例えば、ジフテリアトキソイド）、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ（例えば、破傷風トキソイド）、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、インフルエンザ菌タイプＢ、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（例えば、ＨＢｓＡｇ）、ヒトパピローマウイルス（タイプ６、１１、１６、１８、３１、３３、４５、５２、および５８）インフルエンザウイルスタイプＡおよびＢ（例えば、赤血球凝集素、ノイラミニダーゼ（ｎｅｕｒａｍｉｎａｄａｓｅ））、インフルエンザウイルスタイプＢ、パラインフルエンザウイルス、日本脳炎ウイルス、麻疹ウイルス、ムンプスウイルス、風疹ウイルス、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｇｉｔｉｄｉｓ（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｙ、およびＷ−１３５群）、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ（血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、および２３Ｆ）、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ロタウイルス、ワクシニアウイルス、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ、水痘帯状疱疹ウイルス、および黄熱病ウイルスの抗原が挙げられる（例えば、Ｐｌｏｔｋｉｎ，Ｓ．Ａ．，Ｏｒｅｎｓｔｅｉｎ，Ｗ．，Ｏｆｆｉｔ，Ｐ．Ａ．，Ｅｄｗａｒｄｓ  Ｋ．Ｍ．（２０１７）．Ｐｌｏｔｋｉｎ’ｓＶａｃｃｉｎｅｓ，７ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ．Ｅｌｓｅｖｉｅｒを参照のこと）。いくつかの実施形態において、微生物抗原は、単純ヘルペスウイルスタイプ１または２、ヒトヘルペスウイルス、ヒト免疫不全ウイルスタイプ１、および呼吸器合胞体ウイルスのウイルス抗原である。いくつかの実施形態において、微生物抗原は、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｌａｖｕｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ  ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ、およびＰｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉの真菌抗原である。いくつかの実施形態において、微生物抗原は、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ種、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ種、またはＴｒｙｐａｎｏｓｏｍａ種の寄生虫抗原である。
【０１４１】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物はアレルゲンを含む。いくつかの実施形態において、アレルゲンは、環境抗原（哺乳動物、昆虫、植物、およびカビのアレルゲンなど）である。いくつかの実施形態において、哺乳動物アレルゲンには、毛皮および鱗屑が挙げられる。適切な哺乳動物アレルゲンとしては、例えば、ネコＦｅｌ  ｄ１、ウシＢｏｓ  ｄ２、イヌＣａｎ  ｆ  ＩおよびＣａｎ  ｆ  ＩＩ、ウマＥｑｕ  ｃ１、およびマウスＭＵＰが挙げられる。いくつかの実施形態において、昆虫アレルゲンには、昆虫の糞および毒液が挙げられる。例示的な昆虫アレルゲンとしては、アリＳｏｌ  ｉ２、ミツバチＰＬＡおよびＨｙａ、ゴキブリＢｌａ  ｇ  Ｂｄ９ＯＫ、Ｂｌａ  ｇ４、ＧＳＴ、およびＰｅｒ  ａ３、チリダニＤｅｒ  ｐ２、Ｄｅｒ  ｆ２、Ｄｅｒ  ｐ１０、およびＴｙｒ  ｐ２、ホーネットＤｏｌ  ｍ  Ｖ、カＡｅｄ  ａ１、ならびにスズメバチのヒアルロニダーゼおよびホスホリパーゼが挙げられる。いくつかの実施形態において、植物アレルゲンとしては、イネ科草本、雑草、および樹木のアレルゲン（例えば、花粉）が挙げられる。適切なイネ科草本アレルゲンとしては、例えば、ケンタッキーブルーグラス、ヒロハノウシノケグサ、カモガヤ、コヌカグサ、ペレニアルライグラス、ハルガヤ、およびチモシーのアレルゲンが挙げられる。例示的な植物アレルゲンとしては、オオムギＨｏｒ  ｖ９、カバノキＢｅｔ  ｖ１およびｖ２、チェリーＰｒｕ  ａ１、トウモロコシＺｍｌ３、イネ科草本Ｐｈｌ  ｐ１、２、４、５、６、７、１１、および１２、Ｈｏｌ  １５、Ｃｙｎ  ｄ７およびｄ１２、ヒマラヤスギＪｕｎ  ａ２、Ｃｒｙ  ｊ１、およびｊ２、ビャクシンＪｕｎ  ｏ２、ラテックスＨｅｖ  ｂ７、イエローマスタードＳｉｎ  ａ  Ｉ、アブラナＢｒａ  ｒ１、ブタクサＡｍｂ  ａ１、ならびにライムギＬｏｌ  ｐ１が挙げられる。いくつかの実施形態において、カビアレルゲンは、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓアレルゲン（Ａｓｐ  ｆ  １、２、３、４、および６など）である。いくつかの実施形態において、アレルゲンは、食物アレルゲン（甲殻類アレルゲン、マメ科植物アレルゲン、堅果アレルゲン、またはミルクアレルゲンなど）である。例示的な食物アレルゲンとしては、エビトロポミオシン、ピーナッツＡｒａ  ｈ１、２、３、８、および９、クルミＪｕｇ  ｒ１および３、ヘーゼルナッツＣｏｒ  ａ１、１４、および８  ＬＴＰ、牛乳ラクトアルブミン、カゼイン、およびラクトフェリンが挙げられる。
【０１４２】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は腫瘍抗原を含む。いくつかの実施形態において、腫瘍抗原は、完全長タンパク質またはそのフラグメント（例えば、約１０〜約１００アミノ酸長のポリペプチド）のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、腫瘍抗原は、ＷＴ１、ＭＵＣ１、ＬＭＰ２、ＨＰＶ  Ｅ６、ＨＰＶ  Ｅ７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ、イディオタイプ、ＭＡＧＥ  Ａ３、ｐ５３、ＮＹ−ＥＳＯ−１（ＣＴＡＧ１）、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、ＭｅｌａｎＡ／Ｍａｒｔ１、Ｒａｓ、ｇｐ１００、プロテイナーゼ３、ｂｃｒ−ａｂｌｅ、チロシナーゼ、サバイビン、ＰＳＡ、ｈＴＥＲＴ、肉腫転座ブレークポイント（ｓａｒｃｏｍａ  ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ  ｂｒｅａｋｐｏｉｎｔ）、ＥｐｈＡ２、ＰＡＰ、ＭＰ−ＩＡＰ、ＡＦＰ、ＥｐＣＡＭ、ＥＲＧ、ＮＡ１７−Ａ、ＰＡＸ３、ＡＬＫ、アンドロゲンレセプター、サイクリンＢ１、ＭＹＣＮ、ＰｈｏＣ、ＴＲＰ−２、メソテリン、ＰＳＣＡ、ＭＡＧＥ  Ａ１、ＣＹＰ１Ｂ１、ＰＬＡＣ１、ＢＯＲＩＳ、ＥＴＶ６−ＡＭＬ、ＮＹ−ＢＲ−１、ＲＧＳ５、ＳＡＲＴ３、炭酸脱水酵素ＩＸ、ＰＡＸ５、ＯＹ−ＴＥＳ１、精子タンパク質１７、ＬＣＫ、ＨＭＷＭＡＡ、ＡＫＡＰ−４、ＳＳＸ２、ＸＡＧＥ１、Ｂ７−Ｈ３、レグマイン、Ｔｉｅ２、Ｐａｇｅ４、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＤ−ＣＴ−１、ＦＡＰ、ＰＡＰ、ＰＤＧＦＲ−ベータ、ＭＡＤ−ＣＴ−２、ＣＥＡ、ＴＲＰ−１（ｇｐ７５）、ＢＡＧＥ１、ＢＡＧＥ２、ＢＡＧＥ３、ＢＡＧＥ４、ＢＡＧＥ５、ＣＡＭＥＬ、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ５、ＭＡＧＥ−Ａ６、ＭＡＧＥ−Ａ８、ＭＡＧＥ−Ａ９、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＧＥ−Ａ１１、ＭＡＧＥ−Ａ１２、およびＦｏｓ関連抗原１からなる群のうちの１つまたは複数の完全長タンパク質またはポリペプチドフラグメントを含む。いくつかの好ましい実施形態において、腫瘍抗原は、ｇｐ１００、ｈＴＥＲＴ、ＭＡＧＥ  Ａ１、ＭＡＧＥ  Ａ３、ＭＡＧＥ  Ａ１０、ＭｅｌａｎＡ／Ｍａｒｔ１、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＰＳＡ、Ｒａｓ、サバイビン、ＴＲＰ１（ｇｐ７５）、ＴＲＰ２、およびチロシナーゼからなる群のうちの１つまたは複数に由来するアミノ酸配列またはそのフラグメントを含む。
ＩＶ．使用方法
【０１４３】
本開示の薬学的組成物は、免疫応答の刺激を必要とする哺乳動物被験体における免疫応答の刺激を含む複数の使用に適している。哺乳動物被験体としては、ヒト、非ヒト霊長類、げっ歯類、ペットおよび家畜が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、特定の結果を達成するために有効な量で被験体に投与される。
投与量および投与様式
【０１４４】
あらゆる薬学的組成物と同様に、有効量および投与様式は、当業者に明らかないくつかの因子に基づいて変化し得る。考慮されるべき因子としては、アルキル鎖修飾１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンＴＬＲ７／８アゴニスト化合物の効力、化合物および薬学的組成物が投与部位でのアゴニスト化合物の保持を促進する能力、投与経路、および薬学的組成物が抗原を含むかどうかが挙げられる。考慮されるべき他の因子としては、達成されるべき疾患改変の結果および治療レジメン中に与えられる投与の回数／頻度が挙げられる。
【０１４５】
適切な投与量範囲は、所望の臨床効果が得られる投与量範囲である。投与量を、最小限の有害事象で所望の治療応答を得るために被験体に送達される必要がある薬学的組成物中のＴＬＲ７／８アゴニストの量によって決定することができる。被験体の体重を基準とした送達すべき量で示されたＴＬＲ７／８アゴニスト化合物の例示的な投与量の範囲は、約１〜５０００ｎｇ／ｋｇ（約１〜２，５００ｎｇ／ｋｇ、約１〜１，０００ｎｇ／ｋｇ、約１〜５００ｎｇ／ｋｇ、約１〜２５０ｎｇ／ｋｇ、約１〜１００ｎｇ／ｋｇ、約１〜５０ｎｇ／ｋｇ、約５０〜２，５００ｎｇ／ｋｇ、約５０〜１，０００ｎｇ／ｋｇ、約５０〜５００ｎｇ／ｋｇ、約１００〜５，０００ｎｇ／ｋｇ、約１００〜２，５００ｎｇ／ｋｇ、約１００〜１，０００ｎｇ／ｋｇ、約１００〜５００ｎｇ／ｋｇ、約５００〜５，０００ｎｇ／ｋｇ、約１，０００〜５，０００ｎｇ／ｋｇ、約２，０００〜５，０００ｎｇ／ｋｇ、約２，５００〜５，０００ｎｇ／ｋｇ、約３，０００〜５，０００ｎｇ／ｋｇ、または約４，０００〜５，０００ｎｇ／ｋｇなど）である。いくつかの実施形態において、投与量は、およそ（下限）１、５、１０、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００ｎｇ／ｋｇ超である。いくつかの実施形態において、投与量は、およそ（上限）５０００、２０００、１０００、９００、８００、７００、６００、５００、４５０、４００、３５０、３００、２５０、２００、１５０、または１００ｎｇ／ｋｇ未満である。すなわち、投与量は、下限が上限より小さい、約１〜５０００ｎｇ／ｋｇの範囲のいずれかである。被験体に送達すべき量で示したＴＬＲ７／８アゴニストの例示的な投与量範囲は、約１〜５０００ｎｇである。いくつかの実施形態において、投与量は、さらに多量であり得る（例えば、約２，５００〜５００，０００ｎｇ／ｋｇ、約５，０００〜５００，０００ｎｇ／ｋｇ、約２，５００〜１５０，０００ｎｇ／ｋｇ、約２，５００〜１００，０００ｎｇ／ｋｇ、約２，５００〜５０，０００ｎｇ／ｋｇ、約２，５００〜２５，０００ｎｇ／ｋｇ、約２，５００〜１０，０００ｎｇ／ｋｇ、約１０，０００〜５００，０００ｎｇ／ｋｇ、約２５，０００〜５００，０００ｎｇ／ｋｇ、約５０，０００〜５００，０００ｎｇ／ｋｇ、約１００，０００〜５００，０００ｎｇ／ｋｇ、または約１５０，０００〜５００，０００ｎｇ／ｋｇ）。
【０１４６】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物が抗原をさらに含む場合、被験体に送達すべき量で示した抗原投与量範囲は、約１μｇ〜５００μｇである。いくつかの実施形態において、抗原投与量は、約１μｇ〜５０μｇである。いくつかの実施形態において、抗原投与量は、およそ（下限）１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、１００、２００、または４００μｇ超である。いくつかの実施形態において、抗原投与量は、およそ（上限）５００、４００、３００、２００、１００、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、または１０μｇ未満である。すなわち、抗原投与量は、下限が上限より小さい、約１〜５００μｇの範囲のいずれかである。最適な抗原投与量を、個別の抗原についての実験手段によって決定することができる。
【０１４７】
同様に、適切な投与経路は、所望の効果が得られる投与経路である。一般に、本開示の薬学的組成物は、非経口投与を意図する（例えば、経口投与や直腸投与ではない）。適切な投与経路には、注射、局所、および吸入が挙げられる。特に、本開示の薬学的組成物を、腫瘍内、筋肉内、皮下、静脈内、上皮（遺伝子銃）、経皮、および吸入などの経路によって投与することができる。吸入による投与に適切なデバイスとしては、例えば、アトマイザー、気化器、ネブライザー、およびドライパウダー吸入送達デバイスが挙げられる。いくつかの実施形態において、薬学的組成物が固形腫瘍の処置を意図する場合、組成物を腫瘍内投与する。１つの実施形態では、腫瘍内投与は、少なくとも１つの腫瘍病変への注射による投与である。
【０１４８】
薬学的組成物中に製剤化されたＴＬＲ７／８アゴニストの適切な投薬レジメンは、予防的または治療的な状況において最小の有害事象で所望の効果をもたらす投薬レジメンである。選択された経路によって投与される回数は、１回または１回を超える回数であり得る。投薬頻度は、毎週、隔週、毎月、隔月、または３〜１２ヶ月の投与間隔の範囲であり得る。ＴＬＲ７／８アゴニストの例示的な投与頻度は、およそ１週間に１回から８週間毎に１回までである。いくつかの実施形態において、投与頻度は、８、６、４、２、または１週間毎に約１回超（上限）である。いくつかの実施形態において、投与頻度は、７、１０、または１４日毎に約１回未満（下限）である。被験体に送達されるべきＴＬＲ７／８アゴニストの例示的な投与頻度範囲は、およそ１週間毎に１回から４週間毎に１回である。いくつかの実施形態では、２回投与され、２回目の投与は、１回目の投与の１〜２ヶ月後に投与される。いくつかの実施形態では、３回投与され、２回目の投与は、１回目の投与の１〜２ヶ月後に投与され、３回目の投与は、２回目の投与の１〜５ヶ月後に投与される。他の実施形態では、３〜１２ヶ月間の処置スケジュールにわたって一連の用量を投与することができ、ここで、投与頻度は、１週間毎、隔週、３週間毎、または１ヶ月に１回である。他の実施形態では、それより短いまたは長い期間が、投与間に経過し得る。ある特定の実施形態では、連続する投与の間の間隔は、週数または月数で変動し得る。１つの実施形態において、１週間に２、３、４、５または６回というひと続きの投与が行われた後、その後の時点において、１週間に数回という第２のひと続きの投与が行われ得る。当業者は、生物学的結果（抗原特異的抗体応答または腫瘍退縮など）を計測することによって、投与レジメンを調整することができるであろう。
免疫応答の刺激
【０１４９】
１つの態様において、本開示は、免疫応答の刺激を必要とする哺乳動物被験体において免疫応答を刺激する方法であって、哺乳動物被験体に、前述の被験体における免疫応答を刺激するのに十分な量および頻度で薬学的組成物を投与する工程を含む方法を提供する。免疫応答を「刺激する」は、新規の免疫応答を誘発する（例えば、初回のワクチン接種レジメンの結果として）かまたは既存の免疫応答を増大する（例えば、追加免疫のワクチン接種レジメンの結果として）ことによって生じ得る、免疫応答の増大を意味する。いくつかの実施形態において、免疫応答を刺激することは、ＩＦＮαの産生を刺激すること、タイプ１および／またはタイプ２インターフェロンの産生を刺激すること、ＩＬ−６の産生を刺激すること、ＴＮＦαの産生を刺激すること、Ｂリンパ球の増殖を刺激すること、インターフェロン経路に関連する遺伝子の発現を刺激すること、化学誘引物質に関連する遺伝子の発現を刺激すること、および形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）または骨髄系樹状細胞（ｍＤＣ）の成熟を刺激することからなる群のうちの１つまたは複数を含む。免疫応答の刺激を計測するための方法は、当該分野で公知であり、本開示の生物学的実施例に記載されている。薬学的組成物が抗原をさらに含む実施形態において、免疫応答を刺激することは、抗原特異的抗体応答を誘導することを含む。
【０１５０】
例えば、薬学的組成物が抗原をさらに含むいくつかの実施形態において、本開示は、抗原特異的抗体応答および／またはＴ細胞応答の誘導を必要とする哺乳動物被験体において抗原特異的抗体応答および／またはＴ細胞応答を誘導する方法であって、前述の被験体における抗原特異的抗体応答および／またはＴ細胞応答を誘導するのに十分な量で薬学的組成物を投与することによる、方法を提供する。抗原特異的抗体応答を「誘導する」は、抗原特異的抗体の力価を閾値レベル（投与前のベースライン力価または血清防御的レベルなど）より上に上昇させることを意味する。抗原特異的Ｔ細胞応答を「誘導する」は、抗原特異的細胞傷害性Ｔリンパ球を刺激すること、非免疫化腫瘍部位に存在する抗原特異的Ｔ細胞を生成すること、疲弊が小さく、そして／またはエピトープ拡大によるさらなる腫瘍抗原に対する免疫応答が増強されているＴ細胞を生成することを意味する。
【０１５１】
免疫応答の解析（定性的と定量的の両方）は、当該分野で公知の任意の方法による解析であってよく、それらの方法としては、抗原特異的抗体の産生の計測（特異的抗体サブクラスの計測を含む）、特定集団のリンパ球（例えば、Ｂ細胞およびヘルパーＴ細胞）の活性化の計測、特定の免疫細胞型に特異的な遺伝子セットの発現の計測、サイトカイン（ＩＦＮα、ＩＬ−６、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、ＴＮＦαなど）の産生の計測、および／または好塩基球もしくは肥満細胞からのヒスタミンの放出の計測が挙げられるがこれらに限定されない。抗原特異的抗体応答を計測するための方法には、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）が含まれる。サイトカインの産生も、ＥＬＩＳＡによって計測され得る。遺伝子発現解析を、ＴａｑＭａｎ（登録商標）遺伝子発現アッセイまたはｎＣｏｕｎｔｅｒ（登録商標）遺伝子発現アッセイによって行うことができる。特定集団のリンパ球の活性化は、増殖アッセイおよび蛍光励起細胞分取（ＦＡＣＳ）によって計測され得る。
【０１５２】
好ましくは、Ｔｈ１型免疫応答が刺激される（すなわち、誘発または増大される）。本開示に関しては、Ｔｈ１型免疫応答の刺激は、本開示の活性な作用物質（ＴＬＲ７／８アゴニストである１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンのアルキル鎖誘導体）で処置された細胞からのサイトカインの産生を、活性な作用物質で処置されていないコントロール細胞と比較して計測することによって、インビトロまたはエキソビボにおいて決定され得る。「Ｔｈ１型サイトカイン」の例としては、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＦＮγ、およびＩＦＮαが挙げられるがこれらに限定されない。対照的に、「Ｔｈ２型サイトカイン」としては、ＩＬ−４、ＩＬ−５、およびＩＬ−１３が挙げられるがこれらに限定されない。免疫刺激活性の決定に有用な細胞としては、免疫系の細胞（抗原提示細胞、リンパ球、好ましくは、マクロファージおよびＴ細胞など）が挙げられる。適切な免疫細胞としては、哺乳動物被験体から単離された初代細胞（ｐＤＣ、単球、ｍＤＣ、およびＢ細胞を含む末梢血単核球、または脾細胞など）が挙げられる。
【０１５３】
Ｔｈ１型免疫応答の刺激は、本開示の活性な作用物質で処置された哺乳動物被験体において、ＩＬ−２、ＩＬ−１２およびインターフェロンのレベルを、投与の前および後に、または活性な作用物質で処置されていないコントロール被験体と比較して、計測することによっても決定され得る。Ｔｈ１型免疫応答の刺激は、Ｔｈ１型抗体価とＴｈ２型抗体価との比を計測することによっても決定され得る。「Ｔｈ１型」抗体としては、ヒトＩｇＧ１およびＩｇＧ３ならびにマウスＩｇＧ２ａが挙げられる。対照的に、「Ｔｈ２型」抗体としては、ヒトＩｇＧ２、ＩｇＧ４、およびＩｇＥ、ならびにマウスＩｇＧ１およびＩｇＥが挙げられる。
疾患の処置
【０１５４】
本開示は、さらに、感染症の予防を必要とする哺乳動物被験体において感染症を予防する方法であって、前述の被験体において感染症を予防するのに十分な量の薬学的組成物の投与を含む方法を提供する。すなわち、いくつかの実施形態において、本開示は、予防ワクチンを提供する。いくつかの実施形態において、哺乳動物被験体は、感染性因子に暴露されるリスクがある。感染症を「予防する」は、被験体を感染症の発症から防御することを意味する。いくつかの実施形態において、感染症の予防は、被験体を感染性因子の感染から防御すること（例えば、被験体を急性または慢性の感染症の発症から防御すること）をさらに含む。さらに、本開示は、感染症の症状の回復を必要とする哺乳動物被験体において感染症の症状を回復させる方法であって、前述の被験体において感染症の症状を回復させるのに十分な量の薬学的組成物の投与を含む方法を提供する。すなわち、いくつかの実施形態において、本開示は、治療ワクチンを提供する。いくつかの実施形態において、被験体は、急性または慢性に感染性因子に感染している。感染症は、ウイルス（例えば、肝炎ウイルス、ヘルペスウイルス、またはヒト乳頭腫ウイルス）、細菌、真菌、または寄生虫の疾患であり得る。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、ウイルス、細菌、真菌、または寄生虫の抗原をさらに含む。感染症の症状を「回復させること」は、疾患の症状を改善すること、好ましくは、疾患の範囲を減少させることを意味する。
【０１５５】
さらに、本開示は、ＩｇＥ関連障害の症状の回復を必要とする哺乳動物被験体においてＩｇＥ関連障害の症状を回復させる方法であって、前述の被験体においてＩｇＥ関連障害の症状を回復させるのに十分な量の薬学的組成物の投与を含む方法を提供する。いくつかの好ましい実施形態において、ＩｇＥ関連障害はアレルギーである。アレルギーとしては、アレルギー性鼻炎（枯草熱）、副鼻腔炎、湿疹、およびじんま疹が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、アレルゲンをさらに含む。ＩｇＥ関連障害の症状を「回復させること」は、障害の症状を改善すること、好ましくは、障害の範囲を減少させることを意味する。例えば、ＩｇＥ関連障害がアレルギー性鼻炎である場合、症状を回復させることは、鼻粘膜の腫脹を軽減すること、鼻漏（鼻水）を軽減すること、および／またはくしゃみを軽減することを意味する。
【０１５６】
さらに、本開示は、がんの処置を必要とする哺乳動物被験体においてがんを処置する複数の方法であって、前述の被験体においてがんを処置するのに十分な量の薬学的組成物の投与を含む方法を提供する。ある特定の実施形態において、本開示は、がんの処置を必要とする哺乳動物被験体においてがんを処置する方法であって、有効量の薬学的組成物を腫瘍内送達によって投与する工程を含む方法を提供する。方法の別の態様において、腫瘍内送達は、少なくとも１つの腫瘍病変への薬学的組成物の注射を含む。他の態様において、がんを処置することは、例えば、薬学的組成物が腫瘍外部位に投与された場合よりも多くの数で、注射された腫瘍において腫瘍抗原特異的Ｔ細胞の蓄積を誘導することを含む。他の態様において、がんを処置することは、全身性の腫瘍抗原特異的Ｔ細胞応答（例えば、免疫原性組成物が腫瘍外部位に投与されたときよりも高度な全身性の腫瘍抗原特異的Ｔ細胞応答が含まれる）を誘発することを含む。他の態様において、がんを処置することは、全身性の腫瘍抗原特異的Ｔ細胞応答を誘発することを含む。他の態様において、がんを処置することは、注射された腫瘍においてＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ細胞の数を減少させることを含む。他の態様において、被験体は、前述の注射された腫瘍に加えて、１またはそれを超える注射されていない腫瘍（原発性または転移性の病変）を有し、がんを処置することは、以下：（ａ）注射されていない腫瘍の数を減少させること；（ｂ）注射されていない腫瘍の体積を減少させること；および（ｃ）注射されていない腫瘍の成長を遅らせることのうちの１つまたは複数を含む。いくつかの態様において、がんを処置することは、以下：（ｄ）被験体の生存時間を延長すること；（ｅ）注射された腫瘍の体積を減少させること；および（ｆ）注射された腫瘍の成長を遅らせることのうちの１つまたは複数を含む。いくつかの実施形態において、がんが固形腫瘍である場合、がんを「処置すること」は、固形腫瘍および任意の転移性病変のサイズを縮小させること、または生存がん細胞数を減少させることを含む。他の実施形態において、がんが固形腫瘍である場合、がんを「処置すること」は、固形腫瘍および任意の転移性病変の成長を遅延させることを含む。いくつかの態様において、がんを処置することは、無増悪生存期間の延長または増殖までの期間の延長を含む。他の実施形態において、本方法は、さらに、有効量の第２の、またはさらなる治療剤を被験体に投与する工程を含む。がんを「処置すること」は、有益な臨床結果（緩解を引き起こすこと、または、処置の非存在下において予想される生存と比べて生存を延長することなど）を生じさせることを意味する。いくつかの好ましい実施形態において、「がんを処置すること」は、記載されているようなＲｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ（ＲＥＣＩＳＴバージョン１．１）（例えば、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ  ２００９  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  ４５：２２８−２４７を参照のこと）に従って、免疫原性組成物に対する患者の応答を評価することを含む。ＲＥＣＩＳＴに従って客観的な抗腫瘍応答を決定するための応答基準としては、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、および安定疾患が挙げられる。
【０１５７】
いくつかの実施形態において、腫瘍は、肉腫、癌腫または光線性角化症である。いくつかの実施形態において、腫瘍が、リンパ腫である。いくつかの実施形態において、がんは、乳がん、前立腺がん、肺がん、直腸結腸がん、子宮がん、膀胱がん、メラノーマ、頭頚部がん、非ホジキンリンパ腫、腎臓がん、卵巣がん、膵臓がんおよび甲状腺がんからなる群より選択される。いくつかの実施形態において、がんは、口腔、消化器系、呼吸器系、皮膚、胸部、生殖器系、泌尿器系、眼球系、神経系、内分泌系およびリンパ腫からなる群より選択される部位の原発性がんである。
【０１５８】
いくつかの実施形態において、方法は、有効量の第２の治療剤を被験体に投与する工程をさらに含む。これらの実施形態のいくつかにおいて、第２の治療剤は、アクチノマイシン、アファチニブ、アレクチニブ、アスパラギナーゼ、アザシチジン、アザチオプリン、ビカルタミド、ビニメチニブ、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、カンプトテシン、カルボプラチン、カペシタビン、カルムスチン、セリチニブ（ｃｅｒｔｉｎｉｂ）、シスプラチン、クロラムブシル、コビメチニブ、クリゾチニブ、シクロホスファミド、シタラビン、ダブラフェニブ、ダカルバジン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、エンコラフェニブ、エルロチニブ、エピルビシン、エポチロン、エトポシド、フルダラビン、フルタミン（ｆｌｕｔａｍｉｎｅ）、フルオロウラシル、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブ、イリノテカン、ラパチニブ、レトロゾール、メクロレタミン、メルカプトプリン、メトトレキサート、マイトマイシン、ミトキサントロン、オクトレオチド、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、ラルチトレキセド（ｒａｌｔｉｔｒｅｘｅｄ）、ソラフェニブ、スニチニブ、タモキシフェン、テモゾロマイド、テニポシド、チオグアニン、トポテカン、トラメチニブ、バルルビシン、ベムラフェニブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビンおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される化学療法剤を含む。いくつかの実施形態において、第２の治療剤は、ＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤の一方または両方を含む。いくつかの実施形態において、第２の治療剤は、ＨＤＡＣ阻害剤（例えば、ボリノスタット（ｖｏｒｏｎｉｓｔａｔ）［ＳＡＨＡ］、ロミデプシン、エンチノスタット、アベキシノスタット（ａｂｅｘｉｎｏｓｔａｔ）、エリノスタット（ｅｌｉｎｏｓｔａｔ）［ＣＨＲ−３９９６］、パノビノスタット、キシノスタット（ｑｕｉｓｉｎｏｓｔａｔ）［ＪＮＪ−２６４８１５８５］、４ＳＣ−２０２、レスミノスタット（ｒｅｓｍｉｎｏｓｔａｔ）［ＳＢ９３９］、プラシノスタット（ｐｒａｃｉｎｏｓｔａｔ）［ＣＩ−９９４０］およびバルプロエート）、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤（例えば、アザシチジン、デシタビン（ｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、ゼブラリン、ＳＧＩ−１０２７、ＲＧ−１０８およびシネフンギン（ｓｉｎｆｕｎｇｉｎ）を参照のこと）を参照のこと）およびそれらの組み合わせからなる群より選択されるエピジェネティック調節剤を含む。
【０１５９】
これらの実施形態のいくつかにおいて、第２の治療剤は、阻害性免疫チェックポイント分子のアンタゴニスト、例えば、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ−４（ＣＤ１５２）、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ−３、ＴＩＧＩＴ、ＩＬ−１０、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、Ｐ−セレクチン糖たんぱく質リガンド−１（ＰＳＧＬ−１）およびＴＧＦ−ベータからなる群より選択される阻害性免疫チェックポイント分子のアンタゴニストである。これらの実施形態のいくつかにおいて、第２の治療剤は、免疫刺激分子のアゴニストである。これらの実施形態のいくつかにおいて、免疫刺激分子は、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、ＧＩＴＲ、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＣＤ２８およびＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）からなる群より選択される。これらの実施形態のいくつかにおいて、第２の治療剤は、抗体、そのフラグメントまたは誘導体を含む。これらの実施形態のいくつかにおいて、第２の治療剤は、阻害性免疫チェックポイント分子のアンタゴニストであり、第２の治療剤は、抗体、そのフラグメントまたは誘導体を含む。いくつかの実施形態において、上記方法は、被験体に放射線治療を行う工程および／または有効量の第２の治療剤を投与する工程をさらに含む。これらの実施形態のいくつかにおいて、有効量の免疫原性組成物と有効量の第２の治療剤とは一緒になって、腫瘍に対して相加効果またはそれより良好な効果をもたらす。これらの実施形態のいくつかにおいて、有効量の免疫原性組成物と有効量の第２の治療剤とは一緒になって、腫瘍に対して相乗効果をもたらす
【０１６０】
方法の実施形態のいくつかにおいて、感染性疾患またはがんを処置する工程は、免疫原性組成物の反復投与が禁忌となるような重症度のインフルエンザ様症状の発生をもたらさず、インフルエンザ様症状は、発熱、頭痛、悪寒、筋痛および疲労からなる群のうちの１つまたは複数を含む。
【０１６１】
いくつかの実施形態において、本開示は、薬学的組成物（例えば、式（Ｋ）のＴＬＲ７／８アゴニスト化合物、賦形剤（単数または複数）、および必要に応じた抗原）および本明細書中に記載の方法のための組成物の使用に関する説明書一式を含むキットを提供する。キットの薬学的組成物は、適切に包装されている。薬学的組成物が液体またはナノ粒子の懸濁液である場合、ゴム栓（例えば、Ｅｘｘｐｒｏハロブチルエラストマー）およびアルミニウム圧着トップを備えた二酸化ケイ素バイアル（例えば、ＳＣＨＯＴＴタイプＩプラス（登録商標））が、容器施栓系として通常使用される。いくつかの実施形態において、キットは、薬学的組成物を投与するためのデバイス（例えば、シリンジおよび針）をさらに含む。他の実施形態において、キットは、予め充填されたシリンジ／針システム、自動注入装置または無針デバイスをさらに含む。薬学的組成物の使用に関する指示書は、一般に、意図される使用方法に対する投与量、スケジュールおよび投与経路に関する情報を含む。
Ｖ．実施例
【０１６２】
本開示は、明確にする目的および理解させる目的で例証および例示としていくらか詳細に記載されてきたが、ある特定の変更および改変が行われ得ることが、当業者には明らかであろう。ゆえに、以下の合成実施例および生物学的実施例は、添付の請求項によって詳細に描写される本開示の範囲を限定すると解釈されるべきでない。
合成例
実施例Ｓ１：Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）テトラデカンアミド（化合物番号６３−１０）の合成
【０１６３】
パートＡ。硝酸（１２５ｍＬ）を、キノリン−２，４−ジオール（５０ｇ、０．３モル）を含む酢酸（５００ｍＬ）のスラリーに添加し、反応混合物を６５℃に３時間加熱した。次いで、混合物を５〜１０℃に冷却し、固体材料を濾過によって回収し、冷水で洗浄し、風乾した。次いで、得られた固体を、メタノールから再結晶し、真空下で乾燥させて、５８ｇの３−ニトロ−２，４−キノリンジオールを黄色固体として得た。
【０１６４】
パートＢ。オキシ塩化リン（１５０ｍＬ）を、３−ニトロ−２，４−キノリンジオール（５８ｇ）にアルゴン雰囲気下で添加し、９５℃に４時間加熱した。次いで、混合物を室温に冷却し、一定の速度で撹拌しながらクラッシュアイス上に注いだ。沈殿した生成物を濾過によって回収し、水で洗浄し、真空下で乾燥させた。粗固体を、ヘキサン／酢酸エチルを使用したシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３５ｇの２，４−ジクロロ−３−ニトロキノリンを得た。
【０１６５】
パートＣ。ｔｅｒｔ−ブチル（４−（アミノメチル）ベンジル）カルバマート（３７．３ｇ、０．１６ｍｏｌｅ、１．１当量）を、２，４−ジクロロ−３−ニトロキノリン（３５ｇ、０．１５ｍｏｌｅ、１．０当量）を含む無水ジクロロメタン（４００ｍＬ）およびトリメチルアミン（１６．０ｇ、０．１６ｍｏｌｅ、１．１当量）の溶液に添加し、室温で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、粗生成物を、ヘキサン／酢酸エチルを使用したシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、５２ｇのｔｅｒｔ−ブチル（４−（（（２−クロロ−３−ニトロキノリン−４−イル）アミノ）メチル）ベンジル）カルバマートを得た。
【０１６６】
パートＤ。ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（（２−クロロ−３−ニトロキノリン−４−イル）アミノ）メチル）ベンジル）カルバマート（５２ｇ、０．１２モル）を含む酢酸エチル（２５０ｍＬ）の溶液を、５％炭素担持白金（２．０ｇ）および硫酸ナトリウム（５２ｇ）の存在下でＰａｒｒ水素化装置を使用して６０ｐｓｉで１２時間水素化した。白金触媒および硫酸ナトリウムを、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドでの濾過によって除去し、濾液を減圧下で濃縮した。生成物を、ヘキサン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィによってさらに精製して、３２ｇのｔｅｒｔ−ブチル（４−（（（３−アミノ−２−クロロキノリン−４−イル）アミノ）メチル）ベンジル）カルバマートを得た。
【０１６７】
パートＥ。ペンタノイルクロリド（９．７ｍＬ、８１．５ｍｍｏｌ、１．０５当量）を、ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（（３−アミノ−２−クロロキノリン−４−イル）アミノ）メチル）ベンジル）カルバマート（３２ｇ、７７．６ｍｍｏｌ、１．０当量）を含む無水テトラヒドロフラン（３５０ｍＬ）およびピリジン（３０ｍＬ）の溶液に０〜５℃でゆっくり添加した。次いで、反応混合物を室温に加温し、１２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、次いで、固体を酢酸エチル（４００ｍＬ）に再溶解し、水および飽和重炭酸ナトリウム（１５０ｍＬ）で連続的に洗浄し、最後に無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。生成物を、ヘキサン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィによってさらに精製して、２２ｇのｔｅｒｔ−ブチル（４−（（（３−ブチルアミド−２−クロロキノリン−４−イル）アミノ）メチル）ベンジル）カルバマートを得た。
【０１６８】
パートＦ。水（８０ｍＬ）を、ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（（３−ブチルアミド−２−クロロキノリン−４−イル）アミノ）メチル）ベンジル）カルバマート（２２ｇ、４４．２ｍｍｏｌ、１．０当量）を含むエタノール（３２０ｍＬ）の溶液に添加後、炭酸カリウム（１２．２ｇ、８８．４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加し、混合物を強く撹拌しながら５５℃に１６時間加熱した。この反応混合物を濃縮し、残渣を、酢酸エチル（５００ｍＬ）と水（２５０ｍＬ）との間で分配した。次いで、酢酸エチル層を水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。生成物を、ヘキサン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィによってさらに精製して、１５．４ｇのｔｅｒｔ−ブチル（４−（（２−ブチル−４−クロロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）カルバマートを得た。
【０１６９】
パートＧ。ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（２−ブチル−４−クロロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）カルバマート（１５．４ｇ、３２．２ｍｍｏｌ、１当量）を、無水ジメチルホルムアミド（１２５ｍＬ）に溶解し、次いで、アジ化ナトリウム（８．４ｇ、１２８．６ｍｍｏｌ、４当量）をこの溶液に添加した。得られた懸濁液を脱気し、アルゴン雰囲気下にて１１０〜１１５℃で撹拌し、反応の進行を逆相ＨＰＬＣ分析によってモニタリングした。１８時間後、反応混合物を室温に冷却し、冷水（５００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を水（２×７５ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、Ｃｅｌｉｔｅで濾過し、減圧下で濃縮して、オフホワイトの固体を得た。この固体を、１：１エチル／ヘキサンでの再結晶によってさらにワークアップして、１２．５ｇのｔｅｒｔ−ブチル（４−（（４−アジド−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）カルバマートを得た。
【０１７０】
パートＨ。ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（４−アジド−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）カルバマート（１２．５ｇ、２５．７ｍｍｏｌ）を濃塩酸（６５ｍＬ）に添加し、１０％炭素担持白金（３．０ｇ）をこの懸濁液に添加した。この反応混合物を６５ｐｓｉでの水素化に供し、反応の進行を逆相ＨＰＬＣ分析によってモニタリングした。６日後、触媒を濾別し、濾過ケーキを水（２×２５ｍＬ）で洗浄した。ケーキを氷浴中で冷却し、氷冷１Ｎ水酸化ナトリウムを、ｐＨ８．５に到達するまで強く撹拌しながら滴下により添加し、材料を、５％メタノールを含むジクロロメタン（４×７５ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、８％メタノール／１％アンモニア水を含むジクロロメタンを使用したシリカゲルカラムで精製して、５．３ｇの１−（４−（アミノメチル）ベンジル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンを得た。
【０１７１】
パートＩ。ミリスチン酸（２７．４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、１．２当量）およびトリメチルアミン（０．２ｍＬ）を、１−（４−（アミノメチル）ベンジル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（３４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ、１．０当量）を含む無水ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）の溶液に添加し、スラリーを５分間混合後、ＨＢＴＵ（４７．４ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ、１．２５当量）を添加した。この反応混合物を、アルゴン雰囲気下で２時間さらに撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）に溶解し、水（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸マグネシウムを使用して乾燥させ、真空下で濃縮した。この生成物を、カラムクロマトグラフィ（６％メタノール／ジクロロメタン）を使用して精製して、３５ｍｇのＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）テトラデカンアミド（化合物番号６３−１０）を得た。生成物の純度は逆相ＨＰＬＣによって約９８％であると評価され、意図する合成質量５６９．８がＬＣ／ＭＳによって確認され、意図する合成構造が３００ＭＨｚプロトンＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ７．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．０６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．９５  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．３３  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．０１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．２０  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．８２−１．９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４２−１．７０  （ｍ，４Ｈ），  １．２６−１．４８  （ｍ，  ２０  Ｈ），  ０．８５−１．０５  （ｍ，  ６Ｈ）によって確認された。
実施例Ｓ２：２−ブチル−１−（４−（（ペンチルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−１７）の合成
【０１７２】
パートＡ〜Ｈは、実施例Ｓ１と同一であった。
【０１７３】
パートＩ。吉草酸（３４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ、１．２当量）およびトリメチルアミン（１４０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ、５．０当量）を、１−（４−（アミノメチル）ベンジル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（１００ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０当量）を含む無水ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）の溶液に添加し、スラリーを５分間混合後、ＨＢＴＵ（１３１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、１．２５当量）を添加した。この反応混合物を、アルゴン雰囲気下で２時間さらに撹拌した。反応物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、水（３×３０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸マグネシウムを使用して乾燥させ、真空下で濃縮した。粗残渣を、酢酸エチルおよびメタノールに取り、カラムクロマトグラフィ（６％メタノール／ジクロロメタン）を使用して精製して、１６０ｍｇのＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）ペンタンアミドを得た。
【０１７４】
パートＪ。ボラン−ジメチルスルフィド錯体の溶液（２．０Ｍ、１．５ｍＬ、過剰量）を、Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）ペンタンアミド（１２７ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０当量）を含む無水テトラヒドロフラン（５ｍＬ）の溶液に室温で添加し、反応混合物を１２時間加熱還流した。混合物を周囲温度に冷却し、３Ｎ  ＨＣｌ（１ｍＬ）でクエンチし、４時間撹拌した。反応混合物のｐＨを、２Ｎ水酸化ナトリウムの添加によってアルカリ性にし、生成物をジクロロメタン（２０ｍＬ×１０）で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残渣を、溶出液として６％メタノール／ジクロロメタンを使用したフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２４ｍｇの２−ブチル−１−（４−（（ペンチルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−１７）を得た。生成物の純度は逆相ＨＰＬＣによって約９６％であると評価され、意図する合成質量４２９．６がＬＣ／ＭＳによって確認され、意図する合成構造が３００ＭＨｚプロトンＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７０  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７５−１．８４  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２−１．７５  （ｍ，  ８Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）によって確認された。
実施例Ｓ３：２−ブチル−１−（４−（（（２−シクロプロピルエチル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−３３）の合成
【０１７５】
パートＡ〜Ｈは、実施例Ｓ１と同一であった。
【０１７６】
パートＩ。シクロプロピル酢酸（３３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ、１．２当量）およびトリメチルアミン（１４０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ、５．０当量）を、１−（４−（アミノメチル）ベンジル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（１００ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０当量）を含む無水ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）の溶液に添加し、スラリーを５分間混合後、ＨＢＴＵ（１３１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、１．２５当量）を添加した。この反応混合物を、アルゴン雰囲気下で２時間さらに撹拌した。反応物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、水（３×３０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸マグネシウムを使用して乾燥させ、真空下で濃縮した。粗残渣を酢酸エチルおよびメタノールに取り、カラムクロマトグラフィ（６％メタノール／ジクロロメタン）を使用して精製して、１４０ｍｇのＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）−２−シクロプロピルアセトアミド（化合物番号６３−３４）を得た。
【０１７７】
パートＪ。ボラン−ジメチルスルフィド錯体の溶液（２．０Ｍ、１．５ｍＬ、過剰量）を、Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）−２−シクロプロピルアセトアミド（１２３ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０当量）を含む無水テトラヒドロフラン（５ｍＬ）の溶液に室温で添加し、反応混合物を１２時間加熱還流した。混合物を周囲温度に冷却し、３Ｎ  ＨＣｌ（１ｍＬ）でクエンチし、４時間撹拌した。反応混合物のｐＨを、２Ｎ水酸化ナトリウムの添加によってアルカリ性にし、生成物をジクロロメタン（２０ｍＬ×１０）で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残渣を、溶出液として６％メタノール／ジクロロメタンを使用したフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２８ｍｇの２−ブチル−１−（４−（（（２−シクロプロピルエチル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−３３）を得た。生成物の純度は、逆相ＨＰＬＣによって９７％であると評価され、意図する合成質量４２７．６がＬＣ／ＭＳによって確認され、意図する合成構造が４００ＭＨｚ  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．８０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．５，  １．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．３，  １．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４２  （ｍ，  Ｊ  ＝  ８．４．  ７．０，  １．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２９  （ａｓ，  １Ｈ），  ７．２５  （ａｓ，  １Ｈ），  ７．１０  （ｍ，  Ｊ  ＝  ８．２，  ７．１，  １．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．００  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．９２  （ｂｓ，  ２Ｈ），  ５．６９  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．８２−１．７４  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４５−１．３６  （ｍ，  ４Ｈ），  ０．９１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．９１−０．８５  （ｍ，  １Ｈ），  ０．６８−０．６０  （ｍ，  １Ｈ），  ０．４２−０．３７  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．０４−０．００  （ｍ，  ２Ｈ）によって確認された。
実施例Ｓ４：他の例示的な化合物の合成
【０１７８】
式（Ｊ−１）の例示的なＮ−アルキル化合物を、化合物番号６３−３３に類似の手順を使用して合成した。当業者に公知の技術を使用して、例示的な化合物の計算分配係数（ｃＬｏｇＰ）を、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔソフトウェアのＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｓｃｒｉｐｔｏｒｓアルゴリズムを使用して決定した（例えば、Ｌａｂｕｔｅ  Ｐ，Ｔｈｅ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｓｃｒｉｐｔｏｒｓ  Ｂａｓｅｄ  Ｕｐｏｎ（Ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅ）Ｓｕｒｆａｃｅ  Ａｒｅａ；Ｃｈｅｍｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ：Ｃｏｎｃｅｐｔｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ，ａｎｄ  Ｔｏｏｌｓ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，Ｊ．Ｂａｊｏｒａｔｈ  ｅｄ．２００３を参照のこと）。１Ｈ  ＮＭＲおよび質量分析のデータを、本発明の一定の化合物について以下に詳述し、表３は、純度データおよびｃＬｏｇＰ値を提供する。
【表３】
2020531530.tif 000038
ＮＤ＝未決定。
【０１７９】
化合物番号６３−３３：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ４００  ＭＨｚ）：  δ  ７．８０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．５，  １．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．３，  １．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４２  （ｍ，  Ｊ  ＝  ８．４．  ７．０，  １．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２９  （ａｓ，  １Ｈ），  ７．２５  （ａｓ，  １Ｈ），  ７．１０  （ｍ，  Ｊ  ＝  ８．２，  ７．１，  １．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．００  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．９２  （ｂｓ，  ２Ｈ），  ５．６９  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．８２−１．７４  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４５−１．３６  （ｍ，  ４Ｈ），  ０．９１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．９１−０．８５  （ｍ，  １Ｈ），  ０．６８−０．６０  （ｍ，  １Ｈ），  ０．４２−０．３７  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．０４−０．００  （ｍ，  ２Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４２８．６  （Ｍ＋１）．
【０１８０】
化合物番号６３−３５：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  δ  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８５  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６０  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．２０−２．３５  （ｍ，  １Ｈ），  １．８−２．１（ｍ，  ２Ｈ），  １．６５−１．８  （ｍ，  ６Ｈ），  １．４−１．５５  （ｍ，  ４Ｈ），  ０．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４４２．９  （Ｍ＋１）．
【０１８１】
化合物番号６３−３６：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  δ  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８０  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．６２−１．８４  （ｍ，  ７Ｈ），  １．０−１．２０  （ｍ，  １Ｈ），  ０．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４５６．４  （Ｍ＋１）．
【０１８２】
化合物番号６３−３９：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤ３ＯＤ，  ３００  ＭＨｚ）：  δ  ７．８０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０−７．４８  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．０５−７．１４  （ｍ，  ３Ｈ），  ５．８８  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．８１  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．４４−２．５５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．７０−１．８５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３５−１．５５  （ｍ，３Ｈ），  １．０２  （ｓ，  Ｊ  ＝  ６  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １４．７  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．５０−０．７５  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．２０−０．３５  （ｍ，２Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４２８．４  ［Ｍ＋１］．
【０１８３】
化合物番号６３−４０：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  δ  ７．８２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７３  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．５４  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７８  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．５０−２．７０  （ｍ，  ２Ｈ），  １．７５−１．８０  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４０−１．５５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．０４  （ｓ，  ３Ｈ），  １．０２  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １４．７  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．７−０．８  （ｍ，  １Ｈ），  ０．４−０．５  （ｍ，  １Ｈ），  ０．１−０．０５  （ｍ，  １Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４４２．５  ［Ｍ＋１］．
【０１８４】
化合物番号６３−４２：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  δ  ７．８０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７１  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．７０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２，  １５．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７７−１．９２  （ｍ，  ２Ｈ），  １．７０−１．８４  （ｍ，  ４Ｈ），  ０．９８  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １４．７  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．１８−０．３５  （ｍ，  ４Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４４２．５  ［Ｍ＋１］．
【０１８５】
化合物番号６３−４３：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  δ  ７．８０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２５−７．３１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．１４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７１  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．５９（ｓ，  ２Ｈ），  ３．７５  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８８  （ｂｒ  ｔ，  ２Ｈ），  ２．６３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２，  １４．１  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．５５−０．７２  （ｍ，  １Ｈ），  ０．４  （ｂｒ  ｄ，  ２Ｈ），  ０．０１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．５  Ｈｚ，  ２Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４４２．５  ［Ｍ＋１］．
【０１８６】
化合物番号６３−４６：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  δ  ７．８１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７３  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．５１  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６０−２．７  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．１−２．４  （ｍ，  ３Ｈ），  １．６−１．８５  （ｍ，  ４Ｈ），  １．４０−１．５５  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．９５−１．１５  （ｍ，  ５Ｈ），  ０．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １４．７  Ｈｚ，  ３Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４４２．４  ［Ｍ＋１］．
実施例Ｓ５：２−ブチル−１−（４−（（（シクロプロピルメチル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−３８）の合成。
【０１８７】
パートＡ。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（２７２ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を、シクロプロパンカルボン酸（１７２ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）およびペンタフルオロフェノール（３８７ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（４ｍＬ）の溶液に、触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（１２ｍｇ）の存在下で添加し、室温で一晩撹拌した。次いで、この混合物をエーテル（２０ｍＬ）で希釈し、沈殿した尿素を濾過によって除去し、濾液を濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物を１％酢酸エチル／ヘキサンに懸濁し、任意の残存した沈殿尿素を濾過によって再度除去した。得られた濾液を減圧下で濃縮して、４４０ｍｇの所望の（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）−シクロプロパンカルボキシラート生成物を得た。
【０１８８】
パートＢ。化合物番号６３−００（８０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を、（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）−シクロプロパンカルボキシラート（６１ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液に、トリエチルアミン（４５ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）の存在下で添加し、室温で２時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下で濃縮し、３〜８％メタノール／１％アンモニア水を含むジクロロメタンで溶出するフラッシュクロマトグラフィによって精製して、７８ｍｇのＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）シクロプロパンカルボキサミドをオフホワイトの固体として得た。
【０１８９】
パートＣ。Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）シクロプロパンカルボキサミド（７８ｍｇ）を、ボランジメチルスルフィド錯体（３．５当量）を用いて５５℃で１２時間還元した。次いで、反応物を室温に冷却し、１Ｍ  ＨＣｌ（過剰量）で慎重にクエンチし、５５℃でさらに３時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、水（１０ｍＬ）で希釈し、次いで、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で抽出して、不純物を除去した。反応混合物のｐＨを氷冷１Ｍ  ＮａＯＨ溶液の添加によって８．０に調整し、ジクロロメタン（３×１０ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、オフホワイトの固体を得た。９：１酢酸エチル／ヘキサンで再結晶すると、反応物は２７ｍｇの２−ブチル−１−（４−（（（シクロプロピルメチル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−３８）を与えた。生成物の純度は２５４ｎｍでの逆相ＨＰＬＣによって純度９６％であると評価され、意図する合成質量４１３．３ダルトンがＬＣ／ＭＳによって確認され、意図する合成構造が３００ＭＨｚ  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤ３ＯＤ）：  δ  ７．８０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３８−７．４８  （ｍ，  ３Ｈ），  ７．０７−７．２０  （ｍ，  ３Ｈ），  ５．９２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．９７  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８，  １５．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６６  （２，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７８−１．９０  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４０−１．６０  （ｍ，  ２Ｈ），  １．０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．５−０．６  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．２−０．３  （ｍ，  ２Ｈ）によって確認された。
実施例Ｓ６：２−ブチル−１−（４−（（（（１−メチルシクロブチル）メチル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−４５）の合成。
【０１９０】
パートＡ。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（７６ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を、１−メチルシクロブタンカルボン酸（５７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）およびペンタフルオロフェノール（９４ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液に、触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（６ｍｇ）の存在下で添加し、室温で一晩撹拌した。次いで、この混合物をエーテル（２０ｍＬ）で希釈し、沈殿した尿素を濾過によって除去し、濾液を濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物を１％酢酸エチル／ヘキサンに懸濁し、任意の残存した沈殿尿素を濾過によって再度除去した。得られた濾液を減圧下で濃縮して、１２６ｍｇの所望の（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンカルボキシラート生成物を得た。
【０１９１】
パートＢ。化合物番号６３−００（８４ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を、（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンカルボキシラート（７２ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液に、トリエチルアミン（４８ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）の存在下で添加し、室温で２時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を５％酢酸エチル／ヘキサンで洗浄した。残渣をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、１Ｍ  ＨＣｌで洗浄後に水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、８８ｍｇのＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）−１−メチルシクロブタン−１−カルボキサミドをオフホワイトの固体として得た。
【０１９２】
パートＣ。Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）−１−メチルシクロブタン−１−カルボキサミド（８８ｍｇ）を、ボランジメチルスルフィド錯体（３．５当量）を用いて５５℃で１２時間還元した。次いで、反応物を室温に冷却し、２Ｍ  ＨＣｌ（過剰量）で慎重にクエンチし、５５℃でさらに３時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、水（１０ｍＬ）で希釈し、次いで、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で抽出して、不純物を除去した。反応混合物のｐＨを氷冷１Ｍ  ＮａＯＨ溶液の添加によって８．０に調整し、ジクロロメタン（３×１０ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、オフホワイトの固体を得た。９：１酢酸エチル／ヘキサンで再結晶すると、反応物は３２ｍｇの２−ブチル−１−（４−（（（（１−メチルシクロブチル）メチル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−４５）を与えた。生成物の純度は２５４ｎｍでの逆相ＨＰＬＣによって純度９６％であると評価され、意図する合成質量４４１．３ダルトンがＬＣ／ＭＳによって確認され、意図する合成構造が３００ＭＨｚ  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．８０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７１  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．５２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７８  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．５２  （ｓ，  ２Ｈ），  １．６−１．８８  （ｍ，  ８Ｈ），  １．３５−１．６０  （ｍ，  ２Ｈ），  １．１２  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １４．７  Ｈｚ，  ３Ｈ）によって確認された。
実施例Ｓ７：２−ブチル−１−（４−（（（シクロブチルメチル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−４４）の合成。
【０１９３】
パートＡ。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（１２７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を、シクロブタンカルボン酸（１０６ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）およびペンタフルオロフェノール（１７５ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液に、触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（１２ｍｇ）の存在下で添加し、室温で一晩撹拌した。次いで、この混合物をエーテル（２０ｍＬ）で希釈し、沈殿した尿素を濾過によって除去し、濾液を濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物を１％酢酸エチル／ヘキサンに懸濁し、任意の残存した沈殿尿素を濾過によって再度除去した。得られた濾液を減圧下で濃縮して、１２６ｍｇの所望の（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）シクロブタンカルボキシラート生成物を得た。
【０１９４】
パートＢ。化合物番号６３−００（６２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を、（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）シクロブタンカルボキシラート（５０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液に、トリエチルアミン（３５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の存在下で添加し、室温で２時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を５％酢酸エチル／ヘキサンで洗浄した。残渣をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、１Ｍ  ＨＣｌで洗浄後に水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、８５ｍｇのＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）シクロブタンカルボキサミドをオフホワイトの固体として得た。
【０１９５】
パートＣ。Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）シクロブタンカルボキサミド（８５ｍｇ）を、ボランジメチルスルフィド錯体（３．５当量）を用いて５５℃で１２時間還元した。次いで、反応物を室温に冷却し、２Ｍ  ＨＣｌ（過剰量）で慎重にクエンチし、５５℃でさらに３時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、水（１０ｍＬ）で希釈し、次いで、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で抽出して、不純物を除去した。反応混合物のｐＨを氷冷１Ｍ  ＮａＯＨ溶液の添加によって８．０に調整し、ジクロロメタン（３×１０ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、オフホワイトの固体を得た。９：１酢酸エチル／ヘキサンで再結晶すると、反応物は２１ｍｇの２−ブチル−１−（４−（（（シクロブチルメチル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−４４）を与えた。生成物の純度は２５４ｎｍでの逆相ＨＰＬＣによって純度９５％であると評価され、意図する合成質量４２７．３ダルトンがＬＣ／ＭＳによって確認され、意図する合成構造が３００ＭＨｚ  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．８０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７２  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．５１  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．４０−２．５８  （ｍ，  １Ｈ），  １．７５−２．１５  （ｍ，  ７Ｈ），  １．６０−１．７０  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３５−１．５０  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １４．７  Ｈｚ，  ３Ｈ）によって確認された。
実施例Ｓ８：２−ブチル−１−（４−（（（２−シクロブチル−２−メチルプロピル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−４７）の合成。
【０１９６】
パートＡ。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（１１３ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）を、３−シクロブチル−３−メチル−ブタン−２−オン（７０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）およびペンタフルオロフェノール（１０８ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液に、触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（１１ｍｇ）の存在下で添加し、室温で一晩撹拌した。次いで、この混合物をエーテル（２０ｍＬ）で希釈し、沈殿した尿素を濾過によって除去し、濾液を濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物を１％酢酸エチル／ヘキサンに懸濁し、任意の残存した沈殿尿素を濾過によって再度除去した。得られた濾液を減圧下で濃縮して、１４１ｍｇの所望の（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）−２−シクロブチル−２−メチル−プロパノアート生成物を得た。
パートＢ。化合物番号６３−００（６０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を、（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）−２−シクロブチル−２−メチル−プロパノアート（５４ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液に、トリエチルアミン（３４ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の存在下で添加し、還流状態で３日間撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮し、残渣を５％酢酸エチル／ヘキサンで洗浄した。洗浄した残渣をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、１Ｍ  ＨＣｌで洗浄後に水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、６７ｍｇのＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）−２−シクロブチル−２−メチルプロパンアミドをオフホワイトの固体として得た。
【０１９７】
パートＣ。Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）−２−シクロブチル−２−メチルプロパンアミド（６７ｍｇ）を、ボランジメチルスルフィド錯体（３．５当量）を用いて５５℃で１２時間還元した。次いで、反応物を室温に冷却し、２Ｍ  ＨＣｌ（過剰量）で慎重にクエンチし、５５℃でさらに３時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、水（１０ｍＬ）で希釈し、次いで、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で抽出して、不純物を除去した。反応混合物のｐＨを氷冷１Ｍ  ＮａＯＨ溶液の添加によって８．０に調整し、ジクロロメタン（３×１０ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、オフホワイトの固体を得た。９：１酢酸エチル／ヘキサンで再結晶すると、反応物は１３ｍｇの２−ブチル−１−（４−（（（２−シクロブチル−２−メチルプロピル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−４７）を与えた。生成物の純度は２５４ｎｍでの逆相ＨＰＬＣによって純度９２％であると評価され、意図する合成質量４６９．３ダルトンがＬＣ／ＭＳによって確認され、意図する合成構造が３００ＭＨｚ  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．８０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０    Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．６０  （ｂｒ  ｓ，  １Ｈ），  ５．７３  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７４  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ２．９０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．３５  （ｓ，  ２Ｈ），  １．２０−１．８  （ｍ，  １０Ｈ），  ０．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １４．７  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．９０  （ｓ，  ６Ｈ）によって確認された。
実施例Ｓ９：２−ブチル−１−（４−（（（２−シクロプロピル−２−メチルプロピル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−４１）の合成。
【０１９８】
パートＡ。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（１２７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を、２−シクロプロピル−２−メチル−プロパン酸（１０６ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）およびペンタフルオロフェノール（１７５ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液に、触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（１２ｍｇ）の存在下で添加し、室温で一晩撹拌した。次いで、この混合物をエーテル（２０ｍＬ）で希釈し、沈殿した尿素を濾過によって除去し、濾液を濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物を１％酢酸エチル／ヘキサンに懸濁し、任意の残存した沈殿尿素を濾過によって再度除去した。得られた濾液を減圧下で濃縮して、１３０ｍｇの所望の（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）−２，２−ジメチルシクロプロパンカルボキシラート生成物を得た。
【０１９９】
パートＢ。化合物番号６３−００（６２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を、（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）−２，２−ジメチルシクロプロパンカルボキシラート（５０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液に、トリエチルアミン（３５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の存在下で添加し、室温で２時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を５％酢酸エチル／ヘキサンで洗浄した。洗浄した残渣をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、１Ｍ  ＨＣｌで洗浄後に水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、８５ｍｇのＮ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）−２−シクロプロピル−２−メチルプロパンアミドをオフホワイトの固体として得た。
【０２００】
パートＣ。Ｎ−（４−（（４−アミノ−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンジル）−２−シクロプロピル−２−メチルプロパンアミド（８５ｍｇ）を、ボランジメチルスルフィド錯体（３．５当量）を用いて５５℃で１２時間還元した。次いで、反応物を室温に冷却し、２Ｍ  ＨＣｌ（過剰量）で慎重にクエンチし、５５℃でさらに３時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、水（１０ｍＬ）で希釈し、次いで、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で抽出して、不純物を除去した。反応混合物のｐＨを氷冷１Ｍ  ＮａＯＨ溶液の添加によって８．０に調整し、ジクロロメタン（３×１０ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、オフホワイトの固体を得た。９：１酢酸エチル／ヘキサンで再結晶すると、反応物は１４ｍｇの２−ブチル−１−（４−（（（２−シクロプロピル−２−メチルプロピル）アミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−４１）を与えた。生成物の純度は２５４ｎｍでの逆相ＨＰＬＣによって純度９４％であると評価され、意図する合成質量４５５．３ダルトンがＬＣ／ＭＳによって確認され、意図する合成構造が３００ＭＨｚ  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．８２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７２  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．６２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７９  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．９０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．８７  （ｓ，  ２Ｈ），  １．７５−１．９０  （ｍ，  ２），  １．４０−１．５５  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５，  １４．７  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．７５  （ｓ，  ６Ｈ），  ０．６−０．７５  （ｍ，  １Ｈ），  ０．１５−０．３  （ｍ，  ４Ｈ）によって確認された。
実施例Ｓ１０：２−ブチル−１−（４−（（シクロヘキシルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−４９）の合成。
【０２０１】
パートＡ。ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（３．３１ｇ、２２ｍｍｏｌ）を、４−シアノベンジルアルコール（２．６６ｇ、２０ｍｍｏｌ）を含むＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）の溶液に、イミダゾール（２．７２ｇ、４０ｍｍｏｌ）の存在下にて室温で添加し、４時間撹拌した。反応混合物を水（１５０ｍＬ）に注ぎ、１０％酢酸エチル／ヘキサン（３×７５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた生成物を、ヘキサンを用いて溶離するフラッシュクロマトグラフィによってさらに精製して、４．８４ｇの４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンゾニトリルを得た。
【０２０２】
パートＢ。４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンゾニトリル（４．８４ｇ）を含むメタノール（２００ｍＬ）の溶液を、Ｐａｒｒ水素化装置を用いてラネーニッケル（１．０ｇの水中のスラリー）の存在下で６０ｐｓｉの水素下にて４時間水素化した。反応物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。得られた生成物（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）フェニル）メタンアミン（４．８ｇ）を、精製せずに使用した。
【０２０３】
パートＣ。４−クロロ−３−ニトロキノリン（４．１６ｇ、２０ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（１００ｍＬ）の溶液を、４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシメチル）ベンジルアミン（４．８ｇ、１９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）（３．８７ｇ、３０ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（１００ｍＬ）の溶液にゆっくり添加し、１２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、得られた生成物を、１：１酢酸エチル／ヘキサンで溶出するフラッシュクロマトグラフィによって精製して、４．６７ｇの（４−（（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）アミノ）キノリン−３−イル）（オキソ）−λ４−アザノールを得た。
【０２０４】
パートＤ。（４−（（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）アミノ）−キノリン−３−イル）（オキソ）−λ４−アザノール（４．６７ｇ）を含む酢酸エチル（２５０ｍＬ）の溶液を、炭素担持パラジウム（１０％、１．０ｇ）の存在下にて６０ｐｓｉで４時間水素化した。触媒を濾過によって除去し、溶媒を減圧下で濾液から除去し、生成物Ｎ４−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）キノリン−３，４−ジアミン（４．５ｇ）をさらに精製せずに使用した。
【０２０５】
パートＥ。バレリルクロリド（１．５０ｇ、１２．４６ｍｍｏｌ、１．０５当量）を含むジクロロメタン（３０ｍＬ）の溶液を、Ｎ４−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−ベンジル）キノリン−３，４−ジアミン（４．５ｇ、１１．８６ｍｍｏｌ）を含む乾燥ピリジン（２０ｍＬ）の溶液に０℃で滴下により添加した。添加後、反応混合物を室温に加温し、４時間撹拌した。溶媒およびピリジンを、減圧下で除去した。残渣をジクロロメタン（３００ｍＬ）に溶解し、次いで、水、飽和重炭酸ナトリウム溶液（１００ｍＬ）、飽和硫酸銅溶液（３×５０ｍＬ）、および水（１００ｍＬ）で順次洗浄し、次いで、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。生成物Ｎ−（４−（（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）アミノ）キノリン−３−イル）ペンタンアミド（５．５ｇ）を、さらに精製せずに使用した。
【０２０６】
パートＦ。Ｎ−（４−（（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）アミノ）−キノリン−３−イル）ペンタンアミド（５．５ｇ、１１．８７ｍｍｏｌ）を含むエタノール／水（８：２ｖ／ｖ、１５０ｍＬ）の混合物の溶液を、炭酸カリウム（２．５ｇ、１８．１１ｍｍｏｌ、１．５当量）の存在下にて６０℃に１８時間加熱した。溶媒を減圧下で除去した。残渣を、酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）との間で分配し、酢酸エチル層を分離し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、残渣を減圧下で濃縮した。２０％酢酸エチル／ヘキサンを用いて溶出するフラッシュクロマトグラフィによってさらに精製して、３．４３ｇの２−ブチル−１−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンを得た。
【０２０７】
パートＧ。メタ−クロロ過安息香酸（６０〜７０％、２．５ｇ）を、２−ブチル−１−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン（３．４３ｇ、７．４ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（２００ｍＬ）の溶液に室温で添加し、６時間撹拌した。反応を、飽和亜硫酸ナトリウム溶液（２０ｍＬ）の添加によってクエンチした。有機層を分離し、飽和重炭酸ナトリウム溶液（５０ｍＬ）、次いで水（５０ｍＬ）で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。２５％酢酸エチル／ヘキサンによる溶出を用いたフラッシュクロマトグラフィによってさらに精製して、３．１ｇの２−ブチル−１−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−ベンジル）−１Ｈ−５λ４−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−５−オールを得た。
【０２０８】
パートＨ。２−ブチル−１−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−５λ４−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−５−オール（３．１ｇ、６．５ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（５０ｍＬ）の溶液を、トリ−ｎ−ブチルアミン（２．４ｇ、１３ｍｍｏｌ）およびフタルイミド（１．９１ｇ、１３ｍｍｏｌ）に添加し、反応混合物を０℃に冷却した。塩化ベンゾイル（１．８２ｇ、１３ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（１０ｍＬ）の溶液を反応物にゆっくり添加し、混合物を室温に加温し、３０分間撹拌した。反応物をジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液（１００ｍＬ）、次いで水（１００ｍＬ）で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた生成物を、１０％酢酸エチル／ヘキサンを用いて溶離するフラッシュクロマトグラフィによって単離して、２．８５ｇの２−（２−ブチル−１−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオンを得た。
【０２０９】
パートＩ。１Ｍのテトラブチルアンモニウムフルオリド溶液（６ｍＬ）を、２−（２−ブチル−１−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（２．８５ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を含む乾燥テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）の溶液に０℃で添加した。添加後、反応混合物を室温に加温し、６時間さらに撹拌した。反応を、飽和塩化アンモニウム（２０ｍＬ）の添加によってクエンチし、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。ジクロロメタン／ヘキサン（１：１）を用いて溶離するフラッシュクロマトグラフィによってさらに精製して、１．５７ｇの２−（２−ブチル−１−（４−（ヒドロキシメチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオンを得た。
【０２１０】
パートＪ。ＤＭＳＯ（２．５ｇ、３２ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）の溶液を、塩化オキサリル（２．０ｇ、１６ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン（１０ｍＬ）および３Åモレキュラーシーブを含むＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）の溶液に−７８℃のアルゴン下で添加した。１５分後、２−（２−ブチル−１−（４−（ヒドロキシメチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（１．５７ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を含むＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）の溶液を、ゆっくり滴下により添加した。３０分後、Ｅｔ３Ｎ（４．５ｇ、４５ｍｍｏｌ）を滴下により添加し、反応物を−７８℃で３０分間撹拌し、次いで、室温にゆっくり昇温させた。室温でさらに１時間の撹拌後、反応混合物を、飽和塩化アンモニウム溶液の添加によってクエンチした。有機層を分離し、水（２５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィによってさらに精製して、１．１５ｇの４−（（２−ブチル−４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンズアルデヒドを得た。
【０２１１】
パートＫ。４−（（２−ブチル−４−（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）メチル）ベンズアルデヒド（２．３３ｍｍｏｌ）およびシクロヘキシルアミン（７ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタンの溶液を、触媒量のｐ−トルエンスルホン酸の存在下で１２時間加熱還流する。反応混合物を減圧下で濃縮する。粗生成物２−（２−ブチル−１−（４−（（シクロヘキシルイミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオンを、さらに精製せずに使用する。
【０２１２】
パートＬ。水素化ホウ素ナトリウム（１０ｍｍｏｌ）を、２−（２−ブチル−１−（４−（（シクロヘキシルイミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオンを含むメタノールの溶液に室温で添加し、２時間撹拌する。反応混合物を、飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチし、ジクロロメタン（３×３０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を、水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮する。生成物２−（２−ブチル−１−（４−（（シクロヘキシルアミノ）メチル）−ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオンを、フラッシュクロマトグラフィによって精製する。
【０２１３】
パートＭ。ヒドラジン（１００ｍｇ）を、２−（２−ブチル−１−（４−（（シクロヘキシルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（０．３８ｍｍｏｌ）を含むメタノールの溶液に添加し、１２時間撹拌する。溶媒を減圧下で除去し、得られる生成物２−ブチル−１−（４−（（シクロヘキシルアミノ）メチル）ベンジル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミンを、フラッシュクロマトグラフィによって精製する。
実施例Ｓ１１：式（Ｊ−２）の例示的なＮ−アシル化合物の合成
【０２１４】
式（Ｊ−２）の例示的なＮ−アシル化合物を、化合物番号６３−３３のパートＩまでに類似の手順を使用して合成した。１Ｈ  ＮＭＲおよび質量分析のデータを、本発明の一定の化合物について以下に詳述し、表４は、純度データおよびｃＬｏｇＰ値を提供する。
【表４】
2020531530.tif 000039
【０２１５】
化合物番号６３−３４：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ４００  ＭＨｚ）：  δ  ７．７５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．３，  ０．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．３，  １．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４０  （ｍ，  Ｊ  ＝  ８．３，  ７．１，  １．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１１  （ｍ，  Ｊ  ＝  ８．２，  ７．１，  １．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．３０  （ａｔ，  １Ｈ），  ５．６８  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．４２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．８４  （ａｄｄ，  ２Ｈ），  ２．１６  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．８１−１．７５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４８−１．３７  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．９１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．５７−０．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．１７−０．１４  （ｍ，  ２Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４４２．６  （Ｍ＋１）．
実施例Ｓ１２：式（Ｋ）の例示的な化合物の合成
【０２１６】
式（Ｋ−２）の例示的なＮ−アシル化合物を、化合物番号６３−１０に類似の手順を使用して合成した。１Ｈ  ＮＭＲおよび質量分析のデータを、本発明の一定の化合物について以下に詳述し、表５は、化合物を純度データおよびｃＬｏｇＰ値と共に列挙している。
【０２１７】
式（Ｋ−１）の例示的なＮ−アルキル化合物を、化合物番号６３−１７に類似の手順を使用して合成した。１Ｈ  ＮＭＲおよび質量分析のデータを、本発明の一定の化合物について以下に詳述し、表６は、純度データおよびｃＬｏｇＰ値を提供する。
【０２１８】
化合物番号６３−０２：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ４００  ＭＨｚ）：  δ  ７．８０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．２，  １．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４０  （ｍ，  Ｊ  ＝  ８．４，  ７．０，  １．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．０９  （ｍ，  Ｊ  ＝  ８．２，  ７．１，  １．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．２８  （ｂｓ，  ２Ｈ），  ６．０２  （ｂｔ，  Ｊ  ＝  ５．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．６５  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．３７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．８３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．８，  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．１５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．６，  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．８１−１．７３  （ｍ，  ２Ｈ），  １．６４−１．５６  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４２  （ｄｑ，  Ｊ  ＝  １５．０，  ７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．３２−１．２１  （ｍ，  ４Ｈ），  ０．９１  （ｔ，  Ｊ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．８４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４６８．２  （Ｍ＋１）．
【０２１９】
化合物番号６３−０５：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），７．８６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６９（ｔ，  １Ｈ），  ７．７４  （ｔ，  Ｊ  ＝  １５．６，  ８．４，  １Ｈ），  ７．４７  （ｔ，  Ｊ  ＝  １５．５，  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３８  （ｍ，  ４Ｈ），  ７．１４（ｂｓ，  １Ｈ）  ７．０８  （ｄ，  Ｊ＝８．１  Ｈｚ）  ５．８５  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．５３  （ｄ，  Ｊ＝６Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．９９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．３０  （ｔ，  Ｊ＝７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．９０−１．９７  （ｍ，  ４Ｈ），  １．５２−１．７５  （ｍ，  ４Ｈ），  １．２６−１．４８  （ｍ，  １４  Ｈ），  ０．９０−１．１０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５００．８  （Ｍ＋１）．
【０２２０】
化合物番号６３−０６：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ８．０５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１４（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．０４  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．４２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ３．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．２９  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．９０−１．９７  （ｍ，  ２Ｈ），  １．５２−１．７５  （ｍ，４Ｈ），  １．２６−１．４８  （ｍ，  １２  Ｈ），  ０．９０−１．１０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５１４．５  （Ｍ＋１）．
【０２２１】
化合物番号６３−０７：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６９（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．５０  （ｔ，  Ｊ  ＝  １５．６，  ８．４，  １Ｈ），７．２９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２０  （ｔ，  Ｊ  ＝  １５．５，  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０６（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．９０  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．３３  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ３．０  （ｔ，  Ｊ  ＝  １５．０，  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．２１  （ｔ，    Ｊ  ＝  １４．７，  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．９０−１．９７  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４２−１．７０  （ｍ，４Ｈ），  １．２６−１．４８  （ｍ，  １４  Ｈ），  ０．８５−１．０５  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５２８．６  （Ｍ＋１）．
【０２２２】
化合物番号６３−０８：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ４００  ＭＨｚ）：  δ  ７．７４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．４，  ７．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．１８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．０７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．５，  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．９８  （ｂｔ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．８９  （ｂｓ，  ２Ｈ），  ５．６３  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．３５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．８１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．１４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．６，  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．８０−１．７１  （ｍ，  ２Ｈ），  １．６１−１．５６  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３９  （ｄｑ，  Ｊ  ＝  １５．０，  ７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．３２−１．２１  （ｍ，  １８Ｈ），  ０．９０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．８６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５４２．４  （Ｍ＋１）．
【０２２３】
化合物番号６３−０９：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６，  ３００  ＭＨｚ）：  ８．１８  （ｔ，  １Ｈ），  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．１８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．９−７．１２  （ｍ，  ３Ｈ），６．５５  （ｓ，  ２Ｈ），  ５．８  （  ｓ，  ２Ｈ），４．２  （ｄ，  ２Ｈ），  ２．９０  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．６５−１．８０  （ｍ，  ２Ｈ），１．３−１．７５  （ｍ，  ４Ｈ），  １．２５−１．３８  （ｍ，  １０  Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５５６．９  （Ｍ＋１）．
【０２２４】
化合物番号６３−１０：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．０６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．９５  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．３３  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ３．０１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．２０  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．８２−１．９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４２−１．７０  （ｍ，４Ｈ），  １．２６−１．４８  （ｍ，  ２０  Ｈ），  ０．８５−１．０５  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５７０．８  （Ｍ＋１）．
【０２２５】
化合物番号６３−１１：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７６（ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．０６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．９５  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．３３  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．０３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．２１  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．８２−１．９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４２−１．７０  （ｍ，４Ｈ），  １．２６−１．４８  （ｍ，  ２２  Ｈ），  ０．８５−１．０５  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５８５．２  （Ｍ＋１）．
【０２２６】
化合物番号６３−３１：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤ３ＯＤ，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．９  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．３９  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ３．０  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．２５  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．４２−１．９０  （ｍ，  ６Ｈ），１．２−１．４  （ｍ，  １３Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５９８．７  （Ｍ＋１）．
【０２２７】
化合物番号６３−１３：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ４００  ＭＨｚ）：  δ  ７．７７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．４，  ７．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．５，  ７．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．８７  （ｂｔ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．８７  （ｂｓ，  ２Ｈ），  ５．６８  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．３９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．８５  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．０，  ８．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．１７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．６，  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．８３−１．７５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．６５−１．５８  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４３  （ｄｑ，  Ｊ  ＝  １５．０，  ７．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．３２−１．２１  （ｍ，  ３０Ｈ），  ０．９２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ），  ０．８８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ６２５．５  （Ｍ＋１）．
【０２２８】
化合物番号６３−００：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＭｅＯＨｄ４，  ４００  ＭＨｚ）：  δ  ７．７０  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．４，  ０．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３６  （ｍ，  Ｊ  ＝  ８．４，  ７．０，  １．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．０３  （ｍ，  Ｊ  ＝  ８．３，  ７．０，  １．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７２  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．８８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ７．６，  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７７−１．６９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４５−１．３５  （ｍ，  ２Ｈ），  ０．９０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ，  ３Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ３６０．２  （Ｍ＋１）．
【０２２９】
化合物番号６３−１７：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７０  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７５−１．８４  （ｍ，  ２Ｈ），１．２−１．７５  （ｍ，  ８Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４３０．３  （Ｍ＋１）．
【０２３０】
化合物番号６３−１８：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７２  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．７６  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７５−１．８４  （ｍ，  ２Ｈ），１．４−１．６  （ｍ，  ４Ｈ），１．２−１．３５  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４４４．６  （Ｍ＋１）．
【０２３１】
化合物番号６３−１９：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７０  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７５−１．８４  （ｍ，  ２Ｈ），１．４−１．６  （ｍ，  ４Ｈ），１．２−１．３５  （ｂ，  ｓ，  ８Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４５８．４  （Ｍ＋１）．
【０２３２】
化合物番号６３−２０：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７０  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７５−１．８４  （ｍ，  ２Ｈ），１．４−１．６  （ｍ，  ４Ｈ），１．２−１．３５  （ｂ，  ｓ，  １０Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４７２．４  （Ｍ＋１）．
【０２３３】
化合物番号６３−２１：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７０  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７５−１．８４  （ｍ，  ２Ｈ），１．４−１．６  （ｍ，  ４Ｈ），１．２−１．３５  （ｂ，  ｓ，  １２Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ４８６．５  （Ｍ＋１）．
【０２３４】
化合物番号６３−２２：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７０  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ２．８９  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７５−１．８４  （ｍ，  ２Ｈ），１．４−１．６  （ｍ，  ４Ｈ），１．２−１．３５  （ｂ，  ｓ，  １４Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５００．５  （Ｍ＋１）．
【０２３５】
化合物番号６３−２４：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．７８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．２８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７０  （ｂｒ  ｓ，  ４Ｈ），  ３．７３  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ２．８７  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．５８  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７１−１．８４  （ｍ，  ２Ｈ），１．３８−１．５５  （ｍ，  ４Ｈ），  １．１０−１．３５  （ｍ，  １８Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５２８．７  （Ｍ＋１）．
【０２３６】
化合物番号６３−３２：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７３  （  ｓ，  ２Ｈ），５．５  （ｂｒ  ｓ，  ２Ｈ）  ３．７５  （ｓ，  ２Ｈ），  ），  ２．９０  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．７５−１．８５  （ｍ，  ４Ｈ），１．４−１．６  （ｍ，  ４Ｈ），  １．２５−１．３８  （ｍ，  １５  Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ５８４．９  （Ｍ＋１）．
【０２３７】
化合物番号６３−２９：  １Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３，  ３００  ＭＨｚ）：  ７．８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．７３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．４２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４，  １Ｈ），  ７．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ５．７２  （  ｓ，  ２Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．７８  （ｓ，  ２Ｈ），  ２．９０  （ｔ，  Ｊ  ＝７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．６２  （ｔ，    Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．６５−１．８５  （ｍ，  ２Ｈ），１．３５−１．６  （ｍ，  ４Ｈ），  １．２５−１．３８  （ｍ，  １５  Ｈ），  ０．６５−１．０  （ｍ，  ６Ｈ）．    Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃ：  ｍ／ｚ  ６１２．８  （Ｍ＋１）．
【表５−１】
2020531530.tif 000040
【表５−２】
2020531530.tif 000041
【表６−１】
2020531530.tif 000042
【表６−２】
2020531530.tif 000043
実施例Ｓ１３：式（Ｋ−１）のさらなる例示的なＮ−アルキル化合物の合成
【０２３８】
式（Ｋ−１）の例示的なＮ−アルキル化合物番号６３−１６、６３−２３、６３−２５、６３−２６、６３−２７、６３−２８、および６３−３０を、化合物番号６３−１７について記載の手順（実施例Ｓ２）に類似の手順を使用して合成する。パートＩでは、以下のカルボン酸を、化合物番号６３−１７のために使用した吉草酸の代わりに使用する：ｎ−ブタン酸（化合物番号６３−１６）；ウンデカン酸（化合物番号６３−２３）；トリデカン酸（化合物番号６３−２５）；テトラデカン酸（化合物番号６３−２６）；ペンタデカン酸（化合物番号６３−２７）；ヘプタデカン酸（化合物番号６３−２８）；およびノナデカン酸（化合物番号６３−３０）。次いで、得られたＮ−アシル誘導体を実施例Ｓ２について記載のパートＪにしたがって最終Ｎ−アルキル化合物に還元する。
実施例Ｓ１４：式（Ｋ−２）のさらなる例示的なＮ−アシル化合物の合成
【０２３９】
式（Ｋ−２）の例示的なＮ−アシル化合物番号６３−０１、６３−０３、６３−０４、６３−１２、６３−１４、および６３−１５を、化合物番号６３−１０（実施例Ｓ１）のパートＨまでに記載の手順に類似の手順を使用して合成する。パートＩでは、Ｎ−アシル生成物を形成するために、以下のカルボン酸を、化合物番号６３−１０のために使用したミリスチン酸の代わりに使用する：ペンタン酸（化合物番号６３−０１）、ヘプタン酸（化合物番号６３−０３）、オクタン酸（化合物番号６３−０４）、ヘプタデカン酸（化合物番号６３−１２）、ノナデカン酸（化合物番号６３−１４）、およびアラキジン酸（化合物番号６３−１５）。
生物学的実施例
実施例Ｂ１。インビトロ生物学的アッセイおよび結果
方法
【０２４０】
形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）富化末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を、一連のヒトドナー（３〜５ドナー／実験）の血液から調製した。ＰＢＭＣを、当業者に周知の方法を使用してＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  Ｐｒｅｍｉｕｍ（登録商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｃｈｉｃａｇｏ  ＩＬ）を用いて単離した。製造者の説明書にしたがって、ＣＤ３０４（ＢＤＣＡ−４／ニューロピリン−１）マイクロビーズ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ  ＣＡ）を使用して、回収した全ＰＢＭＣ集団からｐＤＣを磁性的に単離した。次いで、単離したｐＤＣを、この細胞型を相対的に富化させるために、１×１０８と２×１０８との間の対応するドナーのＰＢＭＣに戻した。次いで、ｐＤＣ富化ＰＢＭＣの二連の培養物（ＲＰＭＩ−１６４０培地＋１０％ウシ胎児血清中に２．５×１０６細胞／ｍＬ、９６ウェルプレート中で培養）を、０．１ｎＭ〜４００ｎＭの範囲をカバーする１０の連続希釈濃度の化合物番号６３−０２、６３−０５〜６３−１１、６３−１３、６３−３１、６３−３４、６３−３８〜６３−４７、およびこれらの未改変同類物１−（４−アミノメチルベンジル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−００）と共に２４時間インキュベートした。培養上清を回収し、インターフェロン−アルファ（ＩＦＮα）タンパク質レベルを、製造者の説明書に従ってＥＬＩＳＡ（ＭａｂＴｅｃｈ、Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ  ＯＨ）によって測定した。
【０２４１】
単球を、上記のように調製し、製造者の説明書に従ってＣＤ１４マイクロビーズ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ  ＣＡ）で標識した後にＰＢＭＣから磁性的に単離した。単球の二連の培養物（ＲＰＭＩ−１６４０＋１０％ウシ胎児血清の重複培養中に１×１０６細胞／ｍＬ、９６ウェルプレート中で培養）を、２ｎＭ〜４０μＭの範囲をカバーする１０の連続希釈濃度の化合物番号６３−０２、６３−０５〜６３−１１、６３−１３、６３−３１、６３−３４、６３−３８〜６３−４７、およびこれらの未改変同類物１−（４−アミノメチルベンジル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン（化合物番号６３−００）と共に２４時間インキュベートした。培養上清を回収し、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）タンパク質レベルを、製造者の説明書に従ってＥＬＩＳＡ（ＭａｂＴｅｃｈ、Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ  ＯＨ）によって測定した。
結果
【０２４２】
ｉ）Ｒが、ベンジルメチル部分上のアミド基に５（化合物番号６３−０２）、８（化合物番号６３−０５）、９（化合物番号６３−０６）、１０（化合物番号６３−０７）、１１（化合物番号６３−０８）、１２（化合物番号６３−０９）、１３（化合物番号６３−１０）、１４（化合物番号６３−１１）、１５（化合物番号６３−３１）、または１７（化合物番号６３−１３）個の炭素が付加された直鎖アルキル鎖である式（Ｋ−２）の化合物、またはｉｉ）Ｒ０が、ベンジルメチル部分上のアミド基に４（化合物番号６３−３４）個の炭素が付加されたシクロプロピルメチル部分である式（Ｊ−２）の化合物のいずれかの、インビトロでのＴＬＲ７（ｐＤＣ富化ＰＢＭＣ培養物におけるＩＦＮαタンパク質の誘導）およびＴＬＲ８（単球培養物におけるＴＮＦαタンパク質の誘導）のアゴニスト生物活性に及ぼす改変効果を評価した。表Ｂ１−１は、化合物番号６３−００、６３−０２、６３−０５〜６３−１１、６３−１３、６３−３１、および６３−３４についての構造、ｃＬｏｇＰ計算値、およびＴＬＲ７／８アゴニスト生物活性の関係をまとめている。ＴＬＲ７およびＴＬＲ８のアゴニスト効力を表Ｂ１−１に示し、単位をナノモルとする最大応答の５０％効果濃度（ＥＣ５０、単位ｎＭ）として報告する。これらのアルキル鎖での化合物番号６３−００の改変により、ＴＬＲ７アゴニスト効力がそれぞれ１／１１および１／４１に低下した５（化合物番号６３−０２）および１７（化合物番号６３−１３）個の炭素のバリアントを除いて、一般に、ＴＬＲ７アゴニスト効力が１／２〜１／３に低下した。対照的に、５（化合物番号６３−０２）、８（化合物番号６３−０５）、９（化合物番号６３−０６）、１０（化合物番号６３−０７）、１５（化合物番号６３−３１）、および１７（化合物番号６３−１３）個の炭素鎖バリアントは、未改変の化合物番号６３−００と比較して、ＴＬＲ８アゴニスト効力が１／１０未満〜１／２６に低下した。予想外には、炭素鎖長が１１（化合物番号６３−０８）、１２（化合物番号６３−０９）、１３（化合物番号６３−１０）、および１４（化合物番号６３−１１）のバリアントは、アゴニスト活性がそれほど低下せず、化合物番号６３−１０は、未改変化合物番号６３−００と比較して、ＴＬＲ８アゴニスト効力の低下が１／２．４しかないことが実証された。Ｒ０がシクロプロピルメチル基である化合物番号６３−３４は、未改変化合物番号６３−００と比較してＴＬＲ７アゴニスト効力が１／８に低下し、ＴＬＲ８アゴニスト効力が１／７に低下することが証明された。これらのデータは、直鎖の５炭素アルキル鎖修飾された化合物番号６３−０２で認められたＴＬＲ７およびＴＬＲ８のアゴニスト効力の低下に匹敵する。
【表Ｂ１−１】
2020531530.tif 000044
【０２４３】
ｉ）Ｒが、ベンジルメチル部分上のアミン基に５（化合物番号６３−１７）、６（化合物番号６３−１８）、７（化合物番号６３−１９）、８（化合物番号６３−２０）、９（化合物番号６３−２１）、１０（化合物番号６３−２２）、１２（化合物番号６３−２４）、１６（化合物番号６３−３２）、または１８（化合物番号６３−２９）個の炭素を付加した直鎖アルキル鎖である式（Ｋ−１）の化合物の改変、またはｉｉ）Ｒ０が、アミド基に５（化合物番号６３−３３）個の炭素が付加されたシクロプロピルエチル部分、６（化合物番号６３−３５）個の炭素が付加されたシクロブチルエチル部分、または７（化合物番号６３−３６）個の炭素が付加されたシクロペンチルエチル部分である式（Ｊ−１）の化合物の改変のいずれかの、インビトロでのＴＬＲ７（ｐＤＣ富化ＰＢＭＣ培養物におけるＩＦＮαタンパク質の誘導）およびＴＬＲ８（単球培養物におけるＴＮＦαタンパク質の誘導）のアゴニスト生物活性に及ぼす効果を評価した。表Ｂ１−２は、化合物番号６３−００、６３−１７〜６３−２２、６３−２４、６３−２９、６３−３２、６３−３３、６３−３５、および６３−３６についての構造、ｃＬｏｇＰ計算値、およびＴＬＲ７／８アゴニスト生物活性の関係をまとめている。ＴＬＲ７およびＴＬＲ８のアゴニスト効力を表Ｂ１−２に示し、単位をナノモルとする最大応答の５０％効果濃度（ＥＣ５０、単位ｎＭ）として報告する。直鎖アルキル鎖での化合物番号６３−００の改変によって炭素数が増加するにつれてＴＬＲ７／８アゴニスト効力の低下が大きくなることが実証されたが、５（化合物番号６３−１７）および６（化合物番号６３−１８）個の炭素バリアントはＴＬＲ８アゴニスト効力がわずかに改善されたことを実証していた。３つのヒドロカルビル基（シクロプロピルエチル、シクロブチルエチル、およびシクロペンチルエチル）での化合物番号６３−００の改変によってＴＬＲ７アゴニスト生物活性が１／４〜１／１２に低下したが、アゴニスト効力は２〜３倍に増加した。
【表Ｂ１−２】
2020531530.tif 000045
【０２４４】
Ｒ０が、（シクロプロピル）エチル部分（化合物番号６３−３３）、（シクロブチル）エチル部分（化合物番号６３−３５）、（シクロペンチル）エチル部分（化合物番号６３−３６）、（シクロプロピル）メチル部分（化合物番号６３−３８）、（２−メチルシクロプロピル）メチル部分（化合物番号６３−３９）、（２，２−ジメチルシクロプロピル）メチル部分（化合物番号６３−４０）、（２−シクロプロピル）−（２，２−ジメチル）エチル部分（化合物番号６３−４１）、（１−メチルシクロプロピル）エチル部分（化合物番号６３−４２）、（３−シクロプロピル）プロピル部分（化合物番号６３−４３）、（シクロブチル）メチル部分（化合物番号６３−４４）、（１−メチルシクロブチル）メチル部分（化合物番号６３−４５）、（３−メチルシクロブチル）メチル部分（化合物番号６３−４６）、または（２−シクロブチル）−（２，２−ジメチル）エチル部分（化合物番号６３−４７）である式（Ｊ−１）の化合物の、インビトロでのＴＬＲ７（ｐＤＣ富化ヒトＰＢＭＣ培養物におけるＩＦＮαタンパク質の誘導）およびＴＬＲ８（ヒト単球培養物におけるＴＮＦαタンパク質の誘導）のアゴニスト生物活性に及ぼす改変効果を評価した。表Ｂ１−３は、化合物番号６３−００、６３−３３、６３−３５、６３−３６、および６３−３８〜６３−４７についてのＴＬＲ７／８アゴニスト生物活性の関係をまとめている。表Ｂ１−３に示したＴＬＲ７およびＴＬＲ８のアゴニスト効力を、化合物番号６３−００について決定した最大応答の５０％効果化合物濃度に対する百分率として報告する。ＴＬＲ７およびＴＬＲ８のアゴニスト化合物の効力を評価するために使用した精製免疫細胞から分泌されたサイトカインレベルのヒト血液ドナー間におけるばらつきにより、所与の化合物についてのＥＣ５０効力の計算された絶対値がわずかに変動し；この影響を正規化するために、表Ｂ１−３中のデータを、未改変のイミダゾキノリンベースの化学構造（化合物番号６３−００）について決定したＥＣ５０に対する百分率として示す。
【０２４５】
表Ｂ１−３に示すように、式（Ｊ−１）の化合物を生成するための様々なシクロアルキル部分での化合物番号６３−００の化学構造の改変により、ＴＬＲ７アゴニスト効力が１／１１まで減弱した。（シクロブチル）メチルバリアント（化合物番号６３−４４）および（１−メチルシクロブチル）メチルバリアント（化合物番号６３−４５）は、ＴＬＲ７アゴニスト活性の減弱量は最小であることが実証され（それぞれ、１／１．２および１／１．９の効力低下）、それに対して、（シクロペンチル）エチルバリアント（化合物番号６３−３６）および（２−シクロブチル）−（２，２−ジメチル）エチルバリアント（化合物番号６３−４７）は、ＴＬＲ７アゴニスト活性の減弱量は最大であることが実証された（それぞれ、１／１０．９および１／９．０の効力低下）。化合物番号６３−００の化学構造に対する同一の構造改変組のＴＬＲ８アゴニスト効力が同様であるかそれを超えたことが予想外であった。（シクロブチル）メチルバリアント（化合物番号６３−４４）および（１−メチルシクロブチル）メチルバリアント（化合物番号６３−４５）は、ＴＬＲ８アゴニスト効力の増加が最大であることが実証された（それぞれ、５．９倍および７．７倍）。対照的に、（１−メチルシクロプロピル）エチルバリアント（化合物番号６３−４２）および（２−シクロブチル）−（２，２−ジメチル）エチルバリアント（化合物番号６３−４７）のＴＬＲ８アゴニスト活性は、化合物番号６３−００と比較してわずかな改善からわずかに劣ることが実証された。ＴＬＲ７およびＴＬＲ８アゴニスト効力がより厳密に適合したＴＬＲ７／８アゴニスト小分子は、所与の薬学的組成物中で治療用量の化合物を投与した際に２レセプター系に匹敵する活性化が得られる可能性がより高く、したがって、より広い範囲の関連する免疫細胞型が活性化される可能性がより高い。バランスの取れた二重効力を有する化合物はまた、単一の活性薬学的有効成分を合成して特徴付けることが可能であり、それにより、より低価格でのＧＭＰの製造を容易にし、規制経路をより簡潔かつ予想可能にすることができる。
【表Ｂ１−３】
2020531530.tif 000046
実施例Ｂ２。薬学的組成物の調製
【０２４６】
実施例Ｂ２−１。ゴマ油ベースの薬学的組成物の調製。化合物番号６３−１７、６３−１８、６３−１０、および６３−３３を、９５％ゴマ油／５％エタノール（ｖ／ｖ）中でのインビボ投与のために以下のとおり製剤化した。超精製（登録商標）ゴマ油を、Ｃｒｏｄａ  Ｉｎｃ．（Ｅｄｉｓｏｎ，ＮＪ）から入手し、エタノール（２００プルーフ、ＵＳＰグレード）を、Ｐｈａｒｍａｃｏ−ＡＡＰＥＲ（Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ，ＣＴ）から入手した。化合物をガラスバイアルに入れ、１００％エタノールを添加して２．７５ｍｇ／ｍＬ懸濁液を作製した。溶液を３０秒間のボルテックスによって可溶化し、次いで、５０℃に設定した超音波水浴中に３０分間保持した。次いで、１ｍＬのこれらの溶液を、１６．０ｇのゴマ油を含む２０ｍＬガラスバイアルに移し、回転ミキサーにて周囲温度で２０分間混合し、次いで、９０℃の水浴に２時間移して完全に可溶化させた。製剤化した化合物を３７℃に冷却後、０．２ミクロンの濾過によって滅菌した。製剤化した化合物を、ゴム栓をした滅菌ガラスバイアル中にて２〜８℃で保存した。最終製剤中の成分の濃度は、以下のとおりであった：９５％ゴマ油および５％エタノール（ｖ／ｖ）中０．１ｍｇ／ｍＬ（ｗ／ｖ）化合物。
【０２４７】
実施例Ｂ２−２。スクアレン水中油型ナノエマルジョンベースの薬学的組成物の調製。化合物番号６３−１７、６３−１８、６３−１０、および６３−３３を、スクアレン水中油型ベースのナノエマルジョン中でのインビボ投与のために以下のとおり製剤化した。スクアレン（９８％以上、液体）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０（ポリソルベート８０）、グリセロール、およびクエン酸三ナトリウム二水和物をＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から入手した。１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＯＰＣ）を、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ（Ａｌａｂａｓｔｅｒ，ＡＬ）から入手した。細胞培養グレードの水（注射用滅菌水）を、Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｔｅｗｋｓｂｕｒｙ，ＭＡ）から入手した。
油相を形成するために、ＤＯＰＣ（１７５．６ｍｇ）を、４ｍＬガラスバイアル中のスクアレンオイル（１．４ｍＬ）に添加した。次いで、混合物を、脂質が溶解するまで１５分毎に短時間ボルテックスしながら超音波水浴中で７０℃で４５分間インキュベートした。示した化合物（１３．７ｍｇ）をスクアレン／ＤＯＰＣ溶液に添加し、１分間強くボルテックスした。次いで、この溶液を、超音波水浴中にて１０分毎に短時間ボルテックスしながら７０℃で３０分間インキュベートした。必要に応じて透明な溶液を作製するために、混合物を９０℃の水浴中で１５分毎に短時間ボルテックスしながら２時間さらにインキュベートした。別で水相を形成するために、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０（７０ｍｇ）およびグリセロール（３１５ｍｇ）を、５０ｍＬポリプロピレンチューブ中で１００ｍＭクエン酸ナトリウム（ｐＨ６．５）溶液（３．５ｍＬ）および水（２９．８ｍＬ）と混合した。
【０２４８】
スクアレンオイル／ＤＯＰＣ／化合物含有油相およびＴｗｅｅｎ（登録商標）８０／グリセロール／クエン酸ナトリウム含有水相を合わせた後にＰｏｌｙｔｒｏｎ（登録商標）ミキサー（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ，Ｌｕｚｅｒｎ  ＣＨ）を用いて２４，０００ｒｐｍで５分間高剪断混合することによって水中油型エマルジョンを形成させた。次いで、粗エマルジョンを、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ  Ｍ−１１０Ｐ  Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ（登録商標）（Ｗｅｓｔｗｏｏｄ，ＭＡ）を使用しておよそ３０，０００ｐｓｉで８回通過させる高圧均質化に供した。動的光散乱（Ｍａｌｖｅｒｎ  ＮａｎｏＳ（登録商標），Ｍａｌｖｅｒｎ  ＵＫ）による解析は、平均油滴直径１５０〜１７５ｎｍ、分散指数０．１５未満を示していた。次いで、化合物含有ナノエマルジョン製剤を、０．２ミクロン滅菌シリンジフィルターを使用して滅菌濾過し、ゴム栓をした滅菌ガラスバイアル中にて２〜８℃で保存した。
【０２４９】
最終ナノエマルジョン製剤中の種々の成分の濃度は以下のとおりであった：０．４ｍｇ／ｍＬ化合物（ｗ／ｖ）、４％スクアレンオイル（ｖ／ｖ）、０．５％ＤＯＰＣ（ｗ／ｖ）、０．２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０（ｗ／ｖ）、０．９％グリセロール（ｗ／ｖ）、および１０ｍＭ酢酸ナトリウム。スクアレン水中油型ナノエマルジョン製剤中の化合物のインビボ投与のための薬学的調製物を、穏やかに反転させて混合しながらダルベッコリン酸緩衝生理食塩水と１：１希釈することによって使用前に調製した。
実施例Ｂ３。インビボ全身免疫活性化アッセイ
【０２５０】
１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリンプリビリッジドテンプレート（例えば、イミキモド、レシキモドを参照のこと）から誘導された小分子ＴＬＲ７およびＴＬＲ７／８アゴニストは、腫瘍内注射、皮下注射、または筋肉内注射後に全身区画に迅速に分布することが公知である。野生型マウスにおけるこれらのアゴニスト化合物の広範な全身分布により、主に脾臓細胞および肝臓細胞におけるＴＬＲ７依存性サイトカイン応答が誘導され、その後に３〜６時間以内に血清中で検出することができる。血清サイトカインバイオマーカー（例えば、ＩＬ−６およびＩＬ−１２ｐ４０）の急速な増加を使用して、局所投与されたＴＬＲアゴニストの全身分布の動態学を評価することができる。
【０２５１】
９５％ゴマ油／５％エタノール（ｖ／ｖ）中で製剤化した化合物番号６３−００、６３−１７、または６３−１０から構成される薬学的組成物分布の動態学を、野生型マウスにおける単回皮下注射後に評価した。全てのインビボ手順を、承認されたＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＩＡＣＵＣ）のプロトコールにしたがって実施した。動物を、Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ａｃｃｒｅｄｉｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ（ＡＡＬＡＣ，Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ  ＭＤ）の認定施設に収容した。野生型雌ＢＡＬＢ／ｃマウス（１５〜２０ｇｍ）を、Ｅｎｖｉｇｏ（Ｈａｙｗａｒｄ、ＣＡ）から入手し、使用前に２〜３日間馴化させた。
【０２５２】
薬学的組成物を、実施例Ｂ２−１に記載の様式に類似の様式で最終濃度２００μｇ／ｍＬの３つの化合物を用いて作製した。Ｔ＝０では、３匹のマウスから構成される群を、１％イソフルランで麻酔し、５μｇの３つの各化合物またはビヒクルコントロールを含む２５ｕＬの９５％ゴマ油／５％エタノール（ｖ／ｖ）を右足蹠に皮下注射した。次いで、Ｔ＝３、６、および２４時間で、心穿刺による採血を容易にするために各群の３匹の動物を１％イソフルランで麻酔した。試料を血清に処理し、さらなる解析のために−２０℃で保存した。
【０２５３】
ＩＬ−６およびＩＬ−１２ｐ４０の血清レベルをＥＬＩＳＡによって各動物から定量して、より長いアルキル鎖を用いて誘導体化した化合物の全身分布速度が遅くなるかどうかを判定した。図１に示すように、アルキル鎖修飾していない化合物番号６３−００は、３時間（ＩＬ−６＝７７２±１４１ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１２ｐ４０＝１３９，７６７±３１，０２４ｐｇ／ｍＬ）および６時間（ＩＬ−６＝１６０±１９ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１２ｐ４０＝１４２，３５９±２２，３５０ｐｇ／ｍＬ）でのＩＬ−６およびＩＬ−１２ｐ４０の血清レベル上昇が誘導され、２４時間までにベースラインに戻った（ＩＬ−６＝３２±２ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１２ｐ４０＝７，７９６±１，５４５ｐｇ／ｍＬ）。ペンチルアミノバリアント（化合物番号６３−１７）は、３時間（ＩＬ−６＝８５３±５３９ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１２ｐ４０＝８４，７３１±３２，５３０ｐｇ／ｍＬ）および６時間（ＩＬ−６＝４１４±１０５ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１２ｐ４０＝２５８，６４５±１９，９８２ｐｇ／ｍＬ）における血清区画中の初期サイトカイン産生の規模および動態学が類似し、２４時間までのベースラインレベルまでの回復も類似していた（ＩＬ−６＝３３±４ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１２ｐ４０＝１９，５４６±２，１１６ｐｇ／ｍＬ）。ｃＬｏｇＰ値が実質的により高いテトラデカンアミドバリアント（化合物番号６３−１０）は、３、６、２４時間のいずれにおいても血清サイトカインの検出可能な増加は実証されなかった（３時間：ＩＬ−６＝４９±３２ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１２ｐ４０＝１，０１２±２４６ｐｇ／ｍＬ；６時間：ＩＬ−６＝３３±４ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１２ｐ４０＝２，１７９±５９７ｐｇ／ｍＬ；および２４時間：ＩＬ−６＝３２±２ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１２ｐ４０＝２，４３６±２３７ｐｇ／ｍＬ）。これらのデータは、３つ全ての化合物においてインビトロでＴＬＲ７アゴニスト生物活性が等しいことが実証される（表Ｂ１−１およびＢ１−２を参照のこと）という事実があるが、化合物番号６３−１０およびゴマ油／エタノールの薬学的組成物の製剤の疎水性の高さが注射部位での分子の保持を促進するという解釈と一致する。
実施例Ｂ４。ＣＴ２６結腸癌保有野生型マウスにおけるアルキル鎖修飾ＴＬＲ７／８アゴニストの抗腫瘍有効性
【０２５４】
９５％ゴマ油／５％エタノール（ｖ／ｖ）中に製剤化された化合物番号６３−１０、６３−１８、または６３−３３から構成される、腫瘍内送達される薬学的組成物の週１回の反復投与の腫瘍成長阻害に及ぼす効果を、同系ＣＴ２６結腸癌保有Ｂａｌｂ／ｃマウスにおいて評価した。全てのインビボ手順を、承認されたＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＩＡＣＵＣ）のプロトコールにしたがって実施した。動物を、Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ａｃｃｒｅｄｉｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ（ＡＡＬＡＣ，Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ，ＭＤ）の認定施設に収容した。野生型雌Ｂａｌｂ／ｃマウス（１５〜２０ｇｍ）を、Ｅｎｖｉｇｏ（Ｈａｙｗａｒｄ、ＣＡ）から入手し、使用前に２〜３日間馴化させた。
【０２５５】
薬学的組成物を、実施例Ｂ２−１に記載の様式に類似の様式で最終濃度５、５０、２００μｇ／ｍＬの３つの化合物を用いて作製した。このマウス腫瘍モデルにおいて有効性が事前に実証されているＴＬＲ９  ＣｐＧアゴニストを、ポジティブコントロールとして使用した（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ  ２０１６  ＰＮＡＳ  １１３：Ｅ７２４０−Ｅ７２４９）。０日目に、マウスを１％イソフルランで麻酔し、２００ｕＬのＲＭＰＩ−１６４０培養培地＋２．５％ウシ胎児血清中８０，０００個のＣＴ２６腫瘍細胞を右側腹部に皮下注射した。腫瘍を約３５ｍｍ３まで成長させ、その時点で、動物を、処置を開始するための群に割り付けた。マウスに、９５％ゴマ油／５％エタノール（ｖ／ｖ）中に製剤化された１００ｕＬの、２０、５、または０．５μｇの化合物番号６３−１０、または２０μｇもしくは５μｇの化合物番号６３−１８、または６３−３３を含む薬学的組成物を４週間にわたって週１回、またはビヒクルコントロールを３週間にわたって週２回（実験日９、１２、１６、１９、２３、および２６）腫瘍内注射した。ＴＬＲ９  ＣｐＧアゴニストを、リン酸緩衝生理食塩水中に製剤化された１００μＬの、５０μｇの化合物から構成される薬学的組成物を同一の投与計画で腫瘍内注射した。腫瘍サイズを、カリパスを使用して８日目から３０日目まで週２回測定し、腫瘍容積を以下の式を使用して計算した：長径×短径×短径／２。
【０２５６】
化合物番号６３−１０、６３−１８、および６３−３３は、ビヒクルコントロールと比較して、試験用量範囲にわたってＣＴ２６腫瘍成長を強力に制御することが実証された（図２）。化合物番号６３−１０、６３−１８、および６３−３３について認められた腫瘍成長制御レベルは、ＴＬＲ９  ＣｐＧに匹敵していた。これらのデータは、本発明のＴＬＲ７／８アゴニストがこの同系マウス腫瘍成長モデル系において強力な抗腫瘍効果を有することを実証しており、この効果は、ビヒクルコントロールと比較して腫瘍成長をより制御する（かつ、ＴＬＲ９  ＣｐＧによる腫瘍成長阻害に匹敵する）。これらのデータは、化合物番号６３−１０、６３−１８、および６３−３３の腫瘍成長阻害がインビトロでのそのＴＬＲ７アゴニスト生物活性と相関し（例えば、表Ｂ１−１およびＢ１−２を参照のこと）、その改変したアルキル鎖長とは無関係であるという解釈と一致する。
実施例Ｂ５。２つの側腹部にＣＴ２６結腸癌を保有する野生型マウスにおける腫瘍関連抗原を共投与したアルキル鎖修飾ＴＬＲ７／８アゴニストの抗腫瘍有効性
【０２５７】
スクアレンベースの水中油型ナノエマルジョン中にＣＴ−２６腫瘍関連ＡＨ−１クラスＩＩペプチド（内因性レトロウイルス遺伝子産物ｇｐ７０由来の免疫優性エピトープ配列；例えば、Ｒｉｃｅ  Ｊ，Ｂｕｃｈａｎ  Ｓ  ａｎｄ  Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ  Ｆ  ２００２  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６９：３９０８−３９１３を参照のこと）と共製剤化した化合物番号６３−１０から構成される、腫瘍内送達される薬学的組成物の週１回の反復投与の、注射された腫瘍および遠位の腫瘍の成長阻害に及ぼす効果を、２つの側腹部に腫瘍を保有するＣＴ２６結腸癌保有Ｂａｌｂ／ｃマウスにおいて評価した。全てのインビボ手順を、承認されたＩＡＣＵＣのプロトコールにしたがって実施した。動物を、ＡＡＬＡＣの認定施設に収容した。野生型雌Ｂａｌｂ／ｃマウス（１５〜２０ｇ）を、Ｅｎｖｉｇｏ（Ｈａｙｗａｒｄ，ＣＡ）から入手し、使用前に２〜３日間馴化させた。
【０２５８】
スクアレンベースの水中油型ナノエマルジョンから構成される薬学的組成物を、一般に実施例Ｂ２−２に記載のように作製した。コントロールであるスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョンに加えて、最終濃度５００ｎｇ／ｍＬの化合物番号６３−１０のみ、または最終濃度５００ｎｇ／ｍＬの化合物番号６３−１０＋最終濃度５００，０００ｎｇ／ｍＬのＡＨ−１クラスＩＩペプチドのいずれかを組み込んださらなるナノエマルジョンを作製した。後者の薬学的組成物について、ＡＨ−１ペプチドを、最初にリン酸緩衝生理食塩水中に２倍濃度で溶解し、次いで、最終混合工程中にスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョンに製剤化して、最終濃度５００，０００ｎｇ／ｍＬのナノエマルジョンを得た。０日目に、マウスを１％イソフルランで麻酔し、を含む２．５％ウシ胎児血清を含む２００ｕＬのＲＭＰＩ−１６４０培養培地中８０，０００個のＣＴ２６腫瘍細胞を、右側腹部および左側腹部の両方に皮下注射した。腫瘍を８日目まで成長させ、平均腫瘍サイズがおよそ５０ｍｍ３に到達したとき、その時点でマウスを群に無作為化し、１００ｕＬのスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョンのビヒクルコントロール、５０ｎｇの化合物番号６３−１０を含むナノエマルジョン、または５０ｎｇの化合物番号６３−１０＋５０，０００ｎｇのＡＨ−１腫瘍抗原ペプチドを含むナノエマルジョンを右側腹部の腫瘍に腫瘍内注射した。これら３つの薬学的組成物を、実験日１２、１６、２０日目に右側腹部腫瘍にさらに注射した。次いで、右（注射）および左（遠位）の腫瘍容積を、カリパスを使用して８日目から３０日目まで週２回測定し、腫瘍容積を以下の式を使用して計算した：長径×短径×短径／２。
【０２５９】
５０ｎｇの化合物番号６３−１０を含むスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョンから構成される薬学的組成物は、ナノエマルジョンのビヒクルコントロールと比較して、注射した（右）腫瘍の腫瘍成長阻害が大きい傾向が実証された（図３Ａ）；しかし、この腫瘍成長阻害は２７日目のビヒクルコントロールと有意に異ならなかった。対照的に、５０ｎｇの化合物番号６３−１０＋５０，０００ｎｇのＡＨ−１腫瘍関連ペプチドを含むスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョンから構成される薬学的組成物は、２７日目のナノエマルジョンのビヒクルコントロールと比較して、注射した（右）腫瘍の腫瘍成長阻害が有意に大きいことが実証された。さらに、５０ｎｇの化合物番号６３−１０を含むスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョンから構成される薬学的組成物は、ナノエマルジョンのビヒクルコントロールと比較して、遠位（左）腫瘍の腫瘍成長阻害が大きい傾向が実証された（図３Ｂ）；しかし、この腫瘍成長阻害は２３日目のビヒクルコントロールと有意に異ならなかった。対照的に、５０ｎｇの化合物番号６３−１０＋５０，０００ｎｇのＡＨ−１腫瘍関連ペプチドを含むスクアレンベースの水中油型ナノエマルジョンから構成される薬学的組成物は、２３日目のナノエマルジョンのビヒクルコントロールと比較して、遠位（左）腫瘍の腫瘍成長阻害が有意に大きいことが実証された。これらのデータは、化合物番号６３−１０による注射した腫瘍および遠位腫瘍の成長阻害が、前述の化合物を外因的に添加したＣＴ２６腫瘍関連抗原と共に腫瘍微小環境中の抗原提示細胞に送達された場合により優れているという解釈と一致する。
実施例Ｂ６。両側腹部にＣＴ２６結腸癌を保有する野生型マウスにおける免疫チェックポイント阻害と組み合わせたアルキル鎖修飾ＴＬＲ７／８アゴニストの抗腫瘍有効性
【０２６０】
抗マウスＰＤ−１（ＣＤ２７９）抗体（免疫チェックポイント阻害剤；ＢｉｏＸ  Ｃｅｌｌ，Ｌｅｂａｎｏｎ  ＮＨ）の腹腔内送達と組み合わせた、９５％ゴマ油／５％エタノール（ｖ／ｖ）中に製剤化した化合物番号６３−１０もしくは６３−３３、またはリン酸緩衝生理食塩水中に製剤化した化合物番号６３−００から構成される薬学的組成物の腫瘍内送達の腫瘍成長阻害に及ぼす効果を、２つの側腹部に腫瘍を保有するＣＴ２６結腸癌保有Ｂａｌｂ／ｃマウスにおいて評価した。全てのインビボ手順を、承認されたＩＡＣＵＣのプロトコールにしたがって実施した。動物を、ＡＡＬＡＣの認定施設に収容した。野生型雌Ｂａｌｂ／ｃマウス（１５〜２０ｇ）を、Ｅｎｖｉｇｏ（Ｈａｙｗａｒｄ，ＣＡ）から入手し、使用前に２〜３日間馴化させた。
【０２６１】
薬学的組成物を、実施例Ｂ２−１に記載の様式と類似の様式で最終濃度５０，０００ｎｇ／ｍＬの化合物番号６３−１０または６３−３３を用いて作製した。化合物番号６３−００の薬学的組成物を、リン酸緩衝生理食塩水を用いて最終濃度５０，０００ｎｇ／ｍＬで作製した。０日目に、マウスを１％イソフルランで麻酔し、２００ｕＬのＲＭＰＩ−１６４０培養培地＋２．５％ウシ胎児血清中８０，０００個のＣＴ２６腫瘍細胞を右側腹部および左側腹部の両方に皮下注射した。腫瘍（左および右）を８日目まで成長させ、右および左の側腹部の腫瘍サイズがおよそ３５ｍｍ３に到達したとき、その時点でマウスにリン酸緩衝生理食塩水中に製剤化した２５０μｇの抗ＰＤ−１抗体またはリン酸緩衝生理食塩水のビヒクルコントロールを腹腔内注射した。抗ＰＤ−１処置を、実験１２、１５、１９、２２、および２６日目に繰り返した。実験１４日目に、右（注射した）および左（遠位）の側腹部腫瘍がおよそ１００ｍｍ３に到達したとき、マウスを処置群に無作為化した。抗ＰＤ−１＋処置群の右側腹部腫瘍のみに、リン酸緩衝生理食塩水中に５，０００ｎｇの化合物番号６３−００を含む１００ｕＬの薬学的組成物、９５％ゴマ油／５％エタノール（ｖ／ｖ）中５，０００ｎｇの化合物番号６３−１０、または９５％ゴマ油／５％エタノール（ｖ／ｖ）中５，０００ｎｇの化合物番号６３−３３をさらに腫瘍内注射した。腫瘍サイズを、カリパスを使用して１４日目から２９日目まで週２回測定し、腫瘍容積を以下の式を使用して計算した：長径×短径×短径／２。
【０２６２】
抗ＰＤ−１処置と組み合わせた５，０００ｎｇの化合物番号６３−００、６３−１０、または６３−３３から構成される薬学的組成物は、抗ＰＤ−１処置のみと比較して、注射した腫瘍（右側腹部）の腫瘍成長阻害が大きいことが実証された（図４Ａ）。この腫瘍成長阻害は、化合物番号６３−３３および６３−００について２９日目の抗ＰＤ−１処置コントロールと有意に異なっていた。さらに、抗ＰＤ−１処置と組み合わせた５，０００ｎｇの化合物番号６３−００または６０−３３から構成される薬学的組成物は、抗ＰＤ−１処置のみと比較して、遠位腫瘍（左側腹部）の腫瘍成長阻害が大きい傾向が実証されたが（図４Ｂ）、この腫瘍成長阻害は２９日目の抗ＰＤ−１処置コントロールからの統計的有意性に到達しなかった。抗ＰＤ−１処置と組み合わせた５，０００ｎｇの化合物番号６３−１０から構成される薬学的組成物は、抗ＰＤ−１処置のみと比較して、遠位腫瘍成長阻害の改善が実証されなかった。これらのデータは、免疫チェックポイント阻害剤である抗ＰＤ−１と組み合わせた化合物番号６３−３３が、ビヒクルコントロール＋抗ＰＤ−１での処置と比較して、注射および遠位のＣＴ２６腫瘍成長の両方の制御において優れているという解釈と一致する。
【０２６３】
本明細書中で言及した特許、特許出願、および科学論文を含む全ての刊行物は、あたかも特許、特許出願、または科学論文を含む各々の刊行物が参考として援用されることを具体的かつ個別に示しているのと同じ程度に、あらゆる目的のためにその全体が本明細書中で参考として援用される。
【０２６４】
理解を深めるための実例および例示のために前述の発明をいくらか詳細に記載しているが、上記教示を考慮して、一定の軽微な変更および修正が行われることが当業者に明らかである。したがって、前述の説明および実施例を、本発明の範囲の限定と解釈すべきではない。
【図１】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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