(57)【要約】  本開示は、ケモカインタンパク質であるストロマ細胞由来因子１（ＳＤＦ−１）による腎臓疾患の治療のための組成物および方法、例えば、腎臓疾患を患っているかまたは発症するリスクがある対象を治療する方法であって、対象の腎臓に治療有効量でＳＤＦ−１を投与することを含む、方法を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
腎臓疾患を患っているかまたは発症するリスクがある対象を治療する方法であって、前記対象の腎臓に治療有効量でストロマ細胞由来因子１（ＳＤＦ−１）を投与することを含む、方法。
【請求項２】
前記腎臓疾患が、急性腎不全、慢性腎臓疾患、末期の腎疾患または貧血である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記対象が、ヒト対象である、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記対象が、非ヒト哺乳動物の対象である、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記対象が、ネコ、イヌまたはウマである、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項６】
前記対象が、飼いネコである、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記腎臓疾患が、慢性間質性腎炎である、請求項１から６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記ＳＤＦ−１が薬学的に許容される担体中に提供される、請求項１から７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記薬学的に許容される担体が、無菌である（例えば、エンドトキシンフリーもしくはパイロジェンフリーの水、またはエンドトキシンフリーもしくはパイロジェンフリーの水の生理食塩水）、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記投与するステップが、前記腎臓へのＳＤＦ−１の直接投与によって行われる、請求項１から９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記直接投与が、前記腎臓組織上また中への注射によって行われる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記直接投与が、前記腎臓組織中への注入によって行われる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記直接投与が、前記腎臓上および／または中の複数の部位で行われる、請求項１１または請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記直接投与が、中腎皮質中へである、請求項１１から１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記投与が、前記腎臓の細胞破壊の減少および／または線維症の減少をもたらす、請求項１から１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＳＤＦ−１が、哺乳動物のＳＤＦ−１である、請求項１から１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＳＤＦ−１が、ヒトＳＤＦ−１αまたはヒトＳＤＦ−１βである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＳＤＦ−１が、ネコＳＤＦ−１またはイヌＳＤＦ−１である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記投与するステップが、ＳＤＦ−１をコードする核酸ベクターを前記腎臓に注射することによって行われ、このベクターが前記コードされたＳＤＦ−１を発現する、請求項１から１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ベクターが、プラスミドベクターまたはウイルスベクターである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＳＤＦ−１と組み合わせて血管新生増殖因子（例えば、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ））を前記対象に投与することをさらに含む、請求項１から２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
ＳＤＦ−１および水性担体を含む、腎臓疾患の治療のための無菌注射用組成物。
【請求項２３】
コラーゲンまたはゼラチンを含む、請求項２２に記載の無菌注射用組成物。
【請求項２４】
ＶＥＧＦをさらに含む、請求項２２または請求項２３に記載の無菌注射用組成物。
【請求項２５】
腎臓疾患を患っているかもしくは発症するリスクがある対象を治療する方法の実施における使用のための、または腎臓疾患を患っているかもしくは発症するリスクがある対象を治療する方法の実施のための医薬の調製における使用のための、本明細書に記載のＳＤＦ−１またはＳＤＦ−１をコードするベクター。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
慢性腎疾患または慢性腎不全としても知られる、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）は、数カ月または数年にわたる進行性の腎機能の喪失である。ＣＫＤは、さまざまな状態およびメカニズムによって引き起こされ得、ヒト、ならびにコンパニオンアニマルなどの他の動物に影響を及ぼす。例えば、ＣＫＤは、高齢のネコにおけるもっとも一般的な疾病および死亡の原因の１つである。
【０００２】
新たな治療選択肢が腎臓疾患の治療に必要とされている。
【発明の概要】
【０００３】
本明細書において、腎臓疾患を患っているかまたは発症するリスクがある対象を治療する方法であって、対象に（例えば、対象の腎臓に）治療有効量でストロマ細胞由来因子１（ＳＤＦ−１）を投与することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態において、腎臓疾患は、急性腎不全、慢性腎臓疾患、末期の腎疾患または貧血である。いくつかの実施形態において、腎臓疾患は、慢性間質性腎炎である。
【０００４】
いくつかの実施形態において、本方法は、前記ＳＤＦ−１と組み合わせて血管新生増殖因子（例えば、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ））を前記対象に投与することをさらに含む。
【０００５】
さらに、ＳＤＦ−１および水性担体を含む、腎臓疾患の治療のための無菌注射用組成物を提供する。いくつかの実施形態において、本組成物は、コラーゲンまたはゼラチンを含む。いくつかの実施形態において、本組成物は、血管新生増殖因子（例えば、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ））をさらに含む。
【０００６】
また、腎臓疾患を患っているかもしくは発症するリスクがある対象を治療する方法の実施における使用のための、または腎臓疾患を患っているかもしくは発症するリスクがある対象を治療する方法の実施のための医薬の調製における使用のための、本明細書に記載のＳＤＦ−１またはＳＤＦ−１をコードするベクターを提供する。
【０００７】
図１Ａ〜図１Ｄは、異なる対照群および治療群の腎臓組織の組織像（マッソントリクローム染色）を示す。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１Ａ】対照の対象からの腎臓組織の組織像を示す図である。
【図１Ｂ】治療なしの損傷した対象からの腎臓組織の組織像を示す図である。
【図１Ｃ】担体の注射を受けた損傷した対象からの腎臓組織の組織像を示す図である。
【図１Ｄ】担体中のＳＤＦ−１の注射を受けた損傷した対象からの腎臓組織の組織像を示す図である。ＳＤＦ−１の投与は、より正常な皮質−髄質構造を組織に回復させる。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本開示は、ケモカインタンパク質であるストロマ細胞由来因子１（ＳＤＦ−１）による腎臓疾患の治療のための組成物および方法を提供する。
【００１０】
本明細書において引用されるすべての特許文献の開示は、それらが本明細書において説明される開示と一致する範囲で、引用することにより本明細書の記載の一部となすものとする。本発明の明細書および添付の特許請求の範囲において、本明細書で使用される場合、単数形の「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が他を明確に指示していない限り、複数形を同様に含むことを意図する。本明細書で使用される場合、「および／または」および「／」は、関連する列挙された項目の１つもしくは複数のありとあらゆる可能な組合せ、ならびに別の可能性（「または」）で解釈される場合は組合せの欠如を指し、かつ包含する。
【００１１】
本明細書で使用される場合、「治療する」とは、対象または患者への利益を与える任意の種類の治療、特に、腎臓機能の改善、腎臓機能の不全またはその徴候もしくは症状の、発症または進行または悪化の遅延または遅滞などを指す。
【００１２】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される」とは、化合物または組成物が、疾患の重症度および治療の必要性を考慮して過度に有害な副作用なく、対象への投与のために適切であることを意味する。
【００１３】
「腎臓疾患」とは、限定されるものではないが、急性腎不全（例えば、毒物、心的外傷、ショック、感染症、腎臓結石などの閉塞、心不全などによって引き起こされる）、慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）（例えば、加齢、遺伝、腎臓結石などの閉塞、糖尿病、感染症、歯科疾患、免疫疾患、高血圧、甲状腺障害、がん、先天性腎奇形、先天性多発性嚢胞腎臓疾患などに起因する腎臓機能の段階的な喪失）、末期の腎疾患、貧血などを含む、１つまたは複数の腎臓機能を損ない得る任意の種類の疾患または障害を指す。例として、間質性腎炎（尿細管の周囲の腎臓の間質の炎症）は、急性間質性腎炎または慢性間質性腎炎であってもよく、これは、最終的に腎不全をもたらし得る。
【００１４】
本明細書で使用される場合、一般に、「対象」または「患者」は、研究または獣医学の目的のために、ヒト対象および非ヒト動物対象（例えば、イヌ、ネコ、ウマ、鳥類など）の両方を含む、腎臓疾患になりやすい動物対象を指す。対象は、雄または雌であってもよく、新生児、幼児、小児、青年、成人、および高齢の対象を含む、任意の適切な年齢の対象であってもよい。
【００１５】
１．活性化合物
本明細書において使用される活性化合物は、ケモカインタンパク質であるストロマ細胞由来因子１（ＳＤＦ−１）である。本化合物は、Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフケモカイン１２（ＣＸＣＬ１２）としても公知であり、ヒトにおいては、これは、ＣＸＣＬ１２遺伝子によってコードされる。ＳＤＦ−１は、例えば、Ｍ．Ｄ’Ａｐｕｚｚｏら、Ｔｈｅ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ＳＤＦ−１，ｓｔｒｏｍａｌ  ｃｅｌｌ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆａｃｔｏｒ  １，ａｔｔｒａｃｔｓ  ｅａｒｌｙ  ｓｔａｇｅ  Ｂ  ｃｅｌｌ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  ｖｉａ  ｔｈｅ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ＣＸＣＲ４、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２７巻、１７８８〜１７９３頁（１９９７年）；Ｙ．Ｔａｂａｔａ、米国特許第８，４３５，９５３号、ならびにＰｅｎｎら、米国特許第８，５１３，２１３号および米国特許第８，５１３，００７号；ならびにＳ．Ｉｔｅｓｃｕ、米国特許第７，６６２，３９２号において、公知かつ記載されており、これらの開示は、引用することでそれらの全体が本明細書の記載の一部をなすものとする。Ｊ．Ｋ．Ｗｉｌｌｉａｍｓ、国際公開第２０１５／１７１４１７号も参照のこと。
【００１６】
本明細書で使用される場合、ＳＤＦ−１は、ＳＤＦ−１αもしくはその成熟型に加えて、例えば、ＳＤＦ−１β、ＳＤＦ−１γ、ＳＤＦ−１δ、ＳＤＦ−１εおよびＳＤＦ−１φなどのアイソフォームおよびその成熟型、または任意の比率のこれらの混合物などを含み得る。本発明におけるＳＤＦ−１としては、ＳＤＦ−１α、ＳＤＦ−１β、または任意の比率のこれらの混合物などが挙げられる。米国特許第８，４３５，９５３号を参照のこと。
【００１７】
本発明において、ＳＤＦ−１がケモカインとしての活性を有する限り、ＳＤＦ−１は、アミノ酸配列における１個または複数個のアミノ酸によって、置換、欠失および／または付加されていてもよい。同様に、ＳＤＦ−１は、糖鎖によって、置換、欠失および／または付加されていてもよい。ＳＤＦ−１は、生理学的に許容される酸（例えば、無機酸もしくは有機酸）または塩基（例えば、アルカリ金属塩）と塩（好ましくは、酸付加塩）を形成していてもよい。塩の例としては、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸または硫酸）との塩、および有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、シュウ酸、安息香酸、メタンスルホン酸またはベンゼンスルホン酸）との塩が挙げられる。
【００１８】
本発明において使用されるＳＤＦ−１は、ヒト、またはサル、ヒツジ、ウシ、ウマ、ブタ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラットもしくはマウスなどの非ヒト動物などの哺乳動物に由来していてもよい。例えば、いくつかの実施形態において、本発明の組成物がヒトにおける使用のためである場合、本発明の組成物は、ヒトＳＤＦ−１（例えば、ＳＤＦ−１α（ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿９５４６３７）またはＳＤＦ−１β（ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿０００６００））を使用して産生されてもよい。別の例として、いくつかの実施形態において、本組成物が飼いネコにおける使用のためである場合、本発明の組成物は、ネコＳＤＦ−１（例えば、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１００９８４７（イエネコ（Ｆｅｌｉｓ  ｃａｔｕｓ）））を使用して産生されてもよい。さらなる例として、いくつかの実施形態において、本組成物が飼いイヌにおける使用のためである場合、本発明の組成物は、イヌＳＤＦ−１（例えば、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＡＡＵ８９４７５（イヌ（Ｃａｎｉｓ  ｌｕｐｕｓ  ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）またはＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１１２１５６９（イヌ（Ｃａｎｉｓ  ｌｕｐｕｓ  ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）））を使用して産生されてもよい。
【００１９】
いくつかの実施形態において、ＳＤＦ−１は、ＳＤＦ−１の作用が他の混入物によって阻害されないレベルに精製されていてもよい。好ましくは、ＳＤＦ−１は、医薬調製物として使用可能なように精製されていてもよい。
【００２０】
本発明において、ＳＤＦ−１は、天然源から得てもよく、または遺伝子工学技術によって産生されてもよい。天然源から得られる場合、ＳＤＦ−１は、ＳＤＦ−１が存在することが既知の、ヒトまたは非ヒト動物（例えば、サル、ヒツジ、ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラットもしくはマウス）などの哺乳動物の脾臓などのさまざまな臓器から抽出され得る。ＳＤＦ−１が存在することが既知の臓器の具体例を挙げると、例えば、ＳＤＦ−１は、ＳＤＦ−１受容体であるＣＸＣＲ４を発現する腫瘍細胞が高頻度で転移する臓器中に大量に存在することが知られている。他方では、遺伝子工学技術によって産生される場合、ヒトまたは非ヒト動物（例えば、サル、ヒツジ、ウシ、ウマ、ブタ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラットもしくはマウス）などの哺乳動物からのＳＤＦ−１をコードする遺伝子を適切なベクターに組み込み、これを形質転換のために適切な宿主細胞に導入し、それによって、形質転換体の培養上清から標的の組換えＳＤＦ−１を得ることが可能である。本明細書における宿主細胞は限定されず、遺伝子工学技術において通常使用されている、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）などのさまざまな宿主細胞、酵母細胞、カイコ細胞などのさまざまな昆虫細胞、およびさまざまな動物細胞が使用され得る。
【００２１】
本明細書に開示の活性化合物は、上述のように、それらの薬学的に許容される塩の形態で調製され得る。薬学的に許容される塩は、親化合物の所望の生物活性を維持し、かつ望ましくない毒性効果を与えない、塩である。このような塩の例は、（ａ）無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸などと形成される酸付加塩、および有機酸、例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パルミチン酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ポリガラクツロ酸などと形成される塩、（ｂ）塩素、臭素およびヨウ素などの元素アニオンから形成される塩、ならびに（ｃ）アンモニウム塩などの塩基に由来する塩、ナトリウムおよびカリウムの塩などのアルカリ金属塩、カルシウムおよびマグネシウムの塩などのアルカリ土類金属塩、ならびにジシクロヘキシルアミンおよびＮ−メチル−Ｄ−グルカミンなどの有機塩基との塩である。
【００２２】
いくつかの実施形態において、ＳＤＦ−１は、腎臓組織上および／もしくは中へ直接的に、例えば、注射によって、または腎臓組織においてＳＤＦ−１をコードし、ＳＤＦ−１を発現（例えば、一過性にまたは恒常的に発現）する核酸ベクター（例えば、組み込み、および非組み込ウイルスベクター、レトロウイルスベクター、プラスミドベクター、直鎖状ＤＮＡベクターなど）を投与することによって（例えば、注射によって）、投与されてもよい。一般に、このようなベクターは、組織中で作動可能なプロモーター（例えば、ＣＭＶプロモーター）と作動可能に関連する上記に記載のＳＤＦ−１をコードする核酸セグメントを含む。プラスミドベクターを含む適切なベクターは、公知であるか、または本開示に基づいて当業者には明らかであり、限定されるものではないが、例えば、引用することでその開示が本明細書の記載の一部をなすものとする、Ｐｅｎｎらの米国特許第８，５１３，２１３号および米国特許第８，５１３，００７号に記載されている、受託番号ＰＴＡ−１３３２０でアメリカ合衆国培養細胞系統保存機関に寄託されたプラスミドが挙げられる。
【００２３】
２．医薬製剤
上記に記載の活性化合物は、公知技術に従って、投与のために、医薬担体中で製剤化されてもよい。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（第９版、１９９５年）を参照のこと。本発明による医薬製剤の製造において、活性化合物（その生理学的に許容される塩を含む）は、典型的には、とりわけ、許容される担体と混合される。当然ながら、担体は、製剤中の任意の他の成分と適合するという意味で許容されていなければならず、かつ患者に有害であってはならない。担体は、固体もしくは液体、または両方であってもよく、好ましくは、単位用量製剤、例えば、錠剤として、化合物と製剤化され、これは、０．０１重量％または０．５重量％から９５重量％または９９重量％の活性化合物を含有していてもよい。１つまたは複数の活性化合物が、本発明の製剤中に組み込まれていてもよく、これは、１つまたは複数の補助成分を含んでいてもよい、構成要素と混合することを含む、調剤学の周知技術のいずれかによって調製され得る。
【００２４】
非経口投与のために適切な本発明の製剤は、活性化合物の無菌の水性および非水性の注射液を含み、この調製物は、好ましくは、目的とするレシピエントの血液と等張である。これらの調製物は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、および製剤を目的とするレシピエントの血液と等張にする溶質を含有していてもよい。水性および非水性の無菌の懸濁液は、懸濁化剤および増粘剤を含んでいてもよい。製剤は、単位用量容器または複数回用量容器中、例えば、密封されたアンプルおよびバイアル中に存在していてもよく、使用の直前に、無菌の液体担体、例えば、生理食塩水または注射用水の添加のみを必要とするフリーズドライ（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）（凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ））状態で保存されてもよい。即時注射液および懸濁液は、先述の種類の無菌の散剤、顆粒剤および錠剤から調製されてもよい。
【００２５】
例えば、本発明の１つの態様において、密封容器中に、活性化合物またはその塩を単位剤形で含む、注射可能で、安定な無菌組成物を提供する。本化合物または塩は、対象へのその注射のために適切な液体組成物を形成するために、適切な薬学的に許容される担体を用いて再構成することが可能な、凍結乾燥の形態で提供される。単位剤形は、典型的には、約１０ｍｇから約１０グラムの本化合物または塩を含む。本化合物または塩が実質的に水不溶性である場合、十分な量の生理学的に許容される乳化剤を、水性担体中で本化合物または塩を乳化するために十分な量で、用いてもよい。このような有用な乳化剤の１つは、ホスファチジルコリンである。
【００２６】
無菌担体の非限定的な例としては、エンドトキシンフリーもしくはパイロジェンフリーの水または生理食塩水が挙げられる。
【００２７】
活性化合物に加えて、医薬組成物は、ｐＨ調節添加剤などの他の添加剤を含有していてもよい。特に、有用なｐＨ調節添加剤としては、塩酸などの酸、乳酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウムもしくはグルコン酸ナトリウムなどの塩基または緩衝剤が挙げられる。さらに、本組成物は、微生物保存剤を含有していてもよい。有用な微生物保存剤としては、メチルパラベン、プロピルパラベンおよびベンジルアルコールが挙げられる。微生物保存剤は、典型的には、製剤が複数回投与の使用のために設計されたバイアル中に入れられる場合に用いられる。当然ながら、示されるように、本発明の医薬組成物は、本技術分野において周知の技術を使用して凍結乾燥されてもよい。
【００２８】
医薬組成物は、ＳＤＦ−１の即時放出および／または持続放出のために、例えば、カルボキシル基および／またはスルホ基を有する修飾ゼラチンを用いるハイドロゲルを含有する持続放出組成物に、製剤化されてもよい。例えば、Ｔａｂａｔａに対する米国特許第８，４３５，９５３号を参照のこと。いくつかの実施形態において、本組成物は、コラーゲンおよび／またはゼラチンを含んでいてもよい。
【００２９】
３．投与量および投与経路
上述のように、本発明は、活性化合物（その薬学的に許容される塩を含む）を非経口投与のための薬学的に許容される担体中に含む、医薬製剤を提供する。
【００３０】
臓器への直接投与（例えば、腎臓の一部または複数の部分の上および／または中への直接注射）は、任意の適切な技術によって行われ得る。注射による投与は、持続注入によって、または単回もしくは複数回のボーラスによって、行われてもよい。例えば、Ｐｅｒｅｉｒａ−Ｋａｍａｔｈらに対する米国特許出願公開第２００９／０３０６６２５号を参照のこと。
【００３１】
いくつかの実施形態において、臓器への直接投与は、画像化技術によって、例えば、超音波誘導によって、誘導されてもよい。いくつかの実施形態において、投与は、中腎皮質中の一部または複数の部位（例えば、１、２、または３から７、８、９または１０部位）への直接投与（例えば、直接注射または注入）による。いくつかの実施形態において、投与は、腎臓への動脈内注入による。
【００３２】
その使用が本発明の範囲内である、任意の特定の化合物の治療有効投与量は、化合物間および患者間で幾分異なっていてもよく、患者の状態および送達経路に依存する。一般に、ＳＤＦ−１の臓器への直接注射のためには、対象（例えば、ヒト対象またはコンパニオンアニマル対象）に応じて、１投与あたり約１０もしくは５０ナノグラムから４００、８００もしくは１０００ナノグラムの量、または１投与あたり約１０もしくは５０マイクログラムから４００、８００もしくは１０００マイクログラムの量が適切であり得、治療セッションあたり臓器組織への１回の注射、または治療の各セッションで臓器組織の異なる部位（例えば、臓器またはその一部の周辺に分布する部位（例えば、腎臓の背側極の周辺））への複数回の注射（例えば、２、３、４、５、６回）をそれぞれの対象が受け得る。
【００３３】
治療セッションは、適切と考えられる場合、定期的に繰り返されてもよい（例えば、２カ月毎または４カ月毎に１回）。核酸ベクターが投与される場合、ベクターは、注射部位または近傍で、ＳＤＦ−１の対応する発現のレベルを達成するために有効な量で投与することができる。
【００３４】
４．併用療法
いくつかの実施形態において、ＳＤＦ−１は、血管新生増殖因子（例えば、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ））と組み合わせて投与される。例えば、Ｓｃｈｒｅｉｎｅｒらに対する米国特許第６，３５２，９７５号；Ｃｈａｄｅら、Ｒｅｖｅｒｓａｌ  ｏｆ  ｒｅｎａｌ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＶＥＧＦ  ｉｎｔｏ  ｔｈｅ  ｓｔｅｎｏｔｉｃ  ｋｉｄｎｅｙ：ａ  ｎｏｖｅｌ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｐｐｒｏａｃｈ、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｎａｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ、２０１２年５月１５日、３０２巻（１０号）、Ｆ１３４２〜５０頁；Ｃｈａｄｅらに対する米国特許出願公開第２０１６／０７７６１８号を参照のこと。
【００３５】
ＳＤＦ−１およびＶＥＧＦなどの２以上の薬剤の「組み合わせて」の投与とは、２つの薬剤が、一方の存在が他方の生物学的効果を変えるのに十分に近い時間で投与されることを意味する。２つの薬剤は、同時に（併用してまたは同時期に）または逐次的に、適用され得る。いくつかの実施形態による投与は、有効な治療のために必要に応じて、数分（例えば、１、５、１０、３０、６０または９０分以上）から数日（例えば、１、２、５、８または１０日以上）の範囲の期間内であり得る。
【００３６】
同時投与、併用投与、または同時期投与は、薬剤を投与の前に同じ組成物に混合することによって、または薬剤を、同じ時点ではあるが、身体もしくは臓器の異なる部位で、または異なる種類の投与を使用して投与することによって行われてもよく、あるいは、観察される結果が、薬剤が同じ時点で投与される場合に達成される結果と実質的に同じである十分に近い時に適用されてもよい。
【００３７】
薬剤の逐次適用は、前の投与がその後の投与の効果を増強するように、一方の薬剤を、別の薬剤が投与される前の同じ時点で投与することによって行われてもよい。
【００３８】
ＶＥＧＦと組み合わせられてもよいＳＤＦ−１はまた、１つまたは複数の治療、例えば、脱水に対処するための輸液療法、閉塞を除去するための外科手術、感染症を治療するための抗生物質、高血圧を制御するためのアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、食餌制限（例えば、タンパク質、リン、カルシウムおよび／またはナトリウムが少ない食餌）および／またはサプリメント（例えば、リン結合剤、ビタミンＤサプリメント）などと組み合わせて投与されてもよい。例えば、抗酸化剤、ミトコンドリア補助因子などのサプリメントが食品組成物中に提供されてもよい。例えば、Ｚｉｃｋｅｒらに対する米国特許第８，８５９，６１３号を参照のこと。
【実施例】
【００３９】
本発明を以下の非限定的な実施例においてさらに詳細に説明する。
【００４０】
［実施例１］
慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）は、推定ですべてのネコの１％から３％に影響を及ぼす。ネコ科動物のＣＫＤの有病率は、年齢とともに増加し、１５歳以上のネコの３０％から５０％程度がＣＫＤを有しており、ＣＫＤの有病率は、増加していると思われる。
【００４１】
ネコにおけるＣＫＤについての治療は、大部分は対症療法的である。ＣＫＤの初期段階では、血清リン濃度を減少させる食餌の変更は、ＣＫＤの血清マーカーの回復に有効である（Ｐｏｌｚｉｎら、Ｄｉｅｔａｒｙ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｆｅｌｉｎｅ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｒｅｎａｌ  ｆａｉｌｕｒｅ．Ｗｈｅｒｅ  ａｒｅ  ｗｅ  ｎｏｗ？Ｉｎ  ｗｈａｔ  ｄｉｒｅｃｔｉｏｎ  ａｒｅ  ｗｅ  ｈｅａｄｅｄ？、Ｊ  Ｆｅｌｉｎｅ  Ｍｅｄ  Ｓｕｒｇ、２０００年、２巻、７５〜８２頁）。疾患の進行につれて、アンジオテンシン変換酵素阻害剤およびカルシウムチャネル遮断剤が、タンパク尿を減少させ、全身および糸球体内の血圧を正常化させるために使用される（Ｃｈａｋｒａｂａｒｔｉら、Ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  ｖａｒｉａｂｌｅｓ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ａｚｏｔｅｍｉａ  ｉｎ  ｃａｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｋｉｄｎｅｙ  ｄｉｓｅａｓｅ、Ｊ  Ｖｅｔ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ、２０１２年、２６巻、２７５〜２８１頁；Ｋｉｎｇら、Ｔｏｌｅｒａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｂｅｎａｚｅｐｒｉｌ  ｉｎ  ｃａｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｋｉｄｎｅｙ  ｄｉｓｅａｓｅ、Ｊ  Ｖｅｔ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ、２００６年、２０巻、１０５４〜１０６４頁；Ｍｉｚｕｔａｎｉら、Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｂｅｎａｚｅｐｒｉｌ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｒｅｎａｌ  ｉｎｓｕｆｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｉｎ  ｃａｔｓ、Ｊ  Ｖｅｔ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ、２００６年、２０巻、１０７４〜１０７９頁；Ｊｅｐｓｏｎら、Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｓｙｓｔｏｌｉｃ  ｂｌｏｏｄ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｏｎ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  ｃａｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ、Ｊ  Ｖｅｔ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ、２００７年、２１巻、４０２〜４０９頁）。ＣＫＤの後期段階では、治療は、腎機能の低下と関連する臨床徴候の制限に焦点を当てる傾向がある。これらの治療は、寿命を延ばし、より高いクオリティオブライフを提供することができるが、これらは、治癒を提供しない。
【００４２】
ケモカインＣＸＣＬ１２（しばしば、ストロマ由来因子−１またはＳＤＦ−１と呼ばれる）は、受容体（ＣＸＣＲ４／ＣＸＣＲ７）メカニズムによって損傷部位への前駆細胞の細胞輸送およびホーミングをもたらし、損傷部位である場合に細胞生存を増強する（Ｎａｇａｓａｗａ、ＣＸＣ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ  ｌｉｇａｎｄ  １２（ＣＸＣＬ１２）  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ＣＸＣＲ４、Ｊ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ（Ｂｅｒｌ）、（２０１４年）９２巻（５号）、４３３〜９頁；Ｌａｕら、Ｓｔｒｏｍａｌ  ｃｅｌｌ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆａｃｔｏｒ−１（ＳＤＦ−１）：ｈｏｍｉｎｇ  ｆａｃｔｏｒ  ｆｏｒ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ  ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｂｉｏｌ  Ｔｈｅｒ．、（２０１１年）１１巻（２号）、１８９〜９７頁；Ｈｅｒｂｅｒｇら、Ｓｔｒｏｍａｌ  ｃｅｌｌ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆａｃｔｏｒ−１β  ｍｅｄｉａｔｅｓ  ｃｅｌｌ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｅｎｈａｎｃｉｎｇ  ａｕｔｏｐｈａｇｙ  ｉｎ  ｂｏｎｅ  ｍａｒｒｏｗ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ、ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ、（２０１３年）８巻（３号）、ｅ５８２０７頁；Ａｒａら、Ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｒｅｑｕｉｒｅ  ｓｔｒｏｍａｌ  ｃｅｌｌ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆａｃｔｏｒ−１  ｆｏｒ  ｃｏｌｏｎｉｚｉｎｇ  ｂｏｎｅ  ｍａｒｒｏｗ  ｄｕｒｉｎｇ  ｏｎｔｏｇｅｎｙ、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、（２００３年）１９巻（２号）、２５７〜６７頁；Ｚｉｓａら、Ｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒ  ＶＥＧＦ  ａｃｔｉｖａｔｅｓ  ａｎ  ＳＤＦ１−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  ｃｅｌｌ  ｃａｓｃａｄｅ  ａｎｄ  ａｎ  ＳＤＦ１−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｍｕｓｃｌｅ  ｐａｒａｃｒｉｎｅ  ｃａｓｃａｄｅ  ｆｏｒ  ｃａｒｄｉａｃ  ｒｅｐａｉｒ、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｈｅａｒｔ  Ｃｉｒｃ  Ｐｈｙｓｉｏｌ、（２０１１年）６巻、２４２２〜２４３頁）。１つのグループが、ＣＸＣＬ１２が、急性腎臓損傷のマウスモデルにおいて、骨髄細胞の腎臓への動員に関与していることを報告している。
【００４３】
［方法］
ＣＸＣＬ１２を、実験的に生じさせた慢性腎臓疾患を有するネコの腎臓に直接投与する。
【００４４】
安全性および実現可能性の研究。この研究は、６匹の雌成ネコを用いる。３匹のネコは、左腎臓の背極に沿って互いに等距離（おそらく約１ｃｍの間隔）で５箇所（それぞれ０．２５ｍｌ）に注射する担体注射のみ（ＣＸＣＬ１２なし）を受ける。これらの注射は、中腎皮質のレベルで行われる。他の３匹のネコは、合計で２００ｎｇのＣＸＣＬ１２で同じ部位に注射する４０ｎｇ／ヒト組換えＣＸＣＬ１２（担体溶液の生理食塩水に添加）を除いて同じ注射を受ける。注射は、超音波誘導され、中腎皮質に注射される。
【００４５】
ＣＢＣ、ＢＵＮ、クレアチニン、尿検査、ＩＤＥＸＸ製のＳＤＭＡ試験キット（糸球体濾過機能および腎臓機能を試験するため）を注射の前に評価する。これは、標準ＧＦＲ（濾過率）についての代替として使用し、標準ＧＦＲ（濾過率）と高い相関性がある。これらの測定を、注射４週間後、次いで、再度４週間後に繰り返す。
【００４６】
有効性の研究。この研究は、１４匹の雌成ネコを含む。２匹は何もしない対照である。１）片側だけＣＫＤを誘発／治療なし（ｎ＝４）；２）ＣＫＤを誘発／担体を注射（ｎ＝４）；および３）ＣＫＤを誘発／担体とＣＸＣＬ１２を注射（ｎ＝４）の３つの治療群がある。
【００４７】
左腎臓への虚血／再灌流傷害の誘発。腎臓が安全性の研究のために上記に記載のようにして注射される場合に、血液および尿の評価を、損傷の４週間後および８週間後に繰り返す。血液および尿の分析を、注射の４週間後および８週間後に繰り返す。ＣＢＣ、ＢＵＮ、クレアチニン、尿検査、ＳＤＭＡ（糸球体濾過機能および腎臓機能を試験するため）を評価する。
【００４８】
ネコにおけるＣＫＤの作成。Ｓｃｈｍｉｅｄｔらによって発表された手順を使用する（Ｕｎｉｌａｔｅｒａｌ  Ｒｅｎａｌ  Ｉｓｃｈｅｍｉａ  ａｓ  ａ  Ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ａｃｕｔｅ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｊｕｒｙ  ａｎｄ  Ｒｅｎａｌ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ｉｎ  Ｃａｔｓ、Ｖｅｔ  Ｐａｔｈｏｌ．、２０１６年１月、５３巻（１号）、８７〜１０１頁）。注射を、上記に記載のようにして、中腎皮質のレベルで行う。
【００４９】
［実施例２］
ＳＤＦ−１（４）、担体（４）、Ｔｘなし（４）、対照（１）の４群を試験した。ＣＫＤモデルを、上記に記載のようにして、ネコにおいて外科的に作成した（ｎ＝１２）。２００ｎｇの合計投与量の後腹膜注射を、超音波誘導の下、左腎皮質へのそれぞれ６６．７ｎｇの３回の注射で、左腎臓（ｎ＝６）に行った。
【００５０】
［結果］
【００５１】
【表１】
2020512338.tif 000003
【００５２】
【表２】
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【００５３】
【表３】
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【００５４】
［結論］
腎臓の容積、ならびに血液および尿の尺度に対するＣＸＣＬ１２の有益な効果があった。しかしながら、コラーゲンを含有する担体の注射（国際公開第２０１５／１７１４１７号を参照のこと）は、いくらかの腎臓の病理を引き起こす場合があり、および／またはこれらの尺度のいくらかの有害な変化を引き起こす場合がある。図１Ａから図１Ｄに示す組織学的分析は、損傷が、腎臓の皮質−髄質、線維症および細胞損傷をもたらし、ＳＤＦ−１（ＣＸＣＬ１２）が、より正常な皮質−髄質構造を回復することを証拠付ける。結果は有望であるが、少数の動物の試験であるため、今のところ統計学的有意性はない。
【００５５】
先述は、本発明を例証するものであり、本発明を限定するものとして解釈されるべきではない。本発明は以下の特許請求の範囲によって定義され、特許請求の範囲の均等物は本発明に含まれる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【国際調査報告】
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