(57)【要約】  癌又は感染性疾患を有する個体を処置するための方法及び組成物が提供される。（ａ）デクチン−２に結合し、デクチン−２シグナル伝達を刺激する剤と、（ｂ）抗体及び／又は免疫調節剤と、を含む多価デクチン−２刺激剤であって、（ａ）及び（ｂ）が互いにコンジュゲートされている、多価デクチン−２刺激剤が提供される。いくつかの場合では、（ａ）は、デクチン−２に結合するマンノビオース糖ポリペプチドである。いくつかの場合では、（ｂ）は、ＴＬＲ（例えば、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ７／８、ＴＬＲ２など）に対する刺激性リガンドである。癌及び／又は感染性疾患を有する個体を処置する方法は、有効量のデクチン−２刺激組成物を個体に投与することを含むことができる。いくつかの場合では、デクチン−２刺激組成物は、デクチン−２刺激糖ポリマーを含む。いくつかの場合では、デクチン−２刺激組成物は、多価デクチン−２刺激剤を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）デクチン−２に結合し、デクチン−２シグナル伝達を刺激する剤と、
（ｂ）抗体及び／又は免疫調節剤と、を含む多価デクチン−２刺激剤であって、
（ａ）及び（ｂ）が互いにコンジュゲートされている、多価デクチン−２刺激剤。
【請求項２】
（ａ）が、抗デクチン−２抗体又はその抗原結合領域である、請求項１に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項３】
（ａ）が、デクチン−２に結合するマンノビオース糖ポリペプチドである、請求項１に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項４】
前記マンノビオース糖ポリペプチドが、２０〜２５０個のアミノ酸長であるペプチドを含む、請求項３に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項５】
前記ペプチドが、ムチン様ペプチドである、請求項４に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項６】
前記マンノビオース糖ポリペプチドが、少なくとも２５％のグリカン密度を有する、請求項３〜５のいずれか一項に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項７】
（ｂ）が、免疫調節剤である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項８】
（ｂ）が、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮγ、Ｇ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、及びＧＭ−ＣＳＦから選択されるサイトカインであるか、又は抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、ＣＤ４０アゴニスト、抗ＣＤ４７／ＳＩＲＰＡ剤、及び４−１ＢＢアゴニストからなる群から選択される免疫調節剤である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項９】
（ｂ）が、パターン認識受容体（ＰＲＲ）に対する刺激性リガンドである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項１０】
（ｂ）が、ＴＬＲアゴニストである、請求項９に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項１１】
前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、又はＴＬＲ７／８アゴニストである、請求項１０に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項１２】
前記ＴＬＲ７／８アゴニストが、Ｔ７８５である、請求項１１に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項１３】
前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ２アゴニストである、請求項１０に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項１４】
前記ＴＬＲ２アゴニストが、Ｐａｍ３Ｃｙｓである、請求項１３に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項１５】
（ａ）が、マンノビオース糖ポリペプチドを含み、（ｂ）が、ＴＬＲアゴニストである、請求項１に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項１６】
前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ７／８アゴニスト又はＴＬＲ２アゴニストである、請求項１５に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項１７】
前記ＴＬＲアゴニストが、Ｔ７８５である、請求項１６に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項１８】
前記ＴＬＲアゴニストが、Ｐａｍ３Ｃｙｓである、請求項１６に記載の多価デクチン−２刺激剤。
【請求項１９】
癌及び／又は感染性疾患を有する個体を処置する方法であって、前記方法が、
（ａ）デクチン−２刺激糖ポリマー、又は
（ｂ）
（ｉ）抗デクチン２抗体若しくはデクチン−２刺激糖ポリマーと、
（ｉｉ）抗体及び／若しくは免疫調節剤と、を含む多価デクチン−２刺激剤であって、
（ｉ）が（ｉｉ）とコンジュゲートされている、多価デクチン−２刺激剤を含む、有効量のデクチン−２刺激組成物を前記個体に投与することを含み、
デクチン−２シグナル伝達が、骨髄細胞において刺激され、それにより、前記個体における免疫応答を刺激する、方法。
【請求項２０】
前記（ａ）又は（ｂ）のデクチン−２刺激糖ポリマーが、マンノビオース糖ポリペプチドを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記マンノビオース糖ポリペプチドが、２０〜２５０個のアミノ酸長のペプチドを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ペプチドが、ムチン様ペプチドである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記マンノビオース糖ポリペプチドが、少なくとも２５％のグリカン密度を有する、請求項２０〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記（ｂ）のデクチン−２刺激糖ポリマーが、抗体にコンジュゲートされている、請求項１９〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記（ｂ）のデクチン−２刺激糖ポリマーが、免疫調節剤にコンジュゲートされている、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記（ｂ）のデクチン−２刺激糖ポリマーが、ＩＬ−Ｉ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮγ、Ｇ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、及びＧＭ−ＣＳＦから選択されるサイトカインにコンジュゲートされている、請求項２４又は２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記（ｂ）のデクチン−２刺激糖ポリマーが、パターン認識受容体（ＰＲＲ）に対する刺激性リガンドにコンジュゲートされている、請求項２４又は２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記刺激性リガンドが、ＴＬＲアゴニストである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、又はＴＬＲ７／８アゴニストである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＴＬＲ７／８アゴニストが、Ｔ７８５である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ２アゴニストである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３２】
前記ＴＬＲ２アゴニストが、Ｐａｍ３Ｃｙｓである、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記投与が、局所投与を含む、請求項１９〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記投与が、全身投与を含む、請求項１９〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記投与が、ＣＤ４０アゴニスト、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、及びＩＦＮγのうちの１つ以上との共投与を含む、請求項１９〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
抗原提示細胞（ＡＰＣ）を刺激する方法であって、ＡＰＣをインビトロ又はエクスビボで、デクチン−２刺激糖ポリマーを含むデクチン−２刺激組成物と、ＡＰＣにおけるデクチン−２シグナル伝達を増強するのに十分な用量及び時間で接触させて、それにより、刺激されたＡＰＣを生じさせることを含む、方法。
【請求項３７】
前記刺激されたＡＰＣを癌抗原と接触させて、抗原と接触させたＡＰＣを生じさせることを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記癌抗原が、癌細胞可溶化物中に存在するか、又は癌細胞の一部である、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記刺激されたＡＰＣ又は前記抗原と接触させたＡＰＣを個体に導入することを含む、請求項３６〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記癌抗原が、癌を有する個体由来であり、前記方法が、前記抗原と接触させたＡＰＣを前記個体に導入することを含む、請求項３７又は３８に記載の方法。
【請求項４１】
ＡＰＣが、前記個体の自己由来である、請求項３９又は４０に記載の方法。
【請求項４２】
Ｔ細胞を前記抗原と接触させたＡＰＣと接触させることを含む、請求項３６〜４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記接触させたＴ細胞を個体に導入することを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記Ｔ細胞が、前記個体の自己由来である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記抗原と接触させたＡＰＣが、前記個体の自己由来である、請求項４３又は４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記個体が癌を有する、請求項３９〜４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
前記デクチン−２刺激糖ポリマーが、マンノビオース糖ポリペプチドを含む、請求項３６〜４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記マンノビオース糖ポリペプチドが、２０〜２５０個のアミノ酸長のペプチドを含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記ペプチドが、ムチン様ペプチドである、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記マンノビオース糖ポリペプチドが、少なくとも２５％のグリカン密度を有する、請求項４７〜４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記デクチン−２刺激糖ポリマーが、抗体及び／又は免疫調節剤にコンジュゲートされている、請求項３６〜５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記デクチン−２刺激糖ポリマーが、免疫調節剤にコンジュゲートされている、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記デクチン−２刺激糖ポリマーが、ＩＬ−Ｉ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮγ、Ｇ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、及びＧＭ−ＣＳＦから選択されるサイトカインにコンジュゲートされている、請求項５１又は５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記デクチン−２刺激糖ポリマーが、パターン認識受容体（ＰＲＲ）に対する刺激性リガンドにコンジュゲートされている、請求項５１又は５２に記載の方法。
【請求項５５】
前記刺激性リガンドが、ＴＬＲアゴニストである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、又はＴＬＲ７／８アゴニストである、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記ＴＬＲ７／８アゴニストが、Ｔ７８５である、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ２アゴニストである、請求項５５に記載の方法。
【請求項５９】
前記ＴＬＲ２アゴニストが、Ｐａｍ３Ｃｙｓである、請求項５８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（相互参照）
本出願は、２０１７年６月２８日に出願された米国仮特許出願第６２／５２６，２６６号の利益を主張し、この出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
政府支援
本発明は、国立衛生研究所（National Institutes of Health）によって授与された契約ＣＡ１９６６５７の下で政府支援によりなされた。政府は、本発明における特定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
（導入）
腫瘍細胞と正常組織との間の微妙な差異を検出する免疫系の能力にもかかわらず、癌は増殖して広がりやすく、しばしばそれらの宿主の死をもたらす。腫瘍関連抗原（tumor associated antigen、ＴＡＡ）に対する適応免疫応答は、この状況で生じ得、これにより腫瘍の制御又は退縮がもたらされる。しかしながら、浸潤性腫瘍は、最終的に、免疫編集並びに抗腫瘍免疫細胞及びメディエータを抑制する他の機構を介して免疫制御を回避する。
【０００４】
免疫細胞は、ほとんどの癌における間質コンパートメントの主な成分であり、腫瘍の発達及び進行の形成に重要な役割を果たす。癌免疫療法（例えば、チェックポイント阻害剤、癌ワクチン、ＣＡＲ  Ｔ細胞など）は、いくつかの癌において有効であることが証明されている。しかしながら、多くの患者及び癌の種類が、これらの種類の介入に応答できず、このことは、代替の免疫療法戦略を開発すべきであることを示唆している。
【０００５】
顆粒球、単球（monocyte、Ｍｏ）、マクロファージ（macrophage、Ｍφ）、及び樹状細胞（dendritic cell、ＤＣ）を含む骨髄細胞は、ほとんどの腫瘍において特に豊富であり、様々な方法で広範な悪性疾患にわたって疾患の進行を促進することが示されている。これにもかかわらず、臨床開発での比較的少ない数の処置が、この主要な間質細胞集団を対象とし、その処置のほとんどは、これらの細胞の活性を調節するのではなく、これらの細胞の蓄積を阻害することを目的としている。
【発明の概要】
【０００６】
癌又は感染性疾患を有する個体を処置するための方法及び組成物が提供される。（ａ）デクチン−２に結合し、デクチン−２シグナル伝達を刺激する剤と、（ｂ）抗体及び／又は免疫調節剤と、を含む多価デクチン−２刺激剤であって、（ａ）及び（ｂ）が互いにコンジュゲートされている、多価デクチン−２刺激剤が提供される。いくつかの場合では、（ａ）は、抗デクチン−２抗体又はその抗原結合領域である。いくつかの場合では、（ａ）は、デクチン−２に結合するマンノビオース糖ポリペプチド（例えば、ペプチド、例えば、２０〜２５０個のアミノ酸長であるムチン様ペプチドを含むマンノビオース糖ポリペプチド）である。いくつかの場合では、マンノビオース糖ポリペプチドは、少なくとも２５％のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、（ｂ）は、ＴＬＲに対する刺激性リガンド（例えば、Ｔ７８５又は７８６などのＴＬＲ７／８アゴニスト、７８４などのＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、Ｐａｍ３ＣｙｓなどのＴＬＲ２アゴニストなど）である。いくつかの場合では、（ａ）は、マンノビオース糖ポリペプチドを含み、（ｂ）は、ＴＬＲアゴニストである。
【０００７】
上記のように、癌及び／又は感染性疾患を有する個体を処置する方法も提供される。このような方法は、有効量のデクチン−２刺激組成物を個体に投与することを含むことができる。いくつかの場合では、デクチン−２刺激組成物は、（例えば上記のような）デクチン−２刺激糖ポリマーを含む。いくつかの場合では、デクチン−２刺激組成物は、例えば上記のような多価デクチン−２刺激剤を含む。抗原提示細胞（antigen presenting cell、ＡＰＣ）を刺激する方法も提供され、このような方法は、インビトロ又はエクスビボで、ＡＰＣをデクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）を含むデクチン−２刺激組成物と、ＡＰＣにおけるデクチン−２シグナル伝達を増強するのに十分な用量及び時間で接触させて、それにより、刺激されたＡＰＣを生じさせることを含むことができる。いくつかの場合では、デクチン−２刺激組成物は、例えば上記のような多価デクチン−２刺激剤を含む。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
本発明は、添付の図面と併せて読んだ場合、以下の詳細な説明から最もよく理解される。一般的な実施によれば、図面の様々な特徴は、縮尺どおりではないことを強調しておく。反対に、様々な特徴の寸法は、明確にするために任意に拡大又は縮小される。図面には、以下の図面が含まれる。
【図１Ａ】腫瘍関連骨髄細胞は、高レベルのデクチン−２を発現する。（図１Ａ〜図１Ｂ）マウス及びヒト（human、Ｈｕ）膵管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma、ＰＤＡＣ）由来の組織を示された抗体で染色し、蛍光（図１Ａ）又は光（図１Ｂ）顕微鏡によって画像化した。（図１Ａ）ＬＭＰ又はＰａｎｃ０２マウス腫瘍細胞株を注射した免疫コンピテント（immunocompetent）マウス由来の初代膵臓腫瘍組織及び転移肝臓試料。ＬＭＰ細胞（Ｐｄｘ１−Ｃｒｅ；ＫｒａｓＬＳＬ−Ｇ１２Ｄ／＋；Ｔｒｐ５３ＬＳＬ−Ｒ１７２Ｈ／＋マウスから供給源として取得し、これらの研究全体を通して使用される）は、変異体ｐ５３の蓄積を特徴とする。（図１Ｂ）ヒトＰＤＡＣ及びＰＤＡＣの遺伝子組換えマウスモデル（ＧＥＭＭ）（Ｐｄｘ１−Ｃｒｅ；ＫｒａｓＬＳＬＧ１２Ｄ／＋；Ｃｄｋｎ２ａ−／−）由来の初代腫瘍及び転移組織。スケールバー、１００μｍ。
【図１Ｂ】腫瘍関連骨髄細胞は、高レベルのデクチン−２を発現する。（図１Ａ〜図１Ｂ）マウス及びヒト（human、Ｈｕ）膵管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma、ＰＤＡＣ）由来の組織を示された抗体で染色し、蛍光（図１Ａ）又は光（図１Ｂ）顕微鏡によって画像化した。（図１Ａ）ＬＭＰ又はＰａｎｃ０２マウス腫瘍細胞株を注射した免疫コンピテント（immunocompetent）マウス由来の初代膵臓腫瘍組織及び転移肝臓試料。ＬＭＰ細胞（Ｐｄｘ１−Ｃｒｅ；ＫｒａｓＬＳＬ−Ｇ１２Ｄ／＋；Ｔｒｐ５３ＬＳＬ−Ｒ１７２Ｈ／＋マウスから供給源として取得し、これらの研究全体を通して使用される）は、変異体ｐ５３の蓄積を特徴とする。（図１Ｂ）ヒトＰＤＡＣ及びＰＤＡＣの遺伝子組換えマウスモデル（ＧＥＭＭ）（Ｐｄｘ１−Ｃｒｅ；ＫｒａｓＬＳＬＧ１２Ｄ／＋；Ｃｄｋｎ２ａ−／−）由来の初代腫瘍及び転移組織。スケールバー、１００μｍ。
【図２Ａ】天然デクチン−２アゴニストは、腫瘍関連骨髄細胞を活性化し、抗腫瘍免疫応答を誘導する。（図２Ａ〜図２Ｃ）マウス骨髄単球をＰＤＡＣ馴化培地で培養して、ＴＡＭ様細胞を生成した。サイトカイン生成及び共刺激分子発現を、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の細胞壁抽出物（フルフルマン（furfurman））で一晩刺激した後に分析した。いくつかの実験（図２Ｂ）では、細胞をデクチン−２遮断抗体で前処置した。ＮＤ、検出なし。（図２Ｄ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍に２日間連続してフルフルマン又はビヒクルを注射し、次いで３日目にフローサイトメトリーによって分析した。腫瘍浸潤性免疫細胞の中の全ＣＤ３＋Ｔ細胞をゲーティングする（gated）。（図２Ｅ〜図２Ｇ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍を保有するマウスに、フルフルマン（＋／−ＩＦＮγ）又はビヒクルを腫瘍移植後７日目及び１０日目に腫瘍内注射し、チェックポイント阻害剤（図２Ｅ）、ゲムシタビン（gemcitabine、Ｇｅｍ）（図２Ｆ）、又はＣＤ４０アゴニスト抗体（ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ  ７日目に開始）で全身的に処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（ｎ＝３〜５のマウス／群）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、一元配置分散分析を用いたテューキーの事後検定による、結果は最終時点での腫瘍体積について示されている。
【図２Ｂ】天然デクチン−２アゴニストは、腫瘍関連骨髄細胞を活性化し、抗腫瘍免疫応答を誘導する。（図２Ａ〜図２Ｃ）マウス骨髄単球をＰＤＡＣ馴化培地で培養して、ＴＡＭ様細胞を生成した。サイトカイン生成及び共刺激分子発現を、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の細胞壁抽出物（フルフルマン（furfurman））で一晩刺激した後に分析した。いくつかの実験（図２Ｂ）では、細胞をデクチン−２遮断抗体で前処置した。ＮＤ、検出なし。（図２Ｄ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍に２日間連続してフルフルマン又はビヒクルを注射し、次いで３日目にフローサイトメトリーによって分析した。腫瘍浸潤性免疫細胞の中の全ＣＤ３＋Ｔ細胞をゲーティングする（gated）。（図２Ｅ〜図２Ｇ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍を保有するマウスに、フルフルマン（＋／−ＩＦＮγ）又はビヒクルを腫瘍移植後７日目及び１０日目に腫瘍内注射し、チェックポイント阻害剤（図２Ｅ）、ゲムシタビン（gemcitabine、Ｇｅｍ）（図２Ｆ）、又はＣＤ４０アゴニスト抗体（ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ  ７日目に開始）で全身的に処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（ｎ＝３〜５のマウス／群）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、一元配置分散分析を用いたテューキーの事後検定による、結果は最終時点での腫瘍体積について示されている。
【図２Ｃ】天然デクチン−２アゴニストは、腫瘍関連骨髄細胞を活性化し、抗腫瘍免疫応答を誘導する。（図２Ａ〜図２Ｃ）マウス骨髄単球をＰＤＡＣ馴化培地で培養して、ＴＡＭ様細胞を生成した。サイトカイン生成及び共刺激分子発現を、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の細胞壁抽出物（フルフルマン（furfurman））で一晩刺激した後に分析した。いくつかの実験（図２Ｂ）では、細胞をデクチン−２遮断抗体で前処置した。ＮＤ、検出なし。（図２Ｄ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍に２日間連続してフルフルマン又はビヒクルを注射し、次いで３日目にフローサイトメトリーによって分析した。腫瘍浸潤性免疫細胞の中の全ＣＤ３＋Ｔ細胞をゲーティングする（gated）。（図２Ｅ〜図２Ｇ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍を保有するマウスに、フルフルマン（＋／−ＩＦＮγ）又はビヒクルを腫瘍移植後７日目及び１０日目に腫瘍内注射し、チェックポイント阻害剤（図２Ｅ）、ゲムシタビン（gemcitabine、Ｇｅｍ）（図２Ｆ）、又はＣＤ４０アゴニスト抗体（ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ  ７日目に開始）で全身的に処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（ｎ＝３〜５のマウス／群）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、一元配置分散分析を用いたテューキーの事後検定による、結果は最終時点での腫瘍体積について示されている。
【図２Ｄ】天然デクチン−２アゴニストは、腫瘍関連骨髄細胞を活性化し、抗腫瘍免疫応答を誘導する。（図２Ａ〜図２Ｃ）マウス骨髄単球をＰＤＡＣ馴化培地で培養して、ＴＡＭ様細胞を生成した。サイトカイン生成及び共刺激分子発現を、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の細胞壁抽出物（フルフルマン（furfurman））で一晩刺激した後に分析した。いくつかの実験（図２Ｂ）では、細胞をデクチン−２遮断抗体で前処置した。ＮＤ、検出なし。（図２Ｄ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍に２日間連続してフルフルマン又はビヒクルを注射し、次いで３日目にフローサイトメトリーによって分析した。腫瘍浸潤性免疫細胞の中の全ＣＤ３＋Ｔ細胞をゲーティングする（gated）。（図２Ｅ〜図２Ｇ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍を保有するマウスに、フルフルマン（＋／−ＩＦＮγ）又はビヒクルを腫瘍移植後７日目及び１０日目に腫瘍内注射し、チェックポイント阻害剤（図２Ｅ）、ゲムシタビン（gemcitabine、Ｇｅｍ）（図２Ｆ）、又はＣＤ４０アゴニスト抗体（ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ  ７日目に開始）で全身的に処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（ｎ＝３〜５のマウス／群）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、一元配置分散分析を用いたテューキーの事後検定による、結果は最終時点での腫瘍体積について示されている。
【図２Ｅ】天然デクチン−２アゴニストは、腫瘍関連骨髄細胞を活性化し、抗腫瘍免疫応答を誘導する。（図２Ａ〜図２Ｃ）マウス骨髄単球をＰＤＡＣ馴化培地で培養して、ＴＡＭ様細胞を生成した。サイトカイン生成及び共刺激分子発現を、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の細胞壁抽出物（フルフルマン（furfurman））で一晩刺激した後に分析した。いくつかの実験（図２Ｂ）では、細胞をデクチン−２遮断抗体で前処置した。ＮＤ、検出なし。（図２Ｄ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍に２日間連続してフルフルマン又はビヒクルを注射し、次いで３日目にフローサイトメトリーによって分析した。腫瘍浸潤性免疫細胞の中の全ＣＤ３＋Ｔ細胞をゲーティングする（gated）。（図２Ｅ〜図２Ｇ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍を保有するマウスに、フルフルマン（＋／−ＩＦＮγ）又はビヒクルを腫瘍移植後７日目及び１０日目に腫瘍内注射し、チェックポイント阻害剤（図２Ｅ）、ゲムシタビン（gemcitabine、Ｇｅｍ）（図２Ｆ）、又はＣＤ４０アゴニスト抗体（ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ  ７日目に開始）で全身的に処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（ｎ＝３〜５のマウス／群）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、一元配置分散分析を用いたテューキーの事後検定による、結果は最終時点での腫瘍体積について示されている。
【図２Ｆ】天然デクチン−２アゴニストは、腫瘍関連骨髄細胞を活性化し、抗腫瘍免疫応答を誘導する。（図２Ａ〜図２Ｃ）マウス骨髄単球をＰＤＡＣ馴化培地で培養して、ＴＡＭ様細胞を生成した。サイトカイン生成及び共刺激分子発現を、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の細胞壁抽出物（フルフルマン（furfurman））で一晩刺激した後に分析した。いくつかの実験（図２Ｂ）では、細胞をデクチン−２遮断抗体で前処置した。ＮＤ、検出なし。（図２Ｄ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍に２日間連続してフルフルマン又はビヒクルを注射し、次いで３日目にフローサイトメトリーによって分析した。腫瘍浸潤性免疫細胞の中の全ＣＤ３＋Ｔ細胞をゲーティングする（gated）。（図２Ｅ〜図２Ｇ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍を保有するマウスに、フルフルマン（＋／−ＩＦＮγ）又はビヒクルを腫瘍移植後７日目及び１０日目に腫瘍内注射し、チェックポイント阻害剤（図２Ｅ）、ゲムシタビン（gemcitabine、Ｇｅｍ）（図２Ｆ）、又はＣＤ４０アゴニスト抗体（ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ  ７日目に開始）で全身的に処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（ｎ＝３〜５のマウス／群）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、一元配置分散分析を用いたテューキーの事後検定による、結果は最終時点での腫瘍体積について示されている。
【図２Ｇ】天然デクチン−２アゴニストは、腫瘍関連骨髄細胞を活性化し、抗腫瘍免疫応答を誘導する。（図２Ａ〜図２Ｃ）マウス骨髄単球をＰＤＡＣ馴化培地で培養して、ＴＡＭ様細胞を生成した。サイトカイン生成及び共刺激分子発現を、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の細胞壁抽出物（フルフルマン（furfurman））で一晩刺激した後に分析した。いくつかの実験（図２Ｂ）では、細胞をデクチン−２遮断抗体で前処置した。ＮＤ、検出なし。（図２Ｄ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍に２日間連続してフルフルマン又はビヒクルを注射し、次いで３日目にフローサイトメトリーによって分析した。腫瘍浸潤性免疫細胞の中の全ＣＤ３＋Ｔ細胞をゲーティングする（gated）。（図２Ｅ〜図２Ｇ）皮下ＰＤＡＣ腫瘍を保有するマウスに、フルフルマン（＋／−ＩＦＮγ）又はビヒクルを腫瘍移植後７日目及び１０日目に腫瘍内注射し、チェックポイント阻害剤（図２Ｅ）、ゲムシタビン（gemcitabine、Ｇｅｍ）（図２Ｆ）、又はＣＤ４０アゴニスト抗体（ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ  ７日目に開始）で全身的に処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（ｎ＝３〜５のマウス／群）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、一元配置分散分析を用いたテューキーの事後検定による、結果は最終時点での腫瘍体積について示されている。
【図３Ａ】天然デクチン−２リガンドは、マウス及びヒト細胞を活性化し、複数の腫瘍種において抗癌効果を有する。（図３Ａ）示された抗体で前処置し、次いでプレートに結合したＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅマンナンで一晩刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図３Ｂ、図３Ｃ）ＧＭ−ＣＳＦで前処置し、次いでフルフルマン（図３Ｂ）又はマンナン（図３Ｃ）で刺激した、ヒト単球によるＴＮＦα生成。ｎ＝３のドナーの平均±ＳＥＭを示す。（図３Ｄ〜図３Ｆ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ（図３Ｄ）、肺腺癌（図３Ｅ）、又はＣＴ２６結腸癌を、腫瘍移植後の６〜９日目にマンナン（ｉ．ｖ．）並びに／又はαＣＴＬＡ−４及びαＰＤ−１抗体（ｉ．ｐ．）の組み合わせで処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、対応のないスチューデントのｔ検定による（図３Ｂ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図３Ｄ〜図３Ｆ）。（図３Ｇ）マウスへのマンナン注射（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．）の６時間後におけるＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＣＤ８６及びＭＨＣ−ＩＩの発現。（図３Ｈ）デクチン−２アゴニストは、化学療法及び他の免疫療法と相乗作用する。示された剤で処置した腫瘍保有マウスの腫瘍増殖曲線。腫瘍を７〜９日間増殖させた後、デクチン−２刺激剤を単独でｉ．ｔ．（フルフルマン、１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×２）又はｉ．ｖ．（マンナン、１０ｍｇ／ｋｇｑ  ２ｄ×３ｗｋ）投与したか、又はｉ．ｐ．ゲムシタビン（１００ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３ｗｋ）又はアゴニストＣＤ４０抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３）と組み合わせて投与した＊、ｐ＜０．０５；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図３Ｂ】天然デクチン−２リガンドは、マウス及びヒト細胞を活性化し、複数の腫瘍種において抗癌効果を有する。（図３Ａ）示された抗体で前処置し、次いでプレートに結合したＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅマンナンで一晩刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図３Ｂ、図３Ｃ）ＧＭ−ＣＳＦで前処置し、次いでフルフルマン（図３Ｂ）又はマンナン（図３Ｃ）で刺激した、ヒト単球によるＴＮＦα生成。ｎ＝３のドナーの平均±ＳＥＭを示す。（図３Ｄ〜図３Ｆ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ（図３Ｄ）、肺腺癌（図３Ｅ）、又はＣＴ２６結腸癌を、腫瘍移植後の６〜９日目にマンナン（ｉ．ｖ．）並びに／又はαＣＴＬＡ−４及びαＰＤ−１抗体（ｉ．ｐ．）の組み合わせで処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、対応のないスチューデントのｔ検定による（図３Ｂ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図３Ｄ〜図３Ｆ）。（図３Ｇ）マウスへのマンナン注射（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．）の６時間後におけるＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＣＤ８６及びＭＨＣ−ＩＩの発現。（図３Ｈ）デクチン−２アゴニストは、化学療法及び他の免疫療法と相乗作用する。示された剤で処置した腫瘍保有マウスの腫瘍増殖曲線。腫瘍を７〜９日間増殖させた後、デクチン−２刺激剤を単独でｉ．ｔ．（フルフルマン、１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×２）又はｉ．ｖ．（マンナン、１０ｍｇ／ｋｇｑ  ２ｄ×３ｗｋ）投与したか、又はｉ．ｐ．ゲムシタビン（１００ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３ｗｋ）又はアゴニストＣＤ４０抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３）と組み合わせて投与した＊、ｐ＜０．０５；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図３Ｃ】天然デクチン−２リガンドは、マウス及びヒト細胞を活性化し、複数の腫瘍種において抗癌効果を有する。（図３Ａ）示された抗体で前処置し、次いでプレートに結合したＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅマンナンで一晩刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図３Ｂ、図３Ｃ）ＧＭ−ＣＳＦで前処置し、次いでフルフルマン（図３Ｂ）又はマンナン（図３Ｃ）で刺激した、ヒト単球によるＴＮＦα生成。ｎ＝３のドナーの平均±ＳＥＭを示す。（図３Ｄ〜図３Ｆ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ（図３Ｄ）、肺腺癌（図３Ｅ）、又はＣＴ２６結腸癌を、腫瘍移植後の６〜９日目にマンナン（ｉ．ｖ．）並びに／又はαＣＴＬＡ−４及びαＰＤ−１抗体（ｉ．ｐ．）の組み合わせで処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、対応のないスチューデントのｔ検定による（図３Ｂ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図３Ｄ〜図３Ｆ）。（図３Ｇ）マウスへのマンナン注射（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．）の６時間後におけるＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＣＤ８６及びＭＨＣ−ＩＩの発現。（図３Ｈ）デクチン−２アゴニストは、化学療法及び他の免疫療法と相乗作用する。示された剤で処置した腫瘍保有マウスの腫瘍増殖曲線。腫瘍を７〜９日間増殖させた後、デクチン−２刺激剤を単独でｉ．ｔ．（フルフルマン、１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×２）又はｉ．ｖ．（マンナン、１０ｍｇ／ｋｇｑ  ２ｄ×３ｗｋ）投与したか、又はｉ．ｐ．ゲムシタビン（１００ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３ｗｋ）又はアゴニストＣＤ４０抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３）と組み合わせて投与した＊、ｐ＜０．０５；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図３Ｄ】天然デクチン−２リガンドは、マウス及びヒト細胞を活性化し、複数の腫瘍種において抗癌効果を有する。（図３Ａ）示された抗体で前処置し、次いでプレートに結合したＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅマンナンで一晩刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図３Ｂ、図３Ｃ）ＧＭ−ＣＳＦで前処置し、次いでフルフルマン（図３Ｂ）又はマンナン（図３Ｃ）で刺激した、ヒト単球によるＴＮＦα生成。ｎ＝３のドナーの平均±ＳＥＭを示す。（図３Ｄ〜図３Ｆ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ（図３Ｄ）、肺腺癌（図３Ｅ）、又はＣＴ２６結腸癌を、腫瘍移植後の６〜９日目にマンナン（ｉ．ｖ．）並びに／又はαＣＴＬＡ−４及びαＰＤ−１抗体（ｉ．ｐ．）の組み合わせで処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、対応のないスチューデントのｔ検定による（図３Ｂ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図３Ｄ〜図３Ｆ）。（図３Ｇ）マウスへのマンナン注射（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．）の６時間後におけるＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＣＤ８６及びＭＨＣ−ＩＩの発現。（図３Ｈ）デクチン−２アゴニストは、化学療法及び他の免疫療法と相乗作用する。示された剤で処置した腫瘍保有マウスの腫瘍増殖曲線。腫瘍を７〜９日間増殖させた後、デクチン−２刺激剤を単独でｉ．ｔ．（フルフルマン、１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×２）又はｉ．ｖ．（マンナン、１０ｍｇ／ｋｇｑ  ２ｄ×３ｗｋ）投与したか、又はｉ．ｐ．ゲムシタビン（１００ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３ｗｋ）又はアゴニストＣＤ４０抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３）と組み合わせて投与した＊、ｐ＜０．０５；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図３Ｅ】天然デクチン−２リガンドは、マウス及びヒト細胞を活性化し、複数の腫瘍種において抗癌効果を有する。（図３Ａ）示された抗体で前処置し、次いでプレートに結合したＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅマンナンで一晩刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図３Ｂ、図３Ｃ）ＧＭ−ＣＳＦで前処置し、次いでフルフルマン（図３Ｂ）又はマンナン（図３Ｃ）で刺激した、ヒト単球によるＴＮＦα生成。ｎ＝３のドナーの平均±ＳＥＭを示す。（図３Ｄ〜図３Ｆ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ（図３Ｄ）、肺腺癌（図３Ｅ）、又はＣＴ２６結腸癌を、腫瘍移植後の６〜９日目にマンナン（ｉ．ｖ．）並びに／又はαＣＴＬＡ−４及びαＰＤ−１抗体（ｉ．ｐ．）の組み合わせで処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、対応のないスチューデントのｔ検定による（図３Ｂ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図３Ｄ〜図３Ｆ）。（図３Ｇ）マウスへのマンナン注射（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．）の６時間後におけるＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＣＤ８６及びＭＨＣ−ＩＩの発現。（図３Ｈ）デクチン−２アゴニストは、化学療法及び他の免疫療法と相乗作用する。示された剤で処置した腫瘍保有マウスの腫瘍増殖曲線。腫瘍を７〜９日間増殖させた後、デクチン−２刺激剤を単独でｉ．ｔ．（フルフルマン、１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×２）又はｉ．ｖ．（マンナン、１０ｍｇ／ｋｇｑ  ２ｄ×３ｗｋ）投与したか、又はｉ．ｐ．ゲムシタビン（１００ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３ｗｋ）又はアゴニストＣＤ４０抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３）と組み合わせて投与した＊、ｐ＜０．０５；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図３Ｆ】天然デクチン−２リガンドは、マウス及びヒト細胞を活性化し、複数の腫瘍種において抗癌効果を有する。（図３Ａ）示された抗体で前処置し、次いでプレートに結合したＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅマンナンで一晩刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図３Ｂ、図３Ｃ）ＧＭ−ＣＳＦで前処置し、次いでフルフルマン（図３Ｂ）又はマンナン（図３Ｃ）で刺激した、ヒト単球によるＴＮＦα生成。ｎ＝３のドナーの平均±ＳＥＭを示す。（図３Ｄ〜図３Ｆ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ（図３Ｄ）、肺腺癌（図３Ｅ）、又はＣＴ２６結腸癌を、腫瘍移植後の６〜９日目にマンナン（ｉ．ｖ．）並びに／又はαＣＴＬＡ−４及びαＰＤ−１抗体（ｉ．ｐ．）の組み合わせで処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、対応のないスチューデントのｔ検定による（図３Ｂ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図３Ｄ〜図３Ｆ）。（図３Ｇ）マウスへのマンナン注射（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．）の６時間後におけるＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＣＤ８６及びＭＨＣ−ＩＩの発現。（図３Ｈ）デクチン−２アゴニストは、化学療法及び他の免疫療法と相乗作用する。示された剤で処置した腫瘍保有マウスの腫瘍増殖曲線。腫瘍を７〜９日間増殖させた後、デクチン−２刺激剤を単独でｉ．ｔ．（フルフルマン、１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×２）又はｉ．ｖ．（マンナン、１０ｍｇ／ｋｇｑ  ２ｄ×３ｗｋ）投与したか、又はｉ．ｐ．ゲムシタビン（１００ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３ｗｋ）又はアゴニストＣＤ４０抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３）と組み合わせて投与した＊、ｐ＜０．０５；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図３Ｇ】天然デクチン−２リガンドは、マウス及びヒト細胞を活性化し、複数の腫瘍種において抗癌効果を有する。（図３Ａ）示された抗体で前処置し、次いでプレートに結合したＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅマンナンで一晩刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図３Ｂ、図３Ｃ）ＧＭ−ＣＳＦで前処置し、次いでフルフルマン（図３Ｂ）又はマンナン（図３Ｃ）で刺激した、ヒト単球によるＴＮＦα生成。ｎ＝３のドナーの平均±ＳＥＭを示す。（図３Ｄ〜図３Ｆ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ（図３Ｄ）、肺腺癌（図３Ｅ）、又はＣＴ２６結腸癌を、腫瘍移植後の６〜９日目にマンナン（ｉ．ｖ．）並びに／又はαＣＴＬＡ−４及びαＰＤ−１抗体（ｉ．ｐ．）の組み合わせで処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、対応のないスチューデントのｔ検定による（図３Ｂ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図３Ｄ〜図３Ｆ）。（図３Ｇ）マウスへのマンナン注射（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．）の６時間後におけるＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＣＤ８６及びＭＨＣ−ＩＩの発現。（図３Ｈ）デクチン−２アゴニストは、化学療法及び他の免疫療法と相乗作用する。示された剤で処置した腫瘍保有マウスの腫瘍増殖曲線。腫瘍を７〜９日間増殖させた後、デクチン−２刺激剤を単独でｉ．ｔ．（フルフルマン、１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×２）又はｉ．ｖ．（マンナン、１０ｍｇ／ｋｇｑ  ２ｄ×３ｗｋ）投与したか、又はｉ．ｐ．ゲムシタビン（１００ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３ｗｋ）又はアゴニストＣＤ４０抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３）と組み合わせて投与した＊、ｐ＜０．０５；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図３Ｈ】天然デクチン−２リガンドは、マウス及びヒト細胞を活性化し、複数の腫瘍種において抗癌効果を有する。（図３Ａ）示された抗体で前処置し、次いでプレートに結合したＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅマンナンで一晩刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図３Ｂ、図３Ｃ）ＧＭ−ＣＳＦで前処置し、次いでフルフルマン（図３Ｂ）又はマンナン（図３Ｃ）で刺激した、ヒト単球によるＴＮＦα生成。ｎ＝３のドナーの平均±ＳＥＭを示す。（図３Ｄ〜図３Ｆ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ（図３Ｄ）、肺腺癌（図３Ｅ）、又はＣＴ２６結腸癌を、腫瘍移植後の６〜９日目にマンナン（ｉ．ｖ．）並びに／又はαＣＴＬＡ−４及びαＰＤ−１抗体（ｉ．ｐ．）の組み合わせで処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、対応のないスチューデントのｔ検定による（図３Ｂ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図３Ｄ〜図３Ｆ）。（図３Ｇ）マウスへのマンナン注射（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．）の６時間後におけるＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＣＤ８６及びＭＨＣ−ＩＩの発現。（図３Ｈ）デクチン−２アゴニストは、化学療法及び他の免疫療法と相乗作用する。示された剤で処置した腫瘍保有マウスの腫瘍増殖曲線。腫瘍を７〜９日間増殖させた後、デクチン−２刺激剤を単独でｉ．ｔ．（フルフルマン、１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×２）又はｉ．ｖ．（マンナン、１０ｍｇ／ｋｇｑ  ２ｄ×３ｗｋ）投与したか、又はｉ．ｐ．ゲムシタビン（１００ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３ｗｋ）又はアゴニストＣＤ４０抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｄ×３）と組み合わせて投与した＊、ｐ＜０．０５；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図４Ａ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を誘導し、腫瘍をデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図４Ａ〜図４Ｃ）マウス（図４Ａ、図４Ｂ）及びヒト（図４Ｃ）の単球を、ＧＭ−ＣＳＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）を補充した地又は補充しない培地で２４時間培養した後、デクチン−２発現のフローサイトメトリー分析（図４Ａ、図４Ｃ）又はフルフルマンによる刺激及びＴＮＦα生成の分析（図４Ｂ）を行った。（図４Ｃ）ｎ＝３ドナーの平均ＭＦＩ±ＳＥＭを示す。（図４Ｄ）マウス保有ｓ．ｃ．ＣＴ２６腫瘍をマンナン（ｉ．ｖ．）及び／又はＧＭ−ＣＳＦ（ｉ．ｔ．）で処理し、これは腫瘍移植後６日目に開始した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜４）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１、スチューデントのｔ検定による（図４Ｃ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図４Ｄ）。
【図４Ｂ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を誘導し、腫瘍をデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図４Ａ〜図４Ｃ）マウス（図４Ａ、図４Ｂ）及びヒト（図４Ｃ）の単球を、ＧＭ−ＣＳＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）を補充した地又は補充しない培地で２４時間培養した後、デクチン−２発現のフローサイトメトリー分析（図４Ａ、図４Ｃ）又はフルフルマンによる刺激及びＴＮＦα生成の分析（図４Ｂ）を行った。（図４Ｃ）ｎ＝３ドナーの平均ＭＦＩ±ＳＥＭを示す。（図４Ｄ）マウス保有ｓ．ｃ．ＣＴ２６腫瘍をマンナン（ｉ．ｖ．）及び／又はＧＭ−ＣＳＦ（ｉ．ｔ．）で処理し、これは腫瘍移植後６日目に開始した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜４）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１、スチューデントのｔ検定による（図４Ｃ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図４Ｄ）。
【図４Ｃ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を誘導し、腫瘍をデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図４Ａ〜図４Ｃ）マウス（図４Ａ、図４Ｂ）及びヒト（図４Ｃ）の単球を、ＧＭ−ＣＳＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）を補充した地又は補充しない培地で２４時間培養した後、デクチン−２発現のフローサイトメトリー分析（図４Ａ、図４Ｃ）又はフルフルマンによる刺激及びＴＮＦα生成の分析（図４Ｂ）を行った。（図４Ｃ）ｎ＝３ドナーの平均ＭＦＩ±ＳＥＭを示す。（図４Ｄ）マウス保有ｓ．ｃ．ＣＴ２６腫瘍をマンナン（ｉ．ｖ．）及び／又はＧＭ−ＣＳＦ（ｉ．ｔ．）で処理し、これは腫瘍移植後６日目に開始した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜４）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１、スチューデントのｔ検定による（図４Ｃ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図４Ｄ）。
【図４Ｄ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を誘導し、腫瘍をデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図４Ａ〜図４Ｃ）マウス（図４Ａ、図４Ｂ）及びヒト（図４Ｃ）の単球を、ＧＭ−ＣＳＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）を補充した地又は補充しない培地で２４時間培養した後、デクチン−２発現のフローサイトメトリー分析（図４Ａ、図４Ｃ）又はフルフルマンによる刺激及びＴＮＦα生成の分析（図４Ｂ）を行った。（図４Ｃ）ｎ＝３ドナーの平均ＭＦＩ±ＳＥＭを示す。（図４Ｄ）マウス保有ｓ．ｃ．ＣＴ２６腫瘍をマンナン（ｉ．ｖ．）及び／又はＧＭ−ＣＳＦ（ｉ．ｔ．）で処理し、これは腫瘍移植後６日目に開始した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜４）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１、スチューデントのｔ検定による（図４Ｃ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図４Ｄ）。
【図５Ａ】キフネンシンによるマンノシダーゼ阻害は、高マンノースグリカンの提示を誘導し、腫瘍細胞免疫原性を増加させる。（図５Ａ〜図５Ｃ）ＰＤＡＣ細胞を３日間キフネンシンで処置した後、フローサイトメトリー分析（図５Ａ）又はＴＡＭとの共培養（図５Ｂ、図５Ｃ）を行った。（図５Ａ）マンノース結合レクチンであるコンカナバリンＡで染色したＰＤＡＣ細胞。（図５Ｂ、図５Ｃ）前処置したＰＤＡＣ細胞をＣＳＦＥで標識し、ＴＡＭと共に一晩培養して、デクチン−２発現ＴＡＭによるサイトカイン生成（図５Ｂ）及び腫瘍細胞の取り込み（図５Ｃ）を評価した。いくつかの実験では、ＴＡＭをデクチン−２遮断抗体で処理した後、ＰＤＡＣ細胞と共培養した（図５Ｃ）。＊、ｐ＜０．０５、スチューデントのｔ検定による。（図５Ｄ）キフネンシン処置マウス由来の皮下ＰＤＡＣ腫瘍（ｉ．ｐ．、ｑ２ｄ  ７日間）をフローサイトメトリーによって分析した。全腫瘍浸潤性免疫細胞の中のＣＤ８Ｔ細胞（ＣＤ８＋ＣＤ９０＋）をゲーティングする。
【図５Ｂ】キフネンシンによるマンノシダーゼ阻害は、高マンノースグリカンの提示を誘導し、腫瘍細胞免疫原性を増加させる。（図５Ａ〜図５Ｃ）ＰＤＡＣ細胞を３日間キフネンシンで処置した後、フローサイトメトリー分析（図５Ａ）又はＴＡＭとの共培養（図５Ｂ、図５Ｃ）を行った。（図５Ａ）マンノース結合レクチンであるコンカナバリンＡで染色したＰＤＡＣ細胞。（図５Ｂ、図５Ｃ）前処置したＰＤＡＣ細胞をＣＳＦＥで標識し、ＴＡＭと共に一晩培養して、デクチン−２発現ＴＡＭによるサイトカイン生成（図５Ｂ）及び腫瘍細胞の取り込み（図５Ｃ）を評価した。いくつかの実験では、ＴＡＭをデクチン−２遮断抗体で処理した後、ＰＤＡＣ細胞と共培養した（図５Ｃ）。＊、ｐ＜０．０５、スチューデントのｔ検定による。（図５Ｄ）キフネンシン処置マウス由来の皮下ＰＤＡＣ腫瘍（ｉ．ｐ．、ｑ２ｄ  ７日間）をフローサイトメトリーによって分析した。全腫瘍浸潤性免疫細胞の中のＣＤ８Ｔ細胞（ＣＤ８＋ＣＤ９０＋）をゲーティングする。
【図５Ｃ】キフネンシンによるマンノシダーゼ阻害は、高マンノースグリカンの提示を誘導し、腫瘍細胞免疫原性を増加させる。（図５Ａ〜図５Ｃ）ＰＤＡＣ細胞を３日間キフネンシンで処置した後、フローサイトメトリー分析（図５Ａ）又はＴＡＭとの共培養（図５Ｂ、図５Ｃ）を行った。（図５Ａ）マンノース結合レクチンであるコンカナバリンＡで染色したＰＤＡＣ細胞。（図５Ｂ、図５Ｃ）前処置したＰＤＡＣ細胞をＣＳＦＥで標識し、ＴＡＭと共に一晩培養して、デクチン−２発現ＴＡＭによるサイトカイン生成（図５Ｂ）及び腫瘍細胞の取り込み（図５Ｃ）を評価した。いくつかの実験では、ＴＡＭをデクチン−２遮断抗体で処理した後、ＰＤＡＣ細胞と共培養した（図５Ｃ）。＊、ｐ＜０．０５、スチューデントのｔ検定による。（図５Ｄ）キフネンシン処置マウス由来の皮下ＰＤＡＣ腫瘍（ｉ．ｐ．、ｑ２ｄ  ７日間）をフローサイトメトリーによって分析した。全腫瘍浸潤性免疫細胞の中のＣＤ８Ｔ細胞（ＣＤ８＋ＣＤ９０＋）をゲーティングする。
【図５Ｄ】キフネンシンによるマンノシダーゼ阻害は、高マンノースグリカンの提示を誘導し、腫瘍細胞免疫原性を増加させる。（図５Ａ〜図５Ｃ）ＰＤＡＣ細胞を３日間キフネンシンで処置した後、フローサイトメトリー分析（図５Ａ）又はＴＡＭとの共培養（図５Ｂ、図５Ｃ）を行った。（図５Ａ）マンノース結合レクチンであるコンカナバリンＡで染色したＰＤＡＣ細胞。（図５Ｂ、図５Ｃ）前処置したＰＤＡＣ細胞をＣＳＦＥで標識し、ＴＡＭと共に一晩培養して、デクチン−２発現ＴＡＭによるサイトカイン生成（図５Ｂ）及び腫瘍細胞の取り込み（図５Ｃ）を評価した。いくつかの実験では、ＴＡＭをデクチン−２遮断抗体で処理した後、ＰＤＡＣ細胞と共培養した（図５Ｃ）。＊、ｐ＜０．０５、スチューデントのｔ検定による。（図５Ｄ）キフネンシン処置マウス由来の皮下ＰＤＡＣ腫瘍（ｉ．ｐ．、ｑ２ｄ  ７日間）をフローサイトメトリーによって分析した。全腫瘍浸潤性免疫細胞の中のＣＤ８Ｔ細胞（ＣＤ８＋ＣＤ９０＋）をゲーティングする。
【図６Ａ−１】デクチン−２抗体（例えば、可溶性又は固定化デクチン−２抗体）は、腫瘍関連骨髄細胞を活性化する。（図６Ａ、図６Ｂ）マウス骨髄単球をＰＤＡＣ馴化培地で培養してＴＡＭ様細胞を生成し、次いで、様々な細胞表面分子に対する抗体でコーティングしたウェルに播種した。サイトカイン生成（図６Ａ）及び共刺激分子発現（図６Ｂ）を１８時間後に評価した。
【図６Ａ−２】デクチン−２抗体（例えば、可溶性又は固定化デクチン−２抗体）は、腫瘍関連骨髄細胞を活性化する。（図６Ａ、図６Ｂ）マウス骨髄単球をＰＤＡＣ馴化培地で培養してＴＡＭ様細胞を生成し、次いで、様々な細胞表面分子に対する抗体でコーティングしたウェルに播種した。サイトカイン生成（図６Ａ）及び共刺激分子発現（図６Ｂ）を１８時間後に評価した。
【図６Ｂ】デクチン−２抗体（例えば、可溶性又は固定化デクチン−２抗体）は、腫瘍関連骨髄細胞を活性化する。（図６Ａ、図６Ｂ）マウス骨髄単球をＰＤＡＣ馴化培地で培養してＴＡＭ様細胞を生成し、次いで、様々な細胞表面分子に対する抗体でコーティングしたウェルに播種した。サイトカイン生成（図６Ａ）及び共刺激分子発現（図６Ｂ）を１８時間後に評価した。
【図７Ａ】デクチン−２を活性化することができる合成糖ポリマーの設計。（図７Ａ）腫瘍環境内でデクチン−２を活性化するように、多官能性糖ポリマーを設計することができる。糖ポリマーは、受容体のクラスター化及び活性化のための最適な間隔を有するポリマー骨格上にデクチン−２結合グリカンを提示する。標的化、画像化、追加の細胞経路の刺激、若しくは薬理学的最適化のために、ポリマー骨格に沿って又は末端基として他の官能基を組み込むことができる。（図７Ｂ）マンノビオシル基が、ポリペプチド骨格内のセリン残基に結合されたデクチン−２リガンドとして機能する、一実施形態の例。これらの糖ポリペプチドは、アミノ酸Ｎ−カルボキシヒドリド（N-carboxyanhydride、ＮＣＡ）の重合によって合成することができる。（図７Ｃ）合成糖ペプチドを抗体に結合して糖ペプチド−抗体コンジュゲートを生成するための１つの可能なコンジュゲーション戦略（これは成功裏に使用された）の概略的な例。抗体上のリジン残基をＮＨＳ−シクロオクチン化合物で処理し、続いてアジド末端糖ペプチドとの生体直交（bioorthogonal）共有結合反応を行った。
【図７Ｂ】デクチン−２を活性化することができる合成糖ポリマーの設計。（図７Ａ）腫瘍環境内でデクチン−２を活性化するように、多官能性糖ポリマーを設計することができる。糖ポリマーは、受容体のクラスター化及び活性化のための最適な間隔を有するポリマー骨格上にデクチン−２結合グリカンを提示する。標的化、画像化、追加の細胞経路の刺激、若しくは薬理学的最適化のために、ポリマー骨格に沿って又は末端基として他の官能基を組み込むことができる。（図７Ｂ）マンノビオシル基が、ポリペプチド骨格内のセリン残基に結合されたデクチン−２リガンドとして機能する、一実施形態の例。これらの糖ポリペプチドは、アミノ酸Ｎ−カルボキシヒドリド（N-carboxyanhydride、ＮＣＡ）の重合によって合成することができる。（図７Ｃ）合成糖ペプチドを抗体に結合して糖ペプチド−抗体コンジュゲートを生成するための１つの可能なコンジュゲーション戦略（これは成功裏に使用された）の概略的な例。抗体上のリジン残基をＮＨＳ−シクロオクチン化合物で処理し、続いてアジド末端糖ペプチドとの生体直交（bioorthogonal）共有結合反応を行った。
【図７Ｃ】デクチン−２を活性化することができる合成糖ポリマーの設計。（図７Ａ）腫瘍環境内でデクチン−２を活性化するように、多官能性糖ポリマーを設計することができる。糖ポリマーは、受容体のクラスター化及び活性化のための最適な間隔を有するポリマー骨格上にデクチン−２結合グリカンを提示する。標的化、画像化、追加の細胞経路の刺激、若しくは薬理学的最適化のために、ポリマー骨格に沿って又は末端基として他の官能基を組み込むことができる。（図７Ｂ）マンノビオシル基が、ポリペプチド骨格内のセリン残基に結合されたデクチン−２リガンドとして機能する、一実施形態の例。これらの糖ポリペプチドは、アミノ酸Ｎ−カルボキシヒドリド（N-carboxyanhydride、ＮＣＡ）の重合によって合成することができる。（図７Ｃ）合成糖ペプチドを抗体に結合して糖ペプチド−抗体コンジュゲートを生成するための１つの可能なコンジュゲーション戦略（これは成功裏に使用された）の概略的な例。抗体上のリジン残基をＮＨＳ−シクロオクチン化合物で処理し、続いてアジド末端糖ペプチドとの生体直交（bioorthogonal）共有結合反応を行った。
【図８Ａ】合成マンノビオース糖ポリマー及び糖コンジュゲートは、治療効果のために骨髄細胞を活性化する。（図８Ａ、図８Ｂ）示された抗体で前処置し、次いで、プレートに固定した（図８Ａ）異なるグリカン密度（３５％又は６５％）のマンノース（mannose、Ｍａｎ１）若しくはマンノビオース（mannobiose、Ｍａｎ２）糖ポリペプチド（２５０ｍｅｒ）又は（図８Ｂ）ラクトース（lactose、Ｌａｃ）若しくはＭａｎ２糖ポリペプチド（６５％グリコシル化１００ｍｅｒ）に結合されたαＥｐＣＡＭ抗体で刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図８Ｃ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ腫瘍をＭａｎ２糖ポリペプチド（６５％グリコシル化１００ｍｅｒ）でｉ．ｖ．処置し、これは腫瘍移植後１０日目に開始した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図８Ｂ】合成マンノビオース糖ポリマー及び糖コンジュゲートは、治療効果のために骨髄細胞を活性化する。（図８Ａ、図８Ｂ）示された抗体で前処置し、次いで、プレートに固定した（図８Ａ）異なるグリカン密度（３５％又は６５％）のマンノース（mannose、Ｍａｎ１）若しくはマンノビオース（mannobiose、Ｍａｎ２）糖ポリペプチド（２５０ｍｅｒ）又は（図８Ｂ）ラクトース（lactose、Ｌａｃ）若しくはＭａｎ２糖ポリペプチド（６５％グリコシル化１００ｍｅｒ）に結合されたαＥｐＣＡＭ抗体で刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図８Ｃ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ腫瘍をＭａｎ２糖ポリペプチド（６５％グリコシル化１００ｍｅｒ）でｉ．ｖ．処置し、これは腫瘍移植後１０日目に開始した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図８Ｃ】合成マンノビオース糖ポリマー及び糖コンジュゲートは、治療効果のために骨髄細胞を活性化する。（図８Ａ、図８Ｂ）示された抗体で前処置し、次いで、プレートに固定した（図８Ａ）異なるグリカン密度（３５％又は６５％）のマンノース（mannose、Ｍａｎ１）若しくはマンノビオース（mannobiose、Ｍａｎ２）糖ポリペプチド（２５０ｍｅｒ）又は（図８Ｂ）ラクトース（lactose、Ｌａｃ）若しくはＭａｎ２糖ポリペプチド（６５％グリコシル化１００ｍｅｒ）に結合されたαＥｐＣＡＭ抗体で刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図８Ｃ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ腫瘍をＭａｎ２糖ポリペプチド（６５％グリコシル化１００ｍｅｒ）でｉ．ｖ．処置し、これは腫瘍移植後１０日目に開始した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図９Ａ】本開示の合成マンノビオース糖ペプチドが、デクチン−２を介して腫瘍関連マクロファージ（tumor associated macrophage、ＴＡＭ）を刺激し、腫瘍増殖を抑制することを実証するデータ。
【図９Ｂ】本開示の合成マンノビオース糖ペプチドが、デクチン−２を介して腫瘍関連マクロファージ（tumor associated macrophage、ＴＡＭ）を刺激し、腫瘍増殖を抑制することを実証するデータ。
【図９Ｃ】本開示の合成マンノビオース糖ペプチドが、デクチン−２を介して腫瘍関連マクロファージ（tumor associated macrophage、ＴＡＭ）を刺激し、腫瘍増殖を抑制することを実証するデータ。
【図１０】対照又はデクチン−２遮断抗体で前処置し、次いで、異なるグリカン密度（３０％又は６５％）を有するプレート結合ラクトース（Ｌａｃ）又はマンノビオース（Ｍａｎ２）糖ペプチド（１００ｍｅｒ合成糖ペプチド）を２０時間刺激した、マウス単球由来樹状細胞によるサイトカイン生成。
【図１１】対照又はデクチン−２−遮断抗体で前処置し、次いで、異なるグリカン密度（３５／６５／１００％）を有する可溶性又はプレート結合糖ペプチド（２０−／２５０ｍｅｒ合成糖ペプチド）で２０時間刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるサイトカイン生成。
【図１２Ａ】糖ペプチド−抗体コンジュゲートの生成を示す概略図、及びマンノビオース糖ペプチド−抗体コンジュゲートがＴＡＭを活性化し、デクチン−２を介して腫瘍細胞の取り込みを刺激することを示すデータ。
【図１２Ｂ】糖ペプチド−抗体コンジュゲートの生成を示す概略図、及びマンノビオース糖ペプチド−抗体コンジュゲートがＴＡＭを活性化し、デクチン−２を介して腫瘍細胞の取り込みを刺激することを示すデータ。
【図１２Ｃ】糖ペプチド−抗体コンジュゲートの生成を示す概略図、及びマンノビオース糖ペプチド−抗体コンジュゲートがＴＡＭを活性化し、デクチン−２を介して腫瘍細胞の取り込みを刺激することを示すデータ。
【図１３】抗Ｅｐｃａｍ抗体をＢＣＮ−ＮＨＳ試薬で標識し（１０×又は２５×ＢＣＮ：抗体）、マンノビオース糖ペプチド（６５％  １００ｍｅｒ）にコンジュゲートして、抗体−糖ペプチドコンジュゲート（αＥｐＭ）を調製した。ＰＤＡＣ  ＴＡＭをデクチン−２遮断抗体（αＤ２）で前処置し又は前処置せず、次いで、プレート結合（左上パネル）又は可溶性（右上及び下パネル）抗体コンジュゲートで単独で、又はカルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル（carboxyfluorescein succinimidyl ester、ＣＦＳＥ）標識ＰＤＡＣ細胞との共培養（下パネル、「Ｍｏ腫瘍共培養物」）で刺激した。サイトカイン生成を２０時間後に評価した。
【図１４】抗Ｅｐｃａｍ抗体をＢＣＮ−ＮＨＳ試薬で標識し（１０×又は２５×  ＢＣＮ：抗体）、マンノビオース糖ペプチド（６５％  １００ｍｅｒ）にコンジュゲートして、抗体−糖ペプチドコンジュゲート（αＥｐＭ）を調製した。ＰＤＡＣ  ＴＡＭをデクチン−２遮断抗体（αデクチン−２）で前処置し、又は前処置せず、次いで、ＣＦＳＥ標識したＰＤＡＣ細胞との共培養物での可溶性抗体コンジュゲートで刺激した。２０時間後に、ＴＡＭによるＣＦＳＥの取り込みをフローサイトメトリーによって評価した。
【図１５Ａ】Ｍａｎ２糖ポリペプチドと抗体とのコンジュゲーションにより、可溶性形態で高度に活性であるデクチン−２刺激抗体コンジュゲートが生じることを示すデータ。（図１５Ａ）リシンコンジュゲーション（ＤＡＲ約１〜２；２．５μｇ／ｍｌ抗体濃度）＋／−αデクチン−２（２０μｇ／ｍＬ）により６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒに結合されたαＥｐＣＡＭ抗体、又は同等量の非コンジュゲート（unconjugated）αＥｐＣＡＭ及びＭａｎ２ポリマーの混合物で１８時間刺激した、ＧＭ−ＣＳＦ前処置単球によるサイトカイン生成。（図１５Ｂ）同じαＥｐＣＡＭ−Ｍａｎ２コンジュゲート又は成分混合物で刺激したＧＭ−ＣＳＦ前処置単球の用量応答曲線。
【図１５Ｂ】Ｍａｎ２糖ポリペプチドと抗体とのコンジュゲーションにより、可溶性形態で高度に活性であるデクチン−２刺激抗体コンジュゲートが生じることを示すデータ。（図１５Ａ）リシンコンジュゲーション（ＤＡＲ約１〜２；２．５μｇ／ｍｌ抗体濃度）＋／−αデクチン−２（２０μｇ／ｍＬ）により６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒに結合されたαＥｐＣＡＭ抗体、又は同等量の非コンジュゲート（unconjugated）αＥｐＣＡＭ及びＭａｎ２ポリマーの混合物で１８時間刺激した、ＧＭ−ＣＳＦ前処置単球によるサイトカイン生成。（図１５Ｂ）同じαＥｐＣＡＭ−Ｍａｎ２コンジュゲート又は成分混合物で刺激したＧＭ−ＣＳＦ前処置単球の用量応答曲線。
【図１６】異なる抗体及び様々な長さ（２５残基まで）のＭａｎ２ポリマーを使用して調製された抗体コンジュゲートが、デクチン−２を介して細胞を刺激することができることを示すデータ。
【図１７】デクチン−２アゴニストは、他の免疫刺激剤と相乗作用する。この図は、フルフルマン＋／−示された剤で２４時間処置したマウスＰＤＡＣ  ＴＡＭによる共刺激分子発現を示す。
【図１８】デクチン−２アゴニストは、他の免疫刺激剤と相乗作用する。この図は、フルフルマン＋／−示された剤で２４時間処置したマウスＰＤＡＣ  ＴＡＭによるサイトカイン及び一酸化窒素の生成を示す。
【図１９】デクチン−２アゴニストは、他の免疫刺激剤と相乗作用する。この図は、マンナン（ｑ２ｄ  ｉ．ｖ．）単独で又はＩＦＮγ（ｑ２ｄ  ｉ．ｖ．）若しくは示された抗体（ｑ３ｄ  ｉ．ｐ．）と組み合わせて処置し、当該処置は腫瘍移植後８日目又は９日目に開始した、ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ保有マウスの腫瘍増殖曲線を示す。
【図２０】対象多価剤：腫瘍内注射により、「Ｍａｎ２−Ｔ７８５」と呼ばれる、免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７／８アゴニストＴ７８５）にコンジュゲートされたデクチン−２のアゴニスト（この場合、６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）で処置したか、又はＭａｎ２のみ（「Ｍａｎ２」）で処置した、膵臓癌を有するマウス（ＰＤＡＣマウス）のデータ。
【図２１−１】デクチン−２アゴニスト（この場合、６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７／８アゴニストＴ７８５）にコンジュゲートすることにより、可溶性形態で細胞を強く刺激する糖ペプチドコンジュゲート（Ｍａｎ２−Ｔ７８５）が得られることを示すデータ。
【図２１−２】デクチン−２アゴニスト（この場合、６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７／８アゴニストＴ７８５）にコンジュゲートすることにより、可溶性形態で細胞を強く刺激する糖ペプチドコンジュゲート（Ｍａｎ２−Ｔ７８５）が得られることを示すデータ。
【図２２Ａ】（図２２Ａ）Ｍａｎ２糖ペプチド−Ｔ７８５コンジュゲートの合成：図２０及び図２１で使用されるＭａｎ２−Ｔ７８５コンジュゲートを生成するために使用される合成の概略表示。Ｔ７８５構造は、第一級アミンを有するイミダゾキノリン誘導体を含む。コンジュゲートするために、Ｔ７８５をＮＨＳ−エステル（アミン反応性）及びマレイミド（チオール反応性、次いで、これをＳＡＴＡと反応させる）を含むヘテロ二機能架橋剤であるＳＭＣＣと反応させることができる。（図２２Ｂ）Ｔ７８５及びＳＭＣＣ修飾Ｔ７８５を示す。（図２２Ｃ）図２２Ａの合成は、示したＲ８４８とのコンジュゲーションに使用することもできる。
【図２２Ｂ】（図２２Ａ）Ｍａｎ２糖ペプチド−Ｔ７８５コンジュゲートの合成：図２０及び図２１で使用されるＭａｎ２−Ｔ７８５コンジュゲートを生成するために使用される合成の概略表示。Ｔ７８５構造は、第一級アミンを有するイミダゾキノリン誘導体を含む。コンジュゲートするために、Ｔ７８５をＮＨＳ−エステル（アミン反応性）及びマレイミド（チオール反応性、次いで、これをＳＡＴＡと反応させる）を含むヘテロ二機能架橋剤であるＳＭＣＣと反応させることができる。（図２２Ｂ）Ｔ７８５及びＳＭＣＣ修飾Ｔ７８５を示す。（図２２Ｃ）図２２Ａの合成は、示したＲ８４８とのコンジュゲーションに使用することもできる。
【図２２Ｃ】（図２２Ａ）Ｍａｎ２糖ペプチド−Ｔ７８５コンジュゲートの合成：図２０及び図２１で使用されるＭａｎ２−Ｔ７８５コンジュゲートを生成するために使用される合成の概略表示。Ｔ７８５構造は、第一級アミンを有するイミダゾキノリン誘導体を含む。コンジュゲートするために、Ｔ７８５をＮＨＳ−エステル（アミン反応性）及びマレイミド（チオール反応性、次いで、これをＳＡＴＡと反応させる）を含むヘテロ二機能架橋剤であるＳＭＣＣと反応させることができる。（図２２Ｂ）Ｔ７８５及びＳＭＣＣ修飾Ｔ７８５を示す。（図２２Ｃ）図２２Ａの合成は、示したＲ８４８とのコンジュゲーションに使用することもできる。
【図２３Ａ】（図２３Ａ）免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ２アゴニスト）にコンジュゲートされたデクチン−２アゴニスト（この場合、６５％Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を有する多価剤を使用し、可溶性形態で活性である糖ペプチドコンジュゲートを生じることに関するデータ。（図２３Ｂ）図２３Ａに使用されるコンジュゲートを生成するために使用される反応スキーム。（図２３Ｃ）Ｎ−α−パルミトイル−Ｓ−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２ＲＳ）−プロピル］−Ｌシステイン、パルミトイル−Ｃｙｓ（（ＲＳ）−２，３−ジ（パルミトイルオキシ）−プロピル）−ＯＨ（Ｐａｍ３Ｃｙｓ−ＯＨ）の概略図である。
【図２３Ｂ】（図２３Ａ）免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ２アゴニスト）にコンジュゲートされたデクチン−２アゴニスト（この場合、６５％Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を有する多価剤を使用し、可溶性形態で活性である糖ペプチドコンジュゲートを生じることに関するデータ。（図２３Ｂ）図２３Ａに使用されるコンジュゲートを生成するために使用される反応スキーム。（図２３Ｃ）Ｎ−α−パルミトイル−Ｓ−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２ＲＳ）−プロピル］−Ｌシステイン、パルミトイル−Ｃｙｓ（（ＲＳ）−２，３−ジ（パルミトイルオキシ）−プロピル）−ＯＨ（Ｐａｍ３Ｃｙｓ−ＯＨ）の概略図である。
【図２３Ｃ】（図２３Ａ）免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ２アゴニスト）にコンジュゲートされたデクチン−２アゴニスト（この場合、６５％Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を有する多価剤を使用し、可溶性形態で活性である糖ペプチドコンジュゲートを生じることに関するデータ。（図２３Ｂ）図２３Ａに使用されるコンジュゲートを生成するために使用される反応スキーム。（図２３Ｃ）Ｎ−α−パルミトイル−Ｓ−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２ＲＳ）−プロピル］−Ｌシステイン、パルミトイル−Ｃｙｓ（（ＲＳ）−２，３−ジ（パルミトイルオキシ）−プロピル）−ＯＨ（Ｐａｍ３Ｃｙｓ−ＯＨ）の概略図である。
【図２４】デクチン−２アゴニスト（この場合、αデクチン−２抗体）が免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７／８アゴニスト、Ｔ７８５）がコンジュゲートされた場合に多価剤が活性であり、相乗効果を示し、可溶性形態で細胞を強く活性化するαデクチン−２抗体コンジュゲートが生じることを示すデータ。
【図２５】ＧＭ−ＣＳＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）で前処置した後、可溶性フルフルマン（２０μｇ／ｍｌ）又はプレート結合マンナン（１０μｇ／ウェル）で２４時間刺激した、ヒト単球によるサイトカイン生成及び共刺激分子発現を示す。
【図２６Ａ】デクチン−２刺激剤は、Ｔ細胞媒介抗腫瘍免疫を介してＰＤＡＣの進行を阻害する。示されるように処置したｓ．ｃ．ＬＭＰ保有マウスの腫瘍増殖曲線。（図２６Ａ、図２６Ｂ）腫瘍を７〜１０日間増殖させた後、マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ；２５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｔ．ｑ３ｄ×２）＋／−デクチン−２遮断抗体又は対照抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置した。（図２６Ｃ、図２６Ｄ）マンナン処置（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×３ｗｋ）中のＣＤ４又はＣＤ８枯渇（図２６Ｃ）又はチェックポイント遮断抗体（図２６Ｄ）（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ３ｄ）により処置したマウス。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定（Ａ、Ｂ）又はテューキーの検定（Ｃ、Ｄ）を用いた二元配置分散分析による。
【図２６Ｂ】デクチン−２刺激剤は、Ｔ細胞媒介抗腫瘍免疫を介してＰＤＡＣの進行を阻害する。示されるように処置したｓ．ｃ．ＬＭＰ保有マウスの腫瘍増殖曲線。（図２６Ａ、図２６Ｂ）腫瘍を７〜１０日間増殖させた後、マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ；２５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｔ．ｑ３ｄ×２）＋／−デクチン−２遮断抗体又は対照抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置した。（図２６Ｃ、図２６Ｄ）マンナン処置（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×３ｗｋ）中のＣＤ４又はＣＤ８枯渇（図２６Ｃ）又はチェックポイント遮断抗体（図２６Ｄ）（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ３ｄ）により処置したマウス。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定（Ａ、Ｂ）又はテューキーの検定（Ｃ、Ｄ）を用いた二元配置分散分析による。
【図２６Ｃ】デクチン−２刺激剤は、Ｔ細胞媒介抗腫瘍免疫を介してＰＤＡＣの進行を阻害する。示されるように処置したｓ．ｃ．ＬＭＰ保有マウスの腫瘍増殖曲線。（図２６Ａ、図２６Ｂ）腫瘍を７〜１０日間増殖させた後、マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ；２５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｔ．ｑ３ｄ×２）＋／−デクチン−２遮断抗体又は対照抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置した。（図２６Ｃ、図２６Ｄ）マンナン処置（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×３ｗｋ）中のＣＤ４又はＣＤ８枯渇（図２６Ｃ）又はチェックポイント遮断抗体（図２６Ｄ）（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ３ｄ）により処置したマウス。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定（Ａ、Ｂ）又はテューキーの検定（Ｃ、Ｄ）を用いた二元配置分散分析による。
【図２６Ｄ】デクチン−２刺激剤は、Ｔ細胞媒介抗腫瘍免疫を介してＰＤＡＣの進行を阻害する。示されるように処置したｓ．ｃ．ＬＭＰ保有マウスの腫瘍増殖曲線。（図２６Ａ、図２６Ｂ）腫瘍を７〜１０日間増殖させた後、マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ；２５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｔ．ｑ３ｄ×２）＋／−デクチン−２遮断抗体又は対照抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置した。（図２６Ｃ、図２６Ｄ）マンナン処置（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×３ｗｋ）中のＣＤ４又はＣＤ８枯渇（図２６Ｃ）又はチェックポイント遮断抗体（図２６Ｄ）（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ３ｄ）により処置したマウス。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定（Ａ、Ｂ）又はテューキーの検定（Ｃ、Ｄ）を用いた二元配置分散分析による。
【図２７Ａ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を駆動し、ＴＡＭをデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図２７Ａ、図２７Ｂ）マウス（図２７Ａ）又はヒト（図２７Ｂ）の単球によるデクチン−２発現を、ＧＭ−ＣＳＦを補充した培地又は補充していない培地で１８時間培養した。（Ｃ〜Ｅ）３Ｔ３線維芽細胞馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ（図２７Ｃ）若しくはＬＭＰ腫瘍馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ中和抗体（図２７Ｄ）で前処置したマウス単球による、又は示されるように前処置したヒト単球（図２７Ｅ）による、ＴＮＦα生成。（図２７Ｆ）マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ）及び示された抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置したＬＭＰ保有マウス。（図２７Ｇ）ヒト癌組織における、デクチン−２の発現と示された遺伝子との間の相関を示すヒートマップ。遺伝子発現データをＴＣＧＡから取得し、解析し、スピアマンの相関係数を得た。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、スチューデントのｔ検定（Ｂ）による又はテューキー（Ｆ）の事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２７Ｂ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を駆動し、ＴＡＭをデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図２７Ａ、図２７Ｂ）マウス（図２７Ａ）又はヒト（図２７Ｂ）の単球によるデクチン−２発現を、ＧＭ−ＣＳＦを補充した培地又は補充していない培地で１８時間培養した。（Ｃ〜Ｅ）３Ｔ３線維芽細胞馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ（図２７Ｃ）若しくはＬＭＰ腫瘍馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ中和抗体（図２７Ｄ）で前処置したマウス単球による、又は示されるように前処置したヒト単球（図２７Ｅ）による、ＴＮＦα生成。（図２７Ｆ）マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ）及び示された抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置したＬＭＰ保有マウス。（図２７Ｇ）ヒト癌組織における、デクチン−２の発現と示された遺伝子との間の相関を示すヒートマップ。遺伝子発現データをＴＣＧＡから取得し、解析し、スピアマンの相関係数を得た。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、スチューデントのｔ検定（Ｂ）による又はテューキー（Ｆ）の事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２７Ｃ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を駆動し、ＴＡＭをデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図２７Ａ、図２７Ｂ）マウス（図２７Ａ）又はヒト（図２７Ｂ）の単球によるデクチン−２発現を、ＧＭ−ＣＳＦを補充した培地又は補充していない培地で１８時間培養した。（Ｃ〜Ｅ）３Ｔ３線維芽細胞馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ（図２７Ｃ）若しくはＬＭＰ腫瘍馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ中和抗体（図２７Ｄ）で前処置したマウス単球による、又は示されるように前処置したヒト単球（図２７Ｅ）による、ＴＮＦα生成。（図２７Ｆ）マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ）及び示された抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置したＬＭＰ保有マウス。（図２７Ｇ）ヒト癌組織における、デクチン−２の発現と示された遺伝子との間の相関を示すヒートマップ。遺伝子発現データをＴＣＧＡから取得し、解析し、スピアマンの相関係数を得た。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、スチューデントのｔ検定（Ｂ）による又はテューキー（Ｆ）の事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２７Ｄ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を駆動し、ＴＡＭをデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図２７Ａ、図２７Ｂ）マウス（図２７Ａ）又はヒト（図２７Ｂ）の単球によるデクチン−２発現を、ＧＭ−ＣＳＦを補充した培地又は補充していない培地で１８時間培養した。（Ｃ〜Ｅ）３Ｔ３線維芽細胞馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ（図２７Ｃ）若しくはＬＭＰ腫瘍馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ中和抗体（図２７Ｄ）で前処置したマウス単球による、又は示されるように前処置したヒト単球（図２７Ｅ）による、ＴＮＦα生成。（図２７Ｆ）マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ）及び示された抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置したＬＭＰ保有マウス。（図２７Ｇ）ヒト癌組織における、デクチン−２の発現と示された遺伝子との間の相関を示すヒートマップ。遺伝子発現データをＴＣＧＡから取得し、解析し、スピアマンの相関係数を得た。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、スチューデントのｔ検定（Ｂ）による又はテューキー（Ｆ）の事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２７Ｅ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を駆動し、ＴＡＭをデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図２７Ａ、図２７Ｂ）マウス（図２７Ａ）又はヒト（図２７Ｂ）の単球によるデクチン−２発現を、ＧＭ−ＣＳＦを補充した培地又は補充していない培地で１８時間培養した。（Ｃ〜Ｅ）３Ｔ３線維芽細胞馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ（図２７Ｃ）若しくはＬＭＰ腫瘍馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ中和抗体（図２７Ｄ）で前処置したマウス単球による、又は示されるように前処置したヒト単球（図２７Ｅ）による、ＴＮＦα生成。（図２７Ｆ）マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ）及び示された抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置したＬＭＰ保有マウス。（図２７Ｇ）ヒト癌組織における、デクチン−２の発現と示された遺伝子との間の相関を示すヒートマップ。遺伝子発現データをＴＣＧＡから取得し、解析し、スピアマンの相関係数を得た。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、スチューデントのｔ検定（Ｂ）による又はテューキー（Ｆ）の事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２７Ｆ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を駆動し、ＴＡＭをデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図２７Ａ、図２７Ｂ）マウス（図２７Ａ）又はヒト（図２７Ｂ）の単球によるデクチン−２発現を、ＧＭ−ＣＳＦを補充した培地又は補充していない培地で１８時間培養した。（Ｃ〜Ｅ）３Ｔ３線維芽細胞馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ（図２７Ｃ）若しくはＬＭＰ腫瘍馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ中和抗体（図２７Ｄ）で前処置したマウス単球による、又は示されるように前処置したヒト単球（図２７Ｅ）による、ＴＮＦα生成。（図２７Ｆ）マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ）及び示された抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置したＬＭＰ保有マウス。（図２７Ｇ）ヒト癌組織における、デクチン−２の発現と示された遺伝子との間の相関を示すヒートマップ。遺伝子発現データをＴＣＧＡから取得し、解析し、スピアマンの相関係数を得た。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、スチューデントのｔ検定（Ｂ）による又はテューキー（Ｆ）の事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２７Ｇ】ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を駆動し、ＴＡＭをデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図２７Ａ、図２７Ｂ）マウス（図２７Ａ）又はヒト（図２７Ｂ）の単球によるデクチン−２発現を、ＧＭ−ＣＳＦを補充した培地又は補充していない培地で１８時間培養した。（Ｃ〜Ｅ）３Ｔ３線維芽細胞馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ（図２７Ｃ）若しくはＬＭＰ腫瘍馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ中和抗体（図２７Ｄ）で前処置したマウス単球による、又は示されるように前処置したヒト単球（図２７Ｅ）による、ＴＮＦα生成。（図２７Ｆ）マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ）及び示された抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置したＬＭＰ保有マウス。（図２７Ｇ）ヒト癌組織における、デクチン−２の発現と示された遺伝子との間の相関を示すヒートマップ。遺伝子発現データをＴＣＧＡから取得し、解析し、スピアマンの相関係数を得た。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、スチューデントのｔ検定（Ｂ）による又はテューキー（Ｆ）の事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２８Ａ】ＫＲＡＳによって駆動される腫瘍は、ＧＭ−ＣＳＦを生成し、デクチン−２免疫療法に応答する。（図２８Ａ）野生型ＫＲＡＳ（wild-type、ＷＴ）又は癌細胞株エンサイクロペディア（Encyclopedia）から得たコドン１２、１３、又は６１（mutation、Ｍｕｔ）における変異を有するヒト腫瘍細胞株のＧＭ−ＣＳＦ発現値。箱ひげ図は、中央値及び四分位数範囲を示す。＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、マン・ホイットニーのＵ検定による。（図２８Ｂ）２４時間培養後の腫瘍上清中のＧＭ−ＣＳＦレベルを示す。（図２８Ｃ、図２８Ｄ）マンナン（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ）で処理したｓ．ｃ．２３８Ｎ１又はＭＯＣ２腫瘍を有するマウスの腫瘍増殖曲線。３／５処理したマウスは、２３８Ｎ１腫瘍が治癒した。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２８Ｂ】ＫＲＡＳによって駆動される腫瘍は、ＧＭ−ＣＳＦを生成し、デクチン−２免疫療法に応答する。（図２８Ａ）野生型ＫＲＡＳ（wild-type、ＷＴ）又は癌細胞株エンサイクロペディア（Encyclopedia）から得たコドン１２、１３、又は６１（mutation、Ｍｕｔ）における変異を有するヒト腫瘍細胞株のＧＭ−ＣＳＦ発現値。箱ひげ図は、中央値及び四分位数範囲を示す。＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、マン・ホイットニーのＵ検定による。（図２８Ｂ）２４時間培養後の腫瘍上清中のＧＭ−ＣＳＦレベルを示す。（図２８Ｃ、図２８Ｄ）マンナン（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ）で処理したｓ．ｃ．２３８Ｎ１又はＭＯＣ２腫瘍を有するマウスの腫瘍増殖曲線。３／５処理したマウスは、２３８Ｎ１腫瘍が治癒した。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２８Ｃ】ＫＲＡＳによって駆動される腫瘍は、ＧＭ−ＣＳＦを生成し、デクチン−２免疫療法に応答する。（図２８Ａ）野生型ＫＲＡＳ（wild-type、ＷＴ）又は癌細胞株エンサイクロペディア（Encyclopedia）から得たコドン１２、１３、又は６１（mutation、Ｍｕｔ）における変異を有するヒト腫瘍細胞株のＧＭ−ＣＳＦ発現値。箱ひげ図は、中央値及び四分位数範囲を示す。＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、マン・ホイットニーのＵ検定による。（図２８Ｂ）２４時間培養後の腫瘍上清中のＧＭ−ＣＳＦレベルを示す。（図２８Ｃ、図２８Ｄ）マンナン（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ）で処理したｓ．ｃ．２３８Ｎ１又はＭＯＣ２腫瘍を有するマウスの腫瘍増殖曲線。３／５処理したマウスは、２３８Ｎ１腫瘍が治癒した。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２８Ｄ】ＫＲＡＳによって駆動される腫瘍は、ＧＭ−ＣＳＦを生成し、デクチン−２免疫療法に応答する。（図２８Ａ）野生型ＫＲＡＳ（wild-type、ＷＴ）又は癌細胞株エンサイクロペディア（Encyclopedia）から得たコドン１２、１３、又は６１（mutation、Ｍｕｔ）における変異を有するヒト腫瘍細胞株のＧＭ−ＣＳＦ発現値。箱ひげ図は、中央値及び四分位数範囲を示す。＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、マン・ホイットニーのＵ検定による。（図２８Ｂ）２４時間培養後の腫瘍上清中のＧＭ−ＣＳＦレベルを示す。（図２８Ｃ、図２８Ｄ）マンナン（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ）で処理したｓ．ｃ．２３８Ｎ１又はＭＯＣ２腫瘍を有するマウスの腫瘍増殖曲線。３／５処理したマウスは、２３８Ｎ１腫瘍が治癒した。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【図２９Ａ】免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７アゴニスト７８４）にコンジュゲートされたデクチン−２のアゴニスト（この場合、６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を含む対象多価剤（「Ｍａｎ２−７８４コンジュゲート」と呼ばれる）と接触させた、若しくは７８４及びＭａｎ２の非コンジュゲート混合物（「Ｍａｎ２＋７８４混合物」）と接触させた、又は対照（「Ｍａｎ２−７８４コンジュゲート」の混合物＋デクチン−２を遮断し、それにより、コンジュゲートによって提供されるデクチン−２刺激を無効にする抗体）と接触させた、ＧＭ−ＣＳＦ前処置した単球によるＴＮＦαの生成を示すデータ。（図２９Ａ）Ｍａｎ２−７８６コンジュゲートと呼ばれる、免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７／８アゴニスト７８６）にコンジュゲートされたデクチン−２のアゴニスト（この場合、６５％Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を含む対象多価剤と接触させた、ＧＭ−ＣＳＦ前処置した単球によるＴＮＦαの生成を示すデータ。（図２９Ｂ）
【図２９Ｂ】免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７アゴニスト７８４）にコンジュゲートされたデクチン−２のアゴニスト（この場合、６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を含む対象多価剤（「Ｍａｎ２−７８４コンジュゲート」と呼ばれる）と接触させた、若しくは７８４及びＭａｎ２の非コンジュゲート混合物（「Ｍａｎ２＋７８４混合物」）と接触させた、又は対照（「Ｍａｎ２−７８４コンジュゲート」の混合物＋デクチン−２を遮断し、それにより、コンジュゲートによって提供されるデクチン−２刺激を無効にする抗体）と接触させた、ＧＭ−ＣＳＦ前処置した単球によるＴＮＦαの生成を示すデータ。（図２９Ａ）Ｍａｎ２−７８６コンジュゲートと呼ばれる、免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７／８アゴニスト７８６）にコンジュゲートされたデクチン−２のアゴニスト（この場合、６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を含む対象多価剤と接触させた、ＧＭ−ＣＳＦ前処置した単球によるＴＮＦαの生成を示すデータ。（図２９Ｂ）
【図３０】図２９Ａ〜図２９Ｂの多価剤の構造を示す概略図。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
Ｉ．導入部
癌及び／又は感染性疾患の処置のための方法、組成物、及びキットが本明細書に記載される。方法、組成物、及びキットのうちのいくつかは、デクチン−２刺激は驚くべきことに癌の処置に有効であるとの本発明者らによる発見に基づくものである。デクチン−２刺激は、感染性疾患を処置するためのワクチン及び／又は補助剤にも使用することができる。例えば、本発明者らは、骨髄細胞におけるデクチン−２シグナル伝達の刺激（樹状細胞及びマクロファージなどの腫瘍関連骨髄細胞）は、癌に対する免疫応答を増強／刺激することができることを発見した。
【００１０】
上記で概説したように、（ａ）デクチン−２に結合し、デクチン−２シグナル伝達を刺激する剤と、（ｂ）抗体及び／又は免疫調節剤と、を含み、（ａ）及び（ｂ）が互いにコンジュゲートされている、多価デクチン−２刺激剤が提供される。いくつかの場合では、（ａ）は、抗デクチン−２抗体又はその抗原結合領域である。いくつかの場合では、（ａ）は、デクチン−２に結合するマンノビオース糖ポリペプチド（例えば、いくつかの場合では２０〜２５０個のアミノ酸長である、ムチン様ペプチドなどのペプチドを含むマンノビオース糖ポリペプチド）である。いくつかの場合では、マンノビオース糖ポリペプチドは、少なくとも２５％のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、（ｂ）は、ＴＬＲに対する刺激性リガンド（例えば、Ｔ７８５又は７８６などのＴＬＲ７／８アゴニスト、７８４などのＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、Ｐａｍ３ＣｙｓなどのＴＬＲ２アゴニストなど）である。いくつかの場合では、（ａ）はマンノビオース糖ポリペプチドを含み、（ｂ）はＴＬＲアゴニストである。
【００１１】
いくつかの場合では、（ａ）デクチン−２に結合し、デクチン−２シグナル伝達を刺激する剤と、（ｂ）抗体及び免疫調節剤と、を含み、（ａ）及び（ｂ）が互いにコンジュゲートされている、多価デクチン−２刺激剤が提供される（例えば、多価デクチン−２刺激剤は、例えば１つ以上のリンカーを介して、抗体及び／又は免疫調節剤にコンジュゲートされ得る）。いくつかの場合では、（ａ）は、デクチン−２に結合するマンノビオース糖ポリペプチド（例えば、いくつかの場合では２０〜２５０アミノ酸長である、ムチン様ペプチドなどのペプチドを含むマンノビオース糖ポリペプチド）である。いくつかの場合では、マンノビオース糖ポリペプチドは、少なくとも２５％のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、免疫調節剤は、ＴＬＲに対する刺激性リガンド（例えば、Ｔ７８５又は７８６などのＴＬＲ７／８アゴニスト、７８４などのＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、Ｐａｍ３ＣｙｓなどのＴＬＲ２アゴニストなど）である。いくつかの場合では、（ａ）はマンノビオース糖ポリペプチドを含み、免疫調節剤（ｂ）はＴＬＲアゴニストである。いくつかの場合では、抗体は、癌抗原に結合する。いくつかの場合では、抗体は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４４、ＣＤ４７、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ９６、ＣＤ９７、ＣＤ９９、ＣＤ１２３、ＣＤ２７９（ＰＤ−１）、ＣＤ２７４（ＰＤ−Ｌ１）、ＥｐＣａｍ、ＥＧＦＲ、１７−１Ａ、ＨＥＲ２、ＣＤ１１７、Ｃ−Ｍｅｔ、ＰＴＨＲ２、ＨＡＶＣＲ２（ＴＩＭ３）、及びＳＩＲＰＡからなる群から選択される癌抗原に結合する。いくつかの場合では、抗体は、ＨＥＲ２癌抗原と結合する。
【００１２】
いくつかの場合では、（ａ）はマンノビオース糖ポリペプチドを含み、免疫調節剤はＴＬＲアゴニストであり、抗体は癌抗原に結合する。いくつかの場合では、（ａ）はマンノビオース糖ポリペプチドを含み、免疫調節剤はＴＬＲアゴニストであり、抗体は癌抗原に結合する。いくつかの場合では、（ａ）はマンノビオース糖ポリペプチドを含み、免疫調節剤は、ＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、又はＴＬＲ７／８アゴニストであり、抗体は癌抗原に結合する。いくつかの場合では、（ａ）はマンノビオース糖ポリペプチドを含み、免疫調節剤はＴ７８５、７８４、又は７８６であり、抗体は癌抗原に結合する。
【００１３】
いくつかの場合では、（ａ）はマンノビオース糖ポリペプチドを含み、免疫調節剤はＴＬＲアゴニストであり、抗体は癌抗原に結合する。いくつかの場合では、（ａ）はマンノビオース糖ポリペプチドを含み、免疫調節剤はＴＬＲアゴニストであり、抗体はＨＥＲ２癌抗原に結合する。いくつかの場合では、（ａ）はマンノビオース糖ポリペプチドを含み、免疫調節剤はＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、又はＴＬＲ７／８アゴニストであり、抗体はＨＥＲ２癌抗原に結合する。いくつかの場合では、（ａ）はマンノビオース糖ポリペプチドを含み、免疫調節剤はＴ７８５、７８４、又は７８６であり、抗体はＨＥＲ２癌抗原に結合する。
【００１４】
癌及び／又は感染性疾患を有する個体を処置する方法も提供される。このような方法は、有効量のデクチン−２刺激組成物を個体に投与することを含むことができる。いくつかの場合では、デクチン−２刺激組成物は、（例えば上記のような）デクチン−２刺激糖ポリマーを含む。いくつかの場合では、デクチン−２刺激組成物は、例えば上記のような多価デクチン−２刺激剤を含む。抗原提示細胞（ＡＰＣ）を刺激する方法も提供され、このような方法は、インビトロ又はエクスビボで、ＡＰＣをデクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）を含むデクチン−２刺激組成物と、ＡＰＣにおけるデクチン−２シグナル伝達を増強するのに十分な用量及び時間で接触させて、それにより、刺激されたＡＰＣを生じさせることを含むことができる。いくつかの場合では、デクチン−２刺激組成物は、例えば上記のような多価デクチン−２刺激剤を含む。
【００１５】
本発明の方法及び組成物を記載する前に、本発明は、記載される特定の方法又は組成物に限定されず、したがって、当然に変わり得ることを理解されたい。本発明の範囲は付随する特許請求の範囲によってのみ限定されるので、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を記載する目的のためだけのものであり、限定することを意図しないことも理解されたい。
【００１６】
値の範囲が提供される場合、文脈上、別段の明確な指示がない限り、その範囲の上限及び下限の間の、下限の単位の１０分の１までの各中間値も具体的に開示されていることを理解されたい。記載された範囲内の任意の記載された値又は中間値とその記載された範囲内の任意の他の記載された値又は中間値との間の任意のより小さい値は、本発明に包含される。これらのより小さい範囲の上限及び下限は、独立して、その範囲内に含まれても除外されてもよく、一方若しくは両方の限界がより小さい範囲に含まれるか又はいずれも含まれない各範囲も本発明内に包含され、記載された範囲内の任意の具体的に除外される限界を享受する。記載された範囲が限界のうちの一方又は両方を含む場合、それらの含まれる限界の一方又は両方を除外する範囲もまた本発明に含まれる。
【００１７】
別段定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと同様又は同等の任意の方法及び材料を本発明の実施又は試験に使用することができるが、いくつかの潜在的かつ好ましい方法及び材料がここに記載される。本明細書で言及される全ての刊行物は、当該刊行物が引用される方法及び／又は材料と関連する方法及び／又は材料を開示及び記載するために、参照により本明細書に組み込まれる。本開示は、矛盾が存在する限り、組み込まれた刊行物のいずれの開示にも優先することが理解される。
【００１８】
本開示を読んだ際に当業者には明らかとなるように、本明細書に記載及び例示される個々の実施形態の各々は、本発明の範囲又は趣旨から逸脱することなく、他のいくつかの実施形態のいずれかの特徴から容易に分離する又はそれらと組み合わせることができる別個の構成要素及び特徴を有する。任意の記載された方法は、記載された事象の順序で又は論理的に可能な任意の他の順序で行うことができる。
【００１９】
本明細書及び付随する特許請求の範囲で使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈上、別段の明確な指示がない限り、複数の指示対象を含むことに留意されたい。したがって、例えば、「細胞」についての言及は、複数のそのような細胞を含み、「ペプチド」についての言及は、１つ以上のペプチド及びその等価物、例えば当業者に既知のポリペプチドなどを参照することを含む。
【００２０】
本明細書で論じられる刊行物は、本出願の出願日前のそれらの開示に対してのみ提供される。本明細書では、先行発明のために、本発明がそのような刊行物に先行する資格を持たないことを認めると解釈されるべきではない。更に、提供される刊行物の日付は、実際の刊行物日付とは異なる場合があり、これを独立して確認する必要があり得る。
【００２１】
ＩＩ．定義
「特異的結合」、「特異的に結合する」などの用語は、溶液又は反応混合物中の他の分子又は部分に対する、ある分子への優先的な非共有又は共有結合を指す（例えば、抗体は、他の利用可能なポリペプチドに対して、特定のポリペプチド又はエピトープに特異的に結合する）。例えば、抗デクチン−２抗体は、他の利用可能な抗原に対して、デクチン−２に優先的に結合する。いくつかの実施形態では、特異的に結合する別の分子に対する、ある分子の親和性は、１０−５Ｍ以下（例えば、１０−６Ｍ以下、１０−７Ｍ以下、１０−８Ｍ以下、１０−９Ｍ以下、１０−１０Ｍ以下、１０−１１Ｍ以下、１０−１２Ｍ以下、１０−１３Ｍ以下、１０−１４Ｍ以下、１０−１５Ｍ以下、又は１０−１６Ｍ以下）のＫＤ（解離定数）によって特徴付けられる。「親和性」とは、結合の強度を指す。例えば、結合親和性の増加は、より低いＫＤによって示され得る。いくつかの場合では、結合親和性の増加は、より低いＫＤと相関する。
【００２２】
本明細書で使用する場合、「特異的結合メンバー」という用語は、特異的結合対のメンバー（すなわち、２つの分子、通常は２つの異なる分子、ここで、分子のうちの１つ、例えば、第１の特異的結合メンバーが、非共有結合的手段を介して、他の分子、例えば、第２の特異的結合メンバーに特異的に結合する）を指す。
【００２３】
本明細書で使用する場合、「特異的結合剤」という用語は、生体分子に特異的に結合する任意の剤（例えば、核酸マーカー分子、タンパク質マーカー分子などのマーカー）を指す。いくつかの場合では、マーカー分子（例えば、樹状細胞マーカー分子）のための「特異的結合剤」が使用される。特異的結合剤は、任意の種類の分子であり得る。いくつかの場合では、特異的結合剤は、抗体又はその断片である。いくつかの場合では、特異的結合剤は、核酸プローブ（例えば、ＲＮＡプローブ、ＤＮＡプローブ、ＲＮＡ／ＤＮＡプローブ、修飾された核酸プローブ、例えば、ロックド（locked）核酸（locked nucleic acid、ＬＮＡ）プローブ、モルホリノプローブなど、など）である。
【００２４】
本明細書で使用する場合、「マーカー分子」は、確定的である必要はない（すなわち、マーカーは、細胞を特定の種類であるとして確定的に特徴付ける必要はない）。例えば、細胞によるマーカー分子の発現は、細胞が特定の細胞種であることを示す（すなわち、示唆する）ことができる。例えば、３つの細胞種（Ａ種、Ｂ種、及びＣ種）が特定のマーカー分子（例えば、特定のｍＲＮＡ、特定のタンパク質など）を発現する場合、細胞によるそのマーカー分子の発現は、細胞がＡ種の細胞であると確定的に決定するために、必ずしもそれ自体で使用され得ない。しかしながら、そのようなマーカーの発現は、細胞がＡ種の細胞であることを示唆することができる。いくつかの場合では、そのようなマーカーの発現は、他の証拠と組み合わせて、細胞がＡ種の細胞であることを確定的に示すことができる。別の実例として、特定の細胞種が、２つ以上の特定のマーカー分子（例えば、ｍＲＮＡ、タンパク質、それらの組み合わせなど）を発現することが既知である場合、細胞による、２つ以上の特定のマーカー分子のうちの１つの発現は、細胞が問題の特定の種であることを示唆し得るが、確定的ではない。そのような場合では、マーカーはマーカー分子とみなされる。
【００２５】
「抗体」とは、抗原に特異的に結合し、当該抗原を認識する、免疫グロブリン遺伝子又はその断片に由来する抗原結合領域（相補性決定領域（complementarity determining region、ＣＤＲ）を含む）を含むポリペプチドを指す。認識された免疫グロブリン遺伝子は、κ、λ、α、γ、δ、ε、及びμ（ｍｕ）定常領域遺伝子、並びに多数の免疫グロブリン可変領域遺伝子を含む。軽鎖は、κ又はλのいずれかとして分類される。重鎖は、γ、μ、α、δ、又はεとして分類され、これらは次に、それぞれ、免疫グロブリンクラスＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥを定義する。ＩｇＧ抗体は、４つのペプチド鎖からなる約１５０ｋＤａの巨大分子である。ＩｇＧ抗体は、約５０ｋＤａの２つの同一のクラスγ重鎖及び約２５ｋＤａの２つの同一の軽鎖、したがって、四量体の第四級構造を含む。２つの重鎖は、互いに結合し、ジスルフィド結合によってそれぞれ軽鎖に連結される。得られた四量体は、２つの同一の半体を有し、これは共にＹ字状形状を形成する。フォークの各端部は、同一の抗原結合部位を含む。ヒトには４つのＩｇＧサブクラス（ＩｇＧ１、２、３、及び４）が存在し、血清中のそれらの存在量（ＩｇＧ１が最も豊富である）に従って命名される。典型的には、抗体の抗原結合領域は、結合の特異性及び親和性において最も重要である。
【００２６】
例示的な免疫グロブリン（抗体）構造単位は、四量体を含む。各四量体は、２つの同一の対のポリペプチド鎖からなり、各対は、１つの「軽」鎖（約２５ｋＤ）及び１つの「重」鎖（約５０〜７０ｋＤ）を有する。各鎖のＮ末端は、抗原認識に主に関与する、約１００〜１１０個以上のアミノ酸の可変領域を画定する。用語可変軽鎖（variable light chain、ＶＬ）及び可変重鎖（variable heavy chain、ＶＨ）は、それぞれ、これらの軽鎖及び重鎖を指す。
【００２７】
抗体は、例えば、無傷の免疫グロブリンとして、又は様々なペプチダーゼによる消化によって生成される多くの十分に特徴付けられた断片として存在する。したがって、例えば、ペプシンは、ヒンジ領域中のジスルフィド結合下で抗体を消化して、それ自体がジスルフィド結合によってＶＨ−ＣＨ１に結合された軽鎖であるＦａｂの二量体、Ｆ（ａｂ）’２を生じる。Ｆ（ａｂ）’２は、ヒンジ領域中のジスルフィド結合が切断するための適度な条件下で分解され得、それにより、Ｆ（ａｂ）’２二量体はＦａｂ’モノマーに変換される。Ｆａｂ’モノマーは、本質的に、ヒンジ領域部分を有するＦａｂである（例えば、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｐａｕｌ  ｅｄ．、３ｄ  ｅｄ．１９９３を参照のこと）。様々な抗体断片は、無傷の抗体の消化に関して定義されるが、当業者は、そのような断片が化学的に又は組換えＤＮＡ方法を使用して、デノボで合成され得ることを理解するであろう。したがって、本明細書で使用される抗体という用語は、全抗体の修飾によって生成された抗体断片、若しくは組換えＤＮＡ方法（例えば、単鎖Ｆｖ）を使用してデノボで合成される抗体断片、又はファージディスプレイライブラリー（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．、Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４（１９９０）を参照のこと）を使用して同定された抗体断片も含む。
【００２８】
「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、所望の生物活性を示す（例えば、標的抗原に特異的に結合する）限り、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び抗体断片を包含する。本明細書で使用する「抗体断片」及びその全ての文法的変形は、無傷の抗体の抗原結合部位又は可変領域を含む無傷の抗体の一部として定義され、この部分は、無傷の抗体のＦｃ領域の定常重鎖ドメイン（すなわち、抗体アイソタイプに応じて、ＣＨ２、ＣＨ３、及びＣＨ４）を含まない。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片；ダイアボディ；連続したアミノ酸残基の１つの不介在（uninterrupted）配列からなる一次構造を有するポリペプチドである任意の抗体断片（本明細書では、「単鎖抗体断片」又は「単鎖ポリペプチド」と称する）が含まれ、それには限定されないが、以下が含まれる：（１）一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）分子、（２）１つの軽鎖可変ドメインのみを含む単鎖ポリペプチド、又は軽鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含み、関連する重鎖部分を含まない、その断片、（３）１つの重鎖可変ドメインのみを含む単鎖ポリペプチド、又は重鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含み、関連する軽鎖部分を含まない、その断片；（４）非ヒト種に由来する単一のＩｇドメイン、又は他の特定の単一ドメイン結合モジュールを含むナノボディ；及び（５）抗体断片から形成された多重特異性又は多価構造体。１つ以上の重鎖を含む抗体断片において、重鎖（複数可）は、無傷の抗体の非Ｆｃ領域に見出される任意の定常ドメイン配列（例えば、ＩｇＧアイソタイプ中のＣＨ１）を含むことができ、及び／又は、無傷の抗体に見出される任意のヒンジ領域配列を含むことができ、及び／又は、ヒンジ領域配列又は重鎖（複数可）の定常ドメイン配列に融合された又は位置するロイシンジッパー配列を含むことができる。いくつかの場合では、抗体（例えば、抗デクチン−２抗体）は、ヒト化抗体である（例えば、ＩｇＧ４アイソタイプヒト化抗体、例えば、キメラマウス／ヒトＩｇＧ４抗体に見られる場合がある不均質性を低減するＳ２４１Ｐ変異などのヒンジ領域中に変異を有するＩｇＧ４アイソタイプ抗体であり得る）（例えば、Ａｎｇａｌ  ｅｔ  ａｌ．、Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９３  Ｊａｎ；３０（１）：１０５−８を参照のこと）。
【００２９】
本開示で使用する場合、「エピトープ」という用語は、抗体のパラトープが結合する抗原上の任意の抗原決定基を意味する。エピトープ決定基は、通常、アミノ酸又は糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面集団からなり、通常、特定の三次元構造特性並びに特定の電荷特性を有する。
【００３０】
「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、アミノ酸残基のポリマーを指すために、本明細書において互換的に使用される。この用語はまた、１つ以上のアミノ酸残基が対応する天然に存在するアミノ酸の人工化学的模倣物であるアミノ酸ポリマー、並びに天然に存在するアミノ酸ポリマー及び非天然に存在するアミノ酸ポリマーにも当てはまる。
【００３１】
「ポリマー」という用語は、モノマー構築ブロックから作られるオリゴマーを指し、直鎖状、分枝状、又は樹枝状構造を構成することができる。例えば、「糖ポリマー」は、糖構築ブロックを含むポリマー構造であり、「糖ポリペプチド」は、糖及びアミノ酸構築ブロックを含むポリマー構造である。
【００３２】
本明細書で使用する場合、「ＡＰＣ」又は「抗原提示細胞」という用語は、その細胞膜表面上に主要組織適合性複合体クラスＩＩ（ＭＨＣクラスＩＩ）タンパク質を発現し、ＭＨＣクラスＩＩとＴ細胞との複合体において抗原を提示することができ、それにより、提示された抗原に対してＴ細胞を活性化することができる細胞を指す。いくつかの実施形態では、ＡＰＣは、樹状細胞である。いくつかの実施形態では、ＡＰＣは、マクロファージである。いくつかの実施形態では、ＡＰＣは、Ｂ細胞である。いくつかの実施形態では、ＡＰＣは、樹状細胞、マクロファージ、又はＢ細胞である。いくつかの実施形態では、ＡＰＣは樹状細胞又はマクロファージである。いくつかの実施形態では、ＡＰＣは樹状細胞又はＢ細胞である。いくつかの場合では、ＡＰＣはマクロファージではない。いくつかの場合では、ＡＰＣはＢ細胞ではない。
【００３３】
本明細書で使用する場合、「骨髄細胞」という用語は、顆粒球、単球（Ｍｏ）、マクロファージ（Ｍφ）、及び樹状細胞（ＤＣ）を包含する。これらの細胞はしばしば、腫瘍に豊富にある。したがって、骨髄細胞は、本明細書において、腫瘍関連骨髄（ＴＡＭ）細胞と称される場合がある。
【００３４】
細胞培養に関連して「継代すること（passaging）」又は「継代（passage）」（すなわち、分裂すること（splitting）又は分裂（split））は、当該技術分野で既知であり、少数の細胞を新しい器に移すことを指す。細胞が規則正しく分裂する場合には細胞を培養することができるが、その理由は、それによって、高細胞密度に関連する老化（senescence）が回避されるためである。接着性細胞については、細胞は、継代プロトコルの一部として増殖表面から分離される。分離は、一般に、酵素トリプシン及び／又は他の市販の試薬（例えば、ＴｒｙｐＬＥ、ＥＤＴＡ（ethylenediaminetetraacetic acid）（エチレンジアミン四酢酸）、細胞を表面から物理的に擦り取るなどのためのポリスマン（policemen）（例えば、ラバーポリスマン））を用いて行われる。例えば、追加の培地で希釈した後に、新しい細胞集団を播種するために、少数の分離した細胞（例えば、わずか１つの細胞）を使用することができる。したがって、細胞集団を継代することは、細胞集団の細胞の少なくとも一部を分離し、分離した細胞を希釈し、希釈した分離細胞をプレーティングする（すなわち、新たな細胞集団を播種する）ことを意味する。
【００３５】
「培地（media）」及び「培地（medium）」という用語は、本明細書では互換的に使用される。細胞培地は、インビトロ培養中に細胞を浸す液体混合物である。
【００３６】
本明細書で使用する「集団」、例えば「細胞集団」又は「細胞の集団」という用語は、他の細胞及び／又は細胞群から分離された（すなわち、単離された）２つ以上の細胞の群（すなわち、集団）を意味する。例えば、６ウェル培養皿は、６つの細胞集団を含むことができ、各集団は個々のウェル中に存在する。細胞集団の細胞は、互いにクローン誘導体であり得るが、そうである必要はない。細胞集団は、１つの個々の細胞に由来し得る。例えば、個々の細胞がそれぞれ、６ウェル培養皿の単一ウェルに配置され、各細胞が１度に分割される場合、皿は６つの細胞集団を含む。細胞集団は、任意の所望のサイズであり得、１を超える細胞の任意の数の細胞を含み得る。例えば、細胞集団は、２以上、１０以上、１００以上、１，０００以上、５，０００以上、１０４以上、１０５以上、１０６以上、１０７以上、１０８以上、１０９以上、１０１０以上、１０１１以上、１０１２以上、１０１３以上、１０１４以上、１０１５以上、１０１６以上、１０１７以上、１０１８以上、１０１９以上、又は１０２０以上の細胞であり得る。
【００３７】
本明細書で使用する「複数」という用語は、１を超えることを意味する。例えば、複数は、２以上、５以上、１０以上、２５以上、５０以上、１００以上、５００以上、１，０００以上、２，０００以上、５，０００以上、１０４以上、１０５以上、１０６以上、１０７以上などであり得る。
【００３８】
「デクチン−２」は、細胞外Ｃ型レクチン様ドメインフォールドを有するＩＩ型膜受容体である。デクチン−１とは異なり、デクチン−２は、その細胞質ドメインにおいて免疫受容体チロシンリン系活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を欠いている。ヒトデクチン−２（ＮＣＢＩ参照配列ＮＰ＿００１００７０３４．１）は、ＣＬＥＣ６Ａ、「Ｃ型レクチンドメインファミリー６メンバーＡ」、ＣＬＥＣ４Ｎ、及びＣＬＥＣＳＦ１０としても既知である。ヒトデクチン−２のタンパク質配列は、
ＭＭＱＥＱＱＰＱＳＴＥＫＲＧＷＬＳＬＲＬＷＳＶＡＧＩＳＩＡＬＬＳＡＣＦＩＶＳＣＶＶＴＹＨＦＴＹＧＥＴＧＫＲＬＳＥＬＨＳＹＨＳＳＬＴＣＦＳＥＧＴＫＶＰＡＷＧＣＣＰＡＳＷＫＳＦＧＳＳＣＹＦＩＳＳＥＥＫＶＷＳＫＳＥＱＮＣＶＥＭＧＡＨＬＶＶＦＮＴＥＡＥＱＮＦＩＶＱＱＬＮＥＳＦＳＹＦＬＧＬＳＤＰＱＧＮＮＮＷＱＷＩＤＫＴＰＹＥＫＮＶＲＦＷＨＬＧＥＰＮＨＳＡＥＱＣＡＳＩＶＦＷＫＰＴＧＷＧＷＮＤＶＩＣＥＴＲＲＮＳＩＣＥＭＮＫＩＹＬ（配列番号１）である。
【００３９】
ＩＩＩ．方法及び組成物
本開示の態様は、（例えば、骨髄細胞におけるデクチン−２シグナル伝達を刺激する組成物を個体に投与することによって、例えば、細胞表面上でデクチン−２のクラスター化を誘導し、それにより、個体における抗癌免疫応答を刺激することによって）癌を有する個体を処置するための方法及び組成物を含む。いくつかの場合では、骨髄細胞は腫瘍関連骨髄（ＴＡＭ）細胞である。デクチン−２刺激は、オリゴマンノースグリカンを提示する微生物と接触した際に食細胞の表面上で起こるものと同様のデクチン−２のクラスター化によって達成され得る。このような刺激は、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、及び他の微生物種（例えば、いくつかの病原体種）のような高密度のデクチン−２リガンドを有する微生物に類似した、デクチン−２刺激抗体又はリガンド（例えば、マンノビオースに富む糖ペプチド、マンナン多糖類、及び／又はＭａｎ−９などの他のオリゴマンノースグリカン）を使用しても達成することができる。
【００４０】
骨髄細胞におけるデクチン−２シグナル伝達を（例えば、細胞表面上でデクチン−２の密度を増加させることにより、例えば、細胞表面上でデクチン−２のクラスター化を誘導することにより）刺激する剤は、本明細書では「デクチン−２刺激剤」と称される。デクチン−２刺激剤は、「直接的（direct）」剤であり得（例えば、それらは、骨髄細胞上でのデクチン−２に直接的に結合する、例えば、特異的に結合する）、又は「間接的（indirect）」剤であり得る（例えば、それらは、癌細胞などの細胞表面上のデクチン−２リガンドの量を増加させる）。直接的デクチン−２刺激剤の例には、（ａ）デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド（例えば、マンナン多糖、マンナン抽出物、オリゴマンノース／高マンノースグリカン、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ由来の細胞壁抽出物などの真菌抽出物など）、（ｂ）合成デクチン−２刺激糖ポリマー又はその模倣体（例えば、糖ポリペプチド）（これは、例えば、骨髄細胞上でデクチン−２に直接的に結合するか、又は任意のもの（例えば、癌抗原に特異的に結合する抗体）にコンジュゲートされている）、及び（ｃ）デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体（例えば、いくつかの場合では、可溶性である抗デクチン−２抗体、いくつかの場合では、固体支持体上に固定化された抗デクチン−２抗体、多価抗デクチン−２抗体、例えば、癌抗原にも特異的に結合するものなど）が含まれる。
【００４１】
いくつかの場合では、直接的デクチン−２刺激剤を（例えば、インビトロ、エクスビボ、又はインビボで、例えば、個体に剤を投与することによって）骨髄細胞と接触させて、それにより、骨髄細胞におけるデクチン−２シグナル伝達を誘発する（刺激する）ために使用することができる。いくつかの場合では、直接的デクチン−２刺激剤を癌細胞結合剤（例えば、腫瘍抗原に対する抗体）にコンジュゲートすることができ、したがって、標的細胞（例えば、癌細胞）の表面上の直接的デクチン−２刺激剤のレベルを増加させる。
【００４２】
間接的デクチン−２刺激剤の例には、α−マンノシダーゼクラス１阻害剤（例えば、キフネンシン）、並びに、マンノシダーゼ発現及び／又は活性を低減することができる遺伝子編集剤及び／又はＲＮＡｉ剤が含まれるが、これらに限定されない。これらの全ては、標的細胞（例えば、癌細胞）の表面上の末端マンノース／マンノビオース残基の提示及び／又は密度を増加させることができ、したがって、処置される癌に対する免疫応答の感度／強度を増加させる。
【００４３】
したがって、いくつかの実施形態では、対象方法は、骨髄細胞におけるデクチン−２シグナル伝達を刺激し、例えば、細胞表面上でデクチン−２のクラスター化を誘導し、それにより、個体において抗癌免疫応答を刺激することによって、癌を有する個体を処置する方法であり、当該方法は、対象デクチン−２刺激剤（例えば、デクチン−２結合糖ポリマー、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチド及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの、直接的デクチン−２刺激剤；又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤、マンノシダーゼ発現及び／又は活性を低減する遺伝子編集剤、マンノシダーゼ発現及び／又は活性を低減することができるＲＮＡｉ剤などの、間接的デクチン−２刺激剤）を含む組成物を個体に投与することを含む。
【００４４】
いくつかの実施形態では、骨髄細胞におけるデクチン−２シグナル伝達を刺激して（例えば、細胞表面上でのデクチン−２密度を増加し、例えば、細胞表面上でデクチン−２のクラスター化を誘導して）、それにより、個体における抗癌免疫応答を刺激することによって、癌を有する個体を処置する方法であり、当該方法は、（ａ）デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド（例えば、マンナン多糖、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ由来の抽出物などのマンナン抽出物、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ及び／又Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ由来の細胞壁抽出物などの真菌細胞壁抽出物）、（ｂ）合成デクチン−２刺激糖ポリマー又はその模倣体（例えば、糖ポリペプチド、例えば、マンノビオースに富む糖タンパク質などのオリゴマンノース糖ポリペプチド、例えば、Ｏ−結合及び／又はＮ−結合したマンノビオースに富む糖タンパク質）、（ｃ）デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体（例えば、いくつかの場合では可溶性である抗デクチン−２抗体、いくつかの場合では固体支持体上に固定化された抗デクチン−２抗体、癌抗原にも特異的に結合する多価抗デクチン−２抗体）、及び（ｄ）α−マンノシダーゼクラス１阻害剤（例えば、癌細胞を当該阻害剤と接触させ、それにより、それらの表面上のデクチン−２リガンドのレベルを増加させる）から選択される１つ以上のデクチン−２を含むデクチン−２刺激剤を個体に投与することを含む。
【００４５】
（ａ）デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド
いくつかの実施形態では、癌を有する個体を処置する方法は、「デクチン−２に対する天然に存在するリガンド」を含む組成物を個体に投与することを含む。このような用語は、以下に論じるデクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンドを包含するが、オリゴマンノース糖ポリペプチド、オリゴマンノース／高マンノースグリカン、マンノビオースに富む糖タンパク質、Ｏ−結合及び／又はＮ−結合したマンノビオースに豊む糖タンパク質、並びに天然供給源（例えば、大豆アグルチニン）から得られるマンナン多糖類などの植物由来のデクチン−２刺激リガンドも包含する。
【００４６】
いくつかの実施形態では、癌を有する個体を処置する方法は、デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド（すなわち、非植物由来の天然に存在するデクチン−２刺激剤）を含む組成物を個体に投与することを含む。いくつかの場合では、デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンドを含む対象組成物は、（例えば、細胞表面上のデクチン−２の密度を増加させることによって、例えば、細胞表面上のデクチン−２のクラスター化を誘導することによって）骨髄細胞におけるデクチン−２シグナル伝達を刺激する１つ以上の糖タンパク質を含む真菌細胞壁抽出物を含む。いくつかの場合では、そのような真菌細胞壁抽出物は、デクチン−２刺激糖ポリマー又はその模倣体（例えば、糖ポリペプチド）（例えば、マンノースに富む糖タンパク質などのデクチン−２刺激オリゴマンノース糖ポリペプチド、例えば、Ｏ−結合及び／又はＮ−結合したマンノビオースに富む糖タンパク質）を含む。例えば、Ｉｓｈｉｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｈｏｓｔ  Ｍｉｃｒｏｂｅ，２０１３  Ａｐｒ  １７；１３（４）：４７７−８８を参照のこと。
【００４７】
いくつかの場合では、デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンドを含む対象組成物は、マンナン多糖（例えば、アルカリ性マンナン抽出物などのＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅマンナン、例えば、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈの製品ｍ７５０４、又はＣ．ａｌｂｉｃａｎｓマンナンを参照のこと）を含む。例えば、Ｕｒｙｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１５  Ｍａｙ  ７；１２５（１９）：３０１４−２３；及びＳａｉｊｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，２０１０  Ｍａｙ  ２８；３２（５）：６８１−９１を参照のこと。デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンドを含む組成物は、天然供給源（例えば、ブタサイログロブリン由来のｍａｎ−９など）から得られるオリゴマンノース／高マンノースグリカン（マンノオリゴ糖）を含むことができる。いくつかの場合では、それは天然供給源からは得られないが、代わりに、実験室で生成される生成物である（例えば、合成される）が、植物由来の天然生成物とは構造的に異なる。デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンドを含む組成物は、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ由来のマンナン抽出物に見出すことができるものなどのオリゴマンノースグリカンを含むことができる。いくつかの場合では、マンナン（例えば、マンナン多糖、オリゴマンノースグリカン／高マンノースグリカンを含む組成物）は、個体（例えば、ヒト）に全身的に送達され、複数の腫瘍種（例えば、膵臓癌、肺癌、及び結腸癌などの癌）を処置することができる。例えば、以下の実施例の項を参照のこと。
【００４８】
本明細書で使用する場合、「デクチン−２結合オリゴマンノース糖ポリペプチドを含む組成物」という用語は、デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンドを含む組成物（例えば、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｆｕｒｆｕｒ（Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ）デクチン−２刺激細胞壁抽出物などのデクチン−２刺激細胞壁抽出物、例えば、マンノビオースに富む糖タンパク質、例えば、Ｏ−結合及び／又はＮ−結合したマンノビオースに富む糖タンパク質などのデクチン−２刺激オリゴマンノース糖ポリペプチドを含む抽出物など）を包含することを意味する。同様に、「デクチン−２に結合する糖ポリペプチド」という語句は、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の細胞壁抽出物（例えば、オリゴマンノース糖ポリペプチド、例えば、マンノビオースに富む糖タンパク質、例えば、Ｏ−結合及び／又はＮ−結合したマンノビオースに富む糖タンパク質）に見出すことができる、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（複数可）を包含することを意味する。
【００４９】
いくつかの場合では、非植物由来の天然に存在するリガンドを含む対象組成物は、独立して又は組み合わせでデクチン−２シグナル伝達を刺激する、１つ以上の糖タンパク質（例えば、マンノビオースに富む糖タンパク質などのオリゴマンノース糖タンパク質、例えば、Ｏ−結合及び／又はＮ−結合したマンノビオースに富む糖タンパク質）、（いくつかの場合では、真菌細胞壁抽出物から単離される）を含む。いくつかの場合では、細胞壁抽出物は、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ細胞壁抽出物である。いくつかの場合では、細胞壁抽出物は、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ及び／又はＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ由来である。いくつかの場合では、非植物由来の天然に存在するリガンドを含む対象組成物は、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｍａｎｓｏｎｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｄｅｒｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓ  ｆａｒｉｎａ、Ｃａｎｄｉｄａ  ｇｌａｂｒａｔａ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｆｏｎｓｅｃａｅａ  ｐｅｄｒｏｓｏｉ、及びＡ．ｆｕｍｉｇａｔｕｓのうちの１つ以上由来の抽出物を含み、当該抽出物は、デクチン−２シグナル伝達を刺激する１つ以上の糖タンパク質を含む。
【００５０】
細胞壁抽出物は、任意の好都合な方法を使用して作成することができる。例えば、Ｉｓｈｉｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｈｏｓｔ  Ｍｉｃｒｏｂｅ．２０１３  Ａｐｒ  １７；１３（４）：４７７−８８；及びＭｃＧｒｅａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ．２００６  Ｍａｙ；１６（５）：４２２−３０、を参照のこと（これらは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。いくつかの場合では、好適な細胞壁抽出物は市販されている。例えば、いくつかの場合では、好適な細胞壁抽出物は、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒの市販の細胞壁抽出物（例えば、フルフルマン、Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）である。
【００５１】
いくつかの場合では、癌を有する個体を処置する方法は、デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド（例えば、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の真菌細胞壁抽出物、例えば、マンナン多糖、オリゴマンノースグリカン／高マンノースグリカンを含む組成物、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ由来のマンナンなど）を含む組成物を個体に投与することを含む。いくつかの場合では、癌を有する個体を処置する方法は、非植物由来の天然に存在するデクチン−２刺激糖タンパク質（例えば、マンノビオースに富む糖タンパク質などのオリゴマンノース糖ポリペプチド、例えば、Ｏ−結合及び／又はＮ−結合したマンノビオースに富む糖タンパク質、例えば、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の真菌細胞壁抽出物に見出すことができるものなど）を含む組成物を個体に投与することを含む。いくつかの場合では、癌を有する個体を処置する方法は、糖脂質若しくはＮ−糖ペプチド又はタンパク質断片などの非植物由来の高マンノース糖コンジュゲート（glycoconjugate）（糖ポリマー）を含む組成物を個体に投与することを含む。
【００５２】
（ｂ）合成糖ポリマー（例えば、糖ポリペプチド、例えば、オリゴマンノース糖ポリペプチド）
高密度でＯ−グリコシル化された、セリンに富むタンパク質は、特定の幾何学的配列で表されるグリカンを有する伸長した剛性構造（例えば、これは、いくつかの場合では、デクチン−２によって認識される別個のパターンを構成する）を採る。この構造は、強力なデクチン−２活性化に適合させ、かつ、腫瘍標的化及び免疫細胞活性化などの追加の特性のために官能化された、化学的に定義された糖ポリマーで模倣することができる（図７Ａ）。合成糖ポリマーは、可変的な骨格構造、グリカン構造、長さ、剛性、幾何学性、及び末端官能基を有するように設計することができる。例えば、デクチン−２活性化糖ポリマーは、アミノ酸Ｎ−カルボキシ無水物（ＮＣＡ）の重合によって生成されるポリペプチド骨格を含むことができる（例えば、図７Ｂを参照のこと）。糖ポリペプチドは、マンノビオシル−セリンなどのグリコシル化アミノ酸構築ブロックを単独で含むか又は他のアミノ酸とブレンドして、様々なグリカン密度及びパターンを達成する。合成方法の一例として、例えば、Ｋｒａｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．２０１５  Ｏｃｔ  １３；１１２（４１）：１２５７４−９  ａｎｄ  Ｚｈｏｕ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，５７：３１３７−３１４２（２０１８）を参照のこと（これらの文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【００５３】
本明細書で使用する合成デクチン−２刺激糖ポリペプペプチドは、マンノビオースで修飾されたセリンを含むことができる。いくつかの場合では、合成デクチン−２刺激糖ポリペプチドは、例えばＭ．ｆｕｒｆｕｒ抽出物由来の天然糖ポリペプチドのような、Ｍａｎα１，２Ｍａｎ（マンノビオース、Ｍａｎ２）との高密度のセリンＯ−グリコシル化を有するムチン様糖タンパク質であり、強力なデクチン−２アゴニストとして作用する。いくつかの場合では、対象合成糖ポリペプチドは、固定化された場合にのみデクチン−２を活性化する。いくつかの場合では、対象合成糖ポリペプチドは、可溶性形態の場合にのみデクチン−２を活性化する。いくつかの場合では、対象合成糖ポリペプチドは、固定化された場合又は可溶性形態の場合、デクチン−２を活性化する。対象合成糖ポリペプペプチドは、例えば上記のように天然リガンドのように使用することができ、又は多価デクチン−２刺激剤（例えば、以下により詳細に記載される腫瘍標的化糖コンジュゲート（糖ポリマー））に組み込むことができる。合成糖ペプチドを抗体とコンジュゲートさせるために使用することができる１つの可能なコンジュゲーション戦略の一例（これは成功裏に使用された）として、図７Ｃを参照のこと（例えば、抗体上のリジン残基をＮＨＳ−シクロオクチン化合物で処理し、続いて、アジド末端糖ペプチドと生体直交共有結合反応を行うことができる）。
【００５４】
更に、ブレンドされたアミノ酸構築ブロックを、組織標的化、画像化、代替的な免疫活性化リガンド、及び他の所望の官能基のための部分で官能化することができる。合成アプローチは、デクチン−２活性化の最適な構築物を同定することができるように、グリカン構造、密度、及び介在（intervening）官能基の変化を可能とする。したがって、デクチン−２刺激糖ポリペプチドは、異なる長さ及びグリカン構造／密度を有することができる。例えば、様々な密度のセリン結合マンノース（Ｍａｎ１）又はマンノビオース（Ｍａｎ２）残基を含む一連の糖ペプチドを生成することができる（例えば、図９Ａを参照のこと）。様々な長さ、グリカン構造、及びグリカン密度の糖ペプチドを、アミノ酸構築ブロック（例えば、マンノシル−セリン、ラクトシル−セリンなど）を単独で使用して（例えばＮＣＡ重合によって）生成し、又は他のアミノ酸とブレンドして様々なグリカン密度及びパターンを達成することができる（例えば、図７Ａ〜図７Ｂ及び図９Ａを参照のこと）。モノマーは、例えば低グリコシル化密度で糖ペプチド溶解度を維持するために、アラニンなどの一般的なアミノ酸及びグルタミン酸などの親水性残基も含むことができる。アジド担持ニッケル触媒を使用した重合により、反応性アミン及びアジド鎖末端を有する二官能化糖ペプチドが得られ、これは、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（N-hydroxysuccinimidyl、ＮＨＳ）エステル又はクリック反応を介して、市販の蛍光色素及び他の部分（例えば、細胞膜組み込み脂質）での容易な修飾を可能にする。糖ペプチド長（２０〜３００個のアミノ酸）、グリコシル化密度、及びペプチド組成物は、触媒対モノマー比及び反応における異なるモノマーの比を変化させることによって正確に調整することができる。様々な長さ（例えば、２５、５０、１００残基、例えば、以下を参照のこと）及びグリカン密度（例えば、３５％、６５％、１００％、例えば、以下を参照のこと）のデクチン−２刺激Ｍａｎ２糖ペプチドを使用する（例えば、単独で使用する、あるいは例えばリジン結合を介して、腫瘍結合若しくは免疫調節抗体、又は別の免疫調節剤などの第２の剤にコンジュゲートする）ことができる。
【００５５】
治療開発に関連する他の特性も調節することができる。糖ポリマー官能基には、画像化プローブ、抗体との結合若しくはリポソームへの組み込みのための基、又は他の望ましい要素を含むことができる。いくつかの場合では、対象合成デクチン−２刺激糖ポリペプチドは、８〜４００個のアミノ酸（例えば、８〜３５０個、８〜３００個、８〜２５０個、８〜２００個、８〜１５０個、８〜１２５個、８〜１００個、８〜７５個、８〜５０個、８〜３５個、８〜２５個、８〜２０個、８〜１５個、１０〜４００個、１０〜３５０個、１０〜３００個、１０〜２５０個、１０〜２００個、１０〜１５０個、１０〜１２５個、１０〜１００個、１０〜７５個、１０〜５０個、１０〜３５個、１０〜２５個、２０〜４００個、２０〜３５０個、２０〜３００個、２０〜２５０個、２０〜２００個、２０〜１５０個、２０〜１２５個、２０〜１００個、２０〜７５個、２０〜５０個、２０〜３５個、２０〜２５個、３５〜４００個、３５〜３５０個、３５〜３００個、３５〜２５０個、３５〜２００個、３５〜１５０個、３５〜１２５個、３５〜１００個、３５〜７５個、３５〜５０個、５０〜４００個、５０〜３５０個、５０〜３００個、５０〜２５０個、５０〜２００個、５０〜１５０個、５０〜１２５個、５０〜１００個、５０〜７５個、７５〜４００個、７５〜３５０個、７５〜３００個、７５〜２５０個、７５〜２００個、７５〜１５０個、７５〜１２５個、７５〜１００個、１００〜４００個、１００〜３５０個、１００〜３００個、１００〜２５０個、１００〜２００個、１００〜１５０個、若しくは１２５〜４００個、１２５〜３５０個、１２５〜３００個、１２５〜２５０個、１２５〜２００個、又は１２５〜１５０個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）（例えば、いくつかの場合では、固体支持体上に固定化されたペプチド、いくつかの場合では、可溶性ペプチド、いくつかの場合では、抗体などの腫瘍標的化部分にコンジュゲートされたペプチドなど）を含む。
【００５６】
いくつかの場合では、対象合成デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、２０〜３００個のアミノ酸（２０ｍｅｒ〜３００ｍｅｒ）（例えば、２０〜２５０個、２０〜２２５個、２０〜２００個、２０〜１７５個、２０〜１５０個、２０〜１００個、３５〜３００個、３５〜２５０個、３５〜２２５個、３５〜２００個、３５〜１７５個、３５〜１５０個、３５〜１００個、５０〜３００個、５０〜２５０個、５０〜２２５個、５０〜２００個、５０〜１７５個、５０〜１５０個、又は５０〜１００個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）を含む。いくつかの場合では、対象合成デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、３０〜２００個のアミノ酸（３０ｍｅｒ〜２００ｍｅｒ）（例えば、３０〜１７５個、３０〜１５０個、３０〜１００個、４０〜２００個、４０〜１７５個、４０〜１５０個、４０〜１００個、５０〜２００個、５０〜１７５個、５０〜１５０個、又は５０〜１００個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）を含む。
【００５７】
いくつかの場合では、対象合成デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、５０〜１５０個のアミノ酸（５０ｍｅｒ〜１５０ｍｅｒ）（例えば、５０〜１２５個、５０〜１００個、５０〜７５個、７５〜１５０個、７５〜１２５個、７５〜１００個、１００〜１５０個、又は１２５〜１５０個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）を含む。いくつかの場合では、対象合成デクチン−２刺激糖ポリペプチドは、２０〜１００個のアミノ酸（２０ｍｅｒ〜１００ｍｅｒ）（例えば、２０〜８０個、２０〜７０個、２０〜６０個、２０〜５０個、３０〜１００個、３０〜８０個、３０〜７０個、３０〜６０個、３０〜５０個、４０〜１００個、４０〜８０個、４０〜７０個、４０〜６０個、又は４０〜５０個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）を含む。
【００５８】
対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は任意の所望のグリカン密度を有することができ、そのような密度は任意の好都合な方法を使用して制御／生成することができ、好適な方法は当業者に既知である。いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、少なくとも１０％（例えば、少なくとも１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、又は７５％）のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、少なくとも２５％（例えば、少なくとも３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、又は７５％）のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、少なくとも３０％（例えば、少なくとも３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、又は７５％）のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、少なくとも５０％（例えば、少なくとも５５％、６０％、６５％、７０％、又は７５％）のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、少なくとも６０％（例えば、少なくとも６５％、７０％、又は７５％）のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、６０％のグリカン密度を有する。
【００５９】
いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、１０％〜１００％（例えば、１０％〜９０％、１０％〜８０％、１０％〜７０％、１０％〜６５％、１０％〜６０％、２０％〜１００％、２０％〜９０％、２０％〜８０％、２０％〜７５％、２０％〜７０％、２０％〜６５％、２５％〜１００％、２５％〜９０％、２５％〜８５％、２５％〜８０％、２５％〜７５％、２５％〜７０％、２５％〜６５％、３０％〜１００％、３０％〜９０％、３０％〜８５％、３０％〜８０％、３０％〜７５％、３０％〜７０％、又は３０％〜６５％）の範囲のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、２０％〜８５％（例えば、２０％〜８０％、２０％〜７５％、２０％〜７０％、２０％〜６５％、２５％〜８５％、２５％〜８０％、２５％〜７５％、２５％〜７０％、２５％〜６５％、３０％〜８５％、３０％〜８０％、３０％〜７５％、３０％〜７０％、又は３０％〜６５％）の範囲のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、２５％〜７０％（例えば、２５％〜６５％、３０％〜７０％、又は３０％〜６５％）のグリカン密度を有する。
【００６０】
デクチン−２に対する糖模倣（Glycomimetic）リガンドを、ポリマー構造体中の天然糖の代わりに使用することもできる。糖模倣体は、デクチン−２に結合して、これを活性化する、非加水分解性糖類似体又は非糖合成リガンドを含むことができる。
【００６１】
（ｃ）（例えば、固体支持体上に固定化された又は可溶性の）デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体
いくつかの実施形態では、癌を有する個体を処置する方法は、デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体（例えば、ヒト化抗体、抗デクチン−２抗体の抗原結合領域など）を含む組成物を個体に投与することを含む。いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激剤は、抗デクチン−２単一特異性多価抗体である。いくつかの場合では、抗デクチン−２抗体（例えば、モノクローナル抗デクチン−２抗体）は可溶性である（固体支持体上に固定化されていない）。いくつかの場合では、抗デクチン−２抗体は、固体支持体（例えば、ナノ粒子）上に固定化される。任意の好都合な固体支持体を使用することができる。好適な固体支持体には、プレート、チューブ、ビーズ（ガラスビーズ又はポリスチレンビーズ）、ナイロン、ニトロセルロース、セルロースアセテート、ガラス繊維、任意の好都合な多孔質ポリマー、コロイド粒子、ナノ粒子、ナノプレート、又はナノシェルなどの金属ナノ材料、ラテックスビーズなどが含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、固体支持体は、薬学的に許容される固体支持体（例えば、治療使用のために承認されたナノ粒子）である。
【００６２】
いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激抗体は、ナノキャリアである固体支持体上に固定化される。対象デクチン−２刺激剤の送達のためのナノキャリアの例には、（ａ）薬物がポリマーにコンジュゲートされているか又はポリマー中にカプセル化されたポリマーナノ粒子、（ｂ）ポリマーミセル：水溶液中でナノサイズのコア／シェル構造を形成する両親媒性ブロックコポリマー（疎水性コア領域は、疎水性薬物のリザーバとして機能するのに対し、親水性シェル領域は、疎水性コアを安定化させ、ポリマーを水溶性にする）、（ｃ）デンドリマー：中心コアから放射状に現れる複数の高度に分岐したモノマーからなるナノメートル寸法の合成ポリマー高分子、（ｄ）リポソーム：水性体積部が膜状脂質二重層によって完全に封入された脂質二重層からなる自己集合構造、（ｅ）ウイルスベースのナノ粒子：一般に、当該構造は、多価自己集合構造であるタンパク質ケージである、及び（ｆ）カーボンナノチューブ：ベンゼン環からなる炭素シリンダーが含まれる。
【００６３】
微小粒子（例えば、ビーズ）は、対象抗デクチン−２抗体などの他の材料を結合／コンジュゲートさせることができる固体支持体又は基体として機能することができる。使用の性質（例えば、インビトロで骨髄又は癌細胞などの細胞に接触させること、対、個体への投与）に応じて、様々なビーズサイズを使用することができる。例えば、固体支持ビーズは、直径０．０１〜１，０００μｍ（例えば、０．１〜１００μｍ、１〜１００μｍ、１〜１０μｍなど）の範囲であり得る。いくつかの実施形態では、ビーズは、直径２．５〜３μｍ（例えば、２．７〜２．９μｍ、２．５μｍ、２．６μｍ、２．７μｍ、２．８μｍ、２．９μｍ、又は３．０μｍ）の範囲であり得る。いくつかの場合では、より大きなビーズを使用することが有利であり得る。いくつかの実施形態では、ビーズは、直径４．３〜５．５μｍ（例えば、直径４．４−４．６μｍ、４．３μｍ、４．４μｍ、４．５μｍ、４．６μｍ、４．７μｍ、４．９〜５．１μｍ、４．９μｍ、５．０μｍ、５．１μｍ、５．２μｍ、５．３μｍ、５．４μｍ、又は５．５μｍの直径）の範囲であり得る。いくつかの実施形態では、固体支持ビーズは、直径２〜１５μｍ（例えば、直径２〜１２μｍ、２〜１０μｍ、２〜８μｍ、２〜６μｍ、２〜５μｍ、２〜４μｍ、３〜１５μｍ、３〜１２μｍ、３〜１０μｍ、３〜８μｍ、３〜６μｍ、３〜５μｍ、３〜４μｍ、４〜１５μｍ、４〜１２μｍ、４〜１０μｍ、４〜８μｍ、４〜６μｍ、４〜５μｍ、５〜１５μｍ、５〜１２μｍ、５〜１０μｍ、５〜８μｍ、５〜６μｍ）の範囲のサイズを有することができる。
【００６４】
対象ビーズは、金属、シリカ（例えば、ＳｉＯ２）、ガラス、アルミナ、チタニア、セラミックなどの無機物；ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート（polymethylmethacrylate、ＰＭＭＡ）などの有機物；メラミン、ポリアクチドなど；及びシリカ、ポリスチレン、デキストランなどの磁性材料を含むがこれらに限定されない、任意の好都合な材料（又はそれらの組合わせ）で作ることができる。市販の磁気ビーズには、ＰｒｏＭａｇ、ＣＯＭＰＥＬ、ＢｉｏＭａｇ、ＢｉｏＭａｇＰｌｕｓ、及びＤｙｎａｂｅａｄｓが含まれるが、これらに限定されない。固体支持体上に固定化された対象抗デクチン−２抗体の調製における使用に好適な、様々なサイズの微粒子及びポリマー組成物。微小粒子は、例えば蛍光色素で染色することもできる。好適なビーズの組成及び製造方法は、特許及び非特許科学文献の両方（例えば、米国特許第８，２８３，０３７号、同第５，５９７，５３１号、同第５，６３５，５７４号、及び同第８，１６３，１８３号（これらは、参照により本明細書に組み込まれる））に見出すことができる。
【００６５】
多価単一特異性抗デクチン−２抗体も企図される。多価単一特異性抗体を生成するための様々な方法が記載されており、デクチン−２特異的抗体複合体を生成するために使用することができる。
【００６６】
多価デクチン−２刺激剤
いくつかの実施形態では、デクチン−２刺激剤は多価（例えば、多官能性）である。例えば、いくつかの場合では、直接的デクチン−２刺激剤（「第１の剤」）は、「第２の剤」にコンジュゲートされる。第１の剤は、任意の直接的デクチン−２刺激剤（すなわち、デクチン−２に結合し、骨髄におけるデクチン−２シグナル伝達を刺激する剤、例えば、抗デクチン−２抗体の抗原結合領域、デクチン−２に結合する糖ポリペプチドなどの糖ポリマー、マンノビオースに富む糖タンパク質若しくはマンナンなどの天然デクチン−２リガンドなど）であり得る。したがって、いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第１の剤は、抗デクチン−２抗体又は抗デクチン−２抗体の抗原結合領域である。いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第１の剤は、デクチン−２に結合する糖ポリペプチドなどの糖ポリマー（例えば、Ｍａｎ２糖ポリマー）である。いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第１の剤は、天然デクチン−２リガンド（例えば、デクチン−２に対する非植物由来の天然由来のリガンド、例えば、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｆｕｒｆｕｒ（Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ）及び／又はＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ由来のものなどの真菌細胞壁抽出物；マンナン、例えば、アルカリ抽出物などのマンナン抽出物、例えば、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ由来のマンナン抽出物など）である。多価デクチン−２刺激剤は、本明細書に記載の他のデクチン−２刺激剤として癌を処置するために使用することができる。
【００６７】
上記のように、対象多価デクチン−２刺激剤の第１の剤は、糖ポリマー（例えば、Ｍａｎ２）であり得る。第１の剤は、組織標的化、画像化、代替的な免疫活性化リガンド、及び他の所望の官能基のための部分で官能化することができるアミノ酸構築ブロックの混合体であり得る。合成アプローチにより、グリカン構造、密度、及び介在官能基の変化が可能となる。したがって、デクチン−２刺激糖ポリペプチドは、異なる長さ及びグリカン構造／密度を有することができる。例えば、様々な密度のセリン結合マンノース（Ｍａｎ１）又はマンノビオース（Ｍａｎ２）残基を含む一連の糖ペプチドを生成することができる（例えば、図９Ａを参照のこと）。様々な長さ、グリカン構造、及びグリカン密度の糖ペプチドを、アミノ酸構築ブロック（例えば、マンノシル−セリン、ラクトシル−セリンなど）を単独で使用して（例えばＮＣＡ重合によって）生成し、又は他のアミノ酸とブレンドして様々なグリカン密度及びパターンを達成することができる（例えば、図７Ａ〜図７Ｂ及び図９Ａを参照のこと）。モノマーは、例えば低グリコシル化密度で糖ペプチド溶解度を維持するために、アラニンなどの一般的なアミノ酸及びグルタミン酸などの親水性残基も含むことができる。アジド担持ニッケル触媒を使用した重合により、反応性アミン及びアジド鎖末端を有する二官能化糖ペプチドが得られ、これは、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳ）エステル又はクリック反応を介して、市販の蛍光色素及び他の部分（例えば、細胞膜組み込み脂質）での容易な修飾を可能にする。糖ペプチド長（２０〜３００個のアミノ酸）、グリコシル化密度、及びペプチド組成物は、触媒対モノマー比及び反応における異なるモノマーの比を変化させることによって正確に調整することができる。様々な長さ（例えば、２５、５０、１００残基、例えば、以下を参照のこと）及びグリカン密度（例えば、３５％、６５％、１００％、例えば、以下を参照のこと）のデクチン−２刺激Ｍａｎ２糖ペプチドを使用する（例えば、単独で使用する、又は例えばリジン結合を介して腫瘍結合抗体などの第２の剤にコンジュゲートする）ことができる。
【００６８】
治療開発に関連する他の特性も調節することができる。糖ポリマー官能基には、画像化プローブ、抗体との結合若しくはリポソームへの組み込みのための基、又は他の望ましい要素を含むことができる。いくつかの場合では、第１の剤は、８〜４００個のアミノ酸（８ｍｅｒ〜４００ｍｅｒ）（例えば、８〜３５０個、８〜３００個、８〜２５０個、８〜２００個、８〜１５０個、８〜１２５個、８〜１００個、８〜７５個、８〜５０個、８〜３５個、８〜２５個、８〜２０個、８〜１５個、１０〜４００個、１０〜３５０個、１０〜３００個、１０〜２５０個、１０〜２００個、１０〜１５０個、１０〜１２５個、１０〜１００個、１０〜７５個、１０〜５０個、１０〜３５個、１０〜２５個、２０〜４００個、２０〜３５０個、２０〜３００個、２０〜２５０個、２０〜２００個、２０〜１５０個、２０〜１２５個、２０〜１００個、２０〜７５個、２０〜５０個、２０〜３５個、２０〜２５個、３５〜４００個、３５〜３５０個、３５〜３００個、３５〜２５０個、３５〜２００個、３５〜１５０個、３５〜１２５個、３５〜１００個、３５〜７５個、３５〜５０個、５０〜４００個、５０〜３５０個、５０〜３００個、５０〜２５０個、５０〜２００個、５０〜１５０個、５０〜１２５個、５０〜１００個、５０〜７５個、７５〜４００個、７５〜３５０個、７５〜３００個、７５〜２５０個、７５〜２００個、７５〜１５０個、７５〜１２５個、７５〜１００個、１００〜４００個、１００〜３５０個、１００〜３００個、１００〜２５０個、１００〜２００個、１００〜１５０個、又は１２５〜４００個、１２５〜３５０個、１２５〜３００個、１２５〜２５０個、１２５〜２００個、又は１２５〜１５０個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）（例えば、いくつかの場合では、固体支持体上に固定化されたペプチド、いくつかの場合では、可溶性ペプチド、いくつかの場合では、抗体などの腫瘍標的化部分にコンジュゲートされたペプチドなど）を含む、合成デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である。
【００６９】
いくつかの場合では、対象の第１の剤は、２０〜３００個のアミノ酸（２０ｍｅｒ〜３００ｍｅｒ）（例えば、２０〜２５０個、２０〜２２５個、２０〜２００個、２０〜１７５個、２０〜１５０個、２０〜１００個、３５〜３００個、３５〜２５０個、３５〜２２５個、３５〜２００個、３５〜１７５個、３５〜１５０個、３５〜１００個、５０〜３００個、５０〜２５０個、５０〜２２５個、５０〜２００個、５０〜１７５個、５０〜１５０個、又は５０〜１００個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）を含む、合成デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である。いくつかの場合では、対象の第１の剤は、３０〜２００個のアミノ酸（３０ｍｅｒ〜２００ｍｅｒ）（例えば、３０〜１７５個、３０〜１５０個、３０〜１００個、４０〜２００個、４０〜１７５個、４０〜１５０個、４０〜１００個、５０〜２００個、５０〜１７５個、５０〜１５０個、又は５０〜１００個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）を含む、合成デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である。
【００７０】
いくつかの場合では、対象第１の剤は、５０〜１５０個のアミノ酸（５０ｍｅｒ〜１５０ｍｅｒ）（例えば、５０〜１２５個、５０〜１００個、５０〜７５個、７５〜１５０個、７５〜１２５個、７５〜１００個、１００〜１５０個、又は１２５〜１５０個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）を含む、合成デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である。いくつかの場合では、対象の第１の剤は、２０〜１００個のアミノ酸（２０ｍｅｒ〜１００ｍｅｒ）（例えば、２０〜８０個、２０〜７０個、２０〜６０個、２０〜５０個、３０〜１００個、３０〜８０個、３０〜７０個、３０〜６０個、３０〜５０個、４０〜１００個、４０〜８０個、４０〜７０個、４０〜６０個、又は４０〜５０個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）を含む、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である。いくつかの場合では、対象の第１の剤は、２０〜２５０のアミノ酸（２０ｍｅｒ〜２５０ｍｅｒ）（例えば、２０〜２００個、２０〜１５０個、２０〜１００個、２０〜８０個、２０〜７０個、２０〜６０個、２０〜５０個、３０〜２５０個、３０〜２００個、３０〜１５０個、３０〜１００個、３０〜８０個、３０〜７０個、３０〜６０個、３０〜５０個、４０〜２５０個、４０〜２００個、４０〜１５０個、４０〜１００個、４０〜８０個、４０〜７０個、４０〜６０個、又は４０〜５０個のアミノ酸）の範囲の長さを有するペプチド（例えば、ムチン様ペプチド）を含む、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である。
【００７１】
上記のように、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、任意の所望のグリカン密度を有することができ、そのような密度は、任意の好都合な方法を使用して制御／生成することができ、好適な方法は、当業者に既知である。いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第１の剤は、少なくとも１０％（例えば、少なくとも１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、又は７５％）のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第１の剤は、少なくとも２５％（例えば、少なくとも３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、又は７５％）のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、少なくとも３０％（例えば、少なくとも３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、又は７５％）のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、少なくとも５０％（例えば、少なくとも５５％、６０％、６５％、７０％、又は７５％）のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、少なくとも６０％（例えば、少なくとも６５％、７０％、又は７５％）のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、６０％のグリカン密度を有する。
【００７２】
いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第１の剤は、１０％〜１００％（例えば、１０％〜９０％、１０％〜８０％、１０％〜７０％、１０％〜６５％、１０％〜６０％、２０％〜１００％、２０％〜９０％、２０％〜８０％、２０％〜７５％、２０％〜７０％、２０％〜６５％、２５％〜１００％、２５％〜９０％、２５％〜８５％、２５％〜８０％、２５％〜７５％、２５％〜７０％、２５％〜６５％、３０％〜１００％、３０％〜９０％、３０％〜８５％、３０％〜８０％、３０％〜７５％、３０％〜７０％、又は３０％〜６５％）の範囲のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第１の剤は、２０％〜８５％（例えば、２０％〜８０％、２０％〜７５％、２０％〜７０％、２０％〜６５％、２５％〜８５％、２５％〜８０％、２５％〜７５％、２５％〜７０％、２５％〜６５％、３０％〜８５％、３０％〜８０％、３０％〜７５％、３０％〜７０％、又は３０％〜６５％）の範囲のグリカン密度を有する。いくつかの場合では、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）は、２５％〜７０％（例えば、２５％〜６５％、３０％〜７０％、又は３０％〜６５％）の範囲のグリカン密度を有する。
【００７３】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、パターン認識受容体（pattern recognition receptor、ＰＲＲ）に対する刺激性リガンド（アゴニスト）などの免疫刺激剤である。ＰＲＲの例には、Ｔｏｌｌ様受容体（Toll-like receptor、ＴＬＲ）（例えば、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ７／８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１）、ヌクレオチド結合オリゴマー形成ドメイン様受容体（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor、ＮＬＲ）、Ｃ型レクチン受容体（C-type lectin receptor、ＣＬＲ）、及びＲＩＧ−Ｉ様受容体（RIG-I-like receptor、ＲＬＲ）が含まれるが、これらに限定されない。したがって、いくつかの場合では、第２の剤は、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）、ヌクレオチド結合オリゴマー形成ドメイン様受容体（ＮＬＲ）、Ｃ型レクチン受容体（ＣＬＲ）、及びＲＩＧ−Ｉ様受容体（ＲＬＲ）から選択される。いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、Ｔｏｌｌ様受容体（例えば、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ７／８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１）に対する刺激性リガンド（アゴニスト）である。いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、ＴＬＲ７／８アゴニスト（例えば、Ｔ７８５、例えば、Ｔ７８５を示す図２２Ａ及び図２２Ｂを参照のこと）である。Ｔ７８５は、１−（４−アミノブチル）−２−ブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン［スマイルス（Smiles）：Ｃ１Ｃ（ＣＣＣＣ１）Ｃ（＝Ｏ）ＮＣＣＣＣ［Ｎ］２Ｃ３＝Ｃ（Ｎ＝Ｃ２ＣＣＣＣ）Ｃ（＝ＮＣ４＝ＣＣ＝ＣＣ＝Ｃ３４）Ｎ］）とも称することができる。ＴＬＲ７／８アゴニストの例には、ガーディキモド（gardiquimod）（１−（４−アミノ−２−エチルアミノメチルイミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−オール）、イミキモド（Ｒ８３７−ＴＬＲ７のアゴニスト）、ロキソリビン（loxoribine）（ＴＬＲ７のアゴニスト）、ＩＲＭ２（２−メチル−１−［２−（３−ピリジン−３−イルプロポキシ）エチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン）（ＴＬＲ８のアゴニスト）、ＩＲＭ３（Ｎ−（２−｛２−［４−アミノ−２−（２−メトキシエチル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］エトキシ｝エチル）−Ｎ−メチルシクロヘキサンカルボキサミド）（ＴＬＲ８のアゴニスト）、ＣＬ３０７、７８６、及びＣＬ０９７が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、ＴＬＲ７アゴニスト（例えば、７８４）である。いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、ＴＬＲ８アゴニストである。
【００７４】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、Ｔ７８５である（多価デクチン−２刺激剤の第１の剤は、Ｔ７８５とコンジュゲートされる）。いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、７８４である。いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、７８６である。いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、Ｔ７８５、７８４、又は７８６である。
【００７５】
いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第２の剤は、パターン認識受容体（ＰＲＲ）に対する刺激性リガンド（アゴニスト）などの免疫刺激剤である。いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第２の剤は、Ｔｏｌｌ様受容体（例えば、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ７／８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１）に対する刺激性リガンド（アゴニスト）である。いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第２の剤はＴＬＲ７／８アゴニストである。いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第２の剤は、Ｔ７８５、ガーディキモド（１−（４−アミノ−２−エチルアミノメチルイミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−２−メチルプロパン−２−オール）、イミキモド（Ｒ８３７−ＴＬＲ７のアゴニスト）、ロキソリビン（ＴＬＲ７のアゴニスト）、ＩＲＭ２（２−メチル−１−［２−（３−ピリジン−３−イルプロポキシ）エチル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン）（ＴＬＲ８のアゴニスト）、ＩＲＭ３（Ｎ−（２−｛２−［４−アミノ−２−（２−メトキシエチル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］エトキシ｝エチル）−Ｎ−メチルシクロヘキサンカルボキサミド）（ＴＬＲ８のアゴニスト）、ＣＬ３０７、７８４（ＴＬＲ７のアゴニスト）、７８６（ＴＬＲ７／８のアゴニスト）、又はＣＬ０９７である。
【００７６】
いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第２の剤は７８４である。いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第２の剤は７８６である。いくつかの場合では、デクチン−２刺激多価剤の第１の剤が、デクチン−２刺激糖ポリペプチド（例えば、マンノビオース糖ポリペプチド）である場合、第２の剤はＴ７８５である。
【００７７】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【００７８】
【化１】
2020526482.tif 000002
式中、
Ｊ１は、ＣＨ又はＮであり、
Ｑ１は、次式のものであり、
【００７９】
【化２】
2020526482.tif 000003
Ｔ１、Ｔ２、及び各ＲＨは、独立して、次式のものであり、
【００８０】
【化３】
2020526482.tif 000004
各Ｖは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
各Ｗは、任意選択で存在し、独立して、直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｘは、任意選択で存在し、独立して、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
各Ｙは、任意選択で存在し、独立して、−ＣＯ−又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｚは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
Ｕは、任意選択で存在し、
【００８１】
【化４】
2020526482.tif 000005
であり、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
波線
【００８２】
【化５】
2020526482.tif 000006
は、Ｑ１、Ｔ１、Ｔ２、及びＲＨの結合点を表し、
点
【００８３】
【化６】
2020526482.tif 000007
は、Ｕの結合点を表し、
破線
【００８４】
【化７】
2020526482.tif 000008
は、部分の結合点を表す。
【００８５】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【００８６】
【化８】
2020526482.tif 000009
式中、
Ｑ１は、次式のものであり、
【００８７】
【化９】
2020526482.tif 000010
ＲＨは、次式のものであり、
【００８８】
【化１０】
2020526482.tif 000011
各Ｖは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
各Ｗは、任意選択で存在し、独立して、直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｘは、任意選択で存在し、独立して、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
各Ｙは、任意選択で存在し、独立して、−ＣＯ−又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｚは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
Ｕは、任意選択で存在し、
【００８９】
【化１１】
2020526482.tif 000012
であり、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
波線
【００９０】
【化１２】
2020526482.tif 000013
は、Ｑ１及びＲＨの結合点を表し、
点
【００９１】
【化１３】
2020526482.tif 000014
は、Ｕの結合点を表し、
破線
【００９２】
【化１４】
2020526482.tif 000015
は、部分の結合点を表す。
【００９３】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【００９４】
【化１５】
2020526482.tif 000016
式中、
ＲＨは、次式のものであり、
【００９５】
【化１６】
2020526482.tif 000017
Ｖは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
Ｗは、任意選択で存在し、独立して、直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｘは、任意選択で存在し、独立して、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
各Ｙは、任意選択で存在し、独立して、−ＣＯ−又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｚは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
波線
【００９６】
【化１７】
2020526482.tif 000018
は、ＲＨの結合点を表し、
破線
【００９７】
【化１８】
2020526482.tif 000019
は、部分の結合点を表す。
【００９８】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【００９９】
【化１９】
2020526482.tif 000020
式中、
各Ｘは、任意選択で存在し、独立して、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
Ｙは、任意選択で存在し、独立して、−ＣＯ−又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｚは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
破線
【０１００】
【化２０】
2020526482.tif 000021
は、部分の結合点を表す。
【０１０１】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１０２】
【化２１】
2020526482.tif 000022
であり、
式中、
Ｚは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
破線
【０１０３】
【化２２】
2020526482.tif 000023
は、部分の結合点を表す。
【０１０４】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１０５】
【化２３】
2020526482.tif 000024
式中、
Ｊ１は、ＣＨ又はＮであり、
Ｊ２は、ＣＨ、ＣＨ２、Ｎ、ＮＨ、Ｏ、又はＳであり、
Ｑ１は、次式のものであり、
【０１０６】
【化２４】
2020526482.tif 000025
Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及びＲＨは、独立して、次式のものであり、
【０１０７】
【化２５】
2020526482.tif 000026
各Ｖは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
各Ｗは、任意選択で存在し、独立して、直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｘは、任意選択で存在し、独立して、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
各Ｙは、任意選択で存在し、独立して、−ＣＯ−又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｚは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
Ｕは、任意選択で存在し、
【０１０８】
【化２６】
2020526482.tif 000027
であり、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
【０１０９】
【化２７】
2020526482.tif 000028
は、単結合又は二重結合を表し、
波線
【０１１０】
【化２８】
2020526482.tif 000029
は、Ｑ１、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、及びＲＨの結合点を表し、
点
【０１１１】
【化２９】
2020526482.tif 000030
は、Ｕの結合点を表し、
破線
【０１１２】
【化３０】
2020526482.tif 000031
は、部分の結合点を表す。
【０１１３】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１１４】
【化３１】
2020526482.tif 000032
式中、
Ｊ１は、ＣＨ又はＮであり、
Ｊ２は、ＣＨ２、ＮＨ、Ｏ、又はＳであり、
Ｑ１は、次式のものであり、
【０１１５】
【化３２】
2020526482.tif 000033
Ｔ１、Ｔ２、及びＲＨは、独立して、次式のものであり、
【０１１６】
【化３３】
2020526482.tif 000034
各Ｖは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
各Ｗは、任意選択で存在し、独立して、直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｘは、任意選択で存在し、独立して、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
各Ｙは、任意選択で存在し、独立して、−ＣＯ−又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｚは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
Ｕは、任意選択で存在し、
【０１１７】
【化３４】
2020526482.tif 000035
であり、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
波線
【０１１８】
【化３５】
2020526482.tif 000036
は、Ｑ１、Ｔ１、Ｔ２、及びＲＨの結合点を表し、
点
【０１１９】
【化３６】
2020526482.tif 000037
は、Ｕの結合点を表し、
破線
【０１２０】
【化３７】
2020526482.tif 000038
は、部分の結合点を表す。
【０１２１】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１２２】
【化３８】
2020526482.tif 000039
式中、
Ｊ２は、ＣＨ２、ＮＨ、Ｏ、又はＳであり、
Ｑ１は、次式のものであり、
【０１２３】
【化３９】
2020526482.tif 000040
ＲＨは、次式のものであり、
【０１２４】
【化４０】
2020526482.tif 000041
各Ｖは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
各Ｗは、任意選択で存在し、独立して、直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｘは、任意選択で存在し、独立して、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
各Ｙは、任意選択で存在し、独立して、−ＣＯ−又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｚは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
Ｕは、任意選択で存在し、
【０１２５】
【化４１】
2020526482.tif 000042
であり、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
波線
【０１２６】
【化４２】
2020526482.tif 000043
は、Ｑ１及びＲＨの結合点を表し、
点
【０１２７】
【化４３】
2020526482.tif 000044
は、Ｕの結合点を表し、
破線
【０１２８】
【化４４】
2020526482.tif 000045
は、部分の結合点を表す。
【０１２９】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１３０】
【化４５】
2020526482.tif 000046
式中、
Ｊ２は、ＣＨ２、ＮＨ、Ｏ、又はＳであり、
Ｑ１は、次式のものであり、
【０１３１】
【化４６】
2020526482.tif 000047
ＲＨは、次式のものであり、
【０１３２】
【化４７】
2020526482.tif 000048
Ｖは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
各Ｗは、任意選択で存在し、独立して、直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｘは、任意選択で存在し、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
Ｙは、任意選択で存在し、−ＣＯ−又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｚは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
Ｕは、任意選択で存在し、
【０１３３】
【化４８】
2020526482.tif 000049
であり、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
波線
【０１３４】
【化４９】
2020526482.tif 000050
は、Ｑ１及びＲＨの結合点を表し、
点
【０１３５】
【化５０】
2020526482.tif 000051
は、Ｕの結合点を表し、
破線
【０１３６】
【化５１】
2020526482.tif 000052
は、部分の結合点を表す。
【０１３７】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１３８】
【化５２】
2020526482.tif 000053
式中、
Ｊ２は、ＣＨ２、ＮＨ、Ｏ、又はＳであり、
Ｖは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
Ｘは、任意選択で存在し、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
Ｚは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
ただし、少なくともＸ又はＺが存在し、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
各ｎは、０〜４の整数であり、
破線
【０１３９】
【化５３】
2020526482.tif 000054
は、部分の結合点を表す。
【０１４０】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１４１】
【化５４】
2020526482.tif 000055
式中、
Ｖは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
Ｘは、任意選択で存在し、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
Ｚは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
ただし、少なくともＸ又はＺが存在し、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
各ｎは、０〜４の整数であり、
破線
【０１４２】
【化５５】
2020526482.tif 000056
は、結合点を表す。
【０１４３】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１４４】
【化５６】
2020526482.tif 000057
式中、
Ｖは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
Ｒは、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
各ｎは、０〜４の整数であり、
破線
【０１４５】
【化５７】
2020526482.tif 000058
は、部分の結合点を表す。
【０１４６】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１４７】
【化５８】
2020526482.tif 000059
式中、
Ｑ１は、次式のものであり、
【０１４８】
【化５９】
2020526482.tif 000060
ＲＨは、次式のものであり、
【０１４９】
【化６０】
2020526482.tif 000061
Ｖは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
各Ｗは、任意選択で存在し、独立して、直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
Ｘは、任意選択で存在し、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
Ｙは、任意選択で存在し、−ＣＯ−又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和二価Ｃ１〜Ｃ８アルキルであり、
各Ｚは、任意選択で存在し、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
Ｕは、任意選択で存在し、
【０１５０】
【化６１】
2020526482.tif 000062
であり、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
波線
【０１５１】
【化６２】
2020526482.tif 000063
は、Ｑ１及びＲＨの結合点を表し、
点
【０１５２】
【化６３】
2020526482.tif 000064
は、Ｕの結合点を表し、
破線
【０１５３】
【化６４】
2020526482.tif 000065
は、部分の結合点を表す。
【０１５４】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１５５】
【化６５】
2020526482.tif 000066
式中、
Ｖは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
Ｘは、任意選択で存在し、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
Ｚは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
ただし、少なくともＸ又はＺが存在し、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
各ｎは、０〜４の整数であり、
破線
【０１５６】
【化６６】
2020526482.tif 000067
は、部分の結合点を表す。
【０１５７】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１５８】
【化６７】
2020526482.tif 000068
式中、
Ｖは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
Ｘは、任意選択で存在し、１、２、３、又は４つの二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基であり、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基が存在する場合、２つ以上の二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は縮合しており、結合した二価シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、又はヘテロアリール基は、結合又は−ＣＯ−を介して結合し、
Ｚは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、又は−ＮＲ−であり、
ただし、少なくともＸ又はＺが存在し、
各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
各ｎは、０〜４の整数であり、
破線
【０１５９】
【化６８】
2020526482.tif 000069
は、部分の結合点を表す。
【０１６０】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１６１】
【化６９】
2020526482.tif 000070
式中、
Ｖは、任意選択で存在し、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＮＲ−、又は−ＣＯ−であり、
Ｒは、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素）、ニトリル、−ＣＯＯＨ、又は直鎖状若しくは分枝状の飽和若しくは不飽和Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
各ｎは、０〜４の整数であり、
破線
【０１６２】
【化７０】
2020526482.tif 000071
は、部分の結合点を表す。
【０１６３】
いくつかの場合では、Ｘは、ベンゼン、ナフタレン、ピロール、インドール、イソインドール、インドリジン、フラン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、チオフェン、ピリジン、アクリジン、ナフチリジン、キノロン、イソキノリン、イソオキサゾール、オキサゾール、ベンゾオキサゾール、イソチアゾール、チアゾール、ベンゾチアゾール、イミダゾール、チアジアゾール、テトラゾール、トリアゾール、オキサジアゾール、ベンゾイミダゾール、プリン、ピラゾール、ピラジン、プテリジン、キノキサリン、フタラジン、キナゾリン、トリアジン、フェナジン、シンノリン、ピリミジン、ピリダジン、シクロヘキサン、デカヒドロナフタレン、ピロリジン、オクタヒドロインドール、オクタヒドロイソインドール、テトラヒドロフラン、オクタヒドロベンゾフラン、オクタヒドロベンゾチオフェン、テトラヒドロチオフェン、ピペリジン、テトラデカヒドロアクリジン、ナフチリジン、デカヒドロキノリン、デカヒドロイソキノリン、イソオキサゾリジン、オキサゾリジン、オクタヒドロベンゾオキサゾール、イソチアゾリジン、チアゾリジン、オクタヒドロベンゾチアゾール、イミダゾリジン、１，２，３−チアジアゾリジン、テトラゾリジン、１，２，３−トリアゾリジン、１，２，３−オキサジアゾリジン、オクタヒドロベンゾイミダゾール、オクタヒドロプリン、ピラゾリジン、ピペラジン、デカヒドロプテリジン、デカヒドロキノキサリン、デカヒドロフタラジン、デカヒドロキナゾリン、１，３，５−トリアジン、テトラデカヒドロフェナジン、デカヒドロシンノリン、ヘキサヒドロピリミジン、又はヘキサヒドロピリダジンから選択される１つ以上の二価基である。いくつかの場合では、Ｘの１つ以上の二価基が融合されている。いくつかの場合では、Ｘの１つ以上の二価基が、結合又は−ＣＯ−を介して結合されている。
【０１６４】
いくつかの場合では、Ｘは、次式のものであり
【０１６５】
【化７１】
2020526482.tif 000072
上記の参照構造のいずれも、両側で使用することができる。
【０１６６】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１６７】
【化７２】
2020526482.tif 000073
式中、
Ｖは、任意選択で存在し、−Ｏ−又は−ＮＨ−であり、
各ｎは、０〜４の整数であり、
破線
【０１６８】
【化７３】
2020526482.tif 000074
は、部分の結合点を表す。
【０１６９】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１７０】
【化７４】
2020526482.tif 000075
式中、
Ｖは存在しない。
各ｎは、０〜４の整数であり、
破線
【０１７１】
【化７５】
2020526482.tif 000076
は、部分の結合点を表す。
【０１７２】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものであり、
【０１７３】
【化７６】
2020526482.tif 000077
式中、破線
【０１７４】
【化７７】
2020526482.tif 000078
は、部分の結合点を表す。
【０１７５】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、次式のものである。
【０１７６】
【化７８】
2020526482.tif 000079
【０１７７】
【化７９】
2020526482.tif 000080
【０１７８】
いくつかの場合では、多価デシチン−２刺激剤の第２の剤は、ＴＬＲ２アゴニスト、例えば、Ｎ−α−パルミトイル−Ｓ−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）−（２ＲＳ）−プロピル］−Ｌシステイン、パルミトイル−Ｃｙｓ（（ＲＳ）−２，３−ジ（パルミトイルオキシ）−プロピル）（「Ｐａｍ３Ｃｙｓ」）（例えば、図２３Ｂ及び図２３Ｃを参照のこと）、例えば、Ｐａｍ３Ｃｙｓ、Ｐａｍ３Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−（Ｌｙｓ）４［「Ｐａｍ３Ｃｙｓ−ＳＫＫＫＫ」及び「Ｐａｍ３ＣＳＫ４」］としても既知である］を含む剤である。他のＴＬＲ２アゴニストには、ＯＭ−１７４、リポタイコ酸（ＬＴＡ）、Ｐａｍ２ＣＳＫ４、ペプチドグリカンなどが含まれるが、これらに限定されない。
【０１７９】
いくつかの場合では、第１の剤は、デクチン−２刺激糖ポリマー（上記のペプチド長及びグリカン密度を含む様々な可能なパラメータを有する）（例えば、Ｍａｎ２糖ポリマー、Ｍａｎ２糖ポリペプチド）であり、第２の剤は、ＴＬＲアゴニスト（例えば、Ｒ８４８、Ｔ７８５、又は７８６などのＴＬＲ７／８アゴニスト、７８４などのＴＬＲ７アゴニスト、Ｐａｍ３ＣｙｓなどのＴＬＲ２アゴニスト）である。例えば、いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：ＴＬＲ７／８アゴニストとコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、合成デクチン−２刺激糖ポリマー）（例えば、Ｍａｎ２糖ポリペプチド）を含む。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤（例えば、Ｔ７８５、Ｒ８４８、７８４、７８６）にコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、合成デクチン−２刺激糖ポリマー）（例えば、Ｍａｎ２糖ポリペプチド）を含む。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：ＴＬＲ２アゴニスト（例えば、Ｐａｍ３Ｃｙｓ）にコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、合成デクチン−２刺激糖ポリマー）（例えば、Ｍａｎ２糖ポリペプチド）を含む。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：Ｐａｍ３Ｃｙｓ（Ｐａｍ３Ｃｙｓなど）を含む剤にコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、合成デクチン−２刺激糖ポリマー）（例えば、Ｍａｎ２糖ポリペプチド）を含む。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：Ｐａｍ３Ｃｙｓにコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、合成デクチン−２刺激糖ポリマー）（例えば、Ｍａｎ２糖ポリペプチド）を含む。
【０１８０】
いくつかの場合では、第１の剤は、デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体であり、第２の剤は、ＴＬＲアゴニスト（例えば、Ｔ７８５、Ｒ８４８、又は７８６などのＴＬＲ７／８アゴニスト、７８４などのＴＬＲ７アゴニスト、ＴＬＲ８アゴニスト、又はＰａｍ３ＣｙｓなどのＴＬＲ２アゴニスト）である。レシキモドとしても既知であるＲ８４８は、４−アミノ−２−（エトキシメチル）−α、Ｒ−８４８、Ｒ８４８、Ｓ２８４６３、α−ジメチル−１Ｈ−イミダゾ（４，５−ｃ）キノリン−１−エタノールである（例えば、図２３Ｃを参照のこと）。例えば、いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：ＴＬＲ７／８アゴニストにコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体を含む。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：Ｔ７８５にコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体を含む（図２４を参照のこと）。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：７８４にコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体を含む。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：７８６にコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体を含む。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：ＴＬＲ２アゴニスト（例えば、Ｐａｍ３Ｃｙｓ）にコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体を含む。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：Ｐａｍ３Ｃｙｓである剤にコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体を含む。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：Ｐａｍ３Ｃｙｓにコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体を含む。
【０１８１】
いくつかの場合では、第１の剤は、デクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、Ｍａｎ２糖ポリペプチド）であり、第２の剤は、抗体（例えば、任意の特異性の抗体）である。例えば、いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、第２の剤：抗体（これは、例えば、癌抗原に特異的な抗体であり得るが、任意の特異性の抗体であり得る、すなわち、抗体は、任意の抗原に特異的に結合することができる）にコンジュゲートされた第１の剤：デクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、合成デクチン−２刺激糖ポリマー）（例えば、Ｍａｎ２糖ポリペプチド）を含む。
【０１８２】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、免疫調節剤（例えば、サイトカイン、増殖因子、パターン認識受容体（ＰＲＲ）に対する刺激性リガンドなど）である。例えば、いくつかの場合では、第２の剤は、サイトカインである。サイトカインの例には、ＩＬ−Ｉ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮγ、Ｇ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、及びＧＭ−ＣＳＦが含まれるが、これらに限定されない。したがって、いくつかの場合では、第２の剤は、ＩＬ−Ｉ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮγ、Ｇ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、及びＧＭ−ＣＳＦから選択される。いくつかの場合では、第２の剤は、ＧＭ−ＣＳＦである。いくつかの場合では、第２の剤は、インターフェロンγ（interferon gamma、ＩＦＮγ）、ＩＬ−１５、ＩＦＮ−α、又はＩＦＮ−βなどのサイトカインである。
【０１８３】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、増殖因子である。増殖因子の例には、コロニー刺激因子（colony stimulating factor、ＣＳＦ）、アチビン、結合組織増殖因子（connective tissue growth factor、ＣＴＧＦ）、上皮増殖因子（epidermal growth factor、ＥＧＦ）、エリスロポエチン、線維芽細胞増殖因子（fibroblast growth factor、ＦＧＦ）、ガレクチン、成長ホルモン、肝細胞癌由来増殖因子（hepatoma-derived growth factor、ＨＤＧＦ）、肝細胞増殖因子（hepatocyte growth factor、ＨＧＦ）、インスリン様増殖因子結合タンパク質（insulin-like growth factor binding protein、ＩＧＦＢＰ−１、−３、−４、−５、−６、７など）、インスリン、インスリン様増殖因子（例えば、（insulin-like growth factor）ＩＧＦ−１、−２、−３）、ケラチノサイト増殖因子（keratinocyte growth factor、ＫＧＦ）、レプチン、マクロファージ遊走阻止因子（migration inhibitory factor、ＭＩＦ）、メラノーマ阻害活性（melanoma inhibitory activity、ＭＩＡ）、ミオスタチン、ノギン、オメンチン、オンコスタチン−Ｍ、オステオポンチン、オステオプロテゲリン、血小板由来増殖因子（platelet-derived growth factor、ＰＤＧＦ）、ペリオスチン、胎盤増殖因子（placenta growth factor、ＰＬＧＦ）、胎盤性ラクトゲン、プロラクチン、ＲＡＮＫリガンド（RANK ligand、ＲＡＮＫＬ）、レチノール結合タンパク質（retinol binding protein、ＲＢＰ）、幹細胞因子（stem cell factor、ＳＣＦ）、形質転換増殖因子（transforming growth factor、ＴＧＦβ）、及び血管内皮増殖因子（vascular endothelial growth factor、ＶＥＧＦ）が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの場合では、第２の剤は、デクチン−２発現を誘導する因子である。いくつかの場合では、第２の剤は、ＧＭ−ＣＳＦである。
【０１８４】
いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、ＮＬＲ（ＮＯＤ１／２）リガンド（ＮＯＤ１／２アゴニスト）である。いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、インターフェロン遺伝子（ＳＴＩＮＧ）リガンド／アゴニスト（例えば、ＭＫ−１４５４）の刺激剤である。
【０１８５】
免疫調節剤（多価デクチン−２刺激剤の第２の剤として使用することができる）の例には、抗ＣＴＬＡ４抗体（又はその抗原結合領域）、抗ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１剤（例えば、抗ＰＤ−１抗体又はその抗原結合領域、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２エクトドメインなどのＰＤ−１結合試薬、抗ＰＤ−Ｌ１抗体又はその抗原結合領域、ＰＤ−１エクトドメインなどのＰＤ−Ｌ１結合試薬など）、ＣＤ４０アゴニスト（例えば、ＣＤ４０Ｌ又は抗ＣＤ４０抗体）、４−１ＢＢ調節因子（例えば、４−１ＢＢアゴニスト）、抗ＣＤ４７／ＳＩＲＰＡ剤（例えば、抗ＣＤ４７抗体又はその抗原結合領域、ＳＩＲＰＡエクトドメインなどのＣＤ４７結合試薬、抗ＳＩＲＰＡ抗体又はその抗原結合領域、ＣＤ４７エクトドメインなどのＳＩＲＰＡ結合試薬など）、ＴＩＭ３及び／又はＣＥＡＣＡＭ１の阻害剤、ＴＩＭ３及び／又はＣＥＡＣＡＭ１の阻害剤、ＢＴＬＡ及び／又はＣＤ１６０の阻害剤などが含まれるが、これらに限定されない。したがって、免疫調節剤は、チェックポイント遮断剤であり得る。
【０１８６】
１つの実例として、多価デクチン−２刺激剤の第１の剤は、デクチン−２結合糖ポリマー（若しくは抗デクチン−２抗体、又はマンナンなどの天然デクチン−２リガンド）であり、第２の剤は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（granulocyte-macrophage colony-stimulating factor、ＧＭ−ＣＳＦ）である（すなわち、多価デクチン−２刺激剤は、ＧＭ−ＣＳＦにコンジュゲートされた第１の剤である）。
【０１８７】
いくつかの場合では、直接的デクチン−２刺激剤（すなわち、デクチン−２に結合し、髄膜細胞におけるデクチン−２シグナル伝達を刺激する剤、例えば、抗デクチン−２抗体の抗原結合領域、デクチン−２に結合する糖ポリペプチドなどの糖ポリマー、天然デクチン−２リガンドなど）は、デクチン−２刺激剤が標的細胞表面上に提示されるように、デクチン−２刺激剤を標的細胞（例えば、癌細胞）へと標的化する標的剤にコンジュゲートされている。したがって、いくつかの場合では、多価デクチン−２刺激剤の第２の剤は、デクチン−２刺激剤を標的細胞（例えば、癌細胞）へと標的化する標的化剤（例えば、腫瘍抗原抗体の抗原結合部分）を含む。このような剤は、２つの異なる標的分子（例えば、癌細胞表面上の癌抗原などの標的分子及び骨髄細胞表面上のデクチン−２）に結合することができるため、標的化剤にコンジュゲートされたデクチン−２刺激剤を本明細書では多価デクチン−２刺激剤と称する場合がある。
【０１８８】
いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激剤（例えば、デクチン−２刺激による癌の処置用）は、（ｉ）例えば、骨髄細胞表面上でデクチン−２に特異的に結合し、かつデクチン−２シグナル伝達を刺激するデクチン−２刺激剤（すなわち、直接的デクチン−２刺激剤）である第１の剤、及び（ｉｉ）癌標的化剤（例えば、（ａ）癌細胞標的化剤、すなわち、癌抗原に特異的に結合する標的化剤（例えば、抗腫瘍抗体、腫瘍結合ペプチド、腫瘍結合アプタマーなど）、及び／又は（ｂ）癌免疫療法標的に特異的に結合する剤である免疫調節剤）である第２の剤を含む、多価剤（例えば、多価抗体、抗体−糖コンジュゲートなど）である。
【０１８９】
癌抗原に特異的に結合する（及び多価デクチン−２刺激剤の第２の剤として使用することができる）標的化剤の例は、癌細胞抗原に特異的に結合する抗体の結合領域である。好適な癌抗原は、癌に関連する抗原である。癌抗原（標的化剤が特異的に結合することができる）の例には、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４４、ＣＤ４７、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ９６、ＣＤ９７、ＣＤ９９、ＣＤ１２３、ＣＤ２７９（ＰＤ−１）、ＣＤ２７４（ＰＤ−Ｌ１）、ＥｐＣａｍ、ＥＧＦＲ、１７−１Ａ、ＨＥＲ２、ＣＤ１１７、Ｃ−Ｍｅｔ、ＰＴＨＲ２、ＨＡＶＣＲ２（ＴＩＭ３）、及びＳＩＲＰＡが含まれるが、これらに限定されない。癌抗原に特異的に結合する（及び多価デクチン−２刺激剤の第２の剤として使用することができる）標的化剤の追加の例には、腫瘍結合ペプチド及び腫瘍結合アプタマーが含まれるが、これらに限定されない。
【０１９０】
いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤（例えば、デクチン−２刺激による癌の処置のため）は、（ｉ）骨髄細胞においてデクチン−２シグナル伝達を刺激するように機能する、糖ポリペプチドなどの糖ポリマー（例えば、例えば上記のようなオリゴマンノース糖ポリペプチドなどの天然に存在する糖ポリペプチド又は合成糖ポリペプチド）、及び（ｉｉ）癌細胞標的化剤などの標的化剤（例えば、癌抗原に対する抗体の抗原結合領域、腫瘍結合ペプチド、腫瘍結合アプタマー）を含む。いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤（例えば、デクチン−２刺激を介して癌を処置するため）は、（ｉ）骨髄細胞においてデクチン−２シグナル伝達を刺激するように機能する、糖ポリペプチドなどの糖ポリマー（例えば、例えば上記のようなオリゴマンノース糖ポリペプチドなどの天然又は合成の糖ポリペプチド）、及び（ｉｉ）免疫調節剤（例えば、チェックポイント阻害剤に対する抗体の抗癌結合領域、ＣＤ４０Ｌ又は抗ＣＤ４０抗体などのＣＤ４０アゴニスト、Ｔ細胞調節共刺激分子、チェックポイント遮断剤、癌標的、例えば癌抗原に結合するエクトドメイン、ＰＤ−１、ＰＤ−１Ｌ、ＣＤ４７、ＳＩＲＰＡ、ＣＴＬＡ４などの癌免疫療法標的に特異的に結合するエクトドメイン）を含む。
【０１９１】
抗癌標的化要素（例えば、腫瘍標的化要素）を有する糖コンジュゲート（例えば、オリゴマンノース糖ポリペプチド）は、正常な組織をスペアし、デクチン−２リガンド（例えば、抗デクチン−２抗体由来のデクチン−２結合領域、オリゴマンノース糖ポリペプチド、マンナン多糖、又は他のオリゴマンノースグリカンなど）の選択的提示をもたらすことができる。これらの工学操作生成物の適応性は、機能最適化の機会及び特定の癌に生成物を適合させるための機会も提示する。例えば、いくつかの場合では、対象多価デクチン−２刺激剤は、合成又は天然デクチン−２リガンドにコンジュゲートされた抗腫瘍抗体由来の抗原認識領域を含む。いくつかの場合では、抗デクチン−２抗体は、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒのような高密度のデクチン−２リガンドを有する微生物に類似した、デクチン−２抗体又はリガンド（例えば、マンノビオースに富む糖ペプチド及び／又はＭａｎ−９などの他のオリゴマンノースグリカン）の多価コンジュゲートとして使用される（例えば、固体支持体上の抗デクチン−２抗体を固定化することによる）。合成糖ペプチドを抗体と結合させるために使用することができる１つの可能なコンジュゲーション戦略の一例（これは成功裏に使用された）では、図７Ｃを参照のこと（例えば、抗体上のリジン残基は、ＮＨＳ−シクロオクチン化合物で処理し、続いて、アジド末端糖ペプチドとの生体直交共有結合反応を行うことができる）。
【０１９２】
二重特異性多価抗体は、デクチン−２及び腫瘍関連細胞表面分子（例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４４、ＣＤ４７、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ９６、ＣＤ９７、ＣＤ９９、ＣＤ１２３、ＣＤ２７９（ＰＤ−１）、ＣＤ２７４（ＰＤ−Ｌ１）、ＥｐＣａｍ、ＥＧＦＲ、１７−１Ａ、ＨＥＲ２、ＣＤ１１７、Ｃ−Ｍｅｔ、ＰＴＨＲ２、ＨＡＶＣＲ２（ＴＩＭ３）など）の両方の抗原認識ドメイン（Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、ｓｃＤｂなど）を含むことができる。これらの遺伝子操作された抗体は、臨床開発を行っている二価の二重特異性Ｔ細胞誘導（bispecific T cell engager、ＢｉＴＥ）又は四価の二重特異性抗体（tetravalent bispecific antibody、ＴａｎｄＡｂ）のような免疫細胞及び腫瘍細胞の両方を標的化する二重特異性抗体の他の反復に類似し得る。糖コンジュゲートは、デクチン−２によって認識されるグリカン（例えば、オリゴマンノース糖ペプチド、マンナン多糖類、及び／又はＭａｎ−９などの他のオリゴマンノースグリカン）（例えば、対象デクチン−２刺激糖ポリペプチド）と組み合わされた、腫瘍標的化成分（例えば、ＥｐＣＡＭ抗体などの癌抗原に対する抗体、腫瘍結合ペプチド、腫瘍結合アプタマーなど）を含むことができる。いくつかの場合では、腫瘍標的成分を、デクチン−２リガンドの複数のコピーを提示するように直接修飾することができ、又はグリカン修飾タンパク質（例えば、ストレプトアビジン）へのリンカー（例えば、ビオチン）を使用して、グリカン価を増加させ、炭水化物修飾から生じる腫瘍抗原結合の任意の破壊を回避することができる。タンパク質を炭水化物で修飾するための任意の好都合な方法、例えば、オリゴマンノースグリカンなどの複合炭水化物のコンジュゲーションンのためのプロトコル（例えば、Ｇｉｌｄｅｒｓｌｅｅｖｅ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ．２００８  Ｊｕｌ；１９（７）：１４８５−９０）を参照のこと）を使用することができる。したがって、このような分子で覆われた腫瘍細胞は、デクチン−２リガンド発現微生物と類似し、キフネンシン処理した腫瘍細胞のように、ＴＡＭ細胞と腫瘍細胞との間の接触点でデクチン−２シグナル伝達を活性化する。
【０１９３】
デクチン−２活性化ドメイン及び腫瘍標的化ドメインの両方は、特異性、安定性、親和性、及び価数に関して修飾されてもよく、又は他の分子（例えば、他のＰＲＲリガンド、サイトカイン、毒素など）と組み合わせてもよい。例えば、抗体ベースの糖コンジュゲートは、デクチン−２シグナル伝達をより効率的に引き起こすために、非常に高密度のオリゴマンノースグリカン（例えば、（oligomannose glycan）Ｍａｎ−９）を提示するように修飾されてもよい。一方、抗体成分の可変領域は、特定の腫瘍抗原を認識するように変更されてもよく、定常領域は、ＴＡＭ細胞上の活性化Ｆｃ受容体とより効果的に係合するように修飾されてもよい。デクチン−２及びＦｃ受容体シグナル伝達の両方をこのようにして同時に活性化することは、より効率的な腫瘍細胞の死滅、取り込み、及び抗原提示、並びに続いて、より堅牢な適応免疫応答をもたらすことができる。
【０１９４】
多価抗体を生成するための様々な方法が記載されており、デクチン−２特異的抗体複合体を生成するために使用することができる。同様に、デクチン−２によって認識されるグリカンを組み込むいくつかのものを含む、炭水化物ベースの化合物（例えば、糖ポリマー、糖デンドリマー、糖クラスター、糖リノ粒子）の生成について記載されている。Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の細胞壁抽出物と同様に、これらの抗体ベースの複合体及び炭水化物ベースの複合体の両方は、デクチン−２依存様式で（すなわち、デクチン−２刺激剤として）ＴＡＭを直接刺激するために使用することができる。
【０１９５】
リンカー
いくつかの場合では、本発明の多価デクチン−２刺激剤は、少なくとも１つのリンカーを含む。抗体及び／又は免疫調節剤は、タンパク質修飾のための様々な化学を使用して多価デクチン−２刺激剤（例えば、デクチン−２に結合し、デクチン−２シグナル伝達を刺激する剤）に結合させることができ、本明細書に記載のリンカーは、多価デクチン−２刺激剤と反応性リンカー基を有する試薬との反応から生じる。多種多様なこのような試薬が当該技術分野において既知である。このような試薬の例としては、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳ）エステル及びＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミジル（スルホ−ＮＨＳ）エステル（アミン反応性）；カルボジイミド（アミン及びカルボキシル反応性）；ヒドロキシメチルホスフィン（アミン反応性）；マレイミド（チオール反応性）；Ｎ−ヨードアセトアミド（チオール反応性）などのハロゲン化アセトアミド；アリールアジド（一級アミン反応性）、フッ素化アリールアジド（炭素−水素（Ｃ−Ｈ）挿入による反応）；ペンタフルオロフェニル（pentafluorophenyl、ＰＦＰ）エステル（アミン反応性）；テトラフルオロフェニル（tetrafluorophenyl、ＴＦＰ）エステル（アミン反応性）；イミドエステル（アミン反応性）；イソシアネート（ヒドロキシル反応性）；ビニルスルホン（チオール、アミン、及びヒドロキシル反応性）；ピリジルジスルフィド（チオール反応性）；及びベンゾフェノン誘導体（Ｃ−Ｈ結合挿入による反応）が挙げられるが、これらに限定されない。更なる試薬には、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，２００８に記載されているものが含まれるが、これらに限定されない。
【０１９６】
典型的には、本明細書に記載のリンカーは、抗体及び／又は免疫調節剤を多価デクチン−２刺激剤に結合するために使用される任意の化学部分の残部を介して、多価デクチン−２刺激剤に結合されている。例えば、いくつかの場合では、抗体及び／又は免疫調節剤は、リンカーを介して、システイン残基で多価デクチン−２刺激剤に結合されている。したがって、抗体及び／又は免疫調節剤は、リンカーを介して多価デクチン−２刺激剤に結合され、リンカーはマレイミド又はスクシンイミドサブユニットを介して多価デクチン−２刺激剤に結合されている。別の例では、いくつかの場合では、抗体及び／又は免疫調節剤は、リンカーを介して、リジン残基のアミンで多価デクチン−２刺激剤に結合されている。したがって、抗体及び／又は免疫調節剤は、リンカーを介して多価デクチン−２刺激剤に結合され、リンカーは、カルボニルサブユニットを介して多価デクチン−２刺激剤に結合されている。別の例では、抗体及び／又は免疫調節剤は、リンカーを介して、修飾されたアミノ酸残基のアミンで多価デクチン−２刺激剤に結合されている。したがって、抗体及び／又は免疫調節剤は、リンカーを介して多価デクチン−２刺激剤に結合され、リンカーは、修飾されたアミノ酸サブユニット及びカルボニルサブユニットを介して多価デクチン−２刺激剤に結合されている。
【０１９７】
リンカーが多価デクチン−２刺激剤並びに抗体及び／又は免疫調節剤に共有結合されている場合に、多価デクチン−２刺激剤並びに抗体及び／又は免疫調節剤の機能が維持されるように、リンカーは任意の好適な長さを有することができる。リンカーは、約３Å以上、例えば、約４Å以上、約５Å以上、約６Å以上、約７Å以上、約８Å以上、約９Å以上、約１０Å以上、又は約２０Å以上の長さを有することができる。あるいは又は更に、リンカーは、約１００Å以下、例えば、約９０Å以下、約８０Å以下、約７０Å以下、約６０Å以下、約５０Å以下、約４５Å以下、約４０Å以下、約３５Å以下、約３０Å以下、約２５Å以下、約２０Å以下、又は約１５Å以下の長さを有することができる。したがって、リンカーは、前述の端点のうちのいずれか２つによって画定される長さを有することができる。リンカーは、約３Å〜約１００Å、例えば、約３Å〜約９０Å、約３Å〜約８０Å、約３Å〜約７０Å、約３Å〜約６０Å、約３Å〜約５０Å、約３Å〜約４５Å、約３Å〜約４０Å、約３Å〜約３５Å、約３Å〜約３０Å、約３Å〜約２５Å、約３Å〜約２０Å、約３Å〜約１５Å、約５Å〜約５０Å、約５Å〜約２５Å、約５Å〜約２０Å、約１０Å〜約５０Å、約１０Å〜約２０Å、約５Å〜約３０Å、約５Å〜約１５Å、約２０Å〜約１００Å、約２０Å〜約９０Å、約２０Å〜約８０Å、約２０Å〜約７０Å、約２０Å〜約６０Å、又は約２０Å〜約５０Åの長さを有することができる。いくつかの場合では、リンカーは、約２０Å〜約１００Åの長さを有する。
【０１９８】
いくつかの場合では、リンカーは、生理学的条件下で開裂しない。本明細書で使用する場合、「生理学的条件」という語句は、摂氏２０〜４０度の温度範囲、大気圧（すなわち、１ａｔｍ）、ｐＨ約６〜約８、並びに１つ以上の生理学的酵素、プロテアーゼ、酸、及び塩基の存在を指す。
【０１９９】
いくつかの場合では、リンカーのうちの少なくとも１つは、生理学的条件下で開裂する。例えば、リンカーは、酵素プロセス又は代謝プロセスによって開裂され得る。
【０２００】
リンカーは、リンカーの所望の長さを達成することができるように、任意の好適な有機二価結合部分であり得る。
【０２０１】
例えば、リンカーは、式Ｓ１を有するか又は含むことができ、
【０２０２】
【化８０】
2020526482.tif 000081
式中、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜１２個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２個）の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖であり、Ｇ１は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｇ２は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、ａは、１〜４０の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜２０の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜１０の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜５の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜３の整数である。特定の実施形態では、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜８個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、又は８個）の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖である。
【０２０３】
リンカーは、式Ｓ２を有するか又は含むことができ、
【０２０４】
【化８１】
2020526482.tif 000082
式中、ａは、１〜４０の整数であり、Ｇ１は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｇ２は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合である。いくつかの場合では、ａは、１〜２０の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜１０の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜５の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜３の整数である。
【０２０５】
リンカーは、式Ｓ３を有するか又は含むことができ、
【０２０６】
【化８２】
2020526482.tif 000083
式中、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜１２個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２個）の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖であり、Ｇ１は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｇ２は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、各Ａは、独立して、任意のアミノ酸から選択され、ｃは、１〜２０の整数である。いくつかの場合では、ｃは、１〜１０の整数である。いくつかの場合では、ｃは、１〜５の整数である。いくつかの場合では、ｃは、１〜２の整数である。特定の実施形態では、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜８個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、又は８個）の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖である。
【０２０７】
リンカーは、式Ｓ４を有するか又は含むことができ、
【０２０８】
【化８３】
2020526482.tif 000084
式中、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜１２個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２個）の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖であり、Ｇ１は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｇ２は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、ｃは、１〜２０の整数である。いくつかの場合では、ｃは、１〜１０の整数である。いくつかの場合では、ｃは、１〜５の整数である。特定の実施形態では、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜８個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、又は８個）の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖である。
【０２０９】
リンカーは、式Ｓ５を有するか又は含むことができ、
【０２１０】
【化８４】
2020526482.tif 000085
式中、各Ｒ２は、任意選択で存在し、独立して、１〜１２個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２個）を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖であり、Ｇ１は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｇ２は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｍは、任意選択で存在し、ＣＨ２、ＮＨ、Ｏ、又はＳであり、各Ａは、独立して、任意のアミノ酸から選択され、ｃは、１〜２０の整数である。いくつかの場合では、ｃは、１〜１０の整数である。いくつかの場合では、ｃは、１〜５の整数である。いくつかの場合では、ｃは、１〜２の整数である。特定の実施形態では、各Ｒ２は、任意選択で存在し、独立して、１〜８個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、又は８個）の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖である。
【０２１１】
リンカーは、式Ｓ６を有するか又は含むことができ、
【０２１２】
【化８５】
2020526482.tif 000086
式中、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜１２個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２個）を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖であり、Ｇ１は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｇ２は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合である。特定の実施形態では、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜８個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、又は８個）の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖である。
【０２１３】
リンカーは、式Ｓ７を有するか又は含むことができ、
【０２１４】
【化８６】
2020526482.tif 000087
式中、各Ｒ２は、任意選択で存在し、独立して、１〜１２個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２個）を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖であり、Ｇ１は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｇ２は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合である。特定の実施形態では、各Ｒ２は、任意選択で存在し、独立して、１〜８個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、又は８個）の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖である。
【０２１５】
リンカーは、式Ｓ８を有するか又は含むことができ、
【０２１６】
【化８７】
2020526482.tif 000088
式中、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜１２個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２個）を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖であり、Ｇ１は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｇ２は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｍは、任意選択で存在し、ＣＨ２、ＮＨ、Ｏ、又はＳであり、ａは、１〜４０の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜２０の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜１０の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜５の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜３の整数である。いくつかの場合では、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜８個（すなわち、１、２、３、４、５、６、７、又は８個）の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖である。
【０２１７】
リンカーは、式Ｓ９を有するか又は含むことができ、
【０２１８】
【化８８】
2020526482.tif 000089
式中、各ａは、独立して、１〜４０の整数であり、Ｊは、−ＮＨ−、−ＮＲ１−、−ＣＯ−、−Ｓ（Ｏ２）−、
−Ｓ（Ｏ２）ＮＨ−、−Ｓ（Ｏ２）ＮＲ１−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１−、又は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル若しくはヘテロアルキル基又はＣ１〜Ｃ１０アリール若しくはヘテロアリール基であり、Ｇ１は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｇ２は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合である。いくつかの場合では、ａは、１〜２０の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜１０の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜５の整数である。いくつかの場合では、ａは、１〜３の整数である。
【０２１９】
リンカーＳ１〜Ｓ９は、両側で使用することができ、これは、リンカーが、波線
【０２２０】
【化８９】
2020526482.tif 000090
によって表されるいずれかの末端で抗体及び／若しくは免疫調節剤又は多価デクチン−２刺激剤に結合させることができることを意味する。
【０２２１】
いくつかの場合では、リンカーは、ペプチドサブユニット及び／又はポリエチレングリコールサブユニットを含む。
【０２２２】
リンカーが、ポリエチレングリコールサブユニットを含む場合、ポリエチレングリコールサブユニットは、典型的には約２〜約２５個のポリエチレングリコール単位を含む。いくつかの場合では、リンカーは、少なくとも２個のポリエチレングリコール単位（例えば、少なくとも３個のポリエチレングリコール単位、少なくとも４個のポリエチレングリコール単位、少なくとも５個のポリエチレングリコール単位、少なくとも６個のポリエチレングリコール単位、少なくとも７個のポリエチレングリコール単位を含み、少なくとも８個のポリエチレングリコール単位、少なくとも９個のポリエチレングリコール単位、少なくとも１０個のポリエチレングリコール単位、少なくとも１１個のポリエチレングリコール単位、少なくとも１２個のポリエチレングリコール単位、少なくとも１３個のポリエチレングリコール単位、少なくとも１４個のポリエチレングリコール単位、少なくとも１５個のポリエチレングリコール単位、少なくとも１６個のポリエチレングリコール単位、少なくとも１７個のポリエチレングリコール単位、少なくとも１８個のポリエチレングリコール単位、少なくとも１９個のポリエチレングリコール単位、少なくとも２０個のポリエチレングリコール単位、少なくとも２１個のポリエチレングリコール単位、少なくとも２２個のポリエチレングリコール単位、少なくとも２３個のポリエチレングリコール単位、少なくとも２４個のポリエチレングリコール単位、又は少なくとも２５個のポリエチレングリコール単位を含む。したがって、リンカーは、ジ（エチレングリコール）基、トリ（エチレングリコール）基、若しくはテトラ（エチレングリコール）基、５個のポリエチレングリコール単位、６個のポリエチレングリコール単位、８個のポリエチレングリコール単位、１０個のポリエチレングリコール単位、１２個のポリエチレングリコール単位、２４個のポリエチレングリコール単位、又は２５個のポリエチレングリコール単位を含むことができる。いくつかの場合では、リンカーは、約２〜約１６個のポリエチレングリコール単位、又は約２〜約１０個のポリエチレングリコール単位を含む。
【０２２３】
リンカーが、ペプチドサブユニットを含む場合、ペプチドサブユニットは、典型的には、約２〜約５０個のアミノ酸を含む。いくつかの場合では、リンカーは、少なくとも２個のアミノ酸残基（例えば、少なくとも３個のアミノ酸残基、少なくとも４個のアミノ酸残基、少なくとも５個のアミノ酸残基、少なくとも６個のアミノ酸残基、少なくとも７個のアミノ酸残基、少なくとも８個のアミノ酸残基、少なくとも９個のアミノ酸残基、少なくとも１０個のアミノ酸残基、少なくとも１１個のアミノ酸残基、少なくとも１２個のアミノ酸残基、少なくとも１３個のアミノ酸残基、少なくとも１４個のアミノ酸残基、少なくとも１５個のアミノ酸残基、少なくとも１６個のアミノ酸残基、少なくとも１７個のアミノ酸残基、少なくとも１８個のアミノ酸残基、少なくとも１９個のアミノ酸残基、少なくとも２０個のアミノ酸残基、少なくとも２１個のアミノ酸残基、少なくとも２２個のアミノ酸残基、少なくとも２３個のアミノ酸残基、少なくとも２４個のアミノ酸残基、又は少なくとも２５個のアミノ酸残基）を含む。いくつかの場合では、リンカーは、２個のアミノ酸残基、３個のアミノ酸残基、４個のアミノ酸残基、５個のアミノ酸残基、６個のアミノ酸残基、８個のアミノ酸残基、１０個のアミノ酸残基、１２個のアミノ酸残基、２４個のアミノ酸残基、又は２５個のアミノ酸残基を含む。
【０２２４】
ペプチドサブユニットは、修飾された又は未修飾の天然又は未天然アミノ酸を含むことができる。典型的には、アミノ酸は、天然又は非天然の未修飾アミノ酸である。例えば、アミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、又はヒスチジンであり得る。いくつかの場合では、ペプチドサブユニットの少なくとも１個のアミノ酸は、リンカー及び／又はアジュバントで修飾することができなければならない。例えば、アミノ酸は、リジン、セリン、システイン、トレオニン、チロシン、アスパラギン、又はグルタミンであり得る。いくつかの場合では、少なくとも１つのアミノ酸はリジンである。リンカー及び／又は剤がアミノ酸骨格上の窒素及び／又はアミノ酸側鎖上の窒素に結合することができるので、リジンは特に有利である。
【０２２５】
いくつかの場合では、リンカーは、ポリエチレングリコールサブユニット及びペプチドサブユニットを含む。
【０２２６】
リンカーは、二価シクロヘキシレン基を更に含むことができる。
【０２２７】
いくつかの場合では、リンカーは、以下から選択され：
【０２２８】
【化９０】
2020526482.tif 000091
式中、Ｒ２は、任意選択で存在し、１〜８個の炭素単位を含む、直鎖状若しくは分枝状、環状若しくは直線状、飽和若しくは不飽和のアルキル、ヘテロアルキル、アリール、又はヘテロアリール鎖であり、ａは、１〜４０の整数であり、各Ａは、独立して、任意のアミノ酸から選択され、下付き文字ｃは、１〜２５の整数であり、Ｇ１は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、Ｇ２は、ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、又は結合であり、波線
【０２２９】
【化９１】
2020526482.tif 000092
は、結合点を表す。いくつかの場合では、ａは、２〜２５の整数である。いくつかの場合では、ｃは、２〜８の整数である。
【０２３０】
いくつかの場合では、リンカーは、次式の構造を有するか又は含むことができ、
【０２３１】
【化９２】
2020526482.tif 000093
式中、ａは、１〜４０の整数である。いくつかの場合では、ａは、２〜２５の整数である。いくつかの場合では、ａは、２、３、４、５、６、８、１０、１２、２４、又は２５である。
【０２３２】
例示的なリンカーは、本明細書の開示から明らかであろう。
【０２３３】
共投与及び混合
上記の第１及び第２の剤に関して、第１及び第２の剤が互いにコンジュゲートされていない混合物／組み合わせとして、これらの剤を投与することもできる。したがって、上記の第１及び第２の剤は、必ずしも多価剤としてコンジュゲートされる必要はない。したがって、多価デクチン−２刺激剤の第１の剤及び第２の剤に関する上記の剤の全ては、（例えば、コンジュゲートされていない別個の剤として）共投与することができ、同時に投与し、混合物として投与し、連続して（続けて）投与することができる。
【０２３４】
（ｄ）α−マンノシダーゼクラス１（α−マンノシダーゼＩ）阻害剤
いくつかの実施形態では、癌を有する個体を処置する方法は、α−マンノシダーゼクラス１阻害剤（例えば、キフネンシン；１−デオキシマンノジリマイシン；ＭＡＮ１Ｂ１、ＭＡＮ１Ａ１、ＭＡＮ１Ａ２、及びＭＡＮ１Ｃ１から選択される１つ以上のマンノシダーゼの発現を特異的に低減するＲＮＡｉ剤；ＭＡＮ１Ｂ１、ＭＡＮ１Ａ１、ＭＡＮ１Ａ２、及びＭＡＮ１Ｃ１から選択される１つ以上のマンノシダーゼの発現を特異的に低減する遺伝子編集剤）を含む組成物を個体に投与することを含む。デクチン−２は、複数の末端マンノース残基を含み、高マンノース型グリカンと強く反応する、様々な病原体成分を認識する。高マンノースグリカンは、真核細胞中でのタンパク質のＮ−結合グリコシル化の際に生成される一般的な中間体グリカン種である。哺乳動物細胞において、これらの高マンノースグリカンは、最初の高マンノース前駆体Ｍａｎ９ＧｌｃＮＡｃ２（Ｍａｎ−９）から末端マンノース残基を開裂する様々なマンノシダーゼの作用を必要とするプロセスにより、複合型又はハイブリッド型Ｎ−グリカンに更に加工される。結果として、マンノシダーゼ阻害剤（例えば、α−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤であるキフネンシン及び／又は１−デオキシマンノジリマイシン）で細胞を処理することにより、Ｎ−結合グリコシル化パターンのシフトが生じ、これにより、高マンノース種（例えば、Ｍａｎ−９）で主に修飾された糖タンパク質が得られ、したがって、増加したレベルのデクチン−２リガンドを細胞表面上に提示する細胞が得られる。
【０２３５】
小分子α−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤（α−マンノシダーゼＩ阻害剤とも称される）（すなわち、キフネンシン、１−デオキシマンノジリマイシンなど）は、哺乳動物細胞の小胞体（ＥＲ）及びゴルジ複合体中の複数のマンノシダーゼに作用する。いくつかの場合では、対象α−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤は、Ｎ−グリコシル化経路における最高次の高マンノース種であるＭＡＮ−９に作用するための第１のマンノシダーゼである、ＥＲ  α−マンノシダーゼＩ（ＭＡＮ１Ｂ１）の選択的阻害剤である。しかしながら、デクチン−２は、低次の高マンノースグリカン（例えば、Ｍａｎ−７／８）にも結合する。したがって、いくつかの場合では、対象α−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤は、１つ以上の下流ゴルジマンノシダーゼ（ＭＡＮ１Ａ１、ＭＡＮ１Ａ２、ＭＡＮ１Ｃ１）の選択的阻害剤である。
【０２３６】
いくつかの場合では、阻害剤は、小分子（例えば、キフネンシン及び／又は１−デオキシマンノジリマイシンなどのα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤）である。いくつかの場合では、阻害剤（本明細書ではα−マンノシダーゼクラス１還元剤とも称される）は、ＲＮＡＩ剤又はマンノシダーゼを標的とする（例えば、ＭＡＮ１Ｂ１、ＭＡＮ１Ａ１、ＭＡＮ１Ａ２、ＭＡＮ１Ｃ１から選択される１つ以上のマンノシダーゼの発現を減少させる）遺伝子編集剤である。ＲＮＡｉ剤又は遺伝子編集剤などのα−マンノシダーゼクラス１還元剤によって標的化され得る遺伝子には、ＭＡＮ１Ｂ１、ＭＡＮ１Ａ１、ＭＡＮ１Ａ２、及びＭＡＮ１Ｃ１が含まれる。
【０２３７】
ＲＮＡｉ剤には、ＭＡＮ１Ｂ１、ＭＡＮ１Ａ１、ＭＡＮ１Ａ２、ＭＡＮ１Ｃ１から選択される１つ以上のタンパク質をコードするＲＮＡを特異的に標的化するｓｈＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、及びマイクロＲＮＡ剤が含まれる。いくつかの場合では、ＲＮＡｉ剤は、ＭＡＮ１Ｂ１をコードするＲＮＡを特異的に標的化する。
【０２３８】
遺伝子編集剤には、遺伝子の発現を改変するために細胞のゲノムを標的化することができる剤が含まれる。いくつかの場合では、遺伝子編集剤は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ剤（例えば、ｃａｓタンパク質（複数可）＋１つ以上の適切なガイドＲＮＡ、例えば、Ｃａｓ９＋ガイドＲＮＡ、ｃｐｆ１＋ガイドＲＮＡ）である。いくつかの場合では、遺伝子編集剤は、ジンクフェンガーヌクレアーゼ剤である。いくつかの場合では、遺伝子編集剤は、ＴＡＬＥ又はＴＡＬＥＮ剤である。本明細書で使用する「遺伝子編集剤」という用語は、（例えば、相同組み換え修復又は非相同末端再結合を介して）変異を誘導するために標的化ＤＮＡを開裂する遺伝子編集剤を包含し、標的開裂の非存在下で発現を低減することができる遺伝子編集剤（例えば、転写抑制因子又は発現を低下／低減することができるエピジェネティクス修飾因子（epigenetic modifier）などの発現調節因子と融合又はコンジュゲートされた遺伝子編集剤）も含む。
【０２３９】
本明細書で使用する「α−マンノシダーゼクラス１阻害剤」という用語は、選択的腫瘍標的化のために使用することができる、腫瘍特異的酵素活性化ケージング（caging）基を有するものなどのマンノシダーゼ阻害剤のプロドラッグ形態も包含する。更に、α−マンノシダーゼクラス１阻害剤を、腫瘍送達のために抗体−薬物コンジュゲートに組み込むことができる。
【０２４０】
いくつかの実施形態では、癌を有する個体を処置する方法は、個体由来の癌細胞をインビトロ又はエクスビボでα−マンノシダーゼクラス１阻害剤と接触させること、及び接触させた癌細胞を個体に導入することを含む。理論に束縛されるものではないが、これは機能するが、その理由は、α−マンノシダーゼクラス１阻害剤は、（例えば、細胞表面上の末端マンノース／マンノビオース残基の提示及び／又は密度を増加させることにより）標的細胞（例えば、癌細胞）の表面上においてデクチン−２刺激性化合物の減少したレベルを引き起こし、これにより、標的細胞が疫応答を刺激する可能性がより高くなり、及び／又は標的細胞が、その他で刺激されるであろうよりも強く免疫応答を刺激するようになるからである。いくつかの場合では、接触させた癌細胞は、個体に全身投与される。いくつかの場合では、接触させた癌細胞は、局所的に（例えば、個体の腫瘍にｓ．ｃ．、ｉ．ｄ．、ｉ．ｍ．などで）投与される。
【０２４１】
いくつかの実施形態では、癌を有する個体を処置する方法は、（例えば、α−マンノシダーゼクラス１阻害剤を個体に投与することによって）個体由来の癌細胞をインビボでα−マンノシダーゼクラス１阻害剤と接触させることを含む。いくつかの場合では、α−マンノシダーゼクラス１阻害剤は全身送達される。いくつかの場合では、α−マンノシダーゼクラス１阻害剤は、局所的に（例えば、個体の腫瘍、腫瘍が最近切除された領域などに）送達される。
【０２４２】
骨髄細胞、ＡＰＣ、及び／又はＴ細胞を刺激する
いくつかの実施形態では（例えば、方法が、対象デクチン−２刺激剤を含むデクチン−２刺激組成物を個体に投与することを含む場合）、内在性骨髄細胞（個体中に存在する骨髄細胞）（例えば、腫瘍関連骨髄（ＴＡＭ）細胞、樹状細胞（ＤＣ）、腫瘍関連ＤＣ、抗原提示細胞（ＡＰＣ）、腫瘍関連ＡＰＣなど）を、投与された組成物とインビボで接触させる。したがって、本方法は、癌を有する個体を処置するインビボ方法とみなすことができる。例えば、デクチン−２刺激組成物を個体に投与することができ（例えば、全身的又は局所的に、例えば、腫瘍の中又はその近くに、腫瘍切除部位の中又はその近くなどに注入される）、それにより、内在性骨髄細胞は、デクチン−２刺激組成物と接触する。次いで、刺激された骨髄細胞は、癌細胞に対する増強された免疫応答を有することができ、例えば、刺激されたＡＰＣは、装填すること（loaded）（例えばＴ細胞への提示のための、ＡＰＣによる標的抗原の取り込み）ができ、次いで、インビボで内因性Ｔ細胞と接触することができる。
【０２４３】
本開示の態様は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）（例えば、樹状細胞（ＤＣ）、マクロファージ、Ｂ細胞）を刺激するための組成物及び方法を含む。いくつかの実施形態では、このような方法は、（ａ）インビトロ又はエクスビボで癌細胞をα−マンノシダーゼクラス１阻害剤と接触させて、阻害剤を接触させた癌細胞（例えば、細胞表面上において末端マンノース／マンノビオース残基の増加した提示及び／又は密度を有し、したがって、デクチン−２リガンドの低減した表面レベルを有するもの）を生成すること、及び（ｂ）ＡＰＣを、阻害剤を接触させた癌細胞と接触させること（例えば、ＡＰＣ細胞を刺激して癌抗原を「装填する」ことができ、例えば、ＡＰＣを刺激して癌細胞を包み込むことができる）を含む。いくつかの場合では、本方法は、接触させたＡＰＣを個体に導入することを更に含む（例えば、次いで、癌細胞を接触させ、Ｔ細胞を接触させて、癌細胞に対する免疫応答を刺激／増強することができる）。いくつかの場合では、本方法は、（例えば、ＡＰＣを装填させるために）ＡＰＣを、阻害剤を接触させた癌細胞と接触させた後、Ｔ細胞を、接触させた（例えば、「装填された」）ＡＰＣと接触させ、それにより、Ｔ細胞を刺激することを更に含む。いくつかの場合では、本方法は、刺激されたＴ細胞を個体に導入することを更に含む。細胞（例えば、癌細胞、ＡＰＣ、Ｔ細胞）のいずれか又は全ては、処置される個体の自己由来であり得る。例えば、いくつかの場合では、Ｔ細胞（例えば、Ｔ細胞のみ）は、処置される個体の自己由来である。いくつかの場合では、ＡＰＣ（例えば、ＡＰＣのみ）は、処置される個体の自己由来である。いくつかの場合では、癌細胞（例えば、癌細胞のみ）は、処置される個体の自己由来である。いくつかの場合では、癌細胞及びＡＰＣは、処置される個体の自己由来である。いくつかの場合では、癌細胞及びＴ細胞は、処置される個体の自己由来である。いくつかの場合では、ＡＰＣ及びＴ細胞は、処置される個体の自己由来である。いくつかの場合では、癌細胞、ＡＰＣ、及びＴ細胞は、処置される個体の自己由来である。いくつかの場合では、Ｔ細胞（例えば、個体）を接触させる工程は、インビボである。いくつかの場合では、Ｔ細胞（例えば、個体）を接触させる工程は、インビトロである。
【０２４４】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞を、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣと接触させる。接触中、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣは、Ｔ細胞に抗原を提示して、接触させたＴ細胞を生成し、接触させたＴ細胞は、提示された抗原に特異的な免疫応答を生成する。Ｔ細胞は、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、又はＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の組み合わせであり得る。
【０２４５】
Ｔ細胞を装填されたＡＰＣ、例えばＤＣと接触させることは、インビトロ又はインビボであり得る。したがって、「Ｔ細胞に接触する」という語句は、インビトロ及びインビボでの接触の両方を包含する。接触がインビボである場合、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣを個体に投与し、次いでＡＰＣ、例えばＤＣを個体の内在性Ｔ細胞と接触させて、免疫応答を誘導することができる。したがって、「個体のＴ細胞を、装填されたＡＰＣと接触させる」工程、例えば、「個体のＴ細胞を、装填されたＤＣと接触させる工程」の工程は、インビボで行われる場合、いくつかの場合では、「装填されたＤＣを個体に導入する」ことができると記載することができる。例えば、いくつかの場合では、対象方法は、（ａ）インビトロで、ＡＰＣ、例えばＤＣを（ｉ）標的抗原及び（ｉｉ）対象デクチン−２刺激剤と、ＡＰＣ、例えばＤＣによる標的抗原の取り込みに有効な用量及び時間で接触させて、それにより、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣを生成すること、及び（ｂ）装填されたＡＰＣ、例えばＤＣを個体に導入することを含む。ＡＰＣ（例えば、ＤＣ）及びＴ細胞は、「細胞の投与」について以下に記載されるようにして、Ｔ細胞を個体に投与することができる。
【０２４６】
いくつかの場合では、対象方法は、インビボで行うことができる。いくつかのそのような場合、接触はインビボであり、内因性ＡＰＣ、例えばＤＣはインビボで装填され、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣをインビボでＴ細胞と接触させる。したがって、本方法は、インビボ投与（例えば、対象デクチン−２刺激剤の投与）によって行うことができる。例えば、内因性ＡＰＣ、例えばＤＣ（例えば、ＴＡＤＣ）は、対象デクチン−２刺激剤を含む組成物を個体に投与することによってインビボで装填することができる。
【０２４７】
接触がインビトロである場合、個体由来の自己Ｔ細胞（例えば、自己Ｔ細胞集団）を、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣと接触させて、接触させたＴ細胞（例えば、接触させたＴ細胞集団）を生成することができる。Ｔ細胞が個体に投与されたときに免疫応答を誘導するように、Ｔ細胞を活性化するのに十分な期間、Ｔ細胞を装填されたＡＰＣ、例えばＤＣと接触させることができる。Ｔ細胞（装填されたＡＰＣ、例えばＤＣとの接触前又は接触後のいずれか）は、インビトロで増殖させ、及び／又は改変した（例えば、遺伝子改変した）後、個体に投与することができる。
【０２４８】
いくつかの場合では、Ｔ細胞を、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣと、５分〜２４時間の範囲（例えば、５分間〜１８時間、５分間〜１２時間、５分間〜８時間、５分間〜６時間、５分間〜４時間、５分間〜２時間、５分間〜６０分間、５分間〜４５分間、５分間〜３０分間、１５分間〜１８時間、１５分間〜１２時間、１５分間〜８時間、１５分間〜６時間、１５分間〜４時間、１５分間〜２時間、１５分間〜６０分間、１５分間〜４５分間、１５分間〜３０分間、２０分間〜１８時間、２０分間〜１２時間、２０分間〜８時間、２０分間〜６時間、２０分間〜４時間、２０分間〜２時間、２０分間〜６０分間、２０分間〜４５分間、３０分間〜１８時間、３０分間〜１２時間、３０分間〜８時間、３０分間〜６時間、３０分間〜４時間、３０分間〜２時間、３０分間〜６０分間、３０分間〜４５分間、４５分間〜１８時間、４５分間〜１２時間、４５分間〜８時間、４５分間〜６時間、４５分間〜４時間、４５分間〜２時間、４５分間〜６０分間、１時間〜１８時間、１時間〜１２時間、１時間〜８時間、１時間〜６時間、１時間〜４時間、１時間〜２時間、又は１時間〜９０分間）接触させる。
【０２４９】
いくつかの場合では、Ｔ細胞集団（例えば、１×１０２個以上の細胞（例えば、１×１０３個以上の細胞、１×１０４個以上の細胞、１×１０５個以上の細胞、又は１×１０６個以上の細胞））を、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣ（例えば、装填されたＡＰＣ集団、例えばＤＣ集団；装填されたＡＰＣ、例えばＤＣを有する集団など）と接触させる。いくつかの場合では、Ｔ細胞集団（例えば、１×１０２〜１×１０１０個の細胞（１×１０２〜１×１０８個の細胞、１×１０３〜１×１０７個の細胞、１×１０４〜１×１０６個の細胞、５×１０４〜５×１０５個の細胞、又は１×１０５個の細胞））を、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣ（例えば、装填されたＡＰＣ集団、例えば、ＤＣ集団；装填されたＡＰＣ、例えばＤＣを有する集団など）と接触させる。いくつかの場合では、Ｔ細胞（例えば、Ｔ細胞集団）を、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣを有する細胞集団（例えば、１×１０２個以上の細胞（例えば、１×１０３個以上の細胞、１×１０４個以上の細胞、１×１０５個以上の細胞、又は１×１０６個以上の細胞））と接触させる。いくつかの場合では、Ｔ細胞（例えば、Ｔ細胞集団）を、装填されたＡＰＣ、例えばＤＣを有する細胞集団（例えば、装填されたＡＰＣ細胞集団、例えばＤＣ細胞集団）（例えば、１×１０２〜１×１０１０個の細胞（１×１０２〜１×１０８個の細胞、１×１０３〜１×１０７個の細胞、１×１０４〜１×１０６個の細胞、５×１０４〜５×１０５個の細胞、又は１×１０５個の細胞）の範囲）と接触させる。
【０２５０】
接触させたＴ細胞（例えば、接触させたＴ細胞集団の細胞）は、「細胞の投与」について以下に記載されるように個体に投与することができる。
【０２５１】
樹状細胞。樹状細胞（ＤＣ）は、哺乳動物免疫系の抗原提示細胞種である。本明細書で使用する「樹状細胞」という用語は、リンパ組織又は非リンパ組織に見出される形態学的に類似した細胞種の多様な集団の任意のメンバーを指す。これらの細胞は、それらの特有の形態及び高レベルの表面ＭＨＣクラスＩＩ発現によって特徴付けられる（Ｓｔｅｉｎｍａｎ、ｅｔ  ａｌ．、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：２７１（１９９１）；そのような細胞の説明について参照により本明細書に組み込まれる）。
【０２５２】
樹状細胞は、皮膚、並びに鼻、肺、肝臓、胃、及び腸の内側のほぼ全ての組織、並びに骨髄、血液、脾臓、及びリンパ節に存在する。ＤＣは、活性化されるとリンパ節に移動し、そこでＴ細胞及びＢ細胞と相互作用して適応免疫応答を開始及び形成する。特定の発達段階において、ＤＣは、分枝状突起（樹状突起）を成長させ、これが細胞の名前を付与している。樹状細胞の例には、骨髄由来樹状細胞（ＢＭＤＣ）、形質細胞様樹状細胞、ランゲルハンス細胞、指状嵌入細胞、ヴェール状細胞、及び真皮樹状細胞が含まれる。いくつかの場合では、ＤＣは、ＣＤ１１（例えば、ＣＤ１１ａ及び／又はＣＤ１１ｃ）、ＭＨＣクラスＩＩ（例えば、ヒトの場合、ＨＬＡ−ＤＲ、ＨＬＡ−ＤＰ、及びＨＬＡ−ＤＱ）、ＣＤ４０、ＣＤ８０、及びＣＤ８６から選択される少なくとも１つのマーカーを発現する。いくつかの場合では、ＤＣは、ＨＬＡ−ＤＲ及びＣＤ８３に対して陽性であり、ＣＤ１４に対して陰性である。一般には、マーカー：ＣＤ１１ｃ＋、ＣＤ１４−／低、ＣＤ８０＋、ＣＤ８６＋＋、ＭＨＣクラスＩ＋＋、ＭＨＣクラスＩＩ＋＋＋、ＣＤ４０＋＋、ＣＤ８３＋／−、ＣＣＲ７＋／−のいずれか又は全てに基づいて、ＤＣを同定することができる（例えば、ＤＣの存在を明らかにすることができる）。いくつかの場合では、ＤＣは、ＣＤ１１ｂ＋／Ｇｒ１ｎｅｇ／ＣＤ１１ｃ＋／ＭＨＣＩＩ＋／ＣＤ６４ｄｕｌｌである。いくつかの場合では、ＤＣは、ＣＤ１１ｂｎｅｇ／ＣＤ１１ｃｈｉ／ＭＨＣＩＩ＋。
【０２５３】
いくつかの場合では、樹状細胞は、特異的なＩｇ  Ｆｃ受容体を発現する。例えば、樹状細胞は、ＩｇＧ抗体又はＩｇＧのＦｃ領域を含む抗体を認識するＦｃ−γ受容体を発現することができる。別の例として、樹状細胞は、ＩｇＡ抗体又はＩｇＡのＦｃ領域を含む抗体を認識するＦｃ−α受容体を発現することができる。更に別の例として、樹状細胞は、ＩｇＥ抗体又はＩｇＥのＦｃ領域を含む抗体を認識するＦｃ−ε受容体を発現することができる。いくつかの場合では、特定のＦｃ受容体を発現する樹状細胞が得られ、適切な架橋分子（例えば、樹状細胞Ｆｃ受容体によって認識されるクラスの同種異系Ｉｇ）を装填している。
【０２５４】
いくつかの実施形態では、対象方法は、ＤＣを取得又は単離する工程（例えば、高密度化（enriched）ＤＣ集団を単離する工程）を含む。ＤＣの単離、生成、及び培養のための技術は、当業者に既知であり、任意の好都合な技術を使用することができる。いくつかの場合では、ＤＣは、処置される個体の自己由来である（すなわち、個体から単離された細胞であるか、又は個体の細胞由来の細胞である）。
【０２５５】
いくつかの場合では、ＣＤ３４（＋）前駆細胞（例えば、骨髄（ＢＭ）前駆細胞）は、ＤＣを生成するための供給源として使用される（例えば、ＣＤ３４＋細胞は、例えば、抗体結合した磁気ビーズを使用して高密度化することができる）、次いで、これは骨髄（ＢＭ）由来樹状細胞（ＢＭＤＣ）と称される。例えば、ＢＭＤＣは、白血球増殖因子（例えば、顆粒球−マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、例えば、５０ｎｇ／ｍｌ）及びサイトカイン（例えば、インターロイキン４（ＩＬ−４）、例えば、２０ｎｇ／ｍｌ）として機能するサイトカインの存在下で非接着性細胞（ＣＤ３４＋細胞）を培養することによって生成することができる。いくつかの場合では、ＣＤ３４＋細胞は、４日間〜１８日間の範囲（例えば、５日間〜１７日間、７日間〜１６日間、８日間〜１３日間、９日間〜１２日間、６日間〜１５日間、８日間〜１５日間、１０日間〜１５日間、１２日間〜１５日間、１３日間〜１５日間、５日間〜１４日間、５日間〜１２日間、５日間〜１０日間、５日間〜９日間、６日間〜８日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１２日間、又は１４日間）の期間、ＧＭ−ＣＳＦ及び／又はＩＬ−４の存在下で培養される。ＣＤ３４＋細胞がＧＭ−ＣＳＦ及び／又はＩＬ−４の存在下で培養される場合、ＧＭ−ＣＳＦは、３５ｎｇ／ｍｌ〜６５ｎｇ／ｍｌの範囲の濃度（３５ｎｇ／ｍｌ〜６５ｎｇ／ｍｌ、４０ｎｇ／ｍｌ〜６０ｎｇ／ｍｌ、４５ｎｇ／ｍｌ〜５０ｎｇ／ｍｌ、又は５０ｎｇ／ｍｌ）であり得、ＩＬ−４は、５ｎｇ／ｍｌ〜３５ｎｇ／ｍｌの範囲の濃度（１０ｎｇ／ｍｌ〜３０ｎｇ／ｍｌ、１５ｎｇ／ｍｌ〜２５ｎｇ／ｍｌ、１７．５ｎｇ／ｍｌ〜２２．５ｎｇ／ｍｌ、又は２０ｎｇ／ｍｌ）であり得る。実例として、骨は、生理食塩水溶液（例えば、リン酸緩衝生理食塩水（phosphate buffered saline、ＰＢＳ））で洗い流すことができ、単核細胞は、Ｆｉｃｏｌｌ勾配で骨髄から分離することができる。次いで、ＣＤ３４＋細胞は、（例えば、抗体をコンジュゲートした磁気ビーズを使用して）単離／高密度化することができ、次いで、（上記のように）ＧＭ−ＣＳＦ及びＩＬ−４の存在下で培養することができる。いくつかの場合では（例えば、細胞がマウス細胞である場合）、ＤＣは、ＧＭ−ＣＳＦ中で細胞を培養することによって得ることができる。いくつかの場合では（例えば、細胞がヒト細胞である場合）、ＤＣは、ＧＭ−ＣＳＦ及びＩＬ−４中で細胞を培養することによって得ることができる。
【０２５６】
いくつかの場合では、単球は、ＤＣ（血液由来のＤＣ、血液Ｍｏ−ＤＣ、単球ＤＣなどと称される場合もある）を生成するための供給源として使用される。例えば、ＤＣは、ＧＭ−ＣＳＦ（例えば、ＢＭＤＣについて上記のような範囲の濃度）及び／又はＩＬ−４（例えば、ＢＭＤＣについて上記のような範囲の濃度）の存在下で、３日間〜９日間の範囲（例えば、４日間〜８日間、５日間〜７日間、３日間〜６日間、４日間〜５日間、６日間〜８日間、又は７日間）の期間、接着細胞（単球、例えば、骨髄単球、血液単球など）（例えば、ＣＤ１４＋血液単球）を培養することによって生成することができる。例えば、いくつかの場合では、単核細胞は、血液から単離され、ＣＤ１１ｂ＋細胞について（例えば、磁気ビーズを使用して）高密度化される。細胞は、「炎症性単球」（ＦＳＣｌｏ／ＳＳＣｌｏ／Ｇｒ１ｈｉ／ＣＤ１１５ｈｉ）及び／又は「パトローリング単球」（ＦＳＣｌｏ／ＳＳＣｌｏ／Ｇｒ１ｎｅｇ／ＣＤ１１５ｈｉ）について選別することができる。次いで、ＤＣは、ＧＭ−ＣＳＦの存在下で単球を（例えば、３日間〜６日間の範囲（例えば、４日間〜５日間）の期間）培養することにより、様々な種類の単球から生成することができる。いくつかの場合では（例えば、細胞がマウス細胞である場合では）、ＤＣは、ＧＭ−ＣＳＦ中で細胞を培養することによって誘導される。いくつかの場合では（例えば、細胞がヒト細胞である場合では）、ＤＣは、ＧＭ−ＣＳＦ及びＩＬ−４中で細胞を培養することによって得られる。脾臓由来のＤＣ（脾臓ＤＣ）を得るために、脾臓細胞をＣＤ１１ｃ＋細胞について（例えば、抗体が結合した磁気ビーズを使用して）高密度化することができ、ＣＤ１１ｃｈｉ／ＭＨＣＩＩｈｉ細胞をフローサイトメトリー（例えば、ＦＡＣＳ）を使用して選別／高密度化することができる。
【０２５７】
いくつかの場合では、ＤＣは、腫瘍関連ＤＣ（ＴＡＤＣ）である。ＴＡＤＣは、任意の好都合な方法によって得ることができる。例えば、腫瘍由来のＤＣ（腫瘍関連ＤＣ、ＴＡＤＣ）を得るために、腫瘍を（例えば、コラゲナーゼ及びヌクレアーゼを使用して）消化することができ、ＣＤ１１ｃ＋細胞を（例えば、抗体がコンジュゲートした磁気ビーズを使用して）高密度化することができ、Ｇｒ１ｎｅｇ／ＣＤ１１ｃｈｉ／ＭＨＣＩＩｈｉ細胞をフローサイトメトリー（例えば、ＦＡＣＳ）を使用して選別／高密度化することができる。
【０２５８】
単離及び／又は得られたＤＣ（例えば、上記）は、ＴＮＦα（例えば、５０ｎｇ／ｍｌ）及びＣＤ４０リガンド（例えば、ＣＤ４０Ｌ）（例えば、５００ｎｇ／ｍｌ）（以下に更に詳細に記載される）を含むがこれらに限定されない、様々な因子を使用して活性化することができる。
【０２５９】
樹状細胞並びにＤＣを単離、生成、及び／又は培養する方法に関するより多くの情報については、Ｖａｓｓａｌｌｉ，Ｊ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．２０１３；２０１３：７６１４２９：「Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  Ｃｅｌｌ−Ｂａｓｅｄ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ−Ｏｒｇａｎ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ」；Ｓｙｍｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ．２００５；２３（１）：７４−８１：「Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ＣＤ３４  ａｎｄ  ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｆｒｏｍ  ｃａｎｃｅｒ  ｐａｔｉｅｎｔｓ」；Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０００；１８：７６７−８１１：「Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ」；並びに米国特許出願第２０１３／０３３０８２２号、同第２０１３／０２７３６５４号、同第２０１３／０１３０３８０号、同第２０１２／０２５１５６１号、及び同第２０１２／０２４４６２０号を参照のこと；これらは全て、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【０２６０】
マクロファージ。マクロファージは、哺乳動物免疫系の抗原提示細胞（ＡＰＣ）種である。本明細書で使用する「マクロファージ」との用語は、リンパ組織又は非リンパ組織に見出される形態学的に類似した細胞種の多様な集団の任意のメンバーを指す。これらの細胞は、それらの特有の形態及び高レベルの表面ＭＨＣクラスＩＩ発現によって特徴付けられる。マクロファージは、樹状細胞ではない単球由来の食細胞、又は局所増殖によって組織マクロファージに由来する細胞である。体内では、これらの細胞は組織特異的であり、例えば、肝臓ではクッパー細胞、肺では肺胞マクロファージ、脳では小膠細胞、骨では破骨細胞などを指す。当業者は、マクロファージ細胞を同定する方法、ヒト又は動物の体内からマクロファージ細胞を単離する方法、並びにマクロファージ細胞をそれらのサブクラス及びサブ集団に関して特徴付ける方法を理解している（Ｋｒｕｉｓｂｅｅｋ，２００１；Ｄａｖｉｅｓ  ａｎｄ  Ｇｏｒｄｏｎ  ２００５  ａ  ａｎｄ  ｂ；Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００８；Ｍｏｓｓｅｒ  ａｎｄ  Ｚｈａｎｇ，２００８；Ｗｅｉｓｃｈｅｎｆｅｌｄｔ  ａｎｄ  Ｐｏｒｓｅ，２００８；Ｍａｒｔｉｎｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０；Ｍａｒｔｉｎｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００８；Ｊｅｎｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１）。
【０２６１】
マクロファージは、異なるメカニズムによって、Ｍ１、Ｍ２、Ｍ２ａ、Ｍ２ｂ、及びＭ２ｃサブクラスを含むがこれらに限定されない異なるサブクラスへと活性化することができる。Ｍ１という用語は、傷害又は細菌感染及びＩＦＮ−ｙ活性化に起因して生じる古典的に活性化されたマクロファージを説明するために使用されるが、Ｍ２は、Ｍ１とは異なって活性化される多数の形態のマクロファージについての一般用語である。Ｍ２分類は、サブ集団に更に分けられている（Ｍａｎｔｏｖａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００４）。最も代表的な形態は、虫誘導性（worm induced）Ｔｈ２サイトカインＩＬ−４及びＩＬ−１３への曝露によって蠕虫感染で一般的に生じる、Ｍ２ａマクロファージである。Ｍ２ａマクロファージは、特に、再感染から宿主を保護すること（Ａｎｔｈｏｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００６）又は創傷治癒及び組織リモデリングに寄与すること（Ｇｏｒｄｏｎ，２００３）に本質的に関与することが示された。別のサブ集団は、高レベルのＩＬ−１０及び低レベルのＩＬ−１２を生成するがそれ自体は抗炎症性ではない、Ｍ２ｂマクロファージである（Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ａｎｄ  Ｍｏｓｓｅｒ，２００２；Ｅｄｗａｒｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００６）。Ｍ２ｂマクロファージは、ＴＬＲリガンドとの組み合わせでＦｃ−γ受容体に結合する免疫複合体によって誘導される。最後に、Ｍ２ｃマクロファージは、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、又はグルココルチコイドによって誘導されるサブタイプを表す（Ｍａｒｔｉｎｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００８）。
【０２６２】
したがって、「Ｍ２ａマクロファージ」は、Ｔｈ２条件（例えば、Ｔｈ２サイトカインＩＬ−４及びＩＬ−１３への曝露）下で環境に曝露され、遺伝子Ｙｍ１及び／又は遺伝子ＣＤ２０６及び／又は遺伝子ＲＥＬＭ−α及び／又は遺伝子アルギナーゼ−１（Ａｒｇｉｎａｓｅ−１）のより高い発現によって特定の表現型を示す、マクロファージ細胞を指す。同様に、「Ｍ２ｂマクロファージ」は、ＴＬＲと組み合わせた免疫複合体の環境又はＴＮＦ−α刺激に曝露されたマクロファージ細胞を指す。上記細胞は、遺伝子ＳＰＨＫ−１及び／又は遺伝子ＬＩＧＨＴ及び／又は遺伝子ＩＬ−１０のより高い発現によって特徴付けられる。
【０２６３】
いくつかの場合では、本開示は、「患者の身体に由来する」マクロファージ細胞を指す。これは、Ｗａｈｌ  ｅｔ  ａｌ．２００６；Ｄａｖｉｓ  ａｎｄ  Ｇｏｒｄｏｎ  ２００５；Ｓｍｙｔｈｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００６；Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００８；Ｍｏｓｓｅｒ  ａｎｄ  Ｚｈａｎｇ，２００８に記載されるように、マクロファージが上記患者の身体から得られるか、又はマクロファージ前駆体細胞が、上記患者の身体から得られ、その後、インビトロでマクロファージ細胞へと分化されることを示すことを意味する。
【０２６４】
Ｂ細胞。Ｂ細胞は、哺乳動物免疫系の抗原提示細胞（ＡＰＣ）種である。本明細書で使用する「Ｂ細胞」という用語は、発達の任意の段階由来のＢ細胞（例えば、Ｂ幹細胞、前駆Ｂ細胞、分化Ｂ細胞、形質細胞）、並びに末梢血あるいは腫瘍、リンパ節、骨髄、臍帯血、若しくは脾臓細胞における領域、若しくはそれらの中の領域、又はそれらの近くの領域を含むがこれらに限定されない任意の供給源由来のＢ細胞を指す。
【０２６５】
Ｂ細胞前駆体は、未成熟なＢ細胞が生成される骨髄に存在する。Ｂ細胞の発達はいくつかの段階で発生し、各段階は抗体座（loci）におけるゲノム含有量の変化を表す。ゲノム重鎖可変領域では、３つのセグメントＶ、Ｄ、及びＪが存在し、これらは、ＶＤＪ再構成と呼ばれるプロセスにおいてランダムに再結合して、各Ｂ細胞の免疫グロブリンにおいて固有の可変領域を生成する。２つのセグメントＶ及びＪのみしか関与しないことを除いて、軽鎖可変領域について同様の再配置が生じる。完全な再構成後に、Ｂ細胞は、骨髄においてＩｇＭ＋未成熟段階に到達する。これらの未成熟なＢ細胞は、その表面上に膜結合ＩｇＭ、すなわちＢＣＲを提示し、脾臓に移行し、これらは移行Ｂ細胞と呼ばれる。これらの細胞の一部は、成熟Ｂリンパ球に分化する。ＢＣＲを表面に発現する成熟Ｂ細胞は、免疫監視の役割を果たす血液及びリンパ系を循環する。それらは、完全に活性化されるまで可溶性抗体を生成しない。各Ｂ細胞は、１つの特定の抗原に結合する固有の受容体タンパク質を有する。Ｂ細胞がその抗原に遭遇し、Ｔヘルパー細胞から追加のシグナルを受けると、当該Ｂ細胞は、可溶性抗体を発現及び分泌する血漿Ｂ細胞又は記憶Ｂ細胞のいずれかに更に分化することができる。
【０２６６】
本開示の文脈において、「Ｂ細胞」という用語は、完全に再構成された、すなわち成熟したＢＣＲをその表面上に提示する任意のＢリンパ球を指す。例えば、本発明の文脈におけるＢ細胞は、未成熟又は成熟したＢ細胞であり得る。いくつかの場合では、Ｂ細胞は、ナイーブ型Ｂ細胞、すなわち、上記Ｂ細胞の表面上のＢＣＲによって特異的に認識された抗原に曝露されていないＢ細胞である。いくつかの実施形態では、Ｂ細胞は、ＣＤ１９＋Ｂ細胞であり、すなわち、その表面上にＣＤ１９を発現する。いくつかの場合では、本発明の文脈におけるＢ細胞は、ＣＤ１９＋Ｂ細胞であり、その表面上に完全に再構成されたＢＣＲを発現する。Ｂ細胞はまた、ＣＤ２０＋又はＣＤ２１＋Ｂ細胞であってもよい。いくつかの場合では、ＣＤ２０＋又はＣＤ２１＋Ｂ細胞は、その表面上にＢＣＲを有する。いくつかの実施形態では、Ｂ細胞は、ＩｇＧ＋記憶Ｂ細胞などの記憶Ｂセルである。
【０２６７】
処置
「処置（treatment）」、「処置すること（treating）」、「処置する（treat）」などの用語は、本明細書では、所望の薬理学的及び／又は生理学的効果を得ることを一般に指す。効果は、その疾患若しくは症状（複数可）を完全に若しくは部分的に予防することであってもよく、並びに／又は疾患及び／若しくは疾患に寄与し得る有害効果に対する部分的若しくは完全な安定化若しくは治癒に関して治療的であってもよい。「処置」という用語は、哺乳動物、特にヒトにおける疾患の任意の処置を包含し、（ａ）疾患又は症状（複数可）にかかりやすい素因を有し得るが、まだ疾患又は症状を有すると診断されていない対象において、疾患及び／又は症状（複数可）が発生するのを予防すること、（ｂ）疾患及び／又は症状（複数可）を阻止すること、すなわち、疾患及び／又は関連する症状の発症を阻むこと、あるいは（ｃ）疾患及び関連する症状（複数可）を緩和すること、すなわち、疾患及び／又は症状（複数可）の退縮を生じることを含む。処置を必要とするものには、既に侵されているもの（例えば、癌を有するもの、例えば腫瘍を有するもの）、及び予防が所望されるもの（例えば、癌に対する感受性が増加しているもの；前癌性腫瘍、病変を有するもの；癌を有すると疑われるものなど）が含まれ得る。
【０２６８】
「レシピエント」、「個体」、「対象」、「宿主」、及び「患者」という用語は、本明細書において互換的に使用され、診断、処置、又は治療が所望される任意の哺乳動物対象（例えば、ヒト）を指す。処置目的のための「哺乳動物」は、ヒト、家畜（domestic animal）及び家畜（farm animal）、並びに動物園、運動、又はペット動物、例えば、イヌ、ウマ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ラクダなどの哺乳動物として分類される任意の動物を指す。いくつかの実施形態では、哺乳動物はヒトである。
【０２６９】
治療処置は、投与前に対象が侵されている（inflicted）処置であり、予防処置が対象が投与前に侵されていない処置である。いくつかの実施形態では、対象は、侵される可能性が増加しているか、又は侵される可能性が増加していると疑われる（例えば、標準に対して、例えば、平均的な個体に対して、例えば、対象は、癌に対する遺伝的素因及び／又は癌の増加したリスクを示す家族歴を有し得、その場合、処置は予防的処置であり得る）。いくつかの場合では、「ワクチン接種」という用語は、予防処置を説明するために使用される。例えば、処置される対象が、癌を有すると診断されていない（例えば、対象が、侵される可能性が増加しているか、又は侵される可能性が増加していると疑われる）（例えば、対象は、癌に対する遺伝的素因及び／又は癌の増加したリスクを示す家族歴を有し得る）いくつかの場合、対象は、対象方法のうちの１つ以上を行うことによってワクチン接種する（処置が予防処置であるように処置する）ことができる。
【０２７０】
処置される対象が、癌を有すると診断されていない（例えば、対象が、侵される可能性が増加しているか、又は侵される可能性が増加していると疑われる）（例えば、対象は、癌に対する遺伝的素因及び／又は癌の増加したリスクを示す家族歴を有し得る）いくつかの場合、対象は、対象方法のうちの１つ以上を行うことによってワクチン接種する（処置が予防処置であるように処置する）ことができる。
【０２７１】
処置される個体及び「癌細胞」
いくつかの実施形態では、処置される個体は、癌又は感染性疾患を有する個体である。本明細書で使用する場合、「癌」は、癌の任意の形態（例えば、白血病、急性骨髄性白血病（acute myeloid leukemia、ＡＭＬ）、急性リンパ芽球性白血病（acute lymphoblastic leukemia、ＡＬＬ）、リンパ腫、中皮腫（mesothelioma、ＭＳＴＯ）、微小残存病変、固形腫瘍癌、例えば、肺癌、前立腺癌、乳癌、膀胱癌、結腸癌、卵巣癌、膵臓癌、腎臓癌、膠芽腫、髄芽腫、平滑筋肉腫、及び頭頸部扁平上皮癌、メラノーマなど）を含み、原発及び転移性腫瘍の両方などを含む。いくつかの場合では、個体は癌（例えば、放射線療法、化学療法、外科的切除など）の処置を最近受けており、したがって再発のリスクがある。任意及び全ての癌は、対象方法、組成物、及びキットによって処置するのに好適な癌である。
【０２７２】
「癌」、「新生物」、及び「腫瘍」という用語は、本明細書では、細胞増殖に対する制御の顕著な喪失によって特徴付けられる異常な増殖表現型を示すような、自律的で調節されていない増殖を示す細胞を指す。本開示における検出、分析、及び／又は処置に関する関心のある細胞には、癌細胞（例えば、癌を有する個体由来の癌細胞）、悪性癌細胞、前転移性（pre-metastatic）癌細胞、転移性癌細胞、及び非転移性癌細胞が含まれる。実質的に全ての組織の癌が既知である。「癌積載量（cancer burden）」という語句は、対象における癌細胞又は癌体積の量を指す。したがって、癌積載量の減少は、対象における癌細胞数又は癌体積の減少を指す。本明細書で使用する「癌細胞」という用語は、癌細胞（例えば、個体が処理され得る癌のいずれかに由来する、例えば、癌を有する個体から単離される）であるか、又は癌細胞、例えば癌細胞のクローンに由来する、任意の細胞を指す。例えば、癌細胞は、確立された癌細胞株由来であり得、癌を有する個体から単離された初代細胞であり得、癌を有する個体から単離された初代細胞からの子孫細胞であり得る。いくつかの場合では、この用語は、癌細胞の細胞内（sub-cellular）部分、細胞膜部分、又は細胞可溶化物などの癌細胞の一部を指すことができる。癌腫、肉腫、膠芽腫、メラノーマ、リンパ腫、骨髄腫などの固形腫瘍、及び白血病などの循環癌を含む、多くの種類の癌が当業者に既知である。
【０２７３】
本明細書で使用する場合、「癌」には、固体腫瘍癌（例えば、肺癌、前立腺癌、乳癌、膀胱癌、結腸癌、卵巣癌、膵臓癌、腎臓癌、肝臓癌、膠芽腫、髄芽細胞腫、平滑筋肉腫、頭頸部扁平上皮癌、メラノーマ、神経内分泌癌など）及び液体癌（例えば、血液癌）、癌腫、軟組織腫瘍、肉腫、奇形腫、メラノーマ、白血病、リンパ腫、並びに脳癌（微小残存病変を含み、原発性腫瘍及び転移性腫瘍の両方を含む）を含むがこれらに限定されない、任意の形態の癌が含まれる。任意の癌は、対象方法及び組成物によって処置される好適な癌である。
【０２７４】
癌腫は、上皮組織に由来する悪性腫瘍である。上皮細胞は、身体の外表面を覆い、内部空洞を線状にし、腺組織の内側を形成する。癌腫の例には、腺癌（腺（分泌）細胞で始まる癌、例えば、乳癌、膵臓癌、肺癌、前立腺癌、及び結腸癌は腺癌であり得る）、副腎皮質癌、肝細胞癌、腎細胞癌、卵巣癌、上皮内癌（carcinoma in situ）、乳管癌、乳癌、基底細胞癌、扁平上皮癌、移行上皮癌、結腸癌、上咽頭癌（nasopharyngeal carcinoma）、多房性嚢胞状腎細胞癌（multilocular cystic renal cell carcinoma）、燕麦細胞癌、大細胞肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌などが含まれるが、これらに限定されない。癌腫は、前立腺、膵臓、結腸、脳（通常は二次転移として）、肺、胸、皮膚などに見出され得る。
【０２７５】
軟組織腫瘍は、結合組織に由来する非常に多様な希少腫瘍群である。軟組織腫瘍の例には、胞巣状軟部肉腫、血管腫様線維性組織球腫、軟骨粘液線維腫、骨格軟骨肉腫、骨外性粘液型軟骨肉腫、明細胞肉腫、線維形成性小円形細胞腫瘍、隆起性皮膚線維肉腫、子宮内膜間質腫瘍、ユーイング肉腫、線維腫症（デスモイド）、小児性線維肉、消化管間質腫瘍、骨巨細胞腫、腱鞘巨細胞腫、炎症性筋線維芽細胞性腫瘍、子宮平滑筋腫、平滑筋肉腫、脂肪芽細胞腫、典型的な脂肪腫、紡錘形細胞又は多形性脂肪腫、異型性脂肪腫、軟骨脂肪腫、高分化型脂肪肉腫、粘液／円形細胞型脂肪肉腫、多形性脂肪肉腫、粘液悪性線維性組織球腫、高悪性度悪性線維性組織球腫（high-grade malignant fibrous histiocytoma）、粘液線維肉腫、悪性末梢神経鞘腫、中皮腫、神経芽腫、骨軟骨腫、骨肉腫、原始神経外胚葉性腫瘍、胞巣状横紋筋肉腫（alveolar rhabdomyosarcoma）、胎児性横紋筋肉腫、良性又は悪性神経鞘腫、滑膜肉腫、エバンス腫瘍、結節性筋膜炎、デスモイド型線維腫、孤在性線維性腫、隆起性皮膚線維肉腫（dermatofibrosarcoma protuberans、ＤＦＳＰ）、血管肉腫、類上皮血管内皮腫、腱鞘巨細胞腫（tenosynovial giant cell tumor、ＴＧＣＴ）、色素性絨毛結節性滑膜炎（pigmented villonodular synovitis、ＰＶＮＳ）、線維性骨異形成症、粘液線維肉腫、線維肉腫、滑膜肉腫、悪性末梢神経鞘腫、神経線維腫、及び軟組織多形性腺腫、並びに線維芽細胞、筋線維芽細胞、組織球、血管細胞／内皮細胞、及び神経鞘細胞に由来する新生物（neoplasia）が含まれるが、これらに限定されない。
【０２７６】
肉腫は、軟骨、脂肪、筋肉、血管、繊維組織、又は他の結合組織若しくは支持組織を含む、例えば骨内又は身体の軟組織内における間葉由来の細胞に生じる希少な種類の癌である。異なる種類の肉腫は、癌が形成する場所に基づく。例えば、骨肉腫は骨で形成し、脂肪肉腫は脂肪で形成し、横紋筋肉腫は筋肉で形成する。肉腫の例には、アスキン腫瘍、ブドウ状肉腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性血管内皮腫、悪性シュワノマ、骨肉腫、及び軟組織肉腫（例えば、胞巣状軟部肉腫、血管肉腫、葉状嚢肉腫、隆起性皮膚線維肉腫（ＤＦＳＰ）、デスモイド腫瘍、線維形成性小円形細胞腫瘍、類上皮肉腫、骨外性軟骨肉腫、骨外性骨肉腫、線維肉腫、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、血管外皮腫、血管肉腫（hemangiosarcoma）（より一般的には「血管肉腫（angiosarcoma）」と称される）、カポジ肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンパ管肉腫、悪性末梢神経鞘腫瘍（malignant peripheral nerve sheath tumor、ＭＰＮＳＴ）、神経線維肉腫、滑膜肉腫、未分化多形肉腫など）が含まれるが、これらに限定されない。
【０２７７】
奇形腫は、例えば、毛髪、筋肉、及び骨を含む、いくつかの異なる種類の組織を含み得る（例えば、３つの胚葉：内胚葉、中胚葉、及び外胚葉のいずれか及び／又は全てに由来する組織を含むことができる）胚細胞腫瘍種である。奇形腫は、女性の卵巣、男性の睾丸、及び子供の尾骨で最も頻繁に発生する。
【０２７８】
メラノーマは、メラニン生成細胞（色素メラニンを生成する細胞）で始まる癌の形態である。これは、ほくろ（mole）（皮膚メラノーマ）で始まり得るが、眼又は腸などの他の色素性組織でも始まり得る。
【０２７９】
白血病は、骨髄などの血液形成組織で始まり、多数の異常な血液細胞を生成させて血流に侵入させる癌である。例えば、白血病は、血流中で通常成熟する骨髄由来細胞に由来し得る。白血病は、疾患がどのくらい急速に発症して進行するか（例えば、急性対慢性）、及び罹患した白血球種（例えば、骨髄性対リンパ系）について命名されている。骨髄性白血病（myeloid leukemia）は、骨髄性白血病（myelogenous leukemias）又は骨髄芽球性白血病とも呼ばれる。リンパ性白血病は、リンパ芽球性白血病又はリンパ球性白血病とも呼ばれる。リンパ性白血病細胞は、リンパ節内で収集し得、これは膨潤し得る。白血病の例には、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（chronic myeloid leukemia、ＣＭＬ）、及び慢性リンパ球性白血病（chronic lymphocytic leukemia、ＣＬＬ）が含まれるが、これらに限定されない。
【０２８０】
リンパ腫は、免疫系の細胞中で開始する癌である。例えば、リンパ腫は、リンパ系で通常は成熟する骨髄由来細胞に由来し得る。リンパ腫の２つの基本的分類が存在する。１つの種類は、リード・ステルンベルグ細胞と呼ばれる細胞種の存在を特徴とする、ホジキンリンパ腫（hodgkin lymphoma、ＨＬ）である。現在、６つの認識された種類のＨＬが存在する。ホジキンリンパ腫の例には、結節硬化型古典的ホジキンリンパ腫（classical hodgkin lymphoma、ＣＨＬ）、混合細胞型ＣＨＬ、リンパ球減少型ＣＨＬ、リンパ球豊富型ＣＨＬ、及び結節性リンパ球優位型ＨＬが含まれる。
【０２８１】
リンパ腫の他の分類は、免疫系細胞の癌の大きな多様な群を含む非ホジキンリンパ腫（non-hodgkin lymphomas、ＮＨＬ）である。非ホジキンリンパ腫は、潜行性（増殖が遅い）過程を有する癌及びアグレッシブな（増殖が早い）過程を有する癌に更に分けることができる。現在、６１個の認識された種類のＮＨＬが存在する。非ホジキンリンパ腫の例には、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、未分化大細胞種リンパ腫、血管免疫芽球性リンパ腫、芽球性ＮＫ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、バーキット様リンパ腫（小型非切れ込み核細胞性リンパ腫）、慢性リンパ性白血病／小リンパ球性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、びまん性大細胞種Ｂ細胞リンパ腫、腸管症関連Ｔ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、肝脾ガンマ・デルタＴ細胞リンパ腫、Ｔ細胞白血病、リンパ芽球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、鼻Ｔ細胞リンパ腫（nasal T-Cell lymphoma）、小児リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫、中枢神経系原発リンパ腫、形質転換リンパ腫（transformed lymphomas）、処置関連Ｔ細胞リンパ腫（treatment-related T-Cell lymphomas）、及びワルデンシュトレームマクログロブリン血症が含まれるが、これらに限定されない。
【０２８２】
脳癌には、脳組織の任意の癌が含まれる。脳癌の例には、神経膠腫（例えば、膠芽腫、星状細胞腫、希突起神経膠腫、上衣腫など）、髄膜腫、下垂体腺腫、前庭神経鞘腫、原始神経外胚葉性腫瘍（髄芽細胞腫）などが含まれるが、これらに限定されない。
【０２８３】
癌の「病理」には、患者の健康な状態を損なう全ての現象を含む。これには、異常又は制御不能な細胞増殖、転移、隣接細胞の正常機能の妨害、異常レベルでのサイトカイン又は他の分泌産物の放出、炎症性又は免疫学的応答の抑制又は悪化、新生物、前悪性、悪性腫瘍、リンパ節などの周囲又は遠隔の組織又は器官の浸潤などが含まれるが、これらに限定されない。
【０２８４】
本明細書で使用する場合、「癌再発」及び「腫瘍再発」という用語並びにそれらの文法的変形は、癌の診断後における新生物又は癌性細胞の更なる増殖を指す。特に、更なる癌性細胞増殖が癌組織で生じる場合、再発が発生し得る。「腫瘍の広がり」は、同様に、腫瘍の細胞が局所又は遠位の組織及び器官に広がるときに生じる。したがって、腫瘍の広がりは腫瘍転移を包含する。「腫瘍浸潤」は、腫瘍増殖が局所的に広がり、正常器官の機能の圧迫、破壊、又は予防によって、関与組織の機能を損なわせるときに生じる。
【０２８５】
本明細書で使用する場合、「転移」という用語は、元の癌腫瘍の器官とは関連しない器官又は身体部分における癌性腫瘍の増殖を指す。転移は、元の癌性腫瘍の器官とは直接関連しない器官又は身体部分における検出不能な量の癌性細胞の存在である、微小転移を含むと理解される。転移は、元の腫瘍部位からの癌細胞の出発、並びに癌細胞の身体の他の部分への移行及び／又は浸潤などのプロセスのいくつかの工程として定義することもできる。
【０２８６】
本明細書で使用する場合、「感染」という用語（例えば、「感染性疾患」に関して）は、感染因子によって感染された生物（すなわち、対象）（例えば、対象は、細胞内病原体感染、例えば、慢性細胞内病原体感染を有する）の少なくとも１つの細胞における任意の状態を指す。本明細書で使用する場合、「感染因子」という用語は、感染を引き起こす外来生物学的実体（すなわち、病原体）を指す。例えば、感染因子には、細菌、ウイルス、原生動物、及び真菌が含まれるが、これらに限定されない。細胞内病原体は、特に興味深い。感染性疾患は、感染因子によって引き起こされる疾患である。いくつかの感染因子は、特定の条件下では認識可能な症状又は疾患を引き起こさないが、変化した条件下で症状又は疾患を引き起こす可能性がある。対象方法は、例えば、ウイルス感染、例えば、レトロウイルス、レンチウイルス、ヘパドナウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、ヒトパピローマウイルスなど；細胞内細菌感染、例えば、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｓｐ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉなど；及び細胞内原生動物病原体、例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｓｐ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｓｐ、Ｇｉａｒｄｉａ  ｓｐ．、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｓｐ．、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｓｐなどが含まれるがこれらに限定されない、慢性病原体感染の処置に使用することができる。
【０２８７】
共投与
いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激剤（例えば、デクチン−２結合糖ポリマー、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチド、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的なデクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的なデクチン−２刺激剤）（例えば、医薬組成物として製剤化される）は、癌治療剤（例えば、腫瘍に対する抗体）などの別の剤と共投与される。このような投与は、本開示の剤の投与に関して、薬物／抗体の同時（concurrent）（すなわち同時）投与、前投与、又は後投与を伴い得る。当業者は、本開示の特定の薬物及び組成物に関する投与の適切なタイミング、順序、及び量を決定することについて困難ではないであろう。いくつかの場合では、デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、活性を増強するか又は治療効果を増加する１つ以上の剤（免疫調節剤、腫瘍に対する抗体など）と共に製剤化される。
【０２８８】
「共投与」及び「組み合わせて」という用語は、特定の時間制限なく、同時に、並行して、又は連続的に２つ以上の治療薬を投与することを含む。一実施形態では、剤は、細胞又は対象の身体において同時に存在するか、又はその生物学的効果若しくは治療効果を同時に発揮する。一実施形態では、治療剤は、同じ組成物又は単位剤形である。他の実施形態では、治療剤は、別個の組成物又は単位剤形である。特定の実施形態では、第１の剤は、第２の剤の投与前（例えば、分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、又は１２週間前）、第２の剤の投与と同時、又は第２の剤の投与後（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、又は１２週間後）に投与することができる。
【０２８９】
対象デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、化学療法、放射線療法、及び／又は他の免疫療法と組み合わせて効果を増強することができる。
【０２９０】
いくつかの場合では、２つ以上の対象デクチン−２刺激剤は、互いに共投与される。例えば、デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンドは、（ｉ）合成デクチン−２刺激糖ポリマー又はその模倣体（例えば、糖ポリペプチド）、（ｉｉ）デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体、及び（ｉｉｉ）α−マンノシダーゼクラス１阻害剤のうちの１つ以上と共投与することができる。いくつかの場合では、合成デクチン−２刺激糖ポリマー又はその模倣体（例えば、糖ポリペプチド）は、（ｉ）デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド、（ｉｉ）デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体、及び（ｉｉｉ）α−マンノシダーゼクラス１阻害剤のうちの１つ以上と共投与することができる。いくつかの場合では、デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体は、（ｉ）デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド、（ｉｉ）合成デクチン−２刺激糖ポリマー又はその模倣体（例えば、糖ポリペプチド）、及び（ｉｉｉ）α−マンノシダーゼクラス１阻害剤のうちの１つ以上と共投与することができる。いくつかの場合では、α−マンノシダーゼクラス１阻害剤は、（ｉ）デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド、（ｉｉ）合成デクチン−２刺激糖ポリマー又はその模倣体（例えば、糖ポリペプチド）、及び（ｉｉｉ）デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体のうちの１つ以上と共投与することができる。
【０２９１】
デクチン−２刺激剤と組み合わせて使用する（共投与する）ことができる細胞傷害性剤の１つのクラスは、化学療法剤である。例示的な化学療法剤には、アルデスロイキン、アルトレタミン、アミフォスチン、アスパラギナーゼ、ブレオマイシン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、クラドビン、シサプリド、シスプラチン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）、ダクチノマイシン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ドロナビノール、デュオカルマイシン、エトポシド、フィルグラスチム、フルダラビン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、グラニセトロン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イホスファミド、インターフェロンα、イリノテカン、ランソプラゾール、レバミゾール、ロイコボリン、メゲストロール、メスナ、メトトレキサート、メトクロプラミド、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、オメプラゾール、オンダンセトロン、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標））、ピロカルピン、プロクロルペラジン、リツキシマブ、サプロイン（saproin）、タモキシフェン、タキソール、トポテカン塩酸塩、トラスツズマブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、及びビノレルビン酒石酸塩が含まれるが、これらに限定されない。
【０２９２】
いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、癌標的化剤（例えば、癌抗原に特異的に結合する剤、例えば、腫瘍細胞マーカーに対して選択的な細胞特異性抗体）と共に併用される。任意の好都合な癌細胞標的化剤を使用することができる。いくつかの場合では、癌細胞標的化剤は、癌細胞の癌抗原（例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４４、ＣＤ４７、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ９６、ＣＤ９７、ＣＤ９９、ＣＤ１２３、ＣＤ２７９（ＰＤ−１）、ＣＤ２７４（ＰＤ−Ｌ１）、ＥｐＣａｍ、ＥＧＦＲ、１７−１Ａ、ＨＥＲ２、ＣＤ１１７、Ｃ−Ｍｅｔ、ＰＴＨＲ２、ＨＡＶＣＲ２（ＴＩＭ３）、及びＳＩＲＰＡ）に特異的に結合する特異的結合剤（例えば、癌抗原に特異的な抗原結合領域を含む抗体などのポリペプチド）である。したがって、いくつかの場合では、対象方法は、対象デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）、及びＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４４、ＣＤ４７、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ９６、ＣＤ９７、ＣＤ９９、ＣＤ１２３、ＣＤ２７９（ＰＤ−１）、ＣＤ２７４（ＰＤ−Ｌ１）、ＥｐＣａｍ、ＥＧＦＲ、１７−１Ａ、ＨＥＲ２、ＣＤ１１７、Ｃ−Ｍｅｔ、ＰＴＨＲ２、ＨＡＶＣＲ２（ＴＩＭ３）、及びＳＩＲＰＡから選択される抗原（例えば、癌抗原）に特異的に結合する特異的結合剤である癌細胞標的化剤（例えば、癌抗原に特異的な抗原結合領域を含む抗体などのポリペプチド）を共投与することを含む。
【０２９３】
いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、セツキシマブ（ＥＧＦＲに結合する）、パニツムマブ（ＥＧＦＲに結合する）、リツキシマブ（ＣＤ２０に結合する）、トラスツズマブ（ＨＥＲ２に結合する）、ペルツズマブ（ＨＥＲ２に結合する）、アレムツズマブ（ＣＤ５２に結合する）、ブレンツキシマブ（ＣＤ３０に結合する）、トシツモマブ、イブリツモマブ、ゲムツズマブ、イブリツモマブ、及びエドレコロマブ（結合１７−１Ａする）のうちの１つ以上との併用治療で使用される（共投与される）。
【０２９４】
いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、免疫調節剤との併用治療で使用される（共投与される）。任意の好都合な免疫調節剤を使用することができる。いくつかの場合では、免疫調節剤は、抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１剤（例えば、抗ＰＤ−１抗体、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２エクトドメインなどのＰＤ−１結合試薬、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、ＰＤ−１エクトドメインなどのＰＤ−Ｌ１結合試薬など）、ＣＤ４０アゴニスト（例えば、ＣＤ４０Ｌ）、４−１ＢＢ調節因子（例えば、４−１ＢＢアゴニスト）、抗ＣＤ４７／ＳＩＲＰＡ剤（例えば、抗ＣＤ４７抗体、ＳＩＲＰＡエクトドメインなどのＣＤ４７結合試薬、抗ＳＩＲＰＡ抗体、ＣＤ４７エクトドメインなどのＳＩＲＰＡ結合試薬など）、ＴＩＭ３及び／又はＣＥＡＣＡＭ１の阻害剤、ＴＩＭ３及び／又はＣＥＡＣＡＭ１の阻害剤、ＢＴＬＡ及び／又はＣＤ１６０の阻害剤などが含まれる。
【０２９５】
対象デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）と共投与することができる剤には、（ｉ）ＣＤ４０アゴニスト（例えば、ＣＤ４０Ｌ及び／又はアゴニスト抗ＣＤ４０抗体）、（ｉｉ）炎症誘発性サイトカイン（例えば、ＴＮＦα、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１９、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）など）、（ｉｉｉ）Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト（例えば、ＣｐＧ  ＯＤＮ、ポリイノシン：ポリシチジン酸（「ポリＩ：Ｃ」、ＴＬＲ−３アゴニスト）など）、（ｉｖ）インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）阻害剤、（ｖ）チェックポイント分子中和剤（すなわち、チェックポイント遮断剤）（例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えば、イピリムマブ、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体など）、（ｖｉ）Ｔ細胞関連共刺激分子（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−ＢＢＬなど）、（ｖｉｉ）ＮＦｋＢ活性化因子、及び（ｖｉｉｉ）骨髄細胞によるデクチン−２発現を誘導する剤（例えば、ＴＮＦα、ＩＦＮγ、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）など）が含まれる。
【０２９６】
したがって、いくつかの場合では、共投与される治療剤のうちの１つは、対象デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）を含む組成物であり、それは、（ｉ）ＣＤ４０アゴニスト（例えば、ＣＤ４０Ｌ及び／又はアゴニスト抗ＣＤ４０抗体）、（ｉｉ）炎症誘発性サイトカイン（例えば、ＴＮＦα、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１９、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）など）、（ｉｉｉ）Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト（例えば、ＣｐＧ  ＯＤＮ、ポリイノシン：ポリシチジン酸（「ポリＩ：Ｃ」、ＴＬＲ−３アゴニスト）など）、（ｉｖ）インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）阻害剤、（ｖ）チェックポイント分子中和剤（例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えば、イピリムマブ、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体など）、（ｖｉ）Ｔ細胞関連共刺激分子（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−ＢＢＬなど）、（ｖｉｉ）ＮＦｋＢ活性化因子、及び（ｖｉｉｉ）骨髄細胞によるデクチン−２発現を誘導する剤（例えば、ＴＮＦα、ＩＦＮγ、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）など）から選択される１つ以上の試薬と共投与される。いくつかの場合では、炎症誘発性サイトカインは、ＩＬ−Ｉ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＴＮＦα、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１９、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、Ｇ−ＣＳＦ、又はＧＭ−ＣＳＦである。いくつかの場合では、共投与される治療剤のうちの１つは、対象デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）を含む組成物であり、それは、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、又はＩＦＮγと共投与される。いくつかの場合では、共投与される治療剤のうちの１つは、対象デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）を含む組成物であり、それは、ＧＭ−ＣＳＦと共投与される。いくつかの場合では、共投与される治療剤のうちの１つは、対象デクチン−２刺激剤（例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノース���リカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）を含む組成物であり、それは、ＩＦＮγと共投与される。
【０２９７】
いくつかの場合では、対象処置薬（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含む組成物、例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、ＣＤ４０アゴニスト（例えば、ＣＤ４０Ｌ及び／又はアゴニスト抗ＣＤ４０抗体）と共投与される。いくつかの場合では、対象処置剤（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含む組成物、例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、炎症促進性サイトカイン（例えば、ＴＮＦα、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１９、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）など）と共投与される。
【０２９８】
いくつかの場合では、対象処置剤（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含む組成物、例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト（例えば、ＣｐＧ  ＯＤＮ、ポリイノシン：ポリシチジン酸（「ポリＩ：Ｃ」、ＴＬＲ−３アゴニスト）など）と共投与される。いくつかの場合では、対象処置剤（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含む組成物、例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）阻害剤と共投与される。いくつかの場合では、対象処置剤（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含む組成物、例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、チェックポイント分子中和剤（例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えばイピリムマブ、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体）と共投与される。
【０２９９】
いくつかの場合では、対象処置剤（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含む組成物、例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、Ｔ細胞関連共刺激分子（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−ＢＢＬなど）と共投与される。いくつかの場合では、対象処置薬（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含む組成物、例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、ＮＦｋＢ活性化剤と共投与される。いくつかの場合では、対象処置薬（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含む組成物、例えば、糖ポリペプチド、例えばオリゴマンノース糖ポリペプチドなどのデクチン−２結合糖ポリマー、デクチン−２結合グリカン、例えばマンナン多糖若しくは別のオリゴマンノースグリカン、及び／若しくはデクチン−２抗体を含む組成物などの直接的デクチン−２刺激剤、又はα−マンノシダーゼクラスＩ阻害剤などの間接的デクチン−２刺激剤）は、骨髄細胞によってデクチン−２発現を誘導する剤（例えば、ＴＮＦα、ＩＦＮγ、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）など）と共投与される。
【０３００】
デクチン−２刺激剤による処置は、抗生物質、サイトカイン、抗ウイルス剤などの他の活性剤と組み合わせてもよい（共投与してもよい）。抗生物質のクラスには、ペニシリン、例えば、ペニシリンＧ、ペニシリンＶ、メチシリン、オキサシリン、カルベニシリン、ナフシリン、アンピシリンなど；β−ラクタマーゼ阻害剤、セファロスポリン、例えば、セファクロル、セファゾリン、セフロキシム、モキサラクタムなどと組み合わせたペニシリン；カルバペネム；モノバクタム；アミノグリコシド；テトラサイクリン；マクロライド；リンコマイシン；ポリミキシン；スルホンアミド；キノロン；クロラムフェニカル（cloramphenical）；メトロニダゾール；スペクチノマイシン；トリメトプリム；バンコマイシンなどが含まれる。サイトカインには、例えば、インターフェロンγ、腫瘍壊死因子α、インターロイキン１２などが含まれ得る。抗ウイルス剤、例えば、アシクロビル、ガンシクロビルなども処置に使用され得る。
【０３０１】
細胞及び／又は組成物の投与。いくつかの場合では、細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞）、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）が、個体に移植される（すなわち、個体に投与される）。いくつかの場合では、細胞は、事前のある期間にわたって培養される。細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）は、単独で、又は好適な基質若しくはマトリックスと共に、個体に提供され（すなわち、個体に投与され）、例えば、それらが移植される組織（例えば、標的器官、腫瘍組織、血流など）における増殖及び／又は組織化を支持することができる。いくつかの実施形態では、マトリックスは、足場（例えば、器官の足場）である。いくつかの実施形態では、１×１０３個以上の細胞、例えば、５×１０３個以上の細胞、１×１０４個以上の細胞、５×１０４個以上の細胞、１×１０５個以上の細胞、５×１０５個以上の細胞、１×１０６個以上の細胞、５×１０６個以上の細胞、１×１０７個以上の細胞、５×１０７個以上の細胞、１×１０８個以上の細胞、５×１０８個以上の細胞、１×１０９個以上の細胞、５×１０９個以上の細胞、又は１×１０１０個以上の細胞が投与される。いくつかの実施形態では、対象細胞は、マイクロキャリアで個体に投与される（例えば、細胞を生分解性マイクロキャリア上で増殖させる）。
【０３０２】
対象細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）及び／又は組成物（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含むデクチン−２刺激組成物）は、例えば、移植された細胞が生存及び機能（例えば、器官再構成）のための適切な部位を見出し得る、任意の生理学的に許容可能な賦形剤（例えば、ウィリアムＥ培地）で投与することができる。細胞及び／又は組成物（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含むデクチン−２刺激組成物）は、任意の好都合な方法（例えば、注射、カテーテルなど）によって導入され得る。細胞及び／又は組成物は、リポソーム又は他の生分解性構造体中にカプセル化することができる。いくつかの場合では、対象デクチン−２刺激剤は、リポソーム、マイクロ粒子、又はナノ粒子で投与されるか、又はそれらにコンジュゲートされる。
【０３０３】
対象細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）及び／又は組成物（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含むデクチン−２刺激組成物）は、以下の経路：非経口、皮下（ｓ．ｃ．）、静脈内（ｉ．ｖ．）、頭蓋内（ｉ．ｃ．）、髄腔内、眼内、皮内（ｉ．ｄ．）、筋肉内（ｉ．ｍ．）、リンパ内（ｉ．ｌ．）、又は脊髄液へのいずれかを介して、個体に導入することができる（すなわち、個体に投与することができる）。細胞及び／又は組成物は、全身的に（例えば、非経口、ｓ．ｃ．、ｉ．ｖ．、経口など）又は局所的に（例えば、直接局所注射、腫瘍及び／又は腫瘍切除部位又はその付近への局所注射など）個体に導入することができる。細胞及び／又は組成物は、注射（例えば、全身注射、直接局所注射、腫瘍及び／又は腫瘍切除部位又はその付近への局所注射など）、カテーテルなどによって導入することができる。局所送達（例えば、腫瘍、癌部位、及び／又は腫瘍切除部位への送達）のための方法の例には、例えば関節、腫瘍若しくは関節、腫瘍の付近などへの、例えば注射器による、例えばボーラス注射によること；例えば対流を用いた、例えばカニューレ挿入による、例えば連続注入によること（例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国出願第２００７／０２５４８４２号を参照のこと）；又は細胞が可逆的に付着されるデバイスを埋め込むこと（例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国出願第２００８／００８１０６４号及び同第２００９／０１９６９０３号を参照のこと）が含まれる。
【０３０４】
対象細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）及び／又は組成物（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含むデクチン−２刺激組成物）は、局所、経口、非経口、肺内、及び鼻腔内などを含む任意の好適な手段によって個体に導入することができる。非経口注入には、筋肉内、静脈内（ボーラス又は遅い点滴）、動脈内、腹腔内、髄腔内、又は皮下投与が含まれる。例えば、対象細胞及び組成物は、医学的に許容される任意の方法で投与することができる。これには、静脈内、血管内、動脈内、皮下、筋肉内、腫瘍内、腹腔内、脳室内、硬膜内、又は他のものなどの非経口経路による注射、及び経口、経鼻、眼、直腸、又は局所が含まれ得る。デポー注射又は侵食性の移植（erodible implant）などの手段による持続放出投与も本開示に具体的に含まれる。局所送達、例えば、腎動脈又は局所的腫瘍を付与する血管などの１つ以上の動脈へのカテーテルを介した送達も企図される。
【０３０５】
いくつかの場合では、対象細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）及び／又は組成物（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含むデクチン−２刺激組成物）は、腫瘍及び／若しくは腫瘍切除部位又はその付近への局所注射によって投与される。いくつかの場合では、対象細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）及び／又は組成物（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含むデクチン−２刺激組成物）は、腫瘍及び／又は腫瘍切除部位への局所注射によって（例えば、いくつかの場合では、リポソーム、マイクロ粒子、又はナノ粒子で）投与される。
【０３０６】
対象への処置の投与回数は変動し得る。細胞及び／又は組成物を個体への導入（細胞及び／又は組成物の投与）は、１回の事象であってもよいが、特定の状況では、そのような処置は、限られた期間を改善し、進行中の一連の反復処置を必要とし得る。他の状況では、効果が観察される前に、細胞及び／又は組成物の複数回の投与が必要とされ得る。当業者によって容易に理解されるように、正確なプロトコルは、疾患又は状態、処置される個体の疾患の段階及びパラメータに依存する。
【０３０７】
「治療有効用量」又は「治療用量」は、所望の臨床結果をもたらす（すなわち、治療有効性を達成する）のに十分な量である。治療有効用量は、１回以上の投与で投与することができる。本開示の目的のために、治療有効用量の対象細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）及び／又は組成物（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含むデクチン−２刺激組成物）は、個体に投与された（例えば、移植された）ときに、例えば、抗原細胞（例えば、癌細胞）に対する免疫応答を誘導することにより、疾患状態の進行を軽減する、改善する、安定化する、反転する、予防する、遅らせる、又は遅延させる（例えば、癌細胞数、腫瘍サイズ、腫瘍増殖、腫瘍の存在、癌の存在などを低減する）のに十分な量である。
【０３０８】
治療有効用量のデクチン−２刺激組成物は、使用される特定の剤に依存することができるが、通常、各剤について８ｍｇ／ｋｇ体重以上（例えば、８ｍｇ／ｋｇ以上、１０ｍｇ／ｋｇ以上、１５ｍｇ／ｋｇ以上、２０ｍｇ／ｋｇ以上、２５ｍｇ／ｋｇ以上、３０ｍｇ／ｋｇ以上、３５ｍｇ／ｋｇ以上、又は４０ｍｇ／ｋｇ以上）、又は各剤について１０ｍｇ／ｋｇ〜４０ｍｇ／ｋｇ（例えば、１０ｍｇ／ｋｇ〜３５ｍｇ／ｋｇ、又は１０ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇ）である。特定の血清レベルを達成及び／又は維持するために必要とされる用量は、用量間の時間量に比例し、投与される用量の数に反比例する。したがって、投与頻度が増加するにつれて、必要な用量は減少する。投与計画の最適化は、当業者によって容易に理解され、実施されるであろう。上記で列挙した全ての治療有効用量について、２つ以上の剤（例えば、２つ又はデクチン−２刺激剤、腫瘍標的化抗体などの別の抗癌剤又は免疫調節剤と共投与されるデクチン−２刺激剤）を使用する場合、各剤の用量は、他の剤から独立していてもよい。実例として（用量の独立性を示すため）、１つの場合では、治療用量の対象デクチン−２刺激剤は、７５μｇ／ｍｌ〜２５０μｇ／ｍｌであり得る一方、治療用量の免疫調節剤は、４０μｇ／ｍｌ〜１００μｇ／ｍｌであり得る。
【０３０９】
投与量及び頻度は、患者におけるデクチン−２刺激剤の半減期に応じて変動し得る。このような指針は、例えば、抗体断片の使用において、デクチン−２刺激剤の使用において、活性剤の分子量に対して調節されることが当業者に理解されるであろう。投与量は、局所投与、例えば、鼻腔内、吸入など、又は全身投与、例えば、ｉ．ｍ．、ｉ．ｐ．、ｉ．ｖ．などに対しても変動し得る。
【０３１０】
いくつかの実施形態では、治療有効用量の細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）は、１×１０３個以上の細胞（例えば、５×１０３個以上、１×１０４個の細胞、５×１０４個以上、１×１０５個以上、５×１０５個以上、１×１０６個以上、２×１０６個以上、５×１０６個以上、１×１０７個の細胞、５×１０７個以上、１×１０８個以上、５×１０８個以上、１×１０９個以上、５×１０９個以上、又は１×１０１０個以上）である。
【０３１１】
いくつかの実施形態では、治療有効用量の細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）は、１×１０３個の細胞〜１×１０１０個の細胞（例えば、５×１０３個の細胞〜１×１０１０個の細胞、１×１０４個の細胞〜１×１０１０個の細胞、５×１０４個の細胞〜１×１０１０個の細胞、１×１０５個の細胞〜１×１０１０個の細胞、５×１０５個の細胞〜１×１０１０個の細胞、１×１０６個の細胞〜１×１０１０個の細胞、５×１０６個の細胞〜１×１０１０個の細胞、１×１０７個の細胞〜１×１０１０個の細胞、５×１０７個の細胞〜１×１０１０個の細胞、１×１０８個の細胞〜１×１０１０個の細胞、５×１０８個の細胞〜１×１０１０、５×１０３個の細胞〜５×１０９個の細胞、１×１０４個の細胞〜５×１０９個の細胞、５×１０４個の細胞〜５×１０９個の細胞、１×１０５個の細胞〜５×１０９個の細胞、５×１０５個の細胞〜５×１０９個の細胞、１×１０６個の細胞〜５×１０９個の細胞、５×１０６個の細胞〜５×１０９個の細胞、１×１０７個の細胞〜５×１０９個の細胞、５×１０７個の細胞〜５×１０９個の細胞、１×１０８個の細胞〜５×１０９個の細胞、５×１０８個の細胞〜５×１０９、５×１０３個の細胞〜１×１０９個の細胞、１×１０４個の細胞〜１×１０９個の細胞、５×１０４個の細胞〜１×１０９個の細胞、１×１０５個の細胞〜１×１０９個の細胞、５×１０５個の細胞〜１×１０９個の細胞、１×１０６個の細胞〜１×１０９個の細胞、５×１０６個の細胞〜１×１０９個の細胞、１×１０７個の細胞〜１×１０９個の細胞、５×１０７個の細胞〜１×１０９個の細胞、１×１０８個の細胞〜１×１０９個の細胞、５×１０８個の細胞〜１×１０９、５×１０３個の細胞〜５×１０８個の細胞、１×１０４個の細胞〜５×１０８個の細胞、５×１０４個の細胞〜５×１０８個の細胞、１×１０５個の細胞〜５×１０８個の細胞、５×１０５個の細胞〜５×１０８個の細胞、１×１０６個の細胞〜５×１０８個の細胞、５×１０６個の細胞〜５×１０８個の細胞、１×１０７個の細胞〜５×１０８個の細胞、５×１０７個の細胞〜５×１０８個の細胞、又は１×１０８個の細胞〜５×１０８個の細胞）の範囲である。
【０３１２】
いくつかの実施形態では、細胞の濃度（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）は、１×１０５個の細胞／ｍｌ〜１×１０９個の細胞／ｍｌ（例えば、１×１０５個の細胞／ｍｌ〜１×１０８個の細胞／ｍｌ、５×１０５個の細胞／ｍｌ〜１×１０８個の細胞／ｍｌ、５×１０５個の細胞／ｍｌ〜５×１０７個の細胞／ｍｌ、１×１０６個の細胞／ｍｌ〜１×１０８個の細胞／ｍｌ、１×１０６個の細胞／ｍｌ〜５×１０７個の細胞／ｍｌ、１×１０６個の細胞／ｍｌ〜１×１０７個の細胞／ｍｌ、１×１０６個の細胞／ｍｌ〜６×１０６個の細胞／ｍｌ、又は２×１０６個の細胞／ｍｌ〜８×１０６個の細胞／ｍｌ）の範囲である。
【０３１３】
いくつかの実施形態では、細胞の濃度（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）は、１×１０５個以上の細胞／ｍｌ（例えば、１×１０５個以上の細胞／ｍｌ、２×１０５個以上の細胞／ｍｌ、３×１０５個以上の細胞／ｍｌ、４×１０５個以上の細胞／ｍｌ、５×１０５個以上の細胞／ｍｌ、６×１０５個以上の細胞／ｍｌ、７×１０５個以上の細胞／ｍｌ、８×１０５個以上の細胞／ｍｌ、９×１０５個以上の細胞／ｍｌ、１×１０６個以上の細胞／ｍｌ、２×１０６個以上の細胞／ｍｌ、３×１０６個以上の細胞／ｍｌ、４×１０６個以上の細胞／ｍｌ、５×１０６個以上の細胞／ｍｌ、６×１０６個以上の細胞／ｍｌ、７×１０６個以上の細胞／ｍｌ、又は８×１０６個以上の細胞／ｍｌ）の範囲である。
【０３１４】
細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）及び／又は本開示の組成物（例えば、対象デクチン−２刺激剤を含むデクチン−２刺激組成物）は、ヒト投与に十分に無菌の条件下で調製された等張賦形剤を含む医薬組成物の形態で供与することができる。医薬製剤の一般原理に関して、読み手は、Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ：Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ，ｂｙ  Ｇ．Ｍｏｒｓｔｙｎ  ＆  Ｗ．Ｓｈｅｒｉｄａｎ  ｅｄｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，１９９６；及びＨｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｅ．Ｄ．Ｂａｌｌ，Ｊ．Ｌｉｓｔｅｒ  ＆  Ｐ．Ｌａｗ，Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ  Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ，２０００を参照する。細胞賦形剤及び組成物の任意の付随する要素の選択は、投与に使用される経路及びデバイスに従って適合される。組成物はまた、細胞の生着又は機能的動員を促進する１つ以上の他の成分を含むか、又はそれを伴ってもよい。好適な成分には、細胞接着を支持又は促進するマトリックスタンパク質又は補足的な細胞種が含まれる。
【０３１５】
上記のように、デクチン−２刺激剤は、薬学的に許容される担体（対象剤がその適用を促進するために組み合わされる、天然又は合成の１つ以上の有機又は無機成分）とともに製剤化することができる。好適な担体には滅菌生理食塩水が含まれるが、他の水性及び非水性等張無菌溶液並びに薬学的に許容されることが既知である無菌懸濁液が当業者に既知である。「有効量」とは、疾患状態、変性状態、又は損傷状態の進行を改善する又は遅延させることができる量を指す。有効量は、個々の基準で決定することができ、処置される症状及び求められる結果の考慮に部分的に基づく。有効量は、そのような要因を用い、日常性を超えない実験を使用して、当業者によって決定することができる。
【０３１６】
デクチン−２刺激剤は、活性治療剤及び別の薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物として投与することができる。好ましい形態は、意図される投与様式及び治療用途に依存する。組成物はまた、所望の製剤に応じて、動物又はヒトの投与のための医薬組成物を製剤化するために一般的に使用されるビヒクルとして定義される、薬学的に許容される非毒性担体又は希釈剤も含むことができる。希釈剤は、組み合わせの生物学的活性に影響を及ぼさないように選択される。このような希釈剤の例は、蒸留水、生理的リン酸緩衝生理食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液、及びハンクス溶液である。更に、医薬組成物又は製剤は、他の担体、補助剤、又は非毒性、非治療的、非免疫原性安定剤なども含み得る。
【０３１７】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、タンパク質、キトサン、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、及びコポリマーなどの多糖類（例えば、ラテックス官能化セファロース（商標）、アガロース、セルロースなど）、高分子アミノ酸、アミノ酸コポリマー、及び脂質凝集体（油滴又はリポソームなど）などの大きく、ゆっくりと代謝される高分子も含み得る。
【０３１８】
担体は、直接的又はリンカー基を介した共有結合及び非共有的結合を含む様々な方法で剤を担持し得る。好適な共有結合担体には、アルブミン、ペプチド、及びアミノデキストランなどの多糖類などのタンパク質が含まれ、これらはそれぞれ、部分の結合のための複数の部位を有する。担体は、非共有結合又はカプセル化などの非共有的会合によってデクチン−２刺激剤も担持し得る。担体の性質は、本発明の目的のために可溶性又は不溶性のいずれかであり得る。当業者は、デクチン−２刺激剤に結合するための他の好適な担体について既知であるか、又は日常的な実験を使用してそのようなものを確認することができるであろう。
【０３１９】
許容可能な担体、賦形剤、又は安定剤は、使用される投与量及び濃度においてレシピエントに対して非毒性であり、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸などの緩衝剤、アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤、防腐剤（オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリドなど）、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチル、又はベンジルアルコール、メチル又はプロピルパラベンなどのアルキルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３−ペンタノール、及びｍ−クレゾール）、低分子量（約１０残基未満の）ポリペプチド、血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンなどのタンパク質、ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリシンなどのアミノ酸、グルコース、マンノース、又はデキストリンを含む、単糖類、二糖類、及び他の炭水化物、ＥＤＴＡなどのキレート剤、スクロース、マンニトール、トレハロース、又はソルビトールなどの糖、ナトリウムなどの塩形成対イオン、金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質複合体）、及び／又はＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）、若しくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤が含まれる。インビボ投与に使用される製剤は、無菌でなければならない。これは、無菌濾過膜を通した濾過によって容易に達成される。
【０３２０】
活性成分はまた、それぞれ、コロイド状薬物送達システム（例えば、リポソーム、アルブミン微小球、マイクロエマルション、ナノ粒子、及びナノカプセル）又はマクロエマルションにおける、例えばコアセルベーション技術又は界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、ヒドロキシメチルセルロース又はゼラチンマイクロカプセル及びポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセルに閉じ込められもよい。このような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。
【０３２１】
組成物は、液体溶液又は懸濁液のいずれかとしての注射剤として調製することができ、注射前の液体ビヒクル中の溶液又は懸濁液に好適な固体形態も調製することができる。製剤は、上記のように、補助効果の増強のために、ポリラクチド、ポリグリコリド、又はコポリマーなどのリポソーム又はマイクロ粒子中に乳化又はカプセル化することもできる。Ｌａｎｇｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７，１９９０  ａｎｄ  Ｈａｎｅｓ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２８：９７−１１９，１９９７。本発明の剤は、活性成分の持続放出又はパルス放出を可能にするような様式で製剤化することができるデポー注射又はインプラント製剤の形態で投与することができる。医薬組成物は、一般に、米国食品医薬品局の適正製造規準（good manufacturing practice、ＧＭＰ）規制に完全に準拠して、無菌、実質的に等張性として製剤化される。
【０３２２】
対象デクチン−２刺激剤は、好都合な送達方法を使用して送達（投与）することができる。例えば、癌薬物の生体分布を改善するために、ナノ粒子は、血流中の循環時間を増加させるための最適なサイズ及び表面特性について設計されている。ナノ粒子はまた、増強された透過性及び保持効果並びに腫瘍微小環境などの腫瘍の固有の病態生理学を選択的に使用することによって、装填された活性薬物を癌細胞に運ぶことも可能である。この受動的標的化機構に加えて、選択された腫瘍標的に対するリガンド又は抗体を使用する活性標的化戦略は、これらの治療用ナノ粒子の特異性を増幅する。（例えば、Ｃｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１５  Ｏｃｔ  １５；２１（２０）：４４９９−５０１）。いくつかのケースでは、対象デクチン−２刺激剤は、非担体を使用して個体に投与される。対象デクチン−２刺激剤の送達のためのナノキャリアの例には、（ａ）薬物がポリマーにコンジュゲートしされているか又はポリマー中にカプセル化されたポリマーナノ粒子、（ｂ）ポリマーミセル：水溶液中でナノサイズのコア／シェル構造を形成する両親媒性ブロックコポリマー（疎水性コア領域は、疎水性薬物のリザーバとして機能するのに対し、親水性シェル領域は、疎水性コアを安定化させ、ポリマーを水溶性にする）、（ｃ）デンドリマー：中心コアから放射状に現れる複数の高度に分岐したモノマーからなるナノメートル寸法の合成ポリマー高分子、（ｄ）リポソーム：水性体積部が膜状脂質二重層によって完全に封入された脂質二重層からなる自己集合構造、（ｅ）ウイルスベースのナノ粒子：一般に、構造は、多価自己集合構造であるタンパク質ケージ（ｃａｇｅ）である、及び（ｆ）カーボンナノチューブ：ベンゼン環からなる炭素シリンダーが含まれる。
【０３２３】
デクチン−２刺激剤の毒性は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％の致死用量）又はＬＤ１００（集団の１００％の致死用量）を決定することによって、細胞培養又は実験動物における標準的な薬学的手順によって決定することができる。毒性と処置効果との間の用量比は、治療指数である。これらの細胞培養アッセイ及び動物研究から得られたデータは、治療投与量範囲及び／又は下位の治療投与量範囲（例えば、ヒトでの使用における）を更に最適化及び／又は定義するのに使用することができる。正確な製剤、投与経路、及び投与量は、個々の医師によって、患者の状態を考慮して選択することができる。
【０３２４】
対象方法及び組成物の細胞（例えば、デクチン−２が刺激された骨髄細胞、デクチン−２が刺激されたＡＰＣ、装填されたＡＰＣ、例えば、装填されたＤＣ、装填されたマクロファージ、装填されたＢ細胞、及び／又は接触させた／刺激されたＴ細胞）は、生存の増強、増殖の制御などをするために遺伝子改変され得る。細胞は、当該細胞が目的の遺伝子を発現するように、好適なベクター、相同組換え、又は他の適切な技術によるトランスフェクション又は形質導入によって遺伝子改変され得る。いくつかの実施形態では、所望の細胞の純度をより高くするために、選択マーカーが導入される。
【０３２５】
本開示の実施に有用な一般的技術の更なる詳細のために、熟練者は、標準的教科書及び細胞生物学、組織培養、及び発生学の総説を参照することができる。組織培養及び幹細胞に関して、読み手は、Ｔｅｒａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａｓ  ａｎｄ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ：Ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｅ．Ｊ．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ，ｅｄ．，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ  Ｌｔｄ．１９８７）；Ｇｕｉｄｅ〜Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  Ｍｏｕｓｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（Ｐ．Ｍ．Ｗａｓｓｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  １９９３）；Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ（Ｍ．Ｖ．Ｗｉｌｅｓ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２２５：９００，１９９３）；Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｕｓｅｓ  ｏｆ  Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ：Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ  ｆｏｒ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ〜Ｈｕｍａｎ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ（Ｐ．Ｄ．Ｒａｔｈｊｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔｉｌ．Ｄｅｖ．１０：３１，１９９８）を参照することを所望し得る。
【０３２６】
キット
対象方法において使用するためのキットも提供される。対象キットは、対象方法を実施するための構成成分及び組成物の任意の組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、キットは、以下のうちの１つ以上を含むことができる：対象デクチン−２刺激剤（例えば、マンナン多糖又は別のオリゴマンノースグリカンなどの、デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド；真菌細胞壁抽出物などの、デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド；合成デクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、糖ポリペプチド）；可溶性抗体（例えば、モノクローナル抗体）又は固体支持体上に固定化された抗体などの、デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体；キフネンシンなどのα−マンノシダーゼクラス１阻害剤；あるいは１−デオキシマンノジリマイシン、又はＭＡＮ１Ｂ１、ＭＡＮ１Ａ１、ＭＡＮ１Ａ２、及びＭＡＮ１Ｃ１から選択される１つ以上のタンパク質の発現を特異的に低減するＲＮＡｉ剤若しくは遺伝子編集剤など）；ＡＰＣ、例えばＤＣ、及び／又はＴ細胞の単離、培養、生存、又は投与のための成分；ＡＰＣ、例えばＤＣと接触させるための試薬（例えば、緩衝剤）；Ｔ細胞と接触させるための試薬（例えば、緩衝剤）；標的抗原を対象抗体組成物と接触させて免疫複合体を生成するための試薬（例えば、緩衝剤）；及びこれらの任意の組み合わせ。
【０３２７】
いくつかの実施形態では、キットは、直接的デクチン−２刺激剤（例えば、デクチン−２に対する天然に存在するリガンド；マンナン多糖又は別のオリゴマンノースグリカンなどの、デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド；真菌細胞壁抽出物などの、デクチン−２に対する非植物由来の天然に存在するリガンド；合成デクチン−２刺激糖ポリマー（例えば、糖ポリペプチド）；可溶性抗体（例えば、モノクローナル抗体）又は固体支持体上に固定化された抗体などの、デクチン−２刺激抗デクチン−２抗体）、及び医薬賦形剤を含む。いくつかの実施形態では、キットは、間接的デクチン−２刺激剤（例えば、キフネンシンなどのα−マンノシダーゼクラス１阻害剤；あるいは１−デオキシマンノジリマイシン、又はＭＡＮ１Ｂ１、ＭＡＮ１Ａ１、ＭＡＮ１Ａ２、及びＭＡＮ１Ｃ１から選択される１つ以上のタンパク質の発現を特異的に低減するＲＮＡｉ剤若しくは遺伝子編集剤）、及び医薬賦形剤を含む。
【０３２８】
上記の成分に加えて、対象キットは、（特定の実施形態では）対象方法を実施するための説明書を更に含み得る。これらの説明書は、様々な形態で対象キット中に存在し得、そのうちの１つ以上がキット中に存在し得る。これらの説明書が存在し得る１つの形態は、情報が印刷される好適な媒体又は基体上、例えば紙片上、キットのパケージ類、パッケージ挿入物などに印刷された情報である。これらの説明書の更に別の形態は、情報が記録されたコンピュータ読み取り可読媒体、例えば、ディスケット、コンパクトディスク（ＣＤ）、フラッシュドライブなどである。存在し得るこれらの説明書の更に別の形態は、ウェブサイトアドレスであり、これはインターネットを介して使用され、除去されたサイトでの情報にアクセスし得る。
【０３２９】
本開示の非限定的態様の例
上記の本対象事項の、実施形態を含む態様は、単独で又は１つ以上の他の態様若しくは実施態様と組み合わせて、有益であり得る。前述の説明を限定することなく、１〜５９の番号付けされた本開示の特定の非限定的な態様を以下に提供する。本開示を読んだ際に当業者には明らかとなるように、個々に番号付けされた各態様は、先行又は後続の個々に番号付けされた態様のいずれかとともに又はそれらと組み合わせて使用することができる。これは、そのような全ての態様の組み合わせのための支持を提供することを意図するものであり、以下に明示的に提供される態様の組み合わせに限定されない。
１．（ａ）デクチン−２に結合し、デクチン−２シグナル伝達を刺激する剤、並びに（ｂ）抗体及び／又は免疫調節剤を含み、（ａ）及び（ｂ）は互いにコンジュゲートされている、多価デクチン−２刺激剤。
２．（ａ）が、抗デクチン−２抗体又はその抗原結合領域である、１に記載の多価デクチン−２刺激剤。
３．（ａ）が、デクチン−２に結合するマンノビオース糖ポリペプチドである、１に記載の多価デクチン−２刺激剤。
４．マンノビオース糖ポリペプチドが、２０〜２５０個のアミノ酸長のペプチドを含む、３に記載の多価デクチン−２刺激剤。
５．上記ペプチドが、ムチン様ペプチドである、４に記載の多価デクチン−２刺激剤。
６．マンノビオース糖ポリペプチドが、少なくとも２５％のグリカン密度を有する、３〜５のいずれか１つに記載の多価デクチン−２刺激剤。
７．（ｂ）が、免疫調節剤である、１〜６のいずれか１つに記載の多価デクチン−２刺激剤。
８．（ｂ）が、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮγ、Ｇ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、及びＧＭ−ＣＳＦから選択されるサイトカインであるか、又は抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、ＣＤ４０アゴニスト、抗ＣＤ４７／ＳＩＲＰＡ剤、及び４−１ＢＢアゴニストからなる群から選択される免疫調節剤である、１〜７のいずれか１つに記載の多価デクチン−２刺激剤。
９．（ｂ）が、パターン認識受容体（ＰＲＲ）に対する刺激性リガンドである、１〜７のいずれか１つに記載の多価デクチン−２刺激剤。
１０．（ｂ）が、ＴＬＲアゴニストである、９に記載の多価デクチン−２刺激剤。
１１．ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ７／８アゴニストである、１０に記載の多価デクチン−２刺激剤。
１２．ＴＬＲ７／８アゴニストが、Ｔ７８５である、１１に記載の多価デクチン−２刺激剤。
１３．ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ２アゴニストである、１０に記載の多価デクチン−２刺激剤。
１４．ＴＬＲ２アゴニストが、Ｐａｍ３Ｃｙｓである、１３に記載の多価デクチン−２刺激剤。
１５．（ａ）がマンノビオース糖ポリペプチドを含み、（ｂ）がＴＬＲアゴニストである、１に記載の多価デクチン−２刺激剤。
１６．ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ７／８アゴニスト又はＴＬＲ２アゴニストである、１５に記載の多価デクチン−２刺激剤。
１７．ＴＬＲアゴニストが、Ｔ７８５である、１６に記載の多価デクチン−２刺激剤。
１８．ＴＬＲアゴニストが、Ｐａｍ３Ｃｙｓである、１６に記載の多価デクチン−２刺激剤。
１９．癌及び／又は感染性疾患を有する個体を処置する方法であって、（ａ）デクチン−２刺激糖ポリマー又は（ｂ）（ｉ）抗デクチン−２抗体若しくはデクチン−２刺激糖ポリマーと、（ｉｉ）抗体及び／若しくは免疫調節剤と、を含む多価デクチン−２刺激剤であって、（ｉ）が（ｉｉ）とコンジュゲートされている、多価デクチン−２刺激剤を含む、有効量のデクチン−２刺激組成物を個体に投与することを含み、デクチン−２シグナル伝達が、骨髄細胞において刺激され、それにより、個体における免疫応答を刺激する、方法。
２０．（ａ）又は（ｂ）のデクチン−２刺激糖ポリマーが、マンノビオース糖ポリペプチドを含む、１９に記載の方法。
２１．マンノビオース糖ポリペプチドが、２０〜２５０個のアミノ酸長のペプチドを含む、２０に記載の方法。
２２．上記ペプチドが、ムチン様ペプチドである、２１に記載の方法。
２３．マンノビオース糖ポリペプチドが、少なくとも２５％のグリカン密度を有する、２０〜２２のいずれか１つに記載の方法。
２４．（ｂ）のデクチン−２刺激糖ポリマーが、抗体にコンジュゲートされている、１９〜２３のいずれか１つに記載の方法。
２５．（ｂ）のデクチン−２刺激糖ポリマーが、免疫調節剤にコンジュゲートされている、２４に記載の方法。
２６．（ｂ）のデクチン−２刺激糖ポリマーが、ＩＬ−Ｉ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮγ、Ｇ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、及びＧＭ−ＣＳＦから選択されるサイトカインにコンジュゲートされている、２４又は２５に記載の方法。
２７．（ｂ）のデクチン−２刺激糖ポリマーが、パターン認識受容体（ＰＲＲ）に対する刺激性リガンドにコンジュゲートされている、２４又は２５に記載の方法。
２８．刺激性リガンドが、ＴＬＲアゴニストである、２７に記載の方法。
２９．ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ７／８アゴニストである、２８に記載の方法。
３０．ＴＬＲ７／８アゴニストが、Ｔ７８５である、２９に記載の方法。
３１．ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ２アゴニストである、２８に記載の方法。
３２．ＴＬＲ２アゴニストが、Ｐａｍ３Ｃｙｓである、３１に記載の方法。
３３．上記投与が、局所投与を含む、１９〜３２のいずれか１つに記載の方法。
３４．上記投与が、全身投与を含む、１９〜３３のいずれか１つに記載の方法。
３５．上記投与が、ＣＤ４０アゴニスト、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、及びＩＦＮγのうちの１つ以上との共投与を含む、１９〜３４のいずれか１つに記載の方法。
３６．抗原提示細胞（ＡＰＣ）を刺激する方法であって、ＡＰＣを、インビトロ又はエクスビボで、デクチン−２刺激糖ポリマーを含むデクチン−２刺激組成物と、ＡＰＣにおけるデクチン−２シグナル伝達を増強するのに十分な用量及び時間で接触させて、それにより、刺激されたＡＰＣを生じさせることを含む、方法。
３７．刺激されたＡＰＣを癌抗原と接触させて、抗原と接触させたＡＰＣを生成することを含む、３６に記載の方法。
３８．癌抗原が、癌細胞可溶化物中に存在するか、又は癌細胞の一部である、３７に記載の方法。
３９．刺激されたＡＰＣ又は抗原と接触させたＡＰＣを個体に導入することを含む、３６〜３８のいずれか１つに記載の方法。
４０．癌抗原が癌を有する個体由来であり、方法が、抗原と接触させたＡＰＣを個体に導入することを含む、３７又は３８に記載の方法。
４１．ＡＰＣが、個体の自己由来である、３９又は４０に記載の方法。
４２．Ｔ細胞を、抗原接触させたＡＰＣと接触させることを含む、３６〜４１のいずれか１つに記載の方法。
４３．接触させたＴ細胞を個体に導入することを含む、４２に記載の方法。
４４．Ｔ細胞が、個体の自己由来である、４３に記載の方法。
４５．抗原と接触させたＡＰＣが、個体の自己由来である、４３又は４４に記載の方法。
４６．個体が癌を有する、３９〜４５のいずれか１つに記載の方法。
４７．デクチン−２刺激糖ポリマーが、マンノビオース糖ポリペプチドを含む、３６〜４６のいずれかに記載の方法。
４８．マンノビオース糖ポリペプチドが、２０〜２５０個のアミノ酸長のペプチドを含む、４７に記載の方法。
４９．上記ペプチドが、ムチン様ペプチドである、４８に記載の方法。
５０．マンノビオース糖ポリペプチドが、少なくとも２５％のグリカン密度を有する、４７〜４９のいずれか１つに記載の方法。
５１．デクチン−２刺激糖ポリマーが、抗体及び／又は免疫調節剤にコンジュゲートされている、３６〜５０のいずれか１つに記載の方法。
５２．デクチン−２刺激糖ポリマーが、免疫調節剤にコンジュゲートされている、５１に記載の方法。
５３．デクチン−２刺激糖ポリマーが、ＩＬ−Ｉ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮγ、Ｇ−ＣＳＦ、ＴＮＦα、及びＧＭ−ＣＳＦから選択されるサイトカインにコンジュゲートされている、５１又は５２に記載の方法。
５４．デクチン−２刺激糖ポリマーが、パターン認識受容体（ＰＲＲ）に対する刺激性リガンドにコンジュゲートされている、５１又は５２に記載の方法。
５５．刺激性リガンドが、ＴＬＲアゴニストである、５４に記載の方法。
５６．ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ７／８アゴニストである、５５に記載の方法。
５７．ＴＬＲ７／８アゴニストが、Ｔ７８５である、５６に記載の方法。
５８．ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ２アゴニストである、５５に記載の方法。
５９．ＴＬＲ２アゴニストが、Ｐａｍ３Ｃｙｓである、５８に記載の方法。
【実施例】
【０３３０】
以下の実施例は、本発明を製造及び使用する方法の完全な開示及び説明を当業者に提供するために記載されており、本発明に関する発明者の範囲を限定することを意図するものではなく、以下の実験が全て又は実施される唯一の実験であることを表すことを意図するものではない。使用される数（例えば、量、温度など）に対する精度を確保する努力がなされたが、いくつかの実験誤差及び偏差を考慮するべきである。別段示さない限り、部は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏度であり、圧力は大気圧若しくは大気圧付近である。標準的な略語、例えば室温（ＲＴ）、塩基対（ｂｐ）、キロベース（ｋｂ）、ピコリットル（ｐｌ）、秒（ｓ又はｓｅｃ）、分（ｍ又はｍｉｎ）、時（ｈ又はｈｒ）、日（ｄ）、週（ｗｋ又はｗｋｓ）、ナノリットル（ｎｌ）、マイクロリットル（ｕｌ）、ミリリットル（ｍｌ）、リットル（Ｌ）、ナノグラム（ｎｇ）、マイクログラム（μｇ）、ミリグラム（ｍｇ）、グラム（（ｇ）、質量の文脈において）、キログラム（ｋｇ）、重力（（ｇ）、遠心分離の文脈において）の同等物、ナノモル（ｎＭ）、マイクロモル（ｕＭ）、ミリモル（ｍＭ）、モル（Ｍ）、アミノ酸（ａａ）、キロベース（ｋｂ）、塩基対（ｂｐ）、ヌクレオチド（ｎｔ）、筋肉内（ｉ．ｍ．）、腹腔内（ｉ．ｐ．）、皮下（ｓ．ｃ．）などを使用し得る。
【０３３１】
以下の実験は、デクチン−２の関与を介して骨髄細胞（例えば、マクロファージ及び樹状細胞などの腫瘍関連骨髄（ＴＡＭ）細胞）を活性化するための複数の戦略の開発を実証する。以下の実験は、デクチン−２刺激が、免疫抑制ＴＡＭ細胞を炎症誘発性細胞へと再プログラムし、これが、抗腫瘍免疫応答を誘導し、化学療法（例えば、従来の化学療法）及び他の免疫療法（例えば、チェックポイント阻害剤、ＣＤ４０アゴニスト）を支持し、腫瘍の退縮をもたらすことを示す（図２Ｅ−２Ｇ、図３Ｄ〜Ｆ）。これらの所見は、癌免疫療法（例えば、現在までに試験されたほとんどの治療介入に対して難治性のままであるＰＤＡＣのような癌を処置するためのもの）についての主な関与を有する。
【０３３２】
実施例１：デクチン−２発現
腫瘍関連骨髄（ＴＡＭ）細胞（腫瘍関連マクロファージ及び樹状細胞（ＤＣ））は、様々な感染性疾患における有効な適応免疫応答の誘導に必要とされる、高レベルのデクチン−２（図１Ａ、図１Ｂ）、パターン認識受容体（ＰＲＲ）を発現した。炭水化物結合タンパク質のクラスである、このＣ型レクチン受容体は、真菌及び他の病原体由来の複数の末端マンノース残基を含む多様な範囲の成分を認識することが示されている。これと一致して、デクチン−２は、炭水化物配列中の高マンノースグリカンに選択的に結合する（例えば、ＭｃＧｒｅａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ．２００６  Ｍａｙ；１６（５）：４２２−３０を参照のこと）。
【０３３３】
実施例２：天然デクチン−２アゴニストによる処置
日和見病原体Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ  ｆｕｒｆｕｒ活性化因子のようないくつかの真菌種を含む様々な病原体は、デクチン−２活性化因子を有する。本明細書に提示される実験（図２Ａ〜図２Ｇ）において、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒの市販の細胞壁抽出物（フルフルマン、Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）が、デクチン−２依存様式で腫瘍関連骨髄（ＴＡＭ）細胞を活性化し、これにより、ＴＡＭ細胞による炎症誘発性サイトカイン生成及び共刺激分子発現がもたらされた（図２Ａ〜図２Ｃ）。Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ及びＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ由来のデクチン−２アゴニストの静脈内注射を繰り返しは、マウスにおいて十分に寛容性であった。
【０３３４】
これらのデータと一致して、マウスＰＤＡＣモデルでの研究は、天然デクチン−２アゴニストの腫瘍内注射がＴ細胞浸潤を誘導し（図２Ｄ）、腫瘍増殖を阻害することが示された（図２Ｅ）。更に、従来の化学療法（すなわち、ゲムシタビン）又はより確立された癌免疫療法（すなわち、チェックポイント阻害剤、ＣＤ４０アゴニスト）と組み合わせたとき、デクチン−２刺激は、いくつかの場合では、腫瘍退縮及び更に腫瘍の除去をもたらした（図２Ｅ〜図２Ｇ）。ＴＡＭ活性化を更に高めるために、デクチン−２アゴニストを他の補助剤と組み合わせることができる。例えば、我々は、デクチン−２アゴニスト及びサイトカインＩＦＮγの両方で刺激された細胞が、ＣＤ４０を含む、非常に高レベルの炎症誘発性サイトカイン、細胞傷害性メディエータ、及び共刺激分子を発現することを見出した。それに対応して、これらのアジュバントをＣＤ４０アゴニスト抗体処置と組み合わせることにより、インビボでの腫瘍の退縮が一貫してもたらされた（図２Ｇ）。
【０３３５】
図３Ａ〜３Ｆは、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅマンナン（例えば、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能な抽出物）などの天然デクチン−２リガンドが、腫瘍関連骨髄細胞（例えば、ヒト細胞）を活性化し、治療的な抗腫瘍免疫応答を誘導することを実証している。マンナンは、全身送達されたときに活性であり、複数の腫瘍種（例えば、膵臓癌、肺癌、及び結腸癌）を処置したときに活性であった。（図３Ａ）示された抗体で前処置し、次いで、プレートに結合したＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅで一晩刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図３Ｂ、図３Ｃ）ＧＭ−ＣＳＦで前処置し、次いで、フルフルマン（図３Ｂ）又はマンナン（図３Ｃ）で刺激した、ヒト単球によるＴＮＦα生成。ｎ＝３ドナーの平均±ＳＥＭを示す。（図３Ｄ〜図３Ｆ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ（図３Ｄ）、肺腺癌（図３Ｅ）、又はＣＴ２６結腸癌を、腫瘍移植後の６〜９日目に、マンナン（ｉ．ｖ．）、並びに／又はαＣＴＬＡ−４及びαＰＤ−１抗体（ｉ．ｐ．）の組み合わせで処置した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、対応のあるスチューデントのｔ検定（Ｂ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図３Ｄ〜図３Ｆ）。
【０３３６】
図４Ａ〜４Ｄは、デクチン−２発現が、マウス及びヒト系の両方において、デクチン−２刺激に対してより応答する細胞／腫瘍を生成するために、ＧＭ−ＣＳＦによって誘導することができることを実証している。換言すれば、ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を誘導し、デクチン−２刺激に対して腫瘍を高感受性にした。（図４Ａ〜図４Ｃ）マウス（図４Ａ、図４Ｂ）及びヒト（図４Ｃ）単球を、ＧＭ−ＣＳＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）を補充した又は補充しない培地で２４時間培養した後、デクチン−２発現のフローサイトメトリー分析（図４Ａ、図４Ｃ）、又はフルフルマンによる刺激及びＴＮＦα生成の分析を行った。（図４Ｃ）ｎ＝３のドナーの平均ＭＦＩ±ＳＥＭを示す。（図４Ｄ）マウス保有ｓ．ｃ．ＣＴ２６腫瘍をマンナン（ｉ．ｖ．）及び／又はＧＭ−ＣＳＦ（ｉ．ｔ．）で処理し、これは腫瘍移植後６日目に開始した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜４）。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１、スチューデントのｔ検定（図４Ｃ）又はテューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による（図４Ｄ）。
【０３３７】
実施例３：クラスＩ  α−マンノシダーゼ阻害剤による処置
デクチン−２は、複数の末端マンノース残基を含み、かつ高マンノース型グリカンと強く反応する様々な病原体成分を認識する。高マンノースグリカンは、真核細胞におけるタンパク質のＮ−結合グリコシル化の際に生成される一般的な中間グリカン種である。哺乳動物細胞では、これらの高マンノースグリカンは、末端マンノース残基を最初の高マンノース前駆体Ｍａｎ９ＧｌｃＮＡｃ２（Ｍａｎ−９）から開裂させる様々なマンノシダーゼの作用を必要とするプロセスにより、複合型又はハイブリッド型のＮ−グリカンに更に加工される。
【０３３８】
キフネンシン（小分子α−マンノシダーゼクラス１（α−マンノシダーゼＩ）阻害剤の一例）で腫瘍細胞を処置することにより、細胞表面上で高マンノースグリカンの急激な増加がもたらされた（図５Ａ）。続いて、腫瘍細胞は、デクチン−２依存様式で腫瘍関連骨髄細胞（ＴＡＭ細胞）（例えば、腫瘍関連樹状細胞及びマクロファージ）を活性化し、炎症誘発性サイトカイン生成及び腫瘍細胞の取り込みを誘導した（図５Ｂ、図５Ｃ）。インビボでは、キフネンシン処理により、腫瘍細胞による高マンノースグリカンの提示が増加し、腫瘍へのＴ細胞浸潤がもたらされた（図５Ｄ）。これらのデータは、腫瘍免疫原性を増強するためのマンノシダーゼ阻害剤の使用を支持している。
【０３３９】
実施例４：デクチン−２活性化抗体及び糖コンジュゲートによる処置
本明細書に提示されるデータは、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）が、Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ由来の微粒子細胞壁抽出物及び固定化された（すなわち、プレートに結合された）抗デクチン−２抗体によって強力に活性化されたことを示している（図６Ａ、図６Ｂ）。これらの結果は、デクチン−２がシグナル伝達のために受容体のクラスター化を必要とすることと一致し、ＴＡＭが、十分なデクチン−２のクラスター化を誘導する抗体及び糖コンジュゲートによって活性化され得る（これは、多価デクチン−２刺激剤などの直接的デクチン−２刺激剤（上記のようなもの、例えば、高マンノース修飾抗体糖コンジュゲートなど）の使用、及び／又は糖ポリペプチド、例えば、オリゴマンノース糖ポリペプチド（例えば、マンノビオースに富む糖タンパク質、例えば、Ｏ−結合及び／若しくはＮ−結合したマンノビオースに富む糖タンパク質）などの天然に存在する若しくは合成糖ポリマーの使用を含む、多数の方法で達成することができる）ことを示している。
【０３４０】
図８Ａ〜図８Ｃは、マンノビオース糖ポリマー及び抗体−糖ポリマーコンジュゲートが、デクチン−２を介して細胞を活性化し、マンノビオース糖ポリマーが治療的に活性であることを実証している。合成マンノビオース糖ポリマー及び糖コンジュゲートは、治療効果のために骨髄細胞を活性化した。（図８Ａ、図８Ｂ）示された抗体で前処置し、次いで、プレートに結合された（図８Ａ）異なるグリカン密度（３５％又は６５％）のマンノース（Ｍａｎ１）又はマンノビオース（Ｍａｎ２）で刺激し、又は（図８Ｂ）６５％ラクトース（Ｌａｃ）若しくはＭａｎ２  １００ｍｅｒ糖ポリマーに結合されたαＥｐＣＡＭで刺激した、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図８Ｃ）マウス保有ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ腫瘍を６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒの糖ポリマー（２０ｍｇ／ｋｇのｉ．ｖ．、ｑ２ｄ）で処理し、これは腫瘍移植後１０日目から開始した。平均腫瘍体積±ＳＥＭを示す（１群あたりｎ＝３〜５）。＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、テューキーの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【０３４１】
実施例５
図９Ａ〜図９Ｃ．本開示の合成マンノビオース糖ペプチドが、デクチン−２を通して腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）を刺激し、腫瘍増殖を抑制することを実証するデータ。（図９Ａ）本開示の糖ペプチドを合成するために使用された１つの可能な合成方法を示すスキーム−この場合、ＮＣＡ重合。環化されたアミノ酸モノマーをアジド担持ニッケル開始剤の存在下で開環重合して、調整可能な長さ及び組成の官能化可能なペプチドを得る。糖ペプチドは、タンパク質コンジュゲーション、蛍光顕微鏡、及び膜挿入を含む様々な用途のためにＮＨＳ及びクリック化学によって更に精巧にすることができる。（図９Ｂ）デクチン−２遮断抗体で前処置されたか又は前処置されず、異なるグリカン密度（３５％又は６５％）のプレート結合マンノース（Ｍａｎ１）又はマンノビオース（Ｍａｎ２）糖ペプチド（２５０ｍｅｒ）で１８時間刺激された、ＬＭＰ  ＴＡＭによるＴＮＦα生成。（図９Ｃ）Ｍａｎ２糖ペプチド（６５％  １００ｍｅｒ）（２０ｍｇ／ｋｇのｉ．ｖ．、ｑ２ｄ×２ｗｋ）で処置したｓ．ｃ．ＰＤＡＣ保有マススについての腫瘍増殖曲線。＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【０３４２】
図１０．対照又はデクチン−２遮断抗体で前処置され、次いで、異なるグリカン密度（３０％又は６５％）を有するプレート結合ラクトース（Ｌａｃ）又はマンノビオース（Ｍａｎ２）糖ペプチド（１００ｍｅｒ合成糖ペプチド）で２０時間刺激された、マウス単球由来樹状細胞によるサイトカイン生成。
【０３４３】
図１１．短い及び長いマンノビオース糖ポリマーの両方がデクチン−２を刺激することができることを示すデータ。対照又はデクチン−２遮断抗体で前処置され、次いで、異なるグリカン密度（３５／６５／１００％）を有する可溶性又はプレート結合糖ペプチド（２０−／２５０ｍｅｒ合成糖ペプチド）で２０時間刺激された、ＰＤＡＣ  ＴＡＭによるサイトカイン生成。短い及び／又は長いグリコシル化ポリマーは、プレートに十分に結合しない（２０ｍｅｒ及び１００％  ２５０ｍｅｒについて活性を明らかに欠いていることを説明する）。したがって、サイトカラシンＤを使用して貪食作用を阻害し、それにより、可溶性デクチン−１リガンドについて前に示したように、可溶性形態のポリマーに対する応答を誘導した（Ｒｏｓａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００８  Ｓｅｐ  １；１８１（５）：３５４９−５７）。
【０３４４】
実施例６：本開示の糖コポリマー（例えば、Ｍａｎ２ポリマー）は、抗体にコンジュゲートされている場合、可溶性形態でデクチン−２を刺激し、活性を得る（抗原特異性に関わらない）。
図１２Ａ〜図１２Ｃ．マンノビオース糖ペプチド−抗体コンジュゲートは、ＴＡＭを活性化し、デクチン−２を介して腫瘍細胞の取り込みを刺激する。（図１２Ａ）リシンコンジュゲーションのためのスキーム：抗体をＢＣＮ−ＮＨＳ試薬により修飾し、反応性アジド又はテトラジン部分を保有する糖ペプチドにコンジュゲートすることができる。（図１２Ｂ）部位特異的コンジュゲーションのためのスキーム：アルデヒドタグを保有する抗体は、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）コンセンサス配列ＣＴＰＳＲを導入し、次いで、ＦＧＥと共にインキュベートすることによって作成することができる。次いで、アルデヒドタグを有する抗体を、アミノオキシ−アジドリンカーで修飾し、シクロオクチンを有する糖ペプチドとコンジュゲート結合させることができる。（図１２Ｃ）ＴＡＭ及びＣＦＳＥ標識ＰＤＡＣ細胞の共培養物を、リシンコンジュゲーション＋／−デクチン−２遮断抗体によって調製された１０μｇ／ｍｌの未修飾αＥｐＣＡＭ抗体又はαＥｐＣＡＭ−Ｍａｎ２糖ペプチド（６５％  １００ｍｅｒ）コンジュゲート（αＥｐ−Ｍａｎ２）で１８時間刺激した後、ＣＦＳＥ取り込み、ＴＮＦα生成、及び共刺激分子発現の分析を行った。
【０３４５】
図１３．抗Ｅｐｃａｍ抗体をＢＣＮ−ＮＨＳ試薬で標識し（１０×又は２５×ＢＣＮ：抗体）、マンノビオース糖ペプチド（６５％  １００ｍｅｒ）にコンジュゲートして、抗体−糖ペプチドコンジュゲート（αＥｐＭ）を調製した。ＰＤＡＣ  ＴＡＭを、デクチン−２遮断抗体（αＤ２）で前処置し、又は前処置せず、次いで、プレート結合（左上パネル）又は可溶性（右上及び下パネル）抗体コンジュゲートで単独で、又はＣＦＳＥ標識ＰＤＡＣ細胞との共培養物（下パネル、「Ｍｏ腫瘍共培養物」）で刺激した。サイトカイン生成を２０時間後に評価した。
【０３４６】
図１４．抗Ｅｐｃａｍ抗体をＢＣＮ−ＮＨＳ試薬で標識し（１０×又は２５×ＢＣＮ：抗体）、マンノビオース糖ペプチド（６５％  １００ｍｅｒ）にコンジュゲートして、抗体−糖ペプチドコンジュゲート（αＥｐＭ）を調製した。ＰＤＡＣ  ＴＡＭをデクチン−２遮断抗体（αデクチン−２）で前処置し、又は前処置せず、次いで、ＣＦＳＥ標識したＰＤＡＣ細胞との共培養物での可溶性抗体コンジュゲートで刺激した。２０時間後に、ＴＡＭによるＣＦＳＥの取り込みをフローサイトメトリーによって評価した。
【０３４７】
図１５Ａ〜図１５Ｂ．リシンコンジュゲーション（ＤＡＲ約１〜２；２．５μｇ／ｍｌ抗体濃度）＋／−αデクチン−２（２０μｇ／ｍＬ）により６５％  Ｍａｎ  １００ｍｅｒに結合されたαＥｐＣＡＭ抗体又は同等量の非コンジュゲート（unconjugated）αＥｐＣＡＭ及びＭａｎ２ポリマーの混合物で１８時間刺激した、ＧＭ−ＣＳＦ前処置単球によるサイトカイン生成。図１５Ｂは、抗体−Ｍａｎ２コンジュゲート及び別個の成分の混合物についての用量反応曲線を示す。
【０３４８】
図１６．本開示の糖タンパク質を使用して調製された抗体コンジュゲート（例えば、様々な長さの、例えば２５残基までのＭａｎ２ポリマー）が、デクチン−２を介して細胞を刺激することができることを示すデータ。抗体コンジュゲートを、様々な長さの６５％  Ｍａｎ２ポリマーを使用してリシン結合により調製し、次いで、受動的吸着（２０μｇ／ｍＬ）によってプレート上にコーティングした。ＧＭ−ＣＳＦ前処置単球＋／−αデクチン−２をウェルに添加し、１８時間後にＴＮＦα生成を測定した。
【０３４９】
実施例７：免疫刺激剤と組み合わせるが、これとコンジュゲートしていない、本開示の糖コポリマー（例えば、Ｍａｎ２ポリマー）
デクチン−２リガンド及び他の免疫刺激剤の組み合わせは、インビトロ及びインビボの両方で活性であり、例えば、デクチン−２アゴニストは、他の免疫刺激剤と相乗作用する。
【０３５０】
図１７は、フルフルマン＋／−示された剤で２４時間処置したマウスＰＤＡＣ  ＴＡＭによるマウスＰＤＡＣ  ＴＡＭによる共刺激分子発現を示す。図１８は、フルフルマン＋／−示された剤で２４時間処置したマウスＰＤＡＣ  ＴＡＭによるサイトカイン生成を示す。図１９は、マンナン（ｑ２ｄ  ｉ．ｖ．）で単独で、又はＩＦＮｇ（ｑ２ｄ  ｉ．ｖ．）若しくは示された抗体（ｑ３ｄ  ｉ．ｐ．）と組み合わせて処置し、当該処置は腫瘍移植後８日目又は９日目に開始した、ｓ．ｃ．ＰＤＡＣ保有マウスについての腫瘍増殖曲線を示す。
【０３５１】
実施例８：免疫刺激剤にコンジュゲートされた本開示の糖コポリマー（例えば、Ｍａｎ２ポリマー）は、可溶性形態で活性を得て、相乗効果を示す。
膵臓癌を有するマウス（ＰＤＡＣマウス）を、腫瘍内注射（８日目及び１１日目に１０ｍｇ／ｋｇ）により、「Ｍａｎ２−Ｔ７８５」と呼ばれる、対象多価剤：免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７／８アゴニストＴ７８５）にコンジュゲートされたデクチン−２のアゴニスト（この場合、６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）で処置したか、又はＭａｎ２「Ｍａｎ２」）のみで処置した。（図２０に）示すように、Ｍａｎ２−Ｔ７８５による処置は、ＰＢＳ対照又はＭａｎ２処置と比較して、強くかつ相乗的に腫瘍増殖を抑制した。
【０３５２】
コンジュゲートについては、インビトロで相乗的免疫刺激効果も観察された。（図２１に）示すように、Ｍａｎ２−Ｔ７８５コンジュゲートは低濃度でＴＡＭを強く刺激した一方、同等濃度のＭａｎ２、Ｔ７８５、又は両方の混合物は刺激しなかった。これらの効果は抗デクチン−２抗体で遮断され、これは、当該効果がデクチン−２結合に依存することを示した。この結果は、化学的コンジュゲートが、非コンジュゲート成分の混合物と同様に強力である（又はおそらくそれよりも小さい）ことが予想されるという点で驚くべきことである。また驚くべきことに、ＴＬＲ７／８アゴニストの結合は、インビトロでのＭａｎ２糖ペプチドの挙動を変化させた。Ｍａｎ２糖ペプチドは、ＴＡＭを強く活性化するために（例えば、プレート又は細胞上の）固定化を典型的には必要とするが、示された結果は、溶液中の刺激剤を用いて得られた。これらのデータに基づき、コンジュゲートのインビボ効果は、成分が混合物として（コンジュゲーションなしに）投与される場合よりも実質的に大きいことが予想される。本開示の他の箇所に記載されるＭａｎ２−抗体コンジュゲートについても同じことが言える。図２２Ａは、図２０及び図２１で使用されるＭａｎ２−Ｔ７８５コンジュゲートを生成するために使用される合成の概略図を示す。図２２Ａに示されるものと同様の合成スキームを、Ｒ８４８（図２２Ｃ）及び他のＴＬＲ７／８リガンドを使用してコンジュゲートを調製するために使用することもできる。
【０３５３】
実施例９：ＴＬＲ２リガンドへの糖ポリマー（Ｍａｎ２ポリマー）のコンジュゲート
デクチン−２アゴニスト（この場合、Ｍａｎ２ポリマー）を免疫刺激剤（この場合、Ｐａｍ３Ｃｙｓ、ＴＬＲ２のアゴニスト）にコンジュゲートさせた（図２３Ｂ）。これらの多価剤はまた、可溶性形態で活性であった：ＧＭ−ＣＳＦ前処置単球を、Ｐａｍ３Ｃｙｓ（ＴＬＲ１／２リガンド）に結合された５μＭの６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ又は等モル量の非コンジュゲートＭａｎ２及びＰａｍ３Ｃｙｓで１８時間刺激した。単球によるサイトカイン生成を測定した（図２３Ａ）。これらのデータは、他の免疫刺激剤（例えば、ＴＬＲ７／８アゴニストのみではない）を、対象多価剤の一部としての「第２の剤」として使用することができることを示す。
【０３５４】
実施例１０：ＴＬＲ７／８アゴニストへのαデクチン−２抗体のコンジュゲーション
ＴＬＲ７／８アゴニスト（Ｔ７８５など）にコンジュゲートされたＭａｎ２ポリマーで得られた結果と同様に、デクチン−２アゴニスト（「第１の」剤）が抗デクチン−２抗体である多価剤も、相乗的な免疫刺激効果を示し、可溶性形態で活性であった。（図２４）αデクチン−２及びアイソタイプ（ラットＩｇＧ２ａ）抗体コンジュゲートを、ＳＭＣＣ修飾ＴＬＲ７／８アゴニスト（Ｔ７８５）及びＳＡＴＡ架橋剤を使用して、リシン結合によって調製した。コンジュゲート又は同等量の非コンジュゲート成分で１８時間刺激したＧＭ−ＣＳＦ前処置単球についてのサイトカイン生成を示す。これらのデータは、コンジュゲートされた化合物間の相乗作用を示し、αデクチン−２抗体などの他のデクチン−２アゴニスト（Ｍａｎ２などの糖ポリマーのみではない）を対象多価剤の一部としての「第１の剤」として使用することができることを示す。
【０３５５】
実施例１１
図２５は、ＧＭ−ＣＳＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）で前処置した後に、可溶性フルフルマン（２０μｇ／ｍｌ）又はプレート結合マンナン（１０μｇ／ウェル）で２４時間刺激したヒト単球によるサイトカイン生成及び共刺激分子発現を示す。
【０３５６】
実施例１２
図２６Ａ〜図２６Ｄ．デクチン−２刺激剤は、Ｔ細胞媒介抗腫瘍免疫を介してＰＤＡＣの進行を阻害する。示されるように処置したｓ．ｃ．ＬＭＰ保有マウスの腫瘍増殖曲線。（図２６Ａ、図２６Ｂ）腫瘍を７〜１０日間増殖させた後、マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ；２５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｔ．ｑ３ｄ×２）＋／−デクチン−２遮断抗体又は対照抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置した。（図２６Ｃ、図２６Ｄ）マンナン処置（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×３ｗｋ）中のＣＤ４又はＣＤ８枯渇（図２６Ｃ）又はチェックポイント遮断抗体（図２６Ｄ）（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ３ｄ）により処置したマウス。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊、ｐ＜０．００１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定（Ａ、Ｂ）又はテューキーの検定（Ｃ、Ｄ）を用いた二元配置分散分析による。
【０３５７】
実施例１３
図２７Ａ〜図２７Ｇ．ＧＭ−ＣＳＦは、デクチン−２発現を駆動し、ＴＡＭをデクチン−２刺激に対して高感受性にする。（図２７Ａ、図２７Ｂ）マウス（図２７Ａ）又はヒト（図２７Ｂ）の単球によるデクチン−２発現を、ＧＭ−ＣＳＦを補充した培地又は補充していない培地で１８時間培養した。（Ｃ〜Ｅ）３Ｔ３線維芽細胞馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ（図２７Ｃ）若しくはＬＭＰ腫瘍馴化培地＋／−ＧＭ−ＣＳＦ中和抗体（図２７Ｄ）で前処置したマウス単球による、又は示されるように前処置したヒト単球（図２７Ｅ）による、ＴＮＦα生成。（図２７Ｆ）マンナン（１２．５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ×２ｗｋ）及び示された抗体（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．ｑ２ｄ）で処置したＬＭＰ保有マウス。（図２７Ｇ）ヒト癌組織における、デクチン−２の発現と示された遺伝子との間の相関を示すヒートマップ。遺伝子発現データをＴＣＧＡから取得し、解析し、スピアマンの相関係数を得た。＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、スチューデントのｔ検定（Ｂ）による又はテューキー（Ｆ）の事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【０３５８】
実施例１４
図２８Ａ〜図２８Ｄ．ＫＲＡＳによって駆動される腫瘍は、ＧＭ−ＣＳＦを生成し、デクチン−２免疫療法に応答する。（図２８Ａ）野生型ＫＲＡＳ（ＷＴ）又は癌細胞株エンサイクロペディアから得たコドン１２、１３、若しくは６１（Ｍｕｔ）における変異を有するヒト腫瘍細胞株のＧＭ−ＣＳＦ発現値。箱ひげ図は、中央値及び四分位数範囲を示す。＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、マン・ホイットニーのＵ検定による。（図２８Ｂ）２４時間培養後の腫瘍上清中のＧＭ−ＣＳＦレベルを示す。（図２８Ｃ、図２８Ｄ）マンナン（１０ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｖ．ｑ２ｄ）で処理したｓ．ｃ．２３８Ｎ１又はＭＯＣ２腫瘍を有するマウスの腫瘍増殖曲線。３／５処理したマウスは、２３８Ｎ１腫瘍が治癒した。＊、ｐ＜０．０５；＊＊、ｐ＜０．０１；＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１、シダックの事後検定を用いた二元配置分散分析による。
【０３５９】
実施例１５
（１）デクチン−２のアゴニスト（この場合、６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）及び（２）７８４又は７８６を含む多価剤の合成を以下のようにして調製した。補助剤と抗体との間の距離を延長するために、補助剤を様々な数のＰＥＧ単位を含むポリエチレングリコール（ＰＥＧ）リンカーに結合させた。ＰＥＧリンカー延長部の連結は、リンカー連結及びＴＦＰ活性化について以前記載されたプロトコルを使用して実施した。簡潔に述べると、補助剤をＤＭＦに溶解し、ＤＩＰＥＡを添加し、続いてＨＡＴＵ（１．２当量）を添加した。１時間後、適切なアミノＰＥＧリンカーを添加し、室温で更に２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮乾固させ、残渣を、水中１０〜９０％のアセトニトリルで３０分間溶出したＣ−１８カラム上の分取ＨＰＬＣにより精製した。純粋な画分を合わせ、凍結乾燥した。
【０３６０】
次いで、ＴＦＰエステルを、ホウ酸緩衝生理食塩水（ＢＢＳ−ｐＨ８．４）中で室温において１６時間、グリポリマーにコンジュゲートさせた。３ｋＤａのＭＷＣＯ遠心スピンフィルターを使用して、サイズ排除ベースの濾過を用いて反応混合物を精製した。残留する非コンジュゲート補助剤がＬＣ−ＭＳによって検出可能でなくなるまで、試料を脱イオン水と繰り返し緩衝交換した。次いで、試料を凍結乾燥して、精製されたコンジュゲートを白色固体として得た。
【０３６１】
図２９Ａ〜図２９Ｂ．免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７アゴニスト７８４）にコンジュゲートされたデクチン−２のアゴニスト（この場合、６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を含む対象多価剤（「Ｍａｎ２−７８４コンジュゲート」と呼ばれる）と接触させた、若しくは７８４及びＭａｎ２の非コンジュゲート混合物（「Ｍａｎ２＋７８４混合物」）と接触させた、又は対照（「Ｍａｎ２−７８４コンジュゲート」の混合物＋デクチン−２を遮断し、それにより、コンジュゲートによって提供されるデクチン−２刺激を無効にする抗体）と接触させた、ＧＭ−ＣＳＦ前処置した単球によるＴＮＦαの生成を示すデータ。（図２９Ａ）Ｍａｎ２−７８６コンジュゲートと呼ばれる、免疫刺激剤（この場合、ＴＬＲ７／８アゴニスト７８６）にコンジュゲートされたデクチン−２のアゴニスト（この場合、６５％  Ｍａｎ２  １００ｍｅｒ）を含む対象多価剤と接触させた、ＧＭ−ＣＳＦ前処置した単球によるＴＮＦαの生成を示すデータ。（図２９Ｂ）図２９Ａ〜図２９Ｂに見られるように、Ｍａｎ２−７８４コンジュゲート及びＭａｎ２−７８６コンジュゲートは、ＧＭ−ＣＳＦ前処置単球によるＴＮＦα生成を増加させる。この結果は、コンジュゲートがデクチン−２シグナル伝達を刺激することに成功し、個体における抗癌免疫応答を刺激することを示している。
【０３６２】
図３０．図２９Ａ〜図２９Ｂの多価剤の構造を示す概略図。
【０３６３】
前述のものは、本発明の原理を単に例示するものである。当業者は、本明細書に明示的に記載又は示されていないが、本発明の原理を具現化し、本発明の趣旨及び範囲内に含まれる様々な構成を考案することができると理解されるであろう。更に、本明細書に記載される全ての実施例及び条件を含む文言は、本発明の原理及び本発明者らによる当該技術分野を深めることに寄与する概念を理解する際に読み手を助けることを主に意図しており、このような具体的に記載された実施例及び条件に限定されるものではないと解釈されるべきものである。更に、本発明の原理、態様、及び実施形態並びにそれらの具体的な実施例を記載する本明細書における全ての記述は、その構造的及び機能的等価物の両方を包含することを意図している。更に、そのような等価物は、現在既知である等価物及び将来開発される等価物、すなわち、構造にかかわらず同じ機能を発揮するように開発される任意の要素の両方を含むことが意図される。したがって、本発明の範囲は、本明細書に示され及び記載される例示的な実施形態に限定されることを意図するものではない。むしろ、本発明の範囲及び趣旨は、付随する特許請求の範囲によって具現化される。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図２Ｅ】
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【図２Ｆ】
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【図２Ｇ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図３Ｆ】
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【図３Ｇ】
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【図３Ｈ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図６Ａ−１】
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【図６Ａ−２】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図９Ｃ】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１−１】
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【図２１−２】
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【図２２Ａ】
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【図２２Ｂ】
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【図２２Ｃ】
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【図２３Ａ】
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【図２３Ｂ】
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【図２３Ｃ】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６Ａ】
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【図２６Ｂ】
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【図２６Ｃ】
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【図２６Ｄ】
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【図２７Ａ】
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【図２７Ｂ】
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【図２７Ｃ】
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【図２７Ｄ】
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【図２７Ｅ】
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【図２７Ｆ】
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【図２７Ｇ】
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【図２８Ａ】
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【図２８Ｂ】
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【図２８Ｃ】
2020526482.tif 000168
【図２８Ｄ】
2020526482.tif 000169
【図２９Ａ】
2020526482.tif 000170
【図２９Ｂ】
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【図３０】
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【配列表】
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【国際調査報告】
2020526482.tif 000173
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