(57)【要約】  植物及び作物種子の真菌、卵菌、及び/又は病原性細菌に対する、その殺真菌活性及び/又は殺細菌活性のための、次式(I)を有する分子の使用。2020522581.tif 000038
2020522581.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物及び種子における真菌、卵菌、及び/又は病原性細菌に対するその殺真菌活性及び/又は殺細菌活性のための、次式(I)
【化１】
2020522581.tif 000027
[式中、
・R1は
【化２】
2020522581.tif 000028
(式中、
-  R3はH又はSO3Naを表し、
-  R4はH又はOHであり、
-
【化３】
2020522581.tif 000029
は単結合又は二重結合を表し、
-  nは0又は1と等しく、
-  mは0又は1である)
からなる群から選択され、
・R2は
【化４】
2020522581.tif 000030
からなる群から選択される]
の分子の使用。
【請求項２】
R1が
【化５】
2020522581.tif 000031
(式中、R3はH又はSO3Naである)
である、請求項1に記載の使用。
【請求項３】
R2が
【化６】
2020522581.tif 000032
である、請求項1又は2に記載の使用。
【請求項４】
式(I)の分子がアンフィジノール18
【化７】
2020522581.tif 000033
である、請求項1から3のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
式(I)の分子がAmphidinium属の1種又は複数の微細藻類の細胞から抽出される、請求項1から4のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６】
式(I)の分子がAmphidinium carterae細胞から抽出される、請求項5に記載の使用。
【請求項７】
植物及び種子の前記病原性真菌が、Fusarium属、Colletotrichum属、Mycosphaerella属、Phytophthora属、及びAlternaria属の植物及び種子の病原性真菌であり、好ましくは、栽培植物と真菌とのペアが、Triticum sativum/Mycosphaerella graminicola、Triticum sativum/Fusarium graminearum、Solanum tuberosum/Phytophtora infestans、Vinis vitifera/Plasmopara viticola、Vinis vitifera/Erysiphe necator、Lycopersicon esculentum/Phytophtora infestansである、請求項1から6のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
Fusarium属、Colletotrichum属、Mycosphaerella属、Phytophthora属、及びAlternaria属の、作物植物及び種子の前記病原性真菌が、Fusarium oxysporum、Fusarium solani、Fusarium avenaceum、Fusarium culmorum、Fusarium graminearum、Fusarium moniliforme、Fusarium poae、Fusarium proliferatum、Fusarium sporotrichioides、Fusarium subglutinans、Fusarium tricinctum、Colletotrichum acutatum、Colletotrichum graminicola、Colletotrichum coffeanum、Colletotrichum gloeosporioides、Mycosphaerella graminicola、Phytophthora infestans、Alternaria solani、及びAlternaria brassisicolaからなる群から選択される、請求項7に記載の使用。
【請求項９】
0.1から5mg/mLの間の量での、好ましくは0.5から3mg/mLの間の量での、特に好ましくは0.75から1mg/mLの間の量での、請求項1から8のいずれか一項に記載の式(I)の分子の使用。
【請求項１０】
作物植物及び種子の病原性真菌、卵菌、及び/又は細菌を防除する方法であって、
【化８】
2020522581.tif 000034
[式中、
・R1は
【化９】
2020522581.tif 000035
(式中、
-  R3はH又はSO3Naを表し、
-  R4はH又はOHであり、
-
【化１０】
2020522581.tif 000036
は単結合又は二重結合を表し、
-  nは0又は1と等しく、
-  mは0又は1である)
からなる群から選択され、
・R2は
【化１１】
2020522581.tif 000037
からなる群から選択される]
を、作物植物に施用する及び/又は前記種子にコーティングする工程を含む、方法。
【請求項１１】
治療的又は予防的な、請求項10に記載の防除方法。
【請求項１２】
式(I)の分子を、0.1から5mg/mLの間の用量で、好ましくは0.5から3mg/mLの間の用量で、特に好ましくは0.75から1mg/mLの間の用量で施用する、請求項10又は11に記載の防除方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、種子のための抗真菌剤及び抗細菌剤の分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
世界的な人口増加に対処するために、第二次世界大戦に続く期間、土壌の生産力の管理及び病原生物の防除を目的とした、品種選抜、灌漑、肥料、及び合成殺有害生物剤に関する一連の近代計画である「緑の革命」が出現した。これにより、約40年の間に、これらの様々な要素によって世界の食糧生産をほぼ3倍にすることができた。現在、農業の課題は、ますます資源が限定され制約が増す状況で、2050年までに90億人の人々に食糧を供給すること、及び単位面積当たりの生産量を増加させ続けることである。例えば、生物的侵襲、及び作物防疫方法の不在によって起こりうる損失は、穀類生産の半分を超えると考えられる。したがって、損失を制限するためには、従来の植物防疫製品は世界規模の作物防疫には不可欠なものである。しかしながら、これらの化学薬剤は人の健康や環境に対して強い負の影響を与えており、これによって、(すべての植物防疫方法に天然の機序を使用する)生物的防除等の他の感染性病害の防除手段の使用が進んでいる。本特許の目的は、コムギ及びブドウ等の農学的に非常に重要な作物に感染する植物病原体の生存に直接的に影響を与えることにより「有機殺有害生物剤」として作用しうる新規天然分子の供給源として、植物プランクトン由来の単細胞藻類を利用することである。
【０００３】
フザリウム(Fusarium)病害
欧州では、コムギ(Triticum aestivum)に影響を与える幾つかの病害が、収量低下及び穀粒の健康状態の質の低下の原因となっている。最重要病害の1つは斑点病(Septaria leaf blotch)(Septoria spp.)である。萎凋病(Fusarium wilt)は、2つの属の植物病原性真菌、Fusarium属菌及びMicrodochium属菌からなる種複合体と関連している(1)。これらの2属には、コムギの赤かび病を誘発する可能性がある約19種が含まれる。欧州で最も一般的な種は、F. graminearum、F. culmorum、F. avenaceum、F. poae、M. nivale、及びM. majusである。Fusarium属は、Ascomycota門及びNectriaceae科に属する。Microdochium属菌は、Tuberculariaceae科に属し、Fusarium属菌と同じ症状を穂及び葉に引き起こすM. nivale及びM. majusの2種を含む。Fusarium graminearumに最も代表されるFusarium種の数種は、所与の領域若しくは小区画又は穂で一緒に認められることができ、したがって、Fusarium複合体を形成している。各種の発病程度、発生率、及び有病率は、地理的位置、気候変動、及び栽培手法によって様々である。同じ穂にこれらの種の幾つかが存在することによって、それらの均衡及び毒素産生動態が変わるようである。
【０００４】
コムギの赤かび病は、収穫の2、3週間前に作物へ壊滅的な被害を与えることがある。これは、穀粒中に毒素が存在することよる、著しい収量低下(穀粒発育不全及び低質量)、発芽の質の低下、又は質の低下に関連している可能性がある。実際に、Fusarium属の真菌は、Microdochium属の真菌は産生しない毒性の二次代謝産物であるマイコトキシンを産生でき、この存在が農業生産における病害の発生率を高め、主要な経済学的及び公衆衛生上の問題となっている。萎凋病を防除する主な手段には、栽培手法、品種抵抗性、及び化学的防除が含まれる。今のところ、萎凋病に対して抵抗性のあるコムギ品種はほとんどない。ただし、収量低下及び収穫物中の毒素蓄積を制限する、部分的な抵抗性レベルを有する抵抗性品種がある。作物が定着している場合、化学的防除は可能であるが、有効性は限定的である。病原体の多様性、及び活性物質に対するそれらの異なる感受性が、化学的防除を複雑にしている。例えば、Fusarium属の真菌はトリアゾールに対して感受性であるが、Microdochium属の真菌はストロビルリンに対して感受性である。
【０００５】
セプトリア(Septoria)病害
斑点病は、コムギの病害であり、著しい収量低下の原因であり、全世界的に、とりわけ温帯湿潤地帯において最も大きな経済学的損失をもたらす。斑点病は、大きく2つの形態:ふ枯病(Phaeosphaeria nodorum)及び葉枯病(Mycosphaerella graminicola)に区別することができる。フランスでは、ふ枯病は主に大陸地域に存在するのに対し、葉枯病は、真菌の発生に好都合な気候条件である北西及び海岸地帯に主に認められる。M. graminicolaによって引き起こされる症状は、えそ病斑と呼ばれる褐色がかった斑点へと進展する前に、退緑、淡緑色斑点の形態で順に発現する。最終的にこれらのえそ病斑は同化(融合)する。次に、これらのえそ病斑上に、肉眼でわずかに見ることができる、黒色の子実体である分生子殻が現れる。光合成、生育、又は収量の低下に関わる斑点病の有害性は、幾つかの研究チームが研究している。したがって、収穫穀類のタンパク質含量へ及ぼす病害の影響を示す定性的有害性は、証明することができる。
【０００６】
M. graminicolaは、まず生組織への感染を起こす生体栄養期と、これに続く、M. graminicolaがコロニー形成した組織を殺す毒素を発現する死体栄養期とを確立している半生体栄養性真菌である。環境条件に応じて、M. graminicolaは、有性生殖(子のう胞子産生)、無性生殖(粉胞子産生)のいずれかで繁殖する。風によって長距離にわたり伝搬された子のう胞子は、真菌が宿主植物の非存在下で生き残ることに寄与しており、病害発生の主な一次種菌源であると考えられる。続いて、粉胞子が、主に感染周期が数回連続する病害の流行期の間に産生される。これらの胞子は、雨滴の働きによって短距離に飛散分散される。この病害によって登熟に関与する穂の下の最後の葉が深刻な影響を受けるほど、起こりうる収量の減少はより甚大である。斑点病による収量低下は、平均で1〜2t.ha-1と推定され、3〜3.5t.ha-1に達する場合もあり、これは40%の収量減少である。
【０００７】
M. graminicolaを防除する方法は、殺真菌剤及び抵抗性栽培品種の使用に基づく。しかしながら、近年のトリアゾールの圃場有効性の低下に加えて、例えばストロビルリン系に対する抵抗性を有する病原体の強力な淘汰によって、近年、殺真菌剤の有効性は著しく低下している。
【０００８】
ブドウ病害
今日、ブドウは、全世界的に栽培され、多くの国の経済において中心的な役割を果たしている。ブドウは、食卓にのぼるぶどうやジュースとして消費されるが、その主な利用はワイン産業向けである。欧州連合は、世界最大のワイン生産国であり、世界最大のワイン製品の輸出国である。したがって、この部門は、欧州連合経済に年間およそ150億ユーロを資している(www.ceev.be)。2010年には、フランスのブドウ園は、ほぼ865000ヘクタール又は耕地のほぼ3%を占め、フランスは5110万ヘクトリットルを有する世界を牽引するワイン生産国となった。ブドウは、隠花植物病害を含む多くの病原体の攻撃に対処しなければならない。病原体の攻撃が植物の木化部分に影響を与える場合、それらは「樹木病害」と呼ばれ、有名な例としては、エスカ病、ブラックデッドアーム病(black dead arm)、及びユーティピオシス病(eutypiosis)がある。ブドウの液果及び草質部分(葉、柄等)に感染する真菌は、灰色かび病、黒腐病、べと病、及びうどん粉病を含む「群葉の隠花植物病害」を誘発する。
【０００９】
エスカ病
べと病、うどん粉病、及び灰色かび病が全世界的にブドウ園に影響を与えている3大隠花植物病害であるのと同時に、真菌媒介物によって引き起こされる樹木病害は、ぶどう生産において制限因子である。ワイン生産者は、現在、これらの樹木病害に関して、防除方法がないことと、様々な生物的及び非生物的因子に関する知識が全面的に不足している、という2つの大きな問題に直面している。
【００１０】
エスカ病害に関わる世界的に最も一般的な真菌種は、子のう菌Diplodia seriata、Diplodia mutila、Neofusicoccum parvum、及びNeofusicoccum luteumである。フランスでは、最も多く分離された種はDiplodia seriata及びBotryosphaeria dothideaである。幾つかの病原体を含む多くの他の真菌が、エスカ病に罹病した植物の木質部壊死からたびたび分離されている。これは、ユーティピオシス病の原因である媒介物、Eutypa lataの事例である。この病害には、漸進型(slow form)及び急進型(apoplectic form)の2つの型がある。葉の症状は、急進型で存在する場合もあるものの、漸進型に特有である。漸進型は、特有の葉の着色を特徴とし、葉脈は緑色のままで、白ぶどう品種では葉脈間に黄色がかった斑点ができ、黒ぶどう品種では葉脈間に赤色の縁取りのある斑点ができる。これらの斑点は、徐々に進展して、褐変、乾燥する。漸進型の葉群の症状は、ブドウ株上で1年間みられ、翌年には消失する。急進型は、ブドウ株の部分のうちの空中器官である小枝、葉、及び房の、又はブドウ株全体の急速な乾燥を特徴とする。この症状は、一般的には夏の高温時に発生し、前兆となる症状なくわずか数日でブドウの死をもたらす。様々な種菌源、及びブドウ木質部での非常に遅く目には見えない真菌の発生が、防除方法の実施をきわめて難しくさせている。更に、欧州レベルの植物防疫製品の規制が変わり、亜ヒ酸ナトリウムをベースとした化学薬剤は、これらの製品のヒトへの発癌作用及び環境に対する高い毒性を理由に禁止されている。苗床又はブドウ園で使用できる新規分子を試験するために、世界中で数多くの研究が行われている。
【００１１】
灰色かび病
灰色かび病は、Botrytis cinereaと呼ばれる子のう菌真菌によって引き起こされる隠花植物病害である。この真菌は、Leotiomycetes綱、Helotiales目、及びSclerotiniaceae科に属する。B. cinereaは、健康な植物組織、既に感染している植物組織、並びに死組織(腐生)にコロニー形成することができる死体栄養性真菌である。葉では、症状は、葉身全体に増え広がっていく葉裏の灰色がかったフェルト状(真菌の子実体)に覆われた褐色の斑点として現れる。房は、開花の前に影響を受け、干からびることがある。房は、特に硬核期に影響を受けやすく、白ぶどう品種では液果が褐色に変色し、灰色の厚いフェルト状のものが現れる。分生子は風によって伝搬され、直接又は切り口から草質器官に入り込む。これは、べと病による裂果がB. cinereaによる感染に好都合である理由である。この病害は、40%に達する収量低下をもたらすだけでなく(Viniflhor、2006年のデータ)、ワインの官能的な質も落とす。それにもかかわらず、Botrytis cinereaはまた、ある種の甘口ワインを得るために必要な「貴腐」にも寄与している。
【００１２】
べと病
現在、ブドウ園に最も深刻な影響を与えている2つの病害は、べと病及びうどん粉病である。べと病の原因媒介物であるPeronosporales目に属する卵菌Plasmopara viticolaは、絶対寄生菌である。すなわち、生き続け繁殖するために、残存するブドウの葉の上で増殖することが必須である。P. viticolaは、ブドウの草質組織すべて、並びに房を攻撃する。これは、落葉、液果及び幹の褐変及び乾燥を引き起こす。非処理、及び好都合な気候条件下では、べと病は、最盛期の収穫量の75%に及ぶ壊滅的な被害を与える可能性がある。
【００１３】
P. viticolaの生活環は、有性生殖及び無性生殖相を含む。無性生殖相では、二次感染及び短距離一帯への病原体の分散のために必要な胞子が産生され、これに対し、有性生殖相では、越冬及び一次感染ができる、静止状態にある耐寒性の卵胞子が産生される。ブドウ園において最初に肉眼で認められるべと病の徴候は、葉の上部又は向軸面で拡大する淡黄色の不規則な斑点(油点)の出現である。菌糸体のコロニー形成が内部に進むに従って、葉裏に油点と対応する白いワタ状の生育の進展が顕著となってくる。感染が進行すると、これに組織が死に褐色となる症状が伴う。べと病は、主に殺真菌剤噴霧を使用する予防措置によって防除される。罹病を止めることは可能であるが、いったん花序及び房に引き起こされた損傷を回復させることはできない。
【００１４】
うどん粉病
ブドウうどん粉病菌(Erysiphe necator)は、Erysiphales目に属する、絶対生体栄養性子のう菌である。この真菌は、ブドウのすべての緑色器官の表面、特に葉面上方にコロニー形成し、液果へと伝播する。子のう胞子を含有する閉子のう殻の産生を特徴とする有性生殖相は、分生子を生ずる分生子柄の形成を導く無性生殖相と交互に起こっている可能性がある。ブドウの休眠期である冬の間、この真菌は、休止状態の芽の中で菌糸として又は植物の表面で閉子のう殻として生き残る。閉子のう殻中に含有された胞子は、春に放出されて、芽及び若葉の表面で発芽することとなる。まず主要な菌糸が葉面に発達し、次いで、次第に複雑に分枝した菌糸体のネットワークが葉面を覆う。続いて、胞子形成段階の初めに、分生子柄が菌糸体から分化し、植物の他の緑色組織にコロニー形成し、二次感染をもたらす。
【００１５】
感染した宿主組織の表面に、菌糸体、及び分生子を保有する分生子柄が存在すると、灰白色の粉末状の外観を示す。白いフェルト状のものが花芽上に発生し、花芽は干からびる。糖度8%未満の若い液果だけがうどん粉病にかかりやすい。葉面は、年齢にかかわらずすべて感染しやすい。感染した若葉は、まず暗緑色に変色し、次いで変形し、生育が阻害される。葉面上部に、べと病の油点と類似したより淡い退緑斑を有することもある。現在のところ、ブドウ園に最も深刻な影響を与えるこの病害を防除する主な手段は、大量の殺有害生物剤及び殺真菌剤の使用である。したがって、衛生上の影響力は、ブドウ栽培学において特に強いものがある。
【００１６】
主にべと病及びうどん粉病を防除することを意図した殺真菌性処理が、厳密なスケジュールで適用されて、病害の発現による被害を防ぐ。欧州連合(EU)では、ブドウがEUの有効農業面積の3.3%しか占めていない一方で、ブドウ病害を防除するために年間約68000トンの殺真菌剤が使用されており、これは農業で使用される殺真菌剤の65%である(Eurostat、2007年)。化学薬剤が環境及び健康に及ぼす強い影響力を制限するために、これまで使用されてきた化学的植物防疫製品に最終的に取って代わるために、感染性病害から作物を守ることにおいて役割を果たすこととなる天然源の分子を単離することが必要である。
【００１７】
リンゴ黒星病
黒星病は、灰星病及びうどん粉病と共に、リンゴの木(Malus属)の主な真菌性病害の1つである。黒星病は、数千の菌株があるVenturia inaequelisと呼ばれる子のう菌真菌によって引き起こされ、葉、芽、又は果実の表面に、時には木質部の表面にも、黒色又は褐色の病斑を生じさせる。果実及びより低い部分の葉は、特に黒星病にかかりやすい。
【００１８】
この真菌は、感染した木からの落葉上で子のう殻の形態で越冬する。春に芽が開く頃には、子のう殻は子のう胞子を満たしている。子のう胞子は、湿度の高い日に果樹園の大気中へ放出され、大気の動きよって木に到達する。この子のう胞子の放出は、新芽の出芽時に始まり、多くの場合、6月末まで6〜10週間続く。子のう胞子が群葉に到達し、葉がある期間湿ると、子のう胞子は発芽し、葉に浸透し、一次感染が起こる。湿度及び温度条件によって、真菌感染は、1〜3週間のうちに木の様々な部位で認められるようになる。約5mmの濃オリーブ色又は褐色の斑点が葉に現れ、時には葉全体に広がることもある。感染した花は落下することもある。果実感染は、柄の灰色斑点によってはじめて確認される。
【００１９】
一次感染後、残りの夏の間に、真菌は発達し、生殖構造の別の形態である分生子を産生する。分生子が離脱すると、二次感染が起こる。分生子は、木のあらゆる部分に感染することができ、晩夏に産生された分生子は、貯蔵された果実上でも生育することができる。大雨が分生子を分散させる。
【００２０】
この病害は、宿主を殺すことはまずないが、殺真菌剤処理を行わないと、果実の質及び生産を著しく(100%まで)低減させうる。秋に落葉を収集する予防措置をとった後、春に、防除戦略として、放出された胞子が木に感染する又は木で発病するのを防ぐための効果的な処置が必要である。伝統的な防疫方法は、新しいシュートを保護するために、新芽の出芽時に殺真菌剤施用を開始し、6月下旬まで約7日ごとに施用を繰り返すことであった。リンゴ果樹園は、殺真菌剤及び殺虫剤による処理が最も多く、年間平均28.8回の殺真菌剤処理が行われ、そのうちの19回は黒星病用である(INRAデータ)。
【００２１】
微細藻類
新規の作用機序を有し、病原体によって発現された抵抗性を回避できる天然源の分子は、環境に優しい新規植物防疫製品の開発のためにきわめて有望である。海は、新規の生理活性分子の供給源で且つまだ十分に活用されていない非常に多様な生物(細菌、微細藻類、藻類、脊椎動物、及び無脊椎動物)を擁する(2)。例えば、海洋微生物は、陸生生物ではみられない独特な構造の生理活性二次代謝産物を蓄積する。したがって、これらの代謝産物は、目的の新規分子である可能性がある。海洋生物由来の幾つかの物質が抗真菌活性又は天然の防御物質活性を有すると記載されているが(3)、これらの分子の調査はまだあまり進んでいない。
【００２２】
微細藻類は、水界生態系で重要な役割を果たす単細胞生物である。それらは、有機物質を産生しており、海洋環境の食物連鎖の最下部であるため重要な生態学的役割を果たしている。しかしながら、微細藻類の世界中のすべての海に定着する驚異の能力は、微細藻類が、特に天然の殺有害生物剤を産生することによって、病原体を防除する有効な戦略を発達させてきた可能性を示唆している。例えば、生体毒素を産生する微細藻類の海岸地域での大量増殖は、栄養カスケードに有意な影響を及ぼす有害有毒藻類ブルーム(HABs)の形成の原因である。
【００２３】
微細藻類のうち、Gymnodiniales目及びGymnodiniacae科に属する渦鞭毛藻類は、温帯性及び熱帯性海域に存在し、遊離形態で又は無脊椎動物(例えば、サンゴ)と相利共生して生きている。渦鞭毛藻類は、ポリケチドと呼ばれる多数の二次代謝産物(生存優位性を付与する毒性である可能性がある生物学的又は薬理学的活性を有する化合物)を合成し、HABsの原因であるポリケチドを含むその幾つかは特徴が明らかにされている(4)。例えば、渦鞭毛藻類の標準種であるAmphidinium carteraeは、おびただしい数の様々な生理活性化合物を産生し、それらの多くは治療薬として開発される可能性を有する(5)。Amphidinium種によって産生されたポリケチドは、構造及び形態がきわめて多様であり、マクロライド、直鎖状ポリケチド、及び長鎖ポリケチドの3種類がある。例えば、アンフィジノールは、強力な抗真菌活性及び溶血活性を有するポリヒドロキシ-ポリエン(長鎖ポリケチド)である。したがって、それらは膜脂質と結合することによって膜透過性を高める(6)。様々なAmphidinium菌株のうち、リングシュイオール(lingshuiol)、カラツンギオール、カルテラオールE、ルテオファノール、コロプシノール、及びアンフェゾノールA等の長いポリヒドロキシ鎖を有するアンフィジノール様化合物が単離されている(5)。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２４】
【非特許文献１】www.ceev.be
【非特許文献２】https://ncma.bigelow.org/algal-recipes
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２５】
化学薬剤が環境及び健康へ及ぼす強い影響力を制限するためには、これまで使用されてきた化学的植物防疫製品に最終的に取って代わるために、感染性病害から作物を守ることにおいて役割を果たすこととなる天然源の分子を単離することが必要である。これらの「有機殺有害生物剤」は、このように、コムギ及びブドウ等の農学的に非常に重要な作物の植物病原体の生存に直接的に作用する可能性がある。
【課題を解決するための手段】
【００２６】
驚くべきことに、発明者らは、多くの植物病原性真菌に対するAmphidinium carterae細胞抽出物の殺真菌性効果に寄与する分子の1つが、アンフィジノール18であることを同定した。
【００２７】
本発明の第1の目的は、植物及び種子における真菌、卵菌、及び/又は病原性細菌に対するその殺真菌活性及び/又は殺細菌活性のための、次式(I)
【００２８】
【化１】
2020522581.tif 000003
【００２９】
[式中、
・R1は
【００３０】
【化２】
2020522581.tif 000004
【００３１】
(式中、
-  R3はH又はSO3Naを表し、
-  R4はH又はOHであり、
-
【００３２】
【化３】
2020522581.tif 000005
【００３３】
は単結合又は二重結合を表し、
-  nは0又は1と等しく、
-  mは0又は1である)
からなる群から選択され、
・R2は
【００３４】
【化４】
2020522581.tif 000006
【００３５】
からなる群から選択される]
の分子の使用に関する。
【００３６】
本発明の別の目的は、作物植物及び種子の病原性真菌、卵菌、及び/又は細菌を防除する方法であって、式(I)の分子を作物植物に施用する及び/又は前記種子にコーティングする工程を含む、方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】逆相C18カラムでの抽出物Dの分画、及びHPLCによって得られた抽出物Dの様々な画分の活性試験を示す図である。  A.  メタノール抽出後に得られた5g/Lの抽出物DによるF. graminearum生育阻害のインビトロ試験。  B.  抽出物Dの注入後に得られた液体クロマトグラム。試料は、F1〜F5と表した5つの画分を形成する点線に従ってまとめた。  C.  5g/Lの濃度の画分F1〜F5によるF. graminearum生育阻害のインビトロ試験。  D.  0.5g/L、0.75g/L、1g/L、1.5g/L、2.5g/L、及び5g/Lの濃度の画分F1によるF. graminearum生育阻害のインビトロ試験。-:陰性対照:緩衝液の存在下で、胞子を単独でインキュベートする。
【図２】逆相C18カラムでの画分F1の分画、及びHPLCによって得られた様々な画分の活性試験を示す図である。  A.  画分F1の注入後に得られた液体クロマトグラム。試料は、F1-1〜F1-5と表した5つの画分を形成する点線に従ってまとめた。  B.  5g/Lの濃度の画分F1〜F5によるF. graminearum生育阻害のインビトロ試験。  C.  0.0005g/L〜1g/Lの範囲の濃度の画分F1-2によるF. graminearum生育阻害のインビトロ試験。-:陰性対照:緩衝液の存在下で、胞子を単独でインキュベートする。
【図３】画分F1-2の質量分析を示す図である。  A.  F1-2で収集された目的の分子のポジティブモードエレクトロスプレーイオン化によって取得された質量スペクトル。  B.  Aで検出された1381.8276Daイオンのタンデム質量スペクトル。丸で囲んだピークは、Nuzzoら、2014年によって特性決定されているAM18でみられたピークと一致する(7)。
【図４】画分F1-2のNMR解析を示す図である。  A.  抽出物D由来画分F1-2の分子について得られた1H NMRスペクトル(MeOD4溶媒)。  B.  抽出物D由来画分F1〜2の分子について得られた13C DEPT135NMRスペクトル(MeOD4溶媒)。
【図５】抽出物Dの画分F1-2由来のアンフィジノール18分子の構造式である。  各プロトン間のCOSY及びTOCSY相関はすべて太字で示す。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
本発明の第1の目的は、植物及び種子における真菌、卵菌、及び/又は病原性細菌に対するその殺真菌活性及び/又は殺細菌活性のための、次式(I)
【００３９】
【化５】
2020522581.tif 000007
【００４０】
[式中、
・R1は
【００４１】
【化６】
2020522581.tif 000008
【００４２】
(式中、
-  R3はH又はSO3Naを表し、
-  R4はH又はOHであり、
-
【００４３】
【化７】
2020522581.tif 000009
【００４４】
は単結合又は二重結合を表し、
-  nは0又は1と等しく、
-  mは0又は1である)
からなる群から選択され、
・R2は
【００４５】
【化８】
2020522581.tif 000010
【００４６】
からなる群から選択される]
の分子の使用に関する。
【００４７】
好ましくは、R1は
【００４８】
【化９】
2020522581.tif 000011
【００４９】
(式中、R3はH又はSO3Naである)
である。
【００５０】
好ましくは、R2は
【００５１】
【化１０】
2020522581.tif 000012
【００５２】
である。
【００５３】
好ましくは、式(I)の分子は、アンフィジノール18又はアンフィジノール19である。
【００５４】
【化１１】
2020522581.tif 000013
【００５５】
【化１２】
2020522581.tif 000014
【００５６】
式(I)の分子は、アンフィジノールである。
【００５７】
式(I)の分子は、Amphidinium属の1種又は複数の微細藻類の細胞から合成する又は抽出することができる。
【００５８】
Amphidinium種
好適なAmphidinium種は、Amphidinium achromaticum、Amphidinium aculeatum、Amphidinium acutissimum、Amphidinium acutum、Amphidinium alinii、Amphidinium aloxalocium、Amphidinium amphidinioides、Amphidinium asymmetricum、Amphidinium aureum、Amphidinium belauense、Amphidinium bidentatum、Amphidinium bipes、Amphidinium boekhoutensis、Amphidinium boggayum、Amphidinium caerulescens、Amphidinium carbunculus、Amphidinium carterae、Amphidinium celestinum、Amphidinium chattonii、Amphidinium coeruleum、Amphidinium conradii、Amphidinium conus、Amphidinium coprosum、Amphidinium corallinum、Amphidinium corpulentum、Amphidinium crassum、Amphidinium cristatum、Amphidinium cucurbita、Amphidinium cucurbitella、Amphidinium cupulatisquama、Amphidinium curvatum、Amphidinium cyaneoturbo、Amphidinium dentatum、Amphidinium discoidale、Amphidinium dubium、Amphidinium eilatiensis、Amphidinium emarginatum、Amphidinium fastigium、Amphidinium filum Bohm、Amphidinium flagellans、Amphidinium flexum、Amphidinium galbanum、Amphidinium gibbosum、Amphidinium glaucovirescens、Amphidinium glaucum、Amphidinium globosum、Amphidinium hadai、Amphidinium herdmanii、Amphidinium incoloratum、Amphidinium inflatum、Amphidinium kesselitzii、Amphidinium kesslitzii、Amphidinium klebsii、Amphidinium lacunarum、Amphidinium lanceolatum、Amphidinium lefevrei、Amphidinium lilloense、Amphidinium lissae、Amphidinium longum、Amphidinium luteum、Amphidinium machapungarum、Amphidinium macrocephalum、Amphidinium mammillatum、Amphidinium manannini、Amphidinium mananninii、Amphidinium massartii、Amphidinium mootonorum、Amphidinium mucicola、Amphidinium nasutum、Amphidinium obliquum、Amphidinium obrae、Amphidinium oceanicum、Amphidinium oculatum、Amphidinium operculatum、Amphidinium operculatum var. steinii、Amphidinium ornithocephalum、Amphidinium ovoideum、Amphidinium ovum、Amphidinium pacificum、Amphidinium pelagicum、Amphidinium phthartum、Amphidinium psammophila、Amphidinium psittacus、Amphidinium purpureum、Amphidinium pusillum、Amphidinium rhynchocephalum、Amphidinium roseolum、Amphidinium ruttneri、Amphidinium salinum、Amphidinium schilleri、Amphidinium schroederi、Amphidinium scissum、Amphidinium sphagnicola、Amphidinium sphenoides、Amphidinium steinii、Amphidinium stellatum、Amphidinium stigmatum、Amphidinium sulcatum、Amphidinium tortum、Amphidinium trochodinioides、Amphidinium trochodinoides、Amphidinium trulla、Amphidinium truncatum、Amphidinium turbo、Amphidinium vernal、Amphidinium vigrense、Amphidinium vitreum、Amphidinium vittatum、Amphidinium wigrense、Amphidinium yoorugurrum、Amphidinium yuroogurrumからなる群から選択される。
【００５９】
好ましくは、式(I)の分子は、Amphidinium carteraeから抽出される。菌株CCMP 124、1314、3177(CCMP=Culture Collection of Marine Phytoplankton)、AC 208、792(AC=Algobank Cean)、BEA 01198(BEA=Banco Espanol de Algas)等の数種のAmphidinium carterae菌株がコレクションにある。
【００６０】
有利には、本発明に従って使用されるAmphidinium carterae菌株は、CCMP 1314、AC208、又はAC792である。
【００６１】
抽出
前記抽出物は、当業者に公知の任意の細胞抽出法、例えば水、水溶液、炭化水素溶媒(脂肪族、芳香族)、含酸素溶媒(アルコール、ケトン、酸、エステル、及びエーテル)、ハロゲン化溶媒(ジクロロメタン、クロロホルム)、及びそれらの任意の混和可能比の混合物からなる群から選択されうる無機又は有機溶媒中での抽出である、固液又は液液抽出法によって調製されてもよい。
【００６２】
有利には、好ましい溶媒は、水又は含酸素溶媒、好ましくは、アルコール、特に好ましくは、メタノール又はエタノール等のC1〜C4アルコールとなる。
【００６３】
特に好ましくは、C1〜C4アルコールが好ましい。
【００６４】
好ましくは、前記抽出物は水溶性画分である。
【００６５】
濃度
好ましくは、式(I)の分子は、0.1から5mg/mLの間の量で、好ましくは0.5から3mg/mLの間の量で、特に好ましくは0.75から1mg/mLの間の量で使用される。
【００６６】
作用様式
作物植物及び種子の病原性真菌及び/又は卵菌に対する前記殺真菌活性は、特に、胞子の発芽を阻害することによって、又は真菌及び/若しくは卵菌の生育を阻害することによって発揮されてもよい。
【００６７】
活性は、細胞溶解をもたらす細胞壁及び膜溶解活性によって発揮される。
【００６８】
作物植物
前記作物植物は、具体的には、コムギ、トウモロコシ、オオムギ、イネ、ダイズ等の穀類、ジャガイモ、ニンジン、リンゴの木、モモの木、アンズの木、トマト、ラディッシュ、マメ、ブドウ等の果物及び野菜、並びに花卉類からなる群から選択される。
【００６９】
前記作物植物は、具体的には、Abelmoschus属、Acacia属、Achras属、Agave属、Agrostis属、Aleurites属、Allium属、Anacardium属、Ananas属、Annona属、Apium属、Arachis属、Areca属、Armoracia属、Arracacia属、Artocarpus属、Asparagus属、Aspidosperma属、Avena属、Bertholletia属、Beta属、Boehmeria属、Borassus属、Brassica属、Cajanus属、Camellia属、Cannabis属、Capsicum属、Carica属、Carthamus属、Carum属、Carya属、Castanea属、Ceiba属、Ceratonia属、Chenopodium属、Chrysanthemum属、Cicer属、Cichorium属、Cinchona属、Cinnamomum属、Citrullus属、Citrus属、Cocos属、Coffea属、Cola属、Colocasia属、Corchorus属、Corylus属、Crotalaria属、Cucumis属、Cucurbita属、Cydonia属、Cymbopogon属、Cynara属、Dactylis属、Daucus属、Dioscorea属、Diospyros属、Echinochloa属、Elaeis属、Elettaria属、Eleusine属、Eragrostis属、Eriobotrya属、Eugenia属、Fagopyrum属、Ficus属、Foeniculum属、Fragaria属、Furcraea属、Glycine属、Glycyrrhiza属、Gossypium属、Guizotia属、Helianthus属、Hevea属、Hibiscus属、Hordeum属、Humulus属、Ilex属、Indigofera属、Ipomoea属、Jasminum属、Juglans属、Lactuca属、Lagenaria属、Lavandula属、Lawsonia属、Lens属、Lepidium属、Lespedeza属、Linum属、Litchi属、Lolium属、Lopmoea属、Lotus属、Lupinus属、Lycopersicon属、Lygeum属、Macadamia属、Malus属、Mangifera属、Manihot属、Maranta属、Medicago属、Mentha属、Mespilus属、Metroxylon属、Moringa属、Musa属、Myristica属、Nicotiana属、Olea属、Onobrychis属、Oryza属、Panicum属、Papaver属、Pastinaca属、Pelargonium属、Pennisetum属、Persea属、Phaseolus属、Phleum属、Phoenix属、Phormium属、Pimpinella属、Piper属、Pistacia属、Pisum属、Prunus属、Psidium属、Punica属、Pyrus属、Raphanus Rheum属、Ribes属、Ricinus属、Rose属、Rubus属、Saccharum属、Scorzonera属、Secale属  Sechium属、Sesamum属、Setaria属、Solanum属、Sorghum属、Spinacia属、Theobroma属、Tragopogon属、Trifolium属、Trigonella属、Triticum属、Urena属、Vaccinium属、Valerianella属、Vanilla属、Vicia属、Vigna属、Vitellaria属、Vitis属、Xanthosoma属、Zea属、Zingiber属からなる群から選択される。
【００７０】
病原体
前記作物植物及び種子の病原性真菌は、子のう菌又は担子菌、好ましくは子のう菌である。
【００７１】
前記作物植物及び種子の病原性真菌は、作物植物及び種子に対して病原性を示す、以下の属の真菌である。
Acrocalymma属、Acrocalymma medicaginis、
Fusarium属、Fusarium affine、Fusarium arthrosporioides、Fusarium crookwellense、Fusarium culmorum、Fusarium graminearum、Fusarium moniliforme、Fusarium incarnatum、Fusarium solani、Fusarium langsethiae、Fusarium mangiferae、Fusarium oxysporum f. sp. albedinis、Fusarium oxysporum f. sp. asparagi、Fusarium oxysporum f. sp. batatas、Fusarium oxysporum f. sp. betae、Fusarium oxysporum f. sp. cannabis、Fusarium oxysporum f. sp. carthami、Fusarium oxysporum f. sp. cattleyae、Fusarium oxysporum f. sp. ciceris、Fusarium oxysporum f. sp. coffea、Fusarium oxysporum f. sp. cubense、Fusarium oxysporum f. sp. cyclaminis、Fusarium oxysporum f. sp. dianthi、Fusarium oxysporum f. sp. lentis、Fusarium oxysporum f. sp. lini、Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici、Fusarium oxysporum f. sp. medicaginis、Fusarium oxysporum f. sp. pisi、Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici、Fusarium oxysporum f. sp. spinacia、Fusarium oxysporum、Fusarium pallidoroseum、Fusarium patch、Fusarium proliferatum、Fusarium redolens、Fusarium sacchari、Fusarium solani、Fusarium subglutinans、Fusarium sulphureum、Fusarium tricinctum、Fusarium wilt、
Botrytis属、Botrytis allii、Botrytis anthophila、Botrytis cinerea、Botrytis fabae、Botrytis narcissicola、
Alternaria属、Alternaria alternata、Alternaria brassicae、Alternaria brassicicola、Alternaria carthami、Alternaria cinerariae、Alternaria dauci、Alternaria dianthi、Alternaria dianthicola、Alternaria euphorbiicola、Alternaria helianthi、Alternaria helianthicola、Alternaria japonica、Alternaria leucanthemi、Alternaria limicola、Alternaria linicola、Alternaria padwickii、Alternaria panax、Alternaria radicina、Alternaria raphani、Alternaria saponariae、Alternaria senecionis、Alternaria solani、Alternaria tenuissima、Alternaria triticina、Alternaria zinniae、
Erisyphe属、Erisyphe necator、Erysiphe betae、Erysiphe brunneopunctata、Erysiphe cichoracearum、Erysiphe cruciferarum、Erysiphe graminis f. sp. Avenae、Erysiphe graminis f. sp. tritici、Erysiphe heraclei、Erysiphe pisi、
Claviceps属、Claviceps fusiformis、Claviceps purpurea、Claviceps sorghi、Claviceps zizaniae、
Gaeumannomyces属、Gaeumannomyces graminis、
Leptosphaeria属、Leptosphaeria nodorum、Leptosphaeria acuta、Leptosphaeria cannabina、Leptosphaeria coniothyrium、Leptosphaeria libanotis、Leptosphaeria lindquistii、Leptosphaeria maculans、Leptosphaeria musarum、Leptosphaeria pratensis、Leptosphaeria sacchari、Leptosphaeria woroninii、
Microdochium属、Microdochium spp. Microdochium bolleyi、Microdochium dimerum、Microdochium panattonianum、Microdochium phragmitis、
Mycosphaerella属、Mycosphaerella arachidis、Mycosphaerella areola、Mycosphaerella berkeleyi、Mycosphaerella bolleana、Mycosphaerella brassicicola、Mycosphaerella caricae、Mycosphaerella caryigena、Mycosphaerella cerasella、Mycosphaerella coffeicola、Mycosphaerella confusa、Mycosphaerella cruenta、Mycosphaerella dendroides、Mycosphaerella eumusae、Mycosphaerella gossypina、Mycosphaerella graminicola、Mycosphaerella henningsii、Mycosphaerella horii、Mycosphaerella juglandis、Mycosphaerella lageniformis、Mycosphaerella linicola、Mycosphaerella louisianae、Mycosphaerella musae、Mycosphaerella musicola、Mycosphaerella palmicola、Mycosphaerella pinodes、Mycosphaerella pistaciarum、Mycosphaerella pistacina、Mycosphaerella platanifolia、Mycosphaerella polymorpha、Mycosphaerella pomi、Mycosphaerella punctiformis、Mycosphaerella pyri、
Oculimacula属、Oculimacula acuformis、Oculimacula yallundae、
Blumeria属、Blumeria graminis、
Pyrenophora属、Pyrenophora avenae、Pyrenophora chaetomioides、Pyrenophora graminea、Pyrenophora seminiperda、Pyrenophora teres、Pyrenophora teres f. maculata、Pyrenophora teres f. teres、Pyrenophora tritici-repentis、
Ramularia属、Ramularia collo-cygni、Ramularia beticola、Ramularia coryli、Ramularia cyclaminicola、Ramularia macrospora、Ramularia menthicola、Ramularia necator、Ramularia primulae、Ramularia spinaciae、Ramularia subtilis、Ramularia tenella、Ramularia vallisumbrosae、
Rhynchosporium属、Rhynchosporium secalis、
Cochliobolus属、Cochliobolus、Cochliobolus carbonum、Cochliobolus cymbopogonis、Cochliobolus hawaiiensis、Cochliobolus heterostrophus、Cochliobolus lunatus、Cochliobolus miyabeanus、Cochliobolus ravenelii、Cochliobolus sativus、Cochliobolus setariae、Cochliobolus spicifer、Cochliobolus stenospilus、Cochliobolus tuberculatus、Cochliobolus victoriae、
Microdochium属、Microdochium oryzae、
Pyricularia属、Pyricularia oryzae、
Sarocladium属、Sarocladium oryzae、
Ustilaginoides属、Ustilaginoides virens、
Cercospora属、Cercospora、Cercospora apii、Cercospora apii f. sp. clerodendri、Cercospora apiicola、Cercospora arachidicola、Cercospora asparagi、Cercospora atrofiliformis、Cercospora beticola、Cercospora brachypus、Cercospora brassicicola、Cercospora brunkii、Cercospora cannabis、Cercospora cantuariensis、Cercospora capsici、Cercospora carotae、Cercospora corylina、Cercospora fuchsiae、Cercospora fusca、Cercospora fusimaculans、Cercospora gerberae、Cercospora halstedii、Cercospora handelii、Cercospora hayi、Cercospora hydrangeae、Cercospora kikuchii、Cercospora lentis、Cercospora liquidambaris、Cercospora longipes、Cercospora longissima、Cercospora mamaonis、Cercospora mangiferae、Cercospora medicaginis、Cercospora melongenae、Cercospora minuta、Cercospora nicotianae、Cercospora odontoglossi、Cercospora papayae、Cercospora penniseti、Cercospora pisa-sativae、Cercospora platanicola、Cercospora puderii、Cercospora pulcherrima、Cercospora rhapidicola、Cercospora rosicola、Cercospora sojina、Cercospora solani、Cercospora solani-tuberosi、Cercospora sorghi、Cercospora theae、Cercospora tuberculans、Cercospora vexans、Cercospora vicosae、Cercospora zeae-maydis、Cercospora zebrina、Cercospora zonata、
Corynespora属、Corynespora cassiicola、
Phakospora属、Phakospora pachyrhizi、Phakopsora gossypii、Colletotrichum属、Colletotrichum acutatum、Colletotrichum arachidis、Colletotrichum capsici、Colletotrichum cereale、Colletotrichum coffeanum、Colletotrichum crassipes、Colletotrichum dematium、Colletotrichum dematium f. spinaciae、Colletotrichum derridis、Colletotrichum destructivum、Colletotrichum gloeosporioides、Colletotrichum glycines、Colletotrichum gossypii、Colletotrichum graminicola、Colletotrichum higginsianum、Colletotrichum kahawae、Colletotrichum lindemuthianum、Colletotrichum lini、Colletotrichum mangenotii、Colletotrichum musae、Colletotrichum nigrum、Colletotrichum orbiculare、Colletotrichum pisi、Colletotrichum sublineolum、Colletotrichum trichellum、Colletotrichum trifolii、Colletotrichum truncatum、
Pythium spp.、
Diplodia属、Diplodia allocellula、Diplodia laelio-cattleyae、Diplodia manihoti、Diplodia paraphysaria、Diplodia seriata、Diplodia theae-sinensis、
Monilia属、Monilinia azaleae、Monilinia fructicola、Monilinia fructigena、Monilinia laxa、Monilinia oxycocci、
Pezicula属、Pezicula alba、Pezicula malicorticis、
Zymoseptoria属、Zymoseptoria tritici
Phytophthora属、Phytophthora infestans
Guignardia属、Guignardia bidwelli、Guignardia camelliae、Guignardia fulvida、Guignardia mangiferae、Guignardia musae、Guignardia philoprina、
Plasmopara属、Plasmopara viticola、
Puccinia属、Puccinia angustata、Puccinia arachidis、Puccinia aristidae、Puccinia asparagi、Puccinia cacabata、Puccinia campanulae、Puccinia carthami、Puccinia coronata、Puccinia dioicae、Puccinia erianthi、Puccinia extensicola、Puccinia helianthi、Puccinia hordei、Puccinia jaceae、Puccinia kuehnii、Puccinia malvacearum、Puccinia mariae-wilsoniae、Puccinia melanocephala、Puccinia menthae、Puccinia oxalidis、Puccinia pelargonii-zonalis、Puccinia pittieriana、Puccinia poarum、Puccinia purpurea、Puccinia recondita、Puccinia schedonnardii、Puccinia sessilis、Puccinia striiformis、Puccinia striiformis、Puccinia subnitens、Puccinia substriata、Puccinia verruca、Puccinia xanthii、
Rhizoctonia属、Rhizoctonia solani、Rhizoctonia oryzae、Rhizoctonia cerealis、Rhizoctonia leguminicola、Rhizoctonia rubi、
Sclerotinia属、Sclerotinia borealis、Sclerotinia bulborum、Sclerotinia minor、Sclerotinia ricini、Sclerotinia sclerotiorum、Sclerotinia spermophila、Sclerotinia trifoliorum、
Septoria属、Septoria ampelina、Septoria azaleae、Septoria bataticola、Septoria campanulae、Septoria cannabis、Septoria cucurbitacearum、Septoria darrowii、Septoria dianthi、Septoria eumusae、Septoria glycines、Septoria helianthi、Septoria humuli、Septoria hydrangeae、Septoria lactucae、Septoria lycopersici、Septoria lycopersici、Septoria menthae、Septoria passerinii、Septoria pisi、Septoria rhododendri、Septoria secalis、Septoria selenophomoides、
Venturia属、Venturia inaequalis、Venturia carpophila、
Acrodontium属、Acrodontium simplex、
Acrophialophora属、Acrophialophora fusispora、
Acrosporium属、Acrosporium tingitaninum、
Aecidium属、Aecidium aechmantherae、Aecidium amaryllidis、Aecidium breyniae、Aecidium campanulastri、Aecidium cannabis、Aecidium cantensis、Aecidium caspicum、Aecidium foeniculi、Aecidium narcissi、
Ahmadiago属、
Albonectria属、Albonectria rigidiuscula、
Allodus属、Allodus podophylli、
Amphobotrys属、Amphobotrys ricini、
Anguillosporella属、Anguillosporella vermiformis、
Anthostomella属、Anthostomella pullulans、
Antrodia属、Antrodia albida、Antrodia serialiformis、Antrodia serialis、
Apiospora属、Apiospora montagnei、
Appendiculella属、
Armillaria属、Armillaria heimii、Armillaria sinapina、Armillaria socialis、Armillaria tabescens、
Arthrocladiella属、
Arthuriomyces属、Arthuriomyces peckianus、
Ascochyta属、Ascochyta asparagina、Ascochyta bohemica、Ascochyta caricae、Ascochyta doronici、Ascochyta fabae f. sp. lentis、Ascochyta graminea、Ascochyta hordei、Ascochyta humuli、Ascochyta pisi、Ascochyta prasadii、Ascochyta sorghi、Ascochyta spinaciae、Ascochyta tarda、Ascochyta tritici、
Ascospora属、Ascospora ruborum、
Aspergillus属、Aspergillus aculeatus、Aspergillus fischerianus、Aspergillus niger、
Asperisporium属、Asperisporium caricae、
Asteridiella属、
Asteroma属、Asteroma caryae、
Athelia属、Athelia arachnoidea、Athelia rolfsii、
Aurantiporus属、Aurantiporus fissilis、
Aureobasidium属、Aureobasidium pullulans、
Bambusiomyces属、
バナナ黒点病菌(Banana freckle)、
バヨド病菌(Bayoud disease)、
Beniowskia属、Beniowskia sphaeroidea、
Bionectria属、Bionectria ochroleuca、
Bipolaris属、Bipolaris cactivora、Bipolaris cookei、Bipolaris incurvata、Bipolaris sacchari、
Biscogniauxia属、Biscogniauxia capnodes、Biscogniauxia marginata、
Bjerkandera属、Bjerkandera adusta、
黒シガトカ病菌(Black sigatoka)、
Blakeslea属、Blakeslea trispora、
Botryodiplodia属、Botryodiplodia oncidii、Botryodiplodia ulmicola、
Botryosphaeria属、Botryosphaeria cocogena、Botryosphaeria dothidea、Botryosphaeria marconii、Botryosphaeria obtusa、Botryosphaeria rhodina、Botryosphaeria ribis、Botryosphaeria stevensii、
Botryosporium属、Botryosporium pulchrum、
Botryotinia属、Botryotinia fuckeliana、Botryotinia polyblastis、
セイヨウツゲ胴枯病菌、
Brachybasidiaceae科、
Brasiliomyces属、Brasiliomyces malachrae、
Briosia属、Briosia ampelophaga、
ブラウンリングパッチ病菌(Brown ring patch)、
トマト褐色腐敗病菌(Buckeye rot of tomato)、
Bulbomicrosphaera属、
Cadophora属、Cadophora malorum、
Caespitotheca属、
Calonectria属、Calonectria ilicicola、Calonectria indusiata、Calonectria kyotensis、Calonectria pyrochroa、Calonectria quinqueseptata、
Camarotella属、Camarotella acrocomiae、Camarotella costaricensis、
カンナさび病菌(Canna rust)、
Capitorostrum属、Capitorostrum cocoes、
Capnodium属、Capnodium footii、Capnodium mangiferum、Capnodium ramosum、Capnodium theae、
Cephalosporium属、Cephalosporium gramineum、
Ceratobasidium属、Ceratobasidium cereale、Ceratobasidium cornigerum、Ceratobasidium noxium、Ceratobasidium ramicola、Ceratobasidium setariae、Ceratobasidium stevensii、
Ceratocystis属、Ceratocystis adiposa、Ceratocystis coerulescens、Ceratocystis fimbriata、Ceratocystis moniliformis、Ceratocystis oblonga、Ceratocystis obpyriformis、Ceratocystis paradoxa、Ceratocystis pilifera、Ceratocystis pluriannulata、Ceratocystis polyconidia、Ceratocystis tanganyicensis、Ceratocystis zombamontana、
Ceratorhiza属、Ceratorhiza hydrophila、
Ceratospermopsis属、
Cercoseptoria属、Cercoseptoria ocellata、
Cercosporella属、Cercosporella rubi、
Ceriporia属、Ceriporia spissa、Ceriporia xylostromatoides、
Cerrena属、Cerrena unicolor、
Ceuthospora属、Ceuthospora lauri、
Choanephora属、Choanephora cucurbitarum、Choanephora infundibulifera、
Chrysanthemum属、Chrysanthemum white rust、
Chrysomyxa属、Chrysomyxa cassandrae、
Chrysomyxa属、Chrysomyxa himalensis、Chrysomyxa ledi、Chrysomyxa ledi var. rhododendri、Chrysomyxa ledicola、Chrysomyxa nagodhii、Chrysomyxa neoglandulosi、Chrysomyxa piperiana、Chrysomyxa pirolata、Chrysomyxa pyrolae、Chrysomyxa reticulata、Chrysomyxa roanensis、Chrysomyxa succinea、
Cladosporium属、Cladosporium arthropodii、Cladosporium cladosporioides、Cladosporium cladosporioides f. sp. pisicola、Cladosporium cucumerinum、Cladosporium herbarum、Cladosporium musae、Cladosporium oncobae、
Climacodon属、Climacodon pulcherrimus、Climacodon septentrionalis、
Clitocybe属、Clitocybe parasitica、
Clonostachys rosea f. rosea、
Clypeoporthe属、Clypeoporthe iliau、
Coleosporium属、Coleosporium helianthi、Coleosporium ipomoeae、Coleosporium madiae、Coleosporium pacificum、Coleosporium tussilaginis、
Conidiosporomyces属、
Coniella属、Coniella castaneicola、Coniella diplodiella、Coniella fragariae、
Coniothecium属、Coniothecium chomatosporum、
Coniothyrium属、Coniothyrium celtidis-australis、Coniothyrium henriquesii、Coniothyrium rosarum、Coniothyrium wernsdorffiae、
Coprinopsis属、Coprinopsis psychromorbida、
Cordana属、Cordana johnstonii、Cordana musae、Coriolopsis floccosa、
トウモロコシ斑点病菌、
Corticium属、Corticium invisum、Corticium penicillatum、Corticium theae、
Coryneopsis属、Coryneopsis rubi、
Coryneum属、Coryneum rhododendri、
堅黒穂病菌、
Crinipellis属、Crinipellis sarmentosa、
Cronartium属、Cronartium ribicola、
Cryphonectriaceae科、
Cryptobasidiaceae科、
Cryptocline属、Cryptocline cyclaminis、
Cryptomeliola属種、
Cryptosporella属、Cryptosporella umbrina、
Cryptosporiopsis属、Cryptosporiopsis tarraconensis、
Cryptosporium属、Cryptosporium minimum、
Curvularia属、Curvularia lunata、Curvularia caricae-papayae、Curvularia penniseti、Curvularia senegalensis、Curvularia trifolii、
キクラネウスマふるい病菌、
Cylindrocarpon属、Cylindrocarpon ianthothele var. ianthothele、Cylindrocarpon magnusianum、Cylindrocarpon musae、
Cylindrocladiella属、Cylindrocladiella camelliae、Cylindrocladiella parva、
Cylindrocladium属、Cylindrocladium clavatum、Cylindrocladium lanceolatum、Cylindrocladium peruvianum、Cylindrocladium pteridis、
Cylindrosporium属、Cylindrosporium cannabinum、Cylindrosporium juglandis、Cylindrosporium rubi、
Cymadothea属、Cymadothea trifolii、
Cytospora属、Cytospora palmarum、Cytospora personata、Cytospora sacchari、Cytospora sacculus、Cytospora terebinthi、
Cytosporina属、Cytosporina ludibunda、
Dactuliophora属、Dactuliophora elongata、
Davidiella属、Davidiella dianthi、Davidiella tassiana、
Deightoniella属、Deightoniella papuana、Deightoniella torulosa、
Dendrophora属、Dendrophora marconii、Dendrophora erumpens、
Denticularia属、Denticularia mangiferae、
Dermea pseudotsugae、
Diaporthaceae科、
Diaporthe属、Diaporthe arctii、Diaporthe dulcamarae、Diaporthe eres、Diaporthe helianthi、Diaporthe lagunensis、Diaporthe lokoyae、Diaporthe melonis、Diaporthe orthoceras、Diaporthe perniciosa、Diaporthe phaseolorum、Diaporthe phaseolorum var. caulivora、Diaporthe phaseolorum var. phaseolorum、Diaporthe phaseolorum var. soja、Diaporthe rudis、Diaporthe tanakae、Diaporthe toxica、
Dicarpella属、Dicarpella dryina、
Didymella属、Didymella applanata、Didymella bryoniae、Didymella fabae、Didymella lycopersici
Didymosphaeria属、Didymosphaeria arachidicola、Didymosphaeria taiwanensis、
Dilophospora属、Dilophospora alopecuri、
Dimeriella属、Dimeriella sacchari、
Diplocarpon属、Diplocarpon mespili、Diplocarpon rosae、
Discosia属、Discosia artocreas、
Discostroma属、Discostroma corticola、
Distocercospora属、Distocercospora livistonae、
Dothiorella属、Dothiorella brevicollis、Dothiorella dominicana、Dothiorella dulcispinae、Dothiorella gregaria、
Drechslera属、Drechslera avenacea、Drechslera campanulata、Drechslera dematioidea、Drechslera gigantea、Drechslera glycines、Drechslera musae-sapientium、Drechslera teres f. maculata、Drechslera wirreganensis、
Eballistra属、Eballistra lineata、Eballistra oryzae、
Eballistraceae科、
Echinodontium属、Echinodontium ryvardenii、Echinodontium tinctorium、
Ectendomeliola属、
Elsinoe属、Elsinoe ampelina、Elsinoe batatas、Elsinoe brasiliensis、Elsinoe leucospila、Elsinoe randii、Elsinoe rosarum、Elsinoe sacchari、Elsinoe theae、Elsinoe veneta、
Endomeliola属、
Endothia属、Endothia radicalis、
Endothiella属、Endothiella gyrosa、
Entorrhizomycetes綱、
Entyloma属、Entyloma ageratinae、Entyloma dahliae、Entyloma ellisii、
Epicoccum属、Epicoccum nigrum、
Eremothecium属、Eremothecium coryli、Eremothecium gossypii、
Erysiphales目、
Exobasidiaceae科、Exobasidium burtii、Exobasidium reticulatum、Exobasidium vaccinii var. japonicum、Exobasidium vaccinii-uliginosi、Exobasidium vexans、Exophiala alcalophila、
Exophiala属、Exophiala angulospora、Exophiala attenuata、Exophiala calicioides、Exophiala castellanii、Exophiala dermatitidis、Exophiala dopicola、Exophiala exophialae、Exophiala heteromorpha、Exophiala hongkongensis、Exophiala jeanselmei、Exophiala lecanii-corni、Exophiala mansonii、Exophiala mesophila、Exophiala moniliae、Exophiala negronii、Exophiala phaeomuriformis、Exophiala pisciphila、Exophiala psychrophila、Exophiala salmonis、Exophiala spinifera、
Fomes属、Fomes lamaensis、
Fomitopsis属、Fomitopsis rosea、
Fusicladium pisicola、
Fusicoccum属、Fusicoccum aesculi、Fusicoccum amygdali、Fusicoccum quercus、
Galactomyces属、Galactomyces candidum、
Ganoderma属、Ganoderma brownii、Ganoderma lobatum、Ganoderma megaloma、Ganoderma meredithiae、Ganoderma orbiforme、Ganoderma philippii、Ganoderma sessile、Ganoderma tornatum、Ganoderma zonatum、
Geastrumia属、Geastrumia polystigmatis、
Georgefischeriaceae科、
Georgefischeriales目、
Geosmithia属、Geosmithia pallida、
Geotrichum属、Geotrichum candidum、Geotrichum klebahnii、
Gibberella属、Gibberella acuminata、Gibberella avenacea、Gibberella baccata、Gibberella cyanogena、Gibberella fujikuroi、Gibberella intricans、Gibberella pulicaris、Gibberella stilboides、Gibberella tricincta、Gibberella xylarioides、Gibberella zeae、
Gibellina属、Gibellina cerealis、
Gilbertella属、Gilbertella persicaria、
Gjaerumiaceae科、
Gliocladiopsis属、Gliocladiopsis tenuis、
Gliocladium属、Gliocladium vermoeseni、
Gloeocercospora属、Gloeocercospora sorghi、
Gloeocystidiellum属、Gloeocystidiellum porosum、
Gloeophyllum属、Gloeophyllum mexicanum、Gloeophyllum trabeum、
Gloeoporus属、Gloeoporus dichrous、
Gloeosporium属、Gloeosporium cattleyae、Gloeosporium theae-sinensis、
Glomerella属、Glomerella cingulata、Glomerella graminicola、Glomerella tucumanensis、
Gnomonia属、Gnomonia caryae、Gnomonia comari、Gnomonia dispora、Gnomonia iliau、Gnomonia rubi、
Golovinomyces属、Golovinomyces cichoracearum、
Graphiola phoenicis、
Graphiolaceae科、
Graphium属、Graphium rigidum、Graphium rubrum、
Graphyllium属、Graphyllium pentamerum、
Grovesinia属、Grovesinia pyramidalis、
Gymnoconia属、Gymnoconia nitens、
Gymnopus属、Gymnopus dryophilus、
Gymnosporangium属、Gymnosporangium kernianum、Gymnosporangium libocedri、Gymnosporangium nelsonii、Gymnosporangium yamadae、
Haematonectria属、Haematonectria haematococca、
Hansenula属、Hansenula subpelliculosa、
Hapalosphaeria属、Hapalosphaeria deformans、
Haplobasidion属、Haplobasidion musae、
Helicobasidium属、Helicobasidium compactum、Helicobasidium longisporum、Helicobasidium purpureum、
Helicoma属、Helicoma muelleri、
Helminthosporium属、Helminthosporium cookei、Helminthosporium solani、
Hendersonia属、Hendersonia creberrima、Hendersonia theicola、
Hericium属、Hericium coralloides、
Heterobasidion属、Heterobasidion irregulare、Heterobasidion occidentale、
Hexagonia属、Hexagonia hydnoides、
Hymenula属、Hymenula affinis、
Hyphodermella属、Hyphodermella corrugata、
Hyphodontia属、Hyphodontia aspera、Hyphodontia sambuci、
Hypoxylon属、Hypoxylon tinctor、
Inonotus属、Inonotus arizonicus、Inonotus cuticularis、Inonotus dryophilus、Inonotus hispidus、Inonotus ludovicianus、
Irpex属、Irpex destruens、Irpex lacteus、
Kabatiella属、Kabatiella caulivora、
カーナルバント病菌(Karnal bunt)
コアウィルト病菌(Koa wilt)
Kretzschmaria属、Kretzschmaria zonata、
Kuehneola属、Kuehneola uredinis、
Kutilakesa属、Kutilakesa pironii、
Laetiporus属、Laetiporus ailaoshanensis、Laetiporus baudonii、Laetiporus caribensis、Laetiporus conifericola、Laetiporus cremeiporus、Laetiporus gilbertsonii、Laetiporus huroniensis、Laetiporus montanus、Laetiporus portentosus、Laetiporus zonatus、
Laxitextum属、Laxitextum bicolor、
Leandria属、Leandria momordicae、
Lentinus属、Lentinus tigrinus、
Lenzites属、Lenzites betulina、Lenzites elegans、
Leohumicola属、Leohumicola atra、Leohumicola incrustata、Leohumicola levissima、
Leptodontidium属、Leptodontidium elatius、
Leptographium属、Leptographium microsporum、
Leptosphaerulina属、Leptosphaerulina crassiasca、Leptosphaerulina trifolii、
Leptothyrium属、Leptothyrium nervisedum、
Leptotrochila属、Leptotrochila medicaginis、
Leucocytospora属、Leucocytospora leucostoma、
Leucostoma属、Leucostoma auerswaldii、Leucostoma canker、Leucostoma kunzei、Leucostoma persoonii、
Leveillula属、Leveillula compositarum、Leveillula leguminosarum、Leveillula taurica、
Limacinula属、Limacinula tenuis、
Linochora属、Linochora graminis、
裸黒穂病菌
Lopharia属、Lopharia crassa、
Lophodermium属、Lophodermium aucupariae、Lophodermium schweinitzii、
Macrophoma属、Macrophoma mangiferae、Macrophoma theicola、
Macrosporium属、Macrosporium cocos、
Magnaporthe属、Magnaporthe grisea、Magnaporthe salvinii、
Magnaporthiopsis属、
Mamianiella属、Mamianiella coryli、
Marasmiellus属、Marasmiellus cocophilus、Marasmiellus stenophyllus、
Marasmius属、Marasmius crinis-equi、Marasmius sacchari、Marasmius semiustus、Marasmius stenophyllus、Marasmius tenuissimus、
Massarina属、Massarina walkeri、
Mauginiella属、Mauginiella scaettae、
Melampsora属、Melampsora lini、Melampsora occidentalis、
Melanconis属、Melanconis carthusiana、
Melanconium属、Melanconium juglandinum、
Meliola属、Meliola mangiferae、Meliola zangii、
Meruliopsis属、Meruliopsis ambigua、
Microascus属、Microascus brevicaulis、
Microbotryum属、Microbotryum silenes-dioicae、Microbotryum violaceum、
Microsphaera属、Microsphaera coryli、Microsphaera diffusa、Microsphaera ellisii、Microsphaera euphorbiae、Microsphaera hommae、Microsphaera penicillata、Microsphaera vaccinii、Microsphaera verruculosa、
Microstroma属、Microstroma juglandis、
Moesziomyces属、Moesziomyces bullatus、
Moniliophthora属、Moniliophthora roreri、
Monilochaetes属、Monilochaetes infuscans、
Monochaetia属、Monochaetia coryli、Monochaetia mali、
Monographella属、Monographella albescens、Monographella cucumerina、Monographella nivalis、
Monosporascus属、Monosporascus cannonballus、Monosporascus eutypoides、
Monostichella属、Monostichella coryli、
Mucor属、Mucor circinelloides、Mucor hiemalis、Mucor mucedo、Mucor paronychius、Mucor piriformis、Mucor racemosus、
Mycena属、Mycena citricolor、
Mycocentrospora属、Mycocentrospora acerina、
Mycoleptodiscus属、Mycoleptodiscus terrestris、
Didymella属、Didymella rabiei、
Mycosphaerella属、Mycosphaerella recutita、Mycosphaerella rosicola、Mycosphaerella rubi、Mycosphaerella stigmina-platani、Mycosphaerella striatiformans、
Mycovellosiella属、Mycovellosiella concors、
Passalora属、Passalora fulva、
Mycovellosiella属、Mycovellosiella koepkei、Mycovellosiella vaginae、
Myriogenospora属、Myriogenospora aciculispora、
Myrothecium属、Myrothecium roridum、Myrothecium verrucaria、
Naevala属、Naevala perexigua、
Naohidemyces属、Naohidemyces vaccinii、
Nectria属、Nectria cinnabarina、Nectria ditissima、Nectria foliicola、Nectria mammoidea、Nectria mauritiicola、Nectria peziza、Nectria pseudotrichia、Nectria radicicola、Nectria ramulariae、
Nectriella属、Nectriella pironii、
Nemania属、Nemania diffusa、Nemania serpens、
Neocosmospora属、Neocosmospora vasinfecta、
Neodeightonia属、Neodeightonia phoenicum、
Neoerysiphe属、Neoerysiphe galeopsidis、
Neofabraea属、Neofabraea perennans、
Neofusicoccum属、Neofusicoccum mangiferae、
Oidiopsis属、Oidiopsis gossypii、
Oidium属、Oidium arachidis、Oidium caricae-papayae、Oidium indicum、Oidium mangiferae、Oidium manihotis、
Olpidium属、Olpidium brassicae、
Omphalia属、Omphalia tralucida、
Ophiobolus属、Ophiobolus anguillides、Ophiobolus cannabinus、
Ophioirenina属、
Ovulinia属、Ovulinia azaleae、
Oxyporus属、Oxyporus corticola、
Ozonium属、Ozonium texanum、
Peltaster属、Peltaster fructicola、
Penicillium属、Penicillium expansum、Penicillium funiculosum、
Peniophora属、
Periconia属、Periconia circinata、
Periconiella属、Periconiella cocoes、
Peridermium属、Peridermium californicum、
Pestalosphaeria属、Pestalosphaeria concentrica、
Pestalotia属、Pestalotia longiseta、Pestalotia rhododendri、
Pestalotiopsis属、Pestalotiopsis adusta、Pestalotiopsis arachidis、Pestalotiopsis disseminata、Pestalotiopsis guepini、Pestalotiopsis leprogena、Pestalotiopsis longiseta、Pestalotiopsis mangiferae、Pestalotiopsis palmarum、Pestalotiopsis sydowiana、Pestalotiopsis theae、
Peyronellaea属、Peyronellaea curtisii、
Phacidiopycnis属、Phacidiopycnis padwickii、
Phaeochoropsis属、Phaeochoropsis mucosa、
Phaeocytostroma属、Phaeocytostroma iliau、Phaeocytostroma sacchari、
Phaeoisariopsis属、Phaeoisariopsis bataticola、
Phaeoramularia属、Phaeoramularia heterospora、Phaeoramularia indica、Phaeoramularia manihotis、
Phaeoseptoria属、Phaeoseptoria musae、
Phaeosphaerella属、Phaeosphaerella mangiferae、Phaeosphaerella theae、
Phaeosphaeria属、Phaeosphaeria avenaria、Phaeosphaeria herpotrichoides、Phaeosphaeria microscopica、Phaeosphaeria nodorum、
Phaeosphaeriopsis属、Phaeosphaeriopsis obtusispora、
Phaeotrichoconis属、Phaeotrichoconis crotalariae、
Phialophora属、Phialophora asteris、Phialophora cinerescens、Phialophora gregata、Phialophora tracheiphila、
Phoma属、Phoma clematidina、Phoma costaricensis、Phoma cucurbitacearum、Phoma destructiva、Phoma draconis、Phoma exigua、Phoma exigua、Phoma exigua var. foveata、Phoma exigua、Phoma glomerata、Phoma glycinicola、Phoma herbarum、Phoma insidiosa、Phoma medicaginis、Phoma microspora、Phoma narcissi、Phoma nebulosa、Phoma oncidii-sphacelati、Phoma pinodella、Phoma sclerotioides、Phoma strasseri、
Phomopsis属、Phomopsis asparagi、Phomopsis asparagicola、Phomopsis cannabina、Phomopsis coffeae、Phomopsis ganjae、Phomopsis javanica、Phomopsis longicolla、Phomopsis mangiferae、Phomopsis prunorum、Phomopsis sclerotioides、Phomopsis theae、
Phragmidium属、Phragmidium mucronatum、Phragmidium rosae-pimpinellifoliae、Phragmidium rubi-idaei、Phragmidium violaceum、
Phyllachora属、Phyllachora banksiae、Phyllachora cannabis、Phyllachora graminis、Phyllachora gratissima、Phyllachora musicola、Phyllachora pomigena、Phyllachora sacchari、
Phyllactinia属、
Phyllosticta属、Phyllosticta alliariaefoliae Phyllosticta arachidis-hypogaeae、Phyllosticta batatas、Phyllosticta capitalensis、Phyllosticta carpogena、Phyllosticta coffeicola、Phyllosticta concentrica、Phyllosticta coryli、Phyllosticta cucurbitacearum、Phyllosticta cyclaminella、Phyllosticta erratica、Phyllosticta hawaiiensis、Phyllosticta lentisci、Phyllosticta manihotis、Phyllosticta micropuncta、Phyllosticta mortonii、Phyllosticta nicotianae、Phyllosticta palmetto、Phyllosticta penicillariae、Phyllosticta perseae、Phyllosticta pseudocapsici、Phyllosticta sojaecola、Phyllosticta theae、Phyllosticta theicola、
Phymatotrichopsis属、Phymatotrichopsis omnivora、
Physalospora属、Physalospora disrupta、Physalospora perseae、
Physoderma属、Physoderma alfalfae、Physoderma leproides、Physoderma trifolii、
Physopella属、Physopella ampelopsidis、
Pileolaria属、Pileolaria terebinthi、
Piricaudiopsis属、Piricaudiopsis punicae、Piricaudiopsis rhaphidophorae、Piricaudiopsis rosae、
Plenodomus属、Plenodomus destruens、Plenodomus meliloti、
Pleosphaerulina属、Pleosphaerulina sojicola、
Pleospora属、Pleospora alfalfae、Pleospora betae、Pleospora herbarum、Pleospora lycopersici、Pleospora tarda、Pleospora theae、
Pleuroceras属、
Podosphaera属、Podosphaera fuliginea、Podosphaera fusca、Podosphaera leucotricha、Podosphaera macularis、Podosphaera pannosa、
Polyscytalum属、Polyscytalum pustulans、
Poria属、Poria hypobrunnea、
Postia属、Postia tephroleuca、
うどん粉病菌、
Pseudocercospora属、Pseudocercospora arecacearum、Pseudocercospora cannabina、Pseudocercospora fuligena、Pseudocercosporella herpotrichoides、Pseudocercospora gunnerae、Pseudocercospora pandoreae、Pseudocercospora puderi、Pseudocercospora rhapisicola、Pseudocercospora theae、Pseudocercospora vitis、Pseudocercosporella capsellae、
Pseudocochliobolus属、Pseudocochliobolus eragrostidis、
Pseudoepicoccum属、Pseudoepicoccum cocos、
Pseudopeziza属、Pseudopeziza jonesii、Pseudopeziza medicaginis、Pseudopeziza trifolii、
Pseudoseptoria属、Pseudoseptoria donacis、
Pucciniaceae科、
Pucciniastrum属、Pucciniastrum americanum、Pucciniastrum arcticum、Pucciniastrum epilobii、Pucciniastrum hydrangeae、
Pycnostysanus属、Pycnostysanus azaleae、
Pyrenochaeta属、Pyrenochaeta lycopersici、Pyrenochaeta terrestris、
Pyrenopeziza属、Pyrenopeziza brassicae、
Ramichloridium属、Ramichloridium musae、
Ramulispora属、Ramulispora sorghi、Ramulispora sorghicola、
Rhinocladium属、Rhinocladium corticola、
Rhizophydium属、Rhizophydium graminis、
Rhizopus属、Rhizopus arrhizus、Rhizopus circinans、Rhizopus microsporus、Rhizopus oryzae、
Rhytisma属、Rhytisma punctatum、Rhytisma vitis、
Rigidoporus属、Rigidoporus vinctus、
Rosellinia属、Rosellinia arcuata、Rosellinia bunodes、Rosellinia necatrix、Rosellinia pepo、
Saccharicola属、Saccharicola taiwanensis、
Schiffnerula属、Schiffnerula cannabis、
Schizophyllum属、Schizophyllum commune、
Schizopora属、Schizopora flavipora、
Schizothyrium属、Schizothyrium pomi、
Sclerophthora属、Sclerophthora macrospora、
Sclerotium属、Sclerotium cinnamomi、Sclerotium delphinii、
Scytinostroma属、Scytinostroma galactinum、
Seimatosporium属、Seimatosporium mariae、Seimatosporium rhododendri、
Selenophoma属、Selenophoma linicola、
Septobasidium属、Septobasidium bogoriense、Septobasidium euryae-groffii、Septobasidium gaoligongense、Septobasidium pilosum、Septobasidium polygoni、Septobasidium pseudopedicellatum、Septobasidium theae、
Septocyta属、Septocyta ruborum、
Serpula属、Serpula lacrymans、
Setosphaeria属、Setosphaeria rostrata、Setosphaeria turcica、
Spencermartinsia属、Spencermartinsia pretoriensis、
Sphaceloma属、Sphaceloma arachidis、Sphaceloma menthae、Sphaceloma perseae、Sphaceloma poinsettiae、Sphaceloma sacchari、Sphaceloma theae、
Sphacelotheca属、Sphacelotheca reiliana、Sphaerotheca castagnei、
Sphaerulina属、Sphaerulina oryzina、Sphaerulina rehmiana、Sphaerulina rubi、
Sphenospora属、Sphenospora kevorkianii、
Spilocaea属、Spilocaea oleaginea、
Sporisorium属、Sporisorium cruentum、Sporisorium ehrenbergii、Sporisorium scitamineum、Sporisorium sorghi、
Sporonema属、Sporonema phacidioides、
Stagonospora属、Stagonospora avenae、Stagonospora meliloti、Stagonospora recedens、Stagonospora sacchari、Stagonospora tainanensis、
Stagonosporopsis属、
Stegocintractia属、Stegocintractia junci、
Stemphylium属、Stemphylium alfalfae、Stemphylium bolickii、Stemphylium cannabinum、Stemphylium globuliferum、Stemphylium lycopersici、Stemphylium sarciniforme、Stemphylium solani、Stemphylium vesicarium、
Stenella属、Stenella anthuriicola、
スチグマトマイコシス病菌(Stigmatomycosis)、
Stigmina属、Stigmina carpophila、Stigmina palmivora、Stigmina platani-racemosae、
Stromatinia属、Stromatinia cepivora、
Sydowiella属、Sydowiella depressula、
Sydowiellaceae科、
Synchytrium属、Synchytrium endobioticum、
Tapesia属、Tapesia acuformis、Tapesia yallundae、
Taphrina属、Taphrina coryli、Taphrina potentillae、
Thanatephorus属、Thanatephorus cucumeris、
Thecaphora属、Thecaphora solani、
Thielaviopsis属、Thielaviopsis basicola、Thielaviopsis ceramica、
Thyrostroma属、Thyrostroma compactum、
Tiarosporella属、Tiarosporella urbis-rosarum、
Tilletia属、Tilletia barclayana、Tilletia caries、Tilletia controversa、Tilletia laevis、Tilletia tritici、Tilletia walkeri、
Tilletiariaceae科、
Togniniaceae科、
Tranzschelia属、Tranzschelia pruni-spinosae、
Trichoderma属、Trichoderma koningii、Trichoderma paucisporum、Trichoderma songyi、Trichoderma theobromicola、Trichoderma viride、
Tubercularia属、Tubercularia lateritia、
Tunstallia属、Tunstallia aculeata、
Typhula属、Typhula blight、Typhula idahoensis、Typhula incarnata、Typhula ishikariensis、Typhula variabilis、
Ulocladium属、Ulocladium consortiale、
Uncinula属、
Uredo属、Uredo behnickiana、Uredo kriegeriana、Uredo musae、Uredo nigropuncta、Uredo rangelii、
Urocystis属、Urocystis agropyri、Urocystis brassicae、Urocystis occulta、
Uromyces属、Uromyces apiosporus、Uromyces appendiculatus、Uromyces beticola、Uromyces ciceris-arietini、Uromyces dianthi、Uromyces euphorbiae、Uromyces graminis、Uromyces inconspicuus、Uromyces lineolatus、Uromyces musae、Uromyces oblongus、Uromyces pisi-sativi、Uromyces proeminens、Uromyces medicaginis、Uromyces trifolii-repentis、Uromyces viciae-fabae、
Urophlyctis属、Urophlyctis leproides、Urophlyctis trifolii、
Ustilaginales目、
Ustilago属、Ustilago avenae、Ustilago esculenta、Ustilago hordei、Ustilago maydis、Ustilago nigra、Ustilago nuda、Ustilago scitaminea、Ustilago tritici、
Vankya属、Vankya ornithogali、
ベルベットブライト病菌(Velvet blight)、
Veronaea属、Veronaea musae、
Verticillium属、Verticillium albo-atrum、Verticillium alfalfae、Verticillium dahliae、Verticillium isaacii、Verticillium klebahnii、Verticillium longisporum、Verticillium nonalfalfae、Verticillium theobromae、Verticillium wilt、Verticillium zaregamsianum、
Waitea属、Waitea circinata、
Westea属、
コムギ赤さび病菌、
コムギうどん粉病菌、
Wuestneiopsis属、Wuestneiopsis georgiana、
Xeromphalina属、Xeromphalina fraxinophila、
Zopfia属、Zopfia rhizophila、
Zygosaccharomyces属、Zygosaccharomyces bailii、Zygosaccharomyces florentinus、
Zythiostroma属
【００７２】
好ましくは、本発明によって包含される作物植物と真菌、卵菌、又は細菌とのペアは、以下の通りである。
コムギ(Triticum sativum)
Claviceps purpurea、Erysiphe graminis、Fusarium avenaceum、Fusarium culmorum、Fusarium graminearum、Fusarium langsethiae、Fusarium poae、Fusarium pseudograminearum、Gaeumannomyces graminis、Leptosphaeria nodorum、Microdochium spp.、Mycosphaerella graminicola、Oculimacula acuformis、Oculimacula yallundae、Puccinia recondita、Puccinia striiformis、Pyrenophora tritici-repentis、Rhizoctonia cerealis、Microdochium、及びZymoseptoria tritici
トウモロコシ(Zea mays)
Fusarium graminearum、Fusarium proliferatum、Fusarium subglutinans、Fusarium verticillioides
オオムギ(Hordeum vulgare)
Blumeria graminis、Fusarium spp.、Pyrenophora teres、Ramularia collo-cygni、Rhynchosporium secalis
イネ(Oryza sativa)
Cochliobolus miyabeanus、Fusarium fijikuroi、Magnaporthe oryzae、Microdochium oryzae、Pyricularia oryzae、Rhizoctonia oryzae、Rhizoctonia solani、Sarocladium oryzae、Ustilaginoides virens
ジャガイモ(Solanum tuberosum)
Alternia alternata、Alternaria solani、Phytophtora infestans、Rhizoctonia solani
ブドウ(Vinis vitifera)
Botrytis cinerea、Erysiphe necator、Plasmopara viticola、Guignardia bidwelli、Erisyphe necator、Diplodia seriata
ダイズ(Glycine max)
Cercopora kikuchii、Colletotrichum dematium、Corynespora cassiicola、Fusarium graminearum、Pythium spp.、Rhizoctonia solani、Sclerotinia sclerotiorum、Septoria glycines
リンゴの木(Malus domestica)
Monilia fructigena、Monilia laxa、Pezzicula alba、Pezzicula malicorticis、Venturia inaequalis
トマト(Lycopersicon esculentum)
Phytophtora infestans
マメ(Phaseolus vulgaris)
Uromyces appendiculatus
ラディッシュ(Raphanus sativus)
Alternaria brassicae
すべての果物及び野菜
Botrytis cinerea
イチゴ苗(Fragaria spp.)
Colletotrichum acutatum
ニンジン(Daucus carota)
Aternaria alternata、Alternaria dauci、Alternaria radicina
モモ(Prunus persica)及びアンズ(Prunus armeniaca)
Monilia fructicola、Monilia fructigena、Monilia laxa
【００７３】
特に好ましくは、本発明によって包含される作物植物と真菌又は細菌とのペアは、以下の通りである。
コムギ:Fusarium graminearum、Microdochium属菌、及びZymoseptoria tritici
ブドウ:Botrytis cinerea、Erysiphe necator、Plasmopara viticola、Guignardia bidwelli、Erisyphe necator、Diplodia seriata
ジャガイモ:Alternia alternata、Alternaria solani、Phytophtora infestans、Rhizoctonia solani
トマト:Phytophtora infestans
【００７４】
防除方法
本発明はまた、作物植物及び種子の病原性真菌、卵菌、及び/又は細菌を防除する方法であって、式(I)
【００７５】
【化１３】
2020522581.tif 000015
【００７６】
[式中、
・R1は
【００７７】
【化１４】
2020522581.tif 000016
【００７８】
(式中、
-  R3はH又はSO3Naを表し、
-  R4はH又はOHであり、
-
【００７９】
【化１５】
2020522581.tif 000017
【００８０】
は単結合又は二重結合を表し、
-  nは0又は1と等しく、
-  mは0又は1である)
からなる群から選択され、
・R2は
【００８１】
【化１６】
2020522581.tif 000018
【００８２】
からなる群から選択される]
の分子を作物植物に施用する工程を含む、方法に関する。
【００８３】
好ましくは、R1は
【００８４】
【化１７】
2020522581.tif 000019
【００８５】
(式中、R3はH又はSO3Naである)
である。
【００８６】
好ましくは、R2は
【００８７】
【化１８】
2020522581.tif 000020
【００８８】
である。
【００８９】
該防除は、治療的又は予防的、好ましくは治療的であってもよい。
【００９０】
作物植物への施用は、真菌及び/又は細菌によって影響を受けた植物部分に届ける、当業者に公知の任意の手段によって行われてもよい。
【００９１】
式(I)の分子は、0.1から5mg/mLの間の用量で、好ましくは0.5から3mg/mLの間の用量で、特に好ましい方法では0.75から1mg/mLの間の用量で施用する。
【００９２】
種子のコーティングは、活性剤を種子と接触させたままにしておくことができる、当業者に公知の任意の技術によって実施してもよい。
【００９３】
例えば、コーティングは、粉衣又は噴霧によって行われてもよい。
【００９４】
例えば、コーティングには、配合物及び添加剤が含まれてもよい。
【００９５】
配合物は、ごく少ない投与回数で、製品施用過程を通して、等しく一定の割合で活性物質を種子へ施用し種子の上にとどめておくために使用される。
【００９６】
配合物には、有機溶媒若しくは水、分散剤、乳化剤、界面活性剤、又は湿潤剤、色素等が含まれる。
【００９７】
界面活性剤及び乳化剤は、2つの不相溶性液体を一緒に混合し、安定して維持させる特性を有する。
【００９８】
様々なアジュバントが種子に施用されてもよい。フィルムコーティングは、微細孔フィルムを種子表面に施用することに対応する。フィルムコーティングは、種子の形状又はサイズを変化させることはない。フィルムコーティングは、処理の範囲及び均一性を改善する。農業者が種子を使用する際、粉塵が抑えられ、播種機への種子の流入が容易になることにより、播種の間の種子の取扱いが楽になる。フィルムコーティングは、栽培条件下での活性物質の作用を向上させる。コーティングは、種子の形状サイズ、及び質量を変化させる。これらは、播種の精度を改善する。
【００９９】
本発明による作物植物及び種子の病原性真菌及び/又は細菌を防除する処理方法は、特に、フザリウム病害、好ましくは、Table 1(表1)に列記したフザリウム病害に対して好適である。
【０１００】
【表１Ａ】
2020522581.tif 000021
【０１０１】
【表１Ｂ】
2020522581.tif 000022
【０１０２】
【表１Ｃ】
2020522581.tif 000023
【０１０３】
本発明による作物植物及び種子の病原性真菌、卵菌、及び/又は細菌を防除する処理方法は、特に、以下の作物植物と真菌又は細菌とのペアに好適である。
コムギ:Fusarium graminearum、Microdochium nivale、及びZymoseptoria tritici
ブドウ:Botrytis cinerea、Plasmopara viticola、Guignardia bidwelli、Erisyphe necator、Diplodia seriata
リンゴの木:Venturia inaequalis
バナナの木:Fusarium oxysporum及びMycosphaerella fijiensis
【実施例】
【０１０４】
材料及び方法
(実施例1)
微細藻類培養
微細藻類Amphidinium carterae菌株AC208は、Algobank社(Caen)から入手し、微細藻類Prymnesium parvum菌株RCC 1436及びPhaeodactylum tricornutum菌株CCMP 632は、Roscoff海洋微生物バンク(RCC:Roscoff Culture Collection)から入手する。これらの微細藻類を、12時間/12時間昼夜周期で、19℃のL1人工海水中で培養する(https://ncma.bigelow.org/algal-recipes)。使用する光の強度は100μEである。指数増殖期終了時に、遠心分離(3000RPMで15分)によってバイオマスを回収する。得られた細胞ペレットは凍結し、次いで、活性物質を安定して長期保存するために、実験室用凍結乾燥器(Alpha 1-2 LDplus、Labconco社)を使用して凍結乾燥した。凍結乾燥後、乾燥物を計量する。
【０１０５】
(実施例2)
抽出物の調製
実施例1の乾燥物から活性物質を抽出するために、乾燥物20mgを100℃の蒸留水1mlに再懸濁する。室温(20〜25℃)で2分間のインキュベートした後、抽出物を氷中に保管し、次いで、室温で10,000RPMで5分間、遠心分離する。活性物質を含有する上清は、その抗真菌特性を長期保持するために液体窒素中で凍結する。
【０１０６】
(実施例3)
Fusarium graminearum発芽試験
Fusarium graminearum胞子は、「マングビーン」枯渇培地中で生育させる。胞子をMiracloth(Calbiochem社)でろ過して菌糸体から分離し、遠心分離し、次いで、1.6.106胞子/mLで再懸濁する。約16,000胞子を、対照溶液又は様々な濃度のA. carterae抽出物の存在下でインキュベートする。室温で10分間インキュベートした後、胞子を、6時間後に発芽数計数のためにスライドに載せ、又は72時間後に菌糸体増殖を観察するためにペトリ皿に載せる。
【０１０７】
試験
(実施例4)
抽出物DのHPLC分画、及び得られた様々な画分の抗真菌活性の試験。
A. carterae抽出物中に存在するどの分子が抗真菌活性に寄与するのかを特徴づけるために、生物活性に基づいた分画戦略を選択した。すなわち、A. carterae抽出物をHPLCカラムで分画し、各画分についてF. graminearum胞子に対する殺生物活性の試験を実施して、どの画分が抗真菌活性に寄与する分子を含有するのかを特定する。
【０１０８】
凍結乾燥した細胞200mgをメタノール1ml中に可溶化する。4400rpmで10分間遠心分離した後、上清を回収し、回収したアルコール液相全部を紙でろ過し、次いで、この溶液を回転式エバポレーター中で、低温で蒸発させて、48.5mgの抽出生成物を収集する。F. graminearum胞子に対して活性試験を実施して、A. carterae抽出物の活性を確認する(図1A)。
【０１０９】
活性のある抽出物の準分取分画実験は、以下のプロトコールに従って、Thermo Scientific Ultimate 3000高速液体クロマトグラフを使用して逆相C18カラムで実施した。
【０１１０】
A. carterae抽出物をメタノールに5g/Lで溶解した。抽出物のために、以下の条件を適用した。
流速:2.5mL/分。
カラム:逆相C18:L=250mM;I.D.=10mm;P.D.=5μm。
注入量:150μL。
注入温度:24℃。
検出波長:280nm。
下記のTable 7(表7)に記載のグラジエントプログラム。
【０１１１】
【表２】
2020522581.tif 000024
【０１１２】
これらの条件下で得られたクロマトグラムを図1Bに示す。大部分のピークがそれぞれある画分に対応するように、図1Bに記載したようにF1〜F5の5つの画分を形成した。各画分5mg/mlを用いて、F. graminearum生育に対する活性試験を実施した。結果は、画分F1だけがまだ殺生物活性を有することを示しており(図1C)、この画分では、0.75mg/mlのMICが測定された(図1D)。
【０１１３】
画分F1を、以下のプロトコールに従って新規に分画した。
【０１１４】
抽出物F1をメタノールに5g/Lで溶解した。抽出物Dのために、以下の条件を適用した。
-  流速:2.5mL/分。
-  カラム:逆相C18:L=250mm;.D.=10mm;P.D.=5μm。
-  注入量:150μL。
-  注入温度:24℃。
-  検出波長:280nm。
-  下記のTable 8(表8)に記載のグラジエントプログラム。
【０１１５】
【表３】
2020522581.tif 000025
【０１１６】
これらの条件下で得られたクロマトグラムを図2Aに示す。大部分のピークが画分F1-2に対応するように、図2Aに記載したようにF1-1〜F1-5の5つの画分を形成した。各画分5mg/mlを用いて、F. graminearum生育に対する活性試験を実施した。結果は、画分F1-2及びF1-3だけがまだ殺生物活性を有することを示しており(図2B)、画分F1-2では、0.75mg/mlのMICが測定された(図2D)。
【０１１７】
(実施例5)
画分F1-2の質量分光分析。
画分F1-2中に存在する分子をより詳細に特性決定するために、質量分光分析を以下の条件下で実施した。
【０１１８】
実験は、QStar Elite分光計(Applied Biosystems社)の注入モードで実施した。
イオン化モード:ポジティブモードエレクトロスプレー(ESI)
エレクトロスプレーニードル電圧:室温にて4500V
注入条件:試料20μLを400μL/分のメタノール流速でメタノールに溶解
スキャン範囲:100〜2000ダルトン
【０１１９】
図3Aは、F1-2で収集された目的の分子のポジティブモードエレクトロスプレーイオン化によって取得された質量スペクトルを示す。
【０１２０】
測定された正確な質量は、1381.8276ダルトンである。これは、イオン化の間に形成されたナトリウム付加物に一致する([M+Na]+)。ナトリウムの質量、23ダルトンを減じると、この化合物の分子ピークの質量は1358.8Daである。
【０１２１】
正確な質量を徹底して分析することによって、5ppmの誤差を有するこの質量に関連した1つ又は複数の実験式を決定することが可能となる。非現実的な案を却下した後、選択された実験式は、C71H122O24である。
【０１２２】
1381.8276Daのこのピークに対してタンデム質量分析による徹底した分析を実施した。その質量スペクトルを図3Bに示す。幾つかのピーク(丸で囲まれたピーク、図3B)は、アンフィジノール18のフラグメンテーションから得られたピークと類似している(7)。
【０１２３】
(実施例6)
画分F1-2の核磁気共鳴(NMR)分析
1358.8Da分子量を有する分子の構造を決定するために、NMR解析を以下の手順に従って実施した。
【０１２４】
ピークF1-2に対応する試料を収集し、次いで、約350μLの重水素化メタノール(MeOD4)に完全に溶解した。
【０１２５】
実験は、多核プローブを備えたBruker Avance 14.1T分光計で実施した。一次元及び二次元のプロトン及びカーボンスペクトルを、Bruker社シークエンスライブラリーから入手できるパルスシークエンスを用いて取得した。
【０１２６】
取得条件は以下の通りである。
-  1H:スキャン回数:512;パルス:8μs;取得:5.0s;緩和:1.0s
-  13C DEPT135:スキャン回数:44666;パルス:12μs;取得:1.0s;緩和:3.0s
-  HSQC:スキャン回数:64;512インクリメント
-  HMBC:スキャン回数:48;512インクリメント
-  COSY:スキャン回数:56;256インクリメント
-  TOCSY:スキャン回数:48;256インクリメント
【０１２７】
13C DEPT135シークエンスは、直接結合したプロトンの数に従って、炭素をCH3並びにCH>0及びCH2<0に選別する実験である。
【０１２８】
相関分光法(COSY)シークエンスは、2結合又は3結合離れたスカラー相互作用におけるプロトンを同定する2D同種核実験である。
【０１２９】
全相関分光法(TOCSY)シークエンスは、3結合以上離れたスカラー相互作用におけるプロトンを同定する2D同種核実験である。
【０１３０】
異種核一量子相関(HSQC)シークエンスは、炭素と直接結合しているプロトンとの間の直接的な相互作用を示す2D異種核実験である。
【０１３１】
異種核多結合相関法(HMBC)シークエンスは、2結合又は3結合離れたプロトンと炭素との間の相互作用を示す2D異種核実験である。
【０１３２】
1Dスペクトルは、フーリエ変換によって処理した。このスペクトルは、両次元のフーリエ変換によって処理した。
【０１３３】
得られた結果に基づくと、図4Aに示した取得された1Hスペクトルは、1から6ppmの間含まれる大きなスペクトルのウィンドウにわたって分布する一連のピークを示す。これは、検討対象の化合物が脂肪族及びオレフィンプロトンを含有するということを裏付けるものである。これらのシフトはまた、酸素等のヘテロ原子の存在を示唆している。
【０１３４】
13C DEPT135スペクトル(図4B)は、13から211ppmの間に含まれるスペクトルのウィンドウにおける一連のピークを示す。HMBC及びHSQC 2Dシークエンスは、炭素がどのように連鎖を形成しているかを示す。COSY及び対CSY 2Dシークエンスは、プロトンシフト及び相関に基づく構造的シークエンスを裏付けるものである。
【０１３５】
観察された不飽和及び環の数は、実験式
Ni=(2nC+2-nH+nN-nX)/2
に基づき該分子について算出した数と一致する(=11)。
【０１３６】
式中、nC:炭素原子の数、nH:水素原子の数、nN:窒素原子の数、nX:ハロゲン原子の数である。
【０１３７】
11個の不飽和は、以下のように分布している。
-  1個のケトン官能基
-  8個の二重結合、2個の鎖の末端を含む
-  2個の環
【０１３８】
COSY及びTOCSYシークエンスによって、構造の完全な炭素骨格を再構築することが可能となる。これらの相関を、図5に太字の結合で示す。これらの結果は、分子の二次構造は、アンフィジノール18の二次構造に一致することを示している。全体的な解釈は、本研究で得られた結果を文献(7)でみられた結果と比較することによって裏付けられた。
【０１３９】
結論として、核磁気共鳴及び質量分析によって得られた結果はすべて、抽出物Dの分画後に得られ、F. graminearumに対する抗真菌活性を有する画分F1-2中に存在する分子は、以下の特有の化学的データを有するアンフィジノール18分子であることを裏付けている。
-  実験式:C71H122O24
-  モル質量:1358.83g.mol-1
【０１４０】
［参考文献］
2020522581.tif 000026
【図１】
2020522581.tif 000039
【図２】
2020522581.tif 000040
【図３】
2020522581.tif 000041
【図４Ａ】
2020522581.tif 000042
【図４Ｂ】
2020522581.tif 000043
【図５】
2020522581.tif 000044
【国際調査報告】
2020522581.tif 000045
2020522581.tif 000046
2020522581.tif 000047
2020522581.tif 000048
2020522581.tif 000049
2020522581.tif 000050