(57)【要約】抗ベータアミロイド（Ａβ）抗体またはそのＡβ結合性断片を含有する医薬組成物を提供する。これらの医薬組成物は、中枢神経系におけるＡβの異常蓄積または沈着、軽度の認知機能障害、及びＡβ関連障害、例えばアルツハイマー病の治療において利用される。【選択図】図７
2020531520.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ベータアミロイド（Ａβ）抗体またはそのＡβ結合性断片と、アルギニン塩酸塩（Ａｒｇ．ＨＣｌ）とを含む医薬組成物であって、前記抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片が免疫グロブリン重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び免疫グロブリン軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み、前記ＶＨ及びＶＬがそれぞれ、
（ａ）
ＶＨ−ＣＤＲ１が、配列番号１に示されるアミノ酸配列からなり、
ＶＨ−ＣＤＲ２が、配列番号２に示されるアミノ酸配列からなり、
ＶＨ−ＣＤＲ３が、配列番号３に示されるアミノ酸配列からなる、
ＶＨ相補性決定領域（ＣＤＲ）、及び
（ｂ）
ＶＬ−ＣＤＲ１が、配列番号４に示されるアミノ酸配列からなり、
ＶＬ−ＣＤＲ２が、配列番号５に示されるアミノ酸配列からなり、
ＶＬ−ＣＤＲ３が、配列番号６に示されるアミノ酸配列からなる、
ＶＬ  ＣＤＲ
を含み、前記組成物のｐＨが５．２〜６．２である、前記医薬組成物。
【請求項２】
前記組成物が前記抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記組成物が前記抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を７５〜１６５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記組成物が前記抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記組成物が前記抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１００ｍｇ／ｍｌの濃度で含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記組成物がＡｒｇ．ＨＣｌを５０〜２５０ｍＭの濃度で含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記組成物がＡｒｇ．ＨＣｌを７５〜１７５ｍＭの濃度で含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記組成物がＡｒｇ．ＨＣｌを１５０ｍＭの濃度で含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記組成物がポリソルベート８０（ＰＳ８０）を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記組成物がＰＳ８０を０．０１〜０．１％の濃度で含む、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記組成物がＰＳ８０を０．０３〜０．０８％の濃度で含む、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記組成物がＰＳ８０を０．０５％の濃度で含む、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記組成物が、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩及びクエン酸塩からなる群から選択される緩衝剤を含む、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記組成物がヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩またはクエン酸塩を１０〜３０ｍＭの濃度で含む、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記組成物がヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩またはクエン酸塩を２０ｍＭの濃度で含む、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記緩衝剤がヒスチジンである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
ヒスチジンの濃度が１０〜３０ｍＭである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
ヒスチジンの濃度が２０ｍＭである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記組成物がメチオニンを含む、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
メチオニンの濃度が０．０１〜１５０ｍＭである、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
メチオニンの濃度が５〜１５ｍＭである、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
メチオニンの濃度が１０ｍＭである、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記組成物がスクロースを含む、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記組成物がスクロースを０．０１〜３％の濃度で含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記組成物がスクロースを３％の濃度で含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記組成物のｐＨが５．２〜６．０である、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記組成物のｐＨが５．３〜５．７である、請求項１〜２６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記組成物のｐＨが５．５である、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度の前記抗Ａβ抗体または前記そのＡβ結合性断片、
５０〜２００ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、
０〜１５０ｍＭの濃度のメチオニン、
１０〜３０ｍＭの濃度のヒスチジン、
０．０１〜０．１％の濃度のＰＳ８０、
０〜３％の濃度のスクロース
を含み、前記組成物のｐＨが５．２〜６．０である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
１５０ｍｇ／ｍｌの濃度の前記抗Ａβ抗体または前記そのＡβ結合性断片、
１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、
１０ｍＭの濃度のメチオニン、
２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び
０．０５％の濃度のＰＳ８０
を含み、前記組成物のｐＨが５．５である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
１００ｍｇ／ｍｌの濃度の前記抗Ａβ抗体または前記そのＡβ結合性断片、
１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、
１０ｍＭの濃度のメチオニン、
２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び
０．０５％の濃度のＰＳ８０
を含み、前記組成物のｐＨが５．５である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
（ｉ）前記ＶＨが、配列番号７と少なくとも８０％同一である配列からなり、前記ＶＬが、配列番号８と少なくとも８０％同一である配列からなるか、
（ｉｉ）前記ＶＨが、配列番号７と少なくとも９０％同一である配列からなり、前記ＶＬが、配列番号８と少なくとも９０％同一である配列からなるか、または
（ｉｉｉ）前記ＶＨが、配列番号７に示されるアミノ酸配列からなり、前記ＶＬが、配列番号８に示されるアミノ酸配列からなる、
請求項１〜３１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記抗Ａβ抗体が免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を含み、
（ｉ）前記重鎖が、配列番号９と少なくとも８０％同一である配列からなり、前記軽鎖が、配列番号１０と少なくとも８０％同一である配列からなるか、
（ｉｉ）前記重鎖が、配列番号９と少なくとも９０％同一である配列からなり、前記軽鎖が、配列番号１０と少なくとも９０％同一である配列からなるか、または
（ｉｉｉ）前記重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列からなり、前記軽鎖が、配列番号１０に示されるアミノ酸配列からなる、
請求項１〜３２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
中枢神経系におけるＡβの異常蓄積または沈着の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法であって、
請求項１〜３３のいずれか１項に記載の医薬組成物を前記ヒト対象に投与すること
を含む、前記方法。
【請求項３５】
軽度の認知機能障害の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法であって、
請求項１〜３３のいずれか１項に記載の医薬組成物を前記ヒト対象に投与すること
を含む、前記方法。
【請求項３６】
アルツハイマー病の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法であって、
請求項１〜３３のいずれか１項に記載の医薬組成物を前記ヒト対象に投与すること
を含む、前記方法。
【請求項３７】
前記医薬組成物が前記ヒト対象に皮下投与される、請求項３４〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記医薬組成物が前記ヒト対象に静脈内投与される、請求項３４〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
抗ベータアミロイド（Ａβ）抗体またはそのＡβ結合性断片と、チオール含有酸化防止剤と、アルギニン塩酸塩（Ａｒｇ．ＨＣｌ）とを含む医薬組成物であって、前記抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片が免疫グロブリン重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び免疫グロブリン軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み、前記ＶＨ及びＶＬがそれぞれ、
（ａ）
ＶＨ−ＣＤＲ１が、配列番号１に示されるアミノ酸配列からなり、
ＶＨ−ＣＤＲ２が、配列番号２に示されるアミノ酸配列からなり、
ＶＨ−ＣＤＲ３が、配列番号３に示されるアミノ酸配列からなる、
ＶＨ相補性決定領域（ＣＤＲ）、及び
（ｂ）
ＶＬ−ＣＤＲ１が、配列番号４に示されるアミノ酸配列からなり、
ＶＬ−ＣＤＲ２が、配列番号５に示されるアミノ酸配列からなり、
ＶＬ−ＣＤＲ３が、配列番号６に示されるアミノ酸配列からなる、
ＶＬ  ＣＤＲ
を含み、前記組成物のｐＨが５．２〜６．２である、前記医薬組成物。
【請求項４０】
前記組成物が前記抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記組成物が前記抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を７５〜１６５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
前記組成物が前記抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記組成物が前記抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１００ｍｇ／ｍｌの濃度で含む、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記チオール含有酸化防止剤が、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される、請求項３９〜４３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記チオール含有酸化防止剤がＧＳＨである、請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記チオール含有酸化防止剤がＧＳＳＧである、請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
前記チオール含有酸化防止剤がＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せである、請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
前記チオール含有酸化防止剤の濃度が０．０２〜４ｍＭである、請求項３９〜４７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
前記チオール含有酸化防止剤の濃度が０．２ｍＭである、請求項３９〜４７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
前記チオール含有酸化防止剤の濃度が０．４ｍＭである、請求項３９〜４７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
前記チオール含有酸化防止剤の濃度が１ｍＭである、請求項３９〜４７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
前記ＧＳＨの濃度が０．４ｍＭであり、前記ＧＳＳＧの濃度が０．２ｍＭである、請求項４７に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
前記チオール含有酸化防止剤がシステインとシスチンとの組合せであり、前記システインの濃度が０．４ｍＭであり、前記シスチンの濃度が０．２ｍＭである、請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項５４】
前記組成物がＡｒｇ．ＨＣｌを５０〜２５０ｍＭの濃度で含む、請求項３９〜５３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
前記組成物がＡｒｇ．ＨＣｌを７５〜１７５ｍＭの濃度で含む、請求項３９〜５３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５６】
前記組成物がＡｒｇ．ＨＣｌを１５０ｍＭの濃度で含む、請求項３９〜５３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５７】
前記組成物がポリソルベート８０（ＰＳ８０）を含む、請求項３９〜５６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
前記組成物がＰＳ８０を０．０１〜０．１％の濃度で含む、請求項５７に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
前記組成物がＰＳ８０を０．０３〜０．０８％の濃度で含む、請求項５７に記載の医薬組成物。
【請求項６０】
前記組成物がＰＳ８０を０．０５％の濃度で含む、請求項５７に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
前記組成物が、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩及びクエン酸塩からなる群から選択される緩衝剤を含む、請求項３９〜６０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６２】
前記組成物がヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩またはクエン酸塩を１０〜３０ｍＭの濃度で含む、請求項６１に記載の医薬組成物。
【請求項６３】
前記組成物がヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩またはクエン酸塩を２０ｍＭの濃度で含む、請求項６１に記載の医薬組成物。
【請求項６４】
前記緩衝剤がヒスチジンである、請求項６１に記載の医薬組成物。
【請求項６５】
ヒスチジンの濃度が１０〜３０ｍＭである、請求項６４に記載の医薬組成物。
【請求項６６】
ヒスチジンの濃度が２０ｍＭである、請求項６４に記載の医薬組成物。
【請求項６７】
前記組成物がスクロースを含む、請求項３９〜６６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６８】
前記組成物がスクロースを０．０１〜３％の濃度で含む、請求項６７に記載の医薬組成物。
【請求項６９】
前記組成物がスクロースを１〜３％の濃度で含む、請求項６７に記載の医薬組成物。
【請求項７０】
前記組成物がスクロースを３％の濃度で含む、請求項６７に記載の医薬組成物。
【請求項７１】
前記組成物のｐＨが５．２〜６．０である、請求項３９〜７０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７２】
前記組成物のｐＨが５．３〜５．７である、請求項３９〜７０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７３】
前記組成物のｐＨが５．５である、請求項３９〜７０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７４】
５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度の前記抗Ａβ抗体または前記そのＡβ結合性断片、
５０〜２００ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、
０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、
１０〜３０ｍＭの濃度のヒスチジン、
０．０１〜０．１％の濃度のＰＳ８０、
０〜３％の濃度のスクロース
を含み、前記組成物のｐＨが５．２〜６．０である、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項７５】
１５０ｍｇ／ｍｌの濃度の前記抗Ａβ抗体または前記そのＡβ結合性断片、
１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、
０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、
２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び
０．０５％の濃度のＰＳ８０
を含み、前記組成物のｐＨが５．５である、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項７６】
１００ｍｇ／ｍｌの濃度の前記抗Ａβ抗体または前記そのＡβ結合性断片、
１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、
０．０２〜２ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、
２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び
０．０５％の濃度のＰＳ８０
を含み、前記組成物のｐＨが５．５である、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項７７】
前記チオール含有酸化防止剤が、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される、請求項７４〜７６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７８】
前記チオール含有酸化防止剤がＧＳＨである、請求項７７に記載の医薬組成物。
【請求項７９】
前記チオール含有酸化防止剤がＧＳＳＧである、請求項７７に記載の医薬組成物。
【請求項８０】
前記チオール含有酸化防止剤がＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せである、請求項７７に記載の医薬組成物。
【請求項８１】
メチオニンをさらに含む、請求項３９〜８０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８２】
メチオニンの濃度が０．０１〜１５０ｍＭである、請求項８１に記載の医薬組成物。
【請求項８３】
メチオニンの濃度が５〜２０ｍＭである、請求項８１に記載の医薬組成物。
【請求項８４】
（ｉ）前記ＶＨが、配列番号７と少なくとも８０％同一である配列からなり、前記ＶＬが、配列番号８と少なくとも８０％同一である配列からなるか、
（ｉｉ）前記ＶＨが、配列番号７と少なくとも９０％同一である配列からなり、前記ＶＬが、配列番号８と少なくとも９０％同一である配列からなるか、または
（ｉｉｉ）前記ＶＨが、配列番号７に示されるアミノ酸配列からなり、前記ＶＬが、配列番号８に示されるアミノ酸配列からなる、
請求項３９〜８３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８５】
前記抗Ａβ抗体が免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を含み、
（ｉ）前記重鎖が、配列番号９と少なくとも８０％同一である配列からなり、前記軽鎖が、配列番号１０と少なくとも８０％同一である配列からなるか、
（ｉｉ）前記重鎖が、配列番号９と少なくとも９０％同一である配列からなり、前記軽鎖が、配列番号１０と少なくとも９０％同一である配列からなるか、または
（ｉｉｉ）前記重鎖が、配列番号９に示されるアミノ酸配列からなり、前記軽鎖が、配列番号１０に示されるアミノ酸配列からなる、
請求項３９〜８４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８６】
中枢神経系におけるＡβの異常蓄積または沈着の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法であって、
請求項３９〜８５のいずれか１項に記載の医薬組成物を前記ヒト対象に投与すること
を含む、前記方法。
【請求項８７】
軽度の認知機能障害の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法であって、
請求項３９〜８５のいずれか１項に記載の医薬組成物を前記ヒト対象に投与すること
を含む、前記方法。
【請求項８８】
アルツハイマー病の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法であって、
請求項３９〜８５のいずれか１項に記載の医薬組成物を前記ヒト対象に投与すること
を含む、前記方法。
【請求項８９】
前記医薬組成物が前記ヒト対象に皮下投与される、請求項８６〜８８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９０】
前記医薬組成物が前記ヒト対象に静脈内投与される、請求項８６〜８８のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１７年８月２２日に出願された米国仮出願第６２／５４８，５８３号の優先権の利益を主張するものであり、参照によりその内容全体を本明細書に援用する。
【０００２】
分野
本願は、総じて、抗ベータアミロイド（Ａβ）抗体を含む医薬組成物及びその用途に関する。
【背景技術】
【０００３】
Ａβは、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の代謝によって生成するペプチドである。いくつかのＡβペプチドアロ形が存在する（例えばＡβ４０及びＡβ４２）。これらの単量体ペプチドは、凝集してより高次の二量体及びオリゴマーとなる変化しやすい傾向を有している。可溶性オリゴマーは線維形成のプロセスを通じて、βプリーツシート構造を有する不溶性沈着物に遷移し得る。これらの沈着物はアミロイド斑とも呼称され、主として線維性アミロイドからなる（Ｈａｍｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．，２２３（２）：３３４−４６（２０１０）、Ｇｒｅｇｏｒｙ  ａｎｄ  Ｈａｌｌｉｄａｙ，Ｎｅｕｒｏｔｏｘ  Ｒｅｓ．，７（１−２）：２９−４１（２００５））。Ａβの可溶性形態及び線維性形態の両方ともが、Ａβの沈着を特徴とする障害、例えばアルツハイマー病（ＡＤ）における疾患プロセスの誘因となっているようである（Ｍｅｙｅｒ−Ｌｕｅｈｍａｎｎ，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２９（４０）：１２６３６−４０（２００９）、Ｈｏｃｋ，Ｄｉａｌｏｇｕｅｓ  Ｃｌｉｎ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，５（１）：２７−３３（２００３）、Ｓｅｌｋｏｅ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  Ｂｉｏｌ．，３（７）．ｐｉｉ：ａ００４４５７（２０１１））。
【０００４】
アミロイド斑を認識する抗Ａβ抗体の血清力価が高いＡＤ患者は、抗Ａβ抗体を有さない患者に比べて認知機能低下及び障害の速度がより遅い。しかも、高力価の抗Ａβ抗体を発達させる患者は、長期追跡後に評価される脳Ａβ斑の数の低減及び認知成績の改善を示す。これらの臨床データは、受動免疫療法の枠組みの中で抗Ａβ抗体で処置されたＡＤ患者が認知機能障害の軽減、より低い脳Ａβ沈着物密度、及び認知力退歩の減速を示す可能性があることを示唆している。
抗Ａβ抗体ＢＩＩＢ０３７は、グリコシル化ヒトＩｇＧ１重鎖及びヒトカッパ軽鎖を含む完全ヒト抗体である。組換え発現したＢＩＩＢ０３７は高い見掛け親和性でヒトＡβの高分子量凝集物、おそらくは線維に結合する。免疫組織化学によればＢＩＩＢ０３７は、ヒトＡＤ脳、及びヒトＡＰＰ発現遺伝子導入マウスに由来する脳組織においてＡβ斑に対する高親和性の結合を示す。ヒトＡβの高分子量凝集物に対するＢＩＩＢ０３７の親和性及び特異性は、免疫沈降、イムノブロッティング及び免疫組織化学によって確認された。Ｔｇ２５７６ＡＤ遺伝子導入マウスにおいてＢＩＩＢ０３７処置は、ＥＬＩＳＡによって評価される脳での測定可能な薬物レベルをもたらす。Ｔｇ２５７６マウスにおけるＢＩＩＢ０３７投与の後にはＢＩＩＢ０３７に対する免疫反応性が脳実質及び血管のアミロイド沈着物に関連して認められ、このことから、ＢＩＩＢ０３７が脳実質に進入してその標的に結合することが示唆された。全身投与された抗Ａβ抗体、例えばＢＩＩＢ０３７は、脳に進入し、Ａβの沈着物に結合し、脳からのそのクリアランスをＦｃ受容体依存的機序によって誘発すると考えられる。抗体によって媒介される脳からのＡβの除去は、Ａβ負荷を減少させ、それによって神経機能障害を防止し、病状の進行を遅くし、ＡＤにおける認知機能低下の速度を低減する、という仮説が立てられる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｈａｍｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．，２２３（２）：３３４−４６（２０１０）
【非特許文献２】Ｇｒｅｇｏｒｙ  ａｎｄ  Ｈａｌｌｉｄａｙ，Ｎｅｕｒｏｔｏｘ  Ｒｅｓ．，７（１−２）：２９−４１（２００５）
【非特許文献３】Ｍｅｙｅｒ−Ｌｕｅｈｍａｎｎ，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２９（４０）：１２６３６−４０（２００９）
【非特許文献４】Ｈｏｃｋ，Ｄｉａｌｏｇｕｅｓ  Ｃｌｉｎ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，５（１）：２７−３３（２００３）
【非特許文献５】Ｓｅｌｋｏｅ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  Ｂｉｏｌ．，３（７）．ｐｉｉ：ａ００４４５７（２０１１）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示は、一部において、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を含有する医薬組成物ならびに、中枢神経系におけるＡβの異常蓄積または沈着、軽度の認知機能障害、及びＡβ関連障害、例えばアルツハイマー病の治療におけるそれらの使用に関する。
【０００７】
一態様において、本開示は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片と、アルギニン塩酸塩（Ａｒｇ．ＨＣｌ）とを含む医薬組成物を特徴とする。
【０００８】
いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、免疫グロブリン重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び免疫グロブリン軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み、ＶＨ及びＶＬはＢＩＩＢ０３７のＣＤＲを含む。ある場合には、ＢＩＩＢ０３７の６つのＣＤＲは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５及び配列番号６に示されるアミノ酸配列を含む、またはそれらからなる。
【０００９】
いくつかの実施形態では、組成物は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。他の実施形態では、組成物は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を７５〜１６５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１００ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。
【００１０】
いくつかの実施形態では、組成物は、Ａｒｇ．ＨＣｌを５０〜２５０ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はＡｒｇ．ＨＣｌを７５〜１７５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はＡｒｇ．ＨＣｌを１５０ｍＭの濃度で含む。
【００１１】
いくつかの実施形態では、組成物はさらにポリソルベート８０（ＰＳ８０）を含む。いくつかの実施形態では、組成物はＰＳ８０を０．０１〜０．１％の濃度で含む。他の実施形態では、組成物はＰＳ８０を０．０３〜０．０８％の濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はＰＳ８０を０．０５％の濃度で含む。
【００１２】
いくつかの実施形態では、組成物はさらに、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩及びクエン酸塩からなる群から選択される緩衝剤を含む。場合によっては緩衝剤はヒスチジンである。場合によっては緩衝剤は酢酸塩である。場合によっては緩衝剤はコハク酸塩である。場合によっては緩衝剤はクエン酸塩である。特定の実施形態では、組成物は、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩またはクエン酸塩を１０〜３０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩またはクエン酸塩を２０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はヒスチジンを１０〜３０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はヒスチジンを２０ｍＭの濃度で含む。
【００１３】
いくつかの実施形態では、組成物はさらにメチオニンを含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜１５０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜１２５ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜１００ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜７５ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜５０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜２０ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１５ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜５０ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜７５ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１００ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１２５ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１５０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを５０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを７５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１００ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１２５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１５０ｍＭの濃度で含む。
【００１４】
いくつかの実施形態では、組成物はさらにスクロースを含む。いくつかの実施形態では、組成物はスクロースを０．０１〜５％の濃度で含む。他の実施形態では、組成物はスクロースを１〜４％の濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はスクロースを３％の濃度で含む。
【００１５】
いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは５．２〜６．２である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。
【００１６】
特定の実施形態では、医薬組成物は、５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、５０〜２００ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、０〜２０ｍＭの濃度のメチオニン、１０〜３０ｍＭの濃度のヒスチジン、０．０１〜０．１％の濃度のＰＳ８０、及び０〜３％の濃度のスクロースを含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。
【００１７】
特定の実施形態では、医薬組成物は、１５０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、１０ｍＭの濃度のメチオニン、２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び０．０５％の濃度のＰＳ８０を含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。
【００１８】
特定の実施形態では、医薬組成物は、１００ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、１０ｍＭの濃度のメチオニン、２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び０．０５％の濃度のＰＳ８０を含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。
【００１９】
いくつかの実施形態では、ＶＨは、配列番号７と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、ＶＬは、配列番号８と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。いくつかの実施形態では、ＶＨは、配列番号７と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、ＶＬは、配列番号８と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。いくつかの実施形態では、ＶＨは、配列番号７の配列を含むかまたはそれからなり、ＶＬは、配列番号８の配列を含むかまたはそれからなる。
【００２０】
いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体は免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を含む。場合によっては、重鎖は、配列番号９と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、軽鎖は、配列番号１０と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。他の例では、重鎖は、配列番号９と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、軽鎖は、配列番号１０と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。さらに他の例では、重鎖は配列番号９の配列を含むかまたはそれからなり、軽鎖は配列番号１０の配列を含むかまたはそれからなる。
【００２１】
別の態様では、本開示は、中枢神経系におけるＡβの異常蓄積または沈着の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法を特徴とする。方法は、本明細書に記載の医薬組成物をヒト対象に投与することを含む。
【００２２】
別の態様では、本開示は、軽度の認知機能障害の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法を特徴とする。方法は、本明細書に記載の医薬組成物をヒト対象に投与することを含む。
【００２３】
別の態様では、本開示は、アルツハイマー病の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法を特徴とする。方法は、本明細書に記載の医薬組成物をヒト対象に投与することを含む。
【００２４】
これらの態様のいくつかの実施形態では、医薬組成物はヒト対象に皮下投与される。これらの態様のいくつかの実施形態では、医薬組成物はヒト対象に静脈内投与される。
【００２５】
別の態様では、本開示は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片と、チオール含有酸化防止剤と、アルギニン塩酸塩（Ａｒｇ．ＨＣｌ）とを含む医薬組成物を提供する。
【００２６】
いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、免疫グロブリン重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び免疫グロブリン軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み、ＶＨ及びＶＬはＢＩＩＢ０３７のＣＤＲを含む。ある場合には、ＢＩＩＢ０３７の６つのＣＤＲは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５及び配列番号６に示されるアミノ酸配列を含む、またはそれらからなる。
【００２７】
いくつかの実施形態では、組成物は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。他の実施形態では、組成物は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を７５〜１６５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１００ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。
【００２８】
いくつかの実施形態では、組成物中のチオール含有酸化防止剤は、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される。場合によっては、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨである。場合によっては、チオール含有酸化防止剤はＧＳＳＧである。場合によっては、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨ及びＧＳＳＧである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は０．０２〜４ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は０．０２〜２ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は０．２ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は０．４ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は１ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は２ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は４ｍＭである。場合によっては、組成物中のチオール含有酸化防止剤は、０．４ｍＭの濃度のＧＳＨ及び０．２ｍＭの濃度のＧＳＳＧである。場合によっては、組成物中のチオール含有酸化防止剤は、４ｍＭの濃度のＧＳＨ及び２ｍＭの濃度のＧＳＳＧである。場合によっては、組成物中のチオール含有酸化防止剤は、２ｍＭの濃度のＧＳＨ及び１ｍＭの濃度のＧＳＳＧである。場合によっては、組成物中のチオール含有酸化防止剤は、０．４ｍＭの濃度のシステイン及び０．２ｍＭの濃度のシスチンである。
【００２９】
いくつかの実施形態では、組成物はＡｒｇ．ＨＣｌを５０〜２５０ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はＡｒｇ．ＨＣｌを７５〜１７５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はＡｒｇ．ＨＣｌを１５０ｍＭの濃度で含む。
【００３０】
いくつかの実施形態では、組成物はさらにポリソルベート８０（ＰＳ８０）を含む。いくつかの実施形態では、組成物はＰＳ８０を０．０１〜０．１％の濃度で含む。他の実施形態では、組成物はＰＳ８０を０．０３〜０．０８％の濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はＰＳ８０を０．０５％の濃度で含む。
【００３１】
いくつかの実施形態では、組成物はさらに、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩及びクエン酸塩からなる群から選択される緩衝剤を含む。場合によっては緩衝剤はヒスチジンである。場合によっては緩衝剤は酢酸塩である。場合によっては緩衝剤はコハク酸塩である。場合によっては緩衝剤はクエン酸塩である。特定の実施形態では、組成物は、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩またはクエン酸塩を１０〜３０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩またはクエン酸塩を２０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はヒスチジンを１０〜３０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はヒスチジンを２０ｍＭの濃度で含む。
【００３２】
いくつかの実施形態では、組成物はさらにスクロースを含む。いくつかの実施形態では、組成物はスクロースを０．０１〜５％の濃度で含む。他の実施形態では、組成物はスクロースを１〜４％の濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はスクロースを３％の濃度で含む。
【００３３】
いくつかの実施形態では、組成物はさらにメチオニンを含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜１５０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜１２５ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜１００ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜７５ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜５０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜２０ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１５ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜５０ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜７５ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１００ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１２５ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１５０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを５０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを７５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１００ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１２５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１５０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは５．２〜６．２である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。
【００３４】
特定の実施形態では、医薬組成物は、５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、５０〜２００ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、１０〜３０ｍＭの濃度のヒスチジン、０．０１〜０．１％の濃度のＰＳ８０、及び０〜３％の濃度のスクロースを含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。ある場合には、チオール含有酸化防止剤は、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＳＧである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せである。
【００３５】
特定の実施形態では、医薬組成物は、１５０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び０．０５％の濃度のＰＳ８０を含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。ある場合には、チオール含有酸化防止剤は、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＳＧである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せである。
【００３６】
特定の実施形態では、医薬組成物は、１００ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び０．０５％の濃度のＰＳ８０を含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。ある場合には、チオール含有酸化防止剤は、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＳＧである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せである。
【００３７】
いくつかの実施形態では、ＶＨは、配列番号７と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、ＶＬは、配列番号８と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。いくつかの実施形態では、ＶＨは、配列番号７と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、ＶＬは、配列番号８と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。いくつかの実施形態では、ＶＨは、配列番号７の配列を含むかまたはそれからなり、ＶＬは、配列番号８の配列を含むかまたはそれからなる。
【００３８】
いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体は免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を含む。場合によっては、重鎖は、配列番号９と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、軽鎖は、配列番号１０と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。他の例では、重鎖は、配列番号９と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、軽鎖は、配列番号１０と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。さらに他の例では、重鎖は配列番号９の配列を含むかまたはそれからなり、軽鎖は配列番号１０の配列を含むかまたはそれからなる。
【００３９】
別の態様では、本開示は、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片と、チオール含有酸化防止剤と、メチオニンと、アルギニン塩酸塩（Ａｒｇ．ＨＣｌ）とを含む医薬組成物を提供する。
【００４０】
いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、免疫グロブリン重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び免疫グロブリン軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み、ＶＨ及びＶＬはＢＩＩＢ０３７のＣＤＲを含む。ある場合には、ＢＩＩＢ０３７の６つのＣＤＲは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５及び配列番号６に示されるアミノ酸配列を含む、またはそれらからなる。
【００４１】
いくつかの実施形態では、組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。他の実施形態では、組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を７５〜１６５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１００ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。
【００４２】
いくつかの実施形態では、組成物中のチオール含有酸化防止剤は、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される。場合によっては、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨである。場合によっては、チオール含有酸化防止剤はＧＳＳＧである。場合によっては、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨ及びＧＳＳＧである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は０．０２〜４ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は０．０２〜２ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は０．２ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は０．４ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は１ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は２ｍＭである。特定の実施形態では、チオール含有酸化防止剤の濃度は４ｍＭである。場合によっては、組成物中のチオール含有酸化防止剤は、０．４ｍＭの濃度のＧＳＨ及び０．２ｍＭの濃度のＧＳＳＧである。場合によっては、組成物中のチオール含有酸化防止剤は、４ｍＭの濃度のＧＳＨ及び２ｍＭの濃度のＧＳＳＧである。場合によっては、組成物中のチオール含有酸化防止剤は、２ｍＭの濃度のＧＳＨ及び１ｍＭの濃度のＧＳＳＧである。場合によっては、組成物中のチオール含有酸化防止剤は、０．４ｍＭの濃度のシステイン及び０．２ｍＭの濃度のシスチンである。
【００４３】
いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜１５０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜１２５ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜１００ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜７５ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜５０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はメチオニンを０．０１〜２０ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１５ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜５０ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜７５ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１００ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１２５ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はメチオニンを５〜１５０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを５０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを７５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１００ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１２５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はメチオニンを１５０ｍＭの濃度で含む。
【００４４】
いくつかの実施形態では、組成物はＡｒｇ．ＨＣｌを５０〜２５０ｍＭの濃度で含む。他の実施形態では、組成物はＡｒｇ．ＨＣｌを７５〜１７５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はＡｒｇ．ＨＣｌを１５０ｍＭの濃度で含む。
【００４５】
いくつかの実施形態では、組成物はさらにポリソルベート８０（ＰＳ８０）を含む。いくつかの実施形態では、組成物はＰＳ８０を０．０１〜０．１％の濃度で含む。他の実施形態では、組成物はＰＳ８０を０．０３〜０．０８％の濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はＰＳ８０を０．０５％の濃度で含む。
【００４６】
いくつかの実施形態では、組成物はさらに、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩及びクエン酸塩からなる群から選択される緩衝剤を含む。場合によっては緩衝剤はヒスチジンである。場合によっては緩衝剤は酢酸塩である。場合によっては緩衝剤はコハク酸塩である。場合によっては緩衝剤はクエン酸塩である。特定の実施形態では、組成物は、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩またはクエン酸塩を１０〜３０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は、ヒスチジン、酢酸塩、コハク酸塩またはクエン酸塩を２０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はヒスチジンを１０〜３０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はヒスチジンを２０ｍＭの濃度で含む。
【００４７】
いくつかの実施形態では、組成物はさらにスクロースを含む。いくつかの実施形態では、組成物はスクロースを０．０１〜５％の濃度で含む。他の実施形態では、組成物はスクロースを１〜４％の濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はスクロースを３％の濃度で含む。
【００４８】
いくつかの実施形態では、組成物のｐＨは５．２〜６．２である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。
【００４９】
特定の実施形態では、医薬組成物は、５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、５〜１５０ｍＭの濃度のメチオニン、５０〜２００ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、１０〜３０ｍＭの濃度のヒスチジン、０．０１〜０．１％の濃度のＰＳ８０、及び０〜３％の濃度のスクロースを含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。ある場合には、チオール含有酸化防止剤は、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＳＧである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せである。
【００５０】
特定の実施形態では、医薬組成物は、１５０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、１０ｍＭの濃度のメチオニン、２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び０．０５％の濃度のＰＳ８０を含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。ある場合には、チオール含有酸化防止剤は、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＳＧである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せである。
【００５１】
特定の実施形態では、医薬組成物は、１５０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、１５０ｍＭの濃度のメチオニン、２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び０．０５％の濃度のＰＳ８０を含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。ある場合には、チオール含有酸化防止剤は、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＳＧである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せである。
【００５２】
特定の実施形態では、医薬組成物は、１００ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、１０ｍＭの濃度のメチオニン、２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び０．０５％の濃度のＰＳ８０を含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。ある場合には、チオール含有酸化防止剤は、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＳＧである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せである。
【００５３】
特定の実施形態では、医薬組成物は、１００ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、１５０ｍＭの濃度のＡｒｇ．ＨＣｌ、０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤、１５０ｍＭの濃度のメチオニン、２０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び０．０５％の濃度のＰＳ８０を含む。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．２である。ある場合には、この組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物のｐＨは５．３〜５．７である。他の実施形態では、組成物のｐＨは５．５である。ある場合には、チオール含有酸化防止剤は、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せ、シスチン、システイン、及びシステインとシスチンとの組合せからなる群から選択される。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＳＧである。ある場合には、チオール含有酸化防止剤はＧＳＨとＧＳＳＧとの組合せである。
【００５４】
いくつかの実施形態では、ＶＨは、配列番号７と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、ＶＬは、配列番号８と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。いくつかの実施形態では、ＶＨは、配列番号７と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、ＶＬは、配列番号８と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。いくつかの実施形態では、ＶＨは、配列番号７の配列を含むかまたはそれからなり、ＶＬは、配列番号８の配列を含むかまたはそれからなる。
【００５５】
いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体は免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖を含む。場合によっては、重鎖は、配列番号９と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、軽鎖は、配列番号１０と少なくとも８０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。他の例では、重鎖は、配列番号９と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなり、軽鎖は、配列番号１０と少なくとも９０％同一である配列を含むかまたはそれからなる。さらに他の例では、重鎖は配列番号９の配列を含むかまたはそれからなり、軽鎖は配列番号１０の配列を含むかまたはそれからなる。
【００５６】
別の態様では、本開示は、中枢神経系におけるＡβの異常蓄積または沈着の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法を特徴とする。方法は、本明細書に記載の医薬組成物をヒト対象に投与することを含む。
【００５７】
別の態様では、本開示は、軽度の認知機能障害の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法を特徴とする。方法は、本明細書に記載の医薬組成物をヒト対象に投与することを含む。
【００５８】
別の態様では、本開示は、アルツハイマー病の治療を、それを必要とするヒト対象において行う方法を特徴とする。方法は、本明細書に記載の医薬組成物をヒト対象に投与することを含む。
【００５９】
これらの態様のいくつかの実施形態では、医薬組成物はヒト対象に皮下投与される。これらの態様のいくつかの実施形態では、医薬組成物はヒト対象に静脈内投与される。
【００６０】
特に定義していない限り、本明細書中で使用する全ての科学技術用語は、本発明が属する分野の当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと類似するまたは等価である方法及び材料を本発明の実施及び試験に使用することはできるが、例示的な方法及び材料を以下に記載する。本明細書中で言及される全ての刊行物、特許出願、特許及び他の参考文献は参照によりそれらの全体が本明細書に援用される。齟齬がある場合には定義を含めて本願が優先されることになる。材料、方法及び実施例は例示のためのものにすぎず、限定する意図はない。
【００６１】
本発明の他の特徴及び利点は以下の詳細な説明及び特許請求の範囲から明らかとなろう。
【図面の簡単な説明】
【００６２】
【図１】４週間にわたって４０℃で保存された示されている製剤の％ＨＭＷを表す棒グラフである。
【図２】６週間にわたって４０℃で保存された示されている製剤の％ＨＭＷを示すグラフである。
【図３】２５℃＋相対湿度６０％で保存したときの様々なｐＨでの％ＨＭＷの傾向を示すグラフである。
【図４】２５℃＋相対湿度６０％で保存したときの様々な賦形剤での％ＨＭＷの傾向を示すグラフである。
【図５】製剤の２０℃での粘度を示す棒グラフである。
【図６】室温で７２時間後のポリソルベート８０製剤の％ＨＭＷ結果を表す棒グラフである。
【図７】ＧＳＨとＧＳＳＧとの併用が２５℃及び相対湿度６０％でのアデュカヌマブ製剤の安定性に及ぼす影響を示すグラフである。
【図８】システインとシスチンとの併用が２５℃及び相対湿度６０％でのアデュカヌマブ製剤の安定性に及ぼす影響を示すグラフである。
【図９】チオール含有賦形剤の還元型が２５℃及び相対湿度６０％での安定性に対してレドックス対と同じ影響を与えることを示すグラフである。
【図１０】ＧＳＨと併用した場合にメチオニンが２５℃及び相対湿度６０％でのアデュカヌマブ製剤の安定性に対して限られた利益をもたらすことを例証するグラフである。
【図１１】種々の抗体濃度及びＧＳＨが２５℃及び相対湿度６０％での安定性に及ぼす影響を示す一対のグラフである。
【図１２】ＧＳＨが低濃度であってもＨＭＷ安定性を改善することができることを示す一対のグラフである。
【図１３】ＨＭＷ低減に４ｍＭのＧＳＨが０．５〜２ｍＭのＧＳＨと同じ影響を与えることを示すグラフである。
【図１４】メチオニンの増加が２５℃（上）及び４０℃（下）でのＨＭＷレベルに及ぼす影響を示す一対のグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００６３】
本願は、抗Ａβ抗体及びそのＡβ結合性断片を含有する医薬組成物、ならびに中枢神経系におけるＡβの異常蓄積または沈着、軽度の認知機能障害、及びＡβ関連障害（例えばアルツハイマー病）の治療におけるそれらの使用を提供する。
【００６４】
アミロイドベータ（ＡβまたはＡベータ）
Ａβペプチドは重要な危険因子であり、アルツハイマー病の発症及び進行において中心的役割を有する。Ａβは正常個体において産生されるが、ある状況下ではこの分子が凝集して疾患進行を招く。
【００６５】
Ａβは、アルツハイマー病患者の脳にみられるアミロイド斑を形成するのに関与する３６〜４３アミノ酸のペプチドを表す。同様の斑は、レビー小体型認知症のいくつかの変化形態、及び封入体筋炎において現れる。Ａβはまた、脳アミロイドアンギオパチーにおいて脳血管を覆う凝集物を形成する。
【００６６】
Ａβペプチドは、酵素ベータセクレターゼ及びガンマセクレターゼによるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の切断によって形成される。Ａβ分子は凝集して、いくつかの形態で存在し得る柔軟な可溶性オリゴマーを形成することができる。いくつかのＡβペプチドアロ形、Ａβ４０及びＡβ４２が存在する。ヒトアミロイドβペプチド（１〜４０）のアミノ酸配列を以下に提供する：
ＤＡＥＦＲＨＤＳＧＹＥＶＨＨＱＫＬＶＦＦＡＥＤＶＧＳＮＫＧＡＩＩＧＬＭＶＧＧＶＶ（配列番号１１）。
ヒトアミロイドβペプチド（１〜４２）のアミノ酸配列を以下に提供する：
ＤＡＥＦＲＨＤＳＧＹＥＶＨＨＱＫＬＶＦＦＡＥＤＶＧＳＮＫＧＡＩＩＧＬＭＶＧＧＶＶＩＡ（配列番号１２）。
Ａβペプチドの可溶性オリゴマー形態は、アルツハイマー病の進展の原因物質であると考えられている。
【００６７】
抗Ａβ抗体
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法において使用される抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、「ＢＩＩＢ０３７」またはアデュカヌマブと呼称される抗体の３つの重鎖可変ドメイン相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片はＢＩＩＢ０３７の３つの軽鎖可変ドメインＣＤＲを含む。さらに他の実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片はＢＩＩＢ０３７の３つの重鎖可変ドメインＣＤＲ及び３つの軽鎖可変ドメインＣＤＲを含む。
【００６８】
ＢＩＩＢ０３７は、グリコシル化ヒトＩｇＧ１重鎖及びヒトカッパ軽鎖を含む完全ヒト抗体である。ＢＩＩＢ０３７は、配列番号９で表される成熟重鎖アミノ酸配列及び配列番号１０で表される成熟軽鎖アミノ酸配列からなる。
【００６９】
ＢＩＩＢ０３７のＶＨ及びＶＬは、米国特許第８，９０６，３６７号に記載の抗体ＮＩ−１０１．１２Ｆ６ＡのＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を有する（表２〜４を参照のこと。参照によりその全体を本明細書に援用する）。具体的には、抗体ＢＩＩＢ０３７は、表１（ＶＨ）及び表２（ＶＬ）に示すＶＨ及びＶＬ可変領域を含む抗原結合ドメイン、表３に示す対応する相補性決定領域（ＣＤＲ）、ならびに表４（Ｈ）及び表５（Ｌ）に示す重軽鎖を有する。
【表１】
2020531520.tif 000003
【表２】
2020531520.tif 000004
【表３−１】
2020531520.tif 000005
【表３−２】
2020531520.tif 000006
【００７０】
ＢＩＩＢ０３７の成熟重鎖のアミノ酸配列を以下の表４に示す。
【表４】
2020531520.tif 000007
【００７１】
ＢＩＩＢ０３７の成熟軽鎖のアミノ酸配列を以下の表５に示す。
【表５】
2020531520.tif 000008
【００７２】
いくつかの態様では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＨ  ＣＤＲ１、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＨ  ＣＤＲ２、及び配列番号３に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＨ  ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号４に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＬ  ＣＤＲ１、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＬ  ＣＤＲ２、及び配列番号６に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【００７３】
特定の態様では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号１〜６に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＣＤＲを含む。
【００７４】
特定の実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＨを含む。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸１〜１６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合するものであり、ＢＩＩＢ０３７のＶＨドメインのアミノ酸配列（配列番号７）と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一であるかまたは、配列番号７に比べて少なくとも１〜５アミノ酸残基であって４０、３０、２０、１５もしくは１０よりも少ない残基が異なった、ＶＨドメインを含む。いくつかの実施形態では、これらの抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸３〜６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合する。
【００７５】
特定の実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸１〜１６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合するものであり、ＢＩＩＢ０３７のＶＬドメインのアミノ酸配列（配列番号８）と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一であるかまたは、配列番号８に比べて少なくとも１〜５アミノ酸残基であって４０、３０、２０、１５もしくは１０よりも少ない残基が異なった、ＶＬドメインを含む。いくつかの実施形態では、これらの抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸３〜６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合する。
【００７６】
いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号７に示されるアミノ酸配列を有するＶＨ、及び配列番号８に示されるアミノ酸配列を有するＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸１〜１６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合するものであり、（ｉ）ＢＩＩＢ０３７のＶＨドメインのアミノ酸配列（配列番号７）と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一であるＶＨドメイン、及び（ｉｉ）ＢＩＩＢ０３７のＶＬドメインのアミノ酸配列（配列番号８）と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一であるＶＬドメインを含む；または、配列番号７及び／または配列番号８に比べて少なくとも１〜５アミノ酸残基であって４０、３０、２０、１５もしくは１０よりも少ない残基が異なっている。いくつかの実施形態では、これらの抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸３〜６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合する。
【００７７】
特定の実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有する重鎖（ＨＣ）を含む。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸１〜１６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合するものであり、配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一であるかまたは、配列番号９に比べて少なくとも１〜５アミノ酸残基であって４０、３０、２０、１５もしくは１０よりも少ない残基が異なった、ＨＣを含む。いくつかの実施形態では、これらの抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸３〜６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合する。
【００７８】
特定の実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖（ＬＣ）を含む。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸１〜１６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合するものであり、配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一であるかまたは、配列番号１０に比べて少なくとも１〜５アミノ酸残基であって４０、３０、２０、１５もしくは１０よりも少ない残基が異なった、ＬＣを含む。いくつかの実施形態では、これらの抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸３〜６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合する。
【００７９】
特定の実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を有するＨＣ、及び配列番号１０に示されるアミノ酸配列を有するＬＣを含む。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸１〜１６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合するものであり、（ｉ）アミノ酸配列（配列番号９）と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一であるかまたは、配列番号９に比べて少なくとも１〜５アミノ酸残基であって４０、３０、２０、１５もしくは１０よりも少ない残基が異なった、ＨＣ、及び（ｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれ以上同一であるかまたは、配列番号１０に比べて少なくとも１〜５アミノ酸残基であって４０、３０、２０、１５もしくは１０よりも少ない残基が異なった、ＬＣを含む。いくつかの実施形態では、これらの抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ヒトＡβのアミノ酸３〜６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合する。
【００８０】
特定の実施形態では、抗Ａβ抗体はＩｇＧ抗体である。具体的な実施形態では、抗Ａβ抗体は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ及びＩｇＥから選択される重鎖定常領域を有する。一実施形態では、抗Ａβ抗体はヒトＩｇＧ１アイソタイプのものである。別の実施形態では、抗Ａβ抗体はヒトＩｇＧ２アイソタイプのものである。さらに別の実施形態では、抗Ａβ抗体はヒトＩｇＧ３アイソタイプのものである。さらに別の実施形態では、抗Ａβ抗体はヒトＩｇＧ４アイソタイプのものである。さらなる実施形態では、抗体は、例えば、ヒトカッパまたはヒトラムダ軽鎖から選択される軽鎖定常領域を有する。特定の実施形態では、抗Ａβ抗体はヒトＩｇＧ１／ヒトカッパ抗体である。ある場合には、重鎖定常領域はヒト型、またはヒト定常領域の改変型である。場合によっては、ヒト定常領域は、少なくとも１個であって２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個以下の置換を含み得る。ある実施形態では、改変型ヒトＦｃ領域は改変型ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である。ある場合には、抗Ａβ抗体の定常領域は、所望の機能的特性（例えば、改変されたエフェクター機能または半減期、低減されたグリコシル化）を付与する１つ以上のアミノ酸残基の突然変異によって改変されている。例えば、Ｆｃ領域（例えばヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域）のＮ結合グリコシル化を防止または低減するためにＮ結合グリコシル化部位が置換されていてもよい。
【００８１】
いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体は完全長（完全）抗体または実質的に完全長である。タンパク質は、少なくとも１つ、好ましくは２つの完全な重鎖、及び少なくとも１つ、好ましくは２つの完全は軽鎖を含み得る。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体はＡβ結合性断片である。ある場合には、Ａβ結合性断片はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｃｂ、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、ｓｃ（Ｆｖ）２、またはダイアボディである。
【００８２】
抗体、例えばＢＩＩＢ０３７、またはそのＡβ結合性断片は、例えば、列挙されるアミノ酸配列をコードする合成遺伝子を作製し発現させること、またはヒト生殖細胞系遺伝子を突然変異させて列挙されるアミノ酸配列をコードする遺伝子を形成させることによって作られ得る。さらに、この抗体及び他の抗Ａβ抗体は、例えば、以下の方法の１つ以上を用いて生産され得る。
【００８３】
抗体を生産する方法
抗Ａβ抗体またはＡβ結合性断片は、細菌細胞または真核細胞で産生され得る。いくつかの抗体、例えばＦａｂ’を細菌細胞、例えば大腸菌細胞で産生させることができる。また、抗体を形質転換細胞株（例えば、ＣＨＯ、２９３Ｅ、ＣＯＳ）などの真核細胞で産生させることもできる。加えて、酵母細胞、例えば、Ｐｉｃｈｉａ（例えば、Ｐｏｗｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．２５１：１２３−３５（２００１）を参照されたい）、ＨａｎｓｅｕｌａまたはＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓにおいて抗体（例えばｓｃＦｖ’）を発現させることができる。関心対象の抗体を産生させるためには、抗体をコードするポリヌクレオチドを構築し、発現ベクターに導入し、その後、好適な宿主細胞において発現させる。本明細書に記載のＡβ抗体のＶＨ及び／またはＶＬ、ＨＣ及び／またはＬＣを含む抗Ａβ抗体をコードするポリヌクレオチドは当業者によって容易に予想されるであろう。標準的な分子生物学の技術を用いて組換え発現ベクターを作製し、宿主細胞にトランスフェクトし、形質転換体を選抜し、宿主細胞を培養し、抗体を回収する。
【００８４】
細菌細胞（例えば大腸菌）において抗Ａβ抗体またはＡβ結合性断片を発現させることになっている場合、発現ベクターは、細菌細胞でのベクターの増殖を可能にする特徴を有していなければならない。加えて、大腸菌、例えば、ＪＭ１０９、ＤＨ５α、ＨＢ１０１、またはＸＬ１−Ｂｌｕｅを宿主として使用する場合、ベクターは、大腸菌における効率的な発現をさせることができるプロモーター、例えば、ｌａｃＺプロモーター（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，３４１：５４４−５４６（１９８９））、ａｒａＢプロモーター（Ｂｅｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４０：１０４１−１０４３（１９８８））またはＴ７プロモーターを有していなければならない。そのようなベクターの例としては、例えば、Ｍ１３系列ベクター、ｐＵＣ系列ベクター、ｐＢＲ３２２、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ、ｐＣＲ−Ｓｃｒｉｐｔ、ｐＧＥＸ−５Ｘ−１（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、「ＱＩＡｅｘｐｒｅｓｓシステム」（ＱＩＡＧＥＮ）、ｐＥＧＦＰ、及びｐＥＴ（この発現ベクターを使用する場合、宿主は、Ｔ７ＲＮＡポリメラーゼを発現させるＢＬ２１であることが好ましい）が挙げられる。発現ベクターは抗体分泌のためのシグナル配列を含有していてもよい。大腸菌のペリプラズム内に産生させるためには、抗体分泌のためのシグナル配列としてｐｅｌＢシグナル配列（Ｌｅｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．，１６９：４３７９（１９８７））を使用してもよい。細菌における発現のためには、塩化カルシウム法または電気穿孔法を用いて発現ベクターを細菌細胞内に導入してもよい。
【００８５】
動物細胞、例えば、ＣＨＯ、ＣＯＳ及びＮＩＨ３Ｔ３細胞において抗体を発現させることになる場合、発現ベクターは、これらの細胞での発現に必要なプロモーター、例えば、ＳＶ４０プロモーター（Ｍｕｌｌｉｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２７７：１０８（１９７９））、ＭＭＬＶ−ＬＴＲプロモーター、ＥＦ１αプロモーター（Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，１８：５３２２（１９９０））、またはＣＭＶプロモーターを含む。免疫グロブリンまたはそのドメインをコードする核酸配列に加えて、組換え発現ベクターはさらなる配列、例えば、宿主細胞におけるベクターの複製を調節する配列（例えば複製起点）及び選択マーカー遺伝子を保有し得る。選択マーカー遺伝子は、ベクターが中に導入されている宿主細胞の選択を容易にする（例えば、米国特許第４，３９９，２１６号、第４，６３４，６６５号及び第５，１７９，０１７号を参照のこと）。例えば、典型的には、選択マーカー遺伝子は、ベクターが導入されている宿主細胞にＧ４１８、ヒグロマイシンまたはメトトレキサートなどの薬物に対する抵抗性を付与する。選択マーカーを有するベクターの例としては、ｐＭＡＭ、ｐＤＲ２、ｐＢＫ−ＲＳＶ、ｐＢＫ−ＣＭＶ、ｐＯＰＲＳＶ、及びｐＯＰ１３が挙げられる。
【００８６】
一実施形態では、抗体は哺乳動物細胞において産生される。抗体を発現させるための例示的な哺乳動物宿主細胞としては、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）（例えばＫａｕｆｍａｎ  ａｎｄ  Ｓｈａｒｐ（１９８２）Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５９：６０１−６２１に記載されているようなＤＨＦＲ選択マーカーと共に使用されるＵｒｌａｕｂ  ａｎｄ  Ｃｈａｓｉｎ（１９８０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：４２１６−４２２０に記載のｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞を含む）、ヒト胚性腎臓２９３細胞（例えば、２９３、２９３Ｅ、２９３Ｔ）、ＣＯＳ細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、リンパ球細胞株、例えばＮＳ０骨髄腫細胞及びＳＰ２細胞、ならびに遺伝子導入動物、例えば遺伝子導入哺乳動物からの細胞が挙げられる。例えば、細胞は乳腺上皮細胞である。
【００８７】
例示的な抗体発現用システムにおいて、抗Ａβ抗体（例えばＢＩＩＢ０３７）の抗体重鎖と抗体軽鎖との両方をコードする組換え発現ベクターをリン酸カルシウム媒介トランスフェクションによってｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞に導入する。組換え発現ベクター内で抗体重軽鎖遺伝子はそれぞれ、遺伝子の高レベルの転写を促すためにエンハンサー／プロモーター調節エレメント（例えば、ＳＶ４０、ＣＭＶ、アデノウイルスなどに由来するもの、例えば、ＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメントまたはＳＶ４０エンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメント）に機能的に繋げられている。組換え発現ベクターはさらにＤＨＦＲ遺伝子も保有するが、これは、ベクターがトランスフェクトされたＣＨＯ細胞を、メトトレキサート選択／増幅を用いて選択することを可能にするものである。選択された形質転換宿主細胞を培養して抗体重軽鎖を発現させ、培養培地から抗体を回収する。
【００８８】
抗体を遺伝子導入動物によって産生させることもできる。例えば、米国特許第５，８４９，９９２号には、遺伝子導入哺乳動物の乳腺において抗体を発現させる方法が記載されている。乳特異的プロモーター、及び関心対象の抗体をコードする核酸、及び分泌のためのシグナル配列を含む、導入遺伝子を構築する。そのような遺伝子導入哺乳動物の雌が産生する乳は、その中に分泌された関心対象の抗体を含む。抗体は乳から精製され得るかまたは、いくつかの用途において直接使用され得る。本明細書に記載の核酸の１つ以上を含む動物も提供される。
【００８９】
本開示の抗体は、宿主細胞の内部または外部（例えば培地）から単離されて実質的に純粋で均質な抗体として精製され得る。抗体の単離及び精製のためには、抗体精製に一般的に用いられる単離及び精製の方法が用いられ得るが、これは何ら特定の方法に限定されない。抗体は、例えば、カラムクロマトグラフィー、濾過、限外濾過、塩析、溶媒沈澱、溶媒抽出、蒸留、免疫沈降、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動、等電点電気泳動、透析及び再結晶を適切に選択し組み合わせることによって単離及び精製され得る。クロマトグラフィーとしては、例えば、親和性クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性クロマトグラフィー、ゲル濾過、逆相クロマトグラフィー及び吸着クロマトグラフィーが挙げられる（Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｃｏｕｒｓｅ  Ｍａｎｕａｌ．Ｅｄ  Ｄａｎｉｅｌ  Ｒ．Ｍａｒｓｈａｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，１９９６）。クロマトグラフィーを、ＨＰＬＣ及びＦＰＬＣなどの液相クロマトグラフィーを用いて行うことができる。親和性クロマトグラフィーに使用するカラムには、プロテインＡカラム及びプロテインＧカラムが含まれる。プロテインＡカラムを用いるカラムの例としては、Ｈｙｐｅｒ  Ｄ、ＰＯＲＯＳ、及びセファロースＦＦ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）が挙げられる。本開示には、これらの精製方法によって高度に精製された抗体も含まれる。
【００９０】
抗Ａβ抗体組成物
本開示はさらに、本明細書に記載の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を含む組成物（例えば医薬組成物）を提供する。例えば、抗Ａβ抗体組成物は、免疫グロブリン重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び免疫グロブリン軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を含み、ＶＨはＢＩＩＢ０３７のＨ−ＣＤＲを含むものであり、ＶＬはＢＩＩＢ０３７のＬ−ＣＤＲを含むものである。場合によっては、重鎖ＣＤＲ（Ｈ−ＣＤＲ）は、配列番号１、配列番号２及び配列番号３に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなり、軽鎖ＣＤＲ（Ｌ−ＣＤＲ）は、配列番号４、配列番号５及び配列番号６に示されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体組成物は、（ｉ）配列番号７に示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％同一であるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号８に示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％同一であるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＶＬを含んだ、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を含む。特定の実施形態では、抗Ａβ抗体組成物は、（ｉ）配列番号９に示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％同一であるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる重鎖、及び（ｉｉ）配列番号１０に示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％同一であるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる軽鎖を含んだ、抗Ａβ抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体は、ヒトＡβのアミノ酸１〜１６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合する。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体は、ヒトＡβのアミノ酸３〜６を含むかまたはそれからなるペプチドに選択的に結合する。
【００９１】
特定の実施形態では、これらの組成物は高濃度の抗Ａβ抗体組成物である。「高濃度の抗Ａβ抗体組成物」とは、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を５０ｍｇ／ｍｌより高く３００ｍｇ／ｍｌより低い濃度で含む組成物を意味する。場合によっては、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。場合によっては、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を５０〜２２５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。他の例では、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を７５〜２２５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。他の例では、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を７５〜１６５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。他の例では、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１００〜２２５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。さらに他の例では、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１２５〜２２５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。他の例では、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１２５〜１７５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。場合によっては、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を２４０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。場合によっては、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を２２５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。場合によっては、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を２００ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。場合によっては、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１７５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。場合によっては、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。他の例では、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１２５ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。ある場合には、抗Ａβ抗体組成物は抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を１００ｍｇ／ｍｌの濃度で含む。
【００９２】
本明細書に記載の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を含む組成物（例えば医薬組成物）は、様々な形態のうちのいずれか１つにあり得る。これらとしては、例えば、液体溶液（例えば、注射液及び点滴液）、分散体または懸濁液が挙げられる。好ましい形態は、意図される投与様式及び治療用途によって決まり得る。特定の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物は無菌の注射液または点滴液の形態である。
【００９３】
無菌注射液は、所要量の本明細書に記載の抗体を成分の１つまたは組合せと混合してその後に無菌濾過することによって調製され得る。一般に、分散体は、基礎分散媒及び必要な他の成分を含有する無菌ビヒクルの中に本明細書に記載の抗体を混ぜ込むことによって調製される。無菌注射液を調製するための無菌粉末の場合、例示的な調製方法は、本明細書に記載の抗体と任意のさらなる所望の成分とが合わさった粉末を、先に無菌濾過されたそれらの溶液から得る、真空乾燥及び凍結乾燥である。例えば、レシチンなどのコーティング剤の使用、分散体の場合での必要な粒径の維持、及び界面活性剤の使用によって、溶液の適度の流動性を維持することができる。
【００９４】
抗Ａβ抗体組成物（例えば医薬組成物）はさらに、１つ以上の賦形剤を含んでいてもよい。
【００９５】
一実施形態では、賦形剤は、賦形剤を含まない医薬組成物の中の抗体の凝集及び／または粘度と比較して、組成物中の抗体の凝集及び／または粘度を減らす／低減する。特定の実施形態では、そのような賦形剤はアルギニンである。一例において、賦形剤はＬ−アルギニン塩酸塩である。アルギニン（例えばＬ−アルギニン塩酸塩）は組成物中に４０〜２６０ｍＭ、５０〜２５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、５０〜１５０ｍＭ、５０〜１２５ｍＭ、５０〜１００ｍＭ、７５〜２５０ｍＭ、７５〜２００ｍＭ、７５〜１５０ｍＭ、または７５〜１００ｍＭの濃度で含まれ得る。特定の実施形態では、アルギニン（例えば、Ａｒｇ．ＨＣｌ）は組成物中に５０〜２５０ｍＭの濃度で存在する。他の実施形態では、アルギニン（例えば、Ａｒｇ．ＨＣｌ）は組成物中に５０〜２００ｍＭの濃度で存在する。場合によっては、アルギニン（例えばアルギニン塩酸塩）は組成物中に８０ｍＭ、１００ｍＭ、１２０ｍＭ、１２５ｍＭ、１３０ｍＭ、１３５ｍＭ、１４０ｍＭ、１４５ｍＭ、１５０ｍＭ、２２０ｍＭまたは２６０ｍＭの濃度で含まれ得る。具体例において、アルギニン（例えばアルギニン塩酸塩）は組成物中に１００ｍＭの濃度で含まれ得る。別の具体例において、アルギニン（例えばアルギニン塩酸塩）は組成物中に１５０ｍＭの濃度で含まれ得る。
【００９６】
アルギニンを含有する溶液は、室温またはより高い温度（例えば４０℃）でのインキュベーション後に視認可能な粒子を発達させることがある。スクロースを添加することによって、視認可能な粒子の形成を軽減または防止することができる。さらに、スクロースは、視認できない粒子の数を減らすことができる。いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体組成物はスクロースを０．０５〜５％、０．０５〜４％、０．０５〜３％、１〜５％、１〜４％、１〜３％、２〜５％、２〜４％、または２〜３％の濃度で含む。特定の実施形態では、抗Ａβ抗体組成物はスクロースを０．５％、１％、１．５％、２％、２．５％、３％、３．５％、４％、４．５％または５％の濃度で含む。ある実施形態では、抗Ａβ抗体組成物はスクロースを３％の濃度で含む。別のある実施形態では、抗Ａβ抗体組成物はスクロースを１％の濃度で含む。
【００９７】
一実施形態では、抗Ａβ抗体組成物はメチオニンを含む。一例において、メチオニンは組成物中に０．５〜１５０ｍＭの濃度で含まれる。別の例において、メチオニンは組成物中に０．５〜２５ｍＭの濃度で含まれる。さらに別の例において、メチオニンは組成物中に５〜１５０ｍＭの濃度で含まれる。一例において、メチオニンは組成物中に５ｍＭ、１０ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭまたは２５ｍＭ、５０ｍＭ、７５ｍＭ、１００ｍＭ、１２５ｍＭまたは１５０ｍＭの濃度で含まれる。ある例において、メチオニンは組成物中に１０ｍＭの濃度で含まれる。別のある例において、メチオニンは組成物中に１５０ｍＭの濃度で含まれる。
【００９８】
抗体製品製造は、いくつかのステップ、例えば、薬剤物質及びバルク製剤化、濾過、出荷、貯留、充填、凍結乾燥、検査、梱包及び貯蔵などを含み得る複雑なプロセスである。これらのステップの間、抗体は多種多様な形態のストレス、例えば、撹拌、温度、光曝露及び酸化に曝され得る。これらの類のストレスは抗体の変性及び凝集を招くことがあるが、これは製品の質を悪化させるものであり、生産バッチの損失を招く可能性さえある。撹拌は、製造プロセスの過程において抗体治療剤が曝される一般的な物理的ストレスの１つである。撹拌は例えば混合、限外濾過／透析濾過、圧送、出荷及び充填の最中に起こる。撹拌によって引き起こされるストレスから抗体組成物を保護するために、組成物はポリソルベートを含み得る。特定の実施形態では、組成物はポリソルベート８０を０．０１〜０．５％、０．０１〜０．１％、０．０１〜０．０９％、０．０１〜０．０８％、０．０１〜０．０７％、０．０１〜０．０６％、０．０１〜０．０５％、０．０１〜０．０４％、または０．０１〜０．０３％の濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はポリソルベート８０を０．０２〜０．０８％の濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はポリソルベート８０を０．０１％、０．０２％、０．０３％、０．０４％、０．０５％、０．０６％、０．０７％、０．０８％、０．０９％または０．１％の濃度で含む。ある実施形態では、組成物はポリソルベート８０を０．０５％の濃度で含む。
【００９９】
いかなる抗体組成物にも、良好な緩衝能を提供する緩衝剤が有用である。特定の実施形態では、抗体組成物はヒスチジンを緩衝剤として含む。特定の実施形態では、組成物はヒスチジンを５〜５０ｍＭ、５〜４０ｍＭ、５〜３５ｍＭ、５〜３０ｍＭ、５〜２５ｍＭ、１０〜５０ｍＭ、１０〜４０ｍＭ、１０〜３０ｍＭ、１０〜２５ｍＭ、１５〜５０ｍＭ、１５〜４０ｍＭ、１５〜３０ｍＭ、または１５〜２５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はヒスチジンを５〜３５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はヒスチジンを１０〜３０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はヒスチジンを５ｍＭ、１０ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭまたは３５ｍＭの濃度で含む。ある実施形態では、組成物はヒスチジンを２０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、抗体組成物は酢酸塩を緩衝剤として含む。特定の実施形態では、組成物は酢酸塩を５〜５０ｍＭ、５〜４０ｍＭ、５〜３５ｍＭ、５〜３０ｍＭ、５〜２５ｍＭ、１０〜５０ｍＭ、１０〜４０ｍＭ、１０〜３０ｍＭ、１０〜２５ｍＭ、１５〜５０ｍＭ、１５〜４０ｍＭ、１５〜３０ｍＭ、または１５〜２５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は酢酸塩を５〜３５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物は酢酸塩を１０〜３０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物は酢酸塩を５ｍＭ、１０ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭまたは３５ｍＭの濃度で含む。ある実施形態では、組成物は酢酸塩を２０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、抗体組成物はコハク酸塩を緩衝剤として含む。特定の実施形態では、組成物はコハク酸塩を５〜５０ｍＭ、５〜４０ｍＭ、５〜３５ｍＭ、５〜３０ｍＭ、５〜２５ｍＭ、１０〜５０ｍＭ、１０〜４０ｍＭ、１０〜３０ｍＭ、１０〜２５ｍＭ、１５〜５０ｍＭ、１５〜４０ｍＭ、１５〜３０ｍＭ、または１５〜２５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はコハク酸塩を５〜３５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はコハク酸塩を１０〜３０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はコハク酸塩を５ｍＭ、１０ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭまたは３５ｍＭの濃度で含む。ある実施形態では、組成物はコハク酸塩を２０ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、抗体組成物はクエン酸塩を緩衝剤として含む。特定の実施形態では、組成物はクエン酸塩を５〜５０ｍＭ、５〜４０ｍＭ、５〜３５ｍＭ、５〜３０ｍＭ、５〜２５ｍＭ、１０〜５０ｍＭ、１０〜４０ｍＭ、１０〜３０ｍＭ、１０〜２５ｍＭ、１５〜５０ｍＭ、１５〜４０ｍＭ、１５〜３０ｍＭ、または１５〜２５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はクエン酸塩を５〜３５ｍＭの濃度で含む。特定の実施形態では、組成物はクエン酸塩を１０〜３０ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はクエン酸塩を５ｍＭ、１０ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭまたは３５ｍＭの濃度で含む。ある実施形態では、組成物はクエン酸塩を２０ｍＭの濃度で含む。
【０１００】
抗体組成物のｐＨは５．０〜６．５であり得る。場合によっては、抗体組成物のｐＨは５．２〜６．２であり得る。場合によっては、抗体組成物のｐＨは、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、または６．５である。ある実施形態では、抗体組成物のｐＨは５．５である。
【０１０１】
場合によっては、Ａβ組成物はアルギニン（例えば、Ａｒｇ．ＨＣｌ）を含む。他の例では、Ａβ組成物はアルギニン（例えば、Ａｒｇ．ＨＣｌ）及びメチオニンを含む。
【０１０２】
特定の実施形態では、Ａβ組成物は、Ｌ−アルギニン塩酸塩（例えば１５０ｍＭ）、メチオニン（例えば１０ｍＭ）、ヒスチジン（例えば２０ｍＭ）及びＰＳ８０（例えば０．０５％）を含み、ｐＨが５．２〜６．２である。いくつかの実施形態では、Ａβ組成物は、Ｌ−アルギニン塩酸塩（例えば１５０ｍＭ）、メチオニン（例えば、１０ｍＭ、１５０ｍＭ）、ヒスチジン（例えば２０ｍＭ）及びＰＳ８０（例えば０．０５％）を含み、ｐＨが５．５である。特定の実施形態では、Ａβ組成物は、Ｌ−アルギニン塩酸塩（例えば１５０ｍＭ）、メチオニン（例えば、１０ｍＭ、１５０ｍＭ）、ヒスチジン（例えば２０ｍＭ）、ＰＳ８０（例えば０．０５％）及びスクロース（３％以下）を含み、ｐＨが５．２〜６．２である。いくつかの実施形態では、Ａβ組成物は、Ｌ−アルギニン塩酸塩、メチオニン、ヒスチジン、ＰＳ８０及びスクロースを含み、ｐＨが５．５である。これらの実施形態の全てにおいて、抗Ａβ抗体は１００〜１６５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一例において、抗Ａβ抗体は１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一例において、抗Ａβ抗体は１００ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【０１０３】
ある場合には、抗Ａβ組成物は、チオール含有酸化防止剤（例えば、還元型グルタチオン（ＧＳＨ）、酸化型グルタチオン（ＧＳＳＧ）、ＧＳＨ＋ＧＳＳＧ、システイン、シスチン、システイン＋シスチン）を０．０２〜４ｍＭ（例えば、０．０２、０．０３、０．０５、０．０６、０．０８、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、または４．０ｍＭ）の濃度で含む。そのようなチオール含有酸化防止剤は、不都合な、または誤架橋したジスルフィド結合を切断することができ、好都合な、または適切に架橋したジスルフィド結合の形成を促進することができる。これは、抗体またはその断片の本来の確証の安定化をもたらすであろうし、凝集速度を落とさせるであろう。これらの分子の酸化防止剤特性は、凝集を招く酸化プロセスを減速させ得る。ある場合には、組成物はＧＳＨを０．４ｍＭの濃度で含む。ある場合には、組成物はＧＳＳＧを０．２ｍＭの濃度で含む。ある場合には、組成物は０．４ｍＭの濃度のＧＳＨ及び０．２ｍＭの濃度のＧＳＳＧを含む。ある場合には、組成物は４ｍＭの濃度のＧＳＨ及び２ｍＭの濃度のＧＳＳＧを含む。ある場合には、組成物は２ｍＭの濃度のＧＳＨ及び１ｍＭの濃度のＧＳＳＧを含む。ある場合には、組成物はシステインを０．４ｍＭの濃度で含む。ある場合には、組成物はシスチンを０．２ｍＭの濃度で含む。ある場合には、組成物は０．４ｍＭの濃度のシステイン及び０．２ｍＭの濃度のシスチンを含む。
【０１０４】
特定の実施形態では、Ａβ組成物は、アルギニン（例えば、Ａｒｇ．ＨＣｌ）、チオール含有酸化防止剤及びメチオニンを含む。
【０１０５】
特定の実施形態では、Ａβ組成物は、Ｌ−アルギニン塩酸塩（例えば１５０ｍＭ）、メチオニン（例えば１０ｍＭ）、ヒスチジン（例えば２０ｍＭ）、チオール含有酸化防止剤、例えば、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧ、システイン、シスチン、またはシステインとシスチン（例えば、０．０２〜４ｍＭ）、及びＰＳ８０（例えば０．０５％）を含み、ｐＨが５．２〜６．２である。いくつかの実施形態では、Ａβ組成物は、Ｌ−アルギニン塩酸塩（例えば１５０ｍＭ）、メチオニン（例えば、１０ｍＭ、１５０ｍＭ）、ヒスチジン（例えば２０ｍＭ）、チオール含有酸化防止剤、例えば、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧ、システイン、シスチン、またはシステインとシスチン（例えば、０．０２〜４ｍＭ）、及びＰＳ８０（例えば０．０５％）を含み、ｐＨが５．５である。特定の実施形態では、Ａβ組成物は、Ｌ−アルギニン塩酸塩（例えば１５０ｍＭ）、メチオニン（例えば、１０ｍＭ、１５０ｍＭ）、ヒスチジン（例えば２０ｍＭ）、ＰＳ８０（例えば０．０５％）、チオール含有酸化防止剤、例えば、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧ、システイン、シスチン、またはシステインとシスチン（例えば、０．０２〜４ｍＭ）、及びスクロース（３％以下）を含み、ｐＨが５．２〜６．２である。いくつかの実施形態では、Ａβ組成物は、Ｌ−アルギニン塩酸塩、メチオニン、ヒスチジン、ＰＳ８０、チオール含有酸化防止剤、例えば、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨとＧＳＳＧ、システイン、シスチン、またはシステインとシスチン、及びスクロースを含み、ｐＨが５．５である。これらの実施形態の全てにおいて、抗Ａβ抗体は１００〜１６５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一例において、抗Ａβ抗体は１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一例において、抗Ａβ抗体は１００ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【０１０６】
特定の実施形態では、組成物（例えば医薬組成物）は、５０〜２５０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片、５０〜２００ｍＭの濃度のアルギニン（例えば、Ｌ−アルギニン塩酸塩）、１〜１５０ｍＭ（例えば、１〜２０ｍＭ）の濃度のメチオニン、０．０１〜０．１％の濃度のポリソルベート８０、１０〜３０ｍＭの濃度のヒスチジン、及び０〜３％の濃度のスクロースを含む。ある場合には、組成物のｐＨが５．２〜６．２である。他の例では、組成物のｐＨは５．２〜６．０である。特定の実施形態では、組成物の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ＢＩＩＢ０３７のＣＤＲ（例えば、配列番号１、２、３、４、５及び６）を含むＶＨ及びＶＬを含む。特定の実施形態では、組成物の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号７及び８をそれぞれ含むＶＨ及びＶＬを含む。いくつかの実施形態では、組成物の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号９及び１０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖を含む。一実施形態では、組成物はｐＨが５．５であり、１５０ｍｇ／ｍｌの濃度のＢＩＩＢ０３７またはそのＢＩＩＢ０３７結合性断片、１５０ｍＭの濃度のＬ−アルギニン塩酸塩、１０ｍＭまたは１５０ｍＭの濃度のメチオニン、０．０５％の濃度のポリソルベート８０、及び２０ｍＭの濃度のヒスチジン（１６．２ｍＭのＬ−ヒスチジンＨＣｌ一水和物、３．８ｍＭのＬ−ヒスチジン遊離塩基）を含む。特定の実施形態では、組成物はさらにチオール含有酸化防止剤（例えば、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨ＋ＧＳＳＧ、システイン、シスチン、システイン＋シスチン）を０．０２〜４ｍＭの濃度で含む。いくつかの実施形態では、組成物はさらにスクロースを０．０１〜３％の濃度で含む。特定の実施形態では、組成物の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、ＢＩＩＢ０３７のＣＤＲ（例えば、配列番号１、２、３、４、５及び６）を含むＶＨ及びＶＬを含む。特定の実施形態では、組成物の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号７及び８をそれぞれ含むＶＨ及びＶＬを含む。いくつかの実施形態では、組成物の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片は、配列番号９及び１０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖を含む。
【０１０７】
一実施形態では、組成物はｐＨが５．５であり、１５０ｍｇ／ｍｌの濃度のＢＩＩＢ０３７またはそのＢＩＩＢ０３７結合性断片、１５０ｍＭの濃度のＬ−アルギニン塩酸塩、０．０２〜４ｍＭの濃度のチオール含有酸化防止剤（例えば、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＧＳＨ＋ＧＳＳＧ、システイン、シスチン、システイン＋シスチン）、０．０５％の濃度のポリソルベート８０、及び２０ｍＭの濃度のヒスチジンを含む。一実施形態では、チオール含有酸化防止剤は０．４ｍＭの濃度のＧＳＨである。一実施形態では、チオール含有酸化防止剤は０．４ｍＭの濃度のＧＳＨ及び０．２ｍＭの濃度のＧＳＳＧである。一実施形態では、チオール含有酸化防止剤は４ｍＭの濃度のＧＳＨ及び２ｍＭの濃度のＧＳＳＧである。一実施形態では、チオール含有酸化防止剤は２ｍＭの濃度のＧＳＨ及び１ｍＭの濃度のＧＳＳＧである。別の実施形態では、チオール含有酸化防止剤は０．４ｍＭの濃度のシステインである。別の実施形態では、チオール含有酸化防止剤は０．４ｍＭの濃度のシステイン及び０．２ｍＭの濃度のシスチンである。
【０１０８】
治療方法
ＢＩＩＢ０３７は、斑を含めたＡβの凝集形態を認識する。試験管内での特性評価試験では、Ａβ凝集物中に存在する配座エピトープを抗体ＢＩＩＢ０３７が認識することが立証されたが、これの蓄積がアルツハイマー病（ＡＤ）の進展及び進行の根底にあると考えられている。生体内での薬理試験は、類似する特性を有する抗体（ｃｈ１２Ｆ６Ａ）のマウスＩｇＧ２ａキメラ型が、ＡＤのマウスモデルである老齢Ｔｇ２５７６マウスの脳のアミロイド斑負荷を有意に低減することを示唆している。特定の抗Ａβ抗体について報告されているように、実質アミロイドの低減に血管アミロイドの変化は付随しなかった。
【０１０９】
本明細書において開示される組成物は、中枢神経系におけるＡβの異常蓄積または沈着の治療を必要とするヒト対象の当該治療をするのに役立つ。本明細書において開示される組成物は、軽度の認知機能障害の治療を必要とするヒト対象における当該治療をする上でも役に立つ。本明細書中で使用する場合、「治療する」、「治療すること」または「治療」という用語は概して所望の薬理及び／または生理作用を得ることを意味する。
【０１１０】
特定の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、ＡＤの治療を必要とするヒト対象における当該治療をするのに役立つ。他の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、ＡＤの予防を必要とするヒト対象における当該予防をするのに役立つ。
【０１１１】
本明細書において開示される組成物は、（ａ）ＡＤに罹患しやすい可能性があるが未だそれを有すると診断されたことがない対象にＡＤが起こるのを防止すること、（ｂ）ＡＤを阻止すること、例えばその進展を阻むこと、（ｃ）ＡＤを軽減すること、例えばＡＤの消退をもたらすこと、または（ｄ）治療を受けない場合の予測生存期間に比べて生存期間を延長することのために使用され得る。
【０１１２】
それを必要とするヒト対象に治療的有効量または用量の抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を投与する。治療的有効量は、ＡＤに関連する症候または症状を改善するに足る抗体の量を指す。抗体の治療有効性及び毒性は標準的な薬学的手順によって決定することができる。理想的には、アルツハイマー病の場合に正常な行動及び／または認知特性を回復させるかまたは患者のＡＤの進行を少なくとも遅くするもしくは防止するに足る量で、抗体を使用する。
【０１１３】
いくつかの実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を含む組成物をヒト対象に静脈内投与する。特定の実施形態では、抗Ａβ抗体またはそのＡβ結合性断片を含む組成物をヒト対象に皮下投与する。
【０１１４】
以下は本発明の実施に関する実施例である。それらは決して本発明の範囲を限定するとみなされるべきでない。
【実施例】
【０１１５】
実施例１：最適な製剤化のためにスクリーニングされたｐＨ及び緩衝剤
以下の製剤を調製及びスクリーニングして最適な緩衝剤及びｐＨを決定した。
【表６】
2020531520.tif 000009
【０１１６】
製剤を４０℃＋相対湿度（ＲＨ）７５％で４週間保存した（図１）。
結論：
１）ヒスチジン緩衝剤は、酢酸塩、コハク酸塩及びクエン酸塩緩衝剤と比較して高分子量種百分率（％ＨＭＷ）の最も小さな変化を示した。
２）傾向は５．５〜６．５のｐＨ範囲にわたって一貫していた。
【０１１７】
実施例２：ＨＭＷを制御するのに最適な賦形剤としてのアルギニン
以下の製剤を調製して、最適な安定化賦形剤（複数可）を決定した。ほとんどのものは、Ｌ−アルギニンＨＣｌを単独で、あるいは別の賦形剤と組み合わせて含有していた。２つの製剤はアルギニンを含有せず糖（スクロースまたはトレハロース）を含有するのみであった。
【表７】
2020531520.tif 000010
【０１１８】
製剤を６週間にわたって４０℃＋７５％ＲＨで保存し％ＨＭＷを試験した（図２）。
結論：
１）アルギニンを含有する製剤（実線）はアルギニンなしの製剤（破線）に比べて成績がより良好であった。
２）アルギニン＋メチオニンの組合せ（グラフ中、最下の２本の実線）は、アルギニン単独、及びアルギニンと他の賦形剤との組合せに比べて成績がより良好であった。
３）５．５及び６．０の両方のｐＨで調製した製剤の成績は常に、ｐＨ５．５のときの方が良好であった。
【０１１９】
実施例３：ｐＨ及びタンパク質濃度に対する製剤の堅牢性
主幹製剤をおおよその基準とした様々な製剤（表８）を調製すること、及び様々な質の属性についてスクリーニングすることによって、さらなる製剤最適化を実施した。
【表８】
2020531520.tif 000011
【０１２０】
図３は、２５℃＋相対湿度６０％で保存したときの様々なｐＨでの％ＨＭＷの傾向を示す。経時的な％ＨＭＷの増加速度はこのｐＨ範囲にわたって一貫している。
【０１２１】
図４は、２５℃＋相対湿度６０％で保存したときの様々な賦形剤での％ＨＭＷの傾向を示す。安定化賦形剤が、１５０ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ＋１０ｍＭのメチオニン、１００ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ＋１０ｍＭのメチオニン、メチオニンなしで１５０ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ、または１００ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ＋３％のスクロースのいずれであろうと、％ＨＭＷの増加速度は一貫している。
【０１２２】
実施例４：アルギニンは製剤の粘度を低下させる
各製剤の粘度を室温（２０℃）で測定した。タンパク質濃度は粘度に大きな影響を与えたが、製剤化方法における他の変更は影響を及ぼさなかった。５０ｃＰ未満の粘度は製造プロセス及び投与経路選択肢のために最適である。アルギニンに基づく製剤は高タンパク質濃度（約２２０ｍｇ／ｍＬ）において一貫して低い粘度（約２０ｃＰ）を示す（図５）。
【０１２３】
実施例５：ポリソルベート８０の濃度に対する製剤の堅牢性
製剤中の界面活性剤（ポリソルベート８０）の最適レベルを評価するために以下の製剤を調製した。
【表９】
2020531520.tif 000012
【０１２４】
物理的ストレス中に製品安定性を維持するのに必要とされる界面活性剤の適切なレベルを決定するために撹拌試験を実施した。表９の製剤を３ｍＬのガラス製バイアル及び１ｍＬの針付きガラス製シリンジの中に分配し、その後、６５０ｒｐｍで７２時間室温で撹拌した。非撹拌対照を同じ時間及び温度でガラス製バイアル内に保存した。
【０１２５】
％ＨＭＷ結果は、撹拌された製剤の全てにわたって一貫していた（図６）。非撹拌対照バイアルは、％ポリソルベート８０が０．０５％から０．００％に低下するにつれてＨＭＷの漸増を示す。どの結果も方法の可変性（ノイズ）（±０．２％）の範囲内であり、真の差異ではない可能性がある。安定性は％ポリソルベート８０の広い範囲にわたって同程度である。
【０１２６】
実施例６：チオール基含有賦形剤はアデュカヌマブ製剤の凝集安定性を改善する
チオール基含有賦形剤をアデュカヌマブ製剤に添加することで、保存中の高分子量種の発達によって判定される凝集が軽減される。
【０１２７】
対照アデュカヌマブ製剤は、１６５ｍｇ／ｍＬのアデュカヌマブ、２０ｍＭのヒスチジン、１５０ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ、１０ｍＭのメチオニン、０．０５％のポリソルベート８０を含み、ｐＨが５．５である。対照製剤に、チオール基含有賦形剤であるＧＳＨ及びＧＳＳＧを混入した。製剤を２５℃で相対湿度６０％で保存した。図７に示すように、ＧＳＨ及びＧＳＳＧの添加は保存中のＨＭＷ種の発達を軽減する。
【０１２８】
同じ対照アデュカヌマブ製剤に、システイン及びシスチンを混入した。これらの製剤も２５℃で相対湿度６０％で保存した。ＧＳＨ及びＧＳＧＧの場合と同様に、システイン及びシスチンの添加は保存中のＨＭＷ種の発達を抑制する（図８）。
【０１２９】
実施例７：チオール基含有賦形剤の還元型はレドックス対と同様にＨＭＷの制御に効果的である
チオール基含有賦形剤の還元型単独の添加はレドックス対の添加と同じ影響を及ぼす。
【０１３０】
対照アデュカヌマブ製剤は、１６５ｍｇ／ｍＬのアデュカヌマブ、２０ｍＭのヒスチジン、１５０ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ、１０ｍＭのメチオニン、０．０５％のポリソルベート８０を含有し、ｐＨが５．５である。この製剤に、ＧＳＨ＋ＧＳＳＧ、ＧＳＨ単独、またはＧＳＳＧ単独を混入した。製剤を２５℃で相対湿度６０％で保存した。図９に示すように、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、及びＧＳＨ＋ＧＳＳＧの添加はどれもＨＭＷ種の形成を軽減した。
【０１３１】
実施例８：ＨＭＷの制御においてチオール含有賦形剤はメチオニンよりも優れている
メチオニンの添加は、ＧＳＨ単独でみられる安定性を向上させない。
【０１３２】
対照アデュカヌマブ製剤は、１６５ｍｇ／ｍＬのアデュカヌマブ、２０ｍＭのヒスチジン、１５０ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌを含み、ｐＨが５．５である。ＧＳＨ、またはＧＳＨ＋メチオニンを対照製剤に添加した。これらの製剤を２５℃で相対湿度６０％で保存した。メチオニンの添加は、ＧＳＨ単独でみられるＨＭＷ種の低減に対して付加的利益を何らもたらさなかった（図１０）。
【０１３３】
実施例９：タンパク質及びＧＳＨの複数の濃度でのチオール含有賦形剤製剤の堅牢性
ＧＳＨの添加によるＨＭＷ種の低減は、タンパク質の複数の濃度及びＧＳＨの複数の濃度において認められた。
【０１３４】
ＧＳＨの様々な濃度で、アデュカヌマブ（１６５または２００ｍｇ／ｍＬのアデュカヌマブ、２０ｍＭのヒスチジン、１５０ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ、１０ｍＭのメチオニン、０．０５％のポリソルベート８０、ｐＨ５．５）を２５℃で相対湿度６０％で保存した。図１１に示すように、２００ｍｇ／ｍｌ以下のタンパク質濃度においてＧＳＨは０．２〜１．０ｍＭの濃度でＨＭＷ種形成を抑制する。
【０１３５】
実施例１０：チオール含有賦形剤はＨＭＷを非常に低い濃度に制御するのに効果的である
わずか０．０２ｍＭのチオール含有賦形剤の濃度で、様々な濃度のアデュカヌマブの安定性が改善された。
【０１３６】
ＧＳＨの様々な濃度で、アデュカヌマブ（１６５または２２５ｍｇ／ｍＬのアデュカヌマブ、２０ｍＭのヒスチジン、１５０ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ、１０ｍＭのメチオニン、０．０５％のポリソルベート８０、ｐＨ５．５）を２５℃で相対湿度６０％で保存した。図１２に示すように、２２５ｍｇ／ｍｌ以下のアデュカヌマブを含有する製剤の中のＧＳＨはわずか０．０２ｍＭの濃度でＨＭＷ種形成を抑制する。
【０１３７】
実施例１１：チオール含有賦形剤の増加がＨＭＷに及ぼす影響
この実験は、ＧＳＨの濃度の増加がＨＭＷ低減に及ぼす影響を評価するために実施された。
【０１３８】
試験した製剤は全て、２１０ｍｇ／ｍＬのアデュカヌマブ、２０ｍＭのヒスチジン、１５０ｍＭのアルギニン、１０ｍＭのメチオニン、及び０．０５％のポリソルベート８０を含有し、ＧＳＨ濃度のみが異なっていた。試験したＧＳＨ濃度は０ｍＭ、０．５ｍＭ、１ｍＭ、２ｍＭ及び４ｍＭであった。試料を２５℃で相対湿度６０％で最長４．５ヶ月間保存した。
【０１３９】
データは、ＨＭＷ低減に４ｍＭのＧＳＨが０．５〜２ｍＭのＧＳＨと同じ影響を与えることを示した（図１３参照）。
【０１４０】
実施例１２：メチオニン濃度の増加がＨＭＷに及ぼす影響
この実験は、メチオニンの濃度の増加がＨＭＷ低減に及ぼす影響を評価するために実施された。
【０１４１】
試験した製剤は全て、１６５ｍｇ／ｍＬのアデュカヌマブ、２０ｍＭのヒスチジン、１５０ｍＭのアルギニン、及び０．０５％のポリソルベート８０を含有し、図１４に示すとおり、メチオニンまたはＧＳＨの濃度のみが異なっていた。２５℃で相対湿度６０％（上）、及び４０℃で相対湿度７５％（下）で試料を最長３．５ヶ月間保存した。
【０１４２】
この実験は、メチオニン濃度を１５０ｍＭまで増加させることが１０ｍＭのメチオニンと比較してＨＭＷの低減に役立つことを示した。
【０１４３】
実施例１３：カニクイザルへの静脈内及び皮下注射によって投与される場合のＢＩＩＢ０３７の４週間の忍容性及び毒物動態の試験
この試験の目的は、ＢＩＩＢ０３７（１５０ｍｇ／ｍＬの強さとし、ヒスチジン緩衝剤［１６．２ｍＭのＬ−ヒスチジン一水和物、３．８ｍＭのＬ−ヒスチジン遊離塩基］を２０ｍＭとし、Ｌ−アルギニン塩酸塩（ＨＣｌ）を１５０ｍＭとし、メチオニンを１０ｍＭとし、ポリソルベート８０を０．０５％とし、ｐＨを５．５とする）を４週間にわたって週に１回、静脈内（ＩＶ）または皮下（ＳＣ）注射によって群１つあたり３頭のカニクイザルに与える場合のその忍容性を決定することであった。加えて、試験物品の毒物動態特性を決定した。
【０１４４】
４週間にわたる週に１回の３００ｍｇ／ｋｇ／用量のＢＩＩＢ０３７のＩＶ及びＳＣ投与（２２日目の時間０から時間ｔまでの濃度−時間曲線下面積［ＡＵＣ０−ｔ］はＩＶ及びＳＣについてそれぞれ３２４，０００μｇ・ｈ／ｍＬ及び２４３，０００μｇ・ｈ／ｍＬ）はどちらも、臨床所見または、体重もしくは食餌摂取への悪影響を何らもたらさなかった。１頭のＳＣ注射動物に限っては第３及び第４週目の投与後にＳＣ注射部位の所見がみられ、それは、手技に関係する可能性がある軽度の巣状の好中球性または単核細胞性浸潤及び出血（４回目の注射部位にのみ関連する）を伴った無害でごくわずかな紅斑及び／または浮腫からなっていた。ＳＤ１及びＳＤ２２のＡＵＣτについては生物学的利用能の絶対％が５６．７〜７５．１％の範囲であり、アデュカヌマブＳＣ投与後の良好な吸収動態を示唆していた。平均ＴＫパラメータをまとめたものを表１０に示す。
【表１０】
2020531520.tif 000013
【０１４５】
他の実施形態
本発明をその詳細な説明と併せて記載してきたが、上記記載は、別記の請求項の範囲によって画定されるものである本発明を例示するがその範囲を限定しないことを意図している。他の態様、利点及び改変形態は以下の請求項の範囲内に含まれている。
【図１】
2020531520.tif 000014
【図２】
2020531520.tif 000015
【図３】
2020531520.tif 000016
【図４】
2020531520.tif 000017
【図５】
2020531520.tif 000018
【図６】
2020531520.tif 000019
【図７】
2020531520.tif 000020
【図８】
2020531520.tif 000021
【図９】
2020531520.tif 000022
【図１０】
2020531520.tif 000023
【図１１】
2020531520.tif 000024
【図１２】
2020531520.tif 000025
【図１３】
2020531520.tif 000026
【図１４】
2020531520.tif 000027
【配列表】
2020531520000001.app
【国際調査報告】
2020531520.tif 000028
2020531520.tif 000029
2020531520.tif 000030
2020531520.tif 000031