(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）の化合物および療法、例えば、マイコバクテリア感染症の治療または結核などのマイコバクテリウムにより生じる疾患の治療におけるそれらの使用に関する。2020531575.tif 000040
2020531575.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：
【化１】
2020531575.tif 000038
［式中、
Ｒ１は、ハロゲン；シアノ；Ｃ１−６直鎖アルキル；Ｃ３−４分岐アルキル；Ｃ１−６直鎖アルコキシ；Ｃ３−４分岐アルコキシ；１以上のフルオロにより置換されたメチル；１以上のフルオロにより置換されたエチル；１以上のフルオロにより置換されたメトキシ；または１以上のフルオロにより置換されたエトキシである］。
【請求項２】
Ｒ１が、フルオロ、クロロもしくはブロモ；シアノ；Ｃ１−６直鎖アルキル；Ｃ３−４分岐アルキル；Ｃ１−６直鎖アルコキシ；Ｃ３−４分岐アルコキシ；１以上のフルオロにより置換されたメチル；１以上のフルオロにより置換されたエチル；１以上のフルオロにより置換されたメトキシ；または１以上のフルオロにより置換されたエトキシである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
Ｒ１が、フルオロ、クロロもしくはブロモ；シアノ；Ｃ１−６直鎖アルキル；Ｃ３−４分岐アルキル；Ｃ１−６直鎖アルコキシ；Ｃ３−４分岐アルコキシ；モノ、ジもしくはトリフルオロメチル；モノ、ジもしくはトリフルオロメトキシ；２−フルオロエチル；２，２−ジフルオロエチル；２，２，２−トリフルオロエチル；２−フルオロエトキシ、２，２−ジフルオロエトキシ；または２，２，２−トリフルオロエトキシである、請求項１または２に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項４】
Ｒ１が、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、Ｃ１−６直鎖アルキル、Ｃ３−４分岐アルキル、Ｃ１−６直鎖アルコキシ、Ｃ３−４分岐アルコキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、２，２，２−トリフルオロエチルまたは２，２，２−トリフルオロエトキシである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項５】
Ｒ１が、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、Ｃ１−６直鎖アルキル、Ｃ３−４分岐アルキル、Ｃ１−６直鎖アルコキシ、Ｃ３−４分岐アルコキシ、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチルまたは２，２，２−トリフルオロエトキシである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
Ｒ１が、フルオロ、ブロモ、シアノ、Ｃ１−４直鎖アルキル、Ｃ１−６直鎖アルコキシ、Ｃ４分岐アルコキシ、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチルまたは２，２，２−トリフルオロエトキシである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項７】
Ｒ１が、フルオロ、ブロモ、シアノ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエトキシ、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−ブトキシまたはヘキシルオキシである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項８】
４，４，４−トリフルオロ−１−［３−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル］ブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−プロポキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−イソブトキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−ヘキシルオキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
１−（３−ブロモ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オン；
１−（３−エトキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−メトキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−（トリフルオロメチル）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−メチル−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
１−（３−エチル−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オン；
８−（４，４，４−トリフルオロブタノイル）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−３−カルボニトリル；および
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−フルオロ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン
から選択される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項９】
化合物が、以下の構造：
【化２】
2020531575.tif 000039
を有する４，４，４−トリフルオロ−１−（３−（トリフルオロメチル）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オンである、請求項８に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１０】
治療での使用のための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１１】
マイコバクテリア感染症の治療における使用のための、またはマイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療における使用のための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１２】
マイコバクテリア感染症が結核菌(Mycobacterium tuberculosis)感染症である、請求項１１に記載の使用のための化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１３】
結核の治療における使用のための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１４】
それを必要とする哺乳動物におけるマイコバクテリア感染症の治療のための方法であって、治療上有効な量の請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記哺乳動物に投与することを含んでなる、方法。
【請求項１５】
それを必要とする哺乳動物におけるマイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療のための方法であって、治療上有効な量の請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記哺乳動物に投与することを含んでなる、方法。
【請求項１６】
マイコバクテリア感染症またはマイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療における使用のための薬剤の製造における、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項１７】
（ａ）請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤と
を含んでなる医薬組成物。
【請求項１８】
（ａ）請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、（ｂ）さらなる抗マイコバクテリア剤との組合せ。
【請求項１９】
少なくとも１つの他の抗マイコバクテリア剤が抗結核剤である、請求項１８に記載の組合せ。
【請求項２０】
抗結核剤が、イソニアジド、リファンピン、ピラジナミド、エタンブトール、モキシフロキサシン、リファペンチン、クロファジミン、エチオナミド、プロチオナミド、イソキシル、チアセタゾン、リファブチン、ジアリルキノリン、例えば、ベダキリン（ＴＭＣ２０７）もしくはＴＢＡＪ−５８７、ニトロイミダゾ−オキサジンＰＡ−８２４、デラマニド（ＯＰＣ−６７６８３）、オキサゾリジノン、例えば、リネゾリド、テジゾリド、ラデゾリド、ステゾリド（ＰＮＵ−１００４８０）、ポジゾリド（ＡＺＤ−５８４７）もしくはＴＢＩ−２２３、ＥＭＢ類似体ＳＱ１０９、ＯＰＣ−１６７８３２、ＧＳＫ３０３６６５６（ＧＳＫ０７０としても知られる）、ＧＳＫ２５５６２８６、ＧＳＫ３２１１８３０、ベンゾチアジノン、例えば、ＢＴＺ０４３もしくはＰＢＴＺ１６９、アザインドール、例えば、ＴＢＡ−７３７１、ジニトロベンズアミド、またはβラクタム、例えば、メロペネム、ファロペネム、エルタペネム、テビペネムまたはβラクタムの組合せ、例えば、オーグメンチン（アモキシシリン−クラブラン酸）から選択される、請求項１９に記載の組合せ。 
【請求項２１】
抗レトロウイルス剤を含む抗ウイルス剤をさらに含んでなる、請求項１８〜２０のいずれか一項に記載の組合せ。
【請求項２２】
抗レトロウイルス剤が、ジドブジン、ジダノシン、ラミブジン、ザルシタビン、アバカビル、スタブジン、アデホビル、アデホビルジピボキシル、ホジブジン、トドキシル、エムトリシタビン、アロブジン、アムドキソビル、エルブシタビン、ネビラピン、デラビルジン、エファビレンツ、ロビリデ、イムノカル、オルチプラズ、カプラビリン、レルシビリン、ＧＳＫ２２４８７６１、ＴＭＣ−２７８、ＴＭＣ−１２５、エトラビリン、サキナビル、リトナビル、インジナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、ホスアンプレナビル、ブレカナビル、ダルナビル、アタザナビル、チプラナビル、パリナビル、ラシナビル、エンフビルチド、Ｔ−２０、Ｔ−１２４９、ＰＲＯ−５４２、ＰＲＯ−１４０、ＴＮＸ−３５５、ＢＭＳ−８０６、ＢＭＳ−６６３０６８およびＢＭＳ−６２６５２９、５−ヘリックス、ラルテグラビル、エルビテグラビル、ＧＳＫ１３４９５７２、ＧＳＫ１２６５７４４、ビクリビロック（Ｓｃｈ−Ｃ）、Ｓｃｈ−Ｄ、ＴＡＫ７７９、マラビロク、ＴＡＫ４４９、ジダノシン、テノホビル、ロピナビル、またはダルナビルから選択される、請求項２１に記載の組合せ。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新規化合物、それらを含有する組成物、および治療、例えば、マイコバクテリア感染症の治療または結核（ＴＢとしても知られる）などのマイコバクテリウムにより生じる疾患の治療におけるそれらの使用に関する。
【０００２】
発明の背景
２０１４年に世界保健機関により発表された報告書によれば、毎年ほぼ１，０００万人が結核（ＴＢ）に感染し、毎年１５０万例の死亡が生じている。結核に対する治療が利用可能であるにもかかわらず、この疾患の発生率は、ＴＢの原因となる細菌病原体である結核菌(Mycobacterium tuberculosis)による感染症のために依然として上昇し始めており、この結核菌(Mycobacterium tuberculosis)は、イソニアジドおよびリファンピシンなどの多くの第一選択治療に対して耐性を示すようになってきている。
【０００３】
イソニアジドの構造類似体であるエチオナミドは、多剤耐性ＴＢ（ＭＤＲ  ＴＢ）の治療のために頻繁に処方されており、イソニアジドと同等の効果がある。しかしながら、エチオナミドの使用と関連する不利点として、許容可能な血中薬物濃度を得るためには最大１ｇ／日が必要であるが、これは神経毒性および致死的な肝毒性を含む重度の副作用と関連することが挙げられる。従って、臨床用量およびエチオナミドへの曝露を減らす必要性が存在する。
【０００４】
従って、本発明の一つの目的は、ＴＢの治療に使用される薬物、特に、エチオナミドなどのＥｔｈＡ経路を介して活性化され得る薬物の活性を増強できる可能性が高い新規化合物を提供することである。本発明のさらなる目的は、ＴＢの治療のための新規化合物を提供することである。
【０００５】
ＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１４／０９６３６９は、アリール、シクロアルキルまたはヘテロアリール置換基を有するスピロイソオキサゾリン化合物を記載している。このような化合物は、ＴＢの治療において有用であると言われている。
【発明の概要】
【０００６】
本発明の第１の側面では、下記式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が提供される：
【化１】
2020531575.tif 000003
［式中、Ｒ１は、ハロゲン；シアノ；Ｃ１−６直鎖アルキル；Ｃ３−４分岐アルキル；Ｃ１−６直鎖アルコキシ；Ｃ３−４分岐アルコキシ；１以上のフルオロにより置換されたメチル；１以上のフルオロにより置換されたエチル；１以上のフルオロにより置換されたメトキシ；または１以上のフルオロにより置換されたエトキシである］。
【０００７】
本発明の第２の側面では、治療での使用のための、特に、結核の治療における使用のための、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【０００８】
本発明の第３の側面では、それを必要とする哺乳動物におけるマイコバクテリア感染症の治療のための方法であって、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記哺乳動物に投与することを含んでなる方法が提供される。
【０００９】
本発明の第４の側面では、それを必要とする哺乳動物におけるマイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療のための方法であって、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記哺乳動物に投与することを含んでなる方法が提供される。
【００１０】
本発明の第５の側面では、マイコバクテリア感染症またはマイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療における使用のための薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用が提供される。
【００１１】
本発明の第６の側面では、マイコバクテリア感染症の治療における使用のためのまたはマイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療における使用のための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【００１２】
本発明の第７の側面では、（ａ）式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、（ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物が提供される。
【００１３】
本発明の第８の側面では、（ａ）式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能なものと（ｂ）少なくとも１つの他の抗マイコバクテリア剤の組合せが提供される。
【００１４】
発明の詳細な説明
上記のように、本発明の一つの側面は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：
【化２】
2020531575.tif 000004
［式中、Ｒ１は、ハロゲン；シアノ；Ｃ１−６直鎖アルキル；Ｃ３−４分岐アルキル；Ｃ１−６直鎖アルコキシ；Ｃ３−４分岐アルコキシ；１以上のフルオロにより置換されたメチル；１以上のフルオロにより置換されたエチル；１以上のフルオロにより置換されたメトキシ；または１以上のフルオロにより置換されたエトキシである］に関する。
【００１５】
一つの実施態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００１６】
一つの実施態様では、Ｒ１は、フルオロ、クロロもしくはブロモ；シアノ；Ｃ１−６直鎖アルキル；Ｃ３−４分岐アルキル；Ｃ１−６直鎖アルコキシ；Ｃ３−４分岐アルコキシ；１以上のフルオロにより置換されたメチル；１以上のフルオロにより置換されたエチル；１以上のフルオロにより置換されたメトキシ；または１以上のフルオロにより置換されたエトキシである。
【００１７】
一つの実施態様では、Ｒ１は、フルオロ、クロロもしくはブロモ；シアノ；Ｃ１−６直鎖アルキル；Ｃ３−４分岐アルキル；Ｃ１−６直鎖アルコキシ；Ｃ３−４分岐アルコキシ；モノ、ジもしくはトリフルオロメチル；モノ、ジもしくはトリフルオロメトキシ；２−フルオロエチル；２，２−ジフルオロエチル；２，２，２−トリフルオロエチル；２−フルオロエトキシ、２，２−ジフルオロエトキシ；または２，２，２−トリフルオロエトキシである。
【００１８】
一つの実施態様では、Ｒ１は、クロロもしくはブロモ；シアノ；Ｃ１−６直鎖アルキル；Ｃ３−４分岐アルキル；Ｃ１−６直鎖アルコキシ；Ｃ３−４分岐アルコキシ；モノ、ジもしくはトリフルオロメチル；モノ、ジもしくはトリフルオロメトキシ；２−フルオロエチル；２，２−ジフルオロエチル；２，２，２−トリフルオロエチル；２−フルオロエトキシ、２，２−ジフルオロエトキシ；または２，２，２−トリフルオロエトキシである。
【００１９】
一つの実施態様では、Ｒ１は、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、Ｃ１−６直鎖アルキル、Ｃ３−４分岐アルキル、Ｃ１−６直鎖アルコキシ、Ｃ３−４分岐アルコキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、２，２，２−トリフルオロエチルまたは２，２，２−トリフルオロエトキシである。
【００２０】
一つの実施態様では、Ｒ１は、クロロ、ブロモ、シアノ、Ｃ１−６直鎖アルキル、Ｃ３−４分岐アルキル、Ｃ１−６直鎖アルコキシ、Ｃ３−４分岐アルコキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、２，２，２−トリフルオロエチルまたは２，２，２−トリフルオロエトキシである。
【００２１】
一つの実施態様では、Ｒ１は、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、Ｃ１−６直鎖アルキル、Ｃ３−４分岐アルキル、Ｃ１−６直鎖アルコキシ、Ｃ３−４分岐アルコキシ、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチルまたは２，２，２−トリフルオロエトキシである。
【００２２】
一つの実施態様では、Ｒ１は、クロロ、ブロモ、シアノ、Ｃ１−６直鎖アルキル、Ｃ３−４分岐アルキル、Ｃ１−６直鎖アルコキシ、Ｃ３−４分岐アルコキシ、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチルまたは２，２，２−トリフルオロエトキシである。
【００２３】
一つの実施態様では、Ｒ１は、フルオロ、ブロモ、シアノ、Ｃ１−４直鎖アルキル、Ｃ１−６直鎖アルコキシ、Ｃ４分岐アルコキシ、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチルまたは２，２，２−トリフルオロエトキシである。
【００２４】
一つの実施態様では、Ｒ１は、ブロモ、シアノ、Ｃ１−４直鎖アルキル、Ｃ１−６直鎖アルコキシ、Ｃ４分岐アルコキシ、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチルまたは２，２，２−トリフルオロエトキシである。
【００２５】
一つの実施態様では、Ｒ１は、フルオロ、ブロモ、シアノ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエトキシ、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−ブトキシまたはヘキシルオキシである。
【００２６】
一つの実施態様では、Ｒ１は、ブロモ、シアノ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエトキシ、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−ブトキシまたはヘキシルオキシである。
【００２７】
一つの実施態様では、Ｒ１はトリフルオロメチルである。
【００２８】
本発明において有用である特定の化合物は、
４，４，４−トリフルオロ−１−［３−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル］ブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−プロポキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−イソブトキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−ヘキシルオキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
１−（３−ブロモ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オン；
１−（３−エトキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−メトキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−（トリフルオロメチル）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−メチル−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン；
１−（３−エチル−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オン；
８−（４，４，４−トリフルオロブタノイル）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−３−カルボニトリル；および
４，４，４−トリフルオロ−１−（３−フルオロ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン
を含む。
【００２９】
用語および定義
本明細書で使用する場合、用語「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを指す。しかしながら、より詳しくは、それは、フルオロ、クロロまたはブロモを指すものとする。
【００３０】
本明細書で使用する場合、用語「シアノ」は、−ＣＮを指す。
【００３１】
本明細書で使用する場合、用語「Ｃ１−６直鎖アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖アルキル基を指す。従って、用語「Ｃ１−６直鎖アルキル」は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルを含む。
【００３２】
本明細書で使用する場合、用語「Ｃ３−４分岐アルキル」は、３または４個の炭素原子を有する分岐アルキル基を指す。従って、用語「Ｃ３−４分岐アルキル」は、イソ−プロピル、ｓｅｃ−ブチルおよびイソ−ブチルを含む。
【００３３】
本明細書で使用する場合、用語「Ｃ１−６直鎖アルコキシ」は、１〜３個の炭素原子を有する直鎖アルコキシ基を指す。従って、用語「Ｃ１−６直鎖アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｎ−ペンチルオキシおよびｎ−ヘキシルオキシを含む。
【００３４】
本明細書で使用する場合、用語「Ｃ３−４分岐アルコキシ」は、３または４個の炭素原子を有する分岐鎖アルコキシ基を指す。従って、用語「Ｃ３−４分岐アルコキシ」は、イソ−プロポキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびイソ−ブトキシを含む。
【００３５】
本明細書で使用する場合、用語「１以上のフルオロにより置換されたメチル」は、１、２または３個のフッ素原子により置換されたメチル基を指す。従って、用語「１以上のフルオロにより置換されたメチル」は、モノ−フルオロメチル（−ＣＨ２Ｆ）、ジ−フルオロメチル（−ＣＨＦ２）およびトリフルオロメチル（−ＣＦ３）を含む。
【００３６】
本明細書で使用する場合、用語「１以上のフルオロにより置換されたエチル」は、１、２、３、４または５個のフッ素原子により置換されたエチル基を指す。従って、用語「１以上のフルオロにより置換されたエチル」は、２−フルオロエチル（−ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）、２，２−ジフルオロエチル（−ＣＨ２ＣＨＦ２）および２，２，２−トリフルオロエチル（−ＣＨ２ＣＦ３）を含む。
【００３７】
本明細書で使用する場合、用語「１以上のフルオロにより置換されたメトキシ」は、メチル基の炭素が１、２または３個のフッ素原子により置換されたメトキシ基を指す。従って、用語「１以上のフルオロにより置換されたメチル」は、モノ−フルオロメトキシ（−ＯＣＨ２Ｆ）、ジ−フルオロメトキシ（−ＯＣＨＦ２）およびトリフルオロメトキシ（−ＯＣＦ３）を含む。
【００３８】
本明細書で使用する場合、用語「１以上のフルオロにより置換されたエトキシ」は、エチル基の炭素が１、２、３、４または５個フッ素原子により置換されたエトキシ基を指す。従って、用語「１以上のフルオロにより置換されたエチル」は、２−フルオロエトキシ（−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｆ）、２，２−ジフルオロエトキシ（−ＯＣＨ２ＣＨＦ２）および２，２，２−トリフルオロエトキシ（−ＯＣＨ２ＣＦ３）を含む。
【００３９】
式（Ｉ）の化合物は、異なる互変異性型で存在し得ることが認識されるであろう。総ての考えられる互変異性体が、本発明の範囲内にあることが企図される。
【００４０】
用語「本発明の化合物」は、本明細書で使用する場合、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を意味する。用語「本発明の化合物」は、上記で定義される本発明の化合物のいずれか一つを意味する。
【００４１】
さらに、「式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩」または「本発明の化合物」などの句は、式（Ｉ）の化合物、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物、またはこれらの任意の薬学的に許容可能な組合せを包含するものとすることが理解されるであろう。従って、例示的目的のために本明細書で使用される限定されない例により、「式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩」は、溶媒和物として存在する式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容可能な塩を包含し、この句はまた、式（Ｉ）の化合物と式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容可能な塩の混合物を包含する。
【００４２】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に対する本明細書における言及は、遊離塩基としてのまたはその薬学的に許容可能な塩としての式（Ｉ）の化合物を含むと理解されるべきである。従って、一つの実施態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物を対象とする。別の実施態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容可能な塩を対象とし得る。
【００４３】
用語「薬学的に許容可能な」は、健全な医学的判断の範囲内で、合理的なベネフィット／リスク比と釣り合った、過剰な毒性、刺激、または他の問題もしくは合併症を生じることなく、ヒトおよび動物の組織に接触して使用するために好適なそれらの化合物（塩を含む）、材料、組成物、および剤形を指す。
【００４４】
薬学的に許容可能な塩としては、とりわけ、Berge, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19に記載のもの、またはP H Stahl and C G Wermuth編, Handbook of Pharmaceutical Salts; Properties, Selection and Use, Second Edition Stahl/Wermuth: Wiley- VCH/VHCA, 2011 （http://www.wiley.com/WileyCDA/WileyTitle/productCd-3906390519.html参照）に収載のものが含まれる。
【００４５】
好適な薬学的に許容可能な塩は、酸付加塩を含み得る。このような塩は、場合により、有機溶媒などの好適な溶媒中で、適当な酸との反応により形成することができ、結晶化および濾過により単離され得る塩を生じる。
【００４６】
代表的な薬学的に許容可能な酸付加塩としては、限定されるものではないが、４−アセトアミド安息香酸塩、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、安息香酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、酪酸塩、エデト酸カルシウム、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩（カンシル酸塩）、カプリン酸塩(caprate)（デカン酸塩）、カプロン酸塩（ヘキサン酸塩）、カプリル酸塩（オクタン酸塩）、桂皮酸塩、クエン酸塩、シクラミン酸塩、ジグルコン酸塩、２，５−ジヒドロキシ安息香酸塩、ジコハク酸塩、ドデシル硫酸塩（エストール酸塩）、エデト酸塩（エチレンジアミン四酢酸塩）、エストール酸塩（硫酸ラウリル）、エタン−１，２−ジスルホン酸塩（エジシル酸塩）、エタンスルホン酸塩（エシル酸塩）、ギ酸塩、フマル酸塩、ガラクタル酸塩（ムチン酸塩）、ゲンチジン酸塩（２，５−ジヒドロキシ安息香酸塩）、グルコヘプトン酸塩（グルセプト酸塩）、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、グルタミン酸塩、グルタル酸塩、グリセロリン酸塩(glycerophosphorate)、グリコール酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、馬尿酸塩、ヒドラバミン（Ｎ，Ｎ’−ジ（デヒドロアビエチル）−エチレンジアミン）、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、イソ酪酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩（メシル酸塩）、メチル硫酸塩、ムチン酸塩、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸塩（ナパジシル酸塩）、ナフタレン−２−スルホン酸塩（ナプシル酸塩）、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ｐ−アミノベンゼンスルホン酸塩、ｐ−アミノサリチル酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、パントテン酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルエチルバルビタール酸塩、リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩（トシル酸塩）、ピログルタミン酸塩、ピルビン酸塩、サリチル酸塩、セバシン酸塩、ステアリン酸塩、スバセチン酸塩、コハク酸塩、スルファミン酸塩、硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩（８−クロロテオフィリナート）、チオシアン酸塩、トリエチオダイド、ウンデカン酸塩、ウンデシレン酸塩、および吉草酸塩が含まれる。
【００４７】
本明細書で使用する場合、用語「治療上有効な量」は、このような量を投与されていない対応する対象と比較して、疾患、障害、もしくは副作用の治療、治癒、予防、もしくは寛解の改善、または疾患もしくは障害の進行の速度の減少をもたらす任意の量を意味する。
【００４８】
適当な「治療上有効な量」は、例えば、対象の年齢および体重、治療を必要とする正確な病態およびその重症度、製剤の性質、ならびに投与経路を含む多数の因子に依存し、最終的に担当医の判断による。
【００４９】
化合物の調製
本発明の化合物は、標準化学を含む多様な方法により調製してよい。先に定義されたいずれの変数も、特に断りのない限り、先に定義された意味を継続して有する。例示的な一般的合成法を以下のスキームにおいて説明するが、これらは、本発明の他の化合物を調製するために容易に適合することができる。本発明の特定の化合物は、実施例の項に開示される実験手順に従って調製することができる。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物を合成するために使用される一般的手順を、以下の反応スキーム１〜７に記載し、実施例において説明する。
【００５１】
式（Ｉａ）の化合物の調製
【化３】
2020531575.tif 000005
式（Ｉ）のアルコキシスピロ化合物である式（Ｉａ）の化合物は、例えばＴＦＡによる式（ＩＩ）のアルコキシスピロ化合物のＢｏｃ保護基の脱保護、およびさらに４，４，４−トリフルオロブタン酸とのＴＦＡ塩アミノ基のカップリングにより、スキーム１（下記）に従って調製してよい。式（ＩＩ）の中間体化合物は、式（ＩＶ）のハロゲン化スピロＮ−Ｂｏｃ保護化合物との対応する市販のアルコール（ＲＯＨ）の反応により調製することができ、その合成を以下に記載する。
【化４】
2020531575.tif 000006
スキーム１  −  Ｒ１が、Ｃ１−６直鎖アルコキシ；Ｃ３−４分岐アルコキシ；１以上のフルオロにより置換されたメトキシ；または１以上のフルオロにより置換されたエトキシである、式（Ｉ）の化合物の調製
【００５２】
あるいは、アルコキシスピロ化合物である式（Ｉａ）の化合物は、炭酸カリウムなどの好適な塩基の存在下で、式（ＩＩＩａ）のハロゲン化スピロトリフルオロブタンアミド化合物との対応する市販のアルコール（ＲＯＨ）の反応により、スキーム２（下記）に従って調製してよい。
【化５】
2020531575.tif 000007
スキーム２  −  Ｒ１が、Ｃ１−６直鎖アルコキシ；Ｃ３−４分岐アルコキシ；１以上のフルオロにより置換されたメトキシ；または１以上のフルオロにより置換されたエトキシである、式（Ｉ）の化合物の代替の調製
【００５３】
式（Ｉｂ）の化合物の調製
アルキルスピロ化合物である式（Ｉｂ）の化合物は、４，４，４−トリフルオロブタン酸との式（ＩＶ）の化合物のカップリングにより、スキーム３（下記）に従って調製してよい。式（ＩＶ）の化合物は、式（Ｖ）のオキシム化合物による市販の４−メチレンピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの環化、およびさらに塩化水素などの酸によるＮ−Ｂｏｃ保護基の切断により、調製してよい。
【化６】
2020531575.tif 000008
スキーム３  −  Ｒ１が、Ｃ１−６直鎖アルキルまたはＣ３−４分岐アルキルである、式（Ｉ）の化合物の調製
【００５４】
式（Ｉｃ）の化合物の調製
式（Ｉｃ）のシアノ化合物は、スキーム４（下記）に従って、ＤＭＦなどの好適な溶媒中で、例えばシアン化ナトリウムによる化合物（ＩＩＩａ）の求核置換により、調製してよい。
【化７】
2020531575.tif 000009
スキーム４  −  Ｒ１がＣＮである、式（Ｉ）の化合物の調製
【００５５】
式（Ｉｄ）の化合物の調製
式（Ｉｄ）のフッ素化合物は、スキーム５（下記）に従って、ＤＭＳＯなどの好適な溶媒中で、例えばフッ化カリウムによる化合物（ＩＩＩａ）のハロゲン置換により、調製してよい。
【化８】
2020531575.tif 000010
スキーム５  −  Ｒ１がＦである、式（Ｉ）の化合物の調製
【００５６】
中間体（ＩＩＩａ）および（Ｖ）の調製
式（Ｖ）のオキシム中間体は、スキーム６（下記）に示されるように、ＮＢＳまたはＮＣＳなどのＮ−ハロゲンスクシンイミドとの式（ＶＩ）の中間体化合物のハロゲン化反応により、調製してよい。Ｒがメチルまたはエチルである、式（ＶＩ）のオキシム中間体は、例えばヒドロキシルアミンとの式（ＶＩＩ）の対応するアルデヒドの反応により、調製してよい。あるいは、Ｒがトリフルオロメチルである、トリフルオロメチルオキシム中間体は、ヒドロキシルアミンとの２，２，２−トリフルオロ−１−メトキシエタノールの反応により、調製することができる。
【化９】
2020531575.tif 000011
スキーム６  −  中間体Ｖの調製
【００５７】
式（ＩＩＩ）のハロゲン化スピロＮ−Ｂｏｃ保護中間体は、例えば重炭酸ナトリウム（スキーム７）の存在下で、市販の４−メチレンピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルおよびヒドロキシカルボンイミド酸ジブロミドの反応により、調製してよい。
【化１０】
2020531575.tif 000012
スキーム７  −  中間体ＩＩＩの調製
【００５８】
同様に、中間体（ＩＩＩａ）は、上記と同じ条件下で、ヒドロキシカルボンイミド酸ジブロミドとアルケン（ＶＩＩＩ）の反応により、調製してよい。中間体（ＶＩＩＩ）は、標準条件下で、４，４，４−トリフルオロブタン酸とのアミノ塩酸塩中間体（ＩＸ）のカップリング反応により、調製することができる。最後に、アミノ中間体（ＩＸ）は、塩化水素での処理により、市販の４−メチレンピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルから調製してよい。この点に関しては、下記のスキーム８を参照。
【化１１】
2020531575.tif 000013
スキーム８  −  中間体ＩＩＩａの調製
【００５９】
使用方法
一つの側面では、本発明は、治療での使用のための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【００６０】
別の側面では、本発明は、マイコバクテリア感染症の治療における使用のための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。マイコバクテリア感染症は、マイコバクテリウムの感染により生じるものである。
【００６１】
マイコバクテリウムは、以下のマイコバクテリウムの群：結核菌群(mycobacterium tuberculosis complex)（ＭＴＣ）、マイコバクテリウム・アビウムコンプレックス(Mycobacterium avium complex)（ＭＡＣ）、マイコバクテリウム・ゴルドナエ分岐群(Mycobacterium gordonae clade)、マイコバクテリウム・カンサシ分岐群(Mycobacterium kansasii clade)、マイコバクテリウム・ケロナエ分岐群(Mycobacterium chelonae clade)、マイコバクテリウム・フォーチュイタム分岐群(Mycobacterium fortuitum clade)、マイコバクテリウム・パラフォーチュイタム分岐群(Mycobacterium parafortuitum clade)またはマイコバクテリウム・バッカエ分岐群(Mycobacterium vaccae clade)のうちの一つのメンバーであってよい。マイコバクテリウムはまた、マイコバクテリウム・ウルセランス(Mycobacterium ulcerans)またはらい菌(Mycobacterium leprae)であってもよい。
【００６２】
結核菌群(Mycobacterium tuberculosis complex)（ＭＴＣ）のメンバーには、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)、マイコバクテリウム・アフリカヌム(Mycobacterium africanum)、マイコバクテリウム・ボビス(Mycobacterium bovis)、マイコバクテリウム・ボビス(Mycobacterium bovis)ＢＣＧ、マイコバクテリウム・カネッティ(Mycobacterium canetti)、マイコバクテリウム・カプラエ(Mycobacterium caprae)、マイコバクテリウム・ミクロティ(Mycobacterium microti)およびマイコバクテリウム・ピニペディイ(Mycobacterium pinnipedii)が含まれる。これらのマイコバクテリアは、ヒトおよび動物の結核の原因病原体である。結核菌(Mycobacterium tuberculosis)は、ヒトの結核の主原因である。
【００６３】
一つの実施態様では、マイコバクテリウムは、結核菌群(Mycobacterium tuberculosis complex)（ＭＴＣ）のメンバーである。
【００６４】
一つの実施態様では、感染症は、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)感染症である。すなわち、マイコバクテリア感染症は、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)の感染により生じる。
【００６５】
一つの実施態様では、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)は、多剤耐性である。別の実施態様では、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)は、エチオナミドに対して耐性である。
【００６６】
マイコバクテリウム・アビウムコンプレックス(Mycobacterium avium complex)（ＭＡＣ）のメンバーには、マイコバクテリウム・アビウム(Mycobacterium avium)、マイコバクテリウム・アビウム亜種パラツベルクローシス(Mycobacterium avium paratuberculosis)、マイコバクテリウム・アビウム亜種シラチカム(Mycobacterium avium silaticum)、マイコバクテリウム・アビウム亜種ホミニスイス(Mycobacterium avium hominissuis)、マイコバクテリウム・コロンビエンス(Mycobacterium columbiense)およびマイコバクテリウム・インディカス・パラニ(Mycobacterium indicus pranii)が含まれる。
【００６７】
マイコバクテリウム・ゴルドナエ分岐群(Mycobacterium gordonae clade)のメンバーには、マイコバクテリウム・アジアティカム(Mycobacterium asiaticum)およびマイコバクテリウム・ゴルドナエ(Mycobacterium gordonae)が含まれる。
【００６８】
マイコバクテリウム・カンサシ分岐群(Mycobacterium kansasii clade)のメンバーには、マイコバクテリウム・ガストリ(Mycobacterium gastri)およびマイコバクテリウム・カンサシ(Mycobacterium kansasii)が含まれる。
【００６９】
マイコバクテリウム・ケロナエ分岐群(Mycobacterium chelonae clade)のメンバーには、マイコバクテリウム・アブセサス(Mycobacterium abscessus)、マイコバクテリウム・ボルレティイ(Mycobacterium bolletii)およびマイコバクテリウム・ケロナエ(Mycobacterium chelonae)が含まれる。
【００７０】
マイコバクテリウム・フォーチュイタム分岐群(Mycobacterium fortuitum clade)のメンバーには、マイコバクテリウム・ボエニッキイ(Mycobacterium boenickei)、マイコバクテリウム・ブリスベネンス(Mycobacterium brisbanense)、マイコバクテリウム・コスメティカム(Mycobacterium cosmeticum)、マイコバクテリウム・フォーチュイタム(Mycobacterium fortuitum)、マイコバクテリウム・フォーチュイタム亜種アセトアミドリティカム(Mycobacterium fortuitum subspecies acetamidolyticum)、マイコバクテリウム・ヒューストネンス(Mycobacterium houstonense)、マイコバクテリウム・マジェリテンス(Mycobacterium mageritense)、マイコバクテリウム・ニューオルレアンセンス(Mycobacterium neworleansense)、マイコバクテリウム・ペレグリナム(Mycobacterium peregrinum)、マイコバクテリウム・ポルシナム(Mycobacterium porcinum)、マイコバクテリウム・セネガレンス(Mycobacterium senegalense)およびマイコバクテリウム・セプティカム(Mycobacterium septicum)が含まれる。
【００７１】
マイコバクテリウム・パラフォーチュイタム分岐群(Mycobacterium parafortuitum clade)のメンバーには、マイコバクテリウム・オーストロアフリカーナム(Mycobacterium austroafricanum)、マイコバクテリウム・ディエルンホフェリ(Mycobacterium diernhoferi)、マイコバクテリウム・フレデリクスバーゲンス(Mycobacterium frederiksbergense)、マイコバクテリウム・ホドレリ(Mycobacterium hodleri)、マイコバクテリウム・ネオオーラム(Mycobacterium neoaurum)およびマイコバクテリウム・パラフォーチュイタム(Mycobacterium parafortuitum)が含まれる。
【００７２】
従って、マイコバクテリア感染症は、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)、マイコバクテリウム・アフリカヌム(Mycobacterium africanum)、マイコバクテリウム・ボビス(Mycobacterium bovis)、マイコバクテリウム・ボビス(Mycobacterium bovis)BCG、マイコバクテリウム・カネッティ(Mycobacterium canetti)、マイコバクテリウム・カプラエ(Mycobacterium caprae)、マイコバクテリウム・ミクロティ(Mycobacterium microti)、マイコバクテリウム・ピニペディイ(Mycobacterium pinnipedii)、マイコバクテリウム・アビウム(Mycobacterium avium)、マイコバクテリウム・アビウム亜種パラツベルクローシス(Mycobacterium avium paratuberculosis)、マイコバクテリウム・アビウム亜種シラチカム(Mycobacterium avium silaticum)、マイコバクテリウム・アビウム亜種ホミニスイス(Mycobacterium avium hominissuis)、マイコバクテリウム・コロンビエンス(Mycobacterium columbiense)、マイコバクテリウム・インディカス・パラニ(Mycobacterium indicus pranii)、マイコバクテリウム・アジアティカム(Mycobacterium asiaticum)、マイコバクテリウム・ゴルドナエ(Mycobacterium gordonae)、マイコバクテリウム・ガストリ(Mycobacterium gastri)、マイコバクテリウム・カンサシ(Mycobacterium kansasii)、マイコバクテリウム・アブセサス(Mycobacterium abscessus)、マイコバクテリウム・ボルレティイ(Mycobacterium bolletii)、マイコバクテリウム・ケロナエ(Mycobacterium chelonae)、マイコバクテリウム・ボエニッキイ(Mycobacterium boenickei)、マイコバクテリウム・ブリスベネンス(Mycobacterium brisbanense)、マイコバクテリウム・コスメティカム(Mycobacterium cosmeticum)、マイコバクテリウム・フォーチュイタム(Mycobacterium fortuitum)、マイコバクテリウム・フォーチュイタム亜種アセトアミドリティカム(Mycobacterium fortuitum subspecies acetamidolyticum)、マイコバクテリウム・ヒューストネンス(Mycobacterium houstonense)、マイコバクテリウム・マジェリテンス(Mycobacterium mageritense)、マイコバクテリウム・ニューオルレアンセンス(Mycobacterium neworleansense)、マイコバクテリウム・ペレグリナム(Mycobacterium peregrinum)、マイコバクテリウム・ポルシナム(Mycobacterium porcinum)、マイコバクテリウム・セネガレンス(Mycobacterium senegalense)、マイコバクテリウム・セプティカム(Mycobacterium septicum)、マイコバクテリウム・オーストロアフリカーナム(Mycobacterium austroafricanum)、マイコバクテリウム・ディエルンホフェリ(Mycobacterium diernhoferi)、マイコバクテリウム・フレデリクスバーゲンス(Mycobacterium frederiksbergense)、マイコバクテリウム・ホドレリ(Mycobacterium hodleri)、マイコバクテリウム・ネオオーラム(Mycobacterium neoaurum)、マイコバクテリウム・パラフォーチュイタム(Mycobacterium parafortuitum)、マイコバクテリウム・ウルセランス(Mycobacterium ulcerans)およびらい菌(Mycobacterium leprae)から選択されるマイコバクテリウムの感染により生じ得る。
【００７３】
別の側面では、本発明は、マイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療における使用のための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関し、ここで、マイコバクテリウムは、前述のものから選択される。
【００７４】
マイコバクテリウムの感染により生じる疾患としては、限定されるものではないが、結核（例えば、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)による）、ハンセン病（例えば、らい菌(Mycobacterium leprae)による）、ヨーネ病（例えば、マイコバクテリウム・アビウム亜種パラツベルクローシス(Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis)による）、ブルーリもしくはベアンズデイル潰瘍（例えば、マイコバクテリウム・ウルセラン(Mycobacterium ulceran)による）、クローン病（例えば、マイコバクテリウム・アビウム亜種パラツベルクローシス(Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis)による）、肺疾患もしくは肺感染症、肺炎、嚢、滑膜、腱鞘、限局性膿瘍、リンパ節炎、皮膚および軟組織感染症、Ｌａｄｙ  Ｗｉｎｄｅｒｍｅｒｅ症候群（例えば、マイコバクテリウム・アビウムコンプレックス(Mycobacterium avium complex)（ＭＡＣ）による）、ＭＡＣ肺疾患、播種性マイコバクテリウム・アビウムコンプレックス(disseminated Mycobacterium avium complex)（ＤＭＡＣ）、播種性マイコバクテリウム・アビウム・イントラセルラーレコンプレックス(disseminated Mycobacterium avium intraceullulare complex)（ＤＭＡＩＣ）、ホットタブ肺(hot-tub lung)（例えば、マイコバクテリウム・アビウムコンプレックス(Mycobacterium avium complex)による）、ＭＡＣ乳腺炎、ＭＡＣ化膿性筋炎、または肉芽腫疾患が含まれる。
【００７５】
一つの実施態様では、疾患は結核である。従って、本発明の一つの側面は、結核の治療における使用のための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【００７６】
一つの実施態様では、本発明は、それを必要とする哺乳動物におけるマイコバクテリア感染症の治療の方法であって、前記治療は、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記哺乳動物に投与することを含んでなる方法に関する。本明細書に記載の通り、マイコバクテリア感染症は、マイコバクテリウムの感染により生じるものである。マイコバクテリウムは、前述の通りである。
【００７７】
一つの実施態様では、マイコバクテリア感染症は、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)感染症である。
【００７８】
別の実施態様では、本発明は、それを必要とする哺乳動物におけるマイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療の方法であって、前記治療は、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記哺乳動物に投与することを含んでなる方法に関する。
【００７９】
一つの実施態様では、疾患は結核である。従って、それを必要とする哺乳動物における結核の治療の方法であって、前記治療は、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記哺乳動物に投与することを含んでなる方法も、本明細書に記載される。
【００８０】
一つの実施態様では、哺乳動物はヒトである。
【００８１】
治療に対する本明細書における言及は、確立された病態の治療を指すことが、当業者により認識されるであろう。しかしながら、本発明の化合物は、病態に応じて、特定の疾患の予防においても有用であり得る。従って、一つの実施態様では、ＴＢなどの疾患の治療または予防が提供される。別の実施態様では、ＴＢなどの疾患の治療が提供される。さらなる実施態様では、ＴＢなどの疾患の予防が提供される。
【００８２】
別の実施態様では、本発明は、マイコバクテリア感染症の治療またはマイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療における使用のための薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用に関する。
【００８３】
結核の治療における使用のための薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用も、本明細書に記載される。
【００８４】
一つの実施態様では、ＴＢの治療における使用のための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、チオアミドと併用投与される。さらなる実施態様では、チオアミドはエチオナミドである。代替実施態様では、チオアミドはプロチオナミドである。
【００８５】
従って、一つの実施態様では、ＴＢの治療における使用のための医薬組成物が提供され、ここで、前記組成物は、（ａ）式（Ｉ）の化合物と、（ｂ）チオアミド、例えばエチオナミドまたはプロチオナミドと、場合により、（ｃ）薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる。
【００８６】
別の実施態様では、本発明は、それを必要とする哺乳動物におけるマイコバクテリア感染症の治療の方法であって、前記治療は、チオアミドと組み合わせて、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記哺乳動物に投与することを含んでなる方法に関し、ここで、前記チオアミドはエチオナミドであってよい。代替実施態様では、チオアミドはプロチオナミドである。本明細書に記載の通り、マイコバクテリア感染症は、マイコバクテリウムの感染により生じるものである。マイコバクテリウムは、前述の通りである。
【００８７】
一つの実施態様では、マイコバクテリア感染症は、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)感染症である。
【００８８】
別の実施態様では、本発明は、それを必要とする哺乳動物におけるマイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療の方法であって、前記治療は、チオアミドと組み合わせて、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記哺乳動物に投与することを含んでなる方法に関し、ここで、前記チオアミドはエチオナミドであってよい。代替実施態様では、チオアミドはプロチオナミドである。
【００８９】
一つの実施態様では、疾患は結核である。従って、それを必要とする哺乳動物における結核の治療の方法であって、前記治療は、チオアミドと組み合わせて、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を前記哺乳動物に投与することを含んでなる方法も、本明細書に記載され、ここで、前記チオアミドはエチオナミドであってよい。代替実施態様では、チオアミドはプロチオナミドである。
【００９０】
別の実施態様では、本発明は、マイコバクテリア感染症の治療またはマイコバクテリウムの感染により生じる疾患の治療における使用のための薬剤の製造における、チオアミド（例えば、エチオナミド）と組み合わせた、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用に関する。代替実施態様では、チオアミドはプロチオナミドである。
【００９１】
結核の治療における使用のための薬剤の製造における、チオアミド（例えば、エチオナミド(ethioamide)）と組み合わせた、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用も、本明細書に記載される。代替実施態様では、チオアミドはプロチオナミドである。
【００９２】
ある実施態様では、上記の方法および治療における使用のための式（Ｉ）の化合物は、以下の構造：
【化１２】
2020531575.tif 000014
を有する４，４，４−トリフルオロ−１−（３−（トリフルオロメチル）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オンである。
【００９３】
医薬組成物
式（Ｉ）の化合物およびその薬学的に許容可能な塩は、通常、必ずしもそうではないが、患者に投与する前に医薬組成物に処方される。従って、別の側面では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物が提供される。
【００９４】
医薬組成物は、任意の適当な経路、例えば、経口（口腔(buccal)もしくは舌下を含む）、直腸、吸入、鼻腔内、局所（口腔、舌下もしくは経皮を含む）または非経口（皮下、筋肉内、静脈内もしくは皮内）経路により、投与してよい。特に、本発明の医薬組成物は、経口または静脈内経路により投与してよい。
【００９５】
好適な薬学的に許容可能な賦形剤としては、以下の種類の賦形剤：担体、希釈剤、充填剤(filler)、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動化剤(glidant)、造粒剤、コーティング剤、湿潤剤、溶剤、共溶剤、懸濁剤、乳化剤、甘味剤、香味剤、フレーバーマスキング剤、着色剤、固化防止剤、保湿剤、キレート化剤、可塑剤、増粘剤、抗酸化剤、保存剤、安定剤、界面活性剤および緩衝剤が含まれる。
【００９６】
本発明の化合物を処方するための好適な方法は、当業者にはよく知られているであろうが、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 第21版 2006に記載されている。
【００９７】
医薬組成物は、単位用量あたり所定の量の有効成分を含有する単位剤形で提示されてよい。好ましい単位用量の組成物は、有効成分の一日量もしくは部分用量(sub-dose)、またはその適当な分割量を含有するものである。従って、このような単位用量は、１日２回以上投与してよい。好ましい単位用量の組成物は、有効成分の、本明細書において上記で列挙したような一日量もしくは部分用量(sub-dose)（１日２回以上の投与用）、またはその適当な分割量を含有するものである。
【００９８】
本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が結核の治療において使用される場合、それらは単独で用いてもよいし、または、さらなる抗マイコバクテリア剤、例えば、抗結核剤および／または抗レトロウイルス剤を含む抗ウイルス剤などのさらなる治療薬と組み合わせて用いてもよい。
【００９９】
例えば、本発明は、さらなる抗結核剤と組み合わせた、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。ある実施態様では、組合せは、２、３、４、５、６または７種のさらなる抗結核剤を含んでなる。例えば、多剤耐性結核の治療においては、４種以上の薬物の組合せが患者に投与されることが一般的である。例えば、薬剤感受性結核の治療においては、３または４種の薬物の組合せが患者に投与されることが一般的である。
【０１００】
さらなる抗結核剤は、結核の治療のために開発中の、承認されたまたは推奨された剤であり、イソニアジド、リファンピン、ピラジナミド、エタンブトール、モキシフロキサシン、リファペンチン、クロファジミン、エチオナミド、プロチオナミド、イソキシル、チアセタゾン、リファブチン、ジアリルキノリン、例えば、ベダキリン（ＴＭＣ２０７）もしくはＴＢＡＪ−５８７、ニトロイミダゾ−オキサジンＰＡ−８２４、デラマニド（ＯＰＣ−６７６８３）、オキサゾリジノン、例えば、リネゾリド、テジゾリド、ラデゾリド、ステゾリド（ＰＮＵ−１００４８０）、ポジゾリド（ＡＺＤ−５８４７）もしくはＴＢＩ−２２３、ＥＭＢ類似体ＳＱ１０９、ＯＰＣ−１６７８３２、ＧＳＫ３０３６６５６（ＧＳＫ０７０としても知られる）、ＧＳＫ２５５６２８６、ＧＳＫ３２１１８３０、ベンゾチアジノン、例えば、ＢＴＺ０４３もしくはＰＢＴＺ１６９、アザインドール、例えば、ＴＢＡ−７３７１、ジニトロベンズアミド、またはβラクタム、例えば、メロペネム、ファロペネム、エルタペネム、テビペネムまたはβラクタムの組合せ、例えば、オーグメンチン（アモキシシリン−クラブラン酸）から選択され得る。
【０１０１】
ある実施態様では、抗結核剤は、イソニアジド、リファンピン、ピラジナミド、エタンブトール、モキシフロキサシン、リファペンチン、クロファジミン、エチオナミド、プロチオナミド、イソキシル、チアセタゾン(thiazetazone)、ベダキリン（ＴＭＣ２０７）、ニトロイミダゾ−オキサジンＰＡ−８２４、デラマニド（ＯＰＣ−６７６８３）、オキサゾリジノン、例えば、リネゾリド、テジゾリド、ラデゾリド、ステゾリド（ＰＮＵ−１００４８０）、もしくはポジゾリド（ＡＺＤ−５８４７）、ＥＭＢ類似体ＳＱ１０９、ＯＰＣ−１６７８３２、ＧＳＫ３０３６６５６Ａ（ＧＳＫ０７０としても知られる）、ＧＳＫ２５５６２８６、ＧＳＫ３２１１８３０およびベンゾチアジノンまたはジニトロベンズアミドから選択され得る。
【０１０２】
本発明による組合せは、抗レトロウイルス剤を含む抗ウイルス剤をさらに含んでなってもよい。
【０１０３】
このような抗レトロウイルス剤は、ジドブジン、ジダノシン、ラミブジン、ザルシタビン、アバカビル、スタブジン、アデホビル、アデホビルジピボキシル、ホジブジン、トドキシル、エムトリシタビン、アロブジン、アムドキソビル、エルブシタビン、ネビラピン、デラビルジン、エファビレンツ、ロビリデ、イムノカル、オルチプラズ、カプラビリン、レルシビリン、ＧＳＫ２２４８７６１、ＴＭＣ−２７８、ＴＭＣ−１２５、エトラビリン、サキナビル、リトナビル、インジナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、ホスアンプレナビル、ブレカナビル、ダルナビル、アタザナビル、チプラナビル、パリナビル、ラシナビル、エンフビルチド、Ｔ−２０、Ｔ−１２４９、ＰＲＯ−５４２、ＰＲＯ−１４０、ＴＮＸ−３５５、ＢＭＳ−８０６、ＢＭＳ−６６３０６８およびＢＭＳ−６２６５２９、５−ヘリックス、ラルテグラビル、エルビテグラビル、ＧＳＫ１３４９５７２、ＧＳＫ１２６５７４４、ビクリビロック（Ｓｃｈ−Ｃ）、Ｓｃｈ−Ｄ、ＴＡＫ７７９、マラビロク、ＴＡＫ４４９、ジダノシン、テノホビル、ロピナビルならびにダルナビルから選択され得る。
【０１０４】
本発明の化合物（すなわち、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩）は、ＥｔｈＡ経路を介して活性化され得る抗結核剤と組み合わせて使用してよい。当業者ならば、例えば、以下の刊行物：“Activation of the prodrug ethionamide is regulated by mycobacteria” A. R. Baulard et al., Journal of Biological Chemistry, 2000, 28326-28331頁に記載の方法を適用することにより、特定の化合物がＥｔｈＡ経路を介して活性化され得るかどうかを決定することができる。
【０１０５】
より詳しくは、抗結核剤は、エチオナミド、プロチオナミド、イソキシルおよびチアセタゾンなどのチオアミドファミリーから選択され得る。
【０１０６】
一つの実施態様では、本発明の化合物（すなわち、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩）は、エチオナミドと組み合わせて使用される。この実施態様では、本発明の化合物（すなわち、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩）は、エチオナミドの活性を増強することが示されている。
【０１０７】
組合せは、好都合には、医薬組成物または製剤の形態での使用のために提示されてよい。従って、（ａ）本明細書に記載の本発明の化合物（すなわち、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩）とともに、（ｂ）本明細書に記載の１以上の薬学的に許容可能な担体と、（ｃ）少なくとも１つの他の抗結核剤と、（ｄ）場合により、抗レトロウイルス剤を含む抗ウイルス剤とを含んでなる医薬組成物も、本明細書で企図される。
【０１０８】
本発明の化合物（すなわち、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩）およびさらなる治療薬は、一緒に投与してもよいし、または別々に投与してもよく、別々に投与する場合、これは、任意の順序で別々にまたは逐次的に行ってよい（同じまたは異なる投与経路により）。本発明の化合物（すなわち、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩）およびさらなる治療上有効な薬剤の量、ならびに投与の相対的タイミングは、所望の併用治療効果を達成するために選択される。
【実施例】
【０１０９】
ここで本発明を以下の限定されない実施例により説明する。本発明の特定の実施態様を以下に記載するが、当業者ならば、種々の変更および改変を行うことができると認識するであろう。他の調製と同様に、または他の調製の一般的な方法により実施される調製に対する言及は、時間、温度、ワークアップ条件などの慣例的パラメーターの変動、試薬量の軽微な変更などを包含し得る。
【０１１０】
略語
以下の一覧は、本明細書で使用される特定の略語および記号の定義を示す。この一覧は網羅的ではないが、本明細書で以下に定義されない略語および記号の意味は、当業者には容易に明らかであろうと認識されるであろう。本発明の記載において、化学元素は、元素周期表に従って同定される。
【０１１１】
ＡＣＮ  アセトニトリル
ａｎｈ  無水
ＣＤＣｌ３  重水素化クロロホルム(Deuterated chlorofom)
ＣＤ２Ｃｌ２  重水素化ジクロロメタン
ＣｙＨｅｘ  シクロヘキサン
ＤＣＭ  ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ  ジイソプロピルエチルアミン(Diisoproylethylamine)
ＤＭＡＰ  ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ  ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ−ｄ６  重水素化ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ  １−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
Ｅｘ．  例
ＨＢＴＵ  ヘキサフルオロリン酸Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウム
ＨＰＬＣ  高速液体クロマトグラフィー
lｎｔ．  中間体
Ｍ  モル
ＭＳ  質量分析
ｍｉｎ  分
Ｎ  規定
ＮａＨ  水素化ナトリウム
ＮＭＲ  核磁気共鳴
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
ＴＥＡ  トリエチルアミン
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
ＴＬＣ  薄層クロマトグラフィー
ｒｔ  室温
ＵＰＬＣ  超高速液体クロマトグラフィー
【０１１２】
プロトン核磁気共鳴（１Ｈ  ＮＭＲ）スペクトルを記録し、化学シフトを、内部標準テトラメチルシラン（ＴＭＳ）から低磁場側の百万分率（δ）で報告する。ＮＭＲデータに関する略語は、以下の通りである：ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線、ｄｄ＝二重線の二重線、ｄｔ＝三重線の二重線、ａｐｐ＝見かけ、ｂｒ＝幅広。質量スペクトルは、エレクトロスプレー（ＥＳ）イオン化法を用いて得た。総ての温度は、摂氏度で報告する。
【０１１３】
以下の特定の中間体および例において、出発材料は、他の中間体または例の数字を参照することにより、同定される。これは、いずれかの特定の中間体または例に由来する実際の材料が、本明細書に例示される後の工程で必ず使用されたことを意味するわけではないが、関連する化合物名を示す簡略表現手段として使用される。
【０１１４】
中間体
中間体１：３−ブロモ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化１３】
2020531575.tif 000015
ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）中、４−メチレンピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＦＬＵＯＲＯＣＨＥＭ、２ｇ、１０．１４ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（８．５２ｇ、１０１．３８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジブロモホルムアルドキシム（ＦＬＵＯＲＯＣＨＥＭ、５ｇ、２４．７４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温で５日間撹拌した。セライトを加え、得られたスラリーを真空下で濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。溶媒を蒸発させ、残渣を、溶離液としてＣｙＨｅｘ／ＥｔＯＡｃのグラジエント（ＣｙＨｅｘ／ＥｔＯＡｃ  ９５／５〜９０／１０）を用いたシリカクロマトグラフィーカラムにより精製し、標題化合物（７．２９ｇ、９２％）を白色固体として得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm: 3.72-3.64 (m, 2H), 3.40-3.31 (m, 2H), 2.95 (s, 2H), 1.92-1.84 (m, 2H), 1.72-1.65 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)。[ES+ MS] m/z 319, 321 (MH+)。
【０１１５】
中間体２：３−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化１４】
2020531575.tif 000016
０℃での２ｍＬ  ＴＨＦ中２，２，２−トリフルオロエタノール（ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ、２８２ｍｇ、２．８２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ、１１２，８ｍｇ、２，８２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を３０分間撹拌した。次に、中間体１である３−ブロモ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３００ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）を０℃で加え、混合物を８０℃で２日間撹拌した。この溶液を塩化アンモニウムの飽和溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃにより抽出した（２回）。有機層を（無水）ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を、溶離液としてＣｙＨｅｘ／ＥｔＯＡｃのグラジエント（０〜２０％ＥｔＯＡｃを３０分間および２０％ＥｔＯＡｃを１０分間）を用いたシリカクロマトグラフィーカラムにより精製し、標題化合物（２００ｍｇ、６３％）を得た。[ES+ MS] m/z 339 (MH+)。
【０１１６】
中間体２に関して記載したものと類似した方法によってであるが、アルコール（２，２，２−トリフルオロエタノール）を表１に示したものと置き換えることにより、中間体３〜５を調製した。生成物を、溶離液としてＣｙＨｅｘ／ＥｔＯＡｃのグラジエント（０〜１０％ＥｔＯＡｃを３０分間および１０％ＥｔＯＡｃを１０分間）を用いたシリカクロマトグラフィーカラムにより精製した。
【０１１７】
【表１】
2020531575.tif 000017
【０１１８】
中間体６：４−メチレンピペリジン塩酸塩
【化１５】
2020531575.tif 000018
０℃でのジオキサン（１３０ｍＬ）中４−メチレンピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＡＰＯＬＬＯ、１０ｇ、５０．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ジオキサン（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、１３０ｍＬ、５０７ｍｍｏｌ、１０当量）中ＨＣｌ  ４Ｍの溶液を加え、混合物を室温で一晩撹拌した。ＵＰＬＣおよびＴＬＣによるモニタリングは、反応が完了したことを示した。溶媒を真空下で除去し、所望の化合物４‐メチリデンピペリジン塩酸塩を得、これをさらに精製することなく次の工程に用いた（７．６ｇ、１００％）。1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm: 9.19 (br s, 2H), 4.86 (s, 2H), 3.06 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 2.41 (t, J = 6.0 Hz, 4H)。
【０１１９】
中間体７：４，４，４−トリフルオロ−１−（４−メチレンピペリジン−１−イル）ブタン−１−オン
【化１６】
2020531575.tif 000019
ＤＣＭ（２００ｍＬ）中、ＥＤＣ．ＨＣｌ（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、１９．４ｇ、１０１．３ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、２８ｍＬ、２０２．５ｍｍｏｌ）および４，４，４‐トリフルオロ酪酸（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、１４．４ｇ、１０１．３ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１０分間撹拌し、次に、中間体６（６．７７ｇ、５０．６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で一晩撹拌した。次に、混合物を水で洗浄し、２相を分離し、水相をＤＣＭでさらに抽出した。回収した有機層を（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。得られた粗物をフラッシュクロマトグラフィー（Ｓｉ  ＳＮＡＰ  ３４０、ＣｙＨｅｘ／ＥｔＯＡｃ  ９／１〜６／４）により精製し、所望の生成物（１０．３４ｇ、９２％）を淡黄色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 4.83 (s, 2H), 3.70-3.59 (m, 2H), 3.51-3.44 (m, 2H), 2.65-2.47 (m, 4H), 2.30-2.21 (m, 4H)。[ES+ MS] m/z 222 (MH+)。
【０１２０】
中間体８：２，２，２−トリフルオロアセトアルデヒドオキシム
【化１７】
2020531575.tif 000020
メタノール（３０ｍＬ）中、２，２，２−トリフルオロ−１−メトキシエタノール（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、２０ｇ、１５３．８ｍｍｏｌ）および塩酸ヒドロキシルアミン（ＡＶＲＡ、１２．８ｇ、１８４．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、０℃で水（７０ｍＬ）を加え、次いで、５０％水酸化ナトリウム（ＦＩＮＡＲ、３６ｍＬ）の溶液を０℃で徐々に加えた。反応混合物の温度を２６℃に上昇させ、同じ温度で１６時間撹拌した。反応をＴＬＣによりモニタリングした。反応完了時、ｎ−ヘキサン（２５０ｍＬ）を反応混合物に加え、層を分離した。水層を６Ｍ  ＨＣｌで酸性化し（ｐＨ＝３）、次に、ジエチルエーテル（３×５００ｍＬ）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、標題化合物を無色の液体（１８ｇ、粗）として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 9.11 (br s, 1H), 7.54-7.46 (m, 1H)。
【０１２１】
中間体９：臭化２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−ヒドロキシアセチミドイル
【化１８】
2020531575.tif 000021
ＤＭＦ（９０ｍＬ）中、中間体８（１８ｇ、１５９．２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＭＦ（９０ｍＬ）中Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＡＶＲＡ、３１．１ｇ、１７５．２ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で加えた。反応混合物を２６℃で３時間撹拌した。反応をＴＬＣによりモニタリングした。反応完了時、反応混合物を氷水（３００ｍＬ）に注ぎ、ジエチルエーテル（３×４００ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、標題化合物（２５ｇ、粗）を褐色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 11.55 (br s, 1H)。
【０１２２】
中間体１０：プロピオンアルデヒドオキシム
【化１９】
2020531575.tif 000022
ＤＣＭ（３０ｍＬ）中、プロピオンアルデヒド（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、２ｇ、３４．４３ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（ＣＨＥＭＬＡＢＳ、９．３６ｇ、６８．８７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、塩酸ヒドロキシルアミン（ＡＶＲＡ、２．８６ｇ、４１．３２ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を２６℃で１６時間撹拌した。反応をＴＬＣによりモニタリングした。完了時、反応混合物を水（２００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、標題化合物（１．０ｇ）を白色固体として得た。粗化合物を、さらに精製することなく次の工程に用いた。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.50 (br s, 1H), 6.70 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 2.26-2.22 (m, 2H), 1.14-1.09 (m, 3H)。
【０１２３】
中間体１１：塩化Ｎ−ヒドロキシプロピオンイミドイル
【化２０】
2020531575.tif 000023
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中、中間体１０（１ｇ、１３．６８１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎ−クロロスクシンイミド（ＡＶＲＡ、２．１９ｇ、１６．４１ｍｍｏｌ）をロット毎に(lot wise)２６℃で加え、反応混合物を２６℃で３０分間撹拌した。反応をＴＬＣによりモニタリングした。完了時、反応混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブライン溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、標題化合物を無色の液体（１．０ｇ、６８．４％）として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 8.32 (br s, 1H), 2.53 (q, J = 7.4  Hz, 2H), 1.21 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。
【０１２４】
中間体１２：塩化Ｎ−ヒドロキシアセチミドイル
【化２１】
2020531575.tif 000024
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中（Ｅ）−アセトアルデヒドオキシム（ＴＣＩ、１ｇ、１６．９４９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−クロロスクシンイミド（ＡＶＲＡ、２．９ｇ、２２．０３ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。反応混合物の温度を２６℃に上昇させ、同じ温度で３時間とした。反応をＴＬＣによりモニタリングした。反応完了時、反応混合物を氷水（１００ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（２×３００ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、標題化合物（１．２ｇ、粗）を無色の液体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 8.48 (br s, 1H), 2.27 (s, 3H)。
【０１２５】
中間体１３：３−（トリフルオロメチル）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化２２】
2020531575.tif 000025
ＤＣＭ（６０ｍＬ）中、中間体９（６ｇ、３０．４１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、重炭酸カリウム（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、６．０９ｇ、６０．８３ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。次いで、４−メチレンシクロヘキサンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（ＯＡＫＷＯＯＤ、５．８６ｇ、３０．４１５ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。反応混合物を２６℃で１６時間撹拌した。反応をＴＬＣによりモニタリングした。完了時、反応混合物を水（２００ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×２５０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、次に、濾過し、減圧下で濃縮した。粗物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル１００〜２００メッシュ）により精製し、石油エーテル中０〜１０％ＥｔＯＡｃで溶出させた。純画分を回収し、減圧下で濃縮し、標題化合物（６．５ｇ、５６％）を淡黄色液体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 3.80-3.63 (m, 2H), 3.42-3.35 (m, 2H), 2.91 (q, J = 1.5 Hz, 2H), 1.94-1.89 (m, 2H), 1.77-1.67 (m, 2H), 1.47 (s, 9H). [ES- MS] m/z 307 (M-H)。
【０１２６】
中間体１４および１５は、中間体１３に関して記載したものと類似した方法によってであるが、中間体９を表２に示したものと置き換えることにより、また、重炭酸カリウムをＴＥＡに変えることにより、調製した。
【０１２７】
【表２】
2020531575.tif 000026
【０１２８】
中間体１６：３−（トリフルオロメチル）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン塩酸塩
【化２３】
2020531575.tif 000027
ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）中、中間体１３（３ｇ、９．７３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＥｔＯＡｃ（ＳＹＭＡＸ、３０ｍＬ）中４Ｍ  ＨＣｌを０℃で滴下した。反応混合物を２６℃で２時間撹拌した。反応をＴＬＣによりモニタリングした。完了時、反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をジエチルエーテル（１５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、標題化合物（２．２１ｇ、粗）を灰白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 9.42 (br s, 2H), 3.28 (s, 2H), 3.20-3.04 (m, 4H), 2.14-2.00 (m, 4H). [ES+ MS] m/z 209 (MH+)。
【０１２９】
中間体１７および１８は、中間体１６に関して記載したものと類似した方法によってであるが、中間体１３を表３に示したものと置き換えることにより、調製した。
【０１３０】
【表３】
2020531575.tif 000028
【０１３１】
例
例１：４，４，４−トリフルオロ−１−［３−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル］ブタン−１−オン
【化２４】
2020531575.tif 000029
中間体２（２００ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＣＭに溶かし、ＴＦＡ（２ｍＬ）を０℃で滴下した。混合物を０℃で１０分間撹拌した。重炭酸ナトリウムの飽和溶液を反応混合物に加え、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を（無水）ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、次に、濃縮して乾燥させ、黄色残渣を得た。
【０１３２】
０℃でのアルゴン下のＤＭＦ（５ｍＬ）中ＤＩＰＥＡ（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、０．３ｍｌ、１．７６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＢＴＵ（ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ、６６９ｍｇ、１．７６ｍｍｏｌ）および４，４，４−トリフルオロブタン酸（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、１２５ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）を加えた。次に、上記の残渣を加え、混合物をアルゴン下で室温にて一晩撹拌した。次に、ＤＭＦを真空下で除去した。残渣をＨＰＬＣ（アイソクラティックグラジエント、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏギ酸アンモニウムｐＨ３．８：３６／６４）により精製し、標題化合物（１３７ｍｇ、６４％）を得た。1H NMR (300 MHz, CD2Cl2) δ ppm: 4.54 (q, J = 8.3 Hz, 2H), 4.13-4.05 (m, 1H), 3.66-3.45 (m, 2H), 3.35-3.26 (m, 1H), 2.87 (s, 2H), 2.68-2.37 (m, 4H), 2.10-1.84 (m, 2H), 1.78-1.66 (m, 2H). [ES+ MS] m/z 363 (MH+)。
【０１３３】
例２〜４は、例１に関して記載したものと類似した方法によってであるが、中間体２を表４に示したものと置き換えることにより、調製した。精製工程の改変も示す。
【０１３４】
【表４】
2020531575.tif 000030
ａ  ＨＰＬＣ（ｐＨ３．８、アイソクラティックグラジエント、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏギ酸アンモニウム：３３／６７）による精製
ｂ  ＨＰＬＣ（ｐＨ３．８、アイソクラティックグラジエント、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏギ酸アンモニウム：３９／６１）による精製
ｃ  ＨＰＬＣ（ｐＨ３．８、アイソクラティックグラジエント、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏギ酸アンモニウム：５４／４６）による精製
【０１３５】
例５および中間体１９：１−（３−ブロモ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オン
【化２５】
2020531575.tif 000031
ＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ）中、中間体７（９．３ｇ、４２ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、３５．３ｇ、４２０ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ジブロモホルムアルドキシム（ＣＯＭＢＩ−ＢＬＯＣＫＳ、１０．２ｇ、５０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２日間撹拌した。次に、セライトを加え、得られたスラリーを真空下で濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、溶媒を蒸発させ、残渣（約２０ｇ）をフラッシュクロマトグラフィー（Ｓｉ  ＳＮＡＰ  ３４０、ＣｙＨｅｘ／ＥｔＯＡｃ  ８／２〜１／１）により精製し、標題化合物（１２．２３ｇ、８５％）を無色の油状物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 4.32-4.20 (m, 1H), 3.69-3.60 (m, 1H), 3.59-3.47 (m, 1H), 3.31-3.20 (m, 1H), 3.00 (s, 2H), 2.67-2.43 (m, 4H), 2.07-1.96 (m, 2H), 1.78-1.68 (m, 2H). [ES+ MS] m/z 343, 345 (MH+)。
【０１３６】
例６：１−（３−エトキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オン
【化２６】
2020531575.tif 000032
ＥｔＯＨ（４ｍＬ）中、中間体１９（０．１００ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、固体炭酸カリウム（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、０．１０１ｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を加え、得られた懸濁液を密閉バイアル中で７０℃にて２０時間激しく撹拌した。ＵＰＬＣチェックでは、出発材料が依然として存在していたことを示した。次に、反応混合物にＫ３ＰＯ４（ＡＬＦＡ−ＡＥＳＡＲ、０．１６８ｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を加え、出発材料が消費されるまで、７０℃で延長して４時間加熱した。懸濁液を濾過し、濾液を蒸発させ、粗材料を得、これをセミ分取ＬＣＭＳによる精製に供し、標題化合物（０．０４２７ｇ、４７％）を淡黄色固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 4.08 (q, J = 7.03 Hz, 2H), 3.65-3.55 (m, 1H), 3.50-3.37 (m, 3H), 2.84 (s, 2H), 2.65-2.56 (m, 2H), 2.49-2.40 (m, 2H), 1.78-1.56 (m, 4H), 1.27 (t, J = 7.03 Hz, 3H). [ES+ MS] m/z 309 (MH+)。
【０１３７】
例７：４，４，４−トリフルオロ−１−（３−メトキシ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン
【化２７】
2020531575.tif 000033
メタノール（１０ｍＬ）中、中間体１９（１ｇ、２．９１４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ナトリウムメトキシド（ＡＶＲＡ、７８６ｍｇ、１４．５ｍｍｏｌ）を０℃で少量ずつ加えた。反応混合物を７０℃に１６時間加熱した。反応をＴＬＣによりモニタリングした。反応完了時、反応混合物を水（１００ｍＬ）で急冷し、ＥｔＯＡｃ（３×２００ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。粗物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル１００〜２００メッシュ）により精製し、石油エーテル中０〜３０％ＥｔＯＡｃで溶出させた。純画分を回収し、減圧下で濃縮し、標題化合物（８００ｍｇ、９３％）を灰白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 4.24-4.17 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.63-3.49 (m, 2H), 3.30-3.21 (m, 1H), 2.75 (s, 2H), 2.62-2.44 (m, 4H), 2.08-1.95 (m, 2H), 1.71-1.61 (m, 2H). [ES+ MS] m/z 295 (MH+)。
【０１３８】
例８：４，４，４−トリフルオロ−１−（３−（トリフルオロメチル）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン
【化２８】
2020531575.tif 000034
ＤＭＦ（２５ｍＬ）中、中間体１６（２．２ｇ、９．０１６ｍｍｏｌ）および４，４，４−トリフルオロブタン酸（ＯＡＫＷＯＯＤ、１．５３ｇ、１０．８１９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＥＤＣ．ＨＣｌ（ＳＩＬＶＥＲＹ、４．３ｇ、２２．５４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（ＡＶＲＡ、３．２ｇ、２７．０４ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応混合物を２６℃で１６時間撹拌した。反応をＴＬＣによりモニタリングした。完了時、反応混合物を氷冷水（２００ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×２５０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗物（３．２ｇ）をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル１００〜２００メッシュ）により精製し、石油エーテル中０〜２０％ＥｔＯＡｃで溶出させた。純画分を回収し、減圧下で濃縮し、標題化合物（１．７ｇ、５６％）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 4.33-4.25 (m, 1H), 3.74-3.62 (m, 1H), 3.60-3.49 (m, 1H), 3.33-3.21 (m, 1H), 2.94 (s, 2H), 2.64-2.45 (m, 4H), 2.07-1.94 (m, 2H), 1.80-1.68 (m, 2H). [ES+ MS] m/z 333 (MH+)。
【０１３９】
例９および１０は、例８に関して記載したものと類似した方法によってであるが、中間体１６を表５に示したものと置き換えることにより、調製した。
【０１４０】
【表５】
2020531575.tif 000035
【０１４１】
例１１：８−（４，４，４−トリフルオロブタノイル）−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−３−カルボニトリル
【化２９】
2020531575.tif 000036
ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）中、中間体１（５．５ｇ、１７．２３１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＥｔＯＡｃ（ＳＹＭＡＸ、５０ｍＬ）中４Ｍ  ＨＣｌを０℃で加えた。次に、反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応をＴＬＣによりモニタリングした。完了時、反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をジエチルエーテル（３×２０ｍＬ）で摩砕し、固体を乾燥させ、３−クロロ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン塩酸塩（主(mayor)、[ES+ MS] m/z 175 (MH+)）および３−ブロモ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン塩酸塩（副(minor)、[ES+ MS] m/z 219, 221 (MH+)）の混合物（４．０ｇ、粗）を淡黄色固体として得た。
【０１４２】
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中、この混合物（５００ｍｇ）および４，４，４−トリフルオロブタン酸（ＭＡＴＲＩＸ、５００ｍｇ、３．５５４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＭＡＰ（ＡＶＲＡ、８６０ｍｇ、４．１０９ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ．ＨＣｌ（ＡＳＨＶＡＲＳＨＡ、１．１３ｇ、５．９２ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応をＴＬＣによりモニタリングした。完了時、反応混合物を氷冷水（５０ｍＬ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を１Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で蒸発させ、６００ｍｇの以下の化合物の混合物：１−（３−クロロ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オンおよび１−（３−ブロモ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オンを褐色濃厚液体として得た。
【０１４３】
ＤＭＦ（５ｍＬ）中、先の化合物の混合物（２００ｍｇ）の溶液に、シアン化ナトリウム（ＡＳＨＶＡＲＳＨＡ、６５ｍｇ、１．３４２ｍｍｏｌ）を２６℃で加えた。反応混合物を１００℃に加熱し、同じ温度で８時間撹拌した。反応の進行をＴＬＣによりモニタリングした。反応完了時、反応混合物を氷冷水（５ｍＬ）で急冷し、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル１００〜２００メッシュ）により精製し、石油エーテル中８０％ＥｔＯＡｃで溶出させた。純画分を回収し、減圧下で濃縮し、標題化合物（１５０ｍｇ、７８％）を灰白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 4.35-4.25 (m, 1H), 3.75-3.63 (m, 1H), 3.59-3.49 (m, 1H), 3.32-3.21 (m, 1H), 2.96 (s, 2H), 2.64-2.43 (m, 4H), 2.05-1.92 (m, 2 H), 1.80-1.68 (m, 2 H). [ES+ MS] m/z 290 (MH+)。
【０１４４】
例１２：４，４，４−トリフルオロ−１−（３−フルオロ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）ブタン−１−オン
【化３０】
2020531575.tif 000037
ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中、例１１と同じ中間体の混合物（１−（３−クロロ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オンおよび１−（３−ブロモ−１−オキサ−２，８−ジアザスピロ［４．５］デカ−２−エン−８−イル）−４，４，４−トリフルオロブタン−１−オン）（３ｇ）に、フッ化カリウム（ＣＯＭＢＩＢＬＯＣＫＳ、１．７ｇ、３０．１３１ｍｍｏｌ）を２６℃で少量ずつ加えた。反応混合物を１５０℃に加熱し、マイクロ波条件下で３時間撹拌した。反応の進行をＴＬＣによりモニタリングした。反応完了時、反応混合物を水（２００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、（無水）Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗物を分取ＨＰＬＣ（Ｋｒｏｍｏｓｉｌカラム）グラジエント１６分０％〜１００％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．２％ギ酸）により精製した。純画分を回収し、溶媒を凍結乾燥下で除去し、標題化合物（１１ｍｇ、０．４％）を淡黄色ガム状物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 3.61-3.41 (m, 4H), 3.14 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 2.68-2.58 (m, 2H), 2.55-2.44 (m, 2H), 1.84 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 1.74 (t, J = 5.9 Hz, 2H). [ES+ MS] m/z 283 (MH+)。
【０１４５】
生物活性
エチオナミド（ＥＴＨ）と例１〜１１の組合せによる結核菌(M. tuberculosis)ＧＦＰ株の成長阻害の測定
１．  マイコバクテリア組換え株の構築
結核菌(M. tuberculosis)Ｈ３７Ｒｖ−ＧＦＰ株。緑色蛍光タンパク質を発現する結核菌(M. tuberculosis)Ｈ３７Ｒｖの組換え株（Ｈ３７Ｒｖ−ＧＦＰ）を、組込みプラスミドｐＮＩＰ４８のトランスフォーメーションにより得た(Abadie et al., 2005; Cremer et al., 2002)。Ｍｓ６マイコバクテリオファージに由来するこのプラスミドにおいて、ＧＦＰ遺伝子を強力マイコバクテリアプロモーターｐＢｌａＦの下でクローン化し、ＧＦＰを構成的に発現させた。このプラスミドは、ハイグロマイシン耐性遺伝子も含有していた。
【０１４６】
結核菌(M. tuberculosis)Ｗ４−Ｅ１−ＧＦＰ株（変異体）。結核菌(M. tuberculosis)株Ｅ１は、エチオナミド含有寒天プレート（２０μｇ／ｍｌ）上で選択されたＢｅｉｊｉｎｇ株Ｗ４の誘導体であった。この株は、ＥｔｈＡにおけるＧｌｙ３４３Ａｌａ変異を有する。Ｗ４−Ｅ１株を、上記のようにｐＮＩＰ４８を用いてトランスフォームさせ、蛍光株Ｗ４−Ｅ１−ＧＦＰを得た。
【０１４７】
２．  蛍光マイコバクテリアの成長および調製
−８０℃で保存した細菌ストックを用いて、２５ｃｍ２組織培養フラスコ中で、オレイン酸−アルブミン−デキストロース−カタラーゼ（ＯＡＤＣ、Ｄｉｆｃｏ、スパークス、メリーランド州、米国）および５０μｇ  ｍｌ−１ハイグロマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カールスバッド、カリフォルニア州、米国）を添加したミドルブルック７Ｈ９培地５ｍｌを接種した。フラスコを振り混ぜずに３７℃で７日間インキュベートした。次に、培養液を新鮮培養培地で希釈し、ＯＤ６００を０．１とした。培養フラスコ（７５ｃｍ２）をこの希釈培養液５０ｍｌで満たし、振り混ぜずに３７℃で７日間培養した。
【０１４８】
３．  マイクロプレートの調製
エチオナミド（Ｓｉｇｍａ、Ｅ６００５）を、０．１ｍｇ／ｍＬおよび０．８ｍｇ／ｍｌでＤＭＳＯに希釈し、アリコートを−２０℃で凍結保存した。試験化合物を終濃度１０μＭでＤＭＳＯに再懸濁した。エチオナミドおよび試験化合物を３８４ウェル低容量ポリプロピレンプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ｎｏ．３６７２）に移し、これを用いて、アッセイプレートを調製した。化合物の１０回の３倍段階希釈（一般に、３０〜４．５ｅ−３μＭの範囲）を、Ｅｃｈｏ  ５５０  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｈａｎｄｌｅｒ（Ｌａｂｃｙｔｅ）を用いて、黒色のＧｒｅｉｎｅｒ３８４ウェル透明ボトムポリスチレンプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ、ｎｏ．７８１０９１）の中に行った。全ウェルにわたる濃度が等しくなる（０．３％）ように、ＤＭＳＯ量を補った。
【０１４９】
次に、Ｅｃｈｏを用いて、エチオナミドを３８４ウェルプレートに移した。ＥＴＨの終濃度は、Ｈ３７Ｒｖ−ＧＦＰが関与するアッセイでは０．１μｇ／ｍｌ、Ｗ４−Ｅ１−ＧＦＰが関与するアッセイでは０．８μｇ／ｍｌであった。アッセイプレート中のＤＭＳＯの最終量は、各ウェルに対して１％ｖ／ｖ未満のままであった。
【０１５０】
アッセイプレート中の対照は、０．３％のＤＭＳＯ（陰性対照）および１μｇ／ｍｌのＩＮＨ（陽性対照）を含む。参照プレートは、３０〜１．８ｅ−３μｇ／ｍｌ（１５点、２倍希釈）の範囲のリファンピシン、ＩＮＨおよびＥＴＨを含んだ。
【０１５１】
アッセイプレートに添加するＨ３７Ｒｖ−ＧＦＰまたはＷ４−Ｅ１−ＧＦＰの培養液を、ＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、１４１９０）中で２回洗浄し、新鮮培養培地（ハイグロマイシン不添加）に再懸濁し、３７℃で５日間成長させた。
【０１５２】
最後に、培養液を０．０２のＯＤ６００ｎｍまで希釈し、（ハイグロマイシン不添加新鮮培養培地を用いて）、５０μＬを各アッセイプレートに移した。アッセイプレートを３７℃で５日間インキュベートした。ｅｘｃ＝４８５ｎｍ／ｅｍ＝５３５ｎｍを用いたＶｉｃｔｏｒ  ３マルチラベルプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）で、蛍光シグナルを得た。
【０１５３】
結果
ＥＣ５０＿Ｈ３７Ｒｖは、Ｈ３７Ｒｖ株に対するエチオナミド活性を増強する本発明の化合物の能力を測定し、一方、ＥＣ５０＿変異体は、エチオナミドに耐性を示すＴＢの株に対するエチオナミド活性を増強する本発明の化合物の能力を測定する。
【０１５４】
例１〜１２は、基本的に上記の手順に従って試験し、総てが０．７５μＭ未満の平均ＥＣ５０＿Ｈ３７Ｒｖおよび３．０μＭ未満の平均ＥＣ５０＿変異体を有することが認められた。
【０１５５】
例１、２、５〜８、１０および１１は、０．２０μＭ未満の平均ＥＣ５０＿Ｈ３７Ｒｖおよび１．０μＭ未満の平均ＥＣ５０＿変異体を有していた。
【０１５６】
例６〜８は、０．０４μＭ未満の平均ＥＣ５０＿Ｈ３７Ｒｖおよび０．４５μＭ未満の平均ＥＣ５０＿変異体を有していた。例８は、０．０３８μＭの平均ＥＣ５０＿Ｈ３７Ｒｖおよび０．１４μＭの平均ＥＣ５０＿変異体を有していた。
【０１５７】
比較のために、ＷＯ２０１４／０９６３６９の例１０を上記と同じアッセイで試験し、０．８９μＭのＥＣ５０＿Ｈ３７Ｒｖおよび３．５μＭのＥＣ５０＿変異体を有することが認められた。
【０１５８】
Ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおけるヒトマクロファージＴＨＰ−１阻害アッセイ（細胞内アッセイ）における結核菌(Mycobacterium tuberculosis)Ｈ３７Ｒｖ
細胞内スクリーニングは、ヒトマクロファージにおいて活性を示す新規抗結核化合物を同定するために有用なツールである。この生体外アッセイは、疾患を模倣し、宿主細胞の好ましい寄与を考慮した生理学的条件を表し得る(Sorrentino, F. et al. (2016) Antimicrob. Agents Chemother. 60 (1), 640-645.)。
【０１５９】
手順は、ＴＨＰ−１感染細胞を３８４ウェルプレートに播種する前に、感染マクロファージを、４０μｍセルストレーナーを用いた洗浄工程の最終工程において濾過し、細胞集塊を除去し、単一細胞懸濁液を得たことを除き、Sorrentino, F. et al. (2016) Antimicrob. Agents Chemother. 60 (1), 640-645（補足資料）に記載の通りに行った。
【０１６０】
例の化合物は、基本的に上記のアッセイ（エチオナミドの存在なし）に従って試験し、例１、２および４〜１０は、０．５μＭ未満のＩＣ５０を有することが認められた。例５、６、７、８および１０は、０．１μＭ未満のＩＣ５０を有することが認められた。例６、７および８は、０．０５μＭ以下のＩＣ５０を有することが認められた。
【国際調査報告】
2020531575.tif 000041
2020531575.tif 000042
2020531575.tif 000043
2020531575.tif 000044