(57)【要約】  本発明は、ｓｉＲＮＡ分子をコードするアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）粒子、およびハンチントン病（ＨＤ）を治療するための方法に関する。
2020518259.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
順に、
ａ）５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域であって、配列番号１３８０および１３８１からなる群から選択される５’ＩＴＲ配列領域、
ｂ）エンハンサー配列領域であって、配列番号１４０８および１４０９からなる群から選択されるエンハンサー配列領域、
ｃ）プロモータ配列領域であって、配列番号１４１０〜１４１１および配列ＧＴＴＧからなる群から選択されるプロモータ配列領域、
ｄ）第１のイントロン配列領域であって、配列番号１４１７〜１４１９からなる群から選択される第１のイントロン配列領域、
ｅ）調節性ポリヌクレオチド配列領域であって、配列番号１１８３〜１２７９および１３４６〜１３４７からなる群から選択される調節性ポリヌクレオチド配列領域、
ｆ）ポリアデニル化（ポリＡ）シグナル配列領域であって、配列番号１４２０〜１４２３からなる群から選択されるポリＡシグナル配列領域、ならびに
ｇ）３’ＩＴＲ配列領域であって、配列番号１３８２および１３８３からなる群から選択される３’ＩＴＲ配列領域
を含むＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項２】
少なくとも１つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域を更に含み、前記少なくとも１つのＭＣＳ配列領域が、配列番号１３８４〜１３９０および配列ＴＣＧＡＧからなる群から選択される、請求項１に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項３】
１つのＭＣＳ配列領域を含む、請求項２に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項４】
少なくとも１つのエクソン配列領域を更に含み、前記少なくとも１つのエクソン配列領域が、配列番号１４１５および１４１６からなる群から選択される、請求項２に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項５】
１つのエクソン配列領域を含む、請求項４に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項６】
２つのエクソン配列領域を含む、請求項４に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項７】
第２のイントロン配列領域を含む、請求項６に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項８】
第１のＭＣＳ配列領域および第２のＭＣＳ配列領域を含む、請求項２に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項９】
前記第１のＭＣＳ配列領域が前記５’ＩＴＲ配列領域の３’に位置し、前記第２のＭＣＳ配列領域が前記調節性ポリヌクレオチド配列領域の３’に位置する、請求項８に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項１０】
少なくとも１つのエクソン配列領域を更に含み、前記少なくとも１つのエクソン配列領域が、配列番号１４１５および１４１６からなる群から選択される、請求項８に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項１１】
１つのエクソン配列領域を含む、請求項１０に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項１２】
２つのエクソン配列領域を含む、請求項１０に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項１３】
第２のイントロン配列領域を含む、請求項１２に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項１４】
前記第１のＭＣＳ配列領域が前記５’ＩＴＲ配列領域の３’に位置し、前記第２のＭＣＳ配列領域が前記調節性ポリヌクレオチド配列領域の３’に位置し、前記２つのエクソン配列領域が前記プロモータ領域の３’および前記調節性ポリヌクレオチド配列領域の５’に位置し、ならびに前記第２のイントロン配列領域が前記第１のイントロン配列領域の３’に位置する、請求項１３に記載のＡＡＶウイルスゲノム。
【請求項１５】
配列番号１３５２〜１３７９、１３８８、および１４２６〜１４３８、またはそれらと少なくとも９５％同一性を有する変異体からなる群から選択されるＡＡＶウイルスゲノムポリヌクレオチド。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか一項に記載のＡＡＶウイルスゲノムを含むＡＡＶ粒子。
【請求項１７】
ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３−３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４−４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２−１ｂ、ＡＡＶ４２−２、ＡＡＶ４２−３ａ、ＡＡＶ４２−３ｂ、ＡＡＶ４２−４、ＡＡＶ４２−５ａ、ＡＡＶ４２−５ｂ、ＡＡＶ４２−６ｂ、ＡＡＶ４２−８、ＡＡＶ４２−１０、ＡＡＶ４２−１１、ＡＡＶ４２−１２、ＡＡＶ４２−１３、ＡＡＶ４２−１５、ＡＡＶ４２−ａａ、ＡＡＶ４３−１、ＡＡＶ４３−１２、ＡＡＶ４３−２０、ＡＡＶ４３−２１、ＡＡＶ４３−２３、ＡＡＶ４３−２５、ＡＡＶ４３−５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１−７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１−８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２−１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２−３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２−４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２−５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３−９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３−１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４−８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４−９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４−１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５−３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５−２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ−ＤＪ、ＡＡＶ−ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ−１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ−５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ−１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ−４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１−８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ  １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギ  ＡＡＶ、ウシ  ＡＡＶ、ヒツジ  ＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ、ＡＡＶ−ＬＫ０１、ＡＡＶ−ＬＫ０２、ＡＡＶ−ＬＫ０３、ＡＡＶ−ＬＫ０４、ＡＡＶ−ＬＫ０５、ＡＡＶ−ＬＫ０６、ＡＡＶ−ＬＫ０７、ＡＡＶ−ＬＫ０８、ＡＡＶ−ＬＫ０９、ＡＡＶ−ＬＫ１０、ＡＡＶ−ＬＫ１１、ＡＡＶ−ＬＫ１２、ＡＡＶ−ＬＫ１３、ＡＡＶ−ＬＫ１４、ＡＡＶ−ＬＫ１５、ＡＡＶ−ＬＫ１６、ＡＡＶ−ＬＫ１７、ＡＡＶ−ＬＫ１８、ＡＡＶ−ＬＫ１９、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ−２−ｐｒｅ−ｍｉＲＮＡ−１０１、ＡＡＶ−８ｈ、ＡＡＶ−８ｂ、ＡＡＶ−ｈ、ＡＡＶ−ｂ、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−２、ＡＡＶシャッフル１００−１、ＡＡＶシャッフル１００−３、ＡＡＶシャッフル１００−７、ＡＡＶシャッフル１０−２、ＡＡＶシャッフル１０−６、ＡＡＶシャッフル１０−８、ＡＡＶシャッフル１００−２、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−１、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−８、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−３、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−１０、ＢＮＰ６１  ＡＡＶ、ＢＮＰ６２  ＡＡＶ、ＢＮＰ６３  ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４−８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、トゥルータイプＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ  ＡＡＶ１０、ジャパニーズＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１０、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．２、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．７、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．８、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ１、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ２、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−ｅ５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ６、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ７、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−２、ＡＡＶ  ＣＨｔ−３、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１０、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．５、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．６、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．７、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ２、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ５、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ６、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ９、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１０、ＡＡＶ  ＣＫｄ−２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−７、ＡＡＶ  ＣＫｄ−８、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ５、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ７、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ８、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ５、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−���９、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ１、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ２、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ３、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ４、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ５、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ６、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ７、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−１、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−１０、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１２、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１３、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−４、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−７、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−８、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−９、ＡＡＶ  ＣＬｖ−２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｅ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ９、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ９、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１０、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１１、ＡＡＶ  ＣＳｐ−２、ＡＡＶ  ＣＳｐ−３、ＡＡＶ  ＣＳｐ−４、ＡＡＶ  ＣＳｐ−６、ＡＡＶ  ＣＳｐ−７、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．１０、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．２、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．４、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．５、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．６、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．７、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．８、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．９、ＡＡＶ  ＣＳｐ−９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ−３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、
ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、ＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ＡＡＶ−ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ−ＰＨＰ．Ａ、Ｇ２Ｂ−２６、Ｇ２Ｂ−１３、ＴＨ１．１−３２、ＴＨ１．１−３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ−ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＴＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＧＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＧＧＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３、ＡＡＶＧ２Ｂ４、および／またはＡＡＶＧ２Ｂ５、ならびにそれらのバリアントからなる群から選択されるＡＡＶ血清型を含む、請求項１６に記載のＡＡＶ粒子。
【請求項１８】
請求項１６〜１７のいずれか一項に記載のＡＡＶ粒子を含む医薬組成物。
【請求項１９】
細胞におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害する方法であって、請求項１８に記載の医薬組成物を前記細胞に投与することを含む方法。
【請求項２０】
前記細胞が哺乳類細胞である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記哺乳類細胞が、中型有棘ニューロン、皮質ニューロン、またはアストロサイトである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
治療を必要としている対象のハンチントン病（ＨＤ）を治療する方法であって、請求項１８に記載の医薬組成物の治療有効量を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項２３】
ＨＴＴの発現が阻害または抑制される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
ＨＴＴの発現が約３０％〜約７０％阻害または抑制される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
ＨＴＴの発現が約５０％〜約９０％阻害または抑制される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
細胞におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害する方法であって、前記ＨＴＴ遺伝子は前記細胞の内部で機能獲得効果を引き起こすものであり、請求項１８に記載の医薬組成物を前記細胞に投与することを含む方法。
【請求項２７】
前記細胞が哺乳類細胞である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記哺乳類細胞が、中型有棘ニューロン、皮質ニューロン、またはアストロサイトである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
対象の中枢神経系の一領域におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害する方法であって、請求項１８に記載の医薬組成物を前記細胞に投与することを含む方法。
【請求項３０】
前記領域が前脳である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記発現が、前記前脳の被殻において低下する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記被殻におけるＨＴＴの発現が、４０〜７０％低下する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
治療を必要としている対象のハンチントン病（ＨＤ）を治療する方法であって、前記方法が、対象の中枢神経系の一領域におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害し、請求項１８に記載の医薬組成物を前記細胞に投与することを含む方法。
【請求項３４】
前記領域が前脳である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
前記発現が、前記前脳の被殻において低下する、請求項３３の方法。
【請求項３６】
前記被殻におけるＨＴＴの発現が、４０〜７０％低下する、請求項３４の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ハンチンチン（ＨＴＴ）遺伝子（例えば、野生型または突然変異型ＣＡＧ伸長ＨＴＴ遺伝子）を標的とする調節性ポリヌクレオチド、例えば低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）分子をコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を設計、調製、製造、使用および／または製剤化するための組成物、方法およびプロセスに関する。突然変異型ＨＴＴ遺伝子のターゲティングはＨＴＴ遺伝子発現および結果として生じるＨＴＴタンパク質産生に干渉し得る。ｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターに挿入されてもよい。神経変性疾患（例えばハンチントン病（ＨＤ））を有する対象のＨＴＴ遺伝子発現を阻害するためのＡＡＶ粒子の使用方法もまた開示される。
【背景技術】
【０００２】
ハンチントン病（ＨＤ）は、進行性の舞踏運動、精神神経および認知機能障害によって特徴付けられる単一遺伝子性の致死性神経変性疾患である。ハンチントン病は、ハンチンチン（ＨＴＴ）遺伝子のＮ末端にポリグルタミンをコードする常染色体優性トリプレット（ＣＡＧ）リピート伸長によって引き起こされることが知られている。このリピート伸長がＨＴＴの毒性の機能獲得をもたらし、最終的に線条体神経変性につながり、それが広汎性脳萎縮へと進行する。症状は典型的には３５〜４４歳で現れ、疾患発症後の平均余命は１０〜２５年である。興味深いことに、ＨＴＴ伸長の長さが発症年齢および疾患進行速度の両方と相関し、伸長が長いほど、より高い疾患重症度に結び付く。ＨＤ集団のごく一部では（約６％）、２〜２０歳で無動・筋強直症候群の出現を伴い疾患発症が起こる。これらの症例は遅発型と比べて進行が速い傾向があり、若年性またはウェストファール変異型ＨＤに分類されている。現在、米国および欧州で約３５，０００〜７０，０００人の患者がＨＤに罹患していると推定される。現在、ＨＤの治療には対症的軽減および支持療法のみが利用可能であり、治療法は未だ同定されていない。最終的に、ＨＤ罹患者は他の疾患（例えば、肺炎、心不全）、息詰まり、窒息またはその他の、転倒による身体的外傷などの合併症に陥る。
【０００３】
ＣＡＧ伸長ＨＴＴが神経毒性をもたらす機構については十分に解明されていない。ハンチンチンタンパク質はあらゆる細胞に発現し、但しその濃度は脳で最も高い。ＨＴＴの正常機能は分かっていないが、ＨＤ患者の脳ではＨＴＴが凝集して異常な核封入体になる。現在では、関連するタンパク質中間体（すなわち可溶性種および毒性Ｎ末端断片）に加えて、このミスフォールディングおよび凝集過程が神経毒性をもたらすと考えられている。
【０００４】
ＨＤ動物モデルにおける研究によれば、例えば調節発現モデルにおける遺伝子遮断後に、表現型の逆転が実現可能であることが示唆されている。更に、ＨＴＴのサイレンシングを試験した動物モデルにより有望な結果が実証されており、この療法は良好に忍容されたと共に、潜在的な治療利益を示した。これらの知見は、ＨＴＴサイレンシングがＨＤ治療の潜在的な治療標的となり得ることを示している。
【０００５】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、パルボウイルスファミリーのメンバーであり、主に、このウイルスが明らかに非病原性であり、実際、ＡＡＶはいかなるヒト疾患にも関連付けられていないため、遺伝子療法の魅力的なベクターとして登場した。更なる魅力は、分裂および非分裂細胞を形質導入することが可能であること（ニューロンの効率的な形質導入を含む）、ヒトにおける炎症促進性および免疫応答が少ないこと、ヘルパーウイルス無しには自律的複製が不能であること（ＡＡＶは、ディペンドウイルス属に属するヘルパー依存性ＤＮＡパルボウイルスである）、および遺伝子発現が長期間にわたることによる。１０種超の組換えＡＡＶ血清型（ｒＡＡＶ）が操作によりベクターにされているが、遺伝子療法を試みるために最も頻繁に使用される血清型はｒＡＡＶ２である。ニューロン形質導入がより効率的である追加のｒＡＡＶ血清型が開発され、動物モデルにおいて試験されている。
【０００６】
本発明は、この疾患を治療するためにＨＤ患者においてＣＡＧ伸長ＨＴＴの発現を阻害または防止するための新規二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）コンストラクトおよびｓｉＲＮＡコンストラクトをコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子、およびそれらの設計方法を開発する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本明細書には、ハンチントン病（ＨＤ）関連症状および障害を治療、予防、緩和および／または改善するためのｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を投与する方法、プロセス、組成物キットおよびデバイスが記載される。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、ＨＴＴを標的とし、細胞および／または対象におけるＨＴＴの発現を低減するためのｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むウイルスゲノムを提供する。
【０００９】
一部の実施形態において、ウイルスゲノムは、限定はされないが、配列番号１３８０および１３８１などの、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域、限定はされないが、配列番号１４０８および１４０９などの、エンハンサー配列領域、限定はされないが、配列番号１４１０〜１４１１および配列ＧＴＴＧなどのプロモータ配列領域、限定はされないが、配列番号１４１７〜１４１９などの、少なくとも１つのイントロン配列領域、限定はされないが、配列番号１１８３〜１２７９および１３４６〜１３４７などの、調節性ポリヌクレオチド配列領域、限定はされないが、配列番号１４２０〜１４２３などの、ポリアデニル化（ポリＡ）シグナル配列領域、ならびに配列番号１３８２および１３８３などの、３’ＩＴＲ配列領域を含む。
【００１０】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、少なくとももう１つの配列領域を含み得る。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、限定はされないが、配列番号３８４〜１３９０および配列ＴＣＧＡＧなどの、少なくとも１つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、１つのＭＣＳ配列領域を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのＭＣＳ配列領域を含む。
【００１１】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、限定はされないが、配列番号１３９０〜１４０７などの、少なくとも１つのフィラー配列領域を含む。一実施形態において、ＡＡＶウイルスゲノムは、１つのフィラー配列領域を含む。一実施形態において、ＡＡＶウイルスゲノムは、２つのフィラー配列領域を含む。
【００１２】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、限定はされないが、配列番号１４１５および１４１６などの、少なくとも１つのエクソン配列領域を含む。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、１つのイントロン配列領域を含む。
【００１３】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのイントロン配列領域を含む。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域、エンハンサー配列領域、プロモータ配列領域、少なくとも１つのイントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド配列領域、ポリアデニル化（ポリＡ）シグナル配列領域、および３’ＩＴＲ配列領域を含む。非限定的な例として、ＡＡＶウイルスゲノムは、配列番号１３５２〜１３７９などの配列、またはその断片もしくは変異体を含む。
【００１４】
一実施形態において、限定はされないが、配列番号１３５２〜１３７９のいずれかまたはそれらと少なくとも９５％の同一性を有する変異体などのウイルスゲノム。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、限定はされないが、配列番号１３５２〜１３７９のいずれかまたはそれらと少なくとも９５％の同一性を有する変異体などの、ウイルスゲノムを含み得る。ＡＡＶ粒子は、限定はされないが、表１に挙げられる血清型のいずれかなどの血清型を含み得る。
【００１５】
本明細書ではまた、ＡＡＶ粒子の医薬組成物も提供される。ＡＡＶ粒子は、限定はされないが、配列番号１３５２〜１３７９のいずれかまたはそれらと少なくとも９５％の同一性を有する変異体などの、ウイルスゲノムを含み得る。ＡＡＶ粒子は、限定はされないが、表１に挙げられる血清型のいずれかなどの血清型を含み得る。
【００１６】
一部の実施形態において、本発明は、細胞におけるＨＴＴ遺伝子発現を阻害／サイレンシングする方法を提供する。細胞は、ニューロン（例えば、被殻、尾状核または線条体の中型有棘ニューロン、および大脳皮質の皮質ニューロン）、アストロサイト（例えば、線条体のアストロサイト、大脳皮質の皮質アストロサイト）および／またはオリゴデンドロサイトであってもよい。非限定的な例として、被殻、尾状核および皮質におけるＨＴＴ遺伝子発現の阻害（または低減）が、対象におけるハンチントン病の効果を低下させる。別の非限定的な例として、線条体の中型有棘ニューロンにおけるＨＴＴ遺伝子発現の阻害（または低減）が、対象におけるハンチントン病の効果を低下させる。更に別の非限定的な例として、線条体のアストロサイトにおけるＨＴＴ遺伝子発現の阻害（または低減）が、対象におけるハンチントン病の効果を低下させる。一部の態様において、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害とは、少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％の阻害または低減を指す。したがって、標的遺伝子のタンパク質産物は少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％阻害され得る。
【００１７】
一実施形態において、本発明は、ｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むウイルスゲノムを使用して、細胞においてＨＴＴ遺伝子発現を少なくとも約４０％阻害／サイレンシングする方法を提供する。細胞は、ニューロン（例えば、被殻または線条体の中型有棘ニューロン、および大脳皮質の皮質ニューロン）、アストロサイト（例えば、線条体のアストロサイト、大脳皮質の皮質アストロサイト）および／またはオリゴデンドロサイトであってもよい。非限定的な例として、被殻および皮質におけるＨＴＴ遺伝子発現の少なくとも４０％の阻害（または低減）が、対象におけるハンチントン病の効果を低下させる。別の非限定的な例として、線条体の中型有棘ニューロンにおけるＨＴＴ遺伝子発現の少なくとも４０％の阻害（または低減）が、対象におけるハンチントン病の効果を低下させる。更に別の非限定的な例として、線条体のアストロサイトにおけるＨＴＴ遺伝子発現の少なくとも４０％の阻害（または低減）が、対象におけるハンチントン病の効果を低下させる。
【００１８】
一部の実施形態において、本発明は、治療を必要としている対象のＨＴＴ遺伝子（例えば、ＣＡＧ伸長ＨＴＴ遺伝子）および結果として生じるＨＴＴタンパク質（例えばポリＱタンパク質）に関連するハンチントン病を治療する、または改善する方法であって、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子を含む医薬組成物の薬学的有効量を対象に投与すること、およびその対象においてＨＤの症状を改善することを含む方法を提供する。
【００１９】
一部の実施形態において、ＨＴＴ遺伝子を標的とする少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子が、ＨＤの治療および／または改善を必要としている対象に投与される。ＡＡＶベクター血清型は、表１に挙げられる血清型のいずれであってもよい。
【００２０】
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、対象の中枢神経系に直接、例えば頭蓋内注射によって導入されてもよい。
一部の実施形態において、本発明の医薬組成物は単独療法として使用される。他の実施形態において、本発明の医薬組成物は併用療法で使用される。併用療法は、ニューロン変性に対するそれらの神経保護効果に関して試験済みの、小分子化合物、成長因子およびホルモンなどの１つ以上の神経保護剤との併用であってもよい。
【００２１】
一部の実施形態において、本発明は、本明細書に記載されるプラスミドまたはＡＡＶベクターの治療有効量をそれを必要としている対象に投与することによりハンチントン病を治療する、または改善する方法を提供する。
【００２２】
一部の実施形態において、本発明は、発現されると対象におけるＨＴＴの発現を阻害または抑制するｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含む少なくとも１つのＡＡＶ粒子を有する組成物を対象に投与することによって、対象の中枢神経系の一領域におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害する方法を提供する。発現は、対象の一領域、限定はされないが対象の前脳など、または前脳の一領域、限定はされないが被殻などで低下し得る。前脳または前脳の一領域（例えば被殻）におけるＨＴＴの発現は４０〜７０％、４０〜６０％、５０〜７０％、５０〜６０％低下してもよく、またはそれは５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、または６０％低下してもよい。
【００２３】
一部の実施形態において、本発明は、治療を必要としている対象のハンチントン病（ＨＤ）を治療する方法を提供する。発現されると対象におけるＨＴＴの発現を阻害または抑制するｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含む少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含む組成物を対象に投与することを含むこの方法は、対象の中枢神経系の一領域におけるＨＴＴ遺伝子の発現を阻害し得る。発現は、対象の一領域、限定はされないが対象の前脳など、または前脳の一領域、限定はされないが被殻などで低下し得る。前脳または前脳の一領域（例えば被殻）におけるＨＴＴの発現は４０〜７０％、４０〜６０％、５０〜７０％、５０〜６０％低下してもよく、またはそれは５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、または６０％低下してもよい。
【００２４】
前出の目的、特徴、および利点ならびに他の目的、特徴、および利点は、付属の図面において例示される、本発明の特定の実施形態についての以下の説明から明らかになるであろう。図面は、必ずしも縮尺通りではなく、本発明の多様な実施形態についての原理を例示することに強調を置いている。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】本発明のウイルスゲノムの概略図。
【図２】本発明のウイルスゲノムの概略図。
【図３】本発明のウイルスゲノムの概略図。
【図４】本発明のウイルスゲノムの概略図。
【図５】本発明のウイルスゲノムの概略図。
【図６】本発明のウイルスゲノムの概略図。
【図７】本発明のウイルスゲノムの概略図。
【図８】本発明のウイルスゲノムの概略図。
【図９】本発明のウイルスゲノムの概略図。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本発明の１つ以上の実施形態の詳細が下記の添付の説明に示される。本発明の実施または試験においては本明細書に記載されるものと同様のまたは等価な任意の材料および方法を使用し得るが、ここで好ましい材料および方法について説明する。本発明の他の特徴、目的および利点が、この説明から明らかになるであろう。説明においては、文脈上特に明確に指示されない限り、単数形に複数形も含まれる。特に定義されない限り、本明細書で使用される全ての科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般的に理解するのと同じ意味を有する。矛盾が生じた場合、本説明が優先するものとする。
【００２７】
Ｉ．本発明の組成物
本発明によれば、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）によって、調節性ポリヌクレオチドおよび／または調節性ポリヌクレオチドに基づく組成物を送達するための組成物が提供される。本発明のＡＡＶ粒子は、インビボ、エクスビボまたはインビトロにて、幾つかの投与経路のいずれかを介して、細胞、組織、臓器、または生物に提供することができる。
【００２８】
本明細書で使用されるとき、「ＡＡＶ粒子」は、少なくとも１つのペイロード領域および少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）領域を有するウイルスゲノムを含むウイルスである。
【００２９】
本明細書で使用されるとき、「ウイルスゲノム」または「ベクターゲノム」または「ウイルスベクター」は、ＡＡＶ粒子に被包された核酸配列を指す。ウイルスゲノムは、ポリペプチドまたはそれらの断片をコードする少なくとも１つのペイロード領域を含む。
【００３０】
本明細書で使用されるとき、「ペイロード」または「ペイロード領域」は、本発明の１つ以上のポリペプチドをコードする任意の核酸分子である。ペイロード領域は、最低限、センス配列およびアンチセンス配列、ｓｉＲＮＡに基づく組成物、またはその断片をコードする核酸配列を含むが、任意選択で、転写発現および／またはポリペプチド翻訳を促進する１つ以上の機能性または調節エレメントも含み得る。
【００３１】
本明細書で開示される核酸配列およびポリペプチドは、本発明の調節性ポリヌクレオチドおよび／または調節性ポリヌクレオチドに基づく組成物の発現を可能にするようにアセンブルされたモジュール型のエレメントおよび／または配列モチーフを含有するように操作されていてもよい。一部の実施形態において、ペイロード領域を含む核酸配列は、プロモータ領域、イントロン、コザック配列、エンハンサーまたはポリアデニル化配列の１つ以上を含み得る。本発明のペイロード領域は、典型的には、少なくとも１つのセンス配列およびアンチセンス配列、ｓｉＲＮＡに基づく組成物、または前述のものの断片を、互いに組み合わせてまたは他のポリペプチド部分と組み合わせてコードする。
【００３２】
ＡＡＶ粒子のウイルスゲノム内の本発明のペイロード領域は、１つ以上の標的細胞、組織、臓器または生物に送達され得る
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）およびＡＡＶ粒子
パルボウイルス科のウイルスは、一本鎖ＤＮＡゲノムによって特徴付けられる小型非エンベロープ二十面体カプシドウイルスである。パルボウイルス科ウイルスは、２つの亜科：脊椎動物に感染するパルボウイルス亜科および無脊椎動物に感染するデンソウイルス亜科で構成される。このウイルスファミリーは、その構造が比較的で単純であり、標準的分子生物学技法を使用して容易に操られるため、生物学的ツールとして有用である。ウイルスのゲノムは、所望のペイロードが担持されているかまたは所望のペイロードを発現もしくは送達するように操作されている機能的組換えウイルスまたはウイルス粒子をアセンブリするための最低限の成分を含有するように修飾することができ、所望のペイロードを、標的細胞、組織、臓器、または生物に送達することができる。
【００３３】
パルボウイルスおよびパルボウイルス科の他のメンバーは、ケネス  Ｉ．ベルン（Ｋｅｎｎｅｔｈ  Ｉ．Ｂｅｒｎｓ）、「パルボウイルス科：ウイルスおよびそれらの複製（Ｔｈｅ  Ｖｉｒｕｓｅｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ）」、フィールズ・バイロロジー（ＦＩＥＬＤＳ  ＶＩＲＯＬＯＧＹ）（第３版、１９９６年）の第６９章に概説されている。その内容は全体として参照により援用される。
【００３４】
パルボウイルス科は、限定はされないが、ヒト、霊長類、ウシ、イヌ、ウマ、およびヒツジ種を含む脊椎動物宿主において複製可能なアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含むディペンドウイルス属を含む。
【００３５】
ＡＡＶウイルスゲノムは、およそ５，０００ヌクレオチド（ｎｔ）長の線形一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）分子である。ＡＡＶウイルスゲノムは、ペイロード領域および少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）またはＩＴＲ領域を含み得る。ＩＴＲは、伝統的には、非構造タンパク質（Ｒｅｐ遺伝子によってコードされる）および構造タンパク質（カプシド遺伝子またはＣａｐ遺伝子によってコードされる）のコードヌクレオチド配列に隣接する。理論によって束縛されることを望むものではないが、ＡＡＶウイルスゲノムは、典型的には、２つのＩＴＲ配列を含む。ＡＡＶウイルスゲノムは、エネルギー的に安定した二本鎖領域を形成するｓｓＤＮＡの５’末端および３’末端の自己相補的な末端１４５ｎｔによって規定される特徴的なＴ形ヘアピン構造を含む。二本鎖ヘアピン構造は、限定はされないが、宿主ウイルス複製細胞の内因性ＤＮＡポリメラーゼ複合体のプライマーとして機能することによってＤＮＡ複製の起点として働くことを含む、複数の機能を含む。
【００３６】
コード化異種性ペイロードに加えて、ＡＡＶベクターは、全体または一部が、任意の天然に存在するおよび／または組換えのＡＡＶ血清型ヌクレオチド配列または変異体のウイルスゲノムを含み得る。ＡＡＶバリアントは、概して物理的および機能的等価物であるコンストラクトを産生し、同様の機序によって複製し、および同様の機序によってアセンブルするように、核酸レベル（ゲノムまたはカプシド）およびアミノ酸レベル（カプシド）において有意に相同性である配列を有し得る。チオリニ（Ｃｈｉｏｒｉｎｉ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ．）、第７１巻、ｐ．６８２３〜３３（１９９７年）；スリバスタバ（Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ）、第４５巻、ｐ．５５５〜６４（１９８３年）；チオリニ（Ｃｈｉｏｒｉｎｉ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ）、第７３巻、ｐ．１３０９〜１３１９（１９９９年）；ラトリッジ（Ｒｕｔｌｅｄｇｅ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ）、第７２巻、ｐ．３０９〜３１９（１９９８年）；およびウー（Ｗｕ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ）、第７４巻、ｐ．８６３５〜４７（２０００年）。これらの各々の内容は、本明細書において全体として参照により援用される。
【００３７】
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子は、複製欠損型である組換えＡＡＶベクターであり、それらのウイルスゲノム内に機能的ＲｅｐおよびＣａｐタンパク質をコードする配列を欠如する。これらの欠損ＡＡＶベクターは、ほとんどのまたは全ての親コード配列を欠如してもよく、本質的に、１つまたは２つのＡＡＶ  ＩＴＲ配列および細胞、組織、臓器または生物に送達するための目的の核酸のみを有していてもよい。
【００３８】
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、そこにコードされたコード配列の複製、転写および翻訳を提供する少なくとも１つの制御エレメントを含む。コード配列が適切な宿主細胞中で複製、転写および／または翻訳されることが可能である限り、制御エレメントは全てが常に存在する必要があるわけではない。発現制御エレメントの非限定的な例としては、転写開始および／もしくは終結のための配列、プロモータおよび／もしくはエンハンサー配列、スプライシングおよびポリアデニル化シグナルなどの効率的ＲＮＡプロセシングシグナル、細胞質ｍＲＮＡを安定させる配列、翻訳有効性を増強する配列（例えば、コザックコンセンサス配列）、タンパク質安定性を増強する配列、ならびに／またはタンパク質プロセシングおよび／もしくは分泌を増強する配列が挙げられる。
【００３９】
本発明によれば、療法および／または診断に使用されるＡＡＶ粒子は、目的の核酸ペイロードまたはカーゴの形質導入に必要な最低限の成分へと純化または縮小されているウイルスを含む。このように、ＡＡＶ粒子は、野生型ウイルスに見られる有害な複製および／または組込み特徴を欠きながらも、特異的送達媒体として操作される。
【００４０】
本発明のＡＡＶベクターは、組換え的に産生されてもよく、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）親または参照配列に基づいていてもよい。本明細書で使用されるとき、「ベクター」は、本明細書に記載される核酸などの異種分子を輸送し、形質導入し、またはその他担体として働く任意の分子または部分を意味する。
【００４１】
一本鎖ＡＡＶウイルスゲノム（例えば、ｓｓＡＡＶ）に加えて、本発明はまた、自己相補的ＡＡＶ（ｓｃＡＡＶ）ウイルスゲノムも提供する。ｓｃＡＡＶウイルスゲノムは、共にアニーリングして二本鎖ＤＮＡを形成するＤＮＡ鎖を含有する。第２鎖の合成をスキップすることにより、ｓｃＡＡＶは、細胞において迅速に発現することが可能である。
【００４２】
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子はｓｃＡＡＶである。
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子はｓｓＡＡＶである。
ＡＡＶ粒子を作製および／または修飾する方法は、シュードタイプＡＡＶベクターなど、当該技術分野において開示されている（国際公開第２０００２８００４号パンフレット、同第２００１２３００１号パンフレット、同第２００４１１２７２７号パンフレット、同第２００５００５６１０号パンフレットおよび同第２００５０７２３６４号パンフレット、これらの各々の内容は全体として参照により本明細書に援用される）。
【００４３】
ＡＡＶ粒子は、送達効率が増強されるように修飾されてもよい。かかる修飾されたＡＡＶ粒子は、効率的にパッケージングすることができ、高頻度でおよび最低限の毒性で標的細胞への感染を成功させるために使用することができる。一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子のカプシドは、米国特許出願公開第２０１３０１９５８０１号明細書に記載される方法に従って操作される。この内容は、本明細書において全体として参照によって援用される。
【００４４】
一実施形態において、本発明のポリペプチドをコードするペイロード領域を含むＡＡＶ粒子は、哺乳類細胞に導入することができる。
ＡＡＶ血清型
本発明のＡＡＶ粒子は任意の天然または組換えＡＡＶ血清型を含んでもよく、またはそれに由来してもよい。本発明によれば、ＡＡＶ粒子は以下のいずれか、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ２Ｇ９、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３ａ、ＡＡＶ３ｂ、ＡＡＶ３−３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ４−４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ７．２、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１６．３、ＡＡＶ２４．１、ＡＡＶ２７．３、ＡＡＶ４２．１２、ＡＡＶ４２−１ｂ、ＡＡＶ４２−２、ＡＡＶ４２−３ａ、ＡＡＶ４２−３ｂ、ＡＡＶ４２−４、ＡＡＶ４２−５ａ、ＡＡＶ４２−５ｂ、ＡＡＶ４２−６ｂ、ＡＡＶ４２−８、ＡＡＶ４２−１０、ＡＡＶ４２−１１、ＡＡＶ４２−１２、ＡＡＶ４２−１３、ＡＡＶ４２−１５、ＡＡＶ４２−ａａ、ＡＡＶ４３−１、ＡＡＶ４３−１２、ＡＡＶ４３−２０、ＡＡＶ４３−２１、ＡＡＶ４３−２３、ＡＡＶ４３−２５、ＡＡＶ４３−５、ＡＡＶ４４．１、ＡＡＶ４４．２、ＡＡＶ４４．５、ＡＡＶ２２３．１、ＡＡＶ２２３．２、ＡＡＶ２２３．４、ＡＡＶ２２３．５、ＡＡＶ２２３．６、ＡＡＶ２２３．７、ＡＡＶ１−７／ｒｈ．４８、ＡＡＶ１−８／ｒｈ．４９、ＡＡＶ２−１５／ｒｈ．６２、ＡＡＶ２−３／ｒｈ．６１、ＡＡＶ２−４／ｒｈ．５０、ＡＡＶ２−５／ｒｈ．５１、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９、ＡＡＶ３−９／ｒｈ．５２、ＡＡＶ３−１１／ｒｈ．５３、ＡＡＶ４−８／ｒ１１．６４、ＡＡＶ４−９／ｒｈ．５４、ＡＡＶ４−１９／ｒｈ．５５、ＡＡＶ５−３／ｒｈ．５７、ＡＡＶ５−２２／ｒｈ．５８、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１、ＡＡＶ１２７．５／ｈｕ．４２、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３、ＡＡＶ１４５．５／ｈｕ．５４、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５５、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５、ＡＡＶＡ３．３、ＡＡＶＡ３．４、ＡＡＶＡ３．５、ＡＡＶＡ３．７、ＡＡＶＣ１、ＡＡＶＣ２、ＡＡＶＣ５、ＡＡＶ−ＤＪ、ＡＡＶ−ＤＪ８、ＡＡＶＦ３、ＡＡＶＦ５、ＡＡＶＨ２、ＡＡＶｒｈ．７２、ＡＡＶｈｕ．８、ＡＡＶｒｈ．６８、ＡＡＶｒｈ．７０、ＡＡＶｐｉ．１、ＡＡＶｐｉ．３、ＡＡＶｐｉ．２、ＡＡＶｒｈ．６０、ＡＡＶｒｈ．４４、ＡＡＶｒｈ．６５、ＡＡＶｒｈ．５５、ＡＡＶｒｈ．４７、ＡＡＶｒｈ．６９、ＡＡＶｒｈ．４５、ＡＡＶｒｈ．５９、ＡＡＶｈｕ．１２、ＡＡＶＨ６、ＡＡＶＬＫ０３、ＡＡＶＨ−１／ｈｕ．１、ＡＡＶＨ−５／ｈｕ．３、ＡＡＶＬＧ−１０／ｒｈ．４０、ＡＡＶＬＧ−４／ｒｈ．３８、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９、ＡＡＶＮ７２１−８／ｒｈ．４３、ＡＡＶＣｈ．５、ＡＡＶＣｈ．５Ｒ１、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ１、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ２、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ３、ＡＡＶＣｙ．５Ｒ４、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｈｕ．１、ＡＡＶｈｕ．２、ＡＡＶｈｕ．３、ＡＡＶｈｕ．４、ＡＡＶｈｕ．５、ＡＡＶｈｕ．６、ＡＡＶｈｕ．７、ＡＡＶｈｕ．９、ＡＡＶｈｕ．１０、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．１３、ＡＡＶｈｕ．１５、ＡＡＶｈｕ．１６、ＡＡＶｈｕ．１７、ＡＡＶｈｕ．１８、ＡＡＶｈｕ．２０、ＡＡＶｈｕ．２１、ＡＡＶｈｕ．２２、ＡＡＶｈｕ．２３．２、ＡＡＶｈｕ．２４、ＡＡＶｈｕ．２５、ＡＡＶｈｕ．２７、ＡＡＶｈｕ．２８、ＡＡＶｈｕ．２９、ＡＡＶｈｕ．２９Ｒ、ＡＡＶｈｕ．３１、ＡＡＶｈｕ．３２、ＡＡＶｈｕ．３４、ＡＡＶｈｕ．３５、ＡＡＶｈｕ．３７、ＡＡＶｈｕ．３９、ＡＡＶｈｕ．４０、ＡＡＶｈｕ．４１、ＡＡＶｈｕ．４２、ＡＡＶｈｕ．４３、ＡＡＶｈｕ．４４、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４４Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４５、ＡＡＶｈｕ．４６、ＡＡＶｈｕ．４７、ＡＡＶｈｕ．４８、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ１、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ２、ＡＡＶｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶｈｕ．４９、ＡＡＶｈｕ．５１、ＡＡＶｈｕ．５２、ＡＡＶｈｕ．５４、ＡＡＶｈｕ．５５、ＡＡＶｈｕ．５６、ＡＡＶｈｕ．５７、ＡＡＶｈｕ．５８、ＡＡＶｈｕ．６０、ＡＡＶｈｕ．６１、ＡＡＶｈｕ．６３、ＡＡＶｈｕ．６４、ＡＡＶｈｕ．６６、ＡＡＶｈｕ．６７、ＡＡＶｈｕ．１４／９、ＡＡＶｈｕ．ｔ  １９、ＡＡＶｒｈ．２、ＡＡＶｒｈ．２Ｒ、ＡＡＶｒｈ．８、ＡＡＶｒｈ．８Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１０、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１３、ＡＡＶｒｈ．１３Ｒ、ＡＡＶｒｈ．１４、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２０、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ．３７Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．３８、ＡＡＶｒｈ．３９、ＡＡＶｒｈ．４０、ＡＡＶｒｈ．４６、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｒｈ．４８．１、ＡＡＶｒｈ．４８．１．２、ＡＡＶｒｈ．４８．２、ＡＡＶｒｈ．４９、ＡＡＶｒｈ．５１、ＡＡＶｒｈ．５２、ＡＡＶｒｈ．５３、ＡＡＶｒｈ．５４、ＡＡＶｒｈ．５６、ＡＡＶｒｈ．５７、ＡＡＶｒｈ．５８、ＡＡＶｒｈ．６１、ＡＡＶｒｈ．６４、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ１、ＡＡＶｒｈ．６４Ｒ２、ＡＡＶｒｈ．６７、ＡＡＶｒｈ．７３、ＡＡＶｒｈ．７４、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ａ５８６Ｒ突然変異体、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ｒ５３３Ａ突然変異体、ＡＡＡＶ、ＢＡＡＶ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、ヒツジＡＡＶ、ＡＡＶｈＥ１．１、ＡＡＶｈＥｒ１．５、ＡＡＶｈＥＲ１．１４、ＡＡＶｈＥｒ１．８、ＡＡＶｈＥｒ１．１６、ＡＡＶｈＥｒ１．１８、ＡＡＶｈＥｒ１．３５、ＡＡＶｈＥｒ１．７、ＡＡＶｈＥｒ１．３６、ＡＡＶｈＥｒ２．２９、ＡＡＶｈＥｒ２．４、ＡＡＶｈＥｒ２．１６、ＡＡＶｈＥｒ２．３０、ＡＡＶｈＥｒ２．３１、ＡＡＶｈＥｒ２．３６、ＡＡＶｈＥＲ１．２３、ＡＡＶｈＥｒ３．１、ＡＡＶ２．５Ｔ、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ、ＡＡＶ−ＬＫ０１、ＡＡＶ−ＬＫ０２、ＡＡＶ−ＬＫ０３、ＡＡＶ−ＬＫ０４、ＡＡＶ−ＬＫ０５、ＡＡＶ−ＬＫ０６、ＡＡＶ−ＬＫ０７、ＡＡＶ−ＬＫ０８、ＡＡＶ−ＬＫ０９、ＡＡＶ−ＬＫ１０、ＡＡＶ−ＬＫ１１、ＡＡＶ−ＬＫ１２、ＡＡＶ−ＬＫ１３、ＡＡＶ−ＬＫ１４、ＡＡＶ−ＬＫ１５、ＡＡＶ−ＬＫ１６、ＡＡＶ−ＬＫ１７、ＡＡＶ−ＬＫ１８、ＡＡＶ−ＬＫ１９、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ２、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ４、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ６、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ７、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ８、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１１、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１２、ＡＡＶ−２−ｐｒｅ−ｍｉＲＮＡ−１０１、ＡＡＶ−８ｈ、ＡＡＶ−８ｂ、ＡＡＶ−ｈ、ＡＡＶ−ｂ、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−２、ＡＡＶシャッフル１００−１、ＡＡＶシャッフル１００−３、ＡＡＶシャッフル１００−７、ＡＡＶシャッフル１０−２、ＡＡＶシャッフル１０−６、ＡＡＶシャッフル１０−８、ＡＡＶシャッフル１００−２、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−１、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−８、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−３、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−１０、ＢＮＰ６１  ＡＡＶ、ＢＮＰ６２  ＡＡＶ、ＢＮＰ６３  ＡＡＶ、ＡＡＶｒｈ．５０、ＡＡＶｒｈ．４３、ＡＡＶｒｈ．６２、ＡＡＶｒｈ．４８、ＡＡＶｈｕ．１９、ＡＡＶｈｕ．１１、ＡＡＶｈｕ．５３、ＡＡＶ４−８／ｒｈ．６４、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３、トゥルータイプＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）、ＵＰＥＮＮ  ＡＡＶ１０、ジャパニーズＡＡＶ１０血清型、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１０、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．２、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．７、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．８、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ１、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ２、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ３、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ４、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−ｅ５、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ６、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ７、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−２、ＡＡＶ  ＣＨｔ−３、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１０、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．５、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．６、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．７、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ１、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ２、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ５、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ６、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ８、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ９、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１０、ＡＡＶ  ＣＫｄ−２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−７、ＡＡＶ  ＣＫｄ−８、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ５、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ７、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ８、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ１、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ２、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ５、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ６、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ３、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ４、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ９、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ１、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ２、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ３、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ４、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ５、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ６、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ７、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−１、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−１０、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１２、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１３、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−４、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−７、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−８、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−９、ＡＡＶ  ＣＬｖ−２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｅ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ９、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ１、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ２、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ３、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ４、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ５、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ６、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ７、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ８、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ９、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１０、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１１、ＡＡＶ  ＣＳｐ−２、ＡＡＶ  ＣＳｐ−３、ＡＡＶ  ＣＳｐ−４、ＡＡＶ  ＣＳｐ−６、ＡＡＶ  ＣＳｐ−７、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．１０、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．２、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．４、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．５、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．６、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．７、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．８、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．９、ＡＡＶ  ＣＳｐ−９、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３、ＡＡＶ．ＶＲ−３５５、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５、ＡＡ
ＶＦ１６／ＨＳＣ１６、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８、ＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９、ＡＡＶ−ＰＨＰ．Ｂ（ＰＨＰ．Ｂ）、ＡＡＶ−ＰＨＰ．Ａ（ＰＨＰ．Ａ）、Ｇ２Ｂ−２６、Ｇ２Ｂ−１３、ＴＨ１．１−３２、ＴＨ１．１−３５、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ２、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ３、ＡＡＶＰＨＰ．Ｎ／ＰＨＰ．Ｂ−ＤＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＧＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＴＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＧＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＧＧＴ−Ｔ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＡＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＮＰ（３）、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＮＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＮＱＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＧＳ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＧＮ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＥＧＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＤＳＴ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＰＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＳＱＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＱＬＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＴＭＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ−ＴＴＰ、ＡＡＶＰＨＰ．Ｓ／Ｇ２Ａ１２、ＡＡＶＧ２Ａ１５／Ｇ２Ａ３、ＡＡＶＧ２Ｂ４、および／またはＡＡＶＧ２Ｂ５およびこれらのバリアントから選択される血清型を利用してもよく、またはそれをベースとしてもよい。
【００４５】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、野生型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、およびそれらのハイブリッドのＹ２５２Ｆ、Ｙ２７２Ｆ、Ｙ４４４Ｆ、Ｙ５００Ｆ、Ｙ７００Ｆ、Ｙ７０４Ｆ、Ｙ７３０Ｆ、Ｙ２７５Ｆ、Ｙ２８１Ｆ、Ｙ５０８Ｆ、Ｙ５７６Ｆ、Ｙ６１２Ｇ、Ｙ６７３Ｆ、およびＹ７２０Ｆなどの、米国特許出願公開第２０１６０３６１４３９号明細書（その内容は本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの修飾であってもよくまたはそれを有していてもよい。
【００４６】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ６（米国特許第９５４６１１２号明細書の配列番号４）、ＡＡＶ１（米国特許第９５４６１１２号明細書の配列番号６）、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ７、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０またはＡＡＶ１１またはそれらの誘導体の配列における、Ｆ１２９Ｌ、Ｄ４１８Ｅ、Ｋ５３１Ｅ、Ｌ５８４Ｆ、Ｖ５９８ＡおよびＨ６４２Ｎ突然変異の少なくとも２つ、しかしながら全てではないものなど、米国特許第９５４６１１２号明細書（その内容は本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの突然変異であってもよくまたはそれを有してしてもよい。更に別の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、Ｋ５３１Ｅ突然変異を含むＡＡＶ６配列（米国特許第９５４６１１２号明細書の配列番号５）であってもよくまたはそれを有していてもよい。
【００４７】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、別のアミノ酸、好ましくはフェニルアラニン残基に置換された、好ましくは、ＡＡＶ１（米国特許出願公開第２０１３０２２４８３６号明細書の配列番号２）の２５２、２７３、４４５、７０１、７０５および７３１位の表面露出チロシン残基の少なくとも１つなど、米国特許出願公開第２０１３０２２４８３６号明細書（その内容は本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの、ＡＡＶ１配列における突然変異であってもよくまたはそれを有していてもよい。一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、別のアミノ酸、好ましくはフェニルアラニン残基に置換された、好ましくは、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２０１３０２２４８３６号明細書の配列番号４）の２５２、２７２、４４４、５００、７００、７０４および７３０位の表面露出チロシン残基の少なくとも１つなど、ＡＡＶ９配列における突然変異であってもよくまたはそれを有してしてもよい。一実施形態において、ＡＡＶ９（米国特許出願公開第２０１３０２２４８３６号明細書の配列番号６）の４４６位のチロシン残基は、フェニルアラニン残基に置換されている。
【００４８】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、本明細書において全体として参照により援用される国際公開第２０１６１３０５８９号パンフレットに記載されるとおりのＡＡＶ２またはそのバリアントであってもよい。ＡＡＶ２のアミノ酸配列は、Ｎ５８７Ａ、Ｅ５４８Ａ、またはＮ７０８Ａ突然変異を含み得る。一実施形態において、任意のＡＡＶのアミノ酸配列は、Ｖ７０８Ｋ突然変異を含み得る。
【００４９】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号６および６４）、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号７および７０）、ＡＡＶ３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号８および７１）、ＡＡＶ４（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号６３）、ＡＡＶ５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号１１４）、ＡＡＶ６（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号６５）、ＡＡＶ７（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号１〜３）、ＡＡＶ８（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号４および９５）、ＡＡＶ９（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号５および１００）、ＡＡＶ１０（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号１１７）、ＡＡＶ１１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号１１８）、ＡＡＶ１２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号１１９）、ＡＡＶｒｈ１０（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書の配列番号８１のアミノ酸１〜７３８）、ＡＡＶ１６．３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１０）、ＡＡＶ２９．３／ｂｂ．１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１１）、ＡＡＶ２９．４（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１２）、ＡＡＶ２９．５／ｂｂ．２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１３）、ＡＡＶ１．３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１４）、ＡＡＶ１３．３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１５）、ＡＡＶ２４．１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１６）、ＡＡＶ２７．３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１７）、ＡＡＶ７．２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１８）、ＡＡＶＣ１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号１９）、ＡＡＶＣ３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２０）、ＡＡＶＣ５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２１）、ＡＡＶＦ１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２２）、ＡＡＶＦ３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２３）、ＡＡＶＦ５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２４）、ＡＡＶＨ６（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２５）、ＡＡＶＨ２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２６）、ＡＡＶ４２−８（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２７）、ＡＡＶ４２−１５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２８）、ＡＡＶ４２−５ｂ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号２９）、ＡＡＶ４２−１ｂ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３０）、ＡＡＶ４２−１３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３１）、ＡＡＶ４２−３ａ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３２）、ＡＡＶ４２−４（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３３）、ＡＡＶ４２−５ａ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３４）、ＡＡＶ４２−１０（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３５）、ＡＡＶ４２−３ｂ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３６）、ＡＡＶ４２−１１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３７）、ＡＡＶ４２−６ｂ（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３８）、ＡＡＶ４３−１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号３９）、ＡＡＶ４３−５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４０）、ＡＡＶ４３−１２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４１）、ＡＡＶ４３−２０（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４２）、ＡＡＶ４３−２１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４３）、ＡＡＶ４３−２３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４４）、ＡＡＶ４３−２５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４５）、ＡＡＶ４４．１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４６）、ＡＡＶ４４．５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４７）、ＡＡＶ２２３．１（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４８）、ＡＡＶ２２３．２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号４９）、ＡＡＶ２２３．４（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５０）、ＡＡＶ２２３．５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５１）、ＡＡＶ２２３．６（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５２）、ＡＡＶ２２３．７（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５３）、ＡＡＶＡ３．４（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５４）、ＡＡＶＡ３．５（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５５）、ＡＡＶＡ３．７（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５６）、ＡＡＶＡ３．３（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５７）、ＡＡＶ４２．１２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５８）、ＡＡＶ４４．２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号５９）、ＡＡＶ４２−２（米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書配列番号９）、またはこれらのバリアントなど、米国特許出願公開第２００３０１３８７７２号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００５０】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号７および２３）、ｒｈ２０（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１）、ｒｈ３２／３３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号２）、ｒｈ３９（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号３、２０および３６）、ｒｈ４６（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４および２２）、ｒｈ７３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号５）、ｒｈ７４（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号６）、ＡＡＶ６．１（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号２９）、ｒｈ．８（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４１）、ｒｈ．４８．１（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４４）、ｈｕ．４４（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４５）、ｈｕ．２９（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４２）、ｈｕ．４８（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号３８）、ｒｈ５４（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４９）、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号７）、ｃｙ．５（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号８および２４）、ｒｈ．１０（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号９および２５）、ｒｈ．１３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１０および２６）、ＡＡＶ１（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１１および２７）、ＡＡＶ３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１２および２８）、ＡＡＶ６（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１３および２９）、ＡＡＶ７（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１４および３０）、ＡＡＶ８（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１５および３１）、ｈｕ．１３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１６および３２）、ｈｕ．２６（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１７および３３）、ｈｕ．３７（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１８および３４）、ｈｕ．５３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号１９および３５）、ｒｈ．４３（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号２１および３７）、ｒｈ２（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号３９）、ｒｈ．３７（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４０）、ｒｈ．６４（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４３）、ｒｈ．４８（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４４）、ｃｈ．５（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４６）、ｒｈ．６７（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４７）、ｒｈ．５８（米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書の配列番号４８）、またはこれらのバリアントなど、限定はされないが、Ｃｙ５Ｒ１、Ｃｙ５Ｒ２、Ｃｙ５Ｒ３、Ｃｙ５Ｒ４、ｒｈ．１３Ｒ、ｒｈ．３７Ｒ２、ｒｈ．２Ｒ、ｒｈ．８Ｒ、ｒｈ．４８．１、ｒｈ．４８．２、ｒｈ．４８．１．２、ｈｕ．４４Ｒ１、ｈｕ．４４Ｒ２、ｈｕ．４４Ｒ３、ｈｕ．２９Ｒ、ｃｈ．５Ｒ１、ｒｈ６４Ｒ１、ｒｈ６４Ｒ２、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ６．１、ＡＡＶ６．１２、ｈｕ．４８Ｒ１、ｈｕ．４８Ｒ２、およびｈｕ．４８Ｒ３を含め、米国特許出願公開第２０１５０１５９１７３号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００５１】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ９（米国特許第７１９８９５１号明細書の配列番号１〜３）、ＡＡＶ２（米国特許第７１９８９５１号明細書の配列番号４）、ＡＡＶ１（米国特許第７１９８９５１号明細書の配列番号５）、ＡＡＶ３（米国特許第７１９８９５１号明細書の配列番号６）、およびＡＡＶ８（米国特許第７１９８９５１号明細書の配列番号７）など、米国特許第７１９８９５１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００５２】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ９．９、ＡＡＶ９．１１、ＡＡＶ９．１３、ＡＡＶ９．１６、ＡＡＶ９．２４、ＡＡＶ９．４５、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９．６１、ＡＡＶ９．６８、ＡＡＶ９．８４など、Ｎ・プリチャーラ（Ｎ  Ｐｕｌｉｃｈｅｒｌａ）ら（モレキュラー・セラピー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ）、第１９巻、第６号、ｐ．１０７０〜１０７８、２０１１年、本明細書において全体として参照により援用される）により記載されるとおりのＡＡＶ９配列における突然変異であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００５３】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ３Ｂ（米国特許第６１５６３０３号明細書の配列番号１および１０）、ＡＡＶ６（米国特許第６１５６３０３号明細書の配列番号２、７および１１）、ＡＡＶ２（米国特許第６１５６３０３号明細書の配列番号３および８）、ＡＡＶ３Ａ（米国特許第６１５６３０３号明細書の配列番号４および９）、またはこれらの誘導体など、米国特許第６１５６３０３号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００５４】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ８（米国特許出願公開第２０１４０３５９７９９号明細書の配列番号１）、ＡＡＶＤＪ（米国特許出願公開第２０１４０３５９７９９号明細書の配列番号２および３）、またはこれらのバリアントなど、米国特許出願公開第２０１４０３５９７９９号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００５５】
一部の実施形態において、血清型は、グリム（Ｇｒｉｍｍ）ら（ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ）、第８２巻、第１２号、ｐ．５８８７〜５９１１、２００８年、本明細書において全体として参照により援用される）により記載されるとおり、ＡＡＶＤＪ（またはＡＡＶ−ＤＪ）またはそのバリアント、例えばＡＡＶＤＪ８（またはＡＡＶ−ＤＪ８）などであってもよい。ＡＡＶＤＪ８のアミノ酸配列は、ヘパリン結合ドメイン（ＨＢＤ）を除去するため２つ以上の突然変異を含み得る。非限定的な例として、米国特許第７，５８８，７７２号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に配列番号１として記載されるＡＡＶ−ＤＪ配列は、２つの突然変異：（１）Ｒ５８７Ｑ［アミノ酸５８７のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ；Ｇｌｎ）に変更される］および（２）Ｒ５９０Ｔ［アミノ酸５９０のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がスレオニン（Ｔ；Ｔｈｒ）に変更される］を含み得る。別の非限定的な例として、３つの突然変異：（１）Ｋ４０６Ｒ［アミノ酸４０６のリジン（Ｋ；Ｌｙｓ）がアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）に変更される］、（２）Ｒ５８７Ｑ［アミノ酸５８７のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がグルタミン（Ｑ；Ｇｌｎ）に変更される］および（３）Ｒ５９０Ｔ［アミノ酸５９０のアルギニン（Ｒ；Ａｒｇ）がスレオニン（Ｔ；Ｔｈｒ）に変更される］を含み得る。
【００５６】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ４（国際公開第１９９８０１１２４４号パンフレットの配列番号１〜２０）など、国際公開第１９９８０１１２４４号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりのＡＡＶ４の配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００５７】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、国際公開第２０１４１４４２２９号パンフレットに記載されおよび本明細書において全体として参照により援用されるとおりのＡＡＶ２Ｇ９を生じさせるＡＡＶ２配列における突然変異であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００５８】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ３−３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２１７）、ＡＡＶ１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２１９および２０２）、ＡＡＶ１０６．１／ｈｕ．３７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０）、ＡＡＶ１１４．３／ｈｕ．４０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１１）、ＡＡＶ１２７．２／ｈｕ．４１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号６および８）、ＡＡＶ１２８．３／ｈｕ．４４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８１）、ＡＡＶ１３０．４／ｈｕ．４８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号７８）、ＡＡＶ１４５．１／ｈｕ．５３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１７６および１７７）、ＡＡＶ１４５．６／ｈｕ．５６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１６８および１９２）、ＡＡＶ１６．１２／ｈｕ．１１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５３および５７）、ＡＡＶ１６．８／ｈｕ．１０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５６および５６）、ＡＡＶ１６１．１０／ｈｕ．６０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１７０）、ＡＡＶ１６１．６／ｈｕ．６１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１７４）、ＡＡＶ１−７／ｒｈ．４８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号３２）、ＡＡＶ１−８／ｒｈ．４９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０３および２５）、ＡＡＶ２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２１１および２２１）、ＡＡＶ２−１５／ｒｈ．６２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号３３および１１４）、ＡＡＶ２−３／ｒｈ．６１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２１）、ＡＡＶ２−４／ｒｈ．５０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２３および１０８）、ＡＡＶ２−５／ｒｈ．５１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０４および２２）、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号５および８４）、ＡＡＶ３．１／ｈｕ．９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５５および５８）、ＡＡＶ３−１１／ｒｈ．５３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８６および１７６）、ＡＡＶ３−３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２００）、ＡＡＶ３３．１２／ｈｕ．１７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号４）、ＡＡＶ３３．４／ｈｕ．１５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号５０）、ＡＡＶ３３．８／ｈｕ．１６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号５１）、ＡＡＶ３−９／ｒｈ．５２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号９６および１８）、ＡＡＶ４−１９／ｒｈ．５５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１１７）、ＡＡＶ４−４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２０１および２１８）、ＡＡＶ４−９／ｒｈ．５４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１１６）、ＡＡＶ５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９９および２１６）、ＡＡＶ５２．１／ｈｕ．２０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号６３）、ＡＡＶ５２／ｈｕ．１９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３３）、ＡＡＶ５−２２／ｒｈ．５８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２７）、ＡＡＶ５−３／ｒｈ．５７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０５）、ＡＡＶ５−３／ｒｈ．５７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２６）、ＡＡＶ５８．２／ｈｕ．２５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号４９）、ＡＡＶ６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２０３および２２０）、ＡＡＶ７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２２２および２１３）、ＡＡＶ７．３／ｈｕ．７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号５５）、ＡＡＶ８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号２２３および２１４）、ＡＡＶＨ−１／ｈｕ．１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号４６）、ＡＡＶＨ−５／ｈｕ．３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号４４）、ＡＡＶｈｕ．１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４４）、ＡＡＶｈｕ．１０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５６）、ＡＡＶｈｕ．１１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５３）、ＡＡＶｈｕ．１２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号５９）、ＡＡＶｈｕ．１３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２９）、ＡＡＶｈｕ．１４／ＡＡＶ９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２３および３）、ＡＡＶｈｕ．１５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４７）、ＡＡＶｈｕ．１６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４８）、ＡＡＶｈｕ．１７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８３）、ＡＡＶｈｕ．１８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４９）、ＡＡＶｈｕ．１９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３３）、ＡＡＶｈｕ．２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４３）、ＡＡＶｈｕ．２０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３４）、ＡＡＶｈｕ．２１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３５）、ＡＡＶｈｕ．２２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３８）、ＡＡＶｈｕ．２３．２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３７）、ＡＡＶｈｕ．２４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３６）、ＡＡＶｈｕ．２５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４６）、ＡＡＶｈｕ．２７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４０）、ＡＡＶｈｕ．２９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１３２）、ＡＡＶｈｕ．３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４５）、ＡＡＶｈｕ．３１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２１）、ＡＡＶｈｕ．３２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２２）、ＡＡＶｈｕ．３４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２５）、ＡＡＶｈｕ．３５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１６４）、ＡＡＶｈｕ．３７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８８）、ＡＡＶｈｕ．３９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０２）、ＡＡＶｈｕ．４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４１）、ＡＡＶｈｕ．４０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８７）、ＡＡＶｈｕ．４１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号９１）、ＡＡＶｈｕ．４２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８５）、ＡＡＶｈｕ．４３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１６０）、ＡＡＶｈｕ．４４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４４）、ＡＡＶｈｕ．４５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２７）、ＡＡＶｈｕ．４６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５９）、ＡＡＶｈｕ．４７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１２８）、ＡＡＶｈｕ．４８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５７）、ＡＡＶｈｕ．４９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８９）、ＡＡＶｈｕ．５１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９０）、ＡＡＶｈｕ．５２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９１）、ＡＡＶｈｕ．５３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８６）、ＡＡＶｈｕ．５４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８８）、ＡＡＶｈｕ．５５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８７）、ＡＡＶｈｕ．５６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９２）、ＡＡＶｈｕ．５７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９３）、ＡＡＶｈｕ．５８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９４）、ＡＡＶｈｕ．６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８４）、ＡＡＶｈｕ．６０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８４）、ＡＡＶｈｕ．６１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１８５）、ＡＡＶｈｕ．６３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９５）、ＡＡＶｈｕ．６４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９６）、ＡＡＶｈｕ．６６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９７）、ＡＡＶｈｕ．６７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１９８）、ＡＡＶｈｕ．７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５０）、ＡＡＶｈｕ．８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号１２）、ＡＡＶｈｕ．９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５５）、ＡＡＶＬＧ−１０／ｒｈ．４０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１４）、ＡＡＶＬＧ−４／ｒｈ．３８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８６）、ＡＡＶＬＧ−４／ｒｈ．３８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号７）、ＡＡＶＮ７２１−８／ｒｈ．４３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１６３）、ＡＡＶＮ７２１−８／ｒｈ．４３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号４３）、ＡＡＶｐｉ．１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号２８）、ＡＡＶｐｉ．２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３０）、ＡＡＶｐｉ．３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号２９）、ＡＡＶｒｈ．３８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号８６）、ＡＡＶｒｈ．４０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号９２）、ＡＡＶｒｈ．４３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１６３）、ＡＡＶｒｈ．４４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３４）、ＡＡＶｒｈ．４５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号４１）、ＡＡＶｒｈ．４７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３８）、ＡＡＶｒｈ．４８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１１５）、ＡＡＶｒｈ．４９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０３）、ＡＡＶｒｈ．５０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０８）、ＡＡＶｒｈ．５１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０４）、ＡＡＶｒｈ．５２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレ
ットの配列番号９６）、ＡＡＶｒｈ．５３（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号９７）、ＡＡＶｒｈ．５５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３７）、ＡＡＶｒｈ．５６（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１５２）、ＡＡＶｒｈ．５７（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０５）、ＡＡＶｒｈ．５８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０６）、ＡＡＶｒｈ．５９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号４２）、ＡＡＶｒｈ．６０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３１）、ＡＡＶｒｈ．６１（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１０７）、ＡＡＶｒｈ．６２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号１１４）、ＡＡＶｒｈ．６４（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレットの配列番号９９）、ＡＡＶｒｈ．６５（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３５）、ＡＡＶｒｈ．６８（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号１６）、ＡＡＶｒｈ．６９（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号３９）、ＡＡＶｒｈ．７０（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号２０）、ＡＡＶｒｈ．７２（国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット配列番号９）、またはこれらのバリアントなど、限定はされないが、ＡＡＶｃｙ．２、ＡＡＶｃｙ．３、ＡＡＶｃｙ．４、ＡＡＶｃｙ．５、ＡＡＶｃｙ．６、ＡＡＶｒｈ．１２、ＡＡＶｒｈ．１７、ＡＡＶｒｈ．１８、ＡＡＶｒｈ．１９、ＡＡＶｒｈ．２１、ＡＡＶｒｈ．２２、ＡＡＶｒｈ．２３、ＡＡＶｒｈ．２４、ＡＡＶｒｈ．２５、ＡＡＶｒｈ．２５／４２  １５、ＡＡＶｒｈ．３１、ＡＡＶｒｈ．３２、ＡＡＶｒｈ．３３、ＡＡＶｒｈ．３４、ＡＡＶｒｈ．３５、ＡＡＶｒｈ．３６、ＡＡＶｒｈ．３７、ＡＡＶｒｈ１４を含め、国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。バリアントの非限定的な例としては、国際公開第２００５０３３３２１号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）の配列番号１３、１５、１７、１９、２４、３６、４０、４５、４７、４８、５１〜５４、６０〜６２、６４〜７７、７９、８０、８２、８９、９０、９３〜９５、９８、１００、１０１、１０９〜１１３、１１８〜１２０、１２４、１２６、１３１、１３９、１４２、１５１、１５４、１５８、１６１、１６２、１６５〜１８３、２０２、２０４〜２１２、２１５、２１９、２２４〜２３６が挙げられる。
【００５９】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶｒｈ８Ｒ（国際公開第２０１５１６８６６６号パンフレットの配列番号９）、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ａ５８６Ｒ突然変異体（国際公開第２０１５１６８６６６号パンフレットの配列番号１０）、ＡＡＶｒｈ８Ｒ  Ｒ５３３Ａ突然変異体（国際公開第２０１５１６８６６６号パンフレットの配列番号１１）、またはこれらのバリアントなど、国際公開第２０１５１６８６６６号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００６０】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶｈＥ１．１（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４４）、ＡＡＶｈＥｒ１．５（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４５）、ＡＡＶｈＥＲ１．１４（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４６）、ＡＡＶｈＥｒ１．８（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４７）、ＡＡＶｈＥｒ１．１６（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４８）、ＡＡＶｈＥｒ１．１８（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４９）、ＡＡＶｈＥｒ１．３５（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５０）、ＡＡＶｈＥｒ１．７（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５１）、ＡＡＶｈＥｒ１．３６（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５２）、ＡＡＶｈＥｒ２．２９（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５３）、ＡＡＶｈＥｒ２．４（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５４）、ＡＡＶｈＥｒ２．１６（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５５）、ＡＡＶｈＥｒ２．３０（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５６）、ＡＡＶｈＥｒ２．３１（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５８）、ＡＡＶｈＥｒ２．３６（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５７）、ＡＡＶｈＥＲ１．２３（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５３）、ＡＡＶｈＥｒ３．１（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号５９）、ＡＡＶ２．５Ｔ（米国特許第９２３３１３１号明細書の配列番号４２）、またはこれらのバリアントなど、米国特許第９２３３１３１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００６１】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１）、ＡＡＶ−ＬＫ０１（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２）、ＡＡＶ−ＬＫ０２（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号３）、ＡＡＶ−ＬＫ０３（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号４）、ＡＡＶ−ＬＫ０４（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号５）、ＡＡＶ−ＬＫ０５（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号６）、ＡＡＶ−ＬＫ０６（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号７）、ＡＡＶ−ＬＫ０７（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号８）、ＡＡＶ−ＬＫ０８（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号９）、ＡＡＶ−ＬＫ０９（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１０）、ＡＡＶ−ＬＫ１０（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１１）、ＡＡＶ−ＬＫ１１（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１２）、ＡＡＶ−ＬＫ１２（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１３）、ＡＡＶ−ＬＫ１３（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１４）、ＡＡＶ−ＬＫ１４（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１５）、ＡＡＶ−ＬＫ１５（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１６）、ＡＡＶ−ＬＫ１６（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１７）、ＡＡＶ−ＬＫ１７（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１８）、ＡＡＶ−ＬＫ１８（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号１９）、ＡＡＶ−ＬＫ１９（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２０）、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ２（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２１）、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ４（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２２）、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ６（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２３）、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ７（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２４）、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ８（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２５）、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１１（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２６）、ＡＡＶ−ＰＡＥＣ１２（米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書の配列番号２７）、またはこれらのバリアントなど、米国特許出願公開第２０１５０３７６６０７号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００６２】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ−２−ｐｒｅ−ｍｉＲＮＡ−１０１（配列番号１  米国特許第９１６３２６１号明細書）、またはそのバリアントなど、米国特許第９１６３２６１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００６３】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ−８ｈ（米国特許出願公開第２０１５０３７６２４０号明細書の配列番号６）、ＡＡＶ−８ｂ（米国特許出願公開第２０１５０３７６２４０号明細書の配列番号５）、ＡＡＶ−ｈ（米国特許出願公開第２０１５０３７６２４０号明細書の配列番号２）、ＡＡＶ−ｂ（米国特許出願公開第２０１５０３７６２４０号明細書の配列番号１）、またはこれらのバリアントなど、米国特許出願公開第２０１５０３７６２４０号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００６４】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−２（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号２２）、ＡＡＶシャッフル１００−１（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号２３）、ＡＡＶシャッフル１００−３（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号２４）、ＡＡＶシャッフル１００−７（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号２５）、ＡＡＶシャッフル１０−２（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３４）、ＡＡＶシャッフル１０−６（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３５）、ＡＡＶシャッフル１０−８（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３６）、ＡＡＶシャッフル１００−２（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３７）、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−１（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３８）、ＡＡＶ  ＳＭ  １０−８（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号３９）、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−３（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号４０）、ＡＡＶ  ＳＭ  １００−１０（米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書の配列番号４１）、またはこれらのバリアントなど、米国特許出願公開第２０１６００１７２９５号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００６５】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＢＮＰ６１  ＡＡＶ（米国特許出願公開第２０１５０２３８５５０号明細書の配列番号１）、ＢＮＰ６２  ＡＡＶ（米国特許出願公開第２０１５０２３８５５０号明細書の配列番号３）、ＢＮＰ６３  ＡＡＶ（米国特許出願公開第２０１５０２３８５５０号明細書の配列番号４）、またはこれらのバリアントなど、米国特許出願公開第２０１５０２３８５５０号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００６６】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶｒｈ．５０（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１０８）、ＡＡＶｒｈ．４３（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１６３）、ＡＡＶｒｈ．６２（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１１４）、ＡＡＶｒｈ．４８（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１１５）、ＡＡＶｈｕ．１９（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１３３）、ＡＡＶｈｕ．１１（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１５３）、ＡＡＶｈｕ．５３（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１８６）、ＡＡＶ４−８／ｒｈ．６４（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号１５）、ＡＡＶＬＧ−９／ｈｕ．３９（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号２４）、ＡＡＶ５４．５／ｈｕ．２３（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６０）、ＡＡＶ５４．２／ｈｕ．２２（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６７）、ＡＡＶ５４．７／ｈｕ．２４（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６６）、ＡＡＶ５４．１／ｈｕ．２１（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６５）、ＡＡＶ５４．４Ｒ／ｈｕ．２７（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６４）、ＡＡＶ４６．２／ｈｕ．２８（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６８）、ＡＡＶ４６．６／ｈｕ．２９（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号６９）、ＡＡＶ１２８．１／ｈｕ．４３（米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書の配列番号８０）、またはこれらのバリアントなど、米国特許出願公開第２０１５０３１５６１２号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００６７】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、トゥルータイプＡＡＶ（ｔｔＡＡＶ）（国際公開第２０１５１２１５０１号パンフレットの配列番号２）、「ユーペンＡＡＶ１０」（国際公開第２０１５１２１５０１号パンフレットの配列番号８）、「ジャパニーズＡＡＶ１０」（国際公開第２０１５１２１５０１号パンフレットの配列番号９）、またはこれらのバリアントなど、国際公開第２０１５１２１５０１号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００６８】
本発明によれば、ＡＡＶカプシド血清型の選択または使用は様々な種からであってよい。一実施形態において、ＡＡＶは鳥類ＡＡＶ（ＡＡＡＶ）であってもよい。ＡＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＡＶ（米国特許第９，２３８，８００号明細書の配列番号１、２、４、６、８、１０、１２、および１４）、またはそのバリアントなど、米国特許第９２３８８００号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００６９】
一実施形態において、ＡＡＶはウシＡＡＶ（ＢＡＡＶ）であってもよい。ＢＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＢＡＡＶ（米国特許第９１９３７６９号明細書の配列番号１および６）、またはそのバリアントなど、米国特許第９，１９３，７６９号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。ＢＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＢＡＡＶ（米国特許第７４２７３９６号明細書の配列番号５および６）、またはそのバリアントなど、米国特許第７４２７３９６号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００７０】
一実施形態において、ＡＡＶはヤギＡＡＶであってもよい。ヤギＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ヤギＡＡＶ（米国特許第７４２７３９６号明細書の配列番号３）、またはそのバリアントなど、米国特許第７４２７３９６号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００７１】
他の実施形態において、ＡＡＶは２つ以上の親血清型からハイブリッドＡＡＶとして操作されてもよい。一実施形態において、このＡＡＶは、ＡＡＶ２およびＡＡＶ９からの配列を含むＡＡＶ２Ｇ９であってもよい。ＡＡＶ２Ｇ９  ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開第２０１６００１７００５号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００７２】
一実施形態において、ＡＡＶは、プリチャーラ（Ｐｕｌｉｃｈｅｒｌａ）ら（モレキュラー・セラピー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ）、第１９巻、第６号、ｐ．１０７０〜１０７８、２０１１年（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）により記載されるとおりのアミノ酸３９０〜６２７（ＶＰ１付番）に突然変異を有するＡＡＶ９カプシドライブラリによって生成された血清型であってもよい。血清型ならびに対応するヌクレオチドおよびアミノ酸置換は、限定はされないが、ＡＡＶ９．１（Ｇ１５９４Ｃ；Ｄ５３２Ｈ）、ＡＡＶ６．２（Ｔ１４１８ＡおよびＴ１４３６Ｘ；Ｖ４７３ＤおよびＩ４７９Ｋ）、ＡＡＶ９．３（Ｔ１２３８Ａ；Ｆ４１３Ｙ）、ＡＡＶ９．４（Ｔ１２５０ＣおよびＡ１６１７Ｔ；Ｆ４１７Ｓ）、ＡＡＶ９．５（Ａ１２３５Ｇ、Ａ１３１４Ｔ、Ａ１６４２Ｇ、Ｃ１７６０Ｔ；Ｑ４１２Ｒ、Ｔ５４８Ａ、Ａ５８７Ｖ）、ＡＡＶ９．６（Ｔ１２３１Ａ；Ｆ４１１Ｉ）、ＡＡＶ９．９（Ｇ１２０３Ａ、Ｇ１７８５Ｔ；Ｗ５９５Ｃ）、ＡＡＶ９．１０（Ａ１５００Ｇ、Ｔ１６７６Ｃ；Ｍ５５９Ｔ）、ＡＡＶ９．１１（Ａ１４２５Ｔ、Ａ１７０２Ｃ、Ａ１７６９Ｔ；Ｔ５６８Ｐ、Ｑ５９０Ｌ）、ＡＡＶ９．１３（Ａ１３６９Ｃ、Ａ１７２０Ｔ；Ｎ４５７Ｈ、Ｔ５７４Ｓ）、ＡＡＶ９．１４（Ｔ１３４０Ａ、Ｔ１３６２Ｃ、Ｔ１５６０Ｃ、Ｇ１７１３Ａ；Ｌ４４７Ｈ）、ＡＡＶ９．１６（Ａ１７７５Ｔ；Ｑ５９２Ｌ）、ＡＡＶ９．２４（Ｔ１５０７Ｃ、Ｔ１５２１Ｇ；Ｗ５０３Ｒ）、ＡＡＶ９．２６（Ａ１３３７Ｇ、Ａ１７６９Ｃ；Ｙ４４６Ｃ、Ｑ５９０Ｐ）、ＡＡＶ９．３３（Ａ１６６７Ｃ；Ｄ５５６Ａ）、ＡＡＶ９．３４（Ａ１５３４Ｇ、Ｃ１７９４Ｔ；Ｎ５１２Ｄ）、ＡＡＶ９．３５（Ａ１２８９Ｔ、Ｔ１４５０Ａ、Ｃ１４９４Ｔ、Ａ１５１５Ｔ、Ｃ１７９４Ａ、Ｇ１８１６Ａ；Ｑ４３０Ｌ、Ｙ４８４Ｎ、Ｎ９８Ｋ、Ｖ６０６Ｉ）、ＡＡＶ９．４０（Ａ１６９４Ｔ、Ｅ５６５Ｖ）、ＡＡＶ９．４１（Ａ１３４８Ｔ、Ｔ１３６２Ｃ；Ｔ４５０Ｓ）、ＡＡＶ９．４４（Ａ１６８４Ｃ、Ａ１７０１Ｔ、Ａ１７３７Ｇ；Ｎ５６２Ｈ、Ｋ５６７Ｎ）、ＡＡＶ９．４５（Ａ１４９２Ｔ、Ｃ１８０４Ｔ；Ｎ４９８Ｙ、Ｌ６０２Ｆ）、ＡＡＶ９．４６（Ｇ１４４１Ｃ、Ｔ１５２５Ｃ、Ｔ１５４９Ｇ；Ｇ４８１Ｒ、Ｗ５０９Ｒ、Ｌ５１７Ｖ）、９．４７（Ｇ１２４１Ａ、Ｇ１３５８Ａ、Ａ１６６９Ｇ、Ｃ１７４５Ｔ；Ｓ４１４Ｎ、Ｇ４５３Ｄ、Ｋ５５７Ｅ、Ｔ５８２Ｉ）、ＡＡＶ９．４８（Ｃ１４４５Ｔ、Ａ１７３６Ｔ；Ｐ４８２Ｌ、Ｑ５７９Ｌ）、ＡＡＶ９．５０（Ａ１６３８Ｔ、Ｃ１６８３Ｔ、Ｔ１８０５Ａ；Ｑ５４６Ｈ、Ｌ６０２Ｈ）、ＡＡＶ９．５３（Ｇ１３０１Ａ、Ａ１４０５Ｃ、Ｃ１６６４Ｔ、Ｇ１８１１Ｔ；Ｒ１３４Ｑ、Ｓ４６９Ｒ、Ａ５５５Ｖ、Ｇ６０４Ｖ）、ＡＡＶ９．５４（Ｃ１５３１Ａ、Ｔ１６０９Ａ；Ｌ５１１Ｉ、Ｌ５３７Ｍ）、ＡＡＶ９．５５（Ｔ１６０５Ａ；Ｆ５３５Ｌ）、ＡＡＶ９．５８（Ｃ１４７５Ｔ、Ｃ１５７９Ａ；Ｔ４９２Ｉ、Ｈ５２７Ｎ）、ＡＡＶ．５９（Ｔ１３３６Ｃ；Ｙ４４６Ｈ）、ＡＡＶ９．６１（Ａ１４９３Ｔ；Ｎ４９８Ｉ）、ＡＡＶ９．６４（Ｃ１５３１Ａ、Ａ１６１７Ｔ；Ｌ５１１Ｉ）、ＡＡＶ９．６５（Ｃ１３３５Ｔ、Ｔ１５３０Ｃ、Ｃ１５���８Ａ；Ａ５２３Ｄ）、ＡＡＶ９．６８（Ｃ１５１０Ａ；Ｐ５０４Ｔ）、ＡＡＶ９．８０（Ｇ１４４１Ａ、；Ｇ４８１Ｒ）、ＡＡＶ９．８３（Ｃ１４０２Ａ、Ａ１５００Ｔ；Ｐ４６８Ｔ、Ｅ５００Ｄ）、ＡＡＶ９．８７（Ｔ１４６４Ｃ、Ｔ１４６８Ｃ；Ｓ４９０Ｐ）、ＡＡＶ９．９０（Ａ１１９６Ｔ；Ｙ３９９Ｆ）、ＡＡＶ９．９１（Ｔ１３１６Ｇ、Ａ１５８３Ｔ、Ｃ１７８２Ｇ、Ｔ１８０６Ｃ；Ｌ４３９Ｒ、Ｋ５２８Ｉ）、ＡＡＶ９．９３（Ａ１２７３Ｇ、Ａ１４２１Ｇ、Ａ１６３８Ｃ、Ｃ１７１２Ｔ、Ｇ１７３２Ａ、Ａ１７４４Ｔ、Ａ１８３２Ｔ；Ｓ４２５Ｇ、Ｑ４７４Ｒ、Ｑ５４６Ｈ、Ｐ５７１Ｌ、Ｇ５７８Ｒ、Ｔ５８２Ｓ、Ｄ６１１Ｖ）、ＡＡＶ９．９４（Ａ１６７５Ｔ；Ｍ５５９Ｌ）およびＡＡＶ９．９５（Ｔ１６０５Ａ；Ｆ５３５Ｌ）であってもよい。
【００７３】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶＦ１／ＨＳＣ１（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号２および２０）、ＡＡＶＦ２／ＨＳＣ２（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号３および２１）、ＡＡＶＦ３／ＨＳＣ３（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号５および２２）、ＡＡＶＦ４／ＨＳＣ４（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号６および２３）、ＡＡＶＦ５／ＨＳＣ５（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１１および２５）、ＡＡＶＦ６／ＨＳＣ６（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号７および２４）、ＡＡＶＦ７／ＨＳＣ７（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号８および２７）、ＡＡＶＦ８／ＨＳＣ８（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号９および２８）、ＡＡＶＦ９／ＨＳＣ９（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１０および２９）、ＡＡＶＦ１１／ＨＳＣ１１（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号４および２６）、ＡＡＶＦ１２／ＨＳＣ１２（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１２および３０）、ＡＡＶＦ１３／ＨＳＣ１３（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１４および３１）、ＡＡＶＦ１４／ＨＳＣ１４（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１５および３２）、ＡＡＶＦ１５／ＨＳＣ１５（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１６および３３）、ＡＡＶＦ１６／ＨＳＣ１６（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１７および３４）、ＡＡＶＦ１７／ＨＳＣ１７（国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレットの配列番号１３および３５）、またはこれらのバリアントもしくは誘導体など、国際公開第２０１６０４９２３０号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００７４】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１３および８７）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１４および８８）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１５および８９）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１６および９０）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７および９１）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−ｅ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１８および９２）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１９および９３）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２０および９４）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｅ８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２１および９５）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２２および９６）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２３および９７）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２４および９８）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２５および９９）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２６および１００）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２７および１０１）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２８および１０２）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｄ８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号２９および１０３）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｅ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１３および８７）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３０および１０４）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３１および１０５）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３２および１０６）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３３および１０７）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３４および１０８）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３５および１０９）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３６および１１０）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３７および１１１）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｒ９（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３８および１１２）、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３９および１１３）、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４０および１１４）、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４１および１１５）、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４２および１１６）、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４３および１１７）、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４３および１１７）、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４４および１１８）、ＡＡＶ  ＣＬｇ−Ｆ８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４３および１１７）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４５および１１９）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１０（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４６および１２０）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−１１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４７および１２１）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４８および１２２）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号４９および１２３）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５０および１２４）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５１および１２５）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５２および１２６）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５３および１２７）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−９（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５４および１２８）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５５および１２９）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５６および１３０）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５７および１３１）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−１０（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５８および１３２）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号５９および１３３）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６０および１３４）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６１および１３５）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６２および１３６）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６３および１３７）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６４および１３８）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号３５および１３９）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６６および１４０）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−１３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６７および１４１）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６８および１４２）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号６９および１４３）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７０および１４４）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７１および１４５）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７２および１４６）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７３および１４７）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７４および１４８）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７５および１４９）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７６および１５０）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７７および１５１）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７８および１５２）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７９および１５３）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｂ８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８０および１５４）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８１および１５５）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８２および１５６）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８３および１５７）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８４および１５８）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８５および１５９）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｈ６（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号７７および１５１）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号８６および１６０）、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−１（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７１）、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−２（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７２）、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７３）、ＡＡＶ  ＣＬｖ１−４（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７４）、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−７（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７５）、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−８（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７６）、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−９（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７７）、ＡＡＶ  Ｃｌｖ１−１０（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１７８）、ＡＡＶ．ＶＲ−３５５（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１８１）、ＡＡＶ．ｈｕ．４８Ｒ３（米国特許第８７３４８０９号明細書の配列番号１８３）、またはこれらのバリアントもしくは誘導体など、米国特許第８７３４８０９号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００７５】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ２（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１および５１）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２および５２）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ９（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３および５３）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４および５４）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．２（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号５および５５）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．３（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号６および５６）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号７および５７）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号８および５８）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．７（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号９および５９）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．８（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１０および６０）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−７．１０（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１１および６１）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ３（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１２および６２）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１３および６３）、ＡＡＶ  ＣＫｄ−Ｎ９（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１４および６４）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１５および６５）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１６および６６）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｌ６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１７および６７）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１８および６８）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ３（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号１９および６９）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｋ６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２０および７０）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２１および７１）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ１１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２２および７２）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ２（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２３および７３）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２４および７４）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２５および７５）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ７（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２６および７６）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ８（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２７および７７）、ＡＡＶ  ＣＬｖ−Ｍ９（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号２８および７８）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ１（国際公開第２０１６０６５００１号パ��フレットの配列番号２９および７９）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３０および８０）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−Ｐ８（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３１および８１）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３２および８２）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．１０（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３３および８３）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３４および８４）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３５および８５）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．７（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３６および８６）、ＡＡＶ  ＣＨｔ−６．８（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３７および８７）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．１０（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３８および８８）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．２（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号３９および８９）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４０および９０）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４１および９１）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．６（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４２および９２）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．７（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４３および９３）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．８（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４４および９４）、ＡＡＶ  ＣＳｐ−８．９（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４５および９５）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．３（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４６および９６）、ＡＡＶ  ＣＢｒ−Ｂ７．４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４７および９７）、ＡＡＶ３Ｂ（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４８および９８）、ＡＡＶ４（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号４９および９９）、ＡＡＶ５（国際公開第２０１６０６５００１号パンフレットの配列番号５０および１００）、またはこれらのバリアントもしくは誘導体など、国際公開第２０１６０６５００１号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。
【００７６】
一実施形態において、ＡＡＶは、表１に挙げられるもののいずれかから選択される血清型であってもよい。
一実施形態において、ＡＡＶは、表１にある配列の配列、その断片または変異体を含んでもよい。
【００７７】
一実施形態において、ＡＡＶは、表１に記載されるとおりの配列、断片または変異体によってコードされてもよい。
【００７８】
【表１−１】
2020518259.tif 000003
【００７９】
【表１−２】
2020518259.tif 000004
【００８０】
【表１−３】
2020518259.tif 000005
【００８１】
【表１−４】
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【００８２】
【表１−５】
2020518259.tif 000007
【００８３】
【表１−６】
2020518259.tif 000008
【００８４】
【表１−７】
2020518259.tif 000009
【００８５】
【表１−８】
2020518259.tif 000010
【００８６】
【表１−９】
2020518259.tif 000011
【００８７】
【表１−１０】
2020518259.tif 000012
【００８８】
【表１−１１】
2020518259.tif 000013
【００８９】
【表１−１２】
2020518259.tif 000014
【００９０】
【表１−１３】
2020518259.tif 000015
【００９１】
【表１−１４】
2020518259.tif 000016
【００９２】
【表１−１５】
2020518259.tif 000017
【００９３】
【表１−１６】
2020518259.tif 000018
【００９４】
【表１−１７】
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【００９５】
【表１−１８】
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【００９６】
【表１−１９】
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【００９７】
【表１−２０】
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【００９８】
【表１−２１】
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【００９９】
【表１−２２】
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【０１００】
【表１−２３】
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【０１０１】
【表１−２４】
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【０１０２】
【表１−２５】
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【０１０３】
【表１−２６】
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【０１０４】
【表１−２７】
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【０１０５】
【表１−２８】
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【０１０６】
【表１−２９】
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【０１０７】
【表１−３０】
2020518259.tif 000032
【０１０８】
【表１−３１】
2020518259.tif 000033
【０１０９】
【表１−３２】
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【０１１０】
【表１−３３】
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【０１１１】
【表１−３４】
2020518259.tif 000036
表１に挙げられる特許、出願および／または公報の各々は、本明細書によって全体として参照により援用される。
【０１１２】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ９（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２および１１または本明細書におけるそれぞれ配列番号１２７および１２６）、ＰＨＰ．Ｂ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号８および９、本明細書における配列番号８６８および８６９）、Ｇ２Ｂ−１３（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号１２、本明細書における配列番号８７０）、Ｇ２Ｂ−２６（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号１３、本明細書における配列番号８６８および８６９）、ＴＨ１．１−３２（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号１４、本明細書における配列番号８７１）、ＴＨ１．１−３５（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号１５、本明細書における配列番号８７２）またはこれらのバリアントなど、国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの配列であってもよく、またはそれを有してもよい。更に、国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットに記載されるターゲティングペプチドまたはアミノ酸インサートのいずれかが、限定はされないが、ＡＡＶ９（ＤＮＡ配列について配列番号１２６およびアミノ酸配列について配列番号１２７）など、任意の親ＡＡＶ血清型に挿入されてもよい。一実施形態において、アミノ酸インサートは親ＡＡＶ（例えばＡＡＶ９）のアミノ酸５８６〜５９２に挿入される。別の実施形態において、アミノ酸インサートは親ＡＡＶ配列のアミノ酸５８８〜５８９に挿入される。アミノ酸インサートは、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＴＬＡＶＰＦＫ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号１；本明細書における配列番号８７３）、ＫＦＰＶＡＬＴ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３；本明細書における配列番号８７４）、ＬＡＶＰＦＫ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３１；本明細書における配列番号８７５）、ＡＶＰＦＫ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３２；本明細書における配列番号８７６）、ＶＰＦＫ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３３；本明細書における配列番号８７７）、ＴＬＡＶＰＦ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３４；本明細書における配列番号８７８）、ＴＬＡＶＰ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３５；本明細書における配列番号８７９）、ＴＬＡＶ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３６；本明細書における配列番号８８０）、ＳＶＳＫＰＦＬ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２８；本明細書における配列番号８８１）、ＦＴＬＴＴＰＫ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２９；本明細書における配列番号８８２）、ＭＮＡＴＫＮＶ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３０；本明細書における配列番号８８３）、ＱＳＳＱＴＰＲ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５４；本明細書における配列番号８８４）、ＩＬＧＴＧＴＳ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５５；本明細書における配列番号８８５）、ＴＲＴＮＰＥＡ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５６；本明細書における配列番号８８６）、ＮＧＧＴＳＳＳ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５８；本明細書における配列番号８８７）、またはＹＴＬＳＱＧＷ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号６０；本明細書における配列番号８８８）のいずれかであってもよい。アミノ酸インサートをコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例としては、以下、ＡＡＧＴＴＴＣＣＴＧＴＧＧＣＧＴＴＧＡＣＴ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号３について；本明細書における配列番号８８９）、ＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２４および４９；本明細書における配列番号８９０）、ＡＧＴＧＴＧＡＧＴＡＡＧＣＣＴＴＴＴＴＴＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２５；本明細書における配列番号８９１）、ＴＴＴＡＣＧＴＴＧＡＣＧＡＣＧＣＣＴＡＡＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２６；本明細書における配列番号８９２）、ＡＴＧＡＡＴＧＣＴＡＣＧＡＡＧＡＡＴＧＴＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号２７；本明細書における配列番号８９３）、ＣＡＧＴＣＧＴＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＴＡＧＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号４８；本明細書における配列番号８９４）、ＡＴＴＣＴＧＧＧＧＡＣＴＧＧＴＡＣＴＴＣＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５０および５２；本明細書における配列番号８９５）、ＡＣＧＣＧＧＡＣＴＡＡＴＣＣＴＧＡＧＧＣＴ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５１；本明細書における配列番号８９６）、ＡＡＴＧＧＧＧＧＧＡＣＴＡＧＴＡＧＴＴＣＴ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５３；本明細書における配列番号８９７）、またはＴＡＴＡＣＴＴＴＧＴＣＧＣＡＧＧＧＴＴＧＧ（国際公開第２０１５０３８９５８号パンフレットの配列番号５９；本明細書における配列番号８９８）が挙げられる。
【０１１３】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＳＡＤＮＮＮＳＥＹ（配列番号８９９）、ＬＩＤＱＹＬＹＹＬ（配列番号９００）、ＶＰＱＹＧＹＬＴＬ（配列番号９０１）、ＴＴＳＴＲＴＷＡＬ（配列番号９０２）、ＹＨＬＮＧＲＤＳＬ（配列番号９０３）、ＳＱＡＶＧＲＳＳＦ（配列番号９０４）、ＶＰＡＮＰＳＴＴＦ（配列番号９０５）、ＦＰＱＳＧＶＬＩＦ（配列番号９０６）、ＹＦＤＦＮＲＦＨＣＨＦＳＰＲＤ（配列番号９０７）、ＶＧＮＳＳＧＮＷＨＣＤＳＴＷＭ（配列番号９０８）、ＱＦＳＱＡＧＡＳＤＩＲＤＱＳＲ（配列番号９０９）、ＧＡＳＤＩＲＱＳＲＮＷＬＰ（配列番号９１０）およびＧＮＲＱＡＡＴＡＤＶＮＴＱＧＶ（配列番号９１１）など、ＡＡＶ２の少なくとも１つのＡＡＶカプシドＣＤ８＋  Ｔ細胞エピトープを含むように操作されてもよい。
【０１１４】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＬＤＲＬＭＮＰＬＩ（配列番号９１２）、ＴＴＳＴＲＴＷＡＬ（配列番号９０２）、およびＱＰＡＫＫＲＬＮＦ（配列番号９１３）など、ＡＡＶ１の少なくとも１つのＡＡＶカプシドＣＤ８＋  Ｔ細胞エピトープを含むように操作されてもよい。
【０１１５】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型に含めるペプチドは、ホイ（Ｈｕｉ）ら（モレキュラー・セラピー−メソッド・アンド・クリニカル・デベロップメント（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ−Ｍｅｔｈｏｄｓ  ＆  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）、２０１５年、第２巻、ｐ．１５０２９、ｄｏｉ：１０．１０３８／ｍｔｍ．２０１５．２９；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）により記載される方法を用いて同定されてもよい。非限定的な例として、手順には、ヒト脾細胞を単離すること、インビトロでＡＡＶカプシドタンパク質のアミノ酸配列にわたって個々のペプチドを用いて脾細胞を再刺激すること、インビトロ再刺激に使用した個々のペプチドによるＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳｐｏｔ、バイオインフォマティクス解析によるＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳｐｏｔによって同定された１５ｍｅｒのＨＬＡ拘束性の決定、所与のＨＬＡ対立遺伝子に対する候補反応性９ｍｅｒエピトープの同定、候補９ｍｅｒの合成、同定されたＡＡＶエピトープが結合すると予測されるＨＬＡ対立遺伝子を有する対象からの脾細胞の第２のＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳｐｏｔスクリーニング、ＡＡＶカプシド反応性ＣＤ８＋  Ｔ細胞エピトープを決定すること、および所与のＡＡＶエピトープに反応する対象の頻度を決定することが含まれる。
【０１１６】
一実施形態において、ＡＡＶは、デバーマン（Ｄｅｖｅｒｍａｎ）ら（ネイチャー・バイオテクノロジー（Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、第３４巻、第２号、ｐ．２０４〜２０９、２０１６年）（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）により記載されるとおりのＣｒｅ組換えに基づくＡＡＶターゲット進化（ＣＲＥＡＴＥ：Ｃｒｅ−ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ−ｂａｓｅｄ  ＡＡＶ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）によって生成された血清型であってもよい。一実施形態において、このように作成されたＡＡＶ血清型は、他のＡＡＶ血清型と比較したとき向上したＣＮＳ形質導入および／またはニューロンおよびアストロサイト向性を有する。非限定的な例として、ＡＡＶ血清型は、ＰＨＰ．Ｂ、ＰＨＰ．Ｂ２、ＰＨＰ．Ｂ３、ＰＨＰ．Ａ、Ｇ２Ａ１２、Ｇ２Ａ１５であってもよい。一実施形態において、これらのＡＡＶ血清型は、アミノ酸５８８〜５８９に７アミノ酸インサートを有するＡＡＶ９（配列番号１２６および１２７）誘導体であってもよい。これらの７アミノ酸インサートの非限定的な例としては、ＴＬＡＶＰＦＫ（配列番号８７３）、ＳＶＳＫＰＦＬ（配列番号１２４９）、ＦＴＬＴＴＰＫ（配列番号８８２）、ＹＴＬＳＱＧＷ（配列番号８８８）、ＱＡＶＲＴＳＬ（配列番号１１７６）および／またはＬＡＫＥＲＬＳ（配列番号１１７７）が挙げられる。
【０１１７】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ９（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４５、本明細書における配列番号１４４１）、ＰＨＰ．Ｎ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４６、本明細書における配列番号１４３９）、ＰＨＰ．Ｓ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４７、本明細書における配列番号１４４０）、またはそれらのバリアントなど、国際公開第２０１７１００６７１号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの配列であってもよくまたはそれを有してしてもよい。更に、国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットに記載されるターゲティングペプチドまたはアミノ酸インサートのいずれかが、限定はされないが、ＡＡＶ９（配列番号１２２または配列番号１４４１）など、任意の親ＡＡＶ血清型に挿入されてもよい。一実施形態において、アミノ酸インサートは、親ＡＡＶ（例えば、ＡＡＶ９）のアミノ酸５８６〜５９２に挿入される。別の実施形態において、アミノ酸インサートは、親ＡＡＶ配列のアミノ酸５８８〜５８９に挿入される。アミノ酸インサートは、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＡＱＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１；本明細書における配列番号１４４２）、ＡＱＳＶＳＫＰＦＬＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２；本明細書における配列番号１４４３）、ＡＱＦＴＬＴＴＰＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列表の配列番号３；本明細書における配列番号１４４４）、ＤＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列表の配列番号４；本明細書における配列番号１４４５）、ＥＳＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５；本明細書における配列番号１４４６）、ＧＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６；本明細書における配列番号１４４７）、ＡＱＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７および３３；本明細書における配列番号１４４８）、ＡＴＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８；本明細書における配列番号１４４９）、ＤＧＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号９；本明細書における配列番号１４５０）、ＧＧＴＬＡＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１０；本明細書における配列番号１４５１）、ＳＧＳＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１１；本明細書における配列番号１４５２）、ＡＱＴＬＡＱＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１２；本明細書における配列番号１４５３），ＡＱＴＬＱＱＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１３；本明細書における配列番号１４５４）、ＡＱＴＬＳＮＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１４；本明細書における配列番号１４５５）、ＡＱＴＬＡＶＰＦＳＮＰ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１５；本明細書における配列番号１４５６）、ＱＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１６；本明細書における配列番号１４５７）、ＮＱＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１７；本明細書における配列番号１４５８）、ＥＧＳＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１８；本明細書における配列番号１４５９）、ＳＧＮＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号１９；本明細書における配列番号１４６０）、ＥＧＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２０；本明細書における配列番号１４６１）、ＤＳＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの表１の配列番号２１；本明細書における配列番号１４６２）、ＡＶＴＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２２；本明細書における配列番号１４６３）、ＡＱＴＬＳＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２３；本明細書における配列番号１４６４）、ＡＱＴＬＰＱＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２４および３２；本明細書における配列番号１４６５）、ＡＱＴＬＳＱＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２５；本明細書における配列番号１４６６）、ＡＱＴＬＱＬＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２６；本明細書における配列番号１４６７）、ＡＱＴＬＴＭＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２７および３４、ならびに国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列表の配列番号３５；本明細書における配列番号１４６８）、ＡＱＴＬＴＴＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２８；本明細書における配列番号１４６９）、ＡＱＹＴＬＳＱＧＷＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号２９；本明細書における配列番号１４７０）、ＡＱＭＮＡＴＫＮＶＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３０；本明細書における配列番号１４７１）、ＡＱＶＳＧＧＨＨＳＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３１；本明細書における配列番号１４７２）、ＡＱＴＬＴＡＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの表１の配列番号３５；本明細書における配列番号１４７３）、ＡＱＴＬＳＫＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３６；本明細書における配列番号１４７４）、ＱＡＶＲＴＳＬ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３７；本明細書における配列番号１４７５）、ＹＴＬＳＱＧＷ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３８；本明細書における配列番号８８８）、ＬＡＫＥＲＬＳ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号３９；本明細書における配列番号１４７６）、ＴＬＡＶＰＦＫ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列表の配列番号４０；本明細書における配列番号８７３）、ＳＶＳＫＰＦＬ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４１；本明細書における配列番号８８１）、ＦＴＬＴＴＰＫ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４２；本明細書における配列番号８８２）、ＭＮＳＴＫＮＶ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４３；本明細書における配列番号１４７７）、ＶＳＧＧＨＨＳ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４４；本明細書における配列番号１４７８）、ＳＡＱＴＬＡＶＰＦＫＡＱＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４８；本明細書における配列番号１４７９）、ＳＸＸＸＬＡＶＰＦＫＡＱＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号４９、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１４８０）、ＳＡＱＸＸＸＶＰＦＫＡＱＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５０、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１４８１）、ＳＡＱＴＬＸＸＸＦＫＡＱＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５１、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１４８２）、ＳＡＱＴＬＡＶＸＸＸＡＱＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５２、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１４８３）、ＳＡＱＴＬＡＶＰＦＸＸＸＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５３、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１４８４）、ＴＮＨＱＳＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６５；本明細書における配列番号１４８５）、ＡＱＡＱＴＧＷ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６６；本明細書における配列番号１４８６）、ＤＧＴＬＡＴＰＦＫ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６７；本明細書における配列番号１４８７）、ＤＧＴＬＡＴＰＦＫＸＸ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６８、式中Ｘは任意のアミノ酸であってもよい；本明細書における配列番号１４８８）、ＬＡＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８０；本明細書における配列番号１４８９）、ＶＰＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８１；本明細書における配列番号１４９０）、ＦＫＡＱ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８２；本明細書における配列番号１４９１）、ＡＱＴＬＡＶ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８３；本明細書における配列番号１４９２）、ＡＱＴＬＡＶＰＦ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８４；本明細書における配列番号１４９３）、ＱＡＶＲ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８５；本明細書における配列番号１４９４）、ＡＶＲＴ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８６；本明細書における配列番号１４９５）、ＶＲＴＳ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８７；本明細書における配列番号１４９６）、ＲＴＳＬ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８８；本明細書における配列番号１４９７）、ＱＡＶＲＴ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号８９；本明細書における配列番号１４９８）、ＡＶＲＴＳ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号９０；本明細書における配列番号１４９９）、ＶＲＴＳＬ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号９１；本明細書における配列番号１５００）、ＱＡＶＲＴＳ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号９２；本明細書における配列番号１５０１）、またはＡＶＲＴＳＬ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号９３；本明細書における配列番号１５０２）のいずれであってもよい。
【０１１８】
アミノ酸インサートをコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例としては、以下、ＧＡＴＧＧＧＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧＧＣＡＣＡＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５４；本明細書における配列番号１５０３）、ＧＡＴＧＧＧＡＣＧＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧＧＣＡＣＡＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５５；本明細書における配列番号１５０４）、ＣＡＧＧＣＧＧＴＴＡＧＧＡＣＧＴＣＴＴＴＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５６；本明細書における配列番号１５０５）、ＣＡＧＧＴＣＴＴＣＡＣＧＧＡＣＴＣＡＧＡＣＴＡＴＣＡＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５７および７８；本明細書における配列番号１５０６）、ＣＡＡＧＴＡＡＡＡＣＣＴＣＴＡＣＡＡＡＴＧＴＧＧＴＡＡＡＡＴＣＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５８；本明細書における配列番号１５０７）、ＡＣＴＣＡＴＣＧＡＣＣＡＡＴＡＣＴＴＧＴＡＣＴＡＴＣＴＣＴＣＴＡＧＡＡＣ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号５９；本明細書における配列番号１５０８）、ＧＧＡＡＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６０；本明細書における配列番号１５０９）、ＧＧＴＣＧＣＧＧＴＴＣＴＴＧＴＴＴＧＴＧＧＡＴ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６１；本明細書における配列番号１５１０）、ＣＧＡＣＣＴＴＧＡＡＧＣＧＣＡＴＧＡＡＣＴＣＣＴ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６２；本明細書における配列番号１５１１）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＭＮＮＴＴＧＧＧＣＡＣＴＣＴＧＧＴＧＧＴＴＴＧＴＣ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６３、式中ＮはＡ、Ｃ、Ｔ、またはＧであってもよい；本明細書における配列番号１５１２）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＡＡＡＡＧＧＣＡＣＣＧＣＣＡＡＡＧＴＴＴＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号６９、式中ＮはＡ、Ｃ、Ｔ、またはＧであってもよい；本明細書における配列番号１５１３）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＣＡＣＣＧＣＣＡＡＡＧＴＴＴＧＧＧＣＡＣＴ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７０、式中ＮはＡ、Ｃ、Ｔ、またはＧであってもよい；本明細書における配列番号１５１４）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＣＴＴＡＡＡＭＮＮＭＮＮＭＮＮＣＡＡＡＧＴＴＴＧＧＧＣＡＣＴＣＴＧＧＴＧＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７１、式中ＮはＡ、Ｃ、Ｔ、またはＧであってもよい；本明細書における配列番号１５１５）、ＧＴＡＴＴＣＣＴＴＧＧＴＴＴＴＧＡＡＣＣＣＡＡＣＣＧＧＴＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＧＣＣＴＴＡＡＡＡＧＧＣＡＣＭＮＮＭＮＮＭＮＮＴＴＧＧＧＣＡＣＴＣＴＧＧＴＧＧＴＴＴＧＴＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７２、式中ＮはＡ、Ｃ、Ｔ、またはＧであってもよい；本明細書における配列番号１５１６）、ＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧＴＧＣＣＴＴＴＴＡＡＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７４；本明細書における配列番号８９０）、ＡＧＴＧＴＧＡＧＴＡＡＧＣＣＴＴＴＴＴＴＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７５；本明細書における配列番号８９１）、ＴＴＴＡＣＧＴＴＧＡＣＧＡＣＧＣＣＴＡＡＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７６；本明細書における配列番号８９２）、ＴＡＴＡＣＴＴＴＧＴＣＧＣＡＧＧＧＴＴＧＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７７；本明細書における配列番号８９８）、またはＣＴＴＧＣＧＡＡＧＧＡＧＣＧＧＣＴＴＴＣＧ（国際公開第２０１７１００６７１号パンフレットの配列番号７９；本明細書における配列番号１５１７）が挙げられる。
【０１１９】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ１（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８１）、ＡＡＶ６（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８２）、ＡＡＶ２（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８３）、ＡＡＶ３ｂ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８４）、ＡＡＶ７（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８５）、ＡＡＶ８（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８６）、ＡＡＶ１０（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８７）、ＡＡＶ４（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８８）、ＡＡＶ１１（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８９）、ｂＡＡＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９０）、ＡＡＶ５（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９１）、ＧＰＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９２；本明細書における配列番号１５１８）、Ｂ１９（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９３；本明細書における配列番号１５１９）、ＭＶＭ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９４；本明細書における配列番号１５２０）、ＦＰＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９５；本明細書における配列番号１５２１）、ＣＰＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１９６；本明細書における配列番号１５２２）、またはそれらのバリアントなど、米国特許第９６２４２７４号明細書（その内容は本明細書において本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。更に、米国特許第９６２４２７４号明細書に記載される構造タンパク質インサートのいずれかが、限定はされないが、ＡＡＶ２（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１８３）などの任意の親ＡＡＶ血清型の、限定はされないが、Ｉ−４５３およびＩ−５８７に挿入されてもよい。アミノ酸インサートは、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＶＮＬＴＷＳＲＡＳＧ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号５０；本明細書における配列番号１９０１）、ＥＦＣＩＮＨＲＧＹＷＶＣＧＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号５５；本明細書における配列番号１９０２）、ＥＤＧＱＶＭＤＶＤＬＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号８５；本明細書における配列番号１９０３）、ＥＫＱＲＮＧＴＬＴ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号８６；本明細書における配列番号１９０４）、ＴＹＱＣＲＶＴＨＰＨＬＰＲＡＬＭＲ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号８７；本明細書における配列番号１９０５）、ＲＨＳＴＴＱＰＲＫＴＫＧＳＧ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号８８；本明細書における配列番号１９０６）、ＤＳＮＰＲＧＶＳＡＹＬＳＲ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号８９；本明細書における配列番号１９０７）、ＴＩＴＣＬＷＤＬＡＰＳＫ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９０；本明細書における配列番号１９０８）、ＫＴＫＧＳＧＦＦＶＦ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９１；本明細書における配列番号１９０９）、ＴＨＰＨＬＰＲＡＬＭＲＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９２；本明細書における配列番号１９１０）、ＧＥＴＹＱＣＲＶＴＨＰＨＬＰＲＡＬＭＲＳＴＴＫ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９３；本明細書における配列番号１９１１）、ＬＰＲＡＬＭＲＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９４；本明細書における配列番号１９１２）、ＩＮＨＲＧＹＷＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９５；本明細書における配列番号１９１３）、ＣＤＡＧＳＶＲＴＮＡＰＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号６０；本明細書における配列番号１９１４）、ＡＫＡＶＳＮＬＴＥＳＲＳＥＳＬＱＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９６；本明細書における配列番号１９１５）、ＳＬＴＧＤＥＦＫＫＶＬＥＴ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９７；本明細書における配列番号１９１６）、ＲＥＡＶＡＹＲＦＥＥＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９８；本明細書における配列番号１９１７）、ＩＮＰＥＩＩＴＬＤＧ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号９９；本明細書における配列番号１９１８）、ＤＩＳＶＴＧＡＰＶＩＴＡＴＹＬ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１００；本明細書における配列番号１９１９）、ＤＩＳＶＴＧＡＰＶＩＴＡ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０１；本明細書における配列番号１９２０）、ＰＫＴＶＳＮＬＴＥＳＳＳＥＳＶＱＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０２；本明細書における配列番号１９２１）、ＳＬＭＧＤＥＦＫＡＶＬＥＴ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０３；本明細書における配列番号１９２２）、ＱＨＳＶＡＹＴＦＥＥＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０４；本明細書における配列番号１９２３）、ＩＮＰＥＩＩＴＲＤＧ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０５；本明細書における配列番号１９２４）、ＤＩＳＬＴＧＤＰＶＩＴＡＳＹＬ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０６；本明細書における配列番号１９２５）、ＤＩＳＬＴＧＤＰＶＩＴＡ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０７；本明細書における配列番号１９２６）、ＤＱＳＩＤＦＥＩＤＳＡ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０８；本明細書における配列番号１９２７）、ＫＮＶＳＥＤＬＰＬＰＴＦＳＰＴＬＬＧＤＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１０９；本明細書における配列番号１９２８）、ＫＮＶＳＥＤＬＰＬＰＴ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１０；本明細書における配列番号１９２９）、ＣＤＳＧＲＶＲＴＤＡＰＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１１；本明細書における配列番号１９３０）、ＦＰＥＨＬＬＶＤＦＬＱＳＬＳ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１２；本明細書における配列番号１９３１）、ＤＡＥＦＲＨＤＳＧ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号６５；本明細書における配列番号１９３２）、ＨＹＡＡＡＱＷＤＦＧＮＴＭＣＱＬ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１３；本明細書における配列番号１９３３）、ＹＡＡＱＷＤＦＧＮＴＭＣＱ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１４；本明細書における配列番号１９３４）、ＲＳＱＫＥＧＬＨＹＴ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１５；本明細書における配列番号１９３５）、ＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＷＡＮＰＱＡＥ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１６；本明細書における配列番号１９３６）、ＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＷＡＮＰ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１７；本明細書における配列番号１９３７）、ＳＳＲＴＰＳＤＫＰ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１８；本明細書における配列番号１９３８）、ＮＡＤＧＮＶＤＹＨＭＮＳＶＰ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１１９；本明細書における配列番号１９３９）、ＤＧＮＶＤＹＨＭＮＳＶ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１２０；本明細書における配列番号１９４０）、ＲＳＦＫＥＦＬＱＳＳＬＲＡＬＲＱ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１２１；本明細書における配列番号１９４１）、ＦＫＥＦＬＱＳＳＬＲＡ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１２２；本明細書における配列番号１９４２）、またはＱＭＷＡＰＱＷＧＰＤ（米国特許第９６２４２７４号明細書の配列番号１２３；本明細書における配列番号１９４３）のいずれであってもよい。
【０１２０】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、天然ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸５８５〜５９０位に１つ以上のアミノ酸の修飾を含むＡＡＶカプシドタンパク質など、米国特許第９４７５８４５号明細書（その内容は本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。更に、修飾は、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＲＧＮＲＱＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号３；本明細書における配列番号１９４４）、ＳＳＳＴＤＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４；本明細書における配列番号１９４５）、ＳＳＮＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５；本明細書における配列番号１９４６）、ＳＮＳＮＬＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６；本明細書における配列番号１９４７）、ＳＳＴＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７；本明細書における配列番号１９４８）、ＡＡＮＴＡＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８；本明細書における配列番号１９４９）、ＱＱＮＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９；本明細書における配列番号１９５０）、ＳＡＱＡＱＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０；本明細書における配列番号１９５１）、ＱＡＮＴＧＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１；本明細書における配列番号１９５２）、ＮＡＴＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２；本明細書における配列番号１９５３）、ＳＳＴＡＧＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３および２０；本明細書における配列番号１９５４）、ＱＱＮＴＡＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４；本明細書における配列番号１９５５）、ＰＳＴＡＧＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５；本明細書における配列番号１９５６）、ＮＱＮＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１６；本明細書における配列番号１９５７）、ＱＡＡＮＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１７；本明細書における配列番号１９５８）、ＳＩＶＧＬＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１８；本明細書における配列番号１９５９）、ＡＡＳＴＡＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１９および２７；本明細書における配列番号１９６０）、ＳＱＮＴＴＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２１；本明細書における配列番号１９６１）、ＱＱＤＴＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２２；本明細書における配列番号１９６２）、ＱＴＮＴＧＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２３；本明細書における配列番号１９６３）、ＱＴＮＧＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２４；本明細書における配列番号１９６４）、ＱＱＮＡＡＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２５；本明細書における配列番号１９６５）、またはＡＡＮＴＱＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号２６；本明細書における配列番号１９６６）をもたらし得る。一実施形態において、アミノ酸修飾は、天然ＡＡＶ２カプシドタンパク質のアミノ酸２６２〜２６５位、またはターゲティング配列を有する別のＡＡＶのカプシドタンパク質の対応する位置における置換である。ターゲティング配列は、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＮＧＲＡＨＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号３８；本明細書における配列番号１９６７）、ＱＰＥＨＳＳＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号３９および５０；本明細書における配列番号１９６８）、ＶＮＴＡＮＳＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４０；本明細書における配列番号１９６９）、ＨＧＰＭＱＫＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４１；本明細書における配列番号１９７０）、ＰＨＫＰＰＬＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４２；本明細書における配列番号１９７１）、ＩＫＮＮＥＭＷ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４３；本明細書における配列番号１９７２）、ＲＮＬＤＴＰＭ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４４；本明細書における配列番号１９７３）、ＶＤＳＨＲＱＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４５；本明細書における配列番号１９７４）、ＹＤＳＫＴＫＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４６；本明細書における配列番号１９７５）、ＳＱＬＰＨＱＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４７；本明細書における配列番号１９７６）、ＳＴＭＱＱＮＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４８；本明細書における配列番号１９７７）、ＴＥＲＹＭＴＱ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号４９；本明細書における配列番号１９７８）、ＤＡＳＬＳＴＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５１；本明細書における配列番号１９７９）、ＤＬＰＮＫＫＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５２；本明細書における配列番号１９８０）、ＤＬＴＡＡＲＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５３；本明細書における配列番号１９８１）、ＥＰＨＱＦＮＹ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５４；本明細書における配列番号１９８２）、ＥＰＱＳＮＨＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５５；本明細書における配列番号１９８３）、ＭＳＳＷＰＳＱ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５６；本明細書における配列番号１９８４）、ＮＰＫＨＮＡＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５７；本明細書における配列番号１９８５）、ＰＤＧＭＲＴＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５８；本明細書における配列番号１９８６）、ＰＮＮＮＫＴＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号５９；本明細書における配列番号１９８７）、ＱＳＴＴＨＤＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６０；本明細書における配列番号１９８８）、ＴＧＳＫＱＫＱ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６１；本明細書における配列番号１９８９）、ＳＬＫＨＱＡＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６２；本明細書における配列番号１９９０）、ＳＰＩＤＧＥＱ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６３；本明細書における配列番号１９９１）、ＷＩＦＰＷＩＱＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６４および１１２；本明細書における配列番号１９９２）、ＣＤＣＲＧＤＣＦＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６５；本明細書における配列番号１９９３）、ＣＮＧＲＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６６；本明細書における配列番号１９９４）、ＣＰＲＥＣＥＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６７；本明細書における配列番号１９９５）、ＣＴＴＨＷＧＦＴＬＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６８および１２３；本明細書における配列番号１９９６）、ＣＧＲＲＡＧＧＳＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号６９；本明細書における配列番号１９９７）、ＣＫＧＧＲＡＫＤＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７０；本明細書における配列番号１９９８）、ＣＶＰＥＬＧＨＥＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７１および１１５；本明細書における配列番号１９９９）、ＣＲＲＥＴＡＷＡＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７２；本明細書における配列番号２０００）、ＶＳＷＦＳＨＲＹＳＰＦＡＶＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７３；本明細書における配列番号２００１）、ＧＹＲＤＧＹＡＧＰＩＬＹＮ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７４；本明細書における配列番号２００２）、ＸＸＸＹＸＸＸ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７５；本明細書における配列番号２００３）、ＹＸＮＷ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７６；本明細書における配列番号２００４）、ＲＰＬＰＰＬＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７７；本明細書における配列番号２００５）、ＡＰＰＬＰＰＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７８；本明細書における配列番号２００６）、ＤＶＦＹＰＹＰＹＡＳＧＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号７９；本明細書における配列番号２００７）、ＭＹＷＹＰＹ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８０；本明細書における配列番号２００８）、ＤＩＴＷＤＱＬＷＤＬＭＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８１；本明細書における配列番号２００９）、ＣＷＤＤＸＷＬＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８２；本明細書における配列番号２０１０）、ＥＷＣＥＹＬＧＧＹＬＲＣＹＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８３；本明細書における配列番号２０１１）、ＹＸＣＸＸＧＰＸＴＷＸＣＸＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８４；本明細書における配列番号２０１２）、ＩＥＧＰＴＬＲＱＷＬＡＡＲＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８５；本明細書における配列番号２０１３）、ＬＷＸＸＸ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８６；本明細書における配列番号２０１４）、ＸＦＸＸＹＬＷ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８７；本明細書における配列番号２０１５）、ＳＳＩＩＳＨＦＲＷＧＬＣＤ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８８；本明細書における配列番号２０１６）、ＭＳＲＰＡＣＰＰＮＤＫＹＥ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号８９；本明細書における配列番号２０１７）、ＣＬＲＳＧＲＧＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９０；本明細書における配列番号２０１８）、ＣＨＷＭＦＳＰＷＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９１；本明細書における配列番号２０１９）、ＷＸＸＦ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９２；本明細書における配列番号２０２０）、ＣＳＳＲＬＤＡＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９３；本明細書における配列番号２０２１）、ＣＬＰＶＡＳＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９４；本明細書における配列番号２０２２）、ＣＧＦＥＣＶＲＱＣＰＥＲＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９５；本明細書における配列番号２０２３）、ＣＶＡＬＣＲＥＡＣＧＥＧＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９６；本明細書における配列番号２０２４）、ＳＷＣＥＰＧＷＣＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９７；本明細書における配列番号２０２５）、ＹＳＧＫＷＧＷ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９８；本明細書における配列番号２０２６）、ＧＬＳＧＧＲＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号９９；本明細書における配列番号２０２７）、ＬＭＬＰＲＡＤ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１００；本明細書における配列番号２０２８）、ＣＳＣＦＲＤＶＣＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０１；本明細書における配列番号２０２９）、ＣＲＤＶＶＳＶＩＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０２；本明細書における配列番号２０３０）、ＭＡＲＳＧＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０３；本明細書における配列番号２０３１）、ＭＡＲＡＫＥ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０４；本明細書における配列番号２０３２）、ＭＳＲＴＭＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０５；本明細書における配列番号２０３３）、ＫＣＣＹＳＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０６；本明細書における配列番号２０３４）、ＭＹＷＧＤＳＨＷＬＱＹＷＹＥ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０７；本明細書における配列番号２０３５）、ＭＱＬＰＬＡＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０８；本明細書における配列番号２０３６）、ＥＷＬＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１０９；本明細書における配列番号２０３７
）、ＳＮＥＷ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１０；本明細書における配列番号２０３８）、ＴＮＹＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１１；本明細書における配列番号２０３９）、ＷＤＬＡＷＭＦＲＬＰＶＧ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１３；本明細書における配列番号２０４０）、ＣＴＶＡＬＰＧＧＹＶＲＶＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１４；本明細書における配列番号２０４１）、ＣＶＡＹＣＩＥＨＨＣＷＴＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１６；本明細書における配列番号２０４２）、ＣＶＦＡＨＮＹＤＹＬＶＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１７；本明細書における配列番号２０４３）、ＣＶＦＴＳＮＹＡＦＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１８；本明細書における配列番号２０４４）、ＶＨＳＰＮＫＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１１９；本明細書における配列番号２０４５）、ＣＲＧＤＧＷＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２０；本明細書における配列番号２０４６）、ＸＲＧＣＤＸ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２１；本明細書における配列番号２０４７）、ＰＸＸＸ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２２；本明細書における配列番号２０４８）、ＳＧＫＧＰＲＱＩＴＡＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２４；本明細書における配列番号２０４９）、ＡＡＡＡＡＡＡＡＡＸＸＸＸＸ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２５；本明細書における配列番号２０５０）、ＶＹＭＳＰＦ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２６；本明細書における配列番号２０５１）、ＡＴＷＬＰＰＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２７；本明細書における配列番号２０５２）、ＨＴＭＹＹＨＨＹＱＨＨＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２８；本明細書における配列番号２０５３）、ＳＥＶＧＣＲＡＧＰＬＱＷＬＣＥＫＹＦＧ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１２９；本明細書における配列番号２０５４）、ＣＧＬＬＰＶＧＲＰＤＲＮＶＷＲＷＬＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３０；本明細書における配列番号２０５５）、ＣＫＧＱＣＤＲＦＫＧＬＰＷＥＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３１；本明細書における配列番号２０５６）、ＳＧＲＳＡ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３２；本明細書における配列番号２０５７）、ＷＧＦＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３３；本明細書における配列番号２０５８）、ＡＥＰＭＰＨＳＬＮＦＳＱＹＬＷＹＴ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３４；本明細書における配列番号２０５９）、ＷＡＹＸＳＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３５；本明細書における配列番号２０６０）、ＩＥＬＬＱＡＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３６；本明細書における配列番号２０６１）、ＡＹＴＫＣＳＲＱＷＲＴＣＭＴＴＨ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３７；本明細書における配列番号２０６２）、ＰＱＮＳＫＩＰＧＰＴＦＬＤＰＨ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３８；本明細書における配列番号２０６３）、ＳＭＥＰＡＬＰＤＷＷＷＫＭＦＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１３９；本明細書における配列番号２０６４）、ＡＮＴＰＣＧＰＹＴＨＤＣＰＶＫＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４０；本明細書における配列番号２０６５）、ＴＡＣＨＱＨＶＲＭＶＲＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４１；本明細書における配列番号２０６６）、ＶＰＷＭＥＰＡＹＱＲＦＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４２；本明細書における配列番号２０６７）、ＤＰＲＡＴＰＧＳ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４３；本明細書における配列番号２０６８）、ＦＲＰＮＲＡＱＤＹＮＴＮ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４４；本明細書における配列番号２０６９）、ＣＴＫＮＳＹＬＭＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４５；本明細書における配列番号２０７０）、ＣＸＸＴＸＸＸＧＸＧＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４６；本明細書における配列番号２０７１）、ＣＰＩＥＤＲＰＭＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４７；本明細書における配列番号２０７２）、ＨＥＷＳＹＬＡＰＹＰＷＦ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４８；本明細書における配列番号２０７３）、ＭＣＰＫＨＰＬＧＣ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１４９；本明細書における配列番号２０７４）、ＲＭＷＰＳＳＴＶＮＬＳＡＧＲＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５０；本明細書における配列番号２０７５）、ＳＡＫＴＡＶＳＱＲＶＷＬＰＳＨＲＧＧＥＰ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５１；本明細書における配列番号２０７６）、ＫＳＲＥＨＶＮＮＳＡＣＰＳＫＲＩＴＡＡＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５２；本明細書における配列番号２０７７）、ＥＧＦＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５３；本明細書における配列番号２０７８）、ＡＧＬＧＶＲ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５４；本明細書における配列番号２０７９）、ＧＴＲＱＧＨＴＭＲＬＧＶＳＤＧ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５５；本明細書における配列番号２０８０）、ＩＡＧＬＡＴＰＧＷＳＨＷＬＡＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５６；本明細書における配列番号２０８１）、ＳＭＳＩＡＲＬ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５７；本明細書における配列番号２０８２）、ＨＴＦＥＰＧＶ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５８；本明細書における配列番号２０８３）、ＮＴＳＬＫＲＩＳＮＫＲＩＲＲＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１５９；本明細書における配列番号２０８４）、ＬＲＩＫＲＫＲＲＫＲＫＫＴＲＫ（米国特許第９４７５８４５号明細書の配列番号１６０；本明細書における配列番号２０８５）、ＧＧＧ、ＧＦＳ、ＬＷＳ、ＥＧＧ、ＬＬＶ、ＬＳＰ、ＬＢＳ、ＡＧＧ、ＧＲＲ、ＧＧＨおよびＧＴＶのいずれであってもよい。
【０１２１】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、ＡＡＶ２（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９７；本明細書における配列番号２０８６）またはそのバリアントの部位特異的突然変異カプシドタンパク質であって、特異的部位が、ＶＰ１またはその断片の部位Ｒ４４７、Ｇ４５３、Ｓ５７８、Ｎ５８７、Ｎ５８７＋１、Ｓ６６２から選択される少なくとも１つの部位であるものなど、米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書（その内容は本明細書において本明細書において全体として参照によって援用される）に記載されるとおりの配列であってもよくまたはそれを有してしてもよい。
【０１２２】
更に、米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書に記載される突然変異配列のいずれかが、限定はされないが、以下の配列、ＳＤＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１および配列番号２３１；本明細書における配列番号２０８７）、ＳＰＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２；本明細書における配列番号２０８８）、ＳＨＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３；本明細書における配列番号２０８９）、ＳＲＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４；本明細書における配列番号２０９０）、ＳＫＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５；本明細書における配列番号２０９１）、ＳＮＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６；本明細書における配列番号２０９２）、ＳＧＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７；本明細書における配列番号２０９３）、ＳＡＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８、１７５、および２２１；本明細書における配列番号２０９４）、ＳＥＳＧＴＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９；本明細書における配列番号２０９５）、ＳＴＴＧＧＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０；本明細書における配列番号２０９６）、ＳＳＡＧＳＴＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１１；本明細書における配列番号２０９７）、ＮＮＤＳＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１２；本明細書における配列番号２０９８）、ＮＮＲＮＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１３；本明細書における配列番号２０９９）、ＮＮＮＫＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１４；本明細書における配列番号２１００）、ＮＡＫＲＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１５；本明細書における配列番号２１０１）、ＮＤＥＨＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１６；本明細書における配列番号２１０２）、ＮＴＳＱＫＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１７；本明細書における配列番号２１０３）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＤＴＱＳＲＬＶＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８；本明細書における配列番号２１０４）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＤＳＧＴＥＴＱＳＧＬＤＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１９；本明細書における配列番号２１０５）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＥＳＧＴＰＴＱＳＡＬＥＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０；本明細書における配列番号２１０６）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＨＳＧＴＨＴＱＳＰＬＨＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１；本明細書における配列番号２１０７）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＳＳＧＴＩＴＩＳＨＬＩＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２；本明細書における配列番号２１０８）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＲＳＧＩＭＴＫＳＳＬＭＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２３；本明細書における配列番号２１０９）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＫＳＧＲＫＴＬＳＮＬＳＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２４；本明細書における配列番号２１１０）、ＹＹＬＳＲＴＮＤＧＳＧＰＶＴＰＳＫＬＲＦＳＱＲＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５；本明細書における配列番号２１１１）、ＹＹＬＳＲＴＮＡＡＳＧＨＡＴＨＳＤＬＫＦＳＱＰＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６；本明細書における配列番号２１１２）、ＹＹＬＳＲＴＮＧＱＡＧＳＬＴＭＳＥＬＧＦＳＱＶＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２７；本明細書における配列番号２１１３）、ＹＹＬＳＲＴＮＳＴＧＧＮＱＴＴＳＱＬＬＦＳＱＬＳＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２８；本明細書における配列番号２１１４）、ＹＦＬＳＲＴＮＮＮＴＧＬＮＴＮＳＴＬＮＦＳＱＧＲＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２９；本明細書における配列番号２１１５）、ＳＫＴＧＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３０；本明細書における配列番号２１１６）、ＳＫＴＤＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３１；本明細書における配列番号２１１７）、ＳＫＴＥＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３２；本明細書における配列番号２１１８）、ＳＫＴＰＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３３；本明細書における配列番号２１１９）、ＳＫＴＨＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３４；本明細書における配列番号２１２０）、ＳＫＴＱＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３５；本明細書における配列番号２１２１）、ＳＫＴＩＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３６；本明細書における配列番号２１２２）、ＳＫＴＭＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３７；本明細書における配列番号２１２３）、ＳＫＴＲＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３８；本明細書における配列番号２１２４）、ＳＫＴＮＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号３９；本明細書における配列番号２１２５）、ＳＫＴＶＧＲＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４０；本明細書における配列番号２１２６）、ＳＫＴＡＤＲＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４１；本明細書における配列番号２１２７）、ＳＫＫＬＳＱＮＮＮＳＫＹＳＷＱＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４２；本明細書における配列番号２１２８）、ＳＫＰＴＴＧＮＮＮＳＤＹＳＷＰＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４３；本明細書における配列番号２１２９）、ＳＴＱＫＮＥＮＮＮＳＮＹＳＷＰＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４４；本明細書における配列番号２１３０）、ＨＫＤＤＥＧＫＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４５；本明細書における配列番号２１３１）、ＨＫＤＤＮＲＫＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４６；本明細書における配列番号２１３２）、ＨＫＤＤＴＮＫＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４７；本明細書における配列番号２１３３）、ＨＥＤＳＤＫＮＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４８；本明細書における配列番号２１３４）、ＨＲＤＧＡＤＳＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号４９；本明細書における配列番号２１３５）、ＨＧＤＮＫＳＲＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５０；本明細書における配列番号２１３６）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＦＥＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５１；本明細書における配列番号２１３７）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＳＥＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５２；本明細書における配列番号２１３８）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＶＥＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５３；本明細書における配列番号２１３９）、ＫＱＧＳＤＫＴＮＶＤＤＡＧＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５４；本明細書における配列番号２１４０）、ＫＱＧＳＳＫＴＮＶＤＰＲＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５５；本明細書における配列番号２１４１）、ＫＱＧＳＲＫＴＮＶＤＨＫＱＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５６；本明細書における配列番号２１４２）、ＫＱＧＳＫＧＧＮＶＤＴＮＲＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５７；本明細書における配列番号２１４３）、ＫＱＧＳＧＥＡＮＶＤＮＧＤＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５８；本明細書における配列番号２１４４）、ＫＱＤＡＡＡＤＮＩＤＹＤＨＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号５９；本明細書における配列番号２１４５）、ＫＱＳＧＴＲＳＮＡＡＡＳＳＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６０；本明細書における配列番号２１４６）、ＫＥＮＴＮＴＮＤＴＥＬＴＮＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６１；本明細書における配列番号２１４７）、ＱＲＧＮＮＶＡＡＴＡＤＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６２；本明細書における配列番号２１４８）、ＱＲＧＮＮＥＡＡＴＡＤＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６３；本明細書における配列番号２１４９）、ＱＲＧＮＮＰＡＡＴＡＤＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６４；本明細書における配列番号２１５０）、ＱＲＧＮＮＨＡＡＴＡＤＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６５；本明細書における配列番号２１５１）、ＱＥＥＮＮＩＡＡＴＰＧＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６６；本明細書における配列番号２１５２）、ＱＰＰＮＮＭＡＡＴＨＥＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６７；本明細書における配列番号２１５３）、ＱＨＨＮＮＳＡＡＴＴＩＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６８；本明細書における配列番号２１５４）、ＱＴＴＮＮＲＡＡＦＮＭＶＥＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号６９；本明細書における配列番号２１５５）、ＱＫＫＮＮＮＡＡＳＫＫＶＡＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７０；本明細書における配列番号２１５６）、ＱＧＧＮＮＫＡＡＤＤＡＶＫＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７１；本明細書における配列番号２１５７）、ＱＡＡＫＧＧＡＡＤＤＡＶＫＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７２；本明細書における配列番号２１５８）、ＱＤＤＲＡＡＡＡＮＥＳＶＤＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７３；本明細書における配列番号２１５９）、ＱＱＱＨＤＤＡＡＹＱＲＶＨＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７４；本明細書における配列番号２１６０）、ＱＳＳＳＳＬＡＡＶＳＴＶＱＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７５；本明細書における配列番号２１６１）、ＱＮＮＱＴＴＡＡＩＲＮＶＴＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７６；本明細書における配列番号２１６２）、ＮＹＮＫＫＳＤＮＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７７；本明細書における配列番号２１６３）、ＮＹＮＫＫＳＥＮＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７
８；本明細書における配列番号２１６４）、ＮＹＮＫＫＳＬＮＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号７９；本明細書における配列番号２１６５）、ＮＹＮＫＫＳＰＮＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８０；本明細書における配列番号２１６６）、ＮＹＳＫＫＳＨＣＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８１；本明細書における配列番号２１６７）、ＮＹＲＫＴＩＹＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８２；本明細書における配列番号２１６８）、ＮＹＫＥＫＫＤＶＨＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８３；本明細書における配列番号２１６９）、ＮＹＧＨＲＡＩＶＱＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８４；本明細書における配列番号２１７０）、ＮＹＡＮＨＱＦＶＶＣＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８５；本明細書における配列番号２１７１）、ＮＹＤＤＤＰＴＧＶＬＬＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８６；本明細書における配列番号２１７２）、ＮＹＤＤＰＴＧＶＬＬＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８７；本明細書における配列番号２１７３）、ＮＦＥＱＱＮＳＶＥＷＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８８；本明細書における配列番号２１７４）、ＳＱＳＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号８９および配列番号２４１；本明細書における配列番号２１７５）、ＮＮＧＳＱＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９０；本明細書における配列番号２１７６）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＷＳＲＬＱＦＳＱＡＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９１；本明細書における配列番号２１７７）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９２；本明細書における配列番号２１７８）、ＨＫＤＤＥＥＫＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９３、２０９、２１４、２１９、２２４、２３４、２３９、および２４４；本明細書における配列番号２１７９）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９４；本明細書における配列番号２１８０）、ＱＲＧＮＮＱＡＡＴＡＤＶＮＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９５；本明細書における配列番号２１８１）、ＮＹＮＫＫＳＶＮＶＤＦＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９６；本明細書における配列番号２１８２）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０６；本明細書における配列番号２１８３）、ＳＡＳＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０７；本明細書における配列番号２１８４）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０８；本明細書における配列番号２１８５）、ＳＡＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０９；本明細書における配列番号２１８６）、ＳＱＳＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１１０；本明細書における配列番号２１８７）、ＳＡＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１１１；本明細書における配列番号２１８８）、ＳＱＳＧＡＳＮＹＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１１２；本明細書における配列番号２１８９）、ＳＧＡＧＡＳＮＦＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１１３；本明細書における配列番号２１９０）、ＳＧＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１７６；本明細書における配列番号２１９１）、ＮＳＥＧＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１７７、１８５、１９３、および２０２；本明細書における配列番号２１９２）、ＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１７８；本明細書における配列番号２１９３）、ＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１７９；本明細書における配列番号２１９４）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８０；本明細書における配列番号２１９５）、ＳＱＳＧＡＳＮＹ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８１、１８７、および１９８；本明細書における配列番号２１９６）、ＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８２、１８８、１９１、および１９９；本明細書における配列番号２１９７）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８３；本明細書における配列番号２１９８）、ＳＡＳＧＡＳＮＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８４；本明細書における配列番号２１９９）、ＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１８６、１８９、１９４、１９７、および２０３；本明細書における配列番号２２００）、ＳＡＳＧＡＳＮＹ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１９０および配列番号１９５；本明細書における配列番号２２０１）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＥＦＳＷＰＧＡＴＴＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１９２；本明細書における配列番号２２０２）、ＮＴＰＳＧＳＬＴＱＳＳＬＧＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１９６、；本明細書における配列番号２２０３）、ＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳＷＴＧＡＴＫＹＨ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２００；本明細書における配列番号２２０４）、ＳＧＡＧＡＳＮＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０１；本明細書における配列番号２２０５）、ＣＴＣＣＡＧＶＶＳＶＶＳＭＲＳＲＶＣＶＮＳＧＣＡＧＣＴＤＨＣＶＶＳＲＮＳＧＴＣＶＭＳＡＣＡＣＡＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０４；本明細書における配列番号２２０６）、ＣＴＣＣＡＧＡＧＡＧＧＣＡＡＣＡＧＡＣＡＡＧＣＡＧＣＴＡＣＣＧＣＡＧＡＴＧＴＣＡＡＣＡＣＡＣＡＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０５；本明細書における配列番号２２０７）、ＳＡＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０６；本明細書における配列番号２２０８）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＥＳＧＳＴＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０７；本明細書における配列番号２２０９）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＤＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２０８、２２８、および２５３；本明細書における配列番号２２１０）、ＫＱＧＳＥＫＴＤＶＤＩＤＫＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１０；本明細書における配列番号２２１１）、ＳＴＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１１；本明細書における配列番号２２１２）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＴＳＧＩＥＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１２および配列番号２４７；本明細書における配列番号２１３）、ＳＫＴＤＧＥＮＮＮＳＤＦＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１３および配列番号２４８；本明細書における配列番号２２１４）、ＫＱＧＡＡＡＤＤＶＥＩＤＧＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１５および配列番号２５０；本明細書における配列番号２２１５）、ＳＥＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１６；本明細書における配列番号２２１６）、ＹＹＬＳＲＴＮＴＰＳＧＴＴＴＱＳＲＬＱＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１７、２３２および２４２；本明細書における配列番号２２１７）、ＳＫＴＳＡＤＮＮＮＳＥＹＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２１８、２３３、２３８、および２４３；本明細書における配列番号２２１８）、ＫＱＧＳＥＫＴＮＶＤＩＥＫＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２０、２２５および２４５；本明細書における配列番号２２１９）、ＹＦＬＳＲＴＮＤＡＳＧＳＤＴＫＳＴＬＬＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２２；本明細書における配列番号２２２０）、ＳＴＴＰＳＥＮＮＮＳＥＹＳ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２３；本明細書における配列番号２２２１）、ＳＡＡＧＡＴＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２６および配列番号２５１；本明細書における配列番号２２２２）、ＹＦＬＳＲＴＮＧＥＡＧＳＡＴＬＳＥＬＲＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２７；本明細書における配列番号２２２３）、ＨＧＤＤＡＤＲＦ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２２９および配列番号２５４；本明細書における配列番号２２２４）、ＫＱＧＡＥＫＳＤＶＥＶＤＲＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２３０および配列番号２５５；本明細書における配列番号２２２５）、ＫＱＤＳＧＧＤＮＩＤＩＤＱＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２３５；本明細書における配列番号２２２６）、ＳＤＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２３６；本明細書における配列番号２２２７）、ＹＦＬＳＲＴＮＴＥＧＧＨＤＴＱＳＴＬＲＦＳＱＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２３７；本明細書における配列番号２２２８）、ＫＥＤＧＧＧＳＤＶＡＩＤＥＶ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２４０；本明細書における配列番号２２２９）、ＳＮＡＧＡＳＮ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２４６；本明細書における配列番号２２３０）、およびＹＦＬＳＲＴＮＧＥＡＧＳＡＴＬＳＥＬＲＦＳＱＰＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５２；本明細書における配列番号２２３１）のいずれであってもよく、またはいずれを有していてもよい。アミノ酸突然変異部位をコードし得るヌクレオチド配列の非限定的な例としては、以下、ＡＧＣＶＶＭＤＣＡＧＧＡＲＳＣＡＳＣＡＡＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９７；本明細書における配列番号２２３２）、ＡＡＣＲＡＣＲＲＳＭＲＳＭＡＧＧＣＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９８；本明細書における配列番号２２３３）、ＣＡＣＲＲＧＧＡＣＲＲ
ＣＲＭＳＲＲＳＡＲＳＴＴＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号９９；本明細書における配列番号２２３４）、ＴＡＴＴＴＣＴＴＧＡＧＣＡＧＡＡＣＡＡＡＣＲＶＣＶＶＳＲＳＣＧＧＡＭＮＣＶＨＳＡＣＧＭＨＳＴＣＡＶＶＳＣＴＴＶＤＳＴＴＴＴＣＴＣＡＧＳＢＣＲＧＳＧＣＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１００；本明細書における配列番号２２３５）、ＴＣＡＡＭＡＭＭＡＶＮＳＲＶＣＳＲＳＡＡＣＡＡＣＡＡＣＡＧＴＲＡＳＴＴＣＴＣＧＴＧＧＭＭＡＧＧＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０１；本明細書における配列番号２２３６）、ＡＡＧＳＡＡＲＲＣＲＳＣＲＶＳＲＶＡＲＶＣＲＡＴＲＹＣＧＭＳＮＨＣＲＶＭＶＲＳＧＴＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０２；本明細書における配列番号２２３７）、ＣＡＧＶＶＳＶＶＳＭＲＳＲＶＣＶＮＳＧＣＡＧＣＴＤＨＣＶＶＳＲＮＳＧＴＣＶＭＳＡＣＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０３；本明細書における配列番号２２３８）、ＡＡＣＴＷＣＲＶＳＶＡＳＭＶＳＶＨＳＤＤＴＧＴＧＳＷＳＴＫＳＡＣＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号１０４；本明細書における配列番号２２３９）、ＴＴＧＴＴＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＡＣＧＴＧＡＣＧＣＡＣＧＴＴＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５６、；本明細書における配列番号２２４０）、ＴＣＣＣＣＧＴＧＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＡＴＡＡＴＧＴＧＧＣＣＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５７；本明細書における配列番号２２４１）、ＴＴＣＣＡＣＡＣＴＣＣＧＴＴＴＴＧＧＡＴＡＡＴＧＴＴＧＡＡＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５８；本明細書における配列番号２２４２）、ＡＧＧＧＡＣＡＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＣＡＴＧＣＴＧＴＧＧＴＣＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２５９；本明細書における配列番号２２４３）、ＡＧＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＴＣＣＧＡＣＴＣＧＣＣＣＴＡＡＴＣＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６０；本明細書における配列番号２２４４）、ＴＣＣＴＡＧＴＡＧＡＡＧＡＣＡＣＣＣＴＣＴＣＡＣＴＧＣＣＣＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６１；本明細書における配列番号２２４５）、ＡＧＴＡＣＣＡＴＧＴＡＣＡＣＣＣＡＣＴＣＴＣＣＣＡＧＴＧＣＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６２、；本明細書における配列番号２２４６）、ＡＴＡＴＧＧＡＣＧＴＴＣＡＴＧＣＴＧＡＴＣＡＣＣＡＴＡＣＣＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６３；本明細書における配列番号２２４７）、ＡＧＣＡＧＧＡＧＣＴＣＣＴＴＧＧＣＣＴＣＡＧＣＧＴＧＣＧＡＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６４；本明細書における配列番号２２４８）、ＡＣＡＡＧＣＡＧＣＴＴＣＡＣＴＡＴＧＡＣＡＡＣＣＡＣＴＧＡＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６５；本明細書における配列番号２２４９）、ＣＡＧＣＣＴＡＧＧＡＡＣＴＧＧＣＴＴＣＣＴＧＧＡＣＣＣＴＧＴＴＡＣＣＧＣＣＡＧＣＡＧＡＧＡＧＴＣＴＣＡＡＭＡＭＭＡＶＮＳＲＶＣＳＲＳＡＡＣＡＡＣＡＡＣＡＧＴＲＡＳＴＴＣＴＣＣＴＧＧＭＭＡＧＧＡＧＣＴＡＣＣＡＡＧＴＡＣＣＡＣＣＴＣＡＡＴＧＧＣＡＧＡＧＡＣＴＣＴＣＴＧＧＴＧＡＡＴＣＣＣＧＧＡＣＣＡＧＣＴＡＴＧＧＣＡＡＧＣＣＡＣＲＲＧＧＡＣＲＲＣＲＭＳＲＲＳＡＲＳＴＴＴＴＴＴＣＣＴＣＡＧＡＧＣＧＧＧＧＴＴＣＴＣＡＴＣＴＴＴＧＧＧＡＡＧＳＡＡＲＲＣＲＳＣＲＶＳＲＶＡＲＶＣＲＡＴＲＹＣＧＭＳＮＨＣＲＶＭＶＲＳＧＴＣＡＴＧＡＴＴＡＣＡＧＡＣＧＡＡＧＡＧＧＡＧＡＴＣＴＧＧＡＣ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６６；本明細書における配列番号２２５０）、ＴＧＧＧＡＣＡＡＴＧＧＣＧＧＴＣＧＴＣＴＣＴＣＡＧＡＧＴＴＫＴＫＫＴ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６７；本明細書における配列番号２２５１）、ＡＧＡＧＧＡＣＣＫＫＴＣＣＴＣＧＡＴＧＧＴＴＣＡＴＧＧＴＧＧＡＧＴＴＡ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６８；本明細書における配列番号２２５２）、ＣＣＡＣＴＴＡＧＧＧＣＣＴＧＧＴＣＧＡＴＡＣＣＧＴＴＣＧＧＴＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２６９；本明細書における配列番号２２５３）、およびＴＣＴＣＧＣＣＣＣＡＡＧＡＧＴＡＧＡＡＡＣＣＣＴＴＣＳＴＴＹＹＧ（米国特許出願公開第２０１６０３６９２９８号明細書の配列番号２７０；本明細書における配列番号２２５４）が挙げられる。
【０１２３】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットの配列番号９および配列番号１０など、国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの眼細胞ターゲティングペプチドを含み得る。更に、国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットに記載される眼細胞ターゲティングペプチドまたはアミノ酸のいずれかが、限定はされないが、ＡＡＶ２（国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットの配列番号８；本明細書における配列番号２２５５）、またはＡＡＶ９（国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットの配列番号１１；本明細書における配列番号２２５６）など、任意の親ＡＡＶ血清型に挿入されていてもよい。一部の実施形態において、挿入などの修飾は、ＡＡＶ２タンパク質のＰ３４〜Ａ３５、Ｔ１３８〜Ａ１３９、Ａ１３９〜Ｐ１４０、Ｇ４５３〜Ｔ４５４、Ｎ５８７〜Ｒ５８８、および／またはＲ５８８〜Ｑ５８９になされる。特定の実施形態において、挿入は、ＡＡＶ９のＤ３８４、Ｇ３８５、１５６０、Ｔ５６１、Ｎ５６２、Ｅ５６３、Ｅ５６４、Ｅ５６５、Ｎ７０４、および／またはＹ７０５になされる。眼細胞ターゲティングペプチドは、限定はされないが、以下のアミノ酸配列、ＧＳＴＰＰＰＭ（国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットの配列番号１；本明細書における配列番号２２５７）、またはＧＥＴＲＡＰＬ（国際公開第２０１６１３４３７５号パンフレットの配列番号４；本明細書における配列番号２２５８）のいずれであってもよい。
【０１２４】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、米国特許出願公開第２０１７０１４５４０５号明細書（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりに修飾されていてもよい。ＡＡＶ血清型としては、修飾ＡＡＶ２（例えば、Ｙ４４４Ｆ、Ｙ５００Ｆ、Ｙ７３０Ｆおよび／またはＳ６６２Ｖの修飾）、修飾ＡＡＶ３（例えば、Ｙ７０５Ｆ、Ｙ７３１Ｆおよび／またはＴ４９２Ｖの修飾）、および修飾ＡＡＶ６（例えば、Ｓ６６３Ｖおよび／またはＴ４９２Ｖの修飾）が挙げられる。
【０１２５】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、国際公開第２０１７０８３７２２号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりに修飾されていてもよい。ＡＡＶ血清型としては、ＡＡＶ１（Ｙ７０５＋７３１Ｆ＋Ｔ４９２Ｖ）、ＡＡＶ２（Ｙ４４４＋５００＋７３０Ｆ＋Ｔ４９１Ｖ）、ＡＡＶ３（Ｙ７０５＋７３１Ｆ）、ＡＡＶ５、ＡＡＶ５（Ｙ４３６＋６９３＋７１９Ｆ）、ＡＡＶ６（ＶＰ３バリアントＹ７０５Ｆ／Ｙ７３１Ｆ／Ｔ４９２Ｖ）、ＡＡＶ８（Ｙ７３３Ｆ）、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９（ＶＰ３バリアントＹ７３１Ｆ）、およびＡＡＶ１０（Ｙ７３３Ｆ）が挙げられ得る。
【０１２６】
一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型は、国際公開第２０１７０１５１０２号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりに、アミノ酸ＳＰＡＫＦＡ（国際公開第２０１７０１５１０２号パンフレットの配列番号２４；本明細書における配列番号２２５９）またはＮＫＤＫＬＮ（国際公開第２０１７０１５１０２号パンフレットの配列番号２；本明細書における配列番号２２６０）を含む操作されたエピトープを含み得る。エピトープは、ＡＡＶ８（国際公開第２０１７０１５１０２号パンフレットの配列番号３）のＶＰ１カプシドの付番に基づきアミノ酸６６５〜６７０の領域および／またはＡＡＶ３Ｂ（配列番号３）の残基６６４〜６６８の領域に挿入されていてもよい。
【０１２７】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、限定はされないが、いずれかの組合せで、ＡＡＶ１のアミノ酸残基２６２〜２６８、３７０〜３７９、４５１〜４５９、４７２〜４７３、４９３〜５００、５２８〜５３４、５４７〜５５２、５８８〜５９７、７０９〜７１０、７１６〜７２２の１つ以上（例えば、２、３、４、５、６、または７つ）に、またはＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶｒｈ３２．３３、ウシＡＡＶ、もしくはトリＡＡＶの等価なアミノ酸残基に置換を含み得るカプシドタンパク質を有するＡＡＶバリアントなど、国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載のとおりの配列であってもよくまたはそれを有していてもよい。アミノ酸置換は、限定はされないが、国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットに記載されるアミノ酸配列のいずれであってもよい。一実施形態において、ＡＡＶは、以下の残基、ＡＡＶ１（国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットの配列番号ｌ）の残基２５６Ｌ、２５８Ｋ、２５９Ｑ、２６１Ｓ、２６３Ａ、２６４Ｓ、２６５Ｔ、２６６Ｇ、２７２Ｈ、３８５Ｓ、３８６Ｑ、Ｓ４７２Ｒ、Ｖ４７３Ｄ、Ｎ５００Ｅ  ５４７Ｓ、７０９Ａ、７１０Ｎ、７１６Ｄ、７１７Ｎ、７１８Ｎ、７２０Ｌ、Ａ４５６Ｔ、Ｑ４５７Ｔ、Ｎ４５８Ｑ、Ｋ４５９Ｓ、Ｔ４９２Ｓ、Ｋ４９３Ａ、Ｓ５８６Ｒ、Ｓ５８７Ｇ、Ｓ５８８Ｎ、Ｔ５８９Ｒおよび／または７２２Ｔのいずれかの組合せ、ＡＶＶ５（国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットの配列番号５）の２４４Ｎ、２４６Ｑ、２４８Ｒ、２４９Ｅ、２５０Ｉ、２５１Ｋ、２５２Ｓ、２５３Ｇ、２５４Ｓ、２５５Ｖ、２５６Ｄ、２６３Ｙ、３７７Ｅ、３７８Ｎ、４５３Ｌ、４５６Ｒ、５３２Ｑ、５３３Ｐ、５３５Ｎ、５３６Ｐ、５３７Ｇ、５３８Ｔ、５３９Ｔ、５４０Ａ、５４１Ｔ、５４２Ｙ、５４３Ｌ、５４６Ｎ、６５３Ｖ、６５４Ｐ、６５６Ｓ、６９７Ｑ、６９８Ｆ、７０４Ｄ、７０５Ｓ、７０６Ｔ、７０７Ｇ、７０８Ｅ、７０９Ｙおよび／または７１０Ｒのいずれかの組合せ、ＡＡＶ５（国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットの配列番号５）の２４８Ｒ、３１６Ｖ、３１７Ｑ、３１８Ｄ、３１９Ｓ、４４３Ｎ、５３０Ｎ、５３１Ｓ、５３２Ｑ  ５３３Ｐ、５３４Ａ、５３５Ｎ、５４０Ａ、５４１Ｔ、５４２Ｙ、５４３Ｌ、５４５Ｇ、５４６Ｎ、６９７Ｑ、７０４Ｄ、７０６Ｔ、７０８Ｅ、７０９Ｙおよび／または７１０Ｒのいずれかの組合せ、ＡＡＶ６（国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットの配列番号６）の２６４Ｓ、２６６Ｇ、２６９Ｎ、２７２Ｈ、４５７Ｑ、５８８Ｓおよび／または５８９Ｉのいずれかの組合せ、ＡＡＶ８（国際公開第２０１７０５８８９２号パンフレットの配列番号８）の４５７Ｔ、４５９Ｎ、４９６Ｇ、４９９Ｎ、５００Ｎ、５８９Ｑ、５９０Ｎおよび／または５９２Ａのいずれかの組合せ、ＡＡＶ９（国際公開第２０１７０５８８９２の配列番号９）の４５１Ｉ、４５２Ｎ、４５３Ｇ、４５４Ｓ、４５５Ｇ、４５６Ｑ、４５７Ｎおよび／または４５８Ｑのいずれか��組合せでアミノ酸置換を含み得る。
【０１２８】
一部の実施形態において、ＡＡＶは、国際公開第２０１７０６６７６４号パンフレット（その内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりに、ＶＰ１の１５５、１５６および１５７位またはＶＰ２の１７、１８、１９および２０位にアミノ酸の配列を含み得る。アミノ酸の配列は、限定はされないが、Ｎ−Ｓ−Ｓ、Ｓ−Ｘ−Ｓ、Ｓ−Ｓ−Ｙ、Ｎ−Ｘ−Ｓ、Ｎ−Ｓ−Ｙ、Ｓ−Ｘ−ＹおよびＮ−Ｘ−Ｙ、式中Ｎ、ＸおよびＹは、限定はされないが、独立に、非セリンまたは非トレオニンアミノ酸であり、ＡＡＶは、限定はされないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１およびＡＡＶ１２であってもよい。一部の実施形態において、ＡＡＶは、ＶＰ１の１５６、１５７もしくは１５８位またはＶＰ２の１９、２０もしくは２１位に少なくとも１つのアミノ酸の欠失を含んでいてもよく、ＡＡＶは、限定はされないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１およびＡＡＶ１２であってもよい。
【０１２９】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ジャクソン（Ｊａｃｋｓｏｎ）ら（フロンティア・イン・モレキュラー・ニューロサイエンス（Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ）、第９巻、ｐ．１５４、２０１６年）（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりであってもよい。一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型はＰＨＰ．ＢまたはＡＡＶ９である。一部の実施形態において、ＡＡＶ血清型はシナプシンプロモータと対を成すことにより、遍在性の高いプロモータを使用する場合（すなわち、ＣＢＡまたはＣＭＶ）と比較したときニューロン形質導入を増強する。
【０１３０】
一実施形態において、ＡＡＶ血清型に含めるペプチドは、ヒト脾細胞を単離すること、インビトロでＡＡＶカプシドタンパク質のアミノ酸配列にわたって個々のペプチドを用いて脾細胞を再刺激すること、インビトロ再刺激に使用した個々のペプチドによるＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳｐｏｔ、バイオインフォマティクス解析によるＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳｐｏｔによって同定された１５ｍｅｒの所与の対立遺伝子拘束性の決定、所与の対立遺伝子に対する候補反応性９ｍｅｒエピトープの同定、候補９ｍｅｒの合成、同定されたＡＡＶエピトープが結合すると予測される特異的対立遺伝子を有する対象からの脾細胞の第２のＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳｐｏｔスクリーニング、ＡＡＶカプシド反応性ＣＤ８＋  Ｔ細胞エピトープを決定すること、および所与のＡＡＶエピトープに反応する対象の頻度を決定することにより同定されてもよい。
【０１３１】
ｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、限定はされないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ−ＤＪ８およびＡＡＶ−ＤＪを含む、ＡＡＶの種々の血清型から調製されてもよく、またはそれに由来してもよい。ある場合には、異なるＡＡＶ血清型が共に、または他のタイプのウイルスと混合されることにより、キメラＡＡＶベクターが作製されてもよい。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子はＡＡＶ９血清型に由来する。
【０１３２】
ウイルスゲノム
一実施形態において、に示されるように、ＡＡＶ粒子は、ペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。
【０１３３】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、図１に示されるような成分を含み得る。ペイロード領域１１０は、ウイルスゲノム１００内に位置する。ウイルスゲノム１００の５’末端および／または３’末端には、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）１２０が存在していてもよい。５’ＩＴＲ１２０とペイロード領域１１０との間には、プロモータ領域１３０が存在していてもよい。一実施形態において、ペイロード領域は、少なくとも１つの調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
【０１３４】
一実施形態において、ウイルスゲノム１００は、図２に示されるような成分を含み得る。ペイロード領域１１０は、ウイルスゲノム１００内に位置する。ウイルスゲノム１００の５’末端および／または３’末端には、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）１２０が存在していてもよい。５’ＩＴＲ１２０とペイロード領域１１０との間には、プロモータ領域１３０が存在していてもよい。プロモータ領域１３０とペイロード領域１１０との間には、イントロン領域１４０が存在していてもよい。一実施形態において、ペイロード領域は、少なくとも１つの調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
【０１３５】
一実施形態において、ウイルスゲノム１００は、図３に示されるような成分を含み得る。ウイルスゲノム１００の５’末端および／または３’末端には、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）１２０が存在していてもよい。ウイルスゲノム１００内には、エンハンサー領域１５０、プロモータ領域１３０、イントロン領域１４０、およびペイロード領域１１０が存在していてもよい。一実施形態において、ペイロード領域は、少なくとも１つの調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
【０１３６】
一実施形態において、ウイルスゲノム１００は、図４に示されるような成分を含み得る。ウイルスゲノム１００の５’末端および／または３’末端には、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）１２０が存在していてもよい。ウイルスゲノム１００内には、エンハンサー領域１５０、プロモータ領域１３０、イントロン領域１４０、ペイロード領域１１０、およびポリアデニル化シグナル配列領域１６０が存在していてもよい。一実施形態において、ペイロード領域は、少なくとも１つの調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
【０１３７】
一実施形態において、ウイルスゲノム１００は、図５に示されるような成分を含み得る。ウイルスゲノム１００の５’末端および／または３’末端には、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）１２０が存在していてもよい。ウイルスゲノム１００内には、少なくとも１つのＭＣＳ領域１７０、エンハンサー領域１５０、プロモータ領域１３０、イントロン領域１４０、ペイロード領域１１０、およびポリアデニル化シグナル配列領域１６０が存在していてもよい。一実施形態において、ペイロード領域は、少なくとも１つの調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
【０１３８】
一実施形態において、ウイルスゲノム１００は、図６に示されるような成分を含み得る。ウイルスゲノム１００の５’末端および／または３’末端には、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）１２０が存在していてもよい。ウイルスゲノム１００内には、少なくとも１つのＭＣＳ領域１７０、エンハンサー領域１５０、プロモータ領域１３０、少なくとも１つのエクソン領域１８０、少なくとも１つのイントロン領域１４０、ペイロード領域１１０、およびポリアデニル化シグナル配列領域１６０が存在していてもよい。一実施形態において、ペイロード領域は、少なくとも１つの調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
【０１３９】
一実施形態において、ウイルスゲノム１００は、図７および図８に示されるような成分を含み得る。ウイルスゲノム１００内には、少なくとも１つのプロモータ領域１３０およびペイロード領域１１０が存在していてもよい。一実施形態において、ペイロード領域は、少なくとも１つの調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
【０１４０】
一実施形態において、ウイルスゲノム１００は、図９に示されるような成分を含み得る。ウイルスゲノム１００内には、少なくとも１つのプロモータ領域１３０、ペイロード領域１１０、およびポリアデニル化シグナル配列領域１６０が存在していてもよい。一実施形態において、ペイロード領域は、少なくとも１つの調節性ポリヌクレオチドを含み得る。
【０１４１】
ウイルスゲノムサイズ
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、一本鎖または二本鎖ウイルスゲノムであってもよい。ウイルスゲノムのサイズは、小型、中型、大型または最大サイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
【０１４２】
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、小型一本鎖ウイルスゲノムであってもよい。小型一本鎖ウイルスゲノムは、約２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、および３．５ｋｂサイズなど、２．７〜３．５ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、小型一本鎖ウイルスゲノムは３．２ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
【０１４３】
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、小型二本鎖ウイルスゲノムであってもよい。小型二本鎖ウイルスゲノムは、約１．３、１．４、１．５、１．６、および１．７ｋｂサイズなど、１．３〜１．７ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、小型二本鎖ウイルスゲノムは１．６ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
【０１４４】
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、中型一本鎖ウイルスゲノムであってもよい。中型一本鎖ウイルスゲノムは、約３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２および４．３ｋｂサイズなど、３．６〜４．３ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、中型一本鎖ウイルスゲノムは４．０ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
【０１４５】
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、中型二本鎖ウイルスゲノムであってもよい。中型二本鎖ウイルスゲノムは、約１．８、１．９、２．０、および２．１ｋｂサイズなど、１．８〜２．１ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、中型二本鎖ウイルスゲノムは２．０ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
【０１４６】
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、大型一本鎖ウイルスゲノムであってもよい。大型一本鎖ウイルスゲノムは、約４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９および６．０ｋｂサイズなど、４．４〜６．０ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、大型一本鎖ウイルスゲノムは４．７ｋｂサイズであってもよい。別の非限定的な例として、大型一本鎖ウイルスゲノムは４．８ｋｂサイズであってもよい。更に別の非限定的な例として、大型一本鎖ウイルスゲノムは６．０ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
【０１４７】
一実施形態において、本明細書に記載されるペイロードを含むウイルスゲノムは、大型二本鎖ウイルスゲノムであってもよい。大型二本鎖ベクターゲノムは、約２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９および３．０ｋｂサイズなど、２．２〜３．０ｋｂサイズであってもよい。非限定的な例として、大型二本鎖ウイルスゲノムは２．４ｋｂサイズであってもよい。加えて、ウイルスゲノムはプロモータおよびポリＡテールを含み得る。
【０１４８】
ウイルスゲノム成分：末端逆位配列（ＩＴＲ）
本発明のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのＩＴＲ領域とペイロード領域とを有するウイルスゲノムを含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは２つのＩＴＲを有する。これらの２つのＩＴＲは５’末端および３’末端でペイロード領域に隣接する。ＩＴＲは、複製のための認識部位を含む複製起点として働く。ＩＴＲは、相補的でかつ対称に配置され得る配列領域を含む。本発明のウイルスゲノムに組み込まれるＩＴＲは、天然に存在するポリヌクレオチド配列または組換え的に誘導されたポリヌクレオチド配列を含み得る。
【０１４９】
ＩＴＲは、表１に挙げられる血清型のいずれか、またはその誘導体から選択される、カプシドと同じ血清型に由来してもよい。ＩＴＲはカプシドと異なる血清型であってもよい。一実施形態において、ＡＡＶ粒子は２つ以上のＩＴＲを有する。非限定的な例では、ＡＡＶ粒子は、２つのＩＴＲを含むウイルスゲノムを有する。一実施形態において、ＩＴＲは互いに同じ血清型である。別の実施形態において、ＩＴＲは異なる血清型である。非限定的な例としては、ＩＴＲのうちゼロ個、一方または両方がカプシドと同じ血清型を有することが挙げられる。一実施形態において、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムの両方のＩＴＲがＡＡＶ２  ＩＴＲである。
【０１５０】
独立に、各ＩＴＲは約１００〜約１５０ヌクレオチド長であってもよい。ＩＴＲは、約１００〜１０５ヌクレオチド長、１０６〜１１０ヌクレオチド長、１１１〜１１５ヌクレオチド長、１１６〜１２０ヌクレオチド長、１２１〜１２５ヌクレオチド長、１２６〜１３０ヌクレオチド長、１３１〜１３５ヌクレオチド長、１３６〜１４０ヌクレオチド長、１４１〜１４５ヌクレオチド長または１４６〜１５０ヌクレオチド長であってもよい。一実施形態において、ＩＴＲは１４０〜１４２ヌクレオチド長である。ＩＴＲ長さの非限定的な例は、１０２、１４０、１４１、１４２、１４５ヌクレオチド長、およびそれと少なくとも９５％の同一性を有するものである。
【０１５１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてフリップＩＴＲの５’末端の近傍に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。別の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてフリップＩＴＲの３’末端の近傍に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。更に別の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてフロップＩＴＲの５’末端の近傍に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。更に別の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてフロップＩＴＲの３’末端の近傍に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてフリップＩＴＲの５’末端とフロップＩＴＲの３’末端との間に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてフリップＩＴＲの３’末端とフリップＩＴＲの５’末端との間に（例えば、フリップＩＴＲの５’末端とフロップＩＴＲの３’末端との間またはフロップＩＴＲの３’末端とフリップＩＴＲの５’末端との間の中間に）位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばフリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端から下流に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０ヌクレオチドまたは３０ヌクレオチド超以内に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばフリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端から上流に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０ヌクレオチドまたは３０ヌクレオチド超以内に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばフリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端から下流に１〜５、１〜１０、１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０、５〜１０、５〜１５、５〜２０、５〜２５、５〜３０、１０〜１５、１０〜２０、１０〜２５、１０〜３０、１５〜２０、１５〜２５、１５〜３０、２０〜２５、２０〜３０または２５〜３０ヌクレオチド以内に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばフリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端から上流に１〜５、１〜１０、１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０、５〜１０、５〜１５、５〜２０、５〜２５、５〜３０、１０〜１５、１０〜２０、１０〜２５、１０〜３０、１５〜２０、１５〜２５、１５〜３０、２０〜２５、２０〜３０または２５〜３０以内に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばフリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端から上流にあるヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％または２５％超以内に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてＩＴＲ（例えばフリップまたはフロップＩＴＲ）の５’または３’末端から下流に最初の１〜５％、１〜１０％、１〜１５％、１〜２０％、１〜２５％、５〜１０％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、１０〜１５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１５〜２０％、１５〜２５％、または２０〜２５％で位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。
【０１５２】
ウイルスゲノム成分：プロモータ
一実施形態において、ウイルスゲノムのペイロード領域は、トランス遺伝子標的特異性および発現を増強する少なくとも１つのエレメントを含む（例えば、パウエル（Ｐｏｗｅｌｌ）ら著、「遺伝子療法におけるトランス遺伝子標的特異性および発現を増強するウイルス発現カセットエレメント（Ｖｉｒａｌ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｃａｓｓｅｔｔｅ  Ｅｌｅｍｅｎｔｓ  ｔｏ  Ｅｎｈａｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ  Ｔａｒｇｅｔ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ）」、２０１５年を参照のこと；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。トランス遺伝子標的特異性および発現を増強するエレメントの非限定的な例としては、プロモータ、内因性ｍｉＲＮＡ、転写後調節エレメント（ＰＲＥ）、ポリアデニル化（ポリＡ）シグナル配列および上流エンハンサー（ＵＳＥ）、ＣＭＶエンハンサーおよびイントロンが挙げられる。
【０１５３】
当業者であれば、標的細胞中での本発明のポリペプチドの発現には、限定はされないが、種特異的な、誘導可能な、組織特異的な、または細胞周期特異的なプロモータを含む、特異的なプロモータが必要とされ得ることを認識し得る（パー（Ｐａｒｒ）ら著、ネイチャー・メディシン（Ｎａｔ．Ｍｅｄ．）、第３巻、ｐ．１１４５〜９（１９９７年）；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
【０１５４】
一実施形態において、プロモータは、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムのペイロード領域にコードされたポリペプチドの発現をドライブする場合、有効と見なされる。
一実施形態において、プロモータは、調節性ポリヌクレオチドの発現をドライブするのに有効と見なされるプロモータである。
【０１５５】
一実施形態において、プロモータは、標的とされている細胞中で発現をドライブする場合、有効と見なされるプロモータである。
一実施形態において、プロモータは、標的組織においてペイロードの発現をある期間ドライブする。プロモータによりドライブされた発現は、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、１日、２日、３日、４日、５日、６日、１週間、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、２週間、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、３週間、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日、２９日、３０日、３１日、１ヵ月、２ヵ月、３ヵ月、４ヵ月、５ヵ月、６ヵ月、７ヵ月、８ヵ月、９ヵ月、１０ヵ月、１１ヵ月、１年、１３ヵ月、１４ヵ月、１５ヵ月、１６ヵ月、１７ヵ月、１８ヵ月、１９ヵ月、２０ヵ月、２１ヵ月、２２ヵ月、２３ヵ月、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年または１０年超の期間であってもよい。発現は、１〜５時間、１〜１２時間、１〜２日、１〜５日、１〜２週間、１〜３週間、１〜４週間、１〜２ヵ月、１〜４ヵ月、１〜６ヵ月、２〜６ヵ月、３〜６ヵ月、３〜９ヵ月、４〜８ヵ月、６〜１２ヵ月、１〜２年、１〜５年、２〜５年、３〜６年、３〜８年、４〜８年または５〜１０年であってもよい。
【０１５６】
一実施形態において、プロモータは、少なくとも１ヵ月、２ヵ月、３ヵ月、４ヵ月、５ヵ月、６ヵ月、７ヵ月、８ヵ月、９ヵ月、１０ヵ月、１１ヵ月、１年、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年、１１年、１２年、１３年、１４年、１５年、１６年、１７年、１８年、１９年、２０年、２１年、２２年、２３年、２４年、２５年、２６年、２７年、２８年、２９年、３０年、３１年、３２年、３３年、３４年、３５年、３６年、３７年、３８年、３９年、４０年、４１年、４２年、４３年、４４年、４５年、４６年、４７年、４８年、４９年、５０年、５５年、６０年、６５年、または６５年超にわたって、ペイロードの発現をドライブする。
【０１５７】
プロモータは、天然に存在してもよくまたは天然に存在しなくともよい。プロモータの非限定的な例としては、ウイルスプロモータ、植物プロモータおよび哺乳類プロモータが挙げられる。一部の実施形態において、プロモータは、ヒトプロモータであってもよい。一部の実施形態において、プロモータは、トランケート型であってもよい。
【０１５８】
ほとんどの組織で発現をドライブまたは促進するプロモータとしては、限定はされないが、ヒト伸長因子１α−サブユニット（ＥＦ１α）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）前初期エンハンサーおよび／もしくはプロモータ、ニワトリβ−アクチン（ＣＢＡ）およびその誘導体ＣＡＧ、βグルクロニダーゼ（ＧＵＳＢ）、またはユビキチンＣ（ＵＢＣ）が挙げられる。限定はされないが、筋肉特異的プロモータ、Ｂ細胞プロモータ、単球プロモータ、白血球プロモータ、マクロファージプロモータ、膵腺房細胞プロモータ、内皮細胞プロモータ、肺組織プロモータ、アストロサイトプロモータ、またはニューロン、アストロサイト、もしくはオリゴデンドロサイトに発現を制限するために使用することができる神経系プロモータなど、組織特異的発現エレメントを使用して、発現を特定の細胞型に限定することができる。
【０１５９】
筋肉特異的プロモータの非限定的な例としては、哺乳類筋肉クレアチンキナーゼ（ＭＣＫ）プロモータ、哺乳類デスミン（ＤＥＳ）プロモータ、哺乳類トロポニンＩ（ＴＮＮＩ２）プロモータ、および哺乳類骨格筋型アルファ−アクチン（ＡＳＫＡ）プロモータ（例えば、米国特許出願公開第２０１１０２１２５２９号明細書を参照。その内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
【０１６０】
ニューロンの組織特異的発現エレメントの非限定的な例としては、ニューロン特異的エノラーゼ（ＮＳＥ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、血小板由来増殖因子Ｂ鎖（ＰＤＧＦ−β）、シナプシン（Ｓｙｎ）、メチル−ＣｐＧ結合タンパク質（ＭｅＣＰ２）、Ｃａ２＋／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩＩ（ＣａＭＫＩＩ）、代謝調節型グルタミン酸受容体２（ｍＧｌｕＲ２）、ニューロフィラメント軽鎖（ＮＦＬ）または重鎖（ＮＦＨ）、β−グロビンミニ遺伝子ｎβ２、プレプロエンケファリン（ＰＰＥ）、エンケファリン（Ｅｎｋ）および興奮性アミノ酸トランスポーター２（ＥＡＡＴ２）プロモータが挙げられる。アストロサイトに対する組織特異的発現エレメントの非限定的な例としては、グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）およびＥＡＡＴ２プロモータが挙げられる。オリゴデンドロサイトに対する組織特異的発現エレメントの非限定的な例としては、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）プロモータが挙げられる。
【０１６１】
一実施形態において、プロモータは、１ｋｂ未満であってもよい。プロモータは、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００または８００ヌクレオチド超の長さを有してもよい。プロモータは、２００〜３００、２００〜４００、２００〜５００、２００〜６００、２００〜７００、２００〜８００、３００〜４００、３００〜５００、３００〜６００、３００〜７００、３００〜８００、４００〜５００、４００〜６００、４００〜７００、４００〜８００、５００〜６００、５００〜７００、５００〜８００、６００〜７００、６００〜８００または７００〜８００の長さを有してもよい。
【０１６２】
一実施形態において、プロモータは、限定はされないが、ＣＭＶおよびＣＢＡなど、同じまたは異なる開始または親プロモータの２つ以上の成分の組合せであってもよい。各成分は、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００または８００超の長さを有してもよい。各成分は、２００〜３００、２００〜４００、２００〜５００、２００〜６００、２００〜７００、２００〜８００、３００〜４００、３００〜５００、３００〜６００、３００〜７００、３００〜８００、４００〜５００、４００〜６００、４００〜７００、４００〜８００、５００〜６００、５００〜７００、５００〜８００、６００〜７００、６００〜８００または７００〜８００の長さを有してもよい。一実施形態において、プロモータは、３８２ヌクレオチドＣＭＶエンハンサー配列と２６０ヌクレオチドＣＢＡプロモータ配列との組合せである。
【０１６３】
一実施形態において、ウイルスゲノムはユビキタスプロモータを含む。ユビキタスプロモータの非限定的な例としては、ＣＭＶ、ＣＢＡ（誘導体ＣＡＧ、ＣＢｈ等を含む）、ＥＦ−１α、ＰＧＫ、ＵＢＣ、ＧＵＳＢ（ｈＧＢｐ）、およびＵＣＯＥ（ＨＮＲＰＡ２Ｂ１−ＣＢＸ３のプロモータ）が挙げられる。
【０１６４】
ユー（Ｙｕ）ら（モレキュラー・ペイン（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｉｎ）、２０１１年、第７巻、ｐ．６３；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）は、レンチウイルスベクターを使用してラットＤＲＧ細胞および初代ＤＲＧ細胞におけるＣＡＧ、ＥＦＩα、ＰＧＫおよびＵＢＣプロモータ下のｅＧＦＰの発現を評価し、ＵＢＣが他の３つのプロモータよりも弱い発現を示し、全てのプロモータについて僅か１０〜１２％のグリア細胞発現しか見られなかったことを見出した。セーデルブロム（Ｓｏｄｅｒｂｌｏｍ）ら（イー・ニューロ（Ｅ．Ｎｅｕｒｏ）、２０１５年；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）は、運動皮質における注射後のＣＭＶおよびＵＢＣプロモータを含むＡＡＶ８およびＣＭＶプロモータを含むＡＡＶ２におけるｅＧＦＰの発現を評価した。ＵＢＣまたはＥＦＩαプロモータを含むプラスミドの鼻腔内投与は、ＣＭＶプロモータによる発現よりも高い持続的気道発現を示した（例えば、ギル（Ｇｉｌｌ）ら著、ジーン・セラピー（Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ）、２００１年、第８巻、ｐ．１５３９〜１５４６（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）を参照のこと）。フセイン（Ｈｕｓａｉｎ）ら（ジーン・セラピー（Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ）、２００９年；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）は、ｈＧＵＳＢプロモータ、ＨＳＶ−１ＬＡＴプロモータおよびＮＳＥプロモータを含むＨβＨコンストラクトを評価し、このＨβＨコンストラクトがマウス脳においてＮＳＥよりも弱い発現を示したことを見出した。パッシーニ（Ｐａｓｓｉｎｉ）およびウォルフ（Ｗｏｌｆｅ）（ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．）、２００１年、ｐ．１２３８２〜１２３９２、これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）は、新生仔マウスにおける脳室内注射後のＨβＨベクターの長期効果を評価し、少なくとも１年間にわたり持続的発現があったことを見出した。スー（Ｘｕ）ら（ジーン・セラピー（Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ）、２００１年、第８巻、ｐ．１３２３〜１３３２；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）により、ＮＦＬおよびＮＦＨプロモータを使用したとき、ＣＭＶ−ｌａｃＺ、ＣＭＶ−ｌｕｃ、ＥＦ、ＧＦＡＰ、ｈＥＮＫ、ｎＡＣｈＲ、ＰＰＥ、ＰＰＥ＋ｗｐｒｅ、ＮＳＥ（０．３ｋｂ）、ＮＳＥ（１．８ｋｂ）およびＮＳＥ（１．８ｋｂ＋ｗｐｒｅ）と比較して全ての脳領域で低発現が見出された。スー（Ｘｕ）らは、プロモータ活性が、降順に、ＮＳＥ（１．８ｋｂ）、ＥＦ、ＮＳＥ（０．３ｋｂ）、ＧＦＡＰ、ＣＭＶ、ｈＥＮＫ、ＰＰＥ、ＮＦＬおよびＮＦＨであることを見出した。ＮＦＬは６５０ヌクレオチドプロモータであり、ＮＦＨは９２０ヌクレオチドプロモータであり、両方とも肝臓には存在しないが、ＮＦＨは固有受容感覚ニューロン、脳および脊髄に豊富にあり、ＮＦＨは心臓に存在する。Ｓｃｎ８ａは、ＤＲＧ、脊髄および脳全体にわたって発現する４７０ヌクレオチドプロモータであり、特に海馬ニューロンおよび小脳プルキンエ細胞、皮質、視床および視床下部に高発現が見られる（例えば、ドレウス（Ｄｒｅｗｓ）ら著、「ナトリウムチャネル遺伝子ＳＣＮ８Ａにおける、進化的に保存された機能性非コードエレメントの同定」（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ  ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ，ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ  ｅｌｅｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｒｏｍｏｔｅｒ  ｒｅｇｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｏｄｉｕｍ  ｃｈａｎｎｅｌ  ｇｅｎｅ  ＳＣＮ８Ａ）、マンマリアン・ゲノム（Ｍａｍｍ  Ｇｅｎｏｍｅ）（２００７年）、第１８巻、ｐ．７２３〜７３１；およびレイモンド（Ｒａｙｍｏｎｄ）ら著、「選択的スプライスによるナトリウムチャネルα−サブユニット遺伝子」の発現（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｌｙ  Ｓｐｌｉｃｅｄ  Ｓｏｄｉｕｍ  Ｃｈａｎｎｅｌ  α−ｓｕｂｕｎｉｔ  ｇｅｎｅｓ）、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）２００４年、２７９（４４）、ｐ．４６２３４〜４６２４１を参照のこと；この各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
【０１６５】
前述のユー（Ｙｕ）、セーデルブロム（Ｓｏｄｅｒｂｌｏｍ）、ギル（Ｇｉｌｌ）、フセイン（Ｈｕｓａｉｎ）、パッシーニ（Ｐａｓｓｉｎｉ）、スー（Ｘｕ）、ドレウス（Ｄｒｅｗｓ）またはレイモンド（Ｒａｙｍｏｎｄ）によって教示されるプロモータはいずれも、本発明に使用することができる。
【０１６６】
一実施形態において、プロモータは細胞特異的ではない。
一実施形態において、プロモータはユビキチンｃ（ＵＢＣ）プロモータである。ＵＢＣプロモータは、３００〜３５０ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＵＢＣプロモータは３３２ヌクレオチドである。
【０１６７】
一実施形態において、プロモータは、β−グルクロニダーゼ（ＧＵＳＢ）プロモータである。ＧＵＳＢプロモータは、３５０〜４００ヌクレオチドのサイズを有し得る。非限定的な例として、ＧＵＳＢプロモータは３７８ヌクレオチドである。
【０１６８】
一実施形態において、プロモータはニューロフィラメント軽鎖（ＮＦＬ）プロモータである。ＮＦＬプロモータはサイズが６００〜７００ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ＮＦＬプロモータは６５０ヌクレオチドである。非限定的な例として、コンストラクトはＡＡＶ−プロモータ−ＣＭＶ／グロビンイントロン−調節性ポリヌクレオチド−ＲＢＧであってもよく、ここでＡＡＶは自己相補的であってもよく、およびＡＡＶはＤＪ血清型であってもよい。
【０１６９】
一実施形態において、プロモータはニューロフィラメント重鎖（ＮＦＨ）プロモータである。ＮＦＨプロモータはサイズが９００〜９５０ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ＮＦＨプロモータは９２０ヌクレオチドである。非限定的な例として、コンストラクトはＡＡＶ−プロモータ−ＣＭＶ／グロビンイントロン−調節性ポリヌクレオチド−ＲＢＧであってもよく、ここでＡＡＶは自己相補的であってもよく、およびＡＡＶはＤＪ血清型であってもよい。
【０１７０】
一実施形態において、プロモータはｓｃｎ８ａプロモータである。ｓｃｎ８ａプロモータはサイズが４５０〜５００ヌクレオチドであり得る。非限定的な例として、ｓｃｎ８ａプロモータは４７０ヌクレオチドである。非限定的な例として、コンストラクトはＡＡＶ−プロモータ−ＣＭＶ／グロビンイントロン−調節性ポリヌクレオチド−ＲＢＧであってもよく、ここでＡＡＶは自己相補的であってもよく、およびＡＡＶはＤＪ血清型であってもよい。
【０１７１】
一実施形態において、ウイルスゲノムはＰｏｌ  ＩＩＩプロモータを含む。
一実施形態において、ウイルスゲノムはＰ１プロモータを含む。
一実施形態において、ウイルスゲノムはＦＸＮプロモータを含む。
【０１７２】
一実施形態において、プロモータは、ホスホグリセリン酸キナーゼ１（ＰＧＫ）プロモータである。
一実施形態において、プロモータは、ニワトリβ−アクチン（ＣＢＡ）プロモータである。
【０１７３】
一実施形態において、プロモータは、ニワトリベータ−アクチン（ＣＢＡ）プロモータに融合されたサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）エンハンサーを含むコンストラクトであるＣＡＧプロモータである。
【０１７４】
一実施形態において、プロモータは、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモータである。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、Ｈ１プロモータを含む。
【０１７５】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、Ｕ６プロモータを含む。
一実施形態において、プロモータは、肝臓または骨格筋プロモータである。肝臓プロモータの非限定的な例としては、ヒトα−１−抗トリプシン（ｈＡＡＴ）およびチロキシン結合グロブリン（ＴＢＧ）が挙げられる。骨格筋プロモータの非限定的な例としては、デスミン、ＭＣＫまたは合成Ｃ５−１２が挙げられる。
【０１７６】
一実施形態において、プロモータは、ＲＮＡ  ｐｏｌ  ＩＩＩプロモータである。非限定的な例として、ＲＮＡ  ｐｏｌ  ＩＩＩプロモータはＵ６である。非限定的な例として、ＲＮＡ  ｐｏｌ  ＩＩＩプロモータはＨ１である。
【０１７７】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのプロモータを含む。非限定的な例として、プロモータは、ＥＦ１αプロモータおよびＣＭＶプロモータである。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、エンハンサーエレメント、プロモータおよび／または５’ＵＴＲイントロンを含む。また、エンハンサーエレメントは、本明細書では「エンハンサー」とも称され、限定はされないが、ＣＭＶエンハンサーであってもよく、プロモータは、限定はされないが、ＣＭＶ、ＣＢＡ、ＵＢＣ、ＧＵＳＢ、ＮＳＥ、シナプシン、ＭｅＣＰ２、およびＧＦＡＰプロモータであってもよく、および５’ＵＴＲ／イントロンは、限定はされないが、ＳＶ４０およびＣＢＡ−ＭＶＭであってもよい。非限定的な例として、組合せで使用されるエンハンサー、プロモータおよび／またはイントロンは、（１）ＣＭＶエンハンサー、ＣＭＶプロモータ、ＳＶ４０  ５’ＵＴＲイントロン；（２）ＣＭＶエンハンサー、ＣＢＡプロモータ、ＳＶ４０  ５’ＵＴＲイントロン；（３）ＣＭＶエンハンサー、ＣＢＡプロモータ、ＣＢＡ−ＭＶＭ  ５’ＵＴＲイントロン；（４）ＵＢＣプロモータ；（５）ＧＵＳＢプロモータ；（６）ＮＳＥプロモータ；（７）シナプシンプロモータ；（８）ＭｅＣＰ２プロモータ、（９）ＧＦＡＰプロモータ、（１０）Ｈ１プロモータ；および（１１）Ｕ６プロモータであってもよい。
【０１７８】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、操作されたプロモータを含む。
別の実施形態において、ウイルスゲノムは、天然に発現されるタンパク質のプロモータを含む。
【０１７９】
ウイルスゲノム成分：非翻訳領域（ＵＴＲ）
定義上、遺伝子の野生型非翻訳領域（ＵＴＲ）は、転写されるが翻訳されない。一般的には、５’ＵＴＲは、転写開始部位から始まり、開始コドンで終了し、３’ＵＴＲは、終止コドンの直後から始まり、転写の終結シグナルまで継続する。
【０１８０】
特定の標的臓器の、豊富に発現される遺伝子に典型的に見出される特徴を、ＵＴＲ内に操作して、安定性およびタンパク質産生を増強することができる。非限定的な例として、肝臓において通常発現されるｍＲＮＡ（例えば、アルブミン、血清アミロイドＡ、アポリポタンパク質Ａ／Ｂ／Ｅ、トランスフェリン、アルファフェトプロテイン、エリスロポエチン、または第ＶＩＩＩ因子）に由来する５’ＵＴＲを、本発明のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムに使用して、肝細胞株または肝臓での発現を増強することができる。
【０１８１】
理論によって束縛されることを望むものではないが、野生型５’非翻訳領域（ＵＴＲ）は、翻訳開始に役割を果たす特徴を含む。コザック配列は、リボソームが多数の遺伝子の翻訳を開始させる過程に関与することが広く知られており、通常は５’ＵＴＲに含まれている。コザック配列は、コンセンサスＣＣＲ（Ａ／Ｇ）ＣＣＡＵＧＧを有し、式中Ｒは、開始コドン（ＡＴＧ）の３塩基上流にあるプリン（アデニンまたはグアニン）であり、別の「Ｇ」がその後に続く。
【０１８２】
一実施形態において、ウイルスゲノムの５’ＵＴＲは、コザック配列を含む。
一実施形態において、ウイルスゲノムの５’ＵＴＲは、コザック配列を含まない。
理論によって束縛されることを望むものではないが、野生型３’ＵＴＲは、アデノシンおよびウリジンのストレッチがそこに埋め込まれていることが知られている。これらのＡＵリッチシグネチャーは、高いターンオーバー率を有する遺伝子において特に広く見受けられる。それらの配列特徴および機能的特性に基づき、ＡＵリッチエレメント（ＡＲＥ）は、３つのクラスに分離することができる（チェン（Ｃｈｅｎ）ら著、１９９５年。その内容は本明細書において全体として参照により援用される）：限定はされないが、ｃ−ＭｙｃおよびＭｙｏＤなどのクラスＩ  ＡＲＥは、Ｕリッチ領域内にＡＵＵＵＡモチーフの幾つかの分散コピーを含有する。限定はされないが、ＧＭ−ＣＳＦおよびＴＮＦ−ａなどのクラスＩＩ  ＡＲＥは、２つ以上のオーバーラップＵＵＡＵＵＵＡ（Ｕ／Ａ）（Ｕ／Ａ）ノナマーを有する。限定はされないが、ｃ−ＪｕｎおよびミオゲニンなどのクラスＩＩＩ  ＡＲＥＳは、それほど十分に規定されていない。これらのＵリッチ領域は、ＡＵＵＵＡモチーフを含有しない。ＡＲＥに結合するほとんどのタンパク質は、メッセンジャーを不安定化することが知られているが、ＥＬＡＶファミリーのメンバーである最も顕著にはＨｕＲは、ｍＲＮＡの安定性を増加させることが実証されている。ＨｕＲは、３つ全てのクラスのＡＲＥに結合する。ＨｕＲ特異的結合部位を核酸分子の３’ＵＴＲ内に、操作により加えることは、インビボにて、ＨｕＲ結合を、したがってメッセージの安定化をもたらすことになる。
【０１８３】
３’ＵＴＲ  ＡＵリッチエレメント（ＡＲＥ）の導入、除去または修飾を使用して、ポリヌクレオチドの安定性を調節することができる。特異的なポリヌクレオチド、例えばウイルスゲノムのペイロード領域を操作する場合、ＡＲＥの１つ以上のコピーを導入して、ポリヌクレオチドをより不安定にし、それにより、翻訳を減らし、結果として生じるタンパク質の産生を減少させることができる。同様に、ＡＲＥを、同定および除去または突然変異させて、細胞内安定性を増加させ、したがって結果として生じるタンパク質の翻訳および産生を増加させることができる。
【０１８４】
一実施形態において、ウイルスゲノムの３’ＵＴＲは、ポリＡテールを鋳型付加するためのオリゴ（ｄＴ）配列を含み得る。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのｍｉＲＮＡシード、結合部位または完全な配列を含み得る。ｍｉｃｒｏＲＮＡ（またはｍｉＲＮＡまたはｍｉＲ）は、核酸標的の部位に結合し、核酸分子安定性を低減することまたは翻訳を阻害することのいずれかによって遺伝子発現を下方制御する１９〜２５ヌクレオチド非コードＲＮＡである。ｍｉｃｒｏＲＮＡ配列は、「シード」領域、すなわち成熟ｍｉｃｒｏＲＮＡの２〜８位の領域の配列を含む。この配列は、核酸のｍｉＲＮＡ標的配列に対して完全なワトソンクリック型相補性を有する。
【０１８５】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのｍｉＲＮＡ結合部位、配列またはシード領域を含む、変更するまたは除去するように操作されていてもよい。
当該技術分野で公知の任意の遺伝子に由来する任意のＵＴＲを、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムに組み込むことができる。これらのＵＴＲまたはそれらの部分は、それらが選択されたかまたはそれらの配向性もしくは位置が変更され得る遺伝子と同じ配向性に配置され得る。一実施形態において、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムに使用されるＵＴＲは、逆位化、短縮化、延長化、当該技術分野で公知の１つ以上の他の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲで作製され得る。本明細書で使用されるとき、用語「変更される」は、ＵＴＲに関する場合、ＵＴＲが、参照配列に対して何らかの点で変化していることを意味する。例えば、３’または５’ＵＴＲは、上記で教示されるような配向性または位置の変化によって野生型または天然ＵＴＲに対して変更されていてもよく、または追加ヌクレオチドの介在、ヌクレオチドの欠失、ヌクレオチドの交換もしくは転位によって変更されていてもよい。
【０１８６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、野生型ＵＴＲの変異体でない少なくとも１つの人工ＵＴＲを含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、そのタンパク質が、共通の機能、構造、特徴、または特性を共有する転写物のファミリーから選択されているＵＴＲを含む。
【０１８７】
ウイルスゲノム成分：ポリアデニル化配列
一実施形態において、本発明のＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは少なくとも１つのポリアデニル化配列を含む。ＡＡＶ粒子のウイルスゲノムは、ペイロードコード配列の３’末端と３’ＩＴＲの５’末端との間にポリアデニル化配列を含み得る。
【０１８８】
一実施形態において、ポリアデニル化配列または「ポリＡ配列」は、存在しない〜約５００ヌクレオチド長の範囲であってもよい。ポリアデニル化配列は、限定はされないが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、および５００ヌクレオチド長であってもよい。
【０１８９】
一実施形態において、ポリアデニル化配列は５０〜１００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は５０〜１５０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は５０〜１６０ヌクレオチド長である。
【０１９０】
一実施形態において、ポリアデニル化配列は５０〜２００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は６０〜１００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は６０〜１５０ヌクレオチド長である。
【０１９１】
一実施形態において、ポリアデニル化配列は６０〜１６０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は６０〜２００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は７０〜１００ヌクレオチド長である。
【０１９２】
一実施形態において、ポリアデニル化配列は７０〜１５０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は７０〜１６０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は７０〜２００ヌクレオチド長である。
【０１９３】
一実施形態において、ポリアデニル化配列は８０〜１００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は８０〜１５０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は８０〜１６０ヌクレオチド長である。
【０１９４】
一実施形態において、ポリアデニル化配列は８０〜２００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は９０〜１００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は９０〜１５０ヌクレオチド長である。
【０１９５】
一実施形態において、ポリアデニル化配列は９０〜１６０ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ポリアデニル化配列は９０〜２００ヌクレオチド長である。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてポリアデニル化配列の上流に位置してもよい、ｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。更に、ＡＡＶ粒子は、限定はされないが、ＣＭＶ、Ｕ６、ＣＡＧ、ＣＢＡ、またはＳＶ４０イントロンもしくはヒトβグロビンイントロンを伴うＣＢＡプロモータなど、発現ベクターにおいてプロモータの下流に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０ヌクレオチドまたは３０ヌクレオチド超以内に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流に１〜５、１〜１０、１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０、５〜１０、５〜１５、５〜２０、５〜２５、５〜３０、１０〜１５、１０〜２０、１０〜２５、１０〜３０、１５〜２０、１５〜２５、１５〜３０、２０〜２５、２０〜３０または２５〜３０ヌクレオチド以内に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流にあるヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％または２５％超以内に位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流に最初の１〜５％、１〜１０％、１〜１５％、１〜２０％、１〜２５％、５〜１０％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、１０〜１５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１５〜２０％、１５〜２５％、または２０〜２５％で位置してもよいｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む。
【０１９６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ウサギグロビンポリアデニル化（ポリＡ）シグナル配列を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ヒト成長ホルモンポリアデニル化（ポリＡ）シグナル配列を含む。
【０１９７】
ウイルスゲノム成分：イントロン
一実施形態において、ペイロード領域は、１つ以上のイントロンまたはそれらの部分など、発現を増強するための少なくとも１つのエレメントを含む。イントロンの非限定的な例としては、ＭＶＭ（６７〜９７ｂｐｓ）、Ｆ．ＩＸトランケート型イントロン１（３００ｂｐ）、β−グロビンＳＤ／免疫グロブリン重鎖スプライスアクセプター（２５０ｂｐ）、アデノウイルススプライスドナー／イムノグロビンスプライスアクセプター（５００ｂｐ）、ＳＶ４０後期スプライスドナー／スプライスアクセプター（１９Ｓ／１６Ｓ）（１８０ｂｐ）およびハイブリッドアデノウイルススプライスドナー／ＩｇＧスプライスアクセプター（２３０ｂｐ）が挙げられる。
【０１９８】
一実施形態において、イントロンまたはイントロン部分は１００〜５００ヌクレオチド長であってもよい。イントロンは、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０または５００の長さを有してもよい。イントロンは、８０〜１００、８０〜１２０、８０〜１４０、８０〜１６０、８０〜１８０、８０〜２００、８０〜２５０、８０〜３００、８０〜３５０、８０〜４００、８０〜４５０、８０〜５００、２００〜３００、２００〜４００、２００〜５００、３００〜４００、３００〜５００、または４００〜５００の長さを有してもよい。
【０１９９】
一実施形態において、ＡＡＶウイルスゲノムは、限定はされないが、ＣＭＶまたはＵ６などのプロモータを含み得る。非限定的な例として、本発明のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列を含むＡＡＶのプロモータは、ＣＭＶプロモータである。別の非限定的な例として、本発明のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列を含むＡＡＶのプロモータは、Ｕ６プロモータである。
【０２００】
一実施形態において、ＡＡＶウイルスゲノムはＣＭＶプロモータを含み得る。
一実施形態において、ＡＡＶウイルスゲノムはＵ６プロモータを含み得る。
一実施形態において、ＡＡＶウイルスゲノムはＣＭＶおよびＵ６プロモータを含み得る。
【０２０１】
一実施形態において、ＡＡＶウイルスゲノムは、Ｈ１プロモータを含み得る。
一実施形態において、ＡＡＶウイルスゲノムはＣＢＡプロモータを含み得る。
一実施形態において、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、限定はされないが、ＣＭＶ、Ｕ６、Ｈ１、ＣＢＡ、ＣＡＧ、またはＳＶ４０もしくは当該技術分野において公知の他のものなどのイントロンを伴うＣＢＡプロモータなど、発現ベクターにおいてプロモータの下流に位置してもよい。更に、コード化ｓｉＲＮＡ分子はまた、発現ベクターにおいてポリアデニル化配列の上流に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０ヌクレオチドまたは３０ヌクレオチド超以内に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流に１〜５、１〜１０、１〜１５、１〜２０、１〜２５、１〜３０、５〜１０、５〜１５、５〜２０、５〜２５、５〜３０、１０〜１５、１０〜２０、１０〜２５、１０〜３０、１５〜２０、１５〜２５、１５〜３０、２０〜２５、２０〜３０または２５〜３０ヌクレオチド以内に位置してもよい。非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流にあるヌクレオチドの最初の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％または２５％超以内に位置してもよい。別の非限定的な例として、コード化ｓｉＲＮＡ分子は、発現ベクターにおいてプロモータから下流および／またはポリアデニル化配列の上流に最初の１〜５％、１〜１０％、１〜１５％、１〜２０％、１〜２５％、５〜１０％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、１０〜１５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１５〜２０％、１５〜２５％、または２０〜２５％で位置してもよい。
【０２０２】
ウイルスゲノム成分：フィラー配列
一実施形態において、ウイルスゲノムは、１つ以上のフィラー配列を含む。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、ウイルスゲノムの長さをパッケージングに最適なサイズにするために、１つ以上のフィラー配列を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、ウイルスゲノムの長さを約２．３ｋｂにするために、少なくとも１つのフィラー配列を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、ウイルスゲノムの長さを約４．６ｋｂにするために、少なくとも１つのフィラー配列を含む。
【０２０３】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、ベクターゲノムのヘアピン構造（例えば、本明細書に記載される調節性ポリヌクレオチド）が、発現および／またはパッケージング中に末端逆位配列（ＩＴＲ）として読み取られ得る可能性を低減させるために、１つ以上のフィラー配列を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、ウイルスゲノムの長さを約２．３ｋｂにするために、少なくとも１つのフィラー配列を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、ウイルスゲノムの長さを約４．６ｋｂにするために、少なくとも１つのフィラー配列を含む。
【０２０４】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、一本鎖（ｓｓ）ウイルスゲノムであり、限定はされないが、０．１ｋｂ、０．２ｋｂ、０．３ｋｂ、０．４ｋｂ、０．５ｋｂ、０．６ｋｂ、０．７ｋｂ、０．８ｋｂ、０．９ｋｂ、１ｋｂ、１．１ｋｂ、１．２ｋｂ、１．３ｋｂ、１．４ｋｂ、１．５ｋｂ、１．６ｋｂ、１．７ｋｂ、１．８ｋｂ、１．９ｋｂ、２ｋｂ、２．１ｋｂ、２．２ｋｂ、２．３ｋｂ、２．４ｋｂ、２．５ｋｂ、２．６ｋｂ、２．７ｋｂ、２．８ｋｂ、２．９ｋｂ、３ｋｂ、３．１ｋｂ、３．２ｋｂ、３．３ｋｂ、３．４ｋｂ、３．５ｋｂ、３．６ｋｂ、３．７ｋｂ、または３．８ｋｂなどの、約０．１ｋｂ〜３．８ｋｂの長さを有する１つ以上のフィラー配列を含む。非限定的な例として、ベクターゲノム中のフィラー配列の合計長は、３．１ｋｂである。非限定的な例として、ベクターゲノム中のフィラー配列の合計長は、２．７ｋｂである。非限定的な例として、ベクターゲノム中のフィラー配列の合計長は、０．８ｋｂである。非限定的な例として、ベクターゲノム中のフィラー配列の合計長は、０．４ｋｂである。非限定的な例として、ベクターゲノム中の各フィラー配列の長さは、０．８ｋｂである。非限定的な例として、ベクターゲノム中の各フィラー配列の長さは、０．４ｋｂである。
【０２０５】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、自己相補的（ｓｃ）ウイルスゲノムであり、限定はされないが、０．１ｋｂ、０．２ｋｂ、０．３ｋｂ、０．４ｋｂ、０．５ｋｂ、０．６ｋｂ、０．７ｋｂ、０．８ｋｂ、０．９ｋｂ、１ｋｂ、１．１ｋｂ、１．２ｋｂ、１．３ｋｂ、１．４ｋｂ、または１．５ｋｂなどの、約０．１ｋｂ〜１．５ｋｂの長さを有する１つ以上のフィラー配列を含む。非限定的な例として、ベクターゲノム中のフィラー配列の合計長は、０．８ｋｂである。非限定的な例として、ベクターゲノム中のフィラー配列の合計長は、０．４ｋｂである。非限定的な例として、ベクターゲノム中の各フィラー配列の長さは、０．８ｋｂである。非限定的な例として、ベクターゲノム中の各フィラー配列の長さは、０．４ｋｂである。
【０２０６】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、フィラー配列の任意の部分を含む。ウイルスゲノムは、フィラー配列の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％を含んでいてもよい。
【０２０７】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、一本鎖（ｓｓ）ウイルスゲノムであり、ウイルスゲノムの長さを約４．６ｋｂにするために、１つ以上のフィラー配列を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、５’ＩＴＲ配列の３’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、プロモータ配列の５’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列の３’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、３’ＩＴＲ配列の５’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、２つのイントロン配列間に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、イントロン配列内に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲ配列の３’に位置し、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列の３’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み、第１のフィラー配列は、プロモータ配列の５’に位置し、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列の３’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲ配列の３’に位置し、第２のフィラー配列は、５’ＩＴＲ配列の５’に位置する。
【０２０８】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、自己相補的（ｓｃ）ウイルスゲノムであり、ウイルスゲノムの長さを約２．３ｋｂにするために、１つ以上のフィラー配列を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、５’ＩＴＲ配列の３’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、プロモータ配列の５’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列の３’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、３’ＩＴＲ配列の５’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、２つのイントロン配列間に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列を含み、フィラー配列は、イントロン配列内に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲ配列の３’に位置し、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列の３’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み、第１のフィラー配列は、プロモータ配列の５’に位置し、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列の３’に位置する。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲ配列の３’に位置し、第２のフィラー配列は、５’ＩＴＲ配列の５’に位置する。
【０２０９】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、ウイルスゲノムのより多くの領域の１つの間に１つ以上のフィラー配列を含み得る。一実施形態において、フィラー領域は、限定はされないが、ペイロード領域、末端逆位配列（ＩＴＲ）、プロモータ領域、イントロン領域、エンハンサー領域、ポリアデニル化シグナル配列領域、多重クローニング部位（ＭＣＳ）領域、および／またはエクソン領域などの領域の前に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー領域は、限定はされないが、ペイロード領域、末端逆位配列（ＩＴＲ）、プロモータ領域、イントロン領域、エンハンサー領域、ポリアデニル化シグナル配列領域、多重クローニング部位（ＭＣＳ）領域、および／またはエクソン領域などの領域の後に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー領域は、限定はされないが、ペイロード領域、末端逆位配列（ＩＴＲ）、プロモータ領域、イントロン領域、エンハンサー領域、ポリアデニル化シグナル配列領域、多重クローニング部位（ＭＣＳ）領域、および／またはエクソン領域などの領域の前および後に位置していてもよい。
【０２１０】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、ウイルスゲノムの少なくとも１つの領域を二分する（ｂｉｆｕｒｃａｔｅ）１つ以上のフィラー配列を含み得る。ウイルスゲノムの二分された領域は、フィラー配列領域の５’にある領域の１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％を含んでいてもよい。非限定的な例として、フィラー配列は、領域の１０％がフィラー配列の５’に位置し、領域の９０％がフィラー配列の３’に位置するように、少なくとも１つの領域を二分してもよい。非限定的な例として、フィラー配列は、領域の２０％がフィラー配列の５’に位置し、領域の８０％がフィラー配列の３’に位置するように、少なくとも１つの領域を二分してもよい。非限定的な例として、フィラー配列は、領域の３０％がフィラー配列の５’に位置し、領域の７０％がフィラー配列の３’に位置するように、少なくとも１つの領域を二分してもよい。非限定的な例として、フィラー配列は、領域の４０％がフィラー配列の５’に位置し、領域の６０％がフィラー配列の３’に位置するように、少なくとも１つの領域を二分してもよい。非限定的な例として、フィラー配列は、領域の５０％がフィラー配列の５’に位置し、領域の５０％がフィラー配列の３’に位置するように、少なくとも１つの領域を二分してもよい。非限定的な例として、フィラー配列は、領域の６０％がフィラー配列の５’に位置し、領域の４０％がフィラー配列の３’に位置するように、少なくとも１つの領域を二分してもよい。非限定的な例として、フィラー配列は、領域の７０％がフィラー配列の５’に位置し、領域の３０％がフィラー配列の３’に位置するように、少なくとも１つの領域を二分してもよい。非限定的な例として、フィラー配列は、領域の８０％がフィラー配列の５’に位置し、領域の２０％がフィラー配列の３’に位置するように、少なくとも１つの領域を二分してもよい。非限定的な例として、フィラー配列は、領域の９０％がフィラー配列の５’に位置し、領域の１０％がフィラー配列の３’に位置するように、少なくとも１つの領域を二分してもよい。
【０２１１】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、５’ＩＴＲの後にフィラー配列を含む。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、プロモータ領域の後にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、ペイロード領域の後にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、イントロン領域の後にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、エンハンサー領域の後にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、ポリアデニル化シグナル配列領域の後にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、ＭＣＳ領域の後にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、エクソン領域の後にフィラー配列を含む。
【０２１２】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、プロモータ領域の前にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、ペイロード領域の前にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、イントロン領域の前にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、エンハンサー領域の前にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、ポリアデニル化シグナル配列領域の前にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、ＭＣＳ領域の前にフィラー配列を含む。一実施形態において、ウイルスゲノムは、エクソン領域の前にフィラー配列を含む。
【０２１３】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、３’ＩＴＲの前にフィラー配列を含む。
一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、５’ＩＴＲおよびプロモータ領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、５’ＩＴＲおよびペイロード領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、５’ＩＴＲおよびイントロン領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、５’ＩＴＲおよびエンハンサー領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、５’ＩＴＲおよびポリアデニル化シグナル配列領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、５’ＩＴＲおよびＭＣＳ領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。
【０２１４】
一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、５’ＩＴＲおよびエクソン領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。
一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、プロモータ領域およびペイロード領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、プロモータ領域およびイントロン領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、プロモータ領域およびエンハンサー領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、プロモータ領域およびポリアデニル化シグナル配列領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、プロモータ領域およびＭＣＳ領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、プロモータ領域およびエクソン領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、プロモータ領域および３’ＩＴＲなどの、２つの領域間に位置していてもよい。
【０２１５】
一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ペイロード領域およびイントロン領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ペイロード領域およびエンハンサー領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ペイロード領域およびポリアデニル化シグナル配列領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ペイロード領域およびＭＣＳ領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ペイロード領域およびエクソン領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。
【０２１６】
一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ペイロード領域および３’ＩＴＲなどの、２つの領域間に位置していてもよい。
一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、イントロン領域およびエンハンサー領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、イントロン領域およびポリアデニル化シグナル配列領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、イントロン領域およびＭＣＳ領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、イントロン領域およびエクソン領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、イントロン領域および３’ＩＴＲなどの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、エンハンサー領域およびポリアデニル化シグナル配列領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、エンハンサー領域およびＭＣＳ領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、エンハンサー領域およびエクソン領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、エンハンサー領域および３’ＩＴＲなどの、２つの領域間に位置していてもよい。
【０２１７】
一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ポリアデニル化シグナル配列領域およびＭＣＳ領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ポリアデニル化シグナル配列領域およびエクソン領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ポリアデニル化シグナル配列領域および３’ＩＴＲなどの、２つの領域間に位置していてもよい。
【０２１８】
一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ＭＣＳ領域およびエクソン領域などの、２つの領域間に位置していてもよい。一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、ＭＣＳ領域および３’ＩＴＲなどの、２つの領域間に位置していてもよい。
【０２１９】
一実施形態において、フィラー配列は、限定はされないが、エクソン領域および３’ＩＴＲなどの、２つの領域間に位置していてもよい。
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとプロモータ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２２０】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２２１】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２２２】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２２３】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２２４】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２２５】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、５’ＩＴＲとエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２２６】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とペイロード領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２２７】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２２８】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２２９】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２３０】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２３１】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２３２】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、プロモータ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２３３】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とイントロン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２３４】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２３５】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２３６】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２３７】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２３８】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ペイロード領域と３’ＩＴＲ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２３９】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエンハンサー領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２４０】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２４１】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２４２】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２４３】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、イントロン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２４４】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とポリアデニル化シグナル配列領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２４５】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２４６】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２４７】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、エンハンサー領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２４８】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とＭＣＳ領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２４９】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２５０】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、ＭＣＳ領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ポリアデニル化シグナル配列領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２５１】
一実施形態において、ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列を含み得、第１のフィラー配列は、ＭＣＳ領域とエクソン領域との間に位置していてもよく、第２のフィラー配列は、エクソン領域と３’ＩＴＲとの間に位置していてもよい。
【０２５２】
本発明のペイロード
本開示のＡＡＶ粒子は、少なくとも１つのペイロード領域を含む。本明細書で使用されるとき、「ペイロード」または「ペイロード領域」は、ウイルスゲノムによりもしくはその内にコードされる１つ以上のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド領域、またはかかるポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド領域、例えばトランス遺伝子、ポリペプチドもしくはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの発現産物、または調節性核酸もしくは制御性核酸を指す。本発明のペイロードは、典型的には、調節性ポリヌクレオチドまたはその断片もしくは変異体をコードする。
【０２５３】
ペイロード領域は、ｍＲＮＡの天然構成と同様のまたは反映した領域を再現するように構築され得る。
ペイロード領域は、コードおよび非コード核酸配列の組合せを含み得る。
【０２５４】
一部の実施形態では、ＡＡＶペイロード領域は、コードまたは非コードＲＮＡをコードし得る。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたは他のＲＮＡｉ剤をコードする核酸配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。かかる実施形態において、２つ以上のポリペプチドをコードするウイルスゲノムが、ウイルス粒子へと複製およびパッケージングされ得る。ウイルス粒子で形質導入された標的細胞は、単一細胞内部において、コード化ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたは他のＲＮＡｉ剤を発現し得る。
【０２５５】
調節性ポリヌクレオチド
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチド、例えばＲＮＡまたはＤＮＡ分子を使用して、神経変性疾患、詳細にはハンチントン病（ＨＤ）を治療することができる。本明細書で使用されるとき、「調節性ポリヌクレオチド」は、標的遺伝子のレベルまたは量、例えばｍＲＮＡまたはタンパク質レベルを調節する（増加させるかまたは減少させるかのいずれか）働きをする任意の核酸配列である。
【０２５６】
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドは、少なくとも１つのｓｉＲＮＡ分子をコードする少なくとも１つの核酸配列を含み得る。核酸は、２つ以上ある場合には独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９個、または９個超のｓｉＲＮＡ分子をコードし得る。
【０２５７】
一実施形態において、分子足場は、ＣＭＶプロモータ、その断片または変異体の下流に位置してもよい。
一実施形態において、分子足場は、ＣＢＡプロモータ、その断片または変異体の下流に位置してもよい。
【０２５８】
一実施形態において、分子足場は、ＣＭＶプロモータの下流に位置する天然ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ足場であってもよい。非限定的な例として、天然ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ足場はヒトｍｉＲ１５５足場に由来する。
【０２５９】
一実施形態において、分子足場は、ＣＢＡプロモータの下流に位置する天然ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ足場であってもよい。
一実施形態において、分子足場および調節性ポリヌクレオチドの選択は、ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ内での調節性ポリヌクレオチドを比較する方法によって決定される（例えば、ミニアリコバ（Ｍｉｎｉａｒｉｋｏｖａ）ら著、「ハンチントン病に対する遺伝子療法を開発するためのハンチンチンを標的とする治療用ｍｉＲＮＡの設計、特徴付け、およびリード選択（Ｄｅｓｉｇｎ，Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ，および  Ｌｅａｄ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｍｉＲＮＡｓ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ  ｆｏｒ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ）」、モレキュラー・セラピー−ヌクレイック・アシッド（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ−Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ）、２０１６年、第５巻、ｐ．ｅ２９７および国際公開第２０１６１０２６６４号パンフレット（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）により記載される方法を参照のこと）。調節性ポリヌクレオチドは、限定はされないが、エクソン１、ＣＡＧリピート、エクソン５０のＳＮＰ  ｒｓ３６２３３１および／またはエクソン６７のＳＮＰ  ｒｓ３６２３０７を標的とし得る。調節性ポリヌクレオチドの活性を評価するため、使用し得る使用される分子足場は、ヒトｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ足場（例えば、ｍｉＲ１５５足場）であり、プロモータはＣＭＶであってもよい。活性はインビトロでＨＥＫ２９３Ｔ細胞およびレポータ（例えばルシフェラーゼ）を用いて決定されてもよい。エクソン１のターゲティングについては、ノックダウンが８０％以上である場合に、その調節性ポリヌクレオチドはＨＴＴノックダウンに有効であると決定される。ＣＡＧのターゲティングについては、ノックダウンが少なくとも６０％である場合に、その調節性ポリヌクレオチドはＨＴＴノックダウンに有効であると決定される。ＳＮＰのターゲティングについては、ノックダウンが少なくとも６０％である場合に、その調節性ポリヌクレオチドはＨＴＴノックダウンに有効であると決定される。ＣＡＧリピートまたはＳＮＰターゲティングに関する対立遺伝子選択性のため、調節性ポリヌクレオチドは、対立遺伝子選択性を改善するため少なくとも１つの置換を含み得る。非限定的な例として、置換は、ＧまたはＣをＴまたは対応するＵに置き換えるもの、およびＡまたはＴ／ＵをＣによって置き換えるものであり得る。
【０２６０】
調節性ポリヌクレオチドに最適な分子足場を評価するため、調節性ポリヌクレオチドがｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ足場においてＣＡＧプロモータと共に使用される。このコンストラクトには５０ｎｇのレポータ（例えば、ルシフェラーゼレポータ）がコトランスフェクトされる。５０ｎｇコトランスフェクションで８０％より高いノックダウンのコンストラクトが有効と見なされる。一態様では、強力なガイド鎖活性を有するコンストラクトが好ましい。分子足場をＨＥＫ２９３Ｔ細胞においてＮＧＳによって処理して、ガイド−パッセンジャー比、およびプロセシング変動性を決定することができる。
【０２６１】
インビボでの分子足場および調節性ポリヌクレオチドの評価には、調節性ポリヌクレオチドを含む分子足場がＡＡＶにパッケージングされて（例えば、血清型はＡＡＶ５であってもよい（例えば、国際公開第２０１５０６０７２２号パンフレットに記載される方法およびコンストラクトを参照のこと、この内容は本明細書において全体として参照により援用される））、インビボモデル（例えば、Ｈｕ１２８／２１  ＨＤマウス）に投与され、モデルの種々の範囲においてガイド−パッセンジャー比、５’および３’末端プロセシング、ガイド鎖およびパッセンジャー鎖の逆転、およびノックダウンを決定することができる。
【０２６２】
一実施形態において、分子足場および調節性ポリヌクレオチドの選択は、天然ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡおよび合成ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡでの調節性ポリヌクレオチドを比較する方法によって決定される。調節性ポリヌクレオチドは、限定はされないが、エクソン１以外のエクソンを標的とし得る。調節性ポリヌクレオチドの活性の評価には、分子足場がＣＢＡプロモータと共に使用される。一態様では、活性はインビトロでＨＥＫ２９３Ｔ細胞、ＨｅＬａ細胞およびレポータ（例えば、ルシフェラーゼ）を用いて決定されてもよく、およびノックダウン効率的な調節性ポリヌクレオチドは、試験した細胞において少なくとも８０％のＨＴＴノックダウンを示した。加えて、最も効率的と見なされる調節性ポリヌクレオチドは有意なパッセンジャー鎖（ｐ鎖）活性が低い乃至全くないことを示した。別の態様では、内因性ＨＴＴノックダウン有効性はインビトロでＨＥＫ２９３Ｔ細胞、ＨｅＬａ細胞およびレポータを用いてトランスフェクションにより評価される。効率的な調節性ポリヌクレオチドは５０％より高い内因性ＨＴＴノックダウンを示す。更に別の態様では、内因性ＨＴＴノックダウン有効性は、種々の細胞型（例えば、ＨＥＫ２９３、ＨｅＬａ、初代アストロサイト、Ｕ２５１アストロサイト、ＳＨ−ＳＹ５Ｙニューロン細胞およびＨＤ患者に由来する線維芽細胞）において感染（例えば、ＡＡＶ２）によって評価される。効率的な調節性ポリヌクレオチドは６０％より高い内因性ＨＴＴノックダウンを示す。
【０２６３】
インビボでの分子足場および調節性ポリヌクレオチドの評価には、調節性ポリヌクレオチドを含む分子足場がＡＡＶにパッケージングされてインビボモデル（例えば、ＹＡＣ１２８  ＨＤマウスモデル）に投与され、モデルの種々の範囲（例えば組織領域）においてガイド−パッセンジャー比、５’および３’末端プロセシング、ガイド鎖のパッセンジャー鎖に対する比、およびノックダウンを決定することができる。分子足場をＮＧＳによってインビボ試料から処理して、ガイド−パッセンジャー比、およびプロセシング変動性を決定することができる。
【０２６４】
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドは以下の特性のうちの少なくとも１つを用いて設計される：ループ変異体、シードミスマッチ／バルジ／ゆらぎ変異体、ステムミスマッチ、ループ変異体およびヴァッサルステム（ｖａｓｓａｌ  ｓｔｅｍ）ミスマッチ変異体、シードミスマッチおよびベーサルステム（ｂａｓａｌ  ｓｔｅｍ）ミスマッチ変異体、ステムミスマッチおよびベーサルステム（ｂａｓａｌ  ｓｔｅｍ）ミスマッチ変異体、シードゆらぎおよびベーサルステム（ｂａｓａｌ  ｓｔｅｍ）ゆらぎ変異体、またはステム配列変異体。
【０２６５】
ｓｉＲＮＡ分子
本発明は、神経変性障害を治療するためのＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）誘導性の遺伝子発現阻害に関する。本明細書には、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡ（本明細書では、まとめて「ｓｉＲＮＡ分子」と称される）が提供される。かかるｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、細胞、例えば中型有棘ニューロン、皮質ニューロンおよび／またはアストロサイトにおけるＨＴＴ遺伝子発現を軽減またはサイレンシングして、それによりハンチントン病（ＨＤ）の症状を改善することができる。
【０２６６】
ＲＮＡｉ（転写後遺伝子サイレンシング（ＰＴＧＳ）、クエリング、または共抑制としても知られる）は、ＲＮＡ分子が典型的には特異的ｍＲＮＡ分子の破壊を引き起こすことにより遺伝子発現を配列特異的に阻害する転写後遺伝子サイレンシング過程である。ＲＮＡｉの活性成分は低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）と呼ばれる短鎖／低分子二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）であり、これは典型的には１５〜３０ヌクレオチド（例えば、１９〜２５、１９〜２４または１９〜２１ヌクレオチド）および２ヌクレオチドの３’オーバハングを含有し、かつ標的遺伝子の核酸配列と一致する。これらの低分子ＲＮＡ種は、天然ではインビボでより大きいｄｓＲＮＡのダイサー媒介性切断によって産生されることができ、および哺乳類細胞で機能性である。
【０２６７】
ｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）と称される、天然で発現する低分子ＲＮＡ分子は、ｍＲＮＡの発現を調節することにより遺伝子サイレンシングを誘発する。ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）を含有するｍｉＲＮＡは、シード領域と呼ばれるｍｉＲＮＡの５’領域におけるヌクレオチド２〜７と完全な配列相補性を呈し、かつその３’領域と他の塩基対を呈するｍＲＮＡを標的とする。ｍｉＲＮＡ媒介性の遺伝子発現下方制御は、標的ｍＲＮＡの切断、標的ｍＲＮＡの翻訳阻害、またはｍＲＮＡ崩壊によって引き起こされ得る。ｍｉＲＮＡターゲティング配列は、通常、標的ｍＲＮＡの３’−ＵＴＲに位置する。単一のｍｉＲＮＡが様々な遺伝子の１００より多くの転写物を標的とすることができ、および１つのｍＲＮＡが異なるｍｉＲＮＡの標的となることができる。
【０２６８】
特異的ｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡがインビトロで設計および合成されて、ＲＮＡｉ過程を活性化させるため細胞に導入されてもよい。エルバシール（Ｅｌｂａｓｈｉｒ）らは、２１ヌクレオチドｓｉＲＮＡ二重鎖（低分子干渉ＲＮＡと称される）が哺乳類細胞において免疫応答を誘導することなく強力かつ特異的な遺伝子ノックダウンを生じさせる能力を有したことを実証した（エルバシール・ＳＭ（Ｅｌｂａｓｈｉｒ  ＳＭ）ら著、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、２００１年、第４１１巻、ｐ．４９４〜４９８）。この最初の報告以来、ｓｉＲＮＡによる転写後遺伝子サイレンシングは哺乳類細胞における強力な遺伝子解析ツールとして急速に浮上しており、新規療法を生み出す可能性を秘めている。
【０２６９】
ハンチントン病などのポリグルタミン伸長疾患を引き起こすポリグルタミンリピートタンパク質をコードする核酸配列を標的とするように設計されたＲＮＡｉ分子が、米国特許第９，１６９，４８３号明細書および同第９，１８１，５４４号明細書ならびに国際公開第２０１５１７９５２５号パンフレット（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されている。米国特許第９，１６９，４８３号明細書および同第９，１８１，５４４号明細書ならびに国際公開第２０１５１７９５２５号パンフレットは、各々が、第１のＲＮＡ鎖（例えば、１５連続ヌクレオチド）と第２のＲＮＡ鎖（例えば、第１の鎖の少なくとも１２連続ヌクレオチドと相補的）とを含む単離ＲＮＡ二重鎖を提供し、ここでＲＮＡ二重鎖は約１５〜３０塩基対長である。第１のＲＮＡ鎖と第２のＲＮＡ鎖とはＲＮＡループ（約４〜５０ヌクレオチド）により作動可能に連結されてヘアピン構造を形成してもよく、これが発現カセットに挿入され得る。ループ部分の非限定的な例としては、米国特許第９，１６９，４８３号明細書の配列番号９〜１４（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）が挙げられる。完全配列または配列の一部のいずれかの、ＲＮＡ二重鎖の形成に使用し得るＲＮＡ鎖の非限定的な例としては、米国特許第９，１６９，４８３号明細書の配列番号１〜８ならびに米国特許第９，１８１，５４４号明細書の配列番号１〜１１、３３〜５９、２０８〜２１０、２１３〜２１５および２１８〜２２１（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）が挙げられる。ＲＮＡｉ分子の非限定的な例としては、米国特許第９，１６９，４８３号明細書の配列番号１〜８、米国特許第９，１８１，５４４号明細書の配列番号１〜１１、３３〜５９、２０８〜２１０、２１３〜２１５および２１８〜２２１ならびに国際公開第２０１５１７９５２５号パンフレットの配列番号１、６、７、および３５〜３８（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）が挙げられる。
【０２７０】
ＲＮＡｉを活性化させるため、インビトロ合成したｓｉＲＮＡ分子が細胞に導入されてもよい。外因性ｓｉＲＮＡ二重鎖は、細胞に導入されると、内因性ｄｓＲＮＡと同様にアセンブルして、ｓｉＲＮＡ二重鎖の２本の鎖のうちの一方（すなわちアンチセンス鎖）に相補的なＲＮＡ配列と相互作用する多ユニット複合体であるＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）を形成することができる。この過程でｓｉＲＮＡのセンス鎖（またはパッセンジャー鎖）が複合体から失われ、一方でｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖（またはガイド鎖）はその相補ＲＮＡとマッチする。詳細には、ｓｉＲＮＡを含有するＲＩＳＣの標的は、完全な配列相補性を呈するｍＲＮＡである。次に、標的の切断、放出および分解によってｓｉＲＮＡ媒介性遺伝子サイレンシングが起こる。
【０２７１】
標的ｍＲＮＡに相同なセンス鎖と標的ｍＲＮＡに相補的なアンチセンス鎖とを含むｓｉＲＮＡ二重鎖は、標的ＲＮＡの破壊効率の点で、一本鎖（ｓｓ）−ｓｉＲＮＡ（例えばアンチセンス鎖ＲＮＡまたはアンチセンスオリゴヌクレオチド）の使用と比較してはるかに大きい利点をもたらす。多くの場合に、ｓｓ−ｓｉＲＮＡの使用は、対応する二重鎖の有効な遺伝子サイレンシング効力を達成するのに、より高い濃度のｓｓ−ｓｉＲＮＡを必要とする。
【０２７２】
前述の分子のいずれも、ウイルスゲノムによってコードされてもよい。
ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖の設計および配列
本発明は、ＨＴＴ遺伝子発現および／またはＨＴＴタンパク質産生に干渉するためにＨＴＴ  ｍＲＮＡを標的とする低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）二重鎖（およびそれらをコードする調節性ポリヌクレオチド）を提供する。
【０２７３】
本発明のコード化ｓｉＲＮＡ二重鎖は、共にハイブリダイズして二重鎖構造を形成するアンチセンス鎖およびセンス鎖を含有し、ここでアンチセンス鎖は標的ＨＴＴ遺伝子の核酸配列に相補的であり、センス鎖は標的ＨＴＴ遺伝子の核酸配列と相同である。一部の態様において、アンチセンス鎖の５’末端は５’リン酸基を有し、センス鎖の３’末端は３’ヒドロキシル基を含む。他の態様において、各鎖の３’末端にはヌクレオチドオーバハングがない、１つある、または２つある。
【０２７４】
当該技術分野では、ｓｉＲＮＡの設計に関して幾つかの指針が提案されている。これらの指針は、概して、サイレンシングしようとする遺伝子中の領域を標的とする１９ヌクレオチド二重鎖形成領域、対称２〜３ヌクレオチド３’オーバハング、５’−リン酸基および３’−ヒドロキシル基を作成することを推奨している。ｓｉＲＮＡ配列の好ましさを左右し得る他の規則としては、限定はされないが、（ｉ）アンチセンス鎖の５’末端におけるＡ／Ｕ；（ｉｉ）センス鎖の５’末端におけるＧ／Ｃ；（ｉｉｉ）アンチセンス鎖の５’端側３分の１にある少なくとも５個のＡ／Ｕ残基；および（ｉｖ）９ヌクレオチド長より長いいかなるＧＣストレッチも存在しないことが挙げられる。標的遺伝子の具体的な配列と合わせて、かかる考慮点に従い、哺乳類標的遺伝子発現の抑制に不可欠な極めて有効なｓｉＲＮＡ分子を容易に設計し得る。
【０２７５】
本発明によれば、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子（例えば、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡ）が設計される。かかるｓｉＲＮＡ分子は、特異的にＨＴＴ遺伝子発現およびタンパク質産生を抑制することができる。一部の態様において、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞のＨＴＴ遺伝子変異体、すなわちＨＤ疾患を有する患者に同定される突然変異型ＨＴＴ転写物を選択的に「ノックアウト」するように設計および使用される。一部の態様において、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞のＨＴＴ遺伝子変異体を選択的に「ノックダウン」するように設計および使用される。他の態様において、ｓｉＲＮＡ分子は、野生型および突然変異型の両方のＨＴＴ遺伝子を阻害または抑制することが可能である。
【０２７６】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、両方の鎖が共にハイブリダイズして二重鎖構造を形成するセンス鎖と相補的アンチセンス鎖とを含む。アンチセンス鎖は標的特異的ＲＮＡｉを導くのに十分な、ＨＴＴ  ｍＲＮＡ配列との相補性を有し、すなわちｓｉＲＮＡ分子は、ＲＮＡｉ機構または過程による標的ｍＲＮＡの破壊を惹起するのに十分な配列を有する。
【０２７７】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、両方の鎖が共にハイブリダイズして二重鎖構造を形成するセンス鎖と相補的アンチセンス鎖とを含み、ここでＨＴＴ  ｍＲＮＡとのハイブリダイゼーションの開始部位は、ＨＴＴ  ｍＲＮＡ配列上のヌクレオチド１００〜７０００にある。非限定的な例として、開始部位は、ＨＴＴ  ｍＲＮＡ配列上のヌクレオチド１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜３５０、３５０〜４００、４００〜４５０、４５０〜５００、５００〜５５０、５５０〜６００、６００〜６５０、６５０〜７００、７００〜７０、７５０〜８００、８００〜８５０、８５０〜９００、９００〜９５０、９５０〜１０００、１０００〜１０５０、１０５０〜１１００、１１００〜１１５０、１１５０〜１２００、１２００〜１２５０、１２５０〜１３００、１３００〜１３５０、１３５０〜１４００、１４００〜１４５０、１４５０〜１５００、１５００〜１５５０、１５５０〜１６００、１６００〜１６５０、１６５０〜１７００、１７００〜１７５０、１７５０〜１８００、１８００〜１８５０、１８５０〜１９００、１９００〜１９５０、１９５０〜２０００、２０００〜２０５０、２０５０〜２１００、２１００〜２１５０、２１５０〜２２００、２２００〜２２５０、２２５０〜２３００、２３００〜２３５０、２３５０〜２４００、２４００〜２４５０、２４５０〜２５００、２５００〜２５５０、２５５０〜２６００、２６００〜２６５０、２６５０〜２７００、２７００〜２７５０、２７５０〜２８００、２８００〜２８５０、２８５０〜２９００、２９００〜２９５０、２９５０〜３０００、３０００〜３０５０、３０５０〜３１００、３１００〜３１５０、３１５０〜３２００、３２００〜３２５０、３２５０〜３３００、３３００〜３３５０、３３５０〜３４００、３４００〜３４５０、３４５０〜３５００、３５００〜３５５０、３５５０〜３６００、３６００〜３６５０、３６５０〜３７００、３７００〜３７５０、３７５０〜３８００、３８００〜３８５０、３８５０〜３９００、３９００〜３９５０、３９５０〜４０００、４０００〜４０５０、４０５０〜４１００、４１００〜４１５０、４１５０〜４２００、４２００〜４２５０、４２５０〜４３００、４３００〜４３５０、４３５０〜４４００、４４００〜４４５０、４４５０〜４５００、４５００〜４５５０、４５５０〜４６００、４６００〜４６５０、４６５０〜４７００、４７００〜４７５０、４７５０〜４８００、４８００〜４８５０、４８５０〜４９００、４９００〜４９５０、４９５０〜５０００、５０００〜５０５０、５０５０〜５１００、５１００〜５１５０、５１５０〜５２００、５２００〜５２５０、５２５０〜５３００、５３００〜５３５０、５３５０〜５４００、５４００〜５４５０、５４５０〜５５００、５５００〜５５５０、５５５０〜５６００、５６００〜５６５０、５６５０〜５７００、５７００〜５７５０、５７５０〜５８００、５８００〜５８５０、５８５０〜５９００、５９００〜５９５０、５９５０〜６０００、６０００〜６０５０、６０５０〜６１００、６１００〜６１５０、６１５０〜６２００、６２００〜６２５０、６２５０〜６３００、６３００〜６３５０、６３５０〜６４００、６４００〜６４５０、６４５０〜６５００、６５００〜６５５０、６５５０〜６６００、６６００〜６６５０、６６５０〜６７００、６７００〜６７５０、６７５０〜６８００、６８００〜６８５０、６８５０〜６９００、６９００〜６９５０、６９５０〜７０００、７０００〜７０５０、７０５０〜７１００、７１００〜７１５０、７１５０〜７２００、７２００〜７２５０、７２５０〜７３００、７３００〜７３５０、７３５０〜７４００、７４００〜７４５０、７４５０〜７５００、７５００〜７５５０、７５５０〜７６００、７６００〜７６５０、７６５０〜７７００、７７００〜７７５０、７７５０〜７８００、７８００〜７８５０、７８５０〜７９００、７９００〜７９５０、７９５０〜８０００、８０００〜８０５０、８０５０〜８１００、８１００〜８１５０、８１５０〜８２００、８２００〜８２５０、８２５０〜８３００、８３００〜８３５０、８３５０〜８４００、８４００〜８４５０、８４５０〜８５００、８５００〜８５５０、８５５０〜８６００、８６００〜８６５０、８６５０〜８７００、８７００〜８７５０、８７５０〜８８００、８８００〜８８５０、８８５０〜８９００、８９００〜８９５０、８９５０〜９０００、９０００〜９０５０、９０５０〜９１００、９１００〜９１５０、９１５０〜９２００、９２００〜９２５０、９２５０〜９３００、９３００〜９３５０、９３５０〜９４００、９４００〜９４５０、９４５０〜９５００、９５００〜９５５０、９５５０〜９６００、９６００〜９６５０、９６５０〜９７００、９７００〜９７５０、９７５０〜９８００、９８００〜９８５０、９８５０〜９９００、９９００〜９９５０、９９５０〜１００００、１００００〜１００５０、１００５０〜１０１００、１０１００〜１０１５０、１０１５０〜１０２００、１０２００〜１０２５０、１０２５０〜１０３００、１０３００〜１０３５０、１０３５０〜１０４００、１０４００〜１０４５０、１０４５０〜１０５００、１０５００〜１０５５０、１０５５０〜１０６００、１０６００〜１０６５０、１０６５０〜１０７００、１０７００〜１０７５０、１０７５０〜１０８００、１０８００〜１０８５０、１０８５０〜１０９００、１０９００〜１０９５０、１０９５０〜１１０００、１１０５０〜１１１００、１１１００〜１１１５０、１１１５０〜１１２００、１１２００〜１１２５０、１１２５０〜１１３００、１１３００〜１１３５０、１１３５０〜１１４００、１１４００〜１１４５０、１１４５０〜１１５００、１１５００〜１１５５０、１１５５０〜１１６００、１１６００〜１１６５０、１１６５０〜１１７００、１１７００〜１１７５０、１１７５０〜１１８００、１１８００〜１１８５０、１１８５０〜１１９００、１１９００〜１１９５０、１１９５０〜１２０００、１２０００〜１２０５０、１２０５０〜１２１００、１２１００〜１２１５０、１２１５０〜１２２００、１２２００〜１２２５０、１２２５０〜１２３００、１２３００〜１２３５０、１２３５０〜１２４００、１２４００〜１２４５０、１２４５０〜１２５００、１２５００〜１２５５０、１２５５０〜１２６００、１２６００〜１２６５０、１２６５０〜１２７００、１２７００〜１２７５０、１２７５０〜１２８００、１２８００〜１２８５０、１２８５０〜１２９００、１２９００〜１２９５０、１２９５０〜１３０００、１３０５０〜１３１００、１３１００〜１３１５０、１３１５０〜１３２００、１３２００〜１３２５０、１３２５０〜１３３００、１３３００〜１３３５０、１３３５０〜１３４００、１３４００〜１３４５０、および１３４５０〜１３５００にあってもよい。更に別の非限定的な例として、開始部位は、ＨＴＴ  ｍＲＮＡ配列上のヌクレオチド３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、５９５、５９６、５９７、５９８、５９９、６００、６０１、６０２、６０３、６０４、６０５、６０６、６０７、６０８、６０９、６１０、６１１、６１２、６１３、６１４、６１５、６１６、６１７、６１８、６１９、６２０、６２１、６２２、６２３、６２４、６２５、７１５、７１６、７１７、７１８、７１９、７２０、７２１、７２２、７２３、７２４、７２５、８７５、８７６、８７７、８７８、８７９、８８０、８８１、８８２、８８３、８８４、８８５、８８６、８８７、８８８、８８９、８９０、８９１、８９２、８９３、８９４、８９５、８９６、８９７、８９８、８９９、９００、１３７５、１３７６、１３７７、１３７８、１３７９、１３８０、１３８１、１３８２、１３８３、１３８４、１３８５、１３８６、１３８７、１３８８、１３８９、１３９０、１３９１、１３９２、１３９３、１３９４、１３９５、１３９６、１３９７、１３９８、１３９９、１４００、１４０１、１４０２、１４０３、１４０４、１４０５、１４０６、１４０７、１４０８、１４０９、１４１０、１４１１、１４１２、１４１３、１４１４、１４１５、１４１６、１４１７、１４１８、１４１９、１４２０、１４２１、１４２２、１４２３、１４２４、１４２５、１４２６、１４２７、１４２８、１４２９、１４３０、１４３１、１４３２、１４３３、１４３４、１４３５、１４３６、１４３７、１４３８、１４３９、１４４０、１４４１、１４４２、１４４３、１４４４、１４４５、１４４６、１４４７、１４４８、１４４９、１４５０、１６６０、１６６１、１６６２、１６６３、１６６４、１６６５、１６６６、１６６７、１６６８、１６６９、１６７０、１６７１、１６７２、１６７３、１６７４、１６７５、２０５０、２０５１、２０５２、２０５３、２０５４、２０５５、２０５６、２０５７、２０５８、２０５９、２０６０、２０６１、２０６２、２０６３、２０６４、２０６５、２０６６、２０６７、２０６８、２０６９、２０７０、２０７１、２０７２、２０７３、２０７４、２０７５、２０７６、２０７７、２０７８、２０７９、２０８０、２０８１、２０８２、２０８３、２０８４、２０８５、２０８６、２０８７、２０８８、２０８９、２０９０、２０９１、２０９２、２０９３、２０９４、２０９５、２０９６、２０９７、２０９８、２０���９、２１００、２５８０、２５８１、２５８２、２５８３、２５８４、２５８５、２５８６、２５８７、２５８８、２５８９、２５９０、２５９１、２５９２、２５９３、２５９４、２５９５、２５９６、２５９７、２５９８、２５９９、２６００、２６０１、２６０２、２６０３、２６０４、２６０５、４５２５、４５２６、４５２７、４５２８、４５２９、４５３０、４５３１、４５３２、４５３３、４５３４、４５３５、４５３６、４５３７、４５３８、４５３９、４５４０、４５４１、４５４２、４５４３、４５４４、４５４５、４５４６、４５４７、４５４８、４５４９、４５５０、４５７５、４５７６、４５７７、４５７８、４５７９、４５８０、４５８１、４５８２、４５８３、４５８４、４５８５、４５８６、４５８７、４５８８、４５８９、４５９０、４５９１、４５９２、４５９３、４５９４、４５９５、４５９６、４５９７、４５９８、４５９９、４６００、４８５０、４８５１、４８５２、４８５３、４８５４、４８５５、４８５６、４８５７、４８５８、４８５９、４８６０、４８６１、４８６２、４８６３、４８６４、４８６５、４８６６、４８６７、４８６８、４８６９、４８７０、４８７１、４８７２、４８７３、４８７４、４８７５、４８７６、４８７７、４８７８、４８７９、４８８０、４８８１、４８８２、４８８３、４８８４、４８８５、４８８６、４８８７、４８８８、４８８９、４８９０、４８９１、４８９２、４８９３、４８９４、４８９５、４８９６、４８９７、４８９８、４８９９、４９００、５４６０、５４６１、５４６２、５４６３、５４６４、５４６５、５４６６、５４６７、５４６８、５４６９、５４７０、５４７１、５４７２、５４７３、５４７４、５４７５、５４７６、５４７７、５４７８、５４７９、５４８０、６１７５、６１７６、６１７７、６１７８、６１７９、６１８０、６１８１、６１８２、６１８３、６１８４、６１８５、６１８６、６１８７、６１８８、６１８９、６１９０、６１９１、６１９２、６１９３、６１９４、６１９５、６１９６、６１９７、６１９８、６１９９、６２００、６３１５、６３１６、６３１７、６３１８、６３１９、６３２０、６３２１、６３２２、６３２３、６３２４、６３２５、６３２６、６３２７、６３２８、６３２９、６３３０、６３３１、６３３２、６３３３、６３３４、６３３５、６３３６、６３３７、６３３８、６３３９、６３４０、６３４１、６
３４２、６３４３、６３４４、６３４５、６６００、６６０１、６６０２、６６０３、６６０４、６６０５、６６０６、６６０７、６６０８、６６０９、６６１０、６６１１、６６１２、６６１３、６６１４、６６１５、６７２５、６７２６、６７２７、６７２８、６７２９、６７３０、６７３１、６７３２、６７３３、６７３４、６７３５、６７３６、６７３７、６７３８、６７３９、６７４０、６７４１、６７４２、６７４３、６７４４、６７４５、６７４６、６７４７、６７４８、６７４９、６７５０、６７５１、６７５２、６７５３、６７５４、６７５５、６７５６、６７５７、６７５８、６７５９、６７６０、６７６１、６７６２、６７６３、６７６４、６７６５、６７６６、６７６７、６７６８、６７６９、６７７０、６７７１、６７７２、６７７３、６７７４、６７７５、７６５５、７６５６、７６５７、７６５８、７６５９、７６６０、７６６１、７６６２、７６６３、７６６４、７６６５、７６６６、７６６７、７６６８、７６６９、７６７０、７６７１、７６７２、８５１０、８５１１、８５１２、８５１３、８５１４、８５１５、８５１６、８７１５、８７１６、８７１７、８７１８、８７１９、８７２０、８７２１、８７２２、８７２３、８７２４、８７２５、８７２６、８７２７、８７２８、８７２９、８７３０、８７３１、８７３２、８７３３、８７３４、８７３５、８７３６、８７３７、８７３８、８７３９、８７４０、８７４１、８７４２、８７４３、８７４４、８７４５、９２５０、９２５１、９２５２、９２５３、９２５４、９２５５、９２５６、９２５７、９２５８、９２５９、９２６０、９２６１、９２６２、９２６３、９２６４、９２６５、９２６６、９２６７、９２６８、９２６９、９２７０、９４８０、９４８１、９４８２、９４８３、９４８４、９４８５、９４８６、９４８７、９４８８、９４８９、９４９０、９４９１、９４９２、９４９３、９４９４、９４９５、９４９６、９４９７、９４９８、９４９９、９５００、９５７５、９５７６、９５７７、９５７８、９５７９、９５８０、９５８１、９５８２、９５８３、９５８４、９５８５、９５８６、９５８７、９５８８、９５８９、９５９０、１０５２５、１０５２６、１０５２７、１０５２８、１０５２９、１０５３０、１０５３１、１０５３２、１０５３３、１０５３４、１０５３５、１０５３６、１０５３７、１０５３８、１０５３９、１０５４０、１１５４５、１１５４６、１１５４７、１１５４８、１１５４９、１１５５０、１１５５１、１１５５２、１１５５３、１１５５４、１１５５５、１１５５６、１１５５７、１１５５８、１１５５９、１１５６０、１１８７５、１１８７６、１１８７７、１１８７８、１１８７９、１１８８０、１１８８１、１１８８２、１１８８３、１１８８４、１１８８５、１１８８６、１１８８７、１１８８８、１１８８９、１１８９０、１１８９１、１１８９２、１１８９３、１１８９４、１１８９５、１１８９６、１１８９７、１１８９８、１１８９９、１１９００、１１９１５、１１９１６、１１９１７、１１９１８、１１９１９、１１９２０、１１９２１、１１９２２、１１９２３、１１９２４、１１９２５、１１９２６、１１９２７、１１９２８、１１９２９、１１９３０、１１９３１、１１９３２、１１９３３、１１９３４、１１９３５、１１９３６、１１９３７、１１９３８、１１９３９、１１９４０、１３３７５、１３３７６、１３３７７、１３３７８、１３３７９、１３３８０、１３３８１、１３３８２、１３３８３、１３３８４、１３３８５、１３３８６、１３３８７、１３３８８、１３３８９および１３３９０であってもよい。
【０２７８】
一部の実施形態において、アンチセンス鎖と標的ｍＲＮＡ配列とは１００％の相補性を有する。アンチセンス鎖は標的ｍＲＮＡ配列の任意の一部と相補的であってもよい。
他の実施形態において、アンチセンス鎖と標的ｍＲＮＡ配列とは少なくとも１つのミスマッチを含む。非限定的な例として、アンチセンス鎖と標的ｍＲＮＡ配列とは、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜９９％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜９９％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜９９％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜９９％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜９９％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜９９％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、９０〜９５％、９０〜９９％または９５〜９９％の相補性を有する。
【０２７９】
一実施形態において、ｓｉＲＮＡまたはｄｓＲＮＡは、互いに相補的な少なくとも２つの配列を含む。
本発明によれば、ｓｉＲＮＡ分子は長さが約１０〜５０ヌクレオチドまたはそれ以上であり、すなわち、各鎖が１０〜５０ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）を含む。好ましくは、ｓｉＲＮＡ分子は長さが各鎖約１５〜３０、例えば、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０ヌクレオチドであり、ここで鎖の一方は標的領域と十分に相補的である。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子の各鎖は、約１９〜２５、１９〜２４または１９〜２１ヌクレオチドの長さを有する。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、１９ヌクレオチド長である。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２０ヌクレオチド長である。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２１ヌクレオチド長である。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２２ヌクレオチド長である。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２３ヌクレオチド長である。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２４ヌクレオチド長である。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子の少なくとも一方の鎖は、２５ヌクレオチド長である。
【０２８０】
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、約１９ヌクレオチド〜約２５ヌクレオチド、および３’末端に２オーバハングヌクレオチドを含む合成ＲＮＡ二重鎖であり得る。一部の態様において、ｓｉＲＮＡ分子は非修飾ＲＮＡ分子であってもよい。他の態様において、ｓｉＲＮＡ分子は、塩基、糖または骨格修飾などの少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含有し得る。
【０２８１】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、限定はされないが、表２のアンチセンス（ガイド）配列またはそれらの断片もしくは変異体などのヌクレオチド配列を含み得る。非限定的な例として、本発明のｓｉＲＮＡ分子に使用されるアンチセンス配列は、表２のヌクレオチド配列の少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜９９％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜９９％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜９９％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜９９％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜９９％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜９９％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、９０〜９５％、９０〜９９％または９５〜９９％である。別の非限定的な例として、本発明のｓｉＲＮＡ分子に使用されるアンチセンス配列は、表２のヌクレオチド配列の少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１または２１超の連続ヌクレオチドを含む。更に別の非限定的な例として、本発明のｓｉＲＮＡ分子に使用されるアンチセンス配列は、表２の配列のヌクレオチド１〜２２、１〜２１、１〜２０、１〜１９、１〜１８、１〜１７、１〜１６、１〜１５、１〜１４、１〜１３、１〜１２、１〜１１、１〜１０、１〜９、１〜８、２〜２２、２〜２１、２〜２０、２〜１９、２〜１８、２〜１７、２〜１６、２〜１５、２〜１４、２〜１３、２〜１２、２〜１１、２〜１０、２〜９、２〜８、３〜２２、３〜２１、３〜２０、３〜１９、３〜１８、３〜１７、３〜１６、３〜１５、３〜１４、３〜１３、３〜１２、３〜１１、３〜１０、３〜９、３〜８、４〜２２、４〜２１、４〜２０、４〜１９、４〜１８、４〜１７、４〜１６、４〜１５、４〜１４、４〜１３、４〜１２、４〜１１、４〜１０、４〜９、４〜８、５〜２２、５〜２１、５〜２０、５〜１９、５〜１８、５〜１７、５〜１６、５〜１５、５〜１４、５〜１３、５〜１２、５〜１１、５〜１０、５〜９、５〜８、６〜２２、６〜２１、６〜２０、６〜１９、６〜１８、６〜１７、６〜１６、６〜１５、６〜１４、６〜１３、６〜１２、６〜１１、６〜１０、７〜２２、７〜２１、７〜２０、７〜１９、７〜１８、７〜１７、７〜１６、７〜１５、７〜１４、７〜１３、７〜１２、８〜２２、８〜２１、８〜２０、８〜１９、８〜１８、８〜１７、８〜１６、８〜１５、８〜１４、８〜１３、８〜１２、９〜２２、９〜２１、９〜２０、９〜１９、９〜１８、９〜１７、９〜１６、９〜１５、９〜１４、１０〜２２、１０〜２１、１０〜２０、１０〜１９、１０〜１８、１０〜１７、１０〜１６、１０〜１５、１０〜１４、１１〜２２、１１〜２１、１１〜２０、１１〜１９、１１〜１８、１１〜１７、１１〜１６、１１〜１５、１１〜１４、１２〜２２、１２〜２１、１２〜２０、１２〜１９、１２〜１８、１２〜１７、１２〜１６、１３〜２２、１３〜２１、１３〜２０、１３〜１９、１３〜１８、１３〜１７、１３〜１６、１４〜２２、１４〜２１、１４〜２０、１４〜１９、１４〜１８、１４〜１７、１５〜２２、１５〜２１、１５〜２０、１５〜１９、１５〜１８、１６〜２２、１６〜２１、１６〜２０、１７〜２２、１７〜２１、または１８〜２２を含む。
【０２８２】
【表２−１】
2020518259.tif 000037
【０２８３】
【表２−２】
2020518259.tif 000038
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、限定はされないが、表３のセンス（パッセンジャー）配列またはそれらの断片もしくは変異体などのヌクレオチド配列を含み得る。非限定的な例として、本発明のｓｉＲＮＡ分子に使用されるセンス配列は、表３のヌクレオチド配列の少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜９９％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜９９％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜９９％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜９９％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜９９％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜９９％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、９０〜９５％、９０〜９９％または９５〜９９％である。別の非限定的な例として、本発明のｓｉＲＮＡ分子に使用されるセンス配列は、表３のヌクレオチド配列の少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１または２１超の連続ヌクレオチドを含む。更に別の非限定的な例として、本発明のｓｉＲＮＡ分子に使用されるセンス配列は、表３の配列のヌクレオチド１〜２２、１〜２１、１〜２０、１〜１９、１〜１８、１〜１７、１〜１６、１〜１５、１〜１４、１〜１３、１〜１２、１〜１１、１〜１０、１〜９、１〜８、２〜２２、２〜２１、２〜２０、２〜１９、２〜１８、２〜１７、２〜１６、２〜１５、２〜１４、２〜１３、２〜１２、２〜１１、２〜１０、２〜９、２〜８、３〜２２、３〜２１、３〜２０、３〜１９、３〜１８、３〜１７、３〜１６、３〜１５、３〜１４、３〜１３、３〜１２、３〜１１、３〜１０、３〜９、３〜８、４〜２２、４〜２１、４〜２０、４〜１９、４〜１８、４〜１７、４〜１６、４〜１５、４〜１４、４〜１３、４〜１２、４〜１１、４〜１０、４〜９、４〜８、５〜２２、５〜２１、５〜２０、５〜１９、５〜１８、５〜１７、５〜１６、５〜１５、５〜１４、５〜１３、５〜１２、５〜１１、５〜１０、５〜９、５〜８、６〜２２、６〜２１、６〜２０、６〜１９、６〜１８、６〜１７、６〜１６、６〜１５、６〜１４、６〜１３、６〜１２、６〜１１、６〜１０、７〜２２、７〜２１、７〜２０、７〜１９、７〜１８、７〜１７、７〜１６、７〜１５、７〜１４、７〜１３、７〜１２、８〜２２、８〜２１、８〜２０、８〜１９、８〜１８、８〜１７、８〜１６、８〜１５、８〜１４、８〜１３、８〜１２、９〜２２、９〜２１、９〜２０、９〜１９、９〜１８、９〜１７、９〜１６、９〜１５、９〜１４、１０〜２２、１０〜２１、１０〜２０、１０〜１９、１０〜１８、１０〜１７、１０〜１６、１０〜１５、１０〜１４、１１〜２２、１１〜２１、１１〜２０、１１〜１９、１１〜１８、１１〜１７、１１〜１６、１１〜１５、１１〜１４、１２〜２２、１２〜２１、１２〜２０、１２〜１９、１２〜１８、１２〜１７、１２〜１６、１３〜２２、１３〜２１、１３〜２０、１３〜１９、１３〜１８、１３〜１７、１３〜１６、１４〜２２、１４〜２１、１４〜２０、１４〜１９、１４〜１８、１４〜１７、１５〜２２、１５〜２１、１５〜２０、１５〜１９、１５〜１８、１６〜２２、１６〜２１、１６〜２０、１７〜２２、１７〜２１、または１８〜２２を含む。
【０２８４】
【表３−１】
2020518259.tif 000039
【０２８５】
【表３−２】
2020518259.tif 000040
【０２８６】
【表３−３】
2020518259.tif 000041
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、表２からのアンチセンス配列および表３からのセンス配列、またはそれらの断片もしくは変異体を含み得る。非限定的な例として、アンチセンス配列およびセンス配列は、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜９９％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜９９％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜９９％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜９９％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜９９％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜９９％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、９０〜９５％、９０〜９９％または９５〜９９％の相補性を有する。
【０２８７】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、表４〜表６に記載されるとおりのセンスおよびアンチセンスｓｉＲＮＡ二重鎖を含み得る。非限定的な例として、これらのｓｉＲＮＡ二重鎖は、内因性ＨＴＴ遺伝子発現に対するインビトロ阻害活性に関して試験されてもよい。センス配列およびアンチセンス配列の開始部位は、ＮＣＢＩのＮＭ＿００２１１１．７（配列番号１４２５）として公知であるＨＴＴ遺伝子配列と比較される。
【０２８８】
【表４−１】
2020518259.tif 000042
【０２８９】
【表４−２】
2020518259.tif 000043
【０２９０】
【表４−３】
2020518259.tif 000044
【０２９１】
【表５】
2020518259.tif 000045
【０２９２】
【表６】
2020518259.tif 000046
他の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、細胞への送達用のプラスミドベクター、ＡＡＶ粒子、ウイルスゲノムまたは他の核酸発現ベクターにコードすることができる。
【０２９３】
ＤＮＡ発現プラスミドを使用して、本発明のｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡを細胞内で安定的に発現させ、標的遺伝子発現の長期阻害を実現することができる。一態様において、ｓｉＲＮＡ二重鎖のセンス鎖とアンチセンス鎖とは、典型的には、短いスペーサ配列によって連結され、低分子ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）と呼ばれるステム−ループ構造の発現をもたらす。ヘアピンはダイサーによって認識および切断され、そのようにして成熟ｓｉＲＮＡ分子が生じる。
【０２９４】
本発明によれば、ＨＴＴ  ｍＲＮＡを標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸を含むＡＡＶ粒子が産生され、ＡＡＶ血清型は、表１に挙げられる血清型のいずれであってもよい。ＡＡＶ血清型の非限定的な例としては、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ９．４７、ＡＡＶ９（ｈｕ１４）、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ−ＤＪ８、ＡＡＶ−ＤＪ、ＡＡＶ−ＰＨＰ．Ａ、および／またはＡＡＶ−ＰＨＰ．Ｂ、およびこれらのバリアントが挙げられる。
【０２９５】
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、標的ｍＲＮＡ（例えば、ＨＴＴ）を抑制（または分解）する。したがって、本ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して、細胞、例えばニューロンにおけるＨＴＴ遺伝子発現を実質的に阻害することができる。一部の態様において、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害とは、少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％の阻害を指す。したがって、標的遺伝子のタンパク質産物は、少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％阻害され得る。
【０２９６】
本発明によれば、ｓｉＲＮＡ分子は、培養細胞でのＨＴＴ  ｍＲＮＡレベルを低下させるように設計され、それらの能力に関して試験される。かかるｓｉＲＮＡ分子は、限定はされないが、表４、表５または表６に挙げられるものを含め、二重鎖を形成し得る。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ二重鎖はｓｉＲＮＡ二重鎖ＩＤ：Ｄ−３５００〜Ｄ−３５７０であってもよい。
【０２９７】
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、ガイド鎖に位置する標的（例えば、ＨＴＴ）に対するｍｉＲＮＡシードマッチを含む。別の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、パッセンジャー鎖に位置する標的（例えば、ＨＴＴ）に対するｍｉＲＮＡシードマッチを含む。更に別の実施形態において、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイド鎖またはパッセンジャー鎖に位置する標的（例えば、ＨＴＴ）に対するシードマッチを含まない。
【０２９８】
一実施形態において、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイド鎖について有意な完全長オフターゲット効果をほぼ有しないものであり得る。別の実施形態において、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、パッセンジャー鎖について有意な完全長オフターゲット効果をほぼ有しないものであり得る。ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、パッセンジャー鎖について１％未満、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、１〜５％、２〜６％、３〜７％、４〜８％、５〜９％、５〜１０％、６〜１０％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、１０〜２０％、１０〜３０％、１０〜４０％、１０〜５０％、１５〜３０％、１５〜４０％、１５〜４５％、２０〜４０％、２０〜５０％、２５〜５０％、３０〜４０％、３０〜５０％、３５〜５０％、４０〜５０％、４５〜５０％の完全長オフターゲット効果を有し得る。更に別の実施形態において、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイド鎖またはパッセンジャー鎖について有意な完全長オフターゲット効果をほぼ有しないものであり得る。ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、ガイド鎖またはパッセンジャー鎖について１％未満、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、１〜５％、２〜６％、３〜７％、４〜８％、５〜９％、５〜１０％、６〜１０％、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、１０〜２０％、１０〜３０％、１０〜４０％、１０〜５０％、１５〜３０％、１５〜４０％、１５〜４５％、２０〜４０％、２０〜５０％、２５〜５０％、３０〜４０％、３０〜５０％、３５〜５０％、４０〜５０％、４５〜５０％の完全長オフターゲット効果を有し得る。
【０２９９】
一実施形態において、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡはインビトロで高い活性を有し得る。別の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子はインビトロで低い活性を有し得る。更に別の実施形態において、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡはインビトロで高いガイド鎖活性および低いパッセンジャー鎖活性を有し得る。
【０３００】
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子はインビトロで高いガイド鎖活性および低いパッセンジャー鎖活性を有する。ガイド鎖による標的ノックダウン（ＫＤ）は少なくとも４０％、５０％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、９９．５％または１００％であり得る。ガイド鎖による標的ノックダウンは４０〜５０％、４５〜５０％、５０〜５５％、５０〜６０％、６０〜６５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜９９％、６０〜９９．５％、６０〜１００％、６５〜７０％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、６５〜９９％、６５〜９９．５％、６５〜１００％、７０〜７５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜９９％、７０〜９９．５％、７０〜１００％、７５〜８０％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、７５〜９９％、７５〜９９．５％、７５〜１００％、８０〜８５％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、８０〜９９．５％、８０〜１００％、８５〜９０％、８５〜９５％、８５〜９９％、８５〜９９．５％、８５〜１００％、９０〜９５％、９０〜９９％、９０〜９９．５％、９０〜１００％、９５〜９９％、９５〜９９．５％、９５〜１００％、９９〜９９．５％、９９〜１００％または９９．５〜１００％であり得る。非限定的な例として、ガイド鎖による標的ノックダウン（ＫＤ）は７０％より高い。非限定的な例として、ガイド鎖による標的ノックダウン（ＫＤ）は６０％より高い。
【０３０１】
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ二重鎖は、センス配列またはアンチセンス配列について、非Ｈｔｔ配列に対するｍｉＲＮＡシードマッチがないように設計される。
一実施形態において、最も近いオフターゲットに対するガイド鎖のＩＣ５０は、オンターゲット遺伝子である、Ｈｔｔに対するガイド鎖のＩＣ５０の１００倍よりも高い。非限定的な例として、最も近いオフターゲットに対するガイド鎖のＩＣ５０が標的に対するガイド鎖のＩＣ５０の１００倍よりも高い場合、そのｓｉＲＮＡ分子は、インビトロでのＨｔｔの阻害に高いガイド鎖選択性を有すると言われる。
【０３０２】
一実施形態において、ガイド鎖の５’プロセシングは、インビトロまたはインビボで少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％の確率で５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、インビトロで少なくとも９９％の確率で５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、インビボで少なくとも９９％の確率で５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、インビトロで少なくとも９０％の確率で５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、インビボで少なくとも９０％の確率で５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、インビトロで少なくとも８５％の確率で５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。非限定的な例として、ガイド鎖の５’プロセシングは正確であり、インビボで少なくとも８５％の確率で５’末端に正しい開始（ｎ）を有する。
【０３０３】
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は、インビトロまたはインビボで１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、１；１、２：１０、２：９、２：８、２：７、２：６、２：５、２：４、２：３、２：２、２：１、３：１０、３：９、３：８、３：７、３：６、３：５、３：４、３：３、３：２、３：１、４：１０、４：９、４：８、４：７、４：６、４：５、４：４、４：３、４：２、４：１、５：１０、５：９、５：８、５：７、５：６、５：５、５：４、５：３、５：２、５：１、６：１０、６：９、６：８、６：７、６：６、６：５、６：４、６：３、６：２、６：１、７：１０、７：９、７：８、７：７、７：６、７：５、７：４、７：３、７：２、７：１、８：１０、８：９、８：８、８：７、８：６、８：５、８：４、８：３、８：２、８：１、９：１０、９：９、９：８、９：７、９：６、９：５、９：４、９：３、９：２、９：１、１０：１０、１０：９、１０：８、１０：７、１０：６、１０：５、１０：４、１０：３、１０：２、１０：１、１：９９、５：９５、１０：９０、１５：８５、２０：８０、２５：７５、３０：７０、３５：６５、４０：６０、４５：５５、５０：５０、５５：４５、６０：４０、６５：３５、７０：３０、７５：２５、８０：２０、８５：１５、９０：１０、９５：５、または９９：１である。ガイド対パッセンジャー比とは、ｐｒｉ−ｍｉｃｒｏＲＮＡの細胞内プロセシング後のガイド鎖対パッセンジャー鎖の比を指す。例えば、８０：２０のガイド対パッセンジャー比であれば、前駆体からプロセシングされるパッセンジャー鎖２つにつき８つのガイド鎖を有し得る。非限定的な例として、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比はインビトロで８：２である。非限定的な例として、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比はインビボで８：２である。非限定的な例として、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比はインビトロで９：１である。非限定的な例として、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比はインビボで９：１である。
【０３０４】
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は１より大きい。
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は２より大きい。
【０３０５】
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は５より大きい。
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は１０より大きい。
【０３０６】
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は２０より大きい。
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は５０より大きい。
【０３０７】
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は少なくとも３：１である。
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は少なくとも５：１である。
【０３０８】
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は少なくとも１０：１である。
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は少なくとも２０：１である。
【０３０９】
一実施形態において、ガイド鎖対パッセンジャー鎖（Ｇ：Ｐ）（アンチセンス鎖対センス鎖とも称される）の発現比は少なくとも５０：１である。
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は、インビトロまたはインビボで１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、１；１、２：１０、２：９、２：８、２：７、２：６、２：５、２：４、２：３、２：２、２：１、３：１０、３：９、３：８、３：７、３：６、３：５、３：４、３：３、３：２、３：１、４：１０、４：９、４：８、４：７、４：６、４：５、４：４、４：３、４：２、４：１、５：１０、５：９、５：８、５：７、５：６、５：５、５：４、５：３、５：２、５：１、６：１０、６：９、６：８、６：７、６：６、６：５、６：４、６：３、６：２、６：１、７：１０、７：９、７：８、７：７、７：６、７：５、７：４、７：３、７：２、７：１、８：１０、８：９、８：８、８：７、８：６、８：５、８：４、８：３、８：２、８：１、９：１０、９：９、９：８、９：７、９：６、９：５、９：４、９：３、９：２、９：１、１０：１０、１０：９、１０：８、１０：７、１０：６、１０：５、１０：４、１０：３、１０：２、１０：１、１：９９、５：９５、１０：９０、１５：８５、２０：８０、２５：７５、３０：７０、３５：６５、４０：６０、４５：５５、５０：５０、５５：４５、６０：４０、６５：３５、７０：３０、７５：２５、８０：２０、８５：１５、９０：１０、９５：５、または９９：１である。パッセンジャー対ガイド比とは、ｐｒｉ−ｍｉｃｒｏＲＮＡの細胞内プロセシング後の、ガイド鎖に対するパッセンジャー鎖の比を指す。例えば、８０：２０のパッセンジャー対ガイド比であれば、前駆体からプロセシングされるガイド鎖２つにつき８つのパッセンジャー鎖を有し得る。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビトロで８０：２０である。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビボで８０：２０である。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビトロで８：２である。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビボで８：２である。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビトロで９：１である。非限定的な例として、パッセンジャー鎖対ガイド鎖比はインビボで９：１である。
【０３１０】
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は１より大きい。
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は２より大きい。
【０３１１】
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は５より大きい。
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は１０より大きい。
【０３１２】
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は２０より大きい。
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は５０より大きい。
【０３１３】
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は少なくとも３：１である。
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は少なくとも５：１である。
【０３１４】
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は少なくとも１０：１である。
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は少なくとも２０：１である。
【０３１５】
一実施形態において、パッセンジャー鎖対ガイド鎖（Ｐ：Ｇ）（センス鎖対アンチセンス鎖とも称される）の発現比は少なくとも５０：１である。
一実施形態において、パッセンジャー鎖−ガイド鎖二重鎖は、ｐｒｉ−ｍｉｃｒｏまたはｐｒｅ−ｍｉｃｒｏＲＮＡが、しかし当該技術分野において公知のおよび本明細書に記載される方法、プロセシングを測定したとき２倍より高いガイド鎖対パッセンジャー鎖比を示す場合に有効と見なされる。非限定的な例として、ｐｒｉ−ｍｉｃｒｏまたはｐｒｅ−ｍｉｃｒｏＲＮＡは、プロセシングを測定したとき、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１１倍、１２倍、１３倍、１４倍、１５倍より高い、または２〜５倍、２〜１０倍、２〜１５倍、３〜５倍、３〜１０倍、３〜１５倍、４〜５倍、４〜１０倍、４〜１５倍、５〜１０倍、５〜１５倍、６〜１０倍、６〜１５倍、７〜１０倍、７〜１５倍、８〜１０倍、８〜１５倍、９〜１０倍、９〜１５倍、１０〜１５倍、１１〜１５倍、１２〜１５倍、１３〜１５倍、または１４〜１５倍のガイド鎖対パッセンジャー鎖比を示す。
【０３１６】
一実施形態において、ｄｓＲＮＡをコードするベクターゲノムは、コンストラクトの完全長の少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超である配列を含む。非限定的な例として、ベクターゲノムは、コンストラクトの完全長配列の少なくとも８０％である配列を含む。
【０３１７】
一実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子を使用して、ｈｔｔ配列上の少なくとも１つのエクソンを標的とすることにより野生型または突然変異ＨＴＴがサイレンシングされ得る。エクソンは、エクソン１、エクソン２、エクソン３、エクソン４、エクソン５、エクソン６、エクソン７、エクソン８、エクソン９、エクソン１０、エクソン１１、エクソン１２、エクソン１３、エクソン１４、エクソン１５、エクソン１６、エクソン１７、エクソン１８、エクソン１９、エクソン２０、エクソン２１、エクソン２２、エクソン２３、エクソン２４、エクソン２５、エクソン２６、エクソン２７、エクソン２８、エクソン２９、エクソン３０、エクソン３１、エクソン３２、エクソン３３、エクソン３４、エクソン３５、エクソン３６、エクソン３７、エクソン３８、エクソン３９、エクソン４０、エクソン４１、エクソン４２、エクソン４３、エクソン４４、エクソン４５、エクソン４６、エクソン４７、エクソン４８、エクソン４９、エクソン５０、エクソン５１、エクソン５２、エクソン５３、エクソン５４、エクソン５５、エクソン５６、エクソン５７、エクソン５８、エクソン５９、エクソン６０、エクソン６１、エクソン６２、エクソン６３、エクソン６４、エクソン６５、エクソン６６、および／またはエクソン６７であってもよい。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子を使用して、エクソン１を標的とすることにより野生型または突然変異ＨＴＴがサイレンシングされ得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子を使用して、エクソン１以外のエクソンを標的とすることにより野生型または突然変異ＨＴＴがサイレンシングされ得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子を使用して、エクソン５０を標的とすることにより野生型または突然変異ＨＴＴがサイレンシングされ得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子を使用して、エクソン６７を標的とすることにより野生型または突然変異ＨＴＴがサイレンシングされ得る。
【０３１８】
一実施形態では、ｓｉＲＮＡ分子を使用して、ｈｔｔ配列上の少なくとも１つのエクソンを標的とすることにより野生型および／または突然変異ＨＴＴがサイレンシングされ得る。エクソンは、エクソン１、エクソン２、エクソン３、エクソン４、エクソン５、エクソン６、エクソン７、エクソン８、エクソン９、エクソン１０、エクソン１１、エクソン１２、エクソン１３、エクソン１４、エクソン１５、エクソン１６、エクソン１７、エクソン１８、エクソン１９、エクソン２０、エクソン２１、エクソン２２、エクソン２３、エクソン２４、エクソン２５、エクソン２６、エクソン２７、エクソン２８、エクソン２９、エクソン３０、エクソン３１、エクソン３２、エクソン３３、エクソン３４、エクソン３５、エクソン３６、エクソン３７、エクソン３８、エクソン３９、エクソン４０、エクソン４１、エクソン４２、エクソン４３、エクソン４４、エクソン４５、エクソン４６、エクソン４７、エクソン４８、エクソン４９、エクソン５０、エクソン５１、エクソン５２、エクソン５３、エクソン５４、エクソン５５、エクソン５６、エクソン５７、エクソン５８、エクソン５９、エクソン６０、エクソン６１、エクソン６２、エクソン６３、エクソン６４、エクソン６５、エクソン６６、および／またはエクソン６７であってもよい。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子を使用して、エクソン１を標的とすることにより野生型および／または突然変異ＨＴＴがサイレンシングされ得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子を使用して、エクソン１以外のエクソンを標的とすることにより野生型および／または突然変異ＨＴＴがサイレンシングされ得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子を使用して、エクソン５０を標的とすることにより野生型および／または突然変異ＨＴＴがサイレンシングされ得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ分子を使用して、エクソン６７を標的とすることにより野生型および／または突然変異ＨＴＴがサイレンシングされ得る。
【０３１９】
ｓｉＲＮＡ修飾
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子は、前駆体またはＤＮＡとして送達されるのでない場合、限定はされないがインビボでのｓｉＲＮＡの安定性の増加など、ＲＮＡ分子の幾つかの特徴を調節するように化学的に修飾されてもよい。化学的に修飾されたｓｉＲＮＡ分子はヒトの治療適用において使用することができ、ｓｉＲＮＡ分子のＲＮＡｉ活性を損なうことなく改良される。非限定的な例として、センス鎖およびアンチセンス鎖の両方の３’末端および５’末端の両方で修飾されたｓｉＲＮＡ分子。
【０３２０】
一部の態様において、本発明のｓｉＲＮＡ二重鎖は、限定はされないが、糖修飾ヌクレオチド、核酸塩基修飾および／または骨格修飾など、１つ以上の修飾ヌクレオチドを含み得る。一部の態様において、ｓｉＲＮＡ分子は、組合せの修飾、例えば組合せの核酸塩基および骨格修飾を含み得る。
【０３２１】
一実施形態において、修飾ヌクレオチドは糖修飾ヌクレオチドであってもよい。糖修飾ヌクレオチドとしては、限定はされないが、２’−フルオロ、２’−アミノおよび２’−チオ修飾リボヌクレオチド、例えば２’−フルオロ修飾リボヌクレオチドが挙げられる。修飾ヌクレオチドは糖部分、ならびにリボシルでない糖類またはその類似体を有するヌクレオチドが修飾されてもよい。例えば、糖部分は、マンノース、アラビノース、グルコピラノース、ガラクトピラノース、４’−チオリボース、および他の糖類、複素環、または炭素環であってもよく、またはそれをベースとしてもよい。
【０３２２】
一実施形態において、修飾ヌクレオチドは核酸塩基修飾ヌクレオチドであってもよい。
一実施形態において、修飾ヌクレオチドは骨格修飾ヌクレオチドであってもよい。一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ二重鎖は骨格に他の修飾を更に含み得る。通常の「骨格」は、本明細書で使用されるとき、ＤＮＡまたはＲＮＡ分子における交互に繰り返す糖−リン酸配列を指す。デオキシリボース／リボース糖が３’−ヒドロキシル基および５’−ヒドロキシル基の両方においてエステル結合でリン酸基につなぎ合わされ、これは「リン酸ジエステル」結合／リンカーとしても知られる（ＰＯ連結）。ＰＯ骨格は「ホスホロチオエート骨格」として修飾されてもよい（ＰＳ連結）。ある場合には、天然のリン酸ジエステル結合がアミド結合によって置き換えられてもよく、但し２つの糖単位間の４つの原子は保たれる。かかるアミド修飾は、オリゴヌクレオチドの固相合成を促進し、ｓｉＲＮＡ相補体と形成された二重鎖の熱力学的安定性を増加させることができる。例えばメスマエカー（Ｍｅｓｍａｅｋｅｒ）ら著、ピュア・アンド・アプライド・ケミストリー（Ｐｕｒｅ  ＆  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．）、１９９７年、第３巻、ｐ．４３７〜４４０を参照のこと；この内容は全体として参照により本明細書に援用される。
【０３２３】
修飾塩基とは、１つ以上の原子または基の置換または付加によって修飾された、例えば、アデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、キサンチン、イノシン、およびキューオシンなどのヌクレオチド塩基を指す。核酸塩基部分に対する修飾の幾つかの例としては、限定はされないが、アルキル化、ハロゲン化、チオール化、アミノ化、アミド化、またはアセチル化塩基が、個別にまたは組合せで挙げられる。より具体的な例としては、例えば、５−プロピニルウリジン、５−プロピニルシチジン、６−メチルアデニン、６−メチルグアニン、Ｎ，Ｎ，−ジメチルアデニン、２−プロピルアデニン、２−プロピルグアニン、２−アミノアデニン、１−メチルイノシン、３−メチルウリジン、５−メチルシチジン、５−メチルウリジンおよび５位に修飾を有する他のヌクレオチド、５−（２−アミノ）プロピルウリジン、５−ハロシチジン、５−ハロウリジン、４−アセチルシチジン、１−メチルアデノシン、２−メチルアデノシン、３−メチルシチジン、６−メチルウリジン、２−メチルグアノシン、７−メチルグアノシン、２，２−ジメチルグアノシン、５−メチルアミノエチルウリジン、５−メチルオキシウリジン、デアザヌクレオチド、例えば７−デアザアデノシン、６−アゾウリジン、６−アゾシチジン、６−アゾチミジン、５−メチル−２−チオウリジン、他のチオ塩基、例えば２−チオウリジンおよび４−チオウリジンおよび２−チオシチジン、ジヒドロウリジン、プソイドウリジン、キューオシン、アーケオシン、ナフチルおよび置換ナフチル基、任意のＯ−およびＮ−アルキル化プリンおよびピリミジン、例えばＮ６−メチルアデノシン、５−メチルカルボニルメチルウリジン、ウリジン５−オキシ酢酸、ピリジン−４−オン、ピリジン−２−オン、フェニルおよび修飾フェニル基、例えばアミノフェノールまたは２，４，６−トリメトキシベンゼン、Ｇクランプヌクレオチドとして働く修飾シトシン、８−置換アデニンおよびグアニン、５−置換ウラシルおよびチミン、アザピリミジン、カルボキシヒドロキシアルキルヌクレオチド、カルボキシアルキルアミノアルキルヌクレオチド、およびアルキルカルボニルアルキル化ヌクレオチドが挙げられる。
【０３２４】
一実施形態において、修飾ヌクレオチドはセンス鎖上にだけあってもよい。
別の実施形態において、修飾ヌクレオチドはアンチセンス鎖上にだけあってもよい。
一部の実施形態において、修飾ヌクレオチドはセンス鎖およびアンチセンス鎖の両方にあってもよい。
【０３２５】
一部の実施形態において、化学的に修飾されたヌクレオチドは、アンチセンス鎖がＨＴＴ  ｍＲＮＡ配列などの標的ｍＲＮＡ配列と対合する能力に影響を及ぼさない。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ポリシストロン性分子であるｓｉＲＮＡ分子をコードし得る。加えてｓｉＲＮＡ分子はｓｉＲＮＡ分子の領域間に１つ以上のリンカーを含んでもよい。
【０３２６】
分子足場
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、分子足場もまた含む調節性ポリヌクレオチドにコードされてもよい。本明細書で使用されるとき「分子足場」は、それに対して後続の分子を設計または作製する配列または構造基盤を形成するフレームワークまたは出発分子である。
【０３２７】
一実施形態において、分子足場は少なくとも１つの５’フランキング領域を含む。非限定的な例として、５’フランキング領域は、任意の長さであってよい、かつ全体または一部が野生型ｍｉｃｒｏＲＮＡ配列に由来し得るか、または完全に人工的な配列であり得る５’フランキング配列を含み得る。
【０３２８】
一実施形態において、分子足場は少なくとも１つの３’フランキング領域を含む。非限定的な例として、３’フランキング領域は、任意の長さであってよい、かつ全体または一部が野生型ｍｉｃｒｏＲＮＡ配列に由来し得るか、または完全に人工的な配列であり得る３’フランキング配列を含み得る。
【０３２９】
一実施形態において、分子足場は少なくとも１つのループモチーフ領域を含む。非限定的な例として、ループモチーフ領域は、任意の長さであってよい配列を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、５’フランキング領域、ループモチーフ領域および／または３’フランキング領域を含む。
【０３３０】
一実施形態において、本明細書に記載される少なくとも１つのｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたは他のＲＮＡｉ剤は、少なくとも１つの分子足場もまた含む調節性ポリヌクレオチドによってコードされてもよい。分子足場は、任意の長さであってよい、かつ全体または一部が野生型ｍｉｃｒｏＲＮＡ配列に由来し得るか、または完全に人工的な配列であり得る５’フランキング配列を含み得る。３’フランキング配列はサイズおよび由来の点で５’フランキング配列および／またはある３’フランキング配列を反映し得る。いずれのフランキング配列も存在しないこともある。３’フランキング配列は任意選択で１つ以上のＣＮＮＣモチーフ（式中、「Ｎ」は任意のヌクレオチドを表す）を含有し得る。
【０３３１】
ステムループ構造のステムを形成することが、本明細書に記載される少なくとも１つのｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたは他のＲＮＡｉ剤をコードする調節性ポリヌクレオチドの最低条件（ｍｉｎｉｍｕｍ）である。一部の実施形態において、本明細書に記載されるｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたは他のＲＮＡｉ剤は、標的配列に部分的に相補性であるかまたはハイブリダイズすることになる少なくとも１つの核酸配列を含む。一部の実施形態において、ペイロードはｓｉＲＮＡ分子またはｓｉＲＮＡ分子の断片である。
【０３３２】
一部の実施形態において、調節性ポリヌクレオチドのステムループ構造の５’アームは、センス配列をコードする核酸配列を含む。調節性ポリヌクレオチドによってコードされ得るセンス配列、またはその断片もしくは変異体の非限定的な例は表３に記載する。
【０３３３】
一部の実施形態において、調節性ポリヌクレオチドのステムループの３’アームは、アンチセンス配列をコードする核酸配列を含む。アンチセンス配列は、一部の例では、最も５’側の末端に「Ｇ」ヌクレオチドを含む。調節性ポリヌクレオチドによってコードされ得るアンチセンス配列、またはその断片もしくは変異体の非限定的な例は表２に記載する。
【０３３４】
他の実施形態では、センス配列が調節性ポリヌクレオチドのステムループ構造のステムの３’アームにあってもよく、一方アンチセンス配列が５’アームにある。調節性ポリヌクレオチドによってコードされ得るセンス配列およびアンチセンス配列の非限定的な例は表２および表３に記載する。
【０３３５】
一実施形態において、センス配列とアンチセンス配列とは、それらの長さの実質的な部分にわたって完全に相補的であってもよい。他の実施形態においてセンス配列とアンチセンス配列とは、独立にそれらの鎖の長さの少なくとも５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、または９９％にわたって少なくとも７０、８０、９０、９５または９９％相補的であってもよい。
【０３３６】
センス配列の同一性も、アンチセンス配列の相同性も、標的配列と１００％相補的である必要はない。
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドのステムループ構造のセンス配列とアンチセンス配列とをループ配列（ループモチーフ、リンカーまたはリンカーモチーフとしても知られる）が分離している。ループ配列は、任意の長さ、４〜３０ヌクレオチド、４〜２０ヌクレオチド、４〜１５ヌクレオチド、５〜１５ヌクレオチド、６〜１２ヌクレオチド、６ヌクレオチド、７ヌクレオチド、８ヌクレオチド、９ヌクレオチド、１０ヌクレオチド、１１ヌクレオチド、１２ヌクレオチド、１３ヌクレオチド、１４ヌクレオチド、および／または１５ヌクレオチドであってもよい。
【０３３７】
一部の実施形態において、ループ配列は、少なくとも１つのＵＧＵＧモチーフをコードする核酸配列を含む。一部の実施形態において、ＵＧＵＧモチーフをコードする核酸配列は、ループ配列の５’末端に位置する。
【０３３８】
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドには、１つ以上のモジュール（例えば、５’フランキング領域、ループモチーフ領域、３’フランキング領域、センス配列、アンチセンス配列）を互いに分離するスペーサ領域が存在してもよい。かかるスペーサ領域は１つ以上存在してもよい。
【０３３９】
一実施形態において、センス配列とフランキング領域配列との間には、８〜２０、すなわち、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０ヌクレオチドのスペーサ領域が存在してもよい。
【０３４０】
一実施形態において、スペーサ領域の長さは１３ヌクレオチドであり、センス配列の５’末端とフランキング配列の３’末端との間に位置する。一実施形態において、スペーサは配列の約１ヘリカルターンを形成するのに十分な長さである。
【０３４１】
一実施形態において、アンチセンス配列とフランキング配列との間には、８〜２０、すなわち、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０ヌクレオチドのスペーサ領域が存在してもよい。
【０３４２】
一実施形態において、スペーサ配列は１０〜１３、すなわち、１０、１１、１２または１３ヌクレオチドであり、アンチセンス配列の３’末端とフランキング配列の５’末端との間に位置する。一実施形態において、スペーサは配列の約１ヘリカルターンを形成するのに十分な長さである。
【０３４３】
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドの分子足場は、５’から３’方向に、５’フランキング配列、５’アーム、ループモチーフ、３’アームおよび３’フランキング配列を含む。非限定的な例として、５’アームが、センス配列をコードする核酸配列を含んでいてもよく、３’アームが、アンチセンス配列をコードする核酸配列を含む。別の非限定的な例では、５’アームがアンチセンス配列をコードする核酸配列を含み、３’アームがセンス配列をコードする核酸配列を含む。
【０３４４】
一実施形態において、５’アーム、センスおよび／またはアンチセンス配列、ループモチーフおよび／または３’アーム配列は改変されてもよい（例えば、１ヌクレオチド以上の置換、ヌクレオチドの付加および／またはヌクレオチドの欠失）。改変はコンストラクトの機能に有益な変化を生じさせ得る（例えば、標的配列のノックダウンを増加させ、コンストラクトの分解を低減し、オフターゲット効果を低減し、ペイロードの効率を増加させ、およびペイロードの分解を低減し得る）。
【０３４５】
一実施形態において、ガイド鎖（本明細書ではアンチセンス鎖とも称される）の切出し率をパッセンジャー鎖（本明細書ではセンス鎖とも称される）の切出し率よりも高くするため、調節性ポリヌクレオチドの分子足場が配列される。ガイド鎖またはパッセンジャー鎖の切出し率は、独立に、１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超であり得る。非限定的な例として、ガイド鎖の切出し率は少なくとも８０％である。別の非限定的な例として、ガイド鎖の切出し率は少なくとも９０％である。
【０３４６】
一実施形態において、ガイド鎖の切出し率はパッセンジャー鎖の切出し率よりも高い。一態様において、ガイド鎖の切出し率は、パッセンジャー鎖よりも少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超高くてもよい。
【０３４７】
一実施形態において、ガイド鎖の切出し効率は、少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または９９％超である。非限定的な例として、ガイド鎖の切出し効率は８０％よりも高い。
【０３４８】
一実施形態において、分子足場からのガイド鎖の切出し効率はパッセンジャー鎖の切出しよりも高い。分子足場からのガイド鎖の切出しは、パッセンジャー鎖の切出しよりも２、３、４、５、６、７、８、９、１０倍または１０倍超高効率であり得る。
【０３４９】
一実施形態において、分子足場は二重機能ターゲティング調節性ポリヌクレオチドを含む。本明細書で使用されるとき、「二重機能ターゲティング」調節性ポリヌクレオチドは、ガイド鎖およびパッセンジャー鎖の両方が同じ標的をノックダウンするポリヌクレオチド、またはガイド鎖およびパッセンジャー鎖が異なる標的をノックダウンするポリヌクレオチドである。
【０３５０】
一実施形態において、本明細書に記載される調節性ポリヌクレオチドの分子足場は、５’フランキング領域、ループモチーフ領域および３’フランキング領域を含み得る。本明細書に記載される調節性ポリヌクレオチドに使用され得るまたは使用されるそれらの断片であり得る５’フランキング領域、ループモチーフ領域（リンカー領域とも称され得る）および３’フランキング領域の配列の非限定的な例は、表７〜表９に示される。
【０３５１】
【表７】
2020518259.tif 000047
【０３５２】
【表８】
2020518259.tif 000048
【０３５３】
【表９】
2020518259.tif 000049
一実施形態において、分子足場は、表７に挙げられる少なくとも１つの５’フランキング領域、断片、またはその変異体を含み得る。非限定的な例として、５’フランキング領域は、５Ｆ１、５Ｆ２、５Ｆ３、５Ｆ４、５Ｆ５、５Ｆ６、または５Ｆ７であってもよい。
【０３５４】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ１フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ２フランキング領域を含み得る。
【０３５５】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ４フランキング領域を含み得る。
【０３５６】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ５フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ６フランキング領域を含み得る。
【０３５７】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ７フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、表８に挙げられる少なくとも１つのループモチーフ領域、その断片または変異体を含み得る。非限定的な例として、ループモチーフ領域は、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ｌ５、Ｌ６、Ｌ７、またはＬ８であってもよい。
【０３５８】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ１ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ２ループモチーフ領域を含み得る。
【０３５９】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ３ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域を含み得る。
【０３６０】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ５ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ６ループモチーフ領域を含み得る。
【０３６１】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ７ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ８ループモチーフ領域を含み得る。
【０３６２】
一実施形態において、分子足場は、表９に挙げられる少なくとも１つの３’フランキング領域、断片、またはその変異体を含み得る。非限定的な例として、３’フランキング領域は、３Ｆ１、３Ｆ２、３Ｆ３、３Ｆ４、または３Ｆ５であってもよい。
【０３６３】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの３Ｆ１フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの３Ｆ２フランキング領域を含み得る。
【０３６４】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの３Ｆ３フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの３Ｆ４フランキング領域を含み得る。
【０３６５】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの３Ｆ５フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、表７および表８に記載されるとおりの、少なくとも１つの５’フランキング領域、その断片または変異体と、少なくとも１つのループモチーフ領域、その断片または変異体とを含み得る。非限定的な例として、５’フランキング領域およびループモチーフ領域は、５Ｆ１およびＬ１、５Ｆ１およびＬ２、５Ｆ１およびＬ３、５Ｆ１およびＬ４、５Ｆ１およびＬ５、５Ｆ１およびＬ６、５Ｆ１およびＬ７、５Ｆ１およびＬ８、５Ｆ２およびＬ１、５Ｆ２およびＬ２、５Ｆ２およびＬ３、５Ｆ２およびＬ４、５Ｆ２およびＬ５、５Ｆ２およびＬ６、５Ｆ２およびＬ７、５Ｆ２およびＬ８、５Ｆ３およびＬ１、５Ｆ３およびＬ２、５Ｆ３およびＬ３、５Ｆ３およびＬ４、５Ｆ３およびＬ５、５Ｆ３およびＬ６、５Ｆ３およびＬ７、５Ｆ３およびＬ８、５Ｆ４およびＬ１、５Ｆ４およびＬ２、５Ｆ４およびＬ３、５Ｆ４およびＬ４、５Ｆ４およびＬ５、５Ｆ４およびＬ６、５Ｆ４およびＬ７、５Ｆ４およびＬ８、５Ｆ５およびＬ１、５Ｆ５およびＬ２、５Ｆ５およびＬ３、５Ｆ５およびＬ４、５Ｆ５およびＬ５、５Ｆ５およびＬ６、５Ｆ５およびＬ７、５Ｆ５およびＬ８、５Ｆ６およびＬ１、５Ｆ６およびＬ２、５Ｆ６およびＬ３、５Ｆ６およびＬ４、５Ｆ６およびＬ５、５Ｆ６およびＬ６、５Ｆ６およびＬ７、５Ｆ６およびＬ８、５Ｆ７およびＬ１、５Ｆ７およびＬ２、５Ｆ７およびＬ３、５Ｆ７およびＬ４、５Ｆ７およびＬ５、５Ｆ７およびＬ６、５Ｆ７およびＬ７、ならびに５Ｆ７およびＬ８であってもよい。
【０３６６】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ２フランキング領域および少なくとも１つのＬ１ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ１フランキング領域および少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域を含み得る。
【０３６７】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ７フランキング領域および少なくとも１つのＬ８ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３フランキング領域および少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域を含み得る。
【０３６８】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３フランキング領域および少なくとも１つのＬ５ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ４フランキング領域および少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域を含み得る。
【０３６９】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３フランキング領域および少なくとも１つのＬ７ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ５フランキング領域および少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域を含み得る。
【０３７０】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ６フランキング領域および少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３フランキング領域および少なくとも１つのＬ６ループモチーフ領域を含み得る。
【０３７１】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ７フランキング領域および少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ２フランキング領域および少なくとも１つのＬ２ループモチーフ領域を含み得る。
【０３７２】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ１フランキング領域および少なくとも１つのＬ１ループモチーフ領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ１フランキング領域および少なくとも１つのＬ２ループモチーフ領域を含み得る。
【０３７３】
一実施形態において、分子足場は、表８および表９に記載されるとおりの、少なくとも１つの３’フランキング領域、その断片または変異体と、少なくとも１つのループモチーフ領域、その断片または変異体とを含み得る。非限定的な例として、３’フランキング領域およびループモチーフ領域は、３Ｆ１およびＬ１、３Ｆ１およびＬ２、３Ｆ１およびＬ３、３Ｆ１およびＬ４、３Ｆ１およびＬ５、３Ｆ１およびＬ６、３Ｆ１およびＬ７、３Ｆ１およびＬ８、３Ｆ２およびＬ１、３Ｆ２およびＬ２、３Ｆ２およびＬ３、３Ｆ２およびＬ４、３Ｆ２およびＬ５、３Ｆ２およびＬ６、３Ｆ２およびＬ７、３Ｆ２およびＬ８、３Ｆ３およびＬ１、３Ｆ３およびＬ２、３Ｆ３およびＬ３、３Ｆ３およびＬ４、３Ｆ３およびＬ５、３Ｆ３およびＬ６、３Ｆ３およびＬ７、３Ｆ３およびＬ８、３Ｆ４およびＬ１、３Ｆ４およびＬ２、３Ｆ４およびＬ３、３Ｆ４およびＬ４、３Ｆ４およびＬ５、３Ｆ４およびＬ６、３Ｆ４およびＬ７、３Ｆ４およびＬ８、３Ｆ５およびＬ１、３Ｆ５およびＬ２、３Ｆ５およびＬ３、３Ｆ５およびＬ４、３Ｆ５およびＬ５、３Ｆ５およびＬ６、３Ｆ５およびＬ７、ならびに３Ｆ５およびＬ８であってもよい。
【０３７４】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ１ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ２フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ１フランキング領域を含み得る。
【０３７５】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ８ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ５フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ５ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ１フランキング領域を含み得る。
【０３７６】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ４フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ７ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ１フランキング領域を含み得る。
【０３７７】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ６ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ１フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ５フランキング領域を含み得る。
【０３７８】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ２ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ２フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ１ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ３フランキング領域を含み得る。
【０３７９】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ５ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ４フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ１ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ１フランキング領域を含み得る。
【０３８０】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つのＬ２ループモチーフ領域および少なくとも１つの３Ｆ１フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、表７および表９に記載されるとおりの、少なくとも１つの５’フランキング領域、その断片または変異体と、少なくとも１つの３’フランキング領域、その断片または変異体とを含み得る。非限定的な例として、フランキング領域は、５Ｆ１および３Ｆ１、５Ｆ１および３Ｆ２、５Ｆ１および３Ｆ３、５Ｆ１および３Ｆ４、５Ｆ１および３Ｆ５、５Ｆ２および３Ｆ１、５Ｆ２および３Ｆ２、５Ｆ２および３Ｆ３、５Ｆ２および３Ｆ４、５Ｆ２および３Ｆ５、５Ｆ３および３Ｆ１、５Ｆ３および３Ｆ２、５Ｆ３および３Ｆ３、５Ｆ３および３Ｆ４、５Ｆ３および３Ｆ５、５Ｆ４および３Ｆ１、５Ｆ４および３Ｆ２、５Ｆ４および３Ｆ３、５Ｆ４および３Ｆ４、５Ｆ４および３Ｆ５、５Ｆ５および３Ｆ１、５Ｆ５および３Ｆ２、５Ｆ５および３Ｆ３、５Ｆ５および３Ｆ４、５Ｆ５および３Ｆ５、５Ｆ６および３Ｆ１、５Ｆ６および３Ｆ２、５Ｆ６および３Ｆ３、５Ｆ６および３Ｆ４、５Ｆ６および３Ｆ５、５Ｆ７および３Ｆ１、５Ｆ７および３Ｆ２、５Ｆ７および３Ｆ３、５Ｆ７および３Ｆ４、ならびに５Ｆ７および３Ｆ５であってもよい。
【０３８１】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ２  ５’フランキング領域および少なくとも１つの３Ｆ２  ３’フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ１  ５’フランキング領域および少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域を含み得る。
【０３８２】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ７  ５’フランキング領域および少なくとも１つの３Ｆ５  ３’フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３  ５’フランキング領域および少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域を含み得る。
【０３８３】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ４  ５’フランキング領域および少なくとも１つの３Ｆ４  ３’フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ５  ５’フランキング領域および少なくとも１つの３Ｆ４  ３’フランキング領域を含み得る。
【０３８４】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ６  ５’フランキング領域および少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ２  ５’フランキング領域および少なくとも１つの３Ｆ３  ３’フランキング領域を含み得る。
【０３８５】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３  ５’フランキング領域および少なくとも１つの３Ｆ４  ３’フランキング領域を含み得る。
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ１  ５’フランキング領域および少なくとも１つの３Ｆ２  ３’フランキング領域を含み得る。
【０３８６】
一実施形態において、分子足場は、表７〜表９に記載されるとおりの、少なくとも１つの５’フランキング領域、その断片または変異体と、少なくとも１つのループモチーフ領域、その断片または変異体と、少なくとも１つの３’フランキング領域、その断片または変異体とを含み得る。非限定的な例として、フランキング領域およびループモチーフ領域は、５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ１および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ２および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ３および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ４および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ５および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ６および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ６および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ６および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ６および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ６および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ６および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ６および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ６および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ６および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ６および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ６および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ６および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ６および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ６および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ６および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ６および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ６および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ６および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ６および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ６および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ６および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ６および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ６および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ６および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ６および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ６および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ６および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ６および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ６および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ６および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ６および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ６および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ６および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ６および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ６および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ７および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ７および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ７および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ７および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ７および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ７および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ７および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ７および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ７および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ７および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ７および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ７および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ７および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ７および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ７および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ７および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ７および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ７および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ７および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ７および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ７および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ７および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ７および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ７および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ７および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ７および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ７および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ７および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ７および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ７および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ７および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ７および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ７および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ７および３Ｆ４；５Ｆ７、Ｌ７および３Ｆ５；５Ｆ１、Ｌ８および３Ｆ１；５Ｆ１、Ｌ８および３Ｆ２；５Ｆ１、Ｌ８および３Ｆ３；５Ｆ１、Ｌ８および３Ｆ４；５Ｆ１、Ｌ８および３Ｆ５；５Ｆ２、Ｌ８および３Ｆ１；５Ｆ２、Ｌ８および３Ｆ２；５Ｆ２、Ｌ８および３Ｆ３；５Ｆ２、Ｌ８および３Ｆ４；５Ｆ２、Ｌ８および３Ｆ５；５Ｆ３、Ｌ８および３Ｆ１；５Ｆ３、Ｌ８および３Ｆ２；５Ｆ３、Ｌ８および３Ｆ３；５Ｆ３、Ｌ８および３Ｆ４；５Ｆ３、Ｌ８および３Ｆ５；５Ｆ４、Ｌ８および３Ｆ１；５Ｆ４、Ｌ８および３Ｆ２；５Ｆ４、Ｌ８および３Ｆ３；５Ｆ４、Ｌ８および３Ｆ４；５Ｆ４、Ｌ８および３Ｆ５；５Ｆ５、Ｌ８および３Ｆ１；５Ｆ５、Ｌ８および３Ｆ２；５Ｆ５、Ｌ８および３Ｆ３；５Ｆ５、Ｌ８および３Ｆ４；５Ｆ５、Ｌ８および３Ｆ５；５Ｆ６、Ｌ８および３Ｆ１；５Ｆ６、Ｌ８および３Ｆ２；５Ｆ６、Ｌ８および３Ｆ３；５Ｆ６、Ｌ８および３Ｆ４；５Ｆ６、Ｌ８および３Ｆ５；５Ｆ７、Ｌ８および３Ｆ１；５Ｆ７、Ｌ８および３Ｆ２；５Ｆ７、Ｌ８および３Ｆ３；５Ｆ７、Ｌ８および３Ｆ４；および５Ｆ７、Ｌ８および３Ｆ５であってもよい。
【０３８７】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ２  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ１ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ２  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３８８】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ１  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３８９】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ７  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ８ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ５  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３９０】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３９１】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ５ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３９２】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ４  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ４  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３９３】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ７ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３９４】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ５  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ４  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３９５】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ６  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３９６】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ６ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３９７】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ７  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ４ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ５  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３９８】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ２  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ２ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ２  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０３９９】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ２  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ１ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ３  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０４００】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ３  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ５ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ４  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０４０１】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ１  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ１ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０４０２】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ１  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ２ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ１  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０４０３】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ１  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ１ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ２  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０４０４】
一実施形態において、分子足場は、少なくとも１つの５Ｆ２  ５’フランキング領域と、少なくとも１つのＬ３ループモチーフ領域と、少なくとも１つの３Ｆ３  ３’フランキング領域とを含み得る。
【０４０５】
一実施形態において、分子足場は天然のｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ足場であってもよい。非限定的な例として、分子足場は、ヒトｍｉＲ１５５足場に由来する足場であってもよい。
一実施形態において、分子足場は当該技術分野において公知の１つ以上のリンカーを含み得る。リンカーは、領域間を、または１つの分子足場を別の分子足場と分離し得る。非限定的な例として、分子足場はポリシストロン性であってもよい。
【０４０６】
分子足場と、ＨＴＴを標的とするｓｉＲＮＡ分子とを含む調節性ポリヌクレオチド
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドは、表１０および表１１に記載されるとおりの、５’および３’フランキング領域と、ループモチーフ領域と、センス配列およびアンチセンス配列をコードする核酸配列とを含み得る。表１０および表１１には、パッセンジャー鎖およびガイド鎖ならびに５’および３’フランキング領域およびループ領域（リンカー領域とも称される）のＤＮＡ配列識別名が記載される。表１０および表１１において、配列名の「ｍｉＲ」成分は必ずしもｍｉＲＮＡ遺伝子の配列の付番に対応するわけではない（例えば、ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０２が配列名であるが、必ずしもｍｉＲ−１０２がその配列の一部であることを意味するわけではない）。
【０４０７】
【表１０−１】
2020518259.tif 000050
【０４０８】
【表１０−２】
2020518259.tif 000051
【０４０９】
【表１１】
2020518259.tif 000052
調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、調節性ポリヌクレオチド配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含む。かかる実施形態において、２つ以上のポリペプチドをコードするウイルスゲノムが、ウイルス粒子へと複製またはパッケージングされ得る。調節性ポリヌクレオチドを含むウイルス粒子で形質導入された標的細胞は、単一細胞中でコード化センスおよび／またはアンチセンス配列を発現し得る。
【０４１０】
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、神経学的疾患および／または障害を治療、予防、緩和、または改善するための医学分野に有用である。
調節性ポリヌクレオチド配列を含むペイロード領域を有するウイルスゲノムを含むＡＡＶ粒子のＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表１２に記載される。
【０４１１】
【表１２】
2020518259.tif 000053
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、配列番号１３５２〜１３７９、１３８８、および１４２６〜１４３８のいずれかに対して同一性パーセントを有する配列を含むウイルスゲノムを含む。ウイルスゲノムは、配列番号１３５２〜１３７９、１３８８、および１４２６〜１４３８のいずれかに対して１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％の同一性を有していてもよい。ウイルスゲノムは、配列番号１３５２〜１３７９、１３８８、および１４２６〜１４３８のいずれかに対して１〜１０％、１０〜２０％、３０〜４０％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９９％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９９％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９９％、７０〜１００％、８０〜８５％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜９９％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜９９％、または９０〜１００％を有していてもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、配列番号１３５２〜１３７９、１３８８、および１４２６〜１４３８のいずれかに対して８０％同一性である配列を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、配列番号１３５２〜１３７９、１３８８、および１４２６〜１４３８のいずれかに対して８５％同一性である配列を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、配列番号１３５２〜１３７９、１３８８、および１４２６〜１４３８のいずれかに対して９０％同一性である配列を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、配列番号１３５２〜１３７９、１３８８、および１４２６〜１４３８のいずれかに対して９５％同一性である配列を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、配列番号１３５２〜１３７９、１３８８、および１４２６〜１４３８のいずれかに対して９９％同一性である配列を含む。
【０４１２】
一実施形態において、少なくとも１つのｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む調節性ポリヌクレオチド配列を含むＡＡＶ粒子を、哺乳類細胞に導入し得る。
ＡＡＶ粒子ペイロード領域が調節性ポリヌクレオチドを含む場合、調節性ポリヌクレオチドは、標的遺伝子をノックダウンするためのセンス配列および／またはアンチセンス配列を含み得る。本明細書に記載される調節性ポリヌクレオチドをコードするＡＡＶウイルスゲノムは、ヒト疾患、ウイルス、感染症、獣医学的応用の分野、ならびに様々なインビボおよびインビトロ設定において有用であり得る。
【０４１３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）領域を含み得る。ＩＴＲ領域は、独立に、限定はされないが、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、および１７５ヌクレオチドなどの長さを有していてもよい。ウイルスゲノムのＩＴＲ領域の長さは、７５〜８０、７５〜８５、７５〜１００、８０〜８５、８０〜９０、８０〜１０５、８５〜９０、８５〜９５、８５〜１１０、９０〜９５、９０〜１００、９０〜１１５、９５〜１００、９５〜１０５、９５〜１２０、１００〜１０５、１００〜１１０、１００〜１２５、１０５〜１１０、１０５〜１１５、１０５〜１３０、１１０〜１１５、１１０〜１２０、１１０〜１３５、１１５〜１２０、１１５〜１２５、１１５〜１４０、１２０〜１２５、１２０〜１３０、１２０〜１４５、１２５〜１３０、１２５〜１３５、１２５〜１５０、１３０〜１３５、１３０〜１４０、１３０〜１５５、１３５〜１４０、１３５〜１４５、１３５〜１６０、１４０〜１４５、１４０〜１５０、１４０〜１６５、１４５〜１５０、１４５〜１５５、１４５〜１７０、１５０〜１５５、１５０〜１６０、１５０〜１７５、１５５〜１６０、１５５〜１６５、１６０〜１６５、１６０〜１７０、１６５〜１７０、１６５〜１７５、および１７０〜１７５ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０５ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１４１ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１３０ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。
【０４１４】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つの末端逆位配列（ＩＴＲ）領域を含み得る。ＩＴＲ領域の各々は、独立に、限定はされないが、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、および１７５ヌクレオチドなどの長さを有していてもよい。ウイルスゲノムのＩＴＲ領域の長さは、７５〜８０、７５〜８５、７５〜１００、８０〜８５、８０〜９０、８０〜１０５、８５〜９０、８５〜９５、８５〜１１０、９０〜９５、９０〜１００、９０〜１１５、９５〜１００、９５〜１０５、９５〜１２０、１００〜１０５、１００〜１１０、１００〜１２５、１０５〜１１０、１０５〜１１５、１０５〜１３０、１１０〜１１５、１１０〜１２０、１１０〜１３５、１１５〜１２０、１１５〜１２５、１１５〜１４０、１２０〜１２５、１２０〜１３０、１２０〜１４５、１２５〜１３０、１２５〜１３５、１２５〜１５０、１３０〜１３５、１３０〜１４０、１３０〜１５５、１３５〜１４０、１３５〜１４５、１３５〜１６０、１４０〜１４５、１４０〜１５０、１４０〜１６５、１４５〜１５０、１４５〜１５５、１４５〜１７０、１５０〜１５５、１５０〜１６０、１５０〜１７５、１５５〜１６０、１５５〜１６５、１６０〜１６５、１６０〜１７０、１６５〜１７０、１６５〜１７５、および１７０〜１７５ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０５ヌクレオチド長および１４１ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０５ヌクレオチド長および１３０ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１３０ヌクレオチド長および１４１ヌクレオチド長であるＩＴＲを含む。
【０４１５】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、表１３〜表２０に記載されるとおりの少なくとも１つの配列領域を含み得る。領域は、本明細書に記載される他の配列領域のいずれかの前または後に位置していてもよい。
【０４１６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）領域を含み得る。ＩＴＲ配列領域の非限定的な例は、表１３に記載される。
【０４１７】
【表１３】
2020518259.tif 000054
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つのＩＴＲ領域を含む。一実施形態において、ＩＴＲ配列領域は、ＩＴＲ１配列領域およびＩＴＲ３配列領域である。一実施形態において、ＩＴＲ配列領域は、ＩＴＲ１配列領域およびＩＴＲ４配列領域である。一実施形態において、ＩＴＲ配列領域は、ＩＴＲ２配列領域およびＩＴＲ３配列領域である。一実施形態において、ＩＴＲ配列領域は、ＩＴＲ２配列領域およびＩＴＲ４配列領域である。
【０４１８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域を含み得る。ＭＣＳ領域は、独立に、限定はされないが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、および１５０ヌクレオチドなどの長さを有していてもよい。ウイルスゲノムのＭＣＳ領域の長さは、２〜１０、５〜１０、５〜１５、１０〜２０、１０〜３０、１０〜４０、１５〜２０、１５〜２５、２０〜３０、２０〜４０、２０〜５０、２５〜３０、２５〜３５、３０〜４０、３０〜５０、３０〜６０、３５〜４０、３５〜４５、４０〜５０、４０〜６０、４０〜７０、４５〜５０、４５〜５５、５０〜６０、５０〜７０、５０〜８０、５５〜６０、５５〜６５、６０〜７０、６０〜８０、６０〜９０、６５〜７０、６５〜７５、７０〜８０、７０〜９０、７０〜１００、７５〜８０、７５〜８５、８０〜９０、８０〜１００、８０〜１１０、８５〜９０、８５〜９５、９０〜１００、９０〜１１０、９０〜１２０、９５〜１００、９５〜１０５、１００〜１１０、１００〜１２０、１００〜１３０、１０５〜１１０、１０５〜１１５、１１０〜１２０、１１０〜１３０、１１０〜１４０、１１５〜１２０、１１５〜１２５、１２０〜１３０、１２０〜１４０、１２０〜１５０、１２５〜１３０、１２５〜１３５、１３０〜１４０、１３０〜１５０、１３５〜１４０、１３５〜１４５、１４０〜１５０、および１４５〜１５０ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約５ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１４ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１８ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約７３ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１２１ヌクレオチド長であるＭＣＳ領域を含む。
【０４１９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域を含む。ＭＣＳ配列領域の非限定的な例は、表１４に記載される。
【０４２０】
【表１４】
2020518259.tif 000055
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、１つのＭＣＳ配列領域を含む。一実施形態において、ＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域である。一実施形態において、ＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域である。一実施形態において、ＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ３配列領域である。一実施形態において、ＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ４配列領域である。一実施形態において、ＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、ＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ６配列領域である。
【０４２１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つのＭＣＳ領域を含む。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域およびＭＣＳ２配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域およびＭＣＳ３配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域およびＭＣＳ４配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域およびＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域およびＭＣＳ３配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域およびＭＣＳ４配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域およびＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ３配列領域およびＭＣＳ４配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ３配列領域およびＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ３配列領域およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ４配列領域およびＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ４配列領域およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、２つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ５配列領域およびＭＣＳ６配列領域である。
【０４２２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つ以上のＭＣＳ配列領域を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、３つのＭＣＳ配列領域を含む。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域、ＭＣＳ２配列領域、およびＭＣＳ３配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域、ＭＣＳ２配列領域、およびＭＣＳ４配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域、ＭＣＳ２配列領域、およびＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域、ＭＣＳ２配列領域、およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域、ＭＣＳ３配列領域、およびＭＣＳ４配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域、ＭＣＳ３配列領域、およびＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域、ＭＣＳ３配列領域、およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域、ＭＣＳ４配列領域、およびＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域、ＭＣＳ４配列領域、およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ１配列領域、ＭＣＳ５配列領域、およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域、ＭＣＳ３配列領域、およびＭＣＳ４配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域、ＭＣＳ３配列領域、およびＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域、ＭＣＳ３配列領域、およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域、ＭＣＳ４配列領域、およびＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域、ＭＣＳ４配列領域、およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ２配列領域、ＭＣＳ５配列領域、およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ３配列領域、ＭＣＳ４配列領域、およびＭＣＳ５配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ３配列領域、ＭＣＳ４配列領域、およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ３配列領域、ＭＣＳ５配列領域、およびＭＣＳ６配列領域である。一実施形態において、３つのＭＣＳ配列領域は、ＭＣＳ４配列領域、ＭＣＳ５配列領域、およびＭＣＳ６配列領域である。
【０４２３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つの多重フィラー配列領域を含み得る。フィラー領域は、独立に、限定はされないが、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、５００、５０１、５０２、５０３、５０４、５０５、５０６、５０７、５０８、５０９、５１０、５１１、５１２、５１３、５１４、５１５、５１６、５１７、５１８、５１９、５２０、５２１、５２２、５２３、５２４、５２５、５２６、５２７、５２８、５２９、５３０、５３１、５３２、５３３、５３４、５３５、５３６、５３７、５３８、５３９、５４０、５４１、５４２、５４３、５４４、５４５、５４６、５４７、５４８、５４９、５５０、５５１、５５２、５５３、５５４、５５５、５５６、５５７、５５８、５５９、５６０、５６１、５６２、５６３、５６４、５６５、５６６、５６７、５６８、５６９、５７０、５７１、５７２、５７３、５７４、５７５、５７６、５７７、５７８、５７９、５８０、５８１、５８２、５８３、５８４、５８５、５８６、５８７、５８８、５８９、５９０、５９１、５９２、５９３、５９４、５９５、５９６、５９７、５９８、５９９、６００、６０１、６０２、６０３、６０４、６０５、６０６、６０７、６０８、６０９、６１０、６１１、６１２、６１３、６１４、６１５、６１６、６１７、６１８、６１９、６２０、６２１、６２２、６２３、６２４、６２５、６２６、６２７、６２８、６２９、６３０、６３１、６３２、６３３、６３４、６３５、６３６、６３７、６３８、６３９、６４０、６４１、６４２、６４３、６４４、６４５、６４６、６４７、６４８、６４９、６５０、６５１、６５２、６５３、６５４、６５５、６５６、６５７、６５８、６５９、６６０、６６１、６６２、６６３、６６４、６６５、６６６、６６７、６６８、６６９、６７０、６７１、６７２、６７３、６７４、６７５、６７６、６７７、６７８、６７９、６８０、６８１、６８２、６８３、６８４、６８５、６８６、６８７、６８８、６８９、６９０、６９１、６９２、６９３、６９４、６９５、６９６、６９７、６９８、６９９、７００、７０１、７０２、７０３、７０４、７０５、７０６、７０７、７０８、７０９、７１０、７１１、７１２、７１３、７１４、７１５、７１６、７１７、７１８、７１９、７２０、７２１、７２２、７２３、７２４、７２５、７２６、７２７、７２８、７２９、７３０、７３１、７３２、７３３、７３４、７３５、７３６、７３７、７３８、７３９、７４０、７４１、７４２、７４３、７４４、７４５、７４６、７４７、７４８、７４９、７５０、７５１、７５２、７５３、７５４、７５５、７５６、７５７、７５８、７５９、７６０、７６１、７６２、７６３、７６４、７６５、７６６、７６７、７６８、７６９、７７０、７７１、７７２、７７３、７７４、７７５、７７６、７７７、７７８、７７９、７８０、７８１、７８２、７８３、７８４、７８５、７８６、７８７、７８８、７８９、７９０、７９１、７９２、７９３、７９４、７９５、７９６、７９７、７９８、７９９、８００、８０１、８０２、８０３、８０４、８０５、８０６、８０７、８０８、８０９、８１０、８１１、８１２、８１３、８１４、８１５、８１６、８１７、８１８、８１９、８２０、８２１、８２２、８２３、８２４、８２５、８２６、８２７、８２８、８２９、８３０、８３１、８３２、８３３、８３４、８３５、８３６、８３７、８３８、８３９、８４０、８４１、８４２、８４３、８４４、８４５、８４６、８４７、８４８、８４９、８５０、８５１、８５２、８５３、８５４、８５５、８５６、８５７、８５８、８５９、８６０、８６１、８６２、８６３、８６４、８６５、８６６、８６７、８６８、８６９、８７０、８７１、８７２、８７３、８７４、８７５、８７６、８７７、８７８、８７９、８８０、８８１、８８２、８８３、８８４、８８５、８８６、８８７、８８８、８８９、８９０、８９１、８９２、８９３、８９４、８９５、８９６、８９７、８９８、８９９、９００、９０１、９０２、９０３、９０４、９０５、９０６、９０７、９０８、９０９、９１０、９１１、９１２、９１３、９１４、９１５、９１６、９１７、９１８、９１９、９２０、９２１、９２２、９２３、９２４、９２５、９２６、９２７、９２８、９２９、９３０、９３１、９３２、９３３、９３４、９３５、９３６、９３７、９３８、９３９、９４０、９４１、９４２、９４３、９４４、９４５、９４６、９４７、９４８、９４９、９５０、９５１、９５２、９５３、９５４、９５５、９５６、９５７、９５８、９５９、９６０、９６１、９６２、９６３、９６４、９６５、９６６、９６７、９６８、９６９、９７０、９７１、９７２、９７３、９７４、９７５、９７６、９７７、９７８、９７９、９８０、９８１、９８２、９８３、９８４、９８５、９８６、９８７、９８８、９８９、９９０、９９１、９９２、９９３、９９４、９９５、９９６、９９７、９９８、９９９、１０００、１００１、１００２、１００３、１００４、１００５、１００６、１００７、１００８、１００９、１０１０、１０１１、１０１２、１０１３、１０１４、１０１５、１０１６、１０１７、１０１８、１０１９、１０２０、１０２１、１０２２、１０２３、１０２４、１０２５、１０２６、１０２７、１０２８、１０２９、１０３０、１０３１、１０３２、１０３３、１０３４、１０３５、１０３６、１０３７、１０３８、１０３９、１０４０、１０４１、１０４２、１０４３、１０４４、１０４５、１０４６、１０４７、１０４８、１０４９、１０５０、１０５１、１０５２、１０５３、１０５４、１０５５、１０５６、１０５７、１０５８、１０５９、１０６０、１０６１、１０６２、１０６３、１０６４、１０６５、１０６６、１０６７、１０６８、１０６９、１０７０、１０７１、１０７２、１０７３、１０７４、１０７５、１０７６、１０７７、１０７８、１０７９、１０８０、１０８１、１０８２、１０８３、１０８４、１０８５、１０８６、１０８７、１０８８、１０８９、１０９０、１０９１、１０９２、１０９３、１０９４、１０９５、１０９６、１０９７、１０９８、１０９９、１１００、１１０１、１１０２、１１０３、１１０４、１１０５、１１０６、１１０７、１１０８、１１０９、１１１０、１１１１、１１１２、１１１３、１１１４、１１１５、１１１６、１１１７、１１１８、１１１９、１１２０、１１２１、１１２２、１１２３、１１２４、１１２５、１１２６、１１２７、１１２８、１１２９、１１３０、１１３１、１１３２、１１３３、１１３４、１１３５、１１３６、１１３７、１１３８、１１３９、１１４０、１１４１、１１４２、１１４３、１１４４、１１４５、１１４６、１１４７、１１４８、１１４９、１１５０、１１５１、１１５２、１１５３、１１５４、１１５５、１１５６、１１５７、１１５８、１１５９、１１６０、１１６１、１１６２、１１６３、１１６４、１１６５、１１６６、１１６７、１１６８、１１６９、１１７０、１１７１、１１７２、１１７３、１１７４、１１７５、１１７６、１１７７、１１７８、１１７９、１１８０、１１８１、１１８２、１１８３、１１８４、１１８５、１１８６、１１８７、１１８８、１１８９、１１９０、１１９１、１１９２、１１９３、１１９４、１１９５、１１９６、１１９７、１１９８、１１９９、１２００、１２０１、１２０２、１２０３、１２０４、１２０５、１２０６、１２０７、１２０８、１２０９、１２１０、１２１１、１２１２、１２１３、１２１４、１２１５、１２１６、１２１７、１２１８、１２１９、１２２０、１２２１、１２２２、１２２３、１２２４、１２２５、１２２６、１２２７、１２２８、１２２９、１２３０、１２３１、１２３２、１２３３、１２３４、１２３５、１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８４、２２８５、２２８６、２２８７、２２８８、２２８９、２２９０、２２９１、２２９２、２２９３、２２９４、２２９５、２２９６、２２９７、２２９８、２２９９、２３００、２３０１、２３０２、２３０３、２３０４、２３０５、２３０６、２３０７、２３０８、２３０９、２３１０、２３１１、２３１２、２３１３、２３１４、２３１５、２３１６、２３１７、２３１８、２３１９、２３２０、２３２１、２３２２、２３２３、２３２４、２３２５、２３２６、２３２７、２３２８、２３２９、２３３０、２３３１、２３３２、２３３３、２３３４、２３３５、２３３６、２３３７、２３３８、２３３９、２３４０、２３４１、２３４２、２３４３、２３４４、２３４５、２３４６、２３４７、２３４８、２３４９、２３５０、２３５１、２３５２、２３５３、２３５４、２３５５、２３５６、２３５７、２３５８、２３５９、２３６０、２３６１、２３６２、２３６３、２３６４、２３６５、２３６６、２３６７、２３６８、２３６９、２３７０、２３７１、２３７２、２３７３、２３７４、２３７５、２３７６、２３７７、２３７８、２３７９、２３８０、２３８１、２３８２、２３８３、２３８４、２３８５、２３８６、２３８７、２３８８、２３８９、２３９０、２３９１、２３９２、２３９３、２３９４、２３９５、２３９６、２３９７、２３９８、２３９９、２４００、２４０１、２４０２、２４０３、２４０４、２４０５、２４０６、２４０７、２４０８、２４０９、２４１０、２４１１、２４１２、２４１３、２４１４、２４１５、２４１６、２４１７、２４１８、２４１９、２４２０、２４２１、２４２２、２４２３、２４２４、２４２５、２４２６、２４２７、２４２８、２４２９、２４３０、２４３１、２４３２、２４３３、２４３４、２４３５、２４３６、２４３７、２４３８、２４３９、２４４０、２４４１、２４４２、２４４３、２４４４、２４４５、２４４６、２４４７、２４４８、２４４９、２４５０、２４５１、２４５２、２４５３、２４５４、２４５５、２４５６、２４５７、２４５８、２４５９、２４６０、２４６１、２４６２、２４６３、２４６４、２４６５、２４６６、２４６７、２４６８、２４６９、２４７０、２４７１、２４７２、２４７３、２４７４、２４７５、２４７６、２４７７、２４７８、２４７９、２４８０、２４８１、２４８２、２４８３、２４８４、２４８５、２４８６、２４８７、２４８８、２４８９、２４９０、２４９１、２４９２、２４９３、２４９４、２４９５、２４９６、２４９７、２４９８、２４９９、２５００、２５０１、２５０２、２５０３、２５０４、２５０５、２５０６、２５０７、２５０８、２５０９、２５１０、２５１１、２５１２、２５１３、２５１４、２５１５、２５１６、２５１７、２５１８、２５１９、２５２０、２５２１、２５２２、２５２３、２５２４、２５２５、２５２６、２５２７、２５２８、２５２９、２５３０、２５３１、２５３２、２５３３、２５３４、２５３５、２５３６、２５３７、２５３８、２５３９、２５４０、２５４１、２５４２、２５４３、２５４４、２５４５、２５４６、２５４７、２５４８、２５４９、２５５０、２５５１、２５５２、２５５３、２５５４、２５５５、２５５６、２５５７、２５５８、２５５９、２５６０、２５６１、２５６２、２５６３、２５６４、２５６５、２５６６、２５６７、２５６８、２５６９、２５７０、２５７１、２５７２、２５７３、２５７４、２５７５、２５７６、２５７７、２５７８、２５７９、２５８０、２５８１、２５８２、２５８３、２５８４、２５８５、２５８６、２５８７、２５８８、２５８９、２５９０、２５９１、２５９２、２５９３、２５９４、２５９５、２５９６、２５９７、２５９８、２５９９、２６００、２６０１、２６０２、２６０３、２６０４、２６０５、２６０６、２６０７、２６０８、２６０９、２６１０、２６１１、２６１２、２６１３、２６１４、２６１５、２６１６、２６１７、２６１８、２６１９、２６２０、２６２１、２６２２、２６２３、２６２４、２６２５、２６２６、２６２７、２６２８、２６２９、２６３０、２６３１、２６３２、２６３３、２６３４、２６３５、２６３６、２６３７、２６３８、２６３９、２６４０、２６４１、２６４２、２６４３、２６４４、２６４５、２６４６、２６４７、２６４８、２６４９、２６５０、２６５１、２６５２、２６５３、２６５４、２６５５、２６５６、２６５７、２６５８、２６５９、２６６０、２６６１、２６６２、２６６３、２６６４、２６６５、２６６６、２６６７、２６６８、２６６９、２６７０、２６７１、２６７２、２６７３、２６７４、２６７５、２６７６、２６７７、２６７８、２６７９、２６８０、２６８１、２６８２、２６８３、２６８４、２６８５、２６８６、２６８７、２６８８、２６８９、２６９０、２６９１、２６９２、２６９３、２６９４、２６９５、２６９６、２６９７、２６９８、２６９９、２７００、２７０１、２７０２、２７０３、２７０４、２７０５、２７０６、２７０７、２７０８、２７０９、２７１０、２７１１、２７１２、２７１３、２７１４、２７１５、２７１６、２７１７、２７１８、２７１９、２７２０、２７２１、２７２２、２７２３、２７２４、２７２５、２７２６、２７２７、２７２８、２７２９、２７３０、２７３１、２７３２、２７３３、２７３４、２７３５、２７３６、２７３７、２７３８、２７３９、２７４０、２７４１、２７４２、２７４３、２７４４、２７４５、２７４６、２７４７、２７４８、２７４９、２７５０、２７５１、２７５２、２７５３、２７５４、２７５５、２７５６、２７５７、２７５８、２７５９、２７６０、２７６１、２７６２、２７６３、２７６４、２７６５、２７６６、２７６７、２７６８、２７６９、２７７０、２７７１、２７７２、２７７３、２７７４、２７７５、２７７６、２７７７、２７７８、２７７９、２７８０、２７８１、２７８２、２７８３、２７８４、２７８５、２７８６、２７８７、２７８８、２７８９、２７９０、２７９１、２７９２、２７９３、２７９４、２７９５、２７９６、２７９７、２７９８、２７９９、２８００、２８０１、２８０２、２８０３、２８０４、２８０５、２８０６、２８０７、２８０８、２８０９、２８１０、２８１１、２８１２、２８１３、２８１４、２８１５、２８１６、２８１７、２８１８、２８１９、２８２０、２８２１、２８２２、２８２３、２８２４、２８２５、２８２６、２８２７、２８２８、２８２９、２８３０、２８３１、２８３２、２８３３、２８３４、２８３５、２８３６、２８３７、２８３８、２８３９、２８４０、２８４１、２８４２、２８４３、２８４４、２８４５、２８４６、２８４７、２８４８、２８４９、２８５０、２８５１、２８５２、２８５３、２８５４、２８５５、２８５６、２８５７、２８５８、２８５９、２８６０、２８６１、２８６２、２８６３、２８６４、２８６５、２８６６、２８６７、２８６８、２８６９、２８７０、２８７１、２８７２、２８７３、２８７４、２８７５、２８７６、２８７７、２８７８、２８７９、２８８０、２８８１、２８８２、２８８３、２８８４、２８８５、２８８６、２８８７、２８８８、２８８９、２８９０、２８９１、２８９２、２８９３、２８９４、２８９５、２８９６、２８９７、２８９８、２８９９、２９００、２９０１、２９０２、２９０３、２９０４、２９０５、２９０６、２９０７、２９０８、２９０９、２９１０、２９１１、２９１２、２９１３、２９１４、２９１５、２９１６、２９１７、２９１８、２９１９、２９２０、２９２１、２９２２、２９２３、２９２４、２９２５、２９２６、２９２７、２９２８、２９２９、２９３０、２９３１、２９３２、２９３３、２９３４、２９３５、２９３６、２９３７、２９３８、２９３９、２９４０、２９４１、２９４２、２９４３、２９４４、２９４５、２９４６、２９４７、２９４８、２９４９、２９５０、２９５１、２９５２、２９５３、２９５４、２９５５、２９５６、２９５７、２９５８、２９５９、２９６０、２９６１、２９６２、２９６３、２９６４、２９６５、２９６６、２９６７、２９６８、２９６９、２９７０、２９７１、２９７２、２９７３、２９７４、２９７５、２９７６、２９７７、２９７８、２９７９、２９８０、２９８１、２９８２、２９８３、２９８４、２９８５、２９８６、２９８７、２９８８、２９８９、２９９０、２９９１、２９９２、２９９３、２９９４、２９９５、２９９６、２９９７、２９９８、２９９９、３０００、３００１、３００２、３００３、３００４、３００５、３００６、３００７、３００８、３００９、３０１０、３０１１、３０１２、３０１３、３０１４、３０１５、３０１６、３０１７、３０１８、３０１９、３０２０、３０２１、３０２２、３０２３、３０２４、３０２５、３０２６、３０２７、３０２８、３０２９、３０３０、３０３１、３０３２、３０３３、３０３４、３０３５、３０３６、３０３７、３０３８、３０３９、３０４０、３０４１、３０４２、３０４３、３０４４、３０４５、３０４６、３０４７、３０４８、３０４９、３０５０、３０５１、３０５２、３０５３、３０５４、３０５５、３０５６、３０５７、３０５８、３０５９、３０６０、３０６１、３０６２、３０６３、３０６４、３０６５、３０６６、３０６７、３０６８、３０６９、３０７０、３０７１、３０７２、３０７３、３０７４、３０７５、３０７６、３０７７、３０７８、３０７９、３０８０、３０８１、３０８２、３０８３、３０８４、３０８５、３０８６、３０８７、３０８８、３０８９、３０９０、３０９１、３０９２、３０９３、３０９４、３０９５、３０９６、３０９７、３０９８、３０９９、３１００、３１０１、３１０２、３１０３、３１０４、３１０５、３１０６、３１０７、３１０８、３１０９、３１１０、３１１１、３１１２、３１１３、３１１４、３１１５、３１１６、３１１７、３１１８、３１１９、３１２０、３１２１、３１２２、３１２３、３１２４、３１２５、３１２６、３１２７、３１２８、３１２９、３１３０、３１３１、３１３２、３１３３、３１３４、３１３５、３１３６、３１３７、３１３８、３１３９、３１４０、３１４１、３１４２、３１４３、３１４４、３１４５、３１４６、３１４７、３１４８、３１４９、３１５０、３１５１、３１５２、３１５３、３１５４、３１５５、３１５６、３１５７、３１５８、３１５９、３１６０、３１６１、３１６２、３１６３、３１６４、３１６５、３１６６、３１６７、３１６８、３１６９、３１７０、３１７１、３１７２、３１７３、３１７４、３１７５、３１７６、３１７７、３１７８、３１７９、３１８０、３１８１、３１８２、３１８３、３１８４、３１８５、３１８６、３１８７、３１８８、３１８９、３１９０、３１９１、３１９２、３１９３、３１９４、３１９５、３１９６、３１９７、３１９８、３１９９、３２００、３２０１、３２０２、３２０３、３２０４、３２０５、３２０６、３２０７、３２０８、３２０９、３２１０、３２１１、３２１２、３２１３、３２１４、３２１５、３２１６、３２１７、３２１８、３２１９、３２２０、３２２１、３２２２、３２２３、３２２４、３２２５、３２２６、３２２７、３２２８、３２２９、３２３０、３２３１、３２３２、３２３３、３２３４、３２３５、３２３６、３２３７、３２３８、３２３９、３２４０、３２４１、３２４２、３２４３、３２４４、３２４５、３２４６、３２４７、３２４８、３２４９、および３２５０ヌクレオチドなどの長さを有していてもよい。ウイルスゲノムの任意のフィラー領域の長さは、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜３５０、３５０〜４００、４００〜４５０、４５０〜５００、５００〜５５０、５５０〜６００、６００〜６５０、６５０〜７００、７００〜７５０、７５０〜８００、８００〜８５０、８５０〜９００、９００〜９５０、９５０〜１０００、１０００〜１０５０、１０５０〜１１００、１１００〜１１５０、１１５０〜１２００、１２００〜１２５０、１２５０〜１３００、１３００〜１３５０、１３５０〜１４００、１４００〜１４５０、１
４５０〜１５００、１５００〜１５５０、１５５０〜１６００、１６００〜１６５０、１６５０〜１７００、１７００〜１７５０、１７５０〜１８００、１８００〜１８５０、１８５０〜１９００、１９００〜１９５０、１９５０〜２０００、２０００〜２０５０、２０５０〜２１００、２１００〜２１５０、２１５０〜２２００、２２００〜２２５０、２２５０〜２３００、２３００〜２３５０、２３５０〜２４００、２４００〜２４５０、２４５０〜２５００、２５００〜２５５０、２５５０〜２６００、２６００〜２６５０、２６５０〜２７００、２７００〜２７５０、２７５０〜２８００、２８００〜２８５０、２８５０〜２９００、２９００〜２９５０、２９５０〜３０００、３０００〜３０５０、３０５０〜３１００、３１００〜３１５０、３１５０〜３２００、および３２００〜３２５０ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約５５ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約５６ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約９７ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０３ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１０５ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３５７ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３６３ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約７１２ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約７１４ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１２０３ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１２０９ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１５１２ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１５１９ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２３９５ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２４０３ヌクレオチド長であるフィラー領域を・ワむ。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２４０５ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３０１３ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３０２１ヌクレオチド長であるフィラー領域を含む。
【０４２４】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのフィラー配列領域を含む。フィラー配列領域の非限定的な例は、表１５に記載される。
【０４２５】
【表１５】
2020518259.tif 000056
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、１つのフィラー配列領域を含む。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１８配列領域である。
【０４２６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つのフィラー配列領域を含む。一実施形態において、２つのフィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域およびＦＩＬＬ３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域およびＦＩＬＬ１２配
列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１５配列領域およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１５配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１５配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１６配列領域およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１６配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１７配列領域およびＦＩＬＬ１８配列領域である。
【０４２７】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、３つのフィラー配列領域を含む。一実施形態において、２つのフィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬ
Ｌ８配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形
態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ２配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配
列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列・フ域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配
列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ３配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領
域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ４配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ５配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩ
ＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ６配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ９配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ８配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１１
配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ７配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１０配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ９配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ８配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１１配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１０配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形
態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ９配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１２配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１１配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１０配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１３配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１２配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１１配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１４配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１３配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１２配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１５配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域、ＦＩＬＬ１４配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、
フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１３配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１６配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域、ＦＩＬＬ１５配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１４配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１５配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１７配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１５配列領域、ＦＩＬＬ１６配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１５配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。一実施形態において、フィラー配列領域は、ＦＩＬＬ１６配列領域、ＦＩＬＬ１７配列領域、およびＦＩＬＬ１８配列領域である。
【０４２８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのエンハンサー配列領域を含み得る。エンハンサー配列領域は、独立に、限定はされないが、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、および４００ヌクレオチドなどの長さを有していてもよい。ウイルスゲノムのエンハンサー領域の長さは、３００〜３１０、３００〜３２５、３０５〜３１５、３１０〜３２０、３１５〜３２５、３２０〜３３０、３２５〜３３５、３２５〜３５０、３３０〜３４０、３３５〜３４５、３４０〜３５０、３４５〜３５５、３５０〜３６０、３５０〜３７５、３５５〜３６５、３６０〜３７０、３６５〜３７５、３７０〜３８０、３７５〜３８５、３７５〜４００、３８０〜３９０、３８５〜３９５、および３９０〜４００ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３０３ヌクレオチド長であるエンハンサー領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３８２ヌクレオチド長であるエンハンサー領域を含む。
【０４２９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのエンハンサー配列領域を含む。エンハンサー配列領域の非限定的な例は、表１６に記載される。
【０４３０】
【表１６】
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一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、１つのエンハンサー配列領域を含む。一実施形態において、エンハンサー配列領域は、エンハンサー１配列領域である。一実施形態において、エンハンサー配列領域は、エンハンサー２配列領域である。
【０４３１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つのエンハンサー配列領域を含む。一実施形態において、エンハンサー配列領域は、エンハンサー１配列領域およびエンハンサー２配列領域である。
【０４３２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのプロモータ配列領域を含み得る。プロモータ配列領域は、独立に、限定はされないが、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、５００、５０１、５０２、５０３、５０４、５０５、５０６、５０７、５０８、５０９、５１０、５１１、５１２、５１３、５１４、５１５、５１６、５１７、５１８、５１９、５２０、５２１、５２２、５２３、５２４、５２５、５２６、５２７、５２８、５２９、５３０、５３１、５３２、５３３、５３４、５３５、５３６、５３７、５３８、５３９、５４０、５４１、５４２、５４３、５４４、５４５、５４６、５４７、５４８、５４９、５５０、５５１、５５２、５５３、５５４、５５５、５５６、５５７、５５８、５５９、５６０、５６１、５６２、５６３、５６４、５６５、５６６、５６７、５６８、５６９、５７０、５７１、５７２、５７３、５７４、５７５、５７６、５７７、５７８、５７９、５８０、５８１、５８２、５８３、５８４、５８５、５８６、５８７、５８８、５８９、５９０、５９１、５９２、５９３、５９４、５９５、５９６、５９７、５９８、５９９、および６００ヌクレオチドなどの長さを有していてもよい。ウイルスゲノムのプロモータ領域の長さは、４〜１０、１０〜２０、１０〜５０、２０〜３０、３０〜４０、４０〜５０、５０〜６０、５０〜１００、６０〜７０、７０〜８０、８０〜９０、９０〜１００、１００〜１１０、１００〜１５０、１１０〜１２０、１２０〜１３０、１３０〜１４０、１４０〜１５０、１５０〜１６０、１５０〜２００、１６０〜１７０、１７０〜１８０、１８０〜１９０、１９０〜２００、２００〜２１０、２００〜２５０、２１０〜２２０、２２０〜２３０、２３０〜２４０、２４０〜２５０、２５０〜２６０、２５０〜３００、２６０〜２７０、２７０〜２８０、２８０〜２９０、２９０〜３００、３００〜３１０、３００〜３５０、３１０〜３２０、３２０〜３３０、３３０〜３４０、３４０〜３５０、３５０〜３６０、３５０〜４００、３６０〜３７０、３７０〜３８０、３８０〜３９０、３９０〜４００、４００〜４１０、４００〜４５０、４１０〜４２０、４２０〜４３０、４３０〜４４０、４４０〜４５０、４５０〜４６０、４５０〜５００、４６０〜４７０、４７０〜４８０、４８０〜４９０、４９０〜５００、５００〜５１０、５００〜５５０、５１０〜５２０、５２０〜５３０、５３０〜５４０、５４０〜５５０、５５０〜５６０、５５０〜６００、５６０〜５７０、５７０〜５８０、５８０〜５９０、および５９０〜６００ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約４ヌクレオチド長であるプロモータ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１７ヌクレオチド長であるプロモータ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２０４ヌクレオチド長であるプロモータ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２１９ヌクレオチド長であるプロモータ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２６０ヌクレオチド長であるプロモータ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３０３ヌクレオチド長であるプロモータ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３８２ヌクレオチド長であるプロモータ領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約５８８ヌクレオチド長であるプロモータ領域を含む。
【０４３３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのプロモータ配列領域を含む。プロモータ配列領域の非限定的な例は、表１７に記載される。
【０４３４】
【表１７】
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一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、１つのプロモータ配列領域を含む。一実施形態において、プロモータ配列領域はプロモータ１である。一実施形態において、プロモータ配列領域はプロモータ２である。一実施形態において、プロモータ配列領域はプロモータ３である。一実施形態において、プロモータ配列領域はプロモータ４である。一実施形態において、プロモータ配列領域はプロモータ５である。一実施形態において、プロモータ配列領域はプロモータ６である。
【０４３５】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つのプロモータ配列領域を含む。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ１配列領域およびプロモータ２配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ１配列領域およびプロモータ３配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ１配列領域およびプロモータ４配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ１配列領域およびプロモータ５配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ１配列領域およびプロモータ６配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ２配列領域およびプロモータ３配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ２配列領域およびプロモータ４配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ２配列領域およびプロモータ５配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ２配列領域およびプロモータ６配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ３配列領域およびプロモータ４配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ３配列領域およびプロモータ５配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ３配列領域およびプロモータ６配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ４配列領域およびプロモータ５配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ４配列領域およびプロモータ６配列領域である。一実施形態において、プロモータ配列領域は、プロモータ５配列領域およびプロモータ６配列領域である。
【０４３６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのエクソン配列領域を含み得る。エクソン領域は、独立に、限定はされないが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、および１５０ヌクレオチドなどの長さを有していてもよい。ウイルスゲノムのエクソン領域の長さは、２〜１０、５〜１０、５〜１５、１０〜２０、１０〜３０、１０〜４０、１５〜２０、１５〜２５、２０〜３０、２０〜４０、２０〜５０、２５〜３０、２５〜３５、３０〜４０、３０〜５０、３０〜６０、３５〜４０、３５〜４５、４０〜５０、４０〜６０、４０〜７０、４５〜５０、４５〜５５、５０〜６０、５０〜７０、５０〜８０、５５〜６０、５５〜６５、６０〜７０、６０〜８０、６０〜９０、６５〜７０、６５〜７５、７０〜８０、７０〜９０、７０〜１００、７５〜８０、７５〜８５、８０〜９０、８０〜１００、８０〜１１０、８５〜９０、８５〜９５、９０〜１００、９０〜１１０、９０〜１２０、９５〜１００、９５〜１０５、１００〜１１０、１００〜１２０、１００〜１３０、１０５〜１１０、１０５〜１１５、１１０〜１２０、１１０〜１３０、１１０〜１４０、１１５〜１２０、１１５〜１２５、１２０〜１３０、１２０〜１４０、１２０〜１５０、１２５〜１３０、１２５〜１３５、１３０〜１４０、１３０〜１５０、１３５〜１４０、１３５〜１４５、１４０〜１５０、および１４５〜１５０ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約５３ヌクレオチド長であるエクソン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１３４ヌクレオチド長であるエクソン領域を含む。
【０４３７】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのエクソン配列領域を含む。エクソン配列領域の非限定的な例は、表１８に記載される。
【０４３８】
【表１８】
2020518259.tif 000059
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、１つのエクソン配列領域を含む。一実施形態において、エクソン配列領域は、エクソン１配列領域である。一実施形態において、エクソン配列領域は、エクソン２配列領域である。
【０４３９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つのエクソン領域を含む。一実施形態において、エクソン配列領域は、エクソン１配列領域およびエクソン２配列領域である。
【０４４０】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのイントロン配列領域を含み得る。イントロン領域は、独立に、限定はされないが、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、および３５０ヌクレオチドなどの長さを有していてもよい。ウイルスゲノムのイントロン領域の長さは、２５〜３５、２５〜５０、３５〜４５、４５〜５５、５０〜７５、５５〜６５、６５〜７５、７５〜８５、７５〜１００、８５〜９５、９５〜１０５、１００〜１２５、１０５〜１１５、１１５〜１２５、１２５〜１３５、１２５〜１５０、１３５〜１４５、１４５〜１５５、１５０〜１７５、１５５〜１６５、１６５〜１７５、１７５〜１８５、１７５〜２００、１８５〜１９５、１９５〜２０５、２００〜２２５、２０５〜２１５、２１５〜２２５、２２５〜２３５、２２５〜２５０、２３５〜２４５、２４５〜２５５、２５０〜２７５、２５５〜２６５、２６５〜２７５、２７５〜２８５、２７５〜３００、２８５〜２９５、２９５〜３０５、３００〜３２５、３０５〜３１５、３１５〜３２５、３２５〜３３５、３２５〜３５０、および３３５〜３４５ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３２ヌクレオチド長であるイントロン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１７２ヌクレオチド長であるイントロン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２０１ヌクレオチド長であるイントロン領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約３４７ヌクレオチド長であるイントロン領域を含む。
【０４４１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのイントロン配列領域を含む。イントロン配列領域の非限定的な例は、表１９に記載される。
【０４４２】
【表１９】
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一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、１つのイントロン配列領域を含む。一実施形態において、イントロン配列領域は、イントロン１配列領域である。一実施形態において、イントロン配列領域は、イントロン２配列領域である。一実施形態において、イントロン配列領域は、イントロン３配列領域である。
【０４４３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つのイントロン配列領域を含む。一実施形態において、イントロン配列領域は、イントロン１配列領域およびイントロン２配列領域である。一実施形態において、イントロン配列領域は、イントロン２配列領域およびイントロン３配列領域である。一実施形態において、イントロン配列領域は、イントロン１配列領域およびイントロン３配列領域である。
【０４４４】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、３つのイントロン配列領域を含む。一実施形態において、イントロン配列領域は、イントロン１配列領域、イントロン２配列領域、およびイントロン３配列領域である。
【０４４５】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのポリアデニル化シグナル配列領域を含み得る。ポリアデニル化シグナル領域配列領域は、独立に、限定はされないが、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１４９、１５０、１５１、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１８９、１９０、１９１、１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、１９７、１９８、１９９、２００、２０１、２０２、２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、２２９、２３０、２３１、２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４５、２４６、２４７、２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７０、２７１、２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９７、２９８、２９９、３００、３０１、３０２、３０３、３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、３０９、３１０、３１１、３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、３１７、３１８、３１９、３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、３４１、３４２、３４３、３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、３４９、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、３５７、３５８、３５９、３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、３６５、３６６、３６７、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、３７３、３７４、３７５、３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、３８１、３８２、３８３、３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、３８９、３９０、３９１、３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、３９７、３９８、３９９、４００、４０１、４０２、４０３、４０４、４０５、４０６、４０７、４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、４１３、４１４、４１５、４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、４２１、４２２、４２３、４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、４２９、４３０、４３１、４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８、４３９、４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、４４５、４４６、４４７、４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、４５３、４５４、４５５、４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、４６１、４６２、４６３、４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、４６９、４７０、４７１、４７２、４７３、４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、４７９、４８０、４８１、４８２、４８３、４８４、４８５、４８６、４８７、４８８、４８９、４９０、４９１、４９２、４９３、４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、４９９、５００、５０１、５０２、５０３、５０４、５０５、５０６、５０７、５０８、５０９、５１０、５１１、５１２、５１３、５１４、５１５、５１６、５１７、５１８、５１９、５２０、５２１、５２２、５２３、５２４、５２５、５２６、５２７、５２８、５２９、５３０、５３１、５３２、５３３、５３４、５３５、５３６、５３７、５３８、５３９、５４０、５４１、５４２、５４３、５４４、５４５、５４６、５４７、５４８、５４９、５５０、５５１、５５２、５５３、５５４、５５５、５５６、５５７、５５８、５５９、５６０、５６１、５６２、５６３、５６４、５６５、５６６、５６７、５６８、５６９、５７０、５７１、５７２、５７３、５７４、５７５、５７６、５７７、５７８、５７９、５８０、５８１、５８２、５８３、５８４、５８５、５８６、５８７、５８８、５８９、５９０、５９１、５９２、５９３、５９４、５９５、５９６、５９７、５９８、５９９、および６００ヌクレオチドなどの長さを有していてもよい。ウイルスゲノムのポリアデニル化シグナル配列領域の長さは、４〜１０、１０〜２０、１０〜５０、２０〜３０、３０〜４０、４０〜５０、５０〜６０、５０〜１００、６０〜７０、７０〜８０、８０〜９０、９０〜１００、１００〜１１０、１００〜１５０、１１０〜１２０、１２０〜１３０、１３０〜１４０、１４０〜１５０、１５０〜１６０、１５０〜２００、１６０〜１７０、１７０〜１８０、１８０〜１９０、１９０〜２００、２００〜２１０、２００〜２５０、２１０〜２２０、２２０〜２３０、２３０〜２４０、２４０〜２５０、２５０〜２６０、２５０〜３００、２６０〜２７０、２７０〜２８０、２８０〜２９０、２９０〜３００、３００〜３１０、３００〜３５０、３１０〜３２０、３２０〜３３０、３３０〜３４０、３４０〜３５０、３５０〜３６０、３５０〜４００、３６０〜３７０、３７０〜３８０、３８０〜３９０、３９０〜４００、４００〜４１０、４００〜４５０、４１０〜４２０、４２０〜４３０、４３０〜４４０、４４０〜４５０、４５０〜４６０、４５０〜５００、４６０〜４７０、４７０〜４８０、４８０〜４９０、４９０〜５００、５００〜５１０、５００〜５５０、５１０〜５２０、５２０〜５３０、５３０〜５４０、５４０〜５５０、５５０〜５６０、５５０〜６００、５６０〜５７０、５７０〜５８０、５８０〜５９０、および５９０〜６００ヌクレオチドであってもよい。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約１２７ヌクレオチド長であるポリアデニル化シグナル配列領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約２２５ヌクレオチド長であるポリアデニル化シグナル配列領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約４７６ヌクレオチド長であるポリアデニル化シグナル配列領域を含む。非限定的な例として、ウイルスゲノムは、約４７７ヌクレオチド長であるポリアデニル化シグナル配列領域を含む。
【０４４６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つのポリアデニル化（ポリＡ）シグナル配列領域を含む。ポリＡシグナル配列領域の非限定的な例は、表２０に記載される。
【０４４７】
【表２０】
2020518259.tif 000061
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、１つのポリＡシグナル配列領域を含む。一実施形態において、ポリＡシグナル配列領域は、ポリＡ１配列領域である。一実施形態において、ポリＡシグナル配列領域は、ポリＡ２配列領域である。一実施形態において、ポリＡシグナル配列領域は、ポリＡ３配列領域である。一実施形態において、ポリＡシグナル配列領域は、ポリＡ４配列領域である。
【０４４８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つ以上のポリＡシグナル配列領域を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、少なくとも１つの末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域、少なくとも１つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、少なくとも１つのエンハンサー配列領域、少なくとも１つのプロモータ配列領域、少なくとも１つのエクソン配列領域、少なくとも１つのイントロン配列領域、少なくとも１つの調節性ポリヌクレオチド領域、少なくとも１つのポリアデニル化シグナル配列領域、および少なくとも１つのフィラー配列領域を含む。
【０４４９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、エンハンサー配列領域、プロモータ配列領域、イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む。
【０４５０】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表２１に記載される。表２１には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ１（配列番号１３５２））が記載される。
【０４５１】
【表２１】
2020518259.tif 000062
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３５２（ＶＯＹＨＴ１）を含む。
【０４５２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３５３（ＶＯＹＨＴ２）を含む。
【０４５３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３５４（ＶＯＹＨＴ３）を含む。
【０４５４】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３５５（ＶＯＹＨＴ４）を含む。
【０４５５】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表２２に記載される。表２２には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ５（配列番号１３５６））が記載される。
【０４５６】
【表２２】
2020518259.tif 000063
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３５６（ＶＯＹＨＴ５）を含む。
【０４５７】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３５７（ＶＯＹＨＴ６）を含む。
【０４５８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３５８（ＶＯＹＨＴ７）を含む。
【０４５９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３５９（ＶＯＹＨＴ８）を含む。
【０４６０】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、エンハンサー配列領域、プロモータ配列領域、イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む。
【０４６１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表２３に記載される。表２３には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ９（配列番号１３６０））が記載される。
【０４６２】
【表２３】
2020518259.tif 000064
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む配列番号１３６０（ＶＯＹＨＴ９）を含む。
【０４６３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む配列番号１３６１（ＶＯＹＨＴ１０）を含む。
【０４６４】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む配列番号１３６２（ＶＯＹＨＴ１１）を含む。
【０４６５】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む配列番号１３６３（ＶＯＹＨＴ１２）を含む。
【０４６６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、エンハンサー配列領域、プロモータ配列領域、イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにポリアデニル化シグナル配列領域を含む。
【０４６７】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表２４に記載される。表２４には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ１３（配列番号１３６４））が記載される。
【０４６８】
【表２４】
2020518259.tif 000065
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１３６４（ＶＯＹＨＴ１３）を含む。
【０４６９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つの多重クローニング部位（ＭＣＳ）配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１３６５（ＶＯＹＨＴ１４）を含む。
【０４７０】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、エンハンサー配列領域、プロモータ配列領域、イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにポリアデニル化シグナル配列領域を含む。
【０４７１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表２５〜２９に記載される。表２５〜２９には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ１５（配列番号１３６６））が記載される。
【０４７２】
【表２５】
2020518259.tif 000066
【０４７３】
【表２６】
2020518259.tif 000067
【０４７４】
【表２７】
2020518259.tif 000068
【０４７５】
【表２８】
2020518259.tif 000069
【０４７６】
【表２９】
2020518259.tif 000070
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１３６６（ＶＯＹＨＴ１５）を含む。
【０４７７】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１３６７（ＶＯＹＨＴ１６）を含む。
【０４７８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１３８８（ＶＯＹＨＴ３５）を含む。
【０４７９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４２６（ＶＯＹＨＴ３６）を含む。
【０４８０】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４２７（ＶＯＹＨＴ３７）を含む。
【０４８１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４２８（ＶＯＹＨＴ３８）を含む。
【０４８２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４２９（ＶＯＹＨＴ３９）を含む。
【０４８３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４３０（ＶＯＹＨＴ４０）を含む。
【０４８４】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４３１（ＶＯＹＨＴ４１）を含む。
【０４８５】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４３２（ＶＯＹＨＴ４２）を含む。
【０４８６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４３３（ＶＯＹＨＴ４３）を含む。
【０４８７】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４３４（ＶＯＹＨＴ４４）を含む。
【０４８８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４３５（ＶＯＹＨＴ４５）を含む。
【０４８９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４３６（ＶＯＹＨＴ４６）を含む。
【０４９０】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４３７（ＶＯＹＨＴ４７）を含む。
【０４９１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＢＡプロモータ配列領域、ＳＶ４０イントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにウサギグロビンポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１４３８（ＶＯＹＨＴ４８）を含む。
【０４９２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＭＣＳ配列領域、エンハンサー配列領域、プロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域、２つのイントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む。
【０４９３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｉｎｔｒｏｎ２またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３０に記載される。表３０には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ１７（配列番号１３６８））が記載される。
【０４９４】
【表３０】
2020518259.tif 000071
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｉｎｔｒｏｎ２またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３６８（ＶＯＹＨＴ１７）を含む。
【０４９５】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｉｎｔｒｏｎ２またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３１に記載される。表３１には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ１９（配列番号１３７０））が記載される。
【０４９６】
【表３１】
2020518259.tif 000072
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３７０（ＶＯＹＨＴ１９）を含む。
【０４９７】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、エンハンサー配列領域、プロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域、２つのイントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む。
【０４９８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３２に記載される。表３２には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ１８（配列番号１３６９））が記載される。
【０４９９】
【表３２】
2020518259.tif 000073
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３６９（ＶＯＹＨＴ１８）を含む。
【０５００】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３３に記載される。表３３には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ２０（配列番号１３７１））が記載される。
【０５０１】
【表３３】
2020518259.tif 000074
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３７１（ＶＯＹＨＴ２０）を含む。
【０５０２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３４に記載される。表３４には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ２１（配列番号１３７２））が記載される。
【０５０３】
【表３４】
2020518259.tif 000075
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３７２（ＶＯＹＨＴ２１）を含む。
【０５０４】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびにフィラー配列領域を含む配列番号１３７３（ＶＯＹＨＴ２２）を含む。
【０５０５】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＭＣＳ配列領域、エンハンサー配列領域、プロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域、２つのイントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む。
【０５０６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３５に記載される。表３５には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ２３（配列番号１３７４））が記載される。
【０５０７】
【表３５】
2020518259.tif 000076
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、ＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む配列番号１３７４（ＶＯＹＨＴ２３）を含む。
【０５０８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、エンハンサー配列領域、プロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域、２つのイントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む。
【０５０９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３６に記載される。表３６には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ２４（配列番号１３７５））が記載される。
【０５１０】
【表３６】
2020518259.tif 000077
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域、ならびに２つのフィラー配列領域を含む配列番号１３７５（ＶＯＹＨＴ２４）を含む。
【０５１１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、エンハンサー配列領域、プロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域、２つのイントロン配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにポリアデニル化シグナル配列領域を含む。
【０５１２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３７に記載される。表３７には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ２５（配列番号１３７６））が記載される。
【０５１３】
【表３７】
2020518259.tif 000078
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１３７６（ＶＯＹＨＴ２５）を含む。
【０５１４】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、２つのＭＣＳ配列領域、ＣＭＶエンハンサー配列領域、ＣＭＶプロモータ配列領域、２つのエクソン配列領域（ｉｅ１  ｅｘｏｎ１およびヒトベータグロビン（ｈｂｇｌｏｂｉｎ）ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、２つのイントロン配列領域（ｉｅ１  ｉｎｔｒｏｎ１およびｈｂｇｌｏｂｉｎ  ｅｘｏｎ３またはそれらの断片）、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域を含む配列番号１３７７（ＶＯＹＨＴ２６）を含む。
【０５１５】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、プロモータ配列領域、ならびに調節性ポリヌクレオチド領域を含む。
【０５１６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、Ｈ１プロモータ配列領域、ならびに調節性ポリヌクレオチド領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３８に記載される。表３８には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ２７（配列番号１３７８））が記載される。
【０５１７】
【表３８】
2020518259.tif 000079
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、Ｈ１プロモータ配列領域、ならびに調節性ポリヌクレオチド領域を含む配列番号１３７８（ＶＯＹＨＴ２７）を含む。
【０５１８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、５’末端逆位配列（ＩＴＲ）配列領域および３’ＩＴＲ配列領域、Ｈ１プロモータ配列領域、ならびに調節性ポリヌクレオチド領域を含む配列番号１３７９（ＶＯＹＨＴ２８）を含む。
【０５１９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、１つまたは２つのプロモータ配列領域、調節性ポリヌクレオチド配列領域、およびウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化シグナル配列領域を含む。
【０５２０】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、２つのプロモータ配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、およびポリアデニル化シグナル配列領域を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、ＣＭＶおよびＴ７プロモータ配列領域、調節性ポリヌクレオチド領域、ならびにｂＧＨポリアデニル化シグナル配列領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用されるＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の非限定的な例は、表３９に記載される。表３９には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ２９）が記載される。
【０５２１】
【表３９】
2020518259.tif 000080
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、ＣＭＶプロモータ配列領域（配列番号１４１１）、Ｔ７プロモータ配列領域（配列番号１４１４）、調節性ポリヌクレオチド配列領域（配列番号１２４９）、およびｂＧＨポリアデニル化シグナル配列領域（配列番号１４２１）を含む。
【０５２２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、ＣＭＶプロモータ配列領域（配列番号１４１１）、Ｔ７プロモータ配列領域（配列番号１４１４）、調節性ポリヌクレオチド配列領域（配列番号１２５９）、およびｂＧＨポリアデニル化シグナル配列領域（配列番号１４２１）を含む。
【０５２３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、ＣＭＶプロモータ配列領域（配列番号１４１１）、Ｔ７プロモータ配列領域（配列番号１４１４）、調節性ポリヌクレオチド配列領域（配列番号１２５５）、およびｂＧＨポリアデニル化シグナル配列領域（配列番号１４２１）を含む。
【０５２４】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、ＣＭＶプロモータ配列領域（配列番号１４１１）、Ｔ７プロモータ配列領域（配列番号１４１４）、調節性ポリヌクレオチド配列領域（配列番号１２５３）、およびｂＧＨポリアデニル化シグナル配列領域（配列番号１４２１）を含む。
【０５２５】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、１つまたは２つのプロモータ配列領域、および調節性ポリヌクレオチド配列領域を含む。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、ＣＭＶおよびＴ７プロモータ配列領域、および調節性ポリヌクレオチド領域を含む。上記の配列モジュールを全て有する本発明のＡＡＶ粒子に使用される配列の非限定的な例は、表４０に記載される。表４０には、配列領域の配列識別名または配列（領域配列番号）および配列領域の長さ（領域長）、ならびにＩＴＲ〜ＩＴＲ配列の名称および配列識別名（例えば、ＶＯＹＨＴ３３）が記載される。
【０５２６】
【表４０】
2020518259.tif 000081
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、ＣＭＶプロモータ配列領域（配列：ＧＴＴＧ）、Ｈ１プロモータ配列領域（配列番号１４１３）、および調節性ポリヌクレオチド配列領域（配列番号１２４９）を含む。
【０５２７】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子ウイルスゲノムは、Ｈ１プロモータ配列領域（配列番号１４１３）、および調節性ポリヌクレオチド配列領域（配列番号１２５９）を含む。
ＡＡＶ粒子は、送達効率が増強されるように修飾されてもよい。本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むかかる修飾ＡＡＶベクターは、効率的にパッケージングすることができ、高頻度でおよび最低限の毒性でおよび標的細胞への感染を成功させるために使用することができる。
【０５２８】
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、ヒト血清型ＡＡＶ粒子であってもよい。かかるヒトＡＡＶ粒子は、任意の既知の血清型、例えば血清型ＡＡＶ１〜ＡＡＶ１１のいずれか１つに由来し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ１由来カプシドにＡＡＶ１由来ゲノムを含むベクター；ＡＡＶ２由来カプシドにＡＡＶ２由来ゲノムを含むベクター；ＡＡＶ４由来カプシドにＡＡＶ４由来ゲノムを含むベクター；ＡＡＶ６由来カプシドにＡＡＶ６由来ゲノムを含むベクターまたはＡＡＶ９由来カプシドにＡＡＶ９由来ゲノムを含むベクターであってもよい。
【０５２９】
他の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、少なくとも２つの異なるＡＡＶ血清型を起源とする配列および／または成分を含有するシュードタイプハイブリッドまたはキメラＡＡＶ粒子であってもよい。シュードタイプＡＡＶ粒子は、あるＡＡＶ血清型に由来するＡＡＶゲノムと、少なくとも一部が異なるＡＡＶ血清型に由来するカプシドタンパク質とを含むベクターであってもよい。非限定的な例として、かかるシュードタイプＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ１由来カプシドにＡＡＶ２由来ゲノムを含むベクター；またはＡＡＶ６由来カプシドにＡＡＶ２由来ゲノムを含むベクター；またはＡＡＶ４由来カプシドにＡＡＶ２由来ゲノム；もしくはＡＡＶ９由来カプシドにＡＡＶ２由来ゲノムを含むベクターであってもよい。同様に、本発明は、任意のハイブリッドまたはキメラＡＡＶ粒子を企図する。
【０５３０】
他の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、中枢神経系へのｓｉＲＮＡ分子の送達に使用されてもよい（例えば、米国特許第６，１８０，６１３号明細書；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
【０５３１】
一部の態様において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、非ウイルス起源のペプチドを含む修飾カプシドを更に含み得る。他の態様において、コード化ｓｉＲＮＡ二重鎖の脳および脊髄への送達を促進するため、ＡＡＶ粒子はＣＮＳ特異的キメラカプシドを含んでもよい。例えば、ＣＮＳ向性を呈するＡＡＶバリアントからのｃａｐヌクレオチド配列のアラインメントを作成することにより可変領域（ＶＲ）配列および構造を同定してもよい。
【０５３２】
ウイルス作製
本開示は、ウイルス複製細胞をＡＡＶポリヌクレオチドまたはＡＡＶゲノムに接触させることを含む、ウイルス複製細胞におけるウイルスゲノム複製によるパルボウイルス粒子、例えばＡＡＶ粒子の作成方法を提供する。
【０５３３】
本開示は、１）コンピテント細菌細胞にバクミドベクターおよびウイルスコンストラクトベクターおよび／またはＡＡＶペイロードコンストラクトベクターのいずれかをコトランスフェクトするステップ、２）得られたウイルスコンストラクト発現ベクターおよびＡＡＶペイロードコンストラクト発現ベクターを単離し、ウイルス複製細胞を個別にトランスフェクトするステップ、３）ウイルスコンストラクト発現ベクターまたはＡＡＶペイロードコンストラクト発現ベクターを含む得られたペイロードおよびウイルスコンストラクト粒子を単離および精製するステップ、４）ウイルス複製細胞に、ウイルスコンストラクト発現ベクターまたはＡＡＶペイロードコンストラクト発現ベクターを含むＡＡＶペイロードおよびウイルスコンストラクト粒子の両方を共感染させるステップ、５）パルボウイルスゲノムを含むウイルス粒子を回収および精製するステップを含む、形質導入効率が増強された（増加した、向上した）ＡＡＶ粒子の作製方法を提供する。
【０５３４】
一実施形態において、本発明は、１）限定はされないがＨＥＫ２９３細胞などの哺乳類細胞にペイロード領域、ｒｅｐおよびｃａｐ遺伝子を発現するコンストラクトならびにヘルパーコンストラクトを同時にコトランスフェクトするステップ、２）ウイルスゲノムを含むＡＡＶ粒子を回収および精製するステップを含む、ＡＡＶ粒子の作製方法を提供する。
【０５３５】
細胞
本開示は、ＡＡＶポリヌクレオチドおよび／またはＡＡＶゲノムを含む細胞を提供する。
【０５３６】
本明細書に開示されるウイルス作製は、ペイロード分子をコードするポリヌクレオチド配列を含むペイロードコンストラクト、例えば組換えウイルスコンストラクトを送達するため標的細胞に接触するＡＡＶ粒子の作製プロセスおよび方法を記載する。
【０５３７】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、昆虫細胞を含むウイルス複製細胞で作製されてもよい。
培養下の昆虫細胞の成長条件、および培養下の昆虫細胞における異種産物の産生は当該技術分野において周知であり、米国特許第６，２０４，０５９号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）を参照されたい。
【０５３８】
本発明においては、パルボウイルスの複製を可能にする、かつ培養下に維持することのできる任意の昆虫細胞を使用することができる。細胞株は、限定はされないがＳｆ９またはＳｆ２１細胞株を含めたスポドプテラ・フルギペルダ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）からの細胞株、ショウジョウバエ属（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）細胞株、またはヒトスジシマカ（Ａｅｄｅｓ  ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ）由来細胞株などの蚊細胞株が用いられてもよい。異種タンパク質を発現させるための昆虫細胞の使用については、ベクター、例えば昆虫細胞適合性ベクターなどの核酸をかかる細胞に導入する方法、および培養下のかかる細胞を維持する方法と同様に、十分に実証されている。例えば、「分子生物学の方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ）」、リチャード（Ｒｉｃｈａｒｄ）編、ヒューマナ・プレス（Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ）、ニュージャージー州、１９９５年；オライリー（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ）ら著、「バキュロウイルス発現ベクター、実験マニュアル（Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｖｅｃｔｏｒｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ）」、オックスフォード大学出版局（Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ）、１９９４年；サムルスキ（Ｓａｍｕｌｓｋｉ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ．）、第６３巻、ｐ．３８２２〜８、１９８９年；カジガヤ（Ｋａｊｉｇａｙａ）ら著、米国科学アカデミー紀要（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ）、第８８巻、ｐ．４６４６〜５０、１９９１年；ラフィング（Ｒｕｆｆｉｎｇ）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ．Ｖｉｒ．）、第６６巻、ｐ．６９２２〜３０、１９９２年；キムバウアー（Ｋｉｍｂａｕｅｒ）ら著、バイロロジー（Ｖｉｒ．）、第２１９巻、ｐ．３７〜４４、１９９６年；チャオ（Ｚｈａｏ）ら著、バイロロジー（Ｖｉｒ．）、第２７２巻、ｐ．３８２〜９３、２０００年；およびサムルスキ（Ｓａｍｕｌｓｋｉ）ら著、米国特許第６，２０４，０５９号明細書を参照されたく、これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される。
【０５３９】
ウイルス複製細胞は、原核生物（例えば細菌）細胞、ならびに昆虫細胞、酵母細胞および哺乳類細胞を含めた真核細胞を含め、任意の生物学的有機体から選択されてもよい。ウイルス複製細胞には、Ａ５４９、ＷＥＨ１、３Ｔ３、１０Ｔ１／２、ＢＨＫ、ＭＤＣＫ、ＣＯＳ  １、ＣＯＳ  ７、ＢＳＣ  １、ＢＳＣ  ４０、ＢＭＴ  １０、ＶＥＲＯ、Ｗ１３８、ＨｅＬａ、ＨＥＫ２９３、Ｓａｏｓ、Ｃ２Ｃ１２、Ｌ細胞、ＨＴ１０８０、ＨｅｐＧ２ならびに哺乳類に由来する初代線維芽細胞、ヘパトサイトおよび筋芽細胞など、哺乳類細胞が含まれ得る。ウイルス複製細胞には、限定はされないが、ヒト、サル、マウス、ラット、ウサギ、およびハムスターを含めた哺乳類種、または限定はされないが、線維芽細胞、ヘパトサイト、腫瘍細胞、細胞株形質転換細胞等を含めた細胞型に由来する細胞が含まれる。
【０５４０】
ＡＡＶ粒子の小規模作製
本明細書に開示されるウイルス作製は、ペイロードをコードするポリヌクレオチド配列を含むペイロード、例えば組換えウイルスコンストラクトを送達するため標的細胞に接触するＡＡＶ粒子の作製プロセスおよび方法を記載する。
【０５４１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、哺乳類細胞を含むウイルス複製細胞で作製されてもよい。
組換えＡＡＶ粒子の作製に一般的に使用されるウイルス複製細胞としては、限定はされないが、米国特許第６，１５６，３０３号明細書、同第５，３８７，４８４号明細書、同第５，７４１，６８３号明細書、同第５，６９１，１７６号明細書、および同第５，６８８，６７６号明細書；米国特許出願公開第２００２／００８１７２１号明細書、および国際公開第００／４７７５７号パンフレット、同第００／２４９１６号パンフレット、および同第９６／１７９４７号パンフレット（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの、２９３細胞、ＣＯＳ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＫＢ細胞、および他の哺乳類細胞株が挙げられる。
【０５４２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は哺乳類細胞で作製され、ここでは３つ全てのＶＰタンパク質が１：１：１０（ＶＰ１：ＶＰ２：ＶＰ３）に近い化学量論で発現する。この制御された発現レベルを実現する調節機構には、差次的スプライシングによって作製される、一方がＶＰ１用、および他方がＶＰ２およびＶＰ３用の２つのｍＲＮＡの作製が含まれる。
【０５４３】
別の実施形態において、ＡＡＶ粒子はトリプルトランスフェクション方法を用いて哺乳類細胞で作製され、ここではペイロードコンストラクトとパルボウイルスＲｅｐおよびパルボウイルスＣａｐとヘルパーコンストラクトとが３つの異なるコンストラクト内に含まれる。ＡＡＶ粒子作製の３成分のトリプルトランスフェクション方法を利用して、形質導入効率、標的組織（向性）評価、および安定性を含めたアッセイ用の小規模ロットのウイルスを作製し得る。
【０５４４】
バキュロウイルス
本明細書に開示される粒子作製は、ペイロードをコードするポリヌクレオチド配列を含むペイロードコンストラクトを送達するため標的細胞に接触するＡＡＶ粒子の作製プロセスおよび方法を記載する。
【０５４５】
簡潔に言えば、ウイルスコンストラクトベクターおよびＡＡＶペイロードコンストラクトベクターが、各々、公知の、当業者によって実施されている標準的な分子生物学的技術により、トランスポゾンドナー／アクセプターシステムによってバキュロウイルスプラスミドとしても知られるバクミドに取り込まれる。別個のウイルス複製細胞集団のトランスフェクションにより２つのバキュロウイルスが生じ、一方はウイルスコンストラクト発現ベクターを含み、もう一方はＡＡＶペイロードコンストラクト発現ベクターを含む。これらの２つのバキュロウイルスを使用して単一のウイルス複製細胞集団を感染させて、ＡＡＶ粒子を作製し得る。
【０５４６】
限定はされないが、スポドプテラ・フルギペルダ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）（Ｓｆ９）細胞を含め、昆虫細胞においてウイルス粒子を作製するためのバキュロウイルス発現ベクターは、高力価のウイルス粒子産物を提供する。ウイルスコンストラクト発現ベクターおよびＡＡＶペイロードコンストラクト発現ベクターをコードする組換えバキュロウイルスは、ウイルス複製細胞の増殖性感染を惹起する。初感染から放出された感染性バキュロウイルス粒子は培養物中の更なる細胞に二次感染し、初期感染多重度の関数である所定回数の感染サイクルで細胞培養物集団全体に指数関数的に感染する。ウラベ・Ｍ（Ｕｒａｂｅ，Ｍ．）ら著、ジャーナル・オブ・バイロロジー（Ｊ  Ｖｉｒｏｌ．）、２００６年２月、第８０巻、第４号、ｐ．１８７４〜８５（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）を参照されたい。
【０５４７】
昆虫細胞系におけるバキュロウイルスによるＡＡＶ粒子の作製は、公知のバキュロウイルスの遺伝的および物理的不安定性に対処し得る。一実施形態において、この作製システムは、タイターレス感染細胞保存およびスケールアップシステムを利用することにより複数継代をかけてバキュロウイルスの不安定性に対処する。ウイルス作製細胞の小規模シード培養物に、ウイルス粒子の構造、非構造成分をコードするウイルス発現コンストラクトがトランスフェクトされる。バキュロウイルス感染ウイルス作製細胞がアリコートに回収され、それが液体窒素で凍結保存され得る；アリコートは、大規模ウイルス作製細胞培養物の感染のための生存能力および感染力を維持している。ワシルコ・ＤＪ（Ｗａｓｉｌｋｏ  ＤＪ）ら著、プロテイン・エクスプレッション・アンド・ピュリフィケーション（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒ  Ｐｕｒｉｆ．）、２００９年６月、第６５巻、第２号、ｐ．１２２〜３２、この内容は本明細書において全体として参照により援用される。
【０５４８】
遺伝的に安定したバキュロウイルスを使用して、無脊椎動物細胞においてＡＡＶ粒子を作製するための成分のうちの１つ以上の供給源を作製してもよい。一実施形態において、欠損バキュロウイルス発現ベクターが昆虫細胞のエピソームに保持されてもよい。かかる実施形態においてバクミドベクターは、限定はされないが、プロモータ、エンハンサー、および／または細胞周期調節性複製エレメントを含め、複製制御エレメントで操作される。
【０５４９】
一実施形態において、バキュロウイルスは、キチナーゼ／カテプシン遺伝子座への組換えのため（非）選択可能マーカで操作されてもよい。組織培養におけるバキュロウイルスの増殖にｃｈｉａ／ｖ−ｃａｔｈ遺伝子座は非必須であり、Ｖ−ｃａｔｈ（ＥＣ  ３．４．２２．５０）は、Ａｒｇ−Ａｒｇジペプチド含有基質上で最も活性が高いシステインエンドプロテアーゼである。Ａｒｇ−Ａｒｇジペプチドはデンソウイルスおよびパルボウイルスカプシド構造タンパク質に存在するが、ディペンドウイルスＶＰ１にはまれにしか見られない。
【０５５０】
一実施形態において、バキュロウイルス感染に許容的な安定ウイルス複製細胞は、限定はされないが、ＡＡＶゲノム全体、ＲｅｐおよびＣａｐ遺伝子、Ｒｅｐ遺伝子、Ｃａｐ遺伝子、別個の転写カセットとしての各Ｒｅｐタンパク質、別個の転写カセットとしての各ＶＰタンパク質、ＡＡＰ（アセンブリ活性化タンパク質）、または天然もしくは非天然プロモータを有するバキュロウイルスヘルパー遺伝子のうちの少なくとも１つを含め、ＡＡＶ複製およびウイルス粒子産生に必要なエレメントのいずれかの少なくとも１つの安定に組み込まれたコピーで操作される。
【０５５１】
大規模作製
一部の実施形態において、ＡＡＶ粒子作製は、作製規模を増加させるように改良されてもよい。本開示に係る大規模ウイルス作製方法には、米国特許第５，７５６，２８３号明細書、同第６，２５８，５９５号明細書、同第６，２６１，５５１号明細書、同第６，２７０，９９６号明細書、同第６，２８１，０１０号明細書、同第６，３６５，３９４号明細書、同第６，４７５，７６９号明細書、同第６，４８２，６３４号明細書、同第６，４８５，９６６号明細書、同第６，９４３，０１９号明細書、同第６，９５３，６９０号明細書、同第７，０２２，５１９号明細書、同第７，２３８，５２６号明細書、同第７，２９１，４９８号明細書および同第７，４９１，５０８号明細書または国際公開第１９９６０３９５３０号パンフレット、同第１９９８０１００８８号パンフレット、同第１９９９０１４３５４号パンフレット、同第１９９９０１５６８５号パンフレット、同第１９９９０４７６９１号パンフレット、同第２００００５５３４２号パンフレット、同第２００００７５３５３号パンフレットおよび同第２００１０２３５９７号パンフレット（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に教示されるもののいずれかが含まれてもよい。ウイルス粒子作製規模を増加させる方法は、典型的には、ウイルス複製細胞の数を増加させることを含む。一部の実施形態において、ウイルス複製細胞は接着細胞を含む。接着ウイルス複製細胞によるウイルス粒子作製規模の増加には、より大きい細胞培養表面が必要である。ある場合には、大規模作製方法は、細胞培養表面を増加させるためのローラボトルの使用を含む。表面積が増加した他の細胞培養基材が当該技術分野において公知である。表面積が増加した更なる接着細胞培養製品の例としては、限定はされないが、セルスタック（登録商標）（ＣＥＬＬＳＴＡＣＫ（登録商標））、セルキューブ（登録商標）（ＣＥＬＬＣＵＢＥ（登録商標））（コーニング社（Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｃｏｒｐ．）、ニューヨーク州コーニング（Ｃｏｒｎｉｎｇ））およびヌンク（商標）（ＮＵＮＣ（商標））セル・ファクトリー（商標）（ＣＥＬＬ  ＦＡＣＴＯＲＹ（商標））（サーモ・サイエンティフィック（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、マサチューセッツ州ウォルサム（Ｗａｌｔｈａｍ））が挙げられる。ある場合には、大規模接着細胞表面は約１，０００ｃｍ２〜約１００，０００ｃｍ２を含み得る。ある場合には、大規模接着細胞培養物は、約１０７〜約１０９細胞、約１０８〜約１０１０細胞、約１０９〜約１０１２細胞または少なくとも１０１２細胞を含み得る。ある場合には、大規模接着培養物は、約１０９〜約１０１２、約１０１０〜約１０１３、約１０１１〜約１０１４、約１０１２〜約１０１５または少なくとも１０１５ウイルス粒子を作製し得る。
【０５５２】
一部の実施形態において、本開示の大規模ウイルス作製方法は浮遊細胞培養の使用を含み得る。浮遊細胞培養は細胞数の大幅な増加を可能にする。典型的には、約１０〜５０ｃｍ２の表面積で成長させることのできる接着細胞数を懸濁液中では約１ｃｍ３の体積で成長させることができる。
【０５５３】
大規模培養フォーマットでの複製細胞のトランスフェクションは、当該技術分野において公知の任意の方法により行われてもよい。大規模接着細胞培養には、トランスフェクション方法として、限定はされないが、無機化合物（例えばリン酸カルシウム）、有機化合物［例えばポリエチレンイミン（ＰＥＩ）］の使用または非化学的方法（例えば電気穿孔）の使用を挙げることができる。懸濁液中で成長させる細胞では、トランスフェクション方法として、限定はされないが、リン酸カルシウムの使用およびＰＥＩの使用を挙げることができる。ある場合には、大規模浮遊培養物のトランスフェクションは、Ｆｅｎｇ．Ｌ．ら２００８年、バイオテクノロジー・アンド・アプライド・バイオケミストリー（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．）、第５０巻、ｐ．１２１〜３２（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される「トランスフェクション手順（Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ）」と題される節に従い行われてもよい。かかる実施形態によれば、トランスフェクトしようとするプラスミドの導入用にＰＥＩ−ＤＮＡ複合体が形成され得る。ある場合には、ＰＥＩ−ＤＮＡ複合体をトランスフェクトされる細胞に、トランスフェクション前に「ショック」が与えられてもよい。これは、細胞培養物温度を約１時間にわたって４℃に下げることを含む。ある場合には、約１０分〜約５時間の時間にわたって細胞培養物にショックが与えられてもよい。ある場合には、約０℃〜約２０℃の温度で細胞培養物にショックが与えられてもよい。
【０５５４】
ある場合には、トランスフェクションは、１つ以上のＡＡＶペイロードコンストラクトからの核酸の発現を低下させるため１つ以上のＲＮＡエフェクター分子発現ベクターを含み得る。かかる方法は、ペイロードコンストラクトの発現に浪費される細胞リソースを減少させることによりウイルス粒子の産生を増強し得る。ある場合には、かかる方法は、米国特許出願公開第２０１４／００９９６６６号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に教示されるものに従い行われてもよい。
【０５５５】
バイオリアクター
一部の実施形態において、大規模ウイルス作製には細胞培養バイオリアクターが用いられ得る。ある場合には、バイオリアクターは撹拌槽型リアクターを含む。かかるリアクターは、概して、典型的には円筒形状の、撹拌機（例えばインペラ）を備えたベッセルを含む。一部の実施形態において、かかるバイオリアクターベッセルは、ベッセル温度を制御し、および／または周囲温度の変化による影響を最小限に抑えるため、ウォータジャケット内に置かれ得る。バイオリアクターベッセル容積は、サイズが約５００ｍｌ〜約２Ｌ、約１Ｌ〜約５Ｌ、約２．５Ｌ〜約２０Ｌ、約１０Ｌ〜約５０Ｌ、約２５Ｌ〜約１００Ｌ、約７５Ｌ〜約５００Ｌ、約２５０Ｌ〜約２，０００Ｌ、約１，０００Ｌ〜約１０，０００Ｌ、約５，０００Ｌ〜約５０，０００Ｌまたは少なくとも５０，０００Ｌの範囲であり得る。ベッセルの底は丸底または平底であり得る。ある場合には、動物細胞培養物が丸底ベッセルのバイオリアクターに維持され得る。
【０５５６】
ある場合には、バイオリアクターベッセルはサーモサーキュレータを用いて温められてもよい。サーモサーキュレータは熱水をウォータジャケットの周りに圧送する。ある場合には、熱水は、バイオリアクターベッセル内に存在する管（例えばコイル管）を通じて圧送されてもよい。ある場合には、限定はされないが、培養培地の真上にある空気層を含め、バイオリアクターの周りに温風が循環してもよい。加えて、細胞生存が最適となるようにｐＨおよびＣＯ２レベルが維持され得る。
【０５５７】
ある場合には、バイオリアクターは中空糸リアクターを含み得る。中空糸バイオリアクターは、足場依存性および足場非依存性の両方の細胞の培養を支持し得る。更なるバイオリアクターとしては、限定はされないが、充填床または固定床バイオリアクターを挙げることができる。かかるバイオリアクターは、接着細胞の付着用ガラスビーズを有するベッセルを含み得る。更なる充填床リアクターはセラミックビーズを含み得る。
【０５５８】
ある場合には、ウイルス粒子は使い捨てバイオリアクターを用いて作製される。一部の実施形態において、かかるバイオリアクターとしては、ウェーブ（商標）（ＷＡＶＥ（商標））使い捨てバイオリアクターを挙げることができる。
【０５５９】
一部の実施形態において、動物細胞バイオリアクター培養物におけるＡＡＶ粒子作製は、米国特許第５，０６４７６４号明細書、同第６，１９４，１９１号明細書、同第６，５６６，１１８号明細書、同第８，１３７，９４８号明細書または米国特許出願公開第２０１１／０２２９９７１号明細書（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に教示される方法により行われてもよい。
【０５６０】
細胞溶解
本発明の細胞は、限定はされないがウイルス作製細胞を含め、当該技術分野において公知の任意の方法により細胞溶解に供されてもよい。細胞溶解は、本発明の任意の細胞内に存在する１つ以上の薬剤（例えばウイルス粒子）を入手するために行われ得る。一部の実施形態において、細胞溶解は、米国特許第７，３２６，５５５号明細書、同第７，５７９，１８１号明細書、同第７，０４８，９２０号明細書、同第６，４１０，３００号明細書、同第６，４３６，３９４号明細書、同第７，７３２，１２９号明細書、同第７，５１０，８７５号明細書、同第７，４４５，９３０号明細書、同第６，７２６，９０７号明細書、同第６，１９４，１９１号明細書、同第７，１２５，７０６号明細書、同第６，９９５，００６号明細書、同第６，６７６，９３５号明細書、同第７，９６８，３３３号明細書、同第５，７５６，２８３号明細書、同第６，２５８，５９５号明細書、同第６，２６１，５５１号明細書、同第６，２７０，９９６号明細書、同第６，２８１，０１０号明細書、同第６，３６５，３９４号明細書、同第６，４７５，７６９号明細書、同第６，４８２，６３４号明細書、同第６，４８５，９６６号明細書、同第６，９４３，０１９号明細書、同第６，９５３，６９０号明細書、同第７，０２２，５１９号明細書、同第７，２３８，５２６号明細書、同第７，２９１，４９８号明細書および同第７，４９１，５０８号明細書または国際公開第１９９６０３９５３０号パンフレット、同第１９９８０１００８８号パンフレット、同第１９９９０１４３５４号パンフレット、同第１９９９０１５６８５号パンフレット、同第１９９９０４７６９１号パンフレット、同第２００００５５３４２号パンフレット、同第２００００７５３５３号パンフレットおよび同第２００１０２３５９７号パンフレット（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に挙げられる方法のいずれかにより行われてもよい。細胞溶解方法は化学的または機械的であってもよい。化学的細胞溶解は、典型的には、１つ以上の細胞を１つ以上の溶解剤と接触させることを含む。機械的溶解は、典型的には、１つ以上の細胞を１つ以上の溶解条件および／または１つ以上の溶解力に供することを含む。
【０５６１】
一部の実施形態では、化学的溶解を用いて細胞が溶解されてもよい。本明細書で使用されるとき、用語「溶解剤」は、細胞の破壊を助け得る任意の薬剤を指す。ある場合には、溶解剤は溶液中に導入され、溶解溶液または溶解緩衝液と呼ばれる。本明細書で使用されるとき、用語「溶解溶液」は、１つ以上の溶解剤を含む溶液（典型的には水性）を指す。溶解剤に加えて、溶解溶液は、１つ以上の緩衝剤、可溶化剤、界面活性剤、保存剤、凍結保護物質、酵素、酵素阻害薬および／またはキレータを含み得る。溶解緩衝液は、１つ以上の緩衝剤を含む溶解溶液である。溶解溶液の更なる成分としては、１つ以上の可溶化剤を挙げることができる。本明細書で使用されるとき、用語「可溶化剤」は、溶液の１つ以上の成分の溶解度および／または溶液が適用される１つ以上の実体の溶解度を増強する化合物を指す。ある場合には、可溶化剤はタンパク質溶解度を増強する。ある場合には、可溶化剤は、タンパク質のコンホメーションおよび／または活性を維持しながらもタンパク質溶解度を増強するその能力に基づき選択される。
【０５６２】
例示的溶解剤としては、米国特許第８，６８５，７３４号明細書、同第７，９０１，９２１号明細書、同第７，７３２，１２９号明細書、同第７，２２３，５８５号明細書、同第７，１２５，７０６号明細書、同第８，２３６，４９５号明細書、同第８，１１０，３５１号明細書、同第７，４１９，９５６号明細書、同第７，３００，７９７号明細書、同第６，６９９，７０６号明細書および同第６，１４３，５６７号明細書（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるもののいずれかを挙げることができる。ある場合には、溶解剤は、溶解塩、両性薬剤、カチオン性薬剤、イオン性界面活性剤および非イオン性界面活性剤から選択され得る。溶解塩としては、限定はされないが、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）および塩化カリウム（ＫＣｌ）を挙げることができる。更なる溶解塩としては、米国特許第８，６１４，１０１号明細書、同第７，３２６，５５５号明細書、同第７，５７９，１８１号明細書、同第７，０４８，９２０号明細書、同第６，４１０，３００号明細書、同第６，４３６，３９４号明細書、同第７，７３２，１２９号明細書、同第７，５１０，８７５号明細書、同第７，４４５，９３０号明細書、同第６，７２６，９０７号明細書、同第６，１９４，１９１号明細書、同第７，１２５，７０６号明細書、同第６，９９５，００６号明細書、同第６，６７６，９３５号明細書および同第７，９６８，３３３号明細書（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるもののいずれかを挙げることができる。塩の濃度は、細胞膜を破裂させる有効濃度が得られるように増加または減少させてもよい。両性薬剤とは、本明細書において参照されるとき、酸または塩基として反応する能力を有する化合物である。両性薬剤としては、限定はされないが、リゾホスファチジルコリン、３−（（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニウム）−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）、ツヴィッタージェント（登録商標）（ＺＷＩＴＴＥＲＧＥＮＴ（登録商標））などを挙げることができる。カチオン性薬剤としては、限定はされないが、臭化セチルトリメチルアンモニウム（Ｃ（１６）ＴＡＢ）および塩化ベンザルコニウムを挙げることができる。界面活性剤を含む溶解剤には、イオン性界面活性剤または非イオン性界面活性剤が含まれ得る。界面活性剤は、限定はされないが、細胞膜、細胞壁、脂質、炭水化物、リポタンパク質および糖タンパク質を含めた細胞構造を分解するまたは溶解させる働きをし得る。例示的イオン性界面活性剤としては、米国特許第７，６２５，５７０号明細書および同第６，５９３，１２３号明細書または米国特許出願公開第２０１４／００８７３６１号明細書（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に教示されるもののいずれかが挙げられる。幾つかのイオン性界面活性剤としては、限定はされないが、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、コール酸塩およびデオキシコール酸塩を挙げることができる。ある場合には、イオン性界面活性剤は溶解溶液中に可溶化剤として含まれてもよい。非イオン性界面活性剤としては、限定はされないが、オクチルグルコシド、ジギトニン、ルブロール、Ｃ１２Ｅ８、ツイーン（登録商標）−２０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）−２０）、ツイーン（登録商標）−８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）−８０）、トリトンＸ−１００（Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００）およびノニデットＰ−４０（Ｎｏｎｉｏｄｅｔ  Ｐ−４０）を挙げることができる。非イオン性界面活性剤は、典型的には弱溶解剤であるが、細胞性および／またはウイルス性タンパク質を可溶化するための可溶化剤として含まれてもよい。更なる溶解剤としては、酵素および尿素を挙げることができる。ある場合には、細胞溶解およびタンパク質溶解度のうちの１つ以上を増強するため、１つ以上の溶解剤が溶解溶液中に組み合わされてもよい。ある場合には、細胞膜破壊によって引き起こされ得るタンパク質分解を防ぐため、酵素阻害薬が溶解溶液中に含まれてもよい。
【０５６３】
一部の実施形態において、機械的細胞溶解が行われる。機械的細胞溶解方法としては、１つ以上の溶解条件および／または１つ以上の溶解力の使用を挙げることができる。本明細書で使用されるとき、用語「溶解条件」とは、細胞破壊を促進する状態または状況を指す。溶解条件には、特定の温度、圧力、浸透圧純度、塩分などが含まれ得る。ある場合には、溶解条件には温度の増加または低下が含まれる。一部の実施形態によれば、溶解条件には、細胞破壊を促進する温度の変化が含まれる。かかる実施形態により行われる細胞溶解には、凍結融解溶解が含まれ得る。本明細書で使用されるとき、用語「凍結融解溶解」とは、細胞溶液が１回以上の凍結融解サイクルに供される細胞溶解を指す。凍結融解溶解方法によれば、溶液中の細胞が凍結されて、氷の結晶の形成および拡大によって引き起こされる細胞膜の機械的破壊が誘導される。凍結融解溶解方法により用いられる細胞溶液としては、１つ以上の溶解剤、可溶化剤、緩衝剤、凍結保護物質、界面活性剤、保存剤、酵素、酵素阻害薬および／またはキレータを更に挙げることができる。凍結に供した細胞溶液を解凍すると、かかる成分が所望の細胞産物の回収を増強し得る。ある場合には、凍結融解溶解を受ける細胞溶液中に１つ以上の凍結保護物質が含まれる。本明細書で使用されるとき、用語「凍結保護物質」は、１つ以上の物質を凍結に起因する損傷から保護するために使用される薬剤を指す。凍結保護物質としては、米国特許出願公開第２０１３／０３２３３０２号明細書または米国特許第６，５０３，８８８号明細書、同第６，１８０，６１３号明細書、同第７，８８８，０９６号明細書、同第７，０９１，０３０号明細書（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に教示されるもののいずれかを挙げることができる。ある場合には、凍結保護物質としては、限定はされないが、ジメチルスルホキシド、１，２−プロパンジオール、２，３−ブタンジオール、ホルムアミド、グリセロール、エチレングリコール、１，３−プロパンジオールおよびｎ−ジメチルホルムアミド、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシエチルデンプン、アガロース、デキストラン類、イノシトール、グルコース、ヒドロキシエチルデンプン、ラクトース、ソルビトール、メチルグルコース、スクロースおよび尿素を挙げることができる。一部の実施形態において、凍結融解溶解は、米国特許第７，７０４，７２１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される方法のいずれかにより行われてもよい。
【０５６４】
本明細書で使用されるとき、用語「溶解力」は、細胞を破壊するために用いられる物理的活性を指す。溶解力としては、限定はされないが、機械的力、音波的力、重力、光学的力、電気的力などを挙げることができる。機械的力によって行われる細胞溶解は、本明細書では「機械的溶解」と称される。機械的溶解により用いられ得る機械的力としては、高剪断流体力を挙げることができる。かかる機械的溶解方法によれば、マイクロフルイダイザーが使用されてもよい。マイクロフルイダイザーは、典型的には、細胞溶液が適用され得る入力リザーバを含む。次に細胞溶液がポンプ（例えば高圧ポンプ）によって高速および／または高圧で相互作用チャンバに圧送されることにより剪断流体力が生じ得る。次に得られたライセートが１つ以上の出力リザーバに収集され得る。ポンプ速度および／または圧力を調整することにより、細胞溶解を調節し、および産物（例えばウイルス粒子）の回収を増強し得る。他の機械的溶解方法としては、スクレイピングすることによる細胞の物理的破壊を挙げることができる。
【０５６５】
細胞溶解方法は、溶解させる細胞の細胞培養フォーマットに基づき選択されてもよい。例えば、接着細胞培養物では、幾つかの化学的および機械的溶解方法が用いられてもよい。かかる機械的溶解方法としては、凍結融解溶解またはスクレイピングを挙げることができる。別の例では、トリトンＸ−１００（Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ−１００）などの界面活性剤を含む溶解溶液とのインキュベーションによって接着細胞培養物の化学的溶解が行われてもよい。ある場合には、遊離ＤＮＡによって生じるライセートの粘度を低下させるため、接着細胞培養物から生成された細胞ライセートがもう一つのヌクレアーゼで処理されてもよい。
【０５６６】
一実施形態において、効率的で規模を調整可能なＡＡＶ粒子作製に、溶解のないＡＡＶ粒子の回収方法が用いられてもよい。非限定的な例では、ＡＡＶ粒子は、米国特許出願公開第２００９０２７５１０７号明細書（この内容は全体として参照により本明細書に援用される）に記載されるとおり、ヘパリン結合部位を欠くＡＡＶ粒子を培養し、それによりＡＡＶ粒子を細胞培養物の上清中に移らせて、培養物から上清を収集し；および上清からＡＡＶ粒子を単離することにより作製されてもよい。
【０５６７】
清澄化
ウイルス粒子を含む細胞ライセートは清澄化に供され得る。清澄化とは、細胞ライセートからのウイルス粒子の精製において行われる最初のステップを指す。清澄化は、より大きい不溶性のデブリを除去することにより更なる精製にかけるためのライセートを調製する働きをする。清澄化ステップとしては、限定はされないが、遠心およびろ過を挙げることができる。清澄化において、遠心は、より大きいデブリのみを除去するため低速で行われてもよい。同様に、ろ過は、より大きいデブリのみが除去されるように、より大きい孔径のフィルタを使用して行われてもよい。ある場合には、清澄化の間にタンジェンシャルフローろ過が用いられてもよい。ウイルス清澄化の目的には、細胞ライセートのハイスループット処理および最終的なウイルス回収率の最適化が含まれる。清澄化ステップを含める利点には、更に大容積のライセートを処理するため規模を調整可能であることが含まれる。一部の実施形態において、清澄化は、米国特許第８，５２４，４４６号明細書、同第５，７５６，２８３号明細書、同第６，２５８，５９５号明細書、同第６，２６１，５５１号明細書、同第６，２７０，９９６号明細書、同第６，２８１，０１０号明細書、同第６，３６５，３９４号明細書、同第６，４７５，７６９号明細書、同第６，４８２，６３４号明細書、同第６，４８５，９６６号明細書、同第６，９４３，０１９号明細書、同第６，９５３，６９０号明細書、同第７，０２２，５１９号明細書、同第７，２３８，５２６号明細書、同第７，２９１，４９８号明細書、同第７，４９１，５０８号明細書、米国特許出願公開第２０１３／００４５１８６号明細書、同第２０１１／０２６３０２７号明細書、同第２０１１／０１５１４３４号明細書、同第２００３／０１３８７７２号明細書、および国際公開第２００２０１２４５５号パンフレット、同第１９９６０３９５３０号パンフレット、同第１９９８０１００８８号パンフレット、同第１９９９０１４３５４号パンフレット、同第１９９９０１５６８５号パンフレット、同第１９９９０４７６９１号パンフレット、同第２００００５５３４２号パンフレット、同第２００００７５３５３号パンフレットおよび同第２００１０２３５９７号パンフレット（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に提示される方法のいずれかにより行われてもよい。
【０５６８】
ろ過による細胞ライセート清澄化方法は当該技術分野において十分に理解されており、限定はされないが、受動ろ過およびフローろ過を含め、種々の利用可能な方法により行われてもよい。使用されるフィルタは種々の材料および孔径を含み得る。例えば、細胞ライセートフィルタは、約１μＭ〜約５μＭ、約０．５μＭ〜約２μＭ、約０．１μＭ〜約１μＭ、約０．０５μＭ〜約０．０５μＭおよび約０．００１μＭ〜約０．１μＭの孔径を含み得る。細胞ライセートフィルタの例示的孔径としては、限定はされないが、２．０、１．９、１．８、１．７、１．６、１．５、１．４、１．３、１．２、１．１、１、０．９、０．８、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、０．２、０．１、０．９５、０．９、０．８５、０．８、０．７５、０．７、０．６５、０．６、０．５５、０．５、０．４５、０．４、０．３５、０．３、０．２５、０．２、０．１５、０．１、０．０５、０．２２、０．２１、０．２０、０．１９、０．１８、０．１７、０．１６、０．１５、０．１４、０．１３、０．１２、０．１１、０．１、０．０９、０．０８、０．０７、０．０６、０．０５、０．０４、０．０３、０．０２、０．０１、０．０２、０．０１９、０．０１８、０．０１７、０．０１６、０．０１５、０．０１４、０．０１３、０．０１２、０．０１１、０．０１、０．００９、０．００８、０．００７、０．００６、０．００５、０．００４、０．００３、０．００２、０．００１および０．００１μＭを挙げることができる。一実施形態において、清澄化は、大きいデブリを除去するための２．０μＭ孔径のフィルタによるろ過と、続くインタクトな細胞を除去するための０．４５μＭ孔径のフィルタへの通過を含み得る。
【０５６９】
フィルタ材料は種々の材料を含み得る。かかる材料としては、限定はされないが、ポリマー材料および金属材料（例えば焼結金属および有孔アルミニウム）を挙げることができる。例示的材料としては、限定はされないが、ナイロン、セルロース材料（例えば酢酸セルロース）、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、ポリエーテルスルホン、ポリアミド、ポリスルホン、ポリプロピレン、およびポリエチレンテレフタレートを挙げることができる。ある場合には、細胞ライセートの清澄化に有用なフィルタとしては、限定はされないが、ウルチプリーツ・プロフィール（商標）（ＵＬＴＩＰＬＥＡＴ  ＰＲＯＦＩＬＥ（商標））フィルタ（ポール・コーポレーション（Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ニューヨーク州ポートワシントン）、スポー（商標）（ＳＵＰＯＲ（商標））メンブレンフィルタ（ポール・コーポレーション（Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ニューヨーク州ポートワシントン）を挙げることができる。
【０５７０】
ある場合には、ろ過速度および／または有効性を増加させるためフローろ過が行われてもよい。ある場合には、フローろ過は真空ろ過を含み得る。かかる方法によれば、フィルタのうちろ過される細胞ライセートと反対側に真空が作り出される。ある場合には、細胞ライセートを遠心力によってフィルタに通過させてもよい。ある場合には、ポンプを使用して細胞ライセートが清澄化フィルタに押し通される。１つ以上のフィルタを通る細胞ライセートのフロー速度は、チャネルサイズおよび／または流圧の一方を調整することにより調節し得る。
【０５７１】
一部の実施形態によれば、細胞ライセートは遠心によって清澄化されてもよい。遠心を用いると、ライセート中の不溶性粒子をペレット化し得る。清澄化の間、遠心強度［標準重力の倍数を表す重力単位（ｇ）で表される］は続く精製ステップよりも低くてよい。ある場合には、遠心は細胞ライセートに対して約２００ｇ〜約８００ｇ、約５００ｇ〜約１５００ｇ、約１０００ｇ〜約５０００ｇ、約１２００ｇ〜約１００００ｇまたは約８０００ｇ〜約１５０００ｇで行われてもよい。一部の実施形態において、細胞ライセートの遠心は８０００ｇで１５分間行われる。ある場合には、細胞ライセート中の粒子状物質を沈降速度によって分配するため密度勾配遠心法が行われてもよい。本開示の方法により用いられる勾配としては、限定はされないが、塩化セシウム勾配およびイオジキサノール段階勾配を挙げることができる。
【０５７２】
精製：クロマトグラフィー
ある場合には、ＡＡＶ粒子は、清澄化細胞ライセートから１つ以上のクロマトグラフィー方法によって精製されてもよい。クロマトグラフィーとは、混合物から１つ以上の要素を取り分けるための当該技術分野において公知のあらゆる方法を指す。かかる方法としては、限定はされないが、イオン交換クロマトグラフィー（例えば陽イオン交換クロマトグラフィーおよび陰イオン交換クロマトグラフィー）、イムノアフィニティークロマトグラフィーおよびサイズ排除クロマトグラフィーを挙げることができる。一部の実施形態において、ウイルスクロマトグラフィー方法としては、米国特許第５，７５６，２８３号明細書、同第６，２５８，５９５号明細書、同第６，２６１，５５１号明細書、同第６，２７０，９９６号明細書、同第６，２８１，０１０号明細書、同第６，３６５，３９４号明細書、同第６，４７５，７６９号明細書、同第６，４８２，６３４号明細書、同第６，４８５，９６６号明細書、同第６，９４３，０１９号明細書、同第６，９５３，６９０号明細書、同第７，０２２，５１９号明細書、同第７，２３８，５２６号明細書、同第７，２９１，４９８号明細書および同第７，４９１，５０８号明細書または国際公開第１９９６０３９５３０号パンフレット、同第１９９８０１００８８号パンフレット、同第１９９９０１４３５４号パンフレット、同第１９９９０１５６８５号パンフレット、同第１９９９０４７６９１号パンフレット、同第２００００５５３４２号パンフレット、同第２００００７５３５３号パンフレットおよび同第２００１０２３５９７号パンフレット（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に教示されるもののいずれかを挙げることができる。
【０５７３】
一部の実施形態では、イオン交換クロマトグラフィーを用いてウイルス粒子が単離されてもよい。イオン交換クロマトグラフィーを用いると、カプシドタンパク質と、固定相、典型的にはウイルス調製物（例えば清澄化ライセート）を通過させるカラムに存在する荷電部位との間の電荷間相互作用に基づきウイルス粒子が結合する。ウイルス調製物を加えた後、次に溶出溶液を加えることにより電荷間相互作用が破壊されて、結合したウイルス粒子が溶出し得る。溶出溶液は、結合したウイルス粒子の回収が促進されるように塩濃度および／またはｐＨを調整することにより最適化されてもよい。単離されるウイルスカプシドの電荷に応じて、陽イオンまたは陰イオン交換クロマトグラフィー方法が選択され得る。イオン交換クロマトグラフィー方法としては、限定はされないが、米国特許第７，４１９，８１７号明細書、同第６，１４３，５４８号明細書、同第７，０９４，６０４号明細書、同第６，５９３，１２３号明細書、同第７，０１５，０２６号明細書および同第８，１３７，９４８号明細書（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に教示されるもののいずれかを挙げることができる。
【０５７４】
一部の実施形態において、イムノアフィニティークロマトグラフィーが用いられてもよい。イムノアフィニティークロマトグラフィーは、１つ以上の免疫化合物（例えば抗体または抗体関連構造）を利用してウイルス粒子を保持するクロマトグラフィーの一形態である。免疫化合物は、限定はされないが、１つ以上のウイルスコートタンパク質を含め、ウイルス粒子表面上の１つ以上の構造に特異的に結合し得る。ある場合には、免疫化合物は特定のウイルス変種に特異的であってもよい。ある場合には、免疫化合物は複数のウイルス変種に結合してもよい。一部の実施形態において、免疫化合物は組換え一本鎖抗体を含んでもよい。かかる組換え一本鎖抗体としては、スミス・Ｒ・Ｈ（Ｓｍｉｔｈ，Ｒ．Ｈ．）ら著、２００９年、モレキュラー・セラピー（Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．）、第１７巻、第１１号、ｐ．１８８８〜９６（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるものを挙げることができる。かかる免疫化合物は、限定はされないが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ６およびＡＡＶ８を含め、幾つかのＡＡＶカプシド変種への結合能を有する。
【０５７５】
一部の実施形態において、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）が用いられてもよい。ＳＥＣは、ゲルを使用したサイズによる粒子の分離を含み得る。ウイルス粒子精製では、ＳＥＣろ過は時に「ポリッシング」と称されることもある。ある場合には、ＳＥＣは、ほぼ均一な最終産物を生じさせるために行われ得る。かかる最終産物は、ある場合には、前臨床試験および／または臨床試験で使用され得る（コーチン・Ｒ・Ｍ（Ｋｏｔｉｎ，Ｒ．Ｍ．）、２０１１年、ヒューマン・モレキュラー・ジェネティクス（Ｈｕｍａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、第２０巻、第１号、ｐ．Ｒ２〜Ｒ６、この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。ある場合には、ＳＥＣは、米国特許第６，１４３，５４８号明細書、同第７，０１５，０２６号明細書、同第８，４７６，４１８号明細書、同第６，４１０，３００号明細書、同第８，４７６，４１８号明細書、同第７，４１９，８１７号明細書、同第７，０９４，６０４号明細書、同第６，５９３，１２３号明細書、および同第８，１３７，９４８号明細書（これらの各々の内容は本明細書において全体として参照により援用される）に教示される方法のいずれかにより行われてもよい。
【０５７６】
一実施形態において、少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含む組成物は、米国特許第６１４６８７４号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される方法を用いて単離または精製されてもよい。
【０５７７】
一実施形態において、少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含む組成物は、米国特許第６６６０５１４号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される方法を用いて単離または精製されてもよい。
【０５７８】
一実施形態において、少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含む組成物は、米国特許第８２８３１５１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される方法を用いて単離または精製されてもよい。
【０５７９】
一実施形態において、少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含む組成物は、米国特許第８５２４４４６号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される方法を用いて単離または精製されてもよい。
【０５８０】
ＩＩ．製剤および送達
医薬組成物および製剤
医薬組成物（ｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチド配列を含むＡＡＶ粒子）に加えて、本明細書にはヒトへの投与に好適な医薬組成物が提供され、当業者は、かかる組成物が概して任意の他の動物、例えば非ヒト動物、例えば非ヒト哺乳類への投与に好適であることを理解するであろう。組成物を種々の動物への投与に好適にするための、ヒトへの投与に好適な医薬組成物の修飾については十分に理解されており、獣医薬理学の当業者は、あったとしても通常どおりに過ぎない実験をもって、かかる修飾を設計および／または実施することができる。医薬組成物の投与が企図される対象としては、限定はされないが、ヒトおよび／または他の霊長類；ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、イヌ、マウス、および／またはラットなど、商業的に関連性のある哺乳類を含めた哺乳類；および／または、家禽、ニワトリ、アヒル、ガチョウ、および／またはシチメンチョウなど、商業的に関連性のある鳥類を含めた鳥類が挙げられる。
【０５８１】
一部の実施形態において、組成物は、ヒト、ヒト患者または対象に投与される。本開示の目的のために、「活性成分」という語句は一般に、合成ｓｉＲＮＡ二重鎖、ｓｉＲＮＡ二重鎖をコードする調節性ポリヌクレオチド、または本明細書で記載されるｓｉＲＮＡ二重鎖をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を指す。
【０５８２】
本明細書に記載される医薬組成物の製剤は、薬理学の技術分野において公知のまたは今後開発される任意の方法によって調製されてもよい。一般に、かかる調製方法は、活性成分を賦形剤および／または１つ以上の他の補助成分と合わせるステップ、および次に、必要であればおよび／または望ましい場合には、生成物を所望の単回または複数回用量単位に分割、付形および／または包装するステップを含む。
【０５８３】
本発明に係る医薬組成物中の活性成分、薬学的に許容可能な賦形剤、および／または任意の追加成分の相対量は、治療対象のアイデンティティ、サイズ、および／または状態に応じて、更には組成物が投与される経路に応じて異なることになる。
【０５８４】
本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチド配列を含むＡＡＶ粒子は、１つ以上の賦形剤を使用して製剤化することにより、（１）安定性を増加させる；（２）細胞トランスフェクションまたは形質導入を増加させる；（３）持続または遅延放出を可能にする；または（４）体内分布を変化させる（例えば、ＡＡＶ粒子を脳およびニューロンなどの特異的組織または細胞型に標的化する）ことができる。
【０５８５】
本発明の製剤は、限定なしに、生理食塩水、リピドイド、リポソーム、脂質ナノ粒子、ポリマー、リポプレックス、コア−シェルナノ粒子、ペプチド、タンパク質、ＡＡＶ粒子をトランスフェクトした細胞（例えば、対象への移植用）、ナノ粒子模倣体およびこれらの組合せを含むことができる。更に、本発明のＡＡＶ粒子は、自己集合性核酸ナノ粒子を使用して製剤化されてもよい。
【０５８６】
本明細書に記載される医薬組成物の製剤は、薬理学の技術分野において公知のまたは今後開発される任意の方法によって調製されてもよい。一般に、かかる調製方法は、活性成分を賦形剤および／または１つ以上の他の補助成分と合わせるステップを含む。
【０５８７】
本開示に係る医薬組成物は、バルクで、単回単位用量として、および／または複数の単回単位用量として調製、包装、および／または販売されてもよい。本明細書で使用されるとき、「単位用量」は、所定量の活性成分を含む医薬組成物の個別的な量を指す。活性成分の量は、概して対象に投与されるであろう活性成分の投薬量に等しく、および／またはかかる投薬量の好都合な一部、例えばかかる投薬量の２分の１または３分の１である。
【０５８８】
本開示に係る医薬組成物中の活性成分、薬学的に許容可能な賦形剤、および／または任意の追加成分の相対量は、治療下の対象のアイデンティティ、サイズ、および／または状態に応じて、更には組成物が投与される経路に応じて異なり得る。例えば、組成物は、０．１％〜９９％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。例として、組成物は、０．１％〜１００％、例えば０．５〜５０％、１〜３０％、５〜８０％、少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。
【０５８９】
一部の実施形態において、薬学的に許容可能な賦形剤は、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の純度であってもよい。一部の実施形態において、賦形剤はヒトへの使用および動物への使用が承認されている。一部の実施形態において、賦形剤は米国食品医薬品局によって承認されていてもよい。一部の実施形態において、賦形剤は医薬品グレードであってもよい。一部の実施形態において、賦形剤は、米国薬局方（ＵＳＰ）、欧州薬局方（ＥＰ）、英国薬局方、および／または国際薬局方の規格に適合し得る。
【０５９０】
賦形剤には、本明細書で使用されるとき、限定はされないが、所望の特定の剤形に適するとおりのあらゆる溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体媒体、分散液または懸濁液助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、保存剤などが含まれる。医薬組成物を製剤化するための種々の賦形剤および組成物の調製技法は当該技術分野において公知である（「レミントン：薬学の科学と実践（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ）」、第２１版、Ａ・Ｒ・ジェンナロ（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ）著、リッピンコット・ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ）、メリーランド州ボルチモア（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ）、２００６年を参照のこと；全体として参照により本明細書に援用される）。従来の賦形剤媒体の使用は本開示の範囲内に企図され得るが、但し、任意の望ましくない生物学的効果を生じたり、またはその他、医薬組成物の任意の他の１つまたは複数の成分と有害な形で相互作用したりするなどにより、任意の従来の賦形剤媒体が物質またはその誘導体と不適合である場合は除く。
【０５９１】
例示的希釈剤としては、限定はされないが、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウム  ラクトース、スクロース、セルロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、コーンスターチ、粉末糖等、および／またはこれらの組合せが挙げられる。
【０５９２】
一部の実施形態において、製剤は少なくとも１つの非活性成分を含み得る。本明細書で使用されるとき、用語「非活性成分」は、製剤に含まれる１つ以上の非活性薬剤を指す。一部の実施形態において、本発明の製剤に使用し得る非活性成分は、全てが米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認されているか、いずれも承認されていないか、または一部が承認されているものであり得る。
【０５９３】
本発明のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列を含むベクターの製剤は、カチオンまたはアニオンを含み得る。一実施形態において、製剤は、限定はされないが、Ｚｎ２＋、Ｃａ２＋、Ｃｕ２＋、Ｍｇ＋およびこれらの組合せなど、金属カチオンを含む。
【０５９４】
本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容可能な塩」は、開示される化合物の誘導体を指し、ここで親化合物は、既存の酸または塩基部分からその塩形態への変換（例えば、遊離塩基基を好適な有機酸と反応させることによる）によって修飾される。薬学的に許容可能な塩の例としては、限定はされないが、アミン類などの塩基性残基の鉱酸塩または有機酸塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩または有機塩などが挙げられる。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、酢酸、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、カンファー酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプトン酸塩、ヘキサン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなど、ならびに非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、およびアミン陽イオン、例えば、限定はされないが、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどが挙げられる。本開示の薬学的に許容可能な塩には、例えば非毒性無機酸または有機酸から形成される親化合物の従来の非毒性塩が含まれる。本開示の薬学的に許容可能な塩は、従来の化学的方法により塩基または酸部分を含有する親化合物から合成することができる。概して、かかる塩は、遊離酸または塩基形態のこれらの化合物と、水中または有機溶媒中、またはこれら２つの混合物中（概して、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水性媒体が好ましい）にある化学量論量の適切な塩基または酸とを反応させることにより調製し得る。好適な塩の一覧については、「レミントンの薬学科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）」、第１７版、マック・パブリッシング・カンパニー（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、ペンシルベニア州イーストン（Ｅａｓｔｏｎ）、１９８５年、ｐ．１４１８、「薬学的塩：特性、選択、および使用（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ）」、Ｐ・Ｈ・シュタール（Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ）およびＣ・Ｇ・ウェルムス（Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ）編、ワイリー−ブイシーエイチ（Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ）、２００８年、およびベルジュ（Ｂｅｒｇｅ）ら著、ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンス（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）、第６６巻、ｐ．１〜１９、１９７７年が参照される；この各々の内容は全体として参照により本明細書に援用される。
【０５９５】
用語「薬学的に許容可能な溶媒和物」は、本明細書で使用されるとき、好適な溶媒の分子が結晶格子に取り込まれている本発明の化合物を意味する。好適な溶媒は、投与される投薬量で生理学的に忍容可能である。例えば、溶媒和物は、有機溶媒、水、またはこれらの混合物を含む溶液から結晶化、再結晶化、または沈殿によって調製されてもよい。好適な溶媒の例は、エタノール、水（例えば、一水和物、二水和物、および三水和物）、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン（ＤＭＥＵ）、１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２−（１Ｈ）−ピリミジノン（ＤＭＰＵ）、アセトニトリル（ＡＣＮ）、プロピレングリコール、酢酸エチル、ベンジルアルコール、２−ピロリドン、安息香酸ベンジルなどである。水が溶媒であるとき、その溶媒和物は「水和物」と称される。
【０５９６】
本発明によれば、ｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチド配列を含むＡＡＶ粒子は、ＣＮＳ送達用に製剤化されてもよい。脳血液関門を通過する薬剤が使用されてもよい。例えば、脳血液関門内皮をｓｉＲＮＡ分子の標的とし得る、一部の細胞透過性ペプチドを使用して、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖を製剤化してもよい。
【０５９７】
非活性成分
一部の実施形態において、製剤は、非活性成分である少なくとも１つの賦形剤を含み得る。本明細書で使用されるとき、用語「非活性成分」は、製剤中に含まれる１つ以上の非活性薬剤を指す。一部の実施形態において、本開示の製剤に使用し得る非活性成分は、全てが米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認されているか、いずれも承認されていないか、または一部が承認されているものであり得る。
【０５９８】
本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の製剤は、カチオンまたはアニオンを含み得る。一実施形態において、製剤は、限定はされないが、Ｚｎ２＋、Ｃａ２＋、Ｃｕ２＋、Ｍｇ＋およびこれらの組合せなど、金属カチオンを含む。非限定的な例として、製剤は、金属カチオンと錯体化した本明細書に記載されるポリマーおよび組成物を含み得る（例えば、米国特許第６，２６５，３８９号明細書および同第６，５５５，５２５号明細書を参照のこと、これらの各々は全体として参照により本明細書に援用される）。
【０５９９】
送達
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、欧州特許出願第１８５７５５２号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるＡＡＶビリオンの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
【０６００】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、欧州特許出願第２６７８４３３号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるＡＡＶベクターを用いたタンパク質の送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
【０６０１】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、米国特許第５，８５８，３５１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるＡＡＶベクターを用いたＤＮＡ分子の送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
【０６０２】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、米国特許第６，２１１，１６３号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される血流へのＤＮＡの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
【０６０３】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、米国特許第６，３２５，９９８号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるＡＡＶビリオンの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
【０６０４】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、米国特許第７，５８８，７５７号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される中枢神経系へのペイロードの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
【０６０５】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、米国特許第８２８３１５１号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるペイロードの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
【０６０６】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、国際公開第２００１０８９５８３号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるグルタミン酸デカルボキシラーゼ（ＧＡＤ）送達ベクターを用いたペイロードの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
【０６０７】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、国際公開第２０１２０５７３６３号パンフレット（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載される神経細胞へのペイロードの送達方法を用いて投与または送達されてもよい。
【０６０８】
細胞への送達
本開示は、上述のＡＡＶポリヌクレオチドまたはＡＡＶゲノムのいずれかを細胞または組織に送達する方法であって、前記ＡＡＶポリヌクレオチドまたはＡＡＶゲノムと細胞または組織を接触させることまたは前記ＡＡＶポリヌクレオチドまたはＡＡＶゲノムを含む粒子と細胞または組織を接触させること、または医薬組成物を含めた記載される組成物のいずれかと細胞または組織を接触させることを含む方法を提供する。ＡＡＶポリヌクレオチドまたはＡＡＶゲノムを細胞または組織に送達する方法は、インビトロ、エキソビボ、またはインビボで達成することができる。
【０６０９】
細胞への導入−合成ｄｓＲＮＡ
ｓｉＲＮＡ分子（例えば、ｓｉＲＮＡ二重鎖およびｄｓＲＮＡ）の化学的および生物学的安定性を確保するためには、ｓｉＲＮＡ分子を標的細胞の内部に送達することが重要である。一部の実施形態において、細胞としては、限定はされないが、哺乳類起源の細胞、ヒト起源の細胞、胚性幹細胞、人工多能性幹細胞、神経幹細胞、および神経前駆細胞を挙げることができる。
【０６１０】
核酸は、ｓｉＲＮＡを含め、正常な生理条件下で糖−リン酸骨格に正味負電荷を有する。細胞に侵入するためには、ｓｉＲＮＡ分子は、その頭部基が同様に負電荷である細胞膜の脂質二重層に接触しなければならない。
【０６１１】
ｓｉＲＮＡ二重鎖は、パッケージ粒子など、それが細胞膜を通り抜けることを可能にする担体と複合体化することにより、ｓｉＲＮＡの細胞取込みを促進し得る。パッケージ粒子としては、限定はされないが、リポソーム、ナノ粒子、カチオン性脂質、ポリエチレンイミン誘導体、デンドリマー、カーボンナノチューブおよび炭素系ナノ粒子とデンドリマーとの組合せを挙げることができる。脂質はカチオン性脂質および／または中性脂質であってもよい。ｓｉＲＮＡ分子とカチオン性担体との間の十分に確立された親油性複合体に加えて、ｓｉＲＮＡ分子は、コレステロールなど、疎水性部分にコンジュゲートすることができる（例えば、米国特許出願公開第２０１１０１１０９３７号明細書；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。この送達方法は、ｓｉＲＮＡ分子のインビトロ細胞取込みおよびインビボ薬理特性を改善する可能性がある。本発明のｓｉＲＮＡ分子はまた、ＭＰＧ、トランスポータンまたはペネトラチンなど、ある種のカチオン性細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）に共有結合的または非共有結合的にコンジュゲートされてもよい（例えば、米国特許出願公開第２０１１００８６４２５号明細書；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
【０６１２】
細胞への導入−ＡＡＶ粒子
本発明のｓｉＲＮＡ分子（例えばｓｉＲＮＡ二重鎖）は、限定はされないがＡＡＶ粒子など、種々の手法のいずれかを用いて細胞に導入されてもよい。これらのＡＡＶ粒子は、トランスフェクションに容易には適さない細胞へのｓｉＲＮＡ分子の侵入を促進するように操作および最適化される。また、幾つかの合成ＡＡＶ粒子はｓｈＲＮＡを細胞ゲノムに組み込む能力を有し、それにより安定したｓｉＲＮＡ発現および標的遺伝子の長期ノックダウンがもたらされる。このように、ＡＡＶ粒子は、野生型ウイルスに見られる有害な複製および／または組込み特徴を欠きながらも、特異的送達媒体として操作される。
【０６１３】
一部の実施形態において、細胞を、ｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチド配列を含むＡＡＶ粒子、および親油性担体と接触させることにより、本発明のｓｉＲＮＡ分子を、細胞に導入する。他の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞において転写されるとｓｉＲＮＡ分子を産生する能力を有する核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞にトランスフェクトするか、または感染させることにより細胞に導入される。一部の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、細胞において転写されるとｓｉＲＮＡ分子を産生する能力を有する核酸配列を含むＡＡＶ粒子を細胞に注入することにより細胞に導入される。
【０６１４】
一部の実施形態において、トランスフェクション前に、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は細胞にトランスフェクトされてもよい。
他の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、電気穿孔によって細胞に送達されてもよい（例えば米国特許出願公開第２００５００１４２６４号明細書；この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。
【０６１５】
本明細書に記載されるｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を導入する他の方法としては、米国特許出願公開第２０１２０２６４８０７号明細書（この内容は本明細書において全体として参照により援用される）に記載されるとおりの光化学的インターナリゼーションを挙げることができる。
【０６１６】
一部の実施形態において、本明細書に記載される製剤は、本明細書に記載されるｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含有し得る。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子は、１つの標的部位にあるＨＴＴ遺伝子を標的としてもよい。別の実施形態において、製剤は、各ＡＡＶ粒子が、異なる標的部位において、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む、複数のＡＡＶ粒子を含む。ＨＴＴは、２個、３個、４個、５個、または５個超の部位において、標的とすることができる。
【０６１７】
一実施形態において、限定はされないが、ヒト、イヌ、マウス、ラットまたはサルなど、任意の関連性のある種からのＡＡＶ粒子が細胞に導入されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、治療しようとする疾患に関連性のある細胞に導入されてもよい。非限定的な例として、疾患はＨＤであり、かつ標的細胞はニューロンおよびアストロサイトである。別の非限定的な例として、疾患はＨＤであり、かつ標的細胞は中型有棘ニューロン、皮質ニューロンおよびアストロサイトである。
【０６１８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、標的配列の内因性発現レベルが高い細胞に導入されてもよい。
別の実施形態において、ＡＡＶ粒子は、標的配列の内因性発現レベルが低い細胞に導入されてもよい。
【０６１９】
一実施形態において、細胞は、高いＡＡＶ形質導入効率を有するものであってもよい。
対象への送達
本開示は更に、上述のＡＡＶポリヌクレオチドまたはＡＡＶゲノムのいずれかを哺乳類対象を含めた対象に送達する方法であって、前記ＡＡＶポリヌクレオチドまたはＡＡＶゲノムを対象に投与すること、または前記ＡＡＶポリヌクレオチドまたはＡＡＶゲノムを含む粒子を対象に投与すること、または医薬組成物を含めた記載される組成物のいずれかを対象に投与することを含む方法を提供する。
【０６２０】
本明細書に記載されるＡＡＶ粒子の医薬組成物は、バイオアベイラビリティ、治療ウィンドウおよび／または分布容積のうちの１つ以上によって特徴付けることができる。
ＩＩＩ．投与および用量設定
投与
本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、治療上有効な結果をもたらす任意の経路によって投与されてもよい。それらとしては、限定はされないが、臓器の実質の範囲内、例えば、限定はされないが、脳（例えば実質内）、線条体（線条体内）、経腸（腸の中）、胃腸、硬膜上、経口（口を介して）、経皮、硬膜外、大脳内（大脳の中）、脳室内（脳室の中）、軟膜下（軟膜の下）、皮膚上（皮膚への塗布）、皮内（皮膚それ自体の中）、皮下（皮膚の下）、鼻腔投与（鼻を通じて）、静脈内（静脈の中）、静脈内ボーラス、静脈内点滴、動脈内（動脈の中）、筋肉内（筋肉の中）、心臓内（心臓の中）、骨内注入（骨髄の中）、髄腔内（脊柱管の中）、神経節内（神経節の中）、腹腔内（腹膜への注入または注射）、膀胱内注入、硝子体内（眼を通じて）、海綿体内注射（病的腔の中）、腔内（陰茎の基部の中）、腟内投与、子宮内、羊膜外投与、経皮（全身分布のためのインタクトな皮膚を通じた拡散）、経粘膜（粘膜を通じた拡散）、経腟、インサフレーション（鼻から吸い込む）、舌下、唇下、浣腸、点眼薬（結膜上）、点耳薬で、耳介（耳内または耳を介して）、頬側（頬の方に向けて）、結膜、皮膚、歯（１本または複数の歯に対して）、電気浸透、子宮頚管内、副鼻腔内、気管内、体外、血液透析、浸潤、間質内、腹腔内、羊膜内、関節内、胆管内、気管支内、嚢内、軟骨内（軟骨の範囲内）、仙骨内（馬尾（ｃａｕｄａ  ｅｑｕｉｎｅ）の範囲内）、大槽内（大槽小脳延髄槽の範囲内）、角膜内（角膜の範囲内）、歯冠内、冠内（冠動脈の範囲内）、海綿体内（ｉｎｔｒａｃｏｒｐｏｒｕｓ  ｃａｖｅｒｎｏｓｕｍ）（陰茎海綿体（ｃｏｒｐｏｒｕｓ  ｃａｖｅｒｎｏｓａ）の可膨張性腔の範囲内）、椎間板内（椎間板の範囲内）、管内（腺管の範囲内）、十二指腸内（十二指腸の範囲内）、硬膜内（硬膜の範囲内または真下）、表皮内（表皮に対して）、食道内（食道に対して）、胃内（胃の範囲内）、歯肉内（歯肉の範囲内）、回腸内（小腸の遠位部分の範囲内）、病巣内（局所病変の範囲内、またはそこに直接導入される）、管腔内（管の管腔の範囲内）、リンパ内（リンパの範囲内）、髄内（骨の髄腔の範囲内）、髄膜内（髄膜の範囲内）、眼内（眼の範囲内）、卵巣内（卵巣の範囲内）、心膜内（心膜の範囲内）、胸膜内（胸膜の範囲内）、前立腺内（前立腺の範囲内）、肺内（肺、またはその気管支の範囲内）、洞内（鼻洞または眼窩周囲洞の範囲内）、脊髄内（脊柱の範囲内）、滑液嚢内（関節の滑膜腔の範囲内）、腱内（腱の範囲内）、精巣内（精巣の範囲内）、髄腔内（脳脊髄軸の任意のレベルにおける脳脊髄液の範囲内）、胸腔内（胸郭の範囲内）、細管内（臓器の細管の範囲内）、腫瘍内（腫瘍の範囲内）、鼓室内（中耳（ａｕｒｕｓ  ｍｅｄｉａ）の範囲内）、血管内（１つまたは複数の血管の範囲内）、脳室内（脳室の範囲内）、イオントフォレシス（電流を用いるもので、可溶性塩のイオンが体の組織に移動する）、潅注（開放創または体腔を浸すまたはフラッシュする）、喉頭（喉頭に対して直接）、経鼻胃（鼻を通じて胃の中に）、密封包帯療法（局所経路投与、これは次に包帯で覆われ、包帯がその範囲を閉塞する）、眼（外眼部に対して）、中咽頭（口���よび咽頭に対して直接）、非経口、経皮、関節周囲、硬膜外、神経周囲、歯周、直腸、呼吸器（局所または全身作用のため経口的または鼻腔的に吸入することにより気道の範囲内に）、球後（橋の後ろまたは眼球の後ろ）、軟部組織、くも膜下、結膜下、粘膜下、局所、経胎盤（胎盤を通じてまたは越えて）、経気管（気管の壁を通じて）、経鼓室（鼓室を越えてまたは通じて）、尿管（尿管に対して）、尿道（尿道に対して）、腟、仙骨ブロック、診断的、神経ブロック、胆管灌流、心灌流、フォトフェレーシスまたは脊髄が挙げられる。
【０６２１】
具体的な実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子の組成物は、ベクターまたはｓｉＲＮＡ分子を中枢神経系に侵入させて、中型有棘および／または皮質ニューロンおよび／またはアストロサイトまで入り込ませることを促進する方法で投与されてもよい。
【０６２２】
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、筋肉内注射によって投与されてもよい。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、実質内注射によって投与されてもよい。
【０６２３】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、実質内注射および髄腔内注射によって投与されてもよい。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、線条体内注射によって投与されてもよい。
【０６２４】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、線条体内注射および本明細書に記載される別の投与経路によって投与されてもよい。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ二重鎖を発現するＡＡＶ粒子は、末梢注射（例えば静脈内）および／または鼻腔内送達によって対象に投与されてもよい。当該技術分野では、ｓｉＲＮＡ二重鎖のＡＡＶ粒子の末梢投与が中枢神経系まで、例えばニューロンまで輸送され得ることが開示された（例えば、米国特許出願公開第２０１００２４０７３９号明細書；および同第２０１００１３０５９４号明細書；この各々の内容は全体として参照により本明細書に援用される）。
【０６２５】
他の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含む少なくとも１つのＡＡＶ粒子を含む組成物は、頭蓋内送達によって対象に投与されてもよい（例えば、米国特許第８，１１９，６１１号明細書を参照のこと；この内容は全体として参照により本明細書に援用される）。
【０６２６】
本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は任意の好適な形態で、液体溶液または懸濁液、液体溶液または液体溶液中の懸濁液に好適な固体形態のいずれとして投与されてもよい。ｓｉＲＮＡ二重鎖は、任意の適切なかつ薬学的に許容可能な賦形剤と共に製剤化されてもよい。
【０６２７】
本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子は、「治療上有効な」量、すなわち、疾患に関連する少なくとも１つの症状を軽減および／または予防するのに十分な、または対象の状態の改善をもたらすのに十分な量で投与されてもよい。
【０６２８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ハンチントン病（ＨＤ）の対象に関する機能および／または生存を改善するのに治療上有効な量でＣＮＳに投与されてもよい。非限定的な例として、ベクターは線条体への直接注入によって投与されてもよい。
【０６２９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡが中型有棘ニューロン、皮質ニューロンおよび／またはアストロサイトを標的化するのに治療上有効な量で対象に（例えば、髄腔内投与によって対象のＣＮＳに）投与されてもよい。非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡは、ＨＴＴタンパク質またはｍＲＮＡの発現を低減し得る。別の非限定的な例として、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはｄｓＲＮＡはＨＴＴを抑制し、およびＨＴＴ媒介毒性を低減することができる。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡならびにＨＴＴ媒介毒性の低減は、ほぼ炎症の亢進なしに達成され得る。
【０６３０】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、対象の機能低下（例えば、統一ハンチントン病評価尺度（ＵＨＤＲＳ：ｕｎｉｆｉｅｄ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｒａｔｉｎｇ  ｓｃａｌｅ）などの公知の判定方法を用いて決定される）を遅延させるのに治療上有効な量で対象に（例えば対象のＣＮＳに）投与されてもよい。非限定的な例として、ベクターは実質内注射によって投与されてもよい。
【０６３１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、中型有棘ニューロン、皮質ニューロンおよび／またはアストロサイトを形質導入するのに治療上有効な量で大槽に投与されてもよい。非限定的な例として、ベクターは髄腔内投与されてもよい。
【０６３２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、中型有棘ニューロン、皮質ニューロンおよび／またはアストロサイトを形質導入するのに治療上有効な量で髄腔内注入を用いて投与されてもよい。非限定的な例として、ベクターは髄腔内投与されてもよい。
【０６３３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、中型有棘ニューロン、皮質ニューロンおよび／またはアストロサイトを形質導入するのに治療上有効な量で大槽に投与されてもよい。非限定的な例として、ベクターは実質内注射によって投与されてもよい。
【０６３４】
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子が製剤化されてもよい。非限定的な例として、中枢神経系または中枢神経系の領域もしくは構成要素における最適な薬物分布が確保されるように、製剤のバリシティおよび／またはオスモル濃度が最適化されてもよい。
【０６３５】
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は単一経路投与によって対象に送達されてもよい。
一実施形態において、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は多部位投与経路によって対象に送達されてもよい。対象には、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子が２、３、４、５または５より多い部位に投与されてもよい。
【０６３６】
一実施形態において、対象には、本明細書に記載される調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子がボーラス注射を用いて投与されてもよい。
一実施形態において、対象には、本明細書に記載される調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子が、数分間、数時間または数日間の時間をかけた徐放送達を用いて投与されてもよい。注入速度は、対象、分布、製剤または別の送達パラメータに応じて変更されてもよい。
【０６３７】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は被殻および尾状核注入によって投与される。非限定的な例として、二重注入は広範な線条体分布ならびに前頭および側頭皮質分布をもたらす。
【０６３８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、一側性被殻注入によって投与されるＡＡＶ−ＤＪ８である。非限定的な例として、投与されたＡＡＶ−ＤＪ８の分布は、一側性被殻注入によって送達されたＡＡＶ１の分布と同様である。
【０６３９】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子は、Ｃ１における髄腔内（ＩＴ）注入によって投与される。注入は、１、２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５時間または１５時間超であってもよい。
【０６４０】
一実施形態において、本明細書に記載されるＡＡＶ粒子を投与する対象の選択および／または用量、投与経路および／または投与ボリュームの有効性が、ウィルヒョウ・ロバン腔としても知られる血管周囲腔（ＰＶＳ：ｐｅｒｉｖａｓｃｕｌａｒ  ｓｐａｃｅｓ）のイメージングを用いて判定されてもよい。ＰＶＳは、細動脈および細静脈が脳実質を穿通することに伴いそれらの周囲に存在し、脳脊髄液（ＣＳＦ）／間質液で満たされている。ＰＶＳは中脳、基底核、および半卵円中心によく見られる。理論によって拘束されることを望むものではないが、ＰＶＳは代謝産物の正常なクリアランスにおいて役割を果たし得ると共に、認知の悪化およびパーキンソン病を含めた幾つかの病態と関連付けられている。ＰＶＳは通常は正常なサイズであるが、幾つもの病態で拡大し得る。ポッター（Ｐｏｔｔｅｒ）ら（セレブロバスキュラー・ディジーズ（Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ  Ｄｉｓ．）、２０１５年１月、第３９巻、第４号、ｐ．２２４〜２３１；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）は評価方法を開発し、そこでポッター（Ｐｏｔｔｅｒ）らはあらゆるＰＶＳを調べ、基底核、半卵円中心および中脳ＰＶＳを評価した。この著者らは、マック（Ｍａｃ）およびルリッチ（Ｌｕｌｌｉｃｈ）ら（ジャーナル・オブ・ニューロロジー・ニューロサージェリー・アンド・サイキアトリー（Ｊ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ）、２００４年１１月、第７５巻、第１１号、ｐ．１５１９〜２３；これらの内容は本明細書において全体として参照により援用される）によって使用されるＰＶＳの頻度および範囲を使用しており、ポッター（Ｐｏｔｔｅｒ）らは基底核および半卵円中心ＰＶＳに５段階評点を与え：０（無し）、１（１〜１０）、２（１１〜２０）、３（２１〜４０）および４（＞４０）および中脳ＰＶＳに２段階評点を与えた：０（目視不能）または１（目視可能）。ポッター（Ｐｏｔｔｅｒ）らによる評価方式のユーザガイドは、ｗｗｗ．ｓｂｉｒｃ．ｅｄ．ａｃ．ｕｋ／ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／ｅｐｖｓ−ｒａｔｉｎｇ−ｓｃａｌｅ−ｕｓｅｒ−ｇｕｉｄｅ．ｐｄｆを参照することができる。
【０６４１】
用量設定
本発明の医薬組成物は、ＨＴＴ関連障害（例えば、ハンチントン病（ＨＤ））を軽減、予防および／または治療するのに有効な任意の量を用いて対象に投与されてもよい。必要となる正確な量は、対象の種、年齢、および全身状態、疾患の重症度、詳細な組成物、その投与様式、その活性様式などに応じて対象毎に異なることになる。
【０６４２】
本発明の組成物は典型的には、投与の簡便性および投薬量の均一性のため、単位剤形で製剤化される。しかしながら、本発明の組成物の１日の総使用量は主治医が妥当な医学的判断の範囲内で決定し得ることは理解されるであろう。任意の特定の患者に対する具体的な治療有効性は、治療下の障害および障害の重症度；用いられる具体的な化合物の活性；用いられる具体的な組成物；患者の年齢、体重、全般的な健康、性別および食事；投与時間、投与経路、および用いられるｓｉＲＮＡ二重鎖の排泄速度；治療継続期間；用いられる具体的な化合物と併用してまたは同時に使用される薬物；および医学分野で周知の同様の要因を含めた種々の要因に依存することになる。＼
一実施形態において、対象の年齢および性別を用いて本発明の組成物の用量が決定されてもよい。非限定的な例として、年齢が高い対象ほど、年齢が低い対象と比較してより高用量の（例えば、５〜１０％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜５０％、２５〜５０％または少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９０％超高い）組成物の投与を受け得る。別の非限定的な例として、年齢が低い対象ほど、年齢が高い対象と比較してより高用量の（例えば、５〜１０％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜５０％、２５〜５０％または少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９０％超高い）組成物の投与を受け得る。更に別の非限定的な例として、女性の対象は男性対象と比較してより高用量の（例えば、５〜１０％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜５０％、２５〜５０％または少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９０％超高い）組成物の投与を受け得る。更に別の非限定的な例として、男性の対象は女性の対象と比較してより高用量の（例えば、５〜１０％、１０〜２０％、１５〜３０％、２０〜５０％、２５〜５０％または少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９０％超高い）組成物の投与を受け得る。
【０６４３】
一部の具体的な実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ二重鎖を送達するためのＡＡＶ粒子の用量は、疾患の状態、対象および治療戦略に応じて適合され得る。
一実施形態において、本発明に係る組成物の細胞への送達は、［ＶＧ／時間＝ｍＬ／時間×ＶＧ／ｍＬ］（式中、ＶＧはウイルスゲノムであり、ＶＧ／ｍＬは組成物濃度であり、およびｍＬ／時間は持続送達速度である）によって定義される送達速度を含む。
【０６４４】
一実施形態において、本発明に係る組成物の細胞への送達は、対象当たり約１×１０６ＶＧ〜約１×１０１６ＶＧの総濃度を含み得る。一部の実施形態において、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、１．１×１０１１、１．２×１０１１、１．３×１０１１、１．４×１０１１、１．５×１０１１、１．６×１０１１、１．７×１０１１、１．８×１０１１、１．９×１０１１、２×１０１１、２．１×１０１１、２．２×１０１１、２．３×１０１１、２．４×１０１１、２．５×１０１１、２．６×１０１１、２．７×１０１１、２．８×１０１１、２．９×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、７．１×１０１１、７．２×１０１１、７．３×１０１１、７．４×１０１１、７．５×１０１１、７．６×１０１１、７．７×１０１１、７．８×１０１１、７．９×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、３．１×１０１２、３．２×１０１２、３．３×１０１２、３．４×１０１２、３．５×１０１２、３．６×１０１２、３．７×１０１２、３．８×１０１２、３．９×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、６．１×１０１２、６．２×１０１２、６．３×１０１２、６．４×１０１２、６．５×１０１２、６．６×１０１２、６．７×１０１２、６．８×１０１２、６．９×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、８．１×１０１２、８．２×１０１２、８．３×１０１２、８．４×１０１２、８．５×１０１２、８．６×１０１２、８．７×１０１２、８．８×１０１２、８．９×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、１．１×１０１３、１．２×１０１３、１．３×１０１３、１．４×１０１３、１．５×１０１３、１．６×１０１３、１．７×１０１３、１．８×１０１３、１．９×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／対象の組成物濃度を含み得る。
【０６４５】
一実施形態において、本発明に係る組成物の細胞への送達は、対象当たり約１×１０６ＶＧ／ｋｇ〜約１×１０１６ＶＧ／ｋｇの総濃度を含み得る。一部の実施形態において、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、１．１×１０１１、１．２×１０１１、１．３×１０１１、１．４×１０１１、１．５×１０１１、１．６×１０１１、１．７×１０１１、１．８×１０１１、１．９×１０１１、２×１０１１、２．１×１０１１、２．２×１０１１、２．３×１０１１、２．４×１０１１、２．５×１０１１、２．６×１０１１、２．７×１０１１、２．８×１０１１、２．９×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、７．１×１０１１、７．２×１０１１、７．３×１０１１、７．４×１０１１、７．５×１０１１、７．６×１０１１、７．７×１０１１、７．８×１０１１、７．９×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、３．１×１０１２、３．２×１０１２、３．３×１０１２、３．４×１０１２、３．５×１０１２、３．６×１０１２、３．７×１０１２、３．８×１０１２、３．９×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、６．１×１０１２、６．２×１０１２、６．３×１０１２、６．４×１０１２、６．５×１０１２、６．６×１０１２、６．７×１０１２、６．８×１０１２、６．９×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、８．１×１０１２、８．２×１０１２、８．３×１０１２、８．４×１０１２、８．５×１０１２、８．６×１０１２、８．７×１０１２、８．８×１０１２、８．９×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、１．１×１０１３、１．２×１０１３、１．３×１０１３、１．４×１０１３、１．５×１０１３、１．６×１０１３、１．７×１０１３、１．８×１０１３、１．９×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×��０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｋｇの組成物濃度を含み得る。
【０６４６】
一実施形態において、１用量当たり約１０５〜１０６ウイルスゲノム（単位）が投与されてもよい。
一実施形態において、本発明に係る組成物の細胞への送達は、約１×１０６ＶＧ／ｍＬ〜約１×１０１６ＶＧ／ｍＬの総濃度を含み得る。一部の実施形態において、送達は、約１×１０６、２×１０６、３×１０６、４×１０６、５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１×１０７、２×１０７、３×１０７、４×１０７、５×１０７、６×１０７、７×１０７、８×１０７、９×１０７、１×１０８、２×１０８、３×１０８、４×１０８、５×１０８、６×１０８、７×１０８、８×１０８、９×１０８、１×１０９、２×１０９、３×１０９、４×１０９、５×１０９、６×１０９、７×１０９、８×１０９、９×１０９、１×１０１０、２×１０１０、３×１０１０、４×１０１０、５×１０１０、６×１０１０、７×１０１０、８×１０１０、９×１０１０、１×１０１１、１．１×１０１１、１．２×１０１１、１．３×１０１１、１．４×１０１１、１．５×１０１１、１．６×１０１１、１．７×１０１１、１．８×１０１１、１．９×１０１１、２×１０１１、３×１０１１、４×１０１１、５×１０１１、６×１０１１、７×１０１１、８×１０１１、９×１０１１、１×１０１２、１．１×１０１２、１．２×１０１２、１．３×１０１２、１．４×１０１２、１．５×１０１２、１．６×１０１２、１．７×１０１２、１．８×１０１２、１．９×１０１２、２×１０１２、２．１×１０１２、２．２×１０１２、２．３×１０１２、２．４×１０１２、２．５×１０１２、２．６×１０１２、２．７×１０１２、２．８×１０１２、２．９×１０１２、３×１０１２、３．１×１０１２、３．２×１０１２、３．３×１０１２、３．４×１０１２、３．５×１０１２、３．６×１０１２、３．７×１０１２、３．８×１０１２、３．９×１０１２、４×１０１２、４．１×１０１２、４．２×１０１２、４．３×１０１２、４．４×１０１２、４．５×１０１２、４．６×１０１２、４．７×１０１２、４．８×１０１２、４．９×１０１２、５×１０１２、６×１０１２、６．１×１０１２、６．２×１０１２、６．３×１０１２、６．４×１０１２、６．５×１０１２、６．６×１０１２、６．７×１０１２、６．８×１０１２、６．９×１０１２、７×１０１２、８×１０１２、９×１０１２、１×１０１３、１．１×１０１３、１．２×１０１３、１．３×１０１３、１．４×１０１３、１．５×１０１３、１．６×１０１３、１．７×１０１３、１．８×１０１３、１．９×１０１３、２×１０１３、３×１０１３、４×１０１３、５×１０１３、６×１０１３、６．７×１０１３、７×１０１３、８×１０１３、９×１０１３、１×１０１４、２×１０１４、３×１０１４、４×１０１４、５×１０１４、６×１０１４、７×１０１４、８×１０１４、９×１０１４、１×１０１５、２×１０１５、３×１０１５、４×１０１５、５×１０１５、６×１０１５、７×１０１５、８×１０１５、９×１０１５、または１×１０１６ＶＧ／ｍＬの組成物濃度を含み得る。
【０６４７】
特定の実施形態において、所望のｓｉＲＮＡ二重鎖投薬量は、複数回の投与（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４回、またはそれ以上の投与）を用いて送達されてもよい。複数回の投与が利用される場合、本明細書に記載されるような分割用量投与レジメンが用いられてもよい。本明細書で使用されるとき、「分割用量」は、単一単位用量または総１日用量を２つ以上の用量に分割するもの、例えば単一単位用量の２回以上の投与である。本明細書で使用されるとき、「単一単位用量」は、１用量／１回／単一の経路／単一の接触点、すなわち単一の投与イベントで投与される任意の調節性ポリヌクレオチド治療薬の用量である。本明細書で使用されるとき、「総１日用量」は、２４時間に与えられるまたは処方される量である。これは単一単位用量として投与されてもよい。一実施形態において、本発明の調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は分割用量で対象に投与される。それらの用量は、緩衝液のみに、または本明細書に記載される製剤に製剤化されてもよい。
【０６４８】
一実施形態において、本明細書に記載される組成物の用量、濃度および／または容積は、投与後の皮質および皮質下分布への尾状核または被殻の寄与に応じて調整されてもよい。投与は、脳室内、被殻内、視床内，実質内、軟膜下、および／または髄腔内投与であってもよい。
【０６４９】
一実施形態において、本明細書に記載される組成物の用量、濃度および／または容積は、脳室内、被殻内、視床内、実質内、軟膜下、および／または髄腔内送達による投与後の皮質および軸索分布に応じて調整されてもよい。
【０６５０】
ＩＶ．本発明の組成物の方法および使用
ハンチントン病（ＨＤ）
ハンチントン病（ＨＤ）とは、進行性の舞踏運動、精神神経機能不全、および認知機能不全により特徴付けられる、単一遺伝子性の致死性神経変性疾患である。ハンチントン病は、ＨＴＴタンパク質のＮ末端において、ポリグルタミンをコードする、ハンチンチン（ＨＴＴ）遺伝子内の常染色体優性トリプレット（ＣＡＧ）リピートの伸長によって引き起こされることが公知である。このリピート伸長がＨＴＴの毒性の機能獲得をもたらし、最終的に線条体神経変性につながり、それが広汎性脳萎縮へと進行する。ＨＤでは線条体の中型有棘ニューロンが特に脆弱であるものと見られ、最大９５％が消失する一方、介在ニューロンはほぼ保たれている。
【０６５１】
ハンチントン病はクオリティ・オブ・ライフに深刻な影響を及ぼす。症状は典型的には３５〜４４歳で現れ、発症後の余命は１０〜２５年である。ＨＤ集団のごく一部では（約６％）、２１歳より前に無動・筋強直症候群の出現を伴い疾患発症が起こる。これらの症例は遅発型と比べて進行が速い傾向があり、若年性またはウェストファール変異型ＨＤに分類されている。現在、米国および欧州で約３５，０００〜７０，０００人の患者がＨＤに罹患していると推定される。現在、ＨＤの治療には対症的軽減および支持療法のみが利用可能であり、治療法は未だ同定されていない。最終的に、ＨＤ罹患者は、肺炎、心不全またはその他の、転倒による身体的外傷などの合併症に陥る。
【０６５２】
理論によって拘束されることを望むものではないが、野生型ＨＴＴタンパク質の機能は、他のタンパク質の複合体を協調させる足場として働き得る。ＨＴＴは極めて巨大なタンパク質であり（６７エクソン、３１４４アミノ酸、約３５０ｋＤａ）、広範な翻訳後修飾を受けると共に、特にそのＮ末端（偶然にもＨＤにおいてリピートを保因する領域）に、他のタンパク質との相互作用部位を多数有する。ＨＴＴは主に細胞質に局在するが、核にシャトル輸送されて、そこで遺伝子転写を調節し得ることが示されている。また、ＨＴＴは小胞輸送およびＲＮＡトラフィッキングの調節において役割を担うことも示唆されている。
【０６５３】
非限定的な例として、ＨＴＴタンパク質配列は配列番号１４２４（ＮＣＢＩ  ＮＰ＿００２１０２．４）であり、ＨＴＴ核酸配列は配列番号１４２５（ＮＣＢＩ  ＮＭ＿００２１１１．７）である。
【０６５４】
ＣＡＧ伸長ＨＴＴが正常なＨＴＴ機能を破壊して神経毒性をもたらす機構は、当初ハプロ不全疾患であると考えられたが、この理論は、人におけるＨＴＴ遺伝子の末端欠失がＨＤの発症につながらなかった時点で反証され、ＨＴＴタンパク質の完全な発現は生存にとって重要でないことが示唆された。しかしながら、マウスにおけるＨＴＴの条件的ノックアウトが神経変性につながったことから、ある量のＨＴＴが細胞生存に必要であることが示された。ハンチンチンタンパク質はあらゆる細胞に発現し、但しその濃度は脳で最も高く、そこでは神経核に異常なＨＴＴの凝集体が多量に見られる。ＨＤ患者の脳ではＨＴＴが凝集して異常な核封入体になる。現在では、関連するタンパク質中間体（すなわち可溶性種および毒性Ｎ末端断片）に加えて、このミスフォールディングおよび凝集過程が神経毒性をもたらすと考えられている。実際、ＨＤは、９つの更なるヒト遺伝障害（いずれも、ＣＡＧ伸長遺伝子および結果として生じるポリグルタミン（ポリＱ）タンパク質産物と、続く神経細胞内凝集体の形成によって特徴付けられる）のファミリーに属する。興味深いことに、これらの疾患の全てにおいて伸長の長さが発症年齢および疾患進行速度の両方と相関し、伸長が長いほど高い疾患重症度に結び付く。
【０６５５】
ＣＡＧ伸長ＨＴＴおよび結果として生じるその凝集体の神経毒性の根底にある分子機構に関する仮説としては、広範囲にわたっているものの、カスパーゼ活性化、転写経路の調節異常、活性酸素種の産生増加、ミトコンドリア機能不全、軸索輸送の破壊および／または細胞内のタンパク質分解系の阻害が挙げられる。ＣＡＧ伸長ＨＴＴは毒性の機能獲得を有するのみならず、他の細胞タンパク質および過程の正常機能に干渉することによりドミナントネガティブ効果もまた及ぼし得る。ＨＴＴはまた、非細胞性自律神経毒性にも関係があり、それによりＨＴＴをホストする細胞がＨＴＴを周囲の他のニューロンに広げるとされている。
【０６５６】
一実施形態において、対象は、ＨＴＴ遺伝子が４１回以上のＣＡＧリピート（例えば、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０回または９０回超のＣＡＧリピート）を有する完全浸透ＨＤを有する。
【０６５７】
一実施形態において、対象は、ＨＴＴ遺伝子が３６〜４０回のＣＡＧリピート（例えば、３６、３７、３８、３９および４０回のＣＡＧリピート）を有する不完全浸透を有する。
【０６５８】
ＨＤの症状は、限定はされないが、舞踏運動、ジストニア、動作緩慢、協調運動障害、易興奮性および抑欝、問題解決における困難、人がその通常の日常生活をこなす能力の低下、発話の減少、ならびに嚥下困難など、ＣＮＳ変性に帰せられる特徴、ならびに限定はされないが、体重減少、筋消耗、代謝機能不全、および内分泌異常など、ＣＮＳ変性に帰せられない特徴を含み得る。
【０６５９】
本明細書に記載される調節性ポリヌクレオチドおよびＡＡＶ粒子と共に使用され得る、ハンチントン病の研究用モデルシステムは、限定はされないが、細胞モデル（例えば、初代ニューロンおよび人工多能性幹細胞）、無脊椎動物モデル（例えば、ショウジョウバエ属（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）またはカエノラブディティス・エレガンス（Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  ｅｌｅｇａｎｓ））、マウスモデル（例えば、ＹＡＣ１２８マウスモデル；Ｒ６／２マウスモデル；ＢＡＣ、ＹＡＣおよびノックインマウスモデル）、ラットモデル（例えば、ＢＡＣ）および大型哺乳類モデル（例えば、ブタ、ヒツジ、またはサル）を含む。
【０６６０】
ＨＤ動物モデルにおける研究によれば、例えば調節発現モデルにおける遺伝子遮断後に、表現型の逆転が実現可能であることが示唆されている。９４ポリグルタミンリピートＨＴＴタンパク質の発現の遮断が可能なマウスモデルでは、臨床的症候群が好転したのみならず、細胞内凝集体もまた消散した。更に、ＨＴＴのサイレンシングを試験した動物モデルにより有望な結果が実証されており、この療法は良好に忍容されたと共に、潜在的な治療利益を示した。
【０６６１】
かかるｓｉＲＮＡ媒介性ＨＴＴ発現阻害はＨＤの治療に用いられ得る。本発明によれば、患者のＨＤを治療および／または改善する方法は、細胞内への本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子の有効量を患者に投与することを含む。かかる核酸配列を含むＡＡＶ粒子の投与は、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害／サイレンシングを生じさせるｓｉＲＮＡ分子をコードすることになる。
【０６６２】
一実施形態において、本明細書で記載されるＡＡＶ粒子は、それを必要とする対象におけるＨＴＴの量を低減するのに使用することができ、これにより、本明細書で記載される治療利益をもたらす。
【０６６３】
特定の態様において、ＨＤの症状としては、限定はされないが、無関心または自発性の欠如、不機嫌、易怒、激越または不安、自己管理不足、判断力低下、強情、脱抑制、抑欝、自殺念慮、多幸症、攻撃性、妄想、強迫、性欲亢進、幻覚、発話能力低下、不明瞭発語、嚥下困難、体重減少、実行機能（例えば、整理する、計画する、調べるまたは代替案を取る、および新規運動技能の獲得の遅れ）を損なう認知機能障害、不安定歩行および不随意運動（舞踏運動）など、行動上の困難および症状が挙げられる。他の態様において、本発明の組成物は脳および脊髄の一方または両方に適用される。一実施形態において、本明細書に記載されるＨＤの症状のいずれかを治療することにより、対象の生存が延びる。
【０６６４】
本発明には、治療を必要としている対象のＨＴＴタンパク質に関連するハンチントン病（ＨＤ）を治療する方法が開示される。この方法は、任意選択で、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする核酸配列を含むＡＡＶ粒子を少なくとも含む組成物の治療有効量を対象に投与することを含む。非限定的な例として、このｓｉＲＮＡ分子は対象においてＨＴＴ遺伝子発現をサイレンシングし、ＨＴＴタンパク質産生を阻害し、およびＨＤの１つ以上の症状を軽減することができ、それによりＨＤが治療的に処置される。
【０６６５】
ハンチントン病の治療方法
本発明は、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子ならびにその設計および製造方法を提供する。単一の実施可能性理論によって拘束されることを望むものではないが、本発明は、ＨＴＴ突然変異および／または野生型ＨＴＴ遺伝子発現を含め、ＨＴＴ発現に干渉するｓｉＲＮＡを含めた調節性ポリヌクレオチドを提供する。特に、本発明は、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチド配列を含むアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ウイルスゲノムなどのウイルスゲノムを利用する。本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶベクターは、線条体の中型有棘ニューロンおよび皮質ニューロンなど、目的のニューロンへの活性薬剤の送達を増加させ得る。ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡは、細胞内部のＨＴＴ遺伝子発現（例えばｍＲＮＡレベル）を有意に阻害する；したがって、タンパク質の凝集および封入体の形成、フリーラジカルの増加、ミトコンドリア機能不全およびＲＮＡ代謝など、細胞内部のＨＴＴ発現によって引き起こされるストレスを低減することが可能であり得る。
【０６６６】
本発明には、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチド配列を含むＡＡＶ粒子を細胞に導入する方法であって、標的ＨＴＴ  ｍＲＮＡの分解が起こるのに十分な量でＡＡＶ粒子のいずれかを前記細胞に導入し、それにより細胞において標的特異的ＲＮＡｉを活性化させることを含む方法が提供される。一部の態様において、細胞は、幹細胞、中型有棘または皮質ニューロンなどのニューロン、筋細胞およびアストロサイトなどのグリア細胞であってもよい。
【０６６７】
一部の実施形態において、本発明は、本明細書で記載されるプラスミドまたはＡＡＶベクターの治療有効量を、それを必要とする対象に投与することにより、ハンチントン病（ＨＤ）を治療または改善するための方法を提供する。
【０６６８】
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を使用して、ＨＤを治療および／または改善してもよい。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を使用して、ＨＤの対象の認知および／または運動機能低下を軽減してもよく、この場合、減退の量は、限定はされないが、統一ハンチントン病評価尺度（ＵＨＤＲＳ：Ｕｎｉｆｉｅｄ  Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｒａｔｉｎｇ  Ｓｃａｌｅ）およびサブスコア、ならびに認知機能試験どの標準的な判定方式により決定される。
【０６６９】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を使用して、限定はされないが、全機能的能力（ＴＦＣ：Ｔｏｔａｌ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｃａｐａｃｉｔｙ）尺度などの標準的な判定方式により測定される、機能的能力および日常生活活動の減退を軽減してもよい。
【０６７０】
一部の実施形態において、本発明は、治療を必要とする対象における、ＨＴＴ遺伝子および／またはＨＴＴタンパク質と関連するハンチントン病を治療または改善するための方法であって、ＨＴＴ遺伝子を標的とし、ＨＴＴ遺伝子の発現およびＨＴＴタンパク質の産生を阻害し、対象におけるＨＤの症状を改善する、少なくとも１つのｓｉＲＮＡ二重鎖をコードする調節性ポリヌクレオチドの薬学的に有効な量を含むＡＡＶ粒子を対象に投与することを含む方法を提供する。
【０６７１】
一実施形態において、本発明のＡＡＶベクターを、治療を必要とする対象における、ハンチントン病を治療するための方法として使用してもよい。治療を必要としている対象を定義するための当該技術分野において公知の任意の方法を使用して前記対象を同定してもよい。対象はハンチントン病の臨床診断を有してもよく、または症状が出る前であってもよい。限定はされないが、認知機能評価および／または神経学的もしくは神経精神医学的検査、運動テスト、官能テスト、精神医学的評価、脳イメージング、家族歴および／または遺伝子検査を含め、ＨＤを診断する任意の公知の方法を利用することができる。
【０６７２】
一実施形態において、ＨＤ対象の選択は、ハンチントン病の予後指標、またはその派生指標を使用して決定される（ロング・ＪＤ（Ｌｏｎｇ  ＪＤ）ら著、ムーブメント・ディスオーダーズ（Ｍｏｖｅｍｅｎｔ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）、２０１７年、第３２巻、第２号、ｐ．２５６〜２６３、この内容は本明細書において全体として参照により援用される）。この予後指標は４つの成分、（１）統一ハンチントン病評価尺度（ＵＨＤＲＳ）からの総合運動スコア（ＴＭＳ：ｔｏｔａｌ  ｍｏｔｏｒ  ｓｃｏｒｅ）、（２）符号・数字モダリティ検査（ＳＤＭＴ：Ｓｙｍｂｏｌ  Ｄｉｇｉｔ  Ｍｏｄａｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔ）、（３）ベースライン年齢、および（４）シトシン−アデニン−グアニン（ＣＡＧ）伸長を使用して運動診断の確率を予測する。
【０６７３】
一実施形態において、ハンチントン病の予後指標は、以下の式：ＰＩＨＤ＝５１×ＴＭＳ＋（−３４）×ＳＤＭＴ＋７×年齢×（ＣＡＧ−３４）［式中、ＰＩＨＤの値が大きいほど症状の診断または発症リスクが高いことを意味する］によって計算される。
【０６７４】
別の実施形態において、ハンチントン病の予後指標は、５０％の１０年生存率のコンテクストで解釈されるべき標準偏差単位を求める以下の正規化した式によって計算される：ＰＩＮＨＤ＝（ＰＩＨＤ−８８３）／１０４４［式中、ＰＩＮＨＤ＜０は５０％より高い１０年生存率を意味し、およびＰＩＮＨＤ＞０は５０％未満の１０年生存率を示唆する］。
【０６７５】
一実施形態において、この予後指標を使用して、ＨＤの症状を数年以内に発症するであろうが、しかし臨床的には未だ診断可能な症状を有しない対象が同定されてもよい。更に、これらの無症候患者は、無症候期の間に本発明のＡＡＶベクターおよび組成物を使用した治療に選択され、それを受けてもよい。
【０６７６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、バイオマーカ評価を受けた対象に投与されてもよい。不顕性期および進行初期のＨＤに関する潜在的な血中バイオマーカとしては、限定はされないが、８−ＯｈｄＧ酸化的ストレスマーカ、代謝マーカ（例えば、クレアチンキナーゼ、分枝鎖アミノ酸）、コレステロール代謝産物（例えば、２４−ＯＨコレステロール）、免疫および炎症タンパク質（例えば、クラスタリン、補体成分、インターロイキン６および８）、遺伝子発現変化（例えば、トランスクリプトームマーカ）、内分泌マーカ（例えば、コルチゾール、グレリンおよびレプチン）、ＢＤＮＦ、アデノシン２Ａ受容体が挙げられる。不顕性期および進行初期のＨＤに関する脳イメージング用の潜在的なバイオマーカとしては、限定はされないが、線条体容積、皮質下白質容積、皮質厚、全脳および脳室容積、機能イメージング（例えば、機能ＭＲＩ）、ＰＥＴ（例えば、フルオロデオキシグルコースによる）、および磁気共鳴スペクトロスコピー（例えば、乳酸塩）が挙げられる。不顕性期および進行初期のＨＤに関する定量的臨床ツール用の潜在的なバイオマーカとしては、限定はされないが、定量的運動評価、運動生理機能評価（例えば、経頭蓋磁気刺激）、および定量的眼球運動測定が挙げられる。定量的臨床バイオマーカ評価の非限定的な例としては、舌力の変動、メトロノームに合わせた手拍子、握力、眼球運動評価および認知機能テストが挙げられる。多施設観察研究の非限定的な例としては、ＰＲＥＤＩＣＴ−ＨＤおよびＴＲＡＣＫ−ＨＤが挙げられる。対象はＨＤの症状を有してもよく、ＨＤと診断されてもよく、またはＨＤに関して無症候であってもよい。
【０６７７】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ニューロイメージングを用いたバイオマーカ評価を受けた対象に投与されてもよい。対象はＨＤの症状を有してもよく、ＨＤと診断されてもよく、またはＨＤに関して無症候であってもよい。
【０６７８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＨＤに関して無症候の対象に投与されてもよい。対象は無症候であり得るが、ＨＤのリスクがあるかどうかを判断するための予測的遺伝子検査またはバイオマーカ評価を受けたことがあってもよく、および／または対象は、ＨＤと診断された家系員（例えば、母親、父親、兄弟、姉妹、伯叔母、伯叔父、祖父母）を有してもよい。
【０６７９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＨＤの初期段階にある対象に投与されてもよい。初期段階では、対象は、協調の僅かな変化、一部の不随意運動（舞踏運動）、易怒および抑欝などの気分の変化、問題解決における困難、人がその通常の日常生活をこなす能力の低下を有する。
【０６８０】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＨＤの中期段階にある対象に投与されてもよい。中期段階では、対象は運動障害の増加、発話減少、嚥下困難を有し、通常の活動をこなすのが難しくなり得る。この段階では、対象は随意運動の制御を維持するため作業療法士および理学療法士の助けを借り得ると共に、対象は言語聴覚士を有し得る。
【０６８１】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子は、ＨＤの後期段階にある対象に投与されてもよい。後期段階では、対象はもはや歩行できず、発話不能であるため、ＨＤの対象はケアをほぼ完全にまたは完全に他者に頼る。対象は概してなおも言語を理解することができ、家族および友人を認識するが、窒息が大きな懸念である。
【０６８２】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子を使用して、ＨＤの発症が２０歳未満、早ければ２歳である若年性型のＨＤを有する対象が治療されてもよい。
一実施形態において、ＡＡＶ粒子を使用して、ＨＴＴ遺伝子が４１回以上のＣＡＧリピート（例えば、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０回または９０回超のＣＡＧリピート）を有する完全浸透ＨＤを有するＨＤ対象が治療されてもよい。
【０６８３】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子を使用して、ＨＴＴ遺伝子が３６〜４０回のＣＡＧリピート（例えば、３６、３７、３８、３９および４０回のＣＡＧリピート）を有する不完全浸透を有するＨＤ対象が治療されてもよい。
【０６８４】
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の中枢神経系に投与される。他の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、対象の組織（例えば対象の脳）に投与される。
【０６８５】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を、限定はされないが、中型有棘ニューロンまたは皮質ニューロンを含むニューロン；オリゴデンドロサイト、アストロサイト、およびミクログリアを含むグリア細胞；ならびに／またはＴ細胞など、ニューロンを取り囲む他の細胞を含む、特定のタイプの標的細胞に送達してもよい。
【０６８６】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を、線条体内のニューロンおよび／または皮質のニューロンに送達してもよい。
【０６８７】
一部の実施形態において、ＨＤ治療用の本発明の組成物は、必要としている対象に静脈内、筋肉内、皮下、腹腔内、実質内、軟膜下、髄腔内および／または脳室内投与され、ｓｉＲＮＡ分子またはｓｉＲＮＡ分子を含むベクターが血液脳関門および血液脊髄関門の一方または両方を通過し、または脳および／または脊髄に直接到達することが可能となる。一部の態様において、この方法は、本発明のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列をコードするＡＡＶ粒子を含む組成物の治療有効量を（例えば、輸液ポンプおよび／または送達足場を使用して）対象の中枢神経系（ＣＮＳ）に直接投与（例えば、実質内投与、軟膜下投与、脳室内投与および／または髄腔内投与）することを含む。ベクターは対象においてＨＴＴ遺伝子発現をサイレンシングまたは抑制し、および／またはＨＤの１つ以上の症状を軽減するために使用されてもよく、それによりＨＤが治療的に処置される。
【０６８８】
一部の実施形態において、ｓｉＲＮＡ分子、またはかかるｓｉＲＮＡ分子を含むＡＡＶベクターは、対象の中枢神経系に直接、例えば対象の白質への注入によって導入されてもよい。理論によって拘束されることを望むものではないが、白質への直接注入による分布は、ハンチントン病の対象において損なわれていることもある軸索輸送機構と独立している可能性があり、これは白質注入が一層のＡＡＶベクターの輸送を実現し得ることを意味する。
【０６８９】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を含む組成物は、実質内注射によって対象の中枢神経系に投与される。
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子組成物は、実質内注射および髄腔内注射によって対象の中枢神経系に投与される。
【０６９０】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子組成物は、実質内注射および脳室内注射によって対象の中枢神経系に投与される。
【０６９１】
一部の実施形態において、本発明のＨＤ治療用組成物は、実質内投与によって必要としている対象に投与される。
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子組成物は、例えば、被殻への注入により、対象の中枢神経系へと、直接導入してもよい。
【０６９２】
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子組成物は、対象の中枢神経系に直接、例えば対象の視床への注入によって導入されてもよい。理論によって拘束されることを望むものではないが、視床はハンチントン病の対象において比較的保たれている脳領域であり、これはＡＡＶベクターの軸索輸送を通じたより広範な皮質形質導入が可能となり得ることを意味する。
【０６９３】
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子組成物を、例えば、静脈内投与により、対象の中枢神経系へと、間接的に導入してもよい。
ＨＴＴの発現を調節する
一実施形態において、ＡＡＶ粒子の、対象への投与は、対象におけるＨＴＴの発現を低下させ、ＨＴＴの発現の低減は、対象におけるＨＤの影響を低下させるであろう。
【０６９４】
一実施形態において、本明細書で記載される方法によりアッセイされる場合などにおいて、コード化ｄｓＲＮＡが発現し、ＨＴＴタンパク質を発現する細胞と接触すると、ＨＴＴタンパク質の発現を、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、もしくは少なくとも４０％、またはこれを超えて阻害する。
【０６９５】
一実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡをコードする調節性ポリヌクレオチド配列を含むＡＡＶ粒子の、対象への投与は、対象におけるＨＴＴ（例えば、突然変異体ＨＴＴ、野生型ＨＴＴおよび／または突然変異体および野生型のＨＴＴ）を低減し得る。一実施形態において、ＡＡＶ粒子を対象に投与すると、対象の野生型ＨＴＴが減少し得る。更に別の実施形態において、ＡＡＶ粒子を対象に投与すると、対象の突然変異ＨＴＴおよび野生型ＨＴＴの両方が減少し得る。突然変異および／または野生型ＨＴＴは、限定はされないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの一領域、またはＣＮＳの特定の細胞など、対象において約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％減少し得る。突然変異体ＨＴＴは、限定はされないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域、またはＣＮＳの特定の細胞など、対象において、約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％低減され得る。野生型ＨＴＴは、限定はされないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域、またはＣＮＳの特定の細胞など、対象において、約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％低減され得る。突然変異体および野生型のＨＴＴは、限定はされないが、対象のＣＮＳ、ＣＮＳの領域、またはＣＮＳの特定の細胞など、対象において、約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％低減され得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、中型有棘ニューロンにおいて、ＨＴＴの発現を、少なくとも５０％低減し得る。非限定的な例として、ベクター、例えばＡＡＶベクターは、中型有棘ニューロンにおいて、ＨＴＴの発現を、少なくとも４０％低減し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻の中型有棘ニューロンにおいて、ＨＴＴの発現を、少なくとも４０％低減し得る。非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻の中型有棘ニューロンにおいて、ＨＴＴの発現を、少なくとも３０％低減し得る。更に別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻および皮質におけるＨＴＴの発現を、少なくとも４０％低減し得る。更に別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻および皮質におけるＨＴＴの発現を、少なくとも３０％低減し得る。更に別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻におけるＨＴＴの発現を、少なくとも３０％低減し得る。更に別の非限定的な例として、ＡＡＶ粒子は、被殻におけるＨＴＴの発現を、少なくとも３０％低減することが可能であり、皮質におけるＨＴＴの発現を、少なくとも１５％低減し得る。
【０６９６】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子を使用して、ＨＴＴタンパク質の発現を、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％低下させてもよい。非限定的な例として、ＨＴＴタンパク質の発現は、５０〜９０％低下し得る。非限定的な例として、ＨＴＴタンパク質の発現は、３０〜７０％低下し得る。
【０６９７】
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの発現を、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％低下させてもよい。非限定的な例として、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの発現は、５０〜９０％低下し得る。
【０６９８】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子を使用して対象のＨＴＴタンパク質を減少させてもよい。この減少は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％であり得る。非限定的な例として、対象はＨＴＴタンパク質の５０％の減少を有し得る。非限定的な例として、対象はＨＴＴタンパク質の７０％の減少および野生型ＨＴＴタンパク質の１０％の減少を有し得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおけるＨＴＴの減少は約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質におけるＨＴＴの減少は約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおけるＨＴＴの減少は４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質におけるＨＴＴの減少は４０％〜７０％であり得る。
【０６９９】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子を使用して対象の野生型ＨＴＴタンパク質を減少させてもよい。この減少は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％であり得る。非限定的な例として、対象は野生型ＨＴＴタンパク質の５０％の減少を有し得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおける野生型ＨＴＴの減少は約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質における野生型ＨＴＴの減少は約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおける野生型ＨＴＴの減少は４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質における野生型ＨＴＴの減少は４０％〜７０％であり得る。
【０７００】
一実施形態において、ＡＡＶ粒子を使用して対象の突然変異ＨＴＴタンパク質を減少させてもよい。この減少は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％であり得る。非限定的な例として、対象は突然変異ＨＴＴタンパク質の５０％の減少を有し得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおける突然変異ＨＴＴの減少は約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質における突然変異ＨＴＴの減少は約４０％であり得る。非限定的な例として、被殻の中型有棘ニューロンにおける突然変異ＨＴＴの減少は４０％〜７０％であり得る。非限定的な例として、被殻および皮質における突然変異ＨＴＴの減少は４０％〜７０％であり得る。
【０７０１】
一部の実施形態において、本発明は、細胞におけるＨＴＴ遺伝子発現を阻害／サイレンシングする方法を提供する。したがって、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して、細胞、詳細にはニューロンにおけるＨＴＴ遺伝子発現を実質的に阻害することができる。一部の態様において、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害とは、少なくとも約２０％、例えば少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％の阻害を指す。したがって、標的遺伝子のタンパク質産物が、少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％阻害され得る。
【０７０２】
一部の実施形態において、本発明は、細胞、詳細には中型有棘ニューロンにおけるＨＴＴ遺伝子発現を阻害／サイレンシングする方法を提供する。一部の態様において、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害とは、少なくとも約２０％、例えば少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％の阻害を指す。したがって、標的遺伝子のタンパク質産物が、少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％阻害され得る。
【０７０３】
一部の実施形態において、本発明は、細胞、詳細にはアストロサイトにおけるＨＴＴ遺伝子発現を阻害／サイレンシングする方法を提供する。一部の態様において、ＨＴＴ遺伝子発現の阻害とは、少なくとも約２０％、例えば少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％の阻害を指す。したがって、標的遺伝子のタンパク質産物が、少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％阻害され得る。
【０７０４】
一実施形態では、本ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して、限定はされないが中脳など、ＣＮＳの少なくとも１つの領域におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低下させてもよい。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現はＣＮＳの少なくとも１つの領域において少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５０〜９０％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が４０〜５０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が４０〜５０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が３０〜７０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が４０〜７０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が４０〜５０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５０〜７０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５０〜６０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５１％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５２％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５３％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５４％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５５％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５６％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５７％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５８％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５９％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が６０％低下する。
【０７０５】
一実施形態では、本ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して、限定はされないが前脳など、ＣＮＳの少なくとも１つの領域におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低下させてもよい。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現はＣＮＳの少なくとも１つの領域において少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５０〜９０％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が４０〜５０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が４０〜５０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が３０〜７０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が４０〜７０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が４０〜５０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５０〜７０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５０〜６０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５０％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５１％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５２％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５３％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５４％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５５％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５６％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５７％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５８％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が５９％低下する。非限定的な例として、線条体および／または皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現が６０％低下する。
【０７０６】
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して、線条体におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低下させてもよい。ＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、３０〜７０％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、少なくとも３０％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５１％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５２％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５３％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５４％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５５％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５６％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５７％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５８％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５９％低下する。非限定的な例として、線条体におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、６０％低下する。
【０７０７】
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を使用して、線条体および／または皮質のニューロンおよび／またはアストロサイトにおけるＨＴＴタンパク質を抑制してもよい。非限定的な例として、ＨＴＴタンパク質の抑制は、線条体の中型有棘ニューロンおよび／または皮質のニューロンにおける抑制である。
【０７０８】
一部の実施形態において、本発明のｓｉＲＮＡ分子をコードする調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子を使用して、線条体および／または皮質のニューロンおよび／またはアストロサイトにおけるＨＴＴタンパク質を抑制し、および関連するニューロン毒性を低下させてもよい。線条体および／または皮質のニューロンおよび／またはアストロサイトにおけるＨＴＴタンパク質の抑制は、独立に、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％の抑制であってもよい。関連するニューロン毒性の低下は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９５％超、５〜１５％、５〜２０％、５〜２５％、５〜３０％、５〜３５％、５〜４０％、５〜４５％、５〜５０％、５〜５５％、５〜６０％、５〜６５％、５〜７０％、５〜７５％、５〜８０％、５〜８５％、５〜９０％、５〜９５％、１０〜２０％、１０〜２５％、１０〜３０％、１０〜３５％、１０〜４０％、１０〜４５％、１０〜５０％、１０〜５５％、１０〜６０％、１０〜６５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜８０％、１０〜８５％、１０〜９０％、１０〜９５％、１５〜２５％、１５〜３０％、１５〜３５％、１５〜４０％、１５〜４５％、１５〜５０％、１５〜５５％、１５〜６０％、１５〜６５％、１５〜７０％、１５〜７５％、１５〜８０％、１５〜８５％、１５〜９０％、１５〜９５％、２０〜３０％、２０〜３５％、２０〜４０％、２０〜４５％、２０〜５０％、２０〜５５％、２０〜６０％、２０〜６５％、２０〜７０％、２０〜７５％、２０〜８０％、２０〜８５％、２０〜９０％、２０〜９５％、２５〜３５％、２５〜４０％、２５〜４５％、２５〜５０％、２５〜５５％、２５〜６０％、２５〜６５％、２５〜７０％、２５〜７５％、２５〜８０％、２５〜８５％、２５〜９０％、２５〜９５％、３０〜４０％、３０〜４５％、３０〜５０％、３０〜５５％、３０〜６０％、３０〜６５％、３０〜７０％、３０〜７５％、３０〜８０％、３０〜８５％、３０〜９０％、３０〜９５％、３５〜４５％、３５〜５０％、３５〜５５％、３５〜６０％、３５〜６５％、３５〜７０％、３５〜７５％、３５〜８０％、３５〜８５％、３５〜９０％、３５〜９５％、４０〜５０％、４０〜５５％、４０〜６０％、４０〜６５％、４０〜７０％、４０〜７５％、４０〜８０％、４０〜８５％、４０〜９０％、４０〜９５％、４５〜５５％、４５〜６０％、４５〜６５％、４５〜７０％、４５〜７５％、４５〜８０％、４５〜８５％、４５〜９０％、４５〜９５％、５０〜６０％、５０〜６５％、５０〜７０％、５０〜７５％、５０〜８０％、５０〜８５％、５０〜９０％、５０〜９５％、５５〜６５％、５５〜７０％、５５〜７５％、５５〜８０％、５５〜８５％、５５〜９０％、５５〜９５％、６０〜７０％、６０〜７５％、６０〜８０％、６０〜８５％、６０〜９０％、６０〜９５％、６５〜７５％、６５〜８０％、６５〜８５％、６５〜９０％、６５〜９５％、７０〜８０％、７０〜８５％、７０〜９０％、７０〜９５％、７５〜８５％、７５〜９０％、７５〜９５％、８０〜９０％、８０〜９５％、または９０〜９５％であってもよい。
【０７０９】
一実施形態では、本ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低下させてもよい。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は４０〜５０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は３０〜７０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は少なくとも３０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は４０〜７０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は４０〜５０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０〜７０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０〜６０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５１％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５２％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５３％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５４％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５５％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５６％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５７％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５８％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５９％低下する。非限定的な例として、皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は６０％低下する。
【０７１０】
一実施形態では、本ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して運動皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低下させてもよい。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は４０〜５０％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は３０〜７０％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は少なくとも３０％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は４０〜７０％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０〜７０％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０〜６０％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５１％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５２％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５３％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５４％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５５％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５６％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５７％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５８％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５９％低下する。非限定的な例として、運動皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は６０％低下する。
【０７１１】
一実施形態では、本ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低下させてもよい。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は４０〜５０％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は３０〜７０％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は少なくとも３０％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は４０〜７０％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は４０〜５０％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０〜７０％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０〜６０％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５１％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５２％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５３％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５４％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５５％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５６％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５７％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５８％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５９％低下する。非限定的な例として、体性感覚皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は６０％低下する。
【０７１２】
一実施形態では、本ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低下させてもよい。ＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現は少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％または９５〜１００％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は４０〜５０％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は３０〜７０％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は少なくとも３０％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は４０〜７０％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０〜７０％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０〜６０％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５０％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５１％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５２％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５３％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５４％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５５％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５６％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５７％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５８％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は５９％低下する。非限定的な例として、側頭皮質におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は６０％低下する。
【０７１３】
一実施形態において、ｓｉＲＮＡ二重鎖またはコード化ｄｓＲＮＡを使用して、被殻におけるＨＴＴタンパク質および／またはｍＲＮＡの発現を低下させてもよい。ＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、ＣＮＳの少なくとも１つの領域において、少なくとも約３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８５％、９０％、９５％、および１００％、または少なくとも２０〜３０％、２０〜４０％、２０〜５０％、２０〜６０％、２０〜７０％、２０〜８０％、２０〜９０％、２０〜９５％、２０〜１００％、３０〜４０％、３０〜５０％、３０〜６０％、３０〜７０％、３０〜８０％、３０〜９０％、３０〜９５％、３０〜１００％、４０〜５０％、４０〜６０％、４０〜７０％、４０〜８０％、４０〜９０％、４０〜９５％、４０〜１００％、５０〜６０％、５０〜７０％、５０〜８０％、５０〜９０％、５０〜９５％、５０〜１００％、５５〜６０％、５５〜７０％、５５〜８０％、５５〜９０％、５５〜９５％、５５〜１００％、６０〜７０％、６０〜８０％、６０〜９０％、６０〜９５％、６０〜１００％、７０〜８０％、７０〜９０％、７０〜９５％、７０〜１００％、８０〜９０％、８０〜９５％、８０〜１００％、９０〜９５％、９０〜１００％、もしくは９５〜１００％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜７０％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、４０〜５０％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０〜７０％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０〜６０％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５０％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５１％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５２％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５３％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５４％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５５％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５６％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５７％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５８％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、５９％低下する。非限定的な例として、被殻におけるＨＴＴタンパク質およびｍＲＮＡの発現は、６０％低下する。
単剤療法および組合せ療法
一部の実施形態において、本組成物は、ＨＤの治療用の単独治療薬または併用治療薬として投与される。
【０７１４】
一部の実施形態において、本発明の医薬組成物は単独療法として使用される。他の実施形態において、本発明の医薬組成物は併用療法で使用される。併用療法は、ニューロン変性に対するその神経保護効果に関して試験済みの、小分子化合物、成長因子およびホルモンなどの１つ以上の神経保護剤との併用であってもよい。
【０７１５】
ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖をコードするＡＡＶ粒子は、１つ以上の他の治療用薬剤と併用して使用されてもよい。「〜と併用して」とは、その薬剤が同じ時点で投与されなければならない、および／または一緒に送達されるように製剤化されなければならないことを含意するよう意図するものではなく、しかしながらこれらの送達方法は本開示の範囲内にある。組成物は、１つ以上の他の所望の治療薬または医療手技と同時に、その前に、またはその後に投与することができる。一般に、各薬剤は、当該の薬剤について決定された用量および／またはタイムスケジュールで投与されることになる。
【０７１６】
本発明のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列をコードするＡＡＶ粒子と併用して使用し得る治療剤は、抗酸化剤、抗炎症剤、抗アポトーシス剤、カルシウム調節剤、抗グルタミン酸剤、構造タンパク質阻害薬、筋機能に関与する化合物、および金属イオン調節に関与する化合物である小分子化合物であり得る。
【０７１７】
本明細書に記載されるベクターと併用して使用し得るＨＤ治療用に試験される化合物としては、限定はされないが、ドーパミン枯渇剤（例えば、舞踏運動に対するテトラベナジン）、ベンゾジアゼピン系（例えば、ミオクローヌス、舞踏運動、ジストニア、硬直、および／または痙縮に対するクロナゼパム）、抗痙攣薬（例えば、ミオクローヌスに対するバルプロ酸ナトリウムおよびレベチラセタム）、ドーパミンのアミノ酸前駆物質（例えば、特に若年性ＨＤまたは若年成人発症型パーキンソン病表現型に関連する硬直に対するレボドパ）、骨格筋弛緩薬（例えば、硬直および／または痙縮に対するバクロフェン、チザニジン）、筋筋麻痺を引き起こす神経筋接合部におけるアセチルコリン（ａｃｅｔｙｃｈｏｌｉｎｅ）放出に対する阻害薬（例えば、ブラキシズムおよび／またはジストニアに対するボツリヌス毒素）、非定型神経遮断薬（例えば、精神病および／または易怒に対するオランザピンおよびクエチアピン、精神病、舞踏運動および／または易怒に対するリスペリドン、スルピリドおよびハロペリドール、治療抵抗性精神病に対するクロザピン、顕著な陰性症状を有する精神病に対するアリピプラゾール）、ＡＴＰ／細胞エナジェティクス（例えばクレアチン）を増加させる薬剤、選択的セロトニン再取込み阻害薬（ＳＳＲＩ）（例えば、抑欝、不安、妄想強迫行動および／または易怒に対するシタロプラム、フルオキセチン、パロキセチン、セルトラリン、ミルタザピン、ベンラファキシン）、催眠剤（例えば、睡眠・覚醒サイクルの変化に対するゾピクロン（ｘｏｐｉｃｌｏｎｅ）および／またはゾルピデム）、抗痙攣薬（例えば、躁病または軽躁病に対するバルプロ酸ナトリウムおよびカルバマゼピン）および気分安定剤（例えば、躁病または軽躁病に対するリチウム）が挙げられる。
【０７１８】
ＨＤの治療のため、本発明のｓｉＲＮＡ分子の核酸配列をコードするＡＡＶ粒子との併用療法で神経栄養因子が使用されてもよい。概して、神経栄養因子は、ニューロンの生存、成長、分化、増殖および／または成熟を促進し、またはニューロンの活性増加を刺激する物質として定義される。一部の実施形態において、本方法は、治療を必要としている対象への１つ以上の栄養因子の送達を更に含む。栄養因子としては、限定はされないが、ＩＧＦ−Ｉ、ＧＤＮＦ、ＢＤＮＦ、ＣＴＮＦ、ＶＥＧＦ、コリベリン、キサリプロデン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモンおよびＡＤＮＦ、およびこれらのバリアントを挙げることができる。
【０７１９】
一態様において、ＨＴＴ遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ二重鎖をコードする、調節性ポリヌクレオチドを含むＡＡＶ粒子は、ＡＡＶ−ＩＧＦ−Ｉ（例えば、ヴィンセント（Ｖｉｎｃｅｎｔ）ら著、ニューロモレキュラー・メディシン（Ｎｅｕｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、２００４年、第６巻、ｐ．７９〜８５を参照のこと；この内容は全体として参照により本明細書に援用される）およびＡＡＶ−ＧＤＮＦ（例えば、ワン（Ｗａｎｇ）ら著、ジャーナル・オブ・ニューロサイエンス（Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．）、２００２年、第２２巻、ｐ．６９２０〜６９２８を参照のこと；この内容は全体として参照により本明細書に援用される）などの神経栄養因子を発現するＡＡＶベクターと共投与されてもよい。
【０７２０】
Ｖ．定義
特に明記しない限り、以下の用語および語句は以下に説明する意味を有する。これらの定義は、本質的に限定するよう意図するものでなく、本発明の特定の態様のより明確な理解を提供するために供される。
【０７２１】
本明細書で使用されるとき、用語「核酸」、「ポリヌクレオチド」および「オリゴヌクレオチド」は、ポリデオキシリボヌクレオチド（２−デオキシ−Ｄ−リボースを含有する）、またはポリリボヌクレオチド（Ｄ−リボースを含有する）のいずれか、またはプリンもしくはピリミジン塩基、または修飾プリンもしくはピリミジン塩基のＮグリコシドである任意の他のタイプのポリヌクレオチドで構成される任意の核酸ポリマーを指す。用語「核酸」、「ポリヌクレオチド」および「オリゴヌクレオチド」の間で長さに意図される違いはなく、これらの用語は同義的に用いられ得る。これらの用語は分子の一次構造のみを指す。したがって、これらの用語には、二本鎖および一本鎖ＤＮＡ、ならびに二本鎖および一本鎖ＲＮＡが含まれる。
【０７２２】
本明細書で使用されるとき、用語「ＲＮＡ」または「ＲＮＡ分子」または「リボ核酸分子」は、リボヌクレオチドのポリマーを指す；用語「ＤＮＡ」または「ＤＮＡ分子」または「デオキシリボ核酸分子」は、デオキシリボヌクレオチドのポリマーを指す。ＤＮＡおよびＲＮＡは、例えばそれぞれＤＮＡ複製およびＤＮＡの転写により、天然で合成されることもでき；または化学的に合成されることもできる。ＤＮＡおよびＲＮＡは、一本鎖（すなわち、それぞれｓｓＲＮＡまたはｓｓＤＮＡ）または多重鎖（例えば、二本鎖、すなわち、それぞれｄｓＲＮＡおよびｄｓＤＮＡ）であり得る。用語「ｍＲＮＡ」または「メッセンジャーＲＮＡ」は、本明細書で使用されるとき、１つ以上のポリペプチド鎖のアミノ酸配列をコードする一本鎖ＲＮＡを指す。
【０７２３】
本明細書で使用されるとき、用語「ＲＮＡ干渉」または「ＲＮＡｉ」は、対応するタンパク質コード遺伝子の発現の阻害または干渉または「サイレンシング」をもたらすＲＮＡ分子によって媒介される配列特異的調節機構を指す。ＲＮＡｉは、植物、動物および真菌を含めた多くの種類の生物で観察されている。ＲＮＡｉは細胞において天然で外来性ＲＮＡ（例えばウイルスＲＮＡ）を除去するために起こる。天然ＲＮＡｉは、遊離ｄｓＲＮＡから切断された、分解機構を他の類似のＲＮＡ配列に仕向ける断片によって進行する。ＲＮＡｉはＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）によって制御され、細胞質において短鎖／低分子ｄｓＲＮＡ分子によって開始され、そこでｄｓＲＮＡ分子は触媒ＲＩＳＣ成分アルゴノートと相互作用する。ｄｓＲＮＡ分子は細胞に外因的に導入されることができる。外因性ｄｓＲＮＡはリボヌクレアーゼタンパク質ダイサーを活性化させることによってＲＮＡｉを開始し、ダイサーはｄｓＲＮＡに結合してそれを切断することにより、数個の対を成さないオーバハング塩基を各末端に有する２１〜２５塩基対の二本鎖断片を生じさせる。これらの短鎖二本鎖断片は低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）と呼ばれる。
【０７２４】
本明細書で使用されるとき、用語「短鎖干渉性ＲＮＡ」、「低分子干渉ＲＮＡ」または「ｓｉＲＮＡ」は、ＲＮＡｉを誘導または媒介する能力を有する約５〜６０ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）を含むＲＮＡ分子（またはＲＮＡ類似体）を指す。好ましくは、ｓｉＲＮＡ分子は、約１５〜３０ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体、例えば約１６〜２５ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）、約１８〜２３ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）、約１９〜２２ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）（例えば、１９、２０、２１または２２ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体）、約１９〜２５ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）および約１９〜２４ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）を含む。用語「短鎖」ｓｉＲＮＡは、５〜２３ヌクレオチド、好ましくは２１ヌクレオチド（またはヌクレオチド類似体）、例えば、１９、２０、２１または２２ヌクレオチドを含むｓｉＲＮＡを指す。用語「長鎖」ｓｉＲＮＡは、２４〜６０ヌクレオチド、好ましくは約２４〜２５ヌクレオチド、例えば、２３、２４、２５または２６ヌクレオチドを含むｓｉＲＮＡを指す。短鎖ｓｉＲＮＡは、一部の例では、１９ヌクレオチド未満、例えば、１６、１７または１８ヌクレオチド、または僅か５ヌクレオチドを含んでもよく、但し、これらの短いｓｉＲＮＡはＲＮＡｉを媒介する能力を保持しているものとする。同様に、長鎖ｓｉＲＮＡは、一部の例では、２６ヌクレオチド超、例えば、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、または更には６０ヌクレオチドを含んでもよく、但し、これらの長いｓｉＲＮＡは、短鎖ｓｉＲＮＡへの更なるプロセシング、例えば酵素的プロセシングがない限りＲＮＡｉまたは翻訳抑制を媒介する能力を保持しているものとする。ｓｉＲＮＡは、一本鎖ＲＮＡ分子（ｓｓ−ｓｉＲＮＡ）またはハイブリダイズしてｓｉＲＮＡ二重鎖と呼ばれる二重鎖構造を形成するセンス鎖およびアンチセンス鎖を含む二本鎖ＲＮＡ分子（ｄｓ−ｓｉＲＮＡ）であってもよい。
【０７２５】
本明細書で使用されるとき、ｓｉＲＮＡ分子の「アンチセンス鎖」または「第１鎖」または「ガイド鎖」という用語は、サイレンシングの標的となる遺伝子のｍＲＮＡの約１０〜５０ヌクレオチド、例えば、約１５〜３０、１６〜２５、１８〜２３または１９〜２２ヌクレオチドの一部分と実質的に相補的な鎖を指す。アンチセンス鎖または第１鎖は、標的特異的サイレンシングを誘導するのに所望の標的ｍＲＮＡ配列と十分に相補的な、例えば、ＲＮＡｉ機構または過程によって所望の標的ｍＲＮＡの破壊を引き起こすのに十分に相補的な配列を有する。
【０７２６】
本明細書で使用されるとき、ｓｉＲＮＡ分子の「センス鎖」または「第２鎖」または「パッセンジャー鎖」という用語は、アンチセンス鎖または第１鎖と相補的な鎖を指す。ｓｉＲＮＡ分子のアンチセンス鎖とセンス鎖とはハイブリダイズして二重鎖構造を形成する。本明細書で使用されるとき、「ｓｉＲＮＡ二重鎖」は、サイレンシングの標的となる遺伝子のｍＲＮＡの約１０〜５０ヌクレオチドの一部分と十分な相補性を有するｓｉＲＮＡ鎖と、他方のｓｉＲＮＡ鎖と二重鎖を形成するのに十分な相補性を有するｓｉＲＮＡ鎖とを含む。
【０７２７】
本明細書で使用されるとき、用語「相補」は、ポリヌクレオチドが互いに塩基対を形成する能力を指す。塩基対は、典型的には逆平行ポリヌクレオチド鎖におけるヌクレオチド単位間の水素結合によって形成される。相補ポリヌクレオチド鎖は、ワトソン・クリック方式（例えば、ＡとＴ、ＡとＵ、ＣとＧ）、または二重鎖の形成を可能にする任意の他の方式で塩基対を形成することができる。当業者は認識しているとおり、ＤＮＡと対照的にＲＮＡを使用するとき、チミンでなくウラシルがアデノシンと相補的と見なされる塩基である。しかしながら、本発明の文脈でＵと表記されるとき、特に指定されない限り、Ｔに置き換え可能であることが含意される。完全な相補性または１００％の相補性とは、一方のポリヌクレオチド鎖の各ヌクレオチド単位が第２のポリヌクレオチド鎖のヌクレオチド単位と水素結合を形成することができる状況を指す。完全でない相補性とは、２本の鎖の全てではないものの一部のヌクレオチド単位が互いに水素結合を形成することができる状況を指す。例えば、２本の２０ｍｅｒについて、各鎖の２個の塩基対のみが互いに水素結合を形成することができる場合、このポリヌクレオチド鎖は１０％の相補性を呈する。同じ例で、各鎖の１８個の塩基対が互いに水素結合を形成することができる場合、このポリヌクレオチド鎖は９０％の相補性を呈する。
【０７２８】
本明細書で使用されるとき、用語「実質的に相補的」とは、ｓｉＲＮＡが、所望の標的ｍＲＮＡに結合して標的ｍＲＮＡのＲＮＡサイレンシングを引き起こすのに十分な配列を（例えばアンチセンス鎖に）有することを意味する。
【０７２９】
本明細書で使用されるとき、「ターゲティング」は、標的核酸にハイブリダイズして所望の効果を誘導するであろう核酸配列の設計および選択過程を意味する。
用語「遺伝子発現」は、核酸配列が首尾よく転写およびほとんどの場合に翻訳を受けてタンパク質またはペプチドを産生する過程を指す。明確にするため、「遺伝子発現」の測定に言及するとき、それは、測定が核酸転写産物、例えばＲＮＡもしくはｍＲＮＡの測定またはアミノ酸翻訳産物、例えばポリペプチドもしくはペプチドの測定であり得ることを意味するものと理解されなければならない。ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ポリペプチドおよびペプチドの量またはレベルの測定方法は当該技術分野において周知である。
【０７３０】
本明細書で使用されるとき、用語「突然変異」は、後続の世代に伝達され得る変異型（「突然変異型」とも称される）をもたらす遺伝子の構造の任意の変化を指す。遺伝子の突然変異は、ＤＮＡにおける一塩基の変化、または遺伝子もしくは染色体のより大きい一部分の欠失、挿入、もしくは再配列によって引き起こされ得る。
【０７３１】
本明細書で使用されるとき、用語「ベクター」は、本発明のｓｉＲＮＡ分子などの異種分子を輸送し、形質導入し、またはその他担体として働く任意の分子または部分を意味する。「ウイルスゲノム」または「ベクターゲノム」または「ウイルスベクター」は、目的の分子、例えば、トランス遺伝子をコードするか、もしくは含む、１つ以上のポリヌクレオチド領域、ポリペプチドもしくはマルチポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、または低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）などの調節性核酸を含む配列を指す。ウイルスゲノムは一般に、遺伝物質を細胞に送達するのに使用される。ウイルスゲノムは、具体的適用のために修飾されることが多い。ウイルスゲノム配列の種類は、レトロウイルスのウイルスゲノム配列、レンチウイルスのウイルスゲノム配列、アデノウイルスのウイルスゲノム配列、およびアデノ随伴ウイルスのゲノム配列を含む。
【０７３２】
用語「アデノ随伴ウイルス」または「ＡＡＶ」は、本明細書で使用されるとき、アデノ随伴ベクターの成分を含む、またはそれに由来する任意のベクターを指し、哺乳類細胞、好ましくはヒト細胞を感染させるのに好適である。用語のＡＡＶベクターは、典型的には、ペイロードを含むＡＡＶ型ウイルス粒子またはビリオンを意味する。ＡＡＶベクターは、血清型の組合せ（すなわち「シュードタイプ」ＡＡＶ）を含めた様々な血清型または様々なゲノム（例えば一本鎖または自己相補的）に由来し得る。加えて、ＡＡＶベクターは複製欠損型および／またはターゲット型であってもよい。
【０７３３】
本明細書で使用されるとき、語句「遺伝子の発現を阻害する」は、遺伝子の発現産物量の減少を生じさせることを意味する。発現産物は、遺伝子から転写されたＲＮＡ分子（例えば、ｍＲＮＡ）または遺伝子から転写されたｍＲＮＡから翻訳されたポリペプチドであり得る。典型的には、ｍＲＮＡのレベルが減少することにより、そこから翻訳されるポリペプチドのレベルが減少することになる。発現レベルは標準的なｍＲＮＡまたはタンパク質測定技法を用いて決定し得る。
【０７３４】
本明細書で使用されるとき、用語「インビトロ」は、生物（例えば、動物、植物、または微生物）の中でなく、むしろ人工環境、例えば試験管または反応槽、細胞培養物、ペトリ皿等で起こるイベントを指す。
【０７３５】
本明細書で使用されるとき、用語「インビボ」は、生物（例えば、動物、植物、または微生物またはその細胞もしくは組織）の中で起こるイベントを指す。
本明細書で使用されるとき、用語「修飾された」は、本発明の分子の変化した状態または構造を指す。分子は、化学的、構造的、および機能的に修飾することを含め、多くの方法で修飾し得る。
【０７３６】
本明細書で使用されるとき、用語「合成」は、人間の手で作製、調製、および／または製造されることを意味する。本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチドまたは他の分子の合成は化学的または酵素的であってもよい。
【０７３７】
本明細書で使用されるとき、用語「トランスフェクション」は、外因性核酸を細胞に導入する方法を指す。トランスフェクション方法としては、限定はされないが、化学的方法、物理的処理およびカチオン性脂質または混合が挙げられる。細胞にトランスフェクトし得る薬剤の一覧は広範であり、限定はされないが、ｓｉＲＮＡ、センスおよび／またはアンチセンス配列、１つ以上の遺伝子をコードし、かつ発現プラスミドに編成されるＤＮＡ、タンパク質、タンパク質断片などが含まれる。
【０７３８】
本明細書で使用されるとき、「オフターゲット」は、任意の１つ以上の標的、遺伝子、または細胞転写物に対する任意の意図しない効果を指す。
本明細書で使用されるとき、語句「薬学的に許容可能」は、本明細書では、妥当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激作用、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症のない、妥当なリスク対効果比に相応の、ヒトおよび動物の組織との接触における使用に好適な化合物、材料、組成物、および／または剤形を指して用いられる。
【０７３９】
本明細書で使用されるとき、薬剤の「有効量」という用語は、有益なまたは所望の結果、例えば臨床結果を生じさせるのに十分な量であり、そのため「有効量」は、それが適用されるコンテクストに依存する。例えば、ＨＤを治療する薬剤を投与するコンテクストでは、薬剤の有効量は、例えば、その薬剤の投与なしに達成される応答と比較して、本明細書に定義されるとおりのＨＤの治療を実現するのに十分な量である。
【０７４０】
本明細書で使用されるとき、用語「治療有効量」は、送達される薬剤（例えば、核酸、薬物、治療用薬剤、診断用薬剤、予防用薬剤等）についての、感染、疾患、障害、および／または病態に罹患しているまたはそれに罹り易い対象に投与したとき感染、疾患、障害、および／または病態を治療し、その症状を改善し、それを診断し、予防し、および／またはその発症を遅延させるのに十分な量を意味する。
【０７４１】
本明細書で使用されるとき、用語「対象」または「患者」は、例えば実験的、診断的、予防的、および／または治療的目的で本発明に係る組成物を投与し得る任意の生物を指す。典型的な対象としては、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、チンパンジーならびに他の類人猿およびサル種などの非ヒト霊長類、およびヒトなど、哺乳類）および／または植物が挙げられる。
【０７４２】
本明細書で使用されるとき、用語「予防する」または「予防」は、数週間、数ヵ月間、または数年間を含めたある期間にわたり病態または疾患の発生、展開または進行を遅延させるまたは未然に防ぐことを指す。
【０７４３】
用語「治療」または「治療する」は、本明細書で使用されるとき、疾患の治癒または改善に用いられる１つ以上の特定の手順の適用を指す。特定の実施形態において、特定の手順は１つ以上の医薬品の投与である。本発明との関連において、特定の手順は１つ以上のｓｉＲＮＡ分子の投与である。
【０７４４】
本明細書で使用されるとき、用語「改善」または「改善する」は、病態または疾患の少なくとも１つの指標の重症度を低下させることを指す。例えば、神経変性障害のコンテクストでは、改善には、ニューロン喪失の低減が含まれる。
【０７４５】
本明細書で使用されるとき、用語「投与する」は、対象に医薬品または組成物を提供することを指す。
本明細書で使用されるとき、用語「神経変性」は、神経細胞死をもたらす病的状態を指す。多数の神経障害が共通の病的状態として神経変性を共有する。例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、および筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）は、いずれも慢性神経変性を引き起こし、慢性神経変性は数年の期間にわたる緩慢な進行性の神経細胞死によって特徴付けられる一方、急性神経変性は、脳卒中などの虚血、または外傷性脳傷害などの外傷の結果としての、または例えば脊髄損傷もしくは多発性硬化症によって引き起こされる脱髄または外傷による軸索切断の結果としての、神経細胞死の突発的な発生によって特徴付けられる。一部の神経障害では、例えば初期ＨＤにおける中型有棘ニューロン変性など、主に１つのタイプの神経細胞が変性する。
【０７４６】
ＶＩ．均等物および範囲
当業者は、本明細書に記載される本発明に係る具体的な実施形態の多くの均等物を認識し、またはルーチンに過ぎない実験を用いて確かめることが可能であろう。本発明の範囲が上記の説明に限定されることは意図されず、それはむしろ添付の特許請求の範囲に示されるとおりである。
【０７４７】
特許請求の範囲では、「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」などの冠詞は、反する旨が示されない限り、または文脈上特に明らかでない限り、１つまたは２つ以上を意味し得る。ある群の１つ以上のメンバーの間に「または」を含むクレームまたは説明は、反する旨が示されない限り、または文脈上特に明らかでない限り、その群メンバーの１つ、２つ以上、または全てが所与の製品または方法に存在する、それに用いられる、または他の形でそれに関連する場合に満たされるものと見なされる。本発明は、群の正確に１つのメンバーが所与の製品または方法に存在する、それに用いられる、または他の形でそれに関連する実施形態を含む。本発明は、２つ以上の、または全部の群メンバーが所与の製品または方法に存在する、それに用いられる、または他の形でそれに関連する実施形態を含む。
【０７４８】
また、用語「〜を含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は非限定的（ｏｐｅｎ）であることが意図され、追加の要素または工程の包含を許容するが必須ではないことも注記される。用語「〜を含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」が本明細書で使用されるとき、したがって用語「〜からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」もまた包含され、開示される。
【０７４９】
範囲が提供されるとき、端点は含まれる。更に、特に指示されない限り、または文脈および当業者の理解から特に明らかでない限り、範囲として表される値は、文脈上特に明確に指示されない限り、その範囲の下限の単位の１０分の１に至るまでの、本発明の種々の実施形態において明示される範囲内にある任意の具体的な値または部分的範囲を想定し得ることが理解されるべきである。
【０７５０】
加えて、先行技術に含まれる本発明の任意の特定の実施形態は、クレームの任意の１つ以上から明示的に除外され得ることが理解されるべきである。かかる実施形態は当業者に公知であると見なされるため、除外が本明細書に明示的に示されないとしても、それらは除外され得る。本発明の組成物の任意の詳細な実施形態（例えば、任意の抗生物質、治療薬または活性成分；任意の作製方法；任意の使用方法等）が、先行技術の存在に関係するか否かに関わらず、何らかの理由で任意の１つ以上のクレームから除外されることがある。
【０７５１】
使用した文言は、限定でなく、むしろ説明の文言であること、およびその広義の態様における本発明の真の範囲および趣旨から逸脱することなく、添付の特許請求の範囲内で変更が行われ得ることが理解されるべきである。
【０７５２】
本発明をかなり詳しく、幾つかの説明される実施形態に関するある具体性をもって説明したが、それが任意のかかる具体例もしくは実施形態または任意の具体的な実施形態に限定されるべきであることを意図するものではなく、しかし先行技術を考慮してかかる特許請求の範囲の最も広義の可能な解釈を提供し、したがって本発明の意図される範囲を有効に包含するように添付の特許請求の範囲を参照して解釈されるべきである。
【０７５３】
（実施例）
ＶＩＩ．実施例
実施例１．哺乳類細胞で作製されたＡＡＶ１−ｍｉＲＮＡベクターによる治療後のＨＴＴ抑制、ガイド対パッセンジャー比および５’末端プロセシング精度に関するインビボＹＡＣ１２８マウス試験
プラスミドトランスフェクションおよびＡＡＶにパッケージングされたＡＡＶ−ｍｉＲＮＡ発現ベクターの感染によるＨＴＴのインビトロ抑制に基づき、選択されたＡＡＶ−ｍｉＲＮＡ発現ベクターをＡＡＶ１にパッケージングし、ＹＡＣ１２８マウスにおいてインビボで評価することにより、ＨＴＴ  ｍＲＮＡ抑制を定量化し、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比および５’末端プロセシング精度をディープシーケンシングによって評価した。ＡＡＶ−ｍｉＲＮＡトランス遺伝子ゲノムをＣＢＡプロモータと共にＡＡＶ１にパッケージングし（ＡＡＶ１．ＣＢＡ．ｉＨｔｔ）、次にＨＥＫ２９３またはＨＥＫ２９３Ｔ細胞におけるトリプルトランスフェクションによってベクターを作製し、精製して、０．００１％Ｆ−６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中に製剤化した。７〜１２週齢のＹＡＣ１２８マウスにベクターを半球当たり５ｕＬ中約１Ｅ１０〜３Ｅ１０ｖｇの用量で１０分かけて両側性線条体内注入によって投与した。対照群は媒体（０．００１％Ｆ−６８含有ＰＢＳ）で処置した。各群に４匹の雌および４匹の雄が含まれた。被験物質投与後約２８日で線条体組織パンチを収集し、後の分析のためスナップ凍結した。
【０７５４】
次に線条体組織試料をホモジナイズし、全ＲＮＡを精製した。ＨＴＴの相対発現をｑＲＴ−ＰＣＲにより決定した。正規化用のハウスキーピング遺伝子には、マウスＸＰＮＰＥＰ１（Ｘ−プロリルアミノペプチダーゼ１）およびマウスＨＰＲＴ（ヒポキサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ）が含まれた。ＨＴＴ  ｍＲＮＡをハウスキーピング遺伝子発現に対して正規化し、次に媒体群に対して更に正規化した。総用量（ｖｇ／マウス）およびコンストラクトは、表４１に示される。結果は、表４２および表４３に示される。
【０７５５】
【表４１】
2020518259.tif 000082
【０７５６】
【表４２】
2020518259.tif 000083
【０７５７】
【表４３】
2020518259.tif 000084
ＹＡＣ１２８マウス線条体では、１線条体当たり１Ｅ１０〜３Ｅ１０ｖｇの線条体内注入後約２８日で、ＶＯＹＨＴ４３（ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１２７．０１６）、ＶＯＹＨＴ４６（ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１２７．２５７）、ＶＯＹＨＴ１５（ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１２７．５７９）、ＶＯＹＨＴ４７（ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０４．５７９．３）、ＶＯＹＨＴ４８（ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０４．５７９．１０）、ＶＯＹＨＴ１６（ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０４．０１６）およびＶＯＹＨＴ４０（ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０９．０１６）が、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの約２０〜４０％のサイレンシングを生じさせた。
【０７５８】
線条体組織試料はまた、ディープシーケンシングによってガイド鎖：パッセンジャー鎖比、全内因性ｍｉＲＮＡプールに対するガイド鎖およびパッセンジャー鎖の存在量、およびガイド鎖の５’末端におけるプロセシング精度を評価することにより、ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡプロセシングについても判定した。結果は表４４に示される。
【０７５９】
【表４４】
2020518259.tif 000085
ＶＯＹＨＴ４３、ＶＯＹＨＴ１５、ＶＯＹＨＴ４６、ＶＯＹＨＴ４８、ＶＯＹＨＴ４０、およびＶＯＹＨＴ４７は、他のコンストラクトと比較して、良好なＨｔｔ  ｍＲＮＡノックダウンを有することが示された。ＶＯＹＨＴ３７、ＶＯＹＨＴ４６、ＶＯＹＨＴ４４、およびＶＯＹＨＴ３９は、それらが４未満の比を有していたため、低いガイド鎖対パッセンジャー鎖比（Ｇ：Ｐ比）を有すると見なされた。ＶＯＹＨＴ４３およびＶＯＹＨＴ４５は、総ｍｉＲＮＡ読み取りと比べて１０％よりも多い存在量を有し、追加試験には高すぎると見なされた。追加試験には、ＶＯＹＨＴ４８、ＶＯＹＨＴ４０およびＶＯＹＨＴ４７を選択した。
【０７６０】
実施例２．ＡＡＶ−ｍｉＲＮＡ発現ベクター
ＨＴＴを標的にするガイド鎖とパッセンジャー鎖とを含むｐｒｉ−ｍｉＲＮＡカセットを含むコンストラクトをＡＡＶ−ｍｉＲＮＡ発現ベクター（ｓｓまたはｓｃのいずれか）となるように操作した。ＡＡＶ−ｍｉＲＮＡ発現ベクターコンストラクトは、ＩＴＲからＩＴＲまで、５’から３’に挙げて、突然変異または野生型ＩＴＲ、プロモータ（ＣＭＶ（ＳＶ４０イントロンまたはヒトベータグロビンイントロンを含む）、Ｕ６、Ｈ１、ＣＢＡ（ＣＭＶｉｅエンハンサー、ＣＢプロモータおよびＳＶ４０イントロンまたはヒトベータグロビンイントロンを含む）、またはＣＡＧプロモータ（ＣＭＶｉｅエンハンサー、ＣＢプロモータ、およびウサギベータグロビンイントロンまたはヒトベータグロビンイントロンを含む）のいずれか）、ＨＴＴを標的にするガイド鎖配列とパッセンジャー鎖配列とを含むｐｒｉ−ｍｉＲＮＡカセット、ウサギグロビンポリＡまたはヒト成長ホルモンポリＡおよび野生型ＩＴＲを含む。インビトロおよびインビボ試験を実施してＡＡＶ−ｍｉＲＮＡ発現ベクターの薬理活性を判定する。
【０７６１】
実施例３．Ｂａｃｕｌｏ／Ｓｆ９系で作製されたＡＡＶ−ｍｉＲＮＡベクターによる治療後のＨＴＴ抑制、ガイド鎖対パッセンジャー鎖比およびプロセシング精度に関するインビボＹＡＣ１２８マウス試験
ＨＴＴを標的にするガイド鎖とパッセンジャー鎖とを含むｐｒｉ−ｍｉＲＮＡカセットを含む３つのコンストラクトを、ｂａｃｕｌｏ／Ｓｆ９産生用に設計されたｓｃＡＡＶ−ｍｉＲＮＡ発現ベクターとなるように操作した。ｓｃＡＡＶ−ｍｉＲＮＡ発現ベクターコンストラクトは、ＩＴＲからＩＴＲまで、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、ＣＢＡプロモータ（ＣＭＶｉｅエンハンサー、ＣＢプロモータおよびＳＶ４０イントロンを含む）、ＨＴＴを標的にするガイド鎖配列とパッセンジャー鎖配列とを含むｐｒｉ−ｍｉＲＮＡカセット、ウサギグロビンポリＡ、スタッファー配列、および野生型ＩＴＲを含んでいた。ベクターを、ｂａｃｕｌｏ／Ｓｆ９系で作製し、精製し、０．００１％Ｆ−６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化し、次に５μＬベクターを０．５μＬ／分で７〜１２週齢のＹＡＣ１２８マウスに両側性線条体内注入によって投与した。ベクター濃度は３．６×１０１２ｖｇ／ｍＬであり、総用量は３．６×１０１０ｖｇだった。対照群は媒体（０．００１％Ｆ−６８含有ＰＢＳ）で処置した。各群に４匹の雌および４匹の雄が含まれた。被験物質投与後約２８日で線条体組織パンチを収集し、スナップ凍結した。線条体組織試料をホモジナイズし、全ＲＮＡを精製し、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの相対発現をｑＲＴ−ＰＣＲにより決定した。正規化用のハウスキーピング遺伝子は、マウスＸＰＮＰＥＰ１（Ｘ−プロリルアミノペプチダーゼ１）であった。ＨＴＴ  ｍＲＮＡをハウスキーピング遺伝子発現に対して正規化し、次に媒体群に対して更に正規化した。ＨＴＴ  ｍＲＮＡの結果は表４５に示される。
【０７６２】
【表４５】
2020518259.tif 000086
ＹＡＣ１２８マウス線条体では、１線条体当たり１．８×１０１０ｖｇの線条体内注入後約２８日でＶＯＹＨＴ１（ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０４．５７９．３）、ＶＯＹＨＴ４（ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０４．５７９．１０）、およびＶＯＹＨＴ３（ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０９．０１６）が、ＨＴＴ  ｍＲＮＡの約４２％〜４４％のサイレンシングを生じさせた。
【０７６３】
実施例４．非ヒト霊長類でのインビボ試験
試験設計
アカゲザルで試験を行って、ＨＴＴ抑制、ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡプロセシングの精度および効率、ならびにＣＮＳ内でのベクターゲノムの忍容性および分布を判定した。ＨＴＴを標的にするガイド鎖とパッセンジャー鎖とを含むｐｒｉ−ｍｉＲＮＡカセットを含む選択されたコンストラクトを、ｂａｃｕｌｏ／Ｓｆ９産生用に設計されたｓｃＡＡＶ−ｍｉＲＮＡ発現ベクターとなるように操作した。ｓｃＡＡＶ−ｍｉＲＮＡ発現コンストラクトは、ＩＴＲからＩＴＲまで、５’から３’に挙げて、野生型ＩＴＲ、ＣＢＡプロモータ（ＣＭＶｉｅエンハンサー、ＣＢプロモータおよびＳＶ４０イントロンを含む）、ＨＴＴを標的にするガイド鎖配列とパッセンジャー鎖配列とを含むｐｒｉ−ｍｉＲＮＡカセット、ウサギグロビンポリＡ、スタッファー配列、および野生型ＩＴＲを含んでいた。ベクターを、ｂａｃｕｌｏ／Ｓｆ９系で作製し、精製し、０．００１％Ｆ−６８含有リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で製剤化した。
【０７６４】
４群のアカゲザルに、媒体（ｎ＝３）または３つのベクターの１つ（１群当たりｎ＝６）を、１００μＬ／側の両側性被殻内注入として３〜５μＬ／分で投与した。ガドテリドール（２ｍＭ；プロハンス）を共注入した。ベクターを投与する動物には、同じベクターを両側に注入した。右側は９×１０１１ｖｇ／ｍＬの濃度を投与し、左側は２．７×１０１２ｖｇ／ｍＬの濃度を投与した。投与されたベクターの総用量は、１被殻当たり９×１０１０ｖｇ（低用量）もしくは２．７×１０１１ｖｇ（高用量）、または１動物当たり３．６×１０１１ｖｇだった。動物は全て５週後に安楽死させた。試験設計は表４６に示される。
【０７６５】
【表４６】
2020518259.tif 000087
ＨＴＴ  ｍＲＮＡ分析
ＨＴＴ  ｍＲＮＡレベルを定量化するために、分岐ＤＮＡ（ｂＤＮＡ）を使用して、被殻に由来する２ｍｍ組織パンチでＨＴＴ  ｍＲＮＡ抑制を判定した。ベクターを投与した各群の場合、ベクター１用量当たり合計６０個のパンチを判定した（１被殻当たり１０個のパンチ、ベクター１用量当たり６匹の動物）。媒体群からは、３匹の動物の各々から１被殻当たり１０個のパンチを採取した。ＨＴＴ  ｍＲＮＡを、ハウスキーピング遺伝子ＴＡＴＡボックス結合タンパク質（ＴＢＰ）、アラニル−ｔＲＮＡ合成酵素（ＡＡＲＳ）およびＸ−プロリルアミノペプチダーゼ１（ＸＰＮＰＥＰ１）の幾何平均に対して正規化し、次に媒体群に対して更に正規化した。ＨＴＴ  ｍＲＮＡ結果は、表４７および表４８に示される。
【０７６６】
【表４７】
2020518259.tif 000088
【０７６７】
【表４８】
2020518259.tif 000089
ベクターゲノム定量化
ｂＤＮＡによってＨＴＴ  ｍＲＮＡレベルを定量化するために使用された、被殻に由来する同じ２ｍｍ組織パンチ（高用量および低用量処置による）に由来する組織ライセートの一部を、液滴デジタルＰＣＲによるベクターゲノムコピー（ＶＧ）決定に使用した。群１（ＶＯＹＨＴ１）および群３（ＶＯＹＨＴ４）では、１二倍体細胞当たり約１０個ＶＧコピーで約５０％のＨＴＴ  ｍＲＮＡ抑制が達成された。群２（ＶＯＹＨＴ３）では、１二倍体細胞当たり約４００個ＶＧコピーで約５０％のＨＴＴ  ｍＲＮＡ抑制が達成された。結果は、表４９（高用量、２．７Ｅ１２ｖｇ／ｍＬ）および表５０（低用量、０．９Ｅ１２ｖｇ／ｍＬ）に示される。
【０７６８】
【表４９−１】
2020518259.tif 000090
【０７６９】
【表４９−２】
2020518259.tif 000091
【０７７０】
【表５０−１】
2020518259.tif 000092
【０７７１】
【表５０−２】
2020518259.tif 000093
Ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡプロセシング
高用量および低用量処置された被殻に由来する２ｍｍパンチのディープシーケンシングによってｐｒｉ−ｍｉＲＮＡプロセシングの精度および効率を判定して、ガイド鎖：パッセンジャー鎖比、全内因性ｍｉＲＮＡプールに対するガイド鎖およびパッセンジャー鎖の存在量、およびガイド鎖の５’末端におけるプロセシング精度を評価した。これらの結果は表５１に示される。
【０７７２】
【表５１】
2020518259.tif 000094
忍容性結果
−８日目（すなわち最初の動物に投薬する８日前）、１日目、およびその後３６±３日目に終了するまでの各週にて、体重評価を得た。各群には、５週間の生存期間全体にわたって平均体重に有意な変化はなかった。
【０７７３】
−８日目から始めて予定の剖検までケージ側観察を１日２回（午前および午後）実施して、神経学的徴候および痛みまたは苦痛の徴候、ならびに全般的な健康、外観、および行動の変化を含む異常を評価した。加えて、食餌摂取量を、−８日目から始めて１日１回、質的に評価した。手術後、数匹の動物に欲求（ａｐｐｅｔｅｎｃｅ）の減少が認められたに過ぎなかった。これは、手術後に共通の知見と見なされる。食餌摂取量は、第１週以内に正常に戻り、試験の残り期間は正常を維持した。
【０７７４】
血液学、血清化学、および凝固の判定用に、血液を−８日目、１５±２日目、および３６±３日目に収集した。血液学評価には、ＷＢＣ、ＲＢＣ、ＨＧＢ、ＨＣＴ、ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＭＣＨＣ、ＰＬＴ（質的評価）、ならびにＮＥＵＴ、ＬＹＭＰＨ、ＭＯＮＯ、ＥＯＳ、およびＢＡＳＯの絶対値および相対値が含まれていた。血清化学には、ＴＰ、ＡＬＢ、ＧＬＯＢ、Ａ／Ｇ比、ＡＬＰ  ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＢＩＬ（直接および間接）、ＢＵＮ、ＣＲＥＡＴ、Ｃａ  ＣＨＯＬ、ＧＬＵ、Ｐｈｏｓ、ＴＣＯ２、Ｎａ、ＫおよびＣｌが含まれていた。凝固には、ＰＴ、Ａ−ＰＴＴおよびフィブリノーゲンが含まれていた。一部の値は、正常範囲外であったが、生理学的なばらつきとして解釈され、生存中にいかなる臨床相関性も存在しなかった。
【０７７５】
剖検時、肉眼的所見では異常は観察されなかった。
注入部位を含む被殻に対して組織病理学検査を行った。動物は全て、被殻を含有する３ｍｍ厚冠状脳スラブを、室温で７２〜９６時間、４％パラホルムアルデヒドに浸漬することによって固定し、次に約＋４ｄｅｇＣで保管するためにリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に移した。次に３ｍｍ脳スラブをパラフィンに包埋し、冠状に切片化した。標準的ヘマトキシリンおよびエオジン染色によって、被殻の注入部位を含有する５ｕｍ厚の完全冠状切片を病理について評価した。媒体対照群は、被殻への任意の注射で生じると予想されるものと一致していた。すなわち反応は、針跡に関連するものに典型的だった。群１、２、および３において、３つのベクターの１つで処置した各動物は、針跡に由来する軽度な局所的グリオーシス、最小限から軽度の血管周囲浸潤、および／または注射に由来する外傷とＡＡＶに対する反応との組合せによる可能性が最も高い不定期の浮腫を含む病理学的知見を示した。臨床症状が存在しなかったことから判断して、有害と見なされる病理学的知見は存在しなかった。
【０７７６】
実施例５．フィラー配列を有するベクターの活性
ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０４．５７９．３（配列番号１２６２）またはＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０４．０１６（配列番号１２４９）をコードするｍｉＲＮＡ発現ベクターを、ＡＡＶ１にパッケージングし、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に感染させた。ＨＥＫ２９３Ｔの場合、細胞を９６ウェルプレートにプレーティングし（１００ｕｌ細胞培養培地中２．５Ｅ４細胞／ウェル）、ｍｉＲＮＡ発現ベクターで感染させた。感染後４８時間で細胞を回収し、直ちに細胞溶解、ＲＮＡ単離、およびｑＲＴ−ＰＣＲを行った。ベクターのＭＯＩおよび結果、ならびに試験したベクターの説明は、表５２に示される。表５２において、ＳＣは自己相補的ベクターを意味し、ＳＳは一本鎖を意味する。
【０７７７】
【表５２】
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約２３００ヌクレオチド長だったｍｉＲＮＡ発現ベクターは、約１５００ヌクレオチドまたは１９００ヌクレオチドを有するベクターと比較して、より高いゲノム品質を有していた。ＣＢＡおよびＣＭＶプロモータは、インビトロで同様のレベルのノックダウンを生じさせた。自己相補的ベクターは、インビトロで最高レベルのノックダウンを生じさせた。
【０７７８】
実施例６．大規模のＢａｃｕｌｏ／Ｓｆ９系で作製されたベクターの品質管理
本開示のｍｉＲＮＡ発現ベクターを、１Ｌ規模のＢａｃｕｌｏ／Ｓｆ９系を使用することによって作製した。標準的精製技法に加えて、塩化セシウム（ＣｓＣｌ）勾配分析を使用して完全ベクターの高い％を確保した。達成された完全ベクターの％は、少なくとも８０％だった。力価は、０．９Ｅ１２から４Ｅ１３ｖｇ／Ｌ培地までの範囲だった。５’または３’フィラー配列ベクターを有するベクターが、最も高い力価を提示した。本開示のベクターにパッケージングされたゲノムの品質は、アルカリ変性ゲル分析の使用によって判定したところ、高レベルのゲノム品質を示した。１Ｌ規模産生のゲルバンドパターンは、小規模産生パターンと同様だった。本発明のベクターの純度は、銀染色ＰＡＧＥ分析を使用することによって判定したところ、良好なＶＰ１、ＶＰ２、およびＶＰ３比ならびに純度を示した。
【０７７９】
ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０４．５７９．３、ＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０４．５７９．１０、およびＶＯＹＨＴｍｉＲ−１０９．０１６をコードするｍｉＲＮＡ発現ベクターを、ＡＡＶ１にパッケージングし、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に感染させた。ＨＥＫ２９３Ｔの場合、細胞を９６ウェルプレートにプレーティングし（１００ｕｌ細胞培養培地中２．５Ｅ４細胞／ウェル）、ｍｉＲＮＡ発現ベクターで感染させた。感染後６０時間で細胞を回収し、直ちに細胞溶解、ＲＮＡ単離、およびｑＲＴ−ＰＣＲを行い、ＨＴＴのレベルを、ＧＦＰ形質導入対照と比較して計算した。ベクターのＭＯＩおよび結果、ならびに試験したベクターの説明は、表５３に示される。表５３において、ＳＣは自己相補的ベクターを意味する。
【０７８０】
【表５３】
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コンストラクトのほとんどで用量依存的ノックダウンが観察された。自己相補的ベクターは、一本鎖ベクターと比較して、インビトロで最高レベルのノックダウンを生じさせた。５’または３’フィラー配列を有するベクターは、分割フィラー配列を有するベクターと比較して、インビトロでより高いレベルのノックダウンを提示した。
【０７８１】
本発明をかなり詳しく、幾つかの説明される実施形態に関するある具体性をもって説明したが、それが任意のかかる具体例もしくは実施形態または任意の具体的な実施形態に限定されるべきであることを意図するものではなく、しかし先行技術を考慮してかかる特許請求の範囲の最も広義の可能な解釈を提供し、したがって本発明の意図される範囲を有効に包含するように添付の特許請求の範囲を参照して解釈されるべきである。
【０７８２】
本明細書において言及される刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は全て、全体として参照により援用される。矛盾が生じる場合、定義を含め、本明細書が優先するものとする。加えて、節の見出し、材料、方法、および例は例示に過ぎず、限定を意図するものではない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図８】
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【図９】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年2月14日(2020.2.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
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【国際調査報告】
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