(57)【要約】  一定の実施形態においては、哺乳動物における炎症性免疫応答を減少させ（例えば、Ｔｈ１反応を阻害する）及び／又は制御性免疫応答を促進する（例えば、Ｔｒｅｇを強化する）方法が提供され、当該方法は、哺乳動物に、ＧＡＢＡＡ受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）を、前記哺乳動物において炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進するのに十分な量で投与する工程を伴う。一定の実施形態においては、ＰＡＭはＧＡＢＡ受容体活性化リガンド（例えば、ＧＡＢＡ）と併せて投与される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させる方法であって、前記哺乳動物に、ＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）を、前記哺乳動物における炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させるのに十分な量で投与する工程を含む、方法。
【請求項２】
前記ＰＡＭが炎症性免疫応答を減少させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記炎症性免疫応答がＴ細胞の増殖を含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記ＰＡＭが制御性免疫応答を促進させる、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記制御性免疫応答がＴｈ１媒介免疫応答の阻害を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、１以上の炎症性サイトカイン又はケモカインの下方制御を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、ＩＬ−１、ＩＬ−１２、ＩＬ−６、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、及びＩＬ−２３からなる群から選択される１以上の炎症性サイトカイン又はケモカインの下方制御を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、ＩＬ−１の下方制御を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、ＩＬ−１２の下方制御を含む、請求項７又は８に記載の方法。
【請求項１０】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、ＩＬ−６の下方制御を含む、請求項７から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）の下方制御を含む、請求項７から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）の下方制御を含む、請求項７から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、及びＩＬ−２３の下方制御を含む、請求項７から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、ＩＬ−２３の下方制御を含む、請求項７から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、１以上の炎症関連Ｔ細胞タイプの減少を含む、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記１以上の炎症関連Ｔ細胞タイプの減少が、ＣＤ８＋Ｔ細胞の減少を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記１以上の炎症関連Ｔ細胞タイプの減少が、Ｔヘルパー１７（Ｔh１７）細胞の減少を含む、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇｓ）の増加を含む、請求項１から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）が、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと併せて投与される、請求項１から１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
ＰＡＭとＧＡＢＡ受容体活性化リガンドの組み合わせが、いずれかの因子が単独で投与される場合よりも、前記哺乳動物において炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させるのにより効果的である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
ＰＡＭとＧＡＢＡ受容体活性化リガンドの組み合わせが、いずれかの因子が単独で投与される場合よりも、少なくとも１０％、又は少なくとも２０％、又は少なくとも３０％、又は少なくとも４０％、又は少なくとも５０％、又は少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも１００％、又は少なくとも１．２倍、又は少なくとも１．５倍、又は少なくとも２倍、又は少なくとも３倍、又は少なくとも４倍、又は少なくとも５倍、又は少なくとも１０倍、炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させるのにより効果的である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが、単独、及び／又は前記ポジティブアロステリックモジュレーターが前記ＰＡＭが単独で使用される場合に前記ＰＡＭが設計され及び／又は承認された活性を達成するために使用される用量よりも少ない用量で使用される場合において、炎症性免疫応答の同じ減少を達成するため、及び／又は制御性免疫応答を促進するために使用される用量よりも少ない用量で使用される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが、前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが単独で使用される場合において、炎症性免疫応答の減少及び／又は制御性免疫応答の促進における同じ効果を達成するために使用される用量よりも、少なくとも約９５％、又は少なくとも約９０％、又は少なくとも約８０％、又は少なくとも約７０％、又は少なくとも約６０％、又は少なくとも約５０％、又は少なくとも約４０％、又は少なくとも約３０％、又は少なくとも約２０％、又は少なくとも約１０％少ない用量で使用される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記ポジティブアロステリックモジュレーターが、前記ＰＡＭが単独で使用される場合に前記ＰＡＭが設計され及び／又は承認された活性を達成するために使用される用量よりも、少なくとも約９５％、又は少なくとも約９０％、又は少なくとも約８０％、又は少なくとも約７０％、又は少なくとも約６０％、又は少なくとも約５０％、又は少なくとも約４０％、又は少なくとも約３０％、又は少なくとも約２０％、又は少なくとも約１０％少ない用量で使用される、請求項２２又は２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが、単独で使用され及び／又は前記ポジティブアロステリックモジュレーターが治療量以下の用量で使用される場合において、炎症性免疫応答の減少及び／又は制御性免疫応答の促進に対する同じ効果を達成するために使用される用量よりも少ない用量で使用される、請求項２２から２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１から２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記哺乳動物がＩ型糖尿病と診断されたヒトである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記哺乳動物が前糖尿病性と診断されている、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記哺乳動物が非ヒト哺乳動物である、請求項１から２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及び前記ＰＡＭが、相乗的に作用して炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進する、請求項１から２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＰＡＭが、バルビツレート、ベンゾジアゼピン、キナゾリノン、及びニューロステロイドからなる群から選択される因子を含む、請求項１から３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記ＰＡＭがバルビツレートを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＰＡＭが、アロバルビタール（５，５−ジアリルバルビツレート）、アモバルビタール（５−エチル−５−イソペンチル−バルビツレート）、アプロバルビタール（５−アリル−５−イソプロピル−バルビツレート）、アルフェナール（５−アリル−５−フェニル−バルビツレート）、バルビタール（５，５−ジエチルバルビツレート）、ブラロバルビタール（５−アリル−５−（２−ブロモ−アリル）−バルビツレート）、ペントバルビタール（５−エチル−５−（１−メチルブチル）−バルビツレート）、フェノバルビタール（５−エチル−５−フェニルバルビツレート）、セコバルビタール（５−［（２Ｒ）−ペンタン−２−イル］−５−プロプ−２−エニル−バルビツレート）からなる群から選択されるバルビツレートを含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記ＰＡＭがベンゾジアゼピンを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
前記ＰＡＭが、前記ＰＡＭが、アルプラゾラム、ブロマゼパム、クロルジアゼポキシド、ミダゾラム、クロナゼパム、クロラゼプ酸、ジアゼパム、エスタゾラム、フルラゼパム、ハラゼパム、ケタゾラム、ロラゼパム、ニトラゼパム、オキサゼパム、プラゼパム、クアゼパム、テマゼパム、及びトリアゾラムからなる群から選択されるベンゾジアゼピンを含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記ＰＡＭがアルプラゾラムを含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
前記アルプラゾラムが、不安障害、パニック障害、及び／又はうつ病に起因する不安を治療するために使用される用量よりも少ない用量で投与される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記アルプラゾラムが、１日当たり経口で１．５ｍｇ未満、若しくは１日当たり経口で１．０ｍｇ未満、若しくは１日当たり経口で０．５ｍｇ未満の速放性錠剤として、又は１日当たり経口で０．５ｍｇ未満、若しくは１日当たり経口で０．４ｍｇ未満、若しくは１日当たり経口で０．３ｍｇ未満の徐放性錠剤として投与される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記ＰＡＭがミダゾラムを含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項４０】
前記ミダゾラムが、不安を軽減するため、又は医療処置若しくは手術の前に眠気若しくは麻酔を生じさせるため、又は鎮静作用若しくは麻酔を維持するために使用される用量よりも少ない用量で投与される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記ミダゾラムが、１ｍｇＩＶ未満、又は約０．８ｍｇＩＶ未満、又は約０．５ｍｇＩＶ未満、又は約０．０１ｍｇ／ｋｇ  ＩＶ未満、又は約０．０７ｍｇ／ｋｇ  ＩＭ未満、又は約０．０５ｍｇ／ｋｇ  ＩＭ未満、又は約０．０３ｍｇ／ｋｇ  ＩＭ未満、又は約０．０１ｍｇ／ｋｇ未満の用量で投与される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
前記ＰＡＭがクロナゼパムを含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項４３】
前記クロナゼパムが、成人において、発作障害（欠神発作若しくはレノックス・ガストー症候群を包含する）を治療するために使用される用量よりも少ない用量、又はパニック障害（広場恐怖症を包含する）の治療をするために使用される用量よりも少ない用量で投与される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記クロナゼパムが、１日当たり経口で約０．５ｍｇ未満、又は１日当たり経口で約０．２５ｍｇ未満、又は約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日未満、又は約０．００５ｍｇ／ｋｇ／日未満の用量で投与される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
前記ＰＡＭがニューロステロイドを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項４６】
前記ＰＡＭが、アロプレグナノロン（３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン）、及びプレグナノロンからなる群から選択されるニューロステロイドを含む、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記ＰＡＭが、Ａｌｇｉａｘ  ＡＰ８、Ａｌｇｉａｘ  Ａｐ４、Ａｌｇｉａｘ  ＡＰ３２５、及びＡｌｇｉａｘ  ＡＰ３からなる群から選択される因子を含む、請求項１から３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記ＰＡＭがＡＰ３２５を含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記ＡＰ３２５が、神経障害性疼痛又は脊髄損傷に使用する用量よりも少ない用量で投与される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドがＧＡＢＡを含む、請求項１９から４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが、ホモタウリン、バマルゾール、ガバミド、ＧＡＢＯＢ、ガボキサドール、イボテン酸、イソグバシン、トランスアミノシクロペンタン−３−カルボン酸、トランス−アミノ−４−クロトン酸、ＴＨＩＰ、イミダゾール酢酸、β−グアニジノ−プロピオン酸、ホモヒポタウリン、３−アミノプロパンスルホン酸、コウジアミン、シス−３−［（アミノイミノメチル）チオ］プロペン酸、ホモ−β−プロリン、イソニペコチン酸、ムシモール、フェニブト、ピカミロン、プロガビド、キスカラミン、プロガビド酸（ＳＬ７５１０２）、チオムシモール、プレガバリン、ビガバトリン、６−アミノニコチン酸、ＸＰ１３５１２、及び（（±）−１−（［（α−イソブタノイルオキシエトキシ）カルボニル］アミノメチル）−１−シクロヘキサン酢酸）からなる群から選択される因子を含む、請求項１９から４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドがアルコールではない、請求項１９から５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドがカヴァラクトンではない、請求項１９から５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドがスカルキャップ又はスカルキャップ成分ではない、請求項１９から５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドがカノコソウ又はカノコソウ成分ではない、請求項１９から５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが揮発性ガスではない、請求項１９から５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記方法が炎症性疾患を治療するために使用される、請求項１から５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
前記方法が、メタボリックシンドローム、並びにＩ型糖尿病（Ｔ１Ｄ）、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、重症筋無力症、及び多発性硬化症などの自己免疫疾患からなる群から選択される炎症性疾患を治療するために使用される、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記方法が、移植片を受け取った対象における移植片拒絶を予防し又は緩和させるために使用される、請求項１から５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
前記方法がアレルギー反応を減少させるために使用される、請求項１から５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
前記方法が、花粉症、外因性喘息、虫刺され及び刺痛アレルギー、食物及び薬物アレルギー、アレルギー性鼻炎、気管支喘息、アナフィラキシー症候群、蕁麻疹、血管浮腫、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、結節性紅斑、多型性紅斑、スティーブンス−ジョンソン症候群、皮膚壊死性細静脈炎、並びに水疱性皮膚症からなる群から選択される状態におけるアレルギー反応を減少させるために使用される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記哺乳動物が、神経障害性疼痛、脊髄損傷、不安障害、パニック障害、うつ病に起因する不安、発作障害（欠神発作若しくはレノックス・ガストー症候群を包含する）、及び月経随伴性てんかんからなる群から選択される１以上の状態の治療を受けていない、請求項１から６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
前記ＰＡＭが医療処置若しくは手術の前に眠気若しくは麻酔を生じさせるために、又は鎮静作用若しくは麻酔を維持させるために投与されない、請求項１から６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
ＢＢＢ−透過性である前記ＰＡＭが、ＣＮＳ適応症に使用される用量よりも少ない用量で投与される、請求項１から６３のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
政府支援についての記述
本発明は、国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）により授与されたＤＫ０９２４８０の下で政府支援を受けて作成された。政府は、本発明における一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００２】
免疫系の多くの細胞は、免疫系の機能を調節する神経刺激分子の受容体を発現し、神経系と免疫系との間の連結を作る（例えば、Ｎｉｏ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９３）  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １５０：５２８１−５２８８；Ｔｏｒｃｉａ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９６）  Ｃｅｌｌ，  ８５：３４５−３５６を参照）。
ガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）は、中枢神経系におけるユビキタスな抑制性神経伝達物質である（例えば、Ｅｒｄｏ  ａｎｄ  Ｗｏｌｆｆ  （１９９０）  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．  ５４：３６３−３７２；Ｏｌｓｅｎ  ａｎｄ  Ｔｏｂｉｎ  （１９９０）  Ｆａｓｅｂ  Ｊ．  ４：１４６９−１４８０；Ｋａｕｆｍａｎ  ａｎｄ  Ｔｏｂｉｎ  （１９９３）  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｓｃｉ．  １４：１０７−１０９；Ｍａｃｄｏｎａｌｄ  ａｎｄ  Ｏｌｓｅｎ  （１９９４）  Ａｎｎ．  Ｒｅｖ．  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，  １７：５６９−６０２；及びＬｕｄｄｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９５）  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ３４：２４５−２５４を参照）。ＧＡＢＡは、酵素であるグルタミン酸デカルボキシラーゼによりグルタミン酸から合成される（例えば、Ｅｒｌａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９１）  Ｎｅｕｒｏｎ，  ７：９１−１００を参照）。脳の外部では、ＧＡＤ及びＧＡＢＡ受容体は、膵島、消化管、卵巣、及び副腎髄質において報告されている（例えば、上記Ｅｒｄｏ  ａｎｄ  Ｗｏｌｆｆ  （１９９０）を参照）。
【０００３】
少なくとも２種類の神経型ＧＡＢＡ受容体、ＧＡＢＡA及びＧＡＢＡBが存在する。ＧＡＢＡA受容体は、リガンド開口型イオンチャネルであり、ＧＡＢＡに必須のＣｌ-チャネルを開くことによりＧＡＢＡに応答する（例えば、上記Ｏｌｓｅｎ  ａｎｄ  Ｔｏｂｉｎ  （１９９０）；上記Ｍａｃｄｏｎａｌｄ  ａｎｄ  Ｏｌｓｅｎ  （１９９４）；上記Ｌｕｄｄｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９５）を参照）。薬理学的には、ムシモールはＧＡＢＡA受容体及び抗不安薬であるベンゾジアゼピンのアゴニストとして作用し、麻酔薬（ペントバルビタールなど）はＧＡＢＡA−Ｃｌ-チャネルの開口を増強する。ビククリン及びＲＵ５３１５はＧＡＢＡA受容体の機能に拮抗し、ピクロトキシンはＧＡＢＡA受容体Ｃｌ-チャネルをふさぐ（例えば、上記Ｍａｃｄｏｎａｌｄ  ａｎｄ  Ｏｌｓｅｎ  （１９９４）；及び上記Ｌｕｄｄｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９５）を参照）。
対照的に、ＧＡＢＡB受容体はＧＴＰ結合タンパク質を介してＣａ2+又はＫ+チャネルに連結され、バクロフェンにより選択的に活性化される（例えば、ＢｏＷｅｒｙ  （１９９３）  Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｏｘｉｃｏｌ．  ３３：  １０９−１４７を参照）。ＧＡＢＡＢ受容体は、ビククリン及びピクロトキシンに非感受性である。
ＧＡＢＡ又はそのアゴニストの投与は、周辺的に抗体の生産を阻害し、かつｉｎ  ｖｉｖｏのマクロファージ食作用を調節する。
【０００４】
アレルギー及び自己免疫疾患、並びに移植片拒絶を包含する多くの疾患は、有害な免疫応答に起因する。例えば、現在３０を超える自己免疫疾患が了知されている。これらは１型糖尿病、関節リウマチ（ＲＡ）、重症筋無力症（ＭＧ）、及び多発性硬化症（ＭＳ）を包含する、大いに衆目を集める多くの疾患を包含する。これらの疾患の特徴は、被害者の組織に対する免疫系による攻撃であり、これらの組織抗原は、免疫系の「自己」に対する耐性のために、非罹患者では非免疫原性である。自己免疫疾患においては、この耐性は明らかに損なわれ、苦しむ対象の組織は侵入者として扱われる―即ち、免疫系はこの推定される外来標的を破壊し始める。さらに、移植片拒絶はＴリンパ球及びアレルギー反応に起因するが、これは悪化した免疫応答の結果でもある。あるいは、免疫応答を強化することは、多くの疾患及び感染の治療に有用である。さらに、免疫応答をリダイレクトする（ｒｅｄｉｒｅｃｔ）ことにより、一定の疾患に対するより効果的な免疫がもたらされ得る。例えば、免疫応答を主に抗体反応から細胞障害性ＣＤ８＋Ｔ細胞媒介反応にリダイレクトすることが可能な場合、ウイルス感染はより効果的に排除される。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
ＧＡＢＡが、Ｔ細胞媒介自己免疫疾患の異なるモデルにおける自己免疫応答を阻害し得、Ｔｒｅｇ反応を強化し得、マウス及びヒトのベータ細胞アポトーシスを阻害し得、かつベータ細胞の複製を促進し得ることが発見された。これらの発見を拡大して、ＧＡＢＡA−受容体（ＧＡＢＡA−Ｒ）及びＧＡＢＡB−Ｒの両方の活性化が、マウスのベータ細胞複製及びヒトのベータ細胞の複製もまた促進し得ることが発見された。しかしながらＧＡＢＡは、ｉｎ  ｖｉｖｏでのその受容体に対する比較的低い親和性、速いオフ速度（ｏｆｆ−ｒａｔｅ）、及び短い半減期を有するため、治療効果のために患者は数グラムのＧＡＢＡを１日に２、３回摂取する必要があり、これはやや煩わしく、かつ患者のコンプライアンスを低下させる。
ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド（アゴニスト）とＧＡＢＡA−Ｒポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭＳ）の組み合わせが、哺乳動物におけるベータ細胞の複製、及び／又は生存、及び／又は機能（例えば、インスリン生産、血糖に対する感度など）を促進し得ることは、驚くべき発見であった。さらに、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドとＰＡＭの組み合わせが、ベータ細胞に対するこれらの効果において相乗的であることは、特に驚くべきことであった。
したがって、ここで企図する様々な実施形態は、限定されないが、以下の１以上を包含し得る：
【０００６】
実施形態１：哺乳動物における炎症性免疫応答（ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｉｍｍｕｎｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ）を減少させ及び／又は制御性免疫応答（ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｉｍｍｕｎｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ）を促進させる方法であって、前記哺乳動物に、ＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）を、前記哺乳動物における炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させるのに十分な量で投与する工程を含む、方法。ある態様によると、実施形態１は、哺乳動物における炎症性免疫応答の減少及び／又は制御性免疫応答の促進における使用のためのＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）もまた、包含する。他の態様によると、実施形態１は、哺乳動物における炎症性免疫応答の減少及び／又は制御性免疫応答の促進のための薬を調製するための、ＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）の使用をさらに包含する。実施形態１に適用される態様が、以下に記載される実施形態２から６４のそれぞれにも適用される。
【０００７】
実施形態２：前記ＰＡＭが炎症性免疫応答を減少させる、実施形態１の方法。
実施形態３：前記炎症性免疫応答がＴ細胞の増殖を含む、実施形態１又は２に記載の方法。
実施形態４：前記ＰＡＭが制御性免疫応答を促進させる、実施形態１から３のいずれかに記載の方法。
実施形態５：前記制御性免疫応答がＴｈ１媒介免疫応答の阻害を含む、実施形態１から４のいずれかに記載の方法。
実施形態６：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、１以上の炎症性サイトカイン又はケモカインの下方制御を含む、実施形態１から５のいずれかに記載の方法。
実施形態７：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、ＩＬ−１、ＩＬ−１２、ＩＬ−６、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、及びＩＬ−２３からなる群から選択される１以上の炎症性サイトカイン又はケモカインの下方制御を含む、実施形態６の方法。
【０００８】
実施形態８：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、ＩＬ−１の下方制御を含む、実施形態７の方法。
実施形態９：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、ＩＬ−１２の下方制御を含む、実施形態７又は８に記載の方法。
実施形態１０：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、ＩＬ−６の下方制御を含む、実施形態７から９のいずれかに記載の方法。
実施形態１１：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）の下方制御を含む、実施形態７から１０のいずれかに記載の方法。
実施形態１２：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）の下方制御を含む、実施形態７から１１のいずれかに記載の方法。
実施形態１３：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、及びＩＬ−２３の下方制御を含む、実施形態７から１２のいずれかに記載の方法。
実施形態１４：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、ＩＬ−２３の下方制御を含む、実施形態７から１３のいずれかに記載の方法。
【０００９】
実施形態１５：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、１以上の炎症関連Ｔ細胞タイプの減少を含む、実施形態１から１４のいずれかに記載の方法。
実施形態１６：前記１以上の炎症関連Ｔ細胞タイプの減少が、ＣＤ８＋Ｔ細胞の減少を含む、実施形態１５の方法。
実施形態１７：前記１以上の炎症関連Ｔ細胞タイプの減少が、Ｔヘルパー１７（Ｔh１７）細胞の減少を含む、実施形態１５又は１６に記載の方法。
実施形態１８：前記炎症性免疫応答の減少又は制御性免疫応答の促進が、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇｓ）の増加を含む、実施形態１から１７のいずれかに記載の方法。
【００１０】
実施形態１９：前記ＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）が、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと併せて投与される、実施形態１から１８のいずれかに記載の方法。
実施形態２０：ＰＡＭとＧＡＢＡ受容体活性化リガンドの組み合わせが、いずれかの因子が単独で投与される場合よりも、前記哺乳動物において炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させるのにより効果的である、実施形態１９の方法。
実施形態２１：ＰＡＭとＧＡＢＡ受容体活性化リガンドの組み合わせが、いずれかの因子が単独で投与される場合よりも、少なくとも１０％、又は少なくとも２０％、又は少なくとも３０％、又は少なくとも４０％、又は少なくとも５０％、又は少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも１００％、又は少なくとも１．２倍、又は少なくとも１．５倍、又は少なくとも２倍、又は少なくとも３倍、又は少なくとも４倍、又は少なくとも５倍、又は少なくとも１０倍、炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させるのにより効果的である、実施形態２０の方法。
【００１１】
実施形態２２：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが、単独、及び／又は前記ポジティブアロステリックモジュレーターが前記ＰＡＭが単独で使用される場合に前記ＰＡＭが設計され及び／又は承認された活性を達成するために使用される用量よりも少ない用量で使用される場合において、炎症性免疫応答の同じ減少を達成するため、及び／又は制御性免疫応答を促進するために使用される用量よりも少ない用量で使用される、実施形態１９の方法。
実施形態２３：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが、前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが単独で使用される場合において、炎症性免疫応答の減少及び／又は制御性免疫応答の促進における同じ効果を達成するために使用される用量よりも、少なくとも約９５％、又は少なくとも約９０％、又は少なくとも約８０％、又は少なくとも約７０％、又は少なくとも約６０％、又は少なくとも約５０％、又は少なくとも約４０％、又は少なくとも約３０％、又は少なくとも約２０％、又は少なくとも約１０％少ない用量で使用される、実施形態２２の方法。
【００１２】
実施形態２４：前記ポジティブアロステリックモジュレーターが、前記ＰＡＭが単独で使用される場合に前記ＰＡＭが設計され及び／又は承認された活性を達成するために使用される用量よりも、少なくとも約９５％、又は少なくとも約９０％、又は少なくとも約８０％、又は少なくとも約７０％、又は少なくとも約６０％、又は少なくとも約５０％、又は少なくとも約４０％、又は少なくとも約３０％、又は少なくとも約２０％、又は少なくとも約１０％少ない用量で使用される、実施形態２２又は２３に記載の方法。
実施形態２５：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが、単独で使用され及び／又は前記ポジティブアロステリックモジュレーターが治療量以下の用量で使用される場合において、炎症性免疫応答の減少及び／又は制御性免疫応答の促進に対する同じ効果を達成するために使用される用量よりも少ない用量で使用される、実施形態２２から２４のいずれかに記載の方法。
【００１３】
実施形態２６：前記哺乳動物がヒトである、実施形態１から２５のいずれかに記載の方法。
実施形態２７：前記哺乳動物がＩ型糖尿病と診断されたヒトである、実施形態２６の方法。
実施形態２８：前記哺乳動物が前糖尿病性と診断されている、実施形態２６の方法。
実施形態２９：前記哺乳動物が非ヒト哺乳動物である、実施形態１から２９のいずれかに記載の方法。
実施形態３０：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及び前記ＰＡＭが、相乗的に作用して炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進する、実施形態１から２９のいずれかに記載の方法。
【００１４】
実施形態３１：前記ＰＡＭが、バルビツレート、ベンゾジアゼピン、キナゾリノン、及びニューロステロイドからなる群から選択される因子を含む、実施形態１から３０のいずれかに記載の方法。
実施形態３２：前記ＰＡＭがバルビツレートを含む、実施形態３１の方法。
実施形態３３：前記ＰＡＭが、アロバルビタール（５，５−ジアリルバルビツレート）、アモバルビタール（５−エチル−５−イソペンチル−バルビツレート）、アプロバルビタール（５−アリル−５−イソプロピル−バルビツレート）、アルフェナール（５−アリル−５−フェニル−バルビツレート）、バルビタール（５，５−ジエチルバルビツレート）、ブラロバルビタール（５−アリル−５−（２−ブロモ−アリル）−バルビツレート）、ペントバルビタール（５−エチル−５−（１−メチルブチル）−バルビツレート）、フェノバルビタール（５−エチル−５−フェニルバルビツレート）、セコバルビタール（５−［（２Ｒ）−ペンタン−２−イル］−５−プロプ−２−エニル−バルビツレート）からなる群から選択されるバルビツレートを含む、実施形態３２の方法。
【００１５】
実施形態３４：前記ＰＡＭがベンゾジアゼピンを含む、実施形態３１の方法。
実施形態３５：前記ＰＡＭが、前記ＰＡＭが、アルプラゾラム、ブロマゼパム、クロルジアゼポキシド、ミダゾラム、クロナゼパム、クロラゼプ酸、ジアゼパム、エスタゾラム、フルラゼパム、ハラゼパム、ケタゾラム、ロラゼパム、ニトラゼパム、オキサゼパム、プラゼパム、クアゼパム、テマゼパム、及びトリアゾラムからなる群から選択されるベンゾジアゼピンを含む、実施形態３４の方法。
実施形態３６：前記ＰＡＭがアルプラゾラムを含む、実施形態３４の方法。
実施形態３７：前記アルプラゾラムが、不安障害、パニック障害、及び／又はうつ病に起因する不安を治療するために使用される用量よりも少ない用量で投与される、実施形態３６の方法。
実施形態３８：前記アルプラゾラムが、１日当たり経口で１．５ｍｇ未満、若しくは１日当たり経口で１．０ｍｇ未満、若しくは１日当たり経口で０．５ｍｇ未満の速放性錠剤として、又は１日当たり経口で０．５ｍｇ未満、若しくは１日当たり経口で０．４ｍｇ未満、若しくは１日当たり経口で０．３ｍｇ未満の徐放性錠剤として投与される、実施形態３６の方法。
【００１６】
実施形態３９：前記ＰＡＭがミダゾラムを含む、実施形態３４の方法。
実施形態４０：前記ミダゾラムが、不安を軽減するため、又は医療処置若しくは手術の前に眠気若しくは麻酔を生じさせるため、又は鎮静作用若しくは麻酔を維持するために使用される用量よりも少ない用量で投与される、実施形態３９の方法。
実施形態４１：前記ミダゾラムが、１ｍｇＩＶ未満、又は約０．８ｍｇＩＶ未満、又は約０．５ｍｇＩＶ未満、又は約０．０１ｍｇ／ｋｇ  ＩＶ未満、又は約０．０７ｍｇ／ｋｇ  ＩＭ未満、又は約０．０５ｍｇ／ｋｇ  ＩＭ未満、又は約０．０３ｍｇ／ｋｇ  ＩＭ未満、又は約０．０１ｍｇ／ｋｇ未満の用量で投与される、実施形態３９の方法。
【００１７】
実施形態４２：前記ＰＡＭがクロナゼパムを含む、実施形態３４の方法。
実施形態４３：前記クロナゼパムが、成人において、発作障害（欠神発作若しくはレノックス・ガストー症候群を包含する）を治療するために使用される用量よりも少ない用量、又はパニック障害（広場恐怖症を包含する）の治療をするために使用される用量よりも少ない用量で投与される、実施形態４２の方法。
実施形態４４：前記クロナゼパムが、１日当たり経口で約０．５ｍｇ未満、又は１日当たり経口で約０．２５ｍｇ未満、又は約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日未満、又は約０．００５ｍｇ／ｋｇ／日未満の用量で投与される、実施形態４２の方法。
【００１８】
実施形態４５：前記ＰＡＭがニューロステロイドを含む、実施形態３１の方法。
実施形態４６：前記ＰＡＭが、アロプレグナノロン（３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン）、及びプレグナノロンからなる群から選択されるニューロステロイドを含む、実施形態４５の方法。
実施形態４７：前記ＰＡＭが、Ａｌｇｉａｘ  ＡＰ８、Ａｌｇｉａｘ  Ａｐ４、Ａｌｇｉａｘ  ＡＰ３２５、及びＡｌｇｉａｘ  ＡＰ３からなる群から選択される因子を含む、実施形態１から３０のいずれかに記載の方法。
実施形態４８：前記ＰＡＭがＡＰ３２５を含む、実施形態４７の方法。
実施形態４９：前記ＡＰ３２５が、神経障害性疼痛又は脊髄損傷に使用する用量よりも少ない用量で投与される、実施形態４８の方法。
【００１９】
実施形態５０：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドがＧＡＢＡを含む、実施形態１９から４９のいずれかに記載の方法。
実施形態５１：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが、ホモタウリン、バマルゾール、ガバミド、ＧＡＢＯＢ、ガボキサドール、イボテン酸、イソグバシン、トランスアミノシクロペンタン−３−カルボン酸、トランス−アミノ−４−クロトン酸、ＴＨＩＰ、イミダゾール酢酸、β−グアニジノ−プロピオン酸、ホモヒポタウリン、３−アミノプロパンスルホン酸、コウジアミン、シス−３−［（アミノイミノメチル）チオ］プロペン酸、ホモ−β−プロリン、イソニペコチン酸、ムシモール、フェニブト、ピカミロン、プロガビド、キスカラミン、プロガビド酸（ＳＬ７５１０２）、チオムシモール、プレガバリン、ビガバトリン、６−アミノニコチン酸、ＸＰ１３５１２、及び（（±）−１−（［（α−イソブタノイルオキシエトキシ）カルボニル］アミノメチル）−１−シクロヘキサン酢酸）からなる群から選択される因子を含む、実施形態１９から４９のいずれかに記載の方法。
【００２０】
実施形態５２：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドがアルコールではない、実施形態１９から５１のいずれかに記載の方法。
実施形態５３：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドがカヴァラクトンではない、実施形態１９から５２のいずれかに記載の方法。
実施形態５４：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドがスカルキャップ又はスカルキャップ成分ではない、実施形態１９から５３のいずれかに記載の方法。
実施形態５５：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドがカノコソウ又はカノコソウ成分ではない、実施形態１９から５４のいずれかに記載の方法。
実施形態５６：前記ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが揮発性ガスではない、実施形態１９から５５のいずれかに記載の方法。
【００２１】
実施形態５７：前記方法が炎症性疾患を治療するために使用される、実施形態１から５６のいずれかに記載の方法。
実施形態５８：前記方法が、メタボリックシンドローム、並びにＩ型糖尿病（Ｔ１Ｄ）、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、重症筋無力症、及び多発性硬化症などの自己免疫疾患からなる群から選択される炎症性疾患を治療するために使用される、実施形態５７の方法。
実施形態５９：前記方法が、移植片を受け取った対象における移植片拒絶を予防し又は緩和させるために使用される、実施形態１から５６のいずれかに記載の方法。
【００２２】
実施形態６０：前記方法がアレルギー反応を減少させるために使用される、実施形態１から５６のいずれかに記載の方法。
実施形態６１：前記方法が、花粉症、外因性喘息、虫刺され及び刺痛アレルギー、食物及び薬物アレルギー、アレルギー性鼻炎、気管支喘息、アナフィラキシー症候群、蕁麻疹、血管浮腫、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、結節性紅斑、多型性紅斑、スティーブンス−ジョンソン症候群、皮膚壊死性細静脈炎、並びに水疱性皮膚症からなる群から選択される状態におけるアレルギー反応を減少させるために使用される、実施形態６０の方法。
実施形態６２：前記哺乳動物が、神経障害性疼痛、脊髄損傷、不安障害、パニック障害、うつ病に起因する不安、発作障害（欠神発作若しくはレノックス・ガストー症候群を包含する）、及び月経随伴性てんかんからなる群から選択される１以上の状態の治療を受けていない、実施形態１から６１のいずれかに記載の方法。
実施形態６３：前記ＰＡＭが医療処置若しくは手術の前に眠気若しくは麻酔を生じさせるために、又は鎮静作用若しくは麻酔を維持させるために投与されない、実施形態１から６２のいずれかに記載の方法。
実施形態６４：ＢＢＢ−透過性である前記ＰＡＭが、ＣＮＳ適応症に使用される用量よりも少ない用量で投与される、実施形態１から６３のいずれかに記載の方法。
【００２３】
定義
用語「ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド」は、１以上のＧＡＢＡ受容体のアゴニストである因子を指す。一定の実施形態においては、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドは少なくともＧＡＢＡA受容体のアゴニストである。
用語「ＧＡＢＡA受容体のポジティブアロステリックモジュレーター」又は（ＰＡＭ）は、脊椎動物の中枢神経系におけるＧＡＢＡA受容体タンパク質の活性を増加させる分子を指す。ＧＡＢＡA受容体アゴニストとは異なり、ＧＡＢＡA  ＰＡＭは、ガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）神経伝達物質分子と同じ活性部位には結合しない。様々な実施形態において、ＰＡＭはＧＡＢＡA受容体を誘発し又は増強して、そのクロライドチャネルを開く。
【００２４】
用語「治療量以下の用量」は、ＰＡＭに関して、ＰＡＭがもともと設計され及び／又は承認された活性のために使用する場合における、承認された及び／又は推奨された及び／又は認可された用量のＰＡＭよりも少ない用量を指す。したがって、例えば、アルプラゾラムなどのベンゾジアゼピンの治療量以下の用量は、ベンゾジアゼピンのうつ病、パニック障害、及び／又は不安のための、承認された及び／又は推奨された及び／又は認可された用量よりも少ない用量を指す。一定の実施形態においては、治療量以下の用量は、ＰＡＭが設計され及び／又は承認された活性（例えば、うつ病、パニック障害、発作、及び／又は不安）のための推奨された用量の少なくとも９０％未満、又は少なくとも約８０％未満、又は少なくとも約７０％未満、又は少なくとも約６０％未満、又は少なくとも約５０％未満、又は少なくとも約４０％未満、又は少なくとも約３０％未満、又は少なくとも約２０％未満、又は少なくとも約１０％未満である。
【００２５】
語句「と併せて」又は「と組み合わせて」は、ここに記載の活性剤（例えば、１以上のＧＡＢＡ受容体活性化リガンド）の、１以上のここに記載の他の薬剤（例えば、１以上のＰＡＭ）と併せた使用に関連して使用した場合には、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭが投与され、その結果、有機体、特にベータ細胞での生理学的活動に少なくとも時系列の重複があることを示す。したがって、様々な実施形態において、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭを同時に及び／又は連続して投与することができる。連続投与では、２番目に投与された因子が投与され又は有機体中で活性化するときに、最初に投与された薬剤／因子が有機体に対して何らかの生理学的変化を及ぼしている限り、２番目の部分の投与前にかなりの遅延（例えば、数分又は数時間又は数日）さえあり得る。
【００２６】
用語「制御性応答」は、制御性Ｔ細胞とＢ細胞、抗原提示細胞、及び先天性免疫系の他の細胞（及びそれらの前駆細胞）、並びにＴＧＦ−β、ＩＬ−１０、ＩＬ−４、ＩＬ−１３、ＩＬ−２７、ＩＬ−３５、ＩＬ−２、グランザイムＢ、及びインドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼなどの分泌型抗炎症性サイトカインの機能を包含する。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】図１は、ＨＥＬへの想起応答に対するＧＡＢＡ単独の効果を示す。Ｔ細胞増殖に対する有意な阻害効果が、０．０１〜１ｍＭのＧＡＢＡレベルで観察され、本発明者らの従前の研究に一致した。縦座標：３Ｈ−チミジン摂取、ｃｐｍ（カウント毎分）で表す。横座標：ＧＡＢＡ濃度、ｍＭで表す。
【図２】図２は、アルプラゾラム（Ｘａｎａｘ）単独が、試験したいずれの用量においても、Ｔ細胞増殖に対する有意な効果を有していなかったことを示す。これはＧＡＢＡ−Ｒを活性化するのにＧＡＢＡが必要であること、また、（β細胞とは異なり）免疫細胞がＧＡＢＡ−Ｒを活性化するのに十分でないＧＡＢＡを作り出すことと一致している。縦座標：３Ｈ−チミジン摂取、ｃｐｍ（カウント毎分）で表す。横座標：アルプラゾラム（Ｘａｎａｘ）濃度、Ｍで表す。
【図３】図３は、ＧＡＢＡとアルプラゾラム（Ｘａｎａｘ）の組み合わせが、ＨＥＬに応答して免疫細胞増殖（炎症性反応）をより効果的に阻害することを示す。Ｘａｎａｘの非存在下でのＧＡＢＡの開始点（横軸で「０」とラベルする）で、上部から下部までのカーブは、（ｉ）Ｘａｎａｘなし、（ｉｉ）１０-6のＸａｎａｘ、（ｉｉｉ）３×１０-7のＸａｎａｘ、（ｉｖ）１０-7のＸａｎａｘ、（ｖ）３×１０-8のＸａｎａｘ、及び（ｖｉ）１０-8のＸａｎａｘを表す。縦座標：３Ｈ−チミジン摂取、ｃｐｍ（カウント毎分）で表す。横座標：ＧＡＢＡ濃度、ｍＭで表す。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
ここに記載の組成物、方法及び使用は、ＰＡＭ（ＧＡＢＡ受容体（例えば、ＧＡＢＡA受容体））のポジティブアロステリックモジュレーター）が、哺乳動物における炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させ得るという発見に関係する。さらに、ＰＡＭを１以上のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせて使用することで、ＰＡＭ又はＧＡＢＡ受容体活性化リガンドの単独での使用よりも、優位に優れた効果が提供されることもまた発見された。特定の理論に拘束されることなく、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドとＰＡＭの組み合わせが、炎症性免疫応答の減少及び／又は制御性免疫応答の促進に対する相乗効果を有すると思われる。
【００２９】
したがって、一定の実施形態においては、ＧＡＢＡ−Ｒアゴニストの存在、特に少量の外因性ＧＡＢＡの存在下では、ＧＡＢＡ−Ｒ  ＰＡＭが効果的に炎症性免疫応答を減少させ（例えば、Ｔｈ１反応を阻害する）、及び／又は制御性免疫応答を促進させる（例えば、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇｓ）を促進する）ことができると考えられている。したがって、一定の実施形態においては、哺乳動物において炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させる方法が提供され、当該方法は、ＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）を、哺乳動物における炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進するのに十分な量で哺乳動物に投与する工程を含む。一定の実施形態においては、ＰＡＭはＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと併せて投与される。それらの実施形態によれば、哺乳動物における炎症性免疫応答の減少及び／又は制御性免疫応答の促進のための使用のための、ＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）が提供される。さらにこれらの実施形態によると、哺乳動物における炎症性免疫応答の減少及び／又は制御性免疫応答の促進のための薬の調製のための、ＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）の使用が提供される。
【００３０】
特定の理論に拘束されることなく、１つの重要な結果は、併用治療がＧＡＢＡ−Ｒアゴニスト（例えば、ＧＡＢＡ）、ＰＡＭのいずれか、又はその両方のより少ない用量を使用して免疫応答を調節し、それにより治療をより容易で（例えば、ＧＡＢＡの大量消費を回避する）、より効果的で、及び潜在的により安全にすることであると考えられている。
したがって、様々な実施形態において、哺乳動物における炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させる方法が提供され、当該方法は、必要とする哺乳動物に１以上のＰＡＭをＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと併せて投与する工程を伴い、この場合、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドは、単独、及び／又はポジティブアロステリックモジュレーターが治療量以下の用量で使用される場合に、炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させるために使用される用量よりも少ない用量で使用される。一定の実施形態においては、両方の因子の投与は炎症性免疫応答を減少させる。一定の実施形態においては、両方の因子の投与は制御性免疫応答を促進する。
【００３１】
一定の実施形態においては、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーターを含む医薬製剤が提供される。一定の実施形態においては、ここに記載の方法の実行のためのキットもまた企図される。様々な実施形態において、このようなキットはＧＡＢＡ受容体活性化リガンドを含有する容器及びＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーターを含有する容器、並びに任意で、とりわけここに記載の方法におけるこれらの因子の使用を教示する指示資料を含む。
【００３２】
任意で１以上のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせたＰＡＭの使用
任意で１以上のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせたここに記載のＰＡＭは、免疫機能を伴う多数の疾患の治療に使用することができる。より具体的には、化合物又はその組み合わせは、炎症性応答の下方制御（例えば、Ｔｈ１阻害）及び／又は制御性免疫応答（例えば、Ｔｒｅｇ反応）の促進（上方制御）が望ましい状態を治療するために使用することができる。
一定の実施形態においては、化合物は周辺的に投与される（例えば、経口投与、経皮投与、静脈内投与、皮下投与、又はポンプを使用して）。一定の実施形態においては、化合物は血液脳関門を通過することができず、したがって、中枢神経系に影響を及ぼさない。
【００３３】
炎症性疾患及び／又は自己免疫疾患
ここに記載のＰＡＭは、単独、又は１以上のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせて、炎症を減少させ（例えば、Ｔｈ１反応を阻害する）及び／又はＴｒｅｇ反応を強化するために使用される。一定の実施形態においては、炎症の減少は、１以上の炎症性の（例えば、炎症促進性の）サイトカイン若しくはケモカインの減少、及び／又は１以上の炎症関連Ｔ細胞タイプの減少により特徴づけられる。したがって、例えば、一定の実施形態においては、炎症の減少は例えばインターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、インターロイキン−１７（ＩＬ−１７）、インターロイキン−２３（ＩＬ−２３）などの、１以上の炎症性サイトカイン又はケモカインの減少により特徴づけられる。一定の実施形態においては、炎症の減少は例えばＣＤ８＋Ｔ細胞、Ｔヘルパー１７（Ｔh１７）細胞などの、１以上の炎症関連Ｔ細胞タイプの減少により特徴づけられる。
このような作用は、限定されないが、メタボリックシンドローム、並びに例えばＩ型糖尿病（Ｔ１Ｄ）、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、重症筋無力症、及び多発性硬化症などの自己免疫疾患を包含する炎症性疾患の治療に、高度に有益であると考えられている。
【００３４】
移植片拒絶
Ｔ細胞がヒトの免疫応答を開始する能力を妨げる因子が、移植片拒絶を効果的に予防し又は軽減することが示されている。さらに、移植片拒絶のプロセスの研究によって、それが少なくとも部分的には、Ｔリンパ球、特にＣＤ８表面分子を持つ抗原特異的活性化に起因することが示されている。したがって、Ｔ細胞媒介免疫応答を阻害することにより、移植片のより高い耐性がもたらされる。
一定の実施形態によると、ここに記載のＰＡＭは、単独又は１以上のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせて、Ｔ細胞媒介炎症性免疫応答を阻害し、かつそれにより移植片のより高い耐性を促進する（例えば、移植片の生存を増加する）ために使用される。このような移植片は、限定されないが、ベータ細胞移植などを包含する。
【００３５】
アレルギー
喘息又はアレルギーとして一般的に知られている多種のアトピー性又はアレルギー性障害は、Ｔ細胞活性化の効果に起因する。このようなアレルギー性障害は、例えば、花粉症、外因性喘息、虫刺され及び刺痛アレルギー、食物及び薬物アレルギー、アレルギー性鼻炎、気管支喘息、アナフィラキシー症候群、蕁麻疹、血管浮腫、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、結節性紅斑、多型性紅斑、スティーブンス−ジョンソン症候群、皮膚壊死性細静脈炎、水疱性皮膚症などを包含する。特定の理論に拘束されることなく、ここに記載の方法（例えば、１以上のＰＡＭの、単独、又は１以上のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせた投与）は、これら及び他の状態におけるアレルギー性反応を減らすための介在に使用することができると考えられている。
【００３６】
Ｔｈ１細胞媒介免疫応答の阻害
上記のように、ここに記載のＰＡＭは、単独、又は１以上のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせて、Ｔｈ１媒介免疫応答を阻害するために使用することができる。Ｔｈ１細胞はＩＬ−２及びガンマインターフェロン（γ−ＩＦＮ）を生産し、かつ細胞障害性Ｔリンパ球（ＣＴＬｓ）、遅延型過敏反応（ＤＴＨ）、及びマクロファージ活性化に関連するヘルパー細胞機能を媒介する。Ｔｈ１細胞により生産されるＩＬ−２は、ＣＴＬ前駆体の活性化及び成熟ＣＴＬエフェクターへの分化において主要な役割を果たす。Ｔｈ１細胞は、「細胞媒介」免疫と呼ばれる免疫に関与するが、これは通常ウイルス及び特定の細菌による感染に対処する。それらは、我々の細胞内部に入る病原体に対する身体の最初の防御線である。しかしながら、Ｔｈ１細胞は炎症促進性である傾向があり、かつ自己免疫疾患の発症に関与している。
ここに記載の方法は、Ｔｈ−１細胞媒介免疫の阻害及び／又は制御性応答の促進（例えば、Ｔｒｅｇｓを強化する）のために使用することができ、かつ限定されないが、例えば、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、重症筋無力症、橋本甲状腺炎、バセドウ病、クローン病、乾癬、シェーグレン症候群（Ｓｊｏｒｅｎ’ｓ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、セリアック病、関節リウマチなどの自己免疫状態を包含する病理の治療に有用であると考えられている。前述の使用は例示であり、かつ非限定的である。ここに提供される教示を使用すると、記載された方法の多数の他の用途が、当技術分野の当業者に入手可能になるであろう。
【００３７】
ＧＡＢＡA受容体ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）
ＧＡＢＡＡ受容体のポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）は、当技術分野の当業者に周知である。例示的なＰＡＭは、限定されないが、アルコール（例えば、エタノール、イソプロパノール）、アベルメクチン（例えば、イベルメクチン）、バルビツレート（例えば、フェノバルビタール）、ベンゾジアゼピン、臭化物（例えば、臭化カリウム）、カルバメート（例えば、メプロバメート、カリソプロドール）、クロラロース、クロルメザノン、クロメチアゾール、ジヒドロエルゴリン（例えば、エルゴロイド（ジヒドロエルゴトキシン））、エタゼピン、エチフォキシン、イミダゾール（例えば、エトミデート）、カヴァラクトン（カヴァに含まれる）、ロレクレゾール、神経刺激性ステロイド（例えば、アロプレグナノロン、ガナキソロン）、非ベンゾジアゼピン（例えば、ザレプロン、ゾルピデム、ゾピクロン、エスゾピクロン）、ペトリクロラール、フェノール（例えば、プロポフォール）、ピペリジンジオン（例えば、グルテチミド、メチプリロン）、プロパニジド、ピラゾロピリジン（例えば、エタゾレート）、キナゾリノン（例えば、メタカロン）、スカルキャップ成分（例えば、バカレインなどのフラボノイドを包含するが、これに限定されないスクテラリア種（Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ  ｓｐ．）の成分）、スチリペントール、スルホニルアルカン（例えば、スルホンメタン、テトロナール、トリオン）、カノコソウ成分（例えば、吉草酸、バレレン酸）、及び特定の揮発性物質／ガス（例えば、クロラール水和物、クロロホルム、ジエチルエーテル、セボフルラン）を包含する。様々な実施形態において、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせて使用されるＰＡＭは、アルコール、及び／又はカヴァラクトン、及び／又はスカルキャップ若しくはスカルキャップ成分、及び／又はカノコソウ若しくはカノコソウ成分、及び／又は揮発性ガスを除外する。
【００３８】
一定の実施形態においては、ＰＡＭは、バルビツレート、ベンゾジアゼピン、キナゾリノン、及びニューロステロイドからなる群から選択される因子を含む。一例であるが、限定的でないキノロンの例は、ｄ（＋）−ＲＯＤ１８８（（１Ｒ，２’Ｒ）−１−（２，３，４，５−テトラヒドロ−５−オキソ−２−フリル）−２−Ｎ−（ｐ−トルエン−スルホニル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン、例えば、Ｔｈｏｍｅｔ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  １３１（４）：  ８４３−８５０を参照）である。例示的なバルビツレートは、限定されないが、アロバルビタール（５，５−ジアリルバルビツレート）、アモバルビタール（５−エチル−５−イソペンチル−バルビツレート）、アプロバルビタール（５−アリル−５−イソプロピル−バルビツレート）、アルフェナール（５−アリル−５−フェニル−バルビツレート）、バルビタール（５，５−ジエチルバルビツレート）、ブラロバルビタール（５−アリル−５−（２−ブロモ−アリル）−バルビツレート）、ペントバルビタール（５−エチル−５−（１−メチルブチル）−バルビツレート）、フェノバルビタール（５−エチル−５−フェニルバルビツレート）、セコバルビタール（５−［２（Ｒ）−ペンタン−２−イル］−５−プロプ−２−エニル−バルビツレート）などを包含する。
【００３９】
例示的なベンゾジアゼピンは、限定されないが、アルプラゾラム、ブロマゼパム、クロルジアゼポキシド、クロナゼパム、クロラゼプ酸、ジアゼパム、エスタゾラム、フルラゼパム、ハラゼパム、ケタゾラム、ロラゼパム、ニトラゼパム、オキサゼパム、プラゼパム、クアゼパム、テマゼパム、トリアゾラムなどを包含する。
例示的なニューロステロイドは、限定されないが、アロプレグナノロン、及びプレグナノロンを包含する。
一定の実施形態においては、特定の使用のＰＡＭはアルプラゾラム（ＸＡＮＡＸ（登録商標））を含む。
他の好適なＰＡＭは、限定されないが、Ａｌｇｉａｘにより生産されるＰＡＭ（例えば、Ａｌｇｉａｘ  ＡＰ８、Ａｌｇｉａｘ  Ａｐ４、Ａｌｇｉａｘ  ＡＰ３２５、及びＡｌｇｉａｘ  ＡＰ３）である。
上記で特定されたＰＡＭは、例示的であり、かつ非限定的であることを意図している。他のＰＡＭは当技術分野の当業者に公知であり、ここに記載の方法、製剤、及びキットにおけるそれらの使用が企図されている。
【００４０】
ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド
ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドは当技術分野の当業者に周知である。このようなリガンドには、例えば、ＧＡＢＡ受容体の天然リガンドであるガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）が包含される。他のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドは、限定されないが、ホモタウリン、バマルゾール、ガバミド、ＧＡＢＯＢ、ガボキサドール、イボテン酸、イソグバシン、トランス−アミノシクロペンタン−３−カルボン酸、トランス−アミノ−４−クロトン酸、ＴＨＩＰ、イミダゾール酢酸、β−グアニジノ−プロピオン酸、ホモヒポタウリン、３−アミノプロパンスルホン酸、コウジアミン、シス−３−［（アミノイミノメチル）チオ］プロペン酸、ホモ−β−プロリン、イソニペコチン酸、ムシモール、フェニブト、ピカミロン、プロガビド、キスカラミン、プロガビド酸（ＳＬ７５１０２）、チオムシモール、プレガバリン、ビガバトリン、６−アミノニコチン酸、ＸＰ１３５１２（（±）−１−（［（α−イソブタノイルオキシエトキシ）カルボニル］アミノメチル）−１−シクロヘキサン酢酸）などを包含する。
これらのＧＡＢＡ受容体活性化リガンドは、例示的であり、かつ非限定的であることを意図している。他のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドは当技術分野の当業者に公知であり、ここに記載の方法、製剤、及びキットにおけるそれらの使用が企図されている。
【００４１】
組み合わせ製剤
様々な実施形態において、製剤は、ＧＡＢＡA受容体の１以上のポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）及び１以上のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドを含むことが企図されている。一定の実施形態においては、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドは、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドを単独で含む治療製剤における単位用量よりも少ない単位用量で存在し、及び／又はＰＡＭは、ＰＡＭを単独で含む典型的な、及び／又は承認された、及び／又は推奨された治療製剤における単位用量よりも少ない単位用量で存在する。
【００４２】
一定の実施形態においては、組み合わせ製剤中のＰＡＭは、アルコール（例えば、エタノール、イソプロパノール）、アベルメクチン（例えば、イベルメクチン）、バルビツレート（例えば、フェノバルビタール）、ベンゾジアゼピン、臭化物（例えば、臭化カリウム）、カルバメート（例えば、メプロバメート、カリソプロドール）、クロラロース、クロルメザノン、クロメチアゾール、ジヒドロエルゴリン（例えば、エルゴロイド（ジヒドロエルゴトキシン））、エタゼピン、エチフォキシン、イミダゾール（例えば、エトミデート）、カヴァラクトン（カヴァに含まれる）、ロレクレゾール、神経刺激性ステロイド（例えば、アロプレグナノロン、ガナキソロン）、非ベンゾジアゼピン（例えば、ザレプロン、ゾルピデム、ゾピクロン、エスゾピクロン）、ペトリクロラール、フェノール（例えば、プロポフォール）、ピペリジンジオン（例えば、グルテチミド、メチプリロン）、プロパニジド、ピラゾロピリジン（例えば、エタゾレート）、キナゾリノン（例えば、メタカロン）、スカルキャップ成分（例えば、バカレインなどのフラボノイドを包含するが、これに限定されないスクテラリア種の成分）、スチリペントール、スルホニルアルカン（例えば、スルホンメタン、テトロナール、トリオン）、カノコソウ成分（例えば、吉草酸、バレレン酸）の１以上を含む。様々な実施形態において、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせて使用されるＰＡＭは、例えばここに記載されるような、アルコール、及び／又はカヴァラクトン、及び／又はスカルキャップ若しくはスカルキャップ成分などを除外する。
【００４３】
一定の実施形態においては、組み合わせ製剤中のＧＡＢＡ受容体リガンドは、例えばここに記載されるような、１以上のガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、ホモタウリン、バマルゾール、ガバミド、ＧＡＢＯＢ、ガボキサドール、イボテン酸、イソグバシン、イソニペコチン酸、ムシモール、フェニブト、ピカミロン、プロガビド、キスカラミン、プロガビド酸（ＳＬ７５１０２）、チオムシモール、プレガバリン、ビガバトリン、６−アミノニコチン酸、ＸＰ１３５１２（（±）−１−（［（α−イソブタノイルオキシエトキシ）カルボニル］アミノメチル）−１−シクロヘキサン酢酸）などを包含する。
一定の実施形態においては、組み合わせ製剤はＧＡＢＡ及びアルプラゾラムを含む。
【００４４】
活性剤（例えば、ここに記載のＰＡＭ及びＧＡＢＡ受容体活性化リガンド）は、「天然の」形態で、又は、必要に応じて塩、エステル、アミド、プロドラッグ、誘導体などの形態で製剤化及び投与することができ、提供される塩、エステル、アミド、プロドラッグ若しくは誘導体は薬理学的に好適であり、即ち本方法において効果的である。活性剤の塩、エステル、アミド、プロドラッグ及び他の誘導体は、有機合成化学における当業者に公知の、及びＭａｒｃｈ  （１９９２）  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，  ４ｔｈ  Ｅｄ．  Ｎ．Ｙ．  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅに記載の、及び上記の標準的手順を使用して調製することができる。
例えば、薬学的に容認可能な塩は、塩を形成することができる機能性を有するここに記載の因子（例えば、ここに記載のＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭ）のいずれかのために調製することができる。薬学的に容認可能な塩は、親化合物の活性を維持し、かつそれが投与され、及び文脈により投与される対象に対する、有害な又は不都合な効果を与えない、任意の塩である。
様々な実施形態において、薬学的に認容可能な塩は、有機又は無機塩基に由来し得る。塩は一価又は多価のイオンである。特に関心があるのは、無機イオン、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、及びマグネシウムである。有機塩は、アミン、特にモノ、ジ、及びトリアルキルアミン又はエタノールアミンなどのアンモニウム塩によって作成され得る。塩は、カフェイン、トロメタミン、及び同様の分子によっても形成され得る。
【００４５】
塩、エステル、アミド、プロドラッグなどの薬学的活性剤の製剤方法は、当技術分野の当業者に周知である。例えば、塩は、典型的に好適な酸との反応を伴う従来の方法論を用いて遊離塩基から調製することができる。一般的に、薬剤の原型はメタノール又はエタノールなどの極性有機溶媒に溶解され、そこに酸が添加される。結果として得られた塩は、沈殿するか、極性がより低い溶媒を添加することで溶液から取り出すことができる。酸付加塩の調製に好適な酸には、限定されないが、有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸など、及び無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの両方が包含される。酸付加塩は、好適な塩基の処理により遊離塩基に再変換することができる。ここでの活性剤の、一定の特に好ましい酸付加塩には、塩酸又は臭化水素酸を使用して調製できるようなハロゲン化物塩が包含される。反対に、本発明の活性剤の塩基性塩は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、トリメチルアミンなどの薬学的に容認可能な塩基を使用して、同様の方法で調整することができる。特に好ましい塩基性塩は、アルカリ金属塩、例えばナトリウム塩、及び銅塩を包含する。
【００４６】
塩基性薬物の塩形態の調製では、対イオンのｐＫａは、好ましくは薬物のｐＫａよりも少なくとも約２ｐＨ単位低い。同様に、酸性薬物の塩形態の調製では、対イオンのｐＫａは、好ましくは薬物のｐＫａよりも少なくとも約２ｐＨ単位高い。これにより、対イオンが溶液のｐＨをｐＨmaxよりも低いレベルにして塩のプラトーに達することができ、塩のプラトーでは、塩の溶解度が遊離酸又は遊離塩基の溶解度よりも優先される。医薬品有効成分（ＡＰＩ）及び酸又は塩基のイオン化可能基のｐＫａ単位における差の、一般化された規則は、プロトン移動をエネルギー的に有利にすることを意図している。ＡＰＩ及び対イオンのｐＫａに有意な差がない場合、固体複合体が形成され得るが、水成環境では急速に不均衡になり得る（即ち、薬物及び対イオンの個々の実体に分解される）。
好ましくは、対イオンは薬学的に容認可能な対イオンである。好適な陰イオン塩の形態には、限定されないが、酢酸塩、安息香酸塩、ベンジラート（ｂｅｎｚｙｌａｔｅ）、重酒石酸水素塩、臭化物、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート（ｅｓｔｏｌａｔｅ）、フマル酸塩、グルセプテート（ｇｌｕｃｅｐｔａｔｅ）、グルコン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化物、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル、硫酸メチル、ムチン酸塩（ｍｕｃａｔｅ）、ナプシル酸塩、硝酸塩、パモ酸塩（エンボネート（ｅｍｂｏｎａｔｅ））、リン酸塩及び二リン酸塩、サリチル酸塩及び二サリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシレート、トリエチオジド、吉草酸塩などが包含され、一方で好適な陽イオン塩の形態には、限定されないが、アルミニウム、ベンザチン、カルシウム、エチレンジアミン、リジン、マグネシウム、メグルミン、カリウム、プロカイン、ナトリウム、トロメタミン、亜鉛などが包含される。
【００４７】
エステルの調製は、典型的には、活性剤の分子構造中に存在するヒドロキシル基及び／又はカルボキシル基の官能基化を伴う。一定の実施形態においては、エステルは、典型的には遊離アルコール基のアシル置換誘導体、即ち式ＲＣＯＯＨのカルボン酸に由来する部分であり、式中、Ｒがアルキル、及び好ましくは低級アルキルである。エステルは、必要に応じて、従来の水素化分解又は加水分解手順を使用して遊離酸に再変換することができる。
アミドは、当技術分野の当業者に公知の、又は関連文献に記載の技術を使用して調製することができる。例えば、アミドは好適なアミン反応物質を使用してエステルから調製することができ、又はアンモニア若しくは低級アルキルアミンとの反応により無水物若しくは酸塩化物から調製することができる。
様々な実施形態において、ここで特定する活性剤（例えば、組み合わされたＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭ）は、哺乳動物における炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させるための、非経口投与、局所投与、経口投与、経鼻投与（若しくは、そうでなければ吸入）、直腸内投与、又はエアロゾル若しくは経皮などによる局所投与に有用である。
【００４８】
様々な実施形態において、ここに記載の活性剤は薬学的に容認可能な担体（賦形剤）と組み合わせて、両方の因子を含有する薬理学的組成物を形成することができる。薬学的に容認可能な担体は、例えば組成物を安定化させ、又は活性剤の吸収を増加若しくは減少させるように作用する、１以上の生理学的に容認可能な化合物を含有し得る。生理学的に容認可能な化合物は、例えば、グルコース、スクロース、若しくはデキストランなどの炭水化物、アスコルビン酸若しくはグルタチオンなどの抗酸化剤、キレート剤、低分子量タンパク質、脂質などの保護及び取り込み促進剤、活性剤の除去又は加水分解を減少させる組成物、又は賦形剤若しくは他の安定剤及び／又は緩衝液を包含し得る。
特に錠剤、カプセル、ゲルキャップ（ｇｅｌ  ｃａｐｓ）などに有用な他の生理学的に容認可能な化合物は、限定されないが、結合剤、希釈剤／充填剤、崩壊剤、潤滑剤、懸濁剤などを包含する。
【００４９】
一定の実施形態においては、経口投与剤形（例えば、錠剤）を製造するため、例えば、賦形剤（例えば、ラクトース、スクロース、デンプン、マンニトールなど）、任意の崩壊剤（例えば、炭酸カルシウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスポビドンなど）、結合剤（例えば、アルファデンプン、アラビアガム、微結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、シクロデキストリンなど）、及び任意の潤滑剤（例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール６０００など）が、活性成分（例えば、ここに記載のアラプロクラート及び他の化合物、又はその互変異性体若しくは立体異性体、又は前記アラプロクラート及び他の化合物、前記立体異性体、若しくは前記互変異性体の薬学的に容認可能な塩若しくは溶媒和化合物、又はその類似体、誘導体、若しくはプロドラッグ）に添加され、かつ結果として得られる組成物が、圧縮される。必要に応じて、圧縮製品は、例えば味をマスキングするための、又は腸溶性若しくは持続放出のための公知の方法を使用して、コーティングされる。好適なコーティング剤には、限定されないが、エチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ＰＯＬＹＯＸ（登録商標）エチレングリコール（ｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）、酢酸フタル酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、及びオイドラギッド（Ｒｏｈｍ＆Ｈａａｓ、ドイツ；メタクリル−アクリル共重合体）が包含される。
【００５０】
他の薬学的に容認可能な化合物は、湿潤剤、乳化剤、分散剤、又は微生物の成長及び作用を防止するのに特に有用な防腐剤を包含する。様々な防腐剤が周知であり、かつ、例えばフェノール及びアスコルビン酸を包含する。当技術分野の当業者は、生理学的に容認可能な化合物を包含する薬学的に容認可能な担体の選択は、例えば、活性剤の投与経路及び活性剤の特定の生理化学的特性に依存することを理解するであろう。
特定の実施形態においては、賦形剤は無菌であり、かつ一般的に望ましくない物質を含まない。これらの組成物は、従来の、周知の滅菌技術により滅菌することができる。錠剤やカプセルなどの様々な経口投与剤形の賦形剤の場合、無菌性を必要としない。通常は、ＵＳＰ／ＮＦ基準で十分である。
【００５１】
医薬組成物は、投与方法に応じて様々な単位剤形で投与することができる。好適な単位剤形は、限定されないが、粉末、錠剤、ピル、カプセル、ロゼンジ、坐薬、パッチ、点鼻薬、注射剤（ｉｎｊｅｃｔｉｂｌｅｓ）、移植可能な持続放出製剤、粘膜付着性フィルム（ｍｕｃｏａｄｈｅｒｅｎｔ  ｆｉｌｍｓ）、局所塗り薬（ｔｏｐｉｃａｌ  ｖａｒｎｉｓｈｅｓ）、脂質複合体などを包含する。
ここに記載の活性剤（例えば、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭ）を含む医薬組成物は、従来の混合、溶解、造粒、糖衣錠作成、湿式粉砕、乳化、カプセル化、封入又は凍結乾燥工程により製造することができる。医薬組成物は、薬学的に使用できる調剤への活性剤の加工を促進する１以上の生理学的に容認可能な担体、希釈剤、賦形剤、又は助剤を使用して従来の方法で製剤化することができる。好適な製剤は、選択した投与経路に依存する。
【００５２】
一定の実施形態においては、組み合わされた活性剤（例えば、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭ）は、経口投与のために製剤される。好適な製剤又は経口投与は、活性剤を、当技術分野で周知の経口送達に好適な薬学的に容認可能な担体と組み合わせることにより、容易に調製することができる。このような担体は、ここに記載の活性剤を、治療される患者による経口摂取のための錠剤、ピル、糖衣錠、カプレ、ロゼンジ、ゲルキャップ、カプセル、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などに製剤化することを可能にする。例えば粉末、カプセル、及び錠剤などの経口固体製剤の場合、好適な賦形剤には、糖（例えば、ラクトース、スクロース、マンニトール、及びソルビトール）、セルロース調剤（例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、馬鈴薯デンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム）、合成ポリマー（例えば、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ））、造粒剤、並びに結合剤などの充填剤を包含され得る。必要に応じて、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、又はアルギン酸若しくはアルギン酸ナトリウムなどのその塩などの崩壊剤を添加してもよい。必要に応じて、標準的技術を使用して固体剤形を糖衣又は腸溶コーティングしてもよい。腸溶コーティングされた粒子の調製は、例えば米国特許第４，７８６，５０５号及び４，８５３，２３０号に開示されている。
【００５３】
吸入による投与の場合、活性剤（例えば、ここに記載のＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭ）は、ジクロロフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の好適な気体などの適切な推進剤を使用して、加圧パック又はネブライザーからのエアロゾルスプレーの形で、簡便に送達される。加圧エアロゾルの場合、計量された量を送達するためのバルブを提供することにより、用量単位を決定することができる。例えば吸入器又は注入器での使用のためのゼラチンのカプセル及びカートリッジは、化合物とラクトース又はデンプンなどの好適な粉末基材の粉末混合物を含有するように製剤化することができる。
【００５４】
一定の実施形態においては、ここに記載の活性剤は、当技術分野の当業者に周知の標準的技術に従って、全身的投与のために（例えば、注射用として）製剤化される。全身的製剤は、限定されないが、皮下、静脈内、筋肉内、髄腔内、又は腹腔内注射などの注射による投与のために設計された製剤、並びに、経皮、経粘膜経口又は肺投与のために設計された製剤を包含する。注射の場合、ここに記載の活性剤は水溶液、好ましくはハンクス液、リンガー液、若しくは生理食塩水バッファーなどの生理学的に互換性のあるバッファー、及び／又は一定のエマルジョン製剤に製剤化することができる。溶液は、懸濁剤、安定剤、及び／又は分散剤などの調合剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔｓ）を含有し得る。一定の実施形態においては、活性剤は、使用前に発熱性物質除去蒸留水などの好適なビヒクルで構成するための粉末形態で提供することができる。経粘膜投与の場合、及び／又は血液／脳関門通過の場合、浸透させる関門に適切な浸透剤を製剤に使用することができる。このような浸透剤は、当技術分野で一般に知られている。注射用製剤及び浸透性製剤は、一般に滅菌され、又は実質的に滅菌された製剤である。
【００５５】
これまでに記載した製剤に加えて、活性剤（例えば、ここに記載のＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭ）は、デポ剤として製剤してもよい。このような長時間作用性製剤は、移植（例えば、皮下又は筋肉内に）、又は筋肉内注射により投与することができる。したがって、例えば、活性剤は、好適なポリマー材料若しくは疎水性材料（例えば、容認可能なオイル中のエマルジョンとして）、又はイオン交換樹脂、又は難溶性誘導体、例えば難溶性塩として製剤化することができる。
一定の実施形態においては、ここに記載の活性剤は、従来の経皮薬剤送達システム、即ち経皮「パッチ」を使用して皮膚を通して送達することもでき、この場合活性剤は、典型的には皮膚に貼り付けられる薬剤送達デバイスとして機能する積層構造中に含有される。このような構造中では、薬剤組成物は典型的には層、又は上部バッキング層の下にある「リザーバー（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）」に含有される。この文脈における用語「リザーバー」は、皮膚の表面への送達に最終的に利用可能な「活性成分」の量を指すことが理解されよう。したがって、例えば「リザーバー」は、活性成分を、パッチのバッキング層上の接着剤中、又は当技術分野の当業者に公知の任意の様々な異なるマトリックス製剤中に包含し得る。パッチは単一のリザーバーを含有してもよく、又は多数のリザーバーを含有してもよい。
【００５６】
例示的な一実施形態においては、リザーバーは薬剤送達中にシステムを皮膚に貼り付けるのに役立つ、薬学的に容認可能な接触接着材料のポリマーマトリックスを含む。皮膚接触接着材料の好適な例には、限定されないが、ポリエチレン、ポリシロキサン、ポリイソブチレン、ポリアクリレート、ポリウレタンなどが包含される。あるいは、薬物含有リザーバー及び皮膚接触接着剤は分離した別個の層として存在し、リザーバーの下に接着剤を有し、この場合、上記のポリマーマトリックス、又は液体若しくはハイドロゲルリザーバーであり得、又は他の形態をとり得る。デバイスの上面として役立つこれらのラミネート中のバッキング層は、「パッチ」の主要な構造要素として機能し、かつ高い柔軟性を有するデバイスを提供することが好ましい。バッキング層に選択された材料は、活性剤及び存在する任意の他の材料に実質的に不浸透性であることが好ましい。
あるいは、他の薬学的な送達系を利用することができる。例えば、リポソーム、エマルジョン、及びマイクロエマルジョン／ナノエマルジョンは、薬学的に活性のある化合物を保護し及び送達するために使用され得る送達ビヒクルの周知な例である。ジメチルスルホキシドなどの一定の有機溶媒もまた利用することができるが、通常より高い毒性という代償が伴う。
【００５７】
一定の実施形態においては、組み合わせ製剤は、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及び／又はＰＡＭを、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及び／又はＰＡＭを単独で使用する場合に提供される用量よりも少ない用量（単位用量）含む。一定の実施形態においては、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドは、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンドが単独で使用された場合に、哺乳動物におい炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させるのに必要なＧＡＢＡ受容体活性化リガンドの、約９０％未満、又は約８０％未満、又は約７０％未満、又は約６０％未満、又は約５０％未満、又は約４０％未満、又は約４０％未満、又は約３０％未満、又は約１０％未満、又は約５％未満で存在する。
一定の実施形態においては、ＰＡＭは治療量以下の用量で提供される。これは、ＰＡＭがもともと設計され及び／又は承認された活性に使用される場合に、承認され及び／又は推奨され及び／又は認可されたＰＡＭの用量を下回る用量を指す。
【００５８】
したがって、例えば、パニック障害の治療のためのアルプラゾラム（速放性錠剤）の推奨／承認された用量は、１日３回、経口で０．５ｍｇの初回量であり、分割量で１から１０ｍｇ／日の維持量を有し、かつ分割量で５から６ｍｇ／日の平均用量である。推奨／承認された用量の徐放性アルプラゾラム錠剤は、１日１回、０．５ｍｇから１ｍｇであり、かつ維持量は１日１回１から１０ｍｇであり、１日１回３から６ｍｇの平均用量を有する。成人のうつ病の治療のためのアルプラゾラム（速放性錠剤）の推奨／承認された用量は、１日３回、経口で０．５ｍｇの初回量であり、これは分割量で、経口で毎日３ｍｇの平均有効量まで増加される。不安に対する高齢者の用量は高齢者又は衰弱した患者に１日２から３回、経口で０．２５ｍｇの初回量で提供され、２ｍｇを超える１日の用量は、高齢者における使用には潜在的に不適切である薬品としてのビアーズ基準を満たす。
【００５９】
製剤中では、治療量以下の用量は、典型的には最少の推奨／承認された単位剤形よりも少なく、例えばアルプラゾラムの場合、単位剤形として０．２５ｍｇ未満であり、かつ治療法において１日に合計で０．５ｍｇ未満である。一定の実施形態においては、治療量以下の用量は、この推奨／承認された用量の９０％未満、又は約８０％未満、又は約７０％未満、又は約６０％未満、又は約５０％未満、又は約４０％未満、又は約３０％未満、又は約２０％未満、又は約１０％未満である。
これらの用量は説明を意図し、かつ限定を意図していない。対象に投与されたＢＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭの実際の用量は、体重、状態の深刻度、以前の又は同時的な治療的介在、患者の突発性疾患、及び投与経路などの物理的及び生理学的因子によって決定することができる。用量及び投与経路に応じて、好ましい用量及び／又は有効量の投与回数は、対象の反応に従って変動し得る。投与に責任のある医師は、いずれのイベントにおいても、組成物中の活性剤の濃度及び個々の対象に適した用量を決定するであろう。
【００６０】
キット
一定の実施形態においては、ここに記載の方法の実施のためのキットが提供される。様々な実施形態において、キットは、ＧＡＢＡ活性化リガンドを含有する容器、及びここに記載の通りのＧＡＢＡA受容体のポジティブアロステリックモジュレーターを含有する容器を含む。一定の実施形態においては、キットはＧＡＢＡ及びアルプラゾラムを含む。
一定の実施形態においては、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭは、単位剤形（例えば、錠剤、カプレ、パッチなど）で提供され、及び／又は任意で１以上の薬学的に容認可能な賦形剤と組み合わせることができる。一定の実施形態においては、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭは、別個の容器で提供され得る。一定の実施形態においては、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭは、同じ容器で提供され得る。一定の実施形態においては、ＧＡＢＡ受容体活性化リガンド及びＰＡＭは、同じ容器で組み合わせ製剤として提供され得る。
【００６１】
さらに、キットは任意で、本発明の方法の実施のための説明書を提供する、ラベル及び／又は指示資料（即ち、プロトコル）を包含する。一定のラベル又は指示資料は、１以上のＰＡＭの、単独又は１以上のＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせた、哺乳動物において炎症性免疫応答を減少させ及び／又は制御性免疫応答を促進させるための使用を記載する。ラベル又は指示資料は任意で、好ましい用量／治療レジメン、対抗指示（ｃｏｕｎｔｅｒ  ｉｎｄｉｃａｔｉｏｎｓ）などもまた提供し得る。
指示資料は、典型的には書き出された又は印刷された資料を含む一方で、これらに限定されない。このような指示を備えることが可能であり、かつ最終使用者にそれらを伝達可能な任意の媒体が、本発明によって企図される。このような媒体は、限定されないが、電子記憶媒体（例えば、磁気ディスク、テープ、カートリッジ、チップ）、光学式媒体（例えば、ＣＤ  ＲＯＭ）など包含する。このような媒体は、このような指示資料を提供するインターネットサイトのアドレスを包含し得る。
【００６２】
実施例
以下の実施例は、説明のために提供されるものであるが、特許請求される発明を限定するものではない。
実施例１
炎症性免疫応答を抑制し及び／又は制御性免疫応答を促進させるための、ＰＡＭの、任意でＧＡＢＡ受容体活性化リガンドと組み合わせた使用
ＧＡＢＡ−Ｒポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）は、ＧＡＢＡの作用を強化する。これらはＧＡＢＡ結合部位には結合しないが（即ち、これらはアゴニストではない）、むしろＧＡＢＡ−Ｒ上のその他の場所に結合する。これらはＧＡＢＡ−Ｒを活性化するためのアゴニスト機能を有しない一方で、ＧＡＢＡが受容体に結合した場合にＧＡＢＡの作用を増強する。血液中のＧＡＢＡレベルは低いため、ＰＡＭ単独（例えば、外因性ＧＡＢＡ受容体アゴニストの非存在下で）ではほとんどの周辺免疫応答に影響を与えそうにない。これに一致して、ＧＡＢＡ−Ｒ  ＰＡＭアルプラゾラム（Ｘａｎａｘ）を長期にわたって摂取する個人が免疫抑制を有するとは報告されなかった。
【００６３】
しかしながら、ＧＡＢＡは島（ｉｓｌｅｔｓ）の中で分泌され、かつＰＡＭ単独の投与が、島内ＧＡＢＡ（ｉｎｔｒａ−ｉｓｌｅｔ  ＧＡＢＡ）と相乗作用して、炎症性病理学的膵島炎を阻害し得る可能性があると考えられている。抗原提示細胞がいくらかのＧＡＢＡを作り出すことができ、それが投与されたＰＡＭと協働し得るとも考えられている。
局所的内因性ＧＡＢＡ分泌物との相乗作用に加えて、少量の外因性ＧＡＢＡの存在下で、ＧＡＢＡ−Ｒ  ＰＡＭは効果的に免疫炎症性反応を減少させ（例えば、Ｔｈ１反応を阻害する）、及び／又は制御性（Ｔｒｅｇ）反応を強化し得ると考えられている。免疫応答を調節するために外因性ＧＡＢＡ及びＰＡＭを供給するという思想は、新規であると考えられている。さらに、併用治療は、より少ない用量のＧＡＢＡ、ＰＡＭのいずれか又はその両方を使用して免疫応答を調節することができ、それにより治療をより簡単に（例えば、ＧＡＢＡの大量消費を回避する）、より効果的に、かつ潜在的により安全にする。
【００６４】
方法
マウスの後ろのフードパッド（ｆｏｏｄ−ｐａｄ）に、５０％完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）中で卵白リゾチーム（ＨＥＬ、原型外来抗原（ｐｒｏｔｏｔｙｐｉｃ  ｆｏｒｅｉｇｎ  ａｎｔｉｇｅｎ））を注射した。９日後、リンパ節単核細胞を単離し、３×１０5単核細胞／ウェルを異なる濃度のＧＡＢＡ、又はＰＡＭアルプラゾラム（Ｘａｎａｘ）の存在下でＨＥＬに対するＴ細胞想起応答について、１％ＦＣＳ  ＨＬ−１培地で３回試験した。９６時間のインキュベーション期間の最後の１６時間の間に、１ｍＣｉ3Ｈチミジンを各ウェルに添加した。
図１は、ＧＡＢＡ単独のＨＥＬに対する想起応答への効果を示す。Ｔ細胞増殖に対する有意な阻害効果は、０．０１〜１ｍＭのＧＡＢＡレベルで観察された。図２は、アルプラゾラム（Ｘａｎａｘ）単独が、試験したいずれの用量でもＴ細胞増殖に対する有意な効果を有しなかったことを示す。これはＧＡＢＡ−Ｒを活性化するのにＧＡＢＡが必要であること、また、（β細胞とは異なり）免疫細胞がＧＡＢＡ−Ｒを活性化するのに十分でないＧＡＢＡを作り出すことと一致している。
【００６５】
次いで、ＧＡＢＡを単独で、及びＧＡＢＡを異なる濃度で、異なる組み合わせのＸａｎａｘと組み合わせて試験した。図３は、ＧＡＢＡとＸａｎａｘの組み合わせが、ＨＥＬに応答してより効果的に免疫細胞増殖（炎症性応答）を阻害することを示す。ＧＡＢＡ単独では、０．１〜１．０ｍＭ（水色の線）においてのみ有意な阻害を有していたことに注意されたい。これに対して、ＧＡＢＡが１×１０-6ＭでＸａｎａｘと組み合わされた場合（オレンジ色の線）、組み合わせは、ＧＡＢＡが最も効果の低いＧＡＢＡ（単独）用量よりも１０倍低いレベルである、ちょうど０．０１ｍＭで存在した場合に効果的であった。また、ＧＡＢＡ単独が０．１〜１．０ｍＭで有意な阻害効果を有していた一方で、０．１〜１ｍＭのＧＡＢＡの阻害効果は、１×１０-7のＸａｎａｘの存在下では各用量でより有意に優れており、かつこれらの用量のＧＡＢＡが３×１０-7ＭのＸａｎａｘと組み合わされた場合にさらに優れていたことに注意されたい。したがって、Ｘａｎａｘは炎症性免疫応答に対するＧＡＢＡの阻害効果を増大させ、かつこれらの組み合わせは、いずれかの薬剤単独に比べてより優れた阻害効果を有していた。
特定の理論に拘束されることなく、これらの所見は他のＧＡＢＡ−Ｒ  ＰＡＭに拡大され得ると考えられている。したがって、一定の実施形態においては、ＰＡＭとともに組み合わされた外因性ＧＡＢＡ又は他のＧＡＢＡ−Ｒアゴニストは、炎症性応答を阻害するために使用される。この組み合わせが、少量のいずれか又は両方の薬剤を用いた効果的な治療を可能にし得ると考えられている。さらに、この組み合わせが制御性応答をより効果的に促進し得ると考えられている。
【００６６】
ここに記載の実施例及び実施形態は、説明のみを目的としており、これを考慮して様々な修正又は変更が当技術分野の当業者に提案され、本出願の精神及び範囲並びに添付の特許請求の範囲の領域に包含されることを理解されたい。ここで引用するすべての刊行物、特許、及び特許出願は、すべての目的のために参照により全体としてここに組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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