(57)【要約】  とりわけ、がんの治療のための組成物及び方法が、本明細書で提供される。これらの組成物は、例えば、とりわけ、がん細胞を標的化して死滅させるために有用な抗体可変ドメイン又は抗体構築物を含む。非がん細胞と比較してがん細胞に示差的に結合するそれらの能力に起因して、本明細書で提供される組成物は、例えば、治療及び診断目的のために使用できる。
2020518251.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む抗体可変ドメイン。
【請求項２】
第１の抗体ペプチドを含む抗体構築物であって、第１の抗体ペプチドが、
（ｉ）配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む第１の抗体可変ドメイン；並びに
（ｉｉ）第１の抗体可変ドメインに結合された第１の抗体ドメイン
を含む、抗体構築物。
【請求項３】
抗体可変ドメインが、抗体軽鎖可変ドメインである、請求項１に記載の抗体可変ドメイン又は請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項４】
抗体可変ドメインが、抗体重鎖可変ドメインである、請求項１に記載の抗体可変ドメイン又は請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項５】
一価抗体構築物である、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項６】
第１の抗体ドメインが、第１の可変重鎖ドメインである、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項７】
単鎖抗体（ｓｃＦｖ）である、請求項６に記載の抗体構築物。
【請求項８】
第１の抗体ドメインが、第１の定常重鎖である、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項９】
第１の定常重鎖が、第１の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合された第１の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインを含む、請求項８に記載の抗体構築物。
【請求項１０】
第１のＣＨ３ドメインが、第１のＣＨ２ドメインを介して第１の抗体可変ドメインに結合されている、請求項９に記載の抗体構築物。
【請求項１１】
第１の抗体ペプチドが、第１の定常重鎖１（ＣＨ１）ドメインをさらに含む、請求項１０に記載の抗体構築物。
【請求項１２】
第１のＣＨ１ドメインが、第１の抗体ドメインの一部を形成する、請求項１１に記載の抗体構築物。
【請求項１３】
第１の抗体可変ドメインが、第１のＣＨ１ドメインを介して第１の抗体ドメインに結合されている、請求項１１に記載の抗体構築物。
【請求項１４】
第１の抗体可変ドメインが、第１のＣＨ１ドメインを介して第１のＣＨ２ドメインに結合されている、請求項１１に記載の抗体構築物。
【請求項１５】
第１の抗体ペプチドに結合された第２の抗体ペプチドをさらに含む二価抗体構築物である、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項１６】
第２のペプチドが、第１の抗体ドメインに結合されている、請求項１５に記載の抗体構築物。
【請求項１７】
第２の抗体ペプチドが、第１のＣＨ２ドメインに結合されている、請求項１５に記載の抗体構築物。
【請求項１８】
第２の抗体ペプチド及び第１の抗体ペプチドが、化学的に同一である、請求項１５に記載の抗体構築物。
【請求項１９】
第２の抗体ペプチド及び第１の抗体ペプチドが、化学的に異なる、請求項１５に記載の抗体構築物。
【請求項２０】
第２の抗体ペプチドが、
（ｉ）第２の抗体可変ドメイン、及び
（ｉｉ）第２の抗体可変ドメインに結合された第２の抗体ドメイン
を含む、請求項１５に記載の抗体構築物。
【請求項２１】
第２の抗体可変ドメインが、配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む、請求項２０に記載の抗体構築物。
【請求項２２】
第２の抗体ドメインが第２の定常重鎖である、請求項２０に記載の抗体構築物。
【請求項２３】
第２の定常重鎖が、第２の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合された第２の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインを含む、請求項２２に記載の抗体構築物。
【請求項２４】
第２のＣＨ３ドメインが、第２のＣＨ２ドメインを介して第２の抗体可変ドメインに結合されている、請求項２３に記載の抗体構築物。
【請求項２５】
第２の抗体ペプチドが、第２の第１の定常重鎖１（ＣＨ１）ドメインをさらに含む、請求項２４に記載の抗体構築物。
【請求項２６】
第２のＣＨ１ドメインが、第２の抗体ドメインの一部を形成する、請求項２５に記載の抗体構築物。
【請求項２７】
第２の抗体可変ドメインが、第２のＣＨ１ドメインを介して第２の抗体ドメインに結合されている、請求項２５に記載の抗体構築物。
【請求項２８】
第２の抗体可変ドメインが、第２のＣＨ１ドメインを介して第２のＣＨ２ドメインに結合されている、請求項２５に記載の抗体構築物。
【請求項２９】
第１のＣＨ１ドメイン及び第２のＣＨ１ドメインが、互いに結合されている、請求項２８に記載の抗体構築物。
【請求項３０】
第１の抗体ペプチドに結合された第３の抗体可変ドメイン及び第２の抗体ペプチドに結合された第４の抗体可変ドメインをさらに含む四価抗体構築物である、請求項１５に記載の抗体構築物。
【請求項３１】
第３の抗体可変ドメインが、第１の抗体ペプチドの一部を形成し、第４の抗体可変ドメインが、第２の抗体ペプチドの一部を形成する、請求項３０に記載の抗体構築物。
【請求項３２】
第３の抗体可変ドメインが、第１の抗体可変ドメインを介して第１の抗体ドメインに結合されている、請求項３０に記載の抗体構築物。
【請求項３３】
第３の抗体可変ドメインが、第１の抗体可変ドメインを介して第１のＣＨ２ドメインに結合されている、請求項３０に記載の抗体構築物。
【請求項３４】
第４の抗体可変ドメインが、第２の抗体可変ドメインを介して第２の抗体ドメインに結合されている、請求項３０に記載の抗体構築物。
【請求項３５】
第４の抗体可変ドメインが、第２の抗体可変ドメインを介して第２のＣＨ２ドメインに結合されている、請求項３０に記載の抗体構築物。
【請求項３６】
第３の抗体可変ドメインが、第１の抗体ペプチドに結合された第１の軽鎖抗体ペプチドの一部を形成し、第４の抗体可変ドメインが、第２の抗体ペプチドに結合された第２の軽鎖抗体ペプチドの一部を形成する、請求項３０に記載の抗体構築物。
【請求項３７】
第１の軽鎖抗体ペプチドが、第３の抗体可変ドメインに結合された第１の定常軽鎖１（ＣＬ１）ドメインを含む、請求項３６に記載の抗体構築物。
【請求項３８】
第１の軽鎖抗体ペプチドが、第１のＣＬ１ドメインを介して第１の抗体ペプチドに結合されている、請求項３７に記載の抗体構築物。
【請求項３９】
第３の抗体可変ドメインが、第１のＣＬ１ドメインを介して第１の抗体ペプチドに結合されている、請求項３７に記載の抗体構築物。
【請求項４０】
第２の軽鎖抗体ペプチドが、第４の抗体可変ドメインに結合された第２の定常軽鎖１（ＣＬ１）ドメインをさらに含む、請求項３６に記載の抗体構築物。
【請求項４１】
第２の軽鎖抗体ペプチドが、第２のＣＬ１ドメインを介して第２の抗体ペプチドに結合されている、請求項４０に記載の抗体構築物。
【請求項４２】
第４の抗体可変ドメインが、第２のＣＬ１ドメインを介して第２の抗体ペプチドに結合されている、請求項３７に記載の抗体構築物。
【請求項４３】
抗体である、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項４４】
抗体バリアントである、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項４５】
Ｆａｂ’断片である、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項４６】
キメラ抗体である、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項４７】
ヒト化抗体である、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項４８】
ヒト抗体である、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項４９】
検出可能な部分を含む、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項５０】
検出可能な部分が、蛍光部分である、請求項４９に記載の抗体構築物。
【請求項５１】
がんタンパク質に結合している、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項５２】
がんタンパク質が、がん細胞の一部を形成する、請求項２に記載の抗体構築物。
【請求項５３】
がん細胞が、リンパ系細胞である、請求項５２に記載の抗体構築物。
【請求項５４】
がん細胞が、Ｂ細胞である、請求項５２に記載の抗体構築物。
【請求項５５】
請求項１に記載の抗体可変ドメイン、請求項２に記載の第１の抗体ペプチド、請求項１５に記載の第２の抗体ペプチド、請求項３６に記載の第１の軽鎖抗体ペプチド、又は請求項３６に記載の第２の軽鎖抗体ペプチドをコードする、単離された核酸。
【請求項５６】
請求項１に記載の抗体可変ドメイン又は請求項２に記載の抗体構築物の治療有効量と、薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項５７】
がんの治療を必要とする対象においてがんを治療する方法であって、請求項１に記載の抗体可変ドメイン又は請求項２に記載の抗体構築物の治療有効量を対象に投与し、それによって対象におけるがんを治療することを含む方法。
【請求項５８】
がんが、リンパ腫、白血病又は骨髄腫である、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
リンパ腫が、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫又はバーキットリンパ腫である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
白血病が、リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病又はヘアリー細胞白血病である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
第２の治療剤を対象に投与するステップをさらに含む、請求項５７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、その全体を全ての目的のために参照により本明細書に組み込む、２０１７年５月４日出願の米国仮特許出願第６２／５０１，６４９号の利益を主張する。
【０００２】
ａｓｃｉｉファイルとして提出された「配列表」、表又はコンピュータープログラム列挙付録に対する言及
２０１８年５月４日に作成されたファイル０４８４４０−６６０００１ＷＯ＿ＳＴ２５．ＴＸＴ中に書かれた配列表、１０，４４６バイト、機械フォーマットＩＢＭ−ＰＣ、ＭＳ  Ｗｉｎｄｏｗｓオペレーティングシステムは、参照により本明細書に組み込む。
【背景技術】
【０００３】
新たながん免疫療法は、それらの有望な効能ゆえに、急速にクリニックに登場してきている。モノクローナル抗体及び抗体ベースの免疫療法薬は、それらの高い特異性及び証明された抗腫瘍効果ゆえに、特に魅力的なプラットフォームである。現在開発中の免疫療法薬は、様々な標的に対して設計されている；しかし、これらの腫瘍関連標的は、がん細胞及び健康な細胞の両方によって発現される場合が多い。結果として、これらの免疫治療剤は、腫瘍を排除するプロセスにおいて、健康な細胞を必然的に枯渇させる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
したがって、がん細胞を識別して選択的に死滅させることができる一方で、健康な細胞を無傷なままにする免疫療法薬が、当該分野で必要とされている。とりわけ、当該分野のこれら及び他の問題に対処する抗体構築物及びそれらを使用する方法が、本明細書で提供される。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
ある態様では、配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む抗体可変ドメインが提供される。
【０００６】
別の態様では、第１の抗体ペプチドを含む抗体構築物であって、第１の抗体ペプチドが、（ｉ）配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む第１の抗体可変ドメイン；並びに（ｉｉ）第１の抗体可変ドメインに結合された第１の抗体ドメインを含む、抗体構築物が提供される。
【０００７】
一態様では、実施形態を含めて本明細書で提供される、抗体可変ドメインをコードする単離された核酸が提供される。
【０００８】
別の態様では、実施形態を含めて本明細書で提供される、第１の抗体ペプチドをコードする単離された核酸が提供される。
【０００９】
別の態様では、実施形態を含めて本明細書で提供される、第２の抗体ペプチドをコードする単離された核酸が提供される。
【００１０】
別の態様では、実施形態を含めて本明細書で提供される、第１の軽鎖抗体ペプチドをコードする単離された核酸が提供される。
【００１１】
別の態様では、実施形態を含めて本明細書で提供される、第２の軽鎖抗体ペプチドをコードする単離された核酸が提供される。
【００１２】
一態様では、実施形態を含めて本明細書で提供される、抗体可変ドメインの治療有効量及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
【００１３】
別の態様では、実施形態を含めて本明細書で提供される、抗体構築物の治療有効量及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
【００１４】
一態様では、がんの治療を必要とする対象においてがんを治療するための方法であって、実施形態を含めて本明細書で提供される、抗体可変ドメインの治療有効量を対象に投与することによって、対象におけるがんを治療するステップを含む方法が提供される。
【００１５】
別の態様では、がんの治療を必要とする対象においてがんを治療するための方法であって、実施形態を含めて本明細書で提供される、抗体構築物の治療有効量を対象に投与し、それによって対象におけるがんを治療するステップを含む方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１Ａ】マントル細胞リンパ腫特異的抗体ファージクローンの同定及び特徴付け。ヒト抗体ファージライブラリーをフィルタリングして、正常ヒトＢ細胞に結合したファージを排除した。次いで、フィルタリングされたライブラリーを使用して、ヒトマントル細胞リンパ腫株Ｊｅｋｏ−１をスクリーニングした。ＪｅＫｏ−１細胞に結合したファージを溶出させ、滴定し、引き続くラウンドのバイオパニングのために増幅した。バイオパニング富化結果を、４ラウンドのバイオパニングの各々について、ファージ「アウトプット／インプット比」（×１０−８）で表した。軽鎖の可変結合ドメイン（ＶＬ）を含む、優勢に富化されたファージクローン（４−４）が同定された。
【図１Ｂ】マントル細胞リンパ腫特異的抗体ファージクローンの同定及び特徴付け。ヒト抗体ファージライブラリーをフィルタリングして、正常ヒトＢ細胞に結合したファージを排除した。次いで、フィルタリングされたライブラリーを使用して、ヒトマントル細胞リンパ腫株Ｊｅｋｏ−１をスクリーニングした。ＪｅＫｏ−１細胞に結合したファージを溶出させ、滴定し、引き続くラウンドのバイオパニングのために増幅した。バイオパニング富化結果を、４ラウンドのバイオパニングの各々について、「ファージ数／１０６細胞」で表した。軽鎖の可変結合ドメイン（ＶＬ）を含む、優勢に富化されたファージクローン（４−４）が同定された。
【図１Ｃ−１】マントル細胞リンパ腫特異的抗体ファージクローンの同定及び特徴付け。以下の異なるリンパ腫細胞株の染色に基づいた４−４ファージの結合特異性を示すＦＡＣＳヒストグラム：マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）株−ＪｅＫｏ−１、Ｍｉｎｏ、ＭＡＶＥＲ−１及びＮＣＥＢ−１；非ＭＣＬ株−ＨＢＬ−１（びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ｄｉｆｆｕｓｅｄ  ｌａｒｇｅ  ｂ−ｃｅｌｌ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）、ＤＬＢＣＬ）、ＲＬ（濾胞性リンパ腫、ＦＬ）、Ｒａｊｉ（バーキットリンパ腫、ＢＬ）及びＢＪＡＢ（ＢＬ）。段階的に滴定した４−４ファージクローンを、ＦＩＴＣコンジュゲート化抗Ｍ１３ファージ抗体によって検出し、未染色の細胞を、陰性コントロールとして使用した。
【図１Ｃ−２】マントル細胞リンパ腫特異的抗体ファージクローンの同定及び特徴付け。以下の異なるリンパ腫細胞株の染色に基づいた４−４ファージの結合特異性を示すＦＡＣＳヒストグラム：マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）株−ＪｅＫｏ−１、Ｍｉｎｏ、ＭＡＶＥＲ−１及びＮＣＥＢ−１；非ＭＣＬ株−ＨＢＬ−１（びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ｄｉｆｆｕｓｅｄ  ｌａｒｇｅ  ｂ−ｃｅｌｌ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）、ＤＬＢＣＬ）、ＲＬ（濾胞性リンパ腫、ＦＬ）、Ｒａｊｉ（バーキットリンパ腫、ＢＬ）及びＢＪＡＢ（ＢＬ）。段階的に滴定した４−４ファージクローンを、ＦＩＴＣコンジュゲート化抗Ｍ１３ファージ抗体によって検出し、未染色の細胞を、陰性コントロールとして使用した。
【図２Ａ−１】産生しそして試験した抗体バリアント（抗体構築物）。本研究を通じて操作及び実行された４つの組換え４−４ヒト抗体バリアント（抗体構築物）の模式図。単一特異性ＶＬは、同定された４−４  ＶＬ配列を示す。重鎖及び軽鎖定常Ｆｃ領域（ＣＨ２及びＣＨ３）は、それぞれのマウス及びヒトＩｇＧ１に基づいた。二価ＶＬマウスＦｃ融合抗体構築物を、「ＬＣｍＦｃ−Ａｂ」と名付けた。二価ＶＬヒトＦｃ融合抗体構築物を、「ＬＣ−Ａｂ」と名付けた。四価のリンカー接続された二ＶＬヒトＦｃ融合抗体構築物を、「（ＬＣ）２−Ａｂ」と名付けた。四価のＶＬ置換されたＦｖヒトＩｇＧ抗体構築物を、「ＬＣＦｖ−Ａｂ」と名付けた。
【図２Ａ−２】産生しそして試験した抗体バリアント（抗体構築物）。本研究を通じて操作及び実行された４つの組換え４−４ヒト抗体バリアント（抗体構築物）の模式図。単一特異性ＶＬは、同定された４−４  ＶＬ配列を示す。重鎖及び軽鎖定常Ｆｃ領域（ＣＨ２及びＣＨ３）は、それぞれのマウス及びヒトＩｇＧ１に基づいた。二価ＶＬマウスＦｃ融合抗体構築物を、「ＬＣｍＦｃ−Ａｂ」と名付けた。二価ＶＬヒトＦｃ融合抗体構築物を、「ＬＣ−Ａｂ」と名付けた。四価のリンカー接続された二ＶＬヒトＦｃ融合抗体構築物を、「（ＬＣ）２−Ａｂ」と名付けた。四価のＶＬ置換されたＦｖヒトＩｇＧ抗体構築物を、「ＬＣＦｖ−Ａｂ」と名付けた。
【図２Ｂ】産生しそして試験した抗体バリアント（抗体構築物）。プロテインＡアフィニティ精製された組換え４−４抗体バリアント（抗体構築物）のＳＤＳゲル画像。
【図３Ａ】４−４ヒト抗体構築物によるＭＣＬ特異的結合の特徴付け。ＦＡＣＳヒストグラムは、ＡＰＣコンジュゲート化抗マウスＩｇＧ二次抗体によって検出した、種々の細胞に対する種々の濃度の４−４  ＬＣｍＦｃ−Ａｂの結合を示す。未染色の細胞及び二次抗体単独を、陰性コントロールとして使用した。ＪｅＫｏ−１細胞に対する、段階的に滴定したＬＣｍＦｃ−Ａｂ。
【図３Ｂ−１】４−４ヒト抗体構築物によるＭＣＬ特異的結合の特徴付け。ＦＡＣＳヒストグラムは、ＡＰＣコンジュゲート化抗マウスＩｇＧ二次抗体によって検出した、種々の細胞に対する種々の濃度の４−４  ＬＣｍＦｃ−Ａｂの結合を示す。未染色の細胞及び二次抗体単独を、陰性コントロールとして使用した。ＭＣＬ株（ＪｅＫｏ−１、Ｍｉｎｏ、ＭＡＶＥＲ−１、ＮＣＥＢ−１及びＲＥＣ−１）；並びに非ＭＣＬ株［ＨＢＬ−１（ＤＬＢＣＬ）、ＲＬ（ＦＬ）、Ｒａｊｉ（ＢＬ）、ＢＪＡＢ（ＢＬ）及びＪｕｒｋａｔ（Ｔ細胞リンパ腫）］に対する、２００ｎｇのＬＣｍＦｃ−Ａｂ／１０６細胞。
【図３Ｂ−２】４−４ヒト抗体構築物によるＭＣＬ特異的結合の特徴付け。ＦＡＣＳヒストグラムは、ＡＰＣコンジュゲート化抗マウスＩｇＧ二次抗体によって検出した、種々の細胞に対する種々の濃度の４−４  ＬＣｍＦｃ−Ａｂの結合を示す。未染色の細胞及び二次抗体単独を、陰性コントロールとして使用した。ＭＣＬ株（ＪｅＫｏ−１、Ｍｉｎｏ、ＭＡＶＥＲ−１、ＮＣＥＢ−１及びＲＥＣ−１）；並びに非ＭＣＬ株［ＨＢＬ−１（ＤＬＢＣＬ）、ＲＬ（ＦＬ）、Ｒａｊｉ（ＢＬ）、ＢＪＡＢ（ＢＬ）及びＪｕｒｋａｔ（Ｔ細胞リンパ腫）］に対する、２００ｎｇのＬＣｍＦｃ−Ａｂ／１０６細胞。
【図３Ｃ】４−４ヒト抗体構築物によるＭＣＬ特異的結合の特徴付け。ＦＡＣＳヒストグラムは、ＡＰＣコンジュゲート化抗マウスＩｇＧ二次抗体によって検出した、種々の細胞に対する種々の濃度の４−４  ＬＣｍＦｃ−Ａｂの結合を示す。未染色の細胞及び二次抗体単独を、陰性コントロールとして使用した。ＪｅＫｏ−１（ＭＣＬ）並びにＰＢＭＣ精製された正常ヒトＢ及びＴリンパ球、並びにゲーティングされた骨髄系細胞に対する、１０ｎｇのＬＣｍＦｃ−Ａｂ／１０６細胞。
【図４Ａ】点変異によって確認された４−４  ＶＬ結合特異性。相補性決定領域（ＣＤＲ）３の４−４  ＶＬアミノ酸配列。親４−４  ＶＬ（上）は、ＣＤＲ３上のＫａｂａｔで番号付けされた軽鎖アミノ酸残基９１及び９２に対する２つの点変異（Ｗ９１Ａ及びＤ９２Ｓ）を受けて、４−４  ＶＬ変異体（下）になった。
【図４Ｂ】点変異によって確認された４−４  ＶＬ結合特異性。ＪｅＫｏ−１細胞に対する、４−４変異体ＬＣｍＦｃ−Ａｂと比較した４−４  ＬＣｍＦｃ−Ａｂの結合を示すＦＡＣＳヒストグラム。０．１μｇの抗体／１０６細胞を使用し、結合を、ＦＩＴＣコンジュゲート化抗マウスＦｃ二次抗体によって検出した。未染色の細胞及び二次抗体単独を、陰性コントロールとして使用した。
【図５−１】ＭＣＬに特異的に結合する４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物。ＭＣＬ並びに非ＭＣＬのＢ細胞ＮＨＬ及び白血病に対するＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７コンジュゲート化４−４  ＬＣ−Ａｂの結合を示すＦＡＣＳヒストグラム。非ＭＣＬ株には、以下が含まれる：ＲＬ、濾胞性リンパ腫；Ｒａｊｉ及びＲａｍｏｓ、バーキットリンパ腫；ＳＵ−ＤＨＬ−６及びＣＬＩ−ＬＹ３、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫；ＭＥＣ１、慢性リンパ性白血病；ＲＳ４；１１、急性リンパ芽球性白血病。未染色の細胞及びＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７コンジュゲート化アイソタイプ抗体を、コントロールとして使用した。
【図５−２】ＭＣＬに特異的に結合する４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物。ＭＣＬ並びに非ＭＣＬのＢ細胞ＮＨＬ及び白血病に対するＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７コンジュゲート化４−４  ＬＣ−Ａｂの結合を示すＦＡＣＳヒストグラム。非ＭＣＬ株には、以下が含まれる：ＲＬ、濾胞性リンパ腫；Ｒａｊｉ及びＲａｍｏｓ、バーキットリンパ腫；ＳＵ−ＤＨＬ−６及びＣＬＩ−ＬＹ３、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫；ＭＥＣ１、慢性リンパ性白血病；ＲＳ４；１１、急性リンパ芽球性白血病。未染色の細胞及びＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７コンジュゲート化アイソタイプ抗体を、コントロールとして使用した。
【図５−３】ＭＣＬに特異的に結合する４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物。ＭＣＬ並びに非ＭＣＬのＢ細胞ＮＨＬ及び白血病に対するＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７コンジュゲート化４−４  ＬＣ−Ａｂの結合を示すＦＡＣＳヒストグラム。非ＭＣＬ株には、以下が含まれる：ＲＬ、濾胞性リンパ腫；Ｒａｊｉ及びＲａｍｏｓ、バーキットリンパ腫；ＳＵ−ＤＨＬ−６及びＣＬＩ−ＬＹ３、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫；ＭＥＣ１、慢性リンパ性白血病；ＲＳ４；１１、急性リンパ芽球性白血病。未染色の細胞及びＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７コンジュゲート化アイソタイプ抗体を、コントロールとして使用した。
【図６Ａ】４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物は、ＭＣＬに対する特異的細胞傷害性を実証した。クロム−５１（５１Ｃｒ）放出アッセイの結果。特異的溶解は、４−４  ＬＣ−Ａｂの添加あり又はなしで、Ｅ：Ｔ比２０：１におけるエフェクター（Ｅ）ＮＫ細胞による標的（Ｔ）細胞溶解を測定した。百分率は、界面活性剤による完全な細胞溶解を反映し、放出された自発的５１Ｃｒについて補正されている。コントロールは、ＮＫ細胞のみ及び４−４  ＬＣ−Ａｂのみを含んだ。非ＭＣＬ株ＲＬ及びＲａｊｉと比較した、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）株ＪｅＫｏ−１及びＭｉｎｏの特異的溶解。
【図６Ｂ】４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物は、ＭＣＬに対する特異的細胞傷害性を実証した。クロム−５１（５１Ｃｒ）放出アッセイの結果。特異的溶解は、４−４  ＬＣ−Ａｂの添加あり又はなしで、Ｅ：Ｔ比２０：１におけるエフェクター（Ｅ）ＮＫ細胞による標的（Ｔ）細胞溶解を測定した。百分率は、界面活性剤による完全な細胞溶解を反映し、放出された自発的５１Ｃｒについて補正されている。コントロールは、ＮＫ細胞のみ及び４−４  ＬＣ−Ａｂのみを含んだ。４つのＭＣＬ原発性患者サンプルの特異的溶解。
【図６Ｃ】４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物は、ＭＣＬに対する特異的細胞傷害性を実証した。クロム−５１（５１Ｃｒ）放出アッセイの結果。特異的溶解は、４−４  ＬＣ−Ａｂの添加あり又はなしで、Ｅ：Ｔ比２０：１におけるエフェクター（Ｅ）ＮＫ細胞による標的（Ｔ）細胞溶解を測定した。百分率は、界面活性剤による完全な細胞溶解を反映し、放出された自発的５１Ｃｒについて補正されている。コントロールは、ＮＫ細胞のみ及び４−４  ＬＣ−Ａｂのみを含んだ。様々な濃度にわたる、図２Ａ及び２Ｂに示されるヒト抗体バリアントの使用による特異的溶解。
【図７Ａ】４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物は、正常ヒトＢ細胞に対するインビトロ細胞傷害性を実証しなかった。クロム−５１（５１Ｃｒ）放出アッセイの結果。特異的溶解は、Ｅ：Ｔ比２０：１におけるエフェクター（Ｅ）ＮＫ細胞による標的（Ｔ）細胞溶解を測定した。正常Ｂ細胞の特異的溶解を、４−４  ＬＣ  Ａｂ構築物の添加によって決定した。リツキシマブ、抗体単独又はＮＫ細胞単独を、コントロールとして使用した。
【図７Ｂ−１】４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物は、正常ヒトＢ細胞に対するインビトロ細胞傷害性を実証しなかった。ヒトＰＢＭＣを、段階希釈した４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物と共に２４時間インキュベートした。リツキシマブ及び無関係の抗体を、コントロールとして使用した。抗ＣＤ２０−ＡＰＣで染色した、ＰＢＭＣ由来のヒトＢ細胞のＦＡＣＳプロット。
【図７Ｂ−２】４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物は、正常ヒトＢ細胞に対するインビトロ細胞傷害性を実証しなかった。ヒトＰＢＭＣを、段階希釈した４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物と共に２４時間インキュベートした。リツキシマブ及び無関係の抗体を、コントロールとして使用した。抗ＣＤ２０−ＡＰＣで染色した、ＰＢＭＣ由来のヒトＢ細胞のＦＡＣＳプロット。
【図７Ｂ−３】４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物は、正常ヒトＢ細胞に対するインビトロ細胞傷害性を実証しなかった。ヒトＰＢＭＣを、段階希釈した４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物と共に２４時間インキュベートした。リツキシマブ及び無関係の抗体を、コントロールとして使用した。抗ＣＤ２０−ＡＰＣで染色した、ＰＢＭＣ由来のヒトＢ細胞のＦＡＣＳプロット。
【図８Ａ−１】４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物は、ヒト化マウスにおいてＢ細胞枯渇を引き起こさなかった。ＩＶ注射を介して２００μｇ／マウスの単剤抗体治療（４−４  ＬＣ−Ａｂ）を投与したヒト化マウス由来の、抗ＣＤ２０−ＡＰＣゲーティングされたヒトＢ細胞のＦＡＣＳプロット。血液を、抗体治療の−１、１及び３日目に、後眼窩出血によってサンプリングした。ＦＡＣＳプロットは、治療群１つ当たりｎ＝４匹のマウスを代表する。コントロール群には、リツキシマブ又は無関係のコントロール抗体を投与した。
【図８Ａ−２】４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物は、ヒト化マウスにおいてＢ細胞枯渇を引き起こさなかった。ＩＶ注射を介して２００μｇ／マウスの単剤抗体治療（４−４  ＬＣ−Ａｂ）を投与したヒト化マウス由来の、抗ＣＤ２０−ＡＰＣゲーティングされたヒトＢ細胞のＦＡＣＳプロット。血液を、抗体治療の−１、１及び３日目に、後眼窩出血によってサンプリングした。ＦＡＣＳプロットは、治療群１つ当たりｎ＝４匹のマウスを代表する。コントロール群には、リツキシマブ又は無関係のコントロール抗体を投与した。
【図８Ｂ】４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物は、ヒト化マウスにおいてＢ細胞枯渇を引き起こさなかった。コントロールＡｂ群と比較した、各治療群におけるＣＤ４５ゲーティングされたヒト白血球中のＣＤ２０＋Ｂ細胞のパーセントの平均及び標準偏差を示す折れ線グラフ。
【図９Ａ】ＭＣＬ特異的抗体構築物の生物学的機能のインビボ特徴付け。ＭＣＬモデルにおける４−４抗体構築物治療の治療スケジュール。ＮＳＧマウスに、最小致死用量の腫瘍細胞をＩＶチャレンジし、ｎ＝５匹の群へとランダム化した。各マウスに、１０×１０６個のＮＫ細胞及び５×１０４ＩＵのＩＬ２と共に、抗体の６００μＬ  ＩＶ注射を投与した。コントロールマウスには、ＰＢＳ又はＮＫ細胞単独を投与した。治療は、３、８、１３及び１８日目に行った。腫瘍細胞を、生物発光画像化を使用して腫瘍成長をモニタリングできるようにする赤色ルシフェラーゼを発現するように操作した。
【図９Ｂ】ＭＣＬ特異的抗体構築物の生物学的機能のインビボ特徴付け。抗体構築物治療後のＭＣＬ腫瘍異種移植マウスにおける腫瘍の生物発光画像。実験群は、Ｚ−１３８イブルチニブ耐性ＭＣＬモデルにおける治療１回当たり３００μｇ〜６００μｇの４−４  ＬＣ−Ａｂ投薬効果を比較した。腫瘍チャレンジの１３、１７、２０、２８、４１及び９０日後に撮影した画像が示される。
【図９Ｃ】ＭＣＬ特異的抗体構築物の生物学的機能のインビボ特徴付け。抗体構築物治療後のＭＣＬ腫瘍異種移植マウスにおける腫瘍の生物発光画像。実験群は、Ｚ−１３８イブルチニブ耐性ＭＣＬモデルにおける４−４  ＬＣ−Ａｂ対４−４  ＬＣＦｖ−Ａｂ構築物の３００μｇ抗体治療を比較した。腫瘍チャレンジの１４、２４、３４、５０、７０及び８０日後の画像が示される。
【図９Ｄ】ＭＣＬ特異的抗体構築物の生物学的機能のインビボ特徴付け。抗体構築物治療後のＭＣＬ腫瘍異種移植マウスにおける腫瘍の生物発光画像。実験群は、ＪｅＫｏ−１−ＣＤ２０−ＫＯリツキシマブ耐性ＭＣＬモデルにおける４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物対４−４  ＬＣＦｖ−Ａｂ構築物の３００μｇ抗体治療を比較した。腫瘍チャレンジの１５、２６、３８、５０、７０及び９０日後の画像が示される。さらなるリツキシマブ陰性コントロールを追加した。
【図９Ｅ】ＭＣＬ特異的抗体構築物の生物学的機能のインビボ特徴付け。９０日間にわたって追跡した、４−４抗体構築物で治療した腫瘍異種移植マウスについての無腫瘍生存曲線。＊＊Ｐ＜０．００１。実験群は、Ｚ−１３８イブルチニブ耐性ＭＣＬモデルにおける治療１回当たり３００μｇ〜６００μｇの４−４  ＬＣ−Ａｂ投薬効果を比較した。腫瘍チャレンジの１３、１７、２０、２８、４１及び９０日後に撮影した画像が示される。
【図９Ｆ】ＭＣＬ特異的抗体構築物の生物学的機能のインビボ特徴付け。９０日間にわたって追跡した、４−４抗体構築物で治療した腫瘍異種移植マウスについての全生存曲線。＊＊Ｐ＜０．００１。実験群は、Ｚ−１３８イブルチニブ耐性ＭＣＬモデルにおける４−４  ＬＣ−Ａｂ対４−４  ＬＣＦｖ−Ａｂ構築物の３００μｇ抗体治療を比較した。腫瘍チャレンジの１４、２４、３４、５０、７０及び８０日後の画像が示される。
【図９Ｇ】ＭＣＬ特異的抗体構築物の生物学的機能のインビボ特徴付け。９０日間にわたって追跡した、４−４抗体構築物で治療した腫瘍異種移植マウスについての無腫瘍生存曲線。＊＊Ｐ＜０．００１。実験群は、ＪｅＫｏ−１−ＣＤ２０−ＫＯリツキシマブ耐性ＭＣＬモデルにおける４−４  ＬＣ−Ａｂ構築物対４−４  ＬＣＦｖ−Ａｂ構築物の３００μｇ抗体治療を比較した。腫瘍チャレンジの１５、２６、３８、５０、７０及び９０日後の画像が示される。さらなるリツキシマブ陰性コントロールを追加した。
【図９Ｈ】ＭＣＬ特異的抗体構築物の生物学的機能のインビボ特徴付け。９０日間にわたって追跡した、４−４抗体構築物で治療した腫瘍異種移植マウスについての全生存曲線。＊＊Ｐ＜０．００１。
【図９Ｉ】ＭＣＬ特異的抗体構築物の生物学的機能のインビボ特徴付け。９０日間にわたって追跡した、４−４抗体構築物で治療した腫瘍異種移植マウスについての無腫瘍生存曲線。＊＊Ｐ＜０．００１。
【図９Ｊ】ＭＣＬ特異的抗体構築物の生物学的機能のインビボ特徴付け。９０日間にわたって追跡した、４−４抗体構築物で治療した腫瘍異種移植マウスについての全生存曲線。＊＊Ｐ＜０．００１。
【図１０−１】図２Ａに示される抗体構築物をコードする発現ベクター。
【図１０−２】図２Ａに示される抗体構築物をコードする発現ベクター。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明の種々の実施形態及び態様が、本明細書に示され記載されているが、かかる実施形態及び態様が、例として提供されているに過ぎないことが、当業者に明らかである。多数のバリエーション、変化及び置換が、本発明から逸脱することなく、当業者にここで明らかである。本明細書に記載される発明の実施形態に対する種々の代替が、本発明を実施する際に使用され得ることを理解すべきである。
【００１８】
本明細書で使用されるセクション見出しは、構成上の目的のためのものに過ぎず、記載される主題を限定すると解釈すべきではない。特許、特許出願、論文、書籍、マニュアル及び専門書が含まれるがこれらに限定されない、本出願で引用された全ての文書又は文書の部分は、それらの全体を任意の目的のために参照により本明細書に明示的に組み込む。
【００１９】
本明細書で使用される略号は、化学的技術及び生物学的技術の範囲内の、それらの従来の意味を有する。本明細書に示される化学構造及び式は、化学的技術において公知の化学結合価の標準的なルールに従って構成される。
【００２０】
特に定義がない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は、当業者が一般に理解する意味と同じ意味を有する。例えば、Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎら、ＤＩＣＴＩＯＮＡＲＹ  ＯＦ  ＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹ  ＡＮＤ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ  第２版、Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ  １９９４）；Ｓａｍｂｒｏｏｋら、ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＣＬＯＮＩＮＧ、Ａ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇｓ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇｓ  Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ  １９８９）を参照のこと。本明細書に記載されるものと類似又は等価な任意の方法、デバイス及び材料が、本発明の実施において使用できる。以下の定義は、本明細書で頻繁に使用される特定の用語の理解を促進するために提供されるのであって、本開示の範囲を限定することを意味しない。
【００２１】
置換基が、左から右へと書かれたそれらの従来の化学式によって特定される場合、これらは、右から左へと構造を書くことから生じる化学的に同一な置換基を等しく包含し、例えば、−ＣＨ２Ｏ−は、−ＯＣＨ２−と等しい。
【００２２】
用語「アルキル」は、それ自体で、又は別の置換基の一部として、特に記載がない限り、完全飽和、モノ不飽和又はポリ不飽和であり得、指定された数の炭素原子（即ち、Ｃ１〜Ｃ１０は、０〜１０個の炭素を意味する）を有する二価及び多価の基を含み得る、直鎖（即ち、非分枝鎖）若しくは分枝鎖非環式炭素鎖（若しくは炭素）又はそれらの組み合わせを意味する。飽和炭化水素基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、（シクロヘキシル）メチル、例えば、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチルなどの同族体及び異性体のような基が含まれるがこれらに限定されない。不飽和アルキル基は、１つ以上の二重結合又は三重結合を有するアルキル基であり得る。不飽和アルキル基の例には、ビニル、２−プロペニル、クロチル、２−イソペンテニル、２−（ブタジエニル）、２，４−ペンタジエニル、３−（１，４−ペンタジエニル）、エチニル、１−及び３−プロピニル、３−ブチニル、並びに高級同族体及び異性体が含まれるがこれらに限定されない。アルコキシは、酸素リンカー（−Ｏ−）を介して分子の残部に結合されたアルキルである。アルキル部分は、アルケニル部分であり得る。アルキル部分は、アルキニル部分であり得る。アルキル部分は、完全飽和であり得る。
【００２３】
用語「アルキレン」は、それ自体で、又は別の置換基の一部として、特に記載がない限り、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−によって例示されるがこれに限定されない、アルキルに由来する二価の基を意味する。典型的には、アルキル（又はアルキレン）基は、１〜２４個の炭素原子を有し、１０個以下の炭素原子を有する基が、本発明において好ましい。「低級アルキル」又は「低級アルキレン」は、一般には８個以下の炭素原子を有する、より短い鎖のアルキル又はアルキレン基である。用語「アルケニレン」は、それ自体で、又は別の置換基の一部として、特に記載がない限り、アルケンに由来する二価の基を意味する。
【００２４】
用語「ヘテロアルキル」は、それ自体で、又は別の用語と組み合わせて、特に記載がない限り、少なくとも１つの炭素原子及び少なくとも１つのヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｐ、Ｓｉ又はＳ）を含む、安定な非環式直鎖若しくは分枝鎖、又はそれらの組み合わせを意味し、ここで、これらの窒素原子及び硫黄原子は、任意選択的に酸化され得、窒素ヘテロ原子は、任意選択的に四級化され得る。ヘテロ原子（複数可）Ｏ、Ｎ、Ｐ、Ｓ及びＳｉは、ヘテロアルキル基の任意の内部位置に、又はアルキル基が分子の残部に結合する位置に、配置され得る。例には、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２、−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｏ−ＣＨ３、−Ｓｉ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｎ−ＯＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−Ｏ−ＣＨ３、−Ｏ−ＣＨ−２−ＣＨ３、及び−ＣＮが含まれるがこれらに限定されない。最大で２つ又は３つのヘテロ原子が、例えば、−ＣＨ２−ＮＨ−ＯＣＨ３及び−ＣＨ２−Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ３）３のように、連続してもよい。ヘテロアルキル部分は、１つのヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。ヘテロアルキル部分は、２つの任意選択的に異なるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。ヘテロアルキル部分は、３つの任意選択的に異なるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。ヘテロアルキル部分は、４つの任意選択的に異なるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。ヘテロアルキル部分は、５つの任意選択的に異なるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。ヘテロアルキル部分は、最大で８つの任意選択的に異なるヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。
【００２５】
同様に、用語「ヘテロアルキレン」は、それ自体で、又は別の置換基の一部として、特に記載がない限り、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−及び−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−によって例示されるがこれらに限定されない、ヘテロアルキルに由来する二価の基を意味する。ヘテロアルキレン基について、ヘテロ原子は、鎖末端のいずれか又は両方を占有することもできる（例えば、アルキレンオキシ、アルキレンジオキシ、アルキレンアミノ、アルキレンジアミノなど）。なおさらに、アルキレン及びヘテロアルキレン連結基について、連結基の配向が、連結基の式が書かれる方向によって暗示されることはない。例えば、式−Ｃ（Ｏ）２Ｒ’−は、−Ｃ（Ｏ）２Ｒ’−及び−Ｒ’Ｃ（Ｏ）２−の両方を示す。上記のように、ヘテロアルキル基には、本明細書で使用する場合、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＯＲ’、−ＳＲ’及び／又は−ＳＯ２Ｒ’のような、ヘテロ原子を介して分子の残部に結合された基が含まれる。「ヘテロアルキル」が列挙され、その後に、−ＮＲ’Ｒ’’などのような具体的なヘテロアルキル基の列挙が続く場合、ヘテロアルキル及び−ＮＲ’Ｒ’’という用語は、冗長でも相互排他的でもないことが理解される。むしろ、具体的なヘテロアルキル基は、明確さを付け加えるために列挙される。したがって、用語「ヘテロアルキル」は、本明細書では、−ＮＲ’Ｒ’’などのような具体的なヘテロアルキル基を排除すると解釈すべきではない。
【００２６】
用語「シクロアルキル」及び「ヘテロシクロアルキル」は、それら自体で、又は他の用語と組み合わせて、特に記載がない限り、それぞれ、「アルキル」及び「ヘテロアルキル」の非芳香族環式バージョンを意味し、ここで、環（単数又は複数）を構成する炭素は、非水素原子との結合に参加する全ての炭素結合価に起因して、必ずしも水素に結合している必要はない。さらに、ヘテロシクロアルキルについて、ヘテロ原子は、複素環が分子の残部に結合される位置を占有し得る。シクロアルキルの例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−シクロヘキセニル、３−シクロヘキセニル、シクロヘプチル、３−ヒドロキシ−シクロブト−３−エニル−１，２−ジオン、１Ｈ−１，２，４−トリアゾリル−５（４Ｈ）−オン、４Ｈ−１，２，４−トリアゾリルなどが含まれるがこれらに限定されない。ヘテロシクロアルキルの例には、１−（１，２，５，６−テトラヒドロピリジル）、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−モルホリニル、３−モルホリニル、テトラヒドロフラン−２−イル、テトラヒドロフラン−３−イル、テトラヒドロチエン−２−イル、テトラヒドロチエン−３−イル、１−ピペラジニル、２−ピペラジニルなどが含まれるがこれらに限定されない。「シクロアルキレン」及び「ヘテロシクロアルキレン」は、単独で、又は別の置換基の一部として、それぞれシクロアルキル及びヘテロシクロアルキルに由来する二価の基を意味する。ヘテロシクロアルキル部分は、１つの環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。ヘテロシクロアルキル部分は、２つの任意選択的に異なる環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。ヘテロシクロアルキル部分は、３つの任意選択的に異なる環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。ヘテロシクロアルキル部分は、４つの任意選択的に異なる環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。ヘテロシクロアルキル部分は、５つの任意選択的に異なる環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。ヘテロシクロアルキル部分は、最大で８つの任意選択的に異なる環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｉ又はＰ）を含み得る。
【００２７】
用語「ハロ」又は「ハロゲン」は、それら自体で、又は別の置換基の一部として、特に記載がない限り、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素原子を意味する。さらに、「ハロアルキル」のような用語は、モノハロアルキル及びポリハロアルキルを含むことを意味する。例えば、用語「ハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル」には、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピルなどが含まれるがこれらに限定されない。
【００２８】
用語「アシル」は、特に記載がない限り、−Ｃ（Ｏ）Ｒを意味し、ここで、Ｒは、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール、又は置換若しくは非置換のヘテロアリールである。
【００２９】
用語「アリール」は、特に記載がない限り、単一の環、又は互いに縮合された（即ち、縮合環アリール）若しくは共有結合された複数の環（好ましくは、１〜３つの環）であり得る、ポリ不飽和の芳香族炭化水素置換基を意味する。縮合環アリールとは、縮合した環のうち少なくとも１つがアリール環である、互いに縮合された複数の環を指す。用語「ヘテロアリール」とは、Ｎ、Ｏ又はＳのような少なくとも１つのヘテロ原子を含むアリール基（又は環）を指し、ここで、窒素原子及び硫黄原子は、任意選択的に酸化され、窒素原子（複数可）は、任意選択的に四級化される。したがって、用語「ヘテロアリール」は、縮合環ヘテロアリール基（即ち、縮合した環のうち少なくとも１つが複素芳香族環である、互いに縮合された複数の環）を含む。５，６−縮合環ヘテロアリーレンとは、互いに縮合された２つの環を指し、ここで、一方の環は５員を有し、他方の環は６員を有し、少なくとも１つの環は、ヘテロアリール環である。同様に、６，６−縮合環ヘテロアリーレンとは、互いに縮合された２つの環を指し、ここで、一方の環は６員を有し、他方の環は６員を有し、少なくとも１つの環は、ヘテロアリール環である。そして、６，５−縮合環ヘテロアリーレンとは、互いに縮合された２つの環を指し、ここで、一方の環は６員を有し、他方の環は５員を有し、少なくとも１つの環は、ヘテロアリール環である。ヘテロアリール基は、炭素又はヘテロ原子を介して分子の残部に結合され得る。アリール及びヘテロアリール基の非限定的な例には、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−ビフェニル、１−ピロリル、２−ピロリル、３−ピロリル、３−ピラゾリル、２−イミダゾリル、４−イミダゾリル、ピラジニル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリル、２−フェニル−４−オキサゾリル、５−オキサゾリル、３−イソオキサゾリル、４−イソオキサゾリル、５−イソオキサゾリル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−フリル、３−フリル、２−チエニル、３−チエニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、５−ベンゾチアゾリル、プリニル、２−ベンゾイミダゾリル、５−インドリル、１−イソキノリル、５−イソキノリル、２−キノキサリニル、５−キノキサリニル、３−キノリル、及び６−キノリルが含まれる。上記アリール及びヘテロアリール環系の各々についての置換基は、以下に記載される許容される置換基の群から選択される。「アリーレン」及び「ヘテロアリーレン」は、単独で、又は別の置換基の一部として、それぞれアリール及びヘテロアリールに由来する二価の基を意味する。アリール及びヘテロアリール基の非限定的な例には、ピリジニル、ピリミジニル、チオフェニル、チエニル、フラニル、インドリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキサニル、チアナフタニル、ピロロピリジニル、インダゾリル、キノリニル、キノキサリニル、ピリドピラジニル、キナゾリノニル、ベンゾイソオキサゾリル、イミダゾピリジニル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾチオフェニル、フェニル、ナフチル、ビフェニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、フリルチエニル、ピリジル、ピリミジル、ベンゾチアゾリル、プリニル、ベンゾイミダゾリル、イソキノリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピロリル、ジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ベンゾチアジアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾロピリミジニル、ピロロピリミジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリル、又はキノリルが含まれる。上記例は、置換又は非置換であり得、上記各ヘテロアリールの例の二価の基は、ヘテロアリーレンの非限定的な例である。ヘテロアリール部分は、１つの環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ又はＳ）を含み得る。ヘテロアリール部分は、２つの任意選択的に異なる環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ又はＳ）を含み得る。ヘテロアリール部分は、３つの任意選択的に異なる環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ又はＳ）を含み得る。ヘテロアリール部分は、４つの任意選択的に異なる環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ又はＳ）を含み得る。ヘテロアリール部分は、５つの任意選択的に異なる環ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ又はＳ）を含み得る。アリール部分は、単一の環を有し得る。アリール部分は、２つの任意選択的に異なる環を有し得る。アリール部分は、３つの任意選択的に異なる環を有し得る。アリール部分は、４つの任意選択的に異なる環を有し得る。ヘテロアリール部分は、１つの環を有し得る。ヘテロアリール部分は、２つの任意選択的に異なる環を有し得る。ヘテロアリール部分は、３つの任意選択的に異なる環を有し得る。ヘテロアリール部分は、４つの任意選択的に異なる環を有し得る。ヘテロアリール部分は、５つの任意選択的に異なる環を有し得る。
【００３０】
縮合環ヘテロシクロアルキル−アリールは、ヘテロシクロアルキルに縮合されたアリールである。縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロアリールは、ヘテロシクロアルキルに縮合されたヘテロアリールである。縮合環ヘテロシクロアルキル−シクロアルキルは、シクロアルキルに縮合されたヘテロシクロアルキルである。縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロシクロアルキルは、別のヘテロシクロアルキルに縮合されたヘテロシクロアルキルである。縮合環ヘテロシクロアルキル−アリール、縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロアリール、縮合環ヘテロシクロアルキル−シクロアルキル又は縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロシクロアルキルは、各々独立して、非置換である、又は本明細書に記載される置換基の１つ以上で置換され得る。
【００３１】
用語「オキソ」は、本明細書で使用する場合、炭素原子に二重結合した酸素を意味する。
【００３２】
用語「アルキルスルホニル」は、本明細書で使用する場合、式−Ｓ（Ｏ２）−Ｒ’を有する部分を意味し、ここで、Ｒ’は、上に定義されたような、置換又は非置換のアルキル基である。Ｒ’は、特定された数の炭素を有し得る（例えば、「Ｃ１〜Ｃ４アルキルスルホニル」）。
【００３３】
上記用語の各々（例えば、「アルキル」、「ヘテロアルキル」、「シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」及び「ヘテロアリール」）は、示された基の置換形態及び非置換形態の両方を含む。各型の基についての好ましい置換基は、以下に提供される。
【００３４】
アルキル及びヘテロアルキル基（アルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニル及びヘテロシクロアルケニルとしばしば呼ばれる基を含む）についての置換基は、ゼロから（２ｍ’＋１）の範囲の数の、−ＯＲ’、＝Ｏ、＝ＮＲ’、＝Ｎ−ＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＳＲ’、−ハロゲン、−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、−ＮＲ−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）（’Ｒ’’−ＮＲＳＯ２Ｒ’）、−ＣＮ及び−ＮＯ２から選択されるがこれらに限定されない種々の基の１つ以上であり得、ここで、ｍ’は、アルキル及びヘテロアルキル基中の炭素原子の総数である。Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’は各々、好ましくは独立して、水素、置換若しくは非置換のヘテロアルキル、置換若しくは非置換のシクロアルキル、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換若しくは非置換のアリール（例えば、１〜３つのハロゲンで置換されたアリール）、置換若しくは非置換のアルキル、アルコキシ若しくはチオアルコキシ基、又はアリールアルキル基を指す。例えば、本発明の化合物が１つよりも多いＲ基を含む場合、Ｒ基の各々は独立して選択され、同様に、各Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’基は、それらの基の１つよりも多くが存在する場合、独立して選択される。Ｒ’及びＲ’’が同じ窒素原子に結合される場合、これらは、窒素原子と組み合わさって、４、５、６又は７員環を形成できる。例えば、−ＮＲ’Ｒ’’には、１−ピロリジニル及び４−モルホリニルが含まれるがこれらに限定されない。置換基の上記議論から、当業者は、用語「アルキル」が、ハロアルキル（例えば、−ＣＦ３及び−ＣＨ２ＣＦ３）及びアシル（例えば、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＦ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣＨ３など）のような、水素基以外の基に結合した炭素原子を含む基を含む意味であることを理解するはずである。
【００３５】
アルキル基について記載された置換基と同様に、アリール及びヘテロアリール基についての置換基は様々であり、例えば、ゼロから芳香族環系上の開放原子価（ｏｐｅｎ  ｖａｌｅｎｃｅ）の総数の範囲の数の、−ＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＳＲ’、−ハロゲン、−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、ＮＲＣ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）（Ｒ’’，−ＮＲＳＯ２Ｒ’）、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｒ’、−Ｎ３、−ＣＨ（Ｐｈ）２、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ及びフルオロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルから選択される；ここで、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’は、好ましくは独立して、水素、置換又は非置換のアルキル、置換又は非置換のヘテロアルキル、置換又は非置換のシクロアルキル、置換又は非置換のヘテロシクロアルキル、置換又は非置換のアリール及び置換又は非置換のヘテロアリールから選択される。例えば、本発明の化合物が１つよりも多いＲ基を含む場合、Ｒ基の各々は独立して選択され、同様に、各Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’基は、それらの基の１つよりも多くが存在する場合、独立して選択される。
【００３６】
ある部分がＲ置換基で置換されている場合、その基は、「Ｒ置換されている（Ｒ置換された）」と言われ得る。ある部分がＲ置換されている場合、この部分は、少なくとも１つのＲ置換基で置換され、各Ｒ置換基は、任意選択的に異なる。例えば、本明細書のある部分が、Ｒ１Ａ置換された又は非置換のアルキルである場合、複数のＲ１Ａ置換基が、アルキル部分に結合され得、ここで、各Ｒ１Ａ置換基は、任意選択的に異なる。Ｒ置換された部分が、複数のＲ置換基で置換されている場合、これらＲ置換基の各々は、Ｒ’、Ｒ’’などのように、プライム記号（’）を使用して、本明細書で識別され得る。例えば、ある部分が、Ｒ３Ａ置換された又は非置換のアルキルであり、この部分が、複数のＲ３Ａ置換基で置換されている場合、これら複数のＲ３Ａ置換基は、Ｒ３Ａ’、Ｒ３Ａ’’、Ｒ３Ａ’’’などとして識別され得る。一部の実施形態では、Ｒ置換基の複数性は、３である。
【００３７】
２つ以上の置換基が、任意選択的に連結されて、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基を形成し得る。かかるいわゆる環形成性置換基は、典型的には、必ずではないが、環式基礎構造に結合された形で見出される。一実施形態では、環形成性置換基は、基礎構造の隣接する員に結合されている。例えば、環式基礎構造の隣接する員に結合された２つの環形成性置換基は、縮合環構造を創出する。別の実施形態では、環形成性置換基は、基礎構造の単一の員に結合されている。例えば、環式基礎構造の単一の員に結合された２つの環形成性置換基は、スピロ環式構造を創出する。なお別の実施形態では、環形成性置換基は、基礎構造の隣接しない員に結合されている。
【００３８】
アリール又はヘテロアリール環の隣接原子上の２つの置換基は、任意選択的に、式−Ｔ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＲＲ’）ｑ−Ｕ−の環を形成し得、ここで、Ｔ及びＵは独立して、−ＮＲ−、−Ｏ−、−ＣＲＲ’−又は単結合であり、ｑは、０〜３の整数である。あるいは、アリール又はヘテロアリール環の隣接原子上の２つの置換基は、任意選択的に、式−Ａ−（ＣＨ２）ｒ−Ｂ−の置換基で置き換えられ得、ここで、Ａ及びＢは独立して、−ＣＲＲ’−、−Ｏ−、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−又は単結合であり、ｒは、１〜４の整数である。そうして形成された新たな環の単結合の１つは、任意選択的に、二重結合で置き換えられ得る。あるいは、アリール又はヘテロアリール環の隣接原子上の２つの置換基は、任意選択的に、式−（ＣＲＲ’）ｓ−Ｘ’−（Ｃ’’Ｒ’’Ｒ’’’）ｄ−の置換基で置き換えられ得、ここで、変数ｓ及びｄは独立して、０〜３の整数であり、Ｘ’は、−Ｏ−、−ＮＲ’−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−又は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−である。置換基Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’及びＲ’’’は、好ましくは独立して、水素、置換又は非置換のアルキル、置換又は非置換のヘテロアルキル、置換又は非置換のシクロアルキル、置換又は非置換のヘテロシクロアルキル、置換又は非置換のアリール及び置換又は非置換のヘテロアリールから選択される。
【００３９】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロ原子」又は「環ヘテロ原子」は、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、リン（Ｐ）及びケイ素（Ｓｉ）を含む意味である。
【００４０】
「置換基」は、本明細書で使用する場合、以下の部分から選択される基を意味する：
（Ａ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリール、並びに
（Ｂ）以下から選択される少なくとも１つの置換基で置換された、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール：
（ｉ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリール、及び
（ｉｉ）以下から選択される少なくとも１つの置換基で置換された、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール：
（ａ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリール、及び
（ｂ）以下から選択される少なくとも１つの置換基で置換された、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール：オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリール。
【００４１】
「化学的リンカー」は、本明細書で提供される場合、共有結合リンカー、非共有結合リンカー、ペプチドリンカー（ペプチド部分を含むリンカー）、切断可能なペプチドリンカー、置換若しくは非置換のアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロアルキレン、置換若しくは非置換のシクロアルキレン、置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換若しくは非置換のアリーレン又は置換若しくは非置換のヘテロアリーレン、又はそれらの任意の組み合わせである。したがって、本明細書で提供される化学的リンカーは、複数の化学的部分を含み得、ここで、これら複数の化学的部分の各々は、化学的に異なる。あるいは、化学的リンカーは、非共有結合リンカーであり得る。非共有結合リンカーの例には、イオン結合、水素結合、ハロゲン結合、ファンデルワールス相互作用（例えば、双極子−双極子、双極子誘導性双極子、ロンドン分散）、環スタッキング（パイ効果）及び疎水性相互作用が含まれるがこれらに限定されない。実施形態では、化学的リンカーは、求核置換（例えば、アミン及びアルコールの、アシルハライド、活性エステルとの反応）、求電子置換（例えば、エナミン反応）並びに炭素−炭素及び炭素−ヘテロ原子多重結合への付加（例えば、マイケル反応、ディールス・アルダー付加）が含まれるがこれらに限定されないコンジュゲート化学反応を使用して形成される。
【００４２】
「サイズ制限された置換基（ｓｉｚｅ‐ｌｉｍｉｔｅｄ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ）」又は「サイズ制限された置換基（ｓｉｚｅ‐ｌｉｍｉｔｅｄ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ  ｇｒｏｕｐ）」は、本明細書で使用する場合、「置換基」について上記された置換基の全てから選択される基を意味し、ここで、各置換又は非置換のアルキルは、置換又は非置換のＣ１〜Ｃ２０アルキルであり、各置換又は非置換のヘテロアルキルは、置換又は非置換の２〜２０員のヘテロアルキルであり、各置換又は非置換のシクロアルキルは、置換又は非置換のＣ３〜Ｃ８シクロアルキルであり、各置換又は非置換のヘテロシクロアルキルは、置換又は非置換の３〜８員のヘテロシクロアルキルであり、各置換又は非置換のアリールは、置換又は非置換のＣ６〜Ｃ１０アリールであり、各置換又は非置換のヘテロアリールは、置換又は非置換の５〜１０員のヘテロアリールである。
【００４３】
「低級置換基（ｌｏｗｅｒ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ）」又は「低級置換基（ｌｏｗｅｒ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ  ｇｒｏｕｐ）」、本明細書で使用する場合、「置換基」について上記された置換基の全てから選択される基を意味し、ここで、各置換又は非置換のアルキルは、置換又は非置換のＣ１〜Ｃ８アルキルであり、各置換又は非置換のヘテロアルキルは、置換又は非置換の２〜８員のヘテロアルキルであり、各置換又は非置換のシクロアルキルは、置換又は非置換のＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり、各置換又は非置換のヘテロシクロアルキルは、置換又は非置換の３〜７員のヘテロシクロアルキルであり、各置換又は非置換のアリールは、置換又は非置換のＣ６〜Ｃ１０アリールであり、各置換又は非置換のヘテロアリールは、置換又は非置換の５〜９員のヘテロアリールである。
【００４４】
一部の実施形態では、本明細書の化合物中に記載される各置換された基は、少なくとも１つの置換基で置換される。より具体的には、一部の実施形態では、本明細書の化合物中に記載される各置換されたアルキル、置換されたヘテロアルキル、置換されたシクロアルキル、置換されたヘテロシクロアルキル、置換されたアリール、置換されたヘテロアリール、置換されたアルキレン、置換されたヘテロアルキレン、置換されたシクロアルキレン、置換されたヘテロシクロアルキレン、置換されたアリーレン及び／又は置換されたヘテロアリーレンは、少なくとも１つの置換基で置換される。他の実施形態では、これらの基の少なくとも１つ又は全ては、少なくとも１つのサイズ制限された置換基で置換される。他の実施形態では、これらの基の少なくとも１つ又は全ては、少なくとも１つの低級置換基で置換される。
【００４５】
本明細書の化合物の他の実施形態では、各置換若しくは非置換のアルキルは、置換若しくは非置換のＣ１〜Ｃ２０アルキルであり得、各置換若しくは非置換のヘテロアルキルは、置換若しくは非置換の２〜２０員のヘテロアルキルであり、各置換若しくは非置換のシクロアルキルは、置換若しくは非置換のＣ３〜Ｃ８シクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキルは、置換若しくは非置換の３〜８員のヘテロシクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のアリールは、置換若しくは非置換のＣ６〜Ｃ１０アリールであり、及び／又は各置換若しくは非置換のヘテロアリールは、置換若しくは非置換の５〜１０員のヘテロアリールである。本明細書の化合物の一部の実施形態では、各置換若しくは非置換のアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ１〜Ｃ２０アルキレンであり、各置換若しくは非置換のヘテロアルキレンは、置換若しくは非置換の２〜２０員のヘテロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のシクロアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ３〜Ｃ８シクロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレンは、置換若しくは非置換の３〜８員のヘテロシクロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のアリーレンは、置換若しくは非置換のＣ６〜Ｃ１０アリーレンであり、及び／又は各置換若しくは非置換のヘテロアリーレンは、置換若しくは非置換の５〜１０員のヘテロアリーレンである。
【００４６】
一部の実施形態では、各置換若しくは非置換のアルキルは、置換若しくは非置換のＣ１〜Ｃ８アルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロアルキルは、置換若しくは非置換の２〜８員のヘテロアルキルであり、各置換若しくは非置換のシクロアルキルは、置換若しくは非置換のＣ３〜Ｃ７シクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキルは、置換若しくは非置換の３〜７員のヘテロシクロアルキルであり、各置換若しくは非置換のアリールは、置換若しくは非置換のＣ６〜Ｃ１０アリールであり、及び／又は各置換若しくは非置換のヘテロアリールは、置換若しくは非置換の５〜９員のヘテロアリールである。一部の実施形態では、各置換若しくは非置換のアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ１〜Ｃ８アルキレンであり、各置換若しくは非置換のヘテロアルキレンは、置換若しくは非置換の２〜８員のヘテロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のシクロアルキレンは、置換若しくは非置換のＣ３〜Ｃ７シクロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のヘテロシクロアルキレンは、置換若しくは非置換の３〜７員のヘテロシクロアルキレンであり、各置換若しくは非置換のアリーレンは、置換若しくは非置換のＣ６〜Ｃ１０アリーレンであり、及び／又は各置換若しくは非置換のヘテロアリーレンは、置換若しくは非置換の５〜９員のヘテロアリーレンである。一部の実施形態では、化合物は、以下の実施例のセクション、図面又は表に示される化学種である。
【００４７】
本明細書で使用する場合、用語「コンジュゲート」とは、原子間又は分子間の会合を指す。この会合は、直接的又は間接的であり得る。例えば、核酸とタンパク質との間のコンジュゲートは、例えば共有結合によって直接的であり得、又は例えば、非共有結合（例えば、静電相互作用（例えば、イオン結合、水素結合、ハロゲン結合）、ファンデルワールス相互作用（例えば、双極子−双極子、双極子誘導性双極子、ロンドン分散）、環スタッキング（パイ効果）、疎水性相互作用など）によって間接的であり得る。実施形態では、コンジュゲートは、求核置換（例えば、アミン及びアルコールの、アシルハライド、活性エステルとの反応）、求電子置換（例えば、エナミン反応）並びに炭素−炭素及び炭素−ヘテロ原子多重結合への付加（例えば、マイケル反応、ディールス・アルダー付加）が含まれるがこれらに限定されないコンジュゲート化学反応を使用して形成される。これら及び他の有用な反応は、例えば、Ｍａｒｃｈ、ＡＤＶＡＮＣＥＤ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ、第３版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９８５；Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ、ＢＩＯＣＯＮＪＵＧＡＴＥ  ＴＥＣＨＮＩＱＵＥＳ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、１９９６；及びＦｅｅｎｅｙら、ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮ  ＯＦ  ＰＲＯＴＥＩＮＳ；Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｓｅｒｉｅｓ、第１９８巻、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．、１９８２で議論されている。
【００４８】
本明細書でコンジュゲート化学（当該分野で公知の「クリックケミストリー」を含む）のために使用される有用な反応性部分又は官能基には、例えば以下が含まれる：
（ａ）Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、Ｎ−ヒドロキシベンズトリアゾール（Ｎ−ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｔｒｉａｚｏｌｅ）エステル、酸ハライド、アシルイミダゾール、チオエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、アルキル、アルケニル、アルキニル及び芳香族エステルが含まれるがこれらに限定されない、カルボキシル基及びそれらの種々の誘導体；
（ｂ）エステル、エーテル、アルデヒドなどに変換され得る、ヒドロキシル基
（ｃ）ハライドが、例えば、アミン、カルボン酸アニオン、チオールアニオン、カルボアニオン又はアルコキシドイオンのような求核基によって後に置き換えられ得、それによって、ハロゲン原子の部位における新たな基の共有結合を生じる、ハロアルキル基；
（ｄ）例えば、マレイミド基のような、ディールス・アルダー反応に参加することが可能な求ジエン体基；
（ｅ）引き続く誘導体化が、例えば、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾン若しくはオキシムのようなカルボニル誘導体の形成を介して、又はグリニャール付加若しくはアルキルリチウム付加などの機構を介して可能なような、アルデヒド又はケトン基；
（ｆ）例えば、スルホンアミドを形成するための、アミンとの引き続く反応のための、スルホニルハライド基；
（ｇ）ジスルフィドに変換され得、アシルハライドと反応され得、又は金のような金属に結合され得る、チオール基；
（ｈ）例えば、アシル化、アルキル化又は酸化され得る、アミン又はスルフヒドリル基；
（ｉ）例えば、環化付加、アシル化、マイケル付加などを受け得る、アルケン；
（ｊ）例えば、アミン及びヒドロキシル化合物と反応し得る、エポキシド；
（ｋ）核酸合成において有用なホスホラミダイト及び他の標準的な官能基；
（ｌ）金属酸化ケイ素結合；
（ｍ）例えば、リン酸ジエステル結合を形成するための、反応性リン基（例えば、ホスフィン）への金属結合；並びに
（ｎ）スルホン、例えば、ビニルスルホン。
【００４９】
コンジュゲート化学（「クリック」ケミストリー）を使用して小さいモジュラー単位を連結させることによる組成物の化学的合成は、当該分野で周知であり、例えば、Ｈ．Ｃ．Ｋｏｌｂ、Ｍ．Ｇ．Ｆｉｎｎ及びＫ．Ｂ．Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ（（２００１）．「Ｃｌｉｃｋ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｄｉｖｅｒｓｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｆｒｏｍ  ａ  Ｆｅｗ  Ｇｏｏｄ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ」．Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ４０（１１）：２００４〜２０２１）；Ｒ．Ａ．Ｅｖａｎｓ（（２００７）．「Ｔｈｅ  Ｒｉｓｅ  ｏｆ  Ａｚｉｄｅ−Ａｌｋｙｎｅ  １，３−Ｄｉｐｏｌａｒ  ’Ｃｌｉｃｋ’  Ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ」．Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ６０（６）：３８４〜３９５；Ｗ．Ｃ．Ｇｕｉｄａら  Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．３頁  １９９６；Ｓｐｉｔｅｒｉ、Ｃｈｒｉｓｔｉａｎ及びＭｏｓｅｓ、Ｊｏｈｎ  Ｅ．（（２０１０）．「Ｃｏｐｐｅｒ−Ｃａｔａｌｙｚｅｄ  Ａｚｉｄｅ−Ａｌｋｙｎｅ  Ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ：Ｒｅｇｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  １，４，５−Ｔｒｉｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  １，２，３−Ｔｒｉａｚｏｌｅｓ」．Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ４９（１）：３１〜３３）；Ｈｏｙｌｅ，Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｅ．及びＢｏｗｍａｎ，Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ  Ｎ．（（２０１０）．「Ｔｈｉｏｌ−Ｅｎｅ  Ｃｌｉｃｋ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」．Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ４９（９）：１５４０〜１５７３）；Ｂｌａｃｋｍａｎ，Ｍｅｌｉｓｓａ  Ｌ．及びＲｏｙｚｅｎ，Ｍａｋｓｉｍ及びＦｏｘ，Ｊｏｓｅｐｈ  Ｍ．（（２００８）．「Ｔｅｔｒａｚｉｎｅ  Ｌｉｇａｔｉｏｎ：Ｆａｓｔ  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  Ｂａｓｅｄ  ｏｎ  Ｉｎｖｅｒｓｅ−Ｅｌｅｃｔｒｏｎ−Ｄｅｍａｎｄ  Ｄｉｅｌｓ−Ａｌｄｅｒ  Ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ」．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  １３０（４１）：１３５１８〜１３５１９）；Ｄｅｖａｒａｊ，Ｎｅａｌ  Ｋ．及びＷｅｉｓｓｌｅｄｅｒ，Ｒａｌｐｈ及びＨｉｌｄｅｒｂｒａｎｄ，Ｓｃｏｔｔ  Ａ．（（２００８）．「Ｔｅｔｒａｚｉｎｅ  Ｂａｓｅｄ  Ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎｓ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｒｅｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｌｉｖｅ  Ｃｅｌｌ  Ｌａｂｅｌｉｎｇ」．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９（１２）：２２９７〜２２９９）；Ｓｔｏｃｋｍａｎｎ、Ｈｅｎｎｉｎｇ；Ｎｅｖｅｓ、Ａｎｄｒｅ；Ｓｔａｉｒｓ、Ｓｈａｕｎ；Ｂｒｉｎｄｌｅ、Ｋｅｖｉｎ；Ｌｅｅｐｅｒ、Ｆｉｎｉａｎ（（２０１１）．「Ｅｘｐｌｏｒｉｎｇ  ｉｓｏｎｉｔｒｉｌｅ−ｂａｓｅｄ  ｃｌｉｃｋ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｆｏｒ  ｌｉｇａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ」．Ｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）に記載され、これらは���て、それらの全体を全ての目的のために参照により本明細書に組み込む。
【００５０】
反応性官能基は、それらが、本明細書に記載されるタンパク質又は核酸の化学的安定性に参加することもかかる化学的安定性を妨害することもないように、選択され得る。例として、核酸は、ビニルスルホン又は他の反応性部分（例えば、マレイミド）を含み得る。任意選択的に、核酸は、式−Ｓ−Ｓ−Ｒを有する反応性部分を含み得る。Ｒは、例えば、保護基であり得る。任意選択的に、Ｒはヘキサノールである。本明細書で使用する場合、ヘキサノールという用語は、式Ｃ６Ｈ１３ＯＨを有する化合物を含み、これには、１−ヘキサノール、２−ヘキサノール、３−ヘキサノール、２−メチル−１−ペンタノール、３−メチル−１−ペンタノール、４−メチル−１−ペンタノール、２−メチル−２−ペンタノール、３−メチル−２−ペンタノール、４−メチル−２−ペンタノール、２−メチル−３−ペンタノール、３−メチル−３−ペンタノール、２，２−ジメチル−１−ブタノール、２，３−ジメチル−１−ブタノール、３，３−ジメチル−１−ブタノール、２，３−ジメチル−２−ブタノール、３，３−ジメチル−２−ブタノール、及び２−エチル−１−ブタノールが含まれる。任意選択的に、Ｒは１−ヘキサノールである。
【００５１】
本明細書で使用する場合、用語「約」は、当業者がその特定された値と合理的に類似しているとみなす、その特定された値を含む値の範囲を意味する。実施形態では、用語「約」は、当該分野で一般に許容される測定を使用して、標準偏差内であることを意味する。実施形態では、約は、特定された値の＋／−１０％に及ぶ範囲を意味する。実施形態では、約は、特定された値を意味する。
【００５２】
「核酸」とは、一本鎖形態又は二本鎖形態のいずれかのデオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチド及びそれらのポリマー、並びにそれらの相補体を指す。用語「ポリヌクレオチド」とは、ヌクレオチドの線状配列を指す。用語「ヌクレオチド」とは、典型的には、ポリヌクレオチドの単一の単位、即ちモノマーを指す。ヌクレオチドは、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、又はそれらの改変バージョンであり得る。本明細書で企図されるポリヌクレオチドの例には、一本鎖及び二本鎖ＤＮＡ、一本鎖及び二本鎖ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡを含む）、並びに一本鎖及び二本鎖ＤＮＡ及びＲＮＡの混合物を有するハイブリッド分子が含まれる。核酸とは、本明細書で使用する場合、天然に存在する核酸と同じ基本的化学構造を有する核酸もまた指す。かかるアナログは、改変された糖及び／又は改変された環置換基を有するが、天然に存在する核酸と同じ基本的化学構造を保持する。核酸模倣物とは、核酸の一般的化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在する核酸と類似の様式で機能する、化学化合物を指す。かかるアナログの例には、ホスホロチオレート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｌａｔｅ）、ホスホロアミダート（ｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄａｔｅ）、メチルホスホネート、キラル−メチルホスホネート、２−Ｏ−メチルリボヌクレオチド及びペプチド−核酸（ＰＮＡ）が含まれるがこれらに限定されない。
【００５３】
用語「遺伝子」は、タンパク質の産生に関与するＤＮＡのセグメントを意味する；これは、コード領域の前及び後の領域（リーダー及びトレーラー）、並びに個々のコードセグメント（エクソン）間の介在配列（イントロン）を含む。リーダー、トレーラー、並びにイントロンは、遺伝子の転写及び翻訳の間に必要な調節エレメントを含む。さらに、「タンパク質遺伝子産物」は、特定の遺伝子から発現されるタンパク質である。
【００５４】
単語「発現」又は「発現される」は、遺伝子に言及して本明細書で使用する場合、その遺伝子の転写及び／又は翻訳産物を意味する。細胞におけるＤＮＡ分子の発現のレベルは、細胞内に存在する対応するｍＲＮＡの量、又は細胞によって産生されるそのＤＮＡによってコードされるタンパク質の量のいずれかに基づいて、決定され得る。非コード核酸分子（例えば、ｓｉＲＮＡ）の発現のレベルは、当該分野で周知の標準的なＰＣＲ又はノザンブロット法によって検出され得る。Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、１８．１〜１８．８８を参照のこと。
【００５５】
トランスフェクトされた遺伝子の発現は、細胞において一過的に又は安定に生じ得る。「一過的発現」の間、トランスフェクトされた遺伝子は、細胞分裂の間に娘細胞に伝達されない。その発現は、トランスフェクトされた細胞に限定されるので、遺伝子の発現は、時間経過と共に失われる。対照的に、トランスフェクトされた遺伝子の安定な発現は、その遺伝子が、トランスフェクトされた細胞に選択上の利点を付与する別の遺伝子と共に共トランスフェクトされる場合に生じ得る。かかる選択上の利点は、細胞に提示される特定の毒素に対する耐性であり得る。
【００５６】
用語「プラスミド」又は「発現ベクター」とは、遺伝子をコードする核酸分子及び／又は遺伝子の発現に必要な調節エレメントを指す。プラスミドからの遺伝子の発現は、シス又はトランスで生じ得る。遺伝子がシスで発現される場合、遺伝子及び調節エレメントは、同じプラスミドによってコードされる。トランスでの発現とは、遺伝子及び調節エレメントが別々のプラスミドによってコードされる場合を指す。
【００５７】
用語「アミノ酸」とは、天然に存在する及び合成のアミノ酸、並びに天然に存在するアミノ酸と類似の様式で機能するアミノ酸アナログ及びアミノ酸模倣物を指す。天然に存在するアミノ酸は、遺伝コードによってコードされるアミノ酸、並びに後に改変されたアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタミン酸及びＯ−ホスホセリンである。アミノ酸アナログとは、天然に存在するアミノ酸と同じ基本的化学構造、即ち、水素、カルボキシル基、アミノ基及びＲ基に結合したα炭素を有する化合物、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムを指す。かかるアナログは、改変されたＲ基を有する（例えば、ノルロイシン）又は改変されたペプチド骨格を有するが、天然に存在するアミノ酸と同じ基本的化学構造を保持する。アミノ酸模倣物とは、アミノ酸の一般的化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸と類似の様式で機能する化学化合物を指す。
【００５８】
アミノ酸は、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎによって推奨される、それらの一般に公知の３文字記号又は１文字記号のいずれかによって、本明細書で言及され得る。ヌクレオチドは同様に、それらの一般に受容された１文字コードによって言及され得る。
【００５９】
アミノ酸又はヌクレオチド塩基の「位置」は、Ｎ末端（又は５’末端）に対するその位置に基づいた、参照配列中の各アミノ酸（又はヌクレオチド塩基）を順次同定する番号によって示される。最適なアラインメントを決定する場合に考慮され得る欠失、挿入、トランケーション、融合などに起因して、一般に、単純にＮ末端から数えることによって決定される試験配列中のアミノ酸残基番号は、参照配列中のその対応する位置番号と必ずしも同じにはならない。例えば、バリアントが、アラインされた参照配列と比較して欠失を有する場合、欠失の部位にある参照配列中の位置に対応するアミノ酸は、バリアント中には存在しない。アラインされた参照配列中に挿入が存在する場合、その挿入は、参照配列中の番号付けされたアミノ酸位置には対応しない。トランケーション又は融合の場合、対応する配列中のいずれのアミノ酸にも対応しない、参照配列又はアラインされた配列のいずれか中のアミノ酸のストレッチが存在し得る。
【００６０】
用語「〜を参照して番号付けされる」又は「〜に対応する」とは、所与のアミノ酸又はポリヌクレオチド配列の番号付けに関して使用される場合、その所与のアミノ酸又はポリヌクレオチド配列が参照配列と比較されるときの、特定された参照配列の残基の番号付けを指す。タンパク質中のアミノ酸残基は、タンパク質内の、所与の残基と同じ本質的構造的位置を占有する場合、その所与の残基に「対応する」。当業者は、異なる番号付けシステムを用いて、他のタンパク質中の、あるタンパク質（例えば、本明細書で提供される抗体構築物又は抗原結合ドメイン）中の特定の位置に対応する残基の正体及び位置を、即座に認識する。例えば、タンパク質（例えば、本明細書で提供される抗体構築物又は抗原結合ドメイン）との単純な配列アラインメントを実施することによって、このタンパク質の特定の位置に対応する残基の正体及び位置が、このタンパク質に対してアラインしている他方のタンパク質配列中で同定される。例えば、選択された抗体構築物（又は抗原結合ドメイン）中の選択された残基は、この選択された残基が、Ｋａｂａｔ位置４０において軽鎖スレオニンと同じ本質的な空間的又は他の構造的関連性を占有する場合、Ｋａｂａｔ位置４０において軽鎖スレオニンに対応する。一部の実施形態では、選択されたタンパク質が、抗体（又は抗原結合ドメイン）の軽鎖との最大限の相同性のためにアラインされる場合、スレオニン４０とアラインしている、アラインされた選択されたタンパク質中の位置は、スレオニン４０に対応すると言われる。例えば、選択されたタンパク質の構造が、Ｋａｂａｔ位置４０において軽鎖スレオニンとの最大限の対応のためにアラインされ、構造全体が比較される場合、一次配列アラインメントの代わりに、３次元構造アラインメントもまた使用できる。この場合、構造モデル中のスレオニン４０と同じ本質的位置を占有するアミノ酸は、スレオニン４０残基に対応すると言われる。
【００６１】
「保存的に改変されたバリアント」は、アミノ酸配列及び核酸配列の両方に当てはまる。特定の核酸配列に関して、保存的に改変されたバリアントとは、同一な若しくは本質的に同一なアミノ酸配列をコードする核酸、又は核酸が、本質的に同一な配列といえるほどのアミノ酸配列をコードするわけではない場合を指す。遺伝コードの縮重に起因して、多数の機能的に同一な核酸配列が、任意の所与のアミノ酸残基をコードする。例えば、コドンＧＣＡ、ＧＣＣ、ＧＣＧ及びＧＣＵは全て、アミノ酸アラニンをコードする。したがって、あるコドンによってアラニンが特定される全ての位置において、そのコドンは、コードされるポリペプチドを変更することなしに、記載された対応するコドンのいずれかへと変更され得る。かかる核酸バリエーションは、保存的に改変されたバリエーションの１つの種である「サイレントバリエーション」である。あるポリペプチドをコードする本明細書の全ての核酸配列は、その核酸の全ての可能なサイレントバリエーションも記載する。当業者は、核酸中の各コドン（通常はメチオニンについての唯一のコドンであるＡＵＧ、及び通常はトリプトファンについての唯一のコドンであるＴＧＧを除く）が、機能的に同一な分子を得るために改変され得ることを認識する。したがって、ポリペプチドをコードする核酸の各サイレントバリエーションは、実際のプローブ配列に関してではなく、発現産物に関して、各記載された配列中に潜在している。
【００６２】
アミノ酸配列に関して、その変更が、あるアミノ酸の、化学的に類似のアミノ酸による置換を生じる場合、当業者は、コードされた配列中の単一アミノ酸又は小さい百分率のアミノ酸を変更、付加又は欠失させる、核酸、ペプチド、ポリペプチド又はタンパク質配列に対する個々の置換、欠失又は付加が、「保存的に改変されたバリアント」であることを認識する。機能的に類似のアミノ酸を提供する保存的置換表は、当該分野で周知である。かかる保存的に改変されたバリアントは、本発明の多型バリアント、種間ホモログ及び対立遺伝子に対して追加的であり、これらを排除しない。
【００６３】
以下の８つの群は各々、互いに保存的置換であるアミノ酸を含む：１）アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）；２）アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）；３）アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）；４）アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）；５）イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）；６）フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）；７）セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）；及び８）システイン（Ｃ）、メチオニン（Ｍ）（例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ、Ｐｒｏｔｅｉｎｓ（１９８４）を参照のこと）。
【００６４】
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」は、アミノ酸残基のポリマーを指すために本明細書で相互交換可能に使用され、ここで、このポリマーは、アミノ酸を構成しない部分に、任意選択的にコンジュゲート化され得る。これらの用語は、１つ以上のアミノ酸残基が対応する天然に存在するアミノ酸の人工的な化学的模倣物であるアミノ酸ポリマー、並びに天然に存在するアミノ酸ポリマー及び天然に存在しないアミノ酸ポリマーに当てはまる。「融合タンパク質」とは、単一の部分として組換え発現される２つ以上の別々のタンパク質配列をコードするキメラタンパク質を指す。
【００６５】
用語「ペプチジル」、「ペプチジル部分」又は「ペプチド部分」とは、一価ペプチドを指し、あるいは、ペプチドの一部分又はポリペプチドの一部分と呼ばれ得る。
【００６６】
用語「組換え」は、例えば、細胞、核酸、タンパク質又はベクターに関して使用される場合、その細胞、核酸、タンパク質又はベクターが、実験室方法によって改変されていること、又は実験室方法の結果であることを示す。したがって、例えば、組換えタンパク質には、実験室方法によって産生されたタンパク質が含まれる。組換えタンパク質は、タンパク質のネイティブ（非組換え）形態内には見出されないアミノ酸残基を含み得、又は改変された、例えば、標識されたアミノ酸残基を含み得る。
【００６７】
用語「異種」は、核酸の部分に関して使用される場合、その核酸が、互いに天然状態と同じ関連性では見出されない２つ以上のサブ配列を含むことを示す。例えば、新たな機能的核酸を作製するように配置される、無関係の遺伝子由来の２つ以上の配列、例えば、１つの供給源由来のプロモーター及び別の供給源由来のコード領域を有する核酸が、典型的には、組換え産生される。同様に、異種タンパク質は、このタンパク質が、互いに天然状態と同じ関連性では見出されない２つ以上のサブ配列を含むことを示す（例えば、融合タンパク質）。
【００６８】
用語「単離された」は、核酸又はタンパク質に適用される場合、その核酸又はタンパク質が、その天然状態でそれが関連する他の細胞性構成要素を本質的に含まないことを示す。核酸又はタンパク質は、例えば、均一な状態にあり得、乾燥状態又は水溶液中のいずれかにあり得る。純度及び均一性は、典型的には、ポリアクリルアミドゲル電気泳動又は高速液体クロマトグラフィーのような分析化学技術を使用して決定される。調製物中に存在する優勢な種であるタンパク質は、実質的に精製されている。
【００６９】
用語「同一な」又はパーセント「同一性」とは、２つ以上の核酸又はポリペプチド配列に関して、以下の配列比較アルゴリズムの１つを使用して、又は手動のアラインメント及び目視検査によって測定したときに、比較ウインドウ又は指定された領域にわたって比較され、最大限の対応のためにアラインされた場合に同じである、又は同じであるアミノ酸残基若しくはヌクレオチドの特定された百分率（即ち、例えば、本発明のポリペプチド配列全体又は本発明のポリペプチドの個々のドメインの特定された領域にわたって、６０％の同一性、任意選択的に、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％の同一性）を有する、２つ以上の配列又はサブ配列を指す。このとき、かかる配列は、「実質的に同一」であると言われる。この定義は、試験配列の相補体も指す。任意選択的に、同一性は、少なくとも約５０ヌクレオチド長である領域にわたって、又はより好ましくは、１００〜５００若しくは１０００若しくはそれよりも長いヌクレオチド長である領域にわたって、存在する。本発明は、配列番号１、２、３、４及び５のいずれかに対して実質的に同一なポリペプチドを含む。
【００７０】
「配列同一性の百分率」は、比較ウインドウにわたって２つの最適にアラインされた配列を比較することによって決定され、ここで、比較ウインドウ中のポリヌクレオチド又はポリペプチド配列の部分は、２つの配列の最適なアラインメントのために、参照配列（付加も欠失も含まない）と比較して、付加又は欠失（即ち、ギャップ）を含み得る。百分率は、同一な核酸塩基又はアミノ酸残基が両方の配列中に存在する位置の数を決定してマッチした位置の数を得、マッチした位置の数を、比較ウインドウ中の位置の総数によって除算し、結果に１００を乗算して配列同一性の百分率を得ることによって、計算される。
【００７１】
配列比較のために、典型的には一方の配列が、それに対して試験配列が比較される参照配列として作用する。配列比較アルゴリズムを使用する場合、試験配列及び参照配列が、コンピューターに入力され、サブ配列座標が指定され、必要に応じて、配列アルゴリズムプログラムパラメーターが指定される。デフォルトプログラムパラメーターが使用され得、又は代替的パラメーターが指定され得る。次いで、配列比較アルゴリズムは、プログラムパラメーターに基づいて、参照配列と比較した、試験配列についてのパーセント配列同一性を計算する。
【００７２】
「比較ウインドウ」は、本明細書で使用する場合、２つの配列が最適にアラインされた後に、ある配列が、同じ数の連続する位置の参照配列と比較され得る、例えば、全長配列、又は２０〜６００、約５０〜約２００若しくは約１００〜約１５０アミノ酸若しくはヌクレオチドからなる群から選択される連続する位置の数のいずれか１つのセグメントに対する言及を含む。比較のための配列のアラインメントの方法は、当該分野で周知である。比較のための配列の最適なアラインメントは、例えば、Ｓｍｉｔｈ及びＷａｔｅｒｍａｎ（１９７０）Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２ｃの局所相同性アルゴリズムによって、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕｎｓｃｈ（１９７０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３の相同性アラインメントアルゴリズムによって、Ｐｅａｒｓｏｎ及びＬｉｐｍａｎ（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：２４４４の類似性検索方法によって、これらのアルゴリズムのコンピューター化された実行（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ、５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ中のＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ及びＴＦＡＳＴＡ）によって、又は手動のアラインメント及び目視検査（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９５補遺）を参照のこと）によって、実施され得る。
【００７３】
パーセント配列同一性及び配列類似性を決定するのに適切なアルゴリズムの一例は、それぞれＡｌｔｓｃｈｕｌら（１９７７）Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９〜３４０２及びＡｌｔｓｃｈｕｌら（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３〜４１０に記載される、ＢＬＡＳＴ及びＢＬＡＳＴ  ２．０アルゴリズムである。ＢＬＡＳＴ分析を実施するためのソフトウェアは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）を介して公に入手可能である。このアルゴリズムには、データベース配列中の同じ長さのワードとアラインさせた場合に、いくらか陽性評価された閾値スコアＴとマッチする又はそれを満足する、クエリー配列中の長さＷの短いワードを同定することによって、高スコアリング配列対（ＨＳＰ）を最初に同定することが関与する。Ｔは、隣接ワードスコア閾値と呼ばれる（Ａｌｔｓｃｈｕｌら、上記）。これらの初期隣接ワードヒットは、それらを含むより長いＨＳＰを見出すための検索を開始するためのシードとして作用する。ワードヒットは、累積アラインメントスコアが増加され得る限り、各配列に沿って両方の方向で伸長される。累積スコアは、ヌクレオチド配列については、パラメーターＭ（マッチする残基の対についてのリワードスコア；通常は＞０）及びＮ（ミスマッチする残基についてのペナルティスコア；通常は＜０）を使用して計算される。アミノ酸配列については、スコアリングマトリックスが、累積スコアを計算するために使用される。各方向でのワードヒットの伸長は、以下の場合に停止される：累積アラインメントスコアが、その最大の達成された値から量Ｘだけ低下する場合；累積スコアが、１つ以上の陰性スコアの残基アラインメントの蓄積に起因して、ゼロ以下になる場合；又はいずれかの配列の末端に到達した場合。ＢＬＡＳＴアルゴリズムパラメーターＷ、Ｔ及びＸは、アラインメントの感度及び速度を決定する。ＢＬＡＳＴＮプログラム（ヌクレオチド配列について）は、デフォルトとして、１１のワード長（Ｗ）、１０の期待値（Ｅ）、Ｍ＝５、Ｎ＝−４、及び両方の鎖の比較を使用する。アミノ酸配列について、ＢＬＡＳＴＰプログラムは、デフォルトとして、３のワード長、１０の期待値（Ｅ）、５０のＢＬＯＳＵＭ６２スコアリングマトリックス（Ｈｅｎｉｋｏｆｆ及びＨｅｎｉｋｏｆｆ（１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：１０９１５を参照のこと）アラインメント（Ｂ）、１０の期待値（Ｅ）、Ｍ＝５、Ｎ＝−４、及び両方の鎖の比較を使用する。
【００７４】
ＢＬＡＳＴアルゴリズムは、２つの配列間の類似性の統計分析もまた実施する（例えば、Ｋａｒｌｉｎ及びＡｌｔｓｃｈｕｌ（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３〜５７８７を参照のこと）。ＢＬＡＳＴアルゴリズムによって提供される類似性の１つの尺度は、２つのヌクレオチド配列又はアミノ酸配列間のマッチが偶然に生じる確率の指標を提供する最小和確率（ｓｍａｌｌｅｓｔ  ｓｕｍ  ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ）（Ｐ（Ｎ））である。例えば、核酸は、参照核酸に対する試験核酸の比較における最小和確率が、約０．２未満、より好ましくは約０．０１未満、最も好ましくは約０．００１未満である場合、参照配列と類似であるとみなされる。
【００７５】
２つの核酸配列又はポリペプチドが実質的に同一であることの指標は、以下に記載されるように、第１の核酸によってコードされるポリペプチドが、第２の核酸によってコードされるポリペプチドに対する抗体と免疫学的に交差反応性であるということである。したがって、ポリペプチドは、典型的には、例えば、２つのペプチドが保存的置換のみで異なる場合、第２のポリペプチドに対して実質的に同一である。２つの核酸配列が実質的に同一であることの別の指標は、２つの分子又はそれらの相補体が、以下に記載されるように、ストリンジェントな条件下で互いにハイブリダイズすることである。２つの核酸配列が実質的に同一であることのなお別の指標は、配列を増強するために同じプライマーが使用できることである。
【００７６】
「標識」又は「検出可能な部分」は、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、化学的又は他の物理的手段によって検出可能な組成物である。例えば、有用な標識には、３２Ｐ、蛍光色素、高電子密度試薬、酵素（例えば、ＥＬＩＳＡにおいて一般に使用されるような）、ビオチン、ジゴキシゲニン、又はハプテン、及び例えば、標的ペプチドと特異的に反応性であるペプチド又は抗体中に放射能標識を取り込むことによって検出可能にされ得るタンパク質又は他の実体が含まれる。抗体を標識にコンジュゲート化するための当該分野で公知の任意の適切な方法は、例えば、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １９９６、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏに記載される方法を使用して、利用され得る。
【００７７】
抗体は、複雑な内部構造を有する、大きい複雑な分子（約１５０，０００の分子量又は約１３２０アミノ酸）である。天然の抗体分子は、ポリペプチド鎖の２つの同一な対を含み、各対は、１つの軽鎖及び１つの重鎖を有する。各軽鎖及び重鎖は次に、以下の２つの領域からなる：標的抗原との結合に関与する可変（「Ｖ」）領域及び免疫系の他の構成要素と相互作用する定常（「Ｃ」）領域。軽鎖及び重鎖可変領域は、３次元空間中で一緒になって、抗原（例えば、細胞の表面上の受容体）に結合する可変領域を形成する。各軽鎖又は重鎖可変領域内には、相補性決定領域（「ＣＤＲ」）と呼ばれる３つの短いセグメント（平均して１０アミノ酸長）が存在する。抗体可変ドメイン中の６つのＣＤＲ（軽鎖由来の３つ及び重鎖由来の３つ）は、３次元空間中で一緒にフォールディングされて、標的抗原にドッキングする実際の抗体結合部位を形成する。ＣＤＲの位置及び長さは、Ｋａｂａｔ，Ｅ．ら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、１９８３、１９８７によって正確に定義されている。ＣＤＲ中に含まれない可変領域の一部は、フレームワーク（「ＦＲ」）と呼ばれ、これは、ＣＤＲのための環境を形成する。
【００７８】
「抗体バリアント」とは、本明細書で提供される場合、抗原に結合することが可能であり、抗体の１つ以上の構造ドメイン又はそれらの断片を含むことが可能なポリペプチドを指す。抗体バリアントの非限定的な例には、単一ドメイン抗体又はナノボディ、アフィボディ（ａｆｆｉｂｏｄｙ）（高い親和性で抗原に結合することが可能であり、モノクローナル抗体を模倣することが可能な、モノクローナル抗体よりも小さいポリペプチド（例えば、約６ｋＤＡ））、単一特異性Ｆａｂ２、二重特異性Ｆａｂ２、三重特異性Ｆａｂ３、一価ＩｇＧ、ｓｃＦｖ、二重特異性ディアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、三重特異性トリアボディ（ｔｒｉａｂｏｄｙ）、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、ミニボディ（ｍｉｎｉｂｏｄｙ）、ＩｇＮＡＲ、Ｖ−ＮＡＲ、ｈｃＩｇＧ、ＶｈＨ又はペプチボディが含まれる。「ナノボディ」又は「単一ドメイン抗体」は、本明細書に記載される場合、当該分野で一般に周知であり、単一モノマーの可変抗体ドメインからなる抗体断片を指す。抗体全体と同様、これは、特異的抗原に選択的に結合できる。「ペプチボディ」とは、本明細書で提供される場合、抗体のＦｃドメインに（共有結合又は非共有結合リンカーを介して）結合されたペプチド部分を指す。当該分野で公知の抗体バリアントのさらなる非限定的な例には、軟骨魚類又はラクダ科動物によって産生される抗体が含まれる。ラクダ科動物由来の抗体及びそれらの可変領域、並びにそれらの産生、単離及び使用のための方法の一般的記載は、それらの全体を全ての目的のために参照により本明細書に組み込む、参考文献ＷＯ９７／４９８０５及びＷＯ９７／４９８０５において見出すことができる。同様に、軟骨魚類由来の抗体及びそれらの可変領域、並びにそれらの産生、単離及び使用のための方法は、その全体を全ての目的のために参照により本明細書に組み込むＷＯ２００５／１１８６２９において見出すことができる。
【００７９】
用語「抗体」は、当該分野におけるその一般に公知の意味に従って使用される。抗体は、例えば、インタクトな免疫グロブリンとして、又は種々のペプチダーゼによる消化によって産生されたいくつかの十分特徴付けられた断片として存在する。したがって、例えば、ペプシンは、ヒンジ領域中のジスルフィド連結の下で抗体を消化して、それ自体はジスルフィド結合によってＶＨ−ＣＨ１に連結された軽鎖であるＦａｂのダイマー、Ｆ（ａｂ）’２を産生する。Ｆ（ａｂ）’２は、ヒンジ領域中のジスルフィド連結を切断するために、穏やかな条件下で還元され得、それによって、Ｆ（ａｂ）’２ダイマーをＦａｂ’モノマーへと変換する。Ｆａｂ’モノマーは本質的に、ヒンジ領域の一部を伴うＦａｂである（Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｐａｕｌ編、第３版、１９９３を参照のこと）。種々の抗体断片が、インタクトな抗体の消化の観点から定義されるが、当業者は、かかる断片が、化学的に又は組換えＤＮＡ方法論を使用することによって、デノボで合成され得ることを理解する。したがって、抗体という用語は、本明細書で使用する場合、抗体全体の改変によって産生された抗体断片、又は組換えＤＮＡ方法論を使用してデノボで合成された抗体断片（例えば、単鎖Ｆｖ）、又はファージディスプレイライブラリーを使用して同定された抗体断片もまた含む（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２〜５５４（１９９０）を参照のこと）。
【００８０】
例示的な免疫グロブリン（抗体）の構造単位は、テトラマーを含む。各テトラマーは、ポリペプチド鎖の２つの同一な対から構成され、各対は、１つの「軽」鎖（約２５ｋＤ）及び１つの「重」鎖（約５０〜７０ｋＤ）を有する。各鎖のＮ末端は、抗原認識を主に担う約１００〜１１０又はそれよりも多いアミノ酸の可変領域を規定する。可変軽鎖（ＶＬ）及び可変重鎖（ＶＨ）という用語は、それぞれ、これらの軽鎖及び重鎖を指す。Ｆｃ（即ち、結晶化可能断片領域）は、免疫グロブリンの「基部」又は「尾部」であり、典型的には、抗体のクラスに依存して２つ又は３つの定常ドメインをもたらす２つの重鎖から構成される。特定のタンパク質に結合することによって、Ｆｃ領域は、各抗体が、所与の抗原に対する適切な免疫応答を生成することを確実にする。Ｆｃ領域は、Ｆｃ受容体のような種々の細胞受容体、及び補体タンパク質のような他の免疫分子にも結合する。
【００８１】
用語「抗原」とは、本明細書で提供される場合、本明細書で提供される抗原結合ドメインに結合することが可能な分子を指す。「抗原結合ドメイン」は、本明細書で提供される場合、抗原（エピトープ）に結合する抗体の領域である。上記のように、抗原結合ドメインは、重鎖及び軽鎖の各々の１つの定常ドメイン及び１つの可変ドメイン（それぞれ、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１）を含み得る。実施形態では、抗原結合ドメインは、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含む。実施形態では、抗原結合ドメインは、軽鎖可変ドメインを含むが、重鎖可変ドメイン及び／又は重鎖定常ドメインは含まない。パラトープ又は抗原結合部位は、抗原結合ドメインのＮ末端上に形成される。抗原結合ドメインの２つの可変ドメインが、抗原のエピトープに結合し得る。
【００８２】
抗体は、例えば、インタクトな免疫グロブリンとして、又は種々のペプチダーゼによる消化によって産生されたいくつかの十分特徴付けられた断片として存在する。したがって、例えば、ペプシンは、ヒンジ領域中のジスルフィド連結の下で抗体を消化して、それ自体はジスルフィド結合によってＶＨ−ＣＨ１に連結された軽鎖であるＦａｂのダイマー、Ｆ（ａｂ）’２を産生する。Ｆ（ａｂ）’２は、ヒンジ領域中のジスルフィド連結を切断するために、穏やかな条件下で還元され得、それによって、Ｆ（ａｂ）’２ダイマーをＦａｂ’モノマーへと変換する。Ｆａｂ’モノマーは本質的に、ヒンジ領域の一部を伴う抗原結合部分である（Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｐａｕｌ編、第３版、１９９３を参照のこと）。種々の抗体断片が、インタクトな抗体の消化の観点から定義されるが、当業者は、かかる断片が、化学的に又は組換えＤＮＡ方法論を使用することによって、デノボで合成され得ることを理解する。したがって、抗体という用語は、本明細書で使用する場合、抗体全体の改変によって産生された抗体断片、又は組換えＤＮＡ方法論を使用してデノボで合成された抗体断片（例えば、単鎖Ｆｖ）、又はファージディスプレイライブラリーを使用して同定された抗体断片もまた含む（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２〜５５４（１９９０）を参照のこと）。
【００８３】
単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）は、典型的には、１０〜約２５アミノ酸の短いリンカーペプチドで接続された、免疫グロブリンの重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）の融合タンパク質である。リンカーは通常、柔軟性のためにグリシンリッチであり得、溶解度のためにセリン又はスレオニンリッチであり得る。リンカーは、ＶＨのＮ末端をＶＬのＣ末端に接続でき、逆もまた同様である。
【００８４】
抗体のエピトープは、抗体が結合するその抗原の領域である。２つの抗体は、抗原への他方の抗体の結合を各々が競合的に阻害（遮断）する場合、同じ又は重複するエピトープに結合する。即ち、一方の抗体の１×、５×、１０×、２０×又は１００×過剰は、競合的結合アッセイで測定した場合、他方の抗体の結合を、少なくとも３０％であるが、好ましくは５０％、７５％、９０％又はさらには９９％阻害する（例えば、Ｊｕｎｇｈａｎｓら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５０：１４９５、１９９０を参照のこと）。あるいは、２つの抗体は、一方の抗体の結合を低減させる又は排除する抗原中の本質的に全てのアミノ酸変異が、他方の抗体の結合を低減させる又は排除する場合、同じエピトープを有する。２つの抗体は、一方の抗体の結合を低減させる又は排除する一部のアミノ酸変異が、他方の抗体の結合を低減させる又は排除する場合、重複するエピトープを有する。
【００８５】
本発明の適切な抗体、例えば、組換え、モノクローナル又はポリクローナル抗体の調製のため、及び本発明に従う使用のために、当該分野で公知の多くの技術が使用され得る（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎ、Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５〜４９７（１９７５）；Ｋｏｚｂｏｒら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ４：７２（１９８３）；Ｃｏｌｅら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙの７７〜９６頁、Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．（１９８５）；Ｃｏｌｉｇａｎ、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（１９９１）；Ｈａｒｌｏｗ及びＬａｎｅ、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９８８）；並びにＧｏｄｉｎｇ、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ（第２版、１９８６）を参照のこと）。目的の抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子は、細胞からクローニングされ得、例えば、モノクローナル抗体をコードする遺伝子は、ハイブリドーマからクローニングされ得、組換えモノクローナル抗体を産生するために使用され得る。モノクローナル抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子ライブラリーは、ハイブリドーマ又は形質細胞から作製することもできる。重鎖及び軽鎖遺伝子産物のランダムな組み合わせは、異なる抗原特異性を有する抗体の大きいプールを生成する（例えば、Ｋｕｂｙ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（第３版、１９９７）を参照のこと）。単鎖抗体又は組換え抗体の産生のための技術（米国特許第４，９４６，７７８号、米国特許第４，８１６，５６７号）が、本発明のポリペプチドに対する抗体を産生するために適応され得る。また、トランスジェニックマウス、又は他の哺乳動物のような他の生物が、ヒト化抗体又はヒト抗体を発現させるために使用され得る（例えば、米国特許第５，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；同第５，６６１，０１６号、Ｍａｒｋｓら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９〜７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６〜８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８１２〜１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １４：８４５〜５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １４：８２６（１９９６）；並びにＬｏｎｂｅｒｇ及びＨｕｓｚａｒ、Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５〜９３（１９９５）を参照のこと）。あるいは、ファージディスプレイテクノロジーは、選択された抗原に特異的に結合する抗体及びヘテロマーＦａｂ断片を同定するために使用され得る（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２〜５５４（１９９０）；Ｍａｒｋｓら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９〜７８３（１９９２）を参照のこと）。抗体は、二重特異性にもされ得る、即ち、２つの異なる抗原を認識できるようにされ得る（例えば、ＷＯ９３／０８８２９、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、Ｅ���ＢＯ  Ｊ．１０：３６５５〜３６５９（１９９１）；及びＳｕｒｅｓｈら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  １２１：２１０（１９８６）を参照のこと）。抗体は、ヘテロコンジュゲート、例えば、２つの共有結合された抗体、又は免疫毒素でもあり得る（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号、ＷＯ９１／００３６０；ＷＯ９２／２００３７３；及びＥＰ０３０８９を参照のこと）。
【００８６】
非ヒト抗体をヒト化又は霊長類化するための方法は、当該分野で周知である（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；同第５，５３０，１０１号；同第５，８５９，２０５号；同第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６１号；同第５，６９３，７６２号；同第５，７７７，０８５号；同第６，１８０，３７０号；同第６，２１０，６７１号；及び同第６，３２９，５１１号；ＷＯ８７／０２６７１；欧州特許出願第０１７３４９４号；Ｊｏｎｅｓら（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２；並びにＶｅｒｈｏｙｅｎら（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４）。ヒト化抗体は、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ  ３４９：２９３にさらに記載されている。一般に、ヒト化抗体は、非ヒトである供給源由来の、その中に導入された１つ以上のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、典型的にはインポート可変ドメインから取られ、しばしばインポート残基と呼ばれる。ヒト化は本質的に、げっ歯類ＣＤＲ又はＣＤＲ配列を、ヒト抗体の対応する配列の代わりに使用することによって、Ｗｉｎｔｅｒ及び共同研究者の方法に従って実施され得る（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、ＰＮＡＳ  ＵＳＡ、８１：６８５１〜６８５５（１９８４）、Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２〜５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３〜３２７（１９８８）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ及びＯｉ、Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、４４：６５〜９２（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４〜１５３６（１９８８）並びにＰｒｅｓｔａ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３〜５９６（１９９２）、Ｐａｄｌａｎ、Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．、２８：４８９〜４９８（１９９１）；Ｐａｄｌａｎ、Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．、３１（３）：１６９〜２１７（１９９４）を参照のこと）。したがって、かかるヒト化抗体は、キメラ抗体であり（米国特許第４，８１６，５６７号）、ここで、非ヒト種由来の対応する配列によって置換されているのは、実質的には、インタクトなヒト可変ドメインに満たない。実務では、ヒト化抗体は、典型的には、一部のＣＤＲ残基及びおそらくは一部のＦＲ残基が、げっ歯類抗体中の類似の部位由来の残基によって置換されたヒト抗体である。例えば、ヒト化免疫グロブリンフレームワーク領域をコードする第１の配列及び所望の免疫グロブリン相補性決定領域をコードする第２の配列セットを含むポリヌクレオチドは、合成により、又は適切なｃＤＮＡ及びゲノムＤＮＡセグメントを組み合わせることによって、産生され得る。ヒト定常領域ＤＮＡ配列は、種々のヒト細胞から、周知の手順に従って単離され得る。
【００８７】
「キメラ抗体」は、（ａ）抗原結合部位（可変領域）が、異なる若しくは変更されたクラス、エフェクター機能及び／若しくは種の定常領域、又はキメラ抗体に新たな特性を付与する完全に異なる分子、例えば、酵素、毒素、ホルモン、増殖因子、薬物などに連結されるように、定常領域若しくはその一部分が、変更、置き換え又は交換される；又は（ｂ）可変領域若しくはその一部分が、異なる若しくは変更された抗原特異性を有する可変領域で変更、置き換え又は交換される、抗体分子である。本発明の好ましい抗体及び本発明に従う使用のための好ましい抗体には、ヒト化及び／又はキメラモノクローナル抗体が含まれる。
【００８８】
治療剤を抗体にコンジュゲート化するための技術は、周知である（例えば、Ａｒｎｏｎら、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｆｏｒ  Ｉｍｍｕｎｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ」、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｒｅｉｓｆｅｌｄら（編）、２４３〜５６頁（Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９８５）；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」、Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ（第２版）、Ｒｏｂｉｎｓｏｎら（編）、６２３〜５３頁（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．１９８７）；Ｔｈｏｒｐｅ、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  Ｏｆ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ  Ｒｅｖｉｅｗ」、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ‘８４：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｐｉｎｃｈｅｒａら（編）、４７５〜５０６頁（１９８５）；及びＴｈｏｒｐｅら、「Ｔｈｅ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ａｎｄ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  Ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｔｏｘｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ」、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．、６２：１１９〜５８（１９８２）を参照のこと）。
【００８９】
本明細書で使用する場合、用語「抗体−薬物コンジュゲート」又は「ＡＤＣ」とは、抗体にコンジュゲート化された又は他の方法で共有結合された治療剤を指す。
【００９０】
「治療剤」又は「治療的部分」とは、本明細書で使用する場合、対象に投与した場合に、意図した予防効果、例えば、傷害、疾患、病理若しくは状態の発症（若しくは再発生）を予防若しくは遅延させること、又は傷害、疾患、病理若しくは状態又はそれらの症状の発症（若しくは再発生）の可能性を低減させること、又は意図した治療効果、例えば、鎮圧のような、治療の任意の客観的若しくは主観的パラメーターを含む、傷害、疾患、病理若しくは状態又はそれらの症状の治療若しくは軽快；寛解；症状を弱めること、又は傷害、病理若しくは状態を、患者にとってより容認できるものにすること；縮退若しくは減退の速度を緩徐化すること；縮退の最終点をあまり衰弱性でなくすること；又は患者の肉体的若しくは精神的幸福を改善すること、を有する薬剤（例えば、化合物又は組成物）を指す。実施形態では、治療剤は、がんのような疾患を治療又は予防する際に有用な組成物である。
【００９１】
語句「抗体に特異的に（又は選択的に）結合する」又は「〜と特異的に（又は選択的に）免疫反応性の」とは、タンパク質又はペプチドに言及する場合、しばしば、タンパク質及び他の生物製剤の不均一な集団中のそのタンパク質の存在を決定する結合反応を指す。したがって、指定されたイムノアッセイ条件下で、特定された抗体は、背景の少なくとも２倍、より典型的には、背景の１０〜１００倍を超えて、特定のタンパク質に結合する。かかる条件下での抗体への特異的結合は、典型的には、特定のタンパク質に対するその特異性について選択された抗体を必要とする。例えば、ポリクローナル抗体は、選択された抗原とは特異的に免疫反応性であるが他のタンパク質とは特異的に免疫反応性でない抗体のサブセットのみを取得するために選択され得る。この選択は、他の分子と交差反応する抗体を取り去ることによって達成され得る。種々のイムノアッセイ形式が、特定のタンパク質と特異的に免疫反応性の抗体を選択するために使用され得る。例えば、固相ＥＬＩＳＡイムノアッセイが、タンパク質と特異的に免疫反応性の抗体を選択するために慣用的に使用される（例えば、特異的免疫反応性を決定するために使用され得るイムノアッセイの形式及び条件の記載については、Ｈａｒｌｏｗ及びＬａｎｅ、Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９９８）を参照のこと）。
【００９２】
「接触させること」は、その平易な通常の意味に従って使用され、少なくとも２つの別個の種（例えば、生体分子又は細胞を含む化学化合物）を、反応、相互作用又は物理的に触れるのに十分に近位にさせるプロセスを指す。得られた反応産物は、添加された試薬間の反応から、又は反応混合物中で産生され得る、添加された試薬のうち１種以上由来の中間体から、直接産生され得ることを理解すべきである。
【００９３】
用語「接触させること」は、２つの種を、反応、相互作用又は物理的に触れさせる（例えば、結合させる）ことを含み得、ここで、これら２つの種は、例えば、本明細書に記載される抗体構築物及びがんタンパク質であり得る。実施形態では、接触させることは、例えば、抗体構築物を、がん細胞上で発現されるがんタンパク質に結合させることを含む。
【００９４】
「細胞」とは、本明細書で使用する場合、そのゲノムＤＮＡを維持又は複製するのに十分な代謝又は他の機能を実行する細胞を指す。細胞は、例えば、インタクトな膜の存在、特定の色素による染色、後代を生成できること、又は配偶子の場合には第２の配偶子と組み合わさって生存可能な子孫を生成できることを含め、当該分野で周知の方法によって同定できる。細胞には、原核生物細胞及び真核生物細胞が含まれ得る。原核生物細胞には、細菌が含まれるがこれらに限定されない。真核生物細胞には、酵母細胞並びに植物及び動物に由来する細胞、例えば、哺乳動物、昆虫（例えば、スポドプテラ属（ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ））及びヒト細胞が含まれるがこれらに限定されない。細胞は、天然に非接着性である場合、又は例えばトリプシン処理によって表面に接着しないように処理されている場合、有用であり得る。
【００９５】
「生物学的サンプル」又は「サンプル」とは、対象若しくは患者から取得されたか又は対象若しくは患者に由来する材料を指す。生物学的サンプルには、組織学的目的のために採取された生検及び剖検サンプル、並びに凍結切片のような、組織の切片が含まれる。かかるサンプルには、血液及び血液画分若しくは血液製剤（例えば、血清、血漿、血小板、赤血球など）のような体液、痰、組織、培養細胞（例えば、初代培養物、外植片及び形質転換された細胞）、糞便、尿、滑液、関節組織、滑膜組織、滑膜細胞、線維芽細胞様滑膜細胞、マクロファージ様滑膜細胞、免疫細胞、造血細胞、線維芽細胞、マクロファージ、Ｔ細胞などが含まれる。生物学的サンプルは、典型的には、霊長類、例えば、チンパンジー若しくはヒト；雌ウシ；イヌ；ネコ；げっ歯類、例えば、モルモット、ラット、マウス；ウサギのような哺乳動物；又は鳥類；爬虫類；若しくは魚類のような真核生物から取得される。一部の実施形態では、サンプルは、ヒトから取得される。
【００９６】
「コントロール」サンプル又は値とは、試験サンプルとの比較のための、参照、通常は既知の参照として機能するサンプルを指す。例えば、試験サンプルは、試験条件、例えば、試験化合物の存在下から採取され得、既知の条件、例えば、試験化合物の非存在下（陰性コントロール）又は既知の化合物の存在下（陽性コントロール）からのサンプルと比較され得る。コントロールは、いくつかの試験又は結果から集められた平均値もまた示し得る。当業者は、コントロールが、いくつものパラメーターの評価のために設計され得ることを認識する。例えば、コントロールは、薬理学的データ（例えば、半減期）又は治療的尺度（例えば、副作用の比較）に基づいて、治療的利益を比較するように考案され得る。当業者は、どのコントロールが所与の状況において役立つかを理解し、コントロール値との比較に基づいてデータを分析できる。コントロールは、データの有意性を決定するためにも役立つ。例えば、所与のパラメーターについての値が、コントロールにおいて広く変動する場合、試験サンプルにおける変動は、有意とはみなされない。
【００９７】
「患者」又は「それを必要とする対象」とは、本明細書で提供される組成物又は医薬組成物の投与によって治療できる疾患若しくは状態に罹患しているか、又はかかる疾患若しくは状態になりやすい生きた生物を指す。非限定的な例には、ヒト、他の哺乳動物、ウシ、ラット、マウス、イヌ、サル、ヤギ、ヒツジ、雌ウシ、シカ及び他には非哺乳動物が含まれる。一部の実施形態では、患者はヒトである。
【００９８】
用語「疾患」又は「状態」とは、本明細書で提供される化合物、医薬組成物又は方法で治療することが可能な患者又は対象の存在状態又は健康状態を指す。実施形態では、疾患は、がん（例えば、肺がん、卵巣がん、骨肉腫、膀胱がん、子宮頸がん、肝臓がん、腎臓がん、皮膚がん（例えば、メルケル細胞癌）、精巣がん、白血病、リンパ腫（マントル細胞リンパ腫）、頭頸部がん、結腸直腸がん、前立腺がん、膵臓がん、黒色腫、乳房がん、神経芽細胞腫）である。
【００９９】
本明細書で使用する場合、用語「がん」とは、白血病、リンパ腫、黒色腫、神経内分泌腫瘍、癌及び肉腫を含む、哺乳動物において見出される全ての型のがん、新生物又は悪性腫瘍を指す。本明細書で提供される化合物、医薬組成物又は方法で治療され得る例示的ながんには、リンパ腫（例えば、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫（ｍａｒｇｉｎａｌ  ｚｏｎａ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）、バーキットリンパ腫）、肉腫、膀胱がん、骨がん、脳腫瘍、子宮頸がん、結腸がん、食道がん、胃がん、頭頸部がん、腎臓がん、骨髄腫、甲状腺がん、白血病、前立腺がん、乳房がん（例えば、三重陰性、ＥＲ陽性、ＥＲ陰性、化学療法耐性、ハーセプチン耐性、ＨＥＲ２陽性、ドキソルビシン耐性、タモキシフェン耐性、乳管癌、小葉癌、原発性、転移性）、卵巣がん、膵臓がん、肝臓がん（例えば、肝細胞癌）、肺がん（例えば、非小細胞肺癌、扁平上皮肺癌、腺癌、大細胞肺癌、小細胞肺癌、カルチノイド、肉腫）、多形神経膠芽腫、神経膠腫、黒色腫、前立腺がん、去勢耐性前立腺がん、乳房がん、三重陰性乳房がん、神経膠芽腫、卵巣がん、肺がん、扁平上皮癌（例えば、頭部、頸部又は食道）、結腸直腸がん、白血病（例えば、リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病、ヘアリー細胞白血病）、急性骨髄性白血病、リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫又は多発性骨髄腫が含まれる。さらなる例には、甲状腺、内分泌系、脳、乳房、子宮頸部、結腸、頭頸部、食道、肝臓、腎臓、肺、非小細胞肺、黒色腫、中皮腫、卵巣、肉腫、胃、子宮若しくは髄芽腫のがん、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、多形神経膠芽腫、卵巣がん、横紋筋肉腫、原発性血小板増加症、原発性マクログロブリン血症、原発性脳腫瘍、がん、悪性膵臓インスリノーマ（ｉｎｓｕｌａｎｏｍａ）、悪性カルチノイド、膀胱がん、前悪性皮膚病変、精巣がん、リンパ腫、甲状腺がん、神経芽細胞腫、食道がん、尿生殖器がん、悪性高カルシウム血症、子宮内膜がん、副腎皮質がん、膵内分泌部若しくは膵外分泌部の新生物、甲状腺髄様がん、甲状腺髄様癌、黒色腫、結腸直腸がん、乳頭様甲状腺がん、肝細胞癌、乳頭パジェット病、葉状腫瘍、小葉癌、腺管癌、膵星細胞のがん、肝星細胞のがん、又は前立腺がんが含まれる。
【０１００】
用語「白血病」とは、血液形成性臓器の進行性の悪性疾患を広く指し、一般に、血液及び骨髄における白血球及びそれらの前駆体の歪んだ増殖及び発達を特徴とする。白血病は一般に、以下に基づいて臨床的に分類される：（１）疾患の持続時間及び特徴−急性又は慢性；（２）関与する細胞の型；骨髄系（骨髄性）、リンパ系（リンパ向性）又は単球性；及び（３）血液中の異常な細胞の数における増加又は非増加−白血病性又は無白血病性（亜白血性）。Ｐ３８８白血病モデルは、インビボ抗白血病活性を予測するものとして広く受容されている。Ｐ３８８アッセイにおいて陽性と試験される化合物は、一般に、治療されている白血病の型にかかわらず、インビボでいくらかのレベルの抗白血病活性を示すと考えられている。したがって、本出願は、白血病を治療する方法、好ましくは、急性非リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、急性顆粒球性白血病、慢性顆粒球性白血病、急性前骨髄球性白血病、成人Ｔ細胞白血病、無白血病性白血病、白血球血症性白血病（ｌｅｕｋｏｃｙｔｈｅｍｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、好塩基球性白血病（ｂａｓｏｐｈｙｌｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、芽球細胞白血病（ｂｌａｓｔ  ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、ウシ白血病、慢性骨髄球性白血病、皮膚白血病、胎生細胞性白血病（ｅｍｂｒｙｏｎａｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、好酸球性白血病、グロス白血病（Ｇｒｏｓｓ’  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、ヘアリー細胞白血病、血芽球性白血病（ｈｅｍｏｂｌａｓｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、血球芽細胞性白血病（ｈｅｍｏｃｙｔｏｂｌａｓｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、組織球性白血病、幹細胞白血病（ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性単球性白血病、白血球減少性白血病（ｌｅｕｋｏｐｅｎｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、リンパ性白血病（ｌｙｍｐｈａｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、リンパ芽球性白血病、リンパ球性白血病、リンパ向性白血病（ｌｙｍｐｈｏｇｅｎｏｕｓ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、リンパ様白血病、リンパ肉腫細胞白血病（ｌｙｍｐｈｏｓａｒｃｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、マスト細胞白血病、巨核球性白血病、小骨髄芽球性白血病（ｍｉｃｒｏｍｙｅｌｏｂｌａｓｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、単球性白血病、骨髄芽球性白血病、骨髄球性白血病、骨髄顆粒球性白血病（ｍｙｅｌｏｉｄ  ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、骨髄単球性白血病、ネーゲリ白血病（Ｎａｅｇｅｌｉ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、形質細胞白血病、多発性骨髄腫、形質細胞性白血病、前骨髄球性白血病、リーダー細胞白血病（Ｒｉｅｄｅｒ  ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、シリング白血病（Ｓｃｈｉｌｌｉｎｇ’ｓ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、幹細胞白血病、亜白血性白血病及び未分化細胞白血病（ｕｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ  ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）を治療する方法を含む。
【０１０１】
本明細書で使用する場合、用語「転移」、「転移性」及び「転移性がん」は、相互交換可能に使用され得、１つの臓器から別の非隣接臓器又は身体部分への、増殖性疾患又は障害、例えば、がんの広がりを指す。がんは、発生源の部位、例えば、乳房に存在し、この部位は、原発性腫瘍、例えば、原発性乳房がんと呼ばれる。原発性腫瘍又は発生源の部位中の一部のがん細胞は、局所領域中の周囲の正常組織に侵入及び浸潤する能力、並びに／又はリンパ系若しくは脈管系の壁に侵入して、身体中の他の部位及び組織へとこの系を介して循環する能力を獲得する。原発性腫瘍のがん細胞から形成される第２の臨床的に検出可能な腫瘍は、転移性又は続発性腫瘍と呼ばれる。がん細胞が転移する場合、この転移性腫瘍及びその細胞は、元の腫瘍のものと類似すると推定される。したがって、肺がんが乳房に転移する場合、乳房の部位における続発性腫瘍は、異常な肺細胞からなるのであって、異常な乳房細胞からなるのではない。乳房における続発性腫瘍は、転移性肺がんと呼ばれる。したがって、転移性がんという語句は、対象が原発性腫瘍を有する又は有した、かつ１つ以上の続発性腫瘍を有する疾患を指す。非転移性がん、又は転移性でないがんを有する対象という語句は、対象が原発性腫瘍を有するが１つ以上の続発性腫瘍を有さない疾患を指す。例えば、転移性肺がんとは、原発性肺腫瘍の履歴を有する又は有さず、かつ例えば乳房中の第２の位置又は複数の位置に１つ以上の続発性腫瘍を有する対象における疾患を指す。
【０１０２】
用語「関連する」又は「〜と関連する」は、疾患（例えば、がん（例えば、白血病、リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫又は多発性骨髄腫））と関連する物質又は物質の活性若しくは機能に関して、その疾患（例えば、がん、（例えば、白血病、リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫又は多発性骨髄腫））が、この物質又は物質の活性若しくは機能によって（全体的又は部分的に）引き起こされるか、又はその疾患の症状が、この物質又は物質の活性若しくは機能によって（全体的又は部分的に）引き起こされることを意味する。
【０１０３】
本明細書で使用する場合、「治療」若しくは「治療すること」、又は「軽減すること」若しくは「軽快させること」は、本明細書で相互交換可能に使用される。これらの用語は、治療的利益及び／又は予防的利益が含まれるがこれらに限定されない有益な又は所望の結果を得るためのアプローチを指す。治療的利益とは、治療されている根底にある障害の根絶又は軽快を意味する。また、治療的利益は、その患者が根底にある障害になおも罹患している場合があるにもかかわらず、患者において改善が観察されるような、根底にある障害に伴う生理学的症状の１つ以上の根絶又は軽快によって達成される。予防的利益について、その疾患の診断が行われていない場合であっても、組成物は、特定の疾患を発達させるリスクがある患者、又は疾患の生理学的症状の１つ以上を報告している患者に投与され得る。治療には、疾患を予防すること、即ち、疾患の誘導前の保護的組成物の投与によって、疾患の臨床症状が発達しないようにすること；疾患を抑制すること、即ち、疾患の臨床的出現又は再出現の前であるが誘導事象の後の保護的組成物の投与によって、疾患の臨床症状が発達しないようにすること；疾患を阻害すること、即ち、それらの最初の出現後の保護的組成物の投与によって、臨床症状の発達を停止させること；疾患の再発生を予防すること及び／又は疾患を救済すること、即ち、それらの最初の出現後の保護的組成物の投与によって、臨床症状の退縮を引き起こすことが含まれる。例えば、本明細書の特定の方法は、がん（例えば、肺がん、卵巣がん、骨肉腫、膀胱がん、子宮頸がん、肝臓がん、腎臓がん、皮膚がん（例えば、メルケル細胞癌）、精巣がん、白血病、リンパ腫、頭頸部がん、結腸直腸がん、前立腺がん、膵臓がん、黒色腫、乳房がん、神経芽細胞腫）を治療する。例えば、本明細書の特定の方法は、がんの発生、成長、転移若しくは進行を減少させる若しくは低減させる若しくは予防することによってがんを治療する；又はがんの症状を減少させることによってがんを治療する。がん（例えば、肺がん、卵巣がん、骨肉腫、膀胱がん、子宮頸がん、肝臓がん、腎臓がん、皮膚がん（例えば、メルケル細胞癌）、精巣がん、白血病、リンパ腫、頭頸部がん、結腸直腸がん、前立腺がん、膵臓がん、黒色腫、乳房がん、神経芽細胞腫）の症状は、当業者に公知であるか、又は当業者によって決定され得る。
【０１０４】
本明細書で使用する場合、用語「治療」、「治療する」又は「治療すること」とは、プロテアーゼの発現を特徴とする疾患若しくは状態の１つ以上の症状の影響、又はプロテアーゼの発現を特徴とする疾患若しくは状態の症状を低減させる方法を指す。したがって、開示された方法では、治療とは、確立された疾患、状態、又は疾患若しくは状態の症状の重症度における１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％の低減を指し得る。例えば、疾患を治療するための方法は、コントロールと比較して、対象において疾患の１つ以上の症状における１０％の低減が存在する場合に、治療であるとみなされる。したがって、低減は、ネイティブ又はコントロールレベルと比較して、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、又は１０％〜１００％の間の任意のパーセントの低減であり得る。治療は、疾患、状態、又は疾患若しくは状態の症状の治癒又は完全な消失を必ずしも指さないことが理解される。さらに、本明細書で使用する場合、減少させること、低減させること又は阻害することに対する言及は、コントロールレベルと比較した、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又はそれよりも大きい変化を含み、かかる用語は、完全な排除を含み得るが、必ずしも含まない。
【０１０５】
「有効量」は、述べられた目的を達成する（例えば、そのために有効量が投与される効果を達成する、疾患を治療する、酵素活性を低減させる、疾患又は状態の１つ以上の症状を低減させる）のに十分な量である。「有効量」の一例は、疾患の症状（単数又は複数）の治療、予防又は低減に寄与するのに十分な量であり、これは、「治療有効量」とも呼ばれ得る。症状（単数又は複数）の「低減」（及びこの語句の文法的等価物）は、症状（複数可）の重症度若しくは頻度の減少、又は症状（複数可）の排除を意味する。薬物の「予防有効量」は、対象に投与された場合に、意図した予防効果、例えば、傷害、疾患、病理若しくは状態の発症（若しくは再発生）を予防若しくは遅延させること、又は傷害、疾患、病理若しくは状態又はそれらの症状の発症（若しくは再発生）の可能性を低減させること、を有する薬物の量である。完全な予防効果は、１つの用量の投与によって必ずしも生じず、一連の用量の投与の後にのみ生じる場合がある。したがって、予防有効量は、１回以上の投与で投与され得る。「活性減少量」とは、本明細書で使用する場合、アンタゴニストの非存在下と比較して、酵素又はタンパク質の活性を減少させるために必要とされるアンタゴニストの量を指す。「機能破壊量」とは、本明細書で使用する場合、アンタゴニストの非存在下と比較して、酵素又はタンパク質の機能を破壊させるために必要とされるアンタゴニストの量を指す。所与のクラスの医薬製品にとって適切な投薬量についてのガイダンスは、文献中に見出すことができる。例えば、所与のパラメーターについて、有効量は、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、４０％、５０％、６０％、７５％、８０％、９０％又は少なくとも１００％の増加又は減少を示す。効力は、「〜倍」の増加又は減少としても表現できる。例えば、治療有効量は、コントロールと比較して、少なくとも１．２倍、１．５倍、２倍、５倍又はそれよりも高い効果を有し得る。正確な量は、治療の目的に依存し、公知の技術を使用して当業者が確認できる（例えば、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ（１〜３巻、１９９２）；Ｌｌｏｙｄ、Ｔｈｅ  Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９）；Ｐｉｃｋａｒ、Ｄｏｓａｇｅ  Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ（１９９９）；及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、２００３、Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓを参照のこと）。
【０１０６】
本明細書で使用する場合、用語「投与すること」は、対象への、経口投与、坐剤、外用接触、静脈内、腹腔内、筋肉内、病変内、くも膜下腔内、鼻腔内若しくは皮下投与などの投与、又は緩徐放出デバイス、例えば、ミニ浸透圧ポンプの移植を意味する。投与は、非経口及び経粘膜（例えば、頬側、舌下、口蓋、歯肉、経鼻、膣内、直腸又は経皮）を含む任意の経路による。非経口投与には、例えば、静脈内、筋肉内、細動脈内（ｉｎｔｒａ−ａｒｔｅｒｉｏｌｅ）、真皮内、皮下、腹腔内、脳室内及び頭蓋内が含まれる。他の様式の送達には、リポソーム製剤、静脈内注入、経皮パッチなどの使用が含まれるがこれらに限定されない。「共投与する」とは、本明細書に記載される組成物が、１つ以上のさらなる治療、例えば、化学療法、ホルモン療法、放射線療法若しくは免疫療法のようながん治療の投与と同時に、その直前に、又はその直後に投与されることを意味する。本発明の化合物は、患者に単独で投与され得、又は共投与され得る。共投与は、個々に又は組み合わせでの（１種よりも多い化合物）化合物の同時若しくは逐次的投与、を含む意味である。したがって、調製物は、所望に応じて、（例えば、代謝的分解を低減させるために）他の活性物質と組み合わせることもできる。本発明の組成物は、経皮的に、外用経路により、アプリケータースティック、溶液、懸濁物、エマルジョン、ゲル、クリーム、軟膏、ペースト、ゼリー、ペイント、粉末及びエアロゾルとして製剤化されて、送達され得る。
【０１０７】
経口投与に適切な製剤は、（ａ）水、食塩水又はＰＥＧ  ４００のような希釈剤中に懸濁された、有効量の本明細書で提供される抗体のような、液体溶液；（ｂ）液体、固体、顆粒又はゼラチンとして、所定の量の活性成分を各々が含む、カプセル、サシェ又は錠剤；（ｃ）適切な液体中の懸濁物；及び（ｄ）適切なエマルジョン、からなり得る。錠剤形態は、ラクトース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、リン酸カルシウム、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、結晶セルロース、ゼラチン、コロイド二酸化ケイ素、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、並びに他の賦形剤、着色料、フィラー、バインダー、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤（ｍｏｉｓｔｅｎｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、防腐剤、香味料、色素、崩壊剤、及び薬学的に適合性の担体のうち１つ以上を含み得る。ロゼンジ形態は、香料、例えば、スクロース中に活性成分を含み得、トローチは、ゼラチン及びグリセリン又はスクロース及びアカシアエマルジョンのような不活性基剤中に活性成分を含み得、ゲルなどは、活性成分に加えて、当該分野で公知の担体を含み得る。
【０１０８】
医薬組成物は、タンパク質、キトサンのような多糖、ポリ乳酸、ポリグリコール酸及びコポリマー（ラテックス官能化ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）、アガロース、セルロースなどのような）、ポリマーアミノ酸、アミノ酸コポリマー、並びに脂質凝集物（油滴又はリポソームのような）のような、大きい緩徐に代謝される高分子もまた含み得る。さらに、これらの担体は、免疫賦活剤（即ち、アジュバント）として機能し得る。
【０１０９】
直腸投与に適切な製剤には、例えば、坐剤基剤と共にパッケージングされた核酸からなる坐剤が含まれる。適切な坐剤基剤には、天然又は合成トリグリセリド又はパラフィン炭化水素が含まれる。さらに、選択された化合物と、例えば、液体トリグリセリド、ポリエチレングリコール及びパラフィン炭化水素を含む基剤との組み合わせからなるゼラチン直腸カプセルを使用することも可能である。
【０１１０】
例えば、関節内（関節中）、静脈内、筋肉内、腫瘍内、真皮内、腹腔内及び皮下経路によるような非経口投与に適切な製剤には、抗酸化剤、緩衝液、静菌薬、及び製剤を意図したレシピエントの血液と等張にする溶質を含み得る、水性及び非水性の等張無菌注射溶液、並びに懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤及び防腐剤を含み得る、水性及び非水性の無菌懸濁物が含まれる。本発明の実施では、組成物は、例えば、静脈内注入、経口、外用、腹腔内、膀胱内又はくも膜下腔内で投与され得る。非経口投与、経口投与及び静脈内投与が、投与の好ましい方法である。化合物の製剤は、アンプル及びバイアルのような単位用量又は複数用量の密封容器中で提示され得る。
【０１１１】
注射溶液及び懸濁物は、以前に記載された種類の無菌の粉末、顆粒及び錠剤から調製され得る。エクスビボ治療のための核酸によって形質導入された細胞もまた、上記のように、静脈内又は非経口で投与され得る。
【０１１２】
医薬調製物は、好ましくは、単位投薬形態である。かかる形態では、調製物は、適切な量の活性構成要素を含む単位用量へと下位分割される。単位投薬形態は、包装された調製物であり得、この包装は、バイアル又はアンプル中に、小包にされた錠剤、カプセル及び粉末のような調製物の別個の量を含む。また、単位投薬形態は、カプセル、錠剤、カシェ若しくはロゼンジ自体であり得、又は包装された形態での適切な数のこれらのいずれかであり得る。組成物は、所望の場合、他の適合性の治療剤も含み得る。
【０１１３】
組み合わされた投与は、別々の製剤又は単一の医薬製剤を使用する共投与、及びいずれかの順序での連続投与を企図し、ここで、好ましくは、両方（又は全て）の活性薬剤が、それらの生物学的活性を同時に発揮する期間が存在する。
【０１１４】
本明細書で提供される組成物の有効用量は、投与の手段、標的部位、患者の生理学的状態、患者がヒトなのか動物なのか、投与される他の薬物療法、及び治療が予防的なのか治療的なのかを含む多くの異なる因子に依存して変動する。しかし、当業者は、がんを治療及び予防するための承認された組成物の投薬量をガイダンスとして見て、適切な及び／又は等価な用量を容易に認識する。
【０１１５】
「薬学的に許容される賦形剤」及び「薬学的に許容される担体」とは、対象への活性薬剤の投与及び対象による吸収を補助する、患者に対して顕著な有害な毒物学的影響を引き起こすことなしに本発明の組成物中に含めることができる物質を指す。薬学的に許容される賦形剤の非限定的な例には、水、ＮａＣｌ、生理食塩水溶液、乳酸リンゲル、規定濃度スクロース（ｎｏｒｍａｌ  ｓｕｃｒｏｓｅ）、規定濃度グルコース（ｎｏｒｍａｌ  ｇｌｕｃｏｓｅ）、バインダー、フィラー、錠剤分解物質、滑沢剤、コーティング、甘味料、香料、塩溶液（リンゲル溶液のような）、アルコール、油、ゼラチン、ラクトース、アミロース又はデンプンのような炭水化物、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌ  ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ）及び顔料などが含まれる。かかる調製物は、滅菌されてもよく、所望の場合、本発明の化合物と有害に反応しない、滑沢剤、防腐剤、安定剤、湿潤剤（ｗｅｔｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、乳化剤、浸透圧に影響を与えるための塩、緩衝液、着色物質及び／又は芳香族物質などのような補助剤と混合され得る。当業者は、他の医薬賦形剤が本発明において有用であることを認識する。
【０１１６】
用語「薬学的に許容される塩」とは、当該分野で周知の種々の有機及び無機の対イオンに由来する塩を指し、これには、単なる例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなどが含まれる；分子が塩基性の官能性を含む場合、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などのような、有機酸又は無機酸の塩を指す。
【０１１７】
用語「調製物」は、担体としてカプセル封入材料を用いた活性化合物の製剤を含む意図であり、他の担体あり又はなしの活性構成要素が、活性構成要素とそのように関連する担体によって取り囲まれた、カプセルを提供する。同様に、カシェ及びロゼンジが含まれる。錠剤、粉末、カプセル、丸剤、カシェ及びロゼンジは、経口投与に適切な固体投薬形態として使用され得る。
【０１１８】
医薬調製物は、任意選択的に、単位投薬形態である。かかる形態では、調製物は、適切な量の活性構成要素を含む単位用量へと下位分割される。単位投薬形態は、包装された調製物であり得、この包装は、バイアル又はアンプル中に、小包にされた錠剤、カプセル及び粉末のような調製物の別個の量を含む。また、単位投薬形態は、カプセル、錠剤、カシェ若しくはロゼンジ自体であり得、又は包装された形態での適切な数のこれらのいずれかであり得る。単位投薬形態は、凍結分散物であり得る。
【０１１９】
本発明の組成物は、徐放及び／又は快適さを提供するための構成要素をさらに含み得る。かかる構成要素には、高分子量アニオン性粘膜模倣（ｍｕｃｏｍｉｍｅｔｉｃ）ポリマー、ゲル化多糖及び微細に分割された薬物担体基材が含まれる。これらの構成要素は、米国特許第４，９１１，９２０号；同第５，４０３，８４１号；同第５，２１２，１６２号；及び同第４，８６１，７６０号でより詳細に議論されている。これらの特許の全内容は、それらの全体を全ての目的のために参照により本明細書に組み込む。本発明の組成物は、身体における緩徐放出のためのミクロスフェアとしても送達され得る。例えば、ミクロスフェアは、緩徐に皮下放出する薬物含有ミクロスフェアの真皮内注射を介して（Ｒａｏ、Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ  Ｓｃｉ．Ｐｏｌｙｍ．Ｅｄ．７：６２３〜６４５、１９９５を参照のこと）；生分解性で注射可能なゲル製剤として（例えば、Ｇａｏ  Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１２：８５７〜８６３、１９９５を参照のこと）；又は経口投与のためのミクロスフェアとして（例えば、Ｅｙｌｅｓ、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４９：６６９〜６７４、１９９７を参照のこと）、投与され得る。実施形態では、本発明の組成物の製剤は、細胞膜と融合する又はエンドサイトーシスされるリポソームの使用によって、即ち、エンドサイトーシスを生じる細胞の表面膜タンパク質受容体に結合する、リポソームに結合した受容体リガンドを使用することによって、送達され得る。特に、リポソーム表面が、標的細胞に対して特異的な受容体リガンドを保有するリポソーム、又は特定の臓器へと他の方法で優先的に指向されるリポソームを使用することによって、標的細胞中へのインビボでの本発明の組成物の送達に焦点を当てることができる（例えば、Ａｌ−Ｍｕｈａｍｍｅｄ、Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌ．１３：２９３〜３０６、１９９６；Ｃｈｏｎｎ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６：６９８〜７０８、１９９５；Ｏｓｔｒｏ、Ａｍ．Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．４６：１５７６〜１５８７、１９８９を参照のこと）。本発明の組成物は、ナノ粒子としても送達できる。
【０１２０】
抗体構築物
とりわけ、がんの治療に有用な組成物が、本明細書で提供される。本明細書で提供される抗体可変ドメイン及びそれを含む抗体構築物は、とりわけ、がん細胞を標的化して死滅させ、健康な細胞を無傷なままにするのに有用である。それらの実施形態を含む、本明細書で提供される組成物は、ヒトマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）に特異的に結合することが可能であり、エフェクター細胞（例えば、ＮＫ細胞）の存在下でＭＣＬ細胞の標的化された溶解を引き起こすことが可能である。驚くべきことに、本明細書で提供される抗体可変ドメイン及び抗体構築物は、非がん（健康な）細胞に結合せず、それによって、そうでなかったならば健康な細胞の非特異的死滅によって引き起こされる有害効果を予防する。非がん細胞と比較してがん細胞に示差的に結合するそれらの能力に起因して、本明細書で提供される抗体可変ドメイン及び抗体構築物は、治療目的及び診断目的のために有用な、高度に効率的かつ効果的な薬剤である。
【０１２１】
ある態様では、配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む抗体可変ドメインが提供される。ＣＤＲが列挙される順序は、Ｎ末端からＣ末端への抗体可変ドメイン中のそれらの順序に対応する。したがって、Ｎ末端からＣ末端の方向で、抗体可変ドメインは、配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含み得る。実施形態では、抗体可変ドメインは、配列番号５の配列を含む。実施形態では、抗体可変ドメインは、配列番号５の配列である。
【０１２２】
「抗体可変ドメイン」とは、本明細書で提供される場合、抗原に結合することが可能なペプチド（例えば、ペプチドドメイン）又はペプチジル部分を指す。提供される抗体可変ドメインは、軽鎖可変（ＶＬ）ドメイン又は重鎖可変（ＶＨ）ドメインのＣＤＲ配列及びフレームワーク領域（ＦＲ）配列を含む。提供される抗体可変ドメインは、軽鎖可変（ＶＬ）ドメイン又は重鎖可変（ＶＨ）ドメインを含み得る。したがって、実施形態では、抗体可変ドメインは、軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む。実施形態では、抗体可変ドメインは、重鎖可変（ＶＨ）ドメインを含む。実施形態では、抗体可変ドメインは、軽鎖可変（ＶＬ）ドメインである。実施形態では、抗体可変ドメインは、重鎖可変（ＶＨ）ドメインである。
【０１２３】
「重鎖可変（ＶＨ）ドメイン」は、本明細書で提供される場合、抗体又はその断片の重鎖の抗体可変ドメインである。同様に、「軽鎖可変（ＶＬ）ドメイン」は、本明細書で提供される場合、抗体又はその断片の軽鎖の抗体可変ドメインである。実施形態では、軽鎖可変（ＶＬ）ドメインは、抗体可変軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３並びにＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３及びＦＲ４（フレームワーク領域）を含む。したがって、抗体可変ドメインは、抗体の軽鎖の可変ドメインであり得る。実施形態では、抗体可変ドメインは、抗体の軽鎖の可変ドメインである。実施形態では、抗体可変ドメインは、抗体断片の軽鎖の可変ドメインである。実施形態では、抗体可変ドメインは、抗体バリアントの軽鎖の可変ドメインである。実施形態では、抗体可変ドメインは、Ｆａｂの軽鎖の可変ドメインである。抗体可変ドメインは、抗体の重鎖の可変ドメインであり得る。実施形態では、抗体可変ドメインは、抗体断片の重鎖の可変ドメインである。実施形態では、抗体可変ドメインは、抗体バリアントの重鎖の可変ドメインである。実施形態では、抗体可変ドメインは、Ｆａｂの重鎖の可変ドメインである。上述を考慮すると、本明細書で提供される抗体可変ドメインは、抗体、その断片若しくはバリアントの軽鎖の可変ドメイン、又は抗体、その断片若しくはバリアントの重鎖の可変ドメインを含み得る、又は抗体、その断片若しくはバリアントの軽鎖の可変ドメイン、又は抗体、その断片若しくはバリアントの重鎖の可変ドメインであり得る。したがって、実施形態では、抗体可変ドメインは、抗体軽鎖可変ドメインである。実施形態では、抗体可変ドメインは、抗体重鎖可変ドメインである。
【０１２４】
本明細書で提供される抗体可変ドメインは、抗体、抗体バリアント又は抗体断片の一部を形成し得る。それらの実施形態を含む、本明細書で提供される抗体可変ドメインは、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）の一部を形成し得る。実施形態では、それらの実施形態を含む、本明細書で提供される抗体可変ドメインは、抗体構築物の一部を形成する。抗体構築物は、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体構築物であり得る。したがって、別の態様では、第１の抗体ペプチドを含む抗体構築物であって、第１の抗体ペプチドが、（ｉ）配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む第１の抗体可変ドメイン；並びに（ｉｉ）第１の抗体可変ドメインに結合された第１の抗体ドメインを含む、抗体構築物が提供される。実施形態では、抗体構築物は、図２Ａに示される構築物である。
【０１２５】
「抗体構築物」とは、本明細書で提供される場合、抗体可変ドメイン（例えば、第１の抗体可変ドメイン）及び抗体ドメインを含む抗体ペプチド（例えば、第１の抗体ペプチド）を含む、組換えポリペプチド又は組換えポリペプチド複合体を指す。実施形態では、抗体構築物は、本明細書に記載される抗体である。実施形態では、抗体構築物は、本明細書に記載される抗体バリアントである。抗体構築物は、この抗体可変ドメインを少なくとも一部は介して抗原に結合することが可能であり、一価又は多価（例えば、二価又は四価）ポリペプチド複合体であり得る。本明細書で提供される抗体構築物は、１つ以上の抗体ペプチド（例えば、第１の抗体ペプチド又は第２の抗体ペプチド）の一部を形成する１つ以上の抗体可変ドメイン（例えば、第１、第２、第３又は第４の抗体可変ドメイン）を含み得る。したがって、抗体構築物は、１つ以上の（例えば、２、３又は４つの）抗体可変ドメインを少なくとも一部は介して抗原に結合することができてよく、したがって、それぞれ、一価、二価又は四価抗体構築物と呼ばれ得る。
【０１２６】
本明細書で提供される抗体構築物は、少なくとも１つの抗体ペプチドを含む。「抗体ペプチド」は、本明細書で提供される場合、本明細書で提供される抗体可変ドメインと、１つ以上の重鎖定常ドメイン（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２又はＣＨ３）又はそれらの断片若しくはバリアントとの組み合わせを含むポリペプチドである。「重鎖定常（ＣＨ）ドメイン」は、本明細書で提供される場合、抗体又はその断片の重鎖の定常領域の一部を形成するドメイン（例えば、重鎖定常１（ＣＨ１）ドメイン、重鎖定常２（ＣＨ２）ドメイン、重鎖定常３（ＣＨ３）ドメイン）である。
【０１２７】
実施形態では、抗体ペプチド（例えば、第１の抗体ペプチド）は、抗体軽鎖可変ドメイン（例えば、第１の抗体軽鎖可変ドメイン）、重鎖定常２（ＣＨ２）ドメイン（例えば、第１のＣＨ２ドメイン）及び重鎖定常３（ＣＨ３）ドメイン（例えば、第１のＣＨ３ドメイン）を含む。実施形態では、抗体ペプチドは、第１の抗体軽鎖可変ドメイン、第２の抗体軽鎖可変ドメイン、重鎖定常２（ＣＨ２）ドメイン及び重鎖定常３（ＣＨ３）ドメインを含む。実施形態では、抗体ペプチドは、抗体軽鎖可変ドメイン、重鎖定常１（ＣＨ１）ドメイン、重鎖定常２（ＣＨ２）ドメイン及び重鎖定常３（ＣＨ３）ドメインを含む。上記実施形態について、ドメイン及び領域が列挙される順序は、Ｎ末端からＣ末端への抗体ペプチド中のそれらの順序に対応する。したがって、Ｎ末端からＣ末端の方向で、抗体ペプチドは、抗体軽鎖可変ドメイン、重鎖定常２（ＣＨ２）ドメイン及び重鎖定常３（ＣＨ３）ドメインを含み得る。さらに、Ｎ末端からＣ末端の方向で、抗体ペプチドは、第１の抗体軽鎖可変ドメイン、第２の抗体軽鎖可変ドメイン、重鎖定常２（ＣＨ２）ドメイン及び重鎖定常３（ＣＨ３）ドメイン、又は抗体軽鎖可変ドメイン、重鎖定常１（ＣＨ１）ドメイン、重鎖定常２（ＣＨ２）ドメイン及び重鎖定常３（ＣＨ３）ドメインを含み得る。
【０１２８】
上記のように、抗体構築物は、１つよりも多い抗体ペプチドを含み得る。実施形態では、抗体構築物は、互いに結合された第１の抗体ペプチド及び第２の抗体ペプチドを含む。第１の抗体ペプチドは、化学的リンカーを介して第２の抗体ペプチドに結合され得る。第１の抗体ペプチドは、共有結合を介して第２の抗体ペプチドに結合され得る。第１の抗体ペプチドは、非共有結合を介して第２の抗体ペプチドに結合され得る。第１の抗体ペプチドは、ダイマーを形成するために、第２の抗体ペプチドに結合され得る。
【０１２９】
抗体構築物は、第１の軽鎖抗体ペプチド及び第２の軽鎖抗体ペプチドをさらに含み得、ここで、第１の軽鎖抗体ペプチド及び第１の抗体ペプチドは、互いに結合され、第２の軽鎖抗体ペプチド及び第２の抗体ペプチドは、互いに結合されている。軽鎖抗体ペプチドとは、本明細書で提供される場合、本明細書で提供される抗体可変ドメイン及び軽鎖定常領域／ドメイン（ＣＬ）を含むポリペプチドを指す。「軽鎖定常（ＣＬ）ドメイン」とは、本明細書で提供される場合、抗体又はその断片の軽鎖の定常領域を指す。実施形態では、軽鎖抗体ペプチド（第１又は第２の軽鎖抗体ペプチド）は、抗体軽鎖可変ドメイン及び軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）を含む。したがって、Ｎ末端からＣ末端の方向で、軽鎖抗体ペプチドは、抗体軽鎖可変ドメイン及び軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）を含み得る。第１の軽鎖抗体ペプチドは、化学的リンカー（共有結合又は非共有結合的）を介して第１の抗体ペプチドに結合され得、第２の軽鎖抗体ペプチドは、化学的リンカー（共有結合又は非共有結合的）を介して第２の抗体ペプチドに結合され得る。
【０１３０】
「抗体ドメイン」は、本明細書で言及される場合、上記重鎖定常領域（ＣＨ）を含むポリペプチドの一部分である。抗体ドメインは、１つ以上の重鎖定常ドメイン（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３）を含み得る。実施形態では、抗体ドメインは、定常重鎖２（ＣＨ２）ドメイン及び定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインを含む。実施形態では、抗体ドメインは、定常重鎖１（ＣＨ１）ドメイン、定常重鎖２（ＣＨ２）ドメイン及び定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインを含む。Ｎ末端からＣ末端の方向で、抗体ドメインは、定常重鎖２（ＣＨ２）ドメイン及び定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインを含み得る。実施形態では、抗体ドメインは、Ｎ末端からＣ末端の方向で、定常重鎖１（ＣＨ１）ドメイン、定常重鎖２（ＣＨ２）ドメイン及び定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインを含む。実施形態では、抗体ドメインは、ヒト抗体ドメインである。実施形態では、抗体ドメインは、マウス抗体ドメインである。実施形態では、抗体ドメインは、定常重鎖である。本明細書で提供される「定常重鎖」は、抗体の１つ以上の重鎖定常ドメインを含むペプチジル部分である。
【０１３１】
実施形態では、抗体構築物は、一価抗体構築物である。一価抗体構築物とは、本明細書で提供される場合、１つの抗体可変ドメイン（例えば、第１の抗体可変ドメイン）を含む第１の抗体ペプチドを含む抗体構築物を指し、ここで、この構築物は、この１つの抗体可変ドメインを少なくとも一部は介して抗原に結合する。本明細書で提供される一価抗体構築物は、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）であり得、ここで、抗体可変ドメイン（例えば、第１の抗体可変ドメイン）は、化学的リンカー（例えば、ペプチドリンカー）を介して可変重鎖ドメイン（例えば、第１の可変重鎖ドメイン）に結合されている。「可変重鎖ドメイン」は、本明細書で提供される場合、ＦＲ（フレームワーク領域）及びＣＤＲを含み、抗原に結合することが可能なペプチジル部分である。実施形態では、可変重鎖ドメインは、可変重鎖（ＶＨ）を含む。実施形態では、可変重鎖ドメインは、可変重鎖（ＶＨ）である。したがって、実施形態では、第１の抗体ドメインは、第１の可変重鎖ドメインである。実施形態では、抗体構築物は、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）である。実施形態では、抗体構築物は、単一ドメイン抗体（ナノボディ）である。
【０１３２】
本明細書で提供される一価抗体構築物は、化学的リンカーを介して第１の抗体ドメインに結合された第１の抗体可変ドメインを含む第１の抗体ペプチドを含み得る。実施形態では、化学的リンカーは、共有結合リンカーである。実施形態では、リンカーは結合である。実施形態では、第１の抗体ドメインは、第１の定常重鎖である。実施形態では、第１の定常重鎖は、第１の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合された第１の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインを含む。実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、第１のＣＨ２ドメインを介して第１の抗体可変ドメインに結合されている。実施形態では、第１の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインは、共有結合リンカーを介して第１の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合されている。さらなる実施形態では、第１の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインは、結合を介して第１の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合されている。
【０１３３】
本明細書で提供される第１の抗体ペプチドは、１つ以上の定常重鎖ドメイン（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３）を含み得る。実施形態では、第１の抗体ペプチドは、第１の定常重鎖１（ＣＨ１）ドメインをさらに含む。実施形態では、第１のＣＨ１ドメインは、第１の抗体ドメインの一部を形成する。実施形態では、第１の抗体可変ドメインは、第１のＣＨ１ドメインを介して第１の抗体ドメインに結合されている。実施形態では、第１の抗体可変ドメインは、化学的リンカーを介して第１のＣＨ１ドメインに結合されている。実施形態では、第１の抗体可変ドメインは、結合を介して第１のＣＨ１ドメインに結合されている。実施形態では、第１の抗体可変ドメインは、第１のＣＨ１ドメインを介して第１のＣＨ２ドメインに結合されている。実施形態では、第１のＣＨ２ドメインは、化学的リンカーを介して第１のＣＨ１ドメインに結合されている。実施形態では、第１のＣＨ２ドメインは、ペプチドリンカーを介して第１のＣＨ１ドメインに結合されている。
【０１３４】
一実施形態では、第１の抗体可変ドメインは、抗体軽鎖可変ドメインであり、第１の抗体ドメインは、第１のＣＨ３ドメインに結合された第１のＣＨ２ドメインからなる第１の定常重鎖であり、ここで、第１の抗体可変ドメインは、第１のＣＨ２ドメインを介して第１のＣＨ３ドメインに結合されている。他の一実施形態では、第１の抗体可変ドメインは、抗体軽鎖可変ドメインであり、第１の抗体ドメインは、第１のＣＨ２ドメインを介して第１のＣＨ３ドメインに結合された第１のＣＨ１ドメインからなる第１の定常重鎖であり、ここで、第１の抗体可変ドメインは、ＣＨ１ドメインを介してＣＨ２ドメインに結合されている。
【０１３５】
それらの実施形態を含む、本明細書で提供される抗体構築物は、二価抗体構築物であり得る。本明細書で提供される抗体構築物が二価構築物である場合、この抗体構築物は、第２の抗体可変ドメインを含む。二価抗体構築物では、第２の抗体可変ドメインは、第１の抗体ペプチドの一部を形成し得る。第２の抗体可変ドメインが第１の抗体ペプチドの一部を形成する場合、この第２の抗体可変ドメインは、第１の抗体可変ドメインを介して抗体ドメインに結合されている。したがって、実施形態では、第１の抗体ペプチドは、第１の抗体可変ドメインを介して抗体ドメインに結合された第２の抗体可変ドメインを含む。一実施形態では、第１の抗体可変ドメインは、第１の抗体軽鎖可変ドメインであり、第２の抗体可変ドメインは、第２の抗体軽鎖可変ドメインであり、第１の抗体ドメインは、第１のＣＨ３ドメインに結合された第１のＣＨ２ドメインからなる第１の定常重鎖であり、ここで、この第２の抗体可変ドメインは、第１の抗体可変ドメインを介して第１の抗体ドメインに結合されている。
【０１３６】
あるいは、第２の抗体可変ドメインは、第２の抗体ペプチドの一部を形成し得る。したがって、実施形態では、抗体構築物は、第１の抗体ペプチドに結合された第２の抗体ペプチドをさらに含む二価抗体構築物である。第２の抗体ペプチドは、ダイマーを形成するために、化学的リンカーを介して第１の抗体ペプチドに結合され得る。化学的リンカーは、共有結合リンカーであり得る。実施形態では、化学的リンカーは、ジスルフィドリンカーである。実施形態では、第２の抗体ペプチドは、第１の抗体ドメインに結合されている。実施形態では、第２の抗体ペプチドは、第１のＣＨ２ドメインに結合されている。実施形態では、第２の抗体ペプチドは、ジスルフィドリンカーを介して第１の抗体ドメインに結合されている。
【０１３７】
実施形態では、第２の抗体ペプチド及び第１の抗体ペプチドは、化学的に同一である。実施形態では、第２の抗体ペプチド及び第１の抗体ペプチドは、化学的に異なる。したがって、実施形態では、第２の抗体ペプチドに結合された第１の抗体ペプチドは、ホモダイマーを形成する。実施形態では、第２の抗体ペプチドに結合された第１の抗体ペプチドは、ヘテロダイマーを形成する。
【０１３８】
上記のように、第１の抗体ペプチド及び第２の抗体ペプチドは、化学的に同一であり得る。したがって、本明細書で提供される第２の抗体ペプチドは、第１の抗体ペプチドと同じ化学的組成を有する同一なドメイン（例えば、抗体可変ドメイン及び抗体ドメイン）を含み得る。したがって、本明細書で提供される第２の抗体ペプチドは、（ｉ）第２の抗体可変ドメイン；及び（ｉｉ）第２の抗体可変ドメインに結合された第２の抗体ドメインを含み得る。したがって、実施形態では、第２の抗体可変ドメインは、配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む。
【０１３９】
実施形態では、第２の抗体ドメインは、第２の定常重鎖である。実施形態では、第２の定常重鎖は、第２の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合された第２の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインを含む。実施形態では、第２の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインは、化学的リンカーを介して第２の抗体可変ドメインに結合されている。実施形態では、第２の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインは、結合を介して第２の抗体可変ドメインに結合されている。実施形態では、第２のＣＨ３ドメインは、第２のＣＨ２ドメインを介して第２の抗体可変ドメインに結合されている。実施形態では、第２のＣＨ３ドメインは、化学的リンカーを介して第２のＣＨ２ドメインに結合されている。実施形態では、第２のＣＨ３ドメインは、結合を介して第２のＣＨ２ドメインに結合されている。
【０１４０】
一実施形態では、第１の抗体可変ドメインは、抗体軽鎖可変ドメインであり、第２の抗体可変ドメインは、第２の抗体軽鎖可変ドメインであり、第１の抗体ドメインは、第１のＣＨ３ドメインに結合された第１のＣＨ２ドメインからなる第１の定常重鎖であり、第２の抗体ドメインは、第２のＣＨ３ドメインに結合された第２のＣＨ２ドメインからなる第２の定常重鎖であり、ここで、第１の抗体ペプチド及び第２の抗体ペプチドは、互いに結合されている。
【０１４１】
実施形態では、第２の抗体ペプチドは、第２の定常重鎖１（ＣＨ１）ドメインをさらに含む。実施形態では、第２のＣＨ１ドメインは、第２の抗体ドメインの一部を形成する。実施形態では、第２の抗体可変ドメインは、第２のＣＨ１ドメインを介して第２の抗体ドメインに結合されている。実施形態では、第２の抗体可変ドメインは、化学的リンカーを介して第２のＣＨ１ドメインに結合されている。実施形態では、第２の抗体可変ドメインは、結合を介して第２のＣＨ１ドメインに結合されている。実施形態では、第２の抗体可変ドメインは、第２のＣＨ１ドメインを介して第２のＣＨ２ドメインに結合されている。実施形態では、第２のＣＨ２ドメインは、化学的リンカーを介して第２のＣＨ１ドメインに結合されている。実施形態では、第２のＣＨ２ドメインは、ペプチドリンカーを介して第２のＣＨ１ドメインに結合されている。
【０１４２】
実施形態では、第１のＣＨ１ドメイン及び第２のＣＨ１ドメインは、互いに結合されている。実施形態では、第１のＣＨ１ドメイン及び第２のＣＨ１ドメインは、化学的リンカーを介して結合されている。
【０１４３】
それらの実施形態を含む、本明細書で提供される抗体構築物は、四価抗体構築物であり得る。それらの実施形態を含む、本明細書で提供される抗体構築物が、四価抗体構築物である場合、この抗体構築物は、本明細書で提供される４つの抗体可変ドメイン（例えば、第１、第２、第３及び第４の抗体可変ドメイン）を含む。四価抗体構築物では、第３の抗体可変ドメインは、第１の抗体ペプチドの一部を形成し得、第４の抗体可変ドメインは、第２の抗体ペプチドの一部を形成し得る。第３の抗体可変ドメインが第１の抗体ペプチドの一部を形成し、第４の抗体可変ドメインが第２の抗体ペプチドを形成する場合、第３の抗体可変ドメインは、第１の抗体可変ドメインを介して第１の抗体ドメインに結合され、第４の抗体可変ドメインは、第２の抗体可変ドメインを介して第２の抗体ドメインに結合されている。したがって、第１の抗体ペプチドは、第１の抗体可変ドメインを介して第１の抗体ドメインに結合された第３の抗体可変ドメインを含み得、第２の抗体ペプチドは、第２の抗体可変ドメインを介して第２の抗体ドメインに結合された第４の抗体可変ドメインを含み得る。したがって、実施形態では、抗体構築物は、第１の抗体ペプチドに結合された第３の抗体可変ドメイン及び第２の抗体ペプチドに結合された第４の抗体可変ドメインをさらに含む四価抗体構築物である。実施形態では、第３の抗体可変ドメインは、第１の抗体ペプチドの一部を形成し、第４の抗体可変ドメインは、第２の抗体ペプチドの一部を形成する。実施形態では、第３の抗体可変ドメインは、第１の抗体可変ドメインを介して第１の抗体ドメインに結合されている。実施形態では、第３の抗体可変ドメインは、第１の抗体可変ドメインを介して第１のＣＨ２ドメインに結合されている。実施形態では、第４の抗体可変ドメインは、第２の抗体可変ドメインを介して第２の抗体ドメインに結合されている。実施形態では、第４の抗体可変ドメインは、第２の抗体可変ドメインを介して第２のＣＨ２ドメインに結合されている。
【０１４４】
一実施形態では、第１の抗体可変ドメインは、第１の抗体軽鎖可変ドメインであり、第２の抗体可変ドメインは、第２の抗体軽鎖可変ドメインであり、第３の抗体可変ドメインは、第３の抗体軽鎖可変ドメインであり、第４の抗体可変ドメインは、第４の抗体軽鎖可変ドメインであり、第１の抗体ドメインは、第１のＣＨ３ドメインに結合された第１のＣＨ２ドメインからなる第１の定常重鎖であり、第２の抗体ドメインは、第２のＣＨ３ドメインに結合された第２のＣＨ２ドメインからなる第２の定常重鎖であり、ここで、第１の抗体ペプチド及び第２の抗体ペプチドは、互いに結合さている。
【０１４５】
あるいは、第３の抗体可変ドメインは、第１の軽鎖抗体ペプチドの一部を形成し得、第４の抗体可変ドメインは、第２の軽鎖抗体ペプチドの一部を形成し得、ここで、第１の軽鎖抗体ペプチドは、第１の抗体ペプチドに結合され、第２の軽鎖抗体ペプチドは、第２の抗体ペプチドに結合されている。第１の軽鎖抗体ペプチドは、化学的リンカーを介して第１の抗体ペプチドに結合され得る。第１の軽鎖抗体ペプチドは、共有結合リンカーを介して第１の抗体ペプチドに結合され得る。第１の軽鎖抗体ペプチドは、ジスルフィドリンカーを介して第１の抗体ペプチドに結合され得る。第２の軽鎖抗体ペプチドは、化学的リンカーを介して第２の抗体ペプチドに結合され得る。第２の軽鎖抗体ペプチドは、共有結合リンカーを介して第２の抗体ペプチドに結合され得る。第２の軽鎖抗体ペプチドは、ジスルフィドリンカーを介して第２の抗体ペプチドに結合され得る。したがって、実施形態では、第３の抗体可変ドメインは、第１の抗体ペプチドに結合された第１の軽鎖抗体ペプチドの一部を形成し、第４の抗体可変ドメインは、第２の抗体ペプチドに結合された第２の軽鎖抗体ペプチドの一部を形成する。
【０１４６】
実施形態では、第１の軽鎖抗体ペプチドは、第３の抗体可変ドメインに結合された第１の定常軽鎖１（ＣＬ１）ドメインを含む。実施形態では、第１の軽鎖抗体ペプチドは、第１のＣＬ１ドメインを介して第１の抗体ペプチドに結合されている。実施形態では、第１のＣＬ１ドメインは、化学的リンカーを介して第１のＣＨ１ドメインに結合されている。実施形態では、第１のＣＬ１ドメインは、ジスルフィドリンカーを介して第１のＣＨ１ドメインに結合されている。実施形態では、第３の抗体可変ドメインは、第１のＣＬ１ドメインを介して第１の抗体ペプチドに結合されている。
【０１４７】
実施形態では、第２の軽鎖抗体ペプチドは、第４の抗体可変ドメインに結合された第２の定常軽鎖１（ＣＬ１）ドメインを含む。実施形態では、第２の軽鎖抗体ペプチドは、第２のＣＬ１ドメインを介して第２の抗体ペプチドに結合されている。実施形態では、第２のＣＬ１ドメインは、化学的リンカーを介して第２のＣＨ１ドメインに結合されている。実施形態では、第２のＣＬ１ドメインは、ジスルフィドリンカーを介して第２のＣＨ１ドメインに結合されている。実施形態では、第４の抗体可変ドメインは、第２のＣＬ１ドメインを介して第２の抗体ペプチドに結合されている。
【０１４８】
一実施形態では、第１の抗体可変ドメインは、第１の抗体軽鎖可変ドメインであり、第２の抗体可変ドメインは、第２の抗体軽鎖可変ドメインであり、第３の抗体可変ドメインは、第３の抗体軽鎖可変ドメインであり、第４の抗体可変ドメインは、第４の抗体軽鎖可変ドメインであり、第１の抗体ドメインは、第１のＣＨ２ドメインを介して第１のＣＨ３ドメインに結合された第１のＣＨ１ドメインからなる第１の定常重鎖であり、第２の抗体ドメインは、第２のＣＨ２ドメインを介して第２のＣＨ３ドメインに結合された第２のＣＨ１ドメインからなる第２の定常重鎖であり、ここで、第３の抗体可変ドメインは、第１の抗体軽鎖ペプチドの一部を形成し、第４の抗体可変ドメインは、第２の抗体軽鎖ペプチドの一部を形成し、第１の抗体軽鎖ペプチドは、第１の抗体ペプチドに結合され、第２の抗体軽鎖ペプチドは、第２の抗体ペプチドに結合されている。さらなる一実施形態では、第１の抗体ペプチド及び第２の抗体ペプチドは、互いに結合されている。
【０１４９】
本明細書で提供される抗体構築物は、抗体の一部又は断片（例えば、ＣＤＲ、ＦＲ、ＶＬ、ＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３ドメイン）を含み得る組換えポリペプチドである。実施形態では、抗体構築物は抗体である。実施形態では、抗体構築物は抗体バリアントである。
【０１５０】
実施形態では、抗体構築物はＦａｂ’断片である。実施形態では、抗体構築物はキメラ抗体である。実施形態では、抗体構築物はヒト化抗体である。実施形態では、抗体構築物はヒト抗体である。
【０１５１】
本明細書で提供される抗体構築物は、治療的使用のために企図される。本明細書で提供される抗体構築物ががん細胞を特異的に標的化し、健康な細胞を回避する能力は、これらを、とりわけ、がん治療薬として有用なものにする。それらの実施形態を含む、本明細書で提供される抗体構築物は、がん細胞の溶解を伝えつつ、がんのような疾患を治療若しくは予防する際に有用なさらなる治療剤を含み得、及び／又はかかるさらなる治療剤と共に投与され得る。実施形態では、抗体構築物又は抗体可変ドメインは、治療剤にコンジュゲート化される又は他の方法で共有結合される。実施形態では、抗体構築物又は抗体可変ドメインは、抗体−薬物コンジュゲートである。
【０１５２】
本明細書で提供される抗体構築物は、診断薬における使用のためにさらに企図される。本明細書で提供される抗体構築物ががん細胞を特異的に標的化し、健康な細胞を回避する能力は、これらを、がんの正確な診断のために独自に有用なものにする。したがって、それらの実施形態を含む、本明細書で提供される抗体構築物は、がん細胞の検出を可能にするために、１つ以上の検出可能な部分を備え得る。
【０１５３】
実施形態では、抗体構築物は、検出可能な部分を含む。検出可能な部分は、上記のように化学的リンカーを介して抗体構築物に結合され得る。実施形態では、検出可能な部分は、蛍光部分である。
【０１５４】
実施形態では、抗体構築物は、がんタンパク質に結合している。「がんタンパク質」とは、本明細書で提供される場合、がん細胞によって発現されるが健康な細胞によっては発現されない任意のタンパク質（例えば、表面受容体、分泌型ペプチド又はシグナル伝達ペプチド）を指す。実施形態では、がんタンパク質は、がん細胞の一部を形成する。実施形態では、がん細胞は、リンパ系細胞である。実施形態では、がん細胞は、Ｂ細胞である。実施形態では、がん細胞は、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）細胞である。実施形態では、抗体構築物は、非がん細胞には結合しない。実施形態では、抗体構築物は、標準的なコントロールと比較して、非がん細胞には結合しない。実施形態では、抗体構築物は、非がん細胞に検出可能には結合しない。
【０１５５】
一実施形態では、抗体構築物は、第２の抗体ペプチドに結合された第１の抗体ペプチドを含む二価抗体構築物であり、ここで、この第１の抗体ペプチドは、第１の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインを介して第１の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合された第１の抗体軽鎖可変ドメインを含み、第２の抗体ペプチドは、第２の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインを介して第２の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合された第２の抗体軽鎖可変ドメインを含む。実施形態では、第１のＣＨ２ドメインは、マウスＣＨ２ドメインであり、第１のＣＨ３ドメインは、マウスＣＨ３ドメインであり、第２のＣＨ２ドメインは、マウスＣＨ２ドメインであり、第２のＣＨ３ドメインは、マウスＣＨ３ドメインである。
【０１５６】
一実施形態では、抗体構築物は、第２の抗体ペプチドに結合された第１の抗体ペプチドを含む二価抗体構築物であり、ここで、この第１の抗体ペプチドは、第１の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインを介して第１の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合された第１の抗体軽鎖可変ドメインを含み、第２の抗体ペプチドは、第２の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインを介して第２の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合された第２の抗体軽鎖可変ドメインを含む。実施形態では、第１のＣＨ２ドメインは、ヒトＣＨ２ドメインであり、第１のＣＨ３ドメインは、ヒトＣＨ３ドメインであり、第２のＣＨ２ドメインは、ヒトＣＨ２ドメインであり、第２のＣＨ３ドメインは、ヒトＣＨ３ドメインである。
【０１５７】
核酸組成物
それらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体構築物をコードする単離された核酸がさらに提供される。用語「コードすること」又は「コードする」は、核酸が、タンパク質を産生するために必要な遺伝コードを含むことを特定するために、その通例の意味で使用される。
【０１５８】
実施形態では、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体可変ドメインをコードする単離された核酸が提供される。一態様では、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される第１の抗体ペプチドをコードする単離された核酸が提供される。一態様では、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される第２の抗体ペプチドをコードする単離された核酸が提供される。一態様では、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される第１の軽鎖抗体ペプチドをコードする単離された核酸が提供される。一態様では、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される第２の軽鎖抗体ペプチドをコードする単離された核酸が提供される。
【０１５９】
実施形態では、単離された核酸は、配列番号４、配列番号６、配列番号７、配列番号８又は配列番号９の配列を含む。実施形態では、単離された核酸は、配列番号６の配列を含む。実施形態では、単離された核酸は、配列番号７の配列を含む。実施形態では、単離された核酸は、配列番号８の配列を含む。実施形態では、単離された核酸は、配列番号９の配列を含む。
【０１６０】
実施形態では、抗体構築物は、配列番号４、配列番号６、配列番号７、配列番号８又は配列番号９の配列を含む単離された核酸によってコードされる。実施形態では、抗体構築物は、配列番号４の配列を含む単離された核酸によってコードされる。実施形態では、抗体構築物は、配列番号６の配列を含む単離された核酸によってコードされる。実施形態では、抗体構築物は、配列番号７の配列を含む単離された核酸によってコードされる。実施形態では、抗体構築物は、配列番号８の配列を含む単離された核酸によってコードされる。実施形態では、抗体構築物は、配列番号９の配列を含む単離された核酸によってコードされる。実施形態では、抗体可変ドメインは、配列番号４を含む核酸によってコードされる。実施形態では、抗体可変ドメインは、配列番号４によってコードされる。
【０１６１】
一実施形態では、５’から３’の方向で、第１の抗体軽鎖可変ドメイン、ペプチドリンカー、第１のＣＨ２ドメイン及び第１のＣＨ３ドメインをコードする単離された核酸が提供される。さらなる一実施形態では、第１の抗体軽鎖可変ドメインは、配列番号４を含む核酸によってコードされる。さらなる一実施形態では、第１のＣＨ２ドメイン及び第１のＣＨ３ドメインは、配列番号６を含む核酸によってコードされる。さらなる一実施形態では、配列番号４及び配列番号６は、同じ核酸の一部を形成する。一実施形態では、単離された核酸は、配列番号４及び配列番号６を含む。
【０１６２】
一実施形態では、５’から３’の方向で、第１の抗体軽鎖可変ドメイン、第２の抗体軽鎖可変ドメイン、第１のＣＨ２ドメイン及び第１のＣＨ３ドメインをコードする単離された核酸が提供される。さらなる一実施形態では、第１の抗体軽鎖可変ドメインは、配列番号４を含む核酸によってコードされ、第２の抗体軽鎖可変ドメインは、配列番号４を含む核酸によってコードされる。さらなる一実施形態では、第１のＣＨ２ドメイン及び第１のＣＨ３ドメインは、配列番号６を含む核酸によってコードされる。さらなる一実施形態では、配列番号４及び配列番号６は、同じ核酸の一部を形成する。一実施形態では、単離された核酸は、配列番号４及び配列番号６を含む。
【０１６３】
一実施形態では、５’から３’の方向で、第１の抗体軽鎖可変ドメイン、第１のＣＨ１ドメイン、ペプチドリンカー、第１のＣＨ２ドメイン及び第１のＣＨ３ドメインをコードする単離された核酸が提供される。さらなる一実施形態では、第１の抗体軽鎖可変ドメインは、配列番号４を含む核酸によってコードされる。さらなる一実施形態では、第１のＣＨ１ドメイン、第１のＣＨ２ドメイン及び第１のＣＨ３ドメインは、配列番号８を含む核酸によってコードされる。さらなる一実施形態では、配列番号４及び配列番号８は、同じ核酸の一部を形成する。一実施形態では、単離された核酸は、配列番号４及び配列番号８を含む。
【０１６４】
一実施形態では、５’から３’の方向で、第１の抗体軽鎖可変ドメイン及び第１の定常軽鎖（ＣＬ１）をコードする単離された核酸が提供される。さらなる一実施形態では、第１の抗体軽鎖可変ドメインは、配列番号４を含む核酸によってコードされる。さらなる一実施形態では、第１の定常軽鎖（ＣＬ１）は、配列番号９を含む核酸によってコードされる。さらなる一実施形態では、配列番号４及び配列番号９は、同じ核酸の一部を形成する。一実施形態では、単離された核酸は、配列番号４及び配列番号９を含む。
【０１６５】
医薬組成物
実施形態では、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体可変ドメイン又はそれらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体構築物の治療有効量及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。実施形態では、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体可変ドメインの治療有効量及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。実施形態では、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体構築物の治療有効量及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
【０１６６】
「治療有効量」とは、本明細書で提供される場合、その意図した目的を達成するのに有効な量を指す。特定の適用のために有効な実際の量は、とりわけ、治療されている状態に依存する。疾患を治療するための方法で投与される場合、本明細書に記載される医薬組成物は、所望の結果、例えば、疾患症状（例えば、がん）を低減させる、排除する、又はその進行を緩徐化することを達成するのに有効な量の活性抗体構築物を含む。本明細書で提供される抗体構築物の治療有効量の決定は、特に、本明細書の詳述された開示に照らして、当業者の能力の範囲内に十分に入る。
【０１６７】
許容される担体、賦形剤又は安定剤は、使用される投薬量及び濃度においてレシピエントにとって非毒性であり、これには、典型的には５．０〜８．０、最も頻繁には６．０〜７．０のｐＨの、リン酸、クエン酸又は酢酸のような緩衝液；等張にするための、塩化ナトリウム、塩化カリウムなどのような塩；抗酸化剤、防腐剤、低分子量ポリペプチド、タンパク質、ポリソルベート８０のような親水性ポリマー、グリシンのようなアミノ酸、炭水化物、キレート剤、糖、及び当業者に公知の他の標準的な成分が含まれる（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  第１６版、Ｏｓｏｌ，Ａ編、１９８０）。抗体構築物は、典型的には、０．１〜１００ｍｇ／ｍｌ、例えば、１〜１０ｍｇ／ｍｌ又は１０〜５０ｍｇ／ｍｌ、例えば、５、１０、２０、３０、４０、５０又は６０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【０１６８】
本明細書に記載される抗体構築物を含む医薬組成物は、当該分野で公知の種々の方法によって投与され得る。投与の経路及び／又は様式は、所望の結果に依存して変動する。実施形態では、投与は、静脈内、筋肉内、腹腔内若しくは皮下であり、又は標的の部位に対して近位に投与される。薬学的に許容される賦形剤は、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、脊髄又は表皮投与（例えば、注射又は注入による）に適切であり得る。
【０１６９】
抗体構築物の医薬組成物は、当該分野で周知であり、慣用的に実施される方法に従って調製され得る。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、第２０版、２０００；及びＳｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ編、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９７８を参照のこと。医薬組成物は、好ましくは、ＧＭＰ条件下で製造される。典型的には、抗体構築物の治療的に有効な用量又は効果的な用量が、本発明の医薬組成物において使用される。提供される抗体構築物は、当業者に公知の従来の方法によって、薬学的に許容される投薬形態へと製剤化され得る。投薬レジメンは、最適な所望の応答（例えば、治療応答）を提供するために調整される。例えば、単一のボーラスが投与され得、いくつかの分割された用量が経時的に投与され得、又は用量は、治療的状況の要求によって示される場合、予防的に低減若しくは増加され得る。他の治療又は薬剤と組み合わせて抗体構築物を製剤化することが有利であり得る。投与の容易さ及び投薬量の均一性のために、投薬単位形態で非経口組成物を製剤化することが有利であり得る。投薬単位形態とは、本明細書で使用する場合、治療される対象への単位投薬量として適した物理的に別個の単位を指す；各単位は、必要とされる医薬賦形剤と関連して、所望の治療効果を生成するように計算された抗体構築物の所定の量を含む。
【０１７０】
本発明の医薬組成物中の活性成分の実際の投薬量レベルは、患者にとって毒性であることなしに、特定の患者、組成物、及び投与の様式について、所望の治療応答を達成するのに有効な量の活性成分を得るために、変動され得る。選択された投薬量レベルは、使用される本発明の特定の組成物の活性、投与の経路、投与のタイミング、使用されている特定の抗体の排泄の速度、治療の持続時間、使用される特定の組成物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物及び／又は材料、治療されている患者の年齢、性別、体重、状態、全般的健康及び以前の病歴などの因子を含む種々の薬物動態学的因子に依存する。
【０１７１】
医師又は獣医師は、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベルよりも低いレベルで、医薬組成物中で使用される本発明の抗体構築物の用量を開始でき、所望の効果が達成されるまで、投薬量を徐々に増加させることができる。一般に、本発明の組成物の有効用量は、治療される特定の疾患又は状態、投与の手段、標的部位、患者の生理学的状態、患者がヒトなのか動物なのか、投与される他の薬物療法、及び治療が予防的なのか治療的なのかを含む多くの異なる因子に依存して変動する。治療投薬量は、安全性及び効力を最適化するために、滴定する必要がある。抗体による投与について、投薬量は、宿主体重１ｋｇ当たり、約０．０００１〜１００ｍｇ、より通常は０．０１〜５ｍｇの範囲である。例えば、投薬量は、１ｍｇ／ｋｇ体重若しくは１０ｍｇ／ｋｇ体重、又は１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲内であり得る。例示的な治療レジームは、２週間毎に１回、又は１カ月に１回、又は３〜６カ月毎に１回の投与を伴う。
【０１７２】
本明細書で提供される抗体構築物は、複数の時に投与され得る。単一の投薬量間の間隔は、１週間、１カ月又は１年であり得る。間隔は、患者における抗体構築物の血中レベルを測定することによって示される場合、不規則にすることもできる。一部の方法では、投薬量は、１〜１０００μｇ／ｍｌの血漿抗体構築物濃度を達成するため、一部の方法では、２５〜３００μｇ／ｍｌの血漿抗体構築物濃度を達成するために、調整される。あるいは、抗体は、より低頻度の投与が必要とされる場合、徐放性製剤として投与され得る。投薬量及び頻度は、患者における抗体構築物の半減期に依存して変動する。一般に、ヒト化抗体（例えば、抗体構築物）は、キメラ抗体及び非ヒト抗体の半減期よりも長い半減期を示す。投与の投薬量及び頻度は、治療が予防的なのか治療的なのかに依存して変動し得る。予防的適用では、比較的低い投薬量が、長期間にわたって、比較的低頻度の間隔で投与される。一部の患者は、彼らの残りの人生にわたって治療を受け続ける。治療的適用では、時として、比較的短い間隔での比較的低い投薬量が、疾患の進行が低減又は終結されるまで、好ましくは、患者が、疾患の症状の部分的又は完全な軽快を示すまで、必要とされる。その後、患者には、予防レジームが投与され得る。
【０１７３】
治療の方法
実施形態では、それを必要とする対象においてがんを治療する方法であって、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体可変ドメイン、又はそれらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体構築物の治療有効量を対象に投与し、それによって対象におけるがんを治療するステップを含む方法が提供される。
【０１７４】
実施形態では、それを必要とする対象においてがんを治療する方法であって、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体可変ドメインの治療有効量を対象に投与し、それによって対象におけるがんを治療するステップを含む方法が提供される。
【０１７５】
実施形態では、それを必要とする対象においてがんを治療する方法であって、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体構築物の治療有効量を対象に投与し、それによって対象におけるがんを治療するステップを含む方法が提供される。
【０１７６】
実施形態では、がんは、リンパ腫、白血病又は骨髄腫である。実施形態では、がんはリンパ腫である。実施形態では、がんは骨髄腫である。
【０１７７】
実施形態では、リンパ腫は、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫又はバーキットリンパ腫である。実施形態では、リンパ腫は、マントル細胞リンパ腫である。実施形態では、リンパ腫は、濾胞性リンパ腫である。実施形態では、リンパ腫は、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫である。実施形態では、リンパ腫は、辺縁帯リンパ腫である。実施形態では、リンパ腫は、バーキットリンパ腫である。
【０１７８】
実施形態では、白血病は、リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病又はヘアリー細胞白血病である。実施形態では、白血病は、リンパ芽球性白血病である。実施形態では、白血病は、慢性リンパ性白血病である。実施形態では、白血病は、ヘアリー細胞白血病である。
【０１７９】
実施形態では、この方法は、第２の治療剤を対象に投与するステップをさらに含む。上記のように、治療剤は、がんのような疾患を治療又は予防する際に有用な組成物である。実施形態では、第２の治療剤は、抗がん剤である。
【０１８０】
「抗がん剤（ａｎｔｉ−ｃａｎｃｅｒ  ａｇｅｎｔ）」及び「抗がん剤（ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ａｇｅｎｔ）」は、それらの平易な通常の意味に従って使用され、抗新生物特性又は細胞の成長若しくは増殖を阻害する能力を有する組成物（例えば、化合物、薬物、アンタゴニスト、阻害剤、モジュレーター）を指す。一部の実施形態では、抗がん剤は、化学療法薬である。一部の実施形態では、抗がん剤は、がんを治療する方法において有用性を有する、本明細書で同定される薬剤である。一部の実施形態では、抗がん剤は、がんを治療するために、ＦＤＡ又は米国以外の国の類似の規制機関によって承認された薬剤である。抗がん剤の例には、ＭＥＫ（例えば、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、又はＭＥＫ１及びＭＥＫ２）阻害剤（例えば、ＸＬ５１８、ＣＩ−１０４０、ＰＤ０３５９０１、セルメチニブ／ＡＺＤ６２４４、ＧＳＫ１１２０２１２／トラメチニブ、ＧＤＣ−０９７３、ＡＲＲＹ−１６２、ＡＲＲＹ−３００、ＡＺＤ８３３０、ＰＤ０３２５９０１、Ｕ０１２６、ＰＤ９８０５９、ＴＡＫ−７３３、ＰＤ３１８０８８、ＡＳ７０３０２６、ＢＡＹ  ８６９７６６）、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、イホスファミド、クロラムブシル、ブスルファン、メルファラン、メクロレタミン、ウラムスチン（ｕｒａｍｕｓｔｉｎｅ）、チオテパ、ニトロソウレア、ナイトロジェンマスタード（例えば、メクロレタミン（ｍｅｃｈｌｏｒｏｅｔｈａｍｉｎｅ）、シクロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン（ｍｅｉｐｈａｌａｎ））、エチレンイミン及びメチルメラミン（ｍｅｔｈｙｌｍｅｌａｍｉｎｅ）（例えば、ヘキサメチルメラミン（ｈｅｘａｍｅｔｈｌｙｍｅｌａｍｉｎｅ）、チオテパ）、スルホン酸アルキル（例えば、ブスルファン）、ニトロソウレア（例えば、カルムスチン、ロムスチン（ｌｏｍｕｓｉｔｎｅ）、セムスチン、ストレプトゾシン）、トリアゼン（ダカルバジン（ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）））、代謝拮抗薬（例えば、５−アザチオプリン、ロイコボリン、カペシタビン、フルダラビン、ゲムシタビン、ペメトレキセド、ラルチトレキセド、葉酸アナログ（例えば、メトトレキサート）、又はピリミジンアナログ（例えば、フルオロウラシル、フロクスウリジン（ｆｌｏｘｏｕｒｉｄｉｎｅ）、シタラビン）、プリンアナログ（例えば、メルカプトプリン、チオグアニン、ペントスタチン）など）、植物アルカロイド（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン、ポドフィロトキシン、パクリタキセル、ドセタキセルなど）、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、イリノテカン、トポテカン、アムサクリン、エトポシド（ＶＰ１６）、エトポシドリン酸塩、テニポシドなど）、抗腫瘍抗生物質（例えば、ドキソルビシン、アドリアマイシン、ダウノルビシン、エピルビシン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ミトキサントロン、プリカマイシンなど）、白金ベースの化合物（例えば、シスプラチン、オキサリプラチン（ｏｘａｌｏｐｌａｔｉｎ）、カルボプラチン）、アントラセンジオン（例えば、ミトキサントロン）、置換尿素（例えば、ヒドロキシウレア）、メチルヒドラジン誘導体（例えば、プロカルバジン）、副腎皮質抑制薬（例えば、ミトタン、アミノグルテチミド）、エピポドフィロトキシン（例えば、エトポシド）、抗生物質（例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン）、酵素（例えば、Ｌ−アスパラギナーゼ）、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼシグナル伝達の阻害剤（例えば、Ｕ０１２６、ＰＤ９８０５９、ＰＤ１８４３５２、ＰＤ０３２５９０１、ＡＲＲＹ−１４２８８６、ＳＢ２３９０６３、ＳＰ６００１２５、ＢＡＹ  ４３−９００６、ワートマニン（ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ）、又はＬＹ２９４００２、Ｓｙｋ阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、抗体（例えば、リツキサン）、ゴシポール（ｇｏｓｓｙｐｈｏｌ）、ゲナセンス、ポリフェノールＥ、クロロフジン（Ｃｈｌｏｒｏｆｕｓｉｎ）、オールトランスレチノイン酸（ＡＴＲＡ）、ブリオスタチン、腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘発リガンド（ＴＲＡＩＬ）、５−アザ−２’−デオキシシチジン、オールトランスレチノイン酸、ドキソルビシン、ビンクリスチン、エトポシド、ゲムシタビン、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））、ゲルダナマイシン、１７−Ｎ−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７−ＡＡＧ）、フラボピリドール、ＬＹ２９４００２、ボルテゾミブ、トラスツズマブ、ＢＡＹ  １１−７０８２、ＰＫＣ４１２、ＰＤ１８４３５２、２０−エピ−１，２５ジヒドロキシビタミンＤ３；５−エチニルウラシル；アビラテロン；アクラルビシン；アシルフルベン；アデシペノール（ａｄｅｃｙｐｅｎｏｌ）；アドゼレシン；アルデスロイキン；ＡＬＬ−ＴＫアンタゴニスト；アルトレタミン；アンバムスチン；アミドクス（ａｍｉｄｏｘ）；アミホスチン；アミノレブリン酸；アムルビシン；アムサクリン；アナグレリド；アナストロゾール；アンドログラフォリド（ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ）；血管新生阻害剤；アンタゴニストＤ；アンタゴニストＧ；アンタレリクス（ａｎｔａｒｅｌｉｘ）；抗背側化形態形成タンパク質−１；抗アンドロゲン薬、前立腺癌；抗エストロゲン剤；アンチネオプラストン（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｏｎ）；アンチセンスオリゴヌクレオチド；アフィディコリングリシン酸塩；アポトーシス遺伝子モジュレーター；アポトーシス調節因子；アプリン酸；アラ−ＣＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ；アルギニンデアミナーゼ；アスラクリン（ａｓｕｌａｃｒｉｎｅ）；アタメスタン（ａｔａｍｅｓｔａｎｅ）；アトリムスチン（ａｔｒｉｍｕｓｔｉｎｅ）；アキシナスタチン（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ）１；アキシナスタチン２；アキシナスタチン３；アザセトロン；アザトキシン；アザチロシン；バッカチンＩＩＩ誘導体；バラノール；バチマスタット；ＢＣＲ／ＡＢＬアンタゴニスト；ベンゾクロリン（ｂｅｎｚｏｃｈｌｏｒｉｎ）；ベンゾイルスタウロスポリン（ｂｅｎｚｏｙｌｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ）；ベータラクタム誘導体；ベータ−アレチン（ａｌｅｔｈｉｎｅ）；ベタクラマイシン（ｂｅｔａｃｌａｍｙｃｉｎ）Ｂ；ベツリン酸；ｂＦＧＦ阻害剤；ビカルタミド；ビサントレン（ｂｉｓａｎｔｒｅｎｅ）；ビスアジリジニルスペルミン（ｂｉｓａｚｉｒｉｄｉｎｙｌｓｐｅｒｍｉｎｅ）；ビスナフィド（ｂｉｓｎａｆｉｄｅ）；ビストラテン（ｂｉｓｔｒａｔｅｎｅ）Ａ；ビセ��シン；ブレフレート（ｂｒｅｆｌａｔｅ）；ブロピリミン；ブドチタン（ｂｕｄｏｔｉｔａｎｅ）；ブチオニンスルホキシミン；カルシポトリオール；カルホスチンＣ；カンプトテシン誘導体；カナリアポックスＩＬ−２；カペシタビン；カルボキサミド−アミノ−トリアゾール；カルボキシアミドトリアゾール（ｃａｒｂｏｘｙａｍｉｄｏｔｒｉａｚｏｌｅ）；ＣａＲｅｓｔ  Ｍ３；ＣＡＲＮ  ７００；軟骨由来阻害剤；カルゼレシン（ｃａｒｚｅｌｅｓｉｎ）；カゼインキナーゼ阻害剤（ＩＣＯＳ）；カスタノスペルミン；セクロピンＢ；セトロレリクス；クロリン；クロロキノキサリンスルホンアミド；シカプロスト；シス−ポルフィリン；クラドリビン；クロミフェンアナログ；クロトリマゾール；コリスマイシン（ｃｏｌｌｉｓｍｙｃｉｎ）Ａ；コリスマイシンＢ；コンブレタスタチンＡ４；コンブレタスタチンアナログ；コナゲニン（ｃｏｎａｇｅｎｉｎ）；クランベシジン（ｃｒａｍｂｅｓｃｉｄｉｎ）８１６；クリスナトール（ｃｒｉｓｎａｔｏｌ）；クリプトフィシン８；クリプトフィシンＡ誘導体；クラシン（ｃｕｒａｃｉｎ）Ａ；シクロペンタアントラキノン（ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅ）；シクロプラタム（ｃｙｃｌｏｐｌａｔａｍ）；シペマイシン（ｃｙｐｅｍｙｃｉｎ）；シタラビンオクホスファート（ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ  ｏｃｆｏｓｆａｔｅ）；細胞溶解因子；サイトスタチン（ｃｙｔｏｓｔａｔｉｎ）；ダクリキシマブ（ｄａｃｌｉｘｉｍａｂ）；デシタビン；デヒドロジデムニンＢ；デスロレリン（ｄｅｓｌｏｒｅｌｉｎ）；デキサメタゾン；デキシフォスファミド（ｄｅｘｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）；デクスラゾキサン；デクスベラパミル；ジアジコン（ｄｉａｚｉｑｕｏｎｅ）；ジデムニンＢ；ジドックス（ｄｉｄｏｘ）；ジエチルノルスペルミン（ｄｉｅｔｈｙｌｎｏｒｓｐｅｒｍｉｎｅ）；ジヒドロ−５−アザシチジン；９−ジオキサマイシン（９−ｄｉｏｘａｍｙｃｉｎ）；ジフェニルスピロムスチン（ｓｐｉｒｏｍｕｓｔｉｎｅ）；ドコサノール；ドラセトロン；ドキシフルリジン；ドロキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）；ドロナビノール；デュオカルマイシンＳＡ；エブセレン；エコムスチン（ｅｃｏｍｕｓｔｉｎｅ）；エデルフォシン（ｅｄｅｌｆｏｓｉｎｅ）；エドレコロマブ；エフロルニチン；エレメン（ｅｌｅｍｅｎｅ）；エミテフール；エピルビシン；エプリステリド；エストラムスチンアナログ；エストロゲンアゴニスト；エストロゲンアンタゴニスト；エタニダゾール；エトポシドリン酸塩；エキセメスタン；ファドロゾール；ファザラビン（ｆａｚａｒａｂｉｎｅ）；フェンレチニド；フィルグラスチム；フィナステリド；フラボピリドール；フレゼラスチン（ｆｌｅｚｅｌａｓｔｉｎｅ）；フルアステロン（ｆｌｕａｓｔｅｒｏｎｅ）；フルダラビン；フルオロダウノルビシン（ｆｌｕｏｒｏｄａｕｎｏｒｕｎｉｃｉｎ）塩酸塩；フォルフェニメックス（ｆｏｒｆｅｎｉｍｅｘ）；ホルメスタン；フォストリエシン；ホテムスチン；ガドリニウムテキサフィリン（ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ  ｔｅｘａｐｈｙｒｉｎ）；硝酸ガリウム；ガロシタビン（ｇａｌｏｃｉｔａｂｉｎｅ）；ガニレリクス；ゼラチナーゼ阻害剤；ゲムシタビン；グルタチオン阻害剤；ヘプスルファム（ｈｅｐｓｕｌｆａｍ）；ヘレグリン；ヘキサメチレンビスアセトアミド；ヒペリシン；イバンドロン酸；イダルビシン；イドキシフェン；イドラマントン（ｉｄｒａｍａｎｔｏｎｅ）；イルモフォスチン（ｉｌｍｏｆｏｓｉｎｅ）；イロマスタット；イミダゾアクリドン（ｉｍｉｄａｚｏａｃｒｉｄｏｎｅ）；イミキモド；免疫賦活薬ペプチド；インスリン様増殖因子−１受容体阻害剤；インターフェロンアゴニスト；インターフェロン；インターロイキン；イオベングアン（ｉｏｂｅｎｇｕａｎｅ）；ヨードドキソルビシン（ｉｏｄｏｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）；イポメアノール（ｉｐｏｍｅａｎｏｌ），４−；イロプラクト（ｉｒｏｐｌａｃｔ）；イルソグラジン；イソベンガゾール（ｉｓｏｂｅｎｇａｚｏｌｅ）；イソホモハリコンドリン（ｉｓｏｈｏｍｏｈａｌｉｃｏｎｄｒｉｎ）Ｂ；イタセトロン；ジャスプラキノリド；カハラリド（ｋａｈａｌａｌｉｄｅ）Ｆ；ラメラリン−Ｎ三酢酸塩；ランレオチド；レイナマイシン（ｌｅｉｎａｍｙｃｉｎ）；レノグラスチム；レンチナン硫酸塩；レプトルスタチン（ｌｅｐｔｏｌｓｔａｔｉｎ）；レトロゾール；白血病阻害因子；白血球アルファインターフェロン；リュープロリド＋エストロゲン＋プロゲステロン；リュープロレリン；レバミゾール；リアロゾール（ｌｉａｒｏｚｏｌｅ）；線状ポリアミンアナログ；親油性二糖ペプチド；親油性白金化合物；リソクリナミド（ｌｉｓｓｏｃｌｉｎａｍｉｄｅ）７；ロバプラチン；ロンブリシン（ｌｏｍｂｒｉｃｉｎｅ）；ロメトレキソール（ｌｏｍｅｔｒｅｘｏｌ）；ロニダミン；ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ）；ロバスタチン；ロキソリビン；ルルトテカン（ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ）；ルテチウムテキサフィリン（ｌｕｔｅｔｉｕｍ  ｔｅｘａｐｈｙｒｉｎ）；リソフィリン（ｌｙｓｏｆｙｌｌｉｎｅ）；溶解性ペプチド；マイタンシン（ｍａｉｔａｎｓｉｎｅ）；マンノスタチン（ｍａｎｎｏｓｔａｔｉｎ）Ａ；マリマスタット；マソプロコール；
マスピン；マトリライシン阻害剤；マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤；メノガリル；メルバロン；メテレリン（ｍｅｔｅｒｅｌｉｎ）；メチオニナーゼ（ｍｅｔｈｉｏｎｉｎａｓｅ）；メトクロプラミド；ＭＩＦ阻害剤；ミフェプリストン；ミルテホシン；ミリモスチム；ミスマッチした二本鎖ＲＮＡ；ミトグアゾン；ミトラクトール；マイトマイシンアナログ；ミトナフィド（ｍｉｔｏｎａｆｉｄｅ）；ミトトキシン（ｍｉｔｏｔｏｘｉｎ）線維芽細胞増殖因子−サポリン；ミトキサントロン；モファロテン（ｍｏｆａｒｏｔｅｎｅ）；モルグラモスチム；モノクローナル抗体、ヒト絨毛性ゴナドトロピン；モノホスホリルリピドＡ＋マイコバクテリウム属（ｍｙｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）細胞壁ｓｋ；モピダモール；多剤耐性遺伝子阻害剤；マルチ腫瘍抑制因子（ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｔｕｍｏｒ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ）１ベースの治療；マスタード抗がん剤；ミカペルオキシド（ｍｙｃａｐｅｒｏｘｉｄｅ）Ｂ；マイコバクテリア細胞壁抽出物；ミリアポロン（ｍｙｒｉａｐｏｒｏｎｅ）；Ｎ−アセチルジナリン（Ｎ−ａｃｅｔｙｌｄｉｎａｌｉｎｅ）；Ｎ−置換ベンズアミド；ナファレリン；ナグレスチップ（ｎａｇｒｅｓｔｉｐ）；ナロキソン＋ペンタゾシン；ナパビン（ｎａｐａｖｉｎ）；ナフテルピン（ｎａｐｈｔｅｒｐｉｎ）；ナルトグラスチム；ネダプラチン；ネモルビシン（ｎｅｍｏｒｕｂｉｃｉｎ）；ネリドロン酸；中性エンドペプチダーゼ；ニルタミド；ニサマイシン（ｎｉｓａｍｙｃｉｎ）；一酸化窒素モジュレーター；窒素酸化物抗酸化剤；ニトルリン（ｎｉｔｒｕｌｌｙｎ）；Ｏ６−ベンジルグアニン；オクトレオチド；オキセノン（ｏｋｉｃｅｎｏｎｅ）；オリゴヌクレオチド；オナプリストン；オンダンセトロン；オンダンセトロン；オラシン（ｏｒａｃｉｎ）；経口サイトカイン誘導因子；オルマプラチン（ｏｒｍａｐｌａｔｉｎ）；オサテロン；オキサリプラチン；オキサウノマイシン（ｏｘａｕｎｏｍｙｃｉｎ）；パラウアミン；パルミトイルリゾキシン（ｐａｌｍｉｔｏｙｌｒｈｉｚｏｘｉｎ）；パミドロン酸；パナキシトリオール（ｐａｎａｘｙｔｒｉｏｌ）；パノミフェン（ｐａｎｏｍｉｆｅｎｅ）；パラバクチン（ｐａｒａｂａｃｔｉｎ）；パゼリプチン（ｐａｚｅｌｌｉｐｔｉｎｅ）；ペグアスパルガーゼ；ペルデシン（ｐｅｌｄｅｓｉｎｅ）；ペントサンポリ硫酸ナトリウム；ペントスタチン；ペントロゾール（ｐｅｎｔｒｏｚｏｌｅ）；ペルフルブロン；ペルホスファミド（ｐｅｒｆｏｓｆａｍｉｄｅ）；ペリリルアルコール；フェナジノマイシン（ｐｈｅｎａｚｉｎｏｍｙｃｉｎ）；フェニル酢酸塩；ホスファターゼ阻害剤；ピシバニール；ピロカルピン塩酸塩；ピラルビシン；ピリトレキシム；プラセチン（ｐｌａｃｅｔｉｎ）Ａ；プラセチンＢ；プラスミノーゲン活性化因子阻害剤；白金錯体；白金化合物；白金−トリアミン錯体；ポルフィマーナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニゾン；プロピルビス−アクリドン；プロスタグランジンＪ２；プロテアソーム阻害剤；プロテインＡベースの免疫モジュレーター；タンパク質キナーゼＣ阻害剤；タンパク質キナーゼＣ阻害剤、微細藻類；タンパク質チロシンホスファターゼ阻害剤；プリンヌクレオシドホ��ホリラーゼ阻害剤；プルプリン（ｐｕｒｐｕｒｉｎ）；ピラゾロアクリジン（ｐｙｒａｚｏｌｏａｃｒｉｄｉｎｅ）；ピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレン（ｐｙｒｉｄｏｘｙｌａｔｅｄ  ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ  ｐｏｌｙｏｘｙｅｔｈｙｌｅｒｉｅ）コンジュゲート；ｒａｆアンタゴニスト；ラルチトレキセド；ラモセトロン；ｒａｓファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤；ｒａｓ阻害剤；ｒａｓ−ＧＡＰ阻害剤；脱メチル化レテリプチン（ｒｅｔｅｌｌｉｐｔｉｎｅ  ｄｅｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ）；エチドロン酸レニウムＲｅ  １８６；リゾキシン（ｒｈｉｚｏｘｉｎ）；リボザイム；ＲＩＩレチンアミド；ログレチミド（ｒｏｇｌｅｔｉｍｉｄｅ）；ロヒツキン（ｒｏｈｉｔｕｋｉｎｅ）；ロムルチド；ロキニメックス；ルビギノン（ｒｕｂｉｇｉｎｏｎｅ）Ｂ１；ルボキシル；サフィンゴール；サイントピン（ｓａｉｎｔｏｐｉｎ）；ＳａｒＣＮＵ；サルコフィトールＡ；サルグラモスチム；Ｓｄｉ  １模倣物；セムスチン；老化由来阻害剤１；センスオリゴヌクレオチド；シグナル伝達阻害剤；シグナル伝達モジュレーター；単鎖抗原結合タンパク質；シゾフラン（ｓｉｚｏｆｕｒａｎ）；ソブゾキサン；ボロカプテイトナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｂｏｒｏｃａｐｔａｔｅ）；フェニル酢酸ナトリウム；ソルベロール（ｓｏｌｖｅｒｏｌ）；ソマトメジン結合タンパク質；ソネルミン；スパルフォス酸（ｓｐａｒｆｏｓｉｃ  ａｃｉｄ）；スピカマイシン（ｓｐｉｃａｍｙｃｉｎ）Ｄ；スピロムスチン；スプレノペンチン（ｓｐｌｅｎｏｐｅｎｔｉｎ）；スポンジスタチン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）１；スクアラミン；幹細胞阻害剤；幹細胞分裂阻害剤；スチピアミド（ｓｔｉｐｉａｍｉｄｅ）；ストロメライシン阻害剤；スルフィノシン（ｓｕｌｆｉｎｏｓｉｎｅ）；超活性（ｓｕｐｅｒａｃｔｉｖｅ）血管作用性腸ペプチドアンタゴニスト；スラジスタ（ｓｕｒａｄｉｓｔａ）；スラミン；スウェインソニン；合成グリコサミノグリカン；タリムスチン（ｔａｌｌｉｍｕｓｔｉｎｅ）；タモキシフェンメチオジド（ｔａｍｏｘｉｆｅｎ  ｍｅｔｈｉｏｄｉｄｅ）；タウロムスチン（ｔａｕｒｏｍｕｓｔｉｎｅ）；タザロテン；テコガラン（ｔｅｃｏｇａｌａｎ）ナトリウム；テガフール；テルラピリリウム（ｔｅｌｌｕｒａｐｙｒｙｌｉｕｍ）；テロメラーゼ阻害剤；テモポルフィン；テモゾロミド；テニポシド；テトラクロロデカオキシド（ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｏｄｅｃａｏｘｉｄｅ）；テトラゾミン（ｔｅｔｒａｚｏｍｉｎｅ）；サリブラスチン（ｔｈａｌｉｂｌａｓｔｉｎｅ）；チオコラリン（ｔｈｉｏｃｏｒａｌｉｎｅ）；トロンボポエチン；トロンボポエチン模倣物；サイマルファシン；サイモポエチン受容体アゴニスト；サイモトリナン（ｔｈｙｍｏｔｒｉｎａｎ）；甲状腺刺激ホルモン；スズエチルエチオプルプリン（ｔｉｎ  ｅｔｈｙｌ  ｅｔｉｏｐｕｒｐｕｒｉｎ）；チラパザミン；二塩化チタノセン（ｔｉｔａｎｏｃｅｎｅ  ｂｉｃｈｌｏｒｉｄｅ）；トプセンチン（ｔｏｐｓｅｎｔｉｎ）；トレミフェン；全能性幹細胞因子；翻訳阻害剤；トレチノイン；トリアセチルウリジン；トリシリビン；トリメトレキサート；トリプトレリン；トロピセトロン；ツロステリド（���ｕｒｏｓｔｅｒｉｄｅ）；チロシンキナーゼ阻害剤；チロホスチン；ＵＢＣ阻害剤；ウベニメクス；尿生殖洞由来成長阻害因子；ウロキナーゼ受容体アンタゴニスト；バプレオチド；バリオリン（ｖａｒｉｏｌｉｎ）Ｂ；ベクター系、赤血球遺伝子療法；ベラレゾール（ｖｅｌａｒｅｓｏｌ）；ベラミン（ｖｅｒａｍｉｎｅ）；ベルジン（ｖｅｒｄｉｎ）；ベルテポルフィン；ビノレルビン；ビンキサルチン（ｖｉｎｘａｌｔｉｎｅ）；ビタキシン（ｖｉｔａｘｉｎ）；ボロゾール；ザノテロン；ゼニプラチン（ｚｅｎｉｐｌａｔｉｎ）；ジラスコルブ（ｚｉｌａｓｃｏｒｂ）；ジノスタチンスチマラマー、アドリアマイシン、ダクチノマイシン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、シスプラチン、アシビシン；アクラルビシン；アコダゾール塩酸塩；アクロニン；アドゼレシン；アルデスロイキン；アルトレタミン；アンボマイシン；アメタントロン酢酸塩；アミノグルテチミド；アムサクリン；アナストロゾール；アントラマイシン；アスパラギナーゼ；アスペルリン；アザシチジン；アゼテパ；アゾトマイシン（ａｚｏｔｏｍｙｃｉｎ）；バチマスタット；ベンゾデパ（ｂｅｎｚｏｄｅｐａ）；ビカルタミド；ビサントレン塩酸塩；ビスナフィド二メシル酸塩；ビセレシン；ブレオマイシン硫酸塩；ブレキナルナトリウム；ブロピリミン；ブスルファン；カクチノマイシン（ｃａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）；カルステロン（ｃａｌｕｓｔｅｒｏｎｅ）；カラセミド（ｃａｒａｃｅｍｉｄｅ）；カルベチメル（ｃａｒｂｅｔｉｍｅｒ）；カルボプラチン；カルムスチン；カルビシン塩酸塩；カルゼレシン；セデフィンゴール（ｃｅｄｅｆｉｎｇｏｌ）；クロラムブシル；シロレマイシン（ｃｉｒｏｌｅｍｙｃｉｎ）；クラドリビン；クリスナトールメシル酸塩；シクロホスファミド；シタラビン；ダカルバジン；ダウノルビシン塩酸塩；デシタビン；デキソルマプラチン（ｄｅｘｏｒｍａｐｌａｔｉｎ）；デザグアニン（ｄｅｚａｇｕａｎｉｎｅ）；デザグアニンメシル酸塩；ジアジコン；ドキソルビシン；ドキソルビシン塩酸塩；ドロキシフェン；ドロキシフェンクエン酸塩；ドロモスタノロンプロピオン酸塩；デュアゾマイシン（ｄｕａｚｏｍｙｃｉｎ）；エダトレキサート；エフロルニチン塩酸塩；エルサミトルシン（ｅｌｓａｍｉｔｒｕｃｉｎ）；エンロプラチン（ｅｎｌｏｐｌａｔｉｎ）；エンプロメート（ｅｎｐｒｏｍａｔｅ）；エピプロピジン（ｅｐｉｐｒｏｐｉｄｉｎｅ）；エピルビシン塩酸塩；エルブロゾール（ｅｒｂｕｌｏｚｏｌｅ）；エソルビシン（ｅｓｏｒｕｂｉｃｉｎ）塩酸塩；エストラムスチン；エストラムスチンリン酸エステルナトリウム；エタニダゾール；エトポシド；エトポシドリン酸塩；エトプリン（ｅｔｏｐｒｉｎｅ）；ファドロゾール塩酸塩；ファザラビン；フェンレチニド；フロクスウリジン；フルダラビンリン酸エステル；フルオロウラシル；フルオロシタビン（ｆｌｕｏｒｏｃｉｔａｂｉｎｅ）；ホスキドン（ｆｏｓｑｕｉｄｏｎｅ）；フォストリエシンナトリウム；ゲムシタビン；ゲムシタビン塩酸塩；ヒドロキシウレア；イダルビシン塩酸塩；イホスファミド；イイモフォシン（ｉｉｍｏｆｏｓｉｎｅ）；インターロイキンＩ１（組換えインターロイキンＩＩ又はｒｌＬ２を���む）、インターフェロンアルファ−２ａ；インターフェロンアルファ−２ｂ；インターフェロンアルファ−ｎ１；インターフェロンアルファ−ｎ３；インターフェロンベータ−１ａ；インターフェロンガンマ−１ｂ；イプロプラチン；イリノテカン塩酸塩；ランレオチド酢酸塩；レトロゾール；リュープロリド酢酸塩；リアロゾール塩酸塩；ロメトレキソールナトリウム；ロムスチン；ロソキサントロン塩酸塩；マソプロコール；マイタンシン；メクロレタミン塩酸塩；酢酸メゲストロール；酢酸メレンゲストロール；メルファラン；メノガリル；メルカプトプリン；メトトレキサート；メトトレキサートナトリウム；メトプリン（ｍｅｔｏｐｒｉｎｅ）；メツレデパ（ｍｅｔｕｒｅｄｅｐａ）；ミチンドミド（ｍｉｔｉｎｄｏｍｉｄｅ）；ミトカルシン（ｍｉｔｏｃａｒｃｉｎ）；ミトクロミン（ｍｉｔｏｃｒｏｍｉｎ）；ミトギリン（ｍｉｔｏｇｉｌｌｉｎ）；ミトマルシン（ｍｉｔｏｍａｌｃｉｎ）；マイトマイシン；ミトスペル（ｍｉｔｏｓｐｅｒ）；ミトタン；ミトキサントロン塩酸塩；ミコフェノール酸；ノコダゾール（ｎｏｃｏｄａｚｏｉｅ）；ノガラマイシン；オルマプラチン；オキシスラン（ｏｘｉｓｕｒａｎ）；ペグアスパルガーゼ；ペリオマイシン（ｐｅｌｉｏｍｙｃｉｎ）；ペンタムスチン（ｐｅｎｔａｍｕｓｔｉｎｅ）；ペプロマイシン硫酸塩；ペルホスファミド；ピポブロマン；ピポスルファン（ｐｉｐｏｓｕｌｆａｎ）；ピロキサントロン（ｐｉｒｏｘａｎｔｒｏｎｅ）塩酸塩；プリカマイシン；プロメスタン（ｐｌｏｍｅｓｔａｎｅ）；ポルフィマーナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニムスチン；プロカルバジン塩酸塩；ピューロマイシン；ピューロマイシン塩酸塩；ピラゾフリン（ｐｙｒａｚｏｆｕｒｉｎ）；リボプリン（ｒｉｂｏｐｒｉｎｅ）；ログレチミド；サフィンゴール；サフィンゴール塩酸塩；セムスチン；シムトラゼン（ｓｉｍｔｒａｚｅｎｅ）；スパルフォセート（ｓｐａｒｆｏｓａｔｅ）ナトリウム；スパルソマイシン；スピロゲルマニウム塩酸塩；スピロムスチン；スピロプラチン（ｓｐｉｒｏｐｌａｔｉｎ）；ストレプトニグリン；
ストレプトゾシン；スロフェヌル（ｓｕｌｏｆｅｎｕｒ）；タリソマイシン（ｔａｌｉｓｏｍｙｃｉｎ）；テコガランナトリウム；テガフール；テロキサントロン（ｔｅｌｏｘａｎｔｒｏｎｅ）塩酸塩；テモポルフィン；テニポシド；テロキシロン（ｔｅｒｏｘｉｒｏｎｅ）；テストラクトン；チアミプリン（ｔｈｉａｍｉｐｒｉｎｅ）；チオグアニン；チオテパ；チアゾフリン；チラパザミン；トレミフェンクエン酸塩；トレストロン（ｔｒｅｓｔｏｌｏｎｅ）酢酸塩；リン酸トリシリビン；トリメトレキサート；グルクロン酸トリメトレキサート；トリプトレリン；ツブロゾール（ｔｕｂｕｌｏｚｏｌｅ）塩酸塩；ウラシルマスタード；ウレデパ（ｕｒｅｄｅｐａ）；バプレオチド；ベルテポルフィン；ビンブラスチン硫酸塩；ビンクリスチン硫酸塩；ビンデシン；ビンデシン硫酸塩；ビネピジン（ｖｉｎｅｐｉｄｉｎｅ）硫酸塩；ビングリシネート（ｖｉｎｇｌｙｃｉｎａｔｅ）硫酸塩；ビンレウロシン（ｖｉｎｌｅｕｒｏｓｉｎｅ）硫酸塩；ビノレルビン酒石酸塩；ビンロシジン（ｖｉｎｒｏｓｉｄｉｎｅ）硫酸塩；ビンゾリジン（ｖｉｎｚｏｌｉｄｉｎｅ）硫酸塩；ボロゾール；ゼニプラチン；ジノスタチン；ゾルビシン塩酸塩、Ｇ２−Ｍ期で細胞を停止させる薬剤及び／又は微小管の形成若しくは安定性をモジュレートする薬剤（例えば、Ｔａｘｏｌ（商標）（即ち、パクリタキセル）、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（商標）、タキサン骨格を含む化合物、エルブロゾール（即ち、Ｒ−５５１０４）、ドラスタチン１０（即ち、ＤＬＳ−１０及びＮＳＣ−３７６１２８）、イセチオン酸ミボブリン（Ｍｉｖｏｂｕｌｉｎ  ｉｓｅｔｈｉｏｎａｔｅ）（即ち、ＣＩ−９８０など）、ビンクリスチン、ＮＳＣ−６３９８２９、ディスコデルモリド（即ち、ＮＶＰ−ＸＸ−Ａ−２９６など）、ＡＢＴ−７５１（Ａｂｂｏｔｔ、即ち、Ｅ−７０１０）、アルトリルチン（Ａｌｔｏｒｈｙｒｔｉｎ）（例えば、アルトリルチンＡ及びアルトリルチンＣ）、スポンジスタチン（例えば、スポンジスタチン１、スポンジスタチン２、スポンジスタチン３、スポンジスタチン４、スポンジスタチン５、スポンジスタチン６、スポンジスタチン７、スポンジスタチン８及びスポンジスタチン９）、セマドチン塩酸塩（即ち、ＬＵ−１０３７９３及びＮＳＣ−Ｄ−６６９３５６）、エポチロン（例えば、エポチロンＡ、エポチロンＢ、エポチロンＣ（即ち、デスオキシエポチロンＡ又はｄＥｐｏＡ）、エポチロンＤ（即ち、ＫＯＳ−８６２、ｄＥｐｏＢ及びデスオキシエポチロンＢ）、エポチロンＥ、エポチロンＦ、エポチロンＢ  Ｎ−オキシド、エポチロンＡ  Ｎ−オキシド、１６−アザ−エポチロンＢ、２１−アミノエポチロンＢ（即ち、ＢＭＳ−３１０７０５）、２１−ヒドロキシエポチロンＤ（即ち、デスオキシエポチロンＦ及びｄＥｐｏＦ）、２６−フルオロエポチロン、アウリスタチンＰＥ（即ち、ＮＳＣ−６５４６６３）、ソブリドチン（即ち、ＴＺＴ−１０２７）、ＬＳ−４５５９−Ｐ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ、即ち、ＬＳ−４５７７）、ＬＳ−４５７８（Ｐｈａｒｍａｃｉａ、即ち、ＬＳ−４７７−Ｐ）、ＬＳ−４４７７（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、ＬＳ−４５５９（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、ＲＰＲ−１１２３７８（Ａｖｅｎｔｉｓ）、ビンクリスチン硫酸塩、ＤＺ−３３５８（Ｄａｉｉｃｈｉ）、ＦＲ−１８２８７７（Ｆｕｊｉｓａｗａ、即ち、ＷＳ−９８８５Ｂ）、ＧＳ−１６４（Ｔａｋｅｄａ）、ＧＳ−１９８（Ｔａｋｅｄａ）、ＫＡＲ−２（Ｈｕｎｇａｒｉａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＢＳＦ−２２３６５１（ＢＡＳＦ、即ち、ＩＬＸ−６５１及びＬＵ−２２３６５１）、ＳＡＨ−４９９６０（Ｌｉｌｌｙ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＳＤＺ−２６８９７０（Ｌｉｌｌｙ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＭ−９７（Ａｒｍａｄ／Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）、ＡＭ−１３２（Ａｒｍａｄ）、ＡＭ−１３８（Ａｒｍａｄ／Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）、ＩＤＮ−５００５（Ｉｎｄｅｎａ）、クリプトフィシン５２（即ち、ＬＹ−３５５７０３）、ＡＣ−７７３９（Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ、即ち、ＡＶＥ−８０６３Ａ及びＣＳ−３９．ＨＣｌ）、ＡＣ−７７００（Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ、即ち、ＡＶＥ−８０６２、ＡＶＥ−８０６２Ａ、ＣＳ−３９−Ｌ−Ｓｅｒ．ＨＣｌ及びＲＰＲ−２５８０６２Ａ）、ビチレブアミド（Ｖｉｔｉｌｅｖｕａｍｉｄｅ）、ツブリシン（Ｔｕｂｕｌｙｓｉｎ）Ａ、カナデンソール（Ｃａｎａｄｅｎｓｏｌ）、センタウレイジン（Ｃｅｎｔａｕｒｅｉｄｉｎ）（即ち、ＮＳＣ−１０６９６９）、Ｔ−１３８０６７（Ｔｕｌａｒｉｋ、即ち、Ｔ−６７、ＴＬ−１３８０６７及びＴＩ−１３８０６７）、ＣＯＢＲＡ−１（Ｐａｒｋｅｒ  Ｈｕｇｈｅｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、即ち、ＤＤＥ−２６１及びＷＨＩ−２６１）、Ｈ１０（Ｋａｎｓａｓ  Ｓｔａｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、Ｈ１６（Ｋａｎｓａｓ  Ｓｔａｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、オンコシジン（Ｏｎｃｏｃｉｄｉｎ）Ａ１（即ち、ＢＴＯ−９５６及びＤＩＭＥ）、ＤＤＥ−３１３（Ｐａｒｋｅｒ  Ｈｕｇｈｅｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、フィジアノリド（Ｆｉｊｉａｎｏｌｉｄｅ）Ｂ、ラウリマライド、ＳＰＡ−２（Ｐａｒｋｅｒ  Ｈｕｇｈｅｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、ＳＰＡ−１（Ｐａｒｋｅｒ  Ｈｕｇｈｅｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、即ち、ＳＰＩＫＥＴ−Ｐ）、３−ＩＡＡＢＵ（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ／Ｍｔ．Ｓｉｎａｉ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、即ち、ＭＦ−５６９）、ナルコシン（Ｎａｒｃｏｓｉｎｅ）（ＮＳＣ−５３６６としても公知）、ナスカピン（Ｎａｓｃａｐｉｎｅ）、Ｄ−２４８５１（Ａｓｔａ  Ｍｅｄｉｃａ）、Ａ−１０５９７２（Ａｂｂｏｔｔ）、ヘミアステリン、３−ＢＡＡＢＵ（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ／Ｍｔ．Ｓｉｎａｉ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、即ち、ＭＦ−１９１）、ＴＭＰＮ（Ａｒｉｚｏｎａ  Ｓｔａｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、バナドセンアセチルアセトネート、Ｔ−１３８０２６（Ｔｕｌａｒｉｋ）、モンサトロール（Ｍｏｎｓａｔｒｏｌ）、ルナノシン（ｌｎａｎｏｃｉｎｅ）（即ち、ＮＳＣ−６９８６６６）、３−ＩＡＡＢＥ（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ／Ｍｔ．Ｓｉｎａｉ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、Ａ−２０４１９７（Ａｂｂｏｔｔ）、Ｔ−６０７（Ｔｕｉａｒｉｋ、即ち、Ｔ−９００６０７）、ＲＰＲ−１１５７８１（Ａｖｅｎｔｉｓ）、エリュテロビン（デスメチルエリュテロビン、デスアセチルエリュテロビン（Ｄｅｓａｅｔｙｌｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎ）、イソ��リュテロビンＡ及びＺ−エリュテロビンのような）、カリバエオシド（Ｃａｒｉｂａｅｏｓｉｄｅ）、カリバエオリン（Ｃａｒｉｂａｅｏｌｉｎ）、ハリコンドリンＢ、Ｄ−６４１３１（Ａｓｔａ  Ｍｅｄｉｃａ）、Ｄ−６８１４４（Ａｓｔａ  Ｍｅｄｉｃａ）、ジアゾナミドＡ、Ａ−２９３６２０（Ａｂｂｏｔｔ）、ＮＰＩ−２３５０（Ｎｅｒｅｕｓ）、タッカロノリド（Ｔａｃｃａｌｏｎｏｌｉｄｅ）Ａ、ＴＵＢ−２４５（Ａｖｅｎｔｉｓ）、Ａ−２５９７５４（Ａｂｂｏｔｔ）、ジオゾスタチン（Ｄｉｏｚｏｓｔａｔｉｎ）、（−）−フェニラヒスチン（（−）−Ｐｈｅｎｙｌａｈｉｓｔｉｎ）（即ち、ＮＳＣＬ−９６Ｆ０３７）、Ｄ−６８８３８（Ａｓｔａ  Ｍｅｄｉｃａ）、Ｄ−６８８３６（Ａｓｔａ  Ｍｅｄｉｃａ）、ミオセベリン（Ｍｙｏｓｅｖｅｒｉｎ）Ｂ、Ｄ−４３４１１（Ｚｅｎｔａｒｉｓ、即ち、Ｄ−８１８６２）、Ａ−２８９０９９（Ａｂｂｏｔｔ）、Ａ−３１８３１５（Ａｂｂｏｔｔ）、ＨＴＩ−２８６（即ち、ＳＰＡ−１１０、トリフルオロ酢酸塩）（Ｗｙｅｔｈ）、Ｄ−８２３１７（Ｚｅｎｔａｒｉｓ）、Ｄ−８２３１８（Ｚｅｎｔａｒｉｓ）、ＳＣ−１２９８３（ＮＣＩ）、リン酸レスベラスタチンナトリウム（Ｒｅｓｖｅｒａｓｔａｔｉｎ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｓｏｄｉｕｍ）、ＢＰＲ−ＯＹ−００７（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ）、及びＳＳＲ−２５０４１１（Ｓａｎｏｆｉ））、ステロイド（例えば、デキサメタゾン）、フィナステリド、アロマターゼ阻害剤、ゴセレリン又はリュープロリドのようなゴナドトロピン放出ホルモンアゴニスト（ＧｎＲＨ）、副腎皮質ステロイド（例えば、プレドニゾン）、プロゲスチン（例えば、ヒドロキシプロゲステロンカプロン酸エステル、酢酸メゲストロール、メドロキシプロゲステロン酢酸塩）、エストロゲン（例えば、ジエチルスチルベストロール、エチニルエストラジオール）、抗エストロゲン剤（例えば、タモキシフェン）、アンドロゲン（例えば、テストステロンプロピオン酸塩、フルオキシメステロン）、抗アンドロゲン薬（例えば、フルタミド）、免疫賦活薬（例えば、バチルスカルメットゲラン（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  Ｃａｌｍｅｔｔｅ−Ｇｕｅｒｉｎ）（ＢＣＧ）、レバミゾール、インターロイキン−２、アルファ−インターフェロンなど）、モノクローナル抗体（例えば、抗ＣＤ２０、抗ＨＥＲ２、抗ＣＤ５２、抗ＨＬＡ−ＤＲ及び抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体）、免疫毒素（例えば、抗ＣＤ３３モノクローナル抗体−カリチアマイシンコンジュゲート、抗ＣＤ２２モノクローナル抗体−シュードモナス属（ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）外毒素コンジュゲートなど）、放射免疫療法（例えば、１１１Ｉｎ、９０Ｙ又は１３１Ｉにコンジュゲート化された抗ＣＤ２０モノクローナル抗体など）、トリプトライド、ホモハリントニン、ダクチノマイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、トポテカン、イトラコナゾール、ビンデシン、セリバスタチン、ビンクリスチン、デオキシアデノシン、セルトラリン、ピタバスタチン、イリノテカン、クロファジミン、５−ノニルオキシトリプタミン、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ＥＧＦＲ阻害剤、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）標的化治療又は治療剤（例えば、ゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ（商標））、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（商標））、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（商標））、ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ（商標））、パニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（商標））、バンデタニブ（Ｃａｐｒｅｌｓａ（商標））、アファチニブ／ＢＩＢＷ２９９２、ＣＩ−１０３３／カネルチニブ、ネラチニブ／ＨＫＩ−２７２、ＣＰ−７２４７１４、ＴＡＫ−２８５、ＡＳＴ−１３０６、ＡＲＲＹ３３４５４３、ＡＲＲＹ−３８０、ＡＧ−１４７８、ダコミチニブ／ＰＦ２９９８０４、ＯＳＩ−４２０／デスメチルエルロチニブ、ＡＺＤ８９３１、ＡＥＥ７８８、ペリチニブ／ＥＫＢ−５６９、ＣＵＤＣ−１０１、ＷＺ８０４０、ＷＺ４００２、ＷＺ３１４６、ＡＧ−４９０、ＸＬ６４７、ＰＤ１５３０３５、ＢＭＳ−５９９６２６）、ソラフェニブ、イマチニブ、スニチニブ、ダサチニブなどが含まれるがこれらに限定されない。
【０１８１】
一態様では、がん細胞において細胞溶解を誘導する方法が提供される。この方法は、がん細胞を、それらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体可変ドメイン、又はそれらの実施形態を含む、本明細書に記載される抗体構築物の有効量、及びエフェクター細胞と接触させ、それによってがん細胞において細胞溶解を誘導するステップを含む。実施形態では、接触させるステップは、がん患者において行われる。実施形態では、接触させるステップは、インビトロで行われる。実施形態では、エフェクター細胞は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である。
【実施例】
【０１８２】
［実施例１］
マントル細胞リンパ腫特異的完全ヒト抗体の開発
新たながん免疫療法は、それらの有望な効能に起因して、急速にクリニックに登場してきている。モノクローナル抗体及び抗体ベースの免疫療法薬は、高い特異性及び証明された抗腫瘍効果に起因して、特に魅力的なプラットフォームである。免疫療法薬は現在、様々な標的に対して開発されている；しかし、全てが、悪性細胞及びそれらの良性対応物上に同時に存在する腫瘍関連標的を対象にしている。結果として、これらの治療剤は、腫瘍を排除するプロセスにおいて、健康な非悪性細胞を必然的に枯渇させる。良性細胞からがん性細胞を識別できないことは、抗体開発を制限しており、免疫療法の成功を損なっている。したがって、腫瘍細胞を特異的に標的化する治療薬を開発することは、魅力的ではあるが達成困難なコンセプトであった。
【０１８３】
本出願人らのデノボ細胞スクリーニングテクノロジーを開発するにあたり、本出願人らは、正常ヒトＢ細胞の認識を伴わない、新規マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）特異的なヒト抗体軽鎖結合ドメイン（ＶＬ）を同定することに成功した。細胞スクリーニングテクノロジーは、新規標的発見のために、設計されたファージディスプレイテクノロジーに、出願人の独自のヒト抗体ライブラリーを取り込んでいる。このライブラリーは、正常ヒト組織に結合するＦｖ配列を排除するためにフィルタリングされた高多様性ヒト抗体可変断片（Ｆｖ）から構成される。本出願人らは、ヒトＭＣＬ株ＪｅＫｏ−１をスクリーニングし、ＭＣＬ特異的ＶＬの同定に成功した。ＶＬを、新規ヒト軽鎖ドメイン抗体バリアント：ＬＣ−Ａｂ、（ＬＣ）２−Ａｂ及びＬＣＦｖ−Ａｂ中に操作した。これらのバリアントは、Ｂ細胞及びＴ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）のパネルから、全てのＭＣＬを識別することによって、ＶＬベースの抗体の特異性を実証し、顕著なことに、正常ヒトＢリンパ球に結合することもそれらを死滅させることもなかった。抗体媒介性細胞傷害によるＭＣＬ排除がインビトロで実証され、ヒトＭＣＬ異種移植モデルにおけるインビボでの顕著に延長された全生存期間で確認された。重要なことに、ヒト化マウスに対するインビボヒトＢ細胞枯渇実験により、本発明者らのＭＣＬ特異的抗体が、正常ヒトＢ細胞に対して細胞傷害を示さないことが確認された。
【０１８４】
本出願人らは、ヒトＭＣＬを特異的に同定しそれを死滅させることが可能な、新規の完全ヒト抗体ベースの薬剤を、首尾よく開発した。これは、ＭＣＬに対する診断的及び臨床治療的指標を有する腫瘍特異的薬剤の最初の公知の報告である。
【０１８５】
材料及び方法。
【０１８６】
ヒト抗体ファージディスプレイライブラリーの生成。ヒトＢ細胞を、２０人の健康な血液ドナーのバフィーコートから単離した。抗体重鎖可変領域（ＶＨ）及び抗体軽鎖可変領域（ＶＬ）をコードするｃＤＮＡを、単離されたＢ細胞ｍＲＮＡからコピーした。ＶＨ及びＶＬ  ｃＤＮＡを、ランダムに組み合わせて、抗体単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を形成した。各ｓｃＦｖ  ＤＮＡ配列を、製造業者の指示に従って、Ｍ１３ファージ上での発現のために組換えファージ抗体系ファージミドｐＣＡＮＴＡＢ  ５Ｅ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｌｉｔｔｌｅ  Ｃｈａｌｆｏｎｔ、ＵＫ）中に操作した。ファージの多様性を、＞２００クローンのｓｃＦｖを配列決定することによって確認した。
【０１８７】
ファージディスプレイライブラリースクリーニング：バイオパニング。ヒト抗体ｓｃＦｖファージディスプレイライブラリーは、４ラウンドのバイオパニングを受けた。ファージを、ヒト抗体ｓｃＦｖについて配列決定し、各ラウンド後に分析した。ファージ富化を計算し、優勢な配列（複数可）を同定した。
【０１８８】
各バイオパニングラウンドは、以下の通りであった：ファージライブラリーをフィルタリングして、ファージ結合性正常ヒトＢ細胞を排除した。正常ＰＢＭＣから単離されたＢ細胞を、ファージライブラリーと共にインキュベートした。Ｂ細胞に結合したファージを廃棄し、未結合のファージを、さらなるバイオパニングのために抽出した。抽出されたファージを、１：５の比で、ＣＤ２０標識した悪性ヒト細胞株（ＭＣＬ  ＪｅＫｏ−１、ＡＴＣＣ、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）及び正常ヒトＢ細胞との競合的結合のためにインキュベートした。悪性株に結合するファージを、選別されたＪｅＫｏ−１細胞から溶出させ、配列決定及び引き続くバイオパニングのために拡大増殖させた。ファージを、製造業者の指示に従って、ファージディスプレイコンピテントなＴＧ１細胞（Ｌｕｃｉｇｅｎ、Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎ、ＷＩ）において拡大増殖させた。
【０１８９】
抗体バリアントを生成する。同定された軽鎖可変領域（ＶＬ）を、図２Ａに示されるように、マウス又はヒトＩｇＧ１定常領域と遺伝子融合させた。発現プラスミドを、製造業者の指示に従って、Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ  ２９３  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）中にトランスフェクトした。培養物上清中の組換え抗体を、製造業者（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｍａｒｌｂｏｒｏｕｇｈ、ＭＡ）の指示に従って、ＨｉＴｒａｐプロテインＡアフィニティクロマトグラフィーカラムによって精製した。精製された抗体を、ＳＤＳゲルによって確認した。
【０１９０】
【表１】
2020518251.tif 000003
【０１９１】
非公式の配列表
【０１９２】
【化１】
2020518251.tif 000004
【０１９３】
【化２】
2020518251.tif 000005
【０１９４】
【化３】
2020518251.tif 000006
【０１９５】
【化４】
2020518251.tif 000007
【０１９６】
【化５】
2020518251.tif 000008
【０１９７】
【化６】
2020518251.tif 000009
【０１９８】
【化７】
2020518251.tif 000010
2020518251.tif 000011
【０１９９】
【化８】
2020518251.tif 000012
2020518251.tif 000013
【０２００】
【化９】
2020518251.tif 000014
【０２０１】
実施形態
実施形態１．配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む抗体可変ドメイン。
【０２０２】
実施形態２．第１の抗体ペプチドを含む抗体構築物であって、第１の抗体ペプチドが、（ｉ）配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む第１の抗体可変ドメイン；並びに（ｉｉ）第１の抗体可変ドメインに結合された第１の抗体ドメインを含む、抗体構築物。
【０２０３】
実施形態３．抗体可変ドメインが抗体軽鎖可変ドメインである、実施形態１に記載の抗体可変ドメイン又は実施形態２に記載の抗体構築物。
【０２０４】
実施形態４．抗体可変ドメインが抗体重鎖可変ドメインである、実施形態１に記載の抗体可変ドメイン又は実施形態２に記載の抗体構築物。
【０２０５】
実施形態５．一価抗体構築物である、実施形態２〜４のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２０６】
実施形態６．第１の抗体ドメインが第１の可変重鎖ドメインである、実施形態２〜５のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２０７】
実施形態７．単鎖抗体（ｓｃＦｖ）である、実施形態６に記載の抗体構築物。
【０２０８】
実施形態８．第１の抗体ドメインが第１の定常重鎖である、実施形態２に記載の抗体構築物。
【０２０９】
実施形態９．第１の定常重鎖が、第１の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合された第１の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインを含む、実施形態８に記載の抗体構築物。
【０２１０】
実施形態１０．第１のＣＨ３ドメインが、第１のＣＨ２ドメインを介して第１の抗体可変ドメインに結合されている、実施形態９に記載の抗体構築物。
【０２１１】
実施形態１１．第１の抗体ペプチドが、第１の定常重鎖１（ＣＨ１）ドメインをさらに含む、実施形態１０に記載の抗体構築物。
【０２１２】
実施形態１２．第１のＣＨ１ドメインが、第１の抗体ドメインの一部を形成する、実施形態１１に記載の抗体構築物。
【０２１３】
実施形態１３．第１の抗体可変ドメインが、第１のＣＨ１ドメインを介して第１の抗体ドメインに結合されている、実施形態１１〜１２のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２１４】
実施形態１４．第１の抗体可変ドメインが、第１のＣＨ１ドメインを介して第１のＣＨ２ドメインに結合されている、実施形態１１〜１３のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２１５】
実施形態１５．第１の抗体ペプチドに結合された第２の抗体ペプチドをさらに含む二価抗体構築物である、実施形態２〜１４のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２１６】
実施形態１６．第２のペプチドが、第１の抗体ドメインに結合されている、実施形態１５に記載の抗体構築物。
【０２１７】
実施形態１７．第２の抗体ペプチドが、第１のＣＨ２ドメインに結合されている、実施形態１５に記載の抗体構築物。
【０２１８】
実施形態１８．第２の抗体ペプチド及び第１の抗体ペプチドが、化学的に同一である、実施形態１５〜１７のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２１９】
実施形態１９．第２の抗体ペプチド及び第１の抗体ペプチドが、化学的に異なる、実施形態１５〜１７のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２２０】
実施形態２０．第２の抗体ペプチドが、（ｉ）第２の抗体可変ドメイン；及び（ｉｉ）第２の抗体可変ドメインに結合された第２の抗体ドメインを含む、実施形態１５〜１７のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２２１】
実施形態２１．第２の抗体可変ドメインが、配列番号１に示されるＣＤＲ１、配列番号２に示されるＣＤＲ２及び配列番号３に示されるＣＤＲ３を含む、実施形態２０に記載の抗体構築物。
【０２２２】
実施形態２２．第２の抗体ドメインが第２の定常重鎖である、実施形態２０又は２１に記載の抗体構築物。
【０２２３】
実施形態２３．第２の定常重鎖が、第２の定常重鎖３（ＣＨ３）ドメインに結合された第２の定常重鎖２（ＣＨ２）ドメインを含む、実施形態２２に記載の抗体構築物。
【０２２４】
実施形態２４．第２のＣＨ３ドメインが、第２のＣＨ２ドメインを介して第２の抗体可変ドメインに結合されている、実施形態２３に記載の抗体構築物。
【０２２５】
実施形態２５．第２の抗体ペプチドが、第２の定常重鎖１（ＣＨ１）ドメインをさらに含む、実施形態２４に記載の抗体構築物。
【０２２６】
実施形態２６．第２のＣＨ１ドメインが、第２の抗体ドメインの一部を形成する、実施形態２５に記載の抗体構築物。
【０２２７】
実施形態２７．第２の抗体可変ドメインが、第２のＣＨ１ドメインを介して第２の抗体ドメインに結合されている、実施形態２５〜２６のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２２８】
実施形態２８．第２の抗体可変ドメインが、第２のＣＨ１ドメインを介して第２のＣＨ２ドメインに結合されている、実施形態２５〜２７のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２２９】
実施形態２９．第１のＣＨ１ドメイン及び第２のＣＨ１ドメインが、互いに結合されている、実施形態２８に記載の抗体構築物。
【０２３０】
実施形態３０．第１の抗体ペプチドに結合された第３の抗体可変ドメイン及び第２の抗体ペプチドに結合された第４の抗体可変ドメインをさらに含む四価抗体構築物である、実施形態１５〜２９に記載の抗体構築物。
【０２３１】
実施形態３１．第３の抗体可変ドメインが、第１の抗体ペプチドの一部を形成し、第４の抗体可変ドメインが、第２の抗体ペプチドの一部を形成する、実施形態３０に記載の抗体構築物。
【０２３２】
実施形態３２．第３の抗体可変ドメインが、第１の抗体可変ドメインを介して第１の抗体ドメインに結合されている、実施形態３０又は３１に記載の抗体構築物。
【０２３３】
実施形態３３．第３の抗体可変ドメインが、第１の抗体可変ドメインを介して第１のＣＨ２ドメインに結合されている、実施形態３０〜３２のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２３４】
実施形態３４．第４の抗体可変ドメインが、第２の抗体可変ドメインを介して第２の抗体ドメインに結合されている、実施形態３０〜３３のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２３５】
実施形態３５．第４の抗体可変ドメインが、第２の抗体可変ドメインを介して第２のＣＨ２ドメインに結合されている、実施形態３０〜３４のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２３６】
実施形態３６．第３の抗体可変ドメインが、第１の抗体ペプチドに結合された第１の軽鎖抗体ペプチドの一部を形成し、第４の抗体可変ドメインが、第２の抗体ペプチドに結合された第２の軽鎖抗体ペプチドの一部を形成する、実施形態３０に記載の抗体構築物。
【０２３７】
実施形態３７．第１の軽鎖抗体ペプチドが、第３の抗体可変ドメインに結合された第１の定常軽鎖１（ＣＬ１）ドメインを含む、実施形態３６に記載の抗体構築物。
【０２３８】
実施形態３８．第１の軽鎖抗体ペプチドが、第１のＣＬ１ドメインを介して第１の抗体ペプチドに結合されている、実施形態３７に記載の抗体構築物。
【０２３９】
実施形態３９．第３の抗体可変ドメインが、第１のＣＬ１ドメインを介して第１の抗体ペプチドに結合されている、実施形態３７又は３８に記載の抗体構築物。
【０２４０】
実施形態４０．第２の軽鎖抗体ペプチドが、第４の抗体可変ドメインに結合された第２の定常軽鎖１（ＣＬ１）ドメインをさらに含む、実施形態３６〜３９のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２４１】
実施形態４１．第２の軽鎖抗体ペプチドが、第２のＣＬ１ドメインを介して第２の抗体ペプチドに結合されている、実施形態４０に記載の抗体構築物。
【０２４２】
実施形態４２．第４の抗体可変ドメインが、第２のＣＬ１ドメインを介して第２の抗体ペプチドに結合されている、実施形態３７又は３８に記載の抗体構築物。
【０２４３】
実施形態４３．抗体である、実施形態２〜４２のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２４４】
実施形態４４．抗体バリアントである、実施形態２〜４２のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２４５】
実施形態４５．Ｆａｂ’断片である、実施形態２〜４２のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２４６】
実施形態４６．キメラ抗体である、実施形態２〜４２のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２４７】
実施形態４７．ヒト化抗体である、実施形態２〜４２のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２４８】
実施形態４８．ヒト抗体である、実施形態２〜４２のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２４９】
実施形態４９．検出可能な部分を含む、実施形態２〜４８のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２５０】
実施形態５０．検出可能な部分が蛍光部分である、実施形態４９に記載の抗体構築物。
【０２５１】
実施形態５１．がんタンパク質に結合している、実施形態２〜５０のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２５２】
実施形態５２．がんタンパク質が、がん細胞の一部を形成する、実施形態２〜５１のうちの１つに記載の抗体構築物。
【０２５３】
実施形態５３．がん細胞がリンパ系細胞である、実施形態５２に記載の抗体構築物。
【０２５４】
実施形態５４．がん細胞がＢ細胞である、実施形態５２又は５３に記載の抗体構築物。
【０２５５】
実施形態５５．実施形態１に記載の抗体可変ドメイン、実施形態２〜５４のうちの１つに記載の第１の抗体ペプチド、実施形態１５〜５４のうちの１つに記載の第２の抗体ペプチド、実施形態３６〜５４のうちの１つに記載の第１の軽鎖抗体ペプチド又は実施形態３６〜５４のうちの１つに記載の第２の軽鎖抗体ペプチドをコードする、単離された核酸。
【０２５６】
実施形態５６．実施形態１に記載の抗体可変ドメイン又は実施形態２〜５４のうちの１つに記載の抗体構築物の治療有効量及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【０２５７】
実施形態５７．それを必要とする対象においてがんを治療する方法であって、実施形態１に記載の抗体可変ドメイン又は実施形態２〜５４のうちの１つに記載の抗体構築物の治療有効量を対象に投与し、それによって対象におけるがんを治療することを含む方法。
【０２５８】
実施形態５８．がんが、リンパ腫、白血病又は骨髄腫である、実施形態５７に記載の方法。
【０２５９】
実施形態５９．リンパ腫が、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫又はバーキットリンパ腫である、実施形態５８に記載の方法。
【０２６０】
実施形態６０．白血病が、リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病又はヘアリー細胞白血病である、実施形態５８に記載の方法。
【０２６１】
実施形態６１．第２の治療剤を対象に投与するステップをさらに含む、実施形態５７〜６０のうちの１つに記載の方法。
【図１Ａ】
2020518251.tif 000015
【図１Ｂ】
2020518251.tif 000016
【図１Ｃ−１】
2020518251.tif 000017
【図１Ｃ−２】
2020518251.tif 000018
【図２Ａ−１】
2020518251.tif 000019
【図２Ａ−２】
2020518251.tif 000020
【図２Ｂ】
2020518251.tif 000021
【図３Ａ】
2020518251.tif 000022
【図３Ｂ−１】
2020518251.tif 000023
【図３Ｂ−２】
2020518251.tif 000024
【図３Ｃ】
2020518251.tif 000025
【図４Ａ】
2020518251.tif 000026
【図４Ｂ】
2020518251.tif 000027
【図５−１】
2020518251.tif 000028
【図５−２】
2020518251.tif 000029
【図５−３】
2020518251.tif 000030
【図６Ａ】
2020518251.tif 000031
【図６Ｂ】
2020518251.tif 000032
【図６Ｃ】
2020518251.tif 000033
【図７Ａ】
2020518251.tif 000034
【図７Ｂ−１】
2020518251.tif 000035
【図７Ｂ−２】
2020518251.tif 000036
【図７Ｂ−３】
2020518251.tif 000037
【図８Ａ−１】
2020518251.tif 000038
【図８Ａ−２】
2020518251.tif 000039
【図８Ｂ】
2020518251.tif 000040
【図９Ａ】
2020518251.tif 000041
【図９Ｂ】
2020518251.tif 000042
【図９Ｃ】
2020518251.tif 000043
【図９Ｄ】
2020518251.tif 000044
【図９Ｅ】
2020518251.tif 000045
【図９Ｆ】
2020518251.tif 000046
【図９Ｇ】
2020518251.tif 000047
【図９Ｈ】
2020518251.tif 000048
【図９Ｉ】
2020518251.tif 000049
【図９Ｊ】
2020518251.tif 000050
【図１０−１】
2020518251.tif 000051
【図１０−２】
2020518251.tif 000052
【配列表】
2020518251000001.app
【国際調査報告】
2020518251.tif 000053
2020518251.tif 000054