(57)【要約】  本発明は、新規な構造で、生理活性により優れ、鎮痛効果にも優れた一般式（Ｉ）で表されるペプチドアミド系化合物及びその製造方法、並びに医薬品における用途を提供する。【化２５１】2020526571.tif 000306【選択図】なし
2020526571.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶。
【化２４５】
2020526571.tif 000286
［式（Ｉ）中、
Ｒ１は、
2020526571.tif 000287
から選ばれ、
ｍ１、ｍ２は、それぞれ独立して、１、２、３又は４から選ばれ、
ｍ３、ｍ４は、それぞれ独立して、０、１、２、３又は４から選ばれ（ただし、ｍ３及びｍ４は同時に０にすることができない。）、
ｎ１、ｎ２は、それぞれ独立して、０、１、２、３又は４から選ばれ、
Ｚは、ＣＲｚ１Ｒｚ２又はＮＲｚ３から選ばれ、
Ｒｚ１、Ｒｚ２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-６アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-６アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-ＮＲ１ｅＲ１ｆ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＯＨ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＮＨ２、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、アルコキシ基、アルケニル基、アルキニル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、＝Ｏ、カルボキシル基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含むが、前記ヘテロ原子がＳから選ばれる場合に、さらにＳ、Ｓ＝Ｏ又はＳ（＝Ｏ）２から任意に選ばれるものであり、
Ｒ１ｅ、Ｒ１ｆは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-６アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-６アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-８炭素環基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-３〜８員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
或いは、Ｒｚ１及びＲｚ２は、これらに結合する炭素原子とともに３〜１０員窒素含有複素環を形成し、前記環は、任意にさらにＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、＝Ｏ、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂは、それぞれ独立して、Ｆ、ＣＦ３、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基又は３〜８員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒｚ３は、独立して、Ｈ、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-６アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-６アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ３-８炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ３-８炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（３〜８員複素環基）、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-６アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ３-８炭素環基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-（３〜８員複素環基）、-Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１ｇＲ１ｈ、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-ＮＲ１ｉＲ１ｊ又は３〜８員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈ、Ｒ１ｉ、Ｒ１ｊは、それぞれ独立して、Ｈ又はＣ１-６アルキル基から選ばれ、
或いは、Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈは、これらに結合する窒素原子とともに３〜１０員複素環を形成し、前記環は、任意にさらにＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基又は-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-６アルキル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
ｑは、０、１、２、３又は４から選ばれ、
ｐは、０、１又は２から選ばれ、
ａは、０、１、２又は３から選ばれ、
Ｒ４は、独立して、Ｈ、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基又は-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-８炭素環基から選ばれ、前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又は炭素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＮ、ＣＦ３、ＮＯ２、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-６アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-８炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-３〜８員複素環基又は
2020526571.tif 000288
から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
ｂは、０、１、２、３、４又は５から選ばれ、
ｃは、０、１、２、３、４又は５から選ばれ、
Ｒ５、Ｒ６は、それぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、Ｃ１-４アルキル基、-ＯＲ５ａ、-Ｃ（Ｏ）ＯＲ５ｂ、-ＳＲ５ｃ、-Ｓ（Ｏ）Ｒ５ｄ、-Ｓ（Ｏ）２Ｒ５ｅ又は-ＮＲ５ｆＲ５ｇから選ばれ、
Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ、Ｒ５ｃ、Ｒ５ｄ、Ｒ５ｅ、Ｒ５ｆ及びＲ５ｇは、それぞれ独立して、Ｈ又はＣ１-４アルキル基から選ばれ、
或いは、Ｒ５ｆ、Ｒ５ｇは、これらに結合する窒素原子とともに５〜６員複素環を形成し、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含む。］
【請求項２】
ｍ１、ｍ２、ｍ３、ｍ４は、それぞれ独立して、１又は２から選ばれ、
ｎ１、ｎ２は、それぞれ独立して、０、１又は２から選ばれ、
Ｚは、ＣＲｚ１Ｒｚ２又はＮＲｚ３から選ばれ、
Ｒｚ１、Ｒｚ２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-ＮＲ１ｅＲ１ｆ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＯＨ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＮＨ２、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、＝Ｏ、カルボキシル基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含むが、前記ヘテロ原子がＳから選ばれる場合に、さらにＳ、Ｓ＝Ｏ又はＳ（＝Ｏ）２から任意に選ばれるものであり、
Ｒ１ｅ、Ｒ１ｆは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-６炭素環基から選ばれ、前記アルキル基又は炭素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基、フェニル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、
或いは、Ｒｚ１及びＲｚ２は、これらに結合する炭素原子とともに４〜６員窒素含有複素環を形成してもよく、前記環のいずれは、さらに＝Ｏという置換基で置換され、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂは、独立して、Ｆ、ＣＦ３、メチル基、エチル基、プロピル基又はイソプロピル基から選ばれ、
Ｒｚ３は、それぞれ独立して、Ｈ、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１ｇＲ１ｈ、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-ＮＲ１ｉＲ１ｊ又は３〜６員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基、シクロプロピル基又はフェニル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈ、Ｒ１ｉ、Ｒ１ｊは、それぞれ独立して、Ｈ又はＣ１-４アルキル基から選ばれ、
或いは、Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈは、これらに結合する窒素原子とともに４〜６員複素環を形成し、前記環は、任意にさらにＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基又は-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
ｐは、２から選ばれ、
ｑは、０又は１から選ばれ、
ａは、３から選ばれ、
Ｒ４は、プロピル基又はイソプロピル基から選ばれ、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-ベンジル基から選ばれ、
ｂは、０から選ばれ、
ｃは、０から選ばれる、
請求項１に記載の化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶。
【請求項３】
一般式（ＩＩ）で表される化合物から選ばれる、請求項２に記載の化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶。
【化２４６】
2020526571.tif 000289
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
2020526571.tif 000290
から選ばれ、
ｍ１、ｍ２、ｍ３、ｍ４は、それぞれ独立して、１又は２から選ばれ、
ｎ１、ｎ２は、それぞれ独立して、０又は２から選ばれ、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂは、独立して、Ｆから選ばれ、
Ｚは、ＣＲｚ１Ｒｚ２又はＮＲｚ３から選ばれ、
Ｒｚ１、Ｒｚ２は、それぞれ独立して、Ｈ、カルボキシル基、
2020526571.tif 000291
2020526571.tif 000292
アミノ基、-ＣＨ２ＮＨ２又は
2020526571.tif 000293
から選ばれ、
或いは、Ｒｚ１及びＲｚ２は、これらに結合する炭素原子とともにラクタムである
2020526571.tif 000294
を形成してもよく、
Ｒｚ３は、それぞれ独立して、Ｈ、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１ｇＲ１ｈ、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-ＮＲ１ｉＲ１ｊ又は３〜６員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基、シクロプロピル基又はフェニル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈ、Ｒ１ｉ、Ｒ１ｊは、それぞれ独立して、Ｈ又はＣ１-４アルキル基から選ばれ、
或いは、Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈは、これらに結合する窒素原子とともに４〜６員複素環を形成し、前記環は、任意にさらにＦ、ＣＦ３、メチル基、メトキシ基又は-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
ｐは、２から選ばれ、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立して、Ｈ、メチル基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-ｔｅｒｔ-ブチル基から選ばれる。］
【請求項４】
Ｒｚ３は、それぞれ独立して、Ｈ、
2020526571.tif 000295
2020526571.tif 000296
2020526571.tif 000297
又は
2020526571.tif 000298
から選ばれる、
一般式（ＩＩ）で表される化合物から選ばれる、請求項３に記載の化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶。
【請求項５】
Ｒ１は、
2020526571.tif 000299
2020526571.tif 000300
又は
2020526571.tif 000301
から選ばれる、
請求項４に記載の化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶。
【請求項６】
下記の構造の一つから選ばれる、請求項５に記載の化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶。
【化２４７】
2020526571.tif 000302
【化２４８】
2020526571.tif 000303
【化２４９】
2020526571.tif 000304
【化２５０】
2020526571.tif 000305
【請求項７】
前記薬学的に許容可能な塩は、トリフルオロ酢酸塩から選ばれる、請求項１乃至６のいずれかに記載の化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶。
【請求項８】
請求項１乃至７のいずれかに記載の化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶と、１種又は複数種の薬学的に許容可能なキャリア及び／又は賦形剤と、を含む、薬物組成物。
【請求項９】
請求項１乃至７のいずれかに記載の化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶、或いは、請求項８に記載の薬物組成物の、哺乳動物のκオピオイド受容体の関連疾患又は病態を治療又は予防するための薬物の製造への応用。
【請求項１０】
前記κオピオイド受容体の関連疾患又は病態は、痛み、炎症、痒み、水腫、低ナトリウム血症、低カリウム血症、腸梗塞、咳及び緑内障からなる群より選択されるものである、請求項９に記載の応用。
【請求項１１】
前記痛みは、神経痛、体性痛、内臓痛及び皮膚痛からなる群より選択されるものである、請求項９に記載の応用。
【請求項１２】
前記痛みは、関節炎痛み、腎臓結石痛み、子宮痙攣、月経痛、異所性子宮内膜症、消化不良、外科手術後痛み、医療処理後痛み、眼部痛み、耳炎痛み、爆発的癌痛み及びＧＩ乱れの関連痛みからなる群より選択されるものである、請求項９に記載の応用。
【請求項１３】
請求項１乃至７のいずれかに記載の化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶、或いは、請求項８に記載の薬物組成物を施薬することを含む、哺乳動物のκオピオイド受容体の関連疾患又は病態を治療又は予防する方法。
【請求項１４】
前記κオピオイド受容体の関連疾患又は病態は、痛み、炎症、痒み、水腫、低ナトリウム血症、低カリウム血症、腸梗塞、咳及び緑内障からなる群より選択されるものである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記痛みは、神経痛、体性痛、内臓痛及び皮膚痛からなる群より選択されるものである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記痛みは、関節炎痛み、腎臓結石痛み、子宮痙攣、月経痛、異所性子宮内膜症、消化不良、外科手術後痛み、医療処理後痛み、眼部痛み、耳炎痛み、爆発的癌痛み及びＧＩ乱れの関連痛みからなる群より選択されるものである、請求項１４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、鎮痛作用を有するペプチドアミド系化合物及びその製造方法、並びに医薬品における用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
オピオイド系薬物は、数千年前から痛みの治療に用いられ、主に既知の３種の代表的なオピオイド受容体μ、δ及びκと互いに結合して生理作用を発揮するものである。これらの３種の受容体は、いずれもＧタンパク質共役受容体ファミリーの一員であり、主に中枢神経系に配布するとともに、多くの周辺組織にも存在する。その中に、最も代表的な薬物としてはモルヒネであり、当該モルヒネは主にμオピオイド受容体の作用によって鎮痛効果を発揮する。
【０００３】
また、汎用的な臨床鎮痛薬物には、ジヒドロモルフォン、フェンタニルを代表とする伝統的なオピオイド薬物のようなほかのμオピオイド受容体薬物を含む。
【０００４】
しかし、μオピオイド受容体系薬物は、長期間使用すると、耐性、依存性、呼吸抑制及び胃腸運動への影響などのような複数の副作用を生じ、これにより、治療費の増加の原因となるだけではなく、さらに患者の治療周期に影響する。アセトアミノフェン、ＮＳＡＩＤｓ（非ステロイド系抗炎症薬）などの非オピオイド注射剤は、その鎮痛効果が劣るので、その使用範囲及び投与量が制限され、また副作用があり、例えば、アセトアミノフェンは肝臓毒性の増加の原因となり、ＮＳＡＩＤｓ（非ステロイド系抗炎症薬）は、さまざまな胃腸疾患の原因となる。
【０００５】
現代社会における生活及び仕事のストレスの増加並びに高齢社会の到来に伴い、さらにオピオイド受容体がさまざまな種類の痛みの治療に重要であることを背景として、鎮痛活性が高く、且つ低毒な副作用を有する新規なオピオイドを見出すことは科学的及び社会的意義が重要である。
【０００６】
検討によれば、κオピオイド受容体アゴニストを使用することにより、κオピオイド受容体を介入のターゲットとして、痛みの治療及び種類多くの疾患及び病態の予防に用いられる、ことを発見した。例えば、１９９３年に、Ｗｏｏｌｄらは、非特許文献１に、κオピオイド受容体アゴニストを、痛覚過敏を含む痛みの治療に用いることを開示した。１９９９年に、Ｗｕらは、非特許文献２に、κオピオイド受容体アゴニストを、心血管疾患を予防及び治療するためのターゲットとすることを提案した。２００３年に、Ｋａｕｓｈｉｋらは、非特許文献３に、κオピオイド受容体アゴニストの神経保護作用を開示した。２００４年に、Ｐｏｔｔｅｒらは、非特許文献４に、κオピオイド受容体アゴニストの、目の障害や目の痛みへの応用を開示した。２００５年に、Ｗｉｋｓｔｒｏｍらは、非特許文献５に、κアゴニストの、尿毒症やオピオイドによる痒みへの応用を開示した。２００６年に、Ｂｉｌｅｖｉｃｉｕｔｅ-Ｌｊｕｎｇａｒらは、非特許文献６に、κオピオイド受容体アゴニストが骨関節炎、リウマチ性関節炎などの炎性疾患に用いられる特性を評価した。２００６年に、Ｌｅｍｂｏは、非特許文献７に、κオピオイド受容体アゴニストの、胃腸疾患への応用を評価した。２００６年に、Ｊｏｌｉｖａｌｔらは、非特許文献８に、κオピオイド受容体アゴニストであるアシマドリンの、げっ歯類動物の糖尿病性神経障害への応用を評価した。２００８年に、株式会社カラセラピーのＳｃｈｔｅｉｎｇａｒｔ,Ｃｌａｕｄｉｏ,Ｄらは、特許文献１に、κオピオイド受容体アゴニストの、内臓痛、ｐＨ感受性侵害受容器活性化の関連痛みおよびカプサイシン誘発性眼部痛みへの応用を評価した。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開第２００８／０５７６０８号
【特許文献２】中国特許出願公開第１０１６２７０４９号明細書
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｗｏｏｌｄら、「Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ ａｎｄ Ａｎａｌｇｅｓｉａ」、７７巻、３６２-３７９頁、１９９３年
【非特許文献２】Ｗｕら、「Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ Ｒｅｓ」、８４巻、１３８８-１３９５頁、１９９９年
【非特許文献３】Ｋａｕｓｈｉｋら、「Ｊ．Ｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」、４９巻１号、９０-９５頁、２００３年
【非特許文献４】Ｐｏｔｔｅｒら、「Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ」、２０９巻、５４８-５５３頁、２００４年
【非特許文献５】Ｗｉｋｓｔｒｏｍら、「Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ」、１６巻、３７４２-３７４７頁、２００５年
【非特許文献６】Ｂｉｌｅｖｉｃｉｕｔｅ-Ｌｊｕｎｇａｒら、「Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ」、４５巻、２９５-３０２頁、２００６年
【非特許文献７】Ｌｅｍｂｏ、「Ｄｉｇｅｓ．Ｄｉｓ．」、２４巻、９１-９８頁、２００６年
【非特許文献８】Ｊｏｌｉｖａｌｔら、「Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ」、４９巻１１号、２７７５-２７８５頁、２００６年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、新規な構造で、生理活性により優れ、鎮痛効果にも優れたκオピオイド受容体アゴニスト及びその製造方法、並びに医薬品における用途を提供することを目的とする。
【００１０】
本発明は、一般式（Ｉ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶を提供する。
【００１１】
【化１】
2020526571.tif 000003
【００１２】
［式（Ｉ）中、
Ｒ１は、
2020526571.tif 000004
から選ばれ、
ｍ１、ｍ２は、それぞれ独立して、１、２、３又は４から選ばれ、
ｍ３、ｍ４は、それぞれ独立して、０、１、２、３又は４から選ばれ（ただし、ｍ３及びｍ４は同時に０にすることができない。）、
ｎ１、ｎ２は、それぞれ独立して、０、１、２、３又は４から選ばれ、
Ｚは、ＣＲｚ１Ｒｚ２又はＮＲｚ３から選ばれ、
Ｒｚ１、Ｒｚ２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-６アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-６アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-ＮＲ１ｅＲ１ｆ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＯＨ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＮＨ２、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、アルコキシ基、アルケニル基、アルキニル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、＝Ｏ、カルボキシル基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含むが、前記ヘテロ原子がＳから選ばれる場合に、さらにＳ、Ｓ＝Ｏ又はＳ（＝Ｏ）２から任意に選ばれるものであり、
Ｒ１ｅ、Ｒ１ｆは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-６アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-６アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-８炭素環基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-３〜８員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
或いは、Ｒｚ１及びＲｚ２は、これらに結合する炭素原子とともに３〜１０員窒素含有複素環を形成し、前記環は、任意にさらにＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、＝Ｏ、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂは、それぞれ独立して、Ｆ、ＣＦ３、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基又は３〜８員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒｚ３は、独立して、Ｈ、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-６アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-６アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ３-８炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ３-８炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（３〜８員複素環基）、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-６アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ３-８炭素環基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-（３〜８員複素環基）、-Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１ｇＲ１ｈ、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-ＮＲ１ｉＲ１ｊ又は３〜８員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈ、Ｒ１ｉ、Ｒ１ｊは、それぞれ独立して、Ｈ又はＣ１-６アルキル基から選ばれ、
或いは、Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈは、これらに結合する窒素原子とともに３〜１０員複素環を形成し、前記環は、任意にさらにＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基又は-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-６アルキル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
ｑは、０、１、２、３又は４から選ばれ、
ｐは、０、１又は２から選ばれ、
ａは、０、１、２又は３から選ばれ、
Ｒ４は、独立して、Ｈ、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基又は-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-８炭素環基から選ばれ、前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又は炭素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＮ、ＣＦ３、ＮＯ２、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-６アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-８炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-３〜８員複素環基又は
2020526571.tif 000005
から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基又は３〜８員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
ｂは、０、１、２、３、４又は５から選ばれ、
ｃは、０、１、２、３、４又は５から選ばれ、
Ｒ５、Ｒ６は、それぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、Ｃ１-４アルキル基、-ＯＲ５ａ、-Ｃ（Ｏ）ＯＲ５ｂ、-ＳＲ５ｃ、-Ｓ（Ｏ）Ｒ５ｄ、-Ｓ（Ｏ）２Ｒ５ｅ又は-ＮＲ５ｆＲ５ｇから選ばれ、
Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ、Ｒ５ｃ、Ｒ５ｄ、Ｒ５ｅ、Ｒ５ｆ及びＲ５ｇは、それぞれ独立して、Ｈ又はＣ１-４アルキル基から選ばれ、
或いは、Ｒ５ｆ、Ｒ５ｇは、これらに結合する窒素原子とともに５〜６員複素環を形成し、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含む。］
【００１３】
本発明の好ましい態様としては、以下に示すように一般式（Ｉ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶である。
【００１４】
［式（Ｉ）中に、
Ｒ１は、
2020526571.tif 000006
から選ばれ、
ｍ１、ｍ２、ｍ３、ｍ４は、それぞれ独立して、１又は２から選ばれ、
ｎ１、ｎ２は、それぞれ独立して、０、１又は２から選ばれ、
Ｚは、ＣＲｚ１Ｒｚ２又はＮＲｚ３から選ばれ、
Ｒｚ１、Ｒｚ２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-４アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-ＮＲ１ｅＲ１ｆ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＯＨ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＮＨ２、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれ、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-ＮＲ１ｅＲ１ｆ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＯＨ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＮＨ２、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基が好ましく、前記アルキル基、アルコキシ基、アルケニル基、アルキニル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、＝Ｏ、カルボキシル基、シアノ基、アミノ基、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、前記ヘテロ原子がＳから選ばれる場合に、さらにＳ、Ｓ＝Ｏ又はＳ（＝Ｏ）２から任意に選ばれるものであり、
Ｒ１ｅ、Ｒ１ｆは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-６炭素環基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-３〜６員複素環基から選ばれ、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-６炭素環基が好ましく、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
或いは、Ｒｚ１及びＲｚ２は、これらに結合する炭素原子とともに３〜１０員窒素含有複素環を形成し、４〜６員窒素含有複素環を形成することが好ましく、前記環は、任意にさらにＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、＝Ｏ、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂは、それぞれ独立して、Ｆ、ＣＦ３、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基又は３〜６員複素環基から選ばれ、Ｆ、ＣＦ３、Ｃ２-４アルケニル基又はＣ２-４アルキニル基が好ましく、前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又は複素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒｚ３は、独立して、Ｈ、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ３-４炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ３-６炭素環基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（３〜６員複素環基）、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ３-６炭素環基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-（３〜６員複素環基）、-Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１ｇＲ１ｈ、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-ＮＲ１ｉＲ１ｊ又は３〜６員複素環基から選ばれ、Ｈ、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１ｇＲ１ｈ又は３〜６員複素環基が好ましく、前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈ、Ｒ１ｉ、Ｒ１ｊは、それぞれ独立して、Ｈ又はＣ１-６アルキル基から選ばれ、Ｈ又はＣ１-４アルキル基が好ましく、
或いは、Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈは、これらに結合する窒素原子とともに３〜１０員複素環を形成し、４〜６員複素環を形成することが好ましく、前記環は、任意にさらにＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基又は-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
ｑは、０、１、２、３又は４から選ばれ、０又は１が好ましく、
ｐは、０、１又は２から選ばれ、２が好ましく、
ａは、０、１、２又は３から選ばれ、３が好ましく、
Ｒ４は、独立して、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基又は-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-６炭素環基から選ばれ、Ｃ１-４アルキル基が好ましく、前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又は炭素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＮ、ＣＦ３、ＮＯ２、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-３〜６員複素環基又は
2020526571.tif 000007
から選ばれ、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-６炭素環基が好ましく、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
ｂは、０、１、２、３、４又は５から選ばれ、０又は１が好ましく、
ｃは、０、１、２、３、４又は５から選ばれ、０又は１が好ましく、
Ｒ５、Ｒ６は、それぞれ独立して、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、Ｃ１-４アルキル基、又は-ＮＲ５ｆＲ５ｇから選ばれ、Ｆ、ＣＦ３又はＣ１-４アルキル基が好ましく、
Ｒ５ｆ及びＲ５ｇは、それぞれ独立して、Ｈ又はＣ１-４アルキル基から選ばれる。］
【００１５】
本発明の好ましい態様としては、以下に示すように一般式（Ｉ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶である。
【００１６】
［式（Ｉ）中、
ｍ１、ｍ２、ｍ３、ｍ４は、それぞれ独立して、１又は２から選ばれ、
ｎ１、ｎ２は、それぞれ独立して、０、１又は２から選ばれ、
Ｚは、ＣＲｚ１Ｒｚ２又はＮＲｚ３から選ばれ、
Ｒｚ１、Ｒｚ２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-（ＣＨ２）ｑ-ＮＲ１ｅＲ１ｆ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＯＨ、-（ＣＨ２）ｑ-ＣＯＮＨ２、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、＝Ｏ、カルボキシル基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、Ｃ１-４アルキル基、Ｃ１-４アルコキシ基、Ｃ２-４アルケニル基、Ｃ２-４アルキニル基、Ｃ３-６炭素環基又は３〜６員複素環基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから任意に選ばれるヘテロ原子を１〜３個含むが、前記ヘテロ原子がＳから選ばれる場合に、さらにＳ、Ｓ＝Ｏ又はＳ（＝Ｏ）２から任意に選ばれるものであり、
Ｒ１ｅ、Ｒ１ｆは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-（ＣＨ２）ｑ-Ｃ３-６炭素環基から選ばれ、前記アルキル基又は炭素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基、フェニル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、
或いは、Ｒｚ１及びＲｚ２は、これらに結合する炭素原子とともに４〜６員窒素含有複素環を形成してもよく、前記環は、任意にさらに＝Ｏという置換基で置換されてもよく、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂは、独立して、Ｆ、ＣＦ３、メチル基、エチル基、プロピル基又はイソプロピル基から選ばれ、
Ｒｚ３は、それぞれ独立して、Ｈ、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１ｇＲ１ｈ、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-ＮＲ１ｉＲ１ｊ又は３〜６員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基、シクロプロピル基又はフェニル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈ、Ｒ１ｉ、Ｒ１ｊは、それぞれ独立して、Ｈ又はＣ１-４アルキル基から選ばれ、
或いは、Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈは、これらに結合する窒素原子とともに４〜６員複素環を形成し、前記環は、任意にさらにＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、シアノ基、ニトロ基、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基又は-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基（-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-メチル基が好ましく、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-エチル基が好ましく）から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
ｐは、２から選ばれ、
ｑは、０又は１から選ばれ、
ａは、３から選ばれ、
Ｒ４は、プロピル基又はイソプロピル基から選ばれ、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-ベンジル基から選ばれ、
ｂは、０から選ばれ、
ｃは、０から選ばれる。］
【００１７】
本発明の好ましい態様としては、一般式（ＩＩ）で表される化合物から選ばれる、一般式（Ｉ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶を提供する。
【００１８】
【化２】
2020526571.tif 000008
【００１９】
［式（ＩＩ）中に、
Ｒ１は、
2020526571.tif 000009
から選ばれ、
ｍ１、ｍ２、ｍ３、ｍ４は、それぞれ独立して、１又は２から選ばれ、
ｎ１、ｎ２は、それぞれ独立して、０又は２から選ばれ、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂは、独立して、Ｆから選ばれ、
Ｚは、ＣＲｚ１Ｒｚ２又はＮＲｚ３から選ばれ、
Ｒｚ１、Ｒｚ２は、それぞれ独立して、Ｈ、カルボキシル基、
2020526571.tif 000010
2020526571.tif 000011
アミノ基、-ＣＨ２ＮＨ２又は
2020526571.tif 000012
から選ばれ、
或いは、Ｒｚ１及びＲｚ２は、これらに結合する炭素原子とともにラクタムである
2020526571.tif 000013
を形成してもよく、
Ｒｚ３は、それぞれ独立して、Ｈ、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ１-４アルキル基、-Ｃ（＝Ｏ）-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ３-６炭素環基、-Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１ｇＲ１ｈ、-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-ＮＲ１ｉＲ１ｊ又は３〜６員複素環基から選ばれ、前記アルキル基、炭素環基又は複素環基は、任意にさらに０〜３個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、ニトロ基、シアノ基、アミノ基、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基、シクロプロピル基又はフェニル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈ、Ｒ１ｉ、Ｒ１ｊは、それぞれ独立して、Ｈ又はＣ１-４アルキル基から選ばれ、
或いは、Ｒ１ｇ、Ｒ１ｈは、これらに結合する窒素原子とともに４〜６員複素環を形成し、前記環は、任意にさらにＦ、ＣＦ３、メチル基、メトキシ基又は-Ｓ（＝Ｏ）ｐ-Ｃ１-４アルキル基から選ばれる置換基で置換されてもよく、前記複素環基は、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を１〜３個含み、
ｐは、２から選ばれ、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立して、Ｈ、メチル基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-ｔｅｒｔ-ブチル基から選ばれる。］
【００２０】
本発明の好ましい態様としては、以下に示すように一般式（ＩＩ）で表される化合物、又はその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶を提供する。
【００２１】
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
2020526571.tif 000014
から選ばれ、
ｍ１、ｍ２、ｍ３、ｍ４は、それぞれ独立して、１又は２から選ばれ、
ｎ１、ｎ２は、それぞれ独立して、０又は２から選ばれ、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂは、Ｆから選ばれ、
Ｚは、ＣＲｚ１Ｒｚ２又はＮＲｚ３から選ばれ、
Ｒｚ１、Ｒｚ２は、それぞれ独立して、Ｈ、カルボキシル基、
2020526571.tif 000015
2020526571.tif 000016
アミノ基、-ＣＨ２ＮＨ２又は
2020526571.tif 000017
から選ばれ、
或いは、Ｒｚ１及びＲｚ２は、これらに結合する炭素原子とともにラクタムである
2020526571.tif 000018
を形成してもよく、
Ｒｚ３は、それぞれ独立して、Ｈ、
2020526571.tif 000019
2020526571.tif 000020
2020526571.tif 000021
又は
2020526571.tif 000022
から選ばれ、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立して、Ｈ、メチル基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-ｔｅｒｔ-ブチル基から選ばれる。］
【００２２】
本発明の好ましい態様としては、以下に示すように一般式（ＩＩ）で表される化合物、又はその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶を提供する。
【００２３】
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
2020526571.tif 000023
2020526571.tif 000024
又は
2020526571.tif 000025
から選ばれ、
Ｚは、ＣＲｚ１Ｒｚ２又はＮＲｚ３から選ばれ、
Ｒｚ１、Ｒｚ２は、それぞれ独立して、Ｈ、カルボキシル基、
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アミノ基、-ＣＨ２ＮＨ２又は
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から選ばれ、
或いは、Ｒｚ１及びＲｚ２は、これらに結合する炭素原子とともにラクタムである
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を形成してもよく、
Ｒｚ３は、それぞれ独立して、Ｈ、
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又は
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から選ばれ、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立して、Ｈ、メチル基又は-Ｃ（＝Ｏ）Ｏ-ｔｅｒｔ-ブチル基から選ばれる。］
【００２４】
本発明の好ましい態様としては、下記の構造式で表される化合物の一つを含む（これらに限定されず）、一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶を提供する。
【００２５】
【化３】
2020526571.tif 000034
【００２６】
【化４】
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【００２７】
【化５】
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【００２８】
【化６】
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【００２９】
【化７】
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【００３０】
本発明の好ましい態様としては、前記薬学的に許容可能な塩は、トリフルオロ酢酸塩から選ばれる、一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶を提供する。
【００３１】
本発明は、一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶と、１種又は複数種の薬学的に許容可能なキャリア及び／又は賦形剤と、を含む薬物組成物を提供する。
【００３２】
本発明は、一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶、或いは、一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶を含む薬物組成物の、哺乳動物のκオピオイド受容体の関連疾患又は病態を治療又は予防するための薬物の製造への応用に関する。
【００３３】
本発明の好ましい態様としては、前記κオピオイド受容体の関連疾患又は病態は、痛み、炎症、痒み、水腫、低ナトリウム血症、低カリウム血症、腸梗塞、咳及び緑内障からなる群より選択されるものである。
【００３４】
本発明の好ましい態様としては、前記痛みは、神経痛、体性痛、内臓痛及び皮膚痛からなる群より選択されるものである。
【００３５】
本発明の好ましい態様としては、前記痛みは、関節炎痛み、腎臓結石痛み、子宮痙攣、月経痛、異所性子宮内膜症、消化不良、外科手術後痛み、医療処理後痛み、眼部痛み、耳炎痛み、爆発的癌痛み及びＧＩ乱れの関連痛みからなる群より選択されるものである。
【００３６】
本発明は、一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶、或いは、一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される化合物またはその立体異性体、水和物、代謝産物、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶を含む薬物組成物を施薬することを含む、哺乳動物のκオピオイド受容体の関連疾患又は病態を治療又は予防する方法を提供する。さらに、前記κオピオイド受容体の関連疾患又は病態は、痛み、炎症、痒み、水腫、低ナトリウム血症、低カリウム血症、腸梗塞、咳及び緑内障からなる群より選択されるものが好ましく、前記痛みは、神経痛、体性痛、内臓痛及び皮膚痛からなる群より選択されるものが好ましく、或いは、前記痛みは、関節炎痛み、腎臓結石痛み、子宮痙攣、月経痛、異所性子宮内膜症、消化不良、外科手術後痛み、医療処理後痛み、眼部痛み、耳炎痛み、爆発的癌痛み及びＧＩ乱れ（胃腸乱れ）の関連痛みからなる群より選択されるものが好ましい。
【００３７】
とくに断わらない限り、明細書及び請求の範囲に用いられる用語は、下記の意味を含む。
【００３８】
本発明に記載の上記の基及び化合物に係る炭素、水素、酸素、硫黄、窒素又はハロゲンは、いずれもそれらの同位体を含み、また本発明に記載の上記の基及び化合物に係る炭素、水素、酸素、硫黄、窒素又はハロゲンは、任意にさらに１つまたは複数の対応する同位体で置換されてもよく、その中に、炭素の同位体は１２Ｃ、１３Ｃ及び１４Ｃを含み、水素の同位体はプロチウム（Ｈ）、ジュウテリウム（Ｄ、重水素ともいう）及びトリチウム（Ｔ、三重水素ともいう）を含み、酸素の同位体は１６Ｏ、１７Ｏ及び１８Ｏを含み、硫黄の同位体は３２Ｓ、３３Ｓ、３４Ｓ及び３６Ｓを含み、窒素の同位体は１４Ｎ及び１５Ｎを含み、フッ素の同位体は１９Ｆを含み、塩素の同位体は３５Ｃｌ及び３７Ｃｌを含み、臭素の同位体は７９Ｂｒ及び８１Ｂｒを含む。
【００３９】
「アルキル基」とは、直鎖状又は分岐鎖状の一価飽和炭化水素基を意味し、主鎖は炭素数１〜１０、好ましく炭素数１〜８、より好ましく炭素数１〜６、さらに好ましく炭素数１〜４の直鎖状及び分岐鎖状の基を含み、炭素数１〜２が最も好ましく、アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、ｎ-プロピル基、イソプロピル基、ｎ-ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ-ブチル基、ｔｅｒｔ-ブチル基、ｎ-ペンチル基、２-ペンチル基、３-ペンチル基、２-メチル-２-ブチル基、３-メチル-２-ブチル基、ｎ-ヘキシル基、ｎ-ヘプチル基、ｎ-オクチル基、ｎ-ノニル基及びｎ-デシル基等を含むが、これらに限定されず、前記アルキル基は、任意にさらに０、１、２、３、４又は５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、＝Ｏ、ヒドロキシル基、-ＳＲ１９、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６ヒドロキシアルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基、３〜８員複素環基、-（ＣＨ２）ａ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-ＮＲ１９Ｒ１９ａ、-（ＣＨ２）ｋ-Ｓ（＝Ｏ）ｊ-Ｒ１９、-Ｏ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９又は-ＮＲ１９Ｒ１９ａから選ばれる置換基で置換されてもよく、その中に、Ｒ１９及びＲ１９ａは、それぞれ独立して、Ｈ、ヒドロキシル基、アミノ基、カルボキシル基、Ｃ１-８アルキル基、Ｃ１-８アルコキシ基、Ｃ２-８アルケニル基、Ｃ２-８アルキニル基、３〜１０員炭素環基、４〜１０員複素環基、３〜１０員炭素環基オキシ基又は４〜１０員複素環基オキシ基から選ばれ、ｋは０、１、２、３、４又は５から選ばれ、ｊは０、１又は２から選ばれる。本文に記載のアルキル基、ｋ、ｊ、Ｒ１９及びＲ１９ａは、その定義が以上の通りである。
【００４０】
「アルキレン基」とは、直鎖状又は分岐鎖状の二価飽和炭化水素基を意味し、-（ＣＨ２）ｖ-（ｖが１〜１０の整数）を含み、アルキレン基の例としては、メチレン基、エチレン基、プロピレン基及びブチレン基等を含むが、これらに限定されず、前記アルキレン基は、任意にさらに０、１、２、３、４又は５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、＝Ｏ、ヒドロキシル基、-ＳＲ１９、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６ヒドロキシアルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基、３〜８員複素環基、-（ＣＨ２）ａ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-ＮＲ１９Ｒ１９ａ、-（ＣＨ２）ｋ-Ｓ（＝Ｏ）ｊ-Ｒ１９、-Ｏ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９又は-ＮＲ１９Ｒ１９ａから選ばれる置換基で置換されてもよく、当該アルキレン基における置換基数が２つ以上である場合に、置換基が縮合して環状構造を形成してもよい。本文に記載のアルキレン基、その定義が以上の通りである。
【００４１】
「アルコキシ基」とは、Ｏ-アルキル基の一価基を意味し、その中に、アルキル基は本明細書で定義されるものであり、アルコキシ基の例としては、メトキシ基、エトキシ基、１-プロポキシ基、２-プロポキシ基、１-ブトキシ基、２-メチル-１-プロポキシ基、２-ブトキシ基、２-メチル-２-プロポキシ基、１-ペンチルオキシ基、２-ペンチルオキシ基、３-ペンチルオキシ基、２-メチル-２-ブトキシ基、３-メチル-２-ブトキシ基、３-メチル-１-ブトキシ基及び２-メチル-１-ブトキシ基等を含むが、これらに限定されない。
【００４２】
「アルケニル基」とは、直鎖状又は分岐鎖状の一価不飽和炭化水素基を意味し、少なくとも１個、一般的に１、２又は３個の炭素-炭素二重結合を含み、主鎖は、炭素数２〜１０、より好ましく炭素数２〜６、さらに好ましく炭素数２〜４を含み、アルケニル基の例としては、ビニル基、アリル基、１-プロペニル基、２-プロペニル基、１-ブテニル基、２-ブテニル基、３-ブテニル基、１-ペンテニル基、２-ペンテニル基、３-ペンテニル基、４-ペンテニル基、１-メチル-１-ブテニル基、２-メチル-１-ブテニル基、２-メチル-３-ブテニル基、１-ヘキセニル基、２-ヘキセニル基、３-ヘキセニル基、４-ヘキセニル基、５-ヘキセニル基、１-メチル-１-ペンテニル基、２-メチル-１-ペンテニル基、１-ヘプテニル基、２-ヘプテニル基、３-ヘプテニル基、４-ヘプテニル基、１-オクテニル基、３-オクテニル基、１-ノネニル基、３-ノネニル基、１-デセノイル基、４-デセノイル基、１,３-ブタジエン、１,３-ペンタジエン、１,４-ペンタジエン及び１,４-ヘキサジエン等を含むが、これらに限定されない。前記アルケニル基は、任意にさらに０、１、２、３、４又は５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、＝Ｏ、ヒドロキシル基、-ＳＲ１９、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６ヒドロキシアルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基、３〜８員複素環基、-（ＣＨ２）ａ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-ＮＲ１９Ｒ１９ａ、-（ＣＨ２）ｋ-Ｓ（＝Ｏ）ｊ-Ｒ１９、-Ｏ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９又は-ＮＲ１９Ｒ１９ａから選ばれる置換基で置換されてもよい。本文に記載のアルケニル基は、その定義が以上の通りである。
【００４３】
「アルキニル基」とは、直鎖状又は分岐鎖状の一価不飽和炭化水素基を意味し、少なくとも１つ、一般的に１、２又は３つの炭素-炭素三重結合を含み、主鎖は、炭素数２〜１０、より好ましく炭素数２〜６、さらに好ましく炭素数２〜４を含み、アルキニル基の例としては、エチニル基、１-プロピニル基、２-プロピニル基、ブチニル基、２-ブチニル基、３-ブチニル基、１-メチル-２-プロピニル基、４-ペンチニル基、３-ペンチニル基、１-メチル-２-ブチニル基、２-ヘキシニル基、３-ヘキシニル基、２-ヘプチニル基、３-ヘプチニル基、４-ヘプチニル基、３-オクチニル基、３-ノニニル基及び４-デシニル基等を含むが、これらに限定されない。前記アルキニル基は、任意にさらに０、１、２、３、４又は５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、＝Ｏ、ヒドロキシル基、-ＳＲ１９、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６ヒドロキシアルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基、３〜８員複素環基、-（ＣＨ２）ａ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-ＮＲ１９Ｒ１９ａ、-（ＣＨ２）ｋ-Ｓ（＝Ｏ）ｊ-Ｒ１９、-Ｏ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９又は-ＮＲ１９Ｒ１９ａから選ばれる置換基で置換されてもよい。本文に記載のアルキニル基は、その定義が以上の通りである。
【００４４】
「シクロアルキル基」とは、一価飽和の炭素環状炭化水素基を意味し、一般的に炭素数３〜１０を含むが、非限定的な例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基またはシクロヘプチル基を含む。前記シクロアルキル基は、任意にさらに０、１、２、３、４又は５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、＝Ｏ、ヒドロキシル基、-ＳＲ１９、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６ヒドロキシアルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基、３〜８員複素環基、-（ＣＨ２）ａ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-ＮＲ１９Ｒ１９ａ、-（ＣＨ２）ｋ-Ｓ（＝Ｏ）ｊ-Ｒ１９、-Ｏ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９又は-ＮＲ１９Ｒ１９ａから選ばれる置換基で置換されてもよい。本文に記載のシクロアルキル基は、その定義が以上の通りである。
【００４５】
「炭素環」とは、飽和又は不飽和の芳香環又は非芳香環を意味し、芳香環又は非芳香環は、３〜１０員単環、４〜１２員二環又は１０〜１５員三環系であってもよく、炭素環基は、架橋環又はらせん環に結合されていてもよい。非限定的な例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、１-シクロペンチル-１-アルケニル基、１-シクロペンチル-２-アルケニル基、１-シクロペンチル-３-アルケニル基、シクロヘキシル基、１-シクロヘキシル-２-アルケニル基、１-シクロヘキシル-３-アルケニル基、シクロヘキセニル基、シクロヘキサジエニル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基、シクロノニル基、シクロデシル基、シクロウンデシル基、シクロドデシル基、フェニル基又はナフチル基を含む。前記炭素環基は、任意にさらに０、１、２、３、４又は５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、＝Ｏ、ヒドロキシル基、-ＳＲ１９、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６ヒドロキシアルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基、３〜８員複素環基、-（ＣＨ２）ａ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-ＮＲ１９Ｒ１９ａ、-（ＣＨ２）ｋ-Ｓ（＝Ｏ）ｊ-Ｒ１９、-Ｏ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９又は-ＮＲ１９Ｒ１９ａから選ばれる置換基で置換されてもよい。本文に記載の炭素環は、その定義が以上の通りである。
【００４６】
「複素環」とは、飽和又は不飽和の芳香環又は非芳香環を意味し、芳香環又は非芳香環は、３〜１０員単環、４〜１２員二環又は１０〜１５員三環系であってもよく、且つ、１〜４個の、Ｎ、Ｏ又はＳから選ばれるヘテロ原子を含み、３〜８員複素環基が好ましく、複素環基の環における選択に置換されるＮ、Ｓは種々の酸化状態に酸化されてもよい。複素環基は、ヘテロ原子又は炭素原子に結合されていてもよく、架橋環又はらせん環に結合されていてもよい。非限定的な例としては、エポキシエチル基、エポキシプロピル基、アザシクロプロピル基、オキセタニル基、アザシクロブチル基、チエタニル基、１,３-ジオキソラン基、１,４-ジオキソラン基、１,３-ジオキサン基、アザシクロヘプチル基、オキサシクロヘプチル基、チオシクロヘプチル基、オキサゼピン基、ジアゼピン基、チアゼピン基、ピリジル基、ピペリジル基、ハイピペリジル基、フラニル基、チエニル基、ピラニル基、Ｎ-アルキルピロリル基、ピリミジニル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、ピペラジン基、ハイピペラジン基、イミダゾリル基、ピペリジル基、モルホリニル基、チオモルホリニル基、チオキサン基、ジヒドロフラニル基、ジヒドロピラニル基、ジチオラン基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロチエニル基、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロチオピラニル基、テトラヒドロピロリル基、テトラヒドロイミダゾリル基、テトラヒドロチアゾリル基、テトラヒドロピラニル基、ベンズイミダゾリル基、ベンズピリジル基、ピロロピリジル基、ベンズジヒドロフラニル基、２-ピロリニル基、３-ピロリニル基、ジヒドロインドリル基、２Ｈ-ピラニル基、４Ｈ-ピラニル基、ジオキソシクロヘキシル基、１,３-ジオキソシクロペンチル基、ピラゾリニル基、ジチアニル基、ジチオラニル基、ジヒドロチエニル基、ピラゾリジル基、イミダゾリニル基、イミダゾリジニル基、１,２,３,４-テトラヒドロイソキノリニル基、３-アザジシクロ［３．１．０］ヘキシル基、３-アザジシクロ［４．１．０］ヘプチル基、アザジシクロ［２．２．２］ヘキシル基、３Ｈ-インドリルキナジニル基、Ｎ-ピリジル尿素、１,１-ジオキソチオモルホリニル基、アザジシクロ［３．２．１］オクチル基、アザジシクロ［５．２．０］ノニル基、オキサトリシクロ［５．３．１．１］ドデシル基、アザアダマンチル基及びオキサスピロ［３．３］ヘプチル基を含む。前記複素環基は、任意にさらに０、１、２、３、４又は５個の、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、＝Ｏ、ヒドロキシル基、-ＳＲ１９、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１-６アルキル基、Ｃ１-６ヒドロキシアルキル基、Ｃ１-６アルコキシ基、Ｃ２-６アルケニル基、Ｃ２-６アルキニル基、Ｃ３-８炭素環基、３〜８員複素環基、-（ＣＨ２）ａ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９、-（ＣＨ２）ｋ-Ｃ（＝Ｏ）-ＮＲ１９Ｒ１９ａ、-（ＣＨ２）ｋ-Ｓ（＝Ｏ）ｊ-Ｒ１９、-Ｏ-Ｃ（＝Ｏ）-Ｏ-Ｒ１９又は-ＮＲ１９Ｒ１９ａから選ばれる置換基で置換されてもよい。本文に記載の複素環は、その定義が以上の通りである。
【００４７】
「任意に・・・てもよい」又は「任意に選ばれる」とは、その後に記載の状況又は条件が発生可能なことであるが、必ず発生することではないことを意味し、当該状況又は条件が発生すること又は発生しないことの両方も含む。例えば、「任意にＦで置換されてもよいアルキル基」とは、アルキル基がＦで置換されていてもよいが、必ずしもＦで置換されていなくてもよく、アルキル基がＦで置換されている場合と、アルキル基がＦで置換されていない場合を含む。
【００４８】
「薬物組成物」は、１種類又は複数種類の本文に記載の化合物又はその生理学／薬学的に許容可能な塩又はその立体異性体、溶媒和物、薬学的に許容可能な塩又は共晶とほかの組成との混合物を意味し、その中に、ほかの組成は、生理学／薬学的に許容可能なキャリア及び賦形剤を含む。
【００４９】
「立体異性体」とは、分子において原子の立体配置の相違による異性体を意味し、シスおよびトランス異性体、鏡像異性体及び配座異性体を含む。
【００５０】
「有効投与量」とは、組織、システム又は被験者の生理学的または医学的反応を引き起こす化合物の量を意味し、当該量は求めたいものであり、被験者に投与された時に被治療の疾患又は病症の一つ又はいくつかの症状の発生を予防できる、又はある程度に低減させるのに十分な量を含む。
【００５１】
「溶媒和物」とは、本発明の化合物又はその塩を意味し、それらには分子間非共有結合力によって結合される化学量論的又は非化学量論的な溶媒も含まれる。当該溶媒が水である場合に、水和物である。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
以下、図面及び実施例を参照しながら、本発明を実施するための形態を説明するが、本発明の保護範囲はここに限定されない。
【００５３】
化合物の構造は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）又は（及び）質量分析（ＭＳ）によって定まる。ＮＭＲシフト（δ）は１０-６（ｐｐｍ）の単位で表われる。ＮＭＲの測定には、（Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＩＩＩ ４００及びＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ３００）核磁気機器を用いて、測定溶媒が重水素化ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ-ｄ６）、重水素化クロロホルム（ＣＤＣｌ３）、重水素化メタノール（ＣＤ３ＯＤ）であり、内部基準物質はテトラメチルシラン（ＴＭＳ）である。
【００５４】
ＭＳの測定は、（Ａｇｉｌｅｎｔ ６１２０Ｂ（ＥＳＩ）及びＡｇｉｌｅｎｔ ６１２０Ｂ（ＡＰＣＩ））を用いる。
ＨＰＬＣの測定には、Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ＤＡＤ高速液体クロマトグラフィー（Ｚｏｒｂａｘ ＳＢ-Ｃ１８ １００×４．６ｍｍ）を用いる。
【００５５】
薄層クロマトグラフィーシリカゲルプレートは、煙台黄海ＨＳＧＦ２５４又は青島ＧＦ２５４シリカゲルプレートを用い、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）に用いられるシリカゲルプレートの仕様としては０．１５ｍｍ〜０．２０ｍｍであり、薄層クロマトグラフィーによる製品の分離精製の仕様としては０．４ｍｍ〜０．５ｍｍである。
カラムクロマトグラフィーは、一般に煙台黄海製Ｓｉｌｉｃａ Ｇｅｌ２００〜３００メッシュのシリカゲルを担体として用いる。
【００５６】
本発明の既知の出発物質は、本分野で既知の方法により、またはそれに従って合成されてもいいし、Ｔｉｔａｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ａｎ Ｎａｉｊｉ Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｄｅｍｏ、Ｃｈｅｎｇｄｕ Ｋｅｌｏｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｓｕｉｙｕａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｂｅｌｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙなどの会社から購入されてもいい。
【００５７】
窒素雰囲気とは、反応瓶を容積約１Ｌの窒素バルーンに接続することを意味する。
【００５８】
水素雰囲気とは、反応瓶を容積約１Ｌの水素バルーンに接続することを意味する。
【００５９】
通常に、水素化反応は、真空排気して水素ガスを充填することを３回繰り返す。
【００６０】
実施例において、とくに断わらない限り、反応は窒素雰囲気で行われる。
【００６１】
実施例において、とくに断わらない限り、溶液とは水溶液を意味する。
【００６２】
実施例において、とくに断わらない限り、反応温度は室温である。
【００６３】
室温は最適な反応温度であって、２０℃〜３０℃である。
【００６４】
実施例において、とくに断わらない限り、Ｍはｍｏｌ／Ｌである。
【００６５】
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ-ブチルオキシカルボニル基を意味する。
【００６６】
Ｃｂｚ：ベンジルオキシカルボニル基を意味する。
【００６７】
ＴＨＰ：テトラヒドロピラニル基を意味する。
【００６８】
中間体１：
（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサン酸（中間体１）
（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｉｃ ａｃｉｄ
【００６９】
【化８】
2020526571.tif 000039
【００７０】
ステップ１：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｂ）
ｍｅｔｈｙｌ（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｈｅｘａｎｏａｔｅ
【００７１】
【化９】
2020526571.tif 000040
【００７２】
室温で、（２Ｒ）-２-アミノ-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ａ）（２．６ｇ,１０ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解させ、０℃まで降温した。磁気攪拌下で、（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-４-メチル-ペンタン酸（２．８ｇ,１１ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．６２ｇ,１２ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（２．３ｇ,１２ｍｍｏｌ）を反応液に順次加え、２５℃まで昇温し、当該温度で１５ｈ反応させた。反応液に１Ｍ塩酸水溶液（２５ｍＬ）を加えて洗浄し、分液した。有機相に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２５ｍＬ）を加えて３０分間攪拌し、分液した。有機相を１Ｍ塩酸水溶液（２５ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２５ｍＬ）、飽和塩化ナトリウム水溶液（２５ｍＬ）で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥した。濾過し、ろ液を減圧濃縮し、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｂ）を白色泡状固体（５．０ｇ、収率９９％）として得た。
【００７３】
ステップ２：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｃ）
ｍｅｔｈｙｌ（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｈｅｘａｎｏａｔｅ
【００７４】
【化１０】
2020526571.tif 000041
【００７５】
室温で、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｂ）（５．０ｇ,１０ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解させ、１０％パラジウム炭素（１ｇ,２０％ｗ／ｗ）を反応液に加え、水素で３回置換し、水素雰囲気において室温で５ｈ反応させた。反応液を珪藻土（３ｇ）で濾過し、ろ液を減圧濃縮し、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｃ）粗製品を白色泡状固体（３．７ｇ、収率９９％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【００７６】
ステップ３：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｄ）
ｍｅｔｈｙｌ（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｈｅｘａｎｏａｔｅ
【００７７】
【化１１】
2020526571.tif 000042
【００７８】
室温で、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｃ）粗製品（３．７ｇ,９．９ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解させ、０℃まで降温した。（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパン酸（３．３ｇ,１１ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．６２ｇ,１２ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（２．３ｇ,１２ｍｍｏｌ）を反応液に順次加え、２５℃まで昇温し、当該温度で５ｈ反応させた。１Ｍ塩酸水溶液（２５ｍＬ）を加えて洗浄し、分液した。有機相に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２５ｍＬ）を加えて３０分間攪拌し、分液した。有機相を１Ｍ塩酸水溶液（２５ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２５ｍＬ）、飽和塩化ナトリウム水溶液（２５ｍＬ）で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥した。濾過し、ろ液を減圧濃縮し、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｄ）粗製品を白色泡状固体（３．０ｇ、収率４６％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【００７９】
ステップ４：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｅ）
ｍｅｔｈｙｌ（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｈｅｘａｎｏａｔｅ
【００８０】
【化１２】
2020526571.tif 000043
【００８１】
室温で、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｄ）粗製品（３．０ｇ,４．５８ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解させ、１０％パラジウム炭素（１ｇ,３３％ｗ／ｗ）を反応液に加え、水素で３回置換し、水素雰囲気（バルーン）において室温で５ｈ反応させた。反応液を珪藻土（３ｇ）で濾過し、ろ液を乾燥まで減圧濃縮した。酢酸エチル（６ｍＬ）を加えて加熱溶解し、石油エーテル（６ｍＬ）を加えた後に、室温までゆっくり降温して固体を析出させ、ろ過し、ケーキを５０℃で減圧乾燥し、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｅ）を白色泡状固体（２．１ｇ、収率８８％）として得た。
【００８２】
ステップ５：（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサン酸メチル（１ｆ）
ｍｅｔｈｙｌ（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏａｔｅ
【００８３】
【化１３】
2020526571.tif 000044
【００８４】
室温で、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸メチル（１ｅ）（２．１ｇ,４．０ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（３０ｍＬ）に溶解させ、０℃まで降温した。（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル）-３-フェニル-プロパン酸（１．３ｇ,４．９ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．６５ｇ,４．８ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（１．１ｇ,５．７ｍｍｏｌ）を反応液に順次加え、２５℃まで昇温し、当該温度で５ｈ反応させた。１Ｍ塩酸水溶液（１５ｍＬ）を加えて洗浄し、分液した。有機相に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）に加えて３０分間攪拌し、分液した。有機相を１Ｍ塩酸水溶液（１５ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）、飽和塩化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝１００：１〜５：１）、（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサン酸メチル（１ｆ）を白色泡状固体（２．３ｇ、収率７４％）として得た。
【００８５】
ステップ６：（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサン酸（中間体１）
（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｉｃ ａｃｉｄ
【００８６】
【化１４】
2020526571.tif 000045
【００８７】
室温で、（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサン酸メチル（１ｆ）（２．３ｇ,３．０ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）に溶解させ、水酸化ナトリウム（２００ｍｇ,５．０ｍｍｏｌ）の水溶液（２０ｍＬ）を反応液に加え、当該温度で５ｈ反応させた。反応液がｐＨ<４になるように１Ｍ塩酸水溶液で調整し、酢酸エチル（４０ｍＬ）で抽出し、分液した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサン酸（中間体１）を白色泡状固体（２．１ｇ、収率９３％）として得た。
【００８８】
Ｍｓ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：７５２．５［Ｍ-Ｈ］-;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ７．３８-７．２７（ｍ,３Ｈ）,７．２５-７．０７（ｍ,７Ｈ）,４．８２-４．６２（ｍ,１Ｈ）,４．６１-４．４１（ｍ,２Ｈ）,４．３７-４．１８（ｍ,１Ｈ）,３．３７-２．６７（ｍ,６Ｈ）,２．００-１．６５（ｍ,３Ｈ）,１．５９-１．３７（ｍ,１５Ｈ）,１．３５-１．２６（ｍ,９Ｈ）,０．９０-０．８０（ｍ,６Ｈ）。
【実施例１】
【００８９】
２-アミノ-７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸  トリス（トリフルオロ酢酸）塩
２-ａｍｉｎｏ-７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｔｅ
【００９０】
【化１５】
2020526571.tif 000046
【００９１】
ステップ１：２-［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］イミノ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２Ｂ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ２-［（１Ｓ）-１-ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌ］ｉｍｉｎｏ-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【００９２】
【化１６】
2020526571.tif 000047
【００９３】
室温で、２-オキソ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-ギ酸ｔｅｒｔ-ブチル（２Ａ）（７．２ｇ,３０ｍｍｏｌ）、（１Ｓ）-１-フェニルエチルアミン（３．７ｇ,３１ｍｍｏｌ）をトルエン（１００ｍＬ）に溶解させ、ｐ-トルエンスルホン酸（３００ｍｇ,１．７４ｍｍｏｌ）を加え、Ｄｅａｎ-Ｓｔａｒｋで還流水切った。６ｈ後、反応液を乾燥まで減圧濃縮し、２-［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］イミノ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２Ｂ）粗製品を黄色泡状固体（１０ｇ,収率９７％）として得た。
【００９４】
ステップ２：２-シアノ-２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ２-ｃｙａｎｏ-２-［［（１Ｓ）-１-ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【００９５】
【化１７】
2020526571.tif 000048
【００９６】
室温で、２-［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］イミノ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２Ｂ）粗製品（１０ｇ,２９．２ｍｍｏｌ）をメタノール（９０ｍＬ）に溶解させ、氷浴で０℃に冷却した。攪拌しながら塩化亜鉛（２１０ｍｇ,１．５４ｍｍｏｌ）を加え、シアノトリメチルシラン（３ｇ,３０．２ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下し、０℃を維持しながら３ｈ反応させた。反応液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝４：１）、２-シアノ-２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２Ｃ）を黄色泡状固体（４．７ｇ,収率４４％）として得た。
【００９７】
ステップ３：２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸（２Ｄ）
２-［［（１Ｓ）-１-ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ
【００９８】
【化１８】
2020526571.tif 000049
【００９９】
室温で、２-シアノ-２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２Ｃ）（２ｇ,５．４ｍｍｏｌ）を濃塩酸（２０ｍＬ）に溶解させた後、４０ｈ還流反応させた。室温まで降温し、反応液を減圧濃縮し、２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸（２Ｄ）粗製品を黄色油状液体（１．５ｇ,収率９６％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０１００】
ステップ４：７-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル-２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸（２Ｅ）
７-ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ-２-［［（１Ｓ）-１-ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ
【０１０１】
【化１９】
2020526571.tif 000050
【０１０２】
室温で、２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸（２Ｄ）粗製品（１ｇ,３．４７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解させ、水酸化ナトリウム（０．５ｇ,１２．５ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）溶液を加えた後、二炭酸ジ-ｔｅｒｔ-ブチル（９０８ｍｇ,４．１６ｍｍｏｌ）を加え、室温で６ｈ反応させた。反応液をろ過し、７-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル-２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸（２Ｅ）粗製品を白色固体（０．８ｇ,収率６０％）として得た。
【０１０３】
ステップ５：Ｏ７-ｔｅｒｔ-ブチル  Ｏ２-メチル  ２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボキシレート（２Ｆ）
Ｏ７-ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｏ２-ｍｅｔｈｙｌ ２-［［（１Ｓ）-１-ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２,７-ｄｉｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１０４】
【化２０】
2020526571.tif 000051
【０１０５】
室温で、７-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル-２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸（２Ｅ）（７７５ｍｇ,２．０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、メタノール（１０ｍＬ）を加えた。室温で、攪拌しながら１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２７０ｍｇ,２．０ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（０．６ｇ,３．１３ｍｍｏｌ）を順次加え、１５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：１）、Ｏ７-ｔｅｒｔ-ブチル  Ｏ２-メチル  ２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボキシレート（２Ｆ）を淡黄色泡状固体（５６０ｍｇ,収率７０％）として得た。
【０１０６】
ステップ６：２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸メチル（２Ｇ）
ｍｅｔｈｙｌ ２-［［（１Ｓ）-１-ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１０７】
【化２１】
2020526571.tif 000052
【０１０８】
室温で、Ｏ７-ｔｅｒｔ-ブチル  Ｏ２-メチル  ２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボキシレート（２Ｆ）（５００ｍｇ,１．２４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４．５ｍＬ）に溶解させ、０℃まで降温した。トリフルオロ酢酸（１．５ｍＬ）を加え、室温で３ｈ反応させ、反応液を減圧濃縮し、２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸メチル（２Ｇ）を黄色油状液体（３２０ｍｇ,収率８５％）として得た。
【０１０９】
ステップ７：７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ））-２-［［（２Ｒ）フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸メチル
ｍｅｔｈｙｌ ７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-２-［［（１Ｓ）-１-ｐｈｅｎｙｌｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１１０】
【化２２】
2020526571.tif 000053
【０１１１】
室温で、２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸メチル（２Ｇ）（３００ｍｇ,１．０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、中間体１（７５３ｍｇ,１．０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で、攪拌しながら１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１３５ｍｇ,１．０ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（０．２３ｇ,１．２ｍｍｏｌ）を順次加え、１５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、溶離液を収集し、減圧濃縮し、７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ））-２-［［（２Ｒ）フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸メチル（２Ｈ）を白色泡状固体（７１０ｍｇ,収率６９％）として得た。
【０１１２】
ステップ８：２-アミノ-７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸メチル（２Ｉ）
ｍｅｔｈｙｌ ２-ａｍｉｎｏ-７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１１３】
【化２３】
2020526571.tif 000054
【０１１４】
室温で、７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ））-２-［［（２Ｒ）フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２-［［（１Ｓ）-１-フェニルエチル］アミノ］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸メチル（２Ｈ）（７００ｍｇ,０．７ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（１０ｍＬ）に溶解させた。パラジウム炭素（０．１ｇ、２０ｗｔ％）を加え、水素で３回置換し、水素雰囲気（バルーン）において室温で５ｈ反応させた。反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を乾燥まで濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、２-アミノ-７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸メチル（２Ｉ）を白色泡状固体（３７０ｍｇ,収率６０％）として得た。
【０１１５】
ステップ９：２-アミノ-７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキシラート  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（２Ｊ）
ｍｅｔｈｙｌ ２-ａｍｉｎｏ-７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ;２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０１１６】
【化２４】
2020526571.tif 000055
【０１１７】
室温で、２-アミノ-７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸メチル（２Ｉ）（３７０ｍｇ,０．４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍＬ）に溶解させ、０℃まで降温した。トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を加え、室温までe昇温し、３ｈ反応させた。反応液を乾燥まで減圧濃縮し、２-アミノ-７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキシラート  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（２Ｊ）粗製品を黄色油状液体（３０５ｍｇ,収率７２％）として得た。
【０１１８】
ステップ１０：２-アミノ-７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２）
２-ａｍｉｎｏ-７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ; ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０１１９】
【化２５】
2020526571.tif 000056
【０１２０】
室温で、水酸化ナトリウム（５０ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を水（２ｍＬ）に溶解させ、２-アミノ-７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキシラート  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（２Ｊ）粗製品（３０５ｍｇ,０．２８８ｍｍｏｌ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を乾燥まで減圧濃縮し、分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０ｍｍｏｌ）［［（２Ｒ）-２-ｍｅｔ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、２-アミノ-７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２）（９２ｍｇ,収率３１％）として得た。
【０１２１】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３６０．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４４-７．１８（ｍ,１０Ｈ）,４．６５（ｔ,１Ｈ）,４．３３-４．１８（ｍ,２Ｈ）,３．５８（ｂｒ,２Ｈ）,３．５２-３．４１（ｍ,１Ｈ）,３．４１-３．２９（ｍ,１Ｈ）,３．１７（ｄ,２Ｈ）,３．１０-２．９０（ｍ,４Ｈ）,２．７０-２．４６（ｍ,２Ｈ）,２．３２-２．１８（ｍ,２Ｈ）,２．０５-１．２８（ｍ,１４Ｈ）,０．９８-０．８４（ｍ,６Ｈ）。
【０１２２】
化合物２-１（遊離形態の化合物２）：
化合物２（７．３ｇ,６．８８ｍｍｏ）をイオン交換樹脂（３００ｍＬ）に通じ（水〜３．３％アンモニア水で溶出）、得られた溶出溶液を減圧濃縮し（水温６０℃で１００ｍＬまで減圧濃縮し）、さらにフリーズドライし、化合物２-１を白色固体（４,５ｇ、収率９０．８％）として得た。
【０１２３】
ＭＳ ｍ／ｚ＝７２０．５［Ｍ+２Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．３４-７．２２（ｍ,６Ｈ）,７．１８-７．０６（ｍ,４Ｈ）,４．７８-４．７２（ｍ,１Ｈ）,４．５５（ｔ,１Ｈ）,４．２５（ｔ,１Ｈ）,３．６５-３．４６（ｍ,３Ｈ）,３．４５-３．２５（ｍ,２Ｈ）,３．０９-２．９７（ｍ,１Ｈ）,２．９５-２．８４（ｍ,３Ｈ）,２．８５-２．７３（ｍ,２Ｈ）,２．５１-２．３３（ｍ,２Ｈ）,２．００-１．８３（ｍ,２Ｈ）,１．８２-１．２５（ｍ,１３Ｈ）,０．９６-０．７８（ｍ,６Ｈ）。
【実施例２】
【０１２４】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-オキソ-３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-１０-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｏｘｏ-３,１０-ｄｉａｚａｄｉｓｐｉｒｏ［４．１．５^{７}．１^{５}］ｔｒｉｄｅｃａｎｅ-１０-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ 
【０１２５】
【化２６】
2020526571.tif 000057
【０１２６】
ステップ１：２-（２-エトキシ-２-オキソ-エチリデン）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｂ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ２-（２-ｅｔｈｏｘｙ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌｉｄｅｎｅ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１２７】
【化２７】
2020526571.tif 000058
【０１２８】
テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）を反応瓶に入れ、窒素保護で水素化ナトリウム（１．３ｇ、５４．２ｍｍｏｌ）を加え、氷浴で０℃に冷却し、ホスホノ酢酸トリエチル（６．９ｇ、３１ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下し、滴下完了後０℃で２０ｍｉｎ反応させた。-５〜０℃に冷却し、２-オキソ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ａ）（５ｇ、２０．９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）溶液をゆっくり滴下し、滴下完了後室温まで昇温し、１ｈ反応させた。飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機層を合併し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、２-（２-エトキシ-２-オキソ-エチリデン）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｂ）粗製品を淡黄色油状液体（６．０ｇ、収率９２．８％）として得た後、そのまま次のステップに供する。
【０１２９】
ステップ２：２-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-２-（ニトロメチル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ２-（２-ｅｔｈｏｘｙ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ）-２-（ｎｉｔｒｏｍｅｔｈｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１３０】
【化２８】
2020526571.tif 000059
【０１３１】
２-（２-エトキシ-２-オキソ-エチリデン）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｂ）を反応瓶に入れ、テトラヒドロフラン（６０ｍＬ）を加え、室温で完全に溶解するまで攪拌した後、ニトロメタン（６．０ｇ、９８．３ｍｍｏｌ）及びフッ化テトラブチルアンモニウム（７．８５ｇ、３０ｍｍｏｌ）を加えた。滴下完了後、昇温し５ｈ還流反応させた。反応液を室温に冷却し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）を加え、飽和塩化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ×１）で洗浄し、分液した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、乾燥まで減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１０：１）、２-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-２-（ニトロメチル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｃ）を無色透明の油状液体（６．５ｇ、収率９０％）として得た。
【０１３２】
ステップ３：２-（アミノメチル）-２-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ２-（ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ）-２-（２-ｅｔｈｏｘｙ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１３３】
【化２９】
2020526571.tif 000060
【０１３４】
２-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-２-（ニトロメチル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｃ）（６．５ｇ、１８ｍｍｏｌ）を反応瓶に入れ、エタノール（７５ｍＬ）及び水（２５ｍＬ）、鉄粉（４．９ｇ、８８ｍｍｏｌ）及び塩化アンモニウム（４．７ｇ、８８．００ｍｍｏｌ）を加えた後、５ｈ還流反応させた。室温まで降温し、反応系を２０ｍＬに濃縮し、水（３０ｍＬ）を加え、アンモニア水でｐＨ＞１０になるように調整し、ジクロロメタン（５０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合併し、有機相を乾燥まで減圧濃縮し、２-（アミノメチル）-２-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｄ）を淡黄色油状液体（５．１ｇ、収率８５％）として得た。
【０１３５】
ステップ４：２-オキソ-３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-１０-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｅ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ２-ｏｘｏ-３,１０-ｄｉａｚａｄｉｓｐｉｒｏ［４．１．５^{７}．１^{５}］ｔｒｉｄｅｃａｎｅ-１０-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１３６】
【化３０】
2020526571.tif 000061
【０１３７】
２-（アミノメチル）-２-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｄ）（３ｇ、８．８ｍｍｏｌ）を反応瓶に入れ、水酸化ナトリウム（４００ｍｇ、１０ｍｍｏｌ）の水（３０ｍＬ）溶液を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液をろ過し、２-オキソ-３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-１０-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｅ）を白色固体（２．１０ｇ、収率８１％）として得た。
【０１３８】
ステップ５：３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-２-オン（３Ｆ）
３,１０-ｄｉａｚａｄｉｓｐｉｒｏ［４．１．５^{７}．１^{５}］ｔｒｉｄｅｃａｎ-２-ｏｎｅ
【０１３９】
【化３１】
2020526571.tif 000062
【０１４０】
２-オキソ-３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-１０-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｅ）（１ｇ、３．４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（９ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させ、完全に反応した。反応液を乾燥まで減圧濃縮し、水（２０ｍＬ）を加え、２Ｍ水酸化ナトリウムの水溶液で体系ＰＨ>１０になるように調整し、ジクロロメタン（２０ｍＬ×２）で抽出し、分液し、有機相を合併し、有機相を減圧濃縮し、３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-２-オン（３Ｆ）粗製品を黄色油状液体（０．６ｇ,収率８５％）として得た。
【０１４１】
ステップ６：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）１-（２-オキソ-３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-１０-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｇ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（２-ｏｘｏ-３,１０-ｄｉａｚａｄｉｓｐｉｒｏ［４．１．５^{７}．１^{５}］ｔｒｉｄｅｃａｎｅ-１０-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０１４２】
【化３２】
2020526571.tif 000063
【０１４３】
窒素保護でジクロロメタン（３０ｍＬ）を反応瓶に入れ、中間体１（２．２５ｇ、２．９８ｍｍｏｌ）、３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-２-オン（３Ｆ）粗製品（０．６ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．３９ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（０．８３ｇ、４．３３ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５ｈ反応させた。その後、水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、分液し、有機相を合併し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝２０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）１-（２-オキソ-３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-１０-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｇ）を白色泡状固体（１．７７ｇ、収率７３．２％）として得た。
【０１４４】
ステップ７：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-オキソ-３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-１０-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｏｘｏ-３,１０-ｄｉａｚａｄｉｓｐｉｒｏ［４．１．５^{７}．１^{５}］ｔｒｉｄｅｃａｎｅ-１０-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０１４５】
【化３３】
2020526571.tif 000064
【０１４６】
窒素保護で、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）１-（２-オキソ-３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-１０-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ｇ）（０．９０ｇ,１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２１ｍＬ）を反応瓶に入れ、攪拌しながらトリフルオロ酢酸（７ｍＬ）を加え、室温で３ｈ反応させた。反応液を乾燥まで減圧濃縮し、残留物を分取クロマトグラフィーにより分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-オキソ-３,１０-ジアザスピロ［４．１．５^{７}．１^{５}］トリデカン-１０-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３）を白色固体（０．９８ｇ、率５４％）として得た。
【０１４７】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３６５．９［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ-ｄ６）δ ８．８６-８．６７（ｍ,１Ｈ）,８．４０-８．２３（ｍ,１Ｈ）,８．１４-８．０１（ｍ,３Ｈ）,７．８４-７．７２（ｍ,２Ｈ）,７．５２-７．４２（ｍ,１Ｈ）,７．３７-７．１５（ｍ,１０Ｈ）,４．７６-３．９４（ｍ,４Ｈ）,３．５９-２．６５（ｍ,１２Ｈ）,２．２９-２．１５（ｍ,２Ｈ）,１．９３-１．１９（ｍ,１７Ｈ）,０．８８（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例３】
【０１４８】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（９-オキソ-２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-２-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物４）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（９-ｏｘｏ-２,８-ｄｉａｚａｄｉｓｐｉｒｏ［３．１．４^{６}．１^{４}］ｕｎｄｅｃａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０１４９】
【化３４】
2020526571.tif 000065
【０１５０】
ステップ１：ｔｅｒｔ-ブチル６-（２-エトキシ-２-オキソ-エチリデン）-２-アザスピロ［３．３］ヘプタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｂ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ６-（２-ｅｔｈｏｘｙ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌｉｄｅｎｅ）-２-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．３］ｈｅｐｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１５１】
【化３５】
2020526571.tif 000066
【０１５２】
テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）を反応瓶に入れ、水素化ナトリウム（２．５ｇ、５９．２ｍｍｏｌ）を加え、氷水浴で０℃に冷却し、ホスホノ酢酸トリエチル（７．９６ｇ、３５．５ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下し、滴下完了後０℃で２０ｍｉｎ反応させた。続いて、-５〜０℃に冷却し、６-オキソ-２-アザスピロ［３．３］ヘプタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ａ）（５ｇ、２３．７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）溶液をゆっくり滴下し、滴下完了後、室温で１ｈ反応させた。その後、反応液に飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、分液し、有機相を合併した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ-ブチル６-（２-エトキシ-２-オキソ-エチリデン）-２-アザスピロ［３．３］ヘプタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｂ）粗製品を黄色油状液体（５．５ｇ、収率８３％）として得た後、そのまま次のステップに供する。
【０１５３】
ステップ２：６-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-６-（ニトロメチル）-２-アザスピロ［３．３］ヘプタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ６-（２-ｅｔｈｏｘｙ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ）-６-（ｎｉｔｒｏｍｅｔｈｙｌ）-２-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．３］ｈｅｐｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１５４】
【化３６】
2020526571.tif 000067
【０１５５】
ｔｅｒｔ-ブチル ６-（２-エトキシ-２-オキソ-エチリデン）-２-アザスピロ［３．３］ヘプタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｂ）粗製品を反応瓶に入れ、テトラヒドロフラン（６０ｍＬ）を加え、室温で完全に溶解するまで攪拌した後、ニトロメタン（６．０ｇ、９８．３ｍｍｏｌ）及びフッ化テトラブチルアンモニウム（７．８５ｇ、３０ｍｍｏｌ）を加えた。滴下完了後、昇温し５ｈ還流反応させた。反応液を室温に冷却し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）を加え、飽和塩化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、分液した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝４：１）、６-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-６-（ニトロメチル）-２-アザスピロ［３．３］ヘプタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｃ）を無色透明の油状液体（５．１ｇ、収率７６％）として得た。
【０１５６】
ステップ３：６-（アミノメチル）-６-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-２-アザスピロ［３．３］ヘプタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ６-（ａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ）-６-（２-ｅｔｈｏｘｙ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ）-２-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．３］ｈｅｐｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１５７】
【化３７】
2020526571.tif 000068
【０１５８】
６-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-６-（ニトロメチル）-２-アザスピロ［３．３］ヘプタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｃ）（５．１ｇ、１５ｍｍｏｌ）を反応瓶に入れ、エタノール（７５ｍＬ）及び水（２５ｍＬ）、鉄粉（４．２ｇ、７４ｍｍｏｌ）及び塩化アンモニウム（４．０ｇ、７４ｍｍｏｌ）を加え、昇温し、５ｈ還流反応させた。室温まで降温し、反応系を約２０ｍＬに濃縮し、水（３０ｍＬ）を加え、アンモニア水でｐＨ＞１０になるように調整し、ジクロロメタン（５０ｍＬｘ２）で抽出し、分液し、有機相を合併し、有機相を減圧濃縮し、６-（アミノメチル）-６-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-２-アザスピロ［３．３］ヘプタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｄ）粗製品（４．６ｇ、収率９９％）を得た後、そのまま次のステップに供する。
【０１５９】
ステップ４：９-オキソ-２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｅ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ９-ｏｘｏ-２,８-ｄｉａｚａｄｉｓｐｉｒｏ［３．１．４^{６}．１^{４}］ｕｎｄｅｃａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１６０】
【化３８】
2020526571.tif 000069
【０１６１】
６-（アミノメチル）-６-（２-エトキシ-２-オキソ-エチル）-２-アザスピロ［３．３］ヘプタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｄ）粗製品（４．６ｇ、１５ｍｍｏｌ）を反応瓶に入れ、水酸化ナトリウム（６００ｍｇ、１５ｍｍｏｌ）の水（４５ｍＬ）溶液を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液をろ過し、９-オキソ-２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｅ）を白色固体（２．９０ｇ、収率７４％）として得た。
【０１６２】
ステップ５：２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-９-オン塩酸塩（４Ｆ）
２,８-ｄｉａｚａｄｉｓｐｉｒｏ［３．１．４^{６}．１^{４}］ｕｎｄｅｃａｎ-９-ｏｎｅ;ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ
【０１６３】
【化３９】
2020526571.tif 000070
【０１６４】
９-オキソ-２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｅ）（２ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を４Ｎ ＨＣｌ-イソプロパノール溶液（９ｍＬ）に溶解させ、室温で５ｈ反応させた。反応液を乾燥まで減圧濃縮し、２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-９-オン塩酸塩（４Ｆ）粗製品を白色固体（０．９５ｇ、収率６２％）として得た後、そのまま次のステップに供する。
【０１６５】
ステップ６：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）１-（９-オキソ-２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｇ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（９-ｏｘｏ-２,８-ｄｉａｚａｄｉｓｐｉｒｏ［３．１．４^{６}．１^{４}］ｕｎｄｅｃａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ;
【０１６６】
【化４０】
2020526571.tif 000071
【０１６７】
窒素保護でジクロロメタン（３０ｍＬ）を反応瓶に入れ、中間体１（２．２５ｇ、２．９８ｍｍｏｌ）、２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-９-オン塩酸塩（４Ｆ）（０．６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．３９ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（０．８３ｇ、４．３３ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５ｈ反応させた。その後、水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、分液し、有機相を合併し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝１０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）１-（９-オキソ-２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｇ）を白色泡状固体（１．９ｇ,収率７０％）として得た。
【０１６８】
ステップ７：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（９-オキソ-２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-２-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル〕アミノ〕-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物４）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（９-ｏｘｏ-２,８-ｄｉａｚａｄｉｓｐｉｒｏ［３．１．４^{６}．１^{４}］ｕｎｄｅｃａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０１６９】
【化４１】
2020526571.tif 000072
【０１７０】
窒素保護で、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）１-（９-オキソ-２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４Ｇ）（１．７ｇ,１．９ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２１ｍＬ）を反応瓶に入れ、攪拌しながらトリフルオロ酢酸（７ｍＬ）を加え、室温で３ｈ反応させた。反応液を乾燥まで減圧濃縮し、残留物を分取クロマトグラフィーにより分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（９-オキソ-２,８-ジアザスピロ［３．１．４^{６}．１^{４}］ウンデカン-２-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物４）を白色固体（０．７ｇ、収率４０％）として得た。
【０１７１】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５１．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ-ｄ６）δ ８．７６（ｄ,１Ｈ）,８．３２（ｄ,１Ｈ）,８．１１-７．９７（ｍ,４Ｈ）,７．８５-７．６９（ｍ,３Ｈ）,７．５０（ｓ,１Ｈ）,７．３３-７．１８（ｍ,１０Ｈ）,４．７４-３．７４（ｍ,８Ｈ）,３．２４-２．６３（ｍ,８Ｈ）,２．２７-２．０５（ｍ,６Ｈ）,１．７１-１．１７（ｍ,９Ｈ）,０．８９（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例４】
【０１７２】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド（化合物６）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ
【０１７３】
【化４２】
2020526571.tif 000073
【０１７４】
ステップ１：２-ｔｅｒｔ-ブチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボン酸７-ベンジル（６Ｂ）
７-ｂｅｎｚｙｌ ２-ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２,７-ｄｉｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１７５】
【化４３】
2020526571.tif 000074
【０１７６】
０℃で、５０ｍＬのシングルボトルに、トリエチルアミン（０．１５ｍＬ,１．１ｍｍｏｌ）を２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（０．２３ｇ,１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液に滴下し、滴下完了後、ベンジルクロロホルメート（３４０ｍｇ,２ｍｍｏｌ）を加え、１０ｍｉｎ攪拌した。室温まで昇温し、１ｈ攪拌し続け、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、２-ｔｅｒｔ-ブチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボン酸７-ベンジル（６Ｂ）を無色油状生成物（３６２ｍｇ、収率９９％）として得た。
【０１７７】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３８３．２［Ｍ+Ｎａ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ７．３４-７．３２（ｍ,５Ｈ）,５．１２（ｓ,２Ｈ）,３．６４（ｓ,４Ｈ）,３．４３（ｄｄ,４Ｈ）,１．７７-１．６１（ｍ,４Ｈ）,１．４４（ｓ,９Ｈ）。
【０１７８】
ステップ２：２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）
ｂｅｎｚｙｌ ２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１７９】
【化４４】
2020526571.tif 000075
【０１８０】
５０ｍＬの反応瓶に、２-ｔｅｒｔ-ブチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボン酸７-ベンジル（６Ｂ）（０．３６ｇ、１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）粗製品を黄色油状液体（２６０ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０１８１】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２６１．２［Ｍ+Ｈ］+;
【０１８２】
ステップ３：２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｄ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１８３】
【化４５】
2020526571.tif 000076
【０１８４】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）粗製品（２６０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２００ｍｇ、２ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加えた。氷浴で０℃に冷却し、シクロプロピルスルホニルクロリド（１７０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温まで昇温し、４ｈ反応させた。その後、反応系を飽和炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）で停止させ、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝４：１）、２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル化合物（６Ｄ）を白色固体（３６０ｍｇ、収率９９％）として得た。
【０１８５】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３６５．２［Ｍ+Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ７．４３-７．２８（ｍ,５Ｈ）,５．１２（ｓ,２Ｈ）,３．７０（ｓ,４Ｈ）,３．５３-３．３６（ｍ,４Ｈ）,２．４１-２．２２（ｍ,１Ｈ）,１．８５-１．６９（ｍ,４Ｈ）,１．１９-１．０９（ｍ,２Ｈ）,１．０４-０．９３（ｍ,２Ｈ）。
【０１８６】
ステップ４：２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（６Ｅ）
２-ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ
【０１８７】
【化４６】
2020526571.tif 000077
【０１８８】
５０ｍＬの反応瓶に、２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｄ）（３６０ｍｇ,０．９９ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（７２ｍｇ,２０ｗｔ％）及び酢酸エチル（１０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で２ｈ反応させた。反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（６Ｅ）を淡黄色固体（２１０ｍｇ、収率９２％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０１８９】
ステップ５：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ｆ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（２-ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０１９０】
【化４７】
2020526571.tif 000078
【０１９１】
５０ｍＬの反応瓶に、２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（６Ｅ）（１６１ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（１２４ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１０８ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、中間体１（５００ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ｆ）を白色固体（６１０ｍｇ、収率９５％）として得た。
【０１９２】
ステップ６：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド（化合物６）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ
【０１９３】
【化４８】
2020526571.tif 000079
【０１９４】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）１-（２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ｆ）（３００ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、白色粉末状の化合物が得られた。さらにイオン交換樹脂（水〜３．３％アンモニア水で溶出）を通じて、得られた溶出溶液を減圧濃縮し（水温６０℃で２５ｍＬに減圧濃縮し）、さらにフリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-シクロプロピルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド（化合物６）を白色固体（１５３ｍｇ、収率６３％）として得た。
【０１９５】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３８３．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４０-７．２４（ｍ,６Ｈ）,７．１６（ｄｄ,４Ｈ）,４．７２-４．７３（ｍ,１Ｈ）,４．５８-４．５２（ｍ,１Ｈ）,４．２５（ｔ,１Ｈ）,３．８４（ｄｄ,,４Ｈ）,３．６７-３．５５（ｍ,３Ｈ）,３．４６-３．４５（ｍ,１Ｈ）,３．３５-３．３４（ｍ,１Ｈ）,３．０３（ｄｄ,１Ｈ）,２．９１（ｄｄ,３Ｈ）,２．８２（ｄ,２Ｈ）,２．６９（ｄｄｄ,１Ｈ）,１．８５-１．８６（ｍ,３Ｈ）,１．６７０-１．６６（ｍ,５Ｈ）,１．５１-１．４９（ｍ,３Ｈ）,１．３８-１．３６（ｍ,２Ｈ）,１．２３-１．０６（ｍ,４Ｈ）,０．８８（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例５】
【０１９６】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物７）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｔｅ
【０１９７】
【化４９】
2020526571.tif 000080
【０１９８】
（ステップ１：２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（７Ａ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０１９９】
【化５０】
2020526571.tif 000081
【０２００】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（３３０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２６３ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、攪拌し溶解させた。-１０℃に冷却し、メタンスルホニルクロリド（１６４ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を滴下し、４ｈ反応させた。その後、室温まで昇温し、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０ｍＬ）、３Ｎ塩酸水溶液（６０ｍＬ）で順次洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：１）、２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（７Ａ）を淡黄色油状物（２３６ｍｇ、収率５４．６％）として得た。
【０２０１】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３３９．０［Ｍ+Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ７．４１-７．２８（ｍ,５Ｈ）,５．１２（ｓ,２Ｈ）,３．６８（ｓ,４Ｈ）,３．５０-３．３８（ｍ,４Ｈ）,２．８６（ｓ,３Ｈ）,１．８３-１．７０（ｍ,４Ｈ）。
【０２０２】
ステップ２：２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（７Ｂ）
２-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ
【０２０３】
【化５１】
2020526571.tif 000082
【０２０４】
５０ｍＬの反応瓶に、２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（７Ａ）（２３６ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（４０ｍｇ、２０ｗｔ％）及びメタノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で８ｈ反応させた。その後、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（７Ｂ）粗製品を淡黄色固体（１３３ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０２０５】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２０５．１［Ｍ+１］+;
【０２０６】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（７Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（２-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０２０７】
【化５２】
2020526571.tif 000083
【０２０８】
５０ｍＬの反応瓶に、２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（７Ｂ）粗製品（１３３ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３７４ｍｇ,１．９５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（９６．６ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、中間体１（４９０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（７Ｃ）を淡黄色固体（３１７ｍｇ、収率５２％）として得た。
【０２０９】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド（化合物７）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ
【０２１０】
【化５３】
2020526571.tif 000084
【０２１１】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）１-（２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（７Ｃ）（３１７ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を収集し、減圧濃縮によって大部分の有機溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド（化合物７）を白色粉末（２１７ｍｇ、収率６６．５％）として得た。
【０２１２】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３７０．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４３-７．２７（ｍ,６Ｈ）,７．２５-７．２０（ｍ,４Ｈ）,４．６７-４．６２（ｍ,２Ｈ）,４．３３-４．２０（ｍ,２Ｈ）,３．８７-３．７１（ｍ,４Ｈ）,３．６９-３．５６（ｍ,２Ｈ）,３．５３-３．４１（ｍ,１Ｈ）,３．４０-３．２９（ｍ,１Ｈ）,３．２３-３．１２（ｍ,２Ｈ）,３．１１-３．０７（ｍ,３Ｈ）,３．０７-２．９１（ｍ,４Ｈ）,１．９４-１．７８（ｍ,３Ｈ）,１．７８-１．６０（ｍ,５Ｈ）,１．５８-１．４８（ｍ,３Ｈ）,１．４６-１．２８（ｍ,２Ｈ）,０．９８-０．８２（ｍ,６Ｈ）。
【実施例６】
【０２１３】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（２-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物８）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（２-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-ａｍｉｎｏ-ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２１４】
【化５４】
2020526571.tif 000085
【０２１５】
ステップ１：２-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（８Ａ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０２１６】
【化５５】
2020526571.tif 000086
【０２１７】
窒素保護で、５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（５２０ｍｇ,２．０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解させ、攪拌しながらトリエチルアミン（６０７ｍｇ,６．０ｍｍｏｌ）を加えた。その後、-２０℃まで降温し、塩化アセチル（３１４ｍｇ,４．０ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温まで放冷し、２ｈ攪拌した。続いて反応に０．５Ｍ希塩酸水溶液（２０ｍＬ）を加え、攪拌し分層し、分液し、ジクロロメタンで水層を抽出し（２０ｍＬｘ２）、有機相を合併し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（純酢酸エチル）、２-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル化合物（８Ａ）を淡黄色油状液体（４４０ｍｇ,収率７２．８％）として得た。
【０２１８】
ステップ２：１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）エタノン（８Ｂ）
１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）ｅｔｈａｎｏｎｅ
【０２１９】
【化５６】
2020526571.tif 000087
【０２２０】
５０ｍＬの反応瓶に、２-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（８Ａ）（４４０ｍｇ,１．４６ｍｍｏｌ）を、酢酸エチル（５ｍＬ）とメタノール（２ｍＬ）との混合溶液に加えた。その後、パラジウム炭素（８０ｍｇ,２０ｗｔ％）を加え、水素（バルーン）の雰囲気において室温で２ｈ攪拌した。続いて、反応液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）エタノン（８Ｂ）粗製品を淡黄色油状液体（２５０ｍｇ,收率９９％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０２２１】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（２-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（８Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（２-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０２２２】
【化５７】
2020526571.tif 000088
【０２２３】
窒素保護で、５０ｍＬの反応瓶に、１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）エタノン（８Ｂ）粗製品（２００ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（１０ｍＬ）に加えた。氷浴で０℃に冷却し、中間体１（８６７ｍｇ,１．１５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３３１ｍｇ,１．７３ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１８６ｍｇ,１．３８ｍｍｏｌ）を加え、滴下完了後室温で１．５ｈ反応させた。続いて、反応液に１Ｎ塩酸水溶液（１５ｍＬ）を加え、攪拌して分液した。有機相に飽和炭酸ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）を加え、３０分間攪拌して分液した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（２-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（８Ｃ）粗製品を淡黄色泡状固体（１．０４ｇ,収率９９％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０２２４】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（２-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物８）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（２-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-ａｍｉｎｏ-ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２２５】
【化５８】
2020526571.tif 000089
【０２２６】
Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（２-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（８Ｃ）粗製品（１．０４ｇ,１．１５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（７．５ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（３．５ｍＬ）に加え、室温で１ｈ攪拌した。続いて、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製した後（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を収集し、減圧濃縮によって大部分の有機溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（２-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物８）を白色固体（４６０ｍｇ,２段階の収率４２．９％）として得た。
【０２２７】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５２．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４９-７．００（ｍ,１０Ｈ）,４．６６-４．４９（ｍ,２Ｈ）,４．３０-３．９３（ｍ,４Ｈ）,３．７９-３．５４（ｍ,４Ｈ）,３．５２-３．２５（ｍ,２Ｈ）,３．２２-２．９０（ｍ,６Ｈ）,１．９２-１．２７（ｍ,１６Ｈ）,１．０２-０．７５（ｍ,６Ｈ）．
【０２２８】
化合物８-１：
化合物８（１．０ｇ,１．０７ｍｍｏ）をイオン交換樹脂（６０ｍＬ）（水〜３．３％アンモニア水で溶出）に通じて、得られた溶出溶液を減圧濃縮し（水温６０℃で１００ｍＬに減圧濃縮し）、さらにリーズドライし、化合物８の遊離形態である化合物８-１を白色固体（４５１ｍｇ、収率６０．０％）として得た。
【０２２９】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５２．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４５-７．３２（ｍ,６Ｈ）,７．２３（ｄｄ,４Ｈ）,４．８５-４．７５（ｍ,１Ｈ）,４．６４（ｔ,１Ｈ）,４．３５（ｔ,１Ｈ）,４．０７（ｄ,２Ｈ）,３．８３（ｄ,２Ｈ）,３．７４-３．６３（ｍ,３Ｈ）,３．６２-３．５０（ｍ,１Ｈ）,３．５０-３．３９（ｍ,１Ｈ）,３．１７-２．６５（ｍ,６Ｈ）,２．０１-１．６６（ｍ,９Ｈ）,１．６５-１．３０（ｍ,７Ｈ）,０．９６（ｄｄ,６Ｈ）．
【実施例７】
【０２３０】
７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸イソプロピル  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物９）
ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ ７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２３１】
【化５９】
2020526571.tif 000090
【０２３２】
ステップ１：Ｏ７-ベンジル  Ｏ２-イソプロピル  ２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボキシレート（９Ａ）
Ｏ７-ｂｅｎｚｙｌ Ｏ２-ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ ２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２,７-ｄｉｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０２３３】
【化６０】
2020526571.tif 000091
【０２３４】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（３１０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３６４ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、室温で攪拌し溶解させた。その後、-１０℃に冷却し、クロロギ酸イソプロピル（１４６ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温まで昇温し、４ｈ反応させた。反応系を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０ｍＬ）、３Ｍ塩酸水溶液（６０ｍＬ）で順次洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：１）、Ｏ７-ベンジル  Ｏ２-イソプロピル  ２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボキシレート化合物（９Ａ）を淡黄色油状液体（２７９ｍｇ、収率６８％）として得た。
【０２３５】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３４７．２［Ｍ+Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ７．３８-７．３０（ｍ,５Ｈ）,５．１２（ｓ,２Ｈ）,４．９５-４．８０（ｍ,１Ｈ）,３．６８（ｓ,４Ｈ）,３．４７-３．３９（ｍ,４Ｈ）,１．７５-１．６８（ｍ,４Ｈ）,１．２３（ｄ,６Ｈ）。
【０２３６】
ステップ２：２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸イソプロピル（９Ｂ）
ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ ２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０２３７】
【化６１】
2020526571.tif 000092
【０２３８】
５０ｍＬのシングルボトルに、Ｏ７-ベンジル  Ｏ２-イソプロピル  ２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボキシレート（９Ａ）（２６０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（５２ｍｇ、２０ｗｔ％ｌ）及びメタノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で８ｈ反応させた。その後、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸イソプロピル（９Ｂ）粗製品を淡黄色固体（１５９ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０２３９】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２１３．２［Ｍ+１］。
【０２４０】
ステップ３：７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチルペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸イソプロピル（９Ｃ）
ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ ７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０２４１】
【化６２】
2020526571.tif 000093
【０２４２】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸イソプロピル（９Ｂ）粗製品（１５９ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３７４ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１０ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、中間体１（５６５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチルペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸イソプロピル（９Ｃ）を淡黄色固体（５５６ｍｇ、収率７８％）として得た。
【０２４３】
ステップ４：７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸イソプロピル  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物９）
ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ ７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２４４】
【化６３】
2020526571.tif 000094
【０２４５】
５０ｍＬのシングルボトルに、７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチルペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸イソプロピル（９Ｃ）（３１７ｍｇ、０．３３４ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸イソプロピル  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物９）を白色粉末状生成物（３２６ｍｇ、収率９８％）として得た。
【０２４６】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３７４．９［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．５０-７．１４（ｍ,１０Ｈ）,４．８９-４．７８（ｍ,１Ｈ）,４．６６（ｔ,１Ｈ）,４．３０（ｔ,１Ｈ）,４．２２（ｔ,１Ｈ）,３．８９-３．７４（ｍ,４Ｈ）,３．６９-３．５４（ｍ,２Ｈ）,３．５４-３．４１（ｍ,１Ｈ）,３．４１-３．２８（ｍ,１Ｈ）,３．２１-３．１１（ｍ,２Ｈ）,３．１１-２．９０（ｍ,４Ｈ）,１．９３-１．３０（ｍ,１４Ｈ）,１．２７（ｄ,６Ｈ）,０．９３（ｑ,６Ｈ）。
【実施例８】
【０２４７】
（（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１０）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２４８】
【化６４】
2020526571.tif 000095
【０２４９】
ステップ１：７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１０Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０２５０】
【化６５】
2020526571.tif 000096
【０２５１】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（０．１１ｇ,０．５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（１１５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（８１ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、中間体１（３７８ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１０Ａ）を白色固体（４５０ｍｇ、収率９３％）として得た。
【０２５２】
ステップ２：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１０）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２５３】
【化６６】
2020526571.tif 000097
【０２５４】
５０ｍＬのシングルボトルに、７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１０Ａ）（４５０ｍｇ、０．４６８ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１０）を白色粉末状生成物（３５８ｍｇ、収率７６％）として得た。
【０２５５】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３３１．８［Ｍ-２ＣＦ３ＣＯＯＨ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４８-７．１０（ｍ,１０Ｈ）,４．６５-４．６１（ｍ,２Ｈ）,４．２８-４．２０（ｍ,２Ｈ）,３．９３（ｄ,４Ｈ）,３．７０-３．５７（ｍ,２Ｈ）,３．５２-３．３９（ｍ,１Ｈ）,３．３９-３．２７（ｍ,１Ｈ）,３．１５（ｄ,２Ｈ）,３．０２-２．９４（ｍ,４Ｈ）,１．９８-１．８７（ｍ,３Ｈ）,１．８２-１．６０（ｍ,５Ｈ）,１．５１-１．５０（ｍ,３Ｈ）,１．４４-１．３６（ｍ,２Ｈ）,０．８９（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例９】
【０２５６】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１１）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２５７】
【化６７】
2020526571.tif 000098
【０２５８】
ステップ１：２-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ））-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチルペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１１Ａ）
Ｂｅｎｚｙｌ ２-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０２５９】
【化６８】
2020526571.tif 000099
【０２６０】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（０．２６ｇ、１ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（２３０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１６２ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、中間体１（０．７５ｇ、１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、２-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ））-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１１Ａ）を白色固体（８５０ｍｇ、収率８５％）として得た。
【０２６１】
ステップ２：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１１Ｂ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０２６２】
【化６９】
2020526571.tif 000100
【０２６３】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ））-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１１Ａ）（８５０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（１７０ｍｇ、２０ｗｔ％）及びメタノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で８ｈ反応させた。その後、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１１Ｂ）粗製品を白色固体（５８０ｍｇ、収率７９％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０２６４】
ステップ３：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１１）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２６５】
【化７０】
2020526571.tif 000101
【０２６６】
５０ｍＬのシングルボトルに、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１１Ｂ）（０．５ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１１）を白色粉末状生成物（３８０ｍｇ、収率６６％）として得た。
【０２６７】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３３１．８［Ｍ-２ＣＦ３ＣＯＯＨ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４３-７．１３（ｍ,１０Ｈ）,４．６１（ｔ,１Ｈ）,４．２８-４．０６（ｍ,５Ｈ）,３．８４-３．７４（ｍ,２Ｈ）,３．１９-３．１４（ｍ,６Ｈ）,２．９９-２．９５（ｍ,４Ｈ）,２．０９-１．９４（ｍ,４Ｈ）,１．７９-１．６１（ｍ,４Ｈ）,１．５５-１．３１（ｍ,５Ｈ）,０．８９（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例１０】
【０２６８】
２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１２）
２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（７-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２６９】
【化７１】
2020526571.tif 000102
【０２７０】
ステップ１：７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１２Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０２７１】
【化７２】
2020526571.tif 000103
【０２７２】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（０．２３ｇ,１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２１０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加え、攪拌し溶解させた。-１０℃に冷却し、メタンスルホニルクロリド（１４０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を滴下し、４ｈ反応させた。その後、室温に昇温した後、反応系を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）で停止させ、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝４：１）、７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１２Ａ）を淡黄色油状物（２５０ｍｇ、収率８１％）として得た。
【０２７３】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３２７．２［Ｍ+Ｎａ］+。
【０２７４】
ステップ２：７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（１２Ｂ）
７-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ
【０２７５】
【化７３】
2020526571.tif 000104
【０２７６】
５０ｍＬの反応瓶に、７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１２Ａ）（０．２５ｇ、０．８１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（１２Ｂ）粗製品を淡黄色油状液体（１６５ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０２７７】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１２Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌＮ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（７-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０２７８】
【化７４】
2020526571.tif 000105
【０２７９】
５０ｍＬのシングルボトルに、７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（１２Ｂ）粗製品（１６５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（１９２ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１３５ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、中間体１（６１０ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１２Ｃ）を白色固体（６３０ｍｇ、収率８２．７％）として得た。
【０２８０】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１２）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（７-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２８１】
【化７５】
2020526571.tif 000106
【０２８２】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１２Ｃ）（６３０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（７-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１２）を白色粉末（４１０ｍｇ、収率６３．２％）として得た。
【０２８３】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３７０．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４３-７．１５（ｍ,１０Ｈ）,４．６１（ｔ,１Ｈ）,４．３３-３．９６（ｍ,５Ｈ）,３．７９-３．６９（ｍ,２Ｈ）,３．２５-３．１３（ｍ,７Ｈ）,３．０２-２．９３（ｍ,６Ｈ）,１．９１-１．８６（ｍ,３Ｈ）,１．７０-１．６４（ｍ,３Ｈ）,１．５６-１．３１（ｍ,５Ｈ）,１．２５（ｔ,２Ｈ）,０．８９（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例１１】
【０２８４】
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（ピロリジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１３）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０２８５】
【化７６】
2020526571.tif 000107
【０２８６】
ステップ１：ピロリジン-１-カルボニルクロリド（１３Ｂ）
ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｎｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ
【０２８７】
【化７７】
2020526571.tif 000108
【０２８８】
５０ｍＬのシングルボトルに、ＮａＨＣＯ３（５．０４ｇ、６０ｍｍｏｌ）、トリホスゲン（５．９４ｇ、２０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、反応液を-１０℃に冷却した後、ピロリジン（２．１６ｇ、３０．４ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下し、滴下完了後室温に戻し、一晩反応させた。反応液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝３：１）、ピロリジン-１-カルボニルクロリド（１３Ｂ）を無色油状物（２．０７ｇ,収率５１．６５％）として得た。
【０２８９】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ３．６２-３．５６（ｍ,２Ｈ）,３．５４-３．４４（ｍ,２Ｈ）,２．０２-１．９０（ｍ,４Ｈ）。
【０２９０】
ステップ２：２-（ピロリジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１３Ｃ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０２９１】
【化７８】
2020526571.tif 000109
【０２９２】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（３５０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４０８ｍｇ、４．０３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、室温で攪拌し溶解させた。その後、反応液を０℃に冷却し、ピロリジン-１-カルボニルクロリド（１３Ｂ）（１２３ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温まで昇温し、４ｈ反応させた。反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０ｍＬ）、３ｍｏｌ／Ｌ塩酸水溶液（６０ｍＬ）で順次洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、ろ液を減圧濃縮し、２-（ピロリジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１３Ｃ）粗製品を淡黄色油状液体（４６０ｍｇ、収率１００％）として得た。
【０２９３】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３５８．２［Ｍ+Ｈ］+。
【０２９４】
ステップ３：２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル（ピロリジン-１-イル）メタノン（１３Ｄ）
２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎ-１-ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ
【０２９５】
【化７９】
2020526571.tif 000110
【０２９６】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-（ピロリジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１３Ｃ）粗製品（４６０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、水酸化パラジウム／炭素（１００ｍｇ、２０ｗｔ％）及びイソプロパノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気においてオイルバスで１００℃に加熱し８ｈ反応させた。その後、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル（ピロリジン-１-イル）メタノン（１３Ｄ）粗製品を淡黄色固体（２９０ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０２９７】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２２４．３［Ｍ+Ｈ］+。
【０２９８】
ステップ４：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（ピロリジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１３Ｅ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０２９９】
【化８０】
2020526571.tif 000111
【０３００】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル（ピロリジン-１-イル）メタノン（１３Ｄ）粗製品（１６７ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３７４ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１０８ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、中間体１（５５６ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を順次加え、滴下完了後室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（ピロリジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１３Ｅ）を白色固体（３６０ｍｇ、収率２９％）として得た。
【０３０１】
ステップ５：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（ピロリジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１３）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０３０２】
【化８１】
2020526571.tif 000112
【０３０３】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（ピロリジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１３Ｅ）（３６０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を滴下し、滴下完了後２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（ピロリジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１３）を白色固体（１６９ｍｇ、収率４５．６％）として得た。
【０３０４】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３８０．４［Ｍ+２Ｈ］+／２。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ-ｄ６）δ ８．７５（ｄ,１Ｈ）,８．３５（ｄ,１Ｈ）,８．０９（ｄ,１Ｈ）,８．０１（ｂｒ,３Ｈ）,７．７３（ｂｒ,３Ｈ）,７．３４-７．１７（ｍ,１０Ｈ）,４．７１-４．６０（ｍ,２Ｈ）,４．４０-４．３２（ｍ,１Ｈ）,４．０８-３．９６（ｍ,２Ｈ）,３．７３-３．２３（ｍ,８Ｈ）,３．１６-３．０１（ｍ,３Ｈ）,２．９８-２．８６（ｍ,１Ｈ）,２．８５-２．６９（ｍ,３Ｈ）,１．８２-１．６９（ｍ,４Ｈ）,１．６９-１．４２（ｍ,１１Ｈ）,１．３６-１．２２（ｍ,２Ｈ）,０．８９（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例１２】
【０３０５】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１４）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（３-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌａｚｅｔｉｄｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０３０６】
【化８２】
2020526571.tif 000113
【０３０７】
ステップ１：３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニルクロリド（１４Ｂ）
３-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌａｚｅｔｉｄｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｎｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ
【０３０８】
【化８３】
2020526571.tif 000114
【０３０９】
５０ｍＬのシングルボトルに、ＮａＨＣＯ３（７５６ｍｇ、９．０ｍｍｏｌ）、トリホスゲン（０．８９ｇ、４．５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（８ｍＬ）を加え、反応液を-１０℃に冷却した後、３-メチルスルホニルアゼチジン塩酸塩（７７２ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下し、滴下完了後室温に戻し、一晩反応させた。反応液をろ過し、減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：１）、３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニルクロリド（１４Ｂ）を無色油状物（４９４ｍｇ,収率５０％）として得た。
【０３１０】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ４．６２-４．３２（ｍ,４Ｈ）,４．０７-３．９２（ｍ,１Ｈ）,２．９３（ｓ,３Ｈ）。
【０３１１】
ステップ２：２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１４Ｃ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-（３-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌａｚｅｔｉｄｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０３１２】
【化８４】
2020526571.tif 000115
【０３１３】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（３５０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４０６ｍｇ、４．０１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、室温で攪拌し溶解させた。その後、反応液を０℃に冷却し、３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニルクロリド（１４Ｂ）（２９３ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温まで昇温し、４ｈ反応させた。反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０ｍＬ）、３ｍｏｌ／Ｌ塩酸水溶液（６０ｍＬ）で順次洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１４Ｃ）を白色固体（３００ｍｇ、収率５５％）として得た。
【０３１４】
ＭＳ ｍ／ｚ＝４２２．２［Ｍ+Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ７．４１-７．２８（ｍ,５Ｈ）,５．１２（ｓ,２Ｈ）,４．３０-４．１９（ｍ,４Ｈ）,４．００-３．８９（ｍ,１Ｈ）,３．６９（ｓ,４Ｈ）,３．４９-３．３６（ｍ,４Ｈ）,２．９０（ｓ,３Ｈ）,１．７９-１．６７（ｍ,４Ｈ）。
【０３１５】
ステップ３：２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-イル）メタノン（１４Ｄ）
２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ-（３-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌａｚｅｔｉｄｉｎ-１-ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ
【０３１６】
【化８５】
2020526571.tif 000116
【０３１７】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１４Ｃ）（３００ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、水酸化パラジウム／炭素（６０ｍｇ、２０ｗｔ％）及びイソプロパノール（２０ｍＬ）を順次加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気においてオイルバスで１００℃に加熱し８ｈ反応させた。その後、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-イル）メタノン（１４Ｄ）粗製品を淡黄色固体（２０２ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０３１８】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２８８．１［Ｍ+Ｈ］+。
【０３１９】
ステップ４：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１４Ｅ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-（３-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌａｚｅｔｉｄｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０３２０】
【化８６】
2020526571.tif 000117
【０３２１】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-イル）メタノン（１４Ｄ）粗製品（２０２ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（４０２ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１５ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、中間体１（５３６ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を順次加え、滴下完了後室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝４０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１４Ｅ）を淡黄色固体（６８６ｍｇ、収率９６％）として得た。
【０３２２】
ステップ５：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１４）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（３-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌａｚｅｔｉｄｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０３２３】
【化８７】
2020526571.tif 000118
【０３２４】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１４Ｅ）（６８０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（３-メチルスルホニルアゼチジン-１-カルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１４）を白色固体（３３０ｍｇ、収率４１．３％）として得た。
【０３２５】
ＭＳ ｍ／ｚ＝４１２．３［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４４-７．１８（ｍ,１０Ｈ）,４．６６（ｔ,１Ｈ）,４．４７-４．１６（ｍ,７Ｈ）,３．９０-３．７２（ｍ,４Ｈ）,３．６９-３．５５（ｍ,２Ｈ）,３．５３-３．４１（ｍ,１Ｈ）,３．３９-３．２７（ｍ,１Ｈ）,３．２４-３．１４（ｍ,２Ｈ）,３．１０（ｓ,３Ｈ）,３．０９-２．９０（ｍ,４Ｈ）,１．９４-１．２６（ｍ,１４Ｈ）,０．９２（ｄ,６Ｈ）。
【実施例１３】
【０３２６】
７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１５）
７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ;２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０３２７】
【化８８】
2020526571.tif 000119
【０３２８】
ステップ１：２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１５Ｂ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０３２９】
【化８９】
2020526571.tif 000120
【０３３０】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（３１０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３６４ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、室温で攪拌し溶解させた。その後、反応液を０℃に冷却し、メチルカルバミド酸クロリド（１５Ａ）（１２３ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温まで昇温し、４ｈ反応させた。反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０ｍＬ）、３ｍｏｌ／Ｌ塩酸水溶液（６０ｍＬ）で順次洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、ろ液を減圧濃縮し、２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１５Ｂ）粗製品を黄色油状（４４０ｍｇ、収率１００％）として得た。
【０３３１】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３１８．２［Ｍ+Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ７．３９-７．２８（ｍ,５Ｈ）,５．１２（ｓ,２Ｈ）,３．６６（ｓ,４Ｈ）,３．５０-３．３６（ｍ,４Ｈ）,２．７９（ｓ,３Ｈ）,１．８２-１．６３（ｍ,４Ｈ）。
【０３３２】
ステップ２：Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド（１５Ｃ）
Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ
【０３３３】
【化９０】
2020526571.tif 000121
【０３３４】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１５Ｂ）粗製品（２６０ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、水酸化パラジウム／炭素（５０ｍｇ、２０ｗｔ％）及びイソプロパノール（２０ｍＬ）を順次加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気においてオイルバスで１００℃に加熱し８ｈ反応させた。その後、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド（１５Ｃ）粗製品を淡黄色固体（１５０ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０３３５】
ＭＳ ｍ／ｚ＝１８４．３［Ｍ+Ｈ］+。
【０３３６】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１５Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０３３７】
【化９１】
2020526571.tif 000122
【０３３８】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド（１５Ｃ）粗製品（１５０ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３７４ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１０ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、中間体１（５６５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を順次加え、滴下完了後室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝４０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１５Ｄ）を淡黄色固体（４８０ｍｇ、収率６３％）として得た。
【０３３９】
ステップ４：７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１５）
７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０３４０】
【化９２】
2020526571.tif 000123
【０３４１】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１５Ｄ）（４８０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を滴下し、滴下完了後２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１５）を白色固体（２６０ｍｇ、収率５３％）として得た。
【０３４２】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３６０．３［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４３-７．２８（ｍ,６Ｈ）,７．２７-７．２１（ｍ,４Ｈ）,４．６６（ｔ,１Ｈ）,４．３０（ｔ,１Ｈ）,４．２１（ｔ,１Ｈ）,３．７４（ｓ,２Ｈ）,３．７０（ｓ,２Ｈ）,３．６９-３．５９（ｍ,２Ｈ）,３．５５-３．４３（ｍ,１Ｈ）,３．４１-３．３１（ｍ,１Ｈ）,３．２４-３．１２（ｍ,２Ｈ）,３．１１-２．９２（ｍ,４Ｈ）,２．６９（ｓ,３Ｈ）,１．９４-１．２７（ｍ,１４Ｈ）,０．９３（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例１４】
【０３４３】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１６）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０３４４】
【化９３】
2020526571.tif 000124
【０３４５】
ステップ１：Ｏ７-ベンジル  Ｏ２-ｔｅｒｔ-ブチル  ５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボキシレート（１６Ｂ）
Ｏ７-ｂｅｎｚｙｌ Ｏ２-ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２,７-ｄｉｃａｒｂｏｘｙｌ ａｔｅ
【０３４６】
【化９４】
2020526571.tif 000125
【０３４７】
５０ｍＬのシングルボトルに、トリエチルアミン（０．８５ｍＬ,８．４ｍｍｏｌ）、５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１６Ａ）（２．１ｇ,８．０ｍｍｏｌ）及びテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）を順次加え、反応液を０℃に冷却した後、ベンジルクロロホルメート（１．５ｇ,８．８ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下し、滴下完了後０℃で保持し１０分間反応させ、再び室温に昇温し５ｈ攪拌し続いた。反応液を濾過し、ろ液を減圧濃縮し、Ｏ７-ベンジル  Ｏ２-ｔｅｒｔ-ブチル  ５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボキシレート（１６Ｂ）を淡黄色油状の生成物（３．５ｇ、収率１００％）として得た。
【０３４８】
ＭＳ ｍ／ｚ＝４１９．３［Ｍ+Ｎａ］+;
【０３４９】
ステップ２：５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１６Ｃ）
ｂｅｎｚｙｌ ５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０３５０】
【化９５】
2020526571.tif 000126
【０３５１】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｏ７-ベンジル  Ｏ２-ｔｅｒｔ-ブチル  ５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２,７-ジカルボキシレート（１６Ｂ）（３．１７ｇ、８．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（６．０ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液をｐＨが約１３になるようにアンモニア水で調整した後分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１６Ｃ）を黄色油状液体（２．４３ｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０３５２】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２９７．１［Ｍ+Ｈ］+;
【０３５３】
ステップ３：５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１６Ｄ）
ｂｅｎｚｙｌ ５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０３５４】
【化９６】
2020526571.tif 000127
【０３５５】
５０ｍＬの反応瓶に、５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１６Ｃ）（３１０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３１８ｍｇ、３．１４ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、攪拌し溶解させた。-１０℃に冷却し、メタンスルホニルクロリド（１５６ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）を滴下し、４時間反応させた。その後、室温まで昇温し、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０ｍＬ）、３Ｍ塩酸水溶液（６０ｍＬ）で順次洗浄し、分液し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝６０：１）、５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１６Ｄ）を白色固体（２３３ｍｇ、収率５９％）として得た。
【０３５６】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３９７．２［Ｍ+Ｎａ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ７．４２-７．２９（ｍ,５Ｈ）,５．１５（ｓ,２Ｈ）,４．０９（ｄ,２Ｈ）,３．７８-３．５９（ｍ,４Ｈ）,３．５１（ｔ,２Ｈ）,２．８９（ｓ,３Ｈ）,２．０８（ｓ,２Ｈ）。
【０３５７】
ステップ４：５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（１６Ｅ）
５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ
【０３５８】
【化９７】
2020526571.tif 000128
【０３５９】
５０ｍＬの反応瓶に、５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１６Ｄ）（２３０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、パラジウム／炭素（４０ｍｇ、２０ｗｔ％）及びイソプロパノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気においてオイルバスで１００℃に加熱し８ｈ反応させた。その後、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（１６Ｅ）を淡黄色固体（１５５ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０３６０】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２４１．１［Ｍ+Ｈ］+;
【０３６１】
ステップ５：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１６Ｆ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０３６２】
【化９８】
2020526571.tif 000129
【０３６３】
５０ｍＬの反応瓶に、５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（１６Ｅ）（１５５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３００ｍｇ,２．０ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１５ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、中間体１（３７７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５時間反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝４０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１６Ｆ）を白色固体（３８０ｍｇ、収率７８％）として得た。
【０３６４】
ステップ６：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１６）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２-ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０３６５】
【化９９】
2020526571.tif 000130
【０３６６】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１６Ｆ）（３８０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を滴下し、滴下完了後２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（５,５-ジフルオロ-２-メチルスルホニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１６）を白色粉末（２７０ｍｇ、収率７１％）として得た。
【０３６７】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３８８．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４４-７．１７（ｍ,１０Ｈ）,４．６６（ｔ,１Ｈ）,４．４２-４．１３（ｍ,４Ｈ）,４．１３-３．４９（ｍ,７Ｈ）,３．２５-２．９２（ｍ,９Ｈ）,２．３０-２．００（ｍ,２Ｈ）,１．９１-１．２６（ｍ,９Ｈ）,０．９３（ｑ,６Ｈ）．。
【実施例１５】
【０３６８】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１７）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０３６９】
【化１００】
2020526571.tif 000131
【０３７０】
ステップ１：（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパン酸（１７Ｂ）
（２Ｒ-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎｏｉｃ ａｃｉｄ
【０３７１】
【化１０１】
2020526571.tif 000132
【０３７２】
２５０ｍＬの反応瓶に、Ｄ-アラニン（１７Ａ）（１０ｇ、１１２．２４ｍｍｏｌ）及び水（５６ｍＬ）を加え、反応液を０℃に冷却した後、水酸化ナトリウム（６．７３ｇ、１６８．３６ｍｍｏｌ）を加え、滴下完了後０℃に保持し１０分間反応させ、二炭酸ジ-ｔｅｒｔ-ブチル（３１．８５ｇ,１４５．９１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）溶液を滴下し、滴下完了後室温まで昇温し、一晩攪拌した。反応液を石油エーテル（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を廃棄し、水相をｐＨが約１になるように４Ｍの塩酸溶液で酸性化した後、酢酸エチル（１００ｍＬ×４）で抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、ろ液を減圧濃縮し、（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパン酸（１７Ｂ）を無色油状（２１．２ｇ、收率：１００％）として得た。
【０３７３】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２１２．１［Ｍ+Ｎａ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＤＭＳＯ-ｄ６）δ １２．３４（ｂｒ,１Ｈ）,７．０５（ｄ,１Ｈ）,３．９８-３．８７（ｍ,１Ｈ）,１．３８（ｓ,９Ｈ）,１．２２（ｄ,３Ｈ）。
【０３７４】
ステップ２：２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１７Ｃ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０３７５】
【化１０２】
2020526571.tif 000133
【０３７６】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（３３５ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（７４８ｍｇ,３．９ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２１１ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）、（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパン酸（１７Ｂ）（２４６ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝３：１）、２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１７Ｃ）を白色固体（５１０ｍｇ、収率９１％）として得た。
【０３７７】
ＭＳ ｍ／Ｚ＝４５４．３［Ｍ+Ｎａ］+;
【０３７８】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-１-メチル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１７Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）-１-ｍｅｔｈｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０３７９】
【化１０３】
2020526571.tif 000134
【０３８０】
５０ｍＬの反応瓶に、２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１７Ｃ）（４６０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、水酸化パラジウム／炭素（９２ｍｇ、２０ｗｔ％）及びイソプロパノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気においてオイルバスで１００℃に加熱し８ｈ反応させた。その後、室温まで降温し、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-１-メチル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１７Ｄ）粗製品を淡黄色固体（２５２ｍｇ、収率７７％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０３８１】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２９８．３［Ｍ+Ｈ］+;
【０３８２】
ステップ４：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１７Ｅ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０３８３】
【化１０４】
2020526571.tif 000135
【０３８４】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-１-メチル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１７Ｄ）粗製品（２２３ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３７４ｍｇ,１．９５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１０ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、中間体１（５６５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を順次加え、室温で５ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝４０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１７Ｅ）を淡黄色固体（５６０ｍｇ、収率６９％）として得た。
【０３８５】
ステップ５：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１７）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０３８６】
【化１０５】
2020526571.tif 000136
【０３８７】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１７Ｅ）（５６０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１７）を白色粉末（３１０ｍｇ、収率４５％）として得た。
【０３８８】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３６７．３［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４４-７．２８（ｍ,６Ｈ）,７．２６-７．２０（ｍ,４Ｈ）,４．６５（ｔ,２Ｈ）,４．３３-４．２１（ｍ,２Ｈ）,４．１９-４．０１（ｍ,３Ｈ）,３．９６-３．７８（ｍ,２Ｈ）,３．７５-３．５９（ｍ,２Ｈ）,３．５６-３．４２（ｍ,１Ｈ）,３．４２-３．３０（ｍ,１Ｈ）,３．２４-３．１２（ｍ,２Ｈ）,３．１０-２．９２（ｍ,４Ｈ）,１．９９-１．７９（ｍ,３Ｈ）,１．８０-１．６３（ｍ,５Ｈ）,１．５３（ｄ,３Ｈ）,１．５０-１．３０（ｍ,５Ｈ）,０．９２（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例１６】
【０３８９】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル〕アミノ〕-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１８）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０３９０】
【化１０６】
2020526571.tif 000137
【０３９１】
ステップ１：Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）-１-メチル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ベンジル（１８Ｂ）
ｂｅｎｚｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-７-ｙｌ）-１-ｍｅｔｈｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０３９２】
【化１０７】
2020526571.tif 000138
【０３９３】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（０．４５ｇ,２ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（７８０ｍｇ,４．１ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（３４０ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）、（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）プロパン酸（４４６ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）-１-メチル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ベンジル（１８Ｂ）を白色固体（８６０ｍｇ、収率９９％）として得た。
【０３９４】
ＭＳ ｍ／Ｚ＝４５４．２［Ｍ+Ｎａ］+。
【０３９５】
ステップ２：Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）-１-メチル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ベンジル（１８Ｃ）
ｂｅｎｚｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-７-ｙｌ）-１-ｍｅｔｈｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０３９６】
【化１０８】
2020526571.tif 000139
【０３９７】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）-１-メチル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ベンジル（１８Ｂ）（０．８６ｇ、２ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）-１-メチル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ベンジル（１８Ｃ）粗製品を黄色油状液体（６６０ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０３９８】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３３２．２［Ｍ+Ｈ］+;
【０３９９】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１８Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０４００】
【化１０９】
2020526571.tif 000140
【０４０１】
１００ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）-１-メチル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ベンジル（１８Ｃ）（２４３ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２００ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、中間体１（５００ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝３０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１８Ｄ）を淡黄色固体（７４０ｍｇ、収率９９％）として得た。
【０４０２】
ステップ４：Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１８Ｅ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０４０３】
【化１１０】
2020526571.tif 000141
【０４０４】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１８Ｄ）（７００ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（１４０ｍｇ、２０ｗｔ％）及びメタノール（１５ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素の雰囲気において室温で８ｈ反応させた。その後、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-１,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１８Ｅ）粗製品を淡黄色油状物（６５０ｍｇ、収率９９％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０４０５】
ステップ５：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）（化合物１８）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ -２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４０６】
【化１１１】
2020526571.tif 000142
【０４０７】
５０ｍＬの反応瓶に、（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-１,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１８Ｅ）粗製品（６５０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）（化合物１８）を白色粉末（１７０ｍｇ、収率１９％）として得た。
【０４０８】
ＭＳ ｍ／ｚ＝７３３．５［Ｍ+Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４４-７．２８（ｍ,６Ｈ）,７．２７-７．２０（ｍ,４Ｈ）,４．６４（ｔ,１Ｈ）,４．５５-４．４６（ｍ,１Ｈ）,４．３２-４．２３（ｍ,２Ｈ）,４．２１-４．０５（ｍ,３Ｈ）,３．８６-３．７１（ｍ,２Ｈ）,３．６３-３．４０（ｍ,４Ｈ）,３．２５-３．１０（ｍ,２Ｈ）,３．１０-２．９０（ｍ,４Ｈ）,２．００-１．６０（ｍ,８Ｈ）,１．６０-１．２９（ｍ,８Ｈ）,０．９２（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例１７】
【０４０９】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル〕アミノ〕-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１９）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４１０】
【化１１２】
2020526571.tif 000143
【０４１１】
ステップ１：２-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル〕アミノ〕-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１９Ａ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０４１２】
【化１１３】
2020526571.tif 000144
【０４１３】
１００ｍＬの反応瓶に、５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸エチルベンジル（１６Ｃ）（７９７ｍｇ、２．６９ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（１．０４ｇ、５．４ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（４００ｍｇ、３ｍｍｏｌ）、中間体１（２．０３ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝３０：１）、２-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル〕アミノ〕-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１９Ａ）を淡黄色固体（２．４９ｇ、収率８９．６％）として得た。
【０４１４】
ステップ２：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１９Ｂ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０４１５】
【化１１４】
2020526571.tif 000145
【０４１６】
５０ｍＬの反応瓶に、２-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル〕アミノ〕-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（１９Ａ）（２．４９ｇ、２．４１ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（５００ｍｇ、２０ｗｔ％）及びメタノール（２５ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で４ｈ反応させた。その後、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１９Ｂ）粗製品を淡黄色油状物（２．１６ｇ、収率９９％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０４１７】
ＭＳ ｍ／ｚ＝８９９．５［Ｍ+Ｈ］+;
【０４１８】
ステップ３：Ｎ-（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル〕アミノ〕-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１９Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０４１９】
【化１１５】
2020526571.tif 000146
【０４２０】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１９Ｂ）粗製品（４００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（０．２３ｇ、１．２ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（７０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ-Ｄ-アラニン（７８ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝３０：１）、Ｎ-（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル〕アミノ〕-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１９Ｃ）を淡黄色固体（３４０ｍｇ、収率７９％）として得た。
【０４２１】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル〕アミノ〕-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１９）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４２２】
【化１１６】
2020526571.tif 000147
【０４２３】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル〕アミノ〕-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１９Ｃ）（３４０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノプロパノイル］-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル〕アミノ〕-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物１９）を白色粉末（１７０ｍｇ、収率４８％）として得た。
【０４２４】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３８５．３［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４３-７．２９（ｍ,６Ｈ）,７．２７-７．２１（ｍ,４Ｈ）,４．６７-４．４７（ｍ,３Ｈ）,４．３１-４．０９（ｍ,５Ｈ）,４．０９-３．７６（ｍ,３Ｈ）,３．７４-３．４６（ｍ,２Ｈ）,３．１８（ｄ,２Ｈ）,３．１０-２．９１（ｍ,４Ｈ）,２．３３-１．９７（ｍ,２Ｈ）,１．８４-１．６１（ｍ,４Ｈ）,１．６１-１．２６（ｍ,８Ｈ）,０．９２（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例１８】
【０４２５】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物２０）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-ａｍｉｎｏ-ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４２６】
【化１１７】
2020526571.tif 000148
【０４２７】
ステップ１：７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２０Ｂ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０４２８】
【化１１８】
2020526571.tif 000149
【０４２９】
窒素保護で、５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（４５０ｍｇ,２．０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解させ、攪拌しながらトリエチルアミン（６０６ｍｇ,６．０ｍｍｏｌ）を加えた。その後、-２０℃まで降温し、塩化アセチル（３１０ｍｇ,４．０ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温まで放冷し、２ｈ攪拌した。続いて、反応に０．５Ｍ希塩酸水溶液（２０ｍＬ）を加え、攪拌し分層し、分液し、ジクロロメタンで水層を抽出し（２０ｍＬｘ２）、有機相を合併し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（純酢酸エチル）、７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２０Ｂ）を淡黄色油状液体（５２０ｍｇ,収率９７．０％）として得た。
【０４３０】
ステップ２：１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）エタノン（２０Ｃ）
１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-７-ｙｌ）ｅｔｈａｎｏｎｅ
【０４３１】
【化１１９】
2020526571.tif 000150
【０４３２】
５０ｍＬの反応瓶に、７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２０Ｂ）（５２０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（６ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、残留物に濃アンモニア水４ｍＬを加え、さらに無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥し、メタノール（２０ｍＬ）で洗浄し、洗浄液を濃縮し、１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）エタノン（２０Ｃ）粗製品を黄色油状液体（２５０ｍｇ、収率７７％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０４３３】
ステップ３：Ｎ-（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２０Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌＮ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０４３４】
【化１２０】
2020526571.tif 000151
【０４３５】
窒素保護で、５０ｍＬの反応瓶に、１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）エタノン（２０Ｃ）（２５０ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（１０ｍＬ）に加えた。氷浴で０℃に冷却し、中間体１（８００ｍｇ,１．０６ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３０５ｍｇ,１．６ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１７２ｍｇ,１．２７ｍｍｏｌ）を加え、滴下完了後室温で１．５ｈ反応させた。続いて、反応液に１Ｍ塩酸水溶液（１５ｍＬ）を加え、攪拌して分液した。有機相に飽和炭酸ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）を加え、３０分間攪拌して分液した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、Ｎ-（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２０Ｄ）粗製品を淡黄色泡状固体（０．８５ｇ,収率８８％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０４３６】
ステップ４：（（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物２０）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-ａｍｉｎｏ-ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４３７】
【化１２１】
2020526571.tif 000152
【０４３８】
Ｎ-（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２０Ｄ）粗製品（０．８５ｇ,０．９４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（７．５ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（３．５ｍＬ）を加え、室温で１ｈ攪拌した。続いて、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製した後（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物２０）を白色固体（３１０ｍｇ,収率４０．０％）として得た。
【０４３９】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５２．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４６-７．１７（ｍ,１０Ｈ）,４．６４（ｔ,１Ｈ）,４．２９-４．０５（ｍ,５Ｈ）,３．８３-３．７４（ｍ,２Ｈ）,３．５７-３．３５（ｍ,４Ｈ）,３．２４-３．１１（ｍ,２Ｈ）,３．０９-２．９３（ｍ,４Ｈ）,２．１７-１．２９（ｍ,１６Ｈ）,０．９２（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例１９】
【０４４０】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（１,１-ジオキソ-１,４-チアジナン-４-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル〕アミノ〕-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２１）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（１,１-ｄｉｏｘｏ-１,４-ｔｈｉａｚｉｎａｎ-４-ｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４４１】
【化１２２】
2020526571.tif 000153
【０４４２】
ステップ１：（１,１-ジオキソ-１,４-チアジナン-４-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２１Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ２-（１,１-ｄｉｏｘｏ-１,４-ｔｈｉａｚｉｎａｎ-４-ｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０４４３】
【化１２３】
2020526571.tif 000154
【０４４４】
５０ｍＬの反応瓶に、２-オキソ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ａ）（１２９ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）、酢酸（６５ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）、１,４-チアジナン１,１-ジオキシド（７２ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（２２９ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を順次加え、滴下完了後室温で１６ｈ反応させた。反応液をろ過し、ろ液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、分液して有機層用無水硫酸ナトリウムで乾燥した、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、（１,１-ジオキソ-１,４-チアジナン-４-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２１Ａ）を白色粉末（１４７ｍｇ、収率７６％）として得た。
【０４４５】
ステップ２：４-（７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-１,４-チアジナン-１,１-ジオキシド（２１Ｂ）
４-（７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）-１,４-ｔｈｉａｚｉｎａｎｅ １,１-ｄｉｏｘｉｄｅ
【０４４６】
【化１２４】
2020526571.tif 000155
【０４４７】
５０ｍＬの反応瓶に、（１,１-ジオキソ-１,４-チアジナン-４-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２１Ａ）（１４７ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、４-（７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-１,４-チアジナン-１,１-ジオキシド（２１Ｂ）粗製品を黄色油状液体（１０６ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０４４８】
ステップ３：（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（１,１-ジオキソ-１,４-チアジナン-４-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２１Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌＮ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-（１,１-ｄｉｏｘｏ-１,４-ｔｈｉａｚｉｎａｎ-４-ｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０４４９】
【化１２５】
2020526571.tif 000156
【０４５０】
５０ｍＬのシングルボトルに、４-（７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-１,４-チアジナン-１,１-ジオキシド（２１Ｂ）粗製品（１０６ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（９４ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（６６ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、中間体１（３０９ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（１,１-ジオキソ-１,４-チアジナン-４-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２１Ｃ）を白色固体（３６７ｍｇ、収率９０％）として得た。
【０４５１】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（１,１-ジオキソ-１,４-チアジナン-４-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル〕アミノ〕-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２１）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（１,１-ｄｉｏｘｏ-１,４-ｔｈｉａｚｉｎａｎ-４-ｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４５２】
【化１２６】
2020526571.tif 000157
【０４５３】
５０ｍＬの反応瓶に、（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（１,１-ジオキソ-１,４-チアジナン-４-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２１Ｃ）（３６７ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（１,１-ジオキソ-１,４-チアジナン-４-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル〕アミノ〕-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２１）を白色粉末（２９５ｍｇ、収率７０％）として得た。
【０４５４】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３９７．９［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．３６-７．１９（ｍ,１０Ｈ）,４．６３-４．６０（ｍ,１Ｈ）,４．３２-４．１６（ｍ,３Ｈ）,３．９２-３．７８（ｍ,１Ｈ）,３．６３（ｄ,９Ｈ）,３．５３-３．２２（ｍ,３Ｈ）,３．１５（ｄ,２Ｈ）,３．０１-２．９１（ｍ,４Ｈ）,２．４８-２．３２（ｍ,２Ｈ）,１．９８-２．０６（ｍ,２Ｈ）,１．７５-１．２３（ｍ,１３Ｈ）,０．８９（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例２０】
【０４５５】
７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物２２）
７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［４．４］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４５６】
【化１２７】
2020526571.tif 000158
【０４５７】
ステップ１：７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２２Ｂ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［４．４］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０４５８】
【化１２８】
2020526571.tif 000159
【０４５９】
５０ｍＬの反応瓶に、２-Ｂｏｃ-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン（２２Ａ）（４５２ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４００ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１５ｍＬ）を加え、攪拌し溶解させた。-１０℃に冷却し、メチルカルバミド酸クロリド（１８８ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温で３時間反応させた。反応液に３Ｍ希塩酸（５０ｍＬ）を加えた後、ジクロロメタン（６０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、ろ液を減圧濃縮し、７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２２Ｂ）を白色固体（５７０ｍｇ、収率６５．５％）として得た。
【０４６０】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ３．５１-３．１６（ｍ,８Ｈ）,２．８２（ｓ,３Ｈ）,１．９８-１．７４（ｍ,４Ｈ）,１．４６（ｓ,９Ｈ）。
ステップ２：Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボキサミド（２２Ｃ）
Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［４．４］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ
【０４６１】
【化１２９】
2020526571.tif 000160
【０４６２】
５０ｍＬの反応瓶に、７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２２Ｂ）（１６１ｍｇ、０．５６８ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１０ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸（１．２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボキサミド（２２Ｃ）粗製品を淡黄色油状物が得られ、そのまま次の反応に供する。
【０４６３】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２２Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［４．４］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０４６４】
【化１３０】
2020526571.tif 000161
【０４６５】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボキサミド（２２Ｃ）粗製品（８１ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（０．２８８ｇ、１．５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（８１ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、中間体１（３３０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を順次加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝３０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２２Ｄ）を淡黄色固体（４２０ｍｇ、収率９８％）として得た。
【０４６６】
ステップ４：７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物２２）
７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［４．４］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４６７】
【化１３１】
2020526571.tif 000162
【０４６８】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２２Ｄ）（４００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物２２）を白色粉末（１３０ｍｇ、収率３１．５％）として得た。
【０４６９】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３６０．３［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４３-７．１９（ｍ,１０Ｈ）,４．６８-４．６０（ｍ,１Ｈ）,４．５０-４．１９（ｍ,３Ｈ）,３．９３-３．６２（ｍ,２Ｈ）,３．５５-３．２７（ｍ,５Ｈ）,３．２４（ｓ,１Ｈ）,３．１８（ｄ,２Ｈ）,３．０９-２．９４（ｍ,４Ｈ）,２．７４-２．６６（ｍ,３Ｈ）,２．１０-１．８５（ｍ,４Ｈ）,１．８４-１．６２（ｍ,４Ｈ）,１．５９-１．４３（ｍ,４Ｈ）,１．４３-１．２９（ｍ,１Ｈ）,０．９２（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例２１】
【０４７０】
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-４-メチルペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２３）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（１-ｐｉｐｅｒｉｄｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４７１】
【化１３２】
2020526571.tif 000163
【０４７２】
ステップ１：２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２３Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ２-（１-ｐｉｐｅｒｉｄｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０４７３】
【化１３３】
2020526571.tif 000164
【０４７４】
２-オキソ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-ギ酸ｔｅｒｔ-ブチル（０．４８ｇ、２ｍｍｏｌ）、ピペリジン（０．２５ｇ、３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を反応瓶に入れ、３０ｍｉｎ攪拌して、０-５℃に冷却し、シアノ水素化ほう素ナトリウム（０．１３ｇ、４ｍｍｏｌ）を加え、添加完了後室温で４ｈ反応させ、完全に反応したまでにＴＬＣ監視した。ジクロロメタン（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）を加えて５ｍｉｎ攪拌し、静置分層し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２３Ａ）粗製品を淡黄色固体（０．５３ｇ、収率８６％）として得た後、そのまま次のステップに供する。
【０４７５】
ステップ２：２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン トリフルオロ酢酸塩（２３Ｂ）
２-（１-ｐｉｐｅｒｉｄｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ;２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４７６】
【化１３４】
2020526571.tif 000165
【０４７７】
窒素保護で、５０ｍＬの反応瓶に、２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２３Ａ、０．５３ｇ、１．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に加え、攪拌しながらトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、滴下完了後室温で２ｈ反応させた。完全に反応したまでにＴＬＣ監視し、乾燥まで減圧濃縮し、２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン トリフルオロ酢酸塩（２３Ｂ）を淡黄色油状物（０．５０ｇ、収率９０％）として得た後、そのまま次のステップに供する。
【０４７８】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２３Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-（１-ｐｉｐｅｒｉｄｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０４７９】
【化１３５】
2020526571.tif 000166
【０４８０】
窒素保護で、５０ｍＬの反応瓶に、２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン トリフルオロ酢酸塩（２３Ｂ、０．５０ｇ、１．６０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に加えた。氷浴で０℃に冷却し、中間体１（０．５０ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（１９０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１０ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）を加え、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。続いて、反応液に１Ｍ塩酸水溶液（１５ｍＬ）を加え、攪拌して分液した。有機相に飽和炭酸ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）を加え、３０分間攪拌して分液した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２３Ｃ）粗製品を淡黄色泡状固体（０．４５ｇ,収率７２％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０４８１】
ステップ４：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-４-メチルペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２３）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（１-ｐｉｐｅｒｉｄｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０４８２】
【化１３６】
2020526571.tif 000167
【０４８３】
Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２３Ｃ）粗製品（０．４５ｇ,０．４８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（７．５ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（３．５ｍＬ）を加え、室温で１ｈ攪拌した。続いて、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製した後（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（１-ピペリジル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-４-メチルペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２３）を白色固体（２６０ｍｇ,収率５６％）として得た。
【０４８４】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３７２．９［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４８-７．０９（ｍ,１０Ｈ）,４．６８-４．６０（ｍ,１Ｈ）,４．３４-４．１７（ｍ,２Ｈ）,３．７３-３．５２（ｍ,３Ｈ）,３．５２-２．９２（ｍ,１０Ｈ）,２．８０-２．６４（ｍ,２Ｈ）,２．４７-２．２４（ｍ,２Ｈ）,２．０５-１．８８（ｍ,４Ｈ）,１．８８-１．２０（ｍ,１８Ｈ）,１．００-０．８１（ｍ,６Ｈ）。
【実施例２２】
【０４８５】
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン２-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２４）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（７-ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒａｎ-４-ｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ 
【０４８６】
【化１３７】
2020526571.tif 000168
【０４８７】
ステップ１：７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２４Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ７-ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒａｎ-４-ｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０４８８】
【化１３８】
2020526571.tif 000169
【０４８９】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．４］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（０．４５２ｇ,２ｍｍｏｌ）、テトラヒドロ-４Ｈ-ピラン-４-オン（２００ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、酢酸（１２０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びジクロロエタン（７ｍＬ）を加え、０．５ｈ攪拌し、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（０．６３６ｇ、３ｍｍｏｌ）を加え、５ｈ反応させた後、反応液を水（１０ｍＬ）で停止させ、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝４：１）、７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２４Ａ）を淡黄色油状物（５００ｍｇ、収率８０．６４％）として得た。
【０４９０】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３１１．２［Ｍ+Ｈ］+。
【０４９１】
ステップ２：７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（２４Ｂ）
７-ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒａｎ-４-ｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ
【０４９２】
【化１３９】
2020526571.tif 000170
【０４９３】
５０ｍＬの反応瓶に、７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２４Ａ）（０．５ｇ、１．６１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（２４Ｂ）粗製品を淡黄色油状液体（３３８ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０４９４】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２４Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌＮ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（７-ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒａｎ-４-ｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０４９５】
【化１４０】
2020526571.tif 000171
【０４９６】
５０ｍＬのシングルボトルに、７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（２４Ｂ）粗製品（３３８ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３８４ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２７０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、中間体１（４００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２４Ｃ）を白色固体（２００ｍｇ、収率３９．９３％）
【０４９７】
ステップ４：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン２-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２４）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｐｉｐｅｒａｚｉｎ-１-ｙｌ-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ 
【０４９８】
【化１４１】
2020526571.tif 000172
【０４９９】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２４Ｃ）（２００ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（７-テトラヒドロピラン-４-イル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン２-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２４）を白色粉末（１３５ｍｇ、収率８６．１％）として得た。
【０５００】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３７３．９［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４６-７．２９（ｍ,１０Ｈ）,４．７１（ｔ,１Ｈ）,４．２７-４．１６（ｍ,７Ｈ）,３．９３-３．８６（ｍ,２Ｈ）,３．６６-３．５３（ｍ,５Ｈ）,３．２５-３．０５（ｍ,８Ｈ）,２．３４-２．１３（ｍ,６Ｈ）,１．７９-１．４３（ｍ、１１Ｈ）,１．０２-０．９５（ｍ,６Ｈ）。
【実施例２３】
【０５０１】
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル）アミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２５）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎ-１-ｙｌ-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５０２】
【化１４２】
2020526571.tif 000173
【０５０３】
ステップ１：２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-ギ酸ｔｅｒｔ-ブチル（２５Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ２-ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎ-１-ｙｌ-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０５０４】
【化１４３】
2020526571.tif 000174
【０５０５】
５０ｍＬの反応瓶に、２-オキソ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ａ）（１３１ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、酢酸（６６ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、ピロリジン（３９ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（２３３ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を順次加え、滴下完了後室温で６ｈ反応させた。反応液をろ過し、ろ液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３０ｍＬ）で洗浄し、分液して有機層用無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-ギ酸ｔｅｒｔ-ブチル（２５Ａ））を白色粉末（１２０ｍｇ、収率７５％）として得た。
【０５０６】
ステップ２：２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン（２５Ｂ）
２-ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎ-１-ｙｌ-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ
【０５０７】
【化１４４】
2020526571.tif 000175
【０５０８】
５０ｍＬの反応瓶に、（２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-ギ酸ｔｅｒｔ-ブチル（２５Ａ）（１２０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン（２５Ｂ）粗製品を黄色油状液体（８０ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０５０９】
ステップ３：（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル （２５Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（２-ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎ-１-ｙｌ-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０５１０】
【化１４５】
2020526571.tif 000176
【０５１１】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン（２５Ｂ）粗製品（８０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（９６ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（６７．５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、中間体１（３０９ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２５Ｃ）を淡黄色固体（３４４ｍｇ、収率９０％）として得た。
【０５１２】
ステップ４：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル）アミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２５）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎ-１-ｙｌ-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５１３】
【化１４６】
2020526571.tif 000177
【０５１４】
５０ｍＬの反応瓶に、（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２５Ｃ）（３４４ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル）アミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２５）を白色粉末（２４９ｍｇ、収率７０％）として得た。
【０５１５】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３６５．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４３-７．１３（ｍ,１０Ｈ）,４．７１-４．７０（ｍ,１Ｈ）,４．６２（ｔ,１Ｈ）,４．３０-４．１７（ｍ,２Ｈ）,３．８２-３．７４（ｍ,１Ｈ）,３．６８-３．３９（ｍ,５Ｈ）,３．３８-３．２１（ｍ,１Ｈ）,３．１５（ｄ,２Ｈ）,３．０６-２．９０（ｍ,６Ｈ）,２．４３-２．２５（ｍ,２Ｈ）,２．１６-１．８９（ｍ,６Ｈ）,１．７８-１．２７（ｍ,１３Ｈ）,０．８９（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例２４】
【０５１６】
（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピロリジン-２-カルボン酸  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２６）
（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ］ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５１７】
【化１４７】
2020526571.tif 000178
【０５１８】
ステップ１：２-［（２Ｒ）-２-メトキシカルボニルピロリジン-１-イル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-ギ酸ｔｅｒｔ-ブチル ２６Ａ
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ２-［（２Ｒ）-２-ｍｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎ-１-ｙｌ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０５１９】
【化１４８】
2020526571.tif 000179
【０５２０】
５０ｍＬの反応瓶に、２-オキソ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３Ａ）（２８７ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、酢酸（１４４ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）、Ｄ-プロリンメチル（１５４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（２３３ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を順次加え、滴下完了後室温で６ｈ反応させた。反応液をろ過し、ろ液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、分液して有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、２-ピロリジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-ギ酸ｔｅｒｔ-ブチル（２６Ａ））を白色粉末（２７５ｍｇ、収率６５％）として得た。
【０５２１】
ステップ２：（２Ｒ）-１-（７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）ピロリジン-２-カルボン酸メチル（２６Ｂ）
ｍｅｔｈｙｌ（２Ｒ）-１-（７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０５２２】
【化１４９】
2020526571.tif 000180
【０５２３】
５０ｍＬの反応瓶に、２-［（２Ｒ）-２-メトキシカルボニルピロリジン-１-イル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-ギ酸ｔｅｒｔ-ブチル ２６Ａ（２７５ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、（２Ｒ）-１-（７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）ピロリジン-２-カルボン酸メチル（２６Ｂ）を黄色油状液体（１９６ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０５２４】
ステップ３：（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル）アミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピロリジン-２-カルボン酸メチル（２６Ｃ）
Ｍｅｔｈｙｌ（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ］ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０５２５】
【化１５０】
2020526571.tif 000181
【０５２６】
５０ｍＬのシングルボトルに、（２Ｒ）-１-（７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）ピロリジン-２-カルボン酸メチル ２６Ｂ（１９６ｍｇ,０．７８ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（１８０ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１２７ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）、中間体１（５８７ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル）アミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピロリジン-２-カルボン酸メチル（２６Ｃ）を白色固体（３８５ｍｇ、収率５０％）として得た。
【０５２７】
ステップ４：（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル）アミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピロリジン-２-カルボン酸（２６Ｄ）
（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ］ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ
【０５２８】
【化１５１】
2020526571.tif 000182
【０５２９】
室温で、（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル）アミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピロリジン-２-カルボン酸メチル２６Ｃ（３８５ｍｇ,０．３９ｍｍｏｌ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解させ、水酸化ナトリウム（１６ｍｇ,０．４ｍｍｏｌ）の水溶液（１０ｍＬ）を反応液に加え、室温で５ｈ反応させた。１Ｍ塩酸水溶液で反応液をｐＨ<４になるように調整し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出し、分液した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル）アミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピロリジン-２-カルボン酸（２６Ｄ）を白色固体（３４５ｍｇ、収率９３％）として得た。
【０５３０】
ステップ５：（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピロリジン-２-カルボン酸  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２６）
（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ］ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５３１】
【化１５２】
2020526571.tif 000183
【０５３２】
５０ｍＬの反応瓶に、（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル）アミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピロリジン-２-カルボン酸（２６Ｄ）（３４５ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピロリジン-２-カルボン酸  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２６）を白色粉末（２４０ｍｇ、収率６０％）として得た。
【０５３３】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３８７．８［Ｍ+２Ｈ］+ ／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４４-７．０９（ｍ,１０Ｈ）,４．２７-４．１９（ｍ,３Ｈ）,３．９６-３．８４（ｍ,２Ｈ）,３．６７-３．５０（ｍ,３Ｈ）,３．４８-３．２１（ｍ,３Ｈ）,３．１９-２．８９（ｍ,７Ｈ）,２．５０-２．２２（ｍ,３Ｈ）,２．１８-１．９１（ｍ,５Ｈ）,１．７８-１．２４（ｍ,１３Ｈ）,０．８８（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例２５】
【０５３４】
２-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチルペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２７）
２-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５３５】
【化１５３】
2020526571.tif 000184
【０５３６】
ステップ１：７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ-［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２７Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０５３７】
【化１５４】
2020526571.tif 000185
【０５３８】
窒素保護で、２-ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（０．４５ｇ、２ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１０ｍＬ）及びトリエチルアミン（０．３０ｇ、３ｍｍｏｌ）を反応瓶に加え、０-５℃に冷却し、メチルカルバミド酸クロリド（０．２０ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を滴入し、滴入完了後冷却を外し、室温に昇温し１ｈ反応させた。完全に反応したまでにＴＬＣ監視し、ジクロロメタン（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）を加え、５ ｍｉｎ攪拌した後、静置分層し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン／メタノール＝（ｖ／ｖ）２０／１）、７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ-［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２７Ａ）を淡黄色油状物（０．４８ｇ、収率８５％）として得た。
【０５３９】
ステップ２：Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミドトリフルオロ酢酸塩（２７Ｂ）
Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ;２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５４０】
【化１５５】
2020526571.tif 000186
【０５４１】
窒素保護で、５０ｍＬの反応瓶に、７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ-［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２７Ａ、０．４８ｇ、１．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に加え、攪拌しながらトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、滴下完了後室温で２ｈ反応させた。完全に反応したまでにＴＬＣ監視し、乾燥まで減圧濃縮し、Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミドトリフルオロ酢酸塩（２７Ｂ）を淡黄色油状物（０．４９ｇ、収率９７％）として得た後、そのまま次のステップに供する。
【０５４２】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２７Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［７-（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０５４３】
【化１５６】
2020526571.tif 000187
【０５４４】
窒素保護で、５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミドトリフルオロ酢酸塩（２７Ｂ）粗製品（０．４８ｇ、２．６０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に加えた。氷浴で０℃に冷却し、中間体１（０．５０ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（２００ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１２５ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を加え、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。続いて、反応液に１Ｍ塩酸水溶液（１５ｍＬ）を加え、攪拌して分液した。有機相に飽和炭酸ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）を加え、３０分間攪拌して分液した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２７Ｃ）粗製品を淡黄色泡状固体（０．５ｇ,収率８０％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０５４５】
ステップ４：２-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチルペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２７）
２-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５４６】
【化１５７】
2020526571.tif 000188
【０５４７】
Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２７Ｃ）粗製品（０．５ｇ,０．５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（７．５ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（３．５ｍＬ）を加え、室温で１ｈ攪拌した。続いて、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製した後（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、フリーズドライし、２-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチルペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２７）を白色固体（２２０ｍｇ,収率４０％）として得た。
【０５４８】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３６０．３［Ｍ+１Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４５-７．１６（ｍ,１０Ｈ）,４．６６-４．５７（ｍ,１Ｈ）,４．３２-４．１９（ｍ,２Ｈ）,４．１９-３．９９（ｍ,３Ｈ）,３．８３-３．６６（ｍ,２Ｈ）,３．４０-３．２２（ｍ,４Ｈ）,３．２２-３．１２（ｍ,２Ｈ）,３．０６-２．９９（ｍ,４Ｈ）,２．６９（ｓ,３Ｈ）,１．８０-１．６２（ｍ,８Ｈ）,１．５８-１．２７（ｍ,５Ｈ）,１．０３-０．７９（ｍ,６Ｈ）。
【実施例２６】
【０５４９】
７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物２８）
７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５５０】
【化１５８】
2020526571.tif 000189
【０５５１】
ステップ１：５,５-ジフルオロ-２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（２８Ａ）
ｂｅｎｚｙｌ ５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２-（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０５５２】
【化１５９】
2020526571.tif 000190
【０５５３】
５０ｍＬの反応瓶に、５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸エチルベンジル（１６Ｃ）（３３０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３６４ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、攪拌し溶解させた。-１０℃に冷却し、メチルカルバミド酸クロリド（１０４ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温で３時間反応させた。反応液に３Ｍ希塩酸（５０ｍＬ）を加え、ジクロロメタン（６０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、ろ液を減圧濃縮し、５,５-ジフルオロ-２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（２８Ａ）を白色固体（２６８ｍｇ、収率６８．６％）として得た。
【０５５４】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５４．１［Ｍ+Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ７．４１-７．２８（ｍ,５Ｈ）,５．１４（ｓ,２Ｈ）,４．０９（ｄ,２Ｈ）,３．６５（ｄｄ,４Ｈ）,３．５１-３．４４（ｍ,２Ｈ）,２．７９（ｓ,３Ｈ）,２．０１（ｓ,２Ｈ）。
【０５５５】
ステップ２：５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド（２８Ｂ）
５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ
【０５５６】
【化１６０】
2020526571.tif 000191
【０５５７】
５０ｍＬの反応瓶に、５,５-ジフルオロ-２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（２８Ａ）（２６９ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（５４ｍｇ、２０ｗｔ％）及びメタノール（５ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で３ｈ反応させた。その後、反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド（２８Ｂ）粗製品を淡黄色油状物（１６４ｍｇ、収率９８．５５％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０５５８】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２２０．２［Ｍ+Ｈ］+;
【０５５９】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［５,５-ジフルオロ-２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２８Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２-（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０５６０】
【化１６１】
2020526571.tif 000192
【０５６１】
５０ｍＬの反応瓶に、５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド（２８Ｂ）粗製品（１６４ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（０．３７４ｇ、１．９５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１０ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、中間体１（５６５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を順次加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［５,５-ジフルオロ-２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２８Ｃ）を淡黄色固体（６００ｍｇ、収率８４％）として得た。
【０５６２】
ステップ４：７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物２８）
７-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ;ｄｉｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５６３】
【化１６２】
2020526571.tif 000193
【０５６４】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［５,５-ジフルオロ-２-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２８Ｃ）（６００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、７-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物２８）を白色粉末（１００ｍｇ、収率１３％）として得た。
【０５６５】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：７５５．５［Ｍ+Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４３-７．１８（ｍ,１０Ｈ）,４．８６-４．７５（ｍ,１Ｈ）,４．６５（ｔ,１Ｈ）,４．３９-４．１７（ｍ,２Ｈ）,４．１５-４．０５（ｍ,２Ｈ）,４．０４-３．４５（ｍ,６Ｈ）,３．２４-３．１０（ｍ,２Ｈ）,３．１０-２．９０（ｍ,４Ｈ）,２．７７-２．６０（ｍ,３Ｈ）,２．０６（ｄ,２Ｈ）,１．８５-１．６１（ｍ,４Ｈ）,１．６０-１．４６（ｍ,３Ｈ）,１．４５-１．２７（ｍ,２Ｈ）,０．９２（ｄｔ,６Ｈ）。
【実施例２７】
【０５６６】
２-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２９）
２-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ ｄｉｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５６７】
【化１６３】
2020526571.tif 000194
【０５６８】
ステップ１：５,５-ジフルオロ-７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２９Ｂ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-７-（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０５６９】
【化１６４】
2020526571.tif 000195
【０５７０】
５０ｍＬの反応瓶に、５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸エチルベンジル（１６Ｃ）（１１３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、攪拌し溶解させた。-１０℃に冷却し、メチルカルバミド酸クロリド（４２ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温で３時間反応させた。反応液に０．３Ｍ希塩酸（１０ｍＬ）を加えた後、ジクロロメタン（５ｍＬ×２）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、ろ液を減圧濃縮し、５,５-ジフルオロ-７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２９Ｂ）を白色固体（９６ｍｇ、収率７０％）として得た。
【０５７１】
ステップ２：５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミド（２９Ｃ）
５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ
【０５７２】
【化１６５】
2020526571.tif 000196
【０５７３】
５０ｍＬの反応瓶に、５,５-ジフルオロ-７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２９Ｂ）（９６ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（８ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミド（２９Ｃ）を黄色油状液体（６６ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０５７４】
ステップ３：（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［５,５-ジフルオロ-７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２９Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-７-（ｍｅｔｈｙｌｃａｒｂａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０５７５】
【化１６６】
2020526571.tif 000197
【０５７６】
５０ｍＬのシングルボトルに、５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミド（２９Ｃ）（６６ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（２３９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（４９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、中間体１（２２６ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［５,５-ジフルオロ-７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２９Ｄ）を白色固体（２８６ｍｇ、収率９０％）として得た。
【０５７７】
ステップ４：２-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２９）
２-［（２Ｒ）-６-ａｍｉｎｏ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-Ｎ-ｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ ｄｉｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５７８】
【化１６７】
2020526571.tif 000198
【０５７９】
５０ｍＬの反応瓶に、（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［５,５-ジフルオロ-７-（メチルカルバモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（２９Ｄ）（２８６ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、２-［（２Ｒ）-６-アミノ-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-５,５-ジフルオロ-Ｎ-メチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボキサミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物２９）を白色粉末（１９２ｍｇ、収率６５％）として得た。
【０５８０】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３７８．３［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４６-７．１２（ｍ,１０Ｈ）,４．６４-４．５８（ｍ,１Ｈ）,４．５３-４．４３（ｍ,１Ｈ）,４．２６-４．１９（ｍ,２Ｈ）,４．１７-４．０２（ｍ,３Ｈ）,３．８０-３．７６（ｍ,１Ｈ）,３．７２-３．５７（ｍ,２Ｈ）,３．３６（ｓ,２Ｈ）,３．１９-３．１１（ｍ,２Ｈ）,３．０３-２．９５（ｍ,４Ｈ）,２．６８（ｓ,３Ｈ）,２．０３-１．９９（ｍ,２Ｈ）,１．７５-１．６３（ｍ,４Ｈ）,１．５４-１．２６（ｍ,５Ｈ）,０．８９（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例２８】
【０５８１】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３０）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．４］ｏｃｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-ａｍｉｎｏ-ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５８２】
【化１６８】
2020526571.tif 000199
【０５８３】
ステップ１：７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３０Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．４］ｏｃｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０５８４】
【化１６９】
2020526571.tif 000200
【０５８５】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（Ａ）（０．４１４ｇ,２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４２０ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加え、攪拌し溶解させた。-１０℃に冷却し、塩化アセチル（１８８ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を滴下し、１０ｍｉｎ反応させた。その後、室温に昇温し３ｈ攪拌した後、反応系を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）で停止させ、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝４：１）、７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３０Ａ）を淡黄色油状物（４１１ｍｇ、収率８１％）として得た。
【０５８６】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２５５．２［Ｍ+Ｈ］+。
【０５８７】
ステップ２：７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン（３０Ｂ）
７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．４］ｏｃｔａｎｅ
【０５８８】
【化１７０】
2020526571.tif 000201
【０５８９】
５０ｍＬの反応瓶に、７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３０Ａ）（０．４１ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン（３０Ｂ）粗製品を淡黄色油状液体（２４９ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０５９０】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル）-５（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３０Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．４］ｏｃｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０５９１】
【化１７１】
2020526571.tif 000202
【０５９２】
５０ｍＬのシングルボトルに、７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン（３０Ｂ）粗製品（２４９ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３８４ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２７０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、中間体１（４００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル）-５（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３０Ｃ）を白色固体（２００ｍｇ、収率４２．３％）として得た。
【０５９３】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３０）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．４］ｏｃｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-ａｍｉｎｏ-ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５９４】
【化１７２】
2020526571.tif 000203
【０５９５】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル）-５（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３０Ｃ）（２００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３０）を白色粉末（１２０ｍｇ、収率７９．１％）として得た。
【０５９６】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３４５．９［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４５-７．２９（ｍ,１０Ｈ）,４．７１（ｔ,１Ｈ）,４．３７-４．２（ｍ,５Ｈ）,４．０５-４．００（ｍ,２Ｈ）,３．８２-３．５２（ｍ,４Ｈ）,３．２６-３．０５（ｍ,６Ｈ）,２．３２-２．１１（ｍ,５Ｈ）,１．８-１．７６（ｍ,４Ｈ）,１．６１-１．４５（ｍ,５Ｈ）,１．０２-０．９６（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例２９】
【０５９７】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３１）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［４．４］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-ａｍｉｎｏ-ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０５９８】
【化１７３】
2020526571.tif 000204
【０５９９】
ステップ１：７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３１Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［４．４］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０６００】
【化１７４】
2020526571.tif 000205
【０６０１】
５０ｍＬの反応瓶に、２-Ｂｏｃ-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン（２２Ａ）（４５２ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４００ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１５ｍＬ）を加え、攪拌し溶解させた。-１０℃に冷却し、塩化アセチル（１６０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温で４時間反応させた。反応液に１Ｍ希塩酸（５０ｍＬ）を加え、ジクロロメタン（６０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、ろ液を減圧濃縮し、７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３１Ａ）を淡黄色油状物（３９２ｍｇ、収率７３％）として得た。
【０６０２】
ＭＳ ｍ／ｚ＝２９１．２［Ｍ+Ｎａ］+。
【０６０３】
ステップ２：１-（２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-イル）エタノン（３１Ｂ）
１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［４．４］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）ｅｔｈａｎｏｎｅ
【０６０４】
【化１７５】
2020526571.tif 000206
【０６０５】
５０ｍＬの反応瓶に、７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３１Ａ）（１６１ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１０ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、１-（２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-イル）エタノン（３１Ｂ）粗製品を淡黄色油状物（１００ｍｇ、収率９９％）として得た。
【０６０６】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３１Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［４．４］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０６０７】
【化１７６】
2020526571.tif 000207
【０６０８】
５０ｍＬの反応瓶に、１-（２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-イル）エタノン（３１Ｂ）粗製品（１００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（０．２８８ｇ、１．５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（８１ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、中間体１（４００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を順次加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝３０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３１Ｃ）を淡黄色固体（１２０ｍｇ、収率２２％）として得た。
【０６０９】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３１）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［４．４］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-ａｍｉｎｏ-ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６１０】
【化１７７】
2020526571.tif 000208
【０６１１】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３１Ｃ）（１２０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［４．４］ノナン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３１）を白色粉末（７７ｍｇ、収率８５％）として得た。
【０６１２】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５２．７［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４３-７．１８（ｍ,１０Ｈ）,４．６８-４．６０（ｍ,１Ｈ）,４．４７-４．１９（ｍ,３Ｈ）,３．９１-３．２７（ｍ,８Ｈ）,３．１８（ｄ,２Ｈ）,３．０８-２．９２（ｍ,４Ｈ）,２．１３-１．８６（ｍ,７Ｈ）,１．８５-１．６３（ｍ,４Ｈ）,１．６２-１．２７（ｍ,５Ｈ）,０．９２（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例３０】
【０６１３】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３２）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-ａｍｉｎｏ-ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６１４】
【化１７８】
2020526571.tif 000209
【０６１５】
ステップ１：Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３２Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０６１６】
【化１７９】
2020526571.tif 000210
【０６１７】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（１９Ｂ）（４３０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（０．１８ｇ、０．９４ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（７１ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）、酢酸（２８．８ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を順次加え、室温で３ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３２Ａ）を白色固体（４３０ｍｇ、収率９５％）として得た。
【０６１８】
ステップ２：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３２）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-ａｃｅｔｙｌ-５,５-ｄｉｆｌｕｏｒｏ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-ａｍｉｎｏ-ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６１９】
【化１８０】
2020526571.tif 000211
【０６２０】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３２Ａ）（４３０ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-５,５-ジフルオロ-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル）-５-アミノ-ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３２）を白色粉末（２７３ｍｇ、収率６１％）として得た。
【０６２１】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３７０．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４３-７．１９（ｍ,１０Ｈ）,４．６７-４．６０（ｍ,１Ｈ）,４．５８-４．４７（ｍ,１Ｈ）,４．３１-４．０８（ｍ,５Ｈ）,３．９８-３．７０（ｍ,３Ｈ）,３．７０-３．４３（ｍ,２Ｈ）,３．１８（ｄ,２Ｈ）,３．０６-２．９４（ｍ,４Ｈ）,２．２３-１．９４（ｍ,５Ｈ）,１．８０-１．６３（ｍ,４Ｈ）,１．５６-１．２９（ｍ,５Ｈ）,０．９１（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例３１】
【０６２２】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）（化合物３３）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-（ｏｘｅｔａｎ-３-ｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６２３】
【化１８１】
2020526571.tif 000212
【０６２４】
ステップ１：７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３３Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-（ｏｘｅｔａｎ-３-ｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０６２５】
【化１８２】
2020526571.tif 000213
【０６２６】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（０．４５２ｇ、２．０ｍｍｏｌ）、酢酸（０．２４ｇ、４．０ｍｍｏｌ）、オキセタン-３-オン（０．２８８ｇ、４．０ｍｍｏｌ）、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（１．４８ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を順次加え、滴下完了後室温で１６ｈ反応させた。反応液をろ過し、ろ液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、分液して有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３３Ａ）を白色粉末（４３２ｍｇ、収率７６％）として得た。
【０６２７】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ４．６７-４．５５（ｍ,４Ｈ）,３．６１（ｓ,４Ｈ）,３．４１（ｐ,１Ｈ）,２．１９（ｓ,４Ｈ）,１．７８（ｔ,４Ｈ）,１．４４（ｓ,９Ｈ）。
ステップ２：７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（３３Ｂ）
７-（ｏｘｅｔａｎ-３-ｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ
【０６２８】
【化１８３】
2020526571.tif 000214
【０６２９】
５０ｍＬの反応瓶に、７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３３Ａ）（０．１４ｇ、０．５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（５７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（３３Ｂ）粗製品を黄色油状液体（７０．５ｍｇ、収率８８％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０６３０】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３３Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［７-（ｏｘｅｔａｎ-３-ｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０６３１】
【化１８４】
2020526571.tif 000215
【０６３２】
１００ｍＬの反応瓶に、７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン（３３Ｂ）粗製品（７０．５ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（２８８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（８１ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、中間体１（３３０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３３Ｃ）を淡黄色固体（４００ｍｇ、収率９９％）として得た。
【０６３３】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）（化合物３３）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-（ｏｘｅｔａｎ-３-ｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６３４】
【化１８５】
2020526571.tif 000216
【０６３５】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３３Ｃ）（４００ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。その後、反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-（オキセタン-３-イル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）（化合物３３）を白色粉末（１６０ｍｇ、収率５６％）として得た。
【０６３６】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５９．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４２-７．２０（ｍ,１０Ｈ）,４．９６（ｔ,２Ｈ）,４．８５（ｄｄ,２Ｈ）,４．６６-４．５６（ｍ,２Ｈ）,４．４８-４．３５（ｍ,２Ｈ）,４．３０-４．１０（ｍ,５Ｈ）,３．８４（ｓ,２Ｈ）,３．４３（ｂｒ,１Ｈ）,３．１７（ｄ,２Ｈ）,３．１４（ｓ,１Ｈ）,３．０７-２．９３（ｍ,４Ｈ）,２．１２（ｂｒ,４Ｈ）,１．８０-１．６０（ｍ,４Ｈ）,１．５８-１．２９（ｍ,５Ｈ）,０．９１（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例３２】
【０６３７】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３４）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６３８】
【化１８６】
2020526571.tif 000217
【０６３９】
ステップ１：７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３４Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０６４０】
【化１８７】
2020526571.tif 000218
【０６４１】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（０．４５２ｇ、２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４００ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１５ｍＬ）を加え、攪拌し溶解させた。-１０℃に冷却し、ジメチルスルファモイルクロリド（２８７ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下完了後室温で３時間反応させた。反応液に３Ｍ希塩酸（５０ｍＬ）を加えた後、ジクロロメタン（６０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、ろ液を減圧濃縮し、７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３４Ａ）粗製品を淡黄色固体（４４０ｍｇ、収率６６％）として得た。
【０６４２】
ステップ２：Ｎ,Ｎ-ジメチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-スルホンアミド（３４Ｂ）
Ｎ,Ｎ-ｄｉｍｅｔｈｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅ
【０６４３】
【化１８８】
2020526571.tif 000219
【０６４４】
５０ｍＬの反応瓶に、７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３４Ａ）粗製品（０．２２ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、Ｎ,Ｎ-ジメチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-スルホンアミド（３４Ｂ）粗製品を黄色油状液体（１０３ｍｇ、収率７６％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０６４５】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３４Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［７-（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０６４６】
【化１８９】
2020526571.tif 000220
【０６４７】
１００ｍＬの反応瓶に、Ｎ,Ｎ-ジメチル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-スルホンアミド（３４Ｂ）粗製品（１０３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（２８８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（８１ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、中間体１（３３０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３４Ｃ）を淡黄色固体（２４０ｍｇ、収率５６％）として得た。
【０６４８】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３４）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６４９】
【化１９０】
2020526571.tif 000221
【０６５０】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３４Ｃ）（４００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３４）を白色粉末（１３０ｍｇ、収率２９％）として得た。
【０６５１】
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３８５．３［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４６-７．２９（ｍ,６Ｈ）,７．２９-７．１８（ｍ,４Ｈ）,４．６５（ｔ,１Ｈ）,４．３２-３．９９（ｍ,５Ｈ）,３．８５-３．６８（ｍ,２Ｈ）,３．３５-３．１１（ｍ,６Ｈ）,３．１１-２．９２（ｍ,４Ｈ）,２．８１（ｄ,６Ｈ）,１．９６-１．７９（ｍ,４Ｈ）,１．７１（ｄｄ,４Ｈ）,１．６０-１．３２（ｍ,５Ｈ）,０．９３（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例３３】
【０６５２】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３５）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．４］ｏｃｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６５３】
【化１９１】
2020526571.tif 000222
【０６５４】
ステップ１：７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３５Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．４］ｏｃｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０６５５】
【化１９２】
2020526571.tif 000223
【０６５６】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（Ａ）（０．４１４ｇ,２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４２０ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加え、攪拌し溶解させた。-１０℃に冷却し、ジメチルスルファモイルクロリド（３４３ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を滴下し、１０分間反応させた。その後、室温に昇温し３ｈ攪拌し、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）で停止させ、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝４：１）、７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３５Ａ）を淡黄色油状物（４１４ｍｇ、収率０．６５％）として得た。
【０６５７】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３２０．２［Ｍ+Ｈ］+;
【０６５８】
ステップ２：７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン（３５Ｂ）
７-（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．４］ｏｃｔａｎｅ
【０６５９】
【化１９３】
2020526571.tif 000224
【０６６０】
５０ｍＬの反応瓶に、７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３５Ａ）（０．４１ｇ、１．３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン（３５Ｂ）粗製品を淡黄色油状液体（２８４ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０６６１】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-ジメチルスルファモイル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル）-５（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３５Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｍｏｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．４］ｏｃｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０６６２】
【化１９４】
2020526571.tif 000225
【０６６３】
５０ｍＬのシングルボトルに、７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン（３５Ｂ）粗製品（２８４ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３８４ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２７０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、中間体１（４００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル）-５（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３５Ｃ）を白色固体（２０１ｍｇ、収率３９．７％）として得た。
【０６６４】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３５）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆａｍｏｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．４］ｏｃｔａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６６５】
【化１９５】
2020526571.tif 000226
【０６６６】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-（７-アセチル-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル）-５（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３５Ｃ）（２０１ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（７-（ジメチルスルファモイル）-２,７-ジアザスピロ［３．４］オクタン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３５）を白色粉末（１１５ｍｇ、収率８９．７％）として得た。
【０６６７】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３７８．３［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４６-７．２９（ｍ,１０Ｈ）,４．７１（ｔ,１Ｈ）,４．３８-４．２１（ｍ,５Ｈ）,４．０７-４．０５（ｍ,２Ｈ）,３．６０-３．４６（ｍ,４Ｈ）,３．２３-３．０５（ｍ,６Ｈ）,２．９-２．８９（ｄ,６Ｈ）,２．３２-２．２６（ｍ、２Ｈ）１．８-１．５９（ｍ,９Ｈ）,１．０２-０．９６（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例３４】
【０６６８】
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-ピペラジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  テトラ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３６）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｐｉｐｅｒａｚｉｎ-１-ｙｌ-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｅｔｒａ -ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６６９】
【化１９６】
2020526571.tif 000227
【０６７０】
ステップ１：２-（４-ベンジルオキシカルボニルピペラジン-１-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３６Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ２-（４-ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌｐｉｐｅｒａｚｉｎ-１-ｙｌ）-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０６７１】
【化１９７】
2020526571.tif 000228
【０６７２】
５０ｍＬの反応瓶に、２-オキソ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（Ｃ）（０．４７８ｇ,２ｍｍｏｌ）、１-ピペラジンカルボン酸ベンジル（４４０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、酢酸（１２０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びジクロロエタン（７ｍＬ）を加え、半時間攪拌し、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（０．６３６ｇ、３ｍｍｏｌ）を加え、５ｈ反応させ、反応系を水（１０ｍＬ）で停止させ、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝４：１）、２-（４-ベンジルオキシカルボニルピペラジン-１-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３６Ａ）を淡黄色油状物（４５０ｍｇ、収率５０．７９％）として得た。
【０６７３】
ＭＳ ｍ／ｚ＝４４４．２［Ｍ+Ｈ］+;
ステップ２：４-（７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）ピペラジン-１-カルボン酸ベンジル（３６Ｂ）
ｂｅｎｚｙｌ ４-（７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０６７４】
【化１９８】
2020526571.tif 000229
【０６７５】
５０ｍＬの反応瓶に、２-（４-ベンジルオキシカルボニルピペラジン-１-イル）-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３６Ａ）（０．４５ｇ、１．２０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、４-（７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）ピペラジン-１-カルボン酸ベンジル（３６Ｂ）粗製品を淡黄色油状液体（４１１ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０６７６】
ステップ３：４-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチルペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピペラジン-１-カルボン酸ベンジル（３６Ｃ）
ｂｅｎｚｙｌ４-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｈｅｘａｎｏｙｌ］-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ］ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ-１-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０６７７】
【化１９９】
2020526571.tif 000230
【０６７８】
５０ｍＬのシングルボトルに、４-（７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）ピペラジン-１-カルボン酸ベンジル（３６Ｂ）粗製品（４１１ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３８４ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２７０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、中間体１（４００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、４-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチルペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピペラジン-１-カルボン酸ベンジル（３６Ｃ）を白色固体（３００ｍｇ、収率５２．４％）として得た。
【０６７９】
ステップ４：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-ピペラジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３６Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（２-ｐｉｐｅｒａｚｉｎ-１-ｙｌ-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０６８０】
【化２００】
2020526571.tif 000231
【０６８１】
５０ｍＬの反応瓶に、４-［７-［（２Ｒ）-６-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチルペンタノイル］アミノ］ヘキサノイル］-７-アザスピロ［３．５］ノナン-２-イル］ピペラジン-１-カルボン酸ベンジル（３６Ｃ）（３００ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）及びメタノール（５ｍＬ）、Ｐｄ／Ｃ（３０ｍｇ）を加え、水素の雰囲気において室温で４ｈ反応させた。反応液を珪藻土にろ過し、減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-ピペラジン-１-ｙｌ-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３６Ｄ）（２５５ｍｇ、１００％）として得た後、そのまま次のステップに供する。
【０６８２】
ステップ５：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-ピペラジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  テトラ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３６）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｐｉｐｅｒａｚｉｎ-１-ｙｌ-７-ａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｅｔｒａ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６８３】
【化２０１】
2020526571.tif 000232
【０６８４】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-ピペラジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３６Ｄ）粗製品（２５５ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-ピペラジン-１-イル-７-アザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  テトラ（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３６）を白色粉末（１６０ｍｇ、収率７７．６％）として得た。
【０６８５】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３７３．４［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４７-７．３０（ｍ,１０Ｈ）,４．７１（ｔ,１Ｈ）,４．３６-４．２９（ｍ,２Ｈ）,３．９０-３．８６（ｍ,１Ｈ）,３．８５-３．２４（ｍ,１２Ｈ）,３．２３-３．０４（ｍ,６Ｈ）,２．５２-２．４４（ｍ,２Ｈ）,２．１４-２．１２（ｍ,２Ｈ）,１．７７-１．４７（ｍ、１４Ｈ）,１．０３-０．９６（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例３５】
【０６８６】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３７）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０６８７】
【化２０２】
2020526571.tif 000233
【０６８８】
ステップ１：７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３７Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-［（２Ｒ）-２-（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０６８９】
【化２０３】
2020526571.tif 000234
【０６９０】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（８３ｍｇ,０．３５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（８０ｍｇ,０．４２ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（５７ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパン酸（１０５ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３７Ａ）を白色固体（１７７ｍｇ、収率８０％）として得た。
【０６９１】
ステップ２：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ベンジル（３７Ｂ）
Ｂｅｎｚｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-７-ｙｌ）-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０６９２】
【化２０４】
2020526571.tif 000235
【０６９３】
５０ｍＬの反応瓶に、７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３７Ａ）（１７７ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ベンジル （３７Ｂ）を黄色油状液体（１４３ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０６９４】
ステップ３：Ｎ-（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３７Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０６９５】
【化２０５】
2020526571.tif 000236
【０６９６】
５０ｍＬのシングルボトルに、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ベンジル（３７Ｂ）（１４３ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（８０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（５７ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、中間体１（２６４ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３７Ｃ）を白色固体（４００ｍｇ、収率９９％）として得た。
【０６９７】
ステップ４：Ｎ-（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３７Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０６９８】
【化２０６】
2020526571.tif 000237
【０６９９】
５０ｍＬのシングルボトルに、（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル３７Ｃ（４００ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（８０ｍｇ、２０ｗｔ％ｌ）及びメタノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で３ｈ反応させた。反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３７Ｄ）粗製品を淡黄色固体（３５３ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０７００】
ステップ５：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３７）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７０１】
【化２０７】
2020526571.tif 000238
【０７０２】
５０ｍＬの反応瓶に、（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３７Ｄ）（３５３ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３７）を白色粉末（２８２ｍｇ、収率７０％）として得た。
【０７０３】
ＭＳ ｍ／ｚ＝４０５．３［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．５２-７．０９（ｍ,１５Ｈ）,４．７８-４．７４（ｍ,１Ｈ）,４．６４-４．５８（ｍ,１Ｈ）,４．２６-４．１９（ｍ,２Ｈ）,４．１５-３．９６（ｍ,３Ｈ）,３．８３（ｄ,１Ｈ）,３．７１-３．６３（ｍ,１Ｈ）,３．５９-３．５０（ｍ,１Ｈ）３．４３-２．９０（ｍ,１１Ｈ）,１．９０-１．１８（ｍ,１３Ｈ）,０．９８-０．８０（ｍ,６Ｈ）。
【実施例３６】
【０７０４】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３８）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７０５】
【化２０８】
2020526571.tif 000239
【０７０６】
ステップ１：７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３８Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-［（２Ｒ）-２-（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０７０７】
【化２０９】
2020526571.tif 000240
【０７０８】
５０ｍＬの反応瓶に、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（９３ｍｇ,０．４１ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（９４ｍｇ,０．４９ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（６６ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）プロパン酸（４４６ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３８Ａ）を白色固体（１７５ｍｇ、収率９０％）として得た。
【０７０９】
ステップ２：Ｎ-［（１Ｒ）-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）-３-メチル-ブチル］カルバミン酸ベンジル（３８Ｂ）
Ｂｅｎｚｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０７１０】
【化２１０】
2020526571.tif 000241
【０７１１】
５０ｍＬの反応瓶に、７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３８Ａ）（１７５ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２０ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）-３-メチル-ブチル］カルバミン酸ベンジル（３８Ｂ）を黄色油状液体（１３８ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０７１２】
ステップ３：Ｎ-（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３８Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０７１３】
【化２１１】
2020526571.tif 000242
【０７１４】
５０ｍＬのシングルボトルに、Ｎ-［（１Ｒ）-１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）-３-メチル-ブチル］カルバミン酸ベンジル（３８Ｂ）（１３８ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（８４ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（５９ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、中間体１（２７９ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニルアミノ）-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３８Ｃ）を白色固体（３６６ｍｇ、収率９０％）として得た。
【０７１５】
ステップ４：Ｎ-（１Ｒ）-２-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３８Ｄ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０７１６】
【化２１２】
2020526571.tif 000243
【０７１７】
５０ｍＬのシングルボトルに、（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-（ベンジルオキシカルボニル）-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３８Ｃ）（３６６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（７３ｍｇ、２０ｗｔ％ｌ）及びメタノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で３ｈ反応させた。反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、（１Ｒ）-２-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３８Ｄ）粗製品を淡黄色固体（３２２ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０７１８】
ステップ５：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３８）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７１９】
【化２１３】
2020526571.tif 000244
【０７２０】
５０ｍＬの反応瓶に、（１Ｒ）-２-［（１Ｒ）-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］アミノ］-１-ベンジル-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３８Ｄ）（３２２ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-［（２Ｒ）-２-アミノ-４-メチル-ペンタノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）塩（化合物３８）を白色粉末（２４０ｍｇ、収率６５％）として得た。
【０７２１】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３８８．３［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４４-７．１４（ｍ,１０Ｈ）,４．６１（ｔ,１Ｈ）,４．５０-４．４２（ｍ,１Ｈ）,４．２８-４．０２（ｍ,５Ｈ）,３．８３-３．７０（ｍ,２Ｈ）,３．６６-３．３６（ｍ,４Ｈ）,３．１４（ｔ,２Ｈ）,２．９７（ｔ,４Ｈ）,１．９４-１．６４（ｍ,１０Ｈ）,１．５４-１．３０（ｍ,６Ｈ）,１．０１-０．８１（ｍ,１２Ｈ）。
【実施例３７】
【０７２２】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３９）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７２３】
【化２１４】
2020526571.tif 000245
【０７２４】
ステップ１：２-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（３９Ａ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０７２５】
【化２１５】
2020526571.tif 000246
【０７２６】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（３９０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（７６０ｍｇ、４．９ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（３００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、シクロプロパンカルボン酸（１７２ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、２-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（３９Ａ）を淡黄色油状物（３２０ｍｇ、収率６５％）として得た。
【０７２７】
ステップ２：シクロプロピル（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）メタノン（３９Ｂ）
ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ
【０７２８】
【化２１６】
2020526571.tif 000247
【０７２９】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（３９Ａ）（３２０ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（６４ｍｇ、２０ｗｔ％ｌ）及びメタノール（１０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で３ｈ反応させた。反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、シクロプロピル（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）メタノン（３９Ｂ）粗製品を淡黄色固体（１８９ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０７３０】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３９Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０７３１】
【化２１７】
2020526571.tif 000248
【０７３２】
５０ｍＬのシングルボトルに、シクロプロピル（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）メタノン（３９Ｂ）粗製品（１８９ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（２１６ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１２２ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）、中間体１（５６５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３９Ｃ）を淡黄色固体（４１０ｍｇ、収率４５％）として得た。
【０７３３】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３９）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７３４】
【化２１８】
2020526571.tif 000249
【０７３５】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（３９Ｃ）（４１０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミドジ（トリフルオロ酢酸）（化合物３９）を白色粉末（３３０ｍｇ、収率７８％）として得た。
【０７３６】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３６５．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４５-７．１８（ｍ,１０Ｈ）,４．６６（ｔ,１Ｈ）,４．２６（ｄｔ,２Ｈ）,４．１３（ｄ,２Ｈ）,３．７８（ｄ,２Ｈ）,３．７１-３．６１（ｍ,２Ｈ）,３．５６-３．４５（ｍ,１Ｈ）,３．４２-３．３１（ｍ,１Ｈ）,３．１８（ｄ,２Ｈ）,３．１０-２．９３（ｍ,４Ｈ）,１．９９-１．３０（ｍ,１５Ｈ）,１．０１-０．７７（ｍ,１０Ｈ）。
【実施例３８】
【０７３７】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４０）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７３８】
【化２１９】
2020526571.tif 000250
【０７３９】
ステップ１：７-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４０Ａ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ ７-（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０７４０】
【化２２０】
2020526571.tif 000251
【０７４１】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（６Ａ）（０．４５３ｇ、２．０ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（７６７ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（３２４ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）、シクロプロパンカルボン酸（１７６ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、７-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４０Ａ）を淡黄色油状物（５９０ｍｇ、収率９６％）として得た。
【０７４２】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,ＣＤＣｌ３）δ ３．６８（ｓ,４Ｈ）,３．６２-３．５２（ｍ,４Ｈ）,１．８１-１．６９（ｍ,５Ｈ）,１．４５（ｓ,９Ｈ）,１．００-０．９３（ｍ,２Ｈ）,０．７８-０．７１（ｍ,２Ｈ）。
【０７４３】
ステップ２：シクロプロピル（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）メタノン（４０Ｂ）
ｃｙｃｌｏｐｒｏｐｙｌ（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-７-ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ
【０７４４】
【化２２１】
2020526571.tif 000252
【０７４５】
５０ｍＬの反応瓶に、７-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４０Ａ）（０．２５ｇ、０．８３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（７ｍＬ）を加え、室温でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を滴下し、滴下完了後室温で３ｈ反応させた。反応液を直接減圧濃縮し、シクロプロピル（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）メタノン（４０Ｂ）粗製品を黄色油状液体（１６１ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０７４６】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４０Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［７-（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０７４７】
【化２２２】
2020526571.tif 000253
【０７４８】
５０ｍＬのシングルボトルに、（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-イル）メタノン（４０Ｂ）粗製品（０．１６ｇ、０．８３ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（２３９ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１３５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、中間体１（６２５ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４０Ｃ）を淡黄色固体（７００ｍｇ、収率９０％）として得た。
【０７４９】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４０）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［７-（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅｃａｒｂｏｎｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-２-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７５０】
【化２２３】
2020526571.tif 000254
【０７５１】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［７-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４０Ｃ）（７００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［７-（シクロプロパンカルボニル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４０）を白色粉末（２００ｍｇ、収率２８％）として得た。
【０７５２】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３６５．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４０-７．１７（ｍ,１０Ｈ）,４．６２（ｔ,１Ｈ）,４．３２-４．００（ｍ,５Ｈ）,３．８２-３．６０（ｍ,４Ｈ）,３．４８（ｂｒ,２Ｈ）,３．２３-３．０８（ｍ,２Ｈ）,３．０７-２．９１（ｍ,４Ｈ）,２．０１-１．６１（ｍ,９Ｈ）,１．５８-１．２７（ｍ,５Ｈ）,０．９７-０．６７（ｍ,１０Ｈ）。
【実施例３９】
【０７５３】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）（化合物４１）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７５４】
【化２２４】
2020526571.tif 000255
【０７５５】
ステップ１：２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４１Ａ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０７５６】
【化２２５】
2020526571.tif 000256
【０７５７】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（３９０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（７６０ｍｇ、４．９ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（３００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ-Ｄ-フェニルアラニン（５３０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４１Ａ）を白色固体（５１４ｍｇ、収率６７％）として得た。
【０７５８】
ステップ２：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４１Ｂ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０７５９】
【化２２６】
2020526571.tif 000257
【０７６０】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４１Ａ）（５１４ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（１００ｍｇ、２０ｗｔ％）及びメタノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で３ｈ反応させた。反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４１Ｂ）粗製品を淡黄色固体（３７７ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０７６１】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４１Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０７６２】
【化２２７】
2020526571.tif 000258
【０７６３】
５０ｍＬのシングルボトルに、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４１Ｂ）粗製品（３７７ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（２９０ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１６４ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）、中間体１（７６１ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（石油エーテル：酢酸エチル（ｖ：ｖ）＝１：２）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４１Ｃ）を淡黄色固体（４１０ｍｇ、収率３６．６％）として得た。
【０７６４】
ステップ４：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）（化合物４１）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｔｒｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７６５】
【化２２８】
2020526571.tif 000259
【０７６６】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-［（２Ｒ）-２-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４１Ｃ）（４１０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  トリス（トリフルオロ酢酸）（化合物４１）を白色粉末（２９８ｍｇ、収率７０％）として得た。
【０７６７】
ＭＳ ｍ／ｚ＝４０５．４［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．５２-７．２８（ｍ,１１Ｈ）,７．２８-７．２０（ｍ,４Ｈ）,４．６７-４．６２（ｍ,１Ｈ）,４．３２-４．１５（ｍ,３Ｈ）,３．８５-３．３８（ｍ,６Ｈ）,３．３７-３．２２（ｍ,２Ｈ）,３．２２-３．１３（ｍ,２Ｈ）,３．１２-２．９０（ｍ,６Ｈ）,２．６５（ｄｄ,１Ｈ）,１．８３-１．４８（ｍ,９Ｈ）,１．４７-１．２８（ｍ,３Ｈ）,１．２５-１．１１（ｍ,１Ｈ）,０．９２（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例４０】
【０７６８】
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（２-ヒドロキシアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４２）
（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（２-ｈｙｄｒｏｘｙａｃｅｔｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７６９】
【化２２９】
2020526571.tif 000260
【０７７０】
ステップ１：２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシ酢酸（４２Ｂ）
２-ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒａｎ-２-ｙｌｏｘｙａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７７１】
【化２３０】
2020526571.tif 000261
【０７７２】
２５０ｍＬのシングルボトルに、３,４-ジヒドロ-２Ｈ-ピラン（８４０ｍｇ、１０ｍｍｏｌ）、ヒドロキシ酢酸メチル（４２Ａ）（９００ｍｇ、１０ｍｍｏｌ）、ｐ-トルエンスルホン酸一水和物（１００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１００ｍＬ）を順次加え、滴下完了後室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物に水酸化リチウム溶液（７５ｍＬメタノール+２５ｍＬ水の混合溶液）を加え、滴下完了後室温で一晩反応した。測定反応液ｐＨが２〜３になるように反応液に０．１Ｍ希塩酸（１２ｍＬ）を滴下し、反応液をジクロロメタン（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機層用無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシ酢酸（４２Ｂ）を淡黄色油状物、（５１０ｍｇ、収率３０％）として得た。
【０７７３】
ＭＳ ｍ／ｚ＝１８３．１［Ｍ+Ｎａ］+;
【０７７４】
ステップ２：２-（２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４２Ｃ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-（２-ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒａｎ-２-ｙｌｏｘｙａｃｅｔｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０７７５】
【化２３１】
2020526571.tif 000262
【０７７６】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシ酢酸（４２Ｂ）（５１０ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（１．２ｇ、６．３ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（５１６ｍｇ、３．８２ｍｍｏｌ）、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（８３０ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、２-（２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４２Ｃ）を淡黄色固体（５８０ｍｇ、収率４５％）として得た。
【０７７７】
ステップ３：１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシ-エタノン（４２Ｄ）
１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）-２-ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒａｎ-２-ｙｌｏｘｙ-ｅｔｈａｎｏｎｅ
【０７７８】
【化２３２】
2020526571.tif 000263
【０７７９】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-（２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４２Ｃ）（５８０ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（１２０ｍｇ、２０ｗｔ％ｌ）及びメタノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で３ｈ反応させた。反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシ-エタノン（４２Ｄ）粗製品を淡黄色固体（３８７ｍｇ、収率１００％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０７８０】
ステップ４：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４２Ｅ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-（２-ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒａｎ-２-ｙｌｏｘｙａｃｅｔｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０７８１】
【化２３３】
2020526571.tif 000264
【０７８２】
５０ｍＬのシングルボトルに、１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシ-エタノン（４２Ｄ）粗製品（３８７ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（５５３ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２３３ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）、中間体１（１．０９ｇ、１．４５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４２Ｅ）を淡黄色固体（５９０ｍｇ、収率４１％）として得た。
【０７８３】
ステップ５：（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（２-ヒドロキシアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４２）
【０７８４】
【化２３４】
2020526571.tif 000265
【０７８５】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（２-テトラヒドロピラン-２-イルオキシアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４２Ｅ）（５９０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（４ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（２-ヒドロキシアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４２）を白色粉末（２８６ｍｇ、収率６７％）として得た。
【０７８６】
ＭＳ ｍ／ｚ＝７２０．３［Ｍ+Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４４-７．２９（ｍ,６Ｈ）,７．２４（ｄ,４Ｈ）,４．６６（ｔ,１Ｈ）,４．３４-４．２０（ｍ,２Ｈ）,４．１４（ｄ,２Ｈ）,４．０２（ｄ,２Ｈ）,３．８３（ｄ,２Ｈ）,３．７２-３．６０（ｍ,２Ｈ）,３．５６-３．４２（ｍ,１Ｈ）,３．４２-３．３０（ｍ,１Ｈ）,３．１８（ｄ,２Ｈ）,３．１０-２．９４（ｍ,４Ｈ）,１．９６-１．２９（ｍ,１４Ｈ）,０．９２（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例４１】
【０７８７】
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-プロパノイル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４３）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７８８】
【化２３５】
2020526571.tif 000266
【０７８９】
ステップ１：２-プロパノイル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４３Ａ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０７９０】
【化２３６】
2020526571.tif 000267
【０７９１】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（３９０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（５７５ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２４３ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）、プロパン酸（１２２ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、２-プロパノイル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４３Ａ）を淡黄色固体（２４５ｍｇ、収率５２％）として得た。
【０７９２】
ステップ２：１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）プロパン-１-オン（４３Ｂ）
１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）ｐｒｏｐａｎ-１-ｏｎｅ
【０７９３】
【化２３７】
2020526571.tif 000268
【０７９４】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-プロパノイル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４３Ａ）（２４５ｍｇ、０．７７５ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（４９ｍｇ、２０ｗｔ％ｌ）及びメタノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素の雰囲気において室温で３ｈ反応させた。反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）プロパン-１-オン（４３Ｂ）粗製品を淡黄色固体（１４１ｍｇ、収率９９．８％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０７９５】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-プロパノイル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４３Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-（２-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０７９６】
【化２３８】
2020526571.tif 000269
【０７９７】
５０ｍＬのシングルボトルに、１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）プロパン-１-オン（４３Ｂ）粗製品（１４１ｍｇ、０．７７４ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（３８３ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（１３５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、中間体１（０．５６５ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-プロパノイル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４３Ｃ）を淡黄色固体（５００ｍｇ、収率７２．７％）として得た。
【０７９８】
ステップ４：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-プロパノイル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４３）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-（２-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ）ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０７９９】
【化２３９】
2020526571.tif 000270
【０８００】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-（２-プロパノイル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４３Ｃ）（２６０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（１．３ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-（２-プロパノイル-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル）ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４３）を白色粉末（１２５ｍｇ、収率５１％）として得た。
【０８０１】
ＭＳ ｍ／ｚ＝３５９．８［Ｍ+２Ｈ］+／２;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４５-７．２８（ｍ,６Ｈ）,７．２４（ｄ,４Ｈ）,４．８０-４．７５（ｍ,１Ｈ）４．６６（ｔ,１Ｈ）,４．２９（ｔ,１Ｈ）,４．２７（ｔ,１Ｈ）,４．０１（ｄ,２Ｈ）,３．７７（ｄ,２Ｈ）,３．７１-３．６０（ｍ,２Ｈ）,３．５５-３．４２（ｍ,１Ｈ）,３．４１-３．２７（ｍ,１Ｈ）,３．１８（ｄｄ,２Ｈ）,３．１１-２．９３（ｍ,４Ｈ）,２．１９（ｑｄ,２Ｈ）,１．９５-１．６３（ｍ,８Ｈ）,１．６１-１．４９（ｍ,３Ｈ）,１．４８-１．３０（ｍ,２Ｈ）,１．０７（ｔｄ,３Ｈ）,０．９２（ｄｄ,６Ｈ）。
【実施例４２】
【０８０２】
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（２,２,２-トリフルオロアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４４）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ; ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０８０３】
【化２４０】
2020526571.tif 000271
【０８０４】
ステップ１：２-（２,２,２-トリフルオロアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４４Ａ）
ｂｅｎｚｙｌ ２-（２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ
【０８０５】
【化２４１】
2020526571.tif 000272
【０８０６】
５０ｍＬのシングルボトルに、２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（６Ｃ）（３９０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（５７５ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２４３ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（１７１ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、２-（２,２,２-トリフルオロアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４４Ａ）を淡黄色固体（２２４ｍｇ、収率６３％）として得た。
【０８０７】
ステップ２：１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-２,２,２-トリフルオロエタノン（４４Ｂ）
１-（２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎ-２-ｙｌ）-２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏ-ｅｔｈａｎｏｎｅ
【０８０８】
【化２４２】
2020526571.tif 000273
【０８０９】
５０ｍＬのシングルボトルに、２-（２,２,２-トリフルオロアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボン酸ベンジル（４４Ａ）（２２３ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）、パラジウム炭素（４６ｍｇ、２０ｗｔ％ｌ）及びメタノール（２０ｍＬ）を加えた。水素で３回置換し、水素（バルーン）の雰囲気において室温で３ｈ反応させた。反応液を珪藻土でろ過し、ろ液を減圧濃縮し、１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-２,２,２-トリフルオロエタノン（４４Ｂ）粗製品を淡黄色固体（１１６ｍｇ、収率８３％）として得た後、そのまま次の反応に供する。
【０８１０】
ステップ３：Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（２,２,２-トリフルオロアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４４Ｃ）
ｔｅｒｔ-ｂｕｔｙｌ Ｎ-［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-ｂｅｎｚｙｌ-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ｂｕｔｏｘｙ ｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ）-１-［２-（２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］ｃａｒｂａｍｏｙｌ］-３-ｍｅｔｈｙｌ-ｂｕｔｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］-２-ｏｘｏ-ｅｔｈｙｌ］ｃａｒｂａｍａｔｅ
【０８１１】
【化２４３】
2020526571.tif 000274
【０８１２】
５０ｍＬのシングルボトルに、１-（２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-２-イル）-２,２,２-トリフルオロエタノン（４４Ｂ）粗製品（１１６ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）、１-（３-ジメチルアミノプロピル）-３-エチルカルボジイミド塩酸塩（５７５ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール（２４０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、中間体１（０．４７ｇ、０．６２６ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、室温で５ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製し（ジクロロメタン：メタノール（ｖ：ｖ）＝５０：１）、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（２,２,２-トリフルオロアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４４Ｃ）を淡黄色固体（２１６ｍｇ、収率４２％）として得た。
【０８１３】
ステップ４：（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（２,２,２-トリフルオロアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４４）
（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-ａｍｉｎｏ-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-３-ｐｈｅｎｙｌ-ｐｒｏｐａｎｏｙｌ］ａｍｉｎｏ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-ａｍｉｎｏ-１-［２-（２,２,２-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｙｌ）-２,７-ｄｉａｚａｓｐｉｒｏ［３．５］ｎｏｎａｎｅ-７-ｃａｒｂｏｎｙｌ］ｐｅｎｔｙｌ］-４-ｍｅｔｈｙｌ-ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｅ;ｄｉ-ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ
【０８１４】
【化２４４】
2020526571.tif 000275
【０８１５】
５０ｍＬの反応瓶に、Ｎ-［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-ベンジル-２-［［（１Ｒ）-１-［［（１Ｒ）-５-（ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニルアミノ）-１-［２-（２,２,２-トリフルオロアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］カルバモイル］-３-メチル-ブチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］アミノ］-２-オキソ-エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ-ブチル（４４Ｃ）（２１０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で２ｈ反応させた。反応液を減圧濃縮し、残留物を分取液相により分離精製し（分取条件としては、装置：Ｇｉｌｓｏｎ ＧＸ-２８１;カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８,１５０×３０ｍｍ Ｉ．Ｄ．,５μｍ;移動相：Ａ ｆｏｒ ＡＣＮ ａｎｄ Ｂ ｆｏｒ Ｈ２Ｏ;アイソメトリックス：Ａ ６５％;流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ;背圧：１０００ ＰＳＩ;カラム温度：３０℃;波長：２１０ｎｍ;サイクル：１８ｍｉｎ;試料分取：化合物を１２ｍＬのメタノールに溶解させたもの;注射：０．９ｍＬ／針）、分取液を減圧濃縮してほとんどの溶媒を除去し、フリーズドライし、（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-［［（２Ｒ）-２-アミノ-３-フェニル-プロパノイル］アミノ］-３-フェニルプロパノイル］アミノ］-Ｎ-［（１Ｒ）-５-アミノ-１-［２-（２,２,２-トリフルオロアセチル）-２,７-ジアザスピロ［３．５］ノナン-７-カルボニル］ペンチル］-４-メチル-ペンタンアミド  ジ（トリフルオロ酢酸）（化合物４４）を白色粉末（１１１ｍｇ、収率５１％）として得た。
【０８１６】
ＭＳ ｍ／ｚ＝７５８．３［Ｍ+Ｈ］+;
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ,Ｄ２Ｏ）δ ７．４４-７．２８（ｍ,６Ｈ）,７．２４（ｄ,４Ｈ）,４．６４（ｔ,１Ｈ）,４．３８-４．２１（ｍ,４Ｈ）,３．９７（ｄ,２Ｈ）,３．７３-３．５８（ｍ,２Ｈ）,３．５６-３．４３（ｍ,１Ｈ）,３．４０-３．３２（ｍ,１Ｈ）,３．２５-３．１１（ｍ,２Ｈ）,３．１１-２．９３（ｍ,４Ｈ）,１．９９-１．６３（ｍ,９Ｈ）,１．５３（ｄ,３Ｈ）,１．４９-１．３３（ｍ,２Ｈ）,０．９３（ｄｄ,６Ｈ）。
［生物試験例］
【０８１７】
試験１：人体κ-オピオイド受容体に対するアゴニスト作用
【０８１８】
Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（フォルスコリン）は、人体κ-オピオイド受容体高発現細胞株-ＯＰＲＫ１細胞（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ）ｃＡＭＰの放出を刺激することができるが、κ-オピオイド受容体アゴニストは、ｆｏｒｓｋｏｌｉｎの刺激によるｃＡＭＰの放出を抑制できる。試験化合物の、ｆｏｒｓｋｏｌｉｎの刺激によるｃＡＭＰの放出を抑制する効果を検出することにより、当該化合物の、人体κ-オピオイド受容体に対するアゴニスト作用を測定できる。先ず、一定の濃度のｆｏｒｓｋｏｌｉｎ及び異なる濃度の試験化合物を用いて人体κ-オピオイド受容体高発現細胞株とともに培養した。時間分解蛍光共鳴エネルギー移動（ＴＲ-ＦＲＥＴ）に基づくｃＡＭＰ免疫試験法（ＬＡＮＣＥ（登録商標）,ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）により、刺激されたＯＰＲＫ１細胞におけるｃＡＭＰレベルを確定した。具体的な方法は次のとおりである。
【０８１９】
高発現人体κ-オピオイド受容体のＯＰＲＫ１細胞（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ）を、１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ １００９９-１４１）を含むＭｃＣｏｙ'ｓ ５Ａ（Ｇｉｂｃｏ １６６００-０８２）培養基に培養させた。実験当日に、指数的生長周期にある細胞をＰＢＳ／５ｍＭ ＥＤＴＡですすぎ分離し、遠心コレクションし、Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒで細胞を再懸濁させてカウントし、細胞の濃度が３*１０５ ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるように調整した。母液濃度がそれぞれに１０ｍｍになるようにＤＭＳＯでＦｏｒｓｋｏｌｉｎ及び試験化合物をそれぞれに溶解させ、Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ＢｕｆｆｅｒでＦｏｒｓｋｏｌｉｎを４μＭまでに希釈し、異なる濃度の試験化合物（濃度はそれぞれ８０、１６、３．２、０．６４、０．１２８、０．０２５６、０．００５１２、０．００１０２４、０μＭ）を加え、オリフィスあたり５μｌで３８４オリフィスプレートに添加した。さらに各オリフィスに５μｌの細胞懸濁液を加え、室温で３０ｍｉｎ培養させた。続いて、各オリフィスにそれぞれ５μｌ ４ｘＥｕ-ｃＡＭＰ ｔｒａｃｅｒ作動溶液（ｃＡＭＰ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ＢｕｆｆｅｒでＥｕ-ｃＡＭＰ ｓｔｏｃｋ ｓｏｌｕｔｉｏｎを ５０倍希釈したもの）及び５μｌ ４ｘＵｌｉｇｈｔ-ａｎｔｉ-ｃＡＭＰ作動溶液（ｃＡＭＰ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ＢｕｆｆｅｒでＵＬｉｇｈｔ-ａｎｔｉ-ｃＡＭＰ ｓｔｏｃｋ ｓｏｌｕｔｉｏｎを１５０倍希釈したもの）に加え、室温で１時間培養させた。３８４オリフィスプレートを、マイクロプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ）を用いてＴＲ-ＦＲＥＴ方法によってｃＡＭＰレベルを測定した。得られたデータを、ｏｒｉｇｉｎ７．５ソフトで解析してＥＣ５０をフィッティングした。本発明化合物の人体κ-オピオイド受容体に対するアゴニスト作用は、上記の試験によって測定し、測定したＥＣ５０の値を表１に示した。
【０８２０】
Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒの調整方法としては、１４ｍＬ １*ＨＢＳＳ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ,ｃａｔ．＃１４０２５-０９２）、７５μＬ １Ｍ ＨＥＰＥＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ,ｃａｔ．＃１５６３０-０８０）、３０μＬ ２５０ｍｍＩＢＭＸをＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ,ｃａｔ．＃１７０１８）に溶解させて２００μＬ ７．５％ＢＳＡ Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒと混合し、０．１Ｎ ＮａＯＨで溶液をｐＨ７．４までに調整し、１*ＨＢＳＳで１５ｍＬに定容した。
【０８２１】
【表１】
2020526571.tif 000276
【０８２２】
結果として、本発明化合物は、人体κ-オピオイド受容体に対して明らかなアゴニスト作用を示す。
【０８２３】
試験２：マウスのホットプレートテスト
【０８２４】
雌Ｃ５７マウス１８-２２ｇは、Ｃｈｅｎｇｄｕ  Ｄａｓｈｕｏ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｉｍａｌ  Ｃｏ．,Ｌｔｄから購入した。ホットプレートの温度を５６℃に設定し、昇温した後３０ｍｉｎ安定化させてテストを始めた。動物のそれぞれをホットプレートに入れて測定を行い、痛み反応指標として動物の後足舐め反応を観察し、動物の、ホットプレートに入ったから熱刺激を受けて後足舐め反応を引き起こったまでの時間を記録し、要件を満たす（後足舐め反応までの時間は２５ｓ未満）動物をグループ化して番号付けた。ベースライン閾値に従ってグループ化し、グループあたり１０匹とした。１０ｍｌ／ｋｇで異なる濃度の化合物を皮下投与し、投与したから１５ｍｉｎ後に検出し、３０秒を終了時間とし、反応時間を記録した。結果を統計分析し、下記式に従って％ＭＰＥ値を算出した。実験の結果を表２に示した。
【０８２５】
％ＭＰＥ＝（Ｔｎ-Ｔ０）／（３０-Ｔ０）
（Ｔｎは、投与後に動物の後足舐め時間を表し、Ｔ０は、投与前に動物の後足舐め時間を表す）。
【０８２６】
【表２】
2020526571.tif 000277
【０８２７】
結果として、本発明化合物の鎮痛作用は、末梢κオピオイド受容体によるものである。
【０８２８】
試験３：マウスの身もだえテスト
マウスの腹腔に酢酸を注射すると、マウスの身もだえ行動を引き起こすことができる。身もだえ反応とは、マウスが典型的な腹部筋肉の収縮又は伸張特性を示している行動反応を意味する。化合物の、酢酸によるマウス身もだえ行動を抑制する作用を検出することによって、化合物の鎮痛活性を反映することができる。具体的な方法は次のとおりである。
【０８２９】
８週齢のＩＣＲマウス（Ｃｈｅｎｇｄｕ  Ｄａｓｕｏ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．,Ｌｔｄより購入し、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（川）２００８-２４（ＮＯ：５１２０３５００００２１５０））を用意した。ランダムにグループ分け、各グループに１０匹の動物とし、オスとメスが半分ずつとし、テスト前の１２ｈ以内に断水せず断食した。実験当日に、それぞれに静脈内に１．０ｍｇ／ｋｇの試験化合物を投与し、対照群としてブランク試薬を投与した。投与した１５ｍｉｎ内に、０．４ｍＬ／匹の投与量で腹腔に０．６％（ｖ／ｖ）酢酸溶液を注射した。それぞれに、酢酸注射から１５ｍｉｎ及び６ｈ内のマウス身もだえ回数を記録し、試験化合物の、酢酸によるマウス身もだえ行動に対する抑制百分率をそれぞれに算出し、分析結果を表３に示した。
【０８３０】
抑制百分率％＝（対照群の身もだえ回数-投与群の身もだえ回数）／対照群の身もだえ回数。
【０８３１】
【表３】
2020526571.tif 000278
【０８３２】
ＮＱは、測定していないことを意味する。
【０８３３】
対照としては
2020526571.tif 000279
であり、特許文献２に開示した化合物２５は、その遊離アルカリである。
【０８３４】
結果として、本発明化合物は、明らかな鎮痛作用を有することを示す。
【０８３５】
一部の試験化合物について、さらに酢酸によるマウス身もだえ行動に対する長期間試験を行った。上記と同様なテスト方法に従って、投与方式は静脈注射であり、投与量は３ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇであり、酢酸注射から１８ｈ内のマウス身もだえ回数を記録し、試験化合物の、酢酸によるマウス身もだえ行動に対する抑制百分率をそれぞれに算出し、その結果を表４に示した。
【０８３６】
【表４】
2020526571.tif 000280
【０８３７】
ＣＲ８４５の構造は
2020526571.tif 000281
である。
【０８３８】
結果として、本発明の一部化合物は、明らかな鎮痛作用を有し、また長期間働く利点もあることを示す。
【０８３９】
４．ラットＰＫテスト
2020526571.tif 000282
【０８４０】
【表５】
2020526571.tif 000283
【０８４１】
５．マウスＰＫテスト
2020526571.tif 000284
【０８４２】
【表６】
2020526571.tif 000285
【国際調査報告】
2020526571.tif 000307
2020526571.tif 000308
2020526571.tif 000309
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