(57)【要約】本開示は、生物学的試料において抗体を検出するための組成物、方法、キットおよびシステムを提供する。一部の実施形態では、方法／システムは、病原体不活化化合物で処理したＲＢＣに対して、患者において抗体を検出するのに特に有用である。本開示の組成物、方法、キットおよびシステムは、他の使用の中でも、生物学的試料において抗体を検出するための手段、例えば、処理したＲＢＣの点滴前の、予め存在する架橋反応性抗体に対する病原体不活化ＲＢＣの潜在的レシピエントのスクリーニングなどを提供する。
2020503512.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）第１の基材を含有する第１の容器であって、部分が前記第１の基材の表面に結合しており、前記部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される第１の容器と、
（ｂ）第２の基材を含有する第２の容器であって、前記第２の基材の表面が結合部分を欠く第２の容器と
を含むキット。
【請求項２】
前記部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項１に記載のキット。
【請求項３】
前記部分が、式ＶＩＩＩの化合物およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項１に記載のキット。
【請求項４】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８がそれぞれ水素である、請求項３に記載のキット。
【請求項５】
Ｒ２０がＨである、請求項３または４に記載のキット。
【請求項６】
Ｒ２１が−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である、請求項３から５のいずれか一項に記載のキット。
【請求項７】
前記部分が、式ＩＶ、Ｖ、およびＶＩのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項１に記載のキット。
【請求項８】
前記部分が、式ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）のいずれかの化合物、およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項７に記載のキット。
【請求項９】
前記部分が、Ｓ−３０３、Ｓ−３０３の誘導体、または前述のいずれかの塩である、請求項１に記載のキット。
【請求項１０】
前記部分が、Ｓ−３０３の非脆性類似体またはその塩である、請求項１に記載のキット。
【請求項１１】
Ｓ−３０３の前記非脆性類似体が、Ｓ−１９７またはＳ−２２０である、請求項１０に記載のキット。
【請求項１２】
前記基材の表面に結合した前記部分が、基材１単位当たり少なくとも約１０，０００個の部分の担持レベルで存在する、請求項１から１１のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１３】
前記基材の表面に結合した前記部分が、少なくとも約５０個の部分／μｍ２の担持レベルで存在する、請求項１から１１のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１４】
前記第１および前記第２の基材それぞれが、ポリマー粒子、マトリックス、またはアッセイプレートの一部分を含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１５】
前記第１の基材が赤血球を含み、前記第２の基材が赤血球を含み，前記第１および第２の基材の前記赤血球が１つまたは複数の共通のドナーから得たものである、請求項１から１３のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１６】
第３の基材を含有する第３の容器をさらに含み、第１のレベルの前記部分が前記第１の基材の表面に結合しており、第２のレベルの前記部分が前記第３の基材の表面に結合しており、前記第２のレベルが前記第１のレベル未満である、請求項１から１５のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１７】
前記第１の基材の表面に結合した前記部分の前記第１のレベルが、前記第３の基材の表面に結合した前記部分の前記第２のレベルよりも少なくとも３倍高い、請求項１６に記載のキット。
【請求項１８】
前記第３の基材が、ポリマー粒子、マトリックス、またはアッセイプレートの一部分を含む、請求項１６または請求項１７に記載のキット。
【請求項１９】
前記第３の基材が赤血球を含み、前記第１、前記第２、および前記第３の基材の前記赤血球が１つまたは複数の共通のドナーから得たものである、請求項１６または請求項１７に記載のキット。
【請求項２０】
前記第１の基材が２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１種の試料を含み、前記第１の基材の前記試料のそれぞれが異なる血液ドナーから得た赤血球を含み、前記第２の基材が、別々の血液ドナーのそれぞれからの赤血球を含む、対応する試料を含む、請求項１５または請求項１９に記載のキット。
【請求項２１】
前記２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１種の試料が、複数の血液タイプを表す、請求項２０に記載のキット。
【請求項２２】
赤血球のパネルを調製する方法であって、
ａ）赤血球を含む第１および第２の試料を提供するステップと、
ｂ）前記第１の試料の前記赤血球を化合物で処理するステップであって、前記化合物での処理が、部分の、前記第１の試料の赤血球の表面への結合をもたらすステップと
を含み、前記第２の試料が、前記化合物で処理されず、これによって、表面結合部分を有する赤血球の第１の試料と、前記表面結合部分を欠く赤血球の第２の試料とを含むパネルが生成され、
前記化合物が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、方法。
【請求項２３】
前記化合物が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記化合物が、式ＶＩＩＩの化合物およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８がそれぞれ水素である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
Ｒ２０がＨである、請求項２４または２５に記載の方法。
【請求項２７】
Ｒ２１が−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記化合物が、式ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）のいずれかの化合物、およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記化合物が、Ｓ−３０３の誘導体、またはその塩である、請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
前記化合物が、Ｓ−３０３の非脆性類似体、またはその塩である、請求項２２に記載の方法。
【請求項３１】
前記表面結合部分が、Ｓ−３０３の誘導体、またはその塩である、請求項２２に記載の方法。
【請求項３２】
前記表面結合部分が、Ｓ−３０３の非脆性類似体、またはその塩である、請求項２２に記載の方法。
【請求項３３】
前記赤血球の表面に結合した前記部分が、赤血球１個当たり少なくとも約１０，０００個の部分の担持レベルで存在する、請求項２２から３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記赤血球の表面に結合した前記部分が、少なくとも約５０個の部分／μｍ２の担持レベルで存在する、請求項２２から３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記第１および前記第２の試料の前記赤血球が同じ血液ドナーから得たものである、請求項２２から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
ステップ（ｂ）の後に、
前記第１および前記第２の試料を洗浄するステップ
をさらに含む、請求項２２から３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
ステップ（ｂ）の後に、
前記第１および前記第２の試料に凍結保存剤を加えるステップと、
前記第１および前記第２の試料を冷凍するステップと
をさらに含む、請求項２２から３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
ステップ（ｂ）の後に、前記第１および第２の試料を冷蔵温度で保存するステップをさらに含む、請求項２２から３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
ステップ（ｂ）の後に、前記第１および第２の試料を約−２０℃未満で保存するステップを含む、請求項２２から３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
赤血球を含む第３の試料を前記化合物で処理するステップであって、前記第３の試料の前記赤血球の前記化合物による処理が、前記第３の試料の赤血球の表面に結合した第２のレベルの前記部分をもたらすステップをさらに含み、第１のレベルの前記部分が、前記第１の試料の赤血球の表面に結合しており、前記第２のレベルが前記第１のレベル未満である、請求項２２から３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記第３の試料を前記化合物で処理した後、
前記第３の試料を洗浄するステップ
をさらに含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記第３の試料を前記化合物で処理した後、
凍結保存剤を前記第３の試料に加えるステップと、
前記第３の試料を冷凍するステップと
をさらに含む、請求項４０または請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記第３の試料を前記化合物で処理した後、前記第３の試料を冷蔵温度で保存するステップをさらに含む、請求項４０または請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
化合物に結合する抗体の存在について試料を試験する方法であって、
ａ）血清または血漿を含む試料を提供するステップと、
ｂ）前記試料を赤血球に接触させるステップであって、部分が前記赤血球の表面に結合しており、前記部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択されるステップと、
ｃ）前記試料からの抗体と、前記赤血球の表面結合部分との間の結合の量をアッセイするステップであって、前記抗体と前記表面結合部分との間の結合が、前記抗体が前記化合物に結合することを示すステップと
を含む、方法。
【請求項４５】
前記化合物が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記化合物が、式ＶＩＩＩの化合物およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８がそれぞれ水素である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
Ｒ２０がＨである、請求項４６または４７に記載の方法。
【請求項４９】
Ｒ２１が−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である、請求項４６から４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
前記化合物が、式ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）のいずれかの化合物、およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項４４に記載の方法。
【請求項５１】
前記化合物が、Ｓ−３０３の誘導体、またはその塩である、請求項４４に記載の方法。
【請求項５２】
前記化合物が、Ｓ−３０３の非脆性類似体、またはその塩である、請求項４４に記載の方法。
【請求項５３】
Ｓ−３０３の前記非脆性類似体が、Ｓ−１９７またはＳ−２２０である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記表面結合部分が、Ｓ−３０３の誘導体、またはその塩である、請求項４４に記載の方法。
【請求項５５】
前記表面結合部分が、Ｓ−３０３の非脆性類似体、またはその塩である、請求項４４に記載の方法。
【請求項５６】
前記赤血球の表面に結合した前記部分が、赤血球１個当たり少なくとも約１０，０００個の部分の担持レベルで存在する、請求項４４から５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記赤血球の表面に結合した前記部分が、少なくとも約５０個の部分／μｍ２の担持レベルで存在する、請求項４４から５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
前記化合物および前記表面結合部分が同じである、請求項４４から５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
前記化合物および前記表面結合部分が異なる、請求項４４から５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
ステップ（ｃ）が、前記試料からの抗体と、前記表面結合部分との間の結合の量を、参照と比較するステップであって、前記参照と比較した場合の結合の量の増加が前記試料中の前記抗体の存在を示すステップを含む、請求項４４から５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
ステップ（ｃ）が、前記試料からの抗体と、前記表面結合部分を欠く赤血球との間の結合の量をアッセイするステップを含む、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
ステップ（ｃ）が、前記試料からの抗体と、前記表面結合部分の量がより少ない赤血球との間の結合の量をアッセイするステップをさらに含む、請求項６０に記載の方法。
【請求項６３】
ステップ（ｂ）が前記試料および前記赤血球を、抗ヒトグロブリンと接触させるステップを含み、ステップ（ｃ）が凝集量をアッセイするステップを含む、請求項４４から６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
赤血球輸血を患者に提供する方法であって、前記赤血球輸血が、病原体不活化化合物で処理した赤血球を含み、前記方法が、
ａ）前記患者からの血清または血漿を含む試料を提供するステップと、
ｂ）前記試料を第１の基材と接触させるステップであって、部分が前記基材の表面に結合しているステップと、
ｃ）前記試料からの抗体と、前記第１の基材の表面結合部分との間の結合の量を、参照と比較してアッセイするステップであって、前記抗体と前記表面結合部分との間の結合が、前記抗体が前記病原体不活化化合物で処理した赤血球に結合することを示すステップと、
ｄ）前記結合の量が前記参照より高いかどうかを判定するステップと、
ｆ）前記結合の量が前記参照より高くないという判定に従い、血液輸血を前記患者に提供するステップと
を含む、方法。
【請求項６５】
前記表面結合部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記表面結合部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６７】
前記表面結合部分が、式ＶＩＩＩの化合物およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６８】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８がそれぞれ水素である、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
Ｒ２０がＨである、請求項６７または６８に記載の方法。
【請求項７０】
Ｒ２１が−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である、請求項６７から６９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７１】
前記表面結合部分が、式ＩＶ、Ｖ、およびＶＩのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項６４に記載の方法。
【請求項７２】
前記表面結合部分が、式ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）のいずれかの化合物、およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
前記表面結合部分が、Ｓ−３０３、Ｓ−３０３の誘導体、または前述のいずれかの塩である、請求項６４に記載の方法。
【請求項７４】
前記表面結合部分が、Ｓ−３０３の非脆性類似体またはその塩である、請求項６４に記載の方法。
【請求項７５】
Ｓ−３０３の前記非脆性類似体が、Ｓ−１９７またはＳ−２２０である、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
前記化合物および前記表面結合部分が同じである、請求項６４から７５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７７】
前記化合物および前記表面結合部分が異なる、請求項６４から７５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７８】
前記第１の基材が、ポリマー粒子、マトリックス、またはアッセイプレートの一部分を含む、請求項６４から７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
前記第１の基材が赤血球を含む、請求項６４から７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８０】
ステップ（ｃ）が、前記試料からの抗体と、前記表面結合部分を欠く第２の基材との間の結合の量をアッセイするステップを含む、請求項６４から７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８１】
前記第２の基材が前記第１の基材と同じである、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
ステップ（ｃ）が、前記試料からの抗体と、前記第１の基材と比較してより少量の前記表面結合部分を有する第３の基材との間の結合の量をアッセイするステップをさらに含む、請求項６４から８０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
前記第３の基材が前記第１の基材と同じである、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
ステップ（ｂ）が前記試料および前記基材（複数可）を抗ヒトグロブリンに接触させるステップを含み、ステップ（ｃ）が凝集量をアッセイするステップを含む、請求項６４から８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８５】
前記基材（複数可）の表面に結合した前記部分が、前記病原体不活化化合物と同じではない、請求項６４から８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８６】
ヒト赤血球を含む組成物であって、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される部分が、前記ヒト赤血球の表面に結合している、組成物。
【請求項８７】
前記部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項８６に記載の組成物。
【請求項８８】
前記部分が、式ＶＩＩＩの化合物およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される、請求項８６に記載の組成物。
【請求項８９】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８がそれぞれ水素である、請求項８８に記載の組成物。
【請求項９０】
Ｒ２０がＨである、請求項８８または８９に記載の組成物。
【請求項９１】
Ｒ２１が−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である、請求項８８から９０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９２】
前記部分が、Ｓ−３０３の非脆性類似体またはその塩である、請求項８６に記載の組成物。
【請求項９３】
Ｓ−３０３の前記非脆性類似体が、Ｓ−１９７またはＳ−２２０である、請求項９２に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互参照
本出願は、２０１６年１２月２３日に出願された米国仮出願第６２／４３８，９０９号の優先権の利益を主張し、その内容はその全体が本明細書に参照により援用される。
【０００２】
本開示は、化合物結合基材、例えば、赤血球試薬などを使用して、生物学的試料を試験および／またはスクリーニングするためのシステムおよび方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
血液または血液成分の輸血は、一般に使用されている医療行為である。血液製剤は一般的に、ドナーとレシピエントとの間の適合性について、レシピエントにおける血液製剤の輸血または利用前に試験される。
【０００４】
血液型の抗原は赤血球上の多形タンパク質または炭水化物残基である。これらの抗原は、抗原を欠く個体において抗体応答を刺激する可能性があり、一部の抗体（例えば、臨床的に重要な抗体）は溶血性輸血反応または溶血性疾患をもたらす可能性がある。赤血球上には３００種より多くの血液型抗原（ＢＧＡ）が存在するので、輸血レシピエントは多くの場合このような抗原に曝露され、血液型抗原に対する免疫応答が従来の赤血球輸血では観察される。免疫応答は、同種異系の赤血球および／またはある特定の状態（例えば、ＳＣＤ、サラセミア）への複数の曝露を有する患者においてより頻繁である。
【０００５】
臨床的に重要な血液型同種抗体の検出（クロスマッチ試験）は輸血前試験において重要な試験である。ドナーおよび患者は通常、ＡＢＯおよびＲｈ（Ｄ）が安全な輸血のために最も重要な抗原と考えられることから、ＡＢＯおよびＲｈ（Ｄ）について分類される。分類は一般的にマイナーな抗原、例えば、Ｒｈ（Ｃ／ｃおよびＥ／ｅ）、Ｋｅｌｌ（Ｋ／ｋ）、Ｄｕｆｆｙ（Ｆｙａ、Ｆｙｂ）、Ｋｉｄｄ（Ｊｋａ／Ｊｋｂ）、およびＭＮＳ（Ｍ／ＮおよびＳ／ｓ）系の抗原などについては実施されないが、血漿はこれらの抗原に対する抗体についてスクリーニングされる。患者の抗体スクリーニングが陰性である場合、赤血球（ＲＢＣ）輸血に対する単位もまたＡＢＯおよびＲｈ（Ｄ）に適合していなければならない。臨床的に重要なマイナーな抗原に対する抗体が存在する場合、単位は対応する抗原をさらに欠いているべきである。慣例的には、抗体スクリーニング試験は、固相赤血球付着アッセイ（例えば、Ｇａｌｉｌｅｏシステム、Ｉｍｍｕｃｏｒ）または試験管内での凝集試験、例えば、抗グロブリン試験（例えば、直接抗グロブリン試験（ＤＡＴ）、間接抗グロブリン試験（ＩＡＴ））などとして行われてきた。これは、公知の特異性を有するヒトＲＢＣの使用を含み、ヒトＲＢＣは血漿または血清試料に対して試験される。インキュベーション期間の後、および最も多くの場合、第２の抗体溶液の添加後、混合物は血球凝集について観察される。より最近になって、この試験はまた、当技術分野で公知のマイクロプレートおよびカラム凝集技術システムを使用して行われ、これらはまたある程度自動化して使用することもできる。しかし、現在の試験では、これが検出できる臨床的に重要な抗体の範囲は限られている。
【０００６】
血液製剤および他の生物学的材料による疾患の感染は、依然として深刻な健康上の問題である。ＵＶＡ光での光化学的処理用の、核酸を標的とする化合物、例えば、プソラレンおよびプソラレン誘導体などが、輸血前に病原体を不活化し、輸血伝播性感染症の危険性を減少させるために、血液製剤、例えば、血小板および血漿などに導入されてきた。他の、核酸を標的とする化合物、例えば、Ｓ−３０３（例えば、アムスタリン）などがＲＢＣの病原体不活化処理のために開発されている。Ｓ−３０３化合物は汚染病原体および白血球の核酸と共有結合架橋を形成して、複製を遮断し、輸血伝播性感染症の危険性を減少させる。しかし、ある特定量のこれらの化合物またはその誘導体は、ＲＢＣの表面上のものを含めて、ＲＢＣ成分の他の求核試薬と反応する可能性があり、これは、ある特定の事例において、例えば、表面結合付加体の形成などを介して、化合物またはその誘導体（例えば、部分）をＲＢＣに結合させる結果となり得る。さらに、このような病原体不活化ＲＢＣが安全であり、非免疫原性であると一般的に考えられる場合ですら、ＲＢＣに結合した化合物またはその誘導体は、ある特定の患者において、ある場合には、予め存在する抗体により認識されたり、または望ましくない免疫応答を引き起こしたりすることがある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
したがって、患者において、病原体不活化化合物で処理したＲＢＣに対して抗体を検出するための方法／システムに対する必要性が存在する。
【０００８】
本開示の組成物、方法、キットおよびシステムは、他の使用の中でも、生物学的試料において抗体を検出するための手段、例えば、処理したＲＢＣの点滴前の、予め存在する架橋反応性抗体に対する病原体不活化ＲＢＣの潜在的レシピエントのスクリーニングなどを提供する。一部の実施形態では、本組成物、方法、キットおよびシステムは、Ｓ−３０３化合物で処理したＲＢＣに対して、患者において抗体を検出するのに特に有用である。
【０００９】
一態様では、（ａ）第１の基材を含有する第１の容器であって、部分が第１の基材の表面に結合しており、この部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される第１の容器と、（ｂ）第２の基材を含有する第２の容器であって、第２の基材の表面が結合部分を欠く第２の容器とを含有するキットが提供される。一部の実施形態では、部分は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、部分は、式ＩＶ、Ｖ、およびＶＩのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、部分は、式ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）のいずれかの化合物、およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、部分はＳ−３０３、Ｓ−３０３の誘導体、または前述のいずれかの塩である。一部の実施形態では、部分はＳ−３０３の非脆性類似体またはその塩である。一部の実施形態では、基材の表面に結合した部分は、基材１単位当たり少なくとも約１０，０００個の部分の担持レベルで存在する。一部の実施形態では、基材の表面に結合した部分は少なくとも約５０個の部分／μｍ２の担持レベルで存在する。一部の実施形態では、化合物と、表面に結合した部分は同じである。一部の実施形態では、化合物と、表面に結合した部分は異なる。一部の実施形態では、第１および第２の基材それぞれは、ポリマー粒子、マトリックス、またはアッセイプレートの一部分を含む。一部の実施形態では、第１の基材は赤血球を含み、第２の基材は赤血球を含み、第１および第２の基材の赤血球は１つまたは複数の共通のドナーから得たものである。一部の実施形態では、キットは第３の基材を含有する第３の容器をさらに含有し、第１のレベルの部分は第１の基材の表面に結合しており、第２のレベルの部分は第３の基材の表面に結合しており、第２のレベルは第１のレベル未満である。一部の実施形態では、第１の基材の表面に結合した部分の第１のレベルは、第３の基材の表面に結合した部分の第２のレベルよりも少なくとも３倍高い。一部の実施形態では、第３の基材は、ポリマー粒子、マトリックス、またはアッセイプレートの一部分を含む。一部の実施形態では、第３の基材は赤血球を含み、第１、第２、および第３の基材の赤血球は、１つまたは複数の共通のドナーから得たものである。一部の実施形態では、第１の基材は、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１種の試料を含み、第１の基材の試料のそれぞれは、異なる血液ドナーから得た赤血球を含み、第２の基材は、別々の血液ドナーのそれぞれからの赤血球を含む対応する試料を含む。一部の実施形態では、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１種の試料は、複数の血液タイプを表す。一部の実施形態では、第１の基材および第２の基材は、血液タイプＯのドナーから得た赤血球を含む。一部の実施形態では、���１の基材、第２の基材および第３の基材は、血液タイプＯのドナーから得た赤血球を含む。一部の実施形態では、第１の基材および第２の基材は、赤血球約０．５％〜約５％において、緩衝された懸濁液媒体中に赤血球を含む。一部の実施形態では、第１の基材、第２および第３の基材は、赤血球約０．５％〜約５％の緩衝された懸濁液中に赤血球を含む。一部の実施形態では、第１の基材を含有する第１の容器、第２の基材を含有する第２の容器、ならびに／または第１の容器および第２の容器を含有するキットは２〜８℃での保存に適している。一部の実施形態では、第１の基材を含有する第１の容器、第２の基材を含有する第２の容器、ならびに／または第１の容器および第２の容器を含有するキットは室温での保存に適している。一部の実施形態では、第１の基材を含有する第１の容器、第２の基材を含有する第２の容器、ならびに／または第１の容器および第２の容器を含有するキットは−２０℃未満での保存に適している。
【００１０】
別の態様では、基材のパネルを調製する方法であって、ａ）それぞれが基材を含む第１および第２の試料を提供するステップと、ｂ）第１の試料の基材を化合物で処理するステップであって、化合物での処理が部分を第１の試料の基材表面に結合させるステップとを含み、第２の試料が化合物で処理されず、これによって、表面結合部分を有する基材の第１の試料と、表面結合部分を欠く基材の第２の試料とを含むパネルが生成され、この化合物が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される方法が提供される。一部の実施形態では、ポリマー粒子のパネルを調製する方法であって、ａ）ポリマー粒子を含む第１および第２の試料を提供するステップと、ｂ）第１の試料のポリマー粒子を化合物で処理するステップであって、化合物での処理が部分を第１の試料の粒子表面に結合させるステップとを含み、第２の試料が化合物で処理されず、これによって、表面結合部分を有するポリマー粒子の第１の試料と、表面結合部分を欠くポリマー粒子の第２の試料とを含むパネルが生成され、化合物が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される方法が提供される。一部の実施形態では、赤血球のパネルを調製する方法であって、ａ）赤血球を含む第１および第２の試料を提供するステップと、ｂ）第１の試料の赤血球を化合物で処理するステップであって、化合物での処理が、部分の、第１の試料の赤血球の表面への結合をもたらすステップとを含み、第２の試料が化合物で処理されず、これによって、表面結合部分を有する赤血球の第１の試料と、表面結合部分を欠く赤血球の第２の試料とを含むパネルが生成され、化合物が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される方法が提供される。一部の実施形態では、化合物は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、化合物は、式ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）のいずれかの化合物、およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、化合物はＳ−３０３の誘導体、またはその塩である。一部の実施形態では、化合物はＳ−３０３の非脆性類似体、またはその塩である。一部の実施形態では、表面結合部分はＳ−３０３の誘導体、またはその塩である。一部の実施形態では、表面結合部分はＳ−３０３の非脆性類似体、またはその塩である。一部の実施形態では、赤血球の表面に結合した部分は、赤血球１個当たり少なくとも約１０，０００個の部分の担持レベルで存在する。一部の実施形態では、赤血球の表面に結合した部分は少なくとも約５０個の部分／μｍ２の担持レベルで存在する。一部の実施形態���は、化合物および表面結合部分は同じである。一部の実施形態では、化合物および表面結合部分は異なる。一部の実施形態では、第１および第２の試料の赤血球は同じ血液ドナーから得たものである。一部の実施形態では、第１および第２の試料の赤血球は血液タイプＯのドナーから得たものである。一部の実施形態では、化合物での処理が部分を第１の試料の基材表面に結合させる、化合物による第１の試料の基材の処理は２〜８℃で実施される。一部の実施形態では、化合物での処理が部分を第１の試料の基材表面に結合させる、化合物による第１の試料の基材の処理は室温で実施される。一部の実施形態では、本方法は、ステップ（ｂ）の後に、第１および第２の試料を洗浄するステップをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、ステップ（ｂ）の後に、赤血球約０．５％〜約５％において、第１および第２の試料を緩衝された懸濁液媒体中に再懸濁させるステップをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、ステップ（ｂ）の後に、第１および第２の試料に凍結保存剤を加えるステップと、第１および第２の試料を冷凍するステップとをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、ステップ（ｂ）の後に、第１および第２の試料を冷蔵温度（例えば、２〜８℃）で保存するステップをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、ステップ（ｂ）の後に、第１および第２の試料を約−２０℃未満で保存するステップを含む。一部の実施形態では、本方法は、ステップ（ｂ）の後に、第１および第２の試料を室温で保存するステップを含む。一部の実施形態では、本方法は、赤血球を含む第３の試料を化合物で処理するステップであって、第３の試料の赤血球の化合物による処理が、第３の試料の赤血球の表面に結合した第２のレベルの部分をもたらすステップをさらに含み、第１のレベルの部分が、第１の試料の赤血球の表面に結合しており、第２のレベルが第１のレベル未満である。一部の実施形態では、本方法は、第３の試料を化合物で処理した後、第３の試料を洗浄するステップをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、第３の試料を化合物で処理した後、凍結保存剤を第３の試料に加えるステップと、第３の試料を冷凍するステップとをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、第３の試料を化合物で処理した後、赤血球約０．５％〜約５％において、第３の試料を緩衝された懸濁液媒体中に再懸濁させるステップをさらに含む。一部の実施形態では、本方法は、第３の試料を化合物で処理した後、第３の試料を冷蔵温度または室温で保存するステップをさらに含む。
【００１１】
別の態様では、化合物に結合する抗体の存在について試料を試験する方法であって、ａ）血清または血漿を含む試料を提供するステップと、ｂ）試料を基材と接触させるステップであって、部分が基材表面に結合しており、この部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択されるステップと、ｃ）試料からの抗体と、基材の表面結合部分との間の結合の量をアッセイするステップであって、抗体と表面結合部分との間の結合が、抗体が化合物を結合することを示すステップとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、化合物を結合する抗体の存在について試料を試験する方法は、ａ）血清または血漿を含む試料を提供するステップと、ｂ）試料をポリマー粒子（例えば、ビーズ、マイクロスフェア）、マトリックスまたはアッセイプレートの一部分と接触させるステップであって、部分がポリマー粒子（例えば、ビーズ、マイクロスフェア）、マトリックスまたはアッセイプレートの一部分の表面に結合しており、この部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択されるステップと、ｃ）試料からの抗体と、ポリマー粒子（例えば、ビーズ、マイクロスフェア）、マトリックスまたはアッセイプレートの一部分の表面結合部分との間の結合の量をアッセイするステップであって、抗体と表面結合部分との間の結合が、抗体が化合物を結合することを示すステップとを含む。一部の実施形態では、化合物を結合する抗体の存在について試料を試験する方法は、ａ）血清または血漿を含む試料を提供するステップと、ｂ）試料を赤血球に接触させるステップであって、部分が赤血球の表面に結合しており、この部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択されるステップと、ｃ）試料からの抗体と、赤血球の表面結合部分との間の結合の量をアッセイするステップであって、抗体と表面結合部分との間の結合が、抗体が化合物に結合することを示すステップとを含む。一部の実施形態では、化合物は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、化合物は、式ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）のいずれかの化合物、およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、化合物はＳ−３０３の誘導体、またはその塩である。一部の実施形態では、化合物はＳ−３０３の非脆性類似体、またはその塩である。一部の実施形態では、表面結合部分はＳ−３０３の誘導体、またはその塩である。一部の実施形態では、表面結合部分はＳ−３０３の非脆性類似体、またはその塩である。一部の実施形態では、赤血球の表面に結合した部分は、赤血球１個当たり少なくとも約１０，０００個の部分の担持レベルで存在する。一部の実施形態では、赤血球の表面に結合した部分は少なくとも約５０個の部分／μｍ２の担持レベルで存在する。一部の実施形態では、化合物および表面結合部分は同じである。一部の実施形態では、化合物および表面結合部分は異なる。一部の実施形態では、ステップ（ｃ）は、試料からの抗体と表面結合部分との間の結合の量を参照と比較するステップであって、参照と比較した場合の結合の量の増加が、試料中の抗体の存在を示すステップを含む。一部の実施形態では、ステップ（ｃ）は、試料からの抗体と、表面結合部分を欠く赤血球との間の結合の量をアッセイするステップを含む。一部の実施形態では、ステップ（ｃ）は、試料からの抗体と、表面結合部分の量がより少ない赤血球との間の結合の量をアッセイするステップをさらに含む。一部の実施形態では、ステップ（ｂ）は、試料および赤血球を、抗ヒトグロブリンと接触させるステップを含み、ステップ（ｃ）は凝集量をアッセイするステップを含む。
【００１２】
別の態様では、赤血球輸血を患者に提供する方法であって、赤血球輸血が病原体不活化化合物で処理した赤血球を含み、方法が、ａ）患者からの血清または血漿を含む試料を提供するステップと、ｂ）試料を第１の基材と接触させるステップであって、部分が基材の表面に結合しているステップと、ｃ）試料からの抗体と、第１の基材の表面結合部分との間の結合の量を、参照と比較してアッセイするステップであって、抗体と表面結合部分との間の結合が、抗体が病原体不活化化合物で処理した赤血球に結合することを示すステップと、ｄ）結合の量が参照より高いかどうかを判定するステップと、ｆ）結合の量が参照より高くないという判定に従い、血液輸血を患者に提供するステップとを含む方法が提供される。一部の実施形態では、表面結合部分は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、表面結合部分は式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、表面結合部分は、式ＩＶ、Ｖ、およびＶＩのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、表面結合部分は、式ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）のいずれかの化合物、およびその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、表面結合部分は、Ｓ−３０３、Ｓ−３０３の誘導体、または前述のいずれかの塩である。一部の実施形態では、表面結合部分はＳ−３０３の非脆性類似体またはその塩である。一部の実施形態では、化合物および表面結合部分は同じである。一部の実施形態では、化合物および表面結合部分は異なる。一部の実施形態では、第１の基材はポリマー粒子、マトリックス、またはアッセイプレートの一部分を含む。一部の実施形態では、第１の基材は赤血球を含む。一部の実施形態では、ステップ（ｃ）は、試料からの抗体と、表面結合部分を欠く第２の基材との間の結合の量をアッセイするステップを含む。一部の実施形態では、第２の基材は第１の基材と同じである。一部の実施形態では、ステップ（ｃ）は、試料からの抗体と、第１の基材と比較してより少量の表面結合部分を有する第３の基材との間の結合の量をアッセイするステップをさらに含む。一部の実施形態では、第３の基材は第１の基材と同じである。一部の実施形態では、ステップ（ｂ）は、試料および基材（複数可）を抗ヒトグロブリンと接触させるステップを含み、ステップ（ｃ）は凝集量をアッセイするステップを含む。一部の実施形態では、基材（複数可）の表面に結合した部分は、病原体不活化化合物と同じではない。
【００１３】
別の態様では、ヒト赤血球を含む組成物であって、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される部分が、ヒト赤血球の表面に結合している組成物が提供される。一部の実施形態では、部分は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択される。一部の実施形態では、部分はＳ−３０３の非脆性類似体またはその塩である。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、処理された赤血球の抗体染色のレベルを示すグラフである。
【００１５】
【図２】図２は、処理された赤血球の抗体染色のレベルを示すグラフである。
【００１６】
【図３】図３は、処理された赤血球の抗体染色のレベルを示すグラフである。
【００１７】
【図４】図４は、処理された赤血球の抗体染色のレベルを示すグラフである。
【００１８】
【図５】図５は、処理された赤血球の抗体染色のレベルを示すグラフである。
【００１９】
【図６】図６は、処理された赤血球の抗体染色のレベルを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本開示は、その上に化合物が結合した基材を使用して、生物学的試料を試験および／またはスクリーニングするための方法およびシステムを提供する。発明者らは、本開示の様々な実施形態に従い使用される化合物（例えば、病原体不活化化合物）は赤血球（ＲＢＣ）の処理（例えば、病原体不活化）に対して安全で、有効であり得る一方、このような処理は、化合物がＲＢＣ中の他の求核試薬と反応する可能性を有し、ある特定の事例では、化合物をＲＢＣに、例えば、ＲＢＣの表面などに結合させる（例えば、表面結合付加体の形成）ことがあることを見出した。このような結合は、処理されたＲＢＣを注入された患者内にこのような抗体が存在する場合、化合物またはその一部分に対して特異的な抗体も、処理されたＲＢＣに結合させる結果となり得る。したがって、化合物またはその部分に対する抗体（例えば、臨床的に重要な抗体）の存在または不在について評価するために、生物学的試料（例えば、患者からの試料）を試験することが重要である。本出願は、本明細書に記載されている方法／システムを想定し、基材上に結合した本開示の化合物を含む組成物および／またはキットを使用して、化合物に対する抗体の存在についての生物学的試料の試験にそれらの方法／システムの使用を認識している。一部の実施形態によると、本方法／システムは、病原体不活化化合物で処理したＲＢＣと反応する、患者に予め存在する抗体を輸血前に検出するのに特に適している。
【００２１】
化合物を結合した基材（例えば、病原体不活化化合物を結合したＲＢＣ）の組成物およびキット／システム、組成物を調製する方法、ならびにその使用が本明細書に提供される。
【００２２】
本明細書で使用される冠詞「ａ」および「ａｎ」は、その冠詞の文法的対象の１つのまたは１つより多く（すなわち、少なくとも１つ）を指す。例として、「ある基材（ａ  ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）」とは、１つの基材または１つより多くの基材を意味する。
【００２３】
「生物学的試料」または単に「試料」とは、その用語が本明細書で使用される場合、試料、例えば、それである必要はないが、動物（例えば、ヒト）から得たものなどを意味し、その試料またはその成分を本開示の方法に従い使用して、抗体の存在、不在および／またはレベルを評価することができる。このような試料として、これらに限定されないが、任意の生物学的試料、例えば、生物学的流体（例えば、血液、血清、血漿、リンパ、精液、つば、唾液、痰、涙など）、および抗体の存在または不在についてアッセイすることができる、動物（例えば、ヒト）から得た任意の試料が挙げられる。
【００２４】
「アルキル」とは、本明細書で使用される場合、炭素および水素を含有する環式、分枝、または直鎖の化学基、例えば、メチル、ペンチル、およびアダマンチルなどを指す。アルキル基は、非置換でもよいし、または１つもしくは複数の置換基で置換されていてもよく、例えば、ハロゲン、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、ヒドロキシル、チオール、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、ベンジル、または他の官能基であってよい。アルキル基は、１つのまたはいくつかの位置で、飽和または不飽和であることができる（例えば、−Ｃ＝Ｃ−または−Ｃ−Ｃ−サブユニットを含有する）。通常、アルキル基は、特に明記しない限り、１〜１２個の炭素原子、例えば、１〜１０個の炭素原子または１〜８個の炭素原子などを含むことになる。
【００２５】
「ヘテロアルキル」とは、本明細書で使用される場合、鎖に組み込まれた１個または複数のＮ、Ｏ、Ｓ、またはＰヘテロ原子を有するアルキル鎖を指す。ヘテロ原子（複数可）は、上記に記載の置換基のいずれも保持しないか、１つ、または１つより多くの上記に記載の置換基を保持し得る。「ヘテロ原子」はまた、酸化形態のヘテロ原子Ｎ、Ｓ、およびＰも含む。ヘテロアルキル基の例として、制限なしで、メトキシ、エトキシ、および他のアルコキシ基；エーテル含有基、アミド含有基、例えば、ポリペプチド鎖など；環系、例えば、ピペリジニル、ラクタム、およびラクトンなど；ならびに炭素鎖にヘテロ原子を組み込んでいる他の基が挙げられる。通常、ヘテロアルキル基は、特に明記しない限り、ヘテロ原子（複数可）に加えて、１〜１２個の炭素原子、例えば、１〜１０個の炭素原子または１〜８個の炭素原子を含むことになる。
【００２６】
「アリール」または「Ａｒ」とは、必要に応じて非置換であるか、またはアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１〜８アルキル、アルコキシ、ハロ、チオール、および他の置換基で置換されている、単環（例えば、フェニル）または多重縮合環（例えば、ナフチルまたはアントリル）を有する不飽和の芳香族炭素環式基を指す。
【００２７】
「ヘテロアリール」基は、単環（例えば、ピリジルまたはフリル）または多重縮合環（例えば、アクリジニル、インドリル、またはベンゾチエニル）を有し、環のうちの少なくとも１つの中に少なくとも１個のヘテロ原子、例えば、Ｎ、Ｏ、またはＳなどを有する、不飽和の芳香族炭素環式基である。環（複数可）は必要に応じて非置換であるか、またはアミノ、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、ハロ、チオール、アシルオキシ、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、ベンジル、および他の置換基で置換されている。
組成物
【００２８】
表面結合部分を有する基材を含有する組成物であって、表面結合部分が、例えば、病原体不活化赤血球の調製に使用される化合物などの化合物に対して、生物学的試料中に存在し得る抗体を結合するのに適している組成物が本明細書に提供されている。
基材
【００２９】
当業者により認識されているように、基材は、当技術分野で公知の任意の固形担体であることができる。固形担体は、表面結合部分を結合するのに適した任意の材料（例えば、生物学的材料、合成材料）またはマトリックスで構成されていてもよい。固形担体の例として、ポリマーまたはコポリマー（例えば、ポリエステル、ポリエーテル、ポリオレフィン、ポリアミド、多糖、ポリウレタン、スチレンおよびスチレン誘導体、ポリスチレン、セルロース）、プラスチック、ガラス、金および他の金属などが挙げられる。固形担体の追加の例として、細胞（例えば、ＲＢＣ）、細胞膜および他の細胞由来の材料が挙げられる。固形担体は、２次元フォーマット（例えば、プレート）または３次元フォーマット（例えば、細胞、粒子、ビーズまたは他の球状もしくは準球状の物体）で表面結合部分を提示することができる。固形担体の追加の例として、粒子（例えば、ポリマー粒子）、例えば、ビーズおよびマイクロスフェアなど（例えば、合成ビーズおよびマイクロスフェア、ポリマーまたはコポリマーのビーズおよびマイクロスフェア）が挙げられる。結合剤もまた固形担体に整合性および構造を付与するために使用することができる。基材はアッセイプレートの一部分であることができる。特定の固形担体は、生物学的試料が結合しないまたは実質的に結合しない１種または複数種の材料で構成される。例えば、固形担体は、抗体が結合しない、または実質的に結合しない材料（例えば、特定の抗体が結合する抗原（複数可）を含まない材料）で構成されてもよい。特に、固形担体は病原体不活化赤血球に対して抗体が結合しないまたは実質的に結合しない材料で構成される。
【００３０】
本発明の組成物および方法における使用のための任意の固形担体は、表面結合部分への共有結合または非共有結合に対して適していてもよい。一部の実施形態では、固形担体は不活性である。一部の実施形態では、表面結合部分は、固形担体材料それ自体に共有結合または非共有結合により結合することができる。他の実施形態では、固形担体材料は、表面結合部分と相互作用するまたはさもなければ共有結合もしくは非共有結合により結合することができる反応性基（例えば、アミン（−ＮＨ２）またはアンモニウム（−ＮＨ３＋または−ＮＲ３＋）官能基、アルコール官能基（−ＯＨ）、カルボキシル官能基（−ＣＯＯＨ）イソシアネート官能基（−ＮＣＯ））で官能化されている。
【００３１】
基材が様々な異なる温度、例えば、室温、冷蔵温度、または冷凍温度などで安定していることは有利となり得る。一部の実施形態では、基材は室温で安定している。一部の実施形態では、基材は冷蔵温度（例えば、１〜６℃、２〜８℃、２〜４℃）で安定している。一部の実施形態では、基材は０℃または０℃未満（例えば、−２０℃）で安定している。一部の実施形態では、基材は−８０℃で安定している。
【００３２】
本開示のある特定の実施形態によると、基材はＲＢＣを含む。例えば、免疫血液学的試験に頻繁に使用されるＲＢＣは本明細書に提供されている基材であることができる。
【００３３】
一部の実施形態では、ＲＢＣはヒト血液から調製される。基材は、任意の血液型、例えば、Ｏ型、Ａ型、Ｂ型、またはＡＢ型のドナーからのＲＢＣを含むことができる。ＲＢＣは１種または複数種の抗体混合物の分割を特異的に支持するように設計されていてもよい。一部の実施形態では、ＲＢＣは、抗原Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、Ｋ、ｋ、Ｆｙａ、Ｆｙｂ、Ｊｋａ、Ｊｋｂ、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ１、ＬｅａおよびＬｅｂからなる群から選択される抗原を発現する。一部の実施形態では、ＲＢＣはＲｈ（Ｄ）を発現する。一部の実施形態では、ＲＢＣはＲ１Ｒ１、Ｒ２Ｒ２、Ｒ１ｗＲ１、Ｒ０ｒ、およびｒｒからなる群から選択されるＲｈ型である。ＲＢＣは、室温で（例えば、ＲＢＣ０．５％〜５％での、緩衝された懸濁液媒体の中で）、冷蔵温度（例えば、ＲＢＣ０．５％〜５％での、緩衝された懸濁液媒体の中で）で保存することができ、またはこれらは凍結することもできる（例えば、凍結保存剤、例えば、グリセロライト中で、−８０℃で保存）。
【００３４】
本発明の組成物において基材として利用されるＲＢＣは、単一ドナーから得ることができるか、またはこれらは、２またはそれよりも多くのドナーから得ることもできる（例えば、２またはそれよりも多くのドナーから得たＲＢＣの混合物）。一部の実施形態では、ＲＢＣ基材は、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１またはそれよりも多くの個々のドナーから得たＲＢＣを含む。ある場合には、２またはそれよりも多くのドナーからのＲＢＣは、１種または複数種の特性、例えば、ＡＢＯ血液型、または他のＲＢＣ抗原（例えば、共通のＲＢＣ抗原、臨床的に関連するＲＢＣ抗原）の存在もしくは不在を共通して有する。他の事例では、２またはそれよりも多くのドナーからのＲＢＣは、ある特定の特性、例えば、ＡＢＯ血液型または他のＲＢＣ抗原（例えば、共通のＲＢＣ抗原、臨床的に関連するＲＢＣ抗原）の存在もしくは不在に関して不均一である。一部の実施形態では、ＲＢＣ基材はＡＢＯ血液タイプの混合物を有するＲＢＣを含む。一部の実施形態では、ＲＢＣ基材はＲｈ因子に関して均一である。他の実施形態では、ＲＢＣ基材はＲｈ因子に関して不均一である。一部の実施形態では、ＲＢＣ基材は以下の抗原のいずれか１種または複数種に関して均一である：Ｃｓａ、Ｃｓｂ、Ｅｒａ、Ｅｒｂ、Ｖｅｌ、ＡＢＴＩ、Ｌａｎ、Ａｔａ、Ｊｒａ、ＡｎＷｊ、Ｓｄａ、Ｂａｔｔｙ（Ｂｙ）、Ｂｉｌｅｓ（Ｂｉ）、Ｂｏｘ（Ｂｘａ）Ｃｈｒｉｓｔｉａｎｓｅｎ（Ｃｈｒａ）、ＨＪＫ、ＨＯＦＭ、ＪＦＶ、ＪＯＮＥＳ、Ｊｅｎｓｅｎ（Ｊｅａ）、Ｋａｔａｇｉｒｉ（Ｋｇ）、Ｌｉｖｅｓａｙ（Ｌｉａ）、Ｍｉｌｎｅ、Ｏｌｄｅｉｄｅ（ＯＩａ）、Ｐｅｔｅｒｓ（Ｐｔａ）、Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ（ＲＡＳＭ）、Ｒｅｉｄ（Ｒｅａ）、ＲＥＩＴ、ＳＡＲＡ、Ｔｏｒｋｉｌｄｓｅｎ（Ｔｏａ）、およびＢｅｎｎｅｔｔ−Ｇｏｏｄｓｐｅｅｄ（Ｂｇ）。一部の実施形態では、ＲＢＣ基材は以下の抗原のいずれか１種または複数種に関して不均一である：Ｃｓａ、Ｃｓｂ、Ｅｒａ、Ｅｒｂ、Ｖｅｌ、ＡＢＴＩ、Ｌａｎ、Ａｔａ、Ｊｒａ、ＡｎＷｊ、Ｓｄａ、Ｂａｔｔｙ（Ｂｙ）、Ｂｉｌｅｓ（Ｂｉ）、Ｂｏｘ（Ｂｘａ）Ｃｈｒｉｓｔｉａｎｓｅｎ（Ｃｈｒａ）、ＨＪＫ、ＨＯＦＭ、ＪＦＶ、ＪＯＮＥＳ、Ｊｅｎｓｅｎ（Ｊｅａ）、Ｋａｔａｇｉｒｉ（Ｋｇ）、Ｌｉｖｅｓａｙ（Ｌｉａ）、Ｍｉｌｎｅ、Ｏｌｄｅｉｄｅ（ＯＩａ）、Ｐｅｔｅｒｓ（Ｐｔａ）、Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ（ＲＡＳＭ）、Ｒｅｉｄ（Ｒｅａ）、ＲＥＩＴ、ＳＡＲＡ、Ｔｏｒｋｉｌｄｓｅｎ（Ｔｏａ）、およびＢｅｎｎｅｔｔ−Ｇｏｏｄｓｐｅｅｄ（Ｂｇ）。
【００３５】
本明細書に記載されている組成物および方法において基材として使用するためのＲＢＣは、当技術分野で公知の任意の方法で得ることができる。例えば、ＲＢＣは標準的ＲＢＣ献血技術（例えば、アフェレーシス、ダブルレッド採取）により得ることができる。代わりに、ＲＢＣは、全血の他の成分からのＲＢＣの分離を介して、例えば、遠心分離または他の標準的な分留技術を介して、全血の献血から得ることができる。一部の実施形態では、ＲＢＣは、表面結合部分による機能化の前後に当技術分野で公知の任意の方法を介して滅菌される。
【００３６】
当業者であれば、化合物は本開示の一部の実施形態に従い、配列させて基材に結合することができることを認識している。本明細書で使用される場合、「配列」という用語は、基材、例えば、ガラスまたはプラスチックなどの上の結合化合物の全般的に秩序化した配置を指す。通常配列は、そこに化合物が結合している、定期的に間隔をあけて区切られた一連の領域の形態であってよい。このような配列はチップと記載されてもよい。例えば、マルチ−ウェルマイクロプレートにおける配列は、自動装置によりスキャンすることができる。
表面結合部分
【００３７】
本出願の様々な実施形態に従い、部分は基材表面に結合している。一部の実施形態では、部分は病原体不活化化合物である。一部の実施形態では、部分は病原体不活化化合物（例えば、その部分）の誘導体である。一部の実施形態では、部分は、病原体不活化化合物に類似のまたは共通の部分を有する化合物である。基材は、化合物またはその誘導体が基材表面に結合するように、病原体不活化化合物で処理することができる。代わりに、基材は、反応性部分それ自体が基材に結合するように、またはさらなるその誘導体が基材に結合するように、それ自体が病原体不活化化合物の誘導体である部分で処理することができる。代わりに、基材は、類似のまたは共通の部分が基材に結合するように、病原体不活化化合物と類似のまたは共通の部分を有する化合物で処理することができる。一部の実施形態では、部分は、アクリジン、例えば、アクリジン変異原、モノアルキル化剤、ビスアルキル化剤、アクリジンマスタード（例えば、６−クロロ−９−（３−［（２−クロロエチル）エチルアミノ］プロピルアミノ）−２−メトキシアクリジン、Ｓｉｇｍａ＃Ｉ２８８８）、またはアクリジンハーフマスタード（例えば、６−クロロ−９−［３−（２−クロロエチルアミノ）プロピルアミノ］−２−メトキシアクリジンジヒドロクロリド、Ｓｉｇｍａ＃Ｉ３６３６）などを含む化合物の誘導体であり、基材は、アクリジンを含む化合物または化合物の誘導体で処理することができる。
【００３８】
病原体不活化化合物は、赤血球または他の血液ベースの組成物中の１種または複数種の核酸含有剤を不活化する化合物であって、この核酸含有剤はヒト、他の哺乳動物、または脊椎動物において疾患を引き起こすことが可能である。病原因子は単細胞または多細胞であってよい。病原体の例は、ヒト、他の哺乳動物、または脊椎動物において疾患を引き起こす、細菌、ウイルス、原虫、真菌、酵母、かび、およびマイコプラズマである。病原体の遺伝物質はＤＮＡまたはＲＮＡであってよく、遺伝物質は一本鎖のまたは二本鎖核酸として存在してもよい。
【００３９】
病原体不活化化合物が開発され、この化合物は、病原体、より特異的には病原体核酸と反応する求電子性基を通常有する。例えば、その開示が参照により本明細書に組み込まれている、米国特許第５，６９１，１３２号；第６，１７７，４４１号；第６，４１０，２１９号；第６，１４３，４９０号；および第６，０９３，７２５号は、核酸を標的とする成分、ならびに核酸と反応して病原体を不活化する求電子性成分を有する化合物の使用について記載している。その開示が参照により本明細書に組み込まれている、米国特許第６，０９３，７２５号および第６，５１４，９８７号は、化合物の核酸を標的とする成分が、加水分解性リンカーを介して反応性求電子性成分に連結している化合物について記載している。このような加水分解性リンカーを含有する化合物は脆性化合物と呼ぶことができる。ある特定の条件下、脆性化合物のリンカーは加水分解反応を受け、これによって、化合物の核酸を標的とする成分および求電子性成分を脱カップリングすることになる。非加水分解性リンカーを介して求電子性成分に結合した、核酸を標的とする成分を含有する化合物は、非脆性化合物と呼ぶことができる。
【００４０】
一部の実施形態では、病原体不活化化合物は、反応性基、例えば、求電子性基であるか、または反応性基、例えば、求電子性基を、例えばｉｎ  ｓｉｔｕで形成することが可能であり、それを形成した官能基を含む化合物を含む。ある場合には、病原体不活化化合物は反応性になるために光活性化を必要とする。ある場合には、病原体不活化化合物は、反応性になるために光活性化を必要としない。例えば、官能基は、マスタード基、マスタード基中間体、マスタード基同等物、エポキシド、ホルムアルデヒドまたはホルムアルデヒドシントンであってよい。このような官能基は、反応性基、例えば、求電子性アジリジン、アジリジニウム、チイランまたはチイラニウムイオンなどをｉｎ  ｓｉｔｕで形成することが可能である。マスタード基はモノ−またはビス−（ハロエチル）アミン基またはモノ（ハロエチル）スルフィド基であってよい。マスタード同等物は、マスタードと類似の機序、例えば、反応性中間体を形成することにより反応する基、例えば、アジリジニウムおよびアジリジン基またはチイランおよびチイラニウム基などである。例として、アジリジン誘導体、モノまたはビス−（メシルエチル）アミン基、モノ−（メシルエチル）スルフィド基、モノまたはビス−（トシルエチル）アミン基およびモノ−（トシルエチル）スルフィド基が挙げられる。ホルムアルデヒドシントンはホルムアルデヒドへと分解する任意の化合物であって、ヒドロキシルアミン、例えば、ヒドロキシメチルグリシンを含む化合物である。病原体不活化化合物の反応性基は、病原体の核酸、例えば、核酸上の求核性基と反応することが可能である。反応性基はまた、クエンチャーの求核性基と反応することが可能である。
【００４１】
一部の実施形態では、病原体不活化化合物は、核酸、例えば、固定部分などを化合物の標的にさせる成分を含む。固定部分は、核酸バイオポリマー、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡなどに非共有結合により結合することが可能であり、核酸結合リガンド、核酸結合基、または核酸結合部分とも呼ばれる部分を含む。ある特定の実施形態では、固定部分は、加水分解性リンカーを介して反応性求電子性成分に連結する。
【００４２】
一部の実施形態では、本明細書に提供されている基材の処理に用いられる化合物、または本明細書に提供されている基材の表面に結合した、生成された部分は非脆性化合物またはその誘導体である。非脆性化合物は、以下の通り、式Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩのいずれかの化合物であってよい。
【００４３】
式Ｉは、
【化１】
2020503512.tif 000003
（式中、ｎは１〜１２（両端の値を含む）の整数であり、ＸはＣＨ２、ＮＨ、Ｏ、またはＳである）またはその塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である。
【００４４】
式ＩＩは、
【化２】
2020503512.tif 000004
（式中、ｎは１〜１２（両端の値を含む）の整数である）またはその塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である。
【００４５】
式ＩＩＩは、
【化３】
2020503512.tif 000005
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５のうちの１つまたは２つは、独立して、必要に応じてアミン上に第２の２−エチルハロ基を有し、１〜９個の炭素の鎖により三環系環に結合している、（２−クロロエチル）アミノ基または（２−ブロモエチル）アミノ基であり、その鎖は、酸素、窒素、および硫黄からなる群から選択される１個または複数のヘテロ原子を必要に応じて含有し、鎖は１つまたは複数の不飽和結合またはカルボニル基を必要に応じて含み、この鎖は１つまたは複数の低級アルキル基で必要に応じて置換されており、
残りのＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲ５は、独立して、水素、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン、−ＣＨ２ＯＲ６、または−ＣＨ２ＮＲ７Ｒ８であり、ここで、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８はそれぞれ独立して水素または低級アルキルである）である。
【００４６】
特定の非脆性化合物は、以下：
【化４】
2020503512.tif 000006
【化５】
2020503512.tif 000007
ならびにその塩または立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）を含む。
【００４７】
一部の実施形態では、本明細書に提供されている基材の処理に用いられる化合物、または本明細書に提供されている基材の表面に結合した、生成された部分は、脆性化合物またはその誘導体である。脆性化合物は、以下の通り、式ＩＶ、Ｖ、もしくはＶＩのいずれかの化合物、または式ＩＶ、Ｖ、もしくはＶＩのいずれかの化合物の誘導体であってよい。
【００４８】
式ＩＶは、
【化６】
2020503512.tif 000008
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９のうちの少なくとも１つは、以下に定義されているような−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の残りは、独立して、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群から選択され、
ここで、−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜８アルキル、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３アルキル−アリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキルであり、
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで、−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１〜８アルキル−、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−であり、
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり、
Ｘは、独立して−Ｒ１１−であり、
Ｅは、独立して、−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、および
【化７】
2020503512.tif 000009
からなる群から選択され、
ここで、−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで、各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５、または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり、
Ｒ１３は、独立して−Ｃ１〜８アルキル、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３アルキル−アリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキルである）
またはその塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である。
【００４９】
式ＩＶの一部の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８はそれぞれ水素である。他の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８のうちの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、または少なくとも７つは水素である。
【００５０】
式ＩＶの一部の実施形態では、Ｒ９は−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅである。一部の実施形態では、Ｖは−ＮＨ−Ｒ１１−である。一部のこのような実施形態では、Ｒ１１は−Ｃ１〜８アルキル−、例えば、メチルまたはエチルである。特定の実施形態では、Ｖは−ＮＨ−Ｒ１１−であり、ここで、Ｒ１１は直鎖−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、Ｖは−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−である。一部のこのような実施形態では、Ｒ１１は−Ｃ１〜８アルキル−、例えば、メチルまたはエチルである。特定の実施形態では、Ｖは−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで、Ｒ１１は直鎖−Ｃ１〜８アルキル−である。
【００５１】
式ＩＶの一部の実施形態では、Ｗは−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−である。一部の実施形態では、Ｗは−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−である。一部の実施形態では、Ｗは−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−である。
【００５２】
式ＩＶの一部の実施形態では、Ｘは−Ｒ１１−であり、ここで、−Ｒ１１−は−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、Ｘはメチルである。一部の実施形態では、Ｘはエチルである。一部の実施形態では、Ｘは直鎖−Ｃ１〜８アルキル−である。
【００５３】
式ＩＶの一部の実施形態では、Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２であり、ここで、Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇである。一部のこのような実施形態では、各Ｇは独立して−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉである。一部のこのような実施形態では、Ｇ部分両方とも−Ｃｌである。
【００５４】
式ＩＶの一部の実施形態では、Ｒ９は−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部の実施形態では、Ｒ９は−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、または−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部のこのような実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８のそれぞれは水素である。
【００５５】
式ＩＶの一部の実施形態では、Ｒ９は−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部の実施形態では、Ｒ９は−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、または−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）３−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部のこのような実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８のそれぞれは水素である。
【００５６】
式Ｖは、
【化８】
2020503512.tif 000010
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、独立して、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群から選択され、
ここで、−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜８アルキル、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３アルキル−アリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキルであり、
Ｒ２０は−Ｈまたは−ＣＨ３であり、
Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、
ここで、−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１〜８アルキル−、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−であり、
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり、
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり、
Ｅは、独立して、−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、および
【化９】
2020503512.tif 000011
からなる群から選択され、ここで、−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで、各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５、または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり、
Ｒ１３は、独立して、−Ｃ１〜８アルキル、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３アルキル−アリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキルである）
またはその塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である。
【００５７】
式Ｖの一部の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８はそれぞれ水素である。他の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８のうちの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、または少なくとも７つは水素である。式Ｖの一部の実施形態では、Ｒ２０はＨである。一部の実施形態では、Ｒ２０は−ＣＨ３である。
【００５８】
式Ｖの一部の実施形態では、Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｗ−Ｘ−Ｅである。一部の実施形態では、Ｒ１１は−Ｃ１〜８アルキル−、例えば、メチルまたはエチルである。一部の実施形態では、Ｒ１１は直鎖−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、Ｒ１１は−（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）５−、−（ＣＨ２）６−、−（ＣＨ２）７−、または−（ＣＨ２）８−である。
【００５９】
式Ｖの一部の実施形態では、Ｗは−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−である。一部の実施形態では、Ｗは−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−である。一部の実施形態では、Ｗは−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−である。
【００６０】
式Ｖの一部の実施形態では、Ｘは−Ｒ１１−であり、ここで、−Ｒ１１−は−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、Ｘはメチルまたはエチルである。一部の実施形態では、Ｘは直鎖−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、Ｘは−（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）５−、−（ＣＨ２）６−、−（ＣＨ２）７−、または−（ＣＨ２）８−である。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０はＨである。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０は−ＣＨ３である。
【００６１】
式Ｖの一部の実施形態では、Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２であり、ここで、Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇである。一部のこのような実施形態では、各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉである。一部のこのような実施形態では、Ｇ部分は両方とも−Ｃｌである。
【００６２】
式Ｖの一部の実施形態では、Ｒ２１は−Ｃ１〜８アルキル−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部の実施形態では、Ｒ２１は−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、または−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０はＨである。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０は−ＣＨ３である。前述の実施形態のいずれかでは、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８のそれぞれは水素であってよい。
【００６３】
式Ｖの一部の実施形態では、Ｒ２１は−Ｃ１〜８アルキル−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部の実施形態では、Ｒ２１は−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、または−（ＣＨ２）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）３−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０はＨである。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０は−ＣＨ３である。前述の実施形態のいずれかでは、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８のそれぞれは水素であってよい。
【００６４】
式ＶＩは、
【化１０】
2020503512.tif 000012
（式中、Ｒ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ８の少なくとも１つは−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅ、であり、Ｒ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ８の残りは、独立して、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群から選択され、
ここで、−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜８アルキル、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３アルキル−アリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキルであり、
Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、−ＮＨ−Ｒ１１−または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで、−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１〜８アルキル−、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−であり、
Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−であり、
Ｘは、独立して、−Ｒ１１−であり、
Ｅは、独立して、−Ｎ（Ｒ１２）２、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、および
【化１１】
2020503512.tif 000013
からなる群から選択され、ここで、−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで、各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５、または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり、
Ｒ１３は、独立して、−Ｃ１〜８アルキル、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３アルキル−アリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキルである）
またはその塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である。
【００６５】
上記式ＩＶにおいて、アクリジン核は固定部分であり、−Ｖ−Ｗ−Ｘ−基（複数可）は脆性リンカーを含み、Ｅ基（複数可）はエフェクター基であることを認識されたい。同様に、上記式ＶＩにおいて、プソラレン核は固定部分であり、−Ｖ−Ｗ−Ｘ−基（複数可）は脆性リンカーを含み、Ｅ基（複数可）はエフェクター基である。式Ｖは式ＩＶのサブセットである。
【００６６】
一部の実施形態では、式ＩＶの脆性化合物は式ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）の化合物、またはその塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）であり、特異的に示されていないすべての可変基は上記式ＩＶに対するものと同じである：
【００６７】
式ＩＶ（ａ）：Ｗは、独立して、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−である；
【００６８】
式ＩＶ（ｂ）：Ｖは、独立して、−Ｒ１１−、または−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで、−Ｒ１１−は、独立して、−Ｃ１〜８アルキル−、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−である；
【００６９】
式ＩＶ（ｃ）：−Ｒ１１−は、独立して、−アリール−、−ヘテロアリール−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−、−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル−、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−である；
【００７０】
式ＩＶ（ｄ）：−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで、各Ｇは、独立して、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５、または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３である；
【００７１】
式ＩＶ（ｅ）：Ｅは、独立して、−Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）、−Ｓ−Ｒ１２、および
【化１２】
2020503512.tif 000014
からなる群から選択され、ここで、−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで、各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５、または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３であり、Ｒ１３は、独立して、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３アルキル−アリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキルである；
【００７２】
式ＩＶ（ｆ）：Ｗは、独立して、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｏ−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−Ｏ−、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＲ１０）−である；
【００７３】
式ＩＶ（ｇ）：−Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇであり、ここで、各Ｇは、独立して、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ３、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５、または−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ３である；
【００７４】
式ＩＶ（ｈ）：Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９のうちの少なくとも１つは、式ＩＶに対して定義されているような−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｅであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９のうちの少なくとも１つは、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の残りは、独立して、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群から選択され、Ｒ１０は式ＩＶに対して定義されている通りである。
【００７５】
一部の実施形態では、本明細書に提供されている基材の処理に用いられる化合物、または本明細書に提供されている基材の表面に結合した、生成された部分は、非脆性化合物、例えば、式ＩＶ、Ｖ、またはＶＩのいずれかの化合物の非脆性類似体である。このような非脆性化合物は、以下の通り、式ＶＩＩ、ＶＩＩＩまたはＩＸのいずれかの化合物であってよい。
【００７６】
式ＶＩＩは、
【化１３】
2020503512.tif 000015
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の少なくとも１つは−Ｖ−Ｘ−Ｅであり、ここで、Ｖ、Ｘ、およびＥは式ＩＶに対して定義されている通りであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の残りは、独立して、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群から選択され、
ここで、−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜８アルキル、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３アルキル−アリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキルである）
またはその塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である。
【００７７】
式ＶＩＩの一部の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８はそれぞれ水素である。他の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８のうちの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、または少なくとも７つは水素である。
【００７８】
式ＶＩＩの一部の実施形態では、Ｒ９は−Ｖ−Ｘ−Ｅであり、ここで、Ｖ、Ｘ、およびＥは式ＩＶに対して定義されている通りである。一部の実施形態では、Ｖは−ＮＨ−Ｒ１１−である。一部のこのような実施形態では、Ｒ１１は−Ｃ１〜８アルキル−、例えば、メチルまたはエチルである。特定の実施形態では、Ｖは−ＮＨ−Ｒ１１−であり、ここで、Ｒ１１は直鎖−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、Ｖは−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−である。一部のこのような実施形態では、Ｒ１１は−Ｃ１〜８アルキル−、例えば、メチルまたはエチルである。特定の実施形態では、Ｖは−Ｎ（ＣＨ３）−Ｒ１１−であり、ここで、Ｒ１１は直鎖−Ｃ１〜８アルキル−である。
【００７９】
式ＶＩＩの一部の実施形態では、Ｘは−Ｒ１１−であり、ここで、−Ｒ１１−は−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、部分−Ｖ−Ｘ−は−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、部分−Ｖ−Ｘ−は、−ＮＨ−（ＣＨ２）−、−ＮＨ−（ＣＨ２）２−、−ＮＨ−（ＣＨ２）３−、−ＮＨ−（ＣＨ２）４−、−ＮＨ−（ＣＨ２）５−、−ＮＨ−（ＣＨ２）６−、−ＮＨ−（ＣＨ２）７−、または−ＮＨ−（ＣＨ２）８−である。一部の実施形態では、部分−Ｖ−Ｘ−は−Ｎ（ＣＨ３）−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、部分−Ｖ−Ｘ−は−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）−、−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）２−、−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）３−、−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）４−、−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）５−、−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）６−、−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）７−、または−Ｎ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）８−である。
【００８０】
式ＶＩＩの一部の実施形態では、Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２であり、ここで、Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇである。一部のこのような実施形態では、各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉである。一部のこのような実施形態では、Ｇ部分は両方とも−Ｃｌである。
【００８１】
式ＶＩＩの一部の実施形態では、Ｒ９は−ＮＨ−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部の実施形態では、Ｒ９は−ＮＨ−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）３−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）４−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）５−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）６−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−ＮＨ−（ＣＨ２）７−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、または−ＮＨ−（ＣＨ２）８−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部のこのような実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８のそれぞれは水素である。
【００８２】
式ＶＩＩＩは、
【化１４】
2020503512.tif 000016
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８は、独立して、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群から選択され、
ここで、−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜８アルキル、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３アルキル−アリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキルであり、
Ｒ２０は−Ｈまたは−ＣＨ３であり、
Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｘ−Ｅであり、ここで、Ｒ１１、Ｘ、およびＥは式Ｖに対して定義されている通りである）
またはその塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である。
【００８３】
式ＶＩＩＩの一部の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８はそれぞれ水素である。他の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８のうちの少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、または少なくとも７つは水素である。
【００８４】
式ＶＩＩＩの一部の実施形態では、Ｒ２０はＨである。一部の実施形態では、Ｒ２０は−ＣＨ３である。
【００８５】
式ＶＩＩＩの一部の実施形態では、Ｒ２１は−Ｒ１１−Ｘ−Ｅであり、ここで、Ｒ１１、Ｘ、およびＥは式Ｖに対して定義されている通りである。一部の実施形態では、Ｒ１１は−Ｃ１〜８アルキル−、例えば、メチルまたはエチルである。一部の実施形態では、Ｒ１１は直鎖−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、Ｒ１１は−（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）５−、−（ＣＨ２）６−、−（ＣＨ２）７−、または−（ＣＨ２）８−である。
【００８６】
式ＶＩＩＩの一部の実施形態では、Ｘは−Ｒ１１−であり、ここで、−Ｒ１１−は−Ｃ１〜８アルキル−である。一部の実施形態では、部分−Ｒ１１−Ｘ−は−Ｃ１〜８アルキル−である。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０はＨである。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０は−ＣＨ３である。一部の実施形態では、部分−Ｒ１１−Ｘ−は−（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）５−、−（ＣＨ２）６−、−（ＣＨ２）７−、または−（ＣＨ２）８−である。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０はＨである。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０は−ＣＨ３である。
【００８７】
式ＶＩＩＩの一部の実施形態では、Ｅは−Ｎ（Ｒ１２）２であり、ここで、Ｒ１２は−ＣＨ２ＣＨ２−Ｇである。一部のこのような実施形態では、各Ｇは、独立して、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉである。一部のこのような実施形態では、Ｇ部分は両方とも−Ｃｌである。
【００８８】
式ＶＩＩＩの一部の実施形態では、Ｒ２１は−Ｃ１〜８アルキル−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部の実施形態では、Ｒ２１は−（ＣＨ２）−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）２−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）３−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）４−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）５−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）６−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、−（ＣＨ２）７−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２、または−（ＣＨ２）８−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）２である。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０はＨである。一部のこのような実施形態では、Ｒ２０は−ＣＨ３である。前述の実施形態のいずれかでは、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、およびＲ８のそれぞれは水素であってよい。
【００８９】
式ＩＸは、
【化１５】
2020503512.tif 000017
（式中、Ｒ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ８のうちの少なくとも１つは−Ｖ−Ｘ−Ｅであり、ここで、Ｖ、Ｘ、およびＥは式ＶＩに対して定義されている通りであり、
Ｒ４４、Ｒ５５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ８の残りは、独立して、−Ｈ、−Ｒ１０、−Ｏ−Ｒ１０、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ１０、および−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ１０からなる群から選択され、
ここで、−Ｒ１０は、独立して、Ｈ、−Ｃ１〜８アルキル、−Ｃ１〜８ヘテロアルキル、−アリール、−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３アルキル−アリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール、−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３アルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３アルキル、−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−アリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、−Ｃ１〜３アルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキル、または−Ｃ１〜３ヘテロアルキル−ヘテロアリール−Ｃ１〜３ヘテロアルキルである）
またはその塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）である。
【００９０】
本発明の組成物および方法において使用するのに適した病原体不活化化合物の具体例は、β−アラニン、Ｎ−（アクリジン−９−イル）、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］エチルエステル（また代わりに本明細書では「Ｓ−３０３」と呼ばれている）であり、その塩を含めたその構造は以下の通りである。
【化１６】
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【００９１】
一部の実施形態では、本明細書に提供されている基材の処理に用いられる化合物、または本明細書に提供されている基材の表面に結合した、生成された部分はＳ−３０３である。一部の実施形態では、本明細書に提供されている基材の処理に用いられる化合物、または本明細書に提供されている基材の表面に結合した、生成された部分は、Ｓ−３０３の誘導体である。一部の実施形態では、本明細書に提供されている基材の処理に用いられる化合物、または本明細書に提供されている基材の表面に結合した、生成された部分はＳ−３０３の非脆性類似体またはその誘導体である。
【００９２】
一部の実施形態では、本明細書に提供されている基材の処理に用いられる化合物、または本明細書に提供されている基材の表面に結合した、生成された部分は、以下の化合物、またはその塩もしくは立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む）から選択される化合物である：
【化１７】
2020503512.tif 000019
【化１８】
2020503512.tif 000020
【化１９】
2020503512.tif 000021
【化２０】
2020503512.tif 000022
【化２１】
2020503512.tif 000023
【００９３】
上述の化合物のいずれかの一部の実施形態では、化合物は塩化物の塩である。上述の化合物のいずれかの一部の実施形態では、化合物は二塩化水素化物塩である。一部の実施形態では、化合物はＳ−１９７の二塩化水素化物塩である。一部の実施形態では、化合物はＳ−２２０の二塩化水素化物塩である。
【００９４】
一部の実施形態では、本明細書に提供されている基材の処理に用いられる化合物、または本明細書に提供されている基材の表面に結合した、生成された部分は、前述の化合物のいずれかの誘導体（例えば、加水分解した誘導体）である。一部の実施形態では、本明細書に提供されている基材の処理に用いられる化合物、または本明細書に提供されている基材の表面に結合した、生成された部分は、前述の化合物のいずれかの非脆性類似体である。
【００９５】
本明細書に提供されている化合物の誘導体は、核酸を標的とする部分、核酸を標的とする部分の一部分、求電子性部分、または求電子性部分の一部分を含むことができる。本明細書に提供されている化合物の誘導体は、ａ）核酸を標的とする部分または核酸を標的とする部分の一部分、およびｂ）求電子性の部分または求電子性部分の一部分を含むことができる。本明細書に提供されている化合物の誘導体は、核酸を標的とする部分または核酸を標的とする部分の一部分のみを含むことができる。本明細書に提供されている化合物の誘導体は、求電子性部分または求電子性部分の一部分のみを含むことができる。化合物が非脆性である場合、その誘導体は、ａ）核酸を標的とする部分または核酸を標的とする部分の一部分、およびｂ）求電子性部分または求電子性部分の一部分を含むことができ、ａ）およびｂ）は、非加水分解性リンカーを介して互いに結合している。化合物が脆性である場合、その誘導体は、ａ）核酸を標的とする部分または核酸を標的とする部分の一部分、およびｂ）求電子性部分または求電子性部分の一部分を含むことができ、ａ）およびｂ）は、加水分解性リンカーを介して互いに結合している。化合物が脆性である場合、その誘導体は、ａ）加水分解性リンカーの加水分解生成物を表す部分に結合した核酸を標的とする部分または核酸を標的とする部分の一部分を含み得る。化合物が脆性である場合、その誘導体は、加水分解性リンカーの加水分解生成物を表す部分に結合した求電子性部分または求電子性部分の一部分を含み得る。加水分解生成物を表す部分には、制限なしで、アルコール、アミン、カルボン酸、エステル、および前述のうちのいずれかの塩または立体異性体が含まれる。
【００９６】
本明細書に記載されている化合物または誘導体のいずれかは、基材と反応して、本明細書に提供されている組成物のいずれかを形成するための出発材料であってよい。代わりに、本明細書に記載されている化合物または誘導体のいずれかは、本明細書に提供されている組成物のいずれかにおいて、基材に結合することもできる。本明細書に提供されている任意の誘導体は、これがその誘導体である化合物から形成してもよいし、または、これがその誘導体である化合物から独立して、同等の分子構造を調製してもよい（例えば、合成してもよい）。
【００９７】
所与の基材単位、（例えば、単一の赤血球、単一のポリスチレンビーズ）は、１つまたは複数の表面結合部分を含有することになることが理解されている。表面結合部分は、所与の基材単位にわたり均一であってよい。代わりに、表面結合部分は、所与の基材単位（例えば、赤血球）にわたり不均一であってよい。所与の基材単位にわたる不均一性は、基材単位と、不均一なセットの化合物または誘導体との反応から生じ得る。所与の基材単位にわたる不均一性はまた、基材単位と、均一な化合物または誘導体との反応から生じることもあり、この場合化合物または誘導体と基材との反応は、基材表面に結合した２種またはそれよりも多くの異なる反応生成物をもたらす。ある場合には、表面結合部分は任意の特定の基材単位にわたり均一であるが、基材単位（例えば、赤血球）の一群にわたり不均一であることもある。これは、異なる化合物または誘導体を有する異なる基材単位の反応、これに続く、生成した基材単位の混合による、表面結合した基材単位（例えば、赤血球）の不均一な一群の形成から生じ得る。
【００９８】
本明細書に記載されている実施形態のいずれかにおいて、表面結合部分は、基材表面上のある量で存在することができ、これは基材の担持レベルとも呼ばれる。担持レベルは、基材１単位ベース、例えば、細胞１個ベース（例えば、赤血球）、ビーズ１個ベースまたは粒子１個ベース（例えば、細胞１個当たりの部分、ビーズ１個当たりの部分、粒子１個当たりの部分）で記載することができる。一部の実施形態では、基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球１個当たり）少なくとも約１，０００、少なくとも約２，０００、少なくとも約３，０００、少なくとも約４，０００、少なくとも約５，０００、少なくとも約６，０００、少なくとも約８，０００、少なくとも約１０，０００、少なくとも約１２，０００、少なくとも約１４，０００、少なくとも約１７，０００、少なくとも約２０，０００、少なくとも約２５，０００、少なくとも約３０，０００、少なくとも約３５，０００、少なくとも約４０，０００、または少なくとも約５０，０００個の部分であってよい。一部の実施形態では、基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球１個当たり）約５０，０００個以下、約７５，０００個以下または約１００，０００個以下の部分であってよい。一部の実施形態では、基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球１個当たり）、約１，０００〜約１００，０００個の間、約１，０００〜約７５，０００個の間、約１，０００〜約５０，０００個の間、約１，０００〜約２５，０００個の間、約５，０００〜約５０，０００個の間、約５，０００〜約２５，０００個の間、約５，０００〜約１５，０００個の間、約８，０００〜約１５，０００個の間、約２５，０００〜約５０，０００個の間、約２５，０００〜約４０，０００個の間、約２５，０００〜約３５，０００個の間、約２５，０００〜約３０，０００個の間、約３０，０００〜約４０，０００個の間、または約３０，０００〜約３５，０００個の間の部分であってよい。一部の実施形態では、基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球１個当たり）約１，０００、約２，０００、約３，０００、約４，０００、約５，０００、約６，０００、約７，０００、約８，０００、約９，０００、約１０，０００、約１１，０００、約１２，０００、約１３，０００、約１４，０００、約１５，０００、約１６，０００、約１７，０００、約１８，０００、約２０，０００、約２２，０００、約２４，０００、約２６，０００、約２８，０００、約３０，０００、約、約３２，０００、約３５，０００、約４０，０００、約４５，０００、約５０，０００、約６０，０００、約７０，０００、約８０，０００、約９０，０００、または約１００，０００個の部分であってよい。
【００９９】
担持レベルは、単位面積ベース、例えば、単位表面積ベース（例えば、基材表面積１μｍ２当たりの部分）で記載することができる。一部の実施形態では、基材の担持レベルは、少なくとも約５個の部分／μｍ２、少なくとも約７個の部分／μｍ２、少なくとも約１０個の部分／μｍ２、少なくとも約１５個の部分／μｍ２、少なくとも約２０個の部分／μｍ２、少なくとも約２５個の部分／μｍ２、少なくとも約３０個の部分／μｍ２、少なくとも約３５個の部分／μｍ２、少なくとも約４０個の部分／μｍ２、少なくとも約５０個の部分／μｍ２、少なくとも約６０個の部分／μｍ２、少なくとも約７０個の部分／μｍ２、少なくとも約８０個の部分／μｍ２、少なくとも約９０個の部分／μｍ２、少なくとも約１００個の部分／μｍ２、少なくとも約１２０個の部分／μｍ２、少なくとも約１４０個の部分／μｍ２、少なくとも約１６０個の部分／μｍ２、少なくとも約１８０個の部分／μｍ２、少なくとも約２００個の部分／μｍ２、少なくとも約２２５個の部分／μｍ２、少なくとも約２５０個の部分／μｍ２、少なくとも約２７５個の部分／μｍ２、少なくとも約３００個の部分／μｍ２、少なくとも約３５０個の部分／μｍ２、少なくとも約４００個の部分／μｍ２、少なくとも約４５０個の部分／μｍ２、または少なくとも約５００個の部分／μｍ２であってよい。一部の実施形態では、基材の担持レベルは、約５００個の部分／μｍ２以下、約７５０個の部分／μｍ２以下、または約１，０００個の部分／μｍ２以下であってよい。一部の実施形態では、基材の担持レベルは、約５〜約１，０００個の部分／μｍ２の間、約５〜約７５０個の部分／μｍ２の間、約５〜約５００個の部分／μｍ２の間、約２０〜約５００個の部分／μｍ２の間、約２０〜約４００個の部分／μｍ２の間、約２０〜約２００個の部分／μｍ２の間、約２０〜約１００個の部分／μｍ２の間、約３０〜約２００個の部分／μｍ２の間、約３０〜約１００個の部分／μｍ２の間、約５０〜約１００個の部分／μｍ２の間、約１００〜約５００個の部分／μｍ２の間、約１００〜約４００個の部分／μｍ２の間、約１４０〜約４００個の部分／μｍ２の間、約１４０〜約３００個の部分／μｍ２の間、約１４０〜約２５０個の部分／μｍ２の間または約１８０〜約３００個の部分／μｍ２の間であってよい。一部の実施形態では、基材の担持レベルは、約５個の部分／ｃｍ２、約７個の部分／ｃｍ２、約１０個の部分／ｃｍ２、約１５個の部分／ｃｍ２、約２０個の部分／ｃｍ２、約２５個の部分／ｃｍ２、約３０個の部分／ｃｍ２、約３５個の部分／ｃｍ２、約４０個の部分／ｃｍ２、約４５個の部分／ｃｍ２、約５０個の部分／ｃｍ２、約５５個の部分／ｃｍ２、約６０個の部分／ｃｍ２、約６５個の部分／ｃｍ２、約７０個の部分／ｃｍ２、約７５個の部分／ｃｍ２、約８０個の部分／ｃｍ２、約８５個の部分／ｃｍ２、約９０個の部分／ｃｍ２、約９５個の部分／ｃｍ２、約１００個の部分／ｃｍ２、約１１０個の部分／ｃｍ２、約１２０個の部分／ｃｍ２、約１３０個の部分／ｃｍ２、約１４０個の部分／ｃｍ２、約１５０個の部分／ｃｍ２、約１６０個の部分／ｃｍ２、約１７０個の部分／ｃｍ２、約１８０個の部分／ｃｍ２、約１９０個の部分／ｃｍ２、約２００個の部分／ｃｍ２、約２２５個の部分／ｃｍ２、約２５０個の部分／ｃｍ２、約２７５個の部分／ｃｍ２、約３００個の部分／ｃｍ２、約３２５個の部分／ｃｍ２、約３５０個の部分／ｃｍ２、約３７５個の部分／ｃｍ２、約４００個の部分／ｃｍ２、約４２５個の部分／ｃｍ２、約４５０個の部分／ｃｍ２、約４７５個の部分／ｃｍ２、約５００個の部分／ｃｍ２、約６００個の部分／ｃｍ２、約７００個の部分／ｃｍ２、約８００個の部分／ｃｍ２、約９００個の部分／ｃｍ２、または約１，０００個の部分／ｃｍ２であってよい。
【０１００】
担持レベルは基材単位の一群の全域で実質的に均一であってもよいし、またはこれは基材単位の一群の全域で不均一であってもよい。本明細書に提供されている担持レベルは、基材単位の一群全域での計量した平均担持レベルを表し得る。担持レベルは、当技術分野で公知の任意の方法、例えば、基材に加える前に化合物を標識し（例えば、放射標識、免疫標識、化学的標識、化学発光、蛍光標識）、次いで化合物を基材と合わせた後で標識を検出することによって測定することができる。代わりにまたは加えて、担持レベルは、基材に加えた後で化合物を直接的にまたは間接的に標識し（例えば、免疫標識、免疫蛍光、化学発光）、次いで標識を検出することによって測定することもできる。一般的に、このような標識は、絶対的担持レベルまたは相対的担持レベルを判定する際の比較対照物または参照ポイントとして、本明細書に提供されているキットおよび方法に使用される化合物とは別に（例えば、対照として、検量線として）実施される。このような標識は、定量的または準定量的方法を使用して直接定量してもよいし、または参照標準、例えば、表面上に公知の量の同様に標識した分子を有する細胞、ビーズまたは他の材料などと比較してもよい（例えば、ＦＡＣＳ分析）。
【０１０１】
一部の実施形態では、組成物（例えば、部分結合した基材）は室温で安定している。一部の実施形態では、組成物は冷蔵温度（例えば、２〜８℃）で安定している。一部の実施形態では、組成物は０℃および／または０℃未満（例えば、−２０℃）で安定している。一部の実施形態では、組成物は−８０℃で安定している。組成物は少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約４カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１２カ月間またはそれよりも長く室温で保存するのに適していてもよい。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約４カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１２カ月間またはそれよりも長く冷蔵温度で保存するのに適していてもよい。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約３カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１年またはそれよりも長く０℃および／または０℃未満で保存するのに適していてもよい。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約３カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１年またはそれよりも長く−８０℃で保存するのに適していてもよい。組成物は、液体、緩衝液、または任意の適切な溶液（例えば、非反応性溶液）の存在下で保存されてもよい。例えば、基材が赤血球である場合、組成物は、赤血球添加物溶液、血液バンク生理食塩水、緩衝された懸濁液媒体、または他の適した溶液中に保存することができる。赤血球添加物溶液および緩衝された懸濁液媒体は当技術分野で公知である。基材が赤血球である場合、組成物は、約０．３％〜約１０％ＲＢＣ、約０．５％〜約５％ＲＢＣ、約０．５％〜約１％ＲＢＣ、約１％〜約１．５％ＲＢＣ、約１．５％〜約２％ＲＢＣ、約２％〜約２．５％ＲＢＣ、約２．５％〜約３％ＲＢＣ、約３％〜約３．５％ＲＢＣ、約３．５％〜約４％ＲＢＣ、約４％〜約４．５％ＲＢＣ、約４．５％〜約５％ＲＢＣ、または約０．５％、約１％、約１．５％、約２％、約２．５％、約３％、約３．５％、約４％、約４．５％、または約５％ＲＢＣの懸濁液として保存することができる。組成物が保存のために凍結される場合、凍結保存剤、例えば、当技術分野で公知の任意の凍結保存剤などもまた加えることができる。
【０１０２】
本明細書に提供されている組成物（例えば、部分を結合した基材）の保存のための安定性および適性は、表面結合部分の性質に依存し得る。例えば、加水分解性リンカー（例えば、非脆性化合物またはその誘導体、または脆性化合物の加水分解生成物）を欠く表面結合部分は、加水分解性リンカー（例えば、脆性化合物またはその誘導体）を含有する表面結合部分よりも安定し得る。一部の実施形態では、加水分解性リンカーを欠く表面結合部分を含有する本明細書に提供されている組成物は室温で安定している。一部の実施形態では、組成物は冷蔵温度で安定している。一部の実施形態では、組成物は０℃および／または０℃未満で安定している。一部の実施形態では、組成物は−８０℃で安定している。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約４カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１２カ月間またはそれよりも長い室温での保存に適していてもよい。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約４カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１２カ月間またはそれよりも長い冷蔵温度での保存に適していてもよい。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約３カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１年またはそれよりも長い０℃および／または０℃未満での保存に適していてもよい。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約３カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１年またはそれよりも長い−８０℃での保存に適していてもよい。一部の実施形態では、加水分解性リンカーを含有する表面結合部分を含有する本明細書に提供されている組成物は室温で安定している。一部の実施形態では、組成物は冷蔵温度で安定している。一部の実施形態では、組成物は０℃および／または０℃未満で安定している。一部の実施形態では、組成物は−８０℃で安定している。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約４カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１２カ月間またはそれよりも長い室温での保存に適していてもよい。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約４カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１２カ月間またはそれよりも長い冷蔵温度での保存に適していてもよい。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約２カ月間、約３カ月間、約６カ月間、約９カ月間、または約１年間またはそれよりも長い０℃および／または０℃未満での保存に適していてもよい。組成物は、少なくとも約１時間、約２時間、約４時間、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、２カ月間、約３カ月間、約６カ月間、９カ月間、または約１年またはそれよりも長い−８０℃での保存に適していてもよい。
キット
【０１０３】
本明細書に記載されている組成物（例えば，表面結合部分を有する基材）のいずれかを含む様々なキットが本明細書に提供されている。一部の実施形態では、キットは本明細書に記載されている方法のいずれかを実施するための、基材および／または表面結合部分を有する基材の使用について記載している使用説明書を含む。キットはまた、本明細書に記載されている方法のいずれかを実行するのに必要または有用となり得る追加の成分の任意の組合せも含有し得る。例示的なキットがここに記載されているが、他の有用なキットの内容は、本開示に照らして当業者には明らかとなろう。
【０１０４】
本明細書に記載されている方法に従い、生物学的試料中の抗体の存在を検出するためのキットが本明細書に提供されている。一部の実施形態では、キットは、第１の基材を含有する第１の容器であって、部分が第１の基材の表面に結合しており、この部分が、本明細書に記載されている化合物およびその誘導体から選択される、第１の容器と、第２の基材を含有する第２の容器であって、第２の基材の表面が結合部分を欠く第２の容器とを含む。第１の基材表面に結合した部分は、本明細書に記載されている任意の化合物または誘導体、例えば、病原体不活化化合物またはその誘導体などであってよい。一部の実施形態では、第１の基材の表面に結合した部分はＳ−３０３またはその誘導体である。一部の実施形態では、第１の基材の表面に結合した部分はＳ−３０３の非脆性類似体またはその誘導体である。一部の実施形態では、第１の基材の表面に結合した部分は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＸＩの化合物、ならびにその誘導体、ならびに前述のうちのいずれかの塩および溶媒和物からなる群から選択される。一部の実施形態では、第１の基材の表面に結合した部分は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＸＩの化合物、ならびにその誘導体、ならびに前述のうちのいずれかの塩および溶媒和物からなる群から選択される。一部の実施形態では、第１の基材の表面に結合した部分は、式ＩＶ、Ｖ、およびＶＩの化合物、ならびにその誘導体、ならびに前述のうちのいずれかの塩および溶媒和物からなる群から選択される。一部の実施形態では、第１の基材の表面に結合した部分は、式ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）の化合物、およびその誘導体、ならびに前述のうちのいずれかの塩および溶媒和物からなる群から選択される。
【０１０５】
第１および第２の基材は、任意の適切な基材物質、例えば、本明細書に記載されている任意の基材物質で構成することができる。第１および第２の基材は細胞（例えば、赤血球）で構成することができる。代わりに、第１および第２の基材は、細胞膜または細胞由来の材料で構成することができる。例えば、第１および第２の基材は、赤血球由来の膜調製物、例えば赤血球ゴースト（すなわち溶解した赤血球の膜）を含むことができる。代わりに、第１および第２の基材は固形担体で構成することができる。本明細書に記載されているように、固形担体は、制限なしで、ポリマーまたはコポリマー（例えば、ポリエステル、ポリエーテル、ポリオレフィン、ポリアミド、多糖、ポリウレタン、スチレンおよびスチレン誘導体、ポリスチレン、セルロース）、プラスチック、ガラス、金および他の金属などを含めた、材料（例えば、生物学的材料、合成材料）またはマトリックスで構成することができる。固形担体は、２次元フォーマット（例えば、プレート、マルチ−ウェルプレート）または３次元フォーマット（例えば、細胞、ビーズまたは他の球状のまたは準球状物体）で表面結合部分を提示することができる。基材はアッセイプレートの一部分であることができる。特定の固形担体は、生物学的試料が結合しないまたは実質的に結合しない１種または複数種の材料で構成される。例えば、固形担体は、抗体（例えば、化合物またはその部分に対して特異的な抗体）が結合しないまたは実質的に結合しない材料で構成されてもよい。特に、固形担体は、病原体不活化赤血球に対して抗体が結合しないまたは実質的に結合しない材料で構成される。通常、第１および第２の基材は同じ材料で構成される。一部の実施形態では、第１および第２の基材は、固形担体、例えば、上述の固形担体などの表面に固定化した、赤血球または赤血球由来の膜調製物を含んでもよい。赤血球または膜調製物は、当技術分野で公知の様々な方式、例えば、細胞表面に発現される非血液型抗原に対する抗体の手段により、ポリ−Ｌ−リシン、有機染料またはレクチン（例えば、ガラクトシル部分に対して特異性を有するレクチン）を使用した接着により、固形担体の表面に固定化することができる。好ましくは、使用される試薬は、細胞表面との適合性があり、アッセイ法全体を通して固形担体に対する細胞または膜の結合を安定的に維持することができる。
【０１０６】
一部の実施形態では、第１および第２の基材は両方とも赤血球である。第１および第２の基材のＲＢＣは、１つまたは複数の共通のドナーからまたは異なる血液ドナーから得ることができる。ある場合には、第１の基材のＲＢＣおよび第２の基材のＲＢＣは、１種または複数種の特性、例えば、ＡＢＯ血液型（例えば、血液タイプＯ）、Ｒｈ型、または他のＲＢＣ抗原の存在もしくは不在（例えば、共通のＲＢＣ抗原、臨床的に重要なＲＢＣ抗原、臨床的に関連するＲＢＣ抗原）などを共通して有する。他の事例では、第１の基材のＲＢＣおよび第２の基材のＲＢＣは、ある特定の特性、例えば、ＡＢＯ血液型または他のＲＢＣ抗原の存在または不在など（例えば、共通のＲＢＣ抗原、臨床的に関連するＲＢＣ抗原）に関して異なる。一部の実施形態では、第１および第２の基材は、生物学的試料に一般的に見出される１種または複数種の抗原を示す（例えば、全血、赤血球、血清、または血漿）。このような抗原の存在は、生物学的試料が第１および／または第２の基材と適当な接触を行っていることを示すために対照として機能することができる。
【０１０７】
第１の基材（例えば、赤血球）上の表面結合部分の担持レベルは、本明細書に記載されている任意の担持レベル、例えば、化合物またはその部分に対する抗体を検出するのに十分な担持レベルなどであってよい。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球１個当たり）少なくとも約１，０００、少なくとも約２，０００、少なくとも約３，０００、少なくとも約４，０００、少なくとも約５，０００、少なくとも約６，０００、少なくとも約８，０００、少なくとも約１０，０００、少なくとも約１２，０００、少なくとも約１４，０００、少なくとも約１７，０００、少なくとも約２０，０００、少なくとも約２５，０００、少なくとも約３０，０００、少なくとも約３５，０００、少なくとも約４０，０００、もしくは少なくとも約５０，０００個の部分であってよい。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球１個当たり）、約５０，０００個以下、約７５，０００個以下または約１００，０００個以下の部分であってよい。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球１個当たり）、約１，０００〜約１００，０００個の間、約１，０００〜約７５，０００個の間、約１，０００〜約５０，０００個の間、約１，０００〜約２５，０００個の間、約５，０００〜約５０，０００個の間、約５，０００〜約２５，０００個の間、約５，０００〜約１５，０００個の間、約８，０００〜約１５，０００個の間、約２５，０００〜約５０，０００個の間、約２５，０００〜約４０，０００個の間、約２５，０００〜約３５，０００個の間、約２５，０００〜約３０，０００個の間、約３０，０００〜約４０，０００個の間、または約３０，０００〜約３５，０００個の間の部分であってよい。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは基材１単位当たり（例えば、赤血球１個当たり）、約１，０００、約２，０００、約３，０００、約４，０００、約５，０００、約６，０００、約７，０００、約８，０００、約９，０００、約１０，０００、約１１，０００、約１２，０００、約１３，０００、約１４，０００、約１５，０００、約１６，０００、約１７，０００、約１８，０００、約２０，０００、約２２，０００、約２４，０００、約２６，０００、約２８，０００、約３０，０００、約、約３２，０００、約３５，０００、約４０，０００、約４５，０００、約５０，０００、約６０，０００、約７０，０００、約８０，０００、約９０，０００、または約１００，０００個の部分であってよい。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、少なくとも約５個の部分／μｍ２、少なくとも約７個の部分／μｍ２、少なくとも約１０個の部分／μｍ２、少なくとも約１５個の部分／μｍ２、少なくとも約２０個の部分／μｍ２、少なくとも約２５個の部分／μｍ２、少なくとも約３０個の部分／μｍ２、少なくとも約３５個の部分／μｍ２、少なくとも約４０個の部分／μｍ２、少なくとも約５０個の部分／μｍ２、少なくとも約６０個の部分／μｍ２、少なくとも約７０個の部分／μｍ２、少なくとも約８０個の部分／μｍ２、少なくとも約９０個の部分／μｍ２、少なくとも約１００個��部分／μｍ２、少なくとも約１２０個の部分／μｍ２、少なくとも約１４０個の部分／μｍ２、少なくとも約１６０個の部分／μｍ２、少なくとも約１８０個の部分／μｍ２、少なくとも約２００個の部分／μｍ２、少なくとも約２２５個の部分／μｍ２、少なくとも約２５０個の部分／μｍ２、少なくとも約２７５個の部分／μｍ２、少なくとも約３００個の部分／μｍ２、少なくとも約３５０個の部分／μｍ２、少なくとも約４００個の部分／μｍ２、少なくとも約４５０個の部分／μｍ２、または少なくとも約５００個の部分／μｍ２であってよい。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、約５００個の部分／μｍ２以下、約７５０個の部分／μｍ２以下、または約１，０００個の部分／μｍ２以下であってよい。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、約５〜約１，０００個の部分／μｍ２の間、約５〜約７５０個の部分／μｍ２の間、約５〜約５００個の部分／μｍ２の間、約２０〜約５００個の部分／μｍ２の間、約２０〜約４００個の部分／μｍ２の間、約２０〜約２００個の部分／μｍ２の間、約２０〜約１００個の部分／μｍ２の間、約３０〜約２００個の部分／μｍ２の間、約３０〜約１００個の部分／μｍ２の間、約５０〜約１００個の部分／μｍ２の間、約１００〜約５００個の部分／μｍ２の間、約１００〜約４００個の部分／μｍ２の間、約１４０〜約４００個の部分／μｍ２の間、約１４０〜約３００個の部分／μｍ２の間、約１４０〜約２５０個の部分／μｍ２の間または約１８０〜約３００個の部分／μｍ２の間であってよい。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、約５個の部分／ｃｍ２、約７個の部分／ｃｍ２、約１０個の部分／ｃｍ２、約１５個の部分／ｃｍ２、約２０個の部分／ｃｍ２、約２５個の部分／ｃｍ２、約３０個の部分／ｃｍ２、約３５個の部分／ｃｍ２、約４０個の部分／ｃｍ２、約４５個の部分／ｃｍ２、約５０個の部分／ｃｍ２、約５５個の部分／ｃｍ２、約６０個の部分／ｃｍ２、約６５個の部分／ｃｍ２、約７０個の部分／ｃｍ２、約７５個の部分／ｃｍ２、約８０個の部分／ｃｍ２、約８５個の部分／ｃｍ２、約９０個の部分／ｃｍ２、約９５個の部分／ｃｍ２、約１００個の部分／ｃｍ２、約１１０個の部分／ｃｍ２、約１２０個の部分／ｃｍ２、約１３０個の部分／ｃｍ２、約１４０個の部分／ｃｍ２、約１５０個の部分／ｃｍ２、約１６０個の部分／ｃｍ２、約１７０個の部分／ｃｍ２、約１８０個の部分／ｃｍ２、約１９０個の部分／ｃｍ２、約２００個の部分／ｃｍ２、約２２５個の部分／ｃｍ２、約２５０個の部分／ｃｍ２、約２７５個の部分／ｃｍ２、約３００個の部分／ｃｍ２、約３２５個の部分／ｃｍ２、約３５０個の部分／ｃｍ２、約３７５個の部分／ｃｍ２、約４００個の部分／ｃｍ２、約４２５個の部分／ｃｍ２、約４５０個の部分／ｃｍ２、約４７５個の部分／ｃｍ２、約５００個の部分／ｃｍ２、約６００個の部分／ｃｍ２、約７００個の部分／ｃｍ２、約８００個の部分／ｃｍ２、約９００個の部分／ｃｍ２、または約１，０００個の部分／ｃｍ２であってよい。通常、第１の基材の担持レベルは生物学的試料中の抗体の検出に十分である。特に、担持レベルは、病原体不活化赤血球（例えば、点滴で投与されるＲＢＣ��に対する免疫応答（例えば、予め存在する抗体）を有さないまたは有さないと予想される患者からの生物学的試料から、病原体不活化赤血球（例えば、点滴で投与されるＲＢＣ）に対する免疫応答（例えば、予め存在する抗体）を有するまたは有すると予想される患者からの生物学的試料を区別するのに十分である。
【０１０８】
キットは、第３の基材を含有する第３の容器をさらに含んでもよく、第１のレベルの部分が第１の基材の表面に結合しており、第２のレベルの部分が第３の基材に結合しており、第２のレベルが第１のレベル未満である。当業者であれば、第２のレベルの部分が、第１のレベルの部分での表面結合部分に対する抗体の検出のための内部参照を提供することができることを理解している。したがって、一部の実施形態では、第１および第３の基材の相対的担持レベルは、注入された病原体不活化赤血球に対する免疫応答（例えば、予め存在する抗体）を有さないまたは有さないと予想される患者からの生物学的試料から、病原体不活化赤血球（例えば、点滴で投与されるＲＢＣ）に対する免疫応答（例えば、予め存在する抗体）を有するまたは有すると予想される患者からの生物学的試料を区別するのに十分である。第１の基材の担持レベルは、第３の基材の担持レベルよりも、少なくとも約１．５倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２０倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約１００倍、約２５０倍、約５００倍、１，０００倍、約５，０００倍、または約１０，０００倍またはそれよりも高くてよい。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、第３の基材の担持レベルよりも、約２倍〜約５００倍、約２倍〜約１００倍、約２倍〜約５０倍、約２倍〜約２０倍、約２倍〜約１０倍、約２倍〜約５倍、約４倍〜約１００倍、約４倍〜約５０倍、約４倍〜約２０倍、または約４倍〜約１０倍高い。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、少なくとも約１００個の部分／μｍ２、約１１０個の部分／μｍ２、約１２０個の部分／μｍ２、約１３０個の部分／μｍ２、約１４０個の部分／μｍ２、約１５０個の部分／μｍ２、約１６０個の部分／μｍ２、約１８０個の部分／μｍ２、約２００個の部分／μｍ２、約２２５個の部分／μｍ２、約２５０個の部分／μｍ２、約２７５個の部分／μｍ２、約３００個の部分／μｍ２、約３２５個の部分／μｍ２、約３５０個の部分／μｍ２、約４００個の部分／μｍ２、約４５０個の部分／μｍ２、約５００個の部分／μｍ２であり、第３の基材の担持レベルは、約１００個の部分／μｍ２以下、約９０個の部分／μｍ２以下、約８０個の部分／μｍ２以下、約７０個の部分／μｍ２以下、約６０個の部分／μｍ２以下、約５０個の部分／μｍ２以下、約４０個の部分／μｍ２以下、約３０個の部分／μｍ２以下である。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、約１１０〜約７５０個の部分／μｍ２の間、約１１０〜約５００個の部分／μｍ２の間、約１１０〜約４００個の部分／μｍ２の間、約１１０〜約３００個の部分／μｍ２の間、約１４０〜約７５０個の部分／μｍ２の間、約１４０〜約５００個の部分／μｍ２の間、約１４０〜約４００個の部分／μｍ２の間、約１４０〜約３００個の部分／μｍ２の間、約２００〜約４００個の部分／μｍ２の間、約２００〜約３００個の部分／μｍ２の間であり、第３の基材の担持レベルは、約１０〜約１００個の部分／μｍ２の間、約２０〜約１００個の部分／μｍ２の間、約３０〜約１００個の部分／μｍ２の間、約４０〜約１００個の部分／μｍ２の間、約５０〜約１００個の部分／μ��２の間である。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、約１１０個の部分／μｍ２、約１２０個の部分／μｍ２、約１３０個の部分／μｍ２、約１４０個の部分／μｍ２、約１５０個の部分／μｍ２、約１６０個の部分／μｍ２、約１８０個の部分／μｍ２、約２００個の部分／μｍ２、約２２５個の部分／μｍ２、約２５０個の部分／μｍ２、約２７５個の部分／μｍ２、約３００個の部分／μｍ２、約３２５個の部分／μｍ２、約３５０個の部分／μｍ２、約４００個の部分／μｍ２、約４５０個の部分／μｍ２、約５００個の部分／μｍ２であり、第３の基材の担持レベルは、約１０個の部分／μｍ２、約２０個の部分／μｍ２、約３０個の部分／μｍ２、約４０個の部分／μｍ２、約５０個の部分／μｍ２、約６０個の部分／μｍ２、約７０個の部分／μｍ２、約８０個の部分／μｍ２、約９０個の部分／μｍ２、約１００個の部分／μｍ２である。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球）、少なくとも約１５，０００、約１７，０００、約２０，０００、約２５，０００、約３０，０００、約４０，０００、または約５０，０００個の部分であり、第３の基材の担持レベルは基材１単位当たり（例えば、赤血球）、約１４，０００個以下、約１２，０００個以下、約１０，０００個以下、約８，０００個以下、約６，０００個以下、または約５，０００個以下の部分である。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球）、約１５，０００〜約７５，０００個の間、約１７，０００〜約７５，０００個の間、約２０，０００〜約７５，０００個の間、約２５，０００〜約７５，０００個の間、約３０，０００〜約７５，０００個の間、約４０，０００〜約７５，０００個の間、約１５，０００〜約５０，０００個の間、約１７，０００〜約５０，０００個の間、約２０，０００〜約５０，０００個の間、約２５，０００〜約５０，０００個の間、約３０，０００〜約５０，０００個の間、約４０，０００〜約５０，０００個の間の部分であり、第３の基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球）、約１，０００〜約１５，０００個の間、約３，０００〜約１５，０００個の間、約５，０００〜約１５，０００個の間、約１０，０００〜約１５，０００個の間、約１，０００〜約１４，０００個の間、約３，０００〜約１４，０００個の間、約５，０００〜約１４，０００個の間、約７，０００〜約１４，０００個の間、約１０，０００〜約１４，０００個の間、約５，０００〜約１２，０００個の間、約５，０００〜約１０，０００個の間の部分である。一部の実施形態では、第１の基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球）、約１５，０００、約１７，０００、約２０，０００、約２５，０００、約３０，０００、約３５，０００、約４０，０００、約４５，０００、約５０，０００、約６０，０００、約７５，０００個の部分であり、第３の基材の担持レベルは、基材１単位当たり（例えば、赤血球）、約１，０００、約３，０００、約５，０００、約７，０００、約１０，０００、約１２，０００、約１４，０００個の部分である。本明細書で開示されている担持レベルは、絶対的量、例えば、上に��載されたものなど、または相対的担持レベル、例えば、第３の基材と比べた第１の基材の担持レベルなどを含むことができる。
【０１０９】
通常第３の基材は、第１および／または第２の基材と同じ材料で構成されることになる。一部の実施形態では、第１、第２、および第３の基材は同じである。第１および第３の基材上の表面結合部分の化学構造または結合化学反応に不均一性が存在する場合、第３の基材は、第１の基材と同じまたは異なる表面結合部分の分布を有することができる。一部の実施形態では、第１、第２、および第３の基材はＲＢＣで構成され、これら３種の基材のＲＢＣは１つまたは複数の共通のドナーから得たものである。一部の実施形態では、第１、第２、および第３の基材はすべて、生物学的試料（例えば、全血、赤血球、血清、または血漿）中に一般的に見出される１種または複数種の抗原を示す。
【０１１０】
本明細書に記載されているような第１パネルに加えて、本発明の一部の実施形態に従い、第２パネルを使用することができる。第２パネルのＲＢＣは１種または複数種の共通のドナーから得ることができる。第２パネルのＲＢＣは、第１パネルのＲＢＣと同じまたは異なるドナーから得ることができる。第２パネルの表面結合部分は、第１パネルの表面結合部分と同じまたは異なってよい。第２パネルの表面結合部分は、第１パネルの表面結合部分と同じでもよく、２つのパネルに対する担持レベルは同じでも異なっていてもよい。第１および第２パネルの基材は、追加の抗原、例えば、生物学的試料（例えば、全血、赤血球、血清、または血漿）中に一般的に見出される１種または複数種の抗原などを示してもよい。第１パネルの追加の抗原は、第２パネルの追加の抗原と同じまたは異なってもよい。
【０１１１】
本明細書に提供されているキットの第１、第２、および任意選択の第３の容器は、第１、第２、および任意選択の第３の基材（表面結合部分を有しても、または有さなくてもよい）の保存に適した任意の材料で作製することができる。容器は、ガラス、プラスチック、または任意の適切なポリマー材で作製することができる。容器は滅菌であってよく、容器の内容物の滅菌性を維持するための環境をさらに提供することができる。容器は、その内容物を適当な温度（例えば、室温、冷蔵温度、冷凍温度、０℃、−２０℃、−８０℃）で保存するのに適していることが理解されている。
【０１１２】
本明細書に提供されているキットは、本明細書に提供されている方法のいずれかを実行するのに使用することができる添加物溶液、緩衝液、または他の溶液をさらに含有し得る。添加物溶液、緩衝液、または他の溶液は、キットの基材（例えば、表面結合部分を含有する基材または表面結合部分を欠く基材）の保存に対して有用となり得る。添加物溶液、緩衝液、または他の溶液は、キットの基材（例えば、表面結合部分を含有する基材または表面結合部分を欠く基材）を１種または複数種の生物学的試料と接触させるプロセスにおいて有用となり得る。添加物溶液、緩衝液、または他の溶液の意図した使用に応じて、これらの成分は、キットの基材（例えば、表面結合部分を含有する基材または表面結合部分を欠く基材）と予備混合してもよいし、またはこれらはキット内に別々に含有されていてもよい。
【０１１３】
本明細書に提供されているキットは、生物学的試料を接触させる際、またはその後で表面結合部分に結合した抗体の存在または不在を視覚化するまたはさもなければ確定するのに使用するための追加の成分（例えば、試薬）をさらに含有することができる。これは、抗ヒトグロブリンまたは凝集を誘発する他の材料、ならびに可視化法、例えば、ＩＡＴまたはＤＡＴなどに有用な任意の他の成分を含むことができる。ある特定の実施形態では、本明細書に提供されているキットは、対照（例えば、標準物質）として使用するのに適した材料を含有し得る。
【０１１４】
当業者により容易に認識されるように、上述のキットを含むシステムもまた提供される。例えば、システムは、本明細書に記載されている方法に従い使用することができる自動装置をさらに含む。
調製法
【０１１５】
基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）のパネルを調製するための方法が本明細書に提供されている。一部の実施形態では、本方法は、それぞれが基材を含む第１および第２の試料を提供するステップと、本明細書に提供されている化合物または誘導体で、第１の試料の基材を処理するステップとを含む。一部の実施形態では、本方法は、ポリマー粒子（例えば、ビーズ、マイクロスフェア）を含む第１および第２の試料を提供するステップと、本明細書に提供されている化合物または誘導体で、第１の試料のポリマー粒子を処理するステップとを含む。一部の実施形態では、本方法は、ＲＢＣを含む第１および第２の試料を提供するステップと、本明細書に提供されている化合物または誘導体で、第１の試料のＲＢＣを処理するステップとを含む。一部の実施形態では、第１および第２の試料のＲＢＣは同じ血液ドナーから得たものである。処理ステップは、追加の試薬、例えば、酸、塩基、適切な触媒、または化合物もしくは誘導体の、基材との反応を促進し得る任意の他の試薬などをさらに含んでもよい。適切な溶媒（例えば、水）または緩衝液（例えば、ＲＢＣ添加物溶液、血液バンク生理食塩水）は、処理ステップにおいて利用することができる。処理ステップは、第１の試料の基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）の表面への、部分の共有結合または非共有結合をもたらすことができる。一部の実施形態では、生成した表面結合部分は、第１の試料の基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）を処理するために使用される化合物または誘導体と同じまたは実質的に同じ化学構造を有する。一部の実施形態では、生成した表面結合部分は、第１の試料の基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）を処理するために使用される化合物または誘導体とは実質的に異なる化学構造を有する。例えば、生成した表面結合部分は、反応の、ある種類の加水分解生成物であってよい。第２の試料は化合物で処理されないので、これが、第１の試料と一緒になって、表面結合部分を有する基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）の第１の試料と、表面結合部分を欠く基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）の第２の試料とを含むパネルを生成する。
【０１１６】
一部の実施形態では、基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）のパネルを調製するための方法は、第１および第２の試料を、１種または複数種の追加の抗原、例えば、生物学的試料（例えば、全血、赤血球、血清、または血漿）中に一般的に見出される１種または複数種の抗原と反応させる１つまたは複数のステップをさらに含むことができる。１種または複数種の追加の抗原との反応は、化合物または誘導体による処理の前、これと並行して、またはこの後で行うことができる。１種または複数種の追加の抗原との反応において、溶媒および追加の試薬を必要に応じて使用することができる。
【０１１７】
基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）のパネルを調製するための方法は、基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）を化合物または誘導体で処理するステップに続いて、第１および第２の試料を洗浄する１つまたは複数のステップをさらに含むことができる。本方法はまた、基材処理混合物からの過剰の遊離化合物または誘導体の除去を促進するクエンチステップをさらに含むことができる。一部の実施形態では、クエンチャーはグルタチオンであってよい。クエンチステップは、洗浄ステップの前、これと並行して、またはこの後で行うことができる。ある特定の実施形態では、本方法は、緩衝された懸濁液媒体中の第１および第２の試料（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）を懸濁化させるステップをさらに含む。ある特定の実施形態では、本方法は、洗浄後、第１および第２の試料に凍結保存剤を加えるステップをさらに含む。
【０１１８】
一部の実施形態では、第２の試料は、化合物または誘導体が処理ステップから除外されることを除いて、第１の試料と同様にまたは等しく処理される。これは、第２の試料が適切な対照を提供するように、第１および第２の試料の特徴を調和させる役目を果たすことができる。
【０１１９】
本方法は、化合物または誘導体での処理によって、第１の試料の基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）の表面に結合した部分のレベルと比べて、第３の試料の基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）の表面に結合した部分のレベルがより低くなるように、第１の試料の処理と同じ方式で、基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）を含む第３の試料を、化合物または誘導体で処理するステップをさらに含むことができる。したがって、第１のレベルの部分は、第１の試料の基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）の表面に結合しており、第２のレベルは第１のレベル未満である。一部の実施形態では、これは、第３の試料の基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）を、第１の試料の基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）とは異なる量の化合物または誘導体で処理することにより達成することができる。一部の実施形態では、これは、代わりに、第３の試料の基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）を、第１の試料のＲＢＣの処理よりも短い長さの時間の間化合物または誘導体で処理することにより達成することもできる。また別の代替では、第３の試料は、第１の試料の処理に使用される量より少量の化合物または誘導体で処理し、この処理は、第３の試料に対して、第１の試料の処理より短い長さの時間の間行う。さらに、第１の試料に関する、本明細書に記載されている追加の調製ステップのいずれかを、第３の試料に対しても行うことができる。
【０１２０】
一部の実施形態では、第３の試料は、１種または複数種の追加の抗原、例えば、生物学的試料（例えば、全血、赤血球、または血漿）中に一般的に見出される１種または複数種の抗原などと反応する。１種または複数種の追加の抗原との反応は、化合物または誘導体による処理の前、これと並行して、またはこの後で行うことができる。１種または複数種の追加の抗原との反応において、溶媒および追加の試薬を必要に応じて使用することができる。
【０１２１】
一部の実施形態では、第３の試料は、化合物または誘導体で基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）を処理するステップに続いて、洗浄ステップの１つまたは複数のステップの対象下におかれる。本方法はまた、処理混合物からの過剰の遊離化合物または誘導体の除去を促進するクエンチステップをさらに含むことができる。クエンチステップは、洗浄ステップの前、これと並行して、またはこの後で行うことができる。ある特定の実施形態では、本方法は、緩衝された懸濁液媒体中に第３の試料（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）を懸濁化させるステップをさらに含む。ある特定の実施形態では、本方法は、洗浄後、第３の試料に凍結保存剤を加えるステップをさらに含む。
【０１２２】
一部の実施形態では、処理ステップにおいて使用される化合物または誘導体の量が、第１の試料と比べて、第３の試料に対して少なく、第２の試料に対して、化合物または誘導体が処理ステップから除外されることを除いて、第１、第２、および第３の試料は等しく処理される。
【０１２３】
基材上の表面結合部分の識別情報および担持レベルは、当技術分野で公知の任意の適切な方法で評価することができる。担持レベルは、例えば、基材に加える前に化合物を標識し（例えば、放射標識、免疫標識、化学的標識、蛍光標識、化学発光）、次いで、化合物を基材と合わせた後で標識を検出することによって判定することができる。代わりにまたは加えて、担持レベルは、基材に加えた後で化合物を直接的または間接的に標識し（例えば、免疫標識、免疫蛍光、化学発光）、次いで標識を検出することによって測定することもできる。一般的に、このような標識は、絶対的担持レベルまたは相対的な担持レベルを判定する際の比較対照物または参照ポイントとして、本明細書に提供されているキットおよび方法に使用される化合物とは別に（例えば、対照として、検量線として）実施される。このような標識は、定量的または準定量的方法を使用して直接定量してもよいし、または参照標準、例えば、表面上に公知の量の同様に標識した分子を有する細胞、ビーズもしくは他の材料などと比較してもよい（例えば、ＦＡＣＳ分析）。基材は、少なくともある特定のレベルの特定の生成した表面結合部分の存在についてモニターすることができる。基材は、少なくともある特定の担持レベルのすべての生成した表面結合部分の存在についてモニターすることができる。
【０１２４】
第１、第２、および任意選択の第３の試料は、当技術分野で公知の任意の方法に従い滅菌することができる。滅菌は、化合物または誘導体による処理前または処理後に行うことができる。
【０１２５】
第１、第２、および任意選択の第３の試料を含む、基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）のパネルは、保存用に包装することができる。当技術分野で公知の任意の適切な保存容器（例えば、ボックス、バッグ、瓶、チューブ）を使用することができる。一部の実施形態では、保存容器は滅菌されている。一部の実施形態では、冷凍が必要とされる。例えば、基材に結合した部分が上記に記載のような加水分解性リンカーを含有する場合、パネル中の試料は保存のために凍結することができる。他の実施形態では、パネル中の試料は凍結しなくてもよい。
使用方法
【０１２６】
本明細書に記載されているキットを使用して生物学的試料を試験するための方法が本明細書に提供されている。様々な実施形態では、本明細書に記載されているキット中の基材は、ポリマー粒子、マトリックス、アッセイプレートの一部分、または細胞、例えば、ＲＢＣなどを含む。
試料を試験する方法
【０１２７】
化合物を結合する抗体の存在について試料を試験する方法であって、ａ）血清または血漿を含む試料を提供するステップと、ｂ）試料を基材に接触させるステップであって、部分が基材の表面に結合しており、この部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択されるステップと、ｃ）試料からの抗体と、基材の表面結合部分との間の結合の量をアッセイするステップであって、抗体と表面結合部分との間の結合が、抗体が化合物に結合することを示すステップ、とを含む方法が本明細書に提供されている。
【０１２８】
一部の実施形態では、化合物を結合する抗体の存在について試料を試験する方法は、ａ）血清または血漿を含む試料を提供するステップと、ｂ）試料をポリマー粒子（例えば、ビーズ、マイクロスフェア）、マトリックスまたはアッセイプレートの一部分に接触させるステップであって、部分が、ポリマー粒子（例えば、ビーズ、マイクロスフェア）、マトリックスまたはアッセイプレートの一部分の表面に結合しており、部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択されるステップと、ｃ）試料からの抗体と、ポリマー粒子（例えば、ビーズ、マイクロスフェア）、マトリックスまたはアッセイプレートの一部分の表面結合部分との間の結合の量をアッセイするステップであって、抗体と表面結合部分との間の結合が、抗体が化合物に結合することを示すステップ、とを含む。
【０１２９】
一部の実施形態では、化合物を結合する抗体の存在について試料を試験する方法は、ａ）血清または血漿を含む試料を提供するステップと、ｂ）試料を赤血球に接触させるステップであって、部分が赤血球の表面に結合しており、この部分が、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ（ａ）〜ＩＶ（ｈ）、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、およびＩＸのいずれかの化合物、ならびにその誘導体、または前述のいずれかの塩もしくは立体異性体からなる群から選択されるステップと、ｃ）試料からの抗体と、赤血球の表面結合部分との間の結合の量をアッセイするステップであって、抗体と表面結合部分との間の結合が、抗体が化合物に結合することを示すステップとを含む。
【０１３０】
化合物を結合する抗体の存在について、試料を試験するための方法が本明細書に提供されている。一部の実施形態では、本方法は、血清または血漿を含む試料を提供するステップと、試料を基材（例えば、ＲＢＣ）に接触させるステップであって、部分が基材の表面に結合しているステップと、これに続いて、試料からの抗体と、基材の表面結合部分との間の結合の量をアッセイするステップとを含む。
【０１３１】
一部の実施形態では、アッセイのステップは、試料からの抗体と、表面結合部分との間の結合の量を参照と比較するステップであって、参照と比較した場合の結合の量の増加が試料中の抗体の存在を示すステップを含む。一部の実施形態では、参照は、表面結合部分が存在しないことを除いて、表面結合部分を有する基材と同じ基材である。
【０１３２】
一部の実施形態では、アッセイのステップは、試料からの抗体と、表面結合部分を欠く基材（例えば、ＲＢＣ）との間の結合の量をアッセイするステップを含む。本方法は、試料からの抗体と、試料と比較してより少量の表面結合部分を有する基材（例えばＲＢＣ）との間の結合の量をアッセイするステップをさらに含み得る。
【０１３３】
一部の実施形態では、試料からの抗体と、基材（例えば、ＲＢＣ）との間の結合の量をアッセイするステップは、試料が加えられた基材を、抗ヒトグロブリンに接触させるステップを含み、アッセイのステップは、凝集量についてアッセイするステップを含む。測定のための従来の方法、例えば、固相赤血球付着アッセイ（例えば、Ｇａｌｉｌｅｏ  Ｓｙｓｔｅｍ、Ｉｍｍｕｃｏｒ）など、またはＩＡＴおよびＤＡＴを使用することができる（例えば、ゲルカード、ＩＤ−Ｃａｒｄ  ＤｉａＳｃｒｅｅｎゲルカード、Ｂｉｏ−Ｒａｄ）。
【０１３４】
一部の実施形態では、本明細書に提供されている試験方法は、対象が、病原体不活化赤血球点滴に対して免疫応答を有することが予想されるかどうかを判定するために使用される。対象への点滴用に使用することができる例示的な病原体不活化赤血球組成物は、それぞれの内容が参照により本明細書に組み込まれているＵＳ６，２７０，９５２、ＵＳ２００３／０１１３７０４、ＵＳ７，６５５，３９２、およびＷＯ２００９／１２６７８６に記載されている。一部の実施形態では、本方法に使用される基材上の表面結合部分は、点滴用赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物またはこのような病原体不活化化合物の誘導体と同じである。他の実施形態では、本方法に使用される基材上の表面結合した抗原は、点滴用の赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物の類似体またはこのような類似体の誘導体である。例えば、点滴用の赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物が脆性化合物（例えば、Ｓ−３０３）である場合、病原体不活化化合物の非脆性類似体を、基材上の表面結合部分として使用することができる。非脆性類似体は、抗体結合に対して、病原体不活化化合物と類似のエピトープを示してもよく、病原体不活化化合物それ自体が示すような類似の結合親和性を抗体に対して示してもよい。非脆性類似体を表面結合部分として使用する利点は、非脆性表面結合部分を含有する基材が、脆性表面結合部分を含有する基材より安定し得ることであってよい。したがって、対応する脆性表面結合部分を含有する基材が、表面結合部分の分解（例えば、脆性リンカーの加水分解を介して）を回避するために冷凍庫保存を必要とし得るのに対して、非脆性表面結合部分を含有する基材は、室温でまたは冷蔵温度での保存に適し得る。
【０１３５】
一部の実施形態では、試料は、赤血球の点滴を必要とする対象からのものである。例えば、試料は、赤血球の点滴を必要とする対象からの血清試料、血漿試料、または他の血液試料であってよい。一部の実施形態では、本明細書に提供されている試料を試験する方法は、対象から試料を得る第１のステップを含む。試料は、当技術分野で公知の任意の方法、例えば、腕または指からの標準的採血などにより対象から得ることができる。
【０１３６】
本方法は、本明細書に提供されている組成物またはキットのいずれかを使用して行うことができる。組成物またはキットが冷凍庫に保存されている場合、組成物またはキットを冷凍庫から取り出し、キットまたは組成物の基材（例えば赤血球）を試料と接触させる前に解凍する。キットは、冷蔵庫または室温で解凍することができる。
輸血を提供する方法
【０１３７】
それを必要とする対象に輸血を提供する方法であって、輸血が病原体不活化化合物（例えば、本明細書に記載されている病原体不活化化合物）で処理したＲＢＣを含む、方法が本明細書に提供されている。本方法は、対象からの試料（例えば、血清試料または血漿試料）を提供するステップと、試料を基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）に接触させるステップであって、部分が基材の表面に結合しており、試料からの抗体と、試料の表面結合部分との間の結合の量を、参照と比較してアッセイして、抗体と表面結合部分との間の結合の量が参照より高いかどうか判定するステップと、結合の量が参照より高くないという判定に従い、病原体不活化した赤血球の対象への点滴を提供するステップとを含む。表面結合部分は、点滴用赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物と同じであってよい。代わりに、表面結合部分は、点滴用赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物の誘導体（例えば、加水分解した誘導体）であってよい。また別の代替では、表面結合部分は、点滴用赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物の類似体であってよい。例えば、点滴用赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物が、脆性リンカー（例えば、Ｓ−３０３）を含有する場合、表面結合部分はその非脆性類似体またはこのような非脆性類似体の誘導体であってよい。
【０１３８】
一部の態様では、本方法は、対象からの試料（例えば、血清試料または血漿試料）を提供するステップと、試料を基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）と接触させるステップであって、部分が基材の表面に結合しているステップと、試料からの抗体と、試料の表面結合部分との間の結合の量を、参照と比較してアッセイするステップと、抗体と表面結合部分との間の結合の量が参照より高いかどうか判定するステップと、結合の量が参照より高いという判定に従い、病原体不活化されていない赤血球の点滴を対象に提供するステップとを含む。表面結合部分は、点滴用赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物と同じであってよい。代わりに、表面結合部分は、点滴用赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物の誘導体（例えば、加水分解した誘導体）であってよい。また別の代替では、表面結合部分は、点滴用赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物の類似体であってよい。例えば、点滴用赤血球を処理するために使用される病原体不活化化合物が脆性リンカー（例えば、Ｓ−３０３）を含有する場合、表面結合部分は、その非脆性類似体またはこのような非脆性類似体の誘導体であってよい。
【０１３９】
一部の実施形態では、本方法は、血清または血漿を含む試料を提供するステップと、試料を基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）に接触させるステップであって、部分が基材の表面に結合しているステップと、これに続いて、試料からの抗体と、基材の表面結合部分との間の結合の量をアッセイするステップとを含む。
【０１４０】
一部の実施形態では、アッセイのステップは、試料からの抗体と、表面結合部分との間の結合の量を参照と比較するステップであって、参照と比較した場合の結合の量の増加が試料中の抗体の存在を示す、ステップとを含む。一部の実施形態では、参照は、表面結合部分が存在しないことを除いて、表面結合部分を有する基材と同じ基材である。
【０１４１】
一部の実施形態では、アッセイのステップは、試料からの抗体と、表面結合部分を欠く基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）との間の結合の量をアッセイするステップを含む。本方法は、試料からの抗体と、試料と比較してより少量の表面結合部分を有する基材（例えばポリマー粒子、ＲＢＣ）との間の結合の量をアッセイするステップとをさらに含み得る。
【０１４２】
一部の実施形態では、試料からの抗体と、基材（例えば、ポリマー粒子、ＲＢＣ）との間の結合の量をアッセイするステップは、試料が加えられた基材を、抗ヒトグロブリンに接触させるステップを含み、アッセイのステップは、凝集量についてアッセイするステップを含む。測定のための従来の方法、例えば、ＩＡＴおよびＤＡＴなどを使用することができる。
【０１４３】
一部の実施形態では、抗体の、基材の表面結合部分への結合の量が参照より高くないという判定は、表面結合部分を欠く基材を参照として使用して下される。一部の実施形態では、抗体の、基材の表面結合部分への結合の量が参照より高くないという判定は、より低い担持レベルの表面結合部分を有する基材を参照として使用して下される。表面結合部分の存在もしくは不在のみにおいて、または表面結合部分の担持レベルに関してのみ試験基材と異なる参照基材を有することが有利となり得る。
【０１４４】
対象からの試料は、意図した赤血球の点滴の直前、または意図した赤血球の点滴の５分間、１０分間、３０分間、１時間、２時間、４時間、１２時間、もしくは２４時間、４８時間、７２時間、１週間、２週間、３週間、４週間、もしくは５週間以内前またはそれよりも前に、抗体の表面結合部分への結合のために収集し、試験することができる。対象が一定時間内に１回より多くの赤血球の点滴を受ける場合、対象からの試料は、本明細書に記載されている方法に従い、赤血球（例えば、病原体不活化赤血球）の各点滴前、または赤血球（例えば、病原体不活化赤血球）の最初の点滴の前のみ、または医療専門家により判定されたような周期ベースで試験することができる。
【実施例】
【０１４５】
本発明は以下の非限定的実施例によりさらに例示される。
（実施例１）
赤血球パネルの調製
Ｓ−３０３を有する赤血球パネル
【０１４６】
Ｓ−３０３処理されたおよび対照の試薬ＲＢＣは、１）Ｓ−３０３からの結合付加体を有さない対照ＲＢＣ、２）Ｓ−３０３から高レベルの結合付加体を生成する条件下で、Ｓ−３０３およびグルタチオン（ＧＳＨ）クエンチャーで処理したＲＢＣ、および３）Ｓ−３０３から低レベルの結合付加体を生成する条件下で、Ｓ−３０３およびグルタチオン（ＧＳＨ）クエンチャーで処理したＲＢＣを含むように調製した。より具体的には、ＲＢＣ単位は、標準的な血液採取技術によりヒトドナーから得、各ＲＢＣ単位を、３つの一致した、より小さな（下位の）１００ｍＬ単位試料に分割し、次いでこれらを使用して、３つの異なる処理条件下で試薬細胞パネルを調製した。高レベルの結合付加体を生成するため、３つの一致したＲＢＣ単位のうちの１つを約０．２ｍＭのＳ−３０３および約２ｍＭのＧＳＨを有する加工溶液と混合し（例えば、米国特許第７，６５５，３９２号および同第８，９００，８０５号を参照されたい）、終夜室温でインキュベートし、０．９％ＮａＣｌで洗浄してから、グリセロライト中で、−８０℃で冷凍した。低レベルの結合付加体を生成するため、３つの一致したＲＢＣ単位のうちの１つを、約０．２ｍＭのＳ−３０３および約２０ｍＭのＧＳＨを有する加工溶液と混合し、終夜室温でインキュベートし、０．９％ＮａＣｌで洗浄してから、グリセロライト中で、−８０℃で冷凍した。対照ＲＢＣは、Ｓ−３０３／ＧＳＨ処理の対象下におかずに、０．９％ＮａＣｌで洗浄してから、グリセロライト中で、−８０℃で冷凍した。
【０１４７】
より高いレベルの表面付加体を有するＲＢＣ試薬が、より低いレベルの表面付加体を有するＲＢＣ試薬と比較して、抗体検出においてより大きな感受性を提供するかどうかを判定するため、試薬パネルを評価した。この評価のため、Ｓ−３０３のアクリジン部分に対して事前に特徴付けたモノクローナル抗体（ＫＬＨコンジュゲートしたＳ−１９７、Ｓ−３０３の非脆性類似体で免疫性を付けたマウスから生成）を滴定し、様々なｍＡｂ希釈物をゲルカードアッセイ（例えば、ＩＤ−ＭＴＳ（商標）Ｏｒｔｈｏ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｒａｒｉｔａｎ、ＮＪ）で使用した。低いＳ−３０３付加体のＲＢＣに対して試験した抗アクリジンＳ−１９７ｍＡｂ滴定は、８，０００の平均力価（最も高い希釈の逆数）をもたらした。対照的に、高いＳ−３０３付加体のＲＢＣに対して試験した抗アクリジンＳ−１９７ｍＡｂ希釈物は、３２，０００の平均力価をもたらした。これらのデータは、高い付加体のＲＢＣは、Ｓ−３０３ＲＢＣのアクリジン部分に対して、より高い抗体検出を提供することを示している。
非脆性類似体化合物の結合安定性
【０１４８】
Ｓ−３０３の非脆性類似体である化合物Ｓ−２２０によるＲＢＣ基材への結合を評価するために実験を実施した。本実験ではまた、Ｓ−２２０化合物の表面結合部分の安定性を、同様に結合した脆性Ｓ−３０３の安定性と比較した。より具体的には、グルタチオン（ＧＳＨ）クエンチャーおよびＳ−２２０化合物を、それぞれ２．０ｍＭおよび０．２ｍＭの濃度でヒトＲＢＣの基材に加え、次いで終夜３７℃または４℃でインキュベートした。比較のため、ＧＳＨクエンチャーおよび脆性Ｓ−３０３化合物をヒトＲＢＣにそれぞれ２．０ｍＭおよび０．２ｍＭの濃度で同様に加え、終夜３７℃または４℃でインキュベートした。非脆性Ｓ−２２０と脆性Ｓ−３０３化合物は両方ともこれらの構造の一部としてアクリジン部分を含む。インキュベーション後、ＧＳＨ／Ｓ−２２０およびＧＳＨ／Ｓ−３０３で処理したＲＢＣは、マウスモノクローナル（ｍＡｂ）またはウサギポリクローナル（ｐｏｌｙＡｂ）抗アクリジン抗体（同様に４℃または３７℃）のいずれかで染色し、標準的方法（ＭＦＩとして定量化）を使用してフローサイトメトリーで抗体結合について試料を分析した。免疫化のために、化合物Ｓ−１９７を使用して、ｍＡｂとｐｏｌｙＡｂ抗アクリジン抗体の両方を生成した。
【０１４９】
図１〜６に示されている通り、非脆性Ｓ−２２０で処理されたＲＢＣと脆性Ｓ−３０３で処理されたＲＢＣの両方とも類似の結合レベルを達成することができる。さらに、処理されたＲＢＣのモノクローナルとポリクローナル抗体結合との間に一部の差異が観察されたものの、いずれの抗体のデータも、ＲＢＣへのＳ−３０３の結合は、３７℃で、ＲＢＣへのＳ−２２０の結合ほど安定していないことを示し、これは、本明細書に提供されている方法およびキットにおいて非脆性化合物を使用するメリットを示唆している。
赤血球パネル
【０１５０】
赤血球（ＲＢＣ）は標準的な血液採取技術でＯ型ドナーから得たものである。細胞は抗原Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、Ｋ、ｋ、Ｆｙａ、Ｆｙｂ、Ｊｋａ、Ｊｋｂ、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ１、Ｌｅａ、およびＬｅｂのうちの１種または複数種を発現する。ＲＢＣの各単位（およそ３５０ｍＬ）は、およそ等量（指定されたサブユニットＡ、Ｂ、およびＣ）の３つの一致した、より小さな単位（例えば、サブユニット）に分割する。サブユニットＡはＳ−３０３の非脆性類似体（例えば、Ｓ−２２０、Ｓ−１９７）および２ｍＭのグルタチオンで処理し、これに続いて０．９％ＮａＣｌで洗浄して、「高い」レベルの表面結合付加体を生成する。同じドナー単位からのサブユニットＢはＳ−３０３の同じ非脆性類似体および２０ｍＭのグルタチオンで処理し、これに続いて０．９％ＮａＣｌで洗浄して、「低い」レベルの表面結合付加体を生成する。非脆性類似体および／またはグルタチオン濃度を変化させることにより、他のレベルの表面結合付加体を達成することができる。サブユニットＣは、Ｓ−３０３の非脆性類似体またはグルタチオンで処理しない。サブユニットＣを０．９％ＮａＣｌで洗浄する。本明細書に記載されている処理ステップ後、サブユニットのそれぞれを緩衝された懸濁液媒体（例えば、３％ＲＢＣ）に懸濁させ、１つまたは複数の保存容器に移す。必要に応じて、グリセロライトをサブユニットＡ、Ｂ、およびＣのそれぞれに加え、次いでサブユニットを−８０℃で保存する。サブユニットＡ、Ｂ、およびＣは第１パネルを形成する。
【０１５１】
第２パネルは、サブユニットＡ、Ｂ、およびＣのＲＢＣがそれぞれ異なるＯ型ドナーからのものであることを除いて、第１パネルと同様に調製する。
（実施例２）
患者血清試料の試験
【０１５２】
実施例１の１つ、２つ、または３つの第１パネルを室温に解凍する。各第１パネルは、単一のＯ型ドナーからのサブユニットＡ、Ｂ、およびＣを含有する。患者からの血清および抗ヒトグロブリンを第１パネルのそれぞれのサブユニットＡ、Ｂ、およびＣのそれぞれに加える。各第１パネルのサブユニットを凝集についてモニターし、０、１、２、または３の採点を割り当てる（０は凝集なしを表し、１、２、および３は、次第により多くの凝集を表す）。
【０１５３】
第１パネルのそれぞれのサブユニットＡ、Ｂ、およびＣに対する抗体採点が０である（すなわち、凝集が観察されない）場合、試料は「非反応性」であると考えられ、患者には、病原体不活化化合物としてＳ−３０３で処理したＲＢＣの点滴が投与されてもよい。
【０１５４】
第１パネル内のＲＢＣのいずれかに抗体採点≧１が観察された場合、患者試料は、実施例１に記載されているように、第２パネルを用いて追加の試験を受ける。「高い」または「低い」レベルの表面結合付加体（すなわち、サブユニットＡまたはサブユニットＢ）のいずれかに対してすべての３つの第１パネルの採点が≧であり、対応する未処理の対照ＲＢＣ（すなわち、サブユニットＣ）では採点が０である場合、試料は「初期反応性」と分類される。第２パネルの採点が第１パネルのいずれかと同じ反応性パターンを示す場合、試料は「反応性が確認された」と分類される。患者は、必要な場合、Ｓ−３０３で処理されていないＲＢＣの点滴を受ける。
【０１５５】
第１パネルのうちの３つすべてではないが、１つのまたは２つにおいて、「高い」または「低い」レベルの表面結合付加体（すなわち、サブユニットＡまたはサブユニットＢ）のいずれかに対して抗体採点が≧１であり、第１パネルのすべてで対応する未処理の試薬対照ＲＢＣが０の採点を示す場合、試料は「反応性は予測できない」と分類される。第２パネルの結果が表面結合付加体を有するＲＢＣからの凝集を示さない場合、試料は「非反応性」と分類され、患者には、病原体不活化化合物としてＳ−３０３で処理したＲＢＣの点滴を投与することができる。
【０１５６】
３つの第１パネルの結果が、表面結合付加体を有するＲＢＣと、対応する対照の未処理ＲＢＣとの両方に対して、３つのうちの３つ、３つのうちの２つ、または３つのうちの１つが反応性を示す場合、試料は、内因性赤血球抗原に対して「アロ反応性が推定される」抗体を有すると考えられる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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