(57)【要約】本開示は、マザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスヌクレオチドの組成物、ならびに皮膚炎症、例えば、乾癬またはその症状を処置すること、予防することおよび／または回復させることにおいてこの組成物を使用する方法に関する。とりわけ、マザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩の製剤、ならびにＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩の製剤による皮膚炎症、乾癬、乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症を処置すること、予防することおよび管理することのために一般に有用な方法が本明細書に提供されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚炎症またはその症状の処置、予防および／または回復を必要とする対象における皮膚炎症またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、該対象に、有効量のマザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、該組成物が、該対象の該皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法。
【請求項２】
乾癬またはその症状の処置、予防および／または回復を必要とする対象における乾癬またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、該対象に、有効量のマザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、該組成物が、該対象の該乾癬またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法。
【請求項３】
ケラチノサイトの表皮過剰増殖の低下を必要とする対象におけるケラチノサイトの表皮過剰増殖を低下させる方法であって、該対象に、有効量のマザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、該組成物が、該対象のケラチノサイトの表皮過剰増殖を低下させる、方法。
【請求項４】
皮膚の厚さの低下を必要とする対象における皮膚の厚さを低下させる方法であって、該対象に、有効量のマザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、該組成物が、該対象の皮膚の厚さを低下させる、方法。
【請求項５】
乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症の処置、予防および／または回復を必要とする対象における乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、該対象に、有効量のマザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、該組成物が、該対象の該乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法。
【請求項６】
皮膚炎症および／またはその症状の寛解を維持する方法であって、前記対象に、有効量のマザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、該組成物が、該対象の該皮膚炎症および／またはその症状の寛解を維持する、方法。
【請求項７】
乾癬性関節炎および／またはその症状の進行を遅くする方法であって、前記対象に、有効量のマザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、該組成物が、該対象の乾癬性関節炎および／またはその症状の進行を遅くする、方法。
【請求項８】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩が、１個または複数個のＯ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩の全てのヌクレオシド間連結が、Ｏ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記医薬組成物が、局所的剤形である、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記局所的剤形が、ゲル、クリーム、軟膏、パッチまたは液体剤形として製剤化される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記医薬組成物が、経口医薬組成物である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記経口医薬組成物が、錠剤またはカプセル剤である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記錠剤が、ミニ錠剤またはマイクロ錠剤として製剤化される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記錠剤が、ミニ錠剤、マイクロ錠剤または粒状物を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記カプセル剤が、ミニ錠剤、マイクロ錠剤または粒状物を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
前記経口医薬組成物が、腸溶コーティングされている、請求項１２〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記経口医薬組成物が、腸溶コーティングされていない、請求項１２〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記医薬組成物が、非経口医薬組成物である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記医薬組成物が、皮下投与に適した医薬組成物である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記医薬組成物が、薬学的に許容されるキャリア、アジュバントおよび／または賦形剤をさらに含む、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記医薬組成物が、約１０％（ｗ／ｗ）〜約９５％（ｗ／ｗ）の前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＣＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号１）の配列と９０％〜１００％同一の配列または薬学的に許容されるその塩を含み、Ｘが、５−メチル２’−デオキシシチジンおよびその相補体である、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＣＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号１）の配列または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＴＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号２）の配列または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
マザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドの局所製剤であって、約１０％（ｗ／ｗ）〜約９５％（ｗ／ｗ）の該オリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容されるキャリアを含む局所製剤。
【請求項２７】
ゲル、クリーム、軟膏、液体またはパッチ剤形として製剤化された、請求項２６に記載の局所製剤。
【請求項２８】
対象の皮膚への塗布後に、パッチを形成する、請求項２６に記載の局所製剤。
【請求項２９】
皮膚炎症を処置すること、予防することおよび／または回復させることに適している、請求項２６に記載の局所製剤。
【請求項３０】
前記皮膚炎症が、乾癬性様病変または乾癬である、請求項２９に記載の局所製剤。
【請求項３１】
前記皮膚炎症が、小児皮膚炎症である、請求項２９または３０に記載の局所製剤。
【請求項３２】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記ヌクレオシド間連結のうち１個または複数個が、Ｏ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結である、請求項２６に記載の局所製剤。
【請求項３３】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの全てのヌクレオシド間連結が、Ｏ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結である、請求項２６に記載の局所製剤。
【請求項３４】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＣＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号１）の配列と９０％〜１００％同一の配列または薬学的に許容されるその塩を含み、Ｘが、５−メチル２’−デオキシシチジンおよびその相補体である、請求項２６〜３３のいずれか一項に記載の局所製剤。
【請求項３５】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＣＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号１）の配列または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項３４に記載の局所製剤。
【請求項３６】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＴＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号２）の配列または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項３４に記載の局所製剤。
【請求項３７】
皮膚炎症の処置、予防および／または回復における使用のための、マザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む製剤。
【請求項３８】
前記皮膚炎症が、乾癬様病変、乾癬性病変または乾癬を含む、請求項３７に記載の使用のための製剤。
【請求項３９】
前記皮膚炎症が、小児皮膚炎症である、請求項３７に記載の使用のための製剤。
【請求項４０】
ゲル、クリーム、軟膏、液体またはパッチ剤形として製剤化された、請求項３７〜３９のいずれか一項に記載の使用のための製剤。
【請求項４１】
対象の皮膚への塗布後に、パッチを形成する、請求項３７〜３９のいずれか一項に記載の使用のための製剤。
【請求項４２】
経口医薬組成物である、請求項３７〜３９のいずれか一項に記載の使用のための製剤。
【請求項４３】
前記経口医薬組成物が、錠剤またはカプセル剤である、請求項４２に記載の使用のための製剤。
【請求項４４】
前記錠剤が、ミニ錠剤またはマイクロ錠剤として製剤化される、請求項４３に記載の使用のための製剤。
【請求項４５】
前記錠剤が、ミニ錠剤、マイクロ錠剤または粒状物を含む、請求項４３に記載の使用のための製剤。
【請求項４６】
前記カプセル剤が、ミニ錠剤、マイクロ錠剤または粒状物を含む、請求項４３に記載の使用のための製剤。
【請求項４７】
前記経口医薬組成物が、腸溶コーティングされている、請求項４２〜４６のいずれか一項に記載の使用のための製剤。
【請求項４８】
前記経口医薬組成物が、腸溶コーティングされていない、請求項４２〜４６のいずれか一項に記載の使用のための製剤。
【請求項４９】
非経口医薬組成物として製剤化された、請求項３７〜３９のいずれか一項に記載の使用のための製剤。
【請求項５０】
皮下投与に適した医薬組成物として製剤化された、請求項３７〜３９のいずれか一項に記載の使用のための製剤。
【請求項５１】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記ヌクレオシド間連結のうち１個または複数個が、Ｏ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結である、請求項３７に記載の使用のための製剤。
【請求項５２】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの全てのヌクレオシド間連結が、Ｏ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結である、請求項３７に記載の使用のための製剤。
【請求項５３】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＣＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号１）の配列と９０％〜１００％同一の配列または薬学的に許容されるその塩を含み、Ｘが、５−メチル２’−デオキシシチジンおよびその相補体である、請求項３７〜５２のいずれか一項に記載の使用のための製剤。
【請求項５４】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＣＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号１）の配列または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項５３に記載の使用のための製剤。
【請求項５５】
前記ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＴＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号２）の配列または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項５３に記載の使用のための製剤。
【請求項５６】
前記組成物または製剤が、中等度〜重度の皮膚炎症、乾癬様病変および／または乾癬の症状が発症する前および／または後に投与されるまたは投与に適している、前記請求項のいずれか一項に記載の製剤または方法。
【請求項５７】
前記組成物または製剤が、約６時間毎、約１２時間毎、約２４時間毎、約４８時間毎、約７２時間毎、毎日、１週間に２回、２週間に１回または１ヶ月に１回投与されるまたは投与に適している、前記請求項のいずれか一項に記載の製剤または方法。
【請求項５８】
前記対象が、第１の治療に対して不応性である、前記請求項のいずれか一項に記載の製剤または方法。
【請求項５９】
前記第１の治療が、シクロスポリン、コルチコステロイドおよび／またはフマル酸エステル、またはそれらの誘導体である、請求項５８に記載の製剤または方法。
【請求項６０】
前記対象が、前記第１の治療と併せてまたはその後に処置される、請求項５８または５９に記載の製剤または方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の引用
本願は、２０１６年１２月３０日に出願された米国仮特許出願第６２／４４０，７７９号の利益および優先権を主張する。この内容全体は、すべての目的のために本明細書に参考として援用される。
配列表
本願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子的に提出された、その全体を参照により本明細書に組み込む配列表を含有する。２０１７年１２月１５日に作成された前記ＡＳＣＩＩコピーは、ＧＩＵ−０５６ＰＣ＿ＳＬ．ｔｘｔと命名され、３，８５５バイトのサイズである。
【０００２】
開示分野
本開示は、マザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ（Mothers  Against  Decapentaplegic  Homolog）７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドの組成物、ならびに皮膚炎症、例えば、乾癬またはその症状を処置すること、予防することおよび／または回復させること（ameliorating）においてこの組成物を使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
尋常性乾癬は、細胞性免疫系の不適切な活性化に起因する、最も一般的な自己免疫性疾患として認識されている。およそ７百５十万名のアメリカ人、また、世界的には１億２千５百万名がこれに罹患する。あらゆる年代の人々がこれに罹患するが、疾患発病は一般的に、１５〜２５歳の間である。乾癬を有する人の最大３０％は、乾癬性関節炎も発症する。直接的および間接的な総費用負担は、年間１１２億５千万ドルであると推定され、その４０％は労働損失による（１年間で最大２６日間の失われた労働日数の報告）。乾癬は、上皮細胞の過剰成長から鱗屑を脱落する、炎症し隆起した斑の病巣形成によって特徴付けされる一般的な皮膚障害であり、皮膚の次の組織学的変化のうち１つまたは複数が関与する：
・  表皮ケラチノサイトの過形成、
・  血管過形成および拡張、
・  罹患した皮膚におけるＴリンパ球、好中球および他の種類の白血球の浸潤。
【０００４】
依然として、乾癬治療の改善が必要である。その目標に向けて、乾癬および／または関連する炎症ならびにそれらの症状を処置するための治療剤の改善された製剤を提供することが望ましい。本開示は、乾癬および／または関連する炎症ならびにそれらの症状を処置するための改善された治療を提供する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
概要
とりわけ、マザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩の製剤、ならびにＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩の製剤による皮膚炎症、乾癬、乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症を処置すること、予防することおよび管理することのために一般に有用な方法が本明細書に提供されている。
【０００６】
本開示は、ＴＧＦ−βシグナル伝達経路の肝要なアンタゴニストとしてのＳＭＡＤ７の役割を活用して、ＳＭＡＤ７の阻害により、皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状を処置するための新規方法を提供する。皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状における治療介入のための他の潜在的標的が提案されたが、本開示は、皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状を予防、遅延、停止または反転することが示される新たな処置を提供する。
【０００７】
「アンチセンスオリゴヌクレオチド」（「ＡＳ」）は、本明細書において使用される場合、標的タンパク質（例えば、ＳＭＡＤ７）をコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）に相補的な短鎖合成オリゴヌクレオチド配列を指す。特定の理論に制約されることなく、アンチセンスオリゴヌクレオチド配列は、ｍＲＮＡ分子における相補的領域にハイブリダイズし、これにより、二本鎖ハイブリッドを産生することができ、該ハイブリッドの産生により、ＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッド鎖を分解するＲＮａｓｅ  Ｈ等の遍在性触媒酵素の活性化をもたらし、従ってタンパク質翻訳を防止し得る。理論によって制約されることなく、本明細書に提供されているアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡまたはＤＮＡとしてのその標的配列にハイブリダイズすることができる。よって、ＤＮＡ配列が、標的として提供された場合であっても、対応するＲＮＡ配列（チミンの代わりにウラシルを含む）が含まれる。
【０００８】
本開示は、また、ＳＭＡＤ７の特異的阻害剤の投与により、皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状を処置する方法を提供する。「特異的阻害剤」は、本明細書において使用される場合、排他的にまたは高度な選択性で、それを分子標的に作用させることを可能にする構造的および／または機能的特性を有する薬剤を指す。よって、ＳＭＡＤ７の特異的阻害剤は、ＳＭＡＤ７遺伝子、そのＲＮＡ産物もしくはタンパク質産物を標的とする固有の機能的特性を保有する、または別の分子実体であって、その活性もしくは発現が、排他的にもしくは高度な特異性で、ＳＭＡＤ７もしくはその産物の活性もしくは発現を侵害する分子実体を持つ。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、各アンチセンスオリゴヌクレオチドの組み入れられたヌクレオチド配列の標的化部分が、ＳＭＡＤ７  ｍＲＮＡ配列に完全にまたはほとんど完全に相補的となるように設計することができる。かかる相補的またはほぼ相補的ヌクレオチド配列を組み入れることにより、所与の標的に対し高度な特異性を有するアンチセンスオリゴヌクレオチドを作製する（engineer）ことを可能にする。特異性は、解離定数等のパラメーターの測定、またはタンパク質もしくはＲＮＡ発現レベルの変化等の他の判定基準、またはＳＭＡＤ７活性もしくは発現を測定する他のアッセイにより評価することができる。
【０００９】
本開示は、また、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物の投与により、皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状を処置するための方法を提供する。別の態様では、本開示は、皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状の処置における使用のための医薬組成物を提供する。医薬組成物は、ＳＭＡＤ７を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド等のＳＭＡＤ７の阻害剤、および薬学的に許容されるキャリアを含み得る。本明細書において使用される場合、用語「医薬組成物」は、例えば、皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状を処置するために、哺乳動物、例えば、ヒトに投与されるべき薬学的に許容されるキャリア中に、指定量の治療用化合物、例えば、治療有効量の治療用化合物を含有する混合物を意味する。実施形態では、企図されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドおよび薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物が本明細書で企図される。別の態様では、本開示は、皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状を処置するための医薬の製造におけるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの使用を開示する。「医薬」は、本明細書において使用される場合、用語「医薬組成物」と本質的に同じ意義を有する。
【００１０】
本明細書において使用される場合、「ＳＭＡＤ７」（ＣＲＣＳ３、ＦＬＪ１６４８２、ＭＡＤＨ７、ＭＡＤＨ８、ＭＡＤ（マザーズアゲンストデカペンタプレジック、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）ホモログ７、ＭＡＤホモログ８、ＳＭＡＤ、マザーズアゲンストＤＰＰホモログ７、マザーズアゲンストＤＰＰホモログ８としても公知）は、Ｅｎｔｒｅｚ  ＧｅｎｅＩＤ  Ｎｏ．４０９２によって同定される遺伝子およびそのアレルバリアントによってコードされるヒトタンパク質またはいずれかのｍＲＮＡ転写物を意味する。
【００１１】
本明細書において使用される場合、「ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド」は、ＳＭＡＤ７遺伝子から転写されたｍＲＮＡ分子における核酸配列に相補的な核酸配列を含むオリゴヌクレオチドを指すことが理解される。より具体的には、かかるオリゴヌクレオチドは、かかるｍＲＮＡのコード領域における核酸配列に相補的であり得る。一部の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、細胞（例えば、ＰＢＭＣ、ｐＤＣまたはＢ細胞等、免疫細胞）に導入されると、ＳＭＡＤ７の発現を低下させることができる。一部の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、遺伝子から転写されるｍＲＮＡの発現を低下させることができる。一部の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、遺伝子によってコードされるタンパク質の発現を低下させることができる。一部の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが導入された細胞からの遺伝子によってコードされるタンパク質の分泌を低下させることができる。
【００１２】
アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的タンパク質（例えば、ＳＭＡＤ７）をコードするｍＲＮＡに相補的な、短鎖合成オリゴヌクレオチド配列である。アンチセンスオリゴヌクレオチド配列は、ｍＲＮＡにハイブリダイズして二本鎖ハイブリッドを産生し、該ハイブリッドの産生により、ＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッド鎖を分解するＲＮａｓｅ  Ｈ等の触媒酵素の活性化をもたらし、従ってタンパク質翻訳を防止し得る。
【００１３】
本開示のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩は、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＣＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号１）（配列中、Ｘは、５−メチル２’−デオキシシチジンである）の配列と９０％〜１００％同一である配列を含むＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドに由来するまたは由来し得る。実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号１の配列と９０％、９５％または１００％同一である配列を含む。
【００１４】
本開示のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩は、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＴＣＸＧＣＡＧＣ−３’（配列番号２）（配列中、Ｘは、５−メチル２’−デオキシシチジンである）の配列と９０％〜１００％同一である配列を含むＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドに由来するまたは由来し得る。実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号２の配列と９０％、９５％または１００％同一である配列を含む。
【００１５】
実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ヌクレオシド間連結の１個または複数個がＯ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結（すなわち、ホスホロチオエート連結）である、配列番号１または配列番号２を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドである。実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、全てのヌクレオシド間連結がＯ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結（すなわち、ホスホロチオエート連結）である、配列番号１または配列番号２を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【００１６】
ＳＭＡＤ７を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＣｐＧ対におけるシトシン残基が５−メチルシトシン（Ｍｅ−ｄＣと省略）によって置き換えられた、混合型骨格を含み得ることが企図される。メチルホスホネート連結が、アンチセンスオリゴヌクレオチドの５’および／または３’末端に置かれてもよい（ＭｅＰと省略）。
【００１７】
ＳＭＡＤ７を標的とする他の例示的なアンチセンスオリゴヌクレオチドとして、５’−ＧＴＸＹＣＣＣＣＴＴＣＴＣＣＣＸＹＣＡＧ−３’（配列番号３）（配列中、Ｘは、シトシンおよび５−メチルシトシンまたは２’−Ｏ−メチルシトシンヌクレオシドからなる群から選択される窒素含有塩基を含むヌクレオチドであり、配列中、Ｙは、窒素含有塩基、例えば、グアニン、５−メチルグアニン、または２’−Ｏ−メチルグアニンヌクレオシドを含むヌクレオチドであり、ただし、ヌクレオチドＸまたはＹのうち少なくとも一方が、メチル化窒素含有塩基を含む；例えば、５’−ＧＴＸＧＣＣＣＣＴＴＣＴＣＣＣＸＧＣＡＧ−３’（配列番号４）（配列中、Ｘは、５−メチル２’−デオキシシチジンである）である）が挙げられるがこれらに限定されない。
【００１８】
企図されるアンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列５’−ＧＴＣ＊  ＧＣＣ  ＣＣＴ  ＴＣＴ  ＣＣＣ  Ｃ＊ＹＣ  ＡＧＣ−３’（配列番号５）および５’−ＧＴＣ＊  ＧＣＣ  ＣＣＴ  ＴＣＴ  ＣＴＣ  Ｃ＊ＹＣ  ＡＧＣ−３’（配列番号６）（ここで、Ｃ＊は、５−メチル−２’−デオキシシチジンを表し、配列中、Ｙは、窒素含有塩基、例えば、グアニン、５−メチルグアニンまたは２’−Ｏ−メチルグアニンヌクレオシドを含むヌクレオチドである）を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む。実施形態では、企図されるアンチセンスオリゴヌクレオチドのヌクレオシド間連結のうち少なくとも１個は、Ｏ，Ｏ連結型ホスホロチオエート（すなわち、ホスホロチオエート連結）である。例えば、配列番号５のアンチセンスオリゴヌクレオチドの２０個のヌクレオシド間連結のそれぞれは、Ｏ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結であり得る。
【００１９】
一部の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ヌクレオシド間連結のうち１個または複数個がＯ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結である、配列番号５または配列番号６を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドである。一部の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、全てのヌクレオシド間連結がＯ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結である、配列番号５または配列番号６を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【００２０】
一部の実施形態では、本明細書に開示されている企図される組成物は、１〜２０個のＯ，Ｏ連結型ホスホロチオエートヌクレオシド間連結（すなわち、ホスホロチオエート結合）を必要に応じて含み得る、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５または配列番号６のアンチセンスオリゴヌクレオチドの薬学的に許容される塩、例えば、ナトリウム塩を含み得る。特定の実施形態では、企図されるアンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５または配列番号６の対イオンなしの、遊離酸形態、塩形態またはアニオン性形態を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドであり、２０個のヌクレオシド間連結のそれぞれは、Ｏ，Ｏ連結型ホスホロチオエート連結である。一部の実施形態では、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５または配列番号６のホスホロチオエート骨格を完全にまたは部分的にプロトン化して、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５または配列番号６の酸性形態を形成することができる。オリゴヌクレオチドの企図される塩は、完全に中和された塩を含む、例えば、各ホスホロチオエート連結が、Ｎａ＋等のイオンと会合する。一部の実施形態では、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５または配列番号６のアンチセンスオリゴヌクレオチドの塩は、部分的にのみ中和されている、例えば、全ホスホロチオエート連結未満が、イオンと会合する（例えば、９９％未満、９５％未満、９０％未満、８５％未満、８０％未満、７５％未満、７０％未満、６５％未満、６０％未満、５５％未満、５０％未満、４５％未満、４０％未満、３５％未満、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満、３％未満または１％未満が中和されている）。オリゴヌクレオチドは、天然起源の核酸塩基、糖および共有結合ヌクレオシド間（骨格）連結ならびに非天然起源の部分を含み得る。様々な実施形態では、本開示のアンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５または配列番号６のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、５−メチル−２’−デオキシシチジン５’−モノホスフェートおよび５−メチル−２’−デオキシシチジン５’−モノホスホロチオエートが挙げられるがこれらに限定されない、デオキシシチジンおよび／または５−メチル２’−デオキシシチジンを含むヌクレオチドを含むまたは含み得る。
【００２１】
一態様では、本開示は、皮膚炎症またはその症状の処置、予防および／または回復を必要とする対象における皮膚炎症またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。
【００２２】
一態様では、本開示は、乾癬またはその症状の処置を必要とする対象における乾癬またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。
【００２３】
一態様では、本開示は、乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症の処置、予防および／または回復を必要とする対象における乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。
【００２４】
一態様では、本開示は、ケラチノサイトの表皮過剰増殖の低下を必要とする対象におけるケラチノサイトの表皮過剰増殖を低下させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象のケラチノサイトの表皮過剰増殖を低下させる、方法を提供する。
【００２５】
一態様では、本開示は、皮膚の厚さの低下を必要とする対象における皮膚の厚さを低下させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚の厚さを低下させる、方法を提供する。
【００２６】
一態様では、本開示は、皮膚炎症および／またはその症状の寛解を維持する方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚炎症および／またはその症状の寛解を維持する、方法を提供する。
【００２７】
一態様では、本開示は、乾癬性関節炎および／またはその症状の進行を遅くする方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬性関節炎および／またはその症状の進行を遅くする、方法を提供する。
【００２８】
本特許または出願ファイルは、カラーで作成された少なくとも１枚の図面を含有する。カラー図面（複数可）付きの本特許または特許出願公開のコピーは、請求および必要料金の支払い後に担当省庁によって提供されるであろう。
【００２９】
本発明を理解し、これが実際にどのように実行され得るか実証するために、次に、添付の図面を参照しつつ、単なる非限定例として実施形態を記載する。図面について次に説明する：
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】図１は、乾癬患者の乾癬性区域（ＰＳＯ）および対照対象の健康な区域（ＣＴＲ）から採取した皮膚検体におけるＳＭＡＤ７（右側のパネル）の免疫染色の画像を示す。アイソタイプ対照ＩｇＧによる染色も示す（左側のパネル）。
【００３１】
【図２】図２Ａ〜図２Ｃは、ＳＭＡＤ７がケラチノサイト増殖を持続することを示す、ウエスタンブロット（図２Ａおよび図２Ｂ）および棒グラフ（図２Ｃ）の画像である。図２Ａは、増加用量のＳＭＡＤ７アンチセンス（ＡＳ）オリゴヌクレオチドで処置したＨａＣａＴ細胞におけるＳＭＡＤ７タンパク質発現の用量依存性低下を示すウエスタンブロットである。図２Ｂは、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳ）（２０μｇ／ｍｌ）で処置したＨａＣａＴ細胞のウエスタンブロットである。図２Ｃは、ＨａＣａＴ増殖におけるＳＭＡＤ７ノックダウンの効果を要約する棒グラフである。データは、対照に対する増加倍率として表現され（ＬＩＰＯ）、３回の別々の実験の平均±標準偏差（ＳＤ）を示す（ＳＭＡＤ７  Ｓトランスフェクト細胞、対、ＳＭＡＤ７  ＡＳトランスフェクト細胞、＊Ｐ＜０．０１）。
【００３２】
【図３】図３Ａおよび図３Ｂは、細胞周期のＳ期に停止させるＨａＣａＴ細胞の誘導におけるＳＭＡＤ７ノックダウンの効果の、それぞれヒストグラムおよびウエスタンブロットを示す。図３Ａは、値が、細胞周期の異なる期における細胞のパーセンテージを示し、３回の別々の実験の平均±ＳＤを示す、ヒストグラムである。図３Ｂは、ＨａＣａＴ細胞におけるＳＭＡＤ７ノックダウンの効果のウエスタンブロットであり、ｅＩＦ２αリン酸化の増強およびＣＤＣ２５Ａ発現の下方調節を示す。ＣＤＣ２５Ａ、ＣＤＣ２５ＢおよびＣＤＣ２５Ｃ発現をウエスタンブロッティングにより評価した。同様の結果が得られた３回の代表的実験のうち１回を示す。
【００３３】
【図４】図４Ａ〜図４Ｂは、ＳＭＡＤ７過剰発現が、ケラチン（Ｋ）６Ａおよび１６発現の増加ならびにＨａＣａＴ増殖の正の調節をもたらすことを示す、それぞれウエスタンブロット画像および棒グラフである。図４Ａは、ウエスタンブロッティングによるＫ６ＡおよびＫ１６発現を示す。β−アクチンは、ローディング対照として使用した。図４Ｂは、ＨａＣａＴ細胞増殖におけるＳＭＡＤ７  ＡＳの効果の棒グラフである。ＢｒｄＵ陽性細胞は、市販の比色分析アッセイを使用したＥＬＩＳＡによって評価した。データは、対照に対する増加倍率として表現され、３回の別々の実験の平均±ＳＤを示す（＊Ｐ＜０．０１）。
【００３４】
【図５】図５Ａ〜図５Ｂは、ＳＭＡＤ７発現が、Ａｌｄａｒａ媒介乾癬様病変を有するマウスの皮膚において増加することを示す、それぞれウエスタンブロットおよび免疫染色画像である。図５Ａは、Ａｌｄａｒａクリームが、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの剪毛された背中の皮膚に毎日塗布された後の、マウス皮膚のＳＭＡＤ７発現のウエスタンブロットである。図５Ｂは、図５Ａについて処置されたマウス皮膚の免疫組織化学を示す。本図は、６回の別々の実験の代表である。β−アクチンは、ウエスタンブロッティング試験におけるローディング対照として使用した。アイソタイプ対照ＩｇＧによる染色も図５Ｂに示す。
【００３５】
【図６ＡＢ】図６Ａ〜図６Ｄは、特異的ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドによるＳＭＡＤ７の阻害が、皮膚の厚さおよびケラチノサイト増殖を低下させることを示す、免疫染色（図６Ａ）、棒グラフ（図６Ｂ）、ウエスタンブロット（図６Ｃ）および免疫染色（図６Ｄ）を示す。Ａｌｄａｒａクリームを、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの剪毛された背中の皮膚に４日間毎日塗布し、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳ）またはセンスオリゴヌクレオチド（Ｓ）（１２５μｇ／マウス）を、Ａｌｄａｒａ処置１２時間後から開始して各日、局所的に塗布した。図６Ａは、上記の通りに処置したマウスの皮膚切片のヘマトキシリンおよびエオシンによる代表的染色を示す。１群当たり１２匹のマウスが解析された３回の別々の実験のうち１回を示す。図６Ｂは、上記（図６Ａ）の通りに処置したマウスの皮膚切片の表皮の厚さを要約する棒グラフを示し、データは、全実験の平均±ＳＤとして表現される。ＳＭＡＤ７  ＡＳ処置マウス対ＳＭＡＤ７  Ｓ処置マウス、＊Ｐ＜０．０１。図６Ｃは、上記（図６Ａ）通りに処置されたマウスの皮膚から抽出された総タンパク質のウエスタンブロットのパネルを示す。１回の代表的実験を示す。図６Ｄは、図６Ａに示される通りに処置したマウスの皮膚切片のＫｉ６７（右パネル）の代表的免疫染色を示す。アイソタイプＩｇＧによる染色も示す（左パネル）。
【図６ＣＤ】図６Ａ〜図６Ｄは、特異的ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドによるＳＭＡＤ７の阻害が、皮膚の厚さおよびケラチノサイト増殖を低下させることを示す、免疫染色（図６Ａ）、棒グラフ（図６Ｂ）、ウエスタンブロット（図６Ｃ）および免疫染色（図６Ｄ）を示す。Ａｌｄａｒａクリームを、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの剪毛された背中の皮膚に４日間毎日塗布し、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳ）またはセンスオリゴヌクレオチド（Ｓ）（１２５μｇ／マウス）を、Ａｌｄａｒａ処置１２時間後から開始して各日、局所的に塗布した。図６Ａは、上記の通りに処置したマウスの皮膚切片のヘマトキシリンおよびエオシンによる代表的染色を示す。１群当たり１２匹のマウスが解析された３回の別々の実験のうち１回を示す。図６Ｂは、上記（図６Ａ）の通りに処置したマウスの皮膚切片の表皮の厚さを要約する棒グラフを示し、データは、全実験の平均±ＳＤとして表現される。ＳＭＡＤ７  ＡＳ処置マウス対ＳＭＡＤ７  Ｓ処置マウス、＊Ｐ＜０．０１。図６Ｃは、上記（図６Ａ）通りに処置されたマウスの皮膚から抽出された総タンパク質のウエスタンブロットのパネルを示す。１回の代表的実験を示す。図６Ｄは、図６Ａに示される通りに処置したマウスの皮膚切片のＫｉ６７（右パネル）の代表的免疫染色を示す。アイソタイプＩｇＧによる染色も示す（左パネル）。
【００３６】
【図７ＡＢ】図７Ａは、示されている時点の間Ａｌｄａｒａクリームで処置したマウスの皮膚切片のヘマトキシリンおよびエオシンによる代表的染色を示す。図７Ｂは、図７Ａに示される通りに処置された皮膚の総抽出物におけるＫ６ＡおよびＫ１６発現の棒グラフを示す。図７Ｃは、Ａｌｄａｒａクリームの毎日の皮膚投与で処置したマウスの皮膚切片における表皮の厚さを評価するために行われたタンパク質（Ｋ６Ａ、Ｋ１６およびβ−アクチン（対照））のウエスタンブロットを示す。データは、３回の別々の実験の平均±ＳＤとして表現される。対照マウス（０日目）対Ａｌｄａｒａ処置マウス、＊Ｐ＜０．０５。β−アクチンは、ローディング対照として使用した。
【図７Ｃ】図７Ａは、示されている時点の間Ａｌｄａｒａクリームで処置したマウスの皮膚切片のヘマトキシリンおよびエオシンによる代表的染色を示す。図７Ｂは、図７Ａに示される通りに処置された皮膚の総抽出物におけるＫ６ＡおよびＫ１６発現の棒グラフを示す。図７Ｃは、Ａｌｄａｒａクリームの毎日の皮膚投与で処置したマウスの皮膚切片における表皮の厚さを評価するために行われたタンパク質（Ｋ６Ａ、Ｋ１６およびβ−アクチン（対照））のウエスタンブロットを示す。データは、３回の別々の実験の平均±ＳＤとして表現される。対照マウス（０日目）対Ａｌｄａｒａ処置マウス、＊Ｐ＜０．０５。β−アクチンは、ローディング対照として使用した。
【発明を実施するための形態】
【００３７】
詳細な説明
とりわけ、マザーズアゲンストデカペンタプレジックホモログ７（ＳＭＡＤ７）アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩の製剤、ならびにＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩の製剤による皮膚炎症、乾癬、乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症を処置する、予防するおよび管理することのために一般に有用な方法が本明細書に提供されている。ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＳＭＡＤ７  ｍＲＮＡ転写物に結合し、ＳＭＡＤ７  ｍＲＮＡ転写物の分解を誘導することができる、ＳＭＡＤ７  ｍＲＮＡ転写物のスプライシングを防止することができる、またはＳＭＡＤ７  ｍＲＮＡ転写物のタンパク質翻訳を防止することができるオリゴヌクレオチドであり得る。
【００３８】
定義
本明細書に記載されている「患者」は、哺乳動物、霊長類およびヒトが挙げられるがこれらに限定されない、皮膚炎症、例えば、乾癬を患うまたはそう診断されたいずれかの動物を指す。ある特定の実施形態では、患者は、例えば、ネコ、イヌまたはウマ等、非ヒト哺乳動物であり得る。好ましい実施形態では、患者は、ヒト対象である。
【００３９】
本明細書において使用される場合、「対象」とは、個体を意味する。よって、「対象」は、飼い慣らされた動物（例えば、ネコ、イヌ等）、家畜（例えば、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ等）、実験用動物（例えば、マウス、ウサギ、ラット、モルモット等）および鳥類を含み得る。「対象」は、霊長類またはヒト等、哺乳動物を含むこともできる。用語「対象」および「患者」は、互換的に使用することができるが、一部の実施形態では、対象は、治療を必要としてもよいが、疾患または障害を有すると診断されていないまたはこれに罹患していない場合がある。
【００４０】
「処置すること」は、状態、疾患、障害等の改善をもたらす、いずれかの効果、例えば、低減、低下、モジュレート、予防または排除することを含む。疾患状況を「処置すること」またはその「処置」は、次のものを含む：（１）疾患状況を阻害すること、すなわち、疾患状況もしくはその臨床症状の発症を停止すること；（２）疾患状況を軽減すること、すなわち、疾患状況もしくはその臨床症状の一時的もしくは永続的退縮を引き起こすこと；（３）疾患状況の症状を低下もしくは低減させること；または（４）疾患状況を予防すること、例えば、疾患状況に曝露されたもしくはその素因がある可能性があるが、未だ疾患状況の症状を経験していないもしくは呈していない対象において、疾患状況の臨床症状が発症しないようにすること。本明細書において使用される場合、「予防すること」または「予防する」は、疾患、状態または障害の症状または合併症の発病を低下または排除することを説明する。用語「予防すること」は、眼内圧等の状態に関して使用される場合、技術分野で認識されており、組成物を受けていない対象と比べて、対象における病状の徴候および／または症状の頻度を低下させる、またはその発病を遅延させる、製剤、組成物および／またはデバイス（例えば、眼球挿入物）を指す。
【００４１】
「低下させる」、または「低下させること」もしくは「低下」等のこの単語の他の形態とは、事象または特徴（例えば、血管漏出）を減らすことを意味する。これが典型的に、ある標準値または期待値に関係する、言い換えると、相対的であるが、必ずしも、標準値または相対値が参照されることが必要とは限らないことが理解される。
【００４２】
本開示の方法が、障害を予防することを対象にする限りにおいて、用語「予防する」は、疾患状況が完全に阻止されることを要求しないことが理解される。むしろ、本明細書において使用される場合、予防することという用語は、疾患発病に先立ち本開示の化合物の投与が想起され得るように、当業者が、障害に対して感受性である患者または集団を同定できることを指す。この用語は、疾患状況が完全に回避されることを暗示しない。
【００４３】
用語「症状を回復すること」、または「症状を回復する」等のこの単語の他の形態は、本開示の治療剤の投与が、宿主における疾患もしくは障害の１つもしくは複数の症状を緩和する、および／または治療剤の投与前および／または投与後に疾患もしくは障害に関連する特定の症状を低下、阻害もしくは排除することを意味するように本明細書に使用されている。
【００４４】
用語「管理する」、「管理」、「管理すること」などは、疾患の症状の重症度もしくは顕在化を制御すること、または疾患を処置する手段を一般に意味するように本明細書に使用されている。一般に、管理は、所望の薬理学的および／または生理学的効果を得るように使用されている。効果は、疾患および／または疾患に起因する有害作用を部分的にまたは完全に治癒する、または疾患の特定の症状もしくは顕在化が、患者において起こらないもしくは再び起こらないまたは患者において望ましくないもしくは耐えられないレベルまで上昇しないことを確実にするという点で治療的であり得る。用語「管理」は、本明細書において使用される場合、哺乳動物、特に、ヒトにおける疾患のいずれかの管理を網羅し、次のものを含む：（ａ）疾患を阻害すること、すなわち、疾患が重症度もしくは範囲を増加させるのを予防すること；（ｂ）疾患を軽減すること、すなわち、疾患の部分的もしくは完全回復を引き起こすこと；または（ｃ）疾患の再燃を予防すること、すなわち、疾患が、疾患の症状の処置もしくは疾患の処置が以前に成功した後に活動状況（active  state）に戻るのを予防すること。「管理」は、本明細書において使用される場合、疾患のための特異的処置、例えば、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの投与を参照して使用することもできる。
【００４５】
「有効量」は、本明細書において使用される場合、患者に投与されると、状態を少なくとも部分的に処置するのに十分な薬剤の量を指す。治療有効量は、状態、構成成分の投与経路、および処置されている患者の年齢、体重等に応じて変動する。したがって、ＳＭＡＤ７の特異的阻害剤の有効量は、薬剤の投与が、皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状が、対象において起こるのを予防する；皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状が進行するのを予防する；または皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状の関連症状を軽減または完全に回復する、すなわち、疾患の退縮を引き起こすような、患者における皮膚炎症、乾癬、乾癬性様病変および／またはそれらの症状の処置に必要な阻害剤の量である。
【００４６】
本明細書に使用されている用語法は、単に特定の実施形態を説明することを目的としており、本開示の範囲の限定を意図するものではない。本開示を通して使用されている通り、単数形形態「１つの（a）」、「１つの（an）」および「その（the）」は、文脈がそれ以外を明らかに指示しない限り、複数形の参照を含む。よって、例えば、「１つの組成物（a  composition）」の参照は、単一の組成物のみならず複数のかかる組成物を含み、「１つの治療剤（a  therapeutic  agent）」の参照は、１種または複数種の治療剤および／または医薬品ならびに当業者に公知のそれらの均等物、等々の参照である。本明細書に使用されているあらゆるパーセンテージおよび比は、特に断りのない限り、重量によるものである。
【００４７】
別途定義されていなければ、本明細書に使用されているあらゆる技術および科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されているものと同じ意味を有する。矛盾が生じる場合、本明細書が優先するものとする。本明細書において、単数形形態は、文脈がそれ以外を明らかに指示しない限り、複数形も含む。本明細書に記載されているものと同様のまたは均等な方法および材料を、本開示の実施または検査において使用することができるが、適した方法および材料を下に記載する。本明細書に言及されているあらゆる刊行物、特許出願、特許および他の参考文献を参照により本明細書に組み込む。本明細書に引用されている参考文献は、請求されている開示の先行技術であるとは了承されていない。矛盾が生じる場合、定義を含む本明細書が優先するものとする。加えて、材料、方法および実施例は、単なる説明的であり、限定を意図するものではない。
【００４８】
「薬学的に許容される」とは、生物学的にまたは他の面で望ましくないことのない材料を意味する、すなわち、材料は、臨床的に許容されない生物学的効果を引き起こすことなく、またはこれが含有される医薬組成物の他の構成成分のいずれかと有害な様式で相互作用することなく、関連する活性化合物と共に個体に投与することができる。
【００４９】
本明細書において使用される場合、「薬学的に許容されるキャリア」は、過剰な毒性、刺激、アレルギー性応答または他の問題もしくは合併症を伴わず、妥当なベネフィット／リスク比と釣り合った、人間および動物の組織と接触した使用に適したバッファー、キャリアおよび賦形剤を意味する。キャリア（複数可）は、製剤の他の成分と適合性であり、レシピエントにとって有害ではないという意味で「許容される」べきである。薬学的に許容されるキャリアは、医薬品投与と適合性である、バッファー、溶媒、分散媒、コーティング、等張および吸収遅延剤などを含む。薬学的に活性な物質のためのかかる媒体および剤の使用は、本技術分野で公知である。ある特定の実施形態では、医薬組成物は、経口投与され、消化器系または腸内における被包された物質の吸収部位の調節に適した腸溶コーティングを含む。例えば、腸溶コーティングは、エチルアクリレート−メタクリル酸コポリマーを含み得る。
【００５０】
ある特定の実施形態では、企図されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドおよびそのいずれかの医薬組成物は、経口、局所的、非経口、例えば、皮下注射、吸入スプレーによるまたは直腸を含む、１つまたはいくつかの経路によって投与することができる。非経口という用語は、本明細書において使用される場合、皮下注射、膵内投与、静脈内、筋肉内、腹腔内、胸骨内（intrasternal）注射または注入技法を含む。例えば、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、対象に皮下投与することができる。別の例では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、対象に経口投与することができる。別の例では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、非経口投与により、皮膚炎症、乾癬または乾癬性様病変の部位に直接的に投与することができる。
【００５１】
本明細書の記載および特許請求の範囲を通して、単語「を含む（comprise）」、ならびに「を含むこと（comprising）」および「を含む（comprises）」等のこの単語の他の形態は、例えば、他の添加物、構成成分、整数またはステップを含むがこれらに限定されないことを意味し、それらを除外することを意図するものではない。
【００５２】
「必要に応じた」または「必要に応じて」は、その後に記載される事象または状況が起こっても起こらなくてもよいこと、また、記載が、事象または状況が起こる実例および起こらない実例を含むことを意味する。
【００５３】
「阻害剤」は、本明細書において使用される場合、遺伝子、遺伝子のＲＮＡ産物もしくはタンパク質産物、またはこれらの実体のいずれかの移行形態、または別の分子実体であってその活性または発現が意図される標的の活性または発現を侵害する分子実体との直接的または間接的相互作用のいずれかにより、遺伝子もしくはＤＮＡ配列の発現を減少させる、遺伝子のＲＮＡ産物の産生、活性もしくはタンパク質への翻訳を防止もしくは抑制する、または遺伝子のタンパク質産物の活性を防止もしくは抑制することができる薬剤を指す。かかる阻害剤として、例えば、特異的分子標的に結合する抗体、小分子、および特異的ｍＲＮＡ転写物に標的化されたアンチセンスオリゴヌクレオチドを挙げることができるがこれらに限定されない。したがって、「ＳＭＡＤ７の阻害剤」は、本明細書において使用される場合、ＳＭＡＤ７の遺伝子、ＲＮＡ産物もしくはタンパク質産物、またはこれらの実体のいずれかの移行形態、または別の分子実体であってその活性または発現がＳＭＡＤ７の活性または発現を侵害する分子実体との直接的または間接的相互作用のいずれかにより、ＳＭＡＤ７の発現を減少させる；ＳＭＡＤ７のＲＮＡ産物の産生、活性もしくはタンパク質への翻訳を防止もしくは抑制する；またはＳＭＡＤ７のタンパク質産物の活性を防止もしくは抑制することができる薬剤を指す。
【００５４】
皮膚炎症または症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法
一態様では、本開示は、皮膚炎症またはその症状の処置、予防および／または回復を必要とする対象における皮膚炎症またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、皮膚炎症またはその症状の処置、予防および／または回復を必要とする対象における皮膚炎症またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、皮膚炎症またはその症状の処置、予防および／または回復を必要とする対象における皮膚炎症またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。
【００５５】
一態様では、本開示は、乾癬またはその症状の処置、予防および／または回復を必要とする対象における乾癬またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、乾癬またはその症状の処置、予防および／または回復を必要とする対象における乾癬またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、乾癬またはその症状の処置、予防および／または回復を必要とする対象における乾癬またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬またはその症状を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。
【００５６】
一態様では、本開示は、乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症の処置、予防および／または回復を必要とする対象における乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬性病変および／または乾癬様皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、乾癬性病変および／または乾癬性様皮膚炎症の処置、予防および／または回復を必要とする対象における乾癬性病変および／または乾癬性様皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬性病変または乾癬性様皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、乾癬性病変および／または乾癬性様皮膚炎症の処置、予防および／または回復を必要とする対象における乾癬性病変および／または乾癬性様皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬性病変または乾癬性様皮膚炎症を処置する、予防するおよび／または回復させる、方法を提供する。
【００５７】
細胞過剰増殖を低下させる方法（Method  or  Reducing  Cell  Hyperproliferation）
一態様では、本開示は、ケラチノサイトの表皮過剰増殖の低下を必要とする対象におけるケラチノサイトの表皮過剰増殖を低下させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象のケラチノサイトの表皮過剰増殖を低下させる、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、ケラチノサイトの表皮過剰増殖の低下を必要とする対象におけるケラチノサイトの表皮過剰増殖を低下させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象のケラチノサイトの表皮過剰増殖を低下させる、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、ケラチノサイトの表皮過剰増殖の低下を必要とする対象におけるケラチノサイトの表皮過剰増殖を低下させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象のケラチノサイトの表皮過剰増殖を低下させる、方法を提供する。
【００５８】
一態様では、本開示は、皮膚の厚さの低下を必要とする対象における皮膚の厚さを低下させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚の厚さを低下させる、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、皮膚の厚さの低下を必要とする対象における皮膚の厚さを低下させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚の厚さを低下させる、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、皮膚の厚さの低下を必要とする対象における皮膚の厚さを低下させる方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚の厚さを低下させる、方法を提供する。
【００５９】
炎症の寛解を維持する方法
一態様では、本開示は、皮膚炎症および／またはその症状の寛解を維持する方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚炎症および／またはその症状の寛解を維持する、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、皮膚炎症および／またはその症状の寛解の維持を必要とする対象における皮膚炎症および／またはその症状の寛解を維持する方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚炎症および／またはその症状の寛解を維持する、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、皮膚炎症および／またはその症状の寛解の維持を必要とする対象における皮膚炎症および／またはその症状の寛解を維持する方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の皮膚炎症および／またはその症状の寛解を維持する、方法を提供する。
【００６０】
疾患および／または症状の進行を遅くする方法
一態様では、本開示は、乾癬性関節炎および／またはその症状の進行を遅くする方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬性関節炎および／またはその症状の進行を遅くする、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、乾癬性関節炎および／またはその症状の進行の遅延を必要とする対象における乾癬性関節炎および／またはその症状の進行を遅くする方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬性関節炎および／またはその症状の進行を遅くする、方法を提供する。ある特定の実施形態では、本開示は、乾癬性関節炎および／またはその症状の進行の遅延を必要とする対象における乾癬性関節炎および／またはその症状の進行を遅くする方法であって、対象に、有効量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む医薬組成物を投与するステップを含み、投与後に、組成物が、対象の乾癬性関節炎および／またはその症状の進行を遅くする、方法を提供する。
【００６１】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドとしてのＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの剤形
一態様では、本開示は、治療、例えば、皮膚炎症を処置すること、予防することおよび／または回復させることにおける使用のための、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩を含む製剤を提供する。ある特定の実施形態では、製剤は、乾癬様病変、乾癬性病変または乾癬等、皮膚炎症を処置すること、予防することおよび／または回復させることのために使用される。ある特定の実施形態では、製剤は、小児皮膚炎症を処置すること、予防することおよび／または回復させることのために使用される。
【００６２】
本明細書に開示されている医薬組成物等、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドを含有する医薬組成物は、単位剤形で提示することができ、いずれか適した方法によって調製することができる。医薬組成物は、その意図される投与経路と適合性になるように製剤化する必要がある。有用な製剤は、医薬品技術分野において周知の方法によって調製することができる。例えば、Remington's  Pharmaceutical  Sciences、第１８版（Mack  Publishing  Company、１９９０年）を参照されたい。
【００６３】
医薬製剤は、好ましくは、滅菌されている。滅菌は、例えば、滅菌濾過膜を通した濾過によって達成することができる。組成物が凍結乾燥される場合、凍結乾燥および再構成の前または後に、濾過滅菌を行うことができる。
【００６４】
一部の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドの経口送達に適した組成物（例えば、カプセル剤、錠剤、カプレット剤、丸剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、粉剤・散剤（powder）および顆粒剤）が本明細書で企図される。企図されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＳＭＡＤ７に対して作用するオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含み、経口投与することができる。開示されている治療は、皮膚炎症、例えば、乾癬を患う対象に経口投与されると、患者の腸系に有効量のアンチセンスオリゴヌクレオチドを送達することができる、例えば、患者の回腸末端および／または右結腸に有効量のアンチセンスオリゴヌクレオチドを送達することができる。
【００６５】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の製剤は、経口医薬組成物であり得る。実施形態では、経口医薬組成物は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２または薬学的に許容されるその塩）を含む。実施形態では、経口医薬組成物は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む。
【００６６】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の医薬製剤は、錠剤またはカプセル剤であり得る。
【００６７】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の錠剤は、ミニ錠剤（minitablet）またはマイクロ錠剤（microtablet）として製剤化することができる。ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の錠剤は、ミニ錠剤、マイクロ錠剤または粒状物（granulate）を含み得る。ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）のカプセル剤は、ミニ錠剤、マイクロ錠剤または粒状物を含み得る。経口医薬組成物は、腸溶コーティングされていてよい。ある特定の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の経口医薬組成物（錠剤またはカプセル剤）は、腸溶コーティングされている、または腸溶コーティングされたマイクロペレット、マイクロ錠剤、ミニ錠剤もしくは粒状物を含む。ある特定の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６または薬学的に許容されるその塩）の経口医薬組成物（錠剤またはカプセル剤）は、腸溶コーティングされている、または腸溶コーティングされたマイクロペレット、マイクロ錠剤、ミニ錠剤もしくは粒状物を含む。
【００６８】
ある特定の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の経口医薬組成物は、腸溶コーティングされていない。ある特定の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の経口医薬組成物は、腸溶コーティングされていない。ある特定の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の経口医薬組成物は、腸溶コーティングされていない。
【００６９】
実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの組成物（すなわち、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む治療）は、アンチセンスオリゴヌクレオチドの経口送達に適することができる、例えば、組成物が、例えば、患者の回腸末端および右結腸へのアンチセンス化合物を送達することができるように、腸溶コーティング、例えば、胃抵抗性コーティングを含む錠剤であり得る。かかる投与は、例えば、対象の腸の罹患部分に直接的にアンチセンス化合物を実質的に局所的に塗布することにより、局所的効果をもたらすことができる。かかる投与は、実施形態では、アンチセンス化合物の望まれない全身性吸収を実質的に回避することができる。
【００７０】
例えば、経口投与のための経口剤形（例えば、錠剤）は、開示されているアンチセンス化合物（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）および薬学的に許容される賦形剤を含む顆粒（例えば、顆粒から少なくとも部分的に形成された経口剤形）を含み得る。かかる経口剤形、例えば、錠剤は、腸溶コーティングでコーティングされていてよい。企図される経口剤形、例えば、錠剤は、フィラー、結合剤、崩壊剤および／または滑沢剤、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、ウィンターグリーン、オレンジ、キシリトール、ソルビトール、フルクトースおよびマルトデキストリン等の甘味剤や香味剤、および芳香剤、保存剤および／または抗酸化剤等、薬学的に許容される賦形剤を含み得る。
【００７１】
実施形態では、医薬製剤の企図される経口剤形は、企図されるアンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）および薬学的に許容されるフィラーを含む粒内相を含む。例えば、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）およびフィラーは、必要に応じて他の賦形剤と一緒にブレンドし、顆粒へと形成することができる。実施形態では、粒内相は、湿式造粒を使用して形成することができる、例えば、液体（例えば、水）が、ブレンドされたアンチセンス化合物およびフィラーに添加され、次いでこの組合せ（the  combination）を乾燥、粉砕および／または篩分けして、顆粒を産生する。本技術分野における他のプロセスを使用して、粒内相を達成することができる。
【００７２】
実施形態では、製剤の企図される経口剤形は、１種または複数種の薬学的に許容される賦形剤を含み得る粒外相を含み、これは、粒内相とブレンドされて、開示されている製剤を形成することができる。
【００７３】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）製剤（例えば、経口剤形）は、フィラーを含む粒内相を含み得る。例示的なフィラーとして、セルロース、ゼラチン、リン酸カルシウム、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、ソルビトール、微結晶性セルロース、ペクチン、ポリアクリレート、デキストロース、セルロースアセテート、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、部分的にアルファ化されたデンプン、炭酸カルシウム、およびそれらの組合せを含むその他のものが挙げられるがこれらに限定されない。
【００７４】
実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）製剤（例えば、経口剤形）は、医薬製剤の成分を一緒に保持するように一般に機能し得る結合剤を含む、粒内相および／または粒外相を含み得る。例示的な結合剤として、次のものが挙げられるがこれらに限定されない：デンプン、糖、セルロースまたはヒドロキシプロピルセルロース等の修飾セルロース、ラクトース、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、低置換ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、エチルセルロース、糖アルコール、およびそれらの組合せを含むその他のもの。
【００７５】
企図されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）製剤（例えば、経口剤形）、例えば、粒内相および／または粒外相を含む製剤は、デンプン、セルロース、架橋ポリビニルピロリドン、デンプングリコール酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、アルギネート、コーンスターチ、クロスメロースナトリウム（crosmellose  sodium）、架橋カルボキシメチルセルロース、低置換ヒドロキシプロピルセルロース、アカシア、およびそれらの組合せを含むその他のもの等が挙げられるがこれらに限定されない、崩壊剤を含み得る。例えば、粒内相および／または粒外相は、崩壊剤を含み得る。
【００７６】
ある特定の実施形態では、企図されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）製剤は、開示されているアンチセンスオリゴヌクレオチド、およびマンニトール、微結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびデンプングリコール酸ナトリウムまたはそれらの組合せから選択される賦形剤を含む粒内相、ならびに微結晶性セルロース、デンプングリコール酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムまたはそれらの混合物のうち１つまたは複数を含む粒外相を含む。
【００７７】
ある特定の実施形態では、企図されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）製剤は、滑沢剤を含み得る、例えば、粒外相は、滑沢剤を含有し得る。滑沢剤として、タルク、シリカ、脂肪、ステアリン、ステアリン酸マグネシウム、リン酸カルシウム、二酸化ケイ素（silicone  dioxide）、ケイ酸カルシウム、リン酸カルシウム、コロイド二酸化ケイ素、金属性ステアリン酸塩、水素化植物油、コーンスターチ、安息香酸ナトリウム、ポリエチレングリコール、酢酸ナトリウム、ステアリン酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、タルクおよびステアリン酸が挙げられるがこれらに限定されない。
【００７８】
ある特定の実施形態では、本開示の医薬製剤は、腸溶コーティングを含む。一般に、腸溶コーティングは、消化管に沿って薬物が吸収される場所を制御する、経口薬物療法のための障壁を作り出す。腸溶コーティングは、ｐＨに応じて異なる速度で崩壊するポリマーを含み得る。腸溶コーティングは、例えば、セルロースアセテートフタレート、メチルアクリレート−メタクリル酸コポリマー、セルロースアセテートスクシネート、ヒドロキシルプロピルメチルセルロースフタレート、メチルメタクリレート−メタクリル酸コポリマー、エチルアクリレート−メタクリル酸コポリマー、メタクリル酸コポリマーＣ型、ポリビニルアセテート−フタレートおよびセルロースアセテートフタレートを含み得る。
【００７９】
ある特定の実施形態では、腸溶コーティングは、メタクリル酸、メタクリル／アクリルエステルまたはそれらの誘導体に基づくアニオン性、カチオン性または中性コポリマーを含む。ある特定の実施形態では、腸溶コーティングは、エチルアクリレート−メタクリル酸コポリマーを含む。市販の腸溶コーティングは、Ｏｐａｄｒｙ（登録商標）ＡＭＢ、エチルアクリレート−メタクリル酸コポリマー（例えば、Ａｃｒｙｌ−ＥＺＥ（登録商標））、ジメチルアミノエチルメタクリレート−ブチルメタクリレート−メチルメタクリレートコポリマー（２：１：１）またはポリ（メタクリル酸−ｃｏ−メチル−メタクリレート）１：１およびポリ（メタクリル酸−ｃｏ−メチル−メタクリレート）１：２コポリマー（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標））グレードを含む。実施形態では、腸溶コーティングは、企図される錠剤の重量で約５％〜約１０％、約５％〜約２０％、約８〜約１５％、約８％〜約１８％、約１０％〜約１２％または約１２％〜約１６％を構成する。
【００８０】
例えば、重量で約０．５％〜約７０％、例えば、約０．５％〜約１０％または約１％〜約２０％のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む、錠剤の形態のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）が提供される。かかる錠剤は、例えば、重量で約０．５％〜約６０％のマンニトール、例えば、重量で約３０％〜約５０％マンニトール、例えば、重量で約４０％マンニトール；および／または重量で約２０％〜約４０％の微結晶性セルロースもしくは重量で約１０％〜約３０％の微結晶性セルロースを含み得る。例えば、企図される錠剤は、重量で約３０％〜約６０％、約４５％〜約６５％、あるいは、重量で約５％〜約１０％の配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩、重量で約３０％〜約５０％、あるいは、約５％〜約１５％マンニトール、重量で約５％〜約１５％微結晶性セルロース、約０％〜約４％または約１％〜約７％ヒドロキシプロピルメチルセルロース、および約０％〜約４％、例えば、約２％〜約４％デンプングリコール酸ナトリウムを含む粒内相を含み得る。
【００８１】
例示的なＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド製剤は、約１０ｍｇ〜約５００ｍｇの配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含むまたはこれから本質的になる剤形を含む、例えば、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２００ｍｇまたは約２５０ｍｇの配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含む錠剤が、本明細書で企図される。ある特定の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）は、重量で約０．５％〜約１０％のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド；重量で約３０％〜約５０％マンニトール；および重量で約１０％〜約３０％微結晶性セルロースを含む、経口使用のための錠剤であり得る。
【００８２】
本開示の例示的な実施形態では、重量で約５０％の配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩、重量で約１１．５％マンニトール、重量で約１０％微結晶性セルロース、重量で約３％ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび重量で約２．５％デンプングリコール酸ナトリウムを含み得る粒内相；ならびに重量で約２０％微結晶性セルロース、重量で約２．５％デンプングリコール酸ナトリウムおよび重量で約０．５％ステアリン酸マグネシウムを含み得る粒外相を含む、経口投与のための薬学的に許容される錠剤が提供される。錠剤は、腸溶コーティングを含むこともできる。
【００８３】
別の例示的な実施形態では、重量で約５％〜約１０％、例えば、約８％の配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩（例えば、ナトリウム塩）、重量で約４０％マンニトール、重量で約８％微結晶性セルロース、重量で約５％ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび重量で約２％デンプングリコール酸ナトリウムを含み得る粒内相；ならびに重量で約１７％微結晶性セルロース、重量で約２％デンプングリコール酸ナトリウムおよび重量で約０．４％ステアリン酸マグネシウムを含み得る粒外相を含むまたはこれから本質的になる、経口投与のための薬学的に許容される錠剤が提供される。
【００８４】
企図される錠剤は、腸溶コーティングを含むこともできる、例えば、開示されている錠剤は、重量で約１３％、約１４％、約１５％、約１６％または約１７％の腸溶コーティング、例えば、エチルアクリレート−メタクリル酸コポリマー（例えば、ＡｃｒｙｌＥＺＥ（登録商標））を含み得る。
【００８５】
例えば、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドは、粒内相および粒外相を含む、経口使用のための薬学的に許容される錠剤の形態であり得、例えば、粒内相は、重量で約５％〜約１０％（例えば、重量で約８％）の配列番号４によって表されるアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩、重量で約４０％マンニトール、重量で約８％微結晶性セルロース、重量で約５％ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび重量で約２％デンプングリコール酸ナトリウムを含み、例えば、粒外相は、重量で約１７％微結晶性セルロース、重量で約２％デンプングリコール酸ナトリウムおよび重量で約０．４％ステアリン酸マグネシウムを含み、錠剤は、腸溶コーティングをさらに含み得る。
【００８６】
企図される製剤、例えば、錠剤は、実施形態では、患者に経口投与されると、患者におけるアンチセンスオリゴヌクレオチドの最小血漿濃度をもたらすことができる。別の実施形態では、企図される製剤は、患者に経口投与されると、患者の回腸末端および／または右結腸に、例えば、患者の罹患または罹病した腸部位に局所的に送達する。経口投与に適した製剤は、活性成分として所定量のその対象組成物をそれぞれ含有する、カプセル剤、カシェ剤、丸剤、錠剤、ロゼンジ剤（例えば、スクロースおよびアカシアまたはトラガント等の風味付けされた基剤を使用）、粉剤・散剤、顆粒剤、または水性もしくは非水性液体での液剤もしくは懸濁剤として、または水中油型もしくは油中水型液体エマルションとして、またはエリキシル剤もしくはシロップ剤として、または芳香錠として（ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシア等の不活性基剤を使用）の形態であり得る。本開示の組成物は、ボーラス、舐剤またはペースト剤として投与することもできる。
【００８７】
ある特定の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの医薬経口剤形（例えば、錠剤製剤）は、粒内相を含み得、ここで、粒内相は、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩（例えば、ナトリウム塩）等のアンチセンスオリゴヌクレオチドおよび薬学的に許容されるフィラーを含み、該剤形は、崩壊剤等の薬学的に許容される賦形剤を含み得る粒外相を含むこともできる。粒外相は、微結晶性セルロース、ステアリン酸マグネシウムおよびそれらの混合物から選択される構成成分を含み得る。医薬組成物は、錠剤の重量で約１２％〜１６％の腸溶コーティングを含むこともできる。例えば、経口使用のための薬学的に許容される錠剤は、重量で約０．５％〜約１０％のアンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩、重量で約３０％〜５０％マンニトール、重量で約１０％〜３０％微結晶性セルロース、およびエチルアクリレート−メタクリル酸コポリマーを含む腸溶コーティングを含み得る。
【００８８】
別の例では、経口使用のための薬学的に許容される錠剤は、重量で約５％〜約１０％のアンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩、重量で約４０％マンニトール、重量で約８％微結晶性セルロース、重量で約５％ヒドロプロピルメチルセルロース（hydropropylmethyl  cellulose）および重量で約２％デンプングリコール酸ナトリウムを含む粒内相；重量で約１７％微結晶性セルロース、重量で約２％デンプングリコール酸ナトリウム、重量で約０．４％ステアリン酸マグネシウムを含む粒外相；ならびにエチルアクリレート−メタクリル酸コポリマーを含む錠剤上の腸溶コーティングを含み得る。
【００８９】
一部の実施形態では、医薬組成物は、重量で約１３％、約１５％、約１６％、約１７％または約１８％の例えば、ＡｃｙｒｌＥＺＥ（登録商標）（例えば、その全体を参照により本明細書に組み込む、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１０／０５４８２６を参照）を含む腸溶コーティングを含有し得る。
【００９０】
コーティングが溶解し、活性成分が放出されるポイントでの速度は、その溶解速度である。ある実施形態では、企図される錠剤は、例えば、７．２のｐＨを有するリン酸バッファーにおいて１００ｒｐｍおよび３７℃でＵＳＰ／ＥＰ  ２型装置（パドル）において検査された場合、約１２０分〜約２４０分後、例えば、１８０分後に約５０％〜約１００％のオリゴヌクレオチドを放出する溶解プロファイルを有することができる。別の実施形態では、企図される錠剤は、例えば、１．０のｐＨを有する希ＨＣｌにおいて１００ｒｐｍおよび３７℃でＵＳＰ／ＥＰ  ２型装置（パドル）において検査された場合、１２０分後にオリゴヌクレオチドが実質的に放出されないという溶解プロファイルを有することができる。企図される錠剤は、別の実施形態では、例えば、６．６のｐＨを有するリン酸バッファーにおいて１００ｒｐｍおよび３７℃でＵＳＰ／ＥＰ  ２型装置（パドル）において検査された場合、３０分後に約１０％〜約３０％または約５０％以下のオリゴヌクレオチドを放出する溶解プロファイルを有することができる。
【００９１】
開示されている製剤、例えば、錠剤は、実施形態では、患者に経口投与されると、患者におけるオリゴヌクレオチドの最小血漿濃度をもたらすことができる。別の実施形態では、開示されている製剤は、患者に経口投与されると、患者の結腸または直腸に、例えば、患者の罹患または罹病した部位に局所的に送達する。
【００９２】
非経口投与
本開示の医薬組成物は、非経口投与のために製剤化することができる、例えば、静脈内、筋肉内、皮下、病巣内または腹腔内経路による注射のために製剤化することができる。ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含有する水性医薬組成物等、水性組成物の調製は、本開示を踏まえて、当業者にとって公知であろう。典型的には、かかる組成物は、液体の液剤または懸濁剤のいずれかとしての注射剤として調製することができ；注射の前に液体を添加して溶液または懸濁液を調製するための使用に適した固体形態を調製することもでき；調製物を乳化することもできる。
【００９３】
ある特定の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の製剤は、非経口医薬組成物としての使用のためのものである。ある特定の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の製剤は、非経口医薬組成物としての使用のためのものである。ある特定の実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の製剤は、皮下投与に適している。ある特定の実施形態では、非経口または皮下投与のための医薬組成物／製剤は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１もしくは２のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む。ある特定の実施形態では、非経口または皮下投与のための医薬組成物／製剤は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）を含む。
【００９４】
注射剤としての使用に適した医薬品形態は、滅菌水性液剤または分散液剤（dispersion）；ゴマ油、ピーナッツ油または水性プロピレングリコールを含む製剤；および滅菌注射用液剤または分散液剤の即時調製のための滅菌粉末を含む。全ての事例で、形態は、滅菌されている必要があり、容易な注射針通過性（syringability）が存在する程度まで流動性である必要がある。これは、製造および貯蔵条件下で安定である必要があり、細菌および真菌等の微生物の汚染作用から保存される必要がある。
【００９５】
活性化合物または薬理学的に許容されるその塩の液剤は、ヒドロキシプロピルセルロース等の界面活性物質と適宜混合された水において調製することができる。グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物において、ならびに油において分散液剤を調製することもできる。加えて、溶媒または懸濁媒体として滅菌固定油を用いることができる。この目的のため、合成モノグリセリドまたは合成ジグリセリドを含む、いかなる無刺激固定油を用いることもできる。加えて、注射剤の調製においてオレイン酸等の脂肪酸を使用することができる。滅菌注射用調製物は、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液としての、無毒性非経口に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射用液剤、懸濁剤またはエマルションであってよい。用いることができる許容されるビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．、および等張塩化ナトリウム溶液がある。実施形態では、ＳＭＡＤ７阻害剤は、１％（ｗ／ｖ）カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび０．１％（ｖ／ｖ）ＴＷＥＥＮ（商標）８０を含むキャリア液に懸濁することができる。貯蔵および使用の通常条件下で、このような調製物は、微生物の成長を防止するための保存剤を含有する。
【００９６】
注射用調製物、例えば、滅菌注射用水性または油性懸濁剤は、適した分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を使用して公知技術に従い製剤化することができる。一般に、分散液剤は、基礎分散媒および上に列挙されているものに由来する要求される他の成分を含有する滅菌ビヒクルに様々な滅菌された活性成分を組み入れることにより調製される。本開示の滅菌注射用液剤は、要求に応じて上に列挙されている様々な他の成分と共に、要求される量の適切な溶媒に、ある量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）、例えば、重量で約０．５％〜約７０％、例えば、約０．５％〜約１０％または約１％〜約２０％のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドを組み入れ、続いて、濾過滅菌することにより調製することができる。滅菌注射用液剤の調製のための滅菌粉末の場合、好ましい調製方法は、先に滅菌濾過されたその溶液から活性成分プラスいずれか追加の所望の成分の粉末を生じる真空乾燥およびフリーズドライ技法である。注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通した濾過によって滅菌することができる。
【００９７】
筋肉内注射のためのより濃縮されたまたは高度に濃縮された液剤の調製も企図される。これに関して、溶媒としてのＤＭＳＯは、これが、極めて急速な浸透をもたらし、高濃度のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）、例えば、重量で約０．５％〜約７０％、約０．５％〜約１０％または約１％〜約２０％のアンチセンスオリゴヌクレオチドを小区域に送達することから、その使用が好ましい。
【００９８】
かかる溶液における使用に適した保存剤は、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、クロロブタノール、チメロサールなどを含む。適したバッファーは、約ｐＨ６〜ｐＨ８の間、好ましくは、約ｐＨ７〜ｐＨ７．５の間にｐＨを維持するのに十分な量で、ホウ酸、炭酸水素ナトリウムおよびカリウム、ホウ酸ナトリウムおよびカリウム、炭酸ナトリウムおよびカリウム１０、酢酸ナトリウム、重リン酸ナトリウムなどを含む。適した浸透圧剤は、眼科用液剤に相当する塩化ナトリウムが、０．９プラスまたはマイナス０．２％の範囲に収まるような、デキストラン４０、デキストラン７０、デキストロース、グリセリン、塩化カリウム、プロピレングリコール、塩化ナトリウムなどである。適した抗酸化剤および安定剤は、亜硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ亜硫酸ナトリウム（sodium  thiosulfite）、チオ尿素などを含む。適した湿潤剤および清澄剤は、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、ポロクサマー２８２およびチロキサポールを含む。適した増粘剤は、デキストラン４０、デキストラン７０、ゼラチン、グリセリン、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシメチルプロピルセルロース、ラノリン、メチルセルロース、ワセリン、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースなどを含む。
【００９９】
例示的な実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの皮下投与のための医薬組成物は、配列番号６によって表されるもの等のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩（ナトリウム塩等）、および薬学的に許容されるキャリアを含む。
【０１００】
局所製剤および使用
本開示は、約１％（ｗ／ｗ）〜約９９％（ｗ／ｗ）のオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩および薬学的に許容されるキャリアを含む、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の局所製剤を提供する。実施形態では、本開示は、約１％（ｗ／ｗ）〜約９９％（ｗ／ｗ）のオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩および薬学的に許容されるキャリアを含む、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１または２のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の局所製剤を提供する。実施形態では、本開示は、約１％（ｗ／ｗ）〜約９９％（ｗ／ｗ）のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩および薬学的に許容されるキャリアを含む、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の局所製剤を提供する。
【０１０１】
実施形態では、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６または薬学的に許容されるその塩）の製剤は、ゲル、クリーム、軟膏、液体またはパッチ剤形として製剤化することができる。ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の製剤は、対象の皮膚への塗布後に、製剤がパッチを形成するように製剤化することができる。
【０１０２】
例えば、局所製剤は、約１％〜約１０％、約１０％〜約２０％、約２０％〜約３０％、約３０％〜約４０％、約４０％〜約５０％、約５０％〜約６０％、約６０％〜約７０％、約７０％〜約８０％、約８０％〜約９０％、約９０％〜約９５％または約９５％〜約９９％のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩を含むまたはこれを含み得る。
【０１０３】
本開示の局所製剤は、液体、溶液、エマルション、クリーム、ローション、懸濁液、粉薬（triturate）、ゲル、ゼリー、泡、ペースト、軟膏、シャンプー、接着剤、パッチなどとして製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、液体として製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、溶液として製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、エマルションとして製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、クリームとして製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、ローションとして製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、懸濁液として製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、粉薬として製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、ゲルとして製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、ゼリーとして製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、泡として製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、ペーストとして製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、軟膏として製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、シャンプーとして製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、接着剤として製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、パッチとして製剤化することができる。ある特定の実施形態では、本開示の局所製剤は、対象の皮膚への塗布後に、パッチを形成することができる。
【０１０４】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩）の局所製剤（例えば、液体、溶液、エマルション、クリーム、ローション、懸濁液、粉薬、ゲル、ゼリー、泡、ペースト（past）、軟膏、シャンプー、接着剤、パッチなど）は、皮膚炎症を処置すること、予防することおよび／または回復させることに適するまたは適し得る。ある特定の実施形態では、皮膚炎症は、乾癬性様病変または乾癬である。ある特定の実施形態では、皮膚炎症は、小児皮膚炎症である。
【０１０５】
１週間、２週間、１ヶ月間、２ヶ月間または３ヶ月間〜１年間の間となり得る処置期間において１日に１回朝および／または１日に１回夜の、局所製剤（例えば、液体、溶液、エマルション、クリーム、ローション、懸濁液、粉薬、ゲル、ゼリー、泡、ペースト、軟膏、シャンプー、接着剤、パッチなど）として製剤化された、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の毎日の局所投与が、乾癬性病変の低下に有効であり得る。局所製剤（例えば、液体、溶液、エマルション、クリーム、ローション、懸濁液、粉薬、ゲル、ゼリー、泡、ペースト（past）、軟膏、シャンプー、接着剤、パッチなど）は、約１．０ｍｌ／５ｃｍ２〜１．０ｍｌ／５０ｃｍ２または約１．０ｍｌ／５ｃｍ２〜５０ｍｌ／５０ｃｍ２または約１．０ｍｌ／５ｃｍ２〜１００ｍｌ／５０ｃｍ２の間の量で投与することができる。
【０１０６】
実施形態では、局所製剤（例えば、液体、溶液、エマルション、クリーム、ローション、懸濁液、粉薬、ゲル、ゼリー、泡、ペースト（past）、軟膏、シャンプー、接着剤、パッチなど）は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩および第２の治療剤の両方の混合物であり得る。
【０１０７】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の局所製剤（例えば、液体、溶液、エマルション、クリーム、ローション、懸濁液、粉薬、ゲル、ゼリー、泡、ペースト（past）、軟膏、シャンプー、接着剤、パッチなど）は、１種または複数種の美容的または薬学的に許容されるキャリア／賦形剤を含むこともできる。本明細書で論じられている局所製剤において使用することができる、適したキャリア／賦形剤は、本技術分野で公知であり、そのようなものとして、Ｃ２〜Ｃ８直鎖および分枝鎖アルコール、ジオールおよびトリオール等の可溶化剤、グリセリン、アミノ酸およびアミノ酸誘導体、ポリアミノ酸および誘導体、ピロリドンカルボン酸、およびその塩および誘導体等の保湿剤および保水剤、ラウレス硫酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート等の界面活性物質、セチルアルコール、ステアリルアルコール等の乳化剤、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン（polyvinylpyrollidone）、ポリビニルアルコールおよびアクリルポリマー等の増粘剤が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１０８】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の局所製剤（例えば、液体、溶液、エマルション、クリーム、ローション、懸濁液、粉薬、ゲル、ゼリー、泡、ペースト（past）、軟膏、シャンプー、接着剤、パッチなど）は、プロピレングリコールを含むこともできる。プロピレングリコールは、約１％ｗ／ｗ〜約２５％ｗ／ｗの間で製剤中に存在することができる。その上、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の局所製剤（例えば、液体、溶液、エマルション、クリーム、ローション、懸濁液、粉薬、ゲル、ゼリー、泡、ペースト、軟膏、シャンプー、接着剤、パッチなど）は、エタノールおよび／またはポリエチレングリコール３００を含むこともできる。エタノールは、約１％ｗ／ｗ〜約２５％ｗ／ｗの間で製剤中に存在することができる。ポリエチレングリコール３００は、約１％ｗ／ｗ〜約８０％ｗ／ｗの間の範囲内で存在することができる。加えて、局所製剤は、少なくとも１種の保湿剤／保水剤を含み得る。
【０１０９】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６）または薬学的に許容されるその塩の局所製剤（例えば、液体、溶液、エマルション、クリーム、ローション、懸濁液、粉薬、ゲル、ゼリー、泡、ペースト（past）、軟膏、シャンプー、接着剤、パッチなど）は、エアロゾル、スプレー、ポンプ−パック、ブラシ、スワブまたは他の塗布具によるものが挙げられるがこれらに限定されない、本技術分野で公知のいずれかの手段によって、皮膚に塗布することができる。実施形態では、塗布器は、定量エアロゾル、貯蔵エネルギー定量ポンプまたは手動定量ポンプ等、固定または可変式定量塗布のいずれかを提供する。実施形態では、薬物送達系は、約１０〜８００ｃｍ２、より好ましくは、約１０〜４００ｃｍ２、最も好ましくは、約１０〜２００ｃｍ２の間の送達表面積を覆って、ヒトまたは動物の皮膚に塗布される。塗布は、塗布される用量の量および／または均一性を一緒になって正確に制御する、アクチュエータノズルシュラウドと組み合わせた局所定量スプレーによって行うことができる。シュラウドの一機能は、薬物送達系が塗布されている皮膚の上の所定の高さに、また、それと垂直にノズルを維持することであり得る。この機能は、スペーサーバーなどによって達成することもできる。シュラウドの別の機能は、周囲の環境への薬物送達系の跳ね返り（bounce-back）および／または損失を防止または限定するために、皮膚上の区域を封入することである。実施形態では、シュラウドによって規定される塗布区域は、実質的に円形の形状である。
【０１１０】
ある特定の実施形態では、薬物送達系は、ロールオン式または他の種類の塗布器を備えるまたは備えない、単位容量ディスペンサーであり得る。無処置皮膚にいくつかの投薬量を塗布して、所望の結果を得ることが必要となる場合もある。
【０１１１】
本開示のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の局所製剤（例えば、液体、溶液、エマルション、クリーム、ローション、懸濁液、粉薬、ゲル、ゼリー、泡、ペースト（past）、軟膏、シャンプー、接着剤、パッチなど）は、いかなる追加の薬理学的に活性な薬剤も含まず、薬学的に許容される局所的キャリアおよび薬理学的に活性な基剤を含有し得る。製剤は、リポソーム、ミセルおよび／またはマイクロスフェアを含有するように調製することができる。ある特定の実施形態では、局所製剤は、水性であり得る、すなわち、水を含有し得、または非水性であり得、体表面から蒸発する水分が、体表面への適用後およびその後に製剤内に維持されるように、必要に応じて閉塞性被覆層（occlusive  overlayer）と組み合わせて使用することができる。
【０１１２】
軟膏は、医薬製剤の技術分野で周知の通り、ワセリンまたは他の石油誘導体に典型的に基づく半固体調製物である。使用されるべき特異的軟膏基剤は、当業者によって十分に理解されている通り、最適な薬物送達をもたらす基剤、好ましくは、他の所望の特徴、例えば、皮膚軟化（emolliency）なども同様にもたらす基剤である。他のキャリアまたはビヒクルと同様に、軟膏基剤は、不活性で、安定で、非刺激性および非感作性であるべきである。Remington:  The  Science  and  Practice  of  Pharmacy、第１９版（Easton,  Pa.：Mack  Publishing  Co.、１９９５年）の１３９９〜１４０４頁において説明される通り、軟膏基剤は、４クラスにグループ分けすることができる：油性基剤；乳化性基剤；エマルション基剤；および水溶性基剤。油性軟膏基剤は、例えば、植物油、動物から得られる脂肪、および石油から得られる半固体炭化水素を含む。吸収性軟膏基剤としても公知の乳化性軟膏基剤は、水を殆どまたは全く含有せず、例えば、ヒドロキシステアリンサルフェート、無水ラノリンおよび親水性ワセリンを含む。エマルション軟膏基剤は、油中水型（Ｗ／Ｏ）エマルションまたは水中油型（Ｏ／Ｗ）エマルションのいずれかであり、例えば、セチルアルコール、グリセリルモノステアレート、ラノリンおよびステアリン酸を含む。実施形態では、水溶性軟膏基剤は、様々な分子量のポリエチレングリコールから調製される；さらなる情報については、再度、Remington:  The  Science  and  Practice  of  Pharmacyを参照されたい。
【０１１３】
クリームは、同様に本技術分野で周知の通り、粘稠性の液体、または水中油型もしくは油中水型のいずれかの半固体エマルションである。クリーム基剤は、水で洗浄可能であり、油相、乳化剤および水相を含有する。「内」相とも呼ばれる油相は一般に、ワセリン、およびセチルアルコールまたはステアリルアルコール等の脂肪アルコールからなる。水相は通常、必ずではないが、容量が油相を超え、一般に、保水剤を含有する。クリーム製剤における乳化剤は一般に、非イオン性、アニオン性、カチオン性または両性界面活性物質である。
【０１１４】
ゲルは、半固体の、懸濁液型の系である。単相ゲルは、典型的に水性であるが、アルコールおよび必要に応じて油も含有するキャリア液体全体に実質的に均一に分布した、有機巨大分子を含有する。実施形態では、「有機巨大分子」、すなわち、ゲル化剤は、「カルボマー」ファミリーのポリマー、例えば、ＣＡＲＢＯＰＯＬ（商標）という商標で商業的に得ることができるカルボキシポリアルキレン等、架橋されたアクリル酸ポリマーである。ポリエチレンオキサイド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーおよびポリビニルアルコール等の親水性ポリマー；ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートおよびメチルセルロース等のセルロース系ポリマー；トラガントおよびキサンタンガム等のガム；アルギン酸ナトリウム；ならびにゼラチンが含まれる場合もある。均一なゲルを調製するために、アルコールもしくはグリセリン等の分散剤を添加することができる、またはゲル化剤は、研和、機械的混合もしくは撹拌またはそれらの組合せによって分散させることができる。
【０１１５】
ローションは、摩擦なしで皮膚表面に塗布される調製物であり、典型的には、水またはアルコール基剤中に、活性薬剤を含む固体粒子が存在する、液体または半液体調製物である。ローションは、通常、固体の懸濁液であり、好ましくは、本目的のため、水中油型の液体油性エマルションを含む。実施形態では、ローションは、流動性が高い組成物の塗布のし易さのため、広い身体区域を処置するために使用される。一般に、ローション中の不溶物が微粉化されていることが必要とされる。ローションは、典型的に、より優れた分散液を産生するための懸濁化剤、ならびに皮膚と接触した活性薬剤の局在化および保持に有用な化合物、例えば、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどを含有する。
【０１１６】
ペーストは、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩が適した基剤中に懸濁された、半固体剤形である。基剤の性質に応じて、ペーストは、脂肪ペースト、または単相水性ゲルでできたペーストの間に分けられる。脂肪ペースト中の基剤は一般に、ワセリン、親水性ワセリンなどである。単相水性ゲルでできたペーストは一般に、基剤としてカルボキシメチルセルロースなどを組み入れる。
【０１１７】
製剤は、リポソーム、ミセルおよびマイクロスフェアにより調製することもできる。リポソームは、脂質二重層を含む脂質壁を有する顕微鏡レベルの小胞であり、本明細書において同様に薬物送達系として使用することができる。一般に、リポソーム製剤は、不十分に可溶性のまたは不溶性の医薬品である。本開示における使用のためのリポソーム調製物は、カチオン性（正に荷電）、アニオン性（負に荷電）および中性調製物を含み得る。カチオン性リポソームは、簡単に入手可能である。例えば、Ｎ［１−２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリエチルアンモニウム（ＤＯＴＭＡ）リポソームは、商品名ＬＩＰＯＦＥＣＴＩＮ（商標）（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）で入手可能である。同様に、アニオン性および中性リポソームも同様に、例えば、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ、Ａｌａ．）から簡単に入手可能である、または簡単に入手可能な材料を使用して容易に調製することができる。かかる材料は、ホスファチジルコリン、コレステロール、ホスファチジルエタノールアミン、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）およびジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（dioleoylphoshatidyl  ethanolamine；ＤＯＰＥ）をとりわけ含む。これらの材料は、ＤＯＴＭＡと適切な比で混合することもできる。これらの材料を使用してリポソームを作製するための方法は、本技術分野で周知である。
【０１１８】
ミセルは、その極性頭部が、外側の球状殻を形成する一方、その疎水性炭化水素鎖が、球の中心に向かって配向されコアを形成するように配置された、界面活性物質分子からなることが本技術分野で公知である。ミセルは、ミセルが自然に生じるような十分な高さの濃度で界面活性物質を含有する水性溶液中で形成する。ミセルの形成に有用な界面活性物質として、ラウリン酸カリウム、オクタンスルホン酸ナトリウム、デカンスルホン酸ナトリウム、ドデカンスルホン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ドクセートナトリウム、デシルトリメチルアンモニウムブロマイド、ドデシルトリメチルアンモニウムブロマイド、テトラデシルトリメチルアンモニウムブロマイド、テトラデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ドデシルアンモニウムクロライド、ポリオキシル８ドデシルエーテル、ポリオキシル１２ドデシルエーテル、ノノキシノール１０およびノノキシノール３０が挙げられるがこれらに限定されない。ミセル製剤は、局所的もしくは経皮送達系のリザーバーへの、または体表面へと塗布される製剤への組み入れのいずれかにより、本開示と併せて使用することができる。
【０１１９】
マイクロスフェアは、同様に、本製剤および薬物送達系中に組み入れることができる。リポソームおよびミセルと同様に、マイクロスフェアは本質的に、薬物または薬物含有製剤を被包する。マイクロスフェアは一般に、必ずではないが、合成または天然起源の生体適合性ポリマーから形成されるが、リン脂質等の荷電脂質からなっていてもよい。マイクロスフェアの調製は、本技術分野で周知であり、関連する教科書および文献に記載されている。
【０１２０】
当業者に公知の様々な添加物が、局所製剤に含まれていてよい。例えば、相対的に少量のアルコールを含む溶媒を使用して、ある特定の製剤構成成分を可溶化することができる。実施形態では、製剤は、例えば、ジエチレングリコールモノエチルエーテル（ＴＲＡＮＳＣＵＴＯＬ（商標）として商業的に入手可能）およびジエチレングリコールモノメチルエーテル等のエーテル；ラウリン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、セチルトリメチルアンモニウムブロマイド、塩化ベンザルコニウム、ポロクサマー（２３１、１８２、１８４）、Ｔｗｅｅｎ（２０、４０、６０、８０）およびレシチン（米国特許第４，７８３，４５０号）等の界面活性物質；例えばエタノール、プロパノール、オクタノール、ベンジルアルコール等のアルコール；ポリエチレングリコールモノラウレート（ＰＥＧＭＬ）等のポリエチレングリコールおよびそのエステル；尿素、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、２−ピロリドン、１−メチル−２−ピロリドン、エタノールアミン、ジエタノールアミンおよびトリエタノールアミン等のアミドおよび他の窒素含有化合物；テルペン；アルカノン；ならびに有機酸、特に、クエン酸およびコハク酸が挙げられるがこれらに限定されない、適した増強剤を含む。ＤＭＳＯおよびＣ１０ＭＳＯ等のＡＺＯＮＥ（商標）およびスルホキシドを使用することもできる。
【０１２１】
本製剤は、例えば乳白剤、抗酸化剤、芳香剤、着色料、ゲル化剤、増粘剤、安定剤、界面活性物質等、従来の添加物を含むこともできる。抗菌剤等、他の薬剤を添加して、貯蔵による損傷を防止、すなわち、酵母およびカビ等の微生物の成長を阻害することもできる。適した抗菌剤は典型的に、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のメチルおよびプロピルエステル（すなわち、メチルパラベンおよびプロピルパラベン）、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、イミド尿素（imidurea）、ならびにそれらの組合せからなる群から選択される。
【０１２２】
製剤は、刺激緩和添加物（irritation-mitigating  additive）を含有して、組成物の薬理学的に活性な基剤または他の構成成分に起因する皮膚刺激または皮膚損傷の可能性を最小化または排除することもできる。適した刺激緩和添加物は、例えば：α−トコフェロール；モノアミンオキシダーゼ阻害剤、特に、２−フェニル−１−エタノール等のフェニルアルコール；グリセリン；サリチル酸およびサリチレート；アスコルビン酸およびアスコルベート；モネンシン等のイオノフォア；両親媒性アミン；塩化アンモニウム；Ｎ−アセチルシステイン；シス−ウロカニン酸；カプサイシン；ならびにクロロキンを含む。刺激物緩和添加物（irritant-mitigating  additive）は、存在するのであれば、典型的には、組成物の約２０ｗｔ．％以下、より典型的には、約５ｗｔ．％以下を表す、刺激または皮膚損傷の緩和に有効な濃度で本製剤に組み入れることができる。
【０１２３】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩は、体表面に固着される薬物送達デバイスとして機能する積層構造内にＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドが含有されている、従来の皮膚パッチを使用して、皮膚または粘膜組織を介して投与することもできる。かかる構造において、局所製剤は、層に、または上部バッキング層の下層にある「リザーバー」に含有される。積層構造は、単一のリザーバーを含有し得る、または複数のリザーバーを含有し得る。
【０１２４】
ある特定の実施形態では、リザーバーは、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の送達の際に系を皮膚に固着させるように機能する、薬学的に許容される接着剤材料のポリマーマトリックスを含み得る。実施形態では、接着剤材料は、長期皮膚接触に適しており、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩、および存在するいずれかのキャリア、ビヒクルまたは他の添加物と物理的および化学的に適合性の、感圧接着剤（ＰＳＡ）であり得る。適した接着剤材料の例として、次のものが挙げられるがこれらに限定されない：ポリエチレン；ポリシロキサン；ポリイソブチレン；ポリアクリレート；ポリアクリルアミド；ポリウレタン；可塑化エチレン−ビニルアセテートコポリマー；ならびにポリイソブテン、ポリブタジエン、ポリスチレン−イソプレンコポリマー、ポリスチレン−ブタジエンコポリマーおよびネオプレン（ポリクロロプレン）等の粘着性ゴム。好ましい接着剤は、ポリイソブチレンである。
【０１２５】
バッキング層は、経皮系の一次構造エレメントとして機能し、可塑性、好ましくは、閉塞性を備えるデバイスを提供する。バッキング層に使用される材料は、不活性であるべきであり、デバイス内に含有される製剤の薬物、基剤または他の構成成分を吸収できないものであるべきである。バッキングは、好ましくは、パッチの上部表面を通した伝達による薬物および／またはビヒクルの損失を防止するための保護的被覆として機能し、好ましくは、パッチによって覆われる体表面の区域が使用中に含水するように、系にある程度の閉塞性を付与する、可塑性エラストマー材料を含む。バッキング層に使用される材料は、デバイスが、皮膚の輪郭に従い、かつ、機械的歪みを通常受け、皮膚およびデバイスの可塑性または弾力性の差により皮膚からのデバイス離脱の見込みが殆どまたは全くない関節または他の弯曲点等の皮膚の区域上に心地よく装着されることを可能にするべきである。バッキング層として使用される材料は、上に記す通り閉塞性または透過性のいずれかであるが、閉塞性バッキングが好ましく、これは一般に、合成ポリマー（例えば、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリウレタン、ポリ塩化ビニリジン（polyvinylidine  chloride）およびポリエーテルアミド）、天然ポリマー（例えば、セルロース系材料）、またはマクロ多孔性の織物および不織材料に由来する。
【０１２６】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の局所製剤の送達方法は、様々であり得るが、炎症および／または乾癬に罹患したまたは罹患リスクがある体表面の区域への本開示の製剤の塗布が関与し得る。クリーム、軟膏またはローションは、罹患した表面に塗り広げ、穏やかに擦り込むことができる。溶液は、同じ仕方で塗布することができるが、より典型的には、スポイト、スワブなどで塗布され、罹患した区域に注意深く塗布される。
【０１２７】
ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の局所製剤の用量レジメンは、皮膚病の重症度および処置されるべき状態の応答性等、簡単に決定することができるいくつかの要因に依存するが、通常、１日に１または複数用量となり、処置経過は、数日間〜数ヶ月間、または治癒がもたらされるもしくは疾患状況減縮が達成されるまで続く。当業者は、最適な投薬量、投薬方法論および反復速度（repetition  rate）を簡単に決定することができる。一般に、製剤が、毎日１〜４回適用されることが企図される。皮膚パッチにより、デバイスは一般に、典型的には８〜７２時間の範囲内の薬物送達期間を通して体表面上の適所に維持され、必要な場合交換される。
【０１２８】
本開示を、その好ましい特異的実施形態と併せて記載してきたが、先の記載は、説明を意図するものであり、本開示の範囲を限定するものではないことを理解されたい。他の態様、利点および修正は、本開示が属する技術分野の当業者には明らかとなるであろう。さらに、本開示の実施は、特に断りのない限り、当業者の技能範囲内である、薬物製剤、特に、局所および経皮薬物製剤の従来技法を用いる。かかる技法は、文献において十分に説明されている。Remington:  The  Science  and  Practice  of  Pharmacy、上記に引用、およびGoodmanおよびGilmanのThe  Pharmacological  Basis  of  Therapeutics、第９版（New  York：McGraw-Hill、１９９６年）を参照されたい。
【０１２９】
投薬量レジメン
本開示に提供されているＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の製剤は、中等度〜重度の皮膚炎症、乾癬様病変および／または乾癬の症状が発症する前および／または後に投与することができるまたは投与に適している。
【０１３０】
本開示の製剤（例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６または薬学的に許容されるその塩を含む）は、約６時間毎、約１２時間毎、約２４時間毎、約４８時間毎、約７２時間毎、１日毎、１週間に２回、２週間に１回または１ヶ月に１回投与することができるまたは投与に適している。
【０１３１】
投薬頻度は、投与経路、投薬の量、および処置されている疾患等の要因に応じて変動し得る。例示的な投薬頻度は、１日に１回、１週間に１回および２週間毎に１回である。ある特定の実施形態では、投薬は、１日に１回を７日間である。
【０１３２】
ある特定の実施形態では、製剤は、約３５ｍｇ〜約５００ｍｇのＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む）または薬学的に許容されるその塩）を含むまたはこれから本質的になる剤形を含む。例えば、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇまたは約２５０ｍｇのＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む製剤が、本明細書で企図される。ある特定の実施形態では、製剤は、約４０ｍｇ、約８０ｍｇまたは約１６０ｍｇのＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドを含み得る。ある特定の実施形態では、製剤は、少なくとも約１００μｇのＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドを含み得る。例えば、製剤は、約０．１ｍｇ、約０．２ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．４ｍｇ、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇまたは約２５ｍｇのＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドを含み得る。
【０１３３】
投与される量は、処置されるべき疾患または徴候の種類および程度、患者の健康全般およびサイズ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、医薬製剤のｉｎ  ｖｉｖｏ効力、ならびに投与経路等の変数に依存する。所望の血液レベルまたは組織レベルを急速に達成するために、初回投薬量は、上のレベルを超えて増加させることができる。あるいは、初回投薬量は、最適量よりも少なくすることができ、投薬量は、処置経過において漸進的に増加させることができる。ヒト投薬量は、例えば、４０ｍｇ〜１６０ｍｇで実行するように設計された従来の第Ｉ相用量漸増試験において最適化することができる。
【０１３４】
実施形態では、皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量を投与される。本明細書において使用される場合、「初回用量」は、一連の用量における、皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者に投与されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量を指す。一連の用量は、１または複数用量を含み得る。例えば、一連の用量は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの単一用量、またはＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの単一用量よりも多い用量を含み得る。初回用量は、患者に投与されるいずれかの後の用量に先立ち、患者に投与されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量であり得る。例えば、初回用量は、処置ナイーブ患者に投与されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの第１の用量であり得るが、これに限定されない。初回用量は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドのいずれかの処置サイクルにおける第１の用量であってもよい。例えば、初回用量は、第１の処置サイクルの、第２の処置サイクルの、またはいずれかその後の処置サイクルの第１の用量であり得る。あるいは、「初回用量」は、患者におけるｐ−ＳＭＡＤ３、α−ＳＭＡもしくはＴＧＦ−βおよび／または別のバイオマーカー（単数または複数）のレベルの解析後に、患者に投与される第１の用量であり得る、または患者におけるｐ−ＳＭＡＤ３、α−ＳＭＡもしくはＴＧＦ−βおよび／または別のバイオマーカー（単数または複数）のレベルの決定前の直近に投与された用量であり得る。
【０１３５】
本開示の実施形態では、皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの後続用量を投与され得る。本明細書において使用される場合、「後続用量（subsequent  dose）」は、先行用量（prior  dose）、例えば、初回用量の投与後に、皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者に投与されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量を指す。よって、後続用量は、２またはそれよりも多い用量を含む一連の用量において、皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者に投与され得る。さらに、一部の実例では、後続用量が、先行用量よりも多く、これに等しくまたはこれよりも少なくなるように、後続用量の量は、初回用量または先行用量に関して較正することができる。後続用量の量の較正は、皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者におけるｐ−ＳＭＡＤ３、α−ＳＭＡもしくはＴＧＦ−βおよび／または別のバイオマーカー（単数または複数）のレベルまたはレベルの変化、例えば：先行用量、例えば、初回用量の前もしくは後に解析された、皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者におけるｐ−ＳＭＡＤ３、α−ＳＭＡもしくはＴＧＦ−βのレベル；または先行用量、例えば、初回用量の前および後の皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者におけるｐ−ＳＭＡＤ３、α−ＳＭＡもしくはＴＧＦ−βレベルの変化に基づくことができる。後続用量は、皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者に投与されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの第１の用量、例えば、初回用量の後に、皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者に投与される用量であり得る。後続用量は、皮膚炎症、例えば、乾癬を有する患者に投与されるＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの先行用量の後に投与される用量、例えば、同じ処置ラウンドまたは異なる処置ラウンド、例えば、以前の処置ラウンドにおける先行用量の後に投与される用量であってもよい。後続用量は、いずれかの先行用量、例えば、後続用量の直前の、先行用量、または、後続用量の投与に先立ち投与される１もしくは複数用量が続く、先行用量に対する、後続用量であり得る。
【０１３６】
上記の方法を使用して処置される患者は、検出可能な皮膚炎症、例えば、乾癬を有していてもいなくてもよい。実施形態では、患者は、ＳＭＡＤ７の特異的阻害剤（例えば、例えば、配列番号１、２、３、４、５もしくは６のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的に許容されるその塩を含むＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド）の投与後に、例えば、１日間、２日間、１週間、１ヶ月間もしくは６ヶ月間、またはそれよりも長い期間の後に、患者に存在する皮膚炎症、例えば、乾癬の量の少なくとも約５％、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％もしくはさらに約５０％またはそれよりも多い低下を有する。ＳＭＡＤ７の阻害剤の投与は、例えば、少なくとも毎日の方式であり得る。ＳＭＡＤ７の阻害剤の投与の結果としての患者における皮膚炎症、例えば、乾癬の臨床顕在化の遅延は、ＳＭＡＤ７の阻害剤を投与されていない患者と比較して、少なくとも、例えば、６ヶ月間、１年間、１８ヶ月間もしくはさらに２年間またはそれよりも多くなることができる。
【０１３７】
併用療法
本開示の製剤または方法は、第１の治療に対して不応性である対象への、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の製剤の投与を提供する。
【０１３８】
第１の治療は、シクロスポリン、コルチコステロイド、および／またはフマル酸エステル（例えば、ジメチルフマレート）、またはそれらの誘導体であり得るがこれらに限定されない。
【０１３９】
実施形態では、第１の処置に対して不応性である対象は、第１の治療と併せてまたはその後に、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、配列番号１、２、３、４、５または６のアンチセンスオリゴヌクレオチド）または薬学的に許容されるその塩の製剤で処置される。
【０１４０】
実施形態では、本明細書に提供されている方法は、本明細書に開示されている疾患および障害（例えば、乾癬）の処置を対象とする少なくとも１種の他の薬剤を投与するステップをさらに含み得る。ある特定の実施形態では、企図される他の薬剤は、共投与することができる（例えば、逐次にまたは同時に）。
【０１４１】
企図される薬剤は、グルココルチコイドを含む免疫抑制剤、細胞増殖抑制剤、抗体、イムノフィリンに作用する薬剤、インターフェロン、オピオイド、ＴＮＦ結合タンパク質、ミコフェノール酸塩、および小分子の生物学的薬剤を含む。例えば、企図される免疫抑制剤として、タクロリムス、シクロスポリン、ピメクロリムス、シロリムス、エベロリムス、ミコフェノール酸、フィンゴリモド、デキサメタゾン、フルダラビン、シクロホスファミド、メトトレキセート、アザチオプリン、レフルノミド、テリフルノミド、アナキンラ、抗胸腺細胞グロブリン、抗リンパ球グロブリン、ムロモナブ−ＣＤ３、アフツズマブ、リツキシマブ、テプリズマブ、エファリズマブ、ダクリズマブ、バシリキシマブ、アダリムマブ、インフリキシマブおよびエタネルセプトが挙げられるがこれらに限定されない。
【実施例】
【０１４２】
次の実施例により本開示をさらに説明する。実施例は、単なる説明目的で提供されており、決して本開示の範囲または内容を限定するものとして解釈するべきではない。
【０１４３】
（実施例１）
乾癬性皮膚におけるＳＭＡＤ７の上方調節
【０１４４】
乾癬患者の乾癬性区域（ＰＳＯ）および対照対象の健康な区域（ＣＴＲ）から採取された皮膚検体の免疫染色により、ヒト乾癬性病変におけるＳＭＡＤ７の発現を検査した。図１は、７名のＰＳＯ患者および５名の対照の切片が解析された、４回の別々の実験を代表する。アイソタイプ対照ＩｇＧによる染色も示す。結果は、ＳＭＡＤ７発現が、乾癬性組織において上方調節されたことを示す。
【０１４５】
（実施例２）
ＳＭＡＤ７は、ケラチノサイト増殖を持続させる
【０１４６】
ＳＭＡＤ７は、ケラチノサイト増殖を持続させることが示された。図２Ａは、増加用量のＳＭＡＤ７アンチセンス（ＡＳ）オリゴヌクレオチドで処置したＨａＣａＴ細胞におけるＳＭＡＤ７タンパク質発現の用量依存性低下が観察された実験を示す。ＨａＣａＴ細胞に、ＳＭＡＤ７センスオリゴヌクレオチド（Ｓ）（２０μｇ／ｍｌ）または増加用量（２〜２０μｇ／ｍｌ）のＳＭＡＤ７  ＡＳの存在または非存在下で、リポフェクタミン（ＬＩＰＯ）を２４時間トランスフェクトし、ウエスタンブロッティングによりＳＭＡＤ７タンパク質を評価した。β−アクチンは、ローディング対照として使用した。同様の結果が得られた３回の代表的実験のうち１回を図２Ａに示す。図２Ｂは、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳ）（２０μｇ／ｍｌ）でＨａＣａＴ細胞を処置し、ケラチン（Ｋ）６ＡおよびＫ１６タンパク質発現の低下をもたらした実験の結果を示す。細胞に、ＳＭＡＤ７センスオリゴヌクレオチド（Ｓ）またはＡＳ（２０μｇ／ｍｌ）の存在または非存在下で、リポフェクタミン（ＬＩＰＯ）を２４時間トランスフェクトし、ウエスタンブロッティングによりＫ６ＡおよびＫ１６を評価した。β−アクチンは、ローディング対照として使用した。同様の結果が得られた３回の代表的実験のうち１回を示す。図２Ｃは、ＳＭＡＤ７のノックダウンを、細胞増殖におけるその効果について評価した実験を表す。ＳＭＡＤ７のノックダウンは、ＨａＣａＴ増殖を低下させることが観察された。細胞に、ＳＭＡＤ７  ＳまたはＡＳ（２０μｇ／ｍｌ）の存在または非存在下で、リポフェクタミン（ＬＩＰＯ）を２４時間トランスフェクトし、処置終了の６時間前に、５−ブロモ−２−デオキシウリジン（ＢｒｄＵ）を細胞培養物に添加した。ＢｒｄＵ陽性細胞は、市販の比色分析アッセイを使用したＥＬＩＳＡによって評価した。データは、対照に対する増加倍率として表現され（ＬＩＰＯ）、３回の別々の実験の平均±ＳＤを示す（ＳＭＡＤ７  Ｓトランスフェクト細胞、対、ＳＭＡＤ７  ＡＳトランスフェクト細胞、＊Ｐ＜０．０１）。これらの結果は、ＳＭＡＤ７ノックダウンが、ＨａＣａＴ細胞における減少したケラチンタンパク質レベルおよび減少した細胞増殖をもたらしたことを実証する。
【０１４７】
（実施例３）
ＳＭＡＤ７阻害は、細胞周期のＳ期で停止する
【０１４８】
ＨａＣａＴ細胞において、細胞周期におけるＳＭＡＤ７ノックダウンの効果を検査した。ＳＭＡＤ７ノックダウンは、細胞周期のＳ期で停止するようにＨａＣａＴ細胞を誘導することが観察された。図３Ａは、ＳＭＡＤ７  ＳまたはＡＳ（２０μｇ／ｍｌ）の存在または非存在下で、リポフェクタミン（ＬＩＰＯ）を２４時間トランスフェクトし、その後、フローサイトメトリーによって細胞周期分布を評価した細胞における効果を示す。値は、細胞周期の異なる期における細胞のパーセンテージを示し、３回の別々の実験の平均±ＳＤを示す。Ｓ期において蓄積する細胞数の有意な増加、およびＧ０／Ｇ１における細胞数の有意な減少が、ＳＭＡＤ７  Ｓトランスフェクト細胞と比較して、ＳＭＡＤ７  ＡＳトランスフェクト細胞において認められる（＊Ｐ＜０．０１）。図３Ｂは、ＨａＣａＴ細胞におけるＳＭＡＤ７ノックダウン後のウエスタンブロット結果を示す。ＨａＣａＴ細胞におけるＳＭＡＤ７ノックダウンは、ｅＩＦ２αリン酸化を増強し、ＣＤＣ２５Ａ発現を下方調節した。細胞に、ＳＭＡＤ７  ＳまたはＡＳ（２０μｇ／ｍｌ）の存在または非存在下で、リポフェクタミンを２４時間トランスフェクトし、ウエスタンブロッティングによりＣＤＣ２５Ａ、ＣＤＣ２５ＢおよびＣＤＣ２５Ｃ発現を評価した。同様の結果が得られた３回の代表的実験のうち１回を示す。これらの結果は、ＳＭＡＤ７ノックダウンが、Ｓ期細胞周期停止、および細胞周期調節に関連するタンパク質のモジュレーションをもたらしたことを実証する。
【０１４９】
（実施例４）
ＳＭＡＤ７過剰発現は、ケラチン（Ｋ）６Ａおよび１６の発現増加をもたらす
【０１５０】
ケラチン（Ｋ）６Ａおよび１６の発現レベルにおけるＳＭＡＤ７過剰発現の効果を検査した。結果は、ＳＭＡＤ７過剰発現が、ケラチン（Ｋ）６Ａおよび１６発現を増加させ、ＨａＣａＴ増殖を正に調節したことを示す。ＨａＣａＴ細胞は、４８時間、リポフェクタミン（ＬＩＰＯ）と共にインキュベートした、またはＳＭＡＤ７遺伝子配列を含有するプラスミド（Ｐ）ＤＮＡ（１μｇ／ｍｌ）をトランスフェクトした（図４Ａ）。ウエスタンブロッティングによりＫ６ＡおよびＫ１６発現を評価した。β−アクチンは、ローディング対照として使用した（図４Ａ）。同様の結果が得られた３回の別々の実験のうち１回を示す。その上、ＨａＣａＴ細胞は、４８および７２時間、ＬＩＰＯと共にインキュベートした、またはＳＭＡＤ７遺伝子配列を含有するプラスミド（Ｐ）ＤＮＡ（１μｇ／ｍｌ）をトランスフェクトし、処置終了の６時間前に、５−ブロモ−２−デオキシウリジン（ＢｒｄＵ）を細胞培養物に添加した（図４Ｂ）。ＢｒｄＵ陽性細胞は、市販の比色分析アッセイを使用したＥＬＩＳＡによって評価した。データは、対照に対する増加倍率として表現され、３回の別々の実験の平均±ＳＤを示す（＊Ｐ＜０．０１）。これらの結果は、ＳＭＡＤ７過剰発現が、増加したケラチンタンパク質発現およびＨａＣａＴ細胞増殖をもたらしたことを実証する。
【０１５１】
（実施例５）
ＳＭＡＤ７下方調節は、乾癬性症状の症状軽減において有効である
【０１５２】
５％イミキモド（ＩＭＱ）を含有するクリーム調製物であるＡｌｄａｒａによる皮膚の局所処置は、非黒色腫皮膚がん患者における腫瘍退縮をもたらす。ＩＭＱは、ｔｏｌｌ様受容体ＴＬＲ７およびＴＬＲ８のリガンドである。これは、局所処置区域ならびに遠隔部位の両方における乾癬を増悪させる強力な免疫活性化因子であり、これにより、局所に塗布されたＡｌｄａｒａクリームを使用した乾癬の前臨床モデルの開発につながった。本実施例において、Ａｌｄａｒａ媒介乾癬様病変におけるＳＭＡＤ７発現のレベルを評価した。Ａｌｄａｒａ媒介乾癬様病変を有するマウスの皮膚において、ＳＭＡＤ７発現が増加した（図５Ａ）。Ｃ５７ＢＬ／６マウスの剪毛された背中の皮膚にＡｌｄａｒａクリームを毎日塗布した。４日目にマウスを死滅させ、抽出された総タンパク質を、ウエスタンブロッティング（図５Ａ）および免疫組織化学（図５Ｂ）によりＳＭＡＤ７発現について解析した。本図は、６回の別々の実験の代表である。ウエスタンブロッティング試験におけるローディング対照としてβ−アクチンを使用した。アイソタイプ対照ＩｇＧによる染色もパネル図５Ｂに示す。結果は、乾癬性モデル系において、Ａｌｄａｒａの局所塗布後にＳＭＡＤ７発現レベルが増加したことを確認する。
【０１５３】
皮膚の厚さおよびケラチノサイト増殖におけるＳＭＡＤ７阻害の効果を評価した。特異的ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドによるＳＭＡＤ７の阻害は、皮膚の厚さおよびケラチノサイト増殖を低下させた（図６Ａおよび図６Ｂ）。Ｃ５７ＢＬ／６マウスの剪毛された背中の皮膚にＡｌｄａｒａクリームを毎日４日間塗布し、ＳＭＡＤ７アンチセンス（ＡＳ）またはセンス（Ｓ）（１２５μｇ／マウス）オリゴヌクレオチドを、Ａｌｄａｒａ処置１２時間後から開始して各日、局所的に塗布した。上記の通りに処置したマウスの皮膚切片のヘマトキシリンおよびエオシンによる代表的染色を図６Ａに示す。１群当たり１２匹のマウスが解析された３回の別々の実験のうち１回を示す。上記の通りに処置したマウスの皮膚切片を使用して、表皮の厚さを評価し、データは、全実験の平均±ＳＤとして表現される（図６Ｂ）。ＳＭＡＤ７  ＡＳ処置マウス対ＳＭＡＤ７  Ｓ処置マウス、＊Ｐ＜０．０１。図６Ａおよび図６Ｂに提示されている結果は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの投与が、Ａｌｄａｒａ関連乾癬性症状に関連する表皮の厚さを低下させたことを示した。
【０１５４】
図６Ｃに示す実験のため、マウスを上記通りに処置し、示されているタンパク質について、皮膚から抽出された総タンパク質をウエスタンブロッティングにより解析した。１回の代表的実験を示す。図６Ｄは、図６Ａに示されている通りに処置されたマウスの皮膚切片のＫｉ６７の代表的免疫染色を示す。アイソタイプＩｇＧによる染色も示す。図６Ｃおよび図６Ｄに提示されている結果は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの投与が、Ａｌｄａｒａ関連乾癬性症状に関連するケラチンタンパク質（Ｋ６ＡおよびＫ１６）発現レベルおよび細胞増殖レベルを低下させたことを示した。
【０１５５】
Ａｌｄａｒａクリームの毎日の皮膚投与で処置したマウスの皮膚切片において、表皮の厚さを評価した。示されている時点のＡｌｄａｒａクリームで処置したマウスの皮膚切片のヘマトキシリンおよびエオシンによる代表的染色を図７Ａ〜図７Ｂに示す。図７Ｃにおけるデータは、３回の別々の実験の平均±ＳＤとして表現される。対照マウス（０日目）対Ａｌｄａｒａ処置マウス、＊Ｐ＜０．０５。図７Ｃは、図７Ａの実験に示されている通りに処置したマウス由来の皮膚の総抽出物におけるケラチン（Ｋ）６ＡおよびＫ１６発現を示す。１回の代表的実験を示す。β−アクチンは、ローディング対照として使用した。図７Ａ〜図７Ｃに提示されている結果は、乾癬または乾癬性症状についてのＡｌｄａｒａモデル系において、Ａｌｄａｒａの投与後にＫ１６およびＫ６Ａが過剰発現されることを示し、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチド投与が、Ｋ１６およびＫ６Ａの発現低下、これにより、乾癬または乾癬性症状の処置、予防および／または回復をもたらしたという、図５Ａ〜図５Ｂおよび図６Ａ〜図６Ｄの観察を支持した。
【０１５６】
（実施例６）
皮膚炎症（例えば、乾癬）または症状の処置、予防および／または回復
【０１５７】
乾癬もしくは乾癬性様病変の症状を有する対象、または乾癬もしくは乾癬性様病変のリスクがある対象（例えば、別の薬物で処置された、部分的または完全に寛解しており、症状および／または病変の再出現を予防するために二次的処置を要求する、対象）は、ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドを投与される。乾癬を処置し、予防しおよび／または回復させるため、対象は、有効用量のＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドを投与され、これは、経口、局所的または非経口投与機序によってなされる。ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドの投与は、乾癬および／またはその症状の処置、予防および／または回復をもたらす。ＳＭＡＤ７アンチセンスオリゴヌクレオチドによる乾癬および／またはその症状を処置すること、予防することおよび／または回復させることは、約３０％〜１００％の効果がある。
【０１５８】
参照による組み込み
本明細書に引用されている特許文書および科学論文のそれぞれの開示全体を、あらゆる目的のため、参照により本明細書に組み込む。
【０１５９】
均等物
本開示は、その本質的特徴から逸脱して（with  departing  from）、他の特異的形態で具体化することができる。したがって、上記の実施形態は、本明細書に記載されている本開示に関して限定的ではなく説明的であると考慮するべきである。本開示の範囲は、上述の記載によるのではなく添付の特許請求の範囲によって示されており、特許請求の範囲の均等の意義および範囲内に収まるあらゆる変更が、その内に包含されることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６ＡＢ】
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【図６ＣＤ】
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【図７ＡＢ】
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【図７Ｃ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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