(57)【要約】毒性を予測するため、および処置するためを含む、疾患または状態、例えばがんの処置用の、細胞療法での使用のための方法および製造物品が提供される。いくつかの態様において、毒性は、神経毒性またはサイトカイン放出症候群（CRS）、例えば、重篤な神経毒性または重篤なCRSである。方法は概して、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来する生物学的試料をアッセイすることによってマーカーを検出して、対象が、毒性、例えば、神経毒性もしくはCRSまたは重篤な神経毒性もしくは重篤なCRSを発生する危険性があるかどうかを判定する工程を含む。いくつかの態様において、方法および製造物品は、生物学的試料をアッセイするための試薬と、生物学的試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージまたは数を決定するための説明書とをさらに含む。2020522695.tif 000029
2020522695.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程を含む、処置のために対象を選択する方法：
(A) アフェレーシス試料と、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上もしくは骨髄系マーカーの発現が表面陽性の細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬とを接触させる工程であって、
該アフェレーシス試料が、細胞療法での処置についての候補である対象に由来し、該細胞療法が、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物を含み；かつ
該アフェレーシス試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該アフェレーシス試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含まない、
工程；ならびに
(B) i) 試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上であり、それによって、細胞療法に対する神経毒性を発生する危険性がある対象を特定する；または
ii) 試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である、
i)またはii)のいずれかの対象を処置のために選択する工程。
【請求項２】
(a) i) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、対象に(1) 神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置、および(2) 細胞療法を施与するためであり、該作用物質の投与が、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に投与されるものである；かつ/または
(b) i) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない用量で、施与するためである；かつ/または
(c) i) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与するためであり、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、
請求項1に記載の方法。
【請求項３】
i) の対象が処置のために選択され、かつ前記方法が、
(a) 対象に(1) 神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置、および(2) 細胞療法を施与する工程であって、該作用物質の投与が、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に実施される、工程；
(b) 対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；
(c) 対象に細胞療法を、または、細胞療法の施与後に、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患または状態を有する対象の大多数において、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない、細胞療法の遺伝子操作された細胞の用量を施与する工程；または
(d) 対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、工程
をさらに含む、請求項1または請求項2に記載の方法。
【請求項４】
(a) ii) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、対象に細胞療法を、任意で低減していない用量で、または任意で外来患者ベースで、または任意で1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに施与するためである；
(b) ii) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、対象に細胞療法を施与するためであり、該細胞療法が、該細胞療法の施与の前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の神経毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、神経毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まない；かつ/または
(c) ii) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに細胞療法を施与するためであり、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない、
請求項1に記載の方法。
【請求項５】
ii) の対象が処置のために選択され、かつ前記方法が、対象に細胞療法を、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに施与する工程をさらに含む、請求項1または請求項4に記載の方法。
【請求項６】
ii) の対象が処置のために選択され、かつ前記方法が、対象に細胞療法を施与する工程をさらに含み、
該細胞療法の施与が、該細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の神経毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、神経毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まない；または
該細胞療法の施与が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない、
請求項1、請求項4、または請求項5に記載の方法。
【請求項７】
(a) 骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーが表面陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が表面陽性の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数について、アフェレーシス試料をアッセイする工程であって、該アフェレーシス試料が、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来し、該細胞療法が、対象において疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物の投与を含む、工程；ならびに
(b) アッセイの後にまたはその結果に基づいて、対象に細胞療法を、および任意で、神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、施与する工程
を含む、処置の方法。
【請求項８】
骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーが表面陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が表面陽性の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、対象由来のアフェレーシス試料のアッセイの後にまたはその結果に基づいて、対象に、(i) 対象において疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物を含む、細胞療法、および任意で、(ii) 神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を施与する工程を含む、処置の方法であって、
該アフェレーシス試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られる、
方法。
【請求項９】
前記アッセイが、
アフェレーシス試料と、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬とを接触させること、ならびに、
試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/またはアフェレーシス試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数を決定すること
を含む、請求項7または請求項8に記載の方法。
【請求項１０】
試料における骨髄系マーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は、
対象に、神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する；
対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する；または
対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与し、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、
請求項7〜9のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
試料における骨髄系マーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は、
施与が、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の神経毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、神経毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まない；または
細胞療法の施与が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない、
請求項7〜9のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーが表面陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が表面陽性の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数について、対象由来のアフェレーシス試料をアッセイする工程；および
アッセイの後にまたはその結果に基づいて、対象が、細胞療法の施与後に神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があるかどうかを判定する工程であって、該細胞療法が、対象において疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物を含む、工程
を含む、神経毒性の危険性を評価する方法であって、
該対象が、細胞療法での処置についての候補であり、かつ該アフェレーシス試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該アフェレーシス試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含まない、
方法。
【請求項１３】
試料における骨髄系マーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は、対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると評価される、請求項12に記載の方法。
【請求項１４】
対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると評価される場合は、
細胞療法の施与後に対象を、発熱以外の神経毒性の徴候または症状の発生についてモニタリングする工程；
対象に、神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する工程；
対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；ならびに/または
対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、工程
をさらに含む、請求項13に記載の方法。
【請求項１５】
試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は、対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると疑われないかまたはその危険性がある可能性が低いと評価される、請求項12に記載の方法。
【請求項１６】
対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると疑われないかまたはその可能性が低いと評価される場合は、
細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の神経毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、神経毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置が対象にさらに施与されない；または
前記方法が、対象に細胞療法を、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに施与する工程をさらに含み、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない、
請求項15に記載の方法。
【請求項１７】
細胞療法が施与された対象を、発熱以外の神経毒性または重篤な神経毒性の徴候または症状の発生について観察する工程であって、該対象が、アフェレーシス試料において閾値レベルまたはそれよりも上の、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーが表面陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が表面陽性の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数をアッセイすることに基づいて判定されるように、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性がある、またはその危険性がある可能性が高いと判定されている対象であり、該アフェレーシス試料が、細胞療法の施与の前に対象から得られており、かつ/または該アフェレーシス試料が、組換え受容体および/または操作された細胞を含まない、工程
を含む、細胞療法の施与後に対象をモニタリングする方法であって、
該細胞療法が、対象において疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物を含む、
方法。
【請求項１８】
対象が、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って、細胞療法が施与されているか、または、観察の期間またはその期間の一部分の最中に入院しており、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、危険性があると判定されている対象の非存在下で対象に施与されるものである、請求項17に記載の方法。
【請求項１９】
対象に、神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を施与する工程を含む、予防的処置の方法であって、
該対象が、細胞療法での処置についての候補であり、該細胞療法が、疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物を含み；かつ
骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、対象由来のアフェレーシス試料のアッセイの後にまたはその結果に基づいて、該対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると特定されており、該アフェレーシス試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該アフェレーシス試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含まない、
方法。
【請求項２０】
前記アッセイが、
アフェレーシス試料と、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬とを接触させること、ならびに、
試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数を決定すること
を含む、請求項17〜19のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記閾値レベルが、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られたアフェレーシス試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均（average）もしくは平均（mean）のパーセントもしくは数よりも下の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内、もしくは5％以内であり、かつ/または平均（average）もしくは平均（mean）のパーセントもしくは数の標準偏差以内であり、群の対象の各々が、同じ疾患または状態を処置するために、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に神経毒性または重篤な神経毒性を発生し続けた、請求項1〜20のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記閾値レベルが、アフェレーシス試料における、骨髄系細胞集団のパーセンテージまたは骨髄系マーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージであり、該パーセンテージが、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、もしくは60％であるか、または約45％、約46％、約47％、約48％、約49％、約50％、約51％、約52％、約53％、約54％、約55％、約56％、約57％、約58％、約59％、もしくは約60％である、請求項1〜23のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記パーセンテージが、試料における、総白血球もしくは総CD45+細胞、またはその生存細胞の中の骨髄系細胞集団のまたは骨髄系マーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージであるか、または、試料における、総白血球もしくはCD45+細胞、またはその生存細胞の中の骨髄系細胞集団または骨髄系マーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージである、請求項1〜22のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記アフェレーシス試料が、白血球アフェレーシス試料である、請求項1〜23のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記骨髄系細胞の集団が、単球であるかまたはそれを含む、請求項1〜24のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記マーカーが骨髄系細胞マーカーであり、かつ/または前記マーカーがCD14であり、かつ/または前記細胞の集団がCD14+骨髄系細胞であるかもしくはそれを含み、任意で前記マーカーがヒト細胞の表面上に発現され、任意で前記マーカーがヒトCD14である、請求項1〜25のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記マーカーが、単球マーカーである骨髄系マーカーであり、任意で、
該単球マーカーが、骨髄系細胞以外または単球以外の細胞の集団上に存在しないかまたは通常は発現されず；かつ/または
ヒト細胞におけるCD14と共発現されるかもしくは実質的に共発現される、またはヒト細胞におけるCD14と同一の広がりのもしくは本質的に同一の広がりの発現パターンを有し、かつ/または、ヒトにおけるCD14と類似した、もしくは本質的に同じ発現パターンを有するマーカーである、
請求項1〜26のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記骨髄系マーカーがCD14であるか、または前記骨髄系細胞集団がCD14+であり、かつ前記パーセンテージが、試料における総生存白血球または総生存CD45+細胞の中のCD14+細胞のパーセンテージである、請求項1〜27のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記閾値レベルが、アフェレーシス試料における総生存白血球または総生存CD45+細胞の中のCD14+細胞のパーセンテージであり、該パーセンテージが、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、もしくは60％であるか、または約45％、約46％、約47％、約48％、約49％、約50％、約51％、約52％、約53％、約54％、約55％、約56％、約57％、約58％、約59％、もしくは約60％である、請求項28に記載の方法。
【請求項３０】
前記試薬が、骨髄系細胞集団のマーカーまたは細胞に特異的に結合する結合分子である、請求項1〜29のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記試薬が、抗体またはその抗原結合断片である、請求項1〜30のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
細胞を、骨髄系細胞を、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーをアッセイまたは評価することが、フローサイトメトリーを含む、請求項1〜31のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記神経毒性が、重篤な神経毒性を含み、かつ/または、グレード2以上の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、少なくとも長期にわたるグレード3の神経毒性を含むか、またはグレード4もしくはグレード5のもしくはそれよりも上の神経毒性である、
請求項1〜32のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記神経毒性が、重篤な神経毒性であるか、またはグレード3以上の神経毒性である、請求項1〜33のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記神経毒性が、脳浮腫に関連している、請求項1〜34のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記作用物質または他の処置が、ステロイド；IL-10、IL-10R、IL-6、IL-6受容体、IFNγ、IFNGR、IL-2、IL-2R/CD25、MCP-1、CCR2、CCR4、MIP1β、CCR5、TNFα、TNFR1、IL-1、およびIL-1Rα/IL-1βの中から選択されるサイトカイン受容体もしくはサイトカインのアンタゴニストもしくは阻害剤；または、ミクログリア細胞の活性もしくは機能を阻止する、遮断する、もしくは低減させることができる作用物質のうちの1つまたは複数であるかまたはそれを含む、請求項2〜35のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記アンタゴニストまたは阻害剤が、抗体または抗原結合断片、小分子、タンパク質またはペプチド、および核酸の中から選択される作用物質であるかまたはそれを含む、請求項36に記載の方法。
【請求項３８】
前記作用物質または他の処置が、抗IL-6抗体または抗IL6受容体抗体である、請求項2〜37のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記作用物質または他の処置が、トシリズマブ、シルツキシマブ、クラザキズマブ、サリルマブ、オロキズマブ（CDP6038）、エルシリモマブ、ALD518/BMS-945429、シルクマブ（CNTO 136）、CPSI-2634、ARGX-109、FE301、およびFM101の中から選択される作用物質であるかまたはそれを含む、請求項2〜38のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記作用物質または他の処置が、トシリズマブであるかまたはそれを含む、請求項2〜39のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記作用物質または他の処置が、シルツキシマブであるかまたはそれを含む、請求項2〜40のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記作用物質または他の処置がステロイドであり、かつ該ステロイドが、デキサメタゾンであるかまたはそれを含む、請求項36に記載の方法。
【請求項４３】
前記作用物質が、ミクログリア細胞の活性または機能を阻止する、遮断する、または低減させることができる作用物質であり、かつ該作用物質が、抗炎症剤、NADPHオキシダーゼ（NOX2）の阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬、ナトリウムチャネル遮断薬から選択され、GM-CSFを阻害し、CSF1Rを阻害し、CSF-1に特異的に結合し、IL-34に特異的に結合し、核因子κB（NF-κB）の活性化を阻害し、CB2受容体を活性化し、かつ/またはCB2アゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤であり、マイクロRNA-155（miR-155）を阻害するか、またはマイクロRNA-124（miR-124）を上方制御する、請求項36に記載の方法。
【請求項４４】
ミクログリア細胞の活性化または機能を阻止する、遮断する、または低減させることができる前記作用物質が、小分子、ペプチド、タンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、抗体模倣物、アプタマー、または核酸分子である、請求項43に記載の方法。
【請求項４５】
前記作用物質が、ミノサイクリン、ナロキソン、ニモジピン、リルゾール、MOR103、レナリドミド、カンナビノイド（任意でWIN55または212-2）、静脈内免疫グロブリン（IVIg）、イブジラスト、抗miR-155ロックド核酸（LNA）、MCS110、PLX-3397、PLX647、PLX108-D1、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、AC-708、DCC-3014、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン（GW2580）、AZD6495、Ki20227、BLZ945、エマクツズマブ、IMC-CS4、FPA008、LY-3022855、AMG-820、およびTG-3003から選択される、請求項43または請求項44に記載の方法。
【請求項４６】
前記作用物質が、コロニー刺激因子1受容体（CSF1R）の阻害剤である、請求項43〜45のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
前記阻害剤が、
PLX-3397、PLX647、PLX108-D1、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、AC-708、DCC-3014、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン（GW2580）、AZD6495、Ki20227、BLZ945、またはその薬学的な塩もしくはプロドラッグ；
エマクツズマブ、IMC-CS4、FPA008、LY-3022855、AMG-820、およびTG-3003、またはその抗原結合断片； 
または、前述のいずれかの組み合わせ
から選択される、請求項43〜46のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記阻害剤がPLX-3397である、請求項43〜47のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
前記組換え受容体が、疾患もしくは状態に関連する抗原、または疾患もしくは状態に関連する病変の環境の細胞において発現される抗原に特異的に結合する、請求項1〜48のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
前記疾患または状態ががんである、請求項2〜49のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記疾患または状態が、骨髄腫、白血病、またはリンパ腫である、請求項2〜50のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記疾患または状態が、B細胞悪性腫瘍であり、かつ/または急性リンパ芽球性白血病（ALL）、成人ALL、慢性リンパ芽球性白血病（CLL）、非ホジキンリンパ腫（NHL）、およびびまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）である、請求項2〜51のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記組換え受容体が、疾患もしくは状態に関連する抗原、または疾患もしくは状態の細胞上に発現されるかもしくは存在する抗原に特異的に結合する、請求項1〜52のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
前記抗原が、受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体1（ROR1）、B細胞成熟抗原（BCMA）、炭酸アンヒドラーゼ9（CA9；G250またはCAIXとしても知られる）、Her2/neu（受容体チロシンキナーゼerb-B2）、CD19、CD20、CD22、およびB型肝炎表面抗原、抗葉酸受容体、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4（CSPG4）、上皮成長因子タンパク質（EGFR）、上皮糖タンパク質2（EPG-2）、上皮糖タンパク質40（EPG-40）、エフリンB2、エフリン受容体A2（EPHa2）、Her3（erb-B3）、Her4（erb-B4）、erbB二量体、III型上皮成長因子受容体変異（EGFR vIII）、葉酸結合タンパク質（FBP）、Fc受容体様5（FCRL5；Fc受容体ホモログ5またはFCRH5としても知られる）、胎児アセチルコリン受容体（胎児AchR）、ガングリオシドGD2、ガングリオシドGD3、グリピカン-3（GPC3）、Gタンパク質共役受容体5D（GPCR5D）、ヒト高分子量黒色腫関連抗原（HMW-MAA）、IL-22受容体α（IL-22RαまたはIL-22R-アルファ）、IL-13受容体α2（IL-13Rα2またはIL-13R-アルファ2）、キナーゼインサートドメイン受容体（kdr）、κ軽鎖、ロイシンリッチリピート含有8ファミリーメンバーA（LRRC8A）、ルイスY、L1細胞接着分子（L1-CAM）、黒色腫関連抗原（MAGE）-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、MAGE-A10、黒色腫の優先発現抗原（PRAME）、サバイビン、TAG72、B7-H3、B7-H6、IL-13受容体α2（IL-13Ra2）、CD171、ヒト白血球抗原A1（HLA-A1）、ヒト白血球抗原A2（HLA-A2）、葉酸受容体-α、CD44v6、CD44v7/8、αvβ6インテグリン（avb6インテグリン）、8H9、神経細胞接着分子（NCAM）、血管内皮増殖因子受容体（VEGF受容体またはVEGFR）、栄養膜糖タンパク質（TPBG；5T4としても知られる）、NKG2Dリガンド、二重抗原、がん-精巣抗原、メソテリン（MSLN）、マウスサイトメガロウイルス（CMV）、ムチン1（MUC1）、MUC16、前立腺特異抗原、前立腺幹細胞抗原（PSCA）、前立腺特異的膜抗原（PSMA）、ナチュラルキラーグループ2メンバーD（NKG2D）リガンド、がん/精巣抗原1B（CTAG；NY-ESO-1およびLAGE-2としても知られる）、メランA（MART-1）、糖タンパク質100（gp100）、胎児腫瘍性抗原、腫瘍関連糖タンパク質72（TAG72）、チロシナーゼ関連タンパク質1（TRP1；TYRP1またはgp75としても知られる）、チロシナーゼ関連タンパク質2（TRP2；ドパクロムトートメラーゼ、ドパクロムデルタ-イソメラーゼ、またはDCTとしても知られる）、血管内皮増殖因子受容体2（VEGF-R2）、がん胎児性抗原（CEA）、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、CD123、CD133、c-Met、O-アセチル化GD2（OGD2）、L1-CAMのCE7エピトープ、ウィルムス腫瘍1（WT-1）、サイクリン、サイクリンA2、C-Cモチーフケモカインリガンド1（CCL-1）、CD138、病原体特異的または病原体発現抗原である、請求項53に記載の方法。
【請求項５５】
前記組換え受容体が、疾患もしくは状態、または疾患もしくは状態の細胞を特異的に標的とする治療剤によって含まれるタグに特異的に結合し、該タグが、対象に投与されているかまたは投与されることになる、請求項1〜54のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記組換え受容体が、T細胞受容体または機能的非T細胞受容体である、請求項1〜55のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記組換え受容体がキメラ抗原受容体（CAR）である、請求項1〜56のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
前記CARが、抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、ITAMを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、任意で、該細胞内シグナル伝達ドメインが、CD3-ゼータ（CD3ζ）鎖の細胞内ドメインを含み；かつ/または前記CARが、CD28もしくは4-1BBのシグナル伝達ドメインを任意で含む共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、請求項57に記載の方法。
【請求項５９】
前記操作された細胞が、T細胞、任意でCD4+および/またはCD8+ T細胞を含む、請求項1〜58のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
前記T細胞が、対象から得られた初代T細胞である、請求項59に記載の方法。
【請求項６１】
前記細胞療法が、それぞれ両端の値を含む、1×105〜1×108個もしくは約1×105〜1×108個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）、5×105〜1×107個もしくは約5×105〜1×107個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）、または1×106〜1×107個もしくは約1×106〜1×107個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）の投与を含む、請求項1〜60のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６２】
前記細胞療法が、1×108個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、1×107個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、0.5×107個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、1×106個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、0.5×106個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）の投与を含む、請求項1〜61のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない用量が、5×107個未満または約5×107個未満の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、2.5×107個未満もしくは約2.5×107個未満、1.0×107個未満もしくは約1.0×107個未満、5.0×106個未満もしくは約5.0×106個未満、1.0×106個未満もしくは約1.0×106個未満、5.0×105個未満もしくは約5.0×105個未満、または1×105個未満もしくは約1×105個未満の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）であるかまたはそれを含む、請求項2、3、10、14〜63のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない用量が、1×105〜5×107個または約1×105〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、1×105〜2.5×107個、1×105〜1.0×107個、1×105〜5.0×106個、1×105〜1.0×106個、1.0×105〜5.0×105個、5.0×105〜5×107個、5×105〜2.5×107個、5×105〜1.0×107個、5×105〜5.0×106個、5×105〜1.0×106個、1.0×106〜5×107個、1×106〜2.5×107個、1×106〜1.0×107個、1×106〜5.0×106個、5.0×106〜5×107個、5×106〜2.5×107個、5×106〜1.0×107個、1.0×107〜5×107個、1×107〜2.5×107個、または2.5×107〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）であるかまたはそれを含む、請求項2、3、10、14〜63のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６５】
前記操作された細胞が、対象に対して自己由来である、請求項1〜64のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
前記操作された細胞が、対象に対して同種異系である、請求項1〜65のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
前記試薬が、検出可能に標識されている、任意で蛍光標識されている、請求項1〜66のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬と、該試薬を用いて、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来するアフェレーシス試料をアッセイするための説明書とを含む製造物品であって、該細胞療法が任意で、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含む、製造物品。
【請求項６９】
前記細胞の集団が、単球であるかまたはそれを含む、請求項68に記載の製造物品。
【請求項７０】
前記マーカーが骨髄系細胞マーカーであり、かつ/または前記マーカーがCD14であり、かつ/または前記細胞の集団がCD14+骨髄系細胞であるかもしくはそれを含み、任意で前記マーカーがヒト細胞の表面上に発現され、任意で前記マーカーがヒトCD14である、請求項68または請求項69に記載の製造物品。
【請求項７１】
前記マーカーが、単球マーカーである骨髄系マーカーであり、任意で、
該単球マーカーが、骨髄系細胞以外または単球以外の細胞の集団上に存在しないかまたは通常は発現されず；かつ/または
ヒト細胞におけるCD14と共発現されるかもしくは実質的に共発現される、またはヒト細胞におけるCD14と同一の広がりのもしくは本質的に同一の広がりの発現パターンを有し、かつ/または、ヒトにおけるCD14と類似した、もしくは本質的に同じ発現パターンを有するマーカーである、
請求項68〜70のいずれか一項に記載の製造物品。
【請求項７２】
前記試薬が、骨髄系細胞集団のマーカーまたは細胞に特異的に結合する結合分子である、請求項68〜71のいずれか一項に記載の製造物品。
【請求項７３】
前記試薬が、抗体またはその抗原結合断片である、請求項68〜72のいずれか一項に記載の製造物品。
【請求項７４】
前記アフェレーシス試料が、白血球アフェレーシス試料である、請求項68〜73のいずれか一項に記載の製造物品。
【請求項７５】
細胞療法をさらに含み、かつ/または細胞療法での処置を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含む、請求項68〜74のいずれか一項に記載の製造物品。
【請求項７６】
神経毒性の発生もしくはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、もしくは減衰させるための1つもしくは複数の作用物質もしくは処置、および/または
対象において神経毒性の発生もしくはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、もしくは減衰させるための1つもしくは複数の作用物質もしくは処置の施与のための説明書
をさらに含む、請求項68〜75のいずれか一項に記載の製造物品。
【請求項７７】
前記神経毒性が、重篤な神経毒性であるか、またはグレード3以上の神経毒性である、請求項68〜76のいずれか一項に記載の製造物品。
【請求項７８】
前記説明書が、請求項1〜67のいずれか一項に記載の方法を実施することを指定する、請求項67〜77のいずれか一項に記載の製造物品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、「ARTICLES OF MANUFACTURE AND METHODS RELATED TO TOXICITY ASSOCIATED WITH CELL THERAPY」と題する2017年6月2日に出願された米国特許仮出願第62/514,762号、および「ARTICLES OF MANUFACTURE AND METHODS RELATED TO TOXICITY ASSOCIATED WITH CELL THERAPY」と題する2017年6月5日に出願された米国特許仮出願第62/515,526号の優先権を主張し、その内容は全体が参照により組み入れられる。
【０００２】
配列表の参照による組み入れ
本出願は、電子形式の配列表と共に提出されている。配列表は、サイズが38,592バイトである、2018年5月8日に作成された735042012040SeqList.TXTと題するファイルとして提供される。配列表の電子形式の情報は、その全体が参照により組み入れられる。
【０００３】
分野
本開示は、毒性を予測するため、および処置するためを含む、疾患または状態、例えばがんの処置用の、細胞療法での使用のための方法および製造物品を提供する。いくつかの態様において、毒性は、神経毒性またはサイトカイン放出症候群（CRS）、例えば、重篤な神経毒性または重篤なCRSである。方法は概して、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来する生物学的試料をアッセイすることによってマーカーを検出して、対象が、毒性、例えば、神経毒性もしくはCRSまたは重篤な神経毒性もしくは重篤なCRSを発生する危険性があるかどうかを判定する工程を含む。いくつかの態様において、方法および製造物品は、生物学的試料をアッセイするための試薬と、生物学的試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージまたは数を決定するための説明書とをさらに含む。
【背景技術】
【０００４】
背景
組換え受容体、例えばキメラ抗原受容体（CAR）を発現する操作された細胞を用いた養子細胞療法のために、様々な方法が利用可能である。例えば、安全性を増加させるため、および/または投与された細胞に対する対象における毒性の危険性を低減させるために、改善された戦略が必要とされる。そのような必要を満たす方法、組成物、および製造物品が提供される。
【発明の概要】
【０００５】
概要
骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬と、該試薬を用いて、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来する生物学的試料をアッセイするための説明書とを含有する製造物品であって、該細胞療法が任意で、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する製造物品が、本明細書において提供される。いくつかの態様において、生物学的試料はアフェレーシス試料である。いくつかの態様において、細胞の集団は、単球であるかまたはそれを含有する。いくつかの態様において、マーカーは骨髄系細胞マーカーであり、かつ/またはマーカーはCD14であり、かつ/または細胞の集団は、CD14+骨髄系細胞であるかもしくはそれを含有する。いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、マーカーは、ヒト、任意でヒトCD14である。
【０００６】
いくつかの態様において、マーカーは、骨髄系細胞マーカー、例えばヒト骨髄系細胞マーカー、例えば単球マーカー、例えば、ヒト単球マーカーである。いくつかの局面において、単球マーカーは、任意でヒトにおいてまたは健康な個体において、すべてのもしくは大部分の単球または大部分の単球集団上に、例えば、その表面上に存在するマーカーである。いくつかの局面において、単球マーカーは、骨髄系細胞以外または単球以外の細胞の集団上に存在しないか、または通常はその上に発現されず、例えば、リンパ球上に存在せず、かつ/または好中球上に発現されない。いくつかの局面において、単球マーカーは、ヒト細胞におけるCD14と共発現されるかもしくは実質的に共発現される、またはヒト細胞におけるCD14と同一の広がりのもしくは本質的に同一の広がりの発現パターンを有し、かつ/または、ヒトにおけるCD14と類似した、もしくは本質的に同じ発現パターンを有するマーカーである。
【０００７】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、試薬は、骨髄系細胞集団のマーカーまたは細胞に特異的に結合する結合分子である。いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、試薬は、抗体またはその抗原結合断片である。
【０００８】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、生物学的試料は、血液、血漿、もしくは血清試料であるか、またはそれから得られる。いくつかの例において、生物学的試料は、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料であるか、またはそれから得られる。
【０００９】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、製造物品は、細胞療法をさらに含有し、かつ/または細胞療法での処置を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含有する。いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、製造物品は、毒性の発生もしくはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、もしくは減衰させるための1つもしくは複数の作用物質もしくは処置、および/または対象において毒性の発生もしくはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、もしくは減衰させるための1つもしくは複数の作用物質もしくは処置の施与のための説明書をさらに含有する。いくつかの態様において、毒性は神経毒性である。いくつかの特定の態様において、神経毒性は重篤な神経毒性（例えば、グレード3以上の神経毒性）である。
【００１０】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は、対象に、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する工程；ならびに/または、対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；ならびに/または、対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである工程を、さらに指定する。
【００１１】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は、対象に細胞療法を、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに施与する工程を、さらに指定する。いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、説明書は、対象に細胞療法を施与する工程をさらに指定し、かつ説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は：細胞療法の施与が、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まないこと；ならびに/または、細胞療法の施与が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わないことを、さらに指定する。
【００１２】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、閾値レベルは、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られた生物学的試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均パーセントもしくは数の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内、もしくは5％以内であり、かつ/または平均パーセントもしくは数の標準偏差以内であり、群の対象の各々は、同じ疾患または状態を処置するために組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に、毒性を発生し続けた。いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、閾値レベルは、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、もしくは60％であるか、または約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％、もしくは約60％である、生物学的試料または血液もしくはアフェレーシス試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセントである。
【００１３】
組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含有する細胞療法と、T細胞療法を施与するための説明書とを含有する製造物品であって、(A) 説明書または資料が、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生物学的試料における評価の後にまたはその結果に基づいて、施与が実施され、任意で該生物学的試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該生物学的試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含まないことをさらに提供し；かつ/または、(B) 説明書または資料が、任意で、対象由来の生物学的試料において評価されたパラメータおよび/または細胞療法の施与後の毒性を発生する危険性もしくは毒性アウトカムの評価されたレベルに基づいて、処置の1つもしくは複数の具体的な局面、または施与に関連して実施されるべき1つもしくは複数の介入の実施をさらに指定し、(i) 該パラメータが、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数であるかまたはそれを含み、または、(ii) 該評価された危険性のレベルが、対象の細胞、試料、または組織における、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数に基づく製造物品が提供される。
【００１４】
記載される製造物品のいくつかの態様において、(B)におけるさらなる指定は、対象に、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、治療用細胞組成物または遺伝子操作された細胞の投与の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する工程を指定すること；ならびに/または、対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程を指定すること；ならびに/または、対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである工程を指定することを含む。いくつかの態様において、説明書は、パラメータまたは評価された危険性のレベルをさらに指定する。
【００１５】
いくつかの局面において、(A) における評価は、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接または間接的に検出することができる試薬を、生物学的試料と接触させること、ならびに、生物学的試料におけるマーカーおよび/またはレベルが陽性の、任意で表面陽性の細胞のパーセンテージまたは数を決定することを任意で含む、検出を含む。
【００１６】
いくつかの態様において、細胞の集団は、単球であるかまたはそれを含有する。いくつかの例において、マーカーは骨髄系細胞マーカーであり、かつ/またはマーカーはCD14であり、かつ/または細胞の集団は、CD14+骨髄系細胞であるかもしくはそれを含有する。いくつかの局面において、マーカーは、ヒト、任意でヒトCD14である。
【００１７】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、試薬は、骨髄系細胞集団のマーカーまたは細胞に特異的に結合する結合分子である。いくつかの態様において、試薬は、抗体またはその抗原結合断片である。
【００１８】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、生物学的試料は、血液、血漿、もしくは血清試料であるか、またはそれから得られる。いくつかの例において、生物学的試料は、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料であるか、またはそれから得られる。
【００１９】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、製造物品は、骨髄系細胞、もしくは骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出するための試薬をさらに含有し、かつ/または骨髄系細胞、もしくは骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出するための試薬を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含有する。いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、製造物品は、毒性の発生もしくはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、もしくは減衰させるための1つもしくは複数の作用物質もしくは処置、および/または対象において毒性の発生もしくはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、もしくは減衰させるための1つもしくは複数の作用物質もしくは処置の施与のための説明書をさらに含有する。
【００２０】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、細胞療法を施与するための説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は：対象に、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、治療用細胞組成物または遺伝子操作された細胞の投与の施与の(i) 開始の前に、 (ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する工程；ならびに/または、対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；ならびに/または、対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである工程を指定する。
【００２１】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、細胞療法を施与するための説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は、対象に細胞療法を、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに施与する工程を指定する。いくつかの態様において、説明書は、対象に細胞療法を施与する工程をさらに指定し、かつ説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は：細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与しないこと；ならびに/または、細胞療法の施与が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わないことを、さらに指定する。
【００２２】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、閾値レベルは、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られた生物学的試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均パーセントもしくは数の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内、もしくは5％以内であり、かつ/または平均パーセントもしくは数の標準偏差以内であり、群の対象の各々は、同じ疾患または状態を処置するために組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に、毒性を発生し続けた。いくつかの態様において、閾値レベルは、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、もしくは60％であるか、または約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％、もしくは約60％である、生物学的試料または血液もしくはアフェレーシス試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセントである。
【００２３】
毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質と、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生物学的試料における評価の後にまたはその結果に基づいて、該作用物質を投与するための説明書とを含有する製造物品が提供される。いくつかの態様において、評価は、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接または間接的に検出することができる試薬を、生物学的試料と接触させること、ならびに、生物学的試料における骨髄系マーカーおよび/またはレベルが陽性の、任意で表面陽性の細胞のパーセンテージまたは数を決定することを任意で含む、検出を含む。
【００２４】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、説明書は、作用物質が、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、 (ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与されるべきであることを指定し、かつ/または細胞療法での処置を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含有する。
【００２５】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、生物学的試料は、作用物質または細胞療法を施与する前に対象から得られる。いくつかの態様において、細胞の集団は、単球であるかまたはそれを含有する。いくつかの態様において、マーカーは骨髄系細胞マーカーであり、かつ/またはマーカーはCD14であり、かつ/または細胞の集団は、CD14+骨髄系細胞であるかもしくはそれを含有する。いくつかの態様において、マーカーは、ヒト、任意でヒトCD14である。
【００２６】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、試薬は、骨髄系細胞集団のマーカーまたは細胞に特異的に結合する結合分子である。いくつかの態様において、試薬は、抗体またはその抗原結合断片である。
【００２７】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、生物学的試料は、血液、血漿、もしくは血清試料であるか、またはそれから得られる。いくつかの例において、生物学的試料は、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料であるか、またはそれから得られる。
【００２８】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、製造物品は、骨髄系細胞、もしくは骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出するための試薬をさらに含有し、かつ/または骨髄系細胞、もしくは骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出するための試薬を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含有する。いくつかの態様において、製造物品は、細胞療法をさらに含有し、かつ/または細胞療法での処置を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含有する。
【００２９】
いくつかの態様において、作用物質を投与するための説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は、対象に作用物質を投与する工程を指定する。いくつかの場合には、説明書は、対象に細胞療法を施与する工程であって、作用物質の投与が、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、 (ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に実施されるものである工程をさらに指定する。
【００３０】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、作用物質を投与するための説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージが、閾値レベルよりも下である場合は、対象に細胞療法を施与する工程を指定し、任意で、説明書は、細胞療法が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わないことを指定する。
【００３１】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、閾値レベルは、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られた生物学的試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均パーセントもしくは数の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内、もしくは5％以内であり、かつ/または平均パーセントもしくは数の標準偏差以内であり、群の対象の各々は、同じ疾患または状態を処置するために組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に、毒性を発生し続けた。いくつかの態様において、閾値レベルは、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、もしくは60％であるか、または約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％、もしくは約60％である、生物学的試料または血液もしくはアフェレーシスにおける骨髄系マーカーが表面陽性の細胞のパーセントである。いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、細胞を、骨髄系細胞を、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーをアッセイまたは評価することは、フローサイトメトリーを含む。
【００３２】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、毒性は、神経毒性またはサイトカイン放出症候群（CRS）、任意でグレード1以上の神経毒性またはCRSを含む。いくつかの場合には、毒性は、重篤な神経毒性を含み、かつ/または、グレード2以上の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、少なくとも長期にわたるグレード3の神経毒性を含むか、またはグレード4もしくはグレード5のもしくはそれよりも上の神経毒性であり；かつ/または、毒性は、重篤なCRSを含み、かつ/またはグレード2以上もしくはグレード3以上のCRSを含む。いくつかの例において、毒性は、脳浮腫に関連している。
【００３３】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、作用物質または他の処置は、ステロイド； IL-10、IL-10R、IL-6、IL-6受容体、IFNγ、IFNGR、IL-2、IL-2R/CD25、MCP-1、CCR2、CCR4、MIP1β、CCR5、TNFα、TNFR1、IL-1、およびIL-1Rα/IL-1βの中から選択されるサイトカイン受容体もしくはサイトカインのアンタゴニストもしくは阻害剤；または、ミクログリア細胞の活性もしくは機能を阻止する、遮断する、もしくは低減させることができる作用物質のうちの1つまたは複数であるかまたはそれを含む。いくつかの場合には、アンタゴニストまたは阻害剤は、抗体または抗原結合断片、小分子、タンパク質またはペプチド、および核酸の中から選択される作用物質であるかまたはそれを含有する。いくつかの態様において、作用物質または他の処置は、抗IL-6抗体または抗IL6受容体抗体である。
【００３４】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、作用物質または他の処置は、トシリズマブ、シルツキシマブ、クラザキズマブ、サリルマブ、オロキズマブ（CDP6038）、エルシリモマブ、ALD518/BMS-945429、シルクマブ（CNTO 136）、CPSI-2634、ARGX-109、FE301、およびFM101の中から選択される作用物質であるかまたはそれを含有する。いくつかの態様において、作用物質または他の処置は、トシリズマブであるかまたはそれを含有する。いくつかの態様において、作用物質または他の処置は、シルツキシマブであるかまたはそれを含有する。いくつかの例において、ステロイドは、デキサメタゾンであるかまたはそれを含む。
【００３５】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、ミクログリア細胞の活性または機能を阻止する、遮断する、または低減させることができる作用物質は、抗炎症剤、NADPHオキシダーゼ（NOX2）の阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬、ナトリウムチャネル遮断薬から選択され、GM-CSFを阻害し、CSF1Rを阻害し、CSF-1に特異的に結合し、IL-34に特異的に結合し、核因子κB（NF-κB）の活性化を阻害し、CB2受容体を活性化し、かつ/またはCB2アゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤であり、マイクロRNA-155（miR-155）を阻害するか、またはマイクロRNA-124（miR-124）を上方制御する。いくつかの局面において、ミクログリア細胞の活性化または機能を阻止する、遮断する、または低減させることができる作用物質は、小分子、ペプチド、タンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、抗体模倣物、アプタマー、または核酸分子である。いくつかの例において、作用物質は、ミノサイクリン、ナロキソン、ニモジピン、リルゾール、MOR103、レナリドミド、カンナビノイド（任意でWIN55または212-2）、静脈内免疫グロブリン（IVIg）、イブジラスト、抗miR-155ロックド核酸（LNA）、MCS110、PLX-3397、PLX647、PLX108-D1、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、AC-708、DCC-3014、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン（GW2580）、AZD6495、Ki20227、BLZ945、エマクツズマブ、IMC-CS4、FPA008、LY-3022855、AMG-820、およびTG-3003から選択される。
【００３６】
いくつかの態様において、作用物質は、コロニー刺激因子1受容体（CSF1R）の阻害剤である。いくつかの局面において、阻害剤は、PLX-3397、PLX647、PLX108-D1、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、AC-708、DCC-3014、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン（GW2580）、AZD6495、Ki20227、BLZ945、またはその薬学的な塩もしくはプロドラッグ；エマクツズマブ、IMC-CS4、FPA008、LY-3022855、AMG-820、およびTG-3003、またはその抗原結合断片；または、前述のいずれかの組み合わせから選択される。いくつかの具体的な例において、阻害剤はPLX-3397である。
【００３７】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、組換え受容体は、疾患もしくは状態に関連する抗原、または疾患もしくは状態に関連する病変の環境の細胞において発現される抗原に特異的に結合する。いくつかの態様において、疾患または状態はがんである。いくつかの態様において、疾患または状態は、骨髄腫、白血病、またはリンパ腫である。いくつかの例において、疾患または状態は、B細胞悪性腫瘍であり、かつ/または急性リンパ芽球性白血病（ALL）、成人ALL、慢性リンパ芽球性白血病（CLL）、非ホジキンリンパ腫（NHL）、およびびまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）である。
【００３８】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、抗原は、B細胞成熟抗原（BCMA）、炭酸アンヒドラーゼ9（CA9；G250またはCAIXとしても知られる）、Her2/neu（受容体チロシンキナーゼerb-B2）、CD19、CD20、CD22、およびB型肝炎表面抗原、抗葉酸受容体、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4（CSPG4）、上皮成長因子タンパク質（EGFR）、上皮糖タンパク質2（EPG-2）、上皮糖タンパク質40（EPG-40）、エフリンB2、エフリン受容体A2（EPHa2）、Her3（erb-B3）、Her4（erb-B4）、erbB二量体、III型上皮成長因子受容体変異（EGFR vIII）、葉酸結合タンパク質（FBP）、Fc受容体様5（FCRL5；Fc受容体ホモログ5またはFCRH5としても知られる）、胎児アセチルコリン受容体（胎児AchR）、ガングリオシドGD2、ガングリオシドGD3、グリピカン-3（GPC3）、Gタンパク質共役受容体5D（GPCR5D）、ヒト高分子量黒色腫関連抗原（HMW-MAA）、IL-22受容体α（IL-22RαまたはIL-22R-アルファ）、IL-13受容体α2（IL-13Rα2またはIL-13R-アルファ2）、キナーゼインサートドメイン受容体（kdr）、κ軽鎖、ロイシンリッチリピート含有8ファミリーメンバーA（LRRC8A）、ルイスY、L1細胞接着分子（L1-CAM）、黒色腫関連抗原（MAGE）-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、MAGE-A10、黒色腫の優先発現抗原（PRAME）、サバイビン、TAG72、B7-H3、B7-H6、IL-13受容体α2（IL-13Ra2）、CD171、ヒト白血球抗原A1（HLA-A1）、ヒト白血球抗原A2（HLA-A2）、葉酸受容体-α、CD44v6、CD44v7/8、αvβ6インテグリン（avb6インテグリン）、8H9、神経細胞接着分子（NCAM）、血管内皮増殖因子受容体（VEGF受容体またはVEGFR）、栄養膜糖タンパク質（TPBG；5T4としても知られる）、NKG2Dリガンド、二重抗原、がん-精巣抗原、メソテリン（MSLN）、マウスサイトメガロウイルス（CMV）、ムチン1（MUC1）、MUC16、前立腺特異抗原、前立腺幹細胞抗原（PSCA）、前立腺特異的膜抗原（PSMA）、ナチュラルキラーグループ2メンバーD（NKG2D）リガンド、がん/精巣抗原1B（CTAG；NY-ESO-1およびLAGE-2としても知られる）、メランA（MART-1）、糖タンパク質100（gp100）、胎児腫瘍性抗原、受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体1（ROR1）、腫瘍関連糖タンパク質72（TAG72）、チロシナーゼ関連タンパク質1（TRP1；TYRP1またはgp75としても知られる）、チロシナーゼ関連タンパク質2（TRP2；ドパクロムトートメラーゼ、ドパクロムデルタ-イソメラーゼ、またはDCTとしても知られる）、血管内皮増殖因子受容体2（VEGF-R2）、がん胎児性抗原（CEA）、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、CD123、CD133、c-Met、O-アセチル化GD2（OGD2）、L1-CAMのCE7エピトープ、ウィルムス腫瘍1（WT-1）、サイクリン、サイクリンA2、C-Cモチーフケモカインリガンド1（CCL-1）、CD138、病原体特異的または病原体発現抗原であるかまたはそれを含む。
【００３９】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、組換え受容体は、T細胞受容体または機能的非T細胞受容体である。いくつかの態様において、組換え受容体はキメラ抗原受容体（CAR）である。いくつかの場合には、CARは、抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、ITAMを含有する細胞内シグナル伝達ドメインとを含有し、任意で、該細胞内シグナル伝達ドメインは、CD3-ゼータ（CD3ζ）鎖の細胞内ドメインを含有し；かつ/またはCARは、CD28もしくは4-1BBのシグナル伝達ドメインを任意で含有する共刺激シグナル伝達領域をさらに含有する。
【００４０】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、操作された細胞は、T細胞、任意でCD4+および/またはCD8+を含む。いくつかの場合には、T細胞は、対象から得られた初代T細胞である。
【００４１】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、毒性または重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量は、5×107個未満または約5×107個未満の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、2.5×107個未満もしくは約2.5×107個未満、1.0×107個未満もしくは約1.0×107個未満、5.0×106個未満もしくは約5.0×106個未満、1.0×106個未満もしくは約1.0×106個未満、5.0×105個未満もしくは約5.0×105個未満、または1×105個未満もしくは約1×105個未満の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）であるかまたはそれを含有する。いくつかの態様において、毒性または重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量は、1×105〜5×107個または約1×105〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、1×105〜2.5×107個、1×105〜1.0×107個、1×105〜5.0×106個、1×105〜1.0×106個、1.0×105〜5.0×105個、5.0×105〜5×107個、5×105〜2.5×107個、5×105〜1.0×107個、5×105〜5.0×106個、5×105〜1.0×106個、1.0×106〜5×107個、1×106〜2.5×107個、1×106〜1.0×107個、1×106〜5.0×106個、5.0×106〜5×107個、5×106〜2.5×107個、5×106〜1.0×107個、1.0×107〜5×107個、1×107〜2.5×107個、または2.5×107〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）であるかまたはそれを含有する。
【００４２】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、試薬は、検出可能に標識されており、任意で蛍光標識されている。
【００４３】
また、以下の工程を含む、処置のために対象を選択する方法も提供される：(a) 生物学的試料と、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上もしくは骨髄系マーカーの発現が陽性の細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬とを接触させる工程であって、該生物学的試料が、細胞療法での処置についての候補である対象に由来し、該細胞療法が任意で、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物を含有し；かつ、該生物学的試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該生物学的試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含まない、工程；ならびに(b)(i) 試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上であり、それによって、細胞療法に対する毒性を発生する危険性がある対象を特定する；または(ii) 試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である、(i)または(ii)のいずれかの対象を処置のために選択する工程。いくつかの態様において、生物学的試料はアフェレーシス試料である。いくつかの態様において、毒性は神経毒性である。
【００４４】
いくつかの局面において、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である対象は、対象に(1) 毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置、および(2) 細胞療法を施与するために選択され、該作用物質の投与は、対象に対する細胞療法の施与の開始の前に、その1、2、もしくは3日以内に、それと同時に、および/またはその後の最初の発熱時に施与されるものであり；かつ/または、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である対象は、対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与するために選択され；かつ/または、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である対象は、対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与するために選択され、任意で、該細胞療法はそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである。
【００４５】
いくつかの態様において、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である対象が選択され、方法は、対象に(1) 毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置、および(2) 細胞療法を施与する工程であって、該作用物質の投与が、対象に対する細胞療法の施与の開始の前に、その1、2、もしくは3日以内に、それと同時に、および/またはその後の最初の発熱時に実施される工程；ならびに/または、対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；ならびに/または、対象に細胞療法を、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、細胞療法の遺伝子操作された細胞の用量を施与する工程；ならびに/または、対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである工程をさらに含む。
【００４６】
いくつかの態様において、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である対象は、対象に細胞療法を、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに施与するため；対象に細胞療法を施与するためであり、該細胞療法が、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まないため；かつ/または、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに細胞療法を施与するためであり、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わないために選択される。
【００４７】
いくつかの態様において、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である対象が選択され、方法は、対象に細胞療法を、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに施与する工程をさらに含む。いくつかの例において、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または細胞のパーセンテージもしくは数の対象が選択され、方法は、対象に細胞療法を施与する工程をさらに含み、該細胞療法の施与は、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まず；かつ/または、該細胞療法の施与は、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない。
【００４８】
骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数について、生物学的試料をアッセイする工程であって、該生物学的試料が、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来し、該細胞療法が任意で、疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する工程；ならびに、アッセイの後にまたはその結果に基づいて、対象に細胞療法を、および任意で、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を施与する工程を含む、処置の方法が提供される。
【００４９】
また、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーが陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が陽性の細胞のあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、対象由来の生物学的試料のアッセイの後にまたはその結果に基づいて、対象に(i) 対象において疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含む、細胞療法、および任意で、(ii) 毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を施与する工程を含む、処置の方法であって、該生物学的試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られる方法も提供される。いくつかの態様において、アッセイする工程は、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接または間接的に検出することができる試薬を有する試料を、生物学的試料と接触させること、ならびに、生物学的試料における骨髄系マーカーおよび/またはレベルが陽性の、任意で表面陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数を決定することを任意で含む、検出を含む。
【００５０】
いくつかの態様において、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は：対象に、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の開始の前に、 その1、2、もしくは3日以内に、それと同時に、および/またはその後の最初の発熱時に施与し；かつ/または、対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与し；かつ/または、対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与し、任意で、該細胞療法はそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである。
【００５１】
いくつかの態様において、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は：細胞療法の施与が、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まず；かつ/または、細胞療法の施与が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない。
【００５２】
骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーが陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が陽性の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数について、対象由来のアフェレーシス試料をアッセイする工程；および、アッセイの後にまたはその結果に基づいて、対象が、細胞療法の施与後に神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があるかどうかを判定する工程であって、該細胞療法が、対象において疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物を含む工程を含む、神経毒性の危険性を評価する方法であって、該対象が、細胞療法での処置についての候補であり、かつ該アフェレーシス試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該アフェレーシス試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含まない方法が、本明細書において提供される。いくつかの態様において、対象は、試料における骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると評価される。いくつかの局面において、対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると評価される場合は、方法は、細胞療法の施与後に対象を、発熱以外の神経毒性の徴候または症状の発生についてモニタリングする工程；対象に、神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する工程；対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；ならびに/または、対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである工程をさらに含む。
【００５３】
いくつかの態様において、対象は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると疑われないかまたはその危険性がある可能性が低いと評価される。いくつかの態様において、対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると疑われないかまたはその可能性が低いと評価される場合は、対象は、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の神経毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、神経毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置をさらに施与されず；または、方法は、対象に細胞療法を、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに施与する工程をさらに含み、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない。
【００５４】
細胞療法が施与された対象を、発熱以外の神経毒性または重篤な神経毒性の徴候または症状の発生について観察する工程であって、該対象が、アフェレーシス試料において閾値レベルまたはそれよりも上の、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーが陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が陽性の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数をアッセイすることに基づいて判定されるように、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性がある、またはその危険性がある可能性が高いと判定されている対象であり、該アフェレーシス試料が、細胞療法の施与の前に対象から得られており、かつ/または該アフェレーシス試料が、組換え受容体および/もしくは操作された細胞を含まない工程を含む、細胞療法の施与後に対象をモニタリングする方法であって、該細胞療法が、対象において疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物を含有する方法が、本明細書において提供される。いくつかの態様において、対象は、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って、細胞療法が施与されているか、または、観察の期間またはその期間の一部分の最中に入院しており、任意で、該細胞療法はそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、危険性があると判定されている対象の非存在下で対象に施与されるものである。
【００５５】
対象に、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を施与する工程を含む、予防的処置の方法であって、該対象が、任意で細胞療法での処置についての候補であり、該細胞療法が任意で、疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有し；かつ該対象が、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、対象由来の生物学的試料のアッセイの後にまたはその結果に基づいて、毒性を発生する危険性があると特定されており、該生物学的試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該生物学的試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含有しない方法が提供される。いくつかの態様において、生物学的試料は、アフェレーシス試料である。いくつかの態様において、毒性は神経毒性である。
【００５６】
いくつかの例において、アッセイは、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接または間接的に検出することができる試薬を、生物学的試料と接触させること、ならびに、生物学的試料におけるマーカーおよび/またはレベルが陽性の、任意で表面陽性の細胞のパーセンテージまたは数を決定することを任意で含む、検出を含む。いくつかの態様において、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルであるかまたはそれよりも上である場合は、作用物質が対象に投与される。
【００５７】
いくつかの態様において、作用物質は、対象に対する細胞療法の施与の開始の前に、その1、2、もしくは3日以内に、それと同時に、および/またはその後の最初の発熱時に投与される。
【００５８】
いくつかの態様において、閾値レベルは、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られた生物学的試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均（average）もしくは平均（mean）のパーセントもしくは数の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内、もしくは5％以内であり、かつ/または平均（average）もしくは平均（mean）のパーセントもしくは数の標準偏差以内であり、群の対象の各々は、同じ疾患または状態を処置するために組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に、毒性を発生し続けた。いくつかの態様において、閾値レベルは、20％、25％、30％、35％、40％、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、もしくは60％であるか、または約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約46％、約47％、約48％、約49％、約50％、約51％、約52％、約53％、約54％、約55％、約56％、約57％、約58％、約59％、もしくは約60％である、生物学的試料または血液もしくはアフェレーシス試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセントである。
【００５９】
いくつかの態様において、パーセンテージは、試料における、総白血球もしくは総CD45+細胞、またはその生存細胞の中の骨髄系細胞集団のまたは骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージであるか、または、試料における、総白血球もしくはCD45+細胞、またはその生存細胞の中の骨髄系細胞集団または骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージである。いくつかの場合には、生物学的試料は、アフェレーシス試料である。いくつかのさらなる態様において、アフェレーシス試料は、白血球アフェレーシス試料である。いくつかのそのような態様において、パーセンテージは、試料における、総白血球もしくは総CD45+細胞、またはその生存細胞の中の、CD14が表面陽性のまたは別の単球マーカーが表面陽性の細胞のパーセンテージである。いくつかの態様において、単球マーカーは、例えばヒトにおいて、単球集団のすべてもしくは大部分の単球上に存在する、または、骨髄系細胞以外もしくは単球以外の細胞の集団上に通常は発現されない、例えば、リンパ球上に存在しない、かつ/もしくは好中球上に発現されないマーカーである。いくつかの局面において、単球マーカーは、ヒト細胞におけるCD14と共発現されるかもしくは実質的に共発現される、またはヒト細胞におけるCD14と同一の広がりのもしくは本質的に同一の広がりの発現パターンを有し、かつ/または、ヒトにおけるCD14と類似した、もしくは本質的に同じ発現パターンを有するマーカーである。
【００６０】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、細胞（例えば骨髄系細胞）の集団は、単球であるかまたはそれを含有する。いくつかの態様において、マーカーは骨髄系細胞マーカーであり、かつ/またはマーカーはCD14であり、かつ/または細胞の集団は、CD14+骨髄系細胞であるかまたはそれを含有する。いくつかの局面において、マーカーは、ヒト、任意でヒトCD14である。いくつかの態様において、骨髄系マーカーはCD14であり、または骨髄系細胞集団はCD14+であり、かつパーセンテージは、試料における総生存白血球または総生存CD45+細胞の中のCD14+細胞のパーセンテージである。いくつかの例において、閾値レベルは、アフェレーシス試料における総生存白血球または総生存CD45+細胞の中のCD14+細胞のパーセンテージであり、該パーセンテージは、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、もしくは60％であるか、または約45％、約46％、約47％、約48％、約49％、約50％、約51％、約52％、約53％、約54％、約55％、約56％、約57％、約58％、約59％、もしくは約60％である。
【００６１】
いくつかの態様において、試薬は、骨髄系細胞集団のマーカーまたは細胞に特異的に結合する結合分子である。いくつかの態様において、試薬は、抗体またはその抗原結合断片である。いくつかの態様において、生物学的試料は、血液、血漿、もしくは血清試料であるか、またはそれから得られる。いくつかの例において、生物学的試料は、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料であるか、またはそれから得られる。いくつかの態様において、細胞を、骨髄系細胞を、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーをアッセイまたは評価することは、フローサイトメトリーを含む。
【００６２】
対象を細胞療法の施与後に、発熱以外の神経毒性の徴候または症状の発生についてモニタリングする工程を含む、対象をモニタリングする方法であって、該対象が、神経毒性の危険性について評価されており、かつ対象由来のアフェレーシス試料の評価の結果が、CD14が陽性の生存白血球のパーセンテージが閾値レベルまたはそれよりも上であることを示し、該対象が、任意で細胞療法での処置についての候補であり、該細胞療法が任意で、疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含む方法が、本明細書において提供される。いくつかの態様において、方法は、対象に、神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する工程；対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；ならびに/または、対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである工程をさらに含む。いくつかの場合には、CD14はヒトCD14である。
【００６３】
いくつかの態様において、アッセイは、CD14を直接または間接的に検出することができる試薬を接触させること、およびアフェレーシス試料におけるCD14が陽性の、任意で表面陽性の細胞のパーセンテージまたは数を決定することを任意で含む、検出を含む。いくつかの例において、試薬は、CD14に特異的に結合する結合分子である。いくつかの態様において、試薬は、抗体またはその抗原結合断片である。
【００６４】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、毒性は、神経毒性またはサイトカイン放出症候群（CRS）、任意でグレード1以上の神経毒性またはCRSを含む。いくつかの局面において、毒性は、重篤な神経毒性を含み、かつ/または、グレード2以上の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、少なくとも長期にわたるグレード3の神経毒性を含むか、またはグレード4もしくはグレード5のもしくはそれよりも上の神経毒性であり；かつ/または、毒性は、重篤なCRSを含み、かつ/またはグレード2以上もしくはグレード3以上のCRSを含む。いくつかの態様において、神経毒性は、重篤な神経毒性であるか、またはグレード3以上の神経毒性である。いくつかの場合には、毒性は、脳浮腫に関連している。
【００６５】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、作用物質または他の処置は、ステロイド；IL-10、IL-10R、IL-6、IL-6受容体、IFNγ、IFNGR、IL-2、IL-2R/CD25、MCP-1、CCR2、CCR4、MIP1β、CCR5、TNFα、TNFR1、IL-1、およびIL-1Rα/IL-1βの中から選択されるサイトカイン受容体もしくはサイトカインのアンタゴニストもしくは阻害剤；または、ミクログリア細胞の活性もしくは機能を阻止する、遮断する、もしくは低減させることができる作用物質のうちの1つまたは複数であるかまたはそれを含む。いくつかの場合には、アンタゴニストまたは阻害剤は、抗体または抗原結合断片、小分子、タンパク質またはペプチド、および核酸の中から選択される作用物質であるかまたはそれを含有する。
【００６６】
いくつかの態様において、作用物質または他の処置は、抗IL-6抗体または抗IL6受容体抗体である。いくつかの例において、作用物質または他の処置は、トシリズマブ、シルツキシマブ、クラザキズマブ、サリルマブ、オロキズマブ（CDP6038）、エルシリモマブ、ALD518/BMS-945429、シルクマブ（CNTO 136）、CPSI-2634、ARGX-109、FE301、およびFM101の中から選択される作用物質であるかまたはそれを含有する。いくつかの態様において、作用物質または他の処置は、トシリズマブであるかまたはそれを含有する。いくつかの局面において、作用物質または他の処置は、シルツキシマブであるかまたはそれを含有する。いくつかの例において、ステロイドは、デキサメタゾンであるかまたはそれを含有する。
【００６７】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞の活性または機能を阻止する、遮断する、または低減させることができる作用物質は、抗炎症剤、NADPHオキシダーゼ（NOX2）の阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬、ナトリウムチャネル遮断薬から選択され、GM-CSFを阻害し、CSF1Rを阻害し、CSF-1に特異的に結合し、IL-34に特異的に結合し、核因子κB（NF-κB）の活性化を阻害し、CB2受容体を活性化し、かつ/またはCB2アゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤であり、マイクロRNA-155（miR-155）を阻害するか、またはマイクロRNA-124（miR-124）を上方制御する。いくつかの場合には、ミクログリア細胞の活性化または機能を阻止する、遮断する、または低減させることができる作用物質は、小分子、ペプチド、タンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、抗体模倣物、アプタマー、または核酸分子である。いくつかの態様において、作用物質は、ミノサイクリン、ナロキソン、ニモジピン、リルゾール、MOR103、レナリドミド、カンナビノイド（任意でWIN55または212-2）、静脈内免疫グロブリン（IVIg）、イブジラスト、抗miR-155ロックド核酸（LNA）、MCS110、PLX-3397、PLX647、PLX108-D1、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、AC-708、DCC-3014、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン（GW2580）、AZD6495、Ki20227、BLZ945、エマクツズマブ、IMC-CS4、FPA008、LY-3022855、AMG-820、およびTG-3003から選択される。
【００６８】
いくつかの態様において、作用物質は、コロニー刺激因子1受容体（CSF1R）の阻害剤である。いくつかの態様において、阻害剤は、PLX-3397、PLX647、PLX108-D1、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、AC-708、DCC-3014、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン（GW2580）、AZD6495、Ki20227、BLZ945、またはその薬学的な塩もしくはプロドラッグ；エマクツズマブ、IMC-CS4、FPA008、LY-3022855、AMG-820、およびTG-3003、またはその抗原結合断片；または、前述のいずれかの組み合わせから選択される。いくつかの具体的な例において、阻害剤はPLX-3397である。
【００６９】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、組換え受容体は、疾患もしくは状態に関連する抗原、または疾患もしくは状態に関連する病変の環境の細胞において発現される抗原に特異的に結合する。いくつかの局面において、疾患または状態はがんである。いくつかの場合には、疾患または状態は、骨髄腫、白血病、またはリンパ腫である。いくつかの例において、疾患または状態は、B細胞悪性腫瘍であり、かつ/または急性リンパ芽球性白血病（ALL）、成人ALL、慢性リンパ芽球性白血病（CLL）、非ホジキンリンパ腫（NHL）、およびびまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）である。いくつかの態様において、組換え受容体は、疾患もしくは状態に関連する抗原、または疾患もしくは状態の細胞上に発現されるかもしくは存在する抗原に特異的に結合する。
【００７０】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、抗原は、B細胞成熟抗原（BCMA）、炭酸アンヒドラーゼ9（CA9；G250またはCAIXとしても知られる）、Her2/neu（受容体チロシンキナーゼerb-B2）、CD19、CD20、CD22、およびB型肝炎表面抗原、抗葉酸受容体、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4（CSPG4）、上皮成長因子タンパク質（EGFR）、上皮糖タンパク質2（EPG-2）、上皮糖タンパク質40（EPG-40）、エフリンB2、エフリン受容体A2（EPHa2）、Her3（erb-B3）、Her4（erb-B4）、erbB二量体、III型上皮成長因子受容体変異（EGFR vIII）、葉酸結合タンパク質（FBP）、Fc受容体様5（FCRL5；Fc受容体ホモログ5またはFCRH5としても知られる）、胎児アセチルコリン受容体（胎児AchR）、ガングリオシドGD2、ガングリオシドGD3、グリピカン-3（GPC3）、Gタンパク質共役受容体5D（GPCR5D）、ヒト高分子量黒色腫関連抗原（HMW-MAA）、IL-22受容体α（IL-22RαまたはIL-22R-アルファ）、IL-13受容体α2（IL-13Rα2またはIL-13R-アルファ2）、キナーゼインサートドメイン受容体（kdr）、κ軽鎖、ロイシンリッチリピート含有8ファミリーメンバーA（LRRC8A）、ルイスY、L1細胞接着分子（L1-CAM）、黒色腫関連抗原（MAGE）-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、MAGE-A10、黒色腫の優先発現抗原（PRAME）、サバイビン、TAG72、B7-H3、B7-H6、IL-13受容体α2（IL-13Ra2）、CD171、ヒト白血球抗原A1（HLA-A1）、ヒト白血球抗原A2（HLA-A2）、葉酸受容体-α、CD44v6、CD44v7/8、αvβ6インテグリン（avb6インテグリン）、8H9、神経細胞接着分子（NCAM）、血管内皮増殖因子受容体（VEGF受容体またはVEGFR）、栄養膜糖タンパク質（TPBG；5T4としても知られる）、NKG2Dリガンド、二重抗原、がん-精巣抗原、メソテリン（MSLN）、マウスサイトメガロウイルス（CMV）、ムチン1（MUC1）、MUC16、前立腺特異抗原、前立腺幹細胞抗原（PSCA）、前立腺特異的膜抗原（PSMA）、ナチュラルキラーグループ2メンバーD（NKG2D）リガンド、がん/精巣抗原1B（CTAG；NY-ESO-1およびLAGE-2としても知られる）、メランA（MART-1）、糖タンパク質100（gp100）、胎児腫瘍性抗原、受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体1（ROR1）、腫瘍関連糖タンパク質72（TAG72）、チロシナーゼ関連タンパク質1（TRP1；TYRP1またはgp75としても知られる）、チロシナーゼ関連タンパク質2（TRP2；ドパクロムトートメラーゼ、ドパクロムデルタ-イソメラーゼ、またはDCTとしても知られる）、血管内皮増殖因子受容体2（VEGF-R2）、がん胎児性抗原（CEA）、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、CD123、CD133、c-Met、O-アセチル化GD2（OGD2）、L1-CAMのCE7エピトープ、ウィルムス腫瘍1（WT-1）、サイクリン、サイクリンA2、C-Cモチーフケモカインリガンド1（CCL-1）、CD138、病原体特異的もしくは病原体発現抗原、またはユニバーサルタグに関連する抗原、および/またはビオチン化分子、および/またはHIV、HCV、HBV、もしくは他の病原体によって発現される分子であるかまたはそれを含む。受容体によって標的とされる抗原は、いくつかの態様において、数々の公知のB細胞マーカーのうちのいずれかなどの、B細胞悪性腫瘍に関連する抗原を含む。いくつかの態様において、抗原は、CD20、CD19、CD22、ROR1、CD45、CD21、CD5、CD33、Igκ、Igλ、CD79a、CD79b、またはCD30であるかまたはそれを含む。
【００７１】
いくつかの態様において、抗原は、病原体特異的または病原体発現抗原であるかまたはそれを含む。いくつかの態様において、抗原は、ウイルス抗原（例えば、HIV、HCV、HBVなど由来のウイルス抗原）、細菌抗原、および/または寄生虫抗原である。
【００７２】
いくつかの態様において、組換え受容体は、疾患もしくは状態、または疾患もしくは状態の細胞を特異的に標的とする治療剤によって含まれるタグに特異的に結合し、該タグは、対象に投与されているかまたは投与されることになる。
【００７３】
いくつかの態様において、組換え受容体は、T細胞受容体または機能的非T細胞受容体である。いくつかの態様において、組換え受容体はキメラ抗原受容体（CAR）である。いくつかの場合には、CARは、抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、ITAMを含有する細胞内シグナル伝達ドメインとを含有し、任意で、該細胞内シグナル伝達ドメインは、CD3-ゼータ（CD3ζ）鎖の細胞内ドメインを含有し；かつ/またはCARは、CD28もしくは4-1BBのシグナル伝達ドメインを任意で含有する共刺激シグナル伝達領域をさらに含有する。
【００７４】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、操作された細胞は、T細胞、任意でCD4+および/またはCD8+ T細胞を含む。いくつかの例において、T細胞は、対象から得られた初代T細胞である。
【００７５】
いくつかの態様において、細胞療法は、それぞれ両端の値を含む、1×105〜1×108個もしくは約1×105〜1×108個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）、5×105〜1×107個もしくは約5×105〜1×107個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）、または1×106〜1×107個もしくは約1×106〜1×107個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）の投与を含む。いくつかの態様において、細胞療法は、1×108個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、1×107個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、0.5×107個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、1×106個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、0.5×106個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）の投与を含む。
【００７６】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、毒性または重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量は、5×107個未満または約5×107個未満の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、2.5×107個未満もしくは約2.5×107個未満、1.0×107個未満もしくは約1.0×107個未満、5.0×106個未満もしくは約5.0×106個未満、1.0×106個未満もしくは約1.0×106個未満、5.0×105個未満もしくは約5.0×105個未満、または1×105個未満もしくは約1×105個未満の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）であるかまたはそれを含有する。いくつかの態様において、毒性または重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量は、1×105〜5×107個または約1×105〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、1×105〜2.5×107個、1×105〜1.0×107個、1×105〜5.0×106個、1×105〜1.0×106個、1.0×105〜5.0×105個、5.0×105〜5×107個、5×105〜2.5×107個、5×105〜1.0×107個、5×105〜5.0×106個、5×105〜1.0×106個、1.0×106〜5×107個、1×106〜2.5×107個、1×106〜1.0×107個、1×106〜5.0×106個、5.0×106〜5×107個、5×106〜2.5×107個、5×106〜1.0×107個、1.0×107〜5×107個、1×107〜2.5×107個、または2.5×107〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）であるかまたはそれを含有する。
【００７７】
いずれかのそのような態様のうちのいくつかにおいて、操作された細胞は、対象に対して自己由来である。いくつかの態様において、操作された細胞は、対象に対して同種異系である。いくつかの場合には、試薬は、検出可能に標識されており、任意で蛍光標識されている。
【００７８】
説明書が、本明細書において提供される方法のいずれかを実施することを指定する、提供される製造物品のいずれかが、本明細書において提供される。
【図面の簡単な説明】
【００７９】
【図１】図1Aは、対象の白血球アフェレーシス試料におけるCD14+単球のパーセンテージを表示するグラフを示す。神経毒性を発生しなかった対象（左）対神経毒性を発生した対象（右）についてのデータを示す。図1Bは、対象の白血球アフェレーシス試料におけるCD14+単球のパーセンテージを表示するグラフを示す。神経毒性を発生しなかった対象（左）対グレード3以上の神経毒性を発生した対象（右）についてのデータを示す。
【図２】臨床検査値異常および20％以上の対象において生じたTEAEを経験した、対象のパーセンテージを示す。*:試験処置とは無関係な、リンパ腫の進行による、1つの多臓器不全のグレード5 AE；†:増殖因子ならびに広域スペクトル抗生物質および抗真菌剤の下で好中球減少症であるが、進行性呼吸不全のための機械的換気を拒否した対象において23日目に生じ、調査者がフルダラビン、シクロホスファミド、およびCAR T細胞療法に関連すると評価した、1つのびまん性肺胞損傷のグレード5 AE。
【図３】CRSおよび神経毒性の発症までの観察された時間を図示するカプランマイヤー曲線である。
【図４Ａ】処置された対象の部分群の間の奏効率を図示する。
【図４Ｂ】処置された対象の部分群の間の奏効率を図示する。
【図５Ａ】対象のフルコホートおよびコアコホートにおける奏効（CR/PR、CR、またはPR）の期間および全生存期間を示す。
【図５Ｂ】対象のフルコホートおよびコアコホートにおける奏効（CR/PR、CR、またはPR）の期間および全生存期間を示す。
【図６Ａ】異なる用量レベルでの、処置後の様々な時点での末梢血におけるCAR+ T細胞の薬物動態を示す。
【図６Ｂ】奏効者と非奏効者との間の、処置後の様々な時点での末梢血におけるCAR+ T細胞の薬物動態を示す。
【図６Ｃ】いずれかの神経毒性を発生した対象または発生しなかった対象における、処置後の様々な時点での末梢血におけるCAR+ T細胞の薬物動態を示す。
【図７】CAR+ T細胞の投与前の対象の血清において測定された分析物のレベル、および神経毒性の発生との相関を示す。
【図８】無進行時間（月）をプロットし、CAR-T発現CD4+およびCD8+ T細胞を含有する抗CD19細胞療法で処置されたNHL対象のフルコホートおよびコアコホート内の個々の対象における、最良総合効果および奏効の持続性、ならびに経時的に観察された個々の臨床アウトカムを表すグラフを示す。a:特に断りがある場合を除いて、1ヶ月目にBORを達成した患者；b:2名の患者において観察されたリンパ腫によるCNS浸潤の完全な消散；c:疾患進行時の生検後に再増大した1名の患者。
【図９】図9Aは、対象のアフェレーシス試料におけるCD45+細胞のうちのCD14+単球のパーセンテージを表示するグラフを示す。神経毒性を発生しなかった対象（左）対神経毒性を発生した対象（右）についてのデータを示す。図9Bは、対象のアフェレーシス試料におけるCD45+細胞のうちのCD14+単球のパーセンテージを表示するグラフを示す。神経毒性を発生しなかった対象（左）対グレード3以上の神経毒性を発生した対象（右）についてのデータを示す。
【発明を実施するための形態】
【００８０】
詳細な説明
細胞療法（例えば、CAR+ T細胞）および/または毒性を処置するための薬剤と組み合わせての使用のための、例えば、養子細胞療法に関連する併用診断薬としてのおよび/または予防的処置方法における使用のための、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬を伴う、製造物品、キットおよび方法を、本明細書に提供する。いくつかの態様において、提供される製造物品および方法は、細胞療法（例えば、CAR+ T細胞療法）が施与された対象における、毒性（例えば、重篤な毒性、例えば、重篤な神経毒性）を発生する危険性を低減することに関連する。
【００８１】
いくつかの態様において、細胞療法は、腫瘍浸潤リンパ球(TIL)療法、トランスジェニックTCR療法または組換え受容体発現細胞療法（任意でT細胞療法）（これは、任意で、キメラ抗原受容体(CAR)発現細胞療法である）であるかまたはこれらを含む。従って、いくつかの態様において、免疫療法は、複数の腫瘍浸潤リンパ球(TIL)、複数の細胞、例えば、T細胞、例えば、組換え受容体（例えば、TCRまたはキメラ抗原受容体）を発現する操作されたT細胞を含有する組成物の投与を伴う。いくつかの態様において、組換え受容体はTCRである。いくつかの場合において、組換え受容体はキメラ抗原受容体(CAR)である。
【００８２】
養子細胞療法（関心対象の疾患または障害に特異的なキメラ受容体、例えば、キメラ抗原受容体(CAR)および/または他の組換え抗原受容体を発現する細胞の投与を伴うもの、ならびに他の養子免疫細胞および養子T細胞療法を含む）は、がんならびに他の疾患および障害の処置において有効であり得る。ある状況において、養子細胞療法への利用可能なアプローチは、必ずしも、完全に満足とは限らない場合がある。いくつかの状況において、最適な効力は、投与された細胞の、標的（例えば標的抗原）を認識しそれに結合する能力、対象、腫瘍、およびその環境内で輸送され、局在化し、適当な部位にうまく進入する能力、活性化状態になって、増大する能力、様々なエフェクター機能を発揮する能力（細胞傷害性の殺滅およびサイトカインなどの様々な因子の分泌を含む）、持続（長期間を含む）する能力、一定の表現型状態（エフェクター、長寿命メモリー、低分化、およびエフェクター状態など）に分化し、移行し、またはそれら一定の表現型状態への再プログラミングに従事する能力、クリアランスおよび標的リガンドまたは標的抗原への再曝露に続いて有効で堅牢なリコール応答を与え、疲弊、アネルギー、最終分化、および/または抑制状態への分化を回避しまたは低減する能力、に依存し得る。
【００８３】
毒性を処置または改善するためのある利用可能な方法は、必ずしも完全に満足とは限らない場合がある。多くのそのようなアプローチは、例えば、サイトカイン遮断によるような、毒性の下流の影響を標的とすること、および/または、高用量ステロイドのような薬剤を送達することに注目し、これらはまた、投与される細胞の機能を排除するかまたは損ない得る。さらに、そのようなアプローチは、毒性の身体的徴候もしくは症状の検出時にのみ、そのような介入の施与を伴うことが多く、これらは、いくつかの場合において、対象における重篤な毒性の発生時に現われ得る。対象が毒性の危険性があるかどうかを、細胞療法前に予測することが可能でない場合がある。これらの他のアプローチの多くもまた、養子細胞療法と関連し得る、神経毒性のような毒性の他の形態を阻止しない。いくつかの場合において、そのような療法は、対象が毒性の身体的徴候もしくは症状を示した後にのみ、施与される。いくつかの場合において、これは、そのような症状が重篤である時に行われ、それは、従って、毒性を改善または処置するために、さらにより過酷なまたはより極端な処置（例えば、より高い投薬量または増加した投与頻度）を必要とし得る。
【００８４】
ある代替アプローチの使用は、そのような問題に対して満足な解決策を提供しない。例えば、細胞療法のような処置が施与された対象の全部または大きなサブセット（例えば、最終的に毒性を発生すると考えられるかまたはその危険性の一定のレベル以上にある対象のサブセットよりも大きい）の処置を含んだアプローチは、危険性や低すぎる危険性閾値を問わず、満足ではない場合がある。例えば、対象は、毒性を改善または阻止するための薬剤または療法（例えば、ステロイド）と共に、細胞療法が施与される。例えば、処置が、細胞の投与と同時に、または細胞の投与後のある時間枠内に、但し、身体的徴候もしくは症状または重篤な徴候もしくは症状の発生前に、少なくとも危険性評価の適切なレベル無しで、処置が施与されたそのようなアプローチは、満足ではない場合がある。例えば、細胞療法が施与されたすべての対象が、毒性アウトカムを発生する、または、介入を必要とするような毒性アウトカムを発生するとは限らない。従って、そのような代替法は、いくつかの状況において、そのような処置が不当であり得るある対象を不必要に処置することを伴うだろう。さらに、いくつかの場合において、そのような薬剤および療法（例えば、ステロイド）は、それら自体が、毒性副作用に関連する。そのような副作用はより高い用量または頻度でさらにより大きくなり得、ここで、細胞療法に起因し得る毒性の重症度を処置または改善するために薬剤または療法を施与するかまたはこれらで処置することが必要である。さらに、いくつかの場合において、毒性を処置するための薬剤または療法は、細胞療法の一部として提供される細胞上に発現されたキメラ受容体（例えば、CAR）の効力のような、細胞療法の効力を限定し得る（Sentman (2013) Immunotherapy, 5:10）。
【００８５】
提供される製造物品および方法は、毒性アウトカムの危険性を扱う、予測する、および処置または阻止するための利用可能なアプローチおよび代替の解決策に勝る利点を提供する。提供される試薬は、疾患または状態を処置するための組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞を含む細胞療法（例えば、治療用細胞組成物）と共に併用診断薬として使用することができる。
【００８６】
いくつかの態様において、提供される方法および製造物品は、細胞療法（例えば、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する細胞療法）が後に施与される対象中の生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス）中の骨髄系細胞マーカー（例えば、CD14）を発現する細胞のパーセンテージが、毒性を発生する危険性と相関するという観察に基づく。提供される製造物品および方法は、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬に関する。いくつかの態様において、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来する生体試料をアッセイするために試薬を使用することについての説明書が提供され、該細胞療法は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含む。
【００８７】
いくつかの態様において、方法または製造物品は、対象に施与される場合にある療法に関連し得る潜在的な毒性と相関する（例えば、骨髄系細胞の集団上に発現される）マーカーを評価するために使用される。いくつかの態様において、方法および製造物品は、細胞ベースの療法および/または毒性を低減もしくは改善する薬剤の施与および投薬量を決定するために有用である。いくつかの態様において、細胞療法は、腫瘍浸潤リンパ球(TIL)療法、トランスジェニックTCR療法または組換え受容体発現細胞療法（任意でT細胞療法）（これは、任意で、キメラ抗原受容体(CAR)発現細胞療法である）である。いくつかの態様において、組換え受容体はTCRである。いくつかの場合において、組換え受容体はキメラ抗原受容体(CAR)である。いくつかの態様において、方法は、リンパ球枯渇療法を施与することをさらに伴う。
【００８８】
特に、提供される製造物品または方法は、いくつかの態様において、細胞療法に関するもののような、毒性を発生する危険性があるかまたは毒性を発生することについての特定の閾値危険性レベルを上回ると予測される対象のみを一般に特定することに関連する。従って、提供される方法は、いくつかの態様において、毒性を発生する可能性がより高い対象のサブセットにおいてのみ、毒性アウトカムを発生する危険性の介入を許可する。多くの場合において、これは、細胞療法が施与されるすべての対象において毒性を処置することを回避し、これは、上述したように、対象のうちの多くが毒性を発生しなかったであろう場合、不当であり得、かつ/または、それ自体、著しい副作用を生じさせ得る。
【００８９】
さらに、提供される方法は、いくつかの態様において、神経毒性（例えば、重篤な神経毒性）のような、毒性を発生する危険性が、細胞療法のような処置の施与前に、対象由来の血液試料におけるマーカーを検出することによって予測することができるという特徴に関連する利点をさらに提供する。従って、いくつかの場合において、毒性（例えば、CRSまたは神経毒性、例えば、重篤なCRSまたは重篤な神経毒性）を発生する、危険性があるかつ/または危険性がある可能性がより高いと予測される対象が、介入を早期に受けることができるか、または予防的処置を受けることができる。いくつかの場合において、方法または製造物品は、対象が、そうでなければ介入処置に至るだろう毒性（例えば、重篤な毒性）の身体的徴候または症状が発生するより一般に前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させるための薬剤または処置を受けることを可能にする。いくつかの場合において、毒性アウトカムまたは毒性アウトカムの可能性の処置に早期に介入する能力は、毒性を処置または改善するための薬剤の投薬量を減らすことができること、および/または、そのような薬剤または療法の施与頻度を減らすことができることを意味し得る。
【００９０】
いくつかの態様において、閾値レベルより上である、骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）が陽性の細胞のパーセンテージの存在は、対象は、毒性を改善するための予防的処置を必要とし得、かつ/または、毒性の危険性を最小化または低減する様式で組換え受容体発現細胞が投薬もしくは投与されるべきであることを示す。従って、本明細書に記載されるようなマーカーは、対象の処置により早期に介入して重篤な毒性を低減することができるために、細胞療法に対する毒性を発生する可能性が高いかまたは可能性がより高い対象を特定するための予測方法において使用することができる。そのような方法は、介入について合理的な戦略を通知することができ、それによって、CAR-T細胞療法のような、養子細胞療法の安全かつ有効な臨床適用を促進することができる。
【００９１】
いくつかの態様において、製造物品または方法は、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）を検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬を含む。いくつかの態様において、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来する生体試料をアッセイするために試薬を使用することについての説明書が提供され、該細胞療法は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含む。物品は、いくつかの態様において、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させるための1つまたは複数の薬剤または処置、ならびに/あるいは、対象における毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させるための1つまたは複数の薬剤または処置の施与についての説明書を、代わりにまたはさらに含み得る。
【００９２】
いくつかの態様において、製造物品は、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）を検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬を含有し、かつ、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来する生体試料をアッセイするための説明書を提供する。
【００９３】
組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する細胞療法と、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカー（例えば、CD14）のもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）における評価の後にまたはその結果に基づいて細胞療法を施与するための説明書とを含有する、製造物品をさらに提供する。いくつかの態様において、生体試料は、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または、該生体試料は、組換え受容体および/または前記操作された細胞を含まない。
【００９４】
毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる薬剤と、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生体試料における評価の後にまたはその結果に基づいて薬剤を投与するための説明書とを含有する、製造物品をさらに提供する。
【００９５】
いくつかの態様において、評価は、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接的にまたは間接的に検出することができる試薬を、生体試料と接触させる工程、ならびに、生体試料における骨髄系マーカーおよび/またはレベルが陽性の（任意で表面陽性の）細胞のパーセンテージまたは数を決定する工程を任意で含む、検出を含むいくつかの場合において、細胞の集団は、単球であるかまたは単球を含有する。
【００９６】
製造物品のいくつかの態様において、説明書をさらに提供する。説明書は、例えば、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる薬剤または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i)開始の前に、(ii)開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii)開始と同時に、および/または、(iv)開始の後の最初の発熱時に、対象に施与することを指定する。
【００９７】
いくつかの場合において、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合、細胞療法を、低減した用量で、あるいは、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で、対象に施与することを指示する。さらに、いくつかの態様において、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って細胞療法を対象に施与することを指示し、任意で、細胞療法はそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、対象に施与されるものである。
【００９８】
いくつかの態様において、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルより下である場合、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、細胞療法を患者へ施与することをさらに指示する。
【００９９】
生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）と、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）を検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬とを接触させる工程を含む、処置のために対象を選択するための方法をさらに提供する。方法のいくつかの態様において、生体試料は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する細胞療法での処置についての候補である対象に由来し、かつ、生体試料は、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または、該生体試料は、組換え受容体および/または該操作された細胞を含まない。いくつかの態様において、方法はまた、以下のいずれかの対象を選択する工程を含む：試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上であり、それによって、細胞療法に対する毒性を発生する危険性がある対象を特定する；または、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルより下である。方法はさらに、以下のいずれかの対象を選択する工程を含む：試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上であり、それによって、細胞療法に対する毒性を発生する危険性がある対象を特定する；または、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルより下である。
【０１００】
いくつかの態様において、骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージまたは数が閾値レベルまたはそれよりも上である場合、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる薬剤または他の処置が、遺伝子操作された細胞を含む治療用細胞組成物の投与の前におよび/またはそれと同時に施与され；かつ/あるいは、毒性を発生する危険性に関連しない、または、遺伝子操作された細胞を含む治療用細胞組成物が投与される対象の大多数において毒性を発生する危険性に関連しない、治療用細胞組成物の遺伝子操作された細胞の用量が、対象へ投与され；かつ/あるいは、遺伝子操作された細胞を含む治療用細胞組成物が、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って、対象へ投与され、任意で、細胞療法はそうでなくて、外来患者ベースで、対象に施与されるものである。
【０１０１】
別途定義される場合を除き、本明細書において使用するすべての専門用語、表記法、ならびに他の技術用語および科学用語または用語法は、特許請求の範囲に記載された対象が関係する技術分野の当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有することが意図される。いくつかの場合において、通常理解されている意味を有する用語が、明快さのために、かつ/または即座の参照のために本明細書において定義されており、そのような定義が本明細書に含まれることは、当技術分野において一般に理解されていることを超える実質的な違いを表すように必ずしも解釈されるべきではない。
【０１０２】
本出願において言及される特許文書、科学論文、およびデータベースを含むすべての刊行物は、あたかも各々個々の刊行物が個別に参照により組み入れられるのと同じ程度に、すべての目的でその全体が参照により組み入れられる。本明細書において示される定義が、参照により本明細書に組み入れられる特許、出願、公開出願、および他の刊行物において示される定義と相反するか、またはさもなければ矛盾する場合は、本明細書において示される定義が、参照により本明細書に組み入れられる定義よりも優先される。
【０１０３】
本明細書において用いられる節の見出しは、組織化の目的だけのものであり、記載されている主題を限定すると解釈されるべきではない。
【０１０４】
I．骨髄系細胞、または骨髄系細胞上に発現されるマーカーを検出するための試薬
骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上（例えば、単球の集団上）に発現されるマーカー（例えば、CD14）を検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬を含有する製造物品を、本明細書に提供する。いくつかの態様において、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来する生体試料をアッセイするために試薬を使用することについての説明書が提供され、該細胞療法は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含む。いくつかの態様において、生体試料はアフェレーシス試料である。組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する細胞療法と、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカー（例えば、CD14）のもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）における評価の後にまたはその結果に基づいて細胞療法を施与するための説明書とを含有する、製造物品をさらに提供する。いくつかの態様において、パーセンテージは、試料における、総白血球もしくは総CD45+細胞またはその生存細胞の中の、骨髄系細胞集団のまたは骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージである。いくつかの場合において、パーセンテージは、試料における、総白血球もしくはCD45+細胞またはその生存細胞の中の、骨髄系細胞集団または骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージである。いくつかの例において、パーセンテージは、総白血球またはCD45+細胞の中のCD14+細胞のパーセンテージである。いくつかの態様において、細胞はCD14について表面陽性である。
【０１０５】
いくつかの局面において、細胞の集団は、単球であるかまたは単球を含有する。いくつかの態様において、生体試料は、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または、該生体試料は、組換え受容体および/または前記操作された細胞を含まない。いくつかの態様において、マーカーは骨髄系細胞マーカーであり、かつ/またはここで、マーカーはCD14であり、かつ/またはここで、細胞の集団は、CD14+骨髄系細胞であるかまたはこれらを含む。いくつかの場合において、マーカーは、ヒト、任意でヒトCD14である。生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）と、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）を検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬とを接触させる工程を含む、処置のために対象を選択するための方法をさらに提供する。
【０１０６】
A．試料
いくつかの態様において、生体試料は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含む細胞療法を受ける前に、対象または対象の群から得られる。例えば、生体試料は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する細胞療法での処置についての候補である対象に由来し、かつ、生体試料は、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または、該生体試料は、組換え受容体および/または該操作された細胞を含まない。いくつかの場合において、生体試料は、血液、血漿または血清試料であるかまたはこれらから得られる。例えば、生体試料は、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料であるかまたはこれらから得られる。いくつかの態様において、試料は、単球について濃縮される。いくつかの場合において、試料は、白血球アフェレーシスコレクションシステムから得られる。いくつかの態様において、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料は、細胞療法が操作される同じ試料に由来する。
【０１０７】
いくつかの態様において、試料は、疾患または状態を有する対象に由来する。例えば、疾患または状態はがんである。いくつかの場合において、対象は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する細胞療法での処置についての候補である。いくつかの態様において、疾患または状態は、腫瘍、例えば、固形腫瘍、リンパ腫、白血病、血液腫瘍、転移性腫瘍、または他のがんもしくは腫瘍タイプである。いくつかの具体例において、疾患または状態は、骨髄腫、白血病またはリンパ腫である。
【０１０８】
いくつかの態様において、がんまたは増殖性疾患は、B細胞悪性腫瘍または血液悪性腫瘍である。いくつかの態様において、がんまたは増殖性疾患は、リンパ芽球性白血病(ALL)、非ホジキンリンパ腫(NHL)、または慢性リンパ性白血病(CLL)である。いくつかの態様において、がんはCLLである。いくつかの態様において、方法は、骨髄腫、リンパ腫または白血病を処置するために使用することができる。いくつかの態様において、方法は、非ホジキンリンパ腫(NHL)、急性リンパ芽球性白血病(ALL)、慢性リンパ性白血病(CLL)、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫(DLBCL)、急性骨髄性白血病(AML)、または骨髄腫、例えば、多発性骨髄腫(MM)を処置するために使用することができる。いくつかの態様において、方法は、NHLまたはDBCBLを処置するために使用することができる。
【０１０９】
B．検出方法
骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）を検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬を含有する製造物品、および製造物品の使用を、本明細書に提供する。いくつかの態様において、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来する生体試料をアッセイするために試薬を使用することについての説明書がさらに提供され、該細胞療法は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含む。製造物品を使用することのいくつかの態様において、骨髄系細胞の集団に特異的であるマーカー、または骨髄系細胞の集団上にもしくは骨髄系細胞の集団によって発現されるマーカーについての検出は、操作された細胞の投与の開始の2日前までに、7日前までに、14日前までに、21日前までに、28日前までに、35日前までにまたは40日前までに、行われる。
【０１１０】
いくつかの態様において、製造物品を使用することは、骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）またはその部分を検出することを含む。検出されるマーカーは、骨髄系細胞の表面上にまたは骨髄系細胞の集団内において発現され得る。いくつかの例において、それは単球上に発現される。いくつかの態様において、マーカーは、骨髄系細胞マーカー、例えば、ヒト骨髄系細胞マーカー、例えば、単球マーカー、例えば、ヒト単球マーカーである。いくつかの局面において、単球マーカーは、任意でヒトにおいてまたは健康な個体において、すべてのもしくは大部分の単球または大部分の単球集団上に、例えば、これらの表面上に、存在するマーカーである。いくつかの局面において、単球マーカーは、骨髄系細胞以外のまたは単球以外の細胞の集団上には存在しないかまたは通常は発現されず、例えば、リンパ球上には存在せず、かつ/または、好中球上には発現されない。いくつかの局面において、単球マーカーは、ヒト細胞におけるCD14と共発現されるかもしくは実質的に共発現される、または、ヒト細胞におけるCD14と同一の広がりのもしくは本質的に同一の広がりの発現パターンを有し、かつ/または、ヒトにおけるCD14と類似した、もしくは本質的に同じ発現パターンを有するマーカーである。いくつかの態様において、マーカーは骨髄系細胞マーカーであり、かつ/または、マーカーはCD14であり、かつ/またはここで、細胞の集団は、CD14+骨髄系細胞であるかまたはこれらを含む。いくつかの場合において、CD14は、膜結合されるか、または細胞の表面上に発現される。いくつかの態様において、CD14はヒトCD14である。いくつかの態様において、CD14は、SEQ ID NO: 27〜28に記載のアミノ酸配列、またはSEQ ID NO: 27〜28と少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％もしくはそれ以上または少なくとも約85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％もしくはそれ以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１１】
いくつかの態様において、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬は、マーカー（例えば、CD14）に結合する。いくつかの場合において、細胞を、骨髄系細胞を、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーをアッセイまたは評価することは、フローサイトメトリーを使用することである。いくつかの場合において、試薬は、CD14に結合する可溶性タンパク質である。例えば、いくつかの態様において、細菌リポ多糖(LPS)が、CD14を結合および検出するために使用され得る。いくつかの態様において、CD14検出抗体は、ab45870 (Abcam)、HCD14 (Biolegend)、M5E2 (Biolegend)、TUK4 (Bio-Rad)、およびMAB3832 (R&D Systems)からなる群より選択される。
【０１１２】
本明細書における「抗体」という用語は、最も広い意味で用いられ、無傷の抗体、ならびに断片抗原結合（Fab）断片、F(ab')2断片、Fab'断片、Fv断片、組換えIgG（rIgG）断片、一本鎖可変断片（scFv）を含む一本鎖抗体断片、および単一ドメイン抗体（例えば、sdAb、sdFv、ナノボディ）断片を含む機能的（抗原結合）抗体断片を含む、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を含む。この用語は、免疫グロブリンの遺伝子操作されたおよび/または他の方法で改変された形態、例えばイントラボディ、ペプチボディ、キメラ抗体、完全ヒト抗体、ヒト化抗体、およびヘテロコンジュゲート抗体、多重特異性、例えば二重特異性抗体、ダイアボディ、トリアボディ、およびテトラボディ、タンデムdi-scFv、タンデムtri-scFvを包含する。特に明記されない限り、「抗体」という用語は、その機能的抗体断片を包含すると理解されるべきである。この用語はまた、IgGならびにそのサブクラス、IgM、IgE、IgA、およびIgDを含む任意のクラスまたはサブクラスの抗体を含む、無傷のまたは完全長の抗体も包含する。
【０１１３】
提供される抗体の中には、抗体断片がある。「抗体断片」とは、無傷の抗体が結合する抗原に結合する無傷の抗体の一部分を含む、無傷の抗体以外の分子を指す。抗体断片の例には、Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2；ダイアボディ；直鎖抗体；一本鎖抗体分子（例えばscFv）；ならびに抗体断片から形成される多重特異性抗体が含まれるが、それらに限定されない。特定の態様において、抗体は、scFvなどの、可変重鎖領域および/または可変軽鎖領域を含む一本鎖抗体断片である。
【０１１４】
単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインのすべてもしくは一部分、または軽鎖可変ドメインのすべてもしくは一部分を含む抗体断片である。ある特定の態様において、単一ドメイン抗体はヒト単一ドメイン抗体である。
【０１１５】
抗体断片は、無傷の抗体のタンパク質分解消化、および組換え宿主細胞による産生を含むがそれらに限定されない、様々な技法によって作ることができる。いくつかの態様において、抗体は、組換え生産された断片、例えば、合成リンカー、例えばペプチドリンカーによって連結された2つ以上の抗体領域もしくは鎖を有するものなどの、天然には存在しない配置、および/または天然に存在する無傷の抗体の酵素消化によっては生じ得ない配置を含む断片である。いくつかの局面において、抗体断片はscFvである。
【０１１６】
「ヒト化」抗体は、すべてのまたは実質的にすべてのCDRアミノ酸残基が非ヒトCDRに由来し、すべてのまたは実質的にすべてのFRアミノ酸残基がヒトFRに由来する抗体である。ヒト化抗体は、任意で、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部分を含んでもよい。非ヒト抗体の「ヒト化型」は、典型的には、親の非ヒト抗体の特異性および親和性を保持しながら、ヒトに対する免疫原性を低減させるために、ヒト化を受けている非ヒト抗体のバリアントを指す。いくつかの態様において、ヒト化抗体中のいくつかのFR残基は、例えば、抗体の特異性または親和性を回復するかまたは改善するために、非ヒト抗体（例えば、CDR残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換される。
【０１１７】
提供される抗体の中には、ヒト抗体がある。「ヒト抗体」は、ヒトまたはヒト細胞によって生産される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を持つか、ヒト抗体レパートリーまたは他のヒト抗体コード配列（例えばヒト抗体ライブラリー）を利用する非ヒト供給源によって生産される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を持つ抗体である。非ヒト抗原結合領域を含む非ヒト抗体のヒト化型、例えばCDRのすべてまたは実質的にすべてが非ヒトであるものは、この用語から除外される。
【０１１８】
ヒト抗体は、抗原チャレンジに応答してインタクトなヒト抗体またはヒト可変領域を持つインタクトな抗体を生産するように改変されたトランスジェニック動物に、免疫原を投与することによって調製しうる。そのような動物は、典型的には、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部または一部であって、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置き換えているか、染色体外に存在するか、動物の染色体にランダムに組み込まれているものを含有する。そのようなトランスジェニック動物において内因性免疫グロブリン遺伝子座は一般に不活化されている。ヒト抗体は、ヒトレパートリーに由来する抗体コード配列を含有するファージディスプレイおよび無細胞ライブラリーを含むヒト抗体ライブラリーからも誘導されうる。
【０１１９】
提供される抗体の中には、モノクローナル抗体断片を含む、モノクローナル抗体がある。本明細書において使用する「モノクローナル抗体」という用語は、実質上均一な抗体の集団から得られる抗体またはそのような集団内にある抗体を指す。すなわち集団を構成する個々の抗体は、天然の突然変異を含有する変異体またはモノクローナル抗体調製物の生産中に生じる変異体が考えられる点を除けば同一であり、そのような変異体は一般に微量で存在する。典型的には異なるエピトープを指向する異なる抗体を含むポリクローナル調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、ある抗原上の単一エピトープを指向する。この用語は、何らかの特定の方法による抗体の生産を必要とすると解釈してはならない。モノクローナル抗体は、例えば限定するわけではないが、ハイブリドーマからの生成、組換えDNA法、ファージディスプレイ、および他の抗体ディスプレイ法など、様々な技法によって製造されうる。
【０１２０】
検出可能なシグナルを間接的にまたは直接生じさせることができる、標識へ結合された、骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーに対する抗体を含む、抗体イムノコンジュゲートを、さらに提供する。これらの抗体イムノコンジュゲートは、研究または診断適用に使用され得る。標識は、好ましくは、検出可能なシグナルを直接または間接的に生じさせることができる。例えば、標識は、放射線不透過体もしくは放射性同位体、例えば、3H、14C、32P、35S、123I、125I、131I；蛍光（フルオロフォア）もしくは化学発光（クロモフォア）化合物、例えば、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミンもしくはルシフェリン；酵素、例えば、アルカリホスファターゼ、β-ガラクトシダーゼもしくはホースラディッシュペルオキシダーゼ；イメージング剤；または金属イオンであり得る。いくつかの態様において、標識は、シンチグラフィー試験用の放射性原子、例えば、99Tcもしくは123I、または核磁気共鳴(NMR)イメージング（磁気共鳴画像法、MRIとしても公知）用のスピン標識、例えば、ジルコニウム-89、ヨウ素-123、ヨウ素-131、インジウム-111、フッ素-19、炭素-13、窒素-15、酸素-17、ガドリニウム、マンガンもしくは鉄である。ジルコニウム-89は、例えば、PETイメージング用に、様々な金属キレート剤と錯体形成させ、抗体へコンジュゲートさせてもよい（WO 2011/056983）。
【０１２１】
いくつかの態様において、抗体イムノコンジュゲートは間接的に検出可能である。例えば、骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーに対する抗体イムノコンジュゲートに特異的であり、検出可能な標識を含有する、二次抗体が、抗体イムノコンジュゲートを検出するために使用することができる。
【０１２２】
いくつかの態様において、本明細書に提供される、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）を検出することができるか、またはそれに対して特異的である抗体は、様々な公知のアッセイによってそれらの物理的/化学的特性および/または生物学的活性について同定、スクリーニング、または特徴付けされ得る。一局面において、抗体は、例えば、公知の方法、例えば、イムノアッセイ、ELISA、ウェスタンブロット法、および/またはフローサイトメトリーアッセイ（細胞ベースの結合アッセイを含む）によって、その抗原結合活性について試験される。
【０１２３】
II．毒性の症状を処置または改善する介入または薬剤
提供される製造物品または方法は、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる1つまたは複数の薬剤または他の処置に関して使用されるためのものであるか、またはこれらを伴うかもしくは含む。いくつかの場合において、毒性は、神経毒性またはサイトカイン放出症候群(CRS)、任意でグレード1以上の神経毒性またはCRSを含む。いくつかの態様において、毒性は、重篤な神経毒性を含み、かつ/または、グレード2以上の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、少なくとも長期にわたるグレード3の神経毒性を含むか、またはグレード4もしくはグレード5のもしくはそれより上の神経毒性である；および/あるいは、毒性は、重篤なCRSを含み、かつ/または、グレード2以上もしくはグレード3以上のCRSを含む。いくつかの態様において、毒性は、重篤な神経毒性（例えば、グレード3以上の神経毒性）である。いくつかの具体例において、毒性は脳浮腫に関連する。
【０１２４】
A．毒性
1．神経毒性
いくつかの態様において、療法で誘発される毒性アウトカムまたは症状は、神経毒性に関連する。いくつかの態様において、療法で誘発される毒性アウトカムまたは症状は、重篤な神経毒性（例えば、グレード3以上の神経毒性）に関連する。いくつかの態様において、神経毒性の臨床危険性に関連する症状には、錯乱、せん妄、表出性失語、鈍麻、ミオクローヌス、嗜眠、精神状態変化、痙攣、発作様活動、発作（任意で、脳波[EEG]によって確認される）、高レベルのβアミロイド(Aβ)、高レベルのグルタミン酸、および高レベルの酸素ラジカルが含まれる。いくつかの態様において、神経毒性は、（例えば、グレード1〜5スケールを用いて）重症度に基づいてグレード分類される（例えば、Guido Cavaletti & Paola Marmiroli Nature Reviews Neurology 6, 657-666 (December 2010); National Cancer Institute-Common Toxicity Criteria version 4.03 (NCI-CTCAE v4.03)を参照されたい）。いくつかの場合において、神経毒性は重篤な神経毒性であり、かつ/または、神経毒性はグレード3以上の神経毒性である。いくつかの態様において、毒性アウトカムまたは症状は、グレード3、グレード4またはグレード5の神経毒性に関連する。
【０１２５】
いくつかの場合では、神経症状は、sCRSの初発症状であり得る。いくつかの態様において、神経症状は、細胞療法注入から5〜7日後に始まるのが見られる。いくつかの態様において、神経変化の期間は3〜19日間の範囲であり得る。いくつかの場合において、神経変化の回復は、sCRSの他の症状が消散した後に生じる。いくつかの態様において、神経変化の消散の時間または程度は、抗-IL-6および/またはステロイドでの処置によっては促進されない。
【０１２６】
本明細書において用いられる場合、施与後に、対象が、1)末梢運動神経の炎症または変性を含む末梢性運動ニューロパチーの症状；2)末梢感覚神経の炎症または変性を含む末梢性感覚ニューロパチーの症状、ジセステジア、例えば、異常な感覚および不快な感覚の原因となる感覚認知のゆがみ、神経痛、例えば、神経もしくは神経群に沿った激しく痛い感覚、ならびに/またはパレステジア、例えば、刺激の非存在下での刺痛、しびれ、圧力、冷感、および温感の異常な皮膚感覚の原因となる感覚ニューロンの機能障害の中から、セルフケア（例えば、入浴、衣服の着脱、食事、トイレの使用、服薬）を制限する症状を示すのであれば、対象は、細胞療法またはその用量の細胞の施与に応答または付随して「重篤な神経毒性」を発生しているとみなされる。いくつかの態様において、重篤な神経毒性は、グレード3以上の神経毒性、例えば、表1に示した神経毒性を含む。
【０１２７】
（表１）神経毒性の例示的なグレード分類基準
2020522695.tif 000003
【０１２８】
いくつかの態様において、方法は、他の態様または方法と比較して、CNSアウトカムまたは神経毒性に関連する症状を低減する。例えば、本方法に従って処置された対象は、阻害剤が投与されない他の方法によって処置された対象と比較して、四肢脱力または麻痺、記憶、視力および/または知力の低下、制御不能な強迫および/または強制行動、妄想、頭痛、認知的および行動的問題、例えば、運動制御不能、認知低下、および自律神経機能障害、ならびに性機能障害などの、検出可能な神経毒性の症状を欠き得、かつ/または、神経毒性の低減された症状を有し得る。いくつかの態様において、本方法に従って処置された対象は、末梢性運動ニューロパチー、末梢性感覚ニューロパチー、ジセステジア、神経痛またはパレステジアに関連する低減された症状を有し得る。
【０１２９】
いくつかの態様において、方法は、ニューロン死などの、神経系および/または脳に対する損傷を含む神経毒性に関連するアウトカムを低減させる。いくつかの局面において、方法は、βアミロイド(Aβ)、グルタミン酸、および酸素ラジカルなどの、神経毒性に関連する因子のレベルを低減させる。いくつかの態様において、症状またはアウトカムは、神経毒性と共存する脳浮腫である。いくつかの場合において、脳浮腫は、血液脳関門機能およびまたはタイトジャンクション完全性の変化を伴う。
【０１３０】
いくつかの態様において、薬剤の投与は、他の方法と比較して、神経毒性に関連する症状を低減する。例えば、阻害剤で処置された対象は、薬剤を受けないか、または神経毒性の身体的症状が対象において現れた時点で薬剤を受ける対象と比較して、四肢脱力または麻痺、記憶、視力および/または知力の低下、制御不能な強迫および/または強制行動、妄想、頭痛、認知的および行動的問題、例えば、運動制御不能、認知低下、および自律神経機能障害、ならびに性機能障害などの、神経毒性の低減された症状を有し得る。いくつかの態様において、本方法に従って薬剤で処置された対象は、末梢性運動ニューロパチー、末梢性感覚ニューロパチー、ジセステジア、神経痛またはパレステジアに関連する低減された症状を有し得る。
【０１３１】
毒性アウトカムまたは症状は、錯乱、せん妄、表出性失語、鈍麻、ミオクローヌス、嗜眠、精神状態変化、痙攣、発作様活動、発作（任意で、脳波[EEG]によって確認される）、脳浮腫、高レベルのβアミロイド(Aβ)、高レベルのグルタミン酸、および高レベルの酸素ラジカル、脳症、失語症、振戦、舞踏アテトーゼ、セルフケアを制限する症状、末梢性運動ニューロパチーの症状、末梢性感覚ニューロパチーの症状およびそれらの組み合わせのうちの1つまたは複数である。
【０１３２】
いくつかの態様において、治療剤（例えば、細胞療法）の施与の開始後7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29もしくは30日目までのまたは約7、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約21、約22、約23、約24、約25、約26、約27、約28、約29もしくは約30日目までの日での対象における神経毒性の毒性アウトカムまたは症状は、検出可能ではないか、または、細胞療法が薬剤の非存在下で対象に施与される方法と比較して低減する。いくつかの局面において、神経毒性の毒性アウトカムまたは症状は、50％超、60％超、70％超、80％超、90％超またはそれ以上、低減する。
【０１３３】
いくつかの局面において、毒性に関連する身体的徴候もしくは症状は、例えば重篤な神経毒性を含み、錯乱、せん妄、表出性失語、鈍麻、ミオクローヌス、嗜眠、精神状態変化、痙攣、発作様活動、発作（脳波[EEG]によって確認されるような）、脳症、失語症、振戦、舞踏アテトーゼ、セルフケアを制限する症状、末梢性運動ニューロパチーの症状、末梢性感覚ニューロパチーの症状、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの場合において、毒性（例えば、重篤な神経毒性）に関連する身体的徴候もしくは症状は、グレード3、グレード4またはグレード5の神経毒性に関連する。いくつかの態様において、毒性（例えば、重篤な神経毒性）に関連する身体的徴候もしくは症状は、細胞療法後5日を超えてから、細胞療法後6日を超えてからもしくは細胞療法後7日を超えてから、または細胞療法後約5日を超えてから、細胞療法後約6日を超えてからもしくは細胞療法後約7日を超えてから、または細胞療法から約5日後に、細胞療法から約6日後にもしくは細胞療法から約7日後に、現れる。
【０１３４】
いくつかの態様において、方法は、対象が神経毒性の身体的徴候もしくは症状を示した後に重篤な神経毒性が処置される対象と比較して、および/または、細胞療法の施与後5日を超えてから、6日を超えてからもしくは7日を超えてから重篤な神経毒性が処置される対象と比較して、神経毒性、例えば、重篤な神経毒性を改善し、かつ/または、重篤な神経毒性の身体的徴候もしくは症状を低減させる。いくつかの場合において、処置された対象は、グレード3以上の神経毒性を示さないか、または処置された対象の大多数は、グレード3以上の神経毒性を示さない。
【０１３５】
2．サイトカイン放出症候群
いくつかの態様において、毒性アウトカムまたは症状は、サイトカイン放出症候群(CRS)に関連する。いくつかの態様において、CRSは重篤なCRSであり、かつ/または、CRSはグレード3以上のCRSである。いくつかの場合において、毒性アウトカムまたは症状は、発熱、低血圧、低酸素、神経障害、または炎症性サイトカインもしくはC反応性タンパク質(CRP)の上昇した血清レベルのうちの1つまたは複数である。いくつかの態様において、細胞療法の施与の開始後7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29もしくは30日目までのまたは約7、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約21、約22、約23、約24、約25、約26、約27、約28、約29もしくは約30日目までの日での対象におけるCRSの毒性アウトカムまたは症状は、検出可能ではないか、または、細胞療法が薬剤の非存在下で対象に施与される方法と比較して低減する。いくつかの態様において、CRSは、50％超、60％超、70％超、80％超、90％超またはそれ以上、低減する。
【０１３６】
いくつかの局面において、細胞療法などの、療法の毒性アウトカムは、サイトカイン放出症候群(CRS)または重篤なCRS(sCRS)であるかまたはこれらと関連するかまたはこれらを示す。CRS、例えばsCRSは、場合によっては、養子T細胞療法後に、および他の生物製品が対象に投与された後に起こることがある。Davila et al., Sci Transl Med 6, 224ra25 (2014); Brentjens et al., Sci. Transl. Med. 5, 177ra38 (2013); Grupp et al., N. Engl. J. Med. 368, 1509-1518 (2013); およびKochenderfer et al., Blood 119, 2709-2720 (2012); Xu et al., Cancer Letters 343 (2014) 172-78を参照されたい。
【０１３７】
典型的に、CRSは、例えば、T細胞、B細胞、NK細胞、単球、および/またはマクロファージによって媒介される悪化した全身免疫応答によって引き起こされる。このような細胞は、多量の炎症メディエーター、例えば、サイトカインおよびケモカインを放出することがある。サイトカインは急性炎症応答を誘発することがある、および/または微小血管漏出、心不全、もしくは死亡の原因となり得る内皮臓器損傷を誘導することがある。重篤な、命にかかわるCRSは、肺浸潤および肺損傷、腎不全、または播種性血管内凝固につながる可能性がある。他の重篤な、命にかかわる毒性には、心毒性、呼吸窮迫、神経毒性、および/または肝不全が含まれ得る。
【０１３８】
CRSのアウトカム、徴候および症状は、公知であり、本明細書に記載されるものを含む。いくつかの態様において、特定の投薬レジメンまたは投与が所定のCRS関連アウトカム、徴候または症状をもたらすかまたはもたらさない場合、特定のアウトカム、徴候および症状ならびに/またはその量もしくは程度が明示され得る。
【０１３９】
CAR発現細胞の投与の状況では、CRS、例えば重篤なCRSは、典型的には、CARを発現する細胞を注入して6〜20日後に起こる。Xu et al., Cancer Letters 343 (2014) 172-78を参照されたい。場合によっては、CRSは、CAR T細胞の注入後、6日未満または20日を超える時点で起こる。CRSの発生率およびタイミングは注入時のベースラインサイトカインレベルまたは腫瘍負荷量と関係する場合がある。一般的に、CRSは、インターフェロン(IFN)-γ、腫瘍壊死因子(TNF)-α、および/またはインターロイキン(IL)-2の血清レベルの上昇を伴う。CRSにおいて迅速に誘導され得る他のサイトカインは、IL-1β、IL-6、IL-8、およびIL-10である。
【０１４０】
どの患者が、sCRSを発生する危険性がある可能性がより高いかを予測するために、CRSの発症と相関するように思われるCRS判断基準が開発されている（Davilla et al. Science translational medicine. 2014;6(224):224ra25を参照されたい）。因子には、発熱、低酸素、低血圧、神経変化、処置によって誘導される上昇が処置前の腫瘍負荷量およびsCRS症状の両方とよい相関を示すことができる炎症性サイトカイン、例えば7つのサイトカインのセット（IFNγ、IL-5、IL-6、IL-10、Flt-3L、フラクタルカイン、およびGM-CSF）の血清レベルの上昇が含まれる。CRSの診断および管理に関する他のガイドラインは公知である（例えば、Lee et al, Blood. 2014;124(2):188-95を参照されたい）。いくつかの態様において、CRSグレードを反映する判断基準は、以下の表2に詳述した判断基準である。
【０１４１】
（表２）CRSの例示的なグレード分類基準
2020522695.tif 000004
【０１４２】
本明細書において用いられる場合、施与後に、対象が、(1)少なくとも3日間の少なくとも38℃の発熱；(2)(a)施与直後のレベルと比較しての以下の群の7つのサイトカインのうちの少なくとも2つについての少なくとも75の最大倍率変化：インターフェロンガンマ(IFNγ)、GM-CSF、IL-6、IL-10、Flt-3L、フラクタルカイン、およびIL-5、ならびに/または、(b)施与直後のレベルと比較しての以下の群の7つのサイトカインのうちの少なくとも1つについての少なくとも250の最大倍率変化：インターフェロンガンマ(IFNγ)、GM-CSF、IL-6、IL-10、Flt-3L、フラクタルカイン、およびIL-5、のいずれかを含むサイトカイン上昇；ならびに(c)毒性の少なくとも1つの臨床徴候、例えば、低血圧（少なくとも1種類の静脈内血管作動性昇圧薬(intravenous vasoactive pressor)を必要とする）、または低酸素（PO2 < 90％）、または1つまたは複数の神経障害（精神状態変化、鈍麻、および/または発作を含む）を示すのであれば、対象は、細胞療法またはその用量の細胞の施与に応答または付随して「重篤なCRS」（「sCRS」）を発生しているとみなされる。いくつかの態様において、重篤なCRSは、3以上のグレードを有するCRSを含む。
【０１４３】
いくつかの態様において、重篤なCRSまたはグレード3 CRSに関連するアウトカムとしては、以下のうちの1つまたは複数を含む：持続性の発熱、例えば、2日以上、例えば、3日以上、例えば、4日以上にわたる、または少なくとも3日間連続した、指定された温度の発熱、例えば、38℃または約38℃を超える発熱；38℃または約38℃を超える発熱；サイトカインの上昇、例えば、少なくとも2つのサイトカイン（例えば、インターフェロンガンマ(IFNγ)、GM-CSF、IL-6、IL-10、Flt-3L、フラクタルカイン、およびIL-5、ならびに/または腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)からなる群のうちの少なくとも2つ）の治療前レベルと比較しての、例えば少なくとも75または少なくとも約75の、最大倍率変化、あるいは、例えば、そのようなサイトカインのうちの少なくとも1つの少なくとも250または少なくとも約250の、最大倍率変化；ならびに/あるいは、毒性の少なくとも1つの臨床徴候、例えば、低血圧（例えば、少なくとも1種類の静脈内血管作動性昇圧薬によって測定した時）；低酸素（例えば、90％未満または約90％未満の血漿酸素(PO2)レベル）；ならびに/あるいは、1つまたは複数の神経障害（精神状態変化、鈍麻、および発作を含む）。
【０１４４】
いくつかの態様において、重篤なCRSは、(1)持続性の発熱（少なくとも3日にわたる少なくとも38℃の発熱）および(2)少なくとも20 mg/dLまたは少なくとも約20 mg/dLのCRPの血清レベルの組み合わせを包含する。いくつかの態様において、重篤なCRSは、2種類以上の昇圧薬の使用を必要とする低血圧、または機械換気を必要とする呼吸不全を包含する。
【０１４５】
いくつかの態様において、対象は熱を示し、いくつかの局面において、対象がそのような熱を示しかつ/または特定の期間の間熱を示すかもしくは示したことがある時に処置される。
【０１４６】
いくつかの態様において、対象における熱は、特定の閾値温度もしくはレベルにあるかまたはこれを上回る（または特定の閾値温度もしくはレベルにあるかまたはこれを上回ると測定される）、対象の体温として特徴付けられる。いくつかの局面において、閾値温度は、少なくとも微熱、少なくとも中程度の熱、および/または少なくとも高熱と関連するものである。いくつかの態様において、閾値温度は特定の温度または範囲である。例えば、閾値温度は、38、39、40、41、もしくは42℃、または約38、約39、約40、約41、もしくは約42℃であり得、かつ/または、38℃〜39℃もしくは約38℃〜約39℃の範囲、39℃〜40℃もしくは約39℃〜約40℃の範囲、40℃〜41℃もしくは約40℃〜約41℃の範囲、または41℃〜42℃もしくは約41℃〜約42℃の範囲であり得る。
【０１４７】
いくつかの態様において、熱は稽留熱であり；いくつかの局面において、対象が稽留熱を有すると判定された時に、例えば、疾患標的療法のような、毒性を誘発する可能性を有する最初の療法に続いてのそのような判定のまたは第1のそのような判定の1時間、2時間、3時間、4時間、5時間、6時間、またはより短時間以内に、対象を処置する。
【０１４８】
いくつかの態様において、対象が関連の閾値温度であるかまたはこれを上回る熱を示し、ここで、対象の熱または体温が約1℃または約1℃を超えて変動せず、一般に、約0.5℃、0.4℃、0.3℃もしくは0.2℃または約0.5℃、0.4℃、0.3℃もしくは0.2℃を超えて変動しない場合、対象は、稽留熱を有し、かつ/または、稽留熱を有すると判定されるかもしくは見なされる。ある量のまたはある量を上回るそのような変動の非存在は、一般に、所定の期間にわたって（例えば、示される閾値を上回る第1温度または熱の第1徴候から測定され得る、24時間、12時間、8時間、6時間、3時間、または1時間の期間にわたって）測定される。例えば、いくつかの態様において、対象が少なくとも38℃もしくは少なくとも39℃または少なくとも約38℃もしくは少なくとも約39℃の熱を示し、この熱が、6時間の期間にわたって、8時間の期間にわたって、または12時間の期間にわたって、または24時間の期間にわたって、0.5℃、0.4℃、0.3℃もしくは0.2℃を超えてまたは約0.5℃、約0.4℃、約0.3℃もしくは約0.2℃を超えて温度変動しない場合、対象は、稽留熱を示すと見なされるかまたは判定される。
【０１４９】
いくつかの態様において、対象が関連の閾値温度であるかまたはこれを上回る熱を示し、ここで、解熱薬での処置のような、熱を低下させるように設計された処置のような、指定の処置に続いて、対象の熱または体温が低下しないかまたは指定量もしくは指定量を超えて低下しない（例えば、1℃を超えて；一般に、約0.5℃、0.4℃、0.3℃もしくは0.2℃または約0.5℃、0.4℃、0.3℃もしくは0.2℃を超えて変動しない）場合、対象は、稽留熱を有し、かつ/または、稽留熱を有すると判定されるかもしくは見なされる。解熱薬は、熱を低下させる、任意の薬剤、例えば、化合物、組成物、または成分、例えば、解熱効果を有することが公知の任意の数の薬剤のうちの1つ、例えば、NSAID（例えば、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトプロフェン、およびニメスリド）、サリチラート、例えば、アスピリン、サリチル酸コリン、サリチル酸マグネシウム、およびサリチル酸ナトリウム、パラセタモール、アセトアミノフェン、メタミゾール、ナブメトン、フェナキソン（Phenaxone）、アンチピリン、解熱剤を含み得る。いくつかの態様において、解熱薬はアセトアミノフェンである。いくつかの態様において、それは、イブプロフェンまたはアスピリンであるかまたはこれらを含む。例えば、タイレノールのような解熱薬での処置後であってさえ、6時間の期間にわたって、8時間の期間にわたって、または12時間の期間にわたって、または24時間の期間にわたって、低下しないか、または、0.5℃、0.4℃、0.3℃もしくは0.2℃を超えてまたは約0.5℃、約0.4℃、約0.3℃もしくは約0.2℃を超えて、または、1％、2％、3％、4％もしくは5％または約1％、約2％、約3％、約4％もしくは約5％低下しない、少なくとも38℃もしくは少なくとも39℃または少なくとも約38℃もしくは少なくとも約39℃の熱を対象が示すかまたは示すと判定される場合、対象は稽留熱を有すると見なされる。いくつかの態様において、解熱薬の投薬量は、熱、または、細菌もしくはウイルス感染症、例えば、限局性もしくは全身性感染症と関連する熱のような特定のタイプの熱を低下させるためにそのような対象において通常有効な投薬量である。
【０１５０】
いくつかの態様において、CRSの改善は、IFNγ、GM-CSF、TNFα、IL-6、IL-10、IL-1β、IL-8、IL-2、MIP-1、Flt-3L、フラクタルカイン、およびIL-5のような、血清因子および炎症性サイトカインを含む、CRSを示すバイオマーカーを評価することによって判定される。いくつかの態様において、CRSバイオマーカーの評価またはモニタリングは、細胞療法の施与時および/または細胞療法の施与後に行われる。
【０１５１】
いくつかの局面において、バイオマーカーの検出は、インビトロアッセイを行うことを含む。いくつかの態様において、インビトロアッセイは、イムノアッセイ、アプタマーベースのアッセイ、組織学的もしくは細胞学的アッセイ、またはmRNA発現レベルアッセイである。いくつかの態様において、1つまたは複数のバイオマーカーの各々のうちの1つまたは複数についての1つまたは複数のパラメータは、酵素結合免疫測定法(ELISA)、イムノブロッティング、免疫沈降、ラジオイムノアッセイ(RIA)、免疫染色、フローサイトメトリーアッセイ、表面プラズモン共鳴(SPR)、化学ルミネセンスアッセイ、ラテラルフローイムノアッセイ、阻害アッセイ、またはアビディティアッセイによって検出される。
【０１５２】
いくつかの態様において、1つまたは複数のバイオマーカーのうちの少なくとも1つについてのパラメータは、少なくとも1つのバイオマーカーへ特異的に結合する結合試薬を使用して決定される。いくつかの場合において、結合試薬は、抗体もしくはその抗原結合断片、アプタマーまたは核酸プローブである。
【０１５３】
B．介入
いくつかの例において、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる薬剤または他の処置を、遺伝子操作された細胞を含む治療用細胞組成物の投与の前におよび/またはそれと同時に、施与する。いくつかの例において、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる薬剤または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i)開始の前に、(ii)開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii)開始と同時に、および/または、(iv)開始の後の最初の発熱時に、施与する。
【０１５４】
薬剤または処置は、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカー（例えば、CD14）のもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）における評価の後にまたはその結果に基づいて施与される。例えば、評価は、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接的にまたは間接的に検出することができる試薬を、生体試料と接触させる工程、ならびに、生体試料におけるマーカーおよび/またはレベルが陽性の（任意で表面陽性の）細胞のパーセンテージまたは数を決定する工程によるような、検出を含む。いくつかの態様において、閾値レベルは、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または、試料における集団の、マーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数に基づいて決定される。いくつかの局面において、閾値レベルは、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％もしくは60％であるかまたは約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％もしくは約60％である、生体試料または血液もしくはアフェレーシス試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセントである。いくつかの場合において、閾値レベルは、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％もしくは60％であるかまたは約45％、約46％、約47％、約48％、約49％、約50％、約51％、約52％、約53％、約54％、約55％、約56％、約57％、約58％、約59％もしくは約60％である、生体試料における骨髄系マーカーが表面陽性の細胞のパーセントである。いくつかの態様において、パーセンテージは、試料における、総白血球もしくは総CD45+細胞またはその生存細胞の中の、骨髄系細胞集団のまたは骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージである。いくつかの場合において、パーセンテージは、試料における、総白血球もしくはCD45+細胞またはその生存細胞の中の、骨髄系細胞集団または骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージである。いくつかの例において、パーセンテージは、総白血球またはCD45+細胞の中のCD14+細胞のパーセンテージである。
【０１５５】
いくつかの場合において、閾値レベルは、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られた生体試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均パーセントもしくは数の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内もしくは5％以内であり、かつ/または、平均パーセントもしくは数の標準偏差以内である、閾値レベルであり、ここで、その群の対象の各々は、同じ疾患または状態を処置するための組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に、続けて毒性を発生した。
【０１５６】
いくつかの態様において、生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）と、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）を検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬とを接触させる工程を含む、処置のために対象を選択するための方法を提供する。方法のいくつかの態様において、生体試料は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する細胞療法での処置についての候補である対象に由来し、かつ、生体試料は、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または、該生体試料は、組換え受容体および/または該操作された細胞を含まない。いくつかの態様において、方法はまた、以下のいずれかの対象を選択する工程を含む：試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、記載されるような閾値レベルまたはそれよりも上であり、それによって、細胞療法に対する毒性を発生する危険性がある対象を特定する；または、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルより下である。
【０１５７】
いくつかの態様において、方法は、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる薬剤または他の処置および(2)細胞療法の施与のための対象の選択を可能にし、ここで、薬剤の投与は、対象に対する細胞療法の施与の(i)開始の前に、(ii)開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii)開始と同時に、および/または、(iv)開始の後の最初の発熱時に、投与される。
【０１５８】
いくつかの態様において、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる、薬剤（例えば、毒性ターゲティング剤）または処置は、ステロイドであるか、IL-6受容体、CD122受容体（IL-2Rベータ受容体）、もしくはCCR2のような、サイトカイン受容体のアンタゴニストもしくは阻害剤であるか、または、IL-6、MCP-1、IL-10、IFN-γ、IL-8、もしくはIL-18のような、サイトカインの阻害剤である。いくつかの態様において、薬剤は、サイトカイン受容体および/またはサイトカイン（例えばTGF-β）のアゴニストである。いくつかの態様において、薬剤、例えば、アゴニスト、アンタゴニストまたは阻害剤は、抗体もしくは抗原結合断片、小分子、タンパク質もしくはペプチド、または核酸である。
【０１５９】
いくつかの態様において、流体ボーラスが、例えば、CRSに関連する低血圧を処置するために、介入として用いられ得る。いくつかの態様において、標的ヘマトクリットレベルは>24％である。いくつかの態様において、介入は、血液または血漿濾過を伴う吸収性樹脂技術の使用を含む。いくつかの場合において、介入は、透析、プラスマフェレーシス、または同様の技術を含む。いくつかの態様において、昇圧剤またはアセトアミノフェンが用いられ得る。
【０１６０】
いくつかの態様において、薬剤は、連続的に、断続的に、または、養子細胞療法用の細胞のような、療法と同時にもしくは療法と同じ組成物で、投与され得る。例えば、薬剤は、免疫療法および/または細胞療法の施与前に、施与中に、施与と同時に、または施与後に、投与され得る。
【０１６１】
いくつかの態様において、薬剤は、本明細書に記載されるような時に、かつ、提供される方法に従って、投与される。いくつかの態様において、毒性ターゲティング剤は、免疫療法および/または細胞療法の開始後3、4、5、6、7、8、9または10日以内、例えば、未満であるまたは超えない時に、投与される。いくつかの態様において、毒性ターゲティング剤は、免疫療法および/または細胞療法の施与の開始後1日、2日もしくは3日以内にまたは約1日、約2日もしくは約3日以内に、投与される。
【０１６２】
いくつかの態様において、薬剤、例えば、毒性ターゲティング剤を、免疫療法および/または細胞療法の施与の開始後、対象がグレード2以上のCRSもグレード2以上の神経毒性も示さない時に、対象へ投与する。いくつかの局面において、毒性ターゲティング剤を、免疫療法および/または細胞療法の施与の開始後、対象が重篤なCRSも重篤な神経毒性も示さない時に、投与する。従って、免疫療法および/または細胞療法の施与の開始と毒性ターゲティング剤との間で、対象は、グレード2以上のCRS、例えば重篤なCRSを示さない、かつ/またはグレード2以上の神経毒性、例えば重篤な神経毒性を示さない、対象である。
【０１６３】
重篤なCRS(sCRS)のような、毒性を処置または改善するための介入の非限定的な例を、表3に記載する。いくつかの態様において、介入は、記載されるようなトシリズマブまたは他の毒性ターゲティング剤を含み、これは、対象において38℃を超えるもしくは約38℃を超えるまたは39℃を超えるもしくは約39℃を超える稽留熱または持続熱が存在する時であり得る。いくつかの態様において、熱は、介入前に、10時間を超えて、12時間を超えて、16時間を超えて、または24時間を超えて、対象において継続する。
【０１６４】
（表３）毒性を処置または改善するための介入の例
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【０１６５】
いくつかの場合において、薬剤または処置は、単独で施与されるか、または、本明細書に記載されるような、薬学的組成物または製剤などの、組成物または製剤の一部として施与される。従って、単独のまたは薬学的組成物の一部としての薬剤が、静脈内にもしくは経口的に、または任意の他の許容される公知の投与経路によってまたは本明細書に記載されるように、投与され得る。
【０１６６】
いくつかの態様において、投薬レジメンにおける薬剤の投薬量または薬剤の投与頻度は、グレード2以上のCRSもしくは神経毒性が発生したもしくは診断された後に、例えば、重篤な、例えば、グレード3以上のCRSが発生したもしくは診断された後に、または重篤な、例えば、グレード3以上の神経毒性が発生したもしくは診断された後に（例えば、グレード3以上のCRSもしくは神経毒性の身体的徴候もしくは症状が発現した後に）、対象が薬剤で処置される方法における薬剤の投薬量またはその頻度と比較して、低減する。いくつかの態様において、投薬レジメンにおける薬剤の投薬量または薬剤の投与頻度は、免疫療法および/または細胞療法の施与後3日、4日、5日、6日、1週間、2週間、3週間、またはそれ以上を超えて、CRSまたは神経毒性について対象が処置される方法における薬剤の投薬量またはその頻度と比較して、低減する。いくつかの態様において、投薬量は、1.2倍、1.5倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍もしくはそれ以上を超えて、または約1.2倍、約1.5倍、約2倍、約3倍、約4倍、約5倍、約6倍、約7倍、約8倍、約9倍、約10倍もしくはそれ以上を超えて、低減する。いくつかの態様において、投薬量は、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％もしくはそれ以上を超えて、または約10％、約20％、約30％、約40％、約50％、約60％、約70％、約80％、約90％もしくはそれ以上を超えて、低減する。いくつかの態様において、投薬頻度が低減し、例えば、日用量の数が低減し、または投薬の日数が低減する。
【０１６７】
C．毒性ターゲティング剤
いくつかの態様において、免疫療法および/または細胞療法に対する毒性の発生またはその発生の危険性を、処置する、かつ/または、阻止する、遅らせる、または減衰させる、薬剤、例えば、毒性ターゲティング剤は、ステロイド、例えば、コルチコステロイドである。コルチコステロイドは、典型的に、グルココルチコイドおよびミネラルコルチコイドを含む。
【０１６８】
任意のコルチコステロイド、例えば、グルココルチコイドが、本明細書に提供される方法において使用することができる。いくつかの態様において、グルココルチコイドは合成および非合成グルココルチコイドを含む。例示的なグルココルチコイドとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：アルクロメタゾン、アルゲストン、ベクロメタゾン（例えば、ジプロピオン酸ベクロメタゾン）、ベタメタゾン（例えば、17-吉草酸ベタメタゾン、酢酸ベタメタゾンナトリウム、リン酸ベタメタゾンナトリウム、吉草酸ベタメタゾン）、ブデソニド、クロベタゾール（例えば、プロピオン酸クロベタゾール）、クロベタゾン、クロコルトロン（例えば、ピバル酸クロコルトロン）、クロプレドノール、コルチコステロン、コルチゾンおよびヒドロコルチゾン（例えば、酢酸ヒドロコルチゾン）、コルチバゾール、デフラザコルト、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン（例えば、21-リン酸デキサメタゾン、酢酸デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム）、ジフロラゾン（例えば、二酢酸ジフロラゾン）、ジフルコルトロン、ジフルプレドナート、エノキソロン、フルアザコート、フルクロロニド、フルドロコルチゾン（例えば、酢酸フルドロコルチゾン）、フルメタゾン（例えば、ピバル酸フルメタゾン）、フルニソリド、フルオシノロン（例えば、フルオシノロンアセトニド）、フルオシノニド、フルオコルチン、フルオコルトロン、フルオロメトロン（例えば、酢酸フルオロメトロン）、フルペロロン（例えば、酢酸フルペロロン）、フルプレドニデン、フルプレドニゾロン、フルランドレノリド、フルチカゾン（例えば、プロピオン酸フルチカゾン）、ホルモコルタール、ハルシノニド、ハロベタゾール、ハロメタゾン、ハロプレドン、ヒドロコルタマート、ヒドロコルチゾン（例えば、21-酪酸ヒドロコルチゾン、アセポン酸ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾンブテプラート、酪酸ヒドロコルチゾン、シピオン酸ヒドロコルチゾン、ヘミコハク酸ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾンプロブタート（hydrocortisone probutate）、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、吉草酸ヒドロコルチゾン）、エタボン酸ロテプレドノール、マジプレドン、メドリゾン、メプレドニゾン、メチルプレドニゾロン（アセポン酸メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、ヘミコハク酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム）、モメタゾン（例えば、フロ酸モメタゾン）、パラメタゾン（例えば、酢酸パラメタゾン）、プレドニカルバート、プレドニゾロン（例えば、プレドニゾロン25-ジエチルアミノアセタート、リン酸プレドニゾロンナトリウム、21-ヘミコハク酸プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン；ファルネシル酸プレドニゾロン、ヘミコハク酸プレドニゾロン、プレドニゾロン-21(β-D-グルクロニド)、メタスルホ安息香酸プレドニゾロン、プレドニゾロンステアグラート、テブト酸プレドニゾロン、テトラヒドロフタル酸プレドニゾロン）、プレドニゾン、プレドニバール、プレドニリデン、リメキソロン、チキソコルトール、トリアムシノロン（例えば、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンベネトニ��、トリアムシノロンヘキサアセトニド、トリアムシノロンアセトニド21-パルミタート、二酢酸トリアムシノロン）。これらのグルココルチコイドおよびそれらの塩は、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, A. Osol, ed., Mack Pub. Co., Easton, Pa. (16th ed. 1980)において詳細に議論されている。
【０１６９】
いくつかの例において、グルココルチコイドは、コルチゾン、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロンおよびプレドニゾンの中より選択される。特定の例において、グルココルチコイドはデキサメタゾンである。
【０１７０】
いくつかの態様において、薬剤は、コルチコステロイドであり、CRSまたは神経毒性のような、免疫療法および/または細胞療法に対する毒性の1つまたは複数の症状を処置する、改善するまたは低減させるために治療的有効である量で投与する。いくつかの態様において、改善または成功した処置の指標は、毒性等級分けスケール（例えば、CRSまたは神経毒性等級分けスケール）上の関連スコアを示さないこと、例えば、3未満のスコア、の決定、または、本明細書において議論されるような等級分けスケールにおける等級分けもしくは重症度の変化、例えば、スコア4からスコア3への変化、またはスコア4からスコア2、1もしくは0への変化を含む。
【０１７１】
いくつかの局面において、コルチコステロイドは治療的有効用量で提供される。治療的有効濃度は、公知のインビトロまたはインビボ（例えば、動物モデル）系において試験することによって経験的に決定することができる。例えば、CRSまたは神経毒性のような、免疫療法および/または細胞療法に対する毒性の症状または有害効果を改善するために投与される選択されたコルチコステロイドの量は、標準臨床技術によって決定することができる。さらに、最適な投薬量範囲の特定を助けるために、動物モデルを用いることができる。経験的に決定することができる、正確な投薬量は、特定の治療用調製物、レジメンおよび投薬計画、投与経路、ならびに疾患の重篤度に依存し得る。
【０１７２】
コルチコステロイドは、毒性に関連する、例えば、CRSまたは神経毒性に関連する、1つまたは複数の症状を改善するために有効である任意の量で投与され得る。コルチコステロイド、例えば、グルココルチコイドは、例えば、1用量当たり、0.1〜100 mg、0.1〜80 mg、0.1〜60 mg、0.1〜40 mg、0.1〜30 mg、0.1〜20 mg、0.1〜15 mg、0.1〜10 mg、0.1〜5 mg、0.2〜40 mg、0.2〜30 mg、0.2〜20 mg、0.2〜15 mg、0.2〜10 mg、0.2〜5 mg、0.4〜40 mg、0.4〜30 mg、0.4〜20 mg、0.4〜15 mg、0.4〜10 mg、0.4〜5 mg、0.4〜4 mg、1〜20 mg、1〜15 mgもしくは1〜10 mg、または約0.1〜100 mg、約0.1〜80 mg、約0.1〜60 mg、約0.1〜40 mg、約0.1〜30 mg、約0.1〜20 mg、約0.1〜15 mg、約0.1〜10 mg、約0.1〜5 mg、約0.2〜40 mg、約0.2〜30 mg、約0.2〜20 mg、約0.2〜15 mg、約0.2〜10 mg、約0.2〜5 mg、約0.4〜40 mg、約0.4〜30 mg、約0.4〜20 mg、約0.4〜15 mg、約0.4〜10 mg、約0.4〜5 mg、約0.4〜4 mg、約1〜20 mg、約1〜15 mgもしくは約1〜10 mgの量で、70 kgの成人ヒト対象へ投与され得る。典型的に、コルチコステロイド、例えば、グルココルチコイドは、1用量当たり、0.4〜20 mgまたは約0.4〜20 mg、例えば、0.4 mg、0.5 mg、0.6 mg、0.7 mg、0.75 mg、0.8 mg、0.9 mg、1 mg、2 mg、3 mg、4 mg、5 mg、6 mg、7 mg、8 mg、9 mg、10 mg、11 mg、12 mg、13 mg、14 mg、15 mg、16 mg、17 mg、18 mg、19 mgもしくは20 mg、または約0.4 mg、約0.5 mg、約0.6 mg、約0.7 mg、約0.75 mg、約0.8 mg、約0.9 mg、約1 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mgもしくは約20 mgの量で、平均的な成人ヒト対象へ投与される。
【０１７３】
いくつかの態様において、コルチコステロイドを、例えば、0.001 mg/kg(対象の)、0.002 mg/kg、0.003 mg/kg、0.004 mg/kg、0.005 mg/kg、0.006 mg/kg、0.007 mg/kg、0.008 mg/kg、0.009 mg/kg、0.01 mg/kg、0.015 mg/kg、0.02 mg/kg、0.025 mg/kg、0.03 mg/kg、0.035 mg/kg、0.04 mg/kg、0.045 mg/kg、0.05 mg/kg、0.055 mg/kg、0.06 mg/kg、0.065 mg/kg、0.07 mg/kg、0.075 mg/kg、0.08 mg/kg、0.085 mg/kg、0.09 mg/kg、0.095 mg/kg、0.1 mg/kg、0.15 mg/kg、0.2 mg/kg、0.25 mg/kg、0.30 mg/kg、0.35 mg/kg、0.40 mg/kg、0.45 mg/kg、0.50 mg/kg、0.55 mg/kg、0.60 mg/kg、0.65 mg/kg、0.70 mg/kg、0.75 mg/kg、0.80 mg/kg、0.85 mg/kg、0.90 mg/kg、0.95 mg/kg、1 mg/kg、1.05 mg/kg、1.1 mg/kg、1.15 mg/kg、1.20 mg/kg、1.25 mg/kg、1.3 mg/kg、1.35 mg/kgもしくは1.4 mg/kg、または約0.001 mg/kg(対象の)、約0.002 mg/kg、約0.003 mg/kg、約0.004 mg/kg、約0.005 mg/kg、約0.006 mg/kg、約0.007 mg/kg、約0.008 mg/kg、約0.009 mg/kg、約0.01 mg/kg、約0.015 mg/kg、約0.02 mg/kg、約0.025 mg/kg、約0.03 mg/kg、約0.035 mg/kg、約0.04 mg/kg、約0.045 mg/kg、約0.05 mg/kg、約0.055 mg/kg、約0.06 mg/kg、約0.065 mg/kg、約0.07 mg/kg、約0.075 mg/kg、約0.08 mg/kg、約0.085 mg/kg、約0.09 mg/kg、約0.095 mg/kg、約0.1 mg/kg、約0.15 mg/kg、約0.2 mg/kg、約0.25 mg/kg、約0.30 mg/kg、約0.35 mg/kg、約0.40 mg/kg、約0.45 mg/kg、約0.50 mg/kg、約0.55 mg/kg、約0.60 mg/kg、約0.65 mg/kg、約0.70 mg/kg、約0.75 mg/kg、約0.80 mg/kg、約0.85 mg/kg、約0.90 mg/kg、約0.95 mg/kg、約1 mg/kg、約1.05 mg/kg、約1.1 mg/kg、約1.15 mg/kg、約1.20 mg/kg、約1.25 mg/kg、約1.3 mg/kg、約1.35 mg/kgもしくは約1.4 mg/kgの投薬量で、典型的に約70 kg〜75 kgの体重の、平均的な成人ヒト対象へ、投与することができる。
【０１７４】
コルチコステロイド、またはグルココルチコイド、例えば、デキサメタゾンは、経口的に（錠剤、液体もしくは液体濃縮物）、PO、静脈内に(IV)、筋肉内に、または（例えば薬学的製剤に関して）任意の他の公知の経路もしくは本明細書に記載される経路によって、投与することができる。いくつかの局面において、コルチコステロイドはボーラスとして投与され、他の局面において、それは一定期間にわたって投与され得る。
【０１７５】
いくつかの局面において、グルココルチコイドは、1日を超える期間にわたって、例えば、2日間にわたって、3日間にわたって、または4日間にわたって、またはそれより長い期間にわたって、投与され得る。いくつかの態様において、コルチコステロイドは、1日当たり1回、1日当たり2回、または1日当たり3回もしくはそれ以上、投与され得る。例えば、コルチコステロイド、例えば、デキサメタゾンは、いくつかの例において、3日間、1日2回、10 mg（または等価）IVで投与され得る。
【０１７６】
いくつかの態様において、コルチコステロイド、例えば、グルココルチコイドの投薬量は、処置につき連続的により低い投薬量で投与される。従って、いくつかのそのような処置レジメンにおいて、コルチコステロイドの用量は先細りとなる。例えば、コルチコステロイドは、4 mgの初回用量（または、デキサメタゾンを参照してのような、等価用量）で投与され得、それぞれの連続投与時に、用量が次の投与については3 mg、次の投与については2 mg、そして次の投与については1 mgであるように、用量は低下され得る。
【０１７７】
一般に、投与されるコルチコステロイドの用量は、異なるコルチコステロイド間に効能の差が存在するため、特定のコルチコステロイドに依存する。典型的に、薬物は効能が異なり、従って、等価効果を得るためには用量が変わり得ることが理解される。表4は、様々なグルココルチコイドおよび投与経路についての効能による等価を示す。臨床投薬における等価効能は周知である。等価なステロイド投薬に関する情報（非時間治療様式）は、British National Formulary (BNF) 37, March 1999に見られ得る。
【０１７８】
（表４）グルココルチコイド投与
2020522695.tif 000006
【０１７９】
従って、いくつかの態様において、ステロイドを、1.0 mg〜20 mgデキサメタゾン/日、例えば、1.0 mg〜15 mgデキサメタゾン/日、1.0 mg〜10 mgデキサメタゾン/日、2.0 mg〜8 mgデキサメタゾン/日、もしくは2.0 mg〜6.0 mgデキサメタゾン/日、または約1.0 mg〜20 mgデキサメタゾン/日、例えば、約1.0 mg〜15 mgデキサメタゾン/日、約1.0 mg〜10 mgデキサメタゾン/日、約2.0 mg〜8 mgデキサメタゾン/日、もしくは約2.0 mg〜6.0 mgデキサメタゾン/日（各々を包含）の等価投薬量で投与する。いくつかの場合において、ステロイドを、4 mgもしくは約4 mgまたは8 mgもしくは約8 mgデキサメタゾン/日の等価用量で投与する。
【０１８０】
いくつかの態様において、ステロイドが、トシリズマブでの処置後に熱が持続する場合、投与される。例えば、いくつかの態様において、デキサメタゾンが、持続熱を伴って、最高で6〜12時間毎に、5〜10 mgの投薬量で、経口または静脈内投与される。いくつかの態様において、トシリズマブが、酸素補給と同時にまたは酸素補給後に投与される。
【０１８１】
いくつかの態様において、薬剤はミクログリア細胞活性の阻害剤である。いくつかの態様において、阻害剤の投与は、ミクログリアの活性を調節する。いくつかの態様において、阻害剤は、ミクログリア中におけるシグナル伝達経路の活性を阻害するアンタゴニストである。いくつかの態様において、ミクログリア阻害剤は、ミクログリア恒常性、生存、および/または増殖に影響を与える。いくつかの態様において、阻害剤はCSF1Rシグナル伝達経路を標的とする。いくつかの態様において、阻害剤はCSF1Rの阻害剤である。いくつかの態様において、阻害剤は小分子である。いくつかの場合において、阻害剤は抗体である。
【０１８２】
いくつかの局面において、阻害剤の投与は、ミクログリア恒常性および生存能力の変化、ミクログリア細胞増殖の減少もしくは遮断、ミクログリア細胞の低減もしくは排除、ミクログリア活性化の低減、ミクログリアからの一酸化窒素産生の低減、ミクログリア中の一酸化窒素シンターゼ活性の低減、またはミクログリア活性化によって影響される運動ニューロンの保護より選択される1つまたは複数の効果をもたらす。いくつかの態様において、薬剤は、阻害剤の投与の開始直前の時点と比較して、CSF1R阻害の血清または血液バイオマーカーのレベルを変化させるか、または、尿中1型コラーゲン架橋N-テロペプチド(NTX)のレベルを減少させる。いくつかの態様において、薬剤の投与はミクログリア活性の活性を一時的に阻害し、かつ/または、ここで、ミクログリア活性の阻害は永久でない。いくつかの態様において、薬剤の投与はCSF1Rの活性を一時的に阻害し、かつ/または、ここで、CSF1R活性の阻害は永久でない。
【０１８３】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、小分子、ペプチド、タンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、抗体模倣薬、アプタマー、または核酸分子である。いくつかの態様において、方法は、ミクログリア活性の阻害剤の投与を伴う。いくつかの態様において、薬剤は、ミクログリア中におけるシグナル伝達経路の活性を阻害するアンタゴニストである。いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、ミクログリア恒常性、生存、および/または増殖に影響を与える。
【０１８４】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、抗炎症剤、NADPHオキシダーゼ(NOX2)の阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬、ナトリウムチャネル遮断薬より選択され、GM-CSFを阻害し、CSF1Rを阻害し、CSF-1に特異的に結合し、IL-34に特異的に結合し、核因子κB(NF-κB)の活性化を阻害し、CB2受容体を活性化し、かつ/またはCB2アゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤であり、マイクロRNA-155(miR-155)を阻害し、マイクロRNA-124(miR-124)を上方制御し、ミクログリア中における一酸化窒素産生を阻害し、一酸化窒素シンターゼを阻害し、または転写因子NRF2（核因子(赤血球由来2)様2、もしくはNFE2L2とも呼ばれる）を活性化する。
【０１８５】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、CSF1（マクロファージコロニー刺激因MCSFとも呼ばれる）を標的とする。いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、M-CSF受容体のMCSF刺激リン酸化に影響を与える（Pryer et al. Proc Am Assoc Cancer Res, AACR Abstract nr DDT02-2 (2009)）。いくつかの場合において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、MCS110である（国際特許出願公開番号WO2014001802; 臨床試験登録番号:A1 NCT00757757; NCT02807844; NCT02435680; NCT01643850）。
【０１８６】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、CSF1経路を標的とする小分子である。いくつかの態様において、薬剤は、CSF1Rに結合する小分子である。いくつかの態様において、薬剤は、CSF1Rキナーゼへ結合するATPと競合することによってCSF1Rキナーゼ活性を阻害する小分子である。いくつかの態様において、薬剤は、CFS1R受容体の活性化を阻害する小分子である。いくつかの場合において、CSF1RへのCSF-1リガンドの結合を阻害する。いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、米国特許出願公開番号US20160032248に記載される阻害剤のいずれかである。
【０１８７】
いくつかの態様において、薬剤は、PLX-3397、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、PLX73086 (AC-708)、DCC-3014、AZD6495、GW2580、Ki20227、BLZ945、PLX647、PLX5622より選択される小分子阻害剤である。いくつかの態様において、薬剤は、Conway et al., Proc Natl Acad Sci U S A, 102(44):16078-83 (2005); Dagher et al., Journal of Neuroinflammation, 12:139 (2015); Ohno et al., Mol Cancer Ther. 5(11):2634-43 (2006); von Tresckow et al., Clin Cancer Res., 21(8) (2015); Manthey et al. Mol Cancer Ther. (8(11):3151-61 (2009); Pyonteck et al., Nat Med. 19(10): 1264-1272 (2013); Haegel et al., Cancer Res AACR Abstract nr 288 (2015); Smith et al., Cancer Res AACR Abstract nr 4889 (2016); 臨床試験登録番号: NCT01525602; NCT02734433; NCT02777710; NCT01804530; NCT01597739; NCT01572519; NCT01054014; NCT01316822; NCT02880371; NCT02673736; 国際特許出願公開番号WO2008063888A2、WO2006009755A2、米国特許出願公開番号US20110044998、US 2014/0065141、およびUS 2015/0119267に記載される阻害剤のいずれかである。
【０１８８】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、4-((2-(((1R,2R)-2-ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ)ベンゾ[d]チアゾール-6-イル)オキシ)-N-メチルピコリンアミド(BLZ945)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000007
(式中、R1はアルキルピラゾールまたはアルキルカルボキサミドであり、R2はヒドロキシシクロアルキルである)またはその薬学的に許容される塩である。
【０１８９】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、5-((5-クロロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-イル)メチル)-N-((6-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル)メチル)ピリジン-2-アミン、N-[5-[(5-クロロ-1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-イル)メチル]-2-ピリジニル]-6-(トリフルオロメチル)-3-ピリジンメタンアミン)(PLX 3397)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は、5-(1H-ピロロ[2,3-b]ピリジン-3-イルメチル)-N-[[4-(トリフルオロメチル)フェニル]メチル]-2-ピリジンアミン二塩酸塩(PLX647)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、以下の化合物
2020522695.tif 000008
またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、以下の化合物
2020522695.tif 000009
またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの態様において、薬剤は、米国特許第US7893075号に記載される阻害剤のいずれかである。
【０１９０】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、4-シアノ-N-[2-(1-シクロヘキセン-1-イル)-4-[1-[(ジメチルアミノ)アセチル]-4-ピペリジニル]フェニル]-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド一塩酸塩(JNJ28312141)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000010
またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの態様において、薬剤は、米国特許第US7645755号に記載される阻害剤のいずれかである。
【０１９１】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、1H-イミダゾール-2-カルボキサミド、5-シアノ-N-(2-(4,4-ジメチル-1-シクロヘキセン-1-イル)-6-(テトラヒドロ-2,2,6,6-テトラメチル-2H-ピラン-4-イル)-3-ピリジニル)-、4-シアノ-1H-イミダゾール-2-カルボン酸 N-(2-(4,4-ジメチルシクロヘキサ-1-エニル)-6-(2,2,6,6-テトラメチルテトラヒドロピラン-4-イル)ピリジン-3-イル)アミド、4-シアノ-N-(2-(4,4-ジメチルシクロヘキサ-1-エン-1-イル)-6-(2,2,6,6-テトラメチル-テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピリジン-3-イル)-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド(JNJ-40346527)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000011
またはその薬学的に許容される塩である。
【０１９２】
別の態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン(GW2580)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000012
またはその薬学的に許容される塩である（国際特許出願公開番号WO2009099553）。
【０１９３】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、4-(2,4-ジフルオロアニリノ)-7-エトキシ-6-(4-メチルピペラジン-1-イル)キノリン-3-カルボキサミド(AZD6495)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000013
またはその薬学的に許容される塩である。
【０１９４】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性を低下させる薬剤は、N-{4-[(6,7-ジメトキシ-4-キノリル)オキシ]-2-メトキシフェニル}-N0-[1-(1,3-チアゾール-2-イル)エチル]尿素(Ki20227)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000014
またはその薬学的に許容される塩である。
【０１９５】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、CSF1経路を標的とする抗体である。いくつかの態様において、薬剤は、CSF1Rに結合する抗体である。いくつかの態様において、抗-CSF1R抗体は、CSF1R二量体化を遮断する。いくつかの態様において、抗-CSF1R抗体は、ドメインD4およびD5によって形成されるCSF1R二量体化界面を遮断する（Ries et al. Cancer Cell 25(6):846-59 (2014)）。いくつかの場合において、薬剤は、エマクツズマブ（emactuzumab）(RG7155; RO5509554)、カビラリズマブ(FPA-008)、LY-3022855 (IMC-CS4)、AMG-820、TG-3003、MCS110、H27K15、12-2D6、2-4A5 (Rovida and Sbarba, J Clin Cell Immunol.6:6 (2015); 臨床試験登録番号: NCT02760797; NCT01494688; NCT02323191; NCT01962337; NCT02471716; NCT02526017; NCT01346358; NCT02265536; NCT01444404; NCT02713529, NCT00757757; NCT02807844; NCT02435680; NCT01643850)より選択される。
【０１９６】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、テトラサイクリン系抗生物質である。例えば、薬剤は、ミクログリア細胞中のIL-1b、IL-6、TNF-α、またはiNOS濃度に影響を与える（Yrjanheikki et al. PNAS 95(26): 15769-15774 (1998); 臨床試験登録番号: NCT01120899）。いくつかの態様において、薬剤は、オピオイドアンタゴニストである（Younger et al. Pain Med. 10(4):663-672 (2009.)。いくつかの態様において、薬剤は、グルタミン酸作動性神経伝達を低減する（米国特許第5,527,814号）。いくつかの態様において、薬剤は、NFkBシグナル伝達を調節する（Valera et al J. Neuroinflammation 12:93 (2015); 臨床試験登録番号: NCT00231140）。いくつかの態様において、薬剤は、カンナビノイド受容体を標的とする（Ramirez et al. J. Neurosci 25(8):1904-13(2005)）。いくつかの態様において、薬剤は、ミノサイクリン、ナロキソン、リルゾール、レナリドミド、およびカンナビノイド(任意でWIN55または212-2)より選択される。
【０１９７】
ミクログリアからの一酸化窒素産生は、いくつかの場合において、神経毒性を生じさせるかまたは増加させると考えられている。いくつかの態様において、薬剤はミクログリアからの一酸化窒素産生を調節または阻害する。いくつかの態様において、薬剤は一酸化窒素シンターゼ(NOS)を阻害する。いくつかの態様において、NOS阻害剤は、4-アミノ-テトラヒドロビオプテリン(4-ABH4)としても公知の、ロノプテリン（Ronopterin）(VAS-203)である。いくつかの態様において、NOS阻害剤は、シンドゥニスタット、A-84643、ONO-1714、L-NOARG、NCX-456、VAS-2381、GW-273629、NXN-462、CKD-712、KD-7040、またはグアニジノエチルジスルフィドである。いくつかの態様において、薬剤は、Hoing et al., Cell Stem Cell. 2012 Nov 2;11(5):620-32に記載される阻害剤のいずれかである。
【０１９８】
いくつかの態様において、薬剤は、例えば中枢神経系への、T細胞輸送を遮断する。いくつかの態様において、T細胞輸送の遮断は、血液脳関門を横断することを含む、免疫細胞が中枢神経系中へ血管壁を横断するのを低減または阻止し得る。いくつかの場合において、活性化された抗原特異的T細胞は、CNS中における再活性化時に、IFN-γおよびTNFを含む、炎症性サイトカインを産生し、ミクログリアおよび星状細胞のような常在細胞の活性化をもたらす。Kivisakk et al., Neurology. 2009 Jun 2; 72(22): 1922-1930を参照されたい。従って、いくつかの態様において、輸送を遮断することおよび/または血液脳関門を横断する活性化T細胞の能力を阻害することによってなど、活性化T細胞をミクログリア細胞から隔離することは、ミクログリア活性化を低減または排除することができる。いくつかの態様において、薬剤は、T細胞を含む、免疫細胞上の接着分子を阻害する。いくつかの態様において、薬剤はインテグリンを阻害する。いくつかの態様において、インテグリンはα-4インテグリンである。いくつかの態様において、薬剤はナタリズマブ(Tysabri（登録商標）)である。いくつかの態様において、薬剤は細胞表面受容体を調節する。いくつかの態様において、薬剤は、スフィンゴシン-1-リン酸(S1P)受容体、例えば、S1PR1またはS1PR5を調節する。いくつかの態様において、薬剤は、細胞受容体、例えば、スフィンゴシン-1-リン酸(S1P)受容体、例えば、S1PR1またはS1PR5の、インターナリゼーションを引き起こす。いくつかの態様において、薬剤は、フィンゴリモド(Gilenya（登録商標）)またはオザニモド(RPC-1063)である。
【０１９９】
転写因子NRF2は、例えば、それらのプロモータ領域中にシス作用エレメントを含有する遺伝子をオンすることによって、抗酸化剤応答を調節すると考えられている。そのようなエレメントの例としては、抗酸化剤応答配列(ARE)が挙げられる。いくつかの態様において、薬剤はNRF2を活性化する。いくつかの態様において、ミクログリア細胞中のNRF2を活性化することは、IFNおよびLPSに対するミクログリア細胞の応答性を低減させる。いくつかの態様において、NRF2を活性化することは、脱髄、軸索喪失、ニューロン死、および/または希突起膠細胞死を阻害するか、遅らせるか、または低減する。いくつかの態様において、薬剤は、NRF2によって調節される細胞の細胞保護経路を上方制御する。いくつかの態様において、NRF2を活性化する薬剤は、フマル酸ジメチル(Tecfidera（登録商標）)である。いくつかの態様において、薬剤は、米国特許第8,399,514号に記載される阻害剤のいずれかである。いくつかの態様において、薬剤は、Hoing et al., Cell Stem Cell. 2012 Nov 2;11(5):620-32に記載される阻害剤のいずれかである。
【０２００】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、(4S,4aS,5aR,12aS)-4,7-ビス(ジメチルアミノ)-3,10,12,12a-テトラヒドロキシ-1,11-ジオキソ-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-オクタヒドロテトラセン-2-カルボキサミド(ミノサイクリン)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は、米国特許出願公開番号US20100190755に記載される化合物のいずれかである。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000015
またはその薬学的に許容される塩である。
【０２０１】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、3-(7-アミノ-3-オキソ-1H-イソインドール-2-イル)ピペリジン-2,6-ジオン(レナリドミド)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000016
またはその薬学的に許容される塩である。
【０２０２】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、4R,4aS,7aR,12bS)-4a,9-ジヒドロキシ-3-プロパ-2-エニル-2,4,5,6,7a,13-ヘキサヒドロ-1H-4,12-メタノベンゾフロ[3,2-e]イソキノリン-7-オン(ナロキソン)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は、米国特許第US8247425号に記載される化合物のいずれかである。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000017
またはその薬学的に許容される塩である。
【０２０３】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、2-アミノ-6-(トリフルオロメトキシ)ベンゾチアゾール、6-(トリフルオロメトキシ)ベンゾ[d]チアゾール-2-アミン、または6-(トリフルオロメトキシ)-1,3-ベンゾチアゾール-2-アミン(リルゾール)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体（米国特許第US5527814号に記載されるような）である。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000018
またはその薬学的に許容される塩である。
【０２０４】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、ミクログリア中におけるシグナル伝達経路の調節因子である。いくつかの場合において、薬剤はミクログリアシグナル伝達を低減させる。いくつかの態様において、薬剤はGM-CSF(CSF2)阻害剤である。他の態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、イオンチャネル遮断薬である。いくつかの具体的な態様において、薬剤はカルシウムチャネル遮断薬である。例えば、いくつかの具体例において、薬剤はジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬である。いくつかの態様において、薬剤はマイクロRNA阻害剤である。例えば、薬剤はmiR-155を標的とする。いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、MOR103、ニモジピン、IVIg、およびLNA-anti-miR-155より選択される（Butoxsky et al. Ann Neurol., 77(1):75-99 (2015)およびSanz et al., Br J Pharmacol. 167(8): 1702-1711 (2012); Winter et al., Ann Clin and Transl Neurol. 2328-9503 (2016); 臨床試験登録番号: NCT01517282, NCT00750867）。
【０２０５】
いくつかの態様において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、3-(2-メトキシエチル) 5-プロパン-2-イル 2,6-ジメチル-4-(3-ニトロフェニル)-1,4-ジヒドロピリジン-3,5-ジカルボキシラート(ニモジピン)または薬学的に許容されるその塩もしくはその誘導体である。いくつかの態様において、薬剤は、米国特許第US3799934号に記載される阻害剤のいずれかである。いくつかの態様において、薬剤は以下の化合物
2020522695.tif 000019
またはその薬学的に許容される塩である。
【０２０６】
いくつかの場合において、ミクログリア細胞活性化を低下させる薬剤は、中枢神経系に対してのみ影響を与え、かつ/または、腫瘍関連マクロファージには影響を与えない、形態で投与される。いくつかの態様において、薬剤は、ミクログリア休止を促進するが、ミクログリアの数を排除または低減しない。いくつかの態様において、方法は、Ponomarev et al., Nature Medicine, (1):64-70 (2011)に記載されるように、脳内において特異的にミクログリア活性を阻害することを伴う。
【０２０７】
ミクログリア細胞活性化を低下させる例示的な薬剤、およびそのような薬剤を投与するための例示的な投薬レジメンを、下記表5に記載する。
【０２０８】
（表５）例示的なミクログリア阻害剤および投薬レジメン
2020522695.tif 000020
【０２０９】
D．他の薬剤
いくつかの態様において、CRSまたは神経毒性のような、免疫療法および/または細胞療法の毒性の症状を処置または改善する薬剤または他の処置は、サイトカインを標的とするものであり、例えば、トランスホーミング増殖因子β(TGF-β)、インターロイキン6(IL-6)、インターロイキン10(IL-10)、IL-2、MIP1β(CCL4)、TNFα、IL-1、インターフェロンγ(IFN-γ)、または単球走化性タンパク質-1(MCP-1)のような、サイトカインのアンタゴニストまたは阻害剤である。いくつかの態様において、CRSまたは神経毒性のような、免疫療法および/または細胞療法の毒性の症状を処置または改善する薬剤は、IL-6受容体(IL-6R)、IL-2受容体(IL-2R/CD25)、MCP-1(CCL2)受容体(CCR2もしくはCCR4)、TGF-β受容体(TGF-βI、II、もしくはIII)、IFN-γ受容体(IFNGR)、MIP1β受容体(例えば、CCR5)、TNFα受容体(例えば、TNFR1)、IL-1受容体(IL1-Rα/IL-1Rβ)、またはIL-10受容体(IL-10R)のような、サイトカイン受容体を標的とする（例えば、これを阻害するかまたはこれのアンタゴニストである）ものである。
【０２１０】
CRSまたは神経毒性のような、免疫療法および/または細胞療法に対する毒性の症状または有害効果を改善するために投与される、CRSまたは神経毒性のような、免疫療法および/または細胞療法の毒性の症状を処置または改善する選択された薬剤の量は、標準臨床技術によって決定することができる。例示的な有害事象としては、アラニンアミノトランスフェラーゼの増加、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼの増加、悪寒、発熱性好中球減少症、頭痛、低血圧、左心室機能不全、脳症、水頭症、発作、および/または振戦が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２１１】
いくつかの態様において、薬剤を、30 mg〜5000 mg、例えば、50 mg〜1000 mg、50 mg〜500 mg、50 mg〜200 mg、50 mg〜100 mg、100 mg〜1000 mg、100 mg〜500 mg、100 mg〜200 mg、200 mg〜1000 mg、200 mg〜500 mgもしくは500 mg〜1000 mg、または約30 mg〜5000 mg、例えば、約50 mg〜1000 mg、約50 mg〜500 mg、約50 mg〜200 mg、約50 mg〜100 mg、約100 mg〜1000 mg、約100 mg〜500 mg、約100 mg〜200 mg、約200 mg〜1000 mg、約200 mg〜500 mgもしくは約500 mg〜1000 mgの投薬量で投与する。
【０２１２】
いくつかの態様において、薬剤を、0.5 mg/kg〜100 mg/kg、例えば、1 mg/kg〜50 mg/kg、1 mg/kg〜25 mg/kg、1 mg/kg〜10 mg/kg、1 mg/kg〜5 mg/kg、5 mg/kg〜100 mg/kg、5 mg/kg〜50 mg/kg、5 mg/kg〜25 mg/kg、5 mg/kg〜10 mg/kg、10 mg/kg〜100 mg/kg、10 mg/kg〜50 mg/kg、10 mg/kg〜25 mg/kg、25 mg/kg〜100 mg/kg、25 mg/kg〜50 mg/kgから50 mg/kg〜100 mg/kg、または約0.5 mg/kg〜100 mg/kg、例えば、約1 mg/kg〜50 mg/kg、約1 mg/kg〜25 mg/kg、約1 mg/kg〜10 mg/kg、約1 mg/kg〜5 mg/kg、約5 mg/kg〜100 mg/kg、約5 mg/kg〜50 mg/kg、約5 mg/kg〜25 mg/kg、約5 mg/kg〜10 mg/kg、約10 mg/kg〜100 mg/kg、約10 mg/kg〜50 mg/kg、約10 mg/kg〜25 mg/kg、約25 mg/kg〜100 mg/kg、約25 mg/kg〜50 mg/kgから約50 mg/kg〜100 mg/kg、投与する。いくつかの態様において、薬剤を、1 mg/kg〜10 mg/kg、2 mg/kg〜8 mg/kg、2 mg/kg〜6 mg/kg、2 mg/kg〜4 mg/kg、もしくは6 mg/kg〜8 mg/kg、または約1 mg/kg〜10 mg/kg、約2 mg/kg〜8 mg/kg、約2 mg/kg〜6 mg/kg、約2 mg/kg〜4 mg/kg、もしくは約6 mg/kg〜8 mg/kg（各々を包含）の投薬量で投与する。いくつかの局面において、薬剤を、少なくともまたは少なくとも約または約1 mg/kg、2 mg/kg、4 mg/kg、6 mg/kg、8 mg/kg、10 mg/kgまたはそれ以上の投薬量で投与する。いくつかの態様において、薬剤を4 mg/kgまたは8 mg/kgの用量で投与する。
【０２１３】
いくつかの態様において、薬剤は、注射、例えば、静脈内注射または皮下注射、眼内注射、眼周囲注射、網膜下注射、硝子体内注射、経中隔注射、強膜下注射、脈絡膜内注射、眼房内注射、結膜下注射(subconjectval injection)、結膜下注射(subconjuntival injection)、テノン嚢下注射、眼球後注射、眼球周囲注射、または後強膜近傍送達によって投与される。いくつかの態様において、薬剤は、非経口投与、肺内投与、および鼻腔内投与によって、所望であれば、局所処置の場合、病巣内投与によって投与される。非経口注入には、筋肉内投与、静脈内投与、動脈内投与、腹腔内投与、または皮下投与が含まれる。
【０２１４】
いくつかの態様において、薬剤の量は、約またはおよそ、1日2回、毎日、1日おきに、週3回、毎週、1週おきに、または月1回、投与される。
【０２１５】
いくつかの態様において、薬剤は、下記に記載されるような薬学的組成物または製剤のような、組成物または製剤の一部として投与される。従って、いくつかの場合において、薬剤を含む組成物は、下記に記載されるように投与される。他の局面において、薬剤は、単独で投与され、任意の公知の許容される投与経路によって、または、例えば組成物および薬学的製剤に関して、本明細書に記載される投与経路によって、投与され得る。
【０２１６】
いくつかの態様において、CRSまたは神経毒性のような、免疫療法および/または細胞療法の毒性の症状を処置または改善する薬剤は、抗体または抗原結合断片である。いくつかの態様において、薬剤は、トシリズマブ、シルツキシマブ、サリルマブ、オロキズマブ(CDP6038)、エルシリモマブ、ALD518/BMS-945429、シルクマブ(CNTO 136)、CPSI-2634、ARGX-109、FE301、またはFM101である。
【０２１７】
いくつかの態様において、薬剤は、IL-6またはIL-6受容体(IL-6R)のアンタゴニストまたは阻害剤である。いくつかの局面において、薬剤は、IL-6またはIL-6Rへ結合する抗体または抗原結合断片のような、IL-6活性を中和する抗体である。例えば、いくつかの態様において、薬剤は、トシリズマブ（アトリズマブ）またはサリルマブ、抗-IL-6R抗体であるかまたはこれらを含む。いくつかの態様において、薬剤は、米国特許第8,562,991号に記載される抗-IL-6R抗体である。いくつかの場合において、IL-6を標的とする薬剤は、抗-IL-6抗体、例えば、シルツキシマブ、エルシリモマブ、ALD518/BMS-945429、シルクマブ(CNTO 136)、CPSI-2634、ARGX-109、FE301、FM101、またはオロキズマブ(CDP6038)である。いくつかの局面において、薬剤は、リガンド-受容体相互作用を阻害することによってIL-6活性を中和し得る。この一般的なタイプのアプローチの実行可能性は、インターロイキン-1についての天然の受容体アンタゴニストを用いて実証された。Harmurn, C. H. et al., Nature (1990) 343:336-340を参照されたい。いくつかの局面において、IL-6/IL-6Rアンタゴニストまたは阻害剤は、米国特許第5591827号に記載されるもののような、IL-6ムテインである。いくつかの態様において、IL-6/IL-6Rのアンタゴニストまたは阻害剤である薬剤は、小分子、タンパク質もしくはペプチド、または核酸である。
【０２１８】
いくつかの態様において、薬剤はトシリズマブである。いくつかの態様において、トシリズマブが、1 mg/kg〜12 mg/kgもしくは約1 mg/kg〜12 mg/kg、例えば、4 mg/kg、8 mg/kg、もしくは10 mg/kg、または約4 mg/kg、約8 mg/kg、もしくは約10 mg/kgの投薬量で、提供される方法に従う早期介入として投与される。いくつかの態様において、トシリズマブは静脈内注入によって投与される。いくつかの態様において、トシリズマブは、アセトアミノフェンに応答しない10時間持続する39℃を超える持続性発熱について投与される。いくつかの態様において、症状が初回用量の48時間後に再発する場合、トシリズマブの第2の投与が提供される。
【０２１９】
いくつかの態様において、薬剤は、TGF-βまたはTGF-β受容体（例えば、TGF-β受容体I、II、もしくはIII）のアゴニストまたは刺激物質である。いくつかの局面において、薬剤は、TGF-βまたはその受容体の1つへ結合する抗体または抗原結合断片のような、TGF-β活性を増加させる抗体である。いくつかの態様において、TGF-βおよび/またはその受容体のアゴニストまたは刺激物質である薬剤は、小分子、タンパク質もしくはペプチド、または核酸である。
【０２２０】
いくつかの態様において、薬剤は、MCP-1(CCL2)またはMCP-1受容体（例えば、MCP-1受容体CCR2もしくはCCR4）のアンタゴニストまたは阻害剤である。いくつかの局面において、薬剤は、MCP-1またはその受容体の1つ(CCR2もしくはCCR4)へ結合する抗体または抗原結合断片のような、MCP-1活性を中和する抗体である。いくつかの態様において、MCP-1アンタゴニストまたは阻害剤は、Gong et al. J Exp Med. 1997 Jul 7; 186(1): 131-137またはShahrara et al. J Immunol 2008; 180:3447-3456に記載される任意のものである。いくつかの態様において、MCP-1および/またはその受容体（CCR2もしくはCCR4）のアンタゴニストまたは阻害剤である薬剤は、小分子、タンパク質もしくはペプチド、または核酸である。
【０２２１】
いくつかの態様において、薬剤は、IFN-γまたはIFN-γ受容体(IFNGR)のアンタゴニストまたは阻害剤である。いくつかの局面において、薬剤は、IFN-γまたはその受容体(IFNGR)へ結合する抗体または抗原結合断片のような、IFN-γ活性を中和する抗体である。いくつかの局面において、IFN-γ中和抗体は、Dobber et al. Cell Immunol. 1995 Feb;160(2):185-92またはOzmen et al. J Immunol. 1993 Apr 1;150(7):2698-705に記載される任意のものである。いくつかの態様において、IFN-γ/IFNGRのアンタゴニストまたは阻害剤である薬剤は、小分子、タンパク質もしくはペプチド、または核酸である。
【０２２２】
いくつかの態様において、薬剤は、IL-10またはIL-10受容体(IL-10R)のアンタゴニストまたは阻害剤である。いくつかの局面において、薬剤は、IL-10またはIL-10Rへ結合する抗体または抗原結合断片のような、IL-10活性を中和する抗体である。いくつかの局面において、IL-10中和抗体は、Dobber et al. Cell Immunol. 1995 Feb;160(2):185-92またはHunter et al. J Immunol. 2005 Jun 1;174(11):7368-75に記載される任意のものである。いくつかの態様において、IL-10/IL-10Rのアンタゴニストまたは阻害剤である薬剤は、小分子、タンパク質もしくはペプチド、または核酸である。
【０２２３】
いくつかの態様において、薬剤は、IL-1またはIL-1受容体(IL-1R)のアンタゴニストまたは阻害剤である。いくつかの局面において、薬剤は、アナキンラのような、IL-1Rの改変型である、IL-1受容体アンタゴニストである（例えば、Fleischmann et al., (2006) Annals of the rheumatic diseases. 65(8):1006-12を参照されたい）。いくつかの局面において、薬剤は、カナキヌマブのような、IL-1またはIL-1Rへ結合する抗体または抗原結合断片のような、IL-1活性を中和する抗体である（EP 2277543も参照されたい）。いくつかの態様において、IL-1/IL-1Rのアンタゴニストまたは阻害剤である薬剤は、小分子、タンパク質もしくはペプチド、または核酸である。
【０２２４】
いくつかの態様において、薬剤は、腫瘍壊死因子(TNF)または腫瘍壊死因子受容体(TNFR)のアンタゴニストまたは阻害剤である。いくつかの局面において、薬剤は、TNF（例えば、TNFα）またはその受容体（TNFR、例えば、TNFRp55もしくはTNFRp75）へ結合する抗体または抗原結合断片のような、TNF活性を遮断する抗体である。いくつかの局面において、薬剤は、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブペゴル、ゴリムマブおよびエタネルセプトの中より選択される。いくつかの態様において、TNF/TNFRのアンタゴニストまたは阻害剤である薬剤は、小分子、タンパク質もしくはペプチド、または核酸である。いくつかの態様において、薬剤は、レナリドミドのような、TNFに影響を与える小分子である（例えば、Muller et al. (1999) Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 9 (11):1625を参照されたい）。
【０２２５】
いくつかの態様において、薬剤は、ヤヌスキナーゼ(JAK)および2つのシグナル伝達性転写因子(STAT)シグナル伝達カスケードを通してのシグナル伝達のアンタゴニストまたは阻害剤である。JAK/STATタンパク質は、サイトカインおよびサイトカイン受容体シグナル伝達の一般的な成分である。いくつかの態様において、ルキソリチニブ（例えば、Mesa et al. (2012) Nature Reviews Drug Discovery. 11(2):103-104を参照されたい）、トファシチニブ（ゼルヤンツ、JakvinusタソシチニブおよびCP-690550としても公知）、バリシチニブ（LY-3009104、INCB-28050としても公知）、フィルゴチニブ（G-146034、GLPG-0634）、ガンドチニブ（Gandotinib）(LY-2784544)、レスタウルチニブ(CEP-701)、モメロチニブ(GS-0387、CYT-387)、パクリチニブ(SB1518)、およびウパダシチニブ(ABT-494)のような、JAK/STATのアンタゴニストまたは阻害剤である。いくつかの態様において、薬剤は、小分子、タンパク質もしくはペプチド、または核酸である。
【０２２６】
いくつかの態様において、薬剤はキナーゼ阻害剤である。いくつかの態様において、薬剤はブルトンチロシンキナーゼ(BTK)の阻害剤である。いくつかの態様において、阻害剤はイブルチニブまたはアカラブルチニブであるかまたはこれらを含む（例えば、Barrett et al., ASH 58th Annual Meeting San Diego, CA December 3-6, 2016, Abstract 654; Ruella et al., ASH 58th Annual Meeting San Diego, CA December 3-6, 2016, Abstract 2159を参照されたい）。いくつかの態様において、薬剤は、米国特許第7,514,444号；同第8,008,309号；同第8,476,284号；同第8,497,277号；同第8,697,711号；同第8,703,780号；同第8,735,403号；同第8,754,090号；同第8,754,091号；同第8.957,079号；同第8,999,999号；同第9,125,889号；同第9,181,257号；または同第9,296,753号に記載されるような阻害剤である。
【０２２７】
いくつかの態様において、血液または血漿濾過を伴う吸収性樹脂技術のような、デバイスが、サイトカインレベルを低減するために使用することができる。いくつかの態様において、サイトカインレベルを低減するために使用されるデバイスは、物理的なサイトカイン吸収体、例えば、体外サイトカイン吸収体である。いくつかの態様において、物理的なサイトカイン吸収体は、エクスビボ、体外様式で血流からサイトカインを排除するために使用することができる。いくつかの態様において、薬剤は多孔性ポリマーである。いくつかの態様において、薬剤はCytoSorbである（例えば、Basu et al. Indian J Crit Care Med. (2014) 18(12): 822-824を参照されたい）。
【０２２８】
III．細胞療法および細胞の操作
いくつかの態様において、提供される方法および製造物品に従う使用のための細胞療法、例えば、T細胞療法は、疾患または状態に関連する分子を認識しかつ/またはこれらへ特異的に結合し、そして、そのような分子へ結合するとそのような分子に対する免疫反応のような反応をもたらすように設計された組換え受容体を発現する操作された細胞を含有する治療用細胞組成物を投与する工程を含む。いくつかの態様において、製造物品は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する細胞療法と、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカー（例えば、CD14）のもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）における評価の後にまたはその結果に基づいて細胞療法を施与するための説明書とを含有する。受容体は、キメラ受容体、例えば、キメラ抗原受容体(CAR)、および他のトランスジェニック抗原受容体、例えば、トランスジェニックT細胞受容体(TCR)を含み得る。
【０２２９】
いくつかの態様において、細胞は、操作された受容体、例えば、操作された抗原受容体、例えば、キメラ抗原受容体(CAR)、またはT細胞受容体(TCR)を含有するか、またはこれらを含有するように操作される。そのような細胞の集団、そのような細胞を含有しかつ/またはそのような細胞について濃縮された組成物をさらに提供し、例えば、ここで、T細胞またはCD8+もしくはCD4+細胞のような、あるタイプの細胞が濃縮または選択されている。組成物の中には、養子細胞療法用のような、投与用の薬学的組成物および製剤がある。細胞および組成物を対象、例えば患者へ投与するための治療方法も提供する。
【０２３０】
従って、いくつかの態様において、細胞は、遺伝子操作を介して導入された1種または複数種の核酸を含み、それによって、このような核酸の組換え産物または遺伝子操作された産物を発現する。いくつかの態様において、遺伝子移入は、最初に、細胞を刺激し、例えば、細胞を、例えば、サイトカインまたは活性化マーカーの発現によって測定されるような増殖、生存、および/または活性化などの応答を誘導する刺激と組み合わせ、その後に、活性化された細胞に形質導入し、臨床用途に十分な数まで培養で増殖させることによって成し遂げられる。
【０２３１】
A．組換え受容体
細胞は、一般に、組換え受容体、例えば、抗原受容体、例えば、機能的な非TCR抗原受容体、例えば、キメラ抗原受容体(CAR)、および他の抗原結合性受容体、例えば、トランスジェニックT細胞受容体(TCR)を発現する。受容体の中には他のキメラ受容体もある。
【０２３２】
1. キメラ抗原受容体（CAR）
いくつかの態様において、特定の抗原（またはマーカーまたはリガンド）、例えば、特定の細胞型の表面上に発現される抗原に対して特異性を有するCARを発現する操作された細胞、例えばT細胞が提供される。いくつかの態様において、抗原はポリペプチドである。いくつかの態様において、抗原は、糖質または他の分子である。いくつかの態様において、抗原は、正常のまたは非標的の細胞または組織と比較して、疾患または状態の細胞、例えば、腫瘍または病原性細胞上に選択的に発現されるか、または過剰発現される。他の態様において、抗原は、正常細胞上に発現され、かつ/または操作された細胞上に発現される。
【０２３３】
特定の態様において、組換え受容体、例えばキメラ受容体は、細胞内シグナル伝達領域を含有し、これは、T細胞において一次活性化シグナルを誘導することができる細胞質（細胞内）領域などの細胞質シグナル伝達ドメイン（互換的に細胞内シグナル伝達ドメインとも呼ばれる）、例えば、T細胞受容体（TCR）構成要素の細胞質シグナル伝達ドメイン（例えば、CD3ゼータ（CD3ζ）鎖のζ鎖の細胞質シグナル伝達ドメインまたはその機能的バリアントもしくはシグナル伝達部分）を含み、かつ/または免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ITAM）を含む。
【０２３４】
いくつかの態様において、キメラ受容体は、リガンド（例えば抗原）抗原に特異的に結合する細胞外リガンド結合ドメインをさらに含有する。いくつかの態様において、キメラ受容体は、抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインを含有するCARである。いくつかの態様において、抗原などのリガンドは、細胞の表面上に発現されるタンパク質である。いくつかの態様において、CARはTCR様CARであり、抗原は、細胞内タンパク質のペプチド抗原などのプロセシングされたペプチド抗原であり、これは、TCRのように、主要組織適合遺伝子複合体（MHC）分子に関連して細胞表面上で認識される。
【０２３５】
CARを含む例示的な抗原受容体、およびそのような受容体を操作して細胞中に導入するための方法は、例えば、国際特許出願公開番号WO200014257、WO2013126726、WO2012/129514、WO2014031687、WO2013/166321、WO2013/071154、WO2013/123061、米国特許出願公開第2002131960号、同第2013287748号、同第20130149337号、米国特許第6,451,995号、同第7,446,190号、同第8,252,592号、同第8,339,645号、同第8,398,282号、同第7,446,179号、同第6,410,319号、同第7,070,995号、同第7,265,209号、同第7,354,762号、同第7,446,191号、同第8,324,353号、および同第8,479,118号、ならびに欧州特許出願番号EP2537416に記載されているもの、ならびに/または、Sadelain et al., Cancer Discov.2013 April；3（4）:388-398；Davila et al.（2013）PLoS ONE 8（4）:e61338；Turtle et al., Curr.Opin.Immunol.,2012 October；24（5）:633-39；Wu et al., Cancer,2012 March 18（2）:160-75によって記載されているものを含む。いくつかの局面において、抗原受容体は、米国特許第7,446,190号に記載されているCAR、および国際特許出願公開番号WO/2014055668 A1に記載されているものを含む。CARの例には、WO2014031687、US 8,339,645、US 7,446,179、US 2013/0149337、米国特許第7,446,190号、米国特許第8,389,282号、Kochenderfer et al., 2013, Nature Reviews Clinical Oncology, 10, 267-276 (2013)；Wang et al. (2012) J. Immunother. 35(9): 689-701；およびBrentjens et al., Sci Transl Med. 2013 5(177)などの前述の刊行物のいずれかにおいて開示されているCARが含まれる。WO2014031687、US 8,339,645、US 7,446,179、US 2013/0149337、米国特許第7,446,190号、および米国特許第8,389,282号も参照されたい。
【０２３６】
いくつかの態様において、CARは、特定の抗原（またはマーカーまたはリガンド）、例えば、養子療法によって標的とされる特定の細胞型において発現される抗原、例えばがんマーカー、および/または正常細胞型もしくは非罹患細胞型上に発現される抗原などの減衰応答を誘導することが意図される抗原に対する特異性を備えて構築される。したがって、CARは、典型的には、その細胞外部分に、1つもしくは複数の抗原結合断片、ドメイン、もしくは一部分などの1つもしくは複数の抗原結合分子、または1つもしくは複数の抗体可変ドメイン、および/または抗体分子を含む。いくつかの態様において、CARは、モノクローナル抗体（mAb）の可変重鎖（VH）および可変軽鎖（VL）に由来する一本鎖抗体断片（scFv）などの、抗体分子の1つまたは複数の抗原結合部分を含む。
【０２３７】
いくつかの態様において、抗体またはその抗原結合部分は、組換え受容体、例えば抗原受容体の一部として細胞上に発現される。抗原受容体の中には、機能的非TCR抗原受容体、例えばキメラ抗原受容体（CAR）がある。概して、ペプチド-MHC複合体に対してTCR様の特異性を示す抗体または抗原結合断片を含有するCARはまた、TCR様CARとも呼ばれ得る。いくつかの態様において、TCR様CARのMHC-ペプチド複合体に特異的な細胞外抗原結合ドメインは、いくつかの局面においてはリンカーおよび/または膜貫通ドメインを介して、1つまたは複数の細胞内シグナル伝達構成要素に連結されている。いくつかの態様において、そのような分子は、典型的には、TCRなどの天然の抗原受容体を介するシグナル、および任意で、共刺激受容体と組み合わせたそのような受容体を介するシグナルを模倣するかまたは近似することができる。
【０２３８】
いくつかの態様において、組換え受容体、例えばキメラ受容体（例えばCAR）は、抗原（またはリガンド）に結合する、例えば特異的に結合するリガンド結合ドメインを含む。キメラ受容体によって標的とされる抗原の中には、養子細胞療法を介して標的とされる疾患、状態、または細胞型に関連して発現されるものがある。疾患および状態の中には、血液がん、免疫系のがん、例えば、B、Tおよび骨髄性の白血病、リンパ腫、および多発性骨髄腫などのリンパ腫、白血病、および/または骨髄腫を含むがんおよび腫瘍を含む、増殖性、新生物性、および悪性の疾患および障害がある。
【０２３９】
いくつかの態様において、抗原（またはリガンド）はポリペプチドである。いくつかの態様において、抗原は、糖質または他の分子である。いくつかの態様において、抗原（またはリガンド）は、正常のまたは非標的の細胞または組織と比較して、疾患または状態の細胞、例えば、腫瘍または病原性細胞上に選択的に発現されるか、または過剰発現される。他の態様において、抗原は、正常細胞上に発現され、かつ/または操作された細胞上に発現される。
【０２４０】
いくつかの態様において、CARは、細胞の表面上に発現される抗原、例えば無傷の抗原を特異的に認識する、抗体または抗原結合断片（例えばscFv）を含有する。
【０２４１】
いくつかの態様において、抗原（またはリガンド）は、腫瘍抗原またはがんマーカーである。いくつかの態様において、抗原（またはリガンド）は、受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体1（ROR1）、B細胞成熟抗原（BCMA）、炭酸アンヒドラーゼ9（CA9；G250またはCAIXとしても知られる）、Her2/neu（受容体チロシンキナーゼerb-B2）、CD19、CD20、CD22、およびB型肝炎表面抗原、抗葉酸受容体、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4（CSPG4）、上皮成長因子タンパク質（EGFR）、上皮糖タンパク質2（EPG-2）、上皮糖タンパク質40（EPG-40）、エフリンB2、エフリン受容体A2（EPHa2）、Her3（erb-B3）、Her4（erb-B4）、erbB二量体、III型上皮成長因子受容体変異（EGFR vIII）、葉酸結合タンパク質（FBP）、Fc受容体様5（FCRL5；Fc受容体ホモログ5またはFCRH5としても知られる）、胎児アセチルコリン受容体（胎児AchR）、ガングリオシドGD2、ガングリオシドGD3、グリピカン-3（GPC3）、Gタンパク質共役受容体5D（GPCR5D）、ヒト高分子量黒色腫関連抗原（HMW-MAA）、IL-22受容体アルファ（IL-22RαもしくはIL-22R-アルファ）、IL-13受容体アルファ2（IL-13Rα2もしくはIL-13R-アルファ2）、キナーゼインサートドメイン受容体（kdr）、κ軽鎖、ロイシンリッチリピート含有8ファミリーメンバーA（LRRC8A）、ルイスY、L1細胞接着分子（L1-CAM）、黒色腫関連抗原（MAGE）-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、MAGE-A10、黒色腫の優先発現抗原（PRAME）、サバイビン、TAG72、B7-H3、B7-H6、IL-13受容体α2（IL-13Ra2）、CD171、ヒト白血球抗原A1（HLA-AI）、ヒト白血球抗原A2（HLA-A2）、葉酸受容体-α、CD44v6、CD44v7/8、αvβ6インテグリン（avb6インテグリン）、8H9、神経細胞接着分子（NCAM）、血管内皮増殖因子受容体（VEGF受容体もしくはVEGFR）、栄養膜糖タンパク質（TPBG；5T4としても知られる）、NKG2Dリガンド、二重抗原、がん-精巣抗原、メソテリン（MSLN）、マウスサイトメガロウイルス（CMV）、ムチン1（MUC1）、MUC16、前立腺特異抗原、前立腺幹細胞抗原（PSCA）、前立腺特異的膜抗原（PSMA）、ナチュラルキラーグループ2メンバーD（NKG2D）リガンド、がん/精巣抗原1B（CTAG；NY-ESO-1およびLAGE-2としても知られる）、メランA（MART-1）、糖タンパク質100（gp100）、胎児腫瘍性抗原、腫瘍関連糖タンパク質72（TAG72）、チロシナーゼ関連タンパク質1（TRP1；TYRP1またはgp75としても知られる）、チロシナーゼ関連タンパク質2（TRP2；ドパクロムトートメラーゼ、ドパクロムデルタ-イソメラーゼ、またはDCTとしても知られる）、血管内皮増殖因子受容体2（VEGF-R2）、がん胎児性抗原（CEA）、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、CD123、CD133、c-Met、O-アセチル化GD2（OGD2）、L1-CAMのCE7エピトープ、ウィルムス腫瘍1（WT-1）、サイクリン、サイクリンA2、C-Cモチーフケモカインリガンド1（CCL-1）、CD138、病原体特異的もしくは病原体発現抗原、およびユニバーサルタグに関連する抗原、および/またはビオチン化分子、および/またはHIV、HCV、HBV、もしくは他の病原体によって発現される分子であるかまたはこれらを含む。いくつかの態様において受容体によって標的とされる抗原は、多数の公知のB細胞マーカーのいずれかなどの、B細胞悪性腫瘍に関連する抗原を含む。いくつかの態様において、受容体によって標的とされる抗原は、CD20、CD19、CD22、ROR1、CD45、CD21、CD5、CD33、Igκ、Igλ、CD79a、CD79b、またはCD30である���
【０２４２】
いくつかの態様において、抗原は病原体特異的抗原である。いくつかの態様において、抗原は、ウイルス抗原（例えばHIV、HCV、HBVなど由来のウイルス抗原）、細菌抗原、および/または寄生虫抗原である。
【０２４３】
いくつかの態様において、CARは、TCR様抗体、例えば、細胞表面上にMHC-ペプチド複合体として提示される腫瘍関連抗原などの細胞内抗原を特異的に認識する抗体または抗原結合断片（例えばscFv）を含有する。いくつかの態様において、MHC-ペプチド複合体を認識する抗体またはその抗原結合部分は、組換え受容体、例えば抗原受容体の一部として細胞上に発現されることができる。抗原受容体の中には、機能的非TCR抗原受容体、例えばキメラ抗原受容体（CAR）がある。概して、ペプチド-MHC複合体に対してTCR様の特異性を示す抗体または抗原結合断片を含有するCARはまた、TCR様CARとも呼ばれ得る。
【０２４４】
いくつかの態様において、scFvはFMC63に由来する。FMC63は、ヒト由来のCD19を発現するNalm-1および-16細胞に対して作製されたマウスモノクローナルIgG1抗体である（Ling, N. R., et al. (1987). Leucocyte typing III. 302）。FMC63抗体は、それぞれSEQ ID NO:43および44に示したCDRH1およびH2、およびSEQ ID NO:45または59に示したCDRH3、ならびにSEQ ID NO:40に示したCDRL1、およびSEQ ID NO:41または60に示したCDR L2、およびSEQ ID NO:42または61に示したCDR L3を含む。FMC63抗体は、SEQ ID NO:46のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域(VH)、およびSEQ ID NO:47のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域(VL)を含む。いくつかの態様において、svFvは、SEQ ID NO:40に示したCDRL1、SEQ ID NO:41または60に示したCDRL2、およびSEQ ID NO:42または61に示したCDRL3を含む可変軽鎖、ならびに/またはSEQ ID NO:43に示したCDRH1、SEQ ID NO:44に示したCDRH2、およびSEQ ID NO:45または59に示したCDRH3を含む可変重鎖を含む。いくつかの態様において、scFvは、SEQ ID NO:46に示したFMC63の可変重鎖領域、およびSEQ ID NO:47に示したFMC63の可変軽鎖領域を含む。いくつかの態様において、可変重鎖および可変軽鎖はリンカーによって接続される。いくつかの態様において、リンカーはSEQ ID NO:29に示される。いくつかの態様において、scFvは、順に、VHと、リンカーと、VLとを含む。いくつかの態様において、scFvは、順に、VLと、リンカーと、VHとを含む。いくつかの態様において、svFcは、SEQ ID NO:30に示したヌクレオチド配列、またはSEQ ID NO:30と少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、もしくは99％の配列同一性を示す配列によってコードされる。いくつかの態様において、scFvは、SEQ ID NO:48に示したアミノ酸配列、またはSEQ ID NO:48と少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、もしくは99％の配列同一性を示す配列を含む。
【０２４５】
いくつかの態様において、scFvはSJ25C1に由来する。SJ25C1は、ヒト由来のCD19を発現するNalm-1および-16細胞に対して作製されたマウスモノクローナルIgG1抗体である（Ling, N. R., et al. (1987). Leucocyte typing III. 302）。SJ25C1抗体は、それぞれSEQ ID NO:52-54に示したCDRH1、H2、およびH3、ならびにそれぞれSEQ ID NO:49-51に示したCDRL1、L2、およびL3配列を含む。SJ25C1抗体は、SEQ ID NO:55のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域(VH)、およびSEQ ID NO:56のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域(VL)を含む。いくつかの態様において、svFvは、SEQ ID NO:49に示したCDRL1、SEQ ID NO:50に示したCDRL2、およびSEQ ID NO:51に示したCDRL3を含む可変軽鎖、ならびに/またはSEQ ID NO:52に示したCDRH1、SEQ ID NO:53に示したCDRH2、およびSEQ ID NO:54に示したCDRH3配列を含む可変重鎖を含む。いくつかの態様において、scFvは、SEQ ID NO:55に示したSJ25C1の可変重鎖領域、およびSEQ ID NO:56に示したSJ25C1の可変軽鎖領域を含む。いくつかの態様において、可変重鎖および可変軽鎖はリンカーによって接続される。いくつかの態様において、リンカーはSEQ ID NO:57に示される。いくつかの態様において、scFvは、順に、VHと、リンカーと、VLとを含む。いくつかの態様において、scFvは、順に、VLと、リンカーと、VHとを含む。いくつかの態様において、scFvは、SEQ ID NO:58に示したアミノ酸配列、またはSEQ ID NO:58と少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、もしくは99％の配列同一性を示す配列を含む。「主要組織適合遺伝子複合体」（MHC）への言及は、いくつかの場合には、細胞機構によってプロセシングされたペプチド抗原を含むポリペプチドのペプチド抗原と複合体を形成することができる、多型ペプチド結合部位または結合溝を含有するタンパク質、概して糖タンパク質を指す。いくつかの場合には、MHC分子は、TCRまたはTCR様抗体などの、T細胞上の抗原受容体が認識可能な立体配座での抗原の提示のために、ペプチドとの複合体、すなわちMHC-ペプチド複合体としてのものを含めて、細胞表面上に表示されるかまたは発現されることができる。概して、MHCクラスI分子は、いくつかの場合には3つのαドメインを備える膜貫通α鎖、および非共有結合したβ2ミクログロブリンを有するヘテロ二量体である。概して、MHCクラスII分子は、2つの膜貫通糖タンパク質、αおよびβから構成され、それらは両方とも、典型的には膜を貫通している。MHC分子は、ペプチドに結合するための1つまたは複数の抗原結合部位、および適切な抗原受容体による認識に必要な配列を含有するMHCの有効部分を含むことができる。いくつかの態様において、MHCクラスI分子は、サイトゾルが起源であるペプチドを細胞表面に送達し、ここでMHC-ペプチド複合体は、概してCD8+ T細胞であるが、いくつかの場合にはCD4+ T細胞などのT細胞によって認識される。いくつかの態様において、MHCクラスII分子は、小胞系が起源であるペプチドを細胞表面に送達し、ここでそれらは、典型的にはCD4+ T細胞によって認識される。概して、MHC分子は、マウスではH-2、ヒトではヒト白血球抗原（HLA）と総称される一群の連鎖する遺伝子座によってコードされる。したがって、典型的には、ヒトMHCはまた、ヒト白血球抗原（HLA）とも呼ばれ得る。
【０２４６】
「MHC-ペプチド複合体」もしくは「ペプチド-MHC複合体」という用語またはその変形は、例えば、概して、MHC分子の結合溝または裂におけるペプチドの非共有結合性相互作用による、ペプチド抗原とMHC分子との複合体または会合を指す。いくつかの態様において、MHC-ペプチド複合体は、細胞の表面上に存在するかまたは表示される。いくつかの態様において、MHC-ペプチド複合体は、抗原受容体、例えばTCR、TCR様CAR、またはその抗原結合部分によって特異的に認識されることができる。
【０２４７】
いくつかの態様において、ポリペプチドの、ペプチド抗原またはエピトープなどのペプチドは、例えば抗原受容体による認識のために、MHC分子と会合することができる。概して、ペプチドは、ポリペプチドまたはタンパク質などのより長い生物学的分子の断片に由来するか、またはそれに基づく。いくつかの態様において、ペプチドは、典型的には、長さが約8〜約24アミノ酸である。いくつかの態様において、ペプチドは、MHCクラスII複合体における認識のために、9〜22アミノ酸または約9〜22アミノ酸の長さを有する。いくつかの態様において、ペプチドは、MHCクラスI複合体における認識のために、8〜13アミノ酸または約8〜13アミノ酸の長さを有する。いくつかの態様において、MHC-ペプチド複合体などのMHC分子に関連したペプチドの認識時に、抗原受容体、例えばTCRまたはTCR様CARは、T細胞増殖、サイトカイン産生、細胞傷害性T細胞応答、または他の応答などのT細胞応答を誘導する、T細胞への活性化シグナルを生じるかまたは誘発する。
【０２４８】
いくつかの態様において、TCR様抗体または抗原結合部分は、当技術分野で公知であるか、または当技術分野で公知の方法によって作製することができる（例えば、米国特許出願公開第2002/0150914号；同第2003/0223994号；同第2004/0191260号；同第2006/0034850号；同第2007/00992530号；同第20090226474号；同第20090304679号；および国際PCT公開番号WO 03/068201を参照されたい）。
【０２４９】
いくつかの態様において、MHC-ペプチド複合体に特異的に結合する抗体またはその抗原結合部分は、特異的なMHC-ペプチド複合体を含有する有効量の免疫原で宿主を免疫することによって作製することができる。いくつかの場合には、MHC-ペプチド複合体のペプチドは、MHCに結合することができる抗原、例えば腫瘍抗原、例えば、ユニバーサル腫瘍抗原、骨髄腫抗原、または以下に記載される他の抗原のエピトープである。いくつかの態様において、次いで、免疫応答を惹起するために有効量の免疫原を宿主に投与し、ここで免疫原は、MHC分子の結合溝におけるペプチドの三次元提示に対する免疫応答を惹起するのに十分な期間、その三次元形態を保持する。次いで、宿主から収集した血清をアッセイして、MHC分子の結合溝におけるペプチドの三次元提示を認識する所望の抗体が生じているかどうかを判定する。いくつかの態様において、生じた抗体を評価して、抗体が、MHC分子単独、関心対象のペプチド単独、およびMHCと無関係なペプチドとの複合体からMHC-ペプチド複合体を識別できることを確認することができる。次いで、所望の抗体を単離することができる。
【０２５０】
いくつかの態様において、MHC-ペプチド複合体に特異的に結合する抗体またはその抗原結合部分は、ファージ抗体ライブラリなどの抗体ライブラリディスプレイ法を使用することによって作製できる。いくつかの態様において、例えば、ライブラリのメンバーが1つまたは複数のCDRの1個または複数個の残基で変異している、変異体Fab、scFv、または他の抗体型のファージディスプレイライブラリを生成することができる。例えば、米国特許出願公開第20020150914号、同第2014/0294841号；およびCohen CJ. et al. (2003) J Mol. Recogn. 16:324-332を参照されたい。
【０２５１】
本明細書における「抗体」という用語は、最も広い意味で用いられ、無傷の抗体、ならびに断片抗原結合（Fab）断片、F(ab')2断片、Fab'断片、Fv断片、組換えIgG（rIgG）断片、抗原に特異的に結合することができる可変重鎖（VH）領域、一本鎖可変断片（scFv）を含む一本鎖抗体断片、および単一ドメイン抗体（例えば、sdAb、sdFv、ナノボディ）断片を含む機能的（抗原結合）抗体断片を含む、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を含む。この用語は、免疫グロブリンの遺伝子操作されたおよび/または他の方法で改変された形態、例えばイントラボディ、ペプチボディ、キメラ抗体、完全ヒト抗体、ヒト化抗体、およびヘテロコンジュゲート抗体、多重特異性、例えば二重特異性抗体、ダイアボディ、トリアボディ、およびテトラボディ、タンデムdi-scFv、タンデムtri-scFvを包含する。特に明記されない限り、「抗体」という用語は、その機能的抗体断片を包含すると理解されるべきである。この用語はまた、IgGならびにそのサブクラス、IgM、IgE、IgA、およびIgDを含む任意のクラスまたはサブクラスの抗体を含む、無傷のまたは完全長の抗体も包含する。
【０２５２】
いくつかの態様において、抗原結合タンパク質、抗体、およびその抗原結合断片は、完全長抗体の抗原を特異的に認識する。いくつかの態様において、抗体の重鎖および軽鎖は、完全長であることができ、または抗原結合部分（Fab、F(ab')2、Fv、もしくは一本鎖Fv断片（scFv））であることができる。他の態様において、抗体重鎖定常領域は、例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA1、IgA2、IgD、およびIgEから選択され、特に、例えば、IgG1、IgG2、IgG3、およびIgG4、より詳細にはIgG1（例えばヒトIgG1）から選択される。別の態様において、抗体軽鎖定常領域は、例えば、κまたはλ、特にκから選択される。
【０２５３】
提供される抗体の中には、抗体断片がある。「抗体断片」とは、無傷の抗体が結合する抗原に結合する無傷の抗体の一部分を含む、無傷の抗体以外の分子を指す。抗体断片の例には、Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2；ダイアボディ；直鎖抗体；可変重鎖（VH）領域、scFvおよび単一ドメインVH単一抗体などの一本鎖抗体分子；ならびに抗体断片から形成される多重特異性抗体が含まれるが、それらに限定されない。特定の態様において、抗体は、scFvなどの、可変重鎖領域および/または可変軽鎖領域を含む一本鎖抗体断片である。
【０２５４】
「可変領域」または「可変ドメイン」という用語は、抗体の抗原への結合に関与する抗体重鎖または軽鎖のドメインを指す。天然抗体の重鎖および軽鎖の可変ドメイン（それぞれ、VHおよびVL）は概して、類似した構造を有し、各ドメインは、4つの保存されたフレームワーク領域（FR）および3つのCDRを含む。（例えば、Kindt et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 (2007)を参照されたい。）単一のVHまたはVLドメインが、抗原結合特異性を付与するのに十分であり得る。さらに、特定の抗原に結合する抗体を、抗原に結合する抗体由来のVHまたはVLドメインを用いて単離して、それぞれ相補的なVLまたはVHドメインのライブラリをスクリーニングしてもよい。例えば、Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993)；Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991)を参照されたい。
【０２５５】
単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインのすべてもしくは一部分、または軽鎖可変ドメインのすべてもしくは一部分を含む抗体断片である。ある特定の態様において、単一ドメイン抗体はヒト単一ドメイン抗体である。いくつかの態様において、CARは、抗原、例えばがんマーカーまたは標的とされる細胞もしくは疾患、例えば腫瘍細胞もしくはがん細胞の細胞表面抗原、例えば本明細書に記載されるかまたは当技術分野で公知の標的抗原のいずれかに特異的に結合する抗体重鎖ドメインを含む。
【０２５６】
抗体断片は、無傷の抗体のタンパク質分解消化、および組換え宿主細胞による産生を含むがそれらに限定されない、様々な技法によって作ることができる。いくつかの態様において、抗体は、組換え生産された断片、例えば、合成リンカー、例えばペプチドリンカーによって連結された2つ以上の抗体領域もしくは鎖を有するものなどの、天然には存在しない配置、および/または天然に存在する無傷の抗体の酵素消化によっては生じ得ない配置を含む断片である。いくつかの態様において、抗体断片はscFvである。
【０２５７】
「ヒト化」抗体は、すべてのまたは実質的にすべてのCDRアミノ酸残基が非ヒトCDRに由来し、すべてのまたは実質的にすべてのFRアミノ酸残基がヒトFRに由来する抗体である。ヒト化抗体は、任意で、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部分を含んでもよい。非ヒト抗体の「ヒト化型」は、典型的には、親の非ヒト抗体の特異性および親和性を保持しながら、ヒトに対する免疫原性を低減させるために、ヒト化を受けている非ヒト抗体のバリアントを指す。いくつかの態様において、ヒト化抗体中のいくつかのFR残基は、例えば、抗体の特異性または親和性を回復するかまたは改善するために、非ヒト抗体（例えば、CDR残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換される。
【０２５８】
したがって、いくつかの態様において、TCR様CARを含むキメラ抗原受容体は、抗体または抗体断片を含有する細胞外部分を含む。いくつかの態様において、抗体または断片は、scFvを含む。いくつかの局面において、キメラ抗原受容体は、抗体または断片を含有する細胞外部分、および細胞内シグナル伝達領域を含む。いくつかの態様において、細胞内シグナル伝達領域は、細胞内シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの態様において、細胞内シグナル伝達ドメインは、一次シグナル伝達ドメイン、T細胞において一次活性化シグナルを誘導することができるシグナル伝達ドメイン、T細胞受容体（TCR）構成要素のシグナル伝達ドメイン、および/または免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ITAM）を含むシグナル伝達ドメインであるかまたはそれを含む。
【０２５９】
いくつかの態様において、組換え受容体、例えばCAR、例えばその抗体部分は、スペーサーをさらに含み、これは、ヒンジ領域、例えば、IgG4ヒンジ領域、ならびに/またはCH1/CLおよび/もしくはFc領域などの、免疫グロブリン定常領域またはそのバリアントもしくは改変バージョンの少なくとも一部分であってもよく、またはそれを含んでもよい。いくつかの態様において、組換え受容体は、スペーサーおよび/またはヒンジ領域をさらに含む。いくつかの態様において、定常領域または一部分は、IgG4またはIgG1などのヒトIgGのものである。いくつかの局面において、定常領域の一部分は、抗原認識構成要素、例えばscFvと膜貫通ドメインとの間のスペーサー領域として働く。スペーサーは、スペーサーの非存在下と比較して、抗原結合後に増加した細胞の応答性を提供する長さのものであることができる。いくつかの例において、スペーサーは、12アミノ酸もしくは約12アミノ酸の長さであるか、または12アミノ酸以下の長さである。例示的なスペーサーには、少なくとも約10〜229アミノ酸、約10〜200アミノ酸、約10〜175アミノ酸、約10〜150アミノ酸、約10〜125アミノ酸、約10〜100アミノ酸、約10〜75アミノ酸、約10〜50アミノ酸、約10〜40アミノ酸、約10〜30アミノ酸、約10〜20アミノ酸、または約10〜15アミノ酸を有する、および列挙された範囲のいずれかの両端の値の間の任意の整数を含むものが含まれる。いくつかの態様において、スペーサー領域は、約12アミノ酸以下、約119アミノ酸以下、または約229アミノ酸以下を有する。例示的なスペーサーには、IgG4ヒンジ単独、CH2およびCH3ドメインに連結されたIgG4ヒンジ、またはCH3ドメインに連結されたIgG4ヒンジが含まれる。例示的なスペーサーには、Hudecek et al. (2013) Clin. Cancer Res., 19:3153または国際特許出願公開番号WO2014031687に記載されているものが含まれるが、それらに限定されない。いくつかの態様において、スペーサーは、SEQ ID NO:1に示される配列を有し、SEQ ID NO:2に示される配列によってコードされる。いくつかの態様において、スペーサーは、SEQ ID NO:3に示される配列を有する。いくつかの態様において、スペーサーは、SEQ ID NO:4に示される配列を有する。
【０２６０】
いくつかの態様において、定常領域または一部分は、IgDのものである。いくつかの態様において、スペーサーは、SEQ ID NO:5に示される配列を有する。いくつかの態様において、スペーサーは、SEQ ID NO:1、3、4、および5のいずれかに対して少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、もしくはそれ以上の配列同一性を示すアミノ酸配列を有する。いくつかの態様において、スペーサーは、SEQ ID NO:31〜39に示される配列を有する。いくつかの態様において、スペーサーは、SEQ ID NO:31〜39のいずれかに対して少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、もしくはそれ以上の配列同一性を示すアミノ酸配列を有する。
【０２６１】
抗原認識ドメインは概して、1つまたは複数の細胞内シグナル伝達構成要素、例えば、CARの場合には、TCR複合体などの抗原受容体複合体を介する活性化、および/または別の細胞表面受容体を介するシグナルを模倣するシグナル伝達構成要素に連結されている。したがって、いくつかの態様において、抗原結合構成要素（例えば抗体）は、1つまたは複数の膜貫通領域および細胞内シグナル伝達領域に連結されている。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは、細胞外ドメインに融合されている。1つの態様において、受容体、例えばCAR中のドメインのうちの1つと天然で会合している膜貫通ドメインが用いられる。いくつかの例において、膜貫通ドメインは、同じまたは異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメインに対するそのようなドメインの結合を回避して、受容体複合体の他のメンバーとの相互作用を最小化するように、選択されるかまたはアミノ酸置換によって改変される。
【０２６２】
いくつかの態様における膜貫通ドメインは、天然の供給源または合成供給源のいずれかに由来する。供給源が天然である場合、いくつかの局面におけるドメインは、任意の膜結合または膜貫通タンパク質に由来する。膜貫通領域には、T細胞受容体のα、β、またはζ鎖、CD28、CD3ε、CD45、CD4、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD33、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134、CD137、CD154に由来する（すなわち、少なくともその膜貫通領域を含む）ものが含まれる。あるいは、いくつかの態様における膜貫通ドメインは合成である。いくつかの局面において、合成膜貫通ドメインは、ロイシンおよびバリンなどの疎水性残基を主に含む。いくつかの局面において、フェニルアラニン、トリプトファン、およびバリンのトリプレットが、合成膜貫通ドメインの各末端に見出される。いくつかの態様において、連結は、リンカー、スペーサー、および/または膜貫通ドメインによるものである。
【０２６３】
細胞内シグナル伝達領域の中には、天然の抗原受容体を介するシグナル、共刺激受容体と組み合わせたそのような受容体を介するシグナル、および/または共刺激受容体のみを介するシグナルを模倣するかまたは近似するものがある。いくつかの態様において、短いオリゴペプチドリンカーまたはポリペプチドリンカー、例えば、グリシンおよびセリンを含有するもの、例えばグリシン-セリンダブレットなどの2〜10アミノ酸の長さのリンカーが存在し、CARの膜貫通ドメインと細胞質シグナル伝達ドメインとの間に連結を形成する。
【０２６４】
受容体、例えばCARは、概して、少なくとも1つまたは複数の細胞内シグナル伝達構成要素を含む。いくつかの態様において、受容体は、T細胞活性化および細胞傷害性を媒介するTCR CD3鎖、例えばCD3ζ鎖などのTCR複合体の細胞内構成要素を含む。したがって、いくつかの局面において、ROR1結合抗体は、1つまたは複数の細胞シグナル伝達モジュールに連結されている。いくつかの態様において、細胞シグナル伝達モジュールは、CD3膜貫通ドメイン、CD3細胞内シグナル伝達ドメイン、および/または他のCD膜貫通ドメインを含む。いくつかの態様において、受容体、例えばCARは、Fc受容体γ、CD8、CD4、CD25、またはCD16などの1つまたは複数の追加の分子の一部分をさらに含む。例えば、いくつかの局面において、CARは、CD3ゼータ（CD3ζ）またはFc受容体γとCD8、CD4、CD25、またはCD16との間のキメラ分子を含む。
【０２６５】
いくつかの態様において、CARの連結時に、CARの細胞質ドメインまたは細胞内シグナル伝達領域は、免疫細胞、例えば、CARを発現するように操作されたT細胞の正常なエフェクター機能または応答のうちの少なくとも1つを活性化する。例えば、いくつかの状況において、CARは、T細胞の機能、例えば細胞溶解活性またはTヘルパー活性、例えばサイトカインまたは他の因子の分泌を誘導する。いくつかの態様において、抗原受容体構成要素または共刺激分子の細胞内シグナル伝達領域の切断部分が、例えば、それがエフェクター機能シグナルを伝達する場合、無傷の免疫刺激鎖の代わりに用いられる。いくつかの態様において、1つまたは複数の細胞内ドメインを例えば含む細胞内シグナル伝達領域は、T細胞受容体（TCR）の細胞質配列を含み、およびいくつかの局面においてはまた、天然の状況でそのような受容体と協調的に作用して、抗原受容体結合後にシグナル伝達を開始する共受容体のもの、および/またはそのような分子の任意の誘導体もしくはバリアント、および/または同じ機能的能力を有する任意の合成配列も含む。
【０２６６】
天然のTCRに関連して、完全な活性化は概して、TCRを介するシグナル伝達だけではなく、共刺激シグナルも必要とする。したがって、いくつかの態様において、完全な活性化を促進するために、二次シグナルまたは共刺激シグナルを生成するための構成要素もCARに含まれる。他の態様において、CARは、共刺激シグナルを生成するための構成要素を含まない。いくつかの局面において、追加のCARが、同じ細胞において発現され、二次シグナルまたは共刺激シグナルを生成するための構成要素を提供する。
【０２６７】
T細胞活性化は、いくつかの局面において、2つのクラスの細胞質シグナル伝達配列：TCRを介して抗原依存性の一次活性化を開始するもの（一次細胞質シグナル伝達配列）、および抗原非依存性の様式で作用して、二次シグナルまたは共刺激シグナルを提供するもの（二次細胞質シグナル伝達配列）によって媒介されると説明される。いくつかの局面において、CARは、そのようなシグナル伝達構成要素の一方または両方を含む。
【０２６８】
いくつかの局面において、CARは、TCR複合体の一次活性化を制御する一次細胞質シグナル伝達配列を含む。刺激性の様式で作用する一次細胞質シグナル伝達配列は、免疫受容体チロシン活性化モチーフまたはITAMとして公知であるシグナル伝達モチーフを含有してもよい。ITAM含有一次細胞質シグナル伝達配列の例には、TCRまたはCD3ζ、FcRγまたはFcRβに由来するものが含まれる。いくつかの態様において、CAR中の細胞質シグナル伝達分子は、CD3ζに由来する細胞質シグナル伝達ドメイン、その一部分、または配列を含有する。
【０２６９】
いくつかの態様において、CARは、CD28、4-1BB、OX40、DAP10、およびICOSなどの、共刺激受容体のシグナル伝達領域および/または膜貫通部分を含む。いくつかの局面において、同じCARが、シグナル伝達領域および共刺激構成要素を両方とも含む。
【０２７０】
いくつかの態様において、シグナル伝達領域は、1つのCAR内に含まれ、他方、共刺激構成要素は、別の抗原を認識する別のCARによって提供される。いくつかの態様において、CARは、活性化CARまたは刺激CAR、および共刺激CARを含み、両方とも同じ細胞上で発現される（WO2014/055668を参照されたい）。
【０２７１】
ある特定の態様において、細胞内シグナル伝達領域は、CD3（例えばCD3ζ）細胞内ドメインに連結されたCD28膜貫通ドメインおよびシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの態様において、細胞内シグナル伝達領域は、CD3ζ細胞内ドメインに連結された、キメラCD28およびCD137（4-1BB、TNFRSF9）共刺激ドメインを含む。
【０２７２】
いくつかの態様において、CARは、細胞質部分に、1つまたは複数の、例えば、2つ以上の共刺激ドメインおよび活性化ドメイン、例えば一次活性化ドメインを包含する。例示的なCARには、CD3ζ、CD28、および4-1BBの細胞内構成要素が含まれる。
【０２７３】
いくつかの場合には、CARは、第一世代、第二世代、および/または第三世代のCARと呼ばれる。いくつかの局面において、第一世代のCARは、抗原結合時にCD3鎖誘導シグナルを提供するだけのものである；いくつかの局面において、第二世代のCARは、そのようなシグナルおよび共刺激シグナルを提供するもの、例えば、CD28またはCD137などの共刺激受容体由来の細胞内シグナル伝達ドメインを含むものである；いくつかの局面において、いくつかの局面における第三世代のCARは、異なる共刺激受容体の複数の共刺激ドメインを含むものである。
【０２７４】
いくつかの態様において、キメラ抗原受容体は、本明細書に記載される抗体または断片を含有する細胞外部分を含む。いくつかの局面において、キメラ抗原受容体は、本明細書に記載される抗体または断片を含有する細胞外部分、および細胞内シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの態様において、抗体または断片は、scFvまたは単一ドメインVH抗体を含み、細胞内ドメインは、ITAMを含有する。いくつかの局面において、細胞内シグナル伝達ドメインは、CD3ゼータ（CD3ζ）鎖のζ鎖のシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの態様において、キメラ抗原受容体は、細胞外ドメインと細胞内シグナル伝達領域との間に配置された膜貫通ドメインを含む。
【０２７５】
いくつかの局面において、膜貫通ドメインは、CD28の膜貫通部分を含有する。細胞外ドメインと膜貫通ドメインとは、直接または間接的に連結されることができる。いくつかの態様において、細胞外ドメインと膜貫通ドメインとは、本明細書に記載されるいずれかなどのスペーサーによって連結されている。いくつかの態様において、キメラ抗原受容体は、T細胞共刺激分子の細胞内ドメインを、例えば膜貫通ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインとの間に含有する。いくつかの局面において、T細胞共刺激分子は、CD28または4-1BBである。
【０２７６】
いくつかの態様において、CARは、抗体、例えば抗体断片、CD28の膜貫通部分またはその機能的バリアントであるかまたはそれを含有する膜貫通ドメイン、ならびにCD28のシグナル伝達部分またはその機能的バリアントおよびCD3ζのシグナル伝達部分またはその機能的バリアントを含有する細胞内シグナル伝達ドメインを含有する。いくつかの態様において、CARは、抗体、例えば抗体断片、CD28の膜貫通部分またはその機能的バリアントであるかまたはそれを含有する膜貫通ドメイン、ならびに4-1BBのシグナル伝達部分またはその機能的バリアントおよびCD3ζのシグナル伝達部分またはその機能的バリアントを含有する細胞内シグナル伝達ドメインを含有する。いくつかのそのような態様において、受容体は、ヒトIg分子などのIg分子の一部分、例えばIgヒンジ、例えばIgG4ヒンジを含有するスペーサー、例えばヒンジのみのスペーサーをさらに含む。
【０２７７】
いくつかの態様において、受容体、例えばCARの膜貫通ドメインは、ヒトCD28の膜貫通ドメインまたはそのバリアント、例えば、ヒトCD28（アクセッション番号P10747.1）の27アミノ酸膜貫通ドメインであるか、または、SEQ ID NO:8に示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO:8に対して少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、もしくはそれ以上の配列同一性を示すアミノ酸配列を含む膜貫通ドメインであり；いくつかの態様において、組換え受容体の膜貫通ドメイン含有部分は、SEQ ID NO:9に示されるアミノ酸配列、またはそれに対して少なくとももしくは約85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、もしくはそれ以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２７８】
いくつかの態様において、キメラ抗原受容体は、T細胞共刺激分子の細胞内ドメインを含有する。いくつかの局面において、T細胞共刺激分子は、CD28または4-1BBである。
【０２７９】
いくつかの態様において、細胞内シグナル伝達領域は、ヒトCD28の細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはその機能的バリアントもしくは一部分、例えば、その41アミノ酸ドメインおよび/または天然CD28タンパク質の位置186〜187にLLからGGへの置換を有するそのようなドメインを含む。いくつかの態様において、細胞内シグナル伝達ドメインは、SEQ ID NO:10もしくは11に示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO:10もしくは11に対して少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、もしくはそれ以上の配列同一性を示すアミノ酸配列を含むことができる。いくつかの態様において、細胞内領域は、4-1BBの細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはその機能的バリアントもしくは一部分、例えば、ヒト4-1BB（アクセッション番号Q07011.1）の42アミノ酸細胞質ドメインまたはその機能的バリアントもしくは一部分、例えば、SEQ ID NO:12に示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO:12に対して少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、もしくはそれ以上の配列同一性を示すアミノ酸配列を含む。
【０２８０】
いくつかの態様において、細胞内シグナル伝達領域は、ヒトCD3鎖、任意でCD3ζ刺激シグナル伝達ドメインまたはその機能的バリアント、例えば、ヒトCD3ζのアイソフォーム3（アクセッション番号P20963.2）の112 AAの細胞質ドメイン、または米国特許第7,446,190号もしくは米国特許第8,911,993号に記載されているCD3ζシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの態様において、細胞内シグナル伝達領域は、SEQ ID NO:13、14、もしくは15に示されるアミノ酸配列、またはSEQ ID NO:13、14、もしくは15に対して少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、もしくはそれ以上の配列同一性を示すアミノ酸配列を含む。
【０２８１】
いくつかの局面において、スペーサーは、IgGのヒンジ領域のみ、例えばIgG4またはIgG1のヒンジのみ、例えば、SEQ ID NO:1に示されるヒンジのみのスペーサーを含有する。他の態様において、スペーサーは、CH2および/またはCH3ドメインに連結されたIgヒンジ、例えばIgG4ヒンジである。いくつかの態様において、スペーサーは、SEQ ID NO:3に示されるような、CH2およびCH3ドメインに連結されたIgヒンジ、例えばIgG4ヒンジである。いくつかの態様において、スペーサーは、SEQ ID NO:4に示されるような、CH3ドメインのみに連結されたIgヒンジ、例えばIgG4ヒンジである。いくつかの態様において、スペーサーは、グリシン-セリンリッチ配列または他のフレキシブルリンカー、例えば公知のフレキシブルリンカーであるかまたはそれを含む。
【０２８２】
2. T細胞受容体
いくつかの態様において、腫瘍の抗原、ウイルスまたは自己免疫タンパク質などの標的ポリペプチドのペプチドエピトープまたはT細胞エピトープを認識するT細胞受容体（TCR）またはその抗原結合部分を発現する操作された細胞、例えばT細胞が提供される。
【０２８３】
いくつかの態様において、「T細胞受容体」または「TCR」は、可変α鎖およびβ鎖（それぞれ、TCRαおよびTCRβとしても知られる）もしくは可変γ鎖およびδ鎖（それぞれ、TCRαおよびTCRβとしても知られる）、またはその抗原結合部分を含有し、MHC分子に結合したペプチドに特異的に結合することができる分子である。いくつかの態様において、TCRはαβ形態である。典型的には、αβ形態およびγδ形態で存在するTCRは概して、構造的に類似しているが、それらを発現するT細胞は、別個の解剖学的場所または機能を有し得る。TCRは、細胞の表面上にまたは可溶型で見出されることができる。概して、TCRは、T細胞（またはTリンパ球）の表面上に見出され、ここで概して、主要組織適合遺伝子複合体（MHC）分子に結合した抗原を認識することを担う。
【０２８４】
特に明記されない限り、「TCR」という用語は、完全なTCR、およびその抗原結合部分または抗原結合断片を包含すると理解されるべきである。いくつかの態様において、TCRは、αβ形態またはγδ形態のTCRを含む、無傷または完全長のTCRである。いくつかの態様において、TCRは、完全長未満のTCRであるが、MHC分子に結合した特異的なペプチドに結合する、例えば、MHC-ペプチド複合体に結合する抗原結合部分である。いくつかの場合には、TCRの抗原結合部分または断片は、完全長または無傷のTCRの構造ドメインの一部分のみを含有することができるが、それでもなお、完全なTCRが結合するMHC-ペプチド複合体などのペプチドエピトープに結合することができる。いくつかの場合には、抗原結合部分は、特異的なMHC-ペプチド複合体に結合するための結合部位を形成するのに十分なTCRの可変ドメイン、例えばTCRの可変α鎖および可変β鎖を含有する。概して、TCRの可変鎖は、ペプチド、MHC、および/またはMHC-ペプチド複合体の認識に関与する相補性決定領域を含有する。
【０２８５】
いくつかの態様において、TCRの可変ドメインは、概して抗原認識ならびに結合能力および特異性への主たる寄与因子である、超可変ループまたは相補性決定領域（CDR）を含有する。いくつかの態様において、TCRのCDRまたはそれらの組み合わせは、所与のTCR分子の抗原結合部位のすべてまたは実質的にすべてを形成する。TCR鎖の可変領域内の様々なCDRは概して、CDRと比較してTCR分子の間でより低い変動性を概して示すフレームワーク領域（FR）によって分離されている（例えば、Jores et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. U.S.A. 87:9138, 1990；Chothia et al., EMBO J. 7:3745, 1988を参照されたい；またLefranc et al., Dev. Comp. Immunol. 27:55, 2003も参照されたい）。いくつかの態様において、CDR3は、抗原結合もしくは特異性を担う主なCDRであるか、または抗原認識のため、および/もしくはペプチド-MHC複合体のプロセシングされたペプチド部分との相互作用のために、所与のTCR可変領域上の3つのCDRの中で最も重要である。いくつかの状況において、α鎖のCDR1は、ある特定の抗原ペプチドのN末端部分と相互作用することができる。いくつかの状況において、β鎖のCDR1は、ペプチドのC末端部分と相互作用することができる。いくつかの状況において、CDR2は、MHC-ペプチド複合体のMHC部分との相互作用またはMHC部分の認識に最も強く寄与するか、またはそれを担う主たるCDRである。いくつかの態様において、β鎖の可変領域は、概してスーパー抗原結合に関与し、抗原認識には関与しないさらなる超可変領域（CDR4またはHVR4）を含有することができる（Kotb (1995) Clinical Microbiology Reviews, 8:411-426）。
【０２８６】
いくつかの態様において、TCRはまた、定常ドメイン、膜貫通ドメイン、および/または短い細胞質尾部も含有することができる（例えば、Janeway et al., Immunobiology: The Immune System in Health and Disease, 3rd Ed., Current Biology Publications, p. 4:33, 1997を参照されたい）。いくつかの局面において、TCRの各鎖は、1つのN末端免疫グロブリン可変ドメイン、1つの免疫グロブリン定常ドメイン、膜貫通領域、およびC末端に短い細胞質尾部を保有することができる。いくつかの態様において、TCRは、シグナル伝達の媒介に関与するCD3複合体のインバリアントタンパク質と会合している。
【０２８７】
いくつかの態様において、TCR鎖は、1つまたは複数の定常ドメインを含有する。例えば、所与のTCR鎖（例えば、α鎖またはβ鎖）の細胞外部分は、2つの免疫グロブリン様ドメイン、例えば可変ドメイン（例えば、VαまたはVβ；典型的にはKabatナンバリングに基づくアミノ酸1〜116、Kabat et al., "Sequences of Proteins of Immunological Interest, US Dept. Health and Human Services, Public Health Service National Institutes of Health, 1991, 5th ed.）、および細胞膜に隣接する定常ドメイン（例えば、α鎖定常ドメインもしくはCα、典型的にはKabatナンバリングに基づく鎖の位置117〜259、またはβ鎖定常ドメインもしくはCβ、典型的にはKabatに基づく鎖の位置117〜295）を含有することができる。例えば、いくつかの場合には、2本の鎖によって形成されるTCRの細胞外部分は、2つの膜近位定常ドメイン、および2つの膜遠位可変ドメインを含有し、この可変ドメインは各々、CDRを含有する。TCRの定常ドメインは、システイン残基がジスルフィド結合を形成し、それによってTCRの2本の鎖を連結する短い接続配列を含有し得る。いくつかの態様において、TCRが定常ドメイン中に2つのジスルフィド結合を含有するように、TCRは、α鎖およびβ鎖の各々に追加のシステイン残基を有し得る。
【０２８８】
いくつかの態様において、TCR鎖は膜貫通ドメインを含有する。いくつかの態様において、膜貫通ドメインは正に荷電している。いくつかの場合には、TCR鎖は細胞質尾部を含有する。いくつかの場合には、その構造は、TCRがCD3およびそのサブユニットのような他の分子と会合することを可能にする。例えば、膜貫通領域を有する定常ドメインを含有するTCRは、タンパク質を細胞膜に固定し、CD3シグナル伝達装置または複合体のインバリアントサブユニットと会合し得る。CD3シグナル伝達サブユニット（例えば、CD3γ、CD3δ、CD3ε、およびCD3ζ鎖）の細胞内尾部は、TCR複合体のシグナル伝達能力に関与する1つまたは複数の免疫受容体チロシン活性化モチーフまたはITAMを含有する。
【０２８９】
いくつかの態様において、TCRは、2本の鎖αおよびβ（または任意でγおよびδ）のヘテロ二量体であり得るか、または一本鎖TCR構築物であり得る。いくつかの態様において、TCRは、例えば1つまたは複数のジスルフィド結合によって連結されている、2本の別々の鎖（α鎖およびβ鎖、またはγ鎖およびδ鎖）を含有するヘテロ二量体である。
【０２９０】
いくつかの態様において、TCRは、実質的に完全長のコード配列が容易に入手可能である、Vα、β鎖の配列などの公知のTCR配列から生成することができる。V鎖配列を含む完全長TCR配列を細胞供給源から得るための方法は、周知である。いくつかの態様において、TCRをコードする核酸は、例えば、所与の1つまたは複数の細胞内のもしくは細胞から単離されたTCRコード核酸のポリメラーゼ連鎖反応（PCR）増幅、または公的に入手可能なTCR DNA配列の合成によって、様々な供給源から得ることができる。
【０２９１】
いくつかの態様において、TCRは、生物学的供給源から、例えば細胞から、例えば、T細胞（例えば細胞傷害性T細胞）、T細胞ハイブリドーマ、または他の公的に入手可能な供給源から得られる。いくつかの態様において、T細胞は、インビボで単離された細胞から得ることができる。いくつかの態様において、TCRは、胸腺的に選択されたTCRである。いくつかの態様において、TCRは、ネオエピトープ拘束性TCRである。いくつかの態様において、T細胞は、培養されたT細胞ハイブリドーマまたはクローンであることができる。いくつかの態様において、TCRまたはその抗原結合部分またはその抗原結合断片は、TCRの配列の知識から合成的に生成することができる。
【０２９２】
いくつかの態様において、TCRは、標的ポリペプチド抗原またはその標的T細胞エピトープに対して候補TCRのライブラリをスクリーニングすることから同定されたかまたは選択されたTCRから生成される。TCRライブラリは、PBMC、脾臓、または他のリンパ系器官中に存在する細胞を含む、対象から単離されたT細胞からの、VαおよびVβのレパートリの増幅によって生成することができる。いくつかの場合には、T細胞は、腫瘍浸潤リンパ球（TIL）から増幅することができる。いくつかの態様において、TCRライブラリは、CD4+またはCD8+細胞から生成することができる。いくつかの態様において、TCRは、正常な健常対象のT細胞供給源、すなわち正常なTCRライブラリから増幅することができる。いくつかの態様において、TCRは、罹患対象のT細胞供給源、すなわち罹患TCRライブラリから増幅することができる。いくつかの態様において、ヒトから得られたT細胞などの試料において、例えばRT-PCRによってVαおよびVβの遺伝子レパートリを増幅するために、縮重プライマーが用いられる。いくつかの態様において、scTvライブラリは、ナイーブVαおよびVβライブラリからアセンブルすることができ、ここで、増幅産物がクローニングされるか、またはリンカーによって分離されるようにアセンブルされる。対象および細胞の供給源に依存して、ライブラリは、HLA対立遺伝子特異的であることができる。あるいは、いくつかの態様において、TCRライブラリは、親または骨格TCR分子の突然変異誘発または多様化によって生成することができる。いくつかの局面において、TCRは、例えば、α鎖またはβ鎖の突然変異誘発などによって、指向性進化に供される。いくつかの局面において、TCRのCDR内の特定の残基が、変更される。いくつかの態様において、選択されたTCRを、親和性成熟によって改変することができる。いくつかの態様において、抗原特異的T細胞は、ペプチドに対するCTL活性を評価するためのスクリーニングなどによって選択され得る。いくつかの局面において、例えば、抗原特異的T細胞上に存在するTCRは、結合活性、例えば、抗原に対する特定の親和性または結合力などによって選択され得る。
【０２９３】
いくつかの態様において、TCRまたはその抗原結合部分は、改変されているかまたは操作されているものである。いくつかの態様において、特異的なMHC-ペプチド複合体に対するより高い親和性などの変更された特性を有するTCRを生成するために、指向性進化法が用いられる。いくつかの態様において、指向性進化は、酵母ディスプレイ（Holler et al. (2003) Nat Immunol, 4, 55-62；Holler et al. (2000) Proc Natl Acad Sci U S A, 97, 5387-92）、ファージディスプレイ（Li et al. (2005) Nat Biotechnol, 23, 349-54）、またはT細胞ディスプレイ（Chervin et al. (2008) J Immunol Methods, 339, 175-84）を含むがそれらに限定されないディスプレイ法によって達成される。いくつかの態様において、ディスプレイアプローチは、公知の、親または参照TCRを操作することまたは改変することを含む。例えば、いくつかの場合には、野生型TCRを、CDRのうちの1個または複数個の残基が変異している変異誘発されたTCRを作製するための鋳型として用いることができ、所望の標的抗原に対するより高い親和性などの所望の変更された特性を有する変異体が選択される。
【０２９４】
いくつかの態様において、関心対象のTCRの作製または生成における使用のための標的ポリペプチドのペプチドは、公知であるか、または当業者によって容易に同定されることができる。いくつかの態様において、TCRまたは抗原結合部分の生成における使用に適しているペプチドは、下記の標的ポリペプチドなどの、関心対象の標的ポリペプチド中のHLA拘束性モチーフの存在に基づいて決定することができる。いくつかの態様において、ペプチドは、利用可能なコンピュータ予測モデルを用いて同定される。いくつかの態様において、MHCクラスI結合部位を予測するために、そのようなモデルは、ProPred1（Singh and Raghava (2001) Bioinformatics 17(12):1236-1237）、およびSYFPEITHI（Schuler et al. (2007) Immunoinformatics Methods in Molecular Biology, 409(1): 75-93 2007を参照されたい）を含むが、それらに限定されない。いくつかの態様において、MHC拘束性エピトープはHLA-A0201であり、これは、すべての白人のおよそ39〜46％において発現され、そのため、TCRまたは他のMHC-ペプチド結合分子を調製する使用のためのMHC抗原の適している選択である。
【０２９５】
コンピュータ予測モデルを用いたHLA-A0201結合モチーフならびにプロテアソームおよび免疫プロテアソームについての切断部位が、当業者に公知である。MHCクラスI結合部位を予測するために、そのようなモデルは、ProPred1（Singh and Raghava, ProPred:prediction of HLA-DR binding sites. BIOINFORMATICS 17 (12):1236-1237 2001により詳細に記載されている）、およびSYFPEITHI（Schuler et al. SYFPEITHI, Database for Searching and T-Cell Epitope Prediction. in Immunoinformatics Methods in Molecular Biology, vol 409(1): 75-93 2007を参照されたい）を含むが、それらに限定されない。
【０２９６】
いくつかの態様において、TCRまたはその抗原結合部分は、結合特性などの1つまたは複数の特性が変更されている、組換え生産された天然のタンパク質またはその変異型であってもよい。いくつかの態様において、TCRは、ヒト、マウス、ラット、または他の哺乳動物などの様々な動物種のうちの1つに由来してもよい。TCRは、細胞結合型であってもよく、または可溶型であってもよい。いくつかの態様において、提供される方法の目的で、TCRは、細胞の表面上に発現される細胞結合型である。
【０２９７】
いくつかの態様において、TCRは完全長TCRである。いくつかの態様において、TCRは抗原結合部分である。いくつかの態様において、TCRは二量体TCR（dTCR）である。いくつかの態様において、TCRは一本鎖TCR（sc-TCR）である。いくつかの態様において、dTCRまたはscTCRは、WO 03/020763、WO 04/033685、WO2011/044186に記載されている構造を有する。
【０２９８】
いくつかの態様において、TCRは、膜貫通配列に対応する配列を含有する。いくつかの態様において、TCRは、細胞質配列に対応する配列を含有する。いくつかの態様において、TCRは、CD3とTCR複合体を形成することができる。いくつかの態様において、dTCRまたはscTCRを含むTCRのいずれかは、シグナル伝達ドメインに連結されることができ、T細胞の表面上に活性TCRを生じる。いくつかの態様において、TCRは、細胞の表面上に発現される。
【０２９９】
いくつかの態様において、dTCRは、TCRα鎖可変領域配列に対応する配列がTCRα鎖定常領域細胞外配列に対応する配列のN末端に融合している第1のポリペプチド、およびTCRβ鎖可変領域配列に対応する配列がTCRβ鎖定常領域細胞外配列に対応する配列のN末端に融合している第2のポリペプチドを含有し、第1のポリペプチドと第2のポリペプチドとはジスルフィド結合によって連結されている。いくつかの態様において、結合は、天然の二量体αβTCR中に存在する天然の鎖間ジスルフィド結合に対応することができる。いくつかの態様において、鎖間ジスルフィド結合は、天然のTCR中に存在しない。例えば、いくつかの態様において、1つまたは複数のシステインを、dTCRポリペプチド対の定常領域細胞外配列中に組み込むことができる。いくつかの場合には、天然および非天然のジスルフィド結合が両方とも、望ましい可能性がある。いくつかの態様において、TCRは、膜に固定するための膜貫通配列を含有する。
【０３００】
いくつかの態様において、dTCRは、可変αドメイン、定常αドメイン、および定常αドメインのC末端に付着した第1の二量体化モチーフを含有するTCRα鎖、ならびに可変βドメイン、定常βドメイン、および定常βドメインのC末端に付着した第1の二量体化モチーフを含むTCRβ鎖を含有し、ここで、第1および第2の二量体化モチーフは容易に相互作用して、第1の二量体化モチーフ中のアミノ酸と第2の二量体化モチーフ中のアミノ酸との間に共有結合を形成し、TCRα鎖とTCRβ鎖を一緒に連結する。
【０３０１】
いくつかの態様において、TCRはscTCRである。典型的には、scTCRは、当業者に公知の方法を用いて生成することができる。例えば、Soo Hoo, W. F. et al. PNAS (USA) 89, 4759 (1992)；Wulfing, C. and Pluckthun, A., J. Mol. Biol. 242, 655 (1994)；Kurucz, I. et al. PNAS (USA) 90 3830 (1993)；国際公開PCT番号WO 96/13593、WO 96/18105、WO99/60120、WO99/18129、WO 03/020763、WO2011/044186；およびSchlueter, C. J. et al. J. Mol. Biol. 256, 859 (1996)を参照されたい。いくつかの態様において、scTCRは、TCR鎖の会合を容易にするために導入された非天然のジスルフィド鎖間結合を含有する（例えば、国際公開PCT番号WO 03/020763を参照されたい）。いくつかの態様において、scTCRは、そのC末端に融合した異種のロイシンジッパーが鎖の会合を容易にする、非ジスルフィド結合切断型TCRである（例えば、国際公開PCT番号WO99/60120を参照されたい）。いくつかの態様において、scTCRは、ペプチドリンカーを介してTCRβ可変ドメインに共有結合で連結されたTCRα可変ドメインを含有する（例えば、国際公開PCT番号WO99/18129を参照されたい）。
【０３０２】
いくつかの態様において、scTCRは、TCRα鎖可変領域に対応するアミノ酸配列によって構成される第1のセグメント、TCRβ鎖定常ドメイン細胞外配列に対応するアミノ酸配列のN末端に融合したTCRβ鎖可変領域配列に対応するアミノ酸配列によって構成される第2のセグメント、および第1のセグメントのC末端を第2のセグメントのN末端に連結するリンカー配列を含有する。
【０３０３】
いくつかの態様において、scTCRは、α鎖細胞外定常ドメイン配列のN末端に融合したα鎖可変領域配列によって構成される第1のセグメント、ならびにβ鎖細胞外定常配列および膜貫通配列の配列のN末端に融合したβ鎖可変領域配列によって構成される第2のセグメント、ならびに任意で、第1のセグメントのC末端を第2のセグメントのN末端に連結するリンカー配列を含有する。
【０３０４】
いくつかの態様において、scTCRは、β鎖細胞外定常ドメイン配列のN末端に融合したTCRβ鎖可変領域配列によって構成される第1のセグメント、ならびにα鎖細胞外定常配列および膜貫通配列の配列のN末端に融合したα鎖可変領域配列によって構成される第2のセグメント、ならびに任意で、第1のセグメントのC末端を第2のセグメントのN末端に連結するリンカー配列を含有する。
【０３０５】
いくつかの態様において、第1および第2のTCRセグメントを連結するscTCRのリンカーは、TCRの結合特異性を保持しながら、単一のポリペプチド鎖を形成できる任意のリンカーであることができる。いくつかの態様において、リンカー配列は、例えば、式-P-AA-P-を有してもよく、式中、Pはプロリンであり、AAはアミノ酸配列を表し、アミノ酸はグリシンおよびセリンである。いくつかの態様において、第1および第2のセグメントは、その可変領域配列がそのような結合のために配向されるように対合される。したがって、いくつかの場合には、リンカーは、第1のセグメントのC末端と第2のセグメントのN末端との間、またはその逆の間の距離を橋渡しするのに十分な長さを有するが、標的リガンドに対するscTCRの結合を遮断するかまたは低減するほど長くはない。いくつかの態様において、リンカーは、10〜45アミノ酸または約10〜45アミノ酸、例えば10〜30アミノ酸または26〜41アミノ酸残基、例えば、29、30、31、もしくは32アミノ酸を含有することができる。いくつかの態様において、リンカーは、式-PGGG-(SGGGG)5-P-を有し、式中、Pはプロリンであり、Gはグリシンであり、かつSはセリンである（SEQ ID NO:16）。いくつかの態様において、リンカーは、配列
2020522695.tif 000021
を有する。
【０３０６】
いくつかの態様において、scTCRは、α鎖の定常ドメインの免疫グロブリン領域の残基をβ鎖の定常ドメインの免疫グロブリン領域の残基に連結する、共有ジスルフィド結合を含有する。いくつかの態様において、天然のTCR中の鎖間ジスルフィド結合は存在しない。例えば、いくつかの態様において、1つまたは複数のシステインを、scTCRポリペプチドの第1および第2のセグメントの定常領域細胞外配列中に組み込むことができる。いくつかの場合には、天然および非天然のジスルフィド結合が両方とも、望ましい可能性がある。
【０３０７】
導入された鎖間ジスルフィド結合を含有するdTCRまたはscTCRのいくつかの態様において、天然のジスルフィド結合は存在しない。いくつかの態様において、天然の鎖間ジスルフィド結合を形成する天然のシステインのうちの1つまたは複数は、セリンまたはアラニンなどの別の残基に置換されている。いくつかの態様において、導入されるジスルフィド結合は、第1および第2のセグメント上の非システイン残基をシステインに変異させることによって形成することができる。TCRの例示的な非天然のジスルフィド結合は、国際公開PCT番号WO2006/000830に記載されている。
【０３０８】
いくつかの態様において、TCRまたはその抗原結合断片は、10-5〜10-12M または約10-5〜10-12 Mならびにその中のすべての個々の値および範囲の、標的抗原に対する平衡結合定数で親和性を示す。いくつかの態様において、標的抗原は、MHC-ペプチド複合体またはリガンドである。
【０３０９】
いくつかの態様において、α鎖およびβ鎖などのTCRをコードする1つまたは複数の核酸は、PCR、クローニング、または他の適している手段によって増幅し、適している1つまたは複数の発現ベクターにクローニングすることができる。発現ベクターは、任意の適している組換え発現ベクターであることができ、任意の適している宿主を形質転換するかまたはトランスフェクトするために用いることができる。適しているベクターには、プラスミドおよびウイルスなどの、増殖および増大のため、または発現のため、またはその両方のために設計されたものが含まれる。
【０３１０】
いくつかの態様において、ベクターは、pUCシリーズ（Fermentas Life Sciences）、pBluescriptシリーズ（Stratagene, LaJolla, Calif.）、pETシリーズ（Novagen, Madison, Wis.）、pGEXシリーズ（Pharmacia Biotech, Uppsala, Sweden）、またはpEXシリーズ（Clontech, Palo Alto, Calif.）のベクターであることができる。いくつかの場合には、λG10、λGT11、λZapII（Stratagene）、λEMBL4、およびλNM1149などのバクテリオファージベクターも用いることができる。いくつかの態様において、植物発現ベクターを用いることができ、これには、pBI01、pBI101.2、pBI101.3、pBI121、およびpBIN19（Clontech）が含まれる。いくつかの態様において、動物発現ベクターには、pEUK-Cl、pMAM、およびpMAMneo（Clontech）が含まれる。いくつかの態様において、レトロウイルスベクターなどのウイルスベクターが用いられる。
【０３１１】
いくつかの態様において、組換え発現ベクターは、標準的な組換えDNA技法を用いて調製することができる。いくつかの態様において、ベクターは、適切なように、かつベクターがDNAベースであるかまたはRNAベースであるかを考慮に入れて、ベクターが導入されることになる宿主のタイプ（例えば、細菌、真菌、植物、または動物）に特異的である制御配列、例えば転写および翻訳開始および終止コドンを含有することができる。いくつかの態様において、ベクターは、TCRまたは抗原結合部分（または他のMHC-ペプチド結合分子）をコードするヌクレオチド配列に機能的に連結された非天然のプロモーターを含有することができる。いくつかの態様において、プロモーターは、非ウイルスプロモーターまたはウイルスプロモーター、例えばサイトメガロウイルス（CMV）プロモーター、SV40プロモーター、RSVプロモーター、およびマウス幹細胞ウイルスの長い末端反復配列において見出されるプロモーターであることができる。他の公知のプロモーターもまた、企図される。
【０３１２】
いくつかの態様において、TCRをコードするベクターを生成するために、関心対象のTCRを発現するT細胞クローンから単離された全cDNAから、α鎖およびβ鎖をPCR増幅して、発現ベクターにクローニングする。いくつかの態様において、α鎖とβ鎖とは、同じベクターにクローニングされる。いくつかの態様において、α鎖とβ鎖とは、異なるベクターにクローニングされる。いくつかの態様において、生成されたα鎖およびβ鎖は、レトロウイルスベクター、例えばレンチウイルスベクター中に組み込まれる。
【０３１３】
3. マルチターゲティング
いくつかの態様において、細胞および方法は、マルチターゲティング戦略、例えば、各々が同じかまたは異なる抗原を認識し、典型的には各々が異なる細胞内シグナル伝達構成要素を含む、2つ以上の遺伝子操作された受容体の細胞上での発現を含む。そのようなマルチターゲティング戦略は、例えば、PCT公開番号WO 2014055668 A1（例えば、オフターゲット、例えば正常細胞上では個別に存在するが、処置されるべき疾患または状態の細胞上でのみ一緒に存在する2つの異なる抗原をターゲティングする、活性化CARと共刺激CARとの組み合わせを記載している）、ならびにFedorov et al., Sci. Transl. Medicine, 5(215)（2013）（活性化CARおよび阻害性CARを発現する細胞、例えば、活性化CARが、正常または非罹患細胞、および処置されるべき疾患または状態の細胞の両方上で発現される1つの抗原に結合し、阻害性CARが、正常細胞または処置されることが望ましくない細胞でのみ発現される別の抗原に結合するものを記載している）に記載されている。
【０３１４】
例えば、いくつかの態様において、細胞は、概して第1の受容体によって認識される抗原、例えば第1の抗原への特異的結合時に、細胞への活性化シグナルを誘導することができる、第1の遺伝子操作された抗原受容体（例えば、CARまたはTCR）を発現する受容体を含む。いくつかの態様において、細胞は、概して第2の受容体によって認識される第2の抗原への特異的結合時に、免疫細胞への共刺激シグナルを誘導することができる、第2の遺伝子操作された抗原受容体（例えば、CARまたはTCR）、例えば、キメラ共刺激受容体をさらに含む。いくつかの態様において、第1の抗原と第2の抗原とは同じである。いくつかの態様において、第1の抗原と第2の抗原とは異なる。
【０３１５】
いくつかの態様において、第1および/または第2の遺伝子操作された抗原受容体（例えば、CARまたはTCR）は、細胞への活性化シグナルを誘導することができる。いくつかの態様において、受容体は、ITAMまたはITAM様モチーフを含有する細胞内シグナル伝達構成要素を含む。いくつかの態様において、第1の受容体によって誘導される活性化は、細胞におけるシグナル伝達またはタンパク質発現の変化を含み、ITAMリン酸化および/もしくはITAM媒介性シグナル伝達カスケードの開始などの免疫応答の開始、免疫学的シナプスの形成および/もしくは結合した受容体の近くの分子（例えば、CD4もしくはCD8など）のクラスター化、NF-κBおよび/もしくはAP-1などの1つもしくは複数の転写因子の活性化、ならびに/またはサイトカインなどの因子の遺伝子発現の誘導、増殖、ならびに/または生存を結果としてもたらす。
【０３１６】
いくつかの態様において、第1および/または第2の受容体は、CD28、CD137（4-1BB）、OX40、および/またはICOSなどの共刺激受容体の細胞内シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの態様において、第1の受容体と第2の受容体とは、異なる共刺激受容体の細胞内シグナル伝達ドメインを含む。1つの態様において、第1の受容体はCD28共刺激シグナル伝達領域を含有し、第2の受容体は4-1BB共刺激シグナル伝達領域を含有するか、またはその逆である。
【０３１７】
いくつかの態様において、第1および/または第2の受容体は、ITAMまたはITAM様モチーフを含有する細胞内シグナル伝達ドメインおよび共刺激受容体の細胞内シグナル伝達ドメインを両方とも含む。
【０３１８】
いくつかの態様において、第1の受容体は、ITAMまたはITAM様モチーフを含有する細胞内シグナル伝達ドメインを含有し、第2の受容体は、共刺激受容体の細胞内シグナル伝達ドメインを含有する。同じ細胞において誘導される活性化シグナルと組み合わせた共刺激シグナルは、免疫応答、例えば、遺伝子発現の増加、サイトカインおよび他の因子の分泌、ならびに細胞死滅などのT細胞媒介性エフェクター機能のような堅牢なかつ持続的な免疫応答を結果としてもたらすものである。
【０３１９】
いくつかの態様において、第1の受容体単独の連結または第2の受容体単独の連結はいずれも、堅牢な免疫応答を誘導しない。いくつかの局面において、1つの受容体のみが連結されている場合、細胞は、抗原に対して寛容もしくは非応答性になり、または阻害され、かつ/または増殖するかもしくは因子を分泌するかもしくはエフェクター機能を実行するように誘導されない。しかし、いくつかのそのような態様において、第1および第2の抗原を発現する細胞の遭遇時などの、多数の受容体が連結される時には、例えば、1つもしくは複数のサイトカインの分泌、増殖、持続性、および/または標的細胞の細胞傷害性死滅などの免疫エフェクター機能の実行によって示されるような、完全な免疫活性化または刺激などの所望の応答が達成される。
【０３２０】
いくつかの態様において、2つの受容体は、受容体のうちの一方によるその抗原への結合は細胞を活性化するかまたは応答を誘導するが、第2の阻害性受容体によるその抗原への結合はその応答を抑制するかまたは減衰させるシグナルを誘導するように、それぞれ、細胞への活性化シグナルおよび阻害性シグナルを誘導する。例は、活性化CARと阻害性CARまたはiCARとの組み合わせである。例えば、活性化CARが、疾患または状態において発現されるが正常細胞上でも発現される抗原に結合し、阻害性受容体が、正常細胞上で発現されるが疾患または状態の細胞上では発現されない別々の抗原に結合するそのような戦略が、用いられてもよい。
【０３２１】
いくつかの態様において、マルチターゲティング戦略は、特定の疾患または状態に関連する抗原が非罹患細胞上でおよび/または操作された細胞自体上で、一過性に（例えば、遺伝子操作に関連する刺激時に）、または永続的に、のいずれかで発現される場合に使用される。そのような場合には、2つの別々のおよび個別に特異的な抗原受容体の連結を必要とすることによって、特異性、選択性、および/または有効性が改善され得る。
【０３２２】
いくつかの態様において、多数の抗原、例えば、第1および第2の抗原は、がん細胞などの標的とされる細胞、組織、または疾患もしくは状態で発現される。いくつかの局面において、細胞、組織、疾患または状態は、多発性骨髄腫または多発性骨髄腫細胞である。いくつかの態様において、多数の抗原のうちの1つまたは複数は、概してまた、正常もしくは非罹患細胞もしくは組織などの細胞療法で標的とすることが望ましくない細胞、および/または操作された細胞自体でも発現される。そのような態様において、細胞の応答を達成するために複数の受容体の連結を必要とすることによって、特異性および/または有効性が達成される。
【０３２３】
B. 核酸およびベクター
また、組換え受容体をコードする1つまたは複数のポリヌクレオチド（例えば核酸分子）、受容体を発現するように細胞を遺伝子操作するためのベクター、ならびに操作された細胞を作製するための方法も提供される。
【０３２４】
また、ポリヌクレオチドのセットまたは組み合わせも提供される。また、そのようなポリヌクレオチドのセットまたは組み合わせを含有する組成物も提供される。いくつかの態様において、ポリヌクレオチドのセットまたは組成物は、細胞の操作のために一緒に用いられる。いくつかの態様において、セットにおける第1および第2のポリヌクレオチドは、操作のために細胞中に同時に、または逐次的に任意の順序で導入される。
【０３２５】
他の局面において、シグナル配列は、異種または非天然のシグナルペプチド、例えば、SEQ ID NO:25に示され、かつSEQ ID NO:24に示されるヌクレオチド配列によってコードされるGMCSFRα鎖の例示的なシグナルペプチドをコードしてもよい。いくつかの場合には、組換え受容体、例えばキメラ抗原受容体（CAR）をコードする核酸配列は、シグナルペプチドをコードするシグナル配列を含有する。シグナルペプチドの非限定的な例示的な例には、例えば、SEQ ID NO:25に示され、かつSEQ ID NO:24に示されるヌクレオチド配列によってコードされるGMCSFRα鎖シグナルペプチド、またはSEQ ID NO:26に示されるCD8αシグナルペプチドが含まれる。
【０３２６】
核酸分子が2つ以上の異なるポリペプチド鎖をコードするある特定の場合には、ポリペプチド鎖の各々は、別々の核酸分子によってコードされることができる。例えば、2つの別々の核酸が提供され、各々は、細胞における発現のために、細胞中に個別に移入されるかまたは導入されることができる。
【０３２７】
ポリヌクレオチドが第1および第2の核酸配列を含有する態様などのいくつかの態様において、異なるポリペプチド鎖の各々をコードするコード配列は、同じかまたは異なることができるプロモーターに機能的に連結されることができる。いくつかの態様において、核酸分子は、2つ以上の異なるポリペプチド鎖の発現を駆動するプロモーターを含有することができる。いくつかの態様において、そのような核酸分子は、マルチシストロン性（2シストロン性または3シストロン性、例えば、米国特許第6,060,273号を参照されたい）であることができる。いくつかの態様において、転写単位は、単一のプロモーターからのメッセージによって遺伝子産物の共発現を可能にする、IRES（内部リボソーム進入部位）を含有する2シストロン性単位として操作することができる。あるいは、いくつかの場合には、単一のプロモーターが、単一のオープンリーディングフレーム（ORF）に、自己切断ペプチド（例えば2A配列）またはプロテアーゼ認識部位（例えばフーリン）をコードする配列によって互いに分離された2つまたは3つの遺伝子を含有するRNAの発現を指令してもよい。したがって、ORFは、翻訳中（2Aの場合）または翻訳後のいずれかに個々のタンパク質にプロセシングされる、単一のポリペプチドをコードする。いくつかの場合には、T2Aなどのペプチドは、リボソームに2AエレメントのC末端でのペプチド結合の合成をスキップさせることができ（リボソームスキッピング）、2A配列の末端と下流の次のペプチドとの間の分離をもたらす（例えば、de Felipe, Genetic Vaccines and Ther. 2:13 (2004) およびde Felipe et al. Traffic 5:616-626 (2004)を参照されたい）。様々な2Aエレメントが公知である。本明細書中で開示される方法およびシステムにおいて用いることができる2A配列の例は、非限定的に、米国特許出願公開第20070116690号に記載されているような、口蹄疫ウイルス（F2A、例えばSEQ ID NO:23）、ウマ鼻炎Aウイルス（E2A、例えばSEQ ID NO:22）、トセア・アシグナ（Thosea asigna）ウイルス（T2A、例えばSEQ ID NO:6または18）、およびブタテッショウウイルス-1（P2A、例えばSEQ ID NO:20または21）からの2A配列である。
【０３２８】
いくつかの態様において、ベクターは、1つまたは複数のマーカーをコードする核酸配列を含有する。いくつかの態様において、1つまたは複数のマーカーは、形質導入マーカー、代理マーカーおよび/または選択マーカーである。
【０３２９】
いくつかの態様において、マーカーは形質導入マーカーまたは代理マーカーである。形質導入マーカーまたは代理マーカーは、ポリヌクレオチド、例えば、組換え受容体をコードするポリヌクレオチドが導入された細胞を検出するために使用することができる。いくつかの態様において、形質導入マーカーは、細胞の改変を表示または確認することができる。いくつかの態様において、代理マーカーは、組換え受容体（例えばCAR）と共に細胞表面上に同時発現されるように作られているタンパク質である。特定の態様において、そのような代理マーカーは、活性を有さないかまたはほとんど有さないように改変された表面タンパク質である。ある態様において、代理マーカーは、組換え受容体をコードする同じポリヌクレオチド上にコードされる。いくつかの態様において、組換え受容体をコードする核酸配列は、内部リボソーム侵入部位(IRES)によって、または自己開裂性ペプチドもしくはリボソームスキッピングを引き起こすペプチド（例えば、2A配列、例えば、T2A、P2A、E2AもしくはF2A）をコードする核酸によって任意で分離された、マーカーをコードする核酸配列へ機能的に連結されている。外因性マーカー遺伝子は、いくつかの場合において、操作された細胞に関して利用され、細胞の検出または選択を可能にし得、いくつかの場合において、細胞自殺を促進もし得る。
【０３３０】
例示的な代理マーカーは、細胞表面ポリペプチドの切断形態、例えば、非機能性であり、かつ、シグナルまたは細胞表面ポリペプチドの完全長形態によって通常変換されるシグナルを変換しないかまたは変換することができず、かつ/または、インターナライズしないかまたはインターナライズすることができない、切断形態を含み得る。例示的な切断型細胞表面ポリペプチドは、成長因子または他の受容体の切断形態、例えば、切断型ヒト上皮成長因子受容体2(tHER2)、切断型上皮成長因子受容体(tEGFR、SEQ ID NO:7に記載の例示的なtEGFR配列)または前立腺特異的膜抗原(PSMA)もしくはその改変型を含む。tEGFRは、抗体セツキシマブ(Erbitux（登録商標）)または他の治療用抗-EGFR抗体もしくは結合性分子によって認識されるエピトープを含有し得、これは、tEGFR構築物で操作された細胞、およびコードされた外因性タンパク質を同定もしくは選択するために、ならびに/または、コードされた外因性タンパク質を発現する細胞を排除もしくは分離するために、使用することができる。米国特許第8,802,374号およびLiu et al., Nature Biotech. 2016 April; 34(4): 430-434)を参照されたい。いくつかの局面において、マーカー、例えば、代理マーカーは、全部または一部（例えば、切断形態）のCD34、NGFR、CD19、もしくは切断型CD19、例えば切断型非ヒトCD19、または上皮成長因子受容体(例えば、tEGFR)を含む。いくつかの態様において、マーカーは、蛍光タンパク質、例えば、緑色蛍光タンパク質(GFP)、高感度緑色蛍光タンパク質(EGFP)、例えば、super-fold GFP (sfGFP)、赤色蛍光タンパク質(RFP)、例えば、tdTomato、mCherry、mStrawberry、AsRed2、DsRedもしくはDsRed2、シアン蛍光タンパク質(CFP)、青緑色蛍光タンパク質(BFP)、高感度青色蛍光タンパク質(EBFP)、および黄色蛍光タンパク質(YFP)、ならびにそれらのバリアント、例えば、蛍光タンパク質の、種バリアント、単量体バリアント、および、コドン最適化および/または高感度バリアントであるかまたはこれらを含む。いくつかの態様において、マーカーは、酵素、例えば、ルシフェラーゼ、大腸菌（E. coli）由来のlacZ遺伝子、アルカリホスファターゼ、分泌型胎盤アルカリホスファターゼ(SEAP)、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)であるかまたはこれらを含む。例示的な発光レポーター遺伝子としては、ルシフェラーゼ(luc)、β-ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)、β-グルクロニダーゼ(GUS)またはそれらのバリアントが挙げられる。
【０３３１】
いくつかの態様において、マーカーは選択マーカーである。いくつかの態様において、選択マーカーは、外因性薬剤または薬物に対して耐性を与えるポリペプチドであるかまたはこれを含む。いくつかの態様において、選択マーカーは抗生物質耐性遺伝子である。いくつかの態様において、選択マーカーは、哺乳動物細胞に抗生物質耐性を与える、抗生物質耐性遺伝子である。いくつかの態様において、選択マーカーは、ピューロマイシン耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子、ブラストサイジン耐性遺伝子、ネオマイシン耐性遺伝子、ジェネティシン耐性遺伝子もしくはゼオシン耐性遺伝子またはそれらの改変型であるかまたはこれらを含む。
【０３３２】
いくつかの態様において、マーカーをコードする核酸は、リンカー配列、例えば、切断可能なリンカー配列、例えば、T2Aをコードするポリヌクレオチドに機能的に連結される。例えば、マーカー、および任意でリンカー配列は、PCT公開番号WO2014031687に開示されるような任意のものでよい。例えば、マーカーは、任意で、リンカー配列、例えば、T2A切断可能リンカー配列に連結されている、切断型EGFR(tEGFR)でもよい。切断型EGFR(例えば、tEGFR)の例示的なポリペプチドは、SEQ ID NO:7に示したアミノ酸配列、またはSEQ ID NO:7と少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％の、もしくはこれより多い配列同一性を示すアミノ酸配列を含む。
【０３３３】
また、そのような核酸および/またはポリヌクレオチドを含有するベクターまたは構築物も提供される。いくつかの態様において、ベクターまたは構築物は、組換え受容体をコードする核酸に機能的に連結された1つまたは複数のプロモーターを、その発現を駆動するために含有する。いくつかの態様において、プロモーターは、1つまたは1つよりも多い核酸分子またはポリヌクレオチドに機能的に連結されている。したがって、また、本明細書において提供されるポリヌクレオチドのいずれかを含有するベクターなどのベクターも提供される。
【０３３４】
いくつかの場合には、ベクターは、レトロウイルスベクター、例えば、レンチウイルスベクターまたはガンマウイルスベクターなどのウイルスベクターである。また、ベクターのセットまたは組み合わせも提供される。いくつかの態様において、ベクターのセットまたは組み合わせは、第1のベクターおよび第2のベクターを含む。また、そのようなベクターのセットまたは組み合わせを含有する組成物も提供される。いくつかの態様において、ベクターのセットまたは組み合わせは、細胞の操作のために一緒に用いられる。いくつかの態様において、セットにおける第1および第2のベクターは、操作のために細胞中に同時に、または逐次的に任意の順序で導入される。
【０３３５】
いくつかの態様において、ベクターには、ウイルスベクター、例えば、レトロウイルスもしくはレンチウイルス、非ウイルスベクター、またはトランスポゾン、例えばSleeping Beautyトランスポゾンシステム、シミアンウイルス40（SV40）、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス（AAV）に由来するベクター、レンチウイルスベクターまたはレトロウイルスベクター、例えばガンマレトロウイルスベクター、モロニーマウス白血病ウイルス（MoMLV）、骨髄増殖性肉腫ウイルス（MPSV）、マウス胚性幹細胞ウイルス（MESV）、マウス幹細胞ウイルス（MSCV）、脾フォーカス形成ウイルス（SFFV）、もしくはアデノ随伴ウイルス（AAV）に由来するレトロウイルスベクターが含まれる。
【０３３６】
C. 操作のための細胞および細胞の調製
組換え受容体を含有する操作された細胞などの細胞が、本明細書において提供される。また、例えば、組換え受容体、例えばキメラ受容体を発現する細胞が、組成物中の全細胞、またはT細胞またはCD8+もしくはCD4+細胞などのある特定のタイプの細胞の少なくとも50、60、70、80、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99以上の％を占める、そのような細胞の集団、そのような細胞を含有するかつ/またはそのような細胞が濃縮された組成物も提供される。組成物の中には、養子細胞療法のためなどの、投与のための薬学的組成物および製剤がある。また、そのような細胞を操作する、作製する、または生成するための方法、細胞および組成物を対象、例えば患者に投与するための治療法、ならびに、そのような細胞を検出する、選択する、単離する、または分離するための方法も提供される。
【０３３７】
したがって、組換え受容体、例えばCARを発現する遺伝子操作された細胞が提供される。細胞は概して、哺乳動物細胞などの真核細胞であり、典型的にはヒト細胞である。いくつかの態様において、細胞は、血液、骨髄、リンパ液、またはリンパ系器官に由来し、自然免疫または適応免疫の細胞などの免疫系の細胞、例えば、リンパ球、典型的にはT細胞および/またはNK細胞を含む、骨髄系またはリンパ系細胞である。他の例示的な細胞には、人工多能性幹細胞（iPSC）を含む、多分化能および多能性幹細胞などの幹細胞が含まれる。細胞は、典型的には初代細胞、例えば対象から直接単離されたもの、および/または対象から単離されて凍結されたものである。いくつかの態様において、細胞は、T細胞または他の細胞型の1つまたは複数のサブセット、例えば全T細胞集団、CD4+細胞、CD8+細胞、およびその亜集団、例えば機能、活性化状態、成熟度、分化、増大、再循環、局在化、および/もしくは持続能力についての潜在能、抗原特異性、抗原受容体のタイプ、特定の器官もしくは区画における存在、マーカーもしくはサイトカイン分泌プロファイル、ならびに/または分化の程度によって定義されるものを含む。処置される対象に関して、細胞は、同種異系および/または自己由来であり得る。方法の中には、既製の方法が含まれる。例えば既製の技術についてのいくつかの局面において、細胞は、多能性かつ/または多分化能、例えば、人工多能性幹細胞（iPSC）などの幹細胞である。いくつかの態様において、方法は、対象から細胞を単離すること、本明細書に記載されているように、それらを調製すること、処理すること、培養すること、および/または操作すること、ならびに凍結保存の前または後に、それらを同じ対象中に再導入することを含む。
【０３３８】
T細胞ならびに/またはCD4+および/もしくはCD8+T細胞のサブタイプおよび亜集団の中には、ナイーブT（TN）細胞、エフェクターT細胞（TEFF）、メモリーT細胞およびそのサブタイプ、例えば幹細胞メモリーT（TSCM）、セントラルメモリーT（TCM）、エフェクターメモリーT（TEM）、または最終分化エフェクターメモリーT細胞、腫瘍浸潤リンパ球（TIL）、未熟T細胞、成熟T細胞、ヘルパーT細胞、細胞傷害性T細胞、粘膜関連インバリアントT（MAIT）細胞、天然に存在するかつ適応性の制御性T（Treg）細胞、ヘルパーT細胞、例えばTH1細胞、TH2細胞、TH3細胞、TH17細胞、TH9細胞、TH22細胞、濾胞性ヘルパーT細胞、α/βT細胞、およびδ/γT細胞がある。いくつかの態様において、細胞は制御性T細胞（Treg）である。いくつかの態様において、細胞は、組換えFOXP3またはそのバリアントをさらに含む。
【０３３９】
いくつかの態様において、細胞はナチュラルキラー（NK）細胞である。いくつかの態様において、細胞は、単球または顆粒球、例えば、骨髄系細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、肥満細胞、好酸球、および/または好塩基球である。
【０３４０】
いくつかの態様において、細胞は、遺伝子操作を介して導入された1つまたは複数の核酸を含み、それによって、そのような核酸の組換え産物または遺伝子操作された産物を発現する。いくつかの態様において、核酸は異種であり、すなわち、細胞または細胞から得られる試料中に正常では存在せず、例えば、操作されている細胞、および/またはそのような細胞が由来する生物において通常は見出されない、別の生物または細胞から得られるものなどである。いくつかの態様において、核酸は、天然には存在せず、例えば、複数の異なる細胞型由来の様々なドメインをコードする核酸のキメラ組み合わせを含むものを含む、天然において見出されない核酸である。
【０３４１】
いくつかの態様において、操作された細胞の調製は、1つまたは複数の培養工程および/または調製工程を含む。操作のための細胞は、生物学的試料などの試料、例えば、対象から得られるかまたは対象に由来するものから単離され得る。いくつかの態様において、細胞が単離される対象は、疾患もしくは状態を有するか、または細胞療法を必要とするか、または細胞療法が施与される対象である。いくつかの態様における対象は、特定の治療的介入、例えば、そのために細胞が単離され、処理され、かつ/または操作されている養子細胞療法を必要とするヒトである。
【０３４２】
したがって、いくつかの態様における細胞は、初代細胞、例えば初代ヒト細胞である。試料には、組織、体液、および対象から直接採取された他の試料、ならびに分離、遠心分離、遺伝子操作（例えば、ウイルスベクターでの形質導入）、洗浄、および/またはインキュベーションなどの1つまたは複数の処理工程から結果として生じた試料が含まれる。生物学的試料は、生物学的供給源から直接得られた試料、または処理されている試料であることができる。生物学的試料には、血液、血漿、血清、脳脊髄液、滑液、尿、および汗などの体液、組織および器官の試料が、それに由来する処理された試料を含めて含まれるが、それらに限定されない。
【０３４３】
いくつかの局面において、細胞が由来するかまたは単離される試料は、血液もしくは血液由来の試料であるか、またはアフェレーシスもしくは白血球アフェレーシスの産物であるかもしくはそれに由来する。例示的な試料には、全血、末梢血単核細胞（PBMC）、白血球、骨髄、胸腺、組織生検材料、腫瘍、白血病、リンパ腫、リンパ節、腸管関連リンパ組織、粘膜関連リンパ組織、脾臓、他のリンパ組織、肝臓、肺、胃、腸、結腸、腎臓、膵臓、乳房、骨、前立腺、子宮頸、精巣、卵巣、扁桃腺、もしくは他の器官、および/またはそれに由来する細胞が含まれる。試料には、細胞療法、例えば養子細胞療法に関連して、自己由来および同種異系の供給源由来の試料が含まれる。
【０３４４】
いくつかの態様において、細胞は、細胞株、例えばT細胞株に由来する。いくつかの態様における細胞は、異種供給源から、例えば、マウス、ラット、非ヒト霊長類、またはブタから得られる。
【０３４５】
いくつかの態様において、細胞の単離は、1つまたは複数の調製工程および/または親和性に基づかない細胞分離工程を含む。いくつかの例において、例えば、不要な構成要素を除去する、所望の構成要素を濃縮する、特定の試薬に感受性の細胞を溶解するかまたは除去するために、細胞を、洗浄し、遠心分離し、かつ/または1つもしくは複数の試薬の存在下でインキュベートする。いくつかの例において、細胞は、密度、接着特性、サイズ、特定の構成要素に対する感受性および/または耐性などの1つまたは複数の特性に基づいて分離される。
【０３４６】
いくつかの例において、対象の循環血液由来の細胞は、例えば、アフェレーシスまたは白血球アフェレーシスによって得られる。試料は、いくつかの局面において、T細胞を含むリンパ球、単球、顆粒球、B細胞、他の有核白血球、赤血球、および/または血小板を含有し、いくつかの局面において、赤血球および血小板以外の細胞を含有する。
【０３４７】
いくつかの態様において、対象から収集された血球を、例えば、血漿画分を除去するため、およびその後の処理工程に適切な緩衝液または培地に細胞を置くために洗浄する。いくつかの態様において、細胞を、リン酸緩衝生理食塩水（PBS）で洗浄する。いくつかの態様において、洗浄溶液は、カルシウムおよび/もしくはマグネシウム、ならびに/または多くのもしくはすべての二価カチオンを含まない。いくつかの局面において、洗浄工程は、半自動「フロースルー」遠心分離機（例えば、Cobe 2991細胞プロセッサ、Baxter）において、製造業者の説明書に従って達成される。いくつかの局面において、洗浄工程は、接線流濾過（TFF）によって、製造業者の説明書に従って達成される。いくつかの態様において、細胞を、洗浄後に、例えば、Ca++/Mg++を含まないPBSなどの様々な生体適合性緩衝液に再懸濁する。ある特定の態様において、血球試料の構成要素を除去し、細胞を、培養培地に直接再懸濁する。
【０３４８】
いくつかの態様において、方法は、密度に基づく細胞分離法、例えば、赤血球を溶解することによる末梢血からの白血球の調製、およびPercollまたはFicoll勾配を通した遠心分離を含む。
【０３４９】
いくつかの態様において、単離法は、表面マーカー、例えば表面タンパク質、細胞内マーカー、または核酸などの1つまたは複数の特異的な分子の細胞における発現または存在に基づく、異なる細胞型の分離を含む。いくつかの態様において、そのようなマーカーに基づく分離のための任意の公知の方法が用いられてもよい。いくつかの態様において、分離は、親和性または免疫親和性に基づく分離である。例えば、いくつかの局面における単離は、1つまたは複数のマーカー、典型的には細胞表面マーカーの細胞での発現または発現レベルに基づく、例えば、そのようなマーカーに特異的に結合する抗体または結合パートナーとのインキュベーション、ならびにその後概して続く、洗浄工程、および抗体または結合パートナーに結合していない細胞からの抗体または結合パートナーに結合した細胞の分離による、細胞および細胞集団の分離を含む。
【０３５０】
そのような分離工程は、試薬に結合した細胞がさらなる使用のために保持される陽性選択、および/または抗体もしくは結合パートナーに結合していない細胞が保持される陰性選択に基づくことができる。いくつかの例において、両方の画分が、さらなる使用のために保持される。いくつかの局面において、陰性選択は、分離が、所望の集団以外の細胞によって発現されるマーカーに基づいて最も良好に実施されるように、不均一な集団において細胞型を特異的に同定する抗体が利用可能ではない場合に特に有用であり得る。
【０３５１】
分離は、特定の細胞集団または特定のマーカーを発現する細胞の100％の濃縮または除去を結果としてもたらす必要はない。例えば、マーカーを発現する細胞などの特定のタイプの細胞の陽性選択または濃縮は、そのような細胞の数またはパーセンテージを増加させることを指すが、マーカーを発現しない細胞の完全な非存在を結果としてもたらす必要はない。同様に、マーカーを発現する細胞などの特定のタイプの細胞の陰性選択、除去、または枯渇は、そのような細胞の数またはパーセンテージを減少させることを指すが、そのような細胞すべての完全な除去を結果としてもたらす必要はない。
【０３５２】
いくつかの例において、1つの工程から陽性または陰性選択された画分が、その後の陽性または陰性選択などの別の分離工程に供される、複数回の分離工程が実施される。いくつかの例において、例えば、細胞を、陰性選択のために標的とされるマーカーに各々特異的な多数の抗体または結合パートナーとインキュベートすることによって、単一の分離工程が、複数のマーカーを発現する細胞を同時に枯渇させることができる。同様に、細胞を、様々な細胞型上に発現される多数の抗体または結合パートナーとインキュベートすることによって、複数の細胞型を同時に陽性選択することができる。
【０３５３】
例えば、いくつかの局面において、T細胞の特異的な亜集団、例えば、1つまたは複数の表面マーカーが陽性であるかまたは高レベルを発現する細胞、例えば、CD28+、CD62L+、CCR7+、CD27+、CD127+、CD4+、CD8+、CD45RA+、および/またはCD45RO+ T細胞が、陽性または陰性選択技法によって単離される。
【０３５４】
例えば、CD3+、CD28+ T細胞は、抗CD3/抗CD28コンジュゲート磁性ビーズ（例えば、DYNABEADS（登録商標）M-450 CD3/CD28 T Cell Expander）を用いて陽性選択することができる。
【０３５５】
いくつかの態様において、単離は、陽性選択による特定の細胞集団の濃縮、または陰性選択による特定の細胞集団の枯渇によって実施される。いくつかの態様において、陽性または陰性選択は、細胞を、それぞれ陽性または陰性選択される細胞上に発現される（マーカー＋）かまたは比較的高いレベルで発現される（マーカー高）1つまたは複数の表面マーカーに特異的に結合する1つまたは複数の抗体または他の結合物質とインキュベートすることによって達成される。
【０３５６】
いくつかの態様において、T細胞は、B細胞、単球、または他の白血球などの非T細胞上に発現されるマーカー、例えばCD14の陰性選択によって、PBMC試料から分離される。いくつかの局面において、CD4+またはCD8+選択工程が、CD4+ヘルパーT細胞およびCD8+細胞傷害性T細胞を分離するために用いられる。そのようなCD4+およびCD8+集団は、1つまたは複数のナイーブ、メモリー、および/またはエフェクターT細胞亜集団上に発現されるかまたは比較的高い程度に発現されるマーカーについての陽性または陰性選択によって、さらに亜集団に選別することができる。
【０３５７】
いくつかの態様において、CD8+細胞は、例えば、それぞれの亜集団に関連する表面抗原に基づく陽性または陰性選択によって、ナイーブ、セントラルメモリー、エフェクターメモリー、および/またはセントラルメモリー幹細胞がさらに濃縮されるかまたは枯渇する。いくつかの態様において、セントラルメモリーT（TCM）細胞の濃縮は、有効性を増加させるために、例えば、いくつかの局面ではそのような亜集団において特に堅牢である、投与後の長期生存、増大、および/または生着を改善するために実施される。Terakura et al. (2012) Blood.1:72-82；Wang et al. (2012) J Immunother. 35(9):689-701を参照されたい。いくつかの態様において、TCM濃縮CD8+ T細胞とCD4+ T細胞とを組み合わせることは、有効性をさらに増強する。
【０３５８】
態様において、メモリーT細胞は、CD8+末梢血リンパ球のCD62L+およびCD62L-サブセットの両方に存在する。PBMCは、例えば抗CD8抗体および抗CD62L抗体を用いて、CD62L-CD8+および/またはCD62L＋CD8+画分を濃縮するかまたは枯渇させることができる。
【０３５９】
いくつかの態様において、セントラルメモリーT（TCM）細胞の濃縮は、CD45RO、CD62L、CCR7、CD28、CD3、および/またはCD127の陽性または高い表面発現に基づき；いくつかの局面において、それは、CD45RAおよび/またはグランザイムBを発現するかまたは高発現する細胞についての陰性選択に基づく。いくつかの局面において、TCM細胞が濃縮されたCD8+集団の単離は、CD4、CD14、CD45RAを発現する細胞の枯渇、およびCD62Lを発現する細胞の陽性選択または濃縮によって実施される。1つの局面において、セントラルメモリーT（TCM）細胞の濃縮は、CD4発現に基づいて選択された細胞の陰性画分から出発して実施され、これが、CD14およびCD45RAの発現に基づく陰性選択、ならびにCD62Lに基づく陽性選択に供される。そのような選択は、いくつかの局面において同時に実施され、他の局面においては、連続的に任意の順序で実施される。いくつかの局面において、CD8+細胞集団または亜集団の調製において用いられるのと同じCD4発現に基づく選択工程がまた、CD4に基づく分離からの陽性画分および陰性画分が両方とも保持され、任意で1つまたは複数のさらなる陽性または陰性選択工程後の、方法のその後の工程において用いられるように、CD4+細胞集団または亜集団を生成するためにも用いられる。
【０３６０】
特定の例において、PBMCの試料または他の白血球試料を、CD4+細胞の選択に供し、ここで、陰性画分および陽性画分は両方とも保持される。次いで、陰性画分を、CD14およびCD45RAまたはROR1の発現に基づく陰性選択、ならびにCD62LまたはCCR7などのセントラルメモリーT細胞に特徴的なマーカーに基づく陽性選択に供し、ここで、陽性選択および陰性選択は任意の順序で実施される。
【０３６１】
CD4+ Tヘルパー細胞は、細胞表面抗原を有する細胞集団を同定することによって、ナイーブ、セントラルメモリー、およびエフェクター細胞に選別される。CD4+リンパ球は、標準的な方法によって得ることができる。いくつかの態様において、ナイーブCD4+ Tリンパ球は、CD45RO-、CD45RA+、CD62L+、CD4+ T細胞である。いくつかの態様において、セントラルメモリーCD4+細胞は、CD62L+およびCD45RO+である。いくつかの態様において、エフェクターCD4+細胞は、CD62L-およびCD45RO-である。
【０３６２】
1つの例において、陰性選択によってCD4+細胞を濃縮するために、モノクローナル抗体カクテルは、典型的にはCD14、CD20、CD11b、CD16、HLA-DR、およびCD8に対する抗体を含む。いくつかの態様において、抗体または結合パートナーは、陽性および/または陰性選択のための細胞の分離を可能にするように、磁性ビーズまたは常磁性ビーズなどの固体支持体またはマトリックスに結合している。例えば、いくつかの態様において、細胞および細胞集団は、免疫磁気（または親和性磁気）分離技法（Methods in Molecular Medicine, vol. 58: Metastasis Research Protocols, Vol. 2: Cell Behavior In vitro and In vivo, p 17-25 Edited by: S. A. Brooks and U. Schumacher（著作権） Humana Press Inc., Totowa, NJにおいて概説されている）を用いて分離されるかまたは単離される。
【０３６３】
いくつかの局面において、分離されるべき細胞の試料または組成物を、小さな磁化可能または磁気応答性材料、例えば磁気応答性粒子または微小粒子、例えば常磁性ビーズ（例えば、DynalbeadsまたはMACSビーズなど）とインキュベートする。磁気応答性材料、例えば粒子は、概して、分離することが望ましい、例えば、陰性または陽性選択することが望ましい1つまたは複数の細胞、または細胞の集団上に存在する分子、例えば表面マーカーに特異的に結合する結合パートナー、例えば抗体に直接または間接的に付着している。
【０３６４】
いくつかの態様において、磁性粒子またはビーズは、抗体または他の結合パートナーなどの特異的結合メンバーに結合した磁気応答性材料を含む。磁気分離法において用いられる多くの周知の磁気応答性材料がある。適している磁性粒子には、参照により本明細書に組み入れられる、Moldayの米国特許第4,452,773号、および欧州特許明細書EP 452342 Bに記載されているものが含まれる。コロイドサイズの粒子、例えばOwenの米国特許第4,795,698号およびLibertiらの米国特許第5,200,084号に記載されているものが、他の例である。
【０３６５】
インキュベーションは概して、磁性粒子もしくはビーズに付着している抗体もしくは結合パートナー、または、そのような抗体もしくは結合パートナーに特異的に結合する二次抗体もしくは他の試薬などの分子が、試料内の細胞上に存在する場合は細胞表面分子に特異的に結合する条件下で実施される。
【０３６６】
いくつかの局面において、試料を磁場に置き、磁気応答性または磁化可能粒子が付着している細胞を、磁石に引きつけて、非標識細胞から分離する。陽性選択のためには、磁石に引きつけられる細胞が保持され；陰性選択のためには、引きつけられない細胞（非標識細胞）が保持される。いくつかの局面において、陽性選択と陰性選択との組み合わせが同じ選択工程中に行われ、ここで、陽性画分および陰性画分が保持され、さらに処理されるかまたはさらなる分離工程に供される。
【０３６７】
ある特定の態様において、磁気応答性粒子は、一次抗体または他の結合パートナー、二次抗体、レクチン、酵素、またはストレプトアビジンでコーティングされている。ある特定の態様において、磁性粒子は、1つまたは複数のマーカーに特異的な一次抗体のコーティングを介して細胞に付着している。ある特定の態様において、ビーズではなく細胞を、一次抗体または結合パートナーで標識し、次いで、細胞型特異的二次抗体または他の結合パートナー（例えばストレプトアビジン）でコーティングされた磁性粒子を添加する。ある特定の態様において、ストレプトアビジンコーティング磁性粒子を、ビオチン化一次抗体または二次抗体と組み合わせて用いる。
【０３６８】
いくつかの態様において、磁気応答性粒子は、その後インキュベート、培養、および/または操作されることになる細胞に付着したままであり；いくつかの局面において、粒子は、患者への投与のための細胞に付着したままである。いくつかの態様において、磁化可能または磁気応答性粒子は、細胞から除去される。磁化可能粒子を細胞から除去するための方法は、公知であり、例えば、競合する非標識抗体、切断可能リンカーにコンジュゲートした磁化可能粒子または抗体などの使用を含む。いくつかの態様において、磁化可能粒子は生分解性である。
【０３６９】
いくつかの態様において、親和性に基づく選択は、磁気活性化細胞選別（MACS）（Miltenyi Biotec,Auburn,CA）を介する。磁気活性化細胞選別（MACS）システムは、磁化粒子が付着している細胞の高純度の選択ができる。ある特定の態様において、MACSは、外部磁場の印加後に非標的種および標的種が連続的に溶出されるモードで動作する。すなわち、磁化粒子に付着した細胞は、付着していない種が溶出される間、適所に保持される。次いで、この最初の溶出工程が完了した後に、磁場に捕捉されて溶出が阻止されていた種は、それらが溶出されて回収され得るように、何らかの方法で遊離される。ある特定の局面において、非標的細胞を、標識して、不均一な細胞の集団から枯渇させる。
【０３７０】
ある特定の態様において、単離または分離は、本発明の方法の単離、細胞調製、分離、処理、インキュベーション、培養、および/または製剤化工程のうちの1つまたは複数を実施するシステム、デバイス、または装置を用いて実施される。いくつかの局面において、システムは、例えば、エラー、使用者の取り扱い、および/または汚染を最小化するように、これらの工程の各々を閉鎖環境または無菌環境で実施するために用いられる。1つの例において、システムは、国際PCT公開番号WO2009/072003、またはUS 20110003380 A1に記載されているシステムである。
【０３７１】
いくつかの態様において、システムまたは装置は、統合もしくは自己完結型システムで、および/または自動化もしくはプログラム可能方式で、単離、処理、操作、および製剤化工程のうちの1つまたは複数、例えばすべてを実施する。いくつかの局面において、システムまたは装置は、システムまたは装置に接続されたコンピュータおよび/またはコンピュータプログラムを含み、これにより、使用者が処理、単離、操作、および製剤化工程をプログラムする、制御する、その成果を評価する、かつ/またはその様々な局面を調整することが可能になる。
【０３７２】
いくつかの局面において、分離および/または他の工程は、例えば、閉鎖系および無菌系における臨床規模レベルでの細胞の自動分離のために、CliniMACSシステム（Miltenyi Biotec）を用いて実施される。構成要素には、統合マイクロコンピュータ、磁気分離ユニット、蠕動ポンプ、および様々なピンチバルブが含まれ得る。いくつかの局面における統合コンピュータは、機器のすべての構成要素を制御し、標準化された順序で反復手順を行うようにシステムに指令する。いくつかの局面における磁気分離ユニットは、可動永久磁石および選択カラム用のホルダを含む。蠕動ポンプは、チューブセット全体の流速を制御し、ピンチバルブと共に、システムを通る緩衝液の制御された流れおよび細胞の継続的な懸濁を確実にする。
【０３７３】
いくつかの局面におけるCliniMACSシステムは、無菌非発熱性溶液において供給される抗体カップリング磁化可能粒子を用いる。いくつかの態様において、細胞の磁性粒子での標識化後に、細胞を、洗浄して過剰の粒子を除去する。次いで、細胞調製バッグをチューブセットに接続し、これを次に、緩衝液を含有するバッグおよび細胞収集バッグに接続する。チューブセットは、プレカラムおよび分離カラムを含むあらかじめ組み立てられた無菌チューブからなり、使い捨て専用である。分離プログラムの開始後、システムは、自動的に細胞試料を分離カラム上にアプライする。非標識細胞が一連の洗浄工程によって除去される間、標識細胞は、カラム内に保持される。いくつかの態様において、本明細書に記載される方法での使用のための細胞集団は、標識されておらず、カラムに保持されない。いくつかの態様において、本明細書に記載される方法での使用のための細胞集団は、標識されており、カラムに保持される。いくつかの態様において、本明細書に記載される方法での使用のための細胞集団は、磁場の除去後にカラムから溶出され、細胞収集バッグ内に収集される。
【０３７４】
ある特定の態様において、分離工程および/または他の工程は、CliniMACS Prodigyシステム（Miltenyi Biotec）を用いて実施される。いくつかの局面におけるCliniMACS Prodigyシステムは、遠心分離による細胞の自動洗浄および分画を可能にする細胞処理ユニットを備える。CliniMACS Prodigyシステムはまた、供給源細胞産物の巨視的層を識別することによって最適な細胞分画エンドポイントを決定する、搭載カメラおよび画像認識ソフトウェアも含むことができる。例えば、末梢血は、赤血球、白血球、および血漿層に自動的に分離される。CliniMACS Prodigyシステムはまた、例えば、細胞分化および増大、抗原負荷、ならびに長期細胞培養などの細胞培養プロトコルを達成する、統合細胞培養チャンバも含むことができる。入力ポートは、培地の無菌除去および補充を可能にすることができ、細胞を、統合顕微鏡を用いてモニターすることができる。例えば、Klebanoff et al. (2012) J Immunother. 35(9): 651-660、Terakura et al. (2012) Blood.1:72-82、およびWang et al. (2012) J Immunother. 35(9):689-701を参照されたい。
【０３７５】
いくつかの態様において、本明細書に記載される細胞集団を、複数の細胞表面マーカーについて染色された細胞が流体の流れにおいて運ばれるフローサイトメトリーを介して、収集し、かつ濃縮する（または枯渇させる）。いくつかの態様において、本明細書に記載される細胞集団を、調製規模（FACS）選別を介して、収集し、かつ濃縮する（または枯渇させる）。ある特定の態様において、本明細書に記載される細胞集団を、FACSに基づく検出システムと組み合わせた微小電気機械システム（MEMS）チップの使用によって、収集し、かつ濃縮する（または枯渇させる）（例えば、WO 2010/033140、Cho et al. (2010) Lab Chip 10:1567-1573；およびGodin et al. (2008) J Biophoton. 1(5):355-376を参照されたい）。どちらの場合も、細胞を、明確に定義されたT細胞サブセットの高純度での単離を可能にする、複数のマーカーで標識することができる。
【０３７６】
いくつかの態様において、抗体または結合パートナーは、陽性および/または陰性選択のための分離を容易にするために、1つまたは複数の検出可能なマーカーで標識される。例えば、分離は、蛍光標識抗体への結合に基づいてもよい。いくつかの例において、1つまたは複数の細胞表面マーカーに特異的な抗体または他の結合パートナーの結合に基づく細胞の分離は、例えば、調製規模（FACS）を含む蛍光活性化細胞選別（FACS）、および/または、例えばフローサイトメトリー検出システムと組み合わせた微小電気機械システム（MEMS）チップによって、流体の流れにおいて行われる。そのような方法は、同時に複数のマーカーに基づく陽性選択および陰性選択を可能にする。
【０３７７】
いくつかの態様において、調製法は、単離、インキュベーション、および/または操作の前または後のいずれかに、細胞を凍結する、例えば凍結保存するための工程を含む。いくつかの態様において、凍結およびその後の解凍工程は、細胞集団中の顆粒球を、およびある程度まで、単球を除去する。いくつかの態様において、細胞は、例えば、血漿および血小板を除去するための洗浄工程の後に、凍結溶液中に懸濁される。様々な公知の凍結溶液およびパラメータのいずれかが、いくつかの局面において用いられてもよい。1つの例は、20％ DMSOおよび8％ヒト血清アルブミン（HSA）を含有するPBS、または他の適している細胞凍結培地を用いることを含む。次いで、これを培地で1:1希釈して、DMSOおよびHSAの最終濃度が、それぞれ10％および4％になるようにする。次いで、細胞を、1分あたり1°の速度で-80℃に凍結し、液体窒素貯蔵タンクの気相中で保存する。
【０３７８】
いくつかの態様において、提供される方法は、育成、インキュベーション、培養、および/または遺伝子操作工程を含む。例えば、いくつかの態様において、枯渇させた細胞集団および培養開始組成物をインキュベートする、かつ/または操作するための方法が提供される。
【０３７９】
したがって、いくつかの態様において、細胞集団を、培養開始組成物においてインキュベートする。インキュベーションおよび/または操作は、ユニット、チャンバ、ウェル、カラム、チューブ、チューブセット、バルブ、バイアル、培養皿、バッグ、または細胞の培養もしくは育成のための他の容器などの、培養容器において実施され得る。
【０３８０】
いくつかの態様において、細胞を、遺伝子操作の前にまたはそれに関連して、インキュベートおよび/または培養する。インキュベーション工程は、培養、育成、刺激、活性化、および/または増殖を含むことができる。いくつかの態様において、組成物または細胞を、刺激条件または刺激物質の存在下でインキュベートする。そのような条件には、集団中の細胞の増殖、増大、活性化、および/もしくは生存を誘導するように、抗原曝露を模倣するように、ならびに/または、組換え受容体、例えばCARの導入のためなどの遺伝子操作のために細胞をプライミングするように、設計されたものが含まれる。
【０３８１】
条件は、特定の培地、温度、酸素含量、二酸化炭素含量、時間、作用物質、例えば、栄養素、アミノ酸、抗生物質、イオン、および/または刺激因子、例えばサイトカイン、ケモカイン、抗原、結合パートナー、融合タンパク質、組換え可溶性受容体、および細胞を活性化するように設計された他の任意の作用物質のうちの1つまたは複数を含むことができる。
【０３８２】
いくつかの態様において、刺激条件または刺激物質は、TCR複合体の細胞内シグナル伝達領域を活性化することができる1つまたは複数の作用物質、例えばリガンドを含む。いくつかの局面において、作用物質は、T細胞におけるTCR/CD3細胞内シグナル伝達カスケードを作動するかまたは開始する。そのような作用物質は、TCRに特異的な抗体などの抗体、例えば抗CD3を含むことができる。いくつかの態様において、刺激条件は、共刺激受容体を刺激することができる1つまたは複数の作用物質、例えばリガンド、例えば抗CD28を含む。いくつかの態様において、そのような作用物質および/またはリガンドは、ビーズなどの固体支持体、および/または1つもしくは複数のサイトカインに結合していてもよい。任意で、増大法は、抗CD3抗体および/または抗CD28抗体を培養培地に（例えば、少なくとも約0.5 ng/mlの濃度で）添加する工程をさらに含んでもよい。いくつかの態様において、刺激物質は、IL-2、IL-15、および/またはIL-7を含む。いくつかの局面において、IL-2濃度は、少なくとも約10単位/mLである。
【０３８３】
いくつかの局面において、インキュベーションは、Riddellらの米国特許第6,040,177号、Klebanoff et al. (2012) J Immunother. 35(9): 651-660、Terakura et al. (2012) Blood.1:72-82、および/またはWang et al. (2012) J Immunother. 35(9):689-701に記載されている技法などの技法に従って実施される。
【０３８４】
いくつかの態様において、T細胞を、培養開始組成物に、非分裂末梢血単核細胞（PBMC）などのフィーダ細胞を添加すること（例えば、結果として生じる細胞の集団が、増大させるべき初期集団中の各Tリンパ球に対して少なくとも約5、10、20、もしくは40個、またはそれ以上のPBMCフィーダ細胞を含有するように）；および培養物をインキュベートすること（例えば、T細胞の数を増大させるのに十分な時間）によって増大させる。いくつかの局面において、非分裂フィーダ細胞は、γ線照射PBMCフィーダ細胞を含むことができる。いくつかの態様において、PBMCは、細胞分裂を阻止するために、約3000〜3600ラドの範囲のγ線を照射される。いくつかの局面において、フィーダ細胞は、T細胞の集団の添加の前に、培養培地に添加される。
【０３８５】
いくつかの態様において、刺激条件は、ヒトTリンパ球の増殖に適している温度、例えば、少なくとも約25℃、概して少なくとも約30℃、および概して37℃または約37℃を含む。任意で、インキュベーションは、非分裂EBV形質転換リンパ芽球様細胞（LCL）をフィーダ細胞として添加することをさらに含んでもよい。LCLは、約6000〜10,000ラドの範囲のγ線で照射することができる。いくつかの局面におけるLCLフィーダ細胞は、少なくとも約10:1のLCLフィーダ細胞対初期Tリンパ球の比率などの、任意の適している量で提供される。
【０３８６】
態様において、抗原特異的T細胞、例えば抗原特異的CD4+および/またはCD8+ T細胞は、ナイーブまたは抗原特異的Tリンパ球を抗原で刺激することによって得られる。例えば、抗原特異的T細胞株またはクローンを、サイトメガロウイルス抗原に対して、感染した対象からT細胞を単離すること、および細胞をインビトロで同じ抗原で刺激することによって生成することができる。
【０３８７】
D. 遺伝子操作のための方法
遺伝子操作された構成要素、例えば、組換え受容体、例えば、CARまたはTCRの導入のための様々な方法が、周知であり、提供される方法および組成物と共に用いられてもよい。例示的な方法には、ウイルスベクター、例えば、レトロウイルスもしくはレンチウイルス、非ウイルスベクター、またはトランスポゾン、例えばSleeping Beautyトランスポゾンシステムを介してのものを含む、ポリペプチドまたは受容体をコードする核酸の移入のためのものが含まれる。遺伝子移入の方法には、形質導入、エレクトロポレーション、または細胞中への遺伝子移入を結果としてもたらす他の方法が含まれ得る。
【０３８８】
いくつかの態様において、遺伝子移入は、例えば、サイトカインまたは活性化マーカーの発現によって測定されるような、増殖、生存、および/または活性化などの応答を誘導する刺激薬と細胞を組み合わせることなどにより、細胞を最初に刺激すること、ならびにその後続く、活性化細胞の形質導入、および臨床応用に十分な数までの培養における増大によって達成される。
【０３８９】
いくつかの状況において、対象における毒性に関連する因子などの刺激因子（例えば、リンホカインまたはサイトカイン）の過剰発現が、対象において不要な成果またはより低い有効性を潜在的に結果としてもたらし得る可能性を防ぐことが望ましい場合がある。したがって、いくつかの状況において、操作された細胞は、養子免疫療法における投与時などに、細胞をインビボでの陰性選択を受けやすくさせる遺伝子セグメントを含む。例えば、いくつかの局面において、細胞は、それらが投与される患者のインビボ状態における変化の結果として排除され得るように操作される。陰性選択可能な表現型は、投与される作用物質、例えば化合物に対する感受性を付与する遺伝子の挿入から結果として生じ得る。陰性選択可能な遺伝子には、ガンシクロビル感受性を付与する単純ヘルペスウイルスI型チミジンキナーゼ（HSV-I TK）遺伝子（Wigler et al., Cell 2 :223, 1977）；細胞ヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ（HPRT）遺伝子、細胞アデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（APRT）遺伝子、細菌シトシンデアミナーゼが含まれる（Mullen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 89:33 (1992)）。
【０３９０】
いくつかの態様において、組換え核酸は、例えば、シミアンウイルス40（SV40）、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス（AAV）に由来するベクターなどの組換え感染性ウイルス粒子を用いて、細胞中に移入される。いくつかの態様において、組換え核酸は、組換えレンチウイルスベクターまたはレトロウイルスベクター、例えばガンマ-レトロウイルスベクターを用いて、T細胞中に移入される（例えば、Koste et al. (2014) Gene Therapy 2014 Apr 3. doi: 10.1038/gt.2014.25；Carlens et al. (2000) Exp Hematol 28(10): 1137-46；Alonso-Camino et al. (2013) Mol Ther Nucl Acids 2, e93；Park et al., Trends Biotechnol. 2011 November 29(11): 550-557を参照されたい）。
【０３９１】
いくつかの態様において、レトロウイルスベクター、例えば、モロニーマウス白血病ウイルス（MoMLV）、骨髄増殖性肉腫ウイルス（MPSV）、マウス胚性幹細胞ウイルス（MESV）、マウス幹細胞ウイルス（MSCV）、脾フォーカス形成ウイルス（SFFV）、またはアデノ随伴ウイルス（AAV）に由来するレトロウイルスベクターは、長い末端反復配列（LTR）を有する。ほとんどのレトロウイルスベクターは、マウスレトロウイルスに由来する。いくつかの態様において、レトロウイルスには、任意の鳥類または哺乳類の細胞供給源に由来するものが含まれる。レトロウイルスは、典型的には両種指向性であり、これは、それらが、ヒトを含む数個の種の宿主細胞に感染できることを意味している。1つの態様において、発現されることになる遺伝子は、レトロウイルスのgag、pol、および/またはenv配列に取って代わる。いくつかの例証となるレトロウイルスシステムが、記載されている（例えば、米国特許第5,219,740号；同第6,207,453号；同第5,219,740号；Miller and Rosman (1989) BioTechniques 7:980-990；Miller, A. D. (1990) Human Gene Therapy 1:5-14；Scarpa et al. (1991) Virology 180:849-852；Burns et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:8033-8037；およびBoris-Lawrie and Temin (1993) Cur. Opin. Genet. Develop. 3:102-109）。
【０３９２】
レンチウイルス形質導入の方法は、公知である。例示的な方法は、例えば、Wang et al. (2012) J. Immunother. 35(9): 689-701；Cooper et al. (2003) Blood. 101:1637-1644；Verhoeyen et al. (2009) Methods Mol Biol. 506: 97-114；およびCavalieri et al. (2003) Blood. 102(2): 497-505に記載されている。
【０３９３】
いくつかの態様において、組換え核酸は、エレクトロポレーションを介してT細胞中に移入される（例えば、Chicaybam et al, (2013) PLoS ONE 8(3): e60298およびVan Tedeloo et al. (2000) Gene Therapy 7(16): 1431-1437を参照されたい）。いくつかの態様において、組換え核酸は、転位を介してT細胞中に移入される（例えば、Manuri et al. (2010) Hum Gene Ther 21(4): 427-437；Sharma et al. (2013) Molec Ther Nucl Acids 2, e74；およびHuang et al. (2009) Methods Mol Biol 506: 115-126を参照されたい）。免疫細胞において遺伝物質を導入し、発現させる他の方法には、リン酸カルシウムトランスフェクション（例えば、Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York. N.Y.に記載されている通り）、プロトプラスト融合、カチオン性リポソーム媒介性トランスフェクション；タングステン粒子によって促進される微小粒子照射（Johnston, Nature, 346: 776-777 (1990))；およびリン酸ストロンチウムDNA共沈殿(Brash et al., Mol. Cell Biol., 7: 2031-2034 (1987)）が含まれる。  
【０３９４】
組換え産物をコードする核酸の移入のための他のアプローチおよびベクターは、例えば、国際特許出願公開番号WO2014055668および米国特許第7,446,190号に記載されているものである。
【０３９５】
いくつかの態様において、細胞、例えばT細胞は、増大中または増大後のいずれかに、例えば、組換え受容体、例えば、T細胞受容体（TCR）もしくはキメラ抗原受容体（CAR）をコードする核酸がトランスフェクトされてもよい。所望のポリペプチドまたは受容体の遺伝子の導入のためのこのトランスフェクションは、例えば、任意の適しているレトロウイルスベクターで実施することができる。次いで、遺伝子改変された細胞集団を、最初の刺激（例えば、CD3/CD28刺激）から解放し、その後、第2のタイプの刺激で（例えば、新たに導入された受容体を介して）刺激することができる。この第2のタイプの刺激は、ペプチド/MHC分子、遺伝子導入された受容体の同族（架橋）リガンド（例えば、CARの天然リガンド）、または（例えば、受容体内の定常領域を認識することによって）新しい受容体のフレームワーク内に直接に結合する任意のリガンド（抗体など）の形態における抗原刺激を含んでもよい。例えば、Cheadle et al, "Chimeric antigen receptors for T-cell based therapy" Methods Mol Biol. 2012; 907:645-66またはBarrett et al., Chimeric Antigen Receptor Therapy for Cancer Annual Review of Medicine Vol. 65: 333-347 (2014)を参照されたい。
【０３９６】
追加の核酸、例えば、導入のための遺伝子の中には、例えば、移入された細胞の生存度および/または機能を促進することによって治療の有効性を改善するためのもの；例えば、インビボでの生存または局在化を評価するために、細胞の選択および/または評定用の遺伝子マーカーを提供するための遺伝子；例えば、Lupton S. D. et al., Mol. and Cell Biol., 11:6 (1991);およびRiddell et al., Human Gene Therapy 3:319-338 (1992)によって記載されているような、細胞をインビボでの陰性選択を受けやすくさせることによって安全性を改善するための遺伝子がある。また、有力な陽性選択可能なマーカーと陰性選択可能なマーカーとの融合に由来する二機能性の選択可能な融合遺伝子の使用を記載している、LuptonらによるPCT/US91/08442およびPCT/US94/05601の公開公報も参照されたい。例えば、Riddellらの米国特許第6,040,177号、第14欄〜第17欄を参照されたい。
【０３９７】
上記のように、いくつかの態様において、細胞を、遺伝子操作の前にまたはそれに関連して、インキュベートおよび/または培養する。インキュベーション工程は、培養、育成、刺激、活性化、増殖、および/または保存のための凍結、例えば凍結保存を含むことができる。
【０３９８】
IV．評価、投与および処置の方法
細胞療法（例えば、CAR+ T細胞）および/または毒性を処置するための薬剤と組み合わせての使用のための、例えば、養子細胞療法に関連する併用診断薬としてのおよび/または予防的処置方法における使用のための、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬を伴う、製造物品、キットおよび方法を、本明細書に提供する。いくつかの態様において、提供される製造物品および方法は、細胞療法（例えば、CAR+ T細胞療法）が施与された対象における、毒性（例えば、重篤な毒性、例えば、重篤な神経毒性）を発生する危険性を低減することに関連する。
【０３９９】
A．処置の方法
組換え受容体（例えばCAR）によって認識される抗原が発現される疾患、状態、および障害の処置において使用することおよびこれらにおける使用を含む、骨髄系マーカーを評価する方法および製造物品を提供する。組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する細胞療法と、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカー（例えば、CD14）のもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）における評価の後にまたはその結果に基づいて細胞療法を施与するための説明書とを含有する製造物品を提供する。いくつかの態様において、投与される細胞は、組換え受容体、例えばCARを発現する。いくつかの態様において、処置の方法は、本明細書に提供される操作された細胞のいずれか、または本明細書に提供される組成物のいずれかを、対象へ投与する工程を伴う。さらに、方法は、セクションII.Bに記載されるいずれかのような介入を提供する工程をさらに含む。
【０４００】
骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーが陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が陽性の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数について、対象由来のアフェレーシス試料をアッセイすることによって、毒性（例えば、神経毒性または重篤な神経毒性）の危険性を評価する方法を本明細書に提供する。いくつかの態様において、評価方法は、次いで、アッセイの後にまたはその結果に基づいて、対象が、細胞療法の施与後に、神経毒性（例えば、重篤な神経毒性）を発生する危険性があるかどうかを判定する工程を含み、ここで、対象は、細胞療法での処置についての候補である。いくつかの態様において、評価は、細胞療法を施与する前に対象から得られるアフェレーシス試料に対して行われ、かつ/または、該アフェレーシス試料は、組換え受容体および/または前記操作された細胞を含まない。いくつかの態様において、試料における骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合、対象は神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると評価される。いくつかの態様において、パーセンテージは、試料における、総白血球もしくは総CD45+細胞またはその生存細胞の中の、骨髄系細胞集団のまたは骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージである。いくつかの場合において、パーセンテージは、試料における、総白血球もしくはCD45+細胞またはその生存細胞の中の、骨髄系細胞集団または骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージである。いくつかの例において、パーセンテージは、総白血球またはCD45+細胞の中のCD14+細胞のパーセンテージである。
【０４０１】
いくつかの態様において、評価方法は、発熱以外の神経毒性の徴候または症状の発生について細胞療法の施与後に対象をモニタリングする工程をさらに含む。いくつかの場合において、評価の結果に基づいて、方法は、対象に、神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる薬剤または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i)開始の前に、(ii)開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii)開始と同時に、および/または、(iv)開始の後の最初の発熱時に施与する工程；対象に細胞療法を、低減した用量で、あるいは、細胞療法の施与後に、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；ならびに/あるいは対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、工程をさらに含む。
【０４０２】
いくつかの態様において、方法は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数を、閾値と比較する工程を含む。いくつかの態様において、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルより下である場合、対象は、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性があると疑われないか、または神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性がある可能性が低いと評価される。いくつかの場合において、対象が神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると評価されない場合、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または、発熱以外の神経毒性の徴候もしくは症状の発生前に、神経毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる薬剤または処置が、対象にさらに施与されず；あるいは、方法は、対象に細胞療法を、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに施与する工程をさらに含み、かつ/または、1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない。いくつかの局面において、評価は、細胞療法での処置の一部としてまたは細胞療法での処置の前に行われる。
【０４０３】
生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）と、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）を検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬とを接触させる工程を含む、処置のために対象を選択するための方法をさらに提供する。方法のいくつかの態様において、生体試料は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含有する細胞療法での処置についての候補である対象に由来し、かつ、生体試料は、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または、該生体試料は、組換え受容体および/または該操作された細胞を含まない。
【０４０４】
いくつかの態様において、方法および製造物品は、対象に細胞療法を施与するための説明書をさらに含む。いくつかの場合において、説明書は、例えば、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる薬剤または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i)開始の前に、(ii)開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii)開始と同時に、および/または、(iv)開始の後の最初の発熱時に、対象に施与することを指示する。いくつかの態様において、パーセンテージは、試料における、総白血球もしくは総CD45+細胞またはその生存細胞の中の、骨髄系細胞集団のまたは骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージである。いくつかの場合において、パーセンテージは、試料における、総白血球もしくはCD45+細胞またはその生存細胞の中の、骨髄系細胞集団または骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージである。いくつかの例において、パーセンテージは、総白血球またはCD45+細胞の中のCD14+細胞のパーセンテージである。いくつかの場合において、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合、低減した用量で、あるいは、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で、細胞療法を対象に施与することを指示する。さらに、いくつかの態様において、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って細胞療法を対象に施与することを指示し、任意で、細胞療法はそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、対象に施与されるものである。いくつかの態様において、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルより下である場合、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、細胞療法を患者へ施与することをさらに指示する。いくつかの態様において、毒性は神経毒性である。いくつかの場合において、神経毒性は重篤な神経毒性（例えば、グレード3以上の神経毒性）である。
【０４０５】
いくつかの態様において、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルより下である場合、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、細胞療法を患者へ施与することをさらに指示する。試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルより下である場合、いくつかの態様において、細胞療法の施与は、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または、発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる薬剤または処置を施与することを含まず；かつ/あるいは、細胞療法の施与は、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるかまたは施与されてもよく、かつ/または、1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない。
【０４０６】
細胞療法の施与後に対象をモニタリングする方法も提供する。いくつかの態様において、方法は、発熱以外の神経毒性または重篤な神経毒性の徴候または症状の発生について、細胞療法が施与された対象を観察する工程を含み、ここで、対象は、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞によって発現されるマーカーを検出することによって患者由来の生体試料をアッセイすることに基づいて判定されるように、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性がある、またはその危険性がある可能性が高いと判定されている対象である。いくつかの態様において、アフェレーシス試料は、細胞療法の施与前に対象から得られる。いくつかの態様において、モニタリングは、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って細胞療法が施与された対象に対して、あるいは、観察の期間またはその期間の一部分の最中に入院している対象に対して行われる。
【０４０７】
毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる薬剤または他の処置を、対象に施与する工程を含む、予防的処置の方法をさらに提供する。方法のいくつかの態様において、対象は、任意で細胞療法での処置についての候補であり、該細胞療法は、疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含み；かつ、対象は、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、対象由来の生体試料のアッセイの後にまたはその結果に基づいて、毒性を発生する危険性があると特定されたことがあり、該生体試料は、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または、該生体試料は、組換え受容体および/または該操作された細胞を含まない。
【０４０８】
いくつかの場合において、細胞療法は、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカー（例えば、CD14）のもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）における評価の後にまたはその結果に基づいて施与される。例えば、評価は、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接的にまたは間接的に検出することができる試薬を、生体試料と接触させる工程、ならびに、生体試料におけるマーカーおよび/またはレベルが陽性の（任意で表面陽性の）細胞のパーセンテージまたは数を決定する工程によるような、検出を含む。いくつかの態様において、閾値レベルは、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または、マーカーが陽性の、試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数に基づいて決定される。いくつかの局面において、閾値レベルは、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％もしくは60％であるかまたは約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％もしくは約60％である、生体試料または血液もしくはアフェレーシス試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセントである。いくつかの場合において、閾値レベルは、50％、55％もしくは60％であるかまたは約50％、約55％もしくは約60％である、生体試料における骨髄系マーカーが表面陽性の細胞のパーセントである。
【０４０９】
いくつかの場合において、閾値レベルは、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られた生体試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均パーセントもしくは数の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内もしくは5％以内であり、かつ/または、平均パーセントもしくは数の標準偏差以内である、閾値レベルであり、ここで、その群の対象の各々は、同じ疾患または状態を処置するための組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に、続けて毒性を発生した。
【０４１０】
操作された細胞を含有する製造物品、または操作された細胞および組成物を投与する方法、およびがんを含む、疾患、状態、および障害を処置もしくは阻止するためのそのような操作された細胞および組成物の使用が提供される。いくつかの態様において、操作された細胞および組成物は、例えば、養子T細胞療法などの養子細胞療法を介して、処置される特定の疾患または状態を有する対象または患者に投与される。いくつかの態様において、提供される細胞および組成物は、対象、例えば疾患または状態を有するかまたはその危険性がある対象などに投与される。いくつかの局面において、方法はその結果、操作されたT細胞によって認識される抗原を発現するがんにおける腫瘍量を減らすことなどによって、疾患または状態の1つまたは複数の症状を処置する、例えば改善する。
【０４１１】
いくつかの局面において処置される疾患または状態は、抗原の発現が、疾患、障害または状態の細胞または組織に関連している、それに特異的である、および/もしくはその上に発現している、ならびに/または疾患、状態または障害の病因に関与している、例えば、そのような疾患、状態、または障害を引き起こす、憎悪させる、または他の方法で関与している、いずれかのものであり得る。例示的な疾患および状態としては、悪性腫瘍もしくは細胞の形質転換（例えば、がん）、自己免疫もしくは炎症性疾患、または、例えば細菌、ウイルスもしくは他の病原体によって引き起こされる感染性疾患に関連する疾患または状態を挙げることができる。例示的な抗原は、処置することができる種々の疾患および状態に関連する抗原を含み、上記に記載されている。特定の態様において、免疫調節ポリペプチドおよび/または組換え受容体、例えばキメラ抗原受容体またはTCRは、疾患または状態に関連する抗原に特異的に結合する。いくつかの態様において、対象は、疾患、障害または状態、任意でがん、腫瘍、自己免疫性の疾患、障害もしくは状態、または感染性疾患を有する。
【０４１２】
いくつかの態様において、疾患、障害または状態は、種々のがんに関連する腫瘍を含む。がんは、いくつかの態様において、対象の身体内に位置している任意のがん、例えば、これらに限定されないが、頭頸部、乳房、肝臓、結腸、卵巣、前立腺、膵臓、脳、子宮頸部、骨、皮膚、眼、膀胱、胃、食道、腹膜、または肺に位置しているがんなどであり得る。例えば、抗がん剤が、結腸がん、子宮頸がん、中枢神経系のがん、乳がん、膀胱がん、肛門がん、頭頸部がん、卵巣がん、子宮内膜がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、神経内分泌がん、軟部組織がん、陰茎がん、前立腺がん、膵臓がん、胃がん、胆嚢がん、または食道がんの処置のために用いられ得る。いくつかの場合において、がんは血液のがんであり得る。いくつかの態様において、疾患、障害または状態は、腫瘍、例えば固形腫瘍、リンパ腫、白血病、血液腫瘍、転移性腫瘍、または他のがんもしくは腫瘍タイプなどである。いくつかの態様において、疾患、障害または状態は、結腸、肺、肝臓、乳房、前立腺、卵巣、皮膚、黒色腫、骨のがん、脳がん、卵巣がん、上皮がん、腎細胞がん、膵臓腺がん、子宮頸がん、結腸直腸がん、神経膠芽腫、神経芽腫、ユーイング肉腫、髄芽腫、骨肉腫、滑膜肉腫、および/または中皮腫の中から選択される。
【０４１３】
疾患、状態、および障害の中には、固形腫瘍、血液悪性腫瘍、および黒色腫を含む、ならびに局限性および転移性腫瘍を含む腫瘍、感染性疾患、例えばウイルスまたは他の病原体、例えばHIV、HCV、HBV、CMV、HPVによる感染および寄生虫病など、ならびに自己免疫および炎症性疾患がある。いくつかの態様において、疾患、障害または状態は、腫瘍、がん、悪性腫瘍、新生物、または他の増殖性疾患もしくは障害である。そのような疾患には、これらに限定されないが、白血病、リンパ腫、例えば急性骨髄性（myeloid）（または骨髄性（myelogenous））白血病（AML）、慢性骨髄性（myeloid）（または骨髄性（myelogenous））白血病（CML）、急性リンパ性（またはリンパ芽球性）白血病（ALL）、慢性リンパ性白血病（CLL）、ヘアリー細胞白血病（HCL）、小リンパ球性リンパ腫（SLL）、マントル細胞リンパ腫（MCL）、辺縁帯リンパ腫、バーキットリンパ腫、ホジキンリンパ腫（HL）、非ホジキンリンパ腫（NHL）、未分化大細胞リンパ腫（ALCL）、濾胞性リンパ腫、治療抵抗性濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）および多発性骨髄腫（MM）が含まれ、B細胞悪性腫瘍は、急性リンパ芽球性白血病（ALL）、成人ALL、慢性リンパ芽球性白血病（CLL）、非ホジキンリンパ腫（NHL）、およびびまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）内から選択される。
【０４１４】
いくつかの態様において、疾患または状態は、これらに限定されないが、ウイルス、レトロウイルス、細菌、および原虫感染、免疫不全、サイトメガロウイルス（CMV）、エプスタイン-バーウイルス（EBV）、アデノウイルス、BKポリオーマウイルスなどの、感染性疾患または状態である。いくつかの態様において、疾患または状態は、関節炎、例えば関節リウマチ（RA）、I型糖尿病、全身性エリテマトーデス（SLE）、炎症性腸疾患、乾癬、強皮症、自己免疫性甲状腺疾患、グレーブス病、クローン病、多発性硬化症、喘息、および/または移植に関連する疾患もしくは状態などの、自己免疫または炎症性の疾患または状態である。
【０４１５】
いくつかの態様において、疾患または障害に関連する抗原は、受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体1（ROR1）、B細胞成熟抗原（BCMA）、炭酸アンヒドラーゼ9（CA9；G250またはCAIXとしても知られる）、Her2/neu（受容体チロシンキナーゼerb-B2）、CD19、CD20、CD22、およびB型肝炎表面抗原、抗葉酸受容体、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4（CSPG4）、上皮成長因子タンパク質（EGFR）、上皮糖タンパク質2（EPG-2）、上皮糖タンパク質40（EPG-40）、エフリンB2、エフリン受容体A2（EPHa2）、Her3（erb-B3）、Her4（erb-B4）、erbB二量体、III型上皮成長因子受容体変異（EGFR vIII）、葉酸結合タンパク質（FBP）、Fc受容体様5（FCRL5；Fc受容体ホモログ5またはFCRH5としても知られる）、胎児アセチルコリン受容体（胎児AchR）、ガングリオシドGD2、ガングリオシドGD3、グリピカン-3（GPC3）、Gタンパク質共役受容体5D（GPCR5D）、ヒト高分子量黒色腫関連抗原（HMW-MAA）、IL-22受容体アルファ（IL-22RαもしくはIL-22R-アルファ）、IL-13受容体アルファ2（IL-13Rα2もしくはIL-13R-アルファ2）、キナーゼインサートドメイン受容体（kdr）、κ軽鎖、ロイシンリッチリピート含有8ファミリーメンバーA（LRRC8A）、ルイスY、L1細胞接着分子（L1-CAM）、黒色腫関連抗原（MAGE）-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、MAGE-A10、黒色腫の優先発現抗原（PRAME）、サバイビン、TAG72、B7-H3、B7-H6、IL-13受容体α2（IL-13Ra2）、CD171、ヒト白血球抗原A1（HLA-AI）、ヒト白血球抗原A2（HLA-A2）、葉酸受容体-α、CD44v6、CD44v7/8、αvβ6インテグリン（avb6インテグリン）、8H9、神経細胞接着分子（NCAM）、血管内皮増殖因子受容体（VEGF受容体もしくはVEGFR）、栄養膜糖タンパク質（TPBG；5T4としても知られる）、NKG2Dリガンド、二重抗原、がん-精巣抗原、メソテリン（MSLN）、マウスサイトメガロウイルス（CMV）、ムチン1（MUC1）、MUC16、前立腺特異抗原、前立腺幹細胞抗原（PSCA）、前立腺特異的膜抗原（PSMA）、ナチュラルキラーグループ2メンバーD（NKG2D）リガンド、がん/精巣抗原1B（CTAG；NY-ESO-1およびLAGE-2としても知られる）、メランA（MART-1）、糖タンパク質100（gp100）、胎児腫瘍性抗原、腫瘍関連糖タンパク質72（TAG72）、チロシナーゼ関連タンパク質1（TRP1；TYRP1またはgp75としても知られる）、チロシナーゼ関連タンパク質2（TRP2；ドパクロムトートメラーゼ、ドパクロムデルタ-イソメラーゼ、またはDCTとしても知られる）、血管内皮増殖因子受容体2（VEGF-R2）、がん胎児性抗原（CEA）、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、CD123、CD133、c-Met、O-アセチル化GD2（OGD2）、L1-CAMのCE7エピトープ、ウィルムス腫瘍1（WT-1）、サイクリン、サイクリンA2、C-Cモチーフケモカインリガンド1（CCL-1）、CD138、病原体特異的もしくは病原体発現抗原、およびユニバーサルタグに関連する抗原、および/またはビオチン化分子、および/またはHIV、HCV、HBV、もしくは他の病原体によって発現される分子からなる群より選択される。いくつかの態様において受容体によって標的とされる抗原は、多数の公知のB細胞マーカーのいずれかなどの、B細胞悪性腫瘍に関連する抗原を含む。いくつかの態様において、受容体によって標的とされる抗原は、CD20、CD19、CD22、ROR1、CD45、CD21、CD5、CD33、Igκ、Igλ、CD79a、CD79b、またはCD30である。
【０４１６】
いくつかの態様において受容体によって標的とされる抗原には、複数の公知のB細胞マーカーのいずれかなどの、B細胞悪性腫瘍に関連する抗原を含む。いくつかの態様において、受容体によって標的とされる抗原は、CD20、CD19、CD22、ROR1、CD45、CD21、CD5、CD33、Igκ、Igλ、CD79a、CD79b、またはCD30である。
【０４１７】
養子細胞療法のための操作された細胞の投与のための方法は公知であり、提供される方法および組成物と関連して用いられてもよい。例えば、養子T細胞法は、例えば、Gruenberg et alに対する米国特許出願公開第2003/0170238号；Rosenbergに対する米国特許第4,690,915号；Rosenberg (2011) Nat Rev Clin Oncol. 8(10):577-85)に記載される。例えば、Themeli et al. (2013) Nat Biotechnol. 31(10): 928-933; Tsukahara et al. (2013) Biochem Biophys Res Commun 438(1): 84-9; Davila et al. (2013) PLoS ONE 8(4): e61338を参照。
【０４１８】
本明細書において用いられる「対象」は、哺乳動物、例えば、ヒトまたは他の動物などであり、典型的にはヒトである。いくつかの態様において、免疫調節ポリペプチド、操作された細胞、または組成物が投与される対象、例えば患者は、哺乳動物であり、典型的には、ヒトなどの霊長類である。いくつかの態様において、霊長類はサルまたは類人猿である。対象は雄性または雌性であることが可能であり、乳幼児期、若年期、青年期、成体期および老齢期の対象を含む、任意の適した年齢であることが可能である。いくつかの態様において、対象は霊長類以外の哺乳動物であり、例えば、齧歯類などである。
【０４１９】
本明細書において用いられる「処置」（およびその文法上の変形、例えば、「処置する（treat）」または「処置する（treating）」など）は、疾患もしくは状態もしくは障害、またはそれに付随する症状、有害な作用もしくはアウトカム、または表現型の完全または部分的な改善または軽減を指す。処置の望ましい作用には、それらに限定されないが、疾患の発生または再発を阻止すること、症状の軽減、疾患の任意の直接的なもしくは間接的な病理学的結果の軽減、転移を阻止すること、疾患進行の速度を低下させること、疾患状態の改善または緩和、ならびに寛解または改善された予後が含まれる。これらの用語は、疾患を完全に治癒させること、または任意の症状を完全に排除すること、またはすべての症状もしくはアウトカムに対する作用を暗示するものではない。
【０４２０】
本明細書において用いられる「疾患の発生を遅らせる」とは、疾患（がんなど）の発生を先延ばしすること、妨げること、遅くすること、遅延させること、一定に保つこと、抑制すること、および/または延期させることを意味する。この遅れは、疾患歴および/または処置される個体に応じて、様々な長さの時間の遅れであり得る。当業者に明らかであるように、十分なまたは有意な遅れは、個体が疾患を発生しないという点で、実際には阻止を包含し得る。例えば、後期段階のがん、例えば転移の発生が遅らされる可能性がある。
【０４２１】
本明細書において用いられる「阻止する」は、疾患に対する素因を有するかもしれないが、該疾患が未だ診断されていない対象における該疾患の発生または再発に関して予防を提供することを含む。いくつかの態様において、提供される細胞および組成物は、疾患の発生を遅らせるために、または疾患の進行を遅くするために用いられる。
【０４２２】
本明細書において用いられる、機能または活性を「抑制する」ことは、対象となる条件またはパラメータを除いて他の点では同じ条件と比較したとき、または代替として別の条件と比較して、この機能または活性を低下させることである。例えば、腫瘍成長を抑制する細胞は、該細胞の非存在下での腫瘍の成長速度と比較して腫瘍の成長速度を低下させる。
【０４２３】
投与の文脈において、作用物質、例えば、薬学的製剤、細胞、または組成物の「有効量」は、治療結果または予防結果などの所望の結果を達成するために、必要な投与量/量および期間での、有効な量を指す。
【０４２４】
作用物質、例えば、薬学的製剤または操作された細胞の「治療的有効量」は、例えば疾患、状態、または障害の処置のための、所望の治療結果、および/または処置の薬物動態学的または薬力学的な作用を達成するために、必要な投与量および期間での、有効な量を指す。治療的有効量は、対象の疾患状態、年齢、性別および体重ならびに投与される免疫調節ポリペプチドまたは操作された細胞などの因子に応じて変動する場合がある。いくつかの態様において、提供される方法は、免疫調節ポリペプチド、操作された細胞、または組成物を有効量で、例えば、治療的有効量で投与することを伴う。
【０４２５】
「予防的有効量」は、所望の予防結果を達成するために、必要な投与量および期間での、有効な量を指す。必ずしもそうではないが典型的には、予防的用量は、疾患に先立ってまたは疾患のより初期段階に対象において用いられることから、予防的有効量は治療的有効量より少ないであろう。
【０４２６】
提供される方法および使用は、養子細胞療法のための方法および使用を含む。いくつかの態様において、方法は、対象、組織、または細胞、例えば疾患、状態または障害を有する、その危険性がある、またはそれを有することが疑われるものへの、操作された細胞または該細胞を含有する組成物の投与を含む。いくつかの態様において、細胞、集団、および組成物は、例えば、養子T細胞療法などの養子細胞療法を介して、処置される特定の疾患または状態を有する対象に投与される。いくつかの態様において、細胞または組成物は、疾患もしくは状態を有するまたはその危険性がある対象などの対象に投与され、疾患もしくは状態の1つまたは複数の症状を改善する。
【０４２７】
いくつかの態様において、細胞療法、例えば養子T細胞療法は、該細胞療法を受けることになっている対象からまたはそのような対象に由来する試料から、細胞が単離されているおよび/または別の方法で調製されている、自己由来移植によって行われる。よって、いくつかの局面において、細胞は処置を必要とする対象、例えば患者に由来し、細胞は、単離および処理後に、同じ対象に投与される。
【０４２８】
いくつかの態様において、細胞療法、例えば養子T細胞療法は、該細胞療法を受けることになっているまたは最終的に該細胞療法を受ける対象以外の対象、例えば第1の対象から、細胞が単離されているおよび/または別の方法で調製されている、同種異系移植によって行われる。そのような態様において、細胞は次に、同じ種の異なる対象、例えば第2の対象に投与される。いくつかの態様において、第1および第2の対象は遺伝的に同一である。いくつかの態様において、第1および第2の対象は遺伝的に類似する。いくつかの態様において、第2の対象は、第1の対象と同じHLAクラスまたはスーパータイプを発現する。細胞は任意の適した手段によって投与することができる。用量および投与は、投与が短期または慢性であるかどうかに一部依拠し得る。種々の投与スケジュールは、これらに限定されないが、様々な時点での単回もしくは複数回投与、ボーラス投与、およびパルス注入を含む。
【０４２９】
B．投薬
いくつかの態様において、細胞の用量は、提供される方法に従って対象へ投与される。いくつかの態様において、用量のサイズまたはタイミングは、対象における特定の疾患または状態の関数として決定される。いくつかの場合において、特定の疾患についての用量のサイズまたはタイミングは、提供される説明を考慮して、経験的に決定され得る。
【０４３０】
いくつかの態様において、細胞の用量は、2×105もしくは約2×105の細胞/kg〜2×106もしくは約2×106の細胞/kg、例えば、4×105もしくは約4×105の細胞/kg〜1×106もしくは約1×106の細胞/kg、または6×105もしくは約6×105の細胞/kg〜8×105もしくは約8×105の細胞/kgを含む。いくつかの態様において、細胞の用量は、対象の体重1キログラム当たり（細胞/kg）2×105以下の細胞（例えば、抗原発現細胞、例えばCAR発現細胞）、例えば、3×105もしくは約3×105細胞/kg以下、4×105もしくは約4×105細胞/kg以下、5×105もしくは約5×105細胞/kg以下、6×105もしくは約6×105細胞/kg以下、7×105もしくは約7×105細胞/kg以下、8×105もしくは約8×105細胞/kg以下、9×105もしくは約9×105細胞/kg以下、1×106もしくは約1×106細胞/kg以下、または2×106もしくは約2×106細胞/kg以下を含む。いくつかの態様において、細胞の用量は、対象の体重1キログラム当たり（細胞/kg）少なくとも2×105もしくは少なくとも約2×105または2×105もしくは約2×105の細胞（例えば、抗原発現細胞、例えばCAR発現細胞）、例えば、少なくとも3×105もしくは少なくとも約3×105または3×105もしくは約3×105細胞/kg、少なくとも4×105もしくは少なくとも約4×105または4×105もしくは約4×105細胞/kg、少なくとも5×105もしくは少なくとも約5×105または5×105もしくは約5×105細胞/kg、少なくとも6×105もしくは少なくとも約6×105または6×105もしくは約6×105細胞/kg、少なくとも7×105もしくは少なくとも約7×105または7×105もしくは約7×105細胞/kg、少なくとも8×105もしくは少なくとも約8×105または8×105もしくは約8×105細胞/kg、少なくとも9×105もしくは少なくとも約9×105または9×105もしくは約9×105細胞/kg、少なくとも1×106もしくは少なくとも約1×106または1×106もしくは約1×106細胞/kg、または、少なくとも2×106もしくは少なくとも約2×106または2×106もしくは約2×106細胞/kgを含む。
【０４３１】
ある態様において、細胞、または細胞のサブタイプの個々の集団は、対象の体重1キログラム当たり約100万〜約1000億の細胞の範囲および/またはその量の細胞で、例えば、約100万〜約500億の細胞（例えば、約500万の細胞、約2500万の細胞、約5億の細胞、約10億の細胞、約50億の細胞、約200億の細胞、約300億の細胞、約400億の細胞、もしくは前述の値のうちの任意の2つによって規定される範囲）、例えば、約1000万〜約1000億の細胞（例えば、約2000万の細胞、約3000万の細胞、約4000万の細胞、約6000万の細胞、約7000万の細胞、約8000万の細胞、約9000万の細胞、約100億の細胞、約250億の細胞、約500億の細胞、約750億の細胞、約900億の細胞、もしくは前述の値のうちの任意の2つによって規定される範囲）、いくつかの場合において、約1億の細胞〜約500億の細胞（例えば、約1億2000万の細胞、約2億5000万の細胞、約3億5000万の細胞、約4億5000万の細胞、約6億5000万の細胞、約8億の細胞、約9億の細胞、約30億の細胞、約300億の細胞、約450億の細胞）、または、これらの範囲の中にある任意の値でかつ/または対象の体重1キログラム当たり、対象へ投与される。投薬量は、疾患もしくは障害および/または患者および/または他の処置に特定の特質に依存して、変動し得る。
【０４３２】
いくつかの態様において、例えば、対象がヒトである場合、用量は、約1×108個より少ない総組換え受容体(例えば、CAR)発現細胞、T細胞、もしくは末梢血単核細胞(PBMC)、例えば、約1×106〜1×108個の範囲のこのような細胞、例えば、2×106、5×106、1×107、5×107、または1×108個もしくはすべてのこのような細胞、または前述の値のいずれか2つの間の範囲を含む。いくつかの態様において、対象がヒトである場合、用量は、約1×106〜3×108個の総組換え受容体(例えば、CAR)発現細胞、例えば、約1×107〜2×108個の範囲のこのような細胞、例えば、1×107、5×107、1×108または1.5×108個のすべてのこのような細胞、または前述の値のいずれか2つの間の範囲を含む。いくつかの態様において、患者に複数の用量が投与され、前記用量の各々、または全用量は前述の値のいずれかの範囲内でもよい。いくつかの態様において、細胞の用量は、1×105〜5×108もしくは約1×105〜約5×108個の総組換え受容体発現T細胞もしくは総T細胞、1×105〜1×108個の総組換え受容体発現T細胞もしくは総T細胞、5×105〜1×107もしくは約5×105〜約1×107個の総組換え受容体発現T細胞もしくは総T細胞、または1×106〜1×107もしくは約1×106〜約1×107個の総組換え受容体発現T細胞もしくは総T細胞（各々を包含）の投与を含む。
【０４３３】
いくつかの態様において、細胞、例えば、組換え受容体発現T細胞の用量は、単一用量として対象へ投与されるか、または、2週間、1ヶ月間、3ヶ月間、6ヶ月間、1年間またはそれ以上の期間内に1回のみ投与される。
【０４３４】
養子細胞療法の状況では、ある特定の「用量」の投与は、ある特定の量または数の細胞を、単回組成物投与および/または中断されない（uninterrupted）単回投与、例えば、単回注射または連続注入として投与することを包含し、ある特定の量または数の細胞を、3日以下の指定された期間にわたって複数の個々の組成物または注入の形で提供される分割用量として投与することも包含する。従って、ある状況では、用量は、1つの時点で与えられるか、または開始する、指定された数の細胞の単回投与または連続投与である。しかしながら、ある状況では、用量は、3日以下の期間にわたって、例えば、3日もしくは2日にわたって1日1回の、複数回の注射もしくは注入の形で投与されるか、または1日にわたって複数回の注入によって投与される。
【０４３５】
従って、いくつかの局面において、用量の細胞は単一の薬学的組成物に入れられて投与される。いくつかの態様において、用量の細胞は複数の組成物に入れられて投与され、複数の組成物は合わさって用量の細胞を含有する。
【０４３６】
いくつかの態様において、用語「分割用量」は、複数日にわたって投与されるように分割された用量を指す。このタイプの投薬は本発明の方法に包含され、単一用量とみなされる。
【０４３７】
従って、細胞の用量は、分割用量、例えば、時間をかけて投与される分割用量として、投与されてもよい。例えば、いくつかの態様では、前記用量は2日または3日にわたって対象に投与されてもよい。分割投薬のための例示的な方法は、初日に用量の25％を投与する段階と、2日目に用量の残りの75％を投与する段階を含む。他の態様では、初日に用量の33％が投与されてもよく、2日目に残りの67％が投与されてもよい。いくつかの局面では、初日に用量の10％が投与され、2日目に用量の30％が投与され、3日目に用量の60％が投与される。いくつかの態様では、分割用量は3日を超えて広げられることはない。
【０４３８】
いくつかの態様において、用量の細胞は、各々が用量のいくらかの細胞を含有する、第1および第2、任意でそれ以上のような、複数の組成物または溶液の投与によって投与され得る。いくつかの局面において、各々が細胞の異なる集団および/またはサブタイプを含有する、複数の組成物は、任意で一定の期間内に、別々にまたは独立して投与される。例えば、細胞の集団またはサブタイプは、それぞれ、CD8+およびCD4+ T細胞、ならびに/または、それぞれ、CD8+およびCD4+濃縮集団、例えば、CD4+および/もしくはCD8+ T細胞を含むことができ、各々が個々に、組換え受容体を発現するように遺伝子操作された細胞を含む。いくつかの態様において、用量の投与は、CD8+ T細胞の用量またはCD4+ T細胞の用量を含む第1組成物の投与と、CD4+ T細胞およびCD8+ T細胞の用量の他方を含む第2組成物の投与とを含む。
【０４３９】
いくつかの態様において、組成物または用量の投与、例えば、複数の細胞組成物の投与は、別々に細胞組成物の投与を伴う。いくつかの局面において、別々の投与は、任意の順序で、同時に、または連続的に、行われる。いくつかの態様において、用量は、第1組成物および第2組成物を含み、第1組成物および第2組成物は、0〜12時間離して、0〜6時間離して、または0〜2時間離して、投与される。いくつかの態様において、第1組成物の投与の開始および第2組成物の投与の開始は、2時間以内、1時間以内、または30分以内で離して、15分以内、10分以内、または5分以内で離して、行われる。いくつかの態様において、第1組成物の投与の開始および/または完了ならびに第2組成物の投与の完了および/または開始は、2時間以内、1時間以内、または30分以内で離して、15分以内、10分以内、または5分以内で離して、行われる。
【０４４０】
いくつかの組成物において、第1組成物、例えば、用量の第1組成物は、CD4+ T細胞を含む。いくつかの組成物において、第1組成物、例えば、用量の第1組成物は、CD8+ T細胞を含む。いくつかの態様において、第1組成物は、第2組成物の前に投与される。
【０４４１】
いくつかの態様において、細胞の用量または組成物は、組換え受容体発現CD4+細胞対組換え受容体発現CD8+細胞の、および/または、CD4+細胞対CD8+細胞の、定義された比または標的比を含み、この比は、任意で、およそ1:1であるか、またはおよそ1:3〜およそ3:1、例えば、およそ1:1である。いくつかの局面において、異なる細胞集団の標的比または所望の比（例えば、CD4+:CD8+比またはCAR+CD4+:CAR+CD8+比、例えば1:1）での組成物または用量の投与は、集団の一方を含有する細胞組成物の投与、および次いで集団の他方を含む別個の細胞組成物の投与を伴い、ここで、投与は、標的比もしくは所望の比でまたはほぼ標的比もしくは所望の比で行われる。
【０４４２】
いくつかの態様において、対象は、細胞の、複数の用量、例えば、2つ以上の用量または複数の連続用量を受ける。いくつかの態様において、2つの用量が対象へ投与される。いくつかの態様において、対象は連続用量を受け、例えば、第2用量は、第1用量からおよそ4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20または21日後に投与される。いくつかの態様において、複数の連続用量が、第1用量後に投与され、その結果、1つまたは複数の追加の用量が、連続用量の投与後に投与される。いくつかの局面において、追加の用量において対象へ投与される細胞の数は、第1用量および/または連続用量と同じであるかまたは類似している。いくつかの態様において、1つまたは複数の追加の用量は、先の用量よりも大きい。
【０４４３】
いくつかの局面において、第1および/または連続用量のサイズは、1つまたは複数の判断基準、例えば、前処置、例えば、化学療法に対する対象の応答、対象における疾患負荷、例えば、腫瘍量、容積、サイズ、もしくは程度、転移の度合いもしくはタイプ、ステージ、ならびに/または対象が毒性アウトカム、例えば、CRS、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、神経毒性を発生する可能性もしくは発生率、ならびに/または投与されている細胞および/もしくは組換え受容体に対する宿主免疫応答に基づいて決定される。
【０４４４】
いくつかの局面において、第1の用量の投与と連続用量の投与との間の期間は、約9〜約35日、約14〜約28日、または15〜27日である。いくつかの態様において、連続用量の投与は、第1の用量の投与後約14日より長くかつ約28日より短い時点である。いくつかの局面において、第1の用量と連続用量との間の期間は、約21日である。いくつかの態様において、1つまたは複数の追加の用量、例えば、連続用量は、連続用量の投与後に投与される。いくつかの局面において、1つまたは複数の追加の連続用量は、先の用量の投与後少なくとも約14日かつ約28日より短い時点で投与される。いくつかの態様において、追加の用量は、先の用量後約14日より短い時点で、例えば、先の用量後4、5、6、7、8、9、10、11、12、もしくは13日の時点で、投与される。いくつかの態様において、先の用量後約14日より短い時点では、用量は投与されず、かつ/または、先の用量後約28日より長い時点では、用量は投与されない。
【０４４５】
いくつかの態様において、細胞（例えば、組換え受容体発現細胞）の用量は、T細胞の第1用量およびT細胞の連続用量を含む、2つの用量（例えば、2倍の用量）を含み、ここで、第1用量および第2用量の一方または両方が、T細胞の分割用量の投与を含む。
【０４４６】
いくつかの態様において、細胞の用量は、一般に、疾患負荷の低減において有効であるために十分に大きい。
【０４４７】
いくつかの態様において、細胞を所望の投薬量で投与し、該所望の投薬量は、いくつかの局面において、所望の用量もしくは数の細胞もしくは細胞タイプならびに/または所望の比率の細胞タイプを含む。従って、細胞の投薬量は、いくつかの態様において、細胞の総数（または体重1 kg当たりの数）、および、CD4+対CD8+の比率のような、個々の集団またはサブタイプの所望の比率に基づく。いくつかの態様において、細胞の投薬量は、個々の集団または個々の細胞タイプ中の細胞の所望の総数（または体重1 kg当たりの数）に基づく。いくつかの態様において、投薬量は、このような特徴の組み合わせ、例えば、全細胞の所望の数、所望の比率、および個々の集団中の細胞の所望の総数の組み合わせに基づく。
【０４４８】
いくつかの態様において、細胞の集団またはサブタイプ、例えば、CD8+およびCD4+ T細は、T細胞の所望の用量のような、全細胞の所望の用量の許容差でまたは許容差内で投与される。いくつかの局面において、所望の用量は、所望の細胞数であるか、または細胞が投与される対象の体重の単位当たりの所望の細胞数、例えば細胞/kgである。いくつかの局面において、所望の用量は、細胞の最小数であるかもしくはこれを超えるか、または体重の単位当たりの細胞の最小数であるかもしくはこれを超える。いくつかの局面において、所望の用量で投与される、全細胞の中には、個々の集団またはサブタイプが、所望のアウトプット比率（例えば、CD4+対CD8+比率）でまたはその付近で、例えば、そのような比率の一定の許容差または誤差内で、存在する。
【０４４９】
いくつかの態様において、細胞は、CD4+細胞の所望の用量および/またはCD8+細胞の所望の用量のような、細胞の個々の集団またはサブタイプのうちの1つまたは複数の所望の用量の許容差でまたは許容差内で投与される。いくつかの局面において、所望の用量は、サブタイプもしくは集団の所望の細胞数であるか、または細胞が投与される対象の体重の単位当たりのそのような細胞の所望の数、例えば細胞/kgである。いくつかの局面において、所望の用量は、集団もしくはサブタイプの細胞の最小数であるかもしくはこれを超えるか、または体重の単位当たりの集団もしくはサブタイプの細胞の最小数であるかもしくはこれを超える。
【０４５０】
従って、いくつかの態様において、投薬量は、全細胞の所望の固定用量および所望の比率に基づき、かつ/または、個々のサブタイプまたは部分母集団の、1つまたは複数、例えばそれぞれの、所望の固定用量に基づく。従って、いくつかの態様において、投薬量は、T細胞の所望の固定または最小用量およびCD4+細胞対CD8+細胞の所望の比率に基づき、かつ/または、CD4+細胞および/またはCD8+細胞の所望の固定または最小用量に基づく。
【０４５１】
いくつかの態様において、細胞は、複数の細胞集団またはサブタイプ（例えば、CD4+およびCD8+細胞もしくはサブタイプ）の所望のアウトプット比率の許容範囲でまたは許容範囲内で投与される。いくつかの局面において、所望の比率は、特定の比率であり得るか、またはある範囲の比率であり得る。例えば、いくつかの態様において、所望の比率（例えば、CD4+対CD8+細胞の比率）は、5:1もしくは約5:1〜5:1もしくは約5:1（または約1:5より大きく約5:1より小さい）、または1:3もしくは約1:3〜3:1もしくは約3:1（または約1:3より大きく約3:1より小さい）、例えば、2:1もしくは約2:1〜1:5もしくは約1:5（または約1:5より大きく約2:1より小さい）、例えば、5:1、4.5:1、4:1、3.5:1、3:1、2.5:1、2:1、1.9:1、1.8:1、1.7:1、1.6:1、1.5:1、1.4:1、1.3:1、1.2:1、1.1:1、1:1、1:1.1、1:1.2、1:1.3、1:1.4、1:1.5、1:1.6、1:1.7、1:1.8、1:1.9:  1:2、1:2.5、1:3、1:3.5、1:4、1:4.5、もしくは1:5、または約5:1、約4.5:1、約4:1、約3.5:1、約3:1、約2.5:1、約2:1、約1.9:1、約1.8:1、約1.7:1、約1.6:1、約1.5:1、約1.4:1、約1.3:1、約1.2:1、約1.1:1、約1:1、約1:1.1、約1:1.2、約1:1.3、約1:1.4、約1:1.5、約1:1.6、約1:1.7、約1:1.8、約1:1.9:  約1:2、約1:2.5、約1:3、約1:3.5、約1:4、約1:4.5、もしくは約1:5である。いくつかの局面において、許容差は、所望の比率の約1％、約2％、約3％、約4％  約5％、約10％、約15％、約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％以内であり、これらの範囲の間の任意の値を含む。
【０４５２】
特定の態様において、細胞の数および/または濃度は、組換え受容体(例えば、CAR)発現細胞の数を指す。他の態様において、細胞の数および/または濃度は、投与されるすべての細胞、T細胞、または末梢血単核細胞(PBMC)の数または濃度を指す。
【０４５３】
いくつかの局面において、用量のサイズは、1つまたは複数の判断基準、例えば、前処置、例えば、化学療法に対する対象の応答、対象における疾患負荷、例えば、腫瘍量、容積、サイズ、もしくは程度、転移の度合いもしくはタイプ、ステージ、ならびに/または対象が毒性アウトカム、例えば、CRS、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、神経毒性を発生する可能性もしくは発生率、ならびに/または投与されている細胞および/もしくは組換え受容体に対する宿主免疫応答に基づいて決定される。
【０４５４】
いくつかの態様において、方法はまた、1つまたは複数の追加の用量のキメラ抗原受容体(CAR)発現細胞および/またはリンパ球枯渇療法を施与する工程を含み、かつ/または、方法の1つまたは複数の工程が繰り返される。いくつかの態様において、1つまたは複数の追加の用量は、初回用量と同じである。いくつかの態様において、1つまたは複数の追加の用量は、初回用量とは異なり、例えば、より高く、例えば、初回用量と比べて2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍もしくは10倍高い、もしくはそれ以上高い、または、より低く、例えば、より高く、例えば、初回用量と比べて2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍もしくは10倍低い、もしくはそれ以上低い。いくつかの態様において、1つまたは複数の追加の用量の投与は、初回処置もしくは任意の前処置に対する対象の応答、対象における疾患負荷、例えば、腫瘍量、容積、サイズ、もしくは程度、転移の度合いもしくはタイプ、ステージ、ならびに/または対象が毒性アウトカム、例えば、CRS、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、神経毒性を発生する可能性もしくは発生率、ならびに/または投与されている細胞および/もしくは組換え受容体に対する宿主免疫応答に基づいて決定される。
【０４５５】
ある態様において、細胞、または細胞のサブタイプの個々の集団は、対象の体重1キログラム当たり約100万〜約1000億の細胞の範囲および/またはその量の細胞で、例えば、約100万〜約500億の細胞（例えば、約500万の細胞、約2500万の細胞、約5億の細胞、約10億の細胞、約50億の細胞、約200億の細胞、約300億の細胞、約400億の細胞、もしくは前述の値のうちの任意の2つによって規定される範囲）、例えば、約1000万〜約1000億の細胞（例えば、約2000万の細胞、約3000万の細胞、約4000万の細胞、約6000万の細胞、約7000万の細胞、約8000万の細胞、約9000万の細胞、約100億の細胞、約250億の細胞、約500億の細胞、約750億の細胞、約900億の細胞、もしくは前述の値のうちの任意の2つによって規定される範囲）、いくつかの場合において、約1億の細胞〜約500億の細胞（例えば、約1億2000万の細胞、約2億5000万の細胞、約3億5000万の細胞、約4億5000万の細胞、約6億5000万の細胞、約8億の細胞、約9億の細胞、約30億の細胞、約300億の細胞、約450億の細胞）、または、これらの範囲の中にある任意の値でかつ/または対象の体重1キログラム当たり、対象へ投与される。投薬量は、疾患もしくは障害および/または患者および/または他の処置に特定の特質に依存して、変動し得る。
【０４５６】
いくつかの態様において、例えば、対象がヒトである場合、用量は、約1×108個より少ない総組換え受容体(例えば、CAR)発現細胞、T細胞、もしくは末梢血単核細胞(PBMC)、例えば、約1×106〜1×108個の範囲のこのような細胞、例えば、2×106、5×106、1×107、5×107、または1×108個もしくはすべてのこのような細胞、または前述の値のいずれか2つの間の範囲を含む。
【０４５７】
いくつかの態様において、遺伝子操作された細胞の用量は、1×105〜5×108個の総CAR発現T細胞、1×105〜2.5×108個の総CAR発現T細胞、1×105〜1×108個の総CAR発現T細胞、1×105〜5×107個の総CAR発現T細胞、1×105〜2.5×107個の総CAR発現T細胞、1×105〜1×107個の総CAR発現T細胞、1×105〜5×106個の総CAR発現T細胞、1×105〜2.5×106個の総CAR発現T細胞、1×105〜1×106個の総CAR発現T細胞、1×106〜5×108個の総CAR発現T細胞、1×106〜2.5×108個の総CAR発現T細胞、1×106〜1×108個の総CAR発現T細胞、1×106〜5×107個の総CAR発現T細胞、1×106〜2.5×107個の総CAR発現T細胞、1×106〜1×107個の総CAR発現T細胞、1×106〜5×106個の総CAR発現T細胞、1×106〜2.5×106個の総CAR発現T細胞、2.5×106〜5×108個の総CAR発現T細胞、2.5×106〜2.5×108個の総CAR発現T細胞、2.5×106〜1×108個の総CAR発現T細胞、2.5×106〜5×107個の総CAR発現T細胞、2.5×106〜2.5×107個の総CAR発現T細胞、2.5×106〜1×107個の総CAR発現T細胞、2.5×106〜5×106個の総CAR発現T細胞、5×106〜5×108個の総CAR発現T細胞、5×106〜2.5×108個の総CAR発現T細胞、5×106〜1×108個の総CAR発現T細胞、5×106〜5×107個の総CAR発現T細胞、5×106〜2.5×107個の総CAR発現T細胞、5×106〜1×107個の総CAR発現T細胞、1×107〜5×108個の総CAR発現T細胞、1×107〜2.5×108個の総CAR発現T細胞、1×107〜1×108個の総CAR発現T細胞、1×107〜5×107個の総CAR発現T細胞、1×107〜2.5×107個の総CAR発現T細胞、2.5×107〜5×108個の総CAR発現T細胞、2.5×107〜2.5×108個の総CAR発現T細胞、2.5×107〜1×108個の総CAR発現T細胞、2.5×107〜5×107個の総CAR発現T細胞、5×107〜5×108個の総CAR発現T細胞、5×107〜2.5×108個の総CAR発現T細胞、5×107〜1×108個の総CAR発現T細胞、1×108〜5×108個の総CAR発現T細胞、1×108〜2.5×108個の総CAR発現T細胞、もしくは2.5×108 〜5×108個の総CAR発現T細胞、または概ねそれらの値の総CAR発現T細胞を含む。
【０４５８】
いくつかの態様において、遺伝子改変された細胞の用量は、少なくとも1×105個もしくは少なくとも約1×105個のCAR発現細胞、少なくとも2.5×105個もしくは少なくとも約2.5×105個のCAR発現細胞、少なくとも5×105個もしくは少なくとも約5×105個のCAR発現細胞、少なくとも1×106個もしくは少なくとも約1×106個のCAR発現細胞、少なくとも2.5×106個もしくは少なくとも約2.5×106個のCAR発現細胞、少なくとも5×106個もしくは少なくとも約5×106個のCAR発現細胞、少なくとも1×107個もしくは少なくとも約1×107個のCAR発現細胞、少なくとも2.5×107個もしくは少なくとも約2.5×107個のCAR発現細胞、少なくとも5×107個もしくは少なくとも約5×107個のCAR発現細胞、少なくとも1×108個もしくは少なくとも約1×108個のCAR発現細胞、少なくとも2.5×108個もしくは少なくとも約2.5×108個のCAR発現細胞、または少なくとも5×108個もしくは少なくとも約5×108個のCAR発現細胞を含む。
【０４５９】
いくつかの態様において、細胞療法は、それぞれの両端の値を含む、1×105〜5×108個もしくは約1×105〜5×108個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）、5×105〜1×107個もしくは約5×105〜1×107個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）、または1×106〜1×107個もしくは約1×106〜1×107個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）の細胞の数を含む用量の投与を含む。いくつかの態様において、細胞療法は、少なくとも1×105個または少なくとも約1×105個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、少なくとも1×106個または少なくとも1×106個、少なくとも1×107個または少なくとも約1×107個、少なくとも1×108個または少なくとも約1×108個のそのような細胞の細胞数を含む細胞の用量の投与を含む。いくつかの態様において、該数は、CD3+またはCD8+総数を基準にし、いくつかの場合には、組換え受容体発現（例えばCAR+）細胞も基準にする。いくつかの態様において、細胞療法は、それぞれ両端の値を含む、1×105〜5×108個もしくは約1×105〜5×108個のCD3+もしくはCD8+総T細胞またはCD3+もしくはCD8+組換え受容体発現細胞、5×105〜1×107個もしくは約5×105〜1×107個のCD3+もしくはCD8+総T細胞またはCD3+もしくはCD8+組換え受容体発現細胞、または1×106〜1×107個もしくは約1×106〜1×107個のCD3+もしくはCD8+総T細胞またはCD3+もしくはCD8+組換え受容体発現細胞の細胞数を含む用量の投与を含む。いくつかの態様において、細胞療法は、それぞれ両端の値を含む、1×105〜5×108個もしくは約1×105〜5×108個の総CD3+/CAR+もしくはCD8+/CAR+細胞、5×105〜1×107個もしくは約5×105〜1×107個の総CD3+/CAR+もしくはCD8+/CAR+細胞、または1×106〜1×107個もしくは約1×106〜1×107個の総CD3+/CAR+もしくはCD8+/CAR+細胞の細胞数を含む用量の投与を含む。
【０４６０】
いくつかの態様において、用量のT細胞は、CD4+T細胞、CD8+T細胞、またはCD4+およびCD8+T細胞を含む。
【０４６１】
いくつかの態様において、例えば、対象がヒトである場合、CD4+およびCD8+T細胞を含む用量で含む、用量のCD8+T細胞は、約1×106から5×108 個の間の総組換え受容体（例えば、CAR）発現CD8+細胞、例えば、約5×106〜1×108個のそのような細胞の範囲で、例えば1×107、2.5×107、5×107、7.5×107、1×108、または5×108個の総数のそのような細胞、または前述の値の任意の2つ間の範囲で含む。いくつかの態様において、患者は、複数用量を投与され、用量のそれぞれまたは総用量は前述の値のいずれかの範囲内であり得る。いくつかの態様において、細胞の用量は、それぞれ両端の値を含む、1×107〜0.75×108個または約1×107〜0.75×108個の総組換え受容体発現CD8+ T細胞、1×107〜2.5×107個の総組換え受容体発現CD8+ T細胞、1×107〜0.75×108個または約1×107〜0.75×108個の総組換え受容体発現CD8+ T細胞の投与を含む。いくつかの態様において、細胞の用量は、1×107、2.5×107、5×107 7.5×107、1×108、もしくは5×108個または約1×107、2.5×107、5×107 7.5×107、1×108、もしくは5×108個の総組換え受容体発現CD8+ T細胞の投与を含む。
【０４６２】
いくつかの局面において、用量のサイズは、以前の処置、例えば化学療法に対する対象の応答、対象における疾患負荷、例えば腫瘍の量、容積、サイズ、または転移の程度、範囲、もしくは種類、病期、ならびに/または毒性アウトカム、例えばCRS、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、神経毒性を発生する対象の可能性もしくは発生率、ならびに/または投与される細胞および/もしくは組換え受容体に対する宿主免疫応答などの、1つまたは複数の基準に基づいて決定される。
【０４６３】
いくつかの局面において、用量のサイズは、対象における疾患または状態の負荷によって決定される。例えば、いくつかの局面において、用量で投与される細胞の数は、細胞の用量の投与開始の直前に対象中に存在する腫瘍負荷に基づいて決定される。いくつかの態様において、第1のおよび/またはその後の用量のサイズは、疾患負荷と反比例で相関する。いくつかの局面では、大きな疾患負荷の状況のように、対象は少数の細胞が投与される。他の態様では、低い疾患負荷の状況のように、対象は多数の細胞が投与される。
【０４６４】
いくつかの態様において、用量は、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、対象由来の生体試料の、アッセイの結果に基づいて、決定される。いくつかの場合において、アッセイの結果に基づいて、低減した用量で、あるいは、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で、細胞療法が対象に施与される。
【０４６５】
いくつかの態様において、細胞療法は、1×108個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞(PBMC)、1×107個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞(PBMC)、0.5×107個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞(PBMC)、1×106個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞(PBMC)、0.5×106個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞(PBMC)の投与を含む。いくつかの場合において、低減した用量または毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量は、5×107個未満もしくは約5×107個未満の総組換え受容体発現細胞、任意で、CAR+細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞(PBMC)、例えば、2.5×107個未満もしくは約2.5×107個未満、1.0×107個未満もしくは約1.0×107個未満、5.0×106個未満もしくは約5.0×106個未満、1.0×106個未満もしくは約1.0×106個未満、5.0×105個未満もしくは約5.0×105個未満、または1×105個未満もしくは約1×105個未満の総組換え受容体発現細胞、任意で、CAR+細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞(PBMC)であるかまたはこれらを含む。
【０４６６】
いくつかの例において、毒性または重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量は、1×105〜5×107または約1×105〜約5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意で、CAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞(PBMC)、例えば、1×105〜2.5×107、1×105〜1.0×107、1×105〜5.0×106、1×105〜1.0×106、1.0×105〜5.0×105、5.0×105〜5×107、5×105〜2.5×107、5×105〜1.0×107、5×105〜5.0×106、5×105〜1.0×106、1.0×106〜5×107、1×106〜2.5×107、1×106〜1.0×107、1×106〜5.0×106、5.0×106〜5×107、5×106〜2.5×107、5×106〜1.0×107、1.0×107〜5×107、1×107〜2.5×107または2.5×107〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意で、CAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞(PBMC)であるかまたはこれらを含む。
【０４６７】
いくつかの態様において、1つまたは複数の追加の治療剤は、例えば持続性を高めるための、IL-2などのサイトカインを含む。いくつかの態様において、方法は化学療法剤の投与を含む。いくつかの態様において、1つまたは複数の追加の治療剤は、例えば操作された細胞の投与の開始前またはそれと同時の、1つまたは複数のリンパ枯渇療法を含む。いくつかの態様において、リンパ枯渇療法は、シクロホスファミドなどのホスファミドの投与を含む。いくつかの態様において、リンパ枯渇療法はフルダラビンの投与を含み得る。いくつかの態様において、フルダラビンはリンパ枯渇療法において除外される。いくつかの態様において、リンパ枯渇療法は施与されない。
【０４６８】
細胞の投与後、いくつかの態様における操作された細胞集団の生物学的活性は、例えばいくつかの公知の方法のいずれかによって、測定される。評価するパラメータには、インビボでの、例えばイメージングによる、またはエクスビボでの、例えばELISAもしくはフローサイトメトリーによる、操作されたもしくは天然のT細胞または他の免疫細胞の抗原への特異的結合が含まれる。ある特定の態様において、操作されたT細胞が標的T細胞を破壊する能力は、例えば、Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702 (2009)、およびHerman et al. J. Immunological Methods, 285(1): 25-40 (2004)に記載されている細胞傷害性アッセイなど、任意の適した方法を用いて測定することができる。ある特定の態様において、細胞の生物学的活性は、1つまたは複数のサイトカイン、例えばCD107a、IFNγ、IL-2、およびTNFなどの発現および/または分泌をアッセイすることによって測定される。いくつかの局面において、生物学的活性は、腫瘍負荷または量の減少などの臨床アウトカムを測定することによって測定される。
【０４６９】
ある特定の態様において、操作された細胞は、それらの治療的または予防的有効性が増加するように、任意のいくつかの方法でさらに改変される。例えば、集団によって発現される操作された組換え受容体、例えばCARまたはTCRは、直接的にまたはリンカーを介して間接的に、ターゲティング部分にコンジュゲートすることができる。化合物、例えばCARまたはTCRをターゲティング部分にコンジュゲートすることの実施は当技術分野で公知である。例えば、Wadwa et al., J. Drug Targeting 3: 1 1 1 (1995)、および米国特許第5,087,616号を参照。
【０４７０】
V．製造物品
上述の試薬と使用説明書とを含有する製造物品を提供する。製造物品は、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカー（例えば、CD14）を検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬に関する。いくつかの態様において、試薬は、骨髄系細胞マーカー、例えば、ヒト骨髄系細胞マーカー、例えば、単球マーカー、例えば、ヒト単球マーカーである、マーカーを検出する。いくつかの局面において、単球マーカーは、任意でヒトにおいてまたは健康な個体において、すべてのもしくは大部分の単球または大部分の単球集団上に、例えば、これらの表面上に、存在するマーカーである。いくつかの局面において、単球マーカーは、骨髄系細胞以外のまたは単球以外の細胞の集団上には存在しないかまたは通常は発現されず、例えば、リンパ球上には存在せず、かつ/または、好中球上には発現されない。いくつかの局面において、単球マーカーは、ヒト細胞におけるCD14と共発現されるかもしくは実質的に共発現される、または、ヒト細胞におけるCD14と同一の広がりのもしくは本質的に同一の広がりの発現パターンを有し、かつ/または、ヒトにおけるCD14と類似した、もしくは本質的に同じ発現パターンを有するマーカーである。
【０４７１】
いくつかの態様において、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来する生体試料をアッセイするために試薬を使用することについての説明書が提供され、該細胞療法は、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含む。
【０４７２】
いくつかの態様において、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物と、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカー（例えば、CD14）のもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生体試料（例えば、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料）における評価の後にまたはその結果に基づいて細胞療法を施与するための説明書とを含む、製造物品を提供する。いくつかの態様において、製造物品は、本明細書に記載される操作された細胞のいずれかの治療的有効量を含む組成物と、疾患または状態を処置するために対象へ投与するための説明書とを含む。
【０４７３】
毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる薬剤と、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生体試料における評価の後にまたはその結果に基づいて薬剤を投与するための説明書とを含有する、製造物品をさらに提供する。
【０４７４】
提供される製造物品は、容器と、容器の表面にあるかまたは容器に付けられたラベルまたは添付文書とを含み得る。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、注射器、IV溶液バッグなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックのような様々な材料から形成され得る。容器は、いくつかの態様において、単独で存在するか、または状態を処置、阻止および/もしくは診断するために有効な別の組成物と組み合わされている、組成物を保持する。いくつかの態様において、容器は無菌のアクセスポートを有する。例示的な容器としては、注射用に針で穴を開けることができる栓が付いたものを含む、静脈内溶液バッグ、バイアル、または経口投与される薬剤用のボトルもしくはバイアルが挙げられる。ラベルまたは添付文書は、組成物が疾患または状態を処置するために使用されることを示し得る。
【０４７５】
製造物品のいくつかの態様において、説明書をさらに提供する。説明書は、例えば、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる薬剤または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i)開始の前に、(ii)開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii)開始と同時に、および/または、(iv)開始の後の最初の発熱時に、対象に施与することを指示する。
【０４７６】
いくつかの場合において、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合、低減した用量で、あるいは、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で、細胞療法を対象に施与することを指示する。さらに、いくつかの態様において、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って細胞療法を対象に施与することを指示し、任意で、細胞療法はそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、対象に施与されるものである。
【０４７７】
いくつかの態様において、説明書は、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルより下である場合、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、細胞療法を患者へ施与することをさらに指示する。
【０４７８】
いくつかの局面において、説明書は、細胞療法と、任意で、細胞療法を施与する前に対象から得られた生体試料におけるマーカー（例えば、CD14）の検出に基づいて、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させるための1つまたは複数の薬剤または処置とを施与するためのものである。いくつかの態様において、検出されるマーカーは、骨髄系細胞マーカー、例えば、ヒト骨髄系細胞マーカー、例えば、単球マーカー、例えば、ヒト単球マーカーである。いくつかの局面において、単球マーカーは、任意でヒトにおいてまたは健康な個体において、すべてのもしくは大部分の単球または大部分の単球集団上に、例えば、これらの表面上に、存在するマーカーである。いくつかの局面において、単球マーカーは、骨髄系細胞以外のまたは単球以外の細胞の集団上には存在しないかまたは通常は発現されず、例えば、リンパ球上には存在せず、かつ/または、好中球上には発現されない。いくつかの局面において、単球マーカーは、ヒト細胞におけるCD14と共発現されるかもしくは実質的に共発現される、または、ヒト細胞におけるCD14と同一の広がりのもしくは本質的に同一の広がりの発現パターンを有し、かつ/または、ヒトにおけるCD14と類似した、もしくは本質的に同じ発現パターンを有するマーカーである。いくつかの態様において、説明書は、骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージが、閾値レベルより下である場合、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、細胞療法を患者へ施与することを指示する。いくつかの局面において、細胞療法の施与は、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または、発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる薬剤または処置を施与することを含まない。いくつかの場合において、説明書は、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、細胞療法を対象に施与するかまたは施与してもよく、かつ/または、1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わないことを指示する。
【０４７９】
いくつかの例において、製造物品は、1つまたは複数の治療剤をさらに含有し得る。いくつかの態様において、治療剤は、免疫調節剤、細胞傷害剤、抗がん剤または放射線治療薬である。
【０４８０】
製造物品は、容器と、容器の表面にあるかまたは容器に付けられたラベルまたは添付文書とを含み得る。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、注射器、IV溶液バッグなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックのような様々な材料から形成され得る。容器は、いくつかの態様において、単独で存在するか、または状態を処置、阻止および/もしくは診断するために有効な別の組成物と組み合わされている、組成物を保持する。いくつかの態様において、容器は無菌のアクセスポートを有する。例示的な容器としては、注射用に針で穴を開けることができる栓が付いたものを含む、静脈内溶液バッグ、バイアル、または経口投与される薬剤用のボトルもしくはバイアルが挙げられる。ラベルまたは添付文書は、組成物が疾患または状態を処置するために使用されることを示し得る。製造物品は、特定の状態を処置するために組成物が使用され得ることを示す添付文書をさらに含み得る。代わりに、または加えて、製造物品は、薬学的に許容される緩衝液を含む別のまたは同じ容器をさらに含み得る。製造物品は、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、注射針および/または注射器のような他の材料をさらに含み得る。
【０４８１】
VI．定義
別途定義される場合を除き、本明細書において使用するすべての専門用語、表記法、ならびに他の技術用語および科学用語または用語法は、特許請求の範囲に記載された対象が関係する技術分野の当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有することが意図される。いくつかの場合において、通常理解されている意味を有する用語が、明快さのために、かつ/または即座の参照のために本明細書において定義されており、そのような定義が本明細書に含まれることは、当技術分野において一般に理解されていることを超える実質的な違いを表すように必ずしも解釈されるべきではない。
【０４８２】
本明細書において用いられる「対象」は、哺乳動物、例えば、ヒトまたは他の動物などであり、典型的にはヒトである。いくつかの態様において、免疫調節ポリペプチド、操作された細胞、または組成物が投与される対象、例えば患者は、哺乳動物であり、典型的には、ヒトなどの霊長類である。いくつかの態様において、霊長類はサルまたは類人猿である。対象は雄性または雌性であることが可能であり、乳幼児期、若年期、青年期、成体期および老齢期の対象を含む、任意の適した年齢であることが可能である。いくつかの態様において、対象は霊長類以外の哺乳動物であり、例えば、齧歯類などである。
【０４８３】
本明細書において用いられる「処置」（およびその文法上の変形、例えば、「処置する（treat）」または「処置する（treating）」など）は、疾患もしくは状態もしくは障害、またはそれに付随する症状、有害な作用もしくはアウトカム、または表現型の完全または部分的な改善または軽減を指す。処置の望ましい作用には、それらに限定されないが、疾患の発生または再発を阻止すること、症状の軽減、疾患の任意の直接的なもしくは間接的な病理学的結果の軽減、転移を阻止すること、疾患進行の速度を低下させること、疾患状態の改善または緩和、ならびに寛解または改善された予後が含まれる。これらの用語は、疾患を完全に治癒させること、または任意の症状を完全に排除すること、またはすべての症状もしくはアウトカムに対する作用を暗示するものではない。
【０４８４】
本明細書において用いられる「疾患の発生を遅らせる」とは、疾患（がんなど）の発生を先延ばしすること、妨げること、遅くすること、遅延させること、一定に保つこと、抑制すること、および/または延期させることを意味する。この遅れは、疾患歴および/または処置される個体に応じて、様々な長さの時間の遅れであり得る。当業者に明らかであるように、十分なまたは有意な遅れは、個体が疾患を発生しないという点で、実際には阻止を包含し得る。例えば、後期段階のがん、例えば転移の発生が遅らされる可能性がある。
【０４８５】
本明細書において用いられる「阻止する」は、疾患に対する素因を有するかもしれないが、該疾患が未だ診断されていない対象における該疾患の発生または再発に関して予防を提供することを含む。いくつかの態様において、提供される細胞および組成物は、疾患の発生を遅らせるために、または疾患の進行を遅くするために用いられる。
【０４８６】
本明細書において用いられる、機能または活性を「抑制する」ことは、対象となる条件またはパラメータを除いて他の点では同じ条件と比較したとき、または代替として別の条件と比較して、この機能または活性を低下させることである。例えば、腫瘍成長を抑制する細胞は、該細胞の非存在下での腫瘍の成長速度と比較して腫瘍の成長速度を低下させる。
【０４８７】
投与の文脈において、作用物質、例えば、薬学的製剤、細胞、または組成物の「有効量」は、治療結果または予防結果などの所望の結果を達成するために、必要な投与量/量および期間での、有効な量を指す。
【０４８８】
作用物質、例えば、薬学的製剤または操作された細胞の「治療的有効量」は、例えば疾患、状態、または障害の処置のための、所望の治療結果、および/または処置の薬物動態学的または薬力学的な作用を達成するために、必要な投与量および期間での、有効な量を指す。治療的有効量は、対象の疾患状態、年齢、性別および体重ならびに投与される免疫調節ポリペプチドまたは操作された細胞などの因子に応じて変動する場合がある。いくつかの態様において、提供される方法は、免疫調節ポリペプチド、操作された細胞、または組成物を有効量で、例えば、治療的有効量で投与することを伴う。
【０４８９】
「予防的有効量」は、所望の予防結果を達成するために、必要な投与量および期間での、有効な量を指す。必ずしもそうではないが典型的には、予防的用量は、疾患に先立ってまたは疾患のより初期段階に対象において用いられることから、予防的有効量は治療的有効量より少ないであろう。
【０４９０】
「薬学的製剤」という用語は、その中に含まれる活性成分の生物学的活性を有効にするような形態であり、かつ製剤が投与される対象に対して許容できないほどの毒性を有するさらなる構成成分を含まない調製物を指す。
【０４９１】
「薬学的に許容される担体」は、対象に対して非毒性である、活性成分以外の薬学的製剤中の成分を指す。薬学的に許容される担体には、これらに限定されないが、緩衝剤、賦形剤、安定化剤、または保存剤が含まれる。
【０４９２】
本明細書において用いられる場合、ヌクレオチド位置またはアミノ酸位置が、配列表に示されるものなど、開示された配列におけるヌクレオチド位置またはアミノ酸位置「に対応する」という記載は、標準的なアライメントアルゴリズム、例えばGAPアルゴリズムなどを用いて同一性を最大となるように開示された配列とのアライメント時に特定されたヌクレオチド位置またはアミノ酸位置を指す。配列をアライメントすることによって、当業者は、例えば、保存アミノ酸残基および同一のアミノ酸残基をガイドとして用いて、対応する残基を特定することができる。一般に、対応する位置を特定するために、アミノ酸の配列は、最も高水準の一致が得られるようにアライメントされる（例えば、Computational Molecular Biology, Lesk, A.M., ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D.W., ed., Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A.M., and Griffin, H.G., eds., Humana Press, New.Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987;およびSequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991; Carrillo et al. (1988) SIAM J Applied Math 48: 1073を参照）。
【０４９３】
用語「ベクター」は、本明細書において用いられる場合、それに連結される別の核酸を増やすことができる核酸分子を指す。この用語には、自己複製性核酸構造としてのベクターならびに導入されている宿主細胞のゲノム内に組み込まれるベクターが含まれる。ある種のベクターは、それに機能的に連結される核酸の発現を導くことができる。そのようなベクターは本明細書において「発現ベクター」と呼ばれる。ベクターには、レトロウイルスベクターなどのウイルスベクター、例えば、ガンマレトロウイルスベクターおよびレンチウイルスベクターが含まれる。
【０４９４】
用語「宿主細胞」、「宿主細胞株」、および「宿主細胞培養物」は、互換的に用いられ、その中に外因性核酸が導入されている細胞を、そのような細胞の子孫を含めて指す。宿主細胞には、「形質転換体」および「形質転換細胞」が含まれ、これらには、初代形質転換細胞、および継代の数に関係なくそれらに由来する子孫が含まれる。子孫は、核酸の内容において親細胞と完全に同一でなくてもよく、変異を含有していてもよい。最初に形質転換された細胞においてスクリーニングされたまたは選択されたのと同じ機能または生物学的活性を有する変異子孫は本明細書において含まれる。
【０４９５】
本明細書において用いられる場合、細胞または細胞の集団が特定のマーカーについて「陽性」であるという記述は、特定のマーカー、典型的には表面マーカーの細胞上でのまたは細胞内での検出可能な存在を指す。表面マーカーを指す場合、この用語は、フローサイトメトリーによって、例えば、マーカーに特異的に結合する抗体によって染色し、該抗体を検出することによって検出されるような表面発現の存在を指し、ここで、染色は、アイソタイプが一致する対照を用いてそれ以外は同一条件下で同じ手法を行って検出される染色を実質的に上回るレベルで、および/またはマーカーが陽性であることが公知の細胞のものと実質的に同様のレベルで、および/またはマーカーが陰性であることが公知である細胞のものより実質的に高いレベルで、フローサイトメトリーによって検出することができる。
【０４９６】
本明細書において用いられる場合、細胞または細胞の集団が特定のマーカーについて「陰性」であるという記述は、特定のマーカー、典型的には細胞表面マーカーの細胞上でのまたは細胞内での実質的に検出可能な存在の非存在を指す。表面マーカーを指す場合、この用語は、フローサイトメトリーによって、例えば、マーカーに特異的に結合する抗体によって染色し、該抗体を検出することによって検出されるような表面発現の非存在を指し、ここで、染色は、アイソタイプが一致する対照を用いてそれ以外は同一条件下で同じ手法を行って検出される染色を実質的に上回るレベルでフローサイトメトリーによって検出されず、および/またはマーカーが陽性であることが公知の細胞のものより実質的に低いレベルで、および/またはマーカーが陰性であることが公知である細胞のものと比較して実質的に同様のレベルである。
【０４９７】
本明細書において用いられる場合、アミノ酸配列（参照ポリペプチド配列）に関連して用いられるとき「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」および「パーセント同一性」は、最大のパーセント配列同一性を達成するように配列をアライメントし、必要に応じて、ギャップを導入し後の、かついかなる保存的置換も配列同一性の一部として考慮しない、参照ポリペプチド配列におけるアミノ酸残基と同一である、候補配列（例えば、対象の抗体または断片）におけるアミノ酸残基のパーセンテージとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定することを目的とするアライメントは、当技術分野における技術の範囲内である種々の方法で、例えば、公的に利用可能なコンピュータソフトウェア、例えばBLAST、BLAST-2、ALIGN、またはMegalign（DNASTAR）ソフトウェアなどを使用して達成することができる。当業者は、比較されている配列の全長にわたって最大アライメントを達成するのに必要とされる任意のアルゴリズムを含む、配列をアライメントするための適切なパラメータを決定することができる。
【０４９８】
本明細書において用いられる単数形「1つの（a）」、「1つの（an）」および「その（the）」は、文脈がそうでないことを明確に示す場合を除き、複数の指示対象を包含する。例えば、「1つの（a）」または「1つの（an）」は、「少なくとも1つ」または「1つまたは複数」を意味する。本明細書において記載される局面および変化形は、局面および変化形「からなる」ことおよび/またはそれら「から本質的になる」ことを包含することが理解される。
【０４９９】
本開示の全体を通して、特許請求の範囲に記載される対象の種々の局面が範囲形式で示される。範囲形式での記載は単に便宜および簡潔性のためであり、特許請求の範囲に記載される対象の範囲に関して柔軟性のない限定として解釈されるべきではないことが理解されるべきである。したがって、範囲の記載は、可能性のある部分範囲ならびにその範囲内にある個々の数値をすべて具体的に開示していると見なされるべきである。例えば、値の範囲が与えられる場合、その範囲の上限と下限との間にある各介在する値（intervening value）、およびその表記された範囲における任意の他の表記された値または介在する値が、特許請求の範囲に記載される対象の範囲内に包含されることが理解される。これらのより小さい範囲の上限および下限は、このより小さい範囲に独立して含まれてもよく、表記された範囲における任意の特に除外される限界に従うことを条件に、特許請求の範囲に記載される対象の範囲内にも包含される。表記された範囲が限界点の一方または両方を含む場合、そのような含まれた限界点のどちらかまたは両方を除外する範囲もまた、特許請求の範囲に記載される対象において含まれる。このことは、範囲の広さにかかわらず、当てはまる。
【０５００】
本明細書において用いられる用語「約」は、この技術分野における当業者には容易に理解されるそれぞれの値についての通常の誤差範囲を指す。本明細書における「約」値またはパラメータへの言及には、その値またはパラメータ自体に関する態様が含まれる（および記載される）。例えば、「約X」に言及する記載は、「X」の記載を含む。
【０５０１】
本明細書において用いる場合、組成物は、細胞を含む、2種類以上の産物、物質、または化合物の任意の混合物を指す。組成物は、溶液、懸濁物、液体、粉末、ペースト、水性、非水性、またはそれらの任意の組み合わせであってもよい。
【０５０２】
VII. 例示的な態様
例示的な態様には以下がある。
1. 骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬と、該試薬を用いて、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来する生物学的試料をアッセイするための説明書とを含む製造物品であって、該細胞療法が任意で、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含む、製造物品。
2. 前記細胞の集団が、単球であるかまたはそれを含む、態様1の製造物品。
3. 前記マーカーが骨髄系細胞マーカーであり、かつ/または前記マーカーがCD14であり、かつ/または前記細胞の集団がCD14+骨髄系細胞であるかもしくはそれを含む、態様1または態様2の製造物品。
4. 前記マーカーが、ヒト、任意でヒトCD14である、態様1〜3のいずれかの製造物品。
5. 前記試薬が、骨髄系細胞集団のマーカーまたは細胞に特異的に結合する結合分子である、態様1〜4のいずれかの製造物品。
6. 前記試薬が、抗体またはその抗原結合断片である、態様1〜5のいずれかの製造物品。
7. 前記生物学的試料が、血液、血漿、もしくは血清試料であるか、またはそれから得られる、態様1〜6のいずれかの製造物品。
8. 前記生物学的試料が、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料であるか、またはそれから得られる、態様1〜7のいずれかの製造物品。
9. 細胞療法をさらに含み、かつ/または細胞療法での処置を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含む、態様1〜8のいずれかの製造物品。
10. 毒性の発生もしくはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、もしくは減衰させるための1つもしくは複数の作用物質もしくは処置、および/または
対象において毒性の発生もしくはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、もしくは減衰させるための1つもしくは複数の作用物質もしくは処置の施与のための説明書
をさらに含む、態様1〜9のいずれかの製造物品。
11. 前記説明書が、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は、
対象に、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、 (ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する工程；ならびに/または
対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；ならびに/または
対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、工程
をさらに指定する、態様1〜9のいずれかの製造物品。
12. 前記説明書が、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は、対象に細胞療法を、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに施与する工程をさらに指定する、態様1〜11のいずれかの製造物品。
13. 前記説明書が、対象に細胞療法を施与する工程をさらに指定し、かつ前記説明書が、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は、
細胞療法の施与が、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まないこと；ならびに/または
細胞療法の施与が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わないこと
をさらに指定する、態様1〜12のいずれかの製造物品。
14. 前記閾値レベルが、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られた生物学的試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均パーセントもしくは数の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内、もしくは5％以内であり、かつ/または平均パーセントもしくは数の標準偏差以内であり、群の対象の各々が、同じ疾患または状態を処置するために組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に毒性を発生し続けた、態様11〜13のいずれかの製造物品。
15. 前記閾値レベルが、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、もしくは60％であるか、または約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％、もしくは約60％である、生物学的試料または血液もしくはアフェレーシス試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセントである、態様11〜14のいずれかの製造物品。
16. 組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含む細胞療法と、T細胞療法を施与するための説明書とを含む製造物品であって、
(A) 説明書または資料が、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生物学的試料における評価の後にまたはその結果に基づいて、施与が実施され、任意で該生物学的試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該生物学的試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含まないことをさらに提供する；かつ/または、
(B) 説明書または資料が、任意で、対象由来の生物学的試料において評価されたパラメータおよび/または細胞療法の施与後の毒性を発生する危険性もしくは毒性アウトカムの評価されたレベルに基づいて、処置の1つもしくは複数の具体的な局面、または施与に関連して実施されるべき1つもしくは複数の介入の実施をさらに指定し、(i) 該パラメータが、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数であるかまたはそれを含み、または、(ii) 該評価された危険性のレベルが、対象の細胞、試料、または組織における、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数に基づく、
製造物品。
17. 前記(A) における評価が、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接または間接的に検出することができる試薬を、生物学的試料と接触させること、ならびに、生物学的試料におけるマーカーおよび/またはレベルが陽性の、任意で表面陽性の細胞のパーセンテージまたは数を決定することを任意で含む検出を含む、態様16、155、または156の製造物品。
18. 前記細胞の集団が、単球であるかまたはそれを含む、態様16の製造物品。
19. 前記マーカーが骨髄系細胞マーカーであり、かつ/または前記マーカーがCD14であり、かつ/または前記細胞の集団がCD14+骨髄系細胞であるかもしくはそれを含み、任意で前記マーカーがヒト細胞の表面上に発現され、任意で前記マーカーがヒトCD14である、態様16〜18のいずれかの製造物品。
20. 前記マーカーが、単球マーカーである骨髄系マーカーであり、任意で、
該単球マーカーが、骨髄系細胞以外または単球以外の細胞の集団上に存在しないかまたは通常は発現されず；かつ/または
ヒト細胞におけるCD14と共発現されるかもしくは実質的に共発現される、またはヒト細胞におけるCD14と同一の広がりのもしくは本質的に同一の広がりの発現パターンを有し、かつ/または、ヒトにおけるCD14と類似した、もしくは本質的に同じ発現パターンを有するマーカーである、
態様16〜19のいずれかの製造物品。
21. 前記試薬が、骨髄系細胞集団のマーカーまたは細胞に特異的に結合する結合分子である、態様17〜20のいずれかの製造物品。
22. 前記試薬が、抗体またはその抗原結合断片である、態様17〜21のいずれかの製造物品。
23. 前記生物学的試料が、血液、血漿、もしくは血清試料であるか、またはそれから得られる、態様16〜22のいずれかの製造物品。
24. 前記生物学的試料が、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料であるか、またはそれから得られる、態様16〜23のいずれかの製造物品。
25. 骨髄系細胞、もしくは骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出するための試薬をさらに含み、かつ/または骨髄系細胞、もしくは骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出するための試薬を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含む、態様17〜24のいずれかの製造物品。
26. 毒性の発生もしくはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、もしくは減衰させるための1つもしくは複数の作用物質もしくは処置、および/または
対象において毒性の発生もしくはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、もしくは減衰させるための1つもしくは複数の作用物質もしくは処置の施与のための説明書
をさらに含む、態様16〜25のいずれかの製造物品。
27. 前記細胞療法を施与するための説明書が、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は、
対象に、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、治療用細胞組成物または遺伝子操作された細胞の投与の施与の(i) 開始の前に、 (ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する工程；ならびに/または
対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；ならびに/または
対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、工程
を指定する、態様16〜26のいずれかの製造物品。
28. 前記細胞療法を施与するための説明書が、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は、対象に細胞療法を、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに施与する工程を指定する、態様16〜27のいずれかの製造物品。
29. 前記説明書が、対象に細胞療法を施与する工程をさらに指定し、かつ前記説明書が、試料におけるマーカーが陽性の細胞の数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は、
細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与しないこと；ならびに/または
細胞療法の施与が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わないこと
をさらに指定する、態様16〜28のいずれかの製造物品。 
30. 前記閾値レベルが、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られた生物学的試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均パーセントもしくは数の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内、もしくは5％以内であり、かつ/または平均パーセントもしくは数の標準偏差以内であり、群の対象の各々が、同じ疾患または状態を処置するために組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に毒性を発生し続けた、態様27〜29のいずれかの製造物品。
31. 前記閾値レベルが、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、もしくは60％であるか、または約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％、もしくは約60％である、生物学的試料または血液もしくはアフェレーシス試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセントである、態様27〜30のいずれかの製造物品。
32. 毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質と、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、生物学的試料における評価の後にまたはその結果に基づいて、該作用物質を投与するための説明書とを含む、製造物品。
33. 前記評価が、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接または間接的に検出することができる試薬を、生物学的試料と接触させること、ならびに、生物学的試料における骨髄系マーカーおよび/またはレベルが陽性の、任意で表面陽性の細胞のパーセンテージまたは数を決定することを任意で含む検出を含む、態様32の製造物品。
34. 前記説明書が、作用物質が、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、 (ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与されるべきであることを指定し、かつ/または細胞療法での処置を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含む、態様32または態様33の製造物品。
35. 前記生物学的試料が、作用物質または細胞療法を施与する前に対象から得られる、態様32〜34のいずれかの製造物品。
36. 前記細胞の集団が、単球であるかまたはそれを含む、態様32〜35のいずれかの製造物品。
37. 前記マーカーが骨髄系細胞マーカーであり、かつ/または前記マーカーがCD14であり、かつ/または前記細胞の集団がCD14+骨髄系細胞であるかもしくはそれを含み、任意で前記マーカーがヒト細胞の表面上に発現され、任意で前記マーカーがヒトCD14である、態様32〜34のいずれかの製造物品。
38. 前記マーカーが、単球マーカーである骨髄系マーカーであり、任意で、
該単球マーカーが、骨髄系細胞以外または単球以外の細胞の集団上に存在しないかまたは通常は発現されず；かつ/または
ヒト細胞におけるCD14と共発現されるかもしくは実質的に共発現される、またはヒト細胞におけるCD14と同一の広がりのもしくは本質的に同一の広がりの発現パターンを有し、かつ/または、ヒトにおけるCD14と類似した、もしくは本質的に同じ発現パターンを有するマーカーである、
態様32〜37のいずれかの製造物品。
39. 前記試薬が、骨髄系細胞集団のマーカーまたは細胞に特異的に結合する結合分子である、態様33〜38のいずれかの製造物品。
40. 前記試薬が、抗体またはその抗原結合断片である、態様33〜39のいずれかの製造物品。
41. 前記生物学的試料が、血液、血漿、もしくは血清試料であるか、またはそれから得られる、態様32〜40のいずれかの製造物品。
42. 前記生物学的試料が、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料であるか、またはそれから得られる、態様32〜41のいずれかの製造物品。
43. 骨髄系細胞、もしくは骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出するための試薬をさらに含み、かつ/または骨髄系細胞、もしくは骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出するための試薬を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含む、態様33〜42のいずれかの製造物品。
44. 細胞療法をさらに含み、かつ/または細胞療法での処置を伴う使用、その前の使用、および/もしくはそれに関連した使用のための説明書をさらに含む、態様34〜43のいずれかの製造物品。
45. 前記作用物質を投与するための説明書が、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は、対象に作用物質を投与する工程を指定する、態様32〜44のいずれかの製造物品。
46. 前記説明書が、対象に細胞療法を施与する工程であって、作用物質の投与が、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、 (ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に実施されるものである、工程をさらに指定する、態様45の製造物品。
47. 前記作用物質を投与するための説明書が、試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージが、閾値レベルよりも下である場合は、対象に細胞療法を施与する工程を指定し、任意で、該説明書が、細胞療法が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わないことを指定する、態様32〜44のいずれかの方法。
48. 前記閾値レベルが、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られた生物学的試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均パーセントもしくは数の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内、もしくは5％以内であり、かつ/または平均パーセントもしくは数の標準偏差以内であり、群の対象の各々が、同じ疾患または状態を処置するために組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に毒性を発生し続けた、態様32〜47のいずれかの製造物品。
49. 前記閾値レベルが、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、もしくは60％であるか、または約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％、もしくは約60％である、生物学的試料または血液もしくはアフェレーシスにおける骨髄系マーカーが表面陽性の細胞のパーセントである、態様32〜48のいずれかの製造物品。
50. 細胞を、骨髄系細胞を、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーをアッセイまたは評価することが、フローサイトメトリーを含む、態様1〜49のいずれかの製造物品。
51. 前記毒性が、神経毒性またはサイトカイン放出症候群（CRS）、任意でグレード1以上の神経毒性またはCRSを含む、態様10〜50のいずれかの製造物品。
52. 前記毒性が神経毒性を含む、態様10〜51のいずれかの製造物品。
53. 前記毒性が、重篤な神経毒性を含み、かつ/または、グレード2以上の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、少なくとも長期にわたるグレード3の神経毒性を含むか、またはグレード4もしくはグレード5のもしくはそれよりも上の神経毒性である；かつ/または
前記毒性が、重篤なCRSを含み、かつ/またはグレード2以上もしくはグレード3以上のCRSを含む、
態様10〜51のいずれかの製造物品。
54. 前記毒性が、重篤な神経毒性および/またはグレード3以上の神経毒性を含む、態様10〜53のいずれかの製造物品。
55. 前記毒性が、脳浮腫に関連している、態様10〜54のいずれかの製造物品。
56. 前記作用物質または他の処置が、ステロイド；IL-10、IL-10R、IL-6、IL-6受容体、IFNγ、IFNGR、IL-2、IL-2R/CD25、MCP-1、CCR2、CCR4、MIP1β、CCR5、TNFα、TNFR1、IL-1、およびIL-1Rα/IL-1βの中から選択されるサイトカイン受容体もしくはサイトカインのアンタゴニストもしくは阻害剤；または、ミクログリア細胞の活性もしくは機能を阻止する、遮断する、もしくは低減させることができる作用物質のうちの1つまたは複数であるかまたはそれを含む、態様10〜15および26〜55のいずれかの製造物品。
57. 前記アンタゴニストまたは阻害剤が、抗体または抗原結合断片、小分子、タンパク質またはペプチド、および核酸の中から選択される作用物質であるかまたはそれを含む、態様56の製造物品。
58. 前記作用物質または他の処置が、抗IL-6抗体または抗IL6受容体抗体である、態様10〜15および27〜56のいずれかの製造物品。
59. 前記作用物質または他の処置が、トシリズマブ、シルツキシマブ、クラザキズマブ、サリルマブ、オロキズマブ（CDP6038）、エルシリモマブ、ALD518/BMS-945429、シルクマブ（CNTO 136）、CPSI-2634、ARGX-109、FE301、およびFM101の中から選択される作用物質であるかまたはそれを含む、態様10〜15および27〜58のいずれかの製造物品。
60. 前記作用物質または他の処置が、トシリズマブであるかまたはそれを含む、態様10〜15および27〜59のいずれかの製造物品。
61. 前記作用物質または他の処置が、シルツキシマブであるかまたはそれを含む、態様10〜15および27〜59のいずれかの製造物品。
62. 前記ステロイドが、デキサメタゾンであるかまたはそれを含む、態様56の製造物品。
63. ミクログリア細胞の活性または機能を阻止する、遮断する、または低減させることができる前記作用物質が、抗炎症剤、NADPHオキシダーゼ（NOX2）の阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬、ナトリウムチャネル遮断薬から選択され、GM-CSFを阻害し、CSF1Rを阻害し、CSF-1に特異的に結合し、IL-34に特異的に結合し、核因子κB（NF-κB）の活性化を阻害し、CB2受容体を活性化し、かつ/またはCB2アゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤であり、マイクロRNA-155（miR-155）を阻害するか、またはマイクロRNA-124（miR-124）を上方制御する、態様56の製造物品。
64. ミクログリア細胞の活性化または機能を阻止する、遮断する、または低減させることができる前記作用物質が、小分子、ペプチド、タンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、抗体模倣物、アプタマー、または核酸分子である、態様63の製造物品。
65. 前記作用物質が、ミノサイクリン、ナロキソン、ニモジピン、リルゾール、MOR103、レナリドミド、カンナビノイド（任意でWIN55または212-2）、静脈内免疫グロブリン（IVIg）、イブジラスト、抗miR-155ロックド核酸（LNA）、MCS110、PLX-3397、PLX647、PLX108-D1、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、AC-708、DCC-3014、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン（GW2580）、AZD6495、Ki20227、BLZ945、エマクツズマブ、IMC-CS4、FPA008、LY-3022855、AMG-820、およびTG-3003から選択される、態様63または態様64の製造物品。
66. 前記作用物質が、コロニー刺激因子1受容体（CSF1R）の阻害剤である、態様63〜65のいずれかの製造物品。
67. 前記阻害剤が、
PLX-3397、PLX647、PLX108-D1、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、AC-708、DCC-3014、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン（GW2580）、AZD6495、Ki20227、BLZ945、またはその薬学的な塩もしくはプロドラッグ；
エマクツズマブ、IMC-CS4、FPA008、LY-3022855、AMG-820、およびTG-3003、またはその抗原結合断片； 
または、前述のいずれかの組み合わせ
から選択される、態様63〜66のいずれかの製造物品。
68. 前記阻害剤がPLX-3397である、態様63〜67のいずれかの製造物品。
69. 前記組換え受容体が、疾患もしくは状態に関連する抗原、または疾患もしくは状態に関連する病変の環境の細胞において発現される抗原に特異的に結合する、態様1〜68のいずれかの製造物品。
70. 前記疾患または状態ががんである、態様1〜69のいずれかの製造物品。
71. 前記疾患または状態が、骨髄腫、白血病、またはリンパ腫である、態様1〜70のいずれかの製造物品。
72. 前記疾患または状態が、B細胞悪性腫瘍であり、かつ/または急性リンパ芽球性白血病（ALL）、成人ALL、慢性リンパ芽球性白血病（CLL）、非ホジキンリンパ腫（NHL）、およびびまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）である、態様1〜71のいずれかの製造物品。
73. 前記抗原が、受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体1（ROR1）、B細胞成熟抗原（BCMA）、炭酸アンヒドラーゼ9（CA9；G250またはCAIXとしても知られる）、Her2/neu（受容体チロシンキナーゼerb-B2）、CD19、CD20、CD22、およびB型肝炎表面抗原、抗葉酸受容体、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4（CSPG4）、上皮成長因子タンパク質（EGFR）、上皮糖タンパク質2（EPG-2）、上皮糖タンパク質40（EPG-40）、エフリンB2、エフリン受容体A2（EPHa2）、Her3（erb-B3）、Her4（erb-B4）、erbB二量体、III型上皮成長因子受容体変異（EGFR vIII）、葉酸結合タンパク質（FBP）、Fc受容体様5（FCRL5；Fc受容体ホモログ5またはFCRH5としても知られる）、胎児アセチルコリン受容体（胎児AchR）、ガングリオシドGD2、ガングリオシドGD3、グリピカン-3（GPC3）、Gタンパク質共役受容体5D（GPCR5D）、ヒト高分子量黒色腫関連抗原（HMW-MAA）、IL-22受容体α（IL-22RαまたはIL-22R-アルファ）、IL-13受容体α2（IL-13Rα2またはIL-13R-アルファ2）、キナーゼインサートドメイン受容体（kdr）、κ軽鎖、ロイシンリッチリピート含有8ファミリーメンバーA（LRRC8A）、ルイスY、L1細胞接着分子（L1-CAM）、黒色腫関連抗原（MAGE）-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、MAGE-A10、黒色腫の優先発現抗原（PRAME）、サバイビン、TAG72、B7-H3、B7-H6、IL-13受容体α2（IL-13Ra2）、CD171、ヒト白血球抗原A1（HLA-A1）、ヒト白血球抗原A2（HLA-A2）、葉酸受容体-α、CD44v6、CD44v7/8、αvβ6インテグリン（avb6インテグリン）、8H9、神経細胞接着分子（NCAM）、血管内皮増殖因子受容体（VEGF受容体またはVEGFR）、栄養膜糖タンパク質（TPBG；5T4としても知られる）、NKG2Dリガンド、二重抗原、がん-精巣抗原、メソテリン（MSLN）、マウスサイトメガロウイルス（CMV）、ムチン1（MUC1）、MUC16、前立腺特異抗原、前立腺幹細胞抗原（PSCA）、前立腺特異的膜抗原（PSMA）、ナチュラルキラーグループ2メンバーD（NKG2D）リガンド、がん/精巣抗原1B（CTAG；NY-ESO-1およびLAGE-2としても知られる）、メランA（MART-1）、糖タンパク質100（gp100）、胎児腫瘍性抗原、腫瘍関連糖タンパク質72（TAG72）、チロシナーゼ関連タンパク質1（TRP1；TYRP1またはgp75としても知られる）、チロシナーゼ関連タンパク質2（TRP2；ドパクロムトートメラーゼ、ドパクロムデルタ-イソメラーゼ、またはDCTとしても知られる）、血管内皮増殖因子受容体2（VEGF-R2）、がん胎児性抗原（CEA）、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、CD123、CD133、c-Met、O-アセチル化GD2（OGD2）、L1-CAMのCE7エピトープ、ウィルムス腫瘍1（WT-1）、サイクリン、サイクリンA2、C-Cモチーフケモカインリガンド1（CCL-1）、CD138、病原体特異的または病原体発現抗原である、態様69〜72のいずれかの製造物品。
74. 前記組換え受容体が、T細胞受容体または機能的非T細胞受容体である、態様1〜73のいずれかの製造物品。
75. 前記組換え受容体がキメラ抗原受容体（CAR）である、態様1〜74のいずれかの製造物品。
76. 前記CARが、抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、ITAMを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、任意で、該細胞内シグナル伝達ドメインが、CD3-ゼータ（CD3ζ）鎖の細胞内ドメインを含み；かつ/または前記CARが、CD28もしくは4-1BBのシグナル伝達ドメインを任意で含む共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、態様75の製造物品。
77. 前記操作された細胞が、T細胞、任意でCD4+および/またはCD8+ T細胞を含む、態様1〜74のいずれかの製造物品。
78. 前記T細胞が、対象から得られた初代T細胞である、態様77の製造物品。
79. 毒性または重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量が、5×107個未満または約5×107個未満の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、2.5×107個未満もしくは約2.5×107個未満、1.0×107個未満もしくは約1.0×107個未満、5.0×106個未満もしくは約5.0×106個未満、1.0×106個未満もしくは約1.0×106個未満、5.0×105個未満もしくは約5.0×105個未満、または1×105個未満もしくは約1×105個未満の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）であるかまたはそれを含む、態様1〜78のいずれかの製造物品。
80. 毒性または重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量が、1×105〜5×107個または約1×105〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、1×105〜2.5×107個、1×105〜1.0×107個、1×105〜5.0×106個、1×105〜1.0×106個、1.0×105〜5.0×105個、5.0×105〜5×107個、5×105〜2.5×107個、5×105〜1.0×107個、5×105〜5.0×106個、5×105〜1.0×106個、1.0×106〜5×107個、1×106〜2.5×107個、1×106〜1.0×107個、1×106〜5.0×106個、5.0×106〜5×107個、5×106〜2.5×107個、5×106〜1.0×107個、1.0×107〜5×107個、1×107〜2.5×107個、または2.5×107〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）であるかまたはそれを含む、態様1〜79のいずれかの製造物品。
81. 前記試薬が、検出可能に標識されている、任意で蛍光標識されている、態様1〜80のいずれかの製造物品。
82. 以下の工程を含む、処置のために対象を選択する方法：
(a) 生物学的試料と、骨髄系細胞の集団、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを検出することができるか、またはそれに対して特異的である試薬とを接触させる工程であって、
該生物学的試料が、細胞療法での処置についての候補である対象に由来し、該細胞療法が任意で、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含み；かつ
該生物学的試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該生物学的試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含まない、
工程；ならびに
(b) i) 試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上であり、それによって、細胞療法に対する毒性を発生する危険性がある対象を特定する；または
ii) 試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である、
i)またはii)のいずれかの対象を処置のために選択する工程。
83. (a) i) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、対象に(1) 毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置、および(2) 細胞療法を施与するためであり、該作用物質の投与が、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に投与されるものである；かつ/または
(b) i) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で、施与するためである；かつ/または
(c) i) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与することであり、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、
態様82の方法。
84. i) の対象が処置のために選択され、かつ前記方法が、
(a) 対象に(1) 毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置、および(2) 細胞療法を施与する工程であって、該作用物質の投与が、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、 (ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に実施される、工程；
(b) 対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；
(c) 対象に細胞療法を、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患または状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、細胞療法の遺伝子操作された細胞の用量を施与する工程；ならびに/または
(d) 対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、工程
をさらに含む、態様82または態様83の方法。
85. (a) ii) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、対象に細胞療法を、任意で低減していない用量で、または任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに施与するためである；
(b) ii) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、対象に細胞療法を施与するためであり、該細胞療法が、該細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まない；かつ/または
(c) ii) の対象が処置のために選択され、かつ該処置が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに細胞療法を施与するためであり、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない、
態様82の方法。
86. ii) の対象が選択され、かつ前記方法が、対象に細胞療法を、任意で低減していない用量で、任意で外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに施与する工程をさらに含む、態様82または態様85の方法。
87. ii) の対象が選択され、かつ前記方法が、対象に細胞療法を施与する工程をさらに含み、
該細胞療法の施与が、該細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まない；かつ/または
該細胞療法の施与が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない、
態様82、態様85、または態様86の方法。
88. (a) 骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数について、生物学的試料をアッセイする工程であって、該生物学的試料が、任意で細胞療法での処置についての候補である対象に由来し、該細胞療法が任意で、疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含む、工程；ならびに
(b) アッセイの後にまたはその結果に基づいて、対象に細胞療法を、および任意で、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を施与する工程
を含む、処置の方法。
89. 骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーの発現が陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が陽性のあるレベルの細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、対象由来の生物学的試料のアッセイの後にまたはその結果に基づいて、対象に(i) 疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を任意で含む、細胞療法、および任意で、(ii) 毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を施与する工程を含む、処置の方法であって、該生物学的試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られる、方法。
90. 前記アッセイが、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接または間接的に検出することができる試薬を、生物学的試料と接触させること、ならびに、生物学的試料における骨髄系マーカーおよび/またはレベルが陽性の、任意で表面陽性の細胞のパーセンテージまたは数を決定することを任意で含む検出を含む、態様88または態様89の方法。
91. 試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は、
対象に、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、 (ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する；かつ/または
対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する；かつ/または
対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与し、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、
態様88〜90のいずれかの方法。
92. 試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数もしくはパーセンテージ、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも下である場合は、
細胞療法の施与が、細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置を施与することを含まない；かつ/または
細胞療法の施与が、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに、対象に施与されるべきであるかまたは施与されてもよく、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない、
態様88〜90のいずれかの方法。
93. 骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーが陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が陽性の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数について、対象由来のアフェレーシス試料をアッセイする工程；および
アッセイの後にまたはその結果に基づいて、対象が、細胞療法の施与後に神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があるかどうかを判定する工程であって、該細胞療法が、対象において疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物を含む、工程
を含む、神経毒性の危険性を評価する方法であって、
該対象が、細胞療法での処置についての候補であり、かつ該アフェレーシス試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該アフェレーシス試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含まない、方法。
94. 試料における骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルまたはそれよりも上である場合は、対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると評価される、態様93の方法。
95. 対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると評価される場合は、
細胞療法の施与後に対象を、発熱以外の神経毒性の徴候または症状の発生についてモニタリングする工程；
対象に、神経毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する工程；
対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、神経毒性もしくは重篤な神経毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程；ならびに/または
対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、工程
をさらに含む、態様94の方法。
96. 試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における骨髄系細胞の集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルよりも下である場合は、対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると疑われないかまたはその危険性がある可能性が低いと評価される、態様93の方法。
97. 対象が、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性があると疑われないかまたはその可能性が低いと評価される場合は、
細胞療法を施与する前にもしくはそれと同時に、および/または発熱以外の神経毒性の徴候もしくは症状の発生の前に、神経毒性の発生を処置する、阻止する、遅らせる、または減衰させることができる作用物質または処置がさらに対象に施与されない；または
前記方法が、対象に細胞療法を、外来患者の設定で、および/または一晩の、もしくは1日もしくは複数日の連続した日にわたる対象の入院を伴わずに施与する工程をさらに含み、かつ/または1日もしくは複数日にわたる対象の入院を伴わない、
態様96の方法。
98. 細胞療法が施与された対象を、発熱以外の神経毒性または重篤な神経毒性の徴候または症状の発生について観察する工程であって、該対象が、アフェレーシス試料において閾値レベルまたはそれよりも上の、骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーが陽性のもしくは骨髄系マーカーの発現が陽性の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数をアッセイすることに基づいて判定されるように、神経毒性または重篤な神経毒性を発生する危険性がある、またはその危険性がある可能性が高いと判定されている対象であり、該アフェレーシス試料が、細胞療法の施与の前に対象から得られており、かつ/または該アフェレーシス試料が、組換え受容体および/もしくは操作された細胞を含まない、工程を含む、細胞療法の施与後に対象をモニタリングする方法であって、
該細胞療法が、対象において疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量を含む組成物を含む、方法。
99. 対象が、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って、細胞療法が施与されているか、または、観察の期間またはその期間の一部分の最中に入院しており、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに、危険性があると判定されている対象の非存在下で対象に施与されるものである、態様98の方法。
100. 対象に、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を施与する工程を含む、予防的処置の方法であって、
該対象が、任意で細胞療法での処置についての候補であり、該細胞療法が任意で、疾患または状態を処置するために、組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞の用量または組成物を含み；かつ
骨髄系細胞集団の細胞の、または該集団の細胞によって発現されるマーカーのもしくは骨髄系マーカーのあるレベルの発現の細胞の、存在またはパーセンテージまたは数についての、対象由来の生物学的試料のアッセイの後にまたはその結果に基づいて、該対象が、毒性を発生する危険性があると特定されており、該生物学的試料が、細胞療法を施与する前に対象から得られ、かつ/または該生物学的試料が、組換え受容体および/もしくは該操作された細胞を含まない、方法。
101. 前記アッセイが、骨髄系細胞、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーを直接または間接的に検出することができる試薬を、生物学的試料と接触させること、ならびに、生物学的試料におけるマーカーおよび/またはレベルが陽性の、任意で表面陽性の細胞のパーセンテージまたは数を決定することを任意で含む検出を含む、態様91〜97、および100のいずれかの方法。
102. 試料におけるマーカーが陽性の細胞のパーセンテージもしくは数、および/または試料における集団の細胞のパーセンテージもしくは数が、閾値レベルであるかまたはそれよりも上である場合は、前記作用物質が対象に投与される、態様91〜97、および100〜101の方法。
103. 前記作用物質が、対象に対する細胞療法の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に投与される、態様91〜97、および100〜102のいずれかの方法。
104. 前記閾値レベルが、組換え受容体発現治療用細胞組成物を受ける前に対象の群から得られた生物学的試料における、骨髄系マーカーが表面陽性の細胞の、平均パーセントもしくは数の25％以内、20％以内、15％以内、10％以内、もしくは5％以内であり、かつ/または平均パーセントもしくは数の標準偏差以内であり、群の対象の各々が、同じ疾患または状態を処置するために組換え受容体発現治療用細胞組成物を受けた後に毒性を発生し続けた、態様82〜103のいずれかの方法。
105. 前記閾値レベルが、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、もしくは60％であるか、または約20％、約25％、約30％、約35％、約40％、約45％、約50％、約55％、もしくは約60％である、生物学的試料または血液もしくはアフェレーシス試料におけるマーカーが表面陽性の細胞のパーセントである、態様82〜104のいずれかの方法。
106. 前記パーセンテージが、試料における、総白血球もしくは総CD45+細胞、またはその生存細胞の中の骨髄系細胞集団のまたは骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージであるか、または、試料における、総白血球もしくはCD45+細胞、またはその生存細胞の中の骨髄系細胞集団または骨髄系マーカーが陽性の細胞のパーセンテージである、態様82〜105のいずれかの方法。
107. 前記アフェレーシス試料が、白血球アフェレーシス試料である、態様82〜106のいずれかの方法。
108. 前記細胞の集団が、単球であるかまたはそれを含む、態様82〜107のいずれかの方法。
109. 前記マーカーが骨髄系細胞マーカーであり、かつ/または前記マーカーがCD14であり、かつ/または前記細胞の集団がCD14+骨髄系細胞であるかもしくはそれを含み、任意で前記マーカーがヒト細胞の表面上に発現され、任意で前記マーカーがヒトCD14である、態様82〜108のいずれかの方法。
110. 前記マーカーが、単球マーカーである骨髄系マーカーであり、任意で、
該単球マーカーが、骨髄系細胞以外または単球以外の細胞の集団上に存在しないかまたは通常は発現されず；かつ/または
ヒト細胞におけるCD14と共発現されるかもしくは実質的に共発現される、またはヒト細胞におけるCD14と同一の広がりのもしくは本質的に同一の広がりの発現パターンを有し、かつ/または、ヒトにおけるCD14と類似した、もしくは本質的に同じ発現パターンを有するマーカーである、
態様82〜109のいずれかの方法。
111. 前記マーカーがCD14であるか、または前記骨髄系細胞集団がCD14+であり、かつ前記パーセンテージが、試料における総生存白血球または総生存CD45+細胞の中のCD14+細胞のパーセンテージである、態様82〜110の方法。
112. 前記閾値レベルが、アフェレーシス試料における総生存白血球または総生存CD45+細胞の中のCD14+細胞のパーセンテージであり、該パーセンテージが、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、もしくは60％であるか、または約45％、約46％、約47％、約48％、約49％、約50％、約51％、約52％、約53％、約54％、約55％、約56％、約57％、約58％、約59％、もしくは約60％である、態様111の方法。
113. 前記試薬が、骨髄系細胞集団のマーカーまたは細胞に特異的に結合する結合分子である、態様82〜112のいずれかの方法。
114. 前記試薬が、抗体またはその抗原結合断片である、態様82〜113のいずれかの方法。
115. 前記生物学的試料が、血液、血漿、もしくは血清試料であるか、またはそれから得られる、態様82〜114のいずれかの方法。
116. 前記生物学的試料が、アフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス試料であるか、またはそれから得られる、態様82〜115のいずれかの方法。
117. 細胞を、骨髄系細胞を、または骨髄系細胞の集団上に発現されるマーカーをアッセイまたは評価することが、フローサイトメトリーを含む、態様82〜116のいずれかの方法。
118. 前記毒性が、神経毒性またはサイトカイン放出症候群（CRS）、任意でグレード1以上の神経毒性またはCRSを含む、態様82〜117のいずれかの方法。
119. 前記毒性が神経毒性である、態様82〜118のいずれかの方法。
120. 前記神経毒性が、重篤な神経毒性であるか、またはグレード3以上の神経毒性である、態様119の方法。
121. 前記毒性が、重篤な神経毒性を含み、かつ/または、グレード2以上の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、少なくとも長期にわたるグレード3の神経毒性を含むか、またはグレード4もしくはグレード5のもしくはそれよりも上の神経毒性である；かつ/または
前記毒性が、重篤なCRSを含み、かつ/またはグレード2以上もしくはグレード3以上のCRSを含む、
態様82〜120のいずれかの方法。
122. 前記毒性が、脳浮腫に関連している、態様82〜121のいずれかの方法。
123. 前記作用物質または他の処置が、ステロイド；IL-10、IL-10R、IL-6、IL-6受容体、IFNγ、IFNGR、IL-2、IL-2R/CD25、MCP-1、CCR2、CCR4、MIP1β、CCR5、TNFα、TNFR1、IL-1、およびIL-1Rα/IL-1βの中から選択されるサイトカイン受容体もしくはサイトカインのアンタゴニストもしくは阻害剤；または、ミクログリア細胞の活性もしくは機能を阻止する、遮断する、もしくは低減させることができる作用物質のうちの1つまたは複数であるかまたはそれを含む、態様82〜122のいずれかの方法。
124. 前記アンタゴニストまたは阻害剤が、抗体または抗原結合断片、小分子、タンパク質またはペプチド、および核酸の中から選択される作用物質であるかまたはそれを含む、態様123の方法。
125. 前記作用物質または他の処置が、抗IL-6抗体または抗IL6受容体抗体である、態様83〜124のいずれかの方法。
126. 前記作用物質または他の処置が、トシリズマブ、シルツキシマブ、クラザキズマブ、サリルマブ、オロキズマブ（CDP6038）、エルシリモマブ、ALD518/BMS-945429、シルクマブ（CNTO 136）、CPSI-2634、ARGX-109、FE301、およびFM101の中から選択される作用物質であるかまたはそれを含む、態様83〜125のいずれかの方法。
127. 前記作用物質または他の処置が、トシリズマブであるかまたはそれを含む、態様83〜126のいずれかの方法。
128. 前記作用物質または他の処置が、シルツキシマブであるかまたはそれを含む、態様83〜127のいずれかの方法。
129. 前記ステロイドが、デキサメタゾンであるかまたはそれを含む、態様123の方法。
130. ミクログリア細胞の活性または機能を阻止する、遮断する、または低減させることができる前記作用物質が、抗炎症剤、NADPHオキシダーゼ（NOX2）の阻害剤、カルシウムチャネル遮断薬、ナトリウムチャネル遮断薬から選択され、GM-CSFを阻害し、CSF1Rを阻害し、CSF-1に特異的に結合し、IL-34に特異的に結合し、核因子κB（NF-κB）の活性化を阻害し、CB2受容体を活性化し、かつ/またはCB2アゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤であり、マイクロRNA-155（miR-155）を阻害するか、またはマイクロRNA-124（miR-124）を上方制御する、態様123の方法。
131. ミクログリア細胞の活性化または機能を阻止する、遮断する、または低減させることができる前記作用物質が、小分子、ペプチド、タンパク質、抗体もしくはその抗原結合断片、抗体模倣物、アプタマー、または核酸分子である、態様130の方法。
132. 前記作用物質が、ミノサイクリン、ナロキソン、ニモジピン、リルゾール、MOR103、レナリドミド、カンナビノイド（任意でWIN55または212-2）、静脈内免疫グロブリン（IVIg）、イブジラスト、抗miR-155ロックド核酸（LNA）、MCS110、PLX-3397、PLX647、PLX108-D1、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、AC-708、DCC-3014、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン（GW2580）、AZD6495、Ki20227、BLZ945、エマクツズマブ、IMC-CS4、FPA008、LY-3022855、AMG-820、およびTG-3003から選択される、態様130または態様131の方法。
133. 前記作用物質が、コロニー刺激因子1受容体（CSF1R）の阻害剤である、態様130〜132のいずれかの方法。
134. 前記阻害剤が、
PLX-3397、PLX647、PLX108-D1、PLX7486、JNJ-40346527、JNJ28312141、ARRY-382、AC-708、DCC-3014、5-(3-メトキシ-4-((4-メトキシベンジル)オキシ)ベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン（GW2580）、AZD6495、Ki20227、BLZ945、またはその薬学的な塩もしくはプロドラッグ；
エマクツズマブ、IMC-CS4、FPA008、LY-3022855、AMG-820、およびTG-3003、またはその抗原結合断片； 
または、前述のいずれかの組み合わせ
から選択される、態様130〜133のいずれかの方法。
135. 前記阻害剤がPLX-3397である、態様130〜133のいずれかの方法。
136. 前記組換え受容体が、疾患もしくは状態に関連する抗原、または疾患もしくは状態に関連する病変の環境の細胞において発現される抗原に特異的に結合する、態様83〜135のいずれかの方法。
137. 前記疾患または状態ががんである、態様83〜136のいずれかの方法。
138. 前記疾患または状態が、骨髄腫、白血病、またはリンパ腫である、態様83〜137のいずれかの方法。
139. 前記疾患または状態が、B細胞悪性腫瘍であり、かつ/または急性リンパ芽球性白血病（ALL）、成人ALL、慢性リンパ芽球性白血病（CLL）、非ホジキンリンパ腫（NHL）、およびびまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）である、態様83〜138のいずれかの方法。
140. 前記組換え受容体が、疾患もしくは状態に関連する抗原、または疾患もしくは状態の細胞上に発現されるかもしくは存在する抗原に特異的に結合する、態様82〜139のいずれかの方法。
141. 前記抗原が、受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体1（ROR1）、B細胞成熟抗原（BCMA）、炭酸アンヒドラーゼ9（CA9；G250またはCAIXとしても知られる）、Her2/neu（受容体チロシンキナーゼerb-B2）、CD19、CD20、CD22、およびB型肝炎表面抗原、抗葉酸受容体、CD23、CD24、CD30、CD33、CD38、CD44、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン4（CSPG4）、上皮成長因子タンパク質（EGFR）、上皮糖タンパク質2（EPG-2）、上皮糖タンパク質40（EPG-40）、エフリンB2、エフリン受容体A2（EPHa2）、Her3（erb-B3）、Her4（erb-B4）、erbB二量体、III型上皮成長因子受容体変異（EGFR vIII）、葉酸結合タンパク質（FBP）、Fc受容体様5（FCRL5；Fc受容体ホモログ5またはFCRH5としても知られる）、胎児アセチルコリン受容体（胎児AchR）、ガングリオシドGD2、ガングリオシドGD3、グリピカン-3（GPC3）、Gタンパク質共役受容体5D（GPCR5D）、ヒト高分子量黒色腫関連抗原（HMW-MAA）、IL-22受容体α（IL-22RαまたはIL-22R-アルファ）、IL-13受容体α2（IL-13Rα2またはIL-13R-アルファ2）、キナーゼインサートドメイン受容体（kdr）、κ軽鎖、ロイシンリッチリピート含有8ファミリーメンバーA（LRRC8A）、ルイスY、L1細胞接着分子（L1-CAM）、黒色腫関連抗原（MAGE）-A1、MAGE-A3、MAGE-A6、MAGE-A10、黒色腫の優先発現抗原（PRAME）、サバイビン、TAG72、B7-H3、B7-H6、IL-13受容体α2（IL-13Ra2）、CD171、ヒト白血球抗原A1（HLA-A1）、ヒト白血球抗原A2（HLA-A2）、葉酸受容体-α、CD44v6、CD44v7/8、αvβ6インテグリン（avb6インテグリン）、8H9、神経細胞接着分子（NCAM）、血管内皮増殖因子受容体（VEGF受容体またはVEGFR）、栄養膜糖タンパク質（TPBG；5T4としても知られる）、NKG2Dリガンド、二重抗原、がん-精巣抗原、メソテリン（MSLN）、マウスサイトメガロウイルス（CMV）、ムチン1（MUC1）、MUC16、前立腺特異抗原、前立腺幹細胞抗原（PSCA）、前立腺特異的膜抗原（PSMA）、ナチュラルキラーグループ2メンバーD（NKG2D）リガンド、がん/精巣抗原1B（CTAG；NY-ESO-1およびLAGE-2としても知られる）、メランA（MART-1）、糖タンパク質100（gp100）、胎児腫瘍性抗原、腫瘍関連糖タンパク質72（TAG72）、チロシナーゼ関連タンパク質1（TRP1；TYRP1またはgp75としても知られる）、チロシナーゼ関連タンパク質2（TRP2；ドパクロムトートメラーゼ、ドパクロムデルタ-イソメラーゼ、またはDCTとしても知られる）、血管内皮増殖因子受容体2（VEGF-R2）、がん胎児性抗原（CEA）、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、CD123、CD133、c-Met、O-アセチル化GD2（OGD2）、L1-CAMのCE7エピトープ、ウィルムス腫瘍1（WT-1）、サイクリン、サイクリンA2、C-Cモチーフケモカインリガンド1（CCL-1）、CD138、病原体特異的または病原体発現抗原である、態様140の方法。
142. 前記組換え受容体が、疾患もしくは状態、または疾患もしくは状態の細胞を特異的に標的とする治療剤によって含まれるタグに特異的に結合し、該タグが、対象に投与されているかまたは投与されることになる、態様1〜141のいずれかの方法。
143. 前記組換え受容体が、T細胞受容体または機能的非T細胞受容体である、態様82〜142のいずれかの方法。
144. 前記組換え受容体がキメラ抗原受容体（CAR）である、態様82〜143のいずれかの方法。
145. 前記CARが、抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、ITAMを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、任意で、該細胞内シグナル伝達ドメインが、CD3-ゼータ（CD3ζ）鎖の細胞内ドメインを含み；かつ/または前記CARが、CD28もしくは4-1BBのシグナル伝達ドメインを任意で含む共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、態様144の方法。
146. 前記操作された細胞が、T細胞、任意でCD4+および/またはCD8+ T細胞を含む、態様82〜145のいずれかの方法。
147. 前記T細胞が、対象から得られた初代T細胞である、態様146の方法。
148. 前記細胞療法が、それぞれ両端の値を含む、1×105〜1×108個もしくは約1×105〜1×108個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）、5×105〜1×107個もしくは約5×105〜1×107個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）、または1×106〜1×107個もしくは約1×106〜1×107個の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、もしくは総末梢血単核細胞（PBMC）の投与を含む、態様82〜147のいずれかの方法。
149. 前記細胞療法が、1×108個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、1×107個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、0.5×107個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、1×106個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、0.5×106個以下の総組換え受容体発現細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）の投与を含む、態様82〜148のいずれかの方法。
150. 毒性または重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量が、5×107個未満または約5×107個未満の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、2.5×107個未満もしくは約2.5×107個未満、1.0×107個未満もしくは約1.0×107個未満、5.0×106個未満もしくは約5.0×106個未満、1.0×106個未満もしくは約1.0×106個未満、5.0×105個未満もしくは約5.0×105個未満、または1×105個未満もしくは約1×105個未満の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）であるかまたはそれを含む、態様82〜149のいずれかの方法。
151. 毒性または重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量が、1×105〜5×107個または約1×105〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）、例えば、1×105〜2.5×107個、1×105〜1.0×107個、1×105〜5.0×106個、1×105〜1.0×106個、1.0×105〜5.0×105個、5.0×105〜5×107個、5×105〜2.5×107個、5×105〜1.0×107個、5×105〜5.0×106個、5×105〜1.0×106個、1.0×106〜5×107個、1×106〜2.5×107個、1×106〜1.0×107個、1×106〜5.0×106個、5.0×106〜5×107個、5×106〜2.5×107個、5×106〜1.0×107個、1.0×107〜5×107個、1×107〜2.5×107個、または2.5×107〜5×107個の総組換え受容体発現細胞、任意でCAR+細胞、総T細胞、または総末梢血単核細胞（PBMC）であるかまたはそれを含む、態様82〜150のいずれかの方法。
152. 前記操作された細胞が、対象に対して自己由来である、態様82〜151のいずれかの方法。
153. 前記操作された細胞が、対象に対して同種異系である、態様82〜152のいずれかの方法。
154. 前記試薬が、検出可能に標識されている、任意で蛍光標識されている、態様82〜153のいずれかの方法。
155. (B)におけるさらなる指定が、
対象に、毒性の発生またはその発生の危険性を処置する、阻止する、遅らせる、低減させる、または減衰させることができる作用物質または他の処置を、治療用細胞組成物または遺伝子操作された細胞の投与の施与の(i) 開始の前に、(ii) 開始から1、2、もしくは3日以内に、(iii) 開始と同時に、および/または(iv) 開始の後の最初の発熱時に施与する工程を指定すること；ならびに/または
対象に細胞療法を、低減した用量で、または、細胞療法の施与後に、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない、または対象の大多数、および/もしくは対象が有するかもしくは有すると疑われる疾患もしくは状態を有する対象の大多数において、毒性もしくは重篤な毒性を発生する危険性に関連しない用量で施与する工程を指定すること；ならびに/または
対象に細胞療法を、入院患者の設定においておよび/または1日もしくは複数日にわたる入院を伴って施与する工程であって、任意で、該細胞療法がそうでなくて、外来患者ベースでまたは1日もしくは複数日にわたる入院を伴わずに対象に施与されるものである、工程を指定すること
を含む、態様16の製造物品。
156. 前記説明書が、パラメータまたは評価された危険性のレベルをさらに指定する、態様16または態様155の製造物品。
157. 前記説明書が、態様82〜154のいずれかの方法を実施することを指定する、態様1〜81および155〜156のいずれかの製造物品。
【実施例】
【０５０３】
VIII．実施例
以下の実施例は、例示のみを目的として含まれるものであり、本発明の範囲を限定することを意図しない。
【０５０４】
実施例1：自己由来CAR+ T細胞療法に関連した神経毒性の予測としてのアフェレーシス試料におけるCD14+単球の評価
アフェレーシス由来の単離細胞からの自己由来CAR+ T細胞組成物の生成の前に得られた対象由来のアフェレーシス試料を、CD14+単球のパーセンテージについて評価した。CD14+単球のパーセンテージは、自己由来治療用CAR+ T細胞組成物の投与後の個々の対象における神経毒性の発生と、遡及的に相関していた。
【０５０５】
単核細胞が濃縮されたヒト白血球アフェレーシス試料を、白血球アフェレーシス収集システムを用いて、対象由来の全血試料から得た。白血球アフェレーシスの試料を、抗CD14抗体を用いたフローサイトメトリーによって、CD14+単球の存在について評価した。
【０５０６】
CD4+およびCD8+ T細胞を、個々の対象由来の白血球アフェレーシス試料から免疫親和性に基づく濃縮によって単離し、活性化し、抗CD19 CARをコードするウイルスベクターで形質導入して、その後、増大および凍結保存を行った。CARは、マウス抗体に由来する抗CD19 scFv、免疫グロブリンスペーサー、CD28に由来する膜貫通ドメイン、4-1BBに由来する共刺激領域、およびCD3-ζ細胞内シグナル伝達ドメインを含有していた。
【０５０７】
びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）、NOS（新規および低悪性度から形質転換したもの）、原発性縦隔大細胞型B細胞リンパ腫（PMBCL）、および濾胞性リンパ腫グレード3B（FL3B）を有する対象を含む、0〜2の米国東海岸癌臨床試験グループ（ECOG）スコアを有する再発性または難治性の非ホジキンリンパ腫を有する58名の対象に、生成させた、抗CD19キメラ抗原受容体（CAR）を発現する自己由来T細胞を投与した。凍結保存された細胞組成物を、静脈内投与の前に臨床で解凍した。治療用T細胞組成物を、およそ1:1の標的比で投与される、同じ対象に由来するCAR+操作されたT細胞の製剤化されたCD4+およびCD8+集団を有する規定された組成の細胞産物として投与した。対象を、5×107個の総CAR発現T細胞を含有する用量レベル1（DL-1）、または1×108個の（DL-2）総CAR発現T細胞を含有する用量レベル2（DL-2）のいずれかで処置した。
【０５０８】
CAR発現T細胞の投与の前に、対象を、1日30 mg/m2のフルダラビンで3日間および1日300 mg/m2のシクロホスファミドで3日間処置した。
【０５０９】
処置後に、対象を、米国国立癌研究所-共通毒性基準（CTCAE）スケール、バージョン4.03（NCI-CTCAE v4.03）に従って、1〜5のスケールに等級分けした神経毒性（錯乱、失語症、脳症、ミオクローヌス発作、痙攣、嗜眠、および/または精神状態の変化の症状を含む神経学的合併症）について評価し、モニタリングした。共通毒性基準（CTCAE）スケール、バージョン4.03（NCI-CTCAE v4.03）。2009年5月28日に公表された有害事象に関する共通用語集（CTCAE）バージョン4、アメリカ合衆国保健福祉省（v4.03: June 14, 2010）；およびGuido Cavaletti & Paola Marmiroli Nature Reviews Neurology 6, 657-666 (December 2010)を参照されたい。評価された対象のうち、処置された対象の83％（48/58）は、いかなる神経毒性も示さなかったが、対象の17％（10/58）は、グレード1〜4の神経毒性（いずれかのNTX Gr）を発生し、対象の12％（7/58）においてグレード3以上（NTX Gr3+）の神経毒性が観察された。
【０５１０】
アフェレーシス試料におけるCD14+単球のパーセントと自己由来CAR+ T細胞の注入後の個々の対象における神経毒性との相関の程度を、単変量解析によって評価した。図1Aおよび1Bに示されるように、いかなる神経毒性も発生しなかった対象は、神経毒性（p＝0.0242）またはグレード3以上の神経毒性（p＝0.0149）を発生した対象よりも有意に低い、白血球アフェレーシス試料における生存白血球のうちのCD14+単球のパーセンテージを有していた。同様の結果が、他の統計学的方法で観察された。
【０５１１】
結果は、例えば骨髄系特異的マーカーCD14によって決定される骨髄系細胞（例えば単球）の存在が、その後の自己由来CAR発現T細胞の投与に関連して神経毒性を発生する危険性を予測するための、個々の対象における白血球アフェレーシス試料の内因子であるという知見と一致している。これらの結果は、CAR+ T細胞療法に対する神経毒性の危険性を改善するために介入での予防的処置について対象を特定するかまたはスクリーニングするための、CAR+ T細胞療法についての候補である対象に由来するアフェレーシス試料または他の血液由来の試料におけるマーカーとしてのCD14の使用を支持する。
【０５１２】
実施例2：再発性および難治性の非ホジキンリンパ腫（NHL）を有する対象への抗CD19 CAR発現細胞の投与
A. 対象および処置
CD19に特異的なキメラ抗原受容体（CAR）を発現する自己由来T細胞を含有する治療用CAR+ T細胞組成物を、B細胞悪性腫瘍を有する対象に投与した。びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）、新規のまたは低悪性度から形質転換したリンパ腫（NOS）、原発性縦隔大細胞型b細胞リンパ腫（PMBCL）、および2種類の治療の失敗後の濾胞性リンパ腫グレード3b（FLG3B）を含む、再発性または難治性（R/R）の侵襲性非ホジキンリンパ腫（NHL）を有する55名の成人ヒト対象のコホート（フルコホート）に対する進行中の試験における特定の時点までの評価について、結果をこの実施例に記載する。処置された対象の中には、0〜2の米国東海岸癌臨床試験グループ（ECOG）スコアを有する対象が含まれた（追跡期間中央値3.2ヶ月）。55名の対象には、マントル細胞リンパ腫（MCL）を有する対象は含まれなかった。事前の同種異系幹細胞移植（SCT）に基づいて除外された対象はなく、必要とされるアフェレーシスのための最小絶対リンパ球数（ALC）はなかった。
【０５１３】
55名の対象のうちのコアサブセット（パフォーマンスステータス不良（ECOG2）、辺縁帯リンパ腫（MZL）から形質転換したDLBCL、および/または慢性リンパ性白血病（CLL、リヒター）を有する対象を除外したサブセット（コアコホート））について、この時点でのアウトカムを別々に評価した。
【０５１４】
フルコホートおよびコアコホートの人口統計およびベースライン特徴を表6に示す。
【０５１５】
（表６）人口統計およびベースライン特徴
2020522695.tif 000022
＊最後の化学療法含有レジメンに対してSDもしくはPD、または自己由来SCT後12ヶ月未満に再発。
【０５１６】
投与された治療用T細胞組成物は、処置される個々の対象由来の白血球アフェレーシス試料からのCD4+およびCD8+細胞の免疫親和性に基づく濃縮を含むプロセスによって生成させた。単離されたCD4+およびCD8+ T細胞を活性化し、抗CD19 CARをコードするウイルスベクターで形質導入して、その後、操作された細胞集団の増大および凍結保存を行った。CARは、マウス抗体に由来する抗CD19 scFv、免疫グロブリン由来スペーサー、CD28に由来する膜貫通ドメイン、4-1BBに由来する共刺激領域、およびCD3-ζ細胞内シグナル伝達ドメインを含有していた。
【０５１７】
凍結保存された細胞組成物を、静脈内投与の前に解凍した。治療用T細胞用量を、およそ1:1の標的比で投与される製剤化されたCD4+ CAR+細胞集団および製剤化されたCD8+ CAR+集団を投与することによって、規定された細胞組成物として投与した。対象に、CAR発現T細胞の単回投与または2回投与（各単回投与は、それぞれCD4+ CAR発現T細胞およびCD8+ CAR発現T細胞の別々の注入による）を以下のように施与した：5×107個の総CAR発現T細胞を含有する用量レベル1（DL1）の単回投与（n＝30）、各用量をおよそ14日の間隔をあけて投与したDL1の2回投与（n＝6、投与エラーのため、2回投与スケジュールによって2回のDL2用量を誤って受けた1名の対象を含む）、または1×108個（DL2）の総CAR発現T細胞を含有する用量レベル2（DL2）の単回投与（n＝18）。CAR+ T細胞注入の3日前に開始して、対象は、フルダラビン（flu、30 mg/m2）およびシクロホスファミド（Cy、300 mg/m2）でのリンパ球枯渇化学療法を受けた。
【０５１８】
B. 安全性
CAR-T細胞療法の、治療下で発現した有害事象（TEAE）の有無を評価した。図2は、20％以上の対象において生じた、臨床検査値異常およびTEAEを経験したことが観察された対象のパーセンテージを図示する。図2に示されるTEAEに加えて、以下の事象用語が、5％以上の患者においてグレード3〜4で観察された：白血球数の減少（13.6％）、脳症（12％）、高血圧（7％）。観察された毒性の程度は、用量レベル1と2との間で一致していた。
【０５１９】
対象をまた、米国国立癌研究所-共通毒性基準（CTCAE）スケール、バージョン4.03（NCI-CTCAE v4.03）に従って、1〜5のスケールに等級分けした神経毒性（錯乱、失語症、脳症、ミオクローヌス発作、痙攣、嗜眠、および/または精神状態の変化の症状を含む神経学的合併症）についても評価し、モニタリングした。共通毒性基準（CTCAE）スケール、バージョン4.03（NCI-CTCAE v4.03）。2009年5月28日に公表された有害事象に関する共通用語集（CTCAE）バージョン4、アメリカ合衆国保健福祉省（v4.03: June 14, 2010）；およびGuido Cavaletti & Paola Marmiroli Nature Reviews Neurology 6, 657-666 (December 2010)を参照されたい。サイトカイン放出症候群（CRS）もまた決定し、モニタリングし、重篤度に基づいて等級分けした。
【０５２０】
フルコホート対象の84％において、重篤な（グレード3以上の）サイトカイン放出症候群（CRS）および重篤な神経毒性は観察されなかった。加えて、フルコホート対象の60％は、いかなるグレードのCRSも神経毒性も発生しなかったことが観察された。CRS、神経毒性（NT）、sCRS、または重篤な神経毒性（sNT）の発生率において、いかなる差も用量レベル間で観察されなかった。表7は、少なくとも1つの用量のCAR-T細胞を受けた28日後の患者における、サイトカイン放出症候群（CRS）および神経毒性有害事象の発生率を要約している。表7に示すように、DL2の単回投与またはDL1の2回投与を受けたいずれの対象においても、sCRS（グレード3〜4）は観察されなかった。重篤な神経毒性または重篤なCRS（グレード3〜4）が、対象のフルコホートの16％（9/55）において、およびコアサブセット中の対象の18％（8/44）において観察された。対象の11％（n＝6）がトシリズマブを受け、対象の24％（n＝13）がデキサメタゾンを受けた。フルコホート内のECOG2対象の中で、CRSおよび神経毒性の観察された割合は、それぞれ71％および29％であった。
【０５２１】
（表７）CRSおよび神経毒性有害事象の有無の評価
2020522695.tif 000023
†投与エラーのためにDL2の2回投与スケジュールで処置された1名の患者を含む。
【０５２２】
図3は、CRSおよび/または神経毒性の発症までの観察された時間を図示するカプランマイヤー曲線を示す。示されるように、CRSの発症までおよび神経毒性の発症までの観察された時間の中央値は、それぞれ5日および11日であり、患者の11％のみが、細胞療法の施与の開始後72時間未満でCRSの発症を経験した。CRSおよび神経毒性のグレード1またはそれよりも良好への消散までの時間の中央値は、それぞれ5日および7日であった。CRSおよび神経毒性の完全な消散までの時間の中央値は、それぞれ5日および11日であった。結果は、対象においていずれかのCRSまたは神経毒性の早期発症の割合が低かったという結論と一致していた。
【０５２３】
C. 処置に対する奏効
CAR+ T細胞の投与後1、3、6、7、12、18、および24ヶ月目に腫瘍量を評価することによるものを含め、対象を奏効についてモニタリングした。奏効率を、表8に列挙する。多数の事前処置がされた、または予後不良である、および/または再発性もしくは難治性疾患を有する対象を含んだ対象のコホートにおいて、高い持続性の奏効率が観察された。コア（n＝44）コホートにおける全用量にわたる対象について、観察された全奏効率（ORR）は86％であり、観察された完全奏効（CR）率は59％であった。コアコホートについて3ヶ月目に、全奏効率（ORR）は66％であり、3ヶ月CR率はコアコホートの中で50％であった。コアコホートにおいて、3ヶ月ORRは、用量レベル1で58％（11/19）、および用量レベル2で78％であった；3ヶ月CR率は、用量レベル1について42％（8/19）、および用量レベル2について56％（5/9）であり、示唆された処置アウトカムに対する用量応答効果と一致していた。加えて、結果は、用量と奏効の持続性との間の関係と一致していた。
【０５２４】
（表８）奏効
2020522695.tif 000024
DL1S：DL1の1回投与スケジュール；DL2S：DL2の1回投与スケジュール；DL1D：DL1の2回投与スケジュール。
aPD、死亡、または28日目の再病期分類スキャンの事象を有する患者を含んだ。データスナップショットより28日未満前に処置された患者は含まれなかった。
b分母は、3ヶ月目の効力評価の日またはPDもしくは死亡の評価よりも3ヶ月以上前にCAR T細胞療法を受けた患者の数である。
c投与エラーのためにDL2の2回投与スケジュールで処置された1名の患者を含む。
【０５２５】
フルコホートおよびコアコホートにおける対象の様々な部分群の中の全奏効率を、それぞれ図4Aおよび4Bに示す。危険性が低いDLBCL部分群において、奏効率は概して高かった。50％よりも高いORRが、原発性難治性もしくは化学療法抵抗性DLBCLを有するか、または以前にCRを達成したことがないダブル/トリプルヒット分子サブタイプを有する患者において、3ヶ月目に観察された。リンパ腫によるCNS浸潤の完全な消散が、2名の患者において観察された。
【０５２６】
評価の特定の時点よりも6ヶ月以上前に処置された対象の中で、3ヶ月目に奏効であった10名の患者のうち、9名（90％）は、6ヶ月目に奏効のままであった。評価時点で、奏効していたコアサブセットにおける対象の97％が生存し、追跡中であり、追跡期間中央値は3.2ヶ月であった。
【０５２７】
奏効の期間および全生存期間の結果（最良総合効果（非奏効者、CR/PR、CR、および/またはPR）によって分類した）を、対象のフルコホートおよびコアコホートについて、それぞれ図5Aおよび5Bに示す。示されるように、長期生存が奏効者において観察され、CRを有する対象においては奏効の持続性が増加した。3ヶ月目に奏効であった患者はすべて、評価の時に生存していたが、パフォーマンスステータス不良（ECOG 2）を有する5/6名の対象は亡くなっていた。
【０５２８】
C. 血液中のCAR+ T細胞の評価
処置後の様々な時点で末梢血中のCAR+ T細胞の数を評価するために、薬物動態分析を実施した。図6Aに示されるように、対数スケール上にプロットした細胞数/μL血液（中央値±四分位数）によって測定されるCD4+およびCD8+ CAR発現細胞は、両方の投与用量レベルで評価の過程を通して検出された。
【０５２９】
曲線下面積（AUC）（血液中の経時的なCD8+ CAR+細胞数）中央値の増加が、より低い用量レベルと比較して、より高い用量レベルを投与された対象の間で、毒性の増加が観察されることなく観察された。より高いピークCD8+/CAR+ T細胞曝露が、非奏効者（PD）よりも奏効者（CR/PR）において観察された；3および6ヶ月までを含む評価の期間にわたる細胞の存続が、疾患が進行していた対象においてさえも観察された（図6B）。結果は、処置が、奏効不良の対象においてさえも、操作された細胞の長期曝露および存続を結果としてもたらしたという結論と一致していた。いくつかの態様において、例えば、再発または疾患の進行後に、例えば、末梢血における細胞のレベルによって測定されるような、操作された細胞が対象中で存続している時に、免疫チェックポイント調節物質または他の免疫調節剤の投与などの併用アプローチが用いられる。いくつかの局面において、他の作用物質または処置の施与後に、長期間存続している細胞が、再増大し、または活性化し、かつ/または抗腫瘍機能を示す。CD4+およびCD8+ CAR+ T細胞数のより高い中央値が、概して、神経毒性を発生した対象の血液において経時的に観察された（図6C）。
【０５３０】
D. 血液分析物および神経毒性
サイトカインを含む様々な処置前血液分析物を、CAR+ T細胞の投与前に、対象の血清において測定した。神経毒性を発生する危険性との潜在的な相関を、統計解析を用いて評価した。図7は、CAR+ T細胞療法後に神経毒性を発生しなかった対象対神経毒性を発生した対象における、評価された分析物のレベルの中央値を単位（LDH、U/L；フェリチン、ng/mL；CRP、mg/L；サイトカイン、pg/mL）で示す。LDH、フェリチン、CRP、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、IFN-α2、MCP-1、およびMIP-1βを含むある特定の血液分析物のレベルは、神経毒性を発生する危険性のレベルに関連することが観察された（ウィルコクソンp値＜0.05、多重度調整なし）。特に、結果は、いくつかの態様において疾患負荷の代理物であるLDHの処置前レベルが、潜在的な神経毒性の危険性の評価、および/またはある特定の対象の危険性に適合した投薬もしくは処置の調整に有用であり得るという結論と一致していた。加えて、CAR-T細胞組成物の投与前に測定された腫瘍量は、神経毒性を発生する危険性と相関していた（スピアマンp値＜0.05）。いくつかの局面において、LDHレベルは、単独でおよび/または別の処置前パラメータ、例えば疾患負荷の別の測定値もしくは指標、例えば、積和寸法（SPD）または疾患負荷の他のCTベースもしくはMRIベースの体積測定値などの腫瘍体積測定値と組み合わせて評価され得る。いくつかの局面において、疾患負荷を示す1つまたは複数のパラメータが評価され、いくつかの状況においては、T細胞療法後に神経毒性を発生する危険性の存在、非存在、または程度を示し得る。いくつかの局面において、1つまたは複数のパラメータは、LDHおよび/または腫瘍体積測定値を含む。
【０５３１】
図8は、フルコホートおよびコアコホート内の個々の対象について無進行時間（月）をプロットしたグラフを示す。各バーは1名の患者を表す。陰影付けは（各場合に、特に指示がない限り、1ヶ月目に達成された）最良総合効果を示す；テクスチャは用量を示す（実線＝用量レベル1（DL1）、単回投与；斜交線影、用量レベル2（DL2）、単回投与；垂直線影＝用量レベル1（DL1）、2回投与）。水平方向の矢印は進行中の奏効を示す。ある特定の個々の対象は、最初に安定疾患（SD）または部分奏効（PR）を示すと評価され（例えば、1ヶ月目に）、後にPR（例えば、SDからPRへの変換）またはCRを達成したことが観察された。そのような場合には、個々の患者のバーの陰影付けは、述べられるように、最良総合効果を示し、各個々の対象のバーに沿ったドット（達成された奏効に対する陰影付けと同じ対応）は、各SD、PR、および/またはCRが対象において生じたことがいつ観察されたかを示す。リンパ腫によるCNS浸潤の完全な消散が、2名の患者において観察された。1名の対象におけるCAR+細胞は、再発後の生検の後に増大していたことが観察された。
【０５３２】
実施例3：マントル細胞リンパ腫（MCL）を有する対象への抗CD19 CAR発現細胞の投与
実施例1に記載されるように生成させた、CD19に特異的なキメラ抗原受容体（CAR）を発現する自己由来T細胞を含有する治療用CAR+ T細胞組成物を、1種類の治療に失敗したマントル細胞リンパ腫（MCL）を有する4名のヒト対象に投与した。凍結保存された細胞組成物を、静脈内投与の前に解凍した。治療用T細胞組成物を、およそ1:1の標的比で投与される、同じ対象に由来するCAR+操作されたT細胞の製剤化されたCD4+およびCD8+集団を有する規定された組成の細胞産物として投与した。対象に、5×107個のCAR発現T細胞を含有する用量レベル1（DL1）の単回投与で、CAR発現T細胞の用量を（CD4+およびCD8+ CAR発現T細胞の分割用量として）投与した。CAR+ T細胞注入の3日前に開始して、対象は、フルダラビン（flu、30 mg/m2）およびシクロホスファミド（Cy、300 mg/m2）でのリンパ球枯渇化学療法を受けた。
【０５３３】
対象を、実施例1に記載されるように奏効および毒性についてモニタリングした。対象のいずれにおいても、いかなるCRSも神経毒性も観察されなかった。処置された4名の対象のうち、2名の対象はPR（持続性ではない）を達成し、2名の患者は進行性疾患を有していた。
【０５３４】
実施例4：抗CD19 CAR発現細胞の投与後の再発性および難治性非ホジキンリンパ腫（NHL）を有する対象における、アフェレーシス試料中のCD14+単球、奏効、および安全性アウトカムのさらなる評価
奏効、安全性アウトカム、およびアフェレーシス試料におけるCD14+単球のパーセンテージと神経毒性アウトカムとの相関を、上記の実施例1および2に記載される臨床試験におけるその後の時点で、自己由来抗CD19 CAR+ T細胞組成物が投与された患者において評価した。
【０５３５】
この実施例に示されるこの時点での分析は、DLBCL（DLBCL、新規および濾胞性リンパ腫から形質転換したNOS；高グレードB細胞リンパ腫（ダブル/トリプルヒット）；CLLまたはMZLから形質転換したDLBCL；PMBCL；およびFL3B、ECOG 0〜2、2種類の治療後を有する対象の評価に基づき；分析のためのコアコホートは、DLBCL、NOSおよび濾胞性リンパ腫から形質転換したもの（tFL）、または高グレードB細胞リンパ腫（ダブル/トリプルヒット）を有し、かつ0もしくは1の米国東海岸癌臨床試験グループパフォーマンスステータス（ECOG PS）を伴う対象を含んだ。フルコホートおよびコアコホートにおける処置された患者の多くは、ダブル/トリプルヒットエクスプレッサー、原発性難治性疾患、2種類以上の治療に対する再発、CRを達成したことがない、自己由来幹細胞移植（ASCT）を受けたことがない、または2のECOG PSなどの、3〜6ヶ月の短い全生存期間（OS）中央値を予測する、少なくとも1つの危険性が高い疾患の特徴を有していた（Crump et al., Blood (2017) 130:1800-1808およびVan de Neste et al., Bone Marrow Transplant. (2016) 51(1):51-7を参照されたい）。
【０５３６】
アフェレーシス試料を、概して実施例1に記載されるように、対象から得て、試料中の生存CD45+細胞のうちのCD14+単球のパーセンテージについて評価した。CD14+単球のパーセンテージは、自己由来治療用CAR+ T細胞組成物の投与後の個々の対象における神経毒性の発生と、遡及的に相関していた。
【０５３７】
治療用CAR+ T細胞組成物での処置後に、対象を、奏効アウトカム（全奏効率（ORR）、完全奏効（CR）、部分奏効（PR））、持続性奏効（3ヶ月および6ヶ月ORRおよびCR）について評価した。奏効の期間（DOR）および全生存期間もまた、様々な奏効群において評価した。危険性が高いDLBCL部分群における高い持続性のORRが、抗CD19 CAR+ T細胞投与について観察された。加えて、コアコホートにおいて、3ヶ月目にCRを有する対象は、6ヶ月目にCRを示し続け、6ヶ月目にCRを示した対象は、より長い期間、奏効を示し続けた。結果は、正確なかつ一貫した用量のCD4+およびCD8+ CAR+ T細胞を含有する抗CD19 CAR+細胞組成物の投与が、予後不良および/または多数の事前処置を伴うR/R侵襲性NHLを有する対象において持続性奏効を結果としてもたらすという観察と一致していた。結果は、コアコホートにおいて好ましい持続性奏効率を示した。
【０５３８】
対象をまた、実質的に実施例1および2に記載されるように、神経毒性およびサイトカイン放出症候群（CRS）の発生を含む安全性アウトカムについて評価し、モニタリングした。結果はまた、重篤なCRSおよび重篤な神経毒性の低い割合を含む、管理可能な毒性および好ましい安全性プロファイルとも一致していた。評価された対象のうち、79％（80/101）は、いかなる神経毒性も示さなかったが、対象の21％（21/101）は、グレード1〜4の神経毒性（いずれかのNTX Gr）を発生し、対象の10％（10/101）においてグレード3以上（NTX Gr3+）の神経毒性が観察された。
【０５３９】
アフェレーシス試料におけるCD14+単球のパーセントと自己由来CAR+ T細胞の注入後の個々の対象における神経毒性との相関の程度を、単変量解析によって評価した。図9Aおよび9Bに示されるように、いかなる神経毒性も発生しなかった対象は、神経毒性（p＝0.0299）またはグレード3以上の神経毒性（p＝0.0067）を発生した対象由来の白血球アフェレーシス試料におけるパーセンテージと比較して有意により低い、白血球アフェレーシス試料における生存白血球の中でのCD14+単球のパーセンテージを有していた。0.5516の効果量が、いずれかの神経毒性を有する群またはいかなる神経毒性も有さない群の間の結果について計算され、0.8651の効果量が、グレード0〜2の神経毒性を有する群と重篤な（グレード3+）神経毒性を有する群との間の結果について計算された。
【０５４０】
結果は、例えば骨髄系特異的マーカーCD14によって決定される骨髄系細胞（例えば単球）の存在が、その後の自己由来CAR発現T細胞の投与に関連して神経毒性を発生する危険性を予測するための、個々の対象における白血球アフェレーシス試料の内因子であるという知見と一致していた。
【０５４１】
本発明は、特定の開示される態様に範囲を限定されることを意図せず、それらは、例えば、本発明の様々な局面を例示するために提供される。記載される組成物および方法に対する様々な変更が、本明細書における説明および教示から明らかになるであろう。そのような変形は、本開示の真の範囲および精神から逸脱することなく実施され得、本開示の範囲内に含まれることが意図されている。
【０５４２】
配列
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【図１】
2020522695.tif 000030
【図２】
2020522695.tif 000031
【図３】
2020522695.tif 000032
【図４Ａ】
2020522695.tif 000033
【図４Ｂ】
2020522695.tif 000034
【図５Ａ】
2020522695.tif 000035
【図５Ｂ】
2020522695.tif 000036
【図６Ａ】
2020522695.tif 000037
【図６Ｂ】
2020522695.tif 000038
【図６Ｃ】
2020522695.tif 000039
【図７】
2020522695.tif 000040
【図８】
2020522695.tif 000041
【図９】
2020522695.tif 000042
【配列表】
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【国際調査報告】
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2020522695.tif 000044
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