(57)【要約】  本発明は、経時的に特に安定であること、そして眼に十分に許容されることが示されているリサミングリーンの点眼液に関する。したがって、当該点眼液は、角膜及び結膜の異常の診断において有利な適用を見出す。【特許請求の範囲】
【請求項１】
リサミングリーン、緩衝剤、及び安定化剤を含むｐＨ４．０〜６．０の水溶液であって、
前記安定化剤が、眼科学的に許容される非イオン性界面活性剤である水溶液。
【請求項２】
前記安定化剤が、アルキルポリグルコシド、オクチルグルコシド、デシルマルトシド、脂肪アルコール、セチルアルコール、オレイルアルコール、コカミドＭＥＡ、コカミドＤＥＡ、コカミドＴＥＡ、エトキシレート、ポリオールもしくはアミンオキシドの脂肪酸エステル、又はそれらの混合物である請求項１に記載の水溶液。
【請求項３】
前記安定化剤が、アルキルポリグルコシド、オクチルグルコシド、グリセロール、ソルビトール、スクロースもしくはポリグルコシドのＣ１０−Ｃ２２脂肪酸エステル、又はそれらの混合物である請求項２に記載の水溶液。
【請求項４】
前記安定化剤の濃度が、水溶液の体積の２重量％以下、好ましくは水溶液の体積の１重量％以下、より好ましくは水溶液の体積の０．００１〜０．５重量％である請求項１〜３のいずれか一項に記載の水溶液。
【請求項５】
リサミングリーンの濃度が、水溶液の体積の３重量％以下、好ましくは水溶液の体積の１．０〜２．５重量％、より好ましくは水溶液の体積の１．３〜２．０重量％である請求項１〜４のいずれか一項に記載の水溶液。
【請求項６】
前記緩衝剤が、クエン酸−クエン酸ナトリウム、酢酸−酢酸ナトリウム、ホウ酸−ホウ酸ナトリウム、クエン酸−リン酸水素二ナトリウム、クエン酸−リン酸一カリウム−ホウ酸−ジエチルバルビツル酸、Ｔｒｉｓ−ホウ酸、又はそれらの組み合わせ、好ましくはクエン酸−クエン酸ナトリウムである請求項１〜５のいずれか一項に記載の水溶液。
【請求項７】
リサミングリーンが、眼の外側表面の生体染色のための、水溶液中に存在する唯一の活性成分である請求項１〜６のいずれか一項に記載の水溶液。
【請求項８】
リサミングリーンと安定化剤の濃度が、２００：１〜２：１、好ましくは５０：１〜５：１、より好ましくは３０：１〜１０：１の比である請求項１〜７のいずれか一項に記載の水溶液。
【請求項９】
以下を含む、ｐＨ４．８〜５．１である請求項１〜８のいずれか一項に記載の水溶液：
−０．０１〜０．３％ｗ／ｖのアルキルポリグルコシド；
−１．４〜１．８％ｗ／ｖのリサミングリーン；
−１．５〜２．５％ｗ／ｖのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝剤；及び、
−水。
【請求項１０】
眼の外側表面の生体染色に使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の水溶液。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、経時的に特に安定であること、そして眼に十分に許容されることが示されているリサミングリーンの点眼液に関する。したがって、当該点眼液は、角膜及び結膜の異常の診断において有利な適用を見出す。
【背景技術】
【０００２】
リサミングリーンは有機酸性染料であり、合成的に製造されている。その染色特性はローズベンガルを使用したときに得られるものと非常に類似している。しかし、ローズベンガルとは異なり、リサミングリーンは痛みがなく、血管や出血に対してより優れたカラーコントラストを提供する。リサミングリーンは、罹患及び脱水した細胞を選択的に染色し、それにより結膜上皮の観察を保証し、そして擦傷した又は剥離した上皮領域を際立たせる。
【０００３】
したがって、リサミングリーンは、多くの症状の中でも角結膜炎を特徴とする眼球乾燥（眼球乾燥症）をも引き起こすシェーグレン症候群の診断だけでなく、環境要因や年齢要因、もしくはコンタクトレンズの使用に起因する眼の乾燥を検出するために、又は様々な原因の結膜刺激症の検査のために、目の外側表面の生体染色において通常使用される。
【０００４】
現在、リサミングリーンを用いた診断試験は、リサミングリーン溶液を一端に乾燥させた厚紙ストリップを用いて行われている。使用時には、染料を担持するストリップの端部に１滴又は２滴の生理溶液が施され、それはリサミングリーンの再溶解に役立つ。その後、その液滴を患者の目に落とし、損傷した上皮領域を緑色に染める。
【０００５】
前記ストリップは、リサミングリーンの水溶性の低下と、結果として生じるリサミングリーンの水溶液の高い不安定性の問題を克服するように設計されている。前記ストリップは、固体の形態で染料の投与を提供することを可能にする。そして、それは使用時にのみ、必要な量のみ（すなわち１滴又は２滴）が、溶液の形態に戻される。
【０００６】
しかしながら、これらのストリップは実用的な性質及び技術的な性質のある種の欠点を示す。
【０００７】
実際、大抵の場合、染料の液滴はストリップと眼の表面の直接接触によって放出されるので、患者の観点からは、特に前述の疾患のいずれかの結果として眼の表面が損傷を受けた場合、局所痛に加えてかなりの不快感が生じる。
【０００８】
さらに、厳密にはリサミングリーンは完全には水溶性ではないので、乾燥染料へのその１滴又は２滴の即時的な添加は、使用前に前記染料の一定かつ測定可能な濃度を達成しない。
【０００９】
したがって、本発明の目的は、現在使用されているストリップについて、患者が十分に許容できる実用的かつ効果的な代替物を提供することである。
【発明の概要】
【００１０】
前記目的は、請求項１に記載のように、リサミングリーン、緩衝剤、及び安定化剤を含む、ｐＨ４．０〜６．０の水溶液によって達成された。前記安定化剤は、眼科学的に許容される非イオン性界面活性剤である。
【００１１】
本発明の目的では、「水溶液」は、水中に溶解された様々な成分の均質混合物として理解される。
【００１２】
別の態様では、本発明は、眼の外側表面の生体染色のための前記水溶液の使用に関する。
【００１３】
本発明の水溶液が驚くべきことに経時的に高い安定性と注目に値する使いやすさを有するという本発明の特徴及び利点は、以下の詳細な説明、及び、例示的で非限定的な例として提供される実施形態から容易に明らかになるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
したがって、本発明は、リサミングリーン、緩衝剤、及び、眼科学的に許容される非イオン性界面活性剤である安定化剤を含む、ｐＨ４．０〜６．０の眼科用水溶液に関する。
【００１５】
本発明の目的では、「眼科学的に許容される非イオン性界面活性剤」なる用語は、眼科的投与に適する、すなわち眼の表面に存在する組織及び体液に適合する非イオン性界面活性剤として理解される。
【００１６】
眼科学的に許容される非イオン性界面活性剤は、アルキルポリグルコシド、オクチルグルコシド、デシルマルトシド、脂肪アルコール、セチルアルコール、オレイルアルコール、コカミドＭＥＡ、コカミドＤＥＡ、コカミドＴＥＡ、Ｃ１０−Ｃ２２アルキルエトキシレート、ポリオールの脂肪酸エステル、脂肪酸アミンオキシドのエステル、及びそれらの混合物である。Ｃ１０−Ｃ２２アルキルエトキシレート（例えば、ポリオキシル４０ステアレート、Ｍｙｒｊ  ５２、Ｂｒｉｊ  ３０、Ｔｗｅｅｎ  ２０、Ｔｗｅｅｎ  ４０、Ｔｗｅｅｎ  ６０、Ｔｗｅｅｎ  ６５、Ｔｗｅｅｎ  ８０、ｐｏｌｙｏｘｙｌ  ４０硬化ヒマシ油）は、好ましくは、Ｃ１０−Ｃ２２脂肪酸、Ｃ１０−Ｃ２２脂肪酸アミド、Ｃ１０−Ｃ２２脂肪アミド、Ｃ１０−Ｃ２２アルコール、Ｃ１０−Ｃ２２アルキルフェノールのエトキシレート、ジエトキシレート、トリエトキシレート、テトラエトキシレート、ペンタエトキシレート又はヘキサエトキシレート、及びポリオールのＣ１０−Ｃ２２脂肪酸エステルから選択される。ここで、末端ヒドロキシル基は、ベンジル、ブチルもしくはメチル基、又はそれらの混合物などの疎水性部分で任意に置換されていてもよい。ポリオールの脂肪酸エステル（例えば、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノオレエート）は、好ましくは、グリセロール、ソルビトール、サッカロース、ポリグルコシドのＣ１０−Ｃ２２脂肪酸エステル又はそれらの混合物から選択される。脂肪酸アミンオキシドのエステルは、好ましくはＣ１０−Ｃ２２アルキルジメチルアミンオキシド、Ｃ１０−Ｃ２２アルキルジエタノールアミンオキシドのエステル及びそれらの混合物から選択される。
【００１７】
本発明の目的では、好ましい非イオン性界面活性剤は、アルキルポリグルコシド、オクチルグルコシド、グリセロールのＣ１０−Ｃ２２脂肪酸エステル、ソルビトールのＣ１０−Ｃ２２脂肪酸エステル、スクロースのＣ１０−Ｃ２２脂肪酸エステル、ポリグルコシドのＣ１０−Ｃ２２脂肪酸エステル又はそれらの混合物である。
【００１８】
驚くべきことに、リサミングリーンの力価及びｐＨの両者が少なくとも１８ヶ月間十分なままであるので、上記の特徴を有する水溶液は経時的に著しい安定性を示すことが認められた。さらに、所定の濃度を有する水溶液は、点眼剤と全く同じ方法で眼の表面に投与可能であるというさらなる利点を提供し、それにより厚紙ストリップの使用で観察される欠点を克服する。
【００１９】
実際、患者はもはや厚紙ストリップの端部と眼の表面との接触に起因する不快感を持たず、また、もはや厚紙上に即時的に調製された液滴中のリサミングリーン濃度の変動性に起因する診断の不確実性もない。
【００２０】
好ましくは、前記安定化剤の濃度は水溶液の体積の２ｗｔ％以下である。
【００２１】
本発明の目的では、「体積のｗｔ％」又は「％  ｗ／ｖ」は、「水溶液１００ｍｌ当たりのグラム数」として理解される。
【００２２】
より好ましくは、前記安定化剤の濃度は水溶液の体積の１ｗｔ％以下である。
【００２３】
特に好ましい実施形態では、安定化剤の濃度は水溶液の体積の０．００１〜０．５ｗｔ％である。
【００２４】
好ましくは、リサミングリーンの濃度は水溶液の体積の３ｗｔ％以下である。
【００２５】
より好ましくは、リサミングリーンの濃度は水溶液の体積の１．０〜２．５ｗｔ％である。
【００２６】
特に好ましい実施形態では、リサミングリーンの濃度は水溶液の体積の１．３〜２．０ｗｔ％である。
【００２７】
好ましくは、水溶液のｐＨは４．５〜５．５である。
【００２８】
特に好ましい実施形態では、水溶液のｐＨは４．７〜５．２である。
【００２９】
本発明の水溶液において、緩衝剤は選択されたｐＨの維持に役立つ。
【００３０】
好ましくは、緩衝剤の濃度は水溶液の体積の５ｗｔ％以下である。
【００３１】
より好ましくは、緩衝剤の濃度は水溶液の体積の１．０〜３．０ｗｔ％である。
【００３２】
特に好ましい形態において、緩衝剤の濃度は水溶液の体積の１．５〜２．５ｗｔ％である。
【００３３】
好ましくは、前記緩衝剤は、クエン酸−クエン酸ナトリウム、酢酸−酢酸ナトリウム、ホウ酸−ホウ酸ナトリウム、クエン酸−リン酸水素二ナトリウム（「マッキルベイン緩衝液（ＭｃＩｌｖａｉｎｅ  ｂｕｆｆｅｒ）」としても知られる）、クエン酸−リン酸一カリウム−ホウ酸−ジエチルバルビツル酸、Ｔｒｉｓ−ホウ酸、又はそれらの組み合わせである。
【００３４】
特に好ましい実施形態では、緩衝剤はクエン酸−クエン酸ナトリウムである。
【００３５】
特に好ましい実施形態では、リサミングリーンは、眼の外側表面の生体染色のための、水溶液中に存在する唯一の活性成分である。
【００３６】
本発明の水溶液のさらに特に好ましい実施形態では、水がその中に存在する唯一の溶媒である。
【００３７】
またさらに特に好ましい実施形態では、本発明の水溶液は、リサミングリーンのほかには、防腐剤又は他の染料を含まない。
【００３８】
好ましくは、リサミングリーンは安定化剤よりも高濃度である。
【００３９】
好ましい実施形態において、リサミングリーンと安定化剤の濃度は、２００：１〜２：１、より好ましくは５０：１〜５：１、さらにより好ましくは３０：１〜１０：１の比である。
【００４０】
さらなる実施形態において、本発明の水溶液は単位用量の形態である。
【００４１】
好ましくは、前記単位用量は、上に開示されるように０．１〜２．０ｍｌの水溶液を含む。
【００４２】
特に好ましい実施形態では、前記単位用量は、上に開示されるように０．２〜１．０ｍｌの水溶液を含む。
【００４３】
水溶液の個々の成分について特定された好ましい態様も同様に、上記の単位用量の実施形態において好ましいと考えられると理解されるべきである。
【００４４】
好ましい水溶液及び同様に単位用量は、ｐＨ４．５〜５．５であり、以下を含む：
−２％ｗ／ｖ以下の安定化剤；
−３％ｗ／ｖ以下のリサミングリーン；
−５％ｗ／ｖ以下の緩衝剤；及び、
−水。
【００４５】
より好ましい水溶液及び同様に単位用量は、ｐＨ４．５〜５．５であり、以下を含む：
−１％ｗ／ｖ以下の安定化剤；
−１．０〜２．５％ｗ／ｖのリサミングリーン；
−１．０〜３．０％ｗ／ｖの緩衝剤；及び、
−水。
【００４６】
さらにより好ましい水溶液及び同様に単位用量は、ｐＨ４．５〜５．５であり、以下を含む：
−０．００１〜０．５％ｗ／ｖの安定化剤；
−１．３〜２．０％ｗ／ｖのリサミングリーン；
−１．５〜２．５％ｗ／ｖの緩衝剤；及び、
−水。
【００４７】
本発明の水溶液は、単位用量の形態においても、眼科学的に許容される賦形剤をさらに含むことができる。「眼科学的に許容される賦形剤」なる用語は、眼の外側表面への投与用の製剤中での使用に適した化合物又は混合物として理解されるべきである。例えば、通常、このタイプの賦形剤は患者に有害な反応を引き起こさず、また眼の表面上のリサミングリーンの作用を大きく阻害しない。
【００４８】
適切な賦形剤は、抗酸化剤、ゲル化剤、金属イオン封鎖剤、結合剤、潤滑剤、増粘剤、等張化剤、フィルム形成性物質、及びそれらの混合物である。
【００４９】
すなわち、適切な抗酸化剤は、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、グルコース、システイン、及びそれらの混合物である。
【００５０】
適切な金属イオン封鎖剤は、ＥＤＴＡと、その一ナトリウム塩、二ナトリウム塩、及びカリウム塩、ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸、ヘキサメチレンジアミンテトラメチレンホスホン酸、エチレンジアミンテトラメチレンホスホン酸、アミノトリメチレンホスホン酸塩、並びにそれらの混合物である。
【００５１】
好ましくは、金属イオン封鎖剤は、ＥＤＴＡ、その一ナトリウム塩、二ナトリウム塩、及びカリウム塩、並びにそれらの混合物である。
【００５２】
適切な増粘剤は、ＴＳ多糖類、ＰＶＰ、カルボキシビニルポリマー、キサンタンガム、ヒアルロン酸ナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエチレングリコール、ムコ多糖類、セルロース及びそのエステル、天然ゴム及びそのエステル、ペクチン、ポリアクリレート、並びにそれらの混合物である。
【００５３】
好ましくは、増粘剤は、ＴＳ多糖類、ムコ多糖類、及びそれらの混合物である。
【００５４】
等張化剤は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化マグネシウム及び塩化カルシウムなどの無機塩、又はグリセロール、プロピレングリコール、エリトリトール、マンニトール、ソルビトール及びトレハロースなどのポリオールもしくは糖、又はカルニチンなどのアミノ酸及びベタインである。
【００５５】
好ましい実施形態では、本発明の水溶液は、ｐＨ４．８〜５．１であり、以下を含む：
−０．０１〜０．３％ｗ／ｖのアルキルポリグルコシド；
−１．４〜１．８％ｗ／ｖのリサミングリーン；
−１．５〜２．５％ｗ／ｖのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝剤；及び、
−水。
【００５６】
より好ましい実施形態では、本発明の水溶液は、ｐＨ４．８〜５．１であり、以下を含む：
−０．０１〜０．３％ｗ／ｖのアルキルポリグルコシド；
−１．４〜１．８％ｗ／ｖのリサミングリーン；
−１．５〜２．５％ｗ／ｖのクエン酸−クエン酸ナトリウム緩衝剤；
−０．０１〜０．５％ｗ／ｖのメタ重亜硫酸ナトリウム；
−０．０１〜０．２％ｗ／ｖのＥＤＴＡ；
−０．０１〜０．３％ｗ／ｖのＴＳ多糖類；及び、
−水。
【００５７】
いくつかの実施形態において、本発明の水溶液は、ｐＨ４．０〜６．０であり、実質的に、リサミングリーン、緩衝剤、水、及び安定化剤からなる。前記安定化剤は眼科学的に許容される非イオン性界面活性剤である。「実質的に・・・からなる」という語句は、リサミンが本発明の水溶液中に存在する、眼の外側表面の生体染色のための唯一の活性成分であり、同時にその他の成分又は賦形剤はリサミングリーンの作用を阻害することなく、水混和性かつ水溶性であることを意味する。
【００５８】
別の実施形態では、本発明の水溶液は、ｐＨ４．０〜６．０であり、リサミングリーン、緩衝剤、水、安定化剤、及び眼科学的に許容される賦形剤からなる。前記安定化剤は、眼科学的に許容される非イオン性界面活性剤である。
【００５９】
本発明の水溶液は、既知の方法を用いて調製することができる。実際には、眼の外側表面への投与用に、当該成分は、例えば、撹拌しながら次々に添加してそれらをそのまま混合するか、又は１つ以上の賦形剤と共に混合することができる。
【００６０】
通常は、本発明の水溶液は使用前に既知の方法に従って、例えばガンマ線処理により滅菌される。
【００６１】
別の態様では、本発明は、眼の外側表面の生体染色のための、上に開示された水溶液の使用に関する。既に述べたように、実際に、本発明の水溶液は、驚くべきことに、乾燥したリサミングリーンを担持する厚紙ストリップの使用に伴う欠点を克服した。
【００６２】
したがって、本発明の水溶液は十分に眼に許容されるので、眼科学分野において使用することができ、それにより角膜及び結膜の異常の診断において有利な適用を見出す。
【００６３】
好ましくは、本発明の水溶液は、０．００５〜０．０５０ｍｌ、好ましくは０．０１０〜０．０１５ｍｌの量で眼の外側表面に投与される。
【００６４】
水溶液の成分、単位用量、調製、及び前記水溶液の使用の好ましい態様の全ての可能な組み合わせが本明細書に記載されており、したがって、それらは好適でもあることが理解されるべきである。
【００６５】
水溶液及びその成分にとって好ましく有利であると確認された全ての態様は、前記水溶液の調製及び使用にとっても同様に好ましく有利であると見なされるべきことも理解されるべきである。
【００６６】
以下は、例示の目的で提供された本発明の実施例である。
【実施例】
【００６７】
実施例１
以下のｐＨ４．９の水溶液を調製した：
【００６８】
【表１】
2020503290.tif 000002
【００６９】
（＊）アルキル−ポリグルコシド非イオン性界面活性剤（ダウ・ケミカル社）
【００７０】
実施例２
比較のために２つの水溶液を調製した。
【００７１】
【表２】
2020503290.tif 000003
【００７２】
実施例３
以下のｐＨ４．９の水溶液を調製した。
【００７３】
【表３】
2020503290.tif 000004
【００７４】
実施例４
以下のｐＨ５．０の水溶液を調製した。
【００７５】
【表４】
2020503290.tif 000005
【００７６】
実施例５
以下のｐＨ５．０の水溶液を調製した。
【００７７】
【表５】
2020503290.tif 000006
【００７８】
実施例６
経時安定性試験
【００７９】
実施例２において比較のために使用した水溶液Ａ及びＢは、同じ組成ではあるが異なるｐＨで試験した。
【００８０】
両溶液の試料を２つの別々の安定性試験に供した：
−溶液Ａ及びＢのサンプルの第１セットを２５℃（ＲＨ  ６０％）で貯蔵した；
−溶液Ａ及びＢのサンプルの第２セットを４０℃（ＲＨ  ７４％）で貯蔵した。
【００８１】
上記の条件下で６ヶ月後、全てのサンプルは進行性の酸性化を伴ってリサミングリーン力価の激しい低下を示した。それらは、当初は濃い青色であったが、緑色になる傾向があった。
【００８２】
実施例１の水溶液のサンプルを、２５℃（ＲＨ  ６０％）で、合計９ヶ月間安定性試験に供した。
【００８３】
最初の２ヶ月後、約１０〜１２％のリサミングリーン力価の低下がその間に観察された。その後、前記力価は観察期間の終了までほとんど安定したままであった。
【００８４】
またｐＨも同様の傾向を示し、最初の２ヶ月間で絶対値が約６％低下し、その後観察期間の終了まで安定したレベルが続いた。
【国際調査報告】
2020503290.tif 000007
2020503290.tif 000008
2020503290.tif 000009