(57)【要約】  細胞表面の外側部分にタンパク質を可逆的に局在させる方法及び組成物を提供する。本質的には、該タンパク質は、膜貫通ドメインに加えて、エストロゲン受容体アルファ又はプロゲステロン受容体のようなホルモン受容体も含まなければならない。本明細書で提供される組成物は、目的のポリペプチド及び核ホルモン受容体のリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）をコードする核酸を含み得る。ＣＡＲ  Ｔ細胞の毒性を制御することを含む医学用途が提供される。【選択図】図１
2020512009.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単鎖キメラポリペプチドであって、該単鎖キメラポリペプチドは、
膜貫通ドメインと、
ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
を含み、
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインは互いに直接接しているか、又は１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
単鎖キメラポリペプチド。
【請求項２】
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである、請求項１に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項３】
前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項１に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項４】
前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが、エストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項３に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項５】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接している、請求項１〜４のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項６】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１〜４のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項７】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが１個〜２５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項６に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項８】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが１個〜５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項７に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
【請求項１０】
請求項９に記載の核酸を含むベクター。
【請求項１１】
請求項１０に記載のベクターを含む哺乳動物細胞。
【請求項１２】
哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチドの膜局在を誘導する方法であって、
請求項１〜８のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチドを発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖キメラポリペプチドの局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させること、
を含む、方法。
【請求項１３】
哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチドの膜局在を可逆的に変更する方法であって、
（ａ）請求項１〜８のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチドを発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖キメラポリペプチドの局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、
（ｂ）前記哺乳動物細胞を量が減少された前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることで、前記哺乳動物細胞の形質膜の細胞外側の前記単鎖キメラポリペプチドのレベルの減少を生じさせることと、
を含む、方法。
【請求項１４】
（ｃ）前記哺乳動物細胞を量が増加された前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることで、工程（ｂ）のレベルと比較して前記細胞の形質膜の細胞外側の前記単鎖キメラポリペプチドのレベルの増加を生じさせること、
を更に含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記単鎖キメラポリペプチドをコードする核酸を哺乳動物細胞に導入して前記単鎖キメラポリペプチドを発現する哺乳動物細胞を生じさせることを更に含む、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記哺乳動物細胞がＴ細胞である、請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記哺乳動物細胞が以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である、請求項１２〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記被験体が、癌を有すると識別されている又は診断されている、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記被験体から前記哺乳動物細胞を得ることを更に含む、請求項１８又は１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記接触させる工程がｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる、請求項１２〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記接触させる工程が哺乳動物において行われる、請求項１２〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
単鎖キメラ抗原受容体であって、該単鎖キメラ抗原受容体は、
細胞外抗原結合ドメインと、
膜貫通ドメインと、
ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
共刺激ドメインと、
免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）と、
を含み、
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２４】
前記細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ＶＨＨドメイン、及びＶＮＡＲドメインからなる群から選択される、請求項２３に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２５】
前記細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである、請求項２４に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２６】
前記細胞外抗原結合ドメインが単一の抗原に特異的に結合する、請求項２３〜２５のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２７】
前記単一の抗原が腫瘍抗原である、請求項２６に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２８】
前記腫瘍抗原が、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６の群から選択される、請求項２７の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２９】
前記腫瘍抗原がＣＤ１９である、請求項２８に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項３０】
前記細胞外抗原結合ドメインが、２つの異なる抗原に特異的に結合する、請求項２３に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項３１】
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである、請求項２３〜３０のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項３２】
前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項２３〜３１のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項３３】
前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインがエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項３２に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項３４】
前記共刺激ドメインが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、及びＢ７−Ｈ３に由来する細胞質共刺激ドメインである、請求項２３〜３３のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項３５】
前記共刺激ドメインが４−１ＢＢ又はＣＤ２８である、請求項３４に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項３６】
前記ＩＴＡＭがＣＤ３ζに由来する細胞質シグナル伝達配列を含む、請求項２３〜３５のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項３７】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接している、請求項２３〜３６のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項３８】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項２３〜３６のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項３９】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが１個〜２５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項３８に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項４０】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが１個〜５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項３９に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項４１】
請求項２３〜４０のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体をコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
【請求項４２】
請求項４１に記載の核酸を含むベクター。
【請求項４３】
請求項４２に記載のベクターを含む哺乳動物細胞。
【請求項４４】
哺乳動物細胞において単鎖キメラ抗原受容体の膜局在を誘導する方法であって、
請求項２３〜４０のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させること、
を含む、方法。
【請求項４５】
哺乳動物細胞において単鎖キメラ抗原受容体の膜局在を変更する方法であって、
（ａ）請求項２３〜４０のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、
（ｂ）前記哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側の前記単鎖キメラ抗原受容体のレベルの減少を生じる量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることと、
を含む、方法。
【請求項４６】
（ｃ）前記哺乳動物細胞を、（ｂ）のレベルと比較して、前記細胞の形質膜の細胞外側に対して単鎖キメラ抗原受容体のレベルの増加を生じる量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることを更に含む、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記単鎖キメラ抗原受容体をコードする核酸を哺乳動物細胞に導入して、前記単鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む、請求項４４〜４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記哺乳動物細胞がＴ細胞である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記哺乳動物細胞が以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である、請求項４４〜４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記被験体が、癌を有すると識別されている又は診断されている、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記被験体から前記哺乳動物細胞を得ることを更に含む、請求項５０又は５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記接触させる工程がｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる、請求項４４〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
前記接触させる工程が哺乳動物において行われる、請求項４４〜５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記哺乳動物が癌を有する、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記接触させる工程が結果として前記哺乳動物における癌の治療をもたらす、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
多重鎖キメラ抗原受容体であって、該多重鎖キメラ抗原受容体は、
細胞外抗原結合ドメインと、
膜貫通ドメインと、
ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
を含む少なくとも１つの第１のポリペプチドを含み、
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項５８】
前記細胞外抗原結合ドメインが、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ＶＨＨドメイン、及びＶＮＡＲドメインからなる群から選択される、請求項５７に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項５９】
前記細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである、請求項５８に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項６０】
前記細胞外抗原結合ドメインが単一の抗原に特異的に結合する、請求項５７〜５９のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項６１】
前記単一の抗原が腫瘍抗原である、請求項６０に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項６２】
前記腫瘍抗原が、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６の群から選択される、請求項６１に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項６３】
前記腫瘍抗原がＣＤ１９である、請求項６２に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項６４】
前記細胞外抗原結合ドメインが２つの異なる抗原に特異的に結合する、請求項５７に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項６５】
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである、請求項５７〜６４のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項６６】
前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項５７〜６５のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項６７】
前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが、エストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項６６に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項６８】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接している、請求項５７〜６７のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項６９】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項５７〜６７のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項７０】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが１個〜２５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項６９に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項７１】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが１個〜５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項７０に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項７２】
前記少なくとも１つのポリペプチドが共刺激ドメインを更に含む、請求項５７〜７１のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項７３】
前記共刺激ドメインが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、及びＢ７−Ｈ３に由来する細胞質共刺激ドメインである、請求項７２に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項７４】
前記共刺激ドメインが４−１ＢＢ又はＣＤ２８である、請求項３３に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項７５】
哺乳動物細胞において多重鎖キメラ抗原受容体の膜局在を誘導する方法であって、
請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記多重鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させること、
を含む、方法。
【請求項７６】
哺乳動物細胞において多重鎖キメラ抗原受容体の膜局在を変更する方法であって、
（ａ）請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記多重鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、
（ｂ）前記哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側の前記多重鎖キメラ抗原結合受容体のレベルの減少を生じる量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体、量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることと、
を含む、方法。
【請求項７７】
（ｃ）前記哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側の前記多重鎖キメラ抗原結合受容体のレベルの増加を生じる量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることを更に含む、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
前記単鎖キメラ抗原受容体をコードする核酸を前記哺乳動物細胞に導入して、前記単鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む、請求項７５〜７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
前記哺乳動物細胞がＴ細胞である、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記哺乳動物細胞が以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である、請求項７５〜８０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８２】
前記被験体が、癌を有すると識別されている又は診断されている、請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
前記被験体から前記哺乳動物細胞を得ることを更に含む、請求項８１又は８２に記載の方法。
【請求項８４】
前記接触させる工程がｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる、請求項７５〜８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８５】
前記接触させる工程が哺乳動物において行われる、請求項７５〜８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８６】
前記哺乳動物が癌を有する、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
前記接触させる工程が結果として前記哺乳動物における癌の治療をもたらす、請求項８６に記載の方法。
【請求項８８】
被験体において癌を治療する方法であって、
（ａ）請求項２３〜４０のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体又は請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を前記被験体に投与することと、
なお、前記抗原結合ドメインは前記被験体において癌によって発現される抗原に特異的に結合する；
（ｂ）前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖又は多重鎖のキメラ抗原受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモンを前記被験体に投与することと、
（ｃ）（ｂ）の後に前記被験体において、毒性と関連する１つ以上の症状の存在若しくは重症度、サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方を特定することと、
（ｄ）前記特定された毒性と関連する１つ以上の症状の存在若しくは重症度、前記特定されたサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方を、対照（複数の場合もある）と比較することと、
（ｅ）（ｅ）の後、前記被験体において、前記毒性と関連する１つ以上の症状の存在若しくは重症度、前記サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方が減少されるように、前記細胞の形質膜の細胞外側の前記単鎖又は多重鎖のキメラ抗原受容体のレベルを減少させるのに十分な量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体を前記被験体に投与することと、
を含む、方法。
【請求項８９】
工程（ｅ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量が、工程（ｂ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量と比較して、少なくとも２５％減少されている、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
工程（ｅ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量が、工程（ｂ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量と比較して、少なくとも５０％減少されている、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
工程（ｅ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量が、工程（ｂ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体のレベルと比較して、少なくとも７５％減少されている、請求項９０に記載の方法。
【請求項９２】
工程（ｅ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量が、工程（ｂ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体のレベルと比較して、１００％減少されている、請求項９１に記載の方法。
【請求項９３】
前記毒性と関連する１つ以上の症状が、高熱、腫脹、悪寒、低血圧、頻脈、無力、頭痛、発疹、いがらっぽい喉、呼吸困難、発赤、極度の疲労、吐き気、及び脳浮腫からなる群から選択される、請求項８８に記載の方法。
【請求項９４】
前記サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインが、腫瘍壊死因子アルファ、ＩＦＮγ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、及びＩＬ−１０、顆粒球マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、及びＩＬ−５からなる群から選択される、請求項８８に記載の方法。
【請求項９５】
単鎖キメラポリペプチドであって、該単鎖キメラポリペプチドは、
細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
膜貫通ドメインと、
を含み、
前記ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記細胞外膜貫通ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物において単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
単鎖キメラポリペプチド。
【請求項９６】
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである、請求項９５に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項９７】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインが、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項９５に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項９８】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインがエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項９７に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項９９】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインがヒトエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項９８に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１００】
前記ヒトエストロゲン受容体のリガンド結合ドメインが、それぞれヒトホルモン受容体の野生型全長配列に関して番号が付された、アミノ酸５２１位の置換及びアミノ酸５３７位の置換の一方又は両方を含むことを除いて、野生型配列を有する、請求項９９に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１０１】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが互いに直接接している、請求項９５〜１００のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１０２】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項９５〜１００のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１０３】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１０２に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１０４】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜２５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１０３に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１０５】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜１００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１０４に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１０６】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１０５に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１０７】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜２５個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１０６に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１０８】
前記単鎖キメラポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記膜貫通ドメインとを含む、請求項９５〜１００のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１０９】
前記単鎖キメラポリペプチドが、Ｃ末端からＮ末端に向かって、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記膜貫通ドメインとを含む、請求項９５〜１００のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１１０】
前記単鎖キメラポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記膜貫通ドメインとを含む、請求項９５〜１００のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１１１】
前記単鎖キメラポリペプチドが、Ｃ末端からＮ末端に向かって、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記膜貫通ドメインとを含む、請求項９５〜１００のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１１２】
請求項９５〜１１１のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
【請求項１１３】
請求項１１２に記載の核酸を含むベクター。
【請求項１１４】
請求項１１３に記載のベクターを含む哺乳動物細胞。
【請求項１１５】
Ｔ細胞である、請求項１１４に記載の哺乳動物細胞。
【請求項１１６】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される、請求項１１５に記載の哺乳動物細胞。
【請求項１１７】
哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチドの形質膜局在を誘導する方法であって、
（ａ）請求項９５〜１１１のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチドを発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖キメラポリペプチドの局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させること、
を含む、方法。
【請求項１１８】
哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチドの形質膜局在を可逆的に変更する方法であって、
（ａ）請求項９５〜１１１のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチドを発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖キメラポリペプチドの局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、
（ｂ）前記哺乳動物細胞を量が減少された前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることで、前記哺乳動物細胞の形質膜の細胞外側の前記単鎖キメラポリペプチドのレベルの減少を生じさせることと、
を含む、方法。
【請求項１１９】
（ｃ）前記哺乳動物細胞を量が増加された前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることで、工程（ｂ）のレベルと比較して前記細胞の形質膜の細胞外側の前記単鎖キメラポリペプチドのレベルの増加を生じさせることを更に含む、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２０】
工程（ａ）の前に、前記単鎖キメラポリペプチドをコードする核酸を哺乳動物細胞に導入して、前記単鎖キメラポリペプチドを発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む、請求項１１７〜１１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２１】
前記哺乳動物細胞がＴ細胞である、請求項１１７〜１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２２】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
前記哺乳動物細胞が以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である、請求項１１７〜１２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２４】
前記被験体が、癌を有すると識別されている又は診断されている、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２５】
前記被験体から前記哺乳動物細胞を得ることを更に含む、請求項１２３又は１２４に記載の方法。
【請求項１２６】
前記接触させる工程（複数の場合もある）がｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる、請求項１１７〜１２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２７】
前記接触させる工程（複数の場合もある）が哺乳動物において行われる、請求項１１７〜１２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２８】
単鎖キメラ抗原受容体であって、該単鎖キメラ抗原受容体は、
細胞外抗原結合ドメインと、
細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
膜貫通ドメインと、
細胞内共刺激ドメインと、
細胞内の免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）と、
を含み、
前記膜貫通ドメイン及び前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物において単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１２９】
前記細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ＶＨＨドメイン、及びＶＮＡＲドメインからなる群から選択される、請求項１２８に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３０】
前記細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである、請求項１２９に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３１】
前記細胞外抗原結合ドメインが単一の抗原に特異的に結合する、請求項１２８〜１３０のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３２】
前記単一の抗原が腫瘍抗原である、請求項１３１に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３３】
前記腫瘍抗原が、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６からなる群から選択される、請求項１３２に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３４】
前記腫瘍抗原がＣＤ１９である、請求項１３３に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３５】
前記細胞外抗原結合ドメインが、２つの異なる抗原に特異的に結合する、請求項１２８に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３６】
前記２つの異なる抗原の少なくとも一方が腫瘍抗原である、請求項１３５に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３７】
前記腫瘍抗原が、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６からなる群から選択される、請求項１３６に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３８】
前記腫瘍抗原がＣＤ１９である、請求項１３７に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３９】
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである、請求項１２８〜１３８のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４０】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインが、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項１２８〜１３９のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４１】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインがエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項１４０に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４２】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインがヒトエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項１４１に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４３】
前記ヒトエストロゲン受容体のリガンド結合ドメインが、それぞれヒトホルモン受容体の野生型全長配列に関して番号が付された、アミノ酸５２１位の置換及びアミノ酸５３７位の置換の一方又は両方を含むことを除いて、野生型配列を有する、請求項１４２に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４４】
前記細胞内共刺激ドメインが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、及びＢ７−Ｈ３に由来する細胞質共刺激ドメインである、請求項１２８〜１４３のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４５】
前記細胞内共刺激ドメインが４−１ＢＢ又はＣＤ２８に由来する前記細胞質共刺激ドメインである、請求項１４４に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４６】
前記細胞内のＩＴＡＭがＣＤ３ζに由来する細胞質シグナル伝達配列を含む、請求項１２８〜１４５のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４７】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが互いに直接接している、請求項１２８〜１４６のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４８】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１２８〜１４６のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４９】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１４８に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１５０】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜２５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１４９に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１５１】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜１００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１５０に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１５２】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１５１に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１５３】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜２５個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１５２に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１５４】
前記単鎖キメラ抗原受容体が、Ｎ末端からＣ末端に向かって、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記膜貫通ドメインと、前記細胞内共刺激ドメインと、前記ＩＴＡＭとを含む、請求項１２８〜１４６のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１５５】
前記単鎖キメラ抗原受容体が、Ｃ末端からＮ末端に向かって、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記膜貫通ドメインと、前記細胞内共刺激ドメインと、前記ＩＴＡＭとを含む、請求項１２８〜１４６のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１５６】
前記単鎖キメラ抗原受容体が、Ｎ末端からＣ末端に向かって、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記膜貫通ドメインと、前記細胞内共刺激ドメインと、前記ＩＴＡＭとを含む、請求項１２８〜１４６のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１５７】
前記単鎖キメラポリペプチドが、Ｃ末端からＮ末端に向かって、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記膜貫通ドメインと、前記細胞内共刺激ドメインと、前記ＩＴＡＭとを含む、請求項１２８〜１４６のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１５８】
請求項１２８〜１５７のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体をコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
【請求項１５９】
請求項１５８に記載の核酸を含むベクター。
【請求項１６０】
請求項１５９に記載のベクターを含む哺乳動物細胞。
【請求項１６１】
前記哺乳動物細胞がＴ細胞である、請求項１６０に記載の哺乳動物細胞。
【請求項１６２】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される、請求項１６１に記載の哺乳動物細胞。
【請求項１６３】
哺乳動物細胞において単鎖キメラ抗原受容体の形質膜局在を誘導する方法であって、
（ａ）請求項１２８〜１５７のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させること、
を含む、方法。
【請求項１６４】
哺乳動物細胞において単鎖キメラ抗原受容体の形質膜局在を変更する方法であって、
（ａ）請求項１２８〜１５７のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、
（ｂ）前記哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側の前記単鎖キメラ抗原受容体のレベルの減少を生じる量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることと、
を含む、方法。
【請求項１６５】
（ｃ）前記哺乳動物細胞を、前記（ｂ）におけるレベルと比較して、前記細胞の形質膜の細胞外側に対して前記単鎖キメラ抗原受容体のレベルの増加を生じる量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることを更に含む、請求項１６４に記載の方法。
【請求項１６６】
工程（ａ）の前に、前記単鎖キメラ抗原受容体をコードする核酸を哺乳動物細胞に導入して、前記単鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む、請求項１６３〜１６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６７】
前記哺乳動物細胞がＴ細胞である、請求項１６６に記載の方法。
【請求項１６８】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される、請求項１６７に記載の方法。
【請求項１６９】
前記哺乳動物細胞が以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である、請求項１６３〜１６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７０】
前記被験体が、癌を有すると識別されている又は診断されている、請求項１６９に記載の方法。
【請求項１７１】
前記被験体から前記哺乳動物細胞を得ることを更に含む、請求項１６９又は１７０に記載の方法。
【請求項１７２】
前記接触させる工程（複数の場合もある）がｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる、請求項１６３〜１７１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７３】
前記接触させる工程（複数の場合もある）が哺乳動物において行われる、請求項１６３〜１７１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７４】
前記哺乳動物が癌を有する、請求項１７３に記載の方法。
【請求項１７５】
前記接触させる工程が、結果として前記哺乳動物における癌の治療をもたらす、請求項１７４に記載の方法。
【請求項１７６】
多重鎖キメラ抗原受容体であって、該多重鎖キメラ抗原受容体は、
細胞外抗原結合ドメインと、
細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
膜貫通ドメインと、
を含む少なくとも１つの第１のポリペプチドを含み、
前記膜貫通ドメイン及び前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物において単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１７７】
前記細胞外抗原結合ドメインが、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ＶＨＨドメイン、及びＶＮＡＲドメインからなる群から選択される、請求項１７６に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１７８】
前記細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである、請求項１７７に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１７９】
前記細胞外抗原結合ドメインが単一の抗原に特異的に結合する、請求項１７６〜１７８のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１８０】
前記単一の抗原が腫瘍抗原である、請求項１７９に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１８１】
前記腫瘍抗原が、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６からなる群から選択される、請求項１８０に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１８２】
前記腫瘍抗原がＣＤ１９である、請求項１８１に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１８３】
前記細胞外抗原結合ドメインが２つの異なる抗原に特異的に結合する、請求項１７９に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１８４】
前記２つの異なる抗原の少なくとも一方が腫瘍抗原である、請求項１８３に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１８５】
前記腫瘍抗原が、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６からなる群から選択される、請求項１８４に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１８６】
前記腫瘍抗原がＣＤ１９である、請求項１８５に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１８７】
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである、請求項１７６〜１８６のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１８８】
前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項１７６〜１８７のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１８９】
前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインがエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項１８８に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１９０】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインがヒトエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項１８９に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１９１】
前記ヒトエストロゲン受容体のリガンド結合ドメインが、それぞれヒトホルモン受容体の野生型全長配列に関して番号が付された、アミノ酸５２１位の置換及びアミノ酸５３７位の置換の一方又は両方を含むことを除いて、野生型配列を有する、請求項１９０に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１９２】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが互いに直接接している、請求項１７６〜１９１のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１９３】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１７６〜１９１のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１９４】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１９３に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１９５】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜２５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１９４に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１９６】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜１００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１９５に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１９７】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜５０個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１９６に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１９８】
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが１個〜２５個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１９７に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１９９】
前記少なくとも１つのポリペプチドが細胞内共刺激ドメインを更に含む、請求項１７６〜１９８のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２００】
前記細胞内共刺激ドメインが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、及びＢ７−Ｈ３に由来する前記細胞質共刺激ドメインである、請求項１９９に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２０１】
前記細胞内共刺激ドメインが４−１ＢＢ又はＣＤ２８に由来する細胞質共刺激ドメインである、請求項２００に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２０２】
前記少なくとも１つの第１のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記膜貫通ドメインとを含む、請求項１７６〜１９１のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２０３】
前記少なくとも１つの第１のポリペプチドが、Ｃ末端からＮ末端に向かって、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記膜貫通ドメインとを含む、請求項１７６〜１９１のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２０４】
前記少なくとも１つの第１のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端に向かって、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記膜貫通ドメインとを含む、請求項１７６〜１９１のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２０５】
前記少なくとも１つの第１のポリペプチドが、Ｃ末端からＮ末端に向かって、前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、前記細胞外抗原結合ドメインと、前記膜貫通ドメインとを含む、請求項１７６〜１９１のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２０６】
請求項１７６〜２０５のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ受容体をコードする核酸。
【請求項２０７】
請求項１７６〜２０５のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ受容体を共にコードする１組の核酸。
【請求項２０８】
請求項２０６に記載の核酸を含む哺乳動物細胞。
【請求項２０９】
請求項２０７に記載の１組の核酸を含む哺乳動物細胞。
【請求項２１０】
前記哺乳動物細胞がＴ細胞である、請求項２０８又は２０９に記載の哺乳動物細胞。
【請求項２１１】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される、請求項２１０に記載の哺乳動物細胞。
【請求項２１２】
哺乳動物細胞において多重鎖キメラ抗原受容体の形質膜局在を誘導する方法であって、
（ａ）請求項１７６〜２０５のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記多重鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させること、
を含む、方法。
【請求項２１３】
哺乳動物細胞において多重鎖キメラ抗原受容体の形質膜局在を変更する方法であって、
（ａ）請求項１７６〜２０５のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記多重鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、
（ｂ）前記哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側の前記多重鎖キメラ抗原結合受容体のレベルの減少を生じる量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体、量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることと、
を含む、方法。
【請求項２１４】
（ｃ）前記哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側の前記多重鎖キメラ抗原結合受容体のレベルの増加を生じる量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体と接触させることを更に含む、請求項２１３に記載の方法。
【請求項２１５】
工程（ａ）の前に、前記多重鎖キメラ抗原受容体をコードする核酸又は前記多重鎖キメラ受容体を共にコードする１組の核酸を哺乳動物細胞に導入して、前記多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む、請求項２１２〜２１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１６】
前記哺乳動物細胞がＴ細胞である、請求項２１５に記載の方法。
【請求項２１７】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される、請求項２１６に記載の方法。
【請求項２１８】
前記哺乳動物細胞が以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である、請求項２１２〜２１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１９】
前記被験体が、癌を有すると識別されている又は診断されている、請求項２１８に記載の方法。
【請求項２２０】
前記被験体から前記哺乳動物細胞を得ることを更に含む、請求項２１８又は２１９に記載の方法。
【請求項２２１】
前記接触させる工程がｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる、請求項２１２〜２２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２２】
前記接触させる工程が哺乳動物において行われる、請求項２１２〜２２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２３】
前記哺乳動物が癌を有する、請求項２２２に記載の方法。
【請求項２２４】
前記接触させる工程が結果として前記哺乳動物における癌の治療をもたらす、請求項２２３に記載の方法。
【請求項２２５】
被験体において癌を治療する方法であって、
（ａ）請求項１２８〜１５７のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体又は請求項１７６〜２０５のいずれか一項に記載の多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を、前記被験体に投与することと、
なお、前記抗原結合ドメインが前記被験体において癌によって発現される抗原に特異的に結合する；
（ｂ）前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖又は多重鎖のキメラ抗原受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモンを前記被験体に投与することと、
（ｃ）（ｂ）の後に、前記被験体において、毒性と関連する１以上の症状の存在若しくは重症度、又はサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方を特定することと、
（ｄ）前記特定された毒性と関連する１以上の症状の存在若しくは重症度、又は前記特定されたサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方を、対照（複数の場合もある）と比較することと、
（ｅ）（ｅ）の後、前記被験体において毒性と関連する１以上の症状の存在若しくは重症度、又は前記サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方が減少されるように、前記細胞の形質膜の細胞外側の前記単鎖又は多重鎖のキメラ抗原受容体のレベルを減少させるのに十分な量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体を前記被験体に投与することと、
を含む、方法。
【請求項２２６】
工程（ｅ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量が、工程（ｂ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量と比較して、少なくとも２５％減少される、請求項２２５に記載の方法。
【請求項２２７】
工程（ｅ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量が、工程（ｂ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量と比較して、少なくとも５０％減少される、請求項２２６に記載の方法。
【請求項２２８】
工程（ｅ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量が、工程（ｂ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体のレベルと比較して、少なくとも７５％減少される、請求項２２７に記載の方法。
【請求項２２９】
工程（ｅ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量が、工程（ｂ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体のレベルと比較して、１００％減少される、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３０】
前記毒性と関連する１つ以上の症状が、高熱、腫脹、悪寒、低血圧、頻脈、無力、頭痛、発疹、いがらっぽい喉、呼吸困難、発赤、極度の疲労、吐き気、及び脳浮腫からなる群から選択される、請求項２２５に記載の方法。
【請求項２３１】
前記サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインが、腫瘍壊死因子アルファ、ＩＦＮγ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、及びＩＬ−１０、顆粒球マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、及びＩＬ−５からなる群から選択される、請求項２２５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
本出願は、２０１７年３月２８日付けで出願された米国仮特許出願第６２／４７７，７３３号及び２０１７年１１月１６日付けで出願された米国仮特許出願第６２／５８７，２６２号の優先権を主張するものである。これらの出願の内容は全て引用することにより本明細書の一部をなす。
【０００２】
本開示は、バイオテクノロジーの分野に関し、より具体的にはキメラポリペプチドの細胞局在の調節に関する。
【背景技術】
【０００３】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ：chimeric antigen receptor）は単鎖及び多重鎖のポリペプチドのサブクラスである。キメラ抗原受容体としては、典型的には、例えば抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン、及びＣＤ３ζ又はその他のシグナル伝達ドメインが挙げられる。ＣＡＲは、哺乳類における種々の癌、例えば血液の癌の臨床治療における使用のため調査され、かなりの成功を収めてきた。しかしながら、ＣＡＲ抗癌活性に関連する制御できない毒性が制限要因であった。
【０００４】
核ホルモン受容体は、ＤＮＡ結合モチーフ及びリガンド結合ドメインを含む幾つかのドメインを含む一群のポリペプチドである。リガンドがない状態は、天然の核ホルモン受容体は、様々なシャペロン及び核外の核ホルモン受容体を捕捉するその他の相互作用タンパク質と会合する。リガンド結合は、核ホルモン受容体の立体構造及び相互作用パートナーの変化を誘導し、核移行及び転写活性化、又は核ホルモン標的遺伝子の抑制を可能とする。ステロイドシグナル伝達の古典的な見解は、これらのホルモンが、リガンド活性化転写因子として作用する細胞内受容体を結合すると考えるが、ステロイドは細胞表面で非ゲノム機構によっても作用し得ることが報告されている。
【発明の概要】
【０００５】
本開示は、少なくとも部分的には、膜貫通型ドメインを含むキメラポリペプチドの可逆的な細胞外膜局在を、細胞外膜上に目的のタンパク質又はペプチドを可逆的に発現させることが望ましい医学用途に利用することができるという発見に基づく。本開示の特徴の例は、ＣＡＲ  Ｔ細胞と関連する毒性が、該Ｔ細胞の表面にＣＡＲの抗原結合ドメインを可逆的に発現させることによって調節され得ることである。
【０００６】
本開示は、更に、少なくとも部分的には、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜約７００個のアミノ酸（例えば１個〜約５００個のアミノ酸）によって隔てられ、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチド（例えば単鎖キメラ抗原受容体）に存在しない場合、該哺乳動物細胞をホルモン又はホルモン類縁体と接触させることによって、哺乳動物細胞において膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインを含むキメラポリペプチドの形質膜局在又は細胞外膜局在が調節され得るという発見に基づく。この発見を考慮して、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体及び多重鎖キメラ抗原受容体；それらをコードする核酸；これらの核酸のいずれかを含むベクター；これらのベクターのいずれかを含む哺乳動物細胞；並びに可逆的に細胞外膜局在を誘導する方法、並びにこれらの単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体及び多重鎖キメラポリペプチドの膜局在を変更する方法が本明細書で提供される。
【０００７】
幾つかの実施の形態では、本明細書に開示される１つ以上の組成物又は方法を使用してポリペプチド（例えば単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び／又は多重鎖キメラ抗原受容体）の形質膜局在又は細胞外膜局在を可逆的に誘導することは、細胞に基づく養子免疫療法の領域において有用であり、当該治療法では被験体から単離された免疫細胞が合成タンパク質を発現するように改変され得て、その後に細胞を被験体に戻した後、それらの細胞が新たな治療機能を果たすことを可能とする。かかる合成タンパク質の非限定的な例は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）及び操作されたＴ細胞受容体（ＴＣＲ）である。
【０００８】
幾つかの実施の形態では、本明細書に開示される１つ以上の組成物又は方法を使用することにより、ポリペプチド（例えば単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び／又は多重鎖キメラ抗原受容体）の形質膜局在又は細胞外膜局在を可逆的に誘導することは、細胞の形質膜又は細胞外膜上の抗原結合部分の有無を調節することによって癌細胞の排除に関与するキメラ抗原受容体Ｔ細胞（ＣＡＲ−Ｔ細胞）の毒性作用を制御するのに有用である。
【０００９】
本明細書では、膜貫通ドメインと、ホルモン受容体リガンド結合ドメインとを含み、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインは互いに直接接しているか、又は１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられ、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、単鎖キメラポリペプチドを提供する。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、エストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。
【００１０】
本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインは互いに直接接している。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインは、１個〜５００個のアミノ酸（例えば１個〜２５０個のアミノ酸、又は約１個〜５０個のアミノ酸）によって隔てられている。
【００１１】
また、本明細書では、本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。また、本明細書では、本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸のいずれかを含むベクターを提供する。また、本明細書では、本明細書に記載されるベクターのいずれかを含む哺乳動物細胞を提供する。
【００１２】
また、本明細書では、本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への単鎖キメラポリペプチドの局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを含む、哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチドの膜局在を誘導する方法を提供する。
【００１３】
また、（ａ）本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への単鎖キメラポリペプチドの局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、（ｂ）哺乳動物細胞を量が減少されたホルモン又はホルモン類縁体と接触させることで、哺乳動物細胞の形質膜の細胞外側の単鎖キメラポリペプチドのレベルの減少を生じさせることとを含む、哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチドの膜局在を可逆的に変更する方法を提供する。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、（ｃ）哺乳動物細胞を量が増加されたホルモン又はホルモン類縁体と接触させることで、工程（ｂ）のレベルと比較して細胞の形質膜の細胞外側の単鎖キメラポリペプチドのレベルの増加を生じさせることを更に含む。
【００１４】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、哺乳動物細胞に単鎖キメラポリペプチドをコードする核酸を導入して、単鎖キメラポリペプチドを発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞は、Ｔ細胞（例えばＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞の群から選択されるＴ細胞）である。
【００１５】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞は、以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、被験体は、癌を有すると識別されている又は診断されている。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、被験体から哺乳動物細胞を得ることを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程はｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程は哺乳動物において行われる。
【００１６】
また、本明細書では、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、共刺激ドメインと、免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）とを含み、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられ、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、単鎖キメラ抗原受容体を提供する。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ＶＨＨドメイン、及びＶＮＡＲドメインの群から選択される。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖである。
【００１７】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは単一の抗原に特異的に結合する。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、単一の抗原は腫瘍抗原である。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原は、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６の群から選択される。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原はＣＤ１９である。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは、２つの異なる抗原に特異的に結合する。
【００１８】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインはエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。
【００１９】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、共刺激ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、及びＢ７−Ｈ３に由来する細胞質共刺激ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、共刺激ドメインは４−１ＢＢ又はＣＤ２８である。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、ＩＴＡＭはＣＤ３ζに由来する細胞質シグナル伝達配列を含む。
【００２０】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインは互いに直接接している。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインは１個〜５００個のアミノ酸（例えば、１個〜２５０個のアミノ酸又は１個〜５０個のアミノ酸）によって隔てられている。
【００２１】
また、本明細書では、本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。また、本明細書では、本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を含むベクターを提供する。また、本明細書に記載されるベクターのいずれかを含む哺乳動物細胞を提供する。
【００２２】
また、本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への単鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを含む、哺乳動物細胞において単鎖キメラ抗原受容体の膜局在を誘導する方法を提供する。
【００２３】
また、本明細書では、（ａ）本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への単鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、（ｂ）哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側の単鎖キメラ抗原受容体のレベルの減少を生じる量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることとを含む、哺乳動物細胞において単鎖キメラ抗原受容体の膜局在を変更する方法を提供する。これらの方法の幾つかの実施の形態は、（ｃ）哺乳動物細胞を、（ｂ）のレベルと比較して、細胞の形質膜の細胞外側に対して単鎖キメラ抗原受容体のレベルの増加を生じる量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを更に含む。
【００２４】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、単鎖キメラ抗原受容体をコードする核酸を哺乳動物細胞に導入して、単鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞はＴ細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞の群から選択される。
【００２５】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞は以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、被験体は、癌を有すると識別されている又は診断されている。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、被験体から哺乳動物細胞を得ることを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程はｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程は哺乳動物において行われる。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物は癌を有する。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程は結果として哺乳動物における癌の治療をもたらす。
【００２６】
また、本明細書では、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、ホルモン受容体リガンド結合ドメインとを含む少なくとも１つの第１のポリペプチドを含む多重鎖キメラ抗原受容体であって、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられ、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、多重鎖キメラ抗原受容体を提供する。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ＶＨＨドメイン、及びＶＮＡＲドメインからなる群から選択される。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖである。
【００２７】
本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは単一の抗原に特異的に結合する。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、単一の抗原は腫瘍抗原である。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原は、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６の群から選択される。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原はＣＤ１９である。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは２つの異なる抗原に特異的に結合する。
【００２８】
本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、エストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。
【００２９】
本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインは互いに直接接している。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインは１個〜５００個のアミノ酸（例えば、１個〜２５０個のアミノ酸又は１個〜５０個のアミノ酸）によって隔てられている。
【００３０】
本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、少なくとも１つのポリペプチドは共刺激ドメインを更に含む。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、共刺激ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、又はＢ７−Ｈ３に由来する細胞質共刺激ドメインである。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、共刺激ドメインは４−１ＢＢ又はＣＤ２８である。
【００３１】
また、本明細書では、本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への多重鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを含む、哺乳動物細胞において多重鎖キメラ抗原受容体の膜局在を誘導する方法を提供する。
【００３２】
また、本明細書では、（ａ）本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への多重鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、（ｂ）哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側の多重鎖キメラ抗原結合受容体のレベルの減少を生じる量のホルモン又はホルモン類縁体、量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることとを含む、哺乳動物細胞において多重鎖キメラ抗原受容体の膜局在を変更する方法を提供する。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、（ｃ）哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側の多重鎖キメラ抗原結合受容体のレベルの増加を生じる量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、単鎖キメラ抗原受容体をコードする核酸を哺乳動物細胞に導入して、単鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞はＴ細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞の群から選択される。
【００３３】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、哺乳動物細胞は以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、被験体は、癌を有すると識別されている又は診断されている。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、被験体から哺乳動物細胞を得ることを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程はｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程は哺乳動物において行われる。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物は癌を有する。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程は結果として哺乳動物における癌の治療をもたらす。
【００３４】
また、本明細書では、（ａ）本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか又は本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかを発現する哺乳動物細胞を被験体に投与することと、なお、抗原結合ドメインは被験体において癌によって発現される抗原に特異的に結合する；（ｂ）細胞の形質膜の細胞外側への単鎖又は多重鎖のキメラ抗原受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモンを被験体に投与することと、（ｃ）（ｂ）の後に被験体において、毒性と関連する１つ以上の症状の存在若しくは重症度、サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方を特定することと、（ｄ）特定された毒性と関連する１つ以上の症状の存在若しくは重症度、特定されたサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方を、対照（複数の場合もある）と比較することと、（ｅ）（ｅ）の後、被験体において、毒性と関連する１つ以上の症状の存在若しくは重症度、サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方が減少されるように、細胞の形質膜の細胞外側の単鎖又は多重鎖のキメラ抗原受容体のレベルを減少させるのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体を被験体に投与することとを含む、被験体（例えば、ヒト）において癌を治療する方法を提供する。
【００３５】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量は、工程（ｂ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量と比較して、少なくとも２５％減少されている。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量は、工程（ｂ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量と比較して、少なくとも５０％減少されている。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量は、工程（ｂ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体のレベルと比較して、少なくとも７５％減少されている。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量は、工程（ｂ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体のレベルと比較して、１００％減少されている。
【００３６】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、毒性と関連する１つ以上の症状は、高熱、腫脹、悪寒、低血圧、頻脈、無力、頭痛、発疹、いがらっぽい喉、呼吸困難、発赤、極度の疲労、吐き気、及び脳浮腫からなる群から選択される。これらの方法の幾つかの実施の形態では、サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインは、腫瘍壊死因子アルファ、ＩＦＮγ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、及びＩＬ−１０、顆粒球マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、及びＩＬ−５からなる群から選択される。
【００３７】
また、本明細書では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む単鎖キメラポリペプチドであって、ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び細胞外膜貫通ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられ、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物において単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、単鎖キメラポリペプチドを提供する。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインはエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインはヒトエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、ヒトエストロゲン受容体のリガンド結合ドメインは、それぞれヒトホルモン受容体の野生型全長配列に関して番号が付された、アミノ酸５２１位の置換及びアミノ酸５３７位の置換の一方又は両方を含むことを除いて、野生型配列を有する。
【００３８】
本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び膜貫通ドメインは互いに直接接している。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び膜貫通ドメインは、１個〜７００個のアミノ酸（例えば、１個〜５００個のアミノ酸、１個〜２５０個のアミノ酸、１個〜１００個のアミノ酸、１個〜５０個のアミノ酸、又は１個〜２５個のアミノ酸）によって隔てられている。
【００３９】
本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、単鎖キメラポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、単鎖キメラポリペプチドは、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、単鎖キメラポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかの幾つかの実施の形態では、単鎖キメラポリペプチドは、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。
【００４０】
また、本明細書では、本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。また、本明細書では、本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を含むベクターを提供する。また、本明細書では、本明細書に記載されるベクターのいずれかを含む哺乳動物細胞を提供する。本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞はＴ細胞である。本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれかの幾つかの実施の形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞の群から選択される。
【００４１】
また、本明細書では、（ａ）本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への単鎖キメラポリペプチドの局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを含む、哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチドの形質膜局在を誘導する方法を提供する。
【００４２】
また、本明細書では、（ａ）本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への単鎖キメラポリペプチドの局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、（ｂ）哺乳動物細胞を量が減少されたホルモン又はホルモン類縁体と接触させることで、哺乳動物細胞の形質膜の細胞外側の単鎖キメラポリペプチドのレベルの減少を生じさせることとを含む、哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチドの形質膜局在を可逆的に変更する方法を提供する。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、（ｃ）哺乳動物細胞を量が増加されたホルモン又はホルモン類縁体と接触させることで、工程（ｂ）のレベルと比較して細胞の形質膜の細胞外側の単鎖キメラポリペプチドのレベルの増加を生じさせることを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、工程（ａ）の前に、単鎖キメラポリペプチドをコードする核酸を哺乳動物細胞に導入して、単鎖キメラポリペプチドを発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む。
【００４３】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞はＴ細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞の群から選択される。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞は以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、被験体は、癌を有すると識別されている又は診断されている。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、被験体から哺乳動物細胞を得ることを更に含む。
【００４４】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程（複数の場合もある）はｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程（複数の場合もある）は哺乳動物において行われる。
【００４５】
また、本明細書では、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインと、細胞内共刺激ドメインと、細胞内の免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）とを含む単鎖キメラ抗原受容体であって、膜貫通ドメイン及び細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられ、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物において単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、単鎖キメラ抗原受容体を提供する。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ＶＨＨドメイン、及びＶＮＡＲドメインからなる群から選択される。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖである。
【００４６】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは単一の抗原に特異的に結合する。単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、単一の抗原は腫瘍抗原である。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原は、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６の群から選択される。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原はＣＤ１９である。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは、２つの異なる抗原に特異的に結合する。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、２つの異なる抗原の少なくとも一方は腫瘍抗原である。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原は、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６の群から選択される。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原はＣＤ１９である。
【００４７】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインはエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインはヒトエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、ヒトエストロゲン受容体のリガンド結合ドメインは、それぞれヒトホルモン受容体の野生型全長配列に関して番号が付された、アミノ酸５２１位の置換及びアミノ酸５３７位の置換の一方又は両方を含むことを除いて、野生型配列を有する。
【００４８】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞内共刺激ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、又はＢ７−Ｈ３に由来する細胞質共刺激ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞内共刺激ドメインは４−１ＢＢ又はＣＤ２８に由来する細胞質共刺激ドメインである。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞内のＩＴＡＭはＣＤ３ζに由来する細胞質シグナル伝達配列を含む。
【００４９】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び膜貫通ドメインは互いに直接接している。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び膜貫通ドメインは１個〜７００個のアミノ酸（例えば、１個〜５００個のアミノ酸、１個〜２５０個のアミノ酸、１個〜１００個のアミノ酸、１個〜５０個のアミノ酸、又は１個〜２５個のアミノ酸）によって隔てられている。
【００５０】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、単鎖キメラ抗原受容体は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインと、細胞内共刺激ドメインと、ＩＴＡＭとを含む。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、単鎖キメラ抗原受容体は、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインと、細胞内共刺激ドメインと、ＩＴＡＭとを含む。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、単鎖キメラ抗原受容体は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、細胞内共刺激ドメインと、ＩＴＡＭとを含む。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、単鎖キメラポリペプチドは、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、細胞内共刺激ドメインと、ＩＴＡＭとを含む。
【００５１】
また、本明細書では、本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。また、本明細書では、本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を含むベクターを提供する。また、本明細書に記載されるベクターのいずれかを含む哺乳動物細胞を提供する。本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞はＴ細胞である。本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれかの幾つかの実施の形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞の群から選択される。
【００５２】
また、（ａ）本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への単鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを含む、哺乳動物細胞において単鎖キメラ抗原受容体の形質膜局在を誘導する方法を提供する。
【００５３】
また、本明細書では、（ａ）本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への単鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、（ｂ）哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側の単鎖キメラ抗原受容体のレベルの減少を生じる量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることとを含む、哺乳動物細胞において単鎖キメラ抗原受容体の形質膜局在を変更する方法を提供する。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、（ｃ）哺乳動物細胞を、（ｂ）におけるレベルと比較して、細胞の形質膜の細胞外側に対して単鎖キメラ抗原受容体のレベルの増加を生じる量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、工程（ａ）の前に、単鎖キメラ抗原受容体をコードする核酸を哺乳動物細胞に導入して、単鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む。
【００５４】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞はＴ細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞の群から選択される。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞は以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、被験体は、癌を有すると識別されている又は診断されている。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、被験体から哺乳動物細胞を得ることを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程（複数の場合もある）はｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程（複数の場合もある）は哺乳動物において行われる。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物は癌を有する。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程は、結果として哺乳動物における癌の治療をもたらす。
【００５５】
また、本明細書では、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む少なくとも１つの第１のポリペプチドを含む多重鎖キメラ抗原受容体であって、膜貫通ドメイン及び細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられ、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物において単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、多重鎖キメラ抗原受容体を提供する。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ＶＨＨドメイン、及びＶＮＡＲドメインからなる群から選択される。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖである。
【００５６】
本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは単一の抗原に特異的に結合する。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、単一の抗原は腫瘍抗原である。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原は、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６の群から選択される。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原はＣＤ１９である。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外抗原結合ドメインは２つの異なる抗原に特異的に結合する。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、２つの異なる抗原の少なくとも一方は腫瘍抗原である。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原は、ＣＤ１９、ＷＴ−１、ＣＤ２２、Ｌ１−ＣＡＭ、ＲＯＲ−１、ＣＤ３０、ＣＤ１２５、ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＥＴＡ、ＭＡＧＥ、及びＭＵＣ１６の群から選択される。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、腫瘍抗原はＣＤ１９である。
【００５７】
本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインはエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインはヒトエストロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、ヒトエストロゲン受容体のリガンド結合ドメインは、それぞれヒトホルモン受容体の野生型全長配列に関して番号が付された、アミノ酸５２１位の置換及びアミノ酸５３７位の置換の一方又は両方を含むことを除いて、野生型配列を有する。
【００５８】
本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び膜貫通ドメインは互いに直接接している。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び膜貫通ドメインは１個〜７００個のアミノ酸（例えば、１個〜５００個のアミノ酸、１個〜２５０個のアミノ酸、１個〜１００個のアミノ酸、１個〜５０個のアミノ酸、又は１個〜２５個のアミノ酸）によって隔てられている。
【００５９】
本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、少なくとも１つのポリペプチドは細胞内共刺激ドメインを更に含む。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞内共刺激ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、又はＢ７−Ｈ３に由来する細胞質共刺激ドメインである。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、細胞内共刺激ドメインは４−１ＢＢ又はＣＤ２８に由来する細胞質共刺激ドメインである。
【００６０】
本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドは、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施の形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドは、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。
【００６１】
また、本明細書では、本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかをコードする核酸を提供する。また、本明細書では、本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかを共にコードする核酸のセットを提供する。また、本明細書では、本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかをコードする核酸を含む哺乳動物細胞を提供する。また、本明細書では、本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかを共にコードする１組の核酸を含む哺乳動物細胞を提供する。本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞はＴ細胞である。本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれかの幾つかの実施の形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞からなる群から選択される。
【００６２】
また、本明細書では、（ａ）本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への多重鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを含む、哺乳動物細胞において多重鎖キメラ抗原受容体の形質膜局在を誘導する方法を提供する。
【００６３】
また、本明細書では、（ａ）本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかを発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への多重鎖キメラ抗原結合受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、（ｂ）哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側の多重鎖キメラ抗原結合受容体のレベルの減少を生じる量のホルモン又はホルモン類縁体、量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることとを含む、哺乳動物細胞において多重鎖キメラ抗原受容体の形質膜局在を変更する方法を提供する。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、（ｃ）哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側の多重鎖キメラ抗原結合受容体のレベルの増加を生じる量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、工程（ａ）の前に、多重鎖キメラ抗原受容体をコードする核酸又は多重鎖キメラ受容体を共にコードする１組の核酸を哺乳動物細胞に導入して、多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞はＴ細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞の群から選択される。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物細胞は以前に被験体から得られた哺乳動物細胞である。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、被験体は、癌を有すると識別されている又は診断されている。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態は、被験体から哺乳動物細胞を得ることを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程はｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程は哺乳動物において行われる。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、哺乳動物は癌を有する。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、接触させる工程は結果として哺乳動物における癌の治療をもたらす。
【００６４】
また、本明細書では、（ａ）本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか又は本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかを発現する哺乳動物細胞を、被験体に投与することと、なお、抗原結合ドメインが被験体において癌によって発現される抗原に特異的に結合する；（ｂ）細胞の形質膜の細胞外側への単鎖又は多重鎖のキメラ抗原受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモンを被験体に投与することと、（ｃ）（ｂ）の後に、被験体において、毒性と関連する１以上の症状の存在若しくは重症度、又はサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方を特定することと、（ｄ）特定された毒性と関連する１以上の症状の存在若しくは重症度、又は特定されたサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方を、対照（複数の場合もある）と比較することと、（ｅ）（ｅ）の後、被験体において毒性と関連する１以上の症状の存在若しくは重症度、又はサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方が減少されるように、細胞の形質膜の細胞外側の単鎖又は多重鎖のキメラ抗原受容体のレベルを減少させるのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体を被験体に投与することとを含む、被験体において癌を治療する方法を提供する。
【００６５】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量は、工程（ｂ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量と比較して、少なくとも２５％減少される。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量は、工程（ｂ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量と比較して、少なくとも５０％減少される。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量は、工程（ｂ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体のレベルと比較して、少なくとも７５％減少される。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量は、工程（ｂ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体のレベルと比較して、１００％減少される。
【００６６】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、毒性と関連する１つ以上の症状は、高熱、腫脹、悪寒、低血圧、頻脈、無力、頭痛、発疹、いがらっぽい喉、呼吸困難、発赤、極度の疲労、吐き気、及び脳浮腫の群から選択される。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施の形態では、サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインは、腫瘍壊死因子アルファ、ＩＦＮγ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、及びＩＬ−１０、顆粒球マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、及びＩＬ−５の群から選択される。
【００６７】
名詞の前の「a」という用語の使用は、その特定の名詞の「１つ以上」を意味する。例えば、「哺乳動物細胞（a mammalian cell）」の句は、「１つ以上の哺乳動物細胞」を意味する。
【００６８】
「単鎖キメラポリペプチド」という用語は、第１の連続アミノ酸配列（例えば第１のドメイン）及び第２の連続アミノ酸配列（例えば第２のドメイン）を含み、第１の連続アミノ酸配列及び第２の連続アミノ酸配列が哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在しない、単鎖ポリペプチドを意味する。幾つかの例では、第１の連続アミノ酸配列及び第２の連続アミノ酸配列は、単鎖キメラポリペプチドにおいて、互いに直接接している。幾つかの例では、第１の連続アミノ酸配列及び第２の連続アミノ酸配列は、１つ以上の介在するアミノ酸（例えば１つ以上のドメイン）によって隔てられている。「単鎖キメラポリペプチド」という用語は、いかなる場合も、単鎖ポリペプチド中の第１の連続アミノ酸配列及び第２の連続配列の相対的な配置を制限することを意味するものではない。単鎖キメラポリペプチド（例えば単鎖キメラ抗原受容体）の非限定的な例が本明細書に記載される。単鎖キメラポリペプチド（例えば単鎖キメラ抗原受容体）の更なる例が当該技術分野で知られている。
【００６９】
「キメラ抗原受容体」及び「ＣＡＲ」という用語は、本明細書において同じ意味で使用され、概して、しかしながら排他的でなく、細胞外ドメイン（例えばリガンド／抗原結合ドメイン）と、膜貫通ドメインと、１つ以上の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、免疫細胞の活性化を誘発又は阻害することができる人工的な多重モジュール分子を指す。ＣＡＲ分子及びその誘導体（例えばＣＡＲバリアント）は、例えば、国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０１６５２７号；Fedorov et al. Sci Transl Med (2013); 5(215):215ra172；Glienke et al. Front Pharmacol (2015) 6:21；Kakarla & Gottschalk 52 Cancer J (2014) 20(2):151-5；Riddell et al. Cancer J (2014) 20(2):141-4；Pegram et al. Cancer J (2014) 20(2):127-33；Cheadle et al. Immunol Rev (2014) 257(1):91-106；Barrett et al. Annu Rev Med (2014) 65:333-47；Sadelain et al. Cancer Discov (2013) 3(4):388-98；Cartellieri et al., J Biomed Biotechnol (2010) 956304に記載され、それらの開示は、それらの全体を引用することにより本明細書の一部をなす。
【００７０】
「多重鎖キメラポリペプチド」という用語は、２個以上の単鎖ポリペプチドを含むポリペプチドを意味し、ここで、２個以上の単鎖ポリペプチドの少なくとも１つが、本明細書に定義され、記載される単鎖キメラポリペプチドである。多重鎖キメラポリペプチド（例えば多重鎖キメラ抗原受容体）の非限定的な例が本明細書に記載される。多重鎖キメラポリペプチド（例えば多重鎖キメラ抗原受容体）の更なる例が当該技術分野で知られている。
【００７１】
「膜貫通ドメイン」という用語は、哺乳動物細胞において発現される際、対応する内因性ポリペプチド中に存在する場合に脂質二重層を横断する少なくとも１つの連続アミノ酸配列を含むポリペプチドのドメインを意味する。例えば、哺乳動物細胞において発現される際、対応する内因性ポリペプチド中に存在する場合に膜貫通ドメインは、各々が脂質二重層を横断する１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、又は１０個の連続アミノ酸配列を含む場合がある。当該技術分野で知られているように、膜貫通ドメインは、例えば、脂質二重層中にα−ヘリックス二次構造を有する（哺乳動物細胞において発現される際、対応する内因性ポリペプチド中に存在する場合に、脂質二重層を横断する）少なくとも１個（例えば２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個又は１０個）の連続アミノ酸配列を含んでもよい。幾つかの実施の形態では、膜貫通ドメインは、脂質二重層中にβ−バレル二次構造を形成する（哺乳動物細胞において発現される際、対応する内因性ポリペプチド中に存在する場合に、各々が脂質二重層を横断する）２個以上の連続アミノ酸配列を含んでもよい。膜貫通ドメインの非限定的な例が本明細書に記載される。膜貫通ドメインの更なる例が当該技術分野で知られている。
【００７２】
「形質膜の細胞外側」という句は、ポリペプチドの位置を説明するために使用される場合、ポリペプチドが、形質膜を横断する少なくとも１つの膜貫通ドメインと、細胞外空間に位置する少なくとも１つのドメイン（例えば少なくとも１つの抗原結合ドメイン）とを含むことを意味する。
【００７３】
「ホルモン受容体リガンド結合ドメイン」という用語は、ホルモン又はホルモン類縁体に特異的に結合するホルモン受容体ポリペプチド中のドメインを意味する。ホルモン受容体リガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）の非限定的な例が本明細書に記載される。幾つかの場合、核ホルモン受容体のＬＢＤは、エストロゲン受容体、エクジソン受容体、ＰＰＡＲγ受容体、グルココルチコイド受容体、アンドロゲン受容体、甲状腺ホルモン受容体、ミネラルコルチコイド受容体、プロゲステロン受容体、ビタミンＤ受容体、ＰＰＡＲ受容体α、ＰＰＡＲβ／δ受容体、プレグナンＸ受容体、肝臓Ｘ受容体、ファルネソイドＸ受容体、レチノイドＸ受容体、ＲＡＲ関連オーファン受容体、及びレチノイン酸受容体から選択される。幾つかの場合、本開示のヘテロ二量体ポリペプチドのポリペプチド鎖は、核ホルモン受容体の単一のＬＢＤを含む。幾つかの場合、本開示のヘテロ二量体ポリペプチドのポリペプチド鎖は、核ホルモン受容体の複数の（例えば２個以上の）ＬＢＤを含む。幾つかの場合、本開示のヘテロ二量体ポリペプチドのポリペプチド鎖は、核ホルモン受容体の２個のＬＢＤを含む。幾つかの場合、本開示のヘテロ二量体ポリペプチドのポリペプチド鎖は、核ホルモン受容体の３個のＬＢＤを含む。本開示のヘテロ二量体ポリペプチドのポリペプチド鎖が核ホルモン受容体の複数の（例えば２個以上の）ＬＢＤを含む場合、幾つかの場合には、複数のＬＢＤが同一のアミノ酸配列を含む。幾つかの場合、２個以上のＬＢＤは、直接に又はリンカー（例えば本明細書に記載されるリンカーのいずれか）によって隔てられて、タンデムである。
【００７４】
「抗原結合ドメイン」という用語は、標的抗原に特異的に結合するドメインを意味する。幾つかの例では、抗原結合ドメインは、単鎖ポリペプチド内に存在するアミノ酸から形成され得る。他の例では、抗原結合ドメインは、第１の単鎖ポリペプチド内に存在するアミノ酸、及び１つ以上の追加の単鎖ポリペプチド（例えば第２の単鎖ポリペプチド）中に存在するアミノ酸から形成され得る。抗原結合ドメインの非限定的な例は、限定されることなくｓｃＦｖ又は増殖因子のＬＢＤを含めて本明細書に記載される。抗原結合ドメインの更なる例が当該技術分野で知られている。
【００７５】
本明細書で使用される、「抗原」という用語は、概して、本明細書に記載される抗原結合ドメインによって特異的に認識される結合パートナーを指す。例示的な抗原としては、限定されないが、ポリペプチド及びそのペプチドフラグメント、低分子、脂質、炭水化物、及び核酸等の種々のクラスの分子が挙げられる。抗原、又は抗原結合ドメインのいずれかによって特異的に結合され得る抗原の非限定的な例が本明細書に記載される。抗原、又は抗原結合ドメインのいずれかによって特異的に結合され得る抗原の更なる例が当該技術分野で知られている。
【００７６】
「共刺激ドメイン」という用語は、下流のＴ細胞受容体シグナル伝達及び／又はＴ細胞活性化を促進する、Ｔリンパ球において発現される内因性共刺激膜貫通ポリペプチドに由来するシグナル伝達ドメインを意味する。共刺激ドメインの非限定的な例が本明細書に記載される。共刺激ドメインの更なる例が当該技術分野で知られている。例えば、Chen et al., Nature Reviews Immunol. 13:227-242, 2013を参照されたい。
【００７７】
「免疫受容活性化チロシンモチーフ（immunoreceptor tyrosine-based activation motif）」すなわち「ＩＴＡＭ」）という用語は、チロシンが２個の他のアミノ酸によってロイシン又はイソロイシンと隔てられた４個のアミノ酸コンセンサス配列（ＹｘｘＬ／Ｉ）を含むアミノ酸モチーフを意味する。４アミノ酸コンセンサス配列中のチロシン残基は、シグナル伝達経路キナーゼ（例えばリンパ球シグナル伝達経路キナーゼ）の相互作用の後、リン酸化された状態になる。ＩＴＡＭの非限定的な例が本明細書に記載される。ＩＴＡＭの更なる例が当該技術分野で知られている。
【００７８】
「ホルモン」という用語は、ホルモン受容体のリガンド結合ドメインに特異的に結合し、ホルモン受容体の活性及び／又は位置を調節する天然起源の分子を意味する。ホルモンの非限定的な例が本明細書に記載される。ホルモンの更なる例が当該技術分野で知られている。
【００７９】
「ホルモン類縁体」という用語は、ホルモンの構造を模倣し、ホルモン受容体のリガンド結合ドメインに特異的に結合する分子を意味する。ホルモン類縁体の非限定的な例が本明細書に記載される。ホルモン類縁体の更なる例が当該技術分野で知られている。
【００８０】
「癌の治療」という句は、癌を有する被験体における癌の１以上の（例えば、２つ、３つ、４つ、又は５つの）症状の数、頻度、又は重症度の減少を意味する。癌の非限定的な症状が本明細書に記載される。更なる癌の症状が当該技術分野で知られている。
【００８１】
別段の定義がない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語はいずれも本発明が属する技術分野の当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有する。方法及び材料は、本発明における使用に関して記載され、当該技術分野で知られているその他の好適な方法及び材料も使用され得る。材料、方法、及び実施例は実例に過ぎず、限定を意図するものではない。出版物、特許出願、特許、配列、データベースエントリー、及び本明細書で言及されるその他の引用文献はいずれも、それらの全体が参照することにより本明細書の一部をなす。矛盾が生じる場合には、定義を含めて、本明細書が優先される。
【００８２】
本発明のその他の特徴及び利点は、以下の詳細な説明及び図面、並びに特許請求の範囲から明らかとなる。
【図面の簡単な説明】
【００８３】
【図１】試験した種々のコンストラクトの図である。細胞外及び細胞内の表示は細胞膜に関し、細胞膜は、これらの表示の間の灰色の四角形として表される。細胞外ｓｃＦｖドメイン、及び細胞内共刺激ドメイン（「Ｃｏｓｔｉｍ」）、ＣＤ３ゼータドメイン、及び、ｍＣｈｅｒｒｙドメインを示す。
【図２】種々のコンストラクトの１つを発現する細胞に関する１組のフローサイトメトリードットプロットである。細胞を、処理しないままにするか、又は５００ｎｇ／ｍＬの４−ヒドロキシタモキシフェン（「４−ＯＨＴ」）で処理した。（Ａ）カノニカルＣＡＲをコードするレンチウイルスベクターを用いて、又は抗ＣＤ１９（ＦＭＣ６３）ＥＲａ−ＬＢＤを含むｖ２、ｖ３及びｖ４のＣＡＲコンストラクトを用いて形質導入したＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞。（Ｂ）ｖ４  ＣＡＲコンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて初代ＣＤ４及びＣＤ８ヒトＴ細胞を形質導入した。
【図３】ＥＲａ−ＬＢＤ含有ＦＭＣ６３  ＣＡＲ融合物をコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入したＨＥＫ−２９３Ｔ細胞に関する、１組のフローサイトメトリードットプロットである。細胞を処理しないままにするか、又は５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴで処理した。
【図４】ＦＭＣ６３  ＮＨＲ  ＬＢＤ−ＣＡＲ融合物及びＪ６Ｍ０  ｓｃＦｖを有するＮＨＲ  ＬＢＤ−ＣＡＲをコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入した初代ヒトＣＤ４  Ｔ細胞に関する１組のフローサイトメトリードットプロットである。細胞を処理しないままにするか、又は５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴで処理した。
【図５Ａ】共刺激ドメイン及びＣＤ３ゼータドメインを欠くＶ５核ホルモン受容体リガンド結合ドメインＮＨＲ−ＬＢＤ  ＣＡＲコンストラクトの図、並びにＶ５コンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入した細胞に関する１組のフローサイトメトリードットプロットである。細胞を処理しないままにするか、又は５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴで処理した。
【図５Ｂ】形質導入されていないＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞又はｓｃＦｖドメインがＦＬＡＧタグで置換されているＣＡＲをコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入したＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞の１組のフローサイトメトリー図である。形質導入された細胞を処理しないままにするか、又は５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴで処理した。
【図６】プロゲステロン受容体ＬＢＤを有するＣＡＲコンストラクトを用いて形質導入したＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞の１組のフローサイトメトリー図である。細胞を処理しないままにするか、又は５００ｎｇ／ｍＬのミフェプリストンで処理した。
【図７Ａ】抗原陰性標的（Ｋ５６２細胞株）及び抗原陽性標的（ＭＭ１Ｓ細胞株）との一晩の共培養後にＪ６Ｍ０−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲコンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入した初代ヒトＴ細胞のＴ細胞活性化を示すグラフである。
【図７Ｂ】抗原陰性標的（Ｋ５６２細胞株）及び抗原陽性標的（ＭＭ１Ｓ細胞株）との一晩の共培養後にＪ６Ｍ０−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲコンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入した初代ヒトＴ細胞によるＩＦＮ−γ産生を示すグラフである。
【図８Ａ】Ｖ４  ＦＭＣ６３−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲ又はカノニカルＣＡＲ対照をコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入し、リガンド４−ＯＨＴの濃度を増加させながら抗原陰性標的（Ｋ５６２細胞株）又は抗原陽性標的（Ｒａｊｉ細胞株）のいずれかと共培養させた初代ヒトＣＤ４  Ｔ細胞の増殖を示す、１組のフローサイトメトリー図である。
【図８Ｂ】４−ＯＨＴの濃度の増加を伴う、Ｊ６Ｍ０−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲコンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入した初代ヒトＴ細胞によって媒介される抗原陽性標的（ＭＭ１Ｓ細胞株）の溶解を示すグラフである。
【図９】４−ＯＨＴの漸増濃度での、細胞膜に関して異なる位置にＬＢＤを有する様々なＣＡＲコンストラクトの表面発現を示すグラフである。
【図１０Ａ】実験手順のタイムラインを示す概略図である。
【図１０Ｂ】４−ＯＨＴとの共培養の前及び後の様々なＣＡＲコンストラクトの表面発現を示す棒グラフである。
【図１１Ａ】ＦＬＡＧ−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲを用いて形質導入し、処理しないままにするか、又は１５分間若しくは１２０分間に亘り４−ＯＨＴで処理したＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞を示す１組のフローサイトメトリー図である。
【図１１Ｂ】ＦＭＣ６３−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲをコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入し、処理しないままにするか、又は２時間、４時間若しくは２４時間に亘って４−ＯＨＴで処理したヒトＴ細胞を示す、１組のフローサイトメトリー図である。
【図１２】ＥＲａ  ＬＢＤを有するＦＭＣ６３−ＣＡＲを発現する初代ヒトＴ細胞の１組のフローサイトメトリー図である。細胞を、処理しないままにするか、又は５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴで処理した。幾つかの試料を１μＭブレフェルジンＡで前処理した。
【図１３】試験したｖ２  ＣＡＲコンストラクト及びＥＣＤ．ｖ１  ＣＡＲ（ＬＢＤ−ＥＣＤ  ＣＡＲとも称される）コンストラクトの図である。細胞膜を灰色の四角形として表す。細胞外ｓｃＦｖドメイン、細胞外ＥＲａ  ＬＢＤ、膜貫通ドメイン（細胞膜に埋め込まれている）、細胞内４−１ＢＢドメイン、及び細胞内ＣＤ３γドメインを示す。
【図１４】ｖ２  ＣＡＲコンストラクト又はＬＢＤ−ＥＣＤ  ＣＡＲコンストラクトを発現する細胞に関する１組のフローサイトメトリードットプロットを示す図である。細胞を処理しないままにするか、又は５００ｎｇ／ｍＬの４−ヒドロキシタモキシフェン（「４−ＯＨＴ」）で処理した。
【図１５】ＬＢＤ−ＥＣＤ  ＣＡＲコンストラクト（ＥＣＤ．ｖ１）をコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入したＴ細胞によるＮａｌｍ  ６腫瘍細胞の破壊（％溶解）を示すグラフである。細胞を１．５ｎｇ／ｍＬ〜５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴで処理した。陽性対照は、構成的ＣＡＲをコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入したＴ細胞であった。陰性対照は、４−ＯＨＴで処理しなかったＬＢＤ−ＥＣＤ  ＣＡＲを有するＴ細胞であった。
【図１６】構成的ＣＡＲ、ＬＢＤ−ＥＣＤ  ＣＡＲ又はｖ２  ＣＡＲを発現する細胞に関する１組のフローサイトメトリードットプロットを示す図である。細胞を処理しないままにするか、又はフローサイトメトリーに先立って４８時間に亘りＣＤ３／ＣＤ２８を含むビーズで刺激した。Ｄｙｎａｂｅａｄｓ  ａＣＤ３／ａＣＤ２８のビーズはThermoFisher製であった。Trickett et al., J. Immunol. Methods 275:251-255, 2003を参照されたい。各コンストラクトをｃＭｙｃタグに融合させた。
【図１７】４−ヒドロキシタモキシフェンの存在下（５００ｎｇ／ｍＬ）又は不在下での、ＮＡＬＭ−６標的とのＣＡＲを保有するＴ細胞の一晩の共培養後のＥＣＤ．ｖ１  ＣＡＲ−Ｔ細胞又は従来のＣＡＲ−Ｔ細胞からのＩＬ−２産生を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００８４】
本明細書では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、及び多重鎖キメラ抗原受容体；それらをコードする核酸；これらの核酸のいずれかを含むベクター；これらのベクターのいずれかを含む哺乳動物細胞；並びにこれらの単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体及び多重鎖キメラポリペプチドの細胞外膜局在を可逆的に誘導する方法及び膜局在を変更する方法を提供する。
【００８５】
また、本明細書では、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を有する遺伝子改変された哺乳動物細胞を提供する。幾つかの場合には、遺伝子改変された哺乳動物細胞は、幹細胞、始原細胞、又は幹細胞若しくは始原細胞に由来する細胞に由来する。幾つか場合には、哺乳動物細胞はＴリンパ球又はＮＫ細胞である。
【００８６】
これらの単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び多重鎖キメラ抗原受容体、核酸、ベクター、哺乳動物細胞、及び方法の非限定的な態様が以下に記載され、限定されることなく任意の組み合わせで使用され得る。これらの単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び多重鎖キメラ抗原受容体、核酸、ベクター、哺乳動物細胞、及び方法の更なる態様が、当該技術分野で知られている。
【００８７】
幾つかの実施形態では、本明細書に開示される組成物及び／又は方法を、上記ポリペプチド（例えば、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び／又は多重鎖キメラ抗原受容体）中に存在するＬＢＤに結合するホルモン又はホルモン類縁体の存在下で被験体において癌細胞を選択的に死滅させるために使用することができる。幾つかの実施形態では、ホルモン又はホルモン類縁体の存在下で、上記ポリペプチド（例えば、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び／又は多重鎖キメラ抗原受容体）は、細胞外部の抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、又は本明細書に記載される若しくは当該技術分野で知られている他の抗原結合ドメイン）を提示する細胞外表面に局在化する。上記ポリペプチド（例えば、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体）は、それが結合する抗原を認識することができることから、その表面に抗原を発現する標的細胞（例えば癌細胞）を選択的に死滅させることができる。
【００８８】
幾つかの実施形態では、細胞外表面への上記ポリペプチド（例えば、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体）の局在は、被験体において毒性を引き起こす場合がある。幾つかの実施形態では、上記ポリペプチド（例えば、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体）の細胞外表面へのホルモン又はホルモン類縁体誘導性局在に起因する毒性を経験する被験体を、ホルモン若しくはホルモン類縁体の用量を減らすことにより、又は被験体のホルモン若しくはホルモン類縁体の治療を全て排除することにより治療する又は改善させることができる。かかるホルモン又はホルモン類縁体治療の用量の減少又はそれらの排除は、上記ポリペプチド（例えば、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラポリペプチド）を細胞表面から除去させ、細胞表面の抗原結合ドメインの提示を減少又は排除させることで、被験体において毒性を減少又は排除させ得る。
【００８９】
単鎖キメラポリペプチド
単鎖キメラポリペプチド−細胞内ホルモン受容体ＬＢＤ
本明細書では、膜貫通ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている膜貫通ドメインのいずれか）と、ホルモン受容体リガンド結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているホルモン受容体リガンド結合ドメインのいずれか）とを含む単鎖キメラポリペプチドであって、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜約８００個のアミノ酸（例えば、又は本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられ、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物（例えばヒト）において同じ（単一の）内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、単鎖キメラポリペプチドを提供する。
【００９０】
単鎖キメラポリペプチドの幾つかの例では、膜貫通ドメインは、ホルモン受容体リガンド結合ドメインに直接接している（すなわち、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間に介在するアミノ酸がない）。単鎖キメラポリペプチドの幾つかの例では、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインは、１アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、約６アミノ酸、約５アミノ酸、約４アミノ酸、又は約３アミノ酸（両端を含む）；約２アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、約６アミノ酸、約５アミノ酸、又は約４アミノ酸（両端を含む）；約３アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、約６アミノ酸、又は約５アミノ酸（両端を含む）；約４アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、又は約６アミノ酸（両端を含む）；約５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、約１０アミノ酸、又は約８アミノ酸（両端を含む）；約６アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、約１０アミノ酸、又は約８アミノ酸（両端を含む）；約８アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０
アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、又は約１０アミノ酸（両端を含む）；約１０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、又は約１２アミノ酸（両端を含む）；約１２アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、又は約１４アミノ酸（両端を含む）；約１４アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、又は約１６アミノ酸（両端を含む）；約１６アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、又は約１８アミノ酸（両端を含む）；約１８アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、又は約２０アミノ酸（両端を含む）；約２０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、又は約２５アミノ酸（両端を含む）；約２５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７
６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、又は約３０アミノ酸（両端を含む）；約３０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、又は約３５アミノ酸（両端を含む）；約３５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、又は約４０アミノ酸（両端を含む）；約４０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、又は約４５アミノ酸（両端を含む）；約４５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、又は約５０アミノ酸（両端を含む）；約５０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、又は約５５アミノ酸（両端を含む）；約５５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、又は約６０アミノ酸（両端を含む）；約６０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０ア
ミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、又は約６５アミノ酸（両端を含む）；約６５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、又は約７０アミノ酸（両端を含む）；約７０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、又は約７５アミノ酸（両端を含む）；約７５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、又は約８０アミノ酸（両端を含む）；約８０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、又は約８５アミノ酸（両端を含む）；約８５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、又は約９０アミノ酸（両端を含む）；約９０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、約１００アミノ酸、又は約９５アミノ酸（両端を含む）；約９５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１０５アミノ酸、又は約１００アミノ酸（両端を含む）；約１００アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０
アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、約１１０アミノ酸、又は約１０５アミノ酸（両端を含む）；約１０５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１５アミノ酸、又は約１１０アミノ酸（両端を含む）；約１１０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、約１２０アミノ酸、又は約１１５アミノ酸（両端を含む）；約１１５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２５アミノ酸、又は約１２０アミノ酸（両端を含む）；約１２０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、約１３０アミノ酸、又は約１２５アミノ酸（両端を含む）；約１２５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３５アミノ酸、又は約１３０アミノ酸（両端を含む）；約１３０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、約１４０アミノ酸、又は約１３５アミノ酸（両端を含む）；約１３５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４５アミノ酸、又は約１４０アミノ酸（両端を含む）；約１４０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、約１５０アミノ酸、又は約１４５アミノ酸（両端を含む）；約１４５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０
アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５５アミノ酸、又は約１５０アミノ酸（両端を含む）；約１５０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、約１６０アミノ酸、又は約１５５アミノ酸（両端を含む）；約１５５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６５アミノ酸、又は約１６０アミノ酸（両端を含む）；約１６０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、約１７０アミノ酸、又は約１６５アミノ酸（両端を含む）；約１６５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７５アミノ酸、又は約１７０アミノ酸（両端を含む）；約１７０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、約１８０アミノ酸、又は約１７５アミノ酸（両端を含む）；約１７５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８５アミノ酸、又は約１８０アミノ酸（両端を含む）；約１８０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、約１９０アミノ酸、又は約１８５アミノ酸（両端を含む）；約１８５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９５アミノ酸、又は約１９０アミノ酸（両端を含む）；約１９０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸、又は約１９５アミノ酸（両端を含む）；約１９５アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸、又は約２００アミノ酸（両端を含む）；約２００アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０
アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、約２２０アミノ酸、又は約２１０アミノ酸（両端を含む）；約２１０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２３０アミノ酸、又は約２２０アミノ酸（両端を含む）；約２２０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２４０アミノ酸、又は約２３０アミノ酸（両端を含む）；約２３０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２５０アミノ酸、又は約２４０アミノ酸（両端を含む）；約２４０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、約２６０アミノ酸、又は約２５０アミノ酸（両端を含む）；約２５０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２７０アミノ酸、又は約２６０アミノ酸（両端を含む）；約２６０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、約２８０アミノ酸、又は約２７０アミノ酸（両端を含む）；約２７０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２９０アミノ酸、又は約２８０アミノ酸（両端を含む）；約２８０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、又は約２９０アミノ酸（両端を含む）；約２９０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、又は約３００アミノ酸（両端を含む）；約３００アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、約３００アミノ酸、又は約２９０アミノ酸（両端を含む）；約２９０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３１０アミノ酸、又は約３００アミノ酸（両端を含む）；約３００アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、約３２０アミノ酸、又は約３１０アミノ酸（両端を含む）；約３１０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３３０アミノ酸、又は約３２０アミノ酸（両端を含む）；約３２０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００
アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３４０アミノ酸、又は約３３０アミノ酸（両端を含む）；約３３０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３５０アミノ酸、又は約３４０アミノ酸（両端を含む）；約３４０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、約３６０アミノ酸、又は約３５０アミノ酸（両端を含む）；約３５０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸、又は約３６０アミノ酸（両端を含む）；約３６０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３７０アミノ酸（両端を含む）；約３７０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３９０アミノ酸、又は約３８０アミノ酸（両端を含む）；約３８０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、約４００アミノ酸、又は約３９０アミノ酸（両端を含む）；約３９０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４１０アミノ酸、又は約４００アミノ酸（両端を含む）；約４００アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、約４２０アミノ酸、又は約４１０アミノ酸（両端を含む）；約４１０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４３０アミノ酸、又は約４２０アミノ酸（両端を含む）；約４２０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、又は約４４０アミノ酸（両端を含む）；約４３０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４５０アミノ酸、又は約４４０アミノ酸（両端を含む）；約４４０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、約４６０アミノ酸、又は約４５０アミノ酸（両端を含む）；約４５０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸、又は約４６０アミノ酸（両端を含む）；約４６０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４７０アミノ酸（両端を含む）；約４７０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、約４９０アミノ酸、又は約４８０アミノ酸（両端を含む）；約４８０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、約５００アミノ酸、又は約４９０アミノ酸（両端を含む）；約４９０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、約５２０アミノ酸、又は約５００アミノ酸（両端を含む）；約５００アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、約５４０アミノ酸、又は約５２０アミノ酸（両端を含む）；約５２０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、約５６０アミノ酸、又は約５４０アミノ酸（両端を含む）；約５４０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、約５８０アミノ酸、又は約５６０アミノ酸（両端を含む）；約５６０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、約６００アミノ酸、又は約５８０アミノ酸（両端を含む）；約５８０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、約６２０アミノ酸、又は約６００アミノ酸（両端を含む）；約６００アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、約６４０アミノ酸、又は約６２０アミノ酸（両端を含む）；約６２０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、約６８０アミノ酸、約６６０アミノ酸、又は約６４０アミノ酸（両端を含む）；約６４０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸
、約６８０アミノ酸、又は約６６０アミノ酸（両端を含む）；約６６０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、約７００アミノ酸、又は約６８０アミノ酸（両端を含む）；約６８０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、約７２０アミノ酸、又は約７００アミノ酸（両端を含む）；約７００アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、約７４０アミノ酸、又は約７２０アミノ酸（両端を含む）；約７２０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、約７６０アミノ酸、又は約７４０アミノ酸（両端を含む）；約７４０アミノ酸〜約８００アミノ酸、約７８０アミノ酸、又は約７６０アミノ酸（両端を含む）；約７６０アミノ酸〜約８００アミノ酸、又は約７８０アミノ酸；（両端を含む）；又は約７８０アミノ酸〜約８００アミノ酸（両端を含む）によって隔てられている。
【００９１】
幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間に介在する１個以上のアミノ酸は、リンカーペプチドであってもよい又はリンカーペプチドを含んでもよい。幾つかの実施形態では、リンカーペプチドは以下のアミノ酸配列：ＧＳＧＳＧＳＧＳＧＳ（配列番号２０）、ＧＳＧＳＧＳＧＳ（配列番号２１）、ＲＳＧＳＧＳＧＳ（配列番号２２）、又はＧＳＧＳＧＳＧＳ（配列番号２３）の１つ以上を含んでもよい。幾つかの実施形態では、リンカーペプチドは以下の核酸配列：ＧＧＡＴＣＣＧＧＣＡＧＣＧＧＡＴＣＴＧＧＣＡＧＴＧＧＡＡＧＣ（配列番号２４）、ＧＧＡＴＣＴＧＧＣＴＣＴＧＧＡＡＧＣＧＧＣＡＧＣ（配列番号２５）、ＡＧＡＴＣＣＧＧＡＴＣＴＧＧＡＡＧＴＧＧＣＴＣＣ（配列番号２６）、又はＧＧＡＡＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＧＡＧＣＧＧＣＴＣＴ（配列番号２７）の１つ以上によってコードされ得る。幾つかの実施形態では、リンカーペプチドは、配列番号２０〜配列番号２３のいずれか１つの１個以上（例えば２個、３個、又は４個）のコピーを、例えばタンデムに含んでもよい。
【００９２】
幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間に介在する１個以上のアミノ酸は、膜貫通ドメイン（例えば本明細書に記載される膜貫通ドメインのいずれか）が由来する内因性ポリペプチド中の膜貫通ドメインに接する細胞内配列であってもよく、又は細胞内配列を含んでもよい。幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間に介在する１個以上のアミノ酸は、１つ以上の追加のドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている例示的な追加のドメインのいずれか）であってもよく、又は１つ以上の追加のドメインを含んでもよい。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチドは、単鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか）であってもよい。幾つかの実施形態では、キメラポリペプチドは、１つ以上の追加のドメインを更に含んでもよい。単鎖キメラポリペプチドに含まれ得る追加のドメインの非限定的な例として、細胞外リガンド結合ドメイン（例えば抗原結合ドメイン、例えば本明細書に記載される抗原結合ドメインのいずれか）、ＩＴＩＭ（例えば、当該技術分野で知られているＩＴＩＭのいずれか）、ＩＴＡＭ（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているＩＴＡＭのいずれか）、二量体化ドメイン（例えば、哺乳動物細胞で発現される別のポリペプチド（例えば組み換えポリペプチド）に存在する別の二量体化ドメインと二量体化することができる、例えば当該技術分野で知られている二量体化ドメインのいずれか）、及びペプチドタグ（例えば、ポリ−Ｈｉｓタグ）の１つ以上が挙げられる。
【００９３】
単鎖キメラポリペプチド−細胞外ホルモン受容体ＬＢＤ
本明細書では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているホルモン受容体リガンド結合ドメインのいずれか）と、膜貫通ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている膜貫通ドメインのいずれか）とを含む単鎖キメラポリペプチドであって、膜貫通ドメイン及び細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜約８００個のアミノ酸（例えば、又は本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられ、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物（例えばヒト）において単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、単鎖キメラポリペプチドを提供する。
【００９４】
単鎖キメラポリペプチドの幾つかの例では、膜貫通ドメインは、ホルモン受容体リガンド結合ドメインに直接接している（すなわち、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間に介在するアミノ酸がない）。単鎖キメラポリペプチドの幾つかの例では、膜貫通ドメイン及び細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、１個〜約８００個のアミノ酸（例えば本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられている。
【００９５】
幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間に介在する１個以上のアミノ酸は、リンカーペプチドであってもよい又はリンカーペプチドを含んでもよい。幾つかの実施形態では、リンカーペプチドは以下のアミノ酸配列：ＧＳＧＳＧＳＧＳＧＳ（配列番号２０）、ＧＳＧＳＧＳＧＳ（配列番号２１）、ＲＳＧＳＧＳＧＳ（配列番号２２）、又はＧＳＧＳＧＳＧＳ（配列番号２３）の１つ以上を含んでもよい。幾つかの実施形態では、リンカーペプチドは以下の核酸配列：ＧＧＡＴＣＣＧＧＣＡＧＣＧＧＡＴＣＴＧＧＣＡＧＴＧＧＡＡＧＣ（配列番号２４）、ＧＧＡＴＣＴＧＧＣＴＣＴＧＧＡＡＧＣＧＧＣＡＧＣ（配列番号２５）、ＡＧＡＴＣＣＧＧＡＴＣＴＧＧＡＡＧＴＧＧＣＴＣＣ（配列番号２６）、又はＧＧＡＡＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＧＡＧＣＧＧＣＴＣＴ（配列番号２７）の１つ以上によってコードされ得る。幾つかの実施形態では、リンカーペプチドは、配列番号２０〜配列番号２３のいずれか１つの１個以上（例えば２個、３個、又は４個）のコピーを、例えばタンデムに含んでもよい。幾つかの実施形態では、リンカーペプチドは、配列番号４５、配列番号４７、配列番号４９、配列番号５８、配列番号６０、配列番号６２及び配列番号１０６の１つ以上であってもよく、又はこれらの配列の１つ以上を含んでもよい。幾つかの実施形態では、リンカーペプチドは、ＧＳであってもよく、又はＧＳを含んでもよい。
【００９６】
幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間に介在する１個以上のアミノ酸は、膜貫通ドメイン（例えば本明細書に記載される膜貫通ドメインのいずれか）が由来する内因性ポリペプチド中の膜貫通ドメインに接する配列であってもよく、又は該配列を含んでもよい。幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間に介在する１個以上のアミノ酸は、１つ以上の追加のドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている例示的な追加のドメインのいずれか）であってもよく、又は追加のドメインを含んでもよい。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチドは、単鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか）であってもよい。幾つかの実施形態では、キメラポリペプチドは、１つ以上（例えば、２個、３個、４個、又は５個）の追加のドメインを更に含んでもよい。単鎖キメラポリペプチドに含まれ得る追加のドメインの非限定的な例として、細胞外リガンド結合ドメイン（例えば、抗原結合ドメイン、例えば本明細書に記載される抗原結合ドメインのいずれか）、ＩＴＩＭ（例えば、当該技術分野で知られているＩＴＩＭのいずれか）、ＩＴＡＭ（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているＩＴＡＭのいずれか）、二量体化ドメイン（例えば、哺乳動物細胞で発現される別のポリペプチド（例えば組み換えポリペプチド）に存在する別の二量体化ドメインと二量体化することができる、例えば当該技術分野で知られている二量体化ドメインのいずれか）、及びペプチドタグ（例えば、ポリ−Ｈｉｓタグ）の１つ以上が挙げられる。
【００９７】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチドは、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチドは、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。
【００９８】
単鎖キメラ抗原受容体
単鎖キメラ抗原受容体−細胞内ホルモン受容体ＬＢＤ
また、本明細書では、細胞外抗原結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている抗原結合ドメインのいずれか）と、膜貫通ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている膜貫通ドメインのいずれか）と、ホルモン受容体リガンド結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているホルモン受容体リガンド結合ドメインのいずれか）と、共刺激ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている共刺激ドメインのいずれか）と、免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）とを含む単鎖キメラ抗原受容体であって、膜貫通ドメイン及びホルモンリガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜約８００個のアミノ酸（例えば本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられ、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物において同じ（単一の）内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、単鎖キメラ抗原受容体を提供する。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体は、本明細書に記載される例示的な抗原のいずれか、又は当該技術分野で知られている任意の他の抗原に結合することができる。幾つかの実施形態では、単鎖キメラ抗原受容体は単一の抗原（例えば本明細書に記載される例示的な抗原のいずれか）に特異的に結合する。幾つかの実施形態では、単鎖キメラ抗原受容体は２つの異なる抗原（例えば、本明細書に記載される例示的な抗原の任意の組み合わせ）に特異的に結合する。
【００９９】
これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインは、ホルモン受容体リガンド結合ドメインに接している。これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインは、１個〜約８００個のアミノ酸（例えば、又は本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられている。幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、ドメインを含まない。他の実施形態では、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、１つ以上の介在するドメイン（例えば、１つ以上の共刺激ドメイン及び／又は１つ以上のＩＴＡＭ）を含む。幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、膜貫通ドメインが由来するのと同じ内因性膜貫通型タンパク質に由来する配列を含む。幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸はリンカー配列を含む。
【０１００】
これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態は、１つ以上（例えば２個、３個、４個、又は５個）の共刺激ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている例示的な共刺激ドメインのいずれかの任意の組み合わせ）を含んでもよい。これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態は、４−１ＢＢ共刺激ドメイン及びＣＤ２８共刺激ドメインの一方又は両方を含む。
【０１０１】
これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態は、１つ以上（例えば２個、３個、４個、又は５個）のＩＴＡＭ（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているＩＴＡＭのいずれか）を含んでもよい。これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、ＩＴＡＭは、ＣＤ３ζ（例えばヒトＣＤ３ζ）に由来する細胞質シグナル伝達配列を含む。
【０１０２】
これらの単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施形態において、任意の２つの隣接するドメインは、１アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１５アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、約６アミノ酸、約４アミノ酸、又は約３アミノ酸（両端を含む）；約２アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１５アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、約６アミノ酸、又は約４アミノ酸（両端を含む）；約３アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１５アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、約６アミノ酸、又は約５アミノ酸（両端を含む）；約４アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１５アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、又は約６アミノ酸（両端を含む）；約５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１５アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、又は約７アミノ酸（両端を含む）；約６アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１５アミノ酸、約１０アミノ酸、又は約８アミノ酸（両端を含む）；約８アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１５アミノ酸、又は約１０アミノ酸（両端を含む）；約１０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、又は約１５アミノ酸（両端を含む）；約１５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、又は約２０アミノ酸（両端を含む）；約２０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、又は約２５アミノ酸（両端を含む）；約２５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、又は約３０アミノ酸（両端を含む）；約３０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、又は約３５アミノ酸（両端を含む）；約３５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸（両端を含む）；約４０アミノ酸〜約
５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、又は約４５アミノ酸（両端を含む）；約４５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、又は約５０アミノ酸（両端を含む）；約５０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、又は約５５アミノ酸（両端を含む）；約５５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、又は約６０アミノ酸（両端を含む）；約６０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、又は約６５アミノ酸（両端を含む）；約６５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、又は約７０アミノ酸（両端を含む）；約７０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、又は約７５アミノ酸（両端を含む）；約７５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、又は約７５アミノ酸（両端を含む）；約７５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、又は約８０アミノ酸（両端を含む）；約８０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、又は約９０アミノ酸（両端を含む）；約１００アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、又は約１１０アミノ酸（両端を含む）；約１１０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、又は約１２０アミノ酸（両端を含む）；約１２０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、又は約１２０アミノ酸（両端を含む）；約１２０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、又は約１３０アミノ酸（両端を含む）；約１３０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、又は約１４０アミノ酸（両端を含む）；約１４０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、又は約１５０アミノ酸（両端を含む）；約１５０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、又は約１６０アミノ酸（両端を含む）；約１６０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、又は約１７０アミノ酸（両端を含む）；約１７０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、又は約１８０アミノ酸（両端を含む）；約１８０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸、又は約１９
０アミノ酸（両端を含む）；約１９０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、約２２０アミノ酸、又は約２００アミノ酸（両端を含む）；約２００アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、約２４０アミノ酸、又は約２２０アミノ酸（両端を含む）；約２２０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、約２６０アミノ酸、又は約２４０アミノ酸（両端を含む）；約２４０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２８０アミノ酸、又は約２６０アミノ酸（両端を含む）；約２６０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、約３００アミノ酸、又は約２８０アミノ酸（両端を含む）；約２８０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、約３２０アミノ酸、又は約３００アミノ酸（両端を含む）；約３００アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、約３４０アミノ酸、又は約３２０アミノ酸（両端を含む）；約３２０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、約３６０アミノ酸、又は約３４０アミノ酸（両端を含む）；約３４０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３８０アミノ酸、又は約３６０アミノ酸（両端を含む）；約３６０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、約４００アミノ酸、又は約３８０アミノ酸（両端を含む）；約３８０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、約４２０アミノ酸、又は約４００アミノ酸（両端を含む）；約４００アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、約４４０アミノ酸、又は約４２０アミノ酸（両端を含む）；約４２０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、約４６０アミノ酸、又は約４４０アミノ酸（両端を含む）；約４４０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４８０アミノ酸、又は約４６０アミノ酸（両端を含む）；約４６０アミノ酸〜約５００アミノ酸又は約４８０アミノ酸（両端を含む）；又は約４８０アミノ酸〜約５００アミノ酸（両端を含む）によって隔てられている。
【０１０３】
幾つかの実施形態では、細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、膜貫通ドメインが由来するのと同じ内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列（例えば、ＣＤ８αヒンジ領域、例えば配列番号１１２）である。幾つかの実施形態では、配列番号４２、配列番号５５、又は配列番号１１２を含む配列が、細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間に位置する。幾つかの実施形態では、細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、限定されることなく、ヒト抗体（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）等の抗体のヒンジ領域配列である、又はヒンジ領域配列を含む。幾つかの実施形態では、細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば、非天然起源のリンカー配列、例えばＧＳ、又は本明細書に記載される他のリンカー配列のいずれか）である、又はリンカー配列を含む。
【０１０４】
単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインの後、次のドメインは共刺激ドメインであり、その後にＩＴＡＭが続く。これらの実施形態の幾つかでは、ホルモン受容体リガンド結合ドメインと共刺激ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、共刺激ドメインが由来する又はＩＴＡＭが由来するのと同じ内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列である、又は該配列を含む。これらの実施形態の幾つかでは、ホルモン受容体リガンド結合ドメインと共刺激ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）である、又はリンカー配列を含む。幾つかの実施形態では、共刺激ドメインとＩＴＡＭとの間の１個以上のアミノ酸は、共刺激ドメインが由来する又はＩＴＡＭが由来するのと同じ内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列である、又は該配列を含む。
【０１０５】
単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインの後、次のドメインは共刺激ドメインであり、その後にＩＴＡＭが続く。単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、リガンド結合ドメインの後、次のドメインはＩＴＡＭであり、その後に共刺激ドメインが続く。これらの実施形態の幾つかでは、ホルモン受容体リガンド結合ドメインとＩＴＡＭとの間の１個以上のアミノ酸は、共刺激ドメインが由来する又はＩＴＡＭが由来するのと同じ内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列である、又は該配列を含む。これらの実施形態の幾つかでは、ホルモン受容体リガンド結合ドメインとＩＴＡＭとの間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）である、又はリンカー配列を含む。幾つかの実施形態では、ＩＴＡＭと共刺激ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、ＩＴＡＭが由来する又は共刺激ドメインが由来するのと同じ内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列である、又は該配列を含む。
【０１０６】
幾つかの実施形態では、２つ以上の共刺激ドメインが単鎖キメラ抗原受容体に含まれる場合、２つ以上の共刺激ドメインはホルモン受容体リガンド結合ドメインと１つ以上のＩＴＡＭとの間に置かれてもよい。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、共刺激ドメイン及びＩＴＡＭは、単鎖キメラ抗原受容体の一次アミノ酸配列において交互にあってもよい。
【０１０７】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施形態は、二量体化ドメイン及び／又はペプチドタグを更に含んでもよい。
【０１０８】
幾つかの例では、単鎖キメラ抗原受容体は、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３９、又は配列番号５２に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％）同一の配列を含んでもよい。
【０１０９】
単鎖キメラ抗原受容体−細胞外ホルモン受容体ＬＢＤ
また、本明細書では、細胞外抗原結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている抗原結合ドメインのいずれか）と、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているホルモン受容体リガンド結合ドメインのいずれか）と、膜貫通ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている膜貫通ドメインのいずれか）と、共刺激ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている共刺激ドメインのいずれか）と、免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）とを含む単鎖キメラ抗原受容体であって、膜貫通ドメイン及び細胞外ホルモンリガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜約８００個のアミノ酸（例えば本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられ、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとが哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、単鎖キメラ抗原受容体を提供する。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体は、本明細書に記載される例示的な抗原のいずれか、又は当該技術分野で知られている任意の他の抗原に結合することができる。幾つかの実施形態では、単鎖キメラ抗原受容体は単一の抗原（例えば本明細書に記載される例示的な抗原のいずれか）に特異的に結合する。幾つかの実施形態では、単鎖キメラ抗原受容体は２つの異なる抗原（例えば、本明細書に記載される例示的な抗原の任意の組み合わせ）に特異的に結合する。
【０１１０】
これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインは、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインに接している。これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、１個〜約８００個のアミノ酸（例えば、又は本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられている。幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、ドメインを含まない。他の実施形態では、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、１つ以上の介在するドメイン（例えば、抗原結合ドメイン及び／又は追加の抗原結合ドメイン）を含む。幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、膜貫通ドメインが由来するのと同じ内因性膜貫通型タンパク質に由来する配列を含む。幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸はリンカー配列を含む。
【０１１１】
これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態は、１つ以上（例えば２個、３個、４個、又は５個）の共刺激ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている例示的な共刺激ドメインのいずれかの任意の組み合わせ）を含んでもよい。これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態は、４−１ＢＢ共刺激ドメイン及びＣＤ２８共刺激ドメインの一方又は両方を含む。
【０１１２】
これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態は、１つ以上（例えば２個、３個、４個、又は５個）のＩＴＡＭ（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているＩＴＡＭのいずれか）を含んでもよい。これらの単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、ＩＴＡＭは、ＣＤ３ζ（例えばヒトＣＤ３ζ）に由来する細胞質シグナル伝達配列を含む。
【０１１３】
これらの単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施形態では、任意の２つの隣接するドメインは、１個のアミノ酸〜約５００個のアミノ酸（例えば、又は本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられてもよい。
【０１１４】
幾つかの実施形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン又は細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、膜貫通ドメインが由来するのと同じ内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列（例えば、ヒトＣＤ８αに由来するヒンジ配列、例えば配列番号１１２）である。幾つかの実施形態では、配列番号４２、配列番号５５、又は配列番号１１２を含む配列が、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン又は細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間に配置される。幾つかの実施形態では、細胞外抗原結合ドメイン又は細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、限定されることなく、ヒト抗体（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）等の抗体のヒンジ領域配列である、又はヒンジ領域配列を含む。幾つかの実施形態では、細胞外抗原結合ドメイン又は細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているホルモン受容体リガンド結合ドメインのいずれか）と膜貫通ドメインとの間の１つ個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）である、又はリンカー配列を含む。幾つかの実施形態では、細胞外抗原結合ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列、例えばＧＳ、又は本明細書に記載される他のリンカー配列のいずれか））である、又はリンカー配列を含む。
【０１１５】
単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインの後、次のドメインは共刺激ドメインであり、その後にＩＴＡＭが続く。単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインの後、次のドメインはＩＴＡＭであり、その後に共刺激ドメインが続く。これらの実施形態の幾つかでは、膜貫通ドメインと共刺激ドメイン又はＩＴＡＭとの間の１個以上のアミノ酸は、それぞれ共刺激ドメインが由来する又はＩＴＡＭが由来するのと同じ内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列である、又は該配列を含む。これらの実施形態の幾つかでは、膜貫通ドメインと共刺激ドメイン又はＩＴＡＭとの間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）である、又はリンカー配列を含む。これらの実施形態の幾つかでは、共刺激ドメインとＩＴＡＭとの間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）である、又はリンカー配列を含む。幾つかの実施形態では、共刺激ドメインとＩＴＡＭとの間の１個以上のアミノ酸は、共刺激ドメインが由来する又はＩＴＡＭが由来するのと同じ内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列である、又は該配列を含む。
【０１１６】
幾つかの実施形態では、２つ以上の共刺激ドメインが単鎖キメラ抗原受容体に含まれる場合、２つ以上の共刺激ドメインは１つ以上のＩＴＡＭの間に置かれてもよい。幾つかの実施形態では、２つ以上のＩＴＡＭが単鎖キメラ抗原受容体に含まれる場合、２つ以上のＩＴＡＭは１つ以上の共刺激分子の間に置かれてもよい。本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、共刺激ドメイン及びＩＴＡＭは、単鎖キメラ抗原受容体の一次アミノ酸配列において交互にあってもよい。
【０１１７】
本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれかの幾つかの実施形態は、二量体化ドメイン及び／又はペプチドタグを更に含んでもよい。
【０１１８】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラ抗原受容体は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインと、細胞内共刺激ドメインと、ＩＴＡＭとを含む。幾つかの実施形態では、単鎖キメラ抗原受容体は、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインと、細胞内共刺激ドメインと、ＩＴＡＭとを含む。幾つかの実施形態では、単鎖キメラ抗原受容体は、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、細胞内共刺激ドメインと、ＩＴＡＭとを含む。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチドは、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、細胞内共刺激ドメインと、ＩＴＡＭとを含む。
【０１１９】
幾つかの例では、単鎖キメラ抗原受容体は、配列番号９８に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％）同一の配列を含んでもよい。
【０１２０】
多重鎖キメラ抗原受容体
多重鎖キメラ抗原受容体−細胞内ホルモン受容体ＬＢＤ
また、本明細書では、細胞外抗原結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている抗原結合ドメインのいずれか）と、膜貫通ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている膜貫通ドメインのいずれか）と、ホルモン受容体リガンド結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているホルモン受容体リガンド結合ドメインのいずれか）とを含む少なくとも１つの第１のポリペプチドを含む多重鎖キメラ抗原受容体であって、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜約８００個のアミノ酸（例えば、本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられ、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が同じ（単一の）内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、多重鎖キメラ抗原受容体を提供する。これらの多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの抗原結合ドメインによって特異的に結合される抗原は、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている抗原のいずれかであってもよい。幾つかの実施形態では、多重鎖キメラ抗原受容体は、単一の抗原（例えば本明細書に記載される例示的な抗原のいずれか）のみに特異的に結合する。幾つかの実施形態では、多重鎖キメラ抗原受容体は、２つの異なる抗原（例えば本明細書に記載される例示的な抗原のいずれかの任意の組み合わせ）に特異的に結合する。
【０１２１】
多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、細胞外抗原結合ドメイン及び膜貫通ドメインは互いに接している。多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、１個〜約５００個のアミノ酸（例えば本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）は、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間にある。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、膜貫通ドメインが由来するのと同じ内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列である。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドの細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、ヒト抗体（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）のヒンジ領域配列である、又はヒンジ領域配列を含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）である、又はリンカー配列を含む。
【０１２２】
これらの多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメインは、ホルモン受容体リガンド結合ドメインに接している。これらの多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメイン及びホルモン受容体リガンド結合ドメインは、１個〜約８００個のアミノ酸（例えば、又は本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられている。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸はドメインを含まない。他の実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、１つ以上の介在するドメイン（例えば、１つ以上の共刺激ドメイン（例えば本明細書に記載される共刺激ドメインのいずれか）及び／又は１つ以上のＩＴＡＭ（例えば本明細書に記載されるＩＴＡＭのいずれか））を含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、膜貫通ドメインが由来するのと同じ内因性膜貫通型タンパク質に由来する配列を含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）を含む。
【０１２３】
これらの多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドは、二量体化ドメイン（例えば、当該技術分野で知られている任意の二量体化ドメイン）、共刺激ドメイン（例えば本明細書に記載される共刺激ドメインのいずれか）、及び／又はペプチドタグ（例えば、当該技術分野で知られている任意のペプチドタグ）の１つ以上（例えば２個又は３個）を更に含んでもよい。
【０１２４】
これらの多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態は、膜貫通ドメイン（例えば本明細書に記載される膜貫通ドメインのいずれか）、二量体化ドメイン（例えば、哺乳動物細胞において少なくとも１つの第１のポリペプチド中の二量体化ドメインと相互作用し得る二量体化ドメイン）、１つ以上の共刺激ドメイン（例えば本明細書に記載される共刺激ドメインのいずれか）、及び１つ以上のＩＴＡＭ（例えば本明細書に記載されるＩＴＡＭのいずれか）の１つ以上（例えば２個、３個、又は４個）を含んでもよい第２のポリペプチドを更に含む。当業者に十分理解され得るように、第２のポリペプチドにおいて一対の又は各対の隣接するドメインは、互いに接していてもよく、又は１個〜約８００個のアミノ酸（例えば本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられてもよい。第２のポリペプチド中の一対の隣接するドメイン間の１個以上のアミノ酸は、第２のポリペプチド中に存在する膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン又はＩＴＡＭが由来する内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列であってもよい。
【０１２５】
多重鎖キメラ抗原受容体−細胞外ホルモン受容体ＬＢＤ
また、本明細書では、細胞外抗原結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている抗原結合ドメインのいずれか）と、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られているホルモン受容体リガンド結合ドメインのいずれか）と、膜貫通ドメイン（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている膜貫通ドメインのいずれか）とを含む少なくとも１つの第１のポリペプチドを含む多重鎖キメラ抗原受容体であって、膜貫通ドメイン及び細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜約８００個のアミノ酸（例えば本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられ、膜貫通ドメインとホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、多重鎖キメラ抗原受容体を提供する。これらの多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかの抗原結合ドメインによって特異的に結合される抗原は、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている抗原のいずれかであってもよい。幾つかの実施形態では、多重鎖キメラ抗原受容体は、単一の抗原（例えば本明細書に記載される例示的な抗原のいずれか）のみに特異的に結合する。幾つかの実施形態では、多重鎖キメラ抗原受容体は、２つの異なる抗原（例えば本明細書に記載される例示的な抗原のいずれかの任意の組み合わせ）に特異的に結合する。
【０１２６】
多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び膜貫通ドメインは、互いに接している。多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、１個〜約７００個のアミノ酸（例えば本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）は、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと膜貫通ドメインとの間にある。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、膜貫通ドメインが由来するのと同じ内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列である。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドの細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、ヒト抗体（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）のヒンジ領域配列である、又はヒンジ領域配列を含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）である、又はリンカー配列を含む。幾つかの実施形態では、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと抗原結合ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）であるか、又はリンカー配列を含む。
【０１２７】
これらの多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインは、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインに接している。これらの多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメイン及び細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、１個〜約８００個のアミノ酸（例えば、又は本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられている。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、ドメインを含まない。
【０１２８】
幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間のアミノ酸は、１つ以上の介在するドメイン（例えば抗原結合ドメイン）を含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメインと抗原結合ドメインとの間のアミノ酸は、膜貫通ドメインが由来するのと同じ内因性膜貫通型タンパク質に由来する配列を含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、膜貫通ドメインと抗原結合ドメインとの間のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）を含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドの抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、ヒト抗体（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）のヒンジ領域配列である、又はヒンジ領域配列を含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドにおいて、抗原結合ドメインと細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）である、又はリンカー配列を含む。
【０１２９】
幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドは、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外抗原結合ドメインと、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドは、Ｃ末端からＮ末端に向かって、細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインとを含む。
【０１３０】
これらの多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、少なくとも１つの第１のポリペプチドは、二量体化ドメイン（例えば、当該技術分野で知られている任意の二量体化ドメイン）、共刺激ドメイン（例えば本明細書に記載される共刺激ドメインのいずれか）、及び／又はペプチドタグ（例えば、当該技術分野で知られている任意のペプチドタグ）の１つ以上（例えば２個又は３個）を更に含んでもよい。
【０１３１】
これらの多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態は、膜貫通ドメイン（例えば本明細書に記載される膜貫通ドメインのいずれか）、二量体化ドメイン（例えば、哺乳動物細胞において少なくとも１つの第１のポリペプチド中の二量体化ドメインと相互作用し得る二量体化ドメイン）、１つ以上の共刺激ドメイン（例えば本明細書に記載される共刺激ドメインのいずれか）、及び１つ以上のＩＴＡＭ（例えば本明細書に記載されるＩＴＡＭのいずれか）の１つ以上（例えば、任意の順序又は組み合わせで、２個、３個、又は４個）を含んでもよい第２のポリペプチドを更に含む。当業者に十分理解され得るように、第２のポリペプチドにおいて一対の又は各対の隣接するドメインは、互いに接していてもよく、又は１個〜約８００個のアミノ酸（例えば本明細書に記載されるこの範囲の部分範囲のいずれか）によって隔てられてもよい。第２のポリペプチド中の一対の隣接するドメイン間の１個以上のアミノ酸は、第２のポリペプチド中に存在する膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン又はＩＴＡＭが由来する内因性単鎖ポリペプチドに由来する配列であってもよい。第２のポリペプチドにおいて、一対の隣接するドメイン間の１個以上のアミノ酸は、リンカー配列（例えば非天然起源のリンカー配列）であってもよく、又はリンカー配列を含んでもよい。
【０１３２】
当該技術分野において十分理解され得るように、多重鎖キメラ抗原受容体に存在する２つ以上のポリペプチドは、互いに（二量体化ドメインによって）相互作用する一対のドメインを介して会合することができる。幾つかの実施形態では、二量体化ドメイン間の相互作用は、低分子の付加によって誘発され得る。幾つかの実施形態では、多量体キメラ抗原受容体に存在する２つ以上のポリペプチドは、非共有結合相互作用（例えば、二量体化ドメイン間の会合）によって会合し得る。幾つかの実施形態では、多量体キメラ抗原受容体に存在する２つ以上のポリペプチドは、共有結合相互作用による（例えば、ジスルフィド結合による、エステル結合による、アミド結合による、チオエステル結合による、又はそれらの組み合わせによる）ものであってもよい。
【０１３３】
膜貫通ドメイン
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８（Ｔｐ４４としても知られる）、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７（ＧＰ５２−４０又はＴＳＰＡＮ２６としても知られる）、ＣＤ６４（ＦＣＧＲ１Ａとしても知られる）、ＣＤ８０（Ｂ７、Ｂ７−１、Ｂ７．１、ＢＢ１、ＣＤ２８ＬＧ、ＣＤ２８ＬＧ１、及びＬＡＢ７としても知られる）、ＣＤ４５（ＰＴＰＲＣ、Ｂ２２０、ＣＤ４５Ｒ、ＧＰ１８０、Ｌ−ＣＡ、ＬＣＡ、ＬＹ５、Ｔ２００、及びタンパク質チロシンホスファターゼ、受容体タイプＣとしても知られる）、ＣＤ４、ＣＤ５（ＬＥＵ１及びＴ１としても知られる）、ＣＤ８α（Ｌｅｕ２、ＭＡＬ、及びｐ３２としても知られる）、ＣＤ９（ＢＴＣＣ−１、ＤＲＡＰ−２７、ＭＩＣ３、ＭＲＰ−１、ＴＳＰＡＮ−２９、及びＴＳＰＡＮ２９としても知られる）、ＣＤ１６（ＦＣＧＲ３及びＦＣＧ３としても知られる）、ＣＤ２２（ＳＩＧＬＥＣ−２及びＳＩＧＬＥＣ２としても知られる）、ＣＤ８６（Ｂ７−２、Ｂ７．２、Ｂ７０、ＣＤ２８ＬＧ２、及びＬＡＢ７２としても知られる）、ＣＤ１３４（ＴＮＦＲＳＦ４、ＡＣＴ３５、ＲＰ５−９０２Ｐ８．３、ＩＭＤ１６、ＯＸ４０、ＴＸＧＰ１Ｌ、及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー４としても知られる）、ＣＤ１３７（ＴＮＦＲＳＦ９、４−１ＢＢ、ＣＤｗ１３７、ＩＬＡ、及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー９としても知られる）、ＣＤ２７（Ｓ１５２、Ｓ１５２．ＬＰＦＳ２、Ｔ１４、ＴＮＦＲＳＦ７、及びＴｐ５５としても知られる）、ＣＤ１５２（ＣＴＬＡ４、ＡＬＰＳ５、ＣＥＬＩＡＣ３、ＣＴＬＡ−４、ＧＲＤ４、ＧＳＥ、ＩＤＤＭ１２、及び細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４としても知られる）、ＰＤ１（ＰＤＣＤ１、ＣＤ２７９、ＰＤ−１、ＳＬＥＢ２、ｈＰＤ−１、ｈＰＤ−ｌ、ｈＳＬＥ１、及びプログラム細胞死１としても知られる）、ＩＣＯＳ（ＡＩＬＩＭ、ＣＤ２７８、及びＣＶＩＤ１としても知られる）、ＣＤ２７２（ＢＴＬＡ及びＢＴＬＡ１としても知られる）、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８、Ｄ１Ｓ１６６Ｅ、及びＫｉ−１としても知られる）、ＧＩＴＲ（ＴＮＦＲＳＦ１８、ＲＰ５−９０２Ｐ８．２、ＡＩＴＲ、ＣＤ３５７、及びＧＩＴＲ−Ｄとしても知られる）、ＨＶＥＭ（ＴＮＦＲＳＦ１４、ＲＰ３−３９５Ｍ２０．６、ＡＴＡＲ、ＣＤ２７０、ＨＶＥＡ、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴＲ、及びＴＲ２としても知られる）、ＤＡＰ１０、及びＣＤ１５４（ＣＤ４０ＬＧ、ＣＤ４０Ｌ、ＨＩＧＭ１、ＩＧＭ、ＩＭＤ３、Ｔ−ＢＡＭ、ＴＮＦＳＦ５、ＴＲＡＰ、ｇｐ３９、ｈＣＤ４０Ｌ、及びＣＤ４０リガンドとしても知られる）の群ｇから選択される内因性ポリペプチドに由来する、膜貫通ドメイン又はその部分を含む。「ＣＤ」の文字は、「分化クラスター」を表す前文である。例えば、ＣＤ３は、「分化クラスター３」を表す。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、内因性哺乳動物（例えばヒト）ポリペプチド（例えば、上に列挙されるポリペプチドのいずれかの哺乳動���又はヒトのホモログ）に由来する膜貫通ドメイン又はその部分を含む。
【０１３４】
哺乳動物細胞の脂質二重層（例えば形質膜）中に内因性ポリペプチドを係留する役割を果たす任意の膜貫通ドメイン又はその部分は、本明細書に開示される組成物及び方法による使用に適している。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、ヒトＣＤ２８に由来する膜貫通ドメイン又はその部分、例えばアクセッション番号Ｐ０１７４７、例えば配列番号１のアミノ酸１５３〜アミノ酸１７９を含む。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、配列番号１のアミノ酸１５３〜アミノ酸１７９に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％）同一の膜貫通ドメイン又はその部分を含む。
【０１３５】
幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインは、配列番号１１４（又はその部分）に対して、少なくとも８０％（例えば少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％）同一の配列を含んでもよい。
【０１３６】
配列番号１
MLRLLLALNLFPSIQVTGNKILVKQSPMLVAYDNAVNLSCKYSYNLFSREFRASLHKGLDSAVEVCVVYGNYSQQLQVYSKTGFNCDGKLGNESVTFYLQNLYVNQTDIYFCKIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS
【０１３７】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、ヒトＣＤ３に由来する膜貫通ドメイン又はその部分、例えばアクセッション番号Ｐ２０９６３、例えば配列番号２のアミノ酸３１〜アミノ酸５１を含む。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、配列番号２のアミノ酸３１〜アミノ酸５１に対して、少なくとも８０％（例えば少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％）同一の配列である、又は該配列を含む膜貫通ドメインを含む。
【０１３８】
配列番号２
MKWKALFTAAILQAQLPITEAQSFGLLDPKLCYLLDGILFIYGVILTALFLRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPQRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
【０１３９】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、配列番号３〜配列番号９のいずれか１つの膜貫通ドメイン又はその部分を含む。
LGLLVAGVLVLLVSLGVAIHLCC（配列番号３）、
VAAILGLGLVLGLLGPLAILLALYLL（配列番号４）、
ALIVLGGVAGLLLFIGLGIFFCVRC（配列番号５）、
LCYLLDGILFIYGVILTALFLRV（配列番号６）、
WVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWV（配列番号７）、
IYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC（配列番号８）、及び、
ALPAALAVISFLLGLGLGVACVLA（配列番号９）。
【０１４０】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、配列番号３〜配列番号９のいずれかに対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％）同一の配列である又は該配列を含む膜貫通ドメインを含む。
【０１４１】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、配列番号４３、配列番号５６又は配列番号１１４に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％）同一の配列である又は該配列を含む膜貫通ドメインを含む。
【０１４２】
当業者に十分理解されるように、或る特定の内因性ポリペプチドは、少なくともそれらの一次ポリペプチド配列が異なる、２つ以上のアイソフォームを有する。本明細書に開示される単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、例えば、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＣＤ１５２、ＰＤ１、又はＣＤ１５４のアイソフォーム（例えばヒトアイソフォーム）を含む、内因性膜貫通型タンパク質の任意のアイソフォーム（例えば内因性哺乳動物、例えばヒト膜貫通型タンパク質）に由来するアミノ酸の配列を含む膜貫通ドメインを含んでもよい。
【０１４３】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体の膜貫通ドメイン又はその部分は、以下の内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型タンパク質：Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＣＤ１５２、ＰＤ１、又はＣＤ１５４の１つ以上に由来する膜貫通ドメインに対して、少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体の膜貫通ドメイン又はその部分は、内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型タンパク質：Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＣＤ１５２、ＰＤ１、又はＣＤ１５４の膜貫通ドメインと比較して、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失又は付加を有するアミノ酸の配列を含む。
【０１４４】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、合成膜貫通ドメインを含む。幾つかの場合では、合成膜貫通ドメインは主に、限定されることなく、ロイシン及びバリン等の疎水性残基を含んでもよい。幾つかの実施形態では、合成膜貫通ドメインは、ドメインの各末端にフェニルアラニン、トリプトファン及びバリンのトリプレットを含む。
【０１４５】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、膜貫通ドメインの２つ以上の部分が共に機能性膜貫通ドメインを構成するように、限定されることなく、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＣＤ１５２、ＰＤ１、及びＣＤ１５４等の２つ以上の内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型ポリペプチドに由来する膜貫通ドメインの部分を有するキメラ膜貫通ドメインである膜貫通ドメインを含む。幾つかの実施形態では、野生型膜貫通ドメインの対応する部分と比較して、キメラ膜貫通ドメインのかかる部分は、１以上のアミノ酸の置換、欠失、又は付加を含んでもよい。
【０１４６】
膜貫通ドメインは、哺乳動物細胞において発現される際、対応する内因性ポリペプチド中に存在する場合にそれぞれ脂質二重層を横断する、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、又は１０個の連続アミノ酸配列を含む場合がある。当該技術分野で知られているように、膜貫通ドメインは、例えば、脂質二重層中にα−ヘリックス二次構造を有する（哺乳動物細胞において発現される際、対応する内因性ポリペプチド中に存在する場合に、脂質二重層を横断する）少なくとも１個（例えば２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個又は１０個）の連続アミノ酸配列を含んでもよい。幾つかの実施形態では、膜貫通ドメインは、脂質二重層中にβ−バレル二次構造を形成する（哺乳動物細胞において発現される際、対応する内因性ポリペプチド中に存在する場合に、各々が脂質二重層を横断する）２個以上の連続アミノ酸配列を含んでもよい。膜貫通ドメインの更なる例及び特徴が当該技術分野で知られている。
【０１４７】
ホルモン受容体リガンド結合ドメイン
幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、エストロゲン受容体リガンド結合ドメイン、又はそのフラグメントである、又はそれを含む。本明細書に記載されるポリペプチドのいずれか（例えば単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体）において使用され得るホルモン受容体リガンド結合ドメインの更なる例として、例えば、エストロゲン受容体、エクジソン受容体、ＰＰＡＲγ受容体、グルココルチコイド受容体、アンドロゲン受容体、甲状腺ホルモン受容体、ミネラルコルチコイド受容体、プロゲステロン受容体、ビタミンＤ受容体、ＰＰＡＲ受容体α、ＰＰＡＲβ／δ受容体、プレグナンＸ受容体、肝臓Ｘ受容体、ファルネソイドＸ受容体、レチノイドＸ受容体、ＲＡＲ関連オーファン受容体、及びレチノイン酸受容体のリガンド結合ドメインが挙げられる。
【０１４８】
ヒトエストロゲン受容体リガンド結合ドメインの非限定的な例は、配列番号１０のアミノ酸１０〜アミノ酸２４７である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号１０のアミノ酸１０〜アミノ酸２４７に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１４９】
配列番号１０（ヒト）
1   skknslalsl tadqmvsall daeppilyse ydptrpfsea smmglltnla drelvhminw
61  akrvpgfvdl tlhdqvhlle cawleilmig lvwrsmehpg kllfapnlll drnqgkcveg
121 mveifdmlla tssrfrmmnl qgeefvclks iillnsgvyt flsstlksle ekdhihrvld
181 kitdtlihlm akagltlqqq hqrlaqllli lshirhmsnk gmehlysmkc knvvplydll
241 lemldahrlh
【０１５０】
エストロゲン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号１１のアミノ酸４〜アミノ酸２４１である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号１１のアミノ酸４〜アミノ酸２４１に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１５１】
配列番号１１（ヒト）
1   alsltadqmv salldaeppi lyseydptrp fseasmmgll tnladrelvh minwakrvpg
61  fvdltlhdqv hllecawlei lmiglvwrsm ehpgkllfap nllldrnqgk cvegmveifd
121 mllatssrfr mmnlqgeefv clksiillns gvytflsstl ksleekdhih rvldkitdtl
181 ihlmakaglt lqqqhqrlaq lllilshirh msnkgmehly smkcknvvpl ydlllemlda
241 hrlhapts
【０１５２】
幾つかの実施形態では、エストロゲン受容体リガンド結合ドメインは、１つ以上（例えば２個、３個、４個、５個、又は６個）のアミノ酸置換を含むことを除いて、野生型配列を有する。幾つかの実施形態では、エストロゲン受容体リガンド結合ドメインは、アミノ酸の５２１位（例えばＧ５２１Ｒ置換）及び５３７位（例えばＧ５３７Ｆ置換）（各々、ヒトエストロゲン受容体の野生型全長配列、例えば下記配列番号１１９に関して番号が付される）の一方又は両方のアミノ酸置換を含むことを除いて、野生型配列を有する。
【０１５３】
配列番号１１９（ヒト）
1   mtmtlhtkas gmallhqiqg neleplnrpq lkiplerplg evyldsskpa vynypegaay
61  efnaaaaana qvygqtglpy gpgseaaafg snglggfppl nsvspsplml lhpppqlspf
121 lqphgqqvpy ylenepsgyt vreagppafy rpnsdnrrqg grerlastnd kgsmamesak
181 etrycavcnd yasgyhygvw scegckaffk rsiqghndym cpatnqctid knrrkscqac
241 rlrkcyevgm mkggirkdrr ggrmlkhkrq rddgegrgev gsagdmraan lwpsplmikr
301 skknslalsl tadqmvsall daeppilyse ydptrpfsea smmglltnla drelvhminw
361 akrvpgfvdl tlhdqvhlle cawleilmig lvwrsmehpg kllfapnlll drnqgkcveg
421 mveifdmlla tssrfrmmnl qgeefvclks iillnsgvyt flsstlksle ekdhihrvld
481 kitdtlihlm akagltlqqq hqrlaqllli lshirhmsnk gmehlysmkc knvvplydll
541 lemldahrlh aptsrggasv eetdqshlat agstsshslq kyyitgeaeg fpatv
【０１５４】
エストロゲン受容体リガンド結合ドメインの非限定的な例としては、配列番号１１０（又はそのフラグメント）に対して、少なくとも８０％（例えば少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％）同一の配列を挙げることができる。
【０１５５】
ホルモン受容体リガンド結合ドメインの更なる非限定的な例は、配列番号４６、配列番号５９、又は配列番号１１０に対して、少なくとも８０％（例えば少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％）同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１５６】
エストロゲン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号８８のアミノ酸３１４〜アミノ酸５５１である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号８８のアミノ酸３１４〜アミノ酸５５１に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１５７】
配列番号８８（マウス）
1 mtmtlhtkas gmallhqiqg neleplnrpq lkmpmeralg evyvdnskpt vfnypegaay
61 efnaaaaaaa aasapvygqs giaygpgsea aafsanslga fpqlnsvsps plmllhpppq
121 lspflhphgq qvpyylenep sayavrdtgp pafyrsnsdn rrqngrerls ssnekgnmim
181 esaketryca vcndyasgyh ygvwscegck affkrsiqgh ndymcpatnq ctidknrrks
241 cqacrlrkcy evgmmkggir kdrrggrmlk hkrqrddleg rnemgasgdm raanlwpspl
301 vikhtkknsp alsltadqmv salldaeppm iyseydpsrp fseasmmgll tnladrelvh
361 minwakrvpg fgdlnlhdqv hllecawlei lmiglvwrsm ehpgkllfap nllldrnqgk
421 cvegmveifd mllatssrfr mmnlqgeefv clksiillns gvytflsstl ksleekdhih
481 rvldkitdtl ihlmakaglt lqqqhrrlaq lllilshirh msnkgmehly nmkcknvvpl
541 ydlllemlda hrlhapasrm gvppeepsqt qlattsstsa hslqtyyipp eaegfpnti
【０１５８】
エストロゲン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号８９のアミノ酸３１５〜アミノ酸５５２である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号８９のアミノ酸３１５〜アミノ酸５５２に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１５９】
配列番号８９（ラット）
1 mtmtlhtkas gmallhqiqg neleplnrpq lkmpmeralg evyvdnskpa vfnypegaay
61 efnaaaaaaa agasapvygq ssitygpgse aaafganslg afpqlnsvsp splmllhppp
121 hvspflhphg hqvpyylene psayavrdtg ppafyrsnsd nrrqngrerl ssssekgnmi
181 mesaketryc avcndyasgy hygvwscegc kaffkrsiqg hndymcpatn qctidknrrk
241 scqacrlrkc yevgmmkggi rkdrrggrml khkrqrddle grnemgtsgd mraanlwpsp
301 lvikhtkkns palsltadqm vsalldaepp liyseydpsr pfseasmmgl ltnladrelv
361 hminwakrvp gfgdlnlhdq vhllecawle ilmiglvwrs mehpgkllfa pnllldrnqg
421 kcvegmveif dmllatssrf rmmnlqgeef vclksiilln sgvytflsst lksleekdhi
481 hrvldkindt lihlmakagl tlqqqhrrla qlllilshir hmsnkgmehl ynmkcknvvp
541 lydlllemld ahrlhapasr mgvppeepsq sqltttssts ahslqtyyip peaegfpnti
【０１６０】
エストロゲン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号９０のアミノ酸３１０〜アミノ酸５４７である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号９０のアミノ酸３１０〜アミノ酸５４７に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１６１】
配列番号９０（ヒヒ）
1 mtmtlhtkas gmallhqiqg neleplnrpq lkiplerplg evyvdsskpa vysypegaay
61 efnaaaaana qvygqtglpy gpgseaaafg snglggfppl nsvspsplml lhpppqlspf
121 lqphgqqvpy ylenepsgyt vreagppafy rpnsdnrrqg grerlastnd kgsmamesak
181 etrycavcnd yasgyhygvw scegckaffk rsiqghndym cpatnqctid knrrkscqac
241 rlrkcyevgm mkggirkdrr ggrmlkhkrq rddgegrgev gsagdmraan lwpsplmikh
301 skknspalsl tadqmvsall daeppilyse ydptrpfsea smmglltnla drelvhminw
361 akrvpgfvdl tlhdqvhlle cawleilmig lvwrsmehpg kllfapnlll drnqgkcveg
421 mveifdmlla tssrfrmmnl qgeefvclks iillnsgvyt flsstlksle ekdhihrvld
481 kitdtlihlm akagltlqqq hrrlaqllli lshirhmsnk gmehlysmkc knvvplydll
541 lemldahrlh aptsrggapm eetdqshlat agstsshslq kyyitgdaeg fpatv
【０１６２】
幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、プロゲステロン受容体リガンド結合ドメイン、又はそのフラグメントである、又はそれを含む。ヒトプロゲステロン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号１２のアミノ酸１１〜アミノ酸２５８である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号１２のアミノ酸１１〜アミノ酸２５８に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１６３】
配列番号１２（ヒト）
1   spgqdiqlip plinllmsie pdviyaghdn tkpdtsssll tslnqlgerq llsvvkwsks
61  lpgfrnlhid dqitliqysw mslmvfglgw rsykhvsgqm lyfapdliln eqrmkessfy
121 slcltmwqip qefvklqvsq eeflcmkvll llntiplegl rsqtqfeemr ssyirelika
181 iglrqkgvvs ssqrfyqltk lldnlhdlvk qlhlyclntf iqsralsvef pemmseviaa
241 qlpkilagmv kpllfhkk
【０１６４】
プロゲステロン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号１３のアミノ酸１４〜アミノ酸２６１である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号１３のアミノ酸１４〜アミノ酸２６１に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１６５】
配列番号１３（ヒト）
1   ftfspgqdiq lipplinllm siepdviyag hdntkpdtss slltslnqlg erqllsvvkw
61  skslpgfrnl hiddqitliq yswmslmvfg lgwrsykhvs gqmlyfapdl ilneqrmkes
121 sfyslcltmw qipqefvklq vsqeeflcmk vllllntipl eglrsqtqfe emrssyirel
181 ikaiglrqkg vvsssqrfyq ltklldnlhd lvkqlhlycl ntfiqsrals vefpemmsev
241 iaaqlpkila gmvkpllfhk k
【０１６６】
プロゲステロン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号９１のアミノ酸６７９〜アミノ酸９２６である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号９１のアミノ酸６７９〜アミノ酸９２６に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１６７】
配列番号９１（マウス）
1 mtelqakdpq vlhtsgasps pphigsplla rldsgpfqgs qhsdvssvvs pipisldgll
61 fprscrgpel pdgktgdqqs lsdvegafsg veathreggr nsrapekdsr lldsvldsll
121 tpsgteqsha sppaceaits wclfgpelpe dprsvpatkg llsplmsrpe ikagdssgtg
181 agqkvlpkgl spprqlllpt sgsahwpgag vkpspqpaag eveedsglet egsaapllks
241 kpralegtgs gggvaanaas aapggvtlvp kedsrfsapr vsleqdspia pgrsplattv
301 vdfihvpilp lnhallaart rqllegdsyd ggataqgpfa pprgspsaps ppvpcgdfpd
361 ctyplegdpk edvfplygdf qtpglkikee eegadaavrs prpylsagas sstfpdfpla
421 papqrapssr pgeaavaggp ssaavspass sgsalecily kaegapptqg sfaplpckpp
481 aagscllprd slpaapataa apaiyqplgl nglpqlgyqa avlkdslpqv yppylnylrp
541 dseasqspqy gfdslpqkic licgdeasgc hygvltcgsc kvffkrameg qhnylcagrn
601 dcivdkirrk ncpacrlrkc cqagmvlggr kfkkfnkvrv mrtldgvalp qsvglpnesq
661 algqritfsp nqeiqlvppl inllmsiepd vvyaghdntk pdtsssllts lnqlgerqll
721 svvkwskslp gfrnlhiddq itliqyswms lmvfglgwrs ykhvsgqmly fapdlilneq
781 rmkelsfysl cltmwqipqe fvklqvthee flcmkvllll ntipleglrs qsqfeemrss
841 yirelikaig lrqkgvvpss qrfyqltkll dslhdlvkql hlyclntfiq srtlavefpe
901 mmseviaaql pkilagmvkp llfhkk
【０１６８】
プロゲステロン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号９２のアミノ酸６７６〜アミノ酸９２３である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号９２のアミノ酸６７６〜アミノ酸９２３に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１６９】
配列番号９２（ラット）
1 mtelqakdpr tlhtsgaaps pthvgsplla rldpdpfqgs qhsdassvvs pipisldrll
61 fsrscqaqel pdektqnqqs lsdvegafsg veasrrrsrn prapekdsrl ldsvldtlla
121 psgpeqsqts ppaceaitsw clfgpelped prsvpatkgl lsplmsrpes kagdssgtga
181 gqkvlpkavs pprqlllpts gsahwpgagv kpsqqpatve veedgglete gsagpllksk
241 pralegmcsg ggvtanapga apggvtlvpk edsrfsaprv sleqdapvap grsplattvv
301 dfihvpilpl nhallaartr qllegdsydg gaaaqvpfap prgspsapsp pvpcgdfpdc
361 typpegdpke dgfpvygefq ppglkikeee egteaasrsp rpyllagasa atfpdfplpp
421 rpprappsrp geaavaapsa avspvsssgs alecilykae gapptqgsfa plpckppaas
481 scllprdslp aaptssaapa iypplglngl pqlgyqaavl kdslpqvypp ylnylrpdse
541 asqspqygfd slpqkiclic gdeasgchyg vltcgsckvf fkramegqhn ylcagrndci
601 vdkirrkncp acrlrkccqa gmvlggrkfk kfnkvrvmra ldgvalpqsv afpnesqtlg
661 qritfspnqe iqlvpplinl lmsiepdvvy aghdntkpdt ssslltslnq lgerqllsvv
721 kwskslpgfr nlhiddqitl iqyswmslmv fglgwrsykh vsgqmlyfap dlilneqrmk
781 elsfyslclt mwqipqefvk lqvtheeflc mkvllllnti pleglrsqsq feemrssyir
841 elikaiglrq kgvvpssqrf yqltklldsl hdlvkqlhly clntfiqsra lavefpemms
901 eviaaqlpki lagmvkpllf hkk
【０１７０】
プロゲステロン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号９３のアミノ酸６８６〜アミノ酸９３３である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号９３のアミノ酸６８６〜アミノ酸９３３に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１７１】
配列番号９３（ヒヒ）
1 mtelkakgpr aphvaggpps pevgspllcr paagpfqgsq tsdtlpevsa ipisldgllf
61 prpcqgqdpl dektqdqqsl sdvegaysra eatrgtggss srppekdsgl lhsvldtlla
121 psgpgqsqps ppacevtssw clfgpelped ppaapatqgv lsplmsrsgc kagdssgtaa
181 ahkvlprgls psrqlllpas gsphwsgapv kpspqpaave veeedgsese esagpllkgk
241 pralggaaag ggaaavppga aaggvalvpk edsrfsaprv alveqdapma pgrsplattt
301 mdfthvpilp lshallaart rqlleeesyd ggagaasafa pprsspsass tpvavgdfpd
361 cayppdadpk ddayplygdf qppalkikee eegaevsars prsylvagan paafpdfplg
421 pppplpprap psrpgeaavt aapagasvss asssgstlec ilykaegapp qqgpfapppc
481 kapgaggcll prdglpstsa saaaagaapa lypalglngl pqlgyqaavl keglqqvypp
541 ylnylrpdse asqspqysfe slpqkiclic gdeasgchyg vltcgsckvf fkramegqhn
601 ylcagrndci vdkirrkncp acrlrkccqa gmvlggrkfk kfnkvrvmra ldavalpqpv
661 gipnesqals qrftfppgqd iqlipplinl lvsiepdviy aghdnskpdt ssslltslnq
721 lgerqllsvv kwskllpgfr nlhiddqitl iqyswmslmv fglgwrsykh vsgqmlyfap
781 dlilneqrmk essfyslclt mwqipqefvk lqvsqeeflc mkvllllnti pleglrsqtq
841 feemrssyir elikaiglrq kgvvsssqrf yqltklldnl hdlvkqlhly clntfiqsra
901 lsvefpemms eviaaqlpki lagmvkpllf hkk
【０１７２】
幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、アンドロゲン受容体リガンド結合ドメイン、又はそのフラグメントである、又はそれを含む。ヒトアンドロゲン受容体リガンド結合ドメインの非限定的な例は、配列番号１４のアミノ酸２〜アミノ酸２４７である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号１４のアミノ酸２〜アミノ酸２４７に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１７３】
配列番号１４（ヒト）
1   piflnvleai epgvvcaghd nnqpdsfaal lsslnelger qlvhvvkwak alpgfrnlhv
61  ddqmaviqys wmglmvfamg wrsftnvnsr mlyfapdlvf neyrmhksrm ysqcvrmrhl
121 sqefgwlqit pqeflcmkal llfsiipvdg lknqkffdel rmnyikeldr iiackrknpt
181 scsrrfyqlt klldsvqpia relhqftfdl likshmvsvd fpemmaeiis vqvpkilsgk
241 vkpiyfhtq
【０１７４】
アンドロゲン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号１５のアミノ酸３４〜アミノ酸２７９である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号１５のアミノ酸３４〜アミノ酸２７９に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１７５】
配列番号１５（ヒト）
1   sleegeasst tspteettqk ltvshiegye cqpiflnvle aiepgvvcag hdnnqpdsfa
61  allsslnelg erqlvhvvkw akalpgfrnl hvddqmaviq yswmglmvfa mgwrsftnvn
121 srmlyfapdl vfneyrmhks rmysqcvrmr hlsqefgwlq itpqeflcmk alllfsiipv
181 dglknqkffd elrmnyikel driiackrkn ptscsrrfyq ltklldsvqp iarelhqftf
241 dllikshmvs vdfpemmaei isvqvpkils gkvkpiyfht qeg
【０１７６】
アンドロゲン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号１６のアミノ酸１９〜アミノ酸２６４である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号１６のアミノ酸１９〜アミノ酸２６４に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１７７】
配列番号１６（ヒト）
1   ettqkltvsh iegyecqpif lnvleaiepg vvcaghdnnq pdsfaallss lnelgerqlv
61  hvvkwakalp gfrnlhvddq maviqyswmg lmvfamgwrs ftnvnsrmly fapdlvfney
121 rmhksrmysq cvrmrhlsqe fgwlqitpqe flcmkalllf siipvdglkn qkffdelrmn
181 yikeldriia ckrknptscs rrfyqltkll dsvqpiarel hqftfdllik shmvsvdfpe
241 mmaeiisvqv pkilsgkvkp iyfhtq
【０１７８】
アンドロゲン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号９４のアミノ酸６５２〜アミノ酸８９７である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号９４のアミノ酸６５２〜アミノ酸８９７に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１７９】
配列番号９４（マウス）
1 mevqlglgrv yprppsktyr gafqnlfqsv reaiqnpgpr hpeaaniapp gaclqqrqet
61 sprrrrrqqh tedgspqahi rgptgylale eeqqpsqqqa aseghpessc lpepgaatap
121 gkglpqqppa ppdqddsaap stlsllgptf pglsscsadi kdilneagtm qllqqqqqqq
181 qhqqqhqqhq qqqevisegs sarareatga pssskdsylg gnstisdsak elckavsvsm
241 glgvealehl spgeqlrgdc myasllggpp avrptpcapl peckglplde gpgksteeta
301 eyssfkggya kglegeslgc sgsseagssg tleipsslsl yksgaldeaa ayqnrdyynf
361 plalsgpphp pppthphari klenpldygs awaaaaaqcr ygdlgslhgg svagpstgsp
421 pattssswht lftaeegqly gpgggggsss psdagpvapy gytrppqglt sqesdysase
481 vwypggvvnr vpypspncvk semgpwmeny sgpygdmrld strdhvlpid yyfppqktcl
541 icgdeasgch ygaltcgsck vffkraaegk qkylcasrnd ctidkfrrkn cpscrlrkcy
601 eagmtlgark lkklgnlklq eegensnags ptedpsqkmt vshiegyecq piflnvleai
661 epgvvcaghd nnqpdsfaal lsslnelger qlvhvvkwak alpgfrnlhv ddqmaviqys
721 wmglmvfamg wrsftnvnsr mlyfapdlvf neyrmhksrm ysqcvrmrhl sqefgwlqit
781 pqeflcmkal llfsiipvdg lknqkffdel rmnyikeldr iiackrknpt scsrrfyqlt
841 klldsvqpia relhqftfdl likshmvsvd fpemmaeiis vqvpkilsgk vkpiyfhtq
【０１８０】
アンドロゲン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号９５のアミノ酸６５５〜アミノ酸９００である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号９５のアミノ酸６５５〜アミノ酸９００に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１８１】
配列番号９５（ラット）
1 mevqlglgrv yprppsktyr gafqnlfqsv reaiqnpgpr hpeaasiapp gaclqqrqet
61 sprrrrrqqh pedgspqahi rgttgylale eeqqpsqqqs aseghpesgc lpepgaatap
121 gkglpqqppa ppdqddsaap stlsllgptf pglsscsadi kdilseagtm qllqqqqqqq
181 qqqqqqqqqq qqqqqevise gsssvrarea tgapssskds ylggnstisd sakelckavs
241 vsmglgveal ehlspgeqlr gdcmyasllg gppavrptpc aplaeckgls ldegpgkgte
301 etaeyssfkg gyakgleges lgcsgsseag ssgtleipss lslyksgavd eaaayqnrdy
361 ynfplalsgp phppppthph ariklenpsd ygsawaaaaa qcrygdlasl hggsvagpst
421 gsppatasss whtlftaeeg qlygpggggg ssspsdagpv apygytrppq glasqegdfs
481 asevwypggv vnrvpypsps cvksemgpwm enysgpygdm rldstrdhvl pidyyfppqk
541 tclicgdeas gchygaltcg sckvffkraa egkqkylcas rndctidkfr rkncpscrlr
601 kcyeagmtlg arklkklgnl klqeegenss agsptedpsq kmtvshiegy ecqpiflnvl
661 eaiepgvvca ghdnnqpdsf aallsslnel gerqlvhvvk wakalpgfrn lhvddqmavi
721 qyswmglmvf amgwrsftnv nsrmlyfapd lvfneyrmhk srmysqcvrm rhlsqefgwl
781 qitpqeflcm kalllfsiip vdglknqkff delrmnyike ldriiackrk nptscsrrfy
841 qltklldsvq piarelhqft fdllikshmv svdfpemmae iisvqvpkil sgkvkpiyfh
901 tq
【０１８２】
アンドロゲン受容体リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号９６のアミノ酸６４８〜アミノ酸８９３である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号９６のアミノ酸６４８〜アミノ酸８９３に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１８３】
配列番号９６（ヒヒ）
1 mevqlglgrv yprppsktyr gafqnlfqsv reviqnpgpr hpeaasaapp gaslqqqqqq
61 qqqetsprqq qqqqgedgsp qahrrgptgy lvldeeqqps qpqsapechp ergcvpepga
121 avaagkglpq qlpappdedd saapstlsll gptfpglssc sadlkdilse astmqllqqq
181 qqeavsegss sgrareasga ptsskdnylg gtstisdsak elckavsvsm glgvealehl
241 spgeqlrgdc myapvlgvpp avrptpcapl aeckgslldd sagkstedta eyspfkggyt
301 kglegeslgc sgsaaagssg tlelpstlsl yksgaldeaa ayqsrdyynf plalagpppp
361 pppphphari klenpldygs awaaaaaqcr ygelaslhga gaagpgsgsp saaassswht
421 lftaeegqly gpcggggggg ggggggagea gavapygytr ppqglagqeg dftapdvwyp
481 ggmvsrvpyp sptcvksemg pwmdsysgpy gdmrletard hvlpidyyfp pqktclicgd
541 easgchygal tcgsckvffk raaegkqkyl casrndctid kfrrkncpsc rlrkcyeagm
601 tlgarklkkl gnlklqeege assttsptee taqkltvshi egyecqpifl nvleaiepgv
661 vcaghdnnqp dsfaallssl nelgerqlvh vvkwakalpg frnlhvddqm aviqyswmgl
721 mvfamgwrsf tnvnsrmlyf apdlvfneyr mhksrmysqc vrmrhlsqef gwlqitpqef
781 lcmkalllfs iipvdglknq kffdelrmny ikeldriiac krknptscsr rfyqltklld
841 svqpiarelh qftfdlliks hmvsvdfpem maeiisvqvp kilsgkvkpi yfhtq
【０１８４】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号２８である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号２８のアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１８５】
配列番号２８（ヒト）
1   drrggrmlkh krqrddgegr gevgsagdmr aanlwpsplm ikrskknsla lsltadqmvs
61  alldaeppil yseydptrpf seasmmgllt nladrelvhm inwakrvpgf vdltlhdqvh
121 llecawleil miglvwrsme hpgkllfapn llldrnqgkc vegmveifdm llatssrfrm
181 mnlqgeefvc lksiillnsg vytflsstlk sleekdhihr vldkitdtli hlmakagltl
241 qqqhqrlaql llilshirhm snkrmehlys mkcknvvplf dlllemldah rlhapts
【０１８６】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、配列番号２９である。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号２９のアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１８７】
配列番号２９（ヒト）
1   gqdiqlippl inllmsiepd viyaghdntk pdtsssllts lnqlgerqll svvkwskslp
61  gfrnlhiddq itliqyswms lmvfglgwrs ykhvsgqmly fapdlilneq rmkessfysl
121 cltmwqipqe fvklqvsqee flcmkvllll ntipleglrs qtqfeemrss yirelikaig
181 lrqkgvvsss qrfyqltkll dnlhdlvkql hlyclntfiq sralsvefpe mmseviaaql
241 pkilagmvkp llfhkk
【０１８８】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、エクジソン受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、エクジソン受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号７４のアミノ酸２５６〜アミノ酸４６７であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号７４のアミノ酸２５６〜アミノ酸４６７に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１８９】
配列番号７４（ヒト）
1 merdepppsg ggggggsagf leppaalppp prngfcqdel aeldpgtisv sddraeqrtc
61 licgdratgl hygiiscegc kgffkrsicn krvyrcsrdk ncvmsrkqrn rcqycrllkc
121 lqmgmnrkai redgmpggrn ksigpvqise eeierimsgq efeeeanhws nhgdsdhssp
181 gnrasesnqp spgstlsssr svelngfmaf reqymgmsvp phyqyiphlf sysghspllp
241 qqarsldpqs yslihqllsa edleplgtpm liedgyavtq aelfallcrl adellfrqia
301 wikklpffce lsikdytcll sstwqelill ssltvyskqi fgeladvtak yspsdeelhr
361 fsdegmevie rliylyhkfh qlkvsneeya cmkainflnq dirgltsasq leqlnkrywy
421 icqdfteyky thqpnrfpdl mmclpeiryi agkmvnvple qlpllfkvvl hscktsvgke
【０１９０】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、ＰＰＡＲγ受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、ＰＰＡＲγ受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号７５のアミノ酸２３７〜アミノ酸５０４であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号７５のアミノ酸２３７〜アミノ酸５０４に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１９１】
配列番号７５（ヒト）
1 mgetlgdspi dpesdsftdt lsanisqemt mvdtempfwp tnfgissvdl svmedhshsf
61 dikpfttvdf ssistphyed ipftrtdpvv adykydlklq eyqsaikvep asppyysekt
121 qlynkpheep snslmaiecr vcgdkasgfh ygvhacegck gffrrtirlk liydrcdlnc
181 rihkksrnkc qycrfqkcla vgmshnairf grmpqaekek llaeissdid qlnpesadlr
241 alakhlydsy iksfpltkak arailtgktt dkspfviydm nslmmgedki kfkhitplqe
301 qskevairif qgcqfrsvea vqeiteyaks ipgfvnldln dqvtllkygv heiiytmlas
361 lmnkdgvlis egqgfmtref lkslrkpfgd fmepkfefav kfnaleldds dlaifiavii
421 lsgdrpglln vkpiediqdn llqalelqlk lnhpessqlf akllqkmtdl rqivtehvql
481 lqvikktetd mslhpllqei ykdly
【０１９２】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、グルココルチコイド受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、グルココルチコイド受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号７６のアミノ酸５３１〜アミノ酸７７７であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号７６のアミノ酸５３１〜アミノ酸７７７に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１９３】
配列番号７６（ヒト）
1 mdskesltpg reenpssvla qergdvmdfy ktlrggatvk vsasspslav asqsdskqrr
61 llvdfpkgsv snaqqpdlsk avslsmglym getetkvmgn dlgfpqqgqi slssgetdlk
121 lleesianln rstsvpenpk ssastavsaa ptekefpkth sdvsseqqhl kgqtgtnggn
181 vklyttdqst fdilqdlefs sgspgketne spwrsdllid encllsplag eddsfllegn
241 snedckplil pdtkpkikdn gdlvlsspsn vtlpqvktek edfielctpg vikqeklgtv
301 ycqasfpgan iignkmsais vhgvstsggq myhydmntas lsqqqdqkpi fnvippipvg
361 senwnrcqgs gddnltslgt lnfpgrtvfs ngysspsmrp dvssppssss tattgpppkl
421 clvcsdeasg chygvltcgs ckvffkrave gqhnylcagr ndciidkirr kncpacryrk
481 clqagmnlea rktkkkikgi qqattgvsqe tsenpgnkti vpatlpqltp tlvsllevie
541 pevlyagyds svpdstwrim ttlnmlggrq viaavkwaka ipgfrnlhld dqmtllqysw
601 mflmafalgw rsyrqssanl lcfapdliin eqrmtlpcmy dqckhmlyvs selhrlqvsy
661 eeylcmktll llssvpkdgl ksqelfdeir mtyikelgka ivkregnssq nwqrfyqltk
721 lldsmhevve nllnycfqtf ldktmsiefp emlaeiitnq ipkysngnik kllfhqk
【０１９４】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、甲状腺ホルモン受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、グルココルチコイド受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号７７のアミノ酸１６２〜アミノ酸３７０であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号７７のアミノ酸１６２〜アミノ酸３７０に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１９５】
配列番号７７（ヒト）
1 meqkpskvec gsdpeensar spdgkrkrkn gqcslktsms gyipsyldkd eqcvvcgdka
61 tgyhyrcitc egckgffrrt iqknlhptys ckydsccvid kitrnqcqlc rfkkciavgm
121 amdlvlddsk rvakrklieq nrerrrkeem irslqqrpep tpeewdlihi ateahrstna
181 qgshwkqrrk flpddigqsp ivsmpdgdkv dleafseftk iitpaitrvv dfakklpmfs
241 elpcedqiil lkgccmeims lraavrydpe sdtltlsgem avkreqlkng glgvvsdaif
301 elgkslsafn lddtevallq avllmstdrs gllcvdkiek sqeayllafe hyvnhrkhni
361 phfwpkllmk erevqssily kgaaaegrpg gslgvhpegq qllgmhvvqg pqvrqleqql
421 geagslqgpv lqhqspkspq qrllellhrs gilharavcg eddsseadsp ssseeepevc
481 edlagnaasp
【０１９６】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、ミネラルコルチコイド受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、ミネラルコルチコイド受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号７８のアミノ酸７３７〜アミノ酸９８４であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号７８のアミノ酸７３７〜アミノ酸９８４に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１９７】
配列番号７８（ヒト）
1 metkgyhslp egldmerrwg qvsqaverss lgptertden nymeivnvsc vsgaipnnst
61 qgsskekqel lpclqqdnnr pgiltsdikt eleskelsat vaesmglymd svrdadysye
121 qqnqqgsmsp akiyqnveql vkfykgnghr pstlscvntp lrsfmsdsgs svnggvmrai
181 vkspimchek spsvcsplnm tssvcspagi nsvssttasf gsfpvhspit qgtpltcspn
241 aenrgsrshs pahasnvgsp lssplssmks sissppshcs vkspvsspnn vtlrssvssp
301 aninnsrcsv sspsntnnrs tlsspaastv gsicspvnna fsytasgtsa gsstlrdvvp
361 spdtqekgaq evpfpkteev esaisngvtg qlnivqyikp epdgafsssc lggnskinsd
421 ssfsvpikqe stkhscsgts fkgnptvnpf pfmdgsyfsf mddkdyysls gilgppvpgf
481 dgncegsgfp vgikqepddg syypeasips saivgvnsgg qsfhyrigaq gtislsrsar
541 dqsfqhlssf ppvntlvesw kshgdlssrr sdgypvleyi penvssstlr svstgssrps
601 kiclvcgdea sgchygvvtc gsckvffkra vegqhnylca grndciidki rrkncpacrl
661 qkclqagmnl garkskklgk lkgiheeqpq qqqppppppp pqspeegtty iapakepsvn
721 talvpqlsti sraltpspvm vleniepeiv yagydsskpd taenllstln rlagkqmiqv
781 vkwakvlpgf knlpledqit liqyswmcls sfalswrsyk htnsqflyfa pdlvfneekm
841 hqsamyelcq gmhqislqfv rlqltfeeyt imkvllllst ipkdglksqa afeemrtnyi
901 kelrkmvtkc pnnsgqswqr fyqltkllds mhdlvsdlle fcfytfresh alkvefpaml
961 veiisdqlpk vesgnakply fhrk
【０１９８】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、ビタミンＤ受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、ビタミンＤ受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号７９のアミノ酸１２４〜アミノ酸４２６であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号７９のアミノ酸１２４〜アミノ酸４２６に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０１９９】
配列番号７９（ヒト）
1 meamaastsl pdpgdfdrnv pricgvcgdr atgfhfnamt cegckgffrr smkrkalftc
61 pfngdcritk dnrrhcqacr lkrcvdigmm kefiltdeev qrkremilkr keeealkdsl
121 rpklseeqqr iiailldahh ktydptysdf cqfrppvrvn dgggshpsrp nsrhtpsfsg
181 dsssscsdhc itssdmmdss sfsnldlsee dsddpsvtle lsqlsmlphl adlvsysiqk
241 vigfakmipg frdltsedqi vllkssaiev imlrsnesft mddmswtcgn qdykyrvsdv
301 tkaghsleli eplikfqvgl kklnlheeeh vllmaicivs pdrpgvqdaa lieaiqdrls
361 ntlqtyircr hpppgshlly akmiqkladl rslneehskq yrclsfqpec smkltplvle
421 vfgneis
【０２００】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、ＰＰＡＲα受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、ＰＰＡＲα受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号８０のアミノ酸２０１〜アミノ酸４６７であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号８０のアミノ酸２０１〜アミノ酸４６７に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０２０１】
配列番号８０（ヒト）
1 mvdtesplcp lspleagdle splseeflqe mgniqeisqs igedssgsfg fteyqylgsc
61 pgsdgsvitd tlspasspss vtypvvpgsv despsgalni ecricgdkas gyhygvhace
121 gckgffrrti rlklvydkcd rsckiqkknr nkcqycrfhk clsvgmshna irfgrmprse
181 kaklkaeilt cehdiedset adlkslakri yeaylknfnm nkvkarvils gkasnnppfv
241 ihdmetlcma ektlvaklva ngiqnkeaev rifhccqcts vetvteltef akaipgfanl
301 dlndqvtllk ygvyeaifam lssvmnkdgm lvaygngfit reflkslrkp fcdimepkfd
361 famkfnalel ddsdislfva aiiccgdrpg llnvghiekm qegivhvlrl hlqsnhpddi
421 flfpkllqkm adlrqlvteh aqlvqiikkt esdaalhpll qeiyrdmy
【０２０２】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、ＰＰＡＲβ／δ受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、ＰＰＡＲβ／δ受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号８１のアミノ酸１７３〜アミノ酸４４０であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号８１のアミノ酸１７３〜アミノ酸４４０に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０２０３】
配列番号８１（ヒト）
1 meqpqeeape vreeeekeev aeaegapeln ggpqhalpss sytdlsrsss ppslldqlqm
61 gcdgascgsl nmecrvcgdk asgfhygvha cegckgffrr tirmkleyek cersckiqkk
121 nrnkcqycrf qkclalgmsh nairfgrmpe aekrklvagl tanegsqynp qvadlkafsk
181 hiynaylknf nmtkkkarsi ltgkashtap fvihdietlw qaekglvwkq lvnglppyke
241 isvhvfyrcq cttvetvrel tefaksipsf sslflndqvt llkygvheai famlasivnk
301 dgllvangsg fvtreflrsl rkpfsdiiep kfefavkfna lelddsdlal fiaaiilcgd
361 rpglmnvprv eaiqdtilra lefhlqanhp daqylfpkll qkmadlrqlv tehaqmmqri
421 kktetetslh pllqeiykdm y
【０２０４】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、プレグナンＸ受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、プレグナンＸ受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号８２のアミノ酸１４３〜アミノ酸４２８であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号８２のアミノ酸１４３〜アミノ酸４２８に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０２０５】
配列番号８２（ヒト）
1 mevrpkeswn hadfvhcedt esvpgkpsvn adeevggpqi crvcgdkatg yhfnvmtceg
61 ckgffrramk rnarlrcpfr kgaceitrkt rrqcqacrlr kclesgmkke mimsdeavee
121 rralikrkks ertgtqplgv qglteeqrmm irelmdaqmk tfdttfshfk nfrlpgvlss
181 gcelpeslqa psreeaakws qvrkdlcslk vslqlrgedg svwnykppad sggkeifsll
241 phmadmstym fkgiisfakv isyfrdlpie dqisllkgaa felcqlrfnt vfnaetgtwe
301 cgrlsycled taggfqqlll epmlkfhyml kklqlheeey vlmqaislfs pdrpgvlqhr
361 vvdqlqeqfa itlksyiecn rpqpahrflf lkimamltel rsinaqhtqr llriqdihpf
421 atplmqelfg itgs
【０２０６】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、肝臓Ｘ受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、肝臓Ｘ受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号８３のアミノ酸２０〜アミノ酸２５５であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号８３のアミノ酸２０〜アミノ酸２５５に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０２０７】
配列番号８３（ヒト）
1 gshmsqgsge gegvqltaaq elmiqqlvaa qlqcnkrsfs dqpkvtpwpl gadpqsrdar
61 qqrfahftel aiisvqeivd fakqvpgflq lgredqiall kastieimll etarrynhet
121 ecitflkdft yskddfhrag lqvefinpif efsramrrlg lddaeyalli ainifsadrp
181 nvqepgrvea lqqpyveall sytrikrpqd qlrfprmlmk lvslrtlssv hseqvfalrl
241 qdkklpplls eiwdvhe
【０２０８】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、ファルネソイドＸ受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、ファルネソイドＸ受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号８４のアミノ酸２４７〜アミノ酸４６７であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号８４のアミノ酸２４７〜アミノ酸４６７に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０２０９】
配列番号８４（ヒト）
1 mgskmnlieh shlpttdefs fsenlfgvlt eqvagplgqn levepysqys nvqfpqvqpq
61 issssyysnl gfypqqpeew yspgiyelrr mpaetlyqge tevaempvtk kprmgasagr
121 ikgdelcvvc gdrasgyhyn altcegckgf frrsitknav ykcknggncv mdmymrrkcq
181 ecrlrkckem gmlaecllte iqckskrlrk nvkqhadqtv nedsegrdlr qvtsttkscr
241 ekteltpdqq tllhfimdsy nkqrmpqeit nkilkeefsa eenfliltem atnhvqvlve
301 ftkklpgfqt ldhedqiall kgsaveamfl rsaeifnkkl psghsdllee rirnsgisde
361 yitpmfsfyk sigelkmtqe eyalltaivi lspdrqyikd reaveklqep lldvlqklck
421 ihqpenpqhf acllgrltel rtfnhhhaem lmswrvndhk ftpllceiwd vq
【０２１０】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、ＲＡＲ関連オーファン受容体Ａのリガンド結合ドメインである。例えば、ＲＡＲ関連オーファン受容体Ａのリガンド結合ドメインは、配列番号８５のアミノ酸２１７〜アミノ酸４５６であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号８５のアミノ酸２１７〜アミノ酸４５６に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０２１１】
配列番号８５（ヒト）
1 mmyfviaamk aqieiipcki cgdkssgihy gvitcegckg ffrrsqqsna tyscprqknc
61 lidrtsrnrc qhcrlqkcla vgmsrdavkf grmskkqrds lyaevqkhrm qqqqrdhqqq
121 pgeaepltpt ynisanglte lhddlsnyid ghtpegskad savssfyldi qpspdqsgld
181 ingikpepic dytpasgffp ycsftngets ptvsmaeleh laqniskshl etcqylreel
241 qqitwqtflq eeienyqnkq revmwqlcai kiteaiqyvv efakridgfm elcqndqivl
301 lkagslevvf irmcrafdsq nntvyfdgky aspdvfkslg cedfisfvfe fgkslcsmhl
361 tedeialfsa fvlmsadrsw lqekvkiekl qqkiqlalqh vlqknhredg iltklickvs
421 tlralcgrht eklmafkaiy pdivrlhfpp lykelftsef epamqidg
【０２１２】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、ＲＡＲ関連オーファン受容体Ｃのリガンド結合ドメインである。例えば、ＲＡＲ関連オーファン受容体Ｃのリガンド結合ドメインは、配列番号８６のアミノ酸２６８〜アミノ酸５０６であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号８６のアミノ酸２６８〜アミノ酸５０６に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０２１３】
配列番号８６（ヒト）
1 mdrapqrqhr asrellaakk thtsqievip ckicgdkssg ihygvitceg ckgffrrsqr
61 cnaaysctrq qncpidrtsr nrcqhcrlqk clalgmsrda vkfgrmskkq rdslhaevqk
121 qlqqrqqqqq epvvktppag aqgadtltyt lglpdgqlpl gsspdlpeas acppgllkas
181 gsgpsysnnl akaglngasc hleyspergk aegresfyst gsqltpdrcg lrfeehrhpg
241 lgelgqgpds ygspsfrstp eapyasltei ehlvqsvcks yretcqlrle dllrqrsnif
301 sreevtgyqr ksmwemwerc ahhlteaiqy vvefakrlsg fmelcqndqi vllkagamev
361 vlvrmcrayn adnrtvffeg kyggmelfra lgcselissi fdfshslsal hfsedeialy
421 talvlinahr pglqekrkve qlqynlelaf hhhlckthrq silaklppkg klrslcsqhv
481 erlqifqhlh pivvqaafpp lykelfstet espvglsk
【０２１４】
リガンド結合ドメインの別の非限定的な例は、レチノイン酸受容体のリガンド結合ドメインである。例えば、レチノイン酸受容体のリガンド結合ドメインは、配列番号８７のアミノ酸１５６〜アミノ酸３８５であってもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン受容体リガンド結合ドメインは、配列番号８７のアミノ酸１５６〜アミノ酸３８５に対して、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％同一の配列である、又は該配列を含む。
【０２１５】
配列番号８７（ヒト）
1 mlgglsppga lttlqhqlpv sgystpspat ietqssssee ivpsppsppp lpriykpcfv
61 cqdkssgyhy gvsacegvkg ffrrsiqknm vytvhrdknc iinkvtrnrc qycrlqkcfe
121 vgmskesvrn drnkkkkevp kpecsesytv tpevgeliek vrkahqetfp alcqlgkytt
181 nnsseqrvsl didlwdkfse lstkciiktv efakqlpgft tltiadqitl lkaacldili
241 lrictrytpe qdtmtfsdgl tlnrtqmhna gfgpltdlvf afanqllple mddaetglls
301 aiclicgdrq dleqpdrvdm lqepllealk vyvrkrrpsr hmfpkmlmki tdlrsisakg
361 aervitlkme ipgsmppliq emlensegld tlsgqpgggg rdggglappp gscspslsps
421 snrsspaths p
【０２１６】
当該技術分野で十分理解され得るように、ホルモン受容体リガンド結合ドメインの異なる哺乳動物ホモログ間で保存されていないアミノ酸は、リガンド結合ドメインのホルモン又はホルモン類縁体の結合活性に重要な役割を果たさない可能性が高いのに対して、ホルモン受容体リガンド結合ドメインの異なる哺乳動物ホモログ間で保存されているそれらのアミノ酸は、リガンド結合ドメインのホルモン又はホルモン類縁体の結合活性に重要な役割を果たす可能性が高い。幾つかのリガンド結合ドメインは、ホルモン受容体リガンド結合ドメインの異なる哺乳動物ホモログ間で保存されていないアミノ酸の１つ以上（例えば２個、３個、４個、５個、又は６個）のアミノ酸置換を含んでもよい。
【０２１７】
抗原結合ドメイン
単鎖キメラ抗原受容体又は多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、ＶＨＨドメイン、ＶＮＡＲドメイン、（ｓｃＦｖ）２、及びＢｉＴＥから選択され得る。単鎖キメラ抗原受容体又は多重鎖キメラ抗原受容体において使用され得る抗原結合ドメインの更なる例が当該技術分野で知られている。
【０２１８】
単鎖Ｆｖ又はｓｃＦｖフラグメントは、単一のポリペプチド鎖にＶＨドメイン及びＶＬドメインを含む。ＶＨ及びＶＬは、一般的には、ペプチドリンカーによって連結されている。その他の例では、リンカーは単一のアミノ酸であってもよい。幾つかの例では、リンカーは化学結合であってもよい。例えば、Pluckthun, Antibodies from E. coli. In Rosenberg M. & Moore G.P. (Eds.), The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, Vol. 113, pp. 269-315, Spinger-Verlag, New York, 1994を参照されたい。ｓｃＦｖにおいて使用され得る例示的なＶＬ及びＶＨの配列は、実施例において配列番号１０４及び配列番号１０８で示される。ｓｃＦｖ中のＶＬドメインとＶＨドメインとの間で使用され得る例示的なリンカーは、本明細書に記載される例示的なリンカーのいずれか（例えば、配列番号１０６の配列を有するリンカー）であってもよい。
【０２１９】
Ｓｃ−Ｆｖ−Ｆｃフラグメントは、Ｆｃドメインに付着されたｓｃＦｖを含む。例えば、Ｆｃドメインは、例えば、ｓｃＦｖのＣ末端に付着され得る。Ｆｃドメインは、ｓｃＦｖ中の可変ドメインの配向に応じて、ＶＬ又はＶＨに続いてもよい。Ｆｃドメインは、当該技術分野で知られている任意のＦｃドメインであってもよい。幾つかの例では、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４のＦｃドメイン（例えばヒトのＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４のＦｃドメイン）である。
【０２２０】
ＢｉＴＥは、単一のポリペプチド中に、共に２つのｓｃＦｖを形成する、２つのＶＬ及び２つのＶＨを含む抗原結合ドメインであり、これらのｓｃＦｖはそれぞれ、同じ抗原上の異なるエピトープに結合することができるか、又はそれぞれが異なる抗原に結合することができる。例えば、Baeuerle et al., Curr. Opin. Mol. Ther. 11:22-30, 2009、Wolf et al., Drug Discovery Today 10:1237-1244, 2005、及びHuehls et al., Immunol. Cell Biol. 93:290-296, 2015を参照されたい。
【０２２１】
ＶＨＨドメインはラクダで発見された単一の単量体可変抗体ドメインであり、ＶＮＡＲドメインは軟骨魚類で発見された単一の単量体可変抗体ドメインである。ＶＨＨドメイン及びＶＮＡＲドメインは、例えば、Van Audenhove et al., EBioMedicine 8:40-48, 2016、Krah et al., Immunopharmacol. Immunotoxicol. 38:21-28, 2016、Cromie et al., Curr. Top. Med. Chem. 15:2543-2557, 2016、Kijanka et al., Nanomedicine 10:161-174, 2015、Kovaleva et al., Expert. Opin. Biol. Ther. 14:1527-1539, 2014、De Meyer et al., Trends Biotechnol. 32:263-270, 2014、Mujic-Delic et al., Trends Pharmacol. Sci. 35:247-255, 2014、Muyldermans, Ann. Rev. Biochem. 82:775-797, 2013、Vincke et al., Methods Mol. Biol. 911:15-26, 2012、Rahbarizadeh et al., Immunol. Invest. 40:299-338, 2011、Van Bockstaele et al., Curr. Opin. Investig. Drugs 10:1212-1224, 2009、Wesolowski et al., Med. Microbiol. Immunol. 198:157-174, 2009、De Genst et al., Dev. Comp. Immunol. 30:187-198, 2006、Muyldermans, J. Biotechnol. 74:277-302, 2001、及びMuyldermans et al., Trends Biochem. Sci. 26:230-235, 2001に記載されている。
【０２２２】
多重鎖キメラ抗原受容体の幾つかの実施形態では、多重鎖キメラ抗原受容体を構成する少なくとも２つのポリペプチドが互いに相互作用して抗原結合ドメインを形成することができる。かかる実施形態では、抗原結合ドメインは、抗原結合抗体フラグメント、二重特異性再標的化抗体（ＤＡＲＴ：dual-affinity re-targeting antibody）、Ｆａｂ−ｓｃＦｖ−Ｆｃ、ｔｒｉｏｍａｂ、ｃｒｏｓｓｍａｂ、オルソ−Ｆａｂ  ＩｇＧ、ＩｇＧ−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ２−Ｆｃ、バイナノボディ（bi-nanobody）、タンデン（tanden）抗体、ＤＡＲＴ−Ｆｃ、ｓｃＦｖ−ＨＡＳ−ｓｃＦｖ、ＤＮＬ−Ｆａｂ３、ＤＡＦ（ｔｗｏ−ｉｎ−ｏｎｅ又はｆｏｕｒ−ｉｎ−ｏｎｅ）、ＤｕｔａＭａｂ、ＤＴ−ＩｇＧ、ｋｎｏｂｓ−ｉｎ−ｈｏｌｅｓ共通ＬＣ、ｋｎｏｂｓ−ｉｎ−ｈｏｌｅｓアッセンブリ、Ｆａｂアーム交換抗体（Fab-arm exchange antibody）、ＳＥＥＤｂｏｄｙ、Ｔｒｉｏｍａｂ、ＬＵＺ−Ｙ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ−Ｆｃ、Ｆｃａｂ、ｋλ−ｂｏｄｙ、オルソゴナルＦａｂ、ＤＶＤ−ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｈ）−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−（Ｈ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−（Ｌ）−ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ、Ｈ）−Ｆｃ、ＩｇＧ（Ｈ）−Ｖ、Ｖ（Ｈ）−ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）−Ｖ、Ｖ（Ｌ）−ＩｇＧ、ＫＩＨ  ＩｇＧ−ｓｃＦａｂ、２ｓｃＦｖ−ＩｇＧ、ＩｇＧ−２ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ４−Ｉｇ、Ｚｙｂｏｄｙ、ＤＶＩ−ＩｇＧ、ナノボディ、ナノボディ−ＨＳＡ、ダイアボディ、ＴａｎｄＡｂ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ−ＣＨ３、電荷対抗体（charge pair antibody）、ダイアボディ−ＣＨ３、Ｃｏｖ−Ｘ−Ｂｏｄ、トリプルボディ、ミニ抗体、ＤＶＤ−Ｉｇ、ミニボディ、２−ｉｎ−１−ＩｇＧ  ＴｒｉＢｉミニボディ、ｓｃＦｖ−ＣＨ３  ＫＩＨ、Ｆａｂ−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−ＣＨ−ＣＬ−ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２−ｓｃＦＶ２、ｓｃＦｖ−ＫＩＨ、４価ＨＣＡｂ、ダイアボディ−Ｆｃ、タンデムｓｃＦｖ−Ｆｃ、イントラボディ、ドックアンドロック（dock and lock）二重特異性抗体、ＩｍｍＴＡＣ、ＨＳＡｂｏｄｙ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ−ＨＡＳ、タンデムｓｃＦｖ、ＩｇＧ−ＩｇＧ、及びｓｃＦｖ１−ＰＥＧ−ｓｃＦｖ２の群から選択され得る。
【０２２３】
抗原結合抗体フラグメントの非限定的な例としては、Ｆｖフラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、及びＦａｂ’フラグメントが挙げられる。抗原結合抗体フラグメントの更なる例は、ＩｇＧの抗原結合フラグメント（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４の抗原結合フラグメント）（例えば、ヒト又はヒト化ＩｇＧ、例えばヒト又はヒト化ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４の抗原結合フラグメント）；ＩｇＡの抗原結合フラグメント（例えば、ＩｇＡ１又はＩｇＡ２の抗原結合フラグメント）（例えば、ヒト又はヒト化ＩｇＡ、例えばヒト又はヒト化ＩｇＡ１又はＩｇＡ２の抗原結合フラグメント）；ＩｇＤの抗原結合フラグメント（例えば、ヒト又はヒト化ＩｇＤの抗原結合フラグメント）；ＩｇＥの抗原結合フラグメント（例えば、ヒト又はヒト化ＩｇＥの抗原結合フラグメント）；又はＩｇＭの抗原結合フラグメント（例えば、ヒト又はヒト化ＩｇＭの抗原結合フラグメント）である。
【０２２４】
ＤＶＤ−Ｉｇの例は、例えば、DiGiammarino et al., Methods Mol. Biol. 899:145-156, 2012、Jakob et al., MABs 5:358-363, 2013、並びに米国特許第７，６１２，１８１号、同第８，２５８，２６８号、同第８，５８６，７１４号、同第８，７１６，４５０号、同第８，７２２，８５５号、同第８，７３５，５４６号、及び同第８，８２２，６４５号に記載されている。ＤＡＲＴの例は、例えば、Garber, Nature Reviews Drug Discovery 13:799-801, 2014に記載されている。ｔｒｉｏｍａｂ、共通のＬＣを有するｋｉｈ  ＩｇＧ、ｃｒｏｓｓｍａｂ、オルソＦａｂ  ＩｇＧ、２−ｉｎ−１−ＩｇＧ、ＩｇＧ−ＳｃＦｖ、ｓｃＦｖ２−Ｆｃ、バイナノボディ、タンデン抗体、ＤＡＲＴ−Ｆｃ、ｓｃＦｖ−ＨＡＳ−ｓｃＦｖ、及びＤＮＬ−Ｆａｂ３の例は、例えば、Kontermann et al., Drug Discovery Today 20:838-847, 2015に記載されている。ＤＡＦ（ｔｗｏ−ｉｎ−ｏｎｅ又はｆｏｕｒ−ｉｎ−ｏｎｅ）、ＤｕｔａＭａｂ、ＤＴ−ＩｇＧ、ｋｎｏｂｓ−ｉｎ−ｈｏｌｅｓ共通ＬＣ、ｋｎｏｂｓ−ｉｎ−ｈｏｌｅｓアッセンブリ、電荷対抗体、Ｆａｂアーム交換抗体、ＳＥＥＤｂｏｄｙ、Ｔｒｉｏｍａｂ、ＬＵＺ−Ｙ、Ｆｃａｂ、ｋλ−ｂｏｄｙ、オルソゴナルＦａｂ、ＤＶＤ−ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｈ）−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−（Ｈ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−（Ｌ）−ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ、Ｈ）−Ｆｃ、ＩｇＧ（Ｈ）−Ｖ、Ｖ（Ｈ）−ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）−Ｖ、Ｖ（Ｌ）−ＩｇＧ、ＫＩＨ  ＩｇＧ−ｓｃＦａｂ、２ｓｃＦｖ−ＩｇＧ、ＩｇＧ−２ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ４−Ｉｇ、Ｚｙｂｏｄｙ、ＤＶＩ−ＩｇＧ、ナノボディ、ナノボディ−ＨＳＡ、ダイアボディ、ＴａｎｄＡｂ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ−ＣＨ３、Ｄｉａｂｏｄｙ−ＣＨ３、トリプルボディ、ミニ抗体、ミニボディ、ＴｒｉＢｉミニボディ、ｓｃＦｖ−ＣＨ３  ＫＩＨ、Ｆａｂ−ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−ＣＨ−ＣＬ−ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２−ｓｃＦＶ２、ｓｃＦｖ−ＫＩＨ、Ｆａｂ−ｓｃＦｖ−Ｆｃ、４価ＨＣＡｂ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ−Ｆｃ、ダイアボディ−Ｆｃ、タンデムｓｃＦｖ−Ｆｃ、イントラボディ、ドックアンドロック二重特異性抗体、ＩｍｍＴＡＣ、ＨＳＡｂｏｄｙ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ−ＨＡＳ、タンデムｓｃＦｖ、ＩｇＧ−ＩｇＧ、Ｃｏｖ−Ｘ−Ｂｏｄｙ、及びｓｃＦｖ１−ＰＥＧ−ｓｃＦｖ２の例は、例えばSpiess et al., Mol. Immunol. 67:95-106, 2015に記載されている。
【０２２５】
本明細書に記載される抗原結合ドメインはいずれも、１×１０−７Ｍ未満、１×１０−８Ｍ未満、１×１０−９Ｍ未満、１×１０−１０Ｍ未満、１×１０−１１Ｍ未満、１×１０−１２Ｍ未満、又は１×１０−１３Ｍ未満の解離平衡定数（ＫＤ）で抗原に結合し得る。幾つかの実施形態では、本明細書で提供される抗原結合タンパク質複合体は、約１×１０−４Ｍ〜約１×１０−６Ｍ、約１×１０−５Ｍ〜約１×１０−７Ｍ、約１×１０−６Ｍ〜約１×１０−８Ｍ、約１×１０−７Ｍ〜約１×１０−９Ｍ、約１×１０−８Ｍ〜約１×１０−１０Ｍ、又は約１×１０−９Ｍ〜約１×１０−１１Ｍ（両端を含む）のＫＤで第１及び／又は第２の抗原に結合し得る。当該技術分野で知られている様々な異なる方法（例えば、電気泳動移動度シフト解析、フィルタ結合アッセイ、表面プラズモン共鳴、及びバイオ分子結合動態アッセイ等）を使用して、抗原結合ドメインのＫＤ値を決定することができる。
【０２２６】
抗原
幾つかの実施形態では、本明細書に記載される抗原結合ドメインは、単一の抗原（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている例示的な抗原のいずれか）に結合し得る。幾つかの実施形態では、本明細書に記載される抗原結合ドメインは、２つ以上の異なる抗原（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている例示的な抗原のいずれか２つ以上）に結合することができる。抗原の非限定的な例として、ＨＥＲ２、Ａ３３抗原、９−０−アセチル−ＧＤ３、ＣＡ１９−９マーカー、ＢｈＣＧ、ＣＡ−１２５マーカー、炭酸脱水酵素ＩＸ（ＭＮ／ＣＡＩＸ）、カルレティキュリン、ＣＣＲ５、ＣＣＲ８、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ５、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４４、ＣＤ４４Ｖ６、ＣＤ６３、ＣＤ７０、ＣＤ８４、ＣＤ９６、ＣＤ１００、ＣＣ１２３、ＣＤ１３３、ＣＤ１３７、ＣＤ１３８、ＣＤ１５０、ＣＤ１５２（ＣＴＬＡ−４）、ＣＤ１６０、ＣＲＴＡＭ、ＣＳ１（ＣＤ３１９）、ＤＮＡＭ−１（ＣＤ２２６）、ＣＤ２２９、ＣＤ２４４、ＣＤ２７２（ＢＴＬＡ）、ＣＤ２７４（ＰＤＬ−１、Ｂ７Ｈ１）、ＣＤ２７９（ＰＤ−１）、ＣＤ３１９、ＣＤ３５２、ＣＲＴＡＭ（ＣＤ３５５）、ＣＤ３５８、ＤＲ３、ＧＩＴＲ（ＴＮＦＲＳＦ１８）、ＨＶＥＭ、ＩＣＯＳ、ＬＩＧＨＴ、ＬＴＢＲ、ＯＸ４０、ＫＩＲの活性化形態、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫＧ２Ｅ、１つ以上の天然細胞傷害性受容体、ＮＴＢ−Ａ、ＰＥＮ−５、癌胎児性抗原（ＣＥＡ；ＣＤ６６ｅ）、デスモグレイン４、Ｅ−カドヘリンネオエピトープ、エンドシアリン、エフリンＡ２（ＥｐｈＡ２）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）、フコシルＧＭ１、ＧＤ２、ＧＤ３、ＧＭ２、ガングリオシドＧＭ３、Ｇｌｏｂｏ  Ｈ、糖タンパク質１００、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、インスリン様増殖因子受容体１、Ｌｅｗｉｓ−Ｙ、ＬＧ、Ｌｙ−６、黒色腫特異的コンドロイチン硫酸プロテオグリカン（ＭＣＳＣＰ）、メソテリン、ＭＵＣ１、ＭＵＣ２、ＭＵＣ３、ＭＵＣ４、ＭＵＣ５ＡＣ、ＭＵＣ５ｂ、ＭＵＣ７、ＭＵＣ１６、ミュラー管抑制因子（ＭＩＳ）受容体タイプＩＩ、プラズマ細胞抗原、ポリＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）、ＳＡＳ、ＳＴＥＡＰ、ｓＴｎ抗原、ＴＮＦ−α前駆体、２Ｂ４（ＣＤ２４４）、β２−インテグリン、ＫＩＲ、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＫＩＲ−Ｌ、ＫＬＲＧＩ、ＬＡＩＲ−１、ＮＫＧ２Ａ、ＮＫＲ−Ｐ  ＩＡ、Ｓｉｇｌｅｃ−３、Ｓｉｇｌｅｃ−７、Ｓｉｇｌｅｃ−９、ＴＣＲａ、ＴＣＲＢ、ＴＣＲ５ｙ、ＴＩＭ１、ＬＡＧ３、ＬＡＩＲ１、ＰＤ−１Ｈ、ＴＩＧＩＴ、ＴＩＭ２、及びＴＩＭ３が挙げられる。更なる抗原の例が当該技術分野において知られている。
【０２２７】
共刺激ドメイン
正常なリンパ球では、Ｔ細胞活性化は２つのクラスの細胞内シグナル伝達ドメインによって媒介される。一次シグナル伝達は、Ｔ細胞受容体（例えばＴＣＲ／ＣＤ３複合体）を介する、ＭＨＣ媒介抗原依存性活性化を経て開始される。二次シグナル又は共刺激シグナルは、抗原非依存的に作用する共刺激シグナル伝達ドメインを含む異なる受容体によって提供される。ＴＣＲのシグナル伝達ドメイン単独によって生成されたシグナルは、完全なＴ細胞活性化には不十分であり、共刺激シグナルも必要である。
【０２２８】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、ＣＤ２７（Ｓ１５２、Ｓ１５２．ＬＰＦＳ２、Ｔ１４、ＴＮＦＲＳＦ７、及びＴｐ５５としても知られている）、ＣＤ２８（Ｔｐ４４としても知られている）、４−１ＢＢ（ＴＮＦＲＳＦ９、ＣＤ１３７、ＣＤｗ１３７、ＩＬＡ、及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー９としても知られている）、ＯＸ４０（ＴＮＦＲＳＦ４、ＡＣＴ３５、ＲＰ５−９０２Ｐ８．３、ＩＭＤ１６、ＣＤ１３４、ＴＸＧＰ１Ｌ、及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー４としても知られている）、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８、Ｄ１Ｓ１６６Ｅ、及びＫｉ−１としても知られている）、ＣＤ４０Ｌ（ＣＤ４０ＬＧ、ＣＤ１５４、ＨＩＧＭ１、ＩＧＭ、ＩＭＤ３、Ｔ−ＢＡＭ、ＴＮＦＳＦ５、ＴＲＡＰ、ｇｐ３９、ｈＣＤ４０Ｌ、及びＣＤ４０リガンドとしても知られている）、ＣＤ４０（Ｂｐ５０、ＣＤＷ４０、ＴＮＦＲＳＦ５、ｐ５０、ＣＤ４０（タンパク質）、及びＣＤ４０分子としても知られている）、ＰＤ−１（ＰＤＣＤ１、ＣＤ２７９、ＰＤ−１、ＳＬＥＢ２、ｈＰＤ−１、ｈＰＤ−ｌ、ｈＳＬＥ１、及びプログラム細胞死１としても知られている）、ＰＤ−Ｌ１（ＣＤ２７４、Ｂ７−Ｈ、Ｂ７Ｈ１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤＣＤ１Ｌ１、ＰＤＣＤ１ＬＧ１、ＰＤＬ１、ＣＤ２７４分子、及びプログラム細胞死１リガンド１としても知られている）、ＩＣＯＳ（ＡＩＬＩＭ、ＣＤ２７８、及びＣＶＩＤ１としても知られている）、ＬＦＡ−１（リンパ球機能関連抗原１としても知られている）、ＣＤ２（ＬＦＡ−２、ＳＲＢＣ、Ｔ１１、及びＣＤ２分子としても知られている）、ＣＤ７（ＧＰ４０、ＬＥＵ−９、ＴＰ４１、Ｔｐ４０、及びＣＤ７分子としても知られている）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５、ＮＫ１、ＮＫ２８、及びＣＤ１６０分子としても知られている）、ＬＩＧＨＴ（ＴＮＦＳＦ１４、ＣＤ２５８、ＨＶＥＭＬ、ＬＩＧＨＴ、ＬＴｇ、ＴＲ２、ＴＮＬＧ１Ｄ、及び腫瘍壊死因子スーパーファミリーメンバー１４としても知られている）、ＢＴＬＡ（ＣＤ２７２、及びＢＴＬＡ１としても知られている）、ＴＩＭ３（ＨＡＶＣＲ２、ＨＡＶｃｒ−２、ＫＩＭ−３、ＴＩＭ３、ＴＩＭＤ−３、ＴＩＭＤ３、Ｔｉｍ−３、ＣＤ３６６、及びＡ型肝炎ウイルス細胞受容体２としても知られている）、ＣＤ２４４（２Ｂ４、ＮＡＩＬ、ＮＫＲ２Ｂ４、Ｎｍｒｋ、ＳＬＡＭＦ４、及びＣＤ２４４分子としても知られている）、ＣＤ８０（Ｂ７、Ｂ７−１、Ｂ７．１、ＢＢ１、ＣＤ２８ＬＧ、ＣＤ２８ＬＧ１、ＬＡＢ７、及びＣＤ８０分子としても知られている）、ＬＡＧ３（ＣＤ２２３、及びリンパ球活性化３（lymphocyte activating 3）としても知られている）、ＮＫＧ２Ｃ（ＣＤ３１４、Ｄ１２Ｓ２４８９Ｅ、ＫＬＲ、ＮＫＧ２−Ｄ、ＮＫＧ２Ｄ、及びキラー細胞レクチン様受容体Ｋ１としても知られている）、ＧＩＴＲ（ＴＮＦＲＳＦ１８、ＲＰ５−９０２Ｐ８．２、ＡＩＴＲ、ＣＤ３５７、及びＧＩＴＲ−Ｄとしても知られている）、ＨＶＥＭ（ＴＮＦＲＳＦ１４、ＲＰ３−３９５Ｍ２０．６、ＡＴＡＲ、ＣＤ２７０、ＨＶＥＡ、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴＲ、及びＴＲ２としても知られている）、ＴＬＲｌ、ＴＬＲ���、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲＩＯ、ＣＡＲＤｌｌ、ＣＤ５４（ＩＣＡＭ）、ＣＤ８３、ＤＡＰ１０、ＬＡＴ、ＳＬＰ７６、ＴＲＩＭ、ＺＡＰ７０、及びＢ７−Ｈ３（ＣＤ２７６、４Ｉｇ−Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７Ｈ３、Ｂ７ＲＰ−２、及びＣＤ２７６分子としても知られている）の群から選択される内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型ポリペプチドに由来する共刺激ドメイン又はその部分を含む。「ＣＤ」の文字は「分化クラスター」を表す前文である。例えば、ＣＤ３は「分化クラスター３」を表す。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型ポリペプチド（例えば上に列挙されるポリペプチドのいずれかの哺乳動物又はヒトのホモログ）に由来する共刺激ドメイン又はその部分を含む。
【０２２９】
共刺激シグナルを提供する役目を果たす、任意の共刺激ドメイン、又はその部分は、本明細書に開示される組成物及び方法による使用に適している。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、ヒトＣＤ２８に由来する共刺激ドメイン又はその部分（例えば、アクセション番号Ｐ０１７４７、例えば配列番号１８のアミノ酸１８０〜アミノ酸２２０に由来する）を含む。幾つかの実施形態では、共刺激ドメインは、配列番号１８のアミノ酸１８０〜アミノ酸２２０に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一の（又は同一の）配列又はそのフラグメントである又はそれを含む。幾つかの実施形態では、共刺激ドメインは、配列番号１１６に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％である（又は同一の）配列、又はそのフラグメントである又はそれを含む。
【０２３０】
配列番号１８
MLRLLLALNLFPSIQVTGNKILVKQSPMLVAYDNAVNLSCKYSYNLFSREFRASLHKGLDSAVEVCVVYGNYSQQLQVYSKTGFNCDGKLGNESVTFYLQNLYVNQTDIYFCKIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS  
【０２３１】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、ヒト４−１ＢＢに由来する共刺激ドメイン又はその部分（例えば、アクセッション番号Ｑ０７０１１、例えば、配列番号１９のアミノ酸２１４〜アミノ酸２５５に由来する）を含む。幾つかの実施形態では、共刺激ドメインは、配列番号１９のアミノ酸２１４〜アミノ酸２５５に対して、少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一の配列又はその部分である又はそれを含む。
【０２３２】
配列番号１９
MGNSCYNIVATLLLVLNFERTRSLQDPCSNCPAGTFCDNNRNQICSPCPPNSFSSAGGQRTCDICRQCKGVFRTRKECSSTSNAECDCTPGFHCLGAGCSMCEQDCKQGQELTKKGCKDCCFGTFNDQKRGICRPWTNCSLDGKSVLVNGTKERDVVCGPSPADLSPGASSVTPPAPAREPGHSPQIISFFLALTSTALLFLLFFLTLRFSVVKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL
【０２３３】
幾つかの実施形態では、共刺激ドメインは、配列番号４４、配列番号５７又は配列番号１１６に対して、少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一の配列又はその部分である又はそれを含む。
【０２３４】
本明細書に開示される単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、又はＢ７−Ｈ３（限定されることなく、これらのポリペプチドのいずれかの哺乳動物又はヒトのホモログを含む）のアイソフォームを含む共刺激ドメインを有する内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型ポリペプチドの任意のアイソフォームに由来するアミノ酸の配列を含む共刺激ドメインを含んでもよい。
【０２３５】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体の共刺激ドメイン又はその部分は、哺乳動物（例えばヒト）のＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、又はＢ７−Ｈ３の１つ以上に由来する共刺激ドメインに対して、少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体の共刺激ドメイン又はその部分は、内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通ポリペプチド：Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、又はＢ７−Ｈ３（限定されることなく、これらのポリペプチドのいずれかの哺乳動物又はヒトのホモログを含む）の１つ以上の共刺激ドメインと比較して、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失又は付加を有するアミノ酸の配列を含む。
【０２３６】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、膜貫通ドメインの２つ以上の部分が共に機能性共刺激ドメインを構成するように、限定されることなく、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、又はＢ７−Ｈ３（限定されることなく、これらのポリペプチドのいずれかの哺乳動物又はヒトのホモログを含む）を含む２つ以上の内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通ポリペプチドに由来する共刺激ドメインの部分を有するキメラ共刺激ドメインである共刺激ドメインを含む。幾つかの実施形態では、キメラ共刺激ドメインのかかる部分は、野生型共刺激ドメインの対応する部分と比較して、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失又は付加を含んでもよい。
【０２３７】
本明細書に開示される単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体の共刺激ドメインは、任意の適した長さであってもよい。例えば、共刺激ドメインは、約２０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、又は約２５アミノ酸（両端を含む）；約２５アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、又は約３０アミノ酸（両端を含む）；約３０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、約４０アミノ酸、又は約３５アミノ酸（両端を含む）；約３５アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、約４５アミノ酸、又は約４０アミノ酸（両端を含む）；約４０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、約５０アミノ酸、又は約４５アミノ酸（両端を含む）；約４５アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、約５５アミノ酸、又は約５０アミノ酸（両端を含む）；約５０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、約６０アミノ酸、又は約５５アミノ酸（両端を含む）；約５５アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、約６５アミノ酸、又は約６０アミノ酸（両端を含む）；約６０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、約７０アミノ酸、又は約６５アミノ酸（両端を含む）；約６５アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、約８０アミノ酸、約７５アミノ酸、又は約７０アミノ酸（両端を含む）；約７０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、約９０アミノ酸、約８５アミノ酸、又は約８０アミノ酸（両端を含む）；約８０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９５アミノ酸、又は約９０アミノ酸（両端を含む）；約９０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸、又は約１００アミノ酸（両端を含む）；約１００アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸、又は約１１０アミノ酸（両端を含む）；約１１０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸、又は約１２０アミノ酸（両端を含む）；約１２０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸、又は約１３０アミノ酸（両端を含む）；約１３０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸、又は約１４０アミノ酸（両端を含む）；約１４０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸、又は約１５０アミノ酸（両端を含む）；約１５０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸、又は約１６０アミノ酸（両端を含む）；約１６０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸、又は約１７０アミノ酸（両端を含む）；約１７０アミノ酸〜約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸、又は約１８０アミノ酸（両端を含む）；約１８０アミノ酸〜約２００アミノ酸又は約１９０アミノ酸（両端を含む）；又は約１９０アミノ酸〜約２００アミノ酸（両端を含む）の長さを有し得る。
【０２３８】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、２つ以上の共刺激ドメイン、例えば、２個、３個、４個、又は５個以上の共刺激ドメインを含む。幾つかの実施形態では、２つ以上の共刺激ドメインは同一である（例えば、それらの共刺激ドメインは同じアミノ酸配列を有する）。幾つかの実施形態では、共刺激ドメインは同一ではない。例えば、共刺激ドメインは、限定されることなく、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、又はＢ７−Ｈ３（限定されることなく、これらのポリペプチドのいずれかの哺乳動物又はヒトのホモログを含む）を含む種々の内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型ポリペプチドから選択され得る。幾つかの実施形態では、２つ以上の共刺激ドメインは、１つ以上（例えば、２個、３個、４個、又は５個）のアミノ酸の置換、欠失又は付加によって互いに異なってもよい。幾つかの実施形態では、２つ以上の共刺激ドメインは、互いに対して、少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示す。
【０２３９】
免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）
ＩＴＡＭは、任意の２個の他のアミノ酸によってロイシン又はイソロイシンと隔てられたチロシンを含むことから、例えばＴｙｒ−Ｘ−Ｘ−Ｌｅｕ／Ｉｌｅと表すことができる。ＩＴＡＭは、典型的には免疫系の或る特定の細胞表面タンパク質の細胞質側末端において繰り返され（例えば２回以上）、典型的には６個〜８個のアミノ酸によって隔てられている。
【０２４０】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、内因性哺乳動物（例えばヒト）ポリペプチドに由来するＩＴＡＭ又はその部分を含み、内因性哺乳動物（例えばヒト）ポリペプチドは、ＣＤ３ζ（ＣＤ３ゼータとも呼ばれる）、ＣＤ３Δ（ＣＤ３デルタ）、ＣＤ３ε（ＣＤ３イプシロン）、ＣＤ３γ（ＣＤ３ガンマ）、ＤＡＰ１２、ＦＣεＲ１γ（Ｆｃイプシロン受容体Ｉガンマ鎖）、ＦｃＲｙ、ＦｃＲｆｔ、ＣＤ３５、ＣＤ２２、ＣＤ７９Ａ（抗原受容体複合体関連タンパク質アルファ鎖）、ＣＤ７９Ｂ（抗原受容体複合体関連タンパク質ベータ鎖）、及びＣＤ６６ｄの群から選択される。「ＣＤ」の文字は「分化クラスター」を表す前文である。例えば、ＣＤ３は「分化クラスター３」を表す。
【０２４１】
任意のＩＴＡＭ又はその部分は、本明細書に開示される組成物及び方法による使用に適した内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型タンパク質におけるシグナル伝達を媒介する役目を果たす。幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、ヒトＣＤ３ゼータに由来するＩＴＡＭ又はその部分（例えば、アクセッション番号Ｐ２０９６３、例えば配列番号１７のアミノ酸５２〜アミノ酸１６４又はその部分；配列番号１１８又はその部分に存在するＩＴＡＭ）を含む。幾つかの実施形態では、ＩＴＡＭは、配列番号１７のアミノ酸５２〜アミノ酸１６５の配列（又はその部分）、又は配列番号１１８の配列（又はその部分）に対して、少なくとも８０％（例えば少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％）同一の配列を含む。
【０２４２】
配列番号１７
MKWKALFTAAILQAQLPITEAQSFGLLDPKLCYLLDGILFIYGVILTALFLRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPQRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
【０２４３】
幾つかの実施形態では、ＩＴＡＭは、配列番号４８、配列番号６１、又は配列番号１１８に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８２％、少なくとも８４％、少なくとも８６％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９６％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％）同一の配列若しくはその部分である、又はそれを含む配列を含む。
【０２４４】
当業者に十分理解されるように、或る特定のポリペプチドは、少なくともそれらの一次ポリペプチド配列が異なる２つ以上のアイソフォームを有する。例えば、異なるアイソフォームは、選択的スプライシングの結果として作製され得る。本明細書に開示される単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、例えばＣＤ３ζ、ＣＤ３Ｄ、ＣＤ３Ｅ、ＣＤ３Ｇ、ＤＡＰ１２、ＦＣＥＲ１Ｇ、ＦｃＲｙ、ＦｃＲｆｔ、ＣＤ３５、ＣＤ２２、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、又はＣＤ６６ｄの哺乳動物（例えばヒト）アイソフォームを含むＩＴＡＭを有する内因性哺乳動物膜貫通型ポリペプチドの任意のアイソフォームに由来するアミノ酸の配列を含むＩＴＡＭを含んでもよい。
【０２４５】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体のＩＴＡＭ又はその部分は、ＩＴＡＭと比較して１つ以上（例えば、２個、３個、４個、又は５個）のアミノ酸の置換、欠失又は付加を有する、ＣＤ３ζ、ＣＤ３Ｄ、ＣＤ３Ｅ、ＣＤ３Ｇ、ＤＡＰ１２、ＦＣＥＲ１Ｇ、ＦｃＲｙ、ＦｃＲｆｔ、ＣＤ３５、ＣＤ２２、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、又はＣＤ６６ｄ等の内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型タンパク質中の１つ以上のＩＴＡＭのアミノ酸の配列を含む。例えば、ＩＴＡＭのチロシン、及びロイシン又はイソロイシンは保持され得るが、それらを隔てている２個のアミノ酸は異なるアミノ酸で置換され得る。
【０２４６】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、２つ以上のＩＴＡＭの部分が共に機能性ＩＴＡＭを構成するように、限定されることなく、ＣＤ３ζ、ＣＤ３Ｄ、ＣＤ３Ｅ、ＣＤ３Ｇ、ＤＡＰ１２、ＦＣＥＲ１Ｇ、ＦｃＲｙ、ＦｃＲｆｔ、ＣＤ３５、ＣＤ２２、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ、又はＣＤ６６ｄ（限定されることなく、これらのポリペプチドのいずれかの哺乳動物又はヒトのホモログを含む）を含む２つ以上の内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型ポリペプチドに由来するＩＴＡＭの部分を有するキメラＩＴＡＭであるＩＴＡＭを含む。幾つかの実施形態では、野生型ＩＴＡＭの対応する部分と比較して、キメラＩＴＡＭのかかる部分は、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失、又は付加を含んでもよい。
【０２４７】
幾つかの実施形態では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体は、２つ以上のＩＴＡＭ、例えば、２個、３個、４個、又は５個以上のＩＴＡＭを含む。幾つかの実施形態では、２つ以上のＩＴＡＭは同一である（例えば、それらのＩＴＡＭは同じアミノ酸配列を有する）。幾つかの実施形態では、２つ以上のＩＴＡＭは同一ではない。例えば、ＩＴＡＭは、限定されることなく、ＣＤ３ζ、ＣＤ３Ｄ、ＣＤ３Ｅ、ＣＤ３Ｇ、ＤＡＰ１２、ＦＣＥＲ１Ｇ、ＦｃＲｙ、ＦｃＲｆｔ、ＣＤ３５、ＣＤ２２、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９Ｂ（限定されることなく、これらのポリペプチドのいずれかの哺乳動物又はヒトのホモログを含む）を含む種々の内因性哺乳動物（例えばヒト）膜貫通型ポリペプチドから選択され得る。幾つかの実施形態では、２つ以上のＩＴＡＭは、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失又は付加によって互いに異なってもよい。
【０２４８】
核酸
また、本明細書では、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかをコードする核酸を提供する。また、本発明では、多重鎖キメラポリペプチドを構成する１つ以上の単鎖ポリペプチドをコードする１組の核酸を提供する（例えば、ここで、多重鎖キメラポリペプチドを構成する少なくとも１つの単鎖ポリペプチドは、その１組の各核酸によってコードされている）。
【０２４９】
ベクター
本明細書では、本明細書に提供される核酸のいずれかを含むベクターを提供する。本開示による「ベクター」は、哺乳動物細胞において、組み換えタンパク質（例えば、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体）の発現を誘導することができるポリヌクレオチドである。本明細書で提供されるベクターは、例えば、環状形態又は直線形態であってもよい。ベクターの非限定的な例としては、プラスミド、ＳＶ４０ベクター、アデノウイルスウイルスベクター、及びアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターが挙げられる。ベクターの非限定的な例として、レンチウイルスベクター、又はレトロウイルスベクター、例えばガンマレトロウイルスベクターが挙げられる。例えば、Carlens et al., Exp. Hematol. 28(10:1137-1146, 2000、Park et al., Trends Biotechnol. 29(11):550-557, 2011、及びAlonso-Camino et al., Mol. Ther. Nucleic Acids 2:e93, 2013を参照されたい。レトロウイルスベクターの非限定的な例として、モロニーマウス白血病ウイルス、骨髄増殖性肉腫ウイルス、マウス胚性幹細胞ウイルス、マウス幹細胞ウイルス、脾フォーカス形成ウイルス、又はアデノ随伴ウイルスに由来するものが挙げられる。レトロウイルスベクターの非限定的な例は、例えば、米国特許第５，２１９，７４０号及び同第６，２０７，４５３号、Miller et al., BioTechniques 7:980-990, 1989; Miller, Human Gene Therapy 1:5-14, 1990、Scarpa et al., Virology 180:849-852, 1991、Burns et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:8033-8037, 1993、及びBoris-Lawrie et al., Cur. Opin. Genet. Develop. 3:102-109, 1993に記載されている。例示的なレンチウイルスのベクターは、例えば、Wang et al., J. Immunother. 35(9):689-701, 2003、Cooper et al., Blood 101:1637-1644, 2003、Verhoeyen et al., Methods Mol. Biol. 506:97-114, 2009、及びCavalieri et al., Blood 102(2):497-505, 2003に記載されている。
【０２５０】
本明細書に提供される核酸のいずれかが挿入され得るベクターの例は、例えば、Ausubel et al., Eds. "Current Protocols in Molecular Biology" Current Protocols, 1993、及びSambrook et al., Eds. "Molecular Cloning: A Laboratory Manual," 2nd ed., Cold Spring Harbor Press, 1989に記載されている。
【０２５１】
幾つかの実施形態では、ベクターは、本明細書に記載される核酸のいずれかに制御可能に連結されたプロモーター及び／又はエンハンサーを更に含む。プロモーターの非限定的な例としては、ヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、マウスホスホグリセリン酸キナーゼ１、ポリオーマアデノウイルス、甲状腺刺激ホルモンα、ビメンチン、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）、腫瘍壊死因子、β−グロビン、α−フェトプロテイン、γ−グロビン、β−インターフェロン、γ−グルタミルトランスフェラーゼ、ヒトユビキチンＣ（ＵＢＣ）、マウス乳癌ウイルス（ＭＭＴＶ）、ラウス肉腫ウイルス、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、β−アクチン、メタロチオネインＩＩ（ＭＴ  ＩＩ）、アミラーゼ、ヒトＥＦ１α、カテプシン、ＭＩムスカリン受容体、レトロウイルスＬＴＲ（例えばヒトＴ細胞白血球ウイルスＨＴＬＶ）、ＡＡＶ  ＩＴＲ、インターロイキン−２、コラゲナーゼ、血小板由来増殖因子、アデノウイルスＥ２、ストロメライシン、マウスＭＸ、ラットインスリン、グルコース制御タンパク質７８、ヒト免疫不全ウイルス、グルコース制御タンパク質９４、α−２−マクログロブリン、ＭＨＣクラスＩ、ＨＳＰ７０、プロリフェリン、免疫グロブリン軽鎖、Ｔ細胞受容体、ＨＬＡ  ＤＱα、ＨＬＡ  ＤＱβ、インターロイキン−２受容体、ＭＨＣクラスＩＩ、プレアルブミン（トランスサイレチン）、エラスターゼＩ、アルブミン、ｃ−ｆｏｓ、神経細胞接着分子（ＮＣＡＭ）、Ｈ２Ｂヒストン、ラット成長ホルモン、ヒト血清アミロイド（ＳＡＡ）、筋肉クレアチニンキナーゼ、トロポニンＩ（ＴＮ  Ｉ）、及びテナガザル白血病ウイルス（ＧＡＬＶ）に由来するプロモーターが挙げられる。幾つかの実施形態では、プロモーターは、誘導性プロモーター又は構成的プロモーターであってもよい。プロモーターの更なる例が当該技術分野で知られている。
【０２５２】
幾つかの例では、本明細書に提供されるベクターは、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体を構成するポリペプチドのいずれかをコードする配列に対して制御可能に連結され、３’に配置されるポリ（Ａ）配列を更に含む。ポリ（Ａ）配列の非限定的な例としては、ウシ成長ホルモン（Woychik et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 81(13): 3944-3948, 1984、及び米国特許第５，１２２，４５８号）、マウス−β−グロビン、マウス−α−グロビン（Orkin et al., EMBO J. 4(2): 453-456, 1985）、ヒトコラーゲン、ポリオーマウイルス（Batt et al., Mol. Cell Biol. 15(9):4783-4790, 1995）、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ遺伝子（ＨＳＶ  ＴＫ）、ＩｇＧ重鎖遺伝子ポリアデニル化シグナル（米国特許出願公開第２００６／００４０３５４号）、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）（Szymanski et al., Mol. Therapy 15(7):1340-1347, 2007）、ＳＶ４０ポリ（Ａ）部位、例えばＳＶ４０後期及び初期ポリ（Ａ）部位（Schek et al., Mol. Cell Biol. 12(12):5386-5393, 1992）に由来するものが挙げられる。幾つかの実施形態では、ポリ（Ａ）配列は、高度に保存された上流エレメント（ＡＡＴＡＡＡ）を含む。このＡＡＴＡＡＡ配列は、例えば、シグナル伝達ポリアデニル化が可能なＡＡＴＡＡＡに対して相同性を有する、例えば、ＡＴＴＡＡＡ、ＡＧＴＡＡＡ、ＣＡＴＡＡＡ、ＴＡＴＡＡＡ、ＧＡＴＡＡＡ、ＡＣＴＡＡＡ、ＡＡＴＡＴＡ、ＡＡＧＡＡＡ、ＡＡＴＡＡＴ、ＡＡＡＡＡＡ、ＡＡＴＧＡＡ、ＡＡＴＣＡＡ、ＡＡＣＡＡＡ、ＡＡＴＣＡＡ、ＡＡＴＡＡＣ、ＡＡＴＡＧＡ、ＡＡＴＴＡＡ、及びＡＡＴＡＡＧを含むその他のヘキサヌクレオチド配列で置換されてもよい（例えば、国際公開第０６０１２４１４号を参照されたい）。
【０２５３】
ポリ（Ａ）配列は、例えば合成ポリアデニル化部位であってもよい（例えば、Levitt et al, Genes Dev. 3(7): 1019-1025, 1989を参照されたい）。幾つかの例では、ポリ（Ａ）配列は、可溶性ニューロピリン−１のポリアデニル化シグナル：ＡＡＡＴＡＡＡＡＴＡＣＧＡＡＡＴＧであってもよい。ポリ（Ａ）配列の更なる例が当該技術分野で知られている。ベクターの更なる例及び態様も当該技術分野で知られている。
【０２５４】
哺乳動物細胞に核酸又はベクターを導入する方法
当該技術分野で知られている様々な異なる方法を使用して、哺乳動物細胞（例えば、本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれか、例えば本明細書に記載されるＴ細胞（例えばヒトＴ細胞）のいずれか）に本明細書に開示される核酸及びベクターのいずれかを導入することができる。哺乳動物細胞に核酸又はベクターを導入するため使用され得る方法の非限定的な例としては、リポフェクション、トランスフェクション、電気穿孔、マイクロインジェクション、リン酸カルシウムトランスフェクション、デンドリマーに基づくトランスフェクション、カチオン性ポリマートランスフェクション、細胞スクィージング、ソノポレーション、光学トランスフェクション（optical transfection）、インパレクション（impalection）、流体力学的送達、マグネトフェクション、ウイルス形質導入（例えばアデノウイルス及びレンチウイルスの形質導入）、及びナノ粒子トランスフェクションが挙げられる。哺乳動物細胞に核酸又はベクターを導入する更なる方法が当該技術分野で知られている。
【０２５５】
哺乳動物細胞
また、本明細書では、本明細書に記載される核酸又はベクターのいずれかを含む哺乳動物細胞を提供する。幾つかの実施形態では、哺乳動物細胞は、以前に被験体（例えばヒト被験体、例えば、癌を有すると識別された又は診断されたヒト被験体）から得られる。
【０２５６】
哺乳動物細胞の非限定的な例として、Ｔ細胞（例えばヒトＴ細胞）が挙げられる。Ｔ細胞（例えばヒトＴ細胞）の非限定的な例としては、例えば、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性ＴＨ細胞前駆体、リンパ球前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、記憶Ｔ細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ２２細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ１細胞、ＴＨ３細胞、γδＴ細胞、αβＴ細胞、Ｔｒｅｇ細胞及び腫瘍浸潤性Ｔ細胞が挙げられる。Ｔ細胞（例えばヒトＴ細胞）の更なる例としては、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞が挙げられる。哺乳動物細胞の更なる例としては、肥満細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、及びナチュラルキラー細胞が挙げられる。
【０２５７】
ホルモン及びホルモン類縁体
ホルモンの非限定的な例としては、エストロゲン（１７β−エストラジオール）、プロゲステロン、テストステロン、及びジヒドロテストステロンが挙げられる。ホルモン類縁体の非限定的な例としては、エストロゲンホルモン類縁体、プロゲステロンホルモン類縁体、及びアンドロゲンホルモン類縁体が挙げられる。
【０２５８】
エストロゲンホルモン類縁体の非限定的な例としては、アフィモキシフェン（４−ヒドロキシタモキシフェン、４−ＯＨＴ、４−ＨＴ、及びＯＨＴＡＭとしても知られている）；クロミフェン、オルメロキシフェン、ラロキシフェン、タモキシフェン、トレミフェン、ラソフォキシフェン、及びオスペミフェン等の選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）；エストラジオール；エストロン；ラロキシフェン；エストリオール；ゲニステイン；フィトエストロゲン（例えば、ゲニステイン、ダイゼイン、ホルモノネチン、及びグリシテイン等のイソフラボン；クメステロール及びレペンソール（repensol）、アンドトリフォリオール（andtrifoliol）等のクメスタン；及びラリシレシノール、マタイレシノール、ピノレシノール、セコイソラリシレシノール、ポドフィロトキシン、及びステガナシン等のリグナン）；及びキセノエストロゲン（例えば、ジエチルスチルベストロール、エチニルエストラジオール、ブチル化ヒドロキシアニソール、エリトロシン、カンフル（例えば４−メチルベンジリデンカンフル）、パラベン（例えば、メチルパラベン、エチルパラベン、及びプロピルパラベン）、アトラジン、ジクロロジフェニルジクロロエチレン、ジクロロジフェニルトリクロロエタン、メトキシクロル、ジエルドリン、エンドサルファン、ヘプタクロル、リンデン、フェノール（例えば、ビスフェノールＡ、及びノニルフェノール）、ビフェニル（例えば、モノクロロビフェニル、及びジクロロビフェニル）、フタレート（例えば、ジ−２−エチルヘキシルフタレート、フタル酸ジイソデシル、及びフタル酸ジイソノニル）、及び金属エストロゲン）が挙げられる。幾つかの実施形態では、エストロゲンホルモン類縁体は、例えばミフェプリストン（ＲＵ−４８６としても知られている）であってもよい。幾つかの実施形態では、エストロゲンホルモン類縁体は、オナプリストン（ＺＫ９８２９９）、ロナプリサン（lonaprisan）（ＺＫ２３０２１１、ＢＡＹ８６−５０４４）、ＡＰＲ１９、ＥＣ３０４、ＷＡＹ−２５５３４８、ＯＲＧ３１７１０、アソプリスニル（Ｊ８６７）、テラプリストン（Ｐｒｏｅｌｌｅｘ、ＣＤＢ−４１２４）、及びＣＤＢ−２９１４（酢酸ウリプリスタル）等の選択的プロゲステロン受容体モジュレーター（ＳＰＲＭ）であってもよい。
【０２５９】
プロゲステロンホルモン類縁体の非限定的な例としては、オナプリストン（ＺＫ９８２９９）、ロナプリサン（lonaprisan）（ＺＫ２３０２１１、ＢＡＹ８６−５０４４）、ＡＰＲ１９、ＥＣ３０４、ＷＡＹ−２５５３４８、ＯＲＧ３１７１０、アソプリスニル（Ｊ８６７）、テラプリストン（Ｐｒｏｅｌｌｅｘ、ＣＤＢ−４１２４）、及びＣＤＢ−２９１４（酢酸ウリプリスタル）等の選択的プロゲステロン受容体モジュレーター（ＳＰＲＭ）が挙げられる。
【０２６０】
アンドロゲンホルモン類縁体の非限定的な例としては、エノボサーム（enobosarm）（オスタリン（ostarine）、ＭＫ−２８６６、ＧＴｘ−０２４及びＳ−２２としても知られている）、ＢＭＳ−５６４，９２９、ＬＧＤ−４０３３（リガンドロール（ligandrol））、ＡＣ−２６２，３５６、ＪＮＪ−２８３３０８３５、ＬＧＤ−２２２６、ＬＧＤ−３３０３、Ｓ−４０５０３、Ｓ−２３、ＲＡＤ１４０、アセトチオルタミド（acetothiolutamide）、アンダリン（Andarine）、ＬＧ−１２１０７１、ＴＦＭ−４ＡＳ−１、及びＹＫ−１１が挙げられる。
【０２６１】
当該技術分野において十分理解され得るように、エストロゲン又はエストロゲンホルモン類縁体は、エストロゲン受容体リガンド結合ドメインを含む単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体と共に使用され得る。
【０２６２】
組成物及びキット
また、本明細書では、本明細書に記載される核酸、ベクター、核酸のセット、ベクターのセット、又は哺乳動物細胞のいずれかを含む組成物（例えば医薬組成物）を提供する。例えば、本明細書では、本明細書に記載される核酸若しくは核酸のセットのいずれか、又は本明細書に提供されるベクター若しくはベクターのセットのいずれかと、薬学的に許容可能な溶媒又は担体とを含む組成物を提供する。
【０２６３】
幾つかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体のいずれかをコードする核酸を含む、本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれか（例えば、被験体、例えば、癌を有すると識別された又は診断された被験体から以前に得られた本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれか）であってもよい。本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれかを含む組成物において、該組成物は、細胞培養培地又は薬学的に許容可能なバッファー（例えばリン酸緩衝生理食塩水）を更に含んでもよい。本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれかを含む組成物は、静脈内又は動脈内の投与用に製剤化され得る。
【０２６４】
また、本明細書に記載される組成物のいずれかの１つ以上を備えるキットを提供する。例えば、キットは、本明細書に記載される組成物のいずれかと、被験体に対する投与用に製剤化された（例えば、経口、静脈内、筋肉内、又は皮下の投与用に製剤化された）１つ以上の用量のホルモン又はホルモン類縁体とを備えてもよい。幾つかの実施形態では、キットは、本明細書に記載される方法のいずれかを行うための指示書を更に備えてもよい。
【０２６５】
哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラポリペプチドの膜局在を誘導する方法
また、本明細書では、単鎖キメラポリペプチド（例えば本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれか）、単鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか）、又は多重鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれか）を発現する哺乳動物細胞を、細胞の形質膜の細胞外側への単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原結合受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体の局在をそれぞれ誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることを含む、哺乳動物細胞（例えば本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれか）において、単鎖キメラポリペプチド（例えば本明細書に記載される単鎖キメラポリペプチドのいずれか）、単鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか）、又は多重鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれか）の膜局在を誘導する方法を提供する。
【０２６６】
これらの方法の幾つかの実施形態は、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体をコードする核酸を、哺乳動物細胞（例えば、本明細書に記載される又は当該技術分野で知られている哺乳動物細胞のいずれか）に導入して、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞をそれぞれ作製することを更に含む。これらの方法の幾つかの例では、哺乳動物細胞は、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞）である。幾つかの例では、哺乳動物細胞（例えば、本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれか）は、被験体（例えば、癌、例えば本明細書に記載される癌のいずれかを有すると識別されている又は診断されている被験体）から以前に得られた哺乳動物細胞である。これらの方法の幾つかの実施形態は、被験体から哺乳動物細胞を得ることを更に含む。
【０２６７】
これらの方法のいずれかの幾つかの実施形態では、接触させる工程はｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる。これらの方法のいずれかの幾つかの実施形態では、接触させる工程は、哺乳動物（例えば、癌、例えば本明細書に記載される癌のいずれかを有する哺乳動物、例えばヒト）において行われる。幾つかの実施形態では、接触させる工程は、結果として哺乳動物（例えばヒト）における癌の治療をもたらす。
【０２６８】
本明細書で提供される方法のいずれかで治療することができる癌の非限定的な例として、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形腫様／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮体癌、上衣腫、食道癌、鼻腔神経芽細胞腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、消化器カルチノイド腫瘍、胃腸間質腫瘍、胚細胞腫瘍、毛様細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇及び口腔癌、肺癌、黒色腫、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔癌、口唇癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟組織肉腫、胃癌、精巣癌、咽頭癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、膣癌、並びに外陰癌が挙げられる。
【０２６９】
これらの方法のいずれかの幾つかの実施形態では、上記方法は、結果として被験体において腫瘍負荷（例えば、腫瘍の質量及び／又は体積）の減少をもたらす。例えば、本明細書に記載される方法のいずれかは、少なくとも約１％〜約９９％（例えば約１％〜約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％（両端を含む）；約２％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％（両端を含む）；約３％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％（両端を含む）；約５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、又は約１０％（両端を含む）；約１０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、又は約１５％（両端を含む）；約１５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、又は約２０％（両端を含む）；約２０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、又は約２５％（両端を含む）；約２５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、又は約３０％（両端を含む）；約３０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、又は約３５％（両端を含む）；約３５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、又は約４０％（両端を含む）；約４０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、又は約４５％（両端を含む）；約４５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、又は約５０％（両端を含む）；約５０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、又は約５５％（両端を含む）；約５５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、又は約６０％（両端を含む）；約６０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、又は約６５％（両端を含む）；約６５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、又は約７０％（両端を含む）；約７０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、又は約７２％（両端を含む）；約７２％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、又は約７４％（両端を含む）；約７４％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、又は約７６％（両端を含む）；約７６％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、又は約７８％（両端を含む）；約７８％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、又は約８０％（両端を含む）；約８０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、又は約８２％（両端を含む）；約８２％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、又は約８４％（両端を含む）；約８４％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、又は約８６％（両端を含む）；約８６％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、又は約８８％（両端を含む）；約８８％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、又は約９０％（両端を含む）；約９０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、又は約９２％（両端を含む）；約９２％〜約９９％、約９８％、約９６％、又は約９４％（両端を含む）；約９４％〜約９９％、約９８％、又は約９６％（両端を含む）；又は約９６％〜約９９％又は約９８％（両端を含む））の被験体における腫瘍負荷の減少（例えば治療を受ける前の対象における腫瘍負荷と比較して）をもたらし得る。
【０２７０】
幾つかの実施形態では、上記方法は、結果として被験体における癌の進行速度の減少をもたらす。例えば、本明細書に記載される方法のいずれかは、少なくとも約１％〜約９９％（例えば約１％〜約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％（両端を含む）；約２％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％（両端を含む）；約３％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％（両端を含む）；約５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、又は約１０％（両端を含む）；約１０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、又は約１５％（両端を含む）；約１５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、又は約２０％（両端を含む）；約２０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、又は約２５％（両端を含む）；約２５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、又は約３０％（両端を含む）；約３０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、又は約３５％（両端を含む）；約３５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、又は約４０％（両端を含む）；約４０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、又は約４５％（両端を含む）；約４５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、又は約５０％（両端を含む）；約５０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、約６０％、又は約５５％（両端を含む）；約５５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６５％、又は約６０％（両端を含む）；約６０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、又は約６５％（両端を含む）；約６５％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、又は約７０％（両端を含む）；約７０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、又は約７２％（両端を含む）；約７２％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、又は約７４％（両端を含む）；約７４％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、又は約７６％（両端を含む）；約７６％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、又は約７８％（両端を含む）；約７８％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、又は約８０％（両端を含む）；約８０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、又は約８２％（両端を含む）；約８２％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、約８６％、又は約８４％（両端を含む）；約８４％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、約８８％、又は約８６％（両端を含む）；約８６％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、約９０％、又は約８８％（両端を含む）；約８８％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、約９２％、又は約９０％（両端を含む）；約９０％〜約９９％、約９８％、約９６％、約９４％、又は約９２％（両端を含む）；約９２％〜約９９％、約９８％、約９６％、又は約９４％（両端を含む）；約９４％〜約９９％、約９８％、又は約９６％（両端を含む）；又は約９６％〜約９９％又は約９８％（両端を含む））の被験体における癌の進行率の減少（例えば治療を受ける前の被験体、又は同じ癌を有し、治療を受けない若しくは別の治療を受ける対照被験体若しくは対照被験体集団における癌の進行率と比較して）をもたらし得る。
【０２７１】
これらの方法のいずれかの幾つかの実施形態では、上記方法は、結果として被験体における癌の生存期間の増加をもたらす。例えば、本明細書に記載される方法のいずれかは、約１％〜約８００％（例えば、約１％〜約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、約３００％、約２５０％、約２００％、約１５０％、約１００％、約８０％、約６０％、約４０％、約２０％、約１０％、又は約５％（両端を含む）；約５％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、約３００％、約２５０％、約２００％、約１５０％、約１００％、約８０％、約６０％、約４０％、約２０％、又は約１０％（両端を含む）；約１０％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、約３００％、約２５０％、約２００％、約１５０％、約１００％、約８０％、約６０％、約４０％、又は約２０％（両端を含む）；約２０％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、約３００％、約２５０％、約２００％、約１５０％、約１００％、約８０％、約６０％、又は約４０％（両端を含む）；約４０％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、約３００％、約２５０％、約２００％、約１５０％、約１００％、約８０％、又は約６０％（両端を含む）；約６０％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、約３００％、約２５０％、約２００％、約１５０％、約１００％、約８０％（両端を含む）；約８０％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、約３００％、約２５０％、約２００％、約１５０％、又は約１００％（両端を含む）；約１００％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、約３００％、約２５０％、約２００％、又は約１５０％（両端を含む）；約１５０％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、約３００％、約２５０％、又は約２００％（両端を含む）；約２００％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、約３００％、又は約２５０％（両端を含む）；約２５０％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、約３５０％、又は約３００％（両端を含む）；約３００％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、約４００％、又は約３５０％（両端を含む）；約３５０％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、約４５０％、又は約４００％（両端を含む）；約４００％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、約５００％、又は約４５０％（両端を含む）；約４５０％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、約５５０％、又は約５００％（両端を含む）；約５００％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、約６００％、又は約５５０％（両端を含む）；約５５０％〜約８００％、約７５０％、約７００％、約６５０％、又は約６００％（両端を含む）；約６００％〜約８００％、約７５０％、約７００％、又は約６５０％（両端を含む）；約６５０％〜約８００％、約７５０％、又は約７００％（両端を含む）；約７００％〜約８００％又は約７５０％（両端を含む）；又は約７５０％〜約８００％（両端を含む））の被験体における癌の生存期間の増加（例えば同じ癌を有し、治療を受けない又は別の治療を受ける対照被験体又は対照被験体集団の生存期間と比較して）をもたらし得る。
【０２７２】
哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラポリペプチドの膜局在を可逆的に変更する方法
また、本明細書では、（ａ）単鎖キメラポリペプチド（例えば本明細書に記載される単鎖ポリペプチドのいずれか）、単鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか）、又は多重鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれか）を発現する哺乳動物細胞（例えば本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれか）を、細胞の形質膜の細胞外側への単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体の局在をそれぞれ誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させることと、（ｂ）該哺乳動物細胞を量が減少されたホルモン又はホルモン類縁体と接触させることで、（例えば、工程（ａ）における形質膜の細胞外側のレベルと比較して）哺乳動物細胞の形質膜の細胞外側の単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体のレベルの減少を生じさせることとを含む、哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチド（例えば本明細書に記載される単鎖ポリペプチドのいずれか）、単鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか）、又は多重鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれか）の膜局在を可逆的に変更する方法を提供する。幾つかの実施形態では、工程（ｂ）におけるレベルの減少は、工程（ａ）における形質膜の細胞外側の単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体のレベルの少なくとも５％の減少、少なくとも１０％の減少、少なくとも１５％の減少、少なくとも２０％の減少、少なくとも２５％の減少、少なくとも３０％の減少、少なくとも３５％の減少、少なくとも４０％の減少、少なくとも４５％の減少、少なくとも５０％の減少、少なくとも５５％の減少、少なくとも６０％の減少、少なくとも６５％の減少、少なくとも７０％の減少、少なくとも７５％の減少、少なくとも８０％の減少、少なくとも８５％の減少、少なくとも９０％の減少、少なくとも９５％の減少、又は少なくとも９９％の減少である。幾つかの実施形態では、工程（ｂ）におけるレベルの減少は、工程（ａ）における形質膜の細胞外側の単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体のレベルの１００％の減少である。幾つかの実施形態では、哺乳動物細胞は、工程（ｂ）において任意のホルモン又はホルモン類縁体と接触されない。これらの方法の幾つかの実施形態は、（ｃ）哺乳動物細胞（例えば本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれか）を量が増加されたホルモン又はホルモン類縁体と接触させることで、工程（ｂ）のレベルと比較して、細胞の形質膜の細胞膜外側の単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体のレベルの増加を生じさせることを更に含む。
【０２７３】
これらの方法のいずれかの幾つかの実施形態は、哺乳動物細胞（例えば本明細書に記載される哺乳動物細胞のいずれか）に単鎖キメラポリペプチドをコードする核酸を導入して、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を作製することを更に含む。本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施形態では、哺乳動物細胞はＴ細胞（例えばヒトＴ細胞）である。幾つかの実施形態では、Ｔ細胞（例えばヒトＴ細胞）は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、記憶Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及びナチュラルキラーＴ細胞の群から選択される。幾つかの実施形態では、哺乳動物細胞は、以前に被験体（例えばヒト）から得られた哺乳動物細胞である。幾つかの例では、被験体（例えばヒト）は、癌（例えば本明細書に記載されるいずれかの種類の癌）を有すると識別されている又は診断されている。幾つかの実施形態は、被験体から哺乳動物細胞を得ることを更に含む。
【０２７４】
本明細書に記載される方法のいずれかの幾つかの実施形態では、接触させる工程はｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる。幾つかの実施形態では、接触させる工程は哺乳動物において（例えば、被験体において）行われる。幾つかの実施形態では、接触させる工程は、結果として哺乳動物（例えばヒト）における癌の治療をもたらす。
【０２７５】
本明細書で提供される方法のいずれかを用いて治療することができる癌の非限定的な例として、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形腫様／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性新生物、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮体癌、上衣腫、食道癌、鼻腔神経芽細胞腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、消化器カルチノイド腫瘍、胃腸間質腫瘍、胚細胞腫瘍、有毛細胞性白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇及び口腔癌、肺癌、黒色腫、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔癌、口唇癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟組織肉腫、胃癌、精巣癌、咽頭癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、膣癌、並びに外陰癌が挙げられる。
【０２７６】
哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラポリペプチドの毒性をそれらの膜局在を可逆的に変更することにより制御する方法
幾つかの実施形態では、ポリペプチド（例えば単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体）中に存在するＬＢＤに結合するホルモン又はホルモン類縁体の存在下で、本明細書に開示される組成物及び／又は方法を使用して、被験体（例えばヒト）において癌細胞を選択的に死滅させることができる。幾つかの実施形態では、ホルモン又はホルモン類縁体の存在下で、ポリペプチド（例えば、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体）は、哺乳動物細胞の細胞外表面へと局在化して、細胞外部にその抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、又は本明細書に記載される若しくは当該技術分野で知られている任意の他の抗原結合ドメイン）を提示する。次いで、ポリペプチドは、結合する抗原を認識することで、表面に抗原を発現する標的細胞を選択的に死滅させることができる。
【０２７７】
幾つかの実施形態では、細胞外表面のポリペプチド（例えば単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、又は多重鎖キメラ抗原受容体）の局在は、被験体において毒性を引き起こす場合がある。かかる毒性は、例えばサイトカインストーム（高サイトカイン血症又はサイトカイン放出症候群とも称される）によって引き起こされ得る。幾つかの実施形態では、細胞外表面へのポリペプチドのホルモン又はホルモン類縁体誘導性の局在に起因する毒性を経験する被験体は、被験体に投与されるホルモン若しくはホルモン類縁体の用量を減らすこと、又はホルモン若しくはホルモン類縁体の治療を完全に排除することによって治療され得る。かかるホルモン又はホルモン類縁体治療の用量の減少又はその排除は、細胞表面からポリペプチドを除去させ、細胞表面の抗原結合ドメインの提示を減少又は排除させることで、被験体において毒性を減少又は排除させ得る。
【０２７８】
毒性の例示的な症状としては、限定されることなく、高熱、腫脹、悪寒、低血圧、頻脈、無力、頭痛、発疹、いがらっぽい喉、呼吸困難、発赤、極度の疲労、吐き気、及び脳浮腫（脳の腫脹）が挙げられる。幾つかの実施形態では、被験体における毒性は、被験体に対するホルモン又はホルモン類縁体の１回以上の用量の投与の後、被験体における１つ以上のこれらの症状の存在又は重症度を評価することにより判断され得る。幾つかの実施形態では、毒性と関連する１つ以上のこれらの又はその他の症状は、ＬＢＤを有する、単鎖キメラポリペプチド（例えば本明細書に記載される単鎖ポリペプチドのいずれか）、単鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか）、又は多重鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれか）を含む哺乳動物細胞（例えばＴ細胞）、及びＬＢＤを結合するホルモン又はホルモン類縁体を被験体に導入した後に特定され得る。幾つかの実施形態では、毒性と関連する１つ以上のこれらの又はその他の症状の特定されたレベルは、毒性の欠如又は毒性のレベルの減少と関連するベースラインレベルと比較され得る。かかるベースラインレベルは、例えば、哺乳動物細胞、ホルモン若しくはホルモン類縁体、又はそれらの両方の投与前の被験体における１つ以上のこれらの又はその他の症状のレベルであってもよい。さらに又は代替的には、かかるベースラインレベルは、哺乳動物細胞、ホルモン若しくはホルモン類縁体、又はそれらの両方が投与されていない異なる被験体における１つ以上のこれらの又はその他の症状のレベルであってもよい。当業者は、毒性と関連する１つ以上の症状のレベルを特定する好適な臨床上の又は実験室の方法を心得ているであろう。
【０２７９】
幾つかの実施形態では、毒性はサイトカインストームの結果であってもよい。炎症性サイトカイン及び抗炎症性サイトカインはいずれも、サイトカインストームを経験する被験体の血清において上昇される。サイトカインストームを経験する被験体の血清において上昇されるサイトカインの非限定的な例としては、腫瘍壊死因子アルファ、ＩＦＮγ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、及びＩＬ−１０、顆粒球マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、及びＩＬ−５が挙げられる。幾つかの実施形態では、サイトカインストームと関連する１つ以上のこれらの又はその他のサイトカインは、ＬＢＤを有する、単鎖キメラポリペプチド（例えば本明細書に記載される単鎖ポリペプチドのいずれか）、単鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか）、又は多重鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれか）を含む哺乳動物細胞（例えばＴ細胞）、及びＬＢＤを結合するホルモン又はホルモン類縁体を被験体に導入した後に特定される。幾つかの実施形態では、サイトカインストームと関連する１つ以上のこれらの又はその他のサイトカインの特定されたレベルは、サイトカインストームの欠如又はサイトカインストームのレベルの減少と関連するベースラインレベルと比較され得る。かかるベースラインレベルは、例えば、哺乳動物細胞、ホルモン若しくはホルモン類縁体、又はそれらの両方の投与の前の被験体における１つ以上のこれらの又はその他のサイトカインのレベルであってもよい。さらに又は代替的には、かかるベースラインレベルは、哺乳動物細胞、ホルモン若しくはホルモン類縁体、又はそれらの両方が投与されていない異なる被験体における、１つ以上のこれらの又はその他のサイトカインのレベルであってもよい。サイトカインのレベル（例えば、被験体に哺乳動物細胞、及びホルモン若しくはホルモン類縁体を投与した後のサイトカインのレベル、及び／又はサイトカインのベースラインレベル）は、限定されることなく、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロット、抗体アレイパネル、多重アレイ、Ｅｌｉｓｐｏｔアッセイ、免疫組織化学、又はサイトカインレベルの特定に利用可能な様々な市販のアッセイのいずれかを含む様々な方法及び手法のいずれかによって特定され得る。
【０２８０】
幾つかの実施形態では、被験体（例えば哺乳動物、例えばヒト）において癌（例えば本明細書に記載される様々な癌のいずれか）を治療する方法を提供する。幾つかの実施形態では、癌を治療する方法は、（ａ）ホルモン受容体ＬＢＤを有する、単鎖キメラポリペプチド（例えば本明細書に記載される単鎖ポリペプチドのいずれか）、単鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか）、又は多重鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれか）をコードする核酸を含む哺乳動物細胞（例えばＴ細胞）を被験体に投与することと、（ｂ）ＬＢＤを結合するホルモン又はホルモン類縁体を被験体に投与することと、（ｃ）毒性と関連する１つ以上の症状のレベル、及び／又はサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベルを特定することと、（ｄ）特定された毒性と関連する１つ以上の症状のレベル及び／又はサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベルを、症状又はサイトカインのベースラインレベルと比較することと、（ｅ）特定された毒性と関連する１つ以上の症状のレベル及び／又はサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベルが減少されるように、被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量を減少させることとを含む。幾つかの実施形態では、被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体のレベルは、工程（ｅ）において、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％減少される。幾つかの実施形態では、被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体のレベルは、工程（ｅ）において、１００％減少される（例えば、工程（ｅ）で哺乳動物細胞は被験体に投与されない）。幾つかの実施形態では、工程（ｂ）でホルモン又はホルモン類縁体を投与した後、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び／又は多重鎖キメラ抗原受容体は、可逆的に哺乳動物細胞の細胞外表面に局在化する。幾つかの実施形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量を減少させた後、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び／又は多重鎖キメラ抗原受容体は、細胞外表面から除去されるため、毒性（例えば、毒性と関連する１つ以上の症状、及び／又はサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカイン）を減少させる。幾つかの実施形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量を減少させた後、毒性（例えば、毒性と関連する１つ以上の症状、及び／又はサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカイン）は、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％減少される。幾つかの実施形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量を減少させた後、毒性（例えば、毒性と関連する１つ以上の症状、及び／又はサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカイン）は１００％減少される（例えば、被験体は毒性を経験しない、又はベースラインレベルの毒性を経験するに過ぎない）。幾つかの実施形態では、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量を減少させた後、毒性（例えば、毒性と関連する１つ以上の症状、及び／又はサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカイン）は、ベースラインレベルの毒性（例えば、サイトカインストームの欠如又はサイトカインストームのレベルの減少と関連するレベル）まで正常化する。例えば、工程（ｅ）で被験体に投与されるホルモン又はホルモン類縁体の量を減少させた後、毒性は、１０倍、９倍、８倍、７倍、６倍、５倍、４倍、３倍、２倍未満のレベル、又はベースラインレベル未満の毒性まで正常化され得る。
【０２８１】
幾つかの実施形態では、ＬＢＤを有する単鎖キメラポリペプチド（例えば本明細書に記載される単鎖ポリペプチドのいずれか）、単鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される単鎖キメラ抗原受容体のいずれか）、及び／又は多重鎖キメラ抗原受容体（例えば本明細書に記載される多重鎖キメラ抗原受容体のいずれか）を含む哺乳動物細胞（例えばＴ細胞）、及びＬＢＤを結合するホルモン又はホルモン類縁体を被験体に投与することにより、被験体を治療することができる。被験体において毒性のレベルをモニターすることができ、本明細書に記載される方法のいずれかによって、例えばホルモン又はホルモン類縁体のレベルを減少させることによって、毒性を減少させることができる。毒性が減少された後（例えば、ベースラインレベル、又はベースラインレベルを上回るが、十分低いレベルまで）、ホルモン又はホルモン類縁体のレベルは、治療の有効性を高めるため、その後増加されてもよい。幾つかの実施形態では、ホルモン又はホルモン類縁体のレベルを減少させ、その後、なおも有効な一連の治療を提供しながら、毒性を制御するため、複数回増加させる。幾つかの実施形態では、ホルモンのレベルは、その後、ホルモン又はホルモン類縁体が元々投与されたレベルの１００％まで増加される。幾つかの実施形態では、ホルモン又はホルモン類縁体のレベルは、ホルモン又はホルモン類縁体が元々投与されたレベルの少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％のレベルまでその後増加される。幾つかの実施形態では、ホルモン又はホルモン類縁体のレベルは、その後、ホルモン又はホルモン類縁体が元々投与されたレベルよりも高いレベルまで増加される。例えば、後に投与されるホルモン又はホルモン類縁体は、ホルモン又はホルモン類縁体が元々投与されたレベルの少なくとも１００％、少なくとも１１０％、少なくとも、１２０％、少なくとも１３０％、少なくとも１４０％、少なくとも１５０％、少なくとも１６０％、少なくとも１７０％、少なくとも１８０％、少なくとも１９０％、少なくとも２００％、少なくとも３００％、少なくとも４００％、又は少なくとも５００％のレベルで投与されてもよい。
【０２８２】
幾つかの実施形態では、被験体への第１のホルモン又はホルモン類縁体の投与後に生じる毒性は、被験体に第２のホルモン又はホルモン類縁体を投与することによって減少され得る。例えば、第２のホルモン又はホルモン類縁体は、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び／又は多重鎖キメラ抗原受容体の形質膜局在が、第１のホルモン又はホルモン類縁体によって促進される形質膜局在と比較して減少されるように、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び／又は多重鎖キメラ抗原受容体に存在するＬＢＤに対して親和性が減少していてもよい。幾つかの実施形態では、第２のホルモン又はホルモン類縁体は、単鎖キメラポリペプチド、単鎖キメラ抗原受容体、及び／又は多重鎖キメラ抗原受容体の形質膜局在の促進において第１のホルモン又はホルモン類縁体ほど有効ではない場合がある。幾つかの実施形態では、第２のホルモン又はホルモン類縁体は、ＬＢＤへの結合に対して、第１のホルモン又はホルモン類縁体と競合する。
【０２８３】
幾つかの実施形態では、毒性を減少するためにホルモン又はホルモン類縁体のレベルを減少させることに加えて又はそれに代えて、ホルモン又はホルモン類縁体を不活性化する又は捕捉する組成物を投与することにより、毒性を更に減少させることができる。例えば、外因性ＬＢＤは、以前に被験体に投与されたホルモン又はホルモン類縁体を捕捉するため被験体に（例えば薬学的に許容可能な製剤として）投与され得る。別の例として、投与されたホルモン又はホルモン類縁体を不活性化、分解、或いは捕捉する組成物を被験体に投与してもよい。かかる組成物の非限定的な例は、投与されたホルモン又はホルモン類縁体を結合して、細胞膜に侵入できなくする、ＬＢＤを結合できなくする、又はその分解を促進する抗体又は抗体フラグメントである。
【実施例】
【０２８４】
以下の実施例において、本明細書を更に説明するが、これは特許請求の範囲に記載される本発明の範囲を限定するものではない。
【０２８５】
実施例１−コンストラクトの作製
カノニカルキメラ抗原受容体（「カノニカルＣＡＲ」、図１、左）を、タンパク質内の様々な位置にエストロゲン受容体アルファ（「ＥＲａ」）リガンド結合ドメイン（緑色、矢印で示される「ＥＲａ−ＬＢＤ」）を含むように改変した。ＣＡＲの種々の位置（図１、右）にＥＲａ−ＬＢＤを導入して、「ｖ．２」（「ｖ２」又は「Ｖ２」とも表される）、「ｖ．３」（「ｖ３」又は「Ｖ３」とも表される）、及び「ｖ．４」（「ｖ４」又は「Ｖ４」とも表される）と表される種々のバージョンのＥＲａ−ＬＢＤを作製した。また、操作されたタンパク質を含有する細胞の追跡を可能とするため、ｍＣｈｅｒｒｙ融合物も含めた。ｖ．２（それぞれ、配列番号３０及び配列番号３１）、ｖ．３（それぞれ配列番号３２及び配列番号３３）、及びｖ．４（それぞれ、配列番号３４及び配列番号３５）の核酸配列及びポリペプチド配列を以下に提供する。
【０２８６】
配列番号３０
ATGGCTCTGCCTGTGACAGCTCTGCTGCTGCCTCTGGCCCTGCTGCTGCATGCCGCTAGACCTGAGCAGAAGCTGATCTCCGAAGAGGACCTGGACATCCAGATGACCCAGACCACCAGCAGCCTGAGCGCCAGCCTGGGCGATAGAGTGACCATCAGCTGCAGAGCCAGCCAGGACATCAGCAAGTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAACCCGACGGCACCGTGAAGCTGCTGATCTACCACACCAGCAGACTGCACAGCGGCGTGCCCAGCAGATTTTCTGGCAGCGGCTCCGGCACCGACTACAGCCTGACCATCTCCAACCTGGAACAGGAAGATATCGCTACCTACTTCTGTCAGCAAGGCAACACCCTGCCCTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAGCTGGAAATCACAGGCGGCGGAGGATCTGGCGGAGGCGGAAGTGGCGGAGGGGGATCTGAAGTGAAACTGCAGGAAAGCGGCCCTGGCCTGGTGGCCCCATCTCAGTCTCTGAGCGTGACCTGTACCGTGTCCGGCGTGTCCCTGCCTGACTATGGCGTGTCCTGGATCAGACAGCCCCCCAGAAAGGGCCTGGAATGGCTGGGAGTGATCTGGGGCAGCGAGACAACCTACTACAACAGCGCCCTGAAGTCCCGGCTGACCATCATCAAGGACAACTCCAAGAGCCAGGTGTTCCTGAAGATGAACAGCCTGCAGACCGACGACACCGCCATCTACTACTGCGCCAAGCACTACTACTACGGCGGCAGCTACGCCATGGACTACTGGGGCCAGGGCACAAGCGTGACCGTGTCTAGCACAACCACCCCTGCCCCTAGACCTCCAACCCCAGCCCCTACAATCGCCAGCCAGCCTCTGTCTCTGAGGCCCGAGGCTTGTAGACCAGCTGCTGGCGGAGCCGTGCACACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGACATCTACATCTGGGCCCCTCTGGCCGGCACATGTGGCGTGCTGCTGCTGAGCCTCGTGATCACCCTGTACTGCGGATCCAAGCGGGGCAGAAAGAAACTGCTGTACATCTTTAAGCAGCCCTTCATGCGGCCCGTGCAGACCACCCAGGAAGAGGACGGCTGCTCCTGCAGATTCCCCGAGGAAGAAGAAGGCGGCTGCGAGCTGGGCAGCGGATCTGGCAGTGGAAGCGATAGAAGAGGCGGCAGAATGCTGAAACACAAGCGGCAGAGGGACGACGGGGAAGGCAGAGGCGAAGTGGGATCTGCCGGCGATATGAGAGCCGCCAACCTGTGGCCTAGCCCCCTGATGATCAAGCGGAGCAAGAAGAACTCCCTGGCCCTGAGCCTGACCGCCGACCAGATGGTGTCTGCCCTGCTGGATGCCGAGCCCCCCATCCTGTACAGCGAGTACGACCCCACCAGACCCTTCAGCGAGGCCAGCATGATGGGCCTGCTGACCAACCTGGCCGACCGGGAACTGGTGCACATGATCAACTGGGCCAAGCGGGTGCCCGGCTTCGTGGATCTGACACTGCACGACCAGGTGCACCTGCTGGAATGCGCTTGGCTGGAAATCCTGATGATCGGCCTCGTGTGGCGGAGCATGGAACACCCTGGCAAGCTGCTGTTCGCCCCCAACCTGCTGCTGGACCGGAACCAGGGCAAATGCGTGGAAGGCATGGTGGAAATCTTCGACATGCTGCTGGCCACCTCCAGCCGGTTCCGGATGATGAACCTGCAGGGCGAAGAGTTCGTGTGTCTGAAGTCCATCATCCTGCTGAATAGCGGCGTGTACACCTTCCTGAGCAGCACCCTGAAAAGCCTGGAAGAAAAGGACCACATCCACCGGGTGCTGGACAAGATCACCGACACCCTGATTCACCTGATGGCCAAGGCCGGACTGACCCTGCAGCAGCAGCATCAGAGACTGGCTCAGCTGCTGCTGATCCTGTCCCACATCCGGCACATGAGCAACAAGCGGATGGAACATCTGTACAGCATGAAGTGCAAGAACGTGGTGCCTCTGTTCGATCTGCTGCTGGAAATGCTGGACGCCCACAGGCTGCACGCCCCAACATCCAGATCCGGATCTGGAAGTGGCTCCCTGAGAGTGAAGTTTAGCAGAAGCGCCGACGCCCCTGCCTATCAGCAGGGACAGAACCAGCTGTATAACGAGCTGAACCTGGGCAGGCGGGAAGAGTACGACGTGCTGGATAAGAGGCGGGGCAGGGACCCTGAAATGGGCGGCAAACCCAGACGGAAGAACCCCCAGGAAGGCCTGTACAACGAACTGCAGAAAGACAAGATGGCCGAGGCCTACAGCGAGATCGGAATGAAGGGCGAGCGGCGGAGAGGCAAGGGACATGATGGCCTGTACCAGGGCCTGTCCACCGCCACCAAGGACACCTATGACGCCCTGCACATGCAGGCCCTGCCTCCAAGAGGAAGTGGATCTGGGAGCGGCTCTATGGTGTCTAAGGGGGAAGAGGACAACATGGCCATCATCAAAGAATTCATGCGGTTCAAGGTGCACATGGAAGGCTCCGTGAATGGCCACGAATTCGAGATCGAGGGGGAGGGCGAGGGCAGACCTTATGAGGGAACCCAGACCGCCAAGCTGAAAGTGACCAAGGGCGGACCCCTGCCTTTCGCCTGGGATATCCTGTCTCCCCAGTTTATGTACGGCAGCAAGGCCTACGTGAAGCACCCCGCCGACATCCCCGACTACCTGAAGCTGAGCTTCCCTGAGGGCTTCAAGTGGGAGAGAGTGATGAATTTCGAGGACGGCGGAGTCGTGACAGTGACCCAGGATAGCTCTCTGCAGGACGGCGAGTTCATCTACAAAGTGAAGCTGCGGGGCACCAACTTCCCCAGCGACGGACCCGTGATGCAGAAAAAGACCATGGGCTGGGAGGCCAGCTCCGAGAGAATGTACCCAGAGGACGGGGCCCTGAAGGGGGAGATCAAGCAGCGGCTGAAACTGAAGGATGGCGGCCACTACGACGCAGAAGTGAAAACCACCTACAAGGCCAAGAAACCTGTGCAGCTGCCTGGCGCCTACAATGTGAACATCAAGCTGGACATTACCAGCCACAACGAGGACTACACCATCGTGGAACAGTACGAGCGGGCCGAGGGCAGGCATTCTACAGGCGGAATGGATGAACTGTATAAGTGCGTGACCGACTAG
【０２８７】
配列番号３１
MALPVTALLLPLALLLHAARPEQKLISEEDLDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGGGGSGGGGSGGGGSEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCGSKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELGSGSGSGSDRRGGRMLKHKRQRDDGEGRGEVGSAGDMRAANLWPSPLMIKRSKKNSLALSLTADQMVSALLDAEPPILYSEYDPTRPFSEASMMGLLTNLADRELVHMINWAKRVPGFVDLTLHDQVHLLECAWLEILMIGLVWRSMEHPGKLLFAPNLLLDRNQGKCVEGMVEIFDMLLATSSRFRMMNLQGEEFVCLKSIILLNSGVYTFLSSTLKSLEEKDHIHRVLDKITDTLIHLMAKAGLTLQQQHQRLAQLLLILSHIRHMSNKRMEHLYSMKCKNVVPLFDLLLEMLDAHRLHAPTSRSGSGSGSLRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGSGSGSMVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEGTQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNFEDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALKGEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERAEGRHSTGGMDELYKCVTD
【０２８８】
配列番号３２
ATGGCTCTGCCTGTGACAGCTCTGCTGCTGCCTCTGGCCCTGCTGCTGCATGCCGCTAGACCTGAGCAGAAGCTGATCTCCGAAGAGGACCTGGACATCCAGATGACCCAGACCACCAGCAGCCTGAGCGCCAGCCTGGGCGATAGAGTGACCATCAGCTGCAGAGCCAGCCAGGACATCAGCAAGTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAACCCGACGGCACCGTGAAGCTGCTGATCTACCACACCAGCAGACTGCACAGCGGCGTGCCCAGCAGATTTTCTGGCAGCGGCTCCGGCACCGACTACAGCCTGACCATCTCCAACCTGGAACAGGAAGATATCGCTACCTACTTCTGTCAGCAAGGCAACACCCTGCCCTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAGCTGGAAATCACAGGCGGCGGAGGATCTGGCGGAGGCGGAAGTGGCGGAGGGGGATCTGAAGTGAAACTGCAGGAAAGCGGCCCTGGCCTGGTGGCCCCATCTCAGTCTCTGAGCGTGACCTGTACCGTGTCCGGCGTGTCCCTGCCTGACTATGGCGTGTCCTGGATCAGACAGCCCCCCAGAAAGGGCCTGGAATGGCTGGGAGTGATCTGGGGCAGCGAGACAACCTACTACAACAGCGCCCTGAAGTCCCGGCTGACCATCATCAAGGACAACTCCAAGAGCCAGGTGTTCCTGAAGATGAACAGCCTGCAGACCGACGACACCGCCATCTACTACTGCGCCAAGCACTACTACTACGGCGGCAGCTACGCCATGGACTACTGGGGCCAGGGCACAAGCGTGACCGTGTCTAGCACAACCACCCCTGCCCCTAGACCTCCAACCCCAGCCCCTACAATCGCCAGCCAGCCTCTGTCTCTGAGGCCCGAGGCTTGTAGACCAGCTGCTGGCGGAGCCGTGCACACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGACATCTACATCTGGGCCCCTCTGGCCGGCACATGTGGCGTGCTGCTGCTGAGCCTCGTGATCACCCTGTACTGCGGATCCAAGCGGGGCAGAAAGAAACTGCTGTACATCTTTAAGCAGCCCTTCATGCGGCCCGTGCAGACCACCCAGGAAGAGGACGGCTGCTCCTGCAGATTCCCCGAGGAAGAAGAAGGCGGCTGCGAGCTGAGATCCGGATCTGGAAGTGGCTCCCTGAGAGTGAAGTTTAGCAGAAGCGCCGACGCCCCTGCCTATCAGCAGGGACAGAACCAGCTGTATAACGAGCTGAACCTGGGCAGGCGGGAAGAGTACGACGTGCTGGATAAGAGGCGGGGCAGGGACCCTGAAATGGGCGGCAAACCCAGACGGAAGAACCCCCAGGAAGGCCTGTACAACGAACTGCAGAAAGACAAGATGGCCGAGGCCTACAGCGAGATCGGAATGAAGGGCGAGCGGCGGAGAGGCAAGGGACATGATGGCCTGTACCAGGGCCTGTCCACCGCCACCAAGGACACCTATGACGCCCTGCACATGCAGGCCCTGCCTCCAAGAGGCAGCGGATCTGGCAGTGGAAGCGATAGAAGAGGCGGCAGAATGCTGAAACACAAGCGGCAGAGGGACGACGGGGAAGGCAGAGGCGAAGTGGGATCTGCCGGCGATATGAGAGCCGCCAACCTGTGGCCTAGCCCCCTGATGATCAAGCGGAGCAAGAAGAACTCCCTGGCCCTGAGCCTGACCGCCGACCAGATGGTGTCTGCCCTGCTGGATGCCGAGCCCCCCATCCTGTACAGCGAGTACGACCCCACCAGACCCTTCAGCGAGGCCAGCATGATGGGCCTGCTGACCAACCTGGCCGACCGGGAACTGGTGCACATGATCAACTGGGCCAAGCGGGTGCCCGGCTTCGTGGATCTGACACTGCACGACCAGGTGCACCTGCTGGAATGCGCTTGGCTGGAAATCCTGATGATCGGCCTCGTGTGGCGGAGCATGGAACACCCTGGCAAGCTGCTGTTCGCCCCCAACCTGCTGCTGGACCGGAACCAGGGCAAATGCGTGGAAGGCATGGTGGAAATCTTCGACATGCTGCTGGCCACCTCCAGCCGGTTCCGGATGATGAACCTGCAGGGCGAAGAGTTCGTGTGTCTGAAGTCCATCATCCTGCTGAATAGCGGCGTGTACACCTTCCTGAGCAGCACCCTGAAAAGCCTGGAAGAAAAGGACCACATCCACCGGGTGCTGGACAAGATCACCGACACCCTGATTCACCTGATGGCCAAGGCCGGACTGACCCTGCAGCAGCAGCATCAGAGACTGGCTCAGCTGCTGCTGATCCTGTCCCACATCCGGCACATGAGCAACAAGCGGATGGAACATCTGTACAGCATGAAGTGCAAGAACGTGGTGCCTCTGTTCGATCTGCTGCTGGAAATGCTGGACGCCCACAGGCTGCACGCCCCAACATCCGGATCTGGCTCTGGAAGCGGCAGCATGGTGTCTAAGGGGGAAGAGGACAACATGGCCATCATCAAAGAATTCATGCGGTTCAAGGTGCACATGGAAGGCTCCGTGAATGGCCACGAATTCGAGATCGAGGGGGAGGGCGAGGGCAGACCTTATGAGGGAACCCAGACCGCCAAGCTGAAAGTGACCAAGGGCGGACCCCTGCCTTTCGCCTGGGATATCCTGTCTCCCCAGTTTATGTACGGCAGCAAGGCCTACGTGAAGCACCCCGCCGACATCCCCGACTACCTGAAGCTGAGCTTCCCTGAGGGCTTCAAGTGGGAGAGAGTGATGAATTTCGAGGACGGCGGAGTCGTGACAGTGACCCAGGATAGCTCTCTGCAGGACGGCGAGTTCATCTACAAAGTGAAGCTGCGGGGCACCAACTTCCCCAGCGACGGACCCGTGATGCAGAAAAAGACCATGGGCTGGGAGGCCAGCTCCGAGAGAATGTACCCAGAGGACGGGGCCCTGAAGGGGGAGATCAAGCAGCGGCTGAAACTGAAGGATGGCGGCCACTACGACGCAGAAGTGAAAACCACCTACAAGGCCAAGAAACCTGTGCAGCTGCCTGGCGCCTACAATGTGAACATCAAGCTGGACATTACCAGCCACAACGAGGACTACACCATCGTGGAACAGTACGAGCGGGCCGAGGGCAGGCATTCTACAGGCGGAATGGATGAACTGTATAAGTGCGTGACCGACTAG
【０２８９】
配列番号３３
MALPVTALLLPLALLLHAARPEQKLISEEDLDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGGGGSGGGGSGGGGSEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCGSKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRSGSGSGSLRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGSGSGSDRRGGRMLKHKRQRDDGEGRGEVGSAGDMRAANLWPSPLMIKRSKKNSLALSLTADQMVSALLDAEPPILYSEYDPTRPFSEASMMGLLTNLADRELVHMINWAKRVPGFVDLTLHDQVHLLECAWLEILMIGLVWRSMEHPGKLLFAPNLLLDRNQGKCVEGMVEIFDMLLATSSRFRMMNLQGEEFVCLKSIILLNSGVYTFLSSTLKSLEEKDHIHRVLDKITDTLIHLMAKAGLTLQQQHQRLAQLLLILSHIRHMSNKRMEHLYSMKCKNVVPLFDLLLEMLDAHRLHAPTSGSGSGSGSMVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEGTQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNFEDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALKGEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERAEGRHSTGGMDELYKCVTD
【０２９０】
配列番号３４
ATGGCTCTGCCTGTGACAGCTCTGCTGCTGCCTCTGGCCCTGCTGCTGCATGCCGCTAGACCTGAGCAGAAGCTGATCTCCGAAGAGGACCTGGACATCCAGATGACCCAGACCACCAGCAGCCTGAGCGCCAGCCTGGGCGATAGAGTGACCATCAGCTGCAGAGCCAGCCAGGACATCAGCAAGTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAACCCGACGGCACCGTGAAGCTGCTGATCTACCACACCAGCAGACTGCACAGCGGCGTGCCCAGCAGATTTTCTGGCAGCGGCTCCGGCACCGACTACAGCCTGACCATCTCCAACCTGGAACAGGAAGATATCGCTACCTACTTCTGTCAGCAAGGCAACACCCTGCCCTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAGCTGGAAATCACAGGCGGCGGAGGATCTGGCGGAGGCGGAAGTGGCGGAGGGGGATCTGAAGTGAAACTGCAGGAAAGCGGCCCTGGCCTGGTGGCCCCATCTCAGTCTCTGAGCGTGACCTGTACCGTGTCCGGCGTGTCCCTGCCTGACTATGGCGTGTCCTGGATCAGACAGCCCCCCAGAAAGGGCCTGGAATGGCTGGGAGTGATCTGGGGCAGCGAGACAACCTACTACAACAGCGCCCTGAAGTCCCGGCTGACCATCATCAAGGACAACTCCAAGAGCCAGGTGTTCCTGAAGATGAACAGCCTGCAGACCGACGACACCGCCATCTACTACTGCGCCAAGCACTACTACTACGGCGGCAGCTACGCCATGGACTACTGGGGCCAGGGCACAAGCGTGACCGTGTCTAGCACAACCACCCCTGCCCCTAGACCTCCAACCCCAGCCCCTACAATCGCCAGCCAGCCTCTGTCTCTGAGGCCCGAGGCTTGTAGACCAGCTGCTGGCGGAGCCGTGCACACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGACATCTACATCTGGGCCCCTCTGGCCGGCACATGTGGCGTGCTGCTGCTGAGCCTCGTGATCACCCTGTACTGCGGATCCGGCAGCGGATCTGGCAGTGGAAGCGATAGAAGAGGCGGCAGAATGCTGAAACACAAGCGGCAGAGGGACGACGGGGAAGGCAGAGGCGAAGTGGGATCTGCCGGCGATATGAGAGCCGCCAACCTGTGGCCTAGCCCCCTGATGATCAAGCGGAGCAAGAAGAACTCCCTGGCCCTGAGCCTGACCGCCGACCAGATGGTGTCTGCCCTGCTGGATGCCGAGCCCCCCATCCTGTACAGCGAGTACGACCCCACCAGACCCTTCAGCGAGGCCAGCATGATGGGCCTGCTGACCAACCTGGCCGACCGGGAACTGGTGCACATGATCAACTGGGCCAAGCGGGTGCCCGGCTTCGTGGATCTGACACTGCACGACCAGGTGCACCTGCTGGAATGCGCTTGGCTGGAAATCCTGATGATCGGCCTCGTGTGGCGGAGCATGGAACACCCTGGCAAGCTGCTGTTCGCCCCCAACCTGCTGCTGGACCGGAACCAGGGCAAATGCGTGGAAGGCATGGTGGAAATCTTCGACATGCTGCTGGCCACCTCCAGCCGGTTCCGGATGATGAACCTGCAGGGCGAAGAGTTCGTGTGTCTGAAGTCCATCATCCTGCTGAATAGCGGCGTGTACACCTTCCTGAGCAGCACCCTGAAAAGCCTGGAAGAAAAGGACCACATCCACCGGGTGCTGGACAAGATCACCGACACCCTGATTCACCTGATGGCCAAGGCCGGACTGACCCTGCAGCAGCAGCATCAGAGACTGGCTCAGCTGCTGCTGATCCTGTCCCACATCCGGCACATGAGCAACAAGCGGATGGAACATCTGTACAGCATGAAGTGCAAGAACGTGGTGCCTCTGTTCGATCTGCTGCTGGAAATGCTGGACGCCCACAGGCTGCACGCCCCAACATCCGGATCTGGCTCTGGAAGCGGCAGCAAGCGGGGCAGAAAGAAACTGCTGTACATCTTTAAGCAGCCCTTCATGCGGCCCGTGCAGACCACCCAGGAAGAGGACGGCTGCTCCTGCAGATTCCCCGAGGAAGAAGAAGGCGGCTGCGAGCTGAGATCCGGATCTGGAAGTGGCTCCCTGAGAGTGAAGTTTAGCAGAAGCGCCGACGCCCCTGCCTATCAGCAGGGACAGAACCAGCTGTATAACGAGCTGAACCTGGGCAGGCGGGAAGAGTACGACGTGCTGGATAAGAGGCGGGGCAGGGACCCTGAAATGGGCGGCAAACCCAGACGGAAGAACCCCCAGGAAGGCCTGTACAACGAACTGCAGAAAGACAAGATGGCCGAGGCCTACAGCGAGATCGGAATGAAGGGCGAGCGGCGGAGAGGCAAGGGACATGATGGCCTGTACCAGGGCCTGTCCACCGCCACCAAGGACACCTATGACGCCCTGCACATGCAGGCCCTGCCTCCAAGAGGAAGTGGATCTGGGAGCGGCTCTATGGTGTCTAAGGGGGAAGAGGACAACATGGCCATCATCAAAGAATTCATGCGGTTCAAGGTGCACATGGAAGGCTCCGTGAATGGCCACGAATTCGAGATCGAGGGGGAGGGCGAGGGCAGACCTTATGAGGGAACCCAGACCGCCAAGCTGAAAGTGACCAAGGGCGGACCCCTGCCTTTCGCCTGGGATATCCTGTCTCCCCAGTTTATGTACGGCAGCAAGGCCTACGTGAAGCACCCCGCCGACATCCCCGACTACCTGAAGCTGAGCTTCCCTGAGGGCTTCAAGTGGGAGAGAGTGATGAATTTCGAGGACGGCGGAGTCGTGACAGTGACCCAGGATAGCTCTCTGCAGGACGGCGAGTTCATCTACAAAGTGAAGCTGCGGGGCACCAACTTCCCCAGCGACGGACCCGTGATGCAGAAAAAGACCATGGGCTGGGAGGCCAGCTCCGAGAGAATGTACCCAGAGGACGGGGCCCTGAAGGGGGAGATCAAGCAGCGGCTGAAACTGAAGGATGGCGGCCACTACGACGCAGAAGTGAAAACCACCTACAAGGCCAAGAAACCTGTGCAGCTGCCTGGCGCCTACAATGTGAACATCAAGCTGGACATTACCAGCCACAACGAGGACTACACCATCGTGGAACAGTACGAGCGGGCCGAGGGCAGGCATTCTACAGGCGGAATGGATGAACTGTATAAGTGCGTGACCGACTA
【０２９１】
配列番号３５
MALPVTALLLPLALLLHAARPEQKLISEEDLDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGGGGSGGGGSGGGGSEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCGSGSGSGSGSDRRGGRMLKHKRQRDDGEGRGEVGSAGDMRAANLWPSPLMIKRSKKNSLALSLTADQMVSALLDAEPPILYSEYDPTRPFSEASMMGLLTNLADRELVHMINWAKRVPGFVDLTLHDQVHLLECAWLEILMIGLVWRSMEHPGKLLFAPNLLLDRNQGKCVEGMVEIFDMLLATSSRFRMMNLQGEEFVCLKSIILLNSGVYTFLSSTLKSLEEKDHIHRVLDKITDTLIHLMAKAGLTLQQQHQRLAQLLLILSHIRHMSNKRMEHLYSMKCKNVVPLFDLLLEMLDAHRLHAPTSGSGSGSGSKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRSGSGSGSLRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGSGSGSMVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEGTQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNFEDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALKGEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERAEGRHSTGGMDELYKCVTD
【０２９２】
実施例２−ＮＨＲ−ＬＢＤ含有抗ＣＤ１９キメラ抗原受容体はＣＡＲのリガンド誘導性表面発現を示す
実施例１に記載されるカノニカルＣＡＲをコードするレンチウイルスベクターを用いて、又は抗ＣＤ１９（ＦＭＣ６３）ＥＲａ-ＬＢＤを含むｖ２、ｖ３及びｖ４のＣＡＲコンストラクトを用いてＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞を形質導入した。次いで、細胞を処理しないままにするか、又はＥＲａ−ＬＢＤに対するリガンドで処理した。１時間の薬物処理の後、細胞をプロテインＬ−ビオチンで染色し（プロテインＬは細胞外ｓｃＦｖに結合する）、次いで、ストレプトアビジン−ＢＶ４２１で染色してＣＡＲの表面発現を検出した。その後、ｍＣｈｅｒｒｙ発現について及び細胞表面のＣＡＲの存在についてフローサイトメトリーにより細胞を分析した（図２Ａ）。カノニカルＣＡＲは、薬物の有無にかかわらず、同じレベルで表面に発現された（図２Ａ、「カノニカルＣＡＲ」の見出しのドットプロット）。対照的に、ＥＲａ−ＬＢＤを含有するｖ２及びｖ４のＣＡＲ（本明細書に記載される例示的な単鎖キメラ抗原受容体）はリガンドの存在下で発現されるが（ｍＣｈｅｒｒｙ陽性発現によってアッセイされる）、リガンドの不在下では、細胞表面にＣＡＲは検出されない（図２Ａ、上段、プロテインＬ染色、「ｖ２」及び「ｖ４」の見出しのドットプロット）。５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴによる処理の後、対照ＣＡＲと同等のレベルで、細胞表面にＣＡＲが検出された（図２Ａ、下段、プロテインＬ染色）。注目すべきことに、全ての設計が同じように挙動するのではなく、ｖ３はリガンドの不在下で或る程度のＣＡＲのベース（basal）表面発現を有し（図２Ａ、見出し「ｖ３」の上段ドットプロット）、発現はリガンドの添加によって更に増加される（図２Ａ、見出し「ｖ３」の下段ドットプロット）。
【０２９３】
ｖ４  ＣＡＲコンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて、初代ＣＤ４及びＣＤ８ヒトＴ細胞を形質導入した。この実施例に記載される通り細胞を処理し、抗ｃＭｙｃ抗体を使用して染色し、細胞表面のｃＭｙｃタグ付ｓｃＦｖを検出した。５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴリガンドとのＴ細胞の共培養後にＣＤ４及びＣＤ８の両方のＴ細胞で表面誘導を観察し（図２Ｂ）、表面誘導の表現型がＪｕｒｋａｔ細胞から初代ヒトＴ細胞まで及ぶことを実証した。
【０２９４】
実施例３−ＮＨＲ−ＬＢＤ融合タンパク質は多様な細胞型においてリガンド誘導性表面発現を示す
実施例１に記載されるＥＲａ−ＬＢＤ含有ＦＭＣ６３  ＣＡＲ融合物をコードするレンチウイルスベクターを用いて、ＨＥＫ−２９３Ｔ細胞を形質導入した。その細胞を処理しないままにするか、又は５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴと共に２時間インキュベートし、次いで、表面ＣＡＲ発現に対して染色した。実施例２で実証されたＪｕｒｋａｔ細胞及び初代Ｔ細胞におけるＥＲａ  ＬＢＤの結果と一致して、幾つかのＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲ融合物はリガンドの不在下でＣＡＲの最小限の表面発現を示し、リガンド処理によって強くアップレギュレートされた表面ＣＡＲを示した（図３）。これらのデータは、ＮＨＲ−ＬＢＤ  ＣＡＲ融合物のリガンド誘導性表面発現が、不死化細胞（Ｊｕｒｋａｔ及びＨＥＫ−２９３Ｔ）及び初代細胞（ヒトのＣＤ４  Ｔ細胞及びＣＤ８  Ｔ細胞）と並んで、リンパ細胞型（Ｊｕｒｋａｔ及びヒトＴ）及び非リンパ細胞型（ＨＥＫ−２９３Ｔ）を含む、多様な細胞型において作動することを示す。
【０２９５】
実施例４−ＮＨＲ  ＬＢＤ−ＣＡＲ融合物のリガンド誘導性表面発現は異なるｓｃＦｖ間で保存される
ＮＨＲ  ＬＢＤ−ＣＡＲ融合タンパク質の保存された機能及びモジュラリティーを実証するため、Ｖ４中のＦＭＣ６３  ｓｃＦｖを、Ｂ細胞成熟抗原（「ＢＣＭＡ」）を認識する異なるｓｃＦｖ（Ｊ６Ｍ０）で置換した。ＮＨＲ−ＬＢＤ  ＣＡＲ融合物をコードするレンチウイルスベクターを用いて初代ヒトＣＤ４  Ｔ細胞を形質導入し、処理しないままにするか、又はＥＲａリガンドである４−ＯＨＴ  ５００ｎｇ／ｍＬで処理した。ＦＭＣ６３  ＮＨＲ  ＬＢＤ−ＣＡＲ融合物に類似して、Ｊ６Ｍ０  ｓｃＦｖを有するＮＨＲ  ＬＢＤ−ＣＡＲは、リガンド誘導性表面発現を示した（図４）。
【０２９６】
実施例５−ＮＨＲ  ＬＢＤ融合タンパク質のリガンド誘導性表面輸送はカノニカルＣＡＲに由来するｓｃＦｖ又は細胞内ドメインを必要としない
実施例２で試験したＬＢＤ−ＣＡＲ融合物は、ＮＨＲ  ＬＢＤドメインに加えて、ＣＤ１３７細胞内ドメイン、ＣＤ３ｚ細胞内シグナル伝達ドメイン及びｓｃＦｖドメインを含む、多くのタンパク質モチーフを含有する。ＣＡＲコンストラクト（ＣＤ１３７細胞内ドメイン及びＣＤ３ｚ細胞内ドメイン）の細胞内部分がリガンド誘導性表面輸送に関与するかどうかを判断するため、これらの領域を欠くコンストラクト（「ｖ５」、図５Ａ、左）を作製し、初代ヒトＴ細胞において試験した。コンストラクトｖ５はｓｃＦｖドメイン及びｍＣｈｅｒｒｙドメインを含む。コンストラクトｖ５は、実施例２のコンストラクトｖ２及びコンストラクトｖ４のものに匹敵するリガンド誘導性輸送を示し、ＣＡＲ細胞内モチーフがリガンド誘導性輸送を担っていないことを示した（図５Ａ、右）。ｖ５のヌクレオチド配列（配列番号３６）及びアミノ酸配列（配列番号３７）を以下に示す。
【０２９７】
配列番号３６
ATGGCTCTGCCTGTGACAGCTCTGCTGCTGCCTCTGGCCCTGCTGCTGCATGCCGCTAGACCTGAGCAGAAGCTGATCTCCGAAGAGGACCTGGACATCCAGATGACCCAGACCACCAGCAGCCTGAGCGCCAGCCTGGGCGATAGAGTGACCATCAGCTGCAGAGCCAGCCAGGACATCAGCAAGTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAACCCGACGGCACCGTGAAGCTGCTGATCTACCACACCAGCAGACTGCACAGCGGCGTGCCCAGCAGATTTTCTGGCAGCGGCTCCGGCACCGACTACAGCCTGACCATCTCCAACCTGGAACAGGAAGATATCGCTACCTACTTCTGTCAGCAAGGCAACACCCTGCCCTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAGCTGGAAATCACAGGCGGCGGAGGATCTGGCGGAGGCGGAAGTGGCGGAGGGGGATCTGAAGTGAAACTGCAGGAAAGCGGCCCTGGCCTGGTGGCCCCATCTCAGTCTCTGAGCGTGACCTGTACCGTGTCCGGCGTGTCCCTGCCTGACTATGGCGTGTCCTGGATCAGACAGCCCCCCAGAAAGGGCCTGGAATGGCTGGGAGTGATCTGGGGCAGCGAGACAACCTACTACAACAGCGCCCTGAAGTCCCGGCTGACCATCATCAAGGACAACTCCAAGAGCCAGGTGTTCCTGAAGATGAACAGCCTGCAGACCGACGACACCGCCATCTACTACTGCGCCAAGCACTACTACTACGGCGGCAGCTACGCCATGGACTACTGGGGCCAGGGCACAAGCGTGACCGTGTCTAGCACAACCACCCCTGCCCCTAGACCTCCAACCCCAGCCCCTACAATCGCCAGCCAGCCTCTGTCTCTGAGGCCCGAGGCTTGTAGACCAGCTGCTGGCGGAGCCGTGCACACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGACATCTACATCTGGGCCCCTCTGGCCGGCACATGTGGCGTGCTGCTGCTGAGCCTCGTGATCACCCTGTACTGCGGATCCGGCAGCGGATCTGGCAGTGGAAGCGATAGAAGAGGCGGCAGAATGCTGAAACACAAGCGGCAGAGGGACGACGGGGAAGGCAGAGGCGAAGTGGGATCTGCCGGCGATATGAGAGCCGCCAACCTGTGGCCTAGCCCCCTGATGATCAAGCGGAGCAAGAAGAACTCCCTGGCCCTGAGCCTGACCGCCGACCAGATGGTGTCTGCCCTGCTGGATGCCGAGCCCCCCATCCTGTACAGCGAGTACGACCCCACCAGACCCTTCAGCGAGGCCAGCATGATGGGCCTGCTGACCAACCTGGCCGACCGGGAACTGGTGCACATGATCAACTGGGCCAAGCGGGTGCCCGGCTTCGTGGATCTGACACTGCACGACCAGGTGCACCTGCTGGAATGCGCTTGGCTGGAAATCCTGATGATCGGCCTCGTGTGGCGGAGCATGGAACACCCTGGCAAGCTGCTGTTCGCCCCCAACCTGCTGCTGGACCGGAACCAGGGCAAATGCGTGGAAGGCATGGTGGAAATCTTCGACATGCTGCTGGCCACCTCCAGCCGGTTCCGGATGATGAACCTGCAGGGCGAAGAGTTCGTGTGTCTGAAGTCCATCATCCTGCTGAATAGCGGCGTGTACACCTTCCTGAGCAGCACCCTGAAAAGCCTGGAAGAAAAGGACCACATCCACCGGGTGCTGGACAAGATCACCGACACCCTGATTCACCTGATGGCCAAGGCCGGACTGACCCTGCAGCAGCAGCATCAGAGACTGGCTCAGCTGCTGCTGATCCTGTCCCACATCCGGCACATGAGCAACAAGCGGATGGAACATCTGTACAGCATGAAGTGCAAGAACGTGGTGCCTCTGTTCGATCTGCTGCTGGAAATGCTGGACGCCCACAGGCTGCACGCCCCAACATCCGGATCTGGCTCTGGAAGCGGCAGCATGGTGTCTAAGGGGGAAGAGGACAACATGGCCATCATCAAAGAATTCATGCGGTTCAAGGTGCACATGGAAGGCTCCGTGAATGGCCACGAATTCGAGATCGAGGGGGAGGGCGAGGGCAGACCTTATGAGGGAACCCAGACCGCCAAGCTGAAAGTGACCAAGGGCGGACCCCTGCCTTTCGCCTGGGATATCCTGTCTCCCCAGTTTATGTACGGCAGCAAGGCCTACGTGAAGCACCCCGCCGACATCCCCGACTACCTGAAGCTGAGCTTCCCTGAGGGCTTCAAGTGGGAGAGAGTGATGAATTTCGAGGACGGCGGAGTCGTGACAGTGACCCAGGATAGCTCTCTGCAGGACGGCGAGTTCATCTACAAAGTGAAGCTGCGGGGCACCAACTTCCCCAGCGACGGACCCGTGATGCAGAAAAAGACCATGGGCTGGGAGGCCAGCTCCGAGAGAATGTACCCAGAGGACGGGGCCCTGAAGGGGGAGATCAAGCAGCGGCTGAAACTGAAGGATGGCGGCCACTACGACGCAGAAGTGAAAACCACCTACAAGGCCAAGAAACCTGTGCAGCTGCCTGGCGCCTACAATGTGAACATCAAGCTGGACATTACCAGCCACAACGAGGACTACACCATCGTGGAACAGTACGAGCGGGCCGAGGGCAGGCATTCTACAGGCGGAATGGATGAACTGTATAAGTGCGTGACCGACTAG
【０２９８】
配列番号３７
MALPVTALLLPLALLLHAARPEQKLISEEDLDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGGGGSGGGGSGGGGSEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCGSGSGSGSGSDRRGGRMLKHKRQRDDGEGRGEVGSAGDMRAANLWPSPLMIKRSKKNSLALSLTADQMVSALLDAEPPILYSEYDPTRPFSEASMMGLLTNLADRELVHMINWAKRVPGFVDLTLHDQVHLLECAWLEILMIGLVWRSMEHPGKLLFAPNLLLDRNQGKCVEGMVEIFDMLLATSSRFRMMNLQGEEFVCLKSIILLNSGVYTFLSSTLKSLEEKDHIHRVLDKITDTLIHLMAKAGLTLQQQHQRLAQLLLILSHIRHMSNKRMEHLYSMKCKNVVPLFDLLLEMLDAHRLHAPTSGSGSGSGSMVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEGTQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNFEDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALKGEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERAEGRHSTGGMDELYKCVTD
【０２９９】
細胞外ｓｃＦｖがリガンド誘導性表面発現に関与したかどうかを試験するため、ｓｃＦｖを欠くコンストラクトを作製し、タンパク質の表面検出を可能にするため、その場所にＦＬＡＧタグを挿入した（このコンストラクトに対する核酸及びポリペプチドの配列をそれぞれ下記の配列番号３８及び配列番号３９として示す）。ＥＲａ−ＬＢＤ融合タンパク質をコードするレンチウイルスベクターを用いてＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞を形質導入し、ＥＲａリガンドである４−ＯＨＴの存在下及び不在下で上記ポリペプチドの表面発現に対して染色した。リガンド処理は、上記ポリペプチドのロバストな表面検出を誘導し（図５Ｂ）、ＮＨＲ−ＬＢＤ媒介表面発現がｓｃＦｖを必要とせず、上記の技術を多様なポリペプチドに幅広く一般化できることを示した。
【０３００】
配列番号３８
ATGATCCACCTGGGACACATCCTGTTTTTGCTGCTGCTGCCAGTGGCTGCCGCCgattacaaagacgacgatgataaaCAGACAACACCAGGCGAGAGATCTAGCCTGCCCGCCTTCTACCCTGGCACCAGCGGCTCTTGTTCTGGCTGTGGCAGCCTGTCTCTGCCCatctatatttgggcacccctggctggaacctgcggagtgctgctgctgtctctcgtgattacactgtattgcAAAAGGGGCCGGAAAAAGCTGCTGTATATTTTCAAACAGCCTTTTATGAGGCCTGTGCAGACAACACAGGAAGAGGACGGCTGTAGCTGTCGGTTCCCCGAAGAGGAAGAGGGGGGCTGCGAACTGggatcaggcagtggctctggcagcGATAGAAGAGGCGGCAGAATGCTGAAACACAAGCGGCAGAGGGACGACGGGGAAGGCAGAGGCGAAGTGGGATCTGCCGGCGATATGAGAGCCGCCAACCTGTGGCCTAGCCCCCTGATGATCAAGCGGAGCAAGAAGAACTCCCTGGCCCTGAGCCTGACCGCCGACCAGATGGTGTCTGCCCTGCTGGATGCCGAGCCCCCCATCCTGTACAGCGAGTACGACCCCACCAGACCCTTCAGCGAGGCCAGCATGATGGGCCTGCTGACCAACCTGGCCGACCGGGAACTGGTGCACATGATCAACTGGGCCAAGCGGGTGCCCGGCTTCGTGGATCTGACACTGCACGACCAGGTGCACCTGCTGGAATGCGCTTGGCTGGAAATCCTGATGATCGGCCTCGTGTGGCGGAGCATGGAACACCCTGGCAAGCTGCTGTTCGCCCCCAACCTGCTGCTGGACCGGAACCAGGGCAAATGCGTGGAAGGCATGGTGGAAATCTTCGACATGCTGCTGGCCACCTCCAGCCGGTTCCGGATGATGAACCTGCAGGGCGAAGAGTTCGTGTGTCTGAAGTCCATCATCCTGCTGAATAGCGGCGTGTACACCTTCCTGAGCAGCACCCTGAAAAGCCTGGAAGAAAAGGACCACATCCACCGGGTGCTGGACAAGATCACCGACACCCTGATTCACCTGATGGCCAAGGCCGGACTGACCCTGCAGCAGCAGCATCAGAGACTGGCTCAGCTGCTGCTGATCCTGTCCCACATCCGGCACATGAGCAACAAGCGGATGGAACATCTGTACAGCATGAAGTGCAAGAACGTGGTGCCTCTGTTCGATCTGCTGCTGGAAATGCTGGACGCCCACAGGCTGCACGCCCCAACATCCaGATCCggatctggaagtggctccCTGAGAGTGAAGTTTAGCAGAAGCGCCGACGCCCCTGCCTATCAGCAGGGACAGAACCAGCTGTATAACGAGCTGAACCTGGGCAGGCGGGAAGAGTACGACGTGCTGGATAAGAGGCGGGGCAGGGACCCTGAAATGGGCGGCAAACCCAGACGGAAGAACCCCCAGGAAGGCCTGTACAACGAACTGCAGAAAGACAAGATGGCCGAGGCCTACAGCGAGATCGGAATGAAGGGCGAGCGGCGGAGAGGCAAGGGACATGATGGCCTGTACCAGGGCCTGTCCACCGCCACCAAGGACACCTATGACGCCCTGCACATGCAGGCCCTGCCTCCAAGAggaagtggatctgggagcggctctatggtgtctaagggggaagaggacaacatggccatcatcaaagaattcatgcggttcaaggtgcacatggaaggctccgtgaatggccacgaattcgagatcgagggggagggcgagggcagaccttatgagggaacccagaccgccaagctgaaagtgaccaagggcggacccctgcctttcgcctgggatatcctgtctccccagtttatgtacggcagcaaggcctacgtgaagcaccccgccgacatccccgactacctgaagctgagcttccctgagggcttcaagtgggagagagtgatgaatttcgaggacggcggagtcgtgacagtgacccaggatagctctctgcaggacggcgagttcatctacaaagtgaagctgcggggcaccaacttccccagcgacggacccgtgatgcagaaaaagaccatgggctgggaggccagctccgagagaatgtacccagaggacggggccctgaagggggagatcaagcagcggctgaaactgaaggatggcggccactacgacgcagaagtgaaaaccacctacaaggccaagaaacctgtgcagctgcctggcgcctacaatgtgaacatcaagctggacattaccagccacaacgaggactacaccatcgtggaacagtacgagcgggccgagggcaggcattctacaggcggaatggatgaactgtataagtgcgtgaccgacTAG
【０３０１】
配列番号３９
MIHLGHILFLLLLPVAAADYKDDDDKQTTPGERSSLPAFYPGTSGSCSGCGSLSLPIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELGSGSGSGSDRRGGRMLKHKRQRDDGEGRGEVGSAGDMRAANLWPSPLMIKRSKKNSLALSLTADQMVSALLDAEPPILYSEYDPTRPFSEASMMGLLTNLADRELVHMINWAKRVPGFVDLTLHDQVHLLECAWLEILMIGLVWRSMEHPGKLLFAPNLLLDRNQGKCVEGMVEIFDMLLATSSRFRMMNLQGEEFVCLKSIILLNSGVYTFLSSTLKSLEEKDHIHRVLDKITDTLIHLMAKAGLTLQQQHQRLAQLLLILSHIRHMSNKRMEHLYSMKCKNVVPLFDLLLEMLDAHRLHAPTSRSGSGSGSLRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGSGSGSMVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEGTQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNFEDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALKGEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERAEGRHSTGGMDELYKCVTD
【０３０２】
配列番号３９のポリペプチドは、以下のドメインを含む：Ｄａｐ１０シグナルペプチド（ＭＩＨＬＧＨＩＬＦＬＬＬＬＰＶＡＡＡ、配列番号４０）、ｆｌａｇタグ（ＤＹＫＤＤＤＤＫ、配列番号４１）、Ｄａｐ１０細胞外ドメイン（ＱＴＴＰＧＥＲＳＳＬＰＡＦＹＰＧＴＳＧＳＣＳＧＣＧＳＬＳＬＰ、配列番号４２）、ＣＤ８膜貫通ドメイン（ＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣ、配列番号４３）、４−１ＢＢ共刺激ドメイン（ＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ、配列番号４４）、第１のリンカー（ＧＳＧＳＧＳＧＳ、配列番号４５）、修飾ＥＲａドメイン（ＤＲＲＧＧＲＭＬＫＨＫＲＱＲＤＤＧＥＧＲＧＥＶＧＳＡＧＤＭＲＡＡＮＬＷＰＳＰＬＭＩＫＲＳＫＫＮＳＬＡＬＳＬＴＡＤＱＭＶＳＡＬＬＤＡＥＰＰＩＬＹＳＥＹＤＰＴＲＰＦＳＥＡＳＭＭＧＬＬＴＮＬＡＤＲＥＬＶＨＭＩＮＷＡＫＲＶＰＧＦＶＤＬＴＬＨＤＱＶＨＬＬＥＣＡＷＬＥＩＬＭＩＧＬＶＷＲＳＭＥＨＰＧＫＬＬＦＡＰＮＬＬＬＤＲＮＱＧＫＣＶＥＧＭＶＥＩＦＤＭＬＬＡＴＳＳＲＦＲＭＭＮＬＱＧＥＥＦＶＣＬＫＳＩＩＬＬＮＳＧＶＹＴＦＬＳＳＴＬＫＳＬＥＥＫＤＨＩＨＲＶＬＤＫＩＴＤＴＬＩＨＬＭＡＫＡＧＬＴＬＱＱＱＨＱＲＬＡＱＬＬＬＩＬＳＨＩＲＨＭＳＮＫＲＭＥＨＬＹＳＭＫＣＫＮＶＶＰＬＦＤＬＬＬＥＭＬＤＡＨＲＬＨＡＰＴＳ、配列番号４６）、第２のリンカー（ＲＳＧＳＧＳＧＳ、配列番号４７）、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン（ＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ、配列番号４８）、第３リンカー（ＧＳＧＳＧＳＧＳ、配列番号４９）、ｍＣｈｅｒｒｙ（ＭＶＳＫＧＥＥＤＮＭＡＩＩＫＥＦＭＲＦＫＶＨＭＥＧＳＶＮＧＨＥＦＥＩＥＧＥＧＥＧＲＰＹＥＧＴＱＴＡＫＬＫＶＴＫＧＧＰＬＰＦＡＷＤＩＬＳＰＱＦＭＹＧＳＫＡＹＶＫＨＰＡＤＩＰＤＹＬＫＬＳＦＰＥＧＦＫＷＥＲＶＭＮＦＥＤＧＧＶＶＴＶＴＱＤＳＳＬＱＤＧＥＦＩＹＫＶＫＬＲＧＴＮＦＰＳＤＧＰＶＭＱＫＫＴＭＧＷＥＡＳＳＥＲＭＹＰＥＤＧＡＬＫＧＥＩＫＱＲＬＫＬＫＤＧＧＨＹＤＡＥＶＫＴＴＹＫＡＫＫＰＶＱＬＰＧＡＹＮＶＮＩＫＬＤＩＴＳＨＮＥＤＹＴＩＶＥＱＹＥＲＡＥＧＲＨＳＴＧＧＭＤＥＬＹＫＣＶＴＤ、配列番号５０）。
【０３０３】
実施例６−ＮＨＲ−ＬＢＤ融合コンストラクトのリガンド誘導性表面発現は、プロゲステロン受容体（ＰＲ）を含む異なるＮＨＲまで及ぶ
プロゲステロン受容体（「ＰＲ」）ＬＢＤ融合物がリガンド誘導性表面発現を示すかどうか試験するため、コンストラクト（ｖ３３）を作製した（このコンストラクトに対する核酸及びポリペプチドの配列をそれぞれ配列番号５１及び配列番号５２として以下に示す）。試験したコンストラクトは、表面検出のためのＮ末端ＦＬＡＧタグを含んだ。該コンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いてＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞を形質導入し、処理しないままにするか、又はＰＲリガンドであるミフェプリストン５００ｎｇ／ｍＬで処理した。細胞を、２時間の薬物処理の後、表面のタンパク質発現に対して染色した。コンストラクトは、フローサイトメトリーによって検出されるポリペプチドのリガンド誘導性表面発現を示し（図６）、他のＮＨＲ−ＬＢＤ（ＥＲａとは別に）を使用してリガンド誘導性表面発現を伴うコンストラクトを作製することができたこと、またＮＨＲ−ＬＢＤ融合タンパク質のリガンド誘導性表面発現が一般化可能な現象であることを示した。
【０３０４】
配列番号５１
ATGATCCACCTGGGACACATCCTGTTTTTGCTGCTGCTGCCAGTGGCTGCCGCCgattacaaagacgacgatgataaaCAGACAACACCAGGCGAGAGATCTAGCCTGCCCGCCTTCTACCCTGGCACCAGCGGCTCTTGTTCTGGCTGTGGCAGCCTGTCTCTGCCCatctatatttgggcacccctggctggaacctgcggagtgctgctgctgtctctcgtgattacactgtattgcAAAAGGGGCCGGAAAAAGCTGCTGTATATTTTCAAACAGCCTTTTATGAGGCCTGTGCAGACAACACAGGAAGAGGACGGCTGTAGCTGTCGGTTCCCCGAAGAGGAAGAGGGGGGCTGCGAACTGggatcaggcagtggctctggcagcGGGCAAGACATTCAGCTCATACCTCCTTTGATAAATTTGCTGATGTCTATAGAACCAGATGTCATATACGCTGGTCACGACAATACGAAACCGGACACATCTTCATCTTTGCTTACCTCTCTGAATCAACTGGGTGAACGACAGCTCCTGAGTGTTGTTAAGTGGTCTAAAAGCCTCCCGGGCTTCAGGAATTTGCACATAGACGACCAAATCACGCTCATCCAATATTCCTGGATGAGTCTCATGGTCTTTGGTCTCGGTTGGCGCAGCTATAAGCACGTCTCTGGCCAGATGTTGTATTTCGCACCAGACCTGATCCTGAACGAACAGAGGATGAAGGAATCAAGCTTTTACTCTCTCTGCTTGACTATGTGGCAAATCCCCCAAGAATTCGTGAAACTTCAAGTTTCCCAAGAAGAATTCCTCTGCATGAAAGTCCTTCTTTTGCTCAACACGATTCCCCTGGAAGGCTTGAGGTCTCAAACGCAATTCGAGGAGATGCGGAGTAGCTATATACGCGAACTCATCAAGGCCATCGGTTTGCGGCAAAAGGGAGTGGTCTCTAGTAGCCAACGATTTTACCAGCTGACTAAGCTCCTTGACAACCTTCACGATCTCGTCAAACAACTGCACCTGTACTGTCTTAACACATTTATACAATCACGGGCACTTTCTGTAGAGTTCCCAGAGATGATGTCTGAGGTCATCGCAGCCCAACTTCCGAAAATTCTTGCAGGAATGGTGAAGCCACTTCTGTTCCATAAGAAAaGATCCggatctggaagtggctccCTGAGAGTGAAGTTTAGCAGAAGCGCCGACGCCCCTGCCTATCAGCAGGGACAGAACCAGCTGTATAACGAGCTGAACCTGGGCAGGCGGGAAGAGTACGACGTGCTGGATAAGAGGCGGGGCAGGGACCCTGAAATGGGCGGCAAACCCAGACGGAAGAACCCCCAGGAAGGCCTGTACAACGAACTGCAGAAAGACAAGATGGCCGAGGCCTACAGCGAGATCGGAATGAAGGGCGAGCGGCGGAGAGGCAAGGGACATGATGGCCTGTACCAGGGCCTGTCCACCGCCACCAAGGACACCTATGACGCCCTGCACATGCAGGCCCTGCCTCCAAGAggaagtggatctgggagcggctctatggtgtctaagggggaagaggacaacatggccatcatcaaagaattcatgcggttcaaggtgcacatggaaggctccgtgaatggccacgaattcgagatcgagggggagggcgagggcagaccttatgagggaacccagaccgccaagctgaaagtgaccaagggcggacccctgcctttcgcctgggatatcctgtctccccagtttatgtacggcagcaaggcctacgtgaagcaccccgccgacatccccgactacctgaagctgagcttccctgagggcttcaagtgggagagagtgatgaatttcgaggacggcggagtcgtgacagtgacccaggatagctctctgcaggacggcgagttcatctacaaagtgaagctgcggggcaccaacttccccagcgacggacccgtgatgcagaaaaagaccatgggctgggaggccagctccgagagaatgtacccagaggacggggccctgaagggggagatcaagcagcggctgaaactgaaggatggcggccactacgacgcagaagtgaaaaccacctacaaggccaagaaacctgtgcagctgcctggcgcctacaatgtgaacatcaagctggacattaccagccacaacgaggactacaccatcgtggaacagtacgagcgggccgagggcaggcattctacaggcggaatggatgaactgtataagtgcgtgaccgac
【０３０５】
配列番号５２
MIHLGHILFLLLLPVAAADYKDDDDKQTTPGERSSLPAFYPGTSGSCSGCGSLSLPIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELGSGSGSGSGQDIQLIPPLINLLMSIEPDVIYAGHDNTKPDTSSSLLTSLNQLGERQLLSVVKWSKSLPGFRNLHIDDQITLIQYSWMSLMVFGLGWRSYKHVSGQMLYFAPDLILNEQRMKESSFYSLCLTMWQIPQEFVKLQVSQEEFLCMKVLLLLNTIPLEGLRSQTQFEEMRSSYIRELIKAIGLRQKGVVSSSQRFYQLTKLLDNLHDLVKQLHLYCLNTFIQSRALSVEFPEMMSEVIAAQLPKILAGMVKPLLFHKKRSGSGSGSLRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRGSGSGSGSMVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEGTQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNFEDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALKGEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERAEGRHSTGGMDELYKCVTD
【０３０６】
配列番号５２のポリペプチドは、以下のドメインを含む：Ｄａｐ１０シグナルペプチド（ＭＩＨＬＧＨＩＬＦＬＬＬＬＰＶＡＡＡ、配列番号５３）、ｆｌａｇタグ（ＤＹＫＤＤＤＤＫ、配列番号５４）、Ｄａｐ１０細胞外ドメイン（ＱＴＴＰＧＥＲＳＳＬＰＡＦＹＰＧＴＳＧＳＣＳＧＣＧＳＬＳＬＰ、配列番号５５）、ＣＤ８膜貫通ドメイン（ＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣ、配列番号５６）、４−１ＢＢ共刺激ドメイン（ＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ、配列番号５７）、第１のリンカー（ＧＳＧＳＧＳＧＳ、配列番号５８）、プロゲステロン受容体ＬＢＤ（ＧＱＤＩＱＬＩＰＰＬＩＮＬＬＭＳＩＥＰＤＶＩＹＡＧＨＤＮＴＫＰＤＴＳＳＳＬＬＴＳＬＮＱＬＧＥＲＱＬＬＳＶＶＫＷＳＫＳＬＰＧＦＲＮＬＨＩＤＤＱＩＴＬＩＱＹＳＷＭＳＬＭＶＦＧＬＧＷＲＳＹＫＨＶＳＧＱＭＬＹＦＡＰＤＬＩＬＮＥＱＲＭＫＥＳＳＦＹＳＬＣＬＴＭＷＱＩＰＱＥＦＶＫＬＱＶＳＱＥＥＦＬＣＭＫＶＬＬＬＬＮＴＩＰＬＥＧＬＲＳＱＴＱＦＥＥＭＲＳＳＹＩＲＥＬＩＫＡＩＧＬＲＱＫＧＶＶＳＳＳＱＲＦＹＱＬＴＫＬＬＤＮＬＨＤＬＶＫＱＬＨＬＹＣＬＮＴＦＩＱＳＲＡＬＳＶＥＦＰＥＭＭＳＥＶＩＡＡＱＬＰＫＩＬＡＧＭＶＫＰＬＬＦＨＫＫ、配列番号５９）、第２のリンカー（ＲＳＧＳＧＳＧＳ、配列番号６０）、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン（ＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ、配列番号６１）、第３のリンカー（ＧＳＧＳＧＳＧＳ、配列番号６２）、及びｍＣｈｅｒｒｙ（ＭＶＳＫＧＥＥＤＮＭＡＩＩＫＥＦＭＲＦＫＶＨＭＥＧＳＶＮＧＨＥＦＥＩＥＧＥＧＥＧＲＰＹＥＧＴＱＴＡＫＬＫＶＴＫＧＧＰＬＰＦＡＷＤＩＬＳＰＱＦＭＹＧＳＫＡＹＶＫＨＰＡＤＩＰＤＹＬＫＬＳＦＰＥＧＦＫＷＥＲＶＭＮＦＥＤＧＧＶＶＴＶＴＱＤＳＳＬＱＤＧＥＦＩＹＫＶＫＬＲＧＴＮＦＰＳＤＧＰＶＭＱＫＫＴＭＧＷＥＡＳＳＥＲＭＹＰＥＤＧＡＬＫＧＥＩＫＱＲＬＫＬＫＤＧＧＨＹＤＡＥＶＫＴＴＹＫＡＫＫＰＶＱＬＰＧＡＹＮＶＮＩＫＬＤＩＴＳＨＮＥＤＹＴＩＶＥＱＹＥＲＡＥＧＲＨＳＴＧＧＭＤＥＬＹＫＣＶＴＤ、配列番号６３）。
【０３０７】
配列番号５１のヌクレオチド配列は、示されるドメインをコードする以下の配列を含む：Ｄａｐ１０シグナルペプチド（ＡＴＧＡＴＣＣＡＣＣＴＧＧＧＡＣＡＣＡＴＣＣＴＧＴＴＴＴＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＣＡＧＴＧＧＣＴＧＣＣＧＣＣ、配列番号６３）、ｆｌａｇタグ（ｇａｔｔａｃａａａｇａｃｇａｃｇａｔｇａｔａａａ、配列番号６４）、Ｄａｐ１０細胞外ドメイン（ＣＡＧＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＧＣＧＡＧＡＧＡＴＣＴＡＧＣＣＴＧＣＣＣＧＣＣＴＴＣＴＡＣＣＣＴＧＧＣＡＣＣＡＧＣＧＧＣＴＣＴＴＧＴＴＣＴＧＧＣＴＧＴＧＧＣＡＧＣＣＴＧＴＣＴＣＴＧＣＣＣ、配列番号６５）、ＣＤ８膜貫通ドメイン（ａｔｃｔａｔａｔｔｔｇｇｇｃａｃｃｃｃｔｇｇｃｔｇｇａａｃｃｔｇｃｇｇａｇｔｇｃｔｇｃｔｇｃｔｇｔｃｔｃｔｃｇｔｇａｔｔａｃａｃｔｇｔａｔｔｇｃ、配列番号６６）、４−１ＢＢ共刺激ドメイン（ＡＡＡＡＧＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＡＡＧＣＴＧＣＴＧＴＡＴＡＴＴＴＴＣＡＡＡＣＡＧＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＧＧＣＣＴＧＴＧＣＡＧＡＣＡＡＣＡＣＡＧＧＡＡＧＡＧＧＡＣＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＴＣＧＧＴＴＣＣＣＣＧＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＧＧＧＧＧＧＣＴＧＣＧＡＡＣＴＧ、配列番号６７）、第１のリンカー（ｇｇａｔｃａｇｇｃａｇｔｇｇｃｔｃｔｇｇｃａｇｃ、配列番号６８）、プロゲステロン受容体ＬＢＤ（ＧＧＧＣＡＡＧＡＣＡＴＴＣＡＧＣＴＣＡＴＡＣＣＴＣＣＴＴＴＧＡＴＡＡＡＴＴＴＧＣＴＧＡＴＧＴＣＴＡＴＡＧＡＡＣＣＡＧＡＴＧＴＣＡＴＡＴＡＣＧＣＴＧＧＴＣＡＣＧＡＣＡＡＴＡＣＧＡＡＡＣＣＧＧＡＣＡＣＡＴＣＴＴＣＡＴＣＴＴＴＧＣＴＴＡＣＣＴＣＴＣＴＧＡＡＴＣＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＡＣＡＧＣＴＣＣＴＧＡＧＴＧＴＴＧＴＴＡＡＧＴＧＧＴＣＴＡＡＡＡＧＣＣＴＣＣＣＧＧＧＣＴＴＣＡＧＧＡＡＴＴＴＧＣＡＣＡＴＡＧＡＣＧＡＣＣＡＡＡＴＣＡＣＧＣＴＣＡＴＣＣＡＡＴＡＴＴＣＣＴＧＧＡＴＧＡＧＴＣＴＣＡＴＧＧＴＣＴＴＴＧＧＴＣＴＣＧＧＴＴＧＧＣＧＣＡＧＣＴＡＴＡＡＧＣＡＣＧＴＣＴＣＴＧＧＣＣＡＧＡＴＧＴＴＧＴＡＴＴＴＣＧＣＡＣＣＡＧＡＣＣＴＧＡＴＣＣＴＧＡＡＣＧＡＡＣＡＧＡＧＧＡＴＧＡＡＧＧＡＡＴＣＡＡＧＣＴＴＴＴＡＣＴＣＴＣＴＣＴＧＣＴＴＧＡＣＴＡＴＧＴＧＧＣＡＡＡＴＣＣＣＣＣＡＡＧＡＡＴＴＣＧＴＧＡＡＡＣＴＴＣＡＡＧＴＴＴＣＣＣＡＡＧＡＡＧＡＡＴＴＣＣＴＣＴＧＣＡＴＧＡＡＡＧＴＣＣＴＴＣＴＴＴＴＧＣＴＣＡＡＣＡＣＧＡＴＴＣＣＣＣＴＧＧＡＡＧＧＣＴＴＧＡＧＧＴＣＴＣＡＡＡＣＧＣＡＡＴＴＣＧＡＧＧＡＧＡＴＧＣＧＧＡＧＴＡＧＣＴＡＴＡＴＡＣＧＣＧＡＡＣＴＣＡＴＣＡＡＧＧＣＣＡＴＣＧＧＴＴＴＧＣＧＧＣＡＡＡＡＧＧＧＡＧＴＧＧＴＣＴＣＴＡＧＴＡＧＣＣＡＡＣＧＡＴＴＴＴＡＣＣＡＧＣＴＧＡＣＴＡＡＧＣＴＣＣＴＴＧＡＣＡＡＣＣＴＴＣＡＣＧＡＴＣＴＣＧＴＣＡＡＡＣＡＡＣＴＧＣＡＣＣＴＧＴＡＣＴＧＴＣＴＴＡＡＣＡＣＡＴＴＴＡＴＡＣＡＡＴＣＡＣＧＧＧＣＡＣＴＴＴＣＴＧＴＡＧＡＧＴＴＣＣＣＡＧＡＧＡＴＧＡＴＧＴＣＴＧＡＧＧＴＣＡＴＣＧＣＡＧＣＣＣＡＡＣＴＴＣＣＧＡＡＡＡＴＴＣＴＴＧＣＡＧＧＡＡＴＧＧＴＧＡＡＧＣＣＡＣＴＴＣＴＧＴＴＣＣＡＴＡＡＧＡＡＡ、配列番号６９）、第２のリンカー（ｇｇａｔｃｔｇｇａａｇｔｇｇｃｔｃｃ、配列番号７０）、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン（ＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＴＡＧＣＡＧＡＡＧＣＧＣＣＧＡＣＧＣＣＣＣＴＧＣＣＴＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＧＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＧＡＡＣＣＴＧＧＧＣＡＧＧＣＧＧＧＡＡＧＡＧＴＡＣＧＡＣＧＴＧＣＴＧＧＡＴＡＡＧＡＧＧＣＧＧＧＧＣＡＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＡＡＴＧＧＧＣＧＧＣＡＡＡＣＣＣＡＧＡＣＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＣＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＣＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＣＡＡＧＡＴＧＧＣＣＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＣＧＡＧＡＴＣＧＧＡＡＴＧＡＡＧＧＧＣＧＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＡＧＧＣＡＡＧＧＧＡＣＡＴＧＡＴＧＧＣＣＴＧＴＡＣＣＡＧＧＧＣＣＴＧＴＣＣＡＣＣＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＴＧＡＣＧＣＣＣＴＧＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＴＣＣＡＡＧＡ、配列番号７１）、第３のリンカー（ｇｇａａｇｔｇｇａｔｃｔｇｇｇａｇｃｇｇｃｔｃｔ、配列番号７２）、及びｍＣｈｅｒｒｙ（ａｔｇｇｔｇｔｃｔａａｇｇｇｇｇａａｇａｇｇａｃａａｃａｔｇｇｃｃａｔｃａｔｃａａａｇａａｔｔｃａｔｇｃｇｇｔｔｃａａｇｇｔｇｃａｃａｔｇｇａａｇｇｃｔｃｃｇｔｇａａｔｇｇｃｃａｃｇａａｔｔｃｇａｇａｔｃｇａｇｇｇｇｇａｇｇｇｃｇａｇｇｇｃａｇａｃｃｔｔａｔｇａｇｇｇａａｃｃｃａｇａｃｃｇｃｃａａｇｃｔｇａａａｇｔｇａｃｃａａｇｇｇｃｇｇａｃｃｃｃｔｇｃｃｔｔｔｃｇｃｃｔｇｇｇａｔａｔｃｃｔｇｔｃｔｃｃｃｃａｇｔｔｔａｔｇｔａｃｇｇｃａｇｃａａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇａａｇｃａｃｃｃｃｇｃｃｇａｃａｔｃｃｃｃｇａｃｔａｃｃｔｇａａｇｃｔｇａｇｃｔｔｃｃｃｔｇａｇｇｇｃｔｔｃａａｇｔｇｇｇａｇａｇａｇｔｇａｔｇａａｔｔｔｃｇａｇｇａｃｇｇｃｇｇａｇｔｃｇｔｇａｃａｇｔｇａｃｃｃａｇｇａｔａｇｃｔｃｔｃｔｇｃａｇｇａｃｇｇｃｇａｇｔｔｃａｔｃｔａｃａａａｇｔｇａａｇｃｔｇｃｇｇｇｇｃａｃｃａａｃｔｔｃｃｃｃａｇｃｇａｃｇｇａｃｃｃｇｔｇａｔｇｃａｇａａａａａｇａｃｃａｔｇｇｇｃｔｇｇｇａｇｇｃｃａｇｃｔｃｃｇａｇａｇａａｔｇｔａｃｃｃａｇａｇｇａｃｇｇｇｇｃｃｃｔｇａａｇｇｇｇｇａｇａｔｃａａｇｃａｇｃｇｇｃｔｇａａａｃｔｇａａｇｇａｔｇｇｃｇｇｃｃａｃｔａｃｇａｃｇｃａｇａａｇｔｇａａａａｃｃａｃｃｔａｃａａｇｇｃｃａａｇａａａｃｃｔｇｔｇｃａｇｃｔｇｃｃｔｇｇｃｇｃｃｔａｃａａｔｇｔｇａａｃａｔｃａａｇｃｔｇｇａｃａｔｔａｃｃａｇｃｃａｃａａｃｇａｇｇａｃｔａｃａｃｃａｔｃｇｔｇｇａａｃａｇｔａｃｇａｇｃｇｇｇｃｃｇａｇｇｇｃａｇｇｃａｔｔｃｔａｃａｇｇｃｇｇａａｔｇｇａｔｇａａｃｔｇｔａｔａａｇｔｇｃｇｔｇａｃｃｇａｃ、配列番号７３）。
【０３０８】
実施例７−リガンド誘導性ＮＨＲ−ＬＢＤ  ＣＡＲ  Ｔ細胞活性化は抗原依存性及び薬物依存性である
Ｊ６Ｍ０−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲコンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて、初代ヒトＴ細胞を形質導入した。漸増する濃度の４−ＯＨＴの存在下での抗原陰性標的（Ｋ５６２細胞株）及び抗原陽性標的（ＭＭ１Ｓ細胞株）との一晩の共培養の後、カノニカルＴ細胞活性化マーカーであるＣＤ６９に対する表面染色によって、Ｔ細胞活性化を評価した（図７Ａ）。特有の用量依存的なＴ細胞応答が各コンストラクトについて観察され、細胞膜に対するＬＢＤの近接度はバックグラウンド活性化（リガンドがない状態での活性化）及びリガンドに対する感受性と相関した。全てのコンストラクトは、漸増する薬物濃度で陽性対照（カノニカルＣＡＲ）と同等の活性化レベルを示した。
【０３０９】
漸増する濃度の４−ＯＨＴの存在下での抗原陰性標的（Ｋ５６２細胞株）及び抗原陽性標的（ＭＭ１Ｓ細胞株）とのＴ細胞の一晩の共培養物から単離された共培養上清に対するＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳＡによって、Ｊ６Ｍ０−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲ細胞の炎症性サイトカインを産生する能力を評価した。ＩＦＮ−γ産生は用量依存的であることが示され、いずれのＮＨＲ−ＬＢＤコンストラクトも漸増するリガンド濃度でサイトカインを産生した（図７Ｂ）。
【０３１０】
実施例８−リガンド誘導性ＮＨＲ−ＬＢＤ  ＣＡＲ  Ｔ細胞の増殖及び死滅は抗原依存性及びリガンド依存性である
Ｖ４  ＦＭＣ６３−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲ又はカノニカルＣＡＲ対照をコードするレンチウイルスベクターを用いて、初代ヒトＣＤ４  Ｔ細胞を形質導入した。抗原陰性標的（Ｋ５６２細胞株）又は抗原陽性標的（Ｒａｊｉ細胞株）のいずれかとの共培養に先立って、細胞をカルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル（「ＣＦＳＥ」）で標識した。また、細胞を漸増する濃度のリガンド（４−ＯＨＴ）と共培養した。共培養の３日後、細胞をフローサイトメトリーによって分析し、ＣＤ４＋  Ｔ細胞に対するＣＦＳＥ染料の希釈液によって増殖を評価した。ＦＭＣ６３−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲ  Ｔ細胞は、抗原及びリガンドの存在下でのみ増殖した（図８Ａ）。
【０３１１】
実施例７に記載されるＪ６Ｍ０−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲコンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて、初代ヒトＴ細胞を形質導入した。Ｊ６Ｍ０−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲコンストラクトを持つＴ細胞の薬物依存的に抗原陽性標的（ＭＭ１Ｓ細胞株）を死滅させる能力を、フローサイトメトリーに基づく死滅アッセイにより評価した。共培養に先立って標的細胞をＣＦＳＥで標識し、Ｉｎｔｅｌｌｉｃｙｔフローサイトメーターを使用する一定体積の定量によって共培養後に各ウェルに残っている細胞の数を決定した。１つの実験ウェル当たりに残存する標的の数を、標的と非抗原特異的な従来のＣＡＲ  Ｔ細胞（−ＣＴＲＬ）との両方を含む対照ウェルに残っている標的の数と比較することにより、特異的溶解を判断した。特異的溶解を、以下の等式から得られるパーセンテージとして報告した：１−（１つの実験ウェル当たりの事象の数／平均事象数−ＣＴＲＬウェル）。標的細胞の死滅はリガンドの用量に依存し、いずれのコンストラクトもより高い薬物用量で従来のＣＡＲ（＋ＣＴＲＬ）と同等のレベルで抗原陽性標的を排除した（図８Ｂ）。
【０３１２】
実施例９−ＣＡＲポリペプチド内のＬＢＤの位置がＮＨＲ−ＬＢＤ  ＣＡＲのリガンド誘導性表面発現に対する感受性を決定する
図１に示されるＶ２、Ｖ３、及びＶ４のコンストラクトの用量反応性をＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞において比較した。図９のｘ軸上に示される濃度の４−ＯＨＴリガンドとの１時間のインキュベーションの後Ｊｕｒｋａｔ  Ｔ細胞上のＮＨＲ−ＬＢＤ  ＣＡＲタンパク質の表面発現の検出を行った。抗ｃＭｙｃ抗体を使用して表面受容体発現を検出し、レポーター陽性細胞（ｍＣｈｅｒｒｙ発現によって判断される）のパーセンテージとして報告した。各コンストラクトについて表面発現が検出されたリガンド用量は、各コンストラクトに対して表面膜に関し、ＬＢＤの位置に対応した。表面膜のすぐ隣にＬＢＤを持つコンストラクトＶ４は、リガンドの不在下で検出可能な表面発現を示さず、より高い濃度の４−ＯＨＴでのみ表面発現が検出された。対照的に、ＬＢＤが膜からより遠くに配置された場合（例えばＶ２を参照されたい）、より高いベースレベルの表面発現が検出され（約２０％）、４−ＯＨＴに対する感受性の増強が観察された。ＰＭＡ／イオノマイシンによるＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞の活性化はリガンド非依存性ＮＨＲ−ＬＢＤ  ＣＡＲ表面発現に結び付かず、Ｔ細胞単独の活性化（例えば内因性ＴＣＲによる）は細胞表面への受容体の輸送を生じないことを実証した。
【０３１３】
実施例１０−ＮＨＲ−ＬＢＤ  ＣＡＲ表面発現の持続期間はポリペプチド中のＬＢＤの位置に依存する
ＦＭＣ６３−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲを用いてＴ細胞を形質導入し、３５ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴに１時間曝露してから、抗ｃＭｙｃ抗体を使用して表面発現に対して染色するか、又は洗浄して薬物がない状態で一晩培養した（図１０Ａに示されるタイムライン）。
【０３１４】
表面タンパク質を発現する細胞の数を、レポーター陽性細胞（ｍＣｈｅｒｒｙ発現によって判断される）のパーセンテージとして報告した。Ｖ２、Ｖ３及びＶ４のコンストラクトに対する細胞表面上でのＮＨＲ−ＬＢＤ  ＣＡＲ発現の持続時間を特定した。膜の最も近くにＬＢＤを持つコンストラクト（Ｖ４）は、リガンド除去の２４時間後にベースラインまでの最も急速で完全な回復を示した（図１０Ｂ、「Ｖ４」と表示される棒グラフ）。
【０３１５】
実施例１１−リガンド添加後のＮＨＲ−ＬＢＤ−ＣＡＲコンストラクトにおける表面発現の動態
実施例５で使用したＦＬＡＧ−ＥＲａ−ＬＢＤコンストラクトを用いて形質導入されたＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞を処理しないままにするか、又は１５分間若しくは１２０分間に亘って５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴで処理して、リガンド処理の後に表面発現を検出した。リガンド処理は１５分以内の表面発現を誘導し、経時的に更なるアップレギュレーションが観察された（図１１Ａ）。
【０３１６】
ＦＭＣ６３−ＥＲａ−ＬＢＤ  ＣＡＲ（図１に示されるｖ２）をコードするレンチウイルスベクターを用いてヒトＴ細胞を形質導入した。指定の持続時間に亘ってＥＲａリガンドである４−ＯＨＴで細胞を処理し、次いで、ＣＡＲの表面発現に対して染色した（図１１Ｂ）。図１１Ｂのデータは、Ｊｕｒｋａｔ  Ｔ細胞について観察されたものに類似する、リガンド処理によって誘導された表面発現の動態を示す。
【０３１７】
実施例１２−ブレフェルジンＡ処理は、ＮＨＲ  ＬＢＤ融合物のリガンド誘導性表面輸送を阻止する
ＥＲａ  ＬＢＤ融合物と共にＦＭＣ６３−ＣＡＲを発現する初代ヒトＴ細胞を処理しないままにするか、又はＣＡＲの表面発現を誘導するため２時間に亘って５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴリガンドで処理した。４−ＯＨＴ処理に先立って、ゴルジからのタンパク質排出を阻害するため、細胞の半分を１μＭブレフェルジンＡで前処理した（図１２、下段の２つのパネル）。ブレフェルジンＡの前処理は、表面タンパク質発現の４−ＯＨＴ誘導性の増加を妨げた。理論によって拘束されることを望むものではないが、これらのデータは、リガンドの不在下で細胞内に捕捉されているポリペプチドのプールの再局在化から表面発現の増加が生じることを示唆する。
【０３１８】
実施例１３−コンストラクトの作製
タンパク質（実施例１に記載されるｖ２  ＣＡＲ）の細胞内部分、又はタンパク質（「コンシールドキャリー」ＣＡＲ  ＥＣＤ．ｖ１」又は「ＬＢＤ−ＥＣＤ  ＣＡＲ」）の細胞外部分のいずれかにエストロゲン受容体アルファ（「ＥＲａ」）リガンド結合ドメイン（「ＥＲａ  ＬＢＤ」、図１中緑色）を含むように従来のキメラ抗原受容体（「従来のＣＡＲ」、図１３、左）を改変した。ｖ２  ＣＡＲとＥＣＤ．ｖ１  ＣＡＲとの両方のＥＲａ  ＬＢＤドメインに点突然変異を導入した。ｖ２  ＣＡＲの核酸配列及びポリペプチド配列（配列番号３０及び配列番号３１として上に示される）及びＥＣＤ．ｖ１の核酸配列及びポリペプチド配列（配列番号９７及び配列番号９８）を以下に提供する。
【０３１９】
配列番号９７（ＥＣＤ  ｖ．１  ＣＡＲ）
atgcttctcctggtgacaagccttctgctctgtgagttaccacacccagcattcctcctgattcctgaacagaagctgataagtgaggaggacttggacatccagatgacccagaccaccagcagcctgagcgccagcctgggcgatagagtgaccatcagctgcagagccagccaggacatcagcaagtacctgaactggtatcagcagaaacccgacggcaccgtgaagctgctgatctaccacaccagcagactgcacagcggcgtgcccagcagattttctggcagcggctccggcaccgactacagcctgaccatctccaacctggaacaggaagatatcgctacctacttctgtcagcaaggcaacaccctgccctacaccttcggcggaggcaccaagctggaaatcacaggcggcggaggatctggcggaggcggaagtggcggagggggatctgaagtgaaactgcaggaaagcggccctggcctggtggccccatctcagtctctgagcgtgacctgtaccgtgtccggcgtgtccctgcctgactatggcgtgtcctggatcagacagccccccagaaagggcctggaatggctgggagtgatctggggcagcgagacaacctactacaacagcgccctgaagtcccggctgaccatcatcaaggacaactccaagagccaggtgttcctgaagatgaacagcctgcagaccgacgacaccgccatctactactgcgccaagcactactactacggcggcagctacgccatggactactggggccagggcacaagcgtgaccgtgtctagcggatccgatagaagaggcggcagaatgctgaaacacaagcggcagagggacgacggggaaggcagaggcgaagtgggatctgccggcgatatgagagccgccaacctgtggcctagccccctgatgatcaagcggagcaagaagaactccctggccctgagcctgaccgccgaccagatggtgtctgccctgctggatgccgagccccccatcctgtacagcgagtacgaccccaccagacccttcagcgaggccagcatgatgggcctgctgaccaacctggccgaccgggaactggtgcacatgatcaactgggccaagcgggtgcccggcttcgtggatctgacactgcacgaccaggtgcacctgctggaatgcgcttggctggaaatcctgatgatcggcctcgtgtggcggagcatggaacaccctggcaagctgctgttcgcccccaacctgctgctggaccggaaccagggcaaatgcgtggaaggcatggtggaaatcttcgacatgctgctggccacctccagccggttccggatgatgaacctgcagggcgaagagttcgtgtgtctgaagtccatcatcctgctgaatagcggcgtgtacaccttcctgagcagcaccctgaaaagcctggaagaaaaggaccacatccaccgggtgctggacaagatcaccgacaccctgattcacctgatggccaaggccggactgaccctgcagcagcagcatcagagactggctcagctgctgctgatcctgtcccacatccggcacatgagcaacaagcggatggaacatctgtacagcatgaagtgcaagaacgtggtgcctctgttcgatctgctgctggaaatgctggacgcccacaggctgcacgccccaacatccggatccaccacgacgccagcgccgcgaccaccaacaccggcgcccaccatcgcgtcgcagcccctgtccctgcgcccagaggcgtgccggccagcggcggggggcgcagtgcacacgagggggctggacttcgcctgtgatatctacatctgggcgcccttggccgggacttgtggggtccttctcctgtcactggttatcaccctttactgcaaacggggcagaaagaaactcctgtatatattcaaacaaccatttatgagaccagtacaaactactcaagaggaagatggctgtagctgccgatttccagaagaagaagaaggaggatgtgaactgagagtgaagttcagcaggagcgcagacgcccccgcgtaccagcagggccagaaccagctctataacgagctcaatctaggacgaagagaggagtacgatgttttggacaagagacgtggccgggaccctgagatggggggaaagccgagaaggaagaaccctcaggaaggcctgtacaatgaactgcagaaagataagatggcggaggcctacagtgagattgggatgaaaggcgagcgccggaggggcaaggggcacgatggcctttaccagggtctcagtacagccaccaaggacacctacgacgcccttcacatgcaggccctgccccctcgctag
【０３２０】
配列番号９８（ＥＣＤ  ｖ．１  ＣＡＲ）
MLLLVTSLLLCELPHPAFLLIPEQKLISEEDLDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGGGGSGGGGSGGGGSEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSGSDRRGGRMLKHKRQRDDGEGRGEVGSAGDMRAANLWPSPLMIKRSKKNSLALSLTADQMVSALLDAEPPILYSEYDPTRPFSEASMMGLLTNLADRELVHMINWAKRVPGFVDLTLHDQVHLLECAWLEILMIGLVWRSMEHPGKLLFAPNLLLDRNQGKCVEGMVEIFDMLLATSSRFRMMNLQGEEFVCLKSIILLNSGVYTFLSSTLKSLEEKDHIHRVLDKITDTLIHLMAKAGLTLQQQHQRLAQLLLILSHIRHMSNKRMEHLYSMKCKNVVPLFDLLLEMLDAHRLHAPTSGSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
【０３２１】
ＥＣＤ．ｖ１の各ドメインのタンパク質配列及び核酸配列を、ＥＣＤ．ｖ１のＮ末端からＣ末端の順に以下に示す。
【０３２２】
配列番号９９（ＣＳＦ２ＲＡシグナルペプチド）
atgcttctcctggtgacaagccttctgctctgtgagttaccacacccagcattcctcctgattcct
【０３２３】
配列番号１００（ＣＳＦ２ＲＡシグナルペプチド）
MLLLVTSLLLCELPHPAFLLIP
【０３２４】
配列番号１０１（ｃＭｙｃ  ｔａｇ）
gaacagaagctgataagtgaggaggacttg
【０３２５】
配列番号１０２（ｃＭｙｃ  ｔａｇ）
【０３２６】
配列番号１０３（ＦＭＣ６３  ＶＬ）
gacatccagatgacccagaccaccagcagcctgagcgccagcctgggcgatagagtgaccatcagctgcagagccagccaggacatcagcaagtacctgaactggtatcagcagaaacccgacggcaccgtgaagctgctgatctaccacaccagcagactgcacagcggcgtgcccagcagattttctggcagcggctccggcaccgactacagcctgaccatctccaacctggaacaggaagatatcgctacctacttctgtcagcaaggcaacaccctgccctacaccttcggcggaggcaccaagctggaaatcaca
【０３２７】
配列番号１０４（ＦＭＣ６３  ＶＨ）
DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEIT
【０３２８】
配列番号１０５（ＶＬとＶＨとの間の（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ggcggcggaggatctggcggaggcggaagtggcggagggggatct
【０３２９】
配列番号１０６（ＶＬとＶＨとの間の（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
GGGGSGGGGSGGGGS
【０３３０】
配列番号１０７（ＦＭＣ６３  ＶＨ）
gaagtgaaactgcaggaaagcggccctggcctggtggccccatctcagtctctgagcgtgacctgtaccgtgtccggcgtgtccctgcctgactatggcgtgtcctggatcagacagccccccagaaagggcctggaatggctgggagtgatctggggcagcgagacaacctactacaacagcgccctgaagtcccggctgaccatcatcaaggacaactccaagagccaggtgttcctgaagatgaacagcctgcagaccgacgacaccgccatctactactgcgccaagcactactactacggcggcagctacgccatggactactggggccagggcacaagcgtgaccgtgtctagc
【０３３１】
配列番号１０８（ＦＭＣ６３  ＶＨ）
EVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSS
【０３３２】
ＶＨドメインとエストロゲン受容体アルファリガンド結合ドメインとの間のＧＳリンカー
ggatcc
【０３３３】
ＶＨドメインとエストロゲン受容体アルファリガンド結合ドメインとの間のＧＳリンカー
GS
【０３３４】
配列番号１０９（エストロゲン受容体アルファリガンド結合ドメイン）（ヒンジをコードする配列を下線で示し、ヘリックス１２をコードする配列を太字で示す）
2020512009.tif 000003
【０３３５】
配列番号１１０（エストロゲン受容体アルファリガンド結合ドメイン）（ヒンジを下線で示し、ヘリックス１２を太字で示す）
2020512009.tif 000004
【０３３６】
エストロゲン受容体アルファリガンド結合ドメインとＣＤ８アルファヒンジ領域との間のＧＳリンカー
ggatcc
【０３３７】
エストロゲン受容体アルファリガンド結合ドメインとＣＤ８アルファヒンジ領域との間のＧＳリンカー
GS
【０３３８】
配列番号１１１（ＣＤ８アルファヒンジ）
accacgacgccagcgccgcgaccaccaacaccggcgcccaccatcgcgtcgcagcccctgtccctgcgcccagaggcgtgccggccagcggcggggggcgcagtgcacacgagggggctggacttcgcctgtgatatctacatctgggcgcccttggccgggacttgtggggtccttctcctgtcactggttatcaccctttactgc
【０３３９】
配列番号１１２（ＣＤ８アルファヒンジ）
TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFAC
【０３４０】
配列番号１１３（ＣＤ８アルファ膜貫通ドメイン）
gatatctacatctgggcgcccttggccgggacttgtggggtccttctcctgtcactggttatcaccctttactgc
【０３４１】
配列番号１１４（ＣＤ８アルファ膜貫通ドメイン）
DIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC
【０３４２】
配列番号１１５（４−１ＢＢ共刺激ドメイン）
aaacggggcagaaagaaactcctgtatatattcaaacaaccatttatgagaccagtacaaactactcaagaggaagatggctgtagctgccgatttccagaagaagaagaaggaggatgtgaa
【０３４３】
配列番号１１６（４−１ＢＢ共刺激ドメイン）
KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCE
【０３４４】
配列番号１１７（ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン）
ctgagagtgaagttcagcaggagcgcagacgcccccgcgtaccagcagggccagaaccagctctataacgagctcaatctaggacgaagagaggagtacgatgttttggacaagagacgtggccgggaccctgagatggggggaaagccgagaaggaagaaccctcaggaaggcctgtacaatgaactgcagaaagataagatggcggaggcctacagtgagattgggatgaaaggcgagcgccggaggggcaaggggcacgatggcctttaccagggtctcagtacagccaccaaggacacctacgacgcccttcacatgcaggccctgccccctcgc
【０３４５】
配列番号１１８（ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメイン）
LRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR
【０３４６】
実施例１４−リガンドがない状態でＬＢＤ−ＥＣＤはＣＡＲの細胞表面へのバックグラウンド局在を減少させる
指定のＣＣ．ｖ２又はＬＢＤ  ＥＣＤ．ｖ１のコンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて、初代ヒトＴ細胞を形質導入した。細胞を処理しないままにするか、又は５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴで処理した。処理の持続期間は図１４に示される通であった。その後、抗Ｍｙｃ  ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ  ６４７抗体を使用し、キメラ受容体の表面発現に対して細胞を染色した。
【０３４７】
ＣＡＲの細胞外部分へのＬＢＤの配置は、リガンドが添加されなかった場合、ＣＡＲの細胞内部分にＬＢＤが配置される場合と比べてＣＡＲ表面発現のバックグラウンドレベルを減少させる（図１４）。５００ｎｇ／ｍｌの４−ＯＨＴを添加した場合、ｖ２  ＣＡＲとＥＣＤ．ｖ１との両方が細胞の表面に発現された。
【０３４８】
実施例１５−ＬＢＤ−ＥＣＤ  ＣＡＲは薬物依存的に細胞を死滅させる
指定のＬＢＤ  ＥＣＤ．ｖ１又は対照ＣＡＲのコンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて初代ヒトＴ細胞を形質導入した。Ｔ細胞を増殖の後休止させ、その後、図１５に示されるエフェクター：標的の比でルシフェラーゼ発現Ｎａｌｍ６腫瘍細胞と共培養した。２４時間の共培養の後、細胞を溶解させ、ルシフェラーゼ基質を添加して生存腫瘍細胞の数を定量した。
【０３４９】
ＬＢＤ  ＥＣＤ．ｖ１  ＣＡＲは薬物依存的に細胞を死滅させる。漸増量の４−ＯＨＴを添加することは、より大きなレベルの細胞溶解をもたらす（５００ｎｇ／ｍＬの４−ＯＨＴでおよそ５０％の溶解）（図１５）。
【０３５０】
実施例１６−ＬＢＤ−ＥＣＤ  ＣＡＲは、活性化Ｔ細胞において細胞内に局在化される
指定のＬＢＤ＿ＥＣＤ、ＣＣ．ｖ２又は構成的対照ＣＡＲのコンストラクトをコードするレンチウイルスベクターを用いて初代ヒトＴ細胞を形質導入した。細胞が休止した後、４８時間に亘りａＣＤ３／ａＣＤ２８  ｄｙｎａｂｅａｄｓで再度、細胞を刺激した。ＣＡＲの表面発現を検出するため、その後、細胞を抗Ｍｙｃ抗体で染色し、フローサイトメトリーによって分析した。
【０３５１】
細胞外ＬＢＤを有するＣＡＲ（ＬＢＤ  ＥＣＤ  ｖ１）は、ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズに曝露された場合に活性化されるＴ細胞において細胞内に局在化される。細胞内ＬＢＤを有するＣＡＲ（ｖ２  ＣＡＲ）は、活性化Ｔ細胞において細胞表面に幾らかの局在を示す（図１６）。
【０３５２】
実施例１７−ＥＣＤ．ｖ１  ＣＡＲ（ＬＢＤ＿ＥＣＤ）はサイトカインＩＬ−２を産生する
４−ヒドロキシタモキシフェンの存在下（５００ｎｇ／ｍＬ）又はその不在下でのＮＡＬＭ−６標的とのＣＡＲを持つＴ細胞の一晩の共培養の後、ＥＣＤ．ｖ１  ＣＡＲ  Ｔ細胞からのＩＬ−２産生を従来のＣＡＲ＋対照と比較した（図１６）。ＥＣＤ．ｖ１  ＣＡＲ受容体からのＩＬ−２産生（図１３）は従来のＣＡＲ対照に匹敵して、４−ヒドロキシタモキシフェンに依存性であり、薬物の不在化では検出ができなかった。
【０３５３】
その他の実施形態
本発明をその詳細な説明と併せて記載したが、先の記載は、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲の解説を意図するものであって、限定を意図しないことが理解されよう。その他の態様、利点及び変更は、添付の特許請求の範囲に含まれる。
【図１】
2020512009.tif 000005
【図２】
2020512009.tif 000006
【図３】
2020512009.tif 000007
【図４】
2020512009.tif 000008
【図５】
2020512009.tif 000009
【図６】
2020512009.tif 000010
【図７Ａ】
2020512009.tif 000011
【図７Ｂ】
2020512009.tif 000012
【図８Ａ】
2020512009.tif 000013
【図８Ｂ】
2020512009.tif 000014
【図９】
2020512009.tif 000015
【図１０Ａ】
2020512009.tif 000016
【図１０Ｂ】
2020512009.tif 000017
【図１１Ａ】
2020512009.tif 000018
【図１１Ｂ】
2020512009.tif 000019
【図１２】
2020512009.tif 000020
【図１３】
2020512009.tif 000021
【図１４】
2020512009.tif 000022
【図１５】
2020512009.tif 000023
【図１６】
2020512009.tif 000024
【図１７】
2020512009.tif 000025
【配列表】
2020512009000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和2年1月22日(2020.1.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単鎖キメラポリペプチドであって、該単鎖キメラポリペプチドは、
膜貫通ドメインと、
ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
を含み、
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインは互いに直接接しているか、又は１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
単鎖キメラポリペプチド。
【請求項２】
前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、又はアンドロゲン受容体に由来するリガンド結合ドメインである、請求項１に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項３】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接している、請求項１又は２に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項４】
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられている、請求項１又は２に記載の単鎖キメラポリペプチド。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
【請求項６】
哺乳動物細胞において単鎖キメラポリペプチドの膜局在を誘導する方法であって、
請求項１〜４のいずれか一項に記載の単鎖キメラポリペプチドを発現する哺乳動物細胞を、前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖キメラポリペプチドの局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモン類縁体と接触させること、
を含む、方法。
【請求項７】
単鎖キメラ抗原受容体であって、該単鎖キメラ抗原受容体は、
細胞外抗原結合ドメインと、
膜貫通ドメインと、
ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
共刺激ドメインと、
免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）と、
を含み、
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項８】
前記細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、ＶＨＨドメイン、及びＶＮＡＲドメインからなる群から選択される、請求項７に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項９】
前記細胞外抗原結合ドメインが単一の抗原に特異的に結合する、請求項７又は８に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１０】
前記細胞外抗原結合ドメインが、２つの異なる抗原に特異的に結合する、請求項７又は８に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１１】
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体のα鎖、Ｔ細胞受容体のβ鎖、Ｔ細胞受容体のζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３δ、ＣＤ３γ、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８α、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインである、請求項１〜４及び７〜１１のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１２】
前記共刺激ドメインが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、及びＢ７−Ｈ３に由来する細胞質共刺激ドメインである、請求項７〜１１のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１３】
前記ＩＴＡＭがＣＤ３ζに由来する細胞質シグナル伝達配列を含む、請求項７〜１２のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１４】
多重鎖キメラ抗原受容体であって、該多重鎖キメラ抗原受容体は、
細胞外抗原結合ドメインと、
膜貫通ドメインと、
ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
を含む少なくとも１つの第１のポリペプチドを含み、
前記膜貫通ドメイン及び前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜５００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物において同じ内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
多重鎖キメラ抗原受容体。
【請求項１５】
被験体において癌を治療するための組成物であって、請求項７〜１３のいずれか一項に記載の単鎖キメラ抗原受容体又は請求項１４に記載の多重鎖キメラ抗原受容体を発現する哺乳動物細胞を含み、前記抗原結合ドメインは前記被験体において癌によって発現される抗原に特異的に結合し、該組成物は該治療が下記（ａ）〜（ｄ）を含むことによって特徴付けられる組成物：
（ａ）前記細胞の形質膜の細胞外側への前記単鎖又は多重鎖のキメラ抗原受容体の局在を誘導するのに十分な量のホルモン又はホルモンを前記被験体に投与すること、
（ｂ）（ａ）の後に前記被験体において、毒性と関連する１つ以上の症状の存在若しくは重症度、サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方を特定すること、
（ｃ）前記特定された毒性と関連する１つ以上の症状の存在若しくは重症度、前記特定されたサイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方を、対照（複数の場合もある）と比較すること、
（ｄ）（ｄ）の後、前記被験体において、前記毒性と関連する１つ以上の症状の存在若しくは重症度、前記サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインのレベル、又はそれらの両方が減少されるように、前記細胞の形質膜の細胞外側の前記単鎖又は多重鎖のキメラ抗原受容体のレベルを減少させるのに十分な量の前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体を前記被験体に投与すること。
【請求項１６】
工程（ｄ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量が、工程（ａ）で前記被験体に投与される前記ホルモン又は前記ホルモン類縁体の量と比較して、少なくとも２５％減少されている、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記サイトカインストームと関連する１つ以上のサイトカインが、腫瘍壊死因子アルファ、ＩＦＮγ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、及びＩＬ−１０、顆粒球マクロファージ−コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、及びＩＬ−５からなる群から選択される、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１８】
単鎖キメラポリペプチドであって、該単鎖キメラポリペプチドは、
細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
膜貫通ドメインと、
を含み、
前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物において単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
単鎖キメラポリペプチド。
【請求項１９】
単鎖キメラ抗原受容体であって、該単鎖キメラ抗原受容体は、
細胞外抗原結合ドメインと、
細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
膜貫通ドメインと、
細胞内共刺激ドメインと、
細胞内の免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）と、
を含み、
前記膜貫通ドメイン及び前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が、哺乳動物において単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
単鎖キメラ抗原受容体。
【請求項２０】
多重鎖キメラ抗原受容体であって、該多重鎖キメラ抗原受容体は、
細胞外抗原結合ドメインと、
細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインと、
膜貫通ドメインと、
を含む少なくとも１つの第１のポリペプチドを含み、
前記膜貫通ドメイン及び前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインが互いに直接接しているか、又は１個〜７００個のアミノ酸によって隔てられ、
前記膜貫通ドメインと前記細胞外ホルモン受容体リガンド結合ドメインとの両方が哺乳動物において単一の内因性単鎖ポリペプチドに存在していない、
多重鎖キメラ抗原受容体。
【国際調査報告】
2020512009.tif 000026
2020512009.tif 000027
2020512009.tif 000028
2020512009.tif 000029
2020512009.tif 000030
2020512009.tif 000031
2020512009.tif 000032