(57)【要約】  本発明は、Ｂｃｌ−２抗アポトーシスタンパク質の活性を阻害する化合物、およびそれらの調製と使用に関する。具体的に、本発明は、式（Ｉ）で表されるＮ−ベンゼンスルホニルベンズアミド系化合物、またはその結晶形、プロドラッグ、薬学的に許容される塩、立体異性体、溶媒和物もしくは水和物の医薬組成物を開示した。本発明の化合物およびこの化合物を含む組成物は、Ｂｃｌ−２タンパク質に対する優れた阻害効果を有し、より優れた薬物動態パラメーター特性を持ち、動物体内での化合物の薬物濃度を増加させ、薬物の有効性および安全性を改善することができる。2020527166.tif 000034
2020527166.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で表されるＮ−ベンゼンスルホニルベンズアミド化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、結晶形、立体異性体、水和物もしくは溶媒和物である、Ｂｃｌ−２タンパク質阻害剤であって、
【化１】
2020527166.tif 000031
但し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９およびＲ４０は、それぞれ独立して水素、重水素、ハロゲンまたはトリフルオロメチルからなる群から選択され；
Ｘ１、Ｘ２は、それぞれ独立して「水素（Ｈ）、重水素（Ｈ）、メチル、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＤＣＨ３、ＣＨＤＣＨ２Ｄ、ＣＨＤＣＨＤ２、ＣＨＤＣＤ３、ＣＤ２ＣＨ３、ＣＤ２ＣＨ２Ｄ、ＣＤ２ＣＨＤ２、ＣＤ２ＣＤ３」からなる群から選択され；
追加条件は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９、Ｒ４０、Ｘ１およびＸ２の少なくとも１つが重水素化されたものまたは重水素である、
Ｂｃｌ−２タンパク質阻害剤。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５およびＲ３６は水素であり、Ｘ１およびＸ２はメチルであることを特徴とする、請求項１に記載のＢｃｌ−２タンパク質阻害剤。
【請求項３】
Ｒ９およびＲ１０は重水素であることを特徴とする、請求項２に記載のＢｃｌ−２タンパク質阻害剤。
【請求項４】
Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７およびＲ２８は重水素であることを特徴とする、請求項２に記載のＢｃｌ−２タンパク質阻害剤。
【請求項５】
Ｒ２９およびＲ３０は重水素であることを特徴とする、請求項２〜４のいずれか一項に記載のＢｃｌ−２タンパク質阻害剤。
【請求項６】
以下の化合物から選択されることを特徴とする、請求項１に記載のＢｃｌ−２タンパク質阻害剤。
【化２】
2020527166.tif 000032
【化３】
2020527166.tif 000033
【請求項７】
薬学的に許容される担体と、
請求項１〜６のいずれか一項に記載のＢｃｌ−２タンパク質阻害剤、またはその結晶形、薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物、立体異性体、プロドラッグ、或いは同位体バリアントと、を含む医薬組成物。
【請求項８】
膀胱癌、脳癌、乳癌、骨髄癌、子宮頸癌、慢性リンパ性白血病、結腸直腸癌、食道癌、肝細胞癌、原始リンパ球性白血病（ｐｒｉｍｏｒｄｉａｌ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞またはＢ細胞由来悪性リンパ腫、黒色腫、顆粒球性白血病、骨髄腫、口腔腫瘍、卵巣癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、小細胞癌または脾臓癌の治療薬の調製に用いられる、請求項１〜６のいずれか一項に記載のＢｃｌ−２タンパク質阻害剤の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬の技術分野に属し、具体的に、本発明は、Ｂｃｌ−２タンパク質に対して優れた阻害効果を有するＮ−ベンゼンスルホニルベンズアミド系化合物、それらを含む医薬組成物、およびそれらの調製方法と使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
腫瘍に対して特異的に標的を設計して新規の抗腫瘍薬を合成することは、標的抗腫瘍療法の焦点となっている。最近の研究により、アポトーシス（プログラム細胞死）メカニズムが腫瘍の発生、発達、退縮に関与することが示された。アポトーシスは、高度に保存されており、異なる種の生物にも類似のアポトーシスの分子メカニズムが存在する。既知のアポトーシスシグナル伝達経路には、内因性経路と外因性経路の両方が含まれる。ミトコンドリアのアポトーシス経路は内因性経路であるが、細胞死受容体を介したアポトーシス経路は外因性経路である。アポトーシスの内因性経路では、ミトコンドリア膜電位の低下、ミトコンドリア膜透過性「空洞」の形成または「チャネル」の開口などのミトコンドリアの機能変化は、チトクロムＣの放出につながり、これはアポトーシスの重要な特徴である。
【０００３】
Ｂｃｌ−２ファミリータンパク質（Ｂ−ｃｅｌｌ  ｌｙｍｐｈｏｍａ  ２  ｆａｍｉｌｙ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ）は、ミトコンドリア経路の頂点およびコア因子である。Ｂｃｌ−２ファミリータンパク質は、機能的および構造的特徴に従って３つのサブファミリーに分類される。サブファミリー１は、主にＢｃｌ−２（Ｂ−ｃｅｌｌ  ｌｙｍｐｈｏｍａ  ２）、Ｍｃｌ−１（Ｍｙｅｌｏｉｄ  ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  １）およびＢｃｌ−ｘＬ（Ｂ−ｃｅｌｌ  ｌｙｍｐｈｏｍａ  ｘ  ｌｏｎｇ）などを含み、抗アポトーシス機能を有する。サブファミリー２は、主にＢａｘ（Ｂｃｌ−２  ｒｅｌａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｘ）およびＢｃｋ（Ｂｃｌ−２  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ／ｋｉｌｌｅｒ）を含み、アポトーシス促進機能を有する。もう１つは、Ｂａｄ（Ｂｃｌ−２  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ）、Ｂｉｍ（Ｂｃｌ−２  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ  ｍｅｄｉａｔｏｒ）などを含み、ＢＨ３ドメインのみ（ＢＨ３のみ）を含むアポトーシス促進サブファミリー３である。前立腺癌の３０％〜６０％、乳癌の７０％、結腸直腸癌の９０％、小細胞癌の１００％、およびリンパ球性、顆粒球性白血病細胞などは、抗アポトーシス効果を有するＢｃｌ−２遺伝子および／またはタンパク質を高度に発現する。したがって、癌治療の分野では、Ｂｃｌ−２タンパク質阻害剤を開発する必要がある。
【０００４】
抗癌リード化合物としてのＢｃｌ−２タンパク質阻害剤は、すでに１０年以上研究され、数十の小分子化合物が発見された。しかしながら、現在、国際市場には、承認されたＢｃｌ−２タンパク質阻害剤がＶｅｎｅｔｏｃｌａｘ（ベネトクラックス）のみである。Ｖｅｎｅｔｏｃｌａｘは、アッヴィ（ＡｂｂＶｉｅ）とロシュ（Ｒｏｃｈｅ）が共同開発した画期的な抗癌剤であり、２０１６年４月１１日にアメリカ食品医薬品局によって承認され、２０１６年１２月５日に欧州医薬品庁によって承認され、少なくとも１つの治療を受けた、１７ｐ遺伝子欠失変異を有する慢性リンパ性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ，ＣＬＬ）の患者の治療に用いられる。
【０００５】
Ｖｅｎｅｔｏｃｌａｘは、ＦＤＡが承認した最初のＢｃｌ−２タンパク質阻害剤（化学名は、４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミドであり、以下の式で表される）であり、これは、予後不良で治療選択肢が限られている１７ｐ遺伝子欠失変異を有するＣＬＬ患者の治療の新しい選択肢である。しかし、好中球減少、下痢、悪心、貧血、上気道感染、血小板減少、疲労などの副作用も見られる場合がある。
【化１】
2020527166.tif 000003
【０００６】
多くの薬剤候補において、吸収、分布、代謝および/または排泄（ＡＤＭＥ）特性が乏しいことが、臨床試験の失敗の主な原因であることが知られている。現在、多くの市販薬は、乏しいＡＤＭＥ特性によって適用範囲が限られている。薬物の急速な代謝は、そもそも効率的に疾患を治療できる多くの薬物が、体内からあまりにも早く代謝、除去されるため、薬物として使用できないことにつながる。頻繁または高用量の投与により、急速な薬物クリアランスの問題を解決できる可能性があるが、この方法は、患者のコンプライアンスの低下、高用量投与による副作用、および治療コストの増加などの問題につながる可能性がある。また、急速に代謝される薬物は、患者を有害な毒性または反応性代謝物にさらす可能性もある。
【０００７】
したがって、当技術分野では、Ｂｃｌ−２タンパク質を選択的に阻害することによってアポトーシスプロセスを回復して癌治療の効果を達成し、高い特異性またはより優れた薬力学／薬物動態特性を有するＢｃｌ−２小分子阻害剤を開発する必要がある。
【発明の概要】
【０００８】
上記の技術問題について、本発明は、新規のＮ−ベンゼンスルホニルベンズアミド系Ｂｃｌ−２タンパク質阻害剤、医薬組成物およびその使用を提供する。より具体的には、本発明は、一部の重水素化された４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミドに関する。これらの重水素化された化合物は、より優れたＢｃｌ−２キナーゼ阻害活性、および／またはより優れた薬力学／薬物動態学的特性を有する。これに関して、本発明の技術構成は以下のとおりである。
【０００９】
式（Ｉ）で表されるＮ−ベンゼンスルホニルベンズアミド化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、結晶形、立体異性体、水和物もしくは溶媒和物である、Ｂｃｌ−２タンパク質阻害剤であって、
【化２】
2020527166.tif 000004
但し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９およびＲ４０は、それぞれ独立して水素、重水素、ハロゲンまたはトリフルオロメチルからなる群から選択され；
Ｘ１、Ｘ２は、それぞれ独立して「水素（Ｈ）、重水素（Ｈ）、メチル、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＤＣＨ３、ＣＨＤＣＨ２Ｄ、ＣＨＤＣＨＤ２、ＣＨＤＣＤ３、ＣＤ２ＣＨ３、ＣＤ２ＣＨ２Ｄ、ＣＤ２ＣＨＤ２、ＣＤ２ＣＤ３」からなる群から選択され；
追加条件は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９、Ｒ４０、Ｘ１およびＸ２の少なくとも１つが重水素化されたものまたは重水素である、
Ｂｃｌ−２タンパク質阻害剤。
【００１０】
この技術的解決策では、薬物分子中の重水素の形状および体積は水素とほとんど同じであるため、薬物分子中の水素が選択的に重水素で置換される場合、一般的に、重水素化薬物は元々の生物活性および選択性を保持する。同時に、本発明者らは、炭素-重水素結合が炭素-水素結合よりも安定であり、一部の薬物の吸収、分布、代謝および排泄などの特性に直接影響を与えることで、薬物の有効性、安全性、耐性を改善することを実験により確認した。
【００１１】
好ましくは、重水素は、重水素に置換された各位置における重水素同位体含有量が、少なくとも天然重水素同位体含有量（０．０１５％）より多く、好ましくは３０％超、より好ましくは５０％超、さらにより好ましくは７５％超、さらにより好ましくは９５％超、さらにより好ましくは９９％超である。
【００１２】
具体的には、本発明において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９、Ｒ４０、Ｘ１およびＸ２の重水素に置換された各位置における重水素同位体含有量は、少なくとも５％であり、好ましくは１０％超、より好ましくは１５％超、より好ましくは２０％超、より好ましくは２５％超、より好ましくは３０％超、より好ましくは３５％超、より好ましくは４０％超、より好ましくは４５％超、より好ましくは５０％超、より好ましくは５５％超、より好ましくは６０％超、より好ましくは６５％超、より好ましくは７０％超、より好ましくは７５％超、より好ましくは８０％超、より好ましくは８５％超、より好ましくは９０％超、より好ましくは９５％超、より好ましくは９９％超である。
【００１３】
好ましくは、式（Ｉ）で表れる化合物におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９、Ｒ４０、Ｘ１およびＸ２の少なくとも１つのＲが重水素を含み、好ましくは２個のＲ／Ｘ、より好ましくは３個のＲ／Ｘ、より好ましくは４個のＲ／Ｘ、より好ましくは５個のＲ／Ｘ、より好ましくは６個のＲ／Ｘ、より好ましくは７個のＲ／Ｘ、より好ましくは８個のＲ／Ｘ、より好ましくは９個のＲ／Ｘ、より好ましくは１０個のＲ／Ｘ、より好ましくは１１個のＲ／Ｘ、より好ましくは１２個のＲ／Ｘ、より好ましくは１３個のＲ／Ｘ、より好ましくは１４個のＲ／Ｘ、より好ましくは１５個のＲ／Ｘ、より好ましくは１６個のＲ／Ｘ、より好ましくは１７個のＲ／Ｘ、より好ましくは１８個のＲ／Ｘ、より好ましくは１９個のＲ／Ｘ、より好ましくは２０個のＲ／Ｘ、より好ましくは２１個のＲ／Ｘ、より好ましくは２２個のＲ／Ｘ、より好ましくは２３個のＲ／Ｘ、より好ましくは２４個のＲ／Ｘ、より好ましくは２５個のＲ／Ｘ、より好ましくは２６個のＲ／Ｘ、より好ましくは２６個のＲ／Ｘ、より好ましくは２８個のＲ／Ｘ、より好ましくは２９個のＲ／Ｘ、より好ましくは３０個のＲ／Ｘ、より好ましくは３１個のＲ／Ｘ、より好ましくは３２個のＲ／Ｘ、より好ましくは３３個のＲ／Ｘ、より好ましくは３４個のＲ／Ｘ、より好ましくは３５個のＲ／Ｘ、より好ましくは３６個のＲ／Ｘ、より好ましくは３７個のＲ／Ｘ、より好ましくは３８個のＲ／Ｘ、より好ましくは３９個のＲ／Ｘ、より好ましくは４０個のＲ／Ｘ、より好ましくは４１個のＲ／Ｘ、より好ましくは４２個のＲ／Ｘが重水素を含む。
【００１４】
本発明のさらなる改良として、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は、それぞれ独立して、重水素または水素から選択される。
【００１５】
別の好ましい例において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８は重水素である。
【００１６】
本発明のさらなる改良として、Ｒ９、Ｒ１０は、それぞれ独立して、重水素または水素から選択される。
【００１７】
別の好ましい例において、Ｒ９、Ｒ１０は重水素である。
【００１８】
本発明のさらなる改良として、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３は、それぞれ独立して、重水素または水素から選択される。
【００１９】
別の好ましい例において、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３は重水素である。
【００２０】
本発明のさらなる改良として、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０は、それぞれ独立して、重水素または水素から選択される。
【００２１】
別の好ましい例において、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０は重水素である。
【００２２】
本発明のさらなる改良として、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８は、それぞれ独立して、重水素または水素から選択される。
【００２３】
別の好ましい例において、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８は重水素である。
【００２４】
本発明のさらなる改良として、Ｒ２９、Ｒ３０は、それぞれ独立して、重水素または水素から選択される。
【００２５】
別の好ましい例において、Ｒ２９、Ｒ３０は重水素である。
【００２６】
本発明のさらなる改良として、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６は、それぞれ独立して、重水素または水素から選択される。
【００２７】
別の好ましい例において、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６は重水素である。
【００２８】
本発明のさらなる改良として、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９、Ｒ４０は、それぞれ独立して、重水素または水素から選択される。
【００２９】
別の好ましい例において、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９、Ｒ４０は重水素である。
【００３０】
本発明のさらなる改良として、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９、Ｒ４０は、それぞれ独立して、重水素または水素から選択される。
【００３１】
別の好ましい例において、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９、Ｒ４０は重水素である。
【００３２】
本発明のさらなる改良として、Ｘ１、Ｘ２は、それぞれ独立して、１つまたは複数の重水素で置換されたアルキル基から選択される。
【００３３】
別の好ましい例において、Ｘ１、Ｘ２はＣＤ３である。
【００３４】
本発明のさらなる改良として、前記化合物は、以下の化合物またはその薬学的に許容される塩から選択される。
【化３】
2020527166.tif 000005
【化４】
2020527166.tif 000006
【００３５】
別の好ましい例において、前記化合物は、重水素化されていない化合物を含まない。
【００３６】
本発明は、薬学的に許容される担体、および上記のＢｃｌ−２タンパク質阻害剤、またはその結晶形、薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物、立体異性体、互変異性体、プロドラッグ或いは同位体バリアントを含む医薬組成物も開示される。
【００３７】
本発明のさらなる改良として、前記した薬学的に許容される担体は、カプセルに封入された物質、または添加剤、流動促進剤、甘味料、希釈剤、防腐剤、染料／着色剤、風味増強剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、崩壊剤、懸濁剤、安定剤、等張剤、溶媒もしくは乳化剤の少なくとも1つを含む。
【００３８】
本発明のさらなる改良として、前記医薬組成物は、錠剤、丸剤、カプセル剤、粉剤、顆粒剤、軟膏剤、乳剤、懸濁剤、溶液剤、坐剤、注射剤、吸入剤、ゲル剤、ミクロスフェアまたはエアロゾルである。
【００３９】
本発明の医薬組成物の代表的な投与経路として、経口、直腸、経粘膜、経腸、または局所、経皮、吸入、非経口、舌下、膣内、鼻腔内、眼内、腹腔内、筋肉内、皮下、静脈内投与が挙げられるが、これらに限定されない。経口投与または注射投与が好ましい。
【００４０】
本発明の医薬組成物は、通常の混合法、溶解法、造粒法、糖衣錠調製法、粉砕法、乳化法、凍結乾燥法などの当技術分野で公知の方法により製造することができる。
【００４１】
本発明は、
薬学的に許容される担体と、
前記のようなＢｃｌ−２タンパク質阻害剤、またはその結晶形、薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物、立体異性体、プロドラッグあるいは同位体バリアントと、を混合する工程を含む、医薬組成物の調製方法を提供する。
【００４２】
本発明のさらなる改良として、他の活性化合物をさらに含む。上記の活性化合物は、アルキル化剤、血管新生阻害剤、抗体、代謝拮抗薬、抗有糸分裂薬、抗増殖剤、抗ウイルス剤、オーロラキナーゼ阻害剤、その他のプログラム細胞死促進剤（例えば、Ｂｃｌ−ｘＬ、Ｂｃｌ−ｗ、Ｂｆｌ−１阻害剤）、細胞死受容体経路活性化因子、Ｂｃｒ−Ａｂｌキナーゼ阻害剤、ＢｉＴＥ（Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｔ  ｃｅｌｌ  Ｅｎｇａｇｅｒ）抗体、抗体−薬物複合体、生物学的反応修飾因子、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤、細胞周期阻害剤、シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤、ＤＡＤ、白血病ウイルス腫瘍遺伝子ホモログ（ＥｒｂＢ２）受容体阻害薬、成長因子阻害薬、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）−９０阻害薬、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害薬、ホルモン療法、免疫、アポトーシスタンパク質阻害薬（ＩＡＰｓ）、挿入抗生物質（ｉｎｓｅｒｔ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）、キナーゼ阻害薬、キネシン阻害剤、Ｊａｋ２阻害剤、温血動物を標的としたラパマイシン阻害剤、マイクロＲＮＡ、マイトジェン活性化細胞外シグナル調節キナーゼ阻害剤、多価結合タンパク質、ＮＳＡＩＤｓ、ポリＡＤＰ（アデノシン二リン酸）−リボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤、プラチナ化学療法、ポロ様キナーゼ（Ｐｌｋ）阻害剤、ホスホイノシチド−３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤、プロテオソーム阻害剤、プリン類似体、ピリミジン類似体、受容体チロシンキナーゼ阻害剤、酒石酸エルゴタミンアルカロイド（ｅｔｉｎｏｉｄｓ）／ｒｈｉｚｏｍａ  ｓｐａｒｇａｎｉｉ  ａｌｋａｌｏｉｄｓ（ｄｅｌｔｏｉｄｓ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡｓ）、トポイソメラーゼ阻害剤、ユビキチンリガーゼ阻害剤、化学療法剤などからなる群から選択される。
【００４３】
本発明の活性成分は、他の活性成分と組み合わせて使用してもよい。このような組み合わせの選択は、治療の状況、成分の交差反応性、および組み合わせた医薬特性に基づく。本発明の任意の化合物を、１つまたは複数の他の活性成分と組み合わせて、単一の剤形として、同時にまたは連続して患者に投与してもよい。併用療法は、同時または連続投与のレジメンで投与してもよい。連続投与の場合、２回以上で組み合わせて投与されてもよい。併用療法は、「相乗作用」または「相乗効果」を提供できる。言い換えると、有効成分を組み合わせて使用すると、得られる効果は、化合物を別々に使用することによって得られる効果の合計よりも大きくなる。有効成分は、（１）合わせて調製および投与、または併用製剤として同時に送達する場合、（２）独立した製剤として交互にまたは並行して投与される場合、または（３）他のレジメンによって投与される場合で、相乗効果が得られる。代替療法（ａｌｔｅｒｎａｔｅ  ｔｈｅｒａｐｙ）で送達される場合、化合物が順次に投与または放出されると、例えば、独立した錠剤、丸剤またはカプセルとして、または別個の注射器で別個に注射すると、相乗効果が得られる。通常、代替療法において、各活性成分は、有効用量で順次に、すなわち連続して投与される一方で、併用療法において、２つ以上の活性成分は、有効用量で一緒に投与される。
【００４４】
また、本発明は、膀胱癌、脳癌、乳癌、骨髄癌、子宮頸癌、慢性リンパ性白血病、結腸直腸癌、食道癌、肝細胞癌、原始リンパ球性白血病（ｐｒｉｍｏｒｄｉａｌ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞またはＢ細胞由来悪性リンパ腫、黒色腫、顆粒球性白血病、骨髄腫、口腔腫瘍、卵巣癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、小細胞癌または脾臓癌の治療への使用を含む、上記のＢｃｌ−２タンパク質阻害剤またはその医薬組成物の使用を提供する。
【００４５】
本発明の範囲において、上記の各技術特徴および以下（例えば、実施例）に具体的に記載される各技術特徴が、互いに組み合わされて、新規または好ましい技術を構成し得ることを理解すべきである。スペースの制限のため、ここでは説明を繰り返しない。
【００４６】
本明細書において、特に明記しない限り、「ハロゲン」とは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩを指す。より好ましくは、ハロゲン原子は、Ｆ、ＣｌおよびＢｒから選択される。
【００４７】
本明細書において、特に明記しない限り、「重水素化」とは、化合物または基における１つまたは複数の水素が重水素で置換されていることを意味する。「重水素化」は、重水素によって一置換、二置換、多置換、または完全に置換されていてもよい。「１つ以上の重水素で置換された」および「重水素で１回以上置換された」という用語は互換的に使用できる。
【００４８】
本明細書において、特に明記しない限り、「非重水素化化合物」とは、重水素原子の含有割合が天然重水素同位体含有量（０．０１５％）を超えない化合物である。
【００４９】
また、本発明は同位体標識化合物（「同位体バリアント」とも呼ばれる）を含み、ここで元の化合物を開示することに相当する。本発明の化合物の同位体の例として、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆおよび３６Ｃｌなどの水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素および塩素の同位体が挙げられる。上記の同位体または他の同位体原子を含む本発明の式（Ｉ）で表れる化合物、またはその結晶多形、薬学的に許容される塩、プロドラッグ、立体異性体、同位体バリアント、水和物または溶媒和物は、すべて本発明の範囲内にある。例えば、放射性同位体である３Ｈおよび１４Ｃも本発明の特定の同位体標識化合物の中に含まれ、それは薬物および基質の組織分布実験に有用である。トリチウム（即ち３Ｈ）と炭素１４（即ち１４Ｃ）は、調製および検出が比較的に容易であるため、同位体の第１候補である。さらに、重水素（即ち２Ｈ）のようなより重い同位体による置換は、代謝安定性が優れているため、一部の治療法で優勢を占める。例えば、インビボでの半減期の延長や投与量の削減ができるので、状況に応じて優先に考えられることがある。同位体標識化合物は、通常の方法で非同位体試薬の代わりに容易に入手可能な同位体標識試薬を使用することにより、例に示すプロトコルに従って調製される。
【００５０】
本発明の式（Ｉ）で表れる化合物は、酸付加塩、塩基付加塩または双性イオンの形態で存在し得る。化合物の塩は、化合物の単離中または化合物の精製後に調製される。化合物の酸付加塩は、化合物と酸との反応に由来するものである。例えば、本発明は、化合物およびそのプロドラッグの酢酸塩、アジペート、アルギン酸塩、重炭酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、カンファー酸塩、カンファースルホン酸塩、ジグルコン酸、ギ酸塩、フマル酸塩、グリセロールリン酸塩、グルタミン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トリクロロ酢酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩およびウンデカノエートを含む。化合物の塩基付加塩は、化合物と、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどのカチオンの水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩との反応に由来するものである。
【００５１】
本発明の化合物は、１つ以上の不斉中心を含んでも良く、したがって、例えば鏡像異性体および／またはジアステレオマー形態のような様々な「立体異性体」の形態で存在し得る。例えば、本発明の化合物は、個々の鏡像異性体、ジアステレオマーまたは幾何異性体（例えば、シスおよびトランス異性体）の形態であってもよく、或いはラセミ混合物および１つ以上の立体異性体に富んだ混合物を含む立体異性体混合物の形態であってもよい。異性体は、キラル高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）およびキラル塩の形成や結晶化を含む当業者に公知の方法によって混合物から分離することができ；または、好ましい異性体は、非対称合成によって調製することができる。
【００５２】
特定の場合において、本発明の化合物は、互変異性体の形態でも存在し得る。１種の非局在化共振構造のみが説明されるが、これらの形態はすべて、本発明の範囲内にある。例えば、プリン、ピリミジン、イミダゾール、グアニジン、アミジン、およびテトラゾール系については、エナミン互変異性体が存在する場合があり、それらの可能な互変異性体はすべて本発明の範囲内に含まれる。
【００５３】
「結晶多形」という用語は、化学薬物分子の異なる配置を指し、一般に、薬物原料の固体状態での存在形態として示される。薬物は、さまざまな結晶形で存在する可能性があり、同じ薬物の異なる結晶形は、生体内で異なる溶解および吸収特性を有し、それにより製剤の溶解および放出に影響を与える可能性がある。
【００５４】
「プロドラッグ」という用語は、インビボで、例えば血液中での加水分解によって医学的な効果を有する活性形態に変換される化合物を指す。プロドラッグは、患者に投与されると、インビボで本発明の化合物を放出する任意の共有結合した担体である。プロドラッグは、典型的には、官能基の修飾によって調製され、この修飾により、プロドラッグがインビボで切断させて母体化合物を生じることができる。プロドラッグには、例えば、水酸基、アミノ基またはメルカプト基が任意の基に結合している本発明の化合物が含まれ、それらを患者に投与すると、切断されて、水酸基、アミノ基またはメルカプト基を形成することができる。したがって、プロドラッグの代表例としては、本発明の化合物がその水酸基、アミノ基またはメルカプト基と酢酸、ギ酸または安息香酸とによって形成された共有結合誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。また、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）の場合は、メチルエステル、エチルエステル等のエステルが用いられる。エステル自体は活性を有してもよく、および／またはヒトの体内の条件下で加水分解されてもよい。適切な薬学的に許容されるインビボで加水分解可能なエステルには、人体中で容易に分解して母体酸またはその塩を放出するものが含まれる。
【００５５】
「溶媒和物」という用語は、本発明の化合物が特定の比率で溶媒分子と配位している複合体を指す。「水和物」とは、本発明の化合物と水との配位により形成される複合体を指す。
【００５６】
従来の技術と比較して、本発明は以下の有益な効果を有する。本発明の化合物は、Ｂｃｌ−２タンパク質キナーゼに対して優れた阻害性を有する。また、重水素化技術により、生体内の化合物の代謝を変化させ、化合物の薬物動態パラメーターを向上させる。この場合に、投与量を変更し、長時間作用型製剤にして適用性を改善することができ；また、重水素で化合物の水素原子を置換すると、重水素の同位体効果により動物体内の化合物の薬物濃度を増加し、薬物の有効性を向上させ；さらに、重水素で化合物中の水素原子を置換すると、特定の代謝産物が阻害され、化合物の安全性を向上させる。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
化合物
本発明は、式（Ｉ）で表されるＮ−ベンゼンスルホニルベンズアミド化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、結晶形、立体異性体、水和物もしくは溶媒和物を提供する。
【化５】
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但し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９およびＲ４０は、それぞれ独立して水素、重水素、ハロゲンまたはトリフルオロメチルからなる群から選択され；
Ｘ１、Ｘ２は、それぞれ独立して「水素（Ｈ）、重水素（Ｈ）、メチル、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＤＣＨ３、ＣＨＤＣＨ２Ｄ、ＣＨＤＣＨＤ２、ＣＨＤＣＤ３、ＣＤ２ＣＨ３、ＣＤ２ＣＨ２Ｄ、  ＣＤ２ＣＨＤ２、ＣＤ２ＣＤ３」からなる群から選択され；
追加条件は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９、Ｒ４０、Ｘ１およびＸ２の少なくとも１つが重水素化されたものまたは重水素である。
【００５８】
本発明の好ましい実施形態として、重水素は、重水素に置換された各位置における重水素同位体含有量が、少なくとも天然重水素同位体含有量（０．０１５％）より多く、好ましくは３０％超、より好ましくは５０％超、さらにより好ましくは７５％超、さらにより好ましくは９５％超、さらにより好ましくは９９％超である。
【００５９】
特定の実施形態において、「Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９およびＲ４０は、それぞれ独立して水素、重水素、ハロゲンまたはトリフルオロメチルからなる群から選択される」ことは、Ｒ１が水素、重水素、ハロゲン又はトリフルオロメチルから選択され、Ｒ２が水素、重水素、ハロゲン又はトリフルオロメチルから選択され、Ｒ３が水素、重水素、ハロゲン又はトリフルオロメチルから選択され、同様に、Ｒ４０が水素、重水素、ハロゲン又はトリフルオロメチルから選択されるまでの技術構成を含む。具体的に、Ｒ１が水素、Ｒ１が重水素、Ｒ１がハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ１がトリフルオロメチル、Ｒ２が水素、Ｒ２が重水素、Ｒ２がハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ２がトリフルオロメチル、Ｒ３が水素、Ｒ３が重水素、Ｒ３がハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ３がトリフルオロメチル、同様に、Ｒ４０が水素、Ｒ４０が重水素、Ｒ４０がハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ４０がトリフルオロメチルであるまでの技術構成を含む。
【００６０】
別の特定の実施形態において、［Ｘ１、Ｘ２は、それぞれ独立して「水素（Ｈ）、重水素（Ｈ）、メチル、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＤＣＨ３、ＣＨＤＣＨ２Ｄ、ＣＨＤＣＨＤ２、ＣＨＤＣＤ３、ＣＤ２ＣＨ３、ＣＤ２ＣＨ２Ｄ、ＣＤ２ＣＨＤ２、ＣＤ２ＣＤ３」からなる群から選択される］ことは、Ｘ１が水素（Ｈ）、重水素（Ｈ）、メチル、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＤＣＨ３、ＣＨＤＣＨ２Ｄ、ＣＨＤＣＨＤ２、ＣＨＤＣＤ３、ＣＤ２ＣＨ３、ＣＤ２ＣＨ２Ｄ、ＣＤ２ＣＨＤ２、ＣＤ２ＣＤ３から選択され、Ｘ２が水素（Ｈ）、重水素（Ｈ）、メチル、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＤＣＨ３、ＣＨＤＣＨ２Ｄ、ＣＨＤＣＨＤ２、ＣＨＤＣＤ３、ＣＤ２ＣＨ３、ＣＤ２ＣＨ２Ｄ、ＣＤ２ＣＨＤ２、ＣＤ２ＣＤ３から選択される技術構成を含む。具体的に、Ｘ１が水素、Ｘ１が重水素、Ｘ１がＣＨ２Ｄ、Ｘ１がＣＨＤ２、Ｘ１がＣＤ３、Ｘ１がＣＨ２ＣＨ３、Ｘ１がＣＨＤＣＨ３、Ｘ１がＣＨＤＣＨ２Ｄ、Ｘ１がＣＨＤＣＨＤ２、Ｘ１がＣＨＤＣＤ３、Ｘ１がＣＤ２ＣＨ３、Ｘ１がＣＤ２ＣＨ２Ｄ、Ｘ１がＣＤ２ＣＨＤ２、Ｘ１がＣＤ２ＣＤ３、Ｘ２が水素、Ｘ２が重水素、Ｘ２がＣＨ２Ｄ、Ｘ２がＣＨＤ２、Ｘ２がＣＤ３、Ｘ２がＣＨ２ＣＨ３、Ｘ２がＣＨＤＣＨ３、Ｘ２がＣＨＤＣＨ２Ｄ、Ｘ２がＣＨＤＣＨＤ２、Ｘ２がＣＨＤＣＤ３、Ｘ２がＣＤ２ＣＨ３、Ｘ２がＣＤ２ＣＨ２Ｄ、Ｘ２がＣＤ２ＣＨＤ２、Ｘ２がＣＤ２ＣＤ３である技術構成を含む。
【００６１】
好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）で表れる化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、水和物もしくは溶媒和物、結晶形、立体異性体或いは同位体バリアントに関し、ここで、Ｒ１１−Ｒ２０とＲ３７−Ｒ４０は水素であり、Ｘ１とＸ２は、それぞれ独立してメチル、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３から選択され、Ｒ１−Ｒ１０、Ｒ２１−Ｒ３０、Ｒ３１−Ｒ３６は上記で定義したとおりであり、追加条件は、式（Ｉ）で表れる化合物が少なくとも１つの重水素原子を含む。
【００６２】
好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）で表れる化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、水和物もしくは溶媒和物、結晶形、立体異性体或いは同位体バリアントに関し、ここで、Ｒ１１−Ｒ２０とＲ３７−Ｒ４０は水素であり、Ｘ１とＸ２は、それぞれ独立してメチル、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３から選択され、Ｒ１−Ｒ１０、Ｒ２１−Ｒ３０およびＲ３１−Ｒ３６は、それぞれ独立して水素または重水素から選択され、追加条件は、式（Ｉ）で表れる化合物が少なくとも１つの重水素原子を含む。
【００６３】
好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）で表れる化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、水和物もしくは溶媒和物、結晶形、立体異性体或いは同位体バリアントに関し、ここで、Ｒ１１−Ｒ２０とＲ３７−Ｒ４０は水素であり、Ｘ１とＸ２は、それぞれ独立してメチルまたはＣＤ３から選択され、Ｒ１−Ｒ８とＲ３１−Ｒ３６は水素であり、Ｒ９−Ｒ１０とＲ２１−Ｒ３０は、それぞれ独立して水素または重水素から選択され、追加条件は、式（Ｉ）で表れる化合物が少なくとも１つの重水素原子を含む。
【００６４】
好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）で表れる化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、水和物もしくは溶媒和物、結晶形、立体異性体或いは同位体バリアントに関し、ここで、Ｒ１１−Ｒ２０とＲ３７−Ｒ４０は水素であり、Ｘ１とＸ２は、それぞれ独立してメチルから選択され、Ｒ１−Ｒ８とＲ３１−Ｒ３６は水素であり、Ｒ９−Ｒ１０とＲ２１−Ｒ３０は、それぞれ独立して水素または重水素から選択され、追加条件は、式（Ｉ）で表れる化合物が少なくとも１つの重水素原子を含む。
【００６５】
好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）で表れる化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、水和物もしくは溶媒和物、結晶形、立体異性体或いは同位体バリアントに関し、ここで、Ｒ１１−Ｒ２０とＲ３７−Ｒ４０は水素であり、Ｘ１とＸ２は、それぞれ独立してメチルから選択され、Ｒ１−Ｒ８とＲ３１−Ｒ３６は水素であり、Ｒ９とＲ１０は重水素であり、Ｒ２１−Ｒ３０は、それぞれ独立して水素または重水素から選択される。別の特定の実施形態において、Ｒ２１−Ｒ２８は重水素であり；別の特定の実施形態において、Ｒ２１−Ｒ２８は水素であり；別の特定の実施形態において、Ｒ２９−Ｒ３０は重水素であり；別の特定の実施形態において、Ｒ２９−Ｒ３０は水素である。
【００６６】
好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）で表れる化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、水和物もしくは溶媒和物、結晶形、立体異性体或いは同位体バリアントに関し、ここで、Ｒ１１−Ｒ２０とＲ３７−Ｒ４０は水素であり、Ｘ１とＸ２は、それぞれ独立してメチルから選択され、Ｒ１−Ｒ８とＲ３１−Ｒ３６は水素であり、Ｒ２１−Ｒ２８は重水素であり、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ２９およびＲ３０は、それぞれ独立して水素または重水素から選択される。別の特定の実施形態において、Ｒ９とＲ１０は重水素であり；別の特定の実施形態において、Ｒ２９とＲ３０は水素であり；別の特定の実施形態において、Ｒ２９とＲ３０は重水素である。
【００６７】
好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）で表れる化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、水和物もしくは溶媒和物、結晶形、立体異性体或いは同位体バリアントに関し、ここで、Ｒ１１−Ｒ２０とＲ３７−Ｒ４０は水素であり、Ｘ１とＸ２は、それぞれ独立してメチルから選択され、Ｒ１−Ｒ８とＲ３１−Ｒ３６は水素であり、Ｒ２９とＲ３０は重水素であり、Ｒ９−Ｒ１０とＲ２１−Ｒ２８は、それぞれ独立して水素または重水素から選択される。別の特定の実施形態において、Ｒ９−Ｒ１０は重水素であり；別の特定の実施形態において、Ｒ９−Ｒ１０は水素であり；別の特定の実施形態において、Ｒ２１−Ｒ２８は重水素であり；別の特定の実施形態において、Ｒ２１−Ｒ２８は水素である。
【００６８】
好ましい実施形態において、式（Ｉ）で表れる化合物は、以下の構造の化合物から選択される。
【化６】
2020527166.tif 000008
【００６９】
合成
本発明の化合物（その塩を含む）は、既知の有機合成技術で調製され、以下のスキームのような様々な可能な合成経路のいずれかに従って合成することができる。本発明の化合物を調製する反応は、有機合成分野の技術者によって容易に選択される適切な溶媒中で実施される。適切な溶媒は、反応が行われる温度（例えば、溶媒の凍結温度から沸点までの範囲の温度）で、出発物質（反応物）、中間体または生成物と実質的に反応しない。所定の反応は、１種の溶媒または複数の溶媒の混合物で行われる。当業者は、特定の反応工程に応じて、特定の反応工程用の溶媒を選択することができる。
【００７０】
本発明の化合物の調製は、異なる化学官能基の保護および脱保護に関する。当業者は、保護および脱保護の必要性および適切な保護基の選択を容易に決定することができる。保護基の化学性質は、例えば、ＷｕｔｓおよびＧｒｅｅｎｅ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，４ｔｈ  Ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ：Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ，（２００６）に記載されたが、それらはそれぞれ参照により本明細書に組み入れられる。
【００７１】
反応は、当該分野で公知の任意の適切な方法に従って監視される。たとえば、生成物の形成は、スペクトル法（核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法（１Ｈまたは１３Ｃなど）、赤外線（ＩＲ）分光法、分光法（ＵＶ可視）、質量分析（ＭＳ）、またはクロマトグラフィー法（高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）または薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ））などによって監視される。
【００７２】
医薬組成物、製剤およびキット
他の様態では、本発明は、本発明の化合物（「活性成分」とも呼ばれる）および医薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。一部の実施形態において、前記の医薬組成物は、有効量の活性成分を含む。一部の実施形態において、前記の医薬組成物は、治療有効量の活性成分を含む。一部の実施形態において、前記の医薬組成物は、予防有効量の活性成分を含む。
【００７３】
本発明の薬学的に許容される賦形剤とは、配合される化合物の薬理学的活性を無効にしない非毒性担体、アジュバントまたは媒体を指す。本発明の組成物に使用できる薬学的に許容される担体、アジュバントまたは媒体には、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清アルブミン（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝物質（例えば、リン酸塩）、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン）、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が含まれるが、これらに限定されない。
【００７４】
本発明は、キット（例えば、医薬パック）も含む。提供されるキットは、本発明の化合物、他の治療剤、ならびに本発明の化合物、他の治療剤を含有する第１および第２の容器（例えば、バイアル、アンプル、ボトル、シリンジ、および／または分散パッケージ、あるいは他の適切な容器）を含む。また、一部の実施形態において、提供されるキットは、本発明の化合物および／または他の治療薬を希釈または懸濁するための薬学的に許容される賦形剤を含む第３の容器も有しても良い。一部の実施形態において、第１の容器および第２の容器内の本発明の化合物を他の治療薬と組み合わせて単位製剤を形成して提供する。
【００７５】
本発明によって提供される医薬組成物は、経口投与、非経口投与、吸入投与、局所投与、直腸内投与、鼻腔投与、口腔投与、膣内投与、インプラントによる投与または他の投与方法などの様々な方式によって投与することができるが、これらに限定されない。例えば、本発明で用いる非経口投与として、皮下投与、静脈内投与、筋肉内投与、関節内投与、動脈内投与、滑膜腔内投与、胸骨内投与、脳脊髄膜内投与、病巣内投与、頭蓋内の注射や輸液技術が挙げられる。
【００７６】
通常、有効量で本発明によって提供する化合物を投与する。治療される病状、選択される投与方式、実際に投与される化合物、患者の年齢、体重および反応、患者の症状の重篤度などを含む状況に応じて、実際に投与される化合物の量は医師によって決定される。
【００７７】
前記した本発明の病状を予防するために使用される場合、本発明によって提供される化合物は、前記の病状を発症するリスクのある被験者に投与され、典型的には、医師の推奨に基づいて上記の用量レベルで投与される。特定の病状を発症するリスクのある被験者には、典型的に、前記の病状の家族歴史を有する被験者、または遺伝子検査もしくはスクリーニングによって前記の病状を発症しやすい被験者が含まれる。
【００７８】
本発明によって提供される医薬組成物（「長期投与」）は長期的に投与することもできる。長期投与とは、例えば３ヶ月、６ヶ月、１年、２年、３年、５年などの長期間にわたって化合物またはその医薬組成物を投与できるか、または、例えば被験者の余生において無期限に連続的に投与できることを指す。一部の実施形態において、長期投与は、例えば治療ウィンドウ内で、長期間にわたって血液中に一定レベルの前記の化合物を提供することを意図している。
【００７９】
本発明の医薬組成物は、様々な投与方式を用いてさらに送達することができる。例えば、一部の実施形態において、医薬組成物は、例えば、血液中の化合物の濃度が有効レベルまで速く増加させるために、ボーラス注射によって投与することができる。ボーラス用量の配置は、身体全体で望まれる活性成分の全身レベルに依存し、例えば、筋肉内または皮下のボーラス用量は、活性成分のゆっくりとした放出を可能にし、一方で、静脈に直接送達されるボーラス（例えば、ＩＶ滴注による）は、より速い送達を可能にし、これは、血液中の活性成分の濃度を有効レベルまで迅速に上昇させる。他の実施形態において、この薬学的組成物は、連続注入、例えば、ＩＶ滴注によって投与されて、被験者の身体内での、活性成分の定常状態濃度の維持を提供する。さらに、他の実施形態において、医薬組成物は、最初にボーラス用量で投与され、続いて連続して注入される。
【００８０】
経口投与用の組成物は、バルク液体の溶液もしくは懸濁液またはバルク粉末の形態をとり得る。しかしながら、一般的に、上記組成物は、精確な投薬量で投与できるために、単位投与量で提供される。用語「単位製剤」とは、ヒト被験者および他の哺乳動物への単位投与量に好適な物理的な不連続単位を指し、各単位は、好適な薬学的賦形剤と、所望の治療効果をもたらすのに適合な活性物質とを所定量で含む。典型的な単位製剤としては、液体組成物が予め測定されて予め充填されたアンプルもしくは注射器、または固体組成物の場合は丸剤、錠剤、カプセルなどが挙げられる。そのような組成物において、上記の化合物は、通常、少量の成分（約０．１〜約５０重量％または好ましくは約１〜約４０重量％）であり、残りは、所望の投薬形態を形成するのに役立つ様々な担体または賦形剤および加工助剤である。
【００８１】
経口投与の用量について、１日あたり１〜５回、特に２〜４回、典型的には３回の経口投与量が、代表的なレジメンである。これらの投薬パターンを使用するとき、各用量は、約０．０１〜約２０ｍｇ／ｋｇの本発明の化合物を提供し、好ましい用量は、それぞれ約０．１〜約１０ｍｇ／ｋｇ、特に、約１〜約５ｍｇ／ｋｇを提供する。
【００８２】
一般に、経皮用量は、注射用量を使用して達成されるレベルと類似であるかまたはより低い血液中レベルを提供するように選択され、通常、約０．０１重量％〜約２０重量％、好ましくは、約０．１重量％〜約２０重量％、好ましくは、約０．１重量％〜約１０重量％、そしてより好ましくは、約０．５重量％〜約１５重量％の範囲の量である。
【００８３】
注射剤の用量レベルは、約１〜約１２０時間、特に、２４〜９６時間にわたって約０．１ｍｇ／ｋｇ／時間〜少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ／時間の範囲である。約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇまたはそれ以上の前負荷ボーラス（ｐｒｅｌｏａｄｉｎｇ ｂｏｌｕｓ）も、適切な定常状態レベルを達成するために投与されてもよい。最大総用量は、４０〜８０ｋｇのヒト患者にとって約２ｇ／日を超えない。
【００８４】
経口投与に適した液体の形態は、好適な水性または非水性の担体、および緩衝剤、懸濁剤、分散剤（ｄｉｓｐｅｎｓｉｎｇ ａｇｅｎｔｓ）、着色剤、香料などを含み得る。固体の形態は、例えば、以下の成分または同様の性質の化合物のいずれかを含み得る：結合剤（例えば、微結晶性セルロース、トラガカントゴムまたはゼラチン）；賦形剤（例えば、デンプンまたはラクトース）、崩壊剤（例えば、アルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌまたはトウモロコシデンプン）；滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）；滑剤（例えば、コロイド状二酸化ケイ素）；甘味剤（例えば、スクロースまたはサッカリン）；または香味料（例えば、ペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジフレーバー）。
【００８５】
注射可能な組成物は、典型的には、注射可能な滅菌された食塩水もしくはリン酸緩衝食塩水または当該分野で公知の他の注射可能な賦形剤に基づくものである。以上のとおり、そのような組成物における活性化合物は、典型的には、約０．０５〜１０重量％である少量の成分であり、残りは、注射可能な賦形剤などである。
【００８６】
経皮の組成物は、典型的には、活性成分を含む局所用軟膏またはクリームとして製剤化される。軟膏として製剤化される場合、活性成分は、典型的には、パラフィン軟膏基剤または水混合性軟膏基剤と混合される。あるいは、活性成分は、例えば、水中油型クリーム基剤とともに、クリームとして製剤化される。このような経皮的製剤は、当該分野で周知であり、一般に、活性成分または製剤の皮膚浸透力または安定性を高めるさらなる成分を含む。そのような公知の経皮の製剤および成分のすべてが、本発明の範囲内に含まれる。
【００８７】
本発明の化合物は、経皮的デバイスによっても投与され得る。従って、経皮的投与は、レザバー（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）タイプもしくは多孔質膜タイプ、または多種の固体マトリックスのパッチを用いて実現される。
【００８８】
経口投与、注射、または局所的な投与のための組成物の上述の構成要素は、単に代表的なものである。他の材料ならびに加工手法などは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１７版，１９８５，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａのＰａｒｔ８（参照により本明細書中に組み入れられる）に示されている。
【００８９】
また、本発明の化合物は、徐放形態でまたは徐放薬物送達系から投与され得る。代表的な徐放材料の説明は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓに見出すことができる。
【００９０】
本発明は、本発明の化合物の薬学的に許容される製剤にも関する。１つの実施形態において、上記の製剤は、水を含む。別の実施形態において、上記の製剤は、シクロデキストリン誘導体を含む。最も一般的なシクロデキストリンは、連結される糖部分上に必要に応じて１つ以上の置換基（メチル化、ヒドロキシアルキル化、アシル化およびスルホアルキルエーテル置換が挙げられるが、これらに限定されない）を含む、それぞれ６、７および８個のα−１，４−結合グルコース単位からなるα−、β−およびγ−シクロデキストリンである。一部の実施形態において、シクロデキストリンは、スルホアルキルエーテルβ−シクロデキストリン、例えば、Ｃａｐｔｉｓｏｌとしても知られるスルホブチルエーテルβ−シクロデキストリンである。例えば、米国特許第５，３７６，６４５号を参照する。一部の実施形態において、上記の製剤は、ヘキサプロピル−β−シクロデキストリン（例えば、水において１０〜５０％）を含む。
【００９１】
実施例
以下、本発明の式（Ｉ）で表れる化合物の調製方法をより詳細に説明するが、本発明は、これらの特定の方法に限定されない。本発明の化合物は、本明細書に記載の様々な合成方法または当技術分野における既知の方法を組み合わせることにより便利に調製され、このような組み合わせは、当業者によって容易に行われる。
【００９２】
一般的に、調製プロセスにおいて、各反応は、通常、室温から還流温度までの温度（例えば、０℃〜１００℃、好ましくは０℃〜８０℃）で不活性溶媒中で行われる。反応時間は、通常０．１〜６０時間、好ましくは０．５〜２４時間である。
【００９３】
中間体化合物１：２−［（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）オキシ］−４−フルオロ安息香酸メチルの合成。
【化７】
2020527166.tif 000009
【００９４】
窒素ガス雰囲気下で、１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−オール（１．０ｇ，７．４５ｍｍｏｌ）、２，４−ジフルオロ安息香酸メチル（１．６ｇ，９．３１ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（２．０５ｇ，９．６９ｍｍｏｌ）を、２０ｍＬのジエチレングリコールジメチルエーテル溶液に順次に加え、１１５℃で該反応液を約１０ｈ攪拌し、原料が完全に消費されるまで薄層クロマトグラフィーで分析した。反応液室温まで冷却し、水を添加して反応をクエンチし、酢酸エチルで抽出し、有機相を回収し、カラムクロマトグラフィーにより分離、精製して、収率６２％で白色固体生成物１．３ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  １０．６６（ｓ，１Ｈ），８．２４（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄｄ，Ｊ＝８．８，６．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５０−７．４２（ｍ，１Ｈ），６．８３（ｄｄｄ，Ｊ＝８．８，７．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．５７−６．４９（ｍ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ）．
【００９５】
中間体化合物２：４−クロロフェニルボロン酸ピナコールエステルの合成。
【化８】
2020527166.tif 000010
【００９６】
窒素ガス雰囲気下で、クロロヨードベンゼン（６．０ｇ，２５．１６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（１．０ｇ，１．２６ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（４．９３ｇ，５０．３ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（６．４ｇ，２６．４ｍｍｏｌ）を、５０ｍｌのＤＭＳＯ溶液に順次に加え、９５℃に加熱して１０ｈ反応させた。反応液室温まで冷却し、水を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタンで抽出し、有機相を回収し、カラムクロマトグラフィーにより分離、精製して、収率５０％で黄色固体生成物３．２ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ７．７３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），１．３４（ｓ，１２Ｈ）．
【００９７】
中間体化合物３：３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ベンゼンスルホンアミドの合成。
【化９】
2020527166.tif 000011
【００９８】
４−フルオロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（１．０ｇ，４．５４ｍｍｏｌ）、（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メタンアミン（０．６ｇ，４．４９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．３ｇ，６．８１ｍｍｏｌ）を、１０ｍｌのテトラヒドロフラン溶液に順次に加え、室温で５ｈ撹拌した後、溶媒を除去し、２０ｍｌのメタノールを添加してスラリーを形成し、乾燥させて収率９７％で生成物１．４ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ８．５９（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），７．８３（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３５（ｓ，２Ｈ），７．３０（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｄｄ，Ｊ＝１１．０，３．３Ｈｚ，２Ｈ），３．３７（ｓ，２Ｈ），３．２６（ｔ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ），１．９１（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．２，７．６，４．０Ｈｚ，１Ｈ），１．６１（ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，２Ｈ），１．３３−１．２１（ｍ，２Ｈ）．
【００９９】
実施例１  ４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル］メチル−ｄ２｝ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミド、即ち化合物Ｔ−１の調製。その分子式は以下の通りである。
【化１０】
2020527166.tif 000012
【０１００】
合成は以下の経路で行った。
【化１１】
2020527166.tif 000013
【０１０１】
工程１  化合物５の合成。
窒素ガス保護下で、水素化ナトリウム（１．９ｇ，７９．３ｍｍｏｌ）および炭酸ジメチル（１４．３ｇ，１５８．６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（１５ｍｌ）溶液に加え、加熱して、還流しながら、３，３−ジメチルシクロヘキサノン（５．０ｇ，３９．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液を滴下し、滴下完了後、４ｈ還流を続けた。室温まで冷却し、メタノールを添加して反応をクエンチし、さらに、水およびジクロロメタンを添加して抽出し、有機相を回収し、カラムクロマトグラフィーにより分離、精製して、収率７０％で無色の液体生成物４．２ｇを得た。
【０１０２】
工程２    化合物６の合成。
０℃で化合物５（４．２ｇ，２２．８ｍｍｏｌ）を水素化ナトリウム（１．０ｇ，４５．６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（８０ｍｌ）溶液にゆっくりと滴下し、０．５ｈ反応させ、−２５℃に冷却し、さらにトリフルオロメタンスルホン酸無水物（Ｔｆ２Ｏ，７．７ｇ，２７．４ｍｍｏｌ）をゆっくりと滴下し、滴下完了後、反応液を室温下で一晩反応させた。２Ｍの塩化アンモニウム（５０ｍｌ）溶液を添加して抽出し、有機相を回収し、水（６０ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝１００：１）で分離し、収率６９％で淡黄色の液体生成物５．０ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ３．８１（ｓ，３Ｈ），２．５５−２．４７（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），１．０１（ｓ，６Ｈ）．
【０１０３】
工程３    化合物７の合成。
窒素ガス保護下で、化合物２（０．７０ｇ，２．９３ｍｍｏｌ）、化合物６（０．９２８ｇ，２．９３ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．３００ｇ，０．２９ｍｍｏｌ）およびフッ化カリウム（０．４２ｇ，７．３３ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）およびメタノール（１０ｍｌ）の混合液に順次に加え、６５℃に加熱して６ｈ反応させた。室温まで冷却し、水（２０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（３０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝４０：１）で分離し、収率６７％で無色の液体生成物０．５４ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  δ  ７．３３−７．２７（ｍ，２Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），３．４９（ｓ，３Ｈ），２．５３−２．４５（ｍ，２Ｈ），２．１５（ｔ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，２Ｈ），１．５１（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），１．０２（ｓ，６Ｈ）．
【０１０４】
工程４    化合物８の合成。
０℃の条件下でＬｉＡｌＤ４（０．２ｇ，５．０２ｍｍｏｌ）を化合物７（０．７ｇ，２．５１ｍｍｏｌのテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液にゆっくりと滴下し、滴下完了後、反応を１ｈ続けた。１Ｍの塩酸（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（４０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率９６％で淡黄色の液体生成物０．６ｇを得た。
【０１０５】
工程５    化合物９の合成。
化合物８（１．２ｇ，４．７８ｍｍｏｌ）を含有するアセトニトリル（１５ｍｌ）とジエチルエーテル（１５ｍｌ）の混合溶液を−５℃に冷却し、イミダゾール（０．７２ｇ，１０．５３ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２．５ｇ，９．５７ｍｍｏｌ）を加え、完全に溶解させた後、ヨウ素（２．９２ｇ，１１．５１ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、反応を１ｈ継続し、水（２０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、酢酸エチル（４０ｍｌ×２）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝５０：１）で分離し、収率７７％で無色の液体生成物１．３ｇを得た。
【０１０６】
工程６    化合物１０の合成。
化合物９（１．２ｇ，３．３３ｍｍｏｌ）、Ｎ−ＴＥＲＴ−ブトキシカルボニル−ピペラジン（０．７４ｇ，４．００ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ，０．８６ｇ，６．６６ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ，１０ｍｌ）溶液に順次に加え、８０℃に加熱して１ｈ反応させ、室温まで冷却し、水（２０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率７９％で生成物１．１ｇを得た。
【０１０７】
工程７    化合物１１の合成。
０℃で４Ｍ塩酸的酢酸エチル（６ｍｌ）溶液を化合物１０（１．０ｇ，２．４０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍｌ）溶液にゆっくりと加え、室温に昇温し、反応を３ｈ続けた。吸引濾過し、水で濾過ケーキを溶解し、リン酸カリウムで中性に調整し、酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率９２％で生成物０．７ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３２２．１３（Ｍ＋１）＋。
【０１０８】
工程８  化合物１２の合成。
窒素ガス保護下で、化合物１１（０．９ｇ，２．８３ｍｍｏｌ）、化合物１（０．８ｇ，２．８３ｍｍｏｌ）およびリン酸水素二カリウム（０．９８ｇ，５．６６ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ，２５ｍｌ）溶液に順次に加え、該反応液を１４０℃で１２ｈ反応させ、室温まで冷却し、水（５０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、酢酸エチル（４０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝３：１）で分離し、収率７８％で淡黄色の油状物１．３ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５８８．１６（Ｍ＋１）＋。
【０１０９】
工程９    化合物１３の合成。
水酸化ナトリウム（０．２７ｇ，６．８５ｍｍｏｌ）、水（２ｍｌ）を、化合物１２（０．８ｇ，１．３７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）とメタノール（３ｍｌ）の混合溶液に順次に加え、反応液を４５℃で１０ｈ攪拌した後、室温まで冷却し、ほとんどの溶媒を除去し、２Ｍ塩酸で残留液のｐＨ値を２に調整し、ジクロロメタン（３０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率８３％で白色固体０．６５ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）  δ  １１．７２（ｓ，１Ｈ），１０．８７（ｓ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），７．５１−７．４７（ｍ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．１１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．７７（ｄｄ，Ｊ＝９．０，２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．４５−６．３７（ｍ，２Ｈ），３．６９（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，２Ｈ），３．５５（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，２Ｈ），３．２８（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ），２．７２（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ），２．３８（ｓ，２Ｈ），２．０２（ｓ，２Ｈ），１．４４（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），０．９４（ｓ，６Ｈ）．
【０１１０】
工程１０    化合物Ｔ−１の合成。
化合物１３（０．１０ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、化合物３（０．０５５ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．０５２ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ，０．０４４ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に順次に加え、室温で１０ｈ攪拌した。水（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（１５ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率５３％で淡黄色固体８０ｍｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝８７１．３６（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．７１（ｓ，１Ｈ），１１．４８（ｓ，１Ｈ），８．６０−８．５０（ｍ，２Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝１５．２，５．６Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，３Ｈ），６．６６（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，２．９Ｈｚ，２Ｈ），３．２６（ｄｄ，Ｊ＝１４．６，８．７Ｈｚ，４Ｈ），３．１０（ｓ，４Ｈ），２．８１（ｓ，２Ｈ），２．２１（ｄ，Ｊ＝３４．６Ｈｚ，６Ｈ），１．６１（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，２Ｈ），１．３８（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），１．２３（ｓ，３Ｈ），０．９２（ｓ，６Ｈ）．
【０１１１】
実施例２  ４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル］メチル−ｄ２｝ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル−ｄ２）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミド、即ち化合物Ｔ−２の調製。その分子式は以下の通りである。
【化１２】
2020527166.tif 000014
【０１１２】
合成は以下の経路で行った。
【化１３】
2020527166.tif 000015
【０１１３】
工程１    化合物１５の合成。
０℃条件下でＬｉＡｌＤ４（０．４ｇ，１０．０８ｍｍｏｌ）を化合物１４（１．０ｇ，９．００ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液にゆっくりと滴下し、滴下完了後、反応を１ｈ継続し、１Ｍの塩酸（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（４０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率６８．６％で淡黄色固体０．７２ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝１１８．２９（Ｍ＋１）＋．
【０１１４】
工程２    化合物１６の合成。
４−フルオロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（１．１２ｇ，５．１２ｍｍｏｌ）、化合物１５（０．６ｇ，５．１２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．７８ｇ，７．６８ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（１０ｍｌ）溶液に順次に加え、反応液を室温で５ｈ攪拌し、溶媒を除去し、メタノール（１０ｍｌ）を加えてスラリーを形成し、乾燥させて、収率５０％で生成物０．８ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３１８．２０（Ｍ＋１）＋．
【０１１５】
工程３    化合物Ｔ−２の合成。
化合物１６（０．０５６ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、化合物１３（０．１０ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．０５２ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ，０．０４４ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に順次に加え、室温で１０ｈ攪拌した。水（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（１５ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率３０％で淡黄色固体４５ｍｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝８７３．４７（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．７１（ｓ，１Ｈ），１１．４９（ｓ，１Ｈ），８．５６（ｍ，２Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ），７．３６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，３Ｈ），６．６０（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），３．４５−３．２６（ｄｄ，４Ｈ），３．１０（ｓ，４Ｈ），２．８１（ｓ，２Ｈ），２．５６−２．２１（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，６Ｈ），１．６１（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，２Ｈ），１．３８（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），１．２３（ｓ，３Ｈ），０．９２（ｓ，６Ｈ）．
【０１１６】
実施例３  ４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル−ｄ２）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミド、即ち化合物Ｔ−３の調製。その分子式は以下の通りである。
【化１４】
2020527166.tif 000016
【０１１７】
合成は以下の経路で行った。
【化１５】
2020527166.tif 000017
【０１１８】
工程１  化合物１７の合成。
０℃条件下でＬｉＡｌＨ４（０．１４ｇ，３．５９ｍｍｏｌ）を化合物７（１．０ｇ，３．５９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液にゆっくりと滴下し、滴下完了後、反応を１ｈ続けた。１Ｍの塩酸（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（４０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率８９％で淡黄色の液体生成物０．８ｇを得た。
【０１１９】
工程２    化合物１８の合成。
化合物１７（０．８ｇ，３．１９ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１５ｍｌ）とジエチルエーテル（１５ｍｌ）の混合溶液に加え、−５℃に冷却し、イミダゾール（０．４８ｇ，７．０１ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１．６７ｇ，６．３８ｍｍｏｌ）を加え、完全に溶解させた後、ヨウ素（１．９５ｇ，７．６５ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、反応を１ｈ継続し、水（２０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、酢酸エチル（４０ｍｌ×２）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝５０：１）で分離し、収率７８％で無色の液体生成物０．９ｇを得た。
【０１２０】
工程３    化合物１９の合成。
化合物１８（０．６ｇ，１．６７ｍｍｏｌ）、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン（０．３７ｇ，２．００ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ，０．４３ｇ，３．３３ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ，１０ｍｌ）溶液に順次に加え、８０℃に加熱して１ｈ反応させ、室温まで冷却し、水（２０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率８５％で生成物０．６ｇを得た。
【０１２１】
工程４    化合物２０の合成。
０℃で４Ｍ塩酸的酢酸エチル（４ｍｌ）溶液を化合物１９（０．６ｇ，１．４４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍｌ）溶液にゆっくりと加え、室温に昇温し、反応を３ｈ続けた。吸引濾過し、水で濾過ケーキを溶解し、リン酸カリウムで中性に調整し、酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率８７％で生成物０．４ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３１９．８７（Ｍ＋１）＋。
【０１２２】
工程５    化合物２１の合成。
窒素ガス保護下で、化合物２０（１．０ｇ，３．１３ｍｍｏｌ）、化合物１（０．９ｇ，３．１３ｍｍｏｌ）およびリン酸水素二カリウム（１．１０ｇ，６．２６ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ，２５ｍｌ）溶液に順次に加え、この反応液を１４０℃で１２ｈ反応させ、室温まで冷却し、水（５０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、酢酸エチル（５０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝３：１）で分離し、収率７６％で淡黄色油状物１．４を得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５８５．９１（Ｍ＋１）＋。
【０１２３】
工程６    化合物２２の合成。
水酸化ナトリウム（０．２０ｇ，５．１２ｍｍｏｌ）、水（２ｍｌ）を化合物２１（０．６ｇ，１．０３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）とメタノール（３ｍｌ）の混合溶液に順次に加え、反応液を４５℃で１０ｈ攪拌した後、室温まで冷却し、ほとんどの溶媒を除去し、２Ｍ塩酸で残留液のｐＨ値を２に調整し、ジクロロメタン（３０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率８５％で白色固体０．４５ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５７２．１１（Ｍ＋１）＋。
【０１２４】
工程８    化合物Ｔ−３の合成。
化合物２２（０．１０ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、化合物１６（０．０５５ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．０５２ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ，０．０４４ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に順次に加え、室温で１０ｈ攪拌した。水（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（１５ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率３３％で淡黄色固体５０ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．７０（ｓ，１Ｈ），１１．４５（ｓ，１Ｈ），８．６２−８．５１（ｍ，２Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝１８．９，５．６Ｈｚ，２Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５４−７．４５（ｍ，３Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｄｄ，Ｊ＝１７．２，８．７Ｈｚ，３Ｈ），６．６７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．３８（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．２０（ｓ，１Ｈ），３．８４（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，３．２Ｈｚ，２Ｈ），３．０９（ｓ，４Ｈ），２．７９（ｓ，２Ｈ），２．２０（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，５Ｈ），１．９５（ｓ，２Ｈ），１．６１（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ），１．３８（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），１．２３（ｓ，２Ｈ），０．９２（ｓ，６Ｈ）．
【０１２５】
実施例４  ４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル］−メチル−ｄ２｝ピペラジン−１−イル２，２，３，３，５，５，６，６−ｄ８）−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミド、即ち化合物Ｔ−４の調製。その分子式は以下の通りである。
【化１６】
2020527166.tif 000018
【０１２６】
合成は以下の経路で行った。
【化１７】
2020527166.tif 000019
【０１２７】
工程１    化合物２３の合成。
化合物９（１．０ｇ，２．７６ｍｍｏｌ）、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン−２，２，３，３，５，５，６，６−ｄ８（０．６４ｇ，３．３１ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ，０．５４ｇ，４．１３ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ，１０ｍｌ）溶液に順次に加え、８０℃に加熱して１ｈ反応させ、室温まで冷却し、水（２０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率６８％で生成物０．８ｇを得た。
【０１２８】
工程２    化合物２４の合成。
０℃で４Ｍ塩酸的酢酸エチル（６ｍｌ）溶液を化合物２３（０．８ｇ，１．８６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍｌ）溶液にゆっくりと加え、室温に昇温し、反応を３ｈ続けた。吸引濾過し、水で濾過ケーキを溶解し、リン酸カリウムで中性に調整し、酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率９２％で生成物０．７ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３２９．４１（Ｍ＋１）＋。
【０１２９】
工程３    化合物２５の合成。
窒素ガス保護下で、化合物２４（０．５ｇ，１．５２ｍｍｏｌ）、化合物１（０．４４ｇ，１．５２ｍｍｏｌ）およびリン酸水素二カリウム（０．５３ｇ，３．０４ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ，１５ｍｌ）溶液に順次に加え、この反応液を１４０℃で１２ｈ反応させ、室温まで冷却し、水（３０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、酢酸エチル（４０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝３：１）で分離し、収率６９％で淡黄色油状物０．６２ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５９６．３９（Ｍ＋１）＋。
【０１３０】
工程４    化合物２６の合成。
水酸化ナトリウム（０．２１ｇ，５．０４ｍｍｏｌ）、水（２ｍｌ）を化合物２５（０．６ｇ，１．０１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）とメタノール（３ｍｌ）の混合溶液に順次に加え、反応液を４５℃で１０ｈ攪拌させた後、室温まで冷却し、ほとんどの溶媒を除去し、２Ｍ塩酸で残留液のｐＨ値を２に調整し、ジクロロメタン（３０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率８２％で白色固体０．４８ｇを得た。
【０１３１】
工程５    化合物Ｔ−４の合成。
化合物２６（０．１０ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、化合物３（０．０５５ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．０５２ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ，０．０４４ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に順次に加え、室温で１０ｈ攪拌した。水（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（１５ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率５９％で淡黄色固体９０ｍｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝８７８．９２（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．７２（ｓ，１Ｈ），１１．４３（ｓ，１Ｈ），８．７１−８．５０（ｍ，２Ｈ），８．１０（ｄｄ，Ｊ＝１５．６，５．６Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，３Ｈ），６．５１（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），３．８４（ｄｄ，２Ｈ），３．２６（ｄｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），３．１０（ｓ，２），２．８１（ｓ，２Ｈ），２．３５（ｄ，２Ｈ），１．６１（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，２Ｈ），１．３８（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），１．２１（ｓ，２Ｈ），０．９４（ｓ，６Ｈ）．
【０１３２】
実施例５  ４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル−２，２，３，３，５，５，６，６−ｄ８）−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミド、即ち化合物Ｔ−５の調製。その分子式は以下の通りである。
【化１８】
2020527166.tif 000020
【０１３３】
合成は以下の経路で行った。
【化１９】
2020527166.tif 000021
【０１３４】
工程１    化合物２７の合成。
化合物１８（１．３ｇ，３．６０ｍｍｏｌ）、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン−２，２，３，３，５，５，６，６−ｄ８（０．７０ｇ，３．６０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ，０．７０ｇ，５．４０ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ，１０ｍｌ）溶液に順次に加え、８０℃に加熱して１ｈ反応させ、室温まで冷却し、水（２０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、酢酸エチル（３０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率７８％で生成物１．２ｇを得た。
【０１３５】
工程２    化合物２８の合成。
０℃で４Ｍ塩酸的酢酸エチル（６ｍｌ）溶液を化合物２７（１．２ｇ，２．８１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍｌ）溶液にゆっくりと加え、室温に昇温し、反応を３ｈ続けた。吸引濾過し、水で濾過ケーキを溶解し、リン酸カリウムで中性に調整し、酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率８７％で生成物０．８ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３２７．２６（Ｍ＋１）＋。
【０１３６】
工程３    化合物２９の合成。
窒素ガス保護下で、化合物２８（０．８ｇ，２．４５ｍｍｏｌ）、化合物１（０．７０ｇ，２．４５ｍｍｏｌ）およびリン酸水素二カリウム（０．６４ｇ，３．６７ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ，１５ｍｌ）溶液に順次に加え、この反応液を１４０℃で１２ｈ反応させ、室温まで冷却し、水（３０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、酢酸エチル（５０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル（ｖ／ｖ）＝３：１）で分離し、収率８３％で淡黄色油状物１．２１ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝５９４．０９（Ｍ＋１）＋。
【０１３７】
工程４    化合物３０の合成。
水酸化ナトリウム（０．３４ｇ，８．４３ｍｍｏｌ）、水（２ｍｌ）を、化合物２９（１．０ｇ，１．６９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）とメタノール（３ｍｌ）の混合溶液に順次に加え、反応液を４５℃で１０ｈ攪拌した後、室温まで冷却し、ほとんどの溶媒を除去し、２Ｍ塩酸で残留液のｐＨ値を２に調整し、ジクロロメタン（３０ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、収率７１％で白色固体０．７０ｇを得た。
【０１３８】
工程５    化合物Ｔ−５の合成。
化合物３０（０．１０ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、化合物３（０．０５５ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．０５２ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ，０．０４４ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に順次に加え、室温で１０ｈ攪拌した。水（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（１５ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率３６％で淡黄色固体５５ｍｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝８７６．８５（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．７２（ｓ，１Ｈ），１１．４３（ｓ，１Ｈ），８．７６−８．５０（ｍ，２Ｈ），８．１７（ｄｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，３Ｈ），６．５１（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），３．８５（ｄｄ，２Ｈ），３．５７（ｄｄ，２Ｈ），３．２６（ｄｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），３．１０（ｓ，２），２．８１（ｓ，２Ｈ），２．３５（ｄ，２Ｈ），１．６３（ｄ，２Ｈ），１．３８−１．１９（ｍ，４Ｈ），０．９４（ｓ，６Ｈ）．
【０１３９】
実施例６  ４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル］メチル｝ピペラジン−１−イル−２，２，３，３，５，５，６，６−ｄ８）−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル−ｄ２）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミド、即ち化合物Ｔ−６の調製。その分子式は以下の通りである。
【化２０】
2020527166.tif 000022
【０１４０】
合成は以下の経路で行った。
【化２１】
2020527166.tif 000023
【０１４１】
化合物３０（０．１０ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、化合物１６（０．０５５ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．０５２ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ，０．０４４  ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に順次に加え、室温で１０ｈ攪拌した。水（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（１５ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率３９％で淡黄色固体６０ｍｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝８７８．７９（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）  δ  １１．７３（ｓ，１Ｈ），１１．４０（ｓ，１Ｈ），８．７６−８．６０（ｍ，２Ｈ），８．１７（ｄｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），６．５１（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），３．８７（ｍ，２Ｈ），３．５７（ｄｄ，２Ｈ），３．１０（ｓ，２），２．８１（ｓ，２Ｈ），２．３５（ｍ，２Ｈ），１．６３（ｄ，２Ｈ），１．３８−１．１６（ｍ，４Ｈ），０．９６（ｓ，６Ｈ）．
【０１４２】
実施例７  ４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エン−１−イル］メチル−ｄ２｝ピペラジン−１−イル−２，２，３，３，５，５，６，６−ｄ８））−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル−ｄ２）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミド、即ち化合物Ｔ−７の調製。その分子式は以下の通りである。
【化２２】
2020527166.tif 000024
【０１４３】
合成は以下の経路で行った。
【化２３】
2020527166.tif 000025
【０１４４】
化合物２６（０．１０ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、化合物１６（０．０５５ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．０５２ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ，０．０４４ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に順次に加え、室温で１０ｈ攪拌した。水（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（１５ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率２６％で淡黄色固体４０ｍｇを得た。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝８８０．５２（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）  δ  １１．７３（ｓ，１Ｈ），１１．４２（ｓ，１Ｈ），８．７６−８．６３（ｍ，２Ｈ），８．１７（ｄｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），３．８７（ｍ，２Ｈ），３．５７（ｄｄ，２Ｈ），３．１０（ｓ，２），２．８１（ｓ，２Ｈ），２．３５（ｍ，４Ｈ），１．６３（ｍ，２Ｈ），１．３８−１．１６（ｍ，２Ｈ），０．９５（ｓ，６Ｈ）．
【０１４５】
生物活性試験
（１）Ｂｃｌ−２タンパク質活性試験
タンパク質：Ｂｃｌ−２（Ｃｉｓｂｉｏ  ６３ＡＤＫ０００ＣＢ０１ＰＥＧ）；Ｂｃｌ−ｘＬ（Ｃｉｓｂｉｏ  ６３ＡＤＫ０００ＣＢ０４ＰＥＧ）；
【０１４６】
実験工程：ａ）ＤＭＳＯでの化合物の希釈：受検化合物（１０ｍＭストック溶液）をＤＭＳＯで５００倍希釈して第１濃度とし、得られた溶液を３倍連続希釈し、合計１０個の濃度勾配が得られ、１１番目の濃度はＤＭＳＯコントロールでした。ｂ）ＥＣＨＯで１００ｎＬ／ウェルの化合物（工程ａで調製されたもの）を３８４反応プレート（６００８２８０，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）に加え、１０００ｒｐｍで１分間遠心分離した。ｃ）上記した化合物を加えた３８４反応プレートに、５μＬ／ウェルのＢＣＬ−２溶液（２ｎＭ）、ＢＣＬ−Ｘｌ（５ｎＭ）をそれぞれ加えて調製し、１０００ｒｐｍで１分間遠心分離し、５μＬ／ウェルのＢＡＫ（８０ｎＭ）を添加して調製し、１０００ｒｐｍで１分間遠心分離し、２５℃で１５分間インキュベートした。化合物の濃度は、１００ｎＭを初期濃度として、順次に３倍希釈して合計１０＋０個の点が得られた。ＤＭＳＯの最終濃度は０．５％であった。ｄ）上記した３８４反応プレートに、１０μＬ／ウェルのＡｎｔｉ−Ｔａｇ１−Ｅｕ３＋＆Ａｎｔｉ−Ｔａｇ２−ＸＬ６６５溶液（ｃｉｓｂｉｏ）を加えて調製し、１０００ｒｐｍで１分間遠心分離し、２５℃で１８０分間インキュベートした。ｅ）Ｅｎｖｉｓｉｏｎマルチラベルアナライザーを使用して６６５／６１５ｎｍの比を読み取った。このような方法で本発明の化合物の阻害定数（Ｋｉ）を測定した。ここで、化合物のＫｉは、「＜」（未満）特定の値として表され、これは、結合親和性の値が試験の検出限界を下回ることを意味する。Ｗａｎｇ’ｓ  Ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  ｏｆ  Ｔｗｏ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  Ｌｉｇａｎｄｓ  ｔｏ  ａ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅ（ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．  １９９５，３６０：１１１−４）を使用した。
【０１４７】
阻害定数（Ｋｉ）は、酵素−阻害剤複合体またはタンパク質／小分子複合体の解離定数であり、ここで、小分子は、あるタンパク質と別のタンパク質またはペプチドとの結合を阻害する。したがって、Ｋｉ値が高ければ、低い結合親和性を示し、Ｋｉ値が低ければ、高い結合親和性を示す。
【０１４８】
本発明の化合物およびＶｅｎｅｔｏｃｌａｘは、上記の実験手順により試験された。重水素化されていないＶｅｎｅｔｏｃｌａｘと比較して、本発明の化合物は、抗アポトーシスＢｃｌ−２タンパク質に対する結合親和性が高く、Ｂｃｌ−ｘＬタンパク質に対する結合親和性が低く、Ｂｃｌ−２タンパク質に対する高い選択性を示した。具体的な実験結果を以下の表１に示す。
【表１】
2020527166.tif 000026
【０１４９】
（２）細胞生存率試験（Ｃｅｌｌ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  ｔｅｓｔ）
急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）細胞株ＲＳ４；１１を初代ヒト細胞株として使用し、Ｂｃｌ−２選択薬のインビトロでの細胞生存率およびインビボでの有効性を評価した。
【０１５０】
ＲＳ４；１１は、２ｍＭのＬ−グルタミン、１０％のＦＢＳ、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、２ｍＭのｈＥＰＥＳ、１％のペニシリン／ストレプトマイシンおよび４．５ｇ／Ｌのグルコースを添加したＲＰＭＩ−１６４０で培養し、５％の二酸化炭素の環境で３７℃に維持した。インビトロでの細胞生存率に対する化合物の効果を試験するために、５％二酸化炭素を含む湿った部屋に、９６ウェルマイクロタイタープレートに、１０％ヒト血清の存在下、ウェルあたり５００００個の細胞で細胞を４８時間処理した。細胞毒性のＥＣ５０値は、製造業者の推奨に従ってＣｅｌｌＴｉｅｒ  Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して評価された。このＥＣ５０値は、未処理のコントロール細胞に対する処理後の生細胞の割合によって決定された。
【０１５１】
実験結果は、本発明の化合物がＲＳ４；１１細胞の阻害に非常に効果的であることを示し、具体的な実験結果を以下の表２に示す。
【表２】
2020527166.tif 000027
【０１５２】
（３）肝臓ミクロソーム代謝実験
ミクロソーム実験：マウス肝臓ミクロソーム：０．５ｍｇ／ｍＬ，Ｘｅｎｏｔｅｃｈ；補酵素（ＮＡＤＰＨ／ＮＡＤＨ）：１ｍＭ，Ｓｉｇｍａ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ；塩化マグネシウム：５ｍＭ，１００ｍＭリン酸塩緩衝剤（ｐＨ７．４）。
【０１５３】
ストック液の調製：一定量の化合物の粉末を正確に秤量し、それぞれＤＭＳＯで５ｍＭに溶解した。
【０１５４】
リン酸塩緩衝液（１００ｍＭ，ｐＨ７．４）の調製：予め調製した０．５Ｍのリン酸二水素カリウム１５０ｍＬと０．５Ｍのリン酸水素二カリウム溶液７００ｍＬとを混合し，さらに０．５Ｍのリン酸水素二カリウム溶液で混合液のｐＨ値を７．４に調整した。使用前に超純水で５倍に希釈し、塩化マグネシウムを加えて、１００ｍＭのリン酸カリウム、３．３ｍＭの塩化マグネシウムを含む、ｐＨが７．４であるリン酸塩緩衝液（１００ｍＭ）を得た。
【０１５５】
ＮＡＤＰＨ再生系溶液（６．５ｍＭのＮＡＤＰＨ、１６．５ｍＭのｇ−６−Ｐ、３Ｕ／ｍＬのｇ−６−Ｐ  Ｄ、３．３ｍＭの塩化マグネシウムを含有する）を調製し、使用前に湿った氷上に置いた。
【０１５６】
停止液の調製：停止液は、５０ｎｇ／ｍＬの塩酸プロプラノロールと２００ｎｇ／ｍＬのトルブタミド（内部標準）を含有するアセトニトリル溶液でった。２５０５７．５μＬのリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を５０ｍＬの遠心管に入れ、８１２．５μＬのマウス肝臓ミクロソームをそれぞれ添加し、均一に混合して、タンパク質濃度が０．６２５ｍｇ／ｍＬである肝臓ミクロソーム希釈液を得た。サンプルのインキュベーション：対応する化合物のストック液を、７０％アセトニトリルを含む水溶液でそれぞれ０．２５ｍＭに希釈し、作業溶液として使用した。３９８μＬのヒト肝臓ミクロソーム或いはラット肝臓ミクロソームの希釈液を９６ウェルインキュベーションプレート（Ｎ＝２）にそれぞれ加え、０．２５ｍＭの作業溶液２μＬにそれぞれ添加して均一に混合した。
【０１５７】
代謝安定性アッセイ：予め冷却した停止液３００μＬを９６ウェルディープウェルプレートの各ウェルに添加し、氷上に置いて停止プレートとした。９６ウェルインキュベーションプレートおよびＮＡＤＰＨ再生系を３７℃の水浴に置いて、１００ｒｐｍで振とうし、５分間プレインキュベートした。インキュベーションプレートの各ウェルから８０μＬのインキュベーション溶液を取出し、停止プレートに加え、均一に混合し、ＮＡＤＰＨ再生系溶液２０μＬを補充して０分間サンプルとした。インキュベーションプレートの各ウェルに８０μＬのＮＡＤＰＨ再生系溶液を更に添加し、反応を開始し、時間を計り始めた。対応する化合物の反応濃度は１μＭで、タンパク濃度は０．５ｍｇ／ｍＬである。反応の１０分間、３０分間、９０分間に、それぞれ１００μＬの反応液を採取し、停止プレートに加え、３分間ボルテックス操作を行い、反応を停止させた。５０００×ｇ、４℃の条件下で停止プレートを１０分間遠心分離した。予め１００μＬの蒸留水を入れた９６ウェルプレートに、１００μＬの上清を加え、均一に混合し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いてサンプルを分析した。
【０１５８】
データ分析：ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムによって対応する化合物および内部標準のピーク面積を検出し、化合物と内部標準のピーク面積の比を計算した。時間に対する化合物残存量の百分率の自然対数をプロットすることによって、傾きを測定して、以下の式に従ってｔ1／２及びＣＬｉｎｔを計算した。ここで、Ｖ／Ｍは１／タンパク濃度に等しい。
【化２４】
2020527166.tif 000028
【０１５９】
本発明の化合物とその重水素化されていない化合物を同時に試験して比較することにより、ヒトおよびラット肝臓ミクロソームにおける化合物の代謝安定性を評価した。代謝安定性の指標としての半減期と肝固有クリアランスを表１に示す。表１において、重水素化されていない化合物であるＶｅｎｅｔｏｃｌａｘを、対照サンプルとして使用した。表１に示すように、本発明の化合物は、重水素化されていない化合物であるＶｅｎｅｔｏｃｌａｘと比べて、代謝安定性が大幅に改善され、Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤として適している。
【表３】
2020527166.tif 000029
【０１６０】
（４）ラットにおける薬物動態実験
実験の目的：受検化合物をラットに投与した後、本発明の化合物の薬物動態学的挙動を調査した。
実験動物：
種および系統：ＳＤラットグレード：ＳＰＦグレード
性別および数量：オス、６匹
体重範囲：１８０〜２２０ｇ（実際の体重範囲：１８７〜１９７ｇ）
供給元：Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｓｉｐｐｒ  ＢＫ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ  ｌｔｄ
実験室および動物の資格証明書：ＳＣＸＫ（Ｓｈａｎｇｈａｉ）２０１３−００１６
【０１６１】
実験の手順：
血液サンプルを採取する前に、予め２０Ｌの２Ｍフッ化ナトリウム溶液（エステラーゼ阻害剤）をＥＤＴＡ−Ｋ２抗凝固剤チューブに添加し、８０℃のオーブンで乾燥させた後、４℃の冷蔵庫に保存した。
【０１６２】
ラット（オス、体重１８７〜１９７ｇ）をランダムに２群に分け、実験前日の午後から一晩絶食させたが、水を自由に飲ませた。薬を投与した４時間後に、食事させた。Ａ群にはＶｅｎｅｔｏｃｌａｘ（３ｍｇ／ｋｇ）を投与し、Ｂ群には実施例１−７の化合物（３ｍｇ／ｋｇ）を投与した。投与後１５分間、３０分間、１、２、３、５、８、１０時間に、ラットの眼窩静脈から１００−２００Ｌ程度の血液を採取し、ＥＤＴＡ−Ｋ２抗凝固０．５ｍＬのエッペンドルフ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）チューブに入れ、すぐに混ぜた。抗凝固処理した後、できるだけ早くチューブを５〜６回穏やかに反転させ、均一に混合した。血液を採取した後、アイスボックスに入れ、３０分間以内に、血液サンプルを４０００ｒｐｍ、４℃の条件下で１０分間遠心分離して血漿を分離した。すべての血漿を回収した直後に、−２０℃で保存した。すべての時点でのサンプルを採取した後に、各時点での血漿中の薬物の濃度を測定した。
【０１６３】
上記のように得られた投与後の平均血漿中薬物濃度−時間のデータに基づいて、Ｗｉｎｎｏｎｉｎソフトウェアを使用し、非コンパートメント統計モーメント理論に従って、オスＳＤラットにＶｅｎｅｔｏｃｌａｘ、代表的な実施例化合物（３ｍｇ／ｋｇ）をｉ．ｇで投与した後の薬物動態関連パラメーターを計算した。
【０１６４】
実験により、本発明の化合物は、重水素化されていない化合物と比較して、より良好な薬物動態特性を有することが示された。具体的な実験結果は次のとおりです。
【表４】
2020527166.tif 000030
【０１６５】
これらの実施例は本発明を説明するためのものに過ぎず、本発明の範囲を限定するためのものではないこと、実施例に具体的な条件が明記されていない実験方法は、通常、従来の条件に従うか、メーカーによって推奨される条件に従うことと、を理解すべきである。特に断らない限り、部とパーセントは重量部と重量パーセントである。
【０１６６】
以上、具体的な好ましい実施形態によって本発明をさらに詳細に説明したが、本発明の具体的な実施がこれらの説明に限定されない。当業者にとって、本発明の思想を逸脱することなく、いくつかの簡単な推論や代替ができ、これらは本発明の保護範囲に含まれるものとみなされる。
【手続補正書】
【提出日】令和2年4月30日(2020.4.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化１】
2020527166.tif 000035
但し、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８、Ｒ２９、Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５、Ｒ３６、Ｒ３７、Ｒ３８、Ｒ３９およびＲ４０は、それぞれ独立して水素、重水素、ハロゲンまたはトリフルオロメチルからなる群から選択され；
Ｘ１、Ｘ２は、それぞれ独立して「水素（Ｈ）、重水素（Ｈ）、メチル、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＤＣＨ３、ＣＨＤＣＨ２Ｄ、ＣＨＤＣＨＤ２、ＣＨＤＣＤ３、ＣＤ２ＣＨ３、ＣＤ２ＣＨ２Ｄ、ＣＤ２ＣＨＤ２、ＣＤ２ＣＤ３」からなる群から選択され；
追加条件は、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ２９およびＲ３０の少なくとも１つが重水素である、
式（Ｉ）で表される化合物、またはその薬学的に許容される塩、プロドラッグ、結晶形、立体異性体、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４、Ｒ３５およびＲ３６は水素であり、Ｘ１およびＸ２はメチルであることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７およびＲ２８は重水素であることを特徴とする、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ２７およびＲ２８は水素であることを特徴とする、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ９およびＲ１０は重水素であることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２９およびＲ３０は重水素であることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
以下の化合物から選択される化合物。
【化２】
2020527166.tif 000036
【化３】
2020527166.tif 000037
【請求項８】
薬学的に許容される担体と、
請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物、またはその結晶形、薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物、立体異性体、或いはプロドラッグと、を含む医薬組成物。
【請求項９】
膀胱癌、脳癌、乳癌、骨髄癌、子宮頸癌、慢性リンパ性白血病、結腸直腸癌、食道癌、肝細胞癌、原始リンパ球性白血病（ｐｒｉｍｏｒｄｉａｌ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞またはＢ細胞由来悪性リンパ腫、黒色腫、顆粒球性白血病、骨髄腫、口腔腫瘍、卵巣癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、小細胞癌または脾臓癌の治療薬の調製に用いられる、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２４】
工程７    化合物Ｔ−３の合成。
化合物２２（０．１０ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、化合物１６（０．０５５ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，０．０５２ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ，０．０４４ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液に順次に加え、室温で１０ｈ攪拌した。水（１０ｍｌ）を添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（１５ｍｌ×３）で抽出し、有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を除去し、濃縮液をカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／メタノール（ｖ／ｖ）＝３０：１）で分離し、収率３３％で淡黄色固体５０ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  １１．７０（ｓ，１Ｈ），１１．４５（ｓ，１Ｈ），８．６２−８．５１（ｍ，２Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝１８．９，５．６Ｈｚ，２Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５４−７．４５（ｍ，３Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｄｄ，Ｊ＝１７．２，８．７Ｈｚ，３Ｈ），６．６７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．３８（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．２０（ｓ，１Ｈ），３．８４（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，３．２Ｈｚ，２Ｈ），３．０９（ｓ，４Ｈ），２．７９（ｓ，２Ｈ），２．２０（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，５Ｈ），１．９５（ｓ，２Ｈ），１．６１（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ），１．３８（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），１．２３（ｓ，２Ｈ），０．９２（ｓ，６Ｈ）．
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５６】
停止液の調製：停止液は、５０ｎｇ／ｍＬの塩酸プロプラノロールと２００ｎｇ／ｍＬのトルブタミド（内部標準）を含有するアセトニトリル溶液でった。２５０５７．５μＬのリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を５０ｍＬの遠心管に入れ、８１２．５μＬのマウス肝臓ミクロソームをそれぞれ添加し、均一に混合して、タンパク質濃度が０．６２５ｍｇ／ｍＬである肝臓ミクロソーム希釈液を得た。サンプルのインキュベーション：対応する化合物のストック液を、７０％アセトニトリルを含む水溶液でそれぞれ０．２５ｍＭに希釈し、作業溶液として使用した。３９８μＬのマウス肝臓ミクロソームの希釈液を９６ウェルインキュベーションプレート（Ｎ＝２）にそれぞれ加え、０．２５ｍＭの作業溶液２μＬにそれぞれ添加して均一に混合した。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５９】
本発明の化合物とその重水素化されていない化合物を同時に試験して比較することにより、マウス肝臓ミクロソームにおける化合物の代謝安定性を評価した。代謝安定性の指標としての半減期と肝固有クリアランスを表３に示す。表３において、重水素化されていない化合物であるＶｅｎｅｔｏｃｌａｘを、対照サンプルとして使用した。表３に示すように、本発明の化合物は、重水素化されていない化合物であるＶｅｎｅｔｏｃｌａｘと比べて、代謝安定性が大幅に改善され、Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤として適している。
【表３】
2020527166.tif 000038
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６１】
実験の手順：
血液サンプルを採取する前に、予め２０μＬの２Ｍフッ化ナトリウム溶液（エステラーゼ阻害剤）をＥＤＴＡ−Ｋ２抗凝固剤チューブに添加し、８０℃のオーブンで乾燥させた後、４℃の冷蔵庫に保存した。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６２】
ラット（オス、体重１８７〜１９７ｇ）をランダムに２群に分け、実験前日の午後から一晩絶食させたが、水を自由に飲ませた。薬を投与した４時間後に、食事させた。Ａ群にはＶｅｎｅｔｏｃｌａｘ（３ｍｇ／ｋｇ）を投与し、Ｂ群には実施例１−７の化合物（３ｍｇ／ｋｇ）を投与した。投与後１５分間、３０分間、１、２、３、５、８、１０時間に、ラットの眼窩静脈から１００−２００μＬ程度の血液を採取し、ＥＤＴＡ−Ｋ２抗凝固０．５ｍＬのエッペンドルフ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）チューブに入れ、すぐに混ぜた。抗凝固処理した後、できるだけ早くチューブを５〜６回穏やかに反転させ、均一に混合した。血液を採取した後、アイスボックスに入れ、３０分間以内に、血液サンプルを４０００ｒｐｍ、４℃の条件下で１０分間遠心分離して血漿を分離した。すべての血漿を回収した直後に、−２０℃で保存した。すべての時点でのサンプルを採取した後に、各時点での血漿中の薬物の濃度を測定した。
【国際調査報告】
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2020527166.tif 000044
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