(57)【要約】  本明細書に開示されるのは、４００ナノメートル未満の平均径を有する複数のリポソームを含む組成物であり、複数のリポソームは、以下：第１の脂質またはリン脂質；ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質；そして、リポソームを安定化できる立体的に嵩高い賦形剤；インテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された第三の脂質またはリン脂質；ＤＳＰＥまたはコントラスト増強剤を結合する基で誘導体化された第４の脂質またはリン脂質を含み、ここで、複数のリポソームは、１つ以上の生物活性剤からなるペイロード成分を任意にカプセル化する。
2020518666.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2020518666.tif 000038
［式中、
Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；
ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；
Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；
Ｘは、
【化２】
2020518666.tif 000039
からなる群から選択され；
ｓは、１〜２の整数であり；
Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは７〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびに
Ｙは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である］
で表される化合物（ここで、該化合物の平均分子量は２０００〜７０００である）もしくはインテグリン標的化剤、またはその光学異性体もしくは薬学的に許容される塩。
【請求項２】
式：
【化３】
2020518666.tif 000040
［式中、
Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、シクロアルキル、アラルキル、−ＳＯ2（アルキル）、−ＯＣＦ2、脂肪族アシル、−ＯＣＨ2ＣＦ3−、アルコキシアルコキシ、−Ｏ（シクロアルキルアルキル）、−Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、−ＳＯ2（１−ピペリジニル）ピペリジニル、およびピロリジニル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ1は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、および低級アルキル基からなる群から選択され；ここで、Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は一緒になって環を形成し、各Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子求引基で置換され；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルキル、−ＣＦ3、−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、シクロアルキル、アリール、スルホンアミド、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、およびピロリジニル基からなる群から選択され、Ｒ4は独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子求引基で置換され；
Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；
ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；
Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；
Ｘは、
【化４】
2020518666.tif 000041
からなる群から選択され；
ｓは、１〜２の整数であり；
Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは３８〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびに
Ｙは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である］
で表される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
各Ｒ5は、（ＣＨ2）rＣＨ3（ｒは１０−２０である）である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
式：
【化５】
2020518666.tif 000042
［式中、ｎは、３８〜１１５の範囲の整数である］
で表される、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｌ1が、１，８−（３，６−ジオキサ）オクタン−ジ−イルラジカル、１，５−（３−オキサ）ペンタン−ジ−イルラジカル、またはＣ3−Ｃ12アルカン−ジ−イルラジカルである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
式：
【化６】
2020518666.tif 000043
［式中、各Ｒ6は、独立して、水素、低級アルキルおよびヒドロキシアルキルからなる群から選択され；ｍおよびｐは、独立して０〜４の整数である］
で表される、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
式：
【化７】
2020518666.tif 000044
の構造を有する、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
式：
【化８】
2020518666.tif 000045
の構造を有する、請求項６に記載の化合物。
【請求項９】
式：
【化９】
2020518666.tif 000046
の構造を有する、請求項６に記載の化合物。
【請求項１０】
任意で１テスラの電界強度で、ＭＲＩ画像の生成を可能にする、請求項１〜９のいずれかに１項に記載の化合物。
【請求項１１】
複数のリポソームを含む組成物であって、該リポソームは、
第１の脂質またはリン脂質；
ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質；
リポソームを安定化できる立体的に嵩高い賦形剤；
インテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された第３の脂質またはリン脂質；
場合により、ＤＳＰＥまたはコントラスト増強剤を結合する基で誘導体化された第４の脂質またはリン脂質
を含み、
ここで、複数のリポソームは、１つ以上の生物活性剤、ローダミン、ＤＨＰＥまたはヨウ素造影剤からなるペイロード成分を任意にカプセル化し；
複数のリポソームは４００ナノメートル未満の平均径を有する上記組成物。
【請求項１２】
前記第１の脂質またはリン脂質がＤＰＰＣまたはＨＳＰＣを含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質がｍＰＥＧ（２０００）−ＤＳＰＥを含む、請求項１１記載の組成物。
【請求項１４】
インテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された第３の脂質またはリン脂質が、請求項１〜９の化合物である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１５】
非放射性コントラスト増強剤に結合する基で誘導体化された第４の脂質またはリン脂質が、Ｇｄ−ＤＴＰＡ−ＢＳＡまたはＧｄ−ＤＯＴＡ−ＤＳＰＥである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１６】
第１の脂質またはリン脂質、ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質、およびリポソームを安定化できる立体的に嵩高い賦形剤、および結合基で誘導体化された第４の脂質またはリン脂質、非放射性コントラスト増強剤が、約３０〜３２：３：４０：２５のモル比で存在する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１７】
インテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された脂質またはリン脂質が、０．０５〜２．０％（モルパーセント）の請求項１〜９のいずれかの化合物からなる、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
生物活性剤が、ドキソルビシン、パクリタキセル、ダウノルビシン、ビンクリスチン、トレチノイン、シスプラチン、アンナマイシン、ビノレルビン、イリノテカンＨＣｌ、またはフロクスウリジンを含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１９】
前記リポソームが約１５０ｎｍの平均径を有する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２０】
前記リポソームが２５０ｎｍ未満の平均径を有する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２１】
前記生物活性剤が、化学療法剤、遺伝子、タンパク質、小分子、およびペプチドからなる群から選択される少なくとも１つを含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２２】
組成物が画像化様式で使用されるか、または薬物送達に使用される、請求項１１〜２１のいずれか１項記載の組成物。
【請求項２３】
前記イメージングモダリティが、ＣＴ、マイクロＣＴ、マンモグラフィ、Ｘ線、ＭＲＩ、磁気共鳴分光法、生物発光イメージング、超音波、光学イメージング、光学分光法、蛍光分光法、蛍光イメージング、近赤外分光法、および近赤外イメージングからなる群から選択される、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
任意で１テスラのフィールド強度でのＭＲＩ画像の生成を可能にする、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
リポソームの製造方法であって、第１の脂質またはリン脂質を、ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質、リポソームを安定化させる立体的に嵩高い賦形剤、インテグリン標的化成分で終端されたポリマーで誘導体化された第３の脂質またはリン脂質、および任意でＤＳＰＥまたは第４の脂質または非放射性造影剤を結合できるリン脂質と組合せ、および
押し出して、４００ｎｍ未満の粒子を形成させる製造方法。
【請求項２６】
前記リポソームがコントラスト増強剤を含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記リポソームが、１つ以上の生物活性剤からなるペイロード成分をカプセル化する、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
インテグリン標的化成分が、２０００〜７０００の分子量を有し、光学異性体およびその薬学的に許容される塩を含み、式：
【化１０】
2020518666.tif 000047
［式中、
Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；
ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；
Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；
Ｘは、
【化１１】
2020518666.tif 000048
からなる群から選択され；
ｓは、１〜２の整数であり；
Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは７〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびに
Ｙは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である］
で表されるものである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
インテグリン標的化成分が、
【化１２】
2020518666.tif 000049
［式中、
Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、シクロアルキル、アラルキル、−ＳＯ2（アルキル）、−ＯＣＦ2、脂肪族アシル、−ＯＣＨ2ＣＦ3−、アルコキシアルコキシ、−Ｏ（シクロアルキルアルキル）、−Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、−ＳＯ2（１−ピペリジニル）ピペリジニル、およびピロリジニル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ1は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、および低級アルキル基からなる群から選択され；ここで、Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は一緒になって環を形成し、各Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子求引基で置換され；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルキル、−ＣＦ3、−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、シクロアルキル、アリール、スルホンアミド、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、およびピロリジニル基からなる群から選択され、Ｒ4は独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子求引基で置換され；
Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；
ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；
Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；
Ｘは、
【化１３】
2020518666.tif 000050
からなる群から選択され；
ｓは、１〜２の整数であり；
Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは３８〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびに
Ｙは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である］
で表されるものである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
各Ｒ5は、（ＣＨ2）rＣＨ3（ｒは１０−２０である）である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
式：
【化１４】
2020518666.tif 000051
［式中、ｎは、３８〜１１５の範囲の整数である］
で表される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
Ｌ1が、１，８−（３，６−ジオキサ）オクタン−ジ−イルラジカル、１，５−（３−オキサ）ペンタン−ジ−イルラジカル、またはＣ3−Ｃ12アルカン−ジ−イルラジカルである、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
式：
【化１５】
2020518666.tif 000052
［式中、各Ｒ6は、独立して、水素、低級アルキルおよびヒドロキシアルキルからなる群から選択され；ｍおよびｐは、独立して０〜４の整数である］
で表される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
インテグリン標的化成分が、式：
【化１６】
2020518666.tif 000053
の構造を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
インテグリン標的化成分が、式：
【化１７】
2020518666.tif 000054
の構造を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
インテグリン標的化成分が、式：
【化１８】
2020518666.tif 000055
の構造を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
前記リポソームが、任意で１テスラの電界強度で、ＭＲＩ画像の生成を可能にする、請求項２５、２６、及び２８〜３６のいずれかに１項に記載の方法。
【請求項３８】
任意に光学異性体を含む、構造：
【化１９】
2020518666.tif 000056
［式中、
Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換される］
の機能的に保護されたＶＬＡ−４アンタゴニストを形成し；
官能化された３−１７原子結合基でピリドンヒドロキシルをアルキル化することによりリン脂質を合成し；
場合により、末端官能基を修飾し；
アミドカップリング、カルバメート形成またはトリアゾール形成によってリポソーム形成に適したポリマー基に結合させ、および官能基を脱保護する
ことを含む、インテグリン標的化剤の製造方法。
【請求項３９】
インテグリン標的化成分が、２０００〜７０００の平均分子量を有する、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
記インテグリン標的化剤が、任意で１テスラの電界強度で、ＭＲＩ画像の生成を可能にする、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
前記インテグリン標的化剤が、薬物送達または診断のための送達ビヒクルに組み込まれる、請求項３８に記載の方法。
【請求項４２】
薬物送達方法であって、
平均径が４００ナノメートル未満の複数のリポソームを形成し、該リポソームは、
第１の脂質またはリン脂質；
ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質；
リポソームを安定化できる立体的に嵩高い賦形剤；
平均分子量が２０００〜７０００であるインテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された第３の脂質またはリン脂質；
ＤＳＰＥを含み；
前記複数のリポソームを使用して少なくとも１つの生物活性剤をカプセル化し；ならびに
前記複数のリポソームを患者に投与する
ことを含む方法。
【請求項４３】
前記生物活性剤が、ドキソルビシン、パクリタキセル、ダウノルビシン、ビンクリスチン、トレチノイン、シスプラチン、アンナマイシン、ビノレルビン、塩酸イリノテカン、またはフロクスウリジンを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
光学異性体およびその薬学的に許容される塩を含むインテグリン標的化成分は、式：
【化２０】
2020518666.tif 000057
［式中、
Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；
ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；
Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；
Ｘは、
【化２１】
2020518666.tif 000058
からなる群から選択され；
ｓは、１〜２の整数であり；
Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは３８〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびに
Ｙは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である］
で表されるものである、請求項３２に記載の方法。
【請求項４５】
画像化方法であって、
平均径が４００ナノメートル未満の複数のリポソームを形成し、該リポソームは、
第１の脂質またはリン脂質；
ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質；
リポソームを安定化できる立体的に嵩高い賦形剤；
平均分子量が２０００〜７０００であるインテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された第３の脂質またはリン脂質；
第４の脂質またはリン脂質を含み；
コントラスト増強剤を前記複数のリポソームに組み込み；ならびに
ＣＴ、マイクロＣＴ、マンモグラフィ、胸部Ｘ線、ＭＲＩ、磁気共鳴分光法、生物発光イメージング、超音波、光学イメージング、光学分光法、蛍光分光法、近赤外分光法、および近赤外線イメージングからなる群から選択される画像モダリティを用いる
ことを含む方法。
【請求項４６】
任意で１テスラの電界強度で、ＭＲＩ画像が生成される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
光学異性体およびその薬学的に許容される塩を含むインテグリン標的化成分は、式：
【化２２】
2020518666.tif 000059
［式中、
Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；
ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；
Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；
Ｘは、
【化２３】
2020518666.tif 000060
からなる群から選択され；
ｓは、１〜２の整数であり；
Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは３８〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびに
Ｙは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である］
で表されるものである、請求項４５に記載の方法。
【請求項４８】
複数のリポソームを含む組成物であって、複数のリポソームがインテグリン標的化分子を含み、インテグリン標的化分子がポリマー誘導体化脂質またはリン脂質部分およびインテグリン標的化部分を含む組成物。
【請求項４９】
インテグリン標的化部分が、以下の構造：
【化２４】
2020518666.tif 000061
［式中、Ｒは、ポリマー誘導体化脂質またはリン脂質部分の結合点である］
のいずれか１つを有する、請求項４８に記載の組成物。
【請求項５０】
前記インテグリン標的化分子が請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物である、請求項４８または４９に記載の組成物。
【請求項５１】
複数のリポソームが１５０〜１７５ｎｍの平均径を有する、請求項４８〜５０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５２】
前記インテグリン標的化分子が、複数のリポソームの約０．０５から２モル％を構成する、請求項４８〜５１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５３】
複数のリポソームが生物活性剤をさらに含む、請求項４８〜５２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５４】
生物活性剤が複数のリポソーム内にカプセル化されている、請求項５３記載の組成物。
【請求項５５】
複数のリポソームが、コントラスト増強剤を結合する基で誘導体化された脂質またはリン脂質をさらに含む、請求項４８〜５４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５６】
コントラスト増強剤に結合する基で誘導体化された脂質またはリン脂質が、ＤＴＰＡ−ＧｄまたはＤＯＴＡ−Ｇｄ部分を含む、請求項５５に記載の組成物。
【請求項５７】
リポソームが、３０〜４５ｍｏｌ％のＤＰＰＣ、１５〜４５ｍｏｌ％のコレステロール、１〜６ｍｏｌ％のＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ−２０００、２０〜３０ｍｏｌ％のＧｄ−ＤＯＴＡ−ＤＳＰＥ、０．０５〜２ｍｏｌ％のＴＨＩ−５６７を含む、請求項４８〜５６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５８】
請求項１１〜２３、５３、または５４のいずれか１項に記載の組成物を患者に投与することを含む、患者の標的細胞に生物活性剤を送達する方法。
【請求項５９】
生物活性剤が、α４β１インテグリンを発現する細胞に選択的に送達される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
α４β１インテグリンを発現する細胞が、ＣＤ１１ｂ+単核細胞、ＣＤ３+Ｔ細胞、ＣＤ１９+Ｂ細胞、およびＬｙ−６Ｇ+多形核白血球の１つの種類の細胞を含む、請求項５９記載の方法。
【請求項６１】
請求項１１〜２３、５５、または５６のいずれか１項に記載の組成物を対象に投与し、コンストラクト増強剤を画像化装置で検出することを含む、対象の生物学的構造を画像化する方法。
【請求項６２】
組成物中のリポソームが生物学的構造に富むようになる、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記画像化装置が、ＣＴ、マイクロＣＴ、マンモグラフィ、Ｘ線、ＭＲＩ、磁気共鳴分光法、生物発光イメージング、超音波、光学イメージング、光学分光法、蛍光分光法、蛍光イメージング、近赤外分光法、および近赤外イメージングのうちの１つを実行する、請求項６１または６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記撮像装置が、３Ｔ以下または１Ｔ以下の電界強度を有するＭＲＩスキャナである、請求項６１〜６３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６５】
生物学的構造が、アテローム硬化性プラーク、α４β１インテグリンを発現する複数の細胞、または腫瘍である、請求項６１〜から６４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６６】
急性虚血性事象のリスクがある患者を識別する方法であって、以下：
（ａ）請求項１１〜２３、５５、または５６のいずれか１項に記載の組成物を対象に投与すること；
（ｂ）ＭＲＩスキャナでコントラスト増強剤を検出して画像を生成すること；
（ｃ）アテローム硬化性プラークの存在について画像を評価すること；ならびに
（ｄ）アテローム性動脈硬化プラークが検出された場合、患者を急性虚血事象のリスクがあると特定すること
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
連邦政府が後援する研究開発に関する陳述
該当なし
【０００２】
本発明は、一般に、医療用途におけるナノテクノロジーの分野に関する。具体的には、本発明は、病状の診断および治療のためのナノ粒子の標的化に関する。
【背景技術】
【０００３】
活性化された免疫細胞へのペイロードの監視および送達は、いくつかの病状の診断および治療において非常に重要なプロセスである。たとえば、アテローム硬化性プラークでは、活性化マクロファージの高い有病率がプラークの成熟度および脆弱性の可能性と相関することが知られている。これらのマクロファージを標的とするイメージングナノ粒子は、プラークを識別する方法として認識されている。プラーク内の他の免疫細胞をイメージングすると、メソッドの感度と潜在的に特異性が大幅に向上する。
【０００４】
腫瘍は、腫瘍関連免疫細胞の機能をそらして腫瘍細胞の逃避を可能にすることが認められている。がん免疫療法の分野における重要な目標は、治療効果の尺度として腫瘍内免疫細胞の有病率を監視する能力である。
【０００５】
様々な疾患の改善された診断および治療のための効果的なターゲティング方法およびシステムを開発する必要性が引き続き存在する。
【発明の概要】
【０００６】
本明細書に記載されているのは、次の式の化合物またはその光学異性体および薬学的に許容される塩を含むインテグリン標的化剤である。
【０００７】
【化１】
2020518666.tif 000003
【０００８】
式中、Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；
ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；
Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；
Ｘは、
【０００９】
【化２】
2020518666.tif 000004
【００１０】
からなる群から選択され；ｓは、１〜２の整数であり；Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは７〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびにＹは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）であり；上記化合物の平均分子量は２０００〜７０００である。
【００１１】
一実施形態では、化合物は、式：
【００１２】
【化３】
2020518666.tif 000005
【００１３】
を有し、式中、Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、シクロアルキル、アラルキル、−ＳＯ2（アルキル）、−ＯＣＦ2、脂肪族アシル、−ＯＣＨ2ＣＦ3−、アルコキシアルコキシ、−Ｏ（シクロアルキルアルキル）、−Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、−ＳＯ2（１−ピペリジニル）ピペリジニル、およびピロリジニル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ1は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、および低級アルキル基からなる群から選択され；ここで、Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は一緒になって環を形成し、各Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子求引基で置換され；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルキル、−ＣＦ3、−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、シクロアルキル、アリール、スルホンアミド、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、およびピロリジニル基からなる群から選択され、Ｒ4は独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子求引基で置換され；Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；Ｘは、
【００１４】
【化４】
2020518666.tif 000006
【００１５】
からなる群から選択され；ｓは、１〜２の整数であり；Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは３８〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびにＹは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である。一実施形態では、各Ｒ5は、（ＣＨ2）rＣＨ3（ｒは１０−２０である）である。
【００１６】
一実施形態では、化合物は、式：
【００１７】
【化５】
2020518666.tif 000007
【００１８】
を有し、式中、ｎは、３８〜１１５の範囲の整数である。
【００１９】
一実施形態では、Ｌ1は、１，８−（３，６−ジオキサ）オクタン−ジ−イルラジカル、１，５−（３−オキサ）ペンタン−ジ−イルラジカル、またはＣ3−Ｃ12アルカン−ジ−イルラジカルである。
【００２０】
一実施形態では、化合物は、式：
【００２１】
【化６】
2020518666.tif 000008
【００２２】
を有し、式中、各Ｒ6は、独立して、水素、低級アルキルおよびヒドロキシアルキルからなる群から選択され；ｍおよびｐは、独立して０〜４の整数である。
【００２３】
一実施形態では、化合物は、以下の構造を有する：
【００２４】
【化７】
2020518666.tif 000009
【００２５】
一実施形態では、化合物は、以下の構造を有する：
【００２６】
【化８】
2020518666.tif 000010
【００２７】
一実施形態では、化合物は、以下の構造を有する：
【００２８】
【化９】
2020518666.tif 000011
【００２９】
一実施形態では、本開示の化合物は、ＭＲＩ画像の生成を可能にする。場合によっては、これらのＭＲＩ画像は、臨床的に関連する電界強度、たとえば１テスラの電界強度で生成される。
【００３０】
本明細書では、４００ナノメートル未満の平均径を有する複数のリポソームを含む組成物も開示される。複数のリポソームは、以下を含む。第１の脂質またはリン脂質；ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質；リポソームを安定化できる立体的に嵩高い賦形剤；インテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された第３の脂質またはリン脂質；場合により、ＤＳＰＥまたはコントラスト増強剤を結合する基で誘導体化された第４の脂質またはリン脂質。ここで、複数のリポソームは、場合により、１つ以上の生物活性剤からなるペイロード成分をカプセル化する。第４の脂質またはリン脂質が存在しない実施形態（例えば、ドキソルビシン製剤）では、バランスはＤＰＰＣであり、これは第１の脂質またはリン脂質と同じである。本明細書で使用される場合、コントラスト増強剤は、画像を取得もしくは生成すること、または臨床設定で得られる画像の品質を増強することを可能にするものである。
【００３１】
一実施形態では、組成物は複数のリポソームを含み、前記リポソームは以下を含む：第１の脂質またはリン脂質；ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質；リポソームを安定化できる立体的に嵩高い賦形剤；インテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された第三の脂質またはリン脂質；ＤＳＰＥまたはコントラスト増強剤を結合する基で誘導体化された第４の脂質またはリン脂質。ここで、複数のリポソームは、１つ以上の生物活性剤、ローダミン、ＤＨＰＥまたはヨウ素造影剤からなるペイロード成分を任意にカプセル化する。ここで、複数のリポソームは４００ナノメートル未満の平均径を有する。
【００３２】
一実施形態では、第１の脂質またはリン脂質は、ＤＰＰＣまたはＨＳＰＣを含む。ＨＳＰＣは、水素化大豆ホスファチジルコリンを表す。一実施形態では、ポリマーで誘導体化される第２の脂質またはリン脂質は、ｍＰＥＧ（２０００）−ＤＳＰＥを含む。一実施形態において、インテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された第３の脂質またはリン脂質は、本明細書で議論される化合物である。
【００３３】
一実施形態では、非放射性コントラスト増強剤を結合する基で誘導体化された任意の第４の脂質またはリン脂質は、ビスステアリルアミン−ＤＴＰＡ−Ｇｄである。一実施形態において、非放射性コントラスト増強剤を結合する基で誘導体化された任意の第四の脂質またはリン脂質は、Ｇｄ−ＤＯＴＡ−ＤＳＰＥである。ＤＯＴＡは、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸を表す。ＤＳＰＥは、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンを表す。一実施形態では、第１の脂質またはリン脂質、ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質、およびリポソームを安定化できる立体的に嵩高い賦形剤、および非放射性コントラスト増強剤を結合する基で誘導体化された第４の脂質またはリン脂質は約３０−３２：３：４０：２５のモル比で存在する。
【００３４】
一実施形態では、インテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された脂質またはリン脂質は、本明細書で論じられる化合物０．０５〜２．０％（モルパーセント）からなる。一実施形態では、非放射性ガドリニウム塩に結合することができる任意の第４の脂質は、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）で置き換えられる。一実施形態では、生物活性剤は、ドキソルビシン、パクリタキセル、ダウノルビシン、ビンクリスチン、トレチノイン、シスプラチン、アンナマイシン、ビノレルビン、塩酸イリノテカン、またはフロクスウリジンを含む群から選択される。一実施形態では、リポソームは約１５０ｎｍの平均径を有する。一実施形態において、リポソームは、２５０ｎｍ未満の平均径を有する。一実施形態では、生物活性剤は、化学療法剤、遺伝子、タンパク質、小分子、およびペプチドからなる群から選択される少なくとも１つを含む。
【００３５】
一実施形態では、組成物は、ＣＴ、マイクロＣＴ、マンモグラフィ、Ｘ線、ＭＲＩ、磁気共鳴分光法、生物発光イメージング、超音波、光学イメージング、光学分光法、蛍光分光法、蛍光イメージング、近赤外分光法、近赤外イメージングからなる群から選択される少なくとも１つを使用して検出することができる。様々な実施形態において、組成物は画像化様式で使用されるか、薬物送達に使用される。一実施形態では、本開示の組成物は、ＭＲＩ画像の生成を可能にする。一実施形態では、本開示の組成物は、臨床的に関連する電界強度、例えば、１テスラの電界強度でのＭＲＩ画像の生成を可能にする。
【００３６】
本明細書では、リポソームの製造方法であって、第１の脂質またはリン脂質を、ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質、リポソームを安定化させる立体的に嵩高い賦形剤、インテグリン標的化成分で終端されたポリマーで誘導体化された第３の脂質またはリン脂質、および任意でＤＳＰＥまたは第４の脂質または非放射性造影剤を結合できるリン脂質と組合せ、および押し出して、４００ｎｍ未満の粒子を形成させることを含む方法が開示される。
【００３７】
一実施形態では、リポソームはコントラスト増強剤を含む。一実施形態では、リポソームは、１つ以上の生物活性剤からなるペイロード成分をカプセル化する。
【００３８】
一実施形態では、インテグリン標的化成分は、２０００〜７０００の分子量を有し、その光学異性体および薬学的に許容される塩を含み、以下の式のものである：
【００３９】
【化１０】
2020518666.tif 000012
【００４０】
式中、Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；
ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；
Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；
Ｘは、
【００４１】
【化１１】
2020518666.tif 000013
【００４２】
からなる群から選択され；
ｓは、１〜２の整数であり；Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは３８〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびにＹは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である。
【００４３】
一実施形態では、インテグリン標的化成分は、以下の式のものである。
【００４４】
【化１２】
2020518666.tif 000014
【００４５】
式中、Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、シクロアルキル、アラルキル、−ＳＯ2（アルキル）、−ＯＣＦ2、脂肪族アシル、−ＯＣＨ2ＣＦ3−、アルコキシアルコキシ、−Ｏ（シクロアルキルアルキル）、−Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、−ＳＯ2（１−ピペリジニル）ピペリジニル、およびピロリジニル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ1は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、および低級アルキル基からなる群から選択され；ここで、Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は一緒になって環を形成し、各Ｒ2は、存在する場合、およびＲ3は独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子求引基で置換され；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルキル、−ＣＦ3、−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、シクロアルキル、アリール、スルホンアミド、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、およびピロリジニル基からなる群から選択され、Ｒ4は独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子求引基で置換され；Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；Ｘは、
【００４６】
【化１３】
2020518666.tif 000015
【００４７】
からなる群から選択され；ｓは、１〜２の整数であり；Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは３８〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびにＹは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である。
【００４８】
一実施形態では、各Ｒ5は、（ＣＨ2）rＣＨ3（ｒは１０−２０である）である。
【００４９】
一実施形態では、インテグリン標的化成分は、以下の式のものである：
【００５０】
【化１４】
2020518666.tif 000016
【００５１】
式中、ｎは、３８〜１１５の範囲の整数である。
【００５２】
一実施形態では、Ｌ1は、１，８−（３，６−ジオキサ）オクタン−ジ−イルラジカル、１，５−（３−オキサ）ペンタン−ジ−イルラジカル、またはＣ3−Ｃ12アルカン−ジ−イルラジカルである。
【００５３】
一実施形態では、インテグリン標的化成分は、以下の式のものである：
【００５４】
【化１５】
2020518666.tif 000017
【００５５】
式中、各Ｒ6は、独立して、水素、低級アルキルおよびヒドロキシアルキルからなる群から選択される。
【００５６】
一実施形態では、インテグリン標的化成分は、以下の構造を有する：
【００５７】
【化１６】
2020518666.tif 000018
【００５８】
一実施形態では、インテグリン標的化成分は、以下の構造を有する：
【００５９】
【化１７】
2020518666.tif 000019
【００６０】
一実施形態では、インテグリン標的化成分は、以下の構造を有する：
【００６１】
【化１８】
2020518666.tif 000020
【００６２】
一実施形態では、リポソームはＭＲＩ画像の生成を可能にする。一実施形態では、リポソームは、臨床的に関連する強度、例えば、１テスラの電界強度でＭＲＩ画像の生成を可能にする。
【００６３】
さらに、光学異性体を含む構造の機能的に保護されたＶＬＡ−４アンタゴニストを形成することを含む、インテグリン標的化剤の製造方法が開示される。
【００６４】
【化１９】
2020518666.tif 000021
【００６５】
式中、Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、少なくとも１つの電子供与基または電子吸引基で置換されている。この方法は、官能化された３−１７原子結合基でピリドンヒドロキシルをアルキル化することによりリン脂質を合成することを含み、
場合により、末端官能基を変更し；アミドカップリング、カルバメート形成またはトリアゾール形成、および官能基の脱保護によるリポソーム形成に適したポリマー基に結合することを含む。
【００６６】
一実施形態では、インテグリン標的化剤は、２０００〜７０００の平均分子量を有する。一実施形態では、インテグリン標的化剤は、ＭＲＩ画像の生成を可能にする。一実施形態では、インテグリン標的化剤は、臨床的に関連する電界強度、例えば１テスラの電界強度でＭＲＩ画像の生成を可能にする。一実施形態では、インテグリン標的化剤は、薬物送達または診断のための送達ビヒクルに組み込まれる。
【００６７】
本明細書では、４００ナノメートル未満の平均径を有する複数のリポソームを形成することを含む薬物送達の方法について論じる。ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質；リポソームを安定化できる立体的に嵩高い賦形剤；平均分子量２０００〜７０００のインテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された第３の脂質またはリン脂質；場合により、ＤＳＰＥを含み；前記複数のリポソームを使用して少なくとも１つの生物活性剤をカプセル化する。そして、前記複数のリポソームを患者に投与する。一実施形態では、ＤＳＰＥの代わりにＤＰＰＣが使用される。
【００６８】
一実施形態では、生物活性剤は、ドキソルビシン、パクリタキセル、ダウノルビシン、ビンクリスチン、トレチノイン、シスプラチン、アンナマイシン、ビノレルビン、塩酸イリノテカン、またはフロクスウリジンを含む。一実施形態では、光学異性体およびその薬学的に許容される塩を含むインテグリン標的化成分は、以下の式のものである：
【００６９】
【化２０】
2020518666.tif 000022
【００７０】
式中、Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；
ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；
Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；
Ｘは、
【００７１】
【化２１】
2020518666.tif 000023
【００７２】
からなる群から選択され；ｓは、１〜２の整数であり；Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは７〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびにＹは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である。
【００７３】
本明細書に開示されるのは、平均直径が４００ナノメートル未満の複数のリポソームを形成することを含む画像化方法であり、前記リポソームは、第１の脂質またはリン脂質；ポリマーで誘導体化された第２の脂質またはリン脂質；リポソームを安定化できる立体的に嵩高い賦形剤；平均分子量２０００〜７０００のインテグリン標的化成分で終結したポリマーで誘導体化された第３の脂質またはリン脂質；第４の脂質またはリン脂質；コントラスト増強剤を前記複数のリポソームに組み込み；ＣＴ、マイクロＣＴ、マンモグラフィ、Ｘ線、ＭＲＩ、磁気共鳴分光法、生物発光イメージング、超音波、光学イメージング、光学分光法、蛍光分光法、近赤外分光法、および近−赤外線イメージングからなる群から選択される画像診断法を使用する。一実施形態では、ＭＲＩ画像は１テスラの電界強度で生成される。一実施形態では、ＭＲＩ画像は、１テスラより大きい電界強度で生成される。
【００７４】
一実施形態において、光学異性体およびその薬学的に許容される塩を含むインテグリン標的化成分は、以下の式のものである：
【００７５】
【化２２】
2020518666.tif 000024
【００７６】
式中、Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
Ｒ5は、それぞれの場合で、独立して、アルキルまたはアルケニル基からなるＣ7〜Ｃ21鎖から選択され；ｍおよびｐは、独立して、各々の場合で、０〜５の整数であり；Ｌ1は、３−１４原子の鎖であり、−ＣＨ2−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含み；
Ｘは、
【００７７】
【化２３】
2020518666.tif 000025
【００７８】
からなる群から選択され；
ｓは、１〜２の整数であり；Ｌ2は、−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−鎖（ｎは３８〜１１５の範囲の整数である）であり；ならびにＹは、（ＣＨ2）q（ｑは０〜２の整数である）である。
【００７９】
本明細書では、複数のリポソームを含む組成物が開示され、複数のリポソームはインテグリン標的化分子を含み、インテグリン標的化分子は、ポリマー誘導体化脂質またはリン脂質部分およびインテグリン標的化部分を含む。一実施形態において、インテグリン標的化部分は、以下の構造のうちの１つを有する。
【００８０】
【化２４】
2020518666.tif 000026
【００８１】
式中、Ｒはポリマー誘導体化脂質またはリン脂質部分の付着点である。一実施形態では、インテグリン標的化分子は本開示の化合物である。一実施形態では、複数のリポソームは、１５０から１７５ｎｍの平均径を有する。一実施形態において、インテグリン標的化分子は、複数のリポソームの約０．０５〜２モル％を構成する。一実施形態では、複数のリポソームは生物活性剤をさらに含む。一実施形態では、生物活性剤は、複数のリポソーム内にカプセル化される。
【００８２】
一実施形態では、複数のリポソームは、コントラスト増強剤に結合する基で誘導体化された脂質またはリン脂質をさらに含む。一実施形態では、コントラスト増強剤に結合する基で誘導体化された脂質またはリン脂質は、ＤＴＰＡ−ＧｄまたはＤＯＴＡ−Ｇｄ部分を含む。一実施形態では、リポソームは、３０〜４５モル％のＤＰＰＣ、１５〜４５モル％のコレステロール、１〜６モル％のＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ−２０００、２０〜３０モル％のＧｄ−ＤＯＴＡ−ＤＳＰＥ、および０．０５〜２モル％のＴＨＩ−５６７を含む。
【００８３】
本明細書では、患者の標的細胞に生物活性剤を送達する方法が議論され、この方法は、本開示の組成物を患者に投与することを含む。一実施形態では、生物活性剤は、α４β１インテグリンを発現する細胞に選択的に送達される。一実施形態では、α４β１インテグリンを発現する細胞は、以下のタイプの細胞の１つ以上を含む：ＣＤ１１ｂ+単核細胞、ＣＤ３+Ｔ細胞、ＣＤ１９+Ｂ細胞、およびＬｙ−６Ｇ+多形核白血球。
【００８４】
本明細書でさらに開示されるのは、対象の生物学的構造を画像化する方法であり、この方法は、本開示の組成物を対象に投与し、撮像装置でコントラスト増強剤を検出することを含む。一実施形態では、組成物中のリポソームは、生物学的構造が豊富になる。一実施形態では、撮像装置は、ＣＴ、マイクロＣＴ、マンモグラフィ、Ｘ線、ＭＲＩ、磁気共鳴分光法、生物発光イメージング、超音波、光学イメージング、光学分光法、蛍光分光法、蛍光イメージング、近赤外分光法、および近赤外イメージングのいずれかを実行する。
【００８５】
一実施形態では、撮像装置は、３Ｔ以下または１Ｔ以下の電界強度を有するＭＲＩスキャナである。一実施形態では、生物学的構造は、アテローム硬化性プラーク、α４β１インテグリンを発現する複数の細胞、または腫瘍である。
【００８６】
本明細書でさらに開示されるのは、急性虚血イベントのリスクがある患者を特定する方法であり、この方法は、以下を含む：（ａ）対象に本開示の組成物を投与すること；（ｂ）ＭＲＩスキャナでコントラスト増強剤を検出して画像を生成すること；（ｃ）アテローム硬化性プラークの存在について画像を評価すること；ならびに（ｄ）アテローム硬化性プラークが検出された場合、患者を急性虚血イベントのリスクがあると特定することを含む。
【００８７】
上記は、以下の本発明の詳細な説明がよりよく理解され得るように、本発明の特徴および技術的利点をかなり広く概説した。本発明の請求項の主題を形成する本発明の追加の特徴および利点を以下に説明する。開示された概念および特定の実施形態は、本発明の同じ目的を実行するために他の構造を修正または設計するための基礎として容易に利用できることを当業者は理解すべきである。また、そのような同等の構造は、添付の特許請求の範囲に記載される本発明の精神および範囲から逸脱しないことも当業者によって認識されるべきである。
【００８８】
本発明の好ましい実施形態の詳細な説明については、添付図面を参照する。
【図面の簡単な説明】
【００８９】
【図１】図１は、インテグリンアンタゴニスト標的化リポソームの構造を示す。ＴＨＩ５６７（ジステアロイルホスホエタノールアミン−カルボキシメチレン−ポリエチレングリコール3400−ＴＨＩ５６５（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ３４００−ＴＨＩ５６５））が表示される。ＴＨＩ５６７は１％のレベルで組み込まれ、リポソームのサイズは１５０ｎｍである。
【図２】図２は、リポソーム開発のためのＴＨＩ５６５の構造ならびにリンカーおよび脂質アンカーＴＨＩ５６７の付着を示す。ＴＨＩ５６５の構造を図２Ａに示し、ＴＨＩ５６７の構造を図２Ｂに示す。図２Ｃは、ＶＣＡＭ−１（Ｍｎ++）へのα４β１−Ｋ５６２細胞接着のＴＨＩ５６５およびＴＨＩ０５６７阻害を示す。
【図３】図３は、α４β１−Ｋ５６２細胞に結合するＴＨＩ５６７標的化リポソーム（１５０ｎｍ；１．０％）のＴＨＩ５６５阻害を示す。ＴＨＩ５６７標的化リポソーム（１５０ｎｍ；１．０％）は、２×１０-10ｐＭの濃度で使用され、ＴＨＩ５６５は示された濃度で使用された。ローダミン蛍光はフローサイトメトリーにより検出された。図３ＡはＴＨＩ５６５構造を示す。図３Ｂは、最大信号の阻害率を示す。
【図４】図４は、インテグリンα４β１へのＴＨＩ５６７標的化リポソーム結合の特異的結合を示す。ＴＨＩ５６７標的化リポソーム、または非標的化リポソーム結合をパートＡに示す。パートＢでは、抗α４インテグリンｍＡｂ  ＰＳ／２を使用して、α４β１−Ｋ５６２細胞へのＴＨＩ５６７標的化リポソーム（１５０ｎｍ；１．０％）の結合を阻害した。ＴＨＩ５６７標的化リポソーム（１５０ｎｍ；１．０％）は２×１０−10ｐＭの濃度で使用され、ＰＳ／２、またはラットＩｇＧ２ｂの等型対照抗体は１０ｕｇ／ｍｌの濃度で使用された。ローダミン蛍光は、フローサイトメトリーによって検出され、両方のパネルで幾何平均蛍光強度（ｇＭＦＩ）として表された。
【図５】図５は、インテグリンα４β１を差次的に発現するように操作されたジャーカットおよびＫ５６２細胞に結合するＴＨＩ５６７標的化リポソーム（１５０ｎｍ；１．０％）を示す。ＴＨＩ５６７標的化リポソーム（１５０ｎｍ；１．０％）は、２×１０-10ｐＭの濃度で使用された。ローダミン蛍光はフローサイトメトリーにより検出された。図５Ａは、ジャーカット細胞への結合を示す。図５Ｂは、Ｋ５６２への結合を表す。データは、幾何平均蛍光強度（ｇＭＦＩ）として表される。
【図６】図６は、インテグリンα４β１を発現するジャーカット細胞に結合するＴＨＩ５６７標的化リポソーム（２５０ｎｍ；０．２５％）を示す。ＴＨＩ５６７標的化リポソーム（２５０ｎｍ；０．２５％）を指定濃度で使用し、ＴＨＩ５６７標的化リポソームと２０ｍＭ  ＥＤＴＡの存在下でバックグラウンド蛍光（Ｂｋｇｄ）を測定した。ローダミン蛍光はフローサイトメトリーにより検出され、幾何平均蛍光強度（ｇＭＦＩ）として提示された。
【図７Ａ】図７は、インテグリンα４β１を発現するジャーカット細胞に結合するＴＨＩ５６７標的化リポソームの異なるサイズおよび標的化リガンド濃度のマトリックスを示す。ＴＨＩ５６７標的化リポソーム（２５０ｎｍ；０．２５％）を指定濃度で使用し、ＴＨＩ５６７標的化リポソームと２０ｍＭ  ＥＤＴＡの存在下でバックグラウンド蛍光（Ｂｋｇｄ）を測定した。ローダミン蛍光はフローサイトメトリーにより検出され、幾何平均蛍光強度（ｇＭＦＩ）として提示された。
【図７Ｂ】図７は、インテグリンα４β１を発現するジャーカット細胞に結合するＴＨＩ５６７標的化リポソームの異なるサイズおよび標的化リガンド濃度のマトリックスを示す。ＴＨＩ５６７標的化リポソーム（２５０ｎｍ；０．２５％）を指定濃度で使用し、ＴＨＩ５６７標的化リポソームと２０ｍＭ  ＥＤＴＡの存在下でバックグラウンド蛍光（Ｂｋｇｄ）を測定した。ローダミン蛍光はフローサイトメトリーにより検出され、幾何平均蛍光強度（ｇＭＦＩ）として提示された。
【図８】図８は、リンパ球サブセットへの特異的なＴＨＩ５６７標的化リポソーム結合を示す。ＴＨＩ５６７標的化および非標的化リポソームは、心臓穿刺による全血収集の２時間前に注射された（大腿静脈）。末梢血サブセットは、ＦＩＴＣ−ＣＤ１１ｂ（単球）、ＦＩＴＣ−Ｌｙ−６Ｇ（好中球）、Ｃｙ５−ＣＤ１９（Ｂ細胞）、およびＣｙ５−ＣＤ３（Ｔ細胞）で特定され、各サブセットのリポソーム蛍光（ローダミンＢ）はフローサイトメトリーにより定量化された。３回の独立した実験の平均±ＳＥＭが示される。
【図９】図９は、共焦点顕微鏡で画像化されたリンパ球サブセットにおけるＴＨＩ５６７標的および非標的リポソーム取り込みを示す。心臓穿刺による全血採取の２時間前に、リポソームをＣ５７ＢＬ／６マウス（大腿静脈）に注射した。末梢血サブセットは、ＦＩＴＣ−Ｌｙ−６Ｇ（好中球）、Ｃｙ５−ＣＤ１９（Ｂ細胞）、およびＣｙ５−ＣＤ３（Ｔ細胞）に基づいて分類され、リポソーム蛍光（ローダミンＢ）は共焦点顕微鏡で画像化された。細胞核を特定するためにヘキスト３３３４２染色を実施した。３つの代表的な実験の１つが示される。
【図１０】図１０は、リポソーム構築物の注射の３日後に高脂肪食を与えられたＡｐｏＥ−／−マウスの大動脈における増強されたＴＨＩ５６７標的化リポソーム蓄積の定量的評価を示す。（Ａ）非標的マウス（ｎ＝７）およびＴＨＩ０５６７標的マウス（ｎ＝９）の動脈硬化プラークの正規化された増強比（ＮＥＲ）の比較である。データは、平均±ＳＥＭとして示される。（Ｂ）検査された異なる大動脈セグメントを示すマウス大動脈のボリュームレンダリングされた３Ｄ画像である。（Ｃ）大動脈の異なるセグメントのマウスの非標的群（ｎ＝７）および標的群（ｎ＝６−８）のアテローム硬化性プラークにおけるＮＥＲの比較である。データは、平均±ＳＥＭとして示される。（Ｄ、Ｅ）未治療のＴＨＩ０５６７をターゲットとしたリポソームＧｄ、または非上行大動脈（Ｄ）および大動脈弓（Ｅ）領域からのオイルレッド染色（上パネル）およびローダミンＢ蛍光（下パネル）の代表的なセクション標的化リポソームＧｄ注射マウス。
【図１１Ａ−Ｂ】図１１は、ＡｐｏＥ−／−マウスのアテローム硬化性プラークにおけるＴＨＩ０５６７標的化リポソーム蓄積を示す。（Ａ）ＴＨＩ０５６７標的化リポソーム（ローダミンＢ蛍光）を注射したマウスの大動脈基部の組織切片の共焦点蛍光イメージング。コントロールＩｇＧ染色は、大動脈基部の低倍率（１０倍）画像に表されています（左上のパネル）。他の代表的な切片は、抗ＣＤ３１（右上）、抗Ｆ４／８０（右下）、または抗ＣＤ１１ｂ（左下）で染色された。核はＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２で染色された。（Ｂ）抗ＣＤ１１ｂおよびＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２で染色された腕頭動脈を含む大動脈弓の部分断面。ｎ＝８の動物からの切片蛍光：ＴＨＩ０５６７標的リポソーム（ローダミンＢ）；ＣＤ１１ｂ（緑色）；ＣＤ３１（紫色）；核（ヘキスト３３３４２；青色）。
【図１１Ｃ】図１１は、ＡｐｏＥ−／−マウスのアテローム硬化性プラークにおけるＴＨＩ０５６７標的化リポソーム蓄積を示す。（Ａ）ＴＨＩ０５６７標的化リポソーム（ローダミンＢ蛍光）を注射したマウスの大動脈基部の組織切片の共焦点蛍光イメージング。コントロールＩｇＧ染色は、大動脈基部の低倍率（１０倍）画像に表されています（左上のパネル）。他の代表的な切片は、抗ＣＤ３１（右上）、抗Ｆ４／８０（右下）、または抗ＣＤ１１ｂ（左下）で染色された。核はＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２で染色された。（Ｂ）抗ＣＤ１１ｂおよびＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２で染色された腕頭動脈を含む大動脈弓の部分断面。ｎ＝８の動物からの切片蛍光：ＴＨＩ０５６７標的リポソーム（ローダミンＢ）；ＣＤ１１ｂ（緑色）；ＣＤ３１（紫色）；核（ヘキスト３３３４２；青色）。
【発明を実施するための形態】
【００９０】
定義
本明細書において単独または組み合わせて使用される「アルキル」という用語は、アルキルという用語がＣｘ−Ｃｙ指定によって先行しない限り、１個の水素原子の除去による飽和炭化水素から誘導されるＣ１−Ｃ２２直鎖または分岐鎖、置換または非置換飽和鎖ラジカルを指す。アルキル基の代表例には、とりわけメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、およびステアリルが含まれる。
【００９１】
本明細書で使用される「アルケニル」という用語は、単独でまたは組み合わせて、２〜２２個の炭素原子を含む置換または非置換の直鎖または置換または非置換の分枝鎖不飽和炭化水素ラジカルを指す。本明細書で使用されるアルケニルという用語は、１つ以上の不飽和度を含む鎖を意味すると解釈することができる。そのようなラジカルの例には、エテニル、Ｅ−およびＺ−ペンテニル、デセニル、ドコサ−３、６、９、１２、１５、１８−ヘキサエニルなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００９２】
本明細書で使用される「アルキニル」という用語は、単独または組み合わせて、２〜１０個の炭素原子および１つまたは複数の炭素−炭素三重結合を含む置換または非置換の直鎖または置換または非置換の分岐鎖不飽和炭化水素ラジカルを指す。そのようなラジカルの例には、エチニル、プロピニル、プロパルギル、ブチニル、ヘキシニル、デシニルなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００９３】
「低級」修飾「アルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」または「アルコキシ」という用語は、特定の機能性のためのＣ１−Ｃ６単位を指す。例えば、低級アルキルはＣ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【００９４】
本明細書で使用される「脂肪族アシル」という用語は、単独でまたは組み合わせて、アルカン−、アルケン−またはアルキンカルボン酸から誘導される式アルキル−Ｃ（Ｏ）−、アルケニル−Ｃ（Ｏ）−およびアルキニル−Ｃ（Ｏ）−のラジカルを指す。ここで、用語「アルキル」、「アルケニル」および「アルキニル」は上記で定義された通りである。そのような脂肪族アシル基の例には、とりわけ、アセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリル、４−メチルバレリル、アクリロイル、クロチル、プロピオニルおよびメチルプロピオニルが含まれるが、これらに限定されない。
【００９５】
本明細書で使用される「シクロアルキル」という用語は、とりわけシクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ノルボルニル、およびアダマンチルを含むがこれらに限定されない、３〜１０個の炭素原子および１〜３個の環を有する脂肪族環系を指す。シクロアルキル基は、非置換であるか、低級アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ヒドロキシ、ハロ、メルカプト、ニトロ、カルボキシアルデヒド、カルボキシ、アルコキシカルボニルおよびカルボキサミドから独立して選択される１、２または３個の置換基で置換することができる。
【００９６】
置換された「シクロアルキル」には、シスまたはトランス型が含まれる。さらに、置換基は、架橋二環系のエンドまたはエキソ位置のいずれかにある。
【００９７】
本明細書で単独または組み合わせて使用される「シクロアルケニル」という用語は、４〜８個の炭素原子および１つまたは複数の二重結合を含む環状炭素環を指す。そのようなシクロアルケニルラジカルの例には、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロペンタジエニルなどが含まれるが、これらに限定されない。
【００９８】
本明細書で使用される「シクロアルキルアルキル」という用語は、シクロヘキシルメチルを含むがこれに限定されない、低級アルキルラジカルに付加されたシクロアルキル基を指す。
【００９９】
本明細書で使用される「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、Ｉ、Ｂｒ、ＣｌまたはＦを指す。
【０１００】
本明細書で使用される「ハロアルキル」という用語は、少なくとも１つのハロゲン置換基、例えばとりわけクロロメチル、フルオロエチル、トリフルオロメチルおよびペンタフルオロエチルが付加される低級アルキルラジカルを指す。
【０１０１】
本明細書で使用される「アルコキシ」という用語は、単独でまたは組み合わせて、アルキルエーテルラジカルを指し、用語「アルキル」は上記で定義された通りである。適切なアルキルエーテルラジカルの例には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが含まれるが、これらに限定されない。
【０１０２】
本明細書で使用される「アルコキシアルキル」という用語は、ＲY−Ｏ−Ｒzを指し、ここで、ＲYは、上で定義した低級アルキルであり、Ｒｚは、アルキレン（−（ＣＨ2）w−）であり、ｗは１〜６の整数である。代表例には、とりわけメトキシメチル、メトキシエチル、およびエトキシエチルが含まれる。
【０１０３】
本明細書で使用される「アルケノキシ」という用語は、単独または組み合わせて、式アルケニル−Ｏ−のラジカルを指すが、ただし、ラジカルはエノールエーテルではなく、「アルケニル」という用語は上記定義の通りである。適切なアルケノキシラジカルの例には、アリルオキシ、Ｅ−およびＺ−３−メチル−２−プロペノキシなどが含まれるが、これらに限定されない。
【０１０４】
本明細書で使用される「アルキノキシ」という用語は、単独または組み合わせて、式アルキニル−Ｏのラジカルを指すが、ただし、ラジカルは−イノールエーテルではない。適切なアルキノキシラジカルの例には、プロパルギルオキシ、２−ブチニルオキシなどが含まれるが、これらに限定されない。
【０１０５】
本明細書で使用される「カルボキシ」という用語は、Ｃ（Ｏ）ＯＨを指す。
【０１０６】
「チオアルコキシ」という用語は、式アルキル−Ｓ−のチオエーテルラジカルを指し、ここで「アルキル」は上記で定義された通りである。
【０１０７】
本明細書で使用される「スルホンアミド」という用語は、−ＳＯ2ＮＨ2を指す。
【０１０８】
本明細書で使用される「カルボキシアルデヒド」という用語は、Ｒが水素である−Ｃ（Ｏ）Ｒを指す。
【０１０９】
本明細書で使用される「カルボキサミド」または「アミド」という用語は、Ｃ（Ｏ）ＮＲaＲbを指し、式中、ＲaおよびＲbは、それぞれ独立して、水素、アルキルまたは任意の他の適切な置換基である。
【０１１０】
本明細書で使用される「アルコキシアルコキシ」という用語は、ＲcＯＲdＯ−を指し、Ｒcは上記定義の低級アルキルであり、Ｒdはアルキレンであり、アルキレンは−（ＣＨ2）n−であり、ｎは１〜６の整数である。アルコキシアルコキシの代表例基には、とりわけメトキシメトキシ、エトキシメトキシ、ｔ−ブトキシメトキシが含まれる。
【０１１１】
本明細書で使用される「アルキルアミノ」という用語は、ＲeＮＨ−を指し、ここでＲeは低級アルキル基、例えば、とりわけエチルアミノ、ブチルアミノである。
【０１１２】
本明細書で使用される「アルケニルアミノ」という用語は、単独でまたは組み合わせて、式アルケニル−ＮＨ−または（アルケニル）2Ｎ−のラジカルを指し、ここで、「アルケニル」という用語は上記定義の通りであるが、ラジカルはエナミンではない。そのようなアルケニルアミノラジカルの例は、アリルアミノラジカルである。
【０１１３】
本明細書で使用される「アルキニルアミノ」という用語は、単独でまたは組み合わせて、式アルキニル−ＮＨまたは（アルキニル）2Ｎ−のラジカルを指し、ここで、用語「アルキニル」は、Ｃ≡Ｃ−ＮＨ2または−Ｃ≡Ｃ−ＮＨ。本明細書で使用されるこのようなアルキニルアミノラジカルの例は、プロパルギルアミノラジカルＨＣ≡Ｃ−ＣＨ2ＮＨ−である。
【０１１４】
本明細書で使用される「ジアルキルアミノ」という用語は、（Ｒf）（Ｒg）Ｎ−を指し、ＲfおよびＲgは、とりわけ、低級アルキル、例えばジエチルアミノ、およびメチルプロピルアミノから独立して選択される。
【０１１５】
本明細書で使用される「アルコキシカルボニル」という用語は、カルボニル基を介して親分子部分に付加された、以前に定義されたアルコキシル基を指す。アルコキシカルボニルの例には、とりわけ、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、およびイソプロポキシカルボニルが含まれる。
【０１１６】
本明細書で単独または組み合わせて使用される「アリール」または「芳香族」という用語は、約６〜１２個の炭素原子を有する置換または非置換炭素環式芳香族基を指し、例えば、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、アズレニル、フルオレニルおよびアントラセニル；または、フリル、チエニル、ピリジル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−などの少なくとも１つの環内Ｎ、ＯまたはＳ原子を含む複素環式芳香族基オキサジアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、１，３，５−トリアジニル、インドリジニル、インドリル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、インドリニル、ベンゾ［ｂ］フラニル、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、１Ｈ−インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、プリニル、４Ｈ−キノリジニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、１，８−ナフチジニル、プチリジニル、カルボゾリニル、カルボジニルフェノチアジニル、フェノキシアジニル、ピラゾロ［１，５−ｃ］トリアジニルなどが挙げられる。「アラルキル」および「アルキルアリール」は、上記で定義された用語「アルキル」を使用する。環は複数回置換することができる。
【０１１７】
本明細書で使用される「アラルキル」という用語は、単独または組み合わせて、アリール置換アルキルラジカルを指し、用語「アルキル」および「アリール」は上記で定義された通りである。適切なアラルキルラジカルの例には、フェニルメチル、フェネチル、フェニルヘキシル、ジフェニルメチル、ピリジルメチル、テトラゾリルメチル、フリルメチル、イミダゾリルメチル、インドリルメチル、チエニルプロピルなどが含まれるが、これらに限定されない。
【０１１８】
本明細書で使用される「アラルケニル」という用語は、単独でまたは組み合わせて、アリール置換アルケニルラジカルを指し、用語「アリール」および「アルケニル」は上記で定義された通りである。
【０１１９】
本明細書で使用される「アリールアミノ」という用語は、単独でまたは組み合わせて、式アリール−ＮＨ−のラジカルを指し、ここで「アリール」は上記で定義された通りである。アリールアミノラジカルの例には、フェニルアミノ（アニリド）、ナフチルアミノ、２−、３−、および４−ピリジルアミノなどが含まれるが、これらに限定されない。
【０１２０】
本明細書で使用される「ベンジル」という用語は、Ｃ6Ｈ5−ＣＨ2−を指す。
【０１２１】
本明細書で使用される「ビアリール」という用語は、単独でまたは組み合わせて、式アリール−アリールのラジカルを指し、用語「アリール」は上記で定義された通りである。
【０１２２】
本明細書で使用される「チオアリール」という用語は、単独でまたは組み合わせて、式アリール−Ｓ−のラジカルを指し、用語「アリール」は上記で定義された通りである。チオアリールラジカルの例は、フェニルチオラジカルである。
【０１２３】
本明細書で使用される「アロイル」という用語は、単独でまたは組み合わせて、式アリール−ＣＯ−のラジカルを指し、「アリール」という用語は上記で定義された通りである。適切な芳香族アシルラジカルの例には、ベンゾイル、４−ハロベンゾイル、４−カルボキシベンゾイル、ナフトイル、ピリジルカルボニルなどが含まれるが、これらに限定されない。
【０１２４】
本明細書で使用される「ヘテロシクリル」という用語は、単独でまたは組み合わせて、少なくとも１つの環内Ｎ、Ｏ、またはＳ原子を含む非芳香族３〜１０員環を指す。複素環は、場合によりアリール縮合されていてもよい。複素環はまた、とりわけ、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シアノ、カルボキシ、カルボアルコキシ、カルボキシアルキル、オキソ、アリールスルホニルおよびアラルキルアミノカルボニルからなる群から独立して選択される少なくとも１つの置換基で任意に置換されていてもよい。
【０１２５】
本明細書で使用される「アルキルヘテロシクリル」という用語は、４−メチルピペラジン−１−イルを含むがこれに限定されない、ヘテロシクリル基を介して親分子部分に付加される先に定義されたアルキル基を指す。
【０１２６】
本明細書で使用される「ヘテロシクリルアルキル」という用語は、２−（１−ピペリジニル）エチルを含むがこれに限定されないアルキル基を介して親分子部分に付加される先に定義されたヘテロシクリル基を指す。
【０１２７】
本明細書で使用される「ヘテロシクリル」という用語は、式ヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−のラジカルを指し、「ヘテロシクリル」という用語は上記で定義された通りである。
【０１２８】
本明細書で使用される「アミナール」という用語は、構造ＲhＣ（ＮＲiＲｊ）（ＮＲkＲl）のヘミアセタールを指し、Ｒh、Ｒi、Ｒj、ＲkおよびＲlはそれぞれ独立して水素、アルキルまたは他の任意の適切な置換基である。
【０１２９】
本明細書で使用される「エステル」という用語は、−ＣＯ2Ｒmを指し、式中、Ｒmはアルキルまたは任意の他の適切な置換基である。
【０１３０】
本明細書で使用される「カルバメート」という用語は、カルバミン酸ＮＸＣ（Ｏ）ＯＲに基づく化合物を指し、例えば、Ｘは水素、アルキル、アリールまたはアラルキルであり、独立してＲはアルキル、アリールまたはアラルキルである。
【０１３１】
本明細書で使用される「光学異性体」という用語は、鏡像異性体、ジアステレオマーおよびラセミ体を含む、少なくとも１つの原子の立体化学のみが異なる化合物を指す。
【０１３２】
本開示では、ＴＨＩ０５６７およびＴＨＩ５６７は互換的に使用される。ＴＨＩ０５６５とＴＨＩ５６５は同じ意味で使用される。
【０１３３】
上記の用語の使用は、置換部分および非置換部分を包含することを意味する。置換は、直接または適切なリンカーによって、アルコール、エーテル、エステル、アミド、スルホン、スルフィド、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、カルボキシ、アミン、ヘテロ原子、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、アルコキシアルコキシ、アシルオキシ、ハロゲン、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シアノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、オキソ、アリールスルホニルおよびアラルキルアミノカルボニル、または前段落のいずれかの置換基、またはこれらの置換基のいずれかなどの１つ以上の基によるものであってもよい。リンカーは、通常、−Ｃ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）2−の任意の組み合わせを含む１〜３原子の短鎖である。環は複数回置換できる。
【０１３４】
「電子吸引」または「電子供与」という用語は、水素が分子内の同じ位置を占めた場合、水素の電子に対して電子を吸引または供与する置換基の能力を指す。これらの用語は、当業者によってよく理解されており、参照により本明細書に組み込まれているAdvanced Organic Chemistry by J. March, 1985, pp. 16-18で議論されている。電子吸引基には、とりわけハロ、ニトロ、カルボキシ、低級アルケニル、低級アルキニル、カルボキシアルデヒド、カルボキシアミド、アリール、第四級アンモニウム、トリフルオロメチル、スルホニルおよびアリール低級アルカノイルが含まれる。電子供与基には、とりわけ、ヒドロキシ、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、アリールオキシ、メルカプト、低級アルキルチオ、低級アルキルメルカプト、およびジスルフィドなどの基が含まれる。当業者は、前述の置換基が異なる化学条件下で電子供与性または電子吸引性を有し得ることを理解する。さらに、本発明は、上記で特定された群から選択される置換基の任意の組み合わせを企図する。
【０１３５】
最も好ましい電子供与または電子吸引置換基は、ハロ、ニトロ、アルカノイル、カルボキシアルデヒド、アリールアルカノイル、アリールオキシ、カルボキシル、カルボキサミド、シアノ、スルホニル、スルホキシド、ヘテロシクリル、グアニジン、第四級アンモニウム、低級アルケニル、低級アルキニル、スルホニウム塩、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、アミン低級アルキルメルカプト、メルカプトアルキル、アルキルチオ、カルボキシ低級アルキル、アリールアルコキシ、アルカノイルアミノ、アルカノイル（低級アルキル）アミノ、低級アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、アルキルスルホニル（低級アルキル）アミノ、アリールスルホニル（低級アルキル）アミノ、低級アルキルカルボキサミド、ジ（低級アルキル）カルボキサミド、スルホンアミド、低級アルキルスルホンアミド、ジ（低級アルキル）スルホンアミド、低級アルキルスルホニル、アリールスルホニルおよびアルキルジチオである。
【０１３６】
脂肪酸エステルは、飽和またはカルボン酸官能基で終わる様々な程度の不飽和を有し得る長い炭化水素鎖により形成されるエステルとして当業者により理解されるものであることが意図される。発明者の意図の範囲を制限することなく、脂肪酸は、ほんの一例として、パルミチン酸、ステアリン酸、またはオレイン酸、ドデカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデカン酸、エイコサン酸、シス−９−ヘキサデセン酸、シス−６−オクタデセン酸、シス−９−オクタデセン酸、シス−１１−オクタデセン酸、シス−１３−ドコセン酸、シス−１５−テトラコセン酸、９，１２−オクタデカジエン酸、６，９、１２−オクタデカトリエン酸、９，１２，１５−オクタデカトリエン酸、５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸、５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸、または４，７，１０，１３，１６、１９−ドコサヘキサン酸を含み得る。
【０１３７】
同様に、本開示は、平均を構成する分子量の分布を本質的に含む−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）n−単位として表されるポリエチレングリコールからなるポリマーリンカーの使用を含む。その結果、分子量は、存在する個々の質量の分布全体の平均を反映した平均分子量として表される。一実施形態では、ＴＨＩ５６７中の−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）−モノマー単位の数は７〜１１５である。一実施形態では、ＴＨＩ５６７中の−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）−モノマー単位の数は３８〜１１５である。ＴＨＩ５６７の−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）−モノマー単位は、３８〜１００である。一実施形態では、ＴＨＩ５６７は、３８〜１１５−（CH2CH2O）−モノマー単位を有する分子の混合物である。したがって、例として、ＴＨＩ５６７は分子の混合物であり、ターゲット平均は７６−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）−モノマー単位であり、一例では実際の平均は７０−７１単位の−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）−である。
【０１３８】
その一例では、分布は、質量分析による分子質量±約１５００質量単位を含んでいた。本発明は、平均分子量に寄与する化合物の分布を構成する個々の成分全体を包含することを意図している。したがって、クレームされた平均には、その定義内に最大約＋／−３８−（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）−モノマー単位の範囲が含まれる。ポリエチレングリコールという用語は、Ｌ２リンカーの二価ラジカルを表すために使用される。分子量という用語は、この段落で示されるように、可能な製品の分布全体の平均を表すために使用される。当業者は、バッチごとの分子量分布の変動を認識する。例えば、試薬ＤＳＰＥ−ＰＥＧ3400−ＮＨ2はバッチごとのバリエーションを含むと理解されますが、その分子量範囲について報告されている仕様内に留まる。
【０１３９】
薬学的に受容可能な塩は、当該分野で周知である。例えば、S. M. Bergeらは、J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977)に薬学的に許容される塩を詳細に説明している。塩は、本明細書で教示される化合物の最終単離および精製中にインサイチュで、または以下に一般的に記載されるように、遊離塩基または遊離酸官能基を適切な試薬と反応させることにより別々に調製することができる。例えば、遊離塩基官能基は適切な酸と反応させることができる。さらに、本明細書で教示される化合物が酸性部分を有する場合、その適切な薬学的に許容される塩は、本発明の範囲を限定することなく、アルカリ金属塩、例えばナトリウムまたはカリウム塩などの金属塩；およびアルカリ土類金属塩、例えば、カルシウムまたはマグネシウム塩が含まれる。当業者は、第２の脂質がより短いポリマー鎖長（例えば、ＤＳＰＥ−ｍＰＥＧ（１０００））で置換されてもなおステルス特性を与え得ることを認識する。当業者は、第２の脂質のより短い鎖長への置換により、第３の脂質の置換が、より短い鎖長（例えば、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２０００−ＴＨＩ５６５）を組み込むことを可能にし、第２の脂質より長い鎖長を維持することをさらに認識する。
【０１４０】
インテグリン標的化剤は、細胞表面に位置するインターグリンを認識するように設計された分子を意味し、リポソームを前記細胞の視界に戻す効果を有する。本明細書で予想されるインテグリンは、インテグリンのα４β１（α４β１）、α４β７（α４β７）およびα９β１（α９β１）ファミリーのものである。ＴＨＩ５６７などのインテグリン標的化剤は、リポソームなどのデリバリーメカニズムに組み込むために設計されており、それぞれが完全な機能性、たとえばアテローム性動脈硬化プラークなどの特定の組織のイメージングに必要である。この用語は、「ＴＨＩ−５６５コンジュゲート」（すなわちＴＨＩ５６７）などの用語「コンジュゲート」と交換可能に使用され得る。
【０１４１】
一実施形態において、インテグリン標的化剤は、２０００〜７０００の平均分子量（ＭＷ）を有する。一実施形態において、インテグリン標的化剤は、３１５０〜６８５０の平均分子量（ＭＷ）を有する。例えば、インテグリン標的化剤は、３３００〜６７００の平均分子量（ＭＷ）を有する。一実施形態において、インテグリン標的化剤は、３４５０〜６５５０の平均分子量（ＭＷ）を有する。
【０１４２】
生物活性剤という用語は、例示のみを目的として、ドキソルビシン、パクリタキセル、ダウノルビシン、ビンクリスチン、トレチノイン、シスプラチン、アンナマイシン、ビノレルビン、イリノテカンＨＣｌ、フロクスウリジンなどの化学療法剤を意味する。抗炎症剤；シクロスポリンなどの免疫調節剤。ここで、生物活性剤は、インテグリンを発現する特定の組織に送達され得る。
【０１４３】
一実施形態では、インテグリン標的化剤は、機能的に保護された構造のＶＬＡ−４アンタゴニストの形成によって製造される：
【０１４４】
【化２５】
2020518666.tif 000027
【０１４５】
式中、Ｒ1は、各々の場合で、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アリス、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）ＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボシキアミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、ＯＣＦ2、ＯＣＨ2ＣＦ3、脂肪族アシル、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、Ｏ（アラルキル）、−ＳＯ2（１−ピロリジニル）、ＳＯ2（１−ピペリジニル）、ピペリジニル、ピロリジニル、および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｚは、ＮまたはＣＲ2であり；
Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され、ここで、Ｒ2（存在する場合）およびＲ3は、一緒になって環を形成してもよい；
Ｒ4は、各々の場合、独立して、ハロゲン、低級アルキル、低級アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、脂肪族アシル、−ＣＦ3、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＨ、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＯＨ、アルキニルアミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクロイル、カルボキシ、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）−Ｃ（Ｏ）（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＨＳＯ2（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＮＨＳＯ2（アリール）、アルコキシアルキル、アルキルアミノ、アルケニルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ3）アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ1−Ｃ3アルキル）2、−ＣＨ＝ＮＯＨ、−ＰＯ3Ｈ2、−ＯＰＯ3Ｈ2、ハロアルキル、アルコキシアルコキシ、ヒドロキシアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボキサミド、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、シクロアルキルアルキル、アリール、アロイル、アリールオキシ、アリールアミノ、ビアリール、チオアリール、ジアリールアミノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、アラルケニル、アラルキル、アルキルヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、スルホニル、−ＳＯ2−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、−ＳＯ3−（Ｃ1−Ｃ3アルキル）、スルホンアミド、カルバメート、アリールオキシアルキル、Ｏ（ハロアルキル）、Ｏ（シクロアルキル）、Ｏ（シクロアルキルアルキル）、ピペリジニル、ピロリジニルおよび−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ベンジル）基からなる群から選択され；
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、独立して非置換であるか、または少なくとも１つの電子供与基もしくは電子吸引基で置換され；
この方法は、官能化された３−１７原子結合基でピリドンヒドロキシルをアルキル化することによりリン脂質を合成することを含み；場合により、末端官能基を変更し；アミドカップリング、カルバメート形成またはトリアゾール形成、および官能基の脱保護によるリポソーム形成に適したポリマー基に結合することを含む。
【０１４６】
一実施形態では、本開示によるリポソームは、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ３４００−ＶＬＡ−４標的化剤（例えば、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ３４００−ＴＨＩ５６５）を合計の０．０５から１．０％または０．０５から２．０％の量で、コレステロール、ＤＳＰＥ−Ｐｅｇ２０００、場合によりＧｄ−ＤＴＰＡ−ＢＳＡ、Ｇｄ−ＤＯＴＡ−ＤＳＰＥまたはＤＳＰＥを含む希釈済み成分；および可変量のＤＰＰＣと組み合わせ；必要に応じて、一定量のローダミンＤＨＰＥまたは薬学的に活性な成分を追加し；エタノールで希釈し；１５０ｍＭ生理食塩水／１０ｍＭヒスチン溶液で水和し；４００ｎｍ以下の粒子サイズを形成するために押し出し；場合により、当該分野で公知の種々の方法、例えば透析による精製によって製造される。
【０１４７】
一実施形態では、本開示によるリポソームは、以下によって製造される：
ステップ１：ＤＰＰＣ、コレステロール、ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００、Ｇｄ−ＤＴＰＡ−ＢＳＡおよびＤＳＰＥ−ＰＥＧ３４００−ＴＨＩ５６５はそれぞれ、次の表に示すモル比でのリガンドの発現を目的とする望ましい表面に基づいて構成された。
【０１４８】
【表１】
2020518666.tif 000028
【０１４９】
ステップ２：これらの脂質組成物のそれぞれに、ローダミンＤＨＰＥ（１．０〜２．５ｍｇ）、およびGhaghada KB, Ravoori M, Sabapathy D, Bankson J, Kundra V, Annapragada A. New Dual Mode Gadolinium Nanoparticle Contrast Agent for Magnetic Resonance Imaging. Yang S, editor. PLoS ONE. 2009 Oct 29;4(10):e7628において従前記載されている粒子製剤を添加した。簡単に説明すると、脂質（４６７．４ｍｇ）をエタノール（１．０から１．２ｍＬ）に溶解し、１５０ｍＭ生理食塩水／１０ｍＭヒスチジン（９ｍＬ）で４０分間、６３−６５℃で水和して、５０ｍＭの脂質濃度を達成した。次いで、混合物を、４００ｎｍポリカーボネートトラックエッチングフィルター（５通過）を使用して１０ｍｌのＬｉｐｅｘ押出機（ノーザンリピッド社、バーナビー、カナダ）で押し出して、約２５０ｎｍの平均径を有する粒子を得た。平均径約１５０ｎｍの粒子の場合、次の製剤は、２００ｎｍポリカーボネートフィルターを通してさらに押し出され（８通過）、平均径約１００ｎｍの粒子の場合、製剤は１００ｎｍフィルターを通してさらに押し出された（５回）。次に、得られた溶液を１５０ｍＭ生理食塩水／１０ｍＭヒスチジンに対して透析した。最終製剤の平均リポソームサイズは、動的光散乱（ＤＬＳ）、および誘導結合プラズマ発光分光法（ＩＣＰ−ＯＥＳ）を使用して定量化された製剤中のガドリニウムおよびリン脂質（等価リン）濃度によって決定された。粒子数／ｍＬは、製剤の粒子サイズと最終脂質濃度に基づいて計算された。
【０１５０】
一実施形態では、本開示の組成物は複数のリポソームを含み、複数のリポソームはインテグリン標的化分子を含み、インテグリン標的化分子はポリマー誘導体化脂質またはリン脂質部分およびインテグリン標的化部分を含む。一実施形態において、インテグリン標的化部分は、以下の構造のうちの１つを有する：
【０１５１】
【化２６】
2020518666.tif 000029
【０１５２】
式中、Ｒは、ポリマー誘導体化脂質またはリン脂質部分の結合点である。
【０１５３】
一実施形態において、インテグリン標的化分子は、本明細書で論じられる本開示の化合物である。一実施形態では、複数のリポソームは、１５０〜１７５ｎｍの平均径を有する。一実施形態において、インテグリン標的化分子は、複数のリポソームの約０．０５〜２モル％を構成する。
【０１５４】
ある実施形態では、複数のリポソームは生物活性剤をさらに含む。一実施形態では、生物活性剤は、複数のリポソーム内にカプセル化される。
【０１５５】
一実施形態では、複数のリポソームは、コントラスト増強剤を結合する基で誘導体化された脂質またはリン脂質をさらに含む。一実施形態では、コントラスト増強剤に結合する基で誘導体化された脂質またはリン脂質は、ＤＴＰＡ−ＧｄまたはＤＯＴＡ−Ｇｄ部分を含む。一実施形態では、リポソームは、３０〜４５モル％のＤＰＰＣ、１５〜４５モル％のコレステロール、１〜６モル％のＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ−２０００、２０〜３０モル％のＧｄ−ＤＯＴＡ−ＤＳＰＥ、および０．０５〜２モル％のＴＨＩ−５６７を含む。
【０１５６】
一実施形態では、患者の標的細胞に生物活性剤を送達する方法は、本開示の組成物を患者に投与することを含む。一実施形態では、生物活性剤は、α４β１インテグリンを発現する細胞に選択的に送達される。一実施形態では、α４β１インテグリンを発現する細胞は、以下のタイプの細胞の１つ以上を含む：ＣＤ１１ｂ＋単核細胞、ＣＤ３＋Ｔ細胞、ＣＤ１９＋Ｂ細胞、およびＬｙ−６Ｇ＋多形核白血球。
【０１５７】
一実施形態では、対象の生物学的構造を画像化する方法は、本開示の組成物を対象に投与し、撮像装置でコントラスト増強剤を検出することを含む。一実施形態では、組成物中のリポソームは、生物学的構造が豊富になる。一実施形態では、撮像装置は、ＣＴ、マイクロＣＴ、マンモグラフィ、Ｘ線、ＭＲＩ、磁気共鳴分光法、生物発光イメージング、超音波、光学イメージング、光学分光法、蛍光分光法、蛍光イメージング、近赤外分光法、および近赤外イメージングのいずれかを実行する。
【０１５８】
一実施形態では、撮像装置は、３Ｔ以下の電界強度を有するＭＲＩスキャナである。一実施形態では、撮像装置は、１Ｔ以下の電界強度を有するＭＲＩスキャナである。一実施形態では、生物学的構造は、アテローム硬化性プラーク、α４β１インテグリンを発現する複数の細胞、または腫瘍である。
【０１５９】
一実施形態では、急性虚血イベントのリスクがある患者を識別する方法は、以下：（ａ）請求項１１〜２３、５５、または５６のいずれか１項に記載の組成物を対象に投与すること；（ｂ）ＭＲＩスキャナでコントラスト増強剤を検出して画像を生成すること；（ｃ）アテローム硬化性プラークの存在について画像を評価すること；および（ｄ）アテローム硬化性プラークが検出された場合、患者を急性虚血イベントのリスクがあると特定することを含む。
【０１６０】
利点。理論に制限されることを望まずに、驚くべきことに、本開示のインテグリン標的化剤により、Scientific Reports (2018) 8:3733に示されているように、臨床的に関連する電界強度、例えば１テスラでＭＲＩ画像を取得できることが発見され、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。理論に制限されることを望まないが、驚くべきことに、本開示のリポソームにより、Scientific Reports (2018) 8:3733に示されているように、臨床的に関連する電界強度、たとえば１テスラでＭＲＩ画像を取得できることが発見されましたその開示は参照により本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【０１６１】
以下は、本発明を代表することを意図しており、示された特定の例によって決して限定されない。当業者は、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、他の例を作成する一般的な適用可能性を認識する。後続の例で使用されるすべての試薬は、商業的なソースから取得され、さらに精製することなく使用されました。ＤＳＰＥ−ＰＥＧ3400−ＮＨ2は、ＬａｙｓａｎＢｉｏ、Ｉｎｃ．から入手した。
【０１６２】
実施例１
【０１６３】
【化２７】
2020518666.tif 000030
【０１６４】
ステップ１：アルゴン下、０℃の無水テトラヒドロフラン（２６．２ｍＬ）中のエチレングリコールモノｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３．４４ｍＬ、３．０９６ｇ、２６．２ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散、６５５ｍｇ、１６．４ｍｍｏｌ）を数回に分けて添加した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、２−クロロ−６−フルオロベンゾニトリル（２．０２８ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温までゆっくり温め、一晩撹拌した。混合物をヘキサン：酢酸エチルの１：１混合物で希釈し、水（２回）およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を自動シリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、ＳＮＡＰ５０ＫＰ−Ｓｉｌ、ヘキサン中の０−５０％酢酸エチル）により精製して、１（３．２２ｇ）を無色の油として得た。
【０１６５】
ステップ２：アルゴン下で０℃に冷却した無水テトラヒドロフラン（９４ｍＬ）中の１（３．２１ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化アルミニウムリチウムの溶液（テトラヒドロフラン中２．０Ｍ、１２．７ｍＬ、２５．４ｍｍｏｌ）をシリンジで滴下した。混合物を室温まで徐々に温め、一晩撹拌した。混合物を０℃に再冷却した後、水（０．９７ｍＬ）をシリンジで滴下した。混合物を１０分間激しく撹拌し、次に水酸化ナトリウム溶液（水中２０重量％、０．７１ｍＬ）を滴下し、撹拌を１０分間続けた。最後に、水（３．５３ｍＬ）およびＣｅｌｉｔｅ（登録商標）ろ過助剤を加えた。混合物をジエチルエーテルで希釈し、３０分間激しく撹拌した後、追加のセライト（登録商標）で濾過し、エーテルで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、２（３．２７ｇ）を淡黄色の油として得た。この材料を精製せずに使用した。
【０１６６】
この手順は、１２から（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−クロロフェニル）メタンアミンを調製するためにも使用された。
【０１６７】
ステップ３：３（米国特許第６９７２２９６号の実施例２５のステップ１に記載の手順に従って調製された、２．１１ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、メタノール（５０ｍｌ）中の２（３．２６ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）の溶液をメタノールリンス（１４ｍＬ）とともに加えた。得られた混合物を一晩４５℃に加熱し、次いで２４時間還流した。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、濃縮した（２回）。次いで、残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）に懸濁し、３０分間撹拌し、次いで濾過し、酢酸エチルで洗浄した。固体を真空下で乾燥させて、４（１．４７ｇ）を淡黄色の粉末として得た。
【０１６８】
この手順はまた、（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−クロロフェニル）メタンアミンから１−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−クロロベンジル）−４−ヒドロキシ−５−メチルピリジン−２（１Ｈ）−オンを調製するために使用された。
【０１６９】
ステップ４：（参照：D Koley, OC Colon, SN Savinov. Org. Lett. 2009, 11, 4172-75）。空気に開放された室温でテトラヒドロフラン（２５ｍＬ）中の４（１．７８９ｇ、４．８９ｍｍｏｌ）の懸濁液に、亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．７４ｍＬ、１４．７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を一晩撹拌した後、メタノール（１０ｍＬ）で希釈し、減圧下で濃縮して、５を暗黄色の油として得た。この材料を精製せずに使用した。
【０１７０】
この手順もまた使用して、１−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−クロロベンジル）−４−ヒドロキシ−５−メチル−３−ニトロピリジン−２（１Ｈ）−オンから１−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−クロロベンジル）−４−ヒドロキシ−５−メチルピリジン−２（１Ｈ）−オンを調製した。
【０１７１】
ステップ５：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１６．３ｍＬ）中の粗製造物５（ステップ４からの理論上４．８９ｍｍｏｌ）の溶液に、亜鉛末（１．４４ｇ、２２．０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン塩酸塩（３．７０２ｇ、２６．９ミリモル）を加えた。混合物を３時間５５℃に加熱し、室温に冷却し、１，１’−カルボニルジイミダゾール（２．３７９ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）を一度に加えた。混合物を８０℃に１．５時間加熱し、室温に冷却した。粗反応混合物を水（２００ｍＬ）を含むフラスコにろ過し、少量のＤＭＦで洗浄した。得られた懸濁液を濾過し、収集した固体を水で洗浄した。次いで、固体をジクロロメタンとＨＣｌ水溶液（２Ｎ）の間で分配した。水層をジクロロメタンで２回抽出し、合わせた有機層を水で洗浄し、次いで硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して６（１．９１ｇ）を橙褐色の固体として得た。この材料を精製せずに使用した。
【０１７２】
この手順を使用して、１−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−クロロベンジル）−４−ヒドロキシ−５−メチル−３−ニトロピリジン−２（１Ｈ）−オンから５−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−クロロベンジル）−７−メチルオキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２，４（３Ｈ、５Ｈ）−ジオンを調製した。
【０１７３】
ステップ６：（参照：B List, et. al. Adv. Synth. Catal. 2005, 347, 1558-60）アルゴン下、室温でＤＭＦ（４１ｍＬ）中のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（２００ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）の溶液にマロン酸水素ｔｅｒｔ−ブチル（３．９４ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）および３−ヒドロキシベンズアルデヒド（２．００ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）を加えた。ピペラジン（０．１６ｍＬ、１．６４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３日間撹拌した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、有意な出発物質が残っていることを示したため、混合物を５５℃に一晩加熱し、その後室温に冷却した。混合物を水（２００ｍＬ）で希釈し、４：１ヘキサン：酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液、水（２回）、およびブラインで洗浄し、次いで硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、７（３．７３ｇ）を白色固体として得た。この材料には微量の残留溶媒が含まれていたが、さらに精製することなく使用した。
【０１７４】
この手順も使用して、１３から（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）フェニル）アクリレートを調製した。
【０１７５】
ステップ７：アルゴン下で０℃のジクロロメタン（４６ｍＬ）中の７（２．０４ｇ、９．２６ミリモル）の溶液に、エチレングリコールモノｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１．５８ｍＬ、１２．０４ミリモル）をシリンジで加え、続いてトリフェニルホスフィン（３．６５ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１０分間撹拌し、次いでアゾジカルボン酸ジエチルの溶液（トルエン中４０重量％、６．３３ｍＬ、１３．９ミリモル）を加えた。室温で一晩撹拌した後、ＴＬＣは部分的な変換を示した。エチレングリコールモノｔｅｒｔ−ブチルエーテル（０．７９ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１．８２ｇ、７．０ｍｍｏｌ）、およびアゾジカルボン酸ジエチル（３．２ｍＬ、７．０ｍｍｏｌ）の追加部分を加え、混合物をさらに２４時間撹拌した。次に、減圧下で濃縮した。残留物を３：１のヘキサン：酢酸エチルに溶解し、溶液を水（２回）およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を加熱しながら９：１ヘキサン：ジクロロメタンに溶解して透明な溶液を得、これを室温まで冷却し、一晩放置した。反応からの副産物であるいくつかの結晶がフラスコの側面に付着した。溶液をデカントし、シリカゲルの５インチプラグに直接適用し、９：１ヘキサン：ジクロロメタン、１９：１ヘキサン：酢酸エチル、９：１ヘキサン：酢酸エチル、最後に３：１ヘキサン：酢酸エチルで順次溶出し、８（２．０２９ｇ）を淡黄色の油として得た。少量の未反応の出発物質（０．３９ｇ）も分離された。
【０１７６】
ステップ８：アルゴン下で−７８℃に冷却したテトラヒドロフラン（２８ｍＬ）中の（Ｒ）−（＋）−Ｎ−ベンジル−α−メチルベンジルアミン（１．７７ｇ、８．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、ｎ−ブチルリチウム（１．６Ｍヘキサン中、４．８８ｍＬ、７．８０ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴下した。鮮やかな赤色の溶液を−７８℃で３０分間撹拌し、ＴＨＦ（２ｍＬ）ですすぎながら、テトラヒドロフラン（８ｍＬ）中の８（２．０２９ｇ、６．３３ｍｍｏｌ）の溶液をシリンジで滴下した。得られた溶液を−７８℃で４時間撹拌し、無水エタノール（３ｍＬ）、続いて飽和塩化アンモニウム水溶液（２５ｍＬ）を加えた。得られた混合物を、氷が完全に溶けるまで温めた後、３：１ヘキサン：エチルで抽出した。有機層を水（２回）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液：水およびブラインの１：１混合物で洗浄し、硫酸マグネシウム（無水）で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルの自動クロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、ＳＮＡＰ１００  ＫＰ−Ｓｉｌ、ヘキサン中５−２０％酢酸エチルで溶出）により精製して、９（２．９８  ｇ）を無色の粘性油として得た。
【０１７７】
この手順を使用して、（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）フェニル）アクリレートから（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（ベンジル（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミノ）−３−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）フェニル）プロパノエートを調製し、および２６から（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（ベンジル（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミノ）−３−（３−エトキシフェニル）プロパノエートを調製した。
【０１７８】
ステップ９：アルゴン下、室温で、無水エタノール（３９ｍＬ）中の９（２．９７ｇ、５．８０ｍｍｏｌ）の溶液に、氷酢酸（０．５ｍＬ）、炭素上のパラジウム金属（デグッサタイプＥ１０１ＮＥ／Ｗ、５０％Ｈ2Ｏ、１０％Ｐｄ乾燥重量基準、０．９８ｇ、０．４６ｍｍｏｌＰｄ）を加えた。雰囲気を水素で置き換え（真空とバルーンからの水素を数回切り替え）、反応物を一晩撹拌した。混合物をセライト（登録商標）で濾過し、エタノールで洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をジエチルエーテルおよびヘキサンから再結晶化して、１０（１．３７３ｇ）を白色結晶固体として得た。母液から追加の物質を分離する試みはこれ以上、行わなかった。
【０１７９】
この手順を用いて、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（ベンジル（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミノ）−３−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）フェニル）プロパノエートから（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ−３−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）フェニル）プロパノエートアセテート、および（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（ベンジル（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミノ）−３−（３−エトキシフェニル）プロパノエートから（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ−３−（３−エトキシフェニル）プロパノエートアセテートを調製した。
【０１８０】
ステップ１０：ＤＭＦ（１２．３ｍＬ）およびＮ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）（０．５９ｍＬ、３．３６ｍｍｏｌ）中の６（１．００３ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）および１０（８９０ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）のアルゴン下の溶液を５５℃で８時間加熱した。アリコートは未反応の１０を示したため、追加の６（１００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を追加し、混合物を５５℃で一晩加熱し、室温に冷却し、１：１ヘキサン：酢酸エチルおよびＨＣｌ（２Ｎ）で希釈した。有機層を水（３回）およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルの自動クロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、ＳＮＡＰ１００ＫＰ−Ｓｉｌ、ヘキサン中２５〜５０％酢酸エチルで溶出）で精製した。所望の生成物を含むいくつかの画分も不純物を含んでいた。画分を濃縮し、再精製した（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、ＳＮＡＰ１０Ｕｌｔｒａ、ヘキサン中３０−５０％酢酸エチルで溶出）。所望の生成物のみを含む両方の分離からの画分を合わせて濃縮し、１１（１．２５ｇ）を淡黄色の泡状物として得た。この材料は、重量で約４％の酢酸エチルを含んでいたが、そのまま使用された。
【０１８１】
この手順もまた使用して、５−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−クロロベンジル）−７−メチルオキサゾロから［４，５−ｃ］ピリジン−２，４（３Ｈ、５Ｈ）−ジオンと（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ−３−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）フェニル）プロパノエートアセテートから
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（３−（１−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−クロロベンジル）−４−ヒドロキシ−５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）ウレイド）−３−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）フェニル）プロパノエート（１５）を調製し、ならびに５−（２−エトキシ−６−クロロベンジル）−７−メチルオキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２，４（３Ｈ、５Ｈ）−ジオン（ＵＳ６９７２２９６、実施例３６の化合物１５１）および（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ−３−（３−エトキシフェニル）プロパノエートアセテートから（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（３−（１−（２−クロロ−６−エトキシベンジル）−４−ヒドロキシ−５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）ウレイド）−３−（３−エトキシフェニル）プロパノエートを調製した。
【０１８２】
実施例２
【０１８３】
【化２８】
2020518666.tif 000031
【０１８４】
ステップ１：アルゴン下の室温での無水テトラヒドロフラン（１６．８ｍＬ）中の２−クロロ−６−フルオロベンゾニトリル（１．３１ｇ、８．４ｍｍｏｌ）の溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１．０４ｇ、９．２４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を一晩加熱還流し、次いでヘキサン：酢酸エチルの３：１混合物で希釈し、水（２回）およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、１２（１．６５５ｇ）を淡黄色の油として得た。この材料は精製せずに使用した。
【０１８５】
ステップ２：３−ヒドロキシベンズアルデヒド（２．０５９ｇ、１６．９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２６ｍＬ）溶液に室温で、過塩素酸マグネシウム（３７９ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１０分間撹拌し、次に二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（８．４８ｇ、３８．９ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を１４時間加熱還流し、室温に冷却し、ヘキサン：酢酸エチルの４：１混合物で希釈し、水（２回）およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルの自動クロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、ＳＮＡＰ１００ＫＰ−Ｓｉｌ、ヘキサン中０〜１０％酢酸エチルで溶出）により精製して、１３（１．６４ｇ）を無色の油として得た。
【０１８６】
実施例３
【０１８７】
【化２９】
2020518666.tif 000032
【０１８８】
ステップ１：アルゴン下、室温でビス−１，２−（２−ヨードエトキシ）エタン（７．３７ｇ、１９．９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１３３ｍＬ）溶液に、アジ化ナトリウム（１．２９ｇ、１９．９ｍｍｏｌ）ヨウ化テトラエチルアンモニウム（２５７ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で一晩撹拌し、水（４００ｍＬ）で希釈し、９：１ヘキサン：酢酸エチル（１００ｍＬで３回）で抽出した。有機層を合わせ、水およびブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。これにより、出発物質、所望の生成物、およびビスアジドのほぼ統計的な混合物が得られた。この混合物をシリカゲルの自動クロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、ＳＮＡＰ１００ＫＰ−Ｓｉｌ、ヘキサン中１０〜１５％酢酸エチルで溶出）により精製して、１４（１．９５ｇ）を黄色の油として得た。出発物質と１４の両方を含む画分を濃縮して、約１：１の混合物（１．１５ｇ）を黄色の油として得た。この混合物から追加の１４を単離する試みは行わなかった。
【０１８９】
ステップ２：アルゴン下、室温で、ＤＭＦ（８ｍＬ）中の１１（１．２５ｇ、重量で９６％の１４、１．６１ｍｍｏｌ）および１４（９１８ｍｇ、３．２２ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（６６８ｍｇ）、４．８３ミリモル）を加えた。得られた混合物を一晩８０℃に加熱し、室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、水（３回）およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルの自動クロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、ＳＮＡＰ１００ＫＰ−Ｓｉｌ、ヘキサン中５０−１００％酢酸エチルで溶出）で精製し、１６（１．１６ｇ）を淡黄色の粘性油として得た。
【０１９０】
この手順を使用して、１５から１７、および（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（３−（１−（２−クロロ−６−エトキシベンジル）−４−ヒドロキシ−５−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）ウレイド）−３−（３−エトキシフェニル）プロパノエート（（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノ−３−（３−エトキシフェニル）プロパノエートから実施例３４、ステップ１−２、実施例３６、ステップ１−３、および実施例３７、ＵＳ６９７２２９６のステップ１に記載の手順に従って調製した）およびｔｅｒｔ−ブチルＮ−（６−ブロモヘキシル）カルバメートから２７を調製した。
【０１９１】
ステップ３：アルゴン下、室温のＴＨＦ（１２．９ｍＬ）中の１６（１．１６ｇ、１．２９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフェニルホスフィン（５０８ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１．５時間撹拌し、水（０．２６ｍＬ）を加え、撹拌を一晩続けた。混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルの自動クロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、ＳＮＡＰ２５ＫＰ−Ｓｉｌ、ヘキサン中７５−１００％酢酸エチル、次いで酢酸エチル中２％トリエチルアミンを添加した０−１０％メタノールで溶出、次いで、ジクロロメタン中の２％トリエチルアミンを添加した１０〜２０％メタノール）により精製して、１８（１．１０１ｇ）を黄褐色の粘性油として得た。
【０１９２】
この手順は、１７から１９を調製するためにも使用された。
【０１９３】
ステップ４：アルゴン下、室温でＤＭＦ（６．３ｍＬ）中の１８（１．１０ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．６６ｍＬ、３．７８ｍｍｏｌ）および無水ジグリコール酸（４３９ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌し、酢酸エチルで希釈し、ＨＣｌ水溶液（２Ｎ）、水（３回）、およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を自動逆相クロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、ＳＮＡＰ３０Ｃ１８、水中５０−１００％アセトニトリルで溶出）で精製した。２０を含む画分を合わせ、濁った溶液が生じるまで回転蒸発によりアセトニトリルを除去した。十分なアセトニトリルを加えて透明な溶液を得、これをドライアイス／アセトン浴で凍結し、凍結乾燥して２０（１．００ｇ）をふわふわした白い粉末として得た。
【０１９４】
この手順は、１９から２１を、２８から２９を準備するためにも使用された。
【０１９５】
ステップ５：アルゴン下、室温でＤＭＦ（５．９ｍＬ）中の２０（５８０ｍｇ、０．５８５ｍｍｏｌ）の溶液、ＤＩＰＥＡ（０．３８ｍＬ、２．１９ｍｍｏｌ）およびＮ、Ｎ、Ｎ’、Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（Ｎ−スクシンイミジル）ウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＳＴＵ）（２８３ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を１．５時間撹拌し、次いでＤＭＦ（０．５ｍＬ）リンスとともにカニューレで、アルゴン下、室温でＤＳＭＦ−ＰＥＧ３４００−ＮＨ２（６１６ｍｇ、約０．１４６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１４．６ｍｍｏｌ）溶液にカニューレで入れた。得られた混合物を２．５日間撹拌し、次いで減圧下で濃縮した。残渣をトルエンに溶かし、数回濃縮した後、アセトニトリルと水に溶解させた。わずかに濁るまでアセトニトリルをロータリーエバポレーターで除去した後、透明な溶液が得られるまでアセトニトリルを滴下した。混合物をドライアイス／アセトン浴で凍結し、凍結乾燥した。得られた粉末を、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ−２０）により、メタノールで溶出する４つの部分で精製した。個々の画分をＴＬＣプレート（ＵＶインジケーター付き）にスポットし、ＵＶ光とリンモリブデン酸（ＰＭＡ）染色（エタノール中１０％）で可視化した。ＵＶとＰＭＡの両方がアクティブな材料が２つのバンドでカラムから外れた。最初のバンドでは、ＴＬＣプレート上のスポットは非常にコンパクトで、マイクロピペットスポッターの先端を越えて広がることはほとんどなかった。２番目のバンドでは、スポットはより拡散し、スポッティング溶媒フロントの端まで広がっている。最初のバンドには目的の生成物が含まれており、このバンドの画分を合わせて減圧下で濃縮し、２２（６９０ｍｇ）を黄褐色ガラスとして得た。
【０１９６】
この手順は、２１から２３を、２９から３０を準備するためにも使用された。
【０１９７】
ステップ６：ジクロロメタン（９ｍＬ）中の２２（６８０ｍｇ、約０．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（９ｍＬ）を加えた。混合物を室温で４時間撹拌した後、濃縮した。残渣をジクロロメタンに溶解し、濃縮した（５回）。次に、残留物をアセトニトリルと水の１：１混合物（３０ｍＬ）に取り、一晩放置した。得られた混合物を水（６０ｍＬ）で希釈し、次いで得られた混合物をドライアイス／アセトン浴で凍結し、凍結乾燥した。得られた粉末をサイズ排除クロマトグラフィー（ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ−２０）で２回に分けて精製し、メタノールで溶出した。上記のように画分をスポットし、ＵＶおよびＰＭＡ活性の両方である物質を含む画分を合わせて濃縮した。残渣を水（５０ｍＬ）およびアセトニトリル（１５ｍＬ）に取り、得られた混合物をドライアイス／アセトン浴で凍結し、凍結乾燥して２４（５７２ｍｇ）をオフホワイトの固体として得た。
【０１９８】
この手順を使用して、２３から２５を調製し、３０から３１を調製した。
【０１９９】
実施例４
【０２００】
【化３０】
2020518666.tif 000033
【０２０１】
ステップ１：アルゴン下、室温でトルエン（１３．３ｍＬ）中の３−エトキシケイ皮酸（２．０２８ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ｔｅｒｔ−ブチル２，２，２−トリクロロアセトイミデート（２．３７ｍＬ、１３．３ｍｍｏｌ）を追加した。混合物を一晩５０℃に加熱し、その時点でＴＬＣ分析は部分的な変換を明らかにした。追加の２，２，２−トリクロロアセトイミダートｔｅｒｔ−ブチル（１．２ｍＬ）を加え、２４時間加熱を続けた。反応はまだ完了していなかったため、２，２，２−トリクロロアセトイミダートｔｅｒｔ−ブチル（１．２ｍＬ）を追加し、さらに２４時間加熱を続けた。得られた混合物を濾過し、トルエンで洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、ヘキサン中の１０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製して、２６（２．２２ｇ）を無色の油として得た。
【０２０２】
実施例５
【０２０３】
【化３１】
2020518666.tif 000034
【０２０４】
ステップ１：室温の酢酸エチル（４．０ｍＬ）中の酢酸エチル（２００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）中の２７の溶液に、塩化水素（ジオキサン中４．０Ｍ、１．３ｍＬ、５．２ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。反応物を２時間撹拌し、次いでアルゴンを３０分間散布することにより過剰の塩化水素を除去した。反応混合物を濃縮し、水に溶かし、凍結乾燥して白色粉末を得た。この物質を逆相ＨＰＬＣ（ＳｙｍｍｅｔｒｙＳｈｉｅｌｄＲＰ１８、７μｍ、３０×２５０ｍｍ、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中３０−８０％アセトニトリル）で精製した。所望の物質を含む画分を合わせ、水および酢酸エチルで希釈し、水酸化ナトリウム水溶液で塩基性にし、分液漏斗で振盪し、相を分離した。有機層を水（３回）およびブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、２８（８８ｍｇ）を無色の油として得た。
【０２０５】
ステップ２から４：実施例３のステップ４から６に従って、化合物３１を２８から調製した。
【０２０６】
実施例６
代表的なリポソーム製剤：１，２−ジヘキサデカノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）およびコレステロールは、米国ニュージャージー州ニューアークのＬｉｐｏｉｄ  Ｉｎｃ．から購入した。ジエチレントリアミン五酢酸−ビス（ステアリルアミド）ガドリニウム塩（Ｇｄ−ＤＴＰＡ−ＢＳＡ）は、米国アラバスター州アラバスターのＡｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓから購入しました。１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００）は、スイスのリースタールにあるコーデンファーマから購入した。Ｌｉｓｓａｍｉｎｅ（商標）ローダミンＢ１，２−ジヘキサデカノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、トリエチルアンモニウム塩（ローダミンＤＨＰＥ）は、米国Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入した。購入した試薬はすべて、さらに精製することなく使用した。ＤＳＰＥ−ＰＥＧ３４００−ＴＨＩ５６５コンジュゲートは、上記の合成プロトコルで説明されているように調製された。
【０２０７】
ステップ１：ＤＰＰＣ、コレステロール、ＤＳＰＥ−ＭＰＥＧ２０００、Ｇｄ−ＤＴＰＡ−ＢＳＡまたはＧｄ−ＤＯＴＡ−ＤＳＰＥおよびＤＳＰＥ−ＰＥＧ３４００−ＴＨＩ５６５は、それぞれ、以下の表に示されるモル比でのリガンド標的発現に基づいて構成された。
【０２０８】
【表２】
2020518666.tif 000035
【０２０９】
様々な実施形態では、他の適切なＧｄキレート剤が本開示に含まれ、他の適切なＧｄキレート剤の使用も想定される。
【０２１０】
ステップ２：任意で、これらの脂質組成物のいずれかに、ローダミンＤＨＰＥ（１．０〜２．５ｍｇ）、ヨウ素造影剤（例えばイオジキサノール）または生物活性剤、および従前Ghaghada KB, Ravoori M, Sabapathy D, Bankson J, Kundra V, Annapragada A. New Dual Mode Gadolinium Nanoparticle Contrast Agent for Magnetic Resonance Imaging. Yang S, editor. PLoS ONE. 2009 Oct 29;4(10):e7628に記載される粒子製剤を添加した。簡単に説明すると、脂質（４６７．４ｍｇ）をエタノール（１．０から１．２ｍＬ）に溶解し、１５０ｍＭ生理食塩水／１０ｍＭヒスチジン（９ｍＬ）で４０分間、６３−６５℃で水和して脂質濃度を５０ｍＭにした。次いで、混合物を、４００ｎｍポリカーボネートトラックエッチングフィルター（５パス）を使用して１０ｍｌのＬｉｐｅｘ押出機（ノーザンリピッド社、バーナビー、カナダ）で押し出して、約２５０ｎｍの平均径を有する粒子を得た。平均径〜１５０ｎｍの粒子の場合、次の製剤は２００ｎｍポリカーボネートフィルターを通してさらに押し出され（８通過）、平均径〜１００ｎｍの粒子の場合、製剤は１００を通してさらに押し出されました（５回）ｎｍフィルター。次に、得られた溶液を１５０ｍＭ生理食塩水／１０ｍＭヒスチジンに対して透析した。最終製剤の平均リポソームサイズは、動的光散乱（ＤＬＳ）、および誘導結合プラズマ発光分光法（ＩＣＰ−ＯＥＳ）を使用して定量化された製剤中のガドリニウムおよびリン脂質（等価リン）濃度によって決定された。粒子数／ｍＬは、製剤の粒子サイズと最終脂質濃度に基づいて計算された。
【０２１１】
本開示において、分子を標的とするインテグリン（ＴＨＩ５６７）が組み込まれたリポソームは、Ｔ細胞、Ｂ細胞、単球、および好中球に特異的に結合することが示されている。様々な実施形態において、本開示の標的化剤（例えば、ＴＨＩ５６７）により修飾されたリポソームは、非活性化細胞と活性化細胞の両方に結合することができる。さらに、この分子（ＴＨＩ５６７）には、リポソームの脂質二重層に挿入できる脂質アンカーがある。さらに、この分子（ＴＨＩｋａ５６７）にはユニークな親水性があり、脂質二重層の破壊を防ぐ。したがって、この分子は、リポソームを標的細胞に特異的に送達するのに特に適している。表面上でこの分子で／によって、またはそれを運ぶリポソームは、細胞を画像化／追跡する目的で画像化剤を担持でき、また標的細胞に非常に特異的に送達できる治療剤も担持できる。
【０２１２】
ヨウ素含有ＶＬＡ−４標的化ＣＴ造影剤の調製。別の標的リポソームは、脂質（ＨＳＰＣ  ／  ＤＰＰＣ、Ｃｈｏｌ、ＤＳＰＥ−ｍＰＥＧ２０００、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ３４００−ＴＨＩ０５６５）をエタノールに溶解することにより調製された。エタノール性脂質溶液をイオジキサノール溶液で水和し、ヌクレオポア膜を通して連続的に押し出し、所望の粒子サイズのナノ粒子を得た。得られたナノ粒子溶液をダイアフィルトレーションして、カプセル化されていないイオジキサノールを除去した。ローダミン−ＤＨＰＥは、蛍光標識ナノプローブの調製のために０．２ｍｏｌ％で含まれる場合がある。０．２５〜１．５ｍｏｌ％のターゲティングリガンドと１００〜３００ｎｍの粒子サイズを含むターゲット粒子を用意した。ＨＳＰＣはＤＳＰＥの代わりに水素化大豆ホスファチジルコリンである。
【０２１３】
代表的な生物活性調製物：ＶＬＡ−４標的化リポソーム−ドキソルビシンの調製。脂質（ＨＳＰＣ、Ｃｈｏｌ、ＤＳＰＥ−ｍＰＥＧ２０００、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ３４００−ＴＨＩ０５６５）をエタノールにモル比５６：４０：３：１で溶解する。エタノール性脂質溶液は、３５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液で水和され、Ｎｕｃｌｅｐｏｒｅ膜を通して連続的に押し出され、４００ｎｍを５回通過し、２００ｎｍを８回通過する。得られたリポソーム溶液を、１５０ｍＭ生理食塩水／１０ｍＭヒスチジンに対して透析する。リポソーム溶液を６０℃でドキソルビシン溶液（５ｍｇ／ｍＬ）と混合（１：１Ｖ／Ｖ）する。１時間後、溶液を氷浴で冷却し、続いて１５０ｍＭ生理食塩水／１０ｍＭヒスチジンに対して透析する。
【０２１４】
本開示では、リポソームに結合したインテグリンα４β１ターゲティングリガンドを使用して、自己免疫または炎症性細胞病巣を画像化することが議論されている。この方法論は、例えば、アテローム硬化性プラーク、移植片拒絶、関節リウマチの関節炎、急性肺損傷の肺炎症、リンパ腫に見られるようなα４β１発現腫瘍、および固形腫瘍の免疫細胞浸潤を画像化するために使用できる。さらに、この送達方法を使用したこれらの疾患状態の薬物治療も考えられる。
【０２１５】
本開示の標的分子／部分は、脂質二重層への組み込みに適するユニークな親水性特性および脂質アンカーを有し、安定した活性リポソームを提供するため、当業者とは異なり、有利である。標的細胞を特異的に結合する。
【０２１６】
【表３】
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【０２１７】
本発明者らは、標的化リガンドとしてインテグリンα４β１アンタゴニストＴＨＩ５６５に基づいて標的化ナノ粒子を生成した（構造については表１を参照）。この阻害剤は、高親和性（０．４６７±０．３５６ｎＭ；ｎ＝１３）と低親和性（１１．８８±４．８４ｎＭ；ｎ＝３）の細胞接着アッセイ条件の両方でインテグリンα４β１の強力なアンタゴニストであり、リポソーム取り込みにはＴＨＩ５２０よりもｃＬｏｇＰが優先される。リポソームに組み込まれるように設計されたリンカー（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−３４００−ＮＨ）によるＴＨＩ５６５の修飾は、アンタゴニスト活性に有意な影響を与えなかった（ＴＨＩ５６７  ＩＣ50＝０．４８±０．２ｎＭ；ｎ＝５）。図２は、これら２つの化合物について説明する。
【０２１８】
ＴＨＩ５６７は、様々な異なるリポソーム製剤の生成に使用された（表２を参照）。
【０２１９】
【表４】
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【０２２０】
表２に要約されるように、ＴＨＩ５６７は、総脂質濃度０．０５％から総脂質濃度１％までの範囲の濃度から組み込まれた。粒子サイズは、インビボでのリポソームの許容される機能と薬物動態にとって重要な要素である。一実施形態では、粒子サイズは５０〜４００ｎｍである。一実施形態では、粒子サイズは８５〜２００ｎｍである。別の実施形態では、異なるリポソームサイズが開発された（２５０ｎｍ、１５０ｎｍ、および１００ｎｍ）。リサミンローダミンＢは、蛍光検出のためにリポソームに組み込まれ、ＧｄはＭＲＩベースのイメージングのためにリポソームに組み込まれた。リポソームは「Ｇｄ５６７」（サイズｎｍ、標的リガンド％）と呼ばれていた。表２には、α４β１発現Ｋ５６２細胞への結合（フローサイトメトリーで測定）で測定したリポソーム結合定数も記載されている。結合定数は、モル粒子濃度として表される。リポソームの結合特異性は、多くの異なる手段によって決定された。これらには、無料のターゲティングリガンドとの競合が含まれる（図３）。Ｇｄ５６７（１５０ｎｍ；１．０％）リポソームのインテグリンα４β１発現Ｋ５６２細胞への結合を競合させるために過剰のＴＨＩ５６５が使用された。ＴＨＩ０５６５の最高用量で、Ｇｄ５６７（１５０ｎｍ；１．０％）結合の完全な阻害が観察された（図３）。
【０２２１】
別の一連の実験では、非標的化リポソーム（ステルス特性のために３％の不活性ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００−ＯＭｅ表面コーティングを有し、標的化リポソームは３％ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００−ＯＭｅおよび１％ＤＳＰＥ−  ＰＥＧ−３４００−ＴＨＩ５６５（ＴＨＩ５６７と呼ばれる））は、テストされた濃度で最小限の結合を示したが、ＴＨＩ５６７をターゲットにしたリポソームは用量依存的結合を示した（図４）。また、モノクローナル抗体を使用して、マウス細胞株７０Ｚ／３へのＧｄ５６７（１５０ｎｍ；１．０％）の結合を阻害した。マウスα４インテグリン（ｍＡｂ  ＰＳ／２）に特異的な抗体は、Ｇｄ５６７（１５０ｎｍ；１．０％）の７０Ｚ／３細胞への結合を完全に阻害したが、アイソタイプコントロールｍＡｂ（ラットＩｇＧ２ｂ）は効果がなかった（図４）。これは、インテグリンα４β１へのＧｄ５６７（１５０ｎｍ；１．０％）の特異的結合を示す。
【０２２２】
リポソーム結合特異性のさらなる試験は、インテグリンα４β１を発現するように操作された細胞株、またはインテグリンα４β１の発現の喪失について変異および選択された細胞株を利用した。野生型Ｋ５６２細胞はインテグリンα４β１をほとんどまたはまったく発現しない。Ｇｄ５６７（１５０ｎｍ；１．０％）との結合アッセイで使用した場合、インテグリンα４β１を過剰発現するように設計されたＫ５６２細胞と比較して、この細胞へのリポソームの結合はほとんどなかった（図５）。Ｊｕｒｋａｔ細胞はインテグリンα４β１を発現しています。細胞を突然変異させ、インテグリンα４β１の喪失について選択した。Ｇｄ５６７（１５０  ｎｍ；１．０％）のＪｕｒｋａｔを発現するα４β１への結合が検出されたが、α４β１−Ｊｕｒｋａｔ細胞への結合は観察されなかった（図５）。
【０２２３】
インテグリン細胞接着受容体は、それらのリガンド結合活性のために二価カチオンを必要とする。したがって、リポソーム結合の特異性を実証するために設計された別の実験では、カチオンをキレート化してインテグリン機能を阻害するために、ＥＤＴＡを結合アッセイで使用した。ＥＤＴＡは、試験したリポソームの濃度が高い場合でも、Ｊｕｒｋａｔ  Ｔリンパ球へのＧｄ５６７（２５０ｎｍ；０．２５％）の結合を完全に無効にした（図６）。
【０２２４】
表２に記載された異なるリポソーム製剤のすべてを図６で実施した分析にかけた。示されるように、バックグラウンド蛍光はインテグリン機能を阻害するために２０ｍＭ  ＥＤＴＡの存在下で決定された。このバックグラウンド蛍光を総結合から差し引いて、特異的結合曲線を決定し、そこから見かけのＫｄを決定した。Ｋｄは２２．０〜１００．５×１０-12Ｍの範囲でした（表２を参照）。また、より少ない量のターゲティングリガンド（例えば、０．０５％）が細胞へのより高いバックグラウンドリポソーム結合をもたらし、したがって、リポソーム中のより高い濃度の標的リガンドが特定の細胞結合に最適であることも示された（図７）。
【０２２５】
表２に記載のリポソームのマトリックスから、Ｇｄ５６７（１５０ｎｍ；１．０％）が、観察されたＫｄおよび減少した非特異的結合に基づくさらなるインビボ分析のために選択された。また、結合特異性の別のテストとして、Ｇｄ５６７（１５０ｎｍ；１．０％）と同じ物理化学パラメーターのコントロールリポソームが、ターゲティングリガンドなしで生成された。これらの非標的粒子（Ｇｄｃｏｎ（１５０ｎｍ；１．０％））はステルス特性のために３％不活性ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００−ＯＭｅ表面コーティングを持ち、標的リポソームは３％ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００−ＯＭｅと１％ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−３４００−ＴＨＩ５６５（ＴＨＩ５６７と呼ばれる）を有する。代表的な結合アッセイを示す（図４）。
【０２２６】
インビボでの結合を分析するために、Ｇｄ５６７（１５０ｎｍ；１．０％）またはＧｄｃｏｎ（１５０ｎｍ；１．０％）を健康なＣ５７ＢＬ／６マウスの大腿静脈に注射した。２時間後、心臓穿刺により全血を採取し、末梢血単球、好中球、Ｔ細胞、およびＢ細胞へのリポソーム結合を分析した（図８）。
【０２２７】
図４に記載のインビトロ研究と同様に、Ｇｄ５６７の結合（１５０ｎｍ；１．０％）が検出されたが、インビボではＧｄｃｏｎの有意な結合は観察されなかった（図８）。３つの独立した実験の要約（平均正規化蛍光強度±ＳＥＭ）を図８に示す。
【０２２８】
図８に記載されたこれらの細胞サブセットのそれぞれにおけるリポソーム蛍光を視覚化するために、細胞サブセットも分類され、共焦点分析のためにガラススライド上に固定された（図９）。３つの代表的な実験の１つが示される。
【０２２９】
ＴＨＩ５６７標的化リポソーム取り込みは、マウスのアテローム硬化性プラークにおけるＭＲイメージングにより定量化された。ＭＲＩ研究では、ＡｐｏＥ−／−マウス（１２〜１４週齢）に約１０週間高脂肪食を与えた。次に、マウスにＴＨＩ０５６７標的リポソーム（０．１ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ）または非標的対照リポソーム（０．１ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ）を静脈内注射した。生体内ＭＲイメージングは、Ｔ１加重（Ｔ１ｗ）３Ｄグラジエントリコールエコー（ＧＲＥ）シーケンスを使用して１Ｔ永久磁石で実行された。すべてのマウスは、造影剤前のＴ１ｗイメージングに続いて、リポソームＧｄ造影剤（ＴＨＩ０５６７標的または非標的）の投与および造影後の即時スキャンを受けた。循環からの造影剤のクリアランスを確保するために、リポソーム造影剤を投与してから７２時間後に遅延造影後スキャンを取得した。ＴＨＩ０５６７をターゲットとしたリポソームＧｄ試薬は、大動脈に沿った複数の位置でＴ１ｗ画像上で有意に高い大動脈壁シグナル増強を示した（図１０）。非標的薬剤は、同等の信号増強を示さなかった。ＭＲ画像の信号増強を定量化するために、正規化増強比（ＮＥＲ）を計算した。全体的なＮＥＲは、ＴＨＩ０５６７をターゲットとしたリポソームＧｄ剤を投与したマウスの方が、非ターゲットリポソームＧｄを投与したマウスよりも有意に高かった（４２．８±４５．９対７．４±１４．８、ｐ＝０．０４）（図６Ａ）。最も高い信号エンハンスメントを持つ領域を特定するために、上行大動脈、大動脈弓、下行大動脈といった複数の大動脈セグメントのＮＥＲを決定した（図１０）。ＮＥＲは、大動脈弓（６６．８±４４．０対１２．３±２５．４、ｐ＝０．００１）および下行大動脈（２８．７±３８．５対−１２．２±２２．３、ｐ＝０．０２３）に非標的化リポソームＧｄを投与したマウスよりも、標的化リポソームＧｄ処理マウスで有意に高かった（図６Ｃ）。上行大動脈では、平均ＮＥＲはターゲットリポソームグループで高かったが、２つのグループ間の差は統計的有意性に達しなかった。遅延造影後スキャンの後、大動脈組織を採取して切片化し、リポソーム蓄積パターンを調べた。上行大動脈および大動脈弓の切片の検査では、リポソームの蓄積（ローダミンＢ蛍光によって示される）はオイルレッド陽性プラークに限定されていた（図１０）。未処理マウスのプラークにはローダミンＢの蛍光は観察されなかった（図１０）。
【０２３０】
大動脈プラークの切片を免疫蛍光法により検査して、単球系統の細胞に関連するマーカーがＴＨＩ０５６７標的化リポソームと共局在化したかどうかを判定した。大動脈基部のローダミンＢ蛍光（リポソーム）は、プラーク内の内皮下領域に限定されていました（図１１）。リポソーム蛍光は、ＣＤ１１ｂおよびＦ４／８０単球／マクロファージマーカーの両方と共局在した（図１１）。腕頭動脈などの分岐動脈および大動脈弓領域には、高密度のＴＨＩ０５６７を標的としたリポソームの蓄積が含まれ（図１１）、リポソームはプラーク領域のＣＤ１１ｂ＋細胞内に取り込まれている。
【０２３１】
本発明の実施形態を示して説明したが、本発明の精神および教示から逸脱することなく、当業者はその修正を行うことができる。本明細書で提供される実施形態および実施例は例示にすぎず、限定することを意図するものではない。本明細書に開示された本発明の多くの変形および修正が可能であり、本発明の範囲内である。したがって、保護の範囲は上記の説明によって制限されず、以下の特許請求の範囲によってのみ制限され、その範囲は特許請求の範囲の主題のすべての同等物を含む。
【０２３２】
関連技術の説明における参考文献の議論は、それが本発明の先行技術であることを認めるものではなく、特に、本出願の優先日より後の公開日を有し得る参考文献である。本明細書に引用されるすべての特許、特許出願、および刊行物の開示は、本明細書に記載されるものを補足する例示、手順、または他の詳細を提供する範囲で、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２３３】
本発明の広い範囲を示す数値範囲およびパラメーターは近似値であるにもかかわらず、特定の実施例に示される数値は可能な限り正確に報告されている。ただし、数値には、それぞれのテスト測定で見つかった標準偏差から必然的に生じる特定の誤差が本質的に含まれる。
【０２３４】
「約」という用語は、記載された値の±１０％までを意味する場合があることに留意すべきである。たとえば、「約１０」は９〜１１を意味する。
【０２３５】
さらに、組成物、方法などは、実施例を説明することによって説明され、実施例はかなり詳細に説明されているが、出願人は、そのような詳細に対する添付の特許請求の範囲を制限すること、または何らかの方法で制限することを意図していない。したがって、本出願は、添付の特許請求の範囲内に入る変更、修正、および変形を包含することを意図している。前述の説明は、本発明の範囲を限定することを意図していない。むしろ、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲およびそれらの同等物によって決定されるものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８】
2020518666.tif 000071
【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ−Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【国際調査報告】
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