(57)【要約】  本発明は、脂質代謝関連疾患、例えばアテローム性動脈硬化関連疾患、心血管疾患、及び肥満を予防及び／又は治療するための組成物の調製におけるＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの適用を開示する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
脂質代謝関連疾患を予防及び／又は治療するための組成物又は製剤の製造におけるＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの使用。
【請求項２】
前記脂質代謝関連疾患が、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、肥満、及びそれらの組合せからなる群から選択される請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉが、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１７９、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１４０４、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１５５０、及びそれらの組合せからなる群から選択される請求項１に記載の使用。
【請求項４】
以下からなる群から選択される１つ以上のための組成物又は製剤の製造におけるＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの使用：
（ｉ）哺乳動物の血中脂質レベルを低下させること；
（ｉｉ）哺乳動物の体重を減少させること；
（ｉｉｉ）哺乳動物の心筋虚血を緩和すること；及び
（ｉｖ）哺乳動物の血管病変を軽減すること。
【請求項５】
（ａ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの安全且つ有効な量；及び
（ｂ）食品として又は薬学的に許容される担体を含むことを特徴とする心血管疾患の治療及び／又は予防に使用するための組成物。
【請求項６】
（ａ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの安全且つ有効な量；及び
（ｂ）食品として又は薬学的に許容される担体を含むことを特徴とする肥満の予防及び／又は治療に使用するための組成物。
【請求項７】
（ａ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの安全且つ有効な量；及び
（ｂ）食品として又は薬学的に許容される担体を含むことを特徴とするアテローム性動脈硬化症関連疾患の治療及び／又は予防に使用するための組成物。
【請求項８】
（ａ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの安全且つ有効な量；及び
（ｂ）食品として又は薬学的に許容される担体を含むことを特徴とする脂質代謝関連疾患の治療及び／又は予防に使用するための組成物。
【請求項９】
前記組成物が、プロバイオティクス及び／又はプレバイオティクスを更に含む請求項５から８のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項１０】
前記プロバイオティクスが、乳酸菌、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、及びそれらの組合せからなる群から選択される請求項９に記載の使用のための組成物。
【請求項１１】
前記プレバイオティクスが、フルクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）、ラクトスクロース（ＬＡＣＴ）、大豆オリゴ糖（ＳＯＳ）、イヌリン、オリゴ糖、及びそれらの組合せからなる群から選択される請求項９に記載の使用のための組成物。
【請求項１２】
前記組成物が、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質を更に含む請求項５から８のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項１３】
請求項５から８のいずれかに記載の組成物を調製するための方法であって、
（ｉ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを（ｉｉ）食品として又は薬学的に許容される担体と混合して、請求項５から８のいずれかに記載の組成物を生成する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１４】
前記組成物が、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質を更に含む請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
哺乳動物の心筋虚血を緩和するための方法であって、請求項５から８のいずれかに記載の組成物を被験体に投与し、それによって前記哺乳動物の心筋虚血を緩和する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１６】
哺乳動物の血中脂質及び体重を減少させるための方法であって、請求項５から８のいずれかに記載の組成物を被験体に投与し、それによって前記哺乳動物の血中脂質及び体重を減少させる工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１７】
哺乳動物の血管病変を軽減するための方法であって、請求項５から８のいずれかに記載の組成物を被験体に投与し、それによって前記哺乳動物の血管病変を軽減する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１８】
脂質代謝関連疾患を治療及び／又は予防するための方法であって、請求項５から８のいずれかに記載の組成物を被験体に投与し、それによって脂質代謝関連疾患を治療及び／又は予防する工程を含むことを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、微生物学の分野、特に脂質代謝関連疾患の予防及び／又は治療におけるＡｌｉｓｔｉｐｅｓ  ｓｈａｈｉｉの適用に関する。
【背景技術】
【０００２】
アテローム性動脈硬化症（ＡＳ）は、冠状動脈性心臓病、脳梗塞、末梢血管疾患の主因であり、脂質代謝異常がアテローム性動脈硬化病変の基礎である。アテローム性動脈硬化症は、内膜から始まる動脈の病変、一般に、脂質と複合糖の蓄積、出血と血栓症、それに続く線維組織過形成とカルシウム沈着、次いで、動脈壁の肥厚及び硬化並びに血管腔が狭小化をもたらす動脈の中間層の緩やかな変態と石灰化を伴う動脈病変を特徴とする。常に大中のサイズの筋肉動脈に関与する病変が動脈腔を遮断するほどに発達すると、動脈によって供給される組織又は臓器は、虚血性又は壊死性になる。動脈の内膜に蓄積した脂質の黄色のアテローム性の外観にちなんで名付けられたアテローム性動脈硬化症は、複雑な病因を伴う複合因子によって引き起こされる。それらのうち、アテローム性動脈硬化症の主なリスクファクターとしては、高血圧、高脂血症、及び大量喫煙、並びに糖尿病、肥満、遺伝的要因などが挙げられる。
【０００３】
動脈硬化性心血管疾患（ＡＣＶＤ）は、先進国で最も多い死因であり、発展途上国でますます一般的になってきている。近年、自国の急速に発展した経済と人々の生活水準の大幅な向上に伴って、ライフスタイルが大きく変化しており、例えば、仕事と生活のペースの加速、食事カロリーの増加、身体活動の減少などの変化がある。そのような不健康なライフスタイルは、心臓血管疾患（肥満など）のリスクファクターの著しい増加をもたらし、それにより更に、脳血管疾患の発生率の急速な増加に至る。例えば、脳卒中、心筋梗塞などの疾患は、重度の障害、生活の質の低下、重い医療負担につながる可能性がある。心脳血管疾患は、高い罹患率、死亡率、及び障害のために、今世紀に自国の主要な公衆衛生問題となっている。
【０００４】
ＡＣＶＤには、主に冠状動脈性心臓病（ＣＨＤ）、脳卒中、及び末梢動脈疾患が含まれる。ＡＣＶＤの病因は多面的であり、関連する要因の多くは、喫煙、アテローム硬化性食事、過体重又は肥満、座りがちな状態、身体活動の欠如などを含むライフスタイルに関連している。冠状動脈性心臓病の主因は、アテローム性動脈硬化症と、アテローム性動脈硬化症によって引き起こされる心筋虚血及び壊死の病理学的変化である。冠状動脈性心疾患の病理学的病因は、主に、脂質代謝障害による血中脂質の増加、血管内壁への脂質沈着と浸潤、血管内皮泡沫細胞の形成、冠状血管内皮細胞の機能及び形態を損なわせる血管壁内の慢性炎症反応、血管内皮アテローム硬化性プラークの形成、更なるプラーク破裂、血栓症、冠状動脈血行障害に至る血管狭窄又は閉塞、心筋虚血、心筋細胞の損傷、及び心不全の惹起である。生活水準の向上に伴い、自国の冠状動脈性心臓病の発生率と死亡率は年々増加しており、若年化の傾向を示している。
【０００５】
代謝障害の一般的なグループとしての肥満は、カロリー摂取量がカロリー消費量を超え、肥満の重要な基礎である脂肪合成の増加につながる過剰な食事及び運動不足などの外的要因と、脂質代謝障害の内的要因とによって生じる。肥満患者は、特に太い胴囲（男性で＞９０ｃｍ、女性で＞８５ｃｍ）を有する中心的肥満患者の場合に、非肥満人口よりも、冠状動脈性心疾患と高血圧を同時に患うリスクが著しく高い（一般に５〜１０倍）。肥満は、一部の肥満人口において、心肥大、後壁及び心室中隔の肥厚、血液量の増加を伴う心肥大、細胞内液及び細胞間液、並びに心室終末期拡張期血圧、肺動脈圧及び肺毛細血管楔入圧、左心室機能不全及び肥満型心筋症に至ることがある。肥満患者は、突然死の有意な増加を示し、これは、心肥大によって引き起こされる不整脈と心虚血、及び心臓伝導系の脂肪浸潤に関連している可能性がある。
【０００６】
脂質代謝関連疾患、特にアテローム性動脈硬化性心血管疾患（冠状動脈性心疾患など）の現代医学による治療としては、主に薬物治療、介入治療、及び外科治療が挙げられる。
【０００７】
しかし、薬物治療はしばしばある程度の毒性と副作用を示し、伝統的な漢方薬の効能はあまり効果的ではなく、長期に亘る治療サイクルと治療不可能性を伴う。現在、市場で入手可能な冠状動脈性心臓病を治療するための伝統的な漢方薬の経口製剤は、Ｓａｌｖｉａ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａに基づいており、血液循環促進という主な効能を有する医薬、例えば、ＧｕａｎＸｉｎＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎ（例えば、Ｓａｌｖｉａ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ、Ｐａｎａｘ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ、Ｄａｌｂｅｒｇｉａ  ｗｏｏｄ  ｏｉｌ）、Ｄａｎｓｈｅｎｐｉａｎ（例えば、Ｓａｌｖｉａ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ）、ＳｈｕａｎｇＤａｎＫｏｕＦｕＹｅ（例えば、Ｓａｌｖｉａ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ、Ｐａｅｏｎｉａ ｓｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａ  Ａｎｄｒ．の皮質）、Ｄａｎｑｉｐｉａｎ（例えば、Ｓａｌｖｉａ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ、Ｐａｎａｘ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ）、ＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎ（例えば、Ｓａｌｖｉａ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ、Ｐａｎａｘ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ、Ｂｏｒｎｅｏｌ）、ＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＤｉＷａｎ（例えば、Ｓａｌｖｉａ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ、Ｐａｎａｘ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ、Ｂｏｒｎｅｏｌ）などがある。更に、前記薬剤のいくつかは、芳香族刺激性（ａｒｏｍａｔｉｃ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ）の性質を有するボルネオールを含み、気（ｑｉ）の消費と陽（ｙａｎｇ）の損傷をもたらし、長期間適用すると心臓機能に影響を及ぼし、胃腸管を大きく刺激するので、冠状動脈心疾患、胃炎、胃十二指腸病変若しくは食道炎を罹患している患者、又は欠乏性冷症（ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｃｏｌｄ−ｔｙｐｅ）患者は、ボルネオールなどの薬剤の使用には適していない。更に、長期にわたる薬物ＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎの投与は、腹部膨満、疲労などのカリウム欠乏症状を患者に引き起こす可能性があります。更に、薬剤ＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎの長期間投与は、腹部膨満、疲労などのカリウム欠乏症状を患者に引き起こす可能性がある。
【０００８】
介入的及び外科的治療は、術後の再狭窄、高価なコストなどの問題を有し、血管内の脂質の再沈殿を解決できず、供給源から新しいプラークを形成するため、血管の狭窄と詰まり、及び心筋の血液供給不足によるアテローム性動脈硬化性心血管疾患（例えば、冠状動脈性心臓病）の再発をもたらす。
【０００９】
したがって、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、及び肥満などの脂質代謝関連疾患を治療及び／又は予防するための新規の非毒性及び非副作用薬を開発する喫緊の必要性が当技術分野に存在する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本開示の目的は、脂質代謝関連疾患を治療及び／又は予防するための新しい、非毒性且つ非副作用の医薬を提供することである。
【００１１】
第１の態様においては、実施形態における本開示は、脂質代謝関連疾患を予防及び／又は治療するための組成物又は製剤の製造におけるＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの使用を提供する。
【００１２】
別の好ましい実施形態では、脂質代謝関連疾患は、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、肥満、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００１３】
別の好ましい実施形態では、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ株  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１７９、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１４０４、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１５５０、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００１４】
別の好ましい実施形態では、組成物は、食品組成物、ヘルスケア組成物、医薬組成物、飲料組成物、飼料組成物、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００１５】
別の好ましい実施形態では、組成物は、経口製剤である。
【００１６】
別の好ましい実施形態では、組成物は、液体製剤、固体製剤、又は半固体製剤である。
【００１７】
別の好ましい実施形態では、組成物の剤形は、粉末、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル、顆粒、懸濁液、溶液、シロップ、ドロップ、及び舌下錠剤からなる群から選択される。
【００１８】
別の好ましい実施形態では、食品組成物は、エマルジョン製品、溶液製品、粉末製品、又は懸濁物製品を含む。
【００１９】
別の好ましい実施形態では、食品組成物は、乳製品、粉乳、又はエマルジョンを含む。
【００２０】
別の好ましい実施形態では、液体製剤は、溶液製品及び懸濁液製品からなる群から選択される。
【００２１】
別の好ましい実施形態では、アテローム性動脈硬化症関連疾患は、冠状動脈性心疾患、冠状動脈性疾患（ＣＡＤ）、アテローム性動脈硬化性心疾患、アテローム性動脈硬化性心血管疾患、虚血性心疾患、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００２２】
別の好ましい実施形態では、心血管疾患は、急性冠状動脈症候群、狭心症、動脈硬化、アテローム性動脈硬化、頸動脈アテローム性動脈硬化、脳血管疾患、脳梗塞、うっ血性心不全、先天性心疾患、冠状動脈性心疾患、冠状動脈疾患、冠状プラークの安定化（ｃｏｒｏｎａｒｙ  ｐｌａｑｕｅ  ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ）、脂質異常症、異常リポ蛋白血症、内皮機能不全、家族性高コレステロール血症、家族性複合型高脂血症、低α−リポタンパク血症、高トリグリセリド血症、高β−リポタンパク血症、高コレステロール血症、高血圧、高脂血症、間欠性跛行、虚血、虚血再灌流傷害、虚血性心疾患、心筋虚血、メタボリックシンドローム、多発性脳梗塞認知症、心筋梗塞、肥満、末梢血管疾患、再灌流障害、再狭窄、腎アテローム性動脈硬化、リウマチ性心疾患、脳卒中、血栓性障害、一過性虚血発作及びアルツハイマー病、肥満、糖尿病、Ｘ症候群、インポテンス、多発性硬化症、パーキンソン病、炎症性障害関連異常リポタンパク質、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００２３】
別の好ましい実施形態では、製剤は、微生物生態学的（ｍｉｃｒｏｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ）製剤を含む。
【００２４】
第２の態様において、実施形態における本開示は、以下からなる群から選択される１つ以上のための組成物又は製剤の製造におけるＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの使用を提供する：
（ｉ）哺乳動物の血中脂質レベルを低下させること；
（ｉｉ）哺乳動物の体重を減少させること；
（ｉｉｉ）哺乳動物の心筋虚血を緩和すること；及び
（ｉｖ）哺乳動物の血管病変を軽減すること。
【００２５】
別の好ましい実施形態では、哺乳動物の血管病変の軽減は、血液粘度、血液レオロジー、血圧、血中脂質（例えば、トリグリセリド、総コレステロール、高密度リポタンパク質、低密度リポタンパク質など）、及び心電計のＳＴセグメントからなる群から選択される１つ以上の指標の改善を含む。
【００２６】
別の好ましい実施形態では、哺乳動物の血中脂質レベルを低下させることは、血液中の総コレステロールレベル、トリグリセリドレベル、低密度リポタンパク質レベル、及び／又は血液粘度レベルの低下を含む。
【００２７】
別の好ましい実施形態では、哺乳動物の体重を減少させることは、実験群の哺乳動物の体重がモデル群の体重と比較して少なくとも１０％、好ましくは１５％〜２０％減少することを示す。
【００２８】
別の好ましい実施形態では、哺乳動物の心筋虚血を緩和することは、哺乳動物の心筋虚血のＳＴセグメント変位を低減することを含む。
【００２９】
別の好ましい実施形態では、哺乳動物は、ヒト又は非ヒト哺乳動物を含む。
【００３０】
別の好ましい実施形態では、非ヒト哺乳動物は、ラット及びマウスなどのげっ歯類を含む。
【００３１】
第３の態様において、実施形態における本開示は、
（ａ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの安全且つ有効な量；及び
（ｂ）食品として又は薬学的に許容される担体を含む心血管疾患の治療及び／又は予防に使用するための組成物を提供する。
【００３２】
第４の態様において、実施形態における本開示は、
（ａ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの安全且つ有効な量；及び
（ｂ）食品として又は薬学的に許容される担体を含む肥満の予防及び／又は治療に使用するための組成物を提供する。
【００３３】
第５の態様において、実施形態における本開示は、
（ａ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの安全且つ有効な量；及び
（ｂ）食品として又は薬学的に許容される担体を含むアテローム性動脈硬化症関連疾患の治療及び／又は予防に使用するための組成物を提供する。
【００３４】
第６の態様において、実施形態における本開示は、
（ａ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの安全且つ有効な量；及び
（ｂ）食品として又は薬学的に許容される担体を含む脂質代謝関連疾患の治療及び／又は予防に使用するための組成物を提供する。
【００３５】
別の好ましい実施形態では、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ株  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１７９、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１４０４、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１５５０、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００３６】
別の好ましい実施形態では、組成物は成長因子、好ましくは乳成長因子を更に含む。
【００３７】
別の好ましい実施形態では、組成物は、食品組成物、ヘルスケア組成物、医薬組成物、飲料組成物、飼料組成物、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００３８】
別の好ましい実施形態では、組成物は、経口製剤である。
【００３９】
別の好ましい実施形態では、組成物は、液体製剤、固体製剤、又は半固体製剤である。
【００４０】
別の好ましい実施形態では、組成物の剤形は、粉末、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル、顆粒、懸濁液、溶液、シロップ、ドロップ、及び舌下錠剤からなる群から選択される。
【００４１】
別の好ましい実施形態では、食品組成物は、エマルジョン製品、溶液製品、粉末製品、又は懸濁物製品を含む。
【００４２】
別の好ましい実施形態では、食品組成物は、乳製品、粉乳、又はエマルジョンを含む。
【００４３】
別の好ましい実施形態では、液体製剤は、溶液製品及び懸濁液製品からなる群から選択される。
【００４４】
別の好ましい実施形態では、組成物は、組成物の総体積又は総重量に基づいて、１×１０〜１×１０１５ｃｆｕ／ｍＬ又はｃｆｕ／ｇのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ、好ましくは１×１０４〜１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬ又はｃｆｕ／ｇのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む。
【００４５】
別の好ましい実施形態では、組成物は、組成物の総重量に基づいて、０．０００１ｗｔ％〜９９ｗｔ％、好ましくは０．１ｗｔ％〜９０ｗｔ％のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む。
【００４６】
別の好ましい実施形態では、組成物は、単位剤形、即ち、１つの錠剤、１つのカプセル、又は１つのバイアルであり、各単位剤形中の組成物は、０．０５ｇ〜５ｇ、好ましくは０．１ｇ〜１ｇの質量である。
【００４７】
別の好ましい実施形態では、組成物は、プロバイオティクス及び／又はプレバイオティクスを更に含む。
【００４８】
別の好ましい実施形態では、プロバイオティクスは、乳酸菌、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００４９】
別の好ましい実施形態では、プレバイオティクスは、フルクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）、ラクトスクロース（ＬＡＣＴ）、大豆オリゴ糖（ＳＯＳ）、イヌリン、オリゴ糖、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００５０】
別の好ましい実施形態では、組成物は、保護剤などのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質を更に含む。
【００５１】
別の好ましい実施形態では、保護剤などのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質は、システイン、グルタチオン、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルメチルトルエン、トコフェロール、竹の抗酸化剤、Ｄ−イソアスコルビン酸及びそのナトリウム塩、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カルシウム、リン脂質、ビタミンＣ（アスコルビン酸）、ビタミンＥ、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００５２】
別の好ましい実施形態では、保護剤などのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質は、組成物の総重量に基づいて、０．１％〜２％、好ましくは０．５％〜１．５％、より好ましくは０．５％〜１．０％の重量比（ｗｔ％）である。
【００５３】
別の好ましい実施形態では、保護剤などのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質は、組成物１ｇに基づいて、１ｍｇ〜２０ｍｇ、好ましくは５ｍｇ〜１５ｍｇ、より好ましくは５ｍｇ〜１０ｍｇの量である。
【００５４】
第７の態様では、実施形態の本開示は、本開示の第３の態様、又は第４の態様、又は第５の態様、又は第６の態様で定義される組成物を調製するための方法を提供し、前記方法は、
（ｉ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを（ｉｉ）食品として又は薬学的に許容される担体と混合して、本開示の第３の態様、第４の態様、又は第５の態様、又は第６の態様で定義される組成物を生成する工程を含む。
【００５５】
別の好ましい実施形態では、組成物は、保護剤などのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質を更に含む。
【００５６】
別の好ましい実施形態では、保護剤などのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質は、システイン、グルタチオン、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルメチルトルエン、トコフェロール、竹の抗酸化剤、Ｄ−イソアスコルビン酸及びそのナトリウム塩、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カルシウム、リン脂質、ビタミンＣ（アスコルビン酸）、ビタミンＥ、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００５７】
別の好ましい実施形態では、組成物は、経口製剤である。
【００５８】
第８の態様では、実施形態における本開示は、哺乳動物の心筋虚血を緩和するための方法を提供し、前記方法は、本開示の第３の態様、又は第４の態様、又は第５の態様、又は第６の態様で定義される組成物を被験体に投与し、それによって前記哺乳動物の心筋虚血を緩和する工程を含む。
【００５９】
別の好ましい実施形態では、組成物は、経口投与される。
【００６０】
別の好ましい実施形態では、投与量は、１日当たり０．０１〜５ｇ／５０ｋｇ体重、好ましくは１日当たり０．１〜２ｇ／５０ｋｇ体重である。
【００６１】
別の好ましい実施形態では、被験体は、ヒト及び非ヒト哺乳動物を含む。
【００６２】
別の好ましい実施形態では、非ヒト哺乳動物は、マウス及びラットなどのげっ歯類、及びサルなどの霊長類を含む。
【００６３】
別の好ましい実施形態では、方法は、非治療的又は非診断的である。
【００６４】
第９の態様において、実施形態における本開示は、哺乳動物の血中脂質及び体重を減少させるための方法を提供し、前記方法は、本開示の第３の態様、又は第４の態様、又は第５の態様、又は第６の態様で定義される組成物を被験体に投与し、それによって前記哺乳動物の血中脂質及び体重を減少させる工程を含む。
【００６５】
別の好ましい実施形態では、組成物は、経口投与される。
【００６６】
別の好ましい実施形態では、投与量は、１日当たり０．０１〜５ｇ／５０ｋｇ体重、好ましくは１日当たり０．１〜２ｇ／５０ｋｇ体重である。
【００６７】
別の好ましい実施形態では、被験体は、ヒト及び非ヒト哺乳動物を含む。
【００６８】
別の好ましい実施形態では、非ヒト哺乳動物は、マウス及びラットなどのげっ歯類、及びサルなどの霊長類を含む。
【００６９】
別の好ましい実施形態では、方法は、非治療的又は非診断的である。
【００７０】
第１０の態様において、実施形態における本開示は、哺乳動物の血管病変を軽減するための方法を提供し、前記方法は、本開示の第３の態様、又は第４の態様、又は第５の態様、又は第６の態様で定義される組成物を被験体に投与し、それによって前記哺乳動物の血管病変を軽減する工程を含む。
【００７１】
別の好ましい実施形態では、組成物は、経口投与される。
【００７２】
別の好ましい実施形態では、投与量は、１日当たり０．０１〜５ｇ／５０ｋｇ体重、好ましくは１日当たり０．１〜２ｇ／５０ｋｇ体重である。
【００７３】
別の好ましい実施形態では、被験体は、ヒト及び非ヒト哺乳動物を含む。
【００７４】
別の好ましい実施形態では、方法は、非治療的又は非診断的である。
【００７５】
第１１の態様において、実施形態における本開示は、脂質代謝関連疾患を治療及び／又は予防するための方法を提供し、前記方法は、本開示の第３の態様、又は第４の態様、又は第５の態様、又は第６の態様で定義される組成物を被験体に投与し、それによって脂質代謝関連疾患を治療及び／又は予防する工程を含む。
【００７６】
別の好ましい実施形態では、組成物は、経口投与される。
【００７７】
別の好ましい実施形態では、投与量は、１日当たり０．０１〜５ｇ／５０ｋｇ体重、好ましくは１日当たり０．１〜２ｇ／５０ｋｇ体重である。
【００７８】
別の好ましい実施形態では、被験体は、ヒト及び非ヒト哺乳動物を含む。
【００７９】
別の好ましい実施形態では、方法は、非治療的又は非診断的である。
【００８０】
前記した本開示の技術的特徴及び以下に具体的に記載される技術的特徴（実施例など）を互いに組み合わせて、本開示の範囲（紙面の都合上再掲せず）内で新しい又は好ましい技術的解決策を形成できることを理解されたい。
【発明を実施するための形態】
【００８１】
驚くべきことに、本発明者らは、広範且つ徹底的な研究及び実験の後に、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ株が、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、肥満などの脂質代謝関連疾患を予防及び／又は治療する効力を示すことを発見した。実験から、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む活性組成物は、実験被験体に与えることで、血中脂質を大幅に低下させ、体重を減らし、心筋虚血性疾患を緩和する（例えば、哺乳動物の心筋虚血ＳＴセグメントの変位を低減する）ことができ、血管病変を軽減できることが示された。これに基づいて、本発明者らは本開示を完成した。
【００８２】
本明細書で使用される「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、様々な成分が、本開示の混合物又は組成物中に一緒に適用できることを意味する。したがって、「本質的に〜からなる（ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ・・・」及び「〜からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ・・・）」という用語は、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語の範囲に包含される。
【００８３】
本明細書で使用される「成長因子」という用語は、特にビタミン、プリン、ピリミジン、及びそれらの組合せの栄養素を含む乳成長因子を含む。
ここで、ビタミンとしては、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＡ、ビタミンＡ前駆体、ビタミンＢ６、ビタミンＤ３、ビタミンＫ、葉酸、及びそれらの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
プリンとしては、プリンヌクレオシドの５’−リン酸エステルを含むプリンヌクレオシドが挙げられるが、これらに限定されない。プリンヌクレオシドの５’−リン酸エステルは、イノシン酸（イノシン−５’−リン酸エステル；ＩＭＰ）、グアニル酸（グアノシン−５’−リン酸エステル；ＧＭＰ）、キサンチル酸（キサンチン−５’−リン酸エステル；ＸＭＰ）、アデニル酸（アデノシン−５’−リン酸エステル；ＡＭＰ）、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
ピリミジンは、ピリミジン構造を含む全ての物質を含む。
【００８４】
本明細書で使用される「哺乳動物の体重を減少させる」及び「哺乳動物の体重増加を制御する」という用語は、相互変換可能にに使用でき、肥満によって引き起こされる体重増加の症状の治療を意味する。
【００８５】
本明細書で使用される「哺乳動物の血管病変を軽減する」という用語は、アテローム性動脈硬化によって引き起こされる血管病変の症状の治療を意味する。
【００８６】
本開示において、哺乳動物の血管病変の軽減は、血液粘度、血液レオロジー、血中脂質（主にトリグリセリド、総コレステロール、高密度リポタンパク質、及び低密度リポタンパク質）、及び心電計のＳＴセグメントからなる群から選択される１つ以上の指標の改善を含む。
【００８７】
心筋虚血ＳＴセグメント変位
本明細書で使用される「心筋虚血ＳＴセグメント変位」という用語は、主にＳＴセグメントの低下又は上昇として反映される、心電図によって心筋虚血を診断できることを意味する。
【００８８】
本開示のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ及びその用途
本明細書で使用される「Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ株」、「本開示のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ」、及び「Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ」は、相互変換可能に使用することができる。本開示のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、グラム陰性の細長い棒状の偏性嫌気性菌の一種であり、ＤＮＡのＧ＋Ｃ含量が５６ｍｏｌ％であり、そのモデル細菌はヒトの腸管から単離される（Ｓｏｎｇ  Ｙ，  Ｋｏｅｎｏｅｎｅｎ  Ｅ，  Ｒａｕｔｉｏ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ  ｏｎｄｅｒｄｏｎｋｉｉ  ｓｐ．  ｎｏｖ．  ａｎｄ  Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ  ｓｈａｈｉｉ  ｓｐ．  ｎｏｖ．，  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｏｒｉｇｉｎ  ［Ｊ］．  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  ａｎｄ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ  ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，  ２００６，  ５６（８）：  １９８５−１９９０）。
【００８９】
別の好ましい実施形態では、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１７９、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１４０４、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１５５０、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【００９０】
実施形態における本開示は、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、及び肥満などの脂質代謝関連疾患の予防及び／又は治療におけるＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの使用を提供する。本開示のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、
（ｉ）哺乳動物の血中脂質レベルを低下させること；
（ｉｉ）哺乳動物の体重を減少させること；
（ｉｉｉ）哺乳動物の心筋虚血を緩和すること；及び／又は
（ｉｖ）哺乳動物の血管病変を軽減することができる。
【００９１】
本開示の好ましい実施形態によれば、Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットを実験用ラットとして使用し、高脂血症モデリングのために高脂肪飼料が与えることで、高脂血症ラットモデルが得られる。Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉで処理した高脂血症ラットモデルは、未処理モデル対照群（モデル群）と比較して、体重の大幅な減少と、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、肥満などの疾患に関連する指標のレベル、例えば血中脂質レベル、総コレステロールレベル、トリグリセリドレベル、低密度リポタンパク質レベル、及び血液粘度レベルの大幅な低下を示した。
【００９２】
本開示の別の好ましい実施形態によれば、Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットを実験用ラットとして使用し、ピツイトリン（ｐｉｔｕｉｔｒｉｎ）で処理する。Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを投与した後のピツイトリン処理ＳＤラットは、未処理モデル対照群（モデル群）と比較して、心血管疾患に関連する指標（心筋虚血ＳＴセグメント変位）のレベルが大幅に低下した。
【００９３】
したがって、本開示のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、肥満などの脂質代謝関連疾患を予防及び／又は治療することができる。
【００９４】
組成物とその用途
実施形態における本開示は、組成物も提供する。好ましくは、組成物は、食品組成物、ヘルスケア組成物、医薬組成物、飲料組成物、及び飼料組成物を含む。より好ましくは、組成物は、医薬組成物である。組成物は、（ｉ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの有効量である第１の有効成分、及び（ｉｉ）薬学的に許容される担体を含む。
【００９５】
好ましい実施形態では、組成物は、乳成長因子などの成長因子を更に含む。好ましい実施形態では、組成物は、乳酸菌、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、及びそれらの組合せからなる群から選択されるプロバイオティクス；及び／又はフルクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）、ラクトスクロース（ＬＡＣＴ）、大豆オリゴ糖（ＳＯＳ）、イヌリン、オリゴ糖、及びそれらの組合せからなる群から選択されるプレバイオティクスを更に含む。
【００９６】
好ましい実施形態では、組成物は、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質（例えば、保護剤など）を更に含み、この物質は、システイン、グルタチオン、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルメチルトルエン、トコフェロール、竹の抗酸化剤、Ｄ−イソアスコルビン酸及びそのナトリウム塩、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カルシウム、リン脂質、ビタミンＣ（アスコルビン酸）、ビタミンＥ、及びそれらの組合せからなる群から選択される。Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質（例えば、保護剤など）は、組成物の総重量に基づいて、０．１％〜２％、好ましくは０．５％〜１．５％、より好ましくは０．５％〜１．０％の重量比である。
【００９７】
好ましい実施形態では、組成物は、液体製剤、固体製剤、又は半固体製剤である。
【００９８】
好ましい実施形態では、液体製剤は、溶液製品及び懸濁物製品からなる群から選択される。
【００９９】
好ましい実施形態では、組成物の剤形は、粉末、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル、顆粒、懸濁液、溶液、シロップ、ドロップ、及び舌下錠剤からなる群から選択される。
【０１００】
本開示の組成物は、経口液剤、錠剤、注射剤、口腔内崩壊錠、凍結乾燥粉末、及びカプセルのいずれかの形態で、好ましくは腸溶剤（カプセルなど）の剤形で投与することができる。本開示において、本開示において使用される賦形剤、薬学的に許容されるビヒクル、及び担体は、主に、細菌又はその代謝産物に適した性質に応じて選択され、細菌又はその代謝産物が、特別な兆候を示さずに、スムーズに胃を通過し、投与された被験体に吸収されるのに有益である必要な具体的投与手段に応じて選択される。これらの物質は、投与経路に応じて選択することができる。
【０１０１】
本開示の組成物は、例えば、組成物自体の安定化、又は容易に分散され得ること、又は適切な味の付与のために、医薬製剤に一般に使用される追加の賦形剤を更に含むことができる。
【０１０２】
賦形剤のうち、適切な例としては、イヌリン、フルクトース、デンプン、キシロオリゴ糖、二酸化ケイ素、緩衝剤、及び香味剤が挙げられる。
【０１０３】
本開示の医薬製剤は、補助活性成分を更に含むことができる。
【０１０４】
ラクトース、マルトデキストリン、グルコース、スクロース、ソルビトール、マンノース、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、セルロース、水、シロップ、メチルセルロース、ヒドロキシ安息香酸メチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、鉱油などはいずれも、本開示の医薬組成物の担体、賦形剤又は希釈剤として使用することができる。
【０１０５】
更に、本開示の医薬組成物は、滑沢剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁安定剤、防腐剤、甘味剤、風味剤などを更に含むことができる。本開示の医薬組成物は、医薬組成物の活性成分（即ち、微生物）が胃酸によって破壊されることなく胃をスムーズに通過できるように、様々な周知の方法により腸溶性コーティング製剤として製造することができる。
【０１０６】
更に、本開示の微生物は、従来の方法により調製されたカプセルの形態で使用され得る。例えば、本開示の標準的賦形剤及び凍結乾燥微生物を混合して丸剤を調製し、これをその後ゼラチンカプセルに分配する。更に、本開示の微生物及び薬学的に許容される賦形剤（例えば、液体ガム、セルロース、ケイ酸塩、鉱油など）は、懸濁物又は分散物として混合及び調製することができ、そのような懸濁物又は分散物は、ソフトゼラチンカプセルに充填することができる。
【０１０７】
本開示の医薬組成物は、経口使用のための腸溶性コーティング錠剤として調製することができる。本開示における「腸溶性コーティング」という用語は、従来の薬物に許容されるすべてのコーティングを含む。これらのコーティングは胃酸によって分解されないが、小腸で完全に分解され、その後、本開示の微生物を迅速に放出することができる。本開示の腸溶性コーティングは、胃液合成用のＨＣｌ溶液（例えば、ｐＨ＝１など）中で３６℃〜３８℃で２時間超維持することができ、好ましくは腸液合成用の緩衝液（例えば、ｐＨ＝７など）中に１時間以内維持することができる。
【０１０８】
本開示の腸溶性コーティングは、１錠剤当たり約１６〜３０ｍｇ、好ましくは１錠剤当たり１６〜２５ｍｇ、より好ましくは１錠剤当たり１６〜２０ｍｇの量でコーティングされる。本開示における腸溶性コーティングの厚みは、５〜１００μｍ、理想的には２０〜８０μｍである。腸溶性コーティングの成分は、公知の従来のポリマーから選択される。
【０１０９】
本開示の好ましい腸溶性コーティングは、セルロースアセタートフタラートポリマー又はセルロースアセタートトリメリタートポリマーとメタクリル酸とのコポリマー、例えばメタクリル酸とメチルセルロースヒドロキシプロピルフタラート又はそのエステル誘導体とのコポリマーによって調製され、メタクリル酸の量は、４０％超である。
【０１１０】
本開示の腸溶性コーティングで使用されるセルロースアセタートフタラートは、約４５〜９０ｃｐの粘度、１７〜２６％のアセチル含量、及び３０〜４０％のフタル酸含量を有する。腸溶性コーティングに使用されるセルロースアセタートトリメリタートは、約５〜２１ｃｐの粘度、及び１７〜２６％のアセチル含量を有する。Ｅａｓｔｍａｎ  Ｋｏｄａｋ  Ｃｏｍｐａｎｙによって製造されたセルロースアセタートトリメリタートを、本開示における腸溶性コーティング材料として使用することができる。
【０１１１】
本開示の腸溶性コーティングに使用されるヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラートは、一般に、分子量が２０，０００〜１３０，０００ダルトン（理想的には、８０，０００〜１００，０００ダルトン）、ヒドロキシプロピル含量が５〜１０％、メトキシル含量が１８〜２４％であり、フタロイル含量が２１〜３５％である。
【０１１２】
本開示の腸溶性コーティングに使用されるヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラートは、日本の信越化学（Ｃｈｅｍｉｄｎｌ）工業株式会社によって製造されたＨＰ５０である。ＨＰ５０は、６〜１０％のヒドロキシプロピル、２０〜２４％のメトキシ、及び２１〜２７％のプロピルを含み、分子量は８４，０００ダルトンである。別の腸溶性コーティング材料は、ＨＰ５５であり、５〜９％のヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラート、１８〜２２％のメトキシ、及び２７〜３５％のフタル酸を含み、分子量は７８，０００ダルトンである。
【０１１３】
本開示の腸溶性コーティングは、従来の方法によりコアに腸溶コーティング溶液をスプレーすることにより調製される。腸溶性コーティング法のための溶媒は、アルコール（例えば、エタノールなど）、ケトン（例えば、アセトンなど）、ハロゲン化炭化水素化合物（例えば、ジクロロメタンなど）、又はそれらの組合せである。ジ−ｎ−ブチルフタラート及びグリセリルトリアセタートなどの軟化剤は、軟化剤約０．０５部（又は約０．３部）、コーティング１部の比率で腸溶性コーティング溶液に添加される。スプレー法は連続的に実施することが好ましく、スプレー材料の量は、コーティングの条件にしたがって制御することができる。スプレー圧は柔軟に調整でき、通常、平均圧力１〜１．５Ｐａで理想的な結果となる。
【０１１４】
本明細書における「薬理学的に有効な量」とは、ヒト及び／又は動物にとって機能的又は活性であり、ヒト及び／又は動物にとって許容可能な量を意味する。例えば、本開示では、１×１０〜１×１０２０ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ（特に、１×１０４〜１×１０１５ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ、特に、１×１０６〜１×１０１１ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ）のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む製剤を調製することができる。
【０１１５】
Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉが医薬組成物の製造に使用される場合、使用されるＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの有効投与量は、投与経路及び治療される疾患の重症度に応じて異なり得る。内部投与に適した剤形は、約１×１０〜１×１０２０ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ（特に、１×１０４〜１×１０１５ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ、より詳細には１×１０６〜１×１０１１ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ）のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ又は発酵により生成されるその活性成分を、固体又は液体の薬学的に許容される担体と混合されて含む。この投与レジメンは、最良の治療応答を得るために調整できる。例えば、数回に分けた用量を毎日投与する、又は治療状態の緊急の必要性に応じて用量を相対的に減らすことができる。
【０１１６】
Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、経口経路などによって投与することができる。Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの性質と必要な具体的投与手段に適している限り、固体担体は、デンプン、ラクトース、リン酸二カルシウム、微結晶セルロース、スクロース、及び白土を含み、液体担体は、培養培地、ポリエチレングリコール、非イオン性界面活性剤、及び食用油（例えば、トウモロコシ油、落花生油、ゴマ油など）を含む。医薬組成物の製造において一般に使用されるアジュバントも有利に含めることができ、例えば、香味剤、顔料、防腐剤、並びにビタミンＥ、ビタミンＣ、ＢＨＴ、及びＢＨＡなどの抗酸化剤を含めることができる。
【０１１７】
製造及び投与の容易さの観点から、好ましい医薬組成物は、固体組成物、特に錠剤及び固体充填又は液体充填カプセルである。好ましくは、経口投与である。
【０１１８】
本開示の組成物は、１日当たり１回又は数回、個体に投与される。投与量単位は、物理的に分離され、ヒト又は他の哺乳動物の全ての個体への適用に適した用量を意味する。各単位は、薬学的に許容される担体及び本開示の微生物の治療有効量を含む。投与量は、患者の脂質代謝関連疾患（例えば、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、肥満など）の重症度、含まれる補助活性成分、及び使用される微生物によって異なる。更に、可能であれば、組成物は、必要に応じて別々に連続的に投与することができる。したがって、投与量は、本開示の範囲を限定しない。また、本開示における「組成物」とは、薬剤だけでなく、機能性食品又は健康補助食品も意味する。好ましい実施形態では、組成物は、飲料、食品、医薬品、動物飼料などを含む。
【０１１９】
好ましい実施形態では、提供される本開示は、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの有効量と、バランスとしての、食品として許容される担体とを含む食品組成物である。食品組成物の剤形は、固体製品、乳製品、溶液製品、粉末製品、及び懸濁物製品から選択される。好ましい実施形態では、食品組成物は、乳成長因子などの成長因子を更に含むことができる。好ましい実施形態では、組成物は、乳酸菌、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、及びそれらの組合せからなる群から選択されるプロバイオティクス；及び／又はフルクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）、ラクトスクロース（ＬＡＣＴ）、大豆オリゴ糖（ＳＯＳ）、イヌリン、オリゴ糖、及びそれらの組合せからなる群から選択されるプレバイオティクスを更に含む。好ましい実施形態では、組成物は、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質（例えば、保護剤など）を更に含み、この物質は、システイン、グルタチオン、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルメチルトルエン、トコフェロール、竹の抗酸化剤、Ｄ−イソアスコルビン酸及びそのナトリウム塩、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カルシウム、リン脂質、ビタミンＣ（アスコルビン酸）、ビタミンＥ、及びそれらの組合せを含む。
【０１２０】
好ましい実施形態では、組成物は、以下の組成を有する：
１×１０〜１×１０２０ｃｆｕ／ｍＬのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ；及び
食品として又は薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤。
【０１２１】
別の好ましい実施形態では、組成物は、以下の組成を有する：
１×１０６〜１×１０１１ｃｆｕ／ｍＬのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ；及び
食品として又は薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤。
【０１２２】
微生物生態学的製剤
微生物生態学的製剤は、プロバイオティクス又はその代謝産物を含む生物学的製剤、又はプロバイオティクスを供給することができる栄養サプリメントであり、腸内の微生物の生態バランスを調整及び維持することができ、ヒトの健康を改善する目的を達成する。微生物生態学的製剤は、主に、プロバイオティクス、プレバイオティクス、及びシンバイオティクスを含む。
【０１２３】
本開示では、微生物生態学的製剤は、（ａ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの安全且つ有効な量；及び（ｂ）食品として許容される担体又は薬学的に許容される担体を含む。
【０１２４】
好ましい実施形態では、製剤は、好ましくはビタミン、プリン、及び／又はピリミジンを含む乳成長因子などの成長因子を含む。好ましい実施形態では、製剤は、乳酸菌、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、及びそれらの組合せからなる群から選択されるプロバイオティクス；及び／又はフルクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）、ラクトスクロース（ＬＡＣＴ）、大豆オリゴ糖（ＳＯＳ）、イヌリン、オリゴ糖、及びそれらの組合せからなる群から選択されるプレバイオティクスを更に含む。好ましい実施形態では、組成物は、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質（例えば、保護剤など）を更に含み、この物質は、システイン、グルタチオン、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルメチルトルエン、トコフェロール、竹の抗酸化剤、Ｄ−イソアスコルビン酸及びそのナトリウム塩、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カルシウム、リン脂質、ビタミンＣ（アスコルビン酸）、ビタミンＥ、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【０１２５】
Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの培養物
本開示において、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、改良されたミンチ肉培養培地（ＡＴＣＣ培地１４９０）にて３７℃で４８〜７８時間嫌気培養される。
【０１２６】
哺乳動物の心筋虚血を緩和するための方法
別の好ましい実施形態では、方法は、本開示の医薬組成物、食品組成物、飲料組成物、又はそれらの組合せを摂取することを含む。実験の被験体は、ヒトなどの哺乳動物を含む。
【０１２７】
別の好ましい実施形態では、方法は、本開示の医薬組成物、食品組成物、動物飼料、又はそれらの組合せを摂取することを含む。実験の被験体は、動物、好ましくはマウス又はウサギを含む。
【０１２８】
哺乳動物の血中脂質と体重を減少させるための方法
別の好ましい実施形態では、方法は、本開示の医薬組成物、食品組成物、飲料組成物、又はそれらの組合せを摂取することを含む。実験の被験体は、ヒトなどの哺乳動物を含む。
【０１２９】
別の好ましい実施形態では、方法は、本開示の医薬組成物、食品組成物、動物飼料、又はそれらの組合せを摂取することを含む。実験の被験体は、動物、好ましくはマウス又はウサギを含む。
【０１３０】
哺乳動物の血管病変を軽減するための方法
別の好ましい実施形態では、方法は、本開示の医薬組成物、食品組成物、飲料組成物、又はそれらの組合せを摂取することを含む。実験の被験体は、ヒトなどの哺乳動物を含む。
【０１３１】
別の好ましい実施形態では、方法は、本開示の医薬組成物、食品組成物、動物飼料、又はそれらの組合せを摂取することを含む。実験の被験体は、動物、好ましくはマウス又はウサギを含む。
【０１３２】
脂質代謝関連疾患を治療及び／又は予防するための方法
別の好ましい実施形態では、方法は、本開示の医薬組成物、食品組成物、飲料組成物、又はそれらの組合せを摂取することを含む。実験の被験体は、ヒトなどの哺乳動物を含む。
【０１３３】
別の好ましい実施形態では、方法は、本開示の医薬組成物、食品組成物、動物飼料、又はそれらの組合せを摂取することを含む。実験の被験体は、動物、好ましくはマウス又はウサギを含む。
【０１３４】
本開示の利点としては、主に、以下が挙げられる。
（ａ）本開示のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、肥満などの脂質代謝関連疾患を有意に治療及び／又は予防することができる。
（ｂ）本開示のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、体重及び総コレステロール、トリグリセリド、低密度リポタンパク質などの血中脂質、並びに血液粘度を有意に低減することができる。
（ｃ）本開示のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、心筋虚血を有意に緩和することができる。
（ｄ）本開示のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉは、血管病変を有意に軽減することができる。
【０１３５】
本開示を、特定の実施形態を参照しつつ、以下に更に記載する。これらの例は、本開示を説明するためだけのものであり、本開示の範囲を限定することを意図するものではないことを理解されたい。以下の実施例で具体的に示されていない実験方法の条件は、通常、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，  １９８９）に記載されている従来の条件、若しくはＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ：Ａｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ（Ｐｅａｒｓｏｎ  Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｊａｍｅｓ  Ｃａｐｐｕｃｃｉｎｏ及びＮａｔａｌｉｅ  Ｓｈｅｒｍａｎ編集）に記載されている従来の条件、又は製造業者により提案される条件にしたがう。
【０１３６】
特段の断りがない限り、実施例で使用される材料及び剤は、いずれも市販品である。
【０１３７】
ＴｏｎｇＭａｉＪｉａｎｇＺｈｉＰｉａｎは、Ｚ２２０２４９８４の承認番号で、Ｊｉｌｉｎ  Ｂａｉｘｉｎｇｔａｎｇ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．によって製造されている。
【０１３８】
ＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎは、Ｚ２１０２０３８１の承認番号で、Ｔｉａｎｊｉｎ  Ｔｉａｎｓｈｉｌｉ  （遼寧省）  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．によって製造されている。
【実施例】
【０１３９】
実施例１：高脂血症ラットモデルにおけるＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの治療効果
Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１７９（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  ８３０１とも称される）（細菌剤１）は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から購入した。Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１４０４（細菌剤２）及びＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１５５０（細菌剤３）は、Ｗａｄｓｗｏｒｔｈ  Ａｎａｅｒｏｂｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＵＳＡ（Ｓｏｎｇ，  Ｙ．，  Ｋｏｅｎｏｅｎｅｎ，  Ｅ．，  Ｒａｕｔｉｏ，  Ｍ．，  Ｌｉｕ，  Ｃ．，  Ｂｒｙｋ，  Ａ．，  Ｅｅｒｏｌａ，  Ｅ．，  ＆  Ｆｉｎｅｇｏｌｄ，  Ｓ．  Ｍ．  （２００６）．  Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ  ｏｎｄｅｒｄｏｎｋｉｉ  ｓｐ．  ｎｏｖ．  ａｎｄ  Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ  ｓｈａｈｉｉ  ｓｐ．  ｎｏｖ．，  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｏｒｉｇｉｎ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  ａｎｄ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ  ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，  ５６（８），  １９８５−１９９０）。細菌剤はそれぞれ、改良されたミンチ肉培養培地（ＡＴＣＣ培地１４９０）にて３７℃で４８〜７８時間嫌気培養した。１６Ｓ  ｒＤＮＡシーケンシングによる同定後に実験を開始した。表１は、株の情報を示す。
【０１４０】
表１  株の情報
【表１】
2020531562.tif 000002
【０１４１】
Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｎｔｅｒから購入したＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットを実験で使用した。ＳＤラットは、６週齢のラットであり、特定病原体フリー（ＳＰＦ）レベルの環境で通常の給餌をした。合計７０頭のＳＤラットを購入し、１週間順応的に給餌した後、モデル対照群、細菌剤群１、細菌剤群２、細菌剤群３、ＴｏｎｇＭａｉＪｉａｎｇＺｈｉＰｉａｎ群（ＴｏｎｇＭａｉＪｉａｎｇＺｈｉＰｉａｎは、高脂血症の治療に有効な薬剤）、及び正常対照群を含む６つの群に、各群ラット１０頭ずつランダムに分けた。群分け後の細菌剤群１、細菌剤群２、細菌剤群３、ＴｏｎｇＭａｉＪｉａｎｇＺｈｉＰｉａｎ群、及びモデル対照群には、高脂血症モデルの構築のために、それぞれ高脂肪飼料（基本飼料７８．８％、コレステロール１％、卵黄粉末１０％、ラードオイル１０％、胆汁酸塩０．２％（Ｔｒｏｐｈｉｃ  Ａｎｉｍａｌ  Ｆｅｅｄ  Ｈｉｇｈ−Ｔｅｃｈ  Ｃｏ．  Ｌｔｄ（南通市）から購入）を給餌し、正常対照群にはＧｕａｎｇｄｏｎｇ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｎｔｅｒから購入した通常の飼料を与えた。実験は、モデリングと介入の組合せにより実施した。この実験では、細菌剤群１、細菌剤群２、細菌剤群３の調製済み活性細菌の濃度を、１０９ｃｆｕ／ｍｌ、ＴｏｎｇＭａｉＪｉａｎｇＺｈｉＰｉａｎ群の投与量を１日当たり０．６ｇ／ｋｇとした。バクテリアの不活化又は死滅を防ぐために、細菌溶液を１日おきに新鮮な培地と交換した。バクテリア溶液は、嫌気性条件下にて４℃で保存した。実験開始時、関連するラットに高脂肪飼料を与える一方で、細菌剤を介在させた。具体的には、細菌剤群１、細菌剤群２、及び細菌剤群３には、１日当たり２ｍｌの細菌溶液を胃内投与し、モデル対照群には、１日当たり２ｍｌのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を胃内投与し、ＴｏｎｇＭａｉＪｉａｎｇＺｈｉＰｉａｎ群には、１日当たり０．６ｇ／ｋｇの薬剤ＴｏｎｇＭａｉＪｉａｎｇＺｈｉＰｉａｎを投与した。ラットについて、モデル化及び介入の前後に毎週、体重、身体状態、摂取量などを含むデータを記録した。実験終了後、ラットを屠殺し、脂肪含量を記録し、キットの説明書を参照して血清中の血中脂質含量（総コレステロール（ＴＣ）、トリグリセリド（ＴＧ）、高密度リポタンパク質（ＨＤＬＣ）、及び低密度リポタンパク質（ＬＤＬＣを含む）を測定するため血清を採取した。血液レオロジーの検出のためにラットを屠殺する前に、ラットの血液を頸動脈にて採取した。
【０１４２】
実験結果は以下の通りである。
１．肥満ラットモデルの体重に対するプロバイオティック細菌剤の効果
表２  肥満ラットの体重に対する細菌剤１、２、及び３の効果
【表２】
2020531562.tif 000003
【０１４３】
表２のデータは、実験の進行に伴ってラットの体重が徐々に増加することを示す。ここで、高脂肪を与えられた全てのラットの体重増加は、正常群のラットの体重増加よりも高い。正常群の体重は、５週目のモデル群の体重よりも有意に低い（▲Ｐ＜０．０５）。正常群とモデル群の体重差は、９週目で有意に広がる（▲▲▲Ｐ＜０．０００１）。細菌剤群（細菌剤群２及び３）のラットの体重は、７週目にモデル群の体重と異なり始めた（＊Ｐ＜０．０５）。３種類の細菌剤群のラットの体重は、９週目でモデル群の体重とより有意に異なり、細菌剤群２はより有意な差を示した（＊＊Ｐ＜０．０１）。細菌剤群はいずれも、ＴｏｎｇＭａｉＪｉａｎｇＺｈｉＰｉａｎ群よりも優れた効果を示し、細菌剤１、２、及び３の介入がラットの体重増加を有意に制御できることを示している。
【０１４４】
２．肥満ラットモデルの血中脂質に対するプロバイオティック細菌剤の効果
表３．肥満ラットの血中脂質に対する細菌剤１、２、及び３の効果
【表３】
2020531562.tif 000004
【０１４５】
結果は、細菌剤１、２、及び３の介入により、モデル群に対して、ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬＣ、及び血液中の血液粘度の各レベルを効果的に制御できる（＊Ｐ＜０．０５）こと、細菌剤群１、２、及び３は、ＴｏｎｇＭａｉＪｉａｎｇＺｈｉＰｉａｎ群よりも優れた効果を示す。血中脂質の主成分はコレステロールとトリグリセリドであり、血漿中のコレステロールとトリグリセリドのレベルの増加がアテローム性動脈硬化症の発生と密接に関係していることが知られている。細菌剤１、２、及び３はいずれも、血中脂質を低下させ、血液粘度を有意に低下させることができ、これにより、血液の高粘性及び凝固亢進状態を効果的に防ぎ、血液レオロジーを改善し、血管病変を軽減する。したがって、細菌性薬剤１、２、及び３は、アテローム性動脈硬化症関連疾患及び心血管疾患に関連する指標のレベルを低下させることができる。
【０１４６】
実施例２：ラットの実験的心筋虚血に対するＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの効果
２．１  実験材料
２．１．１  試験薬
Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から購入したＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１７９（別名：Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  ８３０１）（細菌剤１）、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１４０４（細菌剤２）、及びＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１５５０（細菌剤３）をこの実施例で用い、細菌剤の製造及び用量は実施例１と同じとした。一方、ＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎ（Ｚ２１０２０３８１の承認番号で、Ｔｉａｎｊｉｎ  Ｔｉａｎｓｈｉｌｉ  （遼寧省）  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．により製造）を対照薬として使用した。ピツイトリン、即ち、ピツイトリン注射剤は、Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｎｏ：１  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．によって製造されており、承認番号はＨ３１０２２２５９、仕様は２ｍｌ：６単位である。
【０１４７】
２．１．２  実験動物
Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｎｔｅｒから購入したＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットを実験で使用した。ＳＤラットは、６週齢のラットであり、特定病原体フリー（ＳＰＦ）レベルの環境で通常の給餌をした（合計７０頭のラット）。
【０１４８】
２．１．３  実験手順
ピツイトリンにより誘発されたラットにおける急性心筋虚血の効果
体重１８０〜２２０ｇの５０頭のＳＤラット（半数が雌、半数が雄）を、モデル群、ＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎ群、細菌剤群１、細菌剤群２、及び細菌剤群３に、各群ラット１０頭ずつランダムに分けた。ＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎ群と各細菌剤群には、１日１回胃内投与し、ＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎ群の投与量を１日当たり２ｇ／ｋｇとし、各細菌剤群の投与量は、１０９ｃｆｕ／ｍｌの細菌濃度の細菌溶液２ｍｌとした。モデル群には、同量のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を１０日間連続して投与した。各群について、標準のリードＩ心電図を最終投与の１時間後に記録し、１５秒間以内に１単位／ｋｇ（１ｍｌ／ｋｇの量）のピツイトリンを舌下静脈内注射（ｉｖ．）し、その後、心電図の変化を５秒間後、１５秒間後、３０秒間後、１分間後、２分間後、３分間後、及び５分間後に記録し、ピツイトリン投与前後のＳＴセグメント変位の変化を測定、比較し、ｔ検定を用いて群間で統計分析した。具体的な実験結果を表４に示す。
【０１４９】
表４．ピツイトリンにより誘発されたラットの心筋虚血ＳＴセグメント変位に対する細菌剤とＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎの効果
【表４】
2020531562.tif 000005
【０１５０】
表の統計によれば、本開示で提供される３種の細菌剤群はいずれも、モデル群に対してラットの心筋虚血ＳＴセグメント変位を効果的に減少させることができ（＊＊Ｐ＜０．０１、＊Ｐ＜０．０５）、本開示で提供される細菌剤は、心筋虚血に対して優れた緩和及び保護効果を有し、その効果はＦｕＦａｎｇＤａｎＳｈｅｎＰｉａｎ群の効果よりも優れている。
【０１５１】
実施例３  Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む食品組成物
原材料を表５に示した。
【表５】
2020531562.tif 000006
【０１５２】
組成１〜３における細菌成分は、それぞれＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１７９、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１４０４、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１５５０を含む単一の細菌成分とし、組成１〜３は、それぞれ細菌成分をそれぞれ含む３種類の組成を意味し、組成１、組成２、及び組成３と名付ける。
【０１５３】
前記組成の割合でミルクと糖を混合し、完全な混合物まで攪拌し、予熱し、２０Ｍｐａの圧力でホモジナイズし、次いで、約９０℃で５〜１０分間滅菌し、４０〜４３℃に冷却した後、保護剤（ビタミンＣ）を添加し、１〜１００×１０６ｃｆｕ／ｇの細菌成分の接種を行うことにより、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉなどの細菌成分を含む食品組成物を得る。
【０１５４】
実施例４  Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む医薬組成物
原材料を表６に示した。
【表６】
2020531562.tif 000007
【０１５５】
組成１〜３の細菌成分は、それぞれＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１７９、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１４０４、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１５５０を含む単一の細菌成分とした。各割合のラクトース、イーストパウダー、及びペプトンを精製水と混合して均一にし、６０〜６５℃に予熱し、２０Ｍｐａの圧力でホモジナイズし、その後、約９０℃で２０〜３０分間滅菌し、３６〜３８℃に冷却し、その後、ビタミンＣを添加し、１〜５０×１０６ｃｆｕ／ｍＬの活性株Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを接種し、その後、３６〜３８℃でｐＨ６．０まで発酵させ、遠心分離し、含水率３％未満まで凍結乾燥し、細菌成分を含む凍結乾燥製品を得た。細菌成分を含む凍結乾燥製品０．５ｇを秤量し、等量のマルトデキストリンと保護剤（例えば、ビタミンＣなど）と混合し、カプセル状にカプセル化することにより、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉなどの細菌成分を含む医薬組成物を得た。
【０１５６】
実施例５  脂質代謝関連疾患（冠状動脈性心疾患など）を治療するためのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む薬剤の製造
５．１  細菌溶液の調製
Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ（１×１０９ｃｆｕ／ｍｌ）を嫌気性ＰＹＧ培地にて３７℃で２〜３日間嫌気的に発酵させた。
５．２  成長因子の調製
脱脂乳とカゼインを混合し、遠心分離し、限外濾過して、ビタミン、プリン、及び／又はピリミジンの栄養素を含む乳成長因子の粗抽出物を得た。
５．３  医薬又は医薬剤形の製造
５容量（ｍｌ）の成長因子と１容量（ｍｌ）の保護剤（例えば、ビタミンＣなど）を１００容量（ｍｌ）のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの発酵後細菌溶液に添加し、均一になるまで十分に攪拌し、その後、デンプン賦形剤（例えば、マルトデキストリンなど）を添加することによって、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む医薬又は医薬剤形を得た。
【０１５７】
本明細書中に言及される刊行物はいずれも、各文献が、本出願において参照として引用されているかのように、参照により援用される。本開示の前記教示を読めば、当業者は、様々な変更又は修正を行うことができ、それらの等価物は、添付の請求項に定義される特許請求の範囲に含まれることも理解されたい。
【手続補正書】
【提出日】令和2年3月6日(2020.3.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
脂質代謝関連疾患の予防及び／又は治療における使用のためのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ及び／又はその代謝産物。
【請求項２】
前記脂質代謝関連疾患が、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、肥満、及びそれらの組合せからなる群から選択される請求項１に記載の使用のためのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ及び／又はその代謝産物。
【請求項３】
前記Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉが、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１７９、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１４０４、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ  ＷＡＬ  １１５５０、及びそれらの組合せからなる群から選択される請求項１から２のいずれかに記載の使用のためのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ及び／又はその代謝産物。
【請求項４】
以下からなる群から選択される１つ以上を行うことができる請求項１から３のいずれかに記載の使用のためのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ及び／又はその代謝産物：
（ｉ）哺乳動物の血中脂質レベルを低下させること；
（ｉｉ）哺乳動物の体重を減少させること；
（ｉｉｉ）哺乳動物の心筋虚血を緩和すること；及び
（ｉｖ）哺乳動物の血管病変を軽減すること。
【請求項５】
（ａ）Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ及び／又はその代謝産物の安全且つ有効な量；及び
（ｂ）食品として又は薬学的に許容される担体を含むことを特徴とする脂質代謝関連疾患の治療及び／又は予防に使用するための組成物。
【請求項６】
前記脂質代謝関連疾患が、アテローム性動脈硬化症関連疾患、心血管疾患、肥満、及びそれらの組合せからなる群から選択される請求項５に記載の使用のための組成物。
【請求項７】
前記Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉが、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ ＡＴＣＣ ＢＡＡ−１１７９、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ ＷＡＬ １１４０４、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ ＷＡＬ １１５５０、及びそれらの組合せからなる群から選択される請求項５から６のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項８】
前記Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉが、以下からなる群から選択される１つ以上を行うことができる請求項５から７のいずれかに記載の使用のための組成物：
（ｉ）哺乳動物の血中脂質レベルを低下させること；
（ｉｉ）哺乳動物の体重を減少させること；
（ｉｉｉ）哺乳動物の心筋虚血を緩和すること；及び
（ｉｖ）哺乳動物の血管病変を軽減すること。
【請求項９】
前記組成物が、被験体に投与され、それによって前記被験体の前記脂質代謝関連疾患を治療及び／又は予防され、
好ましくは、前記組成物は、経口投与され、
任意に、投与量が、１日当たり０．０１〜５ｇ／５０ｋｇ体重、好ましくは１日当たり０．１〜２ｇ／５０ｋｇ体重であり、
任意に、前記被験体が、ヒト及び非ヒト哺乳動物を含み、
好ましくは、前記非ヒト哺乳動物が、マウス及びラットなどのげっ歯類、及びサルなどの霊長類を含む請求項５から８のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項１０】
前記組成物が、プロバイオティクス及び／又はプレバイオティクスを更に含み、
好ましくは、前記プロバイオティクスが、乳酸菌、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、及びそれらの組合せからなる群から選択され、
好ましくは、前記プレバイオティクスが、フルクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）、ラクトスクロース（ＬＡＣＴ）、大豆オリゴ糖（ＳＯＳ）、イヌリン、オリゴ糖、及びそれらの組合せからなる群から選択される請求項５から９のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質を更に含み、
好ましくは、前記Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質が、システイン、グルタチオン、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルメチルトルエン、トコフェロール、竹の抗酸化剤、Ｄ−イソアスコルビン酸及びそのナトリウム塩、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カルシウム、リン脂質、ビタミンＣ（アスコルビン酸）、ビタミンＥ、及びそれらの組合せからなる群から選択され、
好ましくは、前記Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質が、前記組成物の総重量に基づいて、０．１％〜２％、好ましくは０．５％〜１．５％、より好ましくは０．５％〜１．０％の重量比（ｗｔ％）であり、
好ましくは、前記Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質が、前記組成物１ｇに基づいて、１ｍｇ〜２０ｍｇ、好ましくは５ｍｇ〜１５ｍｇ、より好ましくは５ｍｇ〜１０ｍｇの量である請求項５から１０のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項１２】
前記組成物が、前記組成物の総体積又は総重量に基づいて、１０〜１×１０１５ｃｆｕ／ｍＬ又はｃｆｕ／ｇのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ、好ましくは１×１０４〜１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬ又はｃｆｕ／ｇのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含み、
任意に、前記組成物が、前記組成物の総重量に基づいて、０．０００１ｗｔ％〜９９ｗｔ％、好ましくは０．１ｗｔ％〜９０ｗｔ％のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む請求項５から１１のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項１３】
前記組成物が、１つの錠剤、１つのカプセル、又は１つのバイアルの単位剤形であり、各単位剤形中の前記組成物が、０．０５ｇ〜５ｇ、好ましくは０．１ｇ〜１ｇの質量である請求項５から１２のいずれかに記載の使用のための組成物。
【請求項１４】
請求項５から１３のいずれかに記載の組成物を調製するための方法であって、
（ｉ）請求項１から１３のいずれかに記載の使用のためのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ及び／又はその代謝産物を（ｉｉ）食品として又は薬学的に許容される担体と混合して、請求項５から１３のいずれかに記載の組成物を生成する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項１５】
前記組成物が、Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの生存率を維持することができる物質を更に含む請求項１４に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４４】
別の好ましい実施形態では、組成物は、組成物の総体積又は総重量に基づいて、１０〜１×１０１５ｃｆｕ／ｍＬ又はｃｆｕ／ｇのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ、好ましくは１×１０４〜１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬ又はｃｆｕ／ｇのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１２】
本開示の腸溶性コーティングに使用されるヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラートは、日本の信越化学工業株式会社によって製造されたＨＰ５０である。ＨＰ５０は、６〜１０％のヒドロキシプロピル、２０〜２４％のメトキシ、及び２１〜２７％のプロピルを含み、分子量は８４，０００ダルトンである。別の腸溶性コーティング材料は、ＨＰ５５であり、５〜９％のヒドロキシプロピル、１８〜２２％のメトキシ、及び２７〜３５％のフタル酸を含み、分子量は７８，０００ダルトンである。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１４】
本明細書における「薬理学的に有効な量」とは、ヒト及び／又は動物にとって機能的又は活性であり、ヒト及び／又は動物にとって許容可能な量を意味する。例えば、本開示では、１０〜１×１０２０ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ（特に、１×１０４〜１×１０１５ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ、特に、１×１０６〜１×１０１１ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ）のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉを含む製剤を調製することができる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１５】
Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉが医薬組成物の製造に使用される場合、使用されるＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉの有効投与量は、投与経路及び治療される疾患の重症度に応じて異なり得る。内部投与に適した剤形は、約１０〜１×１０２０ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ（特に、１×１０４〜１×１０１５ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ、より詳細には１×１０６〜１×１０１１ｃｆｕ／ｍｌ又はｃｆｕ／ｇ）のＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ又は発酵により生成されるその活性成分を、固体又は液体の薬学的に許容される担体と混合されて含む。この投与レジメンは、最良の治療応答を得るために調整できる。例えば、数回に分けた用量を毎日投与する、又は治療状態の緊急の必要性に応じて用量を相対的に減らすことができる。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２０】
好ましい実施形態では、組成物は、以下の組成を有する：
１０〜１×１０２０ｃｆｕ／ｍＬのＡｌｉｓｔｉｐｅｓ ｓｈａｈｉｉ；及び
食品として又は薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤。
【手続補正書】
【提出日】令和2年3月18日(2020.3.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
別の好ましい実施形態では、組成物の剤形は、粉末、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル、顆粒、懸濁液、溶液、シロップ、ドロップ、舌下錠剤、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９９】
好ましい実施形態では、組成物の剤形は、粉末、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル、顆粒、懸濁液、溶液、シロップ、ドロップ、舌下錠剤、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
【国際調査報告】
2020531562.tif 000008
2020531562.tif 000009
2020531562.tif 000010
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