(57)【要約】  本発明は、CD19を発現している癌性Ｂ細胞の治療のための抗CD19抗体を含む新規併用療法に関する。１つの好ましい方法は、抗CD19アポトーシス促進性MAbまたはFc最適化アポトーシス促進性ヒト化MAbを使用する方法である。本発明の方法では、リツキサン（登録商標）等のいくつかの抗CD20薬、またはビンクリスチン等の化学療法薬が併用療法において使用され得る。本発明の方法は、より詳しくは、全てのびまん大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）亜型および濾胞性リンパ腫（FL）において、CD19陽性Ｂ細胞レベルを減少させる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗CD19抗体を含む医薬組成物であって、治療を必要とする患者においてCD19を発現しているびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）を治療するために用いられ、
(i) VHおよびVLアミノ酸配列が表1に示される、抗体R005-1、R005-2またはIDD001のいずれか１つのCDR
【表１】
2020526568.tif 000021
(ii) 変異型ヒトIgG1 Fc領域であって、この変異型領域が、ヒトIgG Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここでFc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatの番号付けである、変異型ヒトIgG1 Fc領域、
を含む、抗CD19抗体を含む医薬組成物。
【請求項２】
治療を必要とする患者においてCD19を発現しているびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）の治療に用いるための併用剤であって、
(1) (i) VHおよびVLアミノ酸配列が表2に示される、抗体R005-1、R005-2またはIDD001のいずれか１つのCDR
【表２】
2020526568.tif 000022
(ii) 変異型ヒトIgG1 Fc領域であって、この変異型領域はヒトIgG Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここでFc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatの番号付けである、変異型ヒトIgG1 Fc領域、
を含む抗CD19抗体と、
(2) ビンカアルカロイド系の化学療法薬、
との併用剤。
【請求項３】
前記化学療法薬がビンクリスチンである、請求項２の使用のための併用剤。
【請求項４】
DLBCL亜型GCB、ABC、またはABC/GCBを治療するために用いられる、請求項２または３の使用のための併用剤。
【請求項５】
前記抗体と前記化学療法薬の併用剤の使用が同時、個別または連続である、DLBCL亜型ABCまたはGCBまたはABC/GCBを治療するためにビンクリスチンと併用して用いられる、請求項２〜４のいずれか一項の使用のための併用剤。
【請求項６】
前記ビンクリスチンと併用される抗CD19抗体が、いずれかの単剤と比較してより高い退縮率をもたらす、請求項２〜５のいずれか一項の使用のための併用剤。
【請求項７】
治療を必要とする患者においてCD19とCD20を発現している濾胞性リンパ腫（FL）の治療に用いるための併用剤であって、
(1) (i) VHおよびVLアミノ酸配列が表3に示される、抗体R005-1、R005-2またはIDD001のいずれか１つのCDR
【表３】
2020526568.tif 000023
(ii) 変異型ヒトIgG1 Fc領域であって、この変異型領域が、ヒトIgG Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここでFc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatのものである、変異型ヒトIgG1 Fc領域、
を含む抗CD19抗体と、
(2) 抗CD20抗体、
との併用剤。
【請求項８】
前記抗20抗体が、リツキサンである、請求項８の使用のための併用剤。
【請求項９】
前記２つの抗体の併用剤が、単剤と比較してより高い退縮率または寛解率をもたらす、請求項７または８の使用のための併用剤。
【請求項１０】
前記抗CD19抗体が表4に示されるVHおよびVLアミノ酸配列を含む、請求項２〜９のいずれか一項の使用のための併用剤。
【表４】
2020526568.tif 000024
【請求項１１】
前記抗体が、Phe243がLeuにより置換され、Arg292がProにより置換され、Tyr300がLeuにより置換され、Val305がLeuまたはIleにより置換され、Lys326がAlaにより置換され、そしてPro396がLeuにより置換されているFc領域を含む、請求項１〜10のいずれか一項の使用のための組成物または併用剤。
【請求項１２】
前記抗体が、Phe243がLeuにより置換され、Arg292がProにより置換され、Tyr300がLeuにより置換され、Val305がLeuまたはIleにより置換され、Lys326がAlaにより置換され、Pro396がLeuにより置換され、そしてGlu333がAlaにより置換されているFc領域を含む、請求項１〜10のいずれか一項の使用のための組成物または併用剤。
【請求項１３】
以下の表5;
【表５】
2020526568.tif 000025
に示されるCDRを有するヒト化モノクローナル抗CD19抗体。
【請求項１４】
配列番号39のVH配列１〜121と配列番号37のVL配列１〜103とを有する、請求項13のヒト化モノクローナル抗CD19抗体。
【請求項１５】
配列番号39の重鎖と配列番号37の軽鎖とを有する、請求項13のヒト化モノクローナル抗CD19抗体。
【請求項１６】
治療を必要とする患者においてびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）を治療する方法であって、有効量の請求項1もしくは2に記載の医薬組成物、または有効量の請求項13〜15のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体を投与することを含む方法。
【請求項１７】
治療を必要とする患者において濾胞性リンパ腫（FL）を治療する方法であって、有効量の請求項7に記載の医薬組成物と有効量の抗CD20モノクローナル抗体とを投与することを含む方法。
【請求項１８】
治療を必要とする患者において濾胞性リンパ腫（FL）を治療する方法であって、有効量の請求項13〜15のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体を投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
〔発明の分野〕
【０００２】
本発明は、抗体を用いるまたは抗体と化学療法薬を用いる併用療法の分野に関する。特に、本発明は、CD19陽性Ｂ細胞悪性の治療における、より詳しくは、別の抗体および／または化学療法薬と併用した、CD19を発現しているびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）および濾胞性リンパ腫（FL）の治療における、好ましくは非フルコシル化型のアポトーシス促進性抗CD19抗体の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
〔発明の背景〕
【０００４】
外科手術、化学療法、ホルモン療法および／または放射線療法は、癌と戦う一般的な治療方法である。この10年間、生物学的療法または免疫療法の使用も採用されている。未だに、多くの腫瘍は現行療法に対して部分的にしか応答せず、耐性の症例も発生している。従って、代替的な癌療法が強く要望されている。
【０００５】
Ｂ細胞型の非ホジキンリンパ腫（NHL）には、小リンパ球性／Ｂ細胞慢性白血病（SLL／B-CLL）、リンパ形質細胞性リンパ腫（LPL）、マントル細胞リンパ腫（MCL）、濾胞性リンパ腫（FL）、びまん性大細胞型リンパ腫（DLBCL）およびバーキットリンパ腫（BL）が含まれる（Armitage他、2017、pii: S0140-6736(16)32407-2）。
【０００６】
濾胞性リンパ腫（FL）は、非ホジキンリンパ腫（NHL）の２番目に多い型であり、全リンパ腫の10％〜20％を占める。FLは典型的には55〜60歳の年齢の個体に影響を及ぼす。FLは幾つかのリンパ節部位における無痛性の浸潤により特徴づけられ、症例の約70％が骨髄の浸潤を伴う。単剤として用いられるまたは第一選択化学療法と併用されるリツキシマブは、FLの標準療法である。FLは処置に対して高頻度で応答するが、治療効果が仮にあったとしても治癒は非常にまれである。
【０００７】
予後を改善する別の試みにおいて、MAbは別の分子と組み合わせて試験されている。例えば、抗CD19 Mabは、非ホジキンリンパ腫の治療のため、プリン類似体（フルダラビン）、ブルトン型チロシンキナーゼ阻害剤（イブルチニブ）またはホスホイノシチド３−キナーゼ阻害剤（イデラリシブ）と併用した時の相乗効果について評価されている（それぞれ国際公開WO 2013024095号、WO 2016189014号およびWO 2017032679号公報）。
【０００８】
リツキシマブと併用した抗CD19メイタンシノイド免疫複合体（SAR3419）によるDLBCLの処置が、DLBCLの普及モデルにおいて研究された（対応特許 WO 2013017540）。SAR3419とリツキシマブでの処置後に観察される、単剤処置対象を上回る生存率の改善については、全く統計的有意差が認められなかった。
【０００９】
別の試験（対応特許 WO 2012067981）において、非フコシル化抗CD19 MAb（16C4-afuc MAb）の単独でのまたは抗CD20抗体と併用した効能が研究された。16C4-afuc Abは、CDC（補体依存性細胞傷害）ではなくADCC（抗体依存性細胞傷害）を介して、CD19発現細胞の細胞死を誘導することが証明された。Ｂ細胞リンパ腫を治療するために抗16C4-afuc MAbと抗CD20 Mabの併用療法が検討された。併用療法により付与される、いずれかの剤の単剤療法を上回る抗腫瘍活性の存続期間の延長が、全てではないが一部のバーキットモデルにおいて宣言されたが、一方で他のＢ細胞腫（DLBCLとALL）の提示モデルではより控えめであった。また、実験結果は、MAb抗CD19と抗CD20による併用療法が腫瘍の完全寛解を誘導することができたと実証していない。
【００１０】
従って、Ｂ細胞関連腫瘍を罹患している患者において腫瘍の退縮と寛解を誘導できる併用療法のために、抗CD20 MAbと組み合わせて十分に機能できる抗CD19 MAb 19の同定が役立つだろう。
【００１１】
遺伝子発現プロファイリングの分析に基づいて、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）の２つの主な亜型が同定された：胚中心Ｂ細胞様（GCB）および活性型Ｂ細胞様（ABC）亜型。GCB-DLBCLは胚中心分化のCD10、BCL6および他のマーカーの発現の増加に相関する。GCB-DLBCLの予後はABC-DLBCLのそれよりも良好であるが、GCB-DLBCLの30％は、治療の中心であるR-CHOPレジメン（リツキシマブ、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニソンの多剤併用療法）により治療することはできない。ABC-DLBCLは、NF-κBシグナル伝達経路の構成的活性化により特徴づけられる。幾つかの臨床試験は、R-CHOP療法をボルテゾミブ（NF-κB活性化を抑制するプロテアソーム阻害剤）かまたはレナリドミド（IFN-β産生の誘導剤）のいずれかと併用するとABC DLBCL患者に予後の改善が認められることを示している（Khan N他、2015、Blood 126(16):1869-70）。
【００１２】
Ｂ細胞関連腫瘍を有する患者、例えばFLやDLBCL患者において腫瘍退縮および／または寛解を誘導することができる併用療法にいまだに強いニーズがある。
【発明の概要】
【００１３】
本発明は、治療を必要とする患者において、C19および場合によりCD20を発現している非ホジキンリンパ腫、より詳しくはC19を発現しているびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）およびCD19を発現している濾胞性リンパ腫（FL）の治療に用いるための抗CD19抗体に関する。
【００１４】
一実施形態では、該抗体がマウス抗体R005-1またはR005-02のCDRを含み、それのVHおよびVLアミノ酸配列が下表に示すものである。
【表１】
2020526568.tif 000002
【００１５】
一実施形態では、該抗体がヒト化抗体IDD001（ヒト化R005-1から創出）のCDRを含み、それのVHおよびVLアミノ酸配列が下表に示すものである。より正確には、VL配列それ自体が配列番号37のアミノ酸１〜103であり、そしてVH配列それ自体が配列番号39のアミノ酸１〜121である。
【表２】
2020526568.tif 000003
【００１６】
一実施形態では、該抗体が変異型ヒトIgG1 Fc領域を含む。
【００１７】
この変異型領域は、ヒトIgG1 Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々の位置にアミノ酸置換を含む。Fc領域中のこれらのアミノ酸残基は、Kabatの番号付け法に従って番号付けられている。この抗CD19抗体はDLBCLまたはFLの治療に用いられる。本発明に係るDLBCLとFLは、その細胞がCD19を発現しているものである。
【００１８】
一実施形態では、前記抗体が非フコシル化型である。
【００１９】
一実施形態では、前記抗体がアポトーシス促進性である。
【００２０】
一実施形態では、前記抗体が上述のCDRと、上述の変異型ヒトIgG1 Fc領域のCDRを含む。好ましくは、VH配列とVL配列がヒト化されており、ヒトフレームワーク領域と場合によりCDR変異を有する。この抗体は非フコシル化型であり得る。
【００２１】
好ましい実施形態では、それらの抗体は、抗体R005-1のCDRを含み、そのVHおよびVLアミノ酸配列がそれぞれ配列番号29と配列番号31である。
【００２２】
好ましい実施形態では、VH配列とVL配列がヒト化配列であり、特にそれらは上記のCDRsと、ヒトフレームワーク領域またはヒト化フレームワーク領域とを含む。更に好ましい実施形態では、CDRsの一部はまた、VL配列のCDR1とCDR2について本明細書に後述するように、ヒト化されてもよい。ヒト化フレームワーク領域とVL CDR1とCDR2とを有する典型的な実施形態では、該抗体は配列番号39（aa 1-123）および37（aa 1-103）に与えられるVH配列とVL配列を含む。好ましい実施形態では、該抗体がIDD001であり、その全重鎖と全軽鎖の配列は図10と、それぞれ配列番号39および37に示されるものである。
【００２３】
本発明は、CD19と場合によりCD20を発現している非ホジキンリンパ腫を治療するのに用いられる、特にCD19と場合によりCD20を発現しているDLBCL又はFLを治療するのに用いられる、本発明にかかる抗CD19抗体と適当な医薬担体とを含む製剤にも関する。
【００２４】
一実施形態では、この抗CD19抗体は、DLBCL、亜型ABC、GCBおよび／またはABC/GCBを治療するのに用いられる。より詳しくは、この抗体は化学療法薬のような別の剤との併用療法に用いられる。ここで、化学療法薬はビンカアルカロイド類、特にビンクリスチンであってもよい。
【００２５】
別の実施形態では、この抗CD19抗体はFLを治療するために用いられる。より詳しくは、この抗体はモノクローナル抗体のような別の剤との併用療法に用いられる。ここで前記モノクローナル抗体は抗CD20抗体、特にリツキサンであってよい。
【００２６】
本発明はまた、特にCD19と場合によりCD20を発現している非ホジキンリンパ腫を治療するために用いられる、特にCD19と場合によりCD20を発現しているDLBCLまたはFLを治療するために用いられる、本発明にかかる抗CD19抗体と適当な医薬担体とを含む第一の組成物と、本明細書に開示されたような別の抗体または化学療法薬と適当な医薬担体とを含む第二の組成物を含み、前記第一と第二の組成物が治療を必要とする患者への同時、個別または連続投与用である、キットまたは組成物に関する。
【００２７】
本発明の別の対象は、本明細書中に開示されるIDD001抗体のCDRを有し、より詳しくは配列番号39のVH配列１〜121と配列番号37のVL配列１〜103とを有する、ヒト化モノクローナル抗CD19抗体である。一実施形態では、このヒト化抗体は変異型ヒトIgG1 Fc領域を含み、ここでこの変異型領域は好ましくは、ヒトIgG1 Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここで前記Fc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatの番号付けである。以下にいくつかの実施形態を提示する。一実施形態では、ヒト化モノクローナル抗CD19抗体は配列番号39の重鎖と、配列番号37の軽鎖とを有する。それらのヒト化抗体は、癌、特にCD19を発現している癌を治療するために用いられる。
【００２８】
本発明はまた、CD19と場合によりCD20を発現している非ホジキンリンパ腫を治療する方法、特にCD19と場合によりCD20を発現しているDLBCLまたはFLを治療する方法であって、本明細書に開示される医薬組成物またはキットが十分量で患者に投与される方法に関する。
【００２９】
本発明は、治療を必要とする患者においてびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）を治療する方法であって、有効量の本発明の医薬組成物または本開示のヒト化抗CD19モノクローナル抗体を投与することを含む方法に関する。
【００３０】
本発明はまた、濾胞性リンパ腫（FL）を治療する方法であって、有効量の本発明の医薬組成物、及び有効量の抗CD20モノクローナル抗体を投与することを含む方法に関する。
【００３１】
本発明は更にまた、治療を必要とする患者において濾胞性リンパ腫（FL）を治療する方法であって、有効量の本開示のヒト化抗CD19モノクローナル抗体を投与することを含む方法に関する。
【００３２】
本発明は、治療を必要とする患者において癌を治療する方法であって、本開示のIDD001抗体のCDRを有する、より詳しくは配列番号39のVH配列１〜121と配列番号37のVL配列１〜103を有する、ヒト化モノクローナル抗CD19抗体の有効量を投与することを含む方法に関する。一実施形態では、このヒト化抗体は変異型ヒトIgG1 Fc領域を含み、この変異型領域は好ましくはヒトIgG1 Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここで前記Fc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatの番号付けである。以下にいくつかの実施形態を提示する。一実施形態では、ヒト化モノクローナル抗体抗CD19抗体は配列番号39の重鎖と配列番号37の軽鎖を有する。特に、癌はCD19を発現している。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
〔発明の詳細な説明〕
【００３４】
抗CD19抗体
【００３５】
CD19はＢ細胞と濾胞樹状細胞に発現されるが、幹細胞、前駆Ｂ細胞および正常骨髄性細胞には発現されない、95 kDaのＩ型膜貫通糖タンパク質である。Ｂ細胞におけるCD19発現は、前駆Ｂ細胞段階に始まり、形質細胞への分化の過程を通して維持される。Ｂ細胞受容体（BCR）の一部として、CD19はＢ細胞活性化の調節と、体液性免疫の誘導に関与している。重要なのは、CD19がＢ細胞関連腫瘍の症例の大部分において発現され、その発現が腫瘍の発達を通して保持されることである。改変型のヒトIgG1 Fcを有する抗CD19モノクローナル抗体が国際公開WO 2012/1999号公報に開示されている。この開示は更に、キメラ、ヒト化およびヒトの抗CD19抗体、抗CD19抗体融合タンパク質並びにそれらの断片を提供している。
【００３６】
より詳しくは、本発明は、CD19を発現しているびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）または濾胞性リンパ腫（FL）を治療するために用いられる抗CD19抗体であって、
(1) 抗体R005-1、R005-2またはIDD001のうちの１つのCDRであって、それのVHおよびVLアミノ酸配列が下表に示されるCDR：
【表３】
2020526568.tif 000004
(2) 変異型ヒトIgG1 Fc領域であって、この変異型領域がヒトIgG1のFc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここで前記Fc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatの番号付けである、変異型ヒトIgG1 Fc領域、
を含む、抗CD19抗体に関する。
【００３７】
一実施形態では、上記Fc領域は、ヒトIgG1 Fc領域のアミノ酸位置Phe243、Arg292、Tyr300、Val305、Lys326およびPro396（Kabat法）の各々において修飾される。
【００３８】
本発明によれば、変異型IgG1 Fc領域中、Phe243がLeu、Trp、Tyr、Arg、Ile、AlaまたはGlnにより置換され；Arg292がPro、AlaまたはGlyにより置換され；Tyr300がLeu、Lys、Phe、AlaまたはIleにより置換され；Val305がLeu、AlaまたはIleにより置換され；Lys326がAla、Val、Glu、Asp、Met、Ser、AsnまたはTrpにより置換され；Pro396がLeu、AlaまたはIleにより置換される。
【００３９】
本発明によれば、このFc領域は配列番号１に示されるアミノ酸配列を有する（Fc34）。このFc領域をコードする核酸は配列番号２に示される。
【００４０】
別の実施形態では、Fc領域はヒトIgG1 Fc領域のアミノ酸位置Phe243、Arg292、Tyr300,Val305、Lys326、Glu333およびPro396（Kobat法）の各々において修飾される。
【００４１】
本発明によれば、変異型Fc IgG1 Fc領域中、Phe243がLeu、Trp、Tyr、Arg、Ile、AlaまたはGlnにより置換され；Arg292がPro、AlaまたはGlyにより置換され；Tyr300がLeu、Lys、Phe、AlaまたはIleにより置換され；Val305がLeu、AlaまたはIleにより置換され；Lys326がAla、Val、Glu、Asp、Met、Ser、AsnまたはTrpにより置換され；Pro396がLeu、AlaまたはIleにより置換され；そしてGlu333がVal、Gly、Ala、Gln、Asp、Asn、Lys、ArgまたはSerにより置換される。
【００４２】
本発明によれば、このFc領域は配列番号３に示されるアミノ酸配列を有する（Fc24）。このFc領域をコードする核酸は配列番号４に示される。１つの変異体は、Fc24 に関して１つの変異を有する、すなわちVal305がIleにより置換されている、本明細書中Fc39と称される領域である。
【００４３】
一実施形態では、上記抗体は下表に示されるVHアミノ酸配列とVLアミノ酸配列を含む：
【表４】
2020526568.tif 000005
【００４４】
好ましい実施形態では、上記抗体は抗体mR005-1のCDRを含み、それのVHアミノ酸配列とVLアミノ酸配列がそれぞれ配列番号29と配列番号31であるか、またはそれがそれぞれ配列番号29と配列番号31のVHアミノ酸配列とVLアミノ酸配列を含む。この抗体は、変異型ヒトIgG1 Fc領域を含み、ここでこの変異型領域は本明細書中に開示されるヒトIgG1 Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含む。前記抗体は非フコシル化型であってもよい。
【００４５】
好ましい実施形態では、前記VH配列とVL配列がヒト化されており、特にそれらは上述したCDRsヒトフレームワーク領域またはヒト化フレームワーク領域を含む。典型的な実施形態では、該抗体は、図１０と配列番号39（VH）および37（VL）に示されたVH配列とVL配列を含む。
【００４６】
本発明の抗CD19抗体R005-1のCDRは下表のものである：
【表５】
2020526568.tif 000006
【００４７】
本発明の抗CD19抗体R005-2のCDRは下表のものである：
【表６】
2020526568.tif 000007
【００４８】
本発明の抗CD19ヒト化抗体IDD001のCDRは、VL鎖のCDR1とCDR2を除き、R005-1のものと同一である：
【表７】
2020526568.tif 000008
【００４９】
定義上、それらのCDRは、１つ以上のアミノ酸の欠失、置換または付加により変異型CDRを含み、その変異体はもとのCDRの特異性を保持している。汎用番号付け法は、最も短いアミノ酸配列を有するCDR定義、すなわち最小のCDR定義を与えるものである。
【００５０】
一実施形態では、該抗体は、その配列が配列番号16、6、13および／または8、9、10に示されるCDRを含む。一実施形態では、該抗体はその配列が配列番号5、6、7および／または8、9、10に示されるCDRを含む。一実施形態では、該抗体は、その配列が配列番号11、12、13および／または14、15、10に示されるCDRを含む。一実施形態では、該抗体は、その配列が配列番号28、18、25および／または20、21、22に示されるCDRを含む。一実施形態では、該抗体は、その配列が配列番号17、18、19および／または20、21、22に示されるCDRを含む。一実施形態では、該抗体は、その配列が配列番号23、24、25および／または26、27、22に示されるCDRを含む。一実施形態では、該抗体は、その配列が配列番号17、18、19および／または20、21、22に示されるCDRsを含む。一実施形態では、該抗体は、その配列が配列番号23、24、25および／または26、27、22に示されるCDRを含む。
【００５１】
一実施形態では、該抗体は、その配列が配列番号5、6、7および／または41、43および10に示されるCDRを含む。一実施形態では、該抗体は、その配列が配列番号11、12、13および／または42、44、10に示されるCDRを含む。一実施形態では、該抗体は、その配列が配列番号16、6、13および／または41、43、10に示されるCDRを含む。
【００５２】
１つの特徴によれば、哺乳類細胞中で産生された本発明の抗CD19抗体は、本発明の抗体の変異型領域と共に、本発明による非フコシル化型またはアフコシル化型抗体をもたらす。哺乳類細胞は野生型細胞であってもよい。それはげっ歯類細胞、特にCHO細胞であってもよい。げっ歯類細胞は野生型、例えば特に野生型CHO細胞であってもよい。抗体は、その細胞中でのそれらの産生に由来するグリコシル化プロファイルを有する。野生型という語はそれの通常の意味で用いられ、すなわちそれが天然に存在するような種類の典型的形態の表現型に関連して用いられる。
【００５３】
特に、トランスフェクト細胞から、例えば野生型CHOから、本発明は、ガラクトシル化されているが非フコシル化である末端GlcNacを有する長鎖を含む、共通の二分岐型Ｎ−結合型オリゴ糖構造を所有する組み換え抗体を発現可能にする。好ましい特徴によれば、WO 2012/010562に記載のように、該モノクローナル抗体は低含有量のフルクトースを有する。
【００５４】
一実施形態では、抗CD19抗体はADCCを惹起することができるがCDCはできない。このプロファイルを有する抗体の一例として、アミノ酸位置243、292、300、305、396の各々にアミノ酸置換を含む変異型ヒトIgG1 Fc領域を有するものがある。そのような抗体は米国特許第9,120,856号明細書中に記載されており、それは参考として本明細書中に組み込まれる。
【００５５】
別の実施形態では、抗CD19抗体はCDCとADCC活性を惹起することができる。このプロファイルを有する抗体の一例は、アミノ酸位置243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含む変異型ヒトIgG1 Fc領域を有するものである。そのような抗体は国際公開WO 2012/010562号公報に開示されている。
【００５６】
一実施形態では、本明細書中に開示されるような可変領域を有するそれらの抗体は、プログラム細胞死またはアポトーシスを誘起する。
【００５７】
一実施形態では、それらの抗体は、R005-1、R005-2またはIDD001等のCDRを含むかまたはVH領域とVL領域を含む１つのFabと、別の腫瘍抗原、特に上記に開示されたような癌Ｂ細胞上の抗原（例えばCD20）に対して特異的な１つのFabとを含む。
【００５８】
抗CD20抗体
【００５９】
本明細書に記載の併用療法は、抗CD20抗体を更に含むことができる。
【００６０】
本明細書中に記載の方法と組成物に従って、任意の適当な抗CD20抗体を使用することができる。適当な抗CD20抗体としては、例えば、既知の抗CD20抗体、市販の抗CD20抗体、または当業界で周知の方法を使って開発された抗CD20抗体が挙げられる。
【００６１】
CD20抗原に結合する抗体の例としては以下のものが挙げられる：現在「リツキシマブ（リツキサンRITUXAN（商標）」と呼ばれている「C2B8」；「Y2B8」または「イブリツモマブ・チウキセタン」（ゼバリンZAVALIN（商標））と称されるイットリウム[90]−標識2B8マウス抗体（米国特許第5,736,137号、参考として本明細書に明らかに組み込まれる）；任意に131Iで標識され「131I−BI」抗体（ヨウ素131トシツモマブ、BEXXAR（商標））を生成する、「トシツモマブ」（Beckman Coulter社）とも称されるマウスIgG2aの「BI」（米国特許第5,595,721号、参考として本明細書中に明確に組み込まれる）；「フレームワークパッチド（framework patched）」またはヒト化1F5（WO 03/002607、Leung, S.）を含む、マウスモノクローナル抗体「1F5」（Press他、Blood 69(2):584-591(1987)）およびその変異体；ATCC寄託番号HB-96450；マウス2H7およびキメラ2H7抗体（米国特許第5,677,180号、参考として本明細書中に明確に組み込まれる）；ヒト化2H7；huMax-CD20（Genmab、デンマーク国）；AME-133（Applied Molecular Evolution）；A20抗体またはその変異体、例えばキメラまたはヒト化A20抗体（それぞれcA20、hA20）（米国特許出願2003/0219433、Immunomedics社）；および国際白血球分類ワークショップ（International Leukocyte Typing Workshop）から入手可能であるモノクローナル抗体L27、G28-2、93-1B3、B-CI、またはNU-B2（Valentine他、Leukocyte Typing HI (McMichael編、p.440、Oxford University Press (1987)）。典型的な実施形態では、本開示の方法と組成物は、抗CD19抗体またはその断片と併用してリツキシマブまたはその抗原結合断片を使用する。
【００６２】
リツキシマブの軽鎖可変領域と重鎖可変領域の全核酸配列とアミノ酸配列は米国特許第5,736,137号明細書に開示されている。特に、リツキシマブの軽鎖可変領域の核酸配列とアミノ酸配列は、米国特許第5,736,173号明細書の図４と配列番号６に開示されている。リツキシマブの重鎖可変領域の核酸配列とアミノ酸配列は、米国特許第5,736,137号明細書の図5と配列番号9に開示されている。米国特許第5,736,137号明細書の配列番号6と9および図4と5の核酸配列とアミノ酸配列は、本明細書中に参考として明示的に組み込まれる。リツキシマブは、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ATCC）に受託番号69119のもと寄託されている、大腸菌（E.coli）宿主細胞中に存在するベクターDNAを含むCHO細胞トランスフェクトーマによっても産生することができる。リツキシマブは、受託番号HB 11388のもとATCCに寄託されているハイブリドーマ2B8からも産生することができる。
【００６３】
CD20抗体はモノクローナルヒト、ヒト化またはキメラ抗CD20抗体であってもよい。本開示の組成物および方法に用いられる抗CD20抗体はネイキッド（naked）抗体、免疫複合体または融合タンパク質であることができる。特定の実施形態では、本開示の抗CD20抗体は、循環Ｂ細胞を枯渇させるのに十分な量で、ヒト抗体依存性細胞傷害（ADCC）、補体依存性細胞媒介性細胞傷害（CDC）、および／またはアポトーシスを媒介することができる。代表的な実施形態では、本開示の抗CD20抗体は、親抗体に比較して増強されたADCC活性を有するように遺伝子操作されている抗CD20抗体である。増強されたADCC活性を有する抗体変異体を創出する方法は、上述の通りである。特定の実施形態では、本開示の抗CD20抗体は、増強されたADCC活性を有する非フコシル化抗体である。
【００６４】
化学療法薬
【００６５】
癌療法に使用する剤の他の例は、ターゲット療法のための剤である。それらの剤は、腫瘍の開始および／または進行に関与する特定の分子機構を阻害することにより、腫瘍成長を妨害する。ターゲット療法剤は小分子または抗体であり、通常は分子標的に従って分類される。ターゲット療法の分子標的の例は、細胞シグナル伝達、アポトーシス、遺伝子転写、DNA修復、細胞周期の進行および／またはチェックポイント、血管新生、浸潤および転移に関与しているタンパク質である。
【００６６】
現存の化学療法処置と併用して本発明の抗体によりCD19をターゲティングすることは、化学療法単独よりも腫瘍細胞の死滅に一層効果的であろう。広範囲の薬剤が、癌の化学療法に使用されている。
【００６７】
化学療法薬は、それらの作用機序に従って幾つかのグループに分類することができる。化学療法薬分類の包括的でないリストは次の通りである：アルキル化薬（例えばシクロホスファミド）、アントラサイクリン系薬（例えばドキソルビシン）、細胞骨格破壊薬（例えばパクリタキセル）、エポチロン系（例えばイクサベピロン）、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬（例えばボリノスタット）、トポイソメラーゼ阻害薬（例えばイリノテカン）、キナーゼ阻害薬（例えばイマチニブ）、ヌクレオチド類似体および前駆体類似体（例えばアザシチジン）、ペプチド抗体（例えばブレオマイシン）、白金製剤（例えばシスプラチン）、レチノイド（例えばトレチノイン）、ビンカアルカロイド類および誘導体（例えばビンクリスチン）。
【００６８】
一般にホルモン療法薬として分類される、癌療法に用いられる他の剤としては、ホルモン、ホルモン合成阻害薬、ホルモン受容体拮抗薬が挙げられる。
【００６９】
１つのアプローチでは、少なくとも２種の抗体の組み合わせを含む抗体療法またはレジメンが、癌患者を治療する際の標準化学療法に加えられる。一実施形態では、追加のモノクローナル抗体が癌性Ｂ細胞またはリンパ球上の抗原、例えばCD20を対象とする。
【００７０】
前記抗体と追加の抗癌剤が癌細胞に対して相乗効果を発揮するような組み合わせの場合には、単独投与される第二の剤の標準投与量に比較して、前記追加の剤の投与量を減らすことが可能である。該抗体は、癌細胞の感受性を増強するために有効である量の抗癌剤と共に同時投与され得る。
【００７１】
抗体の組み合わせまたは二重特異性抗体を用いてCD19とCD20をターゲティングする本発明の１つの方法では、該抗体は化学療法薬の投与前に患者に投与される。１つの代替法は、抗体の組み合わせまたは二重特異性抗体と化学療法薬を投与する前に、別の代替スケジュールにおいて化学療法薬を投与することを含む。別の実施形態では、抗体の組み合わせまたは二重特異性抗体と化学療法薬は同時に投与される。
【００７２】
よって、本発明は、癌Ｂ細胞により発現されるCD19および別の抗原、特にC20、を対象とされた二重特異性または多価モノクローナル抗体の使用を包含する。この抗体は、CD19に特異的なFabと、別の標的に特異的なFabとを含む。特に、CD19に特異的なFabは、R005-1、R005-2または好ましくはIDD001のCDRsにより定義される本開示のVH領域とVL領域、またはR005-1、R005-2または好ましくはIDD001の全VH領域と全VL領域を含む。CD20も同時に標的とする二重特異性抗体の場合、本明細書に開示のCD19に特異的なFabに加えて、前述した任意の抗CD20モノクローナル抗体（例えばリツキサン）からのFabを使用することが可能である。好ましくは、二重特異性抗体は、ヒトIgG1のFc、特に本明細書に開示されるように変異されたFc、例えばFc24、Fc34またはFc39を含む。そのような二重特異性抗体はまた、モノクローナル抗体として本発明に包含され、本発明の対象である。
【００７３】
本発明の方法は、放射線照射、小分子または抗体を用いる化学療法のような少なくとも１つの別の治療法の使用を含む治療レジメンに組み入れるために提供することができる。本発明の方法は、ヒトを含む哺乳類への本発明の（１または複数の）抗体との同時、個別または連続投与のための、別の標的を対象とされた少なくとも１つの追加の抗体および／または少なくとも１つの化学療法薬（例えば小分子）の十分量の投与を直接包含しうる。この併用は、より一般的に、単独の剤または単独の本発明の１もしくは複数の抗体による単剤処置に対して十分に応答しない癌（特に悪性の癌）に有用であり、またこの併用が相乗効果を導くためにも有用である。
【００７４】
抗体に対する修飾と改変
【００７５】
本発明のポリペプチドの構造において修飾と改変を行うことができ、かつ同様な特性を保持している分子を得ることができる。言い換えれば、それらの修飾と改変は当業者の技術の範囲内である。例えば、ある所定のアミノ酸を、感知できる活性の損失無しに配列中別のアミノ酸で置換することができる。ポリペプチドの生物学的機能活性を定義するのが該ポリペプチドの相互作用的な能力と性質であるから、ポリペプチド配列（または当然、それの基礎となるDNAコード配列）中に所定のアミノ酸配列置換を作製することが可能であり、それにもかかわらず同様な特性を有しているポリペプチドを得ることができる。
【００７６】
アミノ酸に関する一般的知識に基づいて、当業者は、試行と分析の日常実験により、抗体のFc領域または任意の他の部分（結合ドメインを含む）の機能性を有意に変更することなく、欠失、付加または置換することが可能なアミノ酸位置を決定することができる。
【００７７】
Leu、Trp、Tyr、Arg、Ile、AlaまたはGlnによるPhe243の置換；Pro、AlaまたはGlyによるArg292の置換；Leu、Lys、Phe、AlaまたはIleによるTyr300の置換；Leu、AlaまたはIleによるVal305の置換；Ala、Val、Glu、Asp、Met、Ser、AsnまたはTrpによるLys326の置換；Leu、AlaまたはIleによるPro396の置換；およびVal、Gly、Ala、Gln、Asp、Asn、Lys、Arg、AlaまたはSerによるGlu333の置換は全て、chR005-1 Fc24モノクローナル抗体中で１つずつ分析されており、全血のADCCおよびヒト血清のCDCを提供するのに許容できる置換であると証明されている。
【００７８】
本発明の抗体は、少なくとも１または２つの特異性を有する、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、全長ヒト抗体、二重特異性抗体（例えばCD19とCD20）、組み合わせMAb、多価抗体組成物、抗体医薬複合体（コンジュゲート）または抗体断片であることができる。「ヒト化抗体」または「キメラヒト化抗体」は、非ヒト抗体、典型的にはマウス抗体に由来する抗体であって、親抗体の抗原結合特性を保持または実質的に保持しているが、ヒトでの免疫原性は低減されている抗体を意味するだろう。
【００７９】
当業者に既知である抗体の産生方法
【００８０】
本発明の抗CD19抗体を産生するには、哺乳類細胞、好ましくはCHO細胞のようなげっ歯類細胞、好ましくは野生型細胞（例えば野生型CHO細胞）を１または複数の発現ベクターでトランスフェクトすることができる。好ましくは、細胞を、軽鎖の発現ベクターと重鎖の発現ベクターにより同時トランスフェクトすることができる。本発明に有用な抗体の産生のために、当業者は国際公開WO 2012/010562号公報を参照することができ、それは参考として本明細書中に組み込まれる。
【００８１】
併用療法
【００８２】
本明細書中で用いる場合、用語「併用」は、それの最も広い意味で用いられ、対象が少なくとも２つの治療レジメンにより処置されることを意味する。本明細書中で用いる場合、用語「薬物」は、抗体または化学療法薬を包含し得る。
【００８３】
従って、FLを処置するための「併用抗体療法」は、少なくとも２つの薬物レジメン、より詳しくは少なくとも１つの抗CD19抗体と組み合わせた少なくとも１つのCD20抗体により、対象を処置することを意味するが、異なる抗体レジメンの投与のタイミングは、それらの抗体の組み合わせの有利な効果が達成される限りにおいて変更することができる。抗CD19抗体と組み合わせた抗CD20抗体での処置は、同時点（例えば同時または共同）もしくは異なる時点（例えば連続または順次）またはその組み合わせであることができる。
【００８４】
また、DLBCLを治療するための「併用療法」は、少なくとも２つの薬物レジメン、より詳しくは、少なくとも１つの化学療法薬（例えばビンクリスチン）を少なくとも１つの抗CD19抗体と併用して対象を処置することを意味するが、その異なるレジメンの投与のタイミングは、それらの薬物の組み合わせの有利な効果が達成される限りにおいて変更することができる。抗CD19抗体と併用した化学療法薬（例えばビンクリスチン）での処置は、同時（例えば同時または共同）もしくは異なる時点（例えば連続または順次）またはその組み合わせであることができる。
【００８５】
本開示の目的上、同時点での投与（例えば同時投与）は、その投与が数分から数時間まで離れていてもよいが、１日以上は離れていない、同一製剤中でまたは別々の製剤中でそれらの薬物を一緒に投与することを指す。本明細書中で用いる場合、異なる時点での投与（例えば連続投与）は、その併用療法の薬物を数時間から数日間、数週間または数カ月も離れて投与することを指す。
【００８６】
従って、ある実施形態では、併用療法を受ける対象は、２つの薬物の組み合わせが治療を受けている対象に治療効果を引き起こす限り、同時点に（例えば同時）または異なる時点に（例えばいずれかの順序で、同日にまたは異なる日に連続して）、両薬物を投与されることが可能である。幾つかの実施形態では、薬物の組み合わせは１回の投薬で同時に投与されるだろうが、別の投薬は、いずれかの順序での、同日または異なる日での連続投与を含むだろう。２つの薬物が同時に投与される場合、それらは各組成物がその２つの薬物の組み合わせの一方の薬物を含む、別々の医薬組成物として投与することができ、あるいは、それらの薬物を両方とも含む単一の医薬組成物として投与することができる。
【００８７】
治療活性
【００８８】
腫瘍応答は、臨床医と研究者の自由裁量で、例えば磁気共鳴イメージング（MBS）スキャン、Ｘ線画像診断、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャン、フローサイトメトリーまたは蛍光活性化細胞選別（FACS）分析、生物発光イメージング、例えばルシフェラーゼイメージング、骨のスキャンイメージング、および骨髄穿刺（BMA）を含む腫瘍生検サンプリングのようなスクリーニング技術を用いる、通常の技術を使った腫瘍の形態（例えば全腫瘍量、腫瘍サイズなど）の変化または腫瘍の消滅を評価することもできる。本開示の方法は、FLやDLBCLのようなＢ細胞疾患の治療が必要な対象に陽性の（プラスの）治療反応を付与する併用療法を使用することを含む。抗CD20抗体と抗CD19抗体を使用する（例えばFLを治療するため）または抗CD19抗体とビンクリスチンのような化学療法薬を使用する（例えばDLBCLを治療するため）併用療法に関する陽性の治療反応とは、それらの薬物の抗腫瘍活性に関連した疾患の改善、および／または該疾患に伴う症状の改善を意味することを意図する。すなわち、抗増殖効果、更なる腫瘍の過剰成長の防止、腫瘍サイズの縮小、癌細胞数の減少、および／または腫瘍性Ｂ細胞により媒介される１以上の症状の減少が観察され得る。従って、例えば、疾患の改善は、完全寛解（奏効）として特徴づけられ得る。
【００８９】
併用療法は好ましくは、CD19を発現している非ホジキンリンパ腫の退縮または寛解、特にCD19を発現しているFLまたはDLBCLの退縮または寛解を誘導するだろう。併用療法は、抗体および／または化学療法での現在の治療に対して耐性であるCD19を発現している非ホジキンリンパ腫、例えばABC亜型のある種のDLBCLに対して、細胞死やアポトーシスをはじめとする治療効果を誘導することもできる。
【００９０】
用語「退縮」は、腫瘍塊のサイズの減少；腫瘍の転移侵襲性の減少；腫瘍成長の速度の減少；患者の生存率の増加；および／または改善された予後との観察上の臨床的相関の増加、例えば腫瘍浸潤性リンパ球の増加および腫瘍血管新生の減少；などを意味する。退縮は「部分応答」と見なすことができ、すなわち新規病変の欠損下でおよび少なくとも１カ月間に渡り持続する、全ての測定可能な腫瘍量（例えば対象に存在する腫瘍細胞の数）の少なくとも約50％減少と見なすことができる。
【００９１】
用語「寛解」は、腫瘍または腫瘍細胞がもはや検出できないことを意味する。寛解は、「完全応答」と見なすことができ、すなわち以前の任意の異常な放射線学的検査、骨髄および脳脊髄液（CSF）の正常化を伴う臨床的に検出可能な疾患の非存在を言う。そのような応答は本開示の方法に従った処置の後少なくとも１カ月間持続しなければならない。
【００９２】
本発明の組み合わせは、併用療法として、および／または放射線療法、骨髄および脳脊髄液（CSF）との更なる組み合わせにおいて、哺乳類、特にヒトの癌細胞の成長を阻害する「治療用組成物」として、利用することができる。治療用組成物の有効量は、好ましくはCD19を発現している癌の進行を妨げるまたは食い止めるために投与され、あるいは対照処置に対比した、寛解率または進行無し生存率（すなわち、患者が前記標的癌、つまりDLBCLまたはFLを悪化させることのないまま生存している、治療の間または後の時間の長さ）、または全生存率（「生存率」とも呼ばれる；すなわち患者が癌診断されまたは癌治療された後に一定の期間の間生存している者の、試験群または処置群中の割合）の統計的に有意な増加をもたらす。
【００９３】
医薬組成物
【００９４】
本併用療法に用いられる薬物は、治療有効量で投与される。「治療有効投与量」または「治療有効量」または「有効量」は、ある一定量の抗CD20抗体（例えばFLを治療する際に）または化学療法薬（例えばDLBCLを治療する際に）が投与された時に、FLやDLBCLのような腫瘍性Ｂ細胞を含む癌について対象者の処置に関して陽性の（プラスの）治療応答をもたらす、抗CD19抗体の量であると意図される。幾つかの実施形態では、各薬物のいずれかの治療有効量が約0.1 mg/kg〜約200 mg/kg、例えば約1 mg/kg〜約100 mg/kgの範囲内である。幾つかの実施形態では、投与量は、1、3、5、10、15、20、25または30 mg/kgであり得る。本発明は、少なくとも２つの異なる抗体または少なくとも１つの抗体と少なくとも１つの化学療法薬を用いる併用療法またはレジメンを提供する。この結果、所定の治療効果に必要とされる１つの薬物（抗体または化学療法薬）の治療有効量は、それを単独で使用する場合よりも低くなり、そのため低い用量値（例えば60 mg/kg以下）が十分量であり、例えば1、3、5、10、15、20、25または30 mg/kgであり得る。
【００９５】
そのような「治療有効投与量」、「治療有効量」または「有効量」は、当業者により日常的に決定することができる。実際に投与される化合物の量は、処置すべき状態、投与の選択経路、投与される実際の化合物、個々の患者の年齢、体重および応答、患者の症状の重篤度等をはじめとする関連する状況に鑑みて、典型的には医師により決定されるだろう。投与量が投与されるペプチドの安定性に依存しうることも当業者により理解されるだろう。
【００９６】
医薬組成物は、注射により、すなわち静脈内、筋肉内、皮内、皮下、十二指腸内、または腹腔内的に投与することができる。別の薬物送達システム、例えばリポソームを使用することもできる。
【００９７】
本発明の抗CD19モノクローナル抗体は、本発明にかかる特定の第二のモノクローナル抗体または化学療法薬の前におよび／または後に（まとめて「連続投与」）、および／または同時に（「同時投与」）投与することができる。その組み合わせの連続投与（例えば前処置、後処置または重複処置）は、薬物が交互に投与されるレジメンまたは１つの成分が長期間投与されそして他の成分が間欠的に投与されるというレジメンを含む。本発明の組み合わせの成分は同一のまたは個別の組成物において、そして同一のまたは異なる投与経路で投与することができる。
【００９８】
本発明の治療用組成物を含む医薬組成物は、例えば該組成物のpH、浸透圧、粘度、透明度、色彩、等張性、無菌性、安定性、溶解または放出、吸収または浸透の速度を改変、維持または保存するための製剤材料を含んでもよい。医薬組成物中の主要なビヒクルまたは担体は、その性質が水性または非水性のいずれでもよい。例えば、適当なビヒクルまたは担体は、場合により非経口投与用の組成物において一般的に用いられる別の基材が補足された、注射用水または生理的食塩水であることができる。中性緩衝化食塩水または血清アルブミンと混合された食塩水が追加の例示的なビヒクルである。別の典型的な医薬組成物は、約pH 7.0〜8.5のトリス緩衝液または約pH 4.0〜5.5の酢酸緩衝液を含み、これらは更にソルビトールやそれに代わる適当な代用物を含んでもよい。本発明の一実施形態では、所望の純度を有する特定の組成物を任意の製剤助剤と混合することにより（Remington’s Pharmaceutical Sciences、前掲）、凍結乾燥ケークや水溶液の形態で貯蔵用の結合剤組成物を調製することができる。更に、結合剤生成物は、ショ糖のような適当な賦形剤を使って凍結乾燥製剤として製剤化され得る。
【００９９】
該製剤成分は、投与部位に受け入れられる濃度で存在する。例えば、組成物を生理学的pHにまたはわずかに低いpHに、典型的には約５〜約８のpH範囲内に維持するために緩衝剤が用いられる。経口投与用に特に適当なビヒクルは無菌蒸留水であり、その中に無菌の等張溶液として結合剤が製剤化され、適切に保存される。更に別の製剤は、該製剤の制御放出または持続放出（徐放）を提供する持続性剤と共に所望の分子を製剤化し、次いでそれを蓄積注射〔例えば注射可能なミクロスフェア、生体内分解性粒子、高分子化合物（ポリ乳酸、ポリグリコール酸）、ビーズ、またはリポソーム〕を介して送達させることを伴う。
【０１００】
別の態様では、非経口投与に適当な医薬製剤は、水性溶液、好ましくはハンクス液、リンガー液、または生理的緩衝食塩水中に製剤化され得る。水性注射用懸濁液剤は、懸濁液の粘度を増加させる物質、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストランを含んでもよい。追加の医薬組成物は当業者に明白であり、例えば徐放性または制御放出（コントロールドリリース）製剤中に結合剤分子を含む製剤が挙げられる。
【０１０１】
様々な他の徐放性または制御放出手段、例えばリポソームキャリア、生体内分解性ミクロ粒子または多孔性ビーズ、および蓄積注射剤、を製剤化する技術も当業者に知られている。生体内in vivo投与に用いるための医薬組成物は、典型的には無菌でなければならない。これは、無菌のろ過膜を通したろ過によって達成することができる。組成物が凍結乾燥される場合、この方法を使った滅菌は、凍結乾燥と再構成の前と後のいずれでも実施できる。非経口投与用の組成物は、凍結乾燥形においてまたは溶液中で保存することができる。加えて、非経口組成物は、一般に、無菌のアクセスポート、例えば皮下注射針により突き刺し可能なストッパーを有する、静注用輸液袋またはバイアル中に入れられ得る。
【０１０２】
医薬組成物が製剤化されると、溶液、懸濁液、ゲル、乳液、固体、又は脱水又は凍結乾燥粉末として滅菌バイアルにて保存され得る。そのような製剤は、すぐに使用できる兄弟で、又は投与前に再構成を必要とする形態（例えば、凍結乾燥）で保存され得る。
【０１０３】
いずれの化合物でも、治療有効量は、細胞培養アッセイにおいて、またはマウス、ラット、ウサギ、イヌ、ブタまたはサルのような動物モデルにおいて、最初に評価され得る。動物モデルは、適当な濃度範囲と投与経路を決定するためにも利用され得る。そのような情報を利用して、ヒトへの投与のための有効量と経路を決定することができる。正確な投与量は、治療を必要とする対象に関連する要因を考慮して決定されるだろう。用量と投与は、十分な濃度の活性化合物を提供するようにまたは所望の効果を維持するように調整される。考慮されるであろう要因としては、病気状態の重篤度、対象の一般的健康状態、年齢、体重および性別、投与の期間および頻度、薬物の組み合わせ、反応感受性、並びに治療に対する応答性が挙げられる。長期作用性医薬組成物は、特定の製剤の半減期およびクリアランス速度に依存して、３〜４日毎、毎週または隔週に投与することができる。投与の頻度は、使用する製剤中の該分子の薬物動態パラメータに依存するだろう。典型的には、組成物は、所望の効果を達成する用量に到達するまで投与される。従って、該組成物は、単回投与としてまたは一定期間に渡る複数回投与として（同一または異なる濃度／用量で）、または連続輸液として投与することができる。適当な投与量の更なる微調整は日常的に行われる。適切な投与量は、適当な用量応答データの利用を通して確定することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１０４】
【図１】図１：マウスMAbs R005-1およびR005-2 MAbsのヌクレオチド配列とアミノ酸配列、（Ａ）：ＶH（Ｂ）：ＶL。アミノ酸は一文字記号として表記される。
【表８】
2020526568.tif 000009
【図２】図２：キメラFc24（配列番号３と４）またはFc24（配列番号１と２）変異体MAbのアミノ酸配列と核酸配列。Fc39の配列は、第305位にIleを有する以外は、Fc24の配列と同一である。アミノ酸は一文字記号で表記されている。文献に従い、Fc領域のアミノ酸番号付け法は、Kabatデータベースに基づく（CH1：アミノ酸番号[aa no] 118〜215；Hinge（ヒンジ）：aa no 216〜230；CH2：aa no 231〜340；CH3：aa no 341〜447）。本発明において用いられる種々のFcと生来のFc（Fc0）との間の変異：
【表９】
2020526568.tif 000010
【図３Ａ】図３：MAb抗CD19／IDD001によるDLBCL亜型ABCの腫瘍成長の生体内（in vivo）阻害。用量変化を用いた、３Ａ：異種移植片モデルLY0257；３Ｂ：異種移植片モデルLY2264；３Ｃ：異種移植片モデルLY3604；３Ｄ：異種移植片モデルLY2264。
【図３Ｂ】図３：MAb抗CD19／IDD001によるDLBCL亜型ABCの腫瘍成長の生体内（in vivo）阻害。用量変化を用いた、３Ａ：異種移植片モデルLY0257；３Ｂ：異種移植片モデルLY2264；３Ｃ：異種移植片モデルLY3604；３Ｄ：異種移植片モデルLY2264。
【図３Ｃ】図３：MAb抗CD19／IDD001によるDLBCL亜型ABCの腫瘍成長の生体内（in vivo）阻害。用量変化を用いた、３Ａ：異種移植片モデルLY0257；３Ｂ：異種移植片モデルLY2264；３Ｃ：異種移植片モデルLY3604；３Ｄ：異種移植片モデルLY2264。
【図３Ｄ】図３：MAb抗CD19／IDD001によるDLBCL亜型ABCの腫瘍成長の生体内（in vivo）阻害。用量変化を用いた、３Ａ：異種移植片モデルLY0257；３Ｂ：異種移植片モデルLY2264；３Ｃ：異種移植片モデルLY3604；３Ｄ：異種移植片モデルLY2264。
【図４Ａ】図４：MAb抗CD19／IDD001によるDLBCL亜型GCBの腫瘍成長の生体内阻害。用量変化を用いた、４Ａ：異種移植片モデルLY2214；４Ｂ：異種移植片モデルLY2318；４Ｃ：異種移植片モデルLY2214。
【図４Ｂ】図４：MAb抗CD19／IDD001によるDLBCL亜型GCBの腫瘍成長の生体内阻害。用量変化を用いた、４Ａ：異種移植片モデルLY2214；４Ｂ：異種移植片モデルLY2318；４Ｃ：異種移植片モデルLY2214。
【図４Ｃ】図４：MAb抗CD19／IDD001によるDLBCL亜型GCBの腫瘍成長の生体内阻害。用量変化を用いた、４Ａ：異種移植片モデルLY2214；４Ｂ：異種移植片モデルLY2318；４Ｃ：異種移植片モデルLY2214。
【図５Ａ】図５：MAb抗CD19／IDD001によるDLBCL亜型ABC/GCBの腫瘍成長の生体内阻害。用量変化を用いた、５Ａ：異種移植片モデルLY2345；５Ｂ：異種移植片モデルLY2266；５Ｃ：異種移植片モデルLY2345。
【図５Ｂ】図５：MAb抗CD19／IDD001によるDLBCL亜型ABC/GCBの腫瘍成長の生体内阻害。用量変化を用いた、５Ａ：異種移植片モデルLY2345；５Ｂ：異種移植片モデルLY2266；５Ｃ：異種移植片モデルLY2345。
【図５Ｃ】図５：MAb抗CD19／IDD001によるDLBCL亜型ABC/GCBの腫瘍成長の生体内阻害。用量変化を用いた、５Ａ：異種移植片モデルLY2345；５Ｂ：異種移植片モデルLY2266；５Ｃ：異種移植片モデルLY2345。
【図６】図６：ビンクリスチンと併用した、MAb抗CD19/IDD001によるDLBCL ABC亜型の腫瘍成長の生体内阻害。
【図７】図７：ドキソルビシンと併用した、MAb抗CD19/IDD001によるDLBCL ABC亜型の腫瘍成長の生体内阻害。
【図８】図８：MAb抗CD20（リツキシマブ）と併用したMAb抗CD19/IDD001によるFLの腫瘍成長の生体内阻害。
【図９】図９：CD19とCD20の同時ターゲティングは、低MAb濃度で生存率を増大させる。
【図１０】図１０：軽鎖および重鎖ヒト化配列、抗体IDD001。
【０１０５】
実施例１：抗CD19抗体を国際公開WO 2012/010562公報または米国特許第9,120,856号明細書に記載の通りに作製した。
【０１０６】
最高レベルのプログラム細胞死またはアポトーシスを誘発する能力に関してマウスMAbスクリーニングを実施した。図１に記載のマウスMAb R005-1およびMAb R005-2のヌクレオチド配列とアミノ酸配列を有する２つのMAbs抗CD19が選択された。
【０１０７】
癌細胞枯渇作用を改善するために、ADCCおよびCDCに依存性の細胞傷害能を強化するためにFcの遺伝子操作を行った。最適化されたFcコード化Fc24変異型MAbのアミノ酸配列と核酸配列（配列番号３と４）またはFc34変異型MAbのアミノ酸配列と核酸配列（配列番号１と２）は、図２において１文字表記法として記載された。文献に従い、Fc領域のアミノ酸番号付け法はKabatデータベースに基づいた（CH1：aa no [アミノ酸番号] 118〜215；Hinge（ヒンジ）：aa no 216〜230：CH2：aa no 231〜340；CH3：aa no 341〜447）。本発明に用いられる様々なFc間の変異は生来のFc（Fc0）に関するものである。
【０１０８】
Fcが最適化されたヒト化MAb IDD001の全長配列は図１０に記載される。
【０１０９】
実施例２：Fc領域中の様々なアミノ酸置換
【０１１０】
本発明の実験において、実施例１のchR005-1 Fc24に基づいて幾つかの代替モノクローナル抗体を作製した。この抗体は、CD19に結合する可変領域と、突然変異F243L/R292P/Y300L/V305L/K326A/E333A/P396Lを含むIgG1 Fc領域を有する。１つの置換アミノ酸が変更されているこの抗体の変異体を調製した。
【０１１１】
これらの変異体をヒト血清の存在下でのCDCおよび全血中でのADCCについてアッセイした。
【０１１２】
得られた結果は、米国特許出願第13/811,134号のファイル履歴中の2016年１月11日付の規則132（CFR 1.132）に基づく宣言書（Declaration）において提出されている。その供述書は参考として本明細書中に組み込まれる。その結果は、次の変異置換がADCC全血およびヒト血清中のCDCに対して機能的であり、IDD001のもとの置換に対比して全く有意な影響は観察されないことを示した。
-F243：Ｌは、Ｗ、Ｙ、Ｒ、Ｑ、Ｉ、Ａにより置換され得る
-R292：Ｐは、ＧまたはＡにより置換され得る
-V305：Ｌ（またはＩ）は、Ａにより置換され得る
-P396：Ｌは、ＩまたはＡにより置換され得る
-Y300：Ｌは、Ｋ、Ｆ、Ｉ、Ａにより置換され得る
-K326：Ａは、Ｖ、Ｅ、Ｄ、Ｍ、Ｓ、Ｎ、Ｗにより置換され得る
-E333：Ａは、Ｖ、Ｇ、Ｄ、Ｋ、Ｓ、Ｎ、Ｒ、Ｑにより置換され得る
【０１１３】
よって当業者は、Fc領域において該Fcのまたは該Fcを含む抗体のエフェクター機能を実質的に維持しながら置換を達成でき、そしてそれらの置換が本発明に包含されることを十分認識するだろう。
【０１１４】
実施例３：リツキサン（登録商標）（リツキシマブ）はRoche社より商業的に購入した。
【０１１５】
実施例４：オンコビン（登録商標）（ビンクリスチン）はSelleck社より商業的に購入した（カタログ番号S1241）。
【０１１６】
実施例５：アドリアマイシン（登録商標）（ドキソルビシン）はSelleck社より商業的に購入した（カタログ番号S1208）。
【０１１７】
実施例６：DLBCLのPDXモデルに関する生体内試験：各マウスを右側腹部に、腫瘍発生のために１つの原発ヒト異種移植片モデル（LY0257、LY2214、LY2264、LY2266、LY2318、LY2345またはLY3604）腫瘍断片（直径２〜３mm）を皮下接種した。平均または個別の腫瘍サイズが100〜250 mm3に達した時、マウスを無作為に（必要であれば定期的登録を含める）３つの群に割り付けた。各群は１または２匹のマウスを含んだ。分類と投薬開始の日を０日目（Day 0）とした。投薬量を体重に対して調整した（投薬量＝5 μL/g）。腫瘍接種後、動物を罹患率と死亡率について毎日チェックした。日常監視の時点で、腫瘍成長および運動性、飼料と水の消費といった正常行動に対する任意の効果、体重の増加／減少、目／体毛の艶のない状態（matting）、および他の任意の異常効果についてチェックした。死亡と観察される臨床徴候は、各少数団の中の動物の数に基づいて記録した。最終処置の後に無投薬での二週間の観察を行った。ビヒクル群の動物は、腫瘍体積（TV）が3000 mm3超に達したために試験の終了前に犠牲した。腫瘍サイズはキャリパーを用いて二次元寸法を毎週２回測定した。腫瘍体積は次の式を使ってmm3単位で表した：TV＝0.5 ａ×ｂ2；ここでａとｂはそれぞれ腫瘍の長径と短径である。体重は週２回測定した。個々のマウスが≧15％の体重減少を有した時、その体重が体重減少分に回復するまで投薬の休日（１または複数日）を設けた。次の条件のもと、個々の動物または全群の生存中試験を、死亡前にまたは昏睡状態に達する前に、人的安楽死により終了した。
【０１１８】
患者派生物（PDXモデル）からのDLBCL 生体内概念実証：７つのHuPrime（登録商標）リンパ腫異種移植片モデル（CROセルバンク内cDNAがCD19+のものを選択）LY0257、LY2214、LY2264、LY2266、LY2318、LY2345およびLY3604を選択した。それらのモデルの癌亜型は下表に列挙される通りである：
【表１０】
2020526568.tif 000011
【０１１９】
DLBCL亜型に関するMAb効果の試験計画：７つのHuPrime（登録商標）DLBCLリンパ腫異種移植片モデル、ABC（LY0257、LY2264、LY3604）、GCB（LY2214、LY2318）またはABC/GCB（LY2345、LY2266）を試験した。
【表１１】
2020526568.tif 000012
【０１２０】
DLBCL亜型に関するMAb用量効果の試験計画
３つのHuPrime（登録商標）DLBCLリンパ腫異種移植片モデル、ABC（LY2264）、GCB（LY2214）またはABC/GCB（LY2345）を試験した。
【表１２】
2020526568.tif 000013
【表１３】
2020526568.tif 000014
【０１２１】
DLBCL ABC亜型についての併用療法の試験計画
HuPrime（登録商標）DLBCLリンパ腫異種移植片モデルABC（LY0257）を試験した。
【表１４】
2020526568.tif 000015
【０１２２】
MAb抗CD19によるDLBCL亜型の腫瘍成長の生体内（in vivo）阻害
【０１２３】
図３に示す結果は、PDX移植マウスにおける３つの独立したヒト腫瘍から例証されるように、DLBCL-ABCリンパ腫が部分的に縮小されたことを証明する。３Ａ：異種移植片モデルLY0257；３Ｂ：異種移植片モデルLY2264；３Ｃ：異種移植片モデルLY3604。用量依存形式に従い、LY2264 PDXモデルのIDD001媒介性細胞傷害は、10 mg/kgの最高MAb用量で非常に高い感受性を有した。３Ｄ：用量変化を用いた異種移植片モデルLY2264。
【０１２４】
図４に示す結果は、異なる程度の細胞死滅における２つのDLBCL-GCBリンパ腫に対するIDD001媒介性細胞傷害を証明した。LY2214 PDXモデルは非常に高い感受性を有したのに対し、LY2318 PDXモデルは中程度の感受性であった。４Ａ：異種移植片モデルLY2214；４Ｂ：異種移植片モデルLY2318。用量依存形式に従い、LY2214 PDXモデルのIDD001媒介性細胞傷害は、10 mg/kgの最高MAb用量で非常に高い感受性であった。４Ｃ：用量変化を用いた異種移植片モデルLY2214。
【０１２５】
図５に示す結果は、DLBCL−ABC/GCBリンパ腫が部分的に減縮されたことを証明した。５Ａ：異種移植片モデルLY2345；５Ｂ：異種移植片モデルLY2266。最高MAb濃度（50 mg/mL）でも、全く完全腫瘍退縮は観察されなかった。５Ｃ：用量変化を用いた異種移植片モデルLY2345。
【０１２６】
MAb抗CD19と化学療法薬をベースにした併用療法による、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）亜型の腫瘍成長の生体内阻害
【０１２７】
腫瘍退縮を増大させるために、ID001とビンクリスチンの組み合わせの細胞傷害効果を図６に示した。LY0257 DLBCL-ABCモデルにおけるIDD001とビンクリスチンの併用療法は、いずれの単剤処置と比較して相乗的な殺細胞効果をもたらした。
【０１２８】
対照的に、図７に示す結果は、LY0257 DLBCL-ABCモデルにおいて、IDD001とドキソルビシンによる併用療法後には、同様に増強された腫瘍増殖抑制が全く観察されないことを明らかにした。
【０１２９】
実施例７：FLのCDXモデルに関する生体内試験
【０１３０】
ヒト濾胞細胞系RLを、注射１回（200μL）あたり５×105細胞の濃度で、SCIDマウスに皮下注射した。腫瘍が約100 mm3の平均体積に達した時、マウスを無作為に９つの群に割り付けた（合計45匹のマウス）。製剤の任意の毒性効果を検出するために全てのマウスを観察した。エンドポイントは、動物倫理規定により腫瘍直径＞18 mm、動物の有意な体重減少または健全性の変化として定められた。腫瘍形成に対する化合物の有効性を評価するために、腫瘍体積を週２回測定した。原発腫瘍のサイズを、キャリパーを使って測定し、２回の測定値から平均半径を算出することにより、次の式：TV＝4/3π×ｒ3を使って球体に推定した。中央値（メジアン）と標準偏差も各群について算出した。中央値は、極値を除外するために平均化するのに好適である。MAb処置は、３週間に渡り週２回、30、10または１ mg/kg用量の腹腔内注射により施された。製剤はスポンサーのガイドラインに従って調製し、すなわちPBS中に希釈した。腫瘍が1600 mm3の最大体積に達した時にマウスを屠殺した。エンドポイントは、臨床試験の倫理規定により、＞18 mmの腫瘍直径または体重の＞10％重量減少、または腫瘍がマウスにとって危険となる時点（壊死）として定められた。統計分析はGraphPad Prismソフトウェアを使って実施した。GraphPad Prismを科学グラフィック、包括的曲線適合法、理解可能な統計分析、およびデータ編成と組み合わせた。安楽死の日に測定した腫瘍体積値（mm3）に関してｔ検定（両側検定）を実施した。
【０１３１】
図８に示す結果は、MAb抗CD20（リツキシマブ）と組み合わせたMAb抗CD19／IDD001による併用療法が、FLの腫瘍成長に付加的細胞傷害性をもたらすことを示した。
【０１３２】
CD19とCD20の同時ターゲティングは生存率を増加させた。1 mg/kgのリツキシマブで処置したマウスの33％が完全寛解を示したのに対し、リツキシマブとIDD001で処置したマウスの50％が45日目に完全寛解を示した。55日目の生存率の詳細値を下表に示す：
【表１５】
2020526568.tif 000016
【０１３３】
本発明を次の番号を付与した項目により更に記載する。
１．抗CD19抗体を含む医薬組成物であって、治療を必要とする患者においてCD19を発現しているびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）またはCD19を発現している濾胞性リンパ腫（FL）を治療するために用いられ、
(i) VHおよびVLアミノ酸配列が下表に示される抗体R005-1、R005-2またはIDD001のいずれか１つのCDR、
【表１６】
2020526568.tif 000017
(ii) 変異型ヒトIgG1 Fc領域であって、この変異型領域が、ヒトIgG Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここでFc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatの番号付けである、変異型ヒトIgG1 Fc領域、
を含む医薬組成物。
２．治療を必要とする患者においてCD19を発現しているびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）の治療に用いるための併用剤であって、
(1) (i) VHおよびVLアミノ酸配列が下表に示される抗体R005-1、R005-2またはIDD001のいずれか１つのCDR
【表１７】
2020526568.tif 000018
(ii) 変異型ヒトIgG1 Fc領域であって、この変異型領域が、ヒトIgG Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここでFc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatの番号付けである、変異型ヒトIgG1 Fc領域、
を含む抗CD19抗体と、
(2) ビンカアルカロイド系の化学療法薬、
との併用剤。
３．前記化学療法薬がビンクリスチンである、項目２の使用のための併用剤。
４．DLBCL亜型GCB、ABC、またはABC/GCBを治療するために用いられる、項目２または３の使用のための併用剤。
５．前記抗体と前記化学療法薬の組み合わせ使用が同時、別個または連続である、DLBCL亜型ABCまたはGCBまたはABC/GCBを治療するためにビンクリスチンと併用して用いられる、項目２〜４のいずれか１項目の使用のための併用剤。
６．前記ビンクリスチンと併用される抗CD19抗体が、いずれかの単剤と比較してより高い退縮率をもたらす、項目２〜５のいずれか１項目の使用のための併用剤。
７．治療を必要とする患者においてCD19とCD20を発現している濾胞性リンパ腫（FL）の治療に用いるための併用剤であって、
(1) (i) VHおよびVLアミノ酸配列が下表に示される抗体R005-1、R005-2またはIDD001のいずれか１つのCDR
【表１８】
2020526568.tif 000019
(ii) 変異型ヒトIgG1 Fc領域であって、この変異型領域はヒトIgG Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここでFc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatの番号付けである、変異型ヒトIgG1 Fc領域、
を含む抗CD19抗体と、
(2) 抗CD20抗体、
との併用剤。
８．前記抗20抗体がリツキサンである、項目８の使用のための併用剤。
９．前記２つの抗体の併用剤が単剤に比較してより高い退縮率または寛解率をもたらす、項目７または８の使用のための併用剤。
10．前記抗CD19抗体が下表に示されるVHおよびVLアミノ酸配列を含む、項目２〜９のいずれか１項目の使用のための併用剤。
【表１９】
2020526568.tif 000020
11．前記抗体が、Phe243がLeuにより置換され、Arg292がProにより置換され、Tyr300がLeuにより置換され、Val305がLeuまたはIleにより置換され、Lys326がAlaにより置換され、そしてPro396がLeuにより置換されているFc領域を含む、項目１〜10のいずれか１項目の使用のための組成物または併用剤。
12．前記抗体が、Phe243がLeuにより置換され、Arg292がProにより置換され、Tyr300がLeuにより置換され、Val305がLeuまたはIleにより置換され、Lys326がAlaにより置換され、Pro396がLeuにより置換され、そしてGlu333がAlaにより置換されているFc領域を含む、項目１〜10のいずれか１項目の使用のための組成物または併用剤。
13．配列番号39のVH配列と配列番号37のVL配列を有する、ヒト化モノクローナル抗CD19抗体。
【図１−１】
2020526568.tif 000026
【図１−２】
2020526568.tif 000027
【図１−３】
2020526568.tif 000028
【図１−４】
2020526568.tif 000029
【図２−１】
2020526568.tif 000030
【図２−２】
2020526568.tif 000031
【図２−３】
2020526568.tif 000032
【図２−４】
2020526568.tif 000033
【図２−５】
2020526568.tif 000034
【図２−６】
2020526568.tif 000035
【図３Ａ】
2020526568.tif 000036
【図３Ｂ】
2020526568.tif 000037
【図３Ｃ】
2020526568.tif 000038
【図３Ｄ】
2020526568.tif 000039
【図４Ａ】
2020526568.tif 000040
【図４Ｂ】
2020526568.tif 000041
【図４Ｃ】
2020526568.tif 000042
【図５Ａ】
2020526568.tif 000043
【図５Ｂ】
2020526568.tif 000044
【図５Ｃ】
2020526568.tif 000045
【図６】
2020526568.tif 000046
【図７】
2020526568.tif 000047
【図８】
2020526568.tif 000048
【図９】
2020526568.tif 000049
【図１０−１】
2020526568.tif 000050
【図１０−２】
2020526568.tif 000051
【配列表】
2020526568000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和2年3月18日(2020.3.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
CD19を発現しているびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）を治療するための抗CD19抗体を含む医薬組成物であって、
(i) VHおよびVLアミノ酸配列が表1に示される、抗体R005-1、R005-2またはIDD001のいずれか１つのCDR
【表１】
2020526568.tif 000052
(ii) 変異型ヒトIgG1 Fc領域であって、この変異型領域が、ヒトIgG Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここでFc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatの番号付けである、変異型ヒトIgG1 Fc領域、
を含む抗CD19抗体を含む、医薬組成物。
【請求項２】
CD19を発現しているびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）の治療に用いるための併用剤であって、
(1) (i) VHおよびVLアミノ酸配列が表2に示される、抗体R005-1、R005-2またはIDD001のいずれか１つのCDR
【表２】
2020526568.tif 000053
(ii) 変異型ヒトIgG1 Fc領域であって、この変異型領域はヒトIgG Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここでFc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatの番号付けである、変異型ヒトIgG1 Fc領域、
を含む抗CD19抗体と、
(2) ビンカアルカロイド系の化学療法薬、
との併用剤。
【請求項３】
前記化学療法薬がビンクリスチンである、請求項２の使用のための併用剤。
【請求項４】
DLBCL亜型GCB、ABC、またはABC/GCBを治療するために用いられる、請求項２または３の使用のための併用剤。
【請求項５】
前記抗体と前記化学療法薬の併用剤の使用が同時、個別または連続である、DLBCL亜型ABCまたはGCBまたはABC/GCBを治療するためにビンクリスチンと併用して用いられる、請求項２〜４のいずれか一項の使用のための併用剤。
【請求項６】
前記ビンクリスチンと併用される抗CD19抗体が、いずれかの単剤と比較してより高い退縮率をもたらす、請求項２〜５のいずれか一項の使用のための併用剤。
【請求項７】
CD19とCD20を発現している濾胞性リンパ腫（FL）の治療に用いるための併用剤であって、
(1) (i) VHおよびVLアミノ酸配列が表3に示される、抗体R005-1、R005-2またはIDD001のいずれか１つのCDR
【表３】
2020526568.tif 000054
(ii) 変異型ヒトIgG1 Fc領域であって、この変異型領域が、ヒトIgG Fc領域のアミノ酸位置243、292、300、305、396;または243、292、300、305、326、396;または243、292、300、305、326、333、396の各々にアミノ酸置換を含み、ここでFc領域中のアミノ酸残基の番号付け法はKabatのものである、変異型ヒトIgG1 Fc領域、
を含む抗CD19抗体と、
(2) 抗CD20抗体、
との併用剤。
【請求項８】
前記抗20抗体が、リツキサンである、請求項７の使用のための併用剤。
【請求項９】
前記２つの抗体の併用剤が、単剤と比較してより高い退縮率または寛解率をもたらす、請求項７または８の使用のための併用剤。
【請求項１０】
前記抗CD19抗体が表4に示されるVHおよびVLアミノ酸配列を含む、請求項２〜９のいずれか一項の使用のための併用剤。
【表４】
2020526568.tif 000055
【請求項１１】
前記抗体が、Phe243がLeuにより置換され、Arg292がProにより置換され、Tyr300がLeuにより置換され、Val305がLeuまたはIleにより置換され、Lys326がAlaにより置換され、そしてPro396がLeuにより置換されているFc領域を含む、請求項１〜１０のいずれか一項の使用のための組成物または併用剤。
【請求項１２】
前記抗体が、Phe243がLeuにより置換され、Arg292がProにより置換され、Tyr300がLeuにより置換され、Val305がLeuまたはIleにより置換され、Lys326がAlaにより置換され、Pro396がLeuにより置換され、そしてGlu333がAlaにより置換されているFc領域を含む、請求項１〜１０のいずれか一項の使用のための組成物または併用剤。
【請求項１３】
以下の表5;
【表５】
2020526568.tif 000056
に示されるCDRを有するヒト化モノクローナル抗CD19抗体。
【請求項１４】
配列番号39のVH配列１〜121と配列番号37のVL配列１〜103とを有する、請求項１３のヒト化モノクローナル抗CD19抗体。
【請求項１５】
配列番号39の重鎖と配列番号37の軽鎖とを有する、請求項１３のヒト化モノクローナル抗CD19抗体。
【請求項１６】
癌、好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（DLBCL）又は濾胞性リンパ腫（FL）の治療に使用するための、請求項１３〜１５の何れか一項に記載のヒト化モノクローナル抗CD19抗体。
【国際調査報告】
2020526568.tif 000057
2020526568.tif 000058
2020526568.tif 000059
2020526568.tif 000060
2020526568.tif 000061