(57)【要約】  哺乳動物において特に睡眠、気力及び社会的相互作用を改善し、且つ心配又は不安を軽減するための方法が提供される。ある実施形態では、方法は、１９０ｍｇ〜３２００ｍｇの、クラタエバ（Crateva nurvala）、スギナ（Equisetum arvense）、テンダイウヤク（Lindera aggregata）及びトウモロコシ（Zea mays）を含む組成物の錠剤、カプセル又はカプレットを毎日投与することを含む。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物において睡眠及び社会的相互作用を改善し、且つ心配又は不安を軽減するための方法であって、それを必要とする哺乳動物に、
ｄ）クラタエバ（Crateva nurvala）、
ｅ）スギナ（Equisetum arvense）、及び
ｆ）テンダイウヤク（Lindera aggregata）
から選択される少なくとも２つの成分の抽出物を含む組成物の有効量を投与することを含み、前記組成物は、錠剤、カプセル及びカプレットの１つから選択される経口投与単位として製剤される、方法。
【請求項２】
前記有効量は、１日に約１９０ｍｇ〜２４００ｍｇである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組成物は、約８週間にわたって投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記組成物は、少なくとも３つの成分を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記テンダイウヤク（Lindera aggregata）は、標準化される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記スギナ（Equisetum arvense）は、標準化される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記クラタエバ（Crateva nurvala）は、標準化される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
哺乳動物において睡眠、気力及び社会的相互作用を改善し、且つ心配又は不安を軽減するための方法であって、それを必要とする哺乳動物に、
ｅ）クラタエバ（Crateva nurvala）、
ｆ）スギナ（Equisetum arvense）、
ｇ）テンダイウヤク（Lindera aggregata）、及び
ｈ）トウモロコシ（Zea mays）
から選択される少なくとも２つの成分の抽出物を含む組成物の有効量を投与することを含み、前記組成物は、錠剤、カプセル又はカプレットである、方法。
【請求項９】
前記有効量は、１日に約２８２ｍｇ〜約３２００ｍｇである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
期間は、約８週間である、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物は、クラタエバ（Crateva nurvala）、スギナ（Equisetum arvense）、テンダイウヤク（Lindera aggregata）及びトウモロコシ（Zea mays）の抽出物から構成される、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
前記テンダイウヤク（Lindera aggregata）は、標準化される、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
前記スギナ（Equisetum arvense）は、標準化される、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
前記クラタエバ（Crateva nurvala）は、標準化される、請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
前記トウモロコシ（Zea mays）は、標準化される、請求項８に記載の方法。
【請求項１６】
前記組成物は、約８週間にわたって投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１７】
哺乳動物に、
ｉ）クラタエバ（Crateva nurvala）、
ｊ）スギナ（Equisetum arvense）、
ｋ）テンダイウヤク（Lindera aggregata）、及び
ｌ）トウモロコシ（Zea mays）
から選択される少なくとも３つの成分の抽出物を含む組成物を投与することを含む方法であって、前記組成物は、錠剤、カプセル又はカプレットである、方法。
【請求項１８】
有効量は、１日に約２８２ｍｇ〜約３２００ｍｇであり、及び前記組成物は、約８週間にわたって投与される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記組成物の前記成分は、標準化される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記組成物は、少なくとも２週間にわたって投与される、請求項１７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本開示は、概して、睡眠及び社会的相互作用を改善し、心配又は不安を軽減し、且つ気力を高めるための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般的背景
睡眠不足、心配、不安及び社会的相互作用の困難さは、２１世紀の多くの人々に影響を与える共通の問題である。行動及び生活様式を変えることで、これらの問題が解決され得る。抗不安薬、抗うつ薬及び鎮静薬が処方され得る。レクリエーショナルドラッグ及びアルコールの使用の増加も、少なくとも部分的に、不安を軽減し、且つ個人の社会的状況における緊張を緩和することを促進するセルフメディケーションに起因し得ると考えられる。
【０００３】
神経沈静作用を有する薬草（バレリアン（Valerian）、スカルキャップ（Skullcap）、バーベイン（Vervain）、トケイソウ（Passionflower）等）及びアダプトゲン薬草（高麗人参（Ginseng）、アシュワカンダ（Withania）、ロディオラ（Rhodiola）及びエレウテロコッカス（Eleutherococcus）等）を含む、抗不安、鎮静及び催眠効果を有する薬草療法は、睡眠、不安及び社会的相互作用の改善に有効であることが示されている。
【０００４】
本研究は、クラタエバ（Crateva nurvala）の幹の樹皮及び／又は根、スギナ（Equisetum arvense）の茎（トクサ（Horsetail））並びにテンダイウヤク（Lindera aggregata）の根を含む植物エキスの組み合わせの、不安及び心配の症状の軽減並びに睡眠及び社会との関わりの改善における効能を評価した。
【０００５】
この組み合わせは、尿意切迫感、頻尿、失禁及び夜間頻尿の症状の低減に有効であることが示されている。テンダイウヤク（Lindera aggregata）の局所投与は、血行循環及び筋肉の弛緩に役立ち得、全身的には、テンダイウヤク（Lindera）は、炎症を低減し且つ関節痛を改善することも示されている（Bensky D, Gamble A. Chinese Herbal Materia Medica. Revised ed. Washington Eastland Press; 1993.）。スギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））及びクラタエバ（Crateva nurvala）についての従来のエビデンスは、睡眠及び情緒的健康の改善を示さなかった（BHP. British Herbal Pharmacopeia. West Yorks, UK: British Herbal Medicine Association; 1983; Bone K. Clinical Applications of Ayurvedic and Chinese Herbs; Monographs for the Western Herbal Practitioner. Warwick, Australia: Phytotherapy Press; 1997.）ものの、クラタエバ（Crateva nurvala）は、炎症（骨）を低減することも知られており、テンダイウヤク（Lindera aggregata）との併用で関節痛の低減に役立ち得る。更に、研究から、クラタエバ（Crateva nurvala）は、電解質レベルに影響を与え、カルシウムの保持を増やしてナトリウム及びマグネシウムの排出を増やし、腎尿管結石を減少させ得ることが示されている。クラタエバ（Crateva nurvala）の抗炎症及び筋肉の強壮効果を伴うその後の電解質状態の変化は、情緒的健康及び睡眠に影響を与え得る。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
概要
ランダム化二重盲検プラセボ対照試験により、睡眠の改善、心配又は不安の軽減及び社会的相互作用の改善における、クラタエバ（Crateva nurvala）の樹皮、スギナ（Equisetum arvense）の茎及びテンダイウヤク（Lindera aggregata）の根の様々な薬草の組み合わせの効果を評価した。治療のベースライン及び８週間後に２箇所の一次医療センターで１５０人の参加者に面談した。
【０００７】
更に、睡眠の改善、心配又は不安の軽減、社会的相互作用の改善及び気力の増加における、クラタエバ（Crateva nurvala）の樹皮、スギナ（Equisetum arvense）の茎、テンダイウヤク（Lindera aggregata）の根及びトウモロコシ（Zea mays）のひげの様々な薬草の組み合わせの効果を評価するためのランダム化二重盲検プラセボ対照試験も行った。
【０００８】
治療は、良質な耐容性を示し、治療の中止をもたらす有意な副作用は観察されなかった。２つの薬草の組み合わせでは、特に８週間にわたる治療で、睡眠の量及び質、心配又は不安の軽減、社会的相互作用の改善並びに気力の増加における統計的に有意且つ相乗的な改善を参加者が経験する結果となった。
【０００９】
本発明のある態様によれば、哺乳動物において睡眠及び社会的相互作用を改善し、且つ心配又は不安を軽減するための方法であって、それを必要とする哺乳動物に、
ａ）クラタエバ（Crateva nurvala）、
ｂ）スギナ（Equisetum arvense）、及び
ｃ）テンダイウヤク（Lindera aggregata）
から選択される少なくとも２つの成分の抽出物を含む組成物の有効量を投与することを含み、前記組成物は、錠剤、カプセル及びカプレットの１つから選択される経口投与単位として製剤される、方法が提供される。
【００１０】
本発明の別の態様によれば、哺乳動物において睡眠、気力及び社会的相互作用を改善し、且つ心配又は不安を軽減するための方法であって、それを必要とする哺乳動物に、
ａ）クラタエバ（Crateva nurvala）、
ｂ）スギナ（Equisetum arvense）、
ｃ）テンダイウヤク（Lindera aggregata）、及び
ｄ）トウモロコシ（Zea mays）
から選択される少なくとも２つの成分の抽出物を含む組成物の有効量を投与することを含み、前記組成物は、錠剤、カプセル又はカプレットである、方法が提供される。
【００１１】
本発明の更なる態様によれば、哺乳動物に、
ａ）クラタエバ（Crateva nurvala）、
ｂ）スギナ（Equisetum arvense）、
ｃ）テンダイウヤク（Lindera aggregata）、及び
ｄ）トウモロコシ（Zea mays）
から選択される少なくとも３つの成分の抽出物を含む組成物を投与することを含む方法であって、組成物は、錠剤、カプセル又はカプレットである、方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
図面
【図１Ａ】本明細書に記載の研究から得られた睡眠を標準偏差（ＳＤ）と共に示す。
【図１Ｂ】本明細書に記載の研究から得られた睡眠を標準偏差（ＳＤ）と共に示す。
【図１Ｃ】本明細書に記載の研究から得られた睡眠を標準偏差（ＳＤ）と共に示す。
【図２Ａ】本明細書に記載の研究から得られた社会的相互作用を標準偏差と共に示す。
【図２Ｂ】本明細書に記載の研究から得られた社会的相互作用を標準偏差と共に示す。
【図３Ａ】本明細書に記載の研究から得られた心配又は不安を標準偏差と共に示す。
【図３Ｂ】本明細書に記載の研究から得られた心配又は不安を標準偏差と共に示す。
【図３Ｃ】本明細書に記載の研究から得られた心配又は不安を標準偏差と共に示す。
【図４】本明細書で提示される４つの薬草の組み合わせの研究から得られた睡眠の開始（総平均）を標準偏差と共に示す。
【図５】本明細書で提示される４つの薬草の組み合わせの研究から得られた睡眠の維持（総平均）を標準偏差と共に示す。
【図６】本明細書で提示される４つの薬草の組み合わせの研究から得られた気力（総平均）を標準偏差と共に示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
好ましい実施形態の詳細な説明
本発明の好ましい特徴、実施形態及び変形形態は、本発明を行うのに十分な情報を当業者に提供する以下の詳細な説明から明らかになるであろう。詳細な説明は、決して本発明の前述の概要の範囲を限定するものとしてみなされるべきではない。
【００１４】
Brisbaneホリスティッククリニックから１５０人の成人を募集し、投与（男性３５人；女性４０人）及びプラセボ（男性２７人；女性４８人）治療群に均等に分け、６３．５歳の平均年齢及び７８．８ｋｇの体重でこの研究を開始した。
【００１５】
全ての参加者は、睡眠不足若しくは不安に悩まされているか、又は社会との関わりに関する心配を有していると答えた。参加者は、その時点で妊娠又は授乳中ではなく、利尿薬及び膀胱薬の規制されていない服薬を含む薬物を使用しておらず、精神的健康の問題又は精神病性障害についての治療を受けておらず、近い時期に子宮摘出又は前立腺切除などの手術を受けておらず、治療を受けていない糖尿病、心臓疾患、膵臓疾患、肝臓疾患、腎臓疾患、神経疾患、再発性尿路感染症、前立腺肥大及び慢性炎性疾患を有していなかった。
【００１６】
治療プロトコルは、１カプセル当たり４２０ｍｇの、クラタエバ（Crateva nurvala）、スギナ（Equisetum arvense）及びテンダイウヤク（Lindera aggregata）を含有する、本明細書に示された様々な配合のブレンド物を含む２つのカプセル、又は色を合わせたセルロースを含有する、色を合わせた植物性カプセルプラセボを８週間にわたって毎日摂取することから構成された。１９０ｍｇ〜２４００ｍｇの、本明細書で示されている様々な配合の範囲も試験され、効能を実証した。
【００１７】
抽出物の同一性は、完成品のカプセルの製造前に高性能薄層クロマトグラフィーにより確認した。カプセルは、Good Manufacturing Practice for Medicinal Products, PE 009-9-15 January 2009へのＰＩＣ／Ｓ指針に準拠した、豪州保健省薬品・医薬品行政局によって認可された施設で製造した。睡眠、心配、不安及び社会的相互作用に対する治療の効能は、次の領域における質問への回答を比べることにより評価した。
睡眠
１）必要とする量の睡眠が取れなかったか？
２）良質な夜の休息を取ることができなかったと感じたか？
３）夜に睡眠から目覚めたか？
心配／不安
１）自分がどこかおかしいと感じたか？
２）困惑を経験したか？
社会的相互作用
１）家族及び友人との関係に心配があったか？
２）パートナー又は配偶者との問題を有していたか？
【００１８】
これらの質問に対する参加者の回答を（１）全くなし、（２）わずかにのみある、（３）若干ある、（４）かなりある、（５）大いにある、（６）非常にあるとして１〜６で点数付けした回答の６点評価で尋ねた。
【００１９】
上の基準を満たす参加者は、書面によるインフォームドコンセントが与えられ、４つの方法のブロックにより、第三者によって治療及びプラセボのいずれかに無作為抽出された。参加者及び研究者の両方は、統計的分析の完了後まで治療割り当てを隠されたままであった。
【００２０】
２つの治療の全ての比較（ベースラインからの変化として）は、反復測定のために調整された混合効果順序ロジスティック回帰を使用して作成した。反復測定のｐ値を調整するためにHolm評価試験を使用した。
【００２１】
プラセボ群及び治療群のベースラインの人口学的特徴及び症状の特徴は、２つの群間で類似していた。
【００２２】
対照群と比較した投与群において、研究開始から試験終了まで（第８週）、睡眠、心配又は不安及び社会的相互作用を含む全ての質問のスコアで有意な改善（すなわち減少）が観察された。各測定の平均スコアは、図１Ａ〜１Ｃ、２Ａ、２Ｂ及び３Ａ〜３Ｃに示されている。更に、図１Ａ〜Ｃ、２Ａ、２Ｂ及び３Ａ〜Ｃに標準偏差（ＳＤ）が示されており、これは、グラフの棒により示される平均からの群の広がりの大きさを示す。標準偏差は、＋／−の記号を使用して下で示される。標準偏差は、一連の値の平均値を得ることにより決定し、その値と平均値との間の差を群の各値について計算した。最後に、加重差を合計し、適切な所定の数で割ることで平均からの群の広がりを得た。
【００２３】
試験の開始時、完了した参加者の５０％超（対照群で７３人、治療群で６９人）は、睡眠に関する測定について４以上のスコア（＋／−１．６のＳＤ；最大スコア６）を報告した（例えば、１．必要とする量の睡眠が取れなかった、２．良質な夜の休息を取ることができなかった、及び３．夜中に目覚めた）。対照群では結果が変化しなかった一方、投与群の５０％の患者は、試験の終了までに２以下のスコア（＋／−１．７のＳＤ）を報告した（図１Ａ〜Ｃ）。
【００２４】
社会的相互作用の尺度についての結果は、図２Ａ、２Ｂに示されている通り（例えば、１．家族及び友人との関係における心配、２．パートナー又は配偶者との問題）、治療群で最終スコアの改善／減少を示した。対照群についてのメジアンスコアは、試験の開始から終了まで１（＋／−０．９のＳＤ）のままであった。しかしながら、治療群について、最大スコアが２ポイント（＋／−０．５のＳＤ；開始時６であり試験完了時４）変化し、測定されたパラメータの改善が示唆された。
【００２５】
図３Ａ〜Ｃに示されている通り（例えば、１．自分についてどこかおかしいと感じた、２．不満又は苛立ちを感じた、及び３．困惑を経験した）、同様の改善が心配又は不安の尺度について観察された。対照群についてのメジアン及び平均スコアは、試験の開始から終了まで同じままであった一方、治療群は、患者の５０％でスコアの減少を示し、試験開始時の４のスコア（＋／−１．４のＳＤ）と比較して試験の終了時に１以下のスコア（＋／−１．２のＳＤ）を与えた。
【００２６】
表１に示すように、３つの薬草の組み合わせの具体的な典型的な用量レベルが１つの実施形態として示されている。
【００２７】
【表１】
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【００２８】
３０００ｍｇの乾燥重量のクラタエバ（Crateva nurvala）は、１２０ｍｇの濃縮薬草抽出物重量のために、９５％のエタノールと５％の水とを使用して２５対１の抽出物比率まで減らした。１５００ｍｇの乾燥重量のテンダイウヤク（Lindera aggregata）は、１５０ｍｇの濃縮薬草抽出物重量のために、１００％の水を使用して１０対１の抽出物比率まで減らした。１５００ｍｇの乾燥重量のスギナ（Equisetum arvense）は、１５０ｍｇの濃縮薬草抽出物重量のために、７０％のエタノールと３０％の水とを使用して１０対１の抽出物比率まで減らした。少なくともこの実施形態では、使用した抽出溶媒は、エタノール及び水であった。
【００２９】
また別の実施形態では、同様の結果を得るために、この業界で公知の他の溶媒も使用することができる。
【００３０】
また別の実施形態では、比率は、限定するものでないが、９０：１０、８５：１５、８０：２０、７５：２５、６５：３５、６０：４０、５５：４５及び５０：５０を含む群から選択することができる。
【００３１】
また別の実施形態では、抽出物は、２５：１及び１０：１である。
【００３２】
また別の実施形態では、抽出物比率は、２０：１である。
【００３３】
また別の実施形態では、抽出物比率は、１５：１である。
【００３４】
また別の実施形態では、抽出物比率は、５：１である。
【００３５】
３つの薬草の組み合わせのための本発明の成分は、本明細書で説明される有益性及び優位性を与えるために相乗的に作用する。相乗作用を証明し得る１つの方法は、メジアン効果式：
【数１】
2020522460.tif 000004
を使用することである（Tallarida, Ronald J.,“Quantitative Methods for Assessing Drug Synergism”, Genes & Cancer 2(11) 1003-1008 (Jan. 24, 2012)； Chou, Ting-Chao,“Drug Combination Studies and Their Synergy Quantification Using the Chou-Talalay Method”, Cancer Res. 70(2) (Jan. 15, 2010)；及びBreitinger, Hans-Georg, “Drug Synergy - Mechanisms and Methods of Analysis”, 159, Toxicity and Drug Testing (Feb. 10, 2012)）を参照されたい）。この式では、所定の結果を得るために全ての成分と組み合わせて使用された個々の成分の量は、同じ所定の結果を得るために単独で使用された個々の成分の量によって割られる。式が１以下である場合、その組成物は、相乗的である（Breitingerの１５９ページを参照されたい）。
【００３６】
下の表２Ａ〜２Ｃは、示されている単一の薬草についての、症状の示されているパーセント改善率を達成する投与量レベルを示す。
【００３７】
【表２】
2020522460.tif 000005
【００３８】
【表３】
2020522460.tif 000006
【００３９】
【表４】
2020522460.tif 000007
【００４０】
【表５】
2020522460.tif 000008
【００４１】
【表６】
2020522460.tif 000009
【００４２】
３つの薬草の組み合わせについての表２Ａ〜２Ｃ及び３Ａ、３Ｂに示されているように、睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける７０％の改善を達成するために、１カプセル当たり３３ｇの乾燥重量等価のブレンド物を使用し、ここで、１５ｇがクラタエバ（Crateva nurvala）であり、９ｇがテンダイウヤク（Lindera aggregata）であり、及び９ｇがスギナ（Equisetum arvense）であった。それぞれ睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける７０％の改善の同じ結果を達成するために、５０ｇのクラタエバ（Crateva nurvala）が必要とされ、３５ｇのスギナ（Equisetum arvense）が必要とされ、及び４０ｇのテンダイウヤク（Lindera aggregata）が必要とされた。これらの数字をメジアン効果式に適用すると、１５／５０＋９／３５＋９／４０＝０．７８である。この数字は、１より小さいため、組成物は、相乗的である。これらの個々の薬草について、睡眠における７０％の改善の効果を得るために必要とされるそれぞれの投与量を決定するために試験した。しかし、これらの個々の投与量は、長期間にわたって安全であると考えられる推奨投与量を超えており、長期間の使用は推奨されない。
【００４３】
３つの薬草の組み合わせについての表２Ａ〜Ｃ及び３Ａ、３Ｂに示されているように、睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける５０％の改善を達成するために、１カプセル当たり１２ｇの乾燥重量等価のブレンド物を使用し、ここで、６ｇがクラタエバ（Crateva nurvala）であり、３ｇがテンダイウヤク（Lindera aggregata）であり、及び３ｇがスギナ（Equisetum arvense）であった。それぞれ睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける５０％の改善の同じ結果を達成するために、２０ｇのクラタエバ（Crateva nurvala）が必要とされ、１２ｇのスギナ（Equisetum arvense）が必要とされ、及び１５ｇのテンダイウヤク（Lindera aggregata）が必要とされた。これらの数字をメジアン効果式に適用すると、６／２０＋３／１２＋３／１５＝０．７５である。この数字は、１より小さいため、組成物は、相乗的である。これらの個々の薬草について、睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける５０％の改善の効果を得るために必要とされるそれぞれの投与量を決定するために試験した。しかし、これらの個々の投与量は、長期間にわたって安全であると考えられる推奨投与量を超えており、長期間の使用は推奨されない。
【００４４】
３つの薬草の組み合わせについての表２Ａ〜２Ｃ及び３Ａ、３Ｂに示されているように、睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける１０％の改善を達成するために、１カプセル当たり２．５ｇの乾燥重量等価のブレンド物を使用し、ここで、１ｇがクラタエバ（Crateva nurvala）であり、０．７５ｇがテンダイウヤク（Lindera aggregata）であり、及び０．７５ｇがスギナ（Equisetum arvense）であった。それぞれ睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける１０％の改善の同じ結果を達成するために、４．５ｇのクラタエバ（Crateva nurvala）が必要とされ、２．７５ｇのスギナ（Equisetum arvense）が必要とされ、及び３．２５ｇのテンダイウヤク（Lindera aggregata）が必要とされた。これらの数字をメジアン効果式に適用すると、１／４．５＋０．７５／２．７＋０．７５／３．２５＝０．７３である。この数字は、１より小さいため、組成物は、相乗的である。
【００４５】
本明細書の結果から実証されるように、ある実施形態では、クラタエバ（Crateva nurvala）、スギナ（Equisetum arvense）及びテンダイウヤク（Lindera aggregata）の組み合わせは、治療８週間後に心配及び不安を平均で５０％だけ統計学的に有意に減少させる結果となった。減少は、自分についてどこかおかしいと感じる感覚（４６％減少、３．５から１．９）、不満又は苛立ちを感じる感覚（４９％減少、３．５から１．８）、及び困惑を経験する（５４％減少、２．８から１．３）に対する回答でみられた。３つの薬草の組み合わせは、必要とする量の睡眠が取れたか否か（５２％改善、４．４から２．１の回答）、良質な夜の休息を取ることができなかったか否か（５２％改善、４．８から２．３）、及び夜中に目覚めたか否か（４９％改善、４．９から２．５）に対する回答によってみられるように、平均５１％の睡眠の改善も示した。社会的相互作用も平均３６％改善した。家族及び友人との関係における心配についての総平均スコアは、３３％減少し（１．５から１．０）、パートナー又は配偶者との問題に対する回答では３８％の減少（１．６から１．０）がみられた。
【００４６】
また別の実施形態では、クラタエバ（Crateva nurvala）の樹皮、スギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））の幹、テンダイウヤク（Lindera aggregata）の根及びトウモロコシ（Zea mays）のひげ（コーンシルク（Cornsilk））の４つの薬草の組み合わせを、上の３つの薬草の組み合わせと同じパラメータを使用して試験した。図４〜６のデータに示されているように、４つの薬草を使用した実験の結果から、睡眠の開始、睡眠の維持及び気力レベルの増加における統計的に有意な改善が実証された。
【００４７】
【表７】
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【００４８】
表４に示されている通り、４つの薬草の組み合わせの投与量レベルが１つの実施形態として示されている。２０００ｍｇの乾燥重量のクラタエバ（Crateva nurvala）は、８０ｍｇの濃縮薬草抽出物重量のために、９５％のエタノールと５％の水とを使用して２５対１の抽出物比率まで減らした。１２５０ｍｇの乾燥重量のテンダイウヤク（Lindera aggregata）は、１２５ｍｇの濃縮薬草抽出物重量のために、１００％の水を使用して１０対１の抽出物比率まで減らした。１２５０ｍｇの乾燥重量のスギナ（Equisetum arvense）は、１２５ｍｇの濃縮薬草抽出物重量のために、７０％のエタノールと３０％の水とを使用して１０対１の抽出物比率まで減らした。２２５０ｍｇの乾燥重量のトウモロコシ（Zea mays）は、２２５ｍｇの濃縮薬草抽出物重量のために、７０％のエタノールと３０％の水とを使用して１０対１の抽出物比率まで減らした。この実施形態では、使用した抽出溶媒は、エタノール及び水であった。
【００４９】
本明細書に記載の様々な実施形態のいずれかと共に、当該技術分野で公知の他の溶媒を使用できることが理解されるはずである。
【００５０】
また別の実施形態では、クラタエバ（Crateva nurvala）は、ジオスゲニン、ルペノン、ルペール、タンニン及び／又はカダビシンで標準化することができる。
【００５１】
また別の実施形態では、スギナ（Equisetum arvense）は、シリカ及び／又はコーヒー酸により標準化することができる。
【００５２】
また別の実施形態では、テンダイウヤク（Lindera aggregata）は、ボルネオール、リンデララクトン、リンデレン及び／リンデラアズレンにより標準化することができる。
【００５３】
また別の実施形態では、トウモロコシ（Zea mays）は、マイゼル酸（maizeric acid）により標準化することができる。
【００５４】
４つの薬草の組み合わせに関する、本開示の特許請求される組成物の結果は、本明細書で説明した優位性及び有益性を与えるために相乗的に作用する。上で説明したように、相乗作用は、メジアン効果式：
【数２】
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を使用して証明することができる。
【００５５】
この式では、所定の結果を得るために全ての成分と組み合わせて使用された個々の成分の量は、同じ所定の結果を得るために単独で使用された個々の成分の量によって割られる。式が１以下である場合、その組成物は、相乗的である（Breitingerの１５９ページを参照されたい）。
【００５６】
示されている単一の薬草及び示されている薬草の組み合わせについての７０％、５０％及び１０％の改善の計算値を下に提示する。
【００５７】
具体的な結果としての睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける７０％の改善の獲得（ＥＤ５０）：
・製剤Ａ（クラタエバ（Crateva））：ＥＤ７０は、５０ｇであり、したがってＡ＝５０
・製剤Ｂ（スギナ（Equisetum））：ＥＤ７０は、３５ｇであり、したがってＢ＝３５
・製剤Ｃ（テンダイウヤク（Lindera））：ＥＤ７０は、４０ｇであり、したがってＣ＝４０
・製剤Ｄ（トウモロコシ（Zea））：ＥＤ７０は、７０ｇであり、したがってＤ＝７０
【００５８】
４つの薬草では、ＥＤ７０は、１０ｇのクラタエバ（Crateva）＋６ｇのスギナ（Equisetum）＋６ｇのテンダイウヤク（Lindera）＋１６ｇのトウモロコシ（Zea）の４つの薬草のブレンド物で達成される。したがって、
ａ＝１０；ｂ＝６；ｃ＝６；ｄ＝１６
である。上の数値によると、ａ／Ａ＋ｂ／Ｂ＋ｃ／Ｃ＋ｄ／Ｄ  １０／５０＋６／３５＋６／４０＋１６／７０＝０．２０＋０．１７＋０．１５＋０．２３＝０．７５である。
【００５９】
３つの薬草では、ＥＤ７０は、１５ｇのクラタエバ（Crateva）＋９ｇのトクサ（Horsetail）＋９ｇのテンダイウヤク（Lindera）の３つの薬草のブレンド物で達成される。したがって、
ａ＝１５；ｂ＝９；ｃ＝９
である。上の数値によると、ａ／Ａ＋ｂ／Ｂ＋ｃ／Ｃ＋ｄ／Ｄ  １５／５０＋９／３５＋９／４０＝０．３０＋０．２６＋０．２２＝０．７８である。
【００６０】
具体的な結果としての睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける５０％の改善の獲得（ＥＤ５０）：
・製剤Ａ（クラタエバ（Crateva））：ＥＤ５０は、２０ｇであり、したがってＡ＝２０
・製剤Ｂ（スギナ（Equisetum））：ＥＤ５０は、１２ｇであり、したがってＢ＝１２
・製剤Ｃ（テンダイウヤク（Lindera））：ＥＤ５０は、１５ｇであり、したがってＣ＝１５
・製剤Ｄ（トウモロコシ（Zea））：ＥＤ５０は、３０ｇであり、したがってＤ＝３０
【００６１】
４つの薬草では、ＥＤ５０は、４ｇのクラタエバ（Crateva）＋２．５ｇのスギナ（Equisetum）＋２．５ｇのテンダイウヤク（Lindera）＋４．５ｇのトウモロコシ（Zea）の４つの薬草のブレンド物で達成される。したがって、
ａ＝４；ｂ＝２．５；ｃ＝２．５；ｄ＝４．５
である。上の数値によると、ａ／Ａ＋ｂ／Ｂ＋ｃ／Ｃ＋ｄ／Ｄ  ４／２０＋２．５／１２＋２．５／１５＋４．５／３０＝０．２０＋０．２１＋０．１７＋０．１５＝０．７３である。
【００６２】
３つの薬草では、ＥＤ５０は、６ｇのクラタエバ（Crateva）＋３ｇのトクサ（Horsetail）＋３ｇのテンダイウヤク（Lindera）の３つの薬草のブレンド物で達成される。したがって、
ａ＝６；ｂ＝３；ｃ＝３
である。上の数値によると、ａ／Ａ＋ｂ／Ｂ＋ｃ／Ｃ＝６／２０＋３／１２＋３／１５＝０．３０＋０．２５＋０．２０＝０．７５である。
【００６３】
具体的な結果としての睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける１０％の改善の獲得（すなわちＥＤ１０）：
・製剤Ａ（クラタエバ（Crateva））：ＥＤ１０は、４．５ｇであり、したがってＡ＝４．５
・製剤Ｂ（スギナ（Equisetum））：ＥＤ１０は、２．７５ｇであり、したがってＢ＝２．７５
・製剤Ｃ（テンダイウヤク（Lindera））：ＥＤ１０は、３．２５ｇであり、したがってＣ＝３．２５
・製剤Ｄ（トウモロコシ（Zea））：ＥＤ１０は、６ｇであり、したがってＤ＝６
【００６４】
４つの薬草では、ＥＤ１０は、０．８ｇのクラタエバ（Crateva）＋０．５ｇのスギナ（Equisetum）＋０．５ｇのテンダイウヤク（Lindera）＋１．５ｇのトウモロコシ（Zea）の４つの薬草のブレンド物で達成される。したがって、
ａ＝０．８；ｂ＝０．５；ｃ＝０．５；ｄ＝１．５
である。上の数値によると、ａ／Ａ＋ｂ／Ｂ＋ｃ／Ｃ＋ｄ／Ｄ  ０．８／４．５＋０．５／２．７５＋０．５／３．２５＋１．５／６＝０．１８＋０．１８＋０．１５＋０．２５＝０．７６である。
【００６５】
３つの薬草では、ＥＤ１０は、１ｇのクラタエバ（Crateva）＋０．７５ｇのトクサ（Horsetail）＋０．７５ｇのテンダイウヤク（Lindera）の３つの薬草の薬草ブレンド物で達成される。したがって、
ａ＝１；ｂ＝０．７５；ｃ＝０．７５
である。上の数値によると、ａ／Ａ＋ｂ／Ｂ＋ｃ／Ｃ＝１／４．５＋０．７５／２．７５＋０．７５／３．２５＝０．２２＋０．２７＋０．２３＝０．７２（厳密な端数処理＝０．７３）である。
【００６６】
表２Ａ〜３Ｂ及び上の計算は、睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける７０％、５０％及び１０％の改善を示した様々な薬草組成物及び投与量からのデータを示す。
【００６７】
４つの薬草の組み合わせについての表２Ａ〜３Ｂで示されているように、睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける７０％の改善を達成するために、１カプセル当たり３８ｇの乾燥重量等価のブレンド物を使用し、ここで、１０ｇがクラタエバ（Crateva nurvala）であり、６ｇがスギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））であり、６ｇがテンダイウヤク（Lindera aggregata）であり、及び１６ｇがトウモロコシ（Zea mays）（コーンシルク（Cornsilk））であった。それぞれ睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける７０％の改善の同じ結果を達成するために、５０ｇのクラタエバ（Crateva nurvala）が必要とされ、３５ｇのスギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））が必要とされ、４０ｇのテンダイウヤク（Lindera aggregata）が必要とされ、及び７０ｇのトウモロコシ（Zea mays）（コーンシルク（Cornsilk））が必要とされた。これらの数字をメジアン効果式に適用すると、１０／５０＋６／３５＋６／４０＋１６／７０＝０．７５であり、１より小さい数字が得られ、これにより組成物が相乗的であると見積もられる。
【００６８】
４つの薬草の組み合わせについての表Ａ〜３Ｃに示されているように、睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける５０％の改善を達成するために、１カプセル当たり１３．５ｇの乾燥重量等価のブレンド物を使用し、ここで、４ｇがクラタエバ（Crateva nurvala）であり、２．５ｇがスギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））であり、２．５ｇがテンダイウヤク（Lindera aggregata）であり、及び４．５ｇがトウモロコシ（Zea mays）（コーンシルク（Cornsilk））であった。それぞれ睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける５０％の改善の同じ結果を達成するために、２０ｇのクラタエバ（Crateva nurvala）が必要とされ、１２ｇのスギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））が必要とされ、１５ｇのテンダイウヤク（Lindera aggregata）が必要とされ、及び３０ｇのトウモロコシ（Zea mays）（コーンシルク（Cornsilk））が必要とされた。これらの数字をメジアン効果式に適用すると、４／２０＋２．５／１２＋２．５／１５＋４．５／３０＝０．７３であり、１より小さい数字が得られ、これにより組成物が相乗的であると見積もられる。
【００６９】
４つの薬草の組み合わせについての表２Ａ〜３Ｃに示されているように、睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける１０％の改善を達成するために、１カプセル当たり３．３ｇの乾燥重量等価のブレンド物を使用し、ここで、０．８ｇがクラタエバ（Crateva nurvala）であり、０．５がスギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））であり、０．５ｇがテンダイウヤク（Lindera aggregata）であり、及び１．５ｇがトウモロコシ（Zea mays）（コーンシルク（Cornsilk））であった。それぞれ睡眠、心配又は不安及び社会との関わりにおける１０％の改善の同じ結果を達成するために、４．５ｇのクラタエバ（Crateva nurvala）が必要とされ、２．７５ｇのスギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））が必要とされ、３．２５ｇのテンダイウヤク（Lindera aggregata）が必要とされ、及び６ｇのトウモロコシ（Zea mays）（コーンシルク（Cornsilk））が必要とされた。これらの数字をメジアン効果式に適用すると、０．８／４．５＋０．５／２．７５＋０．５／３．２５＋１．５／６＝０．７６であり、１より小さい数字が得られ、これにより組成物が相乗的であると見積もられる。
【００７０】
試験
クラタエバ（Crateva nurvala）の樹皮、スギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））の茎、テンダイウヤク（Lindera aggregata）の根及びトウモロコシ（Zea mays）のひげ（コーンシルク（Cornsilk））を含む４つのハーブの組成物（表４で示されている通り）を臨床試験で使用することで、組成物を摂取した対象において、これがどのように睡眠の開始、睡眠の維持及び気力レベルの増加を改善することができるかを示した。薬草による治療のベースライン及び８週間後に参加者と面談した。参加者は、睡眠の開始、睡眠の維持及び気力レベルの増加における統計的に有意な改善を経験した。
【００７１】
４つの薬草の組み合わせを使用する治療プロトコルは、１カプセル当たり５５５ｍｇの、クラタエバ（Crateva nurvala）、スギナ（Equisetum arvense）、テンダイウヤク（Lindera aggregata）及びトウモロコシ（Zea mays）を含有する、本明細書に示された様々な配合のブレンド物を含む２つのカプセル、又は色を合わせたセルロースを含有する、色を合わせた植物性カプセルプラセボを８週間にわたって毎日摂取することから構成された。２８２〜３２００ｍｇの、本明細書で示されている様々な配合の範囲も試験され、５５５ｍｇのブレンド物ほど有効でないと判定された。
【００７２】
患者及び方法
この研究における参加者は、睡眠不足に悩まされている個人であった。参加者は、その時点で妊娠又は授乳中ではなく、精神的健康の問題又は精神病性障害についての治療を受けておらず、近い時期に子宮摘出又は前立腺切除などの手術を受けておらず、治療を受けていない糖尿病、心臓病、膵臓疾患、肝臓疾患、腎臓疾患、神経疾患、再発性尿路感染症、前立腺肥大及び慢性炎性疾患を有していなかった。
【００７３】
治療プロトコルは、毎日合計で４ｇのクラタエバ（Crateva nurvala）、２．５ｇのスギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））、２．５ｇのテンダイウヤク（Lindera aggregata）及び４．５ｇのトウモロコシ（Zea mays）（コーンシルク（Cornsilk））を摂取するために、４つの薬草ブレンド物を含む２つのカプセルを８週間にわたって毎日摂取することから構成された。
【００７４】
睡眠についての治療の有効性は、眠りにつくまでにどの程度時間がかかるか（すなわち睡眠の開始、分単位で測定）、夜中に目覚めた回数（すなわち睡眠の維持）及び気力（１〜１０の１０点満点で評価、１０が最も優れた気力のスコアである）を記録することによって評価した。試験開始時、４週目及び８週間の試験期間の終了時の３日間、参加者のこれらの値を記録した。
【００７５】
結果
ベースライン、治療４週間後及び８週間後に１２人の成人の参加者と面談した。（４つの）ハーブの組み合わせにより、参加者は、睡眠の開始、睡眠の維持及び気力レベルの増加における統計的に有意な改善を経験する結果となった。
【００７６】
睡眠の開始及び睡眠の維持についてのスコアで有意な改善（すなわち減少）が観察され、試験期間後に気力レベルが増加した。各測定の平均スコアは、図４〜６に示されている。更に、図４、５及び６に標準偏差（ＳＤ）が示されており、これは、グラフの棒により示される平均からの群の広がりについての大きさを示す。標準偏差は、＋／−の記号を使用して下で示される。標準偏差は、一連の値の平均値を得ることにより決定し、その値と平均値との間の差を群の各値について計算した。最後に、加重差を合計し、適切な所定の数で割ることで平均からの群の広がりを得た。
【００７７】
総平均スコアとしてのデータを分析した場合、睡眠の開始は、試験開始時の入眠前４５分（＋／−１２のＳＤ）から、４週目の２８分（＋／−１０のＳＤ）及び８週目の１２分（＋／−９のＳＤ）へ改善した。これは、統計的に有意であり、図４に示されているように７４％の減少である。
【００７８】
図５は、睡眠の維持（総平均）を示し、参加者は、試験開始時に夜中に平均６回（＋／−１．６のＳＤ）目覚めた。これは、４週目に３回（＋／−１．７のＳＤ）まで、８週目に一晩に１回（＋／−１．０のＳＤ）まで減少した。これは、統計的に有意であり、一晩当たり目覚めの出現が８３％減少した。
【００７９】
図６は、参加者の気力のレベル（総平均）を示す。気力は、１〜１０のスケールで参加者が自己評価した。１０が最も高く、且つ／又は最も優れた気力レベルである。総平均の気力の評価は、試験開始時に４（＋／−１．２のＳＤ）であり、４週目に５．５（＋／−１．５のＳＤ）まで、８週目に８．５（＋／−１．４のＳＤ）まで増加した。これは、統計的に有意であり、試験完了時に２倍を超える気力であった。
【００８０】
また別の実施形態では、睡眠の量及び意欲の改善、増加した気力レベル並びに特許請求される組成物を使用することで個人に生じた利益を実証するために、特許請求される組成物を更に試験した。それと関係して、１つ、２つ、３つ及び４つの薬草の組み合わせが含まれる、表４〜６に示されている様々な異なる薬草の組み合わせと、特許請求される組成物との比較も行った。結果から、特許請求される組成物は、本明細書に記載の有益性及び優位性を与えるために相乗的に機能することが実証される。
【００８１】
表５〜７には、睡眠における７０％、５０％及び１０％の改善を達成するために使用された全ての異なる可能な１つ、２つ、３つ及び４つの薬草の組み合わせが列挙されている。
【００８２】
【表８】
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【００８３】
【表９】
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【００８４】
【表１０】
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【００８５】
表５〜７に示されているように、上述したメジアン効果式を使用して１未満の値を有することにより、特許請求される組成物が相乗効果を有することが証明された。しかし、異なる１つ、２つ、３つ及び４つの薬草の組み合わせについての値は、７０％、５０％及び１０％の改善を達成するために１より大きい数になる結果となった。
【００８６】
この試験の結果は、クラタエバ（Crateva nurvala）、スギナ（Equisetum arvense）（トクサ（Horsetail））、テンダイウヤク（Lindera aggregata）及びトウモロコシ（Zea mays）（コーンシルク（Cornsilk））の組み合わせが、睡眠の開始及び睡眠の維持を大幅に改善させるだけでなく、昼間の気力レベルも増加させることを実証している。４つの薬草の組み合わせは、最小限の副作用のみを有する効果的な治療として機能する。
【００８７】
例えば、異なる問題を抱えているそれぞれ異なる年齢の３人の別々の個人を治療するために、４つの薬草の組み合わせを使用した。以下は、４つの薬草の組み合わせがどのようにこれらの個人の睡眠の開始、睡眠の維持及び気力を改善したかの事例である。
【００８８】
１つ目の事例では、５７歳の女性が、１年前に職場で腕の怪我をし、その際に痛みがその睡眠に著しく影響を及ぼしていることに気付いた。女性は、夜に３時間しか眠れないこともあった。女性は、コデイン及びパラセタモールを３か月摂取し、理学療法を受けながら用量を徐々に減らしていった。腕が完全に機能し、傷みがなくなるまで理学療法を約６か月継続した。最初の怪我から１年後、女性の睡眠は、依然として不眠症の発症及び継続により損なわれていた。女性は、「就寝時間が怖い」と述べ、ベッドで目が覚めたまま何時間も横になっていると述べていた。女性は、一日中不安を感じており、不安は夜に増加した。女性は、睡眠薬を摂取することを望んでいなかったものの、様々な沈静作用及び抗不安作用がある薬草による治療（バレリアン、カモミール、トケイソウを含む）を試みたが、わずかにのみ効果があった。更に、女性は、刺激がその睡眠を更に損なうことを心配していたため、生活様式を変え、朝の約束を避け、また夜の社会的な付き合いを避けた。薬草の組み合わせを開始して２週間後、女性は、改善に気付いた。１か月の時点で、女性は、２０分以内に入眠し（治療開始前には１時間より長くかかっていたのに対して）、一晩当たり１回のみ目覚めた（治療開始前には３回以上であったのに対して）。治療して２か月後、女性は、１０分以内に入眠し、夜間のほとんどにわたって眠っていた。女性の生活の質は大きく改善され、女性は、（夜の）社会的な付き合いの開始に自信を感じただけでなく、朝もより多くの付き合いを持つようになった。
【００８９】
２つ目の事例では、６３歳の男性が不安神経症、悩み及び睡眠不足を呈していた。男性は、ほとんどの時間にわたって神経質で不安を感じており、人々、特にあまり知らない人々と話をする自信がもはやないと述べていた。男性は、更に、過去１年にわたり日中の疲れが徐々に増してきていると感じており、友人と会うこと又は家族との関わりにほとんど興味がなく（病理検査は、正常の範囲内であった）、会話をすることにかなり労力を要すると述べた。加えて、男性は、夜間に３回にわたって目覚めて歩いていた。使用して１か月の時点で、男性の夜間の目覚めは毎晩１回のみ生じ、８週間の時点では、男性は、ほぼ夜間にわたって眠っていた。これは、男性にとって大きい改善であり、１年で初めて自らが正常であると感じた。更に、その心配及び不安に関する答えは、２か月の治療で改善され、発生しているものとしてこれらを評価する治療開始時の「非常にある」（６点）から、治療２か月後の「わずかにのみある」（２点）まで変化した。
【００９０】
３つ目の事例では、７９歳の男性が時間の経過と共に悪化する睡眠障害を呈していた。そのパターンは、容易に眠りにつくことができるものの、その後、夜中に６回にわたって目を覚まし、その半分の場合で排尿が生じ、その後、眠りに戻ることが困難であるというものであった。男性は、前立腺薬（フロマックス、タムスロシン）を用いることで夜間の排尿の減少に関して若干の改善を感じたものの、夜の目覚めについては減らなかった。男性は、退職した男性であり、朝早く起床する必要はなかったものの、ほとんど休めていると感じずに１２時間以上をベッドで過ごしていた。男性は、「睡眠不足によって自らの翌日の活動能力が大きく損なわれる．．．主に疲労感のために自らの人間関係が影響を受けていると感じている」とコメントした。更に、これらの問題に取り組み且つ支援するために、男性は、午後に水及びカフェインの摂取を避け、アルコールを飲むことを控えることにより生活様式を変えた。男性は、悩んでおり、昼間の疲労感のために活動を中止した。男性は、その年齢を考えれば自らの症状が改善することはないであろうと心配していた。使用して１か月の時点で、男性の夜の目覚めは、一晩に６回から３回まで減少した。８週間の時点で、男性の夜の目覚めは、２回に減少し、男性は、容易に眠りに戻ることができ、その昼間の気力が増加し、男性は、社会との関わりに対する意欲が増した。
【００９１】
本明細書で説明したように、また別の実施形態では、クラタエバ（Crateva nurvala）、スギナ（Equisetum arvense）、テンダイウヤク（Lindera aggregata）及びトウモロコシ（Zea mays）の組み合わせは、８週間の治療で睡眠の開始、睡眠の維持及び気力レベルにおける一層の改善をもたらした。睡眠の維持では８３％改善し（平均で一晩に６回にわたって目覚めたのが一晩に１回に減少）、睡眠の開始では７４％改善（平均４５分が１２分まで減少）した。更に、治療８週間後に４／１０の点数から８．５／１０の点数まで気力レベルにおける総平均が改善した。これは、１１２．５％の増加であり、又は気力レベルの２倍超の増加であった。睡眠不足及び関連する低い気力は、社会との関わり、活動及び生活の質を損なうことが知られていることから、この製剤でみられた睡眠及び気力レベルの改善はまた、社会的相互作用の改善及び生活の質の改善をもたらすであろう。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４】
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【図５】
2020522460.tif 000024
【図６】
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【国際調査報告】
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2020522460.tif 000027
2020522460.tif 000028