(57)【要約】  本発明は、プロラクチン受容体抗体ｍａｔ３の製剤に関し、男性型脱毛症および女性型脱毛症の治療におけるその使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
男性型脱毛症および女性型脱毛症の治療において使用するための、２０〜１２０ｍｇ／ｍｌの抗体を含んでなる、安定な抗体含有の液体のまたは凍結乾燥した製剤であって、該抗体がＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３であり、
ａ．１０〜５０ｍＭのアルギニンＨＣＬ
ｂ．５〜３０ｍＭのヒスチジン
ｃ．１〜１０ｍＭのメチオニン
ｄ．５０〜１５０ｐｐｍの非イオン性界面活性剤
ｅ．３４〜２９２ｍＭの糖
を含んでなる、製剤。
【請求項２】
前記非イオン性界面活性剤がポリソルベートであり、前記糖がスクロースである、請求項１に記載の製剤。
【請求項３】
ａ．３０ｍＭのＬ−アルギニンＨＣＬ
ｂ．１．８ｍＭのＬ−ヒスチジン
ｃ．８．２ｍＭのＬ−ヒスチジンＨＣＬ
ｄ．５ｍＭのＬ−メチオニン
ｅ．８０ｐｐｍのポリソルベート８０
ｆ．２３４ｍＭのスクロース
を含んでなる、請求項１または２に記載の製剤。
【請求項４】
前記抗体濃度が６０ｍｇ／ｋｇである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項５】
前記ＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３が、抗原結合ドメインを含んでなり、該抗原結合ドメインが重鎖可変領域および軽鎖結合可変領域を含んでなり、
ａ．該重鎖可変領域のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３のアミノ酸配列が、それぞれ、配列番号３、４および５のアミノ酸配列からなる群から選択されるものであり、かつ
ｂ．該軽鎖可変領域のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３のアミノ酸配列が、配列番号６、７および８からなる群から選択されるものである、
請求項１〜４のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項６】
前記ＬＣＤＲ１のアミノ酸配列が、配列番号９によるものである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項７】
前記ＰＲＬＲ抗体が、重鎖可変領域および軽鎖結合可変領域を含んでなり、
ａ．該重鎖可変領域のアミノ酸配列が、配列番号１のアミノ酸配列によるものであり、かつ
ｂ．該軽鎖可変領域のアミノ酸配列が、配列番号２によるものである、
請求項１〜６のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項８】
ｐＨ値の範囲が５．０〜６．５である、請求項４に記載の製剤。
【請求項９】
少なくとも６か月℃で安定である、請求項５に記載の製剤。
【請求項１０】
プロラクチノーマに起因するプロラクチン関連型の脱毛症を治療するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項１１】
神経遮断薬に起因するプロラクチン関連型の脱毛症を治療するための、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項１２】
産後脱毛症を治療するための、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プロラクチン受容体（ＰＲＬＲ）抗体ｍａｔ３の製剤、ならびに男性型脱毛症、女性型脱毛症およびプロラクチン関連形態の脱毛症（例えば、プロラクチノーマ、神経遮断薬などのプロラクチン増加薬に起因する脱毛症）、または高い全身プロラクチンレベルに関連する周産期の（peripartal）脱毛症を治療するためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
部分的には「アンドロゲン性脱毛症（Androgenetic Alopecia）」としても記載される男性型脱毛症および女性型脱毛症（Ｍ／ＦＰＨＬ）は、脱毛の最も一般的な原因であり、最大で男性の７０％および女性の４０％に関係する（Wolff, H. et al., (2016), Diagnostik und Therapie von Haar und Kopfhauterkrankungen Deutsches Arzteblatt、113、377-386）。Ｍ／ＦＰＨＬは主に頭皮の上部および前部に影響を及ぼし、それによって男性は生え際の後退が見られ、女性は毛髪の薄化が見られる。男性型脱毛症において男性ホルモンであるジヒドロテストステロンが主要な役割を果たしていると考えられている。女性における脱毛パターンは、男性型脱毛症とは異なっている。女性は、生え際は後退せず、完全な禿頭症とならない。
【０００３】
頭皮の発毛周期として：成長期は活発な発毛を特徴とし；退行期は退化を示し、その後休止期（休止）が続く。脱毛期（死毛髪（dead hair）の放出)は、テロゲン期の終わりと一致する。脱毛症は、任意の期における毛髪成長の乱れの結果であり得る。
【０００４】
休止期の脱毛は、多くの誘因（生理学的ストレス、情動性ストレス、健康状態、鉄欠乏および亜鉛欠乏）を有し得る。重要なことに、初期段階のＭ／ＦＰＨＬは、休止期の脱毛を示す（Cleveland Clinic Journal of Medicine(2009). 76, 361-367)。成長期の脱毛は、放射線または化学療法の結果であることが多い。
【０００５】
Ｍ／ＦＰＨＬを治療するためには、フィナステリドおよびミノキシジルなどのいくつかの薬剤が利用可能であるが、脱毛症の治療の医学的必要性は依然として満たされていない。身体がそれ自体の成長期の毛包を攻撃し、毛髪の成長を抑制または停止する円形脱毛症の治療には糖質コルチコイドが使用されている。ミノキシジルおよびフィナステリドは、男性におけるＭ／ＦＰＨＬの治療に使用されるが、ミノキシジルのみが女性におけるこの症状にも使用される。一般に、これらの治療には全て副作用がある。フィナステリドは、男性における性欲喪失およびインポテンスを引き起こし得、乳癌のような他の重篤な副作用が議論されている；これは女性において禁忌である。ミノキシジルは、就下性反応（hypostatic reactions）、狭心症および望ましくない発毛をもたらし得る。また、治療される全ての患者がこれらの薬物のいずれかで効果的に治療されるわけではない。したがって、Ｍ／ＦＰＨＬを治療する問題は明らかに解決されておらず、重要な医学的必要性は未だに満たされないままである。
【０００６】
齧歯類では、成体動物における剃毛実験を用いて、剃毛した領域における毛髪の再生を読み出しパラダイムとして分析することにより、化合物の脱毛に対する効果が分析された（British Journal of dermatology(2008).159-,300-305）。発毛がほとんど休止している時点(休止期)での成体動物の剃毛は、発毛を特徴とする成長期を誘導する。野生型マウスにおけるジヒドロテストステロンの適用は、剃毛後の毛髪の再生を遅延させるが、アンドロゲン受容体欠損マウスは、剃毛後の増強した再生を示すことを実証することができた（British Journal of dermatology 2008;159:300-305）。
【０００７】
注目すべきことに、ヒトアンドロゲン性脱毛症において有効性を示す全ての薬物は、これらの剃毛実験において有効であることが示された（すなわち、フィナステリド、ミノキシジルは、剃毛した野生型マウスにおいて毛髪再生を刺激することが示された（Int J Pharmaceutics（2005））. 306, 91-98;Med Chem Lett(2007). 17, 5983-5988)。
【０００８】
プロラクチン（ＰＲＬ）は、１９９個のアミノ酸からなるポリペプチドホルモンである。ＰＲＬは、ポリペプチドホルモンの成長ホルモン（ＧＨ）、胎盤ラクトゲン（ＰＬ）のファミリーに属し、下垂体のラクトトロピン細胞およびいくつかの下垂体外組織（例えば、リンパ球、乳房上皮細胞、子宮筋層、および前立腺）において合成される。２つの異なるプロモーターは、下垂体および下垂体外のＰＲＬ合成を調節する(BioEssays 28:1051-1055, 2006)。
【０００９】
ＰＲＬは、ＰＲＬ受容体（ＰＲＬＲ）、すなわちＩ型サイトカイン受容体スーパーファミリーに属する単一膜貫通受容体に結合する（Endocrine Reviews 19: 225-268, 1998）。リガンドが二量体化前のＰＲＬＲに結合すると、受容体に結合したＪＡＫ（主にＪＡＫ２、ヤーヌスキナーゼ２）は、相互にリン酸基転移して活性化する。さらに、ＰＲＬＲもリン酸化され、ＳＴＡＴ（シグナル伝達物質および転写活性化因子）などのＳＨ２ドメイン含有タンパク質に結合することができる。受容体に結合したＳＴＡＴは、続いてリン酸化され、受容体から解離し、核に移動し、そこで標的遺伝子の転写を刺激する。さらに、ＲａｓＲａｆ−ＭＡＰＫ経路の活性化およびＰＲＬＲによる細胞質ｓｒｃキナーゼの活性化が記載されている（Endocrine Reviews 19: 225-268, 1998）。
【００１０】
ＰＲＬＲ媒介シグナリングは、乳腺の発達、乳汁分泌、生殖、乳腺および前立腺の腫瘍増殖、自己免疫疾患、一般的な成長および代謝、ならびに免疫調節などの様々なプロセスにおいて役割を果たしている（Endocrine Reviews 19: 225-268, 1998; Annu. Rev. Physiol. 64:47-67, 2002)。
【００１１】
下垂体ＰＲＬ分泌は、ブロモクリプチンおよび他のドーパミン受容体２アゴニストの使用によって阻害することができる（Nature Clinical Practice Endocrinology and Metabolism 2(10): 571-581, 2006）。しかしながら、これらの薬剤は下垂体ＰＲＬ合成の阻害を首尾よく補償し得る下垂体外ＰＲＬ合成を抑制しないのでＰＲＬＲ媒介シグナリングがほぼ損なわれないことにつながる(Endocrine Reviews 19: 225-268, 1998)。従って、ドーパミン2型受容体アゴニストが、乳癌または全身性エリテマトーデスまたは慢性関節リウマチなどの自己免疫疾患に罹患している患者において、プロラクチンがこれらの疾患に関与しているにもかかわらず、有益でないことは驚くべきことではない（Breast Cancer Res. Treat. 14: 289-29, 1989; Lupus 7: 414-419, 1998)）。乳癌または自己免疫疾患においてそれぞれ中心的な役割を果たす乳癌細胞またはリンパ球における局所プロラクチン合成は、ドーパミン受容体アゴニストによって遮断されなかった。アンドロゲン受容体欠損マウスと同様のＰＲＬＲ欠損マウスは、増強した毛髪成長を示すが、野生型マウスへのプロラクチン投与は毛髪成長を遅らせる（J Endocrinol(2006).191-,415-425）。
【００１２】
Foitzikは、プロラクチンが発毛に影響を及ぼし得ることを報告した（Am J Pathol(2003),162(5),1611-1621)。Foitzikは、非生理学的に高いプロラクチン濃度でインキュベーションを行った後の毛髪成長のｉｎ  ｖｉｔｒｏ分析に基づいて、ＰＲＬＲアンタゴニストがアンドロゲン性脱毛症の治療に有用であり得ると結論付けた。しかしながら、ヒトＰＲＬは、ヒトＰＲＬ受容体ならびに成長ホルモン受容体（ＧＨＲ）と相互作用することができる。ＰＲＬを高用量で使用するために、どの受容体、すなわちＧＨＲ、ＰＲＬＲどちらが活性化されているのか不明である。またどの種類のＰＲＬＲアンタゴニストが本研究で使用さていたのか、特定も開示もされなかった。ＰＲＬ変異体ならびに競合的ＰＲＬＲアンタゴニストは、１）ＰＲＬ濃度の増加の存在下での、作用の競合機構によるＰＲＬＲ阻害の低下；２）減少した半減期；および３）ＰＲＬと比較した場合、ＰＲＬＲに対する親和性の低下というそれらの負の特性に起因して、毛包における局所ＰＲＬシグナル伝達の中和に有効ではない。
【００１３】
最近、ＰＲＬＲ媒介シグナリングを妨害するいくつかのＰＲＬＲ抗体が記載された（ＷＯ２０１２１６３９３２、ＷＯ２０１１０６９７９９、ＷＯ２０１１０６９７９５）。中和ＰＲＬＲ抗体（ＷＯ２０１１０６９７９９）は、剃毛した正常のプロラクチンおよび高いプロラクチンの血性マウスにおいて毛髪の再成長を刺激することが実証された。プロラクチン受容体（ＰＲＬＲ）がサルおよびマウスの皮膚の毛包において発現されること（実施例１を参照）、ならびにＰＲＬＲがＰＲＬＲ特異的抗体００５ＣＯ４の結合によって中和されることも実証できた。ＰＲＬＲ抗体００５ＣＯ４が剃毛した雌マウスにおいて毛髪の再生を刺激することも示すことができた（Otto,C.ら、(2015) Endocrinology156(11),4365-4373）。記載の特異的ＰＲＬＲ抗体は、ＧＨＲと相互作用しない。ＰＲＬＲの遮断は、同じ動物モデルにおいて抗アンドロゲンを用いて実証されているように、マウスにおける毛髪再生を増強する。しかし、マウスの背中の毛皮をヒトの頭皮の毛髪の関連モデルとして考えることはできない。従って、マウスの毛皮の毛に対する記載された効果自体は、ヒトの脱毛症における潜在的な治療効果に関して、単に示唆的であるが決定的ではない。しかしながら、マウスデータが決定的であり、アンドロゲン受容体およびＰＲＬＲの文脈におけるサルデータと一致するとしても、マウスの体幹毛（毛皮）の再成長がサルおよびヒトにおける頭皮毛の再成長とは異なる可能性があるという事実、ならびにヒトおよびサルにおける自発的脱毛後の毛髪の再成長がマウスの体幹を剃毛した後の再成長とは異なる可能性があるという事実によって、マウスデータのヒトの状況への翻訳が妨げられ得る。
【００１４】
Ｍ／ＦＰＨＬを治療するための薬剤の提供の医学的必要性は未だに満たされていない。本発明の根底にある課題は、Ｍ／ＦＰＨＬの治療に使用することができる新規な薬剤の提供にある。
【発明の概要】
【００１５】
本発明は、Ｍ／ＦＰＨＬについて最も受け入れられている非ヒト霊長類モデル（ベニガオザルモデル）において驚くほど効果的であるので、ヒトＭ／ＦＰＨＬに対しても新たな治療として有望である、ＰＲＬＲ抗体の安定な抗体含有製剤に関する。
【００１６】
ヒトの男性型脱毛症および女性型脱毛症について高い予測値を有する、この自発的な思春期後の頭皮の脱毛のサルモデルを使用する最近の研究では、動物を安定な抗体含有製剤で治療した場合のＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３の有効性が実証された。抗体自体はＰＣＴ出願ＷＯ２０１２１６３９３２の主題である一方、製剤はＰＣＴ出願ＷＯ２０１４０３６０７６に開示されており、その各々はその全体が参照により本明細書に組み込まれている。
【００１７】
ベニガオザルを使用することで安定なＰＲＬＲ抗体含有製剤による治療が、ヒト男性型脱毛症および女性型脱毛症において有効である可能性が高いことを実証することができた。非常に高い割合（８１％）の動物（１１個体中９個体）が化合物治療に応答したが、集団は年齢および性別に関して不均一であり、観察された領域は治療前に長期の禿頭症を示していた。１１個体のサルのうち５個体は＞２５齢であり、治療が特に困難であると考えられた。しかしながら、これらのうちの３個体が化合物治療に応答した。特に、完全に禿げた頭皮領域が最もよく反応した。ＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３は、Ｍ／ＦＰＨＬのための承認された２つだけの薬物（ミノキシジル（局所、連日））およびフィナステリド（経口、１日１回、男性のみ）よりも、より簡便なレジメン（皮下組織内投与、月に２回）を行うことでより高い有効性を示し、有効であった。（実施例４および図２−３参照）。
【００１８】
したがって、女性および男性におけるＭ／ＦＰＨＬのための新たな治療選択肢として安定なＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３含有製剤を考えることができる。特異的な安定な抗体ｍａｔ３含有製剤の提供により女性および男性におけるＭ／ＦＰＨＬのための新規な医薬を提供するという根本的な問題が解決される。本製剤は、例えばプロラクチノーマおよび、神経遮断薬などのプロラクチン増加薬によって引き起こされたプロラクチン関連型の脱毛症、あるいは高い全身プロラクチンレベルに関連する周産期の脱毛症の治療にも使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は、雌マウスおよびカニクイザル由来の乳腺および皮膚におけるＰＲＬＲに対する免疫反応性を示す図である。
【図１Ａ】図１Ａは、雌カニクイザルの皮膚を示す図である。
【図１Ｂ】図１Ｂは、雌カニクイザルの乳腺を示す図である。
【図１Ｃ】図１Ｃは、雌マウスの皮膚を示す図である。
【図１Ｄ】図１Ｄは、雌マウスの乳腺を示す図である。  ＰＲＬＲに対する免疫反応性は、雌マウス（図１Ｃ）およびサル（図１Ａ）の毛包および皮膚の表皮上皮細胞において見出し得る。両種からの乳房上皮細胞においてＰＲＬＲに対する強い免疫反応性が実証された（図１Ｂおよび１Ｄ）。これらの実験は、毛包生物学におけるＰＲＬＲ媒介シグナル伝達の役割の証拠を提供するものである。
【図２】図２は、毛髪成長の比較：ミノキシジルおよびフィナステリド対ＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３での治療の過去データを示す図である。  図２は、新規ＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３（図２Ｂ）での治療と比較した、承認された参照化合物であるミノキシジルおよびフィナステリドの発毛（図２Ａ）に対する効果の分析を表した図であり、両方の研究においてベニガオザルモデルが使用された。
【図２Ａ】ミノキシジルおよびフィナステリドを使用した研究において、ｍｇ／ｉｎ２で示す毛髪重量の変化を２０週間にわたって測定した（白四角：フィナステリドとビヒクルとの組み合わせ、黒四角：フィナステリドとミノキシジルとの組み合わせ；丸：ミノキシジル単独）。治療期間中、約１２週間後にプラトーに達し、続いて毛髪重量が減少した (Hair Growth Effects of Oral Administration of Finasteride, a Steroid 5a-Reductase Inhibitor, Alone and in a Combination with Topical Minoxidil in the Balding Stumptail Macaque. Diani, A.R.ら(1992). Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism,74,345-350)。
【図２Ｂ】ベニガオザルをＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３で治療した研究において、６ヶ月の治療期間にわたって、太い毛髪の割合を測定した。図２Ｂでは、この期間の間にプラトーに達しなかったことが示された。これらのデータは、参照化合物であるミノキシジルおよびフィナステリドと比較して、ＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３が硬毛再生に対して優れた効果を示すものである。禿げ領域における硬毛の割合の増加は、雌（四角）および雄（菱形）の動物において観察することができた。増加の範囲は、５０〜２２０本／ｃｍ２であり、若齢動物の方が老齢動物よりも良好に応答した（黒四角：雌、黒菱形：雄動物）。
【図３】図３は、硬毛（「濃い」）数を示す図である。図３は、２４週間の治療期間にわたる、「禿げ域」（Ａ）、 「移行域（transition）」（Ｂ）  、「後頭域（rear head）」（Ｃ）、および「体幹域（trunk）」（Ｄ）における硬毛数の分析を表す。そのような領域は、事前に基線で定め、毛髪スキャン（trichoscan）画像の左上および右下の角に生じている二つのタトゥーでマークしたため、研究の全期間にわたって全く同一の毛包をモニタリングすることが可能であった。禿げ域における硬毛数の劇的な増加（１０９％の増加）とともに、移行域における増加（２７％）が示された。予想通り、治療の開始前には軟毛がほとんどなく、硬毛が既に多く存在していた後頭域および体幹域では変化がわずかであった。
【発明の詳細な説明】
【００２０】
本発明は、安定なプロラクチン受容体抗体ｍａｔ３含有製剤が毛髪成長を促進し、したがって、対象に治療上の利益をもたらすことができるという発見に基づくものである。
【００２１】
定義
上記のように、本開示は、液体形態または凍結乾燥形態の抗体を、意図する保存条件で安定化させるＰＲＬＲ抗体製剤を提供するものである。本明細書に記載の製剤は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤または安定化剤を含み、好適なｐＨの緩衝媒体に含有され、生理液と実質的に等浸透圧である。全身投与のために、注射は、筋肉内注射、静脈内注射、腹腔内注射、および皮下注射を含め、投与の１つの可能な経路である。本開示のＰＲＬＲ抗体製剤は粘度が低いため、例えば、限外濾過および滅菌濾過によって簡便に処理することができ、静脈内注射および皮下注射の両方を含めた注射によって患者に投与することができる。さらに、本開示のＰＲＬＲ抗体製剤は実質的に等浸透圧であるため、組織損傷または他の有害な生理的影響を低減し、それによって好ましい患者耐容性および患者コンプライアンスの向上が達成される。
【００２２】
本明細書に記載の製剤は、製剤を緩衝するために使用される有機塩または無機塩以外の添加された塩が実質的に存在しないことを特徴とし、これは、他の安定化剤（例えば、スクロース）の濃度を増加させるための柔軟性をもたらす一方で、改善されたｉｎ  ｖｉｖｏ耐容性のために製剤のオスモル濃度を維持し、その結果、患者のコンプライアンスを増加させる。さらに、本明細書に記載の製剤の低粘度により限外濾過および滅菌濾過を含む簡便な処理が可能となり、かつ薬品溶液の針を介した注入が可能となる。
【００２３】
本明細書を解釈することを目的に以下の定義が適用されるものとする。以下に示す定義が、参照により本明細書に組み込まれる任意の文書を含め、任意の他の文書におけるその単語の用法と矛盾する場合、以下に示す定義は、反対の意味が明確に意図されていない限り(例えば、その用語が元から使用される文書において)、常に本明細書およびその関連する特許請求の範囲を解釈する目的のために把握されるものとする。
【００２４】
適切な場合、常に単数形で使用される用語は複数形も含み、逆もまた同様である。本明細書における「１つ（a）」の使用は、反対の記載がない限り、または「1以上（one or more）」の使用が明らかに不適切である場合を除き、「1つ以上（one or more）」を意味する。「または（or）」の使用は、反対の記載がない限り、「および/または（and/or）」を意味する。「含んでなる(comprise)」、「含んでなる(comprises)」、「含んでなる(comprising)」、「含む(include)」、「含む(includes)」、および「含む(including)」の使用は、交換可能であり、限定することが意図されていない。「など（such as）」という用語も、限定することが意図されていない。例えば、「含む(including)」という用語は、「含むが、それに限定されない（including, but not limited to）」ことを意味する。さらに、1つ以上の実施態様の説明で「含んでなる(comprising)」という用語を使用する場合、当業者は、いくつかの特定の事例では1つ以上の実施態様が、「本質的に〜からなる(consisting essentially of)および/または〜からなる(consisting of)」という用語を使用して代替的に説明され得ることを理解するであろう。
【００２５】
本明細書中で使用される場合、「粘度」という用語は、液体製剤の流動に対する抵抗をいい、例えば患者へ投与する間の液体製剤を注射針を通して注射する場合の抵抗をいう。本明細書に記載されるように、粘度測定は、２２℃〜２３℃などの規定された温度に設定されたペルティエ素子を用いたコーンアンドプレート手法によって行うことができる。典型的には、明確に定義された剪断応力勾配を液体製剤に適用し、得られた剪断速度を測定する。粘度は、せん断速度に対するせん断応力の比である。本明細書中で使用される場合、粘度は、２２℃〜２３℃でのＭＰａ−Ｓの単位（ここで、１ＭＰａ−Ｓ＝１ｃＰ）で表される。本明細書に開示される高濃度、低粘度、実質的に等浸透圧の製剤は、典型的には、２２℃〜２３℃で１〜８ＭＰａ−Ｓの範囲の粘度を有することを特徴とする。
【００２６】
本明細書で使用される場合、「オスモル濃度」という用語は、溶液1kg当たりの溶質のミリモル数として定義される溶質濃度の尺度を指す。マンニトール、デキストロース、グルコース、トレハロース、および/またはスクロースを含む糖または糖アルコールなどの1つ以上の安定剤を添加することによって、所望のレベルのオスモル濃度を達成することができる。オスモル濃度を提供するのに好適なさらなる安定剤は、handbook of Pharmaceutical Excipients (Fourth Edition, Royal Pharmaceutical Society of Great Britain, Science & Practice Publishers) またはRemingtons: The Science and Practice of Pharmacy (Nineteenth Edition, Mack Publishing Company)などの参考文献に記載されている。
【００２７】
本明細書中で使用される場合、「約（about）」という用語は、提供される単位値の＋／−１０％を指す。本明細書中で使用される場合、「実質的に（substantially）」という用語は、目的の特徴または特性の全体的または近似的な程度を示す定性的条件を指す。生物学分野の当業者であれば、生物学的および化学的な組成物および材料の試験、製造、および保存に影響を及ぼす変数が多数存在するため、ならびに生物学的および化学的な組成物および材料の試験、製造、および保存に使用される器具および機器には固有の誤差があるために、生物学的および化学的な現象に絶対的な結果が達成または回避されることは稀であることを、理解するであろう。したがって、この用語は、本明細書では多くの生物学的および化学的現象に固有である潜在的な完全性の欠如を捕捉するために実質的に使用されている。
【００２８】
本明細書中で使用される場合、「等浸透圧」および「等張」という用語は、「実質的に等浸透圧」および「実質的に等張」という用語と交換可能に使用され、そして別の溶液の浸透圧と同じかまたは少なくとも実質的に等価である浸透圧を有することによって特徴付けられる製剤をいい、これは、製剤中の溶質(透過性溶質および不透過性溶質の両方を含む)の合計濃度が、別の溶液中の溶質の合計数値と同じかまたは少なくとも実質的に等価である製剤によって達成される。従って、当業者であればｉｎ  ｖｉｖｏ投与のために使用される「等浸透圧」および「等張」製剤が一般に、約２７０ｍｍｏｌ／ｋｇ〜約３１０ｍｍｏｌ／ｋｇの範囲のオスモル濃度を有することを理解されるであろう一方、本開示の高濃度、低粘度製剤の文脈において、「等浸透圧」、「等張」、「実質的に等浸透圧」および「実質的に等張」という用語は、約２４０ｍｍｏｌ／ｋｇ〜約３８０ｍｍｏｌ／ｋｇ、または約２７０ｍｍｏｌ／ｋｇ〜約３７０ｍｍｏｌ／ｋｇ、約３００ｍｍｏｌ／ｋｇ〜約３３０ｍｍｏｌ／ｋｇの範囲のオスモル濃度を有する製剤を指すために交換可能に使用される。
【００２９】
本開示の高濃度、低粘度、実質的に等浸透圧のＰＲＬＲ製剤は、ｐＨ約５．０〜ｐＨ約６．５のｐＨにて、約０ｍＭ〜約７０ｍＭのヒスチジン；約５０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの非イオン性界面活性剤、例えば、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ（商標））８０および／またはポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ（商標））２０；約３４ｍＭ〜約２９２ｍＭの糖または糖アルコール、例えば、マンニトール、デキストロース、グルコース、トレハロース、および／またはスクロース；約０ｍＭ〜約５０ｍＭのアルギニン；約０ｍＭ〜約５０ｍＭのリジン；約０ｍＭ〜約２７０ｍＭのグリシンまたはアラニン；約０ｍＭ〜約１０ｍＭのメチオニン；および約１ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌのＰＲＬＲ抗体を含有している。本明細書に開示される製剤は、２２℃〜２３℃で約１〜約８ＭＰａ−Ｓの範囲の粘度、および約２４０〜約３８０ｍｍｏｌ／ｋｇの範囲の浸透圧を示す。
【００３０】
これらの製剤において、ヒスチジンは緩衝剤であり、製剤のｐＨを約ｐＨ５．０〜約ｐＨ６．５、または約ｐＨ５．５〜約ｐＨ６．０、例えば約ｐＨ５．０、約ｐＨ５．５、約ｐＨ６．０、または約ｐＨ６．５に維持するために使用することができる。
【００３１】
マンニトール、デキストロース、グルコース、トレハロース、および／またはスクロースなどの糖または糖アルコールは、液体製剤中、同様に凍結乾燥中のＰＲＬＲ抗体のための凍結保護剤および安定剤の両者として、別々にまたは組み合わせて使用される。
【００３２】
ポリソルベート２０およびポリソルベート８０を含むポリソルベート；ポロキサマー１８４および１８８を含むポリオキサマー；プルロニック（商標）ポリオール；および他のエチレン／ポリプロピレンブロックポリマーなどの非イオン性界面活性剤は、界面相互作用を低減することによって、処理中および保存中にＰＲＬＲ抗体を安定化させ、かつＰＲＬＲ抗体を吸着から防止する。
【００３３】
アルギニンは、タンパク質可溶化剤であり、抗体および他のタンパク質の凝集、例えばＰＲＬＲ抗体凝集、および他の可能性のある分解を低減する安定剤でもある。メチオニンは、処理中および保存中の抗体酸化を防止する抗酸化剤である。
【００３４】
糖および無機塩は、タンパク質安定剤として一般的に使用されているが、糖および無機塩の両者とも有効な等張化剤でもある。製剤が、ＰＲＬＲ抗体を安定化させるために１つ以上の高濃度の糖を必要とする場合、製剤のオスモル濃度を維持するために無機塩濃度を０とするべきであるか、または非常に低く維持するべきであり、その結果投与時の注射の痛みが軽減される。
【００３５】
本明細書中で使用される場合、「塩」という用語は、無機塩をいい、これには、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、硫酸ナトリウム（Ｎａ２Ｓ０４）、チオシアン酸ナトリウム（ＮａＳＣＮ）、塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ）、硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ４）、チオシアン酸アンモニウム（ＮＨ４ＳＣＮ）、硫酸アンモニウム（（ＮＨ４）２ＳＯ４）、塩化アンモニウム（ＮＨ４Ｃｌ）、塩化カルシウム（ＣａＣｌ２）、硫酸カルシウム（ＣａＳ０４）、塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２）など、またはそれらの組み合わせが挙げられる。本明細書で開示されるＰＲＬＲ抗体製剤は、添加される塩が実質的に存在しないことを特徴とし、したがって、本明細書では塩非含有抗体製剤と称される。当業者であればｐＨ調整によって導入される本開示の製剤中の無機塩の存在は、添加される塩であるとみなされないことを理解されよう。そのような無機塩は、ｐＨ調整によって導入される場合、本開示による製剤中に存在する場合、約２ｍＭの濃度を超えるべきではない。
【００３６】
本明細書中で使用される場合、「界面活性剤」という用語は、ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０または８０）、およびポリオキサマー（例えば、ポリオキサマー１８４または１８８）、プルロニック（商標）ポリオール、および他のエチレン／ポリプロピレンブロックポリマーを含むが、これらに限定されない非イオン性界面活性剤を含む。安定な高濃度のＰＲＬＲ抗体製剤を提供するのに有効な界面活性剤の量は、通常、５０ｐｐｍ〜３００ｐｐｍの範囲である。非イオン性界面活性剤の使用は、ＰＲＬＲ抗体の変性を引き起こすことなく製剤をせん断および表面応力に曝すことを可能にし、また処理および保存中の表面への吸着を軽減させることも可能にする。本明細書に開示される製剤は、例えば、１つ以上のポリソルベート（ポリソルベート２０または８０など）；１つ以上のポリオキサマー（ポロキサマー１８４または１８８など）；プルロニック（商標）ポリオール；および／または１つ以上のエチレン／ポリプロピレンブロックポリマーを含む、１つ以上の非イオン性界面活性剤を有する製剤を含むが、これらに限定されない。本明細書に例示されているのは、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ（商標）２０）または１０ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ（商標）８０）などのポリソルベートを有する製剤である。
【００３７】
「軟毛」という用語は、小児期の間に発生する、短く、薄く、わずかに着色され、ほとんど目立たない薄毛を指す。軟毛の各ストランド（strand）は、通常、２ｍｍ未満の長さである。
【００３８】
「硬毛」という用語は、通常は毛髪の成長期における、濃く、長く、色素沈着した毛髪を指す。硬毛は、３１．５μｍ以上の平均径を有すると定義される。
【００３９】
「禿げ域（bald area）」という用語は、最初は多毛状であったが、いずれ可視の例えば硬毛の完全な喪失の影響を受ける、頭皮の中央/前頭部の所定の領域を指す。毛包は薄い(一般に軟毛型の)毛髪を生成し続けている。
【００４０】
「移行域（transition area）」という用語は、視覚的に明らかであるが、不完全な脱毛が生じている頭皮の所定の領域、すなわち、後頭皮域と比較して硬毛の密度が減少していて、同時に脱け落ちた硬毛が軟毛型の毛髪に置き換えられている頭皮の所定の領域を指す。
【００４１】
「後頭域（rear head area）」という用語は、毛髪の喪失が生じていない頭皮の部分を指し、すなわち、大部分の毛髪が硬毛タイプに属し、ほんの数本の軟毛型の毛髪が存在する部分を指す。
【００４２】
「体幹（trunk）」という用語は、毛皮の毛（すなわち主に太い硬毛）で覆われたサルの背中の脇腹の所定の領域を指す。
【００４３】
「ポリペプチド」および「タンパク質」という用語は、本明細書中で交換可能に使用され、アミノ酸残基のポリマーを指す。この用語は、１つ以上のアミノ酸残基が、対応する天然に発生するアミノ酸ならびに天然に発生するアミノ酸ポリマーおよび非天然に発生するアミノ酸ポリマーの人工的な化学模倣物であるアミノ酸ポリマーに適用される。反対の指示がない限り、特定のポリペプチド配列はその保存的に組み替えられた変異体をも暗に包含するものとする。
【００４４】
「ＰＲＬＲに結合する抗体」という用語は、抗体がＰＲＬＲを標的とする際に診断薬および／または治療薬として有用であるように、十分な親和性でＰＲＬＲに結合することができる抗体を指す。
【００４５】
本明細書中で使用される場合、「抗体」という用語は、免疫グロブリンとして一般に知られているタンパク質の分類をいう。抗体は、免疫グロブリンＦｃ領域を含むＩｇＧ２モノクローナル抗体などの、全長モノクローナル抗体（ｍＡｂ）を含む。抗体という用語は、二重特異性抗体、ダイアボディ、一本鎖分子、ならびにＦａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖなどの抗体断片も含む。抗体は、好ましくは、４つのポリペプチド鎖、２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含み、これらは典型的には、ジスルフィド結合によって相互連結されている。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＶＨと省略する）および重鎖定常領域からなる。重鎖定常領域は、例えば、３つのドメインＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３を含み得る。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＶＬと省略する）および軽鎖定常領域からなる。軽鎖定常領域は、１つのドメイン（ＣＬ）からなる。ＶＨおよびＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存された領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域にさらに細分することができる。各ＶＨおよびＶＬは、典型的には、３つのＣＤＲから構成される。本明細書で使用される場合、「抗ＰＲＬＲ抗体」という用語は、ヒトＰＲＬＲタンパク質ならびにヒトＰＲＬＲタンパク質の断片および変異体に対して結合特異性を有する抗体を指す。本明細書で提示される抗ＰＲＬＲ抗体は、ＩｇＧ２抗体であり得、キメラ、ヒト化、および完全ヒト抗ＰＲＬＲ  ＩｇＧ２モノクローナル抗体などの抗ＰＲＬＲ  ＩｇＧ２モノクローナル抗体を含む。抗ＰＲＬＲモノクローナル抗体（全長抗体ならびにその抗原結合断片および改変体を含む）は、本明細書中に開示される製剤における使用に好適であり、ＰＣＴ特許公開番号ＷＯ／２０１１１０６９７９９、ＷＯ／２０１１１０６９７９５、およびＷＯ／２０１２１６３９３２（これらの各々は、その全体が本明細書中に参照することにより組み入れられている）に提示されている。これはまた、抗原結合ドメインを含むＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３を含み、その抗原結合ドメインは重鎖可変領域および軽鎖結合可変領域を含み、
ａ．重鎖可変領域のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３のアミノ酸配列は、それぞれ、配列番号３、４および５のアミノ酸配列からなる群から選択され、かつ
ｂ．軽鎖可変領域のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号６、７および８のアミノ酸配列からなる群から選択される。
【００４６】
ＬＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号９によっても表すことができる。ＰＲＬＲ抗体は、重鎖可変領域および軽鎖結合可変領域を含み、この重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号１によるものであり、この軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号２によるものである。
【００４７】
本明細書中で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、少量で存在し得る実質的に均一な抗体の集団（すなわち、この集団を構成する個々の抗体は、可能性のある変異体(例えば、自然に発生する変異体)を除いて同一である）から得られる抗体を指す。従って、「モノクローナル」という用語は、別個の抗体の混合物ではない抗体の特徴を示す。典型的には異なる決定基(エピトープ)に対する異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対するものである。その特異性に加えて、モノクローナル抗体調製物は、典型的には他の免疫グロブリンが混入していないという点で有利である。「モノクローナル」という用語は、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、使用するモノクローナル抗体は、Kohlerら、Nature,256:495[1975]によって最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製され得るか、または組換えＤＮＡ法によって作製され得る（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）。モノクローナル抗体はまた、Clacksonら、Nature352:624-628(1991)およびMarksetら、J Mol. Biol. 222:581-597 (1991)に記載されるような技術を使用して、ファージディスプレイライブラリーから単離され得る。「モノクローナル抗体」はまた、例えば、組換え、キメラ、ヒト化、ヒト、Ｈｕｍａｎ  ＥｎｇｉｎｅｅｒｅｄＴＭ、または抗体フラグメントであり得る。
【００４８】
モノクローナル抗体は、「キメラモノクローナル抗体」を含み、このうち重鎖および／または軽鎖の一部が１つの種に由来する抗体由来の配列を含み、一方、Ｆｃ領域を含む抗体の残りの部分が第２の種に由来する抗体由来の配列を含み、第２の種はヒトであってもよい。例えば、米国特許第４，８１６，５６７号およびMorrisonら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA81:6851-6855(1984)を参照のこと。
【００４９】
モノクローナル抗体はまた、「ヒト化モノクローナル抗体」を含み、このうち１つの種に由来する抗体由来の重鎖および／または軽鎖配列由来の１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）が、第２の種に由来する抗体由来の重鎖および／または軽鎖配列由来の１つ以上のＣＤＲを置換し、そしてこの第２の種はヒトであってもよい。「ヒト化」のプロセスは、通常、ヒトへの投与のために開発されたモノクローナル抗体に適用される。例えば、Riechmannら、Nature332(6162):323-27(1988)およびQueenら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA86(24):10029-33(1989)を参照のこと。
【００５０】
モノクローナル抗体は、全重鎖および全軽鎖の配列がヒト抗体配列に由来する「完全ヒトモノクローナル抗体」も含む。完全ヒトモノクローナル抗体は、ファージディスプレイ技術によって作製することができ、ヒト抗体レパートリーを発現するように遺伝子操作されたマウスから単離することができる。例えば、McCaffertyら、Nature348(6301):552-554(1990)、Biol. 222(3):581-597(1991)、ならびにCarmenおよびJermutus,Brief Funct. Genomic Proteomic 1(2): 189-203 (2002)を参照のこと。
【００５１】
本明細書中で使用される場合、抗体が目的の抗原「に特異的に結合する（binds specifically to）」とは、目的の抗原「に特異的である（specific to/for）」または目的の抗原「を特異的に認識する（specifically recognizes）」ということであり、例えば、ＰＲＬＲポリペプチド抗原標的は、抗体が抗原を発現する細胞または組織を標的化する際の治療剤として有用であるように十分な親和性で抗原に結合し、他のタンパク質と有意に交差反応しないか、または上記の抗原標的のオルソログおよび改変体（例えば、変異体形態、スプライス改変体、またはタンパク質分解短縮形態）以外のタンパク質と有意に交差反応しない抗体である。本明細書中で使用される場合、特定のポリペプチド標的上の特定のポリペプチドまたはエピトープに「特異的である」か「特異的に結合する」か「特異的に認識する」という用語は、例えば、約１０−４Ｍ未満、あるいは約１０−５Ｍ未満、あるいは約１０−６Ｍ未満、あるいは約１０−７Ｍ未満、あるいは約１０−８Ｍ未満、あるいは約１０−９Ｍ未満、あるいは約１０−１０Ｍ未満、あるいは約１０−１１Ｍ未満、あるいは約１０−１２Ｍ未満、あるいはそれ以下の抗原に対する一価のＫＤを有するそれらの抗体またはその抗原結合フラグメントによって示され得る。抗体が抗原「に特異的に結合する」ことは、そのような抗体がそのような抗原と１つ以上の参照抗原を識別できる場合に抗原「に特異的である」か抗原「を特異的に認識する」ことである。最も一般的な形態では、「特異的結合」、「〜に特異的に結合する」ことは「〜に特異的である」ことであり、あるいは「〜を特異的に認識する」ことは、例えば次の方法に従った、抗体の、目的の抗原と関連していない抗原を識別できる能力を指す。このような方法には、ウェスタンブロット、ＥＬＩＳＡ試験、ＲＩＡ試験、ＥＣＬ試験、ＩＲＭＡ試験およびペプチドスキャンが含まれるが、これらに限定されない。例えば、標準的なＥＬＩＳＡアッセイを行うことができる。
【００５２】
「結合親和性」または「親和性」は、分子とその結合パートナーとの間の単一の結合部位の間の非共有相互作用の総和の強度を指す。反対の指示がない限り、本明細書で使用される場合、「結合親和性」は、結合対のメンバー（例えば、抗体と抗原）間の１：１の相互作用を反映する固有の結合親和性をいう。解離定数「ＫＤ」は、分子（例えば、抗体）とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の親和性（すなわち、リガンドが特定のタンパク質にどの程度強く結合するか）を表するために一般的に使用されている。リガンド−タンパク質の親和性は、２つの分子間の非共有分子間相互作用によって影響される。親和性は、本明細書中に記載される方法を含め、当該分野で知られた一般的な方法によって測定し得る。一つの実施態様において、本発明による「ＫＤ」または「ＫＤ値」は、Biacore T200機器(GE Healthcare Biacore, Inc.)を使用する表面プラズモン共鳴アッセイを使用することによって測定される。他の好適な装置は、BIACORE T100、BIACORE(R)-2000、BIACORe4000、BIACORE(R)-3000(BIAcore, Inc., Piscataway, NJ)、またはProteOn XPR36機器(Bio-Rad Laboratories, Inc.)である。
【００５３】
本明細書で使用される場合、「抗体がプロラクチン受容体媒介シグナル伝達に拮抗する」という語句は、ＰＲＬＲ媒介シグナル伝達の阻害をもたらす、本発明の抗体によるＰＲＬＲ活性化の遮断を指すことを意味する。
【００５４】
「アンタゴニスト」抗体または「ブロッキング」抗体は、それが結合する抗原の生物学的活性を（部分的または完全に）有意に阻害する抗体である。成熟Ｆａｂ変異体などの「成熟抗体」または「成熟抗原結合断片」という用語には、標的タンパク質の細胞外ドメインなどの所定の抗原へのより強い結合（即ちより強い親和性を伴う結合）を示す抗体または抗体断片の誘導体が含まれる。成熟は、抗体または抗体フラグメントの６つのＣＤＲ内の少数の変異を同定するプロセスであり、この親和性の増加をもたらす。成熟プロセスは、抗体に変異体を導入するための分子生物学的方法と、改善されたバインダーを同定するためのスクリーニングとの組み合わせである。
【００５５】
本明細書で使用される場合、ＰＲＬＲ抗体製剤の「薬学的に有効な量」という用語は、所望の治療レジメンに従って投与される場合、疾患のこのような症状のいくつかまたはすべてを軽減すること、または疾患に対する素因を減少させることを含め、投与レジメンにおいて治療効果をもたらす製剤の量を指す。
【００５６】
本明細書に開示される高濃度ＰＲＬＲ抗体製剤は、典型的には、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌ、または約２ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌ、または約５ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、または約７．５ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度の抗ＰＲＬＲ抗体を含む。いくつかの態様において、これらの製剤内の抗ＰＲＬＲ抗体の濃度は、約２ｍｇ／ｍｌ、または約７．５ｍｇ／ｍｌ、または約２０ｍｇ／ｍｌ、または約５０ｍｇ／ｍｌ、または約６０ｍｇ／ｍｌである。このような製剤は、典型的には、皮下注射の注射部位あたりに約２ｍｌ未満、または約１．５ｍｌ未満、または約１ｍｌ未満、または約０．５ｍｌ未満の容量で投与される。好ましいのは、抗原結合ドメインを含むＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３を含有する製剤であり、この抗原結合ドメインは重鎖可変領域および軽鎖結合可変領域を含み、ここで、
ａ．この重鎖可変領域のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３のアミノ酸配列は、それぞれ配列番号３、４および５のアミノ酸配列からなる群から選択され、
ｂ．この軽鎖可変領域のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号６、７、および８のアミノ酸配列からなる群から選択される。  
【００５７】
ＬＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号９によっても表すことができる。ＰＲＬＲ抗体は、重鎖可変領域および軽鎖結合可変領域を含み、この重鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号１によるものであり、この軽鎖可変領域のアミノ酸配列は配列番号２によるものである。
【００５８】
製剤は、液体であっても凍結乾燥されていてもよく、少なくとも６ヶ月間、℃で安定であり得る。
【００５９】
他の態様において、抗ＰＲＬＲ抗体製剤は、約５〜３０ｍＭのヒスチジン、約３４〜２９２ｍＭのスクロース、約５０〜１５０ｐｐｍの非イオン性界面活性剤、約１０〜５０ｍＭのアルギニン、約１〜１０ｍＭのメチオニン、約２０〜１２０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＲＬＲ抗体を、約ｐＨ５．０〜約ｐＨ６．５の範囲のｐＨ、例えばｐＨ５．５で含有している。
【００６０】
他の態様において、抗ＰＲＬＲ抗体製剤は、約５〜３０ｍＭのヒスチジン、約３４〜２９２ｍＭのスクロース、約５０〜１５０ｐｐｍのポリソルベート、約１０〜５０ｍＭのアルギニン、約１〜１０ｍＭのメチオニン、約２０〜１２０ｍｇ／ｍｌの抗ＰＲＬＲ抗体を、約ｐＨ５．０〜約ｐＨ６．５の範囲のｐＨ、例えば、ｐＨ５．５で含有している。
【００６１】
他の態様において、抗ＰＲＬＲ抗体製剤は、約１０ｍＭのヒスチジン、約２３４ｍＭのスクロース、約８０ｐｐｍのポリソルベート８０、約３０ｍＭのアルギニン、約５ｍＭのメチオニン、約６０（４０）ｍｇ／ｍｌの抗ＰＲＬＲ抗体を、約ｐＨ５．０〜約ｐＨ６．５の範囲のｐＨ、例えばｐＨ５．５で含有している。
【００６２】
他の態様において、抗ＰＲＬＲ抗体製剤は、約１．８ｍＭのＬ−ヒスチジンおよび８．２ｍＭのＬ−ヒスチジンＨＣｌ、約２３４ｍＭのスクロース、約８０ｐｐｍのポリソルベート８０、約３０ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ、約５ｍＭのＬ−メチオニン、約６０（４０）ｍｇ／ｍｌの抗ＰＲＬＲを、約ｐＨ５．０〜約ｐＨ６．５の範囲のｐＨ、例えばｐＨ５．５で含有している。
【００６３】
「医薬製剤」／「医薬組成物」という用語は、その中に含有される有効成分の生物学的活性が有効となることを可能にするような形態であり、製剤が投与される対象に対して許容できない毒性である追加の成分を含有しない製剤を指す。
【００６４】
したがって、本開示では抗ＰＲＬＲＩｇＧ２ｍＡｂ製剤を含む抗ＰＲＬＲ  ｍＡｂ製剤が提供され、この抗ＰＲＬＲｍＡｂは高タンパク質濃度で可溶性である。本明細書に開示される製剤中の抗ＰＲＬＲｍＡｂは、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌの濃度で可溶性に維持され、等浸透圧保存条件下で安定なままであり、現行利用可能な抗体製剤と比較して低減された粘度を示す。
【００６５】
ＰＣＴ出願ＷＯ２０１２１６３９３２およびＷＯ２０１４０３６０７６（それぞれ参照することにより全体が本明細書に組み込まれることとする）に開示される配列を有する抗ＰＲＬＲ抗体は、プロラクチン受容体（ＰＲＬＲ）を遮断するＩｇＧ２抗体である。上述のように、ＰＲＬＲ抗体は、ＰＲＬＲを遮断することによって毛髪成長を誘導することができ、それによってＭ／ＦＰＨＬの欠損が克服される。本明細書に提示される高濃度の塩非含有抗ＰＲＬＲ抗体製剤は、静脈内注射もしくは皮下注射または他の注射経路によって患者に投与することができる。
【００６６】
抗体生成
本発明の抗体ｍａｔ３およびその生成は、出願ＷＯ２０１２１６３９３２の主題である。本出願の開示は、その全体が本明細書に組み込まれている。抗体ｍａｔ３の配列は表１に示されている。ＰＲＬＲ抗体製剤は、出願ＷＯ２０１４０３６０７６に開示されるように調製した。本出願の開示は、その全体が本明細書に組み込まれている。
【００６７】
【表１】
2020527552.tif 000002
【００６８】
Ｍ／ＦＰＨＬを予防するための所定の製剤中での抗体ｍａｔ３の使用が本発明の主題である。また、本発明の目的は、プロラクチン関連型の脱毛症（例えば、プロラクチノーマ、神経遮断薬などのプロラクチン増加薬に起因する脱毛症）、または高い全身プロラクチンレベルに関連する周産期の脱毛症を治療するための製剤の使用に関する。
【実施例】
【００６９】
実施例１：雌カニクイザルおよびマウスの皮膚および乳腺におけるＰＲＬＲの免疫組織化学
ヒトＰＲＬＲ（ａａ３２３−６２２）（ｓｃ−２０９９２）のＣ末端に対する、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚからのウサギポリクロナール抗ＰＲＬＲ抗血清を用いて、雌カニクイザルおよび雌マウスからの乳腺および皮膚のパラフィン包埋切片に対して免疫組織化学検査を行った。この抗体は、ヒト、マウス、およびラットのＰＲＬＲと交差反応するものである。
【００７０】
ＰＲＬＲに対する免疫反応性は、雌マウス（図１Ｃ）およびサル（図１Ａ）の毛包および皮膚の表皮上皮細胞において見出され得る。両方の種からの乳房上皮細胞において予想されるように、強い免疫反応性も観察された（図１Ｂおよび１Ｄ）。一次抗体を省いた場合、免疫反応性は観察されなかった。
【００７１】
これらの結果は、毛包生物学におけるＰＲＬＲ媒介シグナル伝達の役割の証拠を提供するものである。
【００７２】
実施例２：中和ＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３は、ベニガオザルにおける毛髪再生を刺激する
ベニガオザルにおける毛髪再生に対するＰＲＬ抗体ｍａｔ３の効果を分析した。これらの動物は、ヒトの脱毛について高い予測値を有する、認可された重要なモデルである。これらの研究は、北京大学、分子医学研究所、中華民国共和国、北京市、頤和園路、ナンバー５、１００８７の研究室で行われた。群の規模は１１個体であり、１６週目に１個体の高齢の雌動物が麻酔で死亡した；群は４個体の雌動物と７個体の雄動物からなり、１２〜２７齢であった。動物は、４０ｍｇ／ｋｇのＰＲＬＲ抗体ｍａｔ３を月に２回皮下に受けた。抗体溶液を表２に示す。
【００７３】
【表２】
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【００７４】
毛髪の再成長を、以下の領域で測定した:禿げ域、移行域、影響の無い域、体幹(毛皮)域。血液および血清と同様に二つの隣接する移行域からの生検もサンプリングした。一次読み出しはフォトトリコグラム（phototrichigram）であって、例えば硬毛の濃度を決定するための毛髪スキャンであった。４週間毎に得られた値と基線値を比較した。二次読み出しは、標準化された光学的な毛髪状態、組織学、および反応性プロラクチンレベルであった。一般的なパラメーター、例えば体重、血球数は毎月測定した。基線データと比較して、禿げ域および／または移行域において、確固とした目に見える効力があることを実証することができた（図２参照）。本研究は、安全性／耐容性／毒物学研究として設計されていなかったものの、試験動物の挙動および表現型の異常について観察された。治療期間中またはその後に薬物投与に関連した明らかな安全性または耐容性の兆候はなかった。
【００７５】
毛髪スキャンのデータを、以下の時点で収集した：基線（治療の開始日）、４週間治療（ｄ２８）、８週間治療（ｄ５６）、１２週間治療（ｄ８４）、１６週間治療（ｄｌ１２）、２４週間治療（ｄｌ６８）、および３６４日目（すなわち最後の投薬の２４週間後）。「最良の」毛髪スキャン画像（焦点、コントラスト、染色の質、皮膚のしわの非存在）を、各所定の領域における各時点について選択した。個々の時点で、毛髪の太さを測定した。毛の直径に基づいて、１ｃｍ２当たりの軟毛および硬毛の数を決定した。両方の測定（毛髪の直径および本数）を、手動の評価を伴う半自動様式で、Datinf TrichoScan Smart Softwareを用いて行った。一貫性の理由から、各領域を同じ観察者が経時的に分析した。得られたデータから、１１個体のサルのうちの９個体において、以前に禿げていた領域における硬毛数の増加が示された。毛髪数の増加は、応答サルにおいて５０〜２２０本／ｃｍ２の範囲であった（図２Ｂ参照）。この効果は、雄サルおよび雌サルにおいて観察された。若齢動物は、老齢動物よりも良好に応答した。抗体ｍａｔ３による６ヶ月の治療では、有効性のプラトーに達しなかった。硬毛の絶対数の増加ならびにパーセンテージの増加に関する最良の効果は、以前禿げていた領域、即ち治療の前に軟毛が優勢であった領域で観察された。このような領域は、最初は治療が最も困難であると考えられ、その理由としてはサルによってはこれらの領域の禿頭症が何十年も前から存在していたためである。治療を中止してから６ヶ月後には、毛髪直径のさらなる増加または硬毛の増加は観察されなかった。しかしながら、研究の最後に到達したレベルからわずかな（軽度の）低下しかなかった。硬毛の割合は、１２ヶ月前の治療の開始前よりも顕著に高く、即ち治療の長期持続効果が観察された。
【００７６】
図３は、「禿げ域」（Ａ）、「移行域」（Ｂ）、「後頭域」（Ｃ）、および「体幹域」（Ｄ）の２４週間の治療期間にわたる、硬毛数の分析を表した図である。そのような領域は、基線で事前に定められ、毛髪スキャン画像の左上および右下の角に生じた２つのタトゥーによってマークされたため、研究の全期間にわたって全く同じ毛包を監視することが可能であった。禿げ域における硬毛数の劇的な増加（１０９％の増加）、ならびに移行域における増加（２７％）が示された。予想通り、治療を開始する前に軟毛がほとんどなく、多くの硬毛が既に存在していた後頭域および体幹域で生じた変化はわずかであった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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