(57)【要約】  本発明は、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させることに使用するための薬剤であって、以下：強心配糖体又は非糖部、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるその塩から選択される、前記薬剤に関する。別の態様は老化関連の疾患又は障害の治療又は防止において使用するための化合物、及びそれに関連する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させることに使用するための薬剤であって、以下：強心配糖体又は非糖部、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される、前記薬剤。
【請求項２】
強心配糖体又は非糖部である、請求項１に記載の使用のための薬剤。
【請求項３】
ウアバイン、ジゴキシン、及びＫ−ストロファンチンから選択される強心配糖体である、請求項２に記載の使用のための薬剤。
【請求項４】
ストロファンチジン及びブファリンから選択される非糖部である、請求項２に記載の使用のための薬剤。
【請求項５】
ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤である、請求項１に記載の使用のための薬剤。
【請求項６】
ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤がスタチンである、請求項５に記載の使用のための薬剤。
【請求項７】
スタチンが、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、及びシンバスタチンから選択される、請求項６に記載の使用のための薬剤。
【請求項８】
接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤である、請求項１に記載の使用のための薬剤。
【請求項９】
接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤が、ＰＦ−５７３２２８、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブから選択される、請求項８に記載の使用のための薬剤。
【請求項１０】
対象において１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる方法であって、以下：強心配糖体又は非糖部、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される薬剤を治療有効量で前記対象に投与するステップを含む、前記方法。
【請求項１１】
老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物であって、前記化合物がＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤であり、前記老化関連の疾患又は障害が心血管障害以外である、前記化合物。
【請求項１２】
ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤がスタチンである、請求項１１に記載の使用のための化合物。
【請求項１３】
スタチンが、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、及びシンバスタチンから選択される、請求項１２に記載の使用のための化合物。
【請求項１４】
老化関連の疾患又は障害が、代謝性疾患、炎症性疾患若しくは障害、肺疾患若しくは障害、神経系疾患若しくは障害、増殖性障害、腎臓障害若しくは疾患、眼の疾患若しくは障害、又は皮膚障害若しくは疾患である、請求項１１〜１３のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項１５】
老化関連の疾患又は障害が、以下：
（ｉ）骨関節炎、骨粗鬆症、口腔粘膜炎、炎症性腸疾患、脊柱後弯、及び椎間板ヘルニアから選択される炎症性又は自己免疫性疾患又は障害、
（ii）アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、認知症、軽度認知機能障害、黄斑変性症、及び運動ニューロン機能不全から選択される神経系疾患又は障害、
（iii）糖尿病、糖尿病性潰瘍、代謝症候群、及び肥満症から選択される代謝性疾患、
（iv）肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、嚢胞性線維症、気腫、気管支拡張症、及び肺機能の加齢関連の損失から選択される肺疾患、
（ｖ）黄斑変性症、緑内障、白内障、老眼、及び失明から選択される眼の疾患又は障害、
（vi）腎臓病、腎不全、虚弱、聴覚損失、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚創傷治癒、肝線維症、膵線維症、口腔粘膜下線維症、及び筋肉減少症から選択される加齢関連の障害、並びに
（vii）湿疹、乾癬、色素沈着過剰、母斑、発疹、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、感光性又は光老化に関連する疾患及び障害、皺、そう痒症、知覚異常、湿疹性発疹、好酸球性皮膚症、反応性好中球性皮膚症、天疱瘡、類天疱瘡、免疫水疱性皮膚症、皮膚の線維組織球増殖、皮膚リンパ腫、並びに皮膚ループスから選択される皮膚疾患又は障害、
から選択される、請求項１１〜１４のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項１６】
接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤である、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物。
【請求項１７】
接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤が、ＰＦ−５７３２２８、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブから選択される、請求項１６に記載の使用のための化合物。
【請求項１８】
老化関連の疾患又は障害が、心血管疾患若しくは障害、代謝性疾患、炎症性疾患若しくは障害、肺疾患若しくは障害、神経系疾患若しくは障害、腎臓障害若しくは疾患、又は皮膚障害若しくは疾患である、請求項１６又は１７に記載の使用のための化合物。
【請求項１９】
老化関連の疾患又は障害が、以下：
（ｉ）骨関節炎、骨粗鬆症、口腔粘膜炎、炎症性腸疾患、脊柱後弯、及び椎間板ヘルニアから選択される炎症性又は自己免疫性疾患又は障害、
（ii）アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、認知症、軽度認知機能障害、黄斑変性症、及び運動ニューロン機能不全から選択される神経系疾患又は障害、
（iii）糖尿病、糖尿病性潰瘍、代謝症候群、及び肥満症から選択される代謝性疾患、
（iv）肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、嚢胞性線維症、気腫、気管支拡張症、及び肺機能の加齢関連の損失から選択される肺疾患、
（ｖ）黄斑変性症、緑内障、白内障、老眼、及び失明から選択される眼の疾患又は障害、
（vi）腎臓疾患、腎不全、虚弱、聴覚損失、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚創傷治癒、肝線維症、膵線維症、口腔粘膜下線維症、及び筋肉減少症から選択される加齢関連の障害、
（vii）湿疹、乾癬、色素沈着過剰、母斑、発疹、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、感光性又は光老化に関連する疾患及び障害、皺、そう痒症、知覚異常、湿疹性発疹、好酸球性皮膚症、反応性好中球性皮膚症、天疱瘡、類天疱瘡、免疫水疱性皮膚症、皮膚の線維組織球増殖、皮膚リンパ腫、並びに皮膚ループスから選択される皮膚疾患又は障害、並びに
（viii）アテローム性動脈硬化症、狭心症、不整脈、心筋症、鬱血性心不全、冠動脈疾患、頸動脈疾患、心内膜炎、冠動脈血栓、心筋梗塞、高血圧、大動脈瘤、心拡張機能障害、高コレステロール血症、高脂血症、増帽弁逸脱、末梢血管疾患、心ストレス耐性、心線維症、脳動脈瘤、及び脳卒中から選択される心血管疾患、
から選択される、請求項１６〜１８のいずれかに記載の使用のための化合物。
【請求項２０】
老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための、以下：ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される、化合物。
【請求項２１】
老化関連の疾患又は障害が、心血管疾患若しくは障害、代謝性疾患、炎症性疾患若しくは障害、肺疾患若しくは障害、神経系疾患若しくは障害、腎臓障害若しくは疾患、又は皮膚障害若しくは疾患である、請求項２０に記載の使用のための化合物。
【請求項２２】
老化関連の疾患又は障害が、以下：
（ｉ）骨関節炎、骨粗鬆症、口腔粘膜炎、炎症性腸疾患、脊柱後弯、及び椎間板ヘルニアから選択される炎症性又は自己免疫性疾患又は障害、
（ii）アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、認知症、軽度認知機能障害、黄斑変性症、及び運動ニューロン機能不全から選択される神経系疾患又は障害、
（iii）糖尿病、糖尿病性潰瘍、代謝症候群、及び肥満症から選択される代謝性疾患、
（iv）肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、嚢胞性線維症、気腫、気管支拡張症、及び肺機能の加齢関連の損失から選択される肺疾患、
（ｖ）黄斑変性症、緑内障、白内障、老眼、及び失明から選択される眼の疾患又は障害、
（vi）腎臓疾患、腎不全、虚弱、聴覚損失、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚創傷治癒、肝線維症、膵線維症、口腔粘膜下線維症、及び筋肉減少症から選択される加齢関連の障害、
（vii）湿疹、乾癬、色素沈着過剰、母斑、発疹、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、感光性又は光老化に関連する疾患及び障害、皺、そう痒症、知覚異常、湿疹性発疹、好酸球性皮膚症、反応性好中球性皮膚症、天疱瘡、類天疱瘡、免疫水疱性皮膚症、皮膚の線維組織球増殖、皮膚リンパ腫、並びに皮膚ループスから選択される皮膚疾患又は障害、並びに
（viii）アテローム性動脈硬化症、狭心症、不整脈、心筋症、鬱血性心不全、冠動脈疾患、頸動脈疾患、心内膜炎、冠動脈血栓、心筋梗塞、高血圧、大動脈瘤、心拡張機能障害、高コレステロール血症、高脂血症、増帽弁逸脱、末梢血管疾患、心ストレス耐性、心線維症、脳動脈瘤、及び脳卒中から選択される心血管疾患、
から選択される、請求項２０又は２１に記載の使用のための化合物。
【請求項２３】
老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物であって、前記老化関連の疾患又は障害が心血管障害以外であり、前記化合物が、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される、前記化合物。
【請求項２４】
老化関連の疾患又は障害が、代謝性疾患、炎症性疾患若しくは障害、肺疾患若しくは障害、神経系疾患若しくは障害、腎臓障害若しくは疾患、又は皮膚障害若しくは疾患である、請求項２３に記載の使用のための化合物。
【請求項２５】
老化関連の疾患又は障害が、以下：
（ｉ）骨関節炎、骨粗鬆症、口腔粘膜炎、炎症性腸疾患、脊柱後弯、及び椎間板ヘルニアから選択される炎症性又は自己免疫性疾患又は障害、
（ii）アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、認知症、軽度認知機能障害、黄斑変性症、及び運動ニューロン機能不全から選択される神経系疾患又は障害、
（iii）糖尿病、糖尿病性潰瘍、代謝症候群、及び肥満症から選択される代謝性疾患、
（iv）肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、嚢胞性線維症、気腫、気管支拡張症、及び肺機能の加齢関連の損失から選択される肺疾患、
（ｖ）黄斑変性症、緑内障、白内障、老眼、及び失明から選択される眼の疾患又は障害、
（vi）腎臓疾患、腎不全、虚弱、聴覚損失、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚創傷治癒、肝線維症、膵線維症、口腔粘膜下線維症、及び筋肉減少症から選択される加齢関連の障害、並びに
（vii）湿疹、乾癬、色素沈着過剰、母斑、発疹、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、感光性又は光老化に関連する疾患及び障害、皺、そう痒症、知覚異常、湿疹性発疹、好酸球性皮膚症、反応性好中球性皮膚症、天疱瘡、類天疱瘡、免疫水疱性皮膚症、皮膚の線維組織球増殖、皮膚リンパ腫、並びに皮膚ループスから選択される皮膚疾患又は障害
から選択される、請求項２３又は２４に記載の使用のための化合物。
【請求項２６】
対象に治療有効量のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤を投与するステップを含む、心血管障害以外の老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法。
【請求項２７】
対象に治療有効量の接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤を投与するステップを含む、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法。
【請求項２８】
老化細胞を選択的に死滅させることによって老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法であって、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される化合物を治療有効量で対象に投与するステップを含む、前記方法。
【請求項２９】
老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される化合物の使用であって、前記化合物が、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる、前記使用。
【請求項３０】
老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤の使用。
【請求項３１】
心血管障害以外の老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の使用。
【請求項３２】
ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される、老化細胞除去剤。
【請求項３３】
好ましくは加齢関連の疾患又は状態の発症又は進行を遅延させることによって、対象の生命寿命の延長に使用するための、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される、化合物。
【請求項３４】
がんの治療に使用するための、ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される化合物であって、
−  老化へと押し進められたがん細胞を低減する若しくは排除する、又は
−  老化細胞によって生じた、炎症、がんの増殖の促進、及び転移の促進を含む１又は２以上の副作用を低減する若しくは排除する、又は
−  化学療法の１又は２以上の副作用を低減する若しくは排除する、又は
−  放射線療法の１又は２以上の副作用を低減する若しくは排除する、又は
−  前がん性病変を低減する若しくは排除する、又は
−  ＣＤＫ４又はＣＤＫ６阻害剤を用いた治療によって老化を受ける細胞を低減する若しくは排除する、前記化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、老化細胞を非老化細胞に優先して選択的に死滅させることができる化合物、すなわち老化細胞除去（senolytic）化合物に関する。また、本発明は、老化関連の疾患又は障害の治療において使用するための化合物、及びそれに関連する方法も提供する。
【背景技術】
【０００２】
老化とは、損傷した又は古い細胞に、その複製を回避するために安定した抑止を強いる細胞プログラムである。増殖抑止に加えて、老化細胞は、老化関連分泌表現型（ＳＡＳＰ）と総称される、クロマチン再構成、β−ガラクトシダーゼ活性（老化関連β−ガラクトシダーゼ又はＳＡ−β−Ｇａｌと呼ばれる）の増加、及び複数の因子、主に炎症誘発性のものの分泌を含む根底からの表現型の変化を受ける。
【０００３】
複製老化は、細胞培養物の連続継代の際に（又は細胞が生物内で古くなるにつれて）活性化される。また、老化は、がん遺伝子活性化、放射線照射、及び化学療法薬への曝露を含む一連の様々な侵襲によっても誘導することができる。さらに、老化を誘導するいくつかの薬物が存在し、その原型例はパルボシクリブなどのＣＤＫ４／ＣＤＫ６阻害剤である。
【０００４】
老化の機構
老化の安定した増殖抑止特徴はｐ１６／Ｒｂ及びｐ５３／ｐ２１経路の活性化によって実行される。サイクリン依存性キナーゼ阻害剤ｐ１６ＩＮＫ４ａ及びｐ２１Ｃｉｐ１はＣＤＫ活性を阻害し、その結果、Ｒｂ低リン酸化及びＧ１増殖抑止をもたらす（Kuilman, T., Michaloglou, C., Mooi, W.J., and Peeper, D.S. (2010). The essence of senescence. Genes Dev 24, 2463-2479）。さらに、ｐ１６ＩＮＫ４ａは老化中に特異的に誘導され、単独で、又はＳＡ−β−Ｇａｌ活性、老化関連ヘテロクロマチン病巣（ＳＡＨＦ）の形成などの他のマーカーと組み合わせて、老化細胞の同定に使用される。
【０００５】
老化及び疾患
老化細胞は加齢中に蓄積され、がん、線維症、及び多くの加齢関連病理を含む多くの疾患に関連している。最近の証拠により、老化細胞が複数の病理において有害であり、その排除が多くの利点を与え、複数の病理を寛解させ、健康寿命及び生命寿命を増加させることが示唆されている。
【０００６】
老化細胞は、多くの新生物発生前病変、線維性組織（例えば、肝臓、腎臓、心臓、膵臓）、及び古い組織中に存在する。また、老化細胞は、神経学的なもの（例えば、脳動脈瘤、アルツハイマー、及びパーキンソン）、肺性のもの（例えば、特発性肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、及び嚢胞性線維症）、眼科的なもの（例えば、白内障、緑内障、黄斑変性症）、筋骨格的なもの（例えば、筋肉減少症、椎間板変性、骨関節炎）、心血管性のもの（例えば、アテローム性動脈硬化症、心線維症、大動脈動脈瘤）、腎臓性のもの（例えば、腎臓病、移植合併症）、並びに糖尿病、粘膜炎、高血圧、及び骨骨髄線維症（ＯＭＦ）などの他のものを含む、長いリストの他の病理にも関連している（Munoz-Espin, D., and Serrano, M. (2014). Cellular senescence: from physiology to pathology. Nat Rev Mol Cell Biol 15, 482-496）。
【０００７】
老化細胞はがんに対する保護的な役割を有しており、ほとんどの種類の線維症を制限する一方で、老化及び多くの他の疾患中の老化細胞の蓄積は有害であると考えられている。現在までに、老化細胞がなぜ有害なのかの明解な説明は存在してない。
【０００８】
老化細胞排除の利点
老化細胞の多くの有害効果（及びそれらの選択的排除によって引き起こされる利点）の証拠は、ｖａｎ  Ｄｅｕｒｓｅｎ研究室の一連の研究によって提供されている（Baker, D.J., Childs, B.G., Durik, M., Wijers, M.E., Sieben, C.J., Zhong, J., Saltness, R.A., Jeganathan, K.B., Verzosa, G.C., Pezeshki, A., et al. (2016). Naturally occurring p16(Ink4a)-positive cells shorten healthy lifespan. Nature 530, 184-189、Baker, D.J., Wijshake, T., Tchkonia, T., LeBrasseur, N.K., Childs, B.G., van de Sluis, B., Kirkland, J.L., and van Deursen, J.M. (2011). Clearance of p16Ink4a-positive senescent cells delays ageing-associated disorders. Nature 479, 232-236、Childs, B.G., Baker, D.J., Wijshake, T., Conover, C.A., Campisi, J., and van Deursen, J.M. (2016). Senescent intimal foam cells are deleterious at all stages of atherosclerosis. Science 354, 472-477）。これらの研究では、老化細胞上で特異的に誘導融合タンパク質を発現するトランスジェニックマウス（ＩＮＫ４−ＡＴＴＡＣマウス）を使用した（ｐ１６Ｉｎｋ４ａのプロモーターを利用）。その二量体化を始動させる薬物の添加によるこの融合タンパク質の活性化は、老化細胞の選択的死滅をもたらす。
【０００９】
このマウスモデルを使用することにより、老化細胞のクリアランスが、複数の加齢関連病理を減弱させることによって生命寿命及び健康寿命を増加させることが示された（Baker, D.J., Childs, B.G., Durik, M., Wijers, M.E., Sieben, C.J., Zhong, J., Saltness, R.A., Jeganathan, K.B., Verzosa, G.C., Pezeshki, A., et al. (2016). Naturally occurring p16(Ink4a)-positive cells shorten healthy lifespan. Nature 530, 184-189、Baker, D.J., Wijshake, T., Tchkonia, T., LeBrasseur, N.K., Childs, B.G., van de Sluis, B., Kirkland, J.L., and van Deursen, J.M. (2011). Clearance of p16Ink4a-positive senescent cells delays ageing-associated disorders. Nature 479, 232-236、Childs, B.G., Baker, D.J., Wijshake, T., Conover, C.A., Campisi, J., and van Deursen, J.M. (2016). Senescent intimal foam cells are deleterious at all stages of atherosclerosis. Science 354, 472-477）。老化細胞のクリアランスは、腫瘍化を遅延させ、白内障形成、アテローム性動脈硬化症、並びに他の臓器の中でとりわけ腎臓、脂肪、及び心臓の加齢関連劣化を減弱させた。
【００１０】
ＩＮＫ４−ＡＴＴＡＣマウスで得られた結果は、老化細胞中でｔｋ導入遺伝子を発現させて、ガンシクロビル治療の際にその選択的排除を可能にする、異なるマウスモデル（３ＭＲマウス）において、部分的に再現されている（Demaria, M., Ohtani, N., Youssef, S.A., Rodier, F., Toussaint, W., Mitchell, J.R., Laberge, R.M., Vijg, J., Van Steeg, H., Dolle, M.E., et al. (2014). An essential role for senescent cells in optimal wound healing through secretion of PDGF-AA. Dev Cell 31, 722-733）。さらに、化学療法における老化細胞の排除は、がん再発及び化学療法に関連する副作用を低減した（Demaria, M., O'Leary, M.N., Chang, J., Shao, L., Liu, S., Alimirah, F., Koenig, K., Le, C., Mitin, N., Deal, A.M., et al. (2016). Cellular Senescence Promotes Adverse Effects of Chemotherapy and Cancer Relapse. Cancer Discov.）。重要なことに、老化細胞の排除は、老化細胞が治癒プロセスの間に排除された場合に創傷治癒を遅延させること以外の副作用がない（Baker, D.J., Childs, B.G., Durik, M., Wijers, M.E., Sieben, C.J., Zhong, J., Saltness, R.A., Jeganathan, K.B., Verzosa, G.C., Pezeshki, A., et al. (2016). Naturally occurring p16(Ink4a)-positive cells shorten healthy lifespan. Nature 530, 184-189、Demaria, M., Ohtani, N., Youssef, S.A., Rodier, F., Toussaint, W., Mitchell, J.R., Laberge, R.M., Vijg, J., Van Steeg, H., Dolle, M.E., et al. (2014). An essential role for senescent cells in optimal wound healing through secretion of PDGF-AA. Dev Cell 31, 722-733）。しかし、統一的な一般仮説は、老化細胞によって分泌された（炎症誘発性）因子が組織の恒常性を妨害するということである。このことは、老化細胞によって媒介される共通の機構が、多くの加齢関連病理の効果の原因となっている可能性があることを示唆している。
【００１１】
老化細胞除去薬（senolytic drugs）
概念証明研究により、老化細胞を選択的に排除することができる化合物（いわゆる「老化細胞除去剤」）の同定がもたらされている。ダサチニブ及びケルセチン（Zhu, Y., Tchkonia, T., Pirtskhalava, T., Gower, A.C., Ding, H., Giorgadze, N., Palmer, A.K., Ikeno, Y., Hubbard, G.B., Lenburg, M., et al. (2015). The Achilles' heel of senescent cells: from transcriptome to senolytic drugs. Aging Cell 14, 644-658）、ピペルロングミン（Wang, Y., Chang, J., Liu, X., Zhang, X., Zhang, S., Zhang, X., Zhou, D., and Zheng, G. (2016). Discovery of piperlongumine as a potential novel lead for the development of senolytic agents. Aging (Albany NY) 8, 2915-2926）、並びにＡＢＴ２６３及びＡＢＴ７３７などのＢｃｌ２ファミリー阻害剤（Chang, J., Wang, Y., Shao, L., Laberge, R.M., Demaria, M., Campisi, J., Janakiraman, K., Sharpless, N.E., Ding, S., Feng, W., et al. (2016). Clearance of senescent cells by ABT263 rejuvenates aged hematopoietic stem cells in mice. Nat Med 22, 78-83、Yosef, R., Pilpel, N., Tokarsky-Amiel, R., Biran, A., Ovadya, Y., Cohen, S., Vadai, E., Dassa, L., Shahar, E., Condiotti, R., et al. (2016). Directed elimination of senescent cells by inhibition of BCL-W and BCL-XL. Nat Commun 7, 11190、Zhu, Y., Tchkonia, T., Fuhrmann-Stroissnigg, H., Dai, H.M., Ling, Y.Y., Stout, M.B., Pirtskhalava, T., Giorgadze, N., Johnson, K.O., Giles, C.B., et al. (2016). Identification of a novel senolytic agent, navitoclax, targeting the Bcl-2 family of anti-apoptotic factors. Aging Cell 15, 428-435）を含む、いくつかの老化細胞除去化合物が現在までに同定されている。現在では、ＢＣｌ２ファミリー阻害剤が、様々な老化細胞をインビボで死滅させることが示されており、トランスジェニックマウスモデルにおいて再現性のある効果があるため、最も有望な老化細胞除去剤である（Chang, J., Wang, Y., Shao, L., Laberge, R.M., Demaria, M., Campisi, J., Janakiraman, K., Sharpless, N.E., Ding, S., Feng, W., et al. (2016). Clearance of senescent cells by ABT263 rejuvenates aged hematopoietic stem cells in mice. Nat Med 22, 78-83、Childs, B.G., Baker, D.J., Wijshake, T., Conover, C.A., Campisi, J., and van Deursen, J.M. (2016). Senescent intimal foam cells are deleterious at all stages of atherosclerosis. Science 354, 472-477、Yosef, R., Pilpel, N., Tokarsky-Amiel, R., Biran, A., Ovadya, Y., Cohen, S., Vadai, E., Dassa, L., Shahar, E., Condiotti, R., et al. (2016). Directed elimination of senescent cells by inhibition of BCL-W and BCL-XL. Nat Commun 7, 11190、Zhu, Y., Tchkonia, T., Fuhrmann-Stroissnigg, H., Dai, H.M., Ling, Y.Y., Stout, M.B., Pirtskhalava, T., Giorgadze, N., Johnson, K.O., Giles, C.B., et al. (2016). Identification of a novel senolytic agent, navitoclax, targeting the Bcl-2 family of anti-apoptotic factors. Aging Cell 15, 428-435）。Ｂｃｌ２阻害剤は、当初はリンパ腫の治療剤として開発された。ＡＢＴ−７３７は、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ＸＬ、及びＢＣＬ−ｗの低分子阻害剤であるが、低い溶解度及び経口生体利用度を有する。ＡＢＴ−２６３は同じ分子を阻害し、インビボでの使用により適しているが、副作用として顕著な血小板減少症を引き起こす。現在までに同定されている老化細胞除去化合物によって示される顕著な副作用が原因で（重度の好中球減少症を含む）、老化細胞除去特性を有するさらなる化合物及び化合物クラスを同定する必要性が存在する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Kuilman, T., Michaloglou, C., Mooi, W.J., and Peeper, D.S. (2010). The essence of senescence. Genes Dev 24, 2463-2479
【非特許文献２】Munoz-Espin, D., and Serrano, M. (2014). Cellular senescence: from physiology to pathology. Nat Rev Mol Cell Biol 15, 482-496
【非特許文献３】Baker, D.J., Childs, B.G., Durik, M., Wijers, M.E., Sieben, C.J., Zhong, J., Saltness, R.A., Jeganathan, K.B., Verzosa, G.C., Pezeshki, A., et al. (2016). Naturally occurring p16(Ink4a)-positive cells shorten healthy lifespan. Nature 530, 184-189
【非特許文献４】Baker, D.J., Wijshake, T., Tchkonia, T., LeBrasseur, N.K., Childs, B.G., van de Sluis, B., Kirkland, J.L., and van Deursen, J.M. (2011). Clearance of p16Ink4a-positive senescent cells delays ageing-associated disorders. Nature 479, 232-236
【非特許文献５】Childs, B.G., Baker, D.J., Wijshake, T., Conover, C.A., Campisi, J., and van Deursen, J.M. (2016). Senescent intimal foam cells are deleterious at all stages of atherosclerosis. Science 354, 472-477
【非特許文献６】Demaria, M., Ohtani, N., Youssef, S.A., Rodier, F., Toussaint, W., Mitchell, J.R., Laberge, R.M., Vijg, J., Van Steeg, H., Dolle, M.E., et al. (2014). An essential role for senescent cells in optimal wound healing through secretion of PDGF-AA. Dev Cell 31, 722-733
【非特許文献７】Demaria, M., O'Leary, M.N., Chang, J., Shao, L., Liu, S., Alimirah, F., Koenig, K., Le, C., Mitin, N., Deal, A.M., et al. (2016). Cellular Senescence Promotes Adverse Effects of Chemotherapy and Cancer Relapse. Cancer Discov.
【非特許文献８】Zhu, Y., Tchkonia, T., Pirtskhalava, T., Gower, A.C., Ding, H., Giorgadze, N., Palmer, A.K., Ikeno, Y., Hubbard, G.B., Lenburg, M., et al. (2015). The Achilles' heel of senescent cells: from transcriptome to senolytic drugs. Aging Cell 14, 644-658
【非特許文献９】Wang, Y., Chang, J., Liu, X., Zhang, X., Zhang, S., Zhang, X., Zhou, D., and Zheng, G. (2016). Discovery of piperlongumine as a potential novel lead for the development of senolytic agents. Aging (Albany NY) 8, 2915-2926
【非特許文献１０】Chang, J., Wang, Y., Shao, L., Laberge, R.M., Demaria, M., Campisi, J., Janakiraman, K., Sharpless, N.E., Ding, S., Feng, W., et al. (2016). Clearance of senescent cells by ABT263 rejuvenates aged hematopoietic stem cells in mice. Nat Med 22, 78-83
【非特許文献１１】Yosef, R., Pilpel, N., Tokarsky-Amiel, R., Biran, A., Ovadya, Y., Cohen, S., Vadai, E., Dassa, L., Shahar, E., Condiotti, R., et al. (2016). Directed elimination of senescent cells by inhibition of BCL-W and BCL-XL. Nat Commun 7, 11190
【非特許文献１２】Zhu, Y., Tchkonia, T., Fuhrmann-Stroissnigg, H., Dai, H.M., Ling, Y.Y., Stout, M.B., Pirtskhalava, T., Giorgadze, N., Johnson, K.O., Giles, C.B., et al. (2016). Identification of a novel senolytic agent, navitoclax, targeting the Bcl-2 family of anti-apoptotic factors. Aging Cell 15, 428-435
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の第１の態様は、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させることに使用するための薬剤であって、以下：強心配糖体又は非糖部、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるその塩から選択される、薬剤に関する。
【００１４】
本発明の第２の態様は、対象において１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる方法であって、以下：強心配糖体又は非糖部、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるその塩から選択される薬剤を治療有効量で対象に投与するステップを含む、方法に関する。
【００１５】
本発明の第３の態様は、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物であって、前記化合物がＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤であり、前記老化関連の疾患又は障害が心血管障害以外である、化合物に関する。
【００１６】
本発明の第４の態様は、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤である、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物に関する。
【００１７】
本発明の第５の態様は、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための、以下：ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるその塩から選択される、化合物に関する。
【００１８】
本発明の第６の態様は、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物であって、前記老化関連の疾患又は障害が心血管障害以外であり、前記化合物が、ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるその塩から選択される、化合物に関する。
【００１９】
本発明の第７の態様は、対象に治療有効量のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤を投与するステップを含む、心血管障害以外の老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法に関する。
【００２０】
本発明の第８の態様は、対象に治療有効量の接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤を投与するステップを含む、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法に関する。
【００２１】
本発明の第９の態様は、老化細胞を選択的に死滅させることによって老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法であって、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるその塩から選択される化合物を治療有効量で対象に投与するステップを含む、方法に関する。
【００２２】
本発明の第１０の態様は、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるその塩から選択される化合物の使用であって、前記化合物は、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる、使用に関する。
【００２３】
本発明の第１１の態様は、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤の使用に関する。
【００２４】
本発明の第１２の態様は、心血管障害以外である、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の使用に関する。
【００２５】
本発明の第１３の態様は、ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるその塩から選択される、老化細胞除去剤に関する。
【００２６】
本発明の第１４の態様は、好ましくは加齢関連の疾患又は状態の発症又は進行を遅延させることによって、対象の生命寿命の延長に使用するための、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるその塩から選択される、化合物に関する。
【００２７】
本発明の第１５の態様は、がんの治療に使用するための、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるその塩から選択される化合物であって、
−  老化へと押し進められたがん細胞を低減する若しくは排除する、又は
−  老化細胞によって生じた、炎症、がんの増殖の促進、及び転移の促進を含む１又は２以上の副作用を低減する若しくは排除する、又は
−  化学療法の１又は２以上の副作用をtension若しくは排除する、又は
−  放射線療法の１若しくは２以上の副作用を低減する若しくは排除する、又は
−  前がん性病変を低減する若しくは排除する、又は
−  ＣＤＫ４阻害剤又はＣＤＫ６阻害剤を用いた治療によって老化を受ける細胞を低減する若しくは排除する、
化合物に関する。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
以下の図を参照にして本発明をさらに説明する。
【図１】（Ａ）ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞を１００ｎＭの４ＯＨＴで６日間治療することによって、老化を受けるように誘導したことを示す図である。その時点で、１０μＭの示した薬物を加えた。平行して、同じ治療をＤＭＳＯ（−４ＯＨＴ）で治療したＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞において実施した。これらの細胞は老化を受けない。細胞を４ＯＨＴ誘導後の６、８、及び１０日目に固定し、クリスタルバイオレットで染色して細胞生存度を評価した。Ｔ、Ｔｙｒ−ＡＧ８７９、Ｐ、ＰＦ−５７３２２８、Ｃ、シクロスポリン。（Ｂ）（Ａ）と同様の実験を実施し、誘導後１０日目の細胞を固定し、ＤＡＰＩで染色して細胞数を評価した。
【図２】細胞培養物中の老化細胞除去化合物を試験するために使用した様々な老化モデルの要約である。
【図３】候補老化細胞除去剤の、がん遺伝子誘導性老化を受けているＩＭＲ９０細胞を死滅させるその能力を試験した図である。ＤＭＳＯ（左側のバー）及び４ＯＨＴ（右側のバー）治療における、１、５、及び１０μＭでの％細胞生存。
【図４】候補老化細胞除去剤の、がん遺伝子誘導性老化を受けているＨＭＥＣ細胞を死滅させるその能力を試験した図である。ＤＭＳＯ（左側のバー）及び４ＯＨＴ（右側のバー）治療における、１、５、及び１０μＭでの％細胞生存。
【図５】候補老化細胞除去剤の、ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  Ｅ６／Ｅ７細胞を死滅させるその能力を試験した図である。ＤＭＳＯ（左側のバー）及び４ＯＨＴ治療（右側のバー）における、１、５、及び１０μＭでの％細胞生存。
【図６】候補老化細胞除去剤の、古いＩＭＲ９０細胞を死滅させるその能力を試験した図である。若齢（左側のバー）対老齢（右側のバー）における、１、５、及び１０μＭでの％細胞生存。
【図７】候補老化細胞除去剤の、エトポシド治療による老化を受けているＩＭＲ９０細胞を死滅させるその能力を試験した図である。ＤＭＳＯ（左側のバー）対エトポシド（右側のバー）治療における、１、５、及び１０μＭでの％細胞生存。
【図８】候補老化細胞除去剤の、ドキソルビシン治療による老化を受けているＩＭＲ９０細胞を死滅させるその能力を試験した図である。ＤＭＳＯ（左側のバー）対（右側のバー）ドキソルビシン治療における、１、５、及び１０μＭでの％細胞生存。
【図９】候補老化細胞除去剤を試験した結果の要約である。
【図１０】候補老化細胞除去剤の、がん遺伝子誘導性老化を受けている細胞を死滅させるその能力を試験した図である。ＤＭＳＯ（右側のバー）及び４ＯＨＴ（左側のバー）治療における細胞数。
【図１１】スタチンが老化細胞除去剤として振る舞い、がん遺伝子誘導性老化を受けるＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞を優先的に死滅させることを示す図である。（Ａ）同定したスタチンの試験。（Ｂ）アトルバスタチンは濃度依存的な様式で老化細胞除去として振る舞う。（Ｃ）シンバスタチンは濃度依存的な様式で老化細胞除去として振る舞う。それぞれの化合物について、左側のバー＝ＤＭＳＯ、右側のバー＝４ＯＨＴ。
【図１２】様々な接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤が老化細胞除去剤として振る舞うことを示す図である。３つの異なるＦＡＫ阻害剤（ＰＦ−５７３２２８、ＮＳＣ６７７２４９としても知られる化合物１４、及びデファクチニブ）をＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞において試験して、老化細胞（４ＯＨＴ誘導、右側のバー）対非老化細胞（ＤＭＳＯで治療、左側のバー）を示差的に死滅させるそれらの能力を分析した。
【図１３】老化細胞除去剤のうちのいくつかが、アポトーシスを誘導することによって老化細胞を死滅させることを示す図である。ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞を、ＤＭＳＯ（対照として）又は４ＯＨＴ（老化を誘導するため）で治療した。したがって、細胞を、ＤＭＳＯ、ＡＢＴ−２６３、又は示した老化細胞除去剤で２日間（Ａ）又は３日間（Ｂ）、パンカスパーゼ阻害剤ＱＶＤの存在下（右側のバー）又は非存在下（左側のバー）で治療した。老化細胞除去剤を用いた老化細胞の治療はそれらを死滅させるが、ＰＦ−５７３２２８、ロットレリン、及びロテノンの事例では、パンカスパーゼ阻害剤ＱＶＤを用いた前治療によって妨げられた。ＡＢＴ、ＡＢＴ−２６３；ＰＦ、ＰＦ−５７３２２８；ＪＦＤ、ＪＦＤ００２４４；ＤＰＩ、ジフェニレンヨードニウム。
【図１４】老化細胞除去剤ＪＦＤ００２４４及びロットレリンが、正常細胞及び老化細胞を含有する混合培養物中で老化細胞を特異的に排除することを示す図である。（Ａ）正常細胞（ＩＭＲ９０  Ｃｈｅｒｒｙ）をＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  ＧＦＰ細胞（４ＯＨＴの存在下で老化となる）と混合する、実験のセットアップである。（Ｂ）示した薬物で処置した混合培養物を示す代表的な写真である。下の段で、４ＯＨＴの際にＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  ＧＦＰ細胞が老化となる。（Ｃ）混合培養物中のＩＭＲ９０  Ｃｈｅｒｒｙ（左側のバー）及びＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  ＧＦＰ（右側のバー）の定量化である。
【図１５】ウアバインが、マウスにおいてドキソルビシン治療によって誘導された老化細胞を排除することを示す図である。（Ａ）実験セットアップ、マウス（ｎ＝５匹／群）に単一用量の１０ｍｇ／ｋｇのドキソルビシンを投与した。２カ月後、マウスを媒体、ウアバイン、又はＡＢＴ−２６３（老化細胞除去対照として）で連続した４日間治療したあと、分析のために選別した。（Ｂ）対照及びドキソルビシンで治療したマウスから得た肺の凍結切片を、ヘマトキシリン及びエオシン（組織構造を現すため）並びにＳＡ−β−Ｇａｌ（老化細胞を現すため）で染色した。老化細胞は、ドキソルビシンで治療したマウスの細気管支に蓄積される。（Ｃ）ＳＡ−β−Ｇａｌ染色に陽性である肺面積の定量化。ドキソルビシンを用いた治療は老化細胞の蓄積を誘導し、これはＡＢＴ−２６３又はウアバインを用いた治療の際に部分的に排除することができる。（Ｄ）肺凍結切片の代表的な写真である。
【図１６】ＤＰＩ又はウアバインを用いた治療が、マウスにおいて全身放射線照射によって誘導された老化細胞を排除する排除ことを示す図である。（Ａ）実験セットアップ、老化を誘導するためにマウス（ｎ＝５匹／群）に６グレイを照射した。２カ月後、マウスを媒体、ＤＰＩ、ウアバイン、又はＡＢＴ−２６３（老化細胞除去対照として）で連続した４日間治療したあと、分析のために選別した。（Ｂ）対照及び照射したマウスから得た肺の凍結切片を、ヘマトキシリン及びエオシン（組織構造を現すため）並びにＳＡ−β−Ｇａｌ（老化細胞を現すため）で染色した。老化細胞は、照射したマウスの細気管支に蓄積される。（Ｃ）ＳＡ−β−Ｇａｌ染色に陽性である肺面積の定量化。全身放射線照射は老化細胞の蓄積を誘導し、これはＡＢＴ−２６３、ウアバイン、又はＤＰＩを用いた治療の際に部分的に排除することができる。（Ｄ）肺凍結切片の代表的な写真である。
【図１７】ウアバイン又はジゴキシンを用いた治療が老化細胞においてアポトーシスを誘導することを示す図である。強心配糖体を用いたＯＩＳを受けているＩＭＲ９０細胞の治療の際の、切断されたカスパーゼ３を示すウエスタンブロット。
【図１８】強心配糖体が、がん遺伝子誘導性老化を受けている細胞の用量依存的な死滅を誘導することを示す図である。１００ｎＭの４ＯＨＴを用いた治療によって、ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞を、老化を受けるように誘導した。誘導の６日後、細胞を示した濃度の（Ａ）ウアバイン、（Ｂ）ブファリン、又は（Ｃ）ジゴキシンで治療した。
【図１９】グリコシド基が強心配糖体誘導性の老化細胞除去（senolysis）に必要ないことを示す図である。強心配糖体（Ａ）が、がん遺伝子誘導性老化のＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ系を使用して老化細胞を選択的に死滅させる能力を、その対応する強心ステロイド（Ｂ、グリコシド基を欠く）と比較した。左側のバー＝ＤＭＳＯ、右側のバー＝４ＯＨＴ。
【図２０】ウアバインの老化細胞除去活性が細胞内Ｋ＋濃度及びｐ３８に依存性であることを示す図である。（Ａ）ウアバインが、がん遺伝子誘導性老化を受けているＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞を選択的に死滅させる能力は、ＫＣｌを加えることで細胞内Ｋ＋濃度を増加させることによって妨げられ、これは、これがＫ＋／Ｎａ＋＋ポンプを阻害することによって標的に作用することを示唆している。（Ｂ）ｐ３８の阻害はウアバインの老化細胞除去特性を部分的に妨げる。左側のバー＝ＤＭＳＯ、右側のバー＝４ＯＨＴ。
【図２１】ウアバインを用いた断続的な治療が、高齢マウスの身体フィットネスを改善させることを示す図である。（Ａ）２４カ月齢のメスマウスを、本パネル中に要約したスケジュールに供した。治療週間にはウアバイン治療（１ｍｇ／ｋｇ  ｉｐ）を連続した３日間与えた。対照群ｎ＝７匹、ウアバイン群ｎ＝９匹。（Ｂ）マウスの身体フィットネス及び協調を評価するロータロッド試験の結果である。左側のバー＝生理食塩水、右側のバー＝ウアバイン。
【図２２】ウアバイン治療が血中代謝物の老化関連変化を戻すことを示す図である。血漿中のアルブミン（Ａ）、アミラーゼ（Ｂ）、及びＰＨＯＳ（Ｃ）の濃度を、図２１Ａに記載の加齢実験からのマウスにおいて測定した。９０日齢のメスマウスが比較（若齢）として含まれる。
【図２３】ウアバインで治療した高齢マウスが様々な臓器において老化の低減を示すことを示す図である。Ｃｄｋｎ２ａ  ｍＲＮＡ（老化マーカー及びエフェクターｐ１６Ｉｎｋ４ａをコードしている）の発現は加齢中に増加し、ウアバイン治療後に低減している場合がある。ｍＲＮＡレベルを、図２１Ａに記載の実験からのメスマウス及び対応する若齢（９０日齢のメス）対照の肝臓（Ａ）、腎臓（Ｂ）、及び筋肉（Ｃ）からの抽出物において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって測定した。
【図２４】高齢マウスのウアバイン治療が、肝臓において老化関連β−ガラクトシダーゼ陽性細胞の減少をもたらすことを示す図である。ウアバインで治療した高齢マウスの肝臓におけるＳＡ−β−Ｇａｌ活性（老化のマーカー）の低減を示す（Ａ）定量化及び（Ｂ）代表的な写真である。
【図２５】ウアバインを用いた治療が、肝臓がん発生モデルにおいて前悪性ＮｒａｓＧ１２Ｖ陽性の老化肝細胞を排除することを示す図である。Kang et al (Nature 2011, PMID: 22080947)に記載のように、（Ａ）ＣＢ１７  ＳＣＩＤ／ｂｅｉｇｅマウス免疫抑制マウスを水力学的圧尾静脈注射に供して、肝臓でＮｒａｓＧ１２Ｖを発現させ、肝細胞でがん遺伝子誘導性老化を誘導した。５日後、マウスを１ｍｇ／ｋｇのウアバインｉｐでさらに３日間治療し、翌日（９日目）に肝臓を分析用に採取した。ウアバインを用いた治療は、ＳＡ−ｂ−Ｇａｌ活性（Ｂ）、ｐ２１陽性細胞（Ｃ、老化のマーカー）、及びＮｒａｓ陽性の新生物発生前の肝細胞（Ｄ）を低減させた。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明は、老化細胞を選択的に死滅させることができる薬剤に関する。
【００３０】
本明細書中で使用する用語「老化細胞除去」とは、老化細胞を選択的に（優先的に又はより高い度合で）破壊する、死滅させる、除去する、又はその選択的破壊を促進する化合物をいう、すなわち、化合物は、非老化細胞を破壊する又は死滅させるその能力と比較して、老化細胞を、生物学的に、臨床的に、及び／又は統計的に有意な様式で破壊する又は死滅させる。老化細胞除去化合物は、確立された老化細胞を選択的に死滅させるために十分であるが、非老化細胞を臨床的に有意又は生物学的に有意な様式で死滅させるには不十分な量及び期間で使用する。
【００３１】
特定の実施形態では、本明細書中に記載の老化細胞除去化合物は、老化細胞を誘導（開始、刺激、始動、活性化、促進）して死滅をもたらす様式で、少なくとも１つのシグナル伝達経路を変化させる。老化細胞除去化合物は、１又は２以上の標的タンパク質と相互作用することによって老化細胞中の１又は２以上のシグナル伝達経路を変化させてもよく、これは、アポトーシス経路などの細胞死経路の抑制の除去又は低減をもたらす。例えば、老化細胞を老化細胞除去化合物に接触又は曝露させることで、アポトーシスを開始するための細胞の機構及び経路が修復され得る。好ましい一実施形態では、薬剤はアポトーシスを誘導する。
【００３２】
本発明の一態様は、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させることに使用するための薬剤であって、以下：強心配糖体又は非糖部、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるその塩から選択される、薬剤に関する。
【００３３】
本発明の別の態様は、対象において１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる方法であって、以下：強心配糖体又は非糖部、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるその塩から選択される薬剤を治療有効量で対象に投与するステップを含む、方法に関する。
【００３４】
好ましい態様では、薬剤は、老化細胞を非老化細胞に優先して選択的に死滅させる。好ましくは、薬剤は、老化細胞を非老化細胞に優先して、少なくとも１．５倍、より好ましくは、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、少なくとも１０倍、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも２５倍、少なくとも５０倍、又は少なくとも１００倍で死滅させる選択性を示す。
【００３５】
好ましい一実施形態では、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させることができる薬剤は強心配糖体又は非糖部である。
【００３６】
強心配糖体とは、心不全を治療するために使用されるステロイド医薬品のクラスである。強心配糖体を含有する医薬品は心臓組織に直接働きかける。強心配糖体は、１又は２以上の糖分子と連結した非糖部（ステロイドホルモンと構造的に関連している）からなる。強心配糖体の非糖部は２つの化学群、カルデノライド及びブファジエノライドに分けることができ、前者の群が心臓活性に最も関係づけられている。カルデノライドは不飽和ブチロラクトン環を有する一方で、ブファジエノライドはα−ピロン環を有する。非糖部とは、グリコシド上のグリコシル基が水素原子によって置き換えられた後に残る化合物である。適切な強心配糖体及び非糖部は当分野の当業者が精通しているであろう。
【００３７】
好ましい一実施形態では、老化細胞を選択的に死滅させることができる化合物は、ウアバイン、ジゴキシン、及びＫ−ストロファンチンから選択される強心配糖体である。
【００３８】
別の好ましい実施形態では、老化細胞を選択的に死滅させることができる化合物は、ストロファンチジン及びブファリンから選択される非糖部である。
【００３９】
非常に好ましい一実施形態では、老化細胞を選択的に死滅させることができる薬剤はウアバインである。ｇ−ストロファンチンとしても知られるウアバインは強心配糖体であり、低用量では、低血圧及び一部の不整脈を治療するために医学的に使用されている。これは、ナトリウム−カリウムイオンポンプとしても知られるＮａ／Ｋ−ＡＴＰａｓｅを阻害することによって作用する。本出願人らによる研究により、ウアバインが血中代謝物の老化関連の変化を戻すことができることが示されている。さらなる研究により、ウアバインを用いた断続的な治療が、高齢マウスの身体フィットネスを改善させ（図２１）、肝臓における老化関連β−ガラクトシダーゼ活性の低減（図２４）を含めて、様々な臓器において老化の低減をもたらす（図２２）ことが実証されている。また、研究により、ウアバイン治療が、肝臓がん発生モデルにおいて前悪性ＮｒａｓＧ１２Ｖ陽性の老化肝細胞を排除することも示されており、それによる、肝臓（及び他の）がんの治療における治療的応用も示されている。
【００４０】
好ましい一実施形態では、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させることができる薬剤はＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤である。
【００４１】
ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼは、コレステロール及び他のイソプレノイドを産生する代謝経路であるメバロン酸経路の律速酵素である。哺乳動物細胞では通常、この酵素はＬＤＬ受容体を介した低密度リポタンパク質の内部移行及び分解に由来するコレステロール並びにコレステロールの酸化種によって抑制されている。このレダクターゼの競合的阻害剤は肝臓におけるＬＤＬ受容体の発現を誘導し、立ち代ってこれは、血漿ＬＤＬの異化を増加させ、アテローム性動脈硬化症の重要な決定要因であるコレステロールの血漿濃度を下げる。したがって、この酵素は、集合的にスタチンとして知られる広く利用可能なコレステロール低下薬の標的である。
【００４２】
ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤は、公知の研究室アッセイ（Gerber, R., Ryan, J.D., and Clark, D.S. (2004). Cell-based screen of HMG-CoA reductase inhibitors and expression regulators using LC-MS. Anal Biochem 329, 28-34）によって、又は市販のアッセイキット（例えばSigma Aldrich社）を使用して同定することができる。好ましくは、本発明の目的のために、上記アッセイにおいて約１００μＭ未満、より好ましくは約５０μＭ未満、さらにより好ましくは約２５μＭ未満、約１０μＭ未満、約５μＭ未満、約１μＭ未満、約０．１μＭ未満、若しくは約０．０１μＭ未満、又は１ｎＭのＩＣ５０値す場合に、化合物はＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤であるとみなされる。
【００４３】
好ましい一実施形態では、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤はスタチンである。スタチンの例には、ロスバスタチン（CRESTOR）、ロバスタチン（Mevacor）、アトルバスタチン（Lipitor）、プラバスタチン（Pravachol）、フルバスタチン（Lescol）、ピタバスタチン（Livalo）、及びシンバスタチン（Zocor）が含まれる。スタチンが発見された真菌源の１つである紅色酵母米抽出物は、モナコリンとして知られるいくつかの天然に存在するコレステロール低下分子を含有する。これらのうち、最も活性の高いものはモナコリンＫ、すなわちロバスタチンである（以前は商品名Mevacorで販売されており、現在はジェネリック薬品ロバスタチンとして入手可能）。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤（例えばスタチン）は、心血管疾患の危険性を低減させる手段として血清コレステロールを下げるために使用する。
【００４４】
より好ましい実施形態では、スタチンは、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、及びシンバスタチンから選択される。
【００４５】
シンバスタチンなどのスタチンや、老化増殖抑止に影響を与えずに、又はアポトーシスを介して線維芽細胞を排除せずに、タンパク質のプレニル化を阻害することによって、老化ヒト線維芽細胞の老化関連分泌表現型（ＳＡＳＰ）を減少させることが報告されている（Lui et al, Sci Rep. 2015 Dec 14;5:17895. doi: 10.1038/srep17895）。さらなる研究により、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤が、リンパ腫細胞などの分裂細胞において、ＲＯＳの発生を促進し、メバロン酸経路の抑制によってＡｋｔ、Ｅｒｋ、及びｐ３８シグナルを調節することによって、アポトーシスを誘導することが報告されている（Qi et al, Cell Death and Disease (2013) 4, e518; doi:10.1038/cddis.2013.44）。驚くべきことに、本出願人らによる研究は今回、スタチンが老化細胞を死滅させる能力を有することを示した。
【００４６】
本発明の別の実施形態では、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させることができる薬剤は接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤である。
【００４７】
タンパク質チロシンキナーゼ２（ＰＴＫ２）としても公知の接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）は、ヒトではＰＴＫ２遺伝子によってコードされているタンパク質である。ＰＴＫ２は、細胞接着及び拡大の方法に関与している接着斑関連プロテインキナーゼである。
【００４８】
ＦＡＫは、細胞間の接着斑の動力学の参加物として動員される１２５ｋＤのタンパク質であり、運動性及び細胞生存において役割を有する。ＦＡＫは、がん遺伝子タンパク質チロシンキナーゼｖ−ｓｒｃの基質として最初に同定された、高度に保存された非受容体チロシンキナーゼである。このサイトゾルキナーゼは、細胞運動、マイトジェン応答、及び細胞生存を含む多様な細胞内の役割に関連づけられている。ＦＡＫは、典型的には、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）を細胞質の細胞骨格と連結させる多タンパク質構造である、接着斑として知られる構造に位置する。接着斑のさらなる構成要素には、アクチン、フィラミン、ビンキュリン、タリン、パキシリン、テンシン、及びＲＳＵ−１が含まれる。
【００４９】
ＦＡＫ阻害剤は、公知の研究室アッセイによって、市販のキット、例えば、ＡＤＰ−Ｇｌｏ（商標）キナーゼアッセイ（Promega社）又はＦＡＫ（ホスホ）［ｐＴ９３７］］ヒトＥＬＩＳＡキット（Thermo Fisher Scientific社）を使用して同定することができる。好ましくは、本発明の目的のために、上記アッセイにおいて約１００μＭ未満、より好ましくは約５０μＭ未満、さらにより好ましくは約２５μＭ未満、約１０μＭ未満、約５μＭ未満、約１μＭ未満、約０．１μＭ未満、若しくは約０．０１μＭ未満、又は約１ｎＭ未満のＩＣ５０値を示す場合に、化合物はＦＡＫ阻害剤であるとみなされる。
【００５０】
好ましい実施形態では、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤は、ＰＦ−５７３２２８、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブから選択される。
【００５１】
別の実施形態では、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させることができる薬剤は以下から選択される。
【００５２】
【表１】
2020521734.tif 000002
2020521734.tif 000003
2020521734.tif 000004
2020521734.tif 000005
2020521734.tif 000006
2020521734.tif 000007
2020521734.tif 000008
【００５３】
本発明の別の態様は、上記表に定義した老化細胞除去剤に関する。
【００５４】
本発明の別の態様は、老化細胞除去剤として使用するための、本明細書中に定義した薬剤に関する。好ましくは、薬剤は上記表に定義されている通りである。
【００５５】
本発明による化合物の老化細胞除去活性は、添付の実施例を参照して実証されており、以下にさらに詳述されている。
【００５６】
ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞における本出願人らによる研究により、本明細書中に記載の化合物が老化細胞を排除することができることが実証されている。特に、化合物は、老化細胞数の選択的低減をもたらし（正常細胞の低下はない）、したがって候補老化細胞除去剤である。
【００５７】
使用したセットアップでは、ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞を１００ｎＭの４ＯＨＴで処置して、ＯＩＳ（がん遺伝子誘導性老化）を誘導し、ＥＲ：ＲＡＳ融合タンパク質を活性化させた。４ＯＨＴ誘導（＋４ＯＨＴ）の６日後、細胞が完全に老化したあと、試験する薬剤を１０μＭの濃度で加え、４日後、自動顕微鏡観察と組み合わせたＤＡＰＩ染色によって細胞数を評価した。或いは、細胞を固定し、クリスタルバイオレットで染色した。平行して、同じ処置をＤＭＳＯ（−４ＯＨＴ）で処置したＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞において実施した。これらの細胞は老化を受けない。（−４ＯＨＴ）対（＋４ＯＨＴ）の細胞数のプロットにより、老化細胞を選択的に排除することができる薬剤が同定された。試験した候補のうち、ｔｙｒ−ＡＧ８７９、ＰＦ−５７３２２８、及びシクロスポリンが最も有望な老化細胞除去特性を示した（図１）。本発明によるさらなる化合物による、ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳにおける老化細胞の選択的死滅は、図１０において確認されている。
【００５８】
老化細胞除去剤としてのその役割を検証するために、化合物を、３つの異なる濃度（１、５、及び１０μＭ）で使用した場合に、様々な種類の老化細胞を選択的に排除するその能力について試験した。これらの化合物を試験するために使用した様々な老化の細胞培養モデルの要約を図２に提示する。これらの実験では、化合物を対照ＡＢＴ−２６３（事実上の至適基準の老化細胞除去化合物）と隣り合わせで試験した（Chang, J., Wang, Y., Shao, L., Laberge, R.M., Demaria, M., Campisi, J., Janakiraman, K., Sharpless, N.E., Ding, S., Feng, W., et al. (2016). Clearance of senescent cells by ABT263 rejuvenates aged hematopoietic stem cells in mice. Nat Med 22, 78-83、Yosef, R., Pilpel, N., Tokarsky-Amiel, R., Biran, A., Ovadya, Y., Cohen, S., Vadai, E., Dassa, L., Shahar, E., Condiotti, R., et al. (2016). Directed elimination of senescent cells by inhibition of BCL-W and BCL-XL. Nat Commun 7, 11190、Zhu, Y., Tchkonia, T., Fuhrmann-Stroissnigg, H., Dai, H.M., Ling, Y.Y., Stout, M.B., Pirtskhalava, T., Giorgadze, N., Johnson, K.O., Giles, C.B., et al. (2016). Identification of a novel senolytic agent, navitoclax, targeting the Bcl-2 family of anti-apoptotic factors. Aging Cell 15, 428-435）。ＯＩＳ中に老化細胞除去剤として振る舞う化合物の能力を試験するために実験を実施した（図３ではＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ、及び図４ではＨＭＥＣ  ｈＴＥＲＴ  ＥＲ：ＲＡＳを使用）。結果は、老化細胞除去化合物がヒト線維芽細胞だけでなく、他の細胞型においても老化細胞除去として振る舞うことを示唆している。老化ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳの選択的死滅が老化誘導の結果であるかＲＡＳシグナル伝達の活性化の結果であるかを理解するために、同質遺伝子ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  Ｅ６／Ｅ７細胞において実験を実施した。これらの細胞では、ＥＲ：ＲＡＳ融合タンパク質を活性化させる４ＯＨＴを１００ｎＭ加えることによってＲＡＳシグナル伝達を誘導させる。しかし、Ｅ６／Ｅ７タンパク質の発現は老化誘導を妨げる。試験した化合物のうちの２つ、ウアバイン及びジフェニレンヨードニウムは、ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  Ｅ６／Ｅ７を死滅させることについて選択性を示した（図５）。このことは、これらの化合物の選択性の一部が、老化の活性化ではなくＲＡＳシグナル伝達が原因であることを示唆しているが、ＲＡＳの活性化過剰が多くの腫瘍の特徴であるため、これらの化合物は依然として興味深い。
【００５９】
本発明による化合物が、老化ががん遺伝子活性化以外の刺激によって誘導されている場合にも老化細胞除去剤として振る舞うことができるかどうかを決定するために、実験を実施した。化合物を、複製老化を受けている細胞（古いＩＭＲ９０細胞、図６）、並びにエトポシド（図７）及びドキソルビシン（図８）などの化学療法薬によって誘導された老化を排除する能力について試験した。結果の要約を図９に提示する。一部の化合物は広域性を実証したが（使用した系の多くにおいて老化細胞除去剤として振る舞う）、他のものは所定の細胞型又は誘導因子に対してより特異的であった。
【００６０】
１つの化合物、ＰＦ−５７３２２８はＦＡＫ阻害剤である。他のＦＡＫ阻害剤が老化細胞除去剤としても振る舞うかどうかを試験するために、実験を実施した。化合物１４（ＮＳＣ６７７２４９としても知られる）及びデファクチニブも老化細胞除去特性を有することが示されている（図１２）。これらの結果は、ＦＡＫが老化細胞に必須の遺伝子であり、したがってＦＡＫ阻害剤が老化細胞除去剤としての治療的応用を有する可能性があることを示唆している。また、様々なスタチンも老化細胞除去性であることが同定された。スタチンはＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤であり、心血管疾患を予防するために使用されている脂質低下医薬品のクラスである（Goldstein and Brown, 2015）。これらのスタチンのうちの５つの老化細胞除去効果が実験によって確認された（図１１Ａ）。さらなる実験は、アトルバスタチン及びシンバスタチンの老化細胞除去剤としての用量依存的効果を確認する役割を果たした（図１１Ｂ〜Ｃ）。これらの実験は、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼが老化細胞の必須遺伝子であり、したがってＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤が老化細胞除去剤としての治療的応用を有することを示唆している。
【００６１】
パンカスパーゼ阻害剤（ＱＶＤ）を使用して、老化細胞除去剤が老化細胞の排除を引き起こした機構を調査するために、実験を実施した。この阻害剤の添加は、ＰＦ−５７３２２８、ロットレリン、及びロテノンによる老化細胞の排除を妨げ、これは、これらの薬物が老化細胞のアポトーシスを選択的に誘導することを示している（図１３）。
【００６２】
上記実験はすべて、正常細胞及び老化細胞の培養物における薬物の効果を比較して行った。薬物が混合培養物からの老化細胞を選択的に死滅させるかどうかを理解するために、４ＯＨＴで治療した際に老化を受けるように誘導することができるＣｈｅｒｒｙ標識した正常ＩＭＲ９０細胞及びＧＦＰ標識したＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞を使用して、実験を実施した（図１４Ａ）。この系を使用して、老化細胞除去剤ＪＦＤ００２４４及びロットレリンは、ＡＢＴ−２６３と同様の様式で、共培養物からの老化細胞の選択的排除をもたらす（図１４Ｂ〜Ｃ）。
【００６３】
さらなる実験では、老化細胞除去剤がインビボで老化細胞を排除することができるかどうかを調査した。化学療法剤ドキソルビシンを用いたマウスの治療は老化を誘導することが示されている。これらの老化細胞は、化学療法に関連する副作用の一部の原因であり、がん細胞の増殖をあおる可能性がある（Demaria, M., O'Leary, M.N., Chang, J., Shao, L., Liu, S., Alimirah, F., Koenig, K., Le, C., Mitin, N., Deal, A.M., et al. (2016). Cellular Senescence Promotes Adverse Effects of Chemotherapy and Cancer Relapse. Cancer Discov.）。ウアバインを用いた治療がドキソルビシンによって誘導された老化細胞を排除できるかどうかを理解するために、図１５に記載のように実験を実施した。ドキソルビシン治療は肺において老化を誘導する。ウアバインを用いた治療は、マウスのドキソルビシン治療によって誘導された老化細胞の部分的排除をもたらした（図１５）。
【００６４】
全身放射線照射は老化を引き起こすことが知られている。照射したマウスでは、老化細胞は肺を含む様々な組織に蓄積される（Chang, J., Wang, Y., Shao, L., Laberge, R.M., Demaria, M., Campisi, J., Janakiraman, K., Sharpless, N.E., Ding, S., Feng, W., et al. (2016). Clearance of senescent cells by ABT263 rejuvenates aged hematopoietic stem cells in mice. Nat Med 22, 78-83、Yosef, R., Pilpel, N., Tokarsky-Amiel, R., Biran, A., Ovadya, Y., Cohen, S., Vadai, E., Dassa, L., Shahar, E., Condiotti, R., et al. (2016). Directed elimination of senescent cells by inhibition of BCL-W and BCL-XL. Nat Commun 7, 11190）。これは、公知の老化細胞除去ＡＢＴ−２６３を用いた治療の際に部分的防止することができる（Chang, J., Wang, Y., Shao, L., Laberge, R.M., Demaria, M., Campisi, J., Janakiraman, K., Sharpless, N.E., Ding, S., Feng, W., et al. (2016). Clearance of senescent cells by ABT263 rejuvenates aged hematopoietic stem cells in mice. Nat Med 22, 78-83、Yosef, R., Pilpel, N., Tokarsky-Amiel, R., Biran, A., Ovadya, Y., Cohen, S., Vadai, E., Dassa, L., Shahar, E., Condiotti, R., et al. (2016). Directed elimination of senescent cells by inhibition of BCL-W and BCL-XL. Nat Commun 7, 11190）。ウアバイン又はＤＰＩのどちらかを用いた治療は、ＡＢＴ−２６３と同様の様式で、これらの老化細胞を部分的に排除した（図１６）。
【００６５】
要約すると、本出願人らによる実験により様々な老化細胞除去剤が同定された。それらの効果は様々な老化の系にわたって検証されており、また、これらの老化細胞除去剤の一部は幅広い特異性を有する一方で、他のものは細胞型又は老化誘導因子についてより選択的であることが同定されている。初期実験により、２つの標的（ＦＡＫ及びＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ）に対する複数の阻害剤が老化細胞除去剤として振る舞うことが同定されている。データは、ＦＡＫ及びＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼが老化細胞に必須の遺伝子であることを示唆している。したがって、ＦＡＫ又はＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼを阻害する薬剤は老化細胞除去剤としての治療的応用を有する。また、実験により、ウアバイン及びＤＰＩを用いた治療がマウスにおいて老化細胞を部分的に排除することが確認されており、これは、これらの薬剤（及び本明細書中で同定した他の老化細胞除去剤）が老化関連疾患の治療において応用を有することを示唆している。
【００６６】
治療的応用
本発明は、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させることに使用するための薬剤に関する。本発明のさらなる態様は、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物、及びそれに関連する方法に関する。
【００６７】
好ましい一実施形態では、薬剤は、がん遺伝子誘導性老化を受けている細胞を選択的に死滅させる。
【００６８】
別の好ましい実施形態では、薬剤は、薬物誘発性老化を受けている細胞を選択的に死滅させる。
【００６９】
別の好ましい実施形態では、薬剤は、放射線照射誘導性老化を受けている細胞を選択的に死滅させる。
【００７０】
薬学的活性剤（pharmaceutically active agent）の性質に応じて、本明細書中に記載の薬剤は、広範囲の様々な老化関連の疾患及び障害を治療するために使用することができる。
【００７１】
例えば、好ましい一実施形態では、薬剤は腫瘍化を遅延させる。別の実施形態では、薬剤は白内障形成を減弱させる。別の実施形態では、薬剤はアテローム性動脈硬化症を減弱させる。別の実施形態では、薬剤は、他の臓器の中でとりわけ腎臓、脂肪、及び心臓の加齢関連劣化を減弱させる。
【００７２】
本発明の一態様は、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物であって、前記化合物が強心配糖体又は非糖部であり、前記老化関連の疾患又は障害が心血管障害以外である、化合物に関する。好ましくは、本態様では、強心配糖体又は非糖部は、ウアバイン、ブフェリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、及びストロファンチジンから選択される。
【００７３】
本発明の別の態様は、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物であって、前記化合物がＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤であり、前記老化関連の疾患又は障害が心血管障害以外である、化合物に関する。好ましくは、障害は増殖性障害である。好ましくは、本態様では、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤は、スタチン、より好ましくは、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、及びシンバスタチンから選択されるスタチンである。
【００７４】
本発明の別の態様は、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤である、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物に関する。好ましくは、本態様では、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤は、ＰＦ−５７３２２８、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブから選択される。好ましくは、本実施形態では、障害は増殖性障害（例えばがん）以外である。
【００７５】
本発明の別の態様は、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための、以下：ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるその塩（化合物がまだ塩形態でない場合）から選択される、化合物に関する。
【００７６】
本発明の別の態様は、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物であって、前記老化関連の疾患又は障害が心血管障害以外であり、前記化合物が、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるその塩（化合物がまだ塩形態でない場合）から選択される、化合物に関する。
【００７７】
本発明の別の態様は、対象に治療有効量のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤を投与するステップを含む、心血管障害以外の老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法に関する。
【００７８】
本発明の別の態様は、対象に治療有効量の接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤を投与するステップを含む、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法に関する。好ましくは、本実施形態では、障害は増殖性障害（例えばがん）以外である。
【００７９】
本発明の別の態様は、老化細胞を選択的に死滅させることによって老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法であって、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに薬学的に許容されるその塩（化合物がまだ塩形態でない場合）から選択される化合物を治療有効量で対象に投与するステップを含む、方法に関する。
【００８０】
好ましくは、化合物は、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、エルトロンボパグ、アダパレン、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに薬学的に許容されるその塩（化合物がまだ塩形態でない場合）から選択される。
【００８１】
本発明の別の態様は、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、ブファリン、ジゴキシン、Ｋ−ストロファンチン、ストロファンチジン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるその塩から選択される化合物の使用であって、前記化合物は、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる、使用に関する。
【００８２】
本発明の別の態様は、心血管障害以外の老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、強心配糖体又は非糖部の使用に関する。好ましくは、障害は以下に詳述する増殖性障害である。
【００８３】
本発明の別の態様は、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤の使用に関する。好ましくは、障害は増殖性障害（例えばがん）以外である。
【００８４】
本発明の別の態様は、心血管障害以外である、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の使用に関する。
【００８５】
老化細胞は、当分野で公知の技法及び手順によって検出することができる。例えば、老化細胞の存在は、老化マーカー、ＳＡ−ベータガラクトシダーゼ（ＳＡ−β−ｇａｌ）を検出する組織学的又は免疫組織化学的技法によって分析することができる（Dimri et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92: 9363-9367 (1995)、国際公開公報ＷＯ２０１５／１１６７３５号に記載の方法も参照）。或いは、老化細胞は、公知の免疫化学的方法、例えば免疫ブロッティング分析によって決定された老化細胞関連ポリペプチドｐ１６の存在によって検出することができる。細胞におけるｐｌ６  ｍＲＮＡの発現は、定量的ＰＣＲを含む様々な技法によって測定することができる。老化細胞に関連するポリペプチドは、公知のアッセイ、例えばＬｕｍｉｎｅｘアレイアッセイを使用して検出することができる（Coppe et al, PLoS Biol 6: 2853-68 (2008)）。
【００８６】
老化細胞の存在は、サイトカイン、ケモカイン、発現及び分泌された増殖因子、プロテアーゼ、細胞関連代謝物、反応性酸素種、並びに炎症及び／又は他の生物学的効果を刺激する他の分子などの、他の老化細胞関連分子を検出することによっても決定することができる。老化細胞関連分子の例には、老化関連分泌表現型（ＳＡＳＰ）、老化メッセージングセクレトーム、及びＤＮＡ損傷分泌プログラム（ＤＤＳＰ）を含むものが含まれる。
【００８７】
本明細書中で使用する老化関連の障害又は疾患には、細胞の老化に関連する又はそれによって引き起こされる障害又は疾患が含まれ、加齢関連の疾患及び障害が含まれる。老化関連の疾患又は障害は老化細胞関連の疾患又は障害とも呼ばれ得る。加齢の顕著な一特長は、機能の徐々の損失、又は分子、細胞、組織、及び生物レベルで起こる変性である。加齢関連の変性は、筋肉減少症、アテローム性動脈硬化症及び心不全、骨粗鬆症、肺動脈弁閉鎖症、腎不全、神経変性（黄斑変性症、アルツハイマー病、及びパーキンソン病を含む）、並びに多くの他のものなどの、十分に理解されている病理を引き起こす。
【００８８】
老化関連の疾患及び障害には、それだけには限定されないが、心血管疾患及び障害、がんなどの増殖性障害、炎症性疾患及び障害、自己免疫疾患及び障害、肺疾患及び障害、眼の疾患及び障害、代謝性疾患及び障害、神経系疾患及び障害（例えば神経変性疾患及び障害）、老化によって誘導される加齢関連の疾患及び障害、皮膚の病気、加齢関連疾患、皮膚科学的な疾患及び障害、並びに移植関連の疾患及び障害が含まれる。
【００８９】
好ましくは、対象は哺乳動物、より好ましくはヒトである。
【００９０】
用語「方法」とは、それだけには限定されないが、化学、薬理学、生物学、生化学、及び医学分野の技術者に知られている様式、手段、技法及び手順、又は公知の様式、手段、技法及び手順から容易に開発されるものを含む、所定の課題を達成するための様式、手段、技法及び手順をいう。
【００９１】
本明細書中、用語「治療すること」には、疾患若しくは障害の進行を抑止する、実質的に阻害する、遅らせる、若しくは逆行させること、疾患若しくは障害の臨床症状を実質的に寛解させること、又は疾患若しくは障害の臨床症状の外見を実質的に防止することが含まれる。
【００９２】
本明細書中、用語「防止すること」とは、そもそも生物が障害又は疾患を獲得することを防ぐための方法をいう。
【００９３】
用語「治療有効量」とは、治療している疾患又は障害の症状のうちの１又は２以上をある程度まで軽減させる、投与している薬剤の量をいう。
【００９４】
本発明において使用するいかなる薬剤においても、本明細書中で治療有効用量ともいう治療有効量は、細胞培養アッセイから最初に推定することができる。例えば、細胞培養において決定されたＩＣ５０又はＩＣ１００を含む循環濃度範囲を達成するために、用量を動物モデルで製剤化することができる。そのような情報を使用して、ヒトにおいて有用な用量をより正確に決定することができる。また、初期投薬量はインビボでのデータからも推定することができる。これらの初期指針を使用して、当業者はヒトにおける有効な投薬量を決定することができる。
【００９５】
さらに、本明細書中に記載の薬剤の毒性及び治療上の有効性は、標準の医薬手順によって、例えばＬＤ５０及びＥＤ５０を決定することによって、細胞培養物又は実験動物において決定することができる。毒性効果と治療効果の用量比が治療指数であり、ＬＤ５０とＥＤ５０の比として表すことができる。高い治療指数を示す化合物が好ましい。これらの細胞培養アッセイ及び動物研究から得られたデータを使用して、ヒトにおける使用に毒性がない投薬量範囲を配合することができる。そのような化合物の投薬量は、好ましくは、毒性がわずか又はまったくないＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内にある。投薬量は、用いる剤形及び利用する投与経路に応じてこの範囲内で変動し得る。正確な配合、投与経路、及び投薬量は、患者の状態に鑑みて個々の医師が選択することができる。（例えば、Fingl et al, 1975, The Pharmacological Basis of Therapeutics, chapter 1, page 1を参照）。
【００９６】
投薬の量及び間隔は、治療効果を維持するために十分な活性化合物の血漿レベルを提供するために個々に調節し得る。好ましくは、治療上有効な血清レベルは、複数の用量を各日に投与することによって達成される。局所投与又は選択的取込の場合は、薬物の有効な局所濃度は血漿濃度と関連していない場合がある。当業者は、必要以上の実験を行わずに、治療上有効な局所投薬量を最適化することができるであろう。
【００９７】
本発明の一態様は、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる、老化関連の障害又は疾患の予防又は治療において使用するための強心配糖体又は非糖部に関する。好ましくは、本態様では、老化関連の障害又は疾患は心血管障害ではない。
【００９８】
本発明の一態様は、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる、老化関連の障害又は疾患の予防又は治療において使用するためのＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤に関する。好ましくは、本態様では、老化関連の障害又は疾患は心血管障害ではない。
【００９９】
本発明の別の態様は、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる、老化関連の障害又は疾患の予防又は治療において使用するためのＦＡＫ阻害剤に関する。好ましくは、本態様では、老化関連の障害又は疾患はがんなどの増殖性障害ではない。本態様では、好ましくは、老化関連の疾患又は障害は、心血管疾患若しくは障害、代謝性疾患、炎症性疾患若しくは障害、肺疾患若しくは障害、又は神経系疾患若しくは障害である。
【０１００】
増殖性障害
本発明の好ましい一実施形態では、薬剤は、がん又は白血病などの増殖性障害の治療において使用することができる。
【０１０１】
本発明の本態様に従って治療し得るがんの非限定的な例には、腺癌、副腎腫瘍、エナメル上皮腫、未分化、甲状腺の未分化癌、血管線維腫、血管腫、血管肉腫、アプドーマ、嗜銀細胞腫、男化腫瘍、腹水腫瘍細胞、腹水腫瘍、星状芽細胞腫、星細胞腫、毛細血管拡張性運動失調症、心房粘液腫、基底細胞癌細胞、骨がん、脳幹神経膠腫、脳腫瘍、乳がん、バーキットリンパ腫、小脳星細胞腫、子宮頸がん、サクランボ色血管腫、胆管癌、胆管腫、軟骨芽細胞腫、軟骨腫、軟骨肉腫、絨毛芽腫、絨毛癌、結腸がん、一般急性リンパ芽球性白血病、頭蓋咽頭腫、嚢胞癌、嚢胞線維腫、嚢腫、非浸潤性乳管癌、管内乳頭腫、未分化胚細胞腫、脳腫瘤、子宮内膜癌、内皮腫、上衣腫、上皮腫、赤白血病、ユーイング肉腫、結節外リンパ腫、ネコ肉腫、線維腺腫、線維肉腫、甲状腺濾胞がん、神経節膠腫、ガストリノーマ細胞、多形性膠芽細胞腫、神経膠腫、性腺芽細胞腫、血管芽腫、血管内皮芽細胞腫、血管内皮腫、血管外皮腫、血管リンパ管腫、血球芽細胞腫、血球細胞腫、有毛細胞白血病、過誤腫、肝臓癌、肝細胞癌、肝臓癌、組織腫、ホジキン病、副腎腫、浸潤性がん、浸潤性導管細胞癌、膵島細胞腫、若年性血管線維腫、カポジ肉腫、腎臓腫瘍、大細胞リンパ腫、白血病、非白血病、急性白血病、脂肪腫、肝臓がん、肝臓転移、リュッケ癌、リンパ腺腫、リンパ管腫、リンパ球性白血病、リンパ球性リンパ腫、リンパ球腫、リンパ浮腫、リンパ腫、肺がん、悪性中皮腫、悪性奇形腫、肥満細胞腫、髄芽腫、黒色腫、髄膜腫、中皮腫、モートン神経腫、多発性骨髄腫、骨髄芽細胞腫、骨髄性白血病、骨髄脂肪腫、骨髄腫、筋芽細胞腫、粘液腫、上咽頭癌、新生物性、腎芽細胞腫、神経芽細胞腫、神経線維腫、神経線維腫症、神経膠腫、神経腫、非ホジキンリンパ腫、乏突起神経膠腫、視神経神経膠腫、骨軟骨腫、骨原性肉腫、骨肉腫、卵巣がん、乳頭パジェット病、パンコースト腫瘍、膵臓がん、褐色細胞腫、褐色細胞腫、形質細胞腫、原発性脳腫瘍、胎児転移腫、プロラクチノーマ、腎細胞癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫（rhabdomyosarcoma）、横紋筋肉腫（rhabdo sarcoma）、固形腫瘍、肉腫、二次性腫瘍、精上皮腫、皮膚がん、小細胞癌、扁平細胞癌、イチゴ状血管腫、Ｔ細胞リンパ腫、奇形腫、精巣がん、胸腺腫、栄養芽細胞腫瘍、ウィルムス腫瘍が含まれる。
【０１０２】
非常に好ましい一実施形態では、本発明の薬剤は、放射線照射或いは化学療法（例えば、パルボシクリブ、リボシクリブ、若しくはアベマシクリブ、又は他の化学療法剤を用いた治療）などの、老化を誘導するがんの他の治療と併せて使用することができる。したがって、他の治療と同時に、又はその後に治療することによって、薬剤は、
−  老化へと押し進められたがん細胞を排除することができる、並びに／或いは
−  炎症、がんの増殖の促進、転移の促進、及び化学療法若しくは放射線療法の他の副作用などの、老化細胞によって生じる特定の副作用を排除する又は低減することができる、並びに／又は
−  前がん性病変を低減する若しくは排除することができる、並びに／又は
−  ＣＤＫ４／６阻害剤を用いた治療によって老化を受けた細胞を排除する若しくは低減することができる。
【０１０３】
好ましい一実施形態では、薬剤は、前がん性（又は新生物発生前の）病変を低減する又は排除することができる。老化細胞は、前悪性腫瘍中には存在するが悪性のものには存在しない。この点において、前悪性腫瘍中の相当数の細胞ががん遺伝子誘導性老化を受けるが、ｐ１６ＩＮＫ４ａ又はｐ５３などのがん遺伝子誘導性老化エフェクターの損失が原因で、悪性腫瘍中の細胞はそうされることができないことが理解される（Collado et al; Nature、Vol 436, August 2005, page 642）。したがって、本発明の一実施形態は、前がん性（又は新生物発生前の）病変を低減する又は排除することにおいて使用するための、本明細書中に記載の薬剤に関する。
【０１０４】
本発明の別の好ましい実施形態では、薬剤は、例えば化学療法剤を用いた治療の前、その間、又はその後に、化学療法誘導性老化を排除する又は低減することができる。化学療法剤には、それだけには限定されないが、アントラサイクリン、ドキソルビシン、エトポシド、ダウノルビシン、タキソール、パクリタキセル、ゲムシタビン、ポマリドミド、及びレナミドマイドが含まれる。したがって、好ましい一実施形態では、薬剤は、化学療法剤を用いた組合せ治療で使用することができ、薬剤は、化学療法剤と別々に、順次に、又は同時に投与する。本発明の一実施形態は、化学療法誘導性老化を排除する又は低減することにおいて使用するための、本明細書中に記載の薬剤に関する。
【０１０５】
本発明の別の好ましい実施形態では、薬剤は、ＣＤＫ阻害剤、例えばＣＤＫ４阻害剤又はＣＤＫ６阻害剤を用いた治療によって誘導された老化を排除する又は低減することができる。したがって、好ましい一実施形態では、薬剤は、ＣＤＫ４阻害剤又はＣＤＫ６阻害剤を用いた組合せ治療で使用することができ、薬剤は、ＣＤＫ４阻害剤又はＣＤＫ６阻害剤と別々に、順次に、又は同時に投与する。
【０１０６】
本発明の別の好ましい実施形態では、薬剤は、パルボシクリブ誘導性老化を排除する又は低減ことができる。パルボシクリブ誘導性老化を排除する又は低減する状況において、薬剤の投与は、細胞が再び細胞周期に入る際にがんの寛解を潜在的に妨げる可能性がある（Cadoo et al; Breast Cancer: Targets and Therapy 2014;6, 123-133を参照）。
【０１０７】
別の好ましい実施形態では、薬剤は、老化へと押し進められたがん細胞を排除することができる。好ましい一実施形態では、薬剤は腫瘍化を遅延させる。
【０１０８】
別の好ましい実施形態では、薬剤は、炎症、がんの増殖の促進、転移の促進、及び化学療法若しくは放射線療法の他の副作用などの、老化細胞によって生じる特定の副作用を排除する又は低減することができる。細胞の老化は、若年期には腫瘍化を抑制するが、これは、高齢の生物ではがんを促進し得ることが研究により示されている（Krtolica et al; PNAS, Oct 9, 2001, Vol 98, No 21, 12072-12077）。がん遺伝子誘導性老化は、古典的には腫瘍防御バリアとしてみなされている。しかし、いくつかの研究により、特定の状況下では、老化細胞はその分泌表現型が理由で腫瘍の進行を支持し得ることが示されている（Angelini et al; Cancer Res 73(1), 1 January 2013, 450-458）。
【０１０９】
別の好ましい実施形態では、薬剤は、がん及び転移を駆動する炎症を減少させることができる。
【０１１０】
好ましい一実施形態では、薬剤は、化学療法誘導性又は放射線療法誘導性の副作用の治療において使用することができる。化学療法剤の非限定的な例には、アントラサイクリン、ドキソルビシン、エトポシド、ダウノルビシン、タクソール、パクリタキセル、ゲムシタビン、ポマリドミド、及びレナミドマイドが含まれる。化学療法誘導性副作用又は放射線療法誘導性副作用には、それだけには限定されないが、体重減少、内分泌変化、ホルモン不均衡、ホルモンシグナル伝達の変化、心毒性の変化、体組成、身体活動性能力の低減、胃腸毒性、嘔気、嘔吐、便秘、無食欲症、下痢、末梢神経障害、疲労、倦怠感、低身体活動、血液毒性、貧血、肝毒性、脱毛症、疼痛、感染症、粘膜炎、水分貯留、皮膚毒性、発疹、皮膚炎、色素沈着過剰、蕁麻疹、感光性、爪の変化、口、歯肉、又は咽頭の問題、及び化学療法又は放射線療法によって引き起こされる任意の毒性副作用が含まれる。したがって、好ましい一実施形態では、薬剤は、化学療法剤を用いた組合せ治療で使用することができ、薬剤は、化学療法剤と別々に、順次に、又は同時に投与する。同様に、薬剤は、放射線療法を用いた組合せ治療で使用することができ、薬剤は、放射線療法の前、その間、又はその後に投与される。本発明の別の実施形態は、１又は２以上の化学療法誘導性又は放射線療法誘導性の副作用を低減する又は緩和することにおいて使用するための、本明細書中に記載の薬剤に関する。
【０１１１】
一部の実施形態では、本発明は、化学療法を受けていない若しくは放射線療法を受けていない期間の間、又は化学療法若しくは放射線療法の治療レジメンが完了したあとに、本明細書中に記載の薬剤を投与するステップを含む、転移の可能性を治療する又は低減する方法を提供する。本発明の別の実施形態は、転移の可能性を治療する又は低減することにおいて使用するための、本明細書中に記載の薬剤に関する。
【０１１２】
好ましい一実施形態では、薬剤は、慢性又は長期的な化学療法誘導性又は放射線療法誘導性の副作用の治療において使用することができる。特定の毒性効果は治療のずっと後に現れる場合があり、療法による臓器又は系への損傷から生じる場合がある。臓器不全、例えば、神経、肺、心血管、及び内分泌の機能不全が、小児期の間にがんの治療を行った対象において観察される場合がある。化学療法又は放射線療法を受けた対象において発生する慢性又は遅発型の毒性副作用には、例えば、心筋症、鬱血性心疾患、炎症、早発閉経、骨粗鬆症、不妊症、認知機能障害、末梢神経障害、二次性がん、白内障及び他の視覚問題、聴覚損失、慢性疲労、肺気量低下、並びに肺疾患が含まれる。
【０１１３】
心血管疾患
本発明の好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は心血管疾患である。例には、それだけには限定されないが、アテローム性動脈硬化症、狭心症、不整脈、心筋症、鬱血性心不全、冠動脈疾患、頸動脈疾患、心内膜炎、冠動脈血栓、心筋梗塞、高血圧、大動脈瘤、心拡張機能障害、高コレステロール血症、高脂血症、増帽弁逸脱、末梢血管疾患、心ストレス耐性、心線維症、脳動脈瘤、及び脳卒中が含まれる。
【０１１４】
好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は、アテローム性動脈硬化症（すなわち動脈の硬化）に関連している、又はそれによって引き起こされる。アテローム性動脈硬化症は、中型及び大型の動脈の内腔を侵害するパッチ状の内膜斑（アテローム）によって特徴づけられている。本発明による薬剤の投与により、対象の血管内のアテローム硬化斑の脂質含有量を低減する、及び／又は線維性被膜の厚さを増加させることができる。
【０１１５】
炎症性及び自己免疫疾患及び障害
本発明の好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は炎症性又は自己免疫疾患又は障害である。自己免疫疾患の非限定的な例には、骨粗鬆症、骨関節炎、乾癬、口腔粘膜炎、関節リウマチ、炎症性腸疾患、湿疹、脊柱後弯（脊柱の弯曲）、椎間板ヘルニア、並びに肺疾患、ＣＯＰＤ、及び特発性肺線維症が含まれる。好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は慢性炎症である。
【０１１６】
慢性炎症は、骨関節炎に関連する主な加齢関連因子であると考えられている。加齢と組み合わせて、関節の酷使及び肥満症が骨関節炎を促進すると思われる。老化細胞を選択的に死滅させることによって、本発明の薬剤は、関節内のプロテオグリカン層の損失又は浸食を低減する又は阻害する、患部関節における炎症を低減する、及びコラーゲンの産生を促進することができる。老化細胞の除去は関節内で産生されるＩＬ−６などの炎症性サイトカインの量の低減を引き起こし、炎症が低減する。
【０１１７】
本発明の好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は関節リウマチである。関節リウマチは、手足の関節を典型的に冒す慢性炎症性障害である。
【０１１８】
本発明の好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は骨粗鬆症である。骨粗鬆症は、骨折の危険性の増加をもたらし得る、骨量及び密度の減少によって特徴づけられている進行性の骨疾患である。骨塩密度（ＢＭＤ）が低減し、骨の微小構造が劣化し、骨中のタンパク質の量及び多様性が変化する。
【０１１９】
本発明の好ましい一実施形態では、本発明の薬剤は椎間板ヘルニアの治療において使用するためのものである。椎間板ヘルニアを患っている対象は、血中及び血管壁中に上昇した細胞老化の存在を呈する（Roberts et al. (2006) Eur. Spine J. 15 Suppl 3: S312-316）。
【０１２０】
神経系疾患又は障害
本発明の好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は、アルツハイマー病（及び他の認知症）、パーキンソン病、ハンチントン病、認知症、軽度認知機能障害（ＭＣＩ）、黄斑変性症、及び運動ニューロン機能不全（ＭＮＤ）、並びに加齢黄斑変性症などの眼の疾患及び障害から選択される、神経系疾患又は障害である。
【０１２１】
パーキンソン病（ＰＤ）とは、動きの遅さ（動作緩慢）、揺れ、硬直、姿勢の不安定、及び平衡感覚障害によって特徴づけられた、脳の不能状態である。これらの症状の多くは、ドーパミンの欠乏をもたらす、脳内の特定の神経の損失が原因である。ドーパミン産生ニューロンの老化が、反応性酸素種の産生によって、ＰＤにおいて観察される細胞死に寄与すると考えられている（Cohen et al, J. Neural Transm. Suppl. 19:89-103 (1983)）。
【０１２２】
アルツハイマー病（ＡＤ）とは、記憶力低下、失見当識、及び錯乱を伴うゆっくり進行する精神機能低下を示し、深刻な認知症をもたらす神経変性疾患である。疾患が進行するにつれて、判断力の低下、錯乱、行動の変化、失見当識、並びに歩行及び嚥下の困難が起きる。加齢が、高齢者における認知症の主な原因であるＡＤを発症する、唯一最大の素因的危険因子である（Hebert, et al., Arch. Neurol. 60:1119-1122 (2003)）。初期の臨床症状は軽度認知機能障害と著しい類似性を示す。
【０１２３】
軽度認知機能障害（ＭＣＩ）とは、個体の年齢及び教育に基づいて予想されるものを超えているが、個体の日々の活動を妨げるほど顕著ではない、認知機能障害の発症及び進化に関わる脳機能症候群である。ＭＣＩは、正常な加齢とそれが転向し得る認知症との間の遷移状態であるとみなされる、認知的加齢の側面である（Pepeu, Dialogues in Clinical Neuroscience 6:369-377, 2004）。記憶に主に影響を与えるＭＣＩは「健忘性ＭＣＩ」として知られており、これはしばしばアルツハイマー病の前駆段階としてみなされている。記憶以外の思考能力に影響を与えるＭＣＩは「非健忘性ＭＣＩ」として知られている。
【０１２４】
ＭＮＤとは、発話、歩行、呼吸、及び嚥下などの随意筋の活動を制御する細胞である運動ニューロンを破壊する、進行性神経障害の群である。ＭＮＤの例には、ルーゲーリック病としても知られる筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、進行性球麻痺、仮性球麻痺、原発性側索硬化症、進行性筋萎縮、下位運動ニューロン疾患、及び脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）（例えば、ウェルドニッヒ−ホフマン病とも呼ばれるＳＭＡ１、ＳＭＡ２、クーゲルベルク−ヴェランダー病とも呼ばれるＳＭＡ３、及びケネディー病）、ポリオ後症候群、並びに遺伝性痙攣性対麻痺が含まれる。
【０１２５】
眼の疾患及び障害
本発明の好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は、眼の疾患、障害、又は状態である。例には、それだけには限定されないが、老眼、黄斑変性症、白内障、及び緑内障が含まれる。黄斑変性症は、網膜黄斑と呼ばれる網膜の中央部における光受容細胞の損失を引き起こす神経変性疾患である。
【０１２６】
代謝性疾患
本発明の好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は、糖尿病、糖尿病性潰瘍、代謝症候群、及び肥満症から選択される代謝性疾患である。
【０１２７】
老化細胞は、肥満症及び２型糖尿病などの代謝性疾患において役割を果たすと理解されている。研究により、肥満マウスからの脂肪組織が老化マーカーであるＳＡ−β−Ｇａｌ、ｐ５３、及びｐ２１の誘導を示したことが示されている（Tchkonia et al, Aging Cell 9:667-684 (2010)、Minamino et al, Nat. Med. 15: 1082-1087 (2009)）。炎症誘発性ＳＡＳＰ構成要素も２型糖尿病に寄与すると考えられているため、肥満症における老化細胞の誘導は潜在的に臨床的な意味を有する。老化マーカー及びＳＡＳＰ構成要素の上方制御の同様のパターンが、マウス及びヒトのどちらにおいても糖尿病と関連づけられている。したがって、本明細書中に記載の薬剤は、２型糖尿病、肥満症、及び代謝症候群を治療又は予防することにおいて潜在的な応用を有する。
【０１２８】
肺疾患又は障害
本発明の好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は肺疾患である。例には、それだけには限定されないが、肺線維症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、嚢胞性線維症、気腫、気管支拡張症、及び肺機能の加齢関連の損失が含まれる。
【０１２９】
ＣＯＰＤとは、肺組織の崩壊（気腫）及び小気道の機能不全（閉塞性細気管支炎）から生じる持続的に乏しい空気流によって定義される肺疾患である。肺線維症とは、肺の硬化及び瘢痕によって特徴づけられており、呼吸不全、肺がん、及び心不全をもたらし得る、慢性かつ進行性の肺疾患である。本発明の薬剤は、老齢化しており、肺機能の損失（若しくは変性）（すなわち、より若齢の対象と比較して低下した若しくは損なわれた肺機能）及び／又は肺組織の変性を有する対象を治療するためにも使用することができる。
【０１３０】
他の加齢関連障害
本発明の好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は、腎臓病、腎不全、虚弱、聴覚損失、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚創傷治癒、肝線維症、膵線維症、口腔粘膜下線維症、及び筋肉減少症から選択される加齢関連障害である。
【０１３１】
皮膚の疾患又は障害
本発明の好ましい一実施形態では、老化関連の疾患又は障害は皮膚の疾患又は障害である。例には、それだけには限定されないが、湿疹、乾癬、色素沈着過剰、母斑、発疹、アトピー性皮膚炎（湿疹の一形態であり、炎症に関連している）、蕁麻疹、感光性又は光老化に関連する疾患及び障害、皺（rhytide）（加齢が原因の皺（wrinkle））、そう痒症（糖尿病及び加齢に関連）、知覚異常（糖尿病及び多発性硬化症に関連する化学療法の副作用）、湿疹性発疹（しばしば老齢化患者で観察され、特定の薬物の副作用に関連）、好酸球性皮膚症（特定の種類の血液がんに関連）、反応性好中球性皮膚症（炎症性腸症候群などの根底にある疾患に関連）、天疱瘡、類天疱瘡、免疫水疱性皮膚症（皮膚の自己免疫水疱形成）、皮膚の線維組織球増殖、皮膚リンパ腫、並びに皮膚ループスが含まれる。遅発性ループスは、加齢に関連しているＴ細胞及びＢ細胞並びにサイトカイン（免疫老化）の減少した（すなわち低減した）機能に関連していてもよい。
【０１３２】
生命寿命及び加齢関連の疾患又は状態
好ましい一実施形態では、本明細書中に記載の薬剤は、老化細胞を非老化細胞に優先して選択的に死滅させることによって対象の生命寿命を延長させるために使用することができる。一部の実施形態では、対象の生命寿命の延長は、加齢関連の疾患又は状態の発症又は進行を遅延させることを含む。一部の実施形態では、加齢関連の疾患又は状態は、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、がん、関節炎、認知症、白内障、骨粗鬆症、糖尿病、高血圧、加齢関連脂肪損失、リポジストロフィー、及び腎臓疾患から選択される。一部の実施形態では、加齢関連の疾患又は状態は老人性不安障害である。一部の実施形態では、加齢関連の疾患又は状態は加齢関連不活性である。一部の実施形態では、加齢関連の疾患又は状態は自発活性の低減である。一部の実施形態では、加齢関連の疾患又は状態は探索行動の低減である。
【０１３３】
好ましい一実施形態では、加齢関連の疾患又は状態の発症又は進行を、少なくとも約１カ月間、少なくとも約２カ月間、少なくとも約３カ月間、少なくとも約４カ月間、少なくとも約５カ月間、少なくとも約６カ月間、少なくとも約７カ月間、少なくとも約８カ月間、少なくとも約９カ月間、少なくとも約１０カ月間、少なくとも約１１カ月間、少なくとも約１年間、遅延させることができる。
【０１３４】
好ましい一実施形態では、薬剤は、対象の肉体的健康を改善させることにおいて使用するためのものである。別の好ましい実施形態では、薬剤は、血中代謝物の老化関連変化を戻すことにおいて使用するためのものである。
【０１３５】
β−ガラクトシダーゼ活性の上昇に関連する疾患
別の実施形態では、薬剤は、β−ガラクトシダーゼ活性の上昇と相関又は関連している疾患又は障害の治療において使用することができる。好ましい実施形態では、β−ガラクトシダーゼ活性の上昇は、標準方法によって決定することができるベースラインレベルと比較した、β−ガラクトシダーゼの発現の上昇又はβ−ガラクトシダーゼ活性の過剰発現の結果である。
【０１３６】
β−ガラクトシダーゼの発現は、組織学的又は免疫組織学的方法によって細胞中で検出することができる。例えば、老化マーカーＳＡ−ベータガラクトシダーゼ（ＳＡ−β−Ｇａｌ）は公知の方法によって検出することができる（Dimri et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92: 9363-9367 (1995)。
【０１３７】
本発明のより好ましい実施形態では、疾患は、新生児早老症のヴィーデマン・ラウテンストラウヒ症候群、成人早老症のウェルナー症候群、ハッチンソン・ギルフォード症候群、ロスムンドトムソン症候群、マルビル・スミス症候群、コケイン症候群、先天性角化異常症、特発性肺線維症、再生不良性貧血、気腫、２型糖尿病、及び軟骨の変性から選択される。
【０１３８】
医薬組成物
本発明による使用のために、本明細書中に記載の薬剤を、１又は２以上の薬学的に許容される担体、したがって他の治療的及び／又は予防的成分であってもよいものと共に、医薬配合物として提示し得る。担体は、配合物の他の成分と適合性があり、そのレシピエントに有害でないという意味で、許容されるものでなければならない。医薬組成物は、人医学及び獣医学においてヒト又は動物で使用するためのものであり得る。
【０１３９】
本明細書中に記載の医薬組成物の様々な異なる形態のための、そのような適切な賦形剤の例は、“Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd Edition, (1994), Edited by A Wade and PJ Weller中に見出し得る。
【０１４０】
治療的使用に許容される担体又は希釈剤は医薬分野で周知であり、例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit. 1985)に記載されている。
【０１４１】
適切な担体の例には、ラクトース、デンプン、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、ソルビトールなどが含まれる。適切な希釈剤の例には、エタノール、グリセロール、及び水が含まれる。
【０１４２】
医薬担体、賦形剤、又は希釈剤の選択は、意図された投与経路及び標準の医薬実施に関して選択することができる。医薬組成物は、担体、賦形剤、若しくは希釈剤として、又はそれに加えて、任意の適切な結合剤、滑沢剤、懸濁剤、被覆剤、可溶化剤、緩衝剤、香味料、表面活性剤、増粘剤、保存料（抗酸化剤を含む）など、及び、配合物を意図されたレシピエントの血液と等張にする目的で含められる物質を含み得る。
【０１４３】
適切な結合剤の例には、デンプン、ゼラチン、グルコースなどの天然糖、無水ラクトース、昜流動性ラクトース、ベータ−ラクトース、コーン甘味料、アカシア、トラガカント、又はアルギン酸ナトリウムなどの天然及び合成のガム、カルボキシメチルセルロース、及びポリエチレングリコールが含まれる。
【０１４４】
適切な滑沢剤の例には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが含まれる。保存料、安定化剤、色素、及びさらには香味料を医薬組成物中に提供し得る。保存料の例には、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、及びｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルが含まれる。抗酸化剤及び懸濁剤も使用し得る。
【０１４５】
医薬配合物には、経口、局所（真皮、頬側、及び舌下を含む）、直腸又は非経口（皮下、皮内、筋肉内、及び静脈内を含む）、経鼻及び肺内投与、例えば吸入によるものに適切なものが含まれる。配合物は、適切な場合は、個別の投与量単位で好都合に提示してよく、医薬分野で周知の方法のうちの任意のものによって調製し得る。すべての方法には、活性化合物を液体担体若しくは微粉固形担体又は両方と会合させ、その後、必要な場合は、生成物を所望の配合物へと形成するステップが含まれる。
【０１４６】
担体が固形である、経口投与に適した医薬配合物は、最も好ましくは、それぞれが事前に決定した量の活性化合物を含有する、ボーラス剤、カプセル剤、又は錠剤などの単位剤形として提示する。錠剤は圧縮又は成形によって作製してよく、１又は２以上の副成分を用いてもよい。打錠は、適切な機械において、結合剤、滑沢剤、不活性な希釈剤、滑沢剤、表面活性剤、又は分散剤と混合していてもよい、粉末剤又は粒剤などの易流動性形態の活性化合物を圧縮することによって調製し得る。成形錠剤は、不活性な液体希釈剤を用いて活性化合物を成形することによって作製し得る。錠剤は被覆されていてもよく、被覆されていない場合は切れ目を入れていてもよい。カプセル剤は、活性化合物を、単独で又は１若しくは２以上の副成分と混合してカプセルシェル内に充填し、その後、通常の様式で密封することによって調製し得る。カシェ剤はカプセル剤と同様であり、活性化合物を任意の副成分と一緒にライスペーパーの封筒に密封する。また、薬剤を、例えば投与前に水に懸濁させる、又は食品上に振りかけ得る、分散性粒剤として配合してもよい。粒剤を、例えばサッシェ内にパッケージングしてもよい。担体が液体である、経口投与に適した配合物は、水性若しくは非水性の液体中の液剤若しくは懸濁剤として、又は水中油の液体乳濁液剤として提示し得る。
【０１４７】
経口投与用の配合物には、徐放性剤形、例えば、薬剤が適切な放出制御マトリックス中で配合されている、又は適切な放出制御フィルムで被覆されている錠剤が含まれる。そのような配合物は、予防的使用において特に好都合であり得る。
【０１４８】
担体が固形である、直腸投与に適した医薬配合物は、最も好ましくは、単位用量の坐薬として提示する。適切な担体には、カカオ脂及び当分野において一般的に使用される他の材料が含まれる。坐薬は、活性化合物を軟化又は融解した担体と混合し、続いて急冷及び鋳型で形成することによって、好都合に形成し得る。非経口投与に適した医薬配合物には、水性又は油性の媒体中の、活性化合物の滅菌した溶液又は懸濁液が含まれる。
【０１４９】
注射用調製物をボーラス注射又は持続注入用に適応させ得る。そのような調製物は、配合物を導入したあと使用に必要となるまで密封する、単位用量又は複数用量の容器中で好都合に提示される。或いは、活性化合物は、使用前に滅菌した発熱物質を含まない水などの適切な媒体で構成する粉末形態であり得る。
【０１５０】
また、薬剤を、筋肉内注射によって、又は移植、例えば皮下若しくは筋肉内によって投与し得る、長時間作用性のデポー調製物として配合してもよい。デポー調製物には、例えば、適切なポリマー性若しくは疎水性材料、又はイオン交換樹脂が含まれ得る。そのような長時間作用性の配合物は、予防的使用において特に好都合である。
【０１５１】
頬側口腔を介した肺内投与に適した配合物は、活性化合物を含有しており、望ましくは０．５〜７ミクロンの範囲の直径を有する粒子がレシピエントの気管支樹に送達されるように提示する。
【０１５２】
１つの可能性として、そのような配合物は、吸入デバイスにおいて使用するための、適切には例えばゼラチンからなる突き刺し可能なカプセル、或いは、活性化合物、適切な液体又は気体の噴霧剤、並びに界面活性剤及び／又は固形希釈剤などであってもよい他の成分を含む自己推進式配合物として好都合に提示し得る、細かく微粉砕された粉末剤の形態である。適切な液体噴霧剤にはプロパン及びクロロフルオロカーボンが含まれ、適切な気体噴霧剤には二酸化炭素が含まれる。また、活性化合物が溶液又は懸濁液の液滴形態として分注される自己推進式配合物も用い得る。
【０１５３】
そのような自己推進式配合物は当分野で知られているものと同様であり、確立された手順によって調製し得る。適切には、これらは、所望のスプレー特徴を有する手動操作可能又は自動的に機能する弁が備えられた容器中で提示し、有利には、弁は、それを操作するごとに固定容積、例えば２５〜１００マイクロリットルを送達する計量型のものである。
【０１５４】
さらなる可能性として、薬剤は、加速された空気流又は超音波撹拌を用いて吸入のための微細な液滴の霧を生成する、アトマイザー又はネブライザーにおいて使用するための液剤又は懸濁剤の形態であり得る。
【０１５５】
経鼻投与に適した配合物には、肺内投与について上述したものと一般的に類似の調製物が含まれる。分注した際、そのような配合物は、望ましくは、鼻腔内での保持を可能にするために１０〜２００ミクロンの範囲の粒径を有するべきである。これは、必要に応じて、適切な粒径の粉末の使用又は適切な弁の選択によって達成し得る。他の適切な配合物には、鼻の近くに持った容器から鼻道を介して急速吸入によって投与するための、２０〜５００ミクロンの範囲の粒径を有する粗い粉末、及び水性又は油性の溶液又は懸濁液中の０．２〜５％ｗ／ｖの活性化合物を含む経鼻液滴が含まれる。
【０１５６】
薬学的に許容される担体は当業者に周知であり、それだけには限定されないが、０．１Ｍ、好ましくは０．０５Ｍのリン酸緩衝液又は０．８％の生理食塩水が含まれる。加えて、そのような薬学的に許容される担体は、水性又は非水性の溶液、懸濁液、及び乳濁液であり得る。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、及びオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルである。水性担体には、水、アルコール溶液／水溶液、乳濁液、又は生理食塩水及び緩衝媒体を含む懸濁液が含まれる。非経口媒体には、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロースと塩化ナトリウム、乳酸リンゲル、又は不揮発性油が含まれる。例えば、抗微生物剤、抗酸化剤、キレート化剤、不活性ガスなどの、保存料及び他の添加剤も提示し得る。
【０１５７】
局所配合物に適した配合物は、例えば、ゲル剤、クリーム剤、又は軟膏として提供し得る。そのような調製物は、例えば、創傷若しくは潰瘍の表面に直接広げる、又は治療する領域及びその上に施用し得る帯具、ガーゼ、メッシュなどの適切な支持体上で運んで、創傷又は潰瘍に施用し得る。
【０１５８】
また、治療する部位、例えば創傷又は潰瘍上に直接スプレーする又は振りかけることができる、液体又は粉末の配合物も提供し得る。或いは、帯具、ガーゼ、メッシュなどの担体に配合物をスプレーする又は振りかけて、その後、治療する部位に施用することができる。
【０１５９】
上述の医薬組成物又は獣医学的組成物は、薬剤を担体と、例えば混合することで会合させることによって調製することができる。
【０１６０】
一般に、配合物は、薬剤を液体担体若しくは微粉固形担体又は両方と均一かつ密接に会合させ、その後、必要な場合は生成物を形成することによって調製される。
【０１６１】
塩
本発明の薬剤は、塩、特に薬学的及び獣医学的に許容される塩として存在することができる。
【０１６２】
本発明の薬剤の薬学的に許容される塩には、その適切な酸付加又は塩基塩が含まれる。適切な医薬的塩の総説は、Berge et al, J Pharm Sci, 66, 1-19 (1977)に見出し得る。塩は、例えば、強力な無機酸、例えば、鉱酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、及びヨウ化水素酸などのハロゲン化水素酸、硫酸、リン酸、硫酸塩、硫酸水素塩、ヘミ硫酸塩、チオシアン酸塩、過硫酸塩、及びスルホン酸を用いて、強力な有機カルボン酸、例えば、酢酸などの、非置換若しくは置換（例えばハロゲンによる）の１〜４個の炭素原子のアルカンカルボン酸を用いて、飽和若しくは不飽和ジカルボン酸、例えば、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸、若しくはテトラフタル酸を用いて、ヒドロキシカルボン酸、例えば、アスコルビン酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、若しくはクエン酸を用いて、アミノ酸、例えばアスパラギン酸若しくはグルタミン酸を用いて、安息香酸を用いて、又は有機スルホン酸、例えば、メタン−若しくはｐ−トルエンスルホン酸などの、非置換若しくは置換（例えばハロゲンによる）の（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル−若しくはアリール−スルホン酸を用いて形成する。薬学的又は獣医学的に許容されていない塩も、中間体として価値ある場合がある。
【０１６３】
好ましい塩には、例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、乳酸塩、グルコン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、パントテン酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、酪酸塩、ジグルコン酸塩、シクロペンタン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、シュウ酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、ニコチン酸塩、パルモ酸塩、ペクチン酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、酒石酸塩、ラクトビオン酸塩、ピバル酸塩、ショウノウ酸塩、ウンデカン酸塩、及びコハク酸塩、有機スルホン酸、例えば、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ショウノウスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸塩、及びｐ−トルエンスルホン酸塩、並びに無機酸、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、ヘミ硫酸塩、チオシアン酸塩、過硫酸塩、リン酸、及びスルホン酸が含まれる。
【０１６４】
鏡像異性体／互変異性体
既に論じた本発明のすべての態様において、本発明には、適切な場合は、本発明の薬剤のすべての鏡像異性体、ジアステレオアイソマー、及び互変異性体が含まれる。当業者は、光学的性質（１又は２以上のキラル炭素原子）又は互変異性体特徴を保有する化合物を認識するであろう。対応する鏡像異性体及び／又は互変異性体は、当分野で公知の方法によって単離／調製し得る。
【０１６５】
鏡像異性体はそのキラル中心の絶対配置によって特徴づけられており、カーン、インゴールド、及びプレローグのＲ−及びＳ−シーケンシングルールによって記載される。そのような慣習は当分野で周知である（例えば‘Advanced Organic Chemistry’, 3rdedition, ed. March, J., John Wiley and Sons, New York, 1985を参照）。
【０１６６】
キラル中心を含有する本発明の薬剤は、鏡像異性的に富化された混合物であるラセミ混合物として使用し得るか、又は、周知の技法を使用してラセミ混合物を分離し、個々の鏡像異性体を単独で使用し得る。
【０１６７】
立体異性体及び幾何異性体
本発明において使用するための薬剤の一部は立体異性体及び／又は幾何異性体として存在し得る、例えば、これらは１又は２以上の不斉中心及び／又は幾何学的中心を保有していてよく、しががって、２又は３以上の立体異性及び／又は幾何学形態で存在し得る。本発明は、これらの薬剤の個々の立体異性体及び幾何異性体すべて、並びにそれらの混合物の使用を企図する。前記形態が適切な機能的活性を保持している限りは（ただし必ずしも同じ度合までではない）、特許請求項の範囲において使用する用語にはこれらの形態が包含される。
【０１６８】
また、本発明には、薬剤のすべての適切な同位体変種が含まれる。同位体変種とは、少なくとも１つの原子が、同じ原子番号を有するが自然で通常見つかる原子質量とは異なる原子質量を有する原子によって置き換えられているものとして定義される。取り込むことができる同位体の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、及び塩素の同位体、例えば、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、及び３６Ｃｌが含まれる。特定の同位体変種、例えば、３Ｈ又は１４Ｃなどの放射性同位元素が取り込まれているものは、薬物及び／又は基質組織分布の研究において有用である。トリチウム標識、すなわち３Ｈ、及び炭素−１４、すなわち１４Ｃ同位体が、それらの調製の容易さ及び検出性のために特に好ましい。さらに、重水素、すなわち２Ｈなどの同位体での置換は、より高い代謝安定性から生じる特定の治療上の利点、例えば、インビボ半減期の増加又は投薬必要量の低減をもたらす場合があり、したがって、一部の状況下では好ましい場合がある。例えば、本発明には、任意の水素原子が重水素原子によって置き換えられている薬剤が含まれる。本発明の薬剤の同位体変種、及び本発明の薬学的に許容されるその塩は、一般に、慣例の手順によって、適切な試薬の適切な同位体変種を使用して、調製することができる。
【０１６９】
溶媒和物
また、本発明には、本発明の薬剤の溶媒和物形態も含まれる。特許請求の範囲において使用する用語にはこれらの形態が包含される。
【０１７０】
多型体
本発明は、その様々な結晶形態、多型形態、及び（無水形態）含水形態の本発明の薬剤にさらに関する。精製方法をわずかに変えること、及び／又はそのような化合物の合成による調製において使用した溶媒からの単離によって、化合物をそのような形態のうちの任意のもので単離し得ることは、医薬業界内で十分に確立されている。
【０１７１】
投与
本発明の医薬組成物を、直腸、経鼻、気管支内、局所（頬側及び舌下を含む）、経膣又は非経口（皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、及び皮内を含む）、腹腔内又はくも膜下腔内の投与に適応させ得る。好ましくは、配合物は経口投与する配ee合物である。配合物は、単位剤形で、すなわち、単位用量を含有する個別の部分、又は複数の単位用量若しくは単位用量の副単位の形態で好都合に提示し得る。例として、配合物は錠剤及び持続放出カプセル剤の形態であってよく、薬学分野で周知の任意の方法によって調製し得る。
【０１７２】
本発明における経口投与用配合物は、それぞれが事前に決定した量の活性薬剤を含有する、カプセル剤、ゼラチン質カプセル剤、ドロップ剤、カシェ剤、丸薬、若しくは錠剤などの個別の単位として、粉末剤若しくは顆粒剤として、水性液体若しくは非水性液体中の活性薬剤の溶液剤、乳濁液剤、若しくは懸濁剤として、又は水中油の液体乳濁液剤若しくは油中水の液体乳濁液剤として、又はボーラス剤などとして提示し得る。好ましくは、これらの組成物は、１用量あたり１〜２５０ｍｇ、より好ましくは１０〜１００ｍｇの活性成分を含有する。
【０１７３】
経口投与用の組成物（例えば錠剤及びカプセル剤）では、用語「許容される担体」には、一般的な賦形剤、例えば結合剤、例えば、シロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、スクロース、及びデンプン、充填剤及び担体、例えば、コーンスターチ、ゼラチン、ラクトース、スクロース、微結晶セルロース、カオリン、マンニトール、リン酸二カルシウム、塩化ナトリウム、及びアルギン酸、並びに滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、及び他のステアリン酸金属塩、ステアリン酸グリセロールステアリン酸、シリコーン溶液、タルクワックス、油、及びコロイド状シリカなどの媒体が含まれる。ペパーミント、ウィンターグリーン油、チェリー香味料などの香味料も使用することができる。剤形を容易に同定可能にするために、着色料を加えることが望ましい場合がある。また、錠剤を当分野で周知の方法によって被覆してもよい。
【０１７４】
錠剤は圧縮又は成形によって作製してよく、１又は２以上の副成分を用いていてもよい。打錠は、適切な機械において、結合剤、滑沢剤、不活性な希釈剤、保存料、表面活性剤又は分散剤と混合していてもよい、粉末剤又は顆粒剤などの易流動性形態の活性剤を圧縮することによって調製し得る。成形錠剤は、不活性な液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を適切な機械にて成形することによって作製し得る。錠剤は被覆する又は切れ目を入れていてもよく、活性薬剤の徐放放出又は制御放出を提供するように配合し得る。
【０１７５】
経口投与に適した他の配合物には、香味づけられた基剤、通常はスクロース及びアカシア又はトラガカント中に活性薬剤を含む薬用キャンディー剤、ゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアカシアなどの不活性基剤中に活性薬剤を含むパステル錠、並びに適切な液体担体中に活性薬剤を含む洗口液剤が含まれる。
【０１７６】
他の投与形態は、静脈内、動脈内、くも膜下腔内、皮下、皮内、腹腔内、又は筋肉内で注射してもよく、滅菌した又は滅菌可能な溶液から調製する、液剤又は乳濁液剤を含む。注射用形態は、典型的には１用量あたり１０〜１０００ｍｇ、好ましくは１０〜２５０ｍｇの活性成分を含有する。
【０１７７】
また、本発明の医薬組成物は、坐薬、膣坐薬、懸濁剤、乳濁液剤、ローション剤、軟膏、クリーム剤、ゲル剤、スプレー剤、液剤、又は散布剤の形態であってもよい。
【０１７８】
経皮投与の代替手段は、皮膚パッチ剤の使用によるものである。例えば、活性成分を、ポリエチレングリコール又は流動パラフィンの水性乳濁液剤からなるクリーム剤内に取り込ませることができる。また、活性成分を、１〜１０重量％の濃度で、白蝋又は白色軟パラフィン基剤からなる軟膏内に、必要に応じて安定化剤及び保存料と一緒に取り込ませることができる。
【０１７９】
投薬量
当業者は、必要以上の実験を行わずに、対象に投与するための本発明の組成物のうちの１つの適切な用量を容易に決定することができる。典型的には、医師が、個々の患者最も適切となる実際の投薬量を決定し、これは、用いる具体的な化合物の活性、その化合物の代謝安定性及び作用の長さ、年齢、体重、全体的な健康、性別、食習慣、投与の様式及び時間、排泄速度、薬物の組合せ、特定の状態の重症度、並びに個体の受けている療法を含む、様々な因子に依存する。本明細書中に開示した投薬量は平均的な事例の例示的なものである。もちろん、より高い又はより低い投薬量範囲が利点となる個々の事例も存在することができ、そのようなものは本発明の範囲内にある。
【０１８０】
また、薬物の濃度が本明細書中に開示した治療的症状のうちの１又は２以上を達成するために十分である様式で、本発明の薬剤を患者に経口投与してもよい。典型的には、化合物を含有する医薬組成物を、約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇの経口量で、患者の状態と一貫した様式で投与する。好ましくは、経口量は約０．５〜約２０ｍｇ／ｋｇとなる。
【０１８１】
本発明の薬剤を本発明に従って投与した場合に、許容されない毒性効果は予想されていない。良好な生体利用度を有していてよい本発明の薬剤は、所定の薬理学的効果を持つために必要な化合物の濃度を決定するために、いくつかの生物学的アッセイのうちの１つにおいて試験し得る。
【０１８２】
組合せ
特に好ましい実施形態では、本発明の薬剤を、１又は２以上の他の活性薬剤と、例えば市販されている既存の薬物と組み合わせて投与する。そのような場合、本発明の化合物は、１又は２以上の他の活性薬剤と連続的に、同時に、又は順次に投与し得る。一般に、薬物は組み合わせて使用した場合により有効である。特に、主な毒性、作用機構、及び耐性機構の重複を回避するために組合せ療法が望ましい。さらに、ほとんどの薬物をその最大耐量で、そのような用量間において最小の時間間隔で、投与することも望ましい。化学療法薬を組み合わせることの主な利点は、生化学的相互作用を介して相加的又は場合によっては相乗的な効果が促進され得ることであり、また、耐性の出現も減少又は遅延され得る。有益な組合せは、試験化合物の活性を特定の障害の治療において価値あることが知られている又は考えられている薬剤と共に研究することによって提案し得る。
【０１８３】
本発明を、以下の非限定的な例を通じてさらに説明する。
［実施例］
【０１８４】
材料及び方法
本明細書中に記載の薬剤は市販されている。例えば、以下の化合物を薬理学的活性化合物のライブラリ（ＬＯＰＡＣ，The Library of Pharmacologically Active Compounds；Sigma Aldrich社）から得た。
ＰＦ−５７３２２８
ＪＦＤ００２４４
ウアバイン
ブファリン
Ｋ−ストロファンチン
ストロファンチジン
ジゴキシン
シクロスポリン
チルホスチンＡＧ８７９
カンタリジン
塩化ジフェニレンヨードニウム（ＤＰＩ）
ロットレリン
２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン
ＬＹ−３６７，２６５
ロテノン
イダルビシン
塩化デカリニウム
ビンクリスチン
【０１８５】
以下の化合物をSelleck社の化学ライブラリから得た。
アトルバスタチンカルシウム（Lipitor）
フルバスタチンナトリウム（Lescol）
ロバスタチン（Mevacor）
ピタバスタチンカルシウム（Livalo）
シンバスタチン（Zocor）
ニタゾキサニド（Alinia、Annita）
ニトロフラゾン（ニトロフラール）
シクロスポリン（Neoral）
テムシロリムス（Torisel）
エルトロンボパグ（ＳＢ−４９７１１５−ＧＲ）
ビンクリスチン
アダパレン
アザシクロノール
エノキサシン（Penetrex）
ラルテグラビル（ＭＫ−０５１８）。
【０１８６】
他のＦＡＫ阻害剤（ＮＳＣ６７７２４９としても知られる化合物１４及びデファクチニブ）並びに他の化合物（エトポシド及びドキソルビシンなど）はSIGMA社から入手した。
【０１８７】
ＩＭＲ９０細胞はＡＴＣＣから入手した。ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ及びＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  Ｅ６／Ｅ７は、ＩＭＲ９０細胞のレトロウイルス感染によって生成し、他の箇所に記載されている（Banito, A., Rashid, S.T., Acosta, J.C., Li, S., Pereira, C.F., Geti, I., Pinho, S., Silva, J.C., Azuara, V., Walsh, M., et al. (2009). Senescence impairs successful reprogramming to pluripotent stem cells. Genes Dev 23, 2134-2139、Barradas, M., Anderton, E., Acosta, J.C., Li, S., Banito, A., Rodriguez-Niedenfuhr, M., Maertens, G., Banck, M., Zhou, M.M., Walsh, M.J., et al. (2009). Histone demethylase JMJD3 contributes to epigenetic control of INK4a/ARF by oncogenic RAS. Genes Dev 23, 1177-1182）。ＨＭＥＣ細胞はLonza社から入手した。ＨＭＥＣ  ｈＴＥＲＴ  ＥＲ：ＲＡＳはＨＭＥＣ細胞のレトロウイルス感染によって生成した。（ＰＦ−５７３２２８、ＮＳＣ６７７２４９としても知られる化合物１４、及びデファクチニブ）
【０１８８】
老化細胞除去活性の決定
ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞を１００ｎＭの４ＯＨＴで６日間治療することによって、老化を受けるように誘導した。その時点で、１０μＭの示した薬物を加えた。平行して、同じ治療をＤＭＳＯ（−４ＯＨＴ）で治療したＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞において実施した。これらの細胞は老化を受けない。細胞を４ＯＨＴ誘導後の６、８、及び１０日目に固定し、クリスタルバイオレットで染色して細胞生存度を評価した。同様の実験を実施し、誘導後１０日目の細胞を固定し、ＤＡＰＩで染色して細胞数を評価した（図１を参照）。様々な老化モデルを使用して、細胞培養物中の老化細胞除去化合物を試験した（図２を参照）。
【０１８９】
候補老化細胞除去剤を、
・がん遺伝子誘導性老化を受けている細胞を死滅させる（図３を参照）、
・がん遺伝子誘導性老化を受けているＨＭＥＣ細胞を死滅させる（図４を参照）、
・ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  Ｅ６／Ｅ７細胞を死滅させる（図５を参照）、
・古いＩＭＲ９０細胞を死滅させる（図６を参照）、
・エトポシド治療による老化を受けているＩＭＲ９０細胞を死滅させる（図７を参照）、
・ドキソルビシン治療による老化を受けているＩＭＲ９０細胞を死滅させる（図８を参照）、
・がん遺伝子誘導性老化を受けている細胞を死滅させる（図１０を参照）、
その能力について試験した。
【０１９０】
それぞれの場合で、使用した方法は上述したものに従っていた。結果を図９に要約する。
【０１９１】
結果により、スタチンが老化細胞除去剤として振る舞い、がん遺伝子誘導性老化を受けるＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞を優先的に死滅させることが示された（図１１を参照）。
【０１９２】
また、結果により、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤が老化細胞除去剤として振る舞うことも示された。３つの異なるＦＡＫ阻害剤（ＰＦ−５７３２２８、ＮＳＣ６７７２４９としても知られる化合物１４、及びデファクチニブ）をＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞において試験して、老化細胞（４ＯＨＴ誘導）対非老化細胞（ＤＭＳＯで治療）を示差的に死滅させるその能力を分析した。これらの化合物は、用量依存的な様式で老化細胞を優先的に死滅させることが示された（図１２を参照）。
【０１９３】
本明細書中に記載の薬剤のうちのいくつかは、アポトーシスを誘導することによって老化細胞を死滅させる。ＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ細胞を、ＤＭＳＯ（対照として）又は４ＯＨＴ（老化を誘導するため）で治療した。そのようにして、細胞を、ＤＭＳＯ、ＡＢＴ−２６３、又は示した老化細胞除去剤で２日間（Ａ）又は３日間（Ｂ）、パンカスパーゼ阻害剤ＱＶＤの存在下又は非存在下で治療した。老化細胞除去剤を用いた老化細胞の治療はそれらを死滅させるが、ＰＦ−５７３２２８、ロットレリン、及びロテノンの事例では、パンカスパーゼ阻害剤ＱＶＤを用いた前治療によって妨げられた（図１３を参照）。
【０１９４】
化合物ＪＦＤ００２４４及びロットレリンは、正常細胞及び老化細胞を含有する混合培養物中で老化細胞を特異的に排除する（図１４を参照）。（Ａ）正常細胞（ＩＭＲ９０  Ｃｈｅｒｒｙ）をＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  ＧＦＰ細胞（４ＯＨＴの存在下で老化となる）と混合する、実験のセットアップである。（Ｂ）示した薬物で処置した混合培養物を示す代表的な写真である。下の段で、４ＯＨＴの際にＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  ＧＦＰ細胞が老化となる。（Ｃ）混合培養物中のＩＭＲ９０  Ｃｈｅｒｒｙ、及びＩＭＲ９０  ＥＲ：ＲＡＳ  ＧＦＰの定量化である。
【０１９５】
ウアバインは、マウスにおいてドキソルビシン治療によって誘導された老化細胞を排除する（図１５を参照）。（Ａ）実験セットアップ、マウス（ｎ＝５匹／群）に単一用量の１０ｍｇ／ｋｇのドキソルビシンを投与した。２カ月後、マウスを媒体、ウアバイン、又はＡＢＴ−２６３（老化細胞除去対照として）で連続した４日間治療したあと、分析のために選別した。（Ｂ）対照及びドキソルビシンで治療したマウスから得た肺の凍結切片を、ヘマトキシリン及びエオシン（組織構造を現すため）並びにＳＡ−β−Ｇａｌ（老化細胞を現すため）で染色した。老化細胞は、ドキソルビシンで治療したマウスの細気管支に蓄積される。（Ｃ）ＳＡ−β−Ｇａｌ染色に陽性である肺面積の定量化。ドキソルビシンを用いた治療は老化細胞の蓄積を誘導し、これはＡＢＴ−２６３又はウアバインを用いた治療の際に部分的に排除することができる。（Ｄ）肺凍結切片の代表的な写真である。
【０１９６】
ＤＰＩ又はウアバインを用いた治療は、マウスにおいて全身放射線照射によって誘導された老化細胞を排除する（図１６を参照）。（Ａ）実験セットアップ、老化を誘導するためにマウス（ｎ＝５匹／群）に６グレイを照射した。２カ月後、マウスを媒体、ＤＰＩ、ウアバイン、又はＡＢＴ−２６３（老化細胞除去対照として）で連続した４日間治療したあと、分析のために選別した。（Ｂ）対照及び照射したマウスから得た肺の凍結切片を、ヘマトキシリン及びエオシン（組織構造を現すため）並びにＳＡ−β−Ｇａｌ（老化細胞を現すため）で染色した。老化細胞は、照射したマウスの細気管支に蓄積される。（Ｃ）ＳＡ−β−Ｇａｌ染色に陽性である肺面積の定量化。全身放射線照射は老化細胞の蓄積を誘導し、これはＡＢＴ−２６３、ウアバイン、又はＤＰＩを用いた治療の際に部分的に排除することができる。（Ｄ）肺凍結切片の代表的な写真である。
【０１９７】
本発明のさらなる実施形態を、以下の番号付けした段落に記載する。
【０１９８】
１．１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させることに使用するための薬剤であって、以下：接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される、前記薬剤。
【０１９９】
２．ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤である、段落１に記載の使用のための薬剤。
【０２００】
３．ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤がスタチンである、段落２に記載の使用のための薬剤。
【０２０１】
４．スタチンが、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、及びシンバスタチンから選択される、段落３に記載の使用のための薬剤。
【０２０２】
５．接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤である、段落１に記載の使用のための薬剤。
【０２０３】
６．接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤が、ＰＦ−５７３２２８、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブから選択される、段落５に記載の使用のための薬剤。
【０２０４】
７．対象において１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる方法であって、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに薬学的に許容されるそれらの塩から選択される薬剤を治療有効量で対象に投与するステップを含む、前記方法。
【０２０５】
８．老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物であって、前記化合物がＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤であり、前記老化関連の疾患又は障害が心血管障害以外である、前記化合物。
【０２０６】
９．ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤がスタチンである、段落８に記載の使用のための化合物。
【０２０７】
１０．スタチンが、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、及びシンバスタチンから選択される、段落９に記載の使用のための化合物。
【０２０８】
１１．老化関連の疾患又は障害が、代謝性疾患、炎症性疾患若しくは障害、肺疾患若しくは障害、神経系疾患若しくは障害、増殖性障害、腎臓障害若しくは疾患、眼の疾患若しくは障害、又は皮膚障害若しくは疾患である、段落８〜１０のいずれか１つの段落に記載の使用のための化合物。
【０２０９】
１２．老化関連の疾患又は障害が、以下：
（ｉ）骨関節炎、骨粗鬆症、口腔粘膜炎、炎症性腸疾患、脊柱後弯、及び椎間板ヘルニアから選択される炎症性又は自己免疫性疾患又は障害、
（ii）アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、認知症、軽度認知機能障害、黄斑変性症、及び運動ニューロン機能不全から選択される神経系疾患又は障害、
（iii）糖尿病、糖尿病性潰瘍、代謝症候群、及び肥満症から選択される代謝性疾患、
（iv）肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、嚢胞性線維症、気腫、気管支拡張症、及び肺機能の加齢関連の損失から選択される肺疾患、
（ｖ）黄斑変性症、緑内障、白内障、老眼、及び失明から選択される眼の疾患又は障害、
（vi）腎臓疾患、腎不全、虚弱、聴覚損失、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚創傷治癒、肝線維症、膵線維症、口腔粘膜下線維症、及び筋肉減少症から選択される加齢関連の障害、並びに
（vii）湿疹、乾癬、色素沈着過剰、母斑、発疹、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、感光性又は光老化に関連する疾患及び障害、皺、そう痒症、知覚異常、湿疹性発疹、好酸球性皮膚症、反応性好中球性皮膚症、天疱瘡、類天疱瘡、免疫水疱性皮膚症、皮膚の線維組織球増殖、皮膚リンパ腫、並びに皮膚ループスから選択される皮膚疾患又は障害
から選択される、段落８〜１１のいずれか１つの段落に記載の使用のための化合物。
【０２１０】
１３．接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤である、老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物。
【０２１１】
１４．接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤が、ＰＦ−５７３２２８、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブから選択される、段落１３に記載の使用のための化合物。
【０２１２】
１５．老化関連の疾患又は障害が、心血管疾患若しくは障害、代謝性疾患、炎症性疾患若しくは障害、肺の疾患若しくは障害、神経系疾患若しくは障害、腎臓障害若しくは疾患、又は皮膚障害若しくは疾患である、段落１３又は１４に記載の使用のための化合物。
【０２１３】
１６．老化関連の疾患又は障害が、以下：
（ｉ）骨関節炎、骨粗鬆症、口腔粘膜炎、炎症性腸疾患、脊柱後弯、及び椎間板ヘルニアから選択される炎症性又は自己免疫性疾患又は障害、
（ii）アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、認知症、軽度認知機能障害、黄斑変性症、及び運動ニューロン機能不全から選択される神経系疾患又は障害、
（iii）糖尿病、糖尿病性潰瘍、代謝症候群、及び肥満症から選択される代謝性疾患、
（iv）肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、嚢胞性線維症、気腫、気管支拡張症、及び肺機能の加齢関連の損失から選択される肺疾患、
（ｖ）黄斑変性症、緑内障、白内障、老眼、及び失明から選択される眼の疾患又は障害、
（vi）腎臓疾患、腎不全、虚弱、聴覚損失、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚創傷治癒、肝線維症、膵線維症、口腔粘膜下線維症、及び筋肉減少症から選択される加齢関連の障害、
（vii）湿疹、乾癬、色素沈着過剰、母斑、発疹、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、感光性又は光老化に関連する疾患及び障害、皺、そう痒症、知覚異常、湿疹性発疹、好酸球性皮膚症、反応性好中球性皮膚症、天疱瘡、類天疱瘡、免疫水疱性皮膚症、皮膚の線維組織球増殖、皮膚リンパ腫、並びに皮膚ループスから選択される皮膚疾患又は障害、並びに
（viii）アテローム性動脈硬化症、狭心症、不整脈、心筋症、鬱血性心不全、冠動脈疾患、頸動脈疾患、心内膜炎、冠動脈血栓、心筋梗塞、高血圧、大動脈瘤、心拡張機能障害、高コレステロール血症、高脂血症、増帽弁逸脱、末梢血管疾患、心ストレス耐性、心線維症、脳動脈瘤、及び脳卒中から選択される心血管疾患
から選択される、段落１３から１５のいずれか１つの段落に記載の使用のための化合物。
【０２１４】
１７．老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための、以下：ＪＦＤ００２４４、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるその塩から選択される、化合物。
【０２１５】
１８．老化関連の疾患又は障害が、心血管疾患若しくは障害、代謝性疾患、炎症性疾患若しくは障害、肺疾患若しくは障害、神経系疾患若しくは障害、腎臓障害若しくは疾患、又は皮膚障害若しくは疾患である、段落１７に記載の使用のための化合物。
【０２１６】
１９．老化関連の疾患又は障害が、：
（ｉ）骨関節炎、骨粗鬆症、口腔粘膜炎、炎症性腸疾患、脊柱後弯、及び椎間板ヘルニアから選択される炎症性又は自己免疫性疾患又は障害、
（ii）アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、認知症、軽度認知機能障害、黄斑変性症、及び運動ニューロン機能不全から選択される神経系疾患又は障害、
（iii）糖尿病、糖尿病性潰瘍、代謝症候群、及び肥満症から選択される代謝性疾患、
（iv）肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、嚢胞性線維症、気腫、気管支拡張症、及び肺機能の加齢関連の損失から選択される肺疾患、
（ｖ）黄斑変性症、緑内障、白内障、老眼、及び失明から選択される眼の疾患又は障害、
（vi）腎臓疾患、腎不全、虚弱、聴覚損失、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚創傷治癒、肝線維症、膵線維症、口腔粘膜下線維症、及び筋肉減少症から選択される加齢関連の障害、
（vii）湿疹、乾癬、色素沈着過剰、母斑、発疹、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、感光性又は光老化に関連する疾患及び障害、皺、そう痒症、知覚異常、湿疹性発疹、好酸球性皮膚症、反応性好中球性皮膚症、天疱瘡、類天疱瘡、免疫水疱性皮膚症、皮膚の線維組織球増殖、皮膚リンパ腫、並びに皮膚ループスから選択される皮膚疾患又は障害、並びに
（viii）アテローム性動脈硬化症、狭心症、不整脈、心筋症、鬱血性心不全、冠動脈疾患、頸動脈疾患、心内膜炎、冠動脈血栓、心筋梗塞、高血圧、大動脈瘤、心拡張機能障害、高コレステロール血症、高脂血症、増帽弁逸脱、末梢血管疾患、心ストレス耐性、心線維症、脳動脈瘤、及び脳卒中から選択される心血管疾患、
から選択される、段落１７又は１８に記載の使用のための化合物。
【０２１７】
２０．老化関連の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための化合物であって、前記老化関連の疾患又は障害が心血管障害以外であり、前記化合物が、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される、前記化合物。
【０２１８】
２１．老化関連の疾患又は障害が、代謝性疾患、炎症性の疾患若しくは障害、肺疾患若しくは障害、神経系疾患若しくは障害、腎臓障害若しくは疾患、又は皮膚障害若しくは疾患である、段落２０に記載の使用のための化合物。
【０２１９】
２２．老化関連の疾患又は障害が、以下：
（ｉ）骨関節炎、骨粗鬆症、口腔粘膜炎、炎症性腸疾患、脊柱後弯、及び椎間板ヘルニアから選択される炎症性又は自己免疫性疾患又は障害、
（ii）アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、認知症、軽度認知機能障害、黄斑変性症、及び運動ニューロン機能不全から選択される神経系疾患又は障害、
（iii）糖尿病、糖尿病性潰瘍、代謝症候群、及び肥満症から選択される代謝性疾患、
（iv）肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、嚢胞性線維症、気腫、気管支拡張症、及び肺機能の加齢関連の損失から選択される肺疾患、
（ｖ）黄斑変性症、緑内障、白内障、老眼、及び失明から選択される眼の疾患又は障害、
（vi）腎臓疾患、腎不全、虚弱、聴覚損失、筋肉疲労、皮膚疾患、皮膚創傷治癒、肝線維症、膵線維症、口腔粘膜下線維症、及び筋肉減少症から選択される加齢関連の障害、並びに
（vii）湿疹、乾癬、色素沈着過剰、母斑、発疹、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、感光性又は光老化に関連する疾患及び障害、皺、そう痒症、知覚異常、湿疹性発疹、好酸球性皮膚症、反応性好中球性皮膚症、天疱瘡、類天疱瘡、免疫水疱性皮膚症、皮膚の線維組織球増殖、皮膚リンパ腫、並びに皮膚ループスから選択される皮膚疾患又は障害
から選択される、段落２０又は２１に記載の使用のための化合物。
【０２２０】
２３．対象に治療有効量のＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤を投与するステップを含む、心血管障害以外の老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法。
【０２２１】
２４．対象に治療有効量の接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤を投与するステップを含む、老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法。
【０２２２】
２５．老化細胞を選択的に死滅させることによって老化関連の疾患又は障害を治療又は予防する方法であって、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される化合物を治療有効量で対象に投与するステップを含む、前記方法。
【０２２３】
２６．老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるその塩から選択される化合物の使用であって、前記化合物は、１又は２以上の老化細胞を選択的に死滅させる、前記使用。
【０２２４】
２７．老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）阻害剤の使用。
【０２２５】
２８．心血管障害以外の老化関連の疾患又は障害を治療又は予防するための医薬品の調製における、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の使用。
【０２２６】
２９．ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される老化細胞除去剤。
【０２２７】
３０．好ましくは加齢関連の疾患又は状態の発症又は進行を遅延させることによって、対象の生命寿命の延長に使用するための、以下：ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、ラルテグラビル、ＮＳＣ６７７２４９、及びデファクチニブ、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される、化合物。
【０２２８】
３１．がんの治療に使用するための、ＰＦ−５７３２２８、ＪＦＤ００２４４、ウアバイン、シクロスポリン、チルホスチンＡＧ８７９、カンタリジン、塩化ジフェニレンヨードニウム、ロットレリン、２，３−ジメトキシ−１，４−ナフトキノン、ＬＹ−３６７，２６５、ロテノン、イダルビシン、塩化デカリニウム、ビンクリスチン、アトルバスタチンカルシウム、フルバスタチンナトリウム、ロバスタチン、ピタバスタチンカルシウム、シンバスタチン、ニタゾキサニド、ニトロフラゾン、テムシロリムス、エルトロンボパグ、アダパレン、アザシクロノール、エノキサシン、及びラルテグラビル、並びに化合物がまだ塩形態でない場合は薬学的に許容されるそれらの塩から選択される化合物であって、
−  老化へと押し進められたがん細胞を低減する若しくは排除する、又は
−  老化細胞によって生じた、炎症、がんの増殖の促進、及び転移の促進を含む１又は２以上の副作用を低減する若しくは排除する、又は
−  化学療法の１又は２以上の副作用を低減する若しくは排除する、又は
−  放射線療法の１又は２以上の副作用を低減する若しくは排除する、又は
−  前がん性病変を低減する若しくは排除する、又は
−  ＣＤＫ４阻害剤又はＣＤＫ６阻害剤を用いた治療によって老化を受ける細胞を低減する若しくは排除する、化合物。
【０２２９】
本発明の記載した態様の様々な改変及び変形は、本発明の範囲及び精神から逸脱せずに、当業者に明らかとなるであろう。本発明を具体的な好ましい実施形態に関連して説明したが、特許請求された本発明は、そのような具体的な実施形態に過度に制限されるべきでないことを理解されたい。実際、従来技術の当業者には明白である、記載した本発明を実施する形態の様々な改変が、以下の特許請求の範囲内にあることが意図される。
【０２３０】
（参考文献）
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
2020521734.tif 000031
【図２４】
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【図２５】
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【国際調査報告】
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