(57)【要約】  本明細書に提供されるのは、限定されないが、増殖性疾患などの疾患及び/又は疾病の治療のための化合物、組成物、コンジュゲート、及び方法である。ある実施態様において、シクロデキストリンベースのリンカー-ペイロード及びそのタンパク質コンジュゲートを含む、並びに/又は他の薬剤と組み合わせた、化合物、組成物、及びコンジュゲートが提供される。本明細書に記載されるこれらの化合物、組成物、及びコンジュゲートを特定の標的細胞に投与することにより、例えば、非標的細胞に対する非特異的結合現象に起因する副作用が軽減される。【選択図】図１３
2020521018.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも1つのペイロード部分に連結され、かつ共有結合性リンカーを介して少なくとも1つのシクロデキストリン部分に連結された結合剤:を含み、ここで、該共有結合性リンカーが、該結合剤、該ペイロード部分、及び該シクロデキストリン部分の各々に直接的に又は間接的に結合している、化合物又はその医薬として許容し得る塩。
【請求項２】
式(I)による、請求項1記載の化合物:
【化１】
2020521018.tif 000540
(式中:
BAは、結合剤であり;
Lは、三価リンカーであり;
CDは、シクロデキストリン残基であり;
下付文字nは、1〜30、例えば、1〜4の整数であり;かつ
PAは、ペイロード残基である)。
【請求項３】
式(Ia)による、請求項1又は2のいずれか一項記載の化合物:
【化２】
2020521018.tif 000541
(式中:
BAは、結合剤であり;
LLは、三価リンカーであり;
RGは、反応性リンカー残基であり;
SPは、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基であり;
下付文字nは、1〜30、例えば、1〜4の整数であり;かつ
PAは、ペイロードである)。
【請求項４】
式(Ib)又は(Ic)による、請求項1〜3のいずれか一項記載の化合物:及びその位置異性体及び立体異性体
【化３】
2020521018.tif 000542
(式中:
BAは、結合剤であり;
LLは、三価リンカーであり;
SPは、各々の場合に、独立に、非存在であるか又はスペーサーであり;
環Aはトリアゾールに縮合しており、かつシクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロシクロアルケニルからなる群から選択され;
ここで、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロシクロアルケニルは、アルキル、OH、又はNRaRbで任意に置換されており、ここで、Ra及びRbの各々は、アルキル又はHであり;
nは、1〜30、例えば、1〜4の整数であり;
PAは、ペイロードである)。
【請求項５】
式(Ib1)又は(Ib2)による請求項1〜4のいずれか一項記載の化合物:及びその位置異性体及び立体異性体
【化４】
2020521018.tif 000543
(式中、
BAは、結合剤であり;
LLは、三価リンカーであり;
SPは、各々の場合に、独立に、非存在であるか又はスペーサーであり;
nは、1〜30、例えば、1〜4の整数であり;
PAは、ペイロードである)。
【請求項６】
式(Ib3)、(Ib4)、(Ib5)、又は(Ib6)による請求項1記載の化合物:
【化５】
2020521018.tif 000544
。
【請求項７】
式(Ic1)による請求項1記載の化合物:
【化６】
2020521018.tif 000545
。
【請求項８】
式(Id)による、請求項1又は2記載の化合物:
【化７】
2020521018.tif 000546
(式中:
BAは、結合剤であり;
RGは、反応基残基であり;
SP1及びSP2は、各々の場合、各々独立に、非存在又はスペーサー基残基であり、かつここで、SP1は、三価リンカーを含み;
AA1は、アミノ酸残基を含む三価リンカーであり;
AA2は、ジペプチド残基であり;
PEGは、ポリエチレングリコール残基であり;
PABは、
【化８】
2020521018.tif 000547
であり、ここで、
【化９】
2020521018.tif 000548
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し;
CDは、各々の場合に、独立に、非存在又はシクロデキストリン残基であり、ここで、CDの少なくとも1つのは存在しており;
下付文字nは、1〜30、例えば、1〜4の整数であり;
下付文字mは、0〜5の整数であり;
下付文字pは、0又は1であり;かつ
PAは、ペイロード部分である)。
【請求項９】
式(Ie)による、請求項1〜3のいずれか一項記載の化合物:
【化１０】
2020521018.tif 000549
(式中:
BAは、結合剤であり;
RGは、各々の場合に、独立に、反応基残基であり;
SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり;
AA2は、ジペプチド残基であり;
PEGは、ポリエチレングリコール残基であり;
PABは、
【化１１】
2020521018.tif 000550
であり、ここで、
【化１２】
2020521018.tif 000551
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し;
CDは、シクロデキストリン残基であり、
下付文字nは、1〜30、例えば、1〜4の整数であり;
下付文字mは、0〜5の整数であり;
下付文字pは、0又は1であり;かつ
PAは、ペイロード部分である)。
【請求項１０】
式(Ie1)による、請求項1〜3のいずれか一項記載の化合物:
【化１３】
2020521018.tif 000552
(式中:
BAは、結合剤であり;
RGは、反応基残基であり;
SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり;
AA2は、ジペプチド残基であり;
PEGは、ポリエチレングリコール残基であり;
PABは、
【化１４】
2020521018.tif 000553
であり、ここで、
【化１５】
2020521018.tif 000554
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し;
CDは、シクロデキストリン残基であり;
下付文字nは、1〜30、例えば、1〜4の整数であり;
下付文字mは、0〜5の整数であり;
下付文字pは、0又は1であり;かつ
PAは、ペイロード部分である)。
【請求項１１】
式(Ie2)による、請求項1〜3のいずれか一項記載の化合物:
【化１６】
2020521018.tif 000555
(式中:
BAは、結合剤であり;
RGは、反応基残基であり;
SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり;
AA2は、ジペプチド残基であり;
PEGは、ポリエチレングリコール残基であり;
PABは、
【化１７】
2020521018.tif 000556
であり、ここで、
【化１８】
2020521018.tif 000557
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し;
CDは、シクロデキストリン残基であり;
下付文字nは、1〜30の整数であり;
下付文字mは、0〜5の整数であり;
下付文字pは、0又は1であり;かつ
PAは、ペイロード部分である)。
【請求項１２】
式(If)による、請求項1〜8のいずれか一項記載の化合物:
【化１９】
2020521018.tif 000558
(式中:
BAは、結合剤であり;
RGは、各々の場合に、独立に、反応性リンカー残基であり;
SP1、SP2、及びSP3は、各々の場合に、各々独立に、非存在又はスペーサー基残基であり;
AA2は、ジペプチド残基であり;
PEGは、ポリエチレングリコール残基であり;
PABは、
【化２０】
2020521018.tif 000559
であり、ここで、
【化２１】
2020521018.tif 000560
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し;
CDは、シクロデキストリン残基であり;
下付文字nは、1〜30、例えば、1〜4の整数であり;
下付文字mは、0〜5の整数であり;
下付文字qは、0〜5の整数であり;
下付文字pは、0又は1であり;かつ
PAは、ペイロード部分である)。
【請求項１３】
CDが、各々の場合に、独立に、α-シクロデキストリン、β-シクロデキストリン、及びγ-シクロデキストリンからなる群から選択される、請求項1〜12のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１４】
CDが、各々の場合に、独立に、
【化２２】
2020521018.tif 000561
からなる群から選択され、
ここで、
【化２３】
2020521018.tif 000562
が、該CDが該式中の隣接する基に結合している原子を示す、請求項1〜12のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１５】
RGが、各々の場合に、独立に、クリック化学残基である、請求項1〜12のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１６】
RGが、各々の場合に、独立に、トリアゾール又は縮合トリアゾールを含む、請求項1〜12のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１７】
RGが、各々の場合に、独立に、
【化２４】
2020521018.tif 000563
からなる群から選択され、ここで、
【化２５】
2020521018.tif 000564
が、該RGが該式中の隣接する基に結合している原子を示す、請求項1〜12のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１８】
【化２６】
2020521018.tif 000565
が、
【化２７】
2020521018.tif 000566
2020521018.tif 000567
2020521018.tif 000568
2020521018.tif 000569
2020521018.tif 000570
2020521018.tif 000571
からなる群から選択される、請求項8〜17のいずれか一項記載の化合物、或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体形態、又はこれらの位置異性体、又はこれらの位置異性体の混合物
(ここで:
各々の
【化２８】
2020521018.tif 000572
は、前記結合剤との結合であり;
各々の
【化２９】
2020521018.tif 000573
は、前記ペイロードとの結合であり;かつ
R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2である)。
【請求項１９】
【化３０】
2020521018.tif 000574
2020521018.tif 000575
2020521018.tif 000576
2020521018.tif 000577
2020521018.tif 000578
2020521018.tif 000579
2020521018.tif 000580
2020521018.tif 000581
2020521018.tif 000582
2020521018.tif 000583
からなる群から選択される基を含む、請求項8〜17のいずれか一項記載の化合物、或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体形態、又はこれらの位置異性体、又はこれらの位置異性体の混合物
(ここで:
各々の
【化３１】
2020521018.tif 000584
は、前記結合剤との結合であり;かつ
各々の
【化３２】
2020521018.tif 000585
は、前記ペイロードとの結合である)。
【請求項２０】
請求項3のいずれか一項記載の化合物
(ここで、
-LL-は、式(LL1):
【化３３】
2020521018.tif 000586
によるものであり、
ここで、RAA1、RAA2、及びRAA3は、各々独立に、アミノ酸側鎖であり、そのうちの少なくとも1つは、直接的に又は間接的に、-SP-RG-SP-CDに結合しており、ここで、一方又は両方のSPは非存在であってもよい)。
【請求項２１】
RAA1が直接的に又は間接的にCDに結合したリジン側鎖であり、かつRAA2及びRAA3が、それぞれ、バリン及びシトルリン側鎖、又はバリン及びアラニン側鎖のいずれかである、請求項20記載の化合物。
【請求項２２】
LL1が、
【化３４】
2020521018.tif 000587
である、請求項8〜12のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２３】
前記スペーサー基が、各々の場合に、独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eが0〜4の整数であり、下付文字uが1〜8の整数であり、かつ下付文字vが1〜8の整数である、請求項1〜12のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２４】
下付文字m、q、又はeのいずれか1つが4である、請求項8〜12又は23のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２５】
下付文字pが1である、請求項8〜12のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２６】
下付文字nが2〜4である、請求項1〜12のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２７】
前記結合剤(BA)が抗体又はその抗原結合断片である、請求項1〜26のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２８】
前記結合剤が、AXL、BAFFR、BCMA、BCR-リスト構成要素、BDCA2、BDCA4、BTLA、BTNL2、BTNL3、BTNL8、BTNL9、C10又はf54、CCR1、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR9、CCR10、CD11c、CD137、CD138、CD14、CD168、CD177、CD19、CD20、CD209、CD209L、CD22、CD226、CD248、CD25、CD27、CD274、CD276、CD28、CD30、CD300A、CD33、CD37、CD38、CD4、CD40、CD44、CD45、CD46、CD48、CD5、CD52、CD55、CD56、CD59、CD62E、CD68、CD69、CD70、CD74、CD79a、CD79b、CD8、CD80、CD86、CD90.2、CD96、CLEC12A、CLEC12B、CLEC7A、CLEC9A、CR1、CR3、CRTAM、CSF1R、CTLA4、CXCR1/2、CXCR4、CXCR5、DDR1、DDR2、DEC-205、DLL4、DR6、FAP、FCamR、FCMR、FcR's、Fire、GITR、HHLA2、HLAクラスII、HVEM、ICOSLG、IFNLR1、IL10R1、IL10R2、IL12R、IL13RA1、IL13RA2、IL15R、IL17RA、IL17RB、IL17RC、IL17RE、IL20R1、IL20R2、IL21R、IL22R1、IL22RA、IL23R、IL27R、IL29R、IL2Rg、IL31R、IL36R、IL3RA、IL4R、IL6R、IL5R、IL7R、IL9R、インテグリン、LAG3、LIFR、MAG/シグレック-4、MMR、MSR1、NCR3LG1、NKG2D、NKp30、NKp46、PDCD1、PROKR1、PVR、PVRIG、PVRL2、PVRL3、RELT、SIGIRR、シグレック-1、シグレック-10、シグレック-5、シグレック-6、シグレック-7、シグレック-8、シグレック-9、SIRPA、SLAMF7、TACI、TCR-リスト構成要素/会合体、PTCRA、TCRb、CD3z、CD3、TEK、TGFBR1、TGFBR2、TGFBR3、TIGIT、TLR2、TLR4、TROY、TSLPR、TYRO、VLDLR、VSIG4、及びVTCN1からなる群から選択される抗原に選択的な抗体又はその抗原結合断片である、請求項1〜26のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２９】
PAが、ドラスタチン、オーリスタチン、メイタンシノイド、植物アルカロイド、タキサン、ビンカアルカロイド、ステロイド、LXRモジュレーター、及びこれらの組合せからなる群から選択される基の残基である、請求項1〜28のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３０】
前記化合物が:
【化３５】
2020521018.tif 000588
2020521018.tif 000589
2020521018.tif 000590
2020521018.tif 000591
2020521018.tif 000592
2020521018.tif 000593
2020521018.tif 000594
2020521018.tif 000595
2020521018.tif 000596
から選択される、請求項1記載の化合物もしくは立体異性体形態、これらの医薬として許容し得る塩、又はこれらの溶媒和物
(ここで、Abは、抗体又はその抗原結合断片であり;
PAは、ペイロード部分であり;かつ
nは、1〜30、例えば、1〜4の整数である)。
【請求項３１】
前記化合物が:
【化３６】
2020521018.tif 000597
2020521018.tif 000598
2020521018.tif 000599
2020521018.tif 000600
2020521018.tif 000601
2020521018.tif 000602
2020521018.tif 000603
2020521018.tif 000604
2020521018.tif 000605
2020521018.tif 000606
2020521018.tif 000607
2020521018.tif 000608
2020521018.tif 000609
から選択される、請求項1記載の化合物もしくは立体異性体形態、これらの医薬として許容し得る塩、又はこれらの溶媒和物
(ここで、Abは、抗体又はその抗原結合断片である)。
【請求項３２】
請求項1〜31のいずれか一項記載の化合物又はその医薬として許容し得る塩及び医薬として許容し得る賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項３３】
それを必要としている患者における疾患又は障害の治療方法であって、該患者に、請求項1〜31のいずれか一項記載の化合物又は請求項32記載の組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項３４】
少なくとも1つのペイロード部分に結合し、かつ共有結合性リンカーを介して少なくとも1つのシクロデキストリン部分に結合した反応性リンカーを含む化合物であって、該共有結合性リンカーが、該反応性リンカー、該ペイロード部分、及び該シクロデキストリン部分の各々に直接的に又は間接的に結合している、前記化合物。
【請求項３５】
式(II)による、請求項34記載の化合物:
【化３７】
2020521018.tif 000610
(式中:
RG'は、反応基であり;
Lは、三価リンカーであり;
CDは、シクロデキストリン残基であり;かつ
PAは、ペイロード残基である)。
【請求項３６】
式(IIa)による、請求項34又は35のいずれか一項記載の化合物:
【化３８】
2020521018.tif 000611
(式中:
RG'は、反応基であり;
RGは、反応性リンカー残基であり;
LLは、三価リンカーであり;
SPは、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基であり;かつ
PAは、ペイロードである)。
【請求項３７】
式(IIb)又は(IIc)による、請求項34〜36のいずれか一項記載の化合物:並びにその位置異性体、立体異性体、及び混合物
【化３９】
2020521018.tif 000612
(式中:
RG'は、反応基であり;
LLは、三価リンカーであり;
SPは、各々の場合に、独立に、非存在であるか又はスペーサーであり;
環Aはトリアゾールに縮合しており、かつシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、及びヘテロシクロアルキニルからなる群から選択され;
ここで、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、及びヘテロシクロアルキニルは、アルキル、OH、又はNRaRbで任意に置換されており、ここで、Ra及びRbの各々は、アルキル又はHであり;
PAは、ペイロードである)。
【請求項３８】
式(IIb1)又は(IIb2)による、請求項34〜36のいずれか一項記載の化合物並びにその位置異性体、立体異性体、及び混合物:
【化４０】
2020521018.tif 000613
(式中、
RG'は、反応基であり;
LLは、三価リンカーであり;
SPは、各々の場合に、独立に、非存在であるか又はスペーサーであり;
PAは、ペイロードである)。
【請求項３９】
式(IIb3)、(IIb4)、(IIb5)、又は(IIb6)による、請求項36記載の化合物:
【化４１】
2020521018.tif 000614
(式中、
下付文字eは、0〜4の整数である)。
【請求項４０】
式(IIc1)による、請求項36記載の化合物:
【化４２】
2020521018.tif 000615
。
【請求項４１】
式(IId)による、請求項34又は35記載の化合物:
【化４３】
2020521018.tif 000616
(式中:
RG'は、反応基残基であり;
SP1及びSP2は、各々の場合に、各々独立に、非存在又はスペーサー基残基であり;
AA1は、アミノ酸残基を含む三価リンカーであり;
AA2は、ジペプチド残基であり;
PEGは、ポリエチレングリコール残基であり;
PABは、
【化４４】
2020521018.tif 000617
であり、ここで、
【化４５】
2020521018.tif 000618
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し;
CDは、各々の場合に、独立に、非存在又はシクロデキストリン残基であり、ここで、少なくとも1つのCDは存在しており;
下付文字mは、0〜5の整数であり;
下付文字pは、0又は1であり;かつ
PAは、ペイロード部分である)。
【請求項４２】
式(IIe)による、請求項34〜37のいずれか一項記載の化合物:
【化４６】
2020521018.tif 000619
(式中:
RG'は、反応基であり;
RGは、各々の場合に、独立に、反応基残基であり;
SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり;
AA2は、ジペプチド残基であり;
PEGは、ポリエチレングリコール残基であり;
PABは、
【化４７】
2020521018.tif 000620
であり、ここで、
【化４８】
2020521018.tif 000621
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し;
CDは、シクロデキストリン残基であり、
下付文字mは、0〜5の整数であり;
下付文字pは、0又は1であり;かつ
PAは、ペイロード部分である)。
【請求項４３】
式(IIe1)による、請求項34〜37のいずれか一項記載の化合物:
【化４９】
2020521018.tif 000622
(式中:
RG'は、反応基であり;
SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり;
AA2は、ジペプチド残基であり;
PEGは、ポリエチレングリコール残基であり;
PABは、
【化５０】
2020521018.tif 000623
であり、ここで、
【化５１】
2020521018.tif 000624
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し;
CDは、シクロデキストリン残基であり;
下付文字mは、0〜5の整数であり;
下付文字pは、0又は1であり;かつ
PAは、ペイロード部分である)。
【請求項４４】
式(IIe2)による、請求項34〜37のいずれか一項記載の化合物:
【化５２】
2020521018.tif 000625
(式中:
RG'は、反応基であり;
SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり;
AA2は、ジペプチド残基であり;
PEGは、ポリエチレングリコール残基であり;
PABは、
【化５３】
2020521018.tif 000626
であり、ここで、
【化５４】
2020521018.tif 000627
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し;
CDは、シクロデキストリン残基であり;
下付文字mは、0〜5の整数であり;
下付文字pは、0又は1であり;かつ
PAは、ペイロード部分である)。
【請求項４５】
式(IIf)による、請求項34〜42のいずれか一項記載の化合物:
【化５５】
2020521018.tif 000628
(式中:
RG'は、反応基残基であり;
RGは、反応基残基であり;
SP1、SP2、及びSP3は、各々の場合に、各々独立に、非存在又はスペーサー基残基であり;
AA2は、ジペプチド残基であり;
PEGは、ポリエチレングリコール残基であり;
PABは、
【化５６】
2020521018.tif 000629
であり、ここで、
【化５７】
2020521018.tif 000630
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し;
CDは、シクロデキストリン残基であり;
下付文字mは、0〜5の整数であり;
下付文字pは、0又は1であり;
下付文字qは、0〜5の整数であり;かつ
PAは、ペイロード部分である)。
【請求項４６】
CDが、各々の場合に、独立に、α-シクロデキストリン、β-シクロデキストリン、及びγ-シクロデキストリンからなる群から選択される、請求項34〜45のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４７】
CDが、各々の場合に、独立に、
【化５８】
2020521018.tif 000631
からなる群から選択され、ここで、
【化５９】
2020521018.tif 000632
が、該CDが該式中の隣接する基に結合している原子を示す、請求項34〜45のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４８】
RG'が、各々の場合に、独立に、クリック化学反応基である、請求項34〜45のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４９】
RG'が、各々の場合に、独立に、
【化６０】
2020521018.tif 000633
からなる群から選択され、ここで、
【化６１】
2020521018.tif 000634
が、該RG'が該式中の隣接する基に結合している原子を示す、請求項34〜45のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５０】
【化６２】
2020521018.tif 000635
が、
【化６３】
2020521018.tif 000636
2020521018.tif 000637
2020521018.tif 000638
からなる群から選択される、請求項41〜50のいずれか一項記載の化合物、或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体形態、又はこれらの位置異性体、又はこれらの位置異性体の混合物
(ここで:
各々の
【化６４】
2020521018.tif 000639
は、前記結合剤との結合であり;
各々の
【化６５】
2020521018.tif 000640
は、前記ペイロードとの結合であり;かつ
R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2である)。
【請求項５１】
【化６６】
2020521018.tif 000641
2020521018.tif 000642
2020521018.tif 000643
2020521018.tif 000644
2020521018.tif 000645
2020521018.tif 000646
からなる群から選択される基を含む、請求項41〜50のいずれか一項記載の化合物、或いはその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体形態、又はこれらの位置異性体、又はこれらの位置異性体の混合物
(ここで:
各々の
【化６７】
2020521018.tif 000647
は、前記ペイロードとの結合である)。
【請求項５２】
請求項36〜40のいずれか一項記載の化合物
(ここで、
-LL-は、式:
【化６８】
2020521018.tif 000648
によるものであり、
ここで、RAA1、RAA2、及びRAA3は、各々独立に、アミノ酸側鎖であり、そのうちの少なくとも1つは、直接的に又は間接的に-SP-RG-SP-CDに結合している)。
【請求項５３】
RAA1が直接的に又は間接的にCDに結合したリジン側鎖であり、かつRAA2及びRAA3が、それぞれ、バリン及びシルリン(cirulline)側鎖、又はバリン及びアラニン側鎖のいずれかである、請求項53記載の化合物。
【請求項５４】
-AA2-が、
【化６９】
2020521018.tif 000649
である、請求項41〜45のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５５】
前記スペーサー基が、各々の場合に、独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eが0〜4の整数であり、下付文字uが1〜8の整数であり、かつ下付文字vが1〜8の整数である、請求項36〜45のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５６】
下付文字m又はqのいずれか1つが4である、請求項41〜45のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５７】
下付文字pが1である、請求項41〜45のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５８】
PAが、ドラスタチン、オーリスタチン、メイタンシノイド、植物アルカロイド、タキサン、及びビンカアルカロイドからなる群から選択される基の残基である、請求項34〜52のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５９】
前記化合物が:
【化７０】
2020521018.tif 000650
2020521018.tif 000651
2020521018.tif 000652
2020521018.tif 000653
2020521018.tif 000654
2020521018.tif 000655
2020521018.tif 000656
2020521018.tif 000657
である、請求項34記載の化合物、又はその立体異性体形態、又はこれらの位置異性体、又はこれらの位置異性体の混合物。
【請求項６０】
請求項1の化合物を調製する方法であって、結合剤を、請求項34〜60記載の化合物と、該結合剤と該化合物の結合を形成させるのに好適な条件下で接触させる工程を含む、前記方法。
【請求項６１】
リンカーに結合した請求項34〜60記載のいずれかの化合物を含むリンカー-ペイロード。
【請求項６２】
請求項1〜61記載の化合物の酸素又は一級もしくは二級窒素に結合した請求項34〜60記載のいずれかの化合物を含むリンカー-ペイロード。
【請求項６３】
抗体又はその抗原結合断片に結合した請求項1〜62記載のいずれかの化合物又はリンカー-ペイロードを含む抗体-薬物-コンジュゲート。
【請求項６４】
対象の増殖性疾患、代謝性疾患、炎症、又は神経変性疾患を治療する方法であって、該対象に、請求項1〜33記載のいずれかの化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、前記方法。
【請求項６５】
対象の疾患、障害、又は疾病の治療のための方法であって、該対象に、請求項1〜33記載のいずれかの化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、前記方法。
【請求項６６】
対象の増殖性疾患の治療のための方法であって、該対象に、請求項1〜33記載のいずれかの化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、前記方法。
【請求項６７】
対象の代謝性疾患の治療のための方法であって、該対象に、請求項1〜33記載のいずれかの化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、前記方法。
【請求項６８】
対象の炎症の治療のための方法であって、該対象に、請求項1〜33記載のいずれかの化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、前記方法。
【請求項６９】
対象の神経変性疾患の治療のための方法であって、該対象に、請求項1〜33記載のいずれかの化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
(相互参照)
本出願は、その内容が引用により完全に組み込まれる、2017年5月18日に出願された米国仮出願第62/508,315号の恩典を主張する。
【０００２】
(分野)
本明細書に提供されるのは、新規のシクロデキストリン含有タンパク質薬物コンジュゲート、並びに該シクロデキストリン含有タンパク質薬物コンジュゲートの投与を含む、種々の疾患、障害、及び疾病を治療する方法である。また本明細書に記載されるのは、シクロデキストリン含有タンパク質薬物コンジュゲートを作製する方法である。
【背景技術】
【０００３】
(背景)
抗体-薬物コンジュゲート(ADC)は、抗体を用いて、効力のある薬物を標的発現細胞に選択的に送達し、オフターゲット副作用及び/又は毒性の潜在的な低下をもたらし、それゆえ、治療指数を増大させる。
【０００４】
多くのペイロード(すなわち、薬物)の親油性の性質は、該ペイロードが標的細胞に効率的に送達されないという点で、ADCの特性に悪影響を及ぼし得る。極性基をリンカー中に付加することによりADC特性を調節すると、コンジュゲーション中の凝集が低下し、ADCの物理化学的特性が改善し、ADCの薬物動態(PK)の改善及び治療指数の改善がもたらされ得る(例えば、Nature Biotechnology, 2015, 33,733-735を参照)。最終代謝産物の極性又は電荷の変化をもたらすリンカーの調節は、細胞内部でのペイロードの良好な保持が理由で、多剤耐性(MDR)細胞に対する活性を改善し得る(例えば、Cancer Res; 70(6)March 15, 2010, p2528を参照)。リンカー上の化学的部分、例えば、ポリエチレングリコール(PEG)、糖、又は硫酸基(例えば、WO2014062697号、US20100323973号を参照)は、ADCのコンジュゲーション効率及び生産しやすさに影響を及ぼすだけでなく、多くの場合、代謝産物の一部として残存し、そのため、ADCの活性及び安全性にも影響を及ぼす。ADCを改善するために、様々な戦略が利用されている(例えば、Bioconjugate Chem., 2008, 19(10), pp 1960-1963を参照)。
【０００５】
シクロデキストリン(CD)は、生分解性で可溶性の食物繊維及び食品成分であり、薬物担体としても使用される。その安全性は証明されている。CDはPEGよりも可溶性であり、かつこれはスルホネートのような電荷を有さず、そのため、これは、プロセシング中に取り扱いやすいものとなる。さらに、グルコース単位がα-1,4結合を介して末端と末端で共有結合しているので、全ての単位は同じ化学的特性を有し、また、独特の親水性外部表面と疎水性内部コアを形成するはずである。
【０００６】
親油性ペイロードの低いバイオアベイラビリティは、ADC治療の治療域を悪化させ得る。シクロデキストリン含有タンパク質コンジュゲート、例えば、ADCが開発されれば、特に、親油性ペイロードがADCに含まれる場合、生物学的標的の調節の改善、バイオアベイラビリティの改善、及び治療域の改善が可能になるであろう。それゆえ、例えば、薬剤をシクロデキストリンタンパク質薬物コンジュゲート中で使用する疾患の効果的な治療が引き続き必要とされている。
【発明の概要】
【０００７】
(概要)
本明細書に提供されるのは、例えば、限定されないが、代謝性疾患、増殖性疾患、並びに他の疾患及び疾病を含む、疾患、疾病、及び障害の治療に有用な化合物である。
【０００８】
一実施態様において、本明細書に示されるのは、少なくとも1つのペイロード部分に連結され、かつ共有結合性リンカーを介して少なくとも1つのシクロデキストリン部分に連結されたタンパク質:を含み、ここで、該共有結合性リンカーが、該結合剤、該ペイロード部分、及び該シクロデキストリン部分の各々に直接的に又は間接的に結合している、化合物又はその医薬として許容し得る塩である。
【０００９】
一実施態様において、本明細書に示されるのは、少なくとも1つのペイロード部分に連結され、かつ共有結合性リンカーを介して少なくとも1つのシクロデキストリン部分に連結された結合剤:を含み、ここで、該共有結合性リンカーが、該結合剤、該ペイロード部分、及び該シクロデキストリン部分の各々に直接的に又は間接的に結合している、化合物又はその医薬として許容し得る塩である。
【００１０】
別の実施態様において、本明細書に示されるのは、少なくとも1つのペイロード部分に連結され、かつ共有結合性リンカーを介して少なくとも1つのシクロデキストリン部分に連結された反応基:を含み、ここで、該共有結合性リンカーが、該反応基、該ペイロード部分、及び該シクロデキストリン部分の各々に直接的に又は間接的に結合している、化合物である。
【００１１】
別の実施態様において、本明細書に示されるのは、抗体又はその抗原結合断片に結合した上記の化合物を有する抗体-薬物コンジュゲートである。
【００１２】
別の実施態様において、本明細書に示されるのは、それを必要としている患者の疾患、疾病、又は障害を治療する方法であって、該患者に、本明細書に示される化合物を投与することを含む、方法である。
【００１３】
別の実施態様において、本明細書に示されるのは、抗体-薬物コンジュゲートを調製する方法であって、結合剤を、本明細書に示されるリンカー-ペイロード化合物と、該結合剤と該リンカー-ペイロード化合物の結合を形成するのに好適な条件下で接触させる工程を含む、方法である。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
(図面の簡単な説明)
【図１】図1Aは、3つの異なるタイプのペイロード化合物を示している。
【００１５】
図1Bは、ペイロード化合物1h又は1iを調製するための合成プロセスを示している。
【００１６】
図1Cは、ペイロード化合物1dを調製するための合成プロセスを示している。
【００１７】
【図２】図2は、中間化合物5a〜cを調製するための合成プロセスを示している。
【００１８】
【図３】図3は、中間化合物6bを調製するための合成プロセスを示している。
【００１９】
【図４】図4は、中間化合物7a及び7bを調製するための合成プロセスを示している。
【００２０】
【図５】図5は、2aから化合物3(3e、3f、及び3g)を調製するための手順Aを記載した一般的な合成プロセスを示している。
【００２１】
【図６】図6は、化合物2から化合物3を調製するための及び同じく化合物3から化合物8を作製するための手順Bを記載した一般的な合成プロセスを示している。
【００２２】
【図７】図7は、化合物9a〜Lを作製するための手順Cを記載した一般的な合成プロセスを示している。
【００２３】
【図８】図8は、リンカー-ペイロードを作製するための手順Dを記載した一般的な合成プロセスを示している。
【００２４】
【図９】図9は、リンカー-ペイロードを作製するための手順を記載した合成プロセスを示している。
【００２５】
【図１０】図10は、実施例38のリンカー-ペイロードを作製するための手順を記載した合成プロセスを示している。
【００２６】
【図１１】図11は、実施例39のリンカー-ペイロードを作製するための手順を記載した合成プロセスを示している。
【００２７】
【図１２】図12は、実施例49の溶解度プロットを示している。
【００２８】
【図１３】図13は、マイケル付加を介するコンジュゲーションの一般的な合成プロセスを示している。
【００２９】
【図１４】図14は、Ab-Ex49によって表される[2+3]クリック反応を介するADCコンジュゲーションの一般的な合成プロセスを示している。
【００３０】
【図１５】図15は、抗Her2抗体、抗Her2-PEG3-N3、及び抗Her2-Ex49のクマシー染色SDS-PAGEゲルを示している。
【００３１】
【図１６】図16は、抗Her2抗体、抗Her2-PEG3-N3、及び抗Her2-Ex49のサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)を示している。
【００３２】
【図１７】図17は、％細胞生存と実施例72で試験された特定の化合物のLog10[M]のプロットを示している。
【００３３】
【図１８】図18は、相対発光量(RLU)とLog10[M]のプロットにおけるシクロデキストリンリンカーを有するLXRアゴニストADC及びシクロデキストリンリンカーを有さないLXRアゴニストADCの生体活性を示している。
【００３４】
【図１９】図19は、相対発光量(RLU)とLog10[M]のプロットにおけるシクロデキストリンリンカーを有するLXRアゴニストADC及びシクロデキストリンリンカーを有さないLXRアゴニストADCの生体活性を示している。
【００３５】
【図２０】図20は、本明細書に示される方法でd-Lysの代わりに使用し得る試薬を示している。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
(例示的実施態様の説明)
本明細書に提供されるのは、対象の、例えば、脂質異常症、代謝性疾患、炎症、又は神経変性疾患を治療するのに有用な化合物、組成物、及び方法である。
【００３７】
(定義)
本明細書に提供される化合物に言及する場合、以下の用語は、別途示されない限り、以下の意味を有する。別途定義されない限り、本明細書で使用される技術的及び科学的用語は全て、当業者によって一般に理解されているのと同じ意味を有する。本明細書に提供される用語について複数の定義がある場合、別途明記されない限り、これらの定義が優先する。
【００３８】
本明細書で使用される場合、「アルキル」は、一価及び飽和炭化水素ラジカル部分を指す。アルキルは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状、すなわち、シクロアルキルであることができる。アルキルとしては、1〜20個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-20アルキル; 1〜12個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-12アルキル; 1〜8個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-8アルキル; 1〜6個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-6アルキル;及び1〜3個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C1-3アルキルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキル部分の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、s-ブチル、t-ブチル、i-ブチル、ペンチル部分、ヘキシル部分、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。ペンチル部分としては、n-ペンチル及びi-ペンチルが挙げられるが、これらに限定されない。ヘキシル部分としては、n-ヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３９】
本明細書で使用される場合、「アルキレン」は、二価アルキル基を指す。別途指定されない限り、アルキレンは、1〜20個の炭素原子を含むが、これらに限定されない。アルキレン基は、アルキルについて本明細書に記載されている通りに任意に置換されている。いくつかの実施態様において、アルキレンは、置換されていない。
【００４０】
その立体化学を特定しないアミノ酸又はアミノ酸残基の表記は、L型のアミノ酸、D型のアミノ酸、又はこれらのラセミ混合物を包含することが意図される。
【００４１】
本明細書で使用される場合、「ハロアルキル」は、上で定義されているようなアルキルを指し、ここで、該アルキルは、ハロゲン、例えば、フッ素(F)、塩素(Cl)、臭素(Br)、又はヨウ素(I)から選択される少なくとも1つの置換基を含む。ハロアルキルの例としては、-CF3、-CH2CF3、-CCl2F、及び-CCl3が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４２】
本明細書で使用される場合、「アルケニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1以上の非芳香族炭素-炭素二重結合を含有する一価炭化水素ラジカル部分を指す。アルケニルは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状であることができる。アルケニルとしては、2〜20個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-20アルケニル; 2〜12個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-12アルケニル; 2〜8個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-8アルケニル; 2〜6個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-6アルケニル;及び2〜4個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-4アルケニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルケニル部分の例としては、ビニル、プロペニル、ブテニル、及びシクロヘキセニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４３】
本明細書で使用される場合、「アルキニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1以上の炭素-炭素三重結合を含有する一価炭化水素ラジカル部分を指す。アルキニルは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状であることができる。アルキニルとしては、2〜20個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-20アルキニル; 2〜12個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-12アルキニル; 2〜8個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-8アルキニル; 2〜6個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-6アルキニル;及び2〜4個の炭素原子を有するラジカル、すなわち、C2-4アルキニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキニル部分の例としては、エチニル、プロピニル、及びブチニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４４】
本明細書で使用される場合、「アルコキシ」は、一価及び飽和炭化水素ラジカル部分を指し、ここで、該炭化水素は酸素原子との単結合を含み、かつ該ラジカルは酸素原子上に位置し、例えば、エトキシの場合、CH3CH2-O・である。アルコキシ置換基は、それが該アルコキシ置換基のこの酸素原子を介して置換する化合物に結合する。アルコキシは、任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状、すなわち、シクロアルコキシであることができる。アルコキシとしては、1〜20個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-20アルコキシ; 1〜12個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-12アルコキシ; 1〜8個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-8アルコキシ; 1〜6個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-6アルコキシ;及び1〜3個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-3アルコキシが挙げられるが、これらに限定されない。アルコキシ部分の例としては、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、i-プロポキシ、n-ブトキシ、s-ブトキシ、t-ブトキシ、i-ブトキシ、ペントキシ部分、ヘキソキシ部分、シクロプロポキシ、シクロブトキシ、シクロペントキシ、及びシクロヘキソキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４５】
本明細書で使用される場合、「ハロアルコキシ」は、上で定義されているようなアルコキシを指し、ここで、該アルコキシは、ハロゲン、例えば、F、Cl、Br、又はIから選択される少なくとも1つの置換基を含む。
【００４６】
本明細書で使用される場合、「アリール」は、環原子が炭素原子である芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す。アリールは、任意に置換されており、単環式又は多環式、例えば、二環式もしくは三環式であることができる。アリール部分の例としては、6〜20個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-20アリール; 6〜15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリール、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリールが挙げられるが、これらに限定されない。アリール部分の例としては、フェニル、ナフチル、フルオレニル、アズレニル、アントリル、フェナントリル、及びピレニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４７】
本明細書で使用される場合、「アリールアルキル」は、アルキル化合物のラジカルである一価部分を指し、ここで、該アルキル化合物は、芳香族置換基で置換されている、すなわち、芳香族化合物は、アルキル基との単結合を含み、かつ該ラジカルは、該アルキル基上に位置する。アリールアルキル基は、アルキル基を介して、図示されている化学構造に結合する。アリールアルキルは、構造、例えば、
【化１】
2020521018.tif 000003
(ここで、Bは、芳香族部分、例えば、フェニルである)によって表すことができる。アリールアルキルは任意に置換されている、すなわち、アリール基及び/又はアルキル基は、本明細書に開示されているように置換されることができる。アリールアルキルの例としては、ベンジルが挙げられるが、これに限定されない。
【００４８】
本明細書で使用される場合、「アルキルアリール」は、アリール化合物のラジカルである一価部分を指し、ここで、該アリール化合物はアルキル置換基で置換されている、すなわち、アリール化合物は、アルキル基との単結合を含み、かつ該ラジカルは、該アリール基上に位置する。アルキルアリール基は、アリール基を介して、図示されている化学構造に結合する。アルキルアリールは、構造、例えば、
【化２】
2020521018.tif 000004
(ここで、Bは、芳香族部分、例えば、フェニルである)によって表すことができる。アルキルアリールは任意に置換されている、すなわち、アリール基及び/又はアルキル基は、本明細書に開示されているように置換されることができる。アルキルアリールの例としては、トルイルが挙げられるが、これに限定されない。
【００４９】
本明細書で使用される場合、「アリールオキシ」は、環原子が炭素原子であり、かつ該環が酸素ラジカルと置換されている芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す、すなわち、該芳香族化合物は、酸素原子との単結合を含み、かつ該ラジカルは、該酸素原子上に位置し、例えば、フェノキシの場合、
【化３】
2020521018.tif 000005
である。アリールオキシ置換基は、それがこの酸素原子を介して置換する化合物に結合する。アリールオキシは、任意に置換されている。アリールオキシとしては、6〜20個の環炭素原子を有するラジカル、すなわち、C6-20アリールオキシ; 6〜15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリールオキシ、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリールオキシが挙げられるが、これらに限定されない。アリールオキシ部分の例としては、フェノキシ、ナフトキシ、及びアントロキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５０】
本明細書で使用される場合、「RaRbN-アリールオキシ」は、環原子が炭素原子であり、かつ該環が少なくとも1つのRaRbN-置換基及び少なくとも1つの酸素ラジカルと置換されている芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す、すなわち、該芳香族化合物は、RaRbN-置換基との単結合及び酸素原子との単結合を含み、かつ該ラジカルは、該酸素原子上に位置し、例えば、
【化４】
2020521018.tif 000006
である。RaRbN-アリールオキシ置換基は、それがこの酸素原子を介して置換する化合物に結合する。RaRbN-アリールオキシは、任意に置換されている。RaRbN-アリールオキシとしては、6〜20個の環炭素原子を有するもの、例えば、C6-20(RaRbN)n-アリールオキシ、6〜15個の環炭素原子を有するもの、例えば、C6-15(RaRbN)n-アリールオキシ、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、例えば、C6-10(RaRbN)n-アリールオキシ(ここで、nは、RaRbN-置換基の数を表す)が挙げられるが、これらに限定されない。RaRbN-アリールオキシ部分の例としては、4-(ジメチル-アミノ)-フェノキシ、
【化５】
2020521018.tif 000007
が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５１】
本明細書で使用される場合、「アリーレン」は、環原子が炭素原子のみである芳香族化合物の二価部分を指す。アリーレンは、任意に置換されており、単環式又は多環式、例えば、二環式もしくは三環式であることができる。アリール部分の例としては、6〜20個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-20アリーレン; 6〜15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリーレン、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリーレンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５２】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアルキルを指す。本明細書で使用される場合、「ヘテロアルケニル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアルケニルを指す。本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキニル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアルケニルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアルキルは、任意に置換されている。ヘテロアルキル部分の例としては、アミノアルキル、スルホニルアルキル、及びスルフィニルアルキルが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアルキル部分の例としては、メチルアミノ、メチルスルホニル、及びメチルスルフィニルも挙げられるが、これらに限定されない。
【００５３】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」は、環原子が炭素原子及び少なくとも1つの酸素、硫黄、窒素、又はリン原子を含有する芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す。ヘテロアリール部分の例としては、5〜20個の環原子; 5〜15個の環原子;及び5〜10個の環原子を有するものが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアリールは、任意に置換されている。
【００５４】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリーレン」は、芳香環の1以上の炭素環原子が酸素、硫黄、窒素、又はリン原子と置換されているアリーレンを指す。ヘテロアリーレンは、任意に置換されている。
【００５５】
本明細書で使用される場合、「ヘテロシクロアルキル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているシクロアルキルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキルは、任意に置換されている。ヘテロシクロアルキル部分の例としては、モルホリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、ジオキソラニル、ジチオラニル、オキサニル、又はチアニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５６】
本明細書で使用される場合、「ルイス酸」は、孤立電子対を受け取る分子又はイオンを指す。本明細書に記載される方法で使用されるルイス酸は、プロトン以外のものである。ルイス酸としては、非金属酸、金属酸、硬いルイス酸、及び軟らかいルイス酸が挙げられるが、これらに限定されない。ルイス酸としては、アルミニウム、ホウ素、鉄、スズ、チタン、マグネシウム、銅、アンチモン、リン、銀、イッテルビウム、スカンジウム、ニッケル、及び亜鉛のルイス酸が挙げられるが、これらに限定されない。例示的なルイス酸としては、AlBr3、AlCl3、BCl3、三塩化ホウ素硫化メチル、BF3、三フッ化ホウ素メチルエーテル、三フッ化ホウ素硫化メチル、三フッ化ホウ素テトラヒドロフラン、ジシクロヘキシルボロントリフルオロメタンスルホネート、鉄(III)臭化物、鉄(III)塩化物、スズ(IV)塩化物、チタン(IV)塩化物、チタン(IV)イソプロポキシド、Cu(OTf)2、CuCl2、CuBr2、塩化亜鉛、ハロゲン化アルキルアルミニウム(RnAlX3-n、ここで、Rはヒドロカルビルであり、Xはハライドであり、かつ下付文字nは、0〜3の整数である)、Zn(OTf)2、ZnCl2、Yb(OTf)3、Sc(OTf)3、MgBr2、NiCl2、Sn(OTf)2、Ni(OTf)2、及びMg(OTf)2が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５７】
本明細書で使用される場合、「N-含有ヘテロシクロアルキル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されており、かつ少なくとも1つのヘテロ原子が窒素原子であるシクロアルキルを指す。窒素の他に好適なヘテロ原子としては、酸素及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。N-含有ヘテロシクロアルキルは、任意に置換されている。N-含有ヘテロシクロアルキル部分の例としては、モルホリニル、ピペリジニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、又はチアゾリジニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
本明細書で使用される場合、ラジカル部分を説明するために使用されるときの「任意に置換された」、例えば、任意に置換されたアルキルは、そのような部分が1以上の置換基に任意に結合していることを意味する。そのような置換基の例としては、ハロ、シアノ、ニトロ、任意に置換されたハロアルキル、アジド、エポキシ、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、
【化６】
2020521018.tif 000008
(ここで、RA、RB、及びRCは、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクロアルキルであるか、又はRA及びRBは、それらが結合している原子と一緒に、飽和もしくは不飽和炭素環を形成し、ここで、該環は、任意に置換されており、かつ1以上の環原子はヘテロ原子で任意に置換されている)が挙げられるが、これらに限定されない。ある実施態様において、ラジカル部分が、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和もしくは不飽和炭素環で任意に置換されているとき、該任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和もしくは不飽和炭素環上の置換基は、それらが置換されている場合、さらなる置換基でさらに任意に置換されている置換基で置換されていない。いくつかの実施態様において、本明細書に記載される基が任意に置換されているとき、該基に結合している置換基は、別途規定されない限り、置換されていない。
【００５９】
本明細書で使用される場合、「結合剤」は、所与の結合パートナー、例えば、抗原と特異性を伴って結合することができる任意の分子、例えば、タンパク質を指す。
【００６０】
本明細書で使用される場合、「リンカー」は、結合剤を、本明細書に記載される1以上の化合物、例えば、本明細書に記載されるペイロード化合物及びシクロデキストリン基に共有結合させる二価、三価、又は多価部分を指す。
【００６１】
本明細書で使用される場合、「アミド合成条件」は、例えば、カルボン酸、活性化カルボン酸、又はアシルハライドとアミンとの反応によって、アミドの形成を達成するために好適な反応条件を指す。いくつかの例において、「アミド合成条件」は、カルボン酸とアミンの間のアミド結合の形成を達成するために好適な反応条件を指す。これらの例のいくつかにおいて、カルボン酸は、まず、活性化カルボン酸に変換され、その後、該活性化カルボン酸がアミンと反応して、アミドを形成する。アミドの形成を達成するための好適な条件としては、限定されないが、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、ジイソプロピルカルボジイミド(DIC)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(BOP)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBOP)、(7-アザベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyAOP)、ブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBrOP)、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HBTU)、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート(TBTU)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシドヘキサフルオロホスフェート(HATU)、N-エトキシカルボニル-2-エトキシ-1,2-ジヒドロキノリン(EEDQ)、N-エチル-N'-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDC)、2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリジニウムヘキサフルオロホスフェート(CIP)、2-クロロ-4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン(CDMT)、及びカルボニルジイミダゾール(CDI)を含む、カルボン酸とアミンの反応を達成するための試薬を利用するものが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの例において、カルボン酸を、まず、活性化カルボン酸エステルに変換し、その後、該活性化カルボン酸エステルをアミンで処理して、アミド結合を形成させる。ある実施態様において、カルボン酸を試薬で処理する。試薬は、カルボン酸を脱プロトン化し、その後、脱プロトン化されたカルボン酸によるプロトン化された試薬への求核攻撃の結果として、脱プロトン化されたカルボン酸との生成物複合体を形成させることにより、カルボン酸を活性化する。その後、特定のカルボン酸の活性化カルボン酸エステルは、カルボン酸が活性化される前よりも、アミンによる求核攻撃に対して感受性が高い。この結果として、アミド結合形成が生じる。したがって、カルボン酸は、活性化されたと記載されている。例示的な試薬としては、DCC及びDICが挙げられる。
【００６２】
本明細書で使用される場合、「位置異性体(単数)」、「位置異性体(複数)」、又は「位置異性体の混合物」は、好適なアルキンで処理された好適なアジド(例えば、-N3、又はPEG-N3誘導体化抗体)から誘導される1,3-付加環化又は歪み促進アルキン-アジド付加環化(SPAAC)−別名、クリック反応として知られる−の生成物を指す。ある実施態様において、例えば、位置異性体及び位置異性体の混合物は、下に示されるクリック反応生成物によって特徴付けられる:
【化７】
2020521018.tif 000009
。ある実施態様において、複数の好適なアジド及び複数の好適なアルキンを生成物に向かう途中の合成プロセスで利用することができ、この合成プロセスにおいて、各々のアジド-アルキン対が1以上の独立したクリック反応に関与して、位置異性クリック反応生成物の混合物を生成させることができる。例えば、当業者は、生成物に向かう途中で、第一の好適なアジドが第一の好適なアルキンと独立に反応することができ、第二の好適なアジドが第二の好適なアルキンと独立に反応することができ、4つの可能なクリック反応位置異性体又は4つの可能なクリック反応位置異性体の混合物が結果として生成されることを認識しているであろう。
【００６３】
本明細書で使用される場合、「残基」という用語は、化学反応後に残る化合物内の化学的部分を指す。例えば、「アミノ酸残基」又は「N-アルキルアミノ酸残基」という用語は、アミノ酸又はN-アルキルアミノ酸と好適なカップリングパートナーとのアミドカップリング又はペプチドカップリングの生成物を指し;ここで、例えば、水分子は、該アミノ酸又は該N-アルキルアミノ酸のアミド又はペプチドカップリング後に追い出され、結果として、該アミノ酸残基又はN-アルキルアミノ酸残基がその中に取り込まれた生成物が生じる。
【００６４】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」は、疾患もしくは障害の治療もしくは管理における患者への治療的利益を提供するのに又は疾患もしくは障害と関連する1以上の症状を遅延もしくは最小化させるのに十分である(例えば、化合物の)量を指す。
【００６５】
特定の基、部分、置換基、及び原子は、該基、部分、置換基、原子が結合している原子を示すために、結合(単数)もしくは結合(複数)を交差する波線で示されている。例えば、以下のように示されるプロピル基:
【化８】
2020521018.tif 000010
と置換されているフェニル基は、以下の構造:
【化９】
2020521018.tif 000011
を有する。本明細書で使用される場合、環原子間の結合を介して環状基(例えば、芳香族、ヘテロ芳香族、縮合環、及び飽和もしくは不飽和シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル)に結合した置換基を示す図は、別途規定されない限り、該環状基が、本明細書に記載されるか又は本開示が関係する分野で公知である技法に従って、環状基中の任意の環位置で又は縮合環基中の任意の環上で、その置換基と置換され得ることを示すことが意図される。例えば、下付き文字qが0〜4の整数であり、かつ置換基R1の位置が一般的に記載されている、すなわち、結合線構造の任意の頂点、すなわち、特定の環炭素原子に直接結合していない基
【化１０】
2020521018.tif 000012
は、置換基R1が特定の環炭素原子に結合している以下の非限定的な例の基を含む:
【化１１】
2020521018.tif 000013
。
【００６６】
本明細書で使用される場合、「反応性リンカー」という語句は、例えば、
【化１２】
2020521018.tif 000014
(ここで、RG'は反応基であり、SPはスペーサー基である)として示される、反応基及びスペーサー基を含む一価基を指す。本明細書に記載される場合、反応性リンカーは、複数の反応基及び複数のスペーサー基を含むことができる。スペーサー基は、反応基を、別の基、例えば、ペイロードに又は結合剤にも架橋する任意の二価又は三価部分である。反応性リンカー(RL)は、それが結合しているペイロードと一緒に、本明細書に記載される抗体コンジュゲートの調製のための合成前駆体として有用な中間体(「リンカー-ペイロード」)を提供する。反応性リンカーは、別の基、例えば、本明細書に記載される抗体、修飾抗体、もしくはこれらの抗原結合断片、又はシクロデキストリン基の反応性部分と反応することができる官能基又は官能部分である反応基(RG')を含有する。反応基と、連結基を併せ持つ抗体、修飾抗体、又はこれらの抗原結合断片との反応によって生じる部分には、本明細書に記載されるコンジュゲートの「結合剤リンカー」(「BL」)部分が含まれる。ある実施態様において、「反応基」は、抗体又はその抗原結合断片のシステイン又はリジン残基と反応する官能基又は官能部分(例えば、マレイミド又はN-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)エステル)である。ある実施態様において、「反応基」は、クリック化学反応を受けることができる官能基又は官能部分である(例えば、クリック化学、Huisgenの文献、Proc. Chem. Soc. 1961、Wangらの文献、J. Am. Chem. Soc. 2003、及びAgardらの文献、J. Am. Chem. Soc. 2004を参照)。該クリック化学反応のいくつかの実施態様において、反応基は、アジドとの1,3付加環化反応を受けることができるアルキンである。そのような好適な反応基としては、歪みアルキン、例えば、歪み促進アルキン-アジド付加環化(SPAAC)に好適なもの、シクロアルキン、例えば、シクロオクチン、ベンズ環化アルキン、及び銅触媒の非存在下でアルキンとの1,3付加環化反応を受けることができるアルキンが挙げられるが、これらに限定されない。好適なアルキンとしては、ジベンゾアザシクロオクチン又は
【化１３】
2020521018.tif 000015
例えば、
【化１４】
2020521018.tif 000016
、ジベンゾシクロオクチン又は
【化１５】
2020521018.tif 000017
、例えば、
【化１６】
2020521018.tif 000018
、ビアリールアザシクロオクチノン又は
【化１７】
2020521018.tif 000019
、例えば、
【化１８】
2020521018.tif 000020
、二フッ素化シクロオクチン又は
【化１９】
2020521018.tif 000021
、置換、例えば、フッ素化アルキン、アザ-シクロアルキン、ビシクル[6.1.0]ノニン、又は
【化２０】
2020521018.tif 000022
(ここで、Rは、アルキル、アルコキシ、もしくはアシルである)、及びこれらの誘導体、例えば、
【化２１】
2020521018.tif 000023
も挙げられるが、これらに限定されない。特に有用なアルキンとしては、
【化２２】
2020521018.tif 000024
が挙げられる。
【００６７】
そのような反応基を含むリンカー-ペイロードは、アジド基で官能化されている抗体をコンジュゲートするのに有用である。そのような官能化抗体には、アジド-ポリエチレングリコール基で官能化された抗体が含まれる。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも1つのグルタミン残基、例えば、Gln295、Asn297Gln、及び/又はGln55を有する抗体を、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、アミノ基及びアジド基を担持する化合物で処理することにより得られる。
【００６８】
いくつかの例において、バイオコンジュゲーション反応で使用されるアルキンは、Cu(I)クリック化学コンジュゲーション反応に有用である。いくつかの例において、該コンジュゲーション反応で使用されるアルキンは、CBT反応で1,2アミノチオールと反応する。いくつかの例において、使用されるアルキンは、逆電子要求ディールス・アルダー反応におけるBCN、BCNの誘導体、又はtrans-シクロオクテン(TCO)である。例えば、J. Am. Chem. Soc.;(Article), 2012, 134(6), 2950-2953を参照されたい。
【００６９】
いくつかの例において、反応基は、アルキン、例えば、
【化２３】
2020521018.tif 000025
であり、これは、クリック化学反応を介して、アジド、例えば、
【化２４】
2020521018.tif 000026
と反応して、クリック化学反応生成物、例えば、
【化２５】
2020521018.tif 000027
を形成することができる。いくつかの例において、該基は、修飾抗体又はその抗原結合断片上のアジドと反応する。いくつかの例において、反応基は、アルキン、例えば、
【化２６】
2020521018.tif 000028
であり、これは、クリック化学反応を介して、アジド、例えば、
【化２７】
2020521018.tif 000029
と反応して、クリック化学反応生成物、例えば、
【化２８】
2020521018.tif 000030
を形成することができる。いくつかの例において、反応基は、アルキン、例えば、
【化２９】
2020521018.tif 000031
であり、これは、クリック化学反応を介して、アジド、例えば、
【化３０】
2020521018.tif 000032
と反応して、クリック化学反応生成物、例えば、
【化３１】
2020521018.tif 000033
を形成することができる。いくつかの例において、反応基は、官能基、例えば、
【化３２】
2020521018.tif 000034
であり、これは、抗体又はその抗原結合断片上のシステイン残基と反応して、それとの結合、例えば、
【化３３】
2020521018.tif 000035
(ここで、Abは、抗体又はその抗原結合断片を表し、Sは、それを介して該官能基が該Abに結合するシステイン残基上のS原子を表す)を形成する。いくつかの例において、反応基は、官能基、例えば、
【化３４】
2020521018.tif 000036
であり、これは、抗体又はその抗原結合断片上のリジン残基と反応して、それとの結合、例えば、
【化３５】
2020521018.tif 000037
(ここで、Abは、抗体又はその抗原結合断片を表し、NHは、それを介して該官能基が該Abに結合するリジン残基上のNH原子を表す)を形成する。
【００７０】
本明細書で使用される場合、「結合剤リンカー」又は「BL」という語句は、結合剤(例えば、抗体又はその抗原結合断片)を、本明細書に示されるペイロード化合物(例えば、MMAE、ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド)と、及び任意に1以上の側鎖化合物と連結させ、接続させ、又は結合させる任意の二価、三価、又は多価基又は部分を指す。通常、本明細書に記載される抗体コンジュゲートのための好適な結合剤リンカーは、抗体の循環半減期を利用するのに十分に安定であり、同時に、該コンジュゲートの抗原媒介性内在化の後に、そのペイロードを放出することができるものである。リンカーは、切断性又は非切断性であることができる。切断性リンカーは、内在化後の細胞内代謝、例えば、加水分解、還元、又は酵素反応による切断によって切断されるリンカーである。非切断性リンカーは、結合したペイロードを、内在化後の抗体のリソソーム分解によって放出するリンカーである。好適なリンカーとしては、酸不安定性リンカー、加水分解不安定性リンカー、酵素切断性リンカー、還元不安定性リンカー、自壊性リンカー、及び非切断性リンカーが挙げられるが、これらに限定されない。好適なリンカーとしては、ペプチド、グルクロニド、スクシンイミド-チオエーテル、ポリエチレングリコール(PEG)単位、ヒドラゾン、マル-カプロイル単位、ジペプチド単位、バリン-シトルリン単位、及びパラ-アミノベンジル(PAB)単位であるか、又はこれらを含むものも挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、結合剤リンカー(BL)は、反応性リンカー(RL)の反応基(RG)と結合剤、例えば、抗体、修飾抗体、又はこれらの抗原結合断片の反応部分の反応によって形成される部分を含む。
【００７１】
いくつかの例において、BLは、以下の部分:
【化３６】
2020521018.tif 000038
を含み、ここで、
【化３７】
2020521018.tif 000039
は、結合剤との結合である。いくつかの例において、BLは、以下の部分:
【化３８】
2020521018.tif 000040
を含み、ここで、
【化３９】
2020521018.tif 000041
は、結合剤との結合である。いくつかの例において、BLは、以下の部分:
【化４０】
2020521018.tif 000042
を含み、ここで、
【化４１】
2020521018.tif 000043
は、結合剤との結合である。いくつかの例において、BLは、以下の部分:
【化４２】
2020521018.tif 000044
を含み、ここで、
【化４３】
2020521018.tif 000045
は、抗体又はその抗原結合断片のシステインとの結合である。いくつかの例において、BLは、以下の部分:
【化４４】
2020521018.tif 000046
を含み、ここで、
【化４５】
2020521018.tif 000047
は、抗体又はその抗原結合断片のリジンとの結合である。
【００７２】
(化合物及びペイロード)
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、少なくとも1つのペイロード部分に連結され、かつ共有結合性リンカーを介して少なくとも1つのシクロデキストリン部分に連結された結合剤:を含み、ここで、該共有結合性リンカーが、該結合剤、該ペイロード部分、及び該シクロデキストリン部分の各々に直接的に又は間接的に結合している、化合物又はその医薬として許容し得る塩である。
【００７３】
いくつかの他の例において、本明細書に記載されるのは、少なくとも1つのペイロード部分に連結され、かつ共有結合性リンカーを介して少なくとも1つのシクロデキストリン部分に連結されたタンパク質:を含み、ここで、該共有結合性リンカーが、該結合剤、該ペイロード部分、及び該シクロデキストリン部分の各々に直接的に又は間接的に結合している、化合物又はその医薬として許容し得る塩である。
【００７４】
本明細書に例示されているように、いくつかの例において、該結合剤は、共有結合性リンカー、例えば、リジンアミノ酸に直接的に結合している。これは、該結合剤がリジンアミノ酸共有結合性リンカーから1結合位置離れていることを意味する。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、ペイロード部分にも直接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが、限定されないが、MMAE、ステロイド、又は本明細書に示される任意のペイロードなどのペイロードから1結合位置離れていることを意味する。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、シクロデキストリン部分にも直接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが本明細書に示されるシクロデキストリンなどのシクロデキストリンから1結合位置離れていることを意味する。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、リジンアミノ酸又はその誘導体である。
【００７５】
他の例において、該結合剤は、共有結合性リンカーに間接的に結合している。これは、該結合剤が該共有結合性リンカーから1結合位置よりも大きく離れていることを意味する。これは、該結合剤が別の部分を通して該共有結合性リンカーに結合していることも意味する。例えば、該結合剤は、マレイミド基に結合していてもよく、該マレイミド基は、ポリエチレングリコールに結合しており、該ポリエチレングリコールは、該共有結合性リンカーに結合している。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、ペイロード部分にも間接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが、限定されないが、MMAEもしくはステロイド、又は本明細書に示される任意のペイロードなどのペイロードから1結合位置よりも大きく離れていることを意味する。これは、該共有結合性リンカーが別の部分を通してペイロードに結合していることも意味する。例えば、該共有結合性リンカーは、限定されないが、Val-Ala又はVal-Citなどの、ジペプチドに結合していてもよく、該ジペプチドは、PABに結合していてもよく、該PABは、ペイロードに結合していてもよい。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、シクロデキストリン部分にも間接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが、限定されないが、本明細書に記載されるシクロデキストリンなどのシクロデキストリンから1結合位置よりも大きく離れていることを意味する。これは、該共有結合性リンカーが別の部分を通してシクロデキストリンに結合していることも意味する。例えば、該共有結合性リンカーは、ポリエチレングリコール基に結合していてもよく、該ポリエチレングリコール基は、反応基に結合していてもよく、該反応基は、シクロデキストリンに結合していてもよい。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、リジンアミノ酸又はその誘導体である。
【００７６】
1つの例において、本明細書に示されるのは、式(I)による化合物である:
【化４６】
2020521018.tif 000048
。式(I)中、BAは、結合剤であり、Lは、三価リンカーであり、CDは、シクロデキストリン残基であり、下付文字nは、1〜30の整数であり、かつPAは、ペイロード残基である。いくつかの例において、複数の三価リンカーLは、存在していてもよい。ある実施態様において、nは、1〜4である。ある実施態様において、nは4である。ある実施態様において、nは2である。ある実施態様において、nは1である。ある実施態様において、nは3である。
【００７７】
いくつかの例において、式(I)による化合物は、式(Ia)による化合物である:
【化４７】
2020521018.tif 000049
。式(Ia)中、BAは、結合剤であり、LLは、三価リンカーであり、RGは、反応性リンカー残基であり、SPは、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基であり、下付文字nは、1〜30の整数であり;かつPAは、ペイロードである。ある実施態様において、nは、1〜4である。ある実施態様において、nは4である。ある実施態様において、nは2である。ある実施態様において、nは1である。ある実施態様において、nは3である。
【００７８】
いくつかの例において、式(I)による化合物は、式(Ib)又は(Ic)による化合物である:
【化４８】
2020521018.tif 000050
。式(Ib)又は(Ic)のいずれかにおいて、BAは、結合剤であり、LLは、三価リンカーである。SPは、各々の場合に、独立に、非存在であるか又はスペーサーであり、環Aはトリアゾールに縮合しており、かつシクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロシクロアルケニルからなる群から選択され、ここで、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロシクロアルケニルは、アルキル、OH、又はNRaRbで任意に置換されており、ここで、Ra及びRbの各々は、アルキル又はHであり、nは、1〜30の整数であり、かつPAは、ペイロードである。いくつかの例において、環Aは、任意に置換されたシクロアルキルである。いくつかの例において、環Aは、任意に置換されたシクロアルケニルである。いくつかの例において、環Aは、任意に置換されたシクロアルキニルである。いくつかの例において、環Aは、任意に置換されたヘテロシクロアルキルである。いくつかの例において、環Aは、任意に置換されたヘテロシクロアルキニルである。いくつかの例において、式(Ib)又は(Ic)のいずれかに含まれるのは、式(Ib)又は(Ic)のいずれかの化合物の位置異性体、立体異性体、及びこれらの混合物である。
【００７９】
いくつかの例において、式(I)による化合物は、式(Ib)による化合物である。これらの例のいくつかにおいて、式(Ib)による化合物は、式(Ib1)、(Ib2)、(Ib3)、(Ib4)、(Ib5)、又は(Ib6)による化合物である。これらの例のいくつかにおいて、式(Ib)に対するものは、式(Ib1)による化合物である:
【化４９】
2020521018.tif 000051
。式(Ib1)中、BAは、結合剤であり、LLは、三価リンカーであり、SPは、各々の場合に、独立に、非存在であるか又はスペーサーであり、nは、1〜30の整数であり、かつPAは、ペイロードである。また、式(Ib1)に含まれるのは、位置異性体(例えば、トリアゾール結合に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。ある実施態様において、nは、1〜4である。ある実施態様において、nは4である。ある実施態様において、nは2である。ある実施態様において、nは1である。ある実施態様において、nは3である。
【００８０】
これらの例のいくつかにおいて、式(Ib)に対するものは、式(Ib2)による化合物である:
【化５０】
2020521018.tif 000052
。式(Ib2)中、BAは、結合剤であり、LLは、三価リンカーであり、SPは、各々の場合に、独立に、非存在であるか又はスペーサーであり、nは、1〜30の整数であり、かつPAは、ペイロードである。また、式(Ib2)に含まれるのは、位置異性体(例えば、トリアゾール結合に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。ある実施態様において、nは、1〜4である。ある実施態様において、nは4である。ある実施態様において、nは2である。ある実施態様において、nは1である。ある実施態様において、nは3である。
【００８１】
これらの例のいくつかにおいて、式(Ib)に対するものは、式(Ib3)による化合物である:
【化５１】
2020521018.tif 000053
。式(Ib3)中、BAは、結合剤であり、LLは、三価リンカーであり、nは、1〜30の整数であり、かつPAは、ペイロードである。また、式(Ib3)に含まれるのは、位置異性体(例えば、トリアゾール結合に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。ある実施態様において、nは、1〜4である。ある実施態様において、nは4である。ある実施態様において、nは2である。ある実施態様において、nは1である。ある実施態様において、nは3である。
【００８２】
これらの例のいくつかにおいて、式(Ib)に対するものは、式(Ib4)による化合物である:
【化５２】
2020521018.tif 000054
。式(Ib4)中、BAは、結合剤であり、LLは、三価リンカーであり、nは、1〜30の整数であり、かつPAは、ペイロードである。また、式(Ib4)に含まれるのは、位置異性体(例えば、トリアゾール結合に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。ある実施態様において、nは、1〜4である。ある実施態様において、nは4である。ある実施態様において、nは2である。ある実施態様において、nは1である。ある実施態様において、nは3である。
【００８３】
これらの例のいくつかにおいて、式(Ib)に対するものは、式(Ib5)による化合物である:
【化５３】
2020521018.tif 000055
。式(Ib5)中、BAは、結合剤であり、LLは、三価リンカーであり、eは、0〜4の整数であり、nは、1〜30の整数であり、かつPAは、ペイロードである。また、式(Ib5)に含まれるのは、位置異性体(例えば、トライゾール(traizole)結合に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。ある実施態様において、nは、1〜4である。ある実施態様において、nは4である。ある実施態様において、nは2である。ある実施態様において、nは1である。ある実施態様において、nは3である。
【００８４】
これらの例のいくつかにおいて、式(Ib)に対するものは、式(Ib6)による化合物である:
【化５４】
2020521018.tif 000056
。式(Ib6)中、BAは、結合剤であり、LLは、三価リンカーであり、eは、0〜4の整数であり、nは、1〜30の整数であり、かつPAは、ペイロードである。また、式(Ib6)に含まれるのは、位置異性体(例えば、トライゾール(traizole)結合に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。ある実施態様において、nは、1〜4である。ある実施態様において、nは4である。ある実施態様において、nは2である。ある実施態様において、nは1である。ある実施態様において、nは3である。
【００８５】
いくつかの例において、式(I)による化合物は、式(Ic)による化合物である。これらの例のいくつかにおいて、式(Ic)による化合物は、式(Ic1)による化合物である:
【化５５】
2020521018.tif 000057
。式(Ic1)中、BAは、結合剤であり、LLは、三価リンカーであり、nは、1〜30の整数であり、かつPAは、ペイロードである。また、式(Ic1)に含まれるのは、その位置異性体、立体異性体、及び混合物である。ある実施態様において、nは、1〜4である。ある実施態様において、nは4である。ある実施態様において、nは2である。ある実施態様において、nは1である。ある実施態様において、nは3である。
【００８６】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、式(Id)による化合物である:
【化５６】
2020521018.tif 000058
。式(Id)中、BAは、結合剤であり; RGは、反応基残基であり; SP1及びSP2は、各々の場合、各々独立に、非存在又はスペーサー基残基であり、かつSP1は、三価リンカーを含み; AA1は、アミノ酸残基を含む三価リンカーであり; AA2は、ジペプチド残基であり; PEGは、ポリエチレングリコール残基であり; PABは、
【化５７】
2020521018.tif 000059
であり、ここで、
【化５８】
2020521018.tif 000060
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し、CDは、各々の場合に、独立に、非存在又はシクロデキストリン残基であり、ここで、少なくとも1つのCDは存在しており、下付文字nは、1〜30の整数であり;下付文字mは、0〜5の整数であり;下付文字pは、0又は1であり;かつPAは、ペイロード部分である。これらの例において、下付文字mは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。いくつかの例において、下付文字mは5である。いくつかの例において、下付文字pは0である。いくつかの例において、下付文字pは1である。いくつかの例において、AA1又はAA2のいずれか1つは、各々の場合に、独立に、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリンから選択されるアミノ酸、これらの誘導体、又はこれらの組合せを含む。ある実施態様において、AA1は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリンから選択されるアミノ酸、これらの誘導体、又はこれらの組合せである。ある実施態様において、AA1は、リジンである。ある実施態様において、AA1は、リジン又はリジンの誘導体である。ある実施態様において、AA2は、バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、シトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、AA2は、アラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グリシン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA1-AA2は、グルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA1-AA2は、グルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA1-AA2は、リジン-バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、AA1-AA2は、リジン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA1-AA2は、グルタミン-バリン-シトルリンである。ある実施態様において、リジンは、L-リジンである。ある実施態様において、リジンは、D-リジンである。いくつかの例において、SP1は、各々の場合に、独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eは、0〜4の整数であり、下付文字uは、1〜8の整数であり、かつ下付文字vは、1〜8の整数である。いくつかの例において、SP2は、各々の場合に、独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選��され、ここで、下付文字eは、0〜4の整数であり、下付文字uは、1〜8の整数であり、かつ下付文字vは、1〜8の整数である。
【００８７】
式(Id)のいくつかの例において、CDは、構造:
【化５９】
2020521018.tif 000061
による修飾CD基であり、ここで、RGは、各々の場合に、独立に;反応性リンカー残基であり、SP3は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eは、0〜4の整数であり、下付文字uは、1〜8の整数であり、かつ下付文字vは、1〜8の整数であり; qは、0〜5の整数であり、かつ
【化６０】
2020521018.tif 000062
は、該修飾CD基がSP1又はAA1に結合している原子を表す。
【００８８】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、式(Ie)による化合物である:
【化６１】
2020521018.tif 000063
。式(Ie)中、BAは、結合剤であり; RGは、各々の場合に、独立に、反応性リンカー残基であり; SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり; AA2は、ジペプチド残基であり; PEGは、ポリエチレングリコール残基であり; PABは、
【化６２】
2020521018.tif 000064
であり、ここで、
【化６３】
2020521018.tif 000065
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し、CDは、シクロデキストリン残基であり;下付文字nは、1〜30の整数であり;下付文字mは、0〜5の整数であり;下付文字pは、0又は1であり;かつPAは、ペイロード部分である。これらの例において、下付文字mは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。いくつかの例において、下付文字mは5である。いくつかの例において、下付文字pは0である。いくつかの例において、下付文字pは1である。いくつかの例において、AA1又はAA2のいずれか1つは、各々の場合に、独立に、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリンから選択されるアミノ酸、これらの誘導体、又はこれらの組合せを含む。ある実施態様において、AA2は、バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、シトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、AA2は、アラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グリシン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、リジン-バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、AA2は、リジン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの例において、SP2は、各々の場合に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eは、0〜4の整数であり、下付文字uは、1〜8の整数であり、かつ下付文字vは、1〜8の整数である。
【００８９】
いくつかの例において、式(1e)による化合物は、式(Ie1)による化合物である:
【化６４】
2020521018.tif 000066
。式(1e1)中、BAは、結合剤であり; RGは、反応性リンカー残基であり; SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり; AA2は、ジペプチド残基であり; PEGは、ポリエチレングリコール残基であり; PABは、
【化６５】
2020521018.tif 000067
であり、ここで、
【化６６】
2020521018.tif 000068
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し; CDは、シクロデキストリン残基であり;下付文字nは、1〜30の整数であり、下付文字mは、0〜5の整数であり、下付文字pは、0又は1であり、かつPAは、ペイロード部分である。これらの例において、下付文字mは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。いくつかの例において、下付文字mは5である。いくつかの例において、下付文字pは0である。いくつかの例において、下付文字pは1である。いくつかの例において、AA2は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリンから選択されるアミノ酸、これらの誘導体、又はこれらの組合せを含む。ある実施態様において、AA2は、バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、シトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、AA2は、アラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グリシン-バリンである。
【００９０】
いくつかの例において、式(1e)による化合物は、式(Ie2)による化合物である:
【化６７】
2020521018.tif 000069
。式(1e2)中、BAは、結合剤であり; RGは、反応性リンカー残基であり; SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり; AA2は、ジペプチド残基であり; PEGは、ポリエチレングリコール残基であり; PABは、
【化６８】
2020521018.tif 000070
であり、ここで、
【化６９】
2020521018.tif 000071
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し; CDは、シクロデキストリン残基であり;下付文字nは、1〜30の整数であり;下付文字mは、0〜5の整数であり;下付文字pは、0又は1であり;かつPAは、ペイロード部分である。これらの例において、下付文字mは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。いくつかの例において、下付文字mは5である。いくつかの例において、下付文字pは0である。いくつかの例において、下付文字pは1である。いくつかの例において、AA2は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリンから選択されるアミノ酸、これらの誘導体、又はこれらの組合せを含む。ある実施態様において、AA2は、バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、シトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、AA2は、アラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グリシン-バリンである。
【００９１】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、式(If)の化合物である:
【化７０】
2020521018.tif 000072
。式(If)中、BAは、結合剤であり; RGは、各々の場合に、独立に;反応性リンカー残基であり、SP1、SP2、及びSP3は、各々の場合に、各々独立に、非存在又はスペーサー基残基であり; AA2は、ジペプチド残基であり; PEGは、ポリエチレングリコール残基であり; PABは、
【化７１】
2020521018.tif 000073
であり、ここで、
【化７２】
2020521018.tif 000074
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し; CDは、シクロデキストリン残基であり;下付文字nは、1〜30の整数であり、下付文字mは、0〜5の整数であり、下付文字pは、0又は1であり、下付文字qは、0〜5の整数であり;かつPAは、ペイロード部分である。式(If)のいくつかの例において、SP1は、非存在であり、かつSP2は、各々の場合に、独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eは、0〜4の整数であり、下付文字uは、1〜8の整数であり、かつ下付文字vは、1〜8の整数である。いくつかの例において、AA2は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリンから選択されるアミノ酸、これらの誘導体、又はこれらの組合せを含む。ある実施態様において、AA2は、バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、シトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、AA2は、アラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グリシン-バリンである。
【００９２】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、式(I)の化合物は、少なくとも1つのCD基を含む。具体的な例において、式(I)の化合物は、本明細書に記載される式(Ie)、式(Ie1)、又は式(Ie2)の化合物であり、かつ1つのCD基を含む。別の具体的な例において、式(I)の化合物は、本明細書に記載される式(If)の化合物であり、かつ1つのCD基を含む。
【００９３】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に、シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、α-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、β-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、γ-シクロデキストリンである。これらの例のいずれかにおいて、α-、β-、又はγ-シクロデキストリンは、任意に置換されている。
【００９４】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に、α-シクロデキストリン、β-シクロデキストリン、及びγ-シクロデキストリンからなる群から選択される。いくつかの例において、CDは、α-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、β-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、γ-シクロデキストリンである。
【００９５】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に:
【化７３】
2020521018.tif 000075
から選択され、ここで、
【化７４】
2020521018.tif 000076
は、該CDが該式中の隣接する基に結合している原子を示す。ある例において、CDは、
【化７５】
2020521018.tif 000077
である。ある例において、CDは、
【化７６】
2020521018.tif 000078
である。
【００９６】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に、
【化７７】
2020521018.tif 000079
から選択される。いくつかの例において、CDは、
【化７８】
2020521018.tif 000080
である。いくつかの例において、CDは、
【化７９】
2020521018.tif 000081
である。いくつかの例において、CDは、
【化８０】
2020521018.tif 000082
である。いくつかの例において、CDは、
【化８１】
2020521018.tif 000083
である。いくつかの例において、CDは、
【化８２】
2020521018.tif 000084
である。いくつかの例において、CDは、
【化８３】
2020521018.tif 000085
である。
【００９７】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、RGは、各々の場合に、独立に、クリック化学残基である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、RGは、各々の場合に、独立に、トリアゾール又は縮合トリアゾールを含む。
【００９８】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、RGは、各々の場合に、独立に、
【化８４】
2020521018.tif 000086
からなる群から選択され、ここで、
【化８５】
2020521018.tif 000087
は、該RGが該式中の隣接する基に結合している原子を示す。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化８６】
2020521018.tif 000088
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化８７】
2020521018.tif 000089
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化８８】
2020521018.tif 000090
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化８９】
2020521018.tif 000091
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化９０】
2020521018.tif 000092
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化９１】
2020521018.tif 000093
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化９２】
2020521018.tif 000094
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化９３】
2020521018.tif 000095
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化９４】
2020521018.tif 000096
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化９５】
2020521018.tif 000097
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化９６】
2020521018.tif 000098
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化９７】
2020521018.tif 000099
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化９８】
2020521018.tif 000100
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化９９】
2020521018.tif 000101
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化１００】
2020521018.tif 000102
である。
【００９９】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、式(I)の化合物は、基
【化１０１】
2020521018.tif 000103
を含み、これは、
【化１０２】
2020521018.tif 000104
2020521018.tif 000105
2020521018.tif 000106
2020521018.tif 000107
2020521018.tif 000108
からなる群から選択され、ここで、
【化１０３】
2020521018.tif 000109
は、結合剤、例えば、抗体又はその抗原結合断片との結合を示し、かつここで、R9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2である。
【化１０４】
2020521018.tif 000110
は、シクロデキストリンとの結合を示す。
【化１０５】
2020521018.tif 000111
は、ペイロードとの結合を示す。ある例において、R9は、-CH3である。ある例において、R9は、-(CH2)3N(H)C(O)NH2である。これらの例において、該抗体又はその抗原結合断片は、
【化１０６】
2020521018.tif 000112
が結合している基に直接的に又は間接的に結合していてもよい。いくつかの例において、該抗体又はその抗原結合断片が、
【化１０７】
2020521018.tif 000113
に結合している基に間接的に結合している場合。該抗体又はその抗原結合断片が
【化１０８】
2020521018.tif 000114
が結合している基に間接的に結合しているいくつかの例において、
【化１０９】
2020521018.tif 000115
は、
【化１１０】
2020521018.tif 000116
であり、ここで、下付文字xは、1〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字xは1である。いくつかの例において、下付文字xは2である。いくつかの例において、下付文字xは3である。いくつかの例において、下付文字xは4である。本明細書において、Abは、抗体又はその抗原結合断片である。いくつかの例において、図示されているPEG基、すなわち、
【化１１１】
2020521018.tif 000117
は、Ab上のグルタミンに結合している。本段落に示され、かつ本明細書中の他の実施態様において記載され又は示されるいくつかの例において、リンカー内のリジン側鎖は、L-リジン又はD-リジン由来のものである。本段落に示され、かつ本明細書中の他の実施態様において記載され又は示されるいくつかの例において、該リンカー内のリジン側鎖の立体化学は、(R)である。本段落に示され、かつ本明細書中の他の実施態様において記載され又は示されるいくつかの例において、該リンカー内のリジン側鎖の立体化学は、(S)である。
【０１００】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、式(I)の化合物は、基
【化１１２】
2020521018.tif 000118
を含み、これは、
【化１１３】
2020521018.tif 000119
2020521018.tif 000120
2020521018.tif 000121
2020521018.tif 000122
2020521018.tif 000123
2020521018.tif 000124
からなる群から選択される。
【０１０１】
またこれらの例に含まれるのは、その医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体形態、これらの位置異性体、又はこれらの位置異性体の混合物であり、ここで、各々の
【化１１４】
2020521018.tif 000125
は、該結合剤との結合であり;各々の
【化１１５】
2020521018.tif 000126
は、該ペイロードとの結合であり;かつR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2である。いくつかの例において、R9は、-CH3である。いくつかの例において、R9は、-(CH2)3N(H)C(O)NH2である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１１６】
2020521018.tif 000127
は、
【化１１７】
2020521018.tif 000128
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１１８】
2020521018.tif 000129
は、
【化１１９】
2020521018.tif 000130
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１２０】
2020521018.tif 000131
は、
【化１２１】
2020521018.tif 000132
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１２２】
2020521018.tif 000133
は、
【化１２３】
2020521018.tif 000134
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１２４】
2020521018.tif 000135
は、
【化１２５】
2020521018.tif 000136
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１２６】
2020521018.tif 000137
は、
【化１２７】
2020521018.tif 000138
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１２８】
2020521018.tif 000139
は、
【化１２９】
2020521018.tif 000140
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１３０】
2020521018.tif 000141
は、
【化１３１】
2020521018.tif 000142
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１３２】
2020521018.tif 000143
は、
【化１３３】
2020521018.tif 000144
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１３４】
2020521018.tif 000145
は、
【化１３５】
2020521018.tif 000146
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１３６】
2020521018.tif 000147
は、
【化１３７】
2020521018.tif 000148
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１３８】
2020521018.tif 000149
は、
【化１３９】
2020521018.tif 000150
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１４０】
2020521018.tif 000151
は、
【化１４１】
2020521018.tif 000152
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１４２】
2020521018.tif 000153
は、
【化１４３】
2020521018.tif 000154
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１４４】
2020521018.tif 000155
は、
【化１４５】
2020521018.tif 000156
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１４６】
2020521018.tif 000157
は、
【化１４７】
2020521018.tif 000158
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１４８】
2020521018.tif 000159
は、
【化１４９】
2020521018.tif 000160
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１５０】
2020521018.tif 000161
は、
【化１５１】
2020521018.tif 000162
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１５２】
2020521018.tif 000163
は、
【化１５３】
2020521018.tif 000164
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１５４】
2020521018.tif 000165
は、
【化１５５】
2020521018.tif 000166
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１５６】
2020521018.tif 000167
は、
【化１５７】
2020521018.tif 000168
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１５８】
2020521018.tif 000169
は、
【化１５９】
2020521018.tif 000170
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１６０】
2020521018.tif 000171
は、
【化１６１】
2020521018.tif 000172
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１６２】
2020521018.tif 000173
は、
【化１６３】
2020521018.tif 000174
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１６４】
2020521018.tif 000175
は、
【化１６５】
2020521018.tif 000176
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１６６】
2020521018.tif 000177
は、
【化１６７】
2020521018.tif 000178
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１６８】
2020521018.tif 000179
は、
【化１６９】
2020521018.tif 000180
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１７０】
2020521018.tif 000181
は、
【化１７１】
2020521018.tif 000182
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１７２】
2020521018.tif 000183
は、
【化１７３】
2020521018.tif 000184
である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、
【化１７４】
2020521018.tif 000185
は、
【化１７５】
2020521018.tif 000186
である。
【０１０２】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に、シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、α-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、β-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、γ-シクロデキストリンである。これらの例のいずれかにおいて、α-、β-、又はγ-シクロデキストリンは、任意に置換されている。
【０１０３】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に、α-シクロデキストリン、β-シクロデキストリン、及びγ-シクロデキストリンからなる群から選択される。いくつかの例において、CDは、α-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、β-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、γ-シクロデキストリンである。
【０１０４】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に:
【化１７６】
2020521018.tif 000187
から選択され、ここで、
【化１７７】
2020521018.tif 000188
は、該CDが該式中の隣接する基に結合している原子を示す。ある例において、CDは、
【化１７８】
2020521018.tif 000189
である。ある例において、CDは、
【化１７９】
2020521018.tif 000190
である。
【０１０５】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、式(I)の化合物は、
【化１８０】
2020521018.tif 000191
2020521018.tif 000192
2020521018.tif 000193
2020521018.tif 000194
2020521018.tif 000195
2020521018.tif 000196
2020521018.tif 000197
2020521018.tif 000198
2020521018.tif 000199
2020521018.tif 000200
から選択される基を含む。またこれらの例に含まれるのは、その医薬として許容し得る塩、溶媒和物、立体異性体形態、これらの位置異性体、又はこれらの位置異性体の混合物であり、ここで、各々の
【化１８１】
2020521018.tif 000201
は、該結合剤との結合であり;かつ各々の
【化１８２】
2020521018.tif 000202
は、該ペイロードとの結合である。
【０１０６】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、-LL-は、式(LL1)によるものである:
【化１８３】
2020521018.tif 000203
。式(LL1)中、RAA1、RAA2、及びRAA3は、各々独立に、アミノ酸側鎖であり、そのうちの少なくとも1つは、直接的に又は間接的に-SP-RG-SP-CDに結合している。いくつかの例において、SPは、非存在であってもよい。いくつかの例において、SPは、非存在ではない。いくつかの例において、式(LL1)中、RAA1、RAA2、及びRAA3は、各々独立に、アミノ酸側鎖であり、そのうちの少なくとも1つは、-RG-CDに直接的に又は間接的に結合している。いくつかの例において、RAA1は、リジンアミノ酸側鎖である。いくつかの例において、RAA1は、L-リジンアミノ酸側鎖である。いくつかの例において、RAA1は、D-リジンアミノ酸側鎖である。いくつかの例において、RAA2は、バリンアミノ酸側鎖である。いくつかの例において、RAA3は、アラニンアミノ酸側鎖である。いくつかの例において、RAA3は、シトルリンアミノ酸側鎖である。ある例において、RAA1は、CDに直接的に又は間接的に結合したリジンアミノ酸側鎖であり、RAA2及びRAA3は、独立に、バリン及びアラニンアミノ酸側鎖である。ある例において、RAA1は、CDに直接的に又は間接的に結合したリジンアミノ酸側鎖であり、RAA2及びRAA3は、独立に、バリン及びシトルリンアミノ酸側鎖である。
【０１０７】
いくつかの例において、LLは、
【化１８４】
2020521018.tif 000204
を含む。いくつかの例において、LLは、
【化１８５】
2020521018.tif 000205
を含む。
【０１０８】
いくつかの例において、LLは、
【化１８６】
2020521018.tif 000206
を含む。いくつかの例において、LLは、
【化１８７】
2020521018.tif 000207
を含む。
【０１０９】
いくつかの例において、SP、SP1、SP2、又はこれらの組合せは、スペーサー基である。いくつかの例において、SPは、各々の場合に、独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eは、0〜4の整数であり、下付文字uは、1〜8の整数であり、かつ下付文字vは、1〜8の整数である。いくつかの例において、SP1は、各々の場合に、独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eは、0〜4の整数であり、下付文字uは、1〜8の整数であり、かつ下付文字vは、1〜8の整数である。いくつかの例において、SP2は、各々の場合に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eは、0〜4の整数であり、下付文字uは、1〜8の整数であり、かつ下付文字vは、1〜8の整数である。
【０１１０】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字m、q、又はeは1である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字mは1である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字qは1である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字eは1である。
【０１１１】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字m、q、又はeは2である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字mは2である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字qは2である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字eは2である。
【０１１２】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字m、q、又はeは3である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字mは3である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字qは3である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字eは3である。
【０１１３】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字m、q、又はeは4である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字mは4である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字qは4である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字eは4である。
【０１１４】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字pは1である。
【０１１５】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは、2〜4である。
【０１１６】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは2である。
【０１１７】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは3である。
【０１１８】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは4である。
【０１１９】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、該結合剤(BA)は、任意のポリペプチドから選択される。例となるポリペプチドとしては、天然ポリペプチド及び非天然ポリペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。例となるポリペプチドとしては、遺伝子改変生物から産生されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２０】
本明細書中のポリペプチドには、受容体、タンパク質、酵素、結合剤、乳ペプチド、リボソームペプチド、非リボソームペプチド、ペプトン、及びペプチド断片が含まれるが、これらに限定されない。本明細書中のポリペプチドには、抗微生物ペプチド、タキキニンペプチド、血管作動性腸ペプチド、膵臓ポリペプチド関連ペプチド、オピオド(opiod)ペプチド、及びカルシトニンペプチドが含まれるが、これらに限定されない。本開示に含まれる他のペプチドには、B型ナトリウム利尿ペプチド(BNP)、ラクトトリペプチド、ニューロペプチド、リポペプチド、プロテアーゼ、又はホルモンが含まれるが、これらに限定されない。
【０１２１】
ポリペプチドには、一体的に結合した2以上のアミノ酸を含む短いアミノ酸鎖がさらに含まれるが、これらに限定されない。ポリペプチドには、ぞれぞれ、一体的に結合した2つ、3つ、又は4つのアミノ酸を有する、ジペプチド(Val-Cit)、トリペプチド、及びテトラペプチド(例えば、Val-Gly-Ser-Ala)が含まれるが、これらに限定されない。ポリペプチドには、5以上のアミノ酸を含むより長い鎖が含まれる。ポリペプチドには、50以上のアミノ酸(例えば、タンパク質)を含む長い鎖が含まれる。いくつかの例において、本明細書中のポリペプチドは、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、ヘキサペプチド、ヘプタペプチド、オクタペプチド、ノナペプチド、デカペプチド、ウンデカペプチド、及びイコサペプチドから選択される。
【０１２２】
ポリペプチドには、タンパク質が含まれる。いくつかの例において、タンパク質には、天然アミノ酸のみが含まれる。いくつかの例において、タンパク質には、非天然アミノ酸がさらに含まれる。
【０１２３】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、該結合剤(BA)は、抗体又はその抗原結合断片である。ある例において、該結合剤は、AXL、BAFFR、BCMA、BCR-リスト構成要素、BDCA2、BDCA4、BTLA、BTNL2、BTNL3、BTNL8、BTNL9、C10又はf54、CCR1、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR9、CCR10、CD11c、CD137、CD138、CD14、CD168、CD177、CD19、CD20、CD209、CD209L、CD22、CD226、CD248、CD25、CD27、CD274、CD276、CD28、CD30、CD300A、CD33、CD37、CD38、CD4、CD40、CD44、CD45、CD46、CD48、CD5、CD52、CD55、CD56、CD59、CD62E、CD68、CD69、CD70、CD74、CD79a、CD79b、CD8、CD80、CD86、CD90.2、CD96、CLEC12A、CLEC12B、CLEC7A、CLEC9A、CR1、CR3、CRTAM、CSF1R、CTLA4、CXCR1/2、CXCR4、CXCR5、DDR1、DDR2、DEC-205、DLL4、DR6、FAP、FCamR、FCMR、FcR's、FELD1、Fire、GITR、HER2、HHLA2、HLAクラスII、HVEM、ICOSLG、IFNLR1、IL10R1、IL10R2、IL12R、IL13RA1、IL13RA2、IL15R、IL17RA、IL17RB、IL17RC、IL17RE、IL20R1、IL20R2、IL21R、IL22R1、IL22RA、IL23R、IL27R、IL29R、IL2Rg、IL31R、IL36R、IL3RA、IL4R、IL6R、IL5R、IL7R、IL9R、インテグリン、LAG3、LIFR、MAG/シグレック-4、MMR、MSR1、NCR3LG1、NKG2D、NKp30、NKp46、PDCD1、PRLR、PROKR1、PVR、PVRIG、PVRL2、PVRL3、RELT、SIGIRR、シグレック-1、シグレック-10、シグレック-5、シグレック-6、シグレック-7、シグレック-8、シグレック-9、SIRPA、SLAMF7、TACI、TCR-リスト構成要素/会合体、PTCRA、TCRb、CD3z、CD3、TEK、TGFBR1、TGFBR2、TGFBR3、TIGIT、TLR2、TLR4、TROY、TSLPR、TYRO、VLDLR、VSIG4、及びVTCN1からなる群から選択される抗原に選択的な抗体又はその抗原結合断片である。
【０１２４】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、PAは、ドラスタチン、オーリスタチン、メイタンシノイド、植物アルカロイド、タキサン、ビンカアルカロイド、ステロイド、及びLXRモジュレーターからなる群から選択される基の残基である。いくつかの場合において、PAは、ドラスタチンである。いくつかの場合において、PAは、オーリスタチンである。いくつかの場合において、PAは、メイタンシノイドである。いくつかの場合において、PAは、植物アルカロイドである。いくつかの場合において、PAは、タキサンである。いくつかの場合において、PAは、ビンカアルカロイドである。いくつかの場合において、PAは、ステロイドである。いくつかの場合において、PAは、LXRモジュレーターである。いくつかの場合において、LXRモジュレーターは、LXRアゴニストである。いくつかの実施態様において、LXRモジュレーターは、LXRアンタゴニストである。他の好適なペイロードとしては、疎水性が高いもの、例えば、その疎水性の性質のためにAbコンジュゲーション条件に適さないもの、例えば、ピロロベンゾジアゼピン(PBDs)、SN38(7-エチル-10-ヒドロキシ-カンプトテシン)などのようなペイロードが挙げられる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、PAが疎水性ペイロード部分である抗体-薬物コンジュゲートである。
【０１２５】
いくつかの例において、PAは、図1のいずれか1つに示される任意の化合物である。
【０１２６】
ある実施態様において、PAは、オーリスタチンである。ある実施態様において、PAは、オーリスタチンE、オーリスタチンF、モノメチルオーリスタチン-D(MMAD)、モノメチルオーリスタチン-E(MMAE)、又はモノメチルオーリスタチンF(MMAF)である。
【化１８８】
2020521018.tif 000208
【０１２７】
ある実施態様において、PAは、メイタンシノイドである。メイタンシノイドは、当業者によって好適であるとみなされる任意のメイタンシノイドペイロードであることができる。米国特許出願公開第2016/0375147号として公開された、「メイタンシノイド誘導体、そのコンジュゲート、及び使用方法(MAYTANSINOID DERIVATIVES, CONJUGATES THEREOF, AND METHODS OF USE)」と題する、2016年3月25日に出願された米国非仮出願第15/081,759号、及び米国特許第9,950,076号として発行された、「メイタンシノイド誘導体、そのコンジュゲート、及び使用方法(MAYTANSINOID DERIVATIVES, CONJUGATES THEREOF, AND METHODS OF USE)」と題する、2017年1月24日に出願された米国非仮出願第15/414,537号に開示されているメイタンシノイドペイロードは、引用により本明細書中に組み込まれる。ある実施態様において、PAは、DM1、DM3、又はDM4である。ある実施態様において、PAは、
【化１８９】
2020521018.tif 000209
である。ある実施態様において、PAは、
【化１９０】
2020521018.tif 000210
であり、ここで、Aは、任意に置換されたアリーレン又はヘテロアリーレンである。ある実施態様において、PAは、
【化１９１】
2020521018.tif 000211
である。特定の実施態様において、波線は、LLとの結合を示す。
【０１２８】
ある実施態様において、式(I)の化合物中のペイロードは、式(A)の構造を有するグルココルチコイド又はその医薬として許容し得る立体異性体もしくは誘導体である:
【化１９２】
2020521018.tif 000212
(式中:
R1及びR2は、独立に、-H、アルキル、アルキル-C(O)-O-、-OH、もしくはハロであるか;又はR1及びR2は、一緒に、
【化１９３】
2020521018.tif 000213
を形成し、
ここで、R4は、アルキル、アリール、アリールアルキル、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、該アルキル、アリール、アリールアルキル、及びN-含有ヘテロシクロアルキルは、各々の場合に、独立に、-NRAaRAbで任意に置換されており;
R3は、-OH、RZ-C(O)-X-、ヘテロアルキル、ピペリジニル、-NRAaRAb、-オキシアリール-NRAaRAb、又は-Z-A'(RP)tであり;
R5は、各々の場合に、独立に、-OH、ハロ、アルキル、又はアリールアルキルであり;
RZは、アルキルであり;
Xは、O又はNRAaであり;
Zは、S、S(O)、S(O)2、SO2NRAa、O、C(O)NRAa、C(O)、又はNRAaであり;
A'は、アリール、アリールアルキル、又はヘテロアリールであり;
RP、各々の場合に、独立に、ハロ、任意に置換されたアルキル、-OH、又は-NRAaRAbであり;
RAa及びRAbは、各々の場合に、独立に、-H、任意に置換されたアルキル、又は任意に置換されたアリールであり;
下付文字aは、0〜19の整数であり;かつ
tは、1〜3の整数であり;
ただし:
(1)(a)R1が-OHである場合、又は(b)R1及びR2が、一緒に、
【化１９４】
2020521018.tif 000214
(ここで、R4は、C1-9アルキルもしくは
【化１９５】
2020521018.tif 000215
である)を形成する場合、R3は、-OHではなく、かつ
(2)R3は、
【化１９６】
2020521018.tif 000216
ではない。
【０１２９】
いくつかの実施態様において、R3は、NH2である。そのような実施態様のいくつかにおいて、R3は、
【化１９７】
2020521018.tif 000217
であり、ここで、
【化１９８】
2020521018.tif 000218
は、R3が式(I)中の隣接する基に結合している原子を示す。
【０１３０】
ある実施態様において、PAは、ステロイドである。ある実施態様において、PAは、
【化１９９】
2020521018.tif 000219
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体から選択される。式1110〜1140のいずれかによるある実施態様において、R3は、-O-アリール、-NRAaRAb、-アルキレン-NRAaRAb、-X-アリーレン-Y-NRAaRAb、-X-ヘテロアリーレン-Y-NRAaRAb、又はN-含有ヘテロシクロアルキルであり;ここで、Xは、非存在、-N-、-CH2-、又は-O-であり;ここで、Yは、非存在又は-CH2-であり;かつR4は、アルキル、アリール、アルキルアリール、又はアリールアルキルである。ある実施態様において、R3は、-O-アリーレン-NRAaRAb、-O-ヘテロアリーレン-NRAaRAbであり;ここで、アリール又はヘテロアリールは、ハロゲン、ジュウテリウム、ヒドロキシル、又はメトキシルで任意に置換されている。ある実施態様において、R3は、-O-フェニル-NRAaRAb、-O-ヘテロアリーレン-NRAaRAbであり;ここで、フェニル又はヘテロアリールは、ハロゲン又はジュウテリウムで任意に置換されている。ある実施態様において、R4は、n-プロピルである。ある実施態様において、RAa及びRAbは、各々独立に、水素又はアルキルである。特定の実施態様において、RAa及びRAbのうちの1つは、LLとの結合で置換されている。ある実施態様において、PAは、
【化２００】
2020521018.tif 000220
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体である。ある実施態様において、PAは、
【化２０１】
2020521018.tif 000221
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体である。ある実施態様において、PAは、
【化２０２】
2020521018.tif 000222
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体である。ある実施態様において、PAは、
【化２０３】
2020521018.tif 000223
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体である。ある実施態様において、PAは、
【化２０４】
2020521018.tif 000224
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体である。ある実施態様において、PAは、
【化２０５】
2020521018.tif 000225
又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体である。そのような実施態様において、波線は、LLとの結合を示す。
【０１３１】
本明細書に示されるのは、以下の構造:
【化２０６】
2020521018.tif 000226
2020521018.tif 000227
2020521018.tif 000228
を有する式(A)のペイロード又はその医薬として許容し得る立体異性体でもある。ある実施態様において、該コンジュゲートは、該ペイロードの一級又は二級アミンの残基との結合を介してリンカーに連結した上記のペイロードを含む。「ステロイド及びそのタンパク質コンジュゲート(STEROIDS AND PROTEIN-CONJUGATES THEREOF)」と題する、2017年11月7日に出願された米国非仮出願第15/806,197号に開示されているステロイドペイロードは、引用により本明細書中に組み込まれる。
【０１３２】
ある実施態様において、PAは、肝臓X受容体(LXR)モジュレーターである。ある実施態様において、PAは、式Bによるもの又は医薬として許容し得る塩、溶媒和物、もしくは立体異性体形態である:
【化２０７】
2020521018.tif 000229
(式中、
Wは、-CH2-、-N(H)-、又は-O-であり;
RB1は、-H、-OH、-NH2、アルキル、又は-OP(O)(OR6)2であり;
RB2は、-H、-OH、-CH2NH2、RB3、RB4、RB5、又は-O-RB5であり、ここで、RB1及びRB2は、同時に、-Hであることはなく;
RB3は、-N(R6)2であり;
RB4は、-X-Y-Zであり;
Xは、-O-及び-N(H)- からなる群から選択され;
Yは、アルキレン、置換アルキレン(限定されないが、オキソ置換、すなわち、=O)を含む)、ヘテロアルキレン、及び置換ヘテロアルキレン(限定されないが、オキソ置換(すなわち、=O)を含む)からなる群から選択され;
Zは、-OH及び-NH2からなる群から選択され;
RB5は、アルキル、ヘテロシクロアルキル、又は置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、各々のヘテロシクロアルキル又は置換ヘテロシクロアルキルは、窒素及び酸素から選択される1つ、2つ、又は3つのヘテロ原子を含み、かつ少なくとも1つの-OH及び-CH2OH置換基、又は少なくとも1つの一級もしくは二級窒素、例えば、O-グルコースを含み;
各々のR6は、各々の場合に、-H、アミノ酸残基、N-アルキルアミノ酸残基、ペプチド、又はアルキルであり;かつ
各々のR7は、独立に、ハロ、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、-CN、O-グルコース、O-アミノ酸残基、及びO-PEGbであり、ここで、各々の下付文字bは、0〜3の整数である。特定の実施態様において、RB1又はRB2は、LLとの結合で置換されている。ある実施態様において、PAは:
【化２０８】
2020521018.tif 000230
から選択される。特定の実施態様において、波線は、LLとの結合を示す。
【０１３３】
ある実施態様において、式(B)のペイロードは:
【化２０９】
2020521018.tif 000231
2020521018.tif 000232
又はその医薬として許容し得る立体異性体形態からなる群から選択される。ある実施態様において、該コンジュゲートは、ペイロードの一級又は二級アミンの残基との結合を介してリンカーに連結した上記のペイロードを含む。「ビス-オクタヒドロフェナントレンカルボキサミド及びそのタンパク質コンジュゲート(BIS-OCTAHYDROPHENANTHRENE CARBOXAMIDES AND PROTEIN CONJUGATES THEREOF)」と題する、2017年5月18日に出願された米国非仮出願第62/508,327号に開示されているLXRモジュレーターペイロードは、引用により本明細書中に組み込まれる。
【０１３４】
また、本明細書に提示される実施態様の範囲内で想定されるのは、米国特許出願公開第2016/0030591号として公開された、「生体活性分子、そのコンジュゲート、及び治療的使用(BIOLOGICALLY ACTIVE MOLECULES, CONJUGATES THEREOF, AND THERAPEUTIC USES)」と題する、2015年9月14日に出願された米国非仮出願第14/776,668号、及び米国特許出願公開第2016/0354482号として公開された、「マクロライドジアステレオマーを含む医薬組成物、その合成方法、及び治療的使用(PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS COMPRISING MACROLIDE DIASTEREOMERS, METHODS OF THEIR SYNTHESIS AND THERAPEUTIC USES)」と題する、2016年2月23日に出願された米国非仮出願第14/913,965号に開示されているペイロードであり、該ペイロードの開示は、引用により本明細書中に組み込まれる。
【０１３５】
いくつかの例において、式(I)の化合物は:
【化２１０】
2020521018.tif 000233
2020521018.tif 000234
2020521018.tif 000235
2020521018.tif 000236
2020521018.tif 000237
2020521018.tif 000238
2020521018.tif 000239
2020521018.tif 000240
2020521018.tif 000241
2020521018.tif 000242
もしくはこれらの位置異性体、立体異性体形態、医薬として許容し得る塩、溶媒和物、又はこれらの混合物から選択され、ここで、Abは、抗体又はその抗原結合断片である。これらの例において、Abは、連結されたペイロードに直接的に又は間接的に結合していてもよい。いくつかの例において、Abがリンカー-ペイロードに間接的に結合している場合、
【化２１１】
2020521018.tif 000243
は、
【化２１２】
2020521018.tif 000244
であり、ここで、下付文字xは、1〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字xは1である。いくつかの例において、下付文字xは2である。いくつかの例において、下付文字xは3である。いくつかの例において、下付文字xは4である。本明細書において、Abは、抗体又はその抗原結合断片である。いくつかの例において、図示されているPEG基、すなわち、
【化２１３】
2020521018.tif 000245
は、Ab上のグルタミンに結合している。ある実施態様において、nは、1〜30、例えば、1〜4、例えば、1、2、3、又は4の整数である。
【０１３６】
いくつかの例において、式(I)の化合物は:
【化２１４】
2020521018.tif 000246
2020521018.tif 000247
2020521018.tif 000248
2020521018.tif 000249
2020521018.tif 000250
2020521018.tif 000251
2020521018.tif 000252
2020521018.tif 000253
2020521018.tif 000254
2020521018.tif 000255
2020521018.tif 000256
2020521018.tif 000257
2020521018.tif 000258
2020521018.tif 000259
2020521018.tif 000260
もしくはこれらの位置異性体、立体異性体形態、医薬として許容し得る塩、溶媒和物、又はこれらの混合物から選択され、ここで、Abは、抗体又はその抗原結合断片である。これらの例において、Abは、連結されたペイロードに直接的に又は間接的に結合していてもよい。いくつかの例において、Abがリンカー-ペイロードに間接的に結合している場合、
【化２１５】
2020521018.tif 000261
は、
【化２１６】
2020521018.tif 000262
であり、ここで、下付文字xは、1〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字xは1である。いくつかの例において、下付文字xは2である。いくつかの例において、下付文字xは3である。いくつかの例において、下付文字xは4である。本明細書において、Abは、抗体又はその抗原結合断片である。いくつかの例において、図示されているPEG基、すなわち、
【化２１７】
2020521018.tif 000263
は、Ab上のグルタミンに結合している。ある実施態様において、nは、1〜30、例えば、1〜4、例えば、1、2、3、又は4の整数である。
【０１３７】
いくつかの例において、式(I)の化合物は:
【化２１８】
2020521018.tif 000264
2020521018.tif 000265
2020521018.tif 000266
2020521018.tif 000267
2020521018.tif 000268
2020521018.tif 000269
2020521018.tif 000270
2020521018.tif 000271
2020521018.tif 000272
2020521018.tif 000273
2020521018.tif 000274
2020521018.tif 000275
2020521018.tif 000276
2020521018.tif 000277
もしくはこれらの位置異性体、もしくは立体異性体形態、医薬として許容し得る塩、又はこれらの溶媒和物から選択され、ここで、Abは、抗体又はその抗原結合断片である。
【０１３８】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、前述の化合物のいずれかを含む、本明細書に示される化合物、又はその医薬として許容し得る塩、及び医薬として許容し得る賦形剤を含む医薬組成物である。
【０１３９】
当業者は、アミノ酸残基が、アキラル又はキラル、例えば、L-アミノ酸又はD-アミノ酸であり得ることを認識しているであろう。アミノ酸は、通常、アミノ酸側鎖を含む。該側鎖は、当業者に公知の任意のアミノ酸の側鎖であることができる。ある実施態様において、該側鎖は、ヒスチジン、アラニン、イソロイシン、アルギニン、ロイシン、アスパラギン、リジン、アスパラギン酸、メチオニン、システイン、フェニルアラニン、グルタミン酸、トレオニン、グルタミン、トリプトファン、バリン、オルニチン、セレノシステイン、セリン、グリシン、ホモグリシン(例えば、β-ホモグリシン)、又はチロシンの側鎖である。当業者は、該ペプチドが、例えば、ラセミ体のDL-アミノ酸又は非ラセミ体のD-もしくはL-アミノ酸及びこれらのジアステレオマー混合物を含めて、アキラル又はキラルであり得ることを認識しているであろう。該ペプチドの側鎖は、上記のアミノ酸との関連において記載されている通りである。当業者は、N-アルキルアミノ酸残基が該アミノ酸の末端アミノ基又は該ペプチドの末端アミノ基に、上で定義されているようなアルキル置換基を含むことを認識しているであろう。
【０１４０】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは、0〜30の整数である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは0である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは1である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは2である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは3である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは4である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは5である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは6である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは7である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは8である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは9である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは10である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは11である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは12である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは13である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは14である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは15である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは16である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは17である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは18である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは19である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは20である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは21である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは22である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは23である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは24である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは25である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは26である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは27である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは28である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは29である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字nは30である。
【０１４１】
(結合剤)
本開示において提供されるコンジュゲートのうちのいずれかのための好適な結合剤としては、抗体、リンホカイン、ホルモン、成長因子、ウイルス受容体、インターロイキン、又は任意の他の細胞結合性もしくはペプチド結合性の分子もしくは物質が挙げられるが、これらに限定されない。好適な結合剤としては、ポリペプチドも挙げられる。
【０１４２】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、該結合剤(BA)は、任意のポリペプチドから選択される。例となるポリペプチドとしては、天然ポリペプチド及び非天然ポリペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。例となるポリペプチドとしては、遺伝子改変生物から産生されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４３】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、該BAは、受容体、サイトカイン、タンパク質、酵素、結合剤、乳ペプチド、リボソームペプチド、非リボソームペプチド、ペプトン、及びペプチド断片から選択される。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、該BAは、抗微生物ペプチド、タキキニンペプチド、血管作動性腸ペプチド、膵臓ポリペプチド関連ペプチド、オピオド(opiod)ペプチド、及びカルシトニンペプチドから選択される。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、該BAは、B型ナトリウム利尿ペプチド(BNP)、ラクトトリペプチド、ニューロペプチド、リポペプチド、プロテアーゼ、又はホルモンから選択される。
【０１４４】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、該BAは、一体的に結合した2以上のアミノ酸を含む短いアミノ酸鎖から選択される。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、該BAは、ぞれぞれ、一体的に結合した2つ、3つ、又は4つのアミノ酸を有する、ジペプチド(Val-Cit)、トリペプチド、及びテトラペプチド(例えば、Val-Gly-Ser-Ala)から選択される。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、該BAは、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、ヘキサペプチド、ヘプタペプチド、オクタペプチド、ノナペプチド、デカペプチド、ウンデカペプチド、及びイコサペプチドから選択される。
【０１４５】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、該BAは、任意のタンパク質から選択される。いくつかの例において、該タンパク質は、天然アミノ酸のみを含む。いくつかの例において、該タンパク質は、非天然アミノ酸をさらに含む。いくつかの実施態様において、該結合剤は、抗体又はその抗原結合断片である。該抗体は、当業者に公知の任意の形態のものであることができる。本明細書で使用される「抗体」という用語は、特定の抗原に特異的に結合するか又はそれと特異的に相互作用する少なくとも1つの相補性決定領域(CDR)を含む任意の抗原結合分子又は分子複合体を意味する。「抗体」という用語は、ジスルフィド結合によって相互に接続された、2本の重(H)鎖と2本の軽(L)鎖の4本のポリペプチド鎖を含む免疫グロブリン分子、及びその多量体(例えば、IgM)を含む。各々の重鎖は、重鎖可変領域(本明細書ではHCVR又はVHと略す)及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、3つのドメイン、CH1、CH2、及びCH3を含む。各々の軽鎖は、軽鎖可変領域(本明細書ではLCVR又はVLと略す)及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、1つのドメイン(CL1)を含む。VH及びVL領域は、フレームワーク領域(FR)と呼ばれるより保存された領域が散在する、相補性決定領域(CDR)と呼ばれる超可変領域にさらに細かく分けることができる。各々のVH及びVLは、3つのCDR及び4つのFRから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端にかけて、以下の順序: FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4で配置されている。本発明の様々な実施態様において、本明細書における化合物に好適な抗体(又はその抗原結合部分)のFRは、ヒト生殖系列配列と同一であってもよく、又は自然にもしくは人為的に修飾されていてもよい。アミノ酸コンセンサス配列は、2以上のCDRの対比分析に基づいて定義することができる。本明細書で使用される「抗体」という用語は、完全な抗体分子の抗原結合断片も含む。本明細書で使用される、抗体の「抗原結合部分」、抗体の「抗原結合断片」などの用語は、抗原に特異的に結合して複合体を形成する、任意の天然に存在する、酵素的に得られる、合成された、又は遺伝子改変されたポリペプチド又は糖タンパク質を含む。抗体の抗原結合断片は、任意の好適な標準的技法、例えば、タンパク分解的消化又は抗体可変ドメイン及び任意に定常ドメインをコードするDNAの操作及び発現を伴う組換え遺伝子工学技法を用いて完全な抗体分子から得ることができる。そのようなDNAは公知であり、及び/又は例えば、商業的な供給源、DNAライブラリー(例えば、ファージ-抗体ライブラリーを含む)から容易に入手可能であるか、又は合成することができる。DNAをシークエンシングし、化学的に又は分子生物学的技法を用いることにより操作して、例えば、1以上の可変及び/もしくは定常ドメインを好適な配置に配置すること、又はコドンを導入し、システイン残基を生成させ、アミノ酸を修飾し、付加し、もしくは欠失させること、などができる。抗原結合断片の非限定的な例としては:(i)Fab断片;(ii)F(ab')2断片;(iii)Fd断片;(iv)Fv断片;(v)単鎖Fv(scFv)分子;(vi)dAb断片;及び(vii)抗体の超可変領域を模倣するアミノ酸残基からなる最小認識単位(例えば、CDR3ペプチドなどの単離された相補性決定領域(CDR))、又は拘束性FR3-CDR3-FR4ペプチドが挙げられる。他の改変分子、例えば、ドメイン特異的抗体、単一ドメイン抗体、ドメイン欠失抗体、キメラ抗体、CDR移植抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニボディ、ナノボディ(例えば、一価のナノボディ、二価のナノボディなど)、小モジュラー免疫医薬(SMIP)、及びサメ可変IgNARドメインも、本明細書で使用される「抗原結合断片」という表現に包含される。抗体の抗原結合断片は、通常、少なくとも1つの可変ドメインを含む。可変ドメインは、任意のサイズ又はアミノ酸組成であってもよく、通常、1以上のフレームワーク配列に隣接しているか、又はそれとインフレームになっている少なくとも1つのCDRを含む。VHドメインがVLドメインと会合している抗原結合断片において、VHドメインとVLドメインは、互いに対して任意の好適な配置にあってもよい。例えば、可変領域は二量体であり、かつVH-VH、VH-VL、又はVL-VL二量体を含有していてもよい。或いは、抗体の抗原結合断片は、単量体のVH又はVLドメインを含有していてもよい。ある実施態様において、抗体の抗原結合断片は、少なくとも1つの定常ドメインに共有結合した少なくとも1つの可変ドメインを含有していてもよい。本発明の抗体の抗原結合断片内に見出し得る可変及び定常ドメインの非限定的で例示的な配置としては:(i)VH-CH1;(ii)VH-CH2;(iii)VH-CH3;(iv)VH-CH1-CH2;(v)VH-CH1-CH2-CH3;(vi)VH-CH2-CH3;(vii)VH-CL;(viii)VL-CH1;(ix)VL-CH2;(x)VL-CH3;(xi)VL-CH1-CH2;(xii)VL-CH1-CH2-CH3;(xiii)VL-CH2-CH3;及び(xiv)VL-CLが挙げられる。上記の例示的な配置のいずれかを含む、可変ドメインと定常ドメインの任意の配置において、可変ドメインと定常ドメインは、互いに直接連結されていてもよく、又は完全なもしくは部分的なヒンジもしくはリンカー領域によって連結されていてもよい。ヒンジ領域は、単一ポリペプチド分子中の隣接する可変ドメイン及び/又は定常ドメイン間に柔軟な又は半ば柔軟な連結を生じさせる少なくとも2個(例えば、5個、10個、15個、20個、40個、60個、又はそれより多く)のアミノ酸からなっていてもよい。完全な抗体分子と同様、抗原結合断片は、単一特異性又は多重特異性(例えば、二重特異性)であってもよい。抗体の多重特異性抗原結合断片は、通常、少なくとも2つの異なる可変ドメインを含み、ここで、各々の可変ドメインは、別々の抗原に又は同じ抗原上の異なるエピトープに特異的に結合することができる。本明細書に開示される例示的な二重特異性抗体フォーマットを含む、任意の多重特異性抗体フォーマットは、当技術分野で利用可能なルーチンの技法を用いて、本発明の抗体の抗原結合断片と関連した使用に適合させることができる。本発明のある実施態様において、本発明の抗体は、ヒト抗体である。本明細書で使用される「ヒト抗体」という用語は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変及び定常領域を有する抗体を含むことが意図される。本発明のヒト抗体は、例えば、CDR、特に、CDR3中に、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基(例えば、インビトロでのランダムなもしくは部位特異的な突然変異誘発によるか、又はインビボでの体細胞突然変異によって導入された突然変異)を含み得る。しかしながら、本明細書で使用される「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列に由来するCDR配列がヒトフレームワーク配列に移植されている抗体を含むことが意図されない。「ヒト抗体」という用語は、通常、修飾又はヒトの介入/操作なしで、天然に存在する未修飾の生物に存在する、天然に存在する分子を含まない。本発明の抗体は、いくつかの実施態様において、組換えヒト抗体であってもよい。本明細書で使用される「組換えヒト抗体」という用語は、組換え手段によって調製され、発現され、作出され、又は単離される全てのヒト抗体、例えば、宿主細胞にトランスフェクトされた組換え発現ベクターを用いて発現される抗体(以下でさらに記載する)、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離される抗体(以下でさらに記載する)、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックである動物(例えば、マウス)から単離される抗体(例えば、Taylorらの文献(1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295を参照)、又はヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のDNA配列へのスプライシングを伴う任意の他の手段によって調製され、発現され、作出され、もしくは単離される抗体を含むことが意図される。そのような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変及び定常領域を有する。しかしながら、ある実施態様において、そのような組換えヒト抗体は、インビトロでの突然変異誘発(又はヒトIg配列についてトランスジェニックな動物を使用する場合、インビボでの体細胞突然変異誘発)を受け、したがって、該組換え抗体のVH及びVL領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列VH及びVL配列に由来し、かつそれに関連するが、インビボでヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在しなくてもよい配列である。ヒト抗体は、ヒンジの不均一性と関連する2つの形態で存在することができる。ある形態では、免疫グロブリン分子は、二量体が鎖間重鎖ジスルフィド結合によって結合している、約150〜160kDaの安定な4鎖構築物を含む。第二の形態では、二量体が鎖間ジスルフィド結合によって連結されず、共有結合した軽鎖及び重鎖(半分の抗体)から構成された、約75〜80kDaの分子が形成される。これらの形態は、親和性精製後でさえも、分離するのが極めて難しい。様々なインタクトのIgGアイソタイプにおける第二の形態の出現頻度は、限定されないが、抗体のヒンジ領域アイソタイプと関連する構造上の違いによるものである。ヒトIgG4ヒンジのヒンジ領域における単一アミノ酸置換は、ヒトIgG1ヒンジを用いて通常観察されるレベルにまで第二の形態の出現を有意に低下させることができる(Angalらの文献(1993) Molecular Immunology 30:105)。本発明は、ヒンジ、CH2、又はCH3領域中に1以上の突然変異を有する抗体を包含し、該突然変異は、例えば、産生において、所望の抗体形態の収率を改善するために望ましい場合がある。本発明の抗体は、単離された抗体であってもよい。本明細書で使用される「単離された抗体」は、同定され、かつその天然環境の少なくとも1つの構成要素から分離及び/又は回収された抗体を意味する。例えば、生物の少なくとも1つの構成要素から、又は抗体が天然に存在しもしくは天然に産生される組織もしくは細胞から分離又は除去された抗体は、本発明の目的のための「単離された抗体」である。単離された抗体は、組換え細胞内のインサイチュの抗体も含む。単離された抗体は、少なくとも1つの精製又は単離工程にかけられた抗体である。あ���実施態様によれば、単離された抗体は、他の細胞物質及び/又は化学物質を実質的に含まないものであってもよい。本明細書で使用される抗体は、抗体が由来した対応する生殖系列配列と比較して、重鎖及び軽鎖可変ドメインのフレームワーク及び/又はCDR領域中に1以上のアミノ酸置換、挿入、及び/又は欠失を含むことができる。そのような突然変異は、本明細書に開示されるアミノ酸配列を、例えば、公的な抗体配列データベースから入手可能な生殖系列配列と比較することにより、すぐに確認することができる。本発明は、1以上のフレームワーク及び/又はCDR領域内の1以上のアミノ酸が、抗体が由来した生殖系列配列の対応する残基に、又は別のヒト生殖系列配列の対応する残基に、又は対応する生殖系列残基の保存的アミノ酸置換に突然変異させられている(そのような配列変化は、本明細書において、「生殖系列突然変異」と総称される)、本明細書に開示されるアミノ酸配列のいずれかに由来する抗体及びその抗原結合断片を含む。当業者は、本明細書に開示される重鎖及び軽鎖可変領域配列から出発して、1以上の個々の生殖系列突然変異又はその組合せを含む多くの抗体及び抗原結合断片を容易に産生することができる。ある実施態様において、VH及び/又はVLドメイン内の全てのフレームワーク及び/又はCDR残基を突然
変異させて、抗体が由来したもとの生殖系列配列中に見出される残基に戻す。他の実施態様において、特定の残基のみ、例えば、FR1の最初の8つのアミノ酸もしくはFR4の最後の8つのアミノ酸に見出される突然変異残基のみ、又はCDR1、CDR2、もしくはCDR3に見出される突然変異残基のみを突然変異させて、もとの生殖系列配列に戻す。他の実施態様において、1以上の該フレームワーク及び/又はCDR残基を、異なる生殖系列配列(すなわち、抗体がもともと由来した生殖系列配列と異なる生殖系列配列)の対応する残基に突然変異させる。さらに、本発明の抗体は、例えば、特定の個々の残基が特定の生殖系列配列の対応する残基に突然変異させられている一方で、もとの生殖系列配列と異なる特定の他の残基が維持されているか又は異なる生殖系列配列の対応する残基に突然変異させられているフレームワーク及び/又はCDR領域内に2以上の生殖系列突然変異の任意の組合せを含有し得る。ひとたび得られれば、1以上の生殖系列突然変異を含有する抗体及び抗原結合断片を、例えば、改善された結合特異性、増大した結合親和性、改善又は増強された拮抗的又は作動的生体特性(場合による)、低下した免疫原性などの1以上の所望の特性について容易に試験することができる。この一般的な方法で得られる抗体及び抗原結合断片は、本発明の範囲内に包含される。本明細書中の化合物に有用な抗体には、1以上の保存的置換を有する本明細書に開示されるHCVR、LCVR、及び/又はCDRアミノ酸配列のいずれかの変異体を含む抗体も含まれる。「エピトープ」という用語は、パラトープとして知られる抗体分子の可変領域中の特異的抗原結合部位と相互作用する抗原性決定基を指す。単一の抗原は、複数のエピトープを有し得る。したがって、異なる抗体が抗原上の異なる部分に結合し得、かつ異なる生物学的効果を有し得る。エピトープは、立体構造的又は線状のいずれかであり得る。立体構造エピトープは、線状ポリペプチド鎖の異なるセグメント由来の空間的に並置されたアミノ酸により生じる。線状エピトープは、ポリペプチド鎖中の隣接するアミノ酸残基により生じるものである。ある状況において、エピトープは、抗原上のサッカリド、ホスホリル基、又はスルホニル基の部分を含み得る。
【０１４６】
ある実施態様において、該抗体は、軽鎖を含む。ある実施態様において、該軽鎖は、κ軽鎖である。ある実施態様において、該軽鎖は、λ軽鎖である。ある実施態様において、該抗体は、重鎖を含む。いくつかの態様において、該重鎖は、IgAである。いくつかの態様において、該重鎖は、IgDである。いくつかの態様において、該重鎖は、IgEである。いくつかの態様において、該重鎖は、IgGである。いくつかの態様において、該重鎖は、IgMである。いくつかの態様において、該重鎖は、IgG1である。いくつかの態様において、該重鎖は、IgG2である。いくつかの態様において、該重鎖は、IgG3である。いくつかの態様において、該重鎖は、IgG4である。いくつかの態様において、該重鎖は、IgA1である。いくつかの態様において、該重鎖は、IgA2である。
【０１４７】
いくつかの実施態様において、該抗体は、抗体断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、Fv断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、Fab断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、F(ab')2断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、Fab'断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、scFv(sFv)断片である。いくつかの態様において、該抗体断片は、scFv-Fc断片である。
【０１４８】
いくつかの実施態様において、該抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施態様において、該抗体は、ポリクローナル抗体である。
【０１４９】
いくつかの実施態様において、該抗体は、キメラ抗体である。いくつかの実施態様において、該抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施態様において、該抗体は、ヒト抗体である。
【０１５０】
該抗体は、当業者に好適であるとみなされる任意の抗原に対する結合特異性を有することができる。ある実施態様において、該抗原は、膜貫通分子(例えば、受容体)又は成長因子である。例示的な抗原としては、レニンなどの分子;ヒト成長ホルモン及びウシ成長ホルモンを含む成長ホルモン;成長ホルモン放出因子;副甲状腺ホルモン;甲状腺刺激ホルモン;リポタンパク質;α1-アンチトリプシン;インスリンA鎖;インスリンB鎖;プロインスリン;濾胞刺激ホルモン;カルシトニン;黄体形成ホルモン;グルカゴン;凝固因子、例えば、vmc因子、IX因子、組織因子(TF)、及びフォンビルブランド因子;抗凝固因子、例えば、プロテインC;心房性ナトリウム利尿因子;肺サーファクタント;プラスミノゲン活性化因子、例えば、ウロキナーゼ又はヒト尿もしくは組織型プラスミノゲン活性化因子(t-PA);ボンベシン;トロンビン;造血成長因子;腫瘍壊死因子-α及び-β;エンケファリナーゼ; RANTES(活性化時に調節される、正常T細胞による発現及び分泌);ヒトマクロファージ炎症性タンパク質(MIP-I-α);血清アルブミン、例えば、ヒト血清アルブミン;ミュラー管(Muellerian)阻害物質;リラクシンA鎖;リラクシンB鎖;プロリラクシン;マウスゴナドトロピン関連ペプチド;微生物タンパク質、例えば、βラクタマーゼ; DNアーゼ; 19E;細胞傷害性Tリンパ球関連抗原(CTLA)、例えば、CTLA-4;インヒビン;アクチビン;血管内皮成長因子(VEGF);ホルモン又は成長因子の受容体;プロテインA又はD;リウマトイド因子;神経栄養因子、例えば、骨由来神経栄養因子(BDNF)、ニューロトロフィン-3、-4、-5、もしくは-6(NT-3、NT4、NT-5、もしくはNT-6)、又は神経成長因子、例えば、NGF-β;血小板由来成長因子(PDGF);線維芽細胞成長因子、例えば、aFGF及びbFGF;線維芽細胞成長因子受容体2(FGFR2)、上皮成長因子(EGF);形質転換成長因子(TGF)、例えば、TGF-α及びTGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-β4、又はTGF-β5を含むTGF-β;インスリン様成長因子-I及び-II(IGF-I及びIGF-II); des(I-3)-IGF-1(脳IGF-1)、インスリン様成長因子結合タンパク質、EpCAM、GD3、FLT3、PSMA、PSCA、MUC1、MUC16、STEAP、CEA、TENB2、EphA受容体、EphB受容体、葉酸受容体、FOLRI、メソテリン、クリプト、αvβ6、インテグリン、VEGF、VEGFR、EGFR、トランスフェリン受容体、IRTA1、IRTA2、IRTA3、IRTA4、IRTA5; CDタンパク質、例えば、CD2、CD3、CD4、CD5、CD6、CD8、CD11、CD14、CD19、CD20、CD21、CD22、CD25、CD26、CD28、CD30、CD33、CD36、CD37、CD38、CD40、CD44、CD52、CD55、CD56、CD59、CD70、CD79、CD80、CD81、CD103、CD105、CD134、CD137、CD138、CD152、又は米国公開第2008/0171040号もしくは米国公開第2008/0305044号に開示されており、かつ引用により完全に開示されている1以上の腫瘍関連抗原もしくは細胞表面受容体に結合する抗体;エリスロポエチン;骨誘導因子;免疫毒素;骨形成タンパク質(BMP);インターフェロン、例えば、インターフェロン-α、-β、及び-γ;コロニー刺激因子(CSF)、例えば、M-CSF、GM-CSF、及びG-CSF;インターロイキン(IL)、例えば、IL-1〜IL-10;スーパーオキシドジスムターゼ; T細胞受容体;表面膜タンパク質;崩壊促進因子;例えば、HIVエンベロープの部分などのウイルス抗原;輸送タンパク質;ホーミング受容体;アドレシン;調節タンパク質;インテグリン、例えば、CD11a、CD11b、CD11c、CD18、ICAM、VLA-4、及びVCAM;腫瘍関連抗原、例えば、AFP、ALK、B7H4、BAGEタンパク質、β-カテニン、brc-abl、BRCA1、BORIS、CA9(カルボニックアンンヒドラーゼIX)、カスパーゼ-8、CD20、CD40、CD123、CDK4、CEA、CLEC12A、c-kit、cMET、CTLA4、サイクリン-B1、CYP1B1、EGFR、EGFRvIII、エンドグリン、Epcam、EphA2、ErbB2/Her2、ErbB3/Her3、ErbB4/Her4、ETV6-AML、Fra-1、FOLR1、GAGEタンパク質(例えば、GAGE-1、-2)、GD2、GD3、グロボH、グリピカン-3、GM3、gp100、Her2、HLA/B-raf、HLA/EBNA1、HLA/k-ras、HLA/MAGE-A3、hTERT、IGF1R、LGR5、LMP2、MAGEタンパク質(例えば、MAGE-1、-2、-3、-4、-6、及び-12)、MART-1、メソテリン、ML-IAP、Muc1、Muc16(CA-125)、MUM1、NA17、NGEP、NY-BR1、NY-BR62、NY-BR85、NY-ESO1、OX40、p15、p53、PAP、PAX3、PAX5、PCTA-1、PDGFR-α、PDGFR-β、PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D、PLAC1、PRLR、PRAME、PSCA、PSGR、PSMA(FOLH1)、RAGEタンパク質、Ras、RGS5、Rho、SART-1、SART-3、Steap-1、Steap-2、STn、サバイビン、TAG-72、TGF-β、TMPRSS2、Tn、TNFRSF17、TRP-1、TRP-2、チロシナーゼ、及びウロプラキン-3、並びに上記のポリペプチドのいずれかの断片が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、該抗原は、腫瘍のタイプに特異的な抗原又は特定のタイプの腫瘍上で共有されるか、過剰発現されるか、もしくは修飾される抗原を含む、腫瘍抗原である。例としては:肺癌に関するα-アクチニン-4、メラノーマに関するARTC1、慢性骨髄性白血病に関するBCR-ABL融合タンパク質、メラノーマに関するB-RAF、CLPP、又はCdc27、扁平上皮細胞癌に関するCASP-8、及び腎細胞癌に関するhsp70-2、並びに以下の共通の腫瘍特異的抗原、例えば: BAGE-1、GAGE、GnTV、KK-LC-1、MAGE-A2、NA88-A、TRP2-INT2が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、該抗原は、PRLR又はHER2である。いくつかの実施態様において、該抗体は、抗PRLR又は抗HER2抗体である。
【０１５１】
結合剤リンカーは、抗体又は抗原結合分子内の特定のアミノ酸での結合を介して、結合剤、例えば、抗体又は抗原結合分子に結合させることができる。本開示のこの態様との関連において使用することができる例示的なアミノ酸結合としては、例えば、リジン(例えば、US 5,208,020号; US 2010/0129314号; Hollanderらの文献、Bioconjugate Chem., 2008, 19:358-361; WO 2005/089808号; US 5,714,586号; US 2013/0101546号;及びUS 2012/0585592号を参照)、システイン(例えば、US 2007/0258987号; WO 2013/055993号; WO 2013/055990号; WO 2013/053873号; WO 2013/053872号; WO 2011/130598号; US 2013/0101546号;及びUS 7,750,116号を参照)、セレノシステイン(例えば、WO 2008/122039号;及びHoferらの文献、Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2008, 105: 12451-12456を参照)、ホルミルグリジン(例えば、Carricoらの文献、Nat. Chem. Biol., 2007, 3:321-322; Agarwalらの文献、Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2013, 110:46-51、及びRabukaらの文献、Nat. Protocols, 2012, 10:1052-1067を参照)、非天然アミノ酸(例えば、WO 2013/068874号及びWO 2012/166559号を参照)、並びに酸性アミノ酸(例えば、WO 2012/05982号を参照)が挙げられる。リンカーは、炭水化物への結合を介して抗原結合タンパク質にコンジュゲートすることもできる(例えば、US 2008/0305497号、WO 2014/065661号、及びRyanらの文献、Food & Agriculture Immunol., 2001, 13: 127-130を参照)。
【０１５２】
いくつかの例において、該結合剤は、抗体又は抗原結合分子であり、該抗体は、リジン残基を介してリンカーに結合される。いくつかの実施態様において、該抗体又は抗原結合分子は、システイン残基を介してリンカーに結合される。
【０１５３】
リンカーは、トランスグルタミナーゼに基づく化学的酵素的コンジュゲーションを介して1以上のグルタミン残基にコンジュゲートすることもできる(例えば、Dennlerらの文献、Bioconjugate Chem. 2014, 25, 569-578を参照)。例えば、トランスグルタミナーゼの存在下において、抗体の1以上のグルタミン残基を一級アミン化合物にカップリングさせることができる。一級アミン化合物には、トランスグルタミナーゼ媒介カップリングを介して抗体薬物コンジュゲートを直接的に提供する、ペイロード又はリンカー-ペイロードが含まれる。一級アミン化合物には、抗体薬物コンジュゲートの合成に向けて後にさらなる化合物と反応させることができる反応基で官能化されているリンカー及びスペーサーも含まれる。グルタミン残基を含む抗体は、天然源から単離するか又は1以上のグルタミン残基を含むように改変することができる。抗体ポリペプチド鎖中のグルタミン残基(グルタミニル修飾抗体又は抗原結合分子)を人為作製する技法は、当業者の能力の範囲内である。ある実施態様において、該抗体は、アグリコシル化される。
【０１５４】
ある実施態様において、該抗体又はグルタミニル修飾抗体もしくは抗原結合分子は、少なくとも1つのポリペプチド鎖配列中に、少なくとも1つのグルタミン残基を含む。ある実施態様において、該抗体又はグルタミニル修飾抗体もしくは抗原結合分子は、各々1つのGln295残基を有する2つの重鎖ポリペプチドを含む。さらなる実施態様において、該抗体又はグルタミニル修飾抗体もしくは抗原結合分子は、重鎖Gln 295以外の部位に1以上のグルタミン残基を含む。本明細書に含まれるのは、本明細書に記載されるN297Q突然変異を担持する抗体である。簡潔に述べると、いくつかの実施態様において、グルタミン残基を含む抗体は、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、以下でより詳細に記載される、一級アミン化合物で処理される。いくつかの実施態様において、Asn297Gln(N297Q)突然変異を含む抗体は、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、以下でより詳細に記載される、一級アミン化合物で処理される。いくつかの実施態様において、Gln295(Q295)残基を含む抗体は、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、以下でより詳細に記載される、一級アミン化合物で処理される。いくつかの実施態様において、Gln55(Q55)残基を含む抗体は、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、以下でより詳細に記載される、一級アミン化合物で処理される。例えば、いくつかの実施態様において、そのような抗体を部位特異的突然変異誘発によって調製して、配列を除去又は無効化するか、又は任意の干渉構造から離れた部位にグルタミン残基を挿入することができる。そのような抗体は、天然源又は人工源から単離することもできる。
【０１５５】
(一級アミン化合物)
グルタミンを含む抗体(又は抗原結合化合物)のトランスグルタミナーゼ媒介カップリングに有用な一級アミン化合物は、当業者によって有用であるとみなされる任意の一級アミン化合物であることができる。通常、一級アミン化合物は、式H2N-Rを有し、式中、Rは、抗体及び反応条件と適合する任意の基であることができる。ある実施態様において、Rは、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、又は置換ヘテロアルキルである。
【０１５６】
いくつかの実施態様において、該一級アミン化合物は、反応基又は保護された反応基を含む。有用な反応基としては、アジド、アルキン、シクロアルキン、チオール、アルコール、ケトン、アルデヒド、酸、エステル、ヒドロジド(hydrozide)、アナリン(analine)、及びアミンが挙げられる。ある実施態様において、該反応基は、アジド、アルキン、スルフヒドリル、シクロアルキン、アルデヒド、及びカルボキシルからなる群から選択される。
【０１５７】
ある実施態様において、該一級アミン化合物は、式H2N-LL-Xによるものであり、式中、LLは、二価スペーサーであり、Xは、反応基又は保護された反応基である。特定の実施態様において、LLは、二価ポリエチレングリコール(PEG)基である。ある実施態様において、Xは、-SH、-N3、アルキン、アルデヒド、及びテトラゾールからなる群から選択される。特定の実施態様において、Xは、-N3である。
【０１５８】
ある実施態様において、該一級アミン化合物は、以下の式のうちの1つによるものである:
H2N-(CH2)n-X;
H2N-(CH2CH2O)n-(CH2)p-X;
H2N-(CH2)n-N(H)C(O)-(CH2)m-X;
H2N-(CH2CH2O)n-N(H)C(O)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;
H2N-(CH2)n-C(O)N(H)-(CH2)m-X;
H2N-(CH2CH2O)n-C(O)N(H)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;
H2N-(CH2)n-N(H)C(O)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;
H2N-(CH2CH2O)n-N(H)C(O)-(CH2)m-X;
H2N-(CH2)n-C(O)N(H)-(CH2CH2O)m-(CH2)p-X;及び
H2N-(CH2CH2O)n-C(O)N(H)-(CH2)m-X;
(式中、nは、1〜12から選択される整数であり;
mは、0〜12から選択される整数であり;
pは、0〜2から選択される整数であり;
かつXは、-SH、-N3、-C≡CH、-C(O)H、テトラゾール、及び
【化２１９】
2020521018.tif 000278
のいずれかからなる群から選択される)。
【０１５９】
上記において、該アルキル又はアルキレン(すなわち、-CH2-)基のいずれかは、例えば、C1-8アルキル、メチルホルミル、又は-SO3Hで任意に置換されていてもよい。ある実施態様において、アルキル基は、置換されていない。
【０１６０】
ある実施態様において、該一級アミン化合物は:
【化２２０】
2020521018.tif 000279
からなる群から選択される。
【０１６１】
特定の実施態様において、該一級アミン化合物は、
【化２２１】
2020521018.tif 000280
である。上記の反応のための例示的な条件は、下記の実施例に提供されている。
【０１６２】
(リンカー)
本明細書に記載されるコンジュゲートのリンカーLL部分は、結合剤を本明細書に記載されるペイロード化合物に共有結合させる部分、例えば、二価部分である。他の例において、該リンカーLLは、結合剤を本明細書に記載されるペイロード化合物に共有結合させる三価又は多価部分である。好適なリンカーは、例えば、各々の内容が引用により完全に本明細書中に組み込まれる、抗体-薬物コンジュゲート及び免疫毒素(Antibody-Drug Conjugates and Immunotoxins); Phillips, G. L.編; Springer Verlag: New York, 2013;抗体-薬物コンジュゲート(Antibody-Drug Conjugates); Ducry, L.編; Humana Press, 2013;抗体-薬物コンジュゲート(Antibody-Drug Conjugates); Wang, J.、Shen, W.-C.、及びZaro, J. L.編; Springer International Publishing, 2015に見出すことができる。ペイロード化合物には、図1の化合物、及びリンカーLLとの結合又はリンカーLLによる組込み後のその残基が含まれる。当業者は、ペイロード部分の特定の官能基がリンカー及び/又は結合剤との連結又は結合に好都合であることを認識しているであろう。これらの基には、アミン、ヒドロキシル、ホスフェート、及び糖が含まれる。
【０１６３】
ある実施態様において、該リンカーは、生理的条件で安定である。ある実施態様において、該リンカーは切断性であり、例えば、酵素の存在下で又は特定のpH範囲もしくは値で、少なくともペイロード部分を放出することができる。いくつかの実施態様において、リンカーは、酵素切断性部分を含む。例示的な酵素切断性部分としては、ペプチド結合、エステル連結、ヒドラゾン、及びジスルフィド連結が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、該リンカーは、カテプシン切断性リンカーを含む。
【０１６４】
いくつかの実施態様において、該リンカーは、非切断性部分を含む。いくつかの実施態様において、該非切断性リンカーは、
【化２２２】
2020521018.tif 000281
又はその残基に由来する。いくつかの実施態様において、該非切断性リンカー-ペイロードは、
【化２２３】
2020521018.tif 000282
又はその位置異性体である。いくつかの実施態様において、該非切断性リンカーは、
【化２２４】
2020521018.tif 000283
又はその残基に由来する。いくつかの実施態様において、該非切断性リンカー-ペイロードは、
【化２２５】
2020521018.tif 000284
又はその位置異性体である。一実施態様において、該リンカーは、マレイミドシクロヘキサンカルボキシレート又は4-(N-マレイミドメチル)シクロヘキサンカルボン酸(MCC)である。該構造中、
【化２２６】
2020521018.tif 000285
は、結合剤とのを示す。該構造中、いくつかの例において、
【化２２７】
2020521018.tif 000286
は、例えば、結合剤とリンカーペイロードの反応によって得られるクリック化学残基を示す。
【０１６５】
いくつかの実施態様において、好適なリンカーとしては、単一の結合剤、例えば、抗体の2つのシステイン残基に化学的に結合しているものが挙げられるが、これらに限定されない。そのようなリンカーは、コンジュゲーションプロセスの結果として破壊される抗体のジスルフィド結合を模倣する働きをすることができる。
【０１６６】
いくつかの実施態様において、該リンカーは、1以上のアミノ酸を含む。好適なアミノ酸としては、天然、非天然、標準的、非標準的、タンパク質構成性、非タンパク質構成性、及びL-又はD-α-アミノ酸が挙げられる。いくつかの実施態様において、該リンカーは、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリン、これらの誘導体、又はこれらの組合せを含む。ある実施態様において、該アミノ酸の1以上の側鎖は、下記の側鎖基に連結される。いくつかの実施態様において、該リンカーは、バリン及びシトルリンを含む。いくつかの実施態様において、該リンカーは、リジン、バリン、及びシトルリンを含む。いくつかの実施態様において、該リンカーは、リジン、バリン、及びアラニンを含む。いくつかの実施態様において、該リンカーは、バリン及びアラニンを含む。
【０１６７】
いくつかの実施態様において、該リンカーは、自壊基を含む。該自壊基は、当業者に公知の任意のそのような基であることができる。特定の実施態様において、該自壊基は、p-アミノベンジル(PAB)又はその誘導体である。有用な誘導体としては、p-アミノベンジルオキシカルボニル(PABC)が挙げられる。当業者は、自壊基がペイロードからリンカーの残りの原子を放出する化学反応を行うことができることを認識しているであろう。
【０１６８】
いくつかの実施態様において、反応基RG'は、結合剤との1以上の結合を形成することができることが当業者に知られている任意の反応基であることができる。反応基RG'は、結合剤と反応して(例えば、抗体と、そのシステインもしくはリジン残基で、又はアジド部分で、例えば、PEG-N3官能化抗体と1以上のグルタミン残基で反応して)、式A、Aa、又はAbの化合物を形成することができる部分をその構造中に含む部分である。結合剤とのコンジュゲーションの後、反応基は、反応基(RG)又はリンカー残基になる。例示的な反応基としては、結合剤と反応することができるハロアセチル、イソチオシアネート、スクシンイミド、N-ヒドロキシスクシンイミド、又はマレイミド部分を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６９】
ある実施態様において、反応基としては、アルキンが挙げられるが、これに限定されない。ある実施態様において、該アルキンは、銅触媒の非存在下でアルキンとの1,3-付加環化反応を受けることができるアルキン、例えば、歪みアルキンである。歪みアルキンは、歪み促進アルキン-アジド付加環化(SPAAC)、シクロアルキン、例えば、シクロオクチン、及びベンズ環化アルキンに好適である。好適なアルキンとしては、ジベンゾアザシクロオクチン又は
【化２２８】
2020521018.tif 000287
、ジベンゾシクロオクチン又は
【化２２９】
2020521018.tif 000288
、ビアリールアザシクロオクチノン又は
【化２３０】
2020521018.tif 000289
、二フッ素化シクロオクチン又は
【化２３１】
2020521018.tif 000290
、置換、例えば、フッ素化アルキン、アザ-シクロアルキン、ビシクル[6.1.0]ノニン又は
【化２３２】
2020521018.tif 000291
、及びこれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。特に有用なアルキンとしては、
【化２３３】
2020521018.tif 000292
が挙げられる。
【０１７０】
ある実施態様において、結合剤は、RGに直接的に結合している。ある実施態様において、結合剤は、スペーサーを介してRGに結合している。特定の実施態様において、結合剤は、PEGスペーサーを介してRGに結合している。ある実施態様において、結合剤は、1以上のアジド基を官能化することにより調製される。各々のアジド基は、RG'と反応して、RGを形成することができる。特定の実施態様において、結合剤は、グルタミン残基に連結された-PEG-N3で誘導体化される。例示的な-N3誘導体化結合剤、その調製方法、及びRG'との反応におけるその使用方法は、本明細書に提供されている。ある実施態様において、RG'は、1,3-付加環化への関与に好適なアルキンであり、RG'は、RG'とアジド官能化結合剤との反応から形成される1,2,3-トリアゾリル部分である。さらなる例として、ある実施態様において、RGは、
【化２３４】
2020521018.tif 000293
中に示される結合剤、又は各々の位置異性体の混合物に連結される。各々のR及びR'は、本明細書に記載されている通りである。
【０１７１】
本明細書中の式において、各々のAA1は、アミノ酸である。本明細書中の式におけるいくつかの例において、各々のAA2は、アミノ酸である。本明細書中の式におけるいくつかの例において、各々のAA2は、ジペプチドである。本明細書中の式におけるいくつかの例において、各々のAA2は、トリペプチドである。各々のAA1又はAA2の好適なアミノ酸としては、天然、非天然、標準的、非標準的、タンパク質構成性、非タンパク質構成性、及びL-又はD-アミノ酸が挙げられる。いくつかの実施態様において、該リンカーは、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリン、これらの誘導体、又はこれらの組合せを含む。ある実施態様において、該アミノ酸の1以上の側鎖は、下記の側鎖基に連結される。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、シトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、AA2は、アラニン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-グリシンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グリシン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、シトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グルタミン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、リジン-バリン-アラニンである。いくつかの実施態様において、AA2は、リジン-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グルタミン酸-バリン-シトルリンである。いくつかの実施態様において、AA2は、グルタミン-バリン-シトルリン-PABCである。
【０１７２】
当業者は、PABCを、以下の構造:
【化２３５】
2020521018.tif 000294
を有するp-アミノベンジルオキシカルボニルの残基として認識しているであろう。PABC残基は、インビトロ及びインビボで特定のリンカーの切断を促進することが示されている。
【０１７３】
いくつかの例において、該リンカーは、MC-Suc-PEGm-vc-PABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１７４】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEGm-vc-PABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１７５】
いくつかの例において、該リンカーは、MAL-PEGm-Lys(COT-CD)-vc-PABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。いくつかの例において、該リンカーは、MAL-PEGm-N(suc-DIBAC-CD)Lys-vc-PABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１７６】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-Lys(mc-pip-CD)-vc-PABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１７７】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-Suc-PEGm-N(CD-COT)Lys-vc-PABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１７８】
いくつかの例において、該リンカーは、BCN-PEGm-Lys(COT-CD)-vc-PABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１７９】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-Suc-PEGm-d-Lys(PEG4-COT-CD)-vc-PABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１８０】
いくつかの例において、該リンカーは、BCN-PEG4-d-Lys-(PEGm-COT-CD)-vc-PABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１８１】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEGm-Val-Alaである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１８２】
いくつかの例において、該リンカーは、PEGm-d-Lys-Val-Alaである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１８３】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEGm-d-Lys(PEGm)-vcPABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１８４】
いくつかの例において、該リンカーは、BCN-PEGm-d-Lys(PEGm)-Val-Alaである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１８５】
いくつかの例において、該リンカーは、BCN-PEGm-d-Lys(PEGm)-vcPABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１８６】
いくつかの例において、該リンカーは、BCN-PEG4-d-Lys-Val-Alaである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１８７】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEGm-d-Lys-vcPABである。下付文字mは、0〜4の整数である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。
【０１８８】
いくつかの例において、該リンカーは、MC-Suc-PEG4-vc-PABである。
【０１８９】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEG4-vc-PABである。
【０１９０】
いくつかの例において、該リンカーは、MAL-Lys(suc-DIBAC-CD)-vc-PABである。
【０１９１】
いくつかの例において、該リンカーは、MAL-PEG4-Lys(COT-CD)-vc-PABである。
【０１９２】
いくつかの例において、該リンカーは、MAL-PEG4-N(suc-DIBAC-CD)Lys-vc-PABである。
【０１９３】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-Lys(mc-pip-CD)-vc-PABである。
【０１９４】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-Suc-PEG4-N(CD-COT)Lys-vc-PABである。
【０１９５】
いくつかの例において、該リンカーは、BCN-PEG4-Lys(COT-CD)-vc-PABである。
【０１９６】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-Suc-PEG4-d-Lys(PEG4-COT-CD)-vc-PABである。
【０１９７】
いくつかの例において、該リンカーは、BCN-PEG4-d-Lys(PEG4-COT-CD)-vc-PABである。
【０１９８】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEG4-Val-Alaである。
【０１９９】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEG4-d-Lys(COT-CD)-Val-Alaである。
【０２００】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEG4-d-Lys(COT-CD)-Val-Alaである。
【０２０１】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEG4-Val-Alaである。
【０２０２】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEG4-d-Lys(COT-CD)-Val-Alaである。
【０２０３】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEG4-d-Lys(PEG4-COT-CD)-vcPABである。
【０２０４】
いくつかの例において、該リンカーは、BCN-PEG4-d-Lys(PEG4-COT-CD)-Val-Alaである。
【０２０５】
いくつかの例において、該リンカーは、BCN-PEG4-d-Lys(PEG4-COT-CD)-vcPABである。
【０２０６】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEG4-d-Lys(PEG4-COT-CD)-Val-Alaである。
【０２０７】
いくつかの例において、該リンカーは、BCN-PEG4-d-Lys(COT-CD)-Val-Alaである。
【０２０８】
いくつかの例において、該リンカーは、DIBAC-suc-PEG4-d-Lys(COT-CD)-vc-PABである。
【０２０９】
(反応性リンカー-ペイロード)
本明細書に提供されるコンジュゲートは、上記の反応基RG'を有する反応性リンカー-ペイロードから調製することができる。該反応性リンカーペイロードは、下記の方法に従って、本明細書に記載されるシクロデキストリン基、及び/又は結合剤に連結させることができる。
【０２１０】
いくつかの実施態様において、本明細書に示されるのは、少なくとも1つのペイロード部分に連結され、かつ共有結合性リンカーを介して反応基に連結された少なくとも1つのシクロデキストリン部分を含む反応性リンカー-ペイロードであり、ここで、該共有結合性リンカーは、該反応基、該ペイロード部分、該シクロデキストリン部分の各々に直接的に又は間接的に結合している。
【０２１１】
本明細書に示されているように、いくつかの例において、該反応基は、リジンアミノ酸などの、共有結合性リンカーに直接的に結合している。これは、該反応基が該共有結合性リンカーから1結合位置離れていることを意味する。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、ペイロード部分にも直接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが、限定されないが、MMAE、ステロイド、又は本明細書に示される任意のペイロードなどの、ペイロードから1結合位置離れていることを意味する。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、シクロデキストリン部分にも直接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが、本明細書に示されるシクロデキストリンなどの、シクロデキストリンから1結合位置離れていることを意味する。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、リジンアミノ酸又はその誘導体である。
【０２１２】
他の例において、該反応基は、共有結合性リンカーに間接的に結合している。これは、該反応基が該共有結合性リンカーから1結合位置よりも大きく離れていることを意味する。これは、該反応基が別の部分を介して該共有結合性リンカーに結合していることも意味する。例えば、該反応基は、該共有結合性リンカーに結合しているポリエチレングリコール基に結合していてもよい。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、ペイロード部分にも間接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが、限定されないが、MMAE、ステロイド、又は本明細書に示される任意のペイロードなどの、ペイロードから1結合位置よりも大きく離れていることを意味する。これは、該共有結合性リンカーが別の部分を介して該ペイロードに結合していることも意味する。例えば、該共有結合性リンカーは、限定されないが、Val-Ala又はVal-Citなどの、ジペプチドに結合していてもよく、該ジペプチドは、PABに結合していてもよく、該PABは、該ペイロードに結合していてもよい。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、シクロデキストリン部分にも間接的に結合している。これは、該共有結合性リンカーが本明細書に示されるシクロデキストリンなどの、シクロデキストリンから1結合位置よりも大きく離れていることを意味する。これは、該共有結合性リンカーが別の部分を介して該シクロデキストリンに結合していることも意味する。例えば、該共有結合性リンカーは、ポリエチレングリコール基に結合していてもよく、該ポリエチレングリコール基は、反応基に結合していてもよく、該反応基は、該シクロデキストリンに結合していてもよい。これらの例のいくつかにおいて、該共有結合性リンカーは、リジンアミノ酸又はその誘導体である。
【０２１３】
いくつかの実施態様において、本明細書に示されるのは、式(II)による反応性リンカー-ペイロードである:
【化２３６】
2020521018.tif 000295
。式(II)中、RG'は、反応基であり、Lは、三価リンカーであり、CDは、シクロデキストリン残基であり;かつPAは、ペイロード残基である。
【０２１４】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIa)による化合物である:
【化２３７】
2020521018.tif 000296
。式(IIa)中、RG'は、反応基であり、RGは、反応性リンカー残基であり、LLは、三価リンカーであり、SPは、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基であり;かつPAは、ペイロードである。
【０２１５】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIb)又は(IIc)による化合物である。いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIb)による化合物である:
【化２３８】
2020521018.tif 000297
。式(IIb)又は(IIc)のいずれかにおいて、RG'は、反応基であり、LLは、三価リンカーである。SPは、各々の場合に、独立に、非存在であるか又はスペーサーであり、環Aはトリアゾールに縮合しており、かつシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、及びヘテロシクロアルキニルからなる群から選択され、ここで、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、及びヘテロシクロアルキニルは、アルキル、OH、又はNRaRbで任意に置換されており、ここで、Ra及びRbの各々は、アルキル又はHであり、PAは、ペイロードである。いくつかの例において、環Aは、任意に置換されたシクロアルキルである。いくつかの例において、環Aは、任意に置換されたシクロアルケニルである。いくつかの例において、環Aは、任意に置換されたシクロアルキニルである。いくつかの例において、環Aは、任意に置換されたヘテロシクロアルキルである。いくつかの例において、環Aは、任意に置換されたヘテロシクロアルキニルである。いくつかの例において、式(IIb)又は(IIc)のいずれかに含まれるのは、式(IIb)又は(IIc)のいずれかの化合物の位置異性体(例えば、トリアゾール連結に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。
【０２１６】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIc)による化合物である:
【化２３９】
2020521018.tif 000298
。式(IIc)中、RG'は、反応基であり、LLは、三価リンカーである。SPは、非存在であるか又はスペーサーであり、PAは、ペイロードである。いくつかの例において、式(IIb)(IIc)に含まれるのは、式(IIc)の位置異性体(例えば、スクシンイミド連結に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。
【０２１７】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIb1)、(IIb2)、(IIb3)、(IIb4)、(IIb5)、又は(IIb6)による化合物である。いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIb1)による化合物である:
【化２４０】
2020521018.tif 000299
。式(IIb1)中、RG'は、反応基であり、LLは、三価リンカーである。SPは、非存在であるか又はスペーサーであり、PAは、ペイロードである。いくつかの例において、式(IIb1)に含まれるのは、式(IIb1)の化合物の位置異性体(例えば、トリアゾール連結に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。
【０２１８】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIb2)による化合物である:
【化２４１】
2020521018.tif 000300
。式(IIb2)中、RG'は、反応基であり、LLは、三価リンカーであり、SPは、非存在であるか又はスペーサーであり、PAは、ペイロードである。いくつかの例において、式(IIb2)に含まれるのは、式(IIb2)の化合物の位置異性体(例えば、トリアゾール連結に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。
【０２１９】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIb3)による化合物である:
【化２４２】
2020521018.tif 000301
。式(IIb3)中、RG'は、反応基であり、LLは、三価リンカーであり、PAは、ペイロードである。いくつかの例において、式(IIb3)に含まれるのは、式(IIb3)の化合物の位置異性体(例えば、トリアゾール連結に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。
【０２２０】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIb4)による化合物である:
【化２４３】
2020521018.tif 000302
。式(IIb4)中、RG'は、反応基であり、LLは、三価リンカーであり、PAは、ペイロードである。いくつかの例において、式(IIb4)に含まれるのは、式(IIb4)の化合物の位置異性体(例えば、トリアゾール連結に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。
【０２２１】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIb5)による化合物である:
【化２４４】
2020521018.tif 000303
。式(IIb5)中、RG'は、反応基であり、LLは、三価リンカーであり、neは、0〜4の整数であり、PAは、ペイロードである。いくつかの例において、eは0である。いくつかの例において、eは1である。いくつかの例において、eは2である。いくつかの例において、eは3である。いくつかの例において、eは4である。いくつかの例において、式(IIb5)に含まれるのは、式(IIb5)の化合物の位置異性体(例えば、トリアゾール連結に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。
【０２２２】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIb6)による化合物である:
【化２４５】
2020521018.tif 000304
。式(IIb6)中、RG'は、反応基であり、LLは、三価リンカーであり、neは、0〜4の整数であり、PAは、ペイロードである。いくつかの例において、eは0である。いくつかの例において、eは1である。いくつかの例において、eは2である。いくつかの例において、eは3である。いくつかの例において、eは4である。いくつかの例において、式(IIb6)に含まれるのは、式(IIb6)の化合物の位置異性体(例えば、トリアゾール連結に関して)、立体異性体、及びこれらの混合物である。
【０２２３】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIc1)による化合物である:
【化２４６】
2020521018.tif 000305
。式(IIc1)中、RG'は、結合剤であり、LLは、三価リンカーであり、PAは、ペイロードである。また、式(IIc1)に含まれるのは、その位置異性体(例えば、スクシンイミド連結に関して)、立体異性体、及び混合物である。
【０２２４】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IId)による化合物である:
【化２４７】
2020521018.tif 000306
。式(IId)中、RG'は、反応基であり、SP1及びSP2は、各々の場合に、各々独立に、非存在又はスペーサー基残基であり、ここで、SP1は、三価リンカーを含み、AA1は、アミノ酸残基を含む三価リンカーであり; AA2は、ジペプチド残基であり、PEGは、ポリエチレングリコール残基であり、PABは、
【化２４８】
2020521018.tif 000307
であり、ここで、
【化２４９】
2020521018.tif 000308
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し、CDは、各々の場合に、独立に、非存在又はシクロデキストリン残基であり、ここで、少なくとも1つのCDは存在しており、下付文字mは、0〜5の整数であり、下付文字pは、0又は1であり;かつPAは、ペイロード部分である。これらの例において、下付文字mは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。いくつかの例において、下付文字mは5である。いくつかの例において、下付文字pは0である。いくつかの例において、下付文字pは1である。
【０２２５】
式(IId)のいくつかの例において、CDは、構造:
【化２５０】
2020521018.tif 000309
による修飾されたCD基であり、ここで、RGは、各々の場合に、独立に;反応性リンカー残基であり、SP3は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eは、0〜4の整数であり、下付文字uは、1〜8の整数であり、かつ下付文字vは、1〜8の整数である; qは、0〜5の整数であり、かつ
【化２５１】
2020521018.tif 000310
は、該修飾CD基がSP1又はAA1に結合している原子を表す。
【０２２６】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIe)による化合物である:
【化２５２】
2020521018.tif 000311
。式(IIe)中、RG'は、反応基であり、RGは、反応基残基であり; SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり、ここで、AA2は、ジペプチド残基であり、PEGは、ポリエチレングリコール残基であり、PABは、
【化２５３】
2020521018.tif 000312
であり、ここで、
【化２５４】
2020521018.tif 000313
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し、CDは、非存在又はシクロデキストリン残基であり、下付文字mは、0〜5の整数であり、下付文字pは、0又は1であり;かつPAは、ペイロード部分である。これらの例において、下付文字mは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。いくつかの例において、下付文字mは5である。いくつかの例において、下付文字pは0である。いくつかの例において、下付文字pは1である。
【０２２７】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIe1)による化合物である:
【化２５５】
2020521018.tif 000314
。式(IIe1)中、RG'は、反応基であり、SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり、ここで、AA2は、ジペプチド残基であり、PEGは、ポリエチレングリコール残基であり、PABは、
【化２５６】
2020521018.tif 000315
であり、ここで、
【化２５７】
2020521018.tif 000316
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し、CDは、非存在又はシクロデキストリン残基であり、下付文字mは、0〜5の整数であり、下付文字pは、0又は1であり;かつPAは、ペイロード部分である。これらの例において、下付文字mは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。いくつかの例において、下付文字mは5である。いくつかの例において、下付文字pは0である。いくつかの例において、下付文字pは1である。
【０２２８】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIe2)による化合物である:
【化２５８】
2020521018.tif 000317
。式(IIe)中、RG'は、反応基であり、SP2は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり、AA2は、ジペプチド残基であり、PEGは、ポリエチレングリコール残基であり、PABは、
【化２５９】
2020521018.tif 000318
であり、ここで、
【化２６０】
2020521018.tif 000319
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し、CDは、シクロデキストリン残基であり、下付文字mは、0〜5の整数であり、下付文字pは、0又は1であり、かつPAは、ペイロード部分である。これらの例において、下付文字mは、0、1、2、3、4、又は5である。いくつかの例において、下付文字mは0である。いくつかの例において、下付文字mは1である。いくつかの例において、下付文字mは2である。いくつかの例において、下付文字mは3である。いくつかの例において、下付文字mは4である。いくつかの例において、下付文字mは5である。いくつかの例において、下付文字pは0である。いくつかの例において、下付文字pは1である。
【０２２９】
いくつかの例において、式(II)による化合物は、式(IIf)による化合物である:
【化２６１】
2020521018.tif 000320
。式(IIf)中、RG'は、結合剤であり、RGは、反応基残基であり、SP1、SP2、及びSP3は、各々の場合に、独立に、非存在又はスペーサー基残基であり、AA2は、ジペプチド残基であり、PEGは、ポリエチレングリコール残基であり、PABは、
【化２６２】
2020521018.tif 000321
であり、ここで、
【化２６３】
2020521018.tif 000322
は、該PABが該式中の隣接する基に結合している原子を示し、CDは、シクロデキストリン残基であり、下付文字qは、0〜5の整数であり、下付文字mは、0〜5の整数であり、下付文字pは、0又は1であり;かつPAは、ペイロード部分である。いくつかの例において、mは0である。いくつかの例において、mは1である。いくつかの例において、mは2である。いくつかの例において、mは3である。いくつかの例において、mは4である。いくつかの例において、mは5である。いくつかの例において、pは0である。いくつかの例において、pは1である。いくつかの例において、qは0である。いくつかの例において、qは1である。いくつかの例において、qは2である。いくつかの例において、qは3である。いくつかの例において、qは4である。いくつかの例において、qは5である。式(IIf)のいくつかの例において、SP1は、非存在であり、SP2は、各々の場合に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-、-C(O)-(CH2)u-C(O)-、-C(O)-NH-(CH2)v-、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、下付文字eは、0〜4の整数であり、下付文字uは、1〜8の整数であり、かつ下付文字vは、1〜8の整数である。
【０２３０】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、式(II)の化合物は、少なくとも1つのCD基を含む。具体的な例において、式(I)の化合物は、本明細書に記載される式(IIe)、式(IIe1)、又は式(IIe2)の化合物であり、かつ1つのCD基を含む。別の具体的な例において、式(II)の化合物は、本明細書に記載される式(IIf)の化合物であり、かつ1つのCD基を含む。
【０２３１】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に、シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、α-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、β-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、γ-シクロデキストリンである。これらの例のいずれかにおいて、α-、β-、又はγ-シクロデキストリンは、任意に置換されている。
【０２３２】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に:
【化２６４】
2020521018.tif 000323
から選択され、ここで、
【化２６５】
2020521018.tif 000324
は、該CDが該式中の隣接する基に結合している原子を示す。ある例において、CDは、
【化２６６】
2020521018.tif 000325
である。ある例において、CDは、
【化２６７】
2020521018.tif 000326
である。
【０２３３】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、RGは、各々の場合に、独立に、クリック化学反応由来の残基である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、RGは、各々の場合に、独立に、トリアゾール又は縮合トリアゾールを含む。
【０２３４】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、RG'は、各々の場合に、独立に、
【化２６８】
2020521018.tif 000327
からなる群から選択され、ここで、
【化２６９】
2020521018.tif 000328
は、該RG'が該式中の隣接する基に結合している原子を示す。これらの例のいくつかにおいて、RG'は、各々の場合に、独立に、
【化２７０】
2020521018.tif 000329
である。これらの例のいくつかにおいて、RG'は、各々の場合に、独立に、
【化２７１】
2020521018.tif 000330
である。これらの例のいくつかにおいて、RG'は、各々の場合に、独立に、
【化２７２】
2020521018.tif 000331
である。これらの例のいくつかにおいて、RG'は、各々の場合に、独立に、
【化２７３】
2020521018.tif 000332
である。これらの例のいくつかにおいて、RG'は、各々の場合に、独立に、
【化２７４】
2020521018.tif 000333
である。これらの例のいくつかにおいて、RG'は、各々の場合に、独立に、
【化２７５】
2020521018.tif 000334
である。これらの例のいくつかにおいて、RG'は、各々の場合に、独立に、
【化２７６】
2020521018.tif 000335
である。これらの例のいくつかにおいて、RG'は、各々の場合に、独立に、
【化２７７】
2020521018.tif 000336
である。これらの例のいくつかにおいて、RG'は、各々の場合に、独立に、
【化２７８】
2020521018.tif 000337
である。
【０２３５】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２７９】
2020521018.tif 000338
からなる群から選択され、ここで、
【化２８０】
2020521018.tif 000339
は、該RGが該式中の隣接する基に結合している原子を示す。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２８１】
2020521018.tif 000340
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２８２】
2020521018.tif 000341
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２８３】
2020521018.tif 000342
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２８４】
2020521018.tif 000343
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２８５】
2020521018.tif 000344
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２８６】
2020521018.tif 000345
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２８７】
2020521018.tif 000346
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２８８】
2020521018.tif 000347
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２８９】
2020521018.tif 000348
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２９０】
2020521018.tif 000349
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２９１】
2020521018.tif 000350
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２９２】
2020521018.tif 000351
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２９３】
2020521018.tif 000352
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２９４】
2020521018.tif 000353
である。これらの例のいくつかにおいて、RGは、各々の場合に、独立に、
【化２９５】
2020521018.tif 000354
である。
【０２３６】
いくつかの例において、
【化２９６】
2020521018.tif 000355
は、
【化２９７】
2020521018.tif 000356
2020521018.tif 000357
2020521018.tif 000358
から選択される。また含まれるのは、その塩、溶媒和物、立体異性体形態、これらの位置異性体、又はこれらの位置異性体の混合物であり、ここで、各々の
【化２９８】
2020521018.tif 000359
は、該ペイロードとの結合であり;かつR9は、-CH3又は-(CH2)3N(H)C(O)NH2である。いくつかの例において、R9は、-CH3である。いくつかの例において、R9は、-(CH2)3N(H)C(O)NH2である。
【０２３７】
いくつかの例において、式(II)の化合物は、
【化２９９】
2020521018.tif 000360
2020521018.tif 000361
2020521018.tif 000362
2020521018.tif 000363
2020521018.tif 000364
から選択される基、もしくはこれらの塩、溶媒和物、立体異性体形態、これらの位置異性体、又はこれらの位置異性体の混合物を含み、ここで、各々の
【化３００】
2020521018.tif 000365
は、該ペイロードとの結合である。
【０２３８】
いくつかの例において、-LL-は、式(LL1)
【化３０１】
2020521018.tif 000366
によるものであり、式中、RAA1、RAA2、及びRAA3は、各々独立に、アミノ酸側鎖であり、そのうちの少なくとも1つは、直接的に又は間接的に-SP-RG-SP-CDに結合している。いくつかの例において、RAA1は、リジンアミノ酸側鎖である。いくつかの例において、RAA2は、バリンアミノ酸側鎖である。いくつかの例において、RAA3は、アラニンアミノ酸側鎖である。いくつかの例において、RAA3は、シトルリンアミノ酸側鎖である。ある例において、RAA1は、CDに直接的に又は間接的に結合したリジンアミノ酸側鎖であり、RAA2及びRAA3は、独立に、バリン及びアラニンアミノ酸側鎖である。ある例において、RAA1は、CDに直接的に又は間接的に結合したリジンアミノ酸側鎖であり、RAA2及びRAA3は、独立に、バリン及びシトルリンアミノ酸側鎖である。
【０２３９】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、RAA1は、直接的に又は間接的にCDに結合したリジン側鎖であり、RAA2及びRAA3は、それぞれ、リジン及びバリン又はバリン及びリジン側鎖のいずれかである。
【０２４０】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に、シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、α-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、β-シクロデキストリンである。いくつかの例において、CDは、γ-シクロデキストリンである。これらの例のいずれかにおいて、α-、β-、又はγ-シクロデキストリンは、任意に置換されている。
【０２４１】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、CDは、各々の場合に、独立に:
【化３０２】
2020521018.tif 000367
から選択され、ここで、
【化３０３】
2020521018.tif 000368
は、該CDが該式中の隣接する基に結合している原子を示す。ある例において、CDは、
【化３０４】
2020521018.tif 000369
である。ある例において、CDは、
【化３０５】
2020521018.tif 000370
である。
【０２４２】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、-AA2-は、
【化３０６】
2020521018.tif 000371
である。
【０２４３】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、スペーサー基は、各々の場合に、独立に、C1-6アルキレン、-NH-、-C(O)-、(-CH2-CH2-O)e、-NH-CH2-CH2-(-O-CH2-CH2)e-C(O)-からなる群から選択される。
【０２４４】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字m、q、又はeは1である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字mは1である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字qは1である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字eは1である。
【０２４５】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字m、q、又はeは2である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字mは2である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字qは2である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字eは2である。
【０２４６】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字m、q、又はeは3である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字mは3である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字qは3である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字eは3である。
【０２４７】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字m、q、又はeは4である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字mは4である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字qは4である。前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字eは4である。
【０２４８】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、下付文字pは1である。
【０２４９】
前述のもののいずれかを含む、いくつかの例において、PAは、ドラスタチン、オーリスタチン、メイタンシノイド、植物アルカロイド、タキサン、及びビンカアルカロイドからなる群から選択される基の残基である。いくつかの例において、PAは、図1に示される任意の化合物である。
【０２５０】
いくつかの例において、式(II)の化合物は:
【化３０７】
2020521018.tif 000372
2020521018.tif 000373
2020521018.tif 000374
2020521018.tif 000375
2020521018.tif 000376
2020521018.tif 000377
2020521018.tif 000378
又はその立体異性体形態、又はその位置異性体、又はその位置異性体の混合物から選択される。
【０２５１】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、本明細書に示される化合物を含むリンカー-ペイロードである。
【０２５２】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、本明細書に記載される任意の化合物の酸素又は一級もしくは二級窒素に結合した本明細書に示される化合物を含むリンカー-ペイロードである。
【０２５３】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、抗体又はその抗原結合断片に結合した本明細書に示される化合物又はリンカー-ペイロードを含む抗体-薬物-コンジュゲートである。
【０２５４】
(化合物の調製方法)
本明細書に提供される化合物は、当業者に明白な任意の方法によって調製し、単離し、又は取得することができる。例示的な調製方法は、下記の実施例で詳細に記載されている。ある実施態様において、本明細書に提供される化合物は、図1〜11及び13〜14に従って調製することができる。
【０２５５】
本明細書に記載されるコンジュゲートは、本明細書に記載されるリンカー-ペイロードを、結合剤、例えば、抗体と、標準的なコンジュゲーション条件下でカップリングさせることにより合成することができる(例えば、引用により完全に本明細書中に組み込まれる、Doroninaらの文献、Nature Biotechnology 2003, 21, 7, 778を参照)。該結合剤が抗体である場合、該抗体は、該抗体の1以上のシステイン又はリジン残基を介して、リンカー-ペイロードにカップリングさせることができる。リンカー-ペイロードは、例えば、該抗体を、還元剤、例えば、ジチオテリトール(dithiotheritol)に供して、該抗体のジスルフィド結合を切断し、還元された抗体を、例えば、ゲル濾過によって精製し、その後、該抗体を、好適な反応部分、例えば、マレイミド基を含有するリンカー-ペイロードで処理することにより、システイン残基にカップリングさせることができる。好適な溶媒としては、水、DMA、DMF、及びDMSOが挙げられるが、これらに限定されない。反応基、例えば、活性化エステル又は酸ハライド基を含有するリンカー-ペイロードは、該抗体のリジン残基にカップリングさせることができる。好適なとしては、水、DMA、DMF、及びDMSOが挙げられるが、これらに限定されない。コンジュゲートは、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、透析、及び限外濾過/透析濾過を含む、公知のタンパク質技法を用いて精製することができる。
結合剤、例えば、抗体は、クリック化学反応を介してコンジュゲートすることもできる。該クリック化学反応のいくつかの実施態様において、該リンカー-ペイロードは、アジドとの1,3-付加環化反応を受けることができる反応基、例えば、アルキンを含む。そのような好適な反応基は、上で記載されている。該抗体には、1以上のアジド基を含む抗体が含まれる。そのような抗体には、例えば、アジド-ポリエチレングリコール基で官能化された抗体が含まれる。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも1つのグルタミン残基、例えば、重鎖Gln295及び/又はGln55を有する抗体を、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、一級アミン化合物で処理することにより誘導される。そのような抗体には、Asn297Gln(N297Q)突然変異体も含まれ得る。ある実施態様において、そのような官能化抗体は、少なくとも2つのグルタミン残基、例えば、重鎖Gln295及び重鎖Gln297を有する抗体を、酵素トランスグルタミナーゼの存在下において、一級アミン化合物で処理することにより誘導される。そのような抗体には、Asn297Gln(N297Q)突然変異体が含まれる。ある実施態様において、該抗体は、合計2つ又は合計4つのグルタミン残基に対して、この段落に記載されている2つの重鎖を有する。場合によっては、コンジュゲートされることになる抗体は、トランスグルタミナーゼが接近することができ、それゆえ、コンジュゲートされることができる1以上のさらなる天然のグルタミン残基、例えば、Gln55を、その可変領域に含有する。これらの場合、トランスグルタミナーゼによるコンジュゲーション後の抗体は、4よりも大きいDAR値を有し得る。そのような抗体には、Asn297Gln(N297Q)突然変異体が含まれる。いくつかの実施態様において、該抗体は、合計2つ又は合計4つ又は合計5つ又は6つのグルタミン残基に対して、この段落に記載されている2つの重鎖を有する。
【０２５６】
ある実施態様において、該抗体は、EU付番体系で295と付番された1以上の重鎖位置にグルタミン残基を含む。本開示において、この位置は、グルタミン295又はGln295又はQ295と呼ばれる。当業者は、これが多くの抗体の野生型配列中の保存されたグルタミン残基であることを認識しているであろう。他の有用な実施態様において、該抗体を、グルタミン残基を含むように改変することができる。グルタミン残基を含むように抗体配列を修飾する技法は、当業者の能力の範囲内である(例えば、Ausubelらの文献、Current Protoc. Mol. Biol.を参照)。
【０２５７】
ある実施態様において、該抗体は、2つのグルタミン残基を各々の重鎖に1つで含む。特定の実施態様において、該抗体は、各々の重鎖にQ295残基を含む。さらなる実施態様において、該抗体は、1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、又はそれより多くのグルタミン残基を含む。これらのグルタミン残基は、重鎖、軽鎖、又は重鎖と軽鎖の両方にあることができる。これらのグルタミン残基は、野生型残基又は改変残基であることができる。該抗体は、標準的な技法に従って調製することができる。ある実施態様において、該抗体は、Q55残基を含む又はさらに含む。
【０２５８】
当業者は、抗体が重鎖配列中の残基Q295近くの残基N297でグリコシル化されていることが多いことを認識しているであろう。残基N297におけるグリコシル化は、残基Q295においてトランスグルタミナーゼを妨害することができる(Dennlerらの文献、上記)。したがって、有利な実施態様において、抗体は、グリコシル化されていない。ある実施態様において、該抗体は、脱グリコシル化又はアグリコシル化されている。特定の実施態様において、抗体重鎖は、N297突然変異を有する。別の言い方をすれば、該抗体は、位置297にアスパラギン残基をもはや有さないように突然変異させられている。特定の実施態様において、抗体重鎖は、N297Q突然変異を有する。そのような抗体は、グリコシル化配列を除去もしくは無効化する部位特異的突然変異誘発によるか、又は任意の干渉するグリコシル化部位もしくは任意の他の干渉する構造から離れた部位にグルタミン残基を挿入する部位特異的突然変異誘発によって調製することができる。そのような抗体は、天然源又は人工源から単離することもできる。
【０２５９】
次に、干渉するグリコシル化を有さない抗体を一級アミン化合物で処理する。ある実施態様において、アグリコシル化抗体を一級アミン化合物で処理して、グルタミニル修飾抗体を生じさせる。ある実施態様において、脱グリコシル化抗体を一級アミン化合物で処理して、グルタミニル修飾抗体を生じさせる。
【０２６０】
一級アミンは、トランスグルタミナーゼの存在下でグルタミン残基との共有結合を形成することができる任意の一級アミンであることができる。有用な一級アミンは、本明細書に記載されている。トランスグルタミナーゼは、当業者によって好適であるとみなされる任意のトランスグルタミナーゼであることができる。ある実施態様において、トランスグルタミナーゼは、一級アミン化合物上の遊離アミン基とグルタミン残基の側鎖上のアシル基の間でのイソペプチド結合の形成を触媒する酵素である。トランスグルタミナーゼは、タンパク質-グルタミン-γ-グルタミルトランスフェラーゼとしても知られる。特定の実施態様において、トランスグルタミナーゼは、EC 2.3.2.13に分類されている。トランスグルタミナーゼは、好適であるとみなされる任意の源に由来するものであることができる。ある実施態様において、トランスグルタミナーゼは、微生物のものである。有用なトランスグルタミナーゼは、ストレプトミセス・モバラエンス(Streptomyces mobaraense)、ストレプトミセス・シンナモネウム(Streptomyces cinnamoneum)、ストレプトミセス・グリセオ-カルネウム(Streptomyces griseo-carneum)、ストレプトミセス・ラベンデュラエ(Streptomyces lavendulae)、及び枯草菌(Bacillus subtilis)から単離されている。哺乳動物のトランスグルタミナーゼを含む、非微生物のトランスグルタミナーゼを使用することもできる。ある実施態様において、トランスグルタミナーゼは、任意の技法によって産生するか、又は当業者によって好適であるとみなされる任意の源から入手することができる。特定の実施態様において、トランスグルタミナーゼは、市販の供給源から入手される。
【０２６１】
特定の実施態様において、一級アミン化合物は、トランスグルタミネーション後のさらなる反応が可能な反応基を含む。これらの実施態様において、グルタミニル修飾抗体を反応性ペイロード化合物もしくは反応性リンカー-ペイロード化合物と反応させるか又はこれらで処理して、抗体-ペイロードコンジュゲートを形成させることができる。ある実施態様において、一級アミン化合物は、本明細書に記載されるアジドを含む。
【０２６２】
ある実施態様において、グルタミニル修飾抗体を反応性リンカー-ペイロードと反応させるか又はこれで処理して、抗体-ペイロードコンジュゲートを形成させる。この反応は、当業者によって好適であるとみなされる条件下で進行することができる。ある実施態様において、グルタミニル修飾抗体を、該グルタミニル修飾抗体とリンカー-ペイロード化合物の間での結合を形成させるのに好適な条件下で反応性リンカー-ペイロード化合物と接触させる。好適な反応条件は、当業者に周知である。
【０２６３】
例示的な反応は、下記の実施例で提供されている。
【０２６４】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、コンジュゲートを作製する方法であって、化合物を、カップリング条件下、結合剤で処理するか又は結合剤と接触させることを含み、ここで、該化合物が、少なくとも1つのペイロード部分に連結し、かつ共有結合性リンカーを介して少なくとも1つのシクロデキストリン部分に連結した反応性リンカーを含み、ここで、該共有結合性リンカーが、該反応性リンカー、該ペイロード部分、該シクロデキストリン部分の各々に直接的に又は間接的に結合している、方法である。いくつかの例において、結合剤と反応する化合物は、式(II)による化合物である:
【化３０８】
2020521018.tif 000379
。式(II)中、RG'は、反応基であり、Lは、三価リンカーであり、CDは、シクロデキストリン残基であり;かつPAは、ペイロード残基である。
【０２６５】
いくつかの例において、式(II)の化合物と反応する結合剤は、抗体又はその抗原結合断片である。
【０２６６】
本明細書中のいくつかの例において、d-Lysは、図20に示される試薬と置き換えることができる。
【０２６７】
いくつかの例において、シクロデキストリン含有部分は、[3+2]クリック反応、ディールス・アルダー反応、還元アミノ化、フォトクリック反応、又は他の反応から選択される生物直交反応で反応することができる。
【０２６８】
本明細書中の方法とともに使用するのに好適な他の有用な生物直交反応としては、シュタウディンガーライゲーション、クリック反応、テトラジンライゲーション、及びフォトクリック反応が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２６９】
以下の参考文献は、本明細書に示される生物直交反応とともに使用し得る例となる反応及び試薬を示している: Zheng, Mengmengらの文献、Molecules 2015, 20, 3190-3205(この内容は、あらゆる目的のために引用により完全に本明細書中に組み込まれる)。
【０２７０】
(医薬組成物及び治療方法)
本明細書に提供されるのは、疾患、疾病、又は障害を治療及び予防する方法であって、1以上の本明細書に開示される化合物、例えば、1以上の本明細書に提供される式の化合物の治療又は予防有効量を投与することを含む、方法である。当業者は、該疾患、障害、及び/又は疾病に、限定されないが、本明細書に掲載されている抗原と関連するものが含まれることを理解しているであろう。
【０２７１】
本明細書に記載される化合物は、単独で又は1以上のさらなる治療剤と一緒に投与することができる。1以上のさらなる治療剤は、本明細書に記載される化合物の投与の直前に、その投与と同時に、又はその投与の直後に投与することができる。本開示は、本明細書に記載される化合物のいずれかを1以上のさらなる治療剤との組合せで含む医薬組成物、及びそのような組合せをそれを必要としている対象に投与することを含む治療方法も含む。
【０２７２】
好適なさらなる治療剤としては:第二のグルココルチコイド、自己免疫治療剤、ホルモン剤、生物製剤(biologic)、又はモノクローナル抗体が挙げられるが、これらに限定されない。好適な治療剤としては、本明細書に記載される化合物の任意の医薬として許容し得る塩、酸、又は誘導体も挙げられるが、これらに限定されない。
【０２７３】
本明細書に記載される方法のいくつかの実施態様において、複数用量の本明細書に記載される化合物(又は本明細書に記載される化合物と本明細書に言及されるさらなる治療剤のいずれかの組合せを含む医薬組成物)を規定の時間経過にわたって対象に投与することができる。本開示のこの態様による方法は、対象に、複数用量の本明細書に記載される化合物を順次投与することを含む。本明細書で使用される場合、「順次投与する」とは、各々の用量の該化合物が、異なる時点で、例えば、所定の間隔(例えば、時間、日、週、又は月)で区切られた異なる日に、対象に投与することを意味する。本開示は、患者に、単一の初回用量の本明細書に記載される化合物、その後、1以上の二次用量の該化合物、及び任意にその後、1以上の三次用量の該化合物を順次投与することを含む方法を含む。
【０２７４】
「初回用量」、「二次用量」、及び「三次用量」という用語は、本明細書に記載される化合物の投与の時系列を指す。したがって、「初回用量」は、治療レジメンの開始時に投与される用量(別名、「ベースライン用量」)であり;「二次用量」は、初回用量の後に投与される用量であり;「三次用量」は、二次用量の後に投与される用量である。初回用量、二次用量、及び三次用量は全て、同じ量の本明細書に記載される化合物を含有し得るが、通常、投与の頻度に関して互いに異なり得る。ある実施態様において、初回用量、二次用量、及び/又は三次用量に含まれる化合物の量は、治療経過中、互いに変化する(例えば、必要に応じて、上方調整又は下方調整される)。ある実施態様において、2以上の(例えば、2、3、4、又は5)用量が治療レジメンの開始時に「ローディング用量」として投与され、その後、より低い頻度で投与される後続の用量(例えば、「維持用量」)として投与される。
【０２７５】
本開示のある例示的な実施態様において、各々の二次及び/又は三次用量は、直前の用量から1〜26週間(例えば、1、11/2、2、21/2、3、31/2、4、41/2、5、51/2、6、61/2、7、71/2、8、81/2、9、91/2、10、101/2、11、111/2、12、121/2、13、131/2、14、141/2、15、151/2、16、161/2、17、171/2、18、181/2、19、191/2、20、201/2、21、211/2、22、221/2、23、231/2、24、241/2、25、251/2、26、261/2週間、又はそれより長い期間)後に投与される。本明細書で使用される「直前の用量」という語句は、一連の複数回の投与において、介入用量のない順序で、そのまさに次の用量の投与前に患者に投与される化合物の用量を意味する。
【０２７６】
本開示のこの態様による方法は、患者に、任意の数の二次及び/又は三次用量の化合物を投与することを含み得る。例えば、ある実施態様において、単一の二次用量のみが患者に投与される。他の実施態様において、2以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、又はそれより多く)の二次用量が患者に投与される。同様に、ある実施態様において、単一の三次用量のみが患者に投与される。他の実施態様において、2以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、又はそれより多く)の三次用量が患者に投与される。投与レジメンは、特定の対象の生涯にわたって無期限に、又はそのような治療がもはや治療的に必要でなくなるかもしくは有益でなくなるまで実施することができる。
【０２７７】
複数の二次用量を含む実施態様において、各々の二次用量は、他の二次用量と同じ頻度で投与されてもよい。例えば、各々の二次用量は、患者に、直前の用量から1〜2週間後又は1〜2カ月後に投与されてもよい。同様に、複数の三次用量を含む実施態様において、各々の三次用量は、他の三次用量と同じ頻度で投与されてもよい。例えば、各々の三次用量は、患者に、直前の用量から2〜12週間後に投与されてもよい。本開示のある実施態様において、二次及び/又は三次用量が患者に投与される頻度は、治療レジメンの経過にわたって変化し得る。投与の頻度はまた、臨床検査後の個々の患者の必要性に応じて、医師により、治療経過中に調整されてもよい。
【０２７８】
本開示は、2〜6のローディング用量が、第一の頻度(例えば、週に1回、2週間毎に1回、3週間毎に1回、月に1回、2カ月毎に1回など)で患者に投与され、その後、2以上の維持用量がより低い頻度で患者に投与される投与レジメンを含む。例えば、本開示のこの態様によれば、ローディング用量が月に1回の頻度で投与される場合、維持用量は、6週間毎に1回、2カ月毎に1回、3カ月毎に1回などで、患者に投与されてもよい。
【０２７９】
本開示は、本明細書に記載される化合物及び/又はコンジュゲート、例えば、式I、Ia、Ibの化合物の医薬組成物、例えば、本明細書に記載される化合物、その塩、立体異性体、多形、並びに医薬として許容し得る担体、希釈剤、及び/又は賦形剤を含む組成物を含む。好適な担体、希釈剤、及び賦形剤の例としては:適切な組成物pHの維持のためのバッファー(例えば、クエン酸塩バッファー、コハク酸塩バッファー、酢酸塩バッファー、リン酸塩バッファー、乳酸塩バッファー、シュウ酸塩バッファーなど)、担体タンパク質(例えば、ヒト血清アルブミン)、食塩水、ポリオール(例えば、トレハロース、スクロース、キシリトール、ソルビトールなど)、界面活性剤(例えば、ポリソルベート20、ポリソルベート80、ポリオキソレートなど)、抗菌薬、及び抗酸化剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２８０】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、疾患、障害、又は疾病を治療する方法であって、該障害を有する患者に、式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ib1)、(Ib2)、(Ib3)、(Ib4)、(Ib5)、(Ib6)、(Ic)、(Ic1)、(Id)、(Ie)、(Ie1)、(1e2)、(If)の化合物、又はその医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法である。
【０２８１】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、疾患、障害、又は疾病を予防する方法であって、該障害を有する患者に、式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ib1)、(Ib2)、(Ib3)、(Ib4)、(Ib5)、(Ib6)、(Ic)、(Ic1)、(Id)、(Ie)、(Ie1)、(1e2)、(If)の化合物、又はその医薬組成物の予防有効量を投与することを含む、方法である。
【０２８２】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、増殖性障害、神経変性障害、免疫学的障害、自己免疫疾患、炎症性障害、皮膚疾患、代謝性疾患、心血管疾患、及び胃腸疾患からなる群から選択される疾患、障害、又は疾病を治療又は予防する方法である。
【０２８３】
本明細書に提供されるのは、細胞におけるLDLR(低密度リポタンパク質受容体)タンパク質発現又はコレステロール流出を調節する方法であって、該細胞を、抗体薬物コンジュゲート(ADC)と接触させることを含み、ここで、該ADCが該細胞を標的とする抗体とシクロデキストリンとLXRアゴニストとを含む、方法である。
【０２８４】
増殖性障害は、当業者に公知の任意の増殖性障害であることができる。ある実施態様において、増殖性障害には、限定されないが、腫瘍学的障害(oncology disorder)が含まれ、ここで、該腫瘍学的障害は、当業者に公知の任意の癌障害であることができる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、メラノーマを治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、転移性メラノーマを治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、肺癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、EGFR-チロシンキナーゼインヒビター抵抗性肺癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、口腔癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、口腔扁平上皮細胞癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、前立腺癌を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、ホジキンリンパ腫を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、乳癌を治療又は予防する方法である。
【０２８５】
神経変性障害は、当業者に公知の任意の神経変性障害であることができる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、アルツハイマー病を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、パーキンソン病を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、ハンチントン病を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、筋萎縮性側索硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、ミエリン遺伝子発現を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、髄鞘形成及び髄鞘再生の疾病、疾患、又は障害を治療又は予防する方法である。
【０２８６】
免疫学的障害は、当業者に公知の任意の免疫学的障害であることができる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、潰瘍性大腸炎を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、クローン病を治療又は予防する方法である。
【０２８７】
炎症性障害は、当業者に公知の任意の炎症性障害であることができる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、関節炎を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、関節リウマチを治療又は予防する方法である。
【０２８８】
代謝性疾患は、当業者に公知の任意の代謝性疾患であることができる。ある実施態様において、脂質異常症は、高脂血症、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、高リポタンパク血症、HDL欠損症、ApoA-I欠損症、並びに心血管疾患、例えば、冠動脈疾患(例えば、狭心症、心筋梗塞、及び突然心臓死の治療及び予防を含む);アテローム性動脈硬化症(例えば、アテローム性動脈硬化症の治療及び予防を含む);並びに再狭窄(例えば、バルーン血管形成術などの医療処置の結果として生じるアテローム性動脈硬化性プラークの治療又は予防を含む)からなる群から選択される。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、糖尿病を治療又は予防する方法である。
【０２８９】
心血管疾患は、当業者に公知の任意の心血管疾患であることができる。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、アテローム性動脈硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、異常なマクロファージプロセシングから生じるアテローム性動脈硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、マクロファージがoxLDLをプロセシングすることができない酸化低密度リポタンパク質(oxLDL)の形成から生じるアテローム性動脈硬化症を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、虚血性心疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、卒中を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、高血圧性心疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、大動脈瘤を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、心内膜炎を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、末梢動脈疾患を治療又は予防する方法である。ある実施態様において、本明細書に提供されるのは、この段落で提供されている疾患のいずれかの組合せを治療又は予防する方法である。
【０２９０】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、核内受容体の機能を調節する方法である。非限定的な例として、該機能は、炎症性メディエーター(例えば、サイトカイン、ケモカイン)の発現/分泌、コレステロール調節、コレステロール摂取、コレステロール流出、コレステロール酸化、遊走、走化性、アポトーシス及び壊死、炎症活性、脂質調節、アポトーシス、遊走、走化性、遺伝子転写、並びにタンパク質発現から選択され得る。
【０２９１】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、それを必要としている患者の疾患又は障害を治療する方法であって、該患者に、本明細書に示される化合物又は医薬組成物を投与することを含む、方法である。いくつかの例において、投与される化合物は、本明細書に示される抗体-薬物コンジュゲートである。
【０２９２】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、結合剤を、リンカー-ペイロード化合物と、該結合剤と該化合物の間での結合を形成させるのに好適な条件下で接触させる工程を含む、抗体-薬物コンジュゲートの方法である。
【０２９３】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、対象の増殖性疾患、代謝性疾患、炎症、又は神経変性疾患を治療する方法であって、該対象に、本明細書に示される化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、方法である。いくつかの例において、投与される化合物は、本明細書に示される抗体-薬物コンジュゲートである。
【０２９４】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、対象の疾患、障害、又は疾病を治療する方法であって、該対象に、本明細書に示される化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、方法である。いくつかの例において、投与される化合物は、本明細書に示される抗体-薬物コンジュゲートである。
【０２９５】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、対象の増殖性疾患を治療する方法であって、該対象に、本明細書に示される化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、方法である。いくつかの例において、投与される化合物は、本明細書に示される抗体-薬物コンジュゲートである。
【０２９６】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、対象の代謝性疾患を治療する方法であって、該対象に、本明細書に示される化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、方法である。いくつかの例において、投与される化合物は、本明細書に示される抗体-薬物コンジュゲートである。
【０２９７】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、対象の炎症を治療する方法であって、該対象に、本明細書に示される化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、方法である。いくつかの例において、投与される化合物は、本明細書に示される抗体-薬物コンジュゲートである。
【０２９８】
いくつかの例において、本明細書に示されるのは、対象の神経変性疾患を治療する方法であって、該対象に、本明細書に示される化合物又は医薬組成物の有効治療量を投与することを含む、方法である。いくつかの例において、投与される化合物は、本明細書に示される抗体-薬物コンジュゲートである。
【実施例】
【０２９９】
(実施例)
本実施例に示されるのは、抗体を少なくとも3つのタイプのペイロードと連結させるシクロデキストリン-(PEG)nリンカーである(図1を参照)。抗HER2抗体及び抗PRLR(抗PRLR Ab)抗体という2つの抗体をコンジュゲーションで使用した。これらの抗体は、マレイミド-リンカー-ペイロードに直接(図13を参照)又は[3+2]クリック反応によってアジド官能基を介してDIBAC-リンカー-ペイロードに結合していた(図14を参照)。
【０３００】
シクロデキストリン部分を有さないものと比較して、シクロデキストリン-(PEG)nリンカーを有するコンジュゲートは、より低い計算LogP/LogD値、逆HPLCでのより短い保持時間、及びより良好な水溶解度を示し、より良好な親水性を示した(表8)。これらの新しいリンカー-ペイロードはまた、カテプシンBアッセイで切断可能であった(表8)。さらに、これらのADCは、インビトロアッセイでCD部分を有さないものと同等の生体活性を示した(表10、11、12)。
【０３０１】
本明細書で使用される場合、本明細書中のプロセス及び実施例で使用される記号及び慣例は、別途そうでないことが指定されない限り、現代の科学文献、例えば、the Journal of the American Chemical Society又はthe Journal of Biological Chemistryで使用されているものと一致している。具体的には、限定されないが、以下の略語を実施例及び本明細書の全体を通じて使用することができる:
【表１】
2020521018.tif 000380
2020521018.tif 000381
2020521018.tif 000382
2020521018.tif 000383
【０３０２】
本発明の特定の実施態様を以下の非限定的な実施例によって説明する。
【０３０３】
別途明示的に記述されない限り、試薬及び溶媒は、市販の供給源、例えば、Sinopharm Chemical Reagent Co.(SCRC)、Sigma-Aldrich、Alfa、又は他の供給業者から入手した。
【０３０４】
1H NMR及び他のNMRスペクトルをBruker AVIII 400又はBruker AVIII 500で記録した。データをNutsソフトウェア又はMestReNovaソフトウェアで処理し、プロトンシフトを内部標準(例えば、テトラメチルシラン(TMS))から低磁場方向に移動した百万分率(ppm)で測定した。
【０３０５】
HPLC-MS測定を、以下の条件を用いて、Agilent 1200 HPLC/6100 SQシステムで実行した。
【０３０６】
HPLC-MS測定のための方法Aには、移動相として: A:水(0.01％トリフルオロ酢酸(TFA))、B:アセトニトリル(0.01％TFA);勾配相: 5％のBを15分(min)以内に95％のBまで増大させた;流速: 1.0mL/分;カラム: SunFire C18、4.6×50mm、3.5μm;カラム温度: 50℃、検出器:アナログ・デジタル変換器(ADC)蒸発光散乱検出器(ELSD)、ダイオードアレイ検出器(DAD)(214nm及び254nm)、エレクトロスプレーイオン化-大気イオン化(ES-API)が含まれた。
【０３０７】
HPLC-MS測定のための方法Bには、移動相として: A:水(10mM NH4HCO3)、B:アセトニトリル;勾配相: 15分以内に5％から95％のB;流速: 1.0mL/分;カラム: XBridge C18、4.6×50mm、3.5μm;カラム温度: 50℃、検出器: ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、質量選択的検出器(MSD)(ES-API)が含まれた。
【０３０８】
LC-MS測定を、以下の条件を用いて、Agilent 1200 HPLC/6100 SQシステムで実行した:
【０３０９】
LC-MS測定のための方法Aには、装置として: WATERS 2767;カラム: 2つが直列に接続された、Shimadzu Shim-Pack、PRC-ODS、20×250mm、15μm;移動相: A:水(0.01％TFA)、B:アセトニトリル(0.01％TFA);勾配相: 5％のBを3分以内に95％のBまで増大させた;流速: 1.8〜2.3mL/分;カラム: SunFire C18、4.6×50mm、3.5μm;カラム温度: 50℃、検出器: ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、ES-APIが含まれた。
【０３１０】
LC-MS測定のための方法Bには、装置として: Gilson GX-281;カラム: Xbridge Prep C18 10μm OBD、19×250mm;移動相: A:水(10mM NH4HCO3)、B:アセトニトリル;勾配相: 3分以内に5％から95％のB;流速: 1.8〜2.3mL/分;カラム: XBridge C18、4.6×50mm、3.5μm;カラム温度: 50℃、検出器: ADC ELSD、DAD(214nm及び254nm)、MSD(ES-API)が含まれた。
【０３１１】
酸性溶媒系(方法A)又は塩基性溶媒系(方法B)での分取高圧液体クロマトグラフィー(分取HPLC)をGilson GX-281装置で利用した。酸性溶媒系では、Waters SunFire 10μm C18カラム(100Å、250×19mm)が使用され、分取HPLC用の溶媒Aは、水/0.05％TFAであり、溶媒Bは、アセトニトリルであった。溶出条件は、30mL/分の流速での20分間にわたる5％から100％への溶媒Bの線形勾配増加であった。塩基性溶媒系には、Waters Xbridge 10μm C18カラム(100Å、250×19mm)が含まれ、分取HPLC用の溶媒Aは、水/10mM重炭酸アンモニウム(NH4HCO3)であり、溶媒Bは、アセトニトリルであった。溶出条件は、30mL/分の流速での20分間にわたる5％から100％への溶媒Bの線形勾配増加であった。
【０３１２】
フラッシュクロマトグラフィーは、Agelaフラッシュカラムシリカ-CSカートリッジを用いて、Biotage装置で実施し;逆相フラッシュクロマトグラフィーは、Boston ODS又はAgela C18カートリッジを用いて、Biotage装置で実施した。
表1．リンカー-ペイロードのリスト表
【表２】
2020521018.tif 000384
表2A．リンカー-ペイロードの構造
【表３】
2020521018.tif 000385
2020521018.tif 000386
2020521018.tif 000387
2020521018.tif 000388
2020521018.tif 000389
2020521018.tif 000390
2020521018.tif 000391
2020521018.tif 000392
表2B．リンカー-ペイロードcLogP
【表４】
2020521018.tif 000393
+≦-6; -6＜++≦-3; -3＜+++≦1; 1＜++++≦5; 5＜+++++≦9.5
表3A．リンカー-ペイロードの分析結果
【表５】
2020521018.tif 000394
表3B．リンカー-ペイロードの分析結果
【表６】
2020521018.tif 000395
2020521018.tif 000396
【０３１３】
実施例1〜6には、とりわけ、本明細書に記載されるリンカー、リンカー-ペイロード、及び/又はコンジュゲートの合成に向けた合成中間体に有用な特定の化合物の調製が記載されている。
【０３１４】
(実施例1)
(中間体5aの調製(図2参照))
((2R)-6-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4,6,8,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]ヘキサン酸(5a))
DMF(10mL)中のH-D-Lys(Boc)-OH(11a、0.25g、1.0mmol)の混合物に、6-マレイミドカプロン酸-NHS(10a、0.31g、1.0mmol)及びDIPEA(0.26g、2.0mmol)を室温で順次添加した。化合物11aが完全に消費されるまで、反応液を室温で一晩撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。該混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水(0.05％TFA)中の0〜100％アセトニトリル)によりそのまま分離すると、中間体Boc-12a(ESI m/z: 440(M+H)+)が無色の油状物として得られ、これをDCM(5mL)に溶解させた。該溶液に、TFA(0.5mL)を0℃で滴加し、混合物を室温で1時間撹拌した。中間体Boc-12aが完全に消費されるまで、反応をLCMSによりモニタリングした。揮発性物質を真空中で除去すると、粗12a(ESI m/z: 340(M/2+H)+)が得られ、これをそれ以上精製することなく、次の工程に使用した。DMF(5mL)中の粗化合物12a(0.21g、0.62mmol)の混合物に、活性化エステル10b(0.20g、0.50mmol)及びDIPEA(50mg、0.39mmol)を室温で順次添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した後、化合物12aが完全に消費され、これをLCMSによりモニタリングした。その後、反応混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中の0〜100％アセトニトリル)によりそのまま分離すると、化合物5a(10aから3工程で0.10g、20％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 627(M+H)+。
【化３０９】
2020521018.tif 000397
【０３１５】
(実施例2)
(中間体5bの調製(図2参照))
((2S)-6-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4,6,8,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]ヘキサン酸(5b))
H-D-Lys(Boc)-OH(11a)の代わりにH-L-Lys(Boc)-OH(11b)を用いることを除く、中間体5aについての実施例1の手順の後に、中間体5bが白色の固体として得られた(11bから0.16g、19％収率)。ESI m/z: 627(M+H)+。
【化３１０】
2020521018.tif 000398
【０３１６】
(実施例3)
(中間体5cの調製(図2参照))
((2R)-2-アミノ-6-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4,6,8,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)ヘキサン酸(12c))
無水DMF(3.0mL)中の市販のH-D-Lys(Fmoc)-OH(11c、0.55g、1.5mmol)の混合物に、DIPEA(0.38g、3.0mmol)及び化合物10b(Accounts of Chemical Research, 2011, 805-815を参照)(0.60g、1.5mmol)を室温で順次添加した。LCMSによりモニタリングして、化合物11cが完全に消費されるまで、得られた溶液を室温で2時間撹拌した。その後、混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中の0〜80％アセトニトリル)により精製すると、中間体Fmoc-12c(0.48g、49％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 656.3(M+H)+。DMF(3mL)中の中間体Fmoc-12c(0.15g、0.23mmol)の混合物に、ジエチルアミン(0.1mL)を添加した。混合物を室温で1時間撹拌し、LCMSにより、Fmoc-12cが完全に消費されていることが示された。該混合物を濾過し、濾液を分取HPLC(方法B)により精製すると、化合物12c(42mg、42％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 434(M+H)+。
【化３１１】
2020521018.tif 000399
【０３１７】
((2R)-6-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4,6,8,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-2-[1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]ヘキサン酸(5c))
DMF(2mL)中の化合物12c(40mg、92μmol)の混合物に、DMF中の化合物4d(41mg、0.11mmol)及びTEA(18mg、0.18mmol)を室温で順次添加した。混合物を室温で1時間撹拌した後、LCMSによりモニタリングしたとき、化合物4dの大部分は消費されていた。その後、得られた混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中の0〜100％アセトニトリル)によりそのまま分離すると、中間体5c(33mg、47％収率)が薄黄色の油状物として得られた。ESI m/z: 761(M+H)+。
【化３１２】
2020521018.tif 000400
【０３１８】
(実施例4)
(中間体6bの調製(図3参照))
([31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル4-メチルベンゼン-1-スルホネート(14)2)
α-シクロデキストリン(13、10g、10mmol)の無水ピリジン(Py)溶液(0.32L)に、塩化4-トルエンスルホニル(TsCl)(20g、0.10mol)を室温で添加した。混合物をこの温度で15分間撹拌し、水(60mL)ですぐにクエンチした。反応混合物を減圧下で濃縮して、揮発性物質(ピリジン及び水)を除去した。残渣を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中の0〜25％アセトニトリル)により精製すると、生成物14(1.1g、10％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1127(M+H)+。
【０３１９】
(5,10,15,20,25-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-30-(ピペラジン-1-イルメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデコール(6b))
ピペラジン(1.7g、20mmol)中の化合物14(1.2g、1.0mmol)の混合物を密閉し、120℃で16時間撹拌した。反応液を室温に冷却した後、混合物をDMF(3mL)及びアセトニトリル(30mL)で希釈した。沈殿を濾過により回収し、その後、粗生成物を分取HPLC(方法B)により精製すると、中間体6b(0.32g、30％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1041(M+H)+。
【０３２０】
(実施例5)
(中間体7aの調製(図4参照))
((2R)-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-2-{[(9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル]アミノ}ヘキサン酸(7a))
DMF(2mL)中の市販化合物17(65mg、0.23mmol、CAS: 1425803-45-7)の混合物に、Fmoc-D-Lys-OH(15a、85mg、0.23mmol)及びトリエチルアミン(52mg、0.51mmol)を添加した。反応混合物を室温で30分間撹拌した。該混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水(0.05％TFA)中の0〜100％アセトニトリル)によりそのまま分離すると、中間体7a(85mg、収率70％)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 533(M+H)+。
【化３１３】
2020521018.tif 000401
【０３２１】
(実施例6)
(中間体7bの調製(図4参照))
((R)-26-(((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニルアミノ)-2,2-ジメチル-4,20-ジオキソ-3,8,11,14,17-ペンタオキサ-5,21-ジアザヘプタコサン-27-酸(16))
DMF(10mL)中の化合物10c(4.6g、10mmol、CAS: 859230-20-9)の混合物に、15a(3.6g、10mmol)及びトリエチルアミン(2.0g、20mmol)を添加した。化合物15aが完全に消費されるまで、反応混合物を25℃で1時間撹拌し、これをTLCによりモニタリングした。該混合物をDCMで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(DCM中の0〜5％メタノール)により精製すると、16(5.5g、77％収率)が無色の油状物として得られた。ESI m/z: 716.2(M+H)+。
【化３１４】
2020521018.tif 000402
【０３２２】
((24R)-24-(((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニルアミノ)-1-(シクロオクタ-2-イニルオキシ)-2,18-ジオキソ-6,9,12,15-テトラオキサ-3,19-ジアザペンタコサン-25-酸(7b))
化合物16(0.60g、0.84mmol)のDCM(10mL)溶液に、トリフルオロ酢酸(2.0mL)を0℃で添加した。反応溶液を温め、化合物16が完全に消費されるまで25℃で一晩撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした(ESI m/z: 616.3(M+H)+)。揮発性物質を真空中で除去すると、粗15bが得られ、これを次の工程にそのまま使用した。
【０３２３】
15aの代わりに15bを用いることを除く、中間体7aを作製するための実施例5の手順の後に、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(DCM中の0〜5％メタノール)による精製の後に、表題化合物7bが無色の油状物として得られた(0.38g、49％収率)。ESI m/z: 780.3(M+H)+。
【化３１５】
2020521018.tif 000403
【０３２４】
(実施例7)
(一般的手順A(図5参照):)
Fmoc-vc-PAB-PNP(2a、0.68-1.0当量)及び化合物1(1e、1f、1g、1h、1i、又は1m、1.0当量)のDMF溶液に、シリンジによりDIPEA(5当量)をRTで添加した。混合物を25℃で16〜24時間撹拌し、LCMSによると、2aの大部分が消費された。得られた混合物に、ピペリジン(0.1〜1mL、過剰)を添加し、Fmocが完全に除去されるまで、これを25℃で2時間撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。膜に通して濾過した後、濾液を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、化合物3(32〜73％収率)が白色の固体として得られた。表4は、化合物3e〜3g、3H、及び3Iを作製するための具体的な反応条件を提供している。
表4
【表７】
2020521018.tif 000404
Pip.*＝ピペリジン;精製*:分取HPLC法; **:同等量のHOBtを含む
【０３２５】
(実施例8)
(一般的手順B(図6参照):)
酸(Fmoc-Val-Ala-OH(2b)、Fmoc-dLys(COT)-OH(7a)、又はFmoc-dLys(PEG4-COT)-OH(7b)、1.0〜1.8当量)のDMF(又は8aの場合、DCM/THF)溶液に、HATU(1.0〜2.8当量)及びDIPEA又はTEA(2.0〜5.0当量)を25℃で添加した。混合物を25℃で30分間撹拌した後、アミン(1b〜d、1i、又は3a〜I、1.0当量)のDMF(1mL)の溶液をシリンジにより添加した。LCMSによりアミンがほとんど消費されるまで、得られた混合物を25℃で2〜24時間撹拌した。その後、該混合物に、ピペリジン又はジエチルアミン(過剰)を添加し、Fmocが完全に除去されるまで、混合物を25℃で1〜20時間撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。反応混合物を膜に通して濾過し、濾液を分取HPLC(方法B)又は逆相フラッシュクロマトグラフィーによりそのまま精製すると、化合物3b〜d又は8a〜J(23〜80％収率)が白色の固体として得られた。
表5．一般的手順Bの後に化合物3B〜D、3J、及び8A〜Lを合成するための反応条件
【表８】
2020521018.tif 000405
精製に関して−B:分取HPLC方法B; A:分取HPLC方法A; RP: RP-フラッシュ; RP-B: RP-フラッシュ方法B; RP-A: RP-フラッシュ方法A。
S**: DCM/THF＝4/8(mL)
*:工程1の生成物の40％を工程32で使用した。
【０３２６】
(実施例9)
(化合物3aの調製(図6及び表5を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメート(3a))
(引用により完全に本明細書中に組み込まれるWO2012/166560号を参照されたい)
25mL丸底フラスコに、Fmoc-vc-PAB-PNP(2a)(0.33g、0.43mmol)及び無水DMF(5mL)を添加した。該溶液に、MMAE(1a、0.21g、0.21mmol)、HOBt(38mg、0.28mmol)、及びDIPEA(74mg、0.57mmol)を25℃で順次添加した。LCMSによりMMAEが完全に消費されるまで、混合物を25〜30℃で16時間撹拌した。反応混合物を膜に通して濾過し、濾液を分取HPLC(方法A)により精製すると、Fmoc-3aが白色の固体として得られ、これをDMF(5mL)に溶解させた。該溶液に、ジエチルアミン(0.3mL)を添加した。LCMSによりFmocが除去されるまで、反応混合物を30℃で1時間撹拌した。該反応混合物を膜に通して濾過し、濾液を分取HPLC(方法A)により精製すると、vcPAB-MMAE(3a)(0.20g、58％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 562.5(M/2+H)+。
【０３２７】
(実施例10)
(化合物3bの調製(図6及び表5を参照))
((2S)-2-アミノ-N-[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]-3-メチルブタンアミド(3b))
一般的手順Bの後に、化合物3b(60mg、23％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 692(M+H)+。
【化３１６】
2020521018.tif 000406
【０３２８】
(実施例11)
(化合物3cの調製(図6及び表5を参照))
((2S)-2-アミノ-N-[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,6R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]-3-メチルブタンアミド(3c))
一般的手順Bの後に、化合物3c(36mg、28％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 692(M+H)+。
【化３１７】
2020521018.tif 000407
【０３２９】
(実施例12)
(化合物3dの調製(図6及び表5を参照))
((1S,4aS,10aR)-6-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(3d))
一般的手順Bの後に、化合物3d(0.88g、67％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 699(M+H)+。
【化３１８】
2020521018.tif 000408
【０３３０】
(実施例13)
(化合物3eの調製(図5及び表4を参照))
(4-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)-5-ウレイドペンタンアミド)ベンジル 2-((4bS,8S,8aR)-8-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニルカルバモイル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イルオキシ)エチルカルバメート(3e))
一般的手順Aの後に、化合物3e(14mg、68％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 978(M+1)+。
【化３１９】
2020521018.tif 000409
【０３３１】
(実施例14)
(化合物3fの調製(図5及び表4を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(3f))
一般的手順Aの後に、化合物3f(85mg、32％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 991(M+1)+。
【化３２０】
2020521018.tif 000410
【０３３２】
(実施例15)
(化合物3gの調製(図5及び表4を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(3g))
一般的手順Aの後に、化合物3g(22mg、40％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1021(M+1)+。
【化３２１】
2020521018.tif 000411
【０３３３】
(実施例15-A)
(化合物3Hの調製−図5及び表4を参照)
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル}カルバメート(3H))
【化３２２】
2020521018.tif 000412
実施例7に記載されている一般的手順の後に、化合物3H(127mg、73％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 871(M+1)+。
【０３３４】
(実施例15-B)
(化合物3Iの調製−図5及び表4を参照)
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバメート(3I))
【化３２３】
2020521018.tif 000413
実施例7に記載されている一般的手順の後に、化合物3I(80mg、64％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 963(M+1)+。
【化３２４】
2020521018.tif 000414
【０３３５】
(実施例15-C)
(化合物3Jの調製−図6を参照)
((2S)-2-アミノ-N-[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]-3-メチルブタンアミドTFA塩(3J))
【化３２５】
2020521018.tif 000415
Boc-Val-Ala-OH(2d、0.31g、1.1mmol)のDMF(15mL)溶液に、HATU(0.48g、1.3mmol)及びDIPEA(0.35g、2.7mmol)を10℃で添加した。混合物を10℃で30分間撹拌した後、アミン(1i、0.50g、0.90mmol)を該混合物中に添加した。アミンが完全に消費されるまで、反応混合物を10℃で1時間撹拌した。該混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の50％酢酸エチル)により精製すると、Boc-3Jが得られ、これをDCM(9mL)に溶解させた。該溶液に、TFA(3mL)を10℃で添加した。反応混合物を10℃で2時間撹拌し、その後、真空中で濃縮すると、化合物3J(0.53g、84％収率)がTFA塩として得られ、これをそれ以上精製することなく、次の工程に使用した。ESI m/z: 728(M+1)+。
【０３３６】
(実施例16)
(化合物8aの調製(図6及び表5を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメート(8a))
一般的手順Bの後に、逆相フラッシュクロマトグラフィー(水(0.05％TFA)中の0〜100％アセトニトリル)による精製の後に、化合物8a(17mg、35％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1415(M+H)+。
【化３２６】
2020521018.tif 000416
【０３３７】
(実施例17)
(化合物8bの調製(図6及び表5を参照))
((2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-N-[(1S)-1-{[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]ヘキサンアミド(8b))
一般的手順Bの後に、化合物8b(50mg、49％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 984(M+1)+。
【０３３８】
(実施例18)
(化合物8cの調製(図6及び表5を参照))
((2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-N-[(1S)-1-{[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,6R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]ヘキサンアミド(8c))
一般的手順Bの後に、化合物8c(80mg、56％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 984(M+1)+。
【化３２７】
2020521018.tif 000417
【０３３９】
(実施例19)
(化合物8dの調製(図6及び表5を参照))
((1S,4aS,10aR)-6-((2S)-2-((2S)-2-((2R)-2-アミノ-6-(2-(シクロオクタ-2-イニルオキシ)アセトアミド)ヘキサンアミド)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-N-((1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(8d))
一般的手順Bの後に、化合物8d(30mg、47％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 991(M+1)+。
【化３２８】
2020521018.tif 000418
【０３４０】
(実施例20)
(化合物8eの調製(図6及び表5を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(8e))
一般的手順Bの後に、化合物8e(65mg、62％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1283(M+1)+。
【化３２９】
2020521018.tif 000419
【０３４１】
(実施例21)
(化合物8fの調製(図6及び表5を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(8f))
一般的手順Bの後に、化合物8f(15mg、33％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1313.6(M+H)+。
【化３３０】
2020521018.tif 000420
【０３４２】
(実施例22)
(化合物8gの調製(図6及び表5を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{1-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメート(8g))
一般的手順Bの後に、化合物8g(17mg、43％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 832.2(M/2+H)+。
【化３３１】
2020521018.tif 000421
【０３４３】
(実施例23)
(化合物8hの調製(図6及び表5を参照))
(N-[(5R)-5-アミノ-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]-1-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(8h))
一般的手順Bの後に、化合物8h(54mg、50％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 620(M/2+1)+。
【化３３２】
2020521018.tif 000422
【０３４４】
(実施例24)
(化合物8iの調製(図6及び表5を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{1-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(2-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]オキシ}エチル)カルバメート(8i))
一般的手順Bの後に、化合物8i(40mg、30％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 759(M/2+1)+。
【化３３３】
2020521018.tif 000423
【０３４５】
(実施例24A)
(化合物8Jの調製−(図6及び表5を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル}カルバメート(8J))
【化３３４】
2020521018.tif 000424
実施例8に記載されている一般的手順の後に、化合物8J(120mg、52％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1163(M+1)+。
【化３３５】
2020521018.tif 000425
【０３４６】
(実施例24B)
(化合物8Kの調製−(図6及び表5を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバメート(8K))
【化３３６】
2020521018.tif 000426
実施例8に記載されている一般的手順の後に、化合物8K(192mg、80％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1256(M+1)+。
【０３４７】
(実施例24C)
(化合物8Lの調製−(図6及び表5)を参照)
((2R)-2-アミノ-6-[2-(シクロオクタ-2-イン-1-イルオキシ)アセトアミド]-N-[(1S)-1-{[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]ヘキサンアミド(8L))
【化３３７】
2020521018.tif 000427
実施例8に記載されている一般的手順の後に、化合物8L(0.21g、46％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1021(M+1)+。ESI m/z: 1021.5(M+H)+。
【化３３８】
2020521018.tif 000428
【０３４８】
(実施例25)
(化合物9a〜i及びJ〜Lを作製するための一般的手順C(図7を参照))
対応する溶媒中のアルキン8a〜i、J〜L(1.0当量)の溶液に、α-シクロデキストリン-アジド6a(Synth. Commun., 2002, 32(21), 3367-3372; J. Am. Chem. Soc., 2012, 134(46), 19108-19117; J. Med. Chem., 1997, 40(17), 2755-2761; J. Am. Chem. Soc., 1993, 115(12), 5035-5040を参照)(1.5〜3.0当量)を添加した。その後、LCMSによりモニタリングして、化合物8がほとんど消費され、所望の中間体質量が検出されるまで、得られた混合物を20〜30℃で16時間〜3日間撹拌した。濾過後、得られた混合物を分取HPLCによりそのまま精製する(又はそのまま使用する)と、化合物9(9a〜i、J〜L)(16〜78％収率)が白色の固体(トリアゾール位置異性体を含む)として得られた。
表6．一般的手順cに従って化合物9a〜iを合成するための反応条件
【表９】
2020521018.tif 000429
*: 9bA及び9bBは、2つのトリアゾール位置異性体である。
精製に関して−B:分取HPLC方法B; A:分取HPLC方法A; RP: RP-フラッシュ; RP-B: RP-フラッシュ方法B; RP-A: RP-フラッシュ方法A。
【０３４９】
(実施例26)
(化合物9aの調製(図7及び表6を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメート(9a))
一般的手順Cの後に、化合物9a(9.6mg、25％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1207(M/2+H)+。
【化３３９】
2020521018.tif 000430
【０３５０】
(実施例27)
(化合物9bの調製(図7及び表6を参照))
((2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}-N-[(1S)-1-{[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]ヘキサンアミド(9b))
一般的手順Cの後に、トリアゾール位置異性体9bA(LCMSにおける最初のピーク、13mg、22％収率)及び9bB(LCMSにおける2番目のピーク、19mg、32％収率)が分離され、白色の固体として得られた。両方の化合物のESI m/z: 991(M+H)+。
【０３５１】
(実施例28)
(化合物9cの調製(図7及び表6を参照))
((2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}-N-[(1S)-1-{[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,6R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]ヘキサンアミド(9c))
一般的手順Cの後に、化合物9c(80mg、40％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 991(M+H)+。
【化３４０】
2020521018.tif 000431
【０３５２】
(実施例29)
(化合物9dの調製(図7及び表6を参照))
((1S,4aS,10aR)-N-{[(1S,4aS,10aR)-6-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]プロパンアミド]-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]カルボニル}-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(9d))
一般的手順Cの後に、化合物9d(0.38g、60％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 995(M/2+1)+。
【化３４１】
2020521018.tif 000432
【０３５３】
(実施例30)
(化合物9eの調製(図7及び表6を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,2H,3H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-({[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}メチル)カルバメート(9e))
一般的手順Cの後に、化合物9e(67mg、64％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1141(M/2+1)+。
【化３４２】
2020521018.tif 000433
【０３５４】
(実施例31)
(化合物9fの調製(図7及び表6を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメート(9f))
一般的手順Cの後に、化合物9f(20mg、57％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1156.0(M/2+1)+。
【０３５５】
(実施例32)
(化合物9gの調製(図7及び表6を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-(1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメート(9g))
一般的手順Cの後に、化合物9g(46mg、58％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 887.9(M/3+H)+。
【化３４３】
2020521018.tif 000434
【０３５６】
(実施例33)
(化合物9hの調製(図7及び表6を参照))
(N-[(5R)-5-アミノ-5-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]-1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-9-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド(9h))
一般的手順Cの後に、化合物9h(30mg、72％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1118(M/2+1)+。
【化３４４】
2020521018.tif 000435
【０３５７】
(実施例34)
(化合物9iの調製(図7及び表6を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-(1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-9-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(2-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]オキシ}エチル)カルバメート(9i))
一般的手順Cの後に、化合物9i(51mg、78％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1258(M/2+1)+。
【化３４５】
2020521018.tif 000436
【０３５８】
(実施例34A)
(化合物9Jの調製(図7及び表6を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル}カルバメート(9J))
【化３４６】
2020521018.tif 000437
実施例25に記載されている一般的手順の後に、化合物9J(0.11g、51％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1081(M/2+1)+。
【化３４７】
2020521018.tif 000438
【０３５９】
(実施例34B)
(化合物9Kの調製(図7及び表6を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-アミノ-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバメート(9K))
【化３４８】
2020521018.tif 000439
実施例25に記載されている一般的手順の後に、化合物9K(0.11g、58％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 751(M/3+1)+。
【０３６０】
(実施例34C)
(化合物9Lの調製(図7及び表6を参照))
((2R)-2-アミノ-N-[(1S)-1-{[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド(9L))
【化３４９】
2020521018.tif 000440
実施例25に記載されている一般的手順の後に、化合物9L(40mg、34％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1009.5(M/2+1)+。
【０３６１】
(実施例35)
以下の手順(一般的手順D(図8を参照)の後に、特定のリンカー-ペイロードを合成した。
【０３６２】
一般的手順D:酸4a又は4c(1.0〜2.5当量)のDMF(又はDCM/DMF)溶液に、DIPEA(1.5〜10当量)及びHATU(2.5〜4.0当量)を室温で順次添加した。得られた混合物をこの温度で0.5〜1時間撹拌した後、アミン(3a、3c、3d、3H、3I、又は9a〜i、9J〜L)(1.0当量)を添加した。LCMSによりモニタリングして、アミンが完全に消費されるまで、反応混合物を室温で2〜16時間撹拌した。該反応混合物を膜に通して濾過し、その後、濾液を分取HPLCにより分離すると、実施例化合物(20〜69％収率)が白色の固体として得られた。
表7．EX.36及び41〜61のための反応条件−一般的手順d。
【表１０】
2020521018.tif 000441
2020521018.tif 000442
精製に関して−B:分取HPLC方法B。
(実施例36)
(リンカー-MMAEの調製(図8及び表7を参照))
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメート)
【化３５０】
2020521018.tif 000443
ESI m/z: 829.7(M/2+H)+(100％)、1659.7(M+H)+(20％)。
【化３５１】
2020521018.tif 000444
分析的HPLC: 98％、保持時間: 8.25分(方法B)。
溶解度:水1mL当たり＜0.1mg。
【０３６３】
(実施例37)
本実施例は、特定のリンカー-ペイロードを作製するための代表的な合成経路を提供している(図9を参照)。
【０３６４】
({4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-[(2S)-2-[6-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)ヘキサンアミド]-6-[4-(3-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-3,4,5,13-テトラアザテトラシクロ[13.4.0.02,6.07,12]ノナデカ-1(19),2(6),4,7(12),8,10,15,17-オクタエン-13-イル)-4-オキソブタンアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメート)
Mc-(L)D-Lys(suc-DIBAC)-OH(5b、2.0mg、3.1μmol)の無水THF(1mL)溶液に、HATU(1.8mg、4.7μmol)及びDIPEA(0.8mg、6.2μmol)を室温で順次添加した。混合物を室温で30分間撹拌した後、化合物3a(3.6mg、3.1μmol)の無水THF(1mL)溶液を反応混合物中に添加した。LCMSにより反応が終了したとみなされるまで、得られた混合物を室温で16時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣8j(ESI m/z: 866.3(M/2+H)+)をアセトニトリル(1mL)に溶解させた。該溶液に、αCD-アジド6a(4.6mg、4.7μmol)の水(1mL)溶液を添加した。反応混合物を室温で16時間撹拌し、LCMSによりモニタリングした。該混合物を分取HPLC(方法A)によりそのまま精製すると、本実施例に記載されているリンカーペイロード化合物が白色の固体として得られた(2mg、25％収率)。
ESI m/z: 910.8(M/3+H)+(100％)、1365.4(M/2+H)+(20％)。
分析的HPLC:＞99.9％、保持時間: 6.97分(方法B)。
【０３６５】
(実施例38)
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-6-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4,6,8,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-2-{6-[3-(4-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}ピペラジン-1-イル)-2,5-ジオキソピロリジン-1-イル]ヘキサンアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメートの調製(図10参照))。
THF(1mL)中の中間体5a(15mg、24μmol)及びHATU(15mg、39μmol)の混合物を室温で30分間撹拌した。次に、vc-PAB-MMAE(I、26mg、23μmol)のDMF(2mL)及びDIPEA(8.9mg、69μmol)溶液を後に添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。vc-PAB-MMAEが消費され、所望の化合物が検出されるまで、反応をLCMSによりモニタリングした。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水中の0〜100％アセトニトリル)により精製すると、Ex38-Int(18mg、26％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 1732(M+H)+。
【化３５２】
2020521018.tif 000445
上記の中間体をDMF(0.7mL)に溶解させた。該溶液に、TEA(0.5mg、5.0μmol)及びαCD-pip 6b(9.6mg、9.4μmol)を室温で順次添加した。LCMSにより反応が終了するまで、得られた混合物を室温で16時間撹拌した。該混合物を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、本実施例に記載されているリンカーペイロード化合物(3mg、23％収率)が白色の固体として得られた。
【０３６６】
ESI m/z: 925.1(M/3+H)+(100％)、1387(M/2+H)+(10％)。
【０３６７】
【化３５３】
2020521018.tif 000446
分析的HPLC: 96％、保持時間: 7.22分(方法B)。
溶解度:水1mL当たり0.25mg。
【０３６８】
(実施例39)
本実施例は、特定のリンカー-ペイロードを作製するための代表的な合成経路を提供している(図11を参照)。
【０３６９】
({4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメート)
DMF(0.5mL)中の化合物8a(10mg、7.1μmol)及び化合物4d(6.2mg、14μmol)の混合物に、TEA(2.1mg、21μmol)をシリンジにより25℃で添加した。LCMSによりモニタリングして、8aのほとんどが消費されるまで、混合物を20〜25℃で16時間撹拌した。反応混合物を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水(0.03％TFAを含む)中の0〜100％アセトニトリル)により精製すると、白色の固体(ESI m/z: 1743(M+H)+)が得られ、これをDMF(1mL)及び水(1mL)中に溶解させた。該溶液に、アジド6a(3.0mg、3.0μmol)を25℃で添加し、混合物をこの温度で3日間撹拌した。その後、LCMSにより、反応が終了しているとみなされた。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法A)により精製すると、本実施例に記載されているリンカーペイロード化合物(1.5mg、9％収率)が白色の固体として得られた。
【０３７０】
ESI m/z: 1371(M/2+H)+。
【０３７１】
【化３５４】
2020521018.tif 000447
【０３７２】
分析的HPLC:＞99.9％、保持時間: 5.78分(方法A)。
【０３７３】
(実施例40)
({4-[(2S)-5-(カルバモイルアミノ)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-6-[4-(3-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-3,4,5,13-テトラアザテトラシクロ[13.4.0.02,6.07,12]ノナデカ-1(19),2(6),4,7(12),8,10,15,17-オクタエン-13-イル)-4-オキソブタンアミド]ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメートの調製(図9を参照))
【化３５５】
2020521018.tif 000448
実施例37の合成経路を参照されたい。5bの代わりに化合物5cを用いることを除く、実施例37の手順の後に、本実施例に記載されるリンカーペイロード化合物(8.0mg、36％収率)が白色の固体として得られた。
【０３７４】
ESI m/z: 1432(M/2+H)+。
【０３７５】
【化３５６】
2020521018.tif 000449
【０３７６】
分析的HPLC:＞99.9％、保持時間: 6.84分(方法B)。
【０３７７】
溶解度:水1mL当たり0.33mg。
【０３７８】
(実施例41)
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメートの調製(図8及び表7を参照))
【化３５７】
2020521018.tif 000450
ESI m/z: 983.4(M/3+H)+(100％)、1475(M/2+H)+(5％)。
【０３７９】
【化３５８】
2020521018.tif 000451
【０３８０】
分析的HPLC:＞99.9％、保持時間: 7.29分(方法B)。
溶解度:水1mL当たり0.25mg。
【０３８１】
(実施例42)
((1R,8S,9S)-ビシクロ[6.1.0]ノナ-4-イン-9-イルメチル N-(14-{[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-({4-[({[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル](メチル)カルバモイル}オキシ)メチル]フェニル}カルバモイル)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]カルバモイル}-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-イル)カルバメートの調製(図8及び表7を参照))
【化３５９】
2020521018.tif 000452
ESI m/z: 946.3(M/3+H)+(100％)、1418.9(M/2+H)+(20％)。
【０３８２】
【化３６０】
2020521018.tif 000453
分析的HPLC:＞99.9％、保持時間: 7.33分(方法B)。
溶解度:水1mL当たり1.0mg。
【０３８３】
(実施例43)
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-6-(1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-N-メチルカルバメートの調製(図8及び表7を参照))
【化３６１】
2020521018.tif 000454
ESI m/z: 1065.9(M/3+H)+(100％)、1598.4(M/2+H)+(20％)。
【０３８４】
【化３６２】
2020521018.tif 000455
【０３８５】
分析的HPLC: 98.2％、保持時間: 5.79分(方法B)。
【０３８６】
溶解度:水1mL当たり0.5mg。
【０３８７】
(実施例44)
([(1R,8S,9S)-ビシクロ[6.1.0]ノナ-4-イン-9-イル]メチル N-(14-{[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-({4-[({[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-{[(1S,2R)-1-ヒドロキシ-1-フェニルプロパン-2-イル]カルバモイル}-1-メトキシ-2-メチルエチル]ピロリジン-1-イル]-3-メトキシ-5-メチル-1-オキソヘプタン-4-イル](メチル)カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-2-メチルプロピル](メチル)カルバモイル}オキシ)メチル]フェニル}カルバモイル)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-(1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)ペンチル]カルバモイル}-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-イル)カルバメートの調製(図8及び表7を参照))
【化３６３】
2020521018.tif 000456
ESI m/z: 1028.7(M/3+H)+(100％)、1541.5(M/2+H)+(5％)。
【０３８８】
【化３６４】
2020521018.tif 000457
【０３８９】
分析的HPLC:＞99.9％、保持時間: 7.02分(方法B)。
【０３９０】
溶解度:水1mL当たり1.0mg。
【０３９１】
(実施例45)
本実施例は、リンカー-グルココルチコイド(GC)ステロイドの合成を提供している(図8及び表7を参照)。
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1S)-1-{[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,6R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)
【化３６５】
2020521018.tif 000458
ESI m/z: 1227(M+H)+。
【化３６６】
2020521018.tif 000459
【０３９２】
分析的HPLC: 99％、保持時間: 8.55分(方法B)。
【０３９３】
溶解度:水1mL当たり＜0.1mg;水中の20％DMSO 1mL当たり0.06mg;水中の30％DMSO 1mL当たり0.07mg。
【０３９４】
(実施例46)
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミドの調製(図8及び表7を参照))
【化３６７】
2020521018.tif 000460
ESI m/z: 1259(M/2+H)+。
【０３９５】
【化３６８】
2020521018.tif 000461
【０３９６】
分析的HPLC: 97％、保持時間: 6.62及び6.67分(方法B)。
【０３９７】
(実施例47)
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,6R,8S,9S,11S,12S,13R)-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミドの調製(図8及び表7を参照))
【化３６９】
2020521018.tif 000462
ESI m/z: 839.5(M/3+H)+、1259(M/2+H)+(60％)。
【０３９８】
【化３７０】
2020521018.tif 000463
【０３９９】
分析的HPLC: 98％、保持時間: 6.61(59％)及び6.73(39％)分(方法B)。
【０４００】
溶解度:水中の10％DMSO 1mL当たり0.1mg。
【０４０１】
(実施例48)
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミドの調製(図8及び表7を参照))
【化３７１】
2020521018.tif 000464
ESI m/z: 1234(M+H)+。
【０４０２】
【化３７２】
2020521018.tif 000465
【０４０３】
分析的HPLC:＞99％、保持時間: 9.21分(方法B)。
【０４０４】
溶解度:水1mL当たり＜0.1mg。
【０４０５】
(実施例49)
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミドの調製(図8及び表7を参照))
【化３７３】
2020521018.tif 000466
ESI m/z: 1261(M/2+H)+。
【０４０６】
【化３７４】
2020521018.tif 000467
【０４０７】
分析的HPLC: 99％、保持時間: 6.55分(方法B)。
【０４０８】
溶解度:水1mL当たり0.05mg。
【０４０９】
(実施例50)
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-6-(1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-9-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(2-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]オキシ}エチル)カルバメートの調製(図8及び表7を参照))
【化３７５】
2020521018.tif 000468
化合物9i(25mg、9.9μmol)及びDIBAC-Suc-PEG4-OSu 4b(6.8mg、12μmol)のDMF(1mL)溶液に、トリエチルアミン(2.0mg、20μmol)を添加し、混合物を20〜25℃で16時間撹拌した。その後、LCMSにより、反応が終了しているとみなされた。揮発性物質の大部分を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、(12mg、39％収率)が白色の固体として得られた。
【０４１０】
ESI m/z: 1017(M/3+H)+。
【０４１１】
【化３７６】
2020521018.tif 000469
【０４１２】
分析的HPLC: 96％、保持時間: 6.68分(方法B)。
【０４１３】
溶解度:水1mL当たり0.33mg。
【０４１４】
(実施例51)
({ビシクロ[6.1.0]ノナ-4-イン-9-イル}メチル N-(14-{[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-(1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-9-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)ペンチル]カルバモイル}-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-イル)カルバメートの調製(図8及び表7を参照))
【化３７７】
2020521018.tif 000470
ESI m/z: 1330(M/2+H)+。
【０４１５】
【化３７８】
2020521018.tif 000471
【０４１６】
分析的HPLC:＞99％、保持時間: 6.33分(方法B)。
【０４１７】
溶解度:水1mL当たり0.33mg。
【０４１８】
(実施例52)
図8及び表7に従って調製した。
({ビシクロ[6.1.0]ノナ-4-イン-9-イル}メチル N-(14-{[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[4-({[(2-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]オキシ}エチル)カルバモイル]オキシ}メチル)フェニル]カルバモイル}-4-(カルバモイルアミノ)ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-(1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-9-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)ペンチル]カルバモイル}-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-イル)カルバメートの調製(図8及び表7を参照))
【化３７９】
2020521018.tif 000472
【０４１９】
ESI m/z: 1470(M/2+H)+。
【０４２０】
【化３８０】
2020521018.tif 000473
【０４２１】
分析的HPLC:＞99％、保持時間: 6.62分(方法B)。
【０４２２】
溶解度:水1mL当たり0.29mg。
【０４２３】
(実施例53)
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-(1-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-9-イル)オキシ]アセトアミド}-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミドの調製(図8及び表7を参照))
【化３８１】
2020521018.tif 000474
ESI m/z: 1385.9(M/2+H)+。
【０４２４】
【化３８２】
2020521018.tif 000475
【０４２５】
分析的HPLC: 98％、保持時間: 6.42分(方法B)。
【０４２６】
溶解度:水1mL当たり0.18mg。
【０４２７】
(実施例54)
({ビシクロ[6.1.0]ノナ-4-イン-9-イル}メチル N-(14-{[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-{[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]カルバモイル}-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]カルバモイル}-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-イル)カルバメートの調製(図8及び表7を参照))
【化３８３】
2020521018.tif 000476
ESI m/z: 1207(M/2+H)+。
【０４２８】
【化３８４】
2020521018.tif 000477
【０４２９】
分析的HPLC:＞99％、保持時間: 6.37分(方法B)。
【０４３０】
(実施例55)
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミドの調製(図8及び表7を参照))
【化３８５】
2020521018.tif 000478
ESI m/z: 1409(M/2+H)+。
【０４３１】
【化３８６】
2020521018.tif 000479
【０４３２】
分析的HPLC: 99％、保持時間: 6.33及び6.44分(方法B)。
【０４３３】
(実施例56)
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}-2-ヒドロキシエチル]カルバメートの調製(図8及び表7を参照))
【化３８７】
2020521018.tif 000480
ESI m/z: 1424.3(M/2+H)+。
【化３８８】
2020521018.tif 000481
【０４３４】
分析的HPLC:＞99％、保持時間: 6.11及び6.21分(方法B)。
【０４３５】
溶解度:水1mL当たり＜0.1mg。
【０４３６】
(実施例57)
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.0+]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-{[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバモイル}エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[41,42,43,44,45,46,47,48,49,50,51,52,53,54,55,56-ヘキサデカヒドロキシ-10,15,20,25,30,35,40-ヘプタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29,32,34,37,39-ヘキサデカオキサノナシクロ[36.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26.228,31.233,36]ヘキサペンタコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミドの調製(図9及び表7を参照))
【化３８９】
2020521018.tif 000482
C136H195N11O54、精密質量: 2846.3
【０４３７】
ESI m/z: 1424.2(M/2+H)+。
【化３９０】
2020521018.tif 000483
【０４３８】
(実施例58)
図8及び表7に従って調製した。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル}カルバメート)
【化３９１】
2020521018.tif 000484
C74H94F2N8O17、精密質量: 1404.7
【０４３９】
ESI m/z: 1406(M+H)+。
【化３９２】
2020521018.tif 000485
【０４４０】
分析的HPLC: 100％、保持時間: 7.40分(方法B)。
【０４４１】
溶解度:水1mL当たり0.02mg。
【０４４２】
(実施例59)
図8及び表7に従って調製した。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル}カルバメート)
【化３９３】
2020521018.tif 000486
C126H177F2N13O49、精密質量: 2694.2
【０４４３】
ESI m/z: 1349(M+H)+。
【化３９４】
2020521018.tif 000487
【０４４４】
分析的HPLC: 100％、保持時間: 6.23分(方法B)。
【０４４５】
溶解度:水1mL当たり0.026mg。
【０４４６】
(実施例60)
図8及び表7に従って調製した。
((1R,8S,9S)-ビシクロ[6.1.0]ノナ-4-イン-9-イルメチル N-(14-{[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-4-(カルバモイルアミノ)-1-[(4-{[({2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチル}カルバモイル)オキシ]メチル}フェニル)カルバモイル]ブチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]カルバモイル}-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-イル)カルバメート)
【化３９５】
2020521018.tif 000488
C118H176F2N12O49、精密質量: 2583.2
【０４４７】
ESI m/z: 1292.8(M/2+1)+。
【化３９６】
2020521018.tif 000489
【０４４８】
分析的HPLC(トリアゾール位置異性体(region-isomers)を含む): 48％、保持時間: 7.31分及び52％、保持時間: 7.41分(方法B)。
【０４４９】
(実施例61)
図8及び表7に従って調製した。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバメート)
【化３９７】
2020521018.tif 000490
C80H98F2N8O18、精密質量: 1496.7
【０４５０】
ESI m/z: 1499(M+H)+。
【化３９８】
2020521018.tif 000491
【０４５１】
分析的HPLC: 100％、保持時間: 7.99分(方法B)。
【０４５２】
溶解度:水1mL当たり＜0.01mg。
【０４５３】
(実施例62)
図8及び表7に従って調製した。
({4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(2R)-2-[1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド]-6-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ヘキサンアミド]-3-メチルブタンアミド]-5-(カルバモイルアミノ)ペンタンアミド]フェニル}メチル N-(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバメート)
【化３９９】
2020521018.tif 000492
C132H181F2N13O50、精密質量: 2786.2
【０４５４】
ESI m/z: 1394(M/2+H)+。
【化４００】
2020521018.tif 000493
【０４５５】
分析的HPLC(トリアゾール位置異性体(region-isomers)を含む): 82％、保持時間: 7.93分; 18％、保持時間: 8.02分(方法B)。
【０４５６】
溶解度:水1mL当たり0.02mg。
【０４５７】
(実施例63)
図8及び表7に従って調製した。
(1-(4-{2-アザトリシクロ[10.4.0.04,9]ヘキサデカ-1(12),4(9),5,7,13,15-ヘキサエン-10-イン-2-イル}-4-オキソブタンアミド)-N-[(1R)-1-{[(1S)-1-{[(1S)-1-[(4-{2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエトキシ}フェニル)カルバモイル]エチル]カルバモイル}-2-メチルプロピル]カルバモイル}-5-{2-[(1-{[31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42-ドデカヒドロキシ-10,15,20,25,30-ペンタキス(ヒドロキシメチル)-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29-ドデカオキサヘプタシクロ[26.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26]ドテトラコンタン-5-イル]メチル}-1H,4H,5H,6H,7H,8H,9H-シクロオクタ[d][1,2,3]トリアゾール-4-イル)オキシ]アセトアミド}ペンチル]-3,6,9,12-テトラオキサペンタデカン-15-アミド)
【化４０１】
2020521018.tif 000494
化合物9L(19mg、9.4μmol)のDMF(2mL)溶液に、DIBAC-Suc-PEG4-OSu 4b(7.0mg、11μmol)及びDIPEA(2.3mg、18μmol)を添加した。室温で一晩撹拌した後、得られた混合物を分取HPLC(方法B)によりそのまま精製すると、Ex105(7mg、29％収率)が白色の固体として得られた。
【０４５８】
C121H168F2N10O47、精密質量: 2551.1
【０４５９】
ESI m/z: 1276.8(M/2+H)+。
【化４０２】
2020521018.tif 000495
【０４６０】
分析的HPLC: 100％、保持時間: 7.76分(方法B)。
【０４６１】
(実施例64)
(ペイロード1h及び1iの合成、図1Bを参照)
ステロイド系ペイロード1h及び1iを、市販のフルオシノロンアセトニドP2(CAS: 67-73-2)から、スキーム1に従って調製した。過塩素酸の存在下でのブチルアルデヒドとのケタール交換によりP2から得られた化合物P3をメシレートP4に変換し、その後、メシレート基をアジド部分と置換すると、P5が形成され、これをさらにアミン1hへと還元した。その他の場合、P4中のメシレート部分を4-アミノ-フェノールによっても置換すると、アニリン1iが得られた。
【０４６２】
((1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-8-(2-ヒドロキシアセチル)-9,13-ジメチル-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-16-オン(P3))
【化４０３】
2020521018.tif 000496
【０４６３】
ヘプタン(90mL)中のフルオシノロンアセトニド(P2、0.90g、2.0mmol)及びシリカゲル(18g)の混合物に、ブチルアルデヒド(0.27mL、3.0mmol)を10℃で添加し、懸濁液を10〜20℃で10分間撹拌した。該混合物に、過塩素酸(70％、0.68mL、8.3mmol)を0℃で滴加した。その後、反応混合物を10〜20℃で一晩撹拌した。TLC及びLCMSにより、フルオシノロンアセトニドP2の大部分が消費された。反応混合物を石油エーテルで希釈し、飽和水性Na2CO3でクエンチした。懸濁液を濾過し、固体をDCM/メタノール(v/v＝1)で洗浄した。合わせた濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜100％酢酸エチル)により精製すると、化合物P3(0.15g、16％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 467.1(M+H)+。
【０４６４】
(2-[(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-16-オキソ-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-8-イル]-2-オキソエチルメタンスルホネート(P4))
【化４０４】
2020521018.tif 000497
【０４６５】
化合物P3(0.28g、0.65mmol))及びトリエチルアミン(0.13g、1.3mmol)のDCM(3mL)溶液に、塩化メタンスルホニル(89mg、0.78mmol)を0℃で添加した。0℃で0.5時間撹拌した後、反応混合物をDCM(20mL)で希釈した。該混合物をH2O(20mL×2)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル上でのシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜50％酢酸エチル)により精製すると、化合物P4(0.26g、＞99％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 545(M+H)+。
【０４６６】
((1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-8-(2-アジドアセチル)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-16-オン(P5))
【化４０５】
2020521018.tif 000498
化合物P4(1.0g、1.8mmol)及びアジ化ナトリウム(1.2g、18mmol)のアセトン(15mL)懸濁液を50℃で一晩撹拌した。混合物をRTに冷却し、水(80mL)に注ぎ入れた。水性混合物を酢酸エチル(50mL×3)で抽出した。合わせた有機層をブライン(30mL)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮すると、粗化合物P5(0.90g、＞99％収率)が黄色の固体として得られ、これを、それ以上精製することなく、次の工程に使用した。ESI m/z: 492(M+H)+。
【０４６７】
(ペイロード1h、(1S,2S,4R,6R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-8-(2-アミノアセチル)-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-16-オン;トリフルオロ酢酸塩(1h))
【化４０６】
2020521018.tif 000499
【０４６８】
化合物P5(0.85g、1.7mmol)のTHF(20mL)溶液に、水性塩酸(1N、10mL)を添加した。混合物を透明になるまで28〜32℃で撹拌し、その後、混合物にトリフェニルホスフィン(0.68g、2.6mmol)を添加した。得られた黄色の透明な溶液をRTで18時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、残渣を逆相フラッシュクロマトグラフィー(水性TFA(0.05％)中の0〜50％アセトニトリル)により精製すると、化合物1h(0.56g、57％収率、TFA塩)がオフホワイト色の固体として得られた。ESI m/z: 466(M+H)+。
【化４０７】
2020521018.tif 000500
分析的HPLC: 100％、保持時間: 6.86分(方法A)。
【０４６９】
(ペイロード1i、(1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-8-[2-(4-アミノフェノキシ)アセチル]-12,19-ジフルオロ-11-ヒドロキシ-9,13-ジメチル-6-プロピル-5,7-ジオキサペンタシクロ[10.8.0.02,9.04,8.013,18]イコサ-14,17-ジエン-16-オン(1i))
【化４０８】
2020521018.tif 000501
【０４７０】
アセトン(0.5mL)中の化合物P4(93mg、0.17mmol)、4-アミノフェノール(37mg、0.34mmol)、及び炭酸セシウム(0.11g、0.34mmol)の混合物を2時間還流させた。該混合物をRTに冷却し、H2O(10mL)で希釈した。混合物を酢酸エチル(10mL×3)で抽出した。合わせた有機層を水(20mL)及びブライン(20mL)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣を分取HPLCにより精製すると、ペイロード1i(6.0mg、6.3％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 298(M/2+H)+、558(M+H)+(10％)。
【化４０９】
2020521018.tif 000502
分析的HPLC:純度97.4％、保持時間: 7.55分(方法B)。
【０４７１】
(ペイロード1dの合成、図1Cを参照)
(メチル(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(P7))
【化４１０】
2020521018.tif 000503
【０４７２】
ポドカルピン酸(P6、90g、0.33mol)のメタノール(200mL)及びトルエン(600mL)溶液に、(トリメチルシリル)ジアゾメタン(ヘキサン中2M、200mL)を添加した。反応混合物を室温で2時間撹拌した。その後、LCMSにより、ポドカルピン酸が完全に消費された。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を石油エーテル(2L)からトリチュレートすると、化合物P7(91g、96％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 289(M+H)+。
【化４１１】
2020521018.tif 000504
【０４７３】
(メチル(1S,4aS,10aR)-1,4a-ジメチル-6-(トリフルオロメタンスルホニルオキシ)-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(P8))
【化４１２】
2020521018.tif 000505
【０４７４】
化合物P7(10g、35mmol)の塩化メチレン(200mL)溶液に、ピリジン(3.3g、42mmol)及びDMAP(0.84g、6.9mmol)を窒素雰囲気下で添加した。混合物を-78℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物(12g、42mmol)に添加し、得られた混合物を25℃まで温めておき、25℃でさらに4時間撹拌した。反応混合物をDCM(500mL)で希釈し、水(100mL)、水性塩酸(1N、150mL)、及びブライン(100mL)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮すると、粗化合物P8(14g、97％粗収率)が粘性のある油状物として得られ、これは、次の工程のために十分純粋であった。粗化合物P8をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜10％酢酸エチル)により精製すると、純粋な生成物を粘性のある油状物として得ることができた。ESI m/z: 421.2(M+1)+。
【化４１３】
2020521018.tif 000506
【０４７５】
(メチル(1S,4aS,10aR)-6-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(P9))
【化４１４】
2020521018.tif 000507
【０４７６】
化合物P8(14g、34mmol)及びtert-ブチルカルバメート(BocNH2、7.9g、68mmol)のtert-ブタノール(100mL)溶液に、炭酸セシウム(22g、68mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(Pd2(dba)3、1.8g、2.0mmol)、及びX-Phos(1.8g、4.0mmol)を室温で順次添加した。混合物を脱気し、アルゴンを3回充填し、その後、化合物P8が完全に消費されるまで、アルゴン保護(バルーン)下、80℃で一晩撹拌し、これをTLCによりモニタリングした。室温に冷却した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、セライトに通して濾過した。固体を酢酸エチルで3回洗浄した。合わせた濾液を真空中で濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜6.25％酢酸エチル)により精製すると、化合物P9(11g、82％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 410(M+23)+。
【化４１５】
2020521018.tif 000508
【０４７７】
((1S,4aS,10aR)-6-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]アミノ}-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(P10))
【化４１６】
2020521018.tif 000509
【０４７８】
化合物P9(4.9g、13mmol)のDMSO溶液に、カリウム tert-ブトキシド(15g、0.13mol)を室温で一度に添加した。LCMSにより反応が終了するまで、反応混合物を、アルゴン保護下、60℃で3時間撹拌した。室温に冷却した後、該反応混合物を氷に注ぎ入れ、水性塩酸(0.5M)でゆっくりとpH 5まで酸性化し、その間、温度が25℃を超えるのを許容しなかった。沈殿を濾過により回収し、水で数回洗浄した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜20％酢酸エチル)によりさらに精製すると、化合物P10(4.5g、93％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 318(M-55)+。
【化４１７】
2020521018.tif 000510
【０４７９】
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-カルバモイル-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(P11))
【化４１８】
2020521018.tif 000511
【０４８０】
P10(4.5g、12mmol)及びHATU(4.9g、13mmol)のDMF(50mL)溶液に、ジイソプロピルエチルアミン(20mL、0.12mol)を添加し、混合物を25℃で1時間撹拌した。その後、該混合物に、塩化アンモニウム(16g、0.30mol)を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。得られた混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜20％酢酸エチル)により精製すると、化合物P11(4.2g、94％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 373.3(M+1)+。
【化４１９】
2020521018.tif 000512
【０４８１】
(メチル(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(P13))
【化４２０】
2020521018.tif 000513
【０４８２】
DMF(100mL)中の化合物P7(12g、40mmol)及び炭酸セシウム(14g、44mmol)の混合物を20〜25℃で15分間撹拌した。該混合物に、臭化ベンジル(7.1mL、60mmol)を室温で添加した。室温で4時間撹拌した後、得られた混合物を冷水に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜10％酢酸エチル)により精製すると、表題化合物P13(13g、89％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 379(M+H)+。
【化４２１】
2020521018.tif 000514
【０４８３】
((1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸(P14))
【化４２２】
2020521018.tif 000515
【０４８４】
メチル基が完全に除去されるまで、DMSO(0.19L)中の化合物P13(11g、29mmol)及びカリウム tert-ブトキシド(33g、0.29mol)の混合物を100℃で1時間撹拌し、これをLCMS及びTLCによりモニタリングした。25℃に冷却した後、該混合物を水性塩酸(1N)でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜24％酢酸エチル)により精製すると、化合物P14(7.5g、71％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 365(M+H)+。
【化４２３】
2020521018.tif 000516
【０４８５】
(ペンタフルオロフェニル(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキシレート(P15))
【化４２４】
2020521018.tif 000517
【０４８６】
P14(9.6g、26mmol)のDMF(100mL)溶液に、DIPEA(14mL、79mmol)及びパーフルオロフェニル 2,2,2-トリフルオロアセテート(15g、53mmol)を添加した。この混合物を室温で一晩撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。その後、反応混合物をエーテル(200mL)で希釈し、水(300mL)及びブライン(200mL)で洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜10％酢酸エチル)により精製すると、化合物P15(12g、88％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 531(M+H)+。
【化４２５】
2020521018.tif 000518
【０４８７】
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-(ベンジルオキシ)-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(P16))
【化４２６】
2020521018.tif 000519
【０４８８】
化合物P11(2.3g、6.2mmol)のTHF(20mL)溶液に、n-BuLi(ヘキサン中2.5M、5.5mL、14mmol)を-78℃で滴加した。反応液をこの温度で1時間撹拌した。混合物に、P15(3.0g、5.6mmol)のTHF(20mL)溶液を添加し、その後、化合物P15が消費されるまで、得られた混合物を10〜20℃で一晩撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。反応液を飽和水性塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機溶液を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜30％酢酸エチル)により精製すると、化合物P16(1.59g、51％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 719(M+1)+。
【０４８９】
(tert-ブチル N-[(4bS,8S,8aR)-8-({[(1S,4aS,10aR)-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-イル]ホルムアミド}カルボニル)-4b,8-ジメチル-4b,5,6,7,8,8a,9,10-オクタヒドロフェナントレン-3-イル]カルバメート(P17))
【化４２７】
2020521018.tif 000520
【０４９０】
P16(2.0g、2.78mmol)の酢酸エチル(40mL)溶液に、湿潤パラジウム炭(10％Pd、0.9g)を窒素保護下で添加した。混合物を脱気し、水素を充填し、P16が完全に消費されるまで、水素バルーン下、室温で一晩撹拌し、これをLCMSによりモニタリングした。混合物をセライトに通して濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル中の0〜55％酢酸エチル)により精製すると、P17(1.06g、61％収率)が白色の固体として得られた。ESI m/z: 629(M+H)+。
【化４２８】
2020521018.tif 000521
【０４９１】
(ペイロード1d、(1S,4aS,10aR)-N-[(1S,4aS,10aR)-6-アミノ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボニル]-6-ヒドロキシ-1,4a-ジメチル-1,2,3,4,4a,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボキサミド(1d))
【化４２９】
2020521018.tif 000522
【０４９２】
化合物P17(0.17g、0.27mmol)のDCM(10mL)溶液に、TFA(3mL)を室温で滴加した。LCMSによりBocが除去されるまで、反応混合物を室温で1時間撹拌した。揮発性物質を真空中で除去し、残渣を分取HPLC(方法B)により精製すると、1d(0.10g、70％収率)が白色の固体として得られた。
【０４９３】
ESI m/z: 529.3(M+1)+。
【０４９４】
【化４３０】
2020521018.tif 000523
【０４９５】
【化４３１】
2020521018.tif 000524
【０４９６】
【化４３２】
2020521018.tif 000525
【０４９７】
HPLC(方法B):保持時間: 8.92分、純度: 99.4％。キラルHPLC:＞99.9％(カラムAD、AS、OD、及びOJ中)。
【０４９８】
旋光度(α): +2.53°(1.7g/100mL THF、25℃)。
【０４９９】
(実施例65)
本実施例は、特定のリンカー-ペイロードの解析を記載している。
【０５００】
シクロデキストリン部分を有するリンカー-ペイロードをシクロデキストリン部分を有さないリンカー-ペイロードと比較するために、リンカー-ペイロードを抗体とのコンジュゲーションの前にいくつかの物理化学的アッセイ及び酵素アッセイで評価した。
【０５０１】
以下の試験は、シクロデキストリン部分を有するリンカー-ペイロード及びシクロデキストリン部分を有さないリンカー-ペイロードの溶解度をアッセイするものである。
【０５０２】
試験化合物をDMSOに溶解させて、LC-MSの方法A又はBを用いて標準曲線を作成した。試験試料を水に溶解させ、10分間超音波処理し、その後、遠心分離した。上部の透明な溶液を同じ方法A又はBを用いて解析し、そのピーク面積に基づいて溶解度を計算した。図12に示されているのは、Ex49の溶解度の結果である。対応するリンカー-ペイロード(Ex47)は、検出可能なレベル未満の水溶解度を有していた。
【０５０３】
図12の実施例49の化合物の溶解度を参照されたい。
【表１１】
2020521018.tif 000526
【０５０４】
詳細な試験手順は、次の通りであった:
1. 0.5mgの試験化合物を0.5mLのDMSOに溶解させた。
・DMSO溶液(1mg/mL、0.5mL、0.5mg)を水(4.5mL)で希釈し、溶液A(0.1mg/mL、5mL、0.5mg)を得た。
・0.5mLの溶液A(0.1mg/mL、0.5mL、0.05mg)を水(0.5mL)で希釈し、溶液B(0.05mg/mL、2mL、0.05mg)を得た。
・0.5mLの溶液A(0.1mg/mL、0.5mL、0.05mg)を水(1.5mL)で希釈し、溶液C(0.025mg/mL、2mL、0.05mg)を得た。
・0.5mLの溶液A(0.1mg/mL、0.5mL、0.05mg)を水(4.5mL)で希釈し、溶液D(0.01mg/mL、5mL、0.05mg)を得た。
・0.5mLの溶液D(0.01mg/mL、0.5mL、5μg)を水(4.5mL)で希釈し、溶液E(1μg/mL、5mL、0.5μg)を得た。
2. 0.05mgの化合物を水(1mL)に懸濁させ、10分間超音波処理した。遠心分離後、上部の透明な溶液を回収し、飽和試料溶液を得た。
3.全ての標準溶液A、B、C、D、E、及び試料溶液を(同じ方法及び同じ注入容量を用いて)LCMSにより解析し、ピーク面積を得た。
4. A〜D(X＝濃度、Y＝ピーク面積)のデータに従って標準曲線を計算した。
5.上で得られた関数に従って計算し、飽和試料溶液の濃度を得た。
【０５０５】
(実施例66)
シクロデキストリンを有するリンカー-ペイロードとシクロデキストリンを有さないリンカー-ペイロードのカテプシンB切断率
【０５０６】
カテプシンBアッセイの手順は、次の通りである。試験結果を表8にまとめた。
【０５０７】
(工程1:)
カテプシンBバッファー: 0.1M NaOAc/0.01M DTT(pH5.0)の調製
8.3g/LのNaOAc、1.54g/LのDTTを脱イオン水に溶解させる。HCl/水酸化ナトリウムでpHを5.0に調整する。
【０５０８】
(工程2:)
試験切断率
1. 25μMの試験試料を調製する: 2mLチューブに、0.5mgの試験試料を添加し、その後、0.2mLのDMSOを添加した。この溶液を0.8mLの0.1M NaOAc/0.01M DTTバッファーに滴加した。得られた混合物を5分間超音波処理して、無色透明の溶液を得た。この溶液のpH値は、pH検査ストリップによると、約5であった。
2.アッセイバッファー: 0.1M NaOAc/0.01M DTT(pH 5.0)を予熱する。
3.試験化合物用のスパイク溶液: 試験化合物用の25μMのスパイク溶液: 2μLの5mMストック溶液を398μLの0.1M NaOAc/0.01M DTTバッファー(pH 5.0)に添加した。
4. 50mM NaOAc/1mM EDTA(pH 5.0)中の0.47μg/μLのカテプシンBを予熱する。氷上に置く。
5. CA074を含まない試料: 4μLの0.47μg/μLのカテプシンBを196μLの25μMスパイク溶液(工程2からのもの)に添加し、チューブを37℃でインキュベートする。
6. CA074を含む試料: 4μLの0.47μg/μLのカテプシンBを4μLの10mMインヒビター(CA074)とともに196μLの25μMスパイク溶液(工程2からのもの)に添加し、チューブをインキュベートする。
7.クエンチング後、プレートを振盪させ、それを14000rpmで遠心分離する。
8.各々のウェルからの50μLの上清をLC/MS分析用の50μLの超純水(Millipore, ZMQS50F01)を含有する96ウェル試料プレートに移す。
【０５０９】
(工程3:)
試験参照化合物:
9.アッセイバッファー: 1.33mM EDTA及び2mM DTTを含む、100mMリン酸Na/K、pH 6.0を予熱する。
10. 0.024μg/μLのカテプシンBを調製する: 1μLの0.47μg/μLのカテプシンBストックを19μLのアッセイバッファー(工程11からのもの)に添加する。
11. 2μLの0.024μg/μLのカテプシンB(工程12からのもの)を不透明な96ウェルプレートに添加する。
12. 96μLのアッセイバッファーを各々の試料に添加する。
13. 2μLの10mM基質Z-RR-MNA(200μMの最終濃度)を添加する。
14.陰性対照(インヒビターを含む)については、2μLの10mMインヒビター(CA074)を添加し:試料を340nmの励起/425nmの放出の動力学的モードですぐに読み取る(プレートを30秒毎に3分間読み取る)。
【０５１０】
(工程4:)
インキュベーション試料中のカテプシンBの安定性:
15. 5μLのインキュベーション試料を93μLのアッセイバッファー(工程11からのもの)中に取り、その後、2μLの10mM基質(Z-RR-MNA)に添加する。
16.試料を37℃で2分間インキュベートする。
17.試料を340nmの励起/425nmの放出で読み取る。
【０５１１】
一般に、vcPAB部分を有する大部分のコンジュゲートは、＞50％の切断率でcapBにより切断することができる。
【０５１２】
一般に、該リンカーへのシクロデキストリンの挿入は、カテプシンB切断率を、例えば、14％(Ex47)から62％(Ex48)へと増大させた。
【０５１３】
他の試料を試験し、表8にまとめた。一般に、大部分の試験化合物は、HPLCで6〜7分の範囲の保持時間(RT)を有する。RT＞7分の場合、cLogPは5よりも大きく、その水溶解度は低かった。
表8．シクロデキストリンを有するリンカー-ペイロードの溶解度及びCapB切断率
【表１２】
2020521018.tif 000527
*A及びB:それぞれ、一般的手順のHPLC方法A及びHPLC方法Bを参照されたい。
**:他の溶媒への水溶解度
実施例44の化合物について:水中の20％DMSO中、0.06mg/mL;水中の30％DMSO中、0.07mg/mL。
実施例46の化合物について: 10％DMSO/H2O中、0.10mg/mL。
+≦-6 cLogP
-6＜++≦-3 cLogP
-3＜+++≦1 cLogP
1＜++++≦5 cLogP
5＜+++++≦9.5 cLogP
％≦50 CapB(％)
50＜％％≦60 CapB(％)
60＜％％％≦70 CapB(％)
70＜％％％％≦80 CapB(％)
80＜％％％％％
表8A．シクロデキストリンを有するリンカー-ペイロードとシクロデキストリンを有さないリンカー-ペイロードの溶解度及びCapB切断率の比較
【表１３】
2020521018.tif 000528
【０５１４】
(実施例67)
様々なpH緩衝剤の下でのシクロデキストリンを有するリンカー-ペイロードとシクロデキストリンを有さないリンカー-ペイロードの安定性
【０５１５】
試験試料を0.5mg/mLの20％DMSO＋pH 5.0、7.4、又は8.0の80％PBSバッファーに溶解させた。これらのバッファーは、次の通りに調製した:
1. 0.05Mリン酸ナトリウム及び0.07M NaClバッファー、pH 7.4:
・14.505g/LのNa2HPO4_12H2O、1.483g/LのNaH2PO4_2H2O、及び4.095g/LのNaClを脱イオン水溶解させる。pHをリン酸/水酸化ナトリウムで7.40に調整する。
2. 0.5％BSAを含むPBS:
・0.5gのBSAを100mLのバッファー1に溶解させる。
【０５１６】
これらの結果は、DIBAC-親水性リンカー-ペイロードがpH 6〜8で非常に安定であり、試験時に＞95％が残ることを示した。リンカーの親水性の増大によって、該リンカー-ペイロードの水溶解度が経時的に増大する。
【０５１７】
(実施例68)
(ADCコンジュゲーション)
【０５１８】
マレイミド-リンカー-ペイロードの抗体へのコンジュゲーション(図13)及び[3+2]クリック反応を介するDIBAC-リンカー-ペイロードのアジド官能化抗体へのコンジュゲーション(図14)を、それぞれ、図13及び14で概説した。
【０５１９】
抗体にコンジュゲートされた非部位特異的マレイミド-リンカー-ペイロードについての一般的手順E
【０５２０】
本実施例は、マイケル付加又はチオール-マレイミド結合形成を介する抗体又は抗原結合断片へのリンカー-ペイロードの非部位特異的なコンジュゲーションの方法を示している。本実施例は、図13に示される化合物に言及している。抗体-システインを介するコンジュゲーションを、Adcetris(登録商標)様ADC(Mol. Pharm. 2015, 12(6), 1863-71を参照)を作製する方法と同様の方法を用いて、2工程で実施した。pH 7〜8のモノクローナル抗体(mAb)(50mM HEPES、150mM NaCl中、10mg/mL)を1mMジチオスレイトール(抗体1mg当たり0.006mg)又はTCEP(抗体に対して2.5モル当量)により37℃で30分間還元した。ゲル濾過(G-25、pH 4.5の酢酸ナトリウム)後、DMSO中、1〜10mg/mLの濃度の実施例38の化合物を還元された抗体に添加し、反応液を3〜14時間撹拌させておいた。得られた混合物をSECにより精製して、純粋なコンジュゲートを生成させた。DAR(UV)値を、ADCの測定された吸光度並びに抗体及び実施例38の化合物の減衰係数を用いて決定した。コンジュゲーションの結果を以下の表9にまとめた。
【０５２１】
Ab-Ex.38によって表されるマイケル付加を介するコンジュゲーション。図13を参照されたい。
表9．マイケル付加を介するコンジュゲーションの例
【表１４】
2020521018.tif 000529
【０５２２】
(実施例69)
抗体にコンジュゲートされたアルキン-リンカー-ペイロードへの部位特異的コンジュゲーションのための一般的手順F
【０５２３】
本実施例は、全体として、リンカー-ペイロードの抗体又はその抗原結合断片への部位特異的コンジュゲーションの方法を示している。本実施例は、図14に示される化合物に言及している。
【０５２４】
本実施例において、部位特異的コンジュゲートを2工程で産生した。第一の工程は、アジド-PEG3-アミン(上記)などの小分子のQ-タグ(Qタグに関する参考文献)を有する抗体への微生物トランスグルタミナーゼ(MTG)に基づく酵素的結合(本明細書では、「MTGに基づく」コンジュゲーション)である。第二の工程は、[2+3]付加環化、例えば、アジドとシクロオクチン(別名、銅を含まないクリック化学)との間での1,3-双極子付加環化を介するリンカー-ペイロードのアジド官能化抗体への結合を利用した。Baskin, J. M.; Prescher, J. A.; Laughlin, S. T.; Agard, N. J.; Chang, P. V.; Miller, I. A.; Lo, A.; Codelli, J. A.; Bertozzi, C. R.の文献、PNAS 2007, 104(43), 16793-7を参照されたい。図14に示されているのは、[2+3]付加環化を介してアジド官能化抗体とコンジュゲートされたDIBAC部分を有するリンカー-ペイロードの例である。このプロセスにより、部位特異的かつ化学量論的コンジュゲートが約50〜80％の単離収率で提供された。
【０５２５】
スキーム10．現在の図14のAb-Ex49によって表される[2+3]クリック反応によるADCコンジュゲーション。
【０５２６】
(工程1:)
アジド官能化抗体の調製
【０５２７】
PBS(pH 6.5〜8.0)中のアグリコシル化ヒト抗体IgG(IgG1、IgG4など)又はN297Q突然変異を有するヒトIgG1アイソタイプを≧200モル当量のアジド-dPEG3-アミン(MW＝218.26g/mol)と混合した。得られた溶液をMTG(Zedira, Darmstadt, Germany製のEC 2.3.2.13、又はModernist Pantry[L# 210115A]−ACTIVA TIは、Ajinomoto, Japan製のマルトデキストリンを含有する)(25U/mL;抗体1mg当たり5U MTG)と混合すると、0.5〜5mg/mLの最終濃度の抗体が得られ、その後、該溶液を、穏やかに振盪させながら、37℃で4〜24時間インキュベートした。反応をESI-MSによりモニタリングした。反応が終了したとき、余分なアミン及びMTGをSEC又はプロテインAカラムクロマトグラフィーにより除去すると、アジド官能化抗体が生成された。この生成物をSDS-PAGE(図15)及びESI-MS(図16)により特徴解析した。該抗体の2つの部位に付加されたアジド-dPEG3-アミンは、結果として、2DARの抗体-PEG3-アジドコンジュゲートについて、204Daの増加をもたらした。
【０５２８】
具体的な実験において、7mLカリウム不含PBSバッファー(pH 7.3)中のN-末端Qタグ抗体(24mg)を、MTG(0.350mL、35U、mTGアーゼ、Zedira, Darmstadt, Germany)の存在下、＞200モル当量のアジド-PEG3-アミン(MW 218.26)とともにインキュベートした。反応液を穏やかに混合しながら37℃で一晩インキュベートした。余分なアジド-PEG3-アミン及びmTGアーゼをサイズ排除クロマトグラフィー(SEC、Superdex 200 PG、GE Healthcare)により除去した。
【０５２９】
(工程2:)
クリック化学反応を用いる薬物と抗体との部位特異的コンジュゲートの調製
【０５３０】
表10のヒトIgG(IgG1、IgG4など)を有する部位特異的抗体薬物コンジュゲートをアジド官能化抗体とアルキン含有リンカー-ペイロードとの間の[2+3]クリック反応により調製した。詳細なコンジュゲーション手順は、次の通りである。リンカー-ペイロード(LP)を有する部位特異的抗体コンジュゲートは、水性媒体(例えば、PBS、5％グリセロールを含有するPBS、HBS)中のmAb-PEG3-N3(1〜3mg/mL)を、DMSO、DMF、又はDMAなどの好適な有機溶媒に溶解した≧6モル当量のLPとともに24℃〜37℃で6時間超の間インキュベートすることにより調製した(すなわち、反応混合物は、5〜20％有機溶媒、v/vを含有する)。反応の進行をESI-MSによりモニタリングし、mAb-PEG3-N3の欠如は、コンジュゲーションの終了を示した。余分な量のLP及び有機溶媒を、PBSによる溶出を介するSECによるか、又は酸性バッファーによる溶出と、その後のトリス(pH8.0)による中和を介するプロテインAカラムクロマトグラフィーにより除去した。
【０５３１】
具体的な例において、0.800mLのPBSg(PBS、5％グリセロール、pH 7.4)中のアジド官能化抗体(1mg)を、6モル当量のDIBAC-PEG4-D-Lys(COT-∝-CD)-VC-PABC-ペイロード(DMSO中、10mg/mLの濃度)で、室温で6〜12時間処理し、余分なリンカーペイロード(LP)をサイズ排除クロマトグラフィー(SEC、Superdex 200 HR、GE Healthcare)により除去した。
【０５３２】
最終生成物を超遠心分離により濃縮し、UV、SEC、SDS-PAGE、及びESI-MSにより特徴解析した。
【０５３３】
表10に示されているのは、対応するLP由来の非細胞傷害性ステロイド抗体コンジュゲート(ncADC)、裸の抗体、アジド官能化抗体、LP、及びncADCのその分子量、並びにESI-DAR値のリストである。表中、Abは、抗体を表し、Ab-N3は、アジド官能化抗体を表し、ncADCは、非細胞傷害性抗体薬物コンジュゲートを表す。
表10．CD含有リンカー-ペイロードを有する部位特異的コンジュゲートのリスト。
【表１５】
2020521018.tif 000530
2020521018.tif 000531
2020521018.tif 000532
【０５３４】
(実施例70)
抗体及び抗体-薬物-コンジュゲートの特徴解析のための一般的手順G
【０５３５】
精製されたコンジュゲートを、SEC、SDS-PAGE、及びESI-MSにより解析した。表10の抗Her2-LPコンジュゲートは、表10のLPを有するアジド官能化抗体(抗Her2-PEG3-N3)のクリック反応を介して抗Her2抗体から作製した。ADCを、SEC(図15)、ESI-MS、及びSEC(図16)により特徴解析した。
【０５３６】
SDS-PAGEによるADCの特徴解析
【０５３７】
ある方法において、SDS-PAGE条件には、(1.0mm×10ウェル)のNovex 4-20％トリス-グリシンゲル中にレーン毎にローディングされ、180V、300mAで80分間泳動される非還元試料及び還元試料(2〜4μg)がBenchMarkプレステインドタンパク質ラダー(Invitrogen、カタログ番号10748-010; L# 1671922.)とともに含まれた。解析用試料をNovexトリス-グリシンSDSバッファー(2×)(Invitrogen、カタログ番号LC2676)を用いて調製し、還元試料を10％の2-メカプトエタノール(mecaptoethanol)を含有するSDS試料バッファー(2×)を用いて調製した。
【０５３８】
図15には、還元条件下で行われたSDS-PAGEでの抗体及びADCの分子量のわずかな変化を示す代表的なゲルが示されている。質量変化は、軽鎖では観察されなかった。しかしながら、裸の抗体の質量と比較した場合、ADC重鎖の質量は増加していた。架橋された物質は検出されず、凝集は検出されなかった。
【０５３９】
図15．抗Her2抗体、抗Her2-PEG3-N3、及び抗Her2-EX49のクマシー染色SDS-PAGEゲル。図15において、レーンは、以下の凡例に従って表示されている:
【表１６】
2020521018.tif 000533
【０５４０】
LC-ESI-MSによるADCの特徴解析
【０５４１】
薬物-ペイロード分布プロファイルを決定するために及び平均DARを計算するために、LC-ESI-MSによるncADC試料のインタクト質量の測定を行った。各々の試験試料(20〜50ng、5uL)をAcquity UPLC Protein BEH C4カラム(10K psi、300Å、1.7μm、75μm×100mm;カタログ番号186003810)に充填した。3分間の脱塩の後、タンパク質を溶出させ、質量スペクトルをWaters Synapt G2-Si質量分析計を用いて獲得した。
【０５４２】
デコンボリューション処理した質量スペクトルは、145126.0Daの分子量を有するアグリコシル化抗Her2抗体の主要ピーク及び145932.0Daの分子量を有するアジド官能化抗Her2抗体の主要ピークを示し、そのアグリコシル化親抗体と比較して、806Daの(すなわち、各々のアグリコシル化抗体に対して4アミノ-PEG3-アジドコンジュゲーションに相当する)増加を示した。また、抗Her2-LPコンジュゲートの主要ピークは、152166.0Daの分子量を有し、そのアグリコシル化親抗体と比較して、6234Daの(すなわち、各々のアグリコシル化抗体に対して4 LP(MW＝1558.5Da)コンジュゲーションに相当する)増加を示した。表3にまとめられているように、この文書中の大部分の部位特異的ADCは、4DARを有する。
【０５４３】
(実施例71)
本実施例は、SECによるADCの特徴解析を示している。
【０５４４】
分析的SEC実験を、Waters 600装置を用いて、Superdex 200(1.0×30cm)カラムで、0.80mL/分の流速で、PBS pH 7.4を用いて実行し、Waters 2998 PDAを用いて、λ＝280nmでモニタリングした。分析用試料は、30〜100μLの試験試料を含む、200μL PBS(pH 7.4)から構成されていた。分取SEC精製を、GE Healthcare製のAKTA装置を用いて、Superdex 200 PG(2.6×60cm)カラムで、2mL/分の流速で、PBS pH 7.4で溶出させて行い、λ＝280nmでモニタリングした。図16のSECの結果は、単量体mAb及びそのコンジュゲートの典型的な保持時間を示しており、凝集も分解も検出されなかった。
【０５４５】
図16．抗Her2 Ab、抗Her2-PEG3-N3、及びHer2-Ex49のSEC。
【０５４６】
(実施例72)
本実施例は、シクロデキストリンリンカーを有する細胞傷害性ADC及びシクロデキストリンリンカーを有さない細胞傷害性ADCの生体活性を示している(図17)。
【０５４７】
細胞傷害性ペイロードを含有するCDを有するADCと細胞傷害性ペイロードを含有するCDを有さないADCの同等性を評価するために、細胞傷害性アッセイで、SKBR3細胞が使用された。SKBR3細胞は、aHer2 ADC活性を評価するために一般に使用されている。aPRLR ADCは、SKBR3細胞傷害性アッセイにおける対照mAb ADCとして使用されている。このアッセイのために、抗Her2 ADC又はPRLR ADCのインビトロ細胞傷害性を、CellTiter-Gloアッセイキット(Promega、カタログ番号G7573)を用いて評価した。このキットは、存在するATPの量を用いて、培養物中の生細胞の数を決定する。このアッセイのために、SKBR3細胞を、完全成長培地中、Nunclon白色96ウェルプレートに、6000細胞/ウェルで播種し、37℃、5％CO2で一晩成長させた。細胞生存曲線については、1:4に連続希釈したADC又は遊離ペイロードMMAEを、処理なしの対照を含む、100nMからの濃度で細胞に添加し、その後、5日間インキュベートした。5日間のインキュベーションの後、細胞を室温で100μLのCellTiter-Glo試薬とともに5分間インキュベートした。相対発光単位(RLU)をVictorプレートリーダー(PerkinElmer)で決定した。IC50値を10点応答曲線(GraphPad Prism)に対する4パラメータロジスティック方程式から決定した。全ての曲線及びEC50値をペイロード当量について補正した。IC50は全てnM濃度で表され、死滅した細胞のパーセンテージ(％死滅)は、最大被験濃度について報告されている。
【０５４８】
表11及び図17に示されているように、CDを含有する抗Her2 Ab ADC(Ex38、Ex40、Ex41、Ex48、Ex42、Ex39)は、SKBR3細胞の死滅化において、CDを含有しない抗Her2 Ab ADC(抗Her2 Ab-Ex36)と同様の効力及び効能を有する。両方の組の抗HER2 ADCは、最大被験濃度で90パーセントを超える死滅化を示した。このアッセイにおいて、コンジュゲートされていない抗体は、いかなる効果も示さなかった。アイソタイプ対照ADCは、CDを含有するかどうかかかわらず、このアッセイにおいて、いかなる効果も示さなかった。
表11: SKBR3細胞におけるシクロデキストリンリンカーを有するADC又はシクロデキストリンリンカーを有さないADCの細胞傷害性。
【表１７】
2020521018.tif 000534
NA＝適用外
【０５４９】
シクロデキストリンリンカーを有するステロイドADC及びシクロデキストリンリンカーを有さないステロイドADCの生体活性は、図18に示されている。
【０５５０】
ステロイドペイロードを含有するCDを有するADCとステロイドペイロードを含有するCDを有さないADCの同等性を試験するために、293/PRLR/GRE-Luc細胞におけるその活性をインキュベーションから72時間後に検討した。このアッセイのために、20,000個の細胞を、10％FBS及びペンシリン(pencillin)/ストレプトマイシンが補充されたDMEMを含有する培地(完全培地)中、96ウェルプレートに播種し、37℃、5％CO2で一晩成長させた。遊離の薬物又はADCの用量応答曲線については、100nM〜5.1pMの範囲の連続希釈試薬を細胞に添加し、37℃で72時間インキュベートした。ルシフェラーゼ活性をOne-Glo(商標)試薬(Promega、カタログ番号E6130)の添加により決定し、相対発光量(RLU)をVictorルミノメーター(Perkin Elmer)で測定した。EC50値を、GraphPad Prismを用いて、10点応答曲線に対する4パラメータロジスティック方程式から決定した。ステロイドの送達は、293/PRLR/GRE-Luc細胞におけるLucレポーターの活性化をもたらすことになる。このアッセイにおける完全な活性化は、遊離ペイロードで測定される最大活性化の90〜100％と定義される。このアッセイにおける部分的な活性化は、遊離ペイロードで測定される最大活性化の10％〜90％である活性化である。このアッセイにおける最小の活性化は、遊離ペイロードで測定される最大活性化の10％未満と定義される。
【０５５１】
表12及び図18に示されているように、CDを含有する抗PRLR Ab ADC(抗PRLR Ab-Ex46、抗PRLR Ab-Ex47)は、293/PRLR/GRE-Luc細胞でのGRE-Lucレポーターの活性化において、CDを含有しない抗PRLR Ab ADC(抗PRLR Ab-Ex45)と同様の効力及び効能を有する。このアッセイにおいて、コンジュゲートされていない抗体と同様に、アイソタイプ対照ADCも、CDを含有するかどうかかかわらず、このアッセイにおいて、いかなる顕著な効果も示さなかった。
表12: 293/PRLR/GRE-Luc細胞におけるシクロデキストリンリンカーを有するステロイドADC又はシクロデキストリンリンカーを有さないステロイドADCのGR活性化
【表１８】
2020521018.tif 000535
NA＝適用外
【０５５２】
シクロデキストリンリンカーを有するLXRアゴニストADC及びシクロデキストリンリンカーを有さないLXRアゴニストADCの生体活性。図19を参照されたい。
【０５５３】
LXRアゴニストを含有するCDを有するADCとLXRアゴニストを含有するCDを有さないADCの同等性を試験するために、CDを有する抗HER2 Ab ADC及びCDを有さない抗HER2 Ab ADCを、THP1/LXR-Luc/Her2バイオアッセイでLXRを活性化するその能力について試験した。このアッセイにおいて、THP1/LXR-Luc細胞又はTHP1/LXR-Luc/Her2細胞のいずれかを、10％FBS及びペンシリン(pencillin)/ストレプトマイシニン(streptomycinin)が補充されたRPMIを含む培地(完全培地)中、30,000細胞/ウェルで、白色の96ウェルプレートに播種した。その後、抗体薬物コンジュゲート、コンジュゲートされていない抗体、又は遊離ペイロードの3倍連続希釈物を100nM〜0.01nMの範囲の最終濃度で細胞に添加した。48時間のインキュベーションの後、One-Glo(商標)試薬(Promega, E6130)を各々のウェルの細胞に添加した後に、ルシフェラーゼ活性を決定した。相対発光単位(RLU)をVictorルミノメーター(PerkinElmer)で測定し、EC50値を10点応答曲線(GraphPad Prism)に対する4パラメータロジスティック方程式を用いて決定した。本発明のLXRアゴニスト及び参照化合物のEC50値は、表13に示されている。ncADC及び対応するLXRアゴニストのEC50値は、表13に示されている。このアッセイにおける完全な活性化は、遊離ペイロード1dで測定される最大活性化の95〜100％超と定義される。このアッセイにおける部分的な活性化は、遊離ペイロード1dで測定される最大活性化の10％〜94.9％と定義される。このアッセイにおける最小の活性化は、遊離ペイロード1dで測定される最大活性化の10％未満と定義される。
【０５５４】
表13及び図19に示されているように、CDを含有し、かつペイロード1dを放出する抗Her2 Ab ADC(抗Her2 Ab-Ex49)は、THP1/Her2/LXR-Luc細胞でのLXRの活性化において、CDを含有せず、かつペイロード1dを放出する抗Her2 Ab ADC(抗Her2 Ab-Ex48)と同様の効力及び効能を有する。ペイロード1fを放出する、CDを含有する別の抗Her2 Ab ADCも、遊離ペイロード1dと比較したとき、完全な活性化を示す。このアッセイにおいて、コンジュゲートされていない抗体は、いかなる効果も示さなかった。アイソタイプ対照ADCは、CDを含有するかどうかかかわらず、ほとんどの被験濃度で顕著な効果を示さなかった。アイソタイプ対照の中には、最大被験濃度でいくらかの部分的な活性化を示すものも実際にあった。
表13: LXRアゴニスト及びncADCによるTHP1/LXR-Luc/Her2アッセイでの活性化
【表１９】
2020521018.tif 000536
NA＝適用外
【０５５５】
J. Am. Chem. Soc., 2012, 134(46), 19108-19117; Org. Biomol. Chem., 2009, 7(8), 1680-1688、及びUS2015/284416A1号; Angew. Chem. Int. Ed., 2011, 50(47), 11117-11120; J. Am. Chem. Soc., 2012, 134(46), 18886-18888; Synthesis(Germany), 2014 46(5), 669-677も参照されたい。
【０５５６】
(実施例73)
シクロデキストリン部分をリンカー中に付加したときのステロイド又はLXRアゴニストペイロードに対する切断効率に対する効果を決定するために、カテプシンB切断アッセイを実施した。このアッセイのために、リンカー-ペイロードストック溶液(DMSO中、10mMのリンカー-ペイロード)を、100mM NaOAc、10mMジチオスレイトールの溶液(pH5)中に添加して、50μM基質溶液を得た。50mM NaOAc、1mM EDTA(pH 5)中のヒト肝臓カテプシンB(Athens Research & Technology、カタログ番号16-12-030102)をこの基質溶液に添加した。カテプシンB及び基質溶液を10mMのカテプシンBインヒビター(CA074; APE Bio、カタログ番号A1926)あり及びなしで混合し、37℃で4時間インキュベートした。4時間のインキュベーションの後、酢酸、その後、アセトニトリルを添加して、反応を停止させた。その後、クエンチした試料は、14,000rpmで遠心分離を受けた。その後、得られた上清のアリコートを等量の水で希釈し、LC/MSにより分析して、放出されたペイロードの量を決定した。カテプシンB用の200μMの蛍光性基質(Santa Cruz Biotechnology、カタログ番号207975)(340nmの励起/425nmの放出での蛍光)とともにインキュベートすることにより、カテプシンBの安定性及び活性を確認した。
【０５５７】
表14に示されているように、シクロデキストリンを有さないLXRアゴニストリンカーペイロードは、カテプシンBで4時間処理したとき、13.6％の遊離ペイロードを放出したのに対し、シクロデキストリンを有するLXRアゴニストリンカーペイロードは、カテプシンBで4時間処理したとき、38.5％の遊離ペイロードを放出した。シクロデキストリンを有さないステロイドリンカーペイロードは、カテプシンBで4時間処理したとき、7.5〜17.2％の遊離ペイロードを放出したのに対し、シクロデキストリンを有するステロイドリンカーペイロードは、カテプシンBで4時間処理したとき、28.9％の遊離ペイロードを放出した。
表14:カテプシンBアッセイでシクロデキストリン部分を有するリンカー-ペイロード及びシクロデキストリン部分を有さないリンカー-ペイロードから放出されたペイロードの量
【表２０】
2020521018.tif 000537
【０５５８】
(実施例74)
インビトロでの抗MSR1抗体LXRアゴニスト非細胞傷害性ADCの活性へのシクロデキストリンリンカーの付加の効果を決定するために、細胞ベースのLXR応答ルシフェラーゼレポーターアッセイを開発した。アッセイ細胞株を作製するために、LXR調節型ルシフェラーゼレポーター遺伝子[Cignal Lenti LXR Reporter(luc)キット(Qiagen、カタログ番号CLS-001L)]をTHP1細胞に形質導入し、この細胞をピューロマイシン中で2週間選択した。このレンチウイルスは、最小CMVプロモーター及びLXR転写応答エレメントのタンデムリピートの制御下でホタルルシフェラーゼ遺伝子を発現する。得られる細胞株をTHP1/LXR-Luc細胞と呼ぶ。
【０５５９】
このアッセイのために、THP1/LXR-Luc細胞を、10％FBS及びペンシリン(pencillin)/ストレプトマイシンが補充されたRPMIを含有する培地中、40,000細胞/ウェルで、96ウェルプレートに播種し、その後、200nMホルボールミリステート酢酸塩で、3日間分化させた。3日間の分化の後、新鮮な培地中の抗体薬物コンジュゲートの3倍連続希釈物を100nM〜0.01nMの範囲の最終濃度で細胞に添加した。プレートの最後のウェルは、培地のみを含有するブランク対照としての役割を果たした。48時間後、One-Glo(商標)試薬(Promega、カタログ番号E6130)を各々のウェルに添加した後に、ルシフェラーゼ活性を決定した。相対発光単位(RLU)をVictorルミノメーター(PerkinElmer)で測定し、EC50値を10点応答曲線(GraphPad Prism)に対する4パラメータロジスティック方程式を用いて決定した。各々の被験分子のEC50値は、表15に示されている。抗MSR1抗体の各々について、標準的なもの1つのRLU/標準的なもの8つのRLUを計算することにより、シグナル対ノイズ比(S/N)を決定した。
【０５６０】
表15に示されているように、シクロデキストリンを有さないLXRアゴニストリンカーペイロードとコンジュゲートされたH1H21234N-N297Q(H1H21234N-N297Q-Ex 48)は、1.77nMのEC50値及び16のS/N値で、THP1/LXR-Luc細胞の刺激を示した。シクロデキストリンを有するLXRアゴニストリンカーペイロードとコンジュゲートされたH1H21234N-N297Q(H1H21234N-N297Q-Ex 49)による1.99nMのEC50値及び17のS/N値でのTHP1/LXR-Luc細胞の刺激。
表15: THP1/LXR-Luc細胞ベースのアッセイにおける抗MSR1 Ab-LXRアゴニストncADCの活性
【表２１】
2020521018.tif 000538
【０５６１】
(実施例75)
抗MSR1抗体ステロイド非細胞傷害性ADCの活性へのシクロデキストリンリンカーの付加の効果があるかどうかを決定するために、インビトロのリポ多糖(LPS)媒介性IL-1β放出アッセイを実施した。このアッセイのために、THP-1細胞を、10％FBS及びペンシリン(pencillin)/ストレプトマイシニン(streptomycinin)が補充されたRPMIを含有する培地中、40,000細胞/ウェルで、96ウェルプレートに播種し、200nMホルボールミリステート酢酸塩(PMA)で、3日間分化させた。3日間の分化の後、新鮮な培地中の抗体薬物コンジュゲートの3倍連続希釈物を100nM〜0.01nMの範囲の最終濃度で細胞に添加した。最後のウェルは、培地のみを含有するブランク対照として残した。72時間後、細胞を5μg/mLのLPS(InVivoGen、カタログ番号tlrl-eklps)で5時間処理した。その後、細胞培地を回収し、V-PLEX炎症促進性パネル1ヒトキット(Meso Scale Diagnostics、カタログ番号15049D-2)を製造業者の指示通りに用いて、IL-1βを測定した。その後、プレートをMSDプレートリーダー(Meso Scale Discovery)で読み取った。IC50値を10点応答曲線(GraphPad Prism)に対する4パラメータロジスティック方程式から決定した。IC50値は全て、モル(M)濃度で表されている。
【０５６２】
表16に示されているように、シクロデキストリンを有さないステロイドリンカーペイロードとコンジュゲートされたH1H21234N-N297Q(H1H21234N-N297Q-Ex 58)は、1.73nMのIC50値で、THP1細胞からのLPS媒介性IL-1β放出の阻害を示し、放出されるIL-1βが97.2pg/mLに至るまで低下した。シクロデキストリンを有さないステロイドリンカーペイロードとコンジュゲートされたH1H21234N-N297Q(H1H21234N-N297Q-Ex 59)は、1.33nMのIC50値で、THP1細胞からのLPS媒介性IL-1β放出の同様の阻害を示し、放出されるIL-1βが126.46pg/mLに至るまで低下した。コンジュゲートされていない抗体は、22.9nMのIC50値で、THP1細胞からのLPS媒介性IL-1β放出の阻害を示し、放出されるIL-1βが343.7pg/mLに至るまで低下し、コンジュゲートされた抗体と比較して、効力の欠如を示した。
表16: THP1細胞からのLPS誘導性IL-1β放出に対する抗MSR1 Ab-ステロイドncADCの活性
【表２２】
2020521018.tif 000539
【０５６３】
上記の実施態様及び実施例は、単に例示的かつ非限定的であることが意図される。当業者は、特定の化合物、材料、及び手順の数多くの等価物を認識するか、又はそれらをルーチンの実験だけを用いて確認することができるであろう。そのような等価物は全て、本範囲内にあると考えられ、添付の特許請求の範囲によって包含される。
【図１Ａ】
2020521018.tif 000658
【図１Ｂ】
2020521018.tif 000659
【図１Ｃ−１】
2020521018.tif 000660
【図１Ｃ−２】
2020521018.tif 000661
【図２】
2020521018.tif 000662
【図３】
2020521018.tif 000663
【図４】
2020521018.tif 000664
【図５】
2020521018.tif 000665
【図６】
2020521018.tif 000666
【図７】
2020521018.tif 000667
【図８】
2020521018.tif 000668
【図９】
2020521018.tif 000669
【図１０】
2020521018.tif 000670
【図１１】
2020521018.tif 000671
【図１２】
2020521018.tif 000672
【図１３】
2020521018.tif 000673
【図１４】
2020521018.tif 000674
【図１５】
2020521018.tif 000675
【図１６】
2020521018.tif 000676
【図１７】
2020521018.tif 000677
【図１８】
2020521018.tif 000678
【図１９】
2020521018.tif 000679
【図２０】
2020521018.tif 000680
【国際調査報告】
2020521018.tif 000681
2020521018.tif 000682
2020521018.tif 000683
2020521018.tif 000684
2020521018.tif 000685
2020521018.tif 000686