(57)【要約】  第４級アンモニウム塩の配合量を減らしながら十分な防腐効果を有する点眼剤組成物を提供すること。薬効成分としてニプラジロールを含有する点眼剤であって、第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤を０.０００５〜０.００５質量％含有することを特徴とする点眼剤組成物である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
薬効成分としてニプラジロールを含有する点眼剤であって、第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤を０.０００５〜０.００５ｗ／ｖ％含有することを特徴とする点眼剤組成物。
【請求項２】
第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤を０.０００５〜０.００２ｗ／ｖ％含有する請求項第１項記載の点眼剤組成物。
【請求項３】
第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤が塩化ベンザルコニウムである請求項第１項または第２項記載の点眼剤組成物。
【請求項４】
ニプラジロールと第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤をそれらの質量比で、５０：１ないし５００：１で含有する請求項第１項ないし第３項の何れかの項記載の点眼剤組成物。
【請求項５】
ｐＨが、５ないし８の範囲である請求項第１項ないし第４項の何れかの項記載の点眼剤組成物。
【請求項６】
さらに、緩衝剤を含有する請求項第１項ないし第５項の何れかの項記載の点眼剤組成物。
【請求項７】
緩衝剤が、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、ホウ酸またはホウ砂の１種又は２種以上である請求項第６項記載の点眼剤組成物。
【請求項８】
緩衝剤を、製剤全量に対し０.０１〜５ｗ／ｖ％含有する請求項第６項または第７項記載の点眼剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、点眼剤組成物に関し、更に詳細には、眼に対する高い安全性と、優れた防腐効果を有し、ニプラジロールを含有する点眼剤組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
点眼剤は、医薬品の溶液、懸濁液又は医薬品を用時溶解若しくは懸濁して、結膜嚢に適用する製剤であり、無菌であることが要求されている。【０００３】
そのため、点眼剤は通常、清浄な環境下で、滅菌済みの容器に濾過滅菌した薬剤を充填して製造されており、開封前は無菌状態である。しかし、患者が使用する際には、外栓を外して内容液を滴下して使用するため、非無菌の外気が容器内に流入することになり、内容液内に防腐剤が含まれていない場合には、内容液が微生物によって汚染される恐れがある。【０００４】
このため、通常、点眼剤には第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤（塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム等）や、パラベン類等に代表される防腐剤（抗菌剤）を配合することが多いが、最近の研究によれば、これらの防腐剤の中でも最も広く利用されている第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤が細胞毒性を有することが報告されている（非特許文献１）。【０００５】
通常、この第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤の有効濃度は０.０１ｗ／ｖ％（以下、単に「％」で示す）程度とされることが多い。しかし、この濃度の第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤を配合した点眼剤を長期連用したり、または角膜損傷のある人、もしくはドライアイ症状をもつ人が点眼すると、角膜損傷をきたすおそれがある。このため、安全性を考慮した場合は、第４級アンモニウム塩の濃度を低下させることが求められている。【０００６】
しかし、上記のように、第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤の有効濃度は０.０１％程度とされており、この量を減らすこと、即ち防腐剤を減少させた場合は微生物の発育を防ぐことができないと考えられており、現実性がないとされていた。このように、広範囲の種々の微生物の増殖を防ぎつつ、角膜等の損傷となる原因ともなりうる第４級アンモニウム塩の配合量を減らすことは、極めて難しいことであった。【０００７】
【非特許文献１】あたらしい眼科８（１０）：１５９９〜１６０３、１９９１
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
従って、点眼剤組成物において、第４級アンモニウム塩の配合量を減らしながら微生物の増殖を防ぐ手段が求められていた。特に、緑内障又は高眼圧症の点眼治療薬は、高齢者の長期投与に使用されることが多いので、角膜損傷の防止とより高い防腐効果を有することが求められていた。本発明は、上記のような手段の開発がその課題である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
発明者らは、上記の問題を解決するため鋭意検討を行っていたところ、他剤との組合せでは通常十分な防腐力が得られない第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤の濃度範囲においても、緑内障又は高眼圧症の点眼治療薬として使用され、主に高齢者等に対して処方されることが多いニプラジロールと組み合わせることにより十分な防腐力が得られ、角膜に対する安全性が高い点眼剤組成物となしうることを見出し、本発明を完成した。【００１０】
すなわち本発明は、薬効成分としてニプラジロールを含有する点眼剤であって、第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤を０.０００５％〜０.００５％含有することを特徴とする点眼剤組成物である。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の点眼剤組成物は、第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤の含有量が従来のものに比べ少ないにもかかわらず、優れた防腐効果を有するものであるから、眼への安全性が高く、経時的に優れた防腐効果が得られるものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明の点眼剤組成物に用いられるニプラジロールは、その一般名が３,４−ジヒドロ−８−（２−ヒドロキシ−３−イソプロピルアミノ）プロポキシ−３−ニトロキシ−２Ｈ−１−ベンゾピランである化合物であり、緑内障又は高眼圧症の点眼治療薬の有効成分として使用されるものである。【００１３】
本発明の点眼剤組成物におけるニプラジロールの配合量は、製剤全量に対して、０.０５〜１％であり、特に好ましくは０.１〜０.５％である。【００１４】
一方、本発明の点眼剤組成物において用いられる第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤としては、殺菌剤として知られる塩化ベンザルコニウムや塩化ベンゼトニウムが挙げられるが、特に塩化ベンザルコニウムが好ましい。【００１５】
一般に、点眼剤への第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤の配合量は、０.０１％程度とされることが多いが、ニプラジロールを含有する本願発明の点眼剤組成物では、その配合量は、製剤全体量に対して０.０００５〜０.００５％であり、好ましくは０.０００５〜０.００２％であり、従来に比べ、約１／２〜１／２０程度の量である。【００１６】
また、本発明点眼剤組成物における、ニプラジロールと第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤との配合割合は、質量比で、５０：１ないし５００：１程度とすることが好ましい。【００１７】
本発明の点眼剤組成物において、そのｐＨは、５から８程度であり、好ましくは６.５〜７.５の範囲である。このｐＨの測定は、点眼剤組成物の各成分を加えた後、よく振り混ぜ、室温下でｐＨメーターを用いることにより行われる。また、本発明の点眼剤組成物の浸透圧比は、０.８ないし１.２である。【００１８】
本発明の点眼剤組成物には、上記したニプラジロールおよび第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤の他、各種の任意成分、例えば、必ずしもこれらに限定されるものではないが、緩衝剤、粘稠剤、抗酸化剤及び安定化剤、等張化剤等を配合することが可能である。【００１９】
任意成分のうち、緩衝剤としては、ホウ酸、ホウ砂、リン酸第一塩、リン酸第二塩、酢酸塩、アミノ酸塩、クエン酸塩、炭酸塩及び炭酸水素塩等が挙げられ、抗菌力の観点から、ホウ酸、ホウ砂、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩を用いるのが好ましい。この緩衝剤の含有量は製剤全量に対して通常０.０１〜５％であり、好ましくは、０.０１〜２％である。【００２０】
また、粘稠剤としては、ポリビニルアルコール、ポビドン及びカルボキシビニルポリマー等が挙げられる。この粘稠剤の含有量は製剤全量に対して通常５％程度までである。【００２１】
更に抗酸化剤としては、亜硫酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム等が、製剤全量に対して通常１％程度までの量で配合され、安定化剤としては、カプリル酸ナトリウム、アルギン酸、エチレンジアミン四酢酸ニナトリウム又は四ナトリウム（ＥＤＴＡＮａ）等が、製剤全量に対して通常０〜１％程度の量で配合される。【００２２】
更にまた、等張化剤としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、ソルビトール、マンニトール等が挙げられ、製剤全量に対して通常０.０１〜３％程度の量で配合される。【００２３】
かくして得られる本発明の点眼剤組成物は、点眼溶液製剤や、洗眼用製剤の他、用時溶解型の点眼剤、用時希釈型の点眼剤、眼軟膏製剤等とすることができる。【００２４】
点眼剤組成物は、薬液の微生物汚染を防止するために無菌状態で製造され、使用時においても、微生物による汚染を防ぐため、点眼ノズルが睫毛や目あるいは手指等に触れないように注意して投与する必要がある。【００２５】
しかし、高齢者はコンプライアンスが悪い傾向があり、また、一般的に、若者と比較して指先の感覚が鈍く、人によっては指の震えも認められることがあるため、手指、睫毛などが点眼瓶のノズルに触れることにより、薬液を汚染してしまうおそれがあり、抗菌剤の使用はさけられないとされている。【００２６】
本発明では、従来と同程度の抗菌性を、従来より格段に少ない抗菌剤の配合により達成するものであるから、抗菌性と安全性を兼ね備えた点眼剤組成物であるといえる。
【実施例】
【００２７】
以下、製剤例および試験例を用いて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに何ら制約されるものではない。【００２８】
製 剤 例  １
ニプラジロール  ２５０ｍｇを精製水  ９０ｍｌに加え、更に希塩酸を適量加えて溶解した。この液にリン酸水素ナトリウム  ３９９ｍｇ、リン酸二水素カリウム  ８０ｍｇ、塩化ナトリウム  ７４０ｍｇおよび塩化ベンザルコニウム  ２ｍｇを加えて攪拌溶解し、更に希塩酸を適量加えてｐＨを７とし、全量を精製水で１００ｍｌに調整した後、メンブランフィルターで濾過滅菌して点眼剤組成物１を得た。このものは、無色透明な液体であり、その浸透圧比は１.０であった。【００２９】
製 剤 例  ２
ニプラジロール  ２５０ｍｇを精製水  ９０ｍｌに加え、更に希塩酸を適量加えて溶解した。この液にリン酸水素ナトリウム  ３９９ｍｇ、リン酸二水素カリウム  ８０ｍｇ、塩化ナトリウム  ７４０ｍｇおよび塩化ベンザルコニウム  ０.５ｍｇを加えて攪拌溶解し、更に適量の塩酸を加えてｐＨ７とし、全量を精製水で１００ｍｌに調整した後、メンブランフィルターで濾過滅菌して点眼剤組成物２を得た。このものは、無色透明であり、その浸透圧比は１.０であった。【００３０】
製 剤 例  ３
ニプラジロール  ２５０ｍｇを精製水  ９０ｍｌに加え、更に希塩酸を適量加えて溶解した。この液にリン酸水素ナトリウム  ３９９ｍｇ、リン酸二水素カリウム  ８０ｍｇ、塩化ナトリウム  ７４０ｍｇおよび塩化ベンザルコニウム  ５ｍｇを加えて攪拌溶解し、更に適量の塩酸を加えてｐＨ７とし、全量を精製水で１００ｍｌに調整した後、メンブランフィルターで濾過滅菌して点眼剤組成物３を得た。このものは、無色透明であり、浸透圧比は１.０であった。【００３１】
製 剤 例  ４
ニプラジロール ２５０ｍｇを精製水  ９０ｍｌに加え、更に希塩酸を適量加えて溶解した。この液にリン酸水素ナトリウム  ３９９ｍｇ、リン酸二水素カリウム  ８０ｍｇ、塩化ナトリウム  ７４０ｍｇおよび塩化ベンザルコニウム  １０ｍｇを加えて攪拌溶解し、更に適量の塩酸を加えてｐＨ７とし、全量を精製水で１００ｍｌに調整した後、メンブランフィルターで濾過滅菌して点眼剤組成物４を調製した。このものは無色透明であり、その浸透圧比は１.０であった。【００３２】
製 剤 例  ５
リン酸水素ナトリウム  ３９９ｍｇ、リン酸二水素カリウム  ８０ｍｇ、塩化ナトリウム  ７４０ｍｇおよび塩化ベンザルコニウム  ２ｍｇに精製水  ９０ｍｌを加え、攪拌溶解し、更に適量の塩酸を加えてｐＨ７とし、全量を精製水で１００ｍｌに調整した後、メンブランフィルターで濾過滅菌して点眼剤組成物５を得た。このものは無色透明であり、その浸透圧比は０.９５であった。【００３３】
製 剤 例  ６
リン酸水素ナトリウム  ３９９ｍｇ、リン酸二水素カリウム  ８０ｍｇ、塩化ナトリウム  ７４０ｍｇおよび塩化ベンザルコニウム  ０.５ｍｇに精製水９０ｍｌを加え、攪拌溶解し、更に適量の塩酸を加えてｐＨ７とし、全量を精製水で１００ｍｌに調整した後、メンブランフィルターで濾過滅菌して点眼剤組成物６を得た。このものは無色透明であり、その浸透圧比は０.９５であった。【００３４】
製 剤 例  ７
マレイン酸チモロール  ６８４ｍｇを精製水  ９０ｍｌに加え、更にこの液にリン酸水素ナトリウム  ３９９ｍｇ、リン酸二水素カリウム  ８０ｍｇ、塩化ナトリウム  ７４０ｍｇおよび塩化ベンザルコニウム  ０.５ｍｇを加えて攪拌溶解し、更に適量の塩酸を加えてｐＨ７とし、全量を精製水で１００ｍｌに調整した後、メンブランフィルターで濾過滅菌して点眼剤組成物７を得た。このものは無色透明であり、その浸透圧比は１.１であった。【００３５】
製 剤 例  ８
ニプラジロール  ２５０ｍｇを精製水  ９０ｍｌに加え、更に希塩酸を適量加えて溶解した。この液に塩化ナトリウム  ７４０ｍｇおよび塩化ベンザルコニウム  ０.５ｍｇを加えて攪拌溶解し、全量を精製水で１００ｍｌに調整した後、メンブランフィルターで濾過滅菌して点眼剤組成物８を調製した。このものは無色透明であり、ｐＨは５、浸透圧比は０.８８であった。【００３６】
以上製剤例１〜８の組成を下の表１にまとめて示す。
【表１】
2005072727.tif 000002
【００３７】
試 験 例
（１）抗菌力試験（保存効力試験）：
製剤例１、２、４〜８で得た各点眼剤組成物について、その抗菌力を下に示す方法により調べた。この結果を表２〜４に示す。【００３８】
抗菌力試験は、第１４改正日本薬局方の保存効力試験法に準じて実施した。使用する接種菌としては、細菌であるエシェリヒア・コリ（Ｅ.ｃｏｌｉ）、シュードモナス・アエルギノーザ（Ｐ.ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓ.ａｕｒｅｕｓ）を使用した。各点眼剤組成物中に所定菌数を接種した後、１、４、７、１４、２１および２８日後の残存菌数を測定することにより抗菌力を評価した。【００３９】
なお、コントロールとして、第１４改正日本薬局方微生物試験法に定められる、リン酸緩衝液（リン酸緩衝液ｐＨ７.２）を使用した。【００４０】
【表２】
2005072727.tif 000003
【００４１】
【表３】
2005072727.tif 000004
【００４２】
【表４】
2005072727.tif 000005
【００４３】
（２）細胞毒性試験：
製剤例１ないし４で得た各点眼剤組成物について、その細胞毒性を下に示す方法により調べた。この結果を表５に示す。【００４４】
細胞毒性試験は、ウサギ角膜上皮細胞を用いて行った。まず、４ウェルマルチプレートの各ウェルに１０％ＦＢＳ含有イーグル（Ｅａｇｌｅ'ｓ）ＭＥＭ培地１ｍlを分注し、さらに細胞懸濁液（約１０００ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）を、１ウェルにつき８０個播種し、プレートを前後左右に揺らし、よく撹拌した後、ＣＯ２インキュベーター内で培養した。培養３日後、調製した希釈液を１ｍｌずつ分注し、プレートを前後左右に揺らし、よく撹拌した後、ＣＯ２インキュベーター内でさらに７日間培養した。これをコントロールとした。【００４５】
一方、同様の手順で、点眼剤組成物１ないし４を、各々、１０％ＦＢＳ含有イーグルＭＥＭ培地を用いて２、５、１０、２０、４０および１００倍に希釈したものについて、培養を行った。【００４６】
培養後、細胞をギムザ染色し、青色の生細胞の数をカウントし、これよりコロニー形成率を求めた。更にこの結果より、ＥＤ５０の希釈倍率を求めた。これらの結果を表５に示す。【００４７】
【表５】
2005072727.tif 000006
【００４８】
（３）評価結果：
ニプラジロールを含有せず、塩化ベンザルコニウムを０.００２％含む、製剤例５は、菌が完全に死滅するまでに最低でも７日以上を要していた。一方、ニプラジロールを含有し、上記製剤例５と同量の塩化ベンザルコニウムを含有する製剤例１では、菌の完全な死滅までに要する期間は、製剤例５と比べていずれの菌種においても短く、より強い抗菌力を示している。【００４９】
また、ニプラジロールを含有せず、塩化ベンザルコニウムを０.０００５％含む製剤例６では、シュードモナス・アエルギノーザが２８日を経ても減少が認められず、抗菌力が不足することが示された。これに対し、ニプラジロールを含有し、上記製剤例６と同量の塩化ベンザルコニウムを含有する製剤例２では十分な抗菌力を示していた。【００５０】
製剤例２についての結果から明らかなように、一般的に必要とされる第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤の有効濃度０.０１％を配合した製剤（製剤例４）の１／２０の量の塩化ベンザルコニウムを含有するものでも、十分な抗菌力を得られることが明かとなった。また、製剤例２と同じ量の塩化ベンザルコニウムを有しながら、ニプラジロールを含有しないもの（製剤例６）およびニプラジロールに代えてマレイン酸チモロールを含有するもの（製剤例７）との対比から、この抗菌力維持にニプラジロールが関与していることが明かとなった。更に、製剤例２と同じ量の塩化ベンザルコニウムおよびニプラジロールを含みながら、緩衝剤を含有しない製剤（製剤例８）は、製剤例２に比べ明らかに抗菌力が弱く、抗菌力に緩衝剤も関与していることも示された。【００５１】
以上より、ニプラジロールを配合する点眼剤組成物では、塩化ベンザルコニウムの配合量を大幅に減らしても十分な抗菌力が得られることが示された。【００５２】
一方、ニプラジロールを含有し、塩化ベンザルコニウム０.０１％を配合した製剤例４は、十分な抗菌力を有していたものの、細胞毒性において、ＥＤ５０の値が、５８.５倍希釈という結果となり、この値は、同じくニプラジロールを含有し、塩化ベンザルコニウムの配合量をそれぞれ０.００２％、０.０００５％、０.００５％と低減させた製剤例１、製剤例２、製剤例３のＥＤ５０の値である、３０.３倍希釈、２４.７倍希釈および３４.０倍希釈と比較して極めて高い値であった。【００５３】
なお、塩化ベンザルコニウム含量が０.０００５％である製剤例１、０.００２％である製剤例２及び０.００５％である製剤例３のＥＤ50値に顕著な差が見られないことから、製剤例１の塩化ベンザルコニウム含量が０.０００５〜０.００５％という濃度の間では、細胞毒性が低いものと言える。【００５４】
以上より、ニプラジロールを含有する点眼剤組成物は、第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤を０.０００５％〜０.００５％配合することにより、眼への安全性が高く、経時的に優れた防腐効果を有することが期待できる。
【産業上の利用可能性】
【００５５】
本発明の点眼剤組成物は、第４級アンモニウム塩陽イオン型界面活性剤の含有量が従来のものに比べ少ないにもかかわらず、優れた防腐効果を有するものであり、眼への安全性が高く、経時的に優れた防腐効果が得られるものである。【００５６】
従って、特に高齢者に多い緑内障や高眼圧症の点眼治療薬として有利に使用することができるものである。
【国際調査報告】
2005072727.tif 000007
2005072727.tif 000008
2005072727.tif 000009