(57)【要約】  安全性が高く、優れたリパーゼ阻害活性を有するリパーゼ阻害剤を提供する。  アボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物を有効成分とするリパーゼ阻害剤。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物を有効成分とするリパーゼ阻害剤。
【請求項２】
アボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物を有効成分とする脂質吸収阻害剤。
【請求項３】
脂質吸収阻害剤の製造のためのアボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物の使用。
【請求項４】
アボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物の有効量を投与する脂質吸収阻害方法。
【請求項５】
アボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物を有効成分とする抗肥満剤。
【請求項６】
抗肥満剤製造のためのアボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物の使用。
【請求項７】
アボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物の有効量を投与する肥満防止方法。
【請求項８】
アボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物を有効成分とする高脂血症改善剤。
【請求項９】
高脂血症改善剤製造のためのアボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物の使用。
【請求項１０】
アボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ及びレンブからなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物の有効量を投与する高脂血症改善方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内で脂質の消化吸収を担う膵リパーゼを有効に阻害し、肥満、高脂血症の抑制や予防に有効な安全性の高いリパーゼ阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
体脂肪の増加に伴う肥満や血清脂質が異常に高値となる高脂血症は、高血圧、動脈硬化、糖尿病等の各種生活習慣病の発症に密接に関与している。肥満は、体質的因子、食餌性因子、精神的因子、中枢性因子、代謝性因子、運動不足等が要因となり、摂取するカロリーが消費カロリーを上回った結果、脂肪が蓄積して起こる。食餌中の脂質は、脂質のほとんどを占めるトリアシルグリセロールが膵液中のリパーゼによりモノアシルグリセロールと遊離脂肪酸とに分解されて小腸に吸収される。そこで、このリパーゼ作用を阻害することにより、食餌由来の脂質の吸収を抑制し、肥満・高脂血症を抑制することできると考えられている。【０００３】
このような観点から、優れたリパーゼ阻害活性を有する成分、即ち脂質吸収阻害活性を有する天然由来成分の検索が精力的に行われている。これまでに、生姜、杜仲茶、白茶、緑茶、紅茶、ウーロン茶、ホスファチジルコリン、大豆蛋白、タンニン、シャクヤク、オオレン、オオバク、ボタンピ、ゲンノショウコウ、チャ、クジン、ピーマン、カボチャ、しめじ、まいたけ、ふじき、ドッカリ、リョウキョウ、ビンロウシ、ヨウバイヒ、ケツメイシ等がリパーゼ阻害活性を有するものとして報告されている（特許文献１、２）。しかし、未だ十分な効果は得られていない。
【特許文献１】特開２００２−１７９５８６号公報
【特許文献２】特開２００２−２７５０７７号公報
【発明の開示】
【０００４】
従って、本発明の目的は、優れたリパーゼ阻害活性を有し、かつ安全性の高いリパーゼ阻害剤を提供することにある。また、本発明の目的は、脂質吸収阻害剤、抗肥満剤及び高脂血症改善剤を提供することにある。
【０００５】
本発明者は、数多くの天然由来植物のリパーゼ阻害作用について鋭意検討を行った結果、特定の植物又はその抽出物が優れたリパーゼ阻害作用及び脂質吸収阻害作用を有し、かつ安全性が高いことを見出し、本発明を完成した。
【０００６】
すなわち、本発明は、アボカド（Ｐｅｒｓｅａ  Ａｍｅｒｉｃａｎａ  Ｍｉｌｌ．）、オオミイヌカンコ（Ｆｌａｃｏｕｒｔｉａ  ｉｎｅｒｍｉｓ  Ｒｏｘｂ．）、カニステル（Ｐｏｕｔｅｒｉａ  ｃａｍｐｅｃｈｉａｎａ  Ｂａｅｈｎｉ）、ジャンボラン（Ｅｕｇｅｎｉａ  ｊａｍｂｏｌａｎａ  Ｌａｍ．） 、フトモモ（Ｓｚｙｇｉｕｍ  ｊａｍｂｏｓ（Ｌｉｎｎ．）  Ａｌｓｔｏｎ）及びレンブ（Ｓｙｚｙｇｉｕｍ  ｓａｍａｒａｎｇｅｎｓｅ  Ｍｅｒｒ  ＆  Ｐｅｒｒｙ）からなる群から選ばれる１種以上の植物又はその抽出物を有効成分とするリパーゼ阻害剤を提供するものである。
また、本発明は、これらの植物又はその抽出物を有効成分とする脂質吸収阻害剤、抗肥満剤及び高脂血症改善剤を提供するものである。
また、本発明は、脂質吸収阻害剤、抗肥満剤及び高脂血症改善剤の製造のためのこれらの植物又はその抽出物の使用を提供するものである。
さらに、本発明は、これらの植物又はその抽出物の有効量を投与する脂質吸収阻害方法、肥満防止方法及び高脂血症改善方法を提供するものである。
【０００７】
本発明で使用される特定の植物又はその抽出物がリパーゼ阻害活性を有することは従来全く知られておらず、本発明によって初めて得られた知見である。そして、これら特定の植物又はその抽出物は、優れたリパーゼ阻害活性を有し、リパーゼ阻害剤並びに脂質吸収阻害剤、抗肥満剤及び高脂血症改善剤等として極めて有用である。また、これら特定の植物又はその抽出物は、肥満・高脂血症を抑制するために飲食品や化粧料としても利用することができる。さらに、これら特定の植物又はその抽出物は、天然由来であるため、安全性の高い脂質吸収阻害剤、抗肥満剤及び高脂血症改善剤等の提供が可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明で使用される植物は、アボカド（Ｐｅｒｓｅａ  Ａｍｅｒｉｃａｎａ  Ｍｉｌｌ．、クスノキ科）、オオミイヌカンコ（Ｆｌａｃｏｕｒｔｉａ  ｉｎｅｒｍｉｓ  Ｒｏｘｂ．、イイギリ科）、カニステル（Ｐｏｕｔｅｒｉａ  ｃａｍｐｅｃｈｉａｎａ  Ｂａｅｈｎｉ、アカテツ科）、ジャンボラン（Ｅｕｇｅｎｉａ  ｊａｍｂｏｌａｎａ  Ｌａｍ．、フトモモ科）、フトモモ（Ｓｚｙｇｉｕｍ  ｊａｍｂｏｓ  （Ｌｉｎｎ．）  Ａｌｓｔｏｎ、フトモモ科）及びレンブ（Ｓｙｚｙｇｉｕｍ  ｓａｍａｒａｎｇｅｎｓｅ  Ｍｅｒｒ  ＆  Ｐｅｒｒｙ、フトモモ科)が挙げられる。
これらの植物の抽出物は、市販されているもののほか、後述するように植物から抽出操作等を行って得られたものを使用してもよい。【０００９】
本発明で使用される上記の植物は、その植物の葉、茎、芽、花、木質部、木皮部（樹皮）等の地上部；根、塊茎等の地下部；種子；果実；樹脂等のすべての部位を使用することができる。上記の植物又はその抽出物には、そのまま、粉砕物（生又は乾燥）、搾汁、粗抽出物、粗抽出物の精製物等すべてを含む。これらは単独で使用してもよく又は二種類以上を混合使用してもよい。【００１０】
上記の植物から抽出物を得る抽出溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等の低級アルコール；酢酸エチル等のエステル；エチレングリコール、ブチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレンアルコール、グリセリン等の多価アルコール類；ジエチルエーテル、石油エーテル等のエーテル類；アセトン、酢酸等の極性溶媒；ベンゼン、ヘキサン、キシレン等の炭化水素溶媒；生理食塩水及び水等を挙げることができる。抽出溶媒としては、水又はアルコールが好ましく、特に水が好ましい。これらの抽出溶媒は一種を単独で又は二種以上を組み合わせて使用することができる。【００１１】
抽出方法としては、一般的な方法を使用することができ、例えば、溶媒に乾燥物又乾燥粉砕物を浸漬する方法、常温〜溶媒沸点の温度範囲における加温下で攪拌する方法等を挙げることができる。得られた抽出物は、必要に応じて濾過又は遠心分離等によって固形物を除いた後、そのまま使用するか又は溶媒を濃縮して若しくは乾燥して使用してもよい。
本発明では、溶媒抽出物を減圧乾燥、真空凍結乾燥等の手段によって溶媒を除去、乾燥して、植物抽出物の粗乾燥物として使用することが特に好ましい。【００１２】
粗抽出物の精製は、一般的な方法を使用することができ、例えば、活性炭、シリカゲル、ポリマー系担体等を使用した吸脱着、カラムクロマトグラフィー、液−液抽出、分別沈殿等の方法を挙げることができる。【００１３】
かくして得られる本発明の特定の植物又はその抽出物は、後記実施例に示すように優れたリパーゼ阻害活性を有し、リパーゼ阻害剤、脂質吸収阻害剤、抗肥満剤及び高脂血症改善剤として有効である。【００１４】
本発明のリパーゼ阻害剤を、脂質吸収阻害剤、抗肥満剤及び高脂血症改善剤等の医薬として使用する場合には、経口投与又は非経口投与のいずれも使用でき、錠剤、顆粒剤、散在、カプセル剤、溶液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤等とすることができる。これらの製剤は、製剤上の常套手段により調製することができる。また、このような種々の剤型の医薬製剤を調製するには、他の薬学的に許容される担体を、所望に応じて添加することが可能である。例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングリコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミノ酸、ゼラチン、アルブミン、水、生理食塩水等の他、必要に応じてさらに安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤、等張化剤等の慣用の添加剤を適宜添加することもできる。【００１５】
本発明の植物又はその抽出物は、飲食品等に配合して使用することもできる。ここで、飲食品とは、上記の植物又はその抽出物をそのまま又は種々の栄養成分を加えて若しくは飲食品中に含有せしめて、肥満・高脂血症の治療及び予防に有用な保健用食品又は食品素材として食されるものである。当該飲食品の形態としては、有効成分に慣用の助剤を加えた顆粒状、粒状、錠剤、カプセル、ペースト等の形態が挙げられる。また、ハム、ソーセージ等の食肉加工食品；かまぼこ、ちくわ等の水産加工食品；パン、菓子、バター、粉乳、発酵乳製品等の食品又は水、果汁、牛乳、清涼飲料等の飲料に添加して使用することもできる。【００１６】
本発明の植物又はその抽出物の有効投与量は、患者の年齢、体重、症状、患者の程度、投与経路、投与スケジュール、製剤形態、素材の阻害活性の強さ等により適宜決定されるが、例えば、抽出物を経口投与する場合、一般に１日当たり乾燥重量換算で、０．００１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重程度が好ましい。レンブ（Ｓｙｚｙｇｉｕｍ  ｓａｍａｒａｎｇｅｎｓｅ  Ｍｅｒｒ  ＆  Ｐｅｒｒｙ）の熱水抽出物の場合は、特に１日当たり乾燥重量換算で５〜３００ｍｇ／ｋｇ体重程度が好ましい。【００１７】
また、本発明の植物又はその抽出物は、リパーゼ阻害剤含有化粧料又は化粧料素材として使用することもできる。例えば、本発明の植物の乾燥物又はその抽出物を小麦胚芽油又はオリーブ油に添加してリパーゼ阻害剤含有組成物とし、これを化粧料素材として使用できる。本発明の植物又はその抽出物の添加量は、特に限定されるものではないが、例えば、小麦胚芽油又はオリーブ油に対し、乾燥重量換算で、０．１〜６０重量％以下、特に０．５〜５０重量％が好ましい。【００１８】
上記のリパーゼ阻害剤含有組成物を化粧料成分として使用し、化粧料とする場合は、種々の形態、例えば、乳液、化粧液、フェイスクリーム、ハンドクリーム、ローション、エッセンス、シャンプー、リンス等とすることができる。このような化粧料は、常法に従って製造することができる。また、化粧料成分として一般に使用されている助剤を任意に組合せて使用することができる。本発明の植物又はその抽出物の添加量は、乾燥重量換算で、化粧料全重量の０．０１〜２０重量％が好ましい。
本発明に使用される植物は、天然由来であるため、その毒性は低く、例えばレンブ（Ｓｙｚｙｇｉｕｍ  ｓａｍａｒａｎｇｅｎｓｅ  Ｍｅｒｒ  ＆  Ｐｅｒｒｙ）の熱水抽出物を毎日１０００ｍｇ／ｋｇ、１００日間という長期に渡ってラットに経口投与しても、死亡例は認められず、体重変化も観察されなかった。
【実施例】
【００１９】
以下に、実施例を挙げてこの発明をさらに具体的に説明するが、この発明はこれらの実施例に限定されるものではない。【００２０】
実施例１
（１）植物の抽出
アボカド（Ｐｅｒｓｅａ  Ａｍｅｒｉｃａｎａ  Ｍｉｌｌ．）、オオミイヌカンコ（Ｆｌａｃｏｕｒｔｉａ  ｉｎｅｒｍｉｓ  Ｒｏｘｂ．）、カニステル（Ｐｏｕｔｅｒｉａ  ｃａｍｐｅｃｈｉａｎａ  Ｂａｅｈｎｉ）、ジャンボラン（Ｅｕｇｅｎｉａ  ｊａｍｂｏｌａｎａ  Ｌａｍ．）、フトモモ（Ｓｚｙｇｉｕｍ  ｊａｍｂｏｓ  （Ｌｉｎｎ．）  Ａｌｓｔｏｎ）又はレンブ（Ｓｙｚｙｇｉｕｍ  ｓａｍａｒａｎｇｅｎｓｅ  Ｍｅｒｒ  ＆  Ｐｅｒｒｙ、フトモモ科）の各１０ｇに蒸留水２００ｍＬを加え、１００℃で３０分間煮沸した後、凍結乾燥して、各熱水抽出乾燥物を得た。【００２１】
（２）リパーゼ阻害活性試験
リパーゼ阻害活性の測定は、ブタ膵リパーゼ（Ｓｉｇｍａ社製）及び大日本製薬製の「リパーゼキットＳ」を使用した。測定方法は製造者の説明書を一部改変して行った。すなわち、抽出物を含む試料サンプル溶液１５０μＬ、酵素溶液（ブタ膵リパーゼ０．０５ｍｇ／ｍＬ  １２５ｍｍｏｌ／Ｌトリス塩酸（ｐＨ７．５））４０μＬ、発色液（０．１ｍｇ／ｍＬ  ５，５'−ジチオビス（２−ニトロ安息香酸）を含む緩衝液）５００μＬを入れて混和した後、３０℃で５分間予熱し、基質液（６．６９ｍｇ／ｍＬ三酪酸ジメルカプロール＋５．７３ｍｇ／ｍＬドデシル硫酸ナトリウム）５０μＬを加え混和後、遮光下にて３０℃で３０分間反応させた。その後、反応停止液１ｍＬを添加し反応を停止した。ブランクは試料サンプル溶液、酵素溶液、発色液を添加して３０℃で５分間、遮光下にて３０℃で３０分間加熱し、反応停止液を加えた後基質液を添加した。それぞれのサンプルの吸光度を波長４１２ｎｍで測定した。リパーゼ阻害活性は以下の式を使用して算出した。【００２２】
（数１）
リパーゼ阻害活性=１００−（ＡＴ−ＡＢＴ）／（ＡＣ−ＡＢＣ）×１００（％）
ＡＴ：試料サンプルの吸光度
ＡＢＴ：試料サンプルのブランク吸光度
ＡＣ：盲検用サンプルの吸光度
ＡＢＣ：盲検用サンプルのブランク吸光度【００２３】
比較例１
バナバ、ローズマリー、グァバ、ラフマ、ルイボス、ビンロウジ、オールスパイス、オトギリソウ、カワラケツメイ、サンショウ、ギムネマ、トチュウ、エゾウコギ、サンザシ、ニンジン、セイヨウオトギリソウ、レモングラス、キャッツクロー、ジャスミン、ジンジャー、ホップ、サンシュユ、サンペンズ、セイヨウニンジン、コムギ、サボンソウ、ハトムギ、ケツメイシ、リンゴ、カボチャ、ヤーコン、シャクヤク、センダン、ギムネマ、ニンジンカについても同様の試験を行った。【００２４】
各熱水抽出物のリパーゼ阻害活性の測定結果を表１に示す。
本発明のアボカド、オオミイヌカンコ、カニステル、ジャンボラン、フトモモ、レンブの熱水抽出物は、いずれも高いリパーゼ阻害活性を有していた。【００２５】
【表１】
2005056031.tif 000002
【００２６】
実施例２
（１）植物の抽出
実施例１と同様の方法により、カニステル（Ｐｏｕｔｅｒｉａ  ｃａｍｐｅｃｈｉａｎａ  Ｂａｅｈｎｉ）、ジャンボラン（Ｅｕｇｅｎｉａ  ｊａｍｂｏｌａｎａ  Ｌａｍ．）、レンブ（Ｓｙｚｙｇｉｕｍ  ｓａｍａｒａｎｇｅｎｓｅ  Ｍｅｒｒ  ＆  Ｐｅｒｒｙ）の各１０ｇより、各熱水抽出乾燥物を得た。
（２）脂質吸収阻害活性試験
２４時間絶食したＩＣＲマウス（雄、６〜７週齢）にオリーブ油をマウス一匹当たり、２００μＬ胃内に強制投与し、対照群とした。一方、試験群は、各熱水抽出乾燥物をオリーブ油に１００ｍｇ／ｍＬの濃度で混合し、マウス一匹当たり、２００μＬ胃内に強制投与した。強制投与前及び投与後１、２、３、６時間の各時点で尾静脈より採血し、遠心分離にて血清を得た。血清中のトリグリセライドを和光純薬の「トリグリセライドＧテストワコー」を使用して測定した。時間を横軸に、血清トリグリセライド濃度を縦軸にしたグラフを作成し、得られた曲線からその曲線下面積を求め、脂質吸収阻害活性の指標とした。脂質吸収阻害活性は、対照群の曲線下面積を１００として、各試験群の曲線下面積の相対値で示した。【００２７】
比較例２
バナバ、緑茶についても同様の試験を行った。【００２８】
各熱水抽出物の脂質吸収阻害活性の測定結果を表２に示す。
本発明のカニステル、レンブ、ジャンボランの抽出物は、いずれも高い脂質吸収阻害活性を有していた。【００２９】
【表２】
2005056031.tif 000003
＊  対照群の曲線下面積を１００とした。【００３０】
処方例１
下記の処方で各種成分を混合して造粒・乾燥・整粒した後、打錠して錠剤を製造した。
（処方）
ジャンボラン抽出物（実施例１）    ４０    ｍｇ
微結晶セルロース                  １００
乳糖                                     ８０
ステアリン酸マグネシウム             ０．５
メチルセルロース                     １２【００３１】
処方例２
下記処方により、常法に従って各成分を配合し、均質化して清涼飲料を得た。得られた清涼飲料は褐色瓶に充填後、アルミキャップにて封印し、加熱処理を施した。これらは外観・風味ともに良好なものであった。
（処方）
レンブ抽出物（実施例１）          ０．８ｇ
香料                                   ０．８
水                                  １００
還元澱粉糖化物                  ２４
果糖                                 １８【００３２】
処方例３
下記処方により、常法に従って各成分を配合し、均質化してフェイスクリームを得た。
（処方）
イソステアリン酸イソプロピル                  ８．０重量％
ホホバ油                                          ６．０
セタノール                                        ８．０
ステアリルアルコール                          ２．０
ポリオキシエチレンラウリルエーテール     １．５
プロピレングリコール                           ６．０
ソルビトール                                     １．０
パラベン                                      ０．４
フトモモ抽出物（実施例１）                ０．５
ビタミンＥ                                     ０．５
香料                                           ０．１
水                                            ６６．０
【国際調査報告】
2005056031.tif 000004
2005056031.tif 000005
2005056031.tif 000006
2005056031.tif 000007
2005056031.tif 000008
2005056031.tif 000009