(57)【要約】【課題】  本発明は、ホスホジエステラーゼのｃＡＭＰ基質特異的阻害作用を有する、ベンゾグアナミン誘導体又はその医薬上許容される塩を有効成分とした薬剤を提供することを目的とする。【解決手段】  本発明は、（１）  次の一般式（Ｉ）で表されるベンゾグアナミン誘導体又はその医薬上許容される塩を有効成分として含有する、ホスホジエステラーゼのｃＡＭＰ基質特異的阻害剤、【化３】
2005026132.tif 000004
（式中、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって、水素又はハロゲンを表す。）（２）  上記（１）の一般式（Ｉ）で表されるベンゾグアナミン誘導体又はその医薬上許容される塩を有効成分として含有する、アトピー性喘息を含む気管支喘息等に対する予防薬又はこれらの治療薬、に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（Ｉ）で表されるベンゾグアナミン誘導体又はその医薬上許容される塩を有効成分として含有する、ホスホジエステラーゼのｃＡＭＰ基質特異的阻害剤。
【化２】
2005026132.tif 000003
（式中、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって、水素又はハロゲンを表す。）
【請求項２】
ベンゾグアナミン誘導体が２，４−ジアミノ−６−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，５−トリアジンである、請求項１記載の阻害剤。
【請求項３】
ベンゾグアナミン誘導体の医薬上許容される塩が２，４−ジアミノ−６−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，５−トリアジン  マレイン酸塩である、請求項１記載の阻害剤。
【請求項４】
請求項１記載の一般式（Ｉ）で表されるベンゾグアナミン誘導体又はその医薬上許容される塩を有効成分として含有する、アトピー性喘息を含む気管支喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、成人性呼吸困難症候群、全身性エリテマトーデス、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、結膜炎、じんま疹、乾癬、ケロイド、歯肉炎、歯周炎、歯槽膿漏、強皮症、慢性関節リウマチ、慢性糸球体腎炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、食道炎、尿失禁若しくは血栓症に対する予防薬又はこれらの治療薬。
【請求項５】
ベンゾグアナミン誘導体が２，４−ジアミノ−６−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，５−トリアジンである、請求項４記載の予防薬又は治療薬。
【請求項６】
ベンゾグアナミン誘導体の医薬上許容される塩が２，４−ジアミノ−６−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，５−トリアジン  マレイン酸塩である、請求項４記載の予防薬又は治療薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、次の一般式（Ｉ）で表されるベンゾグアナミン誘導体又はその医薬上許容される塩（以下、本発明化合物という。）を有効成分として含有する、ホスホジエステラーゼのｃＡＭＰ基質特異的阻害剤に関する。
【化１】
2005026132.tif 000002
（式中、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって、水素又はハロゲンを表す。）
【背景技術】
【０００２】  本発明化合物は、優れた抗潰瘍作用、細胞防御作用、胃粘膜血流増加作用を有しており（例えば、特許文献１〜３、非特許文献１〜３参照。）、その中でも２，４−ジアミノ−６−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，５−トリアジン  マレイン酸塩（一般名：マレイン酸イルソグラジン）（以下、マレイン酸イルソグラジンという。）は、商品名「ガスロンＮ」で、胃潰瘍、急性胃炎、慢性胃炎の治療剤として上市されている。また、マレイン酸イルソグラジンは、ラット胃粘膜細胞内ｃＡＭＰの増加作用を有していることが知られている（例えば、非特許文献４参照。）。【０００３】  多くのホルモン及び神経伝達物質は、ｃＡＭＰ（３’，５’−サイクリックアデノシンモノホスフェート）の細胞内レベルを上昇させることで組織機能を調節している。セカンドメッセンジャーとして機能するｃＡＭＰの細胞内レベルは、合成及び分解を制御する機序によって調整される。
ｃＡＭＰの合成はアデニル酸シクラーゼによって制御され、そのアデニル酸シクラーゼはホルスコリンなどの薬物によって直接活性化される。また、プロスタグランジン（ＰＧＥ２あるいはＰＧＩ２など）やβ−アドレナリン受容体作動薬などは、細胞表面受容体への特異的作働薬であり、間接的にアデニル酸シクラーゼを活性化させて細胞内のｃＡＭＰを増加させる引き金としての役割を果たす。
一方、ｃＡＭＰの分解は、いくつかのホスホジエステラーゼ（以下、ＰＤＥという。）アイソザイムによって制御される。これら一連のＰＤＥは、ｃＧＭＰ（グアノシン３’，５’−サイクリックモノホスフェート）の分解も制御する。ＰＤＥは、ｃＡＭＰの加水分解を制御することにより、細胞内情報伝達機構の活性化の程度やその持続に極めて重要な役割を果たしている。また、ｃＡＭＰの生物学的機能の多様性を決めるコンパートメンテーションにも関与する重要な不活化酵素である。【０００４】  ＰＤＥは、その基質特異性、酵素活性調節機構、及び種々の阻害剤の感受性に基づいて機能的に分類され、現在まで、ＰＤＥには遺伝子的に異なる１１種（ＰＤＥ１〜ＰＤＥ１１）の既知のファミリーが知られている（例えば、非特許文献５参照）。この中で、ＰＤＥ４、ＰＤＥ７及びＰＤＥ８は、基質としてｃＡＭＰのみを加水分解するｃＡＭＰ基質特異的ＰＤＥである。ＰＤＥ５、ＰＤＥ６及びＰＤＥ９は、基質としてｃＧＭＰのみを加水分解するｃＧＭＰ特異的ＰＤＥである。ＰＤＥ１〜ＰＤＥ３、ＰＤＥ１０及びＰＤＥ１１は、ｃＡＭＰとｃＧＭＰの両環状ヌクレオチドを加水分解するＰＤＥである。なかでもＰＤＥ１は、カルモジュリンにより制御されており、ＰＤＥ２とＰＤＥ３はｃＧＭＰによって活性の制御が行われている。
ＰＤＥは、組織によりその発現が大きく異なることも良く知られている。例えば、ＰＤＥ１０とＰＤＥ１１は、いずれもｃＡＭＰ、ｃＧＭＰの両環状ヌクレオチドを加水分解するＰＤＥであるが、ＰＤＥ１０は脳に非常に多く分布する一方で、ＰＤＥ１１は骨格筋や前立腺など末梢組織に分布する。また、ＰＤＥ５、ＰＤＥ６ならびにＰＤＥ９はいずれもｃＧＭＰ特異的ＰＤＥであるが、ＰＤＥ６は網膜にのみ発現しているＰＤＥとして知られている。【０００５】  ＰＤＥ４阻害による細胞内ｃＡＭＰの増加は、たとえば、好中球、好酸球、Ｔ−リンパ球、マクロファージなどの炎症性細胞の不活性化や、気管平滑筋の弛緩を引き起こすことが報告されている（例えば、非特許文献６、７参照。）。したがって、ＰＤＥ４阻害剤は、アトピー性喘息を含む気管支喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、成人性呼吸困難症候群、全身性エリテマトーデス、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、結膜炎、じんま疹、乾癬、ケロイド、歯肉炎、歯周炎、歯槽膿漏、強皮症、慢性関節リウマチ、慢性糸球体腎炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、食道炎などの治療に利用することができる。
ＰＤＥ７もＴ−リンパ球に多く発現していることから（例えば、非特許文献８参照。）、その阻害剤は慢性関節リウマチや乾癬などＴ細胞依存性疾患の治療に利用することができる。
ＰＤＥ１はカルモジュリン依存性のＰＤＥである。ＰＤＥ１の阻害剤は尿失禁の治療剤として有用である（例えば、特許文献９参照。）。
また、ＰＤＥ３はｃＧＭＰ阻害性のＰＤＥである。ＰＤＥ３阻害による細胞内ｃＡＭＰの増加は、たとえば、血管平滑筋の弛緩や血小板凝集の阻害を引き起こすことから（例えば、非特許文献１０参照。）、この阻害剤は血栓症の治療剤として有用である。【０００６】
【特許文献１】特開昭５０−１１１０８５号公報
【特許文献２】特開昭５０−１１１０８６号公報
【特許文献３】特開昭５１−７５０８３号公報
【非特許文献１】Ｕｅｄａ  Ｆ，ｅｔ  ａｌ，Ａｒｚｎｅｉｍ．−Ｆｏｒｓｃｈ．／Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．，３４（Ｉ），４７４（１９８４）
【非特許文献２】上田房雄ほか，応用薬理，３３（１），１４３（１９８７）
【非特許文献３】平松新ほか，薬理と治療，１１（７），２４８１（１９８３）
【非特許文献４】上田房雄ほか，応用薬理，３３（１），１５７（１９８７）
【非特許文献５】Ｆｒａｎｃｉｓ  ＳＨ，ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｇ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ，６５，１−５２（２００１）
【非特許文献６】Ｂａｒｎｅｓ  ＰＪ，Ｎａｔｕｒｅ，４０２，Ｂ３１−Ｂ３８（１９９９）
【非特許文献７】Ｍａｕｒｏ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｃｉ，１８，１６４−１７０（１９９７）
【非特許文献８】Ｌｉ  Ｌ，ｅｔ  ａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８３，８４８−８５１（１９９９）
【非特許文献９】Ｔｒｕｓｓ  ＭＣ，ｅｔ  ａｌ，Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｕｒｏｌ，１８，４３９−４４３（２０００）
【非特許文献１０】Ｓｕｄｏ  Ｔ，ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，５９，３４７−３５６（２０００）
【非特許文献１１】Ｂａｎｎｅｒ  ＫＨ，ｅｔ  ａｌ，Ｅｕｒ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｊ，８，９９６−１０００（１９９５）
【非特許文献１２】Ｍａｕｒｏ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｃｉ，１８，１６４−１７０（１９９７）
【非特許文献１３】厚生省医薬安全局，「医薬品等安全性情報別冊  平成８年度  新医薬品等の副作用のまとめ」，１９９７年１０月，ｐ１２
【非特許文献１４】Ｎｉｃｈｏｌｓ  ＭＲ，ｅｔ  ａｌ，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５７，７３８−４５（２０００）
【非特許文献１５】Ｏｋａ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ，Ｎａｕｎｙｎ  Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓ  Ａｒｃｈ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，３５６，１８９−９６（１９９７）
【非特許文献１６】Ｗａｎｇ  Ｐ，ｅｔ  ａｌ，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５６，１７０−１７４（１９９９）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】  本発明は、ベンゾグアナミン誘導体又はその医薬上許容される塩を有効成分として含有する、ＰＤＥのｃＡＭＰ基質特異的阻害剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】  本発明者は、本発明化合物が有する胃粘膜細胞内ｃＡＭＰの増加作用について鋭意研究を重ねた結果、本発明化合物が、ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解のみを選択的に阻害することを見出し、本発明を完成した。【０００９】  本発明は、
（１）  本発明化合物を有効成分として含有する、ＰＤＥのｃＡＭＰ基質特異的阻害剤、
（２）  ベンゾグアナミン誘導体が２，４−ジアミノ−６−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，５−トリアジンである、上記（１）の阻害剤、
（３）  ベンゾグアナミン誘導体の医薬上許容される塩がマレイン酸イルソグラジンである、上記（１）の阻害剤、
（４）  本発明化合物を有効成分として含有する、アトピー性喘息を含む気管支喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、成人性呼吸困難症候群、全身性エリテマトーデス、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、結膜炎、じんま疹、乾癬、ケロイド、歯肉炎、歯周炎、歯槽膿漏、強皮症、慢性関節リウマチ、慢性糸球体腎炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、食道炎、尿失禁若しくは血栓症に対する予防薬又はこれらの治療薬、
（５）  ベンゾグアナミン誘導体が２，４−ジアミノ−６−（２，５−ジクロロフェニル）−１，３，５−トリアジンである、上記（４）の予防薬又は治療薬、
（６）  ベンゾグアナミン誘導体の医薬上許容される塩がマレイン酸イルソグラジンである、上記（４）の予防薬又は治療薬、
に関する。【００１０】  後述の試験例１に示す通り、本発明化合物は、ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解に対して強力な阻害作用を示す一方で、ＰＤＥによるｃＧＭＰの加水分解に対しては明らかな阻害作用を示さない。さらに詳細に検討した結果、後述の試験例２〜４に示す通り、ＰＤＥ１、ＰＤＥ２、ＰＤＥ３及びＰＤＥ４の各アイソザイムに対してほとんど同程度の阻害活性を有する。【００１１】  ＰＤＥ４阻害剤の有する優れた抗炎症作用などを臨床的に応用する場合、しばしば悪心、嘔吐などの消化器系の副作用の発現が問題になることは良く知られている（例えば、非特許文献１１、１２参照。）。本発明化合物は、臨床上、悪心、嘔吐などの消化器系の副作用をほとんど発現しないことから、ＰＤＥ４阻害剤としても非常に有用である（例えば、非特許文献１３参照。）。【００１２】  以下に本発明を詳述する。
「ホスホジエステラーゼのｃＡＭＰ基質特異的阻害剤」とは、ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解のみを選択的に阻害し、ＰＤＥによるｃＧＭＰの加水分解に対しては明らかな阻害作用を有さない薬剤をいう。
「ハロゲン」としては、例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素を挙げることができる。
「医薬上許容される塩」としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、燐酸などの鉱酸の塩、酢酸、クエン酸、酒石酸、マレイン酸、コハク酸、フマル酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸などの有機酸の塩を挙げることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】ウシ脳由来精製ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解に対するマレイン酸イルソグラジンの作用を検討した結果を示したグラフである。縦軸はｃＡＭＰ量（ｐｍｏｌ／３０ｍｉｎ．）、横軸はマレイン酸イルソグラジンの濃度（Ｍ）を表す。各カラムは平均値±標準誤差を示す（ｎ＝５）。グラフ中の「＊＊」はダネット検定の結果（＊＊Ｐ＜０．０１）を表す。
【図２】ウシ脳由来精製ＰＤＥによるｃＧＭＰの加水分解に対するマレイン酸イルソグラジンの作用を検討した結果を示したグラフである。縦軸はｃＧＭＰ量（ｐｍｏｌ／３０ｍｉｎ．）、横軸はマレイン酸イルソグラジンの濃度（Ｍ）を表す。各カラムは平均値±標準誤差を示す（ｎ＝５）。グラフ中の「＊」はダネット検定の結果（＊Ｐ＜０．０５）を表す。
【図３】ウシ脳由来精製ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解に対する各種ＰＤＥ阻害剤の作用を検討した結果を示したグラフである。縦軸はｃＡＭＰ量（ｐｍｏｌ／３０ｍｉｎ．）を示す。各カラムは平均値±標準誤差を示す（ｎ＝５）。グラフ中の「＊＊」はダネット検定の結果（＊＊Ｐ＜０．０１）を表す。
【図４】ウシ心臓由来精製ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解に対する各種ＰＤＥ阻害剤の作用を検討した結果を示したグラフである。縦軸はｃＡＭＰ量（ｐｍｏｌ／３０ｍｉｎ．）を示す。各カラムは平均値±標準誤差を示す（ｎ＝５）。グラフ中の「＊＊」はダネット検定の結果（＊＊Ｐ＜０．０１）を表す。
【図５】ビンポセチン（５×１０−５Ｍ）、又はシロスタミド（５×１０−５Ｍ）存在下、ウシ心臓由来精製ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解に対するマレイン酸イルソグラジンの作用を検討した結果を示したグラフである。縦軸はｃＡＭＰ量（ｐｍｏｌ／３０ｍｉｎ．）を示す。各カラムは平均値±標準誤差を示す（ｎ＝５）。グラフ中の「＊＊」はダネット検定の結果（＊＊Ｐ＜０．０１）を表す。
【図６】ヒト好中球のｃＡＭＰ産生に対する各種ＰＤＥ阻害剤の作用を検討した結果を示したグラフである。縦軸はｃＡＭＰ量（ｐｍｏｌ／３０ｍｉｎ．）を示す。各カラムは平均値±標準誤差を示す（ｎ＝５）。グラフ中の「＊＊」はダネット検定の結果（＊＊Ｐ＜０．０１）を表す。
【図７】ヒト好中球のｃＡＭＰ産生に対するマレイン酸イルソグラジンの作用を検討した結果を示したグラフである。縦軸はｃＡＭＰ量（ｐｍｏｌ／３０ｍｉｎ．）示す。各カラムは平均値±標準誤差を示す（ｎ＝５）。グラフ中の「＊」「＊＊」はダネット検定の結果（＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１）を表す。
【図８】ヒト好中球のｃＡＭＰ産生に対するＩＢＭＸ存在下でのマレイン酸イルソグラジンの作用を検討した結果を示したグラフである。縦軸はｃＡＭＰ量（ｐｍｏｌ／３０ｍｉｎ．）を表す。各カラムは平均値±標準誤差を示す（ｎ＝５）。グラフ中の「＊＊」はダネット検定の結果（＊＊Ｐ＜０．０１）を表す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】  本発明化合物は公知化合物であり、公知の方法（例えば、特許文献１〜３参照。）により製造することができる。例えば、モノ若しくはジハロゲノベンゾニトリルとジシアンジアミドとを反応させることにより、又は、モノ若しくはジハロゲノ安息香酸誘導体（カルボン酸、酸ハロゲン化物、エステル、アミド、等）とビグアナイドとを反応させることにより製造することができる。
本発明化合物は、遊離の塩基のまま医薬として用いることができるが、公知の方法により医薬上許容される塩の形にして用いることもできる。例えば、本発明化合物のマレイン酸塩は、ベンゾグアナミン誘導体を、当量のマレイン酸が溶解したアルコール溶液又は酢酸エチル溶液に溶解し、濃縮することにより得ることができる。【００１５】  本発明化合物は、そのまま又は医薬上許容される無毒性かつ不活性の担体中に、例えば０．０１〜９９．５％、好ましくは０．５〜９０％を含有する医薬組成物として、人を含む動物に投与される。
担体としては、固形、半固形又は液状の希釈剤、充填剤及びその他の処方用の助剤一種以上が用いられる。薬物は投与単位形態で投与することが望ましい。また、薬物は、静脈内投与、経口投与、組織内投与、局所投与（経皮投与等）又は経直腸的に投与することができるが、これらに限定されるものではない。これらの投与方法に適した剤型で投与されるのはもちろんである。
ＰＤＥのｃＡＭＰ基質特異的阻害剤としての用量は、疾患・傷害の性質と程度、年齢、体重などの患者の状態、投与経路などを考慮した上で設定することが望ましいが、通常は、成人に対して本発明に係る薬物の有効成分量として、１日あたり、０．１〜１０００ｍｇ／ヒトの範囲、好ましくは１〜５００ｍｇ／ヒトの範囲が一般的である。
場合によっては、これ以下で足りるし、また逆にこれ以上の用量を必要とすることもある。また１日２〜４回に分割して投与することもできる。【００１６】  経口投与は固形又は液状の用量単位、例えば、末剤、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル剤、顆粒剤、懸濁剤、液剤、シロップ剤、ドロップ剤、舌下錠その他の剤型によって行うことができる。
末剤は薬物を適当な細かさにすることにより製造される。散剤は薬物を適当な細かさと成し、ついで同様に細かくした医薬用担体、例えば澱粉、マンニトールのような可食性炭水化物その他と混合することにより製造される。必要に応じ風味剤、保存剤、分散剤、着色剤、香料その他のものを混じてもよい。【００１７】  カプセル剤は、まず上述のようにして粉末状となった末剤や散剤又は錠剤の項で述べるように顆粒化したものを、例えばゼラチンカプセルのようなカプセル外皮の中へ充填することにより製造される。滑沢剤や流動化剤、例えばコロイド状のシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、固形のポリエチレングリコールのようなものを粉末状態のものに混合し、然るのちに充填操作を行うこともできる。崩壊剤や可溶化剤、例えばカルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウムを添加すれば、カプセル剤が摂取されたときの医薬の有効性を改善することができる。【００１８】  また、薬物の微粉末を植物油、ポリエチレングリコール、グリセリン、界面活性剤中に懸濁分散し、これをゼラチンシートで包んで軟カプセル剤とすることができる。錠剤は賦形剤を加えて粉末混合物を作り、顆粒化もしくはスラグ化し、ついで崩壊剤又は滑沢剤を加えたのち打錠することにより製造される。粉末混合物は、適当に粉末化された薬物を上述の希釈剤やベースと混合し、必要に応じ結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコールなど）、溶解遅延化剤（例えば、パラフィンなど）、再吸収剤（例えば、四級塩）や吸着剤（例えばベントナイト、カオリン、リン酸ジカルシウムなど）をも併用してもよい。粉末混合物は、まず結合剤、例えばシロップ、澱粉糊、アラビアゴム、セルロース溶液又は高分子物質溶液で湿らせ、攪拌混合し、これを乾燥、粉砕して顆粒とすることができる。このように粉末を顆粒化するかわりに、まず打錠機にかけたのち、得られる不完全な形態のスラグを破砕して顆粒にすることも可能である。【００１９】  このようにして作られる顆粒は、滑沢剤としてステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、ミネラルオイルその他を添加することにより、互いに付着することを防ぐことができる。このように滑沢化された混合物をついで打錠する。こうして製造した素錠にフィルムコーティングや糖衣を施すことができる。
また薬物は、上述のように顆粒化やスラグ化の工程を経ることなく、流動性の不活性担体と混合したのちに直接打錠してもよい。シェラックの密閉被膜からなる透明又は半透明の保護被覆、糖や高分子材料の被覆、及び、ワックスよりなる磨上被覆の如きも用いうる。【００２０】  他の経口投与剤型、例えば溶液、シロップ、エリキシルなどもまたその一定量が薬物の一定量を含有するように用量単位形態にすることができる。シロップは、薬物を適当な香味水溶液に溶解して製造され、またエリキシルは非毒性のアルコール性担体を用いることにより製造される。懸濁剤は、薬物を非毒性担体中に分散させることにより処方される。可溶化剤や乳化剤（例えば、エトキシ化されたイソステアリルアルコール類、ポリオキシエチレンソルビトールエステル類）、保存剤、風味賦与剤（例えば、ペパミント油、サッカリン）その他もまた必要に応じ添加することができる。
必要とあらば、経口投与のための用量単位処方はマイクロカプセル化してもよい。該処方はまた被覆をしたり、高分子・ワックス等中にうめこんだりすることにより作用時間の延長や持続放出をもたらすこともできる。【００２１】  組織内投与は、皮下・筋肉又は静脈内注射用としたところの液状用量単位形態、例えば溶液や懸濁剤の形態を用いることによって行うことができる。これらのものは、薬物の一定量を、注射の目的に適合する非毒性の液状担体、例えば水性や油性の媒体に懸濁し又は溶解し、ついで該懸濁液又は溶液を滅菌することにより製造される。注射液を等張にするために非毒性の塩や塩溶液を添加してもよい。更に、安定剤、保存剤、乳化剤のようなものを併用することもできる。【００２２】  直腸投与は、薬物を低融点の水に可溶又は不溶の固体、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、半合成の油脂（例えば、ウイテプゾール、登録商標）、高級エステル類（例えばパルミチン酸ミリスチルエステル）及びそれらの混合物に溶解又は懸濁させて製造した坐剤等を用いることによって行うことができる。
【実施例】
【００２３】  以下に試験例及び製剤例を掲げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれらのみに限定されるものではない。【００２４】試験例１  マレイン酸イルソグラジンがウシ脳由来精製ＰＤＥに及ぼす影響についての検討
マレイン酸イルソグラジンが、ウシ脳由来精製ＰＤＥによるｃＡＭＰ及びｃＧＭＰの加水分解に及ぼす影響について検討した。
ウシ脳から精製されたＰＤＥ（Ｓｉｇｍａ−ＲＢＩ，Ｎａｔｉｃｋ，ＭＡ，ＵＳＡ）を、ｃＡＭＰ又はｃＧＭＰ、及び、マレイン酸イルソグラジン共存下、Ｋｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ  ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ液（１２０ｍＭ  ＮａＣｌ、３．３ｍＭ  ＫＣｌ、１．３ｍＭ  ＣａＣｌ２、１．２ｍＭ  ＭｇＳＯ４、１．２ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４、０．０３ｍＭ  ＥＤＴＡ、２５ｍＭ  ＮａＨＣＯ３、１１ｍＭ  ｇｌｕｃｏｓｅ、ｐＨ７．４）（以下、ＫＲＢ液という）中で３０分間（３７℃）のインキュベ−ションを行った。反応は、過塩素酸（最終濃度０．２Ｍ）を加えることにより停止した。反応液は１０，０００×ｇにて１５分間（４℃）遠心した後、上清をｃＡＭＰ及びｃＧＭＰの定量に用いた。上清はＫ２ＣＯ３を加えて中和し、１０，０００×ｇにて１５分間（４℃）遠心した。ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰの定量はＥＩＡキット（Ａｍｅｒｓｈａｍ，Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ，Ｕ．Ｋ．）（以下同様）を用いて行った。その結果を図１（マレイン酸イルソグラジンがｃＡＭＰの加水分解に及ぼす影響）及び図２（マレイン酸イルソグラジンがｃＧＭＰの加水分解に及ぼす影響）に示す。【００２５】  ｃＡＭＰの加水分解に及ぼす影響について、図１に示す通り、マレイン酸イルソグラジンはＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解を濃度依存的に、かつ、ほぼ完全に抑制し、その抑制作用は、１０−７Ｍ以上の濃度で統計学的に有意なものであった。一方、ｃＧＭＰの加水分解に及ぼす影響については、図２に示す通り、マレイン酸イルソグラジンは、極めて高用量（１０−５Ｍ）でのみ、ｃＧＭＰの加水分解をわずかに抑制するにとどまった。
この結果から、マレイン酸イルソグラジンはＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解のみを選択的に阻害し、ＰＤＥによるｃＧＭＰの加水分解に対しては明らかな阻害作用を有さないことが明らかである。【００２６】試験例２  マレイン酸イルソグラジンのＰＤＥ阻害作用とＰＤＥアイソザイムとの関係についての検討
ウシ脳由来精製ＰＤＥに含まれるアイソザイムを明らかにし、マレイン酸イルソグラジンのｃＡＭＰ加水分解阻害作用と各ＰＤＥアイソザイムとの関係を検討した。
試験例１で用いたＰＤＥを、ｃＡＭＰ及び各被験薬物共存下、ＫＲＢ液中で３０分間（３７℃）のインキュベ−ションを行った。反応は、過塩素酸（最終濃度０．２Ｍ）を加えることにより停止した。反応液は１０，０００×ｇにて１５分間（４℃）遠心した後、上清をｃＡＭＰの定量に用いた。上清はＫ２ＣＯ３を加えて中和し、１０，０００×ｇにて１５分間（４℃）遠心した。ｃＡＭＰの定量はＥＩＡキットを用いて行った。その結果を図３に示す。【００２７】  図３に示すように、ＰＤＥ１選択的阻害剤であるビンポセチン（５×１０−５Ｍ）、ＰＤＥ２選択的阻害剤であるエリスロ−９−（２−ヒドロキシ−３−ノニル）アデニン塩酸塩（ＥＨＮＡ）（５×１０−５Ｍ）、及び、ＰＤＥ４選択的阻害剤であるロリプラム（５×１０−５Ｍ）は、いずれもウシ脳由来精製ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解を部分的に抑制した。一方、ＰＤＥ３選択的阻害剤であるシロスタミド（５×１０−５Ｍ）は、ウシ脳由来精製ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解に対して影響を及ぼさなかった。非選択的ＰＤＥ阻害剤である３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ、１０−３Ｍ）は、ＰＤＥによる加水分解を完全に抑制した。
この結果と試験例１の結果を総合的に判断すると、ウシ脳由来精製ＰＤＥには少なくともＰＤＥ１、ＰＤＥ２及びＰＤＥ４のアイソザイムが含まれており、マレイン酸イルソグラジンは、ＰＤＥ１、ＰＤＥ２及びＰＤＥ４に対し、阻害作用を示すことが明らかである。【００２８】試験例３  マレイン酸イルソグラジンがウシ心臓由来精製ＰＤＥに及ぼす影響についての検討
ウシ脳由来精製ＰＤＥの代わりにウシ心臓由来精製ＰＤＥを用い、試験例１及び試験例２と同様の検討を行った。
ウシ心臓から精製されたＰＤＥ（Ｓｉｇｍａ−ＲＢＩ，Ｎａｔｉｃｋ，ＭＡ，ＵＳＡ）を、ｃＡＭＰ及び各被験薬物（図４）又はマレイン酸イルソグラジン（図５）の共存下、ＫＲＢ液中で３０分間（３７℃）のインキュベ−ションを行った。反応は、過塩素酸（最終濃度０．２Ｍ）を加えることにより停止した。反応液は１０，０００×ｇにて１５分間（４℃）遠心した後、上清をｃＡＭＰの定量に用いた。上清はＫ２ＣＯ３を加えて中和し、１０，０００×ｇにて１５分間（４℃）遠心した。ｃＡＭＰの定量はＥＩＡキットを用いて行った。その結果を図４（各種ＰＤＥ選択的阻害剤がｃＡＭＰの加水分解に及ぼす影響）及び図５（マレイン酸イルソグラジンがｃＡＭＰの加水分解に及ぼす影響）に示す。【００２９】  図４に示すように、ＰＤＥ１選択的阻害剤であるビンポセチン（５×１０−５Ｍ）、及び、ＰＤＥ３選択的阻害剤であるシロスタミド（５×１０−５Ｍ）は、いずれもウシ心臓由来精製ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解を部分的に抑制し、かつ、ビンポセチンとシロスタミドの併用による効果は相加的なものであった。一方、ＰＤＥ２選択的阻害剤であるＥＨＮＡ（５×１０−５Ｍ）、及び、ＰＤＥ４選択的阻害剤であるロリプラム（５×１０−５Ｍ）は、ウシ心臓由来精製ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解に対して影響を及ぼさなかった。非選択的ＰＤＥ阻害剤であるＩＢＭＸ（１０−３Ｍ）は、ＰＤＥによる加水分解を完全に抑制した。
図５に示すように、マレイン酸イルソグラジンは、ＰＤＥ１選択的阻害剤であるビンポセチン存在下（５×１０−５Ｍ）でのＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解を濃度依存的に抑制した。また、マレイン酸イルソグラジンは、ＰＤＥ３選択的阻害剤であるシロスタミド存在下（５×１０−５Ｍ）でのＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解に対しても、濃度依存的な抑制作用を示した。【００３０】  これらの結果より、ウシ心臓由来精製ＰＤＥには少なくともＰＤＥ１及びＰＤＥ３のサブタイプが含まれていることが明らかである。この結果は、ウシ心臓由来ＰＤＥは主にＰＤＥ１とＰＤＥ３で構成されているとの報告（例えば、非特許文献１４参照。）と一致する。また、マレイン酸イルソグラジンは、少なくとも、ＰＤＥ１、及び、ＰＤＥ３に対し、阻害作用を示すことが明らかである。【００３１】試験例４  マレイン酸イルソグラジンがヒト好中球のｃＡＭＰ産生に及ぼす影響についての検討
マレイン酸イルソグラジン、及び各種ＰＤＥ阻害剤が、ヒト好中球のｃＡＭＰ産生に及ぼす影響を検討した。
好中球は健常人静脈血より採取した。ヘパリン加血液を生理食塩水で希釈した後、血球分離剤（Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｐｒｅｐ，ＡＸＩＳ−Ｓｈｉｅｌｄ  ＰｏＣ  ＡＳ，Ｏｓｌｏ，Ｎｏｒｗａｙ）に重層し、血液分離剤添付マニュアルに従い好中球を分離採取した。採取した好中球はＨａｎｋ’ｓ  ｂａｌａｎｃｅｄ  ｓａｌｔ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＨＢＳＳ）にて所定の濃度に調整した。ｃＡＭＰ含量の測定は、公知の方法に準拠した（例えば、非特許文献１５参照。）。分離した好中球（１  ａｓｓａｙあたり１×１０６個）をＨＢＳＳにて洗浄後、３７℃にてＣＯ２インキュベ−タ−中で１０分間プレインキュベ−ションを行った。その後、各被験薬物を添加し、３７°Ｃで３０分間のインキュベ−ションを行った。反応は、過塩素酸（最終濃度０．２Ｍ）を加えることにより停止した。反応液を１０，０００×ｇにて１５分間（４℃）遠心した後、上清をｃＡＭＰの定量に用いた。上清はＫ２ＣＯ３を加えて中和し、１０，０００×ｇにて１５分間（４℃）遠心した。ｃＡＭＰ定量はＥＩＡキットを用いて行った。その結果を図６（各種ＰＤＥ選択的阻害剤が及ぼす影響）、図７（マレイン酸イルソグラジンが及ぼす影響）、図８（マレイン酸イルソグラジン、非選択的ＰＤＥ阻害剤が及ぼす影響）に示す。【００３２】  図６に示すように、ｃＡＭＰ量は、ＰＤＥ４選択的阻害剤であるロリプラム（５×１０−５Ｍ）、又は非選択的ＰＤＥ阻害剤であるＩＢＭＸ（１０−３Ｍ）を作用させた場合に増加し、ＰＤＥ１選択的阻害剤であるビンポセチン（５×１０−５Ｍ）、ＰＤＥ２選択的阻害剤であるＥＨＮＡ（５×１０−５Ｍ）、又はＰＤＥ３選択的阻害剤であるシロスタミド（５×１０−５Ｍ）をそれぞれ作用させた場合には、ｃＡＭＰ量の増加は見られなかった。
図７に示すように、マレイン酸イルソグラジンは、濃度依存的に好中球のｃＡＭＰ産生量を増加させ、その効果は１０−７Ｍ以上の濃度において統計学的に有意であった。
図８に示すように、マレイン酸イルソグラジンのｃＡＭＰ産生亢進作用は、非選択的ＰＤＥ阻害剤であるＩＢＭＸ（１０−３Ｍ）を共存させても増強しなかった。【００３３】  これらの結果から、ヒト好中球においては主にＰＤＥ４がｃＡＭＰの加水分解を担っていることが明らかである。この結果は、ヒト好中球にはＰＤＥ４Ｂが高発現しているとの報告（例えば、非特許文献１６参照）と一致する。また、マレイン酸イルソグラジンは、少なくとも、ＰＤＥ４に対し、阻害作用を示すことが明らかである。【００３４】製剤例１
錠剤（内服錠）
処方１錠８０ｍｇ中
マレイン酸イルソグラジン                    ２．０ｍｇ
トウモロコシ澱粉            ４９．６ｍｇ
結晶セルロース              ２４．０ｍｇ
メチルセルロース              ４．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム      ０．４ｍｇ
この割合の混合末を通常の方法により打錠成形し内服錠とする。
製剤例２
錠剤（内服錠）
処方１錠８０ｍｇ中
マレイン酸イルソグラジン                    ４．０ｍｇ
トウモロコシ澱粉            ４７．６ｍｇ
結晶セルロース              ２４．０ｍｇ
メチルセルロース              ４．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム      ０．４ｍｇ
この割合の混合末を通常の方法により打錠成形し内服錠とする。
【産業上の利用可能性】
【００３５】  本発明化合物は、ＰＤＥによるｃＡＭＰの加水分解のみを選択的に阻害し、ＰＤＥによるｃＧＭＰの加水分解に対しては明らかな阻害作用を有さないことから、アトピー性喘息を含む気管支喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、成人性呼吸困難症候群、全身性エリテマトーデス、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、結膜炎、じんま疹、乾癬、ケロイド、歯肉炎、歯周炎、歯槽膿漏、強皮症、慢性関節リウマチ、慢性糸球体腎炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、食道炎、尿失禁若しくは血栓症に対する予防薬又は治療薬として有用である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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