(57)【要約】本発明は、Ｌ−アルギニンと、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸と、所望によりリボ核酸、リボヌクレオチドおよびリボヌクレオシドからなる群より選択される少なくとも一種とを含んでなり、細胞中のミトコンドリアの機能異常に起因して様々な症状を表す疾病であるところのミトコンドリア病を治療し得る薬剤に関する。本発明のミトコンドリア病治療剤に含まれるＬ−アルギニンは、ＮＯラジカル濃度を増加させて動脈を拡張させる。またＬ−アルギニンの摂取に伴うえぐい味およびえぐい感はＬ−アスコルビン酸により軽減され、また過剰のＮＯラジカルもまたＬ−アスコルビン酸により消去される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｌ−アルギニンと、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを含んでなることを特徴とするミトコンドリア病治療剤。
【請求項２】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜６重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなることを特徴とする、請求項１記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項３】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜０．２５重量部のＬ−アスコルビン酸とを含んでなることを特徴とする、請求項２記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項４】
Ｌ−アルギニンと、リボ核酸、リボヌクレオチドおよびリボヌクレオシドからなる群より選択される少なくとも一種と、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを含んでなることを特徴とするミトコンドリア病治療剤。
【請求項５】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜６重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなることを特徴とする、請求項４記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項６】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜０．２５重量部のＬ−アスコルビン酸とを含んでなることを特徴とする、請求項５記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項７】
Ｌ−アルギニンと、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを医薬的に許容可能な溶液に溶解してなり、かつシステインを含まないことを特徴とするミトコンドリア病治療剤。
【請求項８】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜６重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなることを特徴とする、請求項７記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項９】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜０．２５重量部のＬ−アスコルビン酸とを含んでなることを特徴とする、請求項８記載のミトコンドリア病治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、細胞中のミトコンドリアの機能異常に起因して様々な症状を表す疾病であって、所謂“ミトコンドリア病”として総括される疾病の予防および対策に有効な薬剤を提供する。
技術分野
ミトコンドリアは細胞中に存在し、エネルギー生産に深く関与する小器官である。そしてエネルギー生産系酵素の遺伝異常によりミトコンドリアの機能が低下し、中枢神経、骨格筋、心臓、眼、肝臓、腎臓、大腸、小腸、内耳、膵臓等の器官、また血液、皮膚、内分泌腺等に様々な病型が生じる疾病が総括して“ミトコンドリア病”と呼ばれている。特にエネルギーの消費量が多い脳および筋肉にミトコンドリアの機能異常は大きく影響を及ぼすので、“ミトコンドリア脳筋症”と呼ぶこともある。
ミトコンドリア病は、生化学的異常により、臨床症状により、またＤＮＡ異常の様式により様々に分類されるが、特にＫＳＳ（慢性進行性外眼麻痺症候群）、ＭＥＲＲＦ（福原病）、ＭＥＬＡＳ、Ｌｅｂｅｒ病、Ｌｅｉｇｈ脳症およびＰｅａｒｓｏｎ病と命名されているものが広く知られている。なかんずく、脳卒中様症状を主体とする病型であるＭＥＬＡＳは全体の３０％以上を占め、ミトコンドリア病で最も多い病型とされている。
ＭＥＬＡＳは、小児期に発作性の頭痛（偏頭痛）、嘔吐、半身痙攣で発症するミトコンドリア病の一病型であり、１９８４年にコロンビア大学において初めて臨床的に報告された。ＭＥＬＡＳの患者では、その８０％にミトコンドリアＤＮＡのｔＲＮＡＬｅｕ（ＵＵＲ）遺伝子のＡ３２４３Ｇ変異が報告されている。症状としては、２０歳以前の脳卒中様症状を特徴とし、発作は連続で起こることもあり、発作時に見られる症状は一過性の場合もあるが、適切な治療が無ければ症状は遷延し、また一回の発作で死に至る場合もある。
ミトコンドリア病の診断は、形状、機能およびＤＮＡの観点からミトコンドリアに異常があるか否かを調査することにより行うことができる。
ミトコンドリアの形状についての調査は、骨格筋を薄切片にし、染色後に光学顕微鏡による観察で行う。正常なミトコンドリアを持つ細胞では染色されたミトコンドリアは目立たないが、ミトコンドリア病患者の場合、筋細胞の内部に染色されたミトコンドリアが斑点状に観察されたり、また筋細胞の周辺部に染色されたミトコンドリアが集積していることが観察される。このような異常な筋細胞（筋線維）は、赤色ぼろ線維（ｒａｇｇｅｄ−ｒｅｄ−ｆｉｂｅｒ：ＲＲＦ）と呼ばれ、ミトコンドリア病であるか否かの指標となる。
またミトコンドリアの機能の観察は、例えばミトコンドリアの電子伝達系酵素である複合体ＩＶ：シトクロームＣ酸化酵素（ＣＯＸ）の活性を調査することにより行われる。筋組織の凍結切片についてＣＯＸ活性を調査すると、ミトコンドリア病の患者ではＣＯＸ活性のない筋細胞が散在することがあり、この所謂ＣＯＸ部分欠損はミトコンドリア異常を示す重要な指標である。
さらにミトコンドリアのＤＮＡ自体の異常を調査することによっても、ミトコンドリア病であるか否かを判定することができる。ミトコンドリアＤＮＡの研究は近年大幅な進歩を遂げており、これらの成果が臨床的にも応用されつつある。
ところで、ミトコンドリア病の従来採用されている治療方法は、対症療法および原因療法の二つに大別することができる。
対症療法は、ミトコンドリア病により生じる症状を、ミトコンドリア病以外の疾病、例えば糖尿病や癲癇等により生じる同様の症状の治療に有効であることが周知である薬剤により治療を試みることからなる療法である。この療法では、有効であることが既に確認されている薬剤を用いることから治療効果を十分期待することができるが、ミトコンドリアの機能異常が改善されないので根本的な解消には至らない。
また原因療法は、ミトコンドリアを賦活化する薬剤を投与することにより、ミトコンドリアの機能異常自体を改善することを目的とする療法である。このような薬剤はミトコンドリアで行われれるエネルギー代謝を活性化する観点から選択され、例えばジクロロ酢酸（ＤＣＡ）、ノイキノン、ビタミンＢ１等が使用されている。
ジクロロ酢酸は、ピルビン酸脱水素酵素（ＰＤＨＣ）の活性を高め、ミトコンドリア内のエネルギー代謝を高める作用を有する。特に血中の乳酸値が上昇してアシドーシス（酸血症）となっている場合に顕著な改善効果がある。またＤＣＡを使用するとＰＤＨＣの活性の上昇と共にビタミンＢ１が消費されるので、ＤＣＡとビタミンＢ１の同時投与が必要となる。このようなＤＣＡの投与によりミトコンドリア病の発作が抑制された、全身状態が改善したとの報告があるが、過剰投与での意識障害および肝機能障害も報告されており、血中濃度を常に観察しながらジクロロ酢酸の投与する必要がある。
ノイキノンは鬱血性心不全の治療において知られている薬剤であって、大量使用によりミトコンドリア病に有効との報告がある。しかしながら一方で、大量投与によってもノイキノンはミトコンドリア病に無効であるとの報告もある。
ビタミンＢ１は、ミトコンドリア病の一病型であるＬｅｉｇｈ脳症において、その一部の患者に顕著な効果を示すことが報告されている。Ｌｅｉｇｈ脳症の患者ではビタミンＢ１依存性ビルビン酸脱水素酵素複合体欠損が観察される場合があるが、この場合にビタミンＢ１の投与は顕著な効果を示す。またビタミンＢ１欠乏症でない場合であっても、ビタミンＢ１はミトコンドリア代謝において補酵素に重要な働きをしているため、明確な効果が確認されなくともミトコンドリア病の患者に投与される場合が多い。
このように、ミトコンドリア病の原因療法には、全ての病型のミトコンドリア病に有効であり、かつ重大な副作用を示さない薬剤は知られていなかった。従って本発明は、ミトコンドリアを賦活化することによって全ての病型のミトコンドリア病の予防および治療に有効な薬剤を提供することを目的とする。
【発明の開示】
本発明者等は鋭意研究を行った結果、アルギニンとビタミンＣとを一緒に配合することにより、ミトコンドリアを賦活化できると同時にアルギニンの投与による悪影響を抑制することができ、ミトコンドリア病の原因療法に有効な薬剤となり得ることを見出した。またアルギニンおよびビタミンＣに加えて、さらにリボ核酸を配合することにより、ミトコンドリア病に対する効果を増強し得ることをも見出した。
従って、本発明は、
Ｌ−アルギニンと、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを含んでなることを特徴とするミトコンドリア病治療剤、および
Ｌ−アルギニンと、リボ核酸、リボヌクレオチドおよびリボヌクレオシドからなる群より選択される少なくとも一種と、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを含んでなることを特徴とするミトコンドリア病治療剤
に関する。
【発明を実施するための最良の形態】  本発明のミトコンドリア病治療剤は、第一の態様において、Ｌ−アルギニンと、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを含んでなる。
Ｌ−アルギニンは、化学式：Ｃ６Ｈ１４Ｎ４Ｏ２、分子量：３７４．２０、融点（分解点）：２４４℃を有する塩基性アミノ酸の一種であり、プロタミンヒストンのような塩基性タンパク質中に多く存在する。
近年、このＬ−アルギニンが血圧調節や感染防止など広範な生体機能に関与するＮＯラジカルの発生源であることが報告された。またＬ−アルギニンは、アンモニアの尿素サイクルによる解毒の促進、内分泌ホルモンの分泌促進に関与し、またクレアチンリン酸、ポリアミンおよびプロリンの合成素材、体内情報伝達物質としてのＮＯラジカルの発生源ともなり、多彩な生理機能に関与していることが明らかになりつつある。
加えて、ミトコンドリア病の一病型であるＭＥＬＡＳの患者では、Ｌ−アルギニンの有効濃度が特にその脳卒中急性期において顕著に低下することが明らかのとなった。Ｌ−アルギニン濃度の低下に伴い、ＭＥＬＡＳ患者ではＮＯ産生の総量を表すＮＯラジカルもまた有意に低下し、ＭＥＬＡＳ患者の動脈は非常に拡張し難い状態にあると言える。従って、ミトコンドリア病患者にＬ−アルギニンを投与してＮＯラジカルを増加せしめることは、ミトコンドリア病の治療において効果を有すると予期される。
しかし同時に、Ｌ−アルギニンは極めてえぐい味（あくが強く辛い味で、喉をいらいらと刺激する味）が有るので摂取が極めて困難なことも知られていた。さらにＬ−アルギニン摂取後には、胃のえぐい感（胸焼け、悪心、嘔気または嘔吐）がするので、その摂取は極めて不快であった。特にＬ−アルギニンの無機酸、例えば塩酸塩、硝酸塩、硫酸塩等はえぐい味が強く、摂取後に残るえぐい感もまた強いものであった。
また、Ｌ−アルギニンを長期にわたり摂取し体内でのＮＯ発生量が増大すると、このＮＯが胃中で亜硝酸に変化した後、胃中の食物に含まれる第二アミンと反応して変異原性（発癌性）を有するニトロソアミン化合物を生成する。さらに障害を受けた細胞中ではスーパーオキシドラジカルアニオンのような活性酸素種が頻繁に生成し、このスーパーオキシドラジカルアニオンがＮＯラジカルと反応し、毒性の高い過酸化亜硝酸イオン（Ｏ＝ＮＯＯ−）を生成しする。
しかしながら本発明者等は、これらのＬ−アルギニンの摂取に伴う問題点が、Ｌ−アルギニンをＬ−アスコルビン酸と同時に摂取することにより解消し得ること、またさらにＬ−アスコルビン酸がミトコンドリア病の治療を促進し得ることを見出して、本発明を完成させた。
Ｌ−アスコルビン酸（ビタミンＣ）は生体内の酸化還元反応に関与している水溶性のビタミンであって、ヒト、サル等の動物は、その中間体の反応に関わる酵素を有しないためビタミンである。そして、血中のＬ−アスコルビン酸濃度が減少して低アスコルビン酸血症、誘導性アスコルビン酸過小症等と呼ばれる状態になると、免疫系の障害、血液凝固系の障害、副腎機能の低下によるストレス対応の失調、コラーゲン生成の障害、神経系の機能不全、免疫機能の低下や発ガン物質の解毒能の低下に起因するガンの発生等が引き起こされる。
このＬ−アスコルビン酸をＬ−アルギニンに混合すると、Ｌ−アスコルビン酸の酸味により、Ｌ−アルギニンのえぐい味およびアルギニン摂取後の胃のえぐい感（胸焼け、悪心、嘔気または嘔吐）を軽くすることができる。
また、Ｌ−アスコルビン酸は常に自動酸化してラジカルを放出しているが、Ｌ−アルギニンの投与により発生した過剰のＮＯラジカルは、Ｌ−アスコルビン酸由来のラジカルにより消去（スカベンジ）することができる。これにより、Ｌ−アルギニンの摂取した過剰のＮＯラジカルが有害なニトロソアミン化合物や過酸化亜硝酸イオン等に変化することを抑制できる。
Ｌ−アルギニンとＬ−アスコルビン酸との混合比率は、Ｌ−アルギニンのえぐい味を無くすことを目的とする場合、Ｌ−アルギニン１重量部に対し、少なくよもＬ−アスコルビン酸０．２重量部を混合する必要がある。混合するＬ−アスコルビン酸の重量部が０．２より少ないと、Ｌ−アルギニンのえぐい味が増加する。またＬ−アスコルビン酸の重量部が０．２５より増加すると、混合したＬ−アスコルビン酸の重量部の増加と共に混合物の酸味が増加する。Ｌ−アルギニン摂取後のえぐい感を軽くすることを目的についても同様の傾向が有り、Ｌ−アルギニン１重量部に対して少なくともＬ−アスコルビン酸０．２重量部を混合することにより、えぐい感を軽くすることができる。
一方、本発明のミトコンドリア病治療剤において、Ｌ−アスコルビン酸の混合量がＬ−アルギニン１重量部に対して０．２５重量部を超えた場合に混合物が呈する酸味はアスコルビン酸に由来するものであって、アスコルビン酸の粉末が常用の栄養補助食品として販売されていることが示すように、一般の摂食者にとっては絶え難いものではない。また、錠剤にすることによりこの酸味はかなり減退されるものである。従って、本発明では、Ｌ−アルギニンのえぐい味およびえぐい感を無くすために最小限必要なＬ−アスコルビン酸の量を越えてＬ−アスコルビン酸の混合量が増加することは特に問題は無く、例えばＬ−アルギニン１重量部に対してＬ−アスコルビン酸２０重量部を混合することも可能である。
加えて、混合するＬ−アスコルビン酸の一部について、Ｌ−アスコルビン酸以外のビタミンＣ、または体内でＬ−アスコルビン酸と同様の作用を奏する誘導体および類似体に置き換えることも可能である。
また、本発明のミトコンドリア病治療剤は、第二の態様において、Ｌ−アルギニンと、リボ核酸、リボヌクレオチドおよびリボヌクレオシドからなる群より選択される少なくとも一種と、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを含んでなる。
リボ核酸は栄養補助食品として知られており、脳脊髄性疾患の症状の改善に使用されている。該脳脊髄性疾患には、特に脳脊髄退行性疾患があり、その例として老人性ボケを含む痴呆症、癲癇症、痙攣発作、脳変性疾患、脳神経疾患、脳基底核疾患、小脳の変性疾患、脊髄変性疾患および筋疾患等が挙げられる。従って、Ｌ−アルギニンおよびＬ−アスコルビン酸に加えてリボ核酸をミトコンドリア病の患者に投与することは、ミトコンドリア病が特に脳を含む中枢神経系で引き起こす障害を解消するに役立つ。
リボ核酸の投与量が大量になる場合、アスコルビン酸を併用すると、併用しない場合よりも、血液中の尿酸値が低下する傾向が認められる。これにより、ＲＮＡ等の投与によって尿酸値が上昇する傾向のある体質の患者の場合、血中尿酸値の上昇により招くであろう痛風の症状を回避することが可能である。これは、アスコルビン酸が、最終生成物として尿酸を生成させるプリン排泄系において、ヒポキサンチンからキサンチンへの代謝に関与する酵素の活性を低下させて、それにより尿酸の生成量を減少させるためである。従って、アルギニンのえぐい味を無くすために添加されるアスコルビン酸は、ＲＮＡ等の摂取により増加する場合の血液中の尿酸値を低下させて痛風の発症を回避させることにも効果がある。
なお、Ｌ−アルギニン、Ｌ−アスコルビン酸、並びにそれらの混合比率については上記した通りである。
本発明で使用されるＬ−アルギニン、Ｌ−アスコルビン酸、リボ核酸の形態は、混合するのに適している固形物、例えば粉末または微粉末、結晶または微結晶、または微粉末または微結晶に容易に粉砕できる塊が適している。また、Ｌ−アスコルビン酸としては、接着剤、例えばコーンスターチを少量、例えば３％添加して流動層造粒法により製造した細粒状粉末（例えば、ＢＡＳＦ武田ビタミン株式会社製「ビタミン顆粒−９７」）を使用し得る。
上記混合物に、ポリオール、例えばキシリトールまたはソルビトールの粉末を添加すると、褐変の進行をさらに抑制することができる。
上記混合は通常、各成分の粉末または微粉末、または結晶または微結晶を、均一な混合物が得られるように十分に粉砕することにより行われる。混合は通常粉砕を伴う。
上記混合は、Ｌ−アスコルビン酸が湿気を含む雰囲気中で酸化するのを可能な限り回避するために、４０％以下の低湿度雰囲気中で行われる。また混合容器の内面は、混合成分と不活性でありかつ硬質な材質、例えば陶質のようなセラミックであることが好ましい。混合容器の例として、セラミック製、例えば陶製で、内面が滑面または粗面の耐久性の高い乳鉢、臼または筒（円筒または多角筒）を挙げることができる。Ｌ−アスコルビン酸は鉄と反応し易いので、鉄製のカッター刃で切り砕くミル方式の混合機の使用は好ましくない。
上記混合は通常、常温、好ましくは１０〜１５℃で、各成分が均一となるように十分に行われる。混合時間は各成分が均一に混合されるのに十分な時間であればよい。混合後の混合物の粒度は、例えば５０メッシュ、好ましくは１００メッシュ、さらに好ましくは２００メッシュの篩を通過するものである。
また、Ｌ−アスコルビン酸をコーティングで被覆し、その後にＬ−アルギニンと混合することもできる。この場合では、Ｌ−アスコルビン酸がコーティングにより被覆されているため、Ｌ−アルギニンと直接接触せず、メイラード反応が起こらない。該コーティングにより被覆されたＬ−アスコルビン酸としては、油脂で完全にコーティングしたものを用いることができる。
上記リボ核酸としては例えば、ビール酵母エキス由来のものを挙げることができる。
本発明のミトコンドリア病治療剤は、点滴や注射に適した液体とすることもできる。この液状のミトコンドリア病治療剤は、ミトコンドリア病の急性期において患者が意識を喪失している場合、患者が高齢である場合等において、ミトコンドリア病治療剤の経口投与が困難であるときに有効である。ここで、液体製剤とする際に問題となるのは、アミノ酸が糖類と反応するメイラード反応である。該メイラード反応が生じると各成分の効果を阻害するだけでなく味覚の点でも劣化し、非常に好ましくない。しかしながら本発明者は、システインを含まないならば、Ｌ−アルギニンとＬ−アスコルビン酸とを水溶液の状態で混合しても数ヶ月間、メイラード反応を生じないことを見出した。また、キシリトール、ソルビトール等の糖アルコールを添加することにより、さらにメイラード反応が発生するまでの期間を延長し得ることを見出した。
従って本発明は、Ｌ−アルギニンと、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを医薬的に許容可能な溶液に溶解してなり、かつシステインを含まないことを特徴とするミトコンドリア病治療剤にも関する。
本発明のミトコンドリア病治療剤は、ミトコンドリア自体の活性を増加せしめるものであるので、ミトコンドリア病の病型によらず、以下のような様々な病型のミトコンドリア病の治療に用いることができる：
慢性進行性外眼麻痺症候群（ＫＳＳ）、ＭＥＲＲＦ（福原病）、ＭＥＬＡＳ、Ｌｅｂｅｒ病、Ｌｅｉｇｈ脳症、ミトコンドリア異常を伴う糖尿病、Ｐｅａｒｓｏｎ病。
また、ミトコンドリア病の症候学的分類には以下のものがある：
１．  神経系：ストローク、小脳失調、精神発達遅滞、片頭痛、皮質盲、痙攣（癲癇）、ミオクローヌス、末梢神経障害、痴呆
２．  骨格筋：外眼筋麻痺、筋力低下、眼瞼下垂、易疲労性
３．  内分泌：糖尿病、低身長、二次性徴の遅れ、副甲状腺機能低下症
４．  心血管系：肥厚性心筋症、拡張型心筋症、心伝導ブロック
５．  腎尿細管障害：腎尿細管性アシドーシス、ｄｅ  Ｔｏｎｉ−Ｆａｎｃｏｎｉ症候群
６．  血液：鉄芽球性貧血（Ｐｅａｒｓｏｎ症候群）
７．  肝胆道系：高トランスアミナーゼ、肝不全、膵外分泌機能不全
８．  消化器：腸閉塞、慢性下痢、反復性嘔吐
９．  視覚器：網膜色素変性、視神経萎縮
１０．聴覚器：感音性難聴
１１．精神科的：統合失調症、行動異常、自閉症
また生化学的異常による分類には以下のものがある：
カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ欠損症、カルチニン欠乏症、ピルベートカルボキシラーゼ欠損症、ピルベートデヒドロゲナーゼ欠損症、フマラーゼ欠損症、α−ケトグルタレートデヒドロゲナーゼ欠損症、Ｌｕｆｔ病、複合体１欠損症、複合体２欠損症、複合体３欠損症、複合体４欠損症、複合体５欠損症、複数の複合体欠損症。
さらに臨床症状による分類には以下のものがある：
慢性進行性外眼筋麻痺（ＣＰＥＯ）（Ｋｅａｒｎｓ−Ｓａｙｒｅ症候群を含む）、ミオクローヌスを伴うミトコンドリア病、卒中様症状を伴うミトコンドリア病、Ｌｅｂｅｒ病、Ｌｅｉｇｈ脳症、Ｐｅａｒｓｏｎ病、ＮＡＲＰ。
ＤＮＡ異常による分類：
核ＤＮＡ異常、ｍｔＤＮＡ異常、（欠損・重複）−（点変異）−（欠乏状態）。
本発明のミトコンドリア病治療剤の投与量は、例えばテステープを用いて尿中のＮＯｘ量を観察することにより適宜選択し得る。即ち、ある投与量においてミトコンドリア病の症状に改善が見られない場合には、該ＮＯｘ量に変化が無い範囲で投与量を増加させ、一方、該ＮＯｘ量が増大した場合には投与量を減少させれば良い。ミトコンドリア病治療剤の投与量は、Ｌ−アルギニン換算で３０ｇとなる場合もある。なおＮＯｘの血中濃度は、アルギニンが脳神経系や筋肉に素早くプールされるので投与量の指標とはならない。
本発明は以下の例により、さらに詳細に説明されるが、本発明はそれらの態様に限定されると理解すべきではない。
製造例１
Ｌ−アルギニンの粉末５ｇとＬ−アスコルビン酸の粉末１ｇを陶磁製の乳鉢に入れ、均一となるように十分に挽き混合した。得られた粉末は４２号篩（３５０μ）を通過するものであり、該粉末として本発明のミトコンドリア病治療剤６ｇを得た。
製造例２
Ｌ−アルギニン１ｇとアスコルビン酸粉末０．２ｇに加え、ビール酵母粗ＲＮＡ（ＲＮＡの含有量７０％）粉末１ｇを陶磁製の乳鉢に入れ、均一となるように十分に挽き混合した。得られた粉末は４２号篩（３５０μ）を通過するものであり、該粉末として本発明のミトコンドリア病治療剤２．２ｇを得た。
こうして得られた二種のミトコンドリア病治療剤について、味験者によるえぐい味と酸味の強度を味験を行った。
その結果、上記ミトコンドリア病治療剤については、Ｌ−アルギニン／Ｌ−アスコルビン酸の重量比が１／５であるため、Ｌ−アルギニンの摂取によるえぐい味およびえぐい感は消失していた。また、何れの試料も長期間にわたり褐変しなかった。
製造例３
扶桑製薬工業株式会社製のシステインを含まないＬ−アスコルビン酸注射液に、該注射液中に含まれるＬ−アスコルビン酸１重量部に対して、Ｌ−アルギニン５重量部を添加し、混合溶解して、溶液形態の本発明のミトコンドリア病治療剤を得た。
臨床例１
ミトコンドリア病の急性期に脳卒中様症状を呈するＭＥＬＡＳ患者に、本発明のミトコンドリア病治療剤を投与した。投与量はＬ−アルギニン換算で０．５ｇ／ｋｇ／時とした。
ミトコンドリア病治療剤の投与により、急性期の脳卒中様症状の殆どが解消された。また投与に由来するえぐい味およびえぐい感等の発生は無く、患者が嘔吐することは無かった。
臨床例２
ミトコンドリア病患者に、本発明のミトコンドリア病治療剤を投与した。投与量はＬ−アルギニン換算で０．５ｇ／ｋｇ／時とした。
Ｌ−アルギニンのみを投与した場合、本患者はＬ−アルギニンのえぐい味により嘔吐を繰り返し、その効果が十分に発揮されていなかった。しかし本発明のミトコンドリア病治療剤の投与では嘔吐せず、ミトコンドリア病の症状に改善が認められた。
臨床例３
本発明の溶液形態のミトコンドリア病治療剤を、急性期にあるＭＥＬＡＳ患者に点滴により投与した。点滴時には、周期的に患者の尿中のＮＯｘ濃度をテステープにより測定し、該ＮＯｘ濃度が増加しないように投与量を増減させた。
本発明のミトコンドリア病治療剤の投与により、ＭＥＬＡＳ患者特有の脳卒中様症状は速やかに消失した。
【産業上の利用可能性】  本発明によれば、現在まで有効な治療剤が無かったミトコンドリア病を有効に治療可能な薬剤が提供される。
本発明のミトコンドリア病治療剤では、ＮＯラジカルの発生源となるＬ−アルギニンを投与することにより、ミトコンドリア病の急性期において発生する脳卒中様の症状において、血中のＬ−アルギニン濃度を上昇させて脳の動脈の急性虚血性障害を改善することができる。
さらに本発明のミトコンドリア病治療剤は、Ｌ−アルギニンに加えＬ−アスコルビン酸を含むので、Ｌ−アルギニンの摂取に伴うえぐい味およびえぐい感を無くすと共に、過剰のＮＯラジカルによる有害物質の生成を抑制することができ、さらにはＬ−アスコルビン酸自身が持つ効果により、さらにミトコンドリア病の治療が促進される。
また本発明のミトコンドリア病治療剤が、リボ核酸を含有する場合には、アルギニン併用によりリボ核酸の神経栄養素としての利用が促進される。
【手続補正書】
【提出日】平成18年11月20日(2006.11.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｌ−アルギニンと、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを含み、該Ｌ−アスコルビン酸は油脂でコーティングされている製剤であって、少なくとも０．５ｇ（Ｌ−アルギニン）／ｋｇ（体重）／時（時間）以上の投与量での長期間投与に使用されるミトコンドリア病治療剤。
【請求項２】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜６重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなる請求項１に記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項３】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜０．２５重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなる請求項２に記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項４】
Ｌ−アルギニンと、リボ核酸、リボヌクレオチド及びリボヌクレオシドからなる群より選択される少なくとも一種と、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを含み、該Ｌ−アスコルビン酸は油脂でコーティングされている製剤であって、少なくとも０．５ｇ（Ｌ−アルギニン）／ｋｇ（体重）／時（時間）以上の投与量での長期間投与に使用されるミトコンドリア病治療剤。
【請求項５】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜６重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなる請求項４に記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項６】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜０．２５重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなる請求項５に記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項７】
Ｌ−アルギニンと、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜２０重量部のＬ−アスコルビン酸とを医薬的に許容可能な溶液に溶解してなる製剤であって、少なくとも０．５ｇ（Ｌ−アルギニン）／ｋｇ（体重）／時（時間）以上の投与量での点滴による長期間投与に使用され、かつシスチン及びシステインを含まないミトコンドリア病治療剤。
【請求項８】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜６重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなる請求項７に記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項９】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜０．２５重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなる請求項８に記載のミトコンドリア病治療剤。
【手続補正書】
【提出日】平成19年1月12日(2007.1.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｌ−アルギニンと、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜６重量部のＬ−アスコルビン酸とを含み、該Ｌ−アスコルビン酸は油脂でコーティングされている製剤であって、少なくとも０．５ｇ（Ｌ−アルギニン）／ｋｇ（体重）／時（時間）以上の投与量での長期間投与に使用されるミトコンドリア病治療剤。
【請求項２】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜０．２５重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなる請求項１に記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項３】
Ｌ−アルギニンと、リボ核酸、リボヌクレオチド及びリボヌクレオシドからなる群より選択される少なくとも一種と、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜６重量部のＬ−アスコルビン酸とを含み、該Ｌ−アスコルビン酸は油脂でコーティングされている製剤であって、少なくとも０．５ｇ（Ｌ−アルギニン）／ｋｇ（体重）／時（時間）以上の投与量での長期間投与に使用されるミトコンドリア病治療剤。
【請求項４】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜０．２５重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなる請求項３に記載のミトコンドリア病治療剤。
【請求項５】
Ｌ−アルギニンと、該Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜６重量部のＬ−アスコルビン酸とを医薬的に許容可能な溶液に溶解してなる製剤であって、少なくとも０．５ｇ（Ｌ−アルギニン）／ｋｇ（体重）／時（時間）以上の投与量での点滴による長期間投与に使用され、かつシスチン及びシステインを含まないミトコンドリア病治療剤。
【請求項６】
前記Ｌ−アルギニン１重量部に対して０．２〜０．２５重量部のＬ−アスコルビン酸を含んでなる請求項５に記載のミトコンドリア病治療剤。
【国際調査報告】
2005084660.tif 000002
2005084660.tif 000003
2005084660.tif 000004
2005084660.tif 000005