(57)【要約】  本発明は、抗ＴＩＧＩＴ抗体と、抗ＰＶＲＩＧ抗体と、抗ＰＤ−１または抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含むチェックポイント阻害剤とを用いた三重併用療法に関する。【選択図】図１Ａ
2020521778.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者においてがんを治療する方法であって、
ａ）腫瘍細胞を含む前記患者からの生検を提供することと、
ｂ）前記生検におけるＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度を測定することと、
ｃ）前記ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％を超える場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体を含む三重併用療法を施すことと、
ｄ）前記ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％未満の場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体および抗ＰＶＲＩＧ抗体を含む二重併用療法を施すこととを含む、方法。
【請求項２】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗ＰＶＲＩＧ抗体が、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記抗ＰＤ−１抗体が、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記抗ＴＩＧＩＴ抗体が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項１〜４に記載の方法。
【請求項６】
前記抗ＰＶＲＩＧ抗体が、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項１〜５に記載の方法。
【請求項７】
前記抗ＰＤ−１抗体が、ペンブロリズマブ、セミプリマブ、およびニボルマブのうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項１〜６に記載の方法。
【請求項８】
前記二重併用療法が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記三重併用療法が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記抗体が、同時に投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記抗体が、順次投与される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記がんが、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記がんが、トリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
この出願は、２０１７年６月１日に出願された米国特許出願第６２／５１３，９６０号、２０１７年６月５日に出願された同第６２／５１５，４５２号、２０１７年７月２８日に出願された同第６２／５３８，５６３号、２０１７年８月１７日に出願された同第６２／５４７，０５１号、２０１７年１１月７日に出願された同第６２／５８２，７５６号、および２０１８年１月１６日に出願された同第６２／６１８，００５号に対して米国特許法第１１９条に基づく優先権を主張するものであり、これらの全ては、その全体が参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
ＴＩＧＩＴは、エフェクターおよび制御性（Ｔｒｅｇ）ＣＤ４＋Ｔ細胞、エフェクターＣＤ８＋Ｔ細胞、ならびにＮＫ細胞上で高度に発現される共阻害受容体である。ＴＩＧＩＴは、（１）直接シグナル伝達、（２）リガンドシグナル伝達の誘導、ならびに（３）共刺激受容体ＣＤ２２６（別名ＤＮＡＭ−１）との競合およびそれによるシグナル伝達の妨害によって免疫応答を減弱させることが示されている。ＴＩＧＩＴシグナル伝達は、ＮＫ細胞において最もよく研究されており、その同族リガンドであるポリオウイルス受容体（ＰＶＲ、別名ＣＤ１５５）との結合がその細胞質ＩＴＩＭドメインを介してＮＫ細胞の細胞傷害性を直接抑制することが示されている。ＴＩＧＩＴ遺伝子のノックアウトまたはＴＩＧＩＴ／ＰＶＲ相互作用の抗体遮断は、生体外でのＮＫ細胞殺傷を増強すると共に、生体内での自己免疫疾患を悪化させることが示されている。Ｔ細胞およびＮＫ細胞に対するその直接的な影響に加えて、ＴＩＧＩＴは、樹状細胞または腫瘍細胞におけるＰＶＲ媒介性シグナル伝達を誘導し得、これがＩＬ１０等の抗炎症性サイトカインの産生の増加につながる。Ｔ細胞において、ＴＩＧＩＴはまた、共刺激受容体ＣＤ２２６のホモ二量体化を妨害することによって、およびＰＶＲへの結合についてそれと競合することによって、リンパ球応答を阻害し得る。
【０００３】
ＴＩＧＩＴは、様々な種類の腫瘍に浸潤する腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）およびＴｒｅｇを含むリンパ球で高度に発現される。ＰＶＲはまた、腫瘍中で広く発現され、これは、ＴＩＧＩＴ−ＰＶＲシグナル伝達軸ががんの主要な免疫逃避機構であり得ることを示唆している。注目すべきことに、ＴＩＧＩＴ発現は、別の重要な共阻害性受容体ＰＤ１の発現と密接に相関している。ＴＩＧＩＴおよびＰＤ１は、多数のヒトおよびマウスの腫瘍のＴＩＬ上で共発現される。ＴＩＧＩＴおよびＣＴＬＡ４とは異なり、Ｔ細胞応答のＰＤ１阻害は、共刺激受容体とのリガンド結合の競合を伴わない。
【０００４】
免疫チェックポイントであるポリオウイルス受容体関連免疫グロブリンドメイン（ＰＶＲＩＧ、ＣＤ１１２Ｒとしても知られる）は、ＴＩＧＩＴ受容体ファミリー内の新しい阻害性受容体を表すことを含む。ＰＶＲＩＧは、その同族リガンドであるポリオウイルス受容体関連２（ＰＶＲＬ２、ＣＤ１１２、またはネクチン−２としても知られる）に高い親和性で結合し、ＴおよびＮＫ細胞内のＩＴＩＭモチーフを介して抑制シグナルを伝達する。ＴＩＧＩＴのＰＶＲとの親和性およびＰＶＲＩＧのＰＶＲＬ２との親和性がＣＤ２２６のＰＶＲまたはＰＶＲＬ２との親和性よりも高いことから、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧにはＣＤ２２６からＰＶＲおよびＰＶＲＬ２を打ち負かす能力があり、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧがリンパ球機能を低下させ得る間接的な機序をもたらすことが示唆される。したがって、同じファミリーの２つの受容体であるＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧは、ＴおよびＮＫ細胞応答を減衰させる阻害シグナルを伝達する。
【０００５】
したがって、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧは、抗ＰＤ−１抗体を含むチェックポイント阻害剤との三重併用療法にとって魅力的である。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、本明細書に開示され、請求項内に提供されるＴＩＧＩＴ抗体と、ＰＶＲＩＧ抗体と、抗ＰＤ−１抗体を含むチェックポイント阻害剤との組み合わせを含む、方法および組成物を提供する。本発明は、該抗体およびその組成物をコードする核酸をさらに提供する。
【０００７】
本発明は、ａ）腫瘍細胞を含む該患者からの生検を提供することと、ｂ）該生検におけるＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度を測定することと、ｃ）該ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％を超える場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体を含む三重併用療法を施すことと、ｄ）該ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％未満の場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体および抗ＰＶＲＩＧ抗体を含む二重併用療法を施すこととを含む、該患者のがんを治療する方法を提供する。
【０００８】
方法のいくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【０００９】
方法のいくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００１０】
方法のいくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブ、セミプリマブ、およびニボルマブのうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００１１】
方法のいくつかの実施形態において、二重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される。
【００１２】
方法のいくつかの実施形態において、三重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される。
【００１３】
方法のいくつかの実施形態において、抗体は、同時に投与される。
【００１４】
方法のいくつかの実施形態において、抗体は、順次投与される。
【００１５】
方法のいくつかの実施形態において、がんは、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。方法のいくつかの実施形態において、がんは、がんのトリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。方法のいくつかの実施形態において、がんは、がんのトリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、メルケル細胞がん、および高頻度ＭＳＩがんからなる群から選択される。
【００１６】
本発明は、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体を含む三重併用療法を施すことを含む、該患者のがんを治療する方法をさらに提供する。
【００１７】
方法のいくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００１８】
方法のいくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００１９】
方法のいくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブ、セミプリマブ、およびニボルマブのうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００２０】
方法のいくつかの実施形態において、三重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される二重併用療法と組み合わせた抗ＰＤ−１抗体の投与を含む。
【００２１】
方法のいくつかの実施形態において、三重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される。
【００２２】
方法のいくつかの実施形態において、抗体は、同時に投与される。
【００２３】
方法のいくつかの実施形態において、抗体は、順次投与される。
【００２４】
方法のいくつかの実施形態において、三重併用療法の際のがんは、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。方法のいくつかの実施形態において、がんは、がんのトリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。
【００２５】
本発明は、ａ）抗ＴＩＧＩＴ抗体の単位用量を含む容器と、ｂ）抗ＰＶＲＩＧ抗体の単位用量を含む容器と、を含む、薬学的服用量キットをさらに提供する。
【００２６】
本発明は、ａ）抗ＴＩＧＩＴ抗体の単位用量を含む容器と、ｂ）抗ＰＶＲＩＧ抗体の単位用量を含む容器と、ｃ）抗ＰＤ−１抗体を含む容器と、を含む、薬学的服用量キットをさらに提供する。
【００２７】
さらなる態様において、本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、ｉｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、ｉｉｉ）ＰＶＲタンパク質、ｉｖ）ＰＤ−１タンパク質、ｖ）ＰＤ−Ｌ１タンパク質、ｖｉ）ＰＶＲＬ２、およびｖｉ）ｉ）〜ｖｉ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲ、ＰＤ−１、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−Ｌ１のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定し、ＴＩＧＩＴまたはＰＶＲのいずれか、ＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２のいずれか、およびＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１のいずれかで陽性細胞の割合が＞１％の場合に、ステップｅ）に進むことと、ｅ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【００２８】
さらなる態様において、本発明はａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、ｉｉ）ＰＶＲタンパク質、ｉｉｉ）ＰＤ−１タンパク質、ｉｖ）ＰＤ−Ｌ１タンパク質、およびｖ）ｉ）〜ｉｖ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲ、ＰＤ−１、およびＰＤ−Ｌ１のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定することと、ここで、陽性細胞の割合が４つ全ての受容体に対して≧１％の場合に、ｅ）ＴＩＧＩＴおよびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【００２９】
追加の態様において、本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、ｉｉ）ＰＶＲＬ２タンパク質、ｉｉｉ）ＰＤ−１タンパク質、ｉｖ）ＰＤ−Ｌ１タンパク質、およびｖ）ｉ）〜ｉｖ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲＬ２、ＰＤ−１、およびＰＤ−Ｌ１のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定することと、ここで、陽性細胞の割合が４つ全ての受容体に対して≧１％の場合に、ｅ）ＰＶＲＩＧおよびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【００３０】
さらなる態様において、本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、ｉｉ）ＰＶＲＬ２タンパク質、ｉｉｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、ｉｖ）ＰＶＲタンパク質、およびｖ）ｉ）〜ｉｖ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲＬ２、ＴＩＧＩＴ、およびＰＶＲのそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定することと、ここで、陽性細胞の割合が４つ全ての受容体に対して≧１％の場合に、ｅ）ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴに対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【００３１】
追加の態様において、本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、ｉｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、ｉｉｉ）ＰＶＲＬ２タンパク質、ｉｖ）ＰＤ−１タンパク質、ｖ）ＰＤ−Ｌ１タンパク質、およびｖｉ）ｉ）〜ｖ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＬ２、ＰＤ−１、およびＰＤ−Ｌ１のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定することと、ここで、陽性細胞の割合が５つ全ての受容体に対して≧１％の場合に、ｅ）ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【００３２】
さらなる態様において、本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、ｉｉ）ＰＶＲＬ２タンパク質、ｉｉｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、ｉｖ）ＰＶＲタンパク質、ｖ）ＰＤ−１タンパク質、およびｖｉ）ｉ）〜ｖ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲＬ２、ＴＩＧＩＴ、およびＰＶＲのそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定することと、ここで、陽性細胞の割合が４つ全ての受容体に対して≧１％の場合に、ｅ）ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【００３３】
いくつかの実施形態において、本発明は、ａ）腫瘍細胞を含む該患者からの生検を提供することと、ｂ）該生検におけるＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度を測定することと、ｃ）該ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％を超える場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体を含む三重併用療法を施すことと、ｄ）該ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％未満の場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体および抗ＰＶＲＩＧ抗体を含む二重併用療法を施すこととを含む、患者においてがんを治療する方法を提供する。
【００３４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である。
【００３５】
３いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である。
【００３６】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である。
【００３７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００３８】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００３９】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブ、セミプリマブ、およびニボルマブのうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００４０】
８いくつかの実施形態において、二重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される。
【００４１】
いくつかの実施形態において、三重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される。
【００４２】
いくつかの実施形態において、抗体は、同時に投与される。
【００４３】
いくつかの実施形態において、抗体は、順次投与される。
【００４４】
いくつかの実施形態において、がんは、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。
【００４５】
いくつかの実施形態において、がんは、トリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、メルケル細胞がん、および高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。
【００４６】
いくつかの実施形態において、本発明は、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体を含む三重併用療法を施すことを含む、患者においてがんを治療する方法を提供する。
【００４７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００４８】
いくつかの実施形態において、該抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００４９】
１いくつかの態様において、抗ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブ、セミプリマブ、およびニボルマブからなる群から選択される抗体である。
【００５０】
いくつかの実施形態において、三重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される二重併用療法と組み合わせた抗ＰＤ−１抗体の投与を含む。
【００５１】
いくつかの実施形態において、三重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される。
【００５２】
いくつかの実施形態において、抗体は、同時に投与される。
【００５３】
いくつかの実施形態において、抗体は、順次投与される。
【００５４】
いくつかの実施形態において、がんは、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。
【００５５】
いくつかの実施形態において、がんは、トリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、メルケル細胞がん、および高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。
【００５６】
いくつかの実施形態において、本発明は、ａ）抗ＴＩＧＩＴ抗体の単位用量を含む容器と、ｂ）抗ＰＶＲＩＧ抗体の単位用量を含む容器と、を含む、薬学的服用量キットを提供する。
【００５７】
いくつかの実施形態において、本発明は、ａ）抗ＴＩＧＩＴ抗体の単位用量を含む容器と、ｂ）抗ＰＶＲＩＧ抗体の単位用量を含む容器と、ｃ）抗ＰＤ−１抗体を含む容器と、を含む、薬学的服用量キットを提供する。
【００５８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である。
【００５９】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である。
【００６０】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である。
【００６１】
いくつかの実施形態において、本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、ｉｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、ｉｉｉ）ＰＶＲタンパク質、ｉｖ）ＰＤ−１タンパク質、ｖ）ＰＤ−Ｌ１タンパク質、およびｖｉ）ｉ）〜ｖ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲ、ＰＤ−１、およびＰＤ−Ｌ１のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定することと、ここで、陽性細胞の割合が５つ全ての受容体に対して＞１％の場合に、ｅ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【００６２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である。
【００６３】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である。
【００６４】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である。
【００６５】
いくつかの態様において、ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ．９．０８６である。
【００６６】
いくつかの実施形態において、ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブおよびニボルマブから選択される。
【００６７】
いくつかの実施形態において、ＰＶＲＩＧ抗体は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）である。
【００６８】
いくつかの実施形態において、本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、ｉｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、ｉｉｉ）ＰＶＲＬ２タンパク質、ｉｖ）ＰＤ−１タンパク質、ｖ）ＰＤ−Ｌ１タンパク質、およびｖｉ）ｉ）〜ｖ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＬ２、ＰＤ−１、およびＰＤ−Ｌ１のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定することと、ここで、陽性細胞の割合が５つ全ての受容体に対して＞１％の場合に、ｅ）ＰＶＲＩＧおよびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【００６９】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である。
【００７０】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である。
【００７１】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である。
【００７２】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、図６２において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される抗体である。
【００７３】
いくつかの実施形態において、ＰＶＲＩＧ抗体は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）である。
【００７４】
いくつかの実施形態において、ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブおよびニボルマブから選択される。
【００７５】
いくつかの態様において、ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ．９．０８６である。
【００７６】
いくつかの実施形態において、本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、ｉｉ）ＰＤ−１タンパク質、ｉｉｉ）ＰＶＲＬ２タンパク質、ｉｖ）ＴＩＧＩＴタンパク質、ｖ）ＰＶＲタンパク質、およびｖｉ）ｉ）〜ｖ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲＬ２、ＴＩＧＩＴ、およびＰＶＲのそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定することと、ここで、陽性細胞の割合が５つ全ての受容体に対して＞１％の場合に、ｅ）ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴに対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【００７７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である。
【００７８】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である。
【００７９】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である。
【００８０】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、図６２において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される抗体である。
【００８１】
いくつかの実施形態において、ＰＶＲＩＧ抗体は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）である。
【００８２】
いくつかの態様において、ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ９．０８６である。
【００８３】
いくつかの実施形態において、ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブおよびニボルマブから選択される。
【００８４】
いくつかの実施形態において、本発明は、ａ）腫瘍細胞を含む該患者からの生検を提供することと、ｂ）該生検におけるＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度を測定することと、ｃ）該ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％を超える場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む三重併用療法を施すことと、ｄ）該ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％未満の場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体および抗ＰＶＲＩＧ抗体を含む二重併用療法を施すこととを含む、患者においてがんを治療する方法を提供する。
【００８５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である。
【００８６】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である。
【００８７】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、図６２において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される抗体である。
【００８８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００８９】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００９０】
５８．該抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、アベルマブ、およびデュルバルマブのうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項５２〜５７のいずれか一項に記載の方法。
【００９１】
いくつかの実施形態において、二重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される。
【００９２】
いくつかの実施形態において、三重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される。
【００９３】
いくつかの実施形態において、抗体は、同時に投与される。
【００９４】
いくつかの実施形態において、抗体は、順次投与される。
【００９５】
いくつかの実施形態において、がんは、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。
【００９６】
いくつかの実施形態において、がんは、トリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、メルケル細胞がん、および高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。
【００９７】
いくつかの実施形態において、本発明は、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む三重併用療法を施すことを含む、患者においてがんを治療する方法を提供する。
【００９８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【００９９】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である。
【０１００】
いくつかの態様において、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、アベルマブ、およびデュルバルマブからなる群から選択される抗体である。
【０１０１】
いくつかの実施形態において、三重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される二重併用療法と組み合わせた抗ＰＤ−Ｌ１抗体の投与を含む。
【０１０２】
いくつかの実施形態において、三重併用療法は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、抗体は、同時に投与される。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、抗体は、順次投与される。
【０１０５】
いくつかの実施形態において、がんは、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、がんは、トリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、メルケル細胞がん、および高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。
【図面の簡単な説明】
【０１０７】
【図１Ａ】ヒトＩｇＧ１（いくつかの有用なアミノ酸置換を有する）、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、本発明において特定の用途を見出すヒンジバリアントを有するＩｇＧ４の定常ドメイン、ならびにカッパおよびラムダ軽鎖の定常ドメインのアミノ酸配列を図示する。
【図１Ｂ】ヒトＩｇＧ１（いくつかの有用なアミノ酸置換を有する）、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、本発明において特定の用途を見出すヒンジバリアントを有するＩｇＧ４の定常ドメイン、ならびにカッパおよびラムダ軽鎖の定常ドメインのアミノ酸配列を図示する。
【図２】ヒトならびにカニクイザル（カニクイザル（ｃｙｎｏ）と称される）のＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１タンパク質の配列を図示する。
【図３Ａ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＡＡ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＡＡＡ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＡＡＡＡ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｂ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＢＢ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＢＢＢ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＢＢＢＢ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｃ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＣＣ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＣＣＣ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＣＣＣＣ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｄ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＤＤ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＤＤＤ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＤＤＤＤ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｅ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＥＥ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＥＥＥ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＥＥＥＥ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｆ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＦＦ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＦＦＦ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＦＦＦＦ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｇ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＧＧ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＧＧＧ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＧＧＧＧ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｈ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＨＨ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＨＨＨ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＨＨＨＨ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｉ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＩＩ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＩＩＩ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＩＩＩＩ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｊ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＪＪ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＪＪＪ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＪＪＪＪ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｋ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＫＫ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＫＫＫ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＫＫＫＫ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｌ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＬＬ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＬＬＬ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＬＬＬＬ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｍ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＭＭ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＭＭＭ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＭＭＭＭ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｎ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＮＮ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＮＮＮ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＮＮＮＮ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｏ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＯＯ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＯＯＯ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＯＯＯＯ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｐ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＰＰ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＰＰＰ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＰＰＰＰ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｑ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＱＱ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＱＱＱ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＱＱＱＱ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｒ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＲＲ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＲＲＲ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＲＲＲＲ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｓ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＳＳ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＳＳＳ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＳＳＳＳ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｔ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＴＴ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＴＴＴ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｕ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＵＵ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＵＵＵ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｖ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＶＶ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＶＶＶ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｗ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＷＷ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＷＷＷ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｘ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＸＸ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＸＸＸ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｙ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＹＹ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＹＹＹ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３Ｚ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＺＺ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図３ＺＺＺ】ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの相互作用を遮断する４つの抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９、ならびに他の多数の抗ＴＩＧＩＴ抗体の配列を図示する。
【図４Ａ】ヒト（Ａ）、カニクイザル（Ｂ）、およびマウス（Ｃ）のＴＩＧＩＴ過剰発現Ｅｘｐｉ２９３  ＨＥＫ細胞と結合する抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９のＦＡＣＳによるＫＤの結果を示す。
【図４Ｂ】ヒト（Ａ）、カニクイザル（Ｂ）、およびマウス（Ｃ）のＴＩＧＩＴ過剰発現Ｅｘｐｉ２９３  ＨＥＫ細胞と結合する抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９のＦＡＣＳによるＫＤの結果を示す。
【図４Ｃ】ヒト（Ａ）、カニクイザル（Ｂ）、およびマウス（Ｃ）のＴＩＧＩＴ過剰発現Ｅｘｐｉ２９３  ＨＥＫ細胞と結合する抗ＴＩＧＩＴ抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９のＦＡＣＳによるＫＤの結果を示す。
【図５Ａ】抗ＰＶＲＩＧ抗体であるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の２つの配列を図示する。他のＰＶＲＩＧ抗体を図６３に提供した。
【図５Ｂ】抗ＰＶＲＩＧ抗体であるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の２つの配列を図示する。他のＰＶＲＩＧ抗体を図６３に提供した。
【図５Ｃ】抗ＰＶＲＩＧ抗体であるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の２つの配列を図示する。他のＰＶＲＩＧ抗体を図６３に提供した。
【図５Ｄ】抗ＰＶＲＩＧ抗体であるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の２つの配列を図示する。他のＰＶＲＩＧ抗体を図６３に提供した。
【図５Ｅ】抗ＰＶＲＩＧ抗体であるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の２つの配列を図示する。他のＰＶＲＩＧ抗体を図６３に提供した。
【図５Ｆ】抗ＰＶＲＩＧ抗体であるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の２つの配列を図示する。他のＰＶＲＩＧ抗体を図６３に提供した。
【図６】フローサイトメトリーによるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）とのＰＶＲＩＧの結合を示す。（Ａ）ＰＶＲＩＧ過剰発現ＨＥＫ２９３細胞との結合。ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ヒトおよびカニクイザルのＰＶＲＩＧ過剰発現ＨＥＫ２９３細胞と結合するが、マウスのＰＶＲＩＧ過剰発現または親ＨＥＫ２９３細胞とは結合しない。（Ｂ）Ｊｕｒｋａｔ細胞とのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の結合。特異的な結合を、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）に対して観察したが、重要でないアイソタイプ対照抗体に対して観察していない。細胞上に発現された標的と結合するＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の解離定数（ＫＤ）を表に列挙した。
【図７Ａ】２つの抗ＰＤ−１抗体の配列を図示する。
【図７Ｂ】２つの抗ＰＤ−１抗体の配列を図示する。
【図７Ｃ】２つの抗ＰＤ−１抗体の配列を図示する。
【図７Ｄ】２つの抗ＰＤ−１抗体の配列を図示する。
【図７Ｅ】２つの抗ＰＤ−１抗体の配列を図示する。
【図７Ｆ】２つの抗ＰＤ−１抗体の配列を図示する。
【図８】実施例１の実験において記載したように、ＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ１の発現を示す。（Ａ）四量体が染色されたＣＭＶ−ＣＴＬの検出のためのゲーティングの手法。３ドナーにおけるゲーティングの段階および四量体陽性細胞を示す。リンパ球を、ＦＳ／ＳＳ象限（左上）、続いてシングレットの選択、続いてＣＤ１４−ＣＤ１９−ＣＤ５６−細胞の除去、続いてＣＤ３＋ＣＤ８＋陽性細胞においてゲーティングした。ＣＤ３＋ＣＤ８＋陽性集団内で、各四量体と結合する細胞の割合を個々のドナーにおいて決定した。ＨＬＡ−Ａ＊０２：０１ＣＭＶ四量体を使用した染色結果を示した。（Ｂ）３ドナーから拡大されたＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１の発現を示した。
【図９】実施例１の実験において記載したように、ＣＤ８＋ＣＭＶ＋Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１発現の動態を示す。（Ａ）ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＣＭＶｐｐ６５ペプチドを用いた０、７２、１４４、２１６、および２８８時間の刺激後のｐｐ６５四量体陽性ＣＤ８Ｔ細胞の割合を示した。刺激後の異なる時点でのＣＭＶｐｐ６５応答性ＣＤ８Ｔ細胞上での（Ｂ）ＴＩＧＩＴ、（Ｃ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、（Ｄ）ＰＤ−１発現。（ｎ＝３）
【図１０】実施例１の実験において記載したように、フローサイトメトリーにより評価したＣｏｌｏ２０５およびＰａｎｃ．０４．０５細胞上のＰＶＲＬ２、ＰＶＲ、ＰＤＬ１、およびＨＬＡ−Ａ２の発現を示す。右上隅の数字は、アイソタイプ対照抗体と比較した、腫瘍細胞株上で発現されるリガンド（ＰＶＲＬ２、ＰＶＲ、ＰＤＬ１）またはＨＬＡ−Ａ２の割合を示す。
【図１１Ａ】実施例１の実験において記載したように、がん細胞株との共培養におけるＣＭＶｐｐ６５応答性ＣＤ８Ｔ細胞上での阻害性受容体遮断の効果を示す。２ドナー（ドナー４およびドナー１５６）のＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞を、１０ｕｇ／ｍｌのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＤ−１、またはアイソタイプ対照のいずれか単独または組み合わせの存在下で、０．０３ｕｇ／ｍｌのＣＭＶｐｐ６５ペプチドを負荷したＰａｎｃ．０４．０５またはＣｏｌｏ２０５と２４時間共培養した。（Ａ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、または抗ＰＤ１抗体を、単独で、二重併用で、または三重併用で試験した。（Ｂ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＴＩＧＩＴ抗体を、単独または併用で試験した。（Ｃ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。（Ｄ）抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。馴化された培地をサイトカイン分泌についてアッセイした。棒グラフはＩＦＮ−γの平均＋標準偏差を示し、各点は技術的な複製を表す。データは、ｎ＞２の実験を表示する。
【図１１Ｂ】実施例１の実験において記載したように、がん細胞株との共培養におけるＣＭＶｐｐ６５応答性ＣＤ８Ｔ細胞上での阻害性受容体遮断の効果を示す。２ドナー（ドナー４およびドナー１５６）のＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞を、１０ｕｇ／ｍｌのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＤ−１、またはアイソタイプ対照のいずれか単独または組み合わせの存在下で、０．０３ｕｇ／ｍｌのＣＭＶｐｐ６５ペプチドを負荷したＰａｎｃ．０４．０５またはＣｏｌｏ２０５と２４時間共培養した。（Ａ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、または抗ＰＤ１抗体を、単独で、二重併用で、または三重併用で試験した。（Ｂ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＴＩＧＩＴ抗体を、単独または併用で試験した。（Ｃ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。（Ｄ）抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。馴化された培地をサイトカイン分泌についてアッセイした。棒グラフはＩＦＮ−γの平均＋標準偏差を示し、各点は技術的な複製を表す。データは、ｎ＞２の実験を表示する。
【図１１Ｃ】実施例１の実験において記載したように、がん細胞株との共培養におけるＣＭＶｐｐ６５応答性ＣＤ８Ｔ細胞上での阻害性受容体遮断の効果を示す。２ドナー（ドナー４およびドナー１５６）のＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞を、１０ｕｇ／ｍｌのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＤ−１、またはアイソタイプ対照のいずれか単独または組み合わせの存在下で、０．０３ｕｇ／ｍｌのＣＭＶｐｐ６５ペプチドを負荷したＰａｎｃ．０４．０５またはＣｏｌｏ２０５と２４時間共培養した。（Ａ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、または抗ＰＤ１抗体を、単独で、二重併用で、または三重併用で試験した。（Ｂ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＴＩＧＩＴ抗体を、単独または併用で試験した。（Ｃ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。（Ｄ）抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。馴化された培地をサイトカイン分泌についてアッセイした。棒グラフはＩＦＮ−γの平均＋標準偏差を示し、各点は技術的な複製を表す。データは、ｎ＞２の実験を表示する。
【図１１Ｄ】実施例１の実験において記載したように、がん細胞株との共培養におけるＣＭＶｐｐ６５応答性ＣＤ８Ｔ細胞上での阻害性受容体遮断の効果を示す。２ドナー（ドナー４およびドナー１５６）のＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞を、１０ｕｇ／ｍｌのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＤ−１、またはアイソタイプ対照のいずれか単独または組み合わせの存在下で、０．０３ｕｇ／ｍｌのＣＭＶｐｐ６５ペプチドを負荷したＰａｎｃ．０４．０５またはＣｏｌｏ２０５と２４時間共培養した。（Ａ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、または抗ＰＤ１抗体を、単独で、二重併用で、または三重併用で試験した。（Ｂ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＴＩＧＩＴ抗体を、単独または併用で試験した。（Ｃ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。（Ｄ）抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。馴化された培地をサイトカイン分泌についてアッセイした。棒グラフはＩＦＮ−γの平均＋標準偏差を示し、各点は技術的な複製を表す。データは、ｎ＞２の実験を表示する。
【図１１Ｅ】実施例１の実験において記載したように、がん細胞株との共培養におけるＣＭＶｐｐ６５応答性ＣＤ８Ｔ細胞上での阻害性受容体遮断の効果を示す。２ドナー（ドナー４およびドナー１５６）のＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞を、１０ｕｇ／ｍｌのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＤ−１、またはアイソタイプ対照のいずれか単独または組み合わせの存在下で、０．０３ｕｇ／ｍｌのＣＭＶｐｐ６５ペプチドを負荷したＰａｎｃ．０４．０５またはＣｏｌｏ２０５と２４時間共培養した。（Ａ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、または抗ＰＤ１抗体を、単独で、二重併用で、または三重併用で試験した。（Ｂ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＴＩＧＩＴ抗体を、単独または併用で試験した。（Ｃ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。（Ｄ）抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。馴化された培地をサイトカイン分泌についてアッセイした。棒グラフはＩＦＮ−γの平均＋標準偏差を示し、各点は技術的な複製を表す。データは、ｎ＞２の実験を表示する。
【図１１Ｆ】実施例１の実験において記載したように、がん細胞株との共培養におけるＣＭＶｐｐ６５応答性ＣＤ８Ｔ細胞上での阻害性受容体遮断の効果を示す。２ドナー（ドナー４およびドナー１５６）のＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞を、１０ｕｇ／ｍｌのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＤ−１、またはアイソタイプ対照のいずれか単独または組み合わせの存在下で、０．０３ｕｇ／ｍｌのＣＭＶｐｐ６５ペプチドを負荷したＰａｎｃ．０４．０５またはＣｏｌｏ２０５と２４時間共培養した。（Ａ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、または抗ＰＤ１抗体を、単独で、二重併用で、または三重併用で試験した。（Ｂ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＴＩＧＩＴ抗体を、単独または併用で試験した。（Ｃ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。（Ｄ）抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＤ１抗体は、単独または併用で試験した。馴化された培地をサイトカイン分泌についてアッセイした。棒グラフはＩＦＮ−γの平均＋標準偏差を示し、各点は技術的な複製を表す。データは、ｎ＞２の実験を表示する。
【図１２】実施例２の実験において記載したように、解離した腫瘍からの細胞上でのＰＶＲＩＧの発現を示す。（Ａ）試料を病理学的な報告により定義される腫瘍の種類に基づいてグループ化した。各試料について、ＰＶＲＩＧの発現は、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４−ＣＤ８−Ｔ細胞、およびＮＫ細胞上で示された。列内の各点は、個々の試料を表す。ＭＦＩｒ値が１を上回る試料は、ＰＶＲＩＧの発現を検出したことを示す。中央値を中央線によって図示し、上位および下位の四分位数を中央線の上下の灰色の区域によって図示した。（Ｂ）検査した全ての腫瘍試料にわたって、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４−ＣＤ８−Ｔ細胞、およびＮＫ細胞上でのＰＶＲＩＧの発現を示した。中央値を中央線によって図示し、上位および下位の四分位数を中央線の上下の明るい灰色および暗い灰色の区域によって図示した。ウィスカは四分位間の範囲の１．５倍を図示する。（Ｃ）アイソタイプ対照（赤色）と比較したＰＶＲＩＧ（青色）の代表的なＦＡＣＳヒストグラムは、肺および腎臓腫瘍から単離された４つの細胞サブセットについて示す。
【図１３】実施例２の実験において記載したように、解離した子宮内膜の腫瘍からのＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞上でのＰＤ１、ＴＩＧＩＴ、およびＰＶＲＩＧ発現の相関分析を示す。各子宮内膜の試料について、ＭＦＩｒをＣＤ４およびＣＤ８  Ｔ細胞上のＰＶＲＩＧ、ＰＤ１、およびＴＩＧＩＴに対して計算した。スピアマンの相関分析を実行し、ｒ２およびｐ値を報告した。
【図１４】実施例２の実験において記載したように、解離した肺および腎臓がんの試料からのＣＤ８＋Ｔ細胞上のＰＤ１、ＴＩＧＩＴ、およびＰＶＲＩＧ発現の共発現の分析を示す。
【図１５】実施例２の実験において記載したように、適合されるＮＡＴを有する解離した腫瘍からのＴ細胞上のＰＶＲＩＧ発現の比較を示す。（Ａ）結腸／胃／直腸、子宮内膜／子宮、腎臓、肺、および卵巣の腫瘍からの適合される腫瘍および正常な隣接組織を、ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧ発現について評価した。各行は、適合されるドナーを表す。対合のスチューデントｔ検定を、ＮＡＴ対ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞上でＰＶＲＩＧを発現する腫瘍を比較する全ての試料で実行した。（Ｂ）ＰＶＲＩＧの倍率変化（ＮＡＴ対腫瘍における）を、ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞のＰＤ１倍率変化に対してプロット化した。スピアマンの相関分析を行い、ｒ値およびｐ値を示した。
【図１６】実施例２の実験において記載したように、解離した腫瘍試料の全てからの免疫および非免疫サブセット上でのＰＶＲＬ２の発現を示した。腫瘍由来の様々な細胞サブセット上でのＰＶＲＬ２の発現を示した。１を上回るＭＦＩｒ値は、ＰＶＲＬ２の発現を検出したことを示す。中央値を中央線によって図示し、上位および下位の四分位数を中央線の上下の明るい灰色および暗い灰色の区域によって図示した。ウィスカは四分位間の範囲の１．５倍を図示する。
【図１７】実施例２の実験において記載したように、解離した腫瘍からの非免疫サブセット上でのＰＶＲＬ２の発現を示す。試料を病理学的な報告により定義される腫瘍の種類に基づいてグループ化した。各試料について、ＰＶＲＬ２の発現は、ＣＤ４５非免疫細胞上で示される。各点は、個々の試料を表す。中央値を中央線によって図示し、上位および下位の四分位数を中央線の上下の灰色の区域によって図示した。
【図１８】実施例２の実験において記載したように、解離した腫瘍からの骨髄細胞サブセット上でのＰＶＲＬ２の発現を示す。試料を病理学的な報告により定義される腫瘍の種類に基づいてグループ化した。各試料について、ＰＶＲＬ２の発現は、単球、ｍＤＣ、およびｐＤＣ集団を含む骨髄細胞上で示される。各点は、個々の試料を表す。中央値を中央線によって図示し、上位および下位の四分位数を中央線の上下の灰色の区域によって図示した。
【図１９】実施例２の実験において記載したように、解離した腫瘍および適合されるＮＡＴからの単球およびＣＤ４５腫瘍細胞上でのＰＶＲＬ２発現の比較を示す。（Ａ）結腸／胃／直腸、子宮内膜／子宮、腎臓、肺、および卵巣の腫瘍からの適合される腫瘍および正常な隣接組織を、ＣＤ４５−細胞上および単球上のＰＶＲＬ２発現について評価した。各行は、適合されるドナーを表す。対合されるスチューデントｔ検定を、ＮＡＴ対ＣＤ４５細胞上および単球細胞上でＰＶＲＬ２を発現する腫瘍を比較する全ての試料で実行した。（Ｂ）ＰＶＲＬ２の倍率変化（ＮＡＴ対腫瘍における）を、ＣＤ４５細胞および単球のＰＤ−Ｌ１倍率変化に対してプロット化した。スピアマンの相関分析を行い、ｒ値およびｐ値を示した。
【図２０】実施例２の実験において記載したように、腫瘍組織における単球およびＣＤ４５細胞上のＰＶＲＬ２とＴ細胞上のＰＶＲＩＧの共発現を示す。同試料から、ＣＤ８Ｔ細胞上のＰＶＲＩＧ、および単球またはＣＤ４５−細胞上のＰＶＲＬ２の発現をプロット化した。腫瘍の種類をグループ化し、各点は個々の腫瘍を表す。参照線を２のＭＦＩｒ値で引いた。
【図２１Ａ】実施例３の実験において記載したように、結腸、皮膚、および乳がんにおけるＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現を示す。
【図２１Ｂ】実施例３の実験において記載したように、結腸、皮膚、および乳がんにおけるＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現を示す。
【図２２】実施例３の実験において記載したように、ＰＤ−Ｌ１陰性およびＰＤ−Ｌ１陽性の腫瘍におけるＰＶＲＬ２の発現を示す。ＰＤ−Ｌ１染色に基づいて、腫瘍をＰＤ−Ｌ１陰性（各腫瘍に対する重複コアのそれぞれにおいてＰＤ−Ｌ１の染色を観察していない）またはＰＤ−Ｌ１陽性（各腫瘍に対する重複コアの両方において陽性染色を観察した）として分類した。Ａ）ＰＶＲＬ２の発現を分析し、がん種ごとに示した。Ｂ）ＰＤ−Ｌ１陰性の腫瘍のうち、各がん種に対するＰＶＲＬ２発現試料（ＰＶＲＬ２部分陽性またはそれ以上／合計試料数）の数を示した。
【図２３】実施例３の実験において記載したように、腫瘍の浸潤前部でのＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現を示す。Ａ．この腫瘍試料において、ＰＶＲＬ２は、青色および赤色の線で示したように、浸潤前部での免疫細胞および腫瘍細胞の両方に発現した。Ｂ）この腫瘍試料において、ＰＤ−Ｌ１は免疫区画内で発現した。
【図２４】実施例４の実験において記載したように、ＣＴ２６腫瘍モデルにおける単一、二重、三重併用での抗体治療の抗腫瘍応答を示す。１０〜１５匹のＢａｌｂ／ｃマウスの群に、５×１０５個のＣＴ２６細胞を皮下に注入した。マウスは、指定された抗体の組み合わせを注入した後７日目から開始して、週に２回、３週間治療した。Ａ）陽性対照群（抗ＰＤＬ−１＋抗ＣＴＬＡ−４抗体）を含む、全ての試験群の腫瘍体積を週２回測定した。指定された群と比較した三重併用群のＴＧＩおよびｐ値を表において要約した。Ｂ）割り当てられた群の生存集団。Ｃ）スパイダープロットは治療群にわたる個体の応答を示し、同時にＰＲは腫瘍サイズが１０００ｍｍ３を超えない部分的なレスポンダを示す。
【図２５】実施例２および３の実験において記載したように、様々なヒト腫瘍におけるＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２、ならびにＰＤ−Ｌ１の発現プロファイルを示す。
【図２６】実施例４の実験において記載したように、同系腫瘍の増殖を縮小するためのＴＩＧＩＴ−／−マウスにおける抗ＰＶＲＩＧ抗体、または野生型Ｂａｌｂ／ｃマウスにおける抗ＰＶＲＩＧ抗体と抗ＰＤ−１抗体との組み合わせの使用に関する生体内でのデータを示す。
【図２７】ＰＶＲＩＧは、ヒトがんからの細胞傷害性リンパ球サブセット上で最も高度に発現した。Ａ）５〜８つの健康なドナーＰＢＭＣからの白血球細胞サブセット上でのＰＶＲＩＧの発現を示した。ＰＶＲＩＧ発現をアイソタイプ対照ＭＦＩに対するＰＶＲＩＧ  ＭＦＩの比率として定義した。Ｂ）５つの健康なドナーＰＢＭＣからのＣＤ８  Ｔ細胞サブセットと比較した末梢血Ｔｒｅｇ上でのＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ９６、およびＰＤ−１の発現が示される。Ｃ）３つの健康なドナーからのＣＭＶ  ｐｐ６５特異的Ｔ細胞を、ｐｐ６５（４９５〜５０３）ペプチド、ＩＬ−２およびＩＬ−７で最大７日間、生体外で増殖させた。ＨＬＡ−Ａ２／ｐｐ６５（４９５〜５０３）四量体陽性細胞上でのＴＩＧＩＴ（青色）およびＰＶＲＩＧ（黒色）の発現を示した。Ｄ）ヒトＴ細胞を同種ＤＣと共に培養し、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧの発現は、活性化後０、１、２、および７日目にＣＤ４＋Ｔ細胞上に示される。Ｅ）代表的なＦＡＣＳプロットは、代表的な肺および腎臓がんからのＴＩＬ（ＣＤ４  Ｔ細胞、ＣＤ８  Ｔ細胞、およびＮＫ細胞）上のアイソタイプ対照（赤色）と比較したＰＶＲＩＧ（青色）の発現を示す。Ｆ）肺がん試料由来のＣＤ４およびＣＤ８  ＴＩＬ上でのＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１の共発現を示した。Ｇ）様々ながん種の解離したヒト腫瘍由来のＣＤ８＋およびＣＤ４＋ＴＩＬ上でのＰＶＲＩＧの発現を示した。各点は、個々の患者からの別々の腫瘍を表す。Ｈ）子宮内膜がん、腎臓がん、および肺腫瘍からのＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１についてＣＤ８  ＴＩＬ対Ｔｒｅｇ  ＴＩＬ上での相対的発現を評価した。各腫瘍について、ＣＤ８  ＴＩＬ上での発現倍率をＴｒｅｇ  ＴＩＬ上での発現倍率に対して正規化し、プロット化した。Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｇ、およびＨについて、平均値＋ＳＥＭを誤差バーで示した。
【図２８Ａ】ＰＶＲＬ２発現は、腫瘍の微小環境で増強した。Ａ）ＰＶＲＬ２の発現は、肺、卵巣／子宮内膜、乳房、結腸、および腎臓の腫瘍上でＩＨＣによって評価した。各腫瘍について、２つのコアを２人の独立した観測者によって評価した。各デスクリプタについて代表的な染色を図Ｂ）に示す。間質における腫瘍細胞上および免疫細胞内でＰＶＲＬ２発現を示す代表的な黒色腫腫瘍を示す。Ｃ）解離した腫瘍からのＰＶＲＬ２発現を、ＣＤ４５−、ＣＤ１４＋ＴＡＭ、およびＣＤ１４−ＣＤ３３高ｍＤＣ細胞サブセット上でＦＡＣＳによって調査した。平均値±ＳＥＭを各がん種に対して示した。Ｄ）ＩｇＧ（赤色）と比較したＰＶＲＬ２発現（青色）の代表的なＦＡＣＳプロットを、肺がんについて示した。Ｅ）ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２発現の両方を評価することができた腫瘍試料について、ＣＤ８Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧ発現を、各腫瘍ついてＣＤ１４＋ＴＡＭ上でのＰＶＲＬ２発現に対してプロット化した。各点は、個々の腫瘍試料を表す。赤色の線は、ＩｇＧと比較したＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２の２倍の発現を表す。
【図２８Ｂ】ＰＶＲＬ２発現は、腫瘍の微小環境で増強した。Ａ）ＰＶＲＬ２の発現は、肺、卵巣／子宮内膜、乳房、結腸、および腎臓の腫瘍上でＩＨＣによって評価した。各腫瘍について、２つのコアを２人の独立した観測者によって評価した。各デスクリプタについて代表的な染色を図Ｂ）に示す。間質における腫瘍細胞上および免疫細胞内でＰＶＲＬ２発現を示す代表的な黒色腫腫瘍を示す。Ｃ）解離した腫瘍からのＰＶＲＬ２発現を、ＣＤ４５−、ＣＤ１４＋ＴＡＭ、およびＣＤ１４−ＣＤ３３高ｍＤＣ細胞サブセット上でＦＡＣＳによって調査した。平均値±ＳＥＭを各がん種に対して示した。Ｄ）ＩｇＧ（赤色）と比較したＰＶＲＬ２発現（青色）の代表的なＦＡＣＳプロットを、肺がんについて示した。Ｅ）ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２発現の両方を評価することができた腫瘍試料について、ＣＤ８Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧ発現を、各腫瘍ついてＣＤ１４＋ＴＡＭ上でのＰＶＲＬ２発現に対してプロット化した。各点は、個々の腫瘍試料を表す。赤色の線は、ＩｇＧと比較したＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２の２倍の発現を表す。
【図２８Ｃ】ＰＶＲＬ２発現は、腫瘍の微小環境で増強した。Ａ）ＰＶＲＬ２の発現は、肺、卵巣／子宮内膜、乳房、結腸、および腎臓の腫瘍上でＩＨＣによって評価した。各腫瘍について、２つのコアを２人の独立した観測者によって評価した。各デスクリプタについて代表的な染色を図Ｂ）に示す。間質における腫瘍細胞上および免疫細胞内でＰＶＲＬ２発現を示す代表的な黒色腫腫瘍を示す。Ｃ）解離した腫瘍からのＰＶＲＬ２発現を、ＣＤ４５−、ＣＤ１４＋ＴＡＭ、およびＣＤ１４−ＣＤ３３高ｍＤＣ細胞サブセット上でＦＡＣＳによって調査した。平均値±ＳＥＭを各がん種に対して示した。Ｄ）ＩｇＧ（赤色）と比較したＰＶＲＬ２発現（青色）の代表的なＦＡＣＳプロットを、肺がんについて示した。Ｅ）ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２発現の両方を評価することができた腫瘍試料について、ＣＤ８Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧ発現を、各腫瘍ついてＣＤ１４＋ＴＡＭ上でのＰＶＲＬ２発現に対してプロット化した。各点は、個々の腫瘍試料を表す。赤色の線は、ＩｇＧと比較したＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２の２倍の発現を表す。
【図２８Ｄ】ＰＶＲＬ２発現は、腫瘍の微小環境で増強した。Ａ）ＰＶＲＬ２の発現は、肺、卵巣／子宮内膜、乳房、結腸、および腎臓の腫瘍上でＩＨＣによって評価した。各腫瘍について、２つのコアを２人の独立した観測者によって評価した。各デスクリプタについて代表的な染色を図Ｂ）に示す。間質における腫瘍細胞上および免疫細胞内でＰＶＲＬ２発現を示す代表的な黒色腫腫瘍を示す。Ｃ）解離した腫瘍からのＰＶＲＬ２発現を、ＣＤ４５−、ＣＤ１４＋ＴＡＭ、およびＣＤ１４−ＣＤ３３高ｍＤＣ細胞サブセット上でＦＡＣＳによって調査した。平均値±ＳＥＭを各がん種に対して示した。Ｄ）ＩｇＧ（赤色）と比較したＰＶＲＬ２発現（青色）の代表的なＦＡＣＳプロットを、肺がんについて示した。Ｅ）ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２発現の両方を評価することができた腫瘍試料について、ＣＤ８Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧ発現を、各腫瘍ついてＣＤ１４＋ＴＡＭ上でのＰＶＲＬ２発現に対してプロット化した。各点は、個々の腫瘍試料を表す。赤色の線は、ＩｇＧと比較したＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２の２倍の発現を表す。
【図２８Ｅ】ＰＶＲＬ２発現は、腫瘍の微小環境で増強した。Ａ）ＰＶＲＬ２の発現は、肺、卵巣／子宮内膜、乳房、結腸、および腎臓の腫瘍上でＩＨＣによって評価した。各腫瘍について、２つのコアを２人の独立した観測者によって評価した。各デスクリプタについて代表的な染色を図Ｂ）に示す。間質における腫瘍細胞上および免疫細胞内でＰＶＲＬ２発現を示す代表的な黒色腫腫瘍を示す。Ｃ）解離した腫瘍からのＰＶＲＬ２発現を、ＣＤ４５−、ＣＤ１４＋ＴＡＭ、およびＣＤ１４−ＣＤ３３高ｍＤＣ細胞サブセット上でＦＡＣＳによって調査した。平均値±ＳＥＭを各がん種に対して示した。Ｄ）ＩｇＧ（赤色）と比較したＰＶＲＬ２発現（青色）の代表的なＦＡＣＳプロットを、肺がんについて示した。Ｅ）ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２発現の両方を評価することができた腫瘍試料について、ＣＤ８Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧ発現を、各腫瘍ついてＣＤ１４＋ＴＡＭ上でのＰＶＲＬ２発現に対してプロット化した。各点は、個々の腫瘍試料を表す。赤色の線は、ＩｇＧと比較したＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２の２倍の発現を表す。
【図２８Ｆ】ＰＶＲＬ２発現は、腫瘍の微小環境で増強した。Ａ）ＰＶＲＬ２の発現は、肺、卵巣／子宮内膜、乳房、結腸、および腎臓の腫瘍上でＩＨＣによって評価した。各腫瘍について、２つのコアを２人の独立した観測者によって評価した。各デスクリプタについて代表的な染色を図Ｂ）に示す。間質における腫瘍細胞上および免疫細胞内でＰＶＲＬ２発現を示す代表的な黒色腫腫瘍を示す。Ｃ）解離した腫瘍からのＰＶＲＬ２発現を、ＣＤ４５−、ＣＤ１４＋ＴＡＭ、およびＣＤ１４−ＣＤ３３高ｍＤＣ細胞サブセット上でＦＡＣＳによって調査した。平均値±ＳＥＭを各がん種に対して示した。Ｄ）ＩｇＧ（赤色）と比較したＰＶＲＬ２発現（青色）の代表的なＦＡＣＳプロットを、肺がんについて示した。Ｅ）ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２発現の両方を評価することができた腫瘍試料について、ＣＤ８Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧ発現を、各腫瘍ついてＣＤ１４＋ＴＡＭ上でのＰＶＲＬ２発現に対してプロット化した。各点は、個々の腫瘍試料を表す。赤色の線は、ＩｇＧと比較したＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２の２倍の発現を表す。
【図２９】腫瘍細胞上でのＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の個々の制御。Ａ）ＰＤ−Ｌ１およびＰＶＲＬ２の発現を、連続切片に対するＩＨＣにより評価した。ＰＤ−Ｌ１陰性（左）およびＰＤ−Ｌ１陽性（腫瘍）でのＰＶＲＬ２の発現を示した。ＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍は、所与の腫瘍について重複コアで染色が観察されないとして定義した。ＰＤ−Ｌ１陽性染色は、所与の腫瘍の重複コアの両方で少なくとも部分的に陽性として定義した。ＰＤ−Ｌ１陽性およびＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍からのＰＶＲＬ２陽性腫瘍の数を表に示す（陽性／合計）。Ｂ、Ｃ）ＰＶＲＬ２＋ＰＤ−Ｌ１−子宮内膜（Ｂ）腫瘍およびＰＶＲＬ２＋ＰＤ−Ｌ１−肺（Ｃ）腫瘍の代表的な発現。Ｄ）未成熟ＢＭ−ＤＣを示される刺激物質と共に培養し、培養２日目にＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、ＰＤ−Ｌ１の発現をＦＡＣＳによって評価した。各条件について、発現を培地のみの対照条件に対して正規化した。Ｅ）ＩＦＮ−γまたは培地単独で処理したＨＴ−２９細胞上でのＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−Ｌ１の発現を示す。ＰＤ−Ｌ１またはＰＶＲＬ２を青色で示し、ＩｇＧアイソタイプ対照染色を赤色で示した。
【図３０】ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、Ｔ細胞活性化を増強する高親和性抗体である。Ａ）ＦＡＣＳによるＨＥＫ２９３  ＰＶＲＩＧまたはＨＥＫ２９３親細胞とのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＩｇＧアイソタイプ対照の結合を示した。ＨＥＫ２９３  ｈＰＶＲＩＧ、ＨＥＫ２９３  ｃＰＶＲＩＧ、およびＪｕｒｋａｔ細胞とのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の結合についてのＦＡＣＳによるＫＤ値を示した。Ｂ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＰＶＲＩＧを異所的に発現するＨＥＫ２９３細胞とのＰＶＲＬ２  Ｆｃの結合を妨害する。３連値の平均値±標準偏差を示した。Ｃ）ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＰＶＲＬ２を内因性で発現するＨＥＫ２９３細胞とのＰＶＲＩＧ  Ｆｃの結合を遮断する。Ｄ）ヒトＣＤ４Ｔ細胞を、１０μｇ／ｍｌの抗ＰＶＲＩＧ抗体およびヒトＩｇＧアイソタイプ対照抗体の存在下で、細胞表面結合抗ＣＤ３抗体およびｈＰＶＲＬ２を発現するａＡＰＣ  ＣＨＯ細胞と共培養した。１１の異なるドナーから単離されたＣＤ４Ｔ細胞の増殖に対する抗ＰＶＲＩＧ抗体の効果を示した。バーは平均±ＳＥＭを図示する。Ｅ）ｇｐ１００特異的Ｔ細胞株（ＴＩＬ−２０９、ＴＩＬ−４６３）を、１０μｇ／ｍｌの抗ＰＶＲＩＧまたはＩｇＧアイソタイプ対照抗体と共に、ＨＬＡ−Ａ２およびＰＶＲＬ２を発現するように操作したＣＨＯ細胞と共培養した。ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−α産生は、共培養の２４時間後に試験した。３連値の平均値±標準偏差を示した。アイソタイプ対照と比較した各条件のＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−αの変化率を、各バーの上の数字で示す。Ｆ）ＭＥＬ６２４、Ｃｏｌｏ２０５、およびＰａｎｃ．０５．０４細胞上でのＩｇＧ（青色）と比較したＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−Ｌ１（赤色）の発現を示す。Ｔ細胞については、ＴＩＬ−２０９およびＴＩＬ−４６３  ｇｐ１００特異的Ｔ細胞上での、ならびにＣＭＶ  ｐｐ６５特異的Ｔ細胞上での、ＩｇＧ（青色）と比較したＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１（赤色）の発現が示される。ＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞を増殖させるために、ＰＢＭＣをｐｐ６５（４９５〜５０３）ペプチド、ＩＬ−２、およびＩＬ−７と共に１０日間培養した。ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ−１の発現は、ＨＬＡ−Ａ２／ｐｐ６５四量体陽性細胞上で示される。Ｇ）黒色腫腫瘍に由来するＴＩＬから増殖させたｇｐ１００特異的Ｔ細胞（ＴＩＬ−２０９、ＴＩＬ−４６３）を、１０μｇ／ｍｌの示される抗体の存在下でＭＥＬ６２４細胞と共培養した。馴化された培地中のＩＦＮ−γ濃度を２４時間時点で決定した。Ｈ、Ｉ）増殖させたＣＭＶｐｐ６５特異的Ｔ細胞を、Ｃｏｌｏ２０５およびＰａｎｃ．０５．０４細胞、ＣＭＶｐｐ６５ペプチド、および１０μｇ／ｍｌの示された抗体と共培養した。馴化された培地中のＩＦＮ−γ濃度を２４時間時点で決定した。Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉについて、３連実験の平均値±標準偏差を示した。アイソタイプ対照と比較した各条件のＩＦＮ−γの変化率を、各バーの上の数字で示す。
【図３１】ＰＶＲＩＧ欠損マウスはＴ細胞機能を増加させた。Ａ）精製したマウス免疫細胞サブセットからのｑＲＴ−ＰＣＲによって測定したＰＶＲＩＧのＲＮＡ発現を評価した。ハウスキーピングに対する相対的発現は、ΔＣｔ法によって決定した。Ｂ）ｐｍｅｌ  ＣＤ８＋ＴＣＲトランスジェニックＴ細胞をｇｐ１００（２５〜３３）で活性化し、ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ  ＲＮＡ転写物レベルを、示される時点でｑＲＴ−ＰＣＲによって評価した。グラフは、５つの異なる実験からの結果の平均値±ＳＥＭを示す。Ｃ）脾臓をＰＶＲＩＧ−／−およびＷＴ同腹仔から採取し、ＮＫ、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞（「休止」細胞）上でのＰＶＲＩＧの発現についてフローサイトメトリーによって分析した。さらに、ＣＤ３＋Ｔ細胞を脾細胞から単離し、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズで１１日間活性化した。活性化後、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞（「活性化」細胞）上でのＰＶＲＩＧ発現をフローサイトメトリーによって分析した。各点は、個々のマウス由来の細胞を表す。Ｄ）ＷＴおよびＰＶＲＩＧ−／由来の脾細胞をＣｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ｄｙｅ  ｅＦｌｕｏｒ４５０で標識し、対照−Ｆｃ（マウスＩｇＧ２ａ）の存在下でまたはマウスＰＶＲＬ２  Ｆｃと共に培養した。４日間の培養後、細胞分裂をフローサイトメトリーによって分析した。ある実験からの代表的なＦＡＣＳプロット（左）および３つの独立した実験のＰＶＲＬ２  Ｆｃによる阻害割合（ＰＶＲＬ２  Ｆｃ増殖％から対照−Ｆｃ増殖％を減算したものと定義する）の要約（右）を提示した。＊は、ＷＴに対するＰＶＲＩＧ−／−Ｔ細胞におけるタンパク質対照の存在下での増殖と比較した、ＰＶＲＬ２−ＦＣの存在下での増殖の変化について対合されるスチューデントｔ検定、ｐ値＜０．０５を示す。Ｅ）ｐｍｅｌ  ＰＶＲＩＧ−／−またはｐｍｅｌ  ＰＶＲＩＧ  ＷＴマウス由来のｐｍｅｌ  ＣＤ８＋Ｔ細胞を同族のペプチドおよびＩＬ２で１１日間活性化した。次いで、活性化したｐｍｅｌ  ＣＤ８＋細胞をＢ１６−Ｄｂ／ｇｐ１００細胞と共に１８時間共培養し、共培養後、ＣＤ１０７発現およびサイトカイン産生について評価した。各対合される点によって示したように４つの独立した実験を提示した。＊は、ＷＴに対するＰＶＲＩＧ−／−を比較するスチューデントｔ検定、ｐ値＜０．０５を示す。
【図３２】ＰＶＲＩＧ欠損は、腫瘍増殖の低減およびＣＤ８エフェクターＴ細胞機構の増加をもたらす。Ａ）Ｃ５７ＢＬ／６  ＷＴまたはＰＶＲＩＧ−／−マウスに、５×１０５のＭＣ３８細胞を皮下に注入した。腫瘍体積を週２回測定した。＊は、ＷＴマウスに対するＰＶＲＩＧ−／−マウス（ＡＮＯＶＡ）についてのｐ値＜０．０５を示す。Ｂ）個々の腫瘍増殖曲線を示す。実施した２つの実験のうちの代表的な１つを示す。Ｃ）Ｃ５７ＢＬ／６  ＷＴまたはＰＶＲＩＧ−／−マウスに、５×１０５のＭＣ３８細胞を皮下に注入した。注入後１４日目に、マウスを抗ＰＤ−Ｌ１で週２回、２週間治療した。腫瘍体積を週２回測定した。両方とも抗ＰＤ−Ｌ１を用いて治療したＷＴマウスに対するＰＶＲＩＧ−／−マウスについて、ｐ値＝０．０５２である。（Ｄ）個々の腫瘍増殖曲線を示す。実施した２つの実験のうちの代表的な１つを示す。（Ｅ）１８日目での４つの治療群からの腫瘍流入領域リンパ節におけるＣＤ８＋ＩＦＮ−γ＋ＴＮＦ−α＋エフェクター細胞の頻度を示す。（Ｆ）１８日目での１ｍｇの腫瘍組織あたりのＣＤ８＋ＩＦＮ−γ＋ＴＮＦ−α＋エフェクター細胞の総数を示した。（Ｇ〜Ｈ）野生型およびＰＶＲＩＧ欠損マウスごとに２つの治療群から単離した１８日目のＭＣ３８のＴＩＬからのＣＤ４５＋豊富細胞で実行されるマウス汎がん免疫コードセットパネル（Ｎａｎｏｓｔｒｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓｅａｔｔｌｅ、ＷＡ）のｎＳｏｌｖｅｒ  ３．０の高度な分析に由来する、ＴＩＬと比較した総ＴＩＬＳスコアおよび細胞傷害性Ｔ細胞スコアである。
【図３３】アンタゴニスト抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ＰＤ−１阻害剤またはＴＩＧＩＴ遺伝子欠損の組み合わせにおいて腫瘍増殖を相乗的に阻害する。Ａ）抗ｍＰＶＲＩＧ  ｍＡｂまたはＩｇＧアイソタイプ対照抗体の段階希釈液で予め培養したｍＰＶＲＩＧ  ＨＥＫ２９３操作細胞とのｍＰＶＲＬ２  Ｆｃ融合タンパク質の結合を示した。Ｂ）ＢＡＬＢ／ｃマウスに、５×１０５個のＣＴ２６細胞を皮下に注入した。注入後１４日目にマウスを屠殺し、脾臓、流入領域リンパ節および腫瘍を採取した。ＣＤ３＋ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ３−ＣＤ４９ｂ＋ＮＫ細胞、ＣＤ１１ｂ＋Ｇｒ−１＋骨髄由来サプレッサ細胞（ＭＤＳＣ）およびＣＤ１１ｂ＋Ｆ４／８０＋マクロファージ上でのＰＶＲＩＧの発現について、細胞をフローサイトメトリーによって分析した。Ｃ、Ｄ）ＢＡＬＢ／ｃマウスに、５×１０５のＣＴ２６細胞を皮下に注入した。注入後７日目に、マウスを抗ＰＤ−Ｌ１および／または抗ＰＶＲＩＧ抗体で週２回、３週間治療した（矢印は抗体処置を示す）。Ｃ）腫瘍体積を示した。＊＊＊は、抗ＰＤ−Ｌ１＋ａＰＶＲＩＧ治療群と比較した、抗ＰＤ−Ｌ１＋ラットＩｇＧ２ｂについてのｐ値＜０．００１（ＡＮＯＶＡ）を示す。矢印は、抗体が投与された時期を示す。Ｄ．完全なレスポンダのマウスの生存分析。＊は、抗ＰＤ−Ｌ１＋抗ＰＶＲＩＧ治療群と比較した、抗ＰＤ−Ｌ１＋ラットＩｇＧ２ｂについてのｐ値＜０．０５（ログランク検定）を示す。３つの研究のうちの１つの代表的な研究が示される。Ｅ．Ｃ５７ＢＬ／６またはＴＩＧＩＴ−／−マウスに、１×１０５のＢ１６／Ｄｂ−ｈｍｇｐ１００細胞を皮下に注入した。注入当日（０日目）から開始して、マウスを指定のｍＡｂで週２回、３週間にわたって治療した。腫瘍体積を週２回測定し、平均値±ＳＥＭを示す。対照ＷＴ＋ｍＩｇＧ１アイソタイプ対照と比較した、示される日に測定した腫瘍増殖阻害。＊＊＊は、ＷＴ＋ｍＩｇＧ１アイソタイプ対照と比較した、ＴＩＧＩＴ−／−＋ａＰＶＲＩＧについてのｐ値＜０．００１を示す。矢印は、抗体が投与された時期を示す。Ｆ．各マウスについて個々の腫瘍増殖曲線を示す。実施した２つの実験のうちの代表的な１つを示す。
【図３４】ＰＶＲＩＧが、ヒトがんにおけるＴＩＬのＴ細胞およびＮＫ細胞上で発現される。Ａ）健康なドナーＰＢＭＣからのＣＤ４Ｔ細胞サブセット上でのＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ９６、およびＰＤ−１の発現を示した。平均値±ＳＥＭを示した。Ｂ）ヒトＴ細胞を同種異系ＰＢＭＣと共培養し、ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧタンパク質の発現を示す（上図）。Ｃ）腫瘍を解離し、単一細胞を抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８で活性化した。ＩｇＧアイソタイプ対照（赤色）と比較したＰＶＲＩＧ（青色）の発現を活性化後０日目（生体外で直接）および５日目に評価した。Ｄ）解離したヒト腫瘍からのＮＫ細胞上でのＰＶＲＩＧの発現を示した。各点は、個々の患者からの別々の腫瘍を表す。平均値±９５％信頼区間を示す。Ｄ）解離した腫瘍細胞を抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８ビーズで５日間活性化した。活性化後０日目に生体外で直接、および５日目の、ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞上でのＩｇＧ対照（赤色）と比較したＰＶＲＩＧ（青色）の発現を、２つの解離した腫瘍試料について示す。Ｅ）ＰＶＲＩＧの発現を、解離した腫瘍から、および解離したドナーに一致する正常な隣接組織からのＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞について評価した。各線は、個々の患者から得られた一致した組織を表す。対合されるスチューデントｔ検定を実施した。Ｆ）腫瘍からのＣＤ４およびＣＤ８  Ｔ細胞上での、ＩｇＧアイソタイプ対照と比較したＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１の発現倍率の規模の相関分析を示す。各点は、個々の腫瘍試料を表す。スピアマンの相関係数およびｐ値が示される。
【図３５】ＰＶＲＬ２の発現は大腸がん、皮膚がん、乳がんにおいて増強される。Ａ）顕微鏡写真は、ｐＨ９での抗原回復後の、陰性細胞ＣＨＯ−Ｓ（左）と比較した陽性細胞ＣＨＯ−ＳヒトＰＶＲＬ２（右）のＦＦＰＥ切片とのＳｉｇｍａ抗ヒトＰＶＲＬ２抗体の結合を示す。Ｂ）抗ＰＶＲＬ２抗体をＰＶＲＬ２＋（ＨＴ２９、ＭＣＦ７、ＰＣ３、ＰＡＮＣ１、ＲＴ４、ＮＣＩ−Ｈ１５７３）およびＰＶＲＬ２−（Ｊｕｒｋａｔ、ＯＰＭ２、Ｄａｕｄｉ、ＣＡ４６）細胞株のパネルに対して試験した。Ｃ〜Ｆ）肺の正常組織およびがん組織におけるＰＶＲＬ２の発現例。Ｃ）染色のない正常組織。Ｄ）部分的な陽性染色を示す肺腺がん。Ｅ）陽性染色を示す肺腺がん。Ｆ）強い陽性染色を示す肺腺がん。
【図３６】ＰＶＲＬ２は、正常な隣接組織と比較して、腫瘍におけるＴＡＭおよびＣＤ４５−細胞上で上方制御される。ドナーに適合される腫瘍および正常な隣接組織からのＣＤ４５−細胞およびＴＡＭ上でのＰＶＲＬ２の発現を示した。対合されるスチューデントｔ検定によるｐ値を示す。
【図３７】ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２は、同じ腫瘍試料中で共発現される。ＣＤ４Ｔ細胞（Ａ）およびＮＫ細胞（Ｂ）上でのＰＶＲＩＧ発現を、個々の腫瘍についてＴＡＭ上でのＰＶＲＬ２発現に対してプロット化した。
【図３８】ヒトＴ細胞に対するＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の活性。Ａ）細胞表面に結合した抗ＣＤ３およびＰＶＲＬ２を発現するＣＨＯ細胞で活性化されたＣＤ４Ｔ細胞上でのＰＶＲＩＧの発現。Ｂ）ＨＬＡ−Ａ２、Ｂ−２ｍ、およびＰＶＲＬ２の発現が、ＣＨＯ−Ｓ親細胞株および操作されたＣＨＯ−Ｓ細胞株上で示される。アイソタイプと比較した発現倍率を、数字によって示した。Ｃ）細胞表面に結合した抗ＣＤ３およびＰＶＲＬ２を異所的に発現するＣＨＯ細胞を、様々な濃度の抗ＰＶＲＩＧ抗体または関連ＩｇＧ対照の存在下で精製ＣＤ８Ｔ細胞と共培養した。増殖％を示した。各点は、３連実験値の平均を表す。Ｄ）ＨＬＡ−Ａ２／Ｂ２ｍおよびＰＶＲＬ２異所的発現ＣＨＯ細胞を、１ｕｇ／ｍｌのｇｐ１００および様々な濃度の抗ＰＶＲＩＧ抗体または関連ＩｇＧ対照の存在下で、２つのｇｐ１００特異的Ｔ細胞株（ＴＩＬ  Ｆ４、ＴＩＬ  ２０９）と共培養した。共培養３日目のＴＮＦ−α濃度は低下した。各値は、３連実験の平均を表す。
【図３９】ｍＰＶＲＩＧ結合相互作用および代用抗ｍＰＶＲＩＧ抗体の特徴付け。Ａ、Ｂ）ｍＰＶＲＬ２とのｍＰＶＲＩＧの結合を、表面プラズモン共鳴によって評価した。Ｃ）可溶性受容体Ｆｃまたは対照タンパク質を、ＥＬＩＳＡ形式において固定化したｍＰＶＲＬ２  ＨＩＳと共に用量反応で培養した。結合した受容体Ｆｃを示した。Ｄ）可溶性ＰＶＲＬ２  ＨＩＳタンパク質を、ＰＶＲＩＧ  ＦｃまたはＤＮＡＭ  Ｆｃコーティングプレートと共に用量反応で培養した。Ｅ）ｍＰＶＲＬ２  ｓｉＲＮＡ、ｍＰＶＲｓＲＮＡ、またはスクランブルｓｉＲＮＡトランスフェクションでトランスフェクトされたＢ１６−Ｆ１０細胞系へのｍＰＶＲＩＧ  Ｆｃまたは対照Ｆｃ融合タンパク質の結合を示した。Ｆ）ｍＰＶＲＩＧを過剰発現するＨＥＫ２９３細胞との抗ｍＰＶＲＩＧの結合を検査することにより、ラット抗マウスＰＶＲＩＧ  ｍＡｂの親和性の特徴付けを行った。Ｇ）アイソタイプ対照ラットＩｇＧと対比した、ｍＰＶＲＩＧを内因性で発現するＤ１０．Ｇ４．１細胞株との抗ｍＰＶＲＩＧの結合を検査することにより、ラット抗マウスＰＶＲＩＧ  ｍＡｂの親和性の特徴付けを行った。Ｈ）ｓｃｒ  ｓｉＲＮＡ（橙色のヒストグラム）と対比した、マウスＰＶＲＩＧ−ｓｉＲＮＡをトランスフェクトしたＤ１０．Ｇ４．１細胞（緑のヒストグラム）との抗ｍＰＶＲＩＧの結合。Ｉ）ＰＶＲＬ２を内因性で発現するＢ１６−Ｆ１０細胞との、抗ｍＰＶＲＩＧ抗体で予め培養したｍＰＶＲＩＧ  Ｆｃの結合。
【図４０】トランスジェニックＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴノックアウトマウスの作製。ＰＶＲＩＧ条件付きノックアウトマウスおよびＴｉｇｉｔノックアウトマウス株は、Ｏｚｇｅｎｅ  Ｐｔｙ  Ｌｔｄ（Ｂｅｎｔｌｅｙ  ＷＡ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ）によって作製された。Ａ）ＰＶＲＩＧエクソン１〜４がフロックス化された（ｆｌｏｘｅｄ）標的化構築物をＣ５７ＢＬ／６  ＥＳ細胞株、Ｂｒｕｃｅ４（Ｋｏｅｎｔｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ５：９５７−９６４，１９９３）にエレクトロポレーションした。Ｂ）Ｔｉｇｉｔエクソン１（ＡＴＧを含む）ならびにエクソン２および３のコード領域がＦＲＴ隣接ネオカセットで置換された標的化構築物をＣ５７ＢＬ／６  ＥＳ細胞株、Ｂｒｕｃｅ４にエレクトロポレーションした。相同組換えＥＳ細胞クローンをサザンハイブリダイゼーションにより特定し、ｇｏＧｅｒｍｌｉｎｅ胚盤胞に注入した（Ｋｏｅｎｔｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｇｅｎｅｓｉｓ  ５４：３２６−３３３，２０１６）。雄のキメラマウスを取得し、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雌と交配して、Ｃ５７ＢＬ／６バックグラウンド上にヘテロ接合生殖細胞系列子孫を樹立した。生殖細胞系列マウスをユビキタスＦＬＰ  Ｃ５７ＢＬ／６マウス株と交配し、ＦＲＴ隣接選択可能マーカーカセットを除去し、条件付きまたはノックアウト対立遺伝子（それぞれＰＶＲＩＧおよびＴｉｇｉｔについて）を作製した。ＰＶＲＩＧノックアウトについては、マウスをユビキタスＣｒｅ  Ｃ５７ＢＬ／６マウス株とさらに交配し、ｌｏｘＰ隣接エクソンを除去し、ノックアウト対立遺伝子を作製した。
【図４１−１】ＰＶＲＩＧノックアウトマウスは、野生型マウスと免疫表現型的に同様である。マウス（野生型コホートおよびＰＶＲＩＧノックアウトコホートにつきｎ＝５）を安楽死させてから、静脈血を抗凝固剤コーティングチューブに収集し、臓器を採取した。新しく採取した骨髄、胸腺、脾臓、皮膚および腸間膜リンパ節から単細胞を回収した。細胞を蛍光色素結合表面マーカー抗体で染色し、ＢＤ  ＬＳＲ  Ｆｏｒｔｅｓｓａフローサイトメータで取得した。パネルは、リンパ組織型にわたる骨髄細胞（Ａ）、樹状細胞（Ｂ）、Ｂ細胞（Ｃ）、Ｔ細胞（Ｄ）、ＣＤ４Ｔ細胞（Ｅ）、ＣＤ８Ｔ細胞（Ｆ）、およびＮＫ細胞（Ｇ）の同等の頻度を示す。（Ｈ〜Ｉ）全静脈血をＨｅｍａｖｅｔ  ９５０獣医血液学システムで流して、野生型およびＰＶＲＩＧ欠損マウスからの血液細胞サブセットの示差的数および頻度を比較した。
【図４１−２】ＰＶＲＩＧノックアウトマウスは、野生型マウスと免疫表現型的に同様である。マウス（野生型コホートおよびＰＶＲＩＧノックアウトコホートにつきｎ＝５）を安楽死させてから、静脈血を抗凝固剤コーティングチューブに収集し、臓器を採取した。新しく採取した骨髄、胸腺、脾臓、皮膚および腸間膜リンパ節から単細胞を回収した。細胞を蛍光色素結合表面マーカー抗体で染色し、ＢＤ  ＬＳＲ  Ｆｏｒｔｅｓｓａフローサイトメータで取得した。パネルは、リンパ組織型にわたる骨髄細胞（Ａ）、樹状細胞（Ｂ）、Ｂ細胞（Ｃ）、Ｔ細胞（Ｄ）、ＣＤ４Ｔ細胞（Ｅ）、ＣＤ８Ｔ細胞（Ｆ）、およびＮＫ細胞（Ｇ）の同等の頻度を示す。（Ｈ〜Ｉ）全静脈血をＨｅｍａｖｅｔ  ９５０獣医血液学システムで流して、野生型およびＰＶＲＩＧ欠損マウスからの血液細胞サブセットの示差的数および頻度を比較した。
【図４２】抗ＰＤ−Ｌ１を用いたＷＴと比較して、増加した抗ＰＤＬ１で処置したＰＶＲＩＧ−／−マウスのＴ細胞エフェクター機能。ＭＣ３８腫瘍をＷＴまたはＰＶＲＩＧ−／−マウスに注入し、その後抗ＰＤ−Ｌ１またはラットＩｇＧ２ｂアイソタイプ対照で治療した。１８日目に、ＣＤ４５＋腫瘍浸潤リンパ球を腫瘍から精製し、ＲＮＡを抽出し、転写物プロファイリングを実行した。いくつかのＴ細胞関連遺伝子が示され、各点は個々のマウスを表す。スチューデントｔ検定によるｐ値を示す。
【図４３】抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＶＲＩＧ抗体は、腫瘍細胞の殺傷を誘導する。ヒトＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を増殖させた生体外共培養アッセイを利用して、抗原特異的腫瘍細胞殺傷に対するベンチマーク抗ＴＩＧＩＴ抗体およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の効果を評価した。アッセイに使用したＨＬＡ−Ａ２＋標的細胞株は、Ｍｅｌ６２４（Ａ）およびＰａｎｃ０５．０４（Ｂ）であった。Ｓｙｎａｇｉｓ  ｈＩｇＧ４はアイソタイプ対照抗体である。標的細胞におけるルシフェラーゼ活性を、Ｂｉｏ−Ｇｌｏルシフェラーゼ基質を用いて測定した。代表的なデータ（ｎ≧２）は、３つの異なるドナーからのヒトＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞との１６時間の共培養後の、Ｍｅｌ６２４またはＰａｎｃ０５．０４細胞の特異的殺傷割合（平均値＋／−標準偏差）を示す。
【図４４】ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）を用いた抗ＴＩＧＩＴ抗体の用量依存的腫瘍細胞殺傷。ヒトＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を増殖させた生体外共培養アッセイを利用して、抗原特異的Ｍｅｌ６２４細胞殺傷に対する、２つの異なる抗ＴＩＧＩＴ抗体、ＢＭ２６およびＣＰＡ．９．０８６の、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせた際の効果を評価した。標的細胞におけるルシフェラーゼ活性を、Ｂｉｏ−Ｇｌｏルシフェラーゼ基質を用いて測定した。代表的なデータ（ｎ≧２）は、１つのドナーからのヒトＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞との１６時間の共培養後の、Ｍｅｌ６２４細胞の特異的殺傷割合（平均値＋／−標準偏差）を示す。
【図４５】ＣＰＡ．９．０８６のＣＤＲ配列、ＩＭＧＴおよびＫａｂａｔ付番。
【図４６】抗ＴＩＧＩＴ  ｈＩｇＧ４＋ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の組み合わせは、腫瘍細胞の殺傷を誘導する。ＣＭＶ応答性ＣＤ８＋Ｔ細胞と、Ｍｅｌ６２４  ＰＶＲ、ＰＶＲＬ２およびルシフェラーゼＯＥとを共培養して、ＣＭＶ応答性ドナー４では、１０μｇ／ｍｌの抗ＴＩＧＩＴ抗体および１０μｇ／ｍｌのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の単回投与、一方でＣＭＶ応答性ドナー１５６では、用量滴定は、０．５μｇ／ｍｌのａＴＩＧＩＴ抗体および１０μｇ／ｍｌのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）から開始する。
【図４７】抗ＴＩＧＩＴ抗体は、抗ＰＤ−１抗体と組み合わせた際にＩＦＮ−γを増強する。ヒトＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を用いた生体外での共培養アッセイを利用して、抗ＰＤ−１抗体であるペンブロリズマブと組み合わせた、抗原特異的サイトカイン分泌に対するベンチマーク抗体であるＢＭ２６およびＢＭ２９と比較した、ＣＰＡ．９．０８６の効果を評価した。アッセイに使用した標的細胞株は、ヒトＰＶＲおよびＰＤ−Ｌ１を内因性で発現するＨＬＡ−Ａ２＋膵臓腺がん細胞Ｐａｎｃ．０５．０４であった。Ｐａｎｃ．０５．０４細胞に、０．０１μｇ／ｍｌのＣＭＶ  ｐｐ６５ペプチドを３７℃で１時間パルスした。次いで、細胞を洗浄し、９６ウェル丸底組織培養処理プレートに５０，０００細胞／ウェルで播種した。抗ヒトＴＩＧＩＴ抗体またはアイソタイプ対照ｈＩｇＧ４抗体（抗Ｓｙｎａｇｉｓ）を、抗ＰＤ−１抗体（斜線付きバー）または１０μｇ／ｍｌの対照ｈＩｇＧ４アイソタイプ抗体（塗りつぶされたバー）と組み合わせて、０．１μｇ／ｍｌの濃度で追加した。単一ドナーからのヒトＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を上記のプロトコルに従って増殖した。５０，０００のヒトＣＤ８＋Ｔ細胞を各ウェルに追加した。共培養物を３７℃、５％ＣＯ２で２４時間培養した。共培養上清中のヒトＩＦＮ−γの量を、サイトメトリービーズアッセイ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用したフローサイトメトリーにより測定した。
【図４８】腫瘍におけるＰＶＲＩＧ／ＴＩＧＩＴ軸の発現プロファイリングを示す。肺および子宮内膜がんは、ＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２およびＴＩＧＩＴ−ＰＶＲ経路の両方で高い。（Ａ、Ｂ）ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ発現を、ＦＡＣＳによって解離したヒト腫瘍からのＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞上で分析した。発現倍率は、ＰＶＲＩＧまたはＴＩＧＩＴのＭＦＩをＩｇＧ対照のＭＦＩで割ることにより計算した。灰色の線＝発現が検出されない。橙色の各点は個々の腫瘍試料であり、試料の中央値は青いバーで示した。Ｃ、Ｄ）ＣＤ８＋Ｔ細胞上のＰＶＲＩＧ対ＣＤ４５−細胞上のＰＶＲＬ２、またはＣＤ８＋Ｔ細胞上のＴＩＧＩＴ対ＣＤ４５−細胞上のＰＶＲの発現を、解離した腫瘍からプロット化した。各点は、個々の腫瘍試料を表す。
【図４９−１】ＣＤ８Ｔ細胞上でのＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴの発現データを示しており、ＰＶＲＩＧ＋ＴＩＧＩＴ＋ＰＤ−１＋ＣＤ８＋ＴＩＬが高度に頻出し、プロファイルが枯渇したことを示す。Ａ）ヒトがんからのＴＩＬを、ＣＤ８  Ｔ細胞でのＰＤ１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴ発現に対して染色した。ＣＤ８＋Ｔ細胞上でのＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、またはＴＩＧＩＴの組み合わせを発現する細胞の割合を、ブールゲーティング化することによって決定した。Ｂ）肺腫瘍からのＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞上での代表的なＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴの発現を示した。Ｃ）ヒトがんからのＴＩＬを、ＣＤ８＋Ｔ細胞上での細胞表面ＰＤ１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴに対して染色し、透過処理し、ＥｏｍｅｓおよびＴ−ｂｅｔで染色した。各細胞サブセット内で、Ｅｏｍｅｓ＋Ｔ−ｂｅｔ細胞の割合を示した。対合されるスチューデントｔ検定を実行し、ｐ値を示した。Ｄ）代表的なＦＡＣＳプロットは、卵巣腫瘍および膀胱腫瘍からのＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、またはＴＩＧＩＴを発現するＣＤ８Ｔ細胞上でのＥｏｍｅｓおよびＴ−ｂｅｔ発現を示す。Ｅ）ＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴ発現に基づく細胞を発現するＥｏｍｅｓ＋Ｔ−ｂｅｔ細胞の割合を決定した。したがって、ＰＶＲＩＧ発現は、Ｔ細胞の枯渇に関連することが知られる表現型であるＥｏｍｅｓ＋Ｔ−ｂｅｔ転写因子の発現と相関する。三重陽性ＰＶＲＩＧ＋ＴＩＧＩＴ＋ＰＤ−１＋細胞はさらに、Ｅｏｍｅｓ＋Ｔ−ｂｅｔ細胞の割合が高かった。
【図４９−２】ＣＤ８Ｔ細胞上でのＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴの発現データを示しており、ＰＶＲＩＧ＋ＴＩＧＩＴ＋ＰＤ−１＋ＣＤ８＋ＴＩＬが高度に頻出し、プロファイルが枯渇したことを示す。Ａ）ヒトがんからのＴＩＬを、ＣＤ８  Ｔ細胞でのＰＤ１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴ発現に対して染色した。ＣＤ８＋Ｔ細胞上でのＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、またはＴＩＧＩＴの組み合わせを発現する細胞の割合を、ブールゲーティング化することによって決定した。Ｂ）肺腫瘍からのＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞上での代表的なＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴの発現を示した。Ｃ）ヒトがんからのＴＩＬを、ＣＤ８＋Ｔ細胞上での細胞表面ＰＤ１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴに対して染色し、透過処理し、ＥｏｍｅｓおよびＴ−ｂｅｔで染色した。各細胞サブセット内で、Ｅｏｍｅｓ＋Ｔ−ｂｅｔ細胞の割合を示した。対合されるスチューデントｔ検定を実行し、ｐ値を示した。Ｄ）代表的なＦＡＣＳプロットは、卵巣腫瘍および膀胱腫瘍からのＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、またはＴＩＧＩＴを発現するＣＤ８Ｔ細胞上でのＥｏｍｅｓおよびＴ−ｂｅｔ発現を示す。Ｅ）ＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴ発現に基づく細胞を発現するＥｏｍｅｓ＋Ｔ−ｂｅｔ細胞の割合を決定した。したがって、ＰＶＲＩＧ発現は、Ｔ細胞の枯渇に関連することが知られる表現型であるＥｏｍｅｓ＋Ｔ−ｂｅｔ転写因子の発現と相関する。三重陽性ＰＶＲＩＧ＋ＴＩＧＩＴ＋ＰＤ−１＋細胞はさらに、Ｅｏｍｅｓ＋Ｔ−ｂｅｔ細胞の割合が高かった。
【図５０】ＰＶＲＬ２はがんにおいて誘発され、ＰＤ−Ｌ１−腫瘍において発現されたことを示す。Ａ）ＰＶＲＬ２の発現は、肺、卵巣／子宮内膜、乳房、結腸、腎臓、および皮膚の腫瘍上でＩＨＣによって評価した。バーは平均値±ＳＥＭを表す。各腫瘍について、２つのコアを病理学者が評価し、腫瘍細胞上の膜染色の蔓延率および強度に基づいてスコアを付けた。各腫瘍について、２つのコアの平均スコアを示した。Ｂ）ＰＤ−Ｌ１およびＰＶＲＬ２の発現を、連続切片に対するＩＨＣにより評価した。腫瘍を組織型に基づいてグループ化し、ＰＤ−Ｌ１陰性およびＰＤ−Ｌ１陽性でのＰＶＲＬ２の発現を示す。ＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍は、所与の腫瘍の二重コアのいずれかからの腫瘍または免疫細胞上に膜染色がないとして定義した。ＰＤ−Ｌ１陽性染色は、腫瘍の少なくとも１つのコアでの膜染色として定義した。バーは、各群について平均値±ＳＥＭを表す。Ｃ）ＰＶＲＬ２＋ＰＤ−Ｌ１−類内膜がん性腫瘍およびＰＶＲＬ２＋ＰＤ−Ｌ１−肺腫瘍の代表的な発現。
【図５１】抗ＰＶＲＩＧ／ＴＩＧＩＴ／ＰＤ−１が相乗的にＴ細胞機能を増加させることを示す。（Ａ）ＣＭＶｐｐ６５  ＣＤ８Ｔ細胞はＴＩＧＩＴ／ＰＤ−１／ＰＶＲＩＧ発現について染色され、腫瘍細胞株はＰＤ−Ｌ１、ＨＬＡ−Ａ２、ＰＶＲおよびＰＶＲＬ２について染色された。代表的なＦＡＣＳヒストグラムを表示する。Ｂ）ＣＭＶｐｐ６５特異的Ｔ細胞を、Ｐａｎｃ０５０４およびＣｏｌｏ２０５細胞、１０ｕｇ／ｍｌのＣＭＶｐｐ６５ペプチドおよび示される抗体と共培養した。馴化された培地中のＩＦＮ−γ濃度を１８時間時点で決定した。棒グラフの上の割合は、アイソタイプＩｇＧを超えるＩＦＮ−γ分泌の増加％である。
【図５２】ＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２相互作用の遮断が、ＰＤ−１およびＴＩＧＩＴの発現を誘導することを示す。１〜２ドナーからのＣＭＶｐｐ６５特異的Ｔ細胞を、Ｐａｎｃ０５０４、１０ｕｇ／ｍｌのＣＭＶｐｐ６５ペプチドおよび示される抗体と１８時間共培養した。次に、細胞をＦＡＣＳのために染色し、各治療条件についての細胞のＰＤ−１、ＴＩＧＩＴ、およびＬＡＧ３の割合を示す。各受容体についての代表的なヒストグラムを示した。赤色＝アイソタイプ、青色＝標的発現。Ａ）ＴＩＧＩＴ発現は、ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）または抗ＰＤ１治療によって誘導された。（Ｂ）ＰＤ−１発現は、ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および／またはＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）によって誘導された。（Ｃ）ＬＡＧ−３の発現は、ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、または抗ＰＤ−１によって誘導されなかった。
【図５３】外科的な切除の２４時間以内に得られた腫瘍を解離し、表面に結合する抗ＣＤ３を発現するＭＥＬ６２４細胞、および１０ｕｇ／ｍｌの示された抗体と共に共培養したＣＤ３＋ＴＩＬを精製した。馴化された培地中のＩＦＮ−γ濃度を７２時間時点で決定した。ｈＩｇＧ４に対する各条件のＩＦＮ−γの変化％を示す。
【図５４】腫瘍増殖の低減をもたらすＰＶＲＩＧ抗体による遮断または欠乏。ＰＶＲＩＧ抗体による遮断または欠乏は、腫瘍増殖を阻害する。Ａ）ＢＡＬＢ／ｃマウスに、５×１０５個のＣＴ２６細胞を皮下に注入した。注入後７日目に、マウスを抗ＰＤ−Ｌ１および／または抗ＰＶＲＩＧ抗体で週２回、３週間治療した。腫瘍体積を示した。群あたりｎ＝１０のマウス。平均値＋／−ＳＥＭを示した。＊＊＊抗ＰＤ−Ｌ１＋抗ＰＶＲＩＧ治療群と比較した抗ＰＤ−Ｌ１＋ラットＩｇＧ２ｂについてのｐ値＜０．００１（反復測定によるＡＮＯＶＡ）を示す。Ｂ）Ｃ５７ＢＬ／６  ＷＴまたはＰＶＲＩＧ−／−マウスに、５×１０５のＭＣ３８細胞を皮下に注入した。群あたりｎ＝１０のマウス。平均値＋／−ＳＥＭを示した。＊ＷＴマウスに対するＰＶＲＩＧ−／−マウス（反復測定によるＡＮＯＶＡ）のｐ値＜０．０５を示す。個々の腫瘍増殖曲線をさらに示す。ｎ＝２の実験からの代表的なデータ。
【図５５】ヒト腫瘍におけるＰＶＲＩＧ／ＴＩＧＩＴ軸の発現プロファイリング。肺および子宮内膜がんは、ＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２およびＴＩＧＩＴ−ＰＶＲ経路の両方で高い。（Ａ、Ｂ）ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ発現を、ＦＡＣＳによって解離したヒト腫瘍からのＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞上で分析した。発現倍率は、ＰＶＲＩＧまたはＴＩＧＩＴのＭＦＩをＩｇＧ対照のＭＦＩで割ることにより計算した。灰色の線＝発現が検出されない。橙色の各点は個々の腫瘍試料であり、試料の中央値は青いバーで示した。Ｃ、Ｄ）ＣＤ８＋Ｔ細胞上のＰＶＲＩＧ対ＣＤ４５−細胞上のＰＶＲＬ２、またはＣＤ８＋Ｔ細胞上のＴＩＧＩＴ対ＣＤ４５−細胞上のＰＶＲの発現を、解離したヒト腫瘍からプロット化した。各点は、個々の腫瘍試料を表す。
【図５６】ＣＤ８＋ＴＩＬで最も高い％であり、最も枯渇した、ＰＶＲＩＧ＋ＴＩＧＩＴ＋ＰＤ１＋細胞。ＰＶＲＩＧ＋ＴＩＧＩＴ＋ＰＤ１＋ＣＤ８＋ＴＩＬは高度に頻出しており、枯渇した表現型を有する。Ａ）ヒトがんからのＣＤ８＋ＴＩＬは、ＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴについて染色された。ＣＤ８＋Ｔ細胞上でのＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、またはＴＩＧＩＴの組み合わせを発現するＣＤ８＋ＴＩＬの割合を、ブールゲーティング化することによって決定した。各点は、個々の腫瘍試料を表す。Ｂ）ヒトがんからのＣＤ８＋ＴＩＬを、細胞表面ＰＤ１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴに対して染色し、透過処理し、細胞内ＥｏｍｅｓおよびＴ−ｂｅｔで染色した。Ｅｏｍｅｓ＋Ｔ−ｂｅｔ−ＣＤ８＋Ｔ細胞の割合を示した。対合されるスチューデントｔ検定を実行し、ｐ値を示した。Ｃ）ＰＤ−１、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴを発現するＥｏｍｅｓ＋Ｔ−ｂｅｔ−ＣＤ８＋Ｔ細胞の割合を、複数のヒトがんにわたって測定した。
【図５７】腫瘍の種類によって異なるＰＶＲに対するＰＶＲＬ２の相対発現。ＰＶＲＬ２およびＰＶＲの相対的なＲＮＡおよびタンパク質発現は、異なるヒト腫瘍にわたる。ＴＣＧＡからのＰＶＲＬ２およびＰＶＲのＲＮＡ発現は、複数のヒト腫瘍にわたるＰＶＲに対するＰＶＲＬ２の比率としてプロット化した（左側のパネル）。ＰＶＲと比較してＰＶＲＬ２  ＲＮＡ発現が高い腫瘍には、乳房、卵巣、前立腺、子宮内膜、膀胱、膵臓、および肺が含まれる。ＣＤ４５−腫瘍細胞上でのＰＶＲに対するＰＶＲＬ２のタンパク質発現（ｇＭＦＩ）の比率は、解離したヒト腫瘍からプロット化した（右側のパネル）。各点は、個々の腫瘍試料を表す。ＰＶＲと比較してＰＶＲＬ２タンパク質発現が高い腫瘍には、卵巣、乳房、子宮内膜、肺、前立腺、口腔、および胃が含まれる。より高いＲＮＡ発現は、乳房、卵巣、子宮内膜、前立腺、肺がんを含むいくつかの腫瘍にわたり、ＰＶＲＬ２のタンパク質レベルが高いことと相関する。
【図５８】ヒト腫瘍において存在するＰＶＲＬ２＋ＰＶＲ−腫瘍細胞およびＡＰＣ。ＰＶＲＬ２＋ＰＶＲ−腫瘍細胞およびＡＰＣは、ヒト腫瘍において存在する。Ａ）ＣＤ４５−腫瘍細胞、ならびにＢ）ｃＤＣ２（ＣＤ１ｃ＋ＣＤ１４−ＨＬＡ−ＤＲ高Ｌｉｎ−ＣＤ１４１−）およびＣＤ１４＋ＴＡＭ上でのＦＡＣＳにより決定し、解離した腫瘍からのＰＶＲＬ２およびＰＶＲ発現をプロット化した。ＰＶＲＬ２＋ＰＶＲ−腫瘍細胞およびＡＰＣは、陽性プロットの割合において赤色の点として表す。ＩｇＧアイソタイプ対照（赤色）と比較したＰＶＲＬ２およびＰＶＲ発現（青色）の代表的なＦＡＣＳプロットを、卵巣および子宮内膜腫瘍について示した。
【図５９】初代ＣＤ３＋ＴＩＬでペンブロリズマブ以上の活性を有するＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）＋ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の組み合わせ。ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および／またはＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、新しく単離したヒトＴＩＬでペムブロリズマブと同等もしくはそれを超える有効性を有する。外科的な切除の２４時間以内に得られたヒト腫瘍を解離し、ＣＤ３＋ＴＩＬを精製した。単離したＣＤ３＋ＴＩＬを、表面に結合する抗ＣＤ３を発現する改変されたＭｅｌ−６２４腫瘍細胞株、および１０μｇ／ｍｌの示された抗体と共に共培養した。馴化された培地中のＩＦＮ−γ分泌を７２時間の時点で測定した。ｈＩｇＧアイソタイプ対照に関する各治療についてのＩＦＮ−γの変化率を示す。
【図６０】ＰＶＲＩＧ／ＰＶＲＬ２の遮断は、ＰＤ−１およびＴＩＧＩＴ発現を誘導する。ＰＶＲＩＧ／ＰＶＲＬ２の遮断は、ＰＤ−１およびＴＩＧＩＴ発現を誘導する。２ドナーからのＣＭＶｐｐ６５特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を、Ｐａｎｃ．０５．０４、ＣＭＶｐｐ６５ペプチド、および１０μｇ／ｍｌの示された抗体と共に１８時間共培養した。細胞を染色し、各治療後のＡ）ＴＩＧＩＴ＋、Ｂ）ＰＤ−１＋、およびＣ）ＬＡＧ３＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の割合を示す。
【図６１Ａ】向上した抗腫瘍効果を示す三重併用。Ａ）最小疾患モデルにおけるＣＴ２６腫瘍の増殖動態。１０匹の雌Ｂａｌｂ／ｃ群に、右脇腹にＣＴ２６細胞を注入した。腫瘍が所望の平均値体積（３０〜６０ｍｍ３）に達した際に、抗体のＩ．ｐ．投与を開始した。マウスを、合計６回の投与量で隔週に３回、二重または三重の組み合わせとして、１０ｍｇ／ｋｇの抗ＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１または抗ＰＶＲＩＧ  ｍＩｇＧ１、３ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＩｇＧ１、および１０ｍｇ／ｋｇの対照アイソタイプのそれぞれを用いて治療した。組み合わせにおける抗ＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１でのＴＧＩを、ＴＧＩ％＝［１−（試験物品の平均腫瘍体積を対照物品の平均腫瘍体積で割った値）＊１００］によって計算した。アスタリスク（＊＊＊、＊＊＊＊）は、アイソタイプ対照に関する二重または三重の組み合わせに対する、２因子ＡＮＯＶＡによる二重または三重の組み合わせ群の違いについて、それぞれｐ＜０．００１またはｐ＜０．０００１であることを示す。Ｂ）３治療群における各マウスの個々の腫瘍体積のスパイダープロットを、＞１５００ｍｍ３の腫瘍体積または４５日目（研究のエンドポイント）に達するまで測定した。Ｃ）マウスのカプラン・マイヤー生存曲線は、３つの異なる治療群において治療した。ログランク（Ｍａｎｔｅｌ−Ｃｏｘ）検定では、ｐ値＜０．０００１であり、二重抗体併用治療でのマウスにおける４０％生存に対して、三重抗体併用でのマウスにおける９０％生存を明らかにした。
【図６１Ｂ】向上した抗腫瘍効果を示す三重併用。Ａ）最小疾患モデルにおけるＣＴ２６腫瘍の増殖動態。１０匹の雌Ｂａｌｂ／ｃ群に、右脇腹にＣＴ２６細胞を注入した。腫瘍が所望の平均値体積（３０〜６０ｍｍ３）に達した際に、抗体のＩ．ｐ．投与を開始した。マウスを、合計６回の投与量で隔週に３回、二重または三重の組み合わせとして、１０ｍｇ／ｋｇの抗ＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１または抗ＰＶＲＩＧ  ｍＩｇＧ１、３ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＩｇＧ１、および１０ｍｇ／ｋｇの対照アイソタイプのそれぞれを用いて治療した。組み合わせにおける抗ＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１でのＴＧＩを、ＴＧＩ％＝［１−（試験物品の平均腫瘍体積を対照物品の平均腫瘍体積で割った値）＊１００］によって計算した。アスタリスク（＊＊＊、＊＊＊＊）は、アイソタイプ対照に関する二重または三重の組み合わせに対する、２因子ＡＮＯＶＡによる二重または三重の組み合わせ群の違いについて、それぞれｐ＜０．００１またはｐ＜０．０００１であることを示す。Ｂ）３治療群における各マウスの個々の腫瘍体積のスパイダープロットを、＞１５００ｍｍ３の腫瘍体積または４５日目（研究のエンドポイント）に達するまで測定した。Ｃ）マウスのカプラン・マイヤー生存曲線は、３つの異なる治療群において治療した。ログランク（Ｍａｎｔｅｌ−Ｃｏｘ）検定では、ｐ値＜０．０００１であり、二重抗体併用治療でのマウスにおける４０％生存に対して、三重抗体併用でのマウスにおける９０％生存を明らかにした。
【図６１Ｃ】向上した抗腫瘍効果を示す三重併用。Ａ）最小疾患モデルにおけるＣＴ２６腫瘍の増殖動態。１０匹の雌Ｂａｌｂ／ｃ群に、右脇腹にＣＴ２６細胞を注入した。腫瘍が所望の平均値体積（３０〜６０ｍｍ３）に達した際に、抗体のＩ．ｐ．投与を開始した。マウスを、合計６回の投与量で隔週に３回、二重または三重の組み合わせとして、１０ｍｇ／ｋｇの抗ＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１または抗ＰＶＲＩＧ  ｍＩｇＧ１、３ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＩｇＧ１、および１０ｍｇ／ｋｇの対照アイソタイプのそれぞれを用いて治療した。組み合わせにおける抗ＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１でのＴＧＩを、ＴＧＩ％＝［１−（試験物品の平均腫瘍体積を対照物品の平均腫瘍体積で割った値）＊１００］によって計算した。アスタリスク（＊＊＊、＊＊＊＊）は、アイソタイプ対照に関する二重または三重の組み合わせに対する、２因子ＡＮＯＶＡによる二重または三重の組み合わせ群の違いについて、それぞれｐ＜０．００１またはｐ＜０．０００１であることを示す。Ｂ）３治療群における各マウスの個々の腫瘍体積のスパイダープロットを、＞１５００ｍｍ３の腫瘍体積または４５日目（研究のエンドポイント）に達するまで測定した。Ｃ）マウスのカプラン・マイヤー生存曲線は、３つの異なる治療群において治療した。ログランク（Ｍａｎｔｅｌ−Ｃｏｘ）検定では、ｐ値＜０．０００１であり、二重抗体併用治療でのマウスにおける４０％生存に対して、三重抗体併用でのマウスにおける９０％生存を明らかにした。
【図６２Ａ】例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体の配列を示す。
【図６２Ｂ】例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体の配列を示す。
【図６２Ｃ】例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体の配列を示す。
【図６２Ｄ】例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体の配列を示す。
【図６２Ｅ】例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体の配列を示す。
【図６２Ｆ】例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体の配列を示す。
【図６２Ｇ】例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体の配列を示す。
【図６２Ｈ】例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体の配列を示す。
【図６２Ｉ】例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体の配列を示す。
【図６３Ａ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＡＡ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＡＡＡ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｂ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＢＢ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＢＢＢ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｃ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＣＣ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＣＣＣ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｄ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＤＤ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＤＤＤ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｅ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＥＥ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＥＥＥ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｆ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＦＦ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＦＦＦ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｇ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＧＧ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＧＧＧ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｈ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＨＨ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＨＨＨ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｉ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＩＩ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＩＩＩ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｊ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＪＪ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＪＪＪ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｋ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＫＫ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＫＫＫ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｌ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＬＬ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＬＬＬ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｍ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＭＭ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＭＭＭ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｎ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＮＮ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＮＮＮ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｏ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＯＯ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＯＯＯ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｐ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＰＰ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＰＰＰ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｑ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＱＱ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＱＱＱ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｒ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＲＲ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＲＲＲ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｓ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＳＳ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＳＳＳ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｕ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＵＵ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＵＵＵ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｖ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＶＶ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＶＶＶ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｗ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＷＷ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＷＷＷ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｘ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＸＸ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＸＸＸ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｙ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＹＹ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＹＹＹ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３Ｚ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＺＺ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【図６３ＺＺＺ】多数の例示的なＰＶＲＩＧ抗体の配列を示す。
【発明を実施するための形態】
【０１０８】
Ａ．序論
ＰＤ−１のような免疫のチェックポイント阻害剤に対する治療用抗体は、がん治療のための診療所における限られた状況で非常に有望であることを示す。がんは、患者ががん性細胞を認識し排除する能力がないものと考えることができる。多くの場合、これらの形質転換した（例えば、がん性）細胞は、免疫監視に反作用する。体内でのＴ細胞活性化を制限して無制限なＴ細胞活性を予防する天然の制御機構が存在し、これを、がん性細胞が免疫応答を回避または抑制するために利用し得る。免疫エフェクター細胞、特にＴ細胞ががんを認識し排除する能力を回復させることが、免疫療法の目的である。「免疫療法」と称されることがある免疫腫瘍学の分野は、急速に進化しており、Ｙｅｒｖｏｙ（登録商標）、Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）、およびＯｐｄｉｖｏ（登録商標）などのＴ細胞チェックポイント阻害抗体が、いくつかの最近承認されたものである。これらの抗体は、それらがＴ細胞性免疫の通常は負の制御性因子を遮断するため、一般に「チェックポイント阻害剤」と称される。共刺激性と共抑制性の両方の種々の免疫調節シグナルを使用して、最適な抗原特異的免疫応答を統合することができると一般に理解されている。
【０１０９】
一般的に、これらのモノクローナル抗体は、通常の状況下では細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）の活性化を予防または抑制する、ＣＴＬＡ−４およびＰＤ−１のようなチェックポイント阻害剤タンパク質に結合する。チェックポイントタンパク質を阻害することにより、例えば、これらのタンパク質を結合する抗体の使用を介して、腫瘍に対する増加したＴ細胞応答を達成することができる。つまり、これらのがんチェックポイントタンパク質は免疫応答を抑制し、このタンパク質が、例えばチェックポイントタンパク質に対する抗体を使用して遮断されるとき、免疫系が活性化されることで免疫刺激につながり、その結果、がんおよび感染性疾患等の状態の治療をもたらす。
【０１１０】
本発明は、より良い患者の治療効果をもたらすために、いくつかの抗チェックポイント阻害剤を組み合わせて使用する組成物および方法に関する。特に、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ、および抗ＰＤ−１抗体の組み合わせが考えられる。さらに、これらの方法は、患者の腫瘍からのＰＤ−Ｌ１発現レベルの評価と共に組み合わせて特に有用である。ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の割合が、使用される抗体についての抗体関連アイソタイプ対照抗体で染色された同じ腫瘍細胞と比較して１％を超える（＞１％）場合に、その後、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ、および抗ＰＤ−１抗体の三重併用が施されるべきである。一方で、ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度がアイソタイプ対照と比較して１％を下回る（＜１％）患者には、抗ＴＩＧＩＴ抗体および抗ＰＶＲＩＧ抗体の二重併用が施されるべきである。
【０１１１】
本明細書で議論されるように、ＴＩＧＩＴは、エフェクターおよび制御性（Ｔｒｅｇ）ＣＤ４＋Ｔ細胞、エフェクターＣＤ８＋Ｔ細胞、およびＮＫ細胞で高度に発現される共阻害受容体である。ＴＩＧＩＴは、（１）直接的なシグナル伝達、（２）リガンドシグナル伝達の誘導、ならびに（３）共刺激受容体ＣＤ２２６（ＤＮＡＭ−１としても知られる）によるシグナル伝達との競合およびその妨害によって免疫応答を減弱させることが示されている。
【０１１２】
ヒトポリオウイルス受容体関連免疫グロブリンドメイン含有タンパク質、または「ＰＶＲＩＧ」は、ＮＫおよびＴ細胞の細胞表面上で発現され、他の既知の免疫チェックポイントといくつかの類似点を共有する。ＰＶＲＩＧは、ＵＳＳＮ６２／１１８，２０８、６２／１４１，１２０、６２／２３５，８２３、６２／３７６，３３４、１５／０４８，９６７、６２／３７６，３３５、６２／４１７，２１７、および６２／４７７，９７４を参照して、チェックポイント阻害剤として検証されており、これらの全ては、特にその中の抗体の配列、図および図の凡例について、その全体が参照により本明細書に明示的に組み込まれる。それらの文書において示されるように、ＰＶＲＬ２は、ＰＶＲＩＧの相対物であることが特定／確認された。ＰＶＲＩＧと結合する抗体が生成され、その後、それらのサブセットがＰＶＲＩＧと結合し、ＰＶＲＩＧおよびＰＶＬＲ２の相互作用を遮断することの両方が確認された。ＰＶＲＩＧとそのリガンド（ＰＶＲＬ２）が結合すると、ＮＫおよびＴ細胞の標的細胞に対する免疫応答を減弱させるように作用する（すなわち、ＰＤ−１／ＰＤＬ１に類似した）抑制シグナルが励起される。ＰＶＲＬ２のＰＶＲＩＧとの結合の遮断により、ＰＶＲＩＧのこの抑制シグナルが断たれ、その結果、ＮＫおよびＴ細胞の免疫応答が調節される。
【０１１３】
ＰＤ−１、または「プログラムされた細胞死タンパク質１」は、既知のチェックポイント阻害物質である。２つの承認された抗ＰＤ−１抗体、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標））、セミプリマブ（ＲＥＧＮ２８１０）、およびニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標））、ならびに開発中であるさらに多く（ＷＯ２０１５／１１２９００に記載されるピジリズマブ、ＢＡＰ０４９クローン（その配列は参照により本明細書に明示的に組み込まれる）、ＷＯ２０１５／０３５６０６に記載される抗体３１７−４Ｂ６（その配列は参照により本明細書に明示的に組み込まれる）、ＵＳ２０１６／００７５７８３に記載される抗体ＡＰＥ２０５８（その配列は参照により本明細書に明示的に組み込まれる）を含むが、これらに限定されない）が存在する。
【０１１４】
３つの承認された抗ＰＤ−Ｌ１抗体、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（登録商標））、アベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯ（登録商標））、およびデュルバルマブ、ならびに開発中の他の抗ＰＤ−Ｌ１抗体が存在する。
【０１１５】
ＮＫおよびＴ細胞に対するこれらの抗体の組み合わせの機能的効果は、増殖、サイトカイン放出、細胞表面メーカーのパラメーターの変化を測定することにより、生体外で（および、以下でより詳細に記載されるように、いくつかの場合は生体内で）評価できる。したがって、ＮＫ、エフェクターＴ、およびＴｒｅｇ細胞に対する抗ＴＩＧＩＴ抗体の機能的効果は、増殖、サイトカイン放出、細胞表面受容体のパラメーターの変化を測定することにより、生体外で（および、以下でより詳細に記載されるように、いくつかの場合は生体内で）評価できる。ＮＫ細胞の場合、細胞増殖、細胞傷害（ＣＤ１０７ａ、グランザイム、およびパーフォリンの発現の増加、または標的細胞の殺傷を直接的に測定することにより測定される標的細胞への殺傷能力）、サイトカイン産生（例えば、ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ）、および細胞表面受容体発現（例えば、ＣＤ２５）の増加は、免疫調節、例えば、がん細胞の増強された殺傷の指標である。エフェクターＴおよびＴｒｅｇ細胞の場合、増殖の増加、活動的な細胞表面受容体の発現の増加（例えば、ＣＤ２５、ＣＤ６９、ＣＤ１３７、ＰＤ−１）、細胞傷害（上記で述べられたような標的細胞への殺傷能力）、およびサイトカイン産生（例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１０、ＩＬ−１７Ａ）は、免疫調節、例えば、がん細胞の増強された殺傷の指標である。したがって、治療の評価は、以下のうちの１つ以上を評価するアッセイを使用して行うことができる：（ｉ）免疫応答を増加させる、（ｉｉ）αβおよび／またはγδ  Ｔ細胞の活性化を増加させる、（ｉｉｉ）細胞傷害性Ｔ細胞活性を増加させる、（ｉｖ）ＮＫおよび／またはＮＫＴ細胞活性を増加させる、（ｖ）αβおよび／またはγδ  Ｔ細胞抑制を軽減させる、（ｖｉ）炎症促進性サイトカイン分泌を増加させる、（ｖｉｉ）ＩＬ−２分泌を増加させる；（ｖｉｉｉ）インターフェロン−γ産生を増加させる、（ｉｘ）Ｔｈ１応答を増加させる、（ｘ）Ｔｈ２応答を減少させる、（ｘｉ）制御性Ｔ細胞の少なくとも１つの細胞数および／または活性化を減少させるかまたは排除する。
【０１１６】
特に、実施例１において示されるアッセイのうちのいずれか１つを使用して、Ｔ細胞活性化および／またはＴ細胞阻害の抑制を測定することができる。
【０１１７】
したがって、いくつかの実施形態において、本発明は、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ、および抗ＰＤ−１抗体（または、明細書で概説されているように、いくつかの場合では抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＶＲＩＧ抗体のみ）の併用療法の使用を提供し、それを必要とする対象において以下のうちの１つ以上を実行する：（ａ）炎症性サイトカインを上方制御する；（ｂ）Ｔ細胞の増殖および／もしくは発展を増加する；（ｃ）Ｔ細胞によるインターフェロンもしくはＴＮＦ−α産生を増加する；（ｄ）ＩＬ−２分泌を増加する；（ｅ）抗体応答を活発化する；（ｆ）がん細胞増殖を阻害する；（ｇ）抗原特異的Ｔ細胞免疫を促進する；（ｈ）ＣＤ４＋および／もしくはＣＤ８＋Ｔ細胞活性化を促進する；（ｉ）Ｔｒｅｇ媒介細胞の抑制を緩和する；（ｊ）ＮＫ細胞活性を促進する；（ｋ）がん細胞のアポトーシスもしくは溶解を促進する；ならびに／または（ｌ）がん細胞に対する細胞傷害もしくは細胞増殖抑制効果。
【０１１８】
したがって、本発明は、併用療法、ならびにＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１発現の１つ以上のレベルを測定する診断アッセイと併せて、ならびに／またはＴＩＧＩＴ（例えば、ＰＶＲ）、ＰＶＲＩＧ（ＰＶＲＬ２）、およびＰＤ−１（ＰＤ−Ｌ１）のリガンドのレベルを測定することに使用するための抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ、および抗ＰＤ−１抗体を提供する。
Ｂ．定義
本出願をより完全に理解できるようにするために、いくつかの定義を以下に示す。かかる定義は、文法的同等物を包含することを意図する。
【０１１９】
本明細書において「除去」とは、活性の低下または排除を意味する。いくつかの実施形態において、抗体の定常ドメインから活性を排除することが有用である。したがって、例えば、「ＦｃγＲ結合を切除する」とは、Ｆｃ領域アミノ酸バリアントが、その特定のバリアントを含まないＦｃ領域と比較して５０％未満の開始結合を有することを意味し、７０−８０−９０−９５−９８％未満の活性喪失が好ましく、一般に、活性はＢｉａｃｏｒｅアッセイにおいて検出可能な活性のレベル未満である。図１に示すように、ＩｇＧ１定常領域における１つの切除バリアントはＮ２９７Ａバリアントであり、これは天然グリコシル化部位を取り除き、ＦｃγＲＩＩＩａ結合を大幅に低減し、したがって抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を低減する。
【０１２０】
本明細書において「抗原結合ドメイン」または「ＡＢＤ」とは、ポリペプチド配列の一部として存在する場合、本明細書で考察される標的抗原と特異的に結合する６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）のセットを意味する。したがって、「ＴＩＧＩＴ抗原結合ドメイン」は、本明細書に概説されるＴＩＧＩＴ抗原（その配列は図２に示される）と結合する。当該技術分野で知られているように、これらのＣＤＲは、可変重鎖ＣＤＲ（ｖｈＣＤＲまたはＶＨＣＤＲ）の第１のセットおよび可変軽鎖ＣＤＲの第２のセット（ｖｌＣＤＲまたはＶＬＣＤＲ）として一般に存在し、各々が３つのＣＤＲ、すなわち重鎖についてｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２、ｖｈＣＤＲ３、軽鎖についてｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２およびｖｌＣＤＲ３を含む。ＣＤＲは、可変重および可変軽ドメインにそれぞれ存在し、一緒になってＦｖ領域を形成する。したがって、いくつかの場合において、抗原結合ドメインの６つのＣＤＲには、可変重および可変軽鎖が寄与される。「Ｆａｂ」フォーマットにおいて、６つのＣＤＲのセットには、２つの異なるポリペプチド配列、すなわち可変重ドメイン（ｖｈまたはＶＨ、ｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２およびｖｈＣＤＲ３を含む）および可変軽ドメイン（ｖｌまたはＶＬ、ｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２およびｖｌＣＤＲ３を含む）が寄与され、このうちｖｈドメインのＣ末端が重鎖のＣＨ１ドメインのＮ末端と結合し、ｖｌドメインのＣ末端が定常軽鎖ドメインのＮ末端と結合している（したがって、軽鎖を形成する）。
【０１２１】
本明細書における「修飾」とは、ポリペプチド配列におけるアミノ酸の置換、挿入、および／もしくは欠失、またはタンパク質と化学的に連結された部分に対する改変を意味する。例えば、修飾は、タンパク質と結合した改変された炭水化物またはＰＥＧ構造であり得る。本明細書における「アミノ酸修飾」は、ポリペプチド配列中のアミノ酸の置換、挿入、および／または欠失を意味する。明確にするために、別段の記載がない限り、アミノ酸修飾は常に、ＤＮＡによってコードされるアミノ酸、例えばＤＮＡおよびＲＮＡ中にコドンを有する２０個のアミノ酸に対するものである。
【０１２２】
本明細書における「アミノ酸置換」または「置換」は、親ポリペプチド配列中の特定の位置のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することを意味する。特に、いくつかの実施形態において、置換は、特定の位置で天然に存在しない（生物内で天然に存在しないか、またはいずれの生物中にも存在しない）アミノ酸に対するものである。例えば、置換Ｎ２９７Ａは、２９７位のアスバラギンがアラニンで置換されているバリアントポリペプチド（この場合はＦｃバリアント）を指す。明確にするために、核酸コード配列を変化させるが、開始アミノ酸を変化させない（例えば、宿主生物発現レベルを増加させるためにＣＧＧ（アルギニンをコードする）をＣＧＡ（アルギニンをなおコードする）に交換する）ように操作されたタンパク質は、「アミノ酸置換」ではない。すなわち、同じタンパク質をコードする新たな遺伝子の創出にもかかわらず、タンパク質は、それが開始される特定の位置に同じアミノ酸を有する場合、それはアミノ酸置換ではない。
【０１２３】
本明細書で使用される「アミノ酸挿入」または「挿入」は、親ポリペプチド配列の特定の位置にアミノ酸配列を付加することを意味する。例えば、−２３３Ｅまたは２３３Ｅは、２３３位の後、および２３４位の前のグルタミン酸の挿入を示す。さらに、−２３３ＡＤＥまたはＡ２３３ＡＤＥは、２３３位の後、および２３４位の前のＡｌａＡｓｐＧｌｕの挿入を示す。
【０１２４】
本明細書で使用される「アミノ酸欠失」または「欠失」は、親ポリペプチド配列中の特定の位置でアミノ酸配列を除去することを意味する。例えば、Ｅ２３３−またはＥ２３３＃、Ｅ２３３（）またはＥ２３３ｄｅｌは、２３３位のグルタミン酸の欠失を示す。さらに、ＥＤＡ２３３−またはＥＤＡ２３３＃は、２３３位で始まる配列ＧｌｕＡｓｐＡｌａの欠失を示す。
【０１２５】
本明細書で使用される「バリアントタンパク質」または「タンパク質バリアント」または「バリアント」とは、少なくとも１つのアミノ酸修飾に基づいて親タンパク質のそれとは異なるタンパク質を意味する。タンパク質バリアントは、タンパク質自体、タンパク質を含む組成物、またはそれをコードするアミノ配列を指し得る。好ましくは、タンパク質バリアントは、親タンパク質と比較して少なくとも１つのアミノ酸修飾、例えば、親と比較して約１〜約７０個のアミノ酸修飾、好ましくは約１〜約５個のアミノ酸修飾を有する。以下に記載するように、いくつかの実施形態では、親ポリペプチド、例えばＦｃ親ポリペプチドは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４由来のＦｃ領域等のヒト野生型配列であるが、バリアントを有するヒト配列もまた、「親ポリペプチド」としての役割を果たすことができる。本明細書のタンパク質バリアント配列は、好ましくは、親タンパク質配列と少なくとも約８０％の同一性、最も好ましくは少なくとも約９０％の同一性、より好ましくは少なくとも約９５−９８−９９％の同一性を有する。バリアントタンパク質は、バリアントタンパク質それ自体、タンパク質バリアントを含む組成物、またはそれをコードするＤＮＡ配列を指すことができる。したがって、本明細書で使用される「抗体バリアント」または「バリアント抗体」とは、少なくとも１つのアミノ酸修飾に基づいて親抗体とは異なる抗体を意味し、本明細書で使用される「ＩｇＧバリアント」または「バリアントＩｇＧ」とは、少なくとも１つのアミノ酸修飾に基づいて親ＩｇＧ（ここでも、多くの場合はヒトＩｇＧに由来）とは異なる抗体を意味し、本明細書で使用される「免疫グロブリンバリアント」または「バリアント免疫グロブリン」とは、少なくとも１つのアミノ酸修飾に基づいて親免疫グロブリン配列のそれとは異なる免疫グロブリン配列を意味する。本明細書で使用される「Ｆｃバリアント」または「バリアントＦｃ」とは、Ｆｃドメインにアミノ酸修飾を含むタンパク質を意味する。本発明のＦｃバリアントは、それらを構成するアミノ酸修飾に従って定義される。したがって、例えば、Ｓ２４１ＰまたはＳ２２８Ｐは、親ＩｇＧ４ヒンジポリペプチドと比較して２２８位に置換プロリンを有するヒンジバリアントであり、ここでの付番Ｓ２２８ＰはＥＵインデックスに従い、Ｓ２４１ＰはＫａｂａｔ付番である。ＥＵインデックス、またはＫａｂａｔもしくはＥＵ付番スキームと同様のＥＵインデックスは、ＥＵ抗体の付番を指す（Ｅｄｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９６９，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ６３：７８−８５、参照により全体が本明細書に組み込まれる）。修飾は、付加、欠失、または置換であり得る。置換には、天然に存在するアミノ酸および場合によっては合成アミノ酸が含まれ得る。例としては、米国特許第６，５８６，２０７号、ＷＯ９８／４８０３２、ＷＯ０３／０７３２３８、ＵＳ２００４−０２１４９８８Ａ１、ＷＯ０５／３５７２７Ａ２、ＷＯ０５／７４５２４Ａ２、Ｊ．Ｗ．Ｃｈｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２００２），Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  １２４：９０２６−９０２７、Ｊ．Ｗ．Ｃｈｉｎ，＆Ｐ．Ｇ．Ｓｃｈｕｌｔｚ，（２００２），ＣｈｅｍＢｉｏＣｈｅｍ  １１：１１３５−１１３７、Ｊ．Ｗ．Ｃｈｉｎ，ｅｔ  ａｌ．，（２００２），ＰＩＣＡＳ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ  ９９：１１０２０−１１０２４、およびＬ．Ｗａｎｇ，＆Ｐ．Ｇ．Ｓｃｈｕｌｔｚ，（２００２），Ｃｈｅｍ．１−１０が含まれ、参照により全体が組み込まれる。
【０１２６】
本明細書で使用されるとき、本明細書における「タンパク質」は、タンパク質、ポリペプチド、オリゴペプチド、およびペプチドを含む、少なくとも２つの共有結合したアミノ酸を意味する。ペプチジル基は、天然に存在するアミノ酸およびペプチド結合、または合成ペプチド模倣構造、すなわち、ペプトイド（全体が参照により組み込まれるＳｉｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ８９（２０）：９３６７（１９９２）を参照）等の「類似体」を含み得る。アミノ酸は、当業者には理解されるであろうとおり、天然に存在するものでも合成物（例えば、ＤＮＡによってコードされるアミノ酸ではないもの）のいずれかであり得る。例えば、ホモフェニルアラニン、シトルリン、オルニチン、およびノレオロイシンは、本発明の目的では合成アミノ酸と考えられ、Ｄ−およびＬ−（ＲまたはＳ）立体配置のアミノ酸の両方を利用することができる。本発明のバリアントは、Ｃｒｏｐｐ＆Ｓｈｕｌｔｚ，２００４，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｇｅｎｅｔ．２０（１２）：６２５−３０、Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ１０１（２）：７５６６−７１、Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，３０３（５６５６）：３７１−３、およびＣｈｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３０１（５６３５）：９６４−７（全体が参照によって組み込まれる）によって説明されている方法が含まれるがこれらに限定されない、Ｓｃｈｕｌｔｚおよび共同研究者らによって開発された技術を使用して組み込まれた合成アミノ酸の使用を含む修飾を含み得る。さらに、ポリペプチドには、１つ以上の側鎖または末端の合成誘導体化、グリコシル化、ＰＥＧ化、円順列、環化、他の分子へのリンカー、タンパク質またはタンパク質ドメインへの融合、およびペプチドタグまたは標識の付加が含まれ得る。
【０１２７】
本明細書で使用される「残基」とは、タンパク質における位置、およびその関連するアミノ酸同一性を意味する。例えば、アスパラギン２９７（Ａｓｎ２９７またはＮ２９７とも称される）は、ヒト抗体ＩｇＧ１中の２９７位での残基である。
【０１２８】
本明細書で使用される「Ｆａｂ」または「Ｆａｂ領域」とは、ＶＨ、ＣＨ１、ＶＬ、およびＣＬ免疫グロブリンドメインを含むポリペプチドを意味する。Ｆａｂは、単離したこの領域、または完全長抗体もしくは抗体断片との関連でのこの領域を指し得る。
【０１２９】
本明細書で使用される「Ｆｖ」または「Ｆｖ断片」または「Ｆｖ領域」とは、単一抗体のＶＬおよびＶＨドメインを含むポリペプチドを意味する。当業者には理解されるであろうとおり、それらは一般に、２本の鎖で構成されている。
【０１３０】
本明細書における「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」とは、一般に本明細書で論じられるようなｓｃＦｖリンカーを使用して可変軽ドメインと共有結合し、ｓｃＦｖまたはｓｃＦｖドメインを形成する、可変重ドメインを意味する。ｓｃＦｖドメインは、Ｎ末端からＣ末端（ｖｈ−リンカー−ｖｌまたはｖｌ−リンカー−ｖｈ）のいずれの配向であり得る。一般に、リンカーは、当該技術分野で一般に既知のｓｃＦｖリンカーであり、このうちリンカーペプチドには主として以下のアミノ酸残基：Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、またはＴｈｒが含まれる。リンカーペプチドは、それらが所望の活性を保持するように互いに対して正しい立体配座をとるような様態で２つの分子を連結するのに十分な長さを有するべきである。一実施形態において、リンカーは、約１〜５０アミノ酸長、好ましくは約１〜３０アミノ酸長である。一実施形態において、１〜２０アミノ酸長のリンカーが使用され得、いくつかの実施形態において、約５〜約１０アミノ酸が使用されている。有用なリンカーには、例えば、ｎが少なくとも１つの整数（一般に３〜４）である（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ、（ＧＧＧＧＳ）ｎ、および（ＧＧＧＳ）ｎ、グリシン−アラニンポリマー、アラニン−セリンポリマー、ならびに他の可動性リンカーを含むグリシンセリンポリマーが含まれる。代替的に、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、ポリオキシアルキレン、またはポリエチレングリコールとポリプロピレングリコールとのコポリマーを含むがこれらに限定されない様々な非タンパク質性ポリマーが、リンカーとして有用であり得、すなわちリンカーとして有用であり得る。
【０１３１】
本明細書で使用される「ＩｇＧサブクラス修飾」または「アイソタイプ修飾」とは、１つのＩｇＧアイソタイプの１つのアミノ酸を、異なる、整合したＩｇＧアイソタイプの対応するアミノ酸に変換するアミノ酸修飾を意味する。例えば、ＥＵの２９６位においてＩｇＧ１はチロシンを、ＩｇＧ２はフェニルアラニンを含むため、ＩｇＧ２におけるＦ２９６Ｙ置換は、ＩｇＧサブクラス修飾であると考えられる。同様に、ＩｇＧ１は２４１位にプロリンを有し、ＩｇＧ４はそこでセリンを有するため、Ｓ２４１Ｐを有するＩｇＧ４分子は、ＩｇＧサブクラス修飾であると考えられる。サブクラス修飾は、本明細書のアミノ酸置換と考えられることに留意されたい。
【０１３２】
本明細書で使用される「天然に存在しない修飾」とは、アイソタイプ性ではないアミノ酸修飾を意味する。例えば、ＩｇＧのうちのいずれも２９７位にアスパラギンを含まないため、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４（またはそれらのハイブリッド）におけるＮ２９７Ａ置換は、天然に存在しない修飾であると考えられる。
【０１３３】
本明細書で使用される「アミノ酸」および「アミノ酸同一性」とは、ＤＮＡおよびＲＮＡによってコードされている２０種の天然に存在するアミノ酸のうちの１つを意味する。
【０１３４】
本明細書で使用される「エフェクター機能」とは、抗体Ｆｃ領域とＦｃ受容体またはリガンドとの相互作用から生じる生化学的事象を意味する。エフェクター機能には、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、およびＣＤＣが含まれるが、これらに限定されない。多くの場合において、異なるＩｇＧアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ４）またはＦｃドメイン内のアミノ酸置換のいずれかを使用して、ほとんどまたは全てのエフェクター機能を切除することが望ましく、しかしながら、ＦｃＲｎ受容体との結合を保持することが望ましいのは、これがヒト血清中の抗体の半減期に寄与するためである。
【０１３５】
本明細書で使用される「ＩｇＧ  Ｆｃリガンド」とは、ＩｇＧ抗体のＦｃ領域と結合してＦｃ／Ｆｃリガンド複合体を形成する任意の生物由来の分子、好ましくはポリペプチドを意味する。Ｆｃリガンドには、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、ＦｃＲｎ、Ｃ１ｑ、Ｃ３、マンナン結合レクチン、マンノース受容体、ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃａｌプロテインＡ、ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃａｌプロテインＧ、およびウイルスＦｃγＲが含まれるが、これらに限定されない。Ｆｃリガンドにはまた、ＦｃγＲと同種であるＦｃ受容体のファミリーである、Ｆｃ受容体ホモログ（ＦｃＲＨ）が含まれる（Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  １９０：１２３−１３６、参照により全体が組み込まれる）。Ｆｃリガンドは、Ｆｃと結合する未発見の分子を含み得る。特定のＩｇＧ  Ｆｃリガンドは、ＦｃＲｎおよびＦｃガンマ受容体である。本明細書で使用される「Ｆｃリガンド」とは、抗体のＦｃ領域と結合してＦｃ／Ｆｃリガンド複合体を形成する任意の生物由来の分子、好ましくはポリペプチドを意味する。
【０１３６】
本明細書で使用される「親ポリペプチド」とは、バリアントを生成するようにその後修飾される開始ポリペプチドを意味する。親ポリペプチドは、天然に存在するポリペプチド、または天然に存在するポリペプチドのバリアントもしくは操作された形式であり得る。親ポリペプチドとは、ポリペプチド自体、親ポリペプチドを含む組成物、またはそれをコードするアミノ酸配列を指し得る。したがって、本明細書で使用される「親免疫グロブリン」とは、バリアントを生成するように修飾される非修飾免疫グロブリンポリペプチドを意味し、本明細書で使用される「親抗体」とは、バリアント抗体を生成するように修飾される非修飾抗体を意味する。「親抗体」には、以下に概説されるように、既知の市販の組換え産生抗体が含まれることに留意すべきである。
【０１３７】
本明細書で使用される「Ｆｃ」または「Ｆｃ領域」または「Ｆｃドメイン」とは、第１の定常領域免疫グロブリンドメインを除く抗体の定常領域、および場合によってはヒンジの一部を含む、ポリペプチドを意味する。したがって、Ｆｃは、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびＩｇＧの最後の２つの定常領域免疫グロブリンドメイン、ＩｇＥおよびＩｇＭの最後の３つの定常領域免疫グロブリンドメイン、およびこれらのドメインに対する可動性ヒンジＮ末端を指す。ＩｇＡおよびＩｇＭの場合は、Ｆｃは、Ｊ鎖を含み得る。ＩｇＧの場合は、Ｆｃドメインは、免疫グロブリンドメインＣγ２およびＣγ３（Ｃγ２およびＣγ３）、ならびにＣγ１（Ｃγ１）とＣγ２（Ｃγ２）との間の下部ヒンジ領域を含む。Ｆｃ領域の境界は異なり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、通常、そのカルボキシ末端に残基Ｃ２２６またはＰ２３０を含むものと定義され、ここでの付番はＫａｂａｔと同様のＥＵインデックスに従う。いくつかの実施形態において、以下でより詳細に説明されるように、例えば、１つ以上のＦｃγＲ受容体またはＦｃＲｎ受容体との結合を変化させるために、Ｆｃ領域に対してアミノ酸修飾が行われる。
【０１３８】
本明細書における「重鎖定常領域」とは、抗体のＣＨ１−ヒンジ−ＣＨ２−ＣＨ３部分を意味する。
【０１３９】
本明細書で使用される「位置」とは、タンパク質の配列中の場所を意味する。位置は、順次に、または確立された形式、例えば、抗体付番のためのＥＵインデックスに従って、付番され得る。
【０１４０】
本明細書で使用される「標的抗原」とは、所与の抗体の可変領域が特異的に結合する分子を意味する。本明細書における目的の標的抗原とは、ＴＩＧＩＴ、通常はヒトＴＩＧＩＴおよび任意にカニクイザルＴＩＧＩＴであり、その配列が示される。
【０１４１】
本明細書で使用される「標的細胞」とは、標的抗原を発現する細胞を意味する。
【０１４２】
本明細書で使用される「可変領域」とは、実質的にＶκ（Ｖ．カッパ）またはＶλ（Ｖ．ラムダ）のうちのいずれかでコードされる１つ以上のＩｇドメイン、ならびに／または、それぞれ、カッパ、ラムダ、および重鎖免疫グロブリン遺伝子座を構成するＶＨ遺伝子を含む、免疫グロブリンの領域を意味する。
【０１４３】
本明細書における「野生型またはＷＴ」とは、対立遺伝子バリアント型を含む、自然界に見出されるアミノ酸配列またはヌクレオチド配列を意味する。ＷＴタンパク質は、意図的に修飾されていないアミノ酸配列またはヌクレオチド配列を有する。
【０１４４】
本発明の抗体は一般に、単離されるか、または組換えである。本明細書に開示される様々なポリペプチドを説明するために使用される「単離された」とは、それが発現された細胞または細胞培養物から特定および分離および／または回収されたポリペプチドを意味する。通常、単離されたポリペプチドは、少なくとも１つの精製ステップによって調製されるであろう。「単離された抗体」とは、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指す。「組換え」とは、外来性宿主細胞において組換え核酸技術を用いて抗体が生成されることを意味する。
【０１４５】
特定の抗原またはエピトープとの「特異的結合」もしくは「〜に特異的に結合する」または特定の抗原またはエピトープ「〜に対して特異的である」とは、非特異的相互作用とは測定可能な程度に異なる結合を意味する。特異的結合は、例えば、一般に結合活性を有さない同様の構造の分子である対照分子の結合と比較した分子の結合を決定することによって、測定することができる。例えば、特異的結合は、標的と類似の対照分子との競合によって決定することができる。
【０１４６】
特定の抗原またはエピトープに対する特異的結合とは、例えば、抗原またはエピトープに対して少なくとも約１０−９Ｍ、少なくとも約１０−１０Ｍ、少なくとも約１０−１１Ｍ、少なくとも約１０−１２Ｍ、少なくとも約１０−１３Ｍ、少なくとも約１０−１４Ｍ、少なくとも約１０−１５ＭのＫＤを有する抗体によって示され得、ＫＤとは特定の抗体−抗原相互作用の解離速度を指す。典型的には、抗原に特異的に結合する抗体は、抗原またはエピトープと比較して対照分子に対して２０倍、５０倍、１００倍、５００倍、１０００倍、５，０００倍、１０，０００倍、またはそれを超えるＫＤを有するであろう。
【０１４７】
また、特定の抗原またはエピトープとの特異的結合は、例えば、抗原またはエピトープに対するＫＡまたはＫａが、対照と比べて、そのエピトープに対して少なくとも２０倍、５０倍、１００倍、５００倍、１０００倍、５，０００倍、１０，０００倍、またはそれを超える抗体によって示され得、ＫＡまたはＫａは、特定の抗体−抗原相互作用の会合速度を指す。結合親和性は、一般に、表面プラズモン共鳴（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅアッセイ）および抗原発現細胞によるフローサイトメトリーを用いて測定される。
Ｖ．抗体
以下で論じられるように、「抗体」という用語は全般的に使用される。従来の抗体構造単位は、典型的には四量体を含む。各四量体は、典型的には、２本の同一のポリペプチド鎖対からなり、各対は、１本の「軽」鎖（典型的には、約２５ｋＤａの分子量）と、１本の「重」鎖（典型的には、約５０〜７０ｋＤａの分子量）とを有する。ヒト軽鎖は、カッパ軽鎖およびラムダ軽鎖として分類される。本発明は、一般にＩｇＧクラスに基づく抗体を対象とし、これは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４を含むがこれらに限定されない、いくつかのサブクラスを有する。一般に、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、およびＩｇＧ４が、ＩｇＧ３よりも頻繁に使用される。ＩｇＧ１は、３５６（ＤまたはＥ）および３５８（ＬまたはＭ）で多型を有する異なるアロタイプを有することに留意すべきである。本明細書に図示される配列は３５６Ｄ／３５８Ｍアロタイプを使用するが、他のアロタイプが本明細書に含まれる。すなわち、本明細書に含まれるＩｇＧ１  Ｆｃドメインを含む任意の配列は、３５６Ｄ／３５８Ｍアロタイプの代わりに３５６Ｅ／３５８Ｌを有することができる。
【０１４８】
各鎖のアミノ末端部分は、「Ｆｖドメイン」または「Ｆｖ領域」として当該技術分野および本明細書では一般に称される、抗原認識に主に関与する約１００〜１１０またはそれ以上のアミノ酸の可変領域を含む。可変領域において、重鎖および軽鎖のＶドメインの各々について３つのループが集約されて、抗原結合部位を形成する。ループの各々は、相補性決定領域（これ以降「ＣＤＲ」と称される）と称され、ここではアミノ酸配列における変形が最も顕著である。「可変」とは、可変領域のある特定のセグメントが抗体間で配列において大きく異なるという事実を指す。可変領域内の可変性は均一に分布していない。その代わり、Ｖ領域は、各々が９〜１５アミノ酸長またはそれ以上長い「超可変領域」と称される極可変性のより短い領域によって隔てられた１５〜３０のアミノ酸のフレームワーク領域（ＦＲ）と称される比較的不変の区間からなる。
【０１４９】
各ＶＨおよびＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端へとＦＲ１−ＣＤＲ１−ＦＲ２−ＣＤＲ２−ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４の順序で配列された３つの超可変領域（「相補性決定領域」、「ＣＤＲ」）および４つのＦＲで構成される。
【０１５０】
超可変領域は、一般に、軽鎖可変領域においておよそアミノ酸残基２４〜３４（ＬＣＤＲ１、「Ｌ」は軽鎖を表す）、５０〜５６（ＬＣＤＲ２）、および８９〜９７（ＬＣＤＲ３）、ならびに重鎖可変領域においてはおよそ約３１〜３５Ｂ（ＨＣＤＲ１、「Ｈ」は重鎖を表す）、５０〜６５（ＨＣＤＲ２）、および９５〜１０２（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸残基（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，ＳＥＱＵＥＮＣＥＳ  ＯＦ  ＰＲＯＴＥＩＮＳ  ＯＦ  ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＩＣＡＬ  ＩＮＴＥＲＥＳＴ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））ならびに／または超可変ループを形成する残基（例えば、軽鎖可変領域における残基２６〜３２（ＬＣＤＲ１）、５０〜５２（ＬＣＤＲ２）、および９１〜９６（ＬＣＤＲ３）、ならびに重鎖可変領域における２６〜３２（ＨＣＤＲ１）、５３〜５５（ＨＣＤＲ２）、および９６−１０１（ＨＣＤＲ３）を包含する（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７）。本発明の特定のＣＤＲを以下に記載する。
【０１５１】
当業者には理解されるであろうとおり、ＣＤＲの正確な付番および配置は、異なる付番系間で異なり得る。しかしながら、可変重鎖および／または可変軽鎖の開示は、関連する（固有の）ＣＤＲの開示を含むことが理解されるべきである。したがって、各可変重鎖領域の開示は、ｖｈＣＤＲ（例えば、ｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２、およびｖｈＣＤＲ３）の開示であり、各可変軽鎖領域の開示は、ｖｌＣＤＲ（例えば、ｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２、およびｖｌＣＤＲ３）の開示である。ＣＤＲ付番の有用な比較は以下の通りであり、Ｌａｆｒａｎｃ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７（１）：５５−７７（２００３）を参照されたい。
【０１５２】
【表１】
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【０１５３】
本明細書全体を通して、Ｋａｂａｔ付番系は一般に、可変ドメイン内の残基（およそ、軽鎖可変領域の残基１〜１０７および重鎖可変領域の残基１〜１１３）およびヒンジを参照する場合に使用され、ＥＵ付番系は、Ｆｃ領域に対するものである（例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．、上述（１９９１）を参照）。
【０１５４】
本発明は、多数の異なるＣＤＲセットを提供する。この場合において、「完全ＣＤＲセット」は、３つの可変軽鎖および３つの可変重鎖ＣＤＲ、例えばｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２、ｖｌＣＤＲ３、ｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２、およびｖｈＣＤＲ３を含む。これらは、それぞれより大きな可変軽または可変重鎖ドメインの一部であり得る。さらに、本明細書により詳細に概説されるように、可変重および可変軽ドメインは、重および軽鎖が使用される場合には別個のポリペプチド鎖上に、またはｓｃＦｖ配列の場合には単一ポリペプチド鎖上にあり得る。
【０１５５】
ＣＤＲは、抗原結合の形成、またはより具体的には、抗体のエピトープ結合部位の形成に寄与する。「エピトープ」とは、パラトープとして知られている抗体分子の可変領域内の特異的抗原結合部位と相互作用する決定基を指す。エピトープは、アミノ酸または糖側鎖などの分子の群分けであり、通常、特異的構造特性、ならびに特異的電荷特性を有する。単一抗原が、２つ以上のエピトープを有し得る。
【０１５６】
エピトープは、結合に直接関与するアミノ酸残基（エピトープの免疫優性構成要素とも称される）および結合に直接関与しない他のアミノ酸残基、例えば、特異的抗原結合ペプチドによって効果的に遮断されるアミノ酸残基、換言すると、特異的抗原結合ペプチドのフットプリント内にあるアミノ酸残基を含み得る。
【０１５７】
エピトープは、立体配座または直線状のいずれかであり得る。立体配座エピトープは、直線状のポリペプチド鎖の異なるセグメントからのアミノ酸の空間的な並置によって生成される。直線状エピトープは、ポリペプチド鎖内の隣接アミノ酸残基によって生成されるものである。立体配座エピトープおよび非立体配座エピトープは、変性溶媒の存在下で前者との結合は失われるが、後者との結合は失われないという点で区別され得る。
【０１５８】
エピトープは、典型的には、固有の空間立体配座内に、少なくとも３個、より一般的には、少なくとも５個、または８〜１０個のアミノ酸を含む。同一のエピトープを認識する抗体は、ある抗体が別の抗体の標的抗原との結合を遮断する能力、例えば、「ビニング」を示す単純な免疫アッセイにおいて検証され得る。以下に概説するように、本発明は、列挙された抗原結合ドメインおよび本明細書の抗体を含むだけでなく、列挙された抗原結合ドメインによって結合されるエピトープとの結合について競合するものも含む。
【０１５９】
各鎖のカルボキシ末端部分は、エフェクター機能に主に関与する定常領域を定義する。Ｋａｂａｔらは、重鎖および軽鎖の可変領域の多数の一次配列を収集した。配列の保存の程度に基づき、彼らは、個々の一次配列をＣＤＲおよびフレームワークに分類し、そのリストを作成した（参照により全体が組み込まれるＳＥＱＵＥＮＣＥＳ  ＯＦ  ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＩＣＡＬ  ＩＮＴＥＲＥＳＴ，５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，ＮＩＨ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ，Ｎｏ．９１−３２４２，Ｅ．Ａ．Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．を参照されたい）。
【０１６０】
免疫グロブリンのＩｇＧサブクラスには、重鎖においていくつかの免疫グロブリンドメインが存在する。本明細書の「免疫グロブリン（Ｉｇ）ドメイン」とは、明確に異なる三次構造を有する免疫グロブリンの領域を意味する。定常重（ＣＨ）ドメインおよびヒンジドメインを含む重鎖ドメインが本発明における目的対象である。ＩｇＧ抗体の関連において、ＩｇＧアイソタイプは、各々、３つのＣＨ領域を有する。したがって、ＩｇＧの関連における「ＣＨ」ドメインは以下の通りである。「ＣＨ１」は、Ｋａｂａｔと同様のＥＵインデックスに従って１１８〜２２０位を指す。「ＣＨ２」は、Ｋａｂａｔと同様のＥＵインデックスに従って２３７〜３４０位を指し、「ＣＨ３」は、Ｋａｂａｔと同様のＥＵインデックスに従って３４１〜４４７位を指す。本明細書において示され、以下に記載されるように、ｐＩバリアントは、ＣＨ領域、および以下に論じられるように、ヒンジ領域のうちの１つ以上に存在し得る。
【０１６１】
重鎖のＩｇドメインの別の種類は、ヒンジ領域である。本明細書において、「ヒンジ」または「ヒンジ領域」または「抗体ヒンジ領域」または「免疫グロブリンヒンジ領域」とは、抗体の第１および第２の定常ドメイン間のアミノ酸を含む可動性ポリペプチドを意味する。構造に関して、ＩｇＧ  ＣＨ１ドメインはＥＵの２２０位で終了し、ＩｇＧ  ＣＨ２ドメインは残基ＥＵの２３７位で開始する。したがって、ＩｇＧについては、抗体ヒンジは、２２１位（ＩｇＧ１中のＤ２２１）から２３６位（ＩｇＧ１中のＧ２３６）を含むように本明細書で定義され、付番は、Ｋａｂａｔと同様にＥＵインデックスに従う。いくつかの実施形態では、例えば、Ｆｃ領域に関連して、下側ヒンジが含まれ、「下側ヒンジ」は一般に２２６位または２３０位を指す。
【０１６２】
軽鎖は、一般に、可変軽ドメイン（軽鎖ＣＤＲを含み、可変重ドメインと一緒にＦｖ領域を形成する）、および定常軽鎖領域（しばしばＣＬまたはＣκと称される）の２つのドメインを含む。
【０１６３】
以下に概説される追加の置換のための目的とする別の領域は、Ｆｃ領域である。
Ａ．キメラおよびヒト化抗体
いくつかの実施形態では、本明細書の抗体は、異なる種由来の混合物、例えばキメラ抗体および／またはヒト化抗体に由来し得る。一般に、「キメラ抗体」および「ヒト化抗体」の両方は、２つ以上の種由来の領域を組み合わせる抗体を指す。例えば、「キメラ抗体」は典型的には、マウス（または場合によってはラット）由来の可変領域（複数可）およびヒト由来の定常領域（複数可）を含む。「ヒト化抗体」は一般に、可変ドメインフレームワーク領域がヒト抗体に見出される配列で交換された、非ヒト抗体を指す。一般に、ヒト化抗体において、ＣＤＲを除く抗体全体は、ヒト起源のポリヌクレオチドによってコードされるか、またはそのＣＤＲ内を除いてかかる抗体と同一である。非ヒト生物を起源とする核酸によって一部または全てがコードされるＣＤＲを、ヒト抗体可変領域のベータシートフレームワークに接合して、その特異性が接合されたＣＤＲによって決定される抗体を作製する。かかる抗体の作製は、例えば、ＷＯ９２／１１０１８、Ｊｏｎｅｓ，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６に記載され、これらは全て参照により組み込まれる。選択されたアクセプターフレームワーク残基の、対応するドナー残基への「逆変異」が、最初の接合された構築物において失われた親和性を回復するためにしばしば必要とされる（ＵＳ５５３０１０１、ＵＳ５５８５０８９、ＵＳ５６９３７６１、ＵＳ５６９３７６２、ＵＳ６１８０３７０、ＵＳ５８５９２０５、ＵＳ５８２１３３７、ＵＳ６０５４２９７、ＵＳ６４０７２１３、これらは全て参照により組み込まれる）。ヒト化抗体はまた、最適には、免疫グロブリン定常領域、典型的にはヒト免疫グロブリンの免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部分を含み、したがって典型的にはヒトＦｃ領域を含むであろう。ヒト化抗体はまた、遺伝子操作された免疫系を有するマウスを用いて生成され得る。Ｒｏｑｕｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２０：６３９−６５４、参照により全体が本明細書に組み込まれる。非ヒト抗体をヒト化および再形成するための様々な技法および方法は、当該技術分野で周知である（Ｔｓｕｒｕｓｈｉｔａ  ＆Ｖａｓｑｕｅｚ，２００４，Ｈｕｍａｎｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｂ  Ｃｅｌｌｓ，５３３−５４５，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ（ＵＳＡ）、およびそこで引用される参考文献を参照されたく、これらは全て参照により組み込まれる）。ヒト化方法には、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８；Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４−１５３６、Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ，ＵＳＡ  ８６：１００２９−３３、Ｈｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：１０２９−１０３５、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ８９：４２８５−９、Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７（２０）：４５９３−９、Ｇｏｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：４１８１−４１８５、Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ  １１：３２１−８に記載される方法が含まれるが、これらに限定されず、これらは全て参照により組み込まれる。ヒト化、または非ヒト抗体可変領域の免疫原性を低下させる他の方法には、例えば、参照により全体が組み込まれるＲｏｇｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１：９６９−９７３に記載されているような表面再構成法が含まれ得る。
【０１６４】
特定の実施形態において、本発明の抗体は、特定の生殖細胞系列重鎖免疫グロブリン遺伝子由来の重鎖可変領域および／または特定の生殖細胞系列軽鎖免疫グロブリン遺伝子由来の軽鎖可変領域（本明細書に一般的に記載される任意の変異を有する）を含む。例えば、かかる抗体は、特定の生殖細胞系列配列「の産物」であるまたはそれ「に由来する」重鎖または軽鎖可変領域を含むヒト抗体を含み得るかまたはそれからなり得る。ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列「の産物」であるまたはそれ「に由来する」ヒト抗体は、ヒト抗体のアミノ酸配列をヒト生殖細胞系列免疫グロブリンのアミノ酸配列と比較することと、ヒト抗体の配列に最も近い配列である（すなわち、最も高い同一性％）ヒト生殖細胞系列免疫グロブリンを選択することとによって、そのようなものとして特定され得る。特定のヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列「の産物」であるまたはそれ「に由来する」ヒト抗体は、例えば、天然に生じる体細胞突然変異または部位特異的突然変異の意図的導入に起因して、生殖細胞系列配列と比較してアミノ酸の相違を含み得る。しかしながら、ヒト化抗体は、典型的には、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列とアミノ酸配列において少なくとも９０％同一であり、他の種の生殖細胞系列免疫グロブリンアミノ酸配列（例えば、マウス生殖細胞系列配列）と比較したときに、抗体をヒト配列に由来するものとして特定するアミノ酸残基を含む。ある特定の場合には、ヒト化抗体は、生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列と、アミノ酸配列において少なくとも９５、９６、９７、９８もしくは９９％、または少なくとも９６％、９７％、９８％、または９９％までも同一であり得る。典型的には、特定のヒト生殖細胞系列配列に由来するヒト化抗体は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列と１０〜２０アミノ酸以下の相違しか示さない。ある特定の場合には、ヒト化抗体は、生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列とは５アミノ酸以下、またはさらには４、３、２、もしくは１アミノ酸以下の相違しか示さない場合がある（同様に、本明細書における任意のバリアントの導入前、すなわち、本発明のバリアントの導入前は、バリアントの数は一般的に低い）。
【０１６５】
一実施形態において、親抗体は、当該技術分野で知られているように、親和性成熟されたものである。構造に基づく方法が、例えば、ＵＳＳＮ１１／００４，５９０に記載されているように、ヒト化および親和性成熟のために用いられ得る。Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９４：１５１−１６２、Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２（１６）：１０６７８−１０６８４、Ｒｏｓｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１（３７）：２２６１１−２２６１８、Ｒａｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：８９１０−８９１５、Ｋｒａｕｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  １６（１０）：７５３−７５９に記載される方法を含むがこれらに限定されない選択に基づく方法が抗体可変領域のヒト化および／または親和性成熟のために使用でき、これらは全て参照により本明細書に組み込まれる。他のヒト化方法は、ＣＤＲの部分のみを接合することを含み得、ＵＳＳＮ  ０９／８１０，５１０；Ｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：１１１９−１１２５；Ｄｅ  Ｐａｓｃａｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：３０７６−３０８４に記載される方法が含まれるがこれらに限定されず、これらは全て参照により組み込まれる。
Ｂ．特異的抗ＴＩＧＩＴ抗体
本発明は、いくつかの特異的なＴＩＧＩＴと結合する列挙される６つのＣＤＲのセット、および定義された可変重（ｖｈ、ＶＨ、またはＶＨ）、および可変軽（ｖｌ、ＶＬまたはＶＬ）を含む、全長抗体を含む抗原結合ドメインを提供する。
【０１６６】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３に示されるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）からの６つのＣＤＲのセット（ｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２、ｖｈＣＤＲ３、ｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２、およびｖｌＣＤＲ３）を含む抗体である。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３に示されるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）からの可変重（ｖｈ）および可変軽（ｖｌ）ドメインを含み、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、およびＩｇＧ４のヒトＩｇＧ定常ドメイン（Ｓ２４１Ｐ）と連結される、抗体である。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）である。
【０１６７】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３に示されるＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）からの６つのＣＤＲのセット（ｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２、ｖｈＣＤＲ３、ｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２、およびｖｌＣＤＲ３）を含む抗体である。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３に示されるＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）からの可変重（ｖｈ）および可変軽（ｖｌ）ドメインを含み、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、およびＩｇＧ４のヒトＩｇＧ定常ドメイン（Ｓ２４１Ｐ）と連結される、抗体である。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）である。
【０１６８】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３に示されるＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）からの６つのＣＤＲのセット（ｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２、ｖｈＣＤＲ３、ｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２、およびｖｌＣＤＲ３）を含む抗体である。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３に示されるＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）からの可変重（ｖｈ）および可変軽（ｖｌ）ドメインを含み、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、およびＩｇＧ４のヒトＩｇＧ定常ドメイン（Ｓ２４１Ｐ）と連結される、抗体である。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）である。
【０１６９】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３に示されるＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）からの６つのＣＤＲのセット（ｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２、ｖｈＣＤＲ３、ｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２、およびｖｌＣＤＲ３）を含む抗体である。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３に示されるＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）からの可変重（ｖｈ）および可変軽（ｖｌ）ドメインを含み、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、およびＩｇＧ４のヒトＩｇＧ定常ドメイン（Ｓ２４１Ｐ）と連結される、抗体である。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）である。
【０１７０】
本明細書で概説される抗ＰＶＲＩＧ抗体との組み合わせにおいて使用が見出されるさらなる抗ＴＩＧＩＴ抗体は、譲受人Ｃｏｍｐｕｇｅｎによって２０１７年６月１日に出願された「抗ＴＩＧＩＴ抗体および使用の方法」と題されたＵＳＳＮ６２／５１３，９１６の図４のもの、および図３に含まれるものである。
Ｃ．併用療法において使用するための追加の抗ＴＩＧＩＴ抗体
本明細書で概説される抗ＰＶＲＩＧ抗体および任意で抗ＰＤ−１抗体との組み合わせにおいて使用できる追加の抗ＴＩＧＩＴ抗体も含まれる。以下でさらに詳細に論じられるように、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体との組み合わせにおいて特定の有効性を示す。したがって、いくつかの実施形態において、代替の抗ＴＩＧＩＴ抗体は、本明細書で概説される抗ＰＶＲＩＧ抗体、特にＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のいずれかと組み合わせて使用される。
【０１７１】
したがって、一実施形態において、米国特許第９，４９９，５９６号で概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について本明細書に組み込まれる）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号２１の軽鎖配列、および配列番号２２の重鎖配列（ＵＳＰ９，４９９，５９６から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。さらに、配列番号２９の軽鎖配列、および配列番号３０の重鎖配列（ＵＳＰ９，４９９，５９６から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１７２】
同様に、一実施形態において、ＷＯ２０１６／１９１６４３で概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について、および特にＯＭＰ−３１３Ｍ３２抗体の配列について本明細書に組み込まれる）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号７２の軽鎖配列、および配列番号７０の重鎖配列（ＷＯ２０１６／１９１６４３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１７３】
したがって、一実施形態において、ＷＯ２０１７／０５３７４８で概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について本明細書に組み込まれる）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号３６の可変軽鎖配列、および配列番号３４の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０５３７４８から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。さらに、配列番号３６の可変軽鎖配列、および配列番号３５の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０５３７４８から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。さらに、配列番号３８の可変軽鎖配列、および配列番号３７の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０５３７４８から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。さらに、配列番号４０の可変軽鎖配列、および配列番号３９の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０５３７４８から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体には、現在臨床治験中（Ｗｏｒｌｄ  Ｗｉｄｅ  Ｗｅｂ、ｇｏｖ／ｃｔ２／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ０２７９４５７１？ｔｅｒｍ＝ＭＴＩＧ７１９２Ａ＆ｒａｎｋ＝１を参照されたい）のＧｅｎｅｎｔｅｃｈの抗体であるＭＴＩＧ７１９２Ａが含まれる。一実施形態において、ＭＴＩＧ７１９２Ａ抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１７４】
同様に、一実施形態において、ＷＯ２０１６／１９１６４３で概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について、および特にＯＭＰ−３１３Ｍ３２抗体の配列について本明細書に組み込まれる）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号７２の軽鎖配列、および配列番号７０の重鎖配列（ＷＯ２０１６／１９１６４３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体には、現在臨床治験中（Ｗｏｒｌｄ  Ｗｉｄｅ  Ｗｅｂ、ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／ｃｔ２／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ０３１１９４２８？ｔｅｒｍ＝ＯＭＰ−３１３Ｍ３２＆ｒａｎｋ＝１を参照されたい）のＯｎｃｏｍｅｄの抗体である、ＯＭＰ−３１３Ｍ３２が含まれる。一実施形態において、ＯＭＰ−３１３Ｍ３２抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１７５】
さらに、一実施形態において、ＷＯ２０１６／０２８６５６で概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体（参照によりその全体が、特に以下に列挙された配列番号について、ならびに特にＭＥＢ１２５．３１Ｃ６．Ａ１．２０５  ＶＨ４／ＶＬ１（ヒトＩｇＧ１定常ドメインを有する配列番号１２７のＶＨ、配列番号１３０のＶＬ）、ＭＥＢ１２５．３１Ｃ６．Ａ１．２０５  ＶＨ５／ＶＬ４（配列番号１２８のＶＨ、配列番号１３３のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域）、およびＭＥＢ１２５．３１．Ｃ６，Ａ１．２０５  ＶＨ５／ＶＬ３（配列番号１２８のＶＨ、配列番号１３２のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域）抗体の配列について本明細書に組み込まれる）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＭＥＢ１２５．３１Ｃ６．Ａ１．２０５  ＶＨ４／ＶＬ１（ヒトＩｇＧ１定常ドメインを有する配列番号１２７のＶＨ、配列番号１３０のＶＬ）（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＭＥＢ１２５．３１Ｃ６．Ａ１．２０５  ＶＨ５／ＶＬ４（配列番号１２８のＶＨ、配列番号１３３のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＭＥＢ１２５．３１．Ｃ６．Ａ１．２０５  ＶＨ５／ＶＬ３（配列番号１２８のＶＨ、配列番号１３２のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域）（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号７のＶＨ、配列番号８のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号６３のＶＨ、配列番号６４のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号９４のＶＨ、配列番号９５のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１２６のＶＨ、配列番号１３１のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１２８のＶＨ、配列番号１３１のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１２５のＶＨ、配列番号１３３のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１２６のＶＨ、配列番号１３０のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１２５のＶＨ、配列番号１３２のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１４３のＶＨ、配列番号１４５のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１４４のＶＨ、配列番号１４６のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１４９のＶＨ、配列番号１５１のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１５０のＶＨ、配列番号１５２のＶＬ、およびヒトＩｇＧ１定常領域（ＷＯ２０１６／０２８６５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１７６】
したがって、一実施形態において、ＷＯ２０１７／０３０８２３で概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について本明細書に組み込まれる）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号８の可変軽鎖配列、および配列番号７の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０３０８２３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１３の可変軽鎖配列、および配列番号９の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０３０８２３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号２４の可変軽鎖配列、および配列番号２３の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０３０８２３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号２９の可変軽鎖配列、および配列番号２５の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０３０８２３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。いくつかの実施形態において、配列番号１４、１５、１６、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、または８０の配列から選択される可変軽鎖、および配列番号１０、１１、１２、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、または５６の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０３０８２３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。いくつかの実施形態において、配列番号１４、１５、１６、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、または８０の配列から選択される可変軽鎖、および配列番号１０、１１、１２、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、または５６の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０３０８２３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。いくつかの実施形態において、配列番号３０、３１、または３２の配列から選択される可変軽鎖、および配列番号２６、２７、２８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、または１１２の可変重鎖配列（ＷＯ２０１７／０３０８２３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体には、現在臨床治験中（Ｗｏｒｌｄ  Ｗｉｄｅ  Ｗｅｂ、ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／ｃｔ２／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ０２９６４０１３？ｔｅｒｍ＝ＭＫ−７６８４＆ｒａｎｋ＝１を参照されたい）のＭｅｒｃｋ抗体である、ＭＫ−７６８４が含まれる。一実施形態において、ＭＫ−７６８４抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１７７】
したがって、一実施形態において、米国特許出願第第２０１６／０１７６９６３号で概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について本明細書に組み込まれる）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号６、９、１１、または１３の可変軽鎖配列、および配列番号２、３、４、５、７、８、１０、または１２の可変重鎖配列（ＵＳ２０１６／０１７６９６３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号６の可変軽鎖配列、および配列番号２、３、４、または５の可変重鎖配列（ＵＳ２０１６／０１７６９６３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号９の可変軽鎖配列、および配列番号７または８の可変重鎖配列（ＵＳ２０１６／０１７６９６３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１１の可変軽鎖配列、および配列番号１０の可変重鎖配列（ＵＳ２０１６／０１７６９６３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１３の可変軽鎖配列、および配列番号１２の可変重鎖配列（ＵＳ２０１６／０１７６９６３から）を有する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体には、現在臨床治験中（Ｗｏｒｌｄ  Ｗｉｄｅ  Ｗｅｂ、ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／ｃｔ２／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ０２９１３３１３？ｔｅｒｍ＝ＢＭＳ−９８６２０７＆ｒａｎｋ＝１を参照されたい）のＢＭＳ抗体である、ＢＭＳ−９８６２０が含まれる。一実施形態において、ＢＭＳ−９８６２０抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１７８】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体には、Ａｒｃｕｓ  Ｂｉｏ抗体である、ＡＢ１５４が含まれる。一実施形態において、ＡＢ１５４抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１７９】
さらに、一実施形態において、ＷＯ２０１７／０３７７０７で概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について、ならびに特に以下に列挙される配列番号の配列について、ならびに特にＶＳＩＧ９＃１抗体（配列番号７のＶＨおよび配列番号８のＶＬ）、および２５８−ｃｓｌ＃４抗体（配列番号１８のＶＨおよび配列番号１９のＶＬ）について本明細書に組み込まれる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体のＶＳＩＧ９＃１抗体（ＷＯ２０１７／０３７７０７から；配列番号７のＶＨおよび配列番号８のＶＬ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の２５８−ｃｓｌ＃４抗体（ＷＯ２０１７／０３７７０７から；配列番号１８のＶＨおよび配列番号１９のＶＬ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１８０】
さらに、一実施形態において、ＷＯ２０１７／０５９０９５に概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について、特にそこに開示される配列について本明細書に組み込まれる。具体的には、配列番号１３のＶＨ配列、および配列番号２６のＶＬ配列（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１２のＶＨ配列、および配列番号２６のＶＬ配列（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１４のＶＨ配列、および配列番号２６のＶＬ配列（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１５のＶＨ配列、および配列番号２６のＶＬ配列（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号９のＶＨ配列、および配列番号２６のＶＬ配列（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１０のＶＨ配列、および配列番号２６のＶＬ配列（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１１のＶＨ配列、および配列番号２６のＶＬ配列（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号９９の重鎖、および配列番号９２の軽鎖、または（それ）配列番号１００の重鎖、および配列番号９２の軽鎖（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号９７の重鎖、および配列番号９２の軽鎖、または（ｉｉ）配列番号９８の重鎖、および配列番号９２の軽鎖（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１０１の重鎖、および配列番号９２の軽鎖、または（ｉｉ）配列番号１０２の重鎖、および配列番号９２の軽鎖（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１０３の重鎖、および配列番号９２の軽鎖、または（ｉｉ）配列番号１０４の重鎖、および配列番号９２の軽鎖（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号９０の重鎖、および配列番号９２の軽鎖、または（ｉｉ）配列番号９１の重鎖、および配列番号９２の軽鎖（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号９３の重鎖、および配列番号９２の軽鎖、または（ｉｉ）配列番号９４の重鎖、および配列番号９２の軽鎖（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号９５の重鎖、および配列番号９２の軽鎖、または（ｉｉ）配列番号９６の重鎖、および配列番号９２の軽鎖（ＷＯ２０１７／０５９０９５から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。さらに、一実施形態において、ＷＯ２０１６／１０６３０２に概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について、特にそこに開示される特定の配列の配列について本明細書に組み込まれる。具体的には、配列番号２、３、４、５、７、８、１０、または１２から選択される重鎖配列（ＷＯ２０１６／１０６３０２から）、および配列番号６、９、１１、または１３からの軽鎖配列（ＷＯ２０１６／１０６３０２から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の２２Ｇ２（ＷＯ２０１６／１０６３０２から）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の１１Ｇ１１（ＷＯ２０１６／１０６３０２から）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の１５Ａ６（ＷＯ２０１６／１０６３０２から）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１８１】
さらに、一実施形態において、米国特許公開第２０１７２８１７６４号に概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について、特にそこに開示される配列について本明細書に組み込まれる。具体的には、配列番号１０のＶＨ配列、および配列番号１４のＶＬ配列（ＵＳ２０１７／２８１７６４から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１８のＶＨ配列、および配列番号２２のＶＬ配列（ＵＳ２０１７／２８１７６４から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号２６のＶＨ配列、および配列番号３０のＶＬ配列（ＵＳ２０１７／２８１７６４から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号３５のＶＨ配列、および配列番号３７のＶＬ配列（ＵＳ２０１７／２８１７６４から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号３４のＶＨ配列、および配列番号３６のＶＬ配列（ＵＳ２０１７／２８１７６４から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１８２】
別の実施形態において、国際特許公開第ＷＯ２０１５／００９８５６号に概説される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、（参照によりその全体が、特に以下に列挙される配列番号について、特にそこに開示される配列について（国際特許公開第ＷＯ２０１６／０１１２６４号を参照されたい）本明細書に組み込まれる。具体的には、配列番号１５のＶＨ配列、および配列番号１３のＶＬ配列（ＷＯ２０１５／００９８５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、配列番号１６のＶＨ配列、および配列番号１４のＶＬ配列（ＷＯ２０１５／００９８５６から）を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１８３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、米国特許出願第２０１７／００３７１３３号、国際特許公開第ＷＯ２０１７／０４８８２４号のいずれにも記載される抗体であり、ＭＢＳＡ４３（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅから市販）は、抗ＴＩＧＩＴ抗体のｐａｂ２１９７またはｐａｂ２１９６（米国特許出願第２０１７／００８１４０９）、ＥＯＳ０８４４４８、ＣＡＳＣ−６７４（Ａｄｉｍａｂ  ＬＬＣから入手可能）である。具体的には、米国特許出願第２０１７／００３７１３３号に記載される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、国際特許公開第ＷＯ２０１７／０４８８２４号に記載される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＢＳＡ４３は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体のｐａｂ２１９７は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体のｐａｂ２１９６は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体のＥＯＳ０８４４４８は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体のＣＡＳＣ−６７４は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１８４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、米国特許第９，７１３，３６４号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＰＴＺ−２０１（ＡＳＰ８３７４）である。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体のＰＴＺ−２０１（ＡＳＰ８３７４）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、米国特許第９，７１３，３６４号に記載されるＭＡＢ１、ＭＡＢ２、ＭＡＢ３、ＭＡＢ４、ＭＡＢ５、ＭＡＢ６、ＭＡＢ７、ＭＡＢ８、ＭＡＢ９、ＭＡＢ１０、ＭＡＢ１１、ＭＡＢ１２、ＭＡＢ１３、ＭＡＢ１４、ＭＡＢ１５、ＭＡＢ１６、ＭＡＢ１７、ＭＡＢ１８、４０  ＭＡＢ１９、ＭＡＢ２０、またはＭＡＢ２１からなる群から選択される抗体である。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ２は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ３は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ４は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ５は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ６は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ７は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ８は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ９は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１０は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ���７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１１は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１２は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１３は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１４は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１５は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１６は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１７は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１８は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ１９は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ２０は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、米国特許第９，７１３，３６４号からの抗ＴＩＧＩＴ抗体のＭＡＢ２１は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１８５】
いくつかの態様において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、１０Ａ７、１Ｆ４、１４Ａ６、２８Ｈ５、３１Ｃ６、１５Ａ６、２２Ｇ２、１１Ｇ１１、および／または１０Ｄ７であり、そのそれぞれの内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の１０Ａ７は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の１Ｆ４は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の１４Ａ６は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の２８Ｈ５は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の３１Ｃ６は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の１５Ａ６は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の２２Ｇ２は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の１１Ｇ１１は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。具体的には、抗ＴＩＧＩＴ抗体の１０Ｄ７は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１８６】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、その全体が本明細書に組み込まれる国際特許公開第ＷＯ２０１６／０２８６５６号に記載されるそれらのうちの１つである。具体的には、国際特許公開第ＷＯ２０１６／０２８６５６号に提供される（および本明細書の図３に再現する）抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせることができる。
【０１８７】
本明細書に記載される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、本発明の三重併用療法の方法による用途を見出すことができ、以下のように名付ける。かかるＴＩＧＩＴ抗体は、例えば「ＣＰＡ．９．０８６」のような参照番号を有する。これは、これらの抗体が２本の重鎖および２本の軽鎖を含むという理解に基づいて、例えば図３に図示されるような、可変重鎖および可変軽鎖の組み合わせを表す。「ＣＰＡ．９．０８６．ＶＨ」は、ＣＰＡ．９．０８６の可変重部分を指し、一方で「ＣＰＡ．９．０８６．ＶＬ」は可変軽鎖である。「ＣＰＡ．９．０８６．ｖｈＣＤＲ１」、「ＣＰＡ．９．０８６．ｖｈＣＤＲ２」、「ＣＰＡ．９．０８６．ｖｈＣＤＲ３」、「ＣＰＡ．９．０８６．ｖｌＣＤＲ１」、「ＣＰＡ．９．０８６．ｖｌＣＤＲ２」、および「ＣＰＡ．９．０８６．ｖｌＣＤＲ３」は、示されるＣＤＲを指す。「ＣＰＡ．９．０８６．ＨＣ」は、この分子の重鎖全体（例えば、可変および定常ドメイン）を指し、「ＣＰＡ．９．０８６．ＬＣ」は、同じ分子の軽鎖全体（例えば、可変および定常ドメイン）を指す。一般に、ヒトカッパ軽鎖は、本明細書における各ファージ（またはヒト化ハイブリドーマ）抗体の定常ドメインに使用されるが、いくつかの実施形態では、ラムダ軽鎖定常ドメインが使用される。「ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ１」は、ヒトＩｇＧ１の定常ドメインを含む可変重および軽ドメインを含む完全長抗体を指す（したがって例えばＨ１；ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４配列を図１に示す）。したがって、「ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ２」は、ヒトＩｇＧ２と連結されたＣＰＡ．９．０８６可変ドメインとなる。「ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ３」は、ヒトＩｇＧ３と連結されたＣＰＡ．９．０８６可変ドメインとなり、「ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４」は、ヒトＩｇＧ４と連結されたＣＰＡ．９．０８６可変ドメインとなる。場合によっては、ヒトＩｇＧは、追加の変異を有し得、かかるものは以下に記載され、これには注釈を付けられ得ることに留意されたい。例えば、多くの実施形態において、ヒトＩｇＧ４にＳ２４１Ｐ変異が存在し得、これは、例えば、「ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）」と注釈を付けられ得る。このＳ２４１Ｐヒンジバリアントを有するヒトＩｇＧ４配列を図１に示す。他の可能性のあるバリアントは、ＩｇＧ１（Ｎ２９７Ａ）（またはこの部位でグリコシル化を切除し、したがってＦｃγＲＩＩＩａ結合に関連するエフェクター機能の多くを切除した他のバリアント）、およびＦｃγＲ受容体への結合を低下させるＩｇＧ１（Ｄ２６５Ａ）である。本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＴＩＧＩＴ抗体ドメイン配列のうちのいずれをも含むことができる。本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＴＩＧＩＴ抗原結合ドメインのうちのいずれをも含むことができる。
【０１８８】
本発明は、可変重および軽ドメイン、ならびに完全長重および軽鎖をさらに提供する。
【０１８９】
いくつかの実施形態において、本発明は、上記で概説したｓｃＦｖリンカーによって連結された可変重ドメインおよび可変軽ドメインを含むＴＩＧＩＴと結合するｓｃＦｖを提供する。ＶＬおよびＶＨドメインは、いずれかの配向、例えばＮ末端からＣ末端まで「ＶＨ−リンカー−ＶＬ」または「ＶＬ−リンカー」ＶＨ」であり得る。これらは、それらの構成要素部分によって命名され、例えば、「ｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０８６．ＶＨ−リンカー−ＶＬ」または「ｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０８６．ＶＬ−リンカー−ＶＨ」である。したがって、「ｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０８６」はいずれの配向にあってもよい。本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＴＩＧＩＴと結合する任意のｓｃＦｖを含むことができる。本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＴＩＧＩＴと結合する任意のｓｃＦｖを含むことができる。本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、以下のうちのいずれをも含むことができる：
ＣＰＡ．９．０１８、ＣＰＡ．９．０１８．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０１８．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０１８．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０１８．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ３、ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０１８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０１８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０１８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０１８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０１８．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０１８．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０１８；
ＣＰＡ．９．０２７、ＣＰＡ．９．０２７．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０２７．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０２７．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０２７．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０２７．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０２７．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０２７．Ｈ３、ＣＰＡ．９．０２７．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０２７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０２７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０２７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０２７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０２７．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０２７．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０２７；
ＣＰＡ．９．０４９、ＣＰＡ．９．０４９．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０４９．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０４９．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０４９．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０４９．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０４９．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０４９．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０４９．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０４９．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０４９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０４９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０４９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０４９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０４９．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０４９．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０４９；
ＣＰＡ．９．０５７、ＣＰＡ．９．０５７．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０５７．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０５７．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０５７．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０５７．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０５７．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０５７．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０５７．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０５７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０５７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０５７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０５７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０５７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０５７．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０５７．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０５７；
ＣＰＡ．９．０５９、ＣＰＡ．９．０５９．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０５９．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０５９．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０５９．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０５９．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０５９．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０５９．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０５９．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０５９．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０５９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０５９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０５９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０５９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０５９．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０５９．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０５９；
ＣＰＡ．９．０８３、ＣＰＡ．９．０８３．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０８３．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０８３．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０８３．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０８３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０８３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８３．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８３．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０８３；
ＣＰＡ．９．０８６、ＣＰＡ．９．０８６．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０８６．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０８６．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０８６．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０８６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０８６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８６．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８６．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０８６；
ＣＰＡ．９．０８９、ＣＰＡ．９．０８９．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０８９．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０８９．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０８９．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０８９．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０８９．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０８９．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０８９．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０８９．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０８９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０８９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８９．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８９．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０８９；
ＣＰＡ．９．０９３、ＣＰＡ．９．０９３．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０９３．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０９３．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０９３．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０９３．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０９３．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０９３．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０９３．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０９３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０９３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０９３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０９３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０９３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０９３．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０９３．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０９３；
ＣＰＡ．９．１０１、ＣＰＡ．９．１０１．ＶＨ、ＣＰＡ．９．１０１．ＶＬ、ＣＰＡ．９．１０１．ＨＣ、ＣＰＡ．９．１０１．ＬＣ、ＣＰＡ．９．１０１．Ｈ１、ＣＰＡ．９．１０１．Ｈ２、ＣＰＡ．９．１０１．Ｈ３；ＣＰＡ．９．１０１．Ｈ４；ＣＰＡ．９．１０１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．１０１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．１０１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．１０１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．１０１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．１０１．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．１０１．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．１０１；ならびに
ＣＰＡ．９．１０３、ＣＰＡ．９．１０３．ＶＨ、ＣＰＡ．９．１０３．ＶＬ、ＣＰＡ．９．１０３．ＨＣ、ＣＰＡ．９．１０３．ＬＣ、ＣＰＡ．９．１０３．Ｈ１、ＣＰＡ．９．１０３．Ｈ２、ＣＰＡ．９．１０３．Ｈ３；ＣＰＡ．９．１０３．Ｈ４；ＣＰＡ．９．１０３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．１０３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．１０３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．１０３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．１０３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．１０３．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．１０３．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．１０３。
【０１９０】
さらに、本発明は、ハイブリドーマから生成されたマウス抗体であるいくつかのＣＨＡ抗体を提供する。当該技術分野で周知のように、これらの６つのＣＤＲは、ヒトフレームワーク可変重および可変軽領域に入れられる場合、または可変重および軽ドメインがヒト化される場合に有用である。したがって、本発明は、以下のＣＤＲの組を含む抗体、通常は完全長またはｓｃＦｖドメインを提供し、その配列は図３および／または配列表に示される：
ＣＨＡ．９．５３６．１、ＣＨＡ．９．５３６．１．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．１．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．１．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．１．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．１．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．１．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．１．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．１．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．３、ＣＨＡ．９．５３６．３．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．３．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．３．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．３．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．３．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．３．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．３．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．４、ＣＨＡ．９．５３６．４．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．４．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．４．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．４．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．４．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．４．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．４．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．４．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．４．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．５、ＣＨＡ．９．５３６．５．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．５．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．５．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．５．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．６、ＣＨＡ．９．５３６．６．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．６．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．６．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．６．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．６．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．６．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．６．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．６．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．７、ＣＨＡ．９．５３６．７．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．７．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．７．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．７．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．７．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．７．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．７．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．７．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．８、ＣＨＡ．９．５３６．８．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．８．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．８．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．８．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．８．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．８．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．８．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．８．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．１、ＣＨＡ．９．５６０．１ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．１．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．１．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．１．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．１．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．１．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．１．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．１．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．３、ＣＨＡ．９．５６０．３ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．３．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．３．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．３．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．３．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．３．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．３．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．４、ＣＨＡ．９．５６０．４ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．４．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．４．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．４．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．４．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．４．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．４．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．４．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．４．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．５、ＣＨＡ．９．５６０．５ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．５．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．５．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．５．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．５．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．５．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．５．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．５．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．６、ＣＨＡ．９．５６０．６ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．６．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．６．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．６．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．６．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．６．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．６．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．６．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．７、ＣＨＡ．９．５６０．７ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．７．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．７．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．７．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．７．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．７．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．７．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．７．Ｈ４；ＣＨＡ．９．５６０．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．８、ＣＨＡ．９．５６０．８ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．８．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．８．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．８．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．８．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．８．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．８．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．８．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４６．１、ＣＨＡ．９．５４６．１ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４６．１．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４６．１．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４６．１．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４６．１．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４６．１．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４６．１．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４６．１．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４６．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．１、ＣＨＡ．９．５４７．１ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．１．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．１．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．１．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．１．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．１．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．１．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．１．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．２、ＣＨＡ．９．５４７．２ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．２．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．２．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．２．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．２．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．２．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．２．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．２．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．３、ＣＨＡ．９．５４７．３ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．３．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．３．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．３．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．３．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．３．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．３．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．４、ＣＨＡ．９．５４７．４ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．４．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．４．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．４．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．４．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．４．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．４．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．４．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．４．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．６、ＣＨＡ．９．５４７．６  ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．６．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．６．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．６．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．６．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．６．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．６．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．６．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．７、ＣＨＡ．９．５４７．７ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．７．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．７．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．７．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．８、ＣＨＡ．９．５４７．８ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．８．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．８．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．８．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．８．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．８．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．８．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．８．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．９、ＣＨＡ．９．５４７．９、ＣＨＡ．９．５４７．９ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．９．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．９．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．９．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．１３、ＣＨＡ．９．５４７．１３、ＣＨＡ．９．５４７．１３ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．１、ＣＨＡ．９．５４１．１．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．１．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．１．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．１．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．１．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．１．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．１．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．１．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．３、ＣＨＡ．９．５４１．３．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．３．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．３．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．３．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．３．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．３．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．３．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．４、ＣＨＡ．９．５４１．４．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．４．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．４．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．４．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．４．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．４．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．４．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．４．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．４．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．５、ＣＨＡ．９．５４１．５．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．５．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．５．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．５．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．５．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．５．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．５．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．５．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．５．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．６、ＣＨＡ．９．５４１．６．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．６．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．６．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．６．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．６．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．６．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．６．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．６．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．７、ＣＨＡ．９．５４１．７．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．７．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．７．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．７．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．７．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．７．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．７．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．７．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｈＣＤＲ３；ならびに
ＣＨＡ．９．５４１．８、ＣＨＡ．９．５４１．８．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．８．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．８．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．８．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．８．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．８．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．８．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．８．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５４１．８ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．８．ｖｈＣＤＲ３。
【０１９１】
上記の抗体のＣＤＲを含むｓｃＦｖの場合、これらは、ｓｃＦｖと標示され、ｓｃＦｖは、上記のように再びいずれかの配向で、ｖｈＣＤＲを有する可変重鎖ドメイン、リンカー、およびｖｌＣＤＲを有する可変軽鎖ドメインを含む。したがって、本発明は、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５３６．３．１、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５３６．３、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５３６．４、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５３６．５、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５３６．７、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５３６．８、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５６０．１、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５６０．３、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５６０．４、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５６０．５、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５６０．６、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５６０．７、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５６０．８、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４６．１、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４７．１、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４７．２、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４７．３、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４７．４、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４７．６、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４７．７、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４７．８、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４７．９、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４７．１３、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４１．１、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４１．３、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４１．４、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４１．５、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４１．６、ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４１．７、およびｓｃＦｖ−ＣＨＡ．９．５４１．８の使用を含む。
【０１９２】
さらに、ＣＨＡ．９．５４３は、ＴＩＧＩＴに結合するが、ＴＩＧＩＴ−ＰＶＲ相互作用を遮断しない。
【０１９３】
本明細書で考察されるように、本発明は、上記で概説されるＣＤＲにおけるバリアントを含む、上記の構成要素（ＣＰＡおよびＣＨＡ）のバリアントの使用をさらに提供する。したがって、本発明は、抗体が依然としてＴＩＧＩＴに結合する限り、一組のＣＤＲに１つ、２つまたは３つのアミノ酸の相違を含み得る、本明細書に概説される６つ一組のＣＤＲを含む抗体を提供する。Ｂｉａｃｏｒｅアッセイ等の、本明細書に概説されるＣＤＲ配列と比較して変異を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体かを試験するための好適なアッセイが、当該技術分野で知られている。
【０１９４】
さらに、本発明は、上記の可変重鎖および軽鎖のバリアントをさらに提供する。この場合、可変重鎖は、本明細書の「ＶＨ」配列と、８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％同一であり得、および／またはＦｃバリアントを使用する場合、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれよりも多くのアミノ酸変化を含み得る。本明細書の「ＶＬ」配列（および特にＣＰＡ．９．０８６）と、８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％同一であり得、および／またはＦｃバリアントを使用する場合、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれよりも多くのアミノ酸変化を含み得る、可変軽鎖が提供される。これらの実施形態において、本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体は、依然としてＴＩＧＩＴと結合する。Ｂｉａｃｏｒｅアッセイ等の、本明細書に概説されるＣＤＲ配列と比較して変異を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体かを試験するための好適なアッセイが、当該技術分野で知られている。
【０１９５】
同様に、本明細書の完全長「ＨＣ」および「ＬＣ」配列（および特にＣＰＡ．９．０８６）と、８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％同一であり、および／またはＦｃバリアントを使用する場合、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれよりも多くのアミノ酸変化を含む、重鎖および軽鎖が提供される。これらの実施形態において、本発明は、抗体が依然としてＴＩＧＩＴに結合する限り、これらのバリアントを含む。Ｂｉａｃｏｒｅアッセイ等の、本明細書に概説されるＣＤＲ配列と比較して変異を含む抗ＴＩＧＩＴ抗体かを試験するための好適なアッセイが、当該技術分野で知られている。
【０１９６】
加えて、本明細書のＣＰＡまたはＣＨＡ抗体のいずれかの可変重および可変軽鎖のフレームワーク領域は、当該技術分野で知られているようにヒト化（あるいは、ＣＨＡ抗体の場合、代替のヒト化方法が行われ得る範囲で「再ヒト化」）することができ（時折、バリアントが必要に応じてＣＤＲにおいて生成される）、このようにして、図２３のＶＨ鎖およびＶＬ鎖のヒト化バリアント（および特にＣＰＡ．９．０８６）を生成することができる。さらに、続いてヒト化可変重および軽ドメインを、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４（ＩｇＧ４（Ｓ２４１Ｐ）を含む）由来の定常領域等のヒト定常領域と融合させることができる。
【０１９７】
特に、当該技術分野で知られているように、マウスＶＨおよびＶＬ鎖は、例えば、ヒト化方法について参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＹｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．４１：Ｗ３４−Ｗ４０（２０１３）に概説されるように、ＮＣＢＩウェブサイトのＩｇＢＬＡＳＴプログラムを用いて、当該技術分野で知られているようにヒト化することができる。ＩｇＢＬＡＳＴは、マウスＶＨおよび／またはＶＬ配列を採取し、それを既知のヒト生殖細胞系列配列のライブラリと比較する。本明細書に示されるように、本明細書で生成されるヒト化配列について、使用したデータベースは、ＩＭＧＴヒトＶＨ遺伝子（Ｆ＋ＯＲＦ、２７３生殖細胞系列配列）およびＩＭＧＴヒトＶＬカッパ遺伝子（Ｆ＋ＯＲＦ、７４生殖細胞系列配列）であった。例となる５つのＣＨＡ配列を選択した：ＣＨＡ．９．５３６、ＣＨＡ９．５６０、ＣＨＡ．９．５４６、ＣＨＡ．９．５４７およびＣＨＡ．９．５４１（図３参照）。このヒト化の実施形態のために、ヒト生殖細胞系列ＩＧＨＶ１−４６（対立遺伝子１）を、アクセプタ配列およびヒト重鎖ＩＧＨＪ４（対立遺伝子１）接合領域（Ｊ遺伝子）として５つ全てについて選択した。４つ（ＣＨＡ．７．５１８、ＣＨＡ．７．５３０、ＣＨＡ．７．５３８＿１、およびＣＨＡ．７．５３８＿２）のうちの３つについては、ヒト生殖細胞系列ＩＧＫＶ１−３９（対立遺伝子１）をアクセプタ配列として選択し、ヒト軽鎖ＩＧＫＪ２（対立遺伝子１）（Ｊ遺伝子）を選択した。Ｊ遺伝子は、ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇのｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ情報システム、ＩＭＧＴ（登録商標）にてコンパイルされたヒト接合領域配列から選択した。ＣＤＲは、ＡｂＭ定義（ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆｏ．ｏｒｇ．ｕｋ／ａｂｓ／を参照）に従って定義した。いくつかの実施形態において、本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体には、ＴＩＧＩＴ結合部分または抗原結合ドメインが含まれ、異なるＴＩＧＩＴ結合部分または抗原結合ドメインのＶＨおよびＶＬ配列は、「混合化および適合化」され他のＴＩＧＩＴ結合部分または抗原結合ドメインを創出できる。かかる「混合化および適合化」抗ＴＩＧＩＴ抗体のＴＩＧＩＴ結合は、上述される結合アッセイ、例えば、ＥＬＩＳＡまたはＢｉａｃｏｒｅアッセイ）を使用して試験することができる。いくつかの実施形態において、ＶＨおよびＶＬ鎖が混合化および適合化される場合、特定のＶＨ／ＶＬ対からのＶＨ配列が構造的に同様のＶＨ配列と置き換えられる。同様に、いくつかの実施形態において、特定のＶＨ／ＶＬ対からのＶＬ配列が構造的同様のＶＬ配列と置き換えられる。例えば、同種抗体のＶＨおよびＶＬ配列は、混合化および適合化に特に適している。
【０１９８】
したがって、本発明で使用する抗ＴＩＧＩＴ抗体は、（ａ）本明細書に列挙される配列、（ｂ）（ａ）で指定したＣＤＲアミノ酸配列とは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれよりも多くのアミノ酸置換だけ異なる配列；（ｃ）（ａ）または（ｂ）で指定した配列との９０％以上、９５％以上、９８％以上、または９９％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列；（ｄ）本明細書に列挙されるアミノ酸をコードする核酸配列を有するポリヌクレオチドによってコードされるアミノ酸配列を有するポリペプチドからなる群から選択される、ＣＤＲアミノ酸配列を含むことができる。特に、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、または（ｄ）から選択される配列を有することができるＣＰＡ．９．０８６抗体からの抗原結合ドメインを含むことができる。
【０１９９】
本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体の定義には、本明細書に列挙されるＴＩＧＩＴ抗体からの結合ドメインと同一性を共有するＴＩＧＩＴ結合ドメインを含む抗体がさらに含まれる。つまり、特定の実施形態において、本発明に従う抗ＴＩＧＩＴ抗体は、好ましい抗ＴＩＧＩＴ抗体の抗ＴＩＧＩＴアミノ酸配列からの結合ドメインの全てまたは一部とそれぞれ同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖および軽鎖可変領域を含み、この抗体は、親抗ＴＩＧＩＴ抗体の所望の機能特性を保持する。２つの配列間の同一性パーセントは、２つの配列を最適にアラインメントするために導入する必要があるギャップの数および各ギャップの長さを考慮に入れた、それらの配列が共有する同一位置の数の関数である（即ち、相同性％＝同一位置の数／位置の総数×１００）。配列の比較および２つの配列間の同一性パーセントの決定は、以下の非限定的な実施例において記載するように、数学アルゴリズムを使用して達成することができる。
【０２００】
２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは、ＰＡＭ１２０重み残差テーブル（ｗｅｉｇｈｔ  ｒｅｓｉｄｕｅ  ｔａｂｌｅ）、１２のギャップ長ペナルティ、および４のギャップペナルティを使用して、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれているＥ．Ｍｅｙｅｒｓ  ａｎｄ  Ｗ．Ｍｉｌｌｅｒ（Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．，４：１１−１７（１９８８））のアルゴリズムを使用して決定することができる。さらに、２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは、Ｂｌｏｓｓｕｍ  ６２行列またはＰＡＭ２５０行列のいずれか、ならびに１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップ重み、および１、２、３、４、５、または６の長さ重みを使用して、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（市販されている）中のＧＡＰプログラムに組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４４−４５３（１９７０））アルゴリズムを使用して決定することができる。
【０２０１】
一般に、ＴＩＧＩＴ結合ドメインまたは抗原結合ドメイン間の比較のための同一性の割合は、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも９０％であり、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％パーセント同一性を有することが好ましい。同一性の割合は、全アミノ酸配列、例えば重もしくは軽鎖全体にかかるか、または鎖の一部にかかるものであり得る。例えば、本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体の定義に含まれるのは、そのＴＩＧＩＴ結合部分または抗原結合ドメインが可変領域全体（例えば、同一性が可変領域にかけて９５％または９８％同一である場合）、もしくは定常領域全体、もしくはＦｃドメインのみにかけて同一性を共有する抗体である。特に、本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体には、ＣＰＡ．９．０８６抗体と少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも９０％を有し、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％パーセント同一性を有することが好ましいＴＩＧＩＴ結合部分または抗原結合ドメインを有する抗体が含まれる。
【０２０２】
加えて、ＣＤＲは同一であるが、可変ドメイン（または重もしくは軽鎖全体）のフレームワーク部分において変化を有し得る配列もまた含まれる。例えば、本発明で使用される抗ＴＩＧＩＴ抗体には、図３に示すものと同一のＣＤＲを有するが、可変領域にかけて同一性がより低く、例えば９５または９８％パーセント同一性であり得るものが含まれる。特に、本発明は、ＣＰＡ．９．０８６と同一のＣＤＲを有するが、ＣＰＡ．９．０８６と９５％または９８％同一のフレームワーク領域を有するＴＩＧＩＴ結合部分または抗原結合ドメインを有する、抗ＴＩＧＩＴ抗体の使用を提供する。
Ｄ．抗ＰＤ−１抗体と組み合わせた抗ＴＩＧＩＴ抗体
別の実施形態において、本発明は、本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ−１抗体との組み合わせを提供する。２つの承認された抗ＰＤ−１抗体、ペムブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標））およびニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標））、ならびに開発中のさらに多くのものが存在し、これらは本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体と併用され得る。
【０２０３】
したがって、本発明は以下の特定の組み合わせを提供する：図３Ｆに示されるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）とペンブロリズマブ；図３Ｆに示されるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）とニボルマブ；図３Ｇに示されるＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）とペンブロリズマブ；図３Ｇに示されるＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）とニボルマブ；図４ＨＨに示されるＣＨＡ．９．５４７．７Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）とペンブロリズマブ；図３ＨＨに示されるＣＨＡ．９．５４７．７Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）とニボルマブ；図３ＶＶに示されるＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）とペンブロリズマブ；および図３ＶＶに示されるＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）とニボルマブ；全て譲受人Ｃｏｍｐｕｇｅｎにより２０１７年６月１日に出願された「抗ＴＩＧＩＴ抗体および使用方法」と題されたＵＳＳＮ６２／５１３，９１６の図４からである。抗ＰＤ−１抗体と組み合わせることができる他の抗ＴＩＧＩＴ抗体も同様に図３に提供する。
Ｅ．特異的抗ＰＶＲＩＧ抗体
本発明は、いくつかの特異的なＰＶＲＩＧと結合する列挙される６つのＣＤＲのセット、および定義された可変重（ｖｈ、ＶＨ、またはＶＨ）、および可変軽（ｖｌ、ＶＬまたはＶＬ）を含む、全長抗体を含む抗原結合ドメインを提供する。
【０２０４】
一実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、図５に示されるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）からの６つのＣＤＲのセット（ｖｈＣＤＲ１、ｖｈＣＤＲ２、ｖｈＣＤＲ３、ｖｌＣＤＲ１、ｖｌＣＤＲ２、およびｖｌＣＤＲ３）を含む抗体である。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図５に示されるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）からの可変重（ｖｈ）および可変軽（ｖｌ）ドメインを含み、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、およびＩｇＧ４のヒトＩｇＧ定常ドメイン（Ｓ２４１Ｐ）と連結される、抗体である。一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）である。いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、図５または図６３に示される抗ＰＶＲＩＧ抗体である。
【０２０５】
特に、参照により本明細書に具体的に組み込まれるＺｈｕらのＷＯ２０１７／０４１００４の２Ｈ６抗ＰＶＲＩＧ抗体を使用することができ、ＷＯ２０１７／０４１００４からの配列番号６のｖｈＣＤＲ１、配列番号７のｖｈＣＤＲ２、配列番号８のｖｈＣＤＲ３、配列番号９のｖｌＣＤＲ１、配列番号１０のｖｌＣＤＲ２、および配列番号１１のｖｈＣＤＲ３を有する。Ｚｈｕらの２Ｈ６抗ＰＶＲＩＧ抗体は、配列番号６を含む可変重ドメインおよび配列番号３を含む可変軽ドメインを有し、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、およびＩｇＧ４（Ｓ２４１Ｐ）のヒトＩｇＧ定常ドメインと連結されることができる。この段落の全ての配列番号は、ＷＯ２０１７／０４１００４からであり、図５においてもさらに提供される。
【０２０６】
特に、参照により本明細書に具体的に組み込まれるＷＯ２０１８／０１７８６４からの３３４Ｍ５抗ＰＶＲＩＧ抗体を使用することができ、ＷＯ２０１８／０１７８６４からの配列番号３１のｖｈＣＤＲ１、配列番号３２のｖｈＣＤＲ２、配列番号３３のｖｈＣＤＲ３、配列番号２６のｖｌＣＤＲ１、配列番号２７のｖｌＣＤＲ２、および配列番号２８のｖｈＣＤＲ３を有する。ＷＯ２０１８／０１７８６４からの３３４Ｍ５抗ＰＶＲＩＧ抗体は、配列番号３０を含む可変重ドメインおよび配列番号２５を含む可変軽ドメインを有し、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、およびＩｇＧ４（Ｓ２４１Ｐ）のヒトＩｇＧ定常ドメインと連結されることができる。この段落の全ての配列番号は、ＷＯ２０１８／０１７８６４からであり、図５においてもさらに提供される。
Ｆ．追加の抗ＰＶＲＩＧ抗体
本発明の三重併用よる用途を見出すことができるＰＶＲＩＧ抗体は、以下のように名付ける。本明細書に記載されるこれらのＰＶＲＩＧ抗体は、以下のように名付ける。ＰＶＲＩＧ抗体は、例えば「ＣＰＡ．７．０１３」のような参照番号を有する。これは、例えば図６３に図示されるような、可変重および可変軽鎖の組み合わせを表す。「ＣＰＡ．７．０１３．ＶＨ」はＣＰＡ．７．０１３の可変重部分を指し、一方「ＣＰＡ．７．０１３．ＶＬ」は可変軽鎖である。「ＣＰＡ．７．０１３．ｖｈＣＤＲ１」、「ＣＰＡ．７．０１３．ｖｈＣＤＲ２」、「ＣＰＡ．７．０１３．ｖｈＣＤＲ３」、「ＣＰＡ．７．０１３．ｖｌＣＤＲ１」、「ＣＰＡ．７．０１３．ｖｌＣＤＲ２」、および「ＣＰＡ．７．０１３．ｖｌＣＤＲ３」は、示されるＣＤＲを指す。「ＣＰＡ．７．０１３．ＨＣ」は、この分子の重鎖全体（例えば、可変および定常ドメイン）を指し、「ＣＰＡ．７．０１３．ＬＣ」は、同じ分子の軽鎖全体（例えば、可変および定常ドメイン）を指す。「ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ１」は、ヒトＩｇＧ１の定常ドメインを含む可変重および軽ドメインを含む完全長抗体を指す（したがってＨ１；ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４を例えば図１に提供する）。したがって、「ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ２」は、ヒトＩｇＧ２と連結されたＣＰＡ．７．０１３可変ドメインである。「ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ３」は、ヒトＩｇＧ３と連結されたＣＰＡ．７．０１３可変ドメインであり、「ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ４」は、ヒトＩｇＧ４と連結されたＣＰＡ．７．０１３可変ドメインである。
【０２０７】
本発明の三重併用よる用途を見出すことができるＰＶＲＩＧ抗体は、以下のように名付ける。これらの抗体は参照番号、例えば「ＣＨＡ．７．５１８．１」を有する。これは、これらの抗体が２本の重鎖および２本の軽鎖を含むという理解に基づいて、例えば図５および６３に図示されるような、可変重および可変軽鎖の組み合わせを表す。「ＣＰＡ．「７．５１８．１．ＶＨ」は、ＣＰＡ．７．５１８．１の可変重部分を指し、一方で「ＣＰＡ．７．５１８．１．ＶＬ」は、可変軽鎖である。「ＣＰＡ．７．５１８．１．ｖｈＣＤＲ１」、「ＣＰＡ．７．５１８．１．ｖｈＣＤＲ２」、「ＣＰＡ．７．５１８．１．ｖｈＣＤＲ３」、「ＣＰＡ．７．５１８．１．ｖｌＣＤＲ１」、「ＣＰＡ．７．５１８．１．ｖｌＣＤＲ２」、および「ＣＰＡ．７．５１８．１．ｖｌＣＤＲ３」は、示されるＣＤＲを指す。「ＣＰＡ．７．５１８．１．ＨＣ」は、この分子の重鎖全体（例えば、可変および定常ドメイン）を指し、「ＣＰＡ．７．５１８．１．ＬＣ」は、同じ分子の軽鎖全体（例えば、可変および定常ドメイン）を指す。一般に、ヒトカッパ軽鎖は、本明細書における各ファージ（またはヒト化ハイブリドーマ）抗体の定常ドメインに使用されるが、いくつかの実施形態において、ラムダ軽鎖定常ドメインが使用される。「ＣＰＡ．７．５１８．１．Ｈ１」は、ヒトＩｇＧ１の定常ドメインを含む可変重および軽ドメインを含む完全長抗体を指す（したがってＨ１；ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４を例えば図１に提供する）。したがって、「ＣＰＡ．７．５１８．１．Ｈ２」は、ヒトＩｇＧ２と連結されたＣＰＡ．７．５１８．１可変ドメインとなる。「ＣＰＡ．７．５１８．１．Ｈ３」は、ヒトＩｇＧ３と連結されたＣＰＡ．７．５１８．１可変ドメインとなり、「ＣＰＡ．７．５１８．１．Ｈ４」は、ヒトＩｇＧ４と連結されたＣＰＡ．７．５１８．１可変ドメインとなる。場合によっては、ヒトＩｇＧは、追加の変異を有し得、かかるものは以下に記載され、これには注釈を付けられ得ることに留意されたい。例えば、多くの実施形態において、ヒトＩｇＧ４にＳ２４１Ｐ変異が存在し得、これは、例えば、「ＣＰＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）」と注釈を付けられ得る。このＳ２４１Ｐヒンジバリアントを有するヒトＩｇＧ４配列を図１に示す。他の可能性のあるバリアントは、ＩｇＧ１（Ｎ２９７Ａ）（またはこの部位でグリコシル化を切除し、したがってＦｃγＲＩＩＩａ結合に関連するエフェクター機能の多くを切除した他のバリアント）、およびＦｃγＲ受容体との結合を低減させるＩｇＧ１（Ｄ２６５Ａ）である。本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ＰＶＲＩＧ抗体配列のうちのいずれをも含むことができる。本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ＰＶＲＩＧ抗原結合ドメイン配列のうちのいずれをも含むことができる。
【０２０８】
本発明は、可変重および軽ドメイン、ならびに完全長重および軽鎖をさらに提供し、それらのいずれも、本発明に従う使用のための抗ＰＶＲＩＧ抗体の一部として利用することができる。
【０２０９】
いくつかの実施形態において、本発明は、上記で概説したｓｃＦｖリンカーによって連結された可変重ドメインおよび可変軽ドメインを含むＰＶＲＩＧと結合するｓｃＦｖを提供する。ＶＬおよびＶＨドメインは、いずれかの配向、例えばＮ末端からＣ末端まで「ＶＨ−リンカー−ＶＬ」または「ＶＬ−リンカー」ＶＨ」であり得る。これらは、その構成要素部分によって命名され、例えば、「ｓｃＦｖ−ＣＨＡ．７．５１８．１ＶＨ−リンカー−ＶＬ」または「ｓｃＦｖ−ＣＰＡ．７．５１８．１．ＶＬ−リンカー−ＶＨ」などである。したがって、「ｓｃＦｖ−ＣＰＡ．７．５１８．１」はいずれの配向にあってもよい。本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ＰＶＲＩＧと結合するｓｃＦｖを含むことができる。
【０２１０】
本発明は、いくつかの列挙される６つのＣＤＲのセットを含む、全長抗体を含む抗原結合ドメインを提供する。本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧ抗体は、本明細書で提供されるＰＶＲＩＧ抗体配列からの６つのＣＤＲのセットのうちのいずれをも含むことができる。
【０２１１】
本発明は、可変重および軽ドメイン、ならびに完全長重および軽鎖をさらに提供する。
【０２１２】
多くの実施形態において、本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧ抗体は、ヒト（ファージ由来）であり、ＰＶＲＩＧとＰＶＬＲ２との結合を遮断する。本発明の抗ＰＶＲＩＧ抗体は、受容体−リガンド相互作用の結合および遮断の両方が可能なＰＶＲＩＧ抗体ならびに／または抗原結合ドメイン配列を含むことができる。抗ＰＶＲＩＧは、受容体−リガンド相互作用の結合および遮断の両方が可能なＰＶＲＩＧ抗体配列からのＣＤＲを含むことができる。受容体−リガンド相互作用の結合および遮断の両方を行うＣＰＡ抗体、ならびにＣＤＲ配列は以下のとおりであり、その構成要素も概説されており、その配列を図６３に示す；
ＣＰＡ．７．００１、ＣＰＡ．７．００１．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００１．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００１．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００１．ＬＣ、およびＣＰＡ．７．００１．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００１．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００１．Ｈ３、ＣＰＡ．７．００１．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００１．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．００３、ＣＰＡ．７．００３．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００３．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００３．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００３．ＬＣ、ＣＰＡ．７．００３．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００３．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００３．Ｈ３、ＣＰＡ．７．００３．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００３．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．００４、ＣＰＡ．７．００４．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００４．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００４．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００４．ＬＣ、ＣＰＡ．７．００４．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００４．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００４．Ｈ３  ＣＰＡ．７．００４．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００４．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．００６、ＣＰＡ．７．００６．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００６．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００６．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００６．ＬＣ、ＣＰＡ．７．００６．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００６．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００６．Ｈ３  ＣＰＡ．７．００６．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００６．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．００８、ＣＰＡ．７．００８．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００８．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００８．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００８．ＬＣ、ＣＰＡ．７．００８．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００８．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００８．Ｈ３  ＣＰＡ．７．００８．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００８．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．００９、ＣＰＡ．７．００９．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００９．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００９．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００９．ＬＣ、ＣＰＡ．７．００９．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００９．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００９．Ｈ３  ＣＰＡ．７．００９．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００９．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００９．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１０、ＣＰＡ．７．０１０．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１０．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１０．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１０．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１０．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１０．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１０．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１０．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１０．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１１、ＣＰＡ．７．０１１．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１１．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１１．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１１．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１１．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１１．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１１．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１１．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１１．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１２、ＣＰＡ．７．０１２．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１２．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１２．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１２．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１２．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１２．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１２．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１２．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１２．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１２．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１３、ＣＰＡ．７．０１３．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１３．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１３．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１３．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１３．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１４、ＣＰＡ．７．０１４．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１４．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１４．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１４．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１４．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１４．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１４．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１４．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１４．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１５、ＣＰＡ．７．０１５．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１５．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１５．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１５．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１５．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１５．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１５．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１５．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１５．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１７、ＣＰＡ．７．０１７．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１７．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１７．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１７．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１７Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１７．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１７．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１７．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０００１７１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１８、ＣＰＡ．７．０１８．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１８．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１８．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１８．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１８．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１８．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１８．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１８．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１９、ＣＰＡ．７．０１９．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１９．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１９．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１９．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１９．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１９．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１９．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１９．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１９．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１９．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０２１、ＣＰＡ．７．０２１．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２１．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２１．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２１．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２１．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２１．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２１．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０２１．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０２１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２１．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０２２、ＣＰＡ．７．０２２．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２２．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２２．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２２．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２２．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２２．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２２．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０２２．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００２２０１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２２．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０２３、ＣＰＡ．７．０２３．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２３．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２３．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２３．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２３．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２３．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２３．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０２３．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０２３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２３．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０２４、ＣＰＡ．７．０２４．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２４．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２４．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２４．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２４．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２４．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２４．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０２４．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０２４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２４．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０３３、ＣＰＡ．７．０３３．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０３３．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０３３．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０３３．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０３３．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０３３．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０３３．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０３３．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０３３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０３３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０３３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０３３．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０３４、ＣＰＡ．７．０３４．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０３４．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０３４．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０３４．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０３４．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０３４．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０３４．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０３４．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０３４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０３４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０３４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０３４．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０３６、ＣＰＡ．７．０３６．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０３６．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０３６．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０３６．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０３６．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０３６．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０３６．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０３６．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０３６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０３６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０３６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０３６．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０４０、ＣＰＡ．７．０４０．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４０．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４０．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４０．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４０．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４０．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４０．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０４０．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４０．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０４６、ＣＰＡ．７．０４６．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４６．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４６．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４６．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４６．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４６．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４６．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０４６．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４６．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０４７、ＣＰＡ．７．０４７．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４７．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４７．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４７．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４７．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４７．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４７．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０４７．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００４７０１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４７．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０４９、ＣＰＡ．７．０４９．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４９．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４９．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４９．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４９．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４９．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４９．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０４９．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４９．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４９．ｖｌＣＤＲ３；ならびに
ＣＰＡ．７．０５０、ＣＰＡ．７．０５０．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０５０．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０５０．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０５０．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０５０．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０５０．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０５０．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０５０．Ｈ４、ＣＰＡ．７．０５０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０５０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０５０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０５０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０５０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０５０．ｖｌＣＤＲ３。
【０２１３】
さらに、ＰＶＲＩＧと結合したが、ＰＶＲＩＧとＰＶＬＲ２との相互作用を遮断しなかったいくつかのＣＰＡ抗体が本明細書で生成された。本発明の使用される抗ＰＶＲＩＧ抗体は、受容体−リガンド相互作用の結合することが可能であるが遮断しないＰＶＲＩＧ抗体および／または抗原結合ドメイン配列を含むことができる。本発明の使用される抗ＰＶＲＩＧは、受容体−リガンド相互作用の結合することが可能であるが遮断しない配列が可能なＰＶＲＩＧ抗体配列からのＣＤＲを含むことができる。受容体−リガンド相互作用の結合する、遮断しないＣＰＡ抗体、およびＣＤＲ配列は以下の通りであり、その構成要素も概説されており、その配列を図６３に示す：
ＣＰＡ．７．０２８、ＣＰＡ．７．０２８．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２８．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２８．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２８．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２８．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２８．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２８．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０２８．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０２８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２８．ｖｌＣＤＲ３。
【０２１４】
ＣＰＡ．７．０３０、ＣＰＡ．７．０３０．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０３０．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０３０．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０３０．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０３０．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０３０．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０３０．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０３０．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０３０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０３０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０３０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０３０．ｖｌＣＤＲ３。
【０２１５】
ＣＰＡ．７．０４１、ＣＰＡ．７．０４１．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４１．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４１．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４１．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４１．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４１．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４１．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０４１．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４１．ｖｌＣＤＲ３。
【０２１６】
ＣＰＡ．７．０１６、ＣＰＡ．７．０１６．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１６．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１６．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１６．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１６．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１６．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１６．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０１６．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１６．ｖｌＣＤＲ３。
【０２１７】
ＣＰＡ．７．０２０、ＣＰＡ．７．０２０．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２０．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２０．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２０．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２０．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２０．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２０．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０２０．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０２０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２０．ｖｌＣＤＲ３。
【０２１８】
ＣＰＡ．７．０３８、ＣＰＡ．７．０３８．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０３８．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０３８．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０３８．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０３８．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０３８．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０３８．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０３８．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０３８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０３８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０３８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０３８．ｖｌＣＤＲ３。
【０２１９】
ＣＰＡ．７．０４４、ＣＰＡ．７．０４４．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４４．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４４．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４４．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４４．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４４．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４４．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０４４．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４４．ｖｌＣＤＲ３。
【０２２０】
ＣＰＡ．７．０４５、ＣＰＡ．７．０４５．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４５．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４５．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４５．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４５．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４５．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４５．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０４５．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４５．ｖｌＣＤＲ３。
【０２２１】
本明細書で考察されるように、本発明は、上記で概説されるＣＤＲにおけるバリアントを含む、上記の構成要素のバリアントをさらに提供する。さらに、可変重鎖は、本明細書の「ＶＨ」配列と、８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％同一であり得、および／またはＦｃバリアントを使用する場合、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれよりも多くのアミノ酸変化を含み得る。本明細書の「ＶＬ」配列と、８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％同一であり得、および／またはＦｃバリアントを使用する場合、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれよりも多くのアミノ酸変化を含み得る、可変軽鎖が提供される。同様に、本明細書の「ＨＣ」および「ＬＣ」配列と、８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％同一であり、および／またはＦｃバリアントを使用する場合、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれよりも多くのアミノ酸変化を含む、重鎖および軽鎖が提供される。本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧは、これらのＰＶＲＩＧ抗体および／または抗原結合ドメイン領域配列のうちのいずれをも含むことができる。
【０２２２】
さらに、本発明は、ハイブリドーマから生成されたマウス抗体であるいくつかのＣＨＡ抗体を提供する。当該技術分野で周知のように、６つのＣＤＲは、ヒトフレームワーク可変重および可変軽領域のいずれかに入れられる場合、または可変重および軽ドメインがヒト化される場合に有用である。例えば、図５および６３を参照されたい。
【０２２３】
本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧは、ＰＶＲＩＧ抗体配列からのＣＤＲの以下のＣＨＡセットのうちのいずれをも含むことができる。したがって、本発明は、ＣＤＲの以下のＣＨＡセットを含む抗ＰＶＲＩＧの使用を提供し、その配列は図５および／または図６３に示される：
ＣＨＡ．７．５０２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５０２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５０２．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５０２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５０２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５０２．ｖｌＣＤＲ３。
【０２２４】
ＣＨＡ．７．５０３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５０３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５０３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５０３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５０３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５０３．ｖｌＣＤＲ３。
【０２２５】
ＣＨＡ．７．５０６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５０６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５０６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５０６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５０６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５０６．ｖｌＣＤＲ３。
【０２２６】
ＣＨＡ．７．５０８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５０８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５０８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５０８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５０８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５０８．ｖｌＣＤＲ３。
【０２２７】
ＣＨＡ．７．５１０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５１０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５１０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５１０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５１０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５１０．ｖｌＣＤＲ３。
【０２２８】
ＣＨＡ．７．５１２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５１２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５１２．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５１２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５１２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５１２．ｖｌＣＤＲ３。
【０２２９】
ＣＨＡ．７．５１４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５１４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５１４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５１４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５１４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５１４．ｖｌＣＤＲ３。
【０２３０】
ＣＨＡ．７．５１６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５１６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５１６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５１６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５１６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５１６．ｖｌＣＤＲ３。
【０２３１】
ＣＨＡ．７．５１８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５１８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５１８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５１８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５１８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５１８．ｖｌＣＤＲ３。
【０２３２】
ＣＨＡ．７．５２０＿１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２０＿１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５２０＿１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５２０＿１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２０＿１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５２０＿１．ｖｌＣＤＲ３。
【０２３３】
ＣＨＡ．７．５２０＿２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２０＿２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５２０＿２．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５２０＿２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２０＿２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５２０＿２．ｖｌＣＤＲ３。
【０２３４】
ＣＨＡ．７．５２２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５２２．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５２２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５２２．ｖｌＣＤＲ３。
【０２３５】
ＣＨＡ．７．５２４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５２４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５２４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５２４．ｖｌＣＤＲ３。
【０２３６】
ＣＨＡ．７．５２６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５２６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５２６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５２６．ｖｌＣＤＲ３。
【０２３７】
ＣＨＡ．７．５２７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５２７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５２７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５２７．ｖｌＣＤＲ３。
【０２３８】
ＣＨＡ．７．５２８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５２８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５２８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５２８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５２８．ｖｌＣＤＲ３。
【０２３９】
ＣＨＡ．７．５３０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５３０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５３０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５３０．ｖｌＣＤＲ３。
【０２４０】
ＣＨＡ．７．５３４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５３４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５３４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５３４．ｖｌＣＤＲ３。
【０２４１】
ＣＨＡ．７．５３５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５３５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５３５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５３５．ｖｌＣＤＲ３。
【０２４２】
ＣＨＡ．７．５３７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５３７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５３７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５３７．ｖｌＣＤＲ３。
【０２４３】
ＣＨＡ．７．５３８＿１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３８＿１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５３８＿１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５３８＿１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３８＿１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５３８＿１．ｖｌＣＤＲ３。
【０２４４】
ＣＨＡ．７．５３８＿２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３８＿２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５３８＿２．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５３８＿２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５３８＿２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５３８＿２．ｖｌＣＤＲ３。
【０２４５】
ＣＨＡ．７．５４３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５４３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５４３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５４３．ｖｌＣＤＲ３。
【０２４６】
ＣＨＡ．７．５４４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５４４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５４４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５４４．ｖｌＣＤＲ３。
【０２４７】
ＣＨＡ．７．５４５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５４５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５４５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５４５．ｖｌＣＤＲ３。
【０２４８】
ＣＨＡ．７．５４６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５４６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５４６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５４６．ｖｌＣＤＲ３。
【０２４９】
ＣＨＡ．７．５４７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５４７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５４７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５４７．ｖｌＣＤＲ３。
【０２５０】
ＣＨＡ．７．５４８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５４８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５４８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５４８．ｖｌＣＤＲ３。
【０２５１】
ＣＨＡ．７．５４９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５４９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５４９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５４９．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５４９．ｖｌＣＤＲ３。
【０２５２】
ＣＨＡ．７．５５０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５５０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．７．５５０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．７．５５０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．７．５５０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．７．５５０．ｖｌＣＤＲ３。
【０２５３】
上記のように、これらのＣＤＲのセットは、上述されるアミノ酸バリアントでもあり得る。
【０２５４】
さらに、可変重および可変軽鎖のフレームワーク領域は、当技術分野で公知のようにヒト化することができ（時折、バリアントが必要に応じてＣＤＲにおいて生成される）、したがって図６３のＶＨおよびＶＬ鎖のヒト化バリアントを生成することができた。さらに、続いてヒト化可変重および軽ドメインを、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４からの定常領域などのヒト定常領域と融合させることができる。
【０２５５】
特に、当該技術分野で公知のように、マウスＶＨおよびＶＬ鎖は、例えば、ヒト化方法について参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＹｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．４１：Ｗ３４−Ｗ４０（２０１３）に概説されるように、ＮＣＢＩウェブサイトのＩｇＢＬＡＳＴプログラムを用いて、当該技術分野で公知のようにヒト化することができる。ＩｇＢＬＡＳＴは、マウスＶＨおよび／またはＶＬ配列を採取し、それを既知のヒト生殖細胞系列配列のライブラリと比較する。本明細書に示されるように、本明細書で生成されるヒト化配列について、使用したデータベースは、ＩＭＧＴヒトＶＨ遺伝子（Ｆ＋ＯＲＦ、２７３生殖細胞系列配列）およびＩＭＧＴヒトＶＬカッパ遺伝子（Ｆ＋ＯＲＦ、７４生殖細胞系列配列）であった。例示的な５つのＣＨＡ配列が選択された：ＣＨＡ．７．５１８、ＣＨＡ．７．５３０、ＣＨＡ．７．５３８＿１、ＣＨＡ．７．５３８＿２、およびＣＨＡ．７．５２４（ＶＨおよびＶＬ配列については図５および６３を参照されたい）。このヒト化の実施形態のために、ヒト生殖細胞系列ＩＧＨＶ１−４６（対立遺伝子１）を、アクセプタ配列およびヒト重鎖ＩＧＨＪ４（対立遺伝子１）接合領域（Ｊ遺伝子）として５つ全てについて選択した。４つ（ＣＨＡ．７．５１８、ＣＨＡ．７．５３０、ＣＨＡ．７．５３８＿１、およびＣＨＡ．７．５３８＿２）のうちの３つについては、ヒト生殖細胞系列ＩＧＫＶ１−３９（対立遺伝子１）をアクセプタ配列として選択し、ヒト軽鎖ＩＧＫＪ２（対立遺伝子１）（Ｊ遺伝子）を選択した。Ｊ遺伝子は、ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇのｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ情報システム、ＩＭＧＴ（登録商標）にてコンパイルされたヒト接合領域配列から選択した。ＣＤＲは、ＡｂＭ定義（ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆｏ．ｏｒｇ．ｕｋ／ａｂｓ／を参照されたい）に従って定義した。図６３は、ＰＶＲＩＧとの結合を最適化するための、いくつかの可能性のある変更と共にヒト化配列も示す。本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧ抗体は、これらのヒト化ＰＶＲＩＧ抗体または抗原結合ドメイン領域配列のうちのいずれをも含むことができる。
【０２５６】
ＣＨＡ抗体の特定のヒト化抗体には、例えば図５および６３に示されるそれらが含まれる。本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧは、図５または６３に示されるＣＨＡ  ＰＶＲＩＧ抗体配列を含むことができる。当該技術分野で公知のように、各ヒト化可変重（ヒト化重；ＨＨ）および可変光（ヒト化軽；ＨＬ）配列は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の定常領域と組み合わせることができる。すなわち、ＣＨＡ．７．５１８．ＨＨ１は最初のヒト化可変重鎖であり、ＣＨＡ．７．５１８．ＨＨ１．１は、ＩｇＧ１定常領域を有する「ＨＨ１」ヒト化配列を含む完全長重鎖である（ＣＨＡ．７．５１８．ＨＨ１．２は、ＩｇＧ２を有するＣＨＡ．７．５１８．ＨＨ１、等々である）。
【０２５７】
いくつかの実施形態において、本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧ抗体には、抗ＰＶＲＩＧ抗体が含まれ、異なる抗ＰＶＲＩＧ抗体のＶＨおよびＶＬ配列は、「混合化および適合化」され他の抗ＰＶＲＩＧ抗体を創出できる。かかる「混合化および適合化」抗体のＰＶＲＩＧ結合は、上述される結合アッセイ、例えば、ＥＬＩＳＡ）を使用して試験することができる。いくつかの実施形態において、ＶＨおよびＶＬ鎖が混合化および適合化される場合、特定のＶＨ／ＶＬ対からのＶＨ配列が構造的に同様のＶＨ配列と置き換えられる。同様に、いくつかの実施形態において、特定のＶＨ／ＶＬ対からのＶＬ配列が構造的同様のＶＬ配列と置き換えられる。例えば、同種抗体のＶＨおよびＶＬ配列は、混合化および適合化に特に適している。本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧは、「混合化および適合化」されている異なる抗ＰＶＲＩＧ抗体からのＰＶＲＩＧ  ＶＨおよびＶＬ配列を含むことができる。
【０２５８】
したがって、本発明の抗体は、（ａ）本明細書に列挙される配列、（ｂ）（ａ）で指定したＣＤＲアミノ酸配列とは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれよりも多くのアミノ酸置換だけ異なる配列；（ｃ）（ａ）または（ｂ）で指定した配列との９０％以上、９５％以上、９８％以上、または９９％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列；（ｄ）本明細書に列挙されるアミノ酸をコードする核酸配列を有するポリヌクレオチドによってコードされるアミノ酸配列を有するポリペプチドからなる群から選択される、ＣＤＲアミノ酸配列を含む。本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧは、ＰＶＲＩＧバリアントのＣＤＲ配列を含むことができる。
【０２５９】
さらに、本明細書に列挙するＰＶＲＩＧ抗体との同一性を共有する抗体がＰＶＲＩＧ抗体の定義に含まれる。すなわち、特定の実施形態において、本発明に従う抗ＰＶＲＩＧ抗体は、それぞれ好ましい抗ＰＶＲＩＧ免疫分子の単離された抗ＰＶＲＩＧアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を含む重および軽鎖可変領域を含み、抗体は、親抗ＰＶＲＩＧ抗体の所望の機能特性を保持する。２つの配列間の同一性パーセントは、２つの配列を最適にアラインメントするために導入する必要があるギャップの数および各ギャップの長さを考慮に入れた、それらの配列が共有する同一位置の数の関数である（例えば、相同性％＝同一位置の数／位置の総数×１００）。配列の比較および２つの配列間の同一性パーセントの決定は、以下の非限定的な実施例において記載するように、数学アルゴリズムを使用して達成することができる。本発明で使用される抗ＰＶＲＩＧ抗体は、本明細書に記載される単離された抗ＰＶＲＩＧアミノ酸配列と相同であるアミノ酸配列を含む重および軽鎖可変領域を含むことができる。
【０２６０】
２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは、ＰＡＭ１２０重み残差テーブル（ｗｅｉｇｈｔ  ｒｅｓｉｄｕｅ  ｔａｂｌｅ）、１２のギャップ長ペナルティ、および４のギャップペナルティを使用して、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれているＥ．Ｍｅｙｅｒｓ  ａｎｄ  Ｗ．Ｍｉｌｌｅｒ（Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．，４：１１−１７（１９８８））のアルゴリズムを使用して決定することができる。さらに、２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは、Ｂｌｏｓｓｕｍ  ６２行列またはＰＡＭ２５０行列のいずれか、ならびに１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップ重み、および１、２、３、４、５、または６の長さ重みを使用して、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（市販されている）中のＧＡＰプログラムに組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４４−４５３（１９７０））アルゴリズムを使用して決定することができる。
【０２６１】
一般に、ＰＶＲＩＧ抗体間の比較のための同一性の割合は、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも９０％であり、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％パーセント同一性を有することが好ましい。同一性の割合は、全アミノ酸配列、例えば重もしくは軽鎖全体にかかるか、または鎖の一部にかかるものであり得る。例えば、可変領域全体にかけて（例えば、同一性が可変領域にかけて９５％または９８％同一である場合）、または定常領域全体にかけて、またはＦｃドメインのみにかけて同一性を共有するものが、本発明の抗ＰＶＲＩＧ抗体の定義に含まれる。
Ｇ．抗腫瘍抗体とのＴＩＧＩＴ抗体
いくつかの実施形態において、本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体は、一般に免疫系に作用して患者の自然免疫応答を増加させる免疫腫瘍／チェックポイント阻害剤とは異なり、代わりに特異的な腫瘍標的抗原（ＴＴＡ）に指向される抗体と共投与される。本発明のＴＩＧＩＴ抗体と組み合わせることができる、承認されたまたは開発中のいずれかの多数の抗ＴＴＡ抗体が存在する。現在承認されている抗体には、セツキシマブ、パニツムマブ、ニノツズマブ（全てＥＧＦＲに対する）、リツキシマブ（ＣＤ２０）、トラスツズマブおよびペルツズマブ（ＨＥＲ２）、アレムツズマブ（ＣＤ５２）、ベバシズマブ（ＶＥＧＦ）、オファツムマブ（ＣＤ２０）、デノスマブ（ＲＡＮＫリガンド）、ブレンツキシマブ（ＣＤ３０）、ダラツムマブ（ＣＤ３８）、イブリツモマブ（ＣＤ２０）およびイピリムマブ（ＣＴＬＡ−４）が含まれるが、これらに限定されない。本明細書の抗ＴＩＧＩＴ抗体と組み合わせることができる、臨床治験における特異的な標的腫瘍抗体には、イピリムマブ、トレメリムマブ（例えば、米国特許公開第２０１７／０３０６０２５号を参照されたい）等の抗ＣＴＬＡ４  ｍＡｂ；ニボルマブＢＭＳ−９３６５５８／ＭＤＸ−１１０６／ＯＮＯ−４５３８、ＡＭＰ２２４、ＣＴ−０１１、ＭＫ−３４７５等の抗ＰＤ−１、アテゾリズマブ（ＩＭｐｏｗｅｒ１３３）、ＢＭＳ−９３６５５９／ＭＤＸ−１１０５、ＭＥＤＩ４７３６、ＲＧ−７４４６／ＭＰＤＬ３２８０Ａ等の抗ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト、および米国特許公開番号２０１７／０２８１７６４に記載されるそれらのもの；ＩＭＰ−３２１等の抗ＬＡＧ−３、抗ＴＩＭ−３、抗ＢＴＬＡ、抗Ｂ７−Ｈ４、抗Ｂ７−Ｈ３、抗ＶＩＳＴＡ；ＣＰ−８７０、８９３、ルカツムマブ、ダセツズマブ等の抗ＣＤ４０  ｍＡｂを含む、免疫刺激タンパク質を標的とするアゴニスト抗体；ＢＭＳ−６６３５１３ウレルマブ（抗４−１ＢＢ、例えば、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、米国特許第７，２８８，６３８号および同第８，９６２，８０４号を参照されたい）等の抗ＣＤ１３７  ｍＡｂ；ＰＦ−０５０８２５６６ウトミルマブ（例えば、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、米国特許第８，８２１，８６７号、同第８，３３７，８５０号、および同第９，４６８，６７８号、ならびに国際特許出願公開第ＷＯ２０１２／３２４３３号を参照されたい）；抗ＯＸ４０等の抗ＯＸ４０  ｍＡｂ（例えば、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、ＷＯ２００６／０２９８７９またはＷＯ２０１００９６４１８を参照されたい）；ＴＲＸ５１８（例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許第７，８１２，１３５号を参照されたい）等の抗ＧＩＴＲ  ｍＡｂ；バルリルマブＣＤＸ−１１２７（例えば、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、ＷＯ２０１６／１４５０８５および米国特許公開第ＵＳ２０１１／０２７４６８５号および同第ＵＳ２０１２／０２１３７７１号を参照されたい）等の抗ＣＤ２７  ｍＡｂ、抗ＩＣＯＳ  ｍＡｂ（例えば、ＭＥＤＩ−５７０、ＪＴＸ−２０１１、および抗ＴＩＭ３抗体（例えば、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、ＷＯ２０１３／００６４９０���たは米国特許出願公開第ＵＳ２００６／２５５７７５８号を参照されたい）、ならびに前立腺がん、卵巣がん、乳がん、子宮内膜がん、多発性骨髄腫、黒色腫、リンパ腫、小細胞肺がんを含む肺がん、腎臓がん、結腸直腸がん、膵臓がん、胃がん、脳がんに対するモノクローナル抗体（一般にｗｗｗ．ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖを参照されたい）が含まれるが、これらに限定されない。
Ｈ．特異的抗ＰＤ−１抗体
別の実施形態において、本発明は、本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ−１抗体との組み合わせを提供する。承認された２つの抗ＰＤ−１抗体、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）；ＭＫ−３４７５−０３３）、セミプリマブ（ＲＥＧＮ２８１０；ＵＳ２０１７／０１７４７７９を参照されたい）、およびニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）；ＣｈｅｃｋＭａｔｅ０７８）、ならびに開発中のさらに多くのものが存在し、これらは本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体と併用され得る。他の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体には、例えばＳＨＲ−１２１０（ＣＴＲ２０１６０１７５およびＣＴＲ２０１７００９０）、ＳＨＲ−１２１０（ＣＴＲ２０１７０２９９およびＣＴＲ２０１７０３２２）、ＪＳ−００１（ＣＴＲ２０１６０２７４）、ＩＢＩ３０８（ＣＴＲ２０１６０７３５）、ＢＧＢ−Ａ３１７（ＣＴＲ２０１６０８７２）、および／または米国特許公開第２０１７／００８１４０９号に列挙されるＰＤ−１抗体が含まれる。例示的な抗ＰＤ−１抗体配列は図７に示されており、これらのうちのいずれも本明細書に記載される併用療法の方法と共に使用することができる。
【０２６２】
いくつかの実施形態において、本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体は、三重併用療法として本明細書に記載される抗ＰＶＲＩＧ抗体、および本明細書に記載される抗ＰＤ−１抗体、または当技術分野で公知の他の抗ＰＤ−１抗体と併用される。
Ｉ．特異的抗ＰＤ−Ｌ１抗体
別の実施形態において、本発明は、本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ−Ｌ１抗体との組み合わせを提供する。３つの承認された抗ＰＤ−Ｌ１抗体、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（登録商標）；ＭＰＤＬ３２８０Ａ）、アベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯ（登録商標）；ＭＳＢ００１０７１  ８Ｃ）、およびデュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６）、ならびに開発中の他の抗ＰＤ−Ｌ１抗体が存在する。多数の抗ＰＤ−Ｌ１抗体が利用可能であり、およびさらに多くのものが開発中であり、、これらは本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体と併用され得る。実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国特許公開第２０１７／０２８１７６４号、ならびに国際特許公開第ＷＯ２０１３／０７９１７４（アベルマブ）、およびＷＯ２０１０／０７７６３４（または米国特許出願第２０１６０２２２１１７号、もしくは米国特許第８，２１７，１４９号；アテゾリズマブ）に記載されるものである。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号３４の重鎖配列、および配列番号３６の軽鎖配列（ＵＳ２０１７／２８１７６４から）を含む。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（登録商標）；ＭＰＤＬ３２８０Ａ；ＩＭｐｏｗｅｒ１１０）である。いくつかの実施形態実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯ（登録商標）；ＭＳＢ００１０７１  ８Ｃ）である。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６）である。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体は、例えば、アテゾリズマブ（ＩＭｐｏｗｅｒ１３３）、ＢＭＳ−９３６５５９／ＭＤＸ−１１０５、および／またはＲＧ−７４４６／ＭＰＤＬ３２８０Ａ、および／またはＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ならびに本明細書の図６２に提供されるそれらのいずれをも含む。
【０２６３】
いくつかの実施形態において、本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体は、三重併用療法として本明細書に記載される抗ＰＶＲＩＧ抗体、および本明細書に記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または当技術分野で公知の他の抗ＰＤ−Ｌ１抗体と併用される。
【０２６４】
Ｊ．任意選択の抗体操作
本発明の抗体は、アミノ酸置換によってアミノ酸配列を改変するように修飾または操作され得る。本明細書で考察されるように、アミノ酸置換は、抗原に対するＣＤＲの親和性を改変するため（結合の増加および減少の両方を含む）、ならびに抗体の追加の機能特性を改変するために行われ得る。例えば、抗体は、Ｆｃ領域内に修飾を含むように、典型的には、抗体の１つ以上の機能特性、例えば、血清半減期、補体結合、Ｆｃ受容体結合、および／または抗原依存性細胞傷害性を改変するように操作され得る。さらに、本発明の少なくともいくつかの実施形態に従う抗体は、同じく抗体の１つ以上の機能特性を改変するために、化学修飾され得る（例えば、１つ以上の化学的部分が抗体に結合し得る）か、またはそのグリコシル化を改変するように修飾され得る。かかる実施形態については、以下にさらに記載される。Ｆｃ領域内の残基の付番は、ＫａｂａｔのＥＵインデックスの付番である。
【０２６５】
一実施形態において、ＣＨ１のヒンジ領域は、ヒンジ領域内のシステイン残基の数が改変される、例えば、増加または減少するように修飾される。このアプローチについては、米国特許第５，６７７，４２５号（Ｂｏｄｍｅｒら）にさらに記載されている。ＣＨ１のヒンジ領域内のシステイン残基の数は、例えば、軽および重鎖のアセンブリを容易にするように、または抗体の安定性を増加もしくは減少させるように改変される。
【０２６６】
さらに別の実施形態において、抗体は、特にＩｇＧ４定常ドメインが使用される場合、生体内でのＦａｂアーム交換を抑止するように修飾され得る。具体的には、このプロセスは、機能的に一価である抗体を効果的にもたらす他のＩｇＧ４抗体間でのＩｇＧ４半分子（重鎖１本＋軽鎖１本）の交換を伴う。重鎖のヒンジ領域および定常ドメインに対する変異がこの交換を抑止する（Ａａｌｂｅｒｓｅ，ＲＣ，Ｓｃｈｕｕｒｍａｎ  Ｊ．，２００２，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １０５：９−１９を参照されたい）。本明細書に概説されるように、本発明において特に有用である変異は、ＩｇＧ４定常ドメインの関連におけるＳ２４１Ｐである。ＩｇＧ４は、顕著なエフェクター機能を持たないため本発明での使用が見出され、したがって、細胞枯渇なしに受容体−リガンド結合を遮断するために使用される。
【０２６７】
いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、一般にＦｃγＲ受容体との結合を改変するために、Ｆｃ領域内で行われ得る。本明細書で使用される「Ｆｃガンマ受容体」、「ＦｃγＲ」、または「ＦｃガンマＲ」とは、ＩｇＧ抗体Ｆｃ領域と結合し、かつＦｃγＲ遺伝子によってコードされるタンパク質ファミリーの任意のメンバーを意味する。ヒトにおいて、このファミリーには、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）（アイソフォームＦｃγＲＩａ、ＦｃγＲＩｂ、およびＦｃγＲＩｃを含む）；ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）（アイソフォームＦｃγＲＩＩａ（アロタイプＨ１３１およびＲ１３１を含む）、ＦｃγＲＩＩｂ（ＦｃγＲＩＩｂ−１およびＦｃγＲＩＩｂ−２を含む）、およびＦｃγＲＩＩｃ；ならびにＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）（アイソフォームＦｃγＲＩＩＩａ（アロタイプＶ１５８およびＦ１５８を含む）およびＦｃγＲＩＩＩｂ（アロタイプＦｃγＲＩＩＩｂ−ＮＡ１およびＦｃγＲＩＩＩｂ−ＮＡ２を含む）（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｌｅｔｔ  ８２：５７−６５（参照により全体が組み込まれる））、ならびに任意の発見されていないヒトＦｃγＲまたはＦｃγＲアイソフォームもしくはアロタイプが含まれるが、これらに限定されない。ＦｃγＲは、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、およびサルを含むが、これらに限定されない任意の生物由来であり得る。マウスＦｃγＲには、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩ−１（ＣＤ１６）、およびＦｃγＲＩＩＩ−２（ＣＤ１６−２）、ならびに任意の発見されていないマウスＦｃγＲまたはＦｃγＲアイソフォームもしくはアロタイプが含まれるが、これらに限定されない。
【０２６８】
ＦｃγＲ受容体のうちの１つ以上との結合を改変するために行われ得るいくつかの有用なＦｃ置換が存在する。結合の増加および結合の減少をもたらす置換が有用であり得る。例えば、ＦｃγＲＩＩＩａとの結合の増加は、一般に、ＡＤＣＣ（抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性、すなわち、ＦｃγＲを発現する非特異的細胞傷害性細胞が標的細胞上の結合抗体を認識し、その後、標的細胞の溶解を引き起こす細胞媒介性反応の増加をもたらすことが知られている。同様に、いくつかの状況下では、ＦｃγＲＩＩｂ（抑制性受容体）との結合の減少も有益であり得る。本発明で有用なアミノ酸置換には、米国特許出願第１１／１２４，６２０号（特に図４１）および米国特許第６，７３７，０５６号に記載されているものが含まれ、これらの両方は、参照によりそれらの全体、特にその中に開示されるバリアントが本明細書に明示的に組み込まれる。
【０２６９】
さらに他の実施形態において、抗体のエフェクター機能を改変するために、少なくとも１つのアミノ酸残基を異なるアミノ酸残基で置き換えることによりＦｃ領域が改変される。例えば、アミノ酸残基２３４、２３５、２３６、２３７、２９７、３１８、３２０、および３２２から選択される１つ以上のアミノ酸は、抗体がエフェクターリガンドに対して改変された親和性を有するように異なるアミノ酸残基で置き換えることができるが、親抗体の抗原結合能力は保持される。親和性が改変するエフェクターリガンドは、例えば、Ｆｃ受容体または補体のＣ１成分であり得る。このアプローチについては、Ｗｉｎｔｅｒらによる米国特許第５，６２４，８２１号および第５，６４８，２６０号の両方にさらに詳細に記載される。
【０２７０】
アミノ酸残基３２９、３３１および３２２から選択される１つ以上のアミノ酸は、抗体が改変されたＣ１ｑ結合および／または低減もしくは消失された補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を有するように、異なるアミノ酸残基で置き換えることができる。このアプローチについては、Ｉｄｕｓｏｇｉｅらによる米国特許第６，１９４，５５１号にさらに詳細に記載される。
【０２７１】
別の例において、アミノ酸２３１および２３９位内の１つ以上のアミノ酸残基が改変され、それにより抗体の補体を固定する能力が改変される。このアプローチについては、ＢｏｄｍｅｒらによるＰＣＴ公開第ＷＯ９４／２９３５１にさらに記載される。
【０２７２】
さらに別の例において、Ｆｃ領域は、以下の位置：２３８、２３９、２４８、２４９、２５２、２５４、２５５、２５６、２５８、２６５、２６７、２６８、２６９、２７０、２７２、２７６、２７８、２８０、２８３、２８５、２８６、２８９、２９０、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、３０１、３０３、３０５、３０７、３０９、３１２、３１５、３２０、３２２、３２４、３２６、３２７、３２９、３３０、３３１、３３３、３３４、３３５、３３７、３３８、３４０、３６０、３７３、３７６、３７８、３８２、３８８、３８９、３９８、４１４、４１６、４１９、４３０、４３４、４３５、４３７、４３８、もしくは４３９の１つ以上のアミノ酸を修飾することによって、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を媒介する抗体の能力を増加させ、および／またはＦｃγ受容体に対する抗体の親和性を増加させるように修飾される。このアプローチについては、ＰｒｅｓｔａによるＰＣＴ公開第ＷＯ００／４２０７２号にさらに記載される。さらに、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩ、およびＦｃＲｎに対するヒトＩｇＧ１上の結合部位がマッピングされており、結合が改善されたバリアントが記載される（Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１−６６０４を参照されたい）。２５６、２９０、２９８、３３３、３３４、および３３９位での特異的変異が、ＦｃｙＲＩＩＩとの結合を改善することが示される。さらに、以下の変異体の組み合わせ：Ｔ２５６Ａ／Ｓ２９８Ａ、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ、Ｓ２９８Ａ／Ｋ２２４Ａ、およびＳ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａが、ＦｃγＲＩＩＩ結合を改善することが示される。さらに、Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６ＥまたはＭ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓ等の変異が、ＦｃＲｎとの結合を改善し、抗体の循環半減期を増加させる（Ｃｈａｎ  ＣＡ  ａｎｄ  Ｃａｒｔｅｒ  ＰＪ（２０１０）Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １０：３０１−３１６を参照されたい）。
【０２７３】
さらに、本発明の抗体は、その生物学的半減期を増加させるように修飾される。種々のアプローチが可能である。例えば、米国特許第６，２７７，３７５号（Ｗａｒｄ）に記載されるように、以下の変異：Ｔ２５２Ｌ、Ｔ２５４Ｓ、Ｔ２５６Ｆのうちの１つ以上が導入され得る。あるいは、生物学的半減期を増加するために、抗体は、米国特許第５，８６９，０４６号および同第６，１２１，０２２号（Ｐｒｅｓｔａら）に記載されるように、ＩｇＧのＦｃ領域のＣＨ２ドメインの２つのループから得られるサルベージ受容体結合エピトープを含むようにＣＨ１またはＣＬ領域内で改変され得る。血清半減期を増加させるためのさらなる変異は、米国特許第８，８８３，９７３号、同第６，７３７，０５６号、および同第７，３７１，８２６号に開示され、これには４２８Ｌ、４３４Ａ、４３４Ｓ、および４２８Ｌ／４３４Ｓが含まれる。
【０２７４】
さらに別の実施形態において、抗体のグリコシル化が修飾される。例えば、アグリコシル化抗体が作製され得る（すわなち、抗体はグリコシル化を欠いている）。グリコシル化は、例えば、抗原に対する抗体の親和性を増加させるか、またはＡＤＣＣ等のエフェクター機能を低減するように改変され得る。かかる炭水化物修飾は、例えば、抗体配列内の１つ以上のグリコシル化部位、例えば、Ｎ２９７を改変することによって達成され得る。例えば、１つ以上の可変領域フレームワークのグリコシル化領域の排除をもたらす、１つ以上のアミノ酸置換を行ない、それによってその部位でのグリコシル化を排除することができ、いくつかの実施形態ではアラニン置換が有用である。
【０２７５】
加えてまたは代替的に、改変した種類のグリコシル化を有する抗体、例えば、フコシル残基の量が低減した低フコシル化抗体または二分ＧｌｃＮａｃ構造が増加した抗体が作製され得る。かかるグリコシル化パターンの改変は、抗体のＡＤＣＣ能力を増加させることが示されている。かかる炭水化物修飾は、例えば、抗体をグリコシル化機構が改変された宿主細胞で発現させることによって達成され得る。グリコシル化機構が改変された細胞については、当該技術分野で説明されており、本発明の少なくともいくつかの実施形態に従う組換え抗体を発現させ、それによりグリコシル化が改変された抗体を産生する宿主細胞として使用され得る。例えば、Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、およびＭｓ７０９細胞株で発現する抗体が炭水化物のフコースを欠くように、細胞株Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、およびＭｓ７０９は、フコシルトランスフェラーゼ遺伝子ＦＵＴ８（α（１，６）フコシルトランスフェラーゼ）を欠く。Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、およびＭｓ７０９  ＦＵＴ８細胞株は、２つの置換ベクターを使用したＣＨＯ／ＤＧ４４細胞内のＦＵＴ８遺伝子の標的破壊によって作製される（Ｙａｍａｎｅらによる米国特許公開第２００４／０１１０７０４号、およびＹａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｂｉｏｅｎｇ  ８７：６１４−２２）。別の例として、ＨａｎａｉらによるＥＰ１，１７６，１９５は、機能的に破壊されたＦＵＴ８遺伝子を有する細胞株について記述しており、フコシルトランスフェラーゼをコードするため、かかる細胞株内で発現される抗体は、α１，６結合関連酵素を減少または除去することにより低フコシル化を示す。Ｈａｎａｉらは細胞株についてさらに記載しており、それらは、抗体のＦｃ領域と結合するＮ−アセチルグルコサミンにフコースを追加する低い酵素活性を有し、または、例えば、ラット骨髄腫細胞株ＹＢ２／０（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６６２）などは酵素活性を有しない。ＰｒｅｓｔａによるＰＣＴ公開第ＷＯ０３／０３５８３５号は、Ａｓｎ（２９７）連結炭水化物とフコースを付着させる能力が低減し、さらにその宿主細胞で発現される抗体の低フコシル化ももたらすバリアントＣＨＯ細胞株、Ｌｅｃ１３細胞について記載する（Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：２６７３３−２６７４０もさらに参照されたい）。ＵｍａｎａらによるＰＣＴ公開第ＷＯ９９／５４３４２号は、糖タンパク質修飾グリコシルトランスフェラーゼ（例えば、β（１，４）−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ））を発現するように操作された細胞株について記載し、そのように操作された細胞株で発現した抗体は、二分したＧｌｃＮａｃ構造の増加を示し、抗体のＡＤＣＣ活性の増加をもたらす（Ｕｍａｎａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１７：１７６−１８０もさらに参照されたい）。代替てきに、フコシダーゼ酵素を使用して、抗体のフコース残基を切断でき得る。例えば、フコシダーゼのα−Ｌ−フコシダーゼは、抗体からフコシル残基を除去する（Ｔａｒｅｎｔｉｎｏ，Ａ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（１９７５）Ｂｉｏｃｈｅｍ．１４：５５１６−２３）。
【０２７６】
本発明によって企図される本明細書における抗体の別の修飾は、例えば、半減期を高めるための、ＰＥＧ化、すなわち他の水溶性部分（典型的にはポリマー）の付加である。抗体は、例えば、抗体の生物学的（例えば血清）半減期を増加させるためにＰＥＧ化することができる。抗体、その抗体、またはその断片をＰＥＧ化するには、通常、１つ以上のＰＥＧ基が抗体または抗体断片と結合する条件下で、ＰＥＧの反応性エステルまたはアルデヒド誘導体などのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と反応させる。好ましくは、ＰＥＧ化は、反応性ＰＥＧ分子（または類似の反応性水溶性ポリマー）とのアシル化反応またはアルキル化反応を介して実施される。本明細書で使用される「ポリエチレングリコール」という用語は、モノ（Ｃ１〜Ｃ１０）アルコキシ、またはアリールオキシ−ポリエチレングリコール、またはポリエチレングリコール−マレイミドなどの、他のタンパク質を誘導体化するために使用されているＰＥＧの任意の形態を包含することが意図される。特定の実施形態において、ＰＥＧ化される抗体は、非グリコシル化抗体である。タンパク質をペグ化するための方法は当技術分野で公知であり、本発明の少なくともいくつかの実施形態に従う抗体に適用することができる。例えば、ＮｉｓｈｉｍｕｒａらによるＥＰ  ０  １５４  ３１６、およびＩｓｈｉｋａｗａらによるＥＰ  ０  ４０１  ３８４を参照されたい。
【０２７７】
ＦｃγＲおよび／もしくはＦｃＲｎに対する結合親和性を改変し、ならびに／または生体内血清半減期を増加させるために行われる置換に加えて、以下にさらに詳細に記載されるように、追加の抗体修飾が行われ得る。
【０２７８】
いくつかの場合において、親和性成熟が行われる。ＣＤＲにおけるアミノ酸修飾は、「親和性成熟」と称されることがある。「親和性成熟」抗体は、１つ以上のＣＤＲにおいて１つ以上の改変（複数可）を有するものであり、この改変は、それらの改変（複数可）を有しない親抗体と比較して抗原に対する抗体の親和性の改善をもたらす。いくつかの場合において、抗体のその抗原に対する親和性を低下させることが望ましい場合がある。
【０２７９】
いくつかの実施形態において、１つ以上のアミノ酸修飾が、本発明の抗体のＣＤＲのうちの１つ以上において行われる。一般に、任意の単一のＣＤＲにおいて１または２または３アミノ酸のみが置換され、一般に、１、２、３以下である。４、５、６、７、８、９、または１０の変更がＣＤＲのセット内で行われる。しかしながら、任意のＣＤＲにおける無置換、１、２、または３置換の任意の組み合わせが、独立してかつ任意選択で、任意の他の置換と組み合わされ得ることを理解されたい。
【０２８０】
親和性成熟は、「親」抗体と比較して抗原に対する抗体の結合親和性を少なくとも約１０％〜５０−１００−１５０％以上、または１〜５倍増加させるために行われ得る。好ましい親和性成熟抗体は、抗原に対してナノモル親和性またはさらにはピコモル親和性を有する。親和性成熟抗体は、公知の手順によって生成される。例えば、可変重鎖（ＶＨ）および可変軽鎖（ＶＬ）ドメインシャッフリングによる親和性成熟が記載されるＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３を参照されたい。ＣＤＲおよび／またはフレームワーク残基のランダム変異誘発は、例えば、Ｂａｒｂａｓ，ｅｔ  ａｌ．１９９４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ，ＵＳＡ  ９１：３８０９−３８１３；Ｓｈｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｇｅｎｅ  １６９：１４７−１５５；Ｙｅｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４−２００４；Ｊａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０−９；およびＨａｗｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ，１９９２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９−８９６に記載される。
【０２８１】
代替的に、例えば、抗原に対する抗体の親和性を著しく改変しない「サイレント」なアミノ酸修飾が、本発明の抗体のＣＤＲのうちの１つ以上で行われ得る。これらは、（本発明の抗体をコードする核酸に対して行われ得るような）発現の最適化を含むいくつかの理由で行われ得る。
【０２８２】
したがって、バリアントＣＤＲおよび抗体が本発明のＣＤＲおよび抗体の定義に含まれ、すなわち、本発明の抗体は、本発明の列挙される抗体のＣＤＲのうちの１つ以上にアミノ酸修飾を含み得る。さらに、以下に概説されるように、アミノ酸修飾は、独立してかつ任意選択で、フレームワークおよび定常領域を含む、ＣＤＲ外の任意の領域でも行われ得る。
ＶＩ．併用療法における抗ＴＩＧＩＴ抗体
本発明のＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧ抗体は、本明細書に記載されるように、例えば抗ＰＤ−１抗体などのチェックポイント阻害剤と組み合わせて使用される場合に、がんの治療において特定の用途を見出す。一般に、本発明の抗体は、がん性細胞を直接的に攻撃するというよりは免疫調節性であり、本発明の抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＶＲＩＧ抗体は、一般にそれぞれＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧの作用を阻害することにより免疫系を刺激する。したがって、腫瘍成長および発達に必須である分子経路を阻害すること、ならびに／または腫瘍細胞を枯渇させることを目的とする腫瘍標的化療法とは異なり、がん免疫療法は、患者自身の免疫系を刺激してがん細胞を排除し、息の長い腫瘍破壊を提供することを目的とする。種々のアプローチをがん免疫療法において使用することができ、腫瘍特異的Ｔ細胞応答を誘導するための治療用がんワクチン、および免疫抑制経路を除去するための免疫刺激抗体（すなわち、抑制性受容体の拮抗物質＝免疫チェックポイント）がその一部である。
【０２８３】
標的化療法または従来の抗がん療法による臨床応答は、がん細胞が耐性を発達させ、腫瘍の再発が起きるため、一過性である傾向にある。しかしながら、過去数年のがん免疫療法の臨床使用により、この種の療法が永続的な臨床応答を有し得、長期的な生存率に対する劇的な影響を示すことが示されている。しかしながら、応答は長期的ではあるが、少数の患者しか応答しない（多数の患者が応答するが応答は一過性である従来のまたは標的化療法とは相対的）。
【０２８４】
腫瘍が臨床で検出されるまでに、腫瘍は、免疫耐性および免疫抑制特性を獲得すること、ならびに種々の機序および種々の免疫細胞を通して免疫抑制腫瘍微小環境を創出することによって、既に免疫防御系をかいくぐっている。
【０２８５】
したがって、本発明の抗体は、がんの治療において有用である。免疫腫瘍学的作用機序の性質に起因して、ＴＩＧＩＴおよび、またはＰＶＲＩＧは、必ずしも特定のがんの種で過剰発現されるか、またはそれと相関する必要はなく、すなわち、目標は、抗ＴＩＧＩＴ抗体にＴ細胞およびＮＫ細胞活性化の抑制を解除させて、免疫系ががんを狙うようにすることである。
ＶＩＩ．核酸組成物
本発明の抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ、および抗ＰＤ−１抗体をコードする核酸組成物、ならびに核酸および核酸で形質転換した宿主細胞を含む発現ベクター、および／または発現ベクター組成物も提供される。当該技術者には理解されようが、本明細書に図示されるタンパク質配列は、遺伝コードの縮重に起因して、任意の数の可能性のある核酸配列によってコードされ得る。
【０２８６】
抗体をコードする核酸組成物は、抗体の形式に依存することになる。２本の重鎖および２本の軽鎖を含む従来の四量体抗体は、一方は重鎖をコードする核酸し、もう一方は軽鎖をコードする核酸という２つの異なる核酸によってコードされる。これらは、当該技術分野で公知であるように、単一の発現ベクターまたは２つの発現ベクターの内に入れ、宿主細胞に形質転換することができ、そこでそれらが発現されて本発明の抗体を形成する。いくつかの実施形態において、例えばｓｃＦｖ構築物を使用する場合、可変重鎖−リンカー−可変軽鎖をコードする単一の核酸が通常使用され、これを宿主細胞への形質転換のために発現ベクター内に挿入し得る。核酸は、シグナルおよび分泌配列、調節配列、プロモーター、複製起点、選択遺伝子などが含まれるがこれらに限定されない、適切な転写および翻訳制御配列を含む発現ベクター内に入れることができる。
【０２８７】
本発明の少なくともいくつかの実施形態に従う組換え抗体を発現させるための好ましい哺乳動物宿主細胞には、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）、ＰＥＲ．Ｃ６、ＨＥＫ２９３、および当該技術分野で既知の他の細胞が含まれる。
【０２８８】
核酸は、全細胞において、細胞溶解物において、または部分的に精製されているかもしくは実質的に純粋な形態において存在し得る。核酸は、アルカリ／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンディング、カラムクロマトグラフィー、アガロースゲル電気泳動、および当該技術分野で周知の他のものを含む標準的な技法によって、他の細胞成分または他の汚染物質、例えば、他の細胞核酸またはタンパク質から精製されるときに、「単離される」または「実質的に純粋にされる」。
【０２８９】
ｓｃＦｖ遺伝子を創出するために、ＶＨおよびＶＬをコードするＤＮＡ断片を、可動性リンカーをコードする、例えば、アミノ酸配列（Ｇｌｙ４−Ｓｅｒ）３および本明細書で考察されるその他をコードする別の断片に動作可能に連結させて、その結果、ＶＨおよびＶＬ配列が連続した１本鎖タンパク質として、ＶＬおよびＶＨ領域が可動性リンカーによって接合された状態で発現され得るようにする（例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４を参照されたい）。
ＶＩＩＩ．本発明の抗体の製剤
前述の方法の実行に使用される治療用組成物は、所望の送達方法に好適な担体を含む薬学的組成物に製剤化され得る。好適な担体には、治療用組成物と組み合わせたときに、その治療用組成物の抗腫瘍機能を保持し、かつ一般に患者の免疫系と反応性ではない任意の物質が含まれる。例としては、いくつかの標準的な薬学的担体、例えば、無菌リン酸緩衝生理食塩水、静菌水等のうちの任意のものが含まれるが、これらに限定されない（一般には、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｏｓａｌ．，Ｅｄ．，１９８０を参照されたい）。許容される担体、賦形剤、または安定剤は、用いる投薬量および濃度でレシピエントに対し無毒であり、緩衝液を含み得る。
【０２９０】
好ましい実施形態において、本発明の抗体を含む薬学的組成物は、酸付加塩および塩基付加塩の両方を含むことを意図する、薬学的に許容される塩として存在する等、水溶性形態であり得る。「薬学的に許容される酸付加塩」は、無機酸等によって形成された、遊離塩基の生物学的有効性を保持し、かつ生物学的または別様に不適切でない塩を指す。「薬学的に許容される塩基付加塩」には、無機塩基等から誘導されるものが含まれる。
【０２９１】
好ましくは無菌水溶液の形態である本発明の抗体を含む薬学的組成物の投与は、皮下および静脈内を含むがこれらに限定されない様々な方法で行われ得る。
【０２９２】
投薬量および投薬頻度は、好ましい実施形態では、治療的または予防的に有効であるように選択される。当該技術分野で即知であるように、タンパク質分解、全身対局所送達、および新たなプロテアーゼ合成の速度、ならびに年齢、体重、全般的な健康、性別、食生活、投与時間、薬物相互作用、および状態の重症度に対する調整が必要であり得、これは、当業者によって慣習的な実験を用いて確認可能であろう。
【０２９３】
患者を治療するために、治療有効量の本発明のＦｃバリアントが投与され得る。本明細書における「治療有効量」は、それを投与した目的である効果を生む用量を意味する。正確な用量は治療の目的により異なり、既知の技法を使用して当業者によって確認可能であろう。
Ａ．併用製剤
本発明の抗体（抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ、および抗ＰＤ−１抗体の三重併用として、または抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＶＲＩＧ抗体の二重併用としてのいずれか）は、当業者が理解するように、様々な方法で行うことができる。いくつかの場合において、抗体は、例えば別個の注入（例えば、各ＩＶバッグが単一の抗体を保持する）として、または抗体の混合物の１回の注入として同時に投与される。あるいは、抗体は、例えば数時間または数日間にわたって連続的に投与され得る。
【０２９４】
いくつかの場合において、抗体は投与キットで提供され、各抗体の投与単位は、個々の投与単位で個別に、または単一の投与単位としての抗体の混合物として一緒に包装される。
ＩＸ．併用療法および使用
Ａ．がん療法
本明細書で使用される「がん」は、悪性増殖または腫瘍（例えば、無制御性細胞増殖）を引き起こす異常および無制御の細胞分裂を特徴とする任意の腫瘍性疾患（浸潤性または転移性であろうと）を広く指す。本明細書で使用される用語「がん」または「がん性」は、悪性増殖または腫瘍を引き起こす異常および無制御の細胞分裂を特徴とする任意の腫瘍性疾患（浸潤性、非浸潤性、または転移性であろうと）を包含するものと理解すべきであり、これらの非限定的例が本明細書に記載される。これは、無制御性細胞増殖を典型的に特徴とする哺乳動物におけるいずれの生理学的状態も含む。がんの例は、実施例において例示されており、また、明細書内にも記載される。
【０２９５】
がんの非限定的な例は、本明細書で提供されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ、抗ＰＤ−１および／または抗ＰＤ−Ｌ１抗体のような抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＴＩＧＩＴ抗体と他の抗体との併用で治療できる。かかるがんには、がん腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病が含まれるがこれらに限定されない。かかるがんのより具体的な例には、扁平上皮がん、肺がん（小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺の腺がん、および肺の扁平上皮がんを含む）、腹膜のがん、肝細胞がん、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）がんまたは胃（ｓｔｏｍａｃｈ）がん（胃腸がんを含む）、食道がん、黒色腫、中皮腫、メルケル細胞がん、膵臓がん、膠芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、肝細胞腫、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜または子宮がん、唾液腺がん、腎臓または腎がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肝がん、および様々な種類の頭頸部がん、喉頭がん、口腔がん、尿路上皮がん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、ならびにＢ細胞悪性腫瘍、Ｂ細胞リンパ腫（低度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；小リンパ球（ＳＬ）ＮＨＬ；中程度／濾胞性ＮＨＬ；中程度拡散性ＮＨＬ；高度免疫芽細胞性ＮＨＬ；高度リンパ芽球性ＮＨＬ；高度小型非開裂細胞性ＮＨＬ；巨大病変ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；およびワルデンシュトレームマクログロブリン血症を含む）；慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；有毛細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫；骨髄腫；多発性骨髄腫、および移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、リンパ系悪性腫瘍、脂肪腫に関連した異常な血管増殖、浮腫（脳腫瘍に関連するものなど）、マイグ症候群、直腸がん、腎細胞がん、軟部組織肉腫、カポジ肉腫、カルチノイドがん、早期または進行性（転移を含む）の卵巣にかかわるものが含まれる。本発明の治療に適するがん性状態には、ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲＬ、ＰＤ−１、および／もしくはＰＤ−Ｌ１を発現するか、または発現しないがんが含まれ、さらに、非転移性または非浸潤性のがん、ならびに浸潤性または転移性のがんを含み、免疫、間質、または疾患細胞によるＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲＬ、ＰＤ−１、および／またはＰＤ−Ｌ１の発現は、抗腫瘍応答および抗浸潤性免疫応答を抑制する。本発明の方法は、血管新生腫瘍の治療に特に好適である。いくつかの実施形態において、がんは、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。方法のいくつかの実施形態において、がんは、がんのトリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される。
【０２９６】
本明細書における「がん療法」は、がんを予防または治療するか、またはがんの症状の１つ以上を改善する任意の方法を指す。典型的には、かかる療法は、化学療法、または放射線療法、または他の生物学的製剤と組み合わせてその活性を増加するための、すなわち、ＴＩＧＩＴおよび／またはＰＶＲＩＧの発現が抗腫瘍応答および、化学療法もしくは放射線療法の有効性、または生物学的有効性を抑制する個体における、免疫刺激性抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＶＲＩＧ抗体（抗原結合断片を含む）の投与を含む。
【０２９７】
本発明は、三剤併用療法のための抗ＴＩＧＩＴ抗体および抗ＰＶＲＩＧ抗体の併用療法ならびに使用を、随時の抗ＰＤ−１抗体の追加と共に提供する。本発明は、抗ＴＩＧＩＴ抗体および抗ＰＶＲＩＧ抗体の併用療法ならびに使用を、随時の抗ＰＤ−Ｌ１抗体の追加と共に提供する。上記または図に列挙されるＰＶＲＩＧ抗体のうちのいずれも、三重併用療法に利用できる。上記または図に列挙されるＴＩＧＩＴ抗体のうちのいずれも、三重併用療法に利用でき得る。上記または図に列挙されるＰＤ−１抗体のうちのいずれも、三重併用療法に利用できる。上記または図に列挙されるＰＤ−Ｌ１抗体のうちのいずれも、三重併用療法に利用できる。いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である。
【０２９８】
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）；ＭＫ−３４７５−０３３）、ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）；ＣｈｅｃｋＭａｔｅ０７８）、ケンプリマブ（ＲＥＧＮ２８１０）、ＳＨＲ−１２１０（ＣＴＲ２０１６０１７５およびＣＴＲ２０１７００９０）、ＳＨＲ−１２１０（ＣＴＲ２０１７０２９９およびＣＴＲ２０１７０３２２）、ＪＳ−００１（ＣＴＲ２０１６０２７４）、ＩＢＩ３０８（ＣＴＲ２０１６０７３５）、ＢＧＢ−Ａ３１７（ＣＴＲ２０１６０８７２）および／または米国特許公開第２０１７／００８１４０９号に列挙されるＰＤ−１抗体から選択される。
【０２９９】
いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体は、米国特許公開第２０１７／０２８１７６４号、ならびに国際特許公開第ＷＯ２０１３／０７９１７４（アベルマブ）、およびＷＯ２０１０／０７７６３４（または米国特許出願第２０１６０２２２１１７号、もしくは米国特許第８，２１７，１４９号；アテゾリズマブ）に記載されるものから選択される。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号３４の重鎖配列、および配列番号３６の軽鎖配列（ＵＳ２０１７／２８１７６４から）を含む。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（登録商標）；ＭＰＤＬ３２８０Ａ；ＩＭｐｏｗｅｒ１１０）である。いくつかの実施形態実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯ（登録商標）；ＭＳＢ００１０７１  ８Ｃ）である。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６）である。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１抗体は、例えば、アテゾリズマブ（ＩＭｐｏｗｅｒ１３３）、ＢＭＳ−９３６５５９／ＭＤＸ−１１０５、および／またはＲＧ−７４４６／ＭＰＤＬ３２８０Ａ、および／またはＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ならびに本明細書の図６２に提供されるそれらのいずれをも含む。
【０３００】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、その配列が図５および／または６３に示される抗体から選択される：
ＣＰＡ．７．００１、ＣＰＡ．７．００１．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００１．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００１．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００１．ＬＣ、およびＣＰＡ．７．００１．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００１．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００１．Ｈ３、ＣＰＡ．７．００１．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００１．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．００３、ＣＰＡ．７．００３．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００３．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００３．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００３．ＬＣ、ＣＰＡ．７．００３．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００３．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００３．Ｈ３、ＣＰＡ．７．００３．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００３．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．００４、ＣＰＡ．７．００４．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００４．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００４．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００４．ＬＣ、ＣＰＡ．７．００４．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００４．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００４．Ｈ３  ＣＰＡ．７．００４．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００４．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．００６、ＣＰＡ．７．００６．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００６．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００６．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００６．ＬＣ、ＣＰＡ．７．００６．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００６．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００６．Ｈ３  ＣＰＡ．７．００６．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００６．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．００８、ＣＰＡ．７．００８．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００８．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００８．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００８．ＬＣ、ＣＰＡ．７．００８．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００８．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００８．Ｈ３  ＣＰＡ．７．００８．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００８．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．００９、ＣＰＡ．７．００９．ＶＨ、ＣＰＡ．７．００９．ＶＬ、ＣＰＡ．７．００９．ＨＣ、ＣＰＡ．７．００９．ＬＣ、ＣＰＡ．７．００９．Ｈ１、ＣＰＡ．７．００９．Ｈ２、ＣＰＡ．７．００９．Ｈ３  ＣＰＡ．７．００９．Ｈ４；ＣＰＡ．７．００９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．００９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００９．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．００９．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１０、ＣＰＡ．７．０１０．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１０．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１０．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１０．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１０．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１０．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１０．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１０．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１０．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１１、ＣＰＡ．７．０１１．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１１．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１１．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１１．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１１．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１１．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１１．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１１．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１１．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１２、ＣＰＡ．７．０１２．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１２．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１２．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１２．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１２．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１２．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１２．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１２．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１２．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１２．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１３、ＣＰＡ．７．０１３．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１３．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１３．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１３．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１３．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１３．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１４、ＣＰＡ．７．０１４．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１４．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１４．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１４．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１４．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１４．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１４．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１４．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１４．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１５、ＣＰＡ．７．０１５．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１５．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１５．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１５．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１５．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１５．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１５．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１５．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１５．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１７、ＣＰＡ．７．０１７．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１７．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１７．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１７．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１７Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１７．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１７．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１７．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０００１７１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１８、ＣＰＡ．７．０１８．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１８．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１８．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１８．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１８．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１８．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１８．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１８．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１７．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０１９、ＣＰＡ．７．０１９．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１９．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１９．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１９．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１９．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１９．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１９．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０１９．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１９．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１９．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０２１、ＣＰＡ．７．０２１．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２１．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２１．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２１．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２１．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２１．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２１．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０２１．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０２１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２１．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０２２、ＣＰＡ．７．０２２．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２２．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２２．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２２．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２２．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２２．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２２．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０２２．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．００２２０１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２２．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０２３、ＣＰＡ．７．０２３．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２３．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２３．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２３．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２３．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２３．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２３．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０２３．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０２３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２３．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０２４、ＣＰＡ．７．０２４．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２４．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２４．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２４．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２４．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２４．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２４．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０２４．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０２４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２４．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０３３、ＣＰＡ．７．０３３．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０３３．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０３３．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０３３．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０３３．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０３３．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０３３．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０３３．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０３３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０３３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０３３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０３３．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０３４、ＣＰＡ．７．０３４．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０３４．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０３４．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０３４．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０３４．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０３４．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０３４．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０３４．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０３４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０３４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０３４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０３４．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０３６、ＣＰＡ．７．０３６．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０３６．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０３６．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０３６．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０３６．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０３６．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０３６．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０３６．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０３６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０３６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０３６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０３６．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０４０、ＣＰＡ．７．０４０．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４０．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４０．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４０．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４０．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４０．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４０．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０４０．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４０．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０４６、ＣＰＡ．７．０４６．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４６．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４６．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４６．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４６．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４６．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４６．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０４６．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４６．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０４７、ＣＰＡ．７．０４７．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４７．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４７．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４７．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４７．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４７．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４７．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０４７．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．００４７０１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４７．ｖｌＣＤＲ３；
ＣＰＡ．７．０４９、ＣＰＡ．７．０４９．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４９．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４９．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４９．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４９．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４９．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４９．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０４９．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４９．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４９．ｖｌＣＤＲ３；ならびに
ＣＰＡ．７．０５０、ＣＰＡ．７．０５０．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０５０．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０５０．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０５０．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０５０．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０５０．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０５０．Ｈ３  ＣＰＡ．７．０５０．Ｈ４、ＣＰＡ．７．０５０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０５０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０５０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０５０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０５０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０５０．ｖｌＣＤＲ３。
ＣＰＡ．７．０２８、ＣＰＡ．７．０２８．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２８．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２８．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２８．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２８．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２８．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２８．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０２８．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０２８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２８．ｖｌＣＤＲ３。
ＣＰＡ．７．０３０、ＣＰＡ．７．０３０．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０３０．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０３０．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０３０．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０３０．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０３０．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０３０．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０３０．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０３０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０３０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０３０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０３０．ｖｌＣＤＲ３。
ＣＰＡ．７．０４１、ＣＰＡ．７．０４１．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４１．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４１．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４１．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４１．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４１．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４１．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０４１．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４１．ｖｌＣＤＲ３。
ＣＰＡ．７．０１６、ＣＰＡ．７．０１６．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０１６．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０１６．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０１６．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０１６．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０１６．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０１６．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０１６．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０１６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０１６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０１６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０１６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０１６．ｖｌＣＤＲ３。
ＣＰＡ．７．０２０、ＣＰＡ．７．０２０．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０２０．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０２０．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０２０．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０２０．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０２０．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０２０．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０２０．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０２０．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２０．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０２０．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０２０．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０２０．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０２０．ｖｌＣＤＲ３。
ＣＰＡ．７．０３８、ＣＰＡ．７．０３８．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０３８．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０３８．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０３８．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０３８．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０３８．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０３８．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０３８．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０３８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０３８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０３８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０３８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０３８．ｖｌＣＤＲ３。
ＣＰＡ．７．０４４、ＣＰＡ．７．０４４．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４４．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４４．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４４．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４４．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４４．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４４．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０４４．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４４．ｖｌＣＤＲ３。
ＣＰＡ．７．０４５、ＣＰＡ．７．０４５．ＶＨ、ＣＰＡ．７．０４５．ＶＬ、ＣＰＡ．７．０４５．ＨＣ、ＣＰＡ．７．０４５．ＬＣ、ＣＰＡ．７．０４５．Ｈ１、ＣＰＡ．７．０４５．Ｈ２、ＣＰＡ．７．０４５．Ｈ３、およびＣＰＡ．７．０４５．Ｈ４；ＣＰＡ．７．０４５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．７．０４５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．７．０４５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．７．０４５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＰＡ．７．０４５．ｖｌＣＤＲ３。
【０３０１】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、その配列が図３に示される抗体から選択される：
ＣＰＡ．９．０１８、ＣＰＡ．９．０１８．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０１８．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０１８．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０１８．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ３、ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０１８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０１８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０１８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０１８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０１８．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０１８．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０１８；
ＣＰＡ．９．０２７、ＣＰＡ．９．０２７．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０２７．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０２７．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０２７．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０２７．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０２７．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０２７．Ｈ３、ＣＰＡ．９．０２７．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０１８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０２７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０２７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０２７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０２７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０２７．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０２７．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０２７；
ＣＰＡ．９．０４９、ＣＰＡ．９．０４９．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０４９．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０４９．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０４９．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０４９．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０４９．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０４９．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０４９．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０４９．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０４９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０４９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０４９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０４９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０４９．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０４９．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０４９；
ＣＰＡ．９．０５７、ＣＰＡ．９．０５７．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０５７．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０５７．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０５７．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０５７．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０５７．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０５７．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０５７．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０５７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０５７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０５７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０５７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０５７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０５７．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０５７．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０５７；
ＣＰＡ．９．０５９、ＣＰＡ．９．０５９．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０５９．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０５９．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０５９．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０５９．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０５９．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０５９．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０５９．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０５９．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０５９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０５９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０５９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０５９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０５９．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０５９．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０５９；
ＣＰＡ．９．０８３、ＣＰＡ．９．０８３．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０８３．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０８３．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０８３．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０８３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０８３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８３．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８３．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０８３；
ＣＰＡ．９．０８６、ＣＰＡ．９．０８６．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０８６．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０８６．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０８６．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０８６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０８６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８６．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８６．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０８６；
ＣＰＡ．９．０８９、ＣＰＡ．９．０８９．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０８９．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０８９．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０８９．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０８９．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０８９．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０８９．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０８９．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０８９．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０８９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０８９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０８９．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０８９．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０８９；
ＣＰＡ．９．０９３、ＣＰＡ．９．０９３．ＶＨ、ＣＰＡ．９．０９３．ＶＬ、ＣＰＡ．９．０９３．ＨＣ、ＣＰＡ．９．０９３．ＬＣ、ＣＰＡ．９．０９３．Ｈ１、ＣＰＡ．９．０９３．Ｈ２、ＣＰＡ．９．０９３．Ｈ３；ＣＰＡ．９．０９３．Ｈ４；ＣＰＡ．９．０９３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．０９３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０９３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０９３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．０９３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．０９３．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．０９３．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．０９３；
ＣＰＡ．９．１０１、ＣＰＡ．９．１０１．ＶＨ、ＣＰＡ．９．１０１．ＶＬ、ＣＰＡ．９．１０１．ＨＣ、ＣＰＡ．９．１０１．ＬＣ、ＣＰＡ．９．１０１．Ｈ１、ＣＰＡ．９．１０１．Ｈ２、ＣＰＡ．９．１０１．Ｈ３；ＣＰＡ．９．１０１．Ｈ４；ＣＰＡ．９．１０１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．１０１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．１０１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．１０１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．１０１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．１０１．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．１０１．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．１０１；ならびに
ＣＰＡ．９．１０３、ＣＰＡ．９．１０３．ＶＨ、ＣＰＡ．９．１０３．ＶＬ、ＣＰＡ．９．１０３．ＨＣ、ＣＰＡ．９．１０３．ＬＣ、ＣＰＡ．９．１０３．Ｈ１、ＣＰＡ．９．１０３．Ｈ２、ＣＰＡ．９．１０３．Ｈ３；ＣＰＡ．９．１０３．Ｈ４；ＣＰＡ．９．１０３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＰＡ．９．１０３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．１０３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．１０３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＰＡ．９．１０３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＰＡ．９．１０３．ｖｌＣＤＲ２、ＣＰＡ．９．１０３．ｖｌＣＤＲ３、およびｓｃＦｖ−ＣＰＡ．９．１０３。
ＣＨＡ．９．５３６．１、ＣＨＡ．９．５３６．１．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．１．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．１．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．１．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．１．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．１．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．１．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．１．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．１．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．３、ＣＨＡ．９．５３６．３．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．３．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．３．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．３．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．３．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．３．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．３．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．３．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．４、ＣＨＡ．９．５３６．４．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．４．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．４．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．４．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．４．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．４．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．４．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．４．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．４．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．４．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．５、ＣＨＡ．９．５３６．５．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．５．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．５．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．５．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．５．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．６、ＣＨＡ．９．５３６．６．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．６．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．６．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．６．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．６．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．６．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．６．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．６．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．６．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．７、ＣＨＡ．９．５３６．７．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．７．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．７．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．７．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．７．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．７．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．７．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．７．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．５．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．７．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５３６．８、ＣＨＡ．９．５３６．８．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５３６．８．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５３６．８．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５３６．８．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５３６．８．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５３６．８．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５３６．８．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５３６．８．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５３６．８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５３６．８．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．１、ＣＨＡ．９．５６０．１ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．１．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．１．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．１．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．１．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．１．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．１．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．１．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．１．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．３、ＣＨＡ．９．５６０．３ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．３．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．３．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．３．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．３．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．３．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．３．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．３．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．４、ＣＨＡ．９．５６０．４ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．４．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．４．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．４．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．４．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．４．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．４．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．４．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．４．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．４．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．５、ＣＨＡ．９．５６０．５ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．５．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．５．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．５．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．５．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．５．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．５．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．５．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．５．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．６、ＣＨＡ．９．５６０．６ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．６．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．６．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．６．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．６．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．６．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．６．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．６．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．６．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．７、ＣＨＡ．９．５６０．７ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．７．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．７．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．７．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．７．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．７．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．７．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．７．Ｈ４；ＣＨＡ．９．５６０．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．７．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５６０．８、ＣＨＡ．９．５６０．８ＶＨ、ＣＨＡ．９．５６０．８．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５６０．８．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５６０．８．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５６０．８．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５６０．８．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５６０．８．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５６０．８．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５６０．８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５６０．８．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４６．１、ＣＨＡ．９．５４６．１ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４６．１．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４６．１．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４６．１．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４６．１．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４６．１．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４６．１．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４６．１．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４６．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４６．１．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．１、ＣＨＡ．９．５４７．１ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．１．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．１．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．１．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．１．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．１．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．１．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．１．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．１．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．２、ＣＨＡ．９．５４７．２ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．２．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．２．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．２．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．２．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．２．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．２．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．２．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．２．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．３、ＣＨＡ．９．５４７．３ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．３．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．３．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．３．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．３．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．３．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．３．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．３．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．４、ＣＨＡ．９．５４７．４ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．４．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．４．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．４．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．４．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．４．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．４．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．４．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．４．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．４．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．６、ＣＨＡ．９．５４７．６  ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．６．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．６．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．６．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．６．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．６．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．６．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．６．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．６．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．７、ＣＨＡ．９．５４７．７ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．７．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．７．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．７．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．７．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．８、ＣＨＡ．９．５４７．８ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．８．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．８．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．８．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．８．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．８．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．８．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．８．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．８．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．９、ＣＨＡ．９．５４７．９、ＣＨＡ．９．５４７．９ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．９．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．９．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．９．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．９．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．９．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４７．１３、ＣＨＡ．９．５４７．１３、ＣＨＡ．９．５４７．１３ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．１、ＣＨＡ．９．５４１．１．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．１．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．１．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．１．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．１．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．１．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．１．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．１．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．１．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．３、ＣＨＡ．９．５４１．３．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．３．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．３．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．３．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．３．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．３．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．３．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．３．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．３．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．４、ＣＨＡ．９．５４１．４．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．４．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．４．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．４．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．４．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．４．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．４．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．４．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．４．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．４．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．５、ＣＨＡ．９．５４１．５．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．５．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．５．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．５．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．５．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．５．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．５．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．５．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．５．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．５．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．６、ＣＨＡ．９．５４１．６．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．６．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．６．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．６．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．６．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．６．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．６．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．６．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．６．ｖｈＣＤＲ３；
ＣＨＡ．９．５４１．７、ＣＨＡ．９．５４１．７．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．７．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．７．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．７．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．７．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．７．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．７．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．７．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．７．ｖｈＣＤＲ３；ならびに
ＣＨＡ．９．５４１．８、ＣＨＡ．９．５４１．８．ＶＨ、ＣＨＡ．９．５４１．８．ＶＬ、ＣＨＡ．９．５４１．８．ＨＣ、ＣＨＡ．９．５４１．８．ＬＣ、ＣＨＡ．９．５４１．８．Ｈ１、ＣＨＡ．９．５４１．８．Ｈ２、ＣＨＡ．９．５４１．８．Ｈ３；ＣＨＡ．９．５４１．８．Ｈ４、ＣＨＡ．９．５４１．８．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）；ＣＨＡ．９．５４１．８ｖｈＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．８．ｖｈＣＤＲ２、ＣＨＡ．９．５４１．８．ｖｈＣＤＲ３、ＣＨＡ．９．５４１．８．ｖｌＣＤＲ１、ＣＨＡ．９．５４１．８．ｖｌＣＤＲ２、およびＣＨＡ．９．５４１．８．ｖｈＣＤＲ３。
【０３０２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３０３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３０４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３０５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３０６】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３０７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３０８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３０９】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、ＰＤ−１抗体はニボルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３１０】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３１１】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３１２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３１３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、ＰＤ−１抗体はセミプリマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３１４】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３１５】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３１６】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３１７】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３１８】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３１９】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３２０】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブである。
【０３２１】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブである。
【０３２２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブである。
【０３２３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブである。
【０３２４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブである。
【０３２５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブである。
【０３２６】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブである。
【０３２７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブである。
【０３２８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＳＨＲ−１２１０である。
【０３２９】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＳＨＲ−１２１０である。
【０３３０】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＳＨＲ−１２１０である。
【０３３１】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＳＨＲ−１２１０である。
【０３３２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＳＨＲ−１２１０である。
【０３３３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＳＨＲ−１２１０である。
【０３３４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＳＨＲ−１２１０である。
【０３３５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＳＨＲ−１２１０である。
【０３３６】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＩＢＩ３０８である。
【０３３７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＩＢＩ３０８である。
【０３３８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＩＢＩ３０８である。
【０３３９】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＩＢＩ３０８である。
【０３４０】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＩＢＩ３０８である。
【０３４１】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＩＢＩ３０８である。
【０３４２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＩＢＩ３０８である。
【０３４３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＩＢＩ３０８である。
【０３４４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＢＧＢ−Ａ３１７である。
【０３４５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＢＧＢ−Ａ３１７である。
【０３４６】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＢＧＢ−Ａ３１７である。
【０３４７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＢＧＢ−Ａ３１７である。
【０３４８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＢＧＢ−Ａ３１７である。
【０３４９】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＢＧＢ−Ａ３１７である。
【０３５０】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＢＧＢ−Ａ３１７である。
【０３５１】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はＢＧＢ−Ａ３１７である。
【０３５２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体は米国特許公開第２０１７／００８１４０９号に列挙される抗ＰＤ−１抗体である。
【０３５３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体は米国特許公開第２０１７／００８１４０９号に列挙される抗ＰＤ−１抗体である。
【０３５４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体は米国特許公開第２０１７／００８１４０９号に列挙される抗ＰＤ−１抗体である。
【０３５５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体は米国特許公開第２０１７／００８１４０９号に列挙される抗ＰＤ−１抗体である。
【０３５６】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体は米国特許公開第２０１７／００８１４０９号に列挙される抗ＰＤ−１抗体である。
【０３５７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体は米国特許公開第２０１７／００８１４０９号に列挙される抗ＰＤ−１抗体である。
【０３５８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体は米国特許公開第２０１７／００８１４０９号に列挙される抗ＰＤ−１抗体である。
【０３５９】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体は米国特許公開第２０１７／００８１４０９号に列挙される抗ＰＤ−１抗体である。
【０３６０】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブである。
【０３６１】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブである。
【０３６２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブである。
【０３６３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブである。
【０３６４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブである。
【０３６５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブである。
【０３６６】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブである。
【０３６７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−１抗体はセミプリマブである。
【０３６８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３６９】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐであり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３７０】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３７１】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３７２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３７３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３７４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３７５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐであり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３７６】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３７７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐであり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３７８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３７９】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブであり、ならびに抗ＰＶＲＩＧ抗体は上記および／または図５もしくは６３からの１つである。
【０３８０】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３８１】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３８２】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３８３】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３８４】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３８５】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３８６】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３８７】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３８８】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３８９】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３９０】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３９１】
いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブであり、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体は上記および／または図３からの１つである。
【０３９２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。
【０３９３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。
【０３９４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。
【０３９５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。
【０３９６】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。
【０３９７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。
【０３９８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。
【０３９９】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。
【０４００】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブである。
【０４０１】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブである。
【０４０２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブである。
【０４０３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブである。
【０４０４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブである。
【０４０５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブである。
【０４０６】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブである。
【０４０７】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアベルマブである。
【０４０８】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブである。
【０４０９】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブである。
【０４１０】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブである。
【０４１１】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブである。
【０４１２】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブである。
【０４１３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブである。
【０４１４】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブである。
【０４１５】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体はＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、抗ＰＶＲＩＧ抗体はＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）であり、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体はデュルバルマブである。
Ｂ．バイオマーカー分析
本明細書に示されるように、施される併用療法の選択は、腫瘍生検からの特定のバイオマーカーの発現の評価を使用して行うことができる。すなわち、患者の腫瘍試料から生検を採取し、タンパク質染色化および選別化を使用して特定のタンパク質の存在およびレベルを試験することにより、好適な療法を選択できる。実施例２において示されるように、腫瘍からの細胞をスクリーニングし、免疫細胞集団と非免疫細胞集団とを特定することができ、その後免疫細胞集団は、リガンドおよび抗原レベルの両方を調査することを含むＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＴＩＧＩＴを含むいくつかのバイオマーカーのレベルについて評価した。
【０４１６】
したがって、例えば、免疫細胞集団を特定するために、ＣＤ４５、ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ３３、ＣＤ２５、ＣＤ１２７、ＣＤ１４、ＣＤ４、およびＣＤ５６のうちの１つ以上に対する抗体を評価して、以下の表１に示されるように腫瘍試料中の細胞集団を分類できる：
【０４１７】
【表２】
2020521778.tif 000004
【０４１８】
次にこれらの細胞型のいくつかを、一般的に標識化抗体を使用して、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＴＩＧＩＴのうちの１つ以上の発現について評価し、スコア化する。ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の割合が、使用される抗体についての抗体関連アイソタイプ対照抗体で染色された同じ腫瘍細胞と比較して１％を超える（＞１％）場合に、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ、および抗ＰＤ１抗体の三重併用が施されるべきである。一方で、ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度がアイソタイプ対照と比較して１％を下回る（＜１％）患者には、抗ＴＩＧＩＴ抗体および抗ＰＶＲＩＧ抗体の二重併用が施されるべきである。
１．抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ、および抗ＰＤ−１抗体の併用療法
いくつかの実施形態において、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＴＩＧＩＴから選択される少なくとも１つの細胞表面マーカーの発現について、腫瘍からの免疫細胞が任意に試験されたら、治療の決定を下すことができる。ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の発現が＞１％である場合に、患者は、本明細書で概説される抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ、および抗ＰＤ−１抗体の三重併用を施すことができる。
【０４１９】
したがって、一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４２０】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４２１】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４２２】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４２３】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４２４】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４２５】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４２６】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４２７】
したがって、一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４２８】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４２９】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４３０】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４３１】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４３２】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４３３】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４３４】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４３５】
したがって、一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびセミプリマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびセミプリマブと組み合わされる。
【０４３６】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびセミプリマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびセミプリマブと組み合わされる。
【０４３７】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびセミプリマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびセミプリマブと組み合わされる。
【０４３８】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびセミプリマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびセミプリマブと組み合わされる。
【０４３９】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびセミプリマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびセミプリマブと組み合わされる。
【０４４０】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびセミプリマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびセミプリマブと組み合わされる。
【０４４１】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびセミプリマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびセミプリマブと組み合わされる。
【０４４２】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびセミプリマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびセミプリマブと組み合わされる。
２．抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＶＲＩＧ抗体の併用療法
同様に、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＴＩＧＩＴから選択される少なくとも１つの細胞表面マーカーの発現について、腫瘍からの免疫細胞が試験されていると、治療の決定を下すことができる。ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の発現が＜１％である場合に、患者は、本明細書で概説される抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＶＲＩＧ抗体の二重併用を施すことができる。
【０４４３】
したがって、一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体と組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わされる。
【０４４４】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体と組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わされる。
【０４４５】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体と組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わされる。
【０４４６】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体と組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わされる。
【０４４７】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体と組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わされる。
【０４４８】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体と組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わされる。
【０４４９】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体と組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わされる。
【０４５０】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体と組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わされる。
【０４５１】
一実施形態において、本発明は、本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ−１抗体との組み合わせを提供する。一実施形態において、本発明は、本発明の抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＤ−Ｌ１抗体との組み合わせを提供する。
【０４５２】
一実施形態において、がんを有する患者からの腫瘍から生検を採取し、ＦＡＣＳ分析のために当該技術分野で即知であるように解離させる。細胞は、（１）ＴＩＧＩＴ（例えば、本明細書に記載されるいずれかまたはＭＢＳＡ４３のような当技術分野における他のものを使用して）；（２）ＰＤ−１（例えば、ＥＨ１２．２Ｈ７、Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）、Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）、セミプリマブなどのような当技術分野において即知であるものを使用して）；（３）ＰＤ−Ｌ１（例えば、本明細書で概説されるＢＭ−１、アテゾリズマブ、アベルマブ、およびデュルバルマブのような当技術分野において即知であるものを使用して）、および（４）ＰＶＲ（例えば、ＳＫＩＩ．４のような当技術分野において即知であるものを使用して）、ならびに（５）使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体に対する標識抗体で染色される。ＦＡＣＳが行われ、各受容体について、対照抗体と比較した受容体を発現する細胞の割合が算出される。ＴＩＧＩＴ、ＰＤ−１、ＰＤ−１、およびＰＶＲについての陽性細胞の割合が全ての４つの受容体について≧１％である場合に、患者は本明細書に概説されるようにＴＩＧＩＴおよびＰＤ−１に対する抗体で治療される。
【０４５３】
一実施形態において、がんを有する患者からの腫瘍から生検を採取し、ＦＡＣＳ分析のために当該技術分野で即知であるように解離させる。細胞は、（１）ＰＶＲＩＧ（例えば、一般的にＣＨＡ．７．５１８．１Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）を使用するが、ＷＯ２０１６／１３４３３３（特に遮断しない場合でも結合するものを含む）またはＷＯ２０１７／０４１００４で概説されるいずれか）を使用できる）；（２）ＰＤ−１（例えば、ＥＨ１２．２Ｈ７、Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）、Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）、セミプリマブなどを含む当技術分野において既知であるものを使用して）；（３）ＰＤ−Ｌ１（例えば、本明細書で概説されるＢＭ−１、アテゾリズマブ、アベルマブ、およびデュルバルマブなどの当技術分野において既知であるものを使用して）、および（４）ＰＶＲＬ２（例えば、ＴＸ１１などの当技術分野において既知であるものを使用して）、ならびに（５）使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体に対する標識抗体で染色される。ＦＡＣＳが行われ、各受容体について、対照抗体と比較した受容体を発現する細胞の割合が算出される。ＰＶＲＩＧ、ＰＤ−１、ＰＤ−１およびＰＶＲＬ２についての陽性細胞の割合が全ての４つの受容体について≧１％である場合に、患者は本明細書に概説されるようにＰＶＲＩＧおよびＰＤ−１に対する抗体で治療される。
【０４５４】
一実施形態において、がんを有する患者からの腫瘍から生検を採取し、ＦＡＣＳ分析のために当該技術分野で即知であるように解離させる。細胞は、（１）ＰＶＲＩＧ（例えば、一般的にＣＨＡ．７．５１８．１Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）を使用するが、ＷＯ２０１６／１３４３３３（特に遮断しない場合でも結合するものを含む）またはＷＯ２０１７／０４１００４で概説されるいずれか）を使用できる）；（２）ＴＩＧＩＴ（例えば、本明細書に記載されるいずれかまたはＭＢＳＡ４３のような当技術分野における他のものを使用して）；（３）ＰＶＲ（例えば、ＳＫＩＩ．４のような当技術分野において即知であるものを使用して）、および（４）ＰＶＲＬ２（例えば、ＴＸ１１などの当技術分野において既知であるものを使用して）、ならびに（５）使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体に対する標識抗体で染色される。ＦＡＣＳが行われ、各受容体について、対照抗体と比較した受容体を発現する細胞の割合が算出される。ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲ、およびＰＶＲＬ２についての陽性細胞の割合が全ての４つの受容体について≧１％である場合に、患者は本明細書に概説されるようにＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴに対する抗体で治療される。この点に関する好ましい組み合わせは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＰＡ．９．０８６である。
【０４５５】
一実施形態において、がんを有する患者からの腫瘍から生検を採取し、ＦＡＣＳ分析のために当該技術分野で即知であるように解離させる。細胞は、（１）ＰＶＲＩＧ（例えば、一般的にＣＨＡ．７．５１８．１Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）を使用するが、ＷＯ２０１６／１３４３３３（特に遮断しない場合でも結合するものを含む）またはＷＯ２０１７／０４１００４で概説されるいずれか）を使用できる）；（２）ＴＩＧＩＴ（例えば、本明細書に記載されるいずれかまたはＭＢＳＡ４３のような当技術分野における他のものを使用して）；（３）ＰＶＲ（例えば、ＳＫＩＩ．４のような当技術分野において即知であるものを使用して）、および（４）ＰＶＲＬ２（例えば、ＴＸ１１などの当技術分野において既知であるものを使用して）；（５）ＰＤ−１（例えば、ＥＨ１２．２Ｈ７、Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）、Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）、セミプリマブなどのような当技術分野において即知であるものを使用して）；ならびに（６）使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体に対する標識抗体で染色される。ＦＡＣＳが行われ、各受容体について、対照抗体と比較した受容体を発現する細胞の割合が算出される。ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−１についての陽性細胞の割合が全ての５つの受容体について≧１％である場合に、患者は本明細書に概説されるようにＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１に対する抗体で治療される。この点に関する好ましい組み合わせは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６、およびＥＨ１２．２Ｈ７である。この点に関する他の好ましい組み合わせは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６、およびＫｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）である。この点に関するさらに他の好ましい組み合わせは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６、およびＯｐｄｉｖｏ（登録商標）である。
【０４５６】
一実施形態において、がんを有する患者からの腫瘍から生検を採取し、ＦＡＣＳ分析のために当該技術分野で即知であるように解離させる。細胞は、（１）ＰＶＲＩＧ（例えば、一般的にＣＨＡ．７．５１８．１Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）を使用するが、ＷＯ２０１６／１３４３３３（特に遮断しない場合でも結合するものを含む）またはＷＯ２０１７／０４１００４で概説されるいずれか）を使用できる）；（２）ＴＩＧＩＴ（例えば、本明細書に記載されるいずれかまたはＭＢＳＡ４３のような当技術分野における他のものを使用して）；（（３）ＰＤ−Ｌ１（例えば、本明細書で概説されるＢＭ−１、アテゾリズマブ、アベルマブ、およびデュルバルマブのような当技術分野において即知であるものを使用して）、および（４）ＰＶＲ（例えば、ＳＫＩＩ．４のような当技術分野において即知であるものを使用して）；（５）ＰＤ−１（例えば、ＥＨ１２．２Ｈ７、Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）、Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）、セミプリマブなどのような当技術分野において即知であるものを使用して）；ならびに（６）使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体に対する標識抗体で染色される。ＦＡＣＳが行われ、各受容体について、対照抗体と比較した受容体を発現する細胞の割合が算出される。ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ−Ｌ１、ＰＶＲ、およびＰＤ−１についての陽性細胞の割合が全ての５つの受容体について≧１％である場合に、患者は本明細書に概説されるようにＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１に対する抗体で治療される。この点に関する好ましい組み合わせは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６、およびＥＨ１２．２Ｈ７である。この点に関する他の好ましい組み合わせは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６、およびＫｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）である。この点に関するさらに他の好ましい組み合わせは、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６、およびＯｐｄｉｖｏ（登録商標）である。
３．難治性患者に対するＰＤ−１抗体を伴う抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＶＲＩＧ抗体の併用療法
いくつかの実施形態において、治療は、高ＰＤ−Ｌ１発現を有する腫瘍細胞を標的とするための抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体の組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、治療は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する患者に使用するための抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体の組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、治療は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するための抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体の組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、治療は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現し、かつ抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するための抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体の組み合わせを含む。
【０４５７】
したがって、一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４５８】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４５９】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐは、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４６０】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４６１】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４６２】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４６３】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４６４】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびペンブロリズマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびペンブロリズマブと組み合わされる。
【０４６５】
したがって、一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４６６】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８３からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４６７】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐは、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４６８】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４６９】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４７０】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．７からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４７１】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４７２】
一実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体ＣＨＡ．９．５４７．１３からのＣＤＲセットを含む抗体は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するために抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５３８．１．２からのＣＤＲセットを含む抗体、およびニボルマブと組み合わされる。特定の実施形態において、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、腫瘍がＰＤ−Ｌ１を発現する、および／または抗ＰＤ−１療法に対して難治性であるがん患者に使用するためにＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびニボルマブと組み合わされる。
【０４７３】
いくつかの実施形態において、抗ＴＩＧＩＴ抗体は、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＰＶＲＩＧ抗体は、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である。
４．治療の評価
一般に、本発明の抗体は、単独でまたは併用（ＰＶＲＩＧと共にＰＤ−１、ＴＩＧＩＴと共にＰＤ−１、またはＴＩＧＩＴと共にＰＶＲＩＧ、および／またはＰＶＲＩＧと共にＴＩＧＩＴとＰＤ−１との両方）でがんを有する患者に投与され、本明細書に記載されるいくつかの方法で有効性が評価される。このため、がん量、腫瘍のサイズ、転移の存在または程度の評価等の、有効性の標準的なアッセイを実行し得るが、免疫腫瘍学的治療もまた免疫状態評価に基づいて評価され得る。これは、生体外アッセイおよび生体内アッセイの両方を含むいくつかの方法で行うことができる。例えば、腫瘍量、サイズ、侵襲性、ＬＮ関与、転移などといった「古典的な」測定と併せて、免疫状態（例えば、ｉｐｉ治療後のＩＣＯＳ＋ＣＤ４＋Ｔ細胞の存在）の変化の評価を実施することができる。したがって、以下のうちのいずれかまたは全てを評価することができる：ＣＤ４＋Ｔ細胞活性化もしくは増殖、ＣＤ８＋Ｔ（ＣＴＬ）細胞活性化もしくは増殖、ＣＤ８＋Ｔ細胞媒介性細胞傷害性活性および／もしくはＣＴＬ媒介性細胞枯渇、ＮＫ細胞活性およびＮＫ媒介性細胞枯渇に対するＰＶＲＩＧの抑制効果、Ｔｒｅｇ細胞分化および増殖ならびにＴｒｅｇ細胞もしくは骨髄由来サプレッサ細胞（ＭＤＳＣ）媒介性免疫抑制もしくは免疫耐性に対するＰＶＲＩＧの増強効果、ならびに／または免疫細胞による炎症性サイトカイン産生、例えば、Ｔ細胞もしくは他の免疫細胞によるＩＬ−２、ＩＦＮ−γもしくはＴＮＦ−α産生に対するＰＶＲＩＧの影響。
【０４７４】
いくつかの実施形態では、治療の評価は、例えば、ＣＦＳＥ希釈法、免疫エフェクター細胞のＫｉ６７細胞内染色、および３Ｈ−チミジン組み込み法を使用して、免疫細胞増殖を評価することによって行われる。
【０４７５】
いくつかの実施形態において、治療の評価は、ＣＤ２５、ＣＤ６９、ＣＤ１３７、ＩＣＯＳ、ＰＤ１、ＧＩＴＲ、ＯＸ４０、およびＣＤ１０７Ａの表面発現によって測定される細胞脱顆粒のうちの１つ以上を含む、遺伝子発現の増加または活性化関連マーカーの増加したタンパク質レベルを評価することによって行われる。
【０４７６】
いくつかの実施形態において、治療の評価は、治療の不在下で、例えば、本発明の抗体の投与前に、Ｔ細胞増殖の量を評価することによって行われる。投与後、患者がＴ細胞増殖の増加を有する場合、例えば、患者のＴ細胞のサブセットが増殖している場合、これはＴ細胞が活性化されたことの指標である。
【０４７７】
同様に、本発明の抗体を用いた治療の評価は、治療の有効性を評価するために、投与前および投与後に患者のＩＦＮ−γレベルを測定することによって行うことができる。これは、数時間または数日以内に行われ得る。
【０４７８】
一般に、遺伝子発現アッセイは、当該技術分野で即知であるように行われる。例えば、Ｇｏｏｄｋｉｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｍｐｕｔｅｒｓ  ａｎｄＣｈｅｍ．Ｅｎｇ．２９（３）：５８９  （２００５）、Ｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍ．Ｂｉｏｌ．Ｉｎｓｉｇｈｔｓ  １１／１５／１５  ９（Ｓｕｐｐｌ．１）：２９−４６、Ｃａｍｐｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｏｄ．Ｐａｔｈｏｌ．２０１３  Ｊａｎ；２６  ｓｕｐｐｌ．１：Ｓ９７−Ｓ１１０を参照されたく、その遺伝子発現測定技法は、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
【０４７９】
一般に、タンパク質発現測定もまた同様に、当該技術分野で即知であるように行われ、例えば、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｃｅｎｔ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｃａｐｉｌｌａｒｙ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ−Ｂａｓｅｄ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０１３：９８４：１−１２、Ｔａｙｌｏｒ  ｅｔ  ａｌ，ＢｉｏＭｅｄ  Ｒｅｓ．Ｖｏｌｕｍｅ  ２０１４，Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  ３６１５９０，８  ｐａｇｅｓ、Ｂｅｃｅｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｕｔａｔ．Ｒｅｓ  ２０１１  Ｊｕｎｅ  １７：７２２（２）：１７１−１８２を参照されたく、その測定技法は、参照により本明細書に明示的に組み込まれる
いくつかの実施形態において、治療の評価は、酵素活性（プロテアーゼ活性を含む）、細胞膜透過性、細胞接着、ＡＴＰ産生、補酵素産生、およびヌクレオチド取り込み活性などの多数の細胞パラメーターを推測することを通した標的細胞生存検出によって測定される細胞傷害性活性を評価することによって行なわれる。これらのアッセイの具体的な例としては、トリパンブルーまたはＰＩ染色、５１Ｃｒまたは３５Ｓ放出法、ＬＤＨ活性、ＭＴＴおよび／またはＷＳＴアッセイ、カルセイン−ＡＭアッセイ、発光系アッセイ、ならびに他のものが含まれるが、これらに限定されない。
【０４８０】
いくつかの実施形態では、治療の評価は、サイトカイン産生によって測定されるＴ細胞活性を評価することによって行われ、周知の技法を使用して、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−α、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、および／またはＩＬ−１３を含むがこれらに限定されないサイトカインを使用して、細胞内、培養上清液中のいずれかで測定する。
【０４８１】
したがって、治療の評価は、以下のうちの１つ以上を評価するアッセイを使用して行うことができる：（ｉ）免疫応答を増加させる、（ｉｉ）αβおよび／またはγδ  Ｔ細胞の活性化を増加させる、（ｉｉｉ）細胞傷害性Ｔ細胞活性を増加させる、（ｉｖ）ＮＫおよび／またはＮＫＴ細胞活性を増加させる、（ｖ）αβおよび／またはγδ  Ｔ細胞抑制を軽減させる、（ｖｉ）炎症促進性サイトカイン分泌を増加させる、（ｖｉｉ）ＩＬ−２分泌を増加させる；（ｖｉｉｉ）インターフェロン−γ産生を増加させる、（ｉｘ）Ｔｈ１応答を増加させる、（ｘ）Ｔｈ２応答を減少させる、（ｘｉ）制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の少なくとも１つの細胞数および／または活性化を減少させるかまたは排除する。
有効性を測定するためのアッセイ
いくつかの実施形態において、Ｔ細胞活性化は、実施例に記載のように、混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイを使用して評価される。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４８２】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、異なる因子のリン酸化または脱リン酸化によって、または他の翻訳後修飾を測定することによって測定される免疫応答の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４８３】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、サイトカイン分泌によって、または増殖によって、または例えば、ＣＤ１３７、ＣＤ１０７ａ、ＰＤ１などのような活性化マーカーの発現の変化によって測定される、αβおよび／またはγδ  Ｔ細胞の活性化の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４８４】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、例えばがん細胞のような標的細胞の直接的な殺傷によって、またはサイトカイン分泌によって、または増殖によって、または例えば、ＣＤ１３７、ＣＤ１０７ａ、ＰＤ１などのような活性化マーカーの発現の変化によって測定される、細胞傷害性Ｔ細胞活性の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４８５】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、標的細胞、例えばがん細胞の直接的な殺傷によって、またはサイトカイン分泌によって、または例えば、ＣＤ１０７ａなどのような活性化マーカーの発現の変化によって測定される、ＮＫおよび／またはＮＫＴの細胞活性の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４８６】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、サイトカイン分泌によって、または増殖によって、または例えば、ＣＤ１３７、ＣＤ１０７ａ、ＰＤ１などのような活性化マーカーの発現の変化によって測定される、αβおよび／またはγδのＴ細胞の抑制の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４８７】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、ＥＬＩＳＡによって、またはＬｕｍｉｎｅｘによって、またはＭｕｌｔｉｐｌｅｘビーズに基づく方法によって、または細胞内染色およびＦＡＣＳ解析によって、またはＡｌｉｓｐｏｔなどによって測定される炎症促進性サイトカイン分泌の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４８８】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、ＥＬＩＳＡによって、またはＬｕｍｉｎｅｘによって、またはＭｕｌｔｉｐｌｅｘビーズに基づく方法によって、または細胞内染色およびＦＡＣＳ解析によって、またはＡｌｉｓｐｏｔなどによって測定されるＩＬ−２分泌の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４８９】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、ＥＬＩＳＡによって、またはＬｕｍｉｎｅｘによって、またはＭｕｌｔｉｐｌｅｘビーズ系方法によって、または細胞内染色およびＦＡＣＳ解析によって、またはＡｌｉｓｐｏｔ等によって測定されるインターフェロン−γ産生の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４９０】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、サイトカイン分泌によって、または活性化マーカーの発現の変化によって測定されるＴｈ１応答の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４９１】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、サイトカイン分泌によって、または活性化マーカーの発現の変化によって測定されるＴｈ２応答の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４９２】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、フローサイトメトリーによって、またはＩＨＣによって測定される制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の少なくとも１つの細胞数および／または活性の増加または減少を測定する。応答の減少は免疫刺激活性を示す。適切な減少は、以下に概説する増加の場合と同じである。
【０４９３】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、フローサイトメトリーによって、またはＩＨＣによって測定されるＭ２マクロファージ細胞数の増加または減少を測定する。応答の減少は免疫刺激活性を示す。適切な減少は、以下に概説する増加の場合と同じである。
【０４９４】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、サイトカイン分泌によって、または活性化マーカーの発現の変化によって測定されるＭ２マクロファージ腫瘍形成促進活性の増加または減少を測定する。応答の減少は免疫刺激活性を示す。適切な減少は、以下に概説する増加の場合と同じである。
【０４９５】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、フローサイトメトリーによって、またはＩＨＣによって測定されるＮ２好中球増加の増加または減少を測定する。応答の減少は免疫刺激活性を示す。適切な減少は、以下に概説する増加の場合と同じである。
【０４９６】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、サイトカイン分泌によって、または活性化マーカーの発現の変化によって測定されるＮ２好中球腫瘍形成促進活性の増加または減少を測定する。応答の減少は免疫刺激活性を示す。適切な減少は、以下に概説する増加の場合と同じである。
【０４９７】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、サイトカイン分泌によって、または増殖によって、または例えば、ＣＤ１３７、ＣＤ１０７ａ、ＰＤ１などのような活性化マーカーの発現の変化によって測定される、Ｔ細胞活性化の阻害の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４９８】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、例えばがん細胞のような標的細胞の直接的な殺傷によって、またはサイトカイン分泌によって、または増殖によって、または例えば、ＣＤ１３７、ＣＤ１０７ａ、ＰＤ１などのような活性化マーカーの発現の変化によって測定される、ＣＴＬ活性化の阻害の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０４９９】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例として活性化マーカーの発現の変化によって測定されるαβおよび／またはγδのＴ細胞枯渇の増加または減少を測定する。応答の減少は免疫刺激活性を示す。適切な減少は、以下に概説する増加の場合と同じである。
【０５００】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、サイトカイン分泌によって、または増殖によって、または例えば、ＣＤ１３７、ＣＤ１０７ａ、ＰＤ１などのような活性化マーカーの発現の変化によって測定される、αβおよび／またはγδ  Ｔ細胞の応答の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０５０１】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、サイトカイン分泌によって、または増殖によって、または例えば、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＣＲ７などのような活性化マーカーの発現の変化によって測定される、抗原特異的メモリー応答の刺激の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０５０２】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えばＭＴＴ、Ｃｒ放出、カルサインＡＭなどの細胞傷害性アッセイによって、または例えばＣＦＳＥ希釈もしくはヨウ化プロピジウム染色などのようなフローサイトメトリー系アッセイによって測定される、がん細胞のアポトーシスまたは溶解の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０５０３】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えばＭＴＴ、Ｃｒ放出、カルサインＡＭなどの細胞傷害性アッセイによって、または例えばＣＦＳＥ希釈もしくはヨウ化プロピジウム染色などのようなフローサイトメトリーに基づくアッセイによって測定される、がん細胞の細胞傷害性または細胞増殖抑制性の効果の刺激の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０５０４】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えばＭＴＴ、Ｃｒ放出、カルサインＡＭなどの細胞傷害性アッセイによって、または例えばＣＦＳＥ希釈もしくはヨウ化プロピジウム染色などのようなフローサイトメトリー系アッセイによって測定される、がん細胞の直接殺傷の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０５０５】
一実施形態、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、サイトカイン分泌によって、または増殖によって、または活性化マーカーの発現の変化によって測定されるＴｈ１７活性の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０５０６】
一実施形態において、シグナル伝達経路アッセイは、例えば、例えばＭＴＴ、Ｃｒ放出、カルサインＡＭなどの細胞傷害性アッセイによって、または例えばＣＦＳＥ希釈もしくはヨウ化プロピジウム染色などのようなフローサイトメトリーに基づくアッセイによって測定される、補体依存性細胞傷害性および／または抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性の誘導の増加または減少を測定する。活性の増加は免疫刺激活性を示す。活性の適切な増加を以下に概説する。
【０５０７】
一実施形態において、Ｔ細胞活性化は、例えば、標的細胞、例えばがん細胞の直接的な殺傷によって、またはサイトカイン分泌によって、または増殖によって、または例えば、ＣＤ１３７、ＣＤ１０７ａ、ＰＤ１などのような活性化マーカーの発現の変化によって測定される。Ｔ細胞については、増殖、活性化の細胞表面マーカー（例えば、ＣＤ２５、ＣＤ６９、ＣＤ１３７、ＰＤ１）、細胞傷害性（標的細胞を殺傷する能力）、およびサイトカイン産生（例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＦＮγ、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１０、ＩＬ−１７Ａ）の増加が、がん細胞の強化された殺傷と一致する免疫調節の指標となり得る。
【０５０８】
一実施形態において、ＮＫ細胞活性化は、例えば、標的細胞、例えばがん細胞の直接的な殺傷によって、またはサイトカイン分泌によって、または例えばＣＤ１０７ａなどのような活性化マーカーの発現の変化によって測定される。ＮＫ細胞については、増殖、細胞傷害性（標的細胞を殺傷し、ＣＤ１０７ａ、グランザイム、およびパーフォリン発現を増加させる能力）、サイトカイン産生（例えば、ＩＦＮγおよびＴＮＦ）、および細胞表面受容体発現（例えば、ＣＤ２５）の増加が、がん細胞の強化された殺傷と一致する免疫調節の指標となり得る。
【０５０９】
一実施形態において、γδ  Ｔ細胞活性化は、例えば、サイトカイン分泌によって、または増殖によって、または活性化マーカーの発現の変化によって測定される。
【０５１０】
一実施形態において、Ｔｈ１細胞活性化は、例えば、サイトカイン分泌によって、または活性化マーカーの発現の変化によって測定される。
【０５１１】
活性または応答の適切な増加（または減少、上記で概説されたように適切なもの）は、参照試料または対照試料のいずれか、例えば、本発明の抗ＰＶＲＩＧ抗体を含まない試験試料におけるシグナルと比べた、少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９８〜９９％パーセントの増加である。活性における特定の増加は、添付される図に示される。例えば、Ｔ細胞増殖の増加に関して、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は約６０％の増加を示し、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は４７％の増加を示す。Ｔ細胞増殖またはＩＦＮ−γのいずれかにおいて約１０〜７０％の関連性のある増加が示され、約２０〜６０％もまた有用である。
【０５１２】
同様に、参照または対照試料と比較して、少なくとも１倍、２倍、３倍、４倍または５倍の増加が有効性を示す。
Ｘ．例示的な実施形態
１．患者においてがんを治療する方法であって、
ａ）腫瘍細胞を含む該患者からの生検を提供することと、
ｂ）該生検におけるＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度を測定することと、
ｃ）該ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％を超える場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体を含む三重併用療法を施すことと、
ｄ）該ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％未満の場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体および抗ＰＶＲＩＧ抗体を含む二重併用療法を施すこととを含む、方法。
２．該抗ＴＩＧＩＴ抗体が、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である、請求項１に記載の方法。
３．該抗ＰＶＲＩＧ抗体が、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である、請求項１に記載の方法。
４．該抗ＰＤ−１抗体が、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である、請求項１に記載の方法。
５．該抗ＴＩＧＩＴ抗体が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
６．該抗ＰＶＲＩＧ抗体が、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
７．該抗ＰＤ−１抗体が、ペンブロリズマブ、セミプリマブ、およびニボルマブのうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
８．該二重併用療法が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
９．該三重併用療法が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
１０．該記抗体が、同時に投与される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
１１．該抗体が連続的に投与される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
１２．該がんが、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、および高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
１３．該がんが、トリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、およびメルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
１４．抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−１抗体を含む三重併用療法を施すことを含む、患者においてがんを治療する方法。
１５．該抗ＴＩＧＩＴ抗体が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項１４に記載の方法。
１６．該抗ＰＶＲＩＧ抗体が、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項１４または１５に記載の方法。
１７．該抗ＰＤ−１抗体が、ペンブロリズマブおよびニボルマブからなる群から選択される抗体である、請求項１４、１５、または１６のいずれか一項に記載の方法。
１８．該三重併用療法が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される二重併用療法と組み合わせた抗ＰＤ−１抗体の投与を含む、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の方法。
１９．該三重併用療法が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ペンブロリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ニボルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、セミプリマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の方法。
２０．該記抗体が、同時に投与される、請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の方法。
２１．該抗体が連続的に投与される、請求項１４〜２０のいずれか一項に記載の方法。
２２．該がんが、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の方法。
２３．該がんが、トリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、およびメルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される、請求項１４〜２２のいずれか一項に記載の方法。
２４．
ａ）抗ＴＩＧＩＴ抗体の単位用量を含む容器と、
ｂ）抗ＰＶＲＩＧ抗体の単位用量を含む容器と、を含む、医薬品投与キット。
２５．
ａ）抗ＴＩＧＩＴ抗体の単位用量を含む容器と、
ｂ）抗ＰＶＲＩＧ抗体の単位用量を含む容器と、
ｃ）抗ＰＤ−１抗体を含む容器と、を含む、医薬品投与キット。
２６．該抗ＴＩＧＩＴ抗体が、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である、請求項２４または２５に記載の方法。
２７．該抗ＰＶＲＩＧ抗体が、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である、請求項２４または２５に記載の方法。
２８．該抗ＰＤ−１抗体が、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である、請求項２４または２５に記載の方法。
２９．
ａ）患者の腫瘍試料から細胞集団を提供することと、
ｂ）該集団を、
ｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、
ｉｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、
ｉｉ）ＰＶＲタンパク質、
ｉｉｉ）ＰＤ−１タンパク質、
ｖ）ＰＤ−Ｌ１タンパク質、
ｖｉ）ＰＶＲＬ２、および
ｖｉｉ）ｉ）〜ｖｉ）の抗体に対して関連するアイソタイプ対照と結合する標識抗体で染色することと、
ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、
ｄ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲ、ＰＤ−１、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−Ｌ１のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定し、
ＴＩＧＩＴまたはＰＶＲのいずれか、ＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２のいずれか、およびＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１のいずれかで陽性細胞の割合が＞１％の場合に、ステップｅ）に進むことと、
ｅ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法。
３０．該抗ＴＩＧＩＴ抗体が、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である、請求項２７に記載の方法。
３１．該抗ＰＶＲＩＧ抗体が、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である、請求項２７に記載の方法。
３２．該抗ＰＤ−１抗体が、図７において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−１抗体から選択される抗体である、請求項２７に記載の方法。
３３．前記ＴＩＧＩＴ抗体がＣＰＡ．９．０８６である、請求項２９、３１、または３２に記載の方法。
３４．該ＰＤ−１抗体が、ペンブロリズマブ、セミプリマブ、およびニボルマブから選択される、請求項２９、３０、または３１に記載の方法。
３５．該ＰＶＲＩＧ抗体がＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）である、請求項２９、３０、または３２に記載の方法。
３６．患者においてがんを治療する方法であって、
ａ）腫瘍細胞を含む該患者からの生検を提供することと、
ｂ）該生検におけるＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度を測定することと、
ｃ）該ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％を超える場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む三重併用療法を施すことと、
ｄ）該ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞の頻度が、使用される抗体に関連するアイソタイプ対照抗体を用いて同じ腫瘍細胞を染色する場合と比較して１％未満の場合に、抗ＴＩＧＩＴ抗体および抗ＰＶＲＩＧ抗体を含む二重併用療法を施すこととを含む、方法。
３７．該抗ＴＩＧＩＴ抗体が、図３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＴＩＧＩＴ抗体から選択される抗体である、請求項３６に記載の方法。
３８．該抗ＰＶＲＩＧ抗体が、図５および／または図６３において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＶＲＩＧ抗体から選択される抗体である、請求項３６に記載の方法。
３９．該抗ＰＤ−１抗体が、図６２において記載されるもののうちのいずれをも含む、本明細書に記載されるあらゆる抗ＰＤ−Ｌ１抗体から選択される抗体である、請求項３６に記載の方法。
４０．該抗ＴＩＧＩＴ抗体が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項３６〜３９のいずれか一項に記載の方法。
４１．該抗ＰＶＲＩＧ抗体が、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項３６〜３９のいずれか一項に記載の方法。
４２．該抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、アベルマブ、およびデュルバルマブのうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項３６〜４１のいずれか一項に記載の方法。
４３．該二重併用療法が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される、請求項３６〜４２のいずれか一項に記載の方法。
４４．該三重併用療法が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される、請求項３６〜４３のいずれか一項に記載の方法。
４５．該記抗体が、同時に投与される、請求項３６〜４４のいずれか一項に記載の方法。
４６．該抗体が連続的に投与される、請求項３６〜４５のいずれか一項に記載の方法。
４７．該がんが、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される、請求項３６〜４６のいずれか一項に記載の方法。
４８．該がんが、トリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、およびメルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される、請求項３６〜４７のいずれか一項に記載の方法。
４９．抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＶＲＩＧ抗体、および抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む三重併用療法を施すことを含む、患者においてがんを治療する方法。
５０．該抗ＴＩＧＩＴ抗体が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項４９に記載の方法。
５１．該抗ＰＶＲＩＧ抗体が、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のうちの少なくとも１つから選択される抗体である、請求項４９または５０に記載の方法。
５２．該抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、アベルマブ、およびデュルバルマブからなる群から選択される抗体である、請求項４９、５０、または５１のいずれか一項に記載の方法。
５３．該三重併用療法が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される二重併用療法と組み合わせた抗ＰＤ−Ｌ１抗体の投与を含む、請求項４９〜５２のいずれか一項に記載の方法。
５４．該三重併用療法が、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アテゾリズマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、アベルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびにＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、デュルバルマブ、およびＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の投与から選択される、請求項４９〜５３のいずれか一項に記載の方法。
５５．該記抗体が、同時に投与される、請求項４９〜５４のいずれか一項に記載の方法。
５６．該抗体が連続的に投与される、請求項４９〜５４のいずれか一項に記載の方法。
５７．該がんが、前立腺がん、肝臓がん（ＨＣＣ）、結腸直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膵臓がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、子宮頸がん、頭頸部がん、甲状腺がん、精巣がん、尿路上皮がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、黒色腫、非黒色腫皮膚がん（扁平上皮および基底細胞がん）、神経膠腫、腎がん（ＲＣＣ）、リンパ腫（ＮＨＬまたはＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ−ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、精巣胚細胞腫瘍、中皮腫、食道がん、メルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される、請求項４９〜５６のいずれか一項に記載の方法。
５８．該がんが、トリプルネガティブ乳がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（ｇａｓｔｒｉｃ））がん、肺がん（小細胞肺、非小細胞肺）、およびメルケル細胞がん、高頻度ＭＳＩがん、ＫＲＡＳ変異腫瘍、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）からなる群から選択される、請求項４９〜５７のいずれか一項に記載の方法。
【実施例】
【０５１３】
実施例１：機能分析
この研究の目的は、ヒトＴ細胞機能でのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の機能的活性を、主要な生体外細胞系アッセイで単独、または抗ＴＩＧＩＴおよび／もしくは抗ＰＤ−１抗体との組み合わせのいずれかで特徴付けることである。ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）が、ＣＤ８Ｔ細胞応答を研究するための抗原代用物モデルとして利用されるウイルス抗原特異的ＣＤ８Ｔ細胞のサイトカイン産生を増強したことを示す。ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と抗ＴＩＧＩＴ抗体との組み合わせは、Ｔ細胞機能の相加的増加、またはいくつかの条件では相乗的増加をもたらす。さらに、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＤ−１の三重併用を実行し、二重併用または個々の抗体と比較して、三重併用を使用してＰＤ−Ｌ１高標的腫瘍細胞と共培養されたＴ細胞機能の最大の増加を観察した。ＰＤ−Ｌ１低標的腫瘍細胞との共培養において、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＤ−１の三重併用は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＴＩＧＩＴの二重併用と比較して、Ｔ細胞機能をさらに増強せず、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＴＩＧＩＴ治療は、ＰＤ−Ｌ１発現が低いか、または陰性の患者に有効であり得ることを示唆する。総合すると、ヒトＣＤ８＋Ｔ細胞機能の増強におけるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の有効性を、個別に、または抗ＴＩＧＩＴ、または抗ＰＤ−１と組み合わせて示す。
この報告は、細胞系アッセイにおける完全ヒト化ＩｇＧ４抗ＰＶＲＩＧ抗体であるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の特徴付けについて記載する。ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、高い親和性および特異性でＰＶＲＩＧと結合し、ＰＶＲＩＧとＰＶＲＬ２との相互作用を遮断する。Ｔ細胞機能でのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の効果を理解するために、生体外アッセイでサイトカイン産生に対するＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の効果を調査した。このアッセイは、Ｔ細胞活性化の２つのシグナル仮説に基づいて設計された：シグナル１はＴ細胞受容体の活性化に由来する；シグナル２はＴ細胞応答の増強または阻害を助ける免疫制御性受容体である。これらのアッセイの設計は、ウイルス抗原（ＣＭＶ）に由来する抗原ペプチドでパルスした標的細胞株とヒトＴ細胞との共培養からなる。このシグナルは、Ｔ細胞受容体を介したＴ細胞活性化の「シグナル１」を提供する。これらの標的細胞株は、内在性ＰＶＲＬ２を発現し、この状況下のＰＶＲＬ２において、Ｔ細胞に「シグナル２」を提供する。
ＣＭＶ：腫瘍細胞株アッセイ
ＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞を、ＣＴＬ「凍結保存ＰＢＭＣの解凍」プロトコルに従ってＣＭＶ応答性ドナーを解凍することにより拡大し、２ｅ６細胞／ｍｌを、１％ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｇｉｂｃｏ）、１％ＮＥＡＡ、ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ）、１０％ヒトＡＢ血清（Ｃｏｒｎｉｎｇ）、１ｕｇ／ｍｌ  ＣＭＶペプチド、２ｎｇ／ｍｌ  ＩＬ−２（Ｒ＆Ｄ）、および１０ｎｇ／ｍｌ  ＩＬ−７（Ｒ＆Ｄ）を添加した培地（Ｇｉｂｃｏ）に再懸濁した。ＰＢＭＣは、３日目および６日目にＩＬ−２およびＩＬ−７を補充して８日間培養した。８日目に細胞を採取し、完全ＲＰＭＩ培地中の２ｅ６／ｍｌを低用量ＩＬ−２（１００Ｕ／ｍｌ）で５日間再播種した。９日目に、ＣＤ８＋Ｔ細胞の純度およびＣＭＶ四量体応答性について細胞表現型を決定する。細胞を、０．２５μＬのＣＤ３（クローン：ＯＫＴ）−アロフィコシアニンセブン（ＡＰＣ−Ｃｙ７；Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、０．２５ｕｌのＣＤ８（クローン：Ｈ１Ｔ８ａ）−Ａｌｅｘａｆｌｕｏｒ  ４８８（ＡＦ４８８；Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、０．１２５μＬのＣＤ１４（クローン：ＨＣＤ１４）、０．５ｕｌのＣＤ１９（クローン：ＨＩＢＣＤ１４）、０．５ｕｌのＣＤ５６（クローン：ＨＣＤ５６）−ペリジニンクロロフィルタンパク質（ＰｅｒＣＰ；Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、１．２５ｕｌ  μＬのＴＩＧＩＴ（クローン：ＭＢＳＡ４３）−アロフィコシアニン（ＡＰＣ；ｅ−Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、または１．２５μＬのＩｇＧ４（社内）−アイソタイプ対照（ＡＰＣ：Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、１．２５ｕｌのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）−アロフィコシアニン（社内）、または１．２５μＬのＩｇＧ４−ＡＰＣアイソタイプ対照（社内）、および０．５ｕｌのＰＤ−１（クローン：ＥＨ１２．２Ｈ７）−ブリリアントバイオレット４２１（ＢＶ４２１；Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、または１．２５ｕｌのＩｇＧ１（クローン：ＭＯＰＣ２１）−ブリリアントバイオレット４２１（ＢＶ４２１；Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）で染色した。四量体応答性ＣＤ８＋Ｔ細胞の頻度を評価するために、非標識ＰＢＭＣは、１０μＬのｉＴＡｇ四量体−ＨＬＡ−Ａ＊０２：０１  ＣＭＶ  ｐｐ６５（ＮＬＶＰＭＶＡＴＶ）−フィコエリトリン（ＰＥ、ＭＢＬ−ＢＩＯＮ）で室温で３０分間培養後に染色した。細胞をＰＢＳ／ＢＳＡ／アジド溶液で洗浄し、緩衝液に再懸濁した。Ｆｏｒｔｅｓｓａを使用してデータを取得し、ＦｌｏｗＪｏ（Ｔｒｅｅｓｔａｒ）およびＰｒｉｓｍ（Ｇｒａｐｈｐａｄ）ソフトウェアを使用して解析した。
【０５１４】
共培養アッセイで使用した標的細胞は、Ｐａｎｃ．０５．４およびＣｏｌｏ２０５細胞株（ＡＴＣＣ）であった。これらの細胞株は、１．２５ｕｌのＰＶＲ（ＳＫＩＩ．４）−ｐｈｙｃｏｅｒｙｔｈｒｉｎ（ＰＥ、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、１．２５ｕｌのＰＶＲＬ２（ＴＸ３１）−ｐｅｒｉｄｉｎｉｎ  ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ（ＰｅｒＣＰ５．５；Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、２．５ｕｌ  ＰＤ−Ｌ１（２９Ｅ．２Ａ３）−Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ  ７８５  （ＢＶ７８５；Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、および１．２５  ｕｌのＨＬＡ−Ａ２（ＢＢ７．２）−ａｌｌｏｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ（ＡＰＣ；Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）発現を染色した。１．２５ｕｌの各蛍光体に対応するアイソタイプもさらに評価した（ＭＯＰＣ−２１）。
【０５１５】
共培養を構成するために、腫瘍細胞株を培養物から採取し、定期的に混合しながら３７℃で１時間ＣＭＶペプチド（Ａｎａｓｐｅｃ）でパルスした腫瘍細胞株を採取した。インキュベーション後、標的細胞を完全に洗浄し、計数し、完全ＲＰＭＩ培地に再懸濁させた。アッセイは、Ｔ細胞（１００，０００）対標的細胞（１００，０００）の比が１：１であるように設定した。標的細胞、Ｔ細胞、および１０ｕｇ／ｍｌの各抗体処理剤を９６ウェルＵ底プレート（Ｃｏｓｔａｒ）に一緒に添加し、３７℃で２４時間インキュベートした。抗体処理には、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）ｈＩｇＧ４、抗ＴＩＧＩＴ  ｈＩｇＧ４（ベンチマーク２６、Ｃｏｍｐｕｇｅｎ）、抗ＰＤ−１  ｈＩｇＧ４（ベンチマーク３、Ｃｏｍｐｕｇｅｎ）、およびヒトＩｇＧ４アイソタイプ対照（Ｃｏｍｐｕｇｅｎ）が含まれます。全ての個々および併用群にわたる総抗体濃度を一致させるために、追加のヒトＩｇＧ４アイソタイプ対照を単一または二重併用の条件で追加し、最終総抗体濃度を３０ｕｇ／ｍｌにした。２４時間のインキュベーション期間の後、共培養上清を、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＴＮＦ−α、および／またはＩＦＮ−γを含む分泌されたサイトカインについて、サイトメトリックビーズアレイ（ＣＢＡ）ヒトＴｈ１／Ｔｈ２／Ｔｈ１７サイトカインキット（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、またはＬＥＧＥＮＤｐｌｅｘ（商標）ヒトＴｈサイトカインキット（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）を用いて分析した。Ｆｏｒｔｅｓｓａを使用してデータを取得し、ＦｌｏｗＪｏ（Ｔｒｅｅｓｔａｒ）およびＰｒｉｓｍ（Ｇｒａｐｈｐａｄ）ソフトウェアを使用して解析した。
１．結果および考察
ａ．ＣＭＶ  Ｔ細胞アッセイ：ＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞は、ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ１を発現する。
【０５１６】
ヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）は、人口の高い割合に感染する広範囲に及ぶ持続性のβヘルペスウイルスであり、西ヨーロッパおよび米国ではわずかに血清陽性率が低い（Ｃａｎｎｏｎ  ＭＪ  ｅｔ  ａｌ．２０１０）。慢性ウイルス感染症またはがんを有する患者の免疫系は、機能が損なわれることが多く、ウイルスに対する効果的な応答を開始したり、または悪性細胞を認識および排除することができない。これらの患者において、抑制性受容体の発現が増加し、これはＴ細胞機能不全と関連していることを見出した。したがって、負のチェックポイント受容体の上方制御は、Ｔ細胞枯渇の反転の潜在的な標的として機能し得る。ＣＭＶ  ｐｐ６５タンパク質と特異的なＣＤ８Ｔ細胞は十分に特徴づけられており、これらのＣＭＶ特異的Ｔ細胞を使用して、Ｔ細胞上の調節受容体の役割を研究できる。
【０５１７】
ＣＭＶ  ｐｐ６５ペプチド、ＩＬ−２、およびＩＬ−７を使用したＨＬＡ−Ａ２＋ドナーＰＢＭＣの刺激により、ＣＭＶ  ｐｐ６５特異的Ｔ細胞は、四量体染色により５０〜９０％の範囲の純度まで強力な拡大をもたらした。図８Ａは、拡大後のいくつかのドナーからのＣＭＶ  ｐｐ６５特異的Ｔ細胞の割合を示す。Ｔ細胞でのＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１の表面発現を、ＣＭＶ＋ドナーから評価し、フローサイトメトリーによる受容体発現のそれぞれのアイソタイプと比較した。ＣＭＶ  ｐｐ６５特異的Ｔ細胞は、活性化９日目にＰＶＲＩＧ（ｇＭＦＩ比の中央値：７）、ＴＩＧＩＴ（ｇＭＦＩ比の中央値：３７）、およびＰＤ１（ｇＭＦＩ比の中央値：２）を発現した（図８Ｂ）。
【０５１８】
さらに、時間経過におけるＣＭＶ  ｐｐ６５特異的Ｔ細胞の拡大に対するＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ１の発現の動態を評価した。各ドナーについて、ＣＭＶｐｐ６５応答性ＣＤ８＋Ｔ細胞の頻度を経時的にプロットした（図９Ａ）。ＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞の頻度の有意な拡大（範囲：５０〜９７％）を全てのドナーで観察し、ドナー１９８は３日目で最初に拡大した（３日目のＣＭＶ＋割合：８５．７％）。しかしながら、ドナー１９８は６日目にＣＭＶ四量体発現を喪失していた（６日目ＣＭＶ＋割合：５０．４％）。ＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞のＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１の発現は、１２日間の時間経過にわたりフローサイトメトリーにより評価した。ドナー４、ドナー１９８、およびドナー２１０において、ＣＭＶｐｐ６５特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞内のＴＩＧＩＴ発現が、１２日間の拡大期間中に増加した（３ドナーでの３ドナーＴＩＧＩＴ発現のｇＭＦＩｒの平均値、０日目のｇＭＦＩｒ：１．２、１２日目のｇＭＦＩｒ：４７）（図９Ｂ）。ＣＭＶ＋Ｔ細胞のＰＶＲＩＧ発現も増加した（３ドナーの平均ｇＭＦＩ  ＰＶＲＩＧ平均値、０日目のｇＭＦＩｒ：０．９２、１２日目のｇＭＦＩｒ：８．６）（図６Ｃ）。ＰＤ−１発現も評価され、発現の最小誘導を観察した（ｇＭＦＩｒ  ＰＤ−１の平均値、０日目のｇＭＦＩ：０．９３、１２日目のｇＭＦＩ：２）（図９Ｃ）。
ｂ．ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、および抗ＰＤ１抗体は、ＩＦＮ−γ分泌を増強した
ＣＤ８  ＣＭＶ細胞によるＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１発現の上方制御がＴ細胞機能不全と相関するという理論的根拠により、炎症性サイトカイン産生能に対するＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１遮断の効果を評価することを目的とした。２ドナーからのＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞を、サイトカイン産生のフローサイトメトリー分析の前に、ＣＭＶペプチドを負荷したＰＤ−Ｌ１高（Ｐａｎｃ０４．０５）およびＰＤ−Ｌ１低（Ｃｏｌｏ２０５）腫瘍細胞株と共培養した（図１０）。
【０５１９】
Ｐａｎｃ．０４．０５（ＰＤ−Ｌ１高）共培養において、抗ＴＩＧＩＴの単一遮断により、ＩｇＧ対照ｍＡｂｓと比較してＩＦＮ−γ産生が増強したのに対し、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）または抗ＰＤ−１は最小限の効果であった（図１１）。二重の抗ＴＩＧＩＴおよびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の遮断は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）または抗ＴＩＧＩＴの単独遮断と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞のサイトカイン産生を相乗的かつ一貫して増強した。ドナー４において、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、抗ＴＩＧＩＴ、および抗ＰＤ−１の三重併用でＩＦＮ−γのさらなる増強が観察され、ＰＤ−Ｌ１、ＰＶＲ、およびＰＶＲＬ２が腫瘍細胞上に高レベルで発現する場合に、Ｔ細胞活性化における最大の増強が三重併用で達成されることを示唆する。Ｃｏｌｏ２０５（ＰＤ−Ｌ１ｌｏ）共培養において、単独の抗ＴＩＧＩＴ遮断でＩＦＮ−γ分泌が増強したのに対し、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）または抗ＰＤ１抗体は、Ｐａｎｃ．０４．０５共培養の結果と同様に、最小限の効果であたった。さらに、Ｐａｎｃ．０４．０５共培養と同様に、抗ＴＩＧＩＴおよびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の二重遮断も、抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＤ−１、またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）単独と比較して相乗的にＩＦＮ−γを増加させ、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）または抗ＴＩＧＩＴのいずれか大きい方と抗ＰＤ−１を組み合わせる。Ｐａｎｃ．０４．０５（ＰＤ−Ｌ１高）とは対照的に、ドナー４に対する三重併用条件は、Ｃｏｌｏ２０５共培養（ＰＤ−Ｌ１低）におけるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＴＩＧＩＴの二重併用よりも優れておらず、ＰＶＲおよびＰＶＲＬ２が腫瘍細胞で高レベル、かつＰＤ−Ｌ１が低レベルで発現する場合に、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）および抗ＴＩＧＩＴの二重併用が、ＩＦＮ−γ発現の最大限の増強をもたらしたことを示唆する。これらの発見は、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧ遮断がＰＤ−Ｌ１低腫瘍におけるＣＤ８＋Ｔ細胞応答を増強するのに十分であり、三重併用がＰＤ−Ｌ１高腫瘍におけるＴ細胞活性化の最大限の増強をもたらしたことを示す。
ｃ．概要
ヒト抗ＣＭＶ  Ｔ細胞応答は生体外での抗原特異的な方法として利用され、チェックポイント阻害剤抗体の機能的能力を評価する。ＴＩＧＩＴおよびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の共遮断は、単一の抗体遮断と比較して、Ｔ細胞機能のより大きな回復をもたらすことを観察し、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧ経路の破壊は、ＣＤ８腫瘍細胞の共培養におけるＰＤ１経路の破壊よりも重要であり得ることを示唆する。さらに、ＰＤ−１、ＴＩＧＩＴ、およびＰＶＲＩＧに対する抗体を使用した三重遮断により、ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞または免疫細胞が＞１％の場合に、ＩＦＮ−γが最大限に増強することが観察され、それはＰＤ−Ｌ１高発現レベルと同等である。これらの発見は、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧ遮断がＰＤ−Ｌ１低腫瘍におけるＣＤ８＋Ｔ細胞応答を増強するのに十分であり、三重併用がＰＤ−Ｌ１高腫瘍におけるＴ細胞活性化の最大限の増強をもたらしたことを示す。
【０５２０】
本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、ｉｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、ｉｉｉ）ＰＶＲタンパク質、ｉｖ）ＰＤ−１タンパク質、ｖ）ＰＤ−Ｌ１タンパク質、ｖｉ）ＰＶＲＬ２、およびｖｉｉ）ｉ）〜ｖｉ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲ、ＰＤ−１、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−Ｌ１のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定し、ＴＩＧＩＴまたはＰＶＲのいずれか、ＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２のいずれか、およびＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１のいずれかで陽性細胞の割合が＞１％の場合に、ステップｅ）に進むことと、ｅ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【０５２１】
本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、ｉｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、ｉｉｉ）ＰＶＲタンパク質、ｉｖ）ＰＤ−１タンパク質、ｖ）ＰＤ−Ｌ１タンパク質、ｖｉ）ＰＶＲＬ２、およびｖｉｉ）ｉ）〜ｖｉ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲ、ＰＤ−１、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−Ｌ１のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定し、ＴＩＧＩＴまたはＰＶＲのいずれか、ＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２のいずれか、およびＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１のいずれかで陽性細胞の割合が＞１％の場合に、ステップｅ）に進むことと、ｅ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【０５２２】
本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＴＩＧＩＴタンパク質、およびｉｉ）ＰＶＲタンパク質、およびｉｉｉ）ｉ）〜ｉｉ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲのそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定し、ＴＩＧＩＴまたはＰＶＲのいずれかで陽性細胞の割合が＞１％の場合に、ステップｅ）に進むことと、ｅ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【０５２３】
本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＰＶＲＩＧタンパク質、およびｉｉ）ＰＶＲＬ２タンパク質、およびｉｉｉ）ｉ）〜ｉｉ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定し、ＰＶＲＩＧまたはＰＶＲＬ２のいずれかで陽性細胞の割合が＞１％の場合に、ステップｅ）に進むことと、ｅ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
【０５２４】
本発明は、ａ）患者の腫瘍試料からの細胞集団を提供することと、ｂ）ｉ）ＰＤ−１タンパク質、およびｉｉ）ＰＤ−Ｌ１タンパク質、およびｉｉｉ）ｉ）〜ｉｉ）における抗体に関連するアイソタイプ対照と結合する標識化抗体で該集団を染色することと、ｃ）蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を実行することと、ｄ）ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１のそれぞれについて、該アイソタイプ対照抗体と比較したタンパク質を発現する該集団における細胞の割合を決定し、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１のいずれかで陽性細胞の割合が＞１％の場合に、ステップｅ）に進むことと、ｅ）ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１に対する抗体を該患者に投与することとを含む、方法を提供する。
実施例２：ヒトがんおよび正常な隣接組織におけるＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２の発現
この研究の目的は、ヒト腫瘍および正常な隣接試料におけるＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２の発現を調査することであった。ＰＶＲＩＧは、ＣＤ８＋Ｔ細胞で最も高く、それに続いてＮＫ細胞、ＣＤ４−ＣＤ８−Ｔ細胞、およびＣＤ４＋Ｔ細胞で発現されたことを観察した。単球、ｍＤＣ、ｐＤＣ、または腫瘍細胞では発現を観察しなかった。調査した腫瘍種のうち、子宮内膜、肺、および腎臓腫瘍は、リンパ球で最も高いレベルのＰＶＲＩＧを発現した。同一患者からの腫瘍組織と比較した、正常な隣接組織からのＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞でのＰＶＲＩＧ発現の比較は、腫瘍組織のＰＶＲＩＧにおいて有意な増強を示した。ＰＶＲＩＧ発現の程度とＴＩＧＩＴまたはＰＤ−１発現の程度との相関分析により、ＣＤ４およびＣＤ８  Ｔ細胞で正の有意な相関を示した。さらに、ＰＤ−１、ＴＩＧＩＴ、およびＰＶＲＩＧの共発現単一細胞分析により、ＰＶＲＩＧは細胞のサブセットでＰＤ−１およびＴＩＧＩＴと共発現されることが示された。これらのデータは、ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ、ならびに／またはＰＤ−１の組み合わせの遮断がＴ細胞応答の増強をもたらすであろうという結論を支持する。ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲＬ２についてのリガンドは、骨髄細胞（単球、ｍＤＣ、ｐＤＣ）、および腫瘍上皮と間質細胞とで構成される可能性が高い複数の腫瘍からのＣＤ４５非免疫細胞で発現した。正常な隣接対腫瘍組織に由来する細胞でのＰＶＲＬ２の比較は、単球およびＣＤ４５非免疫細胞でのＰＶＲＬ２の発現において有意な増強を示した。ＰＶＲＬ２発現の程度とＰＤ−Ｌ１発現の程度との相関分析により、ＣＤ４５非免疫細胞および単球で正の有意な相関を示した。これらの試料において、同一試料でＰＶＲＩＧとＰＶＲＬ２との共発現を評価して、どの腫瘍種が受容体とリガンドとの両方の高い共発現を有するかを評価した。調査した腫瘍種のうち、子宮内膜試料、腎臓試料、肺腫瘍試料の大部分でＰＶＲＩＧとＰＶＲＬ２との両方の高発現が観察された。まとめると、これらのデータは、ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２が腫瘍微小環境からの白血球および腫瘍細胞に発現されることを示しており、この経路を利用して抗腫瘍応答を制御できることを示唆する。
【０５２５】
複数の異なる組織からの解離したヒト腫瘍、および適合した正常な隣接組織からの細胞でのフローサイトメトリーを使用して、ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２の発現を調査した。腫瘍における免疫制御因子の発現は、特定の治療に対して、どの腫瘍種または患者が最も応答し得るかを予測するのに役立ち得る。
【０５２６】
健康なヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）ドナーは、スタンフォード血液バンクから入手した。バフィーコートまたはＬＲＳ産物を１ｘＰＢＳ＋２％ＦＢＳで１：１に希釈し、ＰＢＭＣをＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ勾配（Ｓｉｇｍａ）によって単離した。精製したＰＢＭＣをＰＢＳ＋２％ＦＢＳで２回洗浄し、液体窒素で貯蔵した。腫瘍および正常な隣接組織（ＮＡＴ）試料は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ支援リソースであるＣｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｎｅｔｗｏｒｋによって提供された。腫瘍種を、各試料の病理学的報告の検討に基づいて決定した。ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２の発現を調査した腫瘍種ごとの試料数を以下に報告する。
【０５２７】
【表３】
2020521778.tif 000005
【０５２８】
１．腫瘍解離プロトコル
腫瘍およびＮＡＴ試料を外科用メスで小片に切断し、酵素混合物を含むＧｅｎｔｌｅＭＡＣｓ（商標）Ｃチューブ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）に移した。製造元のプロトコルに従って、ＧｅｎｔｌｅＭＡＣｓ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）で試料を解離した。解離後、ＦＡＣＳ染色化の前に細胞を１００μｍフィルターを通してろ過した。
２．抗体および試薬：
免疫および非免疫細胞集団を特定するために、次の抗体は製造元が推奨する濃度であった：
【０５２９】
【表４】
2020521778.tif 000006
【０５３０】
以下の抗体をアイソタイプ対照混合物に５ｕｇ／ｍｌで使用した。
【０５３１】
【表５】
2020521778.tif 000007
【０５３２】
次の混合物を使用して、目的の標的を５ｕｇ／ｍｌで染色した。
【０５３３】
【表６】
2020521778.tif 000008
【０５３４】
全てのアイソタイプ対照抗体および標的抗体を、５ｕｇ／ｍｌ最終濃度で使用した。
３．ＦＡＣＳ染色
ＰＢＭＣまたは解離した腫瘍細胞の１×１０６個の細胞を、染色のために９６穴Ｖ底プレートに播種した。試料を最初に生細胞と死細胞とを区別するためにＬｉｖｅ  Ｄｅａｄ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）水溶液で染色し、Ｆｃ受容体を遮断するために抗ＣＤ１６（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、抗ＣＤ３２（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、抗ＣＤ６４（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）抗体の混合物で染色した。試料をＦＡＣＳバッファーで２回洗浄し、使用した抗体に対する抗体に関連するアイソタイプ対照または「抗体および試薬」の段落に記載される標的抗体混合物で染色した。全ての染色を、４Ｃで３０分間行った。その後、試料を２回洗浄し、ＢＤ  Ｆｏｒｔｅｓｓａフローサイトメータで取得した。ＦｌｏｗＪｏを使用して分析を行い、上記の表１において特定された特定の集団をゲーティングした（全て生細胞でゲーティング）。
【０５３５】
少なくとも１００個の細胞を伴う各集団から、ＭＦＩ値をエクスポートし、標的のＭＦＩを関連するアイソタイプ対照のＭＦＩで除算することによりＭＦＩ比（ＭＦＩｒ）を算出した。ＭＦＩｒ値が１よりも大きい場合に、陽性の発現が検出されたことを示す。
４．結果および考察
ａ．ＰＶＲＩＧは複数の腫瘍種のＴＩＬで発現し、ＴＩＧＩＴおよびＰＤ１と共に共発現した。
【０５３６】
フローサイトメトリーにより腫瘍由来の細胞でのＰＶＲＩＧの発現を調査するために、腫瘍を分離し、免疫細胞系統マーカーで染色して免疫および非免疫細胞サブセットを特定し、ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ１、ＰＶＲＬ２、およびＰＶＲでこれらのサブセットのこれらのターゲットの発現を調査した。ＰＶＲＩＧの発現を、乳房、結腸／直腸／胃、子宮内膜、頭頸部、肺、腎臓、前立腺、および卵巣腫瘍からのＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４−ＣＤ８−Ｔ細胞、およびＮＫ細胞で検出した（図１２Ａ）。調査した全ての腫瘍組織にわたって、ＰＶＲＩＧは最も高くから最も低くまでを、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＮＫ細胞、ＣＤ４−ＣＤ８−Ｔ細胞、およびＣＤ４＋Ｔ細胞で発現した。単球、ｍＤＣ、ｐＤＣ、または非免疫細胞ではＰＶＲＩＧ発現を検出しなかった（図１Ｂ）。ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＮＫ細胞は免疫系内で重要な細胞傷害性リンパ球であることが知られており、これはＰＶＲＩＧがこれらの細胞傷害性リンパ球の活性を直接的に調節できることを示唆する。
【０５３７】
次に、腫瘍浸潤Ｔ細胞でのＴＩＧＩＴおよびＰＤ−１の程度と関連するＰＶＲＩＧの発現の程度を調べた。この分析については、相関分析を実行するのに十分な数の試料を有するため、子宮内膜試料に分析の焦点を合わせた。ＰＶＲＩＧは、ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞の両方でＴＩＧＩＴおよびＰＤ１発現と顕著にかつ直接的に相関しており、これらの分子がＴＭＥ内で共制御されていることを示唆する（図１３）。
【０５３８】
さらに、ＣＤ８Ｔ細胞での単一細胞系でＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ１の共発現を調査した。ＰＶＲＩＧとＰＤ−１およびＴＩＧＩＴとの共発現を、代表的な肺および腎臓がんで観察した（図１４）。
ｂ．ＰＶＲＩＧ発現は、正常な隣接組織に対して腫瘍からのＴ細胞で有意に増強した
結腸／直腸／胃、子宮内膜、腎臓、肺、または卵巣腫瘍のサブセットについては、同ドナーから適合される腫瘍および正常な隣接腫瘍（ＮＡＴ）試料を取得することができた。これらの適合される試料を使用して、ＮＡＴまたは腫瘍試料に由来する細胞のＰＶＲＩＧおよびＰＤ１の発現を比較し、健康な組織と比較して腫瘍において発現の変調があるかを特定した（図１５）。全体として、ＰＶＲＩＧは、適合される正常な隣接部位と比較して、腫瘍組織由来のＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞で有意に増強した（図１５Ａ）。腫瘍種内で、ＰＶＲＩＧは、結腸腫瘍９個のうち３個、子宮内膜腫瘍１個または２個、腎臓腫瘍１１個のうち４個、および肺腫瘍５個のうち４個で少なくとも２倍に上方制御された（図１５Ａ）。同試料において、ＰＤ−１発現も評価した。ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞のＰＶＲＩＧ倍率変化（ＮＡＴと腫瘍との間）とＰＤ−１倍率変化との間の相関分析は、これらの試料において正の有意な相関を示し、これらの分子が腫瘍において同様に共制御できることを示唆する。
ｃ．ＰＶＲＬ２は、複数の腫瘍の骨髄細胞およびＣＤ４５−（非免疫）細胞に発現した
調査したＰＶＲＩＧ発現と同試料において、ＰＶＲＩＧのリガンドであるＰＶＲＬ２の発現も調査した。ＰＶＲＬ２発現を、２つの主要な細胞サブセット、単球、ｍＤＣ、およびｐＤＣ集団を含む骨髄細胞、ならびに腫瘍上皮、間質細胞、および内皮細胞で構成される可能性が高いＣＤ４５非免疫細胞で検出した（図１６）。
【０５３９】
ＣＤ４５非免疫細胞でのＰＶＲＬ２発現を、乳房、結腸／直腸／胃、子宮内膜、肺、前立腺、および卵巣腫瘍からの細胞で検出した（図１７）。ＰＶＲＬ２の発現の最も高い中央値を、子宮内膜および卵巣腫瘍で検出した。
【０５４０】
免疫細胞では、ＰＶＲＬ２は、乳房、結腸／直腸／胃、子宮内膜／子宮、頭頸部、肺、腎臓、前立腺、および卵巣組織からの骨髄細胞で発現した。（
図１８）。骨髄細胞（単球、ｍＤＣ、ｐＤＣ）でのＰＶＲＬ２の発現の中央値は、腫瘍種にわたって同等であった。
【０５４１】
腫瘍組織を正常な隣接組織と比較すると、腫瘍ＣＤ４５−細胞または腫瘍組織からの単球でＰＶＲＬ２の発現が有意に増強した（図１９）。単球またはＣＤ４５−細胞でのＰＶＲＬ２発現は、結腸腫瘍９個のうち５個、子宮内膜腫瘍２個のうち１個、腎臓腫瘍１１個のうち５個、肺腫瘍５個のうち４個、卵巣腫瘍１個のうち１個で正常な隣接と比較して腫瘍において少なくとも２倍に誘導した。これらのデータは、腫瘍細胞および腫瘍内の免疫細胞でのＰＶＬＲ２の発現の増強を支持する。ＰＶＲＬ２倍率変化（ＮＡＴと腫瘍との間）とＣＤ４５細胞および単球でのＰＤ−Ｌ１倍率変化との相関分析は、これらの試料において正の有意な相関を示し、これらの分子が腫瘍において同様に共制御できることを示唆する。
ｄ．ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２が同腫瘍内で共発現した
さらに、どの腫瘍種がＴ細胞でのＰＶＲＩＧと、単球および腫瘍細胞の各々でのＰＶＲＬ２との両方の高い発現を有するかを評価した。この試料セットにおいて、子宮内膜、肺、および腎臓組織からの腫瘍は、Ｔ細胞ではＰＶＲＩＧ、および単球またはＣＤ４５−細胞のいずれかではＰＶＲＬ２の両方の高い発現を示し（図２０）、これらの腫瘍種は、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）治療により応答し得ることを示唆する。
ｅ．結論
これらの研究の結果は、ＰＶＲＩＧが腫瘍微小環境内のＣＤ８Ｔ細胞およびＮＫ細胞などのエフェクターリンパ球に発現されることを示す。ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２の両方が、乳房、結腸／直腸／胃、子宮内膜、肺、前立腺、および卵巣腫瘍からの複数の腫瘍試料で発現した。Ｔ細胞でのＰＶＲＩＧの発現は、適合される正常な隣接組織と比較して腫瘍組織で有意に増強した。さらに、子宮内膜試料からのＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞での、ＰＶＲＩＧおよびＰＤ−１、ならびにＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ発現の間に有意な直接相関を観察した。単一細胞系で、ＰＶＲＩＧとＰＤ１、またはＰＶＲＩＧとＴＩＧＩＴとの共発現をＣＤ８Ｔ細胞で観察した。ＰＶＲＩＧ、ＰＶＲＬ２についてのリガンドは、抗原提示細胞（単球、ｍＤＣ、ｐＤＣ）およびさらに複数の腫瘍組織からのＣＤ４５−細胞（おそらく上皮、間質、内皮細胞で構成される）で発現される。ＰＶＲＬ２発現の誘導を、正常な隣接組織と比較して腫瘍由来の細胞で検出した。受容体およびリガンドの細胞発現プロファイルは、複数の腫瘍種に対するエフェクターリンパ球応答の制御におけるこの経路の役割を示唆する。
実施例３：ＩＨＣによるヒトのがんおよび正常組織におけるＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現
この研究の目的は、ヒトの健康な組織およびがん組織におけるＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現を調査することであった。ホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）固定試料においてＰＶＲＬ２を染色するために、ＰＶＲＬ２に対する２つの抗体を特定した。ＰＤ−Ｌ１を、商業的に検証された抗体を使用して評価した。これらの抗体を使用して、乳房、結腸、肺、卵巣、および皮膚組織からなる腫瘍マイクロアレイ（ＴＭＡ）の連続的な組織切片におけるＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現を調査した。ＰＶＲＬ２発現は、健康な組織と比較して、乳、結腸、肺、卵巣、および皮膚がんで増強されることを観察した。２つのＰＶＲＬ２抗体間でも同様の染色が観察され、得られた結果を確証するための助けとなる。ＰＤ−Ｌ１発現は、健康な組織と比較して、乳、結腸、肺、卵巣、および皮膚がんでも増強した。ＰＶＲＬ２の発現を、腫瘍上皮および浸潤免疫細胞でも観察した。これらの腫瘍試料において、ＰＤ−Ｌ１発現よりもＰＶＲＬ２発現のより高い増強があった。個々の腫瘍試料を、ＰＤ−Ｌ１陰性および陽性発現によってさらに分類し、ＰＶＲＬ２発現をこれらのサブグループにおいて分析した。全てのＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍でもＰＶＲＬ２を発現し、腫瘍における併用療法に対する理論的根拠を提供する。ＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍において、これらの試料のサブセットでＰＶＲＬ２発現を検出し、ＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍におけるＰＶＲＬ２経路を標的とする理論的根拠を提供した。総合すると、これらのデータは、ＰＶＲＬ２発現が、乳、結腸、肺、卵巣、および皮膚がんからの腫瘍微小環境において増強し、ＰＶＲＬ２経路を標的とする薬剤を用いた単剤療法および併用治療に対して理論的根拠を提供することを示す。
プロトコル
抗体
この研究において、抗ＰＶＲＬ２（Ａｂｃａｍ  ａｂ１３５２４６、Ｓｉｇｍａ  ＨＰＡ−０１２７５９）および抗ＰＤＬ１（ＳｐｒｉｎｇＢｉｏ  Ｓｐ１４２）を使用した。アイソタイプ対照抗体（ウサギＩｇＧ）を陰性対照として使用した。
ＩＨＣ染色化
乳房、結腸、肺、卵巣、皮膚腫瘍からのマイクロアレイを取得した。各マイクロアレイには、スライド上に重複して存在する２〜４ドナーからの健康な組織と、３０〜４０ドナーからの腫瘍組織とが含まれる。抗ＰＶＲＬ２  Ａｂｃａｍ  ａｂ１３５２４６染色化を、熱誘導性抗原回復（ＨＩＥＲ）を伴わずに１：２５０希釈で実行した。抗ＰＶＲＬ２（Ｓｉｇｍａ  ＨＰＡ−０１２７５９）を、ｐＨ９．５でのＨＩＥＲを伴って０．１ｕｇ／ｍｌで使用した。抗ＰＤ−Ｌ１（ＳｐｒｉｎｇＢｉｏ  ＳＰ１４２）を、製造元の推奨に基づくｐＨ６．２でのＨＩＥＲを伴って１ｕｇ／ｍｌで使用した。各関連する条件で、適合されるウサギＩｇＧアイソタイプ対照を使用した。各コアを、２つの個々の作動因子による染色化なし（スコア０）、部分陽性（スコア１）、陽性（スコア２）、強い陽性（スコア３）に基づいて定性的にスコア化した。２つの作動因子の間にスコアの不一致がある場合に、最終スコアのために試料を両方の作動因子により再評価した。同腫瘍に由来する２つのコアからのスコアを平均化し、各腫瘍について１つのスコアを取得した。供給元によって提供された病理学データによってスコアをプロットし、試料をグループ化した。
結果および考察
ＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現は、乳、結腸、肺、卵巣、および皮膚がんで増強した
２つの抗ＰＶＲＬ２抗体（ａｂ１３５２４６、ＨＰＡ−０１２７５９）を、ホルマリン固定パラフィン包埋組織におけるＰＶＲＬ２発現を評価するための能力について試験した。ＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現を、乳、結腸、肺、卵巣、および皮膚がんの腫瘍マイクロアレイの連続的な切片で評価した。ＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現は、乳、結腸、肺、卵巣、および皮膚がんにおいて増強した（図２１）。
ＰＶＲＬ２は、ＰＤ−Ｌ１陽性およびＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍において発現した。
【０５４２】
ＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現は同ＴＭＡの連続的な切片で行われたため、腫瘍の同部分からのこれらの腫瘍のそれぞれにおいてＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の発現を調査することができた（図２２）。ＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍試料のサブセット、特に肺、卵巣、乳房腫瘍は、両方の抗ＰＶＲＬ２抗体によって検出されるＰＶＲＬ２（少なくとも部分的な陽性によって定義される）を発現した。これらのデータは、ＰＶＲＬ２がＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍において発現できることを示す。差異的に、全てのＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍は、両方のＰＶＲＬ２抗体によって検出されるＰＶＲＬ２を発現した。
ＰＶＲＬ２は、上皮細胞および浸潤前部での免疫区画に発現した
腫瘍の浸潤前部での免疫チェックポイントの空間的発現は、抗腫瘍応答の制御において重要である。ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１などの既知のチェックポイント標的は、浸潤前部で顕著な発現を有する。これらのＴＭＡはパンチ生検から生成され、腫瘍全体を含んでいないため、これらの試料を腫瘍の浸潤前部での免疫浸潤の存在について検査した。免疫浸潤巣および腫瘍上皮においてＰＶＲＬ２の発現を観察した１つの試料を特定した（図２３）。ＰＤ−Ｌ１発現が免疫浸潤巣で観察され、さらにこれが腫瘍の浸潤前部である可能性を示唆した。
結論
これらの結果は、同器官の健康な組織と比較して、乳、結腸、肺、卵巣、皮膚腫瘍においてＰＶＲＬ２発現が増強したことを示す。ＰＶＲＬ２は、腫瘍上皮および浸潤白血球の両方に発現した。さらに、全てのＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍がＰＶＲＬ２を発現することを示し、ＰＶＲＬ２経路を標的とする薬剤がＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤と組み合わせて有効であり得ることを示唆する。さらに、ＰＶＲＬ２発現がＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍で検出され、ＰＶＲＬ２経路を標的とする薬剤がＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍で有効であり得ることを示唆する。
実施例４：ＣＴ２６腫瘍モデルにおける単一、二重、および三重併用抗体治療の抗腫瘍応答
論理的根拠および目的
ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−Ｌ１の抗体遮断が、単一または二重抗体治療と比較して、同系マウス腫瘍モデルにおいて腫瘍の成長阻害および生存率を増強できるかを調査する。
材料および方法
生体内腫瘍モデル
ＣＴ２６結腸がん性細胞（ＡＴＣＣ）を、１０％ＦＢＳ、および１００ｕｇ／ｍＬペニシリン／ストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ  １６４０で培養した。腫瘍移植のために、５ｘ１０５個のＣＴ２６細胞を、８週齢の雌ＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹内の皮下に注入した。腫瘍の無作為化に続いて、抗体を腹腔内（ｉ．ｐ．）注入により投与し、腫瘍注入後７日目に腫瘍が６０〜９０ｍｍ３の体積に達した際に開始し、合計６回の投与で３週間継続した。腫瘍サイズは、２〜３日毎に電子キャリパーで測定し、０．５×Ｗ２×Ｌｍｍ３と報告された。マウスを、研究終了時、または≧３２５０ｍｍ３の腫瘍体積、腫瘍潰瘍、≧２０％の体重減少、または瀕死の外観を含む臨床エンドポイントのいずれかで屠殺した。
抗体
これらの研究において使用したキメラ抗マウスＰＶＲＩＧ抗体（クローン４０７、内製）は、マウスＩｇＧ１（ｍＩｇＧ１）抗体として操作した。この抗体は、マウスＰＶＲＩＧを過剰発現する２９３ＨＥＫ細胞と結合し、リガンドであるマウスＰＶＲＬ２の結合を遮断することを示した。抗マウスＰＤ−Ｌ１  ｍＩｇＧ１抗体（クローンＹＷ２４３．５５．Ｓ７０）を、ＷＯ／２０１０／０７７６３４における記載に従って生成した。抗マウスＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１抗体（クローン１１Ａ１１）を、ＷＯ２０１６／０２８６５６における記載に従って生成した。Ｓｙｎａｇｉｓ  ＩｇＧ１をアイソタイプ対照として使用し、内部で生産した。抗体を、低エンドトキシン（＜０．０５ＥＵ／ｍｇ）の滅菌ＰＢＳで製剤化した。抗ＰＶＲＩＧ抗体を１０ｍｇ／ｋｇ、抗ＰＤ−Ｌ１を５ｍｇ／ｋｇ、抗ＴＩＧＩＴを１８ｍｇ／ｋｇの用量で投与した。
統計分析
反復測定を伴う二元配置ＡＮＯＶＡ、続いて選択された対の群についての反復測定を伴う二元配置ＡＮＯＶＡを、ＪＵＭＰソフトウェア（Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｉｅｓ（商標））により決定した。全ての研究動物が生存していた最終日に測定した腫瘍体積を比較することによって、腫瘍増殖測定値の分析を行った。腫瘍のないマウスの割合の統計的差異を、Ｌｏｇ  Ｒａｎｋ  Ｍａｎｔｅｌ−Ｃｏｘ試験によって決定した。Ｐ＜０．０５の値を有意とみなした。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１。
結果
抗ＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせた抗ＴＩＧＩＴおよび抗ＰＶＲＩＧ抗体の生体内での有効性
マウスＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−Ｌ１遮断の併用療法の生体内での有効性を、マウス同系ＣＴ２６．ＷＴ異所性皮下腫瘍モデルにおいて評価した。担腫瘍マウスを抗ＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせた抗ＰＶＲＩＧ抗体で治療すると、アイソタイプ対照と比較して４７％の腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）をもたらした。しかしながら、この研究において、単独の抗ＰＤ−Ｌ１抗体治療と比較して、抗ＰＤ−Ｌ１抗体と抗ＰＶＲＩＧ抗体との二重併用では利点を観察しなかった。三重併用（抗ＰＶＲＩＧ、抗ＴＩＧＩＴ、および抗ＰＤ−Ｌ１）におけるＴＩＧＩＴの遮断は、抗ＴＩＧＩＴ抗体を用いた他の二重併用治療と比較した場合に、ＴＧＩにおいて有意な改善をもたらした（抗ＰＤＬ−１＋抗ＴＩＧＩＴ、抗ＰＶＲＩＧ＋抗ＴＩＧＩＴ、および抗ＰＤＬ−１＋抗ＴＩＧＩＴ、それぞれ２９％、６１％、および５５％ＴＧＩに相応する）（図２４ＡおよびＣ）。三重併用は、より高い応答率（５５％対４０％）、促進された持続性のある抗腫瘍活性、３５日目までの生存率がより高くなる傾向をもたらした（図２４Ｂ）。
実施例５：ＰＶＲＩＧアンタゴニスによりＴ細エフェクター機能が増強され、腫瘍増殖が低下する
摘要
最近の進歩にもかかわらず、大多数の患者は、チェックポイント阻害剤から長期的な利益を得ていない。ＰＶＲＩＧは、ＤＮＡＭ／ＴＩＧＩＴファミリーの新規免疫抑制性受容体であり、ここでは、抗腫瘍応答の制御におけるＰＶＲＩＧの役割を実証する。ＰＶＲＩＧはＰＶＲＬ２と結合し、正常な組織由来のリンパ球と比較して、腫瘍浸潤リンパ球で発現が著しく増強される。ＰＶＲＩＧ拮抗作用がヒトＴ細胞活性化を増強し、ＰＶＲＩＧとＰＤ−１阻害剤またはＴＩＧＩＴ阻害剤との併用により、さらに相乗的にリンパ球機能が増加した。次に、前臨床腫瘍モデルにおけるＰＶＲＩＧの役割について検討した。ＰＶＲＩＧ−／−マウスは、生体外で有意にＴ細胞活性化の増強を示し、ＣＤ８エフェクター機能の増強によって媒介されるＭＣ３８腫瘍増殖を低下させた。アンタゴニスト抗ＰＶＲＩＧ抗体は、抗ＰＤ−Ｌ１と組み合わせて、またはＴＩＧＩＴ−／−マウスで試験した場合に、腫瘍増殖を有意に低下させた。要約すると、ＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２経路がヒトがんにおいて誘導され、ＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２相互作用に拮抗することによりＴ細胞機能の増強および腫瘍増殖の低下が生じることを示す。
重要度
これらのデータにより、ＰＶＲＩＧががん治療のための有望な標的であることが示され、単剤療法として、またはＴＩＧＩＴもしくはＰＤ１と組み合わせて新規ながん免疫療法剤としてＰＶＲＩＧ阻害剤ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）を試験するための論理的根拠が提供される。
導入
ますます多くの証拠により、内因性免疫応答ががんの開始、進行、および抑制を形作る際に重要であることが示されている（１）（２）。患者の免疫状態および腫瘍微小環境（ＴＭＥ）内の腫瘍浸潤白血球（ＴＩＬ）の内容は、がん生存率だけでなく、患者が療法にどのように応答するかの主要な予後指標でもある（３）（４）。Ｔ細胞は、抗腫瘍応答を引き起こすことができるＴＩＬの重要な構成要素であり、ほとんどの抗腫瘍免疫応答は、最終的に、エフェクターリンパ球細胞の機能性に依存する。患者の腫瘍のＴＭＥにおけるＣＤ８Ｔ細胞のエンリッチメント、ならびに変異荷重およびＴｈ１極性化ＴＭＥなどの有効なＣＤ８Ｔ細胞応答に対する免疫応答を偏らせる他の因子は全て、好都合な抗腫瘍免疫応答に関する重要な予後指標である（５）（６）。
【０５４３】
多くの固形腫瘍にわたる重要な所見は、エフェクターＴ細胞がＴＭＥ内で活性化されたまたは「枯渇」した発現型を有することである（７）。これにより、ＴＭＥ内のＴ細胞は最初に同種抗原を認識し、活性化され、腫瘍に輸送されたが、その後、有効な抗腫瘍応答を引き起こすことができないことが示される。予め活性化または枯渇したＴ細胞は、ＰＤ−１およびＣＴＬＡ−４（８）などの共抑制性受容体の表面発現の増加によって定義される。これらの共抑制性受容体をそれらの同族リガンドとの相互作用を阻害する抗体で治療的に標的とすることにより、複数の進行したがんを有する患者において顕著な臨床的有効性が示された（９）。機構的には、これらの共抑制性受容体を標的とすると、ＴＭＥ中に既存の既に腫瘍応答性であるＴ細胞の拡大、およびＴ細胞受容体の多様性が広がったＴ細胞プールの産生につながることが示されている（１０）（１１）（１２）。現在診療所にあるチェックポイント阻害剤はがん治療に革命をもたらし、がんとの戦いにおける免疫系の力を示したが、多くの患者は依然として再発し、かつ／または治療に応答しない。結果として、がんにおける免疫応答およびさらなる免疫に基づく経路の標的化の理解を増強することは、さらなる治療処置につながるであろう。
【０５４４】
これらの新規の経路のなかで、可能性のある新規のがん免疫療法として、ネクチンおよびネクチン様のファミリー内の受容体およびリガンドの群が現在研究されている。このファミリーの受容体には、ＤＮＡＭ−１（ＣＤ２２６）、ＣＤ９６（ＴＡＣＴＩＬＥ）、ＴＩＧＩＴ、および最近ではＰＶＲＩＧ（ＣＤ１１２Ｒ）が含まれる（１３）（１４）（１５）。これらの分子のうち、ＤＮＡＭは、活性化シグナルをリンパ球に送達するために、２つのリガンド、ＰＶＲ（ＣＤ１５５）およびＰＶＲＬ２（ＣＤ１１２）に結合する、このサブファミリー内の活性化受容体である（１６）。このファミリーの２つの受容体は、ヒトリンパ球機能、ＴＩＧＩＴ、およびより最近ではＰＶＲＩＧを阻害することが示される（１７）（１８）。ＴＩＧＩＴは、ＰＶＲと高い親和性で相互作用し、ＰＶＲＬ２とは親和性がはるかに弱いことが報告されており、ＩＴＳＭモチーフを介してリンパ球に阻害シグナルを送達することによってＴ細胞応答およびＮＫ細胞応答の両方を阻害することが示される（１９）（２０）。より最近では、ＰＶＲＩＧはＰＶＲＬ２に高親和性で結合し、そのＩＴＩＭモチーフを介して阻害シグナルを伝達することが示された（１５）。どちらの場合においても、ＴＩＧＩＴのＰＶＲとの親和性およびＰＶＲＩＧのＰＶＲＬ２との親和性がＤＮＡＭのＰＶＲまたはＰＶＲＬ２との親和性よりも高いことから、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧにはＤＮＡＭからＰＶＲおよびＰＶＲＬ２を打ち負かす能力があり、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧがＴ細胞機能を低下させ得る間接的な機序をもたらすことが示唆される。このファミリー内では、ＰＶＲもＣＤ９６のリガンドである。ＣＤ９６の機能は、マウスリンパ球（２１）では阻害的であるが、ヒトリンパ球では活性化させるものであることが報告されている（２２）。これらのデータに基づき、ヒトリンパ球について、２つの受容体、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧが、それぞれＰＶＲおよびＰＶＲＬ２と高い親和性で結合し、Ｔ細胞機能を抑えるための阻害シグナルを送達することを仮定する。
【０５４５】
ヒトＰＶＲＩＧはある最近の報告でＴ細胞応答を阻害することが示されているが、がん免疫監視におけるＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２の役割は十分に理解されていない。特に、がんにおけるこの経路の発現プロファイルおよびＣＤ８Ｔ細胞抗腫瘍応答の制御におけるＰＶＲＩＧの役割は報告されていない。さらに、マウスＰＶＲＩＧ遺伝子の機能的特徴付けおよび前臨床腫瘍モデルにおける生体内でのＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２相互作用の妨害の効果は報告されていない。本明細書では、がんにおけるＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２発現プロファイルならびに腫瘍細胞共培養アッセイおよび前臨床腫瘍モデルにおけるＰＶＲＩＧ拮抗作用の効果を報告することによって、がんの設定におけるＰＶＲＩＧの役割を解明した。ＰＶＲＩＧがＴＩＧＩＴまたはＣＤ９６と比較してＴ細胞サブセット上の区別された発現プロファイルを有し、ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２発現が正常な隣接組織と比較してがんにおいて誘導されたことが示される。複数のヒト生体外アッセイ系において、高親和性ＰＶＲＩＧ拮抗性モノクローナル抗体（ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ））は、特に抗ＴＩＧＩＴまたは抗ＰＤ１抗体と組み合わせた場合に、Ｔ細胞機能を増強した。さらに、アンタゴニスト抗体またはＰＶＲＩＧ欠損マウスを用いたマウスＰＶＲＩＧの新規の特徴付けが報告され、ＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２相互作用の阻害により腫瘍増殖が低下し、ＰＤ−１阻害またはＴＩＧＩＴ遺伝子欠損と組み合わせると効果が最も強力であったことが示される。総括的に、このデータにより、ＰＶＲＩＧが、Ｔ細胞の抗腫瘍応答を制御する上で重要な阻害性受容体であり、がん患者の臨床試験のためのＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の開発を支援するものであることが示される。
材料および方法
ヒト末梢血および腫瘍発現研究
健康なドナーのヒトＰＢＭＣは、ヘルシンキ宣言に従ってＳｔａｎｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙから入手した。ヒト組織は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ支援リソースであるＣｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｎｅｔｗｏｒｋによって提供された。ヒトがん組織および適合される正常な隣接組織を、製造業者のプロトコル（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）に従って単一細胞に解離させた。解離させた細胞を、異なる細胞サブセットでの様々な標的の発現についてフローサイトメトリーによって分析した。個々の細胞サブセットでの各標的発現について、アイソタイプ対照のＭＦＩ値で割った標的のＭＦＩ値をとることによって発現倍率値を算出した。他の研究者がこれらの同じ組織標本から試料を受け取った可能性がある。腫瘍種を、各試料の病理学的報告の検討に基づいて決定した。ＩＨＣ試験では、補足的方法に記載の条件を用いて、抗ＰＶＲＬ２抗体（ＨＰＡ−０１２７５９、Ｓｉｇｍａ）およびＰＤ−Ｌ１（Ｓｐ１４２、ＳｐｒｉｎｇＢｉｏ）を用いて腫瘍マイクロアレイ（Ｂｉｏｃｈａｉｎ  ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）を染色した。スコアリングは、同腫瘍からの２連したコアについて２人の独立した評者によって行われた。
ＰＶＲＩＧ抗体の作製および特徴付け
抗ヒトＰＶＲＩＧおよび抗マウスＰＶＲＩＧ抗体を、補足的方法で詳述したように作製した。簡潔には、抗体結合特異性および親和性を、遺伝子を発現しない細胞への検出可能な結合がないＰＶＲＩＧ操作細胞への選択的結合によって評価した。これらの抗ＰＶＲＩＧ抗体の拮抗活性を、ＰＶＲＩＧとＰＶＲＬ２との相互作用が妨害されたＥＬＩＳＡおよびＦＡＣＳに基づくアッセイを用いて決定した。細胞に基づくアッセイにおける特徴付けのために、抗体を、ＰＢＭＣまたは腫瘍由来Ｔ細胞との培養中でＰＶＲＬ２を発現する標的細胞からなるいくつかのＴ細胞標的化細胞共培養アッセイ系において試験した。ｇｐ１００特異的Ｔ細胞株は、既に記載したように黒色腫腫瘍から増殖させた（２３）。ＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞を、ＣＭＶｐｐ６５（４９５〜５０３）、ＩＬ−２、およびＩＬ−７を用いて、健康なドナーのＰＢＭＣ（ＣＴＬ  ｉｍｍｕｎｏｓｐｏｔ）から１０日間増殖させた。併用試験のために、ＰＤ−１、ＴＩＧＩＴ、およびＰＶＲＩＧに対する抗体を１０μｇ／ｍｌで使用した。馴化培地中のサイトカイン濃度を、Ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ  Ｂｅａｄ  Ａｒｒａｙ（ＣＢＡ）を用いて決定し、補足的方法に記載されているようにＦＡＣＳ染色を行った。
マウスＰＶＲＩＧの発現および機能の特徴付け
マウスＰＶＲＩＧとｍＰＶＲＬ２およびｍＰＶＲとの結合相互作用を、組換えＰＶＲＩＧ、ＰＶＲＬ２、およびＰＶＲタンパク質を用いたＳＰＲおよびＥＬＩＳＡ、ならびに異所的に操作したＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２過剰発現細胞株またはＰＶＲもしくはＰＶＲＬ２  ｓｉＲＮＡトランスフェクト細胞株を用いたＦＡＣＳによって評価した。ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ欠損マウスを、補足的方法に記載されているように作製した。発現分析を行って、様々な細胞サブセットにおける脾臓、リンパ節、および腫瘍中のＰＶＲＩＧの発現を調べた。マウスＰＶＲＩＧのＴ細胞調節活性を示す細胞機能アッセイを、補足的材料および方法に詳述されるように、ＷＴおよびＰＶＲＩＧ−／−Ｔ細胞、ならびにＰＶＲＬ２  ＦｃまたはＰＶＲＬ２を異所的に発現した標的細胞を使用して確立した。ＣＴ２６、ＭＣ３８、およびＢ１６／Ｄｂ−ｈｍｇｐ１００腫瘍モデルを、補足的方法に記載されるように行った。全ての試験は、Ｔｅｌ−Ａｖｉｖ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｔｅｌ−ａｖｉｖ，Ｉｓｒａｅｌ）またはＪｏｈｎｓ  Ｈｏｐｋｉｎｓ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＵＳＡ）のＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認された。
結果
ＰＶＲＩＧ発現は、末梢血および腫瘍のエフェクターＴ細胞で最も高い。
【０５４６】
Ｉｇスーパーファミリー（ＩｇＳＦ）は何百ものタンパク質からなるが、それらのうちのほんの少数のみがＴ細胞阻害性受容体である。ＩｇＳＦのタンパク質は迅速に進化する傾向があり（２４）、したがって、これらのタンパク質間の配列類似性は一般に低く、新規の免疫受容体の特定には最適ではない。新規の免疫チェックポイントを特定するために、遺伝子構造、タンパク質ドメイン、予測された細胞局在、および発現パターン等の既知の免疫チェックポイントの間で共有されたゲノムおよびプロテオーム特性に基づいたバイオインフォマティクスアルゴリズムを開発した。これらのアルゴリズムを使用して、ＰＶＲＩＧを新規免疫受容体として特定した。最近、ヒトＰＶＲＩＧ（ＣＤ１１２Ｒ）がＰＶＲＬ２と結合し、Ｔ細胞機能を阻害することも報告されている（１５）。しかしながら、腫瘍免疫監視の制御におけるこの経路の関連性は報告されていない。ここでは、ヒトがんおよび前臨床腫瘍モデルにおけるＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２の発現および機能を解明した。健康なドナー由来の末梢血において、ＰＶＲＩＧは、リンパ球でのみ発現され、この発現は、ＣＤ８Ｔ細胞およびＮＫ細胞で最も高かった。（図２７Ａ）。Ｔ細胞のさらなるサブセット分析により、Ｔｒｅｇサブセットと比較してＣＤ８またはＣＤ４メモリー／エフェクターＴ細胞サブセットでＰＶＲＩＧ発現が最も高かったことが示された（図２７Ｂ、図３４Ａ）。主にメモリーＴ細胞発現パターンにより、ＰＶＲＩＧは、メモリー／エフェクターＴ細胞と比較してＴｒｅｇ上で同等以上の発現を示す傾向のあるファミリー（ＴＩＧＩＴ、ＣＤ９６）の他の受容体と区別される。さらに、２つのアッセイ系（図２７ＣのＣＭＶリコール応答、図２７Ｄ、図３４ＢのＤＣ−ＭＬＲ）におけるＴ細胞活性化後のＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴの発現動態を比較し、ＰＶＲＩＧが、ＴＩＧＩＴと比較して、遅延した誘導速度論、および後期の時点でのより持続した発現を有することを示す。ＴＩＧＩＴと比較したメモリー／エフェクター細胞上のＰＶＲＩＧの優先的発現により、Ｔ細胞応答の調節におけるＰＶＲＩＧの固有の役割が示唆される。
【０５４７】
活性化後のＴ細胞上でのＰＶＲＩＧ発現の遅延および持続的誘導により、これが腫瘍微小環境において発現され得ることが示唆された。次に、ＦＡＣＳにより生体外で直接、解離させたヒト腫瘍由来の白血球上のＰＶＲＩＧの発現を分析した。ＰＶＲＩＧの発現は、複数の腫瘍型由来のＣＤ８Ｔ細胞、ＣＤ４Ｔ細胞、およびＮＫ細胞で検出された（図２７Ｅ〜Ｇ、補足図２７Ｃ）。ＰＶＲＩＧは、ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞でＰＤ−１およびＴＩＧＩＴと共発現し（図２７Ｆ）、平均して、膀胱、結腸直腸、および前立腺と比較して、乳、子宮内膜、頭頸部、肺、腎臓、および卵巣腫瘍由来のＣＤ４＋およびＣＤ８＋ＴＩＬにおいてより高い発現が検出された。ＰＶＲＩＧ発現が生体外で低い／存在しない腫瘍試料において、抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８による活性化により、ＰＶＲＩＧの発現が増強され、ＰＶＲＩＧのＴＩＬ発現が再活性化の際にさらに誘導され得ることが示唆される（図３４Ｄ）。結腸、肺、腎臓、子宮内膜、および卵巣腫瘍について、同じ患者由来の正常な隣接組織を得て、腫瘍から単離したリンパ球対正常組織から単離したリンパ球に対するＰＶＲＩＧ発現の比較を行うことができた。ＴＩＬにより、適合される正常な隣接組織（ＮＡＴ）から単離された細胞と比較して、ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞でのＰＶＲＩＧの有意な誘導が示された（図３４Ｅ）。ＰＢＭＣと同様に、さらに、肺、子宮内膜、および腎臓腫瘍由来のＴｒｅｇ対ＣＤ８Ｔ細胞でのＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ１発現を比較した。ＴＩＬではＴＩＧＩＴの発現はＣＤ８Ｔ細胞と比較してＴｒｅｇでより高かったが、ＰＶＲＩＧおよびＰＤ１ではＴｒｅｇと比較してＣＤ８Ｔ細胞で同様のまたはより高い発現が観察された（図２７Ｅ）。次に、ＴＩＬの生体外での発現の程度または腫瘍とＮＡＴとの間の発現における倍率変化の程度の相関分析によって、Ｔ細胞集団に対するＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１の共制御を試験した。両方の分析において、ＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞は、ＰＶＲＩＧとＰＤ１またはＴＩＧＩＴとの間に有意な正相関を示した（図３４Ｆ）。総合すると、これらのデータにより、ＰＶＲＩＧは、複数のヒトがん由来のＴ細胞およびＮＫ細胞で発現されるため、腫瘍におけるＴ細胞機能を制御するのに重要であり得る新規の阻害性受容体標的とされることが示される。
ＰＶＲＬ２発現は正常な隣接組織と比較して腫瘍組織において増強される
ＰＤ−Ｌ１発現がＰＤ−１阻害剤に対する応答を予測するのに役立つことが示されたので、ＰＶＲＬ２の発現がヒトがん組織におけるその同族受容体ＰＶＲＩＧの発現と同時であるかを調べた。ＩＨＣにおいて使用を検証したＰＶＲＬ２抗体を使用して（図３５Ａ）、肺、結腸、皮膚、乳、卵巣／子宮内膜、および腎臓がん組織からなる腫瘍マイクロアレイ（ＴＭＡ）を染色した。腎臓を除くＰＶＲＬ２発現は、これらの器官からの正常組織の大部分において存在しないか、または最小限に発現された。腫瘍組織において、ＰＶＲＬ２は相当数の肺、結腸、皮膚、乳、および卵巣／子宮内膜がん試料において誘導された（図２８Ａ）。ＰＶＲＬ２発現は、腫瘍細胞および浸潤全部での免疫細胞で検出された（図２８Ｂ）。ＰＶＲＬ２を発現する特定の免疫細胞サブセットを決定するために、新たに解離した腫瘍に対してフローサイトメトリーを行った。ＩＨＣ発現プロファイルと一致して、ＣＤ４５＋免疫細胞、特に骨髄細胞（例えば、ＣＤ１４＋腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）および骨髄ＤＣ）上、ならびに複数の腫瘍型由来のＣＤ４５−非免疫細胞上でＰＶＲＬ２の発現が検出された（図２８Ｃ、Ｄ）。リンパ球ではＰＶＲＬ２の発現は検出されなかった（データは図示せず）。結腸、肺、腎臓、子宮内膜、および卵巣腫瘍から単離されたＣＤ４５−細胞およびＴＡＭ上のＰＶＲＬ２発現の比較により、同ドナーの適合される正常な隣接組織（ＮＡＴ）から単離された細胞と比較して、腫瘍から単離された細胞においてＰＶＲＬ２の有意な誘導が示された（図３６Ｄ）。どの腫瘍がＰＶＲＩＧとＰＶＲＬ２との両方を発現するかを評価するために、骨髄細胞および複数の腫瘍種のＣＤ４５−細胞のＰＶＲＬ２と比較した、リンパ球でのＰＶＲＩＧの発現を調査した。調査したがん種の中で、子宮内膜、肺、および腎臓がんが、ＰＶＲＩＧｈｉリンパ球およびＰＶＲＬ２高ＴＡＭまたはＣＤ４５−非免疫細胞の最も高い分布率を有した（図２８Ｅ、図３７）。これらのデータは、ＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２経路が、子宮内膜、肺、および腎臓がんにおけるＴ細胞−ＴＡＭ相互作用およびＴ細胞−腫瘍細胞相互作用を制御することにより、抗腫瘍応答の調節において特に重要であり得ることを示す。
ＰＤ−Ｌ１と比較して、ＰＶＲＬ２発現は、ＰＤ−Ｌ１−腫瘍で異なって制御され、存在する。
【０５４８】
ＰＶＲＩＧおよびＰＤ−１は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）上で共発現させることができるため、同じＴＭＡの連続的な切片を染色することによって同腫瘍でのＰＶＲＬ２およびＰＤ−Ｌ１の共発現も調査した。全てのＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍もＰＶＲＬ２を発現しており、これら２つの経路の制御においてある程度の重複があり、ＰＶＲＩＧ阻害剤とＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤とを組み合わせる根拠を示す（図２９Ａ）。ＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍において、ＰＶＲＬ２を様々ながん種にわたるこれらの腫瘍の大部分において検出した（図２９Ａ）。これは、ＰＶＲＬ２発現が一部の腫瘍においてＰＤ−Ｌ１よりも一般的であり、この経路を標的化することがＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍において特に効果的であり得ることを示唆した。ＰＤ−Ｌ１は適応性のある抵抗モデルの一部として、ＩＦＮ−γによって腫瘍において誘導されることが報告されているため（２５）、さらに、骨髄由来樹状細胞および腫瘍上皮細胞株での様々な炎症刺激によるＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−Ｌ１発現の制御を評価した（図２９Ｄ）。炎症性シグナルによる未成熟なＢＭ−ＤＣの治療により、概して、ＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−Ｌ１発現の両方の増加が生じ、これにより、ＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−Ｌ１発現がＤＣ成熟時に増加することが示される。対照的に、ＩＦＮ−γを用いた上皮細胞の治療では、ＰＤ−Ｌ１の発現は増加したが、ＰＶＲＬ２の高い基準発現は影響を及ぼさない（図２９Ｅ）。ＰＶＲＬ２はゲノムストレス、ＤＮＡ損傷、および腫瘍抑制遺伝子によって報告されており（２６）（２７）、ＰＤ−Ｌ１と比較してＰＶＲＬ２発現の異なる制御をさらに支持する。要約すると、これらのデータにより、ＰＤ−Ｌ１およびＰＶＲＬ２が、ＤＣ等の抗原提示細胞で共制御され得るが、上皮細胞ではＩＦＮ−γによって差異的に制御され得ることが示される。ＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍におけるＰＶＲＬ２の存在により、この経路を標的とすることが、ＰＤ−１阻害剤に対して非応答性の患者において有益な可能性があり得ることが示唆される。
ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＰＶＲＩＧとＰＶＲＬ２との相互作用を妨害する、ＰＶＲＩＧに対する高親和性ヒト化モノクローナル抗体である
ヒトＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２相互作用に拮抗する機能的結果を調査するために、ＰＶＲＩＧとＰＶＲＬ２との相互作用を遮断する高親和性のアンタゴニスト抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）を作製した。この抗体は、ヒトＰＶＲＩＧまたはカニクイザルＰＶＲＩＧを異所的に発現するＨＥＫ２９３細胞と選択的に結合し、ナノモル以下の親和性でＰＶＲＩＧを内因性発現するＪｕｒｋａｔ細胞とも結合した（図３０Ａ）。生化学的アッセイにおいて、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＰＶＲＩＧ  ＦｃとＰＶＲＬ２＋ＨＥＫ２９３細胞との相互作用を遮断し（図３０Ｂ）、またＰＶＲＬ２  ＦｃのＰＶＲＩＧ＋ＨＥＫ２９３細胞との結合を遮断した（図３０Ｃ）。この抗体を用いて、いくつかのＴ細胞アッセイにおいてアンタゴニスト抗ＰＶＲＩＧの機能的効果を観察した。細胞表面抗ＣＤ３抗体およびヒトＰＶＲＬ２を異所的に発現する人工の抗原提示細胞（ａＡＰＣ）を作製し、抗ＰＶＲＩＧ（ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ））またはアイソタイプ対照の存在下で初代ヒトＣＤ４Ｔ細胞と共培養した。ＣＨＯ抗ＣＤ３  ａＡＰＣとの共培養の際に増殖しているＣＤ４Ｔ細胞でＰＶＲＩＧ発現を誘導した（図３８Ａ）。ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）によるＰＶＲＩＧの拮抗作用により、複数のドナー由来のＣＤ４Ｔ細胞の増殖が増強された（図３０Ｄ）。さらに、黒色腫腫瘍に由来した２つのヒトｇｐ１００応答性ＣＤ８Ｔ細胞株に対する抗ＰＶＲＩＧの効果を試験した。これらのＴ細胞系を、アイソタイプ対照ＩｇＧまたは抗ＰＶＲＩＧ抗体の存在下で、ＨＬＡ−Ａ２およびＰＶＲＬ２を発現するａＡＰＣと共に個々に共培養した（図３８Ｂ）。両方の株において観察されるように、抗ＰＶＲＩＧは、ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−α産生を約２０〜５０％増加させた。用量反応評価において、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、複数のアッセイにおいて１桁のナノモルＥＣ５０値を示した（図３８Ｃ、Ｄ）。これらのデータをまとめると、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）によってＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２相互作用に拮抗することで、Ｔ細胞活性化の増加が生じることが示される。
ＴＩＧＩＴまたはＰＤ−１阻害剤と組み合わせたＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）により、Ｔ細胞機能の相乗的な増強が生じた。
【０５４９】
ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ遮断の組み合わせにより、Ｔ細胞−樹状細胞共培養アッセイ（１５）において相乗的にＣＤ４Ｔ細胞機能が増強し、Ｔ細胞−ＡＰＣ相互作用の制御におけるこの経路の役割が示唆される。腫瘍細胞共培養の背景でのＣＤ８Ｔ細胞に対するＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ遮断の効果は報告されていない。発明者らの腫瘍発現プロファイリングによりＣＤ４５−免疫細胞でのＰＶＲＬ２の発現を示したため、さらに、２Ｔ細胞アッセイ系を用いたＴ細胞−腫瘍細胞共培養におけるこの経路の標的化の効果を調査した。まず、抗ＰＶＲＩＧ、抗ＴＩＧＩＴ、またはアイソタイプ対照抗体の存在下で、単独または併用のいずれかで、２つのｇｐ１００腫瘍抗原特異的ＣＤ８Ｔ細胞株と黒色腫細胞株ＭＥＬ６２４との共培養を行った。ＭＥＬ６２４細胞はＰＶＲおよびＰＶＬＲ２の両方を発現し、ＴＩＬ−２０９およびＴＩＬ−４６３は両方とも、ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１を発現した（図３０Ｆ）。ＴＩＬ−２０９では、抗ＰＶＲＩＧまたは抗ＴＩＧＩＴ単独ではＩＦＮ−γが増強せず、抗ＰＶＲＩＧと抗ＴＩＧＩＴの組み合わせでは相乗的にＩＦＮ−γ産生が増強したことが観察された（図３０Ｇ）。ＴＩＬ−４６３では、抗ＰＶＲＩＧまたは抗ＴＩＧＩＴではＩＦＮ−γ産生が適度に増加し、抗ＰＶＲＩＧおよび抗ＴＩＧＩＴの組合せでは相加的にＩＦＮ−γが増加したことを観察した（図３０Ｇ）。追加のアッセイ系において、ヒトＴ細胞応答を研究するためのモデル系として、ＣＭＶｐｐ６５応答性ＣＤ８Ｔ細胞を利用した。ＨＬＡ−Ａ２＋ＣＭＶ  ｐｐ６５ＣＤ８  Ｔ細胞をＣＭＶｐｐ６５（４９５〜５０３）の存在下で増殖させ、ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１の発現を１０日目に観察した（図３０Ｆ）。ＰＶＲＩＧは、ＣＭＶｐｐ６５特異的ＣＤ８Ｔ細胞で、ヒトがん試料で観察されたものと同様の程度で発現した（図２７）。標的細胞として、同様の量のＰＶＲおよびＰＶＲＬ２を発現するＰＤ−Ｌ１高（Ｐａｎｃ０５．０４）およびＰＤ−Ｌ１低（Ｃｏｌｏ２０５）ＨＬＡ−Ａ２＋がん細胞株を特定した（図３０Ｆ）。次に、ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、および／またはＰＤ−１に対する遮断抗体の存在下で、ＣＭＶｐｐ６５応答性Ｔ細胞とｐｐ６５（４９５〜５０３）ペプチドをパルスしたＨＬＡ−Ａ２＋腫瘍細胞株との共培養を行った。抗ＰＶＲＩＧ  Ａｂにより、Ｐａｎｃ０５．０４細胞との共培養ではＩＦＮ−γが約５０％増加し、Ｃｏｌｏ２０５との共培養では最小限にＩＦＮ−γが増加したことを観察した（図３０Ｈ）。抗ＴＩＧＩＴと抗ＰＶＲＩＧ  Ａｂとの組み合わせにより、両方の標的細胞株で相乗的にＩＦＮ−γ産生が増強し、ＰＤ−１抗体のみと比較してより高いＩＦＮ−γの増強が生じた（図３０Ｈ）。さらに、抗ＰＶＲＩＧと抗ＰＤ−１との組み合わせにより、個々の抗体と比較した場合に、ＩＦＮ−γ産生が相乗的に増強した（図３０Ｉ）。総合すると、これらのデータにより、腫瘍細胞との相互作用によるヒトＣＤ８Ｔ細胞の活性化の増強におけるＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ、またはＰＶＲＩＧおよびＰＤ１の遮断の組み合わせの強力な相乗効果を示唆する。
ＰＶＲＩＧの欠損により、Ｔ細胞増殖の増加および腫瘍成長の減少が生じた。
【０５５０】
マウスＰＶＲＩＧの配列およびそのマウスＰＶＲＬ２との相互作用が報告されているが、マウスＰＶＲＩＧの発現プロファイルおよび免疫調節活性は十分に理解されていない。まず、ＮＫ、ＮＫＴ、およびＴ細胞におけるｍＰＶＲＩＧ  ＲＮＡ発現および転写物を分析した（図３１Ａ）。活性化されたマウスＣＤ８Ｔ細胞は、ＴＩＧＩＴと比較して、誘導速度論が遅延したＰＶＲＩＧ転写産物の上昇を有した（図３１Ｂ）。組換えｍＰＶＲＩＧが、いくつかのアッセイ配向で行われた表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）およびＥＬＩＳＡによってｍＰＶＲＬ２タンパク質と結合することを確認した（図３９Ａ〜Ｄ）。親和性はｍＰＶＲＬ２との相互作用より約１０倍小さかったが、ｍＰＶＲＩＧとｍＰＶＲとの間の相互作用も観察された（図３９Ｅ）。ＰＶＲまたはＰＶＲＬ２がｍＰＶＲＩＧの主要なリガンドであるかどうかを決定するために、ＰＶＲおよびＰＶＲＬ２を発現するＢ１６Ｆ１０細胞とのマウスＰＶＲＩＧ  Ｆｃの結合を試験した（データは図示せず）。ＰＶＲＩＧ  Ｆｃは、Ｂ１６Ｆ１０細胞との用量依存的結合を示し、この結合はＢ１６Ｆ１０細胞におけるＰＶＲＬ２  ｓｉＲＮＡノックダウン時に完全に消滅した（図３９Ｆ）。これと比較して、ＰＶＲＩＧ  Ｆｃ融合タンパク質の結合は、ＰＶＲノックダウン後にわずかに、しかし一貫して減少し（図３９Ｅ）、ｍＰＶＲＩＧとｍＰＶＲとの間に非常に弱い相互作用が生じることが示唆された。総合すると、これらの結果により、マウスにおいてＰＶＲＬ２がヒトにおける場合のようにＰＶＲＩＧの主要なリガンドであることが示される。
免疫応答におけるＰＶＲＩＧの役割を描写するために、ＰＶＲＩＧ欠損（−／−）マウスを作製した（図４０）。ＰＶＲＩＧ−／−マウスは予想されるメンデル比で生まれ、１０カ月齢まで顕著な発現型を示さず、８週齢で野生型マウスと比較して同様の白血球細胞性（末梢およびリンパ組織）を有した（図４１）。野生型（ＷＴ）ＣＤ８Ｔ細胞およびＮＫ細胞はＰＶＲＩＧを発現し、ＰＶＲＩＧ−／−細胞ではＰＶＲＩＧの発現は検出されなかった（図３１Ｃ）。マウスＴ細胞応答の制御におけるＰＶＲＩＧの役割を調べるために、２つのアッセイ系においてＷＴおよびＰＶＲＩＧ−／−  Ｔ細胞の増殖を調査した。ＷＴまたはＰＶＲＩＧ−／−Ｔ細胞を、可溶性ＰＶＲＬ２  Ｆｃまたは対照Ｆｃタンパク質の存在下で固定化抗ＣＤ３で活性化した。可溶性ＰＶＲＬ２  Ｆｃは、ＷＴＣＤ４＋Ｔ細胞増殖を有意に阻害したが、ＰＶＲＩＧ−／−ＣＤ４＋Ｔ細胞増殖を阻害せず（図３１Ｄ）、これは、ＰＶＲＩＧ−／−細胞が阻害シグナルを欠いていることを示唆する。腫瘍細胞とのＣＤ８＋  Ｔ細胞の相互作用におけるマウスＰＶＲＩＧの役割を評価するために、ＰＶＲＩＧ−／−マウスを、ｇｐ１００２５−３３に特異的なトランスジェニックＴＣＲを発現するｐｍｅｌ  ＴＣＲトランスジェニックマウスに交配した（２８）。活性化したＰＶＲＩＧ−／−またはＷＴ  Ｐｍｅｌ  ＣＤ８＋Ｔ細胞を、ＰＶＲＬ２を内因性発現するＢ１６−Ｄｂ／ｇｐ１００黒色腫腫瘍と共培養し（データは図示せず）、活性化およびエフェクター機能を評価した。ＰＶＲＩＧ−／−ｐｍｅｌ  ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＷＴ細胞と比較してエフェクターサイトカイン（ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−α）の脱顆粒および産生の増強を示した（図３１Ｅ）。これらのデータにより、マウスＰＶＲＩＧがＰＶＲＬ２＋腫瘍標的細胞との共培養の際に腫瘍特異的Ｔ細胞の活性化およびエフェクター機能を阻害することが示される。
【０５５１】
次に、ＭＣ３８同系モデルにおける腫瘍増殖に対するＰＶＲＩＧ欠損の効果を研究した。ＰＶＲＩＧ−／−マウスは、ＷＴマウスと比較して有意に減少した腫瘍増殖を示した（図３２Ａ〜Ｂ）。さらに、ＰＶＲＩＧ−／−マウスは、抗ＰＤ−Ｌ１治療ＷＴマウスまたはアイソタイプ対照を用いて治療されたＰＶＲＩＧ−／−マウスと比較して、有意な（ｐ＝０．０５２）腫瘍成長阻害に反映される、ＰＤ−Ｌ１遮断後１４日目から追加の抗腫瘍応答を示した図３２Ｃ、Ｄ）。腫瘍成長の減少と一致して、抗ＰＤ−Ｌ１治療ＰＶＲＩＧ−／−マウスは、抗ＰＤ−Ｌ１治療野生型マウスおよびアイソタイプ治療ＰＶＲＩＧ−／−マウスと比較して、生体外刺激時にＩＦＮ−γ＋ＴＮＦ−α＋エフェクターＣＤ８Ｔ細胞の有意な増強を示した（図３２Ｅ）。さらに、抗ＰＤ−Ｌ１治療ＰＶＲＩＧ−／−マウスは、抗ＰＤ−Ｌ１治療野生型マウスおよびアイソタイプ治療ＰＶＲＩＧ−／−マウスと比較した場合に、エフェクターサイトカイン産生ＣＤ８＋腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の数も増加していた（図３２Ｆ）。実験の途中で採取された腫瘍からのＣＤ４５＋免疫細胞のトランスクリプトームプロファイリングは（１８日目；マウスは２用量の抗ＰＤ−Ｌ１またはアイソタイプ対照を受け取った）、ＴＩＬ数および細胞傷害性ＴＩＬに対する遺伝子シグネチャが、それらの野生型対応物と比較して、抗ＰＤ−Ｌ１治療ＰＶＲＩＧ欠損マウスにおいて有意に増強されたことを示した（図３２Ｇ〜Ｈ）。Ｔ細胞媒介遺伝子（ＧＲＺＢ、ＩＦＮ−γ）における有意な変化を、他の群と比較したＰＶＲＩＧ−／−＋抗ＰＤ−Ｌ１群において観察した（補足図４２）。総合すると、これらのデータは、特にＰＤ−Ｌ１遮断と組み合わせた場合に、ＰＶＲＩＧ欠乏がＴ細胞活性化を増加させ、生体内における腫瘍増殖を減少させることを示す。
ＰＤ−１抗体またはＴＩＧＩＴ欠損と組み合わせた抗ｍＰＶＲＩＧ抗体は、腫瘍増殖を阻害した。
【０５５２】
ＰＶＲＩＧの遺伝的欠損により腫瘍増殖が減少することを示した後、続いて、ヒト生体外データによって示されたように、ＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２相互作用の抗体媒介性阻害により、特にＰＤ１またはＴＩＧＩＴ阻害剤と組み合わせた場合に、抗腫瘍免疫が改善し得ることの実証を目標に定めた。これを評価するために、高親和性のアンタゴニスト抗ｍＰＶＲＩＧ抗体を作製した。ＦＡＣＳによって決定した抗ｍＰＶＲＩＧ  ｍＡｂの親和性評価により、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と同様に、ナノモル以下のＫｄ（ＨＥＫ２９３  ｍＰＶＲＩＧでは０．３３ｎＭ、Ｄ１０．Ｇ４．１細胞では０．３９ｎＭ）が示された（図３９Ｆ〜Ｇ）。この抗体の特異性は、ｍＰＶＲＩＧノックダウン時にＤ１０．Ｇ４．１細胞との結合の大部分が抑止された際に、さらに確認された（図３９Ｈ）。ｍＰＶＲＩＧ  ＦｃとＢ１６Ｆ１０との結合およびｍＰＶＲＬ２  ＦｃとｍＰＶＲＩＧを過剰発現するＨＥＫ２９３細胞との結合を阻害することによるｍＰＶＲＩＧ−ｍＰＶＲＬ２相互作用の妨害について、抗ｍＰＶＲＩＧを試験した（図３３Ａ）。抗ｍＰＶＲＩＧ抗体によるＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２相互作用の完全な遮断が、両方のアッセイ形式（図３３Ａ、図３９Ｉ）で観察され、アンタゴニスト抗ｍＰＶＲＩＧ抗体を示した。次に、同系のＣＴ２６皮下結腸腫瘍モデルにおけるｍＰＶＲＩＧ遮断の生体内の有効性を試験した。ＰＶＲＩＧ発現は、対応する脾臓または流入領域リンパ節サブセットと比較して、腫瘍微小環境におけるＮＫおよびＴ細胞上で上昇した（図３３Ｂ）。単剤療法として腫瘍保持マウスを抗ｍＰＶＲＩＧ遮断ｍＡｂで治療することでは、腫瘍増殖を減少させることはできなかった（データは図示せず）。しかしながら、抗ＰＶＲＩＧおよび抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＡｂの組合せは、ＣＴ２６腫瘍増殖を効果的に遅延させ（図３３Ｃ）、完全寛解マウスの割合が４０％で、治療マウスの生存期間を有意に増加させた（図３３Ｄ）。ヒトＴ細胞アッセイデータと一致して、これらのデータにより、ＰＤ−１およびＰＶＲＩＧ阻害剤の組合せが腫瘍増殖を減少させ得ることが示される。
【０５５３】
さらに、抗腫瘍応答の制御におけるＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ両方のシグナル伝達の切除効果を試験した。これらの研究のために、Ｂ１６Ｆ１０／Ｄｂ−ｈｍｇｐ１００黒色腫細胞を注入したＷＴマウスまたはＴＩＧＩＴ−／−マウスのいずれかにおける抗ｍＰＶＲＩＧ抗体の有効性を試験した。抗ｍＰＶＲＩＧ遮断ｍＡｂを用いた腫瘍保有ＷＴマウスの治療は、アイソタイプ治療（１１日目で１７％のＴＧＩおよび１８日目のエンドポイントで８％のＴＧＩ）と比較してわずかな効果しかなかった。腫瘍増殖に対するＴＩＧＩＴ欠失の影響も、ＷＴ対照群（１１日目で１７％のＴＧＩおよびエンドポイントで１３％のＴＧＩ）と比較してわずかであった。しかしながら、ＴＩＧＩＴ欠失を抗ＰＶＲＩＧ  ｍＡｂ治療と組み合わせた場合に、有意な腫瘍増殖阻害が観察された（１１日目で６３％、エンドポイントで４９％のＴＧＩ（図３３Ｅ、Ｆ）。腫瘍増殖阻害に従って、抗ＰＶＲＩＧ  ｍＡｂ  ４０７で治療したＴＩＧＩＴ−／−マウスは、ＷＴ対照群と比較して生存率が高かったが、侵攻性で急速に増殖する腫瘍モデルでは統計的有意性は達成されなかった（データは図示せず）。総合すると、これらのデータは、ＰＤ１またはＴＩＧＩＴ阻害剤とのＰＶＲＩＧ阻害剤の相乗的活性を示し、かつＰＤ１またはＴＩＧＩＴ阻害剤によるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の臨床治験の論理的根拠を提供する発明者らのヒト機能データと一致する。
考察
ＣＴＬＡ４およびＰＤ−１などの免疫Ｔ細胞チェックポイントを標的とする抗体はがん患者の生存を増加させてきたが、がん患者の大部分は依然として臨床的利益を示さない。この可能性のある理由の１つは、Ｔ細胞の抗腫瘍免疫を阻害する追加のＴ細胞調節因子の存在である。ここでは、エフェクターＴ細胞機能の制御におけるＰＶＲＩＧの役割を解明し、ＰＶＲＩＧ拮抗作用がＴ細胞の抗腫瘍応答を高め、腫瘍増殖を減少させることを示す。
【０５５４】
ＰＶＲＩＧは、ネクチンおよびネクチン様ファミリーの新規のメンバーであり、ファミリー内のいくつかの既知の免疫制御性受容体の中の１つとされる。このファミリー内の受容体の相互作用を理解することは、ＰＶＲＩＧの関連性および作用機序を理解する上で非常に重要である。これらの受容体のうち、ＤＮＡＭ、ＴＩＧＩＴ、およびＣＤ９６は、同じリガンドＰＶＲおよびＰＶＲＬ２を共有する点で、ＰＶＲＩＧと最も密接に関連している。ＤＮＡＭは、ＰＶＲおよびＰＶＲＬ２の両方と結合し、リンパ球に共刺激シグナルを送達する。ＴＩＧＩＴは、ＰＶＲと結合し、ＰＶＲＬ２と弱く結合することが報告されている。ＥＬＩＳＡまたはＳＰＲを用いてＴＩＧＩＴとＰＶＲＬ２との間の相互作用を検出することはできず（データは図示せず）、ＰＶＲがＴＩＧＩＴの主要リガンドであることが示唆された。同様の方法を用いて、本発明者らおよび最近の報告により、ＰＶＲＬ２とＰＶＲＩＧとの間の高い親和性の相互作用が検出され、ＰＶＲＩＧがＰＶＲＬ２に対する優勢な阻害性受容体であることが示唆された。これらのデータにより、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧがこの軸に二重シグナル伝達ノードを含み、このファミリー内のＴ細胞活性化を最大限に増加させるためには、これらの両方を遮断することが必要であることが示唆される。異なるリガンドとの相互作用に加えて、ＰＶＲＩＧはＰＤ−１と同様にエフェクターＴ細胞またはメモリーＴ細胞で最も発現が高いが、ＴＩＧＩＴは制御性Ｔ細胞で最も発現が高いことが観察された。さらに、ＰＶＲＩＧが、ＴＩＧＩＴと比較して、Ｔ細胞活性化後に遅れた誘導を示したことが観察された。これらのデータにより、ＰＶＲＩＧが、ＰＶＲＬ２に対する高い親和性で相互作用し、メモリー細胞上での異なった発現およびＴＩＧＩＴに対する遅れた誘導プロファイルを有するという、このファミリー内で固有の役割を有することが示唆される。
【０５５５】
ここではさらに、ＰＶＲＩＧ欠損マウスおよびアンタゴニスト抗ＰＶＲＩＧ抗体を用いた抗腫瘍Ｔ細胞応答の制御におけるＰＶＲＩＧの新規の役割が報告される。マウスＰＶＲＩＧは、Ｔ細胞およびＮＫ細胞上で発現され、リンパ球活性化時に誘導され、末梢と比較してＴＭＥにおいて最高であることを示した。さらに、ＰＶＲＩＧ欠損により、生体外でＴ細胞機能を増加させ、生体内で腫瘍増殖の減少が生じることを示す。ＰＶＲＩＧに対するアンタゴニスト抗体は、抗ＰＤ−Ｌ１またはＴＩＧＩＴの遺伝子的欠損と組み合わせたときに腫瘍増殖を減少させ、Ｔ細胞応答の制御におけるＰＶＲＩＧの不可欠な役割を示した。これらの新規のデータにより、ＰＤ１またはＴＩＧＩＴ拮抗作用と組み合わせてＰＶＲＩＧを標的とし、がんの治療のための可能性のある新規療法である前臨床腫瘍モデルを用いた生体内での概念実証が提供される。
【０５５６】
臨床治験における試験が継続されているＰＶＲＩＧとＰＶＲＬ２との相互作用を妨害する高親和性の抗ヒトＰＶＲＩＧ抗体について、ここで報告する。臨床治験における患者の選択に関する情報を提供し得る可能性のあるがんの兆候を決定するために、ＦＡＣＳおよびＩＨＣによってヒトがんにおけるこの軸の発現プロファイルを調査した。ＰＶＲＩＧについて、ＦＡＣＳによるＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞でのＰＶＲＩＧの平均発現は、子宮内膜、肺、腎臓、および卵巣がんにおいて最も高いことが観察されたが、この差異は、現在数の試料によるテューキーの多重比較検定を用いたＡＮＯＶＡによって決定して、他のがん種との統計学的差異を達成しなかった。ＰＶＲＩＧがＴ細胞活性化時に誘導され、腫瘍浸潤Ｔ細胞の大部分が抗原を経験していることからすれば、ＰＶＲＩＧ発現の中央値が腫瘍試料およびがんの種類にわたって類似していたことは、おそらく驚くにはあたらない。ＰＶＲＩＧ発現がＰＤ−１およびＴＩＧＩＴ発現と相関することが観察され、これらの３つの阻害性受容体の相互作用が抗腫瘍応答を制御する上で重要となることが示唆された。この報告において、ＰＶＲＩＧ抗体をＣＤ８Ｔ細胞腫瘍細胞共培養においてＴＩＧＩＴ抗体と組み合わせた場合に、ＰＶＲＩＧまたはＴＩＧＩＴ阻害剤と組み合わせたＰＤ−１よりも良好にＴ細胞機能の相乗的増加が観察された。ＤＣ−Ｔ細胞相互作用の制御におけるＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴの役割を示す以前の研究と共に、これらのデータにより、この経路がＴ細胞−ＡＰＣおよびＴ細胞−腫瘍細胞相互作用の制御に関与し、ＰＶＲＩＧを標的とすることにより抗腫瘍免疫応答を増加させる複数の機序を提供することが示される。
【０５５７】
さらに、ＰＤ−Ｌ１の発現とＰＤ−１阻害剤に対する臨床的応答とが相互に関連付けられたため、特定のがん種がより高い発現を有するかを評価するために、ＦＡＣＳおよびＩＨＣによって腫瘍におけるＰＶＲＬ２発現を分析した。解離した腫瘍細胞を評価すると、子宮内膜、頭頸部、腎臓、肺、および卵巣試料由来のマクロファージにおける平均ＰＶＲＬ２発現が、他の腫瘍型と比較して高かったことが観察された。ＣＤ４５−非免疫細胞での平均ＰＶＲＬ２発現は、他のがんと比較して、乳、結腸直腸、子宮内膜、肺、卵巣、および前立腺がんで高かった。ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２発現に基づいて、子宮内膜、頭頸部、肺、腎臓、および卵巣がんの腫瘍発生率が高く、高いＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２発現を伴うこと、またこれらのがんがこの経路の阻害剤に応答し得る可能性のあるがんであることが決定された。
【０５５８】
ＰＶＲＬ２発現は、炎症性メディエーターによって生体外で抗原産生細胞で調節され得るが、がん細胞でのＰＶＲＬ２発現は変化しないことが観察された。これらのデータにより、抗原提示細胞でのＰＶＲＬ２発現が、炎症によって制御され得、炎症性腫瘍の指標であり得ることが示唆される。実際に、ＰＤ−Ｌ１＋腫瘍は全て、腫瘍細胞および免疫区画の両方においてＰＶＲＬ２も発現することが観察された。骨髄細胞でのＰＶＲＬ２の発現は、抗腫瘍効果をさらに増強するためにＰＤ−１またはＴＩＧＩＴによる併用設定においてＰＶＲＩＧ阻害剤に対する応答を予測するのに役立ち得る。興味深いことに、ＰＤ−Ｌ１陰性腫瘍の一部は、主に腫瘍細胞でもＰＶＲＬ２を発現し、免疫細胞では発現しなかった。上皮細胞でのＰＶＲおよびＰＶＲＬ２の発現は、ｘｙｚによる腫瘍形成、さらにストレスおよびＤＮＡ損傷に応答して誘導されることが報告されている。これらのデータは、腫瘍細胞におけるＰＶＲＬ２発現の制御がＩＦＮ−γに依存しないという生体外の所見と一致する。ＰＤ−Ｌ１は、ＩＦＮ−γに応答して適応耐性設定で誘導され、炎症性応答に関連するため、ＰＤ−Ｌ１の非存在下でのＰＶＲＬ２の発現は、ＰＶＲＬ２発現がＰＤ−Ｌ１よりも一般的であり、ＰＶＲＬ２が非炎症性腫瘍において発現されることを示唆する。上記に基づいて、ＰＶＲおよびＰＶＲＬ２の存在がＰＤ−Ｌ１とは無関係に免疫応答の抑制に寄与し、ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴの阻害剤が、ＰＤ−Ｌ１陰性であるか、またはＰＤ−１阻害剤に対して応答性／促進性ではない患者において特に重要である可能性がある。
【０５５９】
要約すると、この報告は、ヒトがんにおけるこの軸の発現を特徴付けること、ＣＤ８−腫瘍細胞相互作用の制御におけるＰＶＲＩＧ／ＴＩＧＩＴの卓越した役割を示すこと、およびＰＤ−１阻害またはＴＩＧＩＴ欠損と組み合わせたＰＶＲＩＧ拮抗作用により、腫瘍増殖における相乗的な減少が生じることを示すことを含む、ＰＶＲＩＧ生物学に対するいくつかの新規の洞察を提供する。これらのデータにより、ＰＶＲＩＧ生物学の現在の理解が広がり、がん患者における高親和性抗ＰＶＲＩＧ抗体であるＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の臨床治験の論理的根拠が提供される。
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２２．Ｆｕｃｈｓ  Ａ，Ｃｅｌｌａ  Ｍ，Ｇｉｕｒｉｓａｔｏ  Ｅ，Ｓｈａｗ  ＡＳ，Ｃｏｌｏｎｎａ  Ｍ．Ｃｕｔｔｉｎｇ  ｅｄｇｅ：ＣＤ９６  （ｔａｃｔｉｌｅ）ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ＮＫ  ｃｅｌｌ−ｔａｒｇｅｔ  ｃｅｌｌ  ａｄｈｅｓｉｏｎ  ｂｙ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ｐｏｌｉｏｖｉｒｕｓ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  （ＣＤ１５５）．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００４；１７２（７）：３９９４−８．
２３．Ｍａｃｈｌｅｎｋｉｎ  Ａ，Ｕｚａｎａ  Ｒ，Ｆｒａｎｋｅｎｂｕｒｇ  Ｓ，Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇ  Ｇ，Ｅｉｓｅｎｂａｃｈ  Ｌ，Ｐｉｔｃｏｖｓｋｉ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．Ｃａｐｔｕｒｅ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌ  ｍｅｍｂｒａｎｅｓ  ｂｙ  ｔｒｏｇｏｃｙｔｏｓｉｓ  ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｓ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ＣＴＬｓ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２００８；６８（６）：２００６−１３  ｄｏｉ  １０．１１５８／０００８−５４７２．ＣＡＮ−０７−３１１９．
２４．Ｏｈｔａｎｉ  Ｈ，Ｎａｋａｊｉｍａ  Ｔ，Ａｋａｒｉ  Ｈ，Ｉｓｈｉｄａ  Ｔ，Ｋｉｍｕｒａ  Ａ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ  ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ  ｇｅｎｅｓ  ｉｎ  ｐｒｉｍａｔｅｓ．Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２０１１；６３（７）：４１７−２８  ｄｏｉ  １０．１００７／ｓ００２５１−０１１−０５１９−７．
２５．Ｔａｕｂｅ  ＪＭ，Ａｎｄｅｒｓ  ＲＡ，Ｙｏｕｎｇ  ＧＤ，Ｘｕ  Ｈ，Ｓｈａｒｍａ  Ｒ，ＭｃＭｉｌｌｅｒ  ＴＬ，ｅｔ  ａｌ．Ｃｏｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｗｉｔｈ  Ｂ７−ｈ１  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｍｅｌａｎｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｓｉｏｎｓ  ｓｕｐｐｏｒｔｓ  ａｎ  ａｄａｐｔｉｖｅ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｅ  ｅｓｃａｐｅ．Ｓｃｉ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ  ２０１２；４（１２７）：１２７ｒａ３７  ｄｏｉ  １０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．３００３６８９．
２６．Ｃｅｒｂｏｎｉ  Ｃ，Ｆｉｏｎｄａ  Ｃ，Ｓｏｒｉａｎｉ  Ａ，Ｚｉｎｇｏｎｉ  Ａ，Ｄｏｒｉａ  Ｍ，Ｃｉｐｐｉｔｅｌｌｉ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  ＤＮＡ  Ｄａｍａｇｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ：Ａ  Ｃｏｍｍｏｎ  Ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＮＫＧ２Ｄ  ａｎｄ  ＤＮＡＭ−１  Ｌｉｇａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｎｏｒｍａｌ，Ｉｎｆｅｃｔｅｄ，ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌｓ．Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２０１４；４：５０８  ｄｏｉ  １０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１３．００５０８．
２７．ｄｅ  Ａｎｄｒａｄｅ  ＬＦ，Ｓｍｙｔｈ  ＭＪ，Ｍａｒｔｉｎｅｔ  Ｌ．ＤＮＡＭ−１  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｎａｔｕｒａｌ  ｋｉｌｌｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｎｅｃｔｉｎ  ａｎｄ  ｎｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２０１４；９２（３）：２３７−４４  ｄｏｉ  １０．１０３８／ｉｃｂ．２０１３．９５．
２８．Ｏｖｅｒｗｉｊｋ  ＷＷ，Ｔｓｕｎｇ  Ａ，Ｉｒｖｉｎｅ  ＫＲ，Ｐａｒｋｈｕｒｓｔ  ＭＲ，Ｇｏｌｅｔｚ  ＴＪ，Ｔｓｕｎｇ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．ｇｐ１００／ｐｍｅｌ  １７  ｉｓ  ａ  ｍｕｒｉｎｅ  ｔｕｍｏｒ  ｒｅｊｅｃｔｉｏｎ  ａｎｔｉｇｅｎ：ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ”ｓｅｌｆ”−ｒｅａｃｔｉｖｅ，ｔｕｍｏｒｉｃｉｄａｌ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｕｓｉｎｇ  ｈｉｇｈ−ａｆｆｉｎｉｔｙ，ａｌｔｅｒｅｄ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｌｉｇａｎｄ．Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １９９８；１８８（２）：２７７−８６．
実施例６：腫瘍細胞殺傷アッセイ
腫瘍細胞殺傷に対する抗ヒトＴＩＧＩＴ抗体およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の単独または併用の効果を、ヒトＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を用いた生体外共培養アッセイによって評価した。アッセイに用いたＨＬＡ−Ａ２＋標的細胞株は、ヒトＰＶＲおよびＰＶＲＬ２を安定に発現する黒色腫細胞株Ｍｅｌ６２４、ならびにヒトＰＶＲおよびＰＶＲＬ２の内因性レベルを発現する膵臓腺がん細胞株Ｐａｎｃ０５．０４であった。両方の腫瘍細胞株を、レンチウイルス形質導入（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を介してルシフェラーゼレポーター遺伝子で安定に形質導入した。Ｍｅｌ６２４およびＰａｎｃ０５．０４細胞に、それぞれ、０．００３３μｇ／ｍｌまたは０．０１μｇ／ｍｌのＣＭＶ  ｐｐ６５ペプチドを３７℃で１時間パルスした。次いで、細胞を洗浄し、２０，０００細胞／ウェルで播種した。ベンチマーク抗ヒトＴＩＧＩＴ抗体およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）を、組み合わせて、または１０μｇ／ｍｌの対照ｈＩｇＧ４アイソタイプ抗体と共に培養物に添加した。ドナー４、ドナー７２、およびドナー２３４として示される３種の異なるドナー由来のヒトＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を１００，０００細胞／ウェルで追加した。共培養物を３７℃で１６時間インキュベートした。インキュベーション後、プレートをインキュベーターから取り出し、３０分間室温に平衡化させた。Ｂｉｏ−Ｇｌｏルシフェラーゼ基質（Ｐｒｏｍｅｇａ）を各ウェルに加え、混合物を遮光しながら室温で１０分間平衡化した。超高感度発光検出器を備えたＥｎｖｉｓｉｏｎマルチラベルリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）で、発光または相対光単位（ＲＬＵ）を定量化した。殺傷率を、［（処理抗体のＲＬＵ−培地のみのＲＬＵ）／培地のみのＲＬＵ］×１００によって算出した。
結果
図４３ＡおよびＢは、Ｍｅｌ６２４およびＰａｎｃ０５．０４細胞の殺傷に対する抗ＴＩＧＩＴ抗体およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）治療の効果をそれぞれ示す。単独で共培養物に添加すると、抗ＴＩＧＩＴ抗体およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の両方が、アイソタイプ対照抗体と比較して腫瘍細胞株の顕著なＴ細胞殺傷を誘導した。抗ＴＩＧＩＴ抗体について、特異的殺傷率は、Ｍｅｌ６２４細胞については１９〜４１％、試験した３種の異なるＣＭＶ反応性ドナーにわたるＰａｎｃ０５．０４細胞については３〜４４％の範囲であった。ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）については、特異的殺傷率は、Ｍｅｌ６２４細胞については１６〜２０％、Ｐａｎｃ０５．０４細胞については０．２１〜２９％の範囲であった。いくつかの場合では、抗ＴＩＧＩＴ抗体およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の併用治療において、腫瘍細胞殺傷に対する相加効果が観察された。
【０５６０】
腫瘍細胞殺傷に対する抗ＴＩＧＩＴ抗体およびＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の効果が用量依存的であるかを決定するために、各抗体について１０点、２倍希釈系列を用いてアッセイを実行し、抗ＴＩＧＩＴ抗体については０．５μｇ／ｍｌ、ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）については１０μｇ／ｍｌで開始した（図４４）。抗ＴＩＧＩＴ抗体、ＢＭ２６、またはＣＰＡ．９．０８６のいずれかをＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせると、Ｍｅｌ６２４殺傷は用量依存的に減少した。ＥＣ５０が２．６±１．７ｎＭであったＢＭ２６とＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）との組み合わせと比較して、ＥＣ５０が０．４０±０．４９ｎＭであったＣＰＡ．９．０８６とＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）との組み合わせについて、より強力な殺傷が観察された。
実施例７：ＫＤ生物学的測定
ＫｉｎＥｘＡ平衡実験を、２２℃でのＫｉｎＥｘＡ  ３２００機器（Ｓａｐｉｄｙｎｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｂｏｉｓｅ，ＩＤ，ＵＳＡ）を使用して実行した。組換えＨｉｓタグ化ヒトＴＩＧＩＴは、Ｓｉｎｏ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ（Ｂｅｉｊｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）から入手し、１倍のＰＢＳ中に再構成した。ＫｉｎＥｘＡ分析のための抗原および抗体試料は全て、１００μｇ／ｍＬの濾過したＢＳＡおよび０．０２％のアジ化ナトリウムを含む脱気ＰＢＳＴ緩衝液（０．０５％のｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ）中で調製した。使用した二次検出抗体は、ｐＨ７．４の１倍ＰＢＳ中０．５ｍｇ／ｍｌの原液から上記のＰＢＳＴ緩衝液（ＢＳＡおよびアジドを含む）中で４００〜７００倍に希釈した、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｏｕｒ  ６４７で標識したヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）であった。各ＫｉｎＥｘＡ実験について、約２０μｇのヒトＴＩＧＩＴを、５０ｍＭの炭酸ナトリウム、ｐＨ９．２の１ｍＬ中に希釈し、これを５０ｍｇのアズラクトンビーズ（Ｕｌｔｒａｌｉｎｋ  Ｓｕｐｐｏｒｔ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ，ＵＳＡ）に直接添加し、一晩４℃で揺動させた。揺動後、ビーズを１０ｍｇ／ｍＬのＢＳＡを含有するｐＨ８．５の１Ｍトリス緩衝液で１回すすぎ、同じ緩衝液中で室温で１時間揺動させる。結合したビーズをＫｉｎＥｘＡ機器のビーズリザーバーに加え、ＫｉｎＥｘＡ機器用の泳動緩衝液でもある０．０２％のアジ化ナトリウムを含有する１倍のＨＢＳ−Ｎ（０．０１ＭのＨｅｐｅｓ、０．１５ＭのＮａＣｌ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ））を用いて約３０ｍＬに希釈した。全ての抗原結合ビーズは、調製直後に使用した。
【０５６１】
ＣＰＡ．９．０８６（表１）に関するＫＤの２回の反復測定のために、９５７ａＭ〜２１２ｐＭの範囲の１４濃度のＴＩＧＩＴを、２．５ｐＭのＣＰＡ．９．０８６結合部位および１．８ｐＭのＣＰＡ．９．０８６結合部位を用いて室温で約７２時間平衡化した。ＣＰＡ．９．０８３について、４７８ａＭ〜１９６ｐＭの範囲の１４濃度のＴＩＧＩＴを、１．８ｐＭのＣＰＡ．９．０８３結合部位を用いて約７２時間平衡化した。ベンチマーク抗体の２連測定のために、ＢＭ２６  ｈＩｇＧ４、９．６ｆＭ〜３．５３ｎＭの範囲の１４濃度のＴＩＧＩＴを、２０ｐＭのＢＭ２６結合部位および８．０ｐＭのＢＭ２６結合部位を用いて約７２時間平衡化した。ＣＨＡ．９．５４７．１３について、１０．５ｆＭ〜２．２ｎＭの範囲の１４濃度のＴＩＧＩＴを、８ｐＭのｍＡｂ  ＣＨＡ．９．５４７．１３結合部位を用いて約７２時間平衡化した。全ての実験について平衡化した各試料のビーズパックを通って流入した体積は、流量０．２５ｍＬ／分で４ｍＬ〜１１ｍＬの範囲であった。ＫＤを推定し、曲線適合の９５％信頼区間（ＣＩ）を生成するために、ＫｉｎＥｘＡ  Ｐｒｏソフトウェア（バージョン４．２．１０；Ｓａｐｉｄｙｎｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて１：１の「標準平衡」結合モデルでデータを適合させた。
結果
ＣＰＡ．９．０８３およびＣＰＡ．９．０８６は共に、フェムトモル結合親和性でヒトＴＩＧＩＴに結合したのに対し、ＣＨＡ．９．５４７．１３およびＢＭ２６はピコモル親和性で結合した。したがって、ＣＰＡ．９．０８３およびＣＰＡ．９．０８６は、試験した４つの異なる抗体の中で最も高い親和性でヒトＴＩＧＩＴと結合した。
【０５６２】
【表７】
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【０５６３】
実施例８：免疫チェックポイントＴＩＧＩＴを標的とする新規の治療用抗体ＣＰＡ．９．０８６の開発および機能的特徴付け
背景：ＴＩＧＩＴは、異なる腫瘍型に浸潤するエフェクターおよび制御性ＣＤ４＋Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、エフェクターＣＤ８＋Ｔ細胞、およびＮＫ細胞を含むリンパ球で高度に発現される、共阻害性受容体である。報告されているリガンド、ポリオウイルス受容体（ＰＶＲ）、およびＰＶＲ様タンパク質（ＰＶＲＬ２およびＰＶＲＬ３）とのＴＩＧＩＴの関与により、リンパ球活性化が直接的に抑制される。ＰＶＲはまた、腫瘍中で広く発現され、これは、ＴＩＧＩＴ−ＰＶＲシグナル伝達軸ががんの主要な免疫逃避機構であり得ることを示唆している。ここでは、ＴＩＧＩＴを標的とする治療用抗体であるＣＰＡ．９．０８６の生物物理学的および機能的特徴付けを報告する。さらに、ＴＩＧＩＴと新たなチェックポイント阻害剤ＰＶＲＩＧとの共遮断により、Ｔ細胞応答が増大することを示す。
【０５６４】
材料および方法：ヒトファージディスプレイおよびマウスハイブリドーマ抗体発見計画を実施して、治療用抗ＴＩＧＩＴ抗体を作製した。得られた抗体を、高い親和性で組換えおよび細胞表面発現ヒトＴＩＧＩＴと結合する能力について評価した。カニクイザルおよびマウスＴＩＧＩＴに対する抗体の交差応答性も調査した。ヒトＴＩＧＩＴと高親和性で結合し、カニクイザルＴＩＧＩＴと交差応答する抗体のサブセットを、ＴＩＧＩＴとＰＶＲとの間の相互作用を遮断する能力についてさらに特徴付けた。遮断抗体を、単独で、または抗ＰＶＲＩＧ抗体ＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせて生体外で抗原特異的Ｔ細胞活性化を増強する能力についてスクリーニングした。
【０５６５】
結果：ヒトＴＩＧＩＴに高いフェムトモル親和性で結合する鉛抗体ＣＰＡ．９．０８６を特定した。この抗体は、試験したベンチマーク抗体よりも高い親和性でヒトＣＤ８＋Ｔ細胞で内因性発現されるＴＩＧＩＴと結合し、またカニクイザルおよびマウスＴＩＧＩＴの両方に対して交差応答性であった。生体外活性について試験すると、ＣＰＡ．９．０８６は、試験したベンチマーク抗体と同等またはそれ以上の効力でＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞によるサイトカイン分泌および腫瘍細胞殺傷を増大させた。ＣＰＡ．９．０８６と抗ＰＤ１抗体またはＣＨＡ．７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）との組み合わせにより、ＣＭＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞活性の増強が生じた。さらに、ＴＩＧＩＴは、末梢血と比較して固形腫瘍由来のＴｒｅｇおよびエフェクターＣＤ８＋Ｔ細胞で主に発現され、これらの集団がＣＰＡ．９．０８６によって優先的に標的化される可能性が高いことを示した。
【０５６６】
結論：現在、前臨床開発中である非常に高い親和性のアンタゴニストＴＩＧＩＴ抗体ＣＰＡ．９．０８６の開発を記載する。ＣＰＡ．９．０８６のフェムトモル親和性により、患者における投薬量を低下させ、投薬頻度を減少させることができると仮定する。ＣＰＡ．９．０８６は、単独で、または他のチェックポイント抗体と組み合わせて、ヒトＴ細胞活性化を増強することができる。したがって、データにより、がんの治療のためのＴＩＧＩＴ、ＰＤ１、およびＰＶＲＩＧの標的化の有用性を示す。
実施例９：併用治療に対する適応選択およびバイオマーカーを支持するためのヒトがんにおけるＴＩＧＩＴ／ＰＶＲＩＧ軸の分析
背景：ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴは、Ｃｏｍｐｕｇｅｎ’ｓ  Ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｐｌａｔｆｏｒｍによって免疫阻害受容体として同定され、抗腫瘍活性を阻害することが報告されている。ＰＶＲＩＧ（例えば、ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ））およびＴＩＧＩＴ（例えば、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ））に対する拮抗抗体の臨床開発を遂行している。ここでは、ＴＩＧＩＴ／ＰＶＲＩＧ軸における発現を特徴付けるために原発性ヒトがん組織および免疫細胞を分析し、これらの抗体に対する適応選択および組み合わせ戦略を支持する。
【０５６７】
方法：ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）を、ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴとその同族リガンド（それぞれＰＶＲＬ２およびＰＶＲ）との相互作用を遮断する能力に基づいて特定し、腫瘍細胞株との共培養において抗原特異的ＣＤ８Ｔ細胞活性化を増強する能力についてスクリーニングした。解離した膀胱、乳、結腸直腸、頭頸部、肺、腎臓、卵巣、前立腺、および胃腫瘍における受容体／リガンド発現を評価するために、免疫組織化学およびフローサイトメトリーを実行した。
【０５６８】
結果：調査したがんの中で、ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２の発現は、正常な隣接組織と比較して、子宮内膜、肺、腎臓、卵巣、頭頸部がんで最も高かった。解離した腫瘍からの、ＰＶＲＬ２発現がＣＤ４５−細胞および骨髄細胞で検出されたのに対し、ＰＶＲＩＧ発現はＴおよびＮＫ  ＴＩＬで検出された。ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ１の共発現分析により、ＰＶＲＩＧはＴＩＧＩＴおよびＰＤ１の両方と共発現し、ＰＶＲＩＧ＋ＴＩＧＩＴ＋ＰＤ１＋細胞がＣＤ８  ＴＩＬの大部分を占めることを示した。ＰＤ−Ｌ１と比較して、ＰＶＲＬ２発現はいくつかのがん種にわたりでより多く存在し、ＰＶＲＬ２の発現をＰＤ−Ｌ１陰性試料において検出した。生体外で、ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）とＰＤ１阻害剤またはＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）との組み合わせは、機能的活性の最大の増加をもたらすＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、およびＰＤ−１抗体の三重併用を用いてＣＤ８サイトカイン産生および細胞傷害活性を増強した。いくつかの免疫受容体は、ＣＤ８Ｔ細胞でのＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）によるＰＶＲＩＧ遮断の応答において誘導された。総合すると、これらのデータは、ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）についての適応選択および組み合わせ戦略、ならびに応答の指標となりうる潜在的なバイオマーカーを支持する。
【０５６９】
結論：要約すると、ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２はヒトがんの腫瘍微小環境で誘導され、単剤療法、またはＴＩＧＩＴ、およびＰＤ−１を標的とする抗体を用いた二重、または三重併用療法のいずれかとしてのＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のがん治療薬としての可能性を示す。これらのデータは、ＰＤ−１阻害剤に応答しないそれらの者を含む、免疫チェックポイント阻害剤応答性がん患者集団を拡大するこの組み合わせアプローチの可能性を強調する。
実施例１０：ＰＶＲＩＧ発現は、Ｔ細胞消耗と関連し、ＴＩＧＩＴと相乗作用して抗腫瘍応答を阻害する
摘要
独自の算定数値検出’プラットフォームを採用することにより、ネクチンファミリーの２つの阻害性受容体、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧで構成される新しいチェックポイント受容体ファミリーを特定した。ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴは両方ともＴ細胞の活性化時に発現するが、Ｔ細胞サブセットおよび発現動態の間で相対的な発現の違いを示す。ＰＶＲＩＧがＰＶＲＬ２と結合するのに対してＴＩＧＩＴはいくつかのリガンドと結合し、その中で、ＰＶＲがＴＩＧＩＴに対する主要な機能性リガンドであることを観察した。ＰＶＲＩＧの明確な発現プロファイルおよび独自の高親和性ＰＶＲＩＧ−ＰＶＲＬ２相互作用は、ＰＶＲＩＧが免疫の制御において独自の役割を果たしていることを示唆する。新規ＰＶＲＩＧ−／−マウスを使用して、ＰＶＲＩＧの遺伝的欠損により前臨床モデルにおいてＴ細胞応答が増加し、腫瘍増殖の減少をもたらすことを観察し、がんにおけるこの経路を標的とする可能性を示した。ＰＶＲＩＧアンタゴニストに対する臨床的ニッチをさらに定義するために、ヒト腫瘍試料におけるＴＩＧＩＴ／ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−１軸の発現を調査した。調査したヒトのがんの中で、腫瘍由来Ｔ細胞でのＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴの発現は、子宮内膜、肺、腎臓、および卵巣がんで最も高かった。ＰＶＲＩＧ、ＴＩＧＩＴ、およびＰＤ１の共発現分析は、ＰＶＲＩＧがＴＩＧＩＴおよびＰＤ１の両方と相関、共発現し、ＰＶＲＩＧ＋ＴＩＧＩＴ＋ＰＤ１＋細胞がＣＤ８腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の大部分を占めることを示した。興味深いことに、ＣＤ８＋ＴＩＬでのＴＩＧＩＴ発現ではなくＰＶＲＩＧ発現が、疲労したＥｏｍｅｓ高Ｔ−ｂｅｔ低表現型と関連していた。ＰＶＲ、ＰＶＲＬ２、およびＰＤ−Ｌ１においても相対的な発現レベルにおいて組織特異的な違いを示し、子宮内膜および卵巣腫瘍はＰＶＲまたはＰＤ−Ｌ１と比較してより高いＰＶＲＬ２発現の割合を有した。抗ＰＶＲＩＧ（ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ））および抗ＴＩＧＩＴ（ＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ））拮抗抗体を用いた初代ヒトＴＩＬの培養は、ＰＤ−１遮断と比較して、Ｔ細胞機能を同程度以上に増強した。図５４〜６０を参照されたい。
ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）のネクチンおよびネクチン様ファミリーにおける標的ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴ：結論
ＰＶＲＩＧおよびＴＩＧＩＴは非重複性チェックポイント受容体であり、がん治療のための有望な標的である
ＰＶＲよりＰＶＲＬ２が高い腫瘍において、ＰＶＲＩＧ／ＰＶＲＬ２の相互作用がより優位であり、ＰＶＲＩＧの直接的な標的化が必要となり得る
実施例１１：免疫腫瘍学におけるＰＶＲＩＧ経路の示差的な特徴、および複数固形腫瘍の治療におけるＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の可能性を示す新しい前臨床データ
データは、ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）についての臨床開発計画およびバイオマーカー戦略に対する理論的根拠をさらに強化する
ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＧＬＰ毒性研究において高用量で安全であることが示されている
腫瘍免疫学におけるＰＶＲＩＧ経路の示差的な特徴、および複数固形腫瘍の治療においてＰＶＲＩＧを標的とする画期的な治療抗体候補であるＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）の可能性を示す新しい前臨床データを提供する。２０１８年１月１６日から２０日に開催されるＫｅｙｓｔｏｎｅ  Ｓｙｍｐｏｓｉａ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ、Ａ３で発表されたデータ：Ｔ  Ｃｅｌｌ  Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ，Ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ（実施例９および関連図において提供される）は、免疫腫瘍学におけるＰＶＲＩＧ／ＴＩＧＩＴ軸の優位性を示し、単独療法、およびＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）との組み合わせとしてのＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）に対する会社の臨床開発プログラムおよびバイオマーカー戦略を支持する。
【０５７０】
「ＰＶＲＩＧ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｔ  Ｃｅｌｌ  Ｅｘｈａｕｓｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｓｙｎｅｒｇｉｚｅｓ  ｗｉｔｈ  ＴＩＧＩＴ  ｔｏ  Ｉｎｈｉｂｉｔ  Ａｎｔｉ−Ｔｕｍｏｒ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ」というタイトルのポスター（ポスター番号２０２８）は、ＰＶＲＩＧに対するリガンドであるＰＶＲＬ２の発現が、ＴＩＧＩＴに対するリガンドであるＰＶＲの発現よりも、肺、乳、子宮内膜、および卵巣を含むいくつかの腫瘍種においてより優位であることを示すデータが含まれる。これらの結果は、ＰＶＲＩＧが上昇したＰＶＲＬ２を発現する腫瘍を有する患者集団の主要なチェックポイントである可能性を示唆しており、その多くがＰＤ−１阻害剤に応答しない。したがって、これらの患者は、単独療法としてＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）に応答する高い可能性の増加を有し得る。
【０５７１】
さらに、発現研究により、ＰＶＲＩＧ、およびＴＩＧＩＴ、およびそれぞれのリガンドは、一般に上記の腫瘍種ならびに腎臓、および頭頸部がんにおいて発現されることが示されており、２つの経路が機能している患者集団において、抗腫瘍免疫応答を十分に刺激するためにＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧの両方の遮断が必要であり得ることを示す。さらに、複数の腫瘍種で見出された疲弊したＴＩＬが、３つのチェックポイント、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ−１、およびＰＶＲＩＧを大部分に共発現していることも示しており、かかる患者集団における三重併用の関連性をさらに支持する。
【０５７２】
ＰＶＲＩＧ−ＴＩＧＩＴ軸および様々な軸構成要素間の相互作用についての理解が深まることにより、マウスからヒトへの移行におけるＰＶＲＩＧ／ＰＶＲＬ２経路の進化も明らかになり、マウスにおける低下した活性経路がもたらされる。データは、この経路に関連するマウス生物学が、この経路が抗腫瘍免疫で及ぼし得るヒトへの影響を過小評価していることを明確に示しており、ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）が前臨床研究で見られたものよりもさらに大きな治療的影響を有し得ることを示唆する。
【０５７３】
「ＰＶＲＩＧ経路の潜在的な優位性、および発現プロファイルと組み合わせた前臨床試験で示されたＴＩＧＩＴおよびＰＤ−１経路との相互作用は、臨床第１ｂ相治験の開始準備を進めているなかで、単独療法、および二重、および三重併用としてＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）を試験する臨床アプローチを支持する生物学的根拠を提供する。全ての来訪者の治験デザインを維持しながら、ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）」に応答する可能性が最も高い患者を豊かにするためのバイオマーカー戦略は、これらの発現プロファイルによって推進されるであろうと、Ｃｏｍｐｕｇｅｎの社長およびＣＥＯであるＡｎａｔ  Ｃｏｈｅｎ−Ｄａｙａｇ博士は述べている。「ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）についてのＧＬＰ毒性研究の結果も奨励されており、高用量で安全であることを示している。データから、ＰＶＲＩＧ経路および画期的な治療抗体であるＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、現在の免疫チェックポイント阻害剤療法に応答しないまたは抵抗性の患者集団のニーズを満たすための新しいがん免疫療法の基礎として重要な臨床的価値を保持し得るという考えをもたらす」。
ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）およびＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）について
ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、Ｃｏｍｐｕｇｅｎにより発見された新規Ｂ７／ＣＤ２８様免疫チェックポイントの標的候補であるＰＶＲＩＧと高い親和性で結合するヒト化ハイブリドーマ抗体であり、この標的物とＰＶＲＬ２との相互作用の遮断を示す。ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）によるＰＶＲＩＧの遮断は、腫瘍微小環境でＴ細胞を活性化して抗腫瘍免疫応答を生成する機構の所望されるメカニズムと一致して、Ｔ細胞活性化の強力で再現可能な増強を示している。さらに、アンタゴニスト抗ＰＤ−１抗体と組み合わせたＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ヒトＴ細胞刺激に対して相乗効果を示しており、これらの組み合わせが腫瘍に対する免疫応答をさらに増強する可能性を示す。
【０５７４】
ＴＩＧＩＴを標的化するＣｏｍｐｕｇｅｎの抗体であるＣＰＡ．９．０８３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）は、ＣＨＡ７．５１８．１．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）と組み合わせて使用するために開発された。前臨床データは、軸の２つの負の共刺激アームであるＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧの二重遮断を強力に支持することにより、抗原刺激に対するＴ細胞応答がより強固になり、したがって、抗腫瘍免疫応答の増強がもたらされ得る。
実施例１２：三重併用治療を用いた生体内での有効性および生存
論理的根拠および目的
この実施例では、マウスＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−Ｌ１遮断の組み合わせが、同系マウス腫瘍モデルにおいて腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ）および生存を有意に増強できるかについてを提供する。
プロトコル
動物
５週齢の雌マウスは、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。マウスをＣｏｍｐｕｇｅｎ  ＵＳＡでの動物施設で飼育し、餌および水を自由を提供し、研究開始以前に最低６日順応させた。全ての研究は、Ｃｏｍｐｕｇｅｎ  ＵＳＡ  （Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）のＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認されたものであった。
同系マウス腫瘍モデル
５×１０５個のＣＴ２６結腸がん性（ＡＴＣＣ）細胞を、雌のＢａｌｂ／ｃマウスの右脇腹内の皮下に（ｓ．ｃ．）注入し、最大８日増殖させた。３０〜６０ｍｍ３と測定された腫瘍を有するマウスを無作為化（無作為化の日を０日目と示す）し、群毎に１０匹のマウスで３つの群とした。動物は、２００μＬのマウスＩｇＧ１（ｍＩｇＧ１）アイソタイプ対照抗体、抗ＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１抗体および抗ＰＶＲＩＧ  ｍＩｇＧ１抗体の二重併用、または抗ＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１、抗ＰＶＲＩＧ  ｍＩｇＧ１、および抗ＰＤ−Ｌ１  ｍＩｇＧ１抗体の三重併用のそれぞれを腹腔内（ｉ．ｐ．）注入により受けた。抗ＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１抗体は、ＣＰＡ．９．０８６のヒト可変重および軽鎖とｍＩｇＧ１の定常領域とを含むＣＰＡ．９．０８６のキメラ形式である。抗体を、８日目で開始されそれから週に３回、２週にわたり１０ｍｇ／ｋｇの抗ＴＩＧＩＴ、１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＶＲＩＧ、および３ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ−Ｌ１の準最適用量の固定用量で投与した。腫瘍の成長を、長さ（Ｌ）および幅（Ｗ）のキャリパー測定によって決定し、腫瘍サイズは式（ＬｘＷ２）／２で計算した。腫瘍サイズは、研究のエンドポイントとして指定された２０００ｍｍ３を超えることは許可されず、マウスはその後安楽死させた。
統計分析
反復測定を伴う二元配置ＡＮＯＶＡ、続いて選択された対の群についての反復測定を伴う二元配置ＡＮＯＶＡを、プリズムフトウェアを使用して行った。全ての研究動物が生存していた最後の日に測定した腫瘍体積を比較することによって、腫瘍増殖測定値の分析を行った。腫瘍のないマウスの割合の統計的差異を、Ｌｏｇ  Ｒａｎｋ  Ｍａｎｔｅｌ−Ｃｏｘ試験によって決定した。
結果と要約
この研究では、３つの異なる免疫チェックポイント経路である、ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲＩＧ、およびＰＤ−Ｌ１を遮断する効果を、マウスにおけるＴＧＩおよび生存で調査した。マウス結腸がん性ＣＴ２６モデルを使用した、抗ＴＩＧＩＴ  ｍＩｇＧ１と抗ＰＶＲＩＧ  ｍＩｇＧ１の組み合わせは、アイソタイプ対照抗体を投与したマウスと比較して、小さいが有意なＴＧＩ（２５日目に２０．７％のＴＧＩ）をもたらした。３つの抗体を組み合わせた場合に、ＴＧＩは２５日目で５８．３％に増加し、これは二重併用と比較して統計的に有意な有効性であった（２５日目の二元配置ＡＮＯＶＡでｐ＜０．００１）。研究の終了（２８日目）までに腫瘍のない（ＣＲ）マウスは存在しなかったが、三重併用における有効性の増強は、二重併用と比較して生存の増加と関連した。三重遮断は、研究のエンドポイント（２８日目）での９０％の生存を伴う全生存の有意な増強を示した。ここで報告された抗腫瘍効果に加えて、観察された全ての群において著しい体重変化はなかった（データは図示せず）。総合すると、三重併用は忍容性が高く、ＴＩＧＩＴおよびＰＶＲＩＧ遮断のみの二重併用と比較した生体内での結腸がん性において優れた抗腫瘍効果をもたらした。図６１を参照されたい。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図３Ｆ】
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【図３Ｇ】
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【図３Ｈ】
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【図３Ｉ】
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【図３Ｊ】
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【図３Ｋ】
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【図３Ｌ】
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【図３Ｍ】
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【図３Ｎ】
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【図３Ｏ】
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【図３Ｐ】
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【図３Ｑ】
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【図３Ｒ】
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【図３Ｓ】
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【図３Ｔ】
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【図３Ｕ】
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【図３Ｖ】
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【図３Ｗ】
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【図３Ｘ】
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【図３Ｙ】
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【図３Ｚ】
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【図３ＡＡ】
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【図３ＢＢ】
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【図３ＣＣ】
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【図３ＤＤ】
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【図３ＥＥ】
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【図３ＦＦ】
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【図３ＧＧ】
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【図３ＨＨ】
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【図３ＩＩ】
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【図３ＪＪ】
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【図３ＫＫ】
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【図３ＬＬ】
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【図３ＮＮ】
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【図３ＯＯ】
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【図３ＰＰ】
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【図３ＱＱ】
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【図３ＲＲ】
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【図３ＳＳ】
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【図３ＴＴ】
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【図３ＵＵ】
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【図３ＶＶ】
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【図３ＷＷ】
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【図３ＸＸ】
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【図３ＹＹ】
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【図３ＡＡＡ】
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【図３ＢＢＢ】
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【図３ＣＣＣ】
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【図３ＤＤＤ】
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【図３ＥＥＥ】
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【図３ＦＦＦ】
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【図３ＧＧＧ】
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【図３ＨＨＨ】
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【図３ＩＩＩ】
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【図３ＪＪＪ】
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【図３ＫＫＫ】
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【図３ＬＬＬ】
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【図３ＭＭＭ】
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【図３ＯＯＯ】
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【図３ＰＰＰ】
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【図３ＱＱＱ】
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【図３ＲＲＲ】
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【図３ＳＳＳ】
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【図３ＴＴＴ】
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【図３ＵＵＵ】
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【図３ＶＶＶ】
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【図３ＷＷＷ】
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【図３ＸＸＸ】
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【図３ＹＹＹ】
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【図３ＺＺＺ】
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【図３ＡＡＡＡ】
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【図３ＢＢＢＢ】
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【図３ＣＣＣＣ】
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【図３ＤＤＤＤ】
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【図３ＥＥＥＥ】
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【図３ＦＦＦＦ】
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【図３ＧＧＧＧ】
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【図３ＨＨＨＨ】
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【図３ＩＩＩＩ】
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【図３ＪＪＪＪ】
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【図３ＫＫＫＫ】
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【図３ＬＬＬＬ】
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【図３ＭＭＭＭ】
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【図３ＮＮＮＮ】
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【図３ＯＯＯＯ】
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【図３ＰＰＰＰ】
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【図３ＱＱＱＱ】
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【図３ＲＲＲＲ】
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【図３ＳＳＳＳ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図５Ｅ】
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【図５Ｆ】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図７Ｆ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１１Ｄ】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８Ａ】
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【図２８Ｂ】
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【図２８Ｃ】
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【図２８Ｄ】
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【図２８Ｅ】
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【図２８Ｆ】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１−１】
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【図４１−２】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９−１】
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【図４９−２】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
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【図６１Ａ】
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【図６１Ｂ】
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【図６１Ｃ】
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【図６２Ａ】
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【図６２Ｂ】
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【図６２Ｃ】
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【図６２Ｄ】
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【図６２Ｅ】
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【図６２Ｆ】
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【図６２Ｇ】
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【図６２Ｈ】
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【図６２Ｉ】
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【図６３Ａ】
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【図６３Ｂ】
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【図６３Ｃ】
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【図６３Ｄ】
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【図６３Ｅ】
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【図６３Ｆ】
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【図６３Ｇ】
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【図６３Ｈ】
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【図６３Ｉ】
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【図６３Ｊ】
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【図６３Ｋ】
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【図６３Ｌ】
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【図６３Ｍ】
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【図６３Ｎ】
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【図６３Ｏ】
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【図６３Ｐ】
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【図６３Ｑ】
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【図６３Ｒ】
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【図６３Ｓ】
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【図６３Ｔ】
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【図６３Ｕ】
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【図６３Ｖ】
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【図６３Ｗ】
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【図６３Ｘ】
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【図６３Ｙ】
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【図６３Ｚ】
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【図６３ＡＡ】
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【図６３ＢＢ】
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【図６３ＣＣ】
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【図６３ＤＤ】
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【図６３ＥＥ】
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【図６３ＦＦ】
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【図６３ＧＧ】
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【図６３ＨＨ】
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【図６３ＩＩ】
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【図６３ＪＪ】
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【図６３ＫＫ】
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【図６３ＬＬ】
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【図６３ＭＭ】
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【図６３ＮＮ】
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【図６３ＯＯ】
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【図６３ＰＰ】
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【図６３ＱＱ】
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【図６３ＲＲ】
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【図６３ＳＳ】
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【図６３ＴＴ】
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【図６３ＵＵ】
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【図６３ＶＶ】
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【図６３ＷＷ】
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【図６３ＸＸ】
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【図６３ＹＹ】
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【図６３ＺＺ】
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【図６３ＡＡＡ】
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【図６３ＢＢＢ】
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【図６３ＣＣＣ】
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【図６３ＤＤＤ】
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【図６３ＥＥＥ】
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【図６３ＦＦＦ】
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【図６３ＧＧＧ】
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【図６３ＨＨＨ】
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【図６３ＩＩＩ】
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【図６３ＪＪＪ】
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【図６３ＫＫＫ】
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【図６３ＬＬＬ】
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【図６３ＭＭＭ】
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【図６３ＮＮＮ】
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【図６３ＯＯＯ】
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【図６３ＰＰＰ】
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【図６３ＱＱＱ】
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【図６３ＲＲＲ】
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【図６３ＳＳＳ】
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【図６３ＴＴＴ】
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【図６３ＵＵＵ】
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【図６３ＶＶＶ】
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【図６３ＷＷＷ】
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【図６３ＸＸＸ】
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【図６３ＹＹＹ】
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【図６３ＺＺＺ】
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【図６３ＡＡＡＡ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
2020521778.tif 000278
2020521778.tif 000279
2020521778.tif 000280