(57)【要約】  本発明の技術は、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および／または前立腺がんの画像化および／または処置に有用な化合物ならびにこうした化合物を含めた組成物を提供する。該化合物は、以下の式（１）またはその薬学的に許容される塩によって表される。【選択図】図１
2020516611.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
2020516611.tif 000094
（式中、
ＡＢＤは、抗原結合ドメインであり；
Ｗ１は、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｎ−または−（ＣＨ２）ｏ−ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、
【化２】
2020516611.tif 000095
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つは、各々Ｈであり；
Ｘ１は、非存在、Ｏ、ＳまたはＮＨであり；
Ｌ１は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ５−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−アリーレン−、−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、アミノ酸、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個もしくは１０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであり、ここで、ｒは、０、１、２、３、４、５、６、７、８または９であり、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、各々独立して、Ｈ、アルキルまたはアリールであり；
Ｔｏｘは、細胞毒含有および／または画像化剤含有ドメインであり；
Ｌ２は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個もしくは２０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであり、ここで、ｓは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８または１９であり；
Ａｌｂは、アルブミン結合部分であり；
ｍは、０または１であり；
ｎは、１または２であり；
ｏは、１または２であり；
ｐは、０、１、２または３であり、ただしｐが０である場合、Ｘ１は非存在であり；
ｑは、１または２である）
の化合物、またはその薬学的に許容される塩および／もしくは溶媒和物。
【請求項２】
式Ｉの化合物が、式ＩＩ
【化３】
2020516611.tif 000096
（式中、
Ｐ１、Ｐ２およびＰ３は、各々独立して、Ｈ、メチル、ベンジル、４−メトキシベンジルまたはｔｅｒｔ−ブチルであり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、
【化４】
2020516611.tif 000097
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つは、各々Ｈであり；
Ｒａｄは、金属イオンを含むことができる、任意選択で金属イオンをさらに含むことができる部分である）
またはその薬学的に許容される塩および／もしくは溶媒和物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が、各々独立して、Ｈまたはｔｅｒｔ−ブチルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が、各々独立してＨである、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒａｄが、金属イオンをキレート化するキレーターを含む、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
金属イオンが、１７７Ｌｕ３＋、１７５Ｌｕ３＋、４５Ｓｃ３＋、６６Ｇａ３＋、６７Ｇａ３＋，６８Ｇａ３＋、６９Ｇａ３＋，７１Ｇａ３＋、８９Ｙ３＋，８６Ｙ３＋、８９Ｚｒ４＋、９０Ｙ３＋、９９ｍＴｃ＋１、１１１Ｉｎ３＋、１１３Ｉｎ３＋、１１５Ｉｎ３＋、１３９Ｌａ３＋、１３６Ｃｅ３＋、１３８Ｃｅ３＋、１４０Ｃｅ３＋、１４２Ｃｅ３＋、１５１Ｅｕ３＋、１５３Ｅｕ３＋、１５２Ｄｙ３＋、１４９Ｔｂ３＋、１５９Ｔｂ３＋、１５４Ｇｄ３＋、１５５Ｇｄ３＋、１５６Ｇｄ３＋、１５７Ｇｄ３＋、１５８Ｇｄ３＋、１６０Ｇｄ３＋、１８８Ｒｅ＋１、１８６Ｒｅ＋１、２１３Ｂｉ３＋、２１１Ａｔ＋、２１７Ａｔ＋、２２７Ｔｈ４＋、２２６Ｔｈ４＋、２２５Ａｃ３＋、２３３Ｒａ２＋、１５２Ｄｙ３＋、２１３Ｂｉ３＋、２１２Ｂｉ３＋、２１１Ｂｉ３＋、２１２Ｐｂ２＋、２１２Ｐｂ４＋、２５５Ｆｍ３＋、またはウラン−２３０である放射性核種である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
金属イオンが、２１３Ｂｉ３＋、２１１Ａｔ＋、２２５Ａｃ３＋、１５２Ｄｙ３＋、２１２Ｂｉ３＋、２１１Ｂｉ３＋、２１７Ａｔ＋、２２７Ｔｈ４＋、２２６Ｔｈ４＋、２３３Ｒａ２＋、２１２Ｐｂ２＋、および２１２Ｐｂ４＋から選択されるアルファ放出放射性核種である、請求項５に記載の化合物。
【請求項８】
前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を過剰発現する哺乳動物組織を検出するための、請求項１から７のいずれか一項の化合物の有効量、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項９】
哺乳動物組織が、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、請求項８に記載に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
がんを画像化するために、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物の有効量を対象に投与すること；および
投与に続いて、ポジトロン放出、ポジトロン放出および消滅からのガンマ線、ならびにポジトロン放出によるチェレンコフ放射線の１つまたは複数を検出すること
を含む方法。
【請求項１１】
がんが、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
対象が、前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を過剰発現する哺乳動物組織を患っている疑いがある、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
哺乳動物組織が、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
化合物を投与することが、非経口投与を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を過剰発現する哺乳動物組織を処置するための、請求項１から７のいずれか一項の化合物の有効量、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１６】
哺乳動物組織が、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、請求項１５に記載に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
がんを処置するための請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物の有効量を対象に投与することを含む方法。
【請求項１８】
がんが、神経膠腫、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
化合物を投与することが、非経口投与を含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
哺乳動物対象への放射線治療薬の投与の約４時間から約２４時間内に１以上である腎臓活性に対する腫瘍活性の比が観察される哺乳動物対象において、インビボにおいて放射線治療薬の組織分布を達成する方法であって、
放射線治療薬を哺乳動物対象に投与することを含み；
放射線治療薬が、前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を標的化する第１の部分、放射性核種を保有する第２の部分、および血清アルブミンへの親和性を有する第３の部分を含み、第１の部分は、第１の共有結合性リンカーによって第２の部分から分離されており、第３の部分は、第２の共有結合性リンカーによって第２の部分から分離されており、
ここで、第１の部分と第２の部分との間の分離（第１の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数に基づく）は、約８個の原子から約４０個の原子であり、第３の部分と第１および第２の部分との間の分離（第２の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数に基づく）は、約１０個の原子から約１００個の原子である、方法。
【請求項２１】
放射線治療薬の投与の約４時間から約２４時間後に、哺乳動物対象の画像を得ることをさらに含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
１以上である腎臓活性に対する腫瘍活性の比が、放射線治療薬の投与後最大約２４時間まで続く、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
放射線治療薬の投与の約２４時間から約４８時間後に、放射性核種活性が、哺乳動物対象の唾液腺において実質的に観察されない、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
第１の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数が、約１０個の原子から約３０個の原子の範囲である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
第２の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数が、約１５個の原子から約４０個の原子の範囲である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２６】
投与が、静脈内投与を含む、請求項２０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照文献
この出願は、２０１７年４月５日に出願された米国仮特許出願第６２／４８２，０３８号および２０１７年１０月１９日に出願された米国仮特許出願第６２／５７４，７２０号の利益を主張し、これらの各々の全開示は、ありとあらゆる目的で参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
米国政府のライセンス権
この発明は、国立衛生研究所によって授与された認可番号ＵＬ１ＴＲ００４５７に基づく政府支援で行われた。政府は、本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
本発明の技術は、一般に、（１）抗原結合ドメイン、（２）細胞毒含有および／または画像化剤含有ドメイン；ならびに（３）アルブミン結合部分を含む三官能性構築物に関する。本発明の技術は、こうした化合物を含めた組成物、ならびに画像化および／または抗腫瘍治療における使用の方法も提供する。例えば、本発明の技術の化合物および組成物は、有用な診断治療化合物である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
ある態様において、式Ｉ：
【０００５】
【化１】
2020516611.tif 000003
（式中、
ＡＢＤは、抗原結合ドメインであり；
Ｗ１は、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｎ−または−（ＣＨ２）ｏ−ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、
【０００６】
【化２】
2020516611.tif 000004
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つは、各々Ｈであり；
Ｘ１は、非存在、Ｏ、ＳまたはＮＨであり；
Ｌ１は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ５−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−アリーレン−、−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、アミノ酸、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個もしくは１０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであり、ここで、ｒは、０、１、２、３、４、５、６、７、８または９であり、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、各々独立して、Ｈ、アルキルまたはアリールであり；
Ｔｏｘは、細胞毒含有および／または画像化剤含有ドメインであり；
Ｌ２は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個もしくは２０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであり、ここで、ｓは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８または１９であり；
Ａｌｂは、アルブミン結合部分であり；
ｍは、０または１であり；ｎは、１または２であり；ｏは、１または２であり；ｐは、０、１、２または３であり、ただしｐが０である場合、Ｘ１は非存在であり；ｑは、１または２である）
の化合物またはその薬学的に許容される塩および／もしくは溶媒和物が提供される。
【０００７】
本明細書における任意の実施形態において、式Ｉの化合物は、式ＩＩ
【０００８】
【化３】
2020516611.tif 000005
（式中、
Ｐ１、Ｐ２およびＰ３は、各々独立して、Ｈ、メチル、ベンジル、４−メトキシベンジルまたはｔｅｒｔ−ブチルであり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、
【０００９】
【化４】
2020516611.tif 000006
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つは、各々Ｈであり；
Ｒａｄは、金属イオンを含むことができる、任意選択で金属イオンをさらに含むことができる部分であり；ｐは、０、１、２または３であり、ただしｐが０である場合、Ｘ１は非存在であり；ｑは、１または２である）
の化合物またはその薬学的に許容される塩および／もしくは溶媒和物であってよい。
【００１０】
別の態様において、本発明の技術は、本明細書で開示される式Ｉの化合物（またはその薬学的に許容される塩）の実施形態の１つのいずれか、および薬学的に許容される担体または１種もしくは複数の賦形剤もしくは充填剤を含む組成物（例えば、医薬組成物）および医薬を提供する。
【００１１】
別の態様において、本発明の技術は、本明細書で開示される式Ｉの化合物（またはその薬学的に許容される塩）の実施形態のいずれか１つを含むものの有効量を、処置および／または画像化が必要な対象に投与することによる、処置の方法および／または画像化の方法を提供する。
【００１２】
別の態様において、本発明の技術は、哺乳動物対象におけるインビボにおいて放射線治療薬の組織分布を達成する方法であって、ここで、１以上である腎臓活性に対する腫瘍活性の比は、哺乳動物対象への放射線治療薬の投与の約４時間から約２４時間内に観察され、該方法は、哺乳動物対象に放射線治療薬を投与することを含み；放射線治療薬は、前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を標的化する第１の部分、放射性核種を保有する第２の部分、および血清アルブミンへの親和性を有する第３の部分を含み、第１の部分は、第１の共有結合性リンカーによって第２の部分から分離されており、第３の部分は、第２の共有結合性リンカーによって第２の部分から分離されており、ここで、第１の部分と第２の部分との間の分離は（第１の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数に基づく）、約８個の原子から約４０個の原子であり、第３の部分と第１および第２の部分との間の分離は（第２の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数に基づく）、約１０個の原子から約１００個の原子である、方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】注入後１時間および３時間の両方で６８Ｇａ−ＲＰＳ−０５５（上）または６８Ｇａ−ＤＫＦＺ−６１７（下）を注入されたマウスのＰＥＴ画像を提供する図である。全ての画像は、右肩（矢）に小さいＬＮＣａＰ腫瘍を保有する同じマウスのものである。画像は、Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｉｎｖｅｏｎ  μＰＥＴ／μＣＴシステム（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｍｕｎｉｃｈ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して連続した日に撮られた。全ての画像は、１ｃｃ組織当たり最大４％の注入用量までウィンドウ化され、減衰補正および用量補正されている。
【図２】注入後１時間（上）および３時間（下）の両方で６８Ｇａ−ＲＰＳ−０５５（左パネル）または６８Ｇａ−ＲＰＳ−０５６（右パネル）を注入されたマウスのＰＥＴ画像を提供する図である。全ての画像は、それらの右肩に小さいＬＮＣａＰ腫瘍を保有する同じマウスのものである。画像は、Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｉｎｖｅｏｎ  μＰＥＴ／μＣＴシステム（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｍｕｎｉｃｈ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して連続した日に撮られた。全ての画像は、１ｃｃ組織当たり最大２０％の注入用量までウィンドウ化され、減衰補正および用量補正されている。
【図３】注入後４時間（上）および３時間（下）の両方で１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０５５を注入されたマウスのＳＰＥＣＴ画像を提供する図である。全ての画像は、それらの右肩に小さいＬＮＣａＰ腫瘍を保有する同じマウスのものである（左パネルおよび右パネル）。画像は、Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｉｎｖｅｏｎ  μＳＰＥＣＴ／μＣＴシステム（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｍｕｎｉｃｈ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して同じ日に撮られた。
【図４】ＬＮＣａＰ腫瘍異種移植片を保有し、６８Ｇａ−ＲＰＳ−０６１、６８Ｇａ−ＰＳＭＡ−６１７または６８Ｇａ−ＲＰＳ−０３０のいずれかを静脈内注入されたＢＡＬＢ／Ｃ  ｎｕ／ｎｕマウスのＰＥＴ画像を示す図である。Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｉｎｖｅｏｎ  μＳＰＥＣＴ／μＣＴシステム（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｍｕｎｉｃｈ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、マウスを、注入後１時間（左）および３時間（右）で連続した日に画像化した。
【図５Ａ】マウスにおける静脈内注入に続く選択臓器について、２２５Ａｃ（ＮＯ３）３（図５Ａ）の体内分布を例示するヒストグラムを提供する図である。成体Ｃ５７ＢＬ／６匹のマウスを、注入後１５分、１時間または５時間に屠殺した。各時点についての値は、平均％ＩＤ／ｇ±１ＳＤとして示される。
【図５Ｂ】マウスにおける静脈内注入に続く選択臓器について、［２２５Ａｃ（ｍａｃｒｏｐａ）］＋（図５Ｂ）の体内分布を例示するヒストグラムを提供する図である。成体Ｃ５７ＢＬ／６匹のマウスを、注入後１５分、１時間または５時間に屠殺した。各時点についての値は、平均％ＩＤ／ｇ±１ＳＤとして示される。
【図５Ｃ】マウスにおける静脈内注入に続く選択臓器について、［２２５Ａｃ（ＤＯＴＡ）］−（図５Ｃ）の体内分布を例示するヒストグラムを提供する図である。成体Ｃ５７ＢＬ／６匹のマウスを、注入後１５分、１時間または５時間に屠殺した。各時点についての値は、平均％ＩＤ／ｇ±１ＳＤとして示される。
【図６】ＬＮＣａＰ腫瘍異種移植片マウスにおける静脈内注入に続く２２５Ａｃ−ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０の体内分布を例示する図である。マウスを、注入後４時間、２４時間または９６時間に屠殺した。各時点についての値は、平均％ＩＤ／ｇ±１ＳＥＭとして示される。
【図７】注入後１時間、３時間、６時間および２４時間に６６Ｇａ標識化トレーサーを用いてＬＮＣａＰ異種移植片マウスのＰＥＴ画像を提供する図である。マウスに、トレーサー０．５６〜５．４ＭＢｑ（１５〜１４５μＣｉ）のボーラス注入を静脈内注入した。注入されたリガンドの総質量は４μｇであった。画像化する前に、マウスはイソフルランで麻酔し、次いで３０分にわたり画像化した。画像は、減衰についておよび注入された活性について補正された。
【図８】１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６１、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６９、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６６、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６７および１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の体内分布を提供する図である。ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍を保有する雄性胸腺欠損ヌードマウス（ｎ＝１時点につき５）に、標識化化合物３４８〜８５１ｋＢｑ（９．４〜２３μＣｉ）を静脈内注入し、注入後４時間、２４時間および９６時間に屠殺した。注入されたリガンドの総質量は、３７〜５０ｎｇ（２３〜２５ｐｍｏｌ）であった。
【図９】注入後４時間、２４時間および９６時間での異なる１７７Ｌｕ標識化リガンドの血液プール活性の比較を提供する図である。誤差はＳＥＭとして表される。ＲＰＳリガンドは、増加するサイズの順番に呈示される。
【図１０】ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍を保有する雄性胸腺欠損ヌードマウスにおける１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６１、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６６、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６７、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６９の腫瘍および腎臓取込みの時間−活性曲線（ＴＡＣ）を提供する図である。取込みは％ＩＤ／ｇとして表される。
【図１１】対応する１７７Ｌｕ標識化化合物を注入され、９６時間にわたって研究された雄性ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍保有マウスの腫瘍における相対用量積分の比較を提供する図である。値は１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７に正規化されている。
【図１２】ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍を保有する雄性ＢＡＬＢ／Ｃ  ｎｕ／ｎｕマウスにおける血液、正常組織および腫瘍中の活性の取込みを示す図である。マウス（ｎ＝４／時点）に、１０５ｋＢｑの２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４を静脈内注入し、注入後４時間、２４時間、７日、１４日および２１日に屠殺した。
【図１３】ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍を保有し、ａ）１３８ｋＢｑ２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４；ｂ）７４ｋＢｑ２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４；ｃ）３７ｋＢｑ２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４；ｄ）１３３ｋＢｑ２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡ；およびｅ）ビヒクルで処置された個々の雄性ＢＡＬＢ／Ｃ  ｎｕ／ｎｕマウスの平均腫瘍体積における変化をプロットする図である。
【図１４】１３８ｋＢｑの２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４（左）または７４ｋＢｑの２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４（右）で処置されたマウスの６８Ｇａ−ＰＳＭＡ−１１  μＰＥＴ／ＣＴ画像を提供する図である。画像は、注入後６０分に獲得され、減衰についておよび注入された活性について補正されている。
【図１５】マウスの全生存を例示するカプラン・マイヤー曲線をプロットする図である。＃＃＝投与された２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡの活性。マウスを、腫瘍体積が２０００ｍｍ３を超えた時に屠殺した。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下の用語は、全体にわたって、下記で定義される通りに使用される。
【００１５】
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用される場合、要素を記載する文脈において（殊に、以下の請求項の文脈において）「１つの（ａ）」および「１つの（ａｎ）」などの単数形の冠詞、および「その（ｔｈｅ）」、ならびに同様の参照対象は、別段に本明細書において表示されていない限りまたは文脈によって明らかに矛盾していない限り、単数および複数の両方を包含すると解釈されるべきである。本明細書における値の範囲の記述は、別段に本明細書において表示されていない限り、範囲内に入る各別個の値を個々に言及する簡略な方法として働くと単に意図され、各別個の値は、それが本明細書において個々に記述されているかのように本明細書に組み込まれる。本明細書に記載される全ての方法は、別段に本明細書において表示されていない限りまたは別段に文脈と明らかに矛盾していない限り、任意の適当な順序で行うことができる。本明細書に提供されるありとあらゆる例または例証的な言葉（例えば、「など」）の使用は、実施形態をより良好に明らかにすると単に意図され、別段に明記されていない限り、請求項の範疇に制限を設けることはない。本明細書における言葉は、任意の非請求要素を必須として示していると解釈されるべきでない。
【００１６】
本明細書で使用される場合、「約」は当業者によって理解されており、それが使用される文脈に依存してある程度変動する。当業者に明らかでない用語の使用があるならば、それが使用される文脈を前提として、「約」は、特別な用語のプラスまたはマイナス最大１０％までを意味する。
【００１７】
一般に、ある特定の元素、例えば水素またはＨへの言及は、その元素の全ての同位体を含むと意味される。例えば、Ｒ基が水素またはＨを含むと定義されるならば、それは重水素およびトリチウムも含む。したがって、トリチウム、Ｃ１４、Ｐ３２およびＳ３５などの放射性同位体を含む化合物は、本発明の技術の範疇内である。こうした標識を本発明の技術の化合物に挿入するための手順は、本明細書における本開示に基づいて当業者に容易に明らかである。
【００１８】
一般に、「置換された」は、そこに含有される水素原子への１つまたは複数の結合が、非水素原子または非炭素原子への結合によって置き換えられる、下記で定義される通りの有機基（例えば、アルキル基）を指す。置換された基は、炭素原子（単数または複数）または水素（単数または複数）原子への１つまたは複数の結合が、ヘテロ原子への二重結合または三重結合を含めて１つまたは複数の結合によって置き換えられる基も含む。したがって、置換された基は、別段に特定されていない限り、１個または複数の置換基で置換される。一部の実施形態において、置換された基は、１個、２個、３個、４個、５個または６個の置換基で置換される。置換基の例としては、以下：ハロゲン（即ち、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ）；ヒドロキシル；アルコキシ基、アルケノキシ基、アリールオキシ基、アラルキルオキシ基、ヘテロシクリル基、ヘテロシクリルアルキル基、ヘテロシクリルオキシ基およびヘテロシクリルアルコキシ基；カルボニル（オキソ）；カルボキシレート；エステル；ウレタン；オキシム；ヒドロキシルアミン；アルコキシアミン；アラルコキシアミン；チオール；スルフィド；スルホキシド；スルホン；スルホニル；ペンタフルオロスルファニル（即ち、ＳＦ５）、スルホンアミド；アミン；Ｎ−オキシド；ヒドラジン；ヒドラジド；ヒドラゾン；アジド；アミド；尿素；アミジン；グアニジン；エナミン；イミド；イソシアネート；イソチオシアネート；シアネート；チオシアネート；イミン；ニトロ基；およびニトリル（即ち、ＣＮ）などが挙げられる。
【００１９】
置換されたシクロアルキル基、アリール基、ヘテロシクリル基およびヘテロアリール基など、置換された環基は、水素原子への結合が炭素原子への結合と置き換えられる環および環系も含む。そのため、置換されたシクロアルキル基、アリール基、ヘテロシクリル基およびヘテロアリール基は、下記で定義される通りの置換または非置換のアルキル基、アルケニル基およびアルキニル基で置換されていてもよい。
【００２０】
本明細書で使用される場合、Ｃ１〜Ｃ１２、Ｃ１〜Ｃ８またはＣ１〜Ｃ６などのＣｍ−Ｃｎは、基の前に使用される場合、ｍ個からｎ個の炭素原子を含有するその基を指す。
【００２１】
アルキル基は、１個から１２個の炭素原子、典型的には１個から１０個の炭素、または一部の実施形態において、１個から８個、１個から６個、もしくは１個から４個の炭素原子を有する直鎖および分岐鎖のアルキル基を含む。直鎖アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基およびｎ−オクチル基などの基が挙げられる。分岐アルキル基の例としては、以下に限定されないが、イソプロピル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ネオペンチル基、イソペンチル基および２，２−ジメチルプロピル基が挙げられる。アルキル基は、置換または非置換であってよい。代表的な置換アルキル基は、上記で列挙されたものなどの置換基で１回または複数回置換されていてよく、これらに限定されないが、ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、ヒドロキシアルキル、チオアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノアルキル、アルコキシアルキルおよびカルボキシアルキルなどを含む。
【００２２】
シクロアルキル基は、環（単数または複数）中に３個から１２個の炭素原子、あるいは一部の実施形態において、３個から１０個、３個から８個、または３個から４個、５個もしくは６個の炭素原子を有する単環式、二環式または三環式のアルキル基を含む。例証的な単環式シクロアルキル基としては、以下に限定されないが、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基およびシクロオクチル基が挙げられる。一部の実施形態において、シクロアルキル基は、３個から８個の環員を有するが、他の実施形態において、環炭素原子の数は、３個から５個、３個から６個、または３個から７個の範囲である。二環式および三環式の環系は、架橋シクロアルキル基および縮合環の両方、例えば、以下に限定されないが、ビシクロ［２．１．１］ヘキサン、アダマンチルおよびデカリニルなどを含む。シクロアルキル基は、置換または非置換であってよい。置換シクロアルキル基は、上記で定義される通りの非水素基および非炭素基で１回または複数回置換されていてよい。しかしながら、置換シクロアルキル基は、上記で定義される通りの直鎖または分岐鎖のアルキル基で置換された環も含む。代表的な置換シクロアルキル基は、一置換であるか、または以下に限定されないが、上記で列挙されたものなどの置換基で置換されていてよい２，２−、２，３−、２，４−、２，５−または２，６−二置換シクロヘキシル基など、１回より多く置換されていてもよい。
【００２３】
シクロアルキルアルキル基は、アルキル基の水素または炭素結合が、上記で定義される通りのシクロアルキル基への結合と置き換えられた、上記で定義される通りのアルキル基である。一部の実施形態において、シクロアルキルアルキル基は、４個から１６個の炭素原子、４個から１２個の炭素原子、典型的には４個から１０個の炭素原子を有する。シクロアルキルアルキル基は、置換または非置換であってよい。置換シクロアルキルアルキル基は、該基のアルキル部分、シクロアルキル部分、またはアルキル部分およびシクロアルキル部分の両方で置換されていてよい。代表的な置換シクロアルキルアルキル基は、一置換されていてもよいし、または以下に限定されないが、上記で列挙されたものなどの置換基での一置換、二置換もしくは三置換など、１回より多く置換されていてもよい。
【００２４】
アルケニル基は、少なくとも１個の二重結合が２個の炭素原子の間に存在することを除いて、上記で定義される通りの直鎖および分岐鎖のアルキル基を含む。アルケニル基は、２個から１２個の炭素原子、典型的には２個から１０個の炭素、または一部の実施形態において、２個から８個、２個から６個、もしくは２個から４個の炭素原子を有する。一部の実施形態において、アルケニル基は、１個、２個または３個の炭素−炭素二重結合を有する。例としては、以下に限定されないが、とりわけビニル、アリル、−ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ３）、−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２、−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ（ＣＨ３）、−Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）＝ＣＨ２が挙げられる。アルケニル基は、置換または非置換であってよい。代表的な置換アルケニル基は、一置換されていてもよいし、または以下に限定されないが、上記で列挙されたものなどの置換基での一置換、二置換もしくは三置換など、１回より多く置換されていてもよい。
【００２５】
シクロアルケニル基は、２個の炭素原子の間に少なくとも１個の二重結合を有する、上記で定義される通りのシクロアルキル基を含む。シクロアルケニル基は、置換または非置換であってよい。一部の実施形態において、シクロアルケニル基は、１個、２個または３個の二重結合を有してよいが、芳香族化合物を含まない。シクロアルケニル基は、４個から１４個の炭素原子、あるいは一部の実施形態において、５個から１４個の炭素原子、５個から１０個の炭素原子、または更には５個、６個、７個もしくは８個の炭素原子を有する。シクロアルケニル基の例としては、シクロヘキセニル、シクロペンテニル、シクロヘキサジエニル、シクロブタジエニルおよびシクロペンタジエニルが挙げられる。
【００２６】
シクロアルケニルアルキル基は、アルキル基の水素または炭素結合が、上記で定義される通りのシクロアルケニル基への結合と置き換えられる、上記で定義される通りのアルキル基である。シクロアルケニルアルキル基は、置換または非置換であってよい。置換シクロアルケニルアルキル基は、該基のアルキル部分、シクロアルケニル部分、またはアルキル部分およびシクロアルケニル部分の両方で置換されていてよい。代表的な置換シクロアルケニルアルキル基は、上記で列挙されたものなどの置換基で１回または複数回置換されていてよい。
【００２７】
アルキニル基は、少なくとも１個の三重結合が２個の炭素原子の間に存在することを除いて、上記で定義される通りの直鎖および分岐鎖のアルキル基を含む。アルキニル基は、２個から１２個の炭素原子、典型的には２個から１０個の炭素、または一部の実施形態において、２個から８個、２個から６個、もしくは２個から４個の炭素原子を有する。一部の実施形態において、アルキニル基は、１個、２個または３個の炭素−炭素三重結合を有する。例としては、以下に限定されないが、とりわけ−Ｃ≡ＣＨ、−Ｃ≡ＣＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ≡ＣＣＨ３、−Ｃ≡ＣＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２が挙げられる。アルキニル基は、置換または非置換であってよい。代表的な置換アルキニル基は、一置換されていてもよいし、または以下に限定されないが、上記で列挙されたものなどの置換基での一置換、二置換もしくは三置換など、１回より多く置換されていてもよい。
【００２８】
アリール基は、ヘテロ原子を含有しない環式芳香族炭化水素である。本明細書におけるアリール基は、単環式、二環式および三環式の環系を含む。したがって、アリール基としては、以下に限定されないが、フェニル基、アズレニル基、ヘプタレニル基、ビフェニル基、フルオレニル基、フェナントレニル基、アントラセニル基、インデニル基、インダニル基、ペンタレニル基およびナフチル基が挙げられる。一部の実施形態において、アリール基は、６〜１４個の炭素、および他の実施形態において６個から１２個、または更には６〜１０個の炭素原子を該基の環部分に含有する。一部の実施形態において、アリール基は、フェニルまたはナフチルである。アリール基は、置換または非置換であってよい。「アリール基」という成句は、縮合芳香族−脂肪族環系（例えば、インダニルおよびテトラヒドロナフチルなど）など、縮合環を含有する基を含む。代表的な置換アリール基は、一置換されていてもよいし、または１回より多く置換されていてもよい。例えば、一置換アリール基としては、以下に限定されないが、二置換、三置換、四置換、五置換または六置換フェニルまたはナフチル基が挙げられ、これらは、上記で列挙されたものなどの置換基で置換されていてよい。
【００２９】
アラルキル基は、アルキル基の水素または炭素結合が、上記で定義される通りのアリール基への結合と置き換えられた、上記で定義される通りのアルキル基である。一部の実施形態において、アラルキル基は、７個から１６個の炭素原子、７個から１４個の炭素原子、または７個から１０個の炭素原子を含有する。アラルキル基は、置換または非置換であってよい。置換アラルキル基は、該基のアルキル部分、アリール部分、またはアルキル部分およびアリール部分の両方で置換されていてよい。代表的なアラルキル基としては、以下に限定されないが、ベンジル基およびフェネチル基、ならびに縮合（シクロアルキルアリール）アルキル基、例えば４−インダニルエチルが挙げられる。代表的な置換アラルキル基は、上記で列挙されたものなどの置換基で１回または複数回置換されていてよい。
【００３０】
ヘテロシクリル基は、１個または複数が以下に限定されないがＮ、ＯおよびＳなどのヘテロ原子である３個以上の環員を含有する芳香族環（ヘテロアリールとも称される）および非芳香族環の化合物を含む。一部の実施形態において、ヘテロシクリル基は、１個、２個、３個または４個のヘテロ原子を含有する。一部の実施形態において、ヘテロシクリル基は、３個から１６個の環員を有する単環式、二環式および三環式の環を含むが、他のこうした基は、３個から６個、３個から１０個、３個から１２個、または３個から１４個の環員を有する。ヘテロシクリル基は、例えばイミダゾリル基、イミダゾリニル基およびイミダゾリジニル基など、芳香族、部分的不飽和および飽和環系を包含する。「ヘテロシクリル基」という成句は、例えばベンゾトリアゾリル、２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシニルおよびベンゾ［１，３］ジオキソリルなど、縮合芳香族および非芳香族基を含むものを含めた縮合環種を含む。該成句は、以下に限定されないがキヌクリジルなど、ヘテロ原子を含有する架橋多環式環系も含む。ヘテロシクリル基は、置換または非置換であってよい。ヘテロシクリル基としては、以下に限定されないが、アジリジニル基、アゼチジニル基、ピロリジニル基、イミダゾリジニル基、ピラゾリジニル基、チアゾリジニル基、テトラヒドロチオフェニル基、テトラヒドロフラニル基、ジオキソリル基、フラニル基、チオフェニル基、ピロリル基、ピロリニル基、イミダゾリル基、イミダゾリニル基、ピラゾリル基、ピラゾリニル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル基、チアゾリニル基、イソチアゾリル基、チアジアゾリル基、オキサジアゾリル基、ピペリジル基、ピペラジニル基、モルホリニル基、チオモルホリニル基、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロチオピラニル基、オキサチアン基、ジオキシル基、ジチアニル基、ピラニル基、ピリジル基、ピリミジニル基、ピリダジニル基、ピラジニル基、トリアジニル基、ジヒドロピリジル基、ジヒドロジチイニル基、ジヒドロジチオニル基、ホモピペラジニル基、キヌクリジル基、インドリル基、インドリニル基、イソインドリル基、アザインドリル（ピロロピリジル）基、インダゾリル基、インドリジニル基、ベンゾトリアゾリル基、ベンズイミダゾリル基、ベンゾフラニル基、ベンゾチオフェニル基、ベンズチアゾリル基、ベンゾオキサジアゾリル基、ベンゾオキサジニル基、ベンゾジチイニル基、ベンゾオキサチイニル基、ベンゾチアジニル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾチアジアゾリル基、ベンゾ［１，３］ジオキソリル基、ピラゾロピリジル基、イミダゾピリジル（アザベンズイミダゾリル）基、トリアゾロピリジル基、イソオキサゾロピリジル基、プリニル基、キサンチニル基、アデニニル基、グアニニル基、キノリニル基、イソキノリニル基、キノリジニル基、キノキサリニル基、キナゾリニル基、シンノリニル基、フタラジニル基、ナフチリジニル基、プテリジニル基、チアナフチル基、ジヒドロベンゾチアジニル基、ジヒドロベンゾフラニル基、ジヒドロインドリル基、ジヒドロベンゾジオキシニル基、テトラヒドロインドリル基、テトラヒドロインダゾリル基、テトラヒドロベンゾイミダゾリル基、テトラヒドロベンゾトリアゾリル基、テトラヒドロピロロピリジル基、テトラヒドロピラゾロピリジル基、テトラヒドロイミダゾピリジル基、テトラヒドロトリアゾロピリジル基およびテトラヒドロキノリニル基が挙げられる。代表的な置換ヘテロシクリル基は、一置換されていてもよいし、または以下に限定されないが、ピリジル基またはモルホリニル基など１回より多く置換されていてよく、これらは、二置換、三置換、四置換、五置換もしくは六置換されているか、または上記で列挙されたものなどの様々な置換基で二置換されている。
【００３１】
ヘテロアリール基は、１個または複数が以下に限定されないがＮ、ＯおよびＳなどのヘテロ原子である５個以上の環員を含有する芳香族環化合物である。ヘテロアリール基としては、以下に限定されないが、ピロリル基、ピラゾリル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル基、ピリジニル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、ピラジニル基、チオフェニル基、ベンゾチオフェニル基、フラニル基、ベンゾフラニル基、インドリル基、アザインドリル（ピロロピリジニル）基、インダゾリル基、ベンズイミダゾリル基、イミダゾピリジニル（アザベンズイミダゾリル）基、ピラゾロピリジニル基、トリアゾロピリジニル基、ベンゾトリアゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾチアジアゾリル基、イミダゾピリジニル基、イソキサゾロピリジニル基、チアナフチル基、プリニル基、キサンチニル基、アデニニル基、グアニニル基、キノリニル基、イソキノリニル基、テトラヒドロキノリニル基、キノキサリニル基およびキナゾリニル基などの基が挙げられる。ヘテロアリール基は、全ての環がインドリル基などの芳香族である縮合環化合物を含み、該環の１つのみが２，３−ジヒドロインドリル基など芳香族である縮合環化合物を含む。ヘテロアリール基は、置換または非置換であってよい。したがって、「ヘテロアリール基」という成句は、縮合環化合物を含み、同様に、アルキル基など環員の１つに結合する他の基を有するヘテロアリール基を含む。代表的な置換ヘテロアリール基は、上記で列挙されたものなどの様々な置換基で１回または複数回置換されていてよい。
【００３２】
ヘテロシクリルアルキル基は、アルキル基の水素または炭素結合が、上記で定義される通りのヘテロシクリル基への結合と置き換えられた、上記で定義される通りのアルキル基である。ヘテロシクリルアルキル基は、置換または非置換であってよい。置換ヘテロシクリルアルキル基は、該基のアルキル部分、ヘテロシクリル部分、またはアルキル部分およびヘテロシクリル部分の両方で置換されていてよい。代表的なヘテロシクリルアルキル基としては、以下に限定されないが、モルホリン−４−イル−エチル、フラン−２−イル−メチル、イミダゾール−４−イル−メチル、ピリジン−３−イル−メチル、テトラヒドロフラン−２−イル−エチルおよびインドール−２−イル−プロピルが挙げられる。代表的な置換ヘテロシクリルアルキル基は、上記で列挙されたものなどの置換基で１回または複数回置換されていてよい。
【００３３】
ヘテロアラルキル基は、アルキル基の水素または炭素結合が、上記で定義される通りのヘテロアリール基への結合と置き換えられた、上記で定義される通りのアルキル基である。ヘテロアラルキル基は、置換または非置換であってよい。置換ヘテロアラルキル基は、該基のアルキル部分、ヘテロアリール部分、またはアルキル部分およびヘテロアリール部分の両方で置換されていてよい。代表的な置換ヘテロアラルキル基は、上記で列挙されたものなどの置換基で１回または複数回置換されていてよい。
【００３４】
本発明の技術の化合物内に２つ以上の付着点（即ち、二価、三価または多価）を有する本明細書に記載される基は、「エン」という接尾辞の使用によって指定される。例えば、二価のアルキル基はアルキレン基であり、二価のアリール基はアリーレン基であり、二価のヘテロアリール基は二価のヘテロアリーレン基であり、以下同様である。本発明の技術の化合物に対して単一の付着点を有する置換された基は、「エン」という名称を使用して言及されない。したがって、例えばクロロエチルは、本明細書ではクロロエチレンとは言わない。こうした基は、さらに置換されていてもよいし、または非置換であってよい。
【００３５】
アルコキシ基は、水素原子への結合が、上記で定義される通りの置換または非置換アルキル基の炭素原子への結合によって置き換えられたヒドロキシル基（−ＯＨ）である。線状アルコキシ基の例としては、以下に限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシおよびヘキソキシなどが挙げられる。分岐アルコキシ基の例としては、以下に限定されないが、イソプロポキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、イソペントキシおよびイソヘキソキシなどが挙げられる。シクロアルコキシ基の例としては、以下に限定されないが、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシおよびシクロヘキシルオキシなどが挙げられる。アルコキシ基は、置換または非置換であってよい。代表的な置換アルコキシ基は、上記で列挙されたものなどの置換基で１回または複数回置換されていてよい。
【００３６】
「アルカノイル」および「アルカノイルオキシ」という用語は、本明細書で使用される場合、それぞれ、−Ｃ（Ｏ）−アルキル基および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−アルキル基を指すことができ、ここで、一部の実施形態において、アルカノイル基またはアルカノイルオキシ基は各々、２〜５個の炭素原子を含有する。同様に、「アリーロイル」および「アリーロイルオキシ」という用語は、それぞれ、−Ｃ（Ｏ）−アリール基および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−アリール基を指す。
【００３７】
「アリールオキシ」および「アリールアルコキシ」という用語は、それぞれ、酸素原子に結合した置換または非置換のアリール基、およびアルキルで酸素原子に結合した置換または非置換のアラルキル基を指す。例としては、以下に限定されないが、フェノキシ、ナフチルオキシおよびベンジルオキシが挙げられる。代表的な置換アリールオキシおよびアリールアルコキシ基は、上記で列挙されたものなどの置換基で１回または複数回置換されていてよい。
【００３８】
「カルボン酸」という用語は、本明細書で使用される場合、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ基を有する化合物を指す。「カルボキシレート」という用語は、本明細書で使用される場合、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−基を指す。「保護カルボキシレート」は、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｇを指し、ここで、Ｇはカルボキシレート保護基である。カルボキシレート保護基は、当業者周知である。カルボキシレート基官能性のための保護基の広範なリストは、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｇｒｅｅｎｅ、Ｔ．Ｗ．；Ｗｕｔｓ、Ｐ．Ｇ．Ｍ．、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ、（第３版、１９９９）において見出すことができ、これは、そこで説明される手順を使用して付加または除去することができ、本明細書において詳細に説明されたかのように参照によりそれ全体でならびにありとあらゆる目的で本明細書によって組み込まれる。
【００３９】
「エステル」という用語は、本明細書で使用される場合、−ＣＯＯＲ７０基を指す。Ｒ７０は、本明細書で定義される通りの置換または非置換のアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、ヘテロシクリルアルキル基またはヘテロシクリル基である。
【００４０】
「アミド（ａｍｉｄｅ）」（または「アミド（ａｍｉｄｏ）」）という用語は、Ｃ−およびＮ−アミド基、即ち、それぞれ−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７１Ｒ７２基および−ＮＲ７１Ｃ（Ｏ）Ｒ７２基を含む。Ｒ７１およびＲ７２は独立して、水素、または本明細書で定義される通りの置換もしくは非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基、ヘテロシクリルアルキル基もしくはヘテロシクリル基である。アミド基はそのため、以下に限定されないが、カルバモイル基（−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２）およびホルムアミド基（−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ）を含む。一部の実施形態において、アミドは、−ＮＲ７１Ｃ（Ｏ）−（Ｃ１〜５アルキル）であり、該基は、「カルボニルアミノ」と名付けられ、他の実施形態において、アミドは−ＮＨＣ（Ｏ）−アルキルであり、該基は「アルカノイルアミノ」と名付けられる。
【００４１】
「ニトリル」または「シアノ」という用語は、本明細書で使用される場合、−ＣＮ基を指す。
【００４２】
ウレタン基は、Ｎ−およびＯ−ウレタン基、即ち、それぞれ−ＮＲ７３Ｃ（Ｏ）ＯＲ７４基および−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ７３Ｒ７４基を含む。Ｒ７３およびＲ７４は独立して、本明細書で定義される通りの置換または非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基、ヘテロシクリルアルキル基またはヘテロシクリル基である。Ｒ７３は、Ｈであってもよい。
【００４３】
「アミン」（または「アミノ」）という用語は、本明細書で使用される場合、−ＮＲ７５Ｒ７６基を指し、ここで、Ｒ７５およびＲ７６は独立して、水素、または本明細書で定義される通りの置換もしくは非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基、ヘテロシクリルアルキル基もしくはヘテロシクリル基である。一部の実施形態において、アミンは、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノまたはアルキルアリールアミノである。他の実施形態において、アミンは、ＮＨ２、メチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、フェニルアミノまたはベンジルアミノである。
【００４４】
「スルホンアミド」という用語は、Ｓ−およびＮ−スルホンアミド基、即ち、それぞれ−ＳＯ２ＮＲ７８Ｒ７９基および−ＮＲ７８ＳＯ２Ｒ７９基を含む。Ｒ７８およびＲ７９は独立して、水素、または本明細書で定義される通りの置換もしくは非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基、ヘテロシクリルアルキル基もしくはヘテロシクリル基である。スルホンアミド基はそのため、以下に限定されないが、スルファモイル基（−ＳＯ２ＮＨ２）を含む。本明細書における一部の実施形態において、スルホンアミドは−ＮＨＳＯ２−アルキルであり、「アルキルスルホニルアミノ」基と称される。
【００４５】
「チオール」という用語は−ＳＨ基を指し、一方、スルフィドは−ＳＲ８０基を含み、スルホキシドは−Ｓ（Ｏ）Ｒ８１基を含み、スルホンは−ＳＯ２Ｒ８２基を含み、スルホニルは−ＳＯ２ＯＲ８３を含む。Ｒ８０、Ｒ８１、Ｒ８２およびＲ８３は各々独立して、本明細書で定義される通りの置換または非置換のアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリールアラルキル基、ヘテロシクリル基またはヘテロシクリルアルキル基である。一部の実施形態において、スルフィドは、アルキルチオ基、−Ｓ−アルキルである。
【００４６】
「尿素」という用語は、−ＮＲ８４−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ８５Ｒ８６基を指す。Ｒ８４基、Ｒ８５基およびＲ８６基は独立して、水素、または本明細書で定義される通りの置換もしくは非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基、ヘテロシクリル基もしくはヘテロシクリルアルキル基である。
【００４７】
「アミジン」という用語は、−Ｃ（ＮＲ８７）ＮＲ８８Ｒ８９および−ＮＲ８７Ｃ（ＮＲ８８）Ｒ８９を指し、ここで、Ｒ８７、Ｒ８８およびＲ８９は各々独立して、水素、または本明細書で定義される通りの置換もしくは非置換のアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリールアラルキル基、ヘテロシクリル基もしくはヘテロシクリルアルキル基である。
【００４８】
「グアニジン」という用語は、−ＮＲ９０Ｃ（ＮＲ９１）ＮＲ９２Ｒ９３を指し、ここで、Ｒ９０、Ｒ９１、Ｒ９２およびＲ９３は各々独立して、水素、または本明細書で定義される通りの置換もしくは非置換のアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリールアラルキル基、ヘテロシクリル基もしくはヘテロシクリルアルキル基である。
【００４９】
「エナミン」という用語は、−Ｃ（Ｒ９４）＝Ｃ（Ｒ９５）ＮＲ９６Ｒ９７および−ＮＲ９４Ｃ（Ｒ９５）＝Ｃ（Ｒ９６）Ｒ９７を指し、ここで、Ｒ９４、Ｒ９５、Ｒ９６およびＲ９７は、各々独立して、水素、本明細書で定義される通りの置換または非置換のアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリールアラルキル基、ヘテロシクリル基またはヘテロシクリルアルキル基である。
【００５０】
「ハロゲン」または「ハロ」という用語は、本明細書で使用される場合、臭素、塩素、フッ素またはヨウ素を指す。一部の実施形態において、ハロゲンはフッ素である。他の実施形態において、ハロゲンは塩素または臭素である。
【００５１】
「ヒドロキシル」という用語は、本明細書で使用される場合、−ＯＨまたはそれのイオン形態−Ｏ−を指すことができる。
【００５２】
「イミド」という用語は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９８Ｃ（Ｏ）Ｒ９９を指し、ここで、Ｒ９８およびＲ９９は各々独立して、水素、または本明細書で定義される通りの置換もしくは非置換のアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリールアラルキル基、ヘテロシクリル基もしくはヘテロシクリルアルキル基である。
【００５３】
「イミン」という用語は、−ＣＲ１００（ＮＲ１０１）基および−Ｎ（ＣＲ１００Ｒ１０１）基を指し、ここで、Ｒ１００およびＲ１０１は各々独立して、水素、または本明細書で定義される通りの置換もしくは非置換のアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリールアラルキル基、ヘテロシクリル基もしくはヘテロシクリルアルキル基であるが、Ｒ１００およびＲ１０１は両方が同時に水素ではないという条件である。
【００５４】
「ニトロ」という用語は、本明細書で使用される場合、−ＮＯ２基を指す。
【００５５】
「トリフルオロメチル」という用語は、本明細書で使用される場合、−ＣＦ３を指す。
【００５６】
「トリフルオロメトキシ」という用語は、本明細書で使用される場合、−ＯＣＦ３を指す。
【００５７】
「アジド」という用語は、−Ｎ３を指す。
【００５８】
「トリアルキルアンモニウム」という用語は、−Ｎ（アルキル）３基を指す。トリアルキルアンモニウム基は、正に荷電されており、したがって、ハロゲンアニオンなどの関連アニオンを典型的に有する。
【００５９】
「トリフルオロメチルジアリジド」という用語は、
【００６０】
【化５】
2020516611.tif 000007
を指す。
【００６１】
「イソシアノ」という用語は、−ＮＣを指す。
【００６２】
「イソチオシアノ」という用語は、−ＮＣＳを指す。
【００６３】
「ペンタフルオロスルファニル」という用語は、−ＳＦ５を指す。
【００６４】
当業者によって理解される通り、ありとあらゆる目的で、特に書面記載を提供する観点から、本明細書で開示される全ての範囲は、ありとあらゆる可能なサブ範囲ならびにそのサブ範囲の組合せも包含する。いかなる列挙の範囲も、同範囲が少なくとも二等分、三等分、四等分、五等分、十等分などに分割されると十分に記載および可能にしていると簡単に認識することができる。非限定的な例として、本明細書において考察されている各範囲は、下位三分の一、中位三分の一および上位三分の一などに容易に分割することができる。その上当業者によって理解される通り、「最大」、「少なくとも」、「超」および「未満」などの全ての言葉は、列挙されている数を含み、上記で考察した通りのサブ範囲に引き続いて分割できる範囲を指す。最終的に、当業者によって理解される通り、範囲は各個々のメンバーを含む。したがって、例えば、１〜３個の原子を有する基は、１個、２個または３個の原子を有する基を指す。同様に、１〜５個の原子を有する基は、１個、２個、３個、４個または５個の原子を有する基を指し、以下同様である。
【００６５】
本明細書に記載される化合物の薬学的に許容される塩は、本発明の技術の範疇内であり、所望の薬理活性を保持するとともに生物学的に望ましくないことがない酸または塩基付加塩を含む（例えば、塩は、不当に毒性、アレルゲン性または刺激性ではなく、生体利用可能である）。本発明の技術の化合物が、例えばアミノ基などの塩基性基を有する場合、薬学的に許容される塩は、無機酸（塩酸、ヒドロホウ酸、硝酸、硫酸およびリン酸など）、有機酸（例えば、アルギネート、ギ酸、酢酸、安息香酸、グルコン酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、乳酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸）または酸性アミノ酸（アスパラギン酸およびグルタミン酸など）で形成することができる。本発明の技術の化合物が、例えばカルボン酸基などの酸性基を有する場合、それは、金属、例えばアルカリ金属および土類アルカリ金属（例えば、Ｎａ＋、Ｌｉ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋、Ｚｎ２＋）、アンモニアまたは有機アミン（例えばジシクロヘキシルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン）または塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン、リジンおよびオルニチン）で塩を形成することができる。こうした塩は、化合物の単離および精製中に、または精製化合物をそれの遊離塩基もしくは遊離酸形態で、それぞれ適当な酸もしくは塩基と別々に反応させること、およびこうして形成された塩を単離することによって、その場で調製することができる。
【００６６】
当業者は、本発明の技術の化合物が、互変異性、立体配座異性、幾何異性および／または立体異性の現象を呈し得ることを認識されよう。本明細書および請求項内の式図が、可能な互変異性体、立体配座異性体、立体化学または幾何異性体の形態の１つのみを表し得る場合、本発明の技術は、本明細書に記載される有用性の１つまたは複数を有する化合物の任意の互変異性体、立体配座異性体、立体化学および／または幾何異性体の形態、ならびにこれらの様々な異なる形態の混合物を包含すると理解されるべきである。
【００６７】
「互変異性体」は、互いに平衡状態である化合物の異性体形態を指す。異性体形態の存在および濃度は、化合物が見出される環境に依存し、例えば化合物が固体であるかまたは有機溶液もしくは水溶液であるかに依存して異なっていてよい。例えば、水溶液において、キナゾリノンは、互いの互変異性体と称される以下の異性体形態：
【００６８】
【化６】
2020516611.tif 000008
を呈することができる。別の例として、グアニジンは、互いの互変異性体とも称される、プロトン性有機溶液における以下の異性体形態：
【００６９】
【化７】
2020516611.tif 000009
を呈することができる。
【００７０】
構造式によって化合物を表す限度のため、本明細書に記載される化合物の全ての化学式は、化合物の全ての互変異性体形態を表し、本発明の技術の範疇内であると理解されるべきである。
【００７１】
化合物の立体異性体（光学異性体としても公知）は、特定の立体化学が明確に示されていない限り、構造の全てのキラル、ジアステレオマーおよびラセミ体の形態を含む。したがって、本発明の技術において使用される化合物は、図示から明らかである通り、任意のまたは全ての不斉原子で、富化または分割された光学異性体を含む。ラセミ混合物およびジアステレオマー混合物の両方、ならびに個々の光学異性体は、それらのエナンチオマーまたはジアステレオマーのパートナーが実質的に無いように単離または合成することができ、これらの立体異性体は全て本発明の技術の範疇内である。
【００７２】
本発明の技術の化合物は、溶媒和物、殊に水和物として存在することができる。水和物は、化合物または化合物を含む組成物の製造中に形成することができるか、または水和物は、化合物の吸湿性質により時間をかけて形成することができる。本発明の技術の化合物は、とりわけＤＭＦ、エーテルおよびアルコール溶媒和物を含めて、同様に、有機溶媒和物として存在することができる。任意の特別な溶媒和物の同定および調製は、合成有機または医薬品化学の当業者の技能内である。
【００７３】
この開示の全体にわたって、様々な公報、特許および公開特許明細書は、識別引用によって参照される。その上、参照された引用を指すアラビア数字はこの開示内であり、この完全な書誌詳細は、実施例内のセクションに提供される。これらの公報、特許および公開特許明細書の開示は、より完全に本発明の技術を記載するために、本明細書によって参照により本開示に組み込まれる。
【００７４】
本発明の技術
一般に、吸収用量は累積活性の積分の関数であるので、正常の臓器中への許容できない取込みがなく、より大きな程度まで腫瘍において蓄積する放射線治療化合物の必要がある。さらに、標的化放射線治療は、放射性核種の大環状錯体を使用して少しの間実践されてきたが、現在使用の大環状分子（例えば、ＤＯＴＡ）は、一般に、放射性核種、特に、より大きいサイズの放射性核種、例えばアクチニウム、ラジウム、ビスマスおよび鉛同位体などを有する不十分な安定性の錯体を形成する。これらのより大きい放射性核種は、一般にアルファ放出放射性核種、即ち、はるかに高いエネルギーの放射性核種であり、したがって、ベータ放出放射性核種よりも実質的に強力である。現在公知の大環状含有化合物の不安定性は、大環状分子から放射性核種の解離をもたらし、これは、標的化組織に対する選択性の欠如をもたらし、これは、非標的化組織に対する毒性ももたらす。
【００７５】
本発明の技術は、これらの問題を克服して、特に、正常の臓器における許容できない取込みがなく、より大きい程度まで腫瘍において蓄積する新たな三官能性化合物を提供する。本発明の技術は、従来技術のものよりも実質的に安定である大環状錯体も含み、ベータ放射性核種の代わりにアルファ放出放射性核種の使用を提供する。したがって、本発明の技術の化合物は、有利には、非標的化組織に対して従来の錯体よりも実質的に少ない毒性で、より有効にがん細胞を標的化する。さらに、新たな錯体は、有利には、放射性核種を用いる錯体化のために昇温（例えば、少なくとも８０℃）を一般に必要とするＤＯＴＡ型錯体と対照的に、室温で生成することができる。
【００７６】
したがって、本発明の技術の一態様において、式Ｉ：
【００７７】
【化８】
2020516611.tif 000010
（式中、
ＡＢＤは、抗原結合ドメインであり；
Ｗ１は、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｎ−または−（ＣＨ２）ｏ−ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、
【００７８】
【化９】
2020516611.tif 000011
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つは、各々Ｈであり；
Ｘ１は、非存在、Ｏ、ＳまたはＮＨであり；
Ｌ１は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ５−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−アリーレン−、−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、アミノ酸、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個もしくは１０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであり、ここで、ｒは、０、１、２、３、４、５、６、７、８または９であり、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、各々独立して、Ｈ、アルキルまたはアリールであり；
Ｔｏｘは、細胞毒含有および／または画像化剤含有ドメインであり；
Ｌ２は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個もしくは２０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであり、ここで、ｓは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８または１９であり；
Ａｌｂは、アルブミン結合部分であり；
ｍは、０または１であり；ｎは、１または２であり；ｏは、１または２であり；ｐは、０、１、２または３であり、ただしｐが０である場合、Ｘ１は非存在であり；ｑは、１または２である）
の化合物またはその薬学的に許容される塩および／もしくは溶媒和物が提供される。
【００７９】
明確にするため、本発明の技術の化合物において、Ｘ１、Ｌ１およびＬ２などの二価の基を参照して「非存在」という用語は、二価の基の代わりに結合があることを意味する。例えば、Ｌ１が「非存在」である場合、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、
【００８０】
【化１０】
2020516611.tif 000012
である。
【００８１】
抗原結合ドメインは、細胞の表面上の分子標的を認識できるまたはそれと相互作用できる部分を含む。これらの分子標的は、受容体、酵素および抗原などの細胞表面タンパク質を含む。例えば、分子標的は、抗原結合ドメインと相互作用できる腫瘍細胞表面（腫瘍特異的細胞表面タンパク質など）上に発現される受容体、酵素および／または抗原であってよい。こうした腫瘍標的部分の例は、ほとんどの前立腺がん細胞の表面上に発現される前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）によって認識されるグルタメート−尿素−リジンモチーフである。別の例は、多くの神経内分泌がんの表面上に発現されるソマトスタチン受容体によって認識されるエドトレオチドである。したがって、本明細書における任意の実施形態の抗原結合ドメインは、ＰＳＭＡ、ソマトスタチンペプチド受容体−２（ＳＳＴＲ２）、ソマトスタチンペプチド受容体−５（ＳＳＴＲ５）、インテグリン（例えば、アルファｖベータ６、アルファｖベータ３および／またはアルファｖベータ５）、ガストリン放出ペプチド受容体、セプラーゼ、線維芽細胞活性化タンパク質アルファ（ＦＡＰ−アルファ）、インクレチン受容体、グルコース依存性インスリン分泌性ポリペプチド受容体、ＶＩＰ−１、ＮＰＹ、葉酸受容体、ＬＨＲＨ、ニューロントランスポーター（例えば、ノルアドレナリントランスポーター（ＮＥＴ））、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ−２、ＶＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＣＥＡ、ＭＵＣ−４、ＥＤ２、ＴＦ抗原、内皮特異的マーカー、ニューロペプチドＹ、ｕＰＡＲ、ＴＡＧ−７２、ＣＣＫ類似体、ＶＩＰ、ボンベシン、ＶＥＧＦＲ、ＧＬＰ−１、ＣＸＣＲ４、ヘプシン、ＴＭＰＲＳＳ２、カスパーゼおよびｃＭＥＴの１つまたは複数に結合できる部分を含むことができる。
【００８２】
アルブミン結合部分は、対象における化合物の血中血漿クリアランスの速度をモジュレートする際に役割を果たし、それによって、抗原を発現することができる正常の臓器および組織の代わりに血漿空間において、循環時間を増加させ、細胞毒含有ドメインの細胞毒性作用および／または画像化剤含有ドメインの画像化能力を区分けする。理論によって束縛されることなく、該構造のこの構成成分は、血清タンパク質、例えばアルブミンおよび／または細胞要素と可逆的に相互作用すると思われる。血液の血漿または細胞構成成分に対するこのアルブミン結合部分の親和性は、対象の血液プールにおける化合物の残留時間に影響するように構成することができる。本明細書における任意の実施形態において、アルブミン結合部分は、それが血中血漿中の場合にアルブミンと可逆的または非可逆的に結合するように構成することができる。本明細書における任意の実施形態において、アルブミン結合部分は、ヒト血清アルブミンを有する化合物の結合親和性が約５μＭから約１５μＭになるように選択されることができる。
【００８３】
例として、本明細書における任意の実施形態のアルブミン結合部分は、短鎖脂肪酸、中鎖鎖脂肪酸、長鎖脂肪酸、ミリスチン酸、置換もしくは非置換のインドール−２−カルボン酸、置換もしくは非置換の４−オキソ−４−（５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−２−イル）ブタン酸、置換もしくは非置換のナフタレンアシルスルホンアミド、置換もしくは非置換のジフェニルシクロヘキサノールホスフェートエステル、置換もしくは非置換の２−（４−ヨードフェニル）酢酸、置換もしくは非置換の３−（４−ヨードフェニル）プロピオン酸、または置換もしくは非置換の４−（４−ヨードフェニル）ブタン酸を含むことができる。本明細書における任意の実施形態において含むことができるアルブミン結合部分のある特定の代表例としては、以下：
【００８４】
【化１１】
2020516611.tif 000013
の１つまたは複数が挙げられる。
【００８５】
本明細書における任意の実施形態において、化合物は、
【００８６】
【化１２】
2020516611.tif 000014
であるアルブミン結合部分を含むことができ、式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４およびＹ５は独立して、Ｈ、ハロまたはアルキルであり、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５およびＸ６は、各々独立して、ＯまたはＳであり、ａは、独立して各出現で、０、１または２であり、ｂは、独立して各出現で、０または１であり、ｃは、独立して各出現で、０または１であり、ｄは、独立して各出現で、０、１、２、３または４である。本明細書における任意の実施形態において、ｂおよびｃは、同じ値であり得ないことがある。本明細書における任意の実施形態において、Ｙ３はＩであり、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ４およびＹ５の各々は、独立してＨであることがある。
【００８７】
上記で考察した通り、式ＩのＴｏｘ基は、細胞毒含有および／または画像化剤含有ドメイン、例えば細胞毒性化学部分、金属イオンを含むことができる部分、キレーター、金属イオン保有部分、またはそれらの任意の２つ以上の組合せである。金属イオンを（金属イオンのキレート化によって、および／または金属イオンとの共有結合を介してなどで）含められる部分を含む化合物の例として、本明細書における任意の実施形態において、式Ｉの化合物は、式ＩＩ：
【００８８】
【化１３】
2020516611.tif 000015
（式中、
Ｗ１、Ｘ１、Ｌ１、Ｌ２、ｒ、ｓ、ｍ、ｎおよびｏ（および任意の他の可変物）は、式Ｉの本明細書における任意の実施形態のために提供した通りであり；
Ｐ１、Ｐ２およびＰ３は、各々独立して、Ｈ、メチル、ベンジル、４−メトキシベンジルまたはｔｅｒｔ−ブチルであり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、
【００８９】
【化１４】
2020516611.tif 000016
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つは、各々Ｈであり；
Ｒａｄは、金属イオンを含むことができる、任意選択で、金属イオンをさらに含むことができる部分であり；ｐは、０、１、２または３であり、ただしｐが０である場合、Ｘ１は非存在であり；ｑは、１または２である）
の化合物、またはその薬学的に許容される塩および／もしくは溶媒和物であってよい。
【００９０】
本明細書における任意の実施形態において、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３は、各々独立して、Ｈであることがある。
【００９１】
式ＩＩの化合物におけるＲａｄは、金属イオンを含むことがあるまたはなく、ここで、化合物は金属イオンを含まない。本明細書における任意の実施形態において、Ｔｏｘおよび／またはＲａｄは、キレーターを含むことができ；本明細書における任意の実施形態において、Ｔｏｘおよび／またはＲａｄは、金属イオンをキレート化するキレーターを含むことができる。こうしたキレート化金属イオンは、例えば、磁気共鳴画像法、発光イメージング、放射線治療、またはそれらの任意の２つ以上の組合せにおいて使用することができる本発明の技術の化合物を提供することができる。Ｔｏｘおよび／またはＲａｄのための本明細書における任意の実施形態の金属イオンは、放射性核種、例えば１７７Ｌｕ３＋、１７５Ｌｕ３＋、４５Ｓｃ３＋、６６Ｇａ３＋、６７Ｇａ３＋，６８Ｇａ３＋、６９Ｇａ３＋，７１Ｇａ３＋、８９Ｙ３＋，８６Ｙ３＋、８９Ｚｒ４＋、９０Ｙ３＋、９９ｍＴｃ＋１、１１１Ｉｎ３＋、１１３Ｉｎ３＋、１１５Ｉｎ３＋、１３９Ｌａ３＋、１３６Ｃｅ３＋、１３８Ｃｅ３＋、１４０Ｃｅ３＋、１４２Ｃｅ３＋、１５１Ｅｕ３＋、１５３Ｅｕ３＋、１５２Ｄｙ３＋、１４９Ｔｂ３＋、１５９Ｔｂ３＋、１５４Ｇｄ３＋、１５５Ｇｄ３＋、１５６Ｇｄ３＋、１５７Ｇｄ３＋、１５８Ｇｄ３＋、１６０Ｇｄ３＋、１８８Ｒｅ＋１、１８６Ｒｅ＋１、２１３Ｂｉ３＋、２１１Ａｔ＋、２１７Ａｔ＋、２２７Ｔｈ４＋、２２６Ｔｈ４＋、２２５Ａｃ３＋、２３３Ｒａ２＋、１５２Ｄｙ３＋、２１３Ｂｉ３＋、２１２Ｂｉ３＋、２１１Ｂｉ３＋、２１２Ｐｂ２＋、２１２Ｐｂ４＋、２５５Ｆｍ３＋、またはウラン−２３０であってよい。例えば、金属イオンは、２１３Ｂｉ３＋、２１１Ａｔ＋、２２５Ａｃ３＋、１５２Ｄｙ３＋、２１２Ｂｉ３＋、２１１Ｂｉ３＋、２１７Ａｔ＋、２２７Ｔｈ４＋、２２６Ｔｈ４＋、２３３Ｒａ２＋、２１２Ｐｂ２＋および２１２Ｐｂ４＋から選択されるアルファ放出放射性核種であってよい。
【００９２】
本発明の技術の任意の実施形態において有用なキレーターとしては、以下に限定されないが、以下のグループの、共有結合的にコンジュゲートされた置換または非置換のキレーターが挙げられる：
１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、
１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、
ｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（２Ｂ−ＤＯＴＡ−ＮＣＳとしても公知）、
ＰＩＰ−ＤＯＴＡ、
ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）、
ＰＩＰ−ＤＴＰＡ、
ＡＺＥＰ−ＤＴＰＡ、
エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、
トリエチレンテトラアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’’’，Ｎ’’’−ヘキサ−酢酸（ＴＴＨＡ）、
７−［２−（ビス−カルボキシメチルアミノ）−エチル］−４，１０−ビス−カルボキシメチル−１，４，７，１０−テトラアザ−シクロドデカ−１−イル−酢酸（ＤＥＰＡ）、
２，２’，２”，−（１０−（２−（ビス（カルボキシメチル）アミノ）−５−（４−イソチオシアナトフェニル）ペンチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリイル）三酢酸（３ｐ−Ｃ−ＤＥＰＡ−ＮＣＳ）、
ＮＥＴＡ、
｛４−カルボキシメチル−７−［２−（カルボキシメチルアミノ）−エチル］−ペルヒドロ−１，４，７−トリアゾニン−１−イル｝−酢酸（ＮＰＴＡ）、
ジアセチルピリジンビス（ベンゾイルヒドラゾン）、
１，４，７，１０，１３，１６−ヘキサアザシクロオクタデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ”，Ｎ’’’，Ｎ’’’’，Ｎ’’’’’−ヘキサ酢酸（ＨＥＨＡ）、
オクタデンテートテレフタルアミドリガンド、
シデロフォア、
２，２’−（４−（２−（ビス（カルボキシメチル）アミノ）−５−（４−イソチオシアナトフェニル）ペンチル）−１０−（２−（ビス（カルボキシメチル）アミノ）エチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジイル）二酢酸、
Ｎ，Ｎ’−ビス［（６−カルボキシ−２−ピリジル）メチル］−４，１３−ジアザ−１８−クラウン−６（Ｈ２ｍａｃｒｏｐａ）、
６−（（１６−（（６−カルボキシピリジン−２−イル）メチル）−１，４，１０，１３−テトラオキサ−７，１６−ジアザシクロオクタデカン−７−イル）メチル）−４−イソチオシアナトピコリン酸（ｍａｃｒｏｐａ−ＮＣＳ）、および
３，９−カルボキシメチル−６−（２−メトキシ−５−イソチオシアナトフェニル）カルボキシメチル−３，６，９，１５−テトラアザビシクロ−［９．３．１］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン。
【００９３】
この例証的なグループのある特定のメンバーは、下記に例示される。
【００９４】
【化１５】
2020516611.tif 000017
【００９５】
「共有結合的にコンジュゲートされた」キレーターは、そこに含有される水素原子への１つまたは複数の結合が、ＴＯＸおよび／もしくはＲＡＤ部分の残部の原子への、Ｌ１へのおよび／またはＬ２への結合によって置き換えられているか、あるいは２個の原子の間のｐｉ結合が、２個の原子の１つからＴＯＸおよび／もしくはＲＡＤ部分の残部の原子への、Ｌ１へのおよび／またはＬ２への結合によって置き換えられており、２個の原子の他方が、例えば水素への新たな結合を含むキレーター（上記で列挙されたものなど）を意味すると理解されるべきである（例えば、キレーター中の−ＮＣＳ基の反応で、共有結合的にコンジュゲートされるキレーターを提供する）。
【００９６】
共有結合的にコンジュゲートされたキレーターを含むＴｏｘ基および／またはＲａｄ基は、本明細書における任意の実施形態において、
【００９７】
【化１６】
2020516611.tif 000018
によって表すことができ、式中、Ｌ３は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−ＮＲ１０−または−アリーレン−であり；Ｒ１０は、Ｈ、アルキルまたはアリールであり、ＣＨＥＬは、本明細書に記載される任意の実施形態のキレート化金属イオンを含むことがあるまたはない共有結合的にコンジュゲートされたキレーターである。例えば、こうしたＴｏｘ基を有する式Ｉの化合物またはこうしたＲａｄ基を有する式ＩＩの化合物は、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つが
【００９８】
【化１７】
2020516611.tif 000019
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つが、各々、Ｈであり；Ｌ３が非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−ＮＲ１０−または−アリーレン−であり；Ｒ１０が、Ｈ、アルキルまたはアリールであり；ＣＨＥＬが、任意選択でキレート化金属イオンを含む共有結合的にコンジュゲートされたキレーターである化合物であってよい。
【００９９】
別の例として、こうしたＲａｄ基を有する式ＩＩの化合物は、式ＩＩＩ
【０１００】
【化１８】
2020516611.tif 000020
の化合物またはその薬学的に許容される塩および／もしくは溶媒和物であってよく、式中、
Ｗ１、Ｘ１、Ｌ１、Ｌ２、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、ｒ、ｓ、ｍ、ｎ、ｏ、ｐ、ｑ（および任意の他の可変物）は、式ＩおよびＩＩの本明細書における任意の実施形態のために提供した通りであり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、
【０１０１】
【化１９】
2020516611.tif 000021
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つは、各々Ｈであり；Ｌ３は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−ＮＲ１０−または−アリーレン−であり；Ｒ１０は、Ｈ、アルキルまたはアリールであり；ＣＨＥＬは、任意選択でキレート化金属イオンを含む共有結合的にコンジュゲートされたキレーターである。
【０１０２】
本明細書における任意の実施形態において、Ｌ１は、−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、アミノ酸、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個もしくは１０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであってよい。本明細書における任意の実施形態において、Ｌ１は、−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、グリシン、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個もしくは１０個のグリシン残基で構成されるポリグリシン、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであってよい。
【０１０３】
本明細書における任意の実施形態において、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個もしくは２０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであってよい。本明細書における任意の実施形態において、Ｌ２は、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個もしくは２０個のアミノ酸で構成されるポリグリシン、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであってよい。
【０１０４】
本発明の技術は、本明細書で開示される式Ｉ、ＩＩ、およびＩＩＩの化合物（またはその薬学的に許容される塩）の実施形態の１つのいずれか、ならびに薬学的に許容される担体あるいは１種もしくは複数の賦形剤または充填剤（別段に特定されていない限り「薬学的に許容される担体」と集団的に称される）を含む組成物および医薬も提供する。該組成物は、本明細書に記載される方法および処置に使用することができる。本発明の技術は、状態を画像化および／または処置するために、薬学的に許容される担体ならびに式Ｉ〜ＩＩＩの化合物の態様および実施形態のいずれか一項に記載の化合物の有効量を含む医薬組成物も提供し；ここで、状態は、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および／または前立腺がんを含むことができる。例えば、こうした状態は、ＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織、例えばＰＳＭＡを発現するがん（がん組織、がん関連の新生脈管構造、またはその組合せを含める）、クローン病またはＩＢＤを含むことができる。
【０１０５】
さらなる関連態様において、式Ｉ〜ＩＩＩの化合物の態様および実施形態のいずれか一項に記載の化合物を対象に投与すること（例えば、有効量を投与することなど）または式Ｉ〜ＩＩＩの化合物の態様および実施形態のいずれか一項に記載の化合物の有効量を含む医薬組成物を投与すること、および投与に続いて、ポジトロン放出を検出すること、ポジトロンの放出および消滅からのガンマ線を検出すること（ポジトロン放出断層撮影法によるなど）および／またはポジトロン放出によるチェレンコフ放射線を検出すること（チェレンコフ発光画像化によるなど）を含む画像化方法が提供される。画像化方法の任意の実施形態において、対象は、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫、前立腺がん、ＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織、例えばＰＳＭＡを発現するがん（がん組織、がん関連の新生脈管構造、またはその組合せを含める）、クローン病またはＩＢＤを含む状態を患っている疑いがあり得る。検出ステップは、例えばＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織を除去するための対象への外科手順中に発生することがある。検出ステップは、検出ステップを行うためにハンドヘルド素子の使用を含むことができる。例えば、チェレンコフ発光画像は、電子倍増電荷結合素子（ＥＭＣＣＤ）カメラなどの超高感度光学カメラを使用して、チェレンコフ光を検出することによって獲得することができる。
【０１０６】
上記実施形態のいずれかにおいて、有効量は、対象に関して決定することができる。「有効量」は、所望の効果を生成するのに必要とされる組成物または化合物の量を指す。有効量の１つの非限定的な例としては、以下に限定されないが、例えば、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの処置を含めて治療的（医薬的）使用のための許容される毒性および生物学的利用能のレベルを生じさせる量または投与量が挙げられる。有効量の別の例としては、例えば増殖および／または転移の低減など、例えば、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫または前立腺がんと関連した症状を低減できる量または投与量が挙げられる。本発明の技術の化合物の有効量は、以下に限定されないが、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫または前立腺がん（去勢抵抗性前立腺がんなど）の１つまたは複数を含めて、目的の標的への化合物の結合の検出を可能にするのに十分な量を含むことができる。有効量の別の例としては、例えばバックグラウンドを超える統計的に有意な放出など、ＰＳＭＡを過剰発現する組織を有する対象において（バックグラウンドを超える）ポジトロンの放出および消滅からの検出可能なガンマ線放出を提供できる量または投与量が挙げられる。有効量の別の例としては、例えばバックグラウンドを超える統計的に有意な放出など、ＰＳＭＡを過剰発現する組織を有する対象においてバックグラウンドを超えるポジトロン放出による検出可能なチェレンコフ放射線放出を提供できる量または投与量が挙げられる。有効量は、組成物の１グラム当たり約０．０１μｇから約１ｍｇの化合物、好ましくは組成物の１グラム当たり約０．１μｇから約５００μｇの化合物であり得る。
【０１０７】
本明細書で使用される場合、「対象」または「患者」は、ネコ、イヌ、げっ歯類または霊長類などの哺乳動物である。典型的に、対象は、ヒト、好ましくは、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫または前立腺がんを患っているまたは患っている疑いがあるヒトである。「対象」および「患者」という用語は、相互交換可能に使用することができる。
【０１０８】
特に、ＰＳＭＡを過剰発現するがんおよび／または哺乳動物組織を処置するための本明細書における任意の実施形態の化合物の有効量は、対象の重さ１キログラム当たり約０．１μｇから約５０μｇであり得る。したがって、がん（例えば、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫、前立腺がんおよび／または去勢抵抗性前立腺がん）および／またはＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織を処置するため；本明細書に記載される任意の実施形態の化合物の有効量は、約０．１μｇ／ｋｇ、約０．２μｇ／ｋｇ、約０．３μｇ／ｋｇ、約０．４μｇ／ｋｇ、約０．５μｇ／ｋｇ、約０．６μｇ／ｋｇ、約０．７μｇ／ｋｇ、約０．８μｇ／ｋｇ、約０．９μｇ／ｋｇ、約１μｇ／ｋｇ、約２μｇ／ｋｇ、約３μｇ／ｋｇ、約４μｇ／ｋｇ、約５μｇ／ｋｇ、約６μｇ／ｋｇ、約７μｇ／ｋｇ、約８μｇ／ｋｇ、約９μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ、約１１μｇ／ｋｇ、約１２μｇ／ｋｇ、約１３μｇ／ｋｇ、約１４μｇ／ｋｇ、約１５μｇ／ｋｇ、約１６μｇ／ｋｇ、約１７μｇ／ｋｇ、約１８μｇ／ｋｇ、約１９μｇ／ｋｇ、約２０μｇ／ｋｇ、約２２μｇ／ｋｇ、約２４μｇ／ｋｇ、約２６μｇ／ｋｇ、約２８μｇ／ｋｇ、約３０μｇ／ｋｇ、約３２μｇ／ｋｇ、約３４μｇ／ｋｇ、約３６μｇ／ｋｇ、約３８μｇ／ｋｇ、約４０μｇ／ｋｇ、約４２μｇ／ｋｇ、約４４μｇ／ｋｇ、約４６μｇ／ｋｇ、約４８μｇ／ｋｇ、約５０μｇ／ｋｇ、またはこれらの値の任意の２つの間を含めたおよび／もしくはその中間の任意の範囲であり得る。
【０１０９】
特に、がん、および／またはＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織を画像化するための本明細書における任意の実施形態の化合物の有効量は、対象の重さ１キログラム当たり約０．１μｇから約５０μｇであり得る。したがって、がん（例えば、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫、前立腺がんおよび／または去勢抵抗性前立腺がん）および／またはＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織を処置するため；本明細書に記載される任意の実施形態の化合物の有効量は、約０．１μｇ／ｋｇ、約０．２μｇ／ｋｇ、約０．３μｇ／ｋｇ、約０．４μｇ／ｋｇ、約０．５μｇ／ｋｇ、約０．６μｇ／ｋｇ、約０．７μｇ／ｋｇ、約０．８μｇ／ｋｇ、約０．９μｇ／ｋｇ、約１μｇ／ｋｇ、約２μｇ／ｋｇ、約３μｇ／ｋｇ、約４μｇ／ｋｇ、約５μｇ／ｋｇ、約６μｇ／ｋｇ、約７μｇ／ｋｇ、約８μｇ／ｋｇ、約９μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ、約１１μｇ／ｋｇ、約１２μｇ／ｋｇ、約１３μｇ／ｋｇ、約１４μｇ／ｋｇ、約１５μｇ／ｋｇ、約１６μｇ／ｋｇ、約１７μｇ／ｋｇ、約１８μｇ／ｋｇ、約１９μｇ／ｋｇ、約２０μｇ／ｋｇ、約２２μｇ／ｋｇ、約２４μｇ／ｋｇ、約２６μｇ／ｋｇ、約２８μｇ／ｋｇ、約３０μｇ／ｋｇ、約３２μｇ／ｋｇ、約３４μｇ／ｋｇ、約３６μｇ／ｋｇ、約３８μｇ／ｋｇ、約４０μｇ／ｋｇ、約４２μｇ／ｋｇ、約４４μｇ／ｋｇ、約４６μｇ／ｋｇ、約４８μｇ／ｋｇ、約５０μｇ／ｋｇ、またはこれらの値の任意の２つの間を含めたおよび／もしくはその中間の任意の範囲であり得る。
【０１１０】
本発明の技術の化合物は、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫、前立腺がん、またはＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織の画像化および／または処置において有用であり得る他の従来の画像化剤と一緒に患者に投与することもできる。こうした哺乳動物組織は、以下に限定されないが、ＰＳＭＡを発現するがん（がん組織、がん関連の新生脈管構造、またはその組合せを含める）、クローン病またはＩＢＤを含む。したがって、本発明の技術の医薬組成物および／または方法は、式Ｉ〜ＩＩＩの化合物と異なる画像化剤をさらに含むことができ；本発明の技術の医薬組成物および／または方法は、式Ｉ〜ＩＩＩの化合物と異なる処理剤を含むことができ；本発明の技術の医薬組成物および／または方法は、式Ｉ〜ＩＩＩの化合物の任意の実施形態に従った画像化剤、およびその上式Ｉ〜ＩＩＩの化合物の任意の実施形態に従った治療剤をさらに含むことができる。式Ｉ、ＩＩおよび／またはＩＩＩの化合物の任意の実施形態に従った化合物は、治療剤および画像化剤の両方であってよい。投与は、経口投与、非経口投与または経鼻投与を含むことができる。これらの実施形態のいずれかにおいて、投与は、皮下注入、静脈内注入、腹腔内注入または筋肉内注入を含むことができる。これらの実施形態のいずれかにおいて、投与は経口投与を含むことができる。本発明の技術の方法は、ＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織の画像化に潜在的または相乗的に有効であり得る量で従来の画像化剤を逐次にまたは本発明の技術の１種または複数の化合物との組合せのいずれかで投与することも含むことができる。
【０１１１】
本明細書に記載される本発明の技術の実施形態のいずれかにおいて、医薬組成物は、単位剤形に包装することができる。単位剤形は、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および／または前立腺がんを処置するのに有効である。一般に、本発明の技術の化合物を含めた単位投与量は、患者への考慮に依存して変動する。こうした考慮としては、例えば、年齢、プロトコール、状態、性別、疾患の程度、禁忌および併用治療などが挙げられる。これらの考慮に基づく例証的単位投与量は、当技術分野における熟練した医師によって調整または修正することもできる。例えば、本発明の技術の化合物を含む患者用の単位投与量は、１×１０−４ｇ／ｋｇから１ｇ／ｋｇ、好ましくは、１×１０−３ｇ／ｋｇから１．０ｇ／ｋｇに変動することができる。本発明の技術の化合物の投与量は、０．０１ｍｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇ、または好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇに変動することもできる。適当な単位剤形としては、以下に限定されないが、粉末、錠剤、丸剤、カプセル、ロゼンジ、坐剤、パッチ、経鼻スプレー、注入可能な移植可能徐放性製剤、粘膜接着フィルム、局所ワニス、脂質複合体などが挙げられる。
【０１１２】
該医薬組成物は、がん（例えば、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がん）と関連する障害を予防および処置するために、式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの１種もしくは複数の化合物、その薬学的に許容される塩、その立体異性体、その互変異性体、またはその溶媒和物を、薬学的に許容される担体、賦形剤、バインダーまたは希釈剤などと混合することによって調製することができる。本明細書に記載される化合物および組成物は、例えば、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんを処置する製剤および医薬を調製するために使用することができる。こうした組成物は、例えば、顆粒、粉末、錠剤、カプセル、シロップ、坐剤、注入、エマルジョン、エリキシル、懸濁液または溶液の形態であってよい。即時組成物は、例えば、経口、非経口、局所的、直腸、経鼻、腟内の投与によるまたは埋め込みリザーバーを介する様々な投与経路用に製剤化することができる。非経口または全身的投与としては、以下に限定されないが、皮下、静脈内、腹腔内および筋肉内の注入が挙げられる。以下の剤形は、例として示されており、本発明の技術を限定すると解釈されるべきでない。
【０１１３】
経口、頬側および舌下の投与のため、粉末、懸濁液、顆粒、錠剤、丸剤、カプセル、ジェルキャップおよびカプレットが固体剤形として許容される。これらは、例えば、本発明の技術の１種または複数の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは互変異性体を、少なくとも１種の添加剤、例えばデンプンまたは他の添加剤と混合することによって調製することができる。適当な添加剤は、スクロース、ラクトース、セルロース糖、マンニトール、マルチトール、デキストラン、デンプン、寒天、アルギネート、キチン、キトサン、ペクチン、トラガカントガム、アラビアガム、ゼラチン、コラーゲン、カゼイン、アルブミン、合成もしくは半合成のポリマーまたはグリセリドである。任意選択で、経口剤形は、投与に役立つ他の成分、例えば不活性希釈液、または滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、または保存料、例えばパラベンもしくはソルビン酸、または酸化防止剤、例えばアスコルビン酸、トコフェロールもしくはシステイン、崩壊剤、バインダー、増粘剤、緩衝液、甘味料、香味剤、または香剤を含有することができる。錠剤および丸剤は、当技術分野において公知の適当なコーティング材料でさらに処理することができる。
【０１１４】
経口投与のための液体剤形は、薬学的に許容されるエマルジョン、シロップ、エリキシル、懸濁液および溶液の形態であってよく、水などの不活性希釈液を含有することができる。医薬製剤および医薬は、以下に限定されないが、滅菌液体、例えば油、水、アルコール、およびこれらの組合せを使用して、液体懸濁液または溶液として調製することができる。薬学的に適当な界面活性剤、懸濁剤、乳化剤は、経口または非経口投与のために添加することができる。
【０１１５】
上で注記した通り、懸濁液は油を含むことができる。こうした油としては、以下に限定されないが、落花生油、ゴマ油、綿実油、コーン油およびオリーブ油が挙げられる。懸濁液調製物は、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、脂肪酸グリセリドおよびアセチル化脂肪酸グリセリドなどの脂肪酸のエステルを含有することもできる。懸濁液製剤は、以下に限定されないが、エタノール、イソプロピルアルコール、ヘキサデシルアルコール、グリセロールおよびプロピレングリコールなどのアルコールを含むことができる。エーテル、例えば以下に限定されないが、ポリ（エチレングリコール）、石油炭化水素、例えば鉱物油およびワセリン；ならびに水も懸濁液製剤中に使用することができる。
【０１１６】
注入可能な剤形は、一般に、適当な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して調製することができる水性懸濁液または油懸濁液を含む。注入可能な形態は、溶液相で、または溶媒もしくは希釈液を用いて調製される懸濁液の形態であってよい。許容される溶媒またはビヒクルは、滅菌水、リンゲル液または等張性生理食塩水溶液を含む。代替として、滅菌油は、溶媒または懸濁剤として用いることができる。典型的に、油または脂肪酸は、天然または合成の油、脂肪酸、モノ−、ジ−またはトリ−グリセリドを含めて、不揮発性である。
【０１１７】
注入のために、医薬製剤および／または医薬は、上に記載した通りの適切な溶液を用いる再構成に適当な粉末であってよい。これらの例としては、以下に限定されないが、凍結乾燥、回転乾燥もしくはスプレー乾燥させた粉末、非晶質粉末、顆粒、沈殿物または微粒子が挙げられる。注入のために、製剤は、任意選択で、安定剤、ｐＨ調整剤、界面活性剤、生物学的利用能調整剤、およびこれらの組合せを含有することができる。
【０１１８】
本発明の技術の化合物は、鼻または口を介する吸入によって肺に投与することができる。吸入のための適当な医薬製剤は、任意の適切な溶媒、ならびに任意選択で他の化合物、例えば、以下に限定されないが、安定剤、抗微生物剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、界面活性剤、生物学的利用能調整剤、およびこれらの組合せを含有する溶液、スプレー、乾燥粉末またはエアロゾルを含む。担体および安定剤は、特別な化合物の要件で変動するが、典型的に、非イオン性界面活性剤（ツイーン、プルロニックまたはポリエチレングリコール）、血清アルブミンのような無害なタンパク質、ソルビタンエステル、オレイン酸、レシチン、グリシンなどのアミノ酸、緩衝液、塩、糖または糖アルコールを含む。水性および非水性（例えば、フッ化炭素噴霧剤中）エアロゾルは、典型的に、吸入による本発明の技術の化合物の送達のために使用される。
【０１１９】
上に記載したそれらの代表的剤形の他に、薬学的に許容される賦形剤および担体は、当業者に一般に公知であり、したがって、本発明の技術中に含まれる。こうした賦形剤および担体は、例えば、参照により本明細書に組み込まれる「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．、Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ（１９９１）に記載されている。即時組成物は、例えば、ミセルもしくはリポソームまたは一部の他のカプセル化形態も含む。
【０１２０】
特定の投与量は、疾患の状態、対象の年齢、体重、全般的な健康状態、性別および食餌、用量間隔、投与経路、排泄率、ならびに薬物の組合せに依存して調整することができる。有効量を含有する上記剤形のいずれも、十分に日常的実験法の範囲内であり、そのため、十分に本発明の技術の範疇内である。
【０１２１】
本発明の技術による処置の治療的有効性を決定するために、様々なアッセイ系およびモデル系が容易に用いられ得る。
【０１２２】
示される状態について、試験対象は、プラセボ処置されたまたは他の適当な対照対象と比較して、対象における障害によって引き起こされるまたはそれと関連した１つまたは複数の症状（単数または複数）において１０％、２０％、３０％、５０％もしくはそれ以上の低減、最大７５〜９０％まで、または９５％以上の低減を呈する。
【０１２３】
本発明の技術は、哺乳動物対象への放射線治療薬の投与の約４時間から約２４時間内に１以上である腎臓活性に対する腫瘍活性の比が観察される哺乳動物対象において、インビボにおいて放射線治療薬の組織分布を達成する方法をさらに提供する。こうした方法は、放射線治療薬を哺乳動物対象に投与することを含み、ここで、放射線治療薬は、前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を標的化する第１の部分、放射性核種を保有する第２の部分、および血清アルブミンへの親和性を有する第３の部分を含み、第１の部分は、第１の共有結合性リンカーによって第２の部分から分離されており、第３の部分は、第２の共有結合性リンカーによって第２の部分から分離されている。第１の部分と第２の部分との間の分離（第１の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数に基づく）は、約８個の原子から約４０個の原子であり、第３の部分と第１および第２の部分との間の分離（第２の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数に基づく）は、約１０個の原子から約１００個の原子である。
【０１２４】
該方法は、放射線治療薬の投与の約４時間から約２４時間後に、哺乳動物対象の画像を得ることを含むことができ；したがって、放射線治療薬の投与後に画像を得るのは、約４時間後、約５時間後、約６時間後、約７時間後、約８時間後、約９時間後、約１０時間後、約１１時間後、約１２時間後、約１３時間後、約１４時間後、約１５時間後、約１６時間後、約１７時間後、約１８時間後、約１９時間後、約２０時間後、約２１時間後、約２２時間後、約２３時間後、約２４時間後、またはこれらの値の任意の２つを含めたおよび／もしくはその間の任意の範囲の後に発生し得る。１以上である腎臓活性に対する腫瘍活性の比は、放射線治療薬の投与後最大約２４時間まで続くことができる。該方法の本明細書における任意の実施形態において、放射線治療薬の投与の約２４時間から約４８時間後に、放射性核種活性は、哺乳動物対象の唾液腺において実質的に観察されないことがあり得る。該方法の本明細書における任意の実施形態において、第１の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数は、約１０個の原子から約３０個の原子の範囲であってもよい。該方法の本明細書における任意の実施形態において、第２の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数は、約１５個の原子から約４０個の原子の範囲であってもよい。該方法の本明細書における任意の実施形態において、投与は、静脈内投与を含むことがあり得る。
【０１２５】
本明細書における実施例は、本発明の技術の利点を例示するために、および当業者が本発明の技術の化合物またはその塩、医薬組成物、誘導体、プロドラッグもしくは互変異性体形態を調製または使用するのをさらに補助するために提供される。本明細書における実施例は、その上、本発明の技術の好ましい態様をより完全に例示するために表される。実施例は、添付の特許請求の範囲で定義される通りの本発明の技術の範疇を限定すると決して解釈されるべきでない。実施例は、上に記載した本発明の技術の変動、態様または実施形態のいずれかを含むまたは組み込むことができる。上に記載した変動、態様または実施形態は、さらに各々、本発明の技術の任意のまたは全ての他の変動、態様または実施形態の変動を含むまたは組み込むこともできる。
【実施例】
【０１２６】
セクション１．１
材料および計器。全ての溶媒および試薬は、別段の注記がない限り、市販供給源から購入し、さらに精製することなく受け取ったままで使用した。「乾燥」と注記された溶媒は、３Åモレキュラーシーブ上での貯蔵に続いて得た。反応は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ、Ｗｈａｔｍａｎ  ＵＶ２５４アルミニウム裏打ちシリカゲル）によってモニタリングした。化合物の分析および精製のために使用されるＨＰＬＣシステムは、ＣＢＭ−２０Ａ通信バスモジュール、ＬＣ−２０ＡＰ（分取用）ポンプ、および２７０ｎｍでモニタリングするＳＰＤ−２０ＡＶ  ＵＶ／Ｖｉｓ検出器（Ｓｈｉｍａｄｚｕ、日本）からなっていた。精製は、別段の注記がない限り、Ｅｐｉｃ  Ｐｏｌａｒ分取カラム、１２０Å、１０μｍ、２５ｃｍ×２０ｍｍ（ＥＳ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ、Ｗｅｓｔ  Ｂｅｒｌｉｎ、ＮＪ）を用いて１４ｍＬ／ｍｉｎの流量で行った。Ｈ２Ｏ（Ａ）およびＭｅＯＨ（Ｂ）またはＡＣＮ（Ｃ）のいずれかを含有する二成分移動相を使用して、グラジエントＨＰＬＣ方法を用いた。ＨＰＬＣ方法Ａ：１０％Ｂ（０〜５分）、１０〜１００％Ｂ（５〜２５分）。方法Ｂ：１０％Ｃ（０〜５分）、１０〜１００％Ｃ（５〜２５分）。方法Ｃ：１０％Ｃ（０〜５分）、１０〜１００％Ｃ（５〜４０分）。方法Ｄ：１０％Ｃ（０〜５分）、１０〜１００％Ｃ（５〜２０分）。溶媒系は、０．２％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含有していた。ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ  Ｉｎｏｖａ  ３００ＭＨｚ、４００ＭＨｚ、５００ＭＨｚもしくは６００ＭＨｚ分光計上にて、または広帯域Ｐｒｏｄｉｇｙクライオプローブが備えられているＢｒｕｋｅｒ  ＡＶ  ＩＩＩ  ＨＤ  ５００ＭＨｚ分光計上にて周囲温度で記録した。化学シフトはｐｐｍで報告されている。１Ｈおよび１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルは、ＴＭＳ内部標準（０ｐｐｍ）、残留の溶媒ピーク、またはアセトニトリル内部標準（Ｄ２Ｏスペクトル中２．０６ｐｐｍ）を基準とした。１９Ｆ  ＮＭＲスペクトルは、モノフルオロベンゼン内部標準（−１１３．１５ｐｐｍ）を基準とした。報告されている１Ｈスペクトルにおけるプロトン共鳴のスプリッティングは、以下の通りに定義される：ｓ＝一重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｑ＝四重項、ｍ＝多重項、ｄｔ＝三重項の二重項、ｔｄ＝二重項の三重項、およびｂｒ＝幅広。ＩＲ分光法は、Ｎｉｃｏｌｅｔ  Ａｖａｔａｒ  ３７０  ＤＴＧＳ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）を使用して試料のＫＢｒペレット上で行った。高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）は、ポジティブＥＳＩモードにおけるＥｘａｃｔｉｖｅ  Ｏｒｂｉｔｒａｐ質量分析計（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）上で記録した。ＵＶ／可視スペクトルは、別段の注記がない限り、１ｃｍの石英キュベットを使用するＣａｒｙ  ８４５４  ＵＶ−Ｖｉｓ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ、ＣＡ）上で記録した。元素分析（ＥＡ）は、Ａｔｌａｎｔｉｃ  Ｍｉｃｒｏｌａｂ，Ｉｎｃ．（Ｎｏｒｃｒｏｓｓ、ＧＡ）によって行った。
【０１２７】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−エチニルフェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）グルタメート（５）の調製
【０１２８】
【化２０】
2020516611.tif 000022
（Ｓ）−２−［（イミダゾール−１−カルボニル）アミノ］ペンタン二酸ジ−ｔｅｒｔブチルエステル（２）：０℃に冷却したＤＣＭ（１５０ｍＬ）中のＬ−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルグルタメート塩酸塩（１５．０ｇ、５１ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＴＥＡ（１８ｍＬ）およびＤＭＡＰ（２５０ｍｇ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＣＤＩ（９．０ｇ、５６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温に加温しながら終夜撹拌した。混合物をＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム（６０ｍＬ）、水（２×１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が半固体として得られ、これは静置でゆっくり固化した。粗材料をヘキサン／酢酸エチルで粉砕することで、白色の固体が得られ、これを濾過し、ヘキサン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させることで、２（１５．９ｇ、４５ｍｍｏｌ、８８％）が白色の固体として得られた。
【０１２９】
（Ｓ）−２−［３（（Ｓ）−（５−ベンジルオキシカルボニルアミノ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルペンチルウレイド］ペンタン二酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３）：ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の２（１ｇ、２．８２ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、ＭｅＯＴｆ（０．４７ｇ、２．８５ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．５７ｇ、５．６５ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を３０分間撹拌した後、Ｃｂｚ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｏｔ−Ｂｕ（１．０６ｇ、２．８２ｍｍｏｌ）を一度に添加し、１時間４０℃で撹拌した。混合物を濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製することで、３が白色の固体として得られた（１．３７ｇ、７９％）。
【０１３０】
２−［３−（５−アミノ−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルペンチル）ウレイド］ペンタン二酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４）：エタノール（２０ｍＬ）中の３（６３０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に、水素雰囲気下で、ギ酸アンモニウム（６３０ｍｇ、１０当量）、続いて１０％のＰｄ−Ｃを添加した。懸濁液を完了まで時折かき混ぜながら終夜静置した。混合物をセライトに通して濾過し、濃縮することで、所望の生成物（４７９ｍｇ、９８％）がロウ状の固体として得られた。
【０１３１】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−エチニルフェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）グルタメート（５）：ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の４（０．４８８、１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＭ（５ｍＬ）中の１−エチニル−３−イソシアナートベンゼン（１８５ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を、室温でＮ２下にて添加した。結果として得られた反応混合物を１２時間の間、同じ温度で撹拌し、分離漏斗に移し、水（２×５０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が半固体として得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製することで、５が白色泡状物として得られた（８４％）。
【０１３２】
ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ２−（Ｎ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）グリシルグリシルグリシル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（１０）の調製
【０１３３】
【化２１】
2020516611.tif 000023
２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リシナート（７）：Ｎ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン６（４．６８ｇ、１０ｍｍｏｌ）を、乾燥ＤＣＭ（２０ｍＬ）中に溶解し、ＤＩＰＥＡ（１．７４ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１０分間撹拌し、固体ジ（Ｎ−スクシンイミジル）カーボネート（３．８４ｇ、１５ｍｍｏｌ）を一度に添加した。結果として得られた反応混合物を３〜４時間の間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、分離漏斗に移し、過剰な水で洗浄した。有機層を回収し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発乾固させることで、半固体が得られた。粗生成物をエタノールおよびジエチルエーテルから再結晶化させることで、７をクリーム着色固体として得た（３．４４ｇ、６１％）。
【０１３４】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）オキシ）カルボニル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（８）：ＤＣＭ（２５ｍＬ）中のＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯｔＢｕ  ＨＣｌ（３．７２ｇ、１０ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（１．７４ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、続いて、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の化合物７（５．６５ｇ、１０ｍｍｏｌ）を滴下により添加した。結果として得られた清澄な溶液を終夜室温で撹拌した。溶媒を蒸発させ、粗化合物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製することで、８が白色の固体として得られた（７６％）。
【０１３５】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｎ２−（Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｌ−リシナート（９）：ＤＣＭ中の化合物８（１．１５６ｇ、２ｍｍｏｌ）の溶液に、ジエチルアミン（６ｍＬ）を滴下により添加し、結果として得られた反応混合物を室温で４〜５時間の間撹拌した。溶媒を減圧下にて蒸発させ、粗生成物をＤＣＭ中に再溶解させ、水（２×１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が半固体として得られ、これをさらに精製することなくそのままで使用した。
【０１３６】
ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ２−（Ｎ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）グリシルグリシルグリシル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（１０）：（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）グリシルグリシルグリシン（２４６ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（２３０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦを添加し、混合物を５分間室温で撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．１２ｍＬ、０．７ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ中の化合物９（２８２ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液を室温で滴下により添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解し、分離漏斗に移し、水（２×２０ｍＬ）およびブライン（１５ｍＬ）で洗浄した。有機層を回収し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発乾固させることで、半固体が得られた。粗化合物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製することで、所望の生成物１０が茶色の固体として得られた（４１％）。
【０１３７】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（２−アジドアセチル）グリシルグリシルグリシル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（１２）
【０１３８】
【化２２】
2020516611.tif 000024
ｔｅｒｔ−ブチルＮ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｎ２−（Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ２−グリシルグリシルグリシル−Ｌ−リジル）−Ｌ−リシナート（１１）：ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の化合物１０（０．４７８ｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ジエチルアミン（２ｍＬ）を滴下により添加し、結果として得られた反応混合物を室温で３時間の間撹拌した。溶媒を減圧下にて蒸発させ、ＤＣＭ中に再溶解させ、水（２×２０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物１１が半固体として得られ、これをさらに精製することなく使用した。
【０１３９】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（２−アジドアセチル）グリシルグリシルグリシル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（１２）：アジド酢酸（１０１ｍｇ、１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（３８３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ）を添加し、混合物を５分間室温で撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．１７ｍＬ、１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（５ｍＬ）中の化合物１１（３６７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解し、水（２×２０ｍＬ）およびブライン（１５ｍＬ）で洗浄した。粗化合物をさらに精製することなく使用した。
【０１４０】
１０−（６−アルカミド−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−１−オキソヘキサン−２−イル）−２４，２８，３０−トリ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２−ジメチル−４，１２，２１，２６−テトラオキソ−３−オキサ−５，１１，２０，２５，２７−ペンタアザトリアコンタン−１０，２４，２８，３０−テトラカルボキシレート（１４）の調製
【０１４１】
【化２３】
2020516611.tif 000025
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−（１−（（９Ｓ，１２Ｓ）−９−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１２−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−３，１１，１４，１７，２０，２３−ヘキサオキソ−１−フェニル−２−オキサ−４，１０，１３，１６，１９，２２−ヘキサアザテトラコサン−２４−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−５−イル）フェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（１３）：化合物１２（１４０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）および化合物５（６３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）中に溶解させ、０．５ＭのＣｕＳＯ４および０．５Ｍのアスコルビン酸ナトリウムの水溶液を引き続き添加した。結果として得られた反応物を３時間の間室温で撹拌した。ＤＭＦを蒸発させ、粗化合物１３をさらに精製することなく使用した。
【０１４２】
１０−（６−アルカミド−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−１−オキソヘキサン−２−イル）−２４，２８，３０−トリ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２−ジメチル−４，１２，２１，２６−テトラオキソ−３−オキサ−５，１１，２０，２５，２７−ペンタアザトリアコンタン−１０，２４，２８，３０−テトラカルボキシレート（１４）：化合物１３（１４４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）をメタノール：ＴＨＦ（１：１、１０ｍＬ）の混合物中に溶解し、１０％のＰｄ−Ｃを添加した。結果として得られた懸濁液をＨ２（バルーン圧力）雰囲気下で３時間の間撹拌した。混合物をセライトに通して濾過し、濃縮することで、対応するアミン（示されていない）が半固体として得られ、これを直ちに次のステップで使用した。酸ＲＣＯＯＨ（０．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（３８ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０１７ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（２ｍＬ）中のアミン（０．１ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、水（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製し、生成物１４を半固体として単離した。
【０１４３】
１５の調製
【０１４４】
【化２４】
2020516611.tif 000026
ジオキサン（２ｍＬ）中の化合物１４（１当量；Ｒ＝（４−ヨードフェニル）ＣＨ２−）の溶液に、ジオキサン（２ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。形成されたアミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけた。生成物を回収し、凍結乾燥させた。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 12.25 (bs, 7H), 9.40 (bs, 1H), 8.64-8.62 (m, 1H, N-H), 8.54-8.52 (m, 1H, N-H), 8.42 (s, 1H), 8.34-8.31 (m, 1H, N-H), 8.15-8.11 (m, 3H), 8.04-8.02 (m, 1H, N-H), 7.94-7.91 (m, 2H, N-H), 7.64-7.63 (m, 3H), 7.37-7.31 (m, 5H), 7.28-7.25 (m, 1H), 7.17-7.16 (m, 2H), 7.05-7.04 (m, 3H), 6.34-6.30 (m, 2H), 6.17 (bs, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.34-4.30 (m, 1H), 4.13-4.04 (m, 4H), 3.84-3.83 (m, 2H), 3.75-3.74 (m, 4H), 3.63-3.60 (m, 3H), 3.16-3.13 (m, 4H), 3.12-3.05 (m, 4H), 3.02-2.98 (m, 6H), 2.30-2.18 (m, 3H), 1.95-1.88 (m, 1H), 1.71-1.65 (m, 5H), 1.58-1.49 (m, 6H), 1.45-1.22 (m, 12H). 13C NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 174.3, 174.0, 173.5, 173.2, 171.4, 169.3, 168.9, 168.7, 168.2, 165.6, 157.1, 154.9, 146.1, 140.9, 136.7, 136.1, 131.2, 130.8, 129.0, 122.6, 118.4, 117.8, 116.9, 116.0, 113.9, 53.4, 52.1, 51.9, 51.6, 51.4, 41.9, 41.8, 41.6, 41.5, 38.2, 31.8, 31.7, 30.3, 29.7, 29.3, 28.5, 28.0, 27.3, 22.7, 22.5, 22.4, 17.9, 16.5, 12.3.  HRMS C73H102IN19O24S ([M+2H]+)の計算値, 1787.6110, 実測値1787.6048.
【０１４５】
２−［３−（５−アミノ−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルペンチル）ウレイド］ペンタン二酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１７）の調製
【０１４６】
【化２５】
2020516611.tif 000027
５−ベンジル１−（ｔｅｒｔ−ブチル）（（（Ｓ）−１，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１，５−ジオキソペンタン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（１６）：ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の２（１ｇ、２．８２ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、ＭｅＯＴｆ（０．４７ｇ、２．８５ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．５７ｇ、５．６５ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を３０分間撹拌した後、Ｈ−Ｌ−Ｇｌｕ（Ｂｚｌ）−ＯｔＢｕ塩酸塩（０．９２７ｇ、２．８２ｍｍｏｌ）を一度に添加し、１時間４０℃で撹拌した。混合物を濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製することで、所望の生成物が白色の固体として得られた（７９％）。
【０１４７】
（Ｓ）−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−４−（３−（（Ｓ）−１，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１，５−ジオキソペンタン−２−イル）ウレイド）−５−オキソペンタン酸（１７）：エタノール（２０ｍＬ）中の１６の溶液に、水素雰囲気下にて、ギ酸アンモニウム（６３０ｍｇ、１０当量）、続いて１０％のＰｄ−Ｃを添加し、懸濁液を完了まで時折かき混ぜながら終夜静置した。混合物をセライトに通して濾過し、濃縮することで、１７、所望の生成物（４７９ｍｇ、９８％）がロウ状の固体として得られた。
【０１４８】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル８−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）オクタノエート（１９）の調製
【０１４９】
【化２６】
2020516611.tif 000028
８−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）オクタン酸、１８（１．４３ｇ、３ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（２０ｍＬ）中に溶解し、ＤＩＰＥＡ（０．５２２ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１０分間撹拌し、固体ジ（Ｎ−スクシンイミジル）カーボネート（１．１５２ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を一度に添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、分離漏斗に移し、過剰の水で洗浄した。有機層を回収し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発乾固させることで、半固体が得られ、これをエタノールおよびジエチルエーテルから再結晶化させることで、所望の生成物がオフホワイトの固体として得られた（０．９３２ｇ、６５．０８％）。
【０１５０】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，７Ｓ，２１Ｓ，２４Ｓ）−２８−アミノ−２１−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−５，１０，１９，２２−テトラオキソ−４，６，１１，２０，２３−ペンタアザオクタコサン−１，３，７，２４−テトラカルボキシレート（２３）の調製
【０１５１】
【化２７】
2020516611.tif 000029
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（８−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）オクタノイル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（２０）：化合物９（０．５５１ｇ、１ｍｍｏｌ）および化合物１９（０．５７３、１．２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解させ、１２時間の間室温で撹拌した。反応の進行をＴＬＣによってモニタリングした。混合物を濃縮乾固し、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製することで、所望の生成物２０が茶色の固体として得られた（４１％）。
【０１５２】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（８−アミノオクタノイル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（２１）：ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の化合物２０（０．４５７ｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ジエチルアミン（３ｍＬ）を滴下により添加し、結果として得られた反応混合物を室温で３時間の間撹拌した。溶媒を減圧下にて蒸発させ、ＤＣＭ中に再溶解させ、水（２×２０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物２１が半固体として得られ、これをさらに精製することなく使用した。
【０１５３】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（９Ｓ，１２Ｓ，２６Ｓ，３０Ｓ）−１２−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−３，１１，１４，２３，２８−ペンタオキソ−１−フェニル−２−オキサ−４，１０，１３，２２，２７，２９−ヘキサアザドトリアコンタン−９，２６，３０，３２−テトラカルボキシレート（２２）：化合物１７（０．１１４、０．２４ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０９２ｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦを添加し、混合物を５分間室温で撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０４１ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ中の化合物２１（０．１４１、０．２ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（１０ｍＬ）中に溶解し、水（２×２０ｍＬ）およびブライン（１５ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製することで、生成物２２が半固体として得られた（２８％）。
【０１５４】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，７Ｓ，２１Ｓ，２４Ｓ）−２８−アミノ−２１−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−５，１０，１９，２２−テトラオキソ−４，６，１１，２０，２３−ペンタアザオクタコサン−１，３，７，２４−テトラカルボキシレート（２３）：化合物２２（０．１ｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）をメタノール：ＴＨＦ（１：１、１０ｍＬ）の混合物中に溶解し、１０％のＰｄ−Ｃを添加した。結果として得られた懸濁液をＨ２（バルーン圧力）雰囲気下にて３時間の間撹拌した。混合物をセライトに通して濾過し、濃縮することで、所望の生成物２３（９１％）がロウ状の固体として得られた。
【０１５５】
２４（ａ〜ｇ）および２５（ａ〜ｈ）の調製
【０１５６】
【化２８】
2020516611.tif 000030
【０１５７】
【表１】
2020516611.tif 000031
【０１５８】
【化２９】
2020516611.tif 000032
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ）−５−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−２−（４−（４−（４−ヨードフェニル）ブタンアミド）ブチル）−１，４，７，１６，２１−ペンタオキソ−３，６，１５，２０，２２−ペンタアザペンタコサン−１，１９，２３，２５−テトラカルボキシレート（２４ａ）：４−（４−ヨードフェニル）ブタン酸（０．０２９ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０３８ｇ、０．１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０１７ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物２３（０．０５２、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、水（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製し、生成物２４ａを半固体として単離した（１８％）。
【０１５９】
【化３０】
2020516611.tif 000033
【０１６０】
３３−（４−ヨードフェニル）−５，１０，１９，２２，３０−ペンタオキソ−２１−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−４，６，１１，２０，２３，２９−ヘキサアザトリトリアコンタン−１，３，７，２４−テトラカルボン酸（２５ａ）：定義されているが、ジオキサン（２ｍＬ）中の化合物２４ａ（０．０２５ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ジオキサン（２ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。アミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（０．０５０ｍｍｏｌ、２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけた。
【０１６１】
【化３１】
2020516611.tif 000034
【０１６２】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ）−２−（４−（４−（４−ブロモフェニル）ブタンアミド）ブチル）−５−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−１，４，７，１６，２１−ペンタオキソ−３，６，１５，２０，２２−ペンタアザペンタコサン−１，１９，２３，２５−テトラカルボキシレート（２４ｂ）：４−（４−ブロモフェニル）ブタン酸（０．０２４ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０３８ｇ、０．１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０１７ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物２３（０．０５２、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、水（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製し、生成物２４ｂを半固体として単離した（６％）。
【０１６３】
【化３２】
2020516611.tif 000035
【０１６４】
３３−（４−ブロモフェニル）−５，１０，１９，２２，３０−ペンタオキソ−２１−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−４，６，１１，２０，２３，２９−ヘキサアザトリトリアコンタン−１，３，７，２４−テトラカルボン酸（２５ｂ）：ジオキサン（２ｍＬ）中の化合物２４ｂ（０．０２０ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ジオキサン（２ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。アミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（０．０５０ｍｍｏｌ、２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけることで、２５ｂが得られた。
【０１６５】
【化３３】
2020516611.tif 000036
【０１６６】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，５Ｓ，１９Ｓ，２３Ｓ）−５−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−２−（４−（４−（４−ヨードフェニル）ブタンアミド）ブチル）−１，４，７，１６，２１−ペンタオキソ−３，６，１５，２０，２２−ペンタアザペンタコサン−１，１９，２３，２５−テトラカルボキシレート（２４ａ）：４−（４−ヨードフェニル）ブタン酸（０．０２９ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０３８ｇ、０．１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０１７ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物２３（０．０５２、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、水（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製し、生成物２４ａを半固体として単離した（１８％）。
【０１６７】
【化３４】
2020516611.tif 000037
【０１６８】
（３Ｓ，７Ｓ，２１Ｓ，２４Ｓ）−３３−（４−ヨードフェニル）−５，１０，１９，２２，３０−ペンタオキソ−２１−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−４，６，１１，２０，２３，２９−ヘキサアザトリトリアコンタン−１，３，７，２４−テトラカルボン酸（２５ａ）：定義されているが、ジオキサン（２ｍＬ）中の化合物２４ａ（０．０２５ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ジオキサン（２ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。アミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（０．０５０ｍｍｏｌ、２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけた。
【０１６９】
【化３５】
2020516611.tif 000038
【０１７０】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，５Ｓ，１９Ｓ，２３Ｓ）−２−（４−（４−（４−ブロモフェニル）ブタンアミド）ブチル）−５−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−１，４，７，１６，２１−ペンタオキソ−３，６，１５，２０，２２−ペンタアザペンタコサン−１，１９，２３，２５−テトラカルボキシレート（２４ｂ）：４−（４−ブロモフェニル）ブタン酸（０．０２４ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０３８ｇ、０．１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０１７ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物２３（０．０５２、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、水（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製し、生成物２４ｂを半固体として単離した（６％）。
【０１７１】
【化３６】
2020516611.tif 000039
【０１７２】
（３Ｓ，７Ｓ，２１Ｓ，２４Ｓ）−３３−（４−ブロモフェニル）−５，１０，１９，２２，３０−ペンタオキソ−２１−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−４，６，１１，２０，２３，２９−ヘキサアザトリトリアコンタン−１，３，７，２４−テトラカルボン酸（２５ｂ）：ジオキサン（２ｍＬ）中の化合物２４ｂ（０．０２０ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ジオキサン（２ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。アミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（０．０５０ｍｍｏｌ、２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけることで、２５ｂが得られた。
【０１７３】
【化３７】
2020516611.tif 000040
【０１７４】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，５Ｓ，１９Ｓ，２３Ｓ）−５−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−１，４，７，１６，２１−ペンタオキソ−２−（４−（４−（ｐ−トリル）ブタンアミド）ブチル）−３，６，１５，２０，２２−ペンタアザペンタコサン−１，１９，２３，２５−テトラカルボキシレート（２４ｃ）：４−（ｐ−トリル）ブタン酸（０．０１７８ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０３８ｇ、０．１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０１７ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物２３（０．０５２、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、水（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製し、生成物２４ｃを半固体として単離した（１８％）。
【０１７５】
【化３８】
2020516611.tif 000041
【０１７６】
（３Ｓ，７Ｓ，２１Ｓ，２４Ｓ）−５，１０，１９，２２，３０−ペンタオキソ−２１−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−３３−（ｐ−トリル）−４，６，１１，２０，２３，２９−ヘキサアザトリトリアコンタン−１，３，７，２４−テトラカルボン酸（２５ｃ）：ジオキサン（２ｍＬ）中の化合物２４ｃ（０．０３ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ジオキサン（２ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。アミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（０．０５０ｍｍｏｌ、２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけた。
【０１７７】
【化３９】
2020516611.tif 000042
【０１７８】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，５Ｓ，１９Ｓ，２３Ｓ）−５−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−１，４，７，１６，２１−ペンタオキソ−２−（４−（４−フェニルブタンアミド）ブチル）−３，６，１５，２０，２２−ペンタアザペンタコサン−１，１９，２３，２５−テトラカルボキシレート（２４ｄ）：４−フェニルブタン酸（０．０１６４ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０３８ｇ、０．１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０１７ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物２３（０．０５２、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、水（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製し、生成物２４ｄを半固体として単離した（２１％）。
【０１７９】
【化４０】
2020516611.tif 000043
【０１８０】
（３Ｓ，７Ｓ，２１Ｓ，２４Ｓ）−５，１０，１９，２２，３０−ペンタオキソ−３３−フェニル−２１−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−４，６，１１，２０，２３，２９−ヘキサアザトリトリアコンタン−１，３，７，２４−テトラカルボン酸（２５ｄ）：ジオキサン（３ｍＬ）中の化合物２４ｄ（０．０４ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ジオキサン（３ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。アミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（０．０８０ｍｍｏｌ、２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけることで、２５ｄが得られた。
【０１８１】
【化４１】
2020516611.tif 000044
【０１８２】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，５Ｓ，１９Ｓ，２３Ｓ）−５−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−１，４，７，１６，２１−ペンタオキソ−２−（４−（４−フェニルブタンアミド）ブチル）−３，６，１５，２０，２２−ペンタアザペンタコサン−１，１９，２３，２５−テトラカルボキシレート（２４ｅ）：４−オキソ−４−（５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−２−イル）ブタン酸（０．０２３ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０３８ｇ、０．１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０１７ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物２３（０．０５２、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、水（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製し、生成物２４ｅを半固体として単離した（１７％）。
【０１８３】
【化４２】
2020516611.tif 000045
【０１８４】
（３Ｓ，７Ｓ，２１Ｓ，２４Ｓ）−５，１０，１９，２２，３０，３３−ヘキサオキソ−３３−（５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−２−イル）−２１−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−４，６，１１，２０，２３，２９−ヘキサアザトリトリアコンタン−１，３，７，２４−テトラカルボン酸（２５ｅ）：ジオキサン（３ｍＬ）中の化合物２４ｅ（０．０２ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ジオキサン（３ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。アミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（０．０８０ｍｍｏｌ、２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけることで、２５ｅが得られた。
【０１８５】
【化４３】
2020516611.tif 000046
【０１８６】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，５Ｓ，１９Ｓ，２３Ｓ）−５−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−２−（４−（２−（４−ヨードフェニル）アセトアミド）ブチル）−１，４，７，１６，２１−ペンタオキソ−３，６，１５，２０，２２−ペンタアザペンタコサン−１，１９，２３，２５−テトラカルボキシレート（２４ｆ）：２−（４−ヨードフェニル）酢酸（０．０２６ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０３８ｇ、０．１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０１７ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物２３（０．０５２、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、水（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製し、生成物２４ｆを半固体として単離した（１０％）。
【０１８７】
【化４４】
2020516611.tif 000047
【０１８８】
（８Ｓ，１１Ｓ，２５Ｓ，２９Ｓ）−１−（４−ヨードフェニル）−２，１０，１３，２２，２７−ペンタオキソ−１１−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−３，９，１２，２１，２６，２８−ヘキサアザヘントリアコンタン−８，２５，２９，３１−テトラカルボン酸（２５ｆ）：ジオキサン（３ｍＬ）中の化合物２４ｆ（０．０２ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ジオキサン（３ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。アミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（０．０８０ｍｍｏｌ、２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけることで、２５ｆが得られた。
【０１８９】
【化４５】
2020516611.tif 000048
【０１９０】
テトラ−ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，５Ｓ，１９Ｓ，２３Ｓ）−２−（４−（１Ｈ−インドール−２−カルボキシアミド）ブチル）−５−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−１，４，７，１６，２１−ペンタオキソ−３，６，１５，２０，２２−ペンタアザペンタコサン−１，１９，２３，２５−テトラカルボキシレート（２４ｇ）：インドール−２−酢酸（０．０１６ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（０．０３８ｇ、０．１ｍｍｏｌ）の固体混合物に、Ｎ２下にて、乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）を添加し、混合物を室温で５分間撹拌した。ＤＩＰＥＡ（０．０１７ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加し、撹拌を１０分間室温で続けた。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の化合物２３（０．０５２、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下により室温で添加し、同じ温度で１２時間の間撹拌した。ＤＭＦを減圧下にて蒸発させることで、懸濁液を得て、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、水（２×１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮することで、粗生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）によって精製し、生成物２４ｇを半固体として単離した（１５％）。
【０１９１】
【化４６】
2020516611.tif 000049
【０１９２】
（７Ｓ，１０Ｓ，２４Ｓ，２８Ｓ）−１−（１Ｈ−インドール−２−イル）−１，９，１２，２１，２６−ペンタオキソ−１０−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−２，８，１１，２０，２５，２７−ヘキサアザトリアコンタン−７，２４，２８，３０−テトラカルボン酸（２５ｇ）：ジオキサン（３ｍＬ）中の化合物２４ｇ（０．０２ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ジオキサン（３ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。アミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（０．０８０ｍｍｏｌ、２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけることで、２５ｇが得られた。
【０１９３】
【化４７】
2020516611.tif 000050
【０１９４】
（９Ｓ，１２Ｓ，２６Ｓ，３０Ｓ）−３，１１，１４，２３，２８−ペンタオキソ−１−フェニル−１２−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−２−オキサ−４，１０，１３，２２，２７，２９−ヘキサアザドトリアコンタン−９，２６，３０，３２−テトラカルボン酸（２５ｈ）：ジオキサン（３ｍＬ）中の化合物２２（本明細書で定義される通りに生成された）（０．０２ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ジオキサン（３ｍＬ）中４ＭのＨＣｌを添加した。結果として得られた反応混合物を３時間の間室温で撹拌した。反応の完了をＴＬＣによってモニタリングした。溶媒を減圧下にて除去し、トルエン（２×５ｍＬ）と共蒸留した。アミンＨＣｌ塩をＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。結果として得られた反応混合物を１０分間撹拌した後に、ｐ−ＮＣＳ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ（０．０８０ｍｍｏｌ、２当量）および蒸留水（０．５ｍＬ）を添加した。撹拌を３時間の間室温で続けた。ＡＣＮおよび水中０．１％のギ酸を使用して、反応混合物をＬＣＭＳ精製に直接かけることで、２５ｈが得られた。
【０１９５】
セクション１．２．
ジメチル４−アミノピリジン−２，６−ジカルボキシレート（２０４）の調製。
【０１９６】
【化４８】
2020516611.tif 000051
ジメチル４−アジドピリジン−２，６−ジカルボキシレート［２４５］（０．９４４５ｇ、４．０ｍｍｏｌ）、１０％のＰｄ／Ｃ（０．１４１９ｇ）およびＤＣＭ：ＭｅＯＨ（１：１、１８ｍＬ）を丸底フラスコの中で合わせた。フラスコをＨ２のバルーンでパージした後、反応物を激しく室温でＨ２雰囲気下にて４６時間の間撹拌した。灰色の混合物をＤＭＦ（４５０ｍＬ）で希釈し、セライトのベッドに通して濾過した。０．２２μｍのナイロン膜に通す後続の濾過に続き、濾液を６０℃で減圧下にて濃縮し、真空中でさらに乾燥させることで、２０４を淡褐色の固体として得た（０．８２４ｇ、９８％の収率）。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ= 7.36 (s, 2 H), 6.72 (s, 2 H), 3.84 (s, 6 H).  13C{1H} APT NMR (126 MHz, DMSO-d6): δ= 165.51, 156.24, 148.05, 111.99, 52.29.  IR (cm-1): 3409, 3339, 3230, 1726, 1639, 1591, 1443, 1265, 996, 939, 787, 630, 543.  HPLC tR = 9.369分 (方法B).  HRMS (m/z): 211.07213 [M + H]+; 計算値: 211.07133.
【０１９７】
エチル４−アミノ−６−（ヒドロキシメチル）ピコリネート（２０５）の調製。
【０１９８】
【化４９】
2020516611.tif 000052
絶対ＥｔＯＨ（２７ｍＬ）中の２０４（０．６７７ｇ、３．２２ｍｍｏｌ）の還流懸濁液に、ＮａＢＨ４（０．１７４５ｇ、４．６１ｍｍｏｌ）を少量ずつ１時間かけて添加することで、淡黄色の懸濁液を得た。反応物を次いでアセトン（３２ｍＬ）でクエンチし、６０℃で減圧下にて褐色の固体に濃縮した。粗生成物をＨ２Ｏ（６０ｍＬ）中に溶解し、酢酸エチル（４×１５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、４０℃で減圧下にて濃縮した。真空中でさらに乾燥させることで、２０５が淡黄色の固体として得られた（０．３１０ｇ、４９％の収率）。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ= 7.07 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.78 (m, 1H), 6.32 (s, 2H), 5.30 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.26 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H).  13C APT NMR (126 MHz, DMSO-d6) δ= 165.57, 162.38, 155.68, 147.25, 108.50, 107.01, 63.95, 60.61, 14.24. IR (cm-1): 3439, 3217, 2974, 2917, 1717, 1643, 1600, 1465, 1396, 1378, 1239, 1135, 1022, 974, 865, 783.  HPLC tR = 8.461分 (方法B).  HRMS (m/z): 197.09288 [M + H]+; 計算値: 197.09207.
【０１９９】
エチル４−アミノ−６−（クロロメチル）ピコリネート（２０６）の調製。
【０２００】
【化５０】
2020516611.tif 000053
塩化チオニル（２．５ｍＬ）および２０５（０．３０１ｇ、１．５３ｍｍｏｌ）の混合物を氷浴中で１時間の間および次いで室温で３０分間撹拌した。黄橙色のエマルジョンを４０℃で減圧下にて油性残留物に濃縮した。残留物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１２ｍＬ）で中和し、次いで酢酸エチル（７５ｍＬ）で抽出した。有機抽出物をＨ２Ｏ（２ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、４０℃で減圧下にて濃縮した。真空中でさらに乾燥させることで、２０６を琥珀ワックスとして得た（０．２８７ｇ、８０％の収率、残留の酢酸エチルについて補正した）。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ= 7.18 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.62 (br s, 2H), 4.62 (s, 2H), 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.30 (t, J = 7.1 Hz, 3H).  13C{1H} APT NMR (126 MHz, DMSO-d6) δ= 164.75, 156.42, 156.19, 147.17, 109.79, 109.50, 60.97, 46.47, 14.15.  IR (cm-1): 3452, 3322, 3209, 2978, 2922, 1726, 1639, 1604, 1513, 1465, 1378, 1248, 1126, 1026, 983, 861, 783, 752, 700.  HPLC tR = 12.364分 (方法B).  HRMS (m/z): 215.05903 [M + H]+; 計算値: 215.05818.
【０２０１】
メチル６−（（１，４，１０，１３−テトラオキサ−７，１６−ジアザシクロオクタデカン−７−イル）メチル）ピコリネート（２０９・２ＴＦＡ・１Ｈ２Ｏ）の調製。
【０２０２】
【化５１】
2020516611.tif 000054
乾燥ＡＣＮ（１．０７５Ｌ）中の１，７，１０，１６−テトラオキサ−４，１３−ジアザシクロオクタデカン（７、１．９６８８ｇ、７．５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．８３５４ｇ、６．５ｍｍｏｌ）の清澄および無色の溶液に、７５℃で、乾燥ＡＣＮ（１２５ｍＬ）中の２０６（０．９２５５ｇ、５．０ｍｍｏｌ）の溶液を、２時間４０分かけて滴下により添加した。次いで、フラスコに凝縮器および乾燥用チューブを備え付け、わずかに黄色の溶液を還流で４２時間の間加熱した。引き続いて、微細な白色の沈殿物を含有する暗金色の溶液を、６０℃で減圧下にて琥珀色の油に濃縮した。粗製油に、０．１％のＴＦＡ（１０ｍＬ）を含有する１０％のＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏを添加した。わずかに懸濁した液を濾過し、濾液を分取ＨＰＬＣによって精製した（方法Ａ）。純粋な画分を合わせ、６０℃で減圧下にて濃縮し、次いで凍結乾燥させることで、２０９（１．６３５０ｇ、５０％の収率）を淡橙色の固体として得た。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ= 8.75 (br s, 2H), 8.17-8.06 (m, 2H), 7.83 (dd, J = 7.4, 1.5 Hz, 1H), 4.68 (br s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.85 (br t, J = 5.1 Hz, 4H), 3.69 (t, J = 5.1 Hz, 4H), 3.59 (br s, 8H), 3.50 (br s, 4H), 3.23 (br t, J = 5.1 Hz, 4H).  13C{1H} APT NMR (126 MHz, DMSO-d6) δ 164.68, 158.78-157.98 (q, TFA), 151.44, 147.13, 139.01, 128.63, 124.87, 120.08-113.01 (q, TFA), 69.33, 69.00, 65.31, 64.60, 56.43, 53.29, 52.67, 46.32.  19F NMR (470 MHz, DMSO-d6) δ= -73.84.  EA実測値: C, 43.88; H, 5.29; N, 6.28.  C20H33N3O6・2CF3COOH・1H2Oの計算値: C, 43.84; H, 5.67; N, 6.39.  HPLC tR = 12.372分 (方法B).  HRMS (m/z): 412.24568 [M + H]+; 計算値: 412.24421.
【０２０３】
エチル４−アミノ−６−（（１６−（（６−（メトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）メチル）−１，４，１０，１３−テトラオキサ−７，１６−ジアザシクロオクタデカン−７−イル）メチル）ピコリネート（２１０）の調製。
【０２０４】
【化５２】
2020516611.tif 000055
凝縮器および乾燥用チューブが備えられている丸底フラスコの中に、２０９（０．４２１０ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（０．３４００ｇ、３．２ｍｍｏｌ）および乾燥ＡＣＮ（１０ｍＬ）を添加した。淡黄色の懸濁液を１５分かけて加熱還流し、この後、２０６（０．１５０８ｇ、０．７０ｍｍｏｌ、残留の酢酸エチルについて補正した）を、乾燥ＡＣＮ（３．５ｍＬ）中のわずかに懸濁した液として添加した。混合物を還流で４４時間の間加熱し、次いで濾過した。橙色の濾液を６０℃で減圧下にて橙茶色の油（０．６１２ｇ）に濃縮し、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。HRMS (m/z): 590.32021 [M + H]+; 計算値: 590.31844.
【０２０５】
４−アミノ−６−（（１６−（（６−カルボキシピリジン−２−イル）メチル）−１，４，１０，１３−テトラオキサ−７，１６−ジアザシクロオクタデカン−７−イル）メチル）ピコリン酸（２１１・４ＴＦＡ）の調製。
【０２０６】
【化５３】
2020516611.tif 000056
化合物２１０（０．６１２ｇ）を６ＭのＨＣｌ（７ｍＬ）中に溶解し、９０℃で１７時間の間加熱した。わずかに沈殿した物を含有する橙茶色溶液を、６０℃で減圧下にて淡褐色の固体に濃縮した。この固体に、０．１％のＴＦＡ（３ｍＬ）を含有する１０％のＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏを添加した。わずかに懸濁した液を濾過し、方法Ａを使用する分取ＨＰＬＣによって、濾液を精製した。純粋な画分を合わせ、６０℃で減圧下にて濃縮し、次いで凍結乾燥させることで、２１１をオフホワイトの固体として得た（０．２９７４ｇ、２ステップにわたって４６％の収率）。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ= 8.13-8.08 (m, 2H), 7.80 (dd, J = 7.3, 1.6 Hz, 1H), 7.64 (br s), 7.24 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.15 (s, 2H), 3.85 (t, J = 5.0 Hz, 4H), 3.63 (t, J = 5.1 Hz, 4H), 3.57-3.50 (m, 12H), 3.09 (br t, J = 5.2 Hz, 4H).  13C{1H} NMR (126 MHz, DMSO-d6) δ 165.96, 163.37, 159.47, 158.78-157.98 (q, TFA), 151.93, 151.64, 148.25, 144.68, 139.59, 128.43, 124.96, 120.79-113.68 (q, TFA), 109.40, 108.96, 70.03, 69.89, 67.09, 65.16, 57.28, 55.85, 54.47, 53.81.  19F NMR (470 MHz, DMSO-d6) δ= -74.03.  EA実測値: C, 40.60; H, 4.29; N, 7.04. C26H37N5O8・4CF3COOHの計算値: C, 40.69; H, 4.12; N, 6.98.  IR (cm-1): 3387, 3161, 1735, 1670, 1204, 1130, 791, 722. HPLC tR = 11.974分 (方法B); 11.546分 (方法D).  HRMS (m/z): 548.26883 [M + H]+; 計算値: 548.27149.
【０２０７】
６−（（１６−（（６−カルボキシピリジン−２−イル）メチル）−１，４，１０，１３−テトラオキサ−７，１６−ジアザシクロオクタデカン−７−イル）メチル）−４−イソチオシアナトピコリン酸（２１２、ｍａｃｒｏｐａ−ＮＣＳ）の調製。
【０２０８】
【化５４】
2020516611.tif 000057
２１１（０．１５９８ｇ、０．１６ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（０．２５４０ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の白色の懸濁液を、還流でアセトン（１０ｍＬ）中にて３０分間加熱した後に、ＣＳＣｌ２（３０５μＬのＣＳＣｌ２、８５％、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ）をゆっくり添加した。結果として得られた橙色の懸濁液を、還流で３時間の間加熱し、次いで、３０℃で減圧下にて淡橙色の固体に濃縮した。０．２％のＴＦＡ（合計８ｍＬ）を含有する１０％のＡＣＮ／Ｈ２Ｏ中に、固体を少量ずつ溶解し、濾過し、方法Ｃ［２４６］を使用する分取ＨＰＬＣによって直ちに精製した。純粋な画分を合わせ、室温で減圧下にて濃縮することで、有機溶媒を除去し、次いで凍結乾燥させた。直ちに濃縮することができない画分を、−８０℃で凍結した。イソチオシアネート２１２を白色および淡黄色の固体（０．０５４７ｇ）の混合物として得て、−８０℃でＤｒｉｅｒｉｔｅの瓶の中で貯蔵した。公知濃度のフルオロベンゼンでスパイクされた２１２の試料の１Ｈ  ＮＭＲおよび１９Ｆ  ＮＭＲスペクトルからの算出で、２１２をテトラ−ＴＦＡ塩として単離したと推算した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ= 8.17-8.06 (m, 2H), 8.00 (s w/微細な分割, 1H), 7.84 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.81-7.75 (d w/微細な分割, J = 7.16 Hz, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 3.89-3.79 (m, 8H), 3.62-3.46 (m, 16H). 19F NMR (470 MHz, DMSO-d6) δ= -74.17. IR (cm-1): 約3500-2800, 2083, 2026, 1735, 1670, 1591, 1448, 1183, 1130, 796, 717.  HPLC tR = 15.053分 (方法B); 13.885分 (方法D).  HRMS (m/z): 590.22600 [M + H]+; 計算値: 590.22791.
【０２０９】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−エチニルフェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（２１４）の調製。
【０２１０】
【化５５】
2020516611.tif 000058
公開されている方法［２４７］に従ってアルキン２１４を調製し、オフホワイトの粉末として単離した。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ= 7.90 (s, 1H), 7.58 (t, 1H, J = 1.7 Hz), 7.51 (dd, 1H, J1= 8.2 Hz, J2 = 1.3 Hz), 7.18 (t, 1H, J = 7.9 Hz), 7.05 (d, 1H, J = 7.7 Hz), 6.38 (d, 1H, J = 7.9 Hz), 6.28 (br s, 1H), 5.77 (d, 1H, J = 6.9 Hz), 4.32 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.53 (m, 1H), 3.05 (m, 1H), 3.00 (s, 1H), 2.39 (m, 2H), 2.07 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 1.74 (m, 1H), 1.62 (m, 1H), 1.49-1.37 (m, 4H), 1.41 (s, 18H), 1.37 (s, 9H).
【０２１１】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リシナート（２１５）の調製。
【０２１２】
【化５６】
2020516611.tif 000059
ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（５．０ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネート（２．７４ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）の懸濁液を、室温でアルゴン下にて撹拌した。次いで、ＤＩＰＥＡ（１．８６ｍＬ、１０．７ｍｍｏｌ）を添加し、懸濁液を終夜撹拌した。溶媒を減圧下にて蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した（ヘキサン中０〜１００％のＥｔＯＡｃ）。リジン２１５を白色の粉末として単離した（２．５ｇ、４１％）。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ= 7.76 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.59 (d, 2H, J = 7.3 Hz), 7.40 (t, 2H, J = 7.4 Hz), 7.32 (t, 2H, J = 7.3 Hz), 5.46 (br s, 1H), 4.71 (m, 2H), 4.45 (m, 2H), 4.23 (t, 1H, J = 6.6 Hz), 3.14 (br s, 2H), 2.85 (s, 4H), 2.02 (m, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.58 (m, 4H), 1.44 (s, 9H).
【０２１３】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（２１６）の調製。
【０２１４】
【化５７】
2020516611.tif 000060
ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中のＬ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯｔＢｕ・ＨＣｌ（１．４９ｇ、４．０ｍｍｏｌ）の懸濁液をＤＩＰＥＡ（０．８７ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ）で処理した。結果として得られた混合物に、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中のリジン２１５（２．２ｇ、３．９ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応物を終夜室温でアルゴン下にて撹拌した。それを次いで、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し（ヘキサン中０〜１００％のＥｔＯＡｃ）、ジ−リジン２１６を白色の粉末として単離した（２．２ｇ、７２％）。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ= 7.76 (d, 2H, J = 7.5 Hz), 7.59 (d, 2H, J = 7.3 Hz), 7.40 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 7.32 (m, 8H), 6.69 (br s, 1H), 5.60 (br s, 1H), 5.06 (m, 4H), 4.72 (br s, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 3.14 (m, 4H), 1.85 (m, 2H), 1.73 (m, 2H), 1.50 (m, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.44 (s, 9H), 1.39 (m, 4H).
【０２１５】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（４−ヨードフェニル）アセテート（２１７）の調製。
【０２１６】
【化５８】
2020516611.tif 000061
ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中の２−（４−ヨードフェニル）酢酸（７８６ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ・ＨＣｌ（６７１ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）の溶液を、１５分間室温でアルゴン下にて撹拌した。次いで、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（３６８ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）およびＮＥｔ３（０．５６ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を７時間の間撹拌した。それを次いで、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜１００％のＥｔＯＡｃ）によって精製し、ＮＨＳエステル２１７を白色の固体として単離した（７６０ｍｇ、７０％）。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ= 7.69 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 7.09 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 3.88 (s, 2H), 2.83 (s, 4H).
【０２１７】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（１−アジド−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘンイコサン−２１−オイル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（２１８）の調製。
【０２１８】
【化５９】
2020516611.tif 000062
ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中のＦｍｏｃ保護ジ−リジン２１６（７６８ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮＨＥｔ２（２．０７ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を終夜室温で撹拌した。溶媒を減圧下にて除去し、粗生成物、黄色の油状物をさらに精製することなく使用した。ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）中のこの油（１８３ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＮＥｔ３（５７μＬ、０．４１ｍｍｏｌ）の溶液、およびＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のアジド−ＰＥＧ６−ＮＨＳエステル（１００ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ；Ｂｒｏａｄｐｈａｒｍ、ＵＳＡ）の溶液を順次に添加し、反応物を終夜室温で撹拌した。それを次いで、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ溶液で順次に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮することで、さらに精製する必要なくアジ化物２１８を無色の油状物として得た（１８４ｍｇ；９５％）。質量 (ESI+): 926.4 [M+H]+.  質量計算値 = 925.54.
【０２１９】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−（１−（（９Ｓ，１２Ｓ）−９−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１２−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−３，１１，１４−トリオキソ−１−フェニル−２，１７，２０，２３，２６，２９，３２−ヘプタオキサ−４，１０，１３−トリアザテトラトリアコンタン−３４−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（２１９）の調製。
【０２２０】
【化６０】
2020516611.tif 000063
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の１００μＬの０．５Ｍ  ＣｕＳＯ４および１００μＬの１．５Ｍアスコルビン酸ナトリウムの溶液を５分間混合し、次いで、ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の２１８（１８４ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）および２１４（１３２ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。結果として得られた混合物を室温で４５分間撹拌した。それを次いで、減圧下にて濃縮し、粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ中０〜３０％のＭｅＯＨ）によって精製することで、トリアゾール２１９を橙色の油状物として得た（２８５ｍｇ；８７％）。質量 (ESI+): 1557.2 [M+H]+.  質量計算値 = 1555.90.
【０２２１】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−（１−（（２３Ｓ，２６Ｓ）−２６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２３−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−３３−（４−ヨードフェニル）−２１，２４，３２−トリオキソ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサ−２２，２５，３１−トリアザトリトリアコンチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（２２０）の調製。
【０２２２】
【化６１】
2020516611.tif 000064
Ｃｂｚ保護トリアゾール２１９（２８５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を二口フラスコの中でＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中に溶解した。溶液に、１０％のＰｄ／Ｃ（２０ｍｇ）を添加し、懸濁液を振盪し、フラスコを排気した。懸濁液を次いで、Ｈ２雰囲気下に置き、終夜撹拌した。それをセライトに通して濾過し、フィルターケーキをＭｅＯＨで３回洗浄した。合わせた濾液を減圧下にて濃縮することで、遊離アミンを無色の油状物として得て（１１７ｍｇ；４５％）、これをさらに精製することなく使用した。質量 (ESI+): 1423.8 [M+H]+.  質量計算値 = 1422.77.ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中のアミン（１１７ｍｇ、８２μｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＤＩＰＥＡ（２３μＬ、１３１ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を室温でアルゴン下にて撹拌した。次いで、ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中の２１７（３７ｍｇ、１０３μｍｏｌ）の溶液を添加し、反応物を室温で２時間の間撹拌した。それを次いで、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）に注ぎ入れ、層を分離させた。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮することで、粗生成物を無色の半固体として得た。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ中１０％のＭｅＯＨ）によって精製することで、ヨウ化フェニル２２０を無色の油状物として得た（３４ｍｇ；２５％）。質量 (ESI+): 1666.6 [M+H]+.  質量計算値 = 1665.80.
【０２２３】
（（（Ｓ）−１−カルボキシ−５−（３−（３−（１−（（２３Ｓ，２６Ｓ）−２６−カルボキシ−２３−（４−（３−（２−カルボキシ−６−（（１６−（（６−カルボキシピリジン−２−イル）メチル）−１，４，１０，１３−テトラオキサ−７，１６−ジアザシクロオクタデカン−７−イル）メチル）ピリジン−４−イル）チオウレイド）ブチル）−３３−（４−ヨードフェニル）−２１，２４，３２−トリオキソ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサ−２２，２５，３１−トリアザトリトリアコンチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）ペンチル）カルバモイル）−Ｌ−グルタミン酸（２２１、ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０）の調製。
【０２２４】
【化６２】
2020516611.tif 000065
ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中の２２０（３４ｍｇ、２０μｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（０．５ｍＬ）を添加し、反応物を室温で５時間の間撹拌した。それを次いで、減圧下にて濃縮し、粗生成物をＨ２Ｏで希釈し、凍結乾燥させることで、遊離アミンをＴＦＡ塩として得た。質量 (ESI+): 1342.5 [M+H]+.  質量 (ESI-): 1340.6 [M-H]-.  質量計算値 = 1341.50.ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中のアミン（９ｍｇ、６．７μｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中のｍａｃｒｏｐａ−ＮＣＳ  ２１２（１５ｍｇ、２５．４μｍｏｌ）の溶液を添加した。次いで、ＤＩＰＥＡ（３００μＬ、１．７２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で２時間の間撹拌した。揮発分を減圧下にて除去し、粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製することで、ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０（２２１）を白色の粉末として得た（５．４ｍｇ；４２％）。質量 (ESI+): 1932.76 [M+H]+. 1931.09 [M+H]-.  質量計算値 = 1931.91.
【０２２５】
２２５Ａｃ−ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０の放射性合成の調製。
一般。全ての試薬は、別段の注記がない限り、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、試薬グレードであった。塩酸（ＨＣｌ）は、微量分析品質のためのｔｒａｃｅＳＥＬＥＣＴ（登録商標）（＞９９．９９９％）であった。アルミニウム裏打ちシリカ薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）プレートは、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから購入した。０．０５ＭのＨＣｌおよび１ＭのＮＨ４ＯＡｃのストック溶液を、Ｍｉｌｌｉ−Ｑ（登録商標）水中での希釈によって調製した。
【０２２６】
放射標識化手順。０．０５ＭのＨＣｌ中の２２５Ａｃ（ＮＯ３）３（Ｏａｋ  Ｒｉｄｇｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＵＳＡ）の溶液に（９７０μＬ中１７．９ＭＢｑ）、ＤＭＳＯ中のｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０の１ｍｇ／ｍＬ溶液２０μＬを添加した。ｐＨを９０μＬの１Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃの添加によって５〜５．５に上昇させた。反応物を周期的に振盪しながら室温で２０分間静置した。次いで、２００μＬの反応溶液を除去し、３．８ｍＬの規定生理食塩水（脱イオン化Ｈ２Ｏ中０．９％のＮａＣｌ；ＶＷＲ）で希釈することで、９１０ｋＢｑ／ｍＬの濃度を有する溶液を得た。アリコートを最終溶液から除去し、アルミニウム裏打ちシリカＴＬＣプレート上にスポットすることで、放射化学的収率を決定した。０．０５ＭのＨＣｌ中の２２５Ａｃ（ＮＯ３）３溶液のアリコートを、対照として平行レーンにスポットした。プレートを１０％ｖ／ｖのＭｅＯＨ／１０ｍＭＥＤＴＡ移動相で直ちに実行し、次いで、８時間の間静置させることで、放射化学的平衡に到達するのを可能にした。プレートを、リン光体スクリーン上での３分曝露に続き、Ｃｙｃｌｏｎｅ  Ｐｌｕｓ  Ｓｔｏｒａｇｅ  Ｐｈｏｓｐｈｏｒ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）上で可視化した。放射化学的収率を総活性に対する２２５Ａｃ−ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０の比として表し、９８．１％であると決定した。
【０２２７】
２２５Ａｃ−ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０を用いる体内分布研究。
細胞培養。ＰＳＭＡ発現ヒト前立腺がん細胞株、ＬＮＣａＰは、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから得た。細胞培養供給物は、別段の注記がない限りＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎからであった。ＬＮＣａＰ細胞は、１０％のウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、４ｍＭのＬ−グルタミン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＮ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、２．５ｍｇ／ｍＬのＤ−グルコース、および５０μｇ／ｍＬのゲンタマイシンが補充されたＲＰＭＩ−１６４０培地中で、加湿インキュベーターの中にて３７℃／５％のＣＯ２で維持した。０．２５％トリプシン／エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）でインキュベートすることによる継代または１２ウェルアッセイプレートへの移動のために、細胞をフラスコから除去した。
【０２２８】
異種移植片を用いるマウスの接種。全ての動物研究は、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｆ  Ｗｅｉｌｌ  Ｃｏｒｎｅｌｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅによって承認され、ＵＳＰＨＳ  Ｐｏｌｉｃｙ  ｏｎ  Ｈｕｍａｎｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓによって説明されたガイドラインに従って行われた。動物は、１２時間の明／暗サイクルを用いる承認施設に標準条件下で収容した。食物および水は、研究過程の全体にわたって無制限に提供した。無毛の雄性ｎｕ／ｎｕマウスは、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙをから購入した。マウスにおける接種のため、ＬＮＣａＰ細胞をＰＢＳ：マトリゲル（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）の１：１混合物中に４×１０７細胞／ｍＬで懸濁させた。各マウスの左側腹部に０．２５ｍＬの細胞懸濁液を注入した。腫瘍が１００〜４００ｍｍ３の範囲にある時に体内分布を行った。
【０２２９】
ＬＮＣａＰ異種移植片マウスにおける２２５Ａｃ−ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０の体内分布。１５匹のＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍保有マウス（１時点につき５匹）に、各リガンド８５〜９５ｋＢｑおよび１００ｎｇ（５０ｐｍｏｌ）のボーラス注入を静脈内注入した。マウスを注入後４時間、２４時間および９６時間で頸椎脱臼によって屠殺した。血液試料を除去し、完全な体内分布研究を以下臓器に（内容物とともに）行った：心臓、肺、肝臓、小腸、大腸、胃、脾臓、膵臓、腎臓、筋肉、骨および腫瘍。組織を秤量し、２４７０  Ｗｉｚａｒｄ  Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｇａｍｍａ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）でカウントした。１％ＩＤ／ｍＬ試料を、各セットの組織試料の前およびそれに続いてカウントすることで、減衰補正が行われるのを可能にした。カウント数を減衰についておよび注入された活性について補正し、組織取込みを１グラム当たりのパーセント注入用量として表した（％ＩＤ／ｇ）。標準誤差測定値を各データ点について算出した。
【０２３０】
表1.LNCaP異種移植片マウス(n=1時点につき5)における静脈内注入に続くt=4時間、24時間および96時間での225Ac-macropa-RPS-070の臓器分布。値は%ID/gとして表される。
【表２】
2020516611.tif 000066
【０２３１】
［２２５Ａｃ（ｍａｃｒｏｐａ）］＋錯体の上記されているものについての結果の考察
［２２５Ａｃ（ｍａｃｒｏｐａ）］＋のインビボ安定性を、それの体内分布を２２５Ａｃ（ＮＯ３）３および［２２５Ａｃ（ＤＯＴＡ）］−のものと比較することによって判定した。Ｃ５７ＢＬ／６匹のマウスに１０〜５０ｋＢｑの各放射性金属錯体を、尾静脈を介して注入し、１５分後、１時間後または５時間後に屠殺した。各臓器に保持された２２５Ａｃの量をガンマカウントすることによって定量化し、組織１グラム当たりの注入用量のパーセント（％ＩＤ／ｇ）として報告した。インビボでの放射性同位体の損失に至る２２５Ａｃ錯体の不適切な安定性は、マウスの肝臓、脾臓および骨における２２５Ａｃの蓄積によって顕在化される。［１１，１２，３１］非錯体化２２５Ａｃ（ＮＯ３）３の体内分布プロファイル（図５Ａ）は、肝臓および脾臓における大きな蓄積に連動されるゆっくりとした血中クリアランスおよび排泄を明らかにしている。［２２５Ａｃ（ｍａｃｒｏｐａ）］＋の体内分布プロファイル（図５Ｂ）は、２２５Ａｃ（ＮＯ３）３のそれと著しく異なる。［２２５Ａｃ（ｍａｃｒｏｐａ）］＋はマウスから急速に排出され、注入後１時間までに血中で測定される活性は非常に少なかった。注入用量のほとんどは腎性排泄され、引き続いて、尿において検出されたが、これは、注入後１５分および１時間でマウスにおいて観察された［２２５Ａｃ（ｍａｃｒｏｐａ）］＋の適度な腎臓および膀胱取込みを説明している。重要なことに、［２２５Ａｃ（ｍａｃｒｏｐａ）］＋は該研究の時間経過にわたって任意の臓器に蓄積せず、該錯体がインビボで遊離２２５Ａｃ３＋を放出しないことを示した。それの体内分布プロファイルは、インビボで２２５Ａｃ３＋を保持すると前にされている［２２５Ａｃ（ＤＯＴＡ）］−のそれ（図５Ｃ）と同様であった。［７］注目すべきことに、［２２５Ａｃ（ＤＯＴＡ）］−は、尿を介してより急速に排出するように見え、甲状腺においてより低い程度に取り込まれた。これらの差異は、一部には該錯体の反対の電荷により起こることがある。集団的に、これらの体内分布研究の結果は、［２２５Ａｃ（ｍａｃｒｏｐａ）］＋がインビボで高安定であることを実証している。
【０２３２】
ＲＰＳ−０７０をｍａｃｒｏｐａ−ＮＣＳにコンジュゲートし、ここで、この構築物は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を阻害するグルタメート−尿素−リジン部分［２３７〜２４１］、前立腺がん細胞に過剰発現される膜結合糖タンパク質を保有する［２４２］。アルブミン結合性官能基、この場合においてヨードフェニルを含めた基も、これらの化合物の重要な構成成分であり、それらの循環半減期を延長する［２４３，２４４］。２２５Ａｃを用いるｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０の放射標識化は、２０分で室温およびｐＨ５〜５．５にて進行し、９８％のＲＣＹを得た。２２５Ａｃ−ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０（８５〜９５ｋＢｑ）を次いで、ＬＮＣａＰ（前立腺がん）腫瘍異種移植片保有マウスに注入し、錯体の体内分布を注入後４時間、２４時間および９６時間に決定した（上記表１参照、図６）。２２５Ａｃ−ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０は、血液から急速に排出され、主に腎臓および腫瘍に分布された（注入後４時間で、それぞれ５２±１６％ＩＤ／ｇおよび１３±３％ＩＤ／ｇ）。４時間後、ほとんどの活性が腎臓から排出し、漸進的な腫瘍洗い流しが観察された。重要なことに、錯体は、他の臓器による無視できる取込み（注入後９６時間で＜１％ＩＤ／ｇ）を呈し、時間をかけて任意の臓器に集まらなかった。４〜９６時間で腫瘍から排出した活性は、この時間中にマウスの肝臓、脾臓および骨における２２５Ａｃの蓄積の欠如によって証明されている通り、ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０によってキレート化されたままであった。これらの結果は重要であり、なぜならば、それらは、ｍａｃｒｏｐａ−ＲＰＳ−０７０が数日にわたってインビボで２２５Ａｃを安定して保持することができること、および該構築が腫瘍に対して選択的に標的化することができることを実証しているからである。
【０２３３】
セクション１．２参考文献
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【０２３４】
セクション１．３
一般的方法。全ての溶媒は、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、別段に表示されていない限り試薬グレード品質であった。溶媒は、活性化されたステンレス鋼カラム（Ｐｕｒｅ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＬＬＣ）上での蒸留によってまたは活性化されたモレキュラーシーブ上で乾燥させることによってのいずれかで乾燥させた。試薬は、ＢｒｏａｄＰｈａｒｍから購入した２−アジド酢酸−ＮＨＳエステルおよびアジド−ＰＥＧｎ−ＮＨＳエステル化合物を除いてＳｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから購入した。試薬は全て試薬グレードであり、さらに精製することなく使用した。
【０２３５】
下に記載されている全ての反応を乾燥ガラス器具の中で実施した。ＶＷＲ（登録商標）Ｈｉｇｈ  Ｐｕｒｉｔｙ  Ｓｉｌｉｃａ  Ｇｅｌ  ６０Å上のシリカクロマトグラフィー、シリカコーティングガラスプレート（Ａｎａｌｔｅｃｈ）上の分取ＴＬＣを使用して、およびＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ＋（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ）システムを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって、精製を行った。Ａｇｉｌｅｎｔ  ＰｒｏＳｔａｒ  ３２５  Ｄｕａｌ  Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ  ＵＶ−Ｖｉｓ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒを装着したデュアルポンプＡｇｉｌｅｎｔ  ＰｒｏＳｔａｒ  ＨＰＬＣ上のＸＢｒｉｄｇｅ（商標）Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ５μｍ  ＯＢＤ（商標）１９×１００ｍｍカラム（Ｗａｔｅｒｓ）を使用して、分取ＨＰＬＣを行った。ＵＶ吸収を２２０ｎｍおよび２８０ｎｍでモニタリングした。２成分溶媒系を使用し、溶媒ＡはＨ２Ｏ＋０．０１％のＴＦＡを含み、溶媒Ｂは９０％ｖ／ｖのＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ＋０．０１％のＴＦＡからなっていた。以下のグラジエントＨＰＬＣ方法：０％Ｂ  ０〜１分、０〜１００％Ｂ  １〜２８分、１００〜０％Ｂ  ２８〜３０分を使用して、精製を達成した。
【０２３６】
薄層クロマトグラフィー、分析ＨＰＬＣおよび質量分光分析法を使用して、最終生成物を同定および特徴付けた。ＮＭＲ分光法を使用することで、化合物７ａ、８ａ、２６および２８の構造を確認した。ＸＳｅｌｅｃｔ（商標）ＣＳＨ（商標）Ｃ１８  ５μｍ  ４．６×５０ｍｍカラム（Ｗａｔｅｒｓ）を使用して、分析ＨＰＬＣを行った。Ｗａｔｅｒｓ  ＳＱ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ２に連動されたＷａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ（登録商標）を使用するＬＣＭＳ分析によって、質量決定を行った。Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＩＩＩ  ５００ＭＨｚ分光計を使用して、ＮＭＲ分析を行った。スペクトルはｐｐｍとして報告されており、クロロホルム−ｄ（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）における溶媒共鳴を基準とした。生物学的アッセイにおいて評価された全ての化合物の純度は、分析ＨＰＬＣによって判断されたところ＞９５％であった。
【０２３７】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−エチニルフェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（２６）：
【０２３８】
【化６３】
2020516611.tif 000067
Ｋｅｌｌｙ  Ｊ、Ａｍｏｒ−Ｃｏａｒａｓａ  Ａ、Ｎｉｋｏｌｏｐｏｕｌｏ  Ａ、Ｋｉｍ  Ｄ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ｃ．，Ｊｒ、Ｐｏｎｎａｌａ  Ｓ、Ｂａｂｉｃｈ  ＪＷ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓに記載されているプロトコール、およびＰＥＴ画像化による前立腺がんの検出のための高親和性１８Ｆ標識化ＰＳＭＡリガンドの新たなクラスの前臨床評価、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｍｏｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ２０１７；４４：６４７〜６１に従って、アルキン２６を調製し、オフホワイトの粉末として単離した。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.90 (s, 1H), 7.58 (t, 1H, J = 1.7 Hz), 7.51 (dd, 1H, J1= 8.2 Hz, J2 = 1.3 Hz), 7.18 (t, 1H, J = 7.9 Hz), 7.05 (d, 1H, J = 7.7 Hz), 6.38 (d, 1H, J = 7.9 Hz), 6.28 (br s, 1H), 5.77 (d, 1H, J = 6.9 Hz), 4.32 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.53 (m, 1H), 3.05 (m, 1H), 3.00 (s, 1H), 2.39 (m, 2H), 2.07 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 1.74 (m, 1H), 1.62 (m, 1H), 1.49-1.37 (m, 4H), 1.41 (s, 18H), 1.37 (s, 9H).
【０２３９】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（８ａ）に関する、セクション１．１におけるものへの合成手順
【０２４０】
【化６４】
2020516611.tif 000068
２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リシナート（７ａ）：ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ  ６ａ（５．０ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネート（２．７４ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）の懸濁液を、室温でアルゴン下にて撹拌した。次いで、ＤＩＰＥＡ（１．８６ｍＬ、１０．７ｍｍｏｌ）を添加し、懸濁液を終夜撹拌した。溶媒を減圧下にて蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜１００％のＥｔＯＡｃ）によって精製した。ＮＨＳエステル７ａを白色の粉末として単離した（２．５ｇ、４１％）。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.76 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.59 (d, 2H, J = 7.3 Hz), 7.40 (t, 2H, J = 7.4 Hz), 7.32 (t, 2H, J = 7.3 Hz), 5.46 (br s, 1H), 4.71 (m, 2H), 4.45 (m, 2H), 4.23 (t, 1H, J = 6.6 Hz), 3.14 (br s, 2H), 2.85 (s, 4H), 2.02 (m, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.58 (m, 4H), 1.44 (s, 9H).
【０２４１】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（８ａ）：ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中のＬ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯｔＢｕ．ＨＣｌ（１．４９ｇ、４．０ｍｍｏｌ）の懸濁液をＤＩＰＥＡ（０．８７ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ）で処理した。結果として得られた混合物に、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の化合物７ａ（２．２ｇ、３．９ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応物を終夜室温でアルゴン下にて撹拌した。それを次いで飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜１００％のＥｔＯＡｃ）によって精製し、ジ−リジン８ａを白色の粉末として単離した（２．２ｇ、７２％）。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.76 (d, 2H, J = 7.5 Hz), 7.59 (d, 2H, J = 7.3 Hz), 7.40 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 7.32 (m, 8H), 6.69 (br s, 1H), 5.60 (br s, 1H), 5.06 (m, 4H), 4.72 (br s, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 3.14 (m, 4H), 1.85 (m, 2H), 1.73 (m, 2H), 1.50 (m, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.44 (s, 9H), 1.39 (m, 4H).
【０２４２】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（４−ヨードフェニル）アセテート（２８）：
【０２４３】
【化６５】
2020516611.tif 000069
ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中の２−（４−ヨードフェニル）酢酸２７（７８６ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ．ＨＣｌ（６７１ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）の溶液を、１５分間室温でアルゴン下にて撹拌した。次いで、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（３６８ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．５６ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を７時間の間撹拌した。それを次いで、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮した。粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜１００％のＥｔＯＡｃ）によって精製し、ＮＨＳエステル２８を白色の固体として単離した（７６０ｍｇ、７０％）。1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.69 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 7.09 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 3.88 (s, 2H), 2.83 (s, 4H).
【０２４４】
ＲＰＳ−０６９の合成のための代表的な手順を用いる三官能性リガンド（ＲＰＳ−０６１、ＲＰＳ−０６３、ＲＰＳ−０６６、ＲＰＳ−０６７、ＲＰＳ−０６８、ＲＰＳ−０６９）の合成
【０２４５】
【化６６】
2020516611.tif 000070
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（１−アジド−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサヘンイコサン−２１−オイル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（２９ｅ）：ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中のＦｍｏｃ保護化合物８ａ（７６８ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）の溶液に、ジエチルアミン（２．０７ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を終夜室温で撹拌した。溶媒を減圧下にて除去し、粗生成物、黄色の油状物をさらに精製することなく使用した。ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）中のこの黄色の油（１８３ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＴＥＡ（５７μＬ、０．４１ｍｍｏｌ）の溶液およびＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のアジド−ＰＥＧ６−ＮＨＳエステル（１００ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応物を終夜室温で撹拌した。それを次いで、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ溶液で順次に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮することで、さらに精製する必要なくアジ化物２９ｅを無色の油状物として得た（１８４ｍｇ；９５％）。質量 (ESI+): 926.4 [M+H]+. 質量計算値 = 925.54.
【０２４６】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−（１−（（９Ｓ，１２Ｓ）−９−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１２−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−３，１１，１４−トリオキソ−１−フェニル−２，１７，２０，２３，２６，２９，３２−ヘプタオキサ−４，１０，１３−トリアザテトラトリアコンタン−３４−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（３０ｅ）：ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の１００μＬの０．５Ｍ  ＣｕＳＯ４および１００μＬの１．５Ｍアスコルビン酸ナトリウムの溶液を５分間混合し、次いで、ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の２９ｅ（１８４ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）および２６（１３２ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。結果として得られた混合物を室温で４５分間撹拌した。それを次いで減圧下にて濃縮し、粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ中０〜３０％のＭｅＯＨ）によって精製することで、トリアゾール３０ｅを橙色の油状物として得た（２８５ｍｇ；８７％）。質量 (ESI+): 1557.2 [M+H]+. 質量計算値 = 1555.90.
【０２４７】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−（１−（（２３Ｓ，２６Ｓ）−２６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２３−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−３３−（４−ヨードフェニル）−２１，２４，３２−トリオキソ−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサ−２２，２５，３１−トリアザトリトリアコンチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（３１ｅ）：Ｃｂｚ保護トリアゾール３０ｅ（２８５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を二口フラスコの中でＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中に溶解した。溶液に、１０％のＰｄ／Ｃ（２０ｍｇ）を添加し、懸濁液を振盪し、フラスコを排気した。懸濁液を次いでＨ２雰囲気下に置き、終夜撹拌した。それをセライトに通して濾過し、フィルターケーキをＭｅＯＨで３回洗浄した。合わせた濾液を減圧下にて濃縮することで、遊離アミンを無色の油状物として得て（１１７ｍｇ；４５％）、これをさらに精製することなく使用した。質量 (ESI+): 1423.8 [M+H]+. 質量計算値 = 1422.77.ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中の遊離アミン（１１７ｍｇ、８２μｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＤＩＰＥＡ（２３μＬ、１３１ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を室温でアルゴン下にて撹拌した。次いで、ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中の２８（３７ｍｇ、１０３μｍｏｌ）の溶液を添加し、反応物を室温で２時間の間撹拌した。それを次いで、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）中に注ぎ、層を分離した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮することで、粗生成物を無色の半固体として得た。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ中１０％のＭｅＯＨ）によって精製することで、ヨウ化フェニル３１ｅを無色の油状物として得た（３４ｍｇ；２５％）。質量 (ESI+): 1666.6 [M+H]+. 質量計算値 = 1665.80.
【０２４８】
（（（１Ｓ）−１−カルボキシ−５−（３−（３−（１−（（２３Ｓ，２６Ｓ）−２６−カルボキシ−３３−（４−ヨードフェニル）−２１，２４，３２−トリオキソ−２３−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−３，６，９，１２，１５，１８−ヘキサオキサ−２２，２５，３１−トリアザトリトリアコンチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）ペンチル）カルバモイル）−Ｌ−グルタミン酸（ＲＰＳ−０６９）：ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中の３１ｅ（３４ｍｇ、２０μｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（０．５ｍＬ）を添加し、反応物を室温で５時間の間撹拌した。それを次いで減圧下にて濃縮し、粗生成物をＨ２Ｏ中に希釈し、凍結乾燥させることで、遊離アミンをＴＦＡ塩として得た。質量 (ESI+): 1342.5 [M+H]+. 質量(ESI-): 1340.6 [M-H]-. 質量計算値 = 1341.50.Ｈ２Ｏ（０．５ｍＬ）中のｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ・２．５ＨＣｌ・２．５Ｈ２Ｏ（Ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃｓ，Ｉｎｃ．）（１３ｍｇ、１９μｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の遊離アミン（１８ｍｇ、１３μｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物がｐＨおよそ９になるまで、ＤＩＰＥＡを添加した。反応物を室温で３時間の間撹拌し、この時点で、反応混合物を次いで分取ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物に対応するピークを回収し、凍結乾燥させることで、ＲＰＳ−０６９を白色の粉末として得た（８ｍｇ；３２％）。質量 (ESI+): 1893.3 [M+H]+, 947.6 [(M+2H)/2]+.  質量 (ESI-): 1891.4 [M-H]-, 945.5 [(M-2H)/2]-. 質量計算値 = 1892.70.
【０２４９】
（（（１Ｓ）−１−カルボキシ−５−（３−（３−（１−（（１７Ｓ，２０Ｓ）−２０−カルボキシ−２７−（４−ヨードフェニル）−１５，１８，２６−トリオキソ−１７−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−３，６，９，１２−テトラオキサ−１６，１９，２５−トリアザへプタコシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）ペンチル）カルバモイル）−Ｌ−グルタミン酸（ＲＰＳ−０６１）：ＲＰＳ−０６９について記載されている手順に従って、ＲＰＳ−０６１を共通のビルディングブロック２６、８ａおよび２８ならびにアジド−ＰＥＧ４−ＮＨＳエステルから合成した。質量 (ESI+): 1805.6664 [M+H]+. 質量計算値 = 1804.6594.
【０２５０】
（（（１Ｓ）−１−カルボキシ−５−（３−（３−（１−（（１４Ｓ，１７Ｓ）−１７−カルボキシ−２４−（４−ヨードフェニル）−１２，１５，２３−トリオキソ−１４−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−３，６，９−トリオキサ−１３，１６，２２−トリアザテトラコシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）ペンチル）カルバモイル）−Ｌ−グルタミン酸（ＲＰＳ−０６３）：ＲＰＳ−０６９について記載されている手順に従って、ＲＰＳ−０６３を共通のビルディングブロック２６、８ａおよび２８ならびにアジド−ＰＥＧ３−ＮＨＳエステルから合成した。質量 (ESI+): 1762.4 [M+H]+. 質量(ESI-): 1760.5 [M-H]-. 質量計算値 = 1761.71.
【０２５１】
（（（１Ｓ）−１−カルボキシ−５−（３−（３−（１−（（２９Ｓ，３２Ｓ）−３２−カルボキシ−３９−（４−ヨードフェニル）−２７，３０，３８−トリオキソ−２９−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサ−２８，３１，３７−トリアザノナトリアコンチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）ペンチル）カルバモイル）−Ｌ−グルタミン酸（ＲＰＳ−０６６）：ＲＰＳ−０６９について記載されている手順に従って、ＲＰＳ−０６６を共通のビルディングブロック２６、８ａおよび２８ならびにアジド−ＰＥＧ８−ＮＨＳエステルから合成した。質量 (ESI+): 1982.3 [M+H]+, 991.5 [(M+2H)/2]-. 質量計算値 = 1980.76.
【０２５２】
（（（１Ｓ）−１−カルボキシ−５−（３−（３−（１−（（４１Ｓ，４４Ｓ）−４４−カルボキシ−５１−（４−ヨードフェニル）−３９，４２，５０−トリオキソ−４１−（４−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ブチル）−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６−ドデカオキサ−４０，４３，４９−トリアザヘンペンタコンチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−５−イル）フェニル）ウレイド）ペンチル）カルバモイル）−Ｌ−グルタミン酸（ＲＰＳ−０６７）：ＲＰＳ−０６９について記載されている手順に従って、ＲＰＳ−０６７を共通のビルディングブロック２６、８ａおよび２８ならびにアジド−ＰＥＧ１２−ＮＨＳエステルから合成した。質量 (ESI+): 1079.7 [(M+2H)/2]+. 質量 (ESI-): 2155.6 (M-H)-, 1077.7 [(M-2H)/2]-. 質量計算値 = 2156.86.
【０２５３】
ＲＰＳ−０６８の合成
【０２５４】
【化６７】
2020516611.tif 000071
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（Ｎ２−（２−アジドアセチル）−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（３２）：ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中のＦｍｏｃ保護８ａ（７６８ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）の溶液に、ジエチルアミン（２．０７ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を終夜室温で撹拌した。溶媒を減圧下にて除去し、粗生成物を、遊離アミン黄色の油状物として、さらに精製することなく使用した。ＣＨ２Ｃｌ２（６ｍＬ）中の遊離アミン（３５６ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＴＥＡ（１７５μＬ、１．２６ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、結果として得られた混合物を室温で撹拌した。次いで、ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）中の２−アジド酢酸ＮＨＳエステル（１３８ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応物を室温で撹拌した。３時間後、それをＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ溶液で順次に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮することで、淡黄色のアジ化物３２を得て（３７４ｍｇ、９２％）、これをさらに精製することなく使用した。質量 (ESI+): 648.1 [M+H]+. 質量計算値 = 647.36.
【０２５５】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−（１−（（９Ｓ，１２Ｓ）−９−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１２−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−３，１１，１４−トリオキソ−１−フェニル−２−オキサ−４，１０，１３−トリアザペンタデカン−１５−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−５−イル）フェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（３３）：ＤＭＦ（０．２ｍＬ）中の１５０μＬの０．５Ｍ  ＣｕＳＯ４および１５０μＬの１．５Ｍアスコルビン酸ナトリウムの溶液を５分間混合し、次いで、ＤＭＦ（２ｍＬ）中のアジ化物３２（３７４ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）およびアルキン２６（３５８ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で２時間の間撹拌した後に、溶媒を減圧下にて除去した。結果として得られた残留物をＣＨ２Ｃｌ２中に溶解し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ中０〜１０％のＭｅＯＨ）によって精製したが、小さい不純物が残った。そのため、第２の精製を分取ＴＬＣ（１００％のＥｔＯＡｃ）によって行い、生成物を無色の油状物として単離した（１４６ｍｇ；２１％）。質量 (ESI+): 1278.6 [M+H]+. 質量計算値 = 1277.73.
【０２５６】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−（１−（２−（（（１０Ｓ，１３Ｓ）−１３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２０−（４−ヨードフェニル）−２，２−ジメチル−４，１１，１９−トリオキソ−３−オキサ−５，１２，１８−トリアザイコサン−１０−イル）アミノ）−２−オキソエチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−５−イル）フェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（３４）：トリアゾール３３（１４６ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を二口フラスコの中でＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中に溶解した。溶液に、１０％のＰｄ／Ｃ（１０ｍｇ）を添加し、懸濁液を振盪しながらフラスコを排気した。次いで、懸濁液をＨ２雰囲気下にて２時間の間撹拌した後に、混合物をセライトに通して濾過した。フィルターケーキをＭｅＯＨで３回洗浄し、濾液を合わせ、減圧下にて濃縮することで、遊離アミンを黒色の残留物として得たが（９１ｍｇ；７２％）、これは痕跡量の副次的不純物を含有していた。粗生成物をさらに精製することなく使用した。質量 (ESI+): 1144.6 [M+H]+. 質量計算値 = 1143.69.ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中の遊離アミン（９０ｍｇ、７９μｍｏｌ）およびＮＥｔ３（１４μＬ、１５０μｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中の２８（３６ｍｇ、１００μｍｏｌ）の溶液を添加した。結果として得られた混合物を終夜室温で撹拌し、次いで、それをＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ溶液で順次に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮することで、黒色の残留物を得た。残留物をＥｔＯＡｃ中に溶解し、黒色の沈殿物を濾過によって除去した。結果として得られた粗生成物を分取ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ中５％のＭｅＯＨ）によって精製し、ヨウ化フェニル３４を白色の固体として単離した（２１ｍｇ；１９％）。質量 (ESI+): 1388.4 [M+H]+. 質量計算値 = 1387.63.
【０２５７】
（（（１Ｓ）−１−カルボキシ−５−（３−（３−（１−（２−（（（２Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−カルボキシ−５−（２−（４−ヨードフェニル）アセトアミド）ペンチル）アミノ）−１−オキソ−６−（３−（４−（（１，４，７，１０−テトラキス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−２−イル）メチル）フェニル）チオウレイド）ヘキサン−２−イル）アミノ）−２−オキソエチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−５−イル）フェニル）ウレイド）ペンチル）カルバモイル）−Ｌ−グルタミン酸（ＲＰＳ−０６８）：ＣＨ２Ｃｌ２（３．５ｍＬ）中の３４（２０ｍｇ、１５μｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（０．５ｍＬ）を添加した。反応物を室温で４時間の間撹拌し、次いで、それを減圧下にて濃縮した。粗残留物をＨ２Ｏ中に溶解し、凍結乾燥させることで、遊離アミンをＴＦＡ塩として得た。質量 (ESI+): 1064.1 [M+H]+. 質量計算値 = 1063.33.１ｍＬの５０％ＤＭＦ中のｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ・２．５ＨＣｌ・２．５Ｈ２Ｏ（Ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃｓ，Ｉｎｃ．）（１０ｍｇ、１５μｍｏｌ）の溶液に、Ｈ２Ｏ中で、ＤＭＦ（０．７ｍＬ）中の遊離アミン（１６ｍｇ、１５μｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物のｐＨがおよそ９になるまで、ＮＥｔ３を添加した（１１０μＬ）。反応物を１時間の間撹拌し、次いで、反応混合物を分取ＨＰＬＣによって精製した。生成物に対応するピークを回収し、凍結乾燥させることで、ＲＰＳ−０６８を白色の粉末として得た（２．４ｍｇ；１０％）。質量 (ESI+): 1615.2 [M+H]+. 質量(ESI-): 1613.3 [M-H]-, 806.4 [(M-2H)/2]-. 質量計算値 = 1614.53.
【０２５８】
放射化学
一般的方法：全ての試薬は、別段の注記がない限りＳｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、試薬グレードであった。塩酸（ＨＣｌ）および酢酸ナトリウム（ＮａＯＡｃ）は、ｔｒａｃｅＳＥＬＥＣＴ（登録商標）（＞９９．９９９％）品質であった。使用された全ての水（Ｈ２Ｏ）は、高純度（１８ｍΩ）であった。分析ＨＰＬＣは、デュアルＵＶ−Ｖｉｓ検出器を装着したデュアルポンプＶａｒｉａｎ  Ｄｙｎａｍａｘ  ＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で行い、ＮａＩ（Ｔｌ）フローカウント検出器（Ｂｉｏｓｃａｎ）を使用して、放射化学的純度を決定した。ＵＶ吸収を２２０ｎｍおよび２８０ｎｍでモニタリングした。溶媒ＡはＨ２Ｏ中０．０１％のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）であり、溶媒Ｂは９０％ｖ／ｖのアセトニトリル（ＭｅＣＮ）：Ｈ２Ｏ中０．０１％のＴＦＡであった。分析を対称Ｃ１８  ４．６×５０ｍｍ、１００Åカラム（Ｗａｔｅｒｓ）上にて２ｍＬ／ｍｉｎの流量および０％Ｂから１００％Ｂの勾配で１０分かけて行った。
【０２５９】
Ｇａ−６６の生成：１５ＭｅＶのビームおよび１７．５ｍＡの電流を使用して２時間かけた（ｐ，ｎ）反応によって天然の亜鉛標的（Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ；０．５ｇ、１００μｍの厚さ、９９．９９９％）の照射から、ガリウム６６（ｔ１／２＝９．４時間）を生成した。天然の亜鉛の照射は、Ｇａ−６６、Ｇａ−６７およびＧａ−６８を生成する。標的を終夜放置することで、Ｇａ−６８（ｔ１／２＝６８分）が加工前に減衰するのを可能にした。加工中の主な放射性核種不純物は、およそ３％のＧａ−６７（ｔ１／２＝７８．３ｈ）であった。標的を濃ＨＣｌ（５ｍＬ）中に溶解し、６６Ｇａ３＋イオンを前に公開された方法［２０］に従って２０ｍｇのＵＴＥＶＡアニオン交換（Ｅｉｃｈｒｏｍ）によってＺｎ２＋イオンから分離させた。カラムを後に３ｍｌの５Ｍ  ＨＣｌ溶液で２回洗浄することで、過剰のＺｎ２＋を取り除いた。最終的に、精製された６６Ｇａ３＋イオンをＨ２Ｏ（０．５ｍＬ）で溶出し、２．１４〜２．３６ＧＢｑ／ｍＬ（５８〜６４ｍＣｉ／ｍＬ）およびおよそ０．１ＭのＨＣｌを含有する最終溶液に至った。
【０２６０】
ＲＰＳシリーズの放射標識化：６６Ｇａ標識化リガンドを以下の手順に従って調製した。１６７〜２０５ＭＢｑ（４．５〜５．５ｍＣｉ）を含有するＧａ−６６ストック溶液１００μＬを１ｍＬの０．０５Ｍ  ＨＣｌで希釈した。この溶液に、ＤＭＳＯ中の前駆体の１ｍｇ／ｍＬ溶液４０〜８０μＬを添加した。反応を４０μＬの３Ｎ  ＮａＯＡｃの添加によって開始し、溶液を９５℃でＥｐｐｅｎｄｏｒｆ  ＴｈｅｒｍｏＭｉｘｅｒ（登録商標）Ｃ（ＶＷＲ）上にて２５分間混合した。混合物を次いでＨ２Ｏで希釈し、予備活性化されたＳｅｐ−Ｐａｋ  Ｃ１８  Ｐｌｕｓ  Ｌｉｇｈｔカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ）に通過させた。カートリッジをＨ２Ｏで洗浄し、生成物を１００μＬのＥｔＯＨ（３００プルーフ、ＶＷＲ）、続いて９００μＬの生理食塩水（０．９％のＮａＣｌ溶液；ＶＷＲ）で溶出した。最終の放射能濃度は７．４〜８５ＭＢｑ／ｍＬ（０．２〜２．３ｍＣｉ／ｍＬ）の範囲であり、放射化学的純度は９０％超であった。
【０２６１】
Ｌｕ−１７７を用いる標識化：担体無添加Ｌｕ−１７７（ＥｎｄｏｌｕｃｉｎＢｅｔａ（登録商標））を、１．５〜３．０ＧＢｑ（４０〜８０ｍＣｉ）の較正で活性を有する塩化物塩としてｉＴＧ（Ｇａｒｃｈｉｎｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入した。Ｌｕ−１７７ストック溶液０．５２〜０．９３ＧＢｑ（１４〜２５ｍＣｉ）を含有するアリコートを、０．０５ＭのＨＣｌで１ｍＬに希釈した。この溶液に、２０μｇの前駆体をＤＭＳＯ中の１ｍｇ／ｍＬ溶液として添加した。３ＮのＮａＯＡｃ（２０〜３０μＬ）を使用してｐＨを４〜５に上昇させることによって、反応を開始した。緩衝溶液を１０分間９５℃で類似の加熱ブロック（ＶＷＲ）上にて加熱した。溶液が室温に冷却した後、それをＨ２Ｏ（９ｍＬ）で希釈し、予備活性化されたＳｅｐ−Ｐａｋ  Ｃ１８  Ｐｌｕｓ  Ｌｉｇｈｔカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ）に通過させた。カートリッジをＨ２Ｏ（５ｍＬ）で洗浄し、生成物を５００μＬのＥｔＯＨ（２００プルーフ、ＶＷＲ）、続いて５００μＬの生理食塩水（０．９％のＮａＣｌ溶液；ＶＷＲ）で溶出した。アリコート（４０〜９８μＬ）をこの溶液から除去し、生理食塩水で４ｍＬに希釈した。注入溶液における各リガンドの最終濃度は、０．２３〜０．２８μＭであり、３．５〜８．８ＭＢｑ／ｍＬ（９３〜２４０μＣｉ／ｍＬ）の活性の範囲であった。１７７Ｌｕ標識化化合物の比活性は、１５．８〜４８．８ＧＢｑ／μｍｏｌを範囲とした。放射化学的収率は、精製および再製剤の後に３３〜８０％であり、放射化学的純度は９８％超であった。
【０２６２】
細胞培養：ＰＳＭＡ発現ヒト前立腺がん細胞株、ＬＮＣａＰは、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから得た。細胞培養供給物は、別段の注記がない限りＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎから得た。ＬＮＣａＰ細胞は、１０％のウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、４ｍＭのＬ−グルタミン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＮ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、２．５ｍｇ／ｍＬのＤ−グルコース、および５０μｇ／ｍＬゲンタマイシンが補充されたＲＰＭＩ−１６４０培地中で、加湿インキュベーターの中にて３７℃／５％ＣＯ２で維持した。０．２５％トリプシン／エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）でインキュベートすることによる継代または１２ウェルアッセイプレートへの移動のために、細胞をフラスコから除去した。
【０２６３】
ＩＣ５０のインビトロ決定：小さい修正がある前に記載されている方法に従って［１８，１９］、ＬＮＣａＰ細胞上のＰＳＭＡへの結合について、９９ｍＴｃ−（（７Ｓ，１２Ｓ，１６Ｓ）−１−（１−（カルボキシメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−２−（（１−（カルボキシメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）−９，１４−ジオキソ−２，８，１３，１５−テトラアザオクタデカン−７，１２，１６，１８−テトラカルボン酸テクネチウムトリカルボニル錯体）（９９ｍＴｃ−ＭＩＰ−１４２７）に対する多濃度競合的結合アッセイにおいてスクリーニングすることによって、非標識化された金属フリーリガンドのＩＣ５０値を決定した。簡潔には、０．２５％のウシ血清アルブミンが補充されたＲＰＭＩ−１６４０培地中でおよそ５×１０５細胞／ウェル（トリプリケートで）の密度を達成するために、ＬＮＣａＰ細胞を実験の４８時間前に平板培養した。細胞を２時間の間、１ｎＭの９９ｍＴｃ−ＭＩＰ−１４２７を用いて、血清フリーのＲＰＭＩ−１６４０培地中で、０．００１〜１０，０００ｎＭの試験化合物の存在下にてインキュベートした。放射性のインキュベーション培地を次いでピペットによって除去し、１ｍＬの氷冷ＰＢＳ  １Ｘ溶液を使用して、細胞を２回洗浄した。１ｍＬの１Ｍ  ＮａＯＨを用いる処理に続き、細胞をプレートから回収し、２４７０  Ｗｉｚａｒｄ２  Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｇａｍｍａ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用する放射カウントのためにチューブに移した。標準溶液（各ウェルに添加された活性の１０％）を調製することで、減衰補正を可能にした。ＯｒｉｇｉｎソフトウェアにおいてデータポイントをＳ字形Ｈｉｌｌｓ１曲線にフィットさせることによって、ＩＣ５０値を決定した。
【０２６４】
異種移植片を用いるマウスの接種：全ての動物研究は、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｆ  Ｗｅｉｌｌ  Ｃｏｒｎｅｌｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅによって承認され、ＵＳＰＨＳ  Ｐｏｌｉｃｙ  ｏｎ  Ｈｕｍａｎｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓによって説明されたガイドラインに従って行われた。動物は、１２時間の明／暗サイクルを有する承認された施設に標準条件下にて収容した。食物および水を研究過程の全体にわたって無制限に提供した。無毛の雄性ｎｕ／ｎｕマウスをＪａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから購入した。マウスにおける接種のため、ＬＮＣａＰ細胞をＰＢＳ：マトリゲル（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）の１：１混合物中に４×１０７細胞／ｍＬで懸濁させた。各マウスの左側腹部に０．２５ｍＬの細胞懸濁液を注入した。腫瘍がおよそ２００〜４００ｍｍ３に達した時にマウスを画像化し、一方、腫瘍が１００〜４００ｍｍ３の範囲にある時に体内分布を行った。
【０２６５】
ＬＮＣａＰ異種移植片マウスにおける６６Ｇａ−ＲＰＳリガンドの画像化：ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍保有マウス（１化合物当たり２〜３匹）に、６６Ｇａ標識化リガンド０．５６〜５．４ＭＢｑ（１５〜１４５μＣｉ）のボーラス注入を静脈内注入した。トレーサーの比活性は、１４．８〜４７ＭＢｑ／μｍｏｌ（０．４〜１．２７ｍＣｉ／μｍｏｌ）の範囲であった。イソフルランでの吸入麻酔に続いて注入後１時間、３時間、６時間および２４時間にμＰＥＴ／ＣＴ（Ｉｎｖｅｏｎ（商標）；Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．）を使用して、マウスを画像化した。総獲得時間は、１時間、３時間および６時間の画像について３０分、および２４時間時点について６０分であった。解剖学的な同時登録および減衰補正の両方に関する獲得の直前に、ＣＴスキャンを得た。ベンダーによって供給されたＩｎｖｅｏｎ（商標）ソフトウェアを使用して、画像を再構築した。画像誘導の腫瘍および腎臓取込みを、画像化視野に導入された１立方ｍｍ当たりの１０％注入用量（％ＩＤ／ｍｍ３）標準との比較によって概算した。注入活性の１０％を生理食塩水で１ｍＬに希釈することによって、標準を調製した。ＣＴを活用して、目的の体積（ＶＯＩ）を引き出し、ＰＥＴによって確認した。ＶＯＩの量を統合し、注入された活性についての補正に続いて前に記述の標準との直接比較によって、算出カウント数を％ＩＤ／ｍｍ３に変換した。
【０２６６】
ＬＮＣａＰ異種移植片マウスにおける１７７Ｌｕ標識化リガンドの体内分布研究：ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍保有マウス（１化合物当たり１時点につき５匹）に、各リガンド３４８〜８５１ｋＢｑ（９．４〜２３μＣｉ）および３７〜５０ｎｇ（２３〜２５ｐｍｏｌ）のボーラス注入の静脈内注入した。マウスを注入後４時間、２４時間および９６時間で屠殺した。血液試料を除去し、完全な体内分布研究を以下の臓器に（内容物とともに）行った：心臓、肺、肝臓、小腸、大腸、胃、脾臓、膵臓、腎臓、筋肉、骨および腫瘍。組織を秤量し、２４７０  Ｗｉｚａｒｄ２  Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｇａｍｍａ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）でカウントした。カウント数を減衰についておよび注入された活性について補正し、組織取込みを１グラム当たりのパーセント注入用量（％ＩＤ／ｇ）として表した。標準誤差測定値を各データ点について算出した。
【０２６７】
線量測定値：線量測定値を算出して、３つの時点の間の直線補間を想定した。活性の平均およびその時点でのマウスの臓器重量を使用することによって、１臓器当たりの平均注入用量を算出した。線形近似値を使用して、４時間毎に中間時点を発生させ、全ての時点を時点間の時間間隔中の減衰について補正した。台形近似値および残留時間を決定するために使用された和を使用して、これらの曲線を統合した。
【０２６８】
統計的分析：時間を通して各化合物の組織取込みを比較するため、包括的な統計的分析を行った。正規性想定を分位点−分位点（ＱＱ）プロットによって視覚的にチェックし、対数変換をデータに適用することで、歪み効果を除去した。各臓器および各化合物下で、チューキーの実際有意差（ＨＳＤ）事後検定を用いる一元配置ＡＮＯＶＡ（変動の分析）を使用することで、３つの時点を通した測定値における差異を評価した。Ｆ検定下で全体的なＰ値を決定し、ｔ検定で対値を決定した。さらに、二元配置ＡＮＯＶＡを使用することで、各臓器における時間、化合物およびそれらの相互作用の影響を判定した。Ｐ値は報告されている。９５％の信頼区間を使用することで、統計的有意性を決定した。
【０２６９】
セクション１．３結果および考察
０（ＲＰＳ−０６８）、３（ＲＰＳ−０６３）、４（ＲＰＳ−０６１）、６（ＲＰＳ−０６９）、８（ＲＰＳ−０６６）または１２（ＲＰＳ−０６７）のＰＥＧサブ単位を組み込むアジド誘導体化ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）スペーサーによって、３つの部分を連結した（表２を参照されたい）。リガンドの劣化または分解は、分析ＨＰＬＣによって決定されたところ、４℃で貯蔵中３カ月の過程で観察されなかった。対照的に、ＰＥＧスペーサーの代わりにＧｌｙ−Ｇｌｙ−ＧｌｙリンカーまたはＣ７Ｈ１４リンカーを使用した同様の類似体は、同じ貯蔵条件下にて数週の過程で分解するのが見出された。
【０２７０】
動物の使用を最小化する努力において、μＰＥＴ／ＣＴ画像化を使用して化合物の初期スクリーニングを行うことで、不要な試験を回避した。この目的で、サイクロトロンにおいてより長い半減期（ｔ１／２＝９．４時間）およびより大きい定量を生成する可能性（＞１．８５ＧＢｑ／５０ｍＣｉ）により、Ｇａ−６８またはＳｃ−４４などの他のＰＥＴ放射性核種に優先してＧａ−６６を選択した。Ｇａ−６６の９９％超は、精製プロセスにおいて回復したが、標識化収率は一貫して低いままであった（４６．４±２０．５％、ｎ＝７）。可変のおよび低い標識化収率は、溶解させた標的材料からの６６Ｇａ３＋イオンの不完全な分離により、標識化反応におけるＺｎ２＋イオンの存在による可能性が高い。
【０２７１】
精製および再製剤化に続いて、１７７Ｌｕ標識化構築物を６７±１７％（ｎ＝２０）の放射化学的収率で調製した。最終生成物収率における変動は、Ｃ１８カートリッジによる捕捉効率における差異により大きく、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６７および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８は、最も低い捕捉（およそ４０％）を示した。精製の前の標識化収率は、典型的に、放射性ＨＰＬＣによって決定されたところ全てのリガンドについて＞７５％であった。ＰＥＧ長と標識化収率との間の明らかな相関はなかった。Ｌｕ−１７７標識化リガンドは、４℃で貯蔵された場合に２４時間の間、放射線分解に対して安定であった。放射化学的安定性は室温で決定されなかった。
【０２７２】
注入されたリガンドの総量は、１マウス当たり２２〜２４ｐｍｏｌであったことで、ヒト対象に投与される１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の臨床的質量用量と比例しているままであった［４］。調製物の比活性は１５．８〜４８．８ＧＢｑ／μｍｏｌを範囲とし、１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の前臨床評価について報告されている値と一致した［２１］。注入された６６Ｇａ標識化リガンドの質量は、１マウス当たり４μｇであり、１．８〜２．５ｎｍｏｌに対応した。このより大きい質量は、この放射性核種を用いた、より低い標識化収率を説明するのに必要とされた。
【０２７３】
細胞ベースの競合的結合アッセイを使用して、全ての化合物をインビトロでのＰＳＭＡ結合について評価した。全ての化合物は高度に強力であり（ＩＣ５０＜１０ｎＭ）、ＰＳＭＡ標的化ファルマコフォアとしてＧｌｕ−尿素−Ｌｙｓの３−エチニルフェニル尿素誘導体の我々の選択を検証した。親和性の範囲をＲＰＳ−０６３（ＩＣ５０＝１．５±０．３ｎＭ）およびＲＰＳ−０６７（ＩＣ５０＝９．５±１．１ｎＭ）によって定義した（表２）。効力は一般に、ＰＥＧリンカー長を増加させると減少するが、ＲＰＳ−０６８（ＰＥＧ０；ＩＣ５０＝２．１±０．１ｎＭ）は、ＲＰＳ−０６３よりもわずかに強力でなかった。同じアッセイにおいて、ＰＳＭＡ−６１７のＩＣ５０は、６．６±０．７ｎＭ（表２）と決定され、前に報告されている値と一致した［２１］。
【０２７４】
表2.化合物構造および鍵となるインビトロおよびインビボ特徴の要約。LNCaP細胞における競合的結合アッセイによって、IC50値を決定した。LNCaP異種移植片腫瘍保有マウスにおいて対応する177Lu標識化化合物を用いる体内分布研究によって、腫瘍取込みを決定した。(a=注入後4時間;b=注入後24時間)
【表３】
2020516611.tif 000072
2020516611.tif 000073
【０２７５】
不十分な標的化を示す化合物に対する完全な体内分布研究を回避する意図で、６６Ｇａを使用するμＰＥＴ／ＣＴ画像化（図７）によって、マウスにおける化合物の予備的スクリーニングを行った。注入後１時間、３時間、６時間および２４時間の腫瘍および腎臓における定量的取込みを決定するため、画像を分析した。腫瘍において、取込みは高かったが、ＰＥＧ長を増加させるとともに減少した。６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６８（ＰＥＧ０；９．７±２．０％ＩＤ／ｃｍ３の最大取込み（３時間）；２４時間で８．３±２．８％ＩＤ／ｃｍ３）および６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６３（ＰＥＧ３；９．５±２．４％ＩＤ／ｃｍ３の最大取込み（６時間）；２４時間で７．９±３．０％ＩＤ／ｃｍ３）は、最も大きい取込みを示し、６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６１（ＰＥＧ４；６．１±１．１％ＩＤ／ｃｍ３）および６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６９（ＰＥＧ６；７．０±３．９％ＩＤ／ｃｍ３）は、注入後２４時間に匹敵する取込みを実証した。６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６６（ＰＥＧ８；７．８±０．７％ＩＤ／ｃｍ３の最大取込み（３時間）；２４時間で５．５±０．４％ＩＤ／ｃｍ３）および６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６７（ＰＥＧ１２；６．６±３．２％ＩＤ／ｃｍ３の最大取込み（１時間）；２４時間で３．１±１．７％ＩＤ／ｃｍ３）は、全ての時点でより低い取込みを示したが、依然として６６Ｇａ−ＰＳＭＡ−６１７（３．１±０．４％ＩＤ／ｃｍ３の最大取込み（１時間）；２４時間で１．１±０．４％ＩＤ／ｃｍ３）を超えていた。腎臓取込みは一般に、腫瘍取込みと同じ位であり、注入後１時間で最も大きかった。取込みは、注入後１時間で１０．５±２．１％ＩＤ／ｃｍ３（６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６１）から３．７±０．５％ＩＤ／ｃｍ３（６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６７）、および注入後２４時間で１．９±０．３％ＩＤ／ｃｍ３（６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６８）から０．２±０．１％ＩＤ／ｃｍ３（６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６６および６６Ｇａ−ＲＰＳ−０６７）を範囲とした。比較において、６６Ｇａ−ＰＳＭＡ−６１７の最大腎臓取込みは、０．４±０．１％ＩＤ／ｃｍ３であり、一方、２４時間での取込みは０．１±０．１％ＩＤ／ｃｍ３であった。
【０２７６】
有望な画像化研究に続いて、１７７Ｌｕ標識化リガンドの体内分布研究は、ＰＥＴ画像における明白な傾向を確認した。ＰＳＭＡに対する化合物の親和性は、１桁内に集まっているが、リガンドの組織分布はかなりの変動を示した。これは、腫瘍および腎臓を含めて、ＰＳＭＡを発現することが知られている組織において最も明白であった（図８）。腫瘍取込みは高く、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８（ＰＥＧ０）、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３（ＰＥＧ３）、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６１（ＰＥＧ４）、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６９（ＰＥＧ６）および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６６（ＰＥＧ８）について高いままであった。より高い親和性化合物１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３について、注入後４時間での取込みは、それぞれ２１．８±２．８％ＩＤ／ｇおよび３０．０±３．１％ＩＤ／ｇであり、注入後９６時間で１４．９±１．５％ＩＤ／ｇおよび１２．９±０．５％ＩＤ／ｇが依然として残っていた。クリアランスは、２４時間（ｐ＞０．１３）まで統計的に有意でなかった。１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６９および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６６の取込みは、注入後４時間にそれぞれ１７．０±２．１％ＩＤ／ｇおよび１８．７±１．１％ＩＤ／ｇであり、注入後９６時間で９．８±０．８％ＩＤ／ｇおよび５．９±０．７％ＩＤ／ｇに減少した。それでもなお、これらの取込み値は、１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７について観察されたものよりも注入後２４時間の後のほうが有意に大きい（注入後４時間および９６時間に１４．４±１．１％ＩＤ／ｇおよび３．５±０．３％ＩＤ／ｇ、ｐ＜０．００１）。１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６７（ＰＥＧ１２）、最も低い親和性リガンドは、注入後４時間で７．６±１．２％ＩＤ／ｇのみ蓄積し、注入後９６時間で３．２±０．１％ＩＤ／ｇまで排出した。この取込みは、１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７を除く全ての他のリガンド（ｐ＜０．００１）よりも有意に低かった。
【０２７７】
ＲＰＳシリーズ内の同様の傾向が腎臓取込みについて観察され、最も低い親和性リガンド、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６７は、試験された他のＲＰＳリガンド（ｐ＜０．００４）よりも注入後４時間で有意に低い取込み（５４．９±１３．２％ＩＤ／ｇ）によって区別された（図８）。腎臓取込みは、ＲＰＳシリーズの全ての他のリガンドについて注入後４時間で１００％ＩＤ／ｇを超え、一方、１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７は公表報告書［２１］と一致して急速に排出することが見出された（注入後４時間で１４．１±３．１％ＩＤ／ｇ）。１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８（注入後２４時間で８７．３±６．７％ＩＤ／ｇ）および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３（注入後２４時間で５１．８±８．６％ＩＤ／ｇ）の延長保持は明白であったが、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６６（注入後２４時間で６．２±０．８％ＩＤ／ｇ）および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６７（注入後２４時間で４．６±０．６％ＩＤ／ｇ）は、有意に（ｐ＜０．００１）およびより急速に排出した。これらの２つのリガンドの取込みは、他のＲＰＳリガンドよりも有意に低くかったが（ｐ＜０．００１）、互いに有意に異なってはいなかった（ｐ＜０．１４）。
【０２７８】
持続的な腫瘍蓄積との組合せにおいて、より急速な腎臓クリアランスは、注入後２４時間での１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６６および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６７について１．９２±０．３０および１．２５±０．２０の腫瘍対腎臓比を生じさせた。これらの比は、他のＲＰＳリガンドよりも有意に高いが（ｐ＜０．００１）、高度および持続的な腫瘍取込みよりはむしろ低いおよび急速な腎臓クリアランスを反映している。同じ理由のため、１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の腫瘍対腎臓比は、研究された全ての時点で他のリガンドよりも有意に高い（ｐ＜０．００１）。９６時間までに、ＲＰＳシリーズの各メンバーは、実質的に１（範囲＝１．５６〜３．３２）を上回る腫瘍対腎臓比を実証した。
【０２７９】
他の組織における取込みは、中程度の、おそらく注入後４時間でのＰＳＭＡ媒介取込み、続いて、バックグラウンドレベルへのクリアランスを示した脾臓を除いて、無視できるほどであった（図８）。予想された通り、血中活性は、ＲＰＳシリーズの全てについて１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７（ｐ＜０．０５）よりも有意に大きかった。１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６１および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８は、注入後４時間で最も高い血中活性を示し（図９）、一方、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６９、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６６および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６７は、同じ時点でより低い血中保持を示した。注入後２４時間までに、血中活性は、リガンドの全てについて０．３％ＩＤ／ｇ未満であり、９６時間までに、それは０．１％ＩＤ／ｇ未満に減少した。興味深いことに、ＲＰＳリガンドの全ては同じアルブミン結合基、Ｎ６−（２−（４−ヨードフェニル）アセチル）−Ｌ−リジンを含有していたが、より短いＰＥＧ化合物１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３と、より長いＰＥＧ化合物１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６６および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６７との間に、有意な差異（ｐ＜０．００１）が観察された。これは、リンカーが血漿タンパク質への結合および／またはクリアランスに影響を及ぼすことを示している。
【０２８０】
ＰＥＧ長とＰＳＭＡへの親和性との間の逆相関は、ＰＳＭＡ構築物および他の標的リガンドについて現在までに報告されている所見と一致する。ＰＥＧ３またはＰＥＧ４などの小さいＰＥＧリンカーは、ＰＳＭＡを標的化する小分子薬物コンジュゲートに組み込まれてきたが［２２，２３］、この性質の構築物は、現在まで、低い親和性および／または不十分な腫瘍取込みを示してきた。１つのＳＡＲ研究は、ＰＥＧ２およびＰＥＧ４リンカーが、ＰＳＭＡ標的化造影剤のファミリーにおいてＰＳＭＡ親和性を最もよく保持し、ＰＥＧ１２およびＰＥＧ２４が親和性における大きな減少に至ることを確証した［２４］。これらの結果は、ＰＥＧ１２リンカーが、小分子ＧＣＰＩＩリガンドにおけるＰＥＧ８に相対して親和性を減少したという観察と一致した［２５］。ボンベシンの６８Ｇａ標識化アンタゴニストに対するＰＥＧリンカーの影響のＳＡＲ研究は、親和性がＰＥＧリンカーの各漸進的延長でわずかに弱まったことを見出した［２６］。この研究は、その上、リガンドの体内分布における小さい差異を同定した。
【０２８１】
腫瘍取込みについての時間−活性曲線（ＴＡＣ）の曲線（ＡＵＣ）下の面積は、１７７Ｌｕ標識化ＲＰＳ−０６１、−０６３、０６６、−０６８および−０６９リガンドが１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７よりも有意に大きい用量を腫瘍へ送達することを示唆している（図１０）。これは、腫瘍における用量積分の比較によって確認される。１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３は、１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７よりもほぼ４倍高く、一方、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６１、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６９および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６６は、その上、少なくとも２倍高い（図１１）。
【０２８２】
１７７Ｌｕ標識化ＲＰＳリガンドの腫瘍取込みは、その上、注入後１時間で７．９６±１．７６のＬＮＣａＰ腫瘍における報告されている取込みを有する１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ  Ｉ＆Ｔ［２７］、およびＰＣ３−ＰＩＰ腫瘍において注入後７２時間で４６％ＩＤ／ｇに達すると報告された［２３］近年報告の１７７Ｌｕ−ＣＴＴ１４０３を含めて、現在までに報告されている他の１７７Ｌｕ標識化ＰＳＭＡ−標的リガンドよりも高いという可能性が高い。ＰＣ３−ＰＩＰ腫瘍におけるＰＳＭＡ発現は、ヒト前立腺がんに典型的に見出されるのよりも高く、注目すべきことにＬＮＣａＰ細胞よりも１０倍大きく［２８］、１７７Ｌｕ−ＣＴＴ１４０３の取込みがＬＮＣａＰ腫瘍においてかなり低い可能性が高いことを意味する。１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８についてＬＮＣａＰ腫瘍における取込みは、１３１Ｉ−ＭＩＰ−１０９５について報告されている取込みと同等であり［２９］、我々の知る限り、現在までに報告されているＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍における最も大きい取込みを有する小分子である。１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８および１３１Ｉ−ＭＩＰ−１０９５についてのＴＡＣの比較は、研究された９６時間の期間の間について同様のＡＵＣを示唆している（図１０）。
【０２８３】
血中保持の延長は、時間とともに腫瘍蓄積の増加に至ることが前に報告されており［２３，３０］、おそらく、リガンドが腫瘍床を通過する回数の増加の帰結である。１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８は、４時間から２４時間で増加するように見えるが、この差異は統計的に有意でない（ｐ＝０．２６）。該現象は、注入後４時間の後の他の三官能性ＲＰＳリガンドシリーズの中でも明白でないが、最初の４時間の中での血中クリアランスの遅延が、この時間間隔における腫瘍取込みを増加させ得ることは可能である。それでもなお、腫瘍からのリガンドのクリアランスは遅く、１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７と比較してより大きな量の活性を標的組織へ送達するのを可能にする。アルブミン結合基の置換によるアルブミン結合のさらなる修正は、血中クリアランスを修正するために、ならびに高度および持続的な腫瘍蓄積を補強するために使用することができる。
【０２８４】
ｍＣＲＰＣのためのＰＳＭＡ−標的化放射性リガンド治療を使用する有望な臨床転帰にもかかわらず、（１）β−粒子放射線に対する耐性を克服し、（２）びまん性転移巣（特に、骨において）を処置するのに適切であり、（３）無進行生存のより長い持続期間を提供する次世代リガンドが、処置における改善の継続に必須である。最小の毒性は現在、１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７または１３１Ｉ−ＭＩＰ−１０９５の単回投与と関連するが、血液学的毒性および持続的口腔乾燥症状の発生率は、後続の治療サイクルで増加することがあり［３］、一方、生化学的応答は減少することがある［３，５］。アルファ−粒子媒介治療は、β−粒子に対する耐性を克服するとともに血液学的毒性を低減する方法として提案されている［３１］。２１３Ｂｉ−ＰＳＭＡ  Ｉ＆Ｔを用いる早期の前臨床研究は、インビボで腫瘍におけるＤＮＡ二重鎖切断の形成を同定しており［３２］、一方、２２５Ａｃ−ＰＳＭＡ−６１７または２１３Ｂｉ−ＰＳＭＡ−６１７を用いるヒト患者の予備的処置は、難治性がんにおいて劇的な応答に至っている［３１，３３］。それでもなお、複数の治療サイクルが効力のために必要とされ、不可逆的な口腔乾燥症状および乾性角結膜炎に至った［３３］。
【０２８５】
これらの早期所見は、α−粒子放射線治療に対する治療的可能性を実証してきたが、高用量を腫瘍に送達することができるより大きな治療指数を有する放射性リガンドの必要に脚光を当てた。１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６１、−０６３、−０６６、−０６８および−０６９の各々は、ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍における１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７よりも有意に高い腫瘍取込みを示し、ＡＵＣにおける対応する増加は、腫瘍に送達される放射能の線量の増加と相関する。最も高い腫瘍取込みを有する３つのリガンド１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６３、１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６８および１７７Ｌｕ−ＲＰＳ−０６１の腫瘍対腎臓比は、注入後９６時間でそれぞれ２．７５±０．１７、１．５６±０．２３および３．６４±０．２９である。対照的に、１７７Ｌｕ−ＣＴＴ１４０３は、１．０に決して達しない［２３］。同じ時点での１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の腫瘍対腎臓比は、１４．３９±２．２であり、９６時間にわたる腎臓用量積分に対する腫瘍用量積分の比は１．９５であるが、これらは、高い腫瘍取込みよりはむしろ非常に低い腎臓取込みによって推進される。ヌードマウスの腎臓におけるＰＳＭＡの発現は、ヒト腎臓における発現レベルよりも高いことが広く実証されてきており［３４，３５，３６］、前臨床研究が一貫して、この臓器に送達される用量を過大評価していることを意味する。１３１Ｉ−ＭＩＰ−１０９５（２９）、１７７Ｌｕ−ＤＫＦＺ−６１７（２１）および１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ  Ｉ＆Ｔ（３７）を含めて、いくつかのＰＳＭＡ−標的化治療薬は全て、ヌードマウスにおいて１００％ＩＤ／ｇ以上の早期の腎臓濃度を示し、依然として、同一ではないが許容される腎臓用量を用いる臨床へと無難に翻訳されてきた。
【０２８６】
さらに、２−ＰＭＰＡとの薬理学的置き換えを含めて、追加の腎保護スキームは、またさらに腎臓における活性を低減すると示されてきた［３７，３８］。まとめると、これらの観察は、三官能性ＲＰＳリガンドが、高度および持続的な腫瘍取込みおよびα−粒子放射線治療薬に望ましい広い治療指数の両方を示すことを例示している。
【０２８７】
セクション１．３参考文献
[1]  Nussbaum N, George DJ, Abernethy AP, Dolan CM, Oestreicher N, Flanders S, Dorff TB. Patient experience in the treatment of metastatic castration-resistant prostate cancer: state of the science. Prostate Cancer Prostatic Dis.2016;19:111-21.
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【０２８８】
セクション１．４
材料および計器。ＲＰＳ−０７４の合成は、下に記載されている。全ての溶媒および試薬は、市販ベンダーから購入し、さらに精製することなく使用した。中間体ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−エチニルフェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（４０６）およびｍａｃｒｏｐａ−ＮＣＳを上に記載した通りに合成した。ＶＷＲ（登録商標）Ｈｉｇｈ  Ｐｕｒｉｔｙ  Ｓｉｌｉｃａ  Ｇｅｌ  ６０Å上のシリカクロマトグラフィー、シリカ−コーティングガラスプレート上の分取ＴＬＣ（Ａｎａｌｔｅｃｈ）、またはＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ＋（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ  Ｉｓｃｏ）システムを使用するフラッシュクロマトグラフィーを使用して、化合物を精製した。Ａｇｉｌｅｎｔ  ＰｒｏＳｔａｒ  ３２５  Ｄｕａｌ  Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ  ＵＶ−Ｖｉｓ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ  を装着したデュアルポンプＡｇｉｌｅｎｔ  ＰｒｏＳｔａｒ  ＨＰＬＣ上のＸＢｒｉｄｇｅ（商標）Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ５μｍ  ＯＢＤ（商標）１９×１００ｍｍカラム（Ｗａｔｅｒｓ）を使用して、分取ＨＰＬＣを行った。ＵＶ吸収を２２０ｎｍおよび２８０ｎｍでモニタリングした。２成分溶媒系を使用し、溶媒ＡはＨ２Ｏ＋０．０１％のＴＦＡを含み、溶媒Ｂは９０％ｖ／ｖのＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ＋０．０１％のＴＦＡからなっていた。以下のグラジエントＨＰＬＣ方法を使用して、精製を達成した：０％Ｂ  ０〜１分、０〜１００％Ｂ  １〜２８分、１００〜０％Ｂ  ２８〜３０分。
【０２８９】
薄層クロマトグラフィー、分析ＨＰＬＣおよび質量分光分析法を使用して、最終生成物を同定および特徴付けた。ＮＭＲ分光法を使用することで、化合物４０６およびｍａｃｒｏｐａ−ＮＣＳの構造を確認した。Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＩＩＩ  ５００ＭＨｚ分光計を使用して、ＮＭＲ分析を行った。スペクトルはＣＤＣｌ３またはＤＭＳＯ−ｄ６において報告されている。ＸＳｅｌｅｃｔ（商標）ＣＳＨ（商標）Ｃ１８  ５μｍ  ４．６×５０ｍｍカラム（Ｗａｔｅｒｓ）を使用して分析ＨＰＬＣを行った。Ｗａｔｅｒｓ  ＳＱ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ２に連動されたＷａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  ＵＰＬＣ（登録商標）を使用するＬＣＭＳ分析によって、質量決定を行った。生物学的アッセイにおいて評価された全ての化合物の純度は、分析ＨＰＬＣによって判断したところ＞９５％の純度であった。
【０２９０】
ＲＰＳ−０７４の合成。
【０２９１】
【化６８】
2020516611.tif 000074
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−３−オキソ−２，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−ノナオキサ−４−アザヘントリアコンタン−３１−オイル）−Ｎ６−（（ベンジルオキシ）カルボニル）−Ｌ−リシナート（４０２）の調製。ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｎ−アミド−ＰＥＧ−８−酸（６６３ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、Ｌ−Ｎε−Ｚ−Ｌｙｓ−ＯｔＢｕ塩酸塩（４４６ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（４５６ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、ＤＩＰＥＡ（２６０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を終夜室温でＮ２下にて撹拌した。溶媒を減圧下にて除去し、粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０〜１０％のＭｅＯＨ）によって精製することで、化合物２を無色の油状物として得た（８４５ｍｇ、８６％）。質量 (ESI+): 983.0 [M+H]+.  質量計算値: 981.5.
【０２９２】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−３−オキソ−２，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−ノナオキサ−４−アザヘントリアコンタン−３１−オイル）−Ｎ６−（４−（４−ヨードフェニル）ブタノイル）−Ｌ−リシナート（４０３）の調製。化合物４０２（１．４５ｇ、１．４８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中に溶解した。木炭（１５ｍｇ）上の１０％パラジウムを添加し、懸濁液を３つ口フラスコの中にて室温で１０分間撹拌した。フラスコを排気し、次いでＨ２雰囲気下に置いた。懸濁液を次いで室温で５時間撹拌した後に、それをセライトに通して濾過した。フィルターケーキをＭｅＯＨで洗浄し、合わせた濾液を減圧下にて濃縮することで、アミンを黄色の油状物として得て（１．１７ｇ、９３％）、これをさらに精製することなく使用した。質量 (ESI+): 849.4 [M+H]+.  質量計算値: 848.0.ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中のアミン（８６５ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）および２，５−ジオキソピロリジン−１−イル４−（４−ヨードフェニル）ブタノエート（３８７ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＥＡ（１６７μＬ、１．２０ｍｍｏｌ）を添加した。結果として得られた溶液を室温でＡｒ下にて４時間の間撹拌した。溶液を次いで、１％ｖ／ｖのＡｃＯＨ／Ｈ２Ｏおよびブラインで順次に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮することで、黄色の油状物を得た。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０〜３０％のＭｅＯＨ）によって精製し、化合物３を黄色の油状物として単離した（３６０ｍｇ、３２％）。質量 (ESI+): 1120.9 [M+H]+.  質量計算値: 1119.5.
【０２９３】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（（Ｓ）−１０−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−２，２−ジメチル−４，１１−ジオキソ−３，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６−ノナオキサ−５，１２−ジアザノナトリアコンタン−３９−オイル）−Ｎ６−（４−（４−ヨードフェニル）ブタノイル）−Ｌ−リシナート（４０４）の調製。ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中の４０３（３６０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびジエチルアミン（０．６７ｍＬ、６．４８ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で７時間の間撹拌した。溶液を減圧下にて濃縮し、粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０〜３０％のＭｅＯＨ）によって精製した。生成物を含有する画分を合わせ、濃縮することで、アミンを黄色の油状物として得た（９６ｍｇ、３３％）。質量 (ESI+): 899.2 [M+H]+.  質量計算値: 897.4.ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中のアミン（９６ｍｇ、１０７μｍｏｌ）およびＦｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＳｕ（６２ｍｇ、１１０μｍｏｌ）の溶液に、ＴＥＡ（２８μＬ、２００μｍｏｌ）を添加した。混合物を終夜室温でＡｒ下にて撹拌した。溶媒を減圧下にて除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０〜３０％のＭｅＯＨ）によって精製した。所望の生成物が副次的不純物と共溶出したので、混合物を分取ＴＬＣ（１０％ｖ／ｖＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）によってもう一度精製した。化合物４０４を無色の油状物として単離した（７８ｍｇ、５１％）。質量 (ESI+): 1349.0 [M+H]+.  質量計算値: 1347.6.
【０２９４】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ２−（（Ｓ）−１０−アミノ−２，２−ジメチル−４，１１−ジオキソ−３，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６−ノナオキサ−５，１２−ジアザノナトリアコンタン−３９−オイル）−Ｎ６−（４−（４−ヨードフェニル）ブタノイル）−Ｌ−リシナート（４０５）の調製。ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中の４０４（７３ｍｇ、５４μｍｏｌ）およびジエチルアミン（０．５ｍＬ、４．８３ｍｍｏｌ）の溶液を終夜室温で撹拌した。溶媒を減圧下にて除去し、粗生成物をＭｅＯＨ中に溶解し、分取ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２中１０％ｖ／ｖのＭｅＯＨ）によって精製した。アミン４０５を淡色の油状物として単離した（２５ｍｇ、４１％）。質量 (ESI+): 1127.7 [M+H]+.  質量計算値: 1126.2.
【０２９５】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−（１−（２−（２−（２−（３−（（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ）−３−オキソプロポキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（４０７）の調製。０．５ＭのＣｕＳＯ４（１００μＬ）および１．５Ｍのアスコルビン酸ナトリウム（１００μＬ）の溶液を、茶色が橙色に変換するまで混合した。この混合物を次いで、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４０６（３１５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）およびアジド−ＰＥＧ３−ＮＨＳ（１７７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で２時間の間撹拌した。それを次いで、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮することで、淡色の油状物を得た。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０〜３０％のＭｅＯＨ）によって精製することで、化合物４０７を清澄な油状物として得た（４６０ｍｇ、９５％）。質量 (ESI+): 975.9 [M+H]+.  質量計算値: 974.5.
【０２９６】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（（（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−６−（３−（３−（１−（（１４Ｓ，４５Ｓ）−４５−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１４−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブチル）−５４−（４−ヨードフェニル）−１２，１５，４３，５１−テトラオキソ−３，６，９，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０−ウンデカオキサ−１３，１６，４４，５０−テトラアザテトラペンタコンチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）−１−オキソヘキサン−２−イル）カルバモイル）−Ｌ−グルタメート（４０８）の調製。ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中のアミン４０５（２５ｍｇ、２２μｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のエステル４０７（２４ｍｇ、２５μｍｏｌ）およびＴＥＡ（７μＬ、５０μｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物を５時間の間室温でＡｒ下にて撹拌した。次いで、反応物を減圧下にて濃縮し、粗残留物をＥｔＯＡｃ（１ｍＬ）中に溶解し、分取ＴＬＣ（ヘキサン中９０％のＥｔＯＡｃ）によって精製することで、化合物４０８を淡色の油状物として得た（３３ｍｇ、７６％）。質量 (ESI+): 994.3 [(M+2H)/2]+.  質量計算値: 1986.2.
【０２９７】
（（（Ｓ）−１−カルボキシ−５−（３−（３−（１−（（１４Ｓ，４５Ｓ）−４５−カルボキシ−１４−（４−（３−（２−カルボキシ−６−（（１６−（（６−カルボキシピリジン−２−イル）メチル）−１，４，１０，１３−テトラオキサ−７，１６−ジアザシクロオクタデカン−７−イル）メチル）ピリジン−４−イル）チオウレイド）ブチル）−５４−（４−ヨードフェニル）−１２，１５，４３，５１−テトラオキソ−３，６，９，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０−ウンデカオキサ−１３，１６，４４，５０−テトラアザテトラペンタコンチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）フェニル）ウレイド）ペンチル）カルバモイル）−Ｌ−グルタミン酸（ＲＰＳ−０７４）の調製。
【０２９８】
【化６９】
2020516611.tif 000075
化合物４０８（３３ｍｇ、１６μｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中に溶解した。次いで、ＴＦＡ（０．５ｍＬ）を添加し、反応物を終夜室温で撹拌した。溶媒をＮ２流下にて除去し、粗生成物を凍結乾燥させることで、白色の残留物を得た（２２ｍｇ、８３％）。質量 (ESI+): 832.0 [(M+2H)/2]+.  質量計算値: 1661.8.ＤＭＦ（１ｍＬ）中の遊離アミン（１３ｍｇ、７．８μｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．２２ｍＬ、１．５６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（１ｍＬ）中のｍａｃｒｏｐａ−ＮＨＳ（６ｍｇ、１０μｍｏｌ）の溶液を添加した。結果として得られた混合物を９０分間室温で撹拌した。反応物を減圧下にて濃縮し、粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物に対応するピークを回収し、凍結乾燥させることで、ＲＰＳ−０７４を白色の粉末として得た（４．５ｍｇ、２６％）。質量 (ESI+): 1126.6 [(M+2H)/2]+.  質量計算値: 2251.3.
【０２９９】
ＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡの合成
【０３００】
【化７０】
2020516611.tif 000076
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル４−（４−ヨードフェニル）ブタノエート（４０９）の調製。ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中の４−（４−ヨードフェニル）ブタン酸（１．１６ｇ、４．０ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（４８３ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（７６８ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）および４−ＤＭＡＰ（５．８ｍｇ、４７μｍｏｌ）の溶液を、２０時間の間撹拌した。次いで、反応混合物を１ＭのＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで順次に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮することで、ＮＨＳエステル４０９を白色の粉末として得た（１．２９ｇ、８３％）。1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ 7.61 (d, 2H, J = 7.2 Hz). 6.95 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 2.83 (s, 4H), 2.67 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 2.59 (t, 2H, J = 7.3 Hz), 2.03 (五重線, 2H, J = 7.3 Hz).
【０３０１】
Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ６−（４−（４−ヨードフェニル）ブタノイル）−Ｌ−リジン（４１０）の調製。Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ−ＯＨ（８７１ｍｇ、３．５３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）中に懸濁させ、室温で撹拌した。撹拌懸濁液に、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＮＨＳエステル４０９（１．２９ｇ、３．３３ｍｍｏｌ）およびＮＥｔ３（５５７μＬ、４．００ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくり添加した。結果として得られた懸濁液を終夜室温で撹拌した。反応物を１ＭのＨＣｌ（２ｍＬ）でクエンチし、溶媒を減圧下にて除去した。粗残留物をＣＨ２Ｃｌ２中に溶解し、１ＭのＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３溶液およびブラインで順次に洗浄した。有機画分をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮することで、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡ（４１０）を清澄な泡状物として得た（１．２５ｇ、７２％）。1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ 7.57 (d, 2H, J = 7.7 Hz), 6.91 (d, 2H, J = 7.8 Hz), 5.94 (br s, 1H), 5.32 (br s, 1H), 4.21 (m, 1H), 3.21 (m, 2H), 2.56 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 2.15 (t, 2H, J = 7.1 Hz), 1.90 (五重線, 2H, J = 7.5 Hz), 1.88 (m, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.51 (m, 2H), 1.42 (s, 9H), 1.41 (m, 2H).  質量 (ESI+): 519.3 (M+H)+.  質量計算値: 518.4.
【０３０２】
Ｎ６−（４−（４−ヨードフェニル）ブタノイル）−Ｌ−リジン（４１１）の調製。Ｂｏｃ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡ（５１８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を、２０％ｖ／ｖのＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２溶液１０ｍＬ中に溶解し、終夜室温で撹拌した。溶媒をＮ２の流下にて除去し、Ｌｙｓ−ＩＰＢＡ（４１１）を無色の油状物として単離した（４０２ｍｇ；９６％）。1H NMR (DMSO, 500 MHz): δ 7.75 (br s, 1H), 7.61 (d, 2H, J = 7.8 Hz), 6.99 (d, 2H, J = 7.8 Hz), 3.79 (m, 1H), 2.99 (m, 2H), 2.02 (t, 2H, J = 7.3 Hz), 1.74 (五重線, 2H, J = 7.4 Hz), 1.37 (m, 4H), 1.24 (m, 2H).  質量 (ESI+): 419.2 (M+H)+.  質量計算値: 418.3.
【０３０３】
２，２’，２”，２’’’−（２−（４−（３−（（Ｓ）−１−カルボキシ−５−（４−（４−ヨードフェニル）ブタンアミド）ペンチル）チオウレイド）ベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトライル）四酢酸（ＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡ）の調製。ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＬｙｓ−ＩＰＢＡ（１１ｍｇ、２６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１７μＬ、１００μｍｏｌ）の溶液に、Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）中のｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ・２．５Ｃｌ・２．５Ｈ２Ｏ（８ｍｇ、１１．６μｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物を室温で４時間の間撹拌した。溶媒を減圧下にて除去し、粗残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。生成物に対応するピークを回収し、凍結乾燥させることで、ＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡを白色の粉末として得た（５ｍｇ、４３％）。1H NMR (DMSO, 500 MHz): δ 9.72 (br s, 1H), 7.89 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.77 (m, 1H), 7.61 (d, 2H, J = 7.1 Hz), 7.51 (d, 2H, J = 7.8 Hz), 7.24 (m, 2H), 6.99 (d, 2H, J = 7.8 Hz), 4.84 (m, 1H), 3.70-3.04 (m, 14H), 3.01 (m, 4H), 2.02 (t, 2H, J = 7.1 Hz), 1.76 (m, 4H), 1.39 (m, 2H), 1.31 (m, 2H).  質量 (ESI+): 971.0 (M+H)+.  質量計算値: 969.9.
【０３０４】
放射化学。全ての試薬は、別段の注記がない限りＳｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、試薬グレードであった。塩酸（ＨＣｌ）は、微量分析品質のためのｔｒａｃｅＳＥＬＥＣＴ（登録商標）（＞９９．９９９％）であった。アルミニウム裏打ちシリカ薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）プレートは、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈをから購入した。０．０５ＭのＨＣｌおよび１ＭのＮＨ４ＯＡｃのストック溶液を、Ｍｉｌｌｉ−Ｑ（登録商標）水中の希釈によって調製した。
【０３０５】
２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４：０．０５ＭのＨＣｌ（９５０μＬ中１６．７〜２１．０ＭＢｑ）中の２２５Ａｃ（ＮＯ３）３（Ｏａｋ  Ｒｉｄｇｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＵＳＡ）の溶液に、ＤＭＳＯ中のＲＰＳ−０７４の１ｍｇ／ｍＬ溶液２０μＬを添加した。９０μＬの１Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃの添加によって、ｐＨを５〜５．５に増加させた。反応物を２０分間２５℃でＥｐｐｅｎｄｏｒｆ  ＴｈｅｒｍｏＭｉｘｅｒ（登録商標）Ｃ（ＶＷＲ）上にて穏やかに振盪した。次いで、反応物をＨ２Ｏ（９ｍＬ）で希釈し、予備活性化Ｓｅｐ−Ｐａｋ  Ｃ１８  Ｌｉｇｈｔカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ）に通過させた。反応バイアルおよびカートリッジをＨ２Ｏ（５ｍＬ）で洗浄し、生成物を５００μＬのＥｔＯＨ、続いて５００μＬの規定生理食塩水（脱イオン化Ｈ２Ｏ中０．９％のＮａＣｌ；ＶＷＲ）で溶出した。溶出物を規定生理食塩水中で４ｍＬに希釈することで、１．１〜１．５ＭＢｑ／ｍＬの放射能濃度を有するストック溶液を得た。アリコートを最終溶液から除去し、アルミニウム裏打ちシリカＴＬＣプレート上にスポットすることで、放射化学的不純物を決定した。０．０５ＭのＨＣｌ中の２２５Ａｃ（ＮＯ３）３溶液のアリコートを、対照として平行レーン中にスポットした。プレートのランを１０％ｖ／ｖのＭｅＯＨ／１０ｍＭのＥＤＴＡ移動相中で直ちに行い、次いで８時間の間静置させることで、放射化学平衡に達するのを可能にした。リン光体スクリーン上への３分の曝露に続いて、プレートをＣｙｃｌｏｎｅ  Ｐｌｕｓ  Ｓｔｏｒａｇｅ  Ｐｈｏｓｐｈｏｒ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）上で可視化した。放射化学的純度を総活性に対する２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４の比として表し、９８．１％であると決定した。プレートを１６時間後に再び可視化することで、純度を確認した。
【０３０６】
２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡ：０．０５ＭのＨＣｌ（９００μＬ中５．０ＭＢｑ）中の２２５Ａｃ（ＮＯ３）３（Ｏａｋ  Ｒｉｄｇｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＵＳＡ）の溶液に、ＤＭＳＯ中のＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡの１ｍｇ／ｍＬ溶液３０μＬを添加した。８０μＬの１Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃの添加によって、ｐＨを５〜５．５に増加させ、反応物を２５分間９５℃でＥｐｐｅｎｄｏｒｆ  ＴｈｅｒｍｏＭｉｘｅｒ（登録商標）Ｃ（ＶＷＲ）上にて加熱した。次いで、反応混合物をＨ２Ｏ（９ｍＬ）で希釈し、予備活性化Ｓｅｐ−Ｐａｋ  Ｃ１８  Ｌｉｇｈｔカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ）に通過させた。反応バイアルおよびカートリッジをＨ２Ｏ（５ｍＬ）で洗浄し、生成物を５０％ｖ／ｖのＥｔＯＨ／生理食塩溶液２００μＬ、続いて８００μＬの規定生理食塩水（脱イオン化Ｈ２Ｏ中０．９％のＮａＣｌ；ＶＷＲ）で溶出した。上に記載した通りの放射性ＴＬＣによって、放射化学的純度（９６％）を決定した。
【０３０７】
細胞培養。ＰＳＭＡ発現ヒト前立腺がん細胞株、ＬＮＣａＰは、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから得た。細胞培養供給物は、別段の注記がない限りＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎから得た。ＬＮＣａＰ細胞は、１０％のウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、４ｍＭのＬ−グルタミン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＮ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、２．５ｍｇ／ｍＬのＤ−グルコースおよび５０μｇ／ｍＬのゲンタマイシンが補充されたＲＰＭＩ−１６４０培地中に、加湿インキュベーター中にて３７℃／５％ＣＯ２で維持した。０．２５％トリプシン／エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）でインキュベートすることによる継代または１２ウェルアッセイプレートへの移動のために、細胞をフラスコから除去した。
【０３０８】
ＩＣ５０のインビトロ決定。非標識化された金属フリーリガンドのＩＣ５０値を、前に記載されている方法［２］に従って、小さい修正を用いて、ＬＮＣａＰ細胞上のＰＳＭＡへの結合について、Ｋｄ＝０．６４±０．４６ｎＭで［１］、９９ｍＴｃ−（（７Ｓ，１２Ｓ，１６Ｓ）−１−（１−（カルボキシメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−２−（（１−（カルボキシメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチル）−９，１４−ジオキソ−２，８，１３，１５−テトラアザオクタデカン−７，１２，１６，１８−テトラカルボン酸テクネチウムトリカルボニル錯体）（９９ｍＴｃ−ＭＩＰ−１４２７）に対する多濃度競合的結合アッセイにおいてスクリーニングすることによって決定した。簡潔には、ＬＮＣａＰ細胞を実験の７２時間前に平板培養することで、０．２５％のウシ血清アルブミンが補充されたＲＰＭＩ−１６４０培地においておよそ５×１０５細胞／ウェルの密度を（トリプリケートで）達成した。１ｎＭの９９ｍＴｃ−ＭＩＰ−１４２７を用いて、０．００１２５％ｗ／ｖウシ血清アルブミンを含有するＲＰＭＩ−１６４０培地中に［３］、０．００１〜１０，０００ｎＭの試験化合物の存在下にて、細胞を２時間の間インキュベートした。放射性インキュベーション培地を次いでピペットによって除去し、１ｍＬの氷冷ＰＢＳ  １Ｘ溶液を使用して細胞を２回洗浄した。１ｍＬの１Ｍ  ＮａＯＨを用いる処置に続いて、細胞をプレートから収集し、２４７０  Ｗｉｚａｒｄ２  Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｇａｍｍａ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用する放射カウントのためにチューブに移した。標準溶液（各ウェルに添加された活性の１０％）を調製することで、減衰補正を可能にした。細胞−比活性を９９ｍＴｃ−ＭＩＰ−１４２７の非特異的結合について補正した。Ｏｒｉｇｉｎソフトウェアにおいてデータ点をＳ字形Ｈｉｌｌｓ１曲線にフィットさせることによって、ＩＣ５０値を決定した。
【０３０９】
異種移植片を用いるマウスの接種。全ての動物研究は、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｆ  Ｗｅｉｌｌ  Ｃｏｒｎｅｌｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅによって承認され、ＵＳＰＨＳ  Ｐｏｌｉｃｙ  ｏｎ  Ｈｕｍａｎｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓによって説明されたガイドラインに従って行われた。動物は、１２時間の明／暗サイクルを有する承認された施設に標準条件下にて収容した。食物および水は、研究過程の全体にわたって無制限に提供した。雄性ＢＡＬＢ／ｃ胸腺欠損ｎｕ／ｎｕマウスは、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから購入した。マウスにおける接種のため、ＬＮＣａＰ細胞をＰＢＳ：マトリゲルの１：１混合物（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）中に４×１０７細胞／ｍＬで懸濁させた。各マウスの左側腹部に０．２５ｍＬの細胞懸濁液を注入した。腫瘍が２００〜８００ｍｍ３の範囲にある時に体内分布を行い、一方、腫瘍が５０〜９００ｍｍ３の範囲にある時に治療研究を開始した。
【０３１０】
ＬＮＣａＰ異種移植片マウスにおける体内分布研究。ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍保有マウス（１化合物当たり１時点につき４匹）に、２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４の１０５ｋＢｑおよび３２０ｎｇ（１４２ｐｍｏｌ）のボーラス注入を静脈内注入した。マウスを注入後４時間、２４時間、７日、１４日および２１日で屠殺した。血液試料を除去し、完全な体内分布研究を以下の臓器に（内容物とともに）行った：心臓、肺、肝臓、小腸、大腸、胃、脾臓、膵臓、腎臓、筋肉、骨および腫瘍。組織を秤量し、２４７０  Ｗｉｚａｒｄ  Ａｕｔｏｍａｔｉｃ  Ｇａｍｍａ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）上でカウントした。カウント数を減衰についておよび注入された活性について補正し、組織取込みを１グラム当たりのパーセント注入用量（％ＩＤ／ｇ）として表した。標準誤差測定を各データ点について算出した。
【０３１１】
ＬＮＣａＰ異種移植片マウスにおける治療研究。ＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍保有マウスを５つの群に（１群当たり７匹のマウス）に無作為に割り当てた。１つの群に１４８ｋＢｑおよび９３ｎｇ（４１ｐｍｏｌ）の２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４のボーラス注入を静脈内注入した。第２の処置群に７４ｋＢｑおよび４７ｎｇ（２１ｐｍｏｌ）の２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４を注入した。第３の処置群に３７ｋＢｑおよび２３ｎｇ（１０ｐｍｏｌ）の２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４を注入した。第４の群に同じ体積のビヒクルを注入した。第５の群に１３３ｋＢｑの２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡを注入した。腫瘍寸法をデジタルノギスで週３回測定および記録し、修正された楕円式、Ｖ＝０．５×長さ×幅×幅［４］を使用して腫瘍体積を算出した。腫瘍が２０００ｍｍ３に達した後に、またはマウスが、体重の損失、食欲の欠如、過度の嗜眠もしくはただれおよび発疹の形成を含めて、窮迫の任意の可視的兆候を示した場合にマウスを屠殺した。体重をデジタル秤で週２回測定し、マウスを窮迫の兆候についてモニタリングした。マウスの写真を毎週撮ることで、腫瘍体積における変化を視覚的に確認した。
【０３１２】
μＰＥＴ／ＣＴによる処置マウスの画像化。前に報告されている通りに［５］、６８Ｇａ−ＰＳＭＡ−１１（６８Ｇａ−ＨＢＥＤ−ＣＣとしても公知）を調製した。１３８ｋＢｑまたは７４ｋＢｑのいずれかの２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４の注入の７５日後、８匹のマウスに５．５ＭＢｑの６８Ｇａ−ＰＳＭＡ−１１を静脈内注入した。イソフルランを用いる吸入麻酔に続いて注入後１時間でμＰＥＴ／ＣＴ（Ｉｎｖｅｏｎ（商標）；Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．）を使用して、マウスを画像化した。総獲得時間は３０分であった。ＣＴスキャンを得た直後に、解剖学的同時登録および減衰補正の両方について獲得した。ベンダーによって供給されたＩｎｖｅｏｎ（商標）ソフトウェアを使用して、画像を再構築した。
【０３１３】
ＲＰＳ−０７４のインビトロおよびインビボ評価
ＬＮＣａＰ細胞上のＰＳＭＡへの親和性を呈する９９ｍＴｃ−ＭＩＰ−１４２７に対する多濃度競合的結合アッセイを使用して、ＲＰＳ−０７４のＩＣ５０値をインビトロで決定した。ＲＰＳ−０７４のＩＣ５０は、構造的に類似した三官能性リガンドの報告されているＰＳＭＡ親和性［６］と一致する値である１２．０±３．４ｎＭであると実証された。ＲＰＳ−０７４の体内分布をＬＮＣａＰ異種移植片腫瘍保有マウスにおいてインビボで検査した。マウスに２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４の１０５ｋＢｑおよび３２０ｎｇ（１４２ｐｍｏｌ）のボーラス注入を静脈内注入した。マウスを注入後４時間、２４時間、７日、１４日および２１日で屠殺した。図１２は、２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４の取込みは、注入後（ｐ．ｉ．）４時間で、血液（１２．３±０．５％ＩＤ／ｇ）、肺（５．０±０．２％ＩＤ／ｇ）、腎臓（６．７±０．４％ＩＤ／ｇ）および腫瘍（５．８±０．３％ＩＤ／ｇ）において明白であると実証している。注入後２４時間までに、腎臓（３．０±０．３％ＩＤ／ｇ）を含めた非標的組織における活性は、血中クリアランスと呼応して排出し、一方、腫瘍における活性は１２．７±１．５％ＩＤ／ｇに増加した（図１２）。注入後７日までに、腫瘍における活性は高いままであり（９．５±１．５％ＩＤ／ｇ）、一方、血液およびあらゆる他の組織における活性は１％ＩＤ／ｇ未満であった（図１２）。持続的な腫瘍取込み（１１．９±１．５％ＩＤ／ｇ）は注入後１４日で明白であり、全ての他の組織はバックグラウンドと大きくは区別できなくなった。注入後２１日までに、抗腫瘍効果は明白であり、１匹のマウスのみが依然として腫瘍を保有していた。腫瘍の非存在にもかかわらず、非標的組織における活性はバックグラウンドと区別できないままであった。
【０３１４】
２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４は、腫瘍が非存在であった場合でも３週にわたって優れた錯体安定性を示した。体内分布研究は、シグナルの蓄積が、遊離２２５Ａｃ３＋を典型的に取り込む２つの臓器である肝臓または骨において明白でないことを実証した［７］。２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４は、好ましい薬物動態プロファイル；腫瘍対腎臓比および腫瘍対血液比が急速に腫瘍を好むことも実証した。注入後２４時間までに、腫瘍対腎臓比は４．３±０．７に達しており、一方、注入後７日および１４日で、それは、それぞれ１５．０±２．９および６２．２±９．５である。同じ時点で腫瘍対血液比は、３．３±０．５、１３７．５±３０．４および９９５．８±１３９．７である。薬物動態プロファイルにおける有意な差異は、各組織によって吸収される用量が異なることを実証している。
【０３１５】
ＬＮＣａＰ異種移植片マウスにおける治療評価
ＬＮＣａＰ異種移植片を５つの群に無作為に割り当て、１４８ｋＢｑおよび９３ｎｇ（４１ｐｍｏｌ）の２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４、７４ｋＢｑおよび４７ｎｇ（２１ｐｍｏｌ）の２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４、３７ｋＢｑおよび２３ｎｇ（１０ｐｍｏｌ）の２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４、１３３ｋＢｑの２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡ、またはビヒクル対照のボーラス注入で処置した。１３８ｋＢｑおよび７４ｋＢｑの２２５Ａｃ−ＲＰＳ−０７４で処置されたマウスにおいて、著しい抗腫瘍効果が観察された。１３８ｋＢｑ処置群において、腫瘍の６／７（８６％）は注入後７５日で検出可能できず（＜０．５ｍｍ３）、一方、腫瘍の１／７（１４％）は７４ｋＢｑ群において検出可能でなかった。初期の腫瘍体積の分布は、２つの群について、それぞれ１００〜６２４ｍｍ３および６４〜４５５ｍｍ３であった（図１３）。腫瘍体積は、７４ｋＢｑ群において注入後４２日もの間減少した後、腫瘍体積の６／７（８６％）は再び増加し始めた。病理学のための試料の回収前に、６８Ｇａ−ＰＳＭＡ−１１を用いるμＰＥＴ／ＣＴ画像化によって、腫瘍の非存在を確認した（図１４）。７４ｋＢｑ処置群において再出現したような腫瘍は、画像化することによって、ＰＳＭＡを発現することが示された。生理的取込みも腎臓および唾液腺において明白であった。
【０３１６】
図１３は、１３３ｋＢｑの２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡを受容した３７ｋＢｑ処置群および陽性対照群の両方がビヒクル群に相対して初期の効果を示したが、腫瘍体積が、それぞれ９９〜３３１ｍｍ３および２３３〜８５９ｍｍ３の開始体積から２０００ｍｍ３超の最終体積に増加したことを実証している。明らかな用量応答がこの研究において明白であった。注入後最大４２日まで、７４ｋＢｑおよび１３８ｋＢｑ処置群は同様に挙動したが、前者の群におけるマウスの５／７（７１％）の腫瘍体積を測定したところ１ｍｍ３未満であった一方で、腫瘍は徐々に戻った。対照的に、３７ｋＢｑ処置群におけるマウスの腫瘍は、未処置腫瘍と同様の速度で成長するように見えた。
【０３１７】
１３８ｋＢｑ処置群における全てのマウスは、７５日の研究を生き延びた（図１５）。対照的に、他の群の各々において、少なくとも１匹のマウスを、過度の腫瘍成長により研究の終了前に屠殺した。３７ｋＢｑ群および１３３ｋＢｑの２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−Ｌｙｓ−ＩＰＢＡ陽性対照群についての生存曲線は同様であり、マウスの１００％が最初の２１日を生き延びた。対照的に、未処置マウスの１／７（１４％）のみが、この時点まで生き延びた。毒性効果は該群のいずれにおいても不可視であった。７５日の研究中の体重における変動は、元の測定値の９２〜１０６％であった。残りのマウスを注入後７５日で屠殺し、腫瘍（存在するならば）、腎臓、肝臓、耳下腺および舌下腺を切除し、損傷の証拠について検査した。
【０３１８】
本発明の技術のさらなる例証的な化合物
本発明の技術の以下の化合物を合成し、上に記載したのと同様のプロトコールおよび方法を介して特徴付けた。
【０３１９】
【化７１】
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【０３２０】
セクション１．４参考文献
[1]  Hillier SM, Maresca KP, Lu G, Merkin RD, Marquis JC, Zimmerman CN, Eckelman WC, Joyal JL, Babich JW. 99mTc-Labeled Small-Molecule Inhibitors of Prostate-Specific Membrane Antigen for Molecular Imaging of Prostate Cancer. J Nucl Med. 2013;54:1369-76.
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[7]  Miederer M, Scheinberg DA, McDevitt MR. Realizing the potential of the Actinium-225 radionuclide generator in targeted alpha-particle therapy applications. Adv Drug Deliv Rev. 2008;60:1371-1382.
【０３２１】
ある特定の実施形態が例示および記載されてきたが、当技術分野における通常の技能者は、前述の明細書を読んだ後、本明細書において説明されている通りの本発明の技術の化合物またはその塩、医薬組成物、誘導体、プロドラッグ、代謝物、互変異性体もしくはラセミ混合物に対して、変化、等価物の置換、および他の型の変更を施すことができる。上に記載した各態様および実施形態は、他の態様および実施形態のいずれかまたは全てに関して開示されている通りのこうした変動または態様をともに含むまたは組み込むこともできる。
【０３２２】
本発明の技術は、その上、本発明の技術の個々の態様の単一の例示として意図される本明細書に記載される特別な態様の観点から限定されるべきでない。この本発明の技術の多くの修正および変動は、当業者に明らかである通り、それの趣旨および範疇から逸脱することなくなされ得る。本発明の技術の範疇内の機能的に同等の方法は、本明細書において列挙されているものに加えて、前述の説明から当業者に明らかである。こうした修正および変動は、添付の特許請求の範囲の範疇内に入ると意図される。この本発明の技術は、当然変動することができる特別な方法、試薬、化合物、組成物、標識化化合物または生物系に限定されないと理解されるべきである。本明細書において使用されている用語法は、特別な態様を記載する目的のみであることも理解されるべきであり、限定していると意図されない。したがって、本明細書は、添付の特許請求の範囲、その定義およびその任意の等価物によってのみ示される本発明の技術の幅、範疇および趣旨を用いる例証としてのみ考えられると意図される。
【０３２３】
本明細書において例示的に記載されている実施形態は、適当には、本明細書において具体的に開示されていない任意の要素（単数または複数）、限定（単数または複数）の非存在で実践することができる。したがって、例えば、「含む」、「含めた」、「含有する」などという用語は、広くおよび限定せずに読まれるべきである。追加として、本明細書において用いられた用語および表現は、記載の用語としておよび限定でない用語として使用されてきており、こうした用語および発現の使用に、示されたおよび記載された特色の任意の等価物またはその部分を排除する意図はなく、特許請求された技術の範疇内で様々な修正が可能であることが認識される。追加として、「から本質的になる」という成句は、具体的に列挙されているような要素、ならびに特許請求された技術の基本および新規な特徴に実質的に影響しないような追加の要素を含むと理解される。「からなる」という成句は、特定されていない任意の要素を排除する。
【０３２４】
加えて、本開示の特色または態様がマーカッシュ群の形態で記載される場合、当業者であれば、それにより本開示は、マーカッシュ群のいずれか個々の要素または要素のサブグループの形態で記載されることが理解されるものとする。包括的開示内に入る、より狭い種および亜属の群分けの各々も、本発明の一部を形成する。これは、除外された材料が本明細書において具体的に列挙されているかどうかにかかわらず、属から任意の主題を除く条件または否定的限定を有する包括的な本発明の記載を含む。
【０３２５】
当業者によって理解される通り、ありとあらゆる目的で、特に書面記載を提供する観点から、本明細書で開示される全ての範囲は、ありとあらゆる可能なサブ範囲ならびにそのサブ範囲の組合せも包含する。いかなる列挙の範囲も、同範囲が少なくとも二等分、三等分、四等分、五等分、十等分などに分割されると十分に記載および可能にしていると簡単に認識することができる。非限定的な例として、本明細書において考察されている各範囲は、下位三分の一、中位三分の一および上位三分の一などに容易に分割できる。その上当業者によって理解される通り、「最大まで」、「少なくとも」、「超」および「未満」などの全ての言葉は、列挙されている数を含み、上記で考察される通りサブ範囲に引き続いて分割することができる範囲を指す。最終的に、当業者によって理解される通り、範囲は各個々のメンバーを含む。
【０３２６】
この明細書において参照される全ての公報、特許出願、発行特許および他の文書（例えば、学術誌、論文および／または教科書）は、各個々の公報、特許出願、発行特許または他の文書が参照によりそれ全体で組み込まれると具体的におよび個々に示されているかのように、参照により本明細書に組み込まれる。参照により組み込まれる文章に含まれている定義は、それらがこの開示における定義と矛盾する限り排除される。
【０３２７】
本発明の技術は、以下に限定されないが、以下の文字の段落において列挙されている特色および特色の組合せを含むことができ、以下の段落は、本明細書に添付されている通りの請求項の範疇を制限するまたは全てのこうした特色がこうした請求項に必ず含まれなければならないと強制すると解釈するべきでないと理解される：
Ａ．式Ｉ
【０３２８】
【化７２】
2020516611.tif 000086
（式中、
ＡＢＤは、抗原結合ドメインであり；
Ｗ１は、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｎ−または−（ＣＨ２）ｏ−ＮＨ２−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、
【０３２９】
【化７３】
2020516611.tif 000087
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つは、各々Ｈであり；
Ｘ１は、非存在、Ｏ、ＳまたはＮＨであり；
Ｌ１は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ４−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ５−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−アリーレン−、−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、アミノ酸、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個もしくは１０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであり、ここで、ｒは、０、１、２、３、４、５、６、７、８または９であり、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、各々独立して、Ｈ、アルキルまたはアリールであり；
Ｔｏｘは、細胞毒含有および／または画像化剤含有ドメインであり；
Ｌ２は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個もしくは２０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せであり、ここで、ｓは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８または１９であり；
Ａｌｂは、アルブミン結合部分であり；
ｍは、０または１であり；
ｎは、１または２であり；
ｏは、１または２であり；
ｐは、０、１、２または３であり、ただしｐが０である場合、Ｘ１は非存在であり；
ｑは、１または２である）
の化合物またはその薬学的に許容される塩および／もしくは溶媒和物。
Ｂ．式Ｉの化合物が、式ＩＩ
【０３３０】
【化７４】
2020516611.tif 000088
（式中、
Ｐ１、Ｐ２およびＰ３は、各々独立して、Ｈ、メチル、ベンジル、４−メトキシベンジルまたはｔｅｒｔ−ブチルであり；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは、
【０３３１】
【化７５】
2020516611.tif 000089
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つは、各々Ｈであり；
Ｒａｄは、金属イオンを含むことができる、任意選択で金属イオンをさらに含むことができる部分である）
またはその薬学的に許容される塩および／もしくは溶媒和物である、段落Ａの化合物。
Ｃ．Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が、各々独立してＨまたはｔｅｒｔ−ブチルである、段落Ｂに記載の化合物。
Ｄ．Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が、各々独立してＨである、段落Ｂまたは段落Ｃの化合物。
Ｅ．式ＩのＴｏｘまたは式ＩＩのＲａｄが金属イオンを含む、段落Ａ〜Ｄのいずれか一項に記載の化合物。
Ｆ．式ＩＩのＲａｄがキレーターおよびキレート化金属イオンを含む、段落Ｂ〜Ｅのいずれか一項に記載の化合物。
Ｇ．金属イオンが、１７７Ｌｕ３＋、１７５Ｌｕ３＋、４５Ｓｃ３＋、６６Ｇａ３＋、６７Ｇａ３＋，６８Ｇａ３＋、６９Ｇａ３＋，７１Ｇａ３＋、８９Ｙ３＋，８６Ｙ３＋、８９Ｚｒ４＋、９０Ｙ３＋、９９ｍＴｃ＋１、１１１Ｉｎ３＋、１１３Ｉｎ３＋、１１５Ｉｎ３＋、１３９Ｌａ３＋、１３６Ｃｅ３＋、１３８Ｃｅ３＋、１４０Ｃｅ３＋、１４２Ｃｅ３＋、１５１Ｅｕ３＋、１５３Ｅｕ３＋、１５２Ｄｙ３＋、１４９Ｔｂ３＋、１５９Ｔｂ３＋、１５４Ｇｄ３＋、１５５Ｇｄ３＋、１５６Ｇｄ３＋、１５７Ｇｄ３＋、１５８Ｇｄ３＋、１６０Ｇｄ３＋、１８８Ｒｅ＋１、１８６Ｒｅ＋１、２１３Ｂｉ３＋、２１１Ａｔ＋、２１７Ａｔ＋、２２７Ｔｈ４＋、２２６Ｔｈ４＋、２２５Ａｃ３＋、２３３Ｒａ２＋、１５２Ｄｙ３＋、２１３Ｂｉ３＋、２１２Ｂｉ３＋、２１１Ｂｉ３＋、２１２Ｐｂ２＋、２１２Ｐｂ４＋、２５５Ｆｍ３＋、またはウラン−２３０である放射性核種である、段落Ａ〜Ｆのいずれか一項に記載の化合物。
Ｈ．金属イオンが、２１３Ｂｉ３＋、２１１Ａｔ＋、２２５Ａｃ３＋、１５２Ｄｙ３＋、２１２Ｂｉ３＋、２１１Ｂｉ３＋、２１７Ａｔ＋、２２７Ｔｈ４＋、２２６Ｔｈ４＋、２３３Ｒａ２＋、２１２Ｐｂ２＋および２１２Ｐｂ４＋から選択されるアルファ放出放射性核種である、段落Ａ〜Ｇのいずれか一項に記載の化合物。
Ｉ．アルブミン結合部分が
【０３３２】
【化７６】
2020516611.tif 000090
（式中、
Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４およびＹ５は、独立して各出現で、Ｈ、ハロまたはアルキルであり；
Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５およびＸ６は、各々独立して、ＯまたはＳであり、
ａは、独立して各出現で、０、１または２であり；
ｂは、独立して各出現で、０または１であり；
ｃは、独立して各出現で、０または１であり；
ｄは、独立して各出現で、０、１、２、３または４であり、ここで任意選択で、ｂおよびｃは、同じ値であり得ない）
である、段落Ａ〜Ｈのいずれか一項に記載の化合物。
Ｊ．Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つが、
【０３３３】
【化７７】
2020516611.tif 000091
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つが、各々、Ｈであり；
Ｌ３が、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−ＮＲ１０−または−アリーレン−であり；
Ｒ１０が、Ｈ、アルキルまたはアリールであり；
ＣＨＥＬが、共有結合的にコンジュゲートされたキレーターであり、任意選択でキレート化金属イオンを含む、段落Ａ〜Ｉのいずれか一項に記載の化合物。
Ｋ．式Ｉの化合物が、式ＩＩＩ
【０３３４】
【化７８】
2020516611.tif 000092
（式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の１つは
【０３３５】
【化７９】
2020516611.tif 000093
であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の残りの２つは、各々Ｈであり；
Ｌ３は、非存在、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン−ＮＲ１０−または−アリーレン−であり；
Ｒ１０は、Ｈ、アルキルまたはアリールであり；
ＣＨＥＬは、共有結合的にコンジュゲートされるキレーターであり、任意選択でキレート化金属イオンを含む）
の化合物またはその薬学的に許容される塩および／もしくは溶媒和物である、段落Ａ〜Ｊのいずれか一項に記載の化合物。
Ｌ．Ｌ１が、−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、アミノ酸、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個もしくは１０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せである、段落Ａ〜Ｋのいずれか一項に記載の化合物。
Ｍ．Ｌ１が、−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、グリシン、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個もしくは１０個のグリシン残基で構成されるポリグリシン、またはそれらの任意の２つ以上の組合せである、段落Ａ〜Ｌのいずれか一項に記載の化合物。
Ｎ．Ｌ２が、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個もしくは２０個のアミノ酸のペプチド、またはそれらの任意の２つ以上の組合せである、段落Ａ〜Ｍのいずれか一項に記載の化合物。
Ｏ．Ｌ２が、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｓ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個もしくは２０個のアミノ酸で構成されるポリグリシン、またはそれらの任意の２つ以上の組合せである、段落Ａ〜Ｎのいずれか一項に記載の化合物。
Ｐ．薬学的に許容される担体および段落Ａ〜Ｏのいずれか一項に記載の組成物を含む組成物。
Ｑ．前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を過剰発現するがんおよび／または哺乳動物組織を検出するための、段落Ａ〜Ｏのいずれか一項に記載の化合物の有効量；ならびに
薬学的に許容される担体
を含む組成物である医薬組成物。
Ｒ．がんが、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、段落Ｑに記載の医薬組成物。
Ｓ．哺乳動物組織が、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、段落Ｑまたは段落Ｒに記載の医薬組成物。
Ｔ．医薬組成物が、任意選択で滅菌水、リンゲル液または等張性生理食塩水溶液を含む、静脈内投与のために製剤化される、段落Ｑ〜Ｓのいずれか一項に記載の医薬組成物。
Ｕ．化合物の有効量が、医薬組成物１グラム当たり化合物約０．０１μｇから約１０ｍｇである、段落Ｑ〜Ｔのいずれか一項に記載の医薬組成物。
Ｖ．注入可能な剤形で提供される、段落Ｑ〜Ｕのいずれか一項に記載の医薬組成物。
Ｗ．前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を過剰発現するがんおよび／または哺乳動物組織を処置するための、段落Ａ〜Ｏのいずれか一項に記載の化合物の有効量；ならびに
薬学的に許容される担体
を含む医薬組成物。
Ｘ．がんが、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、段落Ｗに記載の医薬組成物。
Ｙ．哺乳動物組織が、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、段落Ｗまたは段落Ｘに記載の医薬組成物。
Ｚ．任意選択で滅菌水、リンゲル液または等張性生理食塩水溶液を含む、静脈内投与のために製剤化される、段落Ｗ〜Ｙのいずれか一項に記載の医薬組成物。
ＡＡ．化合物の有効量が、医薬組成物１グラム当たり化合物約０．０１μｇから約１０ｍｇである、段落Ｗ〜Ｚのいずれか一項に記載の医薬組成物。
ＡＢ．注入可能な剤形で提供される、段落Ｗ〜ＡＡのいずれか一項に記載の医薬組成物。
ＡＣ．ＰＳＭＡを過剰発現するがんおよび／または哺乳動物組織を処置するための化合物の有効量が、がんおよび／またはＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織を画像化するための化合物の有効量でもある、段落Ｗ〜ＡＢのいずれか一項に記載の医薬組成物。
ＡＤ．前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を過剰発現するがんおよび／または哺乳動物組織を画像化するための段落Ａ〜Ｏのいずれか一項に記載の化合物の有効量を対象に投与すること；および
投与に続いて、化合物からの放射線を検出すること
を含む方法。
ＡＥ．投与に続いて、ポジトロン放出、ポジトロンの放出および消滅からのガンマ線、ならびにポジトロン放出によるチェレンコフ放射線の１つまたは複数を検出することを含む、段落ＡＤに記載の方法。
ＡＦ．がんが、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、段落ＡＤまたは段落ＡＥに記載の方法。
ＡＧ．対象が、ＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織を患っている疑いがあり、任意選択で、哺乳動物組織が、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、段落ＡＤ〜ＡＦのいずれか一項に記載の方法。
ＡＨ．化合物を投与することが非経口投与を含む、段落ＡＤ〜ＡＧのいずれか一項に記載の方法。
ＡＩ．化合物を投与することが静脈内投与を含む、段落ＡＤ〜ＡＨのいずれか一項に記載の方法。
ＡＪ．化合物の有効量が、対象質量１キログラム当たり約０．１μｇから約５０μｇである、段落ＡＤ〜ＡＩのいずれか一項に記載の方法。
ＡＫ．前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を過剰発現するがんおよび／または哺乳動物組織を処置するための段落Ａ〜Ｏのいずれか一項に記載の化合物の有効量を対象に投与すること
を含む方法。
ＡＬ．がんが、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、段落ＡＫに記載の方法。
ＡＭ．対象が、ＰＳＭＡを過剰発現する哺乳動物組織を患っている疑いがあり、任意選択で、哺乳動物組織が、神経膠腫、乳がん、副腎皮質がん、子宮頸癌腫、外陰癌腫、子宮内膜癌腫、原発性卵巣癌腫、転移性卵巣癌腫、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、結腸がん、原発性胃腺癌腫、原発性結腸直腸腺癌腫、腎細胞癌腫および前立腺がんの１つまたは複数を含む、段落ＡＫまたは段落ＡＬに記載の方法。
ＡＮ．化合物を投与することが非経口投与を含む、段落ＡＫ〜ＡＭのいずれか一項に記載の方法。
ＡＯ．化合物を投与することが静脈内投与を含む、段落ＡＫ〜ＡＮのいずれか一項に記載の方法。
ＡＰ．ＰＳＭＡを過剰発現するがんおよび／または哺乳動物組織を処置するための化合物の有効量が、対象質量１キログラム当たり約０．１μｇから約５０μｇである、段落ＡＫ〜ＡＯのいずれか一項に記載の方法。
ＡＱ．化合物の有効量が、ＰＳＭＡを過剰発現するがんおよび／または哺乳動物組織を画像化するための化合物の有効量でもある、段落ＡＫ〜ＡＰのいずれか一項に記載の方法。
ＡＲ．投与に続いて、化合物からの放射線を検出することをさらに含む、段落ＡＫ〜ＡＱのいずれか一項に記載の方法。
ＡＳ．投与に続いて、ポジトロン放出、ポジトロンの放出および消滅からのガンマ線、ならびにポジトロン放出によるチェレンコフ放射線の１つまたは複数を検出することをさらに含む、段落ＡＫ〜ＡＲのいずれか一項に記載の方法。
ＡＴ．哺乳動物対象への放射線治療薬の投与の約４時間から約２４時間内に１以上である腎臓活性に対する腫瘍活性の比が観察される哺乳動物対象において、インビボにおいて放射線治療薬の組織分布を達成する方法であって、
放射線治療薬を哺乳動物対象に投与することを含み；
放射線治療薬が、前立腺特異的膜抗原（「ＰＳＭＡ」）を標的化する第１の部分、放射性核種を保有する第２の部分、および血清アルブミンへの親和性を有する第３の部分を含み、第１の部分が第１の共有結合性リンカーによって第２の部分から分離されており、第３の部分が第２の共有結合性リンカーによって第２の部分から分離されており、
ここで、第１の部分と第２の部分との間の分離は（第１の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数に基づく）、約８個の原子から約４０個の原子であり、第３の部分と第１および第２の部分との間の分離は（第２の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数に基づく）、約１０個の原子から約１００個の原子である、方法。
ＡＵ．放射線治療薬の投与の約４時間から約２４時間後に、哺乳動物対象の画像を得ることをさらに含む、段落ＡＴに記載の方法。
ＡＶ．１以上である腎臓活性に対する腫瘍活性の比が、放射線治療薬の投与後最大約２４時間まで続く、段落ＡＴまたは段落ＡＵに記載の方法。
ＡＷ．放射線治療薬の投与の約２４時間から約４８時間後に、放射性核種活性が、哺乳動物対象の唾液腺において実質的に観察されない、段落ＡＴ〜ＡＶのいずれか一項に記載の方法。
ＡＸ．第１の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数が、約１０個の原子から約３０個の原子の範囲である、段落ＡＴ〜ＡＷのいずれか一項に記載の方法。
ＡＹ．第２の共有結合性リンカーに会合した連続する原子の数が、約１５個の原子から約４０個の原子の範囲である、段落ＡＴ〜ＡＸのいずれか一項に記載の方法。
ＡＺ．投与が静脈内投与を含む、段落ＡＴ〜ＡＹのいずれか一項に記載の方法。
ＢＡ．放射線治療薬が、段落Ａ〜Ｏのいずれか一項に記載の化合物である、段落ＡＴ〜ＡＺのいずれか一項に記載の方法。
【０３３６】
他の実施形態は、以下の請求項において、こうした請求項が権利を与えられている等価物の完全な範疇と一緒に説明されている。
【図１】
2020516611.tif 000098
【図２】
2020516611.tif 000099
【図３】
2020516611.tif 000100
【図４】
2020516611.tif 000101
【図５Ａ】
2020516611.tif 000102
【図５Ｂ】
2020516611.tif 000103
【図５Ｃ】
2020516611.tif 000104
【図６】
2020516611.tif 000105
【図７】
2020516611.tif 000106
【図８】
2020516611.tif 000107
2020516611.tif 000108
【図９】
2020516611.tif 000109
【図１０】
2020516611.tif 000110
【図１１】
2020516611.tif 000111
【図１２】
2020516611.tif 000112
【図１３】
2020516611.tif 000113
【図１４】
2020516611.tif 000114
【図１５】
2020516611.tif 000115
【国際調査報告】
2020516611.tif 000116
2020516611.tif 000117
2020516611.tif 000118
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