(57)【要約】目下のところ、本明細書中に記載する新規細胞内在化化合物およびその薬学的に許容される組成物が、効果的に生物学的剤を細胞内に送達することを見出した。本明細書中に、式Ｉを有する細胞貫通化合物を提供し：（Ｉ）式中、一般に、各Ｔはチオール反応性基（例えばホスホロチオエート）であり、各Ｌはリンカー（例えば直鎖アルキル）であり、Ｙは生物製剤（例えば抗体）である。細胞貫通化合物を含む医薬組成物、およびその化合物を細胞内へと送達する方法も提供する。
2020507636.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１２】
2020507636.tif 000014
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩であって、式中：
各Ｔはチオール反応性基、ホスホロチオエート、チオホスホアミノ酸、およびマレイミドから選択され；
各Ｌはリンカー基であり；
Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸であり；
ｎは１から５０までの整数であり；
ｍは０、１、または２である、化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
各Ｌが独立して、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルキル、または環状アルキルから選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ｎが５から２５までの整数である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
ｎが１５、１６、または１７である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
各Ｔが独立して：
【化１３】
2020507636.tif 000015
から選択される、請求項１から４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
各Ｌが独立して、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、直鎖アルキル、および環状アルキルから選択される、請求項１から５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
各Ｌが、直鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは環状アルキルである、請求項１から６のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
各Ｌが、直鎖（Ｃ２−Ｃ４）アルキルまたは（Ｃ５−Ｃ１０）環状アルキルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
各Ｌが、直鎖プロピルアルキルである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
ｍが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
ｍが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
ｍが２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
式ＩＩ：
【化１４】
2020507636.tif 000016
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩であって、式中：
各ＲはＣＨ３またはＨであり；
各Ｌはリンカーであり；
Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸であり；
ｎは５から２５までの整数である、化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
ｎが１２から２０までの整数である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
ｎが１５、１６、または１７である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１６】
各Ｌが独立して、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、直鎖アルキル、および環状アルキルから選択される、請求項１３〜１５のいずれかに記載の化合物。
【請求項１７】
各Ｌが直鎖アルキルである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
各Ｌが独立して、直鎖（Ｃ２−Ｃ６）アルキルもしくは環状（Ｃ５−Ｃ６）アルキル、または−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ−であり、ここで、ｐは１から５までの整数である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１９】
各Ｌが−ＣＨ２−である、請求項１３から１５のいずれかに記載の化合物。
【請求項２０】
各Ｌが−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ−であり、ここで、ｐは１から５までの整数である、請求項１３から１５のいずれかに記載の化合物。
【請求項２１】
各ＲがＨであり、各Ｌが−ＣＨ２−であり、ｎが１５、１６、または１７であり、Ｙが抗体である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項２２】
ｎが１６である、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
式ＩＩＩ：
【化１５】
2020507636.tif 000017
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩であって、式中：
Ｌはリンカーであり；
ｎは１から３までの整数であり；
ｍは５から２５までの整数であり；
Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸である、化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２４】
ｍが１５〜２０である、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
ｍが１６、１７、または１８である、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｌが、ＰＥＧ、直鎖アルキル、または環状アルキルである、請求項２３から２５のいずれかに記載の化合物。
【請求項２７】
Ｌが、直鎖（Ｃ２−Ｃ１０）アルキルまたは−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ−であり、ここで、ｐは１から５までの整数である、請求項２６に記載の化合物。
【請求項２８】
式ＩＶ：
【化１６】
2020507636.tif 000018
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩であって、式中：
Ｌはリンカー基であり；
Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸であり；
ｎは５から２５までの整数である、化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２９】
ｎが１５〜２０までの整数である、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３０】
ｎが１６、１７、または１８である、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
Ｌが、ＰＥＧ、直鎖アルキル、または環状アルキルである、請求項２８から３０のいずれかに記載の化合物。
【請求項３２】
Ｌが、直鎖（Ｃ２−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ５−Ｃ６）環状アルキル、または−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ−であり、ここで、ｐは１から５までの整数である、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｌが直鎖（Ｃ３−Ｃ６）アルキルである、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３４】
式Ｖ：
【化１７】
2020507636.tif 000019
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩であって、式中：
Ｌはリンカーであり；
Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸であり；
ｎは５から２５までの整数であり；
各Ｒは独立して：
【化１８】
2020507636.tif 000020
から選択される、化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３５】
ｎが１５から２０までの整数である、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
ｎが１６、１７、または１８である、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
Ｌが、ＰＥＧ、直鎖アルキル、または環状アルキルである、請求項３４から３６のいずれかに記載の化合物。
【請求項３８】
Ｌが、直鎖（Ｃ２−Ｃ１０）アルキル、環状（Ｃ５−Ｃ６）アルキル、または−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ−であり、ここで、ｐは１から５まで整数である、請求項３７に記載の化合物。
【請求項３９】
Ｌが直鎖（Ｃ３−Ｃ６）アルキルである、請求項３８に記載の化合物。
【請求項４０】
Ｙが、抗体または抗体フラグメントである、請求項１から３９のいずれかに記載の化合物。
【請求項４１】
Ｙがペプチドである、請求項１から３９のいずれかに記載の化合物。
【請求項４２】
Ｙがタンパク質である、請求項１から３９のいずれかに記載の化合物。
【請求項４３】
Ｙが核酸である、請求項１から３９のいずれかに記載の化合物。
【請求項４４】
請求項１から４３のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩と；薬学的に許容されるキャリアとを含有する、医薬組成物。
【請求項４５】
治療剤を細胞内へと送達する方法であって、該方法は、請求項１から４３のいずれか１項に記載の化合物または請求項４４に記載の組成物と細胞を接触させる工程を包含し、ここで、該化合物が該細胞内へと内在化される、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、通し番号第６２／４４２，３９１号である米国仮特許出願（２０１７年１月４日に出願）および通し番号第６２／５５６，８１３号である米国仮特許出願第（２０１７年９月１１日に出願）の優先権を主張し、これらの仮特許出願はいずれも、その全体について本明細書に参照により援用される。
【０００２】
分野
本発明は全体として、新規細胞内在化化合物に関連する。
【背景技術】
【０００３】
背景
膜タンパク質（膜貫通タンパク質、表面結合性タンパク質、および非共有結合により細胞表面に結合されたタンパク質など）は、還元された形態（−ＳＨ）または酸化された形態（Ｓ−Ｓ）の露出されたチオール基を提供する。そして、生分子のチオール化は、細胞との会合および内在化を増強するということが提唱されてきた。Ｔｏｒｒｅｓ，  Ａｄｒｉａｎ  Ｇ  ａｎｄ  Ｇａｉｔ，  Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｊ．，  Ｅｘｐｌｏｉｔｉｎｇ  ｃｅｌｌ  ｓｕｒｆａｃｅ  ｔｈｉｏｌｓ  ｔｏ  ｅｎｈａｎｃｅ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｕｐｔａｋｅ．  Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ３０：１８５−１９０  （Ａｐｒｉｌ  ２０１２）。
本出願は、細胞膜を横切って生物学的剤を移動させるビヒクルとしての新規細胞内在化化合物を提供する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｔｏｒｒｅｓ，  Ａｄｒｉａｎ  Ｇ  ａｎｄ  Ｇａｉｔ，  Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｊ．，  Ｅｘｐｌｏｉｔｉｎｇ  ｃｅｌｌ  ｓｕｒｆａｃｅ  ｔｈｉｏｌｓ  ｔｏ  ｅｎｈａｎｃｅ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｕｐｔａｋｅ．  Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ３０：１８５−１９０  （Ａｐｒｉｌ  ２０１２）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
概要
目下のところ、本明細書中に記載する新規細胞内在化化合物およびその薬学的に許容される組成物が、効果的に生物学的剤を細胞内に送達することを見出した。そのような化合物として、式Ｉ：
【化１】
2020507636.tif 000003
を有するものが挙げられ、式中、一般に、各Ｔはチオール反応性部分（例えば、ホスホロチオエート）であり、各Ｌはリンカーであり、ｎおよびｍは本明細書中で定義される通りであり、Ｙは生分子（例えば、抗体、タンパク質、または核酸）である。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】図１は、細胞表面チオールを介する細胞取り込みについての提案される機序について示す。
【０００７】
【図２】図２は、細胞内在化フルオレセイン化合物の構造を示す。
【０００８】
【図３】図３は、図２に示す細胞内在化フルオレセイン化合物の細胞取り込みを示す。
【０００９】
【図４】図４は、抗ＳＴＡＴ３抗体を含む細胞内在化化合物の細胞取り込みを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
詳細な説明
１．化合物の概説
特定の実施形態において、本開示は、式Ｉ：
【化２】
2020507636.tif 000004
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、式中：
各Ｔは独立して、チオール反応性基、ホスホロチオエート、チオホスホアミノ酸、およびマレイミドから選択され；
各Ｌはリンカー基であり；
Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸であり；
ｎは１から５０までの整数であり；
ｍは０、１、または２である。
【００１１】
２．定義
本開示をより容易に理解し得るように、まず特定の用語を定義する。これらの定義は、本開示の残りを考慮して、当業者によって理解される通りに、読まれるべきである。他で定義されない限り、本明細書中で用いられるすべての技術用語および科学用語は、当業者によって通常理解される意味と同じ意味を有する。詳細な説明のいたる所で、さらなる定義が述べられる。
【００１２】
「抗原結合タンパク質」は抗原に結合する部分と、必要に応じて、足場部分またはフレームワーク部分（これらは、抗原結合部分が、抗原への抗原結合タンパク質の結合を促進する構造を取ることを可能にする）とを含むタンパク質である。抗原結合タンパク質の例として、抗体、抗体フラグメント（すなわち、抗体の抗原結合部分）、抗体誘導体、および抗体アナログが挙げられる。抗原結合タンパク質は例えば、移植されたＣＤＲもしくはＣＤＲ誘導体を伴う、代替のタンパク質足場または人工的な足場を含み得る。そのような足場として、例えば抗原結合タンパク質の三次元構造を安定化するために導入された変異を含む、抗体由来の足場と、例えば生体適合性ポリマーを含む、完全に合成された足場とが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、Ｋｏｒｎｄｏｒｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３，  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，  ａｎｄ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，  Ｖｏｌｕｍｅ  ５３，  Ｉｓｓｕｅ  １：１２１−１２９；  Ｒｏｑｕｅ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００４，  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  Ｐｒｏｇ．  ２０：６３９−６５４を参照。さらに、足場としてフィブロネクチン（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｏｎ）構成要素を利用している抗体模倣物ベースの足場と同様に、ペプチド抗体模倣物（「ＰＡＭ」）が用いられ得る。
【００１３】
用語「抗体」は、４つのポリペプチド鎖（２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖）から構成される免疫グロブリン（Ｉｇ）分子、またはＩｇ分子の本質的なエピトープ結合特性を保持している、任意の機能的なフラグメント、変異体、バリアント、もしくはこれらの誘導体を指す。
【００１４】
「抗体フラグメント」、「抗体部分」、「抗体の抗原結合フラグメント」、または「抗体の抗原結合部分」は、完全なままの抗体以外の分子であって、完全なままの抗体が結合する抗原に結合する、完全なままの抗体の一部を含む分子を指す。抗体フラグメントの例として、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；Ｆｄ；およびＦｖフラグメント、ならびにｄＡｂ；ダイアボディ；リニア抗体；一本鎖抗体分子（例えばｓｃＦｖ）；ポリペプチド（そのポリペプチドに抗原との特異的な結合を与えるのに十分である、抗体の少なくとも一部を含む）が挙げられるが、これらに限定されない。抗体の抗原結合部分は、組み換えＤＮＡ技術によるか、または完全なままの抗体の酵素切断もしくは化学的切断により産生され得る。抗原結合部分として、とりわけ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、および相補性決定領域（ＣＤＲ）フラグメント、キメラ抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディなどが挙げられる。
【００１５】
本明細書中で用いられる場合、用語「ヒト抗体」は、ヒト免疫グロブリン配列に由来する１つまたはそれより多くの可変領域および定常領域を有する、組み換え抗体を指す。１つの実施形態において、可変ドメインおよび定常ドメインのすべては、ヒト免疫グロブリン配列に由来する（まったくのヒト抗体）。これらの抗体は、下で例を記載する様々な方法で調製され得、その方法の例として、ヒトの重鎖および／または軽鎖をコードする遺伝子に由来する抗体を発現するように遺伝子操作されたマウスの、対象抗原を用いた免疫化によるものが挙げられる。
【００１６】
単独で、または大きな部分の一部として用いられる用語「アルキル」は、飽和の、直鎖または分枝鎖状一価炭化水素ラジカルを意味する。用語「（Ｃ１−Ｃ６）アルキル」は、１〜６個の炭素原子を直線または分枝状配置で有するラジカルを意味する。一般に、用語「（Ｃ＃−Ｃ＃）」は、指示される範囲の炭素原子を有するラジカルを意味する。
【００１７】
本明細書中で用いられる場合、用語「カルボシクリル」は、完全に飽和しているか、または１つもしくはそれより多くの部分的不飽和単位を含むがその中に芳香環が存在しない、単環式、二環式（例えば、架橋二環式環もしくはスピロ二環式環）、多環式（例えば、三環式もしくはそれを超える多環式）、または縮合炭化水素環系を意味する。「シクロアルキル」は、完全に飽和した炭素環である。単環式カルボシクリル基として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロヘプテニル、およびシクロオクチルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１８】
本明細書中で用いられる場合、「細胞内在化化合物」は、生物製剤（例えば、抗体または抗体フラグメント）に（共有結合的に、または非共有結合的に）コンジュゲートされた細胞内在化部分を含む化合物を指し、この化合物は細胞内へと内在化できる。細胞内送達化合物（抗体にコンジュゲートされたもの）の例を、本明細書のいたる所で提供する。
【００１９】
用語「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」、および「核酸」は、あらゆる点で互換的に用いられ、これらの例として、ＤＮＡ分子（例えば、ｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡ）、ＲＮＡ分子（例えばｍＲＮＡ）、ヌクレオチドアナログを用いて生成される、ＤＮＡまたはＲＮＡのアナログ（例えば、ペプチド核酸、および天然に存在しないヌクレオチドアナログ）、およびこれらのハイブリッドが挙げられる。核酸分子は、一本鎖または二本鎖であり得る。１つの実施形態において、本発明の核酸分子は、抗体、もしくはフラグメント、誘導体、変異タンパク質、またはこれらのバリアントをコードする連続したオープンリーディングフレームを含む。
【００２０】
本明細書中の化合物の薬学的に許容される塩を企図する。医薬における使用のために、本明細書中に記載の化合物の塩は、非毒性の「薬学的に許容される塩」を指す。薬学的に許容される塩の形態として、薬学的に許容される酸性／陰イオン性の、または塩基性／陽イオン性の塩が挙げられる。
【００２１】
用語「薬学的に許容されるキャリア」は、それが配合される化合物の薬理学的活性を破壊しない、非毒性のキャリア、補助剤、またはビヒクルを指す。本開示の組成物において用いられ得る薬学的に許容されるキャリア、補助剤、またはビヒクルとして、薬学的用途に適した、有機または無機キャリア、賦形剤、または希釈剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２２】
本明細書中で用いられる場合、用語「被験体」および「患者」は、互換的に用いられ得、処置の必要のある哺乳動物、例えば、コンパニオン動物（例えば、イヌ、ネコなど）、家畜（例えば、雌ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギなど）、および実験動物（例えば、ラット、マウス、モルモットなど）を意味する。典型的には、被験体は処置の必要のあるヒトである。
【００２３】
本明細書中で用いられる場合、用語「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「処置する（ｔｒｅａｔ）」、および「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、本明細書の記載の通りに、疾患もしくは障害またはこれらの１種もしくはそれより多種の症状を後退させるか、緩和するか、疾患もしくは障害またはこれらの１種もしくはそれより多種の症状の開始を遅らせるか、あるいは、疾患もしくは障害またはこれらの１種もしくはそれより多種の症状の進行を阻害することを指す。ある実施形態においては、１種またはそれより多種の症状が開始した後に、処置、すなわち、治療的処置を施してもよい。別の実施形態では、症状がない場合に処置を施してもよい。例えば、症状の開始に先立って、疑わしい個人に処置、すなわち、予防的処置を施してもよい（例えば、症状歴に照らして、そして／または、遺伝的もしくは他の疑わしい因子に照らして）。症状が解消した後に、例えばその再発
の防止または遅延のために、処置を続けてもよい。
【００２４】
本明細書中で用いられる場合、用語「有効量」は、本明細書中で開示される化合物の量であって、被験体に投与されたときに疾患の処置を達成するのに十分な量を指す。治療上の有効量は、化合物の相対活量によって、そして処置される被験体および疾患の状態、被験体の体重および年齢、疾患状態の重症度、投与の方法などによって変わり、当業者はその量を容易に決定できる。
【００２５】
３．例示的化合物の説明
第１の実施形態において、本開示は、式Ｉ：
【化３】
2020507636.tif 000005
の化合物
【００２６】
またはその薬学的に許容される塩を提供し、式中、各Ｔはチオール反応性基、ホスホロチオエート、チオホスホアミノ酸、およびマレイミドから選択され；各Ｌはリンカー基であり；Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸であり；ｎは１から５０までの整数であり；ｍは０、１、または２である。ｍが０である場合、ＹはＬに直接結合する。
【００２７】
第２の実施形態において、式Ｉ中の各Ｌは独立して、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルキル、または環状アルキルから選択され、ここで、残りの変数は、式Ｉについての上の記載の通りである。
【００２８】
第３の実施形態において、式Ｉ中のｎは５から２５までの整数であり、ここで、残りの変数は式Ｉについての上の記載の通りである。別の実施形態において、ｎは１５、１６、または１７であり、ここで、残りの変数は、式Ｉについての上の記載の通りである。
【００２９】
別の実施形態において、式Ｉ中の各Ｔは独立して：
【化４】
2020507636.tif 000006
から選択され、ここで、残りの変数は、式Ｉについての上の記載の通りである。
【００３０】
さらなる実施形態において、式Ｉ中の各Ｌは独立して、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、直鎖アルキル、および環状アルキルから選択されるか；または、各Ｌは直鎖（Ｃ１−Ｃ６）アルキルもしくは環状アルキルであるか；または、各Ｌは直鎖（Ｃ２−Ｃ４）アルキルもしくは（Ｃ５−Ｃ１０）環状アルキルであるか；または、各Ｌは直鎖プロピルアルキルであり、ここで、残りの変数は、式Ｉについての上の記載の通りである。
【００３１】
本開示は、式ＩＩ：
【化５】
2020507636.tif 000007
の化合物またはその薬学的に許容される塩も提供し、式中：各ＲはＣＨ３またはＨであり；各Ｌはリンカーであり；Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸であり；ｎは５から２５までの整数である。
【００３２】
他の実施形態において、式ＩＩ中のｎは１２から２０までの整数であるか、またはｎは１５、１６、もしくは１７であり、ここで、残りの変数は、式ＩＩについての上の記載の通りである。
【００３３】
他の実施形態において、式ＩＩ中の各Ｌは独立して、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、直鎖アルキル、および環状アルキルから選択されるか；または、各Ｌは直鎖アルキルであるか；または、各Ｌは独立して、直鎖（Ｃ２−Ｃ６）アルキルもしくは環状（Ｃ５−Ｃ６）アルキル、および−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ−（ここで、ｐは１から５までの整数である）から選択されるか；または、各Ｌは−ＣＨ２−であるか；または、各Ｌは−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ−（ここで、ｐは１から５までの整数である）であり、ここで、残りの変数は、式ＩＩについての上の記載の通りである。
【００３４】
別の実施形態において、式ＩＩ中の各ＲはＨであり、各Ｌは−ＣＨ２−であり、ｎは１５、１６、または１７であり、Ｙは抗体である。さらに別の実施形態において、式ＩＩ中でｎは１６である。
【００３５】
本開示は、式ＩＩＩ：
【化６】
2020507636.tif 000008
の化合物またはその薬学的に許容される塩も提供し、式中：Ｌはリンカーであり；ｎは１から３までの整数であり；ｍは５から２５までの整数であり；Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸である。
【００３６】
他の実施形態において、式ＩＩＩ中の変数ｍは、１５から２０までの整数であるか、またはｍは１６、１７、もしくは１８であり、ここで、残りの変数は、式ＩＩＩについての上の記載の通りである。
【００３７】
他の実施形態において、式ＩＩＩ中のＬは、ＰＥＧ、直鎖アルキル、もしくは環状アルキルであるか；または、Ｌは、直鎖（Ｃ２−Ｃ１０）アルキルおよび−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ−（ここで、ｐは１から５までの整数である）であり、ここで、残りの変数は、式ＩＩＩについての上の記載の通りである。
【００３８】
本開示は、式ＩＶ：
【化７】
2020507636.tif 000009
の化合物またはその薬学的に許容される塩も提供し、式中：Ｌはリンカー基であり；Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸であり；ｎは５から２５までの整数である。
【００３９】
さらなる実施形態において、式ＩＶ中の変数ｎは、１５から２０までの整数であるか、またはｎは１６、１７、もしくは１８であり、ここで、残りの変数は、式ＩＶについての上の記載の通りである。
【００４０】
さらなる実施形態において、式ＩＶ中のＬは、ＰＥＧ、直鎖アルキル、もしくは環状アルキルであるか；または、Ｌは、直鎖（Ｃ２−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ５−Ｃ６）環状アルキル、もしくは−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ−（ここで、ｐは１から５までの整数である）であるか；または、Ｌは直鎖（Ｃ３−Ｃ６）アルキルであり、ここで、残りの変数は、式ＩＶについての上の記載の通りである。
【００４１】
本開示は、式Ｖ：
【化８】
2020507636.tif 000010
の化合物またはその薬学的に許容される塩も提供し、式中：Ｌはリンカーであり；Ｙはタンパク質、抗体、ペプチド、または核酸であり；ｎは５から２５までの整数であり；各Ｒは独立して：
【化９】
2020507636.tif 000011
からなる群から選択される。
【００４２】
さらなる実施形態において、式Ｖ中の変数ｎは、１５から２０までの整数であるか、またはｎは１６、１７、もしくは１８であり、ここで、残りの変数は、式Ｖについての上の記載の通りである。
【００４３】
さらなる実施形態において、式Ｖ中のＬは、ＰＥＧ、直鎖アルキル、もしくは環状アルキルであるか；または、Ｌは、直鎖（Ｃ２−Ｃ１０）アルキル、環状（Ｃ５−Ｃ６）アルキル、もしくは−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｐ−（ここで、ｐは１から５まで整数である）であるか；または、Ｌは直鎖（Ｃ３−Ｃ６）アルキルであり、ここで、残りの変数は、式Ｖについての上の記載の通りである。
【００４４】
さらなる実施形態において、式Ｉ〜Ｖのいずれかの中のＹは、抗体または抗体フラグメントであり、ここで、残りの変数は、上の記載の通りである。
【００４５】
さらなる実施形態において、式Ｉ〜Ｖのいずれかの中のＹは、ヒト抗体またはヒト抗体フラグメントであり、ここで、残りの変数は、上の記載の通りである。
【００４６】
さらなる実施形態において、式Ｉ〜Ｖのいずれかの中のＹは、抗原結合タンパク質であり、ここで、残りの変数は、上の記載の通りである。
【００４７】
さらなる実施形態において、式Ｉ〜Ｖのいずれかの中のＹは、ペプチドであり、ここで、残りの変数は、上の記載の通りである。
【００４８】
さらなる実施形態において、式Ｉ〜Ｖのいずれかの中のＹは、タンパク質であり、ここで、残りの変数は、上の記載の通りである。
【００４９】
さらなる実施形態において、式Ｉ〜Ｖのいずれかの中のＹは、核酸であり、ここで、残りの変数は、上の記載の通りである。
【００５０】
化合物の具体例を、本開示のいたる所で提供する。薬学的に許容される塩、ならびにこれらの化合物の中性の形態も、本明細書中に含める。
【００５１】
４．使用、製剤、および投与
本明細書中に記載の化合物は、いままで「新薬の開発につながらないような」標的を標的とするために、生分子（例えば、タンパク質、ペプチド、核酸）を細胞内へと運ぶためのビヒクルとして用いられ得る。本明細書中に記載のキャリア化合物は、チオール特異性部分、またはチオール反応性部分（例えば、ホスホロチオエート、マレイミド、またはチオールなど）を含有する。いかなる特定の理論にも拘束されることを望まないが、開示される新規化合物は、生理的な条件下で細胞表面チオールと反応して、一過的な共有結合を形成し、細胞取り込みプロセスを誘導するか、または容易にすると考えられる（図１）。化学的な方法または生物学的なアプローチにより、このチオール特異性基を対象の生物製剤（例えば、治療剤または診断剤など）とコンジュゲートさせることができる。この、生物製剤含有化合物が、細胞膜を横切って移動して細胞内の標的に到達することを見出した。
【００５２】
特定の実施形態において、本開示は、疾患または障害を有する、本明細書中で定義される被験体（例えばヒト）の処置であって、有効量の、式Ｉの化合物もしくはその薬学的に許容される塩、またはこれらの組成物を患者に投与するステップを包含する処置に役立つ化合物を提供する。
【００５３】
単一の剤形の組成物を生成するためにキャリア材料と組み合わされ得る、提供される化合物の量は、処置される患者と投与の特定の様式とによって変わる。
【００５４】
本明細書中に記載される疾患および状態の１つまたはそれより多くを処置するか、または前記疾患および状態の１つまたはそれより多くの重症度を低減するのに有効な、任意の量、および任意の投与ルートを用いて、本明細書中に記載の化合物または組成物を投与してもよい。任意の特定の患者についての具体的な投薬量および処置レジメンは、年齢、体重、全体的な健康状態、性別、食事、投与の時間、排泄率、薬物の組み合わせ、主治医の判断、および処置される具体的な疾患の重症度を含む様々な因子に依存する。
【００５５】
本明細書中に記載の化合物および組成物は、１種またはそれより多種の生物製剤の細胞内送達に役立つか、またはその細胞内送達を増強し、この生物製剤としては、抗原結合タンパク質（例えば、抗体および抗体フラグメント）、タンパク質、ペプチド、および核酸が挙げられる。したがって、本開示は、例えば抗ＳＴＡＴ３抗体により処置され得る疾患または障害の処置の方法を提供するものと理解される。
【００５６】
特定の実施形態において、本明細書中に記載の化合物および組成物は、がんまたは他の新生物性の状態の処置を必要とする被験体における、がんまたは他の新生物性の状態の処置に役立つ。特定の実施形態において、本明細書中に記載の化合物および組成物は、感染の処置を必要とする被験体における、感染の処置に役立つ。特定の実施形態において、本明細書中に記載の化合物および組成物は、神経性の状態または障害の処置を必要とする被験体における、神経性の状態または障害の処置に役立つ。
【００５７】
別の側面において、診断用化合物またはイメージング化合物を提供する。その化合物は、上記式により定義された任意の化合物（Ｙが診断剤またはイメージング剤である件を除く）である。診断剤またはイメージング剤を細胞標的へと送達する方法も提供する。この方法は、上記式により定義された（Ｙが診断剤またはイメージング剤である件を除く）診断用化合物またはイメージング化合物を細胞標的へと、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで細胞へと送達することか、または被験体に有効量の化合物を投与することにより投与するステップを包含する。
【実施例】
【００５８】
実施例
以下の実施例において示すように、特定の例示的な実施形態において、化合物を、次の一般的な手順にしたがって調製する。この一般的な方法は、本明細書中の特定の化合物の合成について示すが、次の一般的な方法および当業者に公知の他の方法は、本明細書中に記載のすべての化合物に適用され得ると理解される。
【００５９】
フルオレセイン−ホスホロチオエート２０マー化合物の細胞内在化
細胞内在化について確認するために、次のホスホロチオエート２０マー：
【化１０】
2020507636.tif 000012
を合成した。
【００６０】
この化合物の細胞内在化を、ＨＵＶＥＣにおいて、１０ｕＭで試験した。細胞（ＨＵＶＥＣおよびＨＥＬＡ）を、これらの培養液中で一晩プレートした（５Ｋ／ウェル，９６ｗｐ）。実験の日に、液をフルオロブライト（血清を含まない）と交換する。
【００６１】
その後、化合物をフルオロブライト中に調製して、２連で、終濃度１０ｕＭで細胞に分配した。Ｉｎｃｕｃｙｔｅ上での視覚化を可能にするために、６０分間のインキュベーション後にＳＮを吸引して新鮮な液と交換する。結果を図３に示す。
【００６２】
ＰＥ−抗ヒトＩｇＧを有するコンジュゲートの内在化（２Ｈインキュベーション）の検出
抗体の内在化について確認するために、ホスホロチオエート２０マー：
【化１１】
2020507636.tif 000013
にＳＴＡＴ３抗体をコンジュゲートさせた。細胞内在化を試験し、その結果を図４に示す。
【００６３】
本出願のいたる所で引用されるすべての参考文献（文献参照、発行された特許、公開された特許出願、および同時係属特許出願を含む）の内容が、ここに、その全体について参照により、本明細書中に明示的に援用される。他で定義されない限り、本明細書中で用いられるすべての技術用語および科学用語は、当業者によって通常知られる意味と一致する。
【図１】
2020507636.tif 000021
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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