(57)【要約】  本発明は、がんの治療、特に前記治療の過程においてＣＤ３抗体の投与により引き起こされる有害作用の防止に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんの治療における使用のためのＣＤ３抗体であって、前記治療が、ＣＤ３抗体（の投与）により引き起こされる腫瘍炎症関連の有害事象の改善、治療又は予防のためのグルココルチコイド（ＧＣ）の投与を含む、ＣＤ３抗体。
【請求項２】
ＣＤ３抗体及びグルココルチコイド（ＧＣ）の投与を含むがんの治療方法であって、ＧＣがＣＤ３抗体（の投与）により引き起こされる腫瘍炎症関連の有害事象の改善、治療又は予防のために投与される、方法。
【請求項３】
がんの治療のための医薬の製造におけるＣＤ３抗体の使用であって、前記治療が、ＣＤ３抗体（の投与）により引き起こされる腫瘍炎症関連の有害事象の改善、治療又は予防のためのグルココルチコイド（ＧＣ）の投与を含む、使用。
【請求項４】
ＧＣがメチルプレドニゾロン又はプレドニゾンである、請求項１から３のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項５】
ＧＣが約５から約６０ｍｇ、特に約４０ｍｇの用量で投与される、請求項１から４のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項６】
ＧＣが、ＣＤ３抗体の投与の前に、同投与と同時に及び／又は同投与の後で投与される、請求項１から５のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項７】
ＧＣがＣＤ３抗体の投与の後で投与される、請求項１から６のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項８】
ＧＣが、ＣＤ３抗体の投与後、特に初回投与後、約１時間から約７日の間に投与される、請求項１から７のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項９】
ＧＣが、ＣＤ３抗体の（初回）投与の、（ｉ）約３時間、約１日（２４時間）、約２日（４８時間）及び約３日（７２時間）後、又は（ｉｉ）約３時間、約１日（２４時間）、約２日（４８時間）、約３日（７２時間）、約４日（９６時間）、約５日（１２０時間）、約６日（１４４時間）及び約７日（１６８時間）後に投与される、請求項１から８のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項１０】
がんが固形腫瘍がんである、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項１１】
がんが、結腸直腸がん、肺がん、膵臓がん、乳がん、及び胃がんからなる群より選択されるがんである、請求項１から１０のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項１２】
ＣＤ３抗体が、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から１１のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項１３】
ＣＤ３抗体が、ＣＤ３及び標的細胞抗原に特異的に結合する二重特異性抗体である、請求項１から１２のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項１４】
ＣＤ３抗体が、ＣＤ３及びＣＥＡに特異的に結合する二重特異性抗体である、請求項１から１３のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項１５】
ＣＤ３抗体が、
（ｉ）ＣＤ３に特異的に結合する第１の抗原結合部分であって、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む第１の抗原結合部分；と
（ｉｉ）ＣＥＡに特異的に結合する第２の抗原結合部分であって、（ｉ）配列番号９の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１０のＨＣＤＲ２、及び配列番号１１のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号１２の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号１３のＬＣＤＲ２及び配列番号１４のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域；又は（ｉｉ）配列番号１７の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１８のＨＣＤＲ２、及び配列番号１９のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号２０の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号２１のＬＣＤＲ２及び配列番号２２のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む第２の抗原結合部分と
を含む二重特異性抗体である、請求項１から１４のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項１６】
ＣＤ３抗体がＣＥＡ−ＴＣＢである、請求項１から１５のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項１７】
ＣＤ３抗体が約６０ｍｇから約１２００ｍｇの用量で投与される、請求項１から１６のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項１８】
ＣＤ３抗体が毎週／週に一回（ＱＷ）投与される、請求項１から１７のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項１９】
ＣＤ３抗体がＰＤ−１軸結合アンタゴニストと組み合わせて使用される、請求項１から１８のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項２０】
ＣＤ３抗体がアテゾリズマブと組み合わせて使用される、請求項１から１９のいずれか一項に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【請求項２１】
アテゾリズマブが約１２００ｍｇの用量で三週に一回に投与される、請求項２０に記載のＣＤ３抗体、方法又は使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、がんの治療、特に前記治療の過程においてＣＤ３抗体の投与により引き起こされる有害作用の防止に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｔ細胞活性化抗体は、腫瘍細胞に対して細胞傷害性Ｔ細胞を用いるように設計された新しいクラスのがん治療法である。このような抗体がＴ細胞上のＣＤ３と腫瘍細胞上に発現される抗原とに同時結合すると、腫瘍細胞とＴ細胞とを一時的に強制的に相互作用させ、Ｔ細胞の活性化と、その後の腫瘍細胞の溶解とを引き起こす。
【０００３】
それらの作用機序を通して、Ｔ細胞活性化抗体は、例えば腫瘍中におけるリンパ球浸潤及びケモカインの存在の増大を特徴とする、腫瘍、特に固形腫瘍の炎症を招くことがある。しかしながら、このような炎症反応は、患者の安全性のために制御しなければならない有害作用を生じさせうる。このような腫瘍の炎症関連の有害作用の性質は、多岐にわたり、腫瘍のサイズ及び位置に大きく依存する。例えば、肺における腫瘍の炎症（とりわけ腫脹に付随する）は、低酸素症を生じさせ、腹膜における腫瘍の炎症は腸炎に繋がり、肝臓における腫瘍の炎症は肝臓内の酵素を増加させ、結腸における腫瘍の炎症は大腸炎に繋がる。
【０００４】
このような、極めて需要の大きい、高度に積極的ながん治療法の可能性を開拓するためには、起こりうる有害作用を理解して緩和することが必須である。本発明は、ＣＤ３（二重特異性）抗体の作用機序に関連付けられる、特にこのような抗体を用いた固形腫瘍がんの治療において起こる腫瘍炎症関連の有害作用を、効果的に制御するための手段を提供する。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、少なくとも部分的に、ＣＤ３抗体、特にＣＤ３及び腫瘍標的に向けられた二重特異性抗体、最も詳細にはＣＤ３及び固形腫瘍標的に向けられた二重特異性抗体が、腫瘍の炎症を誘導し、それによりその炎症に関連する有害作用（本明細書では「腫瘍炎症関連の有害作用」と呼ぶ）を引き起こしている可能性があるという認識に基づいている。本発明者らは、ＣＤ３抗体を用いた治療の過程でグルココルチコイド（ＧＣ）の投与によりこれら有害作用が有効に改善、治療又は防止されることをさらに見出した。
【０００６】
したがって、本発明は初めて、ＣＤ３抗体、特にＣＤ３及び腫瘍標的に向けられた二重特異性抗体を用いたがん、特に固形腫瘍がんの治療の過程で腫瘍炎症関連の有害作用が起りうること、並びにＣＤ３抗体の投与の前に、同投与と一緒に、又は同投与の後で、特に同投与の後で、グルココルチコイドが投与される場合に、このような有害作用が緩和又は場合によっては防止されうることを証明する。
【０００７】
即ち、第１の態様において、本発明は、ＣＤ３抗体（の投与）により引き起こされる腫瘍炎症関連の有害事象の改善、治療又は予防のためのグルココルチコイド（ＧＣ）の投与を含む、がんの治療における使用のためのＣＤ３抗体を提供する。
【０００８】
さらなる態様では、本発明は、ＣＤ３抗体及びグルココルチコイド（ＧＣ）の投与を含むがんの治療方法を提供し、この場合ＧＣは、ＣＤ３抗体（の投与）により引き起こされる腫瘍炎症関連の有害事象の改善、治療又は予防のために投与される。
【０００９】
さらに別の態様では、本発明は、がんの治療のための医薬の製造におけるＣＤ３抗体の使用を提供し、この場合前記治療は、ＣＤ３抗体（の投与）により引き起こされる腫瘍炎症関連の有害事象の改善、治療又は予防のためのグルココルチコイド（ＧＣ）の投与を含む。
【００１０】
上述の及びここに記載のＣＤ３抗体、方法又は使用のいくつかの実施態様では、ＧＣは、メチルプレドニゾロン及びプレドニゾンより選択される。いくつかの実施態様では、ＧＣは、約５から約６０ｍｇ、特に約４０ｍｇの用量で投与される。
【００１１】
いくつかの実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の投与の前に、同投与と同時に、及び／又は同投与の後で投与される。特定の実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の投与の後で投与される。さらに特定の実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の投与後、特に初回投与後、約１時間から約７日の間に投与される。特定の一実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の（初回）投与の、（ｉ）約３時間、約１日（２４時間）、約２日（４８時間）及び約３日（７２時間）後、又は（ｉｉ）約３時間、約１日（２４時間）、約２日（４８時間）、約３日（７２時間）、約４日（９６時間）、約５日（１２０時間）、約６日（１４４時間）及び約７日（１６８時間）後に投与される。
【００１２】
いくつかの実施態様では、がんは固形腫瘍がんである。特定の実施態様では、がんは、結腸直腸がん、肺がん、膵臓がん、乳がん、及び胃がんからなる群より選択されるがんである。
【００１３】
特定の一実施態様では、ＣＤ３抗体は、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
【００１４】
いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体は、ＣＤ３及び標的細胞抗原に特異的に結合する二重特異性抗体である。特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、ＣＤ３及びＣＥＡに特異的に結合する二重特異性抗体である。
【００１５】
特定の一実施態様では、ＣＤ３抗体は、
（ｉ）ＣＤ３に特異的に結合する第１の抗原結合部分であって、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む第１の抗原結合部分；と
（ｉｉ）ＣＥＡに特異的に結合する第２の抗原結合部分であって、（ｉ）配列番号９の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１０のＨＣＤＲ２、及び配列番号１１のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号１２の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号１３のＬＣＤＲ２及び配列番号１４のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域；又は（ｉｉ）配列番号１７の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１８のＨＣＤＲ２、及び配列番号１９のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号２０の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号２１のＬＣＤＲ２及び配列番号２２のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む第２の抗原結合部分と
を含む二重特異性抗体である。
【００１６】
一実施態様において、ＣＤ３抗体はＣＥＡ−ＴＣＢである。
【００１７】
いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体は、約６０ｍｇから約１２００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体は毎週／週に一回投与される（ＱＷ）。
【００１８】
いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体は、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと組み合わせて使用される。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体は、アテゾリズマブと組み合わせて使用される。いくつかの実施態様では、アテゾリズマブは、約１２００ｍｇの用量で三週に一回投与される。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
ここでの用語は、以下で別途定義されない限り、当技術分野で一般的に使用されるように使用される。
【００２０】
用語「二重特異性」とは、抗体が少なくとも二つの異なる抗原決定基に特異的に結合することができることを意味する。一般に、二重特異性抗体は二つの抗原結合部位を含み、それらの各々は異なる抗原決定基に特異性である。一部の実施態様では、二重特異性抗体は、二つの抗原決定基、特に二つの異なる細胞に発現される二つの抗原決定基に同時に結合することができる。
【００２１】
ここで使用される用語「価」は、抗体中における特定数の抗原結合部位の存在を意味する。したがって、用語「抗原に対する一価の結合」は、抗体中の抗原に対して特異性である一つの（且つ一つを超えない）抗原結合部位の存在を意味する。
【００２２】
ここで使用される用語「抗原結合部分」は、抗原決定基に特異的に結合するポリペプチド分子を指す。一実施態様において、抗原結合部分は、それが結合する前記部分（例えば第２の抗原結合部分）を、標的部位、例えば抗原決定基を持つ特定の種類の腫瘍細胞に向けることができる。別の実施態様では、抗原結合部分は、その標的抗原、例えばＴ細胞受容体複合抗原を通して、シグナル伝達を活性化することができる。抗原結合部分は、後述でさらに定義される抗体及びその断片を含む。特定の抗原結合部分は、抗体重鎖可変領域及び抗体軽鎖可変領域を含む抗体の抗原結合ドメインを含む。一部の実施態様では、抗原結合部分は、後述でさらに定義される、当技術分野で既知の抗体定常領域を含む。有用な重鎖定常領域には、五つのアイソタイプ：α、δ、ε、γ、又はμのいずれかが含まれる。有用な軽鎖定常領域には、二つのアイソタイプ：κ及びλのいずれかが含まれる。
【００２３】
ここで使用される用語「抗原決定基」は、「抗原」及び「エピトープ」と同義であり、抗原結合部分が結合し、抗原結合部分−抗原複合体を形成するポリペプチド巨大分子上の部位（例えば、アミノ酸の連続的広がり又は非連続的アミノ酸の異なる領域から形成される立体配座構造）を指す。有用な抗原決定基は、例えば、腫瘍細胞の表面上に、ウイルス−感染細胞の表面上に、その他の病気の細胞の表面上に、免疫細胞の表面上に、血清中に遊離して、及び／又は細胞外マトリックス（ＥＣＭ）中に、見出すことができる。
【００２４】
「特異的結合」とは、結合が、抗原について選択的であり、望ましくない相互作用又は非特異的相互作用とは区別可能であることを意味する。抗原結合部分の、特定の抗原決定基への結合能は、酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）又は当業者によく知られた他の技術、例えば表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術（例えばＢＩＡｃｏｒｅ計器上での解析）（Liljeblad et al., Glyco J 17, 323-329 （2000））、及び古典的結合アッセイ（Heeley, Endocr Res 28, 217-229 （2002））により測定することができる。一実施態様では、抗原結合部分の無関係なタンパク質への結合の程度は、例えばＳＰＲによって測定した場合、抗原結合部分の抗原への結合の約１０％未満である。一部の実施態様では、抗原に結合する抗原結合部分、又は同抗原結合部分を含む抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、又は≦０．００１ｎＭ（例えば１０−８Ｍ未満、例えば１０−８Ｍから１０−１３Ｍ、例えば１０−９Ｍから１０−１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。
【００２５】
「親和性」は、分子（例えば受容体）の単一結合部位とその結合パートナー（例えばリガンド）との間の非共有結合的相互作用の総和の強度を指す。本明細書で使用する場合、特に断らない限り、「結合親和性」は、結合対（例えば、抗原結合部分と抗原、又は受容体とそのリガンド）のメンバー間の１：１の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子Ｘの、そのパートナーＹに対する親和性は、通常、解離定数（Ｋｄ）によって表され、この解離定数（ＫＤ）は、解離速度定数と会合速度定数（それぞれ、ｋｏｆｆ及びｋｏｎ）の比である。したがって、速度定数の比が同じである限り、同等の親和性が異なる速度定数を含むことがある。親和性は、ここに記載のものを含む当技術分野で既知の確立された方法により測定することができる。親和性を測定するための特定の方法は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）である。
【００２６】
「結合の低減」、例えばＦｃ受容体に対する結合の低減は、例えばＳＰＲによって測定した場合の、それぞれの相互作用に対する親和性の低下を指す。簡潔には、この用語は、親和性のゼロ（又は分析方法の検出限界未満）への低下、即ち相互作用の完全な廃止も含む。逆に、「結合の増大」は、それぞれの相互作用に対する結合親和性の上昇を指す。
【００２７】
特に断らない限り、「ＣＤ３」は、霊長類（例えばヒト）、非ヒト霊長類（例えばカニクイザル）及びげっ歯類（例えばマウス及びラット）といった哺乳動物を含むあらゆる脊椎動物源由来のいずれかの天然型ＣＤ３を指す。用語は、「完全長」の、未処理のＣＤ３と、細胞内でのプロセシングから生じた任意の形態のＣＤ３とを包含する。この用語は、天然に存在するＣＤ３の変異体、例えば、スプライス変異体又は対立遺伝子変異体も包含する。一実施態様において、ＣＤ３は、ヒトＣＤ３、特にヒトＣＤ３のエプシロンサブユニット（ＣＤ３ε）である。ヒトＣＤ３εのアミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ（ｗｗｗ．ｕｎｉｐｒｏｔ．ｏｒｇ）の登録番号Ｐ０７７６６（バージョン１４４）、又はＮＣＢＩ（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）ＲｅｆＳｅｑ  ＮＰ＿０００７２４．１に示されている。配列番号３４も参照のこと。カニクイザル［Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ］ＣＤ３εのアミノ酸配列は、ＮＣＢＩ  ＧｅｎＢａｎｋ  ｎｏ．  ＢＡＢ７１８４９．１に示されている。配列番号３５も参照のこと。
【００２８】
ここで使用される「Ｔ細胞活性化」は：増殖、分化、サイトカイン分泌、細胞傷害性エフェクター分子放出、細胞傷害活性、及び活性化マーカーの発現より選択される、Ｔリンパ球、特に細胞傷害性Ｔリンパ球の一つ又は複数の細胞応答を指す。Ｔ細胞活性化を測定するための適切なアッセイは、当技術分野で既知であり、ここに記載される。
【００２９】
ここで使用される「標的細胞抗原」は、標的細胞、例えばがん細胞又は腫瘍間質の細胞といった腫瘍中の細胞の表面上に存在する抗原決定基を指す。特定の一実施態様では、標的細胞抗原はＣＥＡ、特にヒトＣＥＡである。
【００３０】
特に断らない限り、「がん胎児性抗原」又は「ＣＥＡ」（がん胎児性抗原関連細胞接着分子５（ＣＥＡＣＡＭ５）としても知られる）は、霊長類（例えばヒト）、非ヒト霊長類（例えばカニクイザル）及びげっ歯類（例えばマウス及びラット）といった哺乳動物を含むあらゆる脊椎動物源由来のいずれかの天然型ＣＥＡを指す。用語は、「完全長」の、未処理のＣＥＡと、細胞内でのプロセシングから生じた任意の形態のＣＥＡとを包含する。この用語は、天然に存在するＣＥＡの変異体、例えば、スプライス変異体又は対立遺伝子変異体も包含する。一実施態様において、ＣＥＡはヒトＣＥＡである。ヒトＣＥＡのアミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ（ｗｗｗ．ｕｎｉｐｒｏｔ．ｏｒｇ）の登録番号Ｐ０６７３１、又はＮＣＢＩ（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）ＲｅｆＳｅｑ  ＮＰ＿００４３５４．２に示されている。
【００３１】
ここでＦａｂ分子などに関して使用される用語「第１の」、「第２の」又は「第３の」は、部分の各種類が複数存在するとき、区別を簡便にするために使用されている。これら用語の使用は、特に断らない限り、二重特異性抗体の特定の順序又は配向を付与することを意図していない。
【００３２】
「融合した」とは、成分同士（例えばＦａｂ分子とＦｃドメインサブユニット）が、ペプチド結合により、直接又は一つ又は複数のペプチドリンカーを介して結合されていることを意味する。
【００３３】
「Ｆａｂ分子」は、免疫グロブリンの重鎖（「Ｆａｂ重鎖」）のＶＨ及びＣＨ１ドメインと軽鎖（「Ｆａｂ軽鎖」）のＶＬ及びＣＬドメインとからなるタンパク質を指す。
【００３４】
「クロスオーバー」Ｆａｂ分子（「Ｃｒｏｓｓｆａｂ」とも称される）とは、Ｆａｂ重鎖と軽鎖の可変ドメイン又は定常ドメインが交換されている（即ち互いによって置き替えられている）Ｆａｂ分子を意味し、即ちクロスオーバーＦａｂ分子は、軽鎖可変ドメインＶＬ及び重鎖定常ドメイン１  ＣＨ１（ＶＬ−ＣＨ１、Ｎ末端からＣ末端の方向に）から構成されるペプチド鎖と、重鎖可変ドメインＶＨ及び軽鎖定常ドメインＣＬ（ＶＨ−ＣＬ、Ｎ末端からＣ末端の方向に）から構成されるペプチド鎖とを含む。簡潔には、Ｆａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の可変ドメインが交換されているクロスオーバーＦａｂ分子において、重鎖定常ドメイン１  ＣＨ１を含むペプチド鎖を、ここでは（クロスオーバー）Ｆａｂ分子の「重鎖」と呼ぶ。逆に、Ｆａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の定常ドメインが交換されているクロスオーバーＦａｂ分子において、重鎖可変ドメインＶＨを含むペプチド鎖を、ここでは（クロスオーバー）Ｆａｂ分子の「重鎖」と呼ぶ。
【００３５】
それと対照的に、「一般的な」Ｆａｂ分子は、その天然形式の、即ち重鎖可変ドメイン及び定常ドメイン（ＶＨ−ＣＨ１、Ｎ末端からＣ末端の方向に）から構成される重鎖と、軽鎖可変ドメイン及び定常ドメイン（ＶＬ−ＣＬ、Ｎ末端からＣ末端の方向に）を含む軽鎖とを含むＦａｂ分子である。
【００３６】
用語「免疫グロブリン分子」は、天然に存在する抗体の構造を有するタンパク質を指す。例えば、ＩｇＧクラスの免疫グロブリンは、ジスルフィド結合している二つの軽鎖及び二つの重鎖から構成される約１５００００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端に、各重鎖は可変重鎖ドメイン又は重鎖可変領域とも呼ばれる可変ドメイン（ＶＨ）を有し、それに、重鎖定常領域とも呼ばれる三つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３）が続いている。同様に、Ｎ末端からＣ末端に、各軽鎖は可変軽鎖ドメイン又は軽鎖可変領域とも呼ばれる可変ドメイン（ＶＬ）を有し、それに、軽鎖定常領域とも呼ばれる定常軽鎖（ＣＬ）ドメインが続いている。免疫グロブリンの重鎖は、α（ＩｇＡ）、δ（ＩｇＤ）、ε（ＩｇＥ）、γ（ＩｇＧ）、又はμ（ＩｇＭ）と呼ばれ、そのうちのいくつかはサブタイプ、例えばγ１（ＩｇＧ１）、γ２（ＩｇＧ２）、γ３（ＩｇＧ３）、γ４（ＩｇＧ４）、α１（ＩｇＡ１）及びα２（ＩｇＡ２）へとさらに分割される五種類のうちの一つに割り当てられる。免疫グロブリンの軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）とラムダ（λ）と呼ばれる、二種類のうちのいずれか一つに割り当てることができる。免疫グロブリンは、本質的に、免疫グロブリンのヒンジ領域を介して結合された二つのＦａｂ分子とＦｃドメインからなる。
【００３７】
ここでの用語「抗体」は最も広い意味で用いられ、種々の抗体構造を包含し、限定しないが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、及び所望の抗原結合活性を示す限り、抗体断片を含む。
【００３８】
用語「完全長抗体」、「インタクトな抗体」、及び「全抗体」は、ここでは互換可能に使用され、天然型抗体構造と実質的に類似の構造を有する抗体を指す。
【００３９】
「抗体断片」は、インタクトな抗体が結合する抗原に結合するインタクトな抗体の一部分を含む、インタクトな抗体以外の分子を指す。抗体断片の例には、限定されないが、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、ダイアボディ、直鎖状抗体、単鎖抗体分子（例えばｓｃＦｖ）、及び単一ドメイン抗体が含まれる。特定の抗体断片の総説については、Hudson et al. Nat. Med. 9:129-134(2003)を参照されたい。ｓｃＦｖ断片の総説については、例えば、Pluckthun、in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies、vol. 113、Rosenburg and Moore eds.,(Springer-Verlag、New York)、pp. 269-315(1994)を参照；また、国際公開第９３／１６１８５号；及び米国特許第５５７１８９４号及び同第５５８７４５８号を参照。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、且つｉｎ  ｖｉｖｏ半減期を増加させたＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の議論については、米国特許第５８６９０４６号を参照のこと。ダイアボディは、二価又は二重特異性でありうる二つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、ＥＰ４０４０９７；国際公開第１９９３／０１１６１号；Hudson et al., Nat Med 9, 129-134 （2003）；及びHollinger et al., Proc Natl Acad Sci USA 90, 6444-6448 （1993）を参照のこと。トリアボディ及びテトラボディもHudson et al., Nat Med 9, 129-134 （2003）に記載されている。単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全部若しくは一部又は軽鎖可変ドメインの全部若しくは一部を含む抗体断片である。一部の実施態様では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ；例えば米国特許第６２４８５１６号参照）。抗体断片は、ここに記載されるように、インタクトな抗体のタンパク質消化や組み換え宿主細胞（例えば大腸菌又はファージ）による生成を含むがこれらに限定されない様々な技術により作製することができる。
【００４０】
用語「抗原結合ドメイン」は、抗原の一部又は全部に特異的に結合し、且つ抗原の一部又は全部に相補的な領域を含む抗体の部分を指す。抗原結合ドメインは、例えば、一つ又は複数の抗体可変ドメイン（抗体可変領域とも呼ばれる）により提供されうる。特に、抗原結合ドメインは、抗体軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）及び抗体重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。
【００４１】
用語「可変領域」又は「可変ドメイン」は、抗体の抗原への結合に関与する抗体の重鎖又は軽鎖のドメインを指す。天然型抗体の重鎖及び軽鎖の可変ドメイン（それぞれＶＨ及びＶＬ）は一般に、各々が四つの保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）と三つの超可変領域（ＨＶＲ）とを含む、類似の構造を有する。例えば、Kindt et al., Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 （2007）を参照されたい。単一のＶＨ又はＶＬドメインは、抗原結合特異性を付与するのに十分でありうる。可変領域配列に関してここで使用される「Ｋａｂａｔ番号付け」は、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD （1991）によって規定された番号付けシステムを指す。
【００４２】
ここで使用される場合、重鎖及び軽鎖のすべての定常領域ドメインのアミノ酸部分は、Kabat, et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD （1991）に記載される、ここでは「Ｋａｂａｔによる番号付け」又は「Ｋａｂａｔ番号付け」と呼ぶＫａｂａｔ番号付けシステムに従って番号付けされる。具体的には、Ｋａｂａｔ番号付けシステム（Kabat, et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD （1991）の647-660頁参照）が、カッパ及びラムダアイソタイプの軽鎖定常ドメインＣＬに使用され、ここでさらに「Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け」と呼ぶＫａｂａｔ  ＥＵインデックス番号付けシステム（６６１−７２３頁参照）が重鎖定常ドメイン（ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２及びＣＨ３）に使用される。
【００４３】
ここで使用される用語「超可変領域」又は「ＨＶＲ」は、配列が超可変である（「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」）、及び／又は構造的に定義されたループを形成する（「超可変ループ」）及び／又は抗原接触残基（「抗原接触」）を含む抗体可変ドメインの領域の各々を指す。通常、抗体は、六つのＨＶＲ；ＶＨに三つ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、及びＶＬに三つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）を含む。ここでの例示的ＨＶＲは：
（ａ）アミノ酸残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）、９１−９６（Ｌ３）、２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）、及び９６−１０１（Ｈ３）に生じる超可変ループ（Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 （1987））；
（ｂ）アミノ酸残基２４−３４（Ｌ１）、５０−５６（Ｌ２）、８９−９７（Ｌ３）、３１−３５ｂ（Ｈ１）、５０−６５（Ｈ２）、及び９５−１０２（Ｈ３）に生じるＣＤＲ（Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD （1991））；
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ−３６（Ｌ１）、４６−５５（Ｌ２）、８９−９６（Ｌ３）、３０−３５ｂ（Ｈ１）、４７−５８（Ｈ２）、及び９３−１０１（Ｈ３）に生じる抗原接触（MacCallum et al. J. Mol. Biol. 262: 732-745 （1996））；及び
（ｄ）ＨＶＲアミノ酸残基４６−５６（Ｌ２）、４７−５６（Ｌ２）、４８−５６（Ｌ２）、４９−５６（Ｌ２）、２６−３５（Ｈ１）、２６−３５ｂ（Ｈ１）、４９−６５（Ｈ２）、９３−１０２（Ｈ３）、及び９４−１０２（Ｈ３）を含む（ａ），（ｂ）、及び／又は（ｃ）の組み合わせ
を含む。
【００４４】
別途指示がない限り、可変ドメイン中のＨＶＲ残基及び他の残基（例えばＦＲ残基）は、ここではKabat et al., supraに従って番号付けされる。
【００４５】
「フレームワーク」又は「ＦＲ」は、超可変領域（ＨＶＲ）残基以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは、一般に四つのＦＲのドメイン、即ちＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４で構成される。したがって、ＨＶＲ及びＦＲ配列は一般にＶＨ（又はＶＬ）の以下の順序で現れる：ＦＲ１−Ｈ１（Ｌ１）−ＦＲ２−Ｈ２（Ｌ２）−ＦＲ３−Ｈ３（Ｌ３）−ＦＲ４。
【００４６】
抗体又は免疫グロブリンの「クラス」は、その重鎖が保有する定常ドメイン又は定常領域の種類を指す。抗体には主に五つのクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭがあり、これらのいくつかは、さらにサブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩＧＡ１、及びＩｇＡ２に分けることができる。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。
【００４７】
本明細書の用語「Ｆｃドメイン」又は「Ｆｃ領域」は、定常領域の少なくとも一部を含む、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。この用語は、天然配列Ｆｃ領域と変異型Ｆｃ領域を含む。ＩｇＧ重鎖のＦｃ領域の境界は多少変動するが、ヒトＩｇＧ重鎖のＦｃ領域は通常、Ｃｙｓ２２６から又はＰｒｏ２３０から、重鎖のカルボキシル末端までと定義される。しかしながら、宿主細胞によって生成された抗体は、重鎖のＣ末端から一つ又は複数、特に一つ又は二つのアミノ酸の翻訳後切断を受けることがある。したがって、完全長重鎖をコードする特異的核酸分子の発現により宿主細胞によって生成された抗体は、完全長重鎖を含みうるか、又は完全長重鎖の切断された変異体を含みうる。これは、重鎖の最終的な二つのＣ末端アミノ酸がグリシン（Ｇ４４６）とリジン（Ｋ４４７、Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）である場合に相当しうる。したがって、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）、又はＣ末端グリシン（Ｇｌｙ４４６）及びリジン（Ｋ４４７）は、存在することもしないこともありうる。本明細書に別途指定のない限り、Ｆｃ領域又は定常領域内のアミノ酸残基の番号付けは、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991（上記参照）に記載されるように、ＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵ番号付けシステムに従う。ここで使用されるＦｃドメインの「サブユニット」は、二量体Ｆｃドメインを形成する二つのポリペプチドのうちの一つ、即ち安定した自己会合が可能な、免疫グロブリン重鎖のＣ末端定常領域を含むポリペプチドを指す。例えば、ＩｇＧＦｃドメインのサブユニットは、ＩｇＧ  ＣＨ２及びＩｇＧ  ＣＨ３定常ドメインを含む。
【００４８】
「Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する修飾」は、Ｆｃドメインサブユニットを含むポリペプチドと同一のポリペプチドとの会合によるホモダイマーの形成を低減又は防止する、ペプチド骨格の操作又はＦｃドメインサブユニットの翻訳後修飾である。ここで使用される会合を促進する修飾は、会合することが望ましい二つのＦｃドメインサブユニット（即ちＦｃドメインの第１及び第２のサブユニット）の各々に対して行われる別々の修飾を特に含み、この修飾は、二つのＦｃドメインサブユニットの会合を促進するために、互いに対して相補的である。例えば、会合を促進する修飾は、これらＦｃドメインサブユニットの一方又は両方の構造又は電荷を、それらの会合がそれぞれ立体的に又は静電気的に望ましいものになるように変化させる。したがって、サブユニット（例えば抗原結合部分）の各々に融合したさらなる成分が同じでないという意味で非同一でありうる、（ヘテロ）二量体化が第１のＦｃドメインサブユニットを含むポリペプチドと第２のＦｃドメインサブユニットを含むポリペプチドとの間に起こる。いくつかの実施態様では、会合を促進する修飾は、Ｆｃドメイン内のアミノ酸変異、具体的にはアミノ酸置換を含む。特定の一実施態様では、会合を促進する修飾は、Ｆｃドメインの二つのサブユニットの各々に、別個のアミノ酸変異、具体的にはアミノ酸置換を含む。
【００４９】
用語「エフェクター機能」は、抗体のアイソタイプにより変化する、抗体のＦｃ領域に起因しうる生物学的活性を指す。抗体エフェクター機能の例には：Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）；抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）；サイトカイン分泌；抗原提示細胞による免疫複合体媒介抗原取り込み；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御；及びＢ細胞の活性化が含まれる。
【００５０】
参照ポリペプチド配列に関する「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」は、配列を整列させ、最大のパーセント配列同一性を得るために必要ならば間隙を導入した後、いかなる保存的置換も配列同一性の一部と考えないとした場合の、参照ポリペプチドのアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基のパーセントとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定するためのアラインメントは、当分野の技術の範囲内にある種々の方法、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、Ｃｌｕｓｔａｌ  Ｗ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア又はＦＡＳＴＡプログラムパッケージのような公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用して達成することができる。当業者であれば、比較される配列の完全長に対して最大の整列を達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、配列を整列させるための適切なパラメータを決定することができる。しかしながら、ここでの目的のために、％アミノ酸配列同一性の値は、ＦＡＳＴＡパッケージバージョン３６．３．８ｃのｇｇｓｅａｒｃｈプログラムを用いて又はその後ＢＬＯＳＵＭ５０比較行列を用いて生成される。ＦＡＳＴＡプログラムパッケージは、W. R. Pearson and D. J. Lipman(1988), “Improved Tools for Biological Sequence Analysis”, PNAS 85:2444-2448; W. R. Pearson(1996) “Effective protein sequence comparison” Meth. Enzymol. 266:227- 258；及びPearson et. al.(1997)Genomics 46:24-36により書かれており、ｈｔｔｐ：／／ｆａｓｔａ．ｂｉｏｃｈ．ｖｉｒｇｉｎｉａ．ｅｄｕ／ｆａｓｔａ＿ｗｗｗ２／ｆａｓｔａ＿ｄｏｗｎ．ｓｈｔｍｌ．から公的に入手可能である。代替的に、ｈｔｔｐ：／／ｆａｓｔａ．ｂｉｏｃｈ．ｖｉｒｇｉｎｉａ．ｅｄｕ／ｆａｓｔａ＿ｗｗｗ２／ｉｎｄｅｘ．ｃｇｉにおいてアクセス可能な公的サーバが、ローカルではなくグローバルなアラインメントを確実に実施するために、ｇｇｓｅａｒｃｈ（ｇｌｏｂａｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ：ｐｒｏｔｅｉｎ）プログラム及びデフォルトオプション（ＢＬＯＳＵＭ５０；ｏｐｅｎ：−１０；ｅｘｔ：−２；Ｋｔｕｐ＝２）を用いて、配列を比較するために使用可能である。パーセントアミノ酸同一性は、出力アラインメントヘッダ中に与えられる。
【００５１】
「活性化Ｆｃ受容体」は、抗体のＦｃドメインの結合に続いて、エフェクター機能を実行するように受容体保有細胞を刺激するシグナル伝達現象を生じさせるＦｃ受容体である。ヒト活性化Ｆｃ受容体は、ＦｃγＲＩＩＩａ（ＣＤ１６ａ）、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩａ（ＣＤ３２）、及びＦｃαＲＩ（ＣＤ８９）を含む。
【００５２】
「有害作用」は、時に「副作用」又は「有害事象」（臨床試験において）とも命名され、ＣＤ３抗体を用いた患者の治療において医薬品に起因する有害で望ましくない反応である。
【００５３】
「腫瘍炎症関連の有害作用」は、ＣＤ３抗体（特にＣＤ３及び腫瘍標的に向けられた二重特異性抗体）の投与により引き起こされる腫瘍の炎症に関連する、がん患者の状態を意味する。腫瘍炎症関連の有害作用の性質は、多岐にわたり、腫瘍のサイズ及び位置に大きく依存する。腫瘍炎症関連の有害作用には、例えば、低酸素症（特に腫瘍が肺に位置する場合）、腸炎（特に腫瘍が腹膜に位置する場合）、肝臓酵素の増加（特に腫瘍が肝臓に位置する場合）及び大腸炎（特に腫瘍が結腸に位置する場合）が含まれる。
【００５４】
腫瘍炎症関連の有害作用は通常、腫瘍の炎症が起こる時、ＣＤ３抗体の投与の約２４時間から約７日後、多くの場合約２４から約７２時間後に生じる。有害作用は、主にＣＤ３抗体の初回投与後に生じ、その後の投与後に（再び）発生する可能性は低下する。腫瘍炎症は、例えば、コンピュータートモグラフィー（ＣＴ）又は生検といった、当技術分野で既知の技術によって検出することができる。腫瘍炎症の兆候には、腫瘍病変及び病変周囲の浮腫の拡大（例えばＣＴにより検出される）、又はＴ細胞、特にＣＤ８＋  Ｔ細胞の浸潤（例えば腫瘍生検における免疫組織化学により決定される）が含まれる。
【００５５】
ここで言及される「患者」とは、哺乳動物、好ましくはがん（特に固形腫瘍がん）に罹患した、罹患するであろう、又は（既に）ＣＤ３抗体を用いて治療されているヒトである。特定の実施態様では、がんは固形腫瘍がんである。
【００５６】
「固形腫瘍がん」が意味するのは、患者の体内の特定の位置に分離した腫瘍塊（腫瘍転移も含む）を形成する悪性腫瘍、例えば肉腫又は癌腫（例えば通常固形腫瘍を形成しない白血病といった血液のがんとは対照的な）である。固形腫瘍がんの非限定的な例には、膀胱がん、脳のがん、頸部及び頭部のがん、膵臓がん、肺がん、乳がん、卵巣がん、子宮がん、子宮頸がん、子宮内膜がん、食道がん、結腸がん、結腸直腸がん、直腸がん、胃がん、前立腺がん、皮膚がん、扁平上皮癌、骨がん、肝臓がん及び腎臓がんが含まれる。本発明の文脈において考慮される他の固形腫瘍がんには、限定されないが：腹部、骨、乳房、消化器系、肝臓、膵臓、腹膜、内分泌腺（副腎、副甲状腺、下垂体、睾丸、卵巣、胸腺、甲状腺）、眼、頭部及び頸部、神経系（中枢及び末梢）、リンパ系、骨盤、皮膚、軟組織、筋肉、脾臓、胸部、並びに泌尿器系に位置する腫瘍が含まれる。さらには、前がん性状態又は病変及びがん転移も含まれる。
【００５７】
一部の実施態様では、がんは、結腸直腸がん、肺がん、膵臓がん、乳がん、及び胃がんからなる群より選択されるがんである。特定の一実施態様では、がんは結腸直腸がんである。
【００５８】
ＣＤ３抗体がＣＤ３及び標的細胞抗原に特異的に結合する二重特異性抗体であるいくつかの実施態様では、がんは前記標的細胞抗原を発現する。例示的標的細胞抗原がここに記載されている。一実施態様において、がんはＣＥＡを発現する。一実施態様において、がんは、ＣＥＡに特異的な抗体を用いる免疫組織化学（ＩＨＣ）により決定したとき、腫瘍細胞の少なくとも２０％、好ましくは少なくとも５０％又は少なくとも８０％にＣＥＡを発現する。
【００５９】
グルココルチコイド（ＧＣ、時にグルココルチコステロイドとも呼ばれる）は、炎症性障害及び自己免疫疾患の治療のために広く使用されている免疫抑制剤である。ＧＣは、ヒトを含むほぼすべての脊椎動物の細胞中に存在する、グルココルチコイド受容体に結合するステロイドホルモンの一クラスである。このような化合物は、炎症の原因を問わず強力な抗炎症剤である。
【００６０】
ここで使用される用語「グルココルチコイド」は、好ましくは特異的に、グルココルチコイド受容体に結合する化合物を意味する。前記用語には、限定されないが、その薬学的に許容される誘導体を含め、コルチゾン、コルチゾール（ヒドロコルチゾン）、クロプレドノール、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デフラザコルト、フルオコルトロン、トリアムシノロン，（トリアムシノロンアセトニドを含む）、デキサメタゾン、ベタメサゾン、コルチバゾール、パラメタゾン、プレドニリデン、及び／又はフルチカゾン（フルチカゾンプロピオネートを含む）からなる群より選択される化合物（複数可）が含まれる。用語「薬学的に許容される誘導体」には、塩、エステル、エノールエーテル、エノールエステル、アセタール、ケタール、オルソエステル、ヘミアセタール、ヘミケタール、酸、基剤、塩基、溶媒和物、水和物又はこれらのプロドラッグが含まれる。このような誘導体は、当業者であればこのような誘導体化のための既知の方法を使用して容易に調製することができる。本発明の実施態様の文脈において、言及された化合物は、単独で又は組み合わせて使用することができる。しかしながら、本発明は、上記特定のＧＣに限定されない。「グルココルチコイド」として既に分類されているか又は分類されるであろうすべての物質が、本発明の文脈において同様に利用されうると想定される。このような未来のグルココルチコイドには、グルココルチコイド受容体に特異的に結合してこの受容体を活性化する化合物が含まれる。「ＧＣ受容体に特異的に結合する」という表現は、通常のタンパク質／受容体との会合（即ち、非特異的結合）と比較して、統計的に有意な度合いでＧＣ受容体（ＮＲ３Ｃ１としても知られる）と会合する（例えば、相互作用する）ＧＣ（又はＧＣのように作用するとみなされる化合物）を意味する。ＧＣ受容体がグルココルチコイドに結合するとき、その一次的作用機序は遺伝子転写の制御である。ＧＣの非存在下において、グルココルチコイド受容体は、熱ショックタンパク質９０（ｈｓｐ９０）、熱ショックタンパク質７０（ｈｓｐ７０）及びタンパク質ＦＫＢＰ５２（ＦＫ５０６結合タンパク質５２）を含む様々なタンパク質と複合したサイトゾル中に存在する。グルココルチコイド受容体に対するＧＣの結合は、熱ショックタンパク質の放出を招く。したがって、未来のＧＣ、又は薬学的に許容されるＧＣの誘導体又は塩は、好ましくはＧＣ受容体に結合し、上述の熱ショックタンパク質を放出することができると想定される。活性化されたグルココルチコイド受容体複合体は、核における抗炎症タンパク質の発現を上方制御するか、又はサイトゾルにおける炎症前タンパク質の発現を阻害する（サイトゾルから核への他の転写因子の転座を妨げることにより）。
【００６１】
発明による特定の実施態様では、ＧＣは、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、ベタメサゾン、デキサメタゾン、フルチカゾンプロピオネート、トリアムシノロンアセトニド、コルチゾン、ヒドロコルチゾン又はこれらの組み合わせのような臨床的に最も使用される関連ＧＣより選択される。全身投与用のＧＣが特に適している。静脈内及び／又は経口投与用のＧＣが特に適している。
【００６２】
一実施態様において、ＧＣは、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、及びプレドニゾロンからなる群より選択される。特定の一実施態様では、ＧＣはメチルプレドニゾロン又はプレドニゾンである。一実施態様において、ＧＣはメチルプレドニゾロンである。一実施態様において、ＧＣはプレドニゾンである。一実施態様において、ＧＣはプレドニゾロンである。一実施態様において、ＧＣはデキサメタゾンではない。
【００６３】
プレドニゾン及びメチルプレドニゾロンは、蓄積することなく日用量を可能にするそれらの中間の半減期（グルココルチコイドの中で）に起因して、及びさらには静脈内投与と経口投与が可能であることに起因して、本発明の文脈において特に適している。しかしながら、当業者であれば、ここに一部を開示する他の既知のグルココルチコイドの一つを選択し、ＣＥＡ×ＣＤ３二重特異性抗体といった（二重特異性）ＣＤ３抗体を用いた、治療を要する患者、例えばがん患者の治療に起因しうる腫瘍炎症関連の有害作用を改善、治療又は防止するための適切な有効用量を選択することができる。
【００６４】
ＧＣは、好ましくは、ＣＤ３抗体によって引き起こされる前記腫瘍炎症関連の有害作用を改善、治療又は防止するために十分な量で投与される。腫瘍炎症関連の有害作用は、患者に対するＣＤ３抗体の投与「によって引き起こされる」。「によって引き起こされる」とは、ＣＤ３抗体が有害作用の原因であることを意味する。当業者であれば、例えば投与の過程で患者を注意深くモニタリングし、それによりＣＤ３抗体の投与が有害作用の原因であったことを検出することにより、ＣＤ３結合ドメインの投与が有害作用の原因であるか否かを容易に評価することができる。同様に、ＣＤ３抗体の投与を止め、それにより有害作用が改善されたか又は場合によっては消えたかどうか（やはり有害作用が前記ＣＤ３抗体により引き起こされたことを示す）を評価することが想定される。
【００６５】
本発明の実施態様に従って使用されるＧＣの用量は限定されず、即ちその容量は個々の患者の状況に依存する。ＧＣは、静脈内投与又は経口投与することができる。しかしながら、ＧＣの好ましい投薬量は、約５ｍｇから約６０ｍｇ、例えば約４０ｍｇを含む（プレドニゾン等価物）。前記投薬量は、全部を一度に、又は少量の投薬量に分けて投与することができる。特に好ましいのは、約４０ｍｇの投薬量である（プレドニゾン等価物）。
【００６６】
特定の実施態様では、約４０ｍｇのプレドニゾン（ｐｒｅｄｉｓｏｎｅ）又は約４０ｍｇのメチルプレドニゾンが静脈内又は経口投与される。
【００６７】
本発明の文脈では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の投与（複数可）の前に、同投与と同時に、又は同投与の後で投与することができる。好ましい実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の投与の後で投与することができる。
【００６８】
ＧＣは、ＣＤ３抗体の各投与（複数回の場合）の後で投与することができる。特定の実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の初回投与後に投与することができる。いくつかの実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の初回投与後にのみ投与される（即ちその後の投与の後では投与されない）。いくつかの実施態様では、ＧＣは、初回及び二回目のＣＤ３抗体の投与の後にのみ投与される（即ちその後の投与の後では投与されない）。
【００６９】
いくつかの実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の（初回）投与後約１時間から約７日の範囲内で、特にＣＤ３抗体の（初回）投与後約１時間から約７２時間の間に投与される。いくつかの実施態様では、複数回用量のＧＣ（特に二回分の用量、四回分の用量、又は八回分の用量）が上記時間範囲内に投与される。ＧＣ用量の各々は、１用量につき好ましくは５から６０ｍｇ（プレドニゾン等価物）、好ましくは約４０ｍｇである。特定の実施態様では、各用量は、約４０ｍｇのプレドニゾン（ｐｒｅｄｉｓｏｎｅ）又は約４０ｍｇのメチルプレドニゾンである。
【００７０】
約１時間から約７日の間の時間範囲は、ＣＤ３抗体の（初回）投与後の時間が、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４時間、１日、２日、３日、４日、５日、６日又は７日、例えば約３時間、約２４時間、約２日、約３日又は約７日でよいことを意味する。
【００７１】
約１から約７２時間の間の時間範囲は、ＣＤ３抗体の（初回）投与後の時間が、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１又は７２時間、例えば約３時間、約２４時間、約４８時間又は約７２時間でよいことを意味する。
特定の実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の（初回）投与の約３時間、約１日（２４時間）、約２日（４８時間）、及び約３日（７２時間）後に投与される。他の特定の実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の（初回）投与の約３時間、約１日（２４時間）、約２日（４８時間）、約３日（７２時間）、約４日（９６時間）、約５日（１２０時間）、約６日（１４４時間）及び約７日（１６８時間）後に投与される。
【００７２】
特定の実施態様では、４０ｍｇのメチルプレドニゾロン又は４０ｍｇのプレドニゾンは、ＣＤ３抗体の（初回）投与の約３時間、約１日（２４時間）、約２日（４８時間）、及び約３日（７２時間）後に投与される。別の特定の実施態様では、４０ｍｇのメチルプレドニゾロン又は４０ｍｇのプレドニゾンは、ＣＤ３抗体の（初回）投与の約３時間、約１日（２４時間）、約２日（４８時間）、約３日（７２時間）、約４日（９６時間）、約５日（１２０時間）、約６日（１４４時間）及び約７日（１６８時間）後に投与される。
【００７３】
ＧＣの投与期間（例えば３日まで又は７日まで）は、ＣＤ３抗体に適用される治療レジメン、例えば腫瘍炎症を増強しうるＣＤ３抗体の用量又はさらなる治療剤との組み合わせに応じて変化しうる。
【００７４】
いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体は単剤療法として使用される（即ちＣＤ３抗体と共にさらなる抗がん治療剤が使用されることがない）。そのような一実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の（初回）投与の約３時間、約１日（２４時間）、約２日、及び約３日後に投与される。
【００７５】
他の実施態様では、ＣＤ３抗体は、さらなる治療剤との併用治療に使用され、前記さらなる治療剤は腫瘍炎症関連の有害作用を引き起こしうる及び／又はＣＤ３抗体によって引き起こされた腫瘍炎症関連の有害作用を増強しうる。そのような一実施態様では、ＧＣは、ＣＤ３抗体の（初回）投与の約３時間、約１日（２４時間）、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日及び約７日後に投与される。
【００７６】
一実施態様において、ＣＤ３抗体は、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト、特にヒトＰＤ−１軸結合アンタゴニストと組み合わせて使用される。用語「ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト」は、ＰＤ−１シグナル伝達軸上のシグナル伝達に起因するＴ細胞機能不全を除去するために、ＰＤ−１軸結合パートナーとその結合パートナーのうちの一つ又は複数との相互作用を阻害し、その結果Ｔ細胞機能（例えば、増殖、サイトカイン生成、標的細胞殺傷）が再生又は増強される分子を指す。ここで使用されるＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト及びＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストを含む。「ヒト」ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ヒトＰＤ−１シグナル伝達軸に上記作用を有する、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストを指す。
【００７７】
いくつかの実施態様において、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト及びＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群より選択される。用語「ＰＤ−１結合アンタゴニスト」は、ＰＤ−１と、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２といったその結合パートナーのうちの一つ又は複数との相互作用に起因するシグナル伝達を、低減、ブロック、阻害、抑止、又は妨害する分子を指す。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、その結合パートナーのうちの一つ又は複数に対する結合を阻害する分子である。特定の一態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２に対する結合を阻害する。例えば、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド及びＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２との相互作用に起因するシグナル変換を低減、ブロック、阻害、抑止又は妨害する他の分子を含む。一実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１を介したＴリンパ球媒介性シグナル伝達に発現される細胞表面タンパク質により又は同タンパク質を介して媒介される陰性の共刺激シグナルを低減し、機能障害性のＴ細胞の機能障害性を低下させる（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは抗ＰＤ−１抗体である。特定の一態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＣＴ−０１１（ピディリズマブ）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはここに記載されるＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＰＤＲ００１である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＲＥＧＮ２８１０である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＢＧＢ−１０８である。用語「ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト」は、ＰＤ−Ｌ１と、ＰＤ−１、Ｂ７−１といったその結合パートナーのいずれか一つ又は複数との相互作用に起因するシグナル伝達を、低減、ブロック、阻害、抑止、又は妨害する分子を指す。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のその結合パートナーに対する結合を阻害する分子である。特定の一態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１及び／又はＢ７−１に対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド及びＰＤ−Ｌ１と、ＰＤ−１、Ｂ７−１といったその結合パートナーの一つ又は複数との相互作用に起因するシグナル伝達を、低減、ブロック、阻害、抑止、又は妨害する他の分子を含む。一実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１を介したＴリンパ球媒介性シグナル伝達に発現される細胞表面タンパク質により又は同タンパク質を介して媒介される陰性の共刺激シグナルを低減し、機能障害性のＴ細胞の機能障害性を低下させる（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。特定の一態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＤＸ−１１０５である。また別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）である。また別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＤＸ−１１０５である。また別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）である。また別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）である。用語「ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニスト」は、ＰＤ−Ｌ２と、ＰＤ−１といったその結合パートナーのいずれか一つ又は複数との相互作用に起因するシグナル伝達を、低減、ブロック、阻害、抑止、又は妨害する分子を指す。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２の、結合パートナーに対する結合を阻害する分子である。特定の一態様では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１に対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ２アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド及びＰＤ−Ｌ２と、ＰＤ−１といったその結合パートナーの一つ又は複数との相互作用に起因するシグナル伝達を、低減、ブロック、阻害、抑止、又は妨害する他の分子を含む。一実施態様では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２を介したＴリンパ球媒介性シグナル伝達に発現される細胞表面タンパク質により又は同タンパク質を介して媒介される陰性の共刺激シグナルを低減し、機能障害性のＴ細胞の機能障害性を低下させる（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストはイムノアドヘシンである。
【００７８】
いくつかの実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施態様では、抗体はヒト化抗体、キメラ抗体又はヒト抗体である。いくつかの実施態様では、抗体は抗原結合断片である。いくつかの実施態様では、抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖからなる群より選択される。
【００７９】
いくつかの実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストはＰＤ−１結合アンタゴニストである。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、そのリガンド結合パートナーに対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１に対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ２に対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２両方に対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＭＤＸ  １１０６（ニボルマブ）、ＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ）、ＣＴ−０１１（ピディリズマブ）、ＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、及びＢＧＢ−１０８からなる群より選択される。
【００８０】
いくつかの実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストはＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１に対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＢ７−１に対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１及びＢ７−１両方に対する結合を阻害する。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。いくつかの実施態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＤＸ−１１０５、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、及びＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）からなる群より選択される。
【００８１】
好ましい一実施態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストはアテゾリズマブである。いくつかの実施態様では、アテゾリズマブは、約８００ｍｇから約１５００ｍｇの用量で三週に一回投与される（例えば、約１０００ｍｇから約１３００ｍｇを三週に一回、例えば、約１１００ｍｇから約１２００ｍｇを三週に一回）。好ましい一実施態様では、アテゾリズマブは約１２００ｍｇの用量で三週に一回投与される。
【００８２】
本発明において用いられるＣＤ３抗体は、ＣＤ３、特にＣＤ３ε、最も詳細にはヒトＣＤ３／ＣＤ３εに特異的に結合する（配列番号３４参照）。
【００８３】
一実施態様において、ＣＤ３抗体は、抗体Ｈ２Ｃ（国際公開第２００８／１１９５６７号）、抗体Ｖ９（Rodrigues et al., Int J Cancer Suppl 7, 45-50 （1992）及び米国特許第６０５４２９７号）、抗体ＦＮ１８（Nooij et al., Eur J Immunol 19, 981-984 （1986））、抗体ＳＰ３４（Pessano et al., EMBO J 4, 337-340 （1985））、抗体ＯＫＴ３（Kung et al., Science 206, 347-349 （1979））、抗体ＷＴ３１（Spits et al., J Immunol 135, 1922 （1985））、抗体ＵＣＨＴ１（Burns et al., J Immunol 129, 1451-1457 （1982））、抗体７Ｄ６（Coulie et al., Eur J Immunol 21, 1703-1709 （1991））、抗体Ｌｅｕ−４、又は抗体Ｃｒｉｓ−７（Reinherz et al. （eds.）, Leukocyte Typing II., Springer Verlag, New York, （1986））と結合について競合する又は競合しうる。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体はまた、国際公開第２００５／０４０２２０号、国際公開第２００５／１１８６３５号、国際公開第２００７／０４２２６１号、国際公開第２００８／１１９５６７号、国際公開第２００８／１１９５６５号、国際公開第２０１２／１６２０６７号、国際公開第２０１３／１５８８５６号、国際公開第２０１３／１８８６９３号、国際公開第２０１３／１８６６１３号、国際公開第２０１４／１１０６０１号、国際公開第２０１４／１４５８０６号、国際公開第２０１４／１９１１１３号、国際公開第２０１４／０４７２３１号、国際公開第２０１５／０９５３９２号、国際公開第２０１５／１８１０９８号、国際公開第２０１５／００１０８５号、国際公開第２０１５／１０４３４６号、国際公開第２０１５／１７２８００号、国際公開第２０１６／０７１００４号、国際公開第２０１６／１１６６２６号、国際公開第２０１６／１６６６２９号、国際公開第２０１６／０２０４４４号、国際公開第２０１６／０１４９７４号、国際公開第２０１６／２０４９６６号、国際公開第２０１７／００９４４２号、国際公開第２０１７／５３４６９号、国際公開第２０１７／０１０８７４号、国際公開第２０１７／５３８５６号、国際公開第２０１７／２０１４９３号、又は国際公開第２０１７／２２３１１１号に記載されるＣＤ３に特異的に結合する抗体である。
【００８４】
一実施態様において、ＣＤ３抗体は、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
【００８５】
一実施態様において、ＣＤ３抗体は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列、及び配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列を含む。
【００８６】
一実施態様において、ＣＤ３抗体は、配列番号７の重鎖可変領域配列及び配列番号８の軽鎖可変領域配列を含む。
【００８７】
一実施態様において、ＣＤ３抗体はＩｇＧ抗体、特にＩｇＧ１抗体である。一実施態様において、抗体は完全長抗体である。別の実施態様では、抗体は、Ｆｖ分子、ｓｃＦｖ分子、Ｆａｂ分子、及びＦ（ａｂ’）２分子からなる群より選択される抗体断片である。
【００８８】
いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体はＣＤ３に対する一価の結合を提供する。
【００８９】
特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体である。一実施態様において、ＣＤ３抗体は、ＣＤ３に対して、及び標的細胞（例えば腫瘍細胞）抗原に対して、特異的に結合する二重特異性抗体である。適切な標的細胞抗原は、特に固形腫瘍に発現される抗原を含み、例えば、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ガングリオシドＧＤ２、ＣＤ４４ｖ６、前立腺６膜貫通上皮抗原１（ＳＴＥＡＰ−１）、メソテリン（ＭＳＬＮ）、メラノーマ関連コンドロイチン硫酸塩プロテオグリカン（ＭＣＳＰ）、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）、５Ｔ４がん胎児性抗原、Ｔｒｏｐ２、カドヘリン１９（ＣＤＨ１９）、ＣＤＨ３、Ｐ−カドヘリン、Ｆｃ受容体様５（ＦｃＲＨ５）、グリピカン３（ＧＰＣ３）、クローディン（ＣＬＤＮ）、Ｂ７−Ｈ３、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、ｃ−Ｍｅｔ、糖タンパク質Ａ３３（ｇｐＡ３３）、デスレセプター５（ＤＲ５）、エフリンＡ２（ＥｐｈＡ２）、及びデルタ様３（ＤＬＬ３）を含みうる。
【００９０】
いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体は、ＣＤ３及びＥｐＣＡＭに対する二重特異性抗体である。一実施態様において、二重特異性抗体はカツマキソマブ（ＲＥＶＯＭＡＢ（登録商標））である。一実施態様において、二重特異性抗体はソリトマブ（ＡＭＧ  １１０、ＭＴ１１０）である。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体はＣＤ３及びＨｅｒ２に対する二重特異性抗体である。一実施態様において、二重特異性抗体はエルツマキソマブである。一実施態様において、二重特異性抗体はＧＢＲ  １３０２である。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体はＣＤ３及びＰＳＭＡに対する二重特異性抗体である。一実施態様において、二重特異性抗体はＢＡＹ２０１０１１２（ＡＭＧ２１２、ＭＴ１１２）である。一実施態様において、二重特異性抗体はＭＯＲ２０９／ＥＳ４１４である。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体はＣＤ３及びＣＥＡに対する二重特異性抗体である。一実施態様において、二重特異性抗体はＭＥＤＩ５６５（ＡＭＧ２１１、ＭＴ１１１）である。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体はＣＤ３及びｇｐＡ３３に対する二重特異性抗体である。一実施態様において、二重特異性抗体はＭＧＤ００７である。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体はＣＤ３及びＧＰＣ３に対する二重特異性抗体である。一実施態様において、二重特異性抗体はＥＲＹ９７４である。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体はＣＤ３及びＰ−カドヘリンに対する二重特異性抗体である。一実施態様において、二重特異性抗体はＰＦ−０６６７１００８である。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体はＣＤ３及びＢ７−Ｈ４に対する二重特異性抗体である。一実施態様において、二重特異性抗体はＭＧＤ００９である。
【００９１】
特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、ＣＤ３及びＣＥＡに特異的に結合する二重特異性抗体である。ＣＤ３及びＣＥＡに対する特定の二重特異性抗体は、例えば国際公開第２０１４／１３１７１２号及び国際公開第２０１７／０５５３８９号（参照により各々の全体をここに包含する）に記載されている。
【００９２】
一実施態様において、ＣＤ３抗体は、
（ｉ）ＣＤ３に特異的に結合する第１の抗原結合部分であって、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む第１の抗原結合部分；と
（ｉｉ）ＣＥＡに特異的に結合する第２の抗原結合部分であって、（ｉ）配列番号９の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１０のＨＣＤＲ２、及び配列番号１１のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号１２の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号１３のＬＣＤＲ２及び配列番号１４のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域；又は（ｉｉ）配列番号１７の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１８のＨＣＤＲ２、及び配列番号１９のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号２０の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号２１のＬＣＤＲ２及び配列番号２２のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む第２の抗原結合部分と
を含む二重特異性抗体である。
【００９３】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列、及び配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列を含む。
【００９４】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号７の重鎖可変領域配列及び配列番号８の軽鎖可変領域配列を含む。
【００９５】
一実施態様において、第２の抗原結合部分は、（ｉ）配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列及び配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列；又は（ｉｉ）配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列及び配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列を含む。
【００９６】
一実施態様において、第２の抗原結合部分は、（ｉ）配列番号１５の重鎖可変領域配列及び配列番号１６の軽鎖可変領域配列；又は（ｉｉ）配列番号２３の重鎖可変領域配列及び配列番号２４の軽鎖可変領域配列を含む。
【００９７】
いくつかの実施態様では、第１及び／又は第２の抗原結合部分はＦａｂ分子である。いくつかの実施態様では、第１の抗原結合部分は、Ｆａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の可変領域又は定常領域が交換されているクロスオーバーＦａｂ分子である。このような実施態様では、第２の抗原結合部分は、好ましくは一般的なＦａｂ分子である。
【００９８】
二重特異性抗体の第１及び第２の抗原結合部分が共にＦａｂ分子であり、抗原結合部分の一方（特に第１の抗原結合部分）においてＦａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の可変ドメインＶＬとＶＨが互いによって置き替えられているいくつかの実施態様では、
ｉ）第１の抗原結合部分の定常ドメインＣＬにおいて１２４位のアミノ酸が正に帯電したアミノ酸により置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、第１の抗原結合部分の定常ドメインＣＨ１において１４７位のアミノ酸又は２１３位のアミノ酸が負に帯電したアミノ酸により置換されているか（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）；或いは
ｉｉ）第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＬにおいて１２４位のアミノ酸が正に帯電したアミノ酸により置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＨ１において１４７位のアミノ酸又は２１３位のアミノ酸が負に帯電したアミノ酸により置換されている（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。
【００９９】
二重特異性抗体はｉ）及びｉｉ）に記載された両方の修飾を有さない。ＶＨ／ＶＬ交換を有する抗原結合部分の定常ドメインＣＬ及びＣＨ１は、互いによって置き替えられていない（即ち変化はない）。
【０１００】
さらに特異的な一実施態様では、
ｉ）第１の抗原結合部分の定常ドメインＣＬにおいて１２４位のアミノ酸がリジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）又はヒスチジン（Ｈ）により独立して置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、第１の抗原結合部分の定常ドメインＣＨ１において１４７位のアミノ酸又は２１３位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）、又はアスパラギン酸（Ｄ）により独立して置換されているか（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）；或いは
ｉｉ）第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＬにおいて１２４位のアミノ酸がリジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）又はヒスチジン（Ｈ）により独立して置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＨ１において１４７位のアミノ酸又は２１３位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）、又はアスパラギン酸（Ｄ）により独立して置換されている（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。
【０１０１】
そのような一実施態様では、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＬにおいて１２４位のアミノ酸がリジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）又はヒスチジン（Ｈ）により独立して置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＨ１において１４７位のアミノ酸又は２１３位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）、又はアスパラギン酸（Ｄ）により独立して置換されている（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。
【０１０２】
さらなる一実施態様では、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＬにおいて１２４位のアミノ酸がリジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）又はヒスチジン（Ｈ）により独立して置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＨ１において１４７位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）、又はアスパラギン酸（Ｄ）により独立して置換されている（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。
【０１０３】
特定の一実施態様では、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＬにおいて１２４位のアミノ酸がリジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）又はヒスチジン（Ｈ）により独立して置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、１２３位のアミノ酸がリジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）又はヒスチジン（Ｈ）により独立して置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＨ１において１４７位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）、又はアスパラギン酸（Ｄ）により独立して置換されており（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）、２１３位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）、又はアスパラギン酸（Ｄ）により独立して置換されている（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。
【０１０４】
さらに特定の実施態様では、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＬにおいて１２４位のアミノ酸がリジン（Ｋ）により置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、１２３位のアミノ酸がリジン（Ｋ）により置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＨ１において１４７位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）により置換されており（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）、２１３位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）により置換されている（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。
【０１０５】
それよりもさらに特定の実施態様では、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＬにおいて１２４位のアミノ酸がリジン（Ｋ）により置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、１２３位のアミノ酸がアルギニン（Ｒ）により置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＨ１において１４７位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）により置換されており（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）、２１３位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）により置換されている（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。
【０１０６】
特定の実施態様では、上記実施態様によるアミノ酸置換が第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＬ及び定常ドメインＣＨ１において行われる場合、第２の抗原結合部分の定常ドメインＣＬはカッパアイソタイプである。
【０１０７】
いくつかの実施態様では、第１の抗原結合部分と第２の抗原結合部分が、任意選択的にペプチドリンカーを介して、互いに融合される。
【０１０８】
いくつかの実施態様では、第１及び第２の抗原結合部分の各々はＦａｂ分子であり、（ｉ）第２の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端において第１の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合しているか、又は（ｉｉ）第１の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端において第２の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合している。
【０１０９】
特定の実施態様では、二重特異性抗体は、ＣＤ３に特異的に結合する単一の抗原結合部分と、ＣＥＡに特異的に結合する二つの抗原結合部分とを含む。したがって、いくつかの実施態様では、二重特異性抗体は、ＣＥＡに特異的に結合する第３の抗原結合部分を含む。いくつかの実施態様では、第３の抗原部分は、第１の抗原結合部分と同一である（例えばやはりＦａｂ分子であり、同じアミノ酸配列を含む）。
【０１１０】
特定の実施態様では、二重特異性抗体は第１及び第２のサブユニットから構成されるＦｃドメインをさらに含む。一実施態様において、ＦｃドメインはＩｇＧ  Ｆｃドメインである。特定の一実施態様では、ＦｃドメインはＩｇＧ１  Ｆｃドメインである。別の実施態様では、ＦｃドメインはＩｇＧ４  Ｆｃドメインである。さらに特異的な一実施態様では、Ｆｃドメインは、Ｓ２２８位（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックス番号付け）にアミノ酸置換、特にアミノ酸置換Ｓ２２８Ｐを含むＩｇＧ４  Ｆｃドメインである。このアミノ酸置換は、ＩｇＧ４抗体のＦａｂアームの交換をｉｎ  ｖｉｖｏで低減する（Stubenrauch et al., Drug Metabolism and Disposition 38, 84-91 （2010）参照）。さらに特定の実施態様では、ＦｃドメインはヒトＦｃドメインである。それよりもさらに特定の実施態様では、ＦｃドメインはヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインである。ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域の例示的配列は、配列番号３３に与えられている。
【０１１１】
第１、第２、及び存在する場合は第３の抗原結合部分の各々がＦａｂ分子であるいくつかの実施態様では、（ａ）（ｉ）第２の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端において第１の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合ししており、且つ第１の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第１のサブユニットのＮ末端に融合しているか、又は（ｉｉ）第１の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端において第２の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合しており、且つ第２の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第１のサブユニットのＮ末端に融合しており；（ｂ）存在する場合は、第３の抗原結合部分がＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第２のサブユニットのＮ末端に融合している。
【０１１２】
特定の実施態様では、Ｆｃドメインは、Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する修飾を含む。ヒトＩｇＧのＦｃドメインの二つのサブユニット間においてタンパク質−タンパク質相互作用が最大である部位は、ＣＨ３ドメインである。したがって、一実施態様では、前記修飾はＦｃドメインのＣＨ３ドメイン内で行われる。
【０１１３】
特定の実施態様では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する前記修飾は、いわゆる「ノブ・イントゥー・ホール」修飾であり、Ｆｃドメインの二つのサブユニットの一方に「ノブ」修飾を、Ｆｃドメインの二つのサブユニットの他方に「ホール」修飾を、それぞれ含む。「ノブ−イントゥ−ホール」技術は、例えば、米国特許第５７３１１６８号；同第７６９５９３６号；Ridgway et al., Prot Eng 9, 617-621 （1996） and Carter, J Immunol Meth 248, 7-15 （2001）に記載されている。通常、この方法は、隆起がそれに対応する空洞内に位置できるように、第１のポリペプチドの接触面に隆起（「ノブ」）を、及び第２のポリペプチドの接触面に対応する空洞を、それぞれ導入することにより、ヘテロダイマー形成を促進し、且つホモ二量体形成を妨害することを含む。隆起は、第１のポリペプチドの接触面からの小さなアミノ酸側鎖をそれより大きな側鎖（例えばチロシン又はトリプトファン）で置き換えることにより構築される。隆起と同じ又は同様のサイズの相補的空洞は、大きなアミノ酸側鎖をそれよりも小さなもの（例えばアラニン又はスレオニン）で置き換えることにより、第２のポリペプチドの接触面に作り出される。
【０１１４】
したがって、いくつかの実施態様では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸残基が、より大きな側鎖体積を有するアミノ酸残基で置き換えられ、それにより、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内部に、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内部の空洞内に配置可能な隆起が生成されており、Ｆｃドメインの第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸残基が、より小さな側鎖体積を有するアミノ酸残基で置き換えられ、それにより、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内部に、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内部の隆起を配置可能な空洞が生成されている。好ましくは、より大きな側鎖体積を有する前記アミノ酸残基は、アルギニン（Ｒ）、フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、及びトリプトファン（Ｗ）からなる群より選択される。好ましくは  より小さな側鎖体積を有する前記アミノ酸残基は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、及びバリン（Ｖ）からなる群より選択される。隆起及び空洞は、ポリペプチドをコードする核酸を、例えば部位特異的突然変異誘発により、又はペプチド合成により変化させることにより作製することができる。
【０１１５】
このような特定の実施態様では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットにおいて、３６６位のスレオニン残基がトリプトファン残基で置き換えられており（Ｔ３６６Ｗ）、Ｆｃドメインの第２のサブユニットにおいて、４０７位のチロシン残基がバリン残基で置き換えられており（Ｙ４０７Ｖ）、任意選択的に３６６位のスレオニン残基がセリン残基で置き換えられており（Ｔ３６６Ｓ）、３６８位のロイシン残基がアラニン残基で置き換えられている（Ｌ３６８Ａ）（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。さらなる一実施態様では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットにおいてさらに、３５４位のセリン残基がシステイン残基で置き換えられているか（Ｓ３５４Ｃ）又は３５６位のグルタミン酸残基がシステイン残基で置き換えられており（Ｅ３５６Ｃ）（特に３５４位のセリン残基がシステイン残基で置き換えられている）、Ｆｃドメインの第２のサブユニットにおいてさらに、３４９位のチロシン残基がシステイン残基で置き換えられている（Ｙ３４９Ｃ）（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。特定の一実施態様では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットは、アミノ酸置換Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗを含み、Ｆｃドメインの第２のサブユニットは、アミノ酸置換Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。
【０１１６】
いくつかの実施態様では、Ｆｃドメインは、Ｆｃ受容体への結合を低減する及び／又はエフェクター機能を低下させる一つ又は複数のアミノ酸置換を含む。
【０１１７】
特定の一実施態様では、Ｆｃ受容体はＦｃγ受容体である。一実施態様において、Ｆｃ受容体はヒトＦｃ受容体である。一実施態様において、Ｆｃ受容体は活性化Ｆｃ受容体である。特定の一実施態様では、Ｆｃ受容体は活性化ヒトＦｃγ受容体であり、さらに詳細にはヒトＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩ又はＦｃγＲＩＩａ、最も詳細にはヒトＦｃγＲＩＩＩａである。一実施態様において、エフェクター機能は、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞性食作用（ＡＤＣＰ）、及びサイトカイン分泌の群より選択される一つ又は複数である。特定の一実施態様では、エフェクター機能はＡＤＣＣである。
【０１１８】
一般に、同じ一つ又は複数のアミノ酸置換が、Ｆｃドメインの二つのサブユニットの各々に存在する。一実施態様において、一つ又は複数のアミノ酸置換は、Ｆｃ受容体に対するＦｃドメインの結合親和性を低下させる。一実施態様において、一つ又は複数のアミノ酸置換は、Ｆｃ受容体に対するＦｃドメインの結合親和性を、少なくとも２分の１、少なくとも５分の１、又は少なくとも１０分の１に低下させる。
【０１１９】
一実施態様において、Ｆｃドメインは、Ｅ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｎ２９７、Ｐ３３１及びＰ３２９の群より選択される位置にアミノ酸置換を含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。さらに特定の一実施態様において、Ｆｃドメインは、Ｌ２３４、Ｌ２３５，及びＰ３２９の群より選択される位置にアミノ酸置換を含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。いくつかの実施態様では、Ｆｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａを含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。そのような一実施態様では、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１  Ｆｃドメイン、特にヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインである。一実施態様において、Ｆｃドメインは、Ｐ３２９位にアミノ酸置換を含む。さらに特異的な一実施態様では、アミノ酸置換は、Ｐ３２９Ａ又はＰ３２９Ｇ、特にＰ３２９Ｇである（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。一実施態様において、Ｆｃドメインは、Ｐ３２９位にアミノ酸置換を、Ｅ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｎ２９７及びＰ３３１より選択される位置にさらなるアミノ酸置換を、それぞれ含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。さらに特異的な一実施態様では、さらなるアミノ酸置換は、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３５Ｅ、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｄ又はＰ３３１Ｓである。特定の実施態様では、Ｆｃドメインは、Ｐ３２９、Ｌ２３４及びＬ２３５位にアミノ酸置換を含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。さらに特定の実施態様では、Ｆｃドメインは、アミノ酸変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ（「Ｐ３２９Ｇ  ＬＡＬＡ」、「ＰＧＬＡＬＡ」又は「ＬＡＬＡＰＧ」）を含む。具体的に、特定の実施態様では、Ｆｃドメインの各サブユニットは、アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇを含み（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックス番号付け）、即ちＦｃドメインの第１及び第２のサブユニットの各々では、２３４位のロイシン残基がアラニン残基  で置き換えられており（Ｌ２３４Ａ）、２３５位のロイシン残基がアラニン残基で置き換えられており（Ｌ２３５Ａ）、３２９位のプロリン残基がグリシン残基により置き換えられている（Ｐ３２９Ｇ）（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。そのような一実施態様では、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１  Ｆｃドメイン、特にヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインである。
【０１２０】
一実施態様において、ＣＤ３抗体は、
（ｉ）ＣＤ３に特異的に結合する第１の抗原結合部分であって、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、Ｆａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の可変領域又は定常領域、特に定常領域が交換されている第１の抗原結合部分；と
（ｉｉ）ＣＥＡに特異的に結合する第２及び第３の抗原結合部分であって、配列番号９の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１０のＨＣＤＲ２、及び配列番号１１のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号１２の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号１３のＬＣＤＲ２及び配列番号１４のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、第２及び第３の抗原結合部分の各々がＦａｂ分子、特に一般的なＦａｂ分子である第２及び第３の抗原結合部分；と
（ｉｉｉ）第１及び第２のサブユニットから構成されるＦｃドメイン
を含む二重特異性抗体であり、
第２の抗原結合部分はＦａｂ重鎖のＣ末端において第１の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合しており、第１の抗原結合部分はＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第１のサブユニットのＮ末端に融合しており、第３の抗原結合部分はＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第２のサブユニットのＮ末端に融合している。
【０１２１】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列、及び配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列を含む。
【０１２２】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号７の重鎖可変領域配列及び配列番号８の軽鎖可変領域配列を含む。
【０１２３】
一実施態様において、第２及び第３の抗原結合部分は、配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列、及び配列番号１６のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列を含む。一実施態様において、第２及び第３の抗原結合部分は、配列番号１５の重鎖可変領域及び配列番号１６の軽鎖可変領域を含む。
【０１２４】
上記実施態様によるＦｃドメインは、単独で又は組み合わせで、Ｆｃドメインに関連して上述した特徴のすべてを含むことができる。
【０１２５】
一実施態様において、抗原結合部分とＦｃ領域とは、ペプチドリンカー、特に配列番号２７及び配列番号２８のペプチドリンカーにより互いに対して融合している。一実施態様において、二重特異性抗体は、配列番号２５の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチド、配列番号２６の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチド、配列番号２７の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチド、及び配列番号２８の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチドを含む。
【０１２６】
一実施態様において、二重特異性抗体は、配列番号２５の配列を含むポリペプチド、配列番号２６の配列を含むポリペプチド、配列番号２７の配列を含むポリペプチド、及び配列番号２８の配列を含むポリペプチドを含む。（ＣＥＡ−ＴＣＢ）
【０１２７】
特定の一実施態様では、ＣＤ３抗体はＣＥＡ−ＴＣＢである。
【０１２８】
一実施態様において、ＣＤ３抗体は、
（ｉ）ＣＤ３に特異的に結合する第１の抗原結合部分であって、配列番号１の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号２のＨＣＤＲ２、及び配列番号３のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号４の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号５のＬＣＤＲ２及び配列番号６のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、Ｆａｂ軽鎖とＦａｂ重鎖の可変領域又は定常領域、特に可変領域が交換されている第１の抗原結合部分；と
（ｉｉ）ＣＥＡに特異的に結合する第２及び第３の抗原結合部分であって、配列番号１７の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号１８のＨＣＤＲ２、及び配列番号１９のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；並びに配列番号２０の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号２１のＬＣＤＲ２及び配列番号２２のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、第２及び第３の抗原結合部分の各々がＦａｂ分子、特に一般的なＦａｂ分子である第２及び第３の抗原結合部分；と
（ｉｉｉ）安定に会合することのできる第１のサブユニットと第２のサブユニットから構成されるＦｃドメイン
を含む二重特異性抗体であり、
第２の抗原結合部分はＦａｂ重鎖のＣ末端において第１の抗原結合部分のＦａｂ重鎖のＮ末端に融合しており、第１の抗原結合部分はＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第１のサブユニットのＮ末端に融合しており、第３の抗原結合部分はＦａｂ重鎖のＣ末端においてＦｃドメインの第２のサブユニットのＮ末端に融合している。
【０１２９】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列、及び配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列を含む。
【０１３０】
一実施態様において、第１の抗原結合部分は、配列番号７の重鎖可変領域配列及び配列番号８の軽鎖可変領域配列を含む。
【０１３１】
一実施態様において、第２及び第３の抗原結合部分は、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である重鎖可変領域配列、及び配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％同一である軽鎖可変領域配列を含む。一実施態様において、第２及び第３の抗原結合部分は、配列番号２３の重鎖可変領域及び配列番号２４の軽鎖可変領域を含む。
【０１３２】
上記実施態様によるＦｃドメインは、単独で又は組み合わせで、Ｆｃドメインに関連して上述した特徴のすべてを含むことができる。
【０１３３】
一実施態様において、抗原結合部分とＦｃ領域とは、ペプチドリンカー、特に配列番号３０及び配列番号３１のペプチドリンカーにより互いに対して融合している。
【０１３４】
一実施態様において、（ｉｉ）の第２及び第３のＦａｂ分子の定常ドメインＣＬでは、１２４位のアミノ酸がリジン（Ｋ）により置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、１２３位のアミノ酸がリジン（Ｋ）又はアルギニン（Ｒ）により、特にアルギニン（Ｒ）により置換されており（Ｋａｂａｔによる番号付け）、（ｉｉ）の第２及び第３のＦａｂ分子の定常ドメインＣＨ１では、１４７位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）により置換されており（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）、２１３位のアミノ酸がグルタミン酸（Ｅ）により置換されている（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）。
【０１３５】
一実施態様において、二重特異性抗体は、配列番号２９の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチド、配列番号３０の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチド、配列番号３１の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチド、及び配列番号３２の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を含むポリペプチドを含む。
【０１３６】
一実施態様において、二重特異性抗体は、配列番号２９の配列を含むポリペプチド、配列番号３０の配列を含むポリペプチド、配列番号３１の配列を含むポリペプチド、及び配列番号３２の配列を含むポリペプチドを含む。
【０１３７】
がんの治療における使用のために、ＣＤ３抗体は、医学行動規範に準拠する方式で製剤化され、用量分けされ、投与される。
【０１３８】
本明細書において用いられる場合、「治療」（及び「治療する（ｔｒｅａｔ）」又は「治療している（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」などの文法的変形）は、治療されている個体の疾病の自然経過を変えようと試みる臨床的介入を指し、予防のために又は臨床病理の過程において実行できる。治療の望ましい作用には、限定されないが、疾患の発生又は再発の防止、症候の緩和、疾患のいずれかの直接的又は間接的病理学的帰結の縮小、転移の防止、疾患進行速度の低下、病態の改善又は緩和、及び寛解又は予後の改善が含まれる。いくつかの実施態様において、本発明の抗体は、疾患の発症を遅延させるか又は疾患の進行を遅くするために使用される。
【０１３９】
ＣＤ３抗体の適切な投薬量（単独で又は一つ又は複数の他の追加的治療剤と組み合わせて使用されるとき）は、治療されるがんの種類、投与の経路、患者の体重、ＣＤ３抗体の種類、疾患の重症度及び経過、ＣＤ３抗体投与の目的が防止であるか又は治療であるか、以前又は現在の治療的介入の有無、患者の臨床履歴及びＣＤ３抗体への応答、並びに主治医の裁量に依存するであろう。
【０１４０】
いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体は、約５ｍｇから約１２００ｍｇの用量で、例えば約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約４０ｍｇ、約６０ｍｇ、約８０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約７００ｍｇ、約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ又は約１２００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体は、４０ｍｇ以上（約１２００ｍｇ以下）の用量で投与される。一実施態様において、ＣＤ３抗体は、約４０ｍｇの用量で投与される。好ましい実施態様では、ＣＤ３抗体は、４０ｍｇを上回る用量で投与される。いくつかの実施態様では、ＣＤ３抗体は、約６０ｍｇ以上（約１２００ｍｇ以下）の用量で投与される。一実施態様において、ＣＤ３抗体は、約６０ｍｇから約６００ｍｇの用量で投与される。特定の一実施態様では、ＣＤ３抗体は、約６０ｍｇの用量で投与される。別の特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、約８０ｍｇの用量で投与される。別の特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、約１００ｍｇの用量で投与される。別の特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、約１５０ｍｇの用量で投与される。別の特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、約１６０ｍｇの用量で投与される。別の特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、約３００ｍｇの用量で投与される。別の特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、約４００ｍｇの用量で投与される。別の特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、約６００ｍｇの用量で投与される。別の特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、約８００ｍｇの用量で投与される。別の特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、約１０００ｍｇの用量で投与される。別の特定の実施態様では、ＣＤ３抗体は、約１２００ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施態様では、毎回同じ用量のＣＤ３抗体が投与される。他の実施態様では、ＣＤ３抗体の用量は、その後の投与において、初回投与と比較して増加される。一実施態様において、ＣＤ３抗体の用量は、約１５０ｍｇ、約６００ｍｇ又は約１２００ｍｇの用量まで、投与の度に前回の投与と比較して増加される。好ましくは、用量の増加は、週に一回（ＱＷ）行われる約３から約７回の投与の過程で行われる。徐々に用量を増加させることは、ここに記載される治療の状況においてＣＤ３抗体によって引き起こされる腫瘍炎症関連の有害作用をさらに低減することを助けることができる。
【０１４１】
好ましい一実施態様では、ＣＤ３抗体は毎週／週に一回（ＱＷ）投与される。さらなる一実施態様では、ＣＤ３抗体は三週に一回（Ｑ３Ｗ）投与される。
【０１４２】
本発明は、ＧＣ及び／又はＣＤ３抗体、並びにＧＣが前記ＣＤ３抗体により引き起こされる腫瘍炎症関連の有害作用の治療、改善及び／又は予防のために使用されることを示す指示書及び／又はインプリントを含む（薬学的）キット又はパッケージにも関する。前記ＧＣ及びＣＤ３抗体は、好ましくは、一つの密封されたパッケージ又はキット内に一緒に包装される。また、本発明のパッケージ又はキットが、ＧＣ及び／又はＣＤ３抗体を患者に投与するための手段及び／又は通常治療剤の点滴のために使用されるバッファー、バイアル、テフロンバッグ又は点滴バッグをさらに含むことが想定される。これにより「手段」は、シリンジ、皮下針、カニューレ、カテーテル、静脈内投与用点滴バッグ、静脈内ビヒクル、バイアル、バッファー、安定剤、本発明のそれぞれの用量及び点滴の調製などにおいて当業者を助ける文書による指示からなる群より選択される一つ又は複数の物品（複数可）を含む。
【実施例】
【０１４３】
以下は本発明の方法及び組成物の実施例である。上に提供された一般的な説明を前提として、他の様々な実施態様が実施されうることが理解される。
【０１４４】
実施例１
単剤としての及びアテゾリズマブとの組み合わせでの新規がん胎児性抗原Ｔ細胞二重特異性抗体（ＣＥＡ−ＴＣＢ）抗体の第Ｉ相試験
背景：ＣＥＡ−ＴＣＢ（ＲＧ７８０２、ＲＯ６９５８６８８）は、腫瘍細胞上のＣＥＡ及びＴ細胞上のＣＤ３を標的とする新規のＴ細胞二重特異性抗体である。前臨床的に、ＣＥＡ−ＴＣＢは強力な抗腫瘍活性を有し、腫瘍内Ｔ細胞浸潤及び活性化の増大、Ｔ細胞媒介性腫瘍細胞殺傷及びＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１の上方制御をもたらした。
【０１４５】
方法：進行中の２つの用量漸増第Ｉ相試験において、ＣＥＡ−ＴＣＢは、単剤療法ＩＶ  ＱＷとして（Ｓ１）、又はアテゾリズマブ１２００ｍｇ  Ｑ３Ｗと組み合わせて（ＱＷ）（Ｓ２）、進行性のＣＥＡ陽性（腫瘍細胞の≧２０％に中程度又は高度に発現）固形腫瘍を有する患者に投与される。Ｓ１では、８０名の患者（７０  ＣＲＣ）を０．０５−６００ｍｇの用量レベルで；Ｓ２では、４５名の患者（３５  ＣＲＣ）を５−１６０ｍｇの用量レベルで、それぞれ治療した（データカットオフ、２０１７年３月３日）。加えて、バイオマーカー分析及びＰＫアッセイを実施した。
【０１４６】
結果：用量≧６０ｍｇにおいて（評価可能なＣＲＣ患者はＳ１において３１；Ｓ２において１４であった）、ＣＴスキャンにより、初回用量の４８時間以内に腫瘍炎症の兆候（病変拡大及び病変周囲の浮腫）が明らかになり、これは作用のＣＥＡ−ＴＣＢモードと一致していた。Ｓ１の二名（６％）のＣＲＣ患者（共にマイクロサテライト安定［ＭＳＳ］）及びＳ２の３名（２１．５％）（２名はＭＳＳ  ＣＲＣ、１名はＭＳＩ高）は、確認された部分寛解を有していた（ＰＲ；ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１）。加えて、−１０％から−３０％の腫瘍の縮小（安定な疾患）がＭＳＳ  ＣＲＣ患者（Ｓ１の４名［１３％］及びＳ２の４名［２９％］）に見られた。４−６週目に、Ｓ１の９名（２９％）とＳ２の７名（５０％）のＣＲＣ患者が代謝性ＰＲを有していた（ＦＤＧ  ＰＥＴ；ＥＯＲＴＣ基準）。Ｓ１では、すべての用量において、最も多い関連有害事象（ＡＥ）は発熱（５８％）、点滴関連反応（ＩＲＲ；５５％）及び下痢（４０％）であった。Ｓ１では（≧４０ｍｇであった５９名の患者のうち）、最も多いグレード≧３（Ｇ３）関連ＡＥはＩＲＲ（２４％）及び下痢（７％）であった。五名の患者に用量制限毒性（ＤＬＴ）が見られ、それらは：Ｇ３の呼吸困難、Ｇ３の下痢、Ｇ３の低酸素症、Ｇ４の大腸炎及びＧ５の呼吸不全（６００ｍｇにおいてＧ４及びＧ５［ＭＴＤ（最大耐量）超］）であった。ＤＬＴ事象は、関連器官における腫瘍病変及び病変周囲の浮腫の拡大と相関していた、即ち低酸素症／呼吸困難は肺の病変に、大腸炎／下痢は結腸又は腹膜の病変に、急性呼吸不全は病理学的気管傍リンパ節の拡大によって誘発される気管閉塞に相関していたため、研究者が（研究者毎に）腫瘍病変の炎症と関連付けた可能性が高い。Ｓ２では、新規の毒性の証拠は存在せず、１６０ｍｇで２例のＤＬＴ（肝転移を有する患者におけるＧ３のＡＬＴ増大が１例、及びＧ３の斑点状丘疹が１例）が見られたのみであった。関連ＡＥは主に用量１及び２の後で起こった。
【０１４７】
上記ＡＥは腫瘍病変の炎症に関連している可能性が高かったため、腫瘍炎症関連の有害作用を緩和又は防止するために、始めの３日又は始めの７日の間にＣＥＡ−ＴＣＢの初回投与後、ＣＥＡ−ＴＣＢの用量と、腫瘍病変の数、サイズ、及び位置とに応じて、患者を単回日用量のステロイド（４０ｍｇのプレドニゾン又は４０ｍｇのメチルプレドニゾロン、経口又はｉ．ｖ．）で治療した。ステロイドを用いるこの予防法はこれまで、ＭＴＤ又はそれよりも低い用量において大部分の患者の腫瘍炎症に関連する高グレードの安全性事象（≧グレード３）を防止するために有用であった。上述の予防法で治療された患者に、確認された部分寛解（ＲＥＣＩＳＴ基準により規定されるＰＲ）及び疾患安定化（ＳＤ）が観察されたことから、予備データは、メチルプレドニゾロン又はプレドニゾンのこれら予防的用量がＣＥＡ−ＴＣＢの単剤療法の抗腫瘍活性もアテゾリズマブとの組み合わせでの抗腫瘍活性も損なわなかったことを示唆するものである。
【０１４８】
データは、ＡＤＡ陰性にほぼ直線状のＰＫを示唆する；ＡＤＡはＣＥＡ−ＴＣＢ薬物クリアランスを増大させ、曝露を低減する又は無くすことができる。Ｓ１において、≧６０ｍｇの用量では、ＯＴ生検により、用量依存性なしで、ベースラインと比較した場合にＫｉ６７＋  Ｔ細胞に有意な増加（Ｐ＝０．０３５、３．６倍）が実証された（Ｓ２については分析続行中）。多くの患者において、初回投与の後でＩＬ−６に増加がみられた。
【０１４９】
結論：進行性ＣＲＣにおける抗腫瘍活性の証拠が、ＣＥＡ−ＴＣＢ単剤療法を用いる用量漸増の間に観察された。増強された活性及び管理可能な安全性プロファイルがアテゾリズマブとの組み合わせに見られた。作用機序に沿った治療中の腫瘍内ＣＤ８Ｔ細胞増加は、ＣＥＡ−ＴＣＢが固形腫瘍の兆候において一貫した生物学的活性を示す最初の腫瘍標的化Ｔ細胞二重特異性であるという事実をサポートする。
【０１５０】
腫瘍炎症関連の有害作用は、ここに記載されるグルココルチコイドの投与により有効に管理されうる。
【０１５１】
上記発明は、理解を明瞭にする目的で説明及び例示としてある程度詳細に記載されたが、それら記載及び例示は本発明の範囲を限定するものではない。ここに引用したすべての特許文献及び科学文献の開示内容は、参照によりその全体が明示的に包含されている。
【配列表】
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【国際調査報告】
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