【手続補正書】
【提出日】平成30年6月15日(2018.6.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ブタ重鎖遺伝子の一方の対立遺伝子における連結領域が不活化される、トランスジェニックブタ動物。
【請求項２】
ブタκ軽鎖遺伝子の一方の対立遺伝子における定常領域が不活化される、トランスジェニックブタ動物。
【請求項３】
ブタ重鎖遺伝子の両方の対立遺伝子における連結領域が不活化される、請求項１に記載のトランスジェニックブタ動物。
【請求項４】
ブタκ軽鎖遺伝子の両方の対立遺伝子における定常領域が不活化される、請求項２に記載のトランスジェニックブタ動物。
【請求項５】
前記不活化が、遺伝子ターゲッティング事象によって行われる、請求項１〜４のいずれか一項に記載のトランスジェニックブタ動物。
【請求項６】
ブタ重鎖遺伝子の一方の対立遺伝子における連結領域が不活化され、かつ、ブタκ軽鎖遺伝子の一方の対立遺伝子における定常領域が不活化される、トランスジェニックブタ動物。
【請求項７】
前記ブタが核移植によって生成される、請求項１〜６のいずれか一項に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項８】
前記ブタが、外因性免疫グロブリンを発現する、請求項１〜６のいずれか一項に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項９】
前記外因性免疫グロブリンが、重鎖免疫グロブリンまたはそのフラグメントである、請求項８に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項１０】
前記外因性免疫グロブリンが、軽鎖免疫グロブリンまたはそのフラグメントである、請求項８に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項１１】
λ軽鎖の一方の対立遺伝子におけるＪ／Ｃクラスター領域が不活化される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項１２】
λ軽鎖の両方の対立遺伝子におけるＪ／Ｃクラスター領域が不活化される、請求項１１に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項１３】
前記外因性免疫グロブリンがヒト免疫グロブリンまたはそのフラグメントである、請求項８に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項１４】
前記ブタが人工染色体を含み、前記人工染色体が異種免疫グロブリン遺伝子座を含む、請求項８に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項１５】
前記人工染色体が哺乳動物人工染色体を含む、請求項１４に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項１６】
前記哺乳動物人工染色体が、少なくとも重鎖遺伝子座を含むヒト第１４染色体の部分、少なくともκ軽鎖遺伝子座を含むヒト第２染色体の部分、少なくともλ軽鎖遺伝子座を含むヒト第２２染色体の部分、またはこれらの組み合わせを含む、請求項１５に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項１７】
前記ブタが、異種免疫グロブリンまたはそのフラグメントを発現し、前記異種免疫グロブリンが、内因性ブタ染色体内に組み込まれた異種免疫グロブリン遺伝子座から発現される、請求項１〜６のいずれか一項に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項１８】
前記異種免疫グロブリンがヒト免疫グロブリンまたはそのフラグメントである、請求項１７に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項１９】
前記異種免疫グロブリン遺伝子座が子孫に遺伝する、請求項１７に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項２０】
前記異種免疫グロブリン遺伝子座が、雄生殖系列を介して子孫に遺伝する、請求項１７に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項２１】
前記ブタが核移植によって生成される、請求項１７に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項２２】
前記免疫グロブリン遺伝子座が、Ｂ細胞中で発現され、１つ以上の抗原への曝露に応答して異種免疫グロブリンを生成する、請求項１７に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項２３】
前記ブタが人工染色体を含み、前記人工染色体が前記異種免疫グロブリン遺伝子座を含む、請求項１７に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項２４】
前記人工染色体が哺乳動物人工染色体を含む、請求項２３に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項２５】
前記人工染色体が酵母人工染色体を含む、請求項２３に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項２６】
前記人工染色体が、少なくとも重鎖遺伝子座を含むヒト第１４染色体の部分、少なくともκ軽鎖遺伝子座を含むヒト第２染色体の部分、少なくともλ軽鎖遺伝子座を含むヒト第２２染色体の部分、または、これらの組み合わせを含む、請求項２３に記載のトランスジェニックブタ。
【請求項２７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のトランスジェニックブタに由来する、トランスジェニックブタの細胞、組織または器官。
【請求項２８】
請求項１７に記載のトランスジェニックブタに由来する、トランスジェニックブタの細胞、組織または器官。
【請求項２９】
前記細胞が、体細胞、生殖細胞または胚細胞である、請求項２７または２８に記載の細胞。
【請求項３０】
前記細胞がＢ細胞である、請求項２９に記載の細胞。
【請求項３１】
前記細胞が線維芽細胞である、請求項２９に記載の細胞。
【請求項３２】
前記人工染色体が、再配列を受ける１つ以上の異種免疫グロブリン遺伝子座を含み、かつ前記人工染色体は、１つ以上の抗原への曝露に応答して異種免疫グロブリンを生成し得る、請求項１４に記載のブタ。
【請求項３３】
前記細胞が、体細胞、Ｂ細胞または線維芽細胞である、請求項２８に記載のブタの細胞、組織または器官。
【請求項３４】
前記異種免疫グロブリン遺伝子座がヒト免疫グロブリン遺伝子座である、請求項１４に記載のブタ。
【請求項３５】
１つ以上の人工染色体が哺乳動物人工染色体を含む、請求項１４に記載のブタ。
【請求項３６】
前記哺乳動物人工染色体が、少なくとも重鎖遺伝子座を含むヒト第１４染色体の部分、少なくともκ軽鎖遺伝子座を含むヒト第２染色体の部分、少なくともλ軽鎖遺伝子座を含むヒト第２２染色体の部分、または、これらの組み合わせを含む、請求項３５に記載のブタ。
【請求項３７】
異種抗体を生成する方法であって、前記方法は、
（ａ）１つ以上の目的の抗原を、その細胞が１つ以上の人工染色体を含むブタに投与する工程であって、ブタの重鎖、κ軽鎖およびλ軽鎖遺伝子の両方の対立遺伝子が遺伝子ターゲッティング事象によって不活化され、前記重鎖における連結領域が不活化され、前記κ軽鎖における定常領域が不活化され、かつ、前記λ軽鎖におけるＪ／Ｃクラスター領域が不活化され、各人工染色体が、再配列を受ける１つ以上の異種免疫グロブリン遺伝子座を含み、前記１つ以上の抗原に対する異種抗体の生成をもたらす、工程と；
（ｂ）前記ブタから前記異種抗体を回収する工程と
を含む、方法。
【請求項３８】
前記免疫グロブリン遺伝子座が、Ｂ細胞において再配列を受ける、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記異種抗体が、重鎖免疫グロブリンまたはそのフラグメントを含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記異種抗体が、軽鎖免疫グロブリンまたはそのフラグメントを含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４１】
前記異種免疫グロブリン遺伝子座がヒト免疫グロブリン遺伝子座またはそのフラグメントである、請求項３７に記載の方法。
【請求項４２】
前記人工染色体が前記異種免疫グロブリン遺伝子座を含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４３】
前記人工染色体が哺乳動物人工染色体を含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記哺乳動物人工染色体が、少なくとも重鎖遺伝子座を含むヒト第１４染色体の部分、少なくともκ軽鎖遺伝子座を含むヒト第２染色体の部分、少なくともλ軽鎖遺伝子座を含むヒト第２２染色体の部分、または、これらの組み合わせを含む、請求項４３に記載の方法。