(57)【要約】  本発明は、がんを処置するための組成物および方法を提供し、方法は、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−軸結合アンタゴニストとを投与することを含む。【選択図】図１Ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための方法であって、個体へと、有効量のインターロイキン−２（ＩＬ−２）イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとを投与することを含む方法。
【請求項２】
がんを有する個体における免疫機能を増強する方法であって、有効量のインターロイキン−２（ＩＬ−２）イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとを投与することを含む方法。
【請求項３】
個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための医薬の製造における、ＩＬ−２イムノコンジュゲートの使用であって、医薬が、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、任意選択の薬学的に許容される担体とを含み、処置が、医薬を、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせ、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物とさらに組み合わせて、投与することを含む、使用。
【請求項４】
個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための医薬の製造における、ＣＤ４０アゴニストの使用であって、医薬が、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択の薬学的に許容される担体とを含み、処置が、医薬を、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせ、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物とさらに組み合わせて、投与することを含む、使用。
【請求項５】
個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための医薬の製造における、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストの使用であって、医薬が、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと、任意選択の薬学的に許容される担体とを含み、処置が、医薬を、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせ、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物とさらに組み合わせて、投与することを含む、使用。
【請求項６】
個体におけるがんの処置またはがんの進行の遅延における使用のための、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物であって、処置が、前記組成物を、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第２の組成物と組み合わせ、任意選択で、ＰＤ−１軸アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第３の組成物とさらに組み合わせて、投与することを含む、組成物。
【請求項７】
個体におけるがんの処置またはがんの進行の遅延における使用のための、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物であって、処置が、前記組成物を、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第２の組成物と組み合わせ、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第３の組成物とさらに組み合わせて、投与することを含む、組成物。
【請求項８】
個体におけるがんの処置またはがんの進行の遅延における使用のための、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと、任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物であって、処置が、前記組成物を、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第２の組成物と組み合わせ、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第３の組成物とさらに組み合わせて、投与することを含む、組成物。
【請求項９】
ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第１の医薬と、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第２の医薬とを含み、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第３の医薬とを含むキット。
【請求項１０】
個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための、第１の医薬と、第２の医薬と、任意選択で第３の医薬とを、投与するための指示書を含む添付文書をさらに含む、請求項９に記載のキット。
【請求項１１】
ＩＬ−２イムノコンジュゲートが、腫瘍抗原に特異的に結合する抗体、およびＩＬ−２ポリペプチドを含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項１２】
ＩＬ−２イムノコンジュゲートが、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）に特異的に結合する抗体を含む、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項１３】
抗体が、配列番号３８の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号３９のＨＣＤＲ２、および配列番号４０のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに／または配列番号４１の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号４２のＬＣＤＲ２、および配列番号４３のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１２に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項１４】
抗体が、配列番号３４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１２または１３に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項１５】
ＩＬ−２イムノコンジュゲートが、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）に特異的に結合する抗体を含む、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項１６】
抗体が、配列番号４７の重鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または配列番号４８の軽鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１５に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項１７】
抗体が、配列番号４７の配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号４８の配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１５または１６に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項１８】
抗体が、完全長抗体である、請求項１１から１７のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項１９】
抗体が、ＩｇＧクラスの抗体、特に、ＩｇＧ１サブクラスの抗体である、請求項１１から１８のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項２０】
抗体が、Ｆｃドメイン、特に、ＩｇＧ  Ｆｃドメイン、より特定すると、ＩｇＧ１  Ｆｃドメイン、最も特定すると、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインを含む、請求項１１から１９のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項２１】
Ｆｃドメインが、Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する修飾を含む、請求項２０に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項２２】
Ｆｃドメインの第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内で、アミノ酸残基を、より大きな側鎖体積を有するアミノ酸残基で置きかえ、これにより、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の空隙に配置可能である、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の突出を作出し、Ｆｃドメインの第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内で、アミノ酸残基を、よりより小さな側鎖体積を有するアミノ酸残基で置きかえ、これにより、その中に第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の突出が配置可能である、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の空隙を作出する、請求項２０または２１に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項２３】
Ｆｃドメインの第１のサブユニット内で、３６６位のスレオニン残基を、トリプトファン残基で置きかえ（Ｔ３６６Ｗ）、Ｆｃドメインの第２のサブユニット内で、４０７位のチロシン残基を、バリン残基で置きかえ（Ｙ４０７Ｖ）、任意選択で、３６６位のスレオニン残基を、セリン残基で置きかえ（Ｔ３６６Ｓ）、３６８位のロイシン残基を、アラニン残基で置きかえる（Ｌ３６８Ａ）（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）、請求項２０から２２のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項２４】
Ｆｃドメインの第１のサブユニット内で、加えて、３５４位のセリン残基を、システイン残基で置きかえ（Ｓ３５４Ｃ）、Ｆｃドメインの第２のサブユニット内で、加えて、３４９位のチロシン残基を、システイン残基により置きかえる（Ｙ３４９Ｃ）（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）、請求項２３に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項２５】
Ｆｃドメインが、Ｆｃ受容体、特に、Ｆｃγ受容体への結合、および／またはエフェクター機能、特に、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を、天然のＩｇＧ１  Ｆｃドメインと比較して低減する１または複数のアミノ酸置換を含む、請求項２０から２４のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項２６】
Ｆｃドメインが、Ｌ２３４、Ｌ２３５、およびＰ３２９（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）の群から選択される１または複数の位置における、１または複数のアミノ酸置換を含む、請求項２０から２５のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項２７】
Ｆｃドメインの各サブユニットが、アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＰ３２９Ｇ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む、請求項２０から２６のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項２８】
ＩＬ−２ポリペプチドが、ヒトＩＬ−２ポリペプチドである、請求項１１から２７のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項２９】
ＩＬ−２ポリペプチドが、アミノ酸置換Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、およびＬ７２Ｇ（ヒトＩＬ−２配列である配列番号５２と比べた番号付け）を含む、突然変異体のヒトＩＬ−２ポリペプチドである、請求項１１から２８のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項３０】
ＩＬ−２ポリペプチドが、配列番号５３の配列を含む、請求項１１から２９のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項３１】
ＣＤ４０アゴニストが、ＣＤ４０に特異的に結合する抗体である、請求項１から３０のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項３２】
抗体が、配列番号５７の重鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または配列番号５８の軽鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域を含む、請求項３１に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項３３】
抗体が、配列番号５７の配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号５８の配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項３１または３２に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項３４】
抗体が、完全長抗体である、請求項３１から３３のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項３５】
抗体が、ＩｇＧクラスの抗体、特に、ＩｇＧ２サブクラスの抗体、より特定すると、ヒトＩｇＧ２サブクラスの抗体である、請求項３１から３４のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項３６】
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、およびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される、請求項１から３５のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項３７】
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである、請求項１から３６のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項３８】
ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１および／またはＢ７−１への結合を阻害する、請求項３７に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項３９】
ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＤＸ−１１０５、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、およびＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）からなる群から選択される、請求項３７または３８に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項４０】
ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）である、請求項３７から３９のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項４１】
ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、抗体である、請求項３７または３８に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項４２】
抗体が、配列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨＶＲ−Ｈ２配列、および配列番号２１のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖；ならびに配列番号２２のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列、および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖を含む、請求項４１に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項４３】
抗体が、配列番号２５または２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項４１または４２に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項４４】
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストが、抗体であり、非グリコシル化部位の突然変異を含む、請求項１から４３のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項４５】
非グリコシル化部位の突然変異が、置換突然変異である、請求項４４に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項４６】
置換突然変異が、アミノ酸残基Ｎ２９７、Ｌ２３４、Ｌ２３５、および／またはＤ２６５（ＥＵ番号付け）にある、請求項４５に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項４７】
置換突然変異が、Ｎ２９７Ｇ、Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＤ２６５Ａからなる群から選択される、請求項４５または４６に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項４８】
置換突然変異が、Ｄ２６５Ａ突然変異およびＮ２９７Ｇ突然変異である、請求項４５から４７のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項４９】
がんが、ＣＥＡ陽性がんおよび／またはＦＡＰ陽性がんである、請求項１から４８のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項５０】
がんが、結腸がん、肺がん、卵巣がん、胃がん、膀胱がん、膵臓がん、子宮内膜がん、乳がん、腎臓がん、食道がん、または前立腺がんである、請求項１から４９のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項５１】
がんが、ＰＤ−Ｌ１を発現する、請求項１から５０のいずれか一項に記載の方法、使用、組成物、またはキット。
【請求項５２】
本明細書で以上に記載した発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとを投与することにより、がんを処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
がんは、世界中で、主な死亡原因のうちの１つである。処置選択肢の進歩にもかかわらず、進行がんを伴う患者の予後は、依然として不良である。結果として、許容不可能な毒性を引き起こさずに、がん患者の生存を延長するのに最適な治療が、持続的かつ火急に医療的に必要とされている。
【０００３】
臨床試験からの近年の結果は、免疫チェックポイント阻害剤などの免疫療法が、がん患者の全生存を延長し、持続的な応答をもたらしうることを示している。これらの有望な結果にもかかわらず、現行の免疫ベースの療法が有効なのは、一部の患者に限られ、治療利益を改善するための、組合せ戦略が必要とされている。
【０００４】
Ｔ細胞増殖因子（ＴＣＧＦ）としてもまた公知のインターロイキン２（ＩＬ−２）は、リンパ球の発生、生存、およびホメオスタシスにおいて、中心的な役割を果たす、１５．５ｋＤａの、球形の糖タンパク質である。ＩＬ−２は、Ｔ細胞の増殖および分化を刺激し、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）の発生、ならびに末梢血リンパ球の、細胞傷害性細胞およびリンホカイン活性化キラー（ＬＡＫ）細胞への分化を誘導し、Ｔ細胞によるサイトカインおよび細胞傷害性分子の発現を促進し、Ｂ細胞の増殖および分化、ならびにＢ細胞による免疫グロブリンの合成を容易とし、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の発生、増殖、および活性化を刺激する（例えば、Ｗａｌｄｍａｎｎ、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、６、５９５〜６０１（２００９）；ＯｌｅｊｎｉｃｚａｋおよびＫａｓｐｒｚａｋ、Ｍｅｄ  Ｓｃｉ  Ｍｏｎｉｔ、１４、ＲＡ１７９〜８９（２００８）；Ｍａｌｅｋ、Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、２６、４５３〜７９（２００８）において総説されている）。インビボにおいて、リンパ球集団を拡大し、これらの細胞のエフェクター機能を増大させる、ＩＬ−２の能力は、ＩＬ−２に、抗腫瘍効果を付与し、高用量のＩＬ−２処置は、転移性腎細胞癌および悪性メラノーマを伴う患者における使用について承認されている。
【０００５】
腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーのメンバーであるＣＤ４０は、Ｂリンパ球、樹状細胞（ＤＣ）、および単球を含む、抗原提示細胞（ＡＰＣ）上のその発現を介して、抗腫瘍免疫応答の、極めて重要な制御因子である（例えば、Ｇｒｅｗａｌ  ＩＳら、Ａｎｎ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、１９９８；１６：１１１〜３５；Ｖａｎ  Ｋｏｏｔｅｎ  Ｃら、Ｊ  Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ、２０００；６７：２〜１７；またはＯ’Ｓｕｌｌｉｖａｎ  Ｂら、Ｃｒｉｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３；２３（１２）：８３〜１０７を参照されたい）。ＣＤ４０により刺激されたＤＣは、抗原のプロセシングおよび提示の経路を上方制御し、リンパ節へと遊走して、ナイーブＴ細胞を活性化させる。アゴニスト性のＣＤ４０抗体は、ＣＤ４＋リンパ球の機能を代替する結果として、マウスモデルにおいて、確立されたリンパ腫を除去することが可能な、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）の拡大をもたらすことが示された（例えば、Ｓｏｔｏｍａｙｏｒ  ＥＭら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、１９９９；５（７）：７８０〜７；Ｇｌａｄｕｅ  ＲＰら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ、２０１１；６０（７）：１００９〜１７を参照されたい）。ＣＤ４０アゴニストは、宿主ＡＰＣを活性化させることにより、免疫刺激を誘発し、次いで、これが、腫瘍に対して方向付けられたＴ細胞応答を駆動する（例えば、Ｖｏｎｄｅｒｈｅｉｄｅ  ＲＨ、Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、２００７；１３：１０８３〜８を参照されたい）。
【０００６】
プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）は、免疫細胞および腫瘍細胞の表面上に見出され、その発現は、インターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）により誘導される。ＰＤ−Ｌ１は、活性化Ｔ細胞上の阻害性プログラム死１（ＰＤ−１）およびＢ７．１受容体と相互作用する結果として、Ｔ細胞阻害性シグナルもたらすことにより、免疫系が、がん細胞を破壊することを妨げる。
【０００７】
結果として、ＰＤ−１、ならびにＰＤ−１との相互作用を介してシグナル伝達する他の分子であって、プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）およびプログラム細胞死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）などの分子の治療的ターゲティングが、強い関心領域となる。ＰＤ−Ｌ１は、多くのがんにおいて過剰発現し、予後不良と関連することが多い（Ｏｋａｚａｋｉ  Ｔら、Ｉｎｔｅｒｎ．Ｉｍｍｕｎ．，２００７、１９（７）：８１３）（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ＲＨら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、２００６、６６（７）：３３８１）。興味深いことに、正常組織内のＴリンパ球および末梢血Ｔリンパ球とは対照的に、腫瘍浸潤Ｔリンパ球の大部分は、主に、ＰＤ−１を発現することから、腫瘍反応性Ｔ細胞上の、ＰＤ−１の上方制御は、抗腫瘍免疫応答の機能障害に寄与しうることが指し示される（Ｂｌｏｏｄ、２００９、１１４（８）：１５３７）。これは、ＰＤ−１を発現するＴ細胞と相互作用する、ＰＤ−Ｌ１を発現する腫瘍細胞により媒介される、ＰＤ−Ｌ１シグナル伝達の利用であって、Ｔ細胞活性化の緩和および免疫監視の回避を結果としてもたらす利用に起因しうる（Ｓｈａｒｐｅら、Ｎａｔ  Ｒｅｖ、２００２）（Ｋｅｉｒ  ＭＥら、２００８、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２６：６７７）。したがって、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１間の相互作用の阻害は、腫瘍の、ＣＤ８＋  Ｔ細胞媒介性殺滅を増強しうる。
【０００８】
ＰＤ−Ｌ１シグナル伝達の阻害が、がん、ならびに急性感染症および慢性（例えば、遷延性）感染症の両方を含む感染症の処置のためのＴ細胞免疫（例えば、腫瘍免疫）を増強する手段として提起されている。最適な治療的処置は、ＰＤ−１受容体／リガンド間相互作用の遮断を、例えば、Ｔ細胞を活性化させることにより、腫瘍免疫を増強する、１または複数の薬剤と混合しうる。
【０００９】
上記で言及した通り、ある特定の免疫療法が利用可能であるにもかかわらず、患者における多様ながんを処置し、安定化させ、防止し、かつ／またはこれらの発生を遅延させるための最適な（組合せ）療法が、依然として必要とされている。
【発明の概要】
【００１０】
一態様では、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための方法であって、個体へと、有効量のインターロイキン２（ＩＬ−２）イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとを投与することを含む方法が本明細書で提供される。
【００１１】
別の態様では、がんを有する個体における免疫機能を増強する方法であって、有効量のインターロイキン２（ＩＬ−２）イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとを投与することを含む方法が本明細書で提供される。
【００１２】
別の態様では、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための医薬の製造における、ＩＬ−２イムノコンジュゲートの使用であって、医薬が、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、任意選択の薬学的に許容される担体とを含み、処置が、医薬を、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせ、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物とさらに組み合わせて、投与することを含む、使用が本明細書で提供される。
【００１３】
別の態様では、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための医薬の製造における、ＣＤ４０アゴニストの使用であって、医薬が、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択の薬学的に許容される担体とを含み、処置が、医薬を、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせ、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物とさらに組み合わせた医薬の投与を含む使用が本明細書で提供される。
【００１４】
別の態様では、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための医薬の製造における、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストの使用であって、医薬が、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含み、処置が、医薬を、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせ、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物とさらに組み合わせて投与することを含む使用が本明細書で提供される。
【００１５】
別の態様では、個体におけるがんの処置またはがんの進行の遅延における使用のための、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物であって、処置が、前記組成物を、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第２の組成物と組み合わせ、任意選択で、ＰＤ−１軸アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第３の組成物とさらに組み合わせて投与することを含む、組成物が本明細書で提供される。
【００１６】
別の態様では、個体におけるがんの処置またはがんの進行の遅延における使用のための、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物であって、処置が、前記組成物を、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第２の組成物と組み合わせ、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第３の組成物とさらに組み合わせて投与することを含む、組成物が本明細書で提供される。
【００１７】
別の態様では、個体におけるがんの処置またはがんの進行の遅延における使用のための、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物であって、処置が、前記組成物を、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第２の組成物と組み合わせ、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第３の組成物とさらに組み合わせて投与することを含む、組成物が本明細書で提供される。
【００１８】
別の態様では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む医薬と、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせて医薬を投与するための指示書を含む添付文書とを含むキットが本明細書で提供される。
【００１９】
別の態様では、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む医薬と、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせて医薬を投与するための指示書を含む添付文書とを含むキットが本明細書で提供される。
【００２０】
別の態様では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第１の医薬と、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第２の医薬とを含むキットが本明細書で提供される。一部の実施形態では、キットは、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための、第１の医薬および第２の医薬を投与するための指示書を含む添付文書をさらに含む。
【００２１】
別の態様では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む医薬と、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせ、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物とさらに組み合わせて医薬を投与するための指示書を含む添付文書とを含むキットが本明細書で提供される。
【００２２】
別の態様では、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む医薬と、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせ、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物とさらに組み合わせて医薬を投与するための指示書を含む添付文書とを含むキットが本明細書で提供される。
【００２３】
別の態様では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第１の医薬と、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第２の医薬と、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む第３の医薬とを含むキットが本明細書で提供される。一部の実施形態では、キットは、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための、第１の医薬および第２の医薬および第３の医薬を投与するための指示書を含む添付文書をさらに含む。
【００２４】
別の態様では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む医薬と、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物と組み合わせ、ＣＤ４０アゴニストと任意選択の薬学的に許容される担体とを含む組成物とさらに組み合わせて医薬を投与するための指示書を含む添付文書とを含むキットが本明細書で提供される。
【００２５】
上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ヒトＰＤ−１軸結合アンタゴニストである。一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、およびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される。一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、抗体である。一部の実施形態では、抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体、またはヒト抗体である。一部の実施形態では、抗体は、抗原結合断片である。一部の実施形態では、抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖからなる群から選択される。
【００２６】
一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニストである。一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、そのリガンドである結合パートナーへの結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ１への結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ２への結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２の両方への結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗体である。一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＭＤＸ  １１０６（ニボルマブ）、ＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ）、ＣＴ−０１１（ピジリズマブ）、ＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、およびＢＧＢ−１０８からなる群から選択される。
【００２７】
一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１への結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、Ｂ７−１への結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１およびＢ７−１の両方への結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＤＸ−１１０５、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、およびＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）からなる群から選択される。特定の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）である。一部の実施形態では、ＭＰＤＬ３２８０Ａを、３週間ごとに、約８００ｍｇ〜約１５００ｍｇ（例えば、３週間ごとに、約１０００ｍｇ〜約１３００ｍｇ、例えば、３週間ごとに、約１１００ｍｇ〜約１２００ｍｇ）の用量で投与する。一部の実施形態では、ＭＰＤＬ３２８０Ａを、３週間ごとに、約１２００ｍｇの用量で投与する。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨＶＲ−Ｈ２配列、および配列番号２１のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖；および／または配列番号２２のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列、および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５または２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に参照により援用される、ＷＯ２０１０／０７７６３４および米国特許第８，２１７，１４９号において記載されている抗体であるＹＷ２４３．５５．Ｓ７０の、３つの重鎖ＨＶＲ配列、および／または抗体であるＹＷ２４３５５．Ｓ７０の、３つの軽鎖ＨＶＲ配列を含む。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、抗体であるＹＷ２４３．５５．Ｓ７０の重鎖可変領域配列、および／または抗体であるＹＷ２４３５５．Ｓ７０の軽鎖可変領域配列を含む。
【００２８】
一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストである。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、抗体である。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、イムノアドヘシンである。
【００２９】
一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、抗体（例えば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または抗ＰＤ−Ｌ２抗体）であり、非グリコシル化部位の突然変異を含む。一部の実施形態では、非グリコシル化部位の突然変異は、置換突然変異である。一部の実施形態では、置換突然変異は、アミノ酸残基Ｎ２９７、Ｌ２３４、Ｌ２３５、および／またはＤ２６５（ＥＵ番号付け）にある。一部の実施形態では、置換突然変異は、Ｎ２９７Ｇ、Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＤ２６５Ａからなる群から選択される。一部の実施形態では、置換突然変異は、Ｄ２６５Ａ突然変異およびＮ２９７Ｇ突然変異である。一部の実施形態では、非グリコシル化部位の突然変異は、抗体のエフェクター機能を低減する。一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または抗ＰＤ−Ｌ２抗体）は、ＥＵ番号付けに従う２９７位における、ＡｓｎからＡｌａへの置換を有するヒトＩｇＧ１である。
【００３０】
上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、腫瘍抗原に特異的に結合する抗体、およびＩＬ−２ポリペプチドを含む。
【００３１】
一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）に特異的に結合する抗体を含む。一部の実施形態では、ＣＥＡに特異的に結合する抗体は、配列番号３８の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号３９のＨＣＤＲ２、および配列番号４０のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに／または配列番号４１の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号４２のＬＣＤＲ２、および配列番号４３のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、ＣＥＡに特異的に結合する抗体は、配列番号３４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）に特異的に結合する抗体を含む。一部の実施形態では、ＦＡＰに特異的に結合する抗体は、配列番号４７の重鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または配列番号４８の軽鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号４７の重鎖可変領域配列に由来する、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、および／または配列番号４８の軽鎖可変領域配列に由来する、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号４７の配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号４８の配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【００３２】
一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲート内に含まれる抗体は、完全長抗体である。一部の実施形態では、抗体は、ＩｇＧクラスの抗体、特に、ＩｇＧ１サブクラスの抗体である。一部の実施形態では、抗体は、Ｆｃドメイン、特に、ＩｇＧ  Ｆｃドメイン、より特定すると、ＩｇＧ１  Ｆｃドメインを含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインは、ヒトＦｃドメインである。特定の実施形態では、Ｆｃドメインは、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインである。
【００３３】
一部の実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する修飾を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内で、アミノ酸残基を、より大きな側鎖体積を有するアミノ酸残基で置きかえ、これにより、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の空隙に配置可能である、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の突出を作出し、Ｆｃドメインの第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内で、アミノ酸残基を、より小さな側鎖体積を有するアミノ酸残基で置きかえ、これにより、その中に第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の突出が配置可能である、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の空隙を作出する。一部の実施形態では、Ｆｃドメインの第１のサブユニット内で、３６６位のスレオニン残基を、トリプトファン残基で置きかえ（Ｔ３６６Ｗ）、Ｆｃドメインの第２のサブユニット内で、４０７位のチロシン残基を、バリン残基で置きかえ（Ｙ４０７Ｖ）、任意選択で、３６６位のスレオニン残基を、セリン残基で置きかえ（Ｔ３６６Ｓ）、３６８位のロイシン残基を、アラニン残基で置きかえる（Ｌ３６８Ａ）（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）。一部の実施形態では、Ｆｃドメインの第１のサブユニット内で、加えて、３５４位のセリン残基を、システイン残基で置きかえ（Ｓ３５４Ｃ）、Ｆｃドメインの第２のサブユニット内で、加えて、３４９位チロシン残基を、システイン残基により置きかえる（Ｙ３４９Ｃ）（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）。
【００３４】
一部の実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｆｃ受容体、特に、Ｆｃγ受容体への結合、および／またはエフェクター機能、特に、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を、天然のＩｇＧ１  Ｆｃドメインと比較して低減する１または複数のアミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｌ２３４、Ｌ２３５、およびＰ３２９（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）の群から選択される１または複数の位置における、１または複数のアミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインの各サブユニットは、アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＰ３２９Ｇ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。
【００３５】
一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲート内に含まれるＩＬ−２ポリペプチドは、ヒトＩＬ−２ポリペプチドである。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドは、アミノ酸置換Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、およびＬ７２Ｇ（ヒトＩＬ−２配列である配列番号５２と比べた番号付け）を含む、突然変異体のヒトＩＬ−２ポリペプチドである。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドは、配列番号５３の配列を含む。
【００３６】
一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、単一の（すなわち、１つ以下の）ＩＬ−２ポリペプチドを含む。
【００３７】
一実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、配列番号４４の配列と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配列を含むポリペプチド、配列番号４５の配列と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配列を含むポリペプチド、および配列番号４６の配列と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配列を含むポリペプチドを含む。一実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、配列番号４４の配列を含むポリペプチド、配列番号４５の配列を含むポリペプチド、および配列番号４６の配列を含むポリペプチドを含む（ＣＥＡ−ＩＬ２ｖ）。
【００３８】
一実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、配列番号４９の配列と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配列を含むポリペプチド、配列番号５０の配列と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配列を含むポリペプチド、および配列番号５１の配列と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配列を含むポリペプチドを含む。一実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、配列番号４９の配列を含むポリペプチド、配列番号５０の配列を含むポリペプチド、および配列番号５１の配列を含むポリペプチドを含む（ＦＡＰ−ＩＬ２ｖ）。
【００３９】
一実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、セルグツズマブアムナロイキンを含む。
【００４０】
上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストは、ＣＤ４０に特異的に結合する抗体である。一部の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストは、ヒトＣＤ４０に特異的に結合し、これを活性化させる抗体である。一部の実施形態では、抗体は、配列番号５７の重鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または配列番号５８の軽鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号５７の重鎖可変領域配列に由来する、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、および／または配列番号５８の軽鎖可変領域配列に由来する、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号５７の配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号５８の配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【００４１】
一部の実施形態では、ＣＤ４０に特異的に結合する抗体は、完全長抗体である。一部の実施形態では、抗体は、ＩｇＧクラスの抗体、特に、ＩｇＧ２サブクラスの抗体、より特定すると、ヒトＩｇＧ２サブクラスの抗体である。
【００４２】
一実施形態では、抗体は、配列番号５９の配列と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配列を含む重鎖ポリペプチド、および配列番号６０の配列と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む。一実施形態では、抗体は、配列番号５９の配列を含む重鎖ポリペプチド、および配列番号６０の配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む。
【００４３】
上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、がんは、ＦＡＰ陽性がんである。一部の実施形態では、がんは、ＣＥＡ陽性がんである。一部の実施形態では、がんは、結腸がん、肺がん、卵巣がん、胃がん、膀胱がん、膵臓がん、子宮内膜がん、乳がん、腎臓がん、食道がん、前立腺がん、または本明細書で記載される他のがんである。一部の実施形態では、個体は、がんを有するか、または、がんを伴うと診断されている。一部の実施形態では、個体は、局所進行性がんもしくは転移性がんを有するか、または、局所進行性がんもしくは転移性がんを伴うと診断されている。一部の実施形態では、個体におけるがん細胞は、ＰＤ−Ｌ１を発現する。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１の発現は、免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイにより決定することができる。
【００４４】
上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、処置、またはＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとの投与は、個体における応答を結果としてもたらしうる。一部の実施形態では、応答は、完全寛解である。一部の実施形態では、応答は、処置の中止の後における持続的応答である。一部の実施形態では、応答は、処置の中止の後において持続的である完全寛解である。他の実施形態では、応答は、部分寛解である。一部の実施形態では、応答は、処置の中止の後において持続的である部分寛解である。
【００４５】
上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートを、ＣＤ４０アゴニストの前に、ＣＤ４０アゴニストと同時に、またはＣＤ４０アゴニストの後で投与する。ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＩＬ−２イムノコンジュゲートおよびＣＤ４０アゴニストの前に、これらの間に、これらの後で、またはこれらと同時に投与することができる。
【００４６】
一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、同じ組成物内にある。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、別個の組成物内にある。
【００４７】
上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲート、ＣＤ４０アゴニスト、および／またはＰＤ−１軸結合アンタゴニストを、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、局所投与、経口投与、経皮投与、腹腔内投与、眼内投与、植込みによる投与、吸入による投与、髄腔内投与、脳室内投与、または鼻腔内投与する。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲート、ＣＤ４０アゴニスト、および／またはＰＤ−１軸結合アンタゴニストを、静脈内投与する。上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、処置は、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるために、化学療法剤を投与することをさらに含む。一部の実施形態では、個体は、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとの併用治療の前に、化学療法剤で処置されている。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとの組合せで処置される個体は、化学療法剤による処置に対して、不応性である。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとの組合せで処置される個体は、化学療法剤による処置に対して、非忍容性である。本出願を通して記載される、方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態は、がんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるために、化学療法剤を投与することをさらに含む。
【００４８】
上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、個体におけるＣＤ８  Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖および／または細胞溶解活性が、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとの組合せの投与の前と比べて増強される。一部の実施形態では、ＣＤ８  Ｔ細胞の数が、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとの組合せの投与の前と比べて増大する。一部の実施形態では、ＣＤ８  Ｔ細胞は、抗原特異的ＣＤ８  Ｔ細胞である。一部の実施形態では、Ｔｒｅｇ機能が、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとの組合せの投与の前と比べて抑制される。一部の実施形態では、Ｔ細胞枯渇が、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとの組合せの投与の前と比べて減殺される。
【００４９】
本明細書で記載される、多様な実施形態の特性のうちの１つ、一部、または全てを混合して、本発明の他の実施形態を形成しうることを理解されたい。本発明の、これらの態様および他の態様は、当業者に明らかとなるであろう。本発明の、これらの実施形態および他の実施形態について、後続の「発明を実施するための形態」により、さらに記載する。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
【図１Ａ】単剤としてのＦＡＰ−ＩＬ２ｖ、ＣＤ４０  Ｍａｂ、およびＰＤ−Ｌ１  Ｍａｂ、ならびに組合せ状況におけるこれらについての有効性実験の結果を示す図である。Ｐａｎｃ０２−Ｈ７−Ｆｌｕｃトランスフェクタント膵臓癌細胞株を、Ｂｌａｃｋ  ６マウスの膵臓へと注射して、膵臓同所性同系モデルにおける生存について研究した。化合物は、以下の用量：２ｍｇ／ｋｇのＦＡＰ−ＩＬ２ｖ、１０ｍｇ／ｋｇのＣＤ４０  Ｍａｂ、および１０ｍｇ／ｋｇのＰＤ−Ｌ１  Ｍａｂで投与した。化合物は、毎週１回、３週間にわたり、共時的に、ｉｐ注射した。生存曲線を示す図である。
【図１Ｂ】単剤としてのＦＡＰ−ＩＬ２ｖ、ＣＤ４０  Ｍａｂ、およびＰＤ−Ｌ１  Ｍａｂ、ならびに組合せ状況におけるこれらについての有効性実験の結果を示す図である。Ｐａｎｃ０２−Ｈ７−Ｆｌｕｃトランスフェクタント膵臓癌細胞株を、Ｂｌａｃｋ  ６マウスの膵臓へと注射して、膵臓同所性同系モデルにおける生存について研究した。化合物は、以下の用量：２ｍｇ／ｋｇのＦＡＰ−ＩＬ２ｖ、１０ｍｇ／ｋｇのＣＤ４０  Ｍａｂ、および１０ｍｇ／ｋｇのＰＤ−Ｌ１  Ｍａｂで投与した。化合物は、毎週１回、３週間にわたり、共時的に、ｉｐ注射した。中央値生存率および全生存率の値を示す図である。
【図２】図１に示されたマウスについての生物発光イメージングを示す図である。生物発光シグナル（１秒当たりの光子）の減殺は、腫瘍の阻害を表す。
【発明を実施するための形態】
【００５１】
本出願の発明者らは、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、抗ＰＤ−Ｌ１免疫療法とが、それらの抗がん特性において、相乗的に作用し、それらの組合せが、がんを伴う患者において、有意義な臨床利益を提供しうることを裏付けた。本出願におけるデータは、ＩＬ−２イムノコンジュゲートの、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、さらに、抗ＰＤ−Ｌ１免疫療法との組合せが、中央値生存および全生存の増強のほか、腫瘍増殖の阻害を結果としてもたらしたことを示す。
【００５２】
一態様では、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための方法、組成物、および使用であって、有効量のＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとを投与することを含む方法、組成物、および使用が本明細書で提供される。
【００５３】
別の態様では、がんを有する個体における免疫機能を増強するための方法、組成物、および使用であって、有効量のＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとを投与することを含む方法、組成物、および使用が本明細書で提供される。
【００５４】
Ｉ．定義
本発明について、詳細に記載する前に、本発明が、それらは、当然ながら、変動しうるので、特定の組成物系または生物学的系に限定されないことを理解されたい。また、本明細書で使用される用語法は、特定の実施形態だけについて記載することを目的とするものであり、限定を意図するものではないことも理解されたい。
【００５５】
内容により、別途の指示がない限り、本明細書および付属の特許請求の範囲において使用される、単数形の「ある（ａ）」、「ある（ａｎ）」、および「その」とは、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「ある分子」への言及は、任意選択で、２つまたはこれを超える、このような分子の組合せなどを含む。
【００５６】
抗原結合ドメインなどに関して、本明細書で使用される「第１」、「第２」、「第３の」などの用語は、１つを超える、各種のドメインが存在する場合の、識別の便宜のために使用される。別途明示的な指定のない限り、これらの用語の使用は、具体的な順序または方向を付与することを意図するものではない。
【００５７】
本明細書で使用される「約」という用語は、当業者にたやすく知られる、それぞれの値についての、通例の誤差範囲を指す。本明細書では、「約」つきの値またはパラメータは、この値またはパラメータ自体を対象とする実施形態を含む（そして、これについて記載する）。
【００５８】
本明細書で記載される、本発明の態様および実施形態は、態様および実施形態「を含むこと」、「これらからなること」、および「これらから本質的になること」を含むことが理解される。
【００５９】
「ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト」という用語は、ＰＤ−１シグナル伝達軸におけるシグナル伝達から生じるＴ細胞の機能不全を除去する（結果は、Ｔ細胞の機能（例えば、増殖、サイトカインの産生、標的細胞の殺滅）を回復または増強することである）ように、ＰＤ−１軸結合パートナーの、その結合パートナーのうちの１または複数との相互作用を阻害する分子を指す。本明細書で使用される、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、およびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストを含む。「ヒト」ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、ヒトＰＤ−１シグナル伝達軸に対して、上記で記載した効果を及ぼす、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストを指す。
【００６０】
「ＰＤ−１結合アンタゴニスト」という用語は、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２など、その結合パートナーのうちの１または複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減殺、遮断、阻害するか、これを失効化させるか、またはこれに干渉する分子を指す。一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、その結合パートナーのうちの１または複数への結合を阻害する分子である。具体的な態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２への結合を阻害する。例えば、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２との相互作用から生じるシグナル伝達を減殺、遮断、阻害するか、これを失効化させるか、またはこれに干渉する、抗ＰＤ−１抗体、これらの抗原結合断片、イムノアデシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、および他の分子を含む。一実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、機能不全性のＴ細胞の機能不全性を軽減する（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）ように、ＰＤ−１を介してシグナル伝達する、Ｔリンパ球において発現する細胞表面タンパク質によりまたはこれを介して媒介される負の共刺激シグナルを低減する。一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体である。具体的な態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書で記載されるＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ）である。別の具体的な態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書で記載されるＭＫ−３４７５（ペムブロリズマブ）である。別の具体的な態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書で記載されるＣＴ−０１１（ピジリズマブ）である。別の具体的な態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書で記載されるＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）である。別の具体的な態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書で記載されるＰＤＲ００１である。別の具体的な態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書で記載されるＲＥＧＮ２８１０である。別の具体的な態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書で記載されるＢＧＢ−１０８である。
【００６１】
「ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト」という用語は、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１、Ｂ７−１など、その結合パートナーのうちの１または複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減殺、遮断、阻害するか、これを失効化させるか、またはこれに干渉する分子を指す。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、その結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１および／またはＢ７−１への結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１、Ｂ７−１など、その結合パートナーのうちの１または複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減殺、遮断、阻害するか、これを失効化させるか、またはこれに干渉する、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、これらの抗原結合断片、イムノアデシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、および他の分子を含む。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、機能不全性のＴ細胞の機能不全性を軽減する（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）ように、ＰＤ−Ｌ１を介してシグナル伝達する、Ｔリンパ球において発現する細胞表面タンパク質によりまたはこれを介して媒介される負の共刺激シグナルを低減する。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。具体的な態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書で記載されるＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。別の具体的な態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書で記載されるＭＤＸ−１１０５である。さらに別の具体的な態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書で記載されるＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）である。さらに別の具体的な態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書で記載されるＭＤＸ−１１０５である。さらに具体的な態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書で記載されるＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。さらに具体的な態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書で記載されるＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）である。さらに別の具体的な態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書で記載されるＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）である。
【００６２】
「ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニスト」という用語は、ＰＤ−Ｌ２の、ＰＤ−１など、その結合パートナーのうちの１または複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減殺、遮断、阻害するか、これを失効化させるか、またはこれに干渉する分子を指す。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２の、その結合パートナーのうちの１または複数への結合を阻害する分子である。具体的な態様では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２の、ＰＤ−１への結合を阻害する。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２の、ＰＤ−１など、その結合パートナーのうちの１または複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減殺、遮断、阻害するか、これを失効化させるか、またはこれに干渉する、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、これらの抗原結合断片、イムノアデシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、および他の分子を含む。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、機能不全性のＴ細胞の機能不全性を軽減する（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）ように、ＰＤ−Ｌ２を介してシグナル伝達する、Ｔリンパ球において発現する細胞表面タンパク質によりまたはこれを介して媒介される負の共刺激シグナルを低減する。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、イムノアデシンである。
【００６３】
免疫機能不全の文脈における、「機能不全」という用語は、抗原の刺激に対する免疫応答性が低減された状態を指す。用語は、抗原認識は、生じうるが、後続の免疫応答は、感染または腫瘍増殖をコントロールするのに無効である、枯渇および／またはアネルギーの両方の共通の要素を含む。
【００６４】
本明細書で使用される「機能不全性」という用語はまた、抗原認識に対する不応性または非応答性、とりわけ、抗原認識を、増殖、サイトカインの産生（例えば、ＩＬ−２）、および／または標的細胞の殺滅など、下流のＴ細胞エフェクター機能へと翻訳する能力の機能障害も含む。
【００６５】
「アネルギー」という用語は、抗原刺激に対する非応答性状態であって、Ｔ細胞受容体を介して送達される、不完全または不十分なシグナルから生じる非応答性状態（例えば、ｒａｓ活性化の非存在下における、細胞内Ｃａ２＋の増大）を指す。Ｔ細胞アネルギーはまた、細胞が、その後、共刺激の文脈下に置かれてもなお、抗原による活性化に対して不応性となることを結果としてもたらす、共刺激の非存在下における、抗原による刺激時にも生じる。非応答性状態は、インターロイキン２の存在により無効化しうることが多い。アネルギー性Ｔ細胞は、クローン的拡大を経ず、かつ／またはエフェクター機能を獲得しない。
【００６６】
「枯渇」という用語は、多くの慢性感染症およびがんにおいて生じる、持続的なＴＣＲシグナル伝達に起因する、Ｔ細胞機能不全性の状態としてのＴ細胞枯渇を指す。「枯渇」は、それが、シグナル伝達の不完全または欠損から生じるのではなく、持続的なシグナル伝達から生じるという点で、アネルギーと区別される「枯渇」は、エフェクター機能の不良、阻害性受容体の持続的な発現、および機能的なエフェクターＴ細胞またはメモリーＴ細胞の転写状態と異なる転写状態により規定される。枯渇は、感染症および腫瘍の、最適なコントロールを妨げる。枯渇は、外部からの負の制御経路（例えば、免疫制御性サイトカイン）、ならびに細胞固有の負の制御（共刺激）経路（ＰＤ−１、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４など）の両方から生じうる。
【００６７】
「Ｔ細胞機能の増強」とは、Ｔ細胞が、持続的な生物学的機能もしくはこの増幅を誘導するか、引き起こすか、もしくは刺激するか、または枯渇Ｔ細胞もしくは不活性Ｔ細胞を、更新するか、もしくは再活性化させることを意味する。Ｔ細胞機能の増強の例は、ＣＤ８＋Ｔ細胞からの、γ−インターフェロンの分泌の増大、増殖の増大、介入前のようなレベルと比べた、抗原応答性（例えば、ウイルス、病原体、または腫瘍の除去）の増大を含む。一実施形態では、増強のレベルは、少なくとも、５０％、代替的に、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２０％、１５０％、２００％である。この増強を測定する方式は、当業者に公知である。
【００６８】
「Ｔ細胞機能不全性障害」とは、抗原刺激に対する応答性の減殺により特徴を明らかにされる、Ｔ細胞の障害または状態である。特定の実施形態では、Ｔ細胞機能不全性障害は、具体的には、ＰＤ−１を介する、不適切なシグナル伝達の増大と関連する障害である。別の実施形態では、Ｔ細胞機能不全性障害とは、Ｔ細胞がアネルギー性であるか、またはサイトカインを分泌するか、増殖するか、もしくは細胞溶解活性を果たす能力が減殺されている障害である。具体的な態様では、応答性の減殺は、免疫原を発現する病原体または腫瘍のコントロールの無効を結果としてもたらす。Ｔ細胞機能不全により特徴を明らかにされる、Ｔ細胞機能不全性障害の例は、消散しない急性感染症、慢性感染症、および腫瘍免疫を含む。
【００６９】
「腫瘍免疫」とは、腫瘍が、免疫による認識および除去を回避する過程を指す。したがって、治療概念として、このような回避が、緩和され、腫瘍が、免疫系により、認識および攻撃される場合に、腫瘍免疫は、「処置されている」。腫瘍認識の例は、腫瘍への結合、腫瘍の退縮、および腫瘍の除去を含む。
【００７０】
「免疫原性」とは、特定の物質が、免疫応答を引き起こす能力を指す。腫瘍は、免疫原性であり、腫瘍の免疫原性の増強は、免疫応答による、腫瘍細胞の除去の一助となる。腫瘍の免疫原性の増強の例は、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとによる処置を含む。
【００７１】
「持続的応答」とは、処置の中止の後における、腫瘍増殖の低減に対する持続的効果を指す。例えば、腫瘍サイズは、投与期の開始時におけるサイズと比較して同じであるか、または小さなサイズを維持しうる。一部の実施形態では、持続的応答は、処置の持続期間と、少なくとも同じ持続期間を有し、処置の持続期間の、少なくとも１．５倍、２．０倍、２．５倍、または３．０倍の長さを有する。
【００７２】
「薬学的組成物」という用語は、有効成分の生物活性が有効となることを可能とするが、製剤が投与される対象に対して、許容不可能な程度に毒性となる、さらなる成分は含有しないような形態にある調製物を指す。好ましくは、このような組成物は、滅菌組成物である。
【００７３】
「薬学的に許容される担体」とは、薬学的組成物中の、有効成分以外の成分であって、対象に対して非毒性である成分を指す。薬学的に許容される担体は、バッファー、賦形剤、安定剤、または防腐剤を含むがこれらに限定されない。
【００７４】
本明細書で使用される「処置」という用語は、臨床病態の経過中に、処置される個体または細胞の天然の経過を変更するために設計された、臨床的介入を指す。処置の所望の効果は、疾患の進行速度の減殺、病状の改善または緩和、および寛解または予後の改善を含む。例えば、がん性細胞の増殖を低減すること（またはがん性細胞を破壊すること）、疾患から生じる症候を減殺すること、疾患を患う人の生活の質を増進すること、疾患を処置するのに要請される、他の薬物の用量を減少させることおよび／または個体の生存を延長することを含むがこれらに限定されない、１または複数のがんと関連する症候を、軽減するか、または消失させる場合、個体の「処置」に成功する。
【００７５】
本明細書で使用される「疾患の進行を遅延させること」とは、疾患（がんなど）の発症を、先送りにし、阻止し、緩徐化させ、遅らせ、安定化させ、かつ／または延期することを意味する。この遅延は、処置される疾患および／または個体の履歴に応じて、時間の長さが変動しうる。当業者に明らかな通り、十分な遅延または著明な遅延は、事実上、個体が、疾患を発症しないという点で、防止を包含する。例えば、転移の発症など、末期がんを、遅延させることができる。
【００７６】
「有効量」とは、特定の障害の、測定可能な改善または防止を行うのに要請される、少なくとも最小の量である。本明細書における有効量は、患者の病状、年齢、性別、および体重、ならびに抗体が、個体において所望される応答を誘発する能力などの因子に従い変動しうる。有効量はまた、処置の、治療的に有益な効果が、任意の毒性作用または有害作用に勝る量でもある。予防的使用のために、有益な結果または所望される結果は、疾患の生化学的症候、組織学的症候、および／または行動学的症候、その合併症、ならびに疾患の発症時に提示される、中間的な病理学的表現型を含む、疾患の危険性を消失させるか、もしくは低減すること、疾患の重症度を軽減すること、または疾患の発生を遅延させることなどの結果を含む。治療的使用のために、有益な結果または所望される結果は、疾患から生じる、１または複数の症候を減殺すること、疾患を患う人の生活の質を増進すること、疾患を処置するのに要請される、他の薬物の用量を減少させること、ターゲティングを介するなど、別の薬物の効果を増強すること、疾患の進行を遅延させること、および／または生存を延長することなどの臨床結果を含む。がんまたは腫瘍の場合、有効量の薬物は、がん細胞の数を低減すること；腫瘍サイズを低減すること；がん細胞の、末梢組織への浸潤を阻害すること（すなわち、浸潤を、ある程度緩徐化させるか、または、望ましくは、これを停止させること）；腫瘍の転移を阻害すること（すなわち、転移を、ある程度緩徐化させ、望ましくは、これを停止させること）；腫瘍増殖を、ある程度阻害すること；および／または障害と関連する症候のうちの１または複数を、ある程度緩和することにおいて、効果を及ぼしうる。有効量は、１回または複数回の投与により投与することができる。本発明の目的では、薬物、化合物、または薬学的組成物の有効量は、予防的処置または治療的処置を、直接的または間接的に達成するのに十分な量である。臨床の文脈で理解される通り、薬物、化合物、または薬学的組成物の有効量は、別の薬物、化合物、または薬学的組成物と共に達成できる場合もあり、達成できない場合もある。したがって、「有効量」は、１または複数の治療剤を投与する文脈でも考えることができ、１または複数の他の薬剤と共に、所望される結果が達成されうるか、または達成される場合に、単一の薬剤は、有効量で施されていると考えることができる。
【００７７】
本明細書で使用される「〜と共に」とは、１つの処置モダリティーの、別の処置モダリティーに加えた投与を指す。このようにして、「〜と共に」とは、他の処置モダリティーの、個体への投与の前、投与時、または投与の後における、１つの処置モダリティーの投与を指す。
【００７８】
「障害」とは、処置から利益を得る、任意の状態であって、哺乳動物に、問題の障害への素因を与える病理学的状態を含む、慢性障害および急性障害または慢性疾患および急性疾患を含むがこれらに限定されない状態である。
【００７９】
「細胞増殖性障害」および「増殖性障害」という用語は、何らかの程度の異常な細胞増殖と関連する障害を指す。一実施形態では、細胞増殖性障害は、がんである。一実施形態では、細胞増殖性疾患は、腫瘍である。
【００８０】
本明細書において使用される「腫瘍」とは、悪性であれ、良性であれ、全ての腫瘍性細胞増殖（ｇｒｏｗｔｈおよびｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）を指し、全ての前がん性細胞および前がん性組織ならびにがん性細胞およびがん性組織を指す。本明細書において言及される通り、「がん」、「がん性」、「細胞増殖性疾患」、「増殖性疾患」、および「腫瘍」という用語は、相互に除外的ではない。
【００８１】
「がん」および「がん性」という用語は、哺乳類における生理的状態であって、典型的に、調節不能の細胞増殖により特徴を明らかにされる生理的状態を指すか、またはこれについて記載する。がんの例は、癌、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病、またはリンパ性悪性腫瘍を含むがこれらに限定されない。このようながんのより特定の例は、扁平上皮がん（例えば、上皮性扁平細胞がん）、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺癌、および肺扁平上皮癌を含む肺がん、腹膜がん、肝細胞がん、胃腸がんおよび胃腸間質がんを含む胃（ｇａｓｔｒｉｃまたはｓｔｏｍａｃｈ）がん、膵臓がん、膠芽細胞腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、尿路がん、肝がん、乳がん、結腸がん、直腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎臓がんまたは腎がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝細胞癌、肛門癌、陰茎癌、メラノーマ、表在性伸展メラノーマ、悪性黒子型メラノーマ、末端黒子型黒色腫、結節性メラノーマ、多発性骨髄腫、およびＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性の非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度びまん性ＮＨＬ；高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ；高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度小型非開裂性細胞ＮＨＬ；巨大病変ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；およびワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症を含む）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；ヘアリー細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；および移植後リンパ増殖性疾患（ＰＴＬＤ）のほか、異常な血管増殖と関連する母斑症、浮腫（脳腫瘍と関連する浮腫など）、メイグス症候群、脳のがん、ならびに頭頸部がん、ならびに関連の転移を含むがこれらに限定されない。ある特定の実施形態では、本発明の抗体による処置に適するがんは、乳がん、結腸直腸がん、直腸がん、非小細胞肺がん、膠芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、腎細胞がん、前立腺がん、肝臓がん、膵臓がん、軟部組織肉腫、カポジ肉腫、カルチノイド癌腫、頭頸部がん、卵巣がん、中皮腫、および多発性骨髄腫を含む。一部の実施形態では、がんは、小細胞肺がん、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、メラノーマ、乳癌、胃がん、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、および肝細胞癌から選択される。なお一部の実施形態では、がんは、これらのがんの転移型を含む、非小細胞肺がん、結腸直腸がん、膠芽細胞腫、および乳癌から選択される。一部の実施形態では、がんは、ＣＥＡ陽性がんである。
【００８２】
本明細書で使用される「細胞傷害剤」という用語は、細胞に対して有害な（例えば、細胞死を引き起こすか、増殖を阻害するか、または他の形で、細胞の機能を妨げる）、任意の薬剤を指す。細胞傷害剤は、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、およびＬｕの放射性同位体）；化学療法剤；増殖阻害剤；核酸分解酵素などの酵素およびこれらの断片；ならびに細菌由来、真菌、植物由来、または動物由来の、低分子毒素または酵素活性毒素などの毒素であって、これらの断片および／または変異体を含む毒素を含むがこれらに限定されない。例示的な細胞傷害剤は、抗微小管剤、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモンアナログ、シグナル伝達経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ系血管新生阻害剤、免疫療法剤、アポトーシス促進剤、ＬＤＨ−Ａ阻害剤、脂肪酸生合成阻害剤、細胞周期シグナル伝達阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、ならびにがん代謝阻害剤から選択することができる。一実施形態では、細胞傷害剤は、タキサンである。一実施形態では、タキサンは、パクリタキセルまたはドセタキセルである。一実施形態では、細胞傷害剤は、白金剤である。一実施形態では、細胞傷害剤は、ＥＧＦＲのアンタゴニストである。一実施形態では、ＥＧＦＲのアンタゴニストは、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）キナゾリン−４−アミン（例えば、エルロチニブ）である。一実施形態では、細胞傷害剤は、ＲＡＦ阻害剤である。一実施形態では、ＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦ阻害剤および／またはＣＲＡＦ阻害剤である。一実施形態では、ＲＡＦ阻害剤は、ベムラフェニブである。一実施形態では、細胞傷害剤は、ＰＩ３Ｋ阻害剤である。
【００８３】
「化学療法剤」は、がんの処置に有用な化合物を含む。化学療法剤の例は、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩＰｈａｒｍ．）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍ．）、ジスルフィラム、没食子酸エピガロカテキン、サリノスポラミドＡ、カルフィルゾミブ、１７−ＡＡＧ（ゲルダナマイシン）、ラジシコール、乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨ−Ａ）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、スニチニブ（スーテント（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ／Ｓｕｇｅｎ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、フィナスネート（ＶＡＴＡＬＡＮＩＢ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、ロイコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ロナファミブ（ＳＣＨ６６３３６）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、ＢａｙｅｒＬａｂｓ）、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＡＧ１４７８、チオテパなどのアルキル化剤、およびシトキサン（登録商標）シクロホスファミド；ブスルファン、インプロスルファン、およびピポスルファンなどのスルホン酸アルキル；ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、およびウレドーパなどのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、およびトリメチロメラミンを含むエチレンイミンおよびメチラメラミン；アセトゲニン（とりわけ、ブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（トポテカンおよびイリノテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン合成アナログ、カルゼレシン合成アナログ、およびビゼレシン合成アナログを含む）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；アドレノコルチコステロイド（プレドニゾンおよびプレドニゾロンを含む）；酢酸シプロテロン；フィナステリドおよびデュタステリドを含む５α−レダクターゼ）；ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、モセチノスタットドラスタチン；アルデスロイキン、滑石、デュオカルマイシン（合成アナログである、ＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エレウテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンジスタチン；クロラムブシル、クロマファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、およびラニムスチンなどのニトロソウレア類；エンジイン系抗生物質（例えば、カリケアマ��シン、とりわけ、カリケアマイシンγ１Ｉおよびカリケアマイシンω１Ｉ（Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，１９９４、３３：１８３〜１８６）；ジネマイシンＡを含むジネマイシン；クロドロネートなどのビスホスホネート；エスペラミシンのほか、ネオカルチノスタチン発色団、および類縁の色素タンパク質である、エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アントラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、アドリアマイシン（登録商標）（ドキソルビシン）、モルホリノドキソルビシン、シアノモルホリノドキソルビシン、２−ピロリノドキソルビシン、およびデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エスコルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンなどの抗生物質；メトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝拮抗剤；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸アナログ；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリンアナログ；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンなどのピリミジンアナログ；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎剤；葉酸などの葉酸補充剤；アセグラトン；アルドホスファミド配糖体；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビスアントレン；エダトラキセート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルフォミチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダミン；メイタンシンおよびアンサマイトシンなどのメイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダムノール；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（とりわけ、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡおよびアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例え���、タキソール（パクリタキセル；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、Ｎ．Ｊ．）、アブラキサン（登録商標）（クレモフォール非含有）、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ、Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ、Ｉｌｌ．）、およびタキソテール（登録商標）（ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ、ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）；Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ）；クロラムブシル；ジェムザール（登録商標）（ゲムシタビン）；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチンおよびカルボプラチンなどの白金アナログ；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ナベルビン（登録商標）（ビノレルビン）；ノバントロン；テニポシド；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ゼローダ（登録商標））；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；ならびに上記のうちのいずれかの、薬学的に許容される塩、酸、および誘導体を含む。
【００８４】
化学療法剤はまた、（ｉ）例えば、タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）；タモキシフェンクエン酸塩を含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびフェアストン（登録商標）（トレミフィンクエン酸塩）を含む抗エストロゲン剤および選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）などのホルモンの、腫瘍に対する作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤；（ｉｉ）例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）（酢酸メゲストロール）、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）（エキセメスタン；Ｐｆｉｚｅｒ）、ホルメスタン、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）（ボロゾール）、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、およびＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾ−ル；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）など、副腎内のエストロゲンの産生を調節する酵素であるアロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤；（ｉｉｉ）フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、およびゴセレリンなどの抗アンドロゲン剤；ブセレリン、トリプテレリン、酢酸メドロキシプロゲステロン、ジエチルスチルベストロール、プレマリン、フルオキシメステロン、全ｔｒａｎｓ−レチノイン酸、フェンレチニドのほか、トロキサシタビン（ａ１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ）；（ｉｖ）プロテインキナーゼ阻害剤；（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤；（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、例えば、ＰＫＣ−アルファ、Ｒａｌｆ、およびＨ−Ｒａｓなど、異常な細胞増殖に関与しているシグナル伝達経路内の遺伝子の発現を阻害するアンチセンスオリゴヌクレオチド；（ｖｉｉ）ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標））およびＨＥＲ２発現阻害剤などのリボザイム；（ｖｉｉｉ）遺伝子治療ワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、およびＶＡＸＩＤ（登録商標）などのワクチン；ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨなどのトポイソメラーゼ１阻害剤；ならびに（ｉｘ）上記のうちのいずれかの、薬学的に許容される塩、酸、および誘導体も含む。
【００８５】
化学療法剤はまた、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）、ベバシズマブ（アバスチン（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ）；パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（登録商標）、２Ｃ４、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）などの抗体、および抗体薬物コンジュゲートである、ゲムツズマブオゾガミシン（マイロターグ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）も含む。本発明の化合物と組み合わせて、薬剤としての治療可能性を有する、さらなるヒト化モノクローナル抗体は、アポリズマブ、アセリズマブ、アトリズマブ、バピネウズマブ、ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴル、シドフシツズマブ、シドツズマブ、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガミシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ、ヌマビズマブ、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ、ペクフシツズマブ、ペクツズマブ、ペキセリズマブ、ラリビズマブ、ラニビズマブ、レスリビズマブ、レスリズマブ、レシビズマブ、ロベリズマブ、ルピリズマブ、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タリズマブ、テフィバズマブ、トシリズマブ、トラリズマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツクシツズマブ、ウマビズマブ、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ、ビジリズマブ、およびインターロイキン１２のｐ４０タンパク質を認識するように遺伝子改変された、専一的な組換えヒト配列による、完全長ＩｇＧ１λ抗体である抗インターロイキン１２（ＡＢＴ−８７４／Ｊ６９５、Ｗｙｅｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を含む。
【００８６】
化学療法剤はまた、ＥＧＦＲに結合するか、または、他の形でこれと直接相互作用し、そのシグナル伝達活性を防止または低減する化合物を指し、代替的に、「ＥＧＦＲアンタゴニスト」とも称する、「ＥＧＦＲ阻害剤」も含む。このような薬剤の例は、ＥＧＦＲに結合する抗体および小分子を含む。ＥＧＦＲに結合する抗体の例は、ＭＡｂ  ５７９（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ＨＢ  ８５０６）、ＭＡｂ  ４５５（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ＨＢ８５０７）、ＭＡｂ  ２２５（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ８５０８）、ＭＡｂ  ５２８（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ８５０９）（Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎらによる、米国特許第４，９４３，５３３号を参照されたい）、ならびにキメラ型２２５（Ｃ２２５またはセツキシマブ；ＥＲＢＵＴＩＸ（登録商標））および改変型ヒト２２５（Ｈ２２５）（ＷＯ９６／４０２１０、Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｉｎｃ．を参照されたい）など、これらの変異体；ＥＧＦＲターゲティング完全ヒト抗体である、ＩＭＣ−１１Ｆ８（Ｉｍｃｌｏｎｅ）；ＩＩ型突然変異体ＥＧＦＲに結合する抗体（米国特許第５，２１２，２９０号）；米国特許第５，８９１，９９６号に記載されている、ＥＧＦＲに結合するヒト化抗体およびキメラ抗体；ならびにＡＢＸ−ＥＧＦまたはパニツムマブ（ＷＯ９８／５０４３３、Ａｂｇｅｎｉｘ／Ａｍｇｅｎを参照されたい）；ＥＭＤ  ５５９００（Ｓｔｒａｇｌｉｏｔｔｏら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、３２Ａ：６３６〜６４０（１９９６））；ＥＧＦＲへの結合について、ＥＧＦおよびＴＧＦアルファと競合する、ＥＧＦＲに対するヒト化ＥＧＦＲ抗体であるＥＭＤ７２００（マツズマブ）（ＥＭＤ／Ｍｅｒｃｋ）；ヒトＥＧＦＲ抗体である、ＨｕＭａｘ−ＥＧＦＲ（ＧｅｎＭａｂ）；Ｅ１．１、Ｅ２．４、Ｅ２．５、Ｅ６．２、Ｅ６．４、Ｅ２．１１、Ｅ６．３、およびＥ７．６．３として公知であり、ＵＳ６，２３５，８８３に記載されている完全ヒト抗体；ＭＤＸ−４４７（Ｍｅｄａｒｅｘ  Ｉｎｃ）；ならびにｍＡｂ  ８０６またはヒト化ｍＡｂ  ８０６（Ｊｏｈｎｓら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７９（２９）：３０３７５〜３０３８４（２００４））など、ＥＧＦＲに結合するヒト抗体を含む。抗ＥＧＦＲ抗体を、細胞傷害剤とコンジュゲートさせ、これにより、イムノコンジュゲート（例えば、Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧｍｂＨによる、ＥＰ６５９４３９Ａ２を参照されたい）を作出することができる。ＥＧＦＲアンタゴニストは、米国特許第５，６１６，５８２号、同第５，４５７，１０５号、同第５，４７５，００１号、同第５，６５４，３０７号、同第５，６７９，６８３号、同第６，０８４，０９５号、同第６，２６５，４１０号、同第６，４５５，５３４号、同第６，５２１，６２０号、同第６，５９６，７２６号、同第６，７１３，４８４号、同第５，７７０，５９９号、同第６，１４０，３３２号、同第５，８６６，５７２号、同第６，３９９，６０２号、同第６，３４４，４５９号、同第６，６０２，８６３号、同第６，３９１，８７４号、同第６，３４４，４５５号、同第５，７６０，０４１号、同第６，００２，００８号、および同第５，７４７，４９８号のほか、以下のＰＣＴ公開：ＷＯ９８／１４４５１、ＷＯ９８／５００３８、ＷＯ９９／０９０１６、およびＷＯ９９／２４０３７に記載されている化合物などの低分子を含む。特定の低分子ＥＧＦＲアンタゴニストは、ＯＳＩ−７７４（ＣＰ−３５８７７４、エルロチニブ、ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＰＤ１８３８０５（ＣＩ１０３３、２−プロペンアミド、Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−７−［３−（４−モルホリニル）プロポキシ］−６−キナゾリニル］−ジヒドロクロリド、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．）；ＺＤ１８３９、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））４−（３’−クロロ−４’−フルオロアニリノ）−７−メトキシ−６−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＺＭ１０５１８０（（６−アミノ−４−（３−メチルフェニル−アミノ）−キナゾリン、Ｚｅｎｅｃａ）；ＢＩＢＸ−１３８２（Ｎ８−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−Ｎ２−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミド［５，４−ｄ］ピリミジン−２，８−ジアミン、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）；ＰＫＩ−１６６（（Ｒ）−４−［４−［（１−フェニルエチル）アミノ］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イル］−フェノール）；（Ｒ）−６−（４−ヒドロキシフェニル）−４−［（１−フェニルエチル）アミノ］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン）；ＣＬ−３８７７８５（Ｎ−［４−［（３−ブロモフェニル）アミノ］−６−キナゾリニル］−２−ブチンアミド）；ＥＫＢ−５６９（Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キノリニル］−４−（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド）（Ｗｙｅｔｈ）；ＡＧ１４７８（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＡＧ１５７１（ＳＵ５２７１；Ｐｆｉｚｅｒ）；ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６またはＮ−［３−クロロ−４−［（３  フルオロフェニル）メトキシ］フェニル］−６［５［［［２メチルスルホニル）エチル］アミノ］メチル］−２−フラニル］−４−キナゾリンアミン）など、ＥＧＦＲ／ＨＥＲ２二重チロシンキナーゼ阻害剤を含む。
【００８７】
化学療法剤はまた、前出の段落で言及されたＥＧＦＲターゲティング薬；武田薬品工業株式会社から市販されているＴＡＫ１６５などの、低分子ＨＥＲ２チロシンキナーゼ阻害剤；ＥｒｂＢ２受容体チロシンキナーゼの選択的経口阻害剤である、ＣＰ−７２４，７１４（Ｐｆｉｚｅｒ  ａｎｄ  ＯＳＩ）；ＥＧＦＲに優先的に結合するが、ＨＥＲ２およびＥＧＦＲの両方を過剰発現する細胞を阻害する、ＥＫＢ−５６９（Ｗｙｅｔｈから市販されている）などの二重ＨＥＲ阻害剤；ＨＥＲ２およびＥＧＦＲの経口チロシンキナーゼ阻害剤である、ラパチニブ（ＧＳＫ５７２０１６；Ｇｌａｘｏ−ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから市販されている）；ＰＫＩ−１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓから市販されている）；カネルチニブ（ＣＩ−１０３３；Ｐｈａｒｍａｃｉａ）などの汎ＨＥＲ阻害剤；ＩＳＩＳ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから市販されているアンチセンス薬剤である、ＩＳＩＳ−５１３２など、Ｒａｆ−１シグナル伝達を阻害するＲａｆ−１阻害剤；メシル酸イマチニブ（Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから市販されている、ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標））などの非ＨＥＲターゲティングＴＫ阻害剤；スニチニブ（Ｐｆｉｚｅｒから市販されている、スーテント（登録商標））などのマルチターゲティングチロシンキナーゼ阻害剤；バタラニブ（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧから市販されている、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４）などのＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤；ＭＡＰＫ細胞外調節型キナーゼＩ阻害剤ＣＩ−１０４０（Ｐｈａｒｍａｃｉａから市販されている）；４−（３−クロロアニリノ）キナゾリンであるＰＤ１５３０３５などのキナゾリン；ピリドピリミジン；ピリミドピリミジン；ＣＧＰ  ５９３２６、ＣＧＰ  ６０２６１、およびＣＧＰ  ６２７０６などのピロロピリミジン；４−（フェニルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンである、ピラゾロピリミジン；クルクミン（ジフェルロイルメタン、４，５−ビス（４−フルオロアニリノ）フタルイミド）；ニトロチオフェン部分を含有するチルホスチン；ＰＤ−０１８３８０５（Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒ）；アンチセンス分子（例えば、ＨＥＲをコードする核酸に結合するアンチセンス分子）；キノキサリン（米国特許第５，８０４，３９６号）；チルホスチン（米国特許第５，８０４，３９６号）；ＺＤ６４７４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＰＴＫ−７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）；ＣＩ−１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）などの汎ＨＥＲ阻害剤；Ａｆｆｉｎｉｔａｃ（ＩＳＩＳ  ３５２１；Ｉｓｉｓ／Ｌｉｌｌｙ）；メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標））；ＰＫＩ１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；ＧＷ２０１６（Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）；ＣＩ−１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＥＫＢ−５６９（Ｗｙｅｔｈ）；セマキシニブ（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＺＤ６４７４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＰＴＫ−７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）；ＩＮＣ−１Ｃ１１（Ｉｍｃｌｏｎｅ）、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標））；または以下の特許公開：米国特許第５，８０４，３９６号；ＷＯ１９９９／０９０１６（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃ���ａｎａｍｉｄ）；ＷＯ１９９８／４３９６０（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｙａｎａｍｉｄ）；ＷＯ１９９７／３８９８３（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）；ＷＯ１９９９／０６３７８（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）；ＷＯ１９９９／０６３９６（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）；ＷＯ１９９６／３０３４７（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ）；ＷＯ１９９６／３３９７８（Ｚｅｎｅｃａ）；ＷＯ１９９６／３３９７（Ｚｅｎｅｃａ）およびＷＯ１９９６／３３９８０（Ｚｅｎｅｃａ）のうちのいずれかに記載されているチロシンキナーゼ阻害剤を含む「チロシンキナーゼ阻害剤」も含む。
【００８８】
化学療法剤はまた、デキサメタゾン、インターフェロン、コルヒチン、メトプリン、シクロスポリン、アンホテリシン、メトロニダゾール、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アミホスチン、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、生ＢＣＧ、ベバクジマブ、ベキサロテン、クラドリビン、クロファラビン、ダルベポエチンアルファ、デニロイキン、デキスラゾキサン、エポエチンアルファ、エロチニブ、フィルグラスチム、酢酸ヒストレリン、イブリツモマブ、インターフェロンアルファ２ａ、インターフェロンアルファ２ｂ、レナリドマイド、レバミソール、メスナ、メトキサレン、ナンドロロン、ネララビン、ノフェツモマブ、オプレルベキン、パリフェルミン、パミドロネート、ペガデマーゼ、ペグアスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド二ナトリウム、プリカマイシン、ポルフィマーナトリウム、キナクリン、ｒａｓｂウリカーゼ、サルグラモスチム、テモゾロミド、ＶＭ−２６、６−ＴＧ、トレミフェン、トレチノイン、ＡＴＲＡ、バルルビシン、ゾレドロネート、およびゾレドロン酸、ならびにこれらの薬学的に許容される塩も含む。
【００８９】
化学療法剤はまた、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酢酸コルチゾン、ピバル酸チキソコルトール、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール、モメタゾン、アムシノニド、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ベタメサゾン、ベタメサゾンリン酸ナトリウム、デキサメタゾン、デキサメタゾンリン酸ナトリウム、フルオコルトロン、ヒドロコルチゾン−１７−ブチレート、ヒドロコルチゾン−１７−バレレート、アクロメタゾンジプロピオネート、吉草酸ベタメサゾン、ベタメサゾンジプロピオネート、プレドニカルベート、クロベタゾン−１７−ブチレート、クロベタゾール−１７−プロピオネート、カプロン酸フルオコルトロン、ピバル酸フルオコルトロン、および酢酸フルプレドニデン；フェニルアラニン−グルタミン−グリシン（ＦＥＧ）およびそのＤ−異性体形態（ｆｅＧ）（ＩＭＵＬＡＮ  ＢｉｏＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、ＬＬＣ）などの免疫選択的抗炎症ペプチド（ＩｍＳＡＩＤ）；アザチオプリン、シクロスポリン（シクロスポリンＡ）、Ｄ−ペニシラミン、金の塩、ヒドロキシクロロキン、レフルノミドなどの抗リウマチ薬、ミノサイクリン、スルファサラジン、エタネルセプト（エンブレル）、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、アダリムマブ（ヒュミラ）、セルトリズマブペゴル（シムジア）、ゴリムマブ（シンポニー）などの腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）遮断剤、アナキンラ（Ｋｉｎｅｒｅｔ）などのインターロイキン１（ＩＬ−１）遮断剤、アバタセプト（Ｏｒｅｎｃｉａ）などのＴ細胞共刺激遮断剤、トシリズマブ（ＡＣＴＥＭＲＡ（登録商標））などのインターロイキン６（ＩＬ−６）遮断剤；レブリキズマブなどのインターロイキン１３（ＩＬ−１３）遮断剤；ロンタリズマブなどのインターフェロンアルファ（ＩＦＮ）遮断剤；ｒｈｕＭＡｂベータ７などのベータ７インテグリン遮断剤；抗Ｍ１プライムなどのＩｇＥ経路遮断剤；抗リンホトキシンアルファ（ＬＴａ）などの、分泌型ホモトリマーＬＴａ３遮断剤および膜結合型ヘテロトリマーＬＴａ１／β２遮断剤；放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、およびＬｕの放射性同位体）；チオプラチン、ＰＳ−３４１、フェニルブチレート、ＥＴ−１８−ＯＣＨ３、またはファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（Ｌ−７３９７４９、Ｌ−７４４８３２）など、その他の治験薬剤；ケルセチン、レベラトロール、ピセアタンノール、没食子酸エピガロカテキン、テアフラビン、フラバノール、プロシアニジン、ベツリン酸、およびこれらの誘導体などのポリフェノール；クロロキンなどのオートファジー阻害剤；デルタ−９−テトラヒドロカンナビノール（ドロナビノール、マリノール（登録商標））；ベータ−ラパコン；ラパコール；コルヒチン；ベツリン酸；アセチルカンプトテシン、スコポレクチン、および９−アミノカンプトテシン）；ポドフィロトキシン；テガフール（ＵＦＴＯＲＡＬ（登録商標））；ベキサロテン（ＴＡＲＧＲＥＴＩＮ（登録商標））；クロドロネート（例えば、ＢＯＮＥＦＯＳ（登録商標）またはＯＳＴＡＣ（登録商標））、エチドロネート（ＤＩＤＲＯＣＡＬ（登録商標））、ＮＥ−５８０９５、ゾレドロン酸／ゾレドロネート（ＺＯＭＥＴＡ（登録商標））、アレンドロネート（ＦＯＳＡＭＡＸ（登録商標））、パミドロネート（ＡＲＥＤＩＡ（登録商標））、チルドロネート（ＳＫＥＬＩＤ（登録商標））、またはリセドロネート（ＡＣＴＯＮＥＬ（登録商標））などのビスホスホネート；および上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）；ＴＨＥＲＡＴＯＰＥ（登録商標）ワクチンなどのワクチン；ペリホシン、ＣＯＸ−２阻害剤（例えば、セレコキシブまたはエトリコシキブ）、プロテアソーム阻害剤（例えば、ＰＳ３４１）；ＣＣＩ−７７９；チピファルニブ（Ｒ１１５７７）；オラフェニブ、ＡＢＴ５１０；オブリメルセンナトリウム（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ（登録商標））などのＢｃｌ−２阻害剤；ピクサントロン；ロナファルニブなどのファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（ＳＣＨ  ６６３６、ＳＡＲＡＳＡＲ（商標））；ならびに上記のうちのいずれかの、薬学的に許容される塩、酸、または誘導体のほか、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾロンの混合療法のための略号であるＣＨＯＰ；およびオキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（商標））を、５−ＦＵおよびロイコボリンと混合した治療レジメンのための略号であるＦＯＬＦＯＸなど、上記のうちの２つまたはこれを超えるものの組合せも含む。
【００９０】
化学療法剤はまた、鎮痛剤、解熱剤、および抗炎症効果を伴う、非ステロイド系抗炎症薬も含む。ＮＳＡＩＤは、酵素シクロオキシゲナーゼの非選択的阻害剤を含む。ＮＳＡＩＤの具体例は、アスピリン、イブプロフェン、フェノプロフェン、ケトプロフェン、フルルビプロフェン、オキサプロジン、およびナプロキセンなどのプロピオン酸誘導体、インドメタシン、スリンダク、エトドラク、ジクロフェナクなどの酢酸誘導体、ピロキシカム、メロキシカム、テノキシカム、ドロキシカム、ロルノキシカム、およびイソキシカムなど、エノール型の酸誘導体、メフェナム酸、メクロフェナム酸、フルフェナム酸、トルフェナム酸などのフェナム酸誘導体、およびセレコキシブ、エトリコシキブ、ルミラコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、ロフェコキシブ、およびバルデコキシブなどのＣＯＸ−２阻害剤を含む。ＮＳＡＩＤは、関節リウマチ、変形性関節症、炎症性関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、ライター症候群、急性痛風、月経困難症、転移性骨疼痛、頭痛および片頭痛、手術後疼痛、炎症および組織損傷に起因する、軽度〜中等度の疼痛、発熱、イレウス、および腎疝痛などの状態の症状の緩和に適応でありうる。
【００９１】
「放射線療法」とは、方向付けられたガンマ線またはベータ線の使用であって、細胞へと、正常に機能するよう、その能力を制限するか、または細胞をまとめて破壊するのに十分な損傷を誘導する使用を意味する。当該技術分野では、処置の投与量および持続期間を決定するための、多くの方式が公知であることが察知されるであろう。典型的な処置は、単回投与として施され、典型的な投与量は、１日当たり１０〜２００単位（Ｇ線）の範囲である。
【００９２】
処置を目的とする「対象」または「個体」とは、哺乳動物として分類される任意の動物であって、ヒト、イヌ、ウマ、ネコ、ウシなど、家畜（ｄｏｍｅｓｔｉｃおよびｆａｒｍ  ａｎｉｍａｌ）ならびに動物園動物、競技動物、または愛玩動物を含む動物を指す。好ましくは、哺乳動物は、ヒトである。個体または対象は、患者でありうる。
【００９３】
本明細書では、「抗体」という用語を、最も広い意味で使用し、とりわけ、それらが、所望の生物活性を呈示する限り、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および抗体断片を対象とする。
【００９４】
「単離」抗体とは、その天然の環境（ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ）の構成要素から分離された、すなわち、その天然の環境（ｍｉｌｉｅｕ）にない抗体である。特定レベルの精製が要請されるわけではない。例えば、単離抗体は、その天然（ｎａｔｉｖｅまたはｎａｔｕｒａｌ）環境から取り出すことができる。宿主細胞内で発現される、組換えにより作製された抗体は、本発明の目的では、任意の適切な技法により、分離、分画、または部分的もしくは実質的に精製された、天然または組換えの抗体と同様に、単離されていると考えられる。一部の実施形態では、抗体を、例えば、電気泳動法（例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ法、等電点電気泳動法（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動法）またはクロマトグラフィー法（例えば、イオン交換クロマトグラフィー法または逆相ＨＰＬＣ法）により決定される、９５％を超えるかまたは９９％の純度まで精製する。抗体の純度を評価するための方法の総説については、例えば、Ｆｌａｔｍａｎら、Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ、８４８：７９〜８７（２００７）を参照されたい。
【００９５】
「天然抗体」とは、通例、約１５０，０００ドルトンのヘテロテトラマーの糖タンパク質であって、２つの同一な軽（Ｌ）鎖および２つの同一な重（Ｈ）鎖から構成される糖タンパク質である。各軽鎖は、１つの共有結合的ジスルフィド結合により重鎖へと連結されるが、ジスルフィド連結の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖の間で変動する。各重鎖および各軽鎖はまた、規則的に間隔を置いた鎖間ジスルフィド架橋も有する。各重鎖は、一方の端部において、可変ドメイン（ＶＨ）に続いて、複数の定常ドメインを有する。各軽鎖は、一方の端部において、可変ドメイン（ＶＬ）を有し、その他方の端部において、１つの定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインと位置を合わせて並び、軽鎖の可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと位置を合わせて並ぶ。特定のアミノ酸残基が、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの接触面を形成すると考えられている。
【００９６】
「定常ドメイン」という用語は、免疫グロブリン分子の部分であって、免疫グロブリンの他の部分である、抗原結合部位を含有する可変ドメインと比べて、より多くの保存的アミノ酸配列を有する部分を指す。定常ドメインは、重鎖の、ＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン（まとめて、ＣＨドメイン）、または軽鎖のＣＬドメインを含有する。
【００９７】
「可変領域」または「可変ドメイン」という用語は、抗体の重鎖または軽鎖のドメインであって、抗体の、抗原への結合に関与するドメインを指す。天然の抗体の重鎖および軽鎖の可変ドメイン（それぞれ、ＶＨおよびＶＬ）は一般に、各ドメインが、４つの保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）と、３つの超可変領域（ＨＶＲ）とを含む、類似の構造を有する。例えば、Ｋｉｎｄｔら，Ｋｕｂｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６版，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．，９１頁（２００７）を参照されたい。単一のＶＨまたはＶＬドメインは、抗原結合特異性を付与するのに十分でありうる。本明細書で可変領域配列に関連して使用される「カバット番号付け」とは、Ｋａｂａｔら、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」、５版、Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ（１９９１）により明示される番号づけシステムを指す。
【００９８】
抗体または免疫グロブリンの「クラス」とは、その重鎖により保有される定常ドメインまたは定常領域の種類を指す。抗体には、５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭがあり、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２へとさらに分けることができる。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインを、それぞれ、α、δ、ε、γ、およびμと呼ぶ。
【００９９】
免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニット構造および三次元構成については周知であり、例えば、Ａｂｂａｓら、「Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」、４版（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｃｏ．，２０００）において、一般に記載されている。
【０１００】
本明細書において、「完全長抗体」、「インタクト抗体」、および「全抗体」という用語は、下記において規定される抗体断片ではなく、その実質的なインタクト形態にある抗体を指すように、互換的に使用される。用語は特に、Ｆｃ領域を含有する重鎖を伴う抗体を指す。
【０１０１】
「抗体断片」とは、インタクトな抗体の部分であって、好ましくは、その抗原結合領域を含む部分を含む。一部の実施形態では、本明細書で記載される抗体断片とは、抗原結合断片である。抗体断片の例は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片；ダイアボディー、直鎖状抗体、単鎖抗体分子；および抗体断片から形成される多重特異性抗体を含む。
【０１０２】
抗体のパパイン消化は、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる、２つの同一な抗原結合性断片であって、各々が、単一の抗原結合部位、およびたやすく結晶化する能力を反映する呼称である、残りの「Ｆｃ」断片を伴う、抗原結合断片をもたらす。ペプシン処理は、２つの抗原結合部位を有し、抗原を架橋することがやはり可能な、Ｆ（ａｂ’）２断片をもたらす。
【０１０３】
「Ｆｖ」とは、完全な抗原結合部位を含有する、最小の抗体断片である。一実施形態では、二本鎖Ｆｖ分子種は、緊密な非共有結合的会合下にある、１つの重鎖可変ドメインと、１つの軽鎖可変ドメインとの二量体からなる。単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）分子種において、１つの重鎖可変ドメインと、１つの軽鎖可変ドメインとは、軽鎖および重鎖が、二本鎖Ｆｖ分子種における構造と類似の「ダイマー」構造において会合しうるように、可撓性のペプチドリンカーにより、共有結合的に連結されうる。各可変ドメインの３つずつのＨＶＲが相互作用して、ＶＨ−ＶＬダイマーの表面上において、抗原結合性部位を規定するのは、この立体構成においてである。併せて、６つのＨＶＲは、抗原結合特異性を、抗体に付与する。しかし、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的な３つのＨＶＲだけを含むＦｖの半分）であってもなお、結合部位全体より小さなアフィニティーではあるが、抗原を認識し、抗原に結合する能力を有する。
【０１０４】
Ｆａｂ断片は、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含有し、また、軽鎖の定常ドメインおよび重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）も含有する。Ｆａｂ’断片は、重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端における、少数の残基であって、抗体のヒンジ領域に由来する、１または複数のシステインを含む残基の付加により、Ｆａｂ断片と異なる。Ｆａｂ’−ＳＨとは、定常ドメインのシステイン残基が、遊離チオール基を持つＦａｂ’のための、本明細書における呼称である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元は、それらの間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として作製された。また、抗体断片の他の化学的カップリングも公知である。
【０１０５】
「単鎖Ｆｖ」抗体断片または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨドメインおよびＶＬドメインを含み、この場合、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖に存在する。一般に、ｓｃＦｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間のポリペプチドリンカーであって、ｓｃＦｖが、抗原への結合に所望の構造を形成することを可能とするポリペプチドリンカーをさらに含む。ｓｃＦｖの総説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ、「Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ」、１１３巻、ＲｏｓｅｎｂｕｒｇおよびＭｏｏｒｅ編（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９４）、２６９〜３１５頁を参照されたい。
【０１０６】
「ダイアボディー」という用語は、２つの抗原結合性部位を伴う抗体断片であって、同じポリペプチド鎖内に、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）へと接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む抗体断片（ＶＨ−ＶＬ）を指す。同じ鎖上の２つのドメイン間のペアリングを可能とするには短すぎるリンカーを使用することにより、ドメインは、別の鎖の相補性ドメインとペアリングし、２つの抗原結合部位を創出するように強いられる。ダイアボディーは、二価の場合もあり、二重特異性の場合もある。ダイアボディーについては、例えば、ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ１９９３／０１１６１；Ｈｕｄｓｏｎら、Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，９：１２９〜１３４（２００３）；およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ、９０：６４４４〜６４４８（１９９３）においてより十全に記載されている。トリアボディーおよびテトラボディーについてもまた、Ｈｕｄｓｏｎら、Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，９：１２９〜１３４（２００３）において記載されている。
【０１０７】
本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、集団に含まれる個々の抗体は、例えば、天然に存在する突然変異、またはモノクローナル抗体調製物の作製時に生じる突然変異を含有する、可能な変異体抗体であって、一般に少量で存在する、このような変異体を除き、同一であり、かつ／または同じエピトープに結合する。典型的に、異なる決定基（エピトープ）に対する、異なる抗体を含む、ポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対する。したがって、「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体の特徴を指し示し、任意の特定の方法による抗体の産生を要請するものと見なさないものとする。例えば、本発明に従い使用されるモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法、組換えＤＮＡ法、ファージディスプレイ法、およびヒト免疫グロブリン遺伝子座の全部または一部を含有するトランスジェニック動物を活用する方法を含むがこれらに限定されない、様々な技法により作ることができ、モノクローナル抗体を作るための、このような方法、および他の例示的方法については、本明細書でも記載する。
【０１０８】
本明細書のモノクローナル抗体は、具体的に、重鎖および／または軽鎖の部分が、特定の種に由来する抗体または特定の抗体クラスもしくは抗体サブクラスに属する抗体内の、対応する配列と同一または相同である一方、鎖の残りの部分は、別の種に由来する抗体または別の抗体クラスもしくは抗体サブクラスに属する抗体内の、対応する配列と同一または相同である、「キメラ」抗体のほか、所望の生物活性を呈示する限りにおいて、このような抗体の断片（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ、８１：６８５１〜６８５５（１９８４）を参照されたい）も含む。キメラ抗体は、抗体の抗原結合領域が、例えば、マカクザルを、目的の抗原で免疫化することにより作製される抗体に由来する、ＰＲＩＭＡＴＩＺＥＤ（登録商標）抗体を含む。
【０１０９】
非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する、最小限の配列を含有する、キメラ抗体である。一実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲに由来する残基が、マウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類など、非ヒト種（ドナー抗体）のＨＶＲであって、所望の特異性、アフィニティー、および／または能力を有するＨＶＲに由来する残基により置きかえられた、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の場合、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基を、対応する非ヒト残基により置きかえる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体内でも、ドナー抗体内でも見出されない残基も含みうる。抗体の効能をさらに精緻化するように、これらの修飾を施すことができる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つの可変ドメインであり、典型的に、２つの可変ドメインであって、超可変ループの全てまたは実質的に全てが、非ヒト免疫グロブリン配列の超可変ループに対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全てが、ヒト免疫グロブリン配列のＦＲである可変ドメインの実質的に全てを含むであろう。ヒト化抗体はまた、免疫グロブリンの定常領域（Ｆｃ）のうちの少なくとも一部、典型的に、ヒト免疫グロブリンのＦｃのうちの少なくとも一部も含みうる。さらなる詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ、３２１：５２２〜５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ、３３２：３２３〜３２９（１９８８）；およびＰｒｅｓｔａ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，２：５９３〜５９６（１９９２）を参照されたい。例えば、また、ＶａｓｗａｎｉおよびＨａｍｉｌｔｏｎ、Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ、Ａｓｔｈｍａ  ＆  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１：１０５〜１１５（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ、２３：１０３５〜１０３８（１９９５）；ＨｕｒｌｅおよびＧｒｏｓｓ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．，５：４２８〜４３３（１９９４）；ならびに米国特許第６，９８２，３２１号および同第７，０８７，４０９号も参照されたい。
【０１１０】
「ヒト抗体」とは、ヒトにより産生される抗体のアミノ酸配列、および／または本明細書で開示される、ヒト抗体を作るための技法のうちのいずれかを使用して作られた抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を保有する抗体である。ヒト抗体のこの定義はとりわけ、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を除外する。ヒト抗体は、当該技術分野で公知の、多様な技法であって、ファージディスプレイライブラリーを含む技法を使用して作製することができる。ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１）。Ｃｏｌｅら、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ」、Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ、７７頁（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６〜９５（１９９１）において記載されている方法もまた、ヒトモノクローナル抗体を調製するために利用可能である。また、ｖａｎ  Ｄｉｊｋおよびｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５：３６８〜７４（２００１）も参照されたい。ヒト抗体は、抗原投与に応答して、このような抗体を産生するように改変されているが、それらの内因性の遺伝子座を失効化させたトランスジェニック動物、例えば、免疫化クセノマウスへと、抗原を投与することにより調製することができる（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術に関しては、米国特許第６，０７５，１８１号および同第６，１５０，５８４号を参照されたい）。例えば、また、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して作出されるヒト抗体に関しては、Ｌｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１０３：３５５７〜３５６２（２００６）も参照されたい。
【０１１１】
本明細書で使用される「超可変領域」または「ＨＶＲ」という用語は、配列が超可変性であり（「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」）、かつ／または構造的に規定されたループ（「超可変ループ」）を形成し、かつ／または抗原接触残基（「抗原接触部」）を含有する、抗体の可変ドメインの領域の各々を指す。一般に、抗体は、ＶＨ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）内の３つ、およびＶＬ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）内の３つである、６つのＨＶＲを含む。本明細書における例示的ＨＶＲは、
（ａ）アミノ酸残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）、９１〜９６（Ｌ３）、２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）、および９６〜１０１（Ｈ３）において生じる超可変ループ（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１〜９１７（１９８７））；
（ｂ）アミノ酸残基２４〜３４（Ｌ１）、５０〜５６（Ｌ２）、８９〜９７（Ｌ３）、３１〜３５ｂ（Ｈ１）、５０〜６５（Ｈ２）、および９５〜１０２（Ｈ３）において生じるＣＤＲ（Ｋａｂａｔら、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」、５版、Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅａ、ＭＤ（１９９１））；
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ〜３６（Ｌ１）、４６〜５５（Ｌ２）、８９〜９６（Ｌ３）、３０〜３５ｂ（Ｈ１）、４７〜５８（Ｈ２）、および９３〜１０１（Ｈ３）において生じる抗原接触部（ＭａｃＣａｌｌｕｍら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２６２：７３２〜７４５（１９９６））；ならびに
（ｄ）ＨＶＲのアミノ酸残基４６〜５６（Ｌ２）、４７〜５６（Ｌ２）、４８〜５６（Ｌ２）、４９〜５６（Ｌ２）、２６〜３５（Ｈ１）、２６〜３５ｂ（Ｈ１）、４９〜６５（Ｈ２）、９３〜１０２（Ｈ３）、および９４〜１０２（Ｈ３）を含む、（ａ）、（ｂ）、および／または（ｃ）の組合せを含む。別途指示がない限り、本明細書では、ＨＶＲ残基、および可変ドメイン内の他の残基（例えば、ＦＲ残基）は、Ｋａｂａｔら、前出に従い番号付けされる。
【０１１２】
「フレームワーク」または「ＦＲ」とは、超可変領域（ＨＶＲ）残基以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは、一般に、４つのＦＲドメイン：ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４からなる。したがって、ＨＶＲ配列およびＦＲ配列は一般に、ＶＨ（またはＶＬ）内に、以下の順序：ＦＲ１−Ｈ１（Ｌ１）−ＦＲ２−Ｈ２（Ｌ２）−ＦＲ３−Ｈ３（Ｌ３）−ＦＲ４で現れる。
【０１１３】
「カバットによる可変ドメイン残基の番号付け」または「カバットによるアミノ酸位置の番号付け」という用語、およびこれらの変化形は、Ｋａｂａｔら、前出における抗体集成による、重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインに使用される番号付けシステムを指す。この番号付けシステムを使用する場合、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲまたはＨＶＲの短縮、またはこれらへの挿入に対応する、少数のアミノ酸またはさらなるアミノ酸を含有しうる。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２の後における、単一のアミノ酸挿入（カバットに従う残基５２ａ）、および重鎖ＦＲの残基８２の後に挿入される残基（例えば、カバットに従う残基８２ａ、８２ｂ、および８２ｃなど）を含みうる。残基のカバット番号付けは、所与の抗体について、抗体の配列の相同性領域における、「標準的な」カバットにより番号付けされた配列とのアライメントにより決定することができる。
【０１１４】
カバット番号付けシステムは、一般に、可変ドメイン（軽鎖の残基約１〜１０７、および重鎖の残基１〜１１３）（例えば、Ｋａｂａｔら、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」、５版、Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９９１））内の残基に言及する場合に使用される。「ＥＵ番号付けシステム」または「ＥＵインデックス」は、一般に、免疫グロブリン重鎖定常領域（例えば、Ｋａｂａｔら、前出において報告されている、ＥＵインデックス）内の残基に言及する場合に使用される。「カバットによるＥＵインデックス」とは、ヒトＩｇＧ１  ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。
【０１１５】
本明細書で使用される、「〜に結合する」、「〜に特異的に結合する」、または「〜に特異的な」という用語は、生物学的分子を含む、不均一な分子の集団の存在下において、標的の存在を決定する、標的と抗体との結合など、測定可能かつ再現可能な相互作用を指す。例えば、標的（エピトープでありうる）に結合するか、またはこれに特異的に結合する抗体は、この標的に、それが他の標的に結合するより大きなアフィニティーで、より大きなアビディティーで、よりたやすく、かつ／または長い持続時間を伴って結合する抗体である、すなわち、結合は、抗原に対して選択的であり、望ましくないか、または非特異的な相互作用と区別することができる。一実施形態では、抗体が、非類縁標的に結合する程度は、例えば、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）により測定される通り、抗体の、標的への結合の約１０％未満である。ある特定の実施形態では、標的に特異的に結合する抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、または≦０．１ｎＭの解離定数（ＫＤ）を有する。ある特定の実施形態では、抗体は、異なる種に由来するタンパク質間で保存されている、タンパク質上のエピトープに特異的に結合する。別の実施形態では、特異的結合は、排他的結合を含みうるが、これを要請しない。
【０１１６】
「抗原結合ドメイン」という用語は、抗原の一部または全部に特異的に結合し、これらと相補的な帯域を含む、抗体の一部を指す。抗原結合ドメインは、例えば、１または複数の抗体の可変ドメイン（抗体の可変領域とまた呼ばれる）によりもたらされうる。好ましくは、抗原結合ドメインは、抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）および抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。
【０１１７】
本明細書では、「Ｆｃドメイン」または「Ｆｃ領域」という用語を、定常領域の少なくとも一部を含有する、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を規定するように使用する。用語は、天然配列のＦｃ領域および変異Ｆｃ領域を含む。ＩｇＧ重鎖のＦｃ領域の境界部は、若干変動しうるであろうが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通例、Ｃｙｓ２２６またはＰｒｏ２３０から、重鎖のカルボキシル末端へと拡がると規定される。しかし、宿主細胞により産生される抗体は、重鎖のＣ末端から、１または複数のアミノ酸、特に、１つまたは２つのアミノ酸の翻訳後切断を経る場合がある。したがって、完全長重鎖をコードする、特異的な核酸分子の発現を介して、宿主細胞により産生される抗体は、完全長重鎖を含む場合もあり、完全長重鎖の切断型変異体（本明細書ではまた、「切断型変異体重鎖」とも称する）を含む場合もある。これは、重鎖の最後の２つのＣ末端アミノ酸が、グリシン（Ｇ４４６）およびリジン（Ｋ４４７；カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）である場合でありうる。したがって、Ｆｃ領域のＣ末端のリジン（Ｌｙｓ４４７）、またはＣ末端のグリシン（Ｇｌｙ４４６）およびリジン（Ｋ４４７）は、存在する場合もあり、存在しない場合もある。本明細書では、別途指示のない限り、Ｆｃドメイン（または本明細書で規定されるＦｃドメインのサブユニット）を含む重鎖のアミノ酸配列を、Ｃ末端のグリシン−リジンジペプチドを伴わずに表記する。本発明の一実施形態では、本明細書で指定されたＦｃドメインのサブユニットを含む重鎖、例えば、本発明において有用なイムノコンジュゲート内に含まれる重鎖は、追加のＣ末端グリシン−リジンジペプチド（Ｇ４４６およびＫ４４７；カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。本発明の一実施形態では、本明細書で指定されたＦｃドメインのサブユニットを含む重鎖、例えば、本発明において有用なイムノコンジュゲート内に含まれる重鎖は、追加のＣ末端グリシン残基（Ｇ４４６；カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。本発明の組成物は、抗体またはイムノコンジュゲートの集団を含む。抗体またはイムノコンジュゲートの集団は、完全長重鎖を有する分子と、切断型変異体重鎖を有する分子とを含みうる。抗体またはイムノコンジュゲートの集団は、完全長重鎖を有する分子と、切断型変異体重鎖を有する分子との混合物からなる場合があるが、この場合、抗体またはイムノコンジュゲートのうちの、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％は、切断型変異体重鎖を有する。本発明の一実施形態では、抗体またはイムノコンジュゲートの集団を含む組成物は、本明細書で指定されたＦｃドメインのサブユニットを含む重鎖であって、追加のＣ末端グリシン−リジンジペプチド（Ｇ４４６およびＫ４４７；カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を伴う重鎖を含む、抗体またはイムノコンジュゲートを含む。本発明の一実施形態では、抗体またはイムノコンジュゲートの集団を含む組成物は、本明細書で指定されたＦｃドメインのサブユニットを含む重鎖であって、追加のＣ末端グリシン残基（Ｇ４４６；カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を伴う重鎖を含む、抗体またはイムノコンジュゲートを含む。一実施形態では、このような組成物は、本明細書で指定されたＦｃドメインのサブユニットを含む重鎖を含む分子；本明細書で指定されたＦｃドメインのサブユニットを含む重鎖であって、追加のＣ末端グリシン残基（Ｇ４４６；カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を伴う重鎖を含む分子；および本明細書で指定されたＦｃドメインのサブユニットを含む重鎖であって、追加のＣ末端グリシン−リジンジペプチド（Ｇ４４６およびＫ４４７；カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を伴う重鎖を含む分子から構成される、抗体またはイムノコンジュゲートの集団を含む。本明細書では、別途指定のない限り、Ｆｃ領域内または定常領域内のアミノ酸残基の番号付けは、Ｋａｂａｔら、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」、５版、Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ、１９９１において記載されている（また、上記も参照されたい）、ＥＵインデックスともまた呼ばれるＥＵ番号づけシステムに従う。本明細書で使用される、Ｆｃドメインの「サブユニット」とは、ダイマーのＦｃドメインを形成する２つのポリペプチドのうちの１つ、すなわち、安定的な自己会合が可能な、免疫グロブリン重鎖のＣ末端の定常領域を含むポリペプチドを指す。例えば、ＩｇＧのＦｃドメインのサブユニットは、ＩｇＧ  ＣＨ２定常ドメインおよびＩｇＧ  ＣＨ３定常ドメインを含む。
【０１１８】
「融合させた」とは、構成要素（例えば、抗体およびＩＬ−２ポリペプチド）を、ペプチド結合により、直接、または１もしくは複数のペプチドリンカーを介して連結することを意味する。
【０１１９】
「Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する修飾」とは、Ｆｃドメインサブユニットを含むポリペプチドの、同一なポリペプチドとの会合であって、ホモダイマーを形成する会合を低減するか、または防止する、ペプチド骨格の操作、またはＦｃドメインサブユニットの翻訳後修飾である。本明細書で使用される、会合を促進する修飾は、特に、会合することが所望される、２つのＦｃドメインサブユニット（すなわち、Ｆｃドメインの第１のサブユニットおよび第２のサブユニット）の各々へと施される個別の修飾であって、２つのＦｃドメインサブユニットの会合を促進するように、互いと相補的な修飾を含む。例えば、会合を促進する修飾は、それらの会合を、立体的または静電的に、それぞれ、好適とするように、Ｆｃドメインサブユニットの一方または両方の構造または電荷を変更しうる。したがって、サブユニット（例えば、抗原結合部分）の各々へと融合させる、さらなる構成要素が同じではないという意味において、非同一でありうる、第１のＦｃドメインサブユニットを含むポリペプチドと、第２のＦｃドメインサブユニットを含むポリペプチドとの間で、（ヘテロ）二量体化が生じる。一部の実施形態では、会合を促進する修飾は、Ｆｃドメイン内のアミノ酸突然変異、具体的には、アミノ酸置換を含む。特定の実施形態では、会合を促進する修飾は、Ｆｃドメインの、２つのサブユニットの各々における、個別のアミノ酸突然変異、具体的には、アミノ酸置換を含む。
【０１２０】
「活性化Ｆｃ受容体」とは、抗体のＦｃドメインの係合の後で、エフェクター機能を果たすように、受容体保有細胞を刺激するシグナル伝達イベントを誘発するＦｃ受容体である。活性化Ｆｃ受容体は、ＦｃγＲＩＩＩａ（ＣＤ１６ａ）、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩａ（ＣＤ３２）、およびＦｃαＲＩ（ＣＤ８９）を含む。
【０１２１】
抗体に言及して使用される場合の「エフェクター機能」という用語は、抗体のＦｃ領域へと帰せられうる生物活性であって、抗体のアイソタイプと共に変動する生物活性を指す。抗体のエフェクター機能の例は、Ｃ１ｑ結合および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）、サイトカイン分泌、抗原提示細胞による、免疫複合体に媒介される抗原の取込み、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方調節、およびＢ細胞活性化を含む。
【０１２２】
抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）とは、抗体でコートされた標的細胞の、免疫エフェクター細胞による溶解をもたらす免疫機構である。標的細胞とは、一般に、Ｆｃ領域に対してＮ末端であるタンパク質の部分を介して、抗体またはＦｃ領域を含むその誘導体が、特異的に結合する細胞である。本明細書で使用される「ＡＤＣＣの低減」という用語は、標的細胞を取り囲む培地中の抗体の所与の濃度で、所与の時間内に、上記で規定されたＡＤＣＣ機構により溶解する標的細胞の数の低減、および／または所与の時間内に、ＡＤＣＣ機構により、所与の数の標的細胞の溶解を達成するのに要請される、標的細胞を取り囲む培地中の抗体の濃度の増大と規定される。ＡＤＣＣの低減は、同じ標準的な作製法、精製法、製剤化法、および保管法（当業者に公知である）を使用して、同じ種類の宿主細胞により産生され、操作されていない、同じ抗体に媒介されるＡＤＣＣと比べた低減である。例えば、そのＦｃドメイン内に、ＡＤＣＣを低減するアミノ酸置換を含む抗体に媒介される、ＡＤＣＣの低減は、Ｆｃドメイン内のこのアミノ酸置換を伴わない同じ抗体に媒介されるＡＤＣＣと比べた低減である。当該技術分野では、ＡＤＣＣを測定するのに適するアッセイが周知である（例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００６／０８２５１５号またはＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／１３０８３１号を参照されたい）。
【０１２３】
本明細書で使用される「〜を操作する（ｅｎｇｉｎｅｅｒ）」、「操作された（ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ）」、「〜を操作すること（ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）」という用語は、天然に存在するポリペプチドもしくは組換えポリペプチドまたはこれらの断片のペプチド骨格または翻訳後修飾の任意の操作を含むと考えられる。操作すること（ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）は、個別のアミノ酸のアミノ酸配列、グリコシル化パターン、または側鎖基の修飾のほか、これらの手法の組合せを含む。
【０１２４】
本明細書で使用される「イムノコンジュゲート」という用語は、少なくとも１つのＩＬ−２分子と、少なくとも１つの抗体とを含むポリペプチド分子を指す。ＩＬ−２分子は、抗体へと、本明細書で記載される、様々な相互作用により、かつ、様々な構成により接続することができる。特定の実施形態では、ＩＬ−２分子を、ペプチドリンカーを介して、抗体へと融合させる。本発明において有用な、特定のイムノコンジュゲートは、１つのＩＬ−２分子と、１または複数のリンカー配列を接続された抗体とから本質的になる。
【０１２５】
「低減」（および「〜を低減する」または「〜を低減すること」など、その文法的変化形）、例えば、結合の低減とは、当該技術分野で公知の、適切な方法により測定される、それぞれの数量の減少を指す。明確さのために、用語はまた、ゼロ（または解析法の検出限界を下回る）への低減、すなわち、完全な消失（ａｂｏｌｉｓｈｍｅｎｔまたはｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ）も含む。逆に、「増大させた」とは、それぞれの数量の増大を指す。例えば、「結合の低減」とは、例えば、ＳＰＲにより測定される、それぞれの相互作用についての、アフィニティーの減少を指し、また、アフィニティーの、ゼロ（または解析法の検出限界を下回る）への低減、すなわち、相互作用の完全な消失も含む。逆に、「結合の増大」とは、それぞれの相互作用についての、結合アフィニティーの増大を指す。
【０１２６】
本明細書で使用される「インターロイキン２」または「ＩＬ−２」という用語は、別途指示がない限り、霊長類（例えば、ヒト）およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳類を含む、任意の脊椎動物供給源に由来する、任意の天然のＩＬ−２を指す。用語は、プロセシングされていないＩＬ−２のほか、細胞内のプロセシングから生じる、ＩＬ−２の任意の形態を包含する。用語はまた、ＩＬ−２の、天然に存在する変異体、例えば、スプライスバリアントまたは対立遺伝子変異体も包含する。例示的なヒトＩＬ−２のアミノ酸配列を、配列番号５２に示す。プロセシングされていないヒトＩＬ−２は、加えて、配列番号５５の配列を有する、Ｎ末端の２０アミノ酸のシグナルペプチドであって、成熟ＩＬ−２分子内に非存在であるシグナルペプチドを含む。
【０１２７】
本明細書で使用される「ＩＬ−２突然変異体」または「突然変異体ＩＬ−２ポリペプチド」という用語は、ＩＬ−２分子の多様な形態であって、完全長ＩＬ−２、ＩＬ−２の切断形態、およびＩＬ−２を、融合または化学的コンジュゲーションなどにより、別の分子へと連結した形態を含む形態の、任意の突然変異形態を包含することを意図する。ＩＬ−２に言及して使用される場合の「完全長」とは、成熟した長さ、天然の長さのＩＬ−２分子を意味することを意図する。例えば、完全長ヒトＩＬ−２とは、１３３アミノ酸を有する分子（例えば、配列番号５２を参照されたい）を指す。ＩＬ−２突然変異体の多様な形態は、ＩＬ−２の、ＣＤ２５との相互作用に影響を及ぼす、少なくとも１つのアミノ酸突然変異を有することにおいて、特徴を明らかにされる。この突然変異は、この位置に通常配置される、野生型アミノ酸残基の置換、欠失、トランケーション、または修飾を伴いうる。アミノ酸置換により得られる突然変異体が好ましい。別途指示がない限り、本明細書では、ＩＬ−２突然変異体を、突然変異体ＩＬ−２ペプチド配列、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチド、突然変異体ＩＬ−２タンパク質、または突然変異体ＩＬ−２アナログと称する場合がある。
【０１２８】
本明細書では、ＩＬ−２の、配列番号５２に示される配列に関して、多様な形態で表記する。本明細書では、同じ突然変異を指し示すのに、多様な表記法を使用する場合がある。例えば、４２位における、フェニルアラニンから、アラニンへの突然変異は、４２Ａ、Ａ４２、Ａ４２、Ｆ４２Ａ、またはＰｈｅ４２Ａｌａと表示することができる。
【０１２９】
本明細書で使用される「ヒトＩＬ−２分子」とは、配列番号５２のヒトＩＬ−２配列と、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％同一なアミノ酸配列を含むＩＬ−２分子を意味する。特に、配列同一性は、少なくとも約９５％、より特定すると、少なくとも約９６％である。特定の実施形態では、ヒトＩＬ−２分子は、完全長ＩＬ−２分子である。
【０１３０】
本明細書で使用される「アミノ酸突然変異」という用語は、アミノ酸の置換、欠失、挿入、および修飾を包含することを意図する。最終的なコンストラクトに到達するように、最終的なコンストラクトが、所望の特性、例えば、ＣＤ２５への結合の低減を保有するという条件で、置換、欠失、挿入、および修飾の任意の組合せを施すことができる。アミノ酸配列の欠失および挿入は、アミノ酸の、アミノ末端および／またはカルボキシ末端の、欠失および挿入を含む。末端における欠失の例は、完全長ヒトＩＬ−２の１位における、アラニン残基の欠失である。好ましいアミノ酸突然変異は、アミノ酸置換である。例えば、ＩＬ−２ポリペプチドの結合特性を変更する目的では、非保存的アミノ酸置換、すなわち、１つのアミノ酸を、異なる構造的特性および／または化学的特性を有する、別のアミノ酸で置きかえることが、特に、好ましい。好ましいアミノ酸置換は、疎水性アミノ酸を、親水性アミノ酸により置きかえることを含む。アミノ酸置換は、天然に存在しないアミノ酸、または２０の標準的なアミノ酸の、天然に存在するアミノ酸誘導体（例えば、４−ヒドロキシプロリン、３−メチルヒスチジン、オルニチン、ホモセリン、５−ヒドロキシリジン）による置きかえを含む。アミノ酸突然変異は、当該技術分野で周知の遺伝子法または化学法を使用して作出することができる。遺伝子法は、部位特異的突然変異誘発、ＰＣＲ、遺伝子合成などを含みうる。化学修飾など、遺伝子操作以外の方法により、アミノ酸の側鎖基を変更する方法もまた、有用でありうることが想定される。
【０１３１】
本明細書で使用されるＩＬ−２の「野生型」形態とは、野生型形態が、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの各アミノ酸位置において、野生型アミノ酸を有することを除く他の点では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドと同じである、ＩＬ−２の形態である。例えば、ＩＬ−２突然変異体が、完全長ＩＬ−２（すなわち、他の任意の分子へと融合またはコンジュゲートさせていないＩＬ−２）である場合、この突然変異体の野生型形態は、天然の完全長ＩＬ−２である。ＩＬ−２突然変異体が、ＩＬ−２と、ＩＬ−２の下流においてコードされる別のポリペプチド（例えば、抗体鎖）との融合体である場合、このＩＬ−２突然変異体の野生型形態は、同じ下流のポリペプチドへと融合させた野生型アミノ酸配列を伴うＩＬ−２である。さらに、ＩＬ−２突然変異体が、ＩＬ−２（ＩＬ−２の非切断型部分内の、突然変異配列または修飾配列）の切断型形態である場合、このＩＬ−２突然変異体の野生型形態も、同様に、野生型配列を有する切断型ＩＬ−２である。ＩＬ−２突然変異体の多様な形態の、ＩＬ−２受容体への結合のアフィニティーまたは生物活性を、ＩＬ−２の、対応する野生型形態と比較する目的で、野生型という用語は、天然に存在する、天然のＩＬ−２と比較して、ＩＬ−２受容体への結合に影響を及ぼさない、１または複数のアミノ酸突然変異であって、例えば、ヒトＩＬ−２の残基１２５に対応する位置におけるシステインの、アラニンへの置換などのアミノ酸突然変異を含む、ＩＬ−２の形態を包含する。一部の実施形態では、本発明の目的のための、野生型ＩＬ−２は、アミノ酸置換であるＣ１２５Ａ（配列番号５４を参照されたい）を含む。本発明に従う、ある特定の実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドを比較する、野生型ＩＬ−２ポリペプチドは、配列番号５２のアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドを比較する、野生型ＩＬ−２ポリペプチドは、配列番号５４のアミノ酸配列を含む。
【０１３２】
本明細書で使用される、「ＣＤ２５」または「ＩＬ−２受容体のα−サブユニット」という用語は、別途指示がない限り、霊長類（例えば、ヒト）およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳類を含む、任意の脊椎動物供給源に由来する、任意の天然のＣＤ２５を指す。用語は、「完全長」ＣＤ２５、プロセシングされていないＣＤ２５のほか、細胞内のプロセシングから生じる、ＣＤ２５の任意の形態を包含する。用語はまた、ＣＤ２５の、天然に存在する変異体、例えば、スプライスバリアントまたは対立遺伝子変異体も包含する。ある特定の実施形態では、ＣＤ２５は、ヒトＣＤ２５である。ヒトＣＤ２５のアミノ酸配列は、例えば、ＵｎｉＰｒｏｔ登録番号：Ｐ０１５８９（ｖｅｒｓｉｏｎ  １８５）に見出される。
【０１３３】
本明細書で使用される「高アフィニティーＩＬ−２受容体」という用語は、受容体γサブユニット（サイトカイン受容体コモンγサブユニット、γｃ、またはＣＤ１３２としてもまた公知であり、ＵｎｉＰｒｏｔ登録番号：Ｐ１４７８４（ｖｅｒｓｉｏｎ  １９２）を参照されたい）、受容体βサブユニット（ＣＤ１２２またはｐ７０としてもまた公知であり、ＵｎｉＰｒｏｔ登録番号：Ｐ３１７８５（ｖｅｒｓｉｏｎ  １９７）を参照されたい）、および受容体αサブユニット（ＣＤ２５またはｐ５５としてもまた公知であり、ＵｎｉＰｒｏｔ登録番号：Ｐ０１５８９（ｖｅｒｓｉｏｎ  １８５）を参照されたい）からなる、ＩＬ−２受容体のヘテロトリマー形態を指す。「中アフィニティーＩＬ−２受容体」という用語は、対照的に、α−サブユニットを伴わず、γ−サブユニットおよびβ−サブユニットだけを含むＩＬ−２受容体（総説については、例えば、ＯｌｅｊｎｉｃｚａｋおよびＫａｓｐｒｚａｋ、Ｍｅｄ  Ｓｃｉ  Ｍｏｎｉｔ  １４、ＲＡ１７９〜１８９（２００８）を参照されたい）を指す。
【０１３４】
「アフィニティー」とは、分子（例えば、受容体）の単一の結合部位と、その結合パートナー（例えば、リガンド）との非共有結合的相互作用の総計の強度を指す。別途指示がない限り、本明細書で使用される「結合アフィニティー」とは、結合対のメンバーの間（例えば、抗原結合部分と抗原との間、または受容体とそのリガンドとの間）の１：１の相互作用を反映する、固有の結合アフィニティーを指す。分子Ｘの、そのパートナーＹに対するアフィニティーは一般に、解離速度定数および会合速度定数（それぞれ、ｋｏｆｆおよびｋｏｎ）の比である、解離定数（ＫＤ）により表されうる。したがって、同等なアフィニティーは、速度定数の比が、同じ比を維持する限り、異なる速度定数を含みうる。アフィニティーは、当該技術分野で公知の、十分に確立された方法であって、本明細書で記載される方法を含む方法により測定することができる。アフィニティーを測定するための特定の方法は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）である。突然変異体または野生型のＩＬ−２ポリペプチドの、ＩＬ−２受容体の多様な形態に対するアフィニティーは、ＷＯ２０１２／１０７４１７において明示される方法に従い、ＢＩＡｃｏｒｅ計器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）などの標準的な計測、および組換え発現などにより得られうる受容体サブユニット（例えば、Ｓｈａｎａｆｅｌｔら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、１８、１１９７〜１２０２（２０００）を参照されたい）を使用して、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）により決定することができる。代替的に、ＩＬ−２受容体の異なる形態に対する、ＩＬ−２突然変異体の結合アフィニティーは、受容体の、１つまたは他のこのような形態を発現することが公知の細胞株を使用して査定することができる。結合アフィニティーを測定するための、具体的な例示的（ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｖｅおよびｅｘｅｍｐｌａｒｙ）実施形態については、本明細書の後出で記載する。
【０１３５】
「制御性Ｔ細胞」または「Ｔｒｅｇ細胞」とは、他のＴ細胞の応答を抑制しうる、ＣＤ４＋Ｔ細胞の特化型を意味する。Ｔｒｅｇ細胞は、ＩＬ−２受容体α−サブユニット（ＣＤ２５）および転写因子フォークヘッドボックスＰ３（ＦＯＸＰ３）の発現により特徴を明らかにされ（Ｓａｋａｇｕｃｈｉ、Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、２２、５３１〜６２（２００４））、腫瘍により発現される抗原を含む抗原に対する、末梢性自己寛容の誘導および維持において、極めて重要な役割を果たす。Ｔｒｅｇ細胞は、それらの機能ならびにそれらの抑制特性の発生および誘導のために、ＩＬ−２を要請する。
【０１３６】
本明細書で使用される「エフェクター細胞」という用語は、ＩＬ−２の細胞傷害効果を媒介するリンパ球の集団を指す。エフェクター細胞は、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞などのエフェクターＴ細胞、ＮＫ細胞、リンホカイン活性化キラー（ＬＡＫ）細胞、およびマクロファージ／単球を含む。
【０１３７】
基準ポリペプチド配列に照らした「アミノ酸配列の同一性パーセント（％）」とは、配列をアライメントし、必要な場合は、ギャップを導入して、最大の配列同一性パーセントを達成するが、保存的置換は、配列同一性の部分として考慮せずにおいた後における、基準ポリペプチド配列内のアミノ酸残基と同一な、候補配列内のアミノ酸残基の百分率と規定される。アミノ酸配列の同一性パーセントを決定することを目的とするアライメントは、例えば、ＢＬＡＳＴソフトウェア、ＢＬＡＳＴ−２ソフトウェア、Ｃｌｕｓｔａｌ  Ｗソフトウェア、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア、またはＦＡＳＴＡプログラムパッケージなど、公開されているコンピュータソフトウェアを使用して、当該技術分野の範囲内にある多様な方式で達成することができる。当業者は、配列をアライメントするのに適切なパラメータであって、比較される配列の完全長にわたり、最大のアライメントを達成するのに必要とされる、任意のアルゴリズムを含むパラメータを決定することができる。しかし、本明細書の目的では、アミノ酸配列の同一性パーセント％値は、ｇｇｓｅａｒｃｈプログラムＦＡＳＴＡパッケージｖｅｒｓｉｏｎ  ３６．３．８ｃ、またはその後に、ＢＬＯＳＵＭ５０比較マトリックスを使用して生成する。ＦＡＳＴＡプログラムパッケージは、Ｗ．Ｒ．ＰｅａｒｓｏｎおよびＤ．Ｊ．Ｌｉｐｍａｎ（１９８８）、「Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ｔｏｏｌｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ」、ＰＮＡＳ、８５：２４４４〜２４４８；Ｗ．Ｒ．Ｐｅａｒｓｏｎ（１９９６）、「Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ」、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，２６６：２２７〜２５８；およびＰｅａｒｓｏｎら（１９９７）、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ、４６：２４〜３６により作製され、ｈｔｔｐ：／／ｆａｓｔａ．ｂｉｏｃｈ．ｖｉｒｇｉｎｉａ．ｅｄｕ／ｆａｓｔａ＿ｗｗｗ２／ｆａｓｔａ＿ｄｏｗｎ．ｓｈｔｍｌから公開されている。代替的に、ｈｔｔｐ：／／ｆａｓｔａ．ｂｉｏｃｈ．ｖｉｒｇｉｎｉａ．ｅｄｕ／ｆａｓｔａ＿ｗｗｗ２／ｉｎｄｅｘ．ｃｇｉにおいてアクセス可能な公開サーバーを使用して、配列を比較することができ、ｇｇｓｅａｒｃｈ（グローバルタンパク質：タンパク質）プログラムおよびデフォルトのオプション（ＢＬＯＳＵＭ５０；ｏｐｅｎ：−１０；ｅｘｔ：−２；Ｋｔｕｐ＝２）を使用して、ローカルではなく、グローバルなアライメントの確保を実施する。アミノ酸同一性パーセントは、出力のアライメントヘッダーに示される。
【０１３８】
本明細書で使用される「ポリペプチド」という用語は、アミド結合（ペプチド結合としてもまた公知である）により直鎖状に連結されたモノマー（アミノ酸）から構成される分子を指す。「ポリペプチド」という用語は、２つまたはこれを超えるアミノ酸の任意の鎖を指し、具体的な長さの産物を指すわけではない。したがって、２つまたはこれを超えるアミノ酸の鎖を指すのに使用される、ペプチド、ジペプチド、トリペプチド、オリゴペプチド、「タンパク質」、「アミノ酸鎖」、または他の任意の用語が、「ポリペプチド」の定義内に含まれ、「ポリペプチド」という用語を、これらの用語のうちのいずれかの代わりに使用することもでき、これらと互換的に使用することもできる。「ポリペプチド」という用語はまた、限定せずに述べると、グリコシル化、アセチル化、リン酸化、アミド化、公知の保護／ブロッキング基による誘導、タンパク質分解性切断、または天然に存在しないアミノ酸による修飾を含む、ポリペプチドの発現後修飾の産物を指すことも意図する。ポリペプチドは、天然の生物学的供給源に由来する場合もあり、組換え技術により作製される場合もあるが、必ずしも、表示の核酸配列から翻訳されるわけではない。ポリペプチドは、化学合成を含む、任意の方式で作出することができる。ポリペプチドは、規定された三次元構造を有しうるが、必ずしも、このような構造を有するわけではない。規定された三次元構造を伴うポリペプチドを、フォールディングポリペプチドと称し、規定された三次元構造を有さず、多数の異なるコンフォメーションを取りうるポリペプチドを、アンフォールディングポリペプチドと称する。
【０１３９】
「免疫グロブリン分子」という用語は、天然に存在する抗体の構造を有するタンパク質を指す。例えば、ＩｇＧクラスの免疫グロブリンとは、ジスルフィド結合させた、２つの軽鎖と、２つの重鎖とから構成される、約１５０，０００ドルトンの、ヘテロテトラマーの糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端へと、各重鎖は、重鎖可変ドメインまたは重鎖可変領域ともまた呼ばれる可変ドメイン（ＶＨ）に続き、重鎖定常領域ともまた呼ばれる、３つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３）を有する。同様に、Ｎ末端からＣ末端へと、各軽鎖は、軽鎖可変ドメインまたは軽鎖可変領域ともまた呼ばれる可変ドメイン（ＶＬ）に続き、軽鎖定常領域ともまた呼ばれる、軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）ドメインを有する。免疫グロブリンの重鎖は、α（ＩｇＡ）、δ（ＩｇＤ）、ε（ＩｇＥ）、γ（ＩｇＧ）、またはμ（ＩｇＭ）と呼ばれる５種類のうちの１つへと割り当てることができ、これらの一部は、亜型、例えば、γ１（ＩｇＧ１）、γ２（ＩｇＧ２）、γ３（ＩｇＧ３）、γ４（ＩｇＧ４）、α１（ＩｇＡ１）、およびα２（ＩｇＡ２）へとさらに分けることができる。免疫グロブリンの軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づき、カッパ（κ）およびラムダ（λ）と呼ばれる、２種類のうちの１つへと割り当てることができる。免疫グロブリンは、免疫グロブリンのヒンジ領域を介して連結された、２つのＦａｂ分子およびＦｃドメインから本質的になる。
【０１４０】
本明細書で使用される「ＣＤ４０アゴニスト」は、ＣＤ４０／ＣＤ４０Ｌ間相互作用をアゴナイズする、任意の部分を含む。典型的に、これらの部分は、アゴニスト性ＣＤ４０抗体、またはアゴニスト性ＣＤ４０Ｌポリペプチドであろう。「アゴニスト」とは、細胞上の受容体と結合し、受容体の天然のリガンドにより誘発される反応または活性と同様であるか、または同じ反応または活性を誘発する。「ＣＤ４０アゴニスト」とは、以下の応答：Ｂ細胞の増殖および／または分化；ＩＣＡＭ−１、Ｅ−セレクチン、ＶＣＡＭなどの分子を介する、細胞間接着の上方制御；ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２、ＴＮＦなど、炎症促進性サイトカインの分泌；ＣＤ４０受容体を介するシグナル伝達であって、ＴＲＡＦ（例えば、ＴＲＡＦ２および／またはＴＲＡＦ３）、ＮＩＫ（ＮＦ−ｋＢ誘導キナーゼ）、Ｉ−カッパＢキナーゼ（ＩＫＫ／ベータ）、転写因子ＮＦ−ｋＢ、Ｒａｓ経路およびＭＥＫ／ＥＲＫ経路、ＰＩ３Ｋ  ＡＫＴ経路、Ｐ３８ＭＡＰＫ経路などのＭＡＰキナーゼなどの経路によるシグナル伝達；ＸＩＡＰ、ｍｃｌ−１、ｂｃｌ−ｘなどの分子による、抗アポトーシスシグナルの伝達；Ｂ細胞および／またはＴ細胞による記憶の発生；Ｂ細胞による抗体の産生；Ｂ細胞アイソタイプの切り替え、ＭＨＣクラスＩＩおよびＣＤ８０／８６の細胞表面発現の上方制御などのうちのいずれかまたは全てであるがこれらに限定されない応答を誘導しうる。アゴニスト活性とは、Ｂ細胞応答についてのアッセイにおいて測定される通り、陰性コントロールにより誘導されるアゴニスト活性を、少なくとも３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％超えるアゴニスト活性を意図する。別の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストは、Ｂ細胞応答についてのアッセイにおいて測定される通り、陰性コントロールにより誘導されるアゴニスト活性の、少なくとも２倍または少なくとも３倍のアゴニスト活性を有する。したがって、例えば、目的のＢ細胞応答が、Ｂ細胞増殖である場合、アゴニスト活性は、陰性コントロールにより誘導されるＢ細胞増殖レベルの、少なくとも２倍または少なくとも３倍のＢ細胞増殖レベルの誘導であろう。
【０１４１】
ＩＩ．ＩＬ−２イムノコンジュゲート
本発明の方法、使用、組成物、およびキットに有用なＩＬ−２イムノコンジュゲートの例、ならびにこれらを作るための方法については、その全内容の各々が本明細書に参照により援用される、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／１０７４１７号および同第ＷＯ２０１２／１４６６２８号において記載されている。
【０１４２】
上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、腫瘍抗原に特異的に結合する抗体、およびＩＬ−２ポリペプチドを含む。
【０１４３】
イムノコンジュゲート内に含まれるＩＬ−２ポリペプチド
本発明において有用なイムノコンジュゲートは、ＩＬ−２ポリペプチドを含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドは、ヒトＩＬ−２ポリペプチドである。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドは、１２５位におけるシステインを、セリン（Ｃ１２５Ｓ）、アラニン（Ｃ１２５Ａ）、スレオニン（Ｃ１２５Ｔ）、またはバリン（Ｃ１２５Ｖ）などの中性アミノ酸で置きかえた、ヒトＩＬ−２ポリペプチドである。
【０１４４】
本発明のために、特に有用なイムノコンジュゲートは、免疫療法に有利な特性を有する、突然変異体のＩＬ−２ポリペプチドを含む。特に、突然変異体のＩＬ−２ポリペプチドでは、ＩＬ−２の薬理的特性であって、ＩＬ−２の毒性に寄与するが、有効性に不可欠ではない薬理的特性を消失させる。このような突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドについては、その全内容が本明細書に参照により援用される、ＷＯ２０１２／１０７４１７において詳細に記載されている。上記で論じた通り、ＩＬ−２受容体の異なる形態は、異なるサブユニットからなり、ＩＬ−２に対する、異なるアフィニティーを呈示する。β受容体サブユニットと、γ受容体サブユニットとからなる、中アフィニティーＩＬ−２受容体は、休眠中のエフェクター細胞上で発現し、ＩＬ−２シグナル伝達に十分である。加えて、受容体のα−サブユニットを含む、高アフィニティーＩＬ−２受容体は、主に、ＩＬ−２による係合が、それぞれ、Ｔｒｅｇ細胞媒介性免疫抑制または活性化誘導性細胞死（ＡＩＣＤ）を促進しうる、制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞上、ならびに活性化エフェクター細胞上で発現する。したがって、理論に束縛されることを望まないが、ＩＬ−２の、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットに対するアフィニティーを低減するか、または消失させることは、ＩＬ−２誘導性の、制御性Ｔ細胞による、エフェクター細胞機能の下方制御と、ＡＩＣＤ過程による、腫瘍に対する寛容の発生とを低減するはずである。他方、中アフィニティーＩＬ−２受容体に対するアフィニティーの維持は、ＩＬ−２による、ＮＫ細胞およびＴ細胞のようなエフェクター細胞の増殖および活性化の誘導を保存するはずである。
【０１４５】
本発明において有用なイムノコンジュゲート内に含まれる、突然変異体インターロイキン２（ＩＬ−２）ポリペプチドは、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットに対するアフィニティーを消失させるか、またはこれを低減する、少なくとも１つのアミノ酸突然変異を含み、各々、野生型ＩＬ−２ポリペプチドと比較して、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、アフィニティーが中程度であるＩＬ−２受容体に対するアフィニティーを保存する。
【０１４６】
ＣＤ２５に対するアフィニティーが減殺された、ヒトＩＬ−２（ｈＩＬ−２）の突然変異体は、例えば、アミノ酸位置３５、３８、４２、４３、４５、もしくは７２、またはこれらの組合せにおけるアミノ酸置換（ヒトＩＬ−２配列である配列番号５２と比べた番号付け）により作出することができる。例示的なアミノ酸置換は、Ｋ３５Ｅ、Ｋ３５Ａ、Ｒ３８Ａ、Ｒ３８Ｅ、Ｒ３８Ｎ、Ｒ３８Ｆ、Ｒ３８Ｓ、Ｒ３８Ｌ、Ｒ３８Ｇ、Ｒ３８Ｙ、Ｒ３８Ｗ、Ｆ４２Ｌ、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｇ、Ｆ４２Ｓ、Ｆ４２Ｔ、Ｆ４２Ｑ、Ｆ４２Ｅ、Ｆ４２Ｎ、Ｆ４２Ｄ、Ｆ４２Ｒ、Ｆ４２Ｋ、Ｋ４３Ｅ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｇ、Ｙ４５Ｓ、Ｙ４５Ｔ、Ｙ４５Ｑ、Ｙ４５Ｅ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｄ、Ｙ４５Ｒ、Ｙ４５Ｋ、Ｌ７２Ｇ、Ｌ７２Ａ、Ｌ７２Ｓ、Ｌ７２Ｔ、Ｌ７２Ｑ、Ｌ７２Ｅ、Ｌ７２Ｎ、Ｌ７２Ｄ、Ｌ７２Ｒ、およびＬ７２Ｋを含む。本発明のためのイムノコンジュゲートに有用な、特定のＩＬ−２突然変異体は、ヒトＩＬ−２の残基４２、４５、もしくは７２に対応するアミノ酸位置、またはこれらの組合せにおけるアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、前記アミノ酸突然変異は、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｇ、Ｆ４２Ｓ、Ｆ４２Ｔ、Ｆ４２Ｑ、Ｆ４２Ｅ、Ｆ４２Ｎ、Ｆ４２Ｄ、Ｆ４２Ｒ、Ｆ４２Ｋ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｇ、Ｙ４５Ｓ、Ｙ４５Ｔ、Ｙ４５Ｑ、Ｙ４５Ｅ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｄ、Ｙ４５Ｒ、Ｙ４５Ｋ、Ｌ７２Ｇ、Ｌ７２Ａ、Ｌ７２Ｓ、Ｌ７２Ｔ、Ｌ７２Ｑ、Ｌ７２Ｅ、Ｌ７２Ｎ、Ｌ７２Ｄ、Ｌ７２Ｒ、およびＬ７２Ｋの群から選択されるアミノ酸置換、より具体的には、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、およびＬ７２Ｇの群から選択されるアミノ酸置換である。これらの突然変異体は、中アフィニティーＩＬ−２受容体に対する、ＩＬ−２突然変異体の野生型形態と比較して、実質的に同様の結合アフィニティーを呈示し、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットおよび高アフィニティーのＩＬ−２受容体に対する、実質的に低減されたアフィニティーを有する。
【０１４７】
有用な突然変異体の、他の特性は、ＩＬ−２受容体を保有するＴ細胞および／またはＮＫ細胞の増殖を誘導する能力、ＩＬ−２受容体を保有するＴ細胞内および／またはＮＫ細胞内のＩＬ−２シグナル伝達を誘導する能力、ＮＫ細胞による二次サイトカインとしてのインターフェロン（ＩＦＮ）−γを発生させる能力、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）による、二次サイトカイン（特に、ＩＬ−１０およびＴＮＦ−α）の同化を誘導する能力の低減、制御性Ｔ細胞を活性化させる能力の低減、Ｔ細胞内のアポトーシスを誘導する能力の低減、およびインビボにおける毒性プロファイルの低減を含みうる。
【０１４８】
本発明のためのＩＬ−２イムノコンジュゲート内で有用な、特定の突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットに対するアフィニティーを消失させるか、またはこれを低減する、３つのアミノ酸突然変異を含むが、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、アフィニティーが中程度であるＩＬ−２受容体に対するアフィニティーを保存する。一実施形態では、前記３つのアミノ酸突然変異は、ヒトＩＬ−２の残基４２、４５、および７２に対応する位置にある。一実施形態では、前記３つのアミノ酸突然変異は、アミノ酸置換である。一実施形態では、前記３つのアミノ酸突然変異は、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｇ、Ｆ４２Ｓ、Ｆ４２Ｔ、Ｆ４２Ｑ、Ｆ４２Ｅ、Ｆ４２Ｎ、Ｆ４２Ｄ、Ｆ４２Ｒ、Ｆ４２Ｋ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｇ、Ｙ４５Ｓ、Ｙ４５Ｔ、Ｙ４５Ｑ、Ｙ４５Ｅ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｄ、Ｙ４５Ｒ、Ｙ４５Ｋ、Ｌ７２Ｇ、Ｌ７２Ａ、Ｌ７２Ｓ、Ｌ７２Ｔ、Ｌ７２Ｑ、Ｌ７２Ｅ、Ｌ７２Ｎ、Ｌ７２Ｄ、Ｌ７２Ｒ、およびＬ７２Ｋの群から選択されるアミノ酸置換である。具体的な実施形態では、前記３つのアミノ酸突然変異は、アミノ酸置換Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、およびＬ７２Ｇ（配列番号５２のヒトＩＬ−２配列と比べた番号付け）である。
【０１４９】
ある特定の実施形態では、前記アミノ酸突然変異は、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットに対するアフィニティーを、少なくとも５分の１、具体的には、少なくとも１０分の１、より具体的には、少なくとも２５分の１に低減する。突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットに対するアフィニティーを低減する、１つを超えるアミノ酸突然変異が存在する実施形態では、これらのアミノ酸突然変異の組合せは、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットに対するアフィニティーを、少なくとも３０分の１、少なくとも５０分の１、なおまたは少なくとも１００分の１に低減しうる。一実施形態では、前記アミノ酸突然変異、またはアミノ酸突然変異の組合せは、表面プラズモン共鳴により、結合が検出可能とならないように、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットに対するアフィニティーを消失させる。
【０１５０】
アフィニティーが中程度である受容体に対する、実質的に同様の結合、すなわち、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、前記受容体に対するアフィニティーの保存は、ＩＬ−２突然変異体が、ＩＬ−２突然変異体の野生型形態の、中アフィニティーＩＬ−２受容体に対するアフィニティーの、約７０％を超えるアフィニティーを呈示する場合に達成される。本発明において有用なＩＬ−２突然変異体は、このようなアフィニティーの約８０％を超えるアフィニティーを呈示することが可能であり、このようなアフィニティーの約９０％を超えるアフィニティーを呈示しうる。
【０１５１】
ＩＬ−２のＯグリコシル化の消失と組み合わせた、ＩＬ−２の、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットに対するアフィニティーの低減は、特性が改善されたＩＬ−２タンパク質を結果としてもたらす。例えば、Ｏグリコシル化部位の消失は、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドを、ＣＨＯ細胞またはＨＥＫ細胞などの哺乳動物細胞内で発現させる場合に、より均一な産物を結果としてもたらす。
【０１５２】
したがって、ある特定の実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、ヒトＩＬ−２の残基３に対応する位置におけるＩＬ−２のＯグリコシル化部位を消失させる、さらなるアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、ヒトＩＬ−２の残基３に対応する位置におけるＩＬ−２のＯグリコシル化部位を消失させる、前記さらなるアミノ酸突然変異は、アミノ酸置換である。例示的なアミノ酸置換は、Ｔ３Ａ、Ｔ３Ｇ、Ｔ３Ｑ、Ｔ３Ｅ、Ｔ３Ｎ、Ｔ３Ｄ、Ｔ３Ｒ、Ｔ３Ｋ、およびＴ３Ｐを含む。具体的な実施形態では、前記さらなるアミノ酸突然変異は、アミノ酸置換Ｔ３Ａである。
【０１５３】
ある特定の実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、本質的に、完全長ＩＬ−２分子である。ある特定の実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、ヒトＩＬ−２分子である。一実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットに対するアフィニティーを消失させるか、またはこれを低減する、少なくとも１つのアミノ酸突然変異を伴う、配列番号５２の配列を含むが、前記突然変異を伴わない、配列番号５２を含むＩＬ−２ポリペプチドと比較して、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、アフィニティーが中程度であるＩＬ−２受容体に対するアフィニティーを保存する。別の実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、ＩＬ−２受容体のα−サブユニットに対するアフィニティーを消失させるか、またはこれを低減する、少なくとも１つのアミノ酸突然変異を伴う、配列番号５４の配列を含むが、前記突然変異を伴わない、配列番号５４を含むＩＬ−２ポリペプチドと比較して、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、アフィニティーが中程度であるＩＬ−２受容体に対するアフィニティーを保存する。
【０１５４】
具体的な実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、活性化Ｔリンパ球の増殖、活性化Ｔリンパ球の分化、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）の活性、活性化Ｂ細胞の増殖、活性化Ｂ細胞の分化、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖、ＮＫ細胞の分化、活性化Ｔ細胞または活性化ＮＫ細胞によるサイトカインの分泌、およびＮＫ／リンパ球活性化キラー（ＬＡＫ）による抗腫瘍細胞傷害性からなる群から選択される細胞応答のうちの１または複数を誘発しうる。
【０１５５】
一実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、制御性Ｔ細胞内のＩＬ−２シグナル伝達を誘導する能力が、野生型ＩＬ−２ポリペプチドと比較して低減されている。一実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、Ｔ細胞内の活性化誘導性細胞死（ＡＩＣＤ）の誘導が、野生型ＩＬ−２ポリペプチドと比較して低下する。一実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、インビボにおける毒性プロファイルが、野生型ＩＬ−２ポリペプチドと比較して低減される。一実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、血清半減期が、野生型ＩＬ−２ポリペプチドと比較して延長される。
【０１５６】
本発明のためのＩＬ−２イムノコンジュゲート内で有用な、特定の突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、ヒトＩＬ−２の、残基３、４２、４５、および７２に対応する位置における、４つのアミノ酸置換を含む。特異的アミノ酸置換は、Ｔ３Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、およびＬ７２Ｇである。ＷＯ２０１２／１０７４１７において裏付けられる通り、前記四重突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、ＣＤ２５への、検出可能な結合の消失、Ｔ細胞内のアポトーシスを誘導する能力の低減、Ｔｒｅｇ細胞内のＩＬ−２シグナル伝達を誘導する能力の低減、およびインビボにおける毒性プロファイルの低減を呈示する。しかし、前記四重突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、エフェクター細胞内のＩＬ−２シグナル伝達を活性化させ、エフェクター細胞の増殖を誘導し、ＮＫ細胞による二次サイトカインとしてのＩＦＮ−γを発生させる能力を保持する。
【０１５７】
さらに、前記突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、ＷＯ２０１２／１０７４１７において記載されている通り、表面疎水性の低減、良好な安定性、および良好な発現収量など、さらなる有利な特性を有する。予測外に、前記突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドはまた、野生型ＩＬ−２と比較した、血清半減期の延長ももたらす。
【０１５８】
本発明において有用なＩＬ−２突然変異体は、ＩＬ−２の、ＣＤ２５との接触面を形成する、ＩＬ−２の領域内、またはグリコシル化部位内に突然変異を有することに加えて、これらの領域の外部のアミノ酸配列内にもまた、１または複数の突然変異を有しうる。ヒトＩＬ−２内の、このようなさらなる突然変異は、発現または安定性の増大など、さらなる利点をもたらしうる。例えば、１２５位におけるシステインは、米国特許第４，５１８，５８４号において記載されている通り、セリン、アラニン、スレオニン、またはバリンなどの中性アミノ酸で置きかえることができ、それぞれ、Ｃ１２５Ｓ  ＩＬ−２、Ｃ１２５Ａ  ＩＬ−２、Ｃ１２５Ｔ  ＩＬ−２、またはＣ１２５Ｖ  ＩＬ−２をもたらす。米国特許第４，５１８，５８４号において記載されている通り、ＩＬ−２の、Ｎ末端のアラニン残基を欠失させ、ｄｅｓ−Ａ１  Ｃ１２５Ｓまたはｄｅｓ−Ａ１  Ｃ１２５Ａのような突然変異体をもたらすこともできる。代替的にまたはこれと共に、ＩＬ−２突然変異体は、通常は、野生型ヒトＩＬ−２の１０４位に生じるメチオニンを、アラニンなどの中性アミノ酸により置きかえる突然変異も含みうる（米国特許第５，２０６，３４４号を参照されたい）。結果として得られる突然変異体、例えば、ｄｅｓ−Ａ１  Ｍ１０４Ａ  ＩＬ−２、ｄｅｓ−Ａ１  Ｍ１０４Ａ  Ｃ１２５Ｓ  ＩＬ−２、Ｍ１０４Ａ  ＩＬ−２、Ｍ１０４Ａ  Ｃ１２５Ａ  ＩＬ−２、ｄｅｓ−Ａ１  Ｍ１０４Ａ  Ｃ１２５Ａ  ＩＬ−２、またはＭ１０４Ａ  Ｃ１２５Ｓ  ＩＬ−２（これらの突然変異体、および他の突然変異体は、米国特許第５，１１６，９４３号およびＷｅｉｇｅｒら、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ、１８０、２９５〜３００（１９８９）において見出すことができる）を、本明細書の上記で記載した、特定のＩＬ−２突然変異と共に使用することができる。
【０１５９】
したがって、ある特定の実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、ヒトＩＬ−２の残基１２５に対応する位置における、さらなるアミノ酸突然変異を含む。一実施形態では、前記さらなるアミノ酸突然変異は、アミノ酸置換であるＣ１２５Ａである。
【０１６０】
当業者は、本発明の目的で、どのさらなる突然変異が、さらなる利点をもたらしうるのかを決定することが可能であろう。例えば、当業者は、ＩＬ−２の、中アフィニティーＩＬ−２受容体に対するアフィニティーを低減するか、またはこれを消失させる、ＩＬ−２配列内のアミノ酸突然変異であって、Ｄ２０Ｔ、Ｎ８８Ｒ、またはＱ１２６Ｄ（例えば、ＵＳ２００７／００３６７５２を参照されたい）などのアミノ酸突然変異は、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチド内に組み入れるのに適さない場合があることを察知するであろう。
【０１６１】
一実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、対応する野生型ＩＬ−２配列、例えば、配列番号５２のヒトＩＬ−２配列と比較して１２以下、１１以下、１０以下、９つ以下、８つ以下、７つ以下、６つ以下、または５つ以下のアミノ酸突然変異を含む。特定の実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、対応する野生型ＩＬ−２配列、例えば、配列番号５２のヒトＩＬ−２配列と比較して５つ以下のアミノ酸突然変異を含む。
【０１６２】
一実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、配列番号５３の配列を含む。一実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドは、配列番号５３の配列からなる。
【０１６３】
イムノコンジュゲートフォーマット
本発明において有用なイムノコンジュゲートは、ＩＬ−分子と、抗体とを含む。このようなイムノコンジュゲートは、ＩＬ−２を、例えば、腫瘍微小環境へと、直接ターゲティングすることにより、ＩＬ−２療法の有効性を、著明に増大させる。イムノコンジュゲート内に含まれる抗体は、全抗体の場合もあり、免疫グロブリンの場合もあり、抗原特異的な結合アフィニティーなどの生物学的機能を有する、その部分または変異体の場合もある。
【０１６４】
イムノコンジュゲート療法の利益は、たやすく明らかである。例えば、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体は、腫瘍特異的エピトープを認識し、イムノコンジュゲート分子の、腫瘍部位へのターゲティングを結果としてもたらす。したがって、非コンジュゲートＩＬ−２に要請される用量より、はるかに低用量のイムノコンジュゲートを使用して、高濃度のＩＬ−２を、腫瘍微小環境へと送達し、これにより、本明細書で言及される、様々な免疫エフェクター細胞の活性化および増殖を結果としてもたらすことができる。さらに、イムノコンジュゲートの形態にあるＩＬ−２の適用は、サイトカイン自体の用量の低下を可能とするので、ＩＬ−２の、所望されない副作用の潜在的可能性は、制限され、イムノコンジュゲートにより、ＩＬ−２を、体内の特異的な部位へとターゲティングすることはまた、全身への曝露の低減も結果としてもたらすことができ、これにより、副作用を、非コンジュゲートＩＬ−２によりもたらされる副作用より小さくする。加えて、イムノコンジュゲートの循環半減期の、非コンジュゲートＩＬ−２と比較した延長は、イムノコンジュゲートの有効性に寄与する。しかし、ＩＬ−２イムノコンジュゲートのこの特性もまた、ＩＬ−２分子の潜在的な副作用を悪化させうる：血流中のＩＬ−２イムノコンジュゲートの循環半減期が、非コンジュゲートＩＬ−２と比べて、著明に長いために、ＩＬ−２または融合タンパク質分子の他の部分が、血管内に一般に存在する成分を活性化させる可能性が増大する。同じ懸念は、Ｆｃまたはアルブミンなど、別の部分へと融合させたＩＬ−２を含有する、他の融合タンパク質であって、循環中のＩＬ−２の半減期の延長を結果としてもたらす融合タンパク質にも当てはまる。したがって、本明細書およびＷＯ２０１２／１０７４１７において記載されている、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドを含むイムノコンジュゲートであって、ＩＬ−２の野生型形態と比較して、毒性が低減されたイムノコンジュゲートは、特に、有利である。
【０１６５】
したがって、本発明では、特に、本明細書で以上に記載した、突然変異体のＩＬ−２ポリペプチドと、標的抗原に結合する抗体とを含むＩＬ−２イムノコンジュゲートが有用である。一実施形態では、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドと、抗体とは、融合タンパク質を形成する、すなわち、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドは、ペプチド結合を、抗体と共有する。一部の実施形態では、抗体は、第１のサブユニットと、第２のサブユニットとから構成されるＦｃドメインを含む。具体的な実施形態では、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドを、そのアミノ末端のアミノ酸において、任意選択で、リンカーペプチドを介して、Ｆｃドメインのサブユニットのうちの１つの、カルボキシ末端のアミノ酸へと融合させる。一部の実施形態では、抗体は、完全長抗体である。一部の実施形態では、抗体は、免疫グロブリン分子、特に、ＩｇＧクラスの免疫グロブリン分子、より特定すると、ＩｇＧ１サブクラスの免疫グロブリン分子である。このような一実施形態では、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドは、アミノ末端のペプチド結合を、免疫グロブリン重鎖のうちの１つと共有する。ある特定の実施形態では、抗体は、抗体断片である。一部の実施形態では、抗体は、Ｆａｂ分子またはｓｃＦｖ分子である。一実施形態では、抗体は、Ｆａｂ分子である。別の実施形態では、抗体は、ｓｃＦｖ分子である。イムノコンジュゲートはまた、１つを超える抗体も含みうる。１つを超える抗体、例えば、第１の抗体および第２の抗体が、イムノコンジュゲート内に含まれる場合、各抗体は、独立して、多様な形態の抗体および抗体断片から選択されうる。例えば、第１の抗体は、Ｆａｂ分子であることが可能であり、第２の抗体は、ｓｃＦｖ分子でありうる。具体的な実施形態では、前記第１の抗体および前記第２の抗体の各々は、ｓｃＦｖ分子であるか、または前記第１の抗体および前記第２の抗体の各々は、Ｆａｂ分子である。特定の実施形態では、前記第１の抗体および前記第２の抗体の各々は、Ｆａｂ分子である。一実施形態では、前記第１の抗体および前記第２の抗体の各々は、同じ標的抗原に結合する。
【０１６６】
例示的なイムノコンジュゲートフォーマットについては、その全内容が本明細書に参照により援用される、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０２０７８３号において記載されている。これらのイムノコンジュゲートは、少なくとも２つの抗体を含む。したがって、一実施形態では、本発明に有用なイムノコンジュゲートは、本明細書で記載される（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドと、少なくとも第１の抗体および第２の抗体とを含む。特定の実施形態では、前記第１の抗体および第２の抗体は、独立して、Ｆｖ分子、特に、ｓｃＦｖ分子、およびＦａｂ分子からなる群から選択される。具体的な実施形態では、前記（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドは、アミノ末端またはカルボキシ末端のペプチド結合を、前記第１の抗体と共有し、前記第２の抗体は、アミノ末端またはカルボキシ末端のペプチド結合を、ｉ）（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチド、またはｉｉ）第１の抗体と共有する。特定の実施形態では、イムノコンジュゲートは、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドと、１または複数のリンカー配列により接続された、第１の抗体および第２の抗体、特に、第１のＦａｂ分子および第２のＦａｂ分子とから本質的になる。このようなフォーマットは、高アフィニティーで、標的抗原に結合するが、ＩＬ−２受容体へのモノマーとしての結合だけをもたらすという利点を有し、これにより、イムノコンジュゲートを、標的部位以外の位置において、ＩＬ−２受容体を保有する免疫細胞へとターゲティングすることを回避する。特定の実施形態では、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドは、カルボキシ末端のペプチド結合を、第１の抗体、特に、第１のＦａｂ分子と共有し、さらには、アミノ末端のペプチド結合を、第２の抗体、特に、第２のＦａｂ分子と共有する。別の実施形態では、第１の抗体、特に、第１のＦａｂ分子は、カルボキシ末端のペプチド結合を、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドと共有し、さらには、アミノ末端のペプチド結合を、第２の抗体、特に、第２のＦａｂ分子と共有する。別の実施形態では、第１の抗体、特に、第１のＦａｂ分子は、アミノ末端のペプチド結合を、第１の（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドと共有し、さらには、カルボキシ末端のペプチド結合を、第２の抗体、特に、第２のＦａｂ分子と共有する。特定の実施形態では、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドは、カルボキシ末端のペプチド結合を、第１の重鎖可変領域と共有し、さらには、アミノ末端のペプチド結合を、第２の重鎖可変領域と共有する。別の実施形態では、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドは、カルボキシ末端のペプチド結合を、第１の軽鎖可変領域と共有し、さらには、アミノ末端のペプチド結合を、第２の軽鎖可変領域と共有する。別の実施形態では、第１の重鎖可変領域または軽鎖可変領域は、カルボキシ末端のペプチド結合により、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドへと接続され、アミノ末端のペプチド結合により、第２の重鎖可変領域または軽鎖可変領域へと、さらに接続される。別の実施形態では、第１の重鎖可変領域または軽鎖可変領域は、アミノ末端のペプチド結合により、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドへと接続され、カルボキシ末端のペプチド結合により、第２の重鎖可変領域または軽鎖可変領域へと、さらに接続される。一実施形態では、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドは、カルボキシ末端のペプチド結合を、第１のＦａｂ重鎖またはＦａｂ軽鎖と共有し、さらには、アミノ末端のペプチド結合を、第２のＦａｂ重鎖またはＦａｂ軽鎖と共有する。別の実施形態では、第１のＦａｂ重鎖またはＦａｂ軽鎖は、カルボキシ末端のペプチド結合を、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドと共有し、さらには、アミノ末端のペプチド結合を、第２のＦａｂ重鎖またはＦａｂ軽鎖と共有する。他の実施形態では、第１のＦａｂ重鎖またはＦａｂ軽鎖は、アミノ末端のペプチド結合を、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドと共有し、さらには、カルボキシ末端のペプチド結合を、第２のＦａｂ重鎖またはＦａｂ軽鎖と共有する。一実施形態では、イムノコンジュゲートは、アミノ末端のペプチド結合を、１または複数のｓｃＦｖ分子と、共有し、カルボキシ末端のペプチド結合を、１または複数のｓｃＦｖ分子と、さらに共有する、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドを含む。
【０１６７】
しかし、本発明において有用なイムノコンジュゲートに、特に適するフォーマットは、抗体としての免疫グロブリン分子を含む。このようなイムノコンジュゲートフォーマットについては、その全内容が本明細書に参照により援用される、ＷＯ２０１２／１４６６２８において記載されている。
【０１６８】
したがって、特定の実施形態では、イムノコンジュゲートは、本明細書で記載される（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドと、標的抗原に結合する免疫グロブリン分子、特に、ＩｇＧ分子、より特定すると、ＩｇＧ１分子とを含む。一実施形態では、イムノコンジュゲートは、１つを超えない（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドを含む。一実施形態では、免疫グロブリン分子は、ヒトである。一実施形態では、免疫グロブリン分子は、ヒト定常領域、例えば、ヒトのＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、および／またはＣＬドメインを含む。一実施形態では、免疫グロブリンは、ヒトＦｃドメイン、特に、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインを含む。一実施形態では、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドは、アミノ末端またはカルボキシ末端のペプチド結合を、免疫グロブリン分子と共有する。一実施形態では、イムノコンジュゲートは、１または複数のリンカー配列により接続された、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドと、免疫グロブリン分子、特に、ＩｇＧ分子、より特定すると、ＩｇＧ１分子とから本質的になる。具体的な実施形態では、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドを、そのアミノ末端のアミノ酸において、任意選択で、リンカーペプチドを介して、免疫グロブリン重鎖のうちの１つの、カルボキシ末端のアミノ酸へと融合させる。
【０１６９】
（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドは、抗体へと、直接融合させることもでき、１または複数のアミノ酸、典型的に、約２〜２０のアミノ酸を含む、リンカーペプチドを介して融合させることもできる。当該技術分野では、リンカーペプチドについて公知であり、本明細書でも記載する。適する、非免疫原性リンカーペプチドは、例えば、（Ｇ４Ｓ）ｎ、（ＳＧ４）ｎ、（Ｇ４Ｓ）ｎ、またはＧ４（ＳＧ４）ｎのリンカーペプチドを含む。「ｎ」は、一般に、１〜１０、典型的に、２〜４の整数である。一実施形態では、リンカーペプチドは、少なくとも５アミノ酸の長さ、一実施形態では、５〜１００、さらなる実施形態では、１０〜５０アミノ酸の長さを有する。特定の実施形態では、リンカーペプチドは、１５アミノ酸の長さを有する。一実施形態では、リンカーペプチドは、（ＧｘＳ）ｎまたは（ＧｘＳ）ｎＧｍであり、Ｇ＝グリシン、Ｓ＝セリンであり、かつ、（ｘ＝３、ｎ＝３、４、５、または６、およびｍ＝０、１、２、または３）または（ｘ＝４、ｎ＝２、３、４、または５、ｍ＝０、１、２、または３）であり、一実施形態では、ｘ＝４およびｎ＝２または３であり、さらなる実施形態では、ｘ＝４およびｎ＝３である。特定の実施形態では、リンカーペプチドは、（Ｇ４Ｓ）３（配列番号６７）である。一実施形態では、リンカーペプチドは、配列番号６７のアミノ酸配列を有する（またはこれからなる）。
【０１７０】
特定の実施形態では、イムノコンジュゲートは、（突然変異体）ＩＬ−２分子と、免疫グロブリン分子、特に、標的抗原に結合する、ＩｇＧ１サブクラスの免疫グロブリン分子とを含み、この場合、（突然変異体）ＩＬ−２分子を、そのアミノ末端のアミノ酸において、配列番号６７のリンカーペプチドを介して、免疫グロブリン重鎖のうちの１つの、カルボキシ末端のアミノ酸へと融合させる。
【０１７１】
特定の実施形態では、イムノコンジュゲートは、（突然変異体）ＩＬ−２分子と、標的抗原に結合する抗体とを含み、この場合、抗体は、Ｆｃドメイン、特に、第１のサブユニットと、第２のサブユニットとから構成される、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインを含み、（突然変異体）ＩＬ−２分子を、そのアミノ末端のアミノ酸において、配列番号６７のリンカーペプチドを介して、Ｆｃドメインのサブユニットのうちの１つの、カルボキシ末端のアミノ酸へと融合させる。
【０１７２】
イムノコンジュゲート内に含まれる抗体
本発明において有用なイムノコンジュゲート内に含まれる抗体は、標的抗原、特に、ヒト標的抗原に結合し、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチドを、抗原が発現する標的部位、特に、腫瘍へと方向付けることが可能である。
【０１７３】
一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）に特異的に結合する抗体を含む。
【０１７４】
「ＣＥＡ」の代替的名称は、ＣＥＡＣＡＭ５を含む。本明細書で使用される「ＣＥＡ」という用語は、別途指示がない限り、霊長類（例えば、ヒト）、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）、およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳類を含む、任意の脊椎動物供給源に由来する、任意の天然のＣＥＡを指す。用語は、「完全長」ＣＥＡ、およびプロセシングされていないＣＥＡのほか、細胞内のプロセシングから生じる、ＣＥＡの任意の形態（例えば、成熟タンパク質）を包含する。用語はまた、ＣＥＡの、天然に存在する変異体およびアイソフォーム、例えば、スプライスバリアントまたは対立遺伝子変異体も包含する。一実施形態では、ＣＥＡは、ヒトＣＥＡである。ヒトＣＥＡのアミノ酸配列を、ＵｎｉＰｒｏｔ（ｗｗｗ．ｕｎｉｐｒｏｔ．ｏｒｇ）受託番号：Ｐ０６７３１、またはＮＣＢＩ（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）ＲｅｆＳｅｑ：ＮＰ＿００４３５４．２に示す。
【０１７５】
本発明のためのイムノコンジュゲートにおいて使用されうる、適切なＣＥＡＰ抗体については、その全内容が本明細書に参照により援用される、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／１１７００２号において記載されている。
【０１７６】
イムノコンジュゲートは、同じ抗原または異なる抗原に結合しうる、２つまたはこれを超える抗体を含みうる。しかし、特定の実施形態では、これらの抗体の各々は、ＣＥＡに結合する。一実施形態では、イムノコンジュゲート内に含まれる本発明の抗体は、単一特異性である。特定の実施形態では、イムノコンジュゲートは、単一の単一特異性抗体、特に、単一特異性の免疫グロブリン分子を含む。
【０１７７】
抗体は、ＣＥＡ、特に、ヒトＣＥＡへの特異的結合を保持する、任意の種類の抗体、またはこの断片でありうる。抗体断片は、Ｆｖ分子、ｓｃＦｖ分子、Ｆａｂ分子、およびＦ（ａｂ’）２分子を含むがこれらに限定されない。しかし、特定の実施形態では、抗体は、完全長抗体である。一部の実施形態では、抗体は、第１のサブユニットと、第２のサブユニットとから構成されるＦｃドメインを含む。一部の実施形態では、抗体は、免疫グロブリン、特に、ＩｇＧクラスの、より特定すると、ＩｇＧ１サブクラスの免疫グロブリンである。
【０１７８】
一部の実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体である。
【０１７９】
一部の実施形態では、ＣＥＡに特異的に結合する抗体は、配列番号３８の重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）１、配列番号３９のＨＣＤＲ２、および配列番号４０のＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域；ならびに／または配列番号４１の軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）１、配列番号４２のＬＣＤＲ２、および配列番号４３のＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖可変領域は、ヒト化可変領域である。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖可変領域は、ヒトフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【０１８０】
一部の実施形態では、抗体は、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号４１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、および配列番号４３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を含む。
【０１８１】
一部の実施形態では、抗体は、（ａ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、および配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、および配列番号４３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖可変領域は、ヒト化可変領域である。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖可変領域は、ヒトフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【０１８２】
一部の実施形態では、抗体は、配列番号３４のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号３５のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。一部の実施形態では、抗体は、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。
【０１８３】
特定の実施形態では、抗体は、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。
【０１８４】
一部の実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。一実施形態では、抗体は、ヒト定常領域を含む免疫グロブリン分子、特に、ヒトのＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、および／またはＣＬドメインを含む、ＩｇＧクラスの免疫グロブリン分子である。ヒト定常ドメインの例示的配列を、配列番号６８および６９（それぞれ、ヒトカッパおよびヒトラムダのＣＬドメイン）、ならびに配列番号７０（ヒトＩｇＧ１の重鎖定常ドメインである、ＣＨ１−ＣＨ２−ＣＨ３）に与える。一部の実施形態では、抗体は、配列番号６８または配列番号６９のアミノ酸配列、特に、配列番号６８のアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号７０のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む重鎖定常領域を含む。特に、重鎖定常領域は、本明細書で記載されるＦｃドメイン内のアミノ酸突然変異を含みうる。
【０１８５】
一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）に特異的に結合する抗体を含む。
【０１８６】
「ＦＡＰ」の代替的名称は、セプラーゼを含む。本明細書で使用される「ＦＡＰ」という用語は、別途指示がない限り、霊長類（例えば、ヒト）、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）、およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳類を含む、任意の脊椎動物供給源に由来する、任意の天然のＣＥＡを指す。用語は、「完全長」ＦＡＰ、およびプロセシングされていないＦＡＰのほか、細胞内のプロセシングから生じる、ＦＡＰの任意の形態（例えば、成熟タンパク質）を包含する。用語はまた、ＦＡＰの、天然に存在する変異体およびアイソフォーム、例えば、スプライスバリアントまたは対立遺伝子変異体も包含する。一実施形態では、ＦＡＰは、ヒトＦＡＰである。ヒトＦＡＰのアミノ酸配列を、ＵｎｉＰｒｏｔ（ｗｗｗ．ｕｎｉｐｒｏｔ．ｏｒｇ）受託番号：Ｑ１２８８４、またはＮＣＢＩ（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）ＲｅｆＳｅｑ：ＮＰ＿００４４５１に示す。
【０１８７】
本発明のためのイムノコンジュゲートにおいて使用されうる、適切なＦＡＰ抗体については、その全内容が本明細書に参照により援用される、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／０２０００６号において記載されている。
【０１８８】
イムノコンジュゲートは、同じ抗原または異なる抗原に結合しうる、２つまたはこれを超える抗体を含みうる。しかし、特定の実施形態では、これらの抗体の各々は、ＦＡＰに結合する。一実施形態では、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体は、単一特異性である。特定の実施形態では、イムノコンジュゲートは、単一の単一特異性抗体、特に、単一特異性の免疫グロブリン分子を含む。
【０１８９】
抗体は、ＦＡＰ、特に、ヒトＦＡＰへの特異的結合を保持する、任意の種類の抗体、またはこの断片でありうる。抗体断片は、Ｆｖ分子、ｓｃＦｖ分子、Ｆａｂ分子、およびＦ（ａｂ’）２分子を含むがこれらに限定されない。しかし、特定の実施形態では、抗体は、完全長抗体である。一部の実施形態では、抗体は、第１のサブユニットと、第２のサブユニットとから構成されるＦｃドメインを含む。一部の実施形態では、抗体は、免疫グロブリン、特に、ＩｇＧクラスの、より特定すると、ＩｇＧ１サブクラスの免疫グロブリンである。
【０１９０】
一部の実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体である。
【０１９１】
一部の実施形態では、ＦＡＰに特異的に結合する抗体は、配列番号４７の重鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または配列番号４８の軽鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号４７の重鎖可変領域配列に由来する、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、および／または配列番号４８の軽鎖可変領域配列に由来する、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖可変領域は、ヒト可変領域である。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖可変領域は、ヒトフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【０１９２】
一部の実施形態では、ＦＡＰに特異的に結合する抗体は、配列番号４７の重鎖可変領域配列に由来する、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２、およびＨＶＲ−Ｈ３と、配列番号４８の軽鎖可変領域配列に由来する、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、およびＨＶＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号４７の重鎖可変領域配列に由来する、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１、ＨＣＤＲ  ２、およびＨＣＤＲ  ３と、配列番号４８の軽鎖可変領域配列に由来する、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１、ＬＣＤＲ  ２、およびＬＣＤＲ  ３とを含む。
【０１９３】
一部の実施形態では、抗体は、配列番号４７のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号４８のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。一部の実施形態では、抗体は、（ａ）配列番号４７のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号４８のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。
【０１９４】
特定の実施形態では、抗体は、（ａ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。
【０１９５】
一部の実施形態では、抗体は、ヒト抗体である。一実施形態では、抗体は、ヒト定常領域を含む免疫グロブリン分子、特に、ヒトのＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、および／またはＣＬドメインを含む、ＩｇＧクラスの免疫グロブリン分子である。ヒト定常ドメインの例示的配列を、配列番号６８および６９（それぞれ、ヒトカッパおよびヒトラムダのＣＬドメイン）、ならびに配列番号７０（ヒトＩｇＧ１の重鎖定常ドメインである、ＣＨ１−ＣＨ２−ＣＨ３）に与える。一部の実施形態では、抗体は、配列番号６８または配列番号６９のアミノ酸配列、特に、配列番号６８のアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号７０のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む重鎖定常領域を含む。特に、重鎖定常領域は、本明細書で記載されるＦｃドメイン内のアミノ酸突然変異を含みうる。
【０１９６】
Ｆｃドメイン
特定の実施形態では、本発明において有用なイムノコンジュゲート内に含まれる抗体は、第１のサブユニットと、第２のサブユニットとから構成されるＦｃドメインを含む。抗体のＦｃドメインは、免疫グロブリン分子の重鎖ドメインを含むポリペプチド鎖の対からなる。例えば、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）分子のＦｃドメインは、それらの各サブユニットが、ＣＨ２  ＩｇＧ重鎖定常ドメインおよびＣＨ３  ＩｇＧ重鎖定常ドメインを含むダイマーである。Ｆｃドメインの２つのサブユニットは、互いとの安定的な会合が可能である。一実施形態では、本発明において有用なイムノコンジュゲートは、１つを超えないＦｃドメインを含む。
【０１９７】
一実施形態では、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体のＦｃドメインは、ＩｇＧのＦｃドメインである。特定の実施形態では、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１のＦｃドメインである。別の実施形態では、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ４のＦｃドメインである。より具体的な実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｓ２２８位（カバットＥＵインデックス番号付け）におけるアミノ酸置換、特に、アミノ酸置換であるＳ２２８Ｐを含む、ＩｇＧ４のＦｃドメインである。このアミノ酸置換は、ＩｇＧ４抗体の、インビボにおけるＦａｂアームの交換を低減する（Ｓｔｕｂｅｎｒａｕｃｈら、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ、３８、８４〜９１（２０１０）を参照されたい）。さらなる特定の実施形態では、Ｆｃドメインは、ヒトＦｃドメインである。なおより特定の実施形態では、Ｆｃドメインは、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインである。ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域の例示的配列を、配列番号６６に与える。
【０１９８】
ヘテロ二量体化を促進するＦｃドメイン修飾
本発明において有用なイムノコンジュゲートは、Ｆｃドメインの、２つのサブユニットのうちの一方または他方へと融合させた、（突然変異体）ＩＬ−２ポリペプチド、特に、単一の（１つを超えない）ＩＬ−２ポリペプチドを含み、したがって、Ｆｃドメインの２つのサブユニットは、典型的に、２つの同一でないポリペプチド鎖内に含まれる。これらのポリペプチドの組換え共発現、およびその後の二量体化は、２つのポリペプチドの、いくつかの可能な組合せをもたらす。したがって、組換え作製における、イムノコンジュゲートの収量および純度を改善するためには、抗体のＦｃドメイン内に、所望のポリペプチドの会合を促進する修飾を導入することが有利であろう。
【０１９９】
したがって、特定の実施形態では、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体のＦｃドメインは、Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する修飾を含む。ヒトＩｇＧのＦｃドメインの、２つのサブユニットの間の、最も広範なタンパク質間相互作用の部位は、ＦｃドメインのＣＨ３ドメイン内の部位である。したがって、一実施形態では、前記修飾は、ＦｃドメインのＣＨ３ドメイン内の部位である。
【０２００】
ヘテロ二量体化を強化するための、ＦｃドメインのＣＨ３ドメイン内の修飾には、いくつかの手法が存在し、これらは、例えば、ＷＯ９６／２７０１１、ＷＯ９８／０５０４３１、ＥＰ１８７０４５９、ＷＯ２００７／１１０２０５、ＷＯ２００７／１４７９０１、ＷＯ２００９／０８９００４、ＷＯ２０１０／１２９３０４、ＷＯ２０１１／９０７５４、ＷＯ２０１１／１４３５４５、ＷＯ２０１２０５８７６８、ＷＯ２０１３１５７９５４、ＷＯ２０１３０９６２９１において記載されている。典型的に、全てのこのような手法では、Ｆｃドメインの、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン、およびＦｃドメインの、第２のサブユニットのＣＨ３ドメインの両方を、各ＣＨ３ドメイン（またはこれを含む重鎖）が、もはや、それ自体とホモ二量体化せず、相補的に操作された他のＣＨ３ドメインとのヘテロ二量体化を強いられるように（第１のＣＨ３ドメインと、第２のＣＨ３ドメインとが、ヘテロ二量体化し、２つの第１のＣＨ３ドメインまたは２つの第２のＣＨ３ドメインの間にホモダイマーが形成されないように）、相補的に操作する。
【０２０１】
具体的な実施形態では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する前記修飾は、いわゆる、Ｆｃドメインの、２つのサブユニットのうちの１つにおける「ノブ」修飾と、Ｆｃドメインの、２つのサブユニットのうちの他の１つにおける「ホール」修飾とを含む、「ノブ・イントゥー・ホール」修飾である。
【０２０２】
ノブ・イントゥー・ホール技術については、例えば、ＵＳ５，７３１，１６８；ＵＳ７，６９５，９３６；Ｒｉｄｇｗａｙら，Ｐｒｏｔ  Ｅｎｇ、９、６１７〜６２１（１９９６）；およびＣａｒｔｅｒ、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈ、２４８、７〜１５（２００１）において記載されている。一般に、方法は、ヘテロダイマー形成を促進し、ホモダイマー形成を妨げるよう、突出部を、空隙内に配置しうるように、第１のポリペプチドの接触面に、突出部（「ノブ」）を導入し、第２のポリペプチドの接触面に、対応する空隙（「ホール」）を導入することを伴う。第１のポリペプチドの接触面に由来する、小型のアミノ酸側鎖を、大型の側鎖（例えば、チロシンまたはトリプトファン）で置きかえることにより、突出部を構築する。大型のアミノ酸側鎖を、小型のアミノ酸側鎖（例えば、アラニンまたはスレオニン）で置きかえることにより、突出部と同一または同様のサイズの代補的空隙を、第２のポリペプチドの接触面内に創出する。
【０２０３】
したがって、特定の実施形態では、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体のＦｃドメインの、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内で、アミノ酸残基を、より大きな側鎖体積を有するアミノ酸残基で置きかえ、これにより、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の空隙に配置可能である、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の突出を作出し、Ｆｃドメインの第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内で、アミノ酸残基を、より小さな側鎖体積を有するアミノ酸残基で置きかえ、これにより、その中に第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の突出が配置可能である、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内の空隙を作出する。
【０２０４】
好ましくは、前記より大きな側鎖体積を有するアミノ酸残基は、アルギニン（Ｒ）、フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、およびトリプトファン（Ｗ）からなる群から選択される。
【０２０５】
好ましくは、前記より小さな側鎖体積を有するアミノ酸残基は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、およびバリン（Ｖ）からなる群から選択される。
【０２０６】
突出および空隙は、例えば、部位特異的突然変異誘発を介して、またはペプチド合成を介して、ポリペプチドをコードする核酸を変更することにより作ることができる。
【０２０７】
具体的な実施形態では、Ｆｃドメインの、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン（「ノブ」サブユニット）内で、３６６位におけるスレオニン残基を、トリプトファン残基で置きかえ（Ｔ３６６Ｗ）、Ｆｃドメインの、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン（「ホール」サブユニット）内で、４０７位におけるチロシン残基を、バリン残基で置きかえる（Ｙ４０７Ｖ）。一実施形態では、Ｆｃドメインの第２のサブユニット内で、加えて、３６６位スレオニン残基を、セリン残基で置きかえ（Ｔ３６６Ｓ）、３６８位のロイシン残基を、アラニン残基で置きかえる（Ｌ３６８Ａ）（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）。
【０２０８】
なおさらなる実施形態では、Ｆｃドメインの第１のサブユニット内で、加えて、３５４位のセリン残基を、システイン残基で置きかえる（Ｓ３５４Ｃ）か、または３５６位におけるグルタミン酸残基を、システイン残基で置きかえ（Ｅ３５６Ｃ）（特に、３５４位におけるセリン残基を、システイン残基で置きかえ）、Ｆｃドメインの第２のサブユニット内で、加えて、３４９位チロシン残基を、システイン残基により置きかえる（Ｙ３４９Ｃ）（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）。これらの２つのシステイン残基の導入は、Ｆｃドメインの、２つのサブユニットの間における、ジスルフィド架橋の形成を結果としてもたらし、ダイマーを、さらに安定化させる（Ｃａｒｔｅｒ、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ、２４８、７〜１５（２００１））。
【０２０９】
特定の実施形態では、Ｆｃドメイン第１のサブユニットは、アミノ酸置換Ｓ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗを含み、Ｆｃドメイン第２のサブユニットは、アミノ酸置換Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。
【０２１０】
一部の実施形態では、Ｆｃドメイン第２のサブユニットは、加えて、アミノ酸置換Ｈ４３５ＲおよびＹ４３６Ｆ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。
【０２１１】
特定の実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドを、（任意選択で、リンカーペプチドを介して、）Ｆｃドメインの第１のサブユニット（「ノブ」修飾を含む）へと融合させる。理論に束縛されることを望まないが、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドの、Ｆｃドメインの、ノブ含有サブユニットへの融合は、２つの突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドを含む、イムノコンジュゲートの発生（２つのノブ含有ポリペプチドの立体衝突）を（さらに）最小化するであろう。
【０２１２】
ヘテロ二量体化を強化するための、ＣＨ３修飾の他の技法が、代替法として想定され、例えば、ＷＯ９６／２７０１１、ＷＯ９８／０５０４３１、ＥＰ１８７０４５９、ＷＯ２００７／１１０２０５、ＷＯ２００７／１４７９０１、ＷＯ２００９／０８９００４、ＷＯ２０１０／１２９３０４、ＷＯ２０１１／９０７５４、ＷＯ２０１１／１４３５４５、ＷＯ２０１２／０５８７６８、ＷＯ２０１３／１５７９５４、ＷＯ２０１３／０９６２９１において記載されている。
【０２１３】
一実施形態では、ＥＰ１８７０４５９において記載されているヘテロ二量体化法を、代替的に使用する。この手法は、Ｆｃドメインの、２つのサブユニットの間の、ＣＨ３ドメイン／ＣＨ３ドメイン間接触面内の、特異的なアミノ酸位置における、反対の電荷を伴う、帯電アミノ酸の導入に基づく。イムノコンジュゲート内に含まれる抗体についての、具体的な実施形態は、２つのＣＨ３ドメイン（Ｆｃドメインの）のうちの一方のアミノ酸突然変異Ｒ４０９Ｄ；Ｋ３７０Ｅ、およびＦｃドメインの、ＣＨ３ドメインのうちの他の一方のアミノ酸突然変異Ｄ３９９Ｋ；Ｅ３５７Ｋ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）である。
【０２１４】
別の実施形態では、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体は、Ｆｃドメインの、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸突然変異Ｔ３６６Ｗと、Ｆｃドメインの、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸突然変異Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖと、加えて、Ｆｃドメインの、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸突然変異Ｒ４０９Ｄ；Ｋ３７０Ｅと、Ｆｃドメインの、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸突然変異Ｄ３９９Ｋ；Ｅ３５７Ｋ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。
【０２１５】
別の実施形態では、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体は、Ｆｃドメインの、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸突然変異Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗと、Ｆｃドメインの、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖを含み、または前記抗体は、Ｆｃドメインの、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸突然変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｗと、Ｆｃドメインの、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸突然変異Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖと、加えて、Ｆｃドメインの、第１のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸突然変異Ｒ４０９Ｄ；Ｋ３７０Ｅと、Ｆｃドメインの、第２のサブユニットのＣＨ３ドメイン内のアミノ酸突然変異Ｄ３９９Ｋ；Ｅ３５７Ｋと（全ての番号付けは、カバットのＥＵインデックスに従う）を含む。
【０２１６】
一実施形態では、ＷＯ２０１３／１５７９５３において記載されている、ヘテロ二量体化法を、代替的に使用する。一実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｔ３６６Ｋを含み、第２のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｌ３５１Ｄ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。さらなる実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、さらなるアミノ酸突然変異Ｌ３５１Ｋを含む。さらなる実施形態では、第２のＣＨ３ドメインは、Ｙ３４９Ｅ、Ｙ３４９Ｄ、およびＬ３６８Ｅ（好ましくはＬ３６８Ｅ）（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）から選択される、さらなるアミノ酸突然変異を含む。
【０２１７】
一実施形態では、ＷＯ２０１２／０５８７６８において記載されている、ヘテロ二量体化法を、代替的に使用する。一実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｌ３５１Ｙ、Ｙ４０７Ａを含み、第２のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｔ３６６Ａ、Ｋ４０９Ｆを含む。さらなる実施形態では、第２のＣＨ３ドメインは、例えば、ａ）Ｔ４１１Ｎ、Ｔ４１１Ｒ、Ｔ４１１Ｑ、Ｔ４１１Ｋ、Ｔ４１１Ｄ、Ｔ４１１Ｅ、またはＴ４１１Ｗ、ｂ）Ｄ３９９Ｒ、Ｄ３９９Ｗ、Ｄ３９９Ｙ、またはＤ３９９Ｋ、ｃ）Ｓ４００Ｅ、Ｓ４００Ｄ、Ｓ４００Ｒ、またはＳ４００Ｋ、ｄ）Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｔ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｖ、またはＦ４０５Ｗ、ｅ）Ｎ３９０Ｒ、Ｎ３９０Ｋ、またはＮ３９０Ｄ、ｆ）Ｋ３９２Ｖ、Ｋ３９２Ｍ、Ｋ３９２Ｒ、Ｋ３９２Ｌ、Ｋ３９２Ｆ、またはＫ３９２Ｅ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）から選択される、Ｔ４１１、Ｄ３９９、Ｓ４００、Ｆ４０５、Ｎ３９０、またはＫ３９２位における、さらなるアミノ酸突然変異を含む。さらなる実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｌ３５１Ｙ、Ｙ４０７Ａを含み、第２のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｔ３６６Ｖ、Ｋ４０９Ｆを含む。さらなる実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｙ４０７Ａを含み、第２のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｔ３６６Ａ、Ｋ４０９Ｆを含む。さらなる実施形態では、第２のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｋ３９２Ｅ、Ｔ４１１Ｅ、Ｄ３９９Ｒ、Ｓ４００Ｒをさらに含む（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）。
【０２１８】
一実施形態では、ＷＯ２０１１／１４３５４５において記載されている、ヘテロ二量体化法を、例えば、３６８および４０９位（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）からなる群から選択される位置において、アミノ酸修飾と共に、代替的に使用する。
【０２１９】
一実施形態では、ＷＯ２０１１／０９０７６２において記載されている、ヘテロ二量体化法であって、また、上記で記載したノブ・イントゥー・ホール技術も使用するヘテロ二量体化法を、代替的に使用する。一実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｔ３６６Ｗを含み、第２のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｙ４０７Ａを含む。一実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｔ３６６Ｙを含み、第２のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｙ４０７Ｔ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。
【０２２０】
一実施形態では、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体またはそのＦｃドメインは、ＩｇＧ２サブクラスの抗体であり、ＷＯ２０１０／１２９３０４において記載されている、ヘテロ二量体化法を、代替的に使用する。
【０２２１】
代替的な実施形態では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットと第２のサブユニットとの会合を促進する修飾は、例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００９／０８９００４号に記載されている、静電ステアリング効果を媒介する修飾を含む。一般に、この方法は、ホモダイマーの形成が、静電的に好適でなく、ヘテロ二量体化が、静電的に好適であるように、２つのＦｃドメインサブユニットの接触面における、１または複数のアミノ酸残基の、帯電アミノ酸残基による置きかえを伴う。このような一実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、Ｋ３９２またはＮ３９２の、負に帯電したアミノ酸によるアミノ酸置換（例えば、グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）によるアミノ酸置換、好ましくは、Ｋ３９２ＤまたはＮ３９２Ｄ）を含み、第２のＣＨ３ドメインは、Ｄ３９９、Ｅ３５６、Ｄ３５６、またはＥ３５７の、正に帯電したアミノ酸によるアミノ酸置換（例えば、リジン（Ｋ）またはアルギニン（Ｒ）によるアミノ酸置換、好ましくは、Ｄ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、Ｄ３５６Ｋ、またはＥ３５７Ｋであり、より好ましくは、Ｄ３９９ＫおよびＥ３５６Ｋ）を含む。さらなる実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、Ｋ４０９またはＲ４０９の、負に帯電したアミノ酸によるアミノ酸置換（例えば、グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）によるアミノ酸置換、好ましくは、Ｋ４０９ＤまたはＲ４０９Ｄ）をさらに含む。さらなる実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、Ｋ４３９および／またはＫ３７０の、負に帯電したアミノ酸によるアミノ酸置換（例えば、グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）によるアミノ酸置換）（全ての番号付けは、カバットのＥＵインデックスに従う）をさらに、または代替的に含む。
【０２２２】
なおさらなる実施形態では、ＷＯ２００７／１４７９０１において記載されている、ヘテロ二量体化法を、代替的に使用する。一実施形態では、第１のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｋ２５３Ｅ、Ｄ２８２Ｋ、およびＫ３２２Ｄを含み、第２のＣＨ３ドメインは、アミノ酸突然変異Ｄ２３９Ｋ、Ｅ２４０Ｋ、およびＫ２９２Ｄ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。
【０２２３】
さらに別の実施形態では、ＷＯ２００７／１１０２０５において記載されている、ヘテロ二量体化法を、代替的に使用することができる。
【０２２４】
一実施形態では、Ｆｃドメインの第１のサブユニットは、アミノ酸置換Ｋ３９２ＤおよびＫ４０９Ｄを含み、Ｆｃドメインの第２のサブユニットは、アミノ酸置換Ｄ３５６ＫおよびＤ３９９Ｋ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。
【０２２５】
Ｆｃ受容体の結合および／またはエフェクター機能を低減するＦｃドメイン修飾
Ｆｃドメインは、イムノコンジュゲートへと、標的組織内の良好な蓄積、および好適な組織−血液分布比に寄与する、長い血清半減期を含む、好適な薬物動態特性を付与する。しかし、Ｆｃドメインは、同時に、イムノコンジュゲートの、好ましい抗原保有細胞ではなく、Ｆｃ受容体を発現する細胞への、所望されないターゲティングももたらしうる。さらに、Ｆｃ受容体シグナル伝達経路の共活性化は、ＩＬ−２ポリペプチド、およびイムノコンジュゲートの長い半減期と組み合わされ、全身投与されると、サイトカイン受容体の過剰な活性化と、重度の副作用とを結果としてもたらす、サイトカインの放出ももたらしうる。従来のＩｇＧ−ＩＬ−２イムノコンジュゲートが、インフュージョンリアクションと関連すると記載されていることは、これと符合する（例えば、Ｋｉｎｇら、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ、２２、４４６３〜４４７３（２００４）を参照されたい）。
【０２２６】
したがって、特定の実施形態では、本発明において有用なイムノコンジュゲート内に含まれる抗体のＦｃドメインは、天然ＩｇＧ１のＦｃドメインと比較した、Ｆｃ受容体への結合アフィニティーの低減、および／またはエフェクター機能の低減を呈示する。このような一実施形態では、Ｆｃドメイン（または前記Ｆｃドメインを含む抗体）は、天然ＩｇＧ１のＦｃドメイン（または天然ＩｇＧ１のＦｃドメインを含む抗体）と比較して、５０％未満、好ましくは２０％未満、より好ましくは１０％未満であり、最も好ましくは５％未満の、Ｆｃ受容体への結合アフィニティー、および／または天然ＩｇＧ１のＦｃドメイン（または天然ＩｇＧ１のＦｃドメインを含む抗体）と比較して、５０％未満、好ましくは２０％未満、より好ましくは１０％未満であり、最も好ましくは５％未満のエフェクター機能を呈示する。一実施形態では、Ｆｃドメイン（または前記Ｆｃドメインを含む抗体）は、実質的に、Ｆｃ受容体に結合せず、かつ／またはエフェクター機能を誘導しない。特定の実施形態では、Ｆｃ受容体は、Ｆｃγ受容体である。一実施形態では、Ｆｃ受容体は、ヒトＦｃ受容体である。一実施形態では、Ｆｃ受容体は、活性化Ｆｃ受容体である。具体的な実施形態では、Ｆｃ受容体は、活性化ヒトＦｃγ受容体、より具体的には、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩ、またはＦｃγＲＩＩａ、最も具体的には、ヒトＦｃγＲＩＩＩａである。一実施形態では、エフェクター機能は、ＣＤＣ、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、およびサイトカイン分泌の群から選択される、１または複数のエフェクター機能である。特定の実施形態では、エフェクター機能は、ＡＤＣＣである。一実施形態では、Ｆｃドメインは、天然ＩｇＧ１のＦｃドメインと比較して、実質的に同様の、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する結合アフィニティーを呈示する。ＦｃＲｎへの、実質的に同様の結合は、Ｆｃドメイン（または前記Ｆｃドメインを含む抗体）が、天然ＩｇＧ１のＦｃドメイン（または天然ＩｇＧ１のＦｃドメインを含む抗体）の、ＦｃＲｎに対する結合アフィニティーの、約７０％を超える、特に、約８０％を超える、より特定すると、約９０％を超える結合アフィニティーを呈示する場合に達成される。
【０２２７】
ある特定の実施形態では、操作されていないＦｃドメインと比較して、Ｆｃ受容体に対する結合アフィニティーが低減され、かつ／またはエフェクター機能が低減されるように、Ｆｃドメインを操作する。特定の実施形態では、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体のＦｃドメインは、Ｆｃドメインの、Ｆｃ受容体への結合アフィニティー、および／またはエフェクター機能を低減する、１または複数のアミノ酸突然変異を含む。典型的に、同じ、１または複数のアミノ酸突然変異が、Ｆｃドメインの、２つのサブユニットの各々に存在する。一実施形態では、アミノ酸突然変異は、Ｆｃドメインの、Ｆｃ受容体への結合アフィニティーを低減する。一実施形態では、アミノ酸突然変異は、Ｆｃドメインの、Ｆｃ受容体への結合アフィニティーを、少なくとも２分の１、少なくとも５分の１、または少なくとも１０分の１に低減する。Ｆｃドメインの、Ｆｃ受容体への結合アフィニティーを低減する、１つを超えるアミノ酸突然変異が存在する実施形態では、これらのアミノ酸突然変異の組合せは、Ｆｃドメインの、Ｆｃ受容体への結合アフィニティーを、少なくとも１０分の１、少なくとも２０分の１、なおまたは少なくとも５０分の１に低減しうる。一実施形態では、操作されたＦｃドメインを含む抗体は、操作されていないＦｃドメインを含む抗体と比較して、２０％未満、特に、１０％未満、より特定すると、５％未満の、Ｆｃ受容体に対する結合アフィニティーを呈示する。特定の実施形態では、Ｆｃ受容体は、Ｆｃγ受容体である。一部の実施形態では、Ｆｃ受容体は、ヒトＦｃ受容体である。一部の実施形態では、Ｆｃ受容体は、活性化Ｆｃ受容体である。具体的な実施形態では、Ｆｃ受容体は、活性化ヒトＦｃ受容体、より具体的には、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩ、またはＦｃγＲＩＩａ、最も具体的には、ヒトＦｃγＲＩＩＩａである。これらの受容体の各々への結合を低減することが好ましい。一部の実施形態では、補体成分に対する結合アフィニティー、具体的には、Ｃ１ｑに対する結合アフィニティーもまた、低減する。一実施形態では、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する結合アフィニティーは、低減しない。ＦｃＲｎに対する、実質的に同様の結合、すなわち、Ｆｃドメインの、前記受容体に対する結合アフィニティーの保存は、Ｆｃドメイン（または前記Ｆｃドメインを含む抗体）が、Ｆｃドメインの非操作形態（またはＦｃドメインの、前記非操作形態を含む抗体）の、ＦｃＲｎに対する結合アフィニティーの、約７０％を超える結合アフィニティーを呈示する場合に達成される。Ｆｃドメイン、または前記Ｆｃドメインを含むイムノコンジュゲート内に含まれる抗体は、このようなアフィニティーの約８０％を超えるアフィニティーを呈示することが可能であり、このようなアフィニティーの約９０％を超えるアフィニティーを呈示しうる。ある特定の実施形態では、操作されていないＦｃドメインと比較して、エフェクター機能が低減されるように、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体のＦｃドメインを操作する。エフェクター機能の低減は、以下：補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の低減、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）の低減、抗体依存性細胞媒介性食作用（Ａ��ＣＰ）の低減、サイトカイン分泌の低減、抗原提示細胞による免疫複合体に媒介される抗原の取込みの低減、ＮＫ細胞への結合の低減、マクロファージへの結合の低減、単球への結合の低減、多形核細胞への結合の低減、アポトーシスを誘導する直接的なシグナル伝達の低減、標的に結合した抗体の架橋の低減、樹状細胞の成熟の低減、またはＴ細胞プライミングの低減のうちの１または複数を含みうるがこれらに限定されない。一実施形態では、エフェクター機能の低減は、ＣＤＣの低減、ＡＤＣＣの低減、ＡＤＣＰの低減、およびサイトカイン分泌の低減の群から選択される１または複数のエフェクター機能の低減である。特定の実施形態では、エフェクター機能の低減は、ＡＤＣＣの低減である。一実施形態では、ＡＤＣＣの低減は、操作されていないＦｃドメイン（または操作されていないＦｃドメインを含む抗体）により誘導されるＡＤＣＣの２０％未満である。
【０２２８】
一実施形態では、Ｆｃドメインの、Ｆｃ受容体への結合アフィニティー、および／またはエフェクター機能を低減するアミノ酸突然変異は、アミノ酸置換である。一実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｅ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｎ２９７、Ｐ３３１、およびＰ３２９（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）の群から選択される位置におけるアミノ酸置換を含む。より具体的な実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｌ２３４、Ｌ２３５、およびＰ３２９（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）の群から選択される位置におけるアミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５Ａ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。このような一実施形態では、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１  Ｆｃドメイン、特に、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインである。一実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｐ３２９位におけるアミノ酸置換を含む。より具体的な実施形態では、アミノ酸置換は、Ｐ３２９ＡまたはＰ３２９Ｇ、特に、Ｐ３２９Ｇ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）である。一実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｐ３２９位におけるアミノ酸置換と、Ｅ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｎ２９７、およびＰ３３１（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）から選択される位置における、さらなるアミノ酸置換とを含む。より具体的な実施形態では、さらなるアミノ酸置換は、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３５Ｅ、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｄ、またはＰ３３１Ｓである。特定の実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｐ３２９、Ｌ２３４、およびＬ２３５位におけるアミノ酸置換、（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。より特定の実施形態では、Ｆｃドメインは、アミノ酸突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＰ３２９Ｇ（「Ｐ３２９Ｇ  ＬＡＬＡ」、「ＰＧＬＡＬＡ」または「ＬＡＬＡＰＧ」）を含む。具体的に述べると、特定の実施形態では、Ｆｃドメインの各サブユニットは、アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＰ３２９Ｇ（カバットのＥＵインデックス番号付け）を含む、すなわち、Ｆｃドメインの、第１のサブユニットおよび第２のサブユニットの各々において、２３４位のロイシン残基を、アラニン残基（Ｌ２３４Ａ）で置きかえ、２３５位のロイシン残基を、アラニン残基で置きかえ（Ｌ２３５Ａ）、３２９位におけるプロリン残基を、グリシン残基により置きかえる（Ｐ３２９Ｇ）（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）。このような一実施形態では、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１  Ｆｃドメイン、特に、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインである。アミノ酸置換の、「Ｐ３２９Ｇ  ＬＡＬＡ」の組合せは、その全内容が本明細書に参照により援用される、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／１３０８３１号において記載される通り、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインの、Ｆｃγ受容体（ならびに補体）への結合を、ほぼ完全に消失させる。ＷＯ２０１２／１３０８３１はまた、このような突然変異体のＦｃドメインを調製する方法、およびＦｃ受容体の結合またはエフェクター機能など、その特性を決定するための方法についても記載する。
【０２２９】
ＩｇＧ４抗体は、Ｆｃ受容体に対する結合アフィニティーの低減、およびＩｇＧ１抗体と比較した、エフェクター機能の低減を呈示する。よって、一部の実施形態では、イムノコンジュゲート内に含まれる抗体のＦｃドメインは、ＩｇＧ４  Ｆｃドメイン、特に、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃドメインである。一実施形態では、ＩｇＧ４  Ｆｃドメインは、Ｓ２２８位におけるアミノ酸置換、具体的には、アミノ酸置換Ｓ２２８Ｐ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。Ｆｃ受容体に対するその結合アフィニティー、および／またはそのエフェクター機能をさらに低減するために、一実施形態では、ＩｇＧ４  Ｆｃドメインは、Ｌ２３５位におけるアミノ酸置換、具体的には、アミノ酸置換Ｌ２３５Ｅ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。別の実施形態では、ＩｇＧ４  Ｆｃドメインは、Ｐ３２９位におけるアミノ酸置換、具体的には、アミノ酸置換Ｐ３２９Ｇ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。特定の実施形態では、ＩｇＧ４  Ｆｃドメインは、Ｓ２２８、Ｌ２３５、およびＰ３２９位におけるアミノ酸置換、具体的には、アミノ酸置換Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅ、およびＰ３２９Ｇ（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）を含む。このようなＩｇＧ４  Ｆｃドメインの突然変異体およびそれらのＦｃγ受容体に対する結合特性については、その全内容が本明細書に参照により援用される、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／１３０８３１号において記載されている。
【０２３０】
特定の実施形態では、天然のＩｇＧ１  Ｆｃドメインと比較して、Ｆｃ受容体に対する結合アフィニティーの低減、および／またはエフェクター機能の低減を呈示するＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａと、任意選択で、Ｐ３２９Ｇとを含むヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメイン、またはアミノ酸置換Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３５Ｅと、任意選択で、Ｐ３２９Ｇとを含むヒトＩｇＧ４  Ｆｃドメイン（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）である。
【０２３１】
ある特定の実施形態では、ＦｃドメインのＮ−グリコシル化を、消失させている。このような一実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｎ２９７位におけるアミノ酸突然変異、特に、アスパラギンを、アラニンにより置きかえるアミノ酸置換（Ｎ２９７Ａ）またはアスパラギン酸により置きかえるアミノ酸置換（Ｎ２９７Ｄ）を含む（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）。
【０２３２】
本明細書の上記および国際ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１２／１３０８３１号に記載されているＦｃドメインに加えて、Ｆｃ受容体への結合および／またはエフェクター機能を低減したＦｃドメインはまた、Ｆｃドメイン残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７、および３２９（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）のうちの１または複数を置換したＦｃドメイン（米国特許第６，７３７，０５６号）も含む。このようなＦｃ突然変異体は、２つまたはこれを超えるアミノ酸位置である、２６５、２６９、２７０、２９７、および３２７位において置換したＦｃ突然変異体であって、残基２６５および２９７を、アラニンへと置換した、いわゆる、「ＤＡＮＡ」Ｆｃ突然変異体を含むＦｃ突然変異体（米国特許第７，３３２，５８１号）を含む。
【０２３３】
突然変異体のＦｃドメインは、当該技術分野で周知の遺伝子法または化学法を使用する、アミノ酸の欠失、置換、挿入、または修飾により調製することができる。遺伝子法は、コードＤＮＡ配列の部位特異的突然変異誘発、ＰＣＲ、遺伝子合成などを含みうる。適正なヌクレオチド変化は、例えば、シーケンシングにより検証することができる。
【０２３４】
Ｆｃ受容体への結合は、ＢＩＡｃｏｒｅ計器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）などの標準的な計測、および組換え発現などにより得られうるＦｃ受容体を使用して、例えば、ＥＬＩＳＡ、または表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）により容易に決定することができる。代替的に、ＦｃドメインまたはＦｃドメインを含む抗体の、Ｆｃ受容体に対する結合アフィニティーは、ＦｃγＩＩＩａ受容体を発現するヒトＮＫ細胞など、特定のＦｃ受容体を発現することが公知の細胞株を使用して査定することができる。
【０２３５】
Ｆｃドメイン、またはＦｃドメインを含む抗体のエフェクター機能は、当該技術分野で公知の方法により測定することができる。目的の分子のＡＤＣＣ活性について評価するインビトロアッセイの例については、米国特許第５，５００，３６２号；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ８３、７０５９〜７０６３（１９８６）および、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ８２、１４９９〜１５０２（１９８５）；米国特許第５，８２１，３３７号；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎら、Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １６６、１３５１〜１３６１（１９８７）において記載されている。代替的に、非放射性アッセイ法も、援用することができる（例えば、フローサイトメトリーのためのＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞傷害アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）；およびＣｙｔｏＴｏｘ  ９６（登録商標）非放射性細胞傷害アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を参照されたい）。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む。代替的に、または加えて、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、例えば、Ｃｌｙｎｅｓら、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９５、６５２〜６５６（１９９８）において開示されている動物モデルなどの動物モデルにおいて、インビボで評価することができる。
【０２３６】
一部の実施形態では、Ｆｃドメインの、補体成分への結合、具体的に、Ｃ１ｑへの結合を低減する。したがって、エフェクター機能を低減するように、Ｆｃドメインを操作する、一部の実施形態では、前記エフェクター機能の低減は、ＣＤＣの低減を含む。Ｃ１ｑ結合アッセイを実行して、Ｆｃドメイン、またはＦｃドメインを含む抗体が、Ｃ１ｑに結合することが可能であり、したがって、ＣＤＣ活性を有するのかどうかを決定することができる。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９およびＷＯ２００５／１００４０２における、Ｃ１ｑ結合ＥＬＩＳＡおよびＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照されたい。補体の活性化について評価するために、ＣＤＣアッセイを実施することができる（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ、２０２、１６３（１９９６）；Ｃｒａｇｇら、Ｂｌｏｏｄ、１０１、１０４５〜１０５２（２００３）；ならびにＣｒａｇｇおよびＧｌｅｎｎｉｅ、Ｂｌｏｏｄ、１０３、２７３８〜２７４３（２００４）を参照されたい）。
【０２３７】
ＦｃＲｎの結合およびインビボにおけるクリアランス／半減期の決定はまた、当該技術分野で公知の方法（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ、Ｓ．Ｂ．ら、Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１８（１２）：１７５９〜１７６９（２００６）；ＷＯ２０１３／１２０９２９を参照されたい）を使用しても実施することができる。
【０２３８】
特定のイムノコンジュゲート
一態様では、本発明では、特に、突然変異体のＩＬ−２ポリペプチドと、ＣＥＡに結合する抗体とを含むイムノコンジュゲートであって、
突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドが、アミノ酸置換Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、およびＬ７２Ｇ（ヒトＩＬ−２配列である配列番号５２と比べた番号付け）を含むヒトＩＬ−２分子であり；
抗体が、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む
イムノコンジュゲートが有用である。
【０２３９】
一態様では、本発明では、特に、突然変異体のＩＬ−２ポリペプチドと、ＣＥＡに結合する抗体とを含むイムノコンジュゲートであって、
突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドが、アミノ酸置換Ｔ３Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｌ７２Ｇ、およびＣ１２５Ａ（ヒトＩＬ−２配列である配列番号５２と比べた番号付け）を含むヒトＩＬ−２分子であり；
抗体が、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む
イムノコンジュゲートが有用である。
【０２４０】
一態様では、本発明では、特に、突然変異体のＩＬ−２ポリペプチドと、ＣＥＡに結合する抗体とを含むイムノコンジュゲートであって、
突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドが、配列番号５３のアミノ酸配列を含み；
抗体が、（ａ）配列番号３４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む
イムノコンジュゲートが有用である。
【０２４１】
本発明の上記の態様のうちのいずれかに従う一実施形態では、抗体は、第１のサブユニットと、第２のサブユニットとから構成されるヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインを含む、ＩｇＧクラスの免疫グロブリンであって、
Ｆｃドメインの第１のサブユニット内で、３６６位のスレオニン残基を、トリプトファン残基で置きかえ（Ｔ３６６Ｗ）、Ｆｃドメインの第２のサブユニット内で、４０７位のチロシン残基を、バリン残基で置きかえ（Ｙ４０７Ｖ）、任意選択で、３６６位のスレオニン残基を、セリン残基で置きかえ（Ｔ３６６Ｓ）、３６８位のロイシン残基を、アラニン残基（Ｌ３６８Ａ）（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）で置きかえており、
さらなるＦｃドメインの各サブユニットが、アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＰ３２９Ｇ（カバットのＥＵインデックス番号付け）を含む
免疫グロブリンである。
【０２４２】
この実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドを、そのアミノ末端のアミノ酸において、配列番号６７のリンカーペプチドを介して、Ｆｃドメインの第１のサブユニットの、カルボキシ末端のアミノ酸へと融合させることができる。
【０２４３】
一態様では、本発明では、特に、配列番号４４の配列と、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド、配列番号４５の配列と、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド、および配列番号４６の配列と、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むイムノコンジュゲートが有用である。
【０２４４】
特に、本発明に有用なイムノコンジュゲートは、セルグツズマブアムナロイキン（「ＷＨＯ  Ｄｒｕｇ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ」（「Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｎｏｎｐｒｏｐｒｉｅｔａｒｙ  Ｎａｍｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｈａｒｍｅｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ」）、「Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  ＩＮＮ：Ｌｉｓｔ  ７５」、２０１６、公刊前の謄本（その全内容が本明細書に参照により援用される）を参照されたい）である。
【０２４５】
さらなる態様では、本発明では、特に、突然変異体のＩＬ−２ポリペプチドと、ＦＡＰに結合する抗体とを含むイムノコンジュゲートであって、
突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドが、アミノ酸置換Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、およびＬ７２Ｇ（ヒトＩＬ−２配列である配列番号５２と比べた番号付け）を含むヒトＩＬ−２分子であり；
抗体が、（ａ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む
イムノコンジュゲートが有用である。
【０２４６】
一態様では、本発明では、特に、突然変異体のＩＬ−２ポリペプチドと、ＦＡＰに結合する抗体とを含むイムノコンジュゲートであって、
突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドが、アミノ酸置換Ｔ３Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｌ７２Ｇ、およびＣ１２５Ａ（ヒトＩＬ−２配列である配列番号５２と比べた番号付け）を含むヒトＩＬ−２分子であり；
抗体が、（ａ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む
イムノコンジュゲートが有用である。
【０２４７】
一態様では、本発明では、特に、突然変異体のＩＬ−２ポリペプチドと、ＦＡＰに結合する抗体とを含むイムノコンジュゲートであって、
突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドが、配列番号５３のアミノ酸配列を含み；
抗体が、（ａ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む
イムノコンジュゲートが有用である。
【０２４８】
本発明の上記の態様のうちのいずれかに従う一実施形態では、抗体は、第１のサブユニットと、第２のサブユニットとから構成されるヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインを含む、ＩｇＧクラスの免疫グロブリンであって、
Ｆｃドメインの第１のサブユニット内で、３６６位のスレオニン残基を、トリプトファン残基で置きかえ（Ｔ３６６Ｗ）、Ｆｃドメインの第２のサブユニット内で、４０７位のチロシン残基を、バリン残基で置きかえ（Ｙ４０７Ｖ）、任意選択で、３６６位のスレオニン残基を、セリン残基で置きかえ（Ｔ３６６Ｓ）、３６８位のロイシン残基を、アラニン残基（Ｌ３６８Ａ）（カバットのＥＵインデックスに従う番号付け）で置きかえており、
さらなるＦｃドメインの各サブユニットが、アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＰ３２９Ｇ（カバットのＥＵインデックス番号付け）を含む
免疫グロブリンである。
【０２４９】
この実施形態では、突然変異体ＩＬ−２ポリペプチドを、そのアミノ末端のアミノ酸において、配列番号６７のリンカーペプチドを介して、Ｆｃドメインの第１のサブユニットの、カルボキシ末端のアミノ酸へと融合させることができる。
【０２５０】
一態様では、一態様では、本発明では、特に、配列番号４９の配列と、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド、配列番号５０の配列と、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド、および配列番号５１の配列と、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むイムノコンジュゲートが有用である。
【０２５１】
本発明において有用なＩＬ−２イムノコンジュゲートであって、このようなＩＬ−２イムノコンジュゲートを含有する組成物を含むＩＬ−２イムノコンジュゲートを、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと組み合わせて使用して、がんを処置することができる。
【０２５２】
ＩＩＩ．ＣＤ４０アゴニスト
本発明の方法、使用、組成物、およびキットに有用なＣＤ４０アゴニストの例、ならびにこれらを作るための方法については、その全内容が本明細書に参照により援用される、ＰＣＴ公開第ＷＯ２００３／０４０１７０号において記載されている。
【０２５３】
上記および本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットについての、一部の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストは、ＣＤ４０に特異的に結合する抗体である。一部の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストは、ヒトＣＤ４０に特異的に結合し、これを活性化させる抗体である。
【０２５４】
当該技術分野では、ＣＤ４０はまた、「腫瘍壊死因子スーパーファミリーメンバー５」、ＴＮＦＲＳＦ５、Ｂ細胞表面抗原４０、ＣＤ４０Ｌ受容体、ＣＤｗ４０、およびｐ５０とも称する。本明細書で使用される「ＣＤ４０」という用語は、別途指示がない限り、霊長類（例えば、ヒト）、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）、およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳類を含む、任意の脊椎動物供給源に由来する、任意の天然のＣＤ４０を指す。用語は、「完全長」ＣＤ４０、およびプロセシングされていないＣＤ４０のほか、細胞内のプロセシングから生じる、ＣＤ４０の任意の形態（例えば、成熟タンパク質）を包含する。用語はまた、ＣＤ４０の、天然に存在する変異体およびアイソフォーム、例えば、スプライスバリアントまたは対立遺伝子変異体も包含する。一実施形態では、ＣＤ４０は、ヒトＣＤ４０である。ヒトＣＤ４０のアミノ酸配列を、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号：Ｐ２５９４２に示す。
【０２５５】
一部の実施形態では、抗体は、配列番号５７の重鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含む重鎖可変領域、ならびに／または配列番号５８の軽鎖可変領域配列に由来するＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号５７の重鎖可変領域配列に由来する、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、および／または配列番号５８の軽鎖可変領域配列に由来する、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖可変領域は、ヒト可変領域である。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖可変領域は、ヒトフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【０２５６】
一部の実施形態では、抗体は、配列番号５７の重鎖可変領域配列に由来する、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２、およびＨＶＲ−Ｈ３と、配列番号５８の軽鎖可変領域配列に由来する、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、およびＨＶＲ−Ｌ３とを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号５７の重鎖可変領域配列に由来する、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１、ＨＣＤＲ  ２、およびＨＣＤＲ  ３と、配列番号５８の軽鎖可変領域配列に由来する、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１、ＬＣＤＲ  ２、およびＬＣＤＲ  ３とを含む。
【０２５７】
一部の実施形態では、抗体は、配列番号５７のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。一部の実施形態では、抗体は、（ａ）配列番号５７のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｂ）配列番号５８のアミノ酸配列と、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。
【０２５８】
一部の実施形態では、抗体は、配列番号５７の配列を含む重鎖可変領域と、配列番号５８の配列を含む軽鎖可変領域とを含む。
【０２５９】
一部の実施形態では、ＣＤ４０に特異的に結合する抗体は、完全長抗体である。一部の実施形態では、抗体は、ＩｇＧクラスの抗体、特に、ＩｇＧ２サブクラスの抗体、より特定すると、ヒトＩｇＧ２サブクラスの抗体である。一部の実施形態では、ＣＤ４０に特異的に結合する抗体は、ＩｇＧ２サブクラスの完全ヒト抗体である。一実施形態では、抗体は、４×１０−１０Ｍまたはこれ未満のＫＤでヒトＣＤ４０に結合する、ＩｇＧ２サブクラスの完全ヒト抗体である。
【０２６０】
一実施形態では、ＣＤ４０に特異的に結合する抗体は、配列番号５９の配列と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配列を含む重鎖ポリペプチド、および配列番号６０の配列と、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一な配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む。一実施形態では、抗体は、配列番号５９の配列を含む重鎖ポリペプチド、および配列番号６０の配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む。
【０２６１】
一部の実施形態では、前記ＣＤ４０アゴニストは、具体的には、ＷＯ２００３／０４０１７０において開示されている、抗ＣＤ４０抗体のうちのいずれかである。一部の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストは、ＷＯ２００３／０４０１７０に従い、３．１．１、７．１．２、１０．８．３、１５．１．１、２１．４．１、２１．２．１、２２．１．１、２３．５．１、２３．２５．１、２３．２９．１、および２４．２．１と称する抗体の群から選択される。これらの抗体を分泌するハイブリドーマは、ブダペスト条約に従い寄託されている。寄託番号は、ＷＯ２００３／０４０１７０の［０２５０］段落において見出すことができる。一実施形態では、ＣＤ４０アゴニストは、ＷＯ２００３／０４０１７０の抗体である２１．４．１である。一実施形態では、ＣＤ４０アゴニストは、ＷＯ２００３／０４０１７０の抗体である２１．４．１の重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列を含む抗体である。さらに別の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストは、ＷＯ２００３／０４０１７０の抗体である２１．４．１の重鎖および軽鎖のアミノ酸配列を含む抗体である。
【０２６２】
本発明において有用なＣＤ４０アゴニストであって、このようなＣＤ４０アゴニストを含有する組成物を含むＣＤ４０アゴニストを、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと組み合わせて使用して、がんを処置することができる。
【０２６３】
ＩＶ．ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト
ＰＤ−１軸結合アンタゴニストを、任意選択で、本発明の方法、使用、組成物、およびキットにおいて使用することができる。例えば、使用されうるＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、およびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストを含む。当該技術分野では、ＰＤ−１（プログラム死１）はまた、「プログラム細胞死１」、ＰＤＣＤ１、ＣＤ２７９、およびＳＬＥＢ２とも称する。例示的ヒトＰＤ−１は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号：Ｑ１５１１６に示される。当該技術分野では、ＰＤ−Ｌ１（プログラム細胞死リガンド１）はまた、「プログラム細胞死１リガンド１」、ＰＤＣＤ１ＬＧ１、ＣＤ２７４、Ｂ７−Ｈ、およびＰＤＬ１とも称する。例示的ヒトＰＤ−Ｌ１は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号：Ｑ９ＮＺＱ７に示される。当該技術分野では、ＰＤ−Ｌ２（プログラム細胞死リガンド２）はまた、「プログラム細胞死１リガンド２」、ＰＤＣＤ１ＬＧ２、ＣＤ２７３、Ｂ７−ＤＣ、Ｂｔｄｃ、およびＰＤＬ２とも称する。例示的ヒトＰＤ−Ｌ２は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号：Ｑ９ＢＱ５１に示される。一部の実施形態では、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＰＤ−Ｌ２は、ヒトＰＤ−１、ヒトＰＤ−Ｌ１、およびヒトＰＤ−Ｌ２である。
【０２６４】
一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、そのリガンドである結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な態様では、ＰＤ−１のリガンドである結合パートナーは、ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２である。別の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、その結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な態様では、ＰＤ−Ｌ１の結合パートナーは、ＰＤ−１および／またはＢ７−１である。別の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２の、その結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な態様では、ＰＤ−Ｌ２の結合パートナーは、ＰＤ−１である。アンタゴニストは、抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、またはオリゴペプチドでありうる。
【０２６５】
一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体（例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体）である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＭＤＸ  １１０６（ニボルマブ）、ＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ）、ＣＴ−０１１（ピジリズマブ）、ＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、およびＢＧＢ−１０８からなる群から選択される。一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、イムノアドヘシン（例えば、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の細胞外部分またはＰＤ−１結合部分であって、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）へと融合させた細胞外部分または結合部分を含むイムノアドヘシンである。一部の実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＡＭＰ−２２４である。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＭＤＸ−１１０５、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、およびＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）からなる群から選択される。好ましい実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブである。抗体であるＹＷ２４３．５５．Ｓ７０とは、ＷＯ２０１０／０７７６３４において記載されている抗ＰＤ−Ｌ１である。ＢＭＳ−９３６５５９としてもまた公知のＭＤＸ−１１０５とは、ＷＯ２００７／００５８７４において記載されている抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。ＭＥＤＩ４７３６とは、ＷＯ２０１１／０６６３８９およびＵＳ２０１３／０３４５５９において記載されている抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体である。ＭＤＸ−１１０６−０４、ＭＤＸ−１１０６、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８、およびＯＰＤＩＶＯ（登録商標）としてもまた公知のニボルマブとは、ＷＯ２００６／１２１１６８において記載されている抗ＰＤ−１抗体である。ＭＫ−３４７５、Ｍｅｒｃｋ  ３４７５、ラボリズマブ、ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）、およびＳＣＨ−９００４７５としてもまた公知のペンブロリズマブとは、ＷＯ２００９／１１４３３５において記載されている抗ＰＤ−１抗体である。ｈＢＡＴ、ｈＢＡＴ−１またはピジリズマブとしてもまた公知のＣＴ−０１１とは、ＷＯ２００９／１０１６１１において記載されている抗ＰＤ−１抗体である。Ｂ７−ＤＣＩｇとしてもまた公知のＡＭＰ−２２４とは、ＷＯ２０１０／０２７８２７およびＷＯ２０１１／０６６３４２において記載されているＰＤ−Ｌ２−Ｆｃ融合可溶型受容体である。
【０２６６】
一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＰＤ−Ｌ１と、ＰＤ−１との結合、および／またはＰＤ−Ｌ１と、Ｂ７−１との結合を阻害することが可能である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、および（Ｆａｂ’）２断片からなる群から選択される抗体断片である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒト化抗体である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒト抗体である。
【０２６７】
本発明の方法、使用、組成物、およびキットに有用な抗ＰＤ−Ｌ１抗体の例、ならびにこれらを作るための方法については、それらの全内容が本明細書に参照により援用される、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１０／０７７６３４号、同第ＷＯ２００７／００５８７４号、同第ＷＯ２０１１／０６６３８９号、およびＵＳ２０１３／０３４５５９において記載されている。本発明において有用な抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、このような抗体を含有する組成物を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体を、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと組み合わせて使用して、がんを処置することができる。
【０２６８】
抗ＰＤ１抗体
一部の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＭＤＸ−１１０６である。「ＭＤＸ−１１０６」の代替的名称は、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８、またはニボルマブを含む。一部の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ（ＣＡＳ登録番号：９４６４１４−９４−４）である。なおさらなる実施形態では、配列番号１に由来する重鎖可変領域のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号２に由来する軽鎖可変領域のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、単離抗ＰＤ−１抗体が有用である。なおさらなる実施形態では、重鎖配列および／または軽鎖配列を含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、
（ａ）重鎖配列が、重鎖配列：
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＤＣＫＡＳＧＩＴＦＳＮＳＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＷＹＤＧＳＫＲＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＦＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＮＤＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号１）
に対する、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、
および、
（ｂ）軽鎖配列が、軽鎖配列：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＳＳＮＷＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２）
に対する、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。
【０２６９】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体
ＷＯ２０１０／０７７６３４Ａ１およびＵＳ８，２１７，１４９において記載されている抗ＰＤ−Ｌ１抗体を、本明細書で記載される方法、使用、組成物、およびキットにおいて使用することができる。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号３の重鎖可変領域配列、および／または配列番号４の軽鎖可変領域配列を含む。なおさらなる実施形態では、重鎖配列および／または軽鎖配列を含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、
（ａ）重鎖配列が、重鎖配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ（配列番号３）
に対する、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、および、
（ｂ）軽鎖配列が、軽鎖配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号４）
に対する、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、
単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。
【０２７０】
一実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２、およびＨＶＲ−Ｈ３の配列を含む、重鎖可変領域のポリペプチドであって、
（ａ）ＨＶＲ−Ｈ１配列が、ＧＦＴＦＳＸ１ＳＷＩＨ（配列番号５）であり；
（ｂ）ＨＶＲ−Ｈ２配列が、ＡＷＩＸ２ＰＹＧＧＳＸ３ＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号６）であり；
（ｃ）ＨＶＲ−Ｈ３配列が、ＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号７）である
［さらに、式中、Ｘ１は、ＤまたはＧであり；Ｘ２は、ＳまたはＬであり；Ｘ３は、ＴまたはＳである］
重鎖可変領域のポリペプチドを含む。具体的な一態様では、Ｘ１は、Ｄであり；Ｘ２は、Ｓであり；Ｘ３は、Ｔである。
【０２７１】
別の態様では、ポリペプチドは、式：（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）に従い、ＨＶＲの間に並置された、重鎖可変領域のフレームワーク配列をさらに含む。さらに別の態様では、フレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。さらなる態様では、フレームワーク配列は、ＶＨ亜群ＩＩＩのコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、フレームワーク配列のうちの少なくとも１つは、以下である：
ＨＣ−ＦＲ１は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳ（配列番号８）であり；
ＨＣ−ＦＲ２は、ＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶ（配列番号９）であり；
ＨＣ−ＦＲ３は、ＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲ（配列番号１０）であり；
ＨＣ−ＦＲ４は、ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ（配列番号１１）である。
【０２７２】
なおさらなる態様では、重鎖ポリペプチドを、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域とさらに混合するが、この場合、
（ａ）ＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＲＡＳＱＸ４Ｘ５Ｘ６ＴＸ７Ｘ８Ａ（配列番号１２）であり；
（ｂ）ＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＳＡＳＸ９ＬＸ１０Ｓ（配列番号１３）であり；
（ｃ）ＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＱＱＸ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４ＰＸ１５Ｔ（配列番号１４）であり；
［式中、Ｘ４は、ＤまたはＶであり；Ｘ５は、ＶまたはＩであり；Ｘ６は、ＳまたはＮであり；Ｘ７は、ＡまたはＦであり；Ｘ８は、ＶまたはＬであり；Ｘ９は、ＦまたはＴであり；Ｘ１０は、ＹまたはＡであり；Ｘ１１は、Ｙ、Ｇ、Ｆ、またはＳであり；Ｘ１２は、Ｌ、Ｙ、Ｆ、またはＷであり；Ｘ１３は、Ｙ、Ｎ、Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｆ、またはＩであり；Ｘ１４は、Ｈ、Ｖ、Ｐ、Ｔ、またはＩであり；Ｘ１５は、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｐ、またはＴである］。なおさらなる態様では、Ｘ４は、Ｄであり；Ｘ５は、Ｖであり；Ｘ６は、Ｓであり；Ｘ７は、Ａであり；Ｘ８は、Ｖであり；Ｘ９は、Ｆであり；Ｘ１０は、Ｙであり；Ｘ１１は、Ｙであり；Ｘ１２は、Ｌであり；Ｘ１３は、Ｙであり；Ｘ１４は、Ｈであり；Ｘ１５は、Ａである。
【０２７３】
なおさらなる態様では、軽鎖は、式：（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）に従い、ＨＶＲの間に並置された、軽鎖可変領域のフレームワーク配列をさらに含む。なおさらなる態様では、フレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる態様では、フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、フレームワーク配列のうちの少なくとも１つは、以下である：
ＬＣ−ＦＲ１は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（配列番号１５）であり；
ＬＣ−ＦＲ２は、ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹ（配列番号１６）であり；
ＬＣ−ＦＲ３は、ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣ（配列番号１７）であり；
ＬＣ−ＦＲ４は、ＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号１８）である。
【０２７４】
別の実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体または抗原結合断片であって、
（ａ）重鎖が、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２、およびＨＶＲ−Ｈ３を含み、この場合、さらに：
（ｉ）ＨＶＲ−Ｈ１配列が、ＧＦＴＦＳＸ１ＳＷＩＨ（配列番号５）であり；
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ２配列が、ＡＷＩＸ２ＰＹＧＧＳＸ３ＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号６）であり；
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ３配列が、ＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号７）であり； 
（ｂ）軽鎖が、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、およびＨＶＲ−Ｌ３を含み、この場合、さらに：
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１配列が、ＲＡＳＱＸ４Ｘ５Ｘ６ＴＸ７Ｘ８Ａ（配列番号１２）であり；
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２配列が、ＳＡＳＸ９ＬＸ１０Ｓ（配列番号１３）であり； 
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３配列が、ＱＱＸ１１Ｘ１２Ｘ１３Ｘ１４ＰＸ１５Ｔ（配列番号１４）である
［式中、Ｘ１は、ＤまたはＧであり；Ｘ２は、ＳまたはＬであり；Ｘ３は、ＴまたはＳであり；Ｘ４は、ＤまたはＶであり；Ｘ５は、ＶまたはＩであり；Ｘ６は、ＳまたはＮであり；Ｘ７は、ＡまたはＦであり；Ｘ８は、ＶまたはＬであり；Ｘ９は、ＦまたはＴであり；Ｘ１０は、ＹまたはＡであり；Ｘ１１は、Ｙ、Ｇ、Ｆ、またはＳであり；Ｘ１２は、Ｌ、Ｙ、Ｆ、またはＷであり；Ｘ１３は、Ｙ、Ｎ、Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｆ、またはＩであり；Ｘ１４は、Ｈ、Ｖ、Ｐ、Ｔ、またはＩであり；Ｘ１５は、Ａ、Ｗ、Ｒ、Ｐ、またはＴである］
単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体または抗原結合断片が有用である。具体的な態様では、Ｘ１は、Ｄであり；Ｘ２は、Ｓであり；Ｘ３は、Ｔである。別の態様では、Ｘ４は、Ｄであり；Ｘ５は、Ｖであり；Ｘ６は、Ｓであり；Ｘ７は、Ａであり；Ｘ８は、Ｖであり；Ｘ９は、Ｆであり；Ｘ１０は、Ｙであり；Ｘ１１は、Ｙであり；Ｘ１２は、Ｌであり；Ｘ１３は、Ｙであり；Ｘ１４は、Ｈであり；Ｘ１５は、Ａである。さらに別の態様では、Ｘ１は、Ｄであり；Ｘ２は、Ｓであり；Ｘ３は、Ｔであり；Ｘ４は、Ｄであり；Ｘ５は、Ｖであり；Ｘ６は、Ｓであり；Ｘ７は、Ａであり；Ｘ８は、Ｖであり；Ｘ９は、Ｆであり；Ｘ１０は、Ｙであり；Ｘ１１は、Ｙであり；Ｘ１２は、Ｌであり；Ｘ１３は、Ｙであり；Ｘ１４は、Ｈであり；Ｘ１５は、Ａである。
【０２７５】
さらなる態様では、重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲの間に並置された、１または複数のフレームワーク配列を含み、軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲの間に並置された、１または複数のフレームワーク配列を含む。なおさらなる態様では、フレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列は、カバット亜群Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩの配列に由来する。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列は、ＶＨ亜群ＩＩＩのコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列のうちの１または複数は、配列番号８、９、１０、および１１として明示される。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩ、またはＩＶ亜群の配列に由来する。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列のうちの１または複数は、配列番号１５、１６、１７、および１８として明示される。
【０２７６】
なおさらに具体的な態様では、抗体は、ヒト定常領域またはマウス定常領域をさらに含む。なおさらなる態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらに具体的な態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらに具体的な態様では、抗体は、低減されるか、または最小限のエフェクター機能を有する。なおさらに具体的な態様では、最小限のエフェクター機能は、「エフェクターを欠くＦｃ突然変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる実施形態では、エフェクターを欠くＦｃ突然変異は、定常領域内の、Ｎ２９７Ａ置換またはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。
【０２７７】
さらに別の実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、
（ａ）重鎖が、ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ（配列番号１９）、ＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２０）、およびＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号２１）のそれぞれに対する、少なくとも８５％の配列同一性を有するＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２、およびＨＶＲ−Ｈ３の配列をさらに含むか、または
（ｂ）軽鎖が、ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号２２）、ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号２３）、およびＱＱＹＬＹＨＰＡＴ（配列番号２４）のそれぞれに対する、少なくとも８５％の配列同一性を有するＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、およびＨＶＲ−Ｌ３の配列をさらに含む
抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。具体的な態様では、配列同一性は、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％である。
【０２７８】
別の態様では、重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲの間に並置された、１または複数のフレームワーク配列を含み、軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲの間に並置された、１または複数のフレームワーク配列を含む。さらに別の態様では、フレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列は、カバット亜群Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩの配列に由来する。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列は、ＶＨ亜群ＩＩＩのコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列のうちの１または複数は、配列番号８、９、１０、および１１として明示される。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩ、またはＩＶ亜群の配列に由来する。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列のうちの１または複数は、配列番号１５、１６、１７、および１８として明示される。
【０２７９】
なおさらに具体的な態様では、抗体は、ヒト定常領域またはマウス定常領域をさらに含む。なおさらなる態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらに具体的な態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらに具体的な態様では、抗体は、低減されるか、または最小限のエフェクター機能を有する。なおさらに具体的な態様では、最小限のエフェクター機能は、「エフェクターを欠くＦｃ突然変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる実施形態では、エフェクターを欠くＦｃ突然変異は、定常領域内の、Ｎ２９７Ａ置換またはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。
【０２８０】
別のさらなる実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、
（ａ）重鎖配列が、重鎖配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２５）
に対する、少なくとも８５％の配列同一性を有し、かつ／または
（ｂ）軽鎖配列が、軽鎖配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号４）
に対する、少なくとも８５％の配列同一性を有する、
単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。具体的な態様では、配列同一性は、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％である。別の態様では、重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲの間に並置された、１または複数のフレームワーク配列を含み、軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲの間に並置された、１または複数のフレームワーク配列を含む。さらに別の態様では、フレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。さらなる態様では、重鎖フレームワーク配列は、カバット亜群Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩの配列に由来する。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列は、ＶＨ亜群ＩＩＩのコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列のうちの１または複数は、配列番号８、９、１０、およびＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２７）として明示される。
なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩ、またはＩＶ亜群の配列に由来する。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列のうちの１または複数は、配列番号１５、１６、１７、および１８として明示される。
【０２８１】
なおさらに具体的な態様では、抗体は、ヒト定常領域またはマウス定常領域をさらに含む。なおさらなる態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらに具体的な態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらに具体的な態様では、抗体は、低減されるか、または最小限のエフェクター機能を有する。なおさらに具体的な態様では、最小限のエフェクター機能は、原核細胞内の産生から生じる。なおさらに具体的な態様では、最小限のエフェクター機能は、「エフェクターを欠くＦｃ突然変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる実施形態では、エフェクターを欠くＦｃ突然変異は、定常領域内の、Ｎ２９７Ａ置換またはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。
【０２８２】
さらなる態様では、重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲの間に並置された、１または複数のフレームワーク配列を含み、軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲの間に並置された、１または複数のフレームワーク配列を含む。なおさらなる態様では、フレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列は、カバット亜群Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩの配列に由来する。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列は、ＶＨ亜群ＩＩＩのコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列のうちの１または複数は、以下：
ＨＣ−ＦＲ１  ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳ（配列番号２９）
ＨＣ−ＦＲ２  ＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡ（配列番号３０）
ＨＣ−ＦＲ３  ＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲ（配列番号１０）
ＨＣ−ＦＲ４  ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２７）
である。
【０２８３】
なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩ、またはＩＶ亜群の配列に由来する。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列のうちの１または複数は、以下：
ＬＣ−ＦＲ１  ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（配列番号１５）
ＬＣ−ＦＲ２  ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹ（配列番号１６）
ＬＣ−ＦＲ３  ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣ（配列番号１７）
ＬＣ−ＦＲ４  ＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２８）
である。
【０２８４】
なおさらに具体的な態様では、抗体は、ヒト定常領域またはマウス定常領域をさらに含む。なおさらなる態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらに具体的な態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらに具体的な態様では、抗体は、低減されるか、または最小限のエフェクター機能を有する。なおさらに具体的な態様では、最小限のエフェクター機能は、「エフェクターを欠くＦｃ突然変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる実施形態では、エフェクターを欠くＦｃ突然変異は、定常領域内の、Ｎ２９７Ａ置換またはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。
【０２８５】
さらに別の実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、
（ｃ）重鎖が、ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ（配列番号１９）、ＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２０）、およびＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号２１）のそれぞれに対する、少なくとも８５％の配列同一性を有するＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２、およびＨＶＲ−Ｈ３の配列をさらに含み、かつ／または
（ｄ）軽鎖が、ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号２２）、ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号２３）、およびＱＱＹＬＹＨＰＡＴ（配列番号２４）のそれぞれに対する、少なくとも８５％の配列同一性を有するＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２、およびＨＶＲ−Ｌ３の配列をさらに含む
抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。具体的な態様では、配列同一性は、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％である。
【０２８６】
別の態様では、重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲの間に並置された、１または複数のフレームワーク配列を含み、軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲの間に並置された、１または複数のフレームワーク配列を含む。さらに別の態様では、フレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列は、カバット亜群Ｉ、ＩＩ、またはＩＩＩの配列に由来する。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列は、ＶＨ亜群ＩＩＩのコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、重鎖フレームワーク配列のうちの１または複数は、配列番号８、９、１０、およびＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫ（配列番号３１）として明示される。
【０２８７】
なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩ、またはＩＶ亜群の配列に由来する。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる態様では、軽鎖フレームワーク配列のうちの１または複数は、配列番号１５、１６、１７、および１８として明示される。なおさらに具体的な態様では、抗体は、ヒト定常領域またはマウス定常領域をさらに含む。なおさらなる態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらに具体的な態様では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる態様では、マウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらに具体的な態様では、抗体は、低減されるか、または最小限のエフェクター機能を有する。なおさらに具体的な態様では、最小限のエフェクター機能は、「エフェクターを欠くＦｃ突然変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる実施形態では、エフェクターを欠くＦｃ突然変異は、定常領域内の、Ｎ２９７Ａ置換またはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。
【０２８８】
なおさらなる実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、
（ａ）重鎖配列が、重鎖配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２５）
に対する、少なくとも８５％の配列同一性を有するか、または
（ｂ）軽鎖配列が、軽鎖配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号４）
に対する、少なくとも８５％の配列同一性を有する、
単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。
【０２８９】
一部の実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、軽鎖可変領域配列が、配列番号４のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。一部の実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、重鎖可変領域配列が、配列番号２５のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。一部の実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、軽鎖可変領域配列が、配列番号４のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、重鎖可変領域配列が、配列番号２５のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖のＮ末端の、１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのアミノ酸残基を、欠失させるか、置換するか、または修飾することができる。
【０２９０】
なおさらなる実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、
（ａ）重鎖配列が、重鎖配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫ（配列番号２６）
に対する、少なくとも８５％の配列同一性を有するか、または
（ｂ）軽鎖配列が、軽鎖配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号４）
に対する、少なくとも８５％の配列同一性を有する、
単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。
【０２９１】
一部の実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、軽鎖可変領域配列が、配列番号４のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。一部の実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、重鎖可変領域配列が、配列番号２６のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。一部の実施形態では、重鎖可変領域配列と、軽鎖可変領域配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、軽鎖可変領域配列が、配列番号４のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、重鎖可変領域配列が、配列番号２６のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖のＮ末端の、１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのアミノ酸残基を、欠失させるか、置換するか、または修飾することができる。
【０２９２】
なおさらなる実施形態では、重鎖配列と、軽鎖配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、
（ａ）重鎖配列が、重鎖配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号３２）
に対する、少なくとも８５％の配列同一性を有し、かつ／または
（ｂ）軽鎖配列が、軽鎖配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号３３）
に対する、少なくとも８５％の配列同一性を有する、
単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。
なおさらなる実施形態では、重鎖配列と、軽鎖配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、
（ａ）重鎖配列が、重鎖配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号５６）
に対する、少なくとも８５％の配列同一性を有し、かつ／または
（ｂ）軽鎖配列が、軽鎖配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号３３）
に対する、少なくとも８５％の配列同一性を有する、
単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。
【０２９３】
一部の実施形態では、重鎖配列と、軽鎖配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、軽鎖配列が、配列番号３３のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。一部の実施形態では、重鎖配列と、軽鎖配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、重鎖配列が、配列番号３２または５６のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。一部の実施形態では、重鎖配列と、軽鎖配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、軽鎖配列が、配列番号３３のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有し、重鎖配列が、配列番号３２または５６のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。一部の実施形態では、重鎖配列と、軽鎖配列とを含む単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体であって、軽鎖配列が、配列番号３３のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有し、重鎖配列が、配列番号３２のアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有する、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体が有用である。
【０２９４】
一部の実施形態では、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、非グリコシル化抗体である。抗体のグリコシル化は、典型的に、Ｎ結合型またはＯ結合型である。Ｎ結合型は、炭水化物部分の、アスパラギン残基の側鎖への接合を指す。トリペプチド配列であるアスパラギン−Ｘ−セリンおよびアスパラギン−Ｘ−スレオニン［式中、Ｘは、プロリンを除く、任意のアミノ酸である］は、炭水化物部分の、アスパラギン側鎖への酵素的結合のための認識配列である。したがって、ポリペプチド内の、これらのトリペプチド配列の存在は、潜在的なグリコシル化部位を創出する。Ｏ結合型グリコシル化は、糖類である、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのうちの１つの、ヒドロキシアミノ酸への接合であって、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンへの接合もまた使用されうるが、最も一般には、セリンまたはスレオニンへの接合を指す。グリコシル化部位の、抗体からの除去は、上記で記載したトリペプチド配列（Ｎ結合型グリコシル化部位の場合）が除去されるように、簡便には、アミノ酸配列を変更することにより達成する。変更は、アスパラギン、セリン、またはスレオニン残基内のグリコシル化部位の、別のアミノ酸残基（例えば、グリシン、アラニンまたは保存的置換）による置換により施すことができる。
【０２９５】
本明細書の実施形態のうちのいずれかでは、単離抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒトＰＤ−Ｌ１、例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号：Ｑ９ＮＺＱ７．１に示されるヒトＰＤ−Ｌ１、またはこの変異体に結合しうる。
【０２９６】
ＩＶ．薬学的組成物および製剤
本明細書ではまた、本明細書で記載される、ＩＬ−２イムノコンジュゲート、ＣＤ４０アゴニスト、および／またはＰＤ−１軸結合アンタゴニストと、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物および製剤も提供される。
【０２９７】
本明細書で記載される薬学的組成物および製剤は、所望される純度を有する有効成分（例えば、ＩＬ−２イムノコンジュゲート、ＣＤ４０アゴニスト、および／またはＰＤ−１軸結合アンタゴニスト）を、凍結乾燥製剤または水溶液の形態にある、１または複数の、任意選択の薬学的に許容される担体（「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、１６版、Ｏｓｏｌ，Ａ．編（１９８０））と混合することにより調製することができる。薬学的に許容される担体は、一般に、援用される投与量および濃度において、レシピエントに対して非毒性であり、リン酸、クエン酸、および他の有機酸などのバッファー；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ヘキサメトニウムクロライド；ベンザルコニウムクロライド；ベンゼトニウムクロライド；フェノール、ブチル、もしくはベンジルアルコール；メチルパラベンもしくはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；およびｍ−クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満の）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリジンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む、単糖類、二糖類、および他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；ショ糖、マンニトール、トレハロース、もしくはソルビトールなどの糖類；ナトリウムなどの塩形成対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質複合体）；ならびに／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含むがこれらに限定されない。本明細書における、例示的な、薬学的に許容される担体は、可溶型中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）、Ｂａｘｔｅｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）などのヒト可溶型ＰＨ−２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質などの間質薬物分散剤をさらに含む。ｒＨｕＰＨ２０を含む、ある特定の例示的ｓＨＡＳＥＧＰおよび使用法については、米国特許公開第２００５／０２６０１８６号および同第２００６／０１０４９６８号において記載されている。一態様では、ｓＨＡＳＥＧＰを、コンドロイチナーゼなど、１または複数のさらなるグリコサミノグリカンと混合する。
【０２９８】
例示的な、凍結乾燥抗体製剤については、米国特許第６，２６７，９５８号において記載されている。水性抗体製剤は、米国特許第６，１７１，５８６号およびＷＯ２００６／０４４９０８において記載された水性抗体製剤を含み、後者の製剤は、ヒスチジン酢酸バッファーを含む。
【０２９９】
本明細書における組成物および製剤はまた、処置される特定の適応に必要な、１つを超える有効成分、好ましくは、互いに有害な影響を及ぼし合わない、相補的活性を伴う有効成分も含有しうる。このような有効成分は、意図される目的に有効な量で、組合せ中に存在することが適切である。
【０３００】
有効成分は、例えば、コアセルベーション法により、または界面重合により調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、コロイド状薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子、およびナノカプセル）またはマクロエマルジョンにおける、ヒドロキシメチルセルロースマイクロカプセルまたはゼラチンマイクロカプセルおよびポリ（メチルメタクリレート）マイクロカプセルに封入することができる。このような技法は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、１６版、Ｏｓｏｌ，Ａ．編（１９８０）において開示されている。
【０３０１】
徐放性調製物が調製されうる。適切な徐放性調製物の例は、抗体を含有する固体の疎水性ポリマーによる半透性マトリックスであって、成型品、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態にあるマトリックスを含む。インビボにおける投与のために使用される製剤は、一般に、滅菌製剤である。無菌状態は、例えば、滅菌濾過膜を介する濾過によりたやすく達成することができる。
【０３０２】
ＩＶ．処置法
本明細書では、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための方法であって、個体へと、有効量のＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとを投与することを含む方法が提供される。一部の実施形態では、処置は、処置後の個体における応答を結果としてもたらす。一部の実施形態では、応答は、部分寛解である。一部の実施形態では、応答は、完全寛解である。一部の実施形態では、処置は、処置の中止後の個体における持続的応答（例えば、持続的な部分寛解または完全寛解）を結果としてもたらす。本明細書で記載される方法は、がんを処置するための、腫瘍免疫原性の増大など、免疫原性の増強が所望される状態の処置において使用することができる。本明細書ではまた、がんを有する個体における免疫機能を増強する方法であって、個体へと、有効量のＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとを投与することを含む方法も提供される。
【０３０３】
一部の場合に、本明細書で提供される方法は、有効量の、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、およびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択されるＰＤ−１軸結合アンタゴニストの投与を含む。一部の場合に、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１およびＢ７．１への結合を阻害することが可能であるが、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ２への結合を破壊しない抗体などの抗体である。一部の場合に、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト抗体は、３週間ごとに、約８００ｍｇ〜約１５００ｍｇ（例えば、３週間ごとに、約１０００ｍｇ〜約１３００ｍｇ、例えば、３週間ごとに、約１１００ｍｇ〜約１２００ｍｇ）の用量で投与しうる、ＭＰＤＬ３２８０Ａである。一部の実施形態では、ＭＰＤＬ３２８０Ａを、３週間ごとに、約１２００ｍｇの用量で投与する。
【０３０４】
一般論として、ヒトへと投与されうる、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）の治療的有効量は、１回の投与によるのであれ、複数回の投与によるのであれ、患者の体重１ｋｇ当たり約０．０１〜約５０ｍｇの範囲であろう。一部の実施形態では、例えば、アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）を、例えば、毎日投与される、約０．０１〜約４５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約３５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１〜約５ｍｇ／ｋｇ、または約０．０１〜約１ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。一部の実施形態では、アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）を、１５ｍｇ／ｋｇで投与する。しかし、他の投与量レジメンも、有用でありうる。一実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）を、ヒトへと、約１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約７００ｍｇ、約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、約１４００ｍｇ、または約１５００ｍｇの用量で投与する。一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）を、３週間ごとに、約１１５０ｍｇ〜約１２５０ｍｇの用量で投与する。一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）を、３週間ごとに、約１２００ｍｇの用量で投与する。投与は、単回投与として実施することもでき、点滴など、複数回投与（例えば、２または３回の投与）として実施することもできる。併用治療において投与される抗体の用量は、単一の処置と比較して、低減することができる。一部の実施形態では、例えば、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための方法は、個体に、各サイクルの１日目に、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）を、約１２００ｍｇの用量で投与し、各サイクルが、２１日間である（すなわち、各サイクルは、２１日ごとに繰り返される）、処置サイクルを含む投与レジメンを含む。この治療の経過は、従来の技法により、容易にモニタリングされる。
【０３０５】
一部の場合に、本明細書で提供される方法は、有効量のＩＬ−２イムノコンジュゲート（例えば、ＣＥＡ  ＩＬ２ｖ、ＦＡＰ  ＩＬ２ｖ）の投与を含む。一部の場合に、ＩＬ−２イムノコンジュゲートを、個体へと、毎週約５ｍｇ〜約１００ｍｇ（例えば、毎週約１０ｍｇ〜約６０ｍｇ、例えば、毎週約１０ｍｇ〜約４０ｍｇ）の用量で投与する。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートを、毎週約１０ｍｇの用量で投与する。一般論としては、ヒトへと投与されるＩＬ−２イムノコンジュゲートの治療有効量は、１回の投与によるのであれ、複数回の投与によるのであれ、約５〜約１００ｍｇの範囲（例えば、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、または約１００ｍｇ）であろう。例えば、一部の実施形態では、約１０ｍｇのＩＬ−２イムノコンジュゲートを投与する。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートを、毎週１回、１０ｍｇで投与する。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、毎週、２週間ごと、３週間ごと、４週間ごと、各２１日サイクルの１、８、および１５日目に、または各２８日サイクルの１、８、および１５日目に投与することができる。
【０３０６】
一部の場合に、本明細書で提供される方法は、有効量のＣＤ４０アゴニストの投与を含む。一部の場合に、ＣＤ４０アゴニストを、個体へと、毎週約２ｍｇ〜約１００ｍｇ（例えば、毎週約４ｍｇ〜約６０ｍｇ、例えば、毎週約４ｍｇ〜約２０ｍｇ）の用量で投与する。一部の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストを、毎週約８ｍｇの用量で投与する。一般論としては、ヒトへと投与されるＣＤ４０アゴニストの治療有効量は、１回の投与によるのであれ、複数回の投与によるのであれ、約２〜約１００ｍｇの範囲（例えば、約２ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約８ｍｇ、約１０ｍｇ、約１２ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約２０ｍｇ、約３０ｍｇ、約４０ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、または約１００ｍｇ）であろう。例えば、一部の実施形態では、約８ｍｇのＣＤ４０アゴニストを投与する。一部の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストを、毎週１回、８ｍｇで投与する。一部の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストは、毎週、２週間ごと、３週間ごと、４週間ごと、各２１日サイクルの１、８、および１５日目に、または各２８日サイクルの１、８、および１５日目に投与することができる。
【０３０７】
一部の場合に、ＩＬ−２イムノコンジュゲート（例えば、ＣＥＡ  ＩＬ２ｖまたはＦＡＰ  ＩＬ２ｖ）と、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）とを、単一の投与レジメンで投与する。これらの薬剤の投与は、投与レジメンの文脈内で、共時的な場合もあり、個別的な場合もある。例えば、一部の場合に、本明細書で提供される方法は、処置サイクルを含む投与レジメンを含み、この場合、個体に、各周期の１日目に、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストを、約１２００ｍｇの用量で、かつ、各周期の１、８、および１５日目に、ＩＬ−２イムノコンジュゲートを、約１０ｍｇの用量で、かつ、各周期の１日目に、ＣＤ４０アゴニストを、約１６ｍｇの用量で投与し、各周期を、２１日ごとに繰り返す。
【０３０８】
一部の実施形態では、個体は、ヒトである。一部の実施形態では、個体は、局所進行性がんもしくは転移性がんを患っている。一部の実施形態では、個体は、ＣＥＡ陽性がんを有する。一部の実施形態では、個体は、ＦＡＰ陽性がんを有する。一部の実施形態では、がんは、固形腫瘍である。一部の実施形態では、がんは、結腸がん、肺がん、卵巣がん、胃がん、膀胱がん、膵臓がん、子宮内膜がん、乳がん、腎臓がん、食道がん、または前立腺がんである。一部の実施形態では、乳がんは、乳癌または乳腺癌である。一部の実施形態では、乳癌は、侵襲性乳管癌である。一部の実施形態では、肺がんは、肺腺癌である。一部の実施形態では、結腸がんは、結腸直腸腺癌である。一部の実施形態では、個体におけるがん細胞は、ＰＤ−Ｌ１を発現する。一部の実施形態では、個体におけるがん細胞は、ＣＥＡタンパク質を。検出可能な（例えば、当該技術分野で公知の方法を使用して検出可能な）レベルで発現する。一部の実施形態では、個体におけるがん細胞（特に、線維芽細胞など、がんの間質細胞）は、ＦＡＰタンパク質を。検出可能な（例えば、当該技術分野で公知の方法を使用して検出可能な）レベルで発現する。
【０３０９】
一部の実施形態では、個体は、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとによる併用治療の前に、がん治療で処置されている。一部の実施形態では、個体は、１または複数のがん治療に対して耐性であるがんを有する。一部の実施形態では、がん治療に対する耐性は、がんまたは不応性がんの再発を含む。再発は、処置後の、元の部位または新たな部位におけるがんの再出現を指す場合がある。一部の実施形態では、がん治療に対する耐性は、抗がん治療による処置時における、がんの進行を含む。一部の実施形態では、がん治療に対する耐性は、処置に応答しないがんを含む。がんは、処置の開始時に耐性の場合もあり、処置時に耐性となる場合もある。一部の実施形態では、がんは、早期がんまたは末期がんである。
【０３１０】
一部の実施形態では、本発明の併用療法は、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとの投与を含む。ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、当該技術分野で公知である、任意の適切な方式で投与することができる。例えば、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、逐次的に（異なる時点において）投与することもでき、共時的に（同時に）投与することもできる。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、各々、別個の組成物中にある。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートは、ＣＤ４０アゴニストおよび／またはＰＤ−１軸結合アンタゴニストと同じ組成物中にある。
【０３１１】
ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、同じ投与経路により投与することもでき、異なる投与経路により投与することもできる。一部の実施形態では、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストを、静脈内投与、筋肉内投与、皮下、局所、経口、経皮、腹腔内投与、眼内投与、植込みによる投与、吸入による投与、髄腔内投与、脳室内投与、または鼻腔内投与する。一部の実施形態では、ＣＤ４０アゴニストを、静脈内投与、筋肉内投与、皮下、局所、経口、経皮、腹腔内投与、眼内投与、植込みによる投与、吸入による投与、髄腔内投与、脳室内投与、または鼻腔内投与する。有効量のＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、疾患の防止のために投与することもでき、疾患の処置のために投与することもできる。ＩＬ−２イムノコンジュゲート、ＣＤ４０アゴニスト、および／またはＰＤ−１軸結合アンタゴニストの適切な投与量は、処置される疾患の種類、ＩＬ−２イムノコンジュゲート、ＣＤ４０アゴニスト、およびＰＤ−１軸結合アンタゴニストの種類、疾患の重症度および経過、個体の臨床状態、個体の病歴、および処置に対する応答、ならびに主治医の裁量に基づき決定することができる。
【０３１２】
一部の実施形態では、方法は、さらなる治療をさらに含みうる。さらなる治療は、放射線療法、手術（例えば、腫瘍摘出手術および乳房切除術）、化学療法、遺伝子治療、ＤＮＡ療法、ウイルス療法、ＲＮＡ療法、免疫療法、骨髄移植、ナノ療法、モノクローナル抗体療法、または前出の組合せでありうる。さらなる治療は、アジュバント療法またはネオアジュバント療法の形態でありうる。一部の実施形態では、さらなる治療は、低分子酵素阻害剤または抗転移剤の投与である。一部の実施形態では、さらなる治療は、副作用制限剤（例えば、抗悪心剤など、処置の副作用の発生および／または重症度を軽減することを意図した薬剤）の投与である。一部の実施形態では、さらなる治療は、放射線療法である。一部の実施形態では、さらなる治療は、手術である。一部の実施形態では、さらなる治療は、放射線療法と手術との組合せである。一部の実施形態では、さらなる治療は、ガンマ照射である。一部の実施形態では、さらなる治療は、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ経路をターゲティングする療法、ＨＳＰ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、アポトーシス阻害剤、および／または化学予防剤である。さらなる治療は、本明細書で記載される化学療法剤のうちの１または複数でありうる。
【０３１３】
他の併用療法
本明細書ではまた、個体におけるがんを処置するか、またはがんの進行を遅延させるための方法であって、個体へと、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）とを、別の抗がん剤またはがん治療と共に投与することを含む方法も提供される。
【０３１４】
一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、化学療法または化学療法剤と共に投与することができる。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、放射線療法または放射線療法剤と共に投与することができる。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、ターゲティング療法またはターゲティング療法剤と共に投与することができる。一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、免疫療法または免疫療法剤、例えば、モノクローナル抗体と共に投与することができる。
【０３１５】
Ｖ．製造品またはキット
本発明の別の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲート、ＣＤ４０アゴニスト、および／またはＰＤ−１軸結合アンタゴニストを含む製造品またはキットが提供される。一部の実施形態では、製造品またはキットは、ＩＬ−２イムノコンジュゲートを、ＣＤ４０アゴニストと、任意選択で、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと共に使用して、個体におけるがんを処置するか、もしくはがんの進行を遅延させるか、またはがんを有する個体の免疫機能を増強するための指示書を含む添付文書をさらに含む。本明細書で記載されるＩＬ−２イムノコンジュゲート、ＣＤ４０アゴニストおよび／またはＰＤ−１軸結合アンタゴニストのうちのいずれかは、製造品またはキットに含まれうる。
【０３１６】
一部の実施形態では、ＩＬ−２イムノコンジュゲートと、ＣＤ４０アゴニストと、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストとは、同じ容器内にある場合もあり、別個の容器内にある場合もある。適切な容器は、例えば、ボトル、バイアル、バッグ、およびシリンジを含む。容器は、ガラス、プラスチック（ポリ塩化ビニルまたはポリオレフィンなど）、または合金（ステンレス鋼またはハステロイなど）など、様々な材料から形成することができる。一部の実施形態では、容器は、製剤と、容器上のラベルまたは容器に貼付されたラベルとを保持し、容器は、使用のための指示を指し示しうる。製造品またはキットは、市場および使用者の観点から所望される、他の材料であって、他のバッファー、希釈剤、フィルター、注射針、シリンジ、および使用説明書を伴う添付文書を含む材料をさらに含みうる。一部の実施形態では、製造品は、別の薬剤（例えば、化学療法剤、および抗腫瘍剤）のうちの１または複数をさらに含む。１または複数の薬剤に適する容器は、例えば、ボトル、バイアル、バッグ、およびシリンジを含む。
【０３１７】
本明細書は、当業者が、本発明を実施することを可能とするのに十分であると考えられる。当業者には、前出の記載から、本明細書で示され、記載される改変に加えて、本発明の多様な改変が明らかであり、これらも、付属の特許請求の範囲内に収まるであろう。本明細書で引用される、全ての刊行物、特許、特許出願は、それらの全内容が、全ての目的で、本明細書に参照により援用される。
【実施例】
【０３１８】
本発明は、以下の例を参照することにより、より完全に理解されるであろう。しかし、以下の例は、本発明の範囲を限定するものとみなされるべきではない。本明細書で記載される例および実施形態は、例示だけを目的とするものであり、当業者には、これに照らした、多様な改変または変化が示唆され、本出願の精神および範囲の範囲内、ならびに付属の特許請求の範囲内に含まれるものとすることが理解される。
【０３１９】
実施例１
マウス腫瘍細胞株の同系モデルにおける、ＦＡＰに対してターゲティングされたＩＬ２ｖイムノコンジュゲートの、インビボにおける、単独の有効性、ならびに抗ＣＤ４０  Ｍａｂおよび抗ＰＤ−Ｌ１  Ｍａｂと組み合わせた有効性
ＦＡＰに対してターゲティングされたＩＬ２ｖイムノコンジュゲートを、同系マウスモデルにおける、それらの単独の抗腫瘍有効性、ならびにＣＤ４０  ｍａｂおよびＰＤ−Ｌ１  Ｍａｂと組み合わせた抗腫瘍有効性について調べた。
【０３２０】
Ｐａｎｃ０２−Ｆｌｕｃ膵臓同系モデル
マウスサロゲートＦＡＰターゲティングＦＡＰ−ＩＬ２ｖイムノコンジュゲートについて、Ｂｌａｃｋ  ６マウスへと膵臓内注射された、マウス膵臓Ｐａｎｃ０２−Ｆｌｕｃトランスフェクタント細胞株内で調べた。
【０３２１】
Ｐａｎｃ０２−Ｈ７細胞（マウス膵臓癌）は、元来、ＭＤ  Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｎｔｅｒ（Ｔｅｘａｓ、ＵＳＡ）から得られ、拡大の後で、Ｒｏｃｈｅ−Ｇｌｙｃａｒｔの社内細胞バンクに寄託された。Ｐａｎｃ０２−Ｈ７−Ｆｌｕｃ細胞株は、カルシウムトランスフェクションおよびサブクローニング法により、社内で作製された。Ｐａｎｃ０２−Ｈ７−Ｆｌｕｃは、１０％のＦＣＳ（Ｓｉｇｍａ）、５００μｇ／ｍｌのハイグロマイシン、および１％のＧｌｕｔａｍａｘを含有するＲＰＭＩ培地中で培養した。細胞は、３７℃、水飽和雰囲気中、５％ＣＯ２で培養した。第１４代継代を、移植のために使用した。細胞生存率は、９２．８％であった。０．３ｍｌのツベルクリン用シリンジ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、動物１匹当たりの細胞１×１０５個を、マウスの膵臓へと注射した。このために、麻酔をかけたＢｌａｃｋ  ６マウスの左腹部に、小さな切開を施した。腹壁を開き、膵臓を、鉗子により、注意深く摘出した。１０マイクロリットル（ＲＰＭＩ培地中のＰａｎｃ０２−Ｈ７−Ｆｌｕｃ細胞１×１０５個）の細胞懸濁液を、膵尾に注射した。腹壁および皮膚の創傷は、５／０分解性縫合糸を使用して閉止させた。
【０３２２】
認定されたガイドライン（ＧＶ−Ｓｏｌａｓ；Ｆｅｌａｓａ；ＴｉｅｒｓｃｈＧ）に従い、実験開始時に８〜９週齢の雌Ｂｌａｃｋ  ６マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ、Ｌｙｏｎ、Ｆｒａｎｃｅ）を、１２時間の明期／１２時間の暗期による日周期を伴う、特定の病原体がない条件下で維持した。実験研究プロトコールは、地方自治体により、精査および承認された（ＺＨ１９３／２０１４）。到着後、新たな環境への馴致および観察のために、動物を、１週間にわたり維持した。持続的な健康モニタリングを、定期的に実行した。
【０３２３】
研究０日目に、マウスに、Ｐａｎｃ０２−Ｆｌｕｃ細胞１×１０５個を、膵臓内注射し、無作為化し、秤量した。腫瘍細胞注射の１週間後に、マウスに、ＦＡＰ−ＩＬ−２ｖ（４０μｇ）、ＰＤ−Ｌ１−Ｍａｂ（２００μｇ）、ＣＤ４０  Ｍａｂ（２００μｇ）、およびそれらの組合せである、ＦＡＰ−ＩＬ−２ｖ＋ＰＤ−Ｌ１  Ｍａｂ、ＦＡＰ−ＩＬ−２ｖ＋ＣＤ４０  Ｍａｂ、ＦＡＰ−ＩＬ−２ｖ＋ＰＤ−Ｌ１  Ｍａｂ＋ＣＤ４０Ｍａｂを、毎週１回、３週間にわたり、ｉ．ｖ．注射した。ビヒクル群内のマウスに、ヒスチジンバッファーを注射した。
【０３２４】
図１は、組合せである、ＦＡＰ−ＩＬ−２ｖ＋ＣＤ４０  Ｍａｂ＋ＰＤ−Ｌ１  Ｍａｂが、中央値生存および全生存の増強に関して、他の全ての単一の被験薬剤および組合せの被験薬剤と比較して、優れた有効性を媒介したことを示す。
【０３２５】
ＩＶＩＳ（登録商標）ＳＰＥＣＴＲＵＭによる生物発光イメージングのために、マウスに、生物発光イメージング収集（ＢＬＩ）の１０分前に、１５０ｍｇ／ｋｇのＤ−ルシフェリンを、腹腔内注射し、その後、４％のイソフルランで麻酔をかけた。その後、マウスを、隔離チャンバーへと移し、これを、ＩＶＩＳ（登録商標）ｓｐｅｃｔｒｕｍ内に置いた。発光シグナルを、１０〜５０秒間にわたり収集することにより、インビボにおけるＢＬＩの収集を実施する。データは、放射輝度（光子）／秒／ｃｍ２／ｓｒとして保存する。インビボにおけるＢＬＩデータ解析を、Ｌｉｖｉｎｇ  Ｉｍａｇｅ（登録商標）４．４ソフトウェアにより実施し、腫瘍阻害曲線により表す。
【０３２６】
図２は、組合せである、ＦＡＰ−ＩＬ−２ｖ＋ＣＤ４０  Ｍａｂ＋ＰＤ−Ｌ１  Ｍａｂが、生物発光シグナル（１秒当たりの光子）の減殺に関して、他の全ての単一の被験薬剤および組合せの被験薬剤と比較して、優れた有効性を媒介したことを示す。
【０３２７】
ＷＯ２０１０／０７７６３４に記載されたＰＤ−Ｌ１抗体である、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０に基づく抗マウスＰＤ−Ｌ１抗体（配列を、図１１に示す）を、インビボの腫瘍モデルにおいて使用した。この抗体は、ＦｃγＲ相互作用を消失させるように、ＤＡＰＧ突然変異を含有した。ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０の可変領域を、ＤＡＰＧ  Ｆｃ突然変異を伴う、マウスＩｇＧ１定常ドメインへと接合させた。
【０３２８】
抗薬剤抗体（ＡＤＡ）の形成を低減するために、ＦＡＰターゲティングＩＬ−２変異体免疫サイトカインである、ｍｕＦＡＰ−ｍｕＩＬ２ｖと称する、ＦＡＰ−ＩＬ２ｖのマウス化キメラ形を、完全免疫コンピテントマウスによる、インビボの腫瘍モデルにおいて使用した。マウス化サロゲート分子内で、Ｆｃドメインのノブ・イントゥー・ホール突然変異を、ｍｕＩｇＧ１上の、ＤＤＫＫ突然変異により置きかえ、ＬＡＬＡ  Ｐ３２９Ｇ突然変異を、ｍｕＩｇＧ１上の、ＤＡＰＧ突然変異により置きかえた。
【０３２９】
抗マウスＣＤ４０抗体を、インビボの腫瘍モデルにおいて使用した。
【０３３０】
インビボの腫瘍モデルにおいて使用した分子のポリペプチド配列は、以下の通りである。
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【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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