【事件の表示】
　特許第３４５７００４号「ｈＰＴＨ（１−３７）配列由来のペプチド」の請求項１ないし１０に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第３４５７００４号の請求項１ないし５に係る特許を取り消す。
【理　由】
１．手続の経緯
　本件特許第３４５７００４号の発明についての出願は、平成７年９月２２日（パリ条約による優先権主張、１９９４年９月２８日、ドイツ）に出願され、平成１５年８月１日にその発明について特許権の設定登録がなされ、その後、平成１５年１２月２９日付でスキャンティーボディーズ・ラボラトリー，インコーポレイテッドより本件特許の請求項１−１０に係る発明について本件特許異議の申立てがなされ、取消理由の通知がなされ、その指定期間内である平成１７年１月１１日に訂正請求がなされた。
　一方で、本件特許について、平成１６年４月３０日付で、請求項１及び請求項３乃至６についての特許を無効とすることについて審判が請求され、平成１８年５月２日に当該請求項についての特許を無効とする旨の審決がなされ、平成２０年２月５日に当該審決が確定した。
　そこで、この間中止していた本件特許異議申立の審理手続の中止が解除され、平成２０年６月３日に、特許異議申立人から、特許異議の申立に係る特許の表示につき、「全請求項（請求項の数１０）」を「請求項２，７〜１０（請求項の数５）」とする手続補正書が提出され、一方で、取消理由の通知がなされ、その指定期間内である平成２０年６月１３日に、新たに訂正請求がなされ、同日付で、平成１７年１月１１日付けの訂正請求が取り下げられたものである。
　
２．平成２０年６月１３日付訂正の適否
（１）訂正の内容
ア．訂正事項ａ
　平成１５年５月１２日付の手続補正書により補正された請求の範囲の請求項１及び３〜６を削除するとともに、同日付の手続補正書により補正された請求の範囲の請求項２及び７〜１０を、訂正後の請求項１〜５として請求項の番号を付け直し、また、訂正後の請求項１〜５において、本訂正請求により削除された「平成１５年５月１２日の本件特許出願人提出に係る手続補正書により補正された請求の範囲の請求項１及び３〜６」を引用している記載について、削除された請求項の番号を引用することなく、削除された請求項に記載されている内容を記載する。
　
イ．訂正事項ｂ
　訂正後の請求項４における項目（ｉ）において、「生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を診断するための」という記載を追加する。
　
ウ．訂正事項ｃ
　訂正後の請求項４における項目（ｉｉｉ）において、「生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を診断するための」という記載を追加する。
　
（２）訂正の目的の適否、新規事項の有無、及び特許請求の範囲の拡張・変更の存否
　上記訂正事項ａ乃至ｃは、いずれも、特許請求の範囲の減縮を目的とした明細書の訂正に該当し、新規事項の追加に該当せず、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではない。
　したがって、上記訂正は、適法なものである。
　
（３）むすび
　したがって、上記訂正は、平成１５年改正前特許法第１２０条の４第２項の規定、及び同条第３項で準用する同法第１２６条第２，３項の規定に適合するので、当該訂正を認める。
　
３．特許異議の申立ての概要
　特許異議申立人は、
（１）甲第１号証、甲第２号証、甲第１０〜１２号証、甲第１４号証、及び、甲第１５号証を提出し、訂正前の請求項２，７〜１０に係る発明の特許は、特許法第２９条第１項第３号の規定に違反してなされたものであるから、取り消すべき旨、
（２）甲第１〜１５号証を提出し、訂正前の請求項２，７〜１０に係る発明の特許は、特許法第２９条第２項の規定に違反してなされたものであるから、取り消すべき旨、
（３）甲第２号証、甲第５号証、甲第１３号証、及び、甲第１６号証を提出し、本願は、特許法第３６条第４項に規定する要件を満たしていないから、訂正前の請求項２，７〜１０に係る発明の特許を取り消すべき旨、主張する。
　これに対し、上述のとおり、訂正前の請求項２，７〜１０は、新たな請求項１〜５に訂正された。
　したがって、以下、訂正後の請求項１〜５に係る発明の特許について、特許異議申立ての理由により取消すべきものであるか否か、検討する。
　
４．特許異議の申立て理由（２）についての判断
（１）本件発明
　訂正明細書の請求項１〜５に係る発明（以下、それぞれ、「本件発明１」〜「本件発明５」という。）は、訂正明細書の特許請求の範囲の請求項１〜５に記載された事項により特定される、以下のとおりのものである。
　
「１．　生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を診断するための抗体又は抗体フラグメントを製造するための、以下の配列からなるペプチドの使用であって、
　
ｈＰＴＨ　１−１０ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−Ａｓｎ１０−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−９ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−８ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−ＯＨ 
ｈＰＴＨ １−７ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−６ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−５ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−ＯＨ 
　
ペプチドのＮ末端、側鎖、及び／若しくはＣ末端が修飾されて、ヘモシアニンに結合している、上記の使用。　
　
２．　以下の配列から選ばれるペプチドを特異的に認識してそれに結合する抗体又は抗体フラグメントを含む、生物活性を有するヒト上皮小体ホルモン（ｈＰＴＨ（１−３７）を検出するための診断薬。
　
ｈＰＴＨ　１−１０ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−Ａｓｎ１０−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−９ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−８ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−ＯＨ 
ｈＰＴＨ １−７ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−６ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−５ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−ＯＨ 
　
３．　ヒト上皮小体ホルモンのアミノ酸領域９−１５又は３０−３７に結合する第２の抗体又は抗体フラグメントをさらに含み、両抗体が、相互立体障害を避けるために互いに十分離れた位置にある抗原エピトープを認識できる、請求項２に記載の診断薬。
　
４．　以下の（ｉ）から（ｉｉｉ）の何れかに記載の抗体を用いて、インビトロで生物活性を有するヒト上皮小体ホルモン（ｈＰＴＨ（１−３７））を検出する方法。
（ｉ）少なくとも１個の以下のペプチド、又はペプチドのＮ末端、側鎖、及び／若しくはＣ末端が修飾されて、ヘモシアニンに結合している上記のペプチド、による動物の免疫によって得ることができる、生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を診断するための抗体又は抗体フラグメント：
　
ｈＰＴＨ　１−１０ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−Ａｓｎ１０−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−９ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−８ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−ＯＨ 
ｈＰＴＨ １−７ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−６ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−５ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−ＯＨ 
　
（ｉｉ）以下の配列から選ばれるペプチドを認識してそれに結合する、上記（ｉ）に記載の抗体又は抗体フラグメント。
　
ｈＰＴＨ　１−１０ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−Ａｓｎ１０−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−９ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−８ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−ＯＨ 
ｈＰＴＨ １−７ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−６ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−５ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−ＯＨ 
　
（ｉｉｉ）以下の配列から選ばれるペプチドを特異的に認識してそれに結合する、生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を診断するための抗体又は抗体フラグメント：
　
ｈＰＴＨ　１−１０ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−Ａｓｎ１０−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−９ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−８ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−ＯＨ 
ｈＰＴＨ １−７ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−６ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−５ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−ＯＨ 
　
５．　ヒト上皮小体ホルモンのアミノ酸領域９−１５又は３０−３７に結合する第２の抗体又は抗体フラグメントをさらに使用し、両抗体が、相互立体障害を避けるために互いに十分離れた位置にある抗原エピトープを認識できる、請求項４に記載の方法。」
　
（２）異議申立人の提出した甲号証
甲第１号証：European Journal of Pharmaceutical Sciences vol.2,No.1/2(1994)p154（右上欄）甲第３号証：Journal of immunoassay,13(1),1992,p1-13 
甲第５号証：Antibodies-A laboratory manual;Cold Spring Harbor Laboratory, l988 
甲第７号証：Advances in Protein Design InternationaI Workshop 1988;GBF Monographs,Vol.12
甲第８号証：Advances in Experimental Medicine and Biology 208,1986, p315−327 
甲第１１号証：Elsevier Science B.V社の「Pharmaceutical Sciences of Elsevier Science」出版編集長であるKimberly L.Briggs氏による、宣誓供述書の写し 
甲第１２号証：大英図書館文献サービスセンター（British Library Document Supply Centre）の特許裁判担当官であるAndrew William Smith氏による宣誓供述書の写し 
　
（３）甲号証の記載事項
　甲第１，３，５，７，８，１１，及び１２号証には、それぞれ、以下の事項が記載されている。
　
甲第１号証：European Journal of Pharmaceutical Sciences vol.2,No.1/2(1994)p154（右上欄）（１−１）ｈＰＴＨの生理的循環型フラグメントである、ヒト上皮小体ホルモン１−３７（ｈＰＴＨ１−３７）の免疫学的検出（表題） 
（１−２）ヒト上皮小体ホルモン（８４アミノ酸ペプチド）は、カルシウム代謝のホメオスタシスにおける主要な因子の一つである。ｈＰＴＨは代謝されて多数のＣ末端フラグメントを生じるが、それらの生物学的意義は不明である。Ｎ末端フラグメントのｈＰＴＨ１−３７はｈＰＴＨの生理的循環体として提案されていたことから、我々は、ヒト血清におけるこのフラグメントを測定するための免疫学的アッセイを開発した。（２頁本文第１〜７行） 
（１−３）我々は、無血清細胞培養におけるハイブリドーマ細胞によりｈＰＴＨ１−３７に対するモノクローナル抗体（Ｍａｂ）を作製した。ｈＰＴＨ１−３７に対する配列特異的ポリクローナル抗体を生成するために、我々はｈＰＴＨ１−３７の一次構造の一部を有する多重抗原性ペブチドシステム（ＭＡＰ）を合成した。我々は、ウサギにおいて惹起された１０種のポリクローナル抗血清：血清Ｋ1−Ｋ3（ｈＰＴＨ１−１０ＭＡＰから）残基５−９の間のヘリツクス領域を含む；血清Ｋ4−Ｋ6（ｈＰＴＨ９−１８ＭＡＰから）残基１０−１６の間の不定領域を提示する、および血清Ｋ7−Ｋ10（ｈＰＴＨ２４−３７ＭＡＰから）Ｃ末端らせん（残基１７−３４）を構成する、を得た。（２頁本文第７〜１６行） 
（１−４）全てのポリクローナルおよびモノクローナル抗体をエピトープマッピングにより特徴付けた。この目的のため、ｈＰＴＨ１−３７全体に相当するように配列を重なり合わせたペプチド（９−１０アミノ酸残基）を合成した。抗原決定基が以下のように見出された：（１）血清Ｋ1−Ｋ3はｈＰＴＨ１−５の配列に優位的に結合する、（２）血清Ｋ4−Ｋ6は残基９−１４に選択的に結合する、（３）血清Ｋ7は２４−３０残基を認識する、（４）血清Ｋ8およびＫ9は残基２８−３６に結合する、（５）血清Ｋ10は残基３０−３７を認識する。（６）全てのＭａｂは、ｈＰＴＨフラグメント１６−２４を認識する。まとめると、ｈＰＴＨ１−３７の様々な領域が産生された抗体によりカバーされている。（２頁本文第１６〜２５行） 
（１−５）さらに、二つの抗体を組み合わせた二部位アッセイの試験を行った。これらの実験によって、血清中の生理的循環型ヒトＰＴＨフラグメントを特異的に検出できる可能性が示される。（２頁本文第２５〜２８行） 
　
甲第３号証：Journal of immunoassay,13(1),1992,p1−13 
（３−１）エピトープマッピングによるｈＰＴＨ（１−３８）に対するマウスポリクローナル抗血清の結合特性（図２の表題）ピン１のペプチド（ｈＰＴＨ１−６）に結合特性が認められる。　 
（３−２）抗体の有意な量が結合する少なくとも４つの異なるエピトープ：配列　５−１２（ピン５〜７、Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ）、１６−２５（ピン１６〜２０、Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ）、２４−３０（ピン２４〜２５、Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ）および２７−３４（ピン２７〜２９、Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ）が存在した。（５頁１６〜２１行） 
　
甲第５号証：Antibodies-A laboratory manual;Cold Spring Harbor Laboratory, l988 
（５−１）ペプチドのサイズ　元のタンパク質に結合する抗体を確実に誘導することができる最小の合成ペプチドのサイズは６残基であろう。小さいペプチドは典型的には免疫原性が弱く、所望のタンパク質を認識しないかもしれない。・・・一般的には約１０残基のペプチドが、キャリアと結合させて用いる場合の最低限のサイズとして用いられている。（第７６頁２０〜３０行） 
（５−２）好適なキャリアの選択　多くのキャリアタンパク質が合成ペプチドに結合するのに用いられる。最も一般的に用いられるキャリアタンパク質は、キーホールリンベットヘモシアニン（KLH）と、ウシ血清アルブミン（BSA）である。（第７７頁２７〜３０行）
　
甲第７号証：Advances in Protein Design InternationaI Workshop 1988;GBF Monographs,Vol.12 
（７−１）最初の二つのアミノ酸残基のようなわずかな欠失であっても、腎ＰＴＨレセプターとの相互作用はまだあるものの、インビトロでのＰＴＨ活性を完全に消失させる。（１６９頁２１〜２４行） 
　
甲第８号証：Advances in Experimental Medicine and Biology 208,1986,p315−327 
（８−１）１０アミノ酸を除去しなくても、１位と２位のアミノ酸残基を単に除去するだけで、同じインビトロアッセイにおいて明らかな生物活性の完全な消失がみられる。（３１８頁８〜１０行） 
　
甲第１１号証：Elsevier Science B.V社の「Pharmaceutical Sciences of Elsevier Science」出版編集長であるKimberly L.Briggs氏による、宣誓供述書の写し 
（１１−１）甲第１号証であるEuropean Journal of Pharmaceutical Sciences vol.2,No.1/2の発行日が１９９４年９月１２日である旨が証明されている。  
　
甲第１２号証：大英図書館文献サービスセンター（British Library Document Supply Centre）の特許裁判担当官であるAndrew William Smith氏による宣誓供述書の写し 
（１２−１）甲第１号証であるEuropean Journal of Pharmaceutical Sciences vol.2,No.1/2が大英図書館に１９９４年９月１６日に受け入れられた旨が証明されている。 
 　
（４）対比・判断　
　最初に、上記甲第１号証が、本件優先日前に頒布された刊行物であるか否かについて検討する。 
　上記甲第１号証の発行日については、その表紙に「September　１９９４」と記載されているものの、何日であるのかは明示されていないが、上記甲第１号証の発行元であるElsevier Science B.V社の「Pharmaceutical Sciences of Elsevier Science」出版編集長であるKimberly L.Briggs氏による、宣誓供述書である甲第１１号証を参照すれば、上記甲第１号証の掲載された雑誌の発行日は、１９９４年９月１２日であり、また、甲第１２号証に示されるとおり、当該雑誌は大英図書館に１９９４年９月１６日に受け入れられたものと認められる。 
　そうすると、上記甲第１号証が、１９９４年９月１２日に発行され、１９９４年９月１６日に大英図書館に受け入れられていたのであるから、上記甲第１号証が、本件優先日である１９９４年９月２８日前に、不特定の者が見得る状態におかれたことは明らかである。
　
　なお、特許権者は、乙第１，６乃至８号証を提出して、「受領印のある日に受け入れられたとしても、頒布された刊行物とは言えない」旨を主張しているが、大英図書館へ受け入れたことにより、不特定の者が見得る状態におかれたとすることが社会通念上妥当なことであるといえるから、上記甲第１号証は大英図書館受け入れ日に頒布された刊行物ということができ、特許権者の主張は採用できない。 
　したがって、上記甲第１号証は、本件優先日前に頒布された刊行物であるものと認められる。 
（なお、本件特許に対する無効審判である、無効２００４−８００３７号で提出された、「国立国会図書館による受領印付きの表紙」によっても、甲第１号証が、１９９４年９月１２日に発行され、１９９４年９月２６日に国会図書館に受け入れられ、本件優先日である１９９４年９月２８日前に、不特定の者が見得る状態におかれたことは明らかである。）　
　そこで、本件優先日前に頒布された甲第１号証の記載内容を検討する。 
　上記記載事項（１−１）「ｈＰＴＨの生理的循環型フラグメントである、ヒト上皮小体ホルモン１−３７（ｈＰＴＨ１−３７）の免疫学的検出」によれば、甲第１号証の主題は、アミノ酸１−３７からなるヒト血液中に存在するｈＰＴＨのフラグメントである「ｈＰＴＨ（１−３７）」を検出することにあることは明らかである。 
　次に、上記記載事項（１−３）「我々は、ウサギにおいて惹起された１０種のポリクローナル抗血清：血清Ｋ1−Ｋ3（ｈＰＴＨ１−１０ＭＡＰから）・・を得た。」によれば、ｈＰＴＨ１−１０のペプチドを使用して、三重リジン分枝化したもの（ｈＰＴＨ１−１０ＭＡＰ）でウサギを免疫してポリクローナル抗血清を得たのであるから、「抗体を製造するためのペプチド（ｈＰＴＨ１−１０）の使用」及び「ペブチド（ｈＰＴＨ１−１０）による動物（ウサギ）の免疫によってポリクローナル抗体を含む抗血清Ｋ1−Ｋ3が得られたこと」が記載されているといえる。 
　さらに、上記記載事項（１−４）には、（１）として、「血清Ｋ1−Ｋ3はｈＰＴＨ１−５の配列に優位的に結合する」と記載されている。 
　ところで、（１−４）では、「全てのポリクローナルおよびモノクローナル抗体をエピトープマッピングにより特徴付けた。」と記載されているところからみて、（１−４）の（１）〜（５）に記載された各血清Ｋ1−Ｋ10は、いずれもポリクローナル抗体として位置づけられており、（６）によると全てのモノクローナル抗体は、ｈＰＴＨフラグメント１６−２４を認識するものであったのだから、（１−４）の「まとめると、ｈＰＴＨ１−３７の様々な領域が産生された抗体によりカバーされている。」との記載、及び（１−５）の「二つの抗体を組み合わせた二部位アッセイの試験」との記載中の「抗体」とは（１−４）の（１）〜（５）の血清群及び（６）のモノクローナル抗体を含めた６種類の「抗体」を指すものであると解される。 
　そして、上記（１−４）の（１）の記載は、ｈＰＴＨ１−１０によりウサギを免疫することにより得られたポリクローナル抗体が、エピトープマッピングでは他のペプチドと比較して優位さをもってペプチド（ｈＰＴＨ１−５）に結合したことに他ならないから、このことは、ｈＰＴＨ（１−３７）中の１−５部位付近にエピトープが存在することと共に、ｈＰＴＨ１−１０によりウサギを免疫することにより得られたポリクローナル抗体が当該ｈＰＴＨ１−５エピトープを認識するものであることを強く教示するものである。 　
　さらに、各血清群をモノクローナル抗体と共に（１−４）の（１）〜（６）の６種類に場合分けした後のまとめの記載として、「ｈＰＴＨ１−３７の様々な領域が産生された抗体によりカバーされている。」と結論づけていることからも、当該文献の筆者が「ｈＰＴＨ１−１０によりウサギを免疫することにより得られたポリクローナル抗体」に対して１−５部位付近のエピトープの認識能を期待していることが窺われる。 
　また、上記記載事項（１−５）における「二つの抗体を組み合わせた二部位アッセイの試験を行った。」の二つの抗体は、（１−４）のこれら（１）〜（６）の６種類の抗体から選択されることは明らかであるから、上記ペプチド（ｈＰＴＨ１−５）に結合する「ｈＰＴＨ１−１０によりウサギを免疫することにより得られたポリクローナル抗体」も当然に当該アッセイのための「抗体」の候補の一つである。そして、続く「これらの実験によって、血清中の生理的循環型ヒトＰＴＨフラグメントを特異的に検出できる可能性が示される。」の記載からみて、当該「二部位アッセイ」は、生理的循環型ヒトＰＴＨフラグメントを特異的に検出するためのものであるから、甲第１号証には、上記ペプチド（ｈＰＴＨ１−５）に結合する「ｈＰＴＨ１−１０によりウサギを免疫することにより得られたポリクローナル抗体」を血清中の生理的循環型ヒトＰＴＨフラグメントであるｈＰＴＨ（１−３７）を免疫学的に検出するための候補の一つとすることが記載されているといえる。
 　　　　　 
ア．本件発明１に対して 
　本件発明１と、甲第１号証に記載された発明とを比較すると、「ｈＰＴＨ（１−３７）を免疫学的に検出すること」は、「ｈＰＴＨ（１−３７）を診断すること」に他ならないから、両者は、「ｈＰＴＨ（１−３７）を診断するための抗体又は抗体フラグメントを製造するための、以下の配列からなるペプチドの使用。
ｈＰＴＨ　１−１０ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−Ａｓｎ１０−ＯＨ 」である点で一致し、 
（１）診断対象となるｈＰＴＨ（１−３７）について、前者が、「生物活性を有する」と特定しているのに対して、後者が「生理的循環型」としている点で、また、（２）後者では、「ｈＰＴＨ１−１０」により得られたポリクローナル抗体を血清中の生理的循環型ヒトＰＴＨフラグメントであるｈＰＴＨ（１−３７）を免疫学的に検出するための候補の一つとすることが記載されているだけである点で、また、（３）前者は、ｈＰＴＨ１−１０を使用する態様の他に、
「ｈＰＴＨ　１−９ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−Ｈｉｓ９−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−８ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−Ｍｅｔ８−ＯＨ 
ｈＰＴＨ １−７ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−Ｌｅｕ７−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−６ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−Ｇｌｎ６−ＯＨ 
ｈＰＴＨ　１−５ 
ＮＨ２−Ｓｅｒ１−Ｖａｌ２−Ｓｅｒ３−Ｇｌｕ４−Ｉｌｅ５−ＯＨ」を使用する態様を含むのに対し、後者では、ペプチドｈＰＴＨ１−１０よりもＣ末端側の短いペプチドｈＰＴＨ１−５乃至ｈＰＴＨ１−９は用いていない点で、さらに、（４）前者では、ペプチドのＮ末端、側鎖、及び／若しくはＣ末端が修飾されて、へモシアニンに結合しているものを用いるのに対して、後者ではそのようなものを使用しておらず、具体的には、当該ペプチドを使用して三重リジン分岐化したｈＰＴＨ（１−１０）ＭＡＰを用いている点で、相違している。 
　
　上記相違点について検討する。 
　
相違点（１）について　 
　本件発明２における「生物活性を有する」とは、本件特許明細書の記載によれば、ｈＰＴＨの最初の二つのアミノ酸が欠けることのないものを意味するものであるが、甲第１号証に記載の発明も、ｈＰＴＨ（１−３７）の全長の検出を行うものであるから、上記点で、診断対象となるｈＰＴＨ（１−３７）が相違するものではなく、この点は実質的な相違点とはいえない。 
　
相違点（２）について 
　前記のとおり、甲第１号証には、２種類の抗体を用いた二部位アッセイにより、血清中の生理的循環型ヒトＰＴＨフラグメントであるｈＰＴＨ（１−３７）を免疫学的に検出するための６種類の抗体のうちの１つの候補として、ペプチド（ｈＰＴＨ１−５）に結合する「ｈＰＴＨ１−１０によりウサギを免疫することにより得られたポリクローナル抗体」が、挙げられている。 
　また、上記甲第３号証の上記記載事項（３−１）によれば、ペプチドｈＰＴＨ１−６も有意にペプチドｈＰＴＨ１−３８に対するマウスポリクローナル抗血清に対する反応性を有するといえるから、ペプチドｈＰＴＨ１−３８の抗原エピトープの一つが１−６部位付近に存在すると期待することに無理はない。 
　そして、本件優先日前に、既に、上記甲第７及び８号証の上記記載事項（７−１）、（８−１）のとおり、ｈＰＴＨのＮ末端の１位と２位のアミノ酸は生物活性を維持する上で必須であることが知られているのだから、甲第１号証のみならず上記甲第３号証の記載からも、ｈＰＴＨのＮ末端付近にエピトープが存在することが強く示唆されている以上、甲第１号証に接した当業者であれば、上記二部位アッセイ用の抗体の一つとしては、むしろ必ずｈＰＴＨ１−１０に対する抗体を選択するということができる。 
　このことは、とりもなおさず、甲第１号証及び甲第３，７，８号証の記載に基づいて、血清中の生理的循環型ヒトＰＴＨフラグメントであるｈＰＴＨ（１−３７）を免疫学的に検出するための抗体を産生するための免疫原として、ｈＰＴＨの１−１０位のペプチドフラグメントを用いようとすることが当業者にとって容易に想到できることであることに他ならない。
　
相違点（３）について　 
　上記甲第５号証に記載のとおり、抗体を確実に誘導することができる最小の合成ペプチドのサイズは６残基であることを考慮すれば、ペプチドｈＰＴＨ１−１０よりもＣ末端側の短いペプチドｈＰＴＨ断片を用いても、同様の抗体が得られる可能性があることは十分に予測できることである。 
　したがって、ｈＰＴＨ１−５を認識する抗体を得る目的で、ペプチドｈＰＴＨ１−１０に代えて、ペプチドｈＰＴＨ１−１０よりもＣ末端側の短いペプチドｈＰＴＨ１−５乃至ｈＰＴＨ１−９を用いてみようとすること自体に格別の困難性は見出せない。 
　
相違点（４）について
　上記甲第５号証の記載事項（５−２）のとおり、ペプチド抗原にも用いられるキャリアタンパク質として、キーホールリンベットヘモシアニンは一般的なものであるから、引用例発明において、免疫原として用いるペプチドを、そのペプチドのＮ末端、側鎖、及び／若しくはＣ末端が修飾されて、へモシアニンに結合しているものとすることは当業者が適宜なし得たことである。
　
　そして、本件発明１により得られる効果について検討しても、本件明細書においては、実施例において、ペプチドｈＰＴＨ１−１０の合成（実施例１）、精製及び分析（実施例２）、キャリア一蛋白へのカップリング（実施例３）、多重抗原性ペプチド（ＭＡＰ）の合成（実施例４）、免疫（実施例５）までの内容を全て現在形で記載しただけであり、免疫した動物からどこを認識する抗体が得られたのか、二部位アッセイの結果がどうあったのか、さらに、ペプチドのＮ末端、側鎖、及び／若しくはＣ末端が修飾されて、へモシアニンに結合することにより、そうでない場合と比較してどのような作用効果が奏されるのかについては全く記載されていないから、これにより甲第１号証に記載の発明と比較して格別の効果を奏するものともいえない。
　したがって、本件発明１は、上記甲第１号証及び甲第３、５，７，８号証に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものである。 
　
イ．本件発明２に対して 
　本件発明２は、ペプチドｈＰＴＨ１−５乃至ｈＰＴＨ１−１０を特異的に認識してそれに結合する抗体又は抗体フラグメントを含む、生物活性を有するヒト上皮小体ホルモン（ｈＰＴＨ（１−３７））を検出するための診断薬に係る発明である。
  ア．の「相違点（２）について」で述べたとおり、甲第１号証には、２種類の抗体を用いた二部位アッセイにより、血清中の生理的循環型ヒトＰＴＨフラグメントであるｈＰＴＨ（１−３７）、すなわち本件発明２でいうところの生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を免疫学的に検出するための６種類の抗体のうちの一つの候補として、ペプチド（ｈＰＴＨ１−５）に結合する「血清Ｋ１−Ｋ３」即ち「ｈＰＴＨ１−１０によりウサギを免疫することにより得られたポリクローナル抗体」が挙げられており、また、甲第３号証に、ペプチドｈＰＴＨ１−３８の抗原エピトープの一つが１−６部位付近に存在することが示唆され、甲第７、８号証により、ｈＰＴＨのＮ末端の１位と２位のアミノ酸は生物活性を維持する上で必須であることが知られていることから、甲第１号証の記載に接した当業者は、生物活性を有するｈＰＴＨ１−３７を検出するための診断薬に用いる抗体としては、必ず上記ｈＰＴＨ１−１０に対するポリクローナル抗体を選択するということができる。　そして、甲第１号証において、「ｈＰＴＨ１−１０によりウサギを免疫することにより得られたポリクローナル抗体」が「ｈＰＴＨ１−５の配列に優位に結合する」と記載されていることからみて、ｈＰＴＨ１−１０に対するポリクローナル抗体がｈＰＴＨ（１−３７）が有する１−５部位付近のエピトープを認識するものであることが強く示唆されているといえるから、ｈＰＴＨ１−１０若しくはｈＰＴＨ１−５乃至１−９のペプチドフラグメントを免疫原として得られるモノクローナル抗体の中には、同１−５部位付近のエピトープを特異的に認識し、ｈＰＴＨ１−５乃至１−１０の配列から選ばれるペプチドに特異的に結合するモノクローナル抗体が存在する可能性も十分示唆されているといえ、そのような特異的抗体を想定すること自体に困難性はない。　
　してみると、ｈＰＴＨ１−５乃至１−１０の配列から選ばれるペプチドを特異的に認識してそれに結合する抗体又は抗体フラグメントを含む、生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を検出するための診断薬は、これらの甲号証に基づき当業者が容易に想起し得るものである。
　そして、本件明細書の実施例の記載は上記「ア．」で述べたとおりのものであり、ｈＰＴＨ１−５乃至１−１０を特異的に認識してそれに結合する抗体又は抗体フラグメントについては実際に得られておらず、本件発明２が甲第１号証に記載のものと比較して格別顕著な効果を奏するものであるとすることもできない。
　したがって、本件発明２は、上記甲第１号証及び甲第３、５，７，８号証に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものである。 　
　
ウ．本件発明３に対して 
　本件発明３は、本件発明２において、ヒト上皮ホルモンのアミノ酸領域９−１５又は３０−３７に結合する第２の抗体又は抗体フラグメントをさらに含み、本件発明２に記載された「ｈＰＴＨ１−５乃至１−１０の配列から選ばれるペプチドを特異的に認識してそれに結合する抗体」と当該抗体とが、相互立体障害を避けるために互いに十分離れた位置にある抗原エピトープを認識できるものである、生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を検出するための診断薬に係る発明である。　
　甲第１号証に記載された二部位アッセイにおいて、「ｈＰＴＨ１−５乃至１−１０を特異的に認識してそれに結合する抗体」とともに他の上記記載事項（１−４）の（２）〜（６）のいずれかの抗体、例えば（２）の血清Ｋ4−Ｋ6即ち残基９−１４に選択的に結合する抗体又は、（５）の血清Ｋ10即ち残基３０−３７を認識する抗体であって、相互に立体障害となりにくいものを用いることは当業者が適宜なしうるところであり、本件明細書には実際にこれを行ったことも記載されておらず、これにより格別の効果を奏するものでもないから、本件発明３も、本件発明２と同様に、上記甲第１号証及び甲第３，５，７，８号証に記載された発明に基いて当業者が容易に発明をすることができたものである。 
　
エ．本件発明４に対して 
　本件発明４は、（ｉ）本件発明１により製造された抗体又は抗体フラグメント、（ｉｉ）ｈＰＴＨ１−５乃至１−１０の配列から選ばれるペプチドを認識して結合する、上記（ｉ）の抗体又は抗体フラグメント、及び（ｉｉｉ）本願発明２に記載された、ｈＰＴＨ１−５乃至１−１０の配列から選ばれるペプチドを特異的に認識してそれに結合する抗体又は抗体フラグメント、の何れかに記載の抗体を用いて、インビトロで生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を検出する方法に係る発明である。　
　本件発明１，２について検討したとおり、甲第１号証の記載に基づき、ペプチドのＮ末端、側鎖、及び／若しくはＣ末端が修飾されて、へモシアニンに結合しているｈＰＴＨ１−１０を免疫原としてポリクローナル抗体を得ること、及び、ｈＰＴＨ１−１０を免疫原として得られる抗体の中にｈＰＴＨ１−５乃至１−１０を特異的に認識してそれに結合する抗体が存在することを想定することに困難性はなく、また甲第１号証及び甲第３、５、７、８号証の記載に基づけば、当該抗体は生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を検出するための二部位アッセイ用の抗体として必ず選択されるものといえるから、（ｉ）本件発明１により製造された抗体又は抗体フラグメント、（ｉｉ）ｈＰＴＨ１−５乃至１−１０の配列から選ばれるペプチドを認識して結合する、上記（ｉ）の抗体又は抗体フラグメント、及び（ｉｉｉ）本願発明２に記載された、ｈＰＴＨ１−５乃至１−１０の配列から選ばれるペプチドを特異的に認識してそれに結合する抗体又は抗体フラグメント、の何れかに記載の抗体を用いてインビトロで生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を検出することは、これらの引用例に基づき当業者が容易に想起し得るものである。　
　そして、上述のとおり、本件明細書においてもこれらの抗体が得られたことは記載されていないから、本件明細書に基づき顕著な効果を主張することはできず、本件発明４は、本件発明１，２と同様に、甲第１号証及び甲第３、５、７、８号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。
　したがって、本件発明４も、上記甲第１号証及び甲第３，５，７，８号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。　
　
オ　本件発明５に対して 
 　本件発明５は、本件発明４において、ヒト上皮ホルモンのアミノ酸領域９−１５又は３０−３７に結合する第２の抗体又は抗体フラグメントをさらに使用し、本件発明４で用いる抗体又は抗体フラグメントと当該抗体とが、相互立体障害を避けるために互いに十分離れた位置にある抗原エピトープを認識できるものである、インビトロで生物活性を有するヒトｈＰＴＨ（１−３７）を検出する方法に係る発明である。　
　本件発明３で検討したとおり、甲第１号証に記載された二部位アッセイにおいて、ペプチド（ｈＰＴＨ１−５）に結合する「ｈＰＴＨ１−１０によりウサギを免疫することにより得られたポリクローナル抗体」とともに、例えばｈＰＴＨ９−１４に選択的に結合する抗体又はｈＰＴＨ３０−３７を認識する抗体であって、相互に立体障害となりにくいものを用いることは、当業者が適宜なし得ることであり、それにより格別の効果を奏するものでもないから、本願発明５は、本願発明３と同様に、甲第１号証及び甲第３、５、７、８号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。
　
　したがって、本件発明１〜５は、上記甲第１号証及び甲第３，５，７，８号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものである。 
　
（５）特許権者の主張について 
　
ア．特許権者は、意見書７頁９〜２３行において「引用例は、生理的循環体のｈＰＴＨ（１−３７）の検出に言及しているのみであるが、生理的循環体には生物活性を有さないもの（例えばｈＰＴＨ（３−３７））もある一方、本発明の抗体は、生物活性を有するｈＰＴＨだけを認識するものであり、生物活性を有さないｈＰＴＨ（３−３７）には結合しないものである」旨主張している。 
　しかしながら、確かに、生理的循環体の中には、一般に生物活性を有するものと有さないものとがあろうが、甲第１号証（意見書中の「引用例」に相当）のｈＰＴＨ（１−３７）のようにＮ末端の１，２位を含むｈＰＴＨフラグメントは、生物活性を有するものである。そして、甲第１号証は、生理的循環体の一つであるｈＰＴＨ（１−３７）の検出を目的とするものであるから、甲第１号証で言う「ｈＰＴＨ（１−３７）」はＮ末端の１，２位を含む「生物活性を有するｈＰＴＨ」であることは明白であり、特許権者の主張は採用できない。 
　また、特許権者は、乙第３号証を挙げて、抗血清Ｋ１−Ｋ３がｈＰＴＨ４−１２に結合することが示されているから、本件発明は甲第１号証に記載の発明と相違する旨主張しているが、本件発明において、「生物活性を有さないｈＰＴＨには結合しないものである」ことが特許請求の範囲に記載されてもいないから、特許権者の主張は、特許請求の範囲に基づくものではなく、特許権者の主張は採用できない。 
　また、本件発明の抗体について、本件明細書の実施例では、ｈＰＴＨ１−１０のキャリアーペプチド共役体又はＭＡＰを動物に免疫することが現在形で記載されているだけであって、実際に「生物活性を有さないｈＰＴＨ（３−３７）等には結合しない」抗体を調製したことのみならず、そのような抗体の取得法についても何ら示していない。 
　更に、乙第４乃至５号証によれば、免疫学的アッセイにより検出し得る、生理的循環体のｈＰＴＨは、「１−８４、１−３３、４３−８４、７−８４、Ｎ，Ｍ，Ｃ」であり、特許権者が問題にしている、ｈＰＴＨ（３−３７）、ｈＰＴＨ（４−３７）の存在は無視できるから、実際の診断において格別の問題となるようなものではなく、この点からも特許権者の主張は採用できない。 
　なお、甲第１号証に記載の抗体のｈＰＴＨ（３−３７）への結合性については、甲第１号証に言及はないが、本件発明と甲第１号証に記載の抗体は、多重抗原性ペプチドを合成し、ｈＰＴＨ１−１０のペプチドを用いて免疫する点で同一であるから、甲第１号証で得られる抗体が本件発明と相違するとは言えない。 
　
イ．特許権者は、意見書１６頁３〜１６行において甲第１号証には、「本発明の抗体を単離しようとする動機付けが存在しない」、「本発明の抗体の作成を試みるという動機付けが存在しない」、「２種類の抗体を用いた二部位アッセイは記載されてない」と主張している。 
　しかしながら、甲第１号証は、生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）の免疫学的検出に関するものであり、ｈＰＴＨの検出に精製抗体を用いることは、本件明細書の従来技術の項でも言及されている通り、本件優先日前、当業者にとって極めて一般的なことであった。
　例えば、参考資料１「ホルモンと臨床　Vol.38、No.1, 7-10, 1990」及び参考資料２「Clin.Chem,33:1364-1367, 1987」には、以下の事項が記載されている。
　参考資料１の７頁右欄２〜５行には、「・・・２−siteＩＲＭＡ法（サンドイッチ法）の測定原理に基づき、ＰＴＨ（１−８４）のみを高感度、広濃度域にわたり、簡便かつ迅速に測定できる画期的なアッセイが開発された。」旨記載されており、また、参考資料２の１３６４頁右欄１０〜１４行には、「ここで、一つはＰＴＨ分子のＮ−末端１−３４部分に特異的で、もう一方は３９−８４アミノ酸配列に対して特異的な、アフィニティ精製したポリクローナル抗血清を用いた、ＰＴＨの２部位ＩＲＭＡの開発について述べる。」と記載されている。
　このように、参考資料１及び２に示されるように、本件優先日前、アフィニティ精製したポリクローナル抗血清を用いたｈＰＴＨ（１−８４）の新しいアッセイキットが開発されたことは公知であった。 
　してみると、甲第１号証に記載の抗血清から抗体を精製することは、当業者が通常適宜行う程度のことであり、動機付けがないとは到底いえない。また、精製抗体を用いることで検出精度が向上することも当業者にとって自明のことにすぎない。 
　また、甲第１号証には、確かに、二部位アッセイの詳細についての開示はないものの、甲第１号証に記載の発明の目的がｈＰＴＨ（１−３７）という、１，２位を含んだ生物活性を有するｈＰＴＨの検出であるから、「二つの抗体を組み合わせた二部位アッセイの試験を行った。これらの実験によって、血清中の生理的循環型ヒトＰＴＨフラグメントを特異的に検出できる可能性が示される。」という記載事項（１−５）によれば、甲第１号証に記載された抗血清中に含まれる、異なる２カ所の部位に結合する抗体を用いた二部位アッセイにより、生理的循環型ヒトＰＴＨフラグメントであるｈＰＴＨ（１−３７）を免疫学的に検出することが記載されているといえ、そして甲第１号証における検出対象はｈＰＴＨ（１−３７）の全長であり、ｈＰＴＨ（１−３７）の全長を検出する上で、ｈＰＴＨ１−５に結合する抗体を二部位の内の一方に用いることが好ましいことは当然である。 
　
ウ．特許権者は、意見書１６頁１〜１６行において、特許異議申立人の提出した甲第２号証である（Ｌｏｇｕｅ　ｅｔ　ａｌ．，Ｊ　Ｉｍｍｕｎｏｌ　Ｍｅｔｈｏｄ，１３７，１９９１，ｐ．１５９−１６６）を挙げて、甲第２号証には、「ヒトＰＴＨ（１−１０）を抗原としたマウスの免疫による抗体力価は観察されなかった。」と記載されており、ｈＰＴＨ（１−１０）に対する抗体を作製することが困難であり、上記引用例１においてもそれは不可能となるはずである」と述べ、甲第２号証は、本件発明の達成が困難であることを開示していると主張している。 
　しかしながら、甲第２号証には、短いペプチドＰＴＨ（１−１０）あるいはＰＴＨ（１−３４）ペプチドをキャリアーであるキーホールリンペットヘモシアニンあるいはウシ血清アルブミンに結合させてそれを抗原として抗体を作製する方法で抗体を作成しようとしており、そのために抗体が産生されなかったものと考えられる。 
　ところで、本件優先日においては短いペプチドに対する抗体を取得する方法として、ペプチドをキャリアタンパク質に結合させて抗原として用いる方法も、あるいは短いペプチドを多数つなぎあわせたＭＡＰ法（Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5409-5413 (1988)参照。）も常套手段であって、当業者はこれらの方法を適宜選択して抗体を作製していた。 
　そして、上記甲第１号証の上記記載事項（１−３）「我々は、ウサギにおいて惹起された１０種のポリクローナル抗血清：血清Ｋ1−Ｋ3（ｈＰＴＨ１−１０ＭＡＰから）・・を得た。」によれば、ｈＰＴＨ１−１０のペプチドを使用して、三重リジン分枝化したもの（ｈＰＴＨ１−１０ＭＡＰ）でウサギを免疫してポリクローナル抗血清を得たのであるから、上記甲第１号証においては、多抗原性ペプチド法を用いて免疫することにより、抗体が得られていると解するのが相当である。 
　そうすると、甲第１号証の上記記載事項（１−４）「血清Ｋ1−Ｋ3はｈＰＴＨ１−５の配列に優位的に結合する」によれば、血清Ｋ1−Ｋ3には、ｈＰＴＨ１−５に結合するものが多く含まれていたものと解されるところ、その中にはＰＴＨ１−５にのみに結合するものも含まれれていることは容易に予測できることであり、そのような抗体があれば、当業者は周知のスクリーニングでそれを得ることができるものであるから、被請求人の主張は採用できない。
　また、特許権者が、キーホールリンペットヘモシアニンに結合させたペプチドＰＴＨ（１−１０）によっては、抗体を産生することができない旨主張するのであれば、下記「５．」に示すように、本願は、特許法第３６条第４項に規定する要件を満たしていないともいえる。
　
エ．特許権者は、意見書２２頁下から５行〜２３頁１６行において、乙第２号証を挙げて縷々述べているが、乙第２号証は本件出願後の製品に関する文書に過ぎず、本件発明の進歩性とは関係のないものである。 
　
オ．なお、特許権者は、意見書１０頁１６〜２１頁行において、乙第８号証を挙げて対応米国特許に関する侵害訴訟に関して言及しているが、本件とは関係がない。 
　
５．特許異議申立理由（３）についての判断
　本件発明１は、上記「４．」において認定したとおり、特許請求の範囲の請求項１に記載のとおりのものである。
　一方、本件の発明の詳細な説明には、実施例３に、「キャリアー蛋白へのカップリング」手法が、現在形で記載され、実施例５に、「免疫」手法が、「最初の免疫用に、免疫すべき動物の体重１ｋｇ当たり１２５μｇもキャリアーペプチド共役体又はＭＡＰを水２５０ｍｌに溶解して２５０μｌの完全フロインド・アジュバンドを加えて乳化する。このエマルジョンを背中の種々の位置に１０箇所に分けて皮下注射する。完全フロインド・アジュバンドを不完全フロインド・アジュバンドに置き換える以外は同様の方法でブースティングを２−４週間後に行う。」と記載されるにとどまり、実際に、上記ペプチドをヘモシアニンに結合して免疫した具体例は記載されていない。
　そして、甲第２号証（Ｊ　Ｉｍｍｕｎｏｌ　Ｍｅｔｈｏｄ，１３７，１９９１，ｐ．１５９−１６６）には、抗原としてヒトＰＴＨ１−１０を用い、ヒトＰＴＨ１−１０のＣ末端にビスジアゾ化トリジン結合を用いて、キーホールリンペッドヘモシアニンを共有結合させ（第１６０頁、左欄、第２４〜２９行参照）、マウスに一次免疫したこと（第１６０頁、左欄、第３０〜３３行参照）が記載され、この結果、マウスに免疫した場合には、ＰＴＨ抗体の力価が検出されなかったことが記載されている（第１６１頁、右欄、第２〜６行）。
　してみれば、本件発明１において、ｈＰＴＨ　１−１０にヘモシアニンを共有結合させて免疫しても、本件の所期の抗体が得られない場合が存在し、上記一般的な抗体の製造方法の記載がされているのみの本件明細書の記載に基づいて、本件発明１の実施をするためには、当業者に期待し得る程度を超える試行錯誤を要するものであるといえる。
　したがって、本願は、特許法第３６条第４項に規定する要件を満たしていない。
　
６．むすび 
　以上のとおり、本件請求項１乃至５に係る発明の特許は、本件出願の優先日前に頒布された甲第１号証及び甲第３，５，７，８号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定に違反してされたものである。 
　また、本件は、本件請求項２に係る発明について、明細書の記載が、特許法第３６条第４項に規定する要件を満たしていない。
　したがって、本件請求項１乃至５に係る発明の特許は、特許法第１１３条第２号及び第４号に該当し、取り消されるべきものである。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成２０年９月８日（２００８．９．８）
【訂正の要旨】
審決（決定）の【理由】欄参照。
（５４）【発明の名称】
ｈＰＴＨ（１−３７）配列由来のペプチド
【発明の詳細な説明】
　本発明はｈＰＴＨ（１−３７）配列からのペプチド、該ペプチドを使用して動物を免疫することによって得ることのできる診断薬、該ペプチドを使用して動物を免疫することによって得ることのできる抗体又はそのフラグメント、及び生物活性を持つｈＰＴＨを診断するための薬剤の製造における該ペプチドの使用に関する。
　８４アミノ酸を有する直鎖状ポリペプチドであるヒト上皮小体ホルモン（ｈＰＴＨ）はカルシウム代謝の調節において重要な役割を演じている。このホルモンの代謝によって多数のＣ−末端フラグメントが生じるが、その生物学的作用はまだ解明されていない。ｈＰＴＨ（１−３７）が体循環型のＮ−末端フラグメントであることが立証されている（ＥＰ−Ａ　０　３４９　５４５）。このフラグメントは上記ホルモン全体の生物活性を完全に有している。しかしながら、最初のアミノ酸であるセリンを失うと活性は著しく低下し、最初の２アミノ酸、すなわちセリン及びバリンが無いと活性が完全に失われる。
　完全なホルモンｈＰＴＨ（１−８４）及びＮ−末端フラグメントについては血清中レベルが１０−１２ｍｏｌ／ｌの範囲にあることが測定されている。このような低濃度の測定には免疫学的測定法が使用される。この場合、最も確実な結果は、二重抗体又はサンドイッチ原理（例えば、二部位ラジオイムノメトリックアッセイ、ＩＲＭＡ、又はサンドイッチ酵素結合免疫吸着剤アッセイ、サンドイッチＥＬＩＳＡ）による測定法によって得られる。ｈＰＴＨ（１−８４）については、そのようなアッセイ系が市販されている。ｈＰＴＨ（１−３４）を測定するための二重抗体原理によるアッセイ系は知られていない。
　この場合、２個の抗体が必要である。相互立体障害を避けるために、それらは互いに十分離れた位置にある抗原エピトープを認識できる必要がある。抗原全体を用いた免疫では、種々の抗体の不均質な混合物が得られ、サンドイッチアッセイを行うにはまず最初に費用のかかる精製にかけなければならない。ジェームソン及びウォルフ（Ｂ．Ａ．Ｊａｍｅｓｏｎ　ａｎｄ　Ｈ．Ｗｏｌｆ）、「抗原指数：抗原決定因子を予測するための新規計算法」、ＣＡＢＩＯＳ　４，ｐ．１８１−１８６，１９８８による理論的計算から、Ｎ−末端のアミノ酸７−１４領域中に免疫原活性を持つ好ましい配列を検出することは従来でも可能であった。確立されている方法を用いたＮ−末端フラグメントによる免疫化からは、ｈＰＴＨ（１−３４）について記載されているような（タンペ、ブロジオ、マネック、ミシュビヒラー、ブリング、ミラーズ、シュミッツガイク、及びアルムブルスター（Ｊ．Ｔａｍｐｅ，Ｐ．Ｂｒｏｚｉｏ，Ｈ．Ｅ．Ｍａｎｎｅｃｋ，Ａ．Ｍｉｓｓｂｉｃｈｌｅｒ，Ｅ．Ｂｌｉｎｄ，Ｋ．Ｂ．ＭＩｌｌｅｒｓ，Ｈ．Ｓｃｈｍｉｄｔ−Ｇａｙｋ，ａｎｄ　Ｆ．Ｐ．Ａｒｍｂｒｕｓｔｅｒ），「エピトープマッピングによるヒトＮ−末端上皮小体ホルモンに対する抗体の特性決定」；Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ　１３，ｐ．１−１３，１９９２）これらのアミノ酸の領域に結合する抗体が主に得られる。しかしながら、これらの抗体は生物活性を持つＰＴＨ（１−８４）と生物活性を持たないＰＴＨ（１−８４）又はその最初の２アミノ酸、セリン及びバリンを欠くフラグメントとを識別することができない。
　本発明の基礎となる技術的課題は、生物活性を有するｈＰＴＨの診断における上記のような欠点を無くすことができるペプチドを提供することである。
　驚くべきことに、上記の技術的課題はα−ヘリックス形アミノ酸配列領域及び／又は不定構造のアミノ酸配列領域を含むｈＰＴＨ（１−３７）の配列由来のペプチドによって解決され、当該ペプチドは動物に注射した際に抗体を誘導することができる。上記ペプチドは好ましくはｈＰＴＨ（１−３７）のアミノ酸５−９領域のＮ−末端α−ヘリックス、アミノ酸１０−１６の不定構造（ｎｏｎ−ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ）部分、及び／又はアミノ酸配列１７−３４領域のＣ−末端α−ヘリックスを含む。本発明の以下のペプチドが免疫化に使用されることが好ましい：
　これらのＮＭＲデータから具体的に示されるように、提示した配列はその一次構造中に二次構造の必須の特徴を表している。このための前提条件の一つは生理的溶液中におけるＰＴＨ（１−３７）二次構造の決定である。
　上記の特徴的な構造の領域は良好な免疫原性を持つ。抗体はＮ−末端の最初のアミノ酸に結合して形成される。わずか２個のアミノ酸が欠失すると親和性の実質的な消失が生じる。これらのアミノ酸は生物活性の発現に不可欠であるために、本発明のペプチドを使用することによって生物活性を有するｈＰＴＨ及びそのフラグメントだけを認識する抗体を得ることが可能である。
　さらに、アミノ酸３０−３７の領域にＣ−末端で結合する抗体と共に、中間領域９−１５を検出する抗体を製造することができる。従って、理論的計算では分子全体中の免疫原活性を示さないｈＰＴＨ（１−３７）領域に対する抗体を本発明によって製造することが可能である。さらに、これらの領域は２個の抗体が同時に結合するのを妨げる立体障壁が存在しないように互いに離れた距離に分離されている。
　好ましい態様においては、上記ペプチドはＮ−末端、側鎖及び／又はＣ−末端が修飾されていてもよく、すなわちアシル化、アミド化、リン酸化及び／又はグリコシル化生成物の形態を取ってもよい。
　その結果、本発明のペプチドはヘモシアニン、チログロブリン、ウシ血清アルブミン、オバルブミン、又はマウス血清アルブミン等のようなキャリアー蛋白に結合していてもよい。キャリアー蛋白への結合は好ましくはカルボジイミド又はホルムアルデヒドを用いて行われる。
　本発明のペプチドは診断薬の製造に使用することもできる。本発明の診断薬は動物に少なくとも１個の本発明のペプチドによりそれ自体は公知の免疫法を用いて得ることができる。免疫の後、免疫グロブリン分画を免疫した動物から単離することができ、この免疫グロブリン分画は少なくとも１個の本発明のペプチドに対する抗体力価を有する抗体分画を含んでいる。本発明は、このようにして得られた抗体にも関する。Ｆａｂ及びＦｃからなる完全な抗体の他に、Ｆａｂのようなそれのフラグメント又はペプチド・エピトープのイディオタイプである抗体フラグメントも他の態様として使用することができる。
　本発明のペプチドは生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）の診断に用いる薬剤の製造に適している。
　以下の実施例により、本発明をさらに詳細に説明する。
実施例１
ペプチドの固相合成
　ペプチドを合成するための本発明の方法は固体担体を用いたペプチド合成に基づくものである。Ｃ−末端アミノ酸のそれぞれをジシクロヘキシルカルボジイミド及びジメチルアミノピリジンの存在下で担体部材に結合させる。Ｗａｎｇ樹脂又は同様の樹脂を合成用の担体部材として用いる。
　以下のＬ−アミノ酸誘導体を、特定されているペプチド樹脂から開始する上記配列合成に使用した：ａ）ｈＰＴＨ（１−１０）：Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−Ｗａｎｇ樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ；ｂ）ｈＰＴＨ（９−１８）：Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−Ｗａｎｇ樹脂、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ；ｃ）ｈＰＴＨ（２４−３７）：Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−Ｗａｎｇ樹脂、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ。
　合成は、ジイソプロピルエチルアミン又はＮ−メチルモルホリン及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下で２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム・テトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）若しくはその誘導体、又はベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）若しくはその誘導体を用いる
ｉｎ　ｓｉｔｕ
　担体からの除去及び脱保護は上記ペプチド樹脂を室温で３０−９０分間、５％殺菌剤、水、エタンジオール、フェノール又はチオアニソールを含むトリフルオロ酢酸と反応させ、濾過してトリフルオロ酢酸で洗浄し、その後、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで沈殿させることにより行われる。この沈殿を水溶液から凍結乾燥させる。
実施例２
精製及び分析
　未処理の生成物をＣ１８逆相カラムのクロマトグラフィーにより精製する（１０μｍ、バッファーＡ：０．０１　Ｎ　ＨＣｌ　水；バッファーＢ：２０％イソプロパノール、３０％メタノール、５０％水、０．０１　Ｎ　ＨＣｌ；勾配：６０分間で１０−８０％；２３０ｎｍで検出）。
　生成物の純度はマススペクトル及びＣ１８逆相クロマトグラフィーを用いて測定する。
実施例３
キャリアー蛋白へのカップリング
　ヘモシアニン、チログロブリン、ウシ血清アルブミン、オバルブミン、又はマウス血清アルブミンをキャリアー蛋白として使用する。カップリングはカルボジイミド法によりペプチドのカルボキシル基を用いて行う。ペプチドを水溶液中で塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドと５分間反応させることにより活性化する。カップリングは活性ペプチドをキャリアーの水溶液に加えることによって行う。モル比はキャリアー蛋白の５０アミノ酸に対して１ペプチドである。反応には４時間を要する。
　反応は酢酸ナトリウムを１００ｍＭの最終濃度になるように加えて停止する。インキュベーションは１時間継続する。
　上記蛋白−ペプチド共役体を１００ｍＭリン酸バッファー、ｐＨ　７．２に対して透析を繰り返すことによってペプチドから分離する。
実施例４
多重抗原性ペプチド（ＭＡＰ）の合成
　三重リジン分枝化（ｔｒｉｐｌｅ　ｌｙｓｉｎｅ　ｂｒａｎｃｈｉｎｇ）をＷａｎｇ樹脂に結合したＣ−末端アラニンにＦｍｏｃ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨを３回のカップリングサイクルを用いて結合させることによって行う。ピペリジンを用いて開裂すると８個の遊離のアミノ基が得られ、ヒト上皮小体ホルモン配列が上記の記載に従って合成される。
実施例５
免疫
　最初の免疫用に、免疫すべき動物の体重１ｋｇ当たり１２５μｇのキャリアー−ペプチド共役体又はＭＡＰを水２５０ｍｌに溶解して２５０μｌの完全フロインド・アジュバンドを加えて乳化する。このエマルジョンを背中の種々の位置に１０箇所に分けて皮下注射する。
　完全フロインド・アジュバンドを不完全フロインド・アジュバンドに置き換える以外は同様の方法でブースティングを２−４週間後に行う。
（５７）【特許請求の範囲】
　１．生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を診断するための抗体又は抗体フラグメントを製造するための、以下の配列からなるペプチドの使用であって、
ペプチドのＮ末端、側鎖、及び／若しくはＣ末端が修飾されて、ヘモシアニンに結合している、上記の使用。
　２．以下の配列から選ばれるペプチドを特異的に認識してそれに結合する抗体又は抗体フラグメントを含む、生物活性を有するヒト上皮小体ホルモン（ｈＰＴＨ（１−３７））を検出するための診断薬。
　３．ヒト上皮小体ホルモンのアミノ酸領域９−１５又は３０−３７に結合する第２の抗体又は抗体フラグメントをさらに含み、両抗体が、相互立体障害を避けるために互いに十分離れた位置にある抗原エピトープを認識できる、請求項２に記載の診断薬。
　４．以下の（ｉ）から（ｉｉｉ）の何れかに記載の抗体を用いて、インビトロで生物活性を有するヒト上皮小体ホルモン（ｈＰＴＨ（１−３７））を検出する方法。
　（ｉ）少なくとも１個の以下のペプチド、又はペプチドのＮ末端、側鎖、及び／若しくはＣ末端が修飾されて、ヘモシアニンに結合している上記のペプチド、による動物の免疫によって得ることができる、生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を診断するための抗体又は抗体フラグメント：
　（ｉｉ）以下の配列から選ばれるペプチドを認識してそれに結合する、上記（ｉ）に記載の抗体又は抗体フラグメント。
　（ｉｉｉ）以下の配列から選ばれるペプチドを特異的に認識してそれに結合する、生物活性を有するｈＰＴＨ（１−３７）を診断するための抗体又は抗体フラグメント：
　５．ヒト上皮小体ホルモンのアミノ酸領域９−１５又は３０−３７に結合する第２の抗体又は抗体フラグメントをさらに使用し、両抗体が、相互立体障害を避けるために互いに十分離れた位置にある抗原エピトープを認識できる、請求項４に記載の方法。