(57)【要約】  本発明は、極度のストレス、抽出または通気などの、温度条件および圧力条件の下で処理された、プロバイオティクスのバチルス・コアグランスおよび水溶性プレバイオティクス繊維を含む飲料組成物であって、胞子生存率が前記処理後に維持される、飲料組成物を開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含む飲料組成物であって、前記バクテリア胞子が、前記飲料組成物の極度のストレス、温度処理および通気処理に生き残る能力を有する、飲料組成物。
【請求項２】
飲料が、コーヒー、茶、果汁、炭酸ソーダ、麦芽、栄養飲料、チョコレート、ココア、スムージー、ミルクセーキ、ミネラルウォーター、コーラ、チーズスプレッド、蜂蜜、トマトケチャップ、ジャム、マヨネーズ、タンパク質飲料、およびアイスクリームからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
胞子が、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
バクテリアが、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
請求項２に記載された、胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含むコーヒー組成物であって、前記バクテリア胞子が、耐熱性であり、コーヒーを抽出した後、生存率９５％を有する、コーヒー組成物。
【請求項６】
コーヒーが、カフェイン抜きコーヒー、未焙煎生コーヒー、および焙煎コーヒーからなる群から選択される、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
胞子が、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
バクテリアが、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項９】
請求項２に記載された、胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含む茶組成物であって、前記バクテリア胞子が、耐熱性であり、茶を抽出した後、９５％より高い生存率を有する、茶組成物。
【請求項１０】
茶が、緑茶、紅茶、ウーロン茶、黄茶、白茶、またはカフェイン抜き茶と、ローズヒップ茶、カモミール茶、アマチャヅル茶、ペパーミント茶、ルイボス茶、生姜茶、高麗人参茶、もしくはレモングラス茶からなる群から選択される薬草茶とからなる群から選択される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
胞子が、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項１２】
バクテリアが、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項１３】
果汁の果実成分が、オレンジ、リンゴ、ナシ、イチゴ、ラズベリー、クランベリー、ブルーベリー、アプリコット、パイナップル、モモ、バナナ、マンゴー、ライム、ブドウ、トマト、ザクロ、パパイヤ、テンダーココナッツウォーター、キウイ、および果実混合物からなる群から選択される、請求項２に記載の果実組成物。
【請求項１４】
請求項２に記載された、胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含む炭酸ソーダ組成物であって、前記バクテリア胞子が、通気に生き残る能力を有する、炭酸ソーダ組成物。
【請求項１５】
胞子が、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
バクテリアが、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
水溶性プレバイオティクス繊維ならびに胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスを含む相乗的飲料組成物であって、前記バクテリア胞子が、前記飲料組成物の極度のストレス、温度処理および通気処理に生き残る能力を有する、相乗的飲料組成物。
【請求項１８】
飲料が、コーヒー、茶、果汁、炭酸ソーダ、麦芽、栄養飲料、チョコレート、ココア、果実飲料、スムージー、ミルクセーキ、ミネラルウォーター、コーラ、チーズスプレッド、蜂蜜、トマトケチャップ、ジャム、マヨネーズ、タンパク質飲料、およびアイスクリームからなる群から選択される、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
水溶性繊維が、ＦＯＳ、ＧＯＳ、イヌリン、およびポリデキストロースからなる群から選択される、請求項１７に記載の組成物。
【請求項２０】
バチルス・コアグランス株が、好ましくはバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６であり、バチルス・コアグランスハンマー株受託番号ＡＴＣＣ３１２８４およびＡＴＣＣ７０５０から誘導される株でもある、請求項１７に記載の組成物。
【請求項２１】
胞子が、バチルス・コアグランスの、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む、請求項１７に記載の組成物。
【請求項２２】
バクテリアが、バチルス・コアグランスの、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む、請求項１７に記載の組成物。
【請求項２３】
プレバイオティクス水溶性繊維ならびに胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスを含む相乗的コーヒー組成物であって、前記バクテリア胞子が、耐熱性であり、コーヒーを抽出した後、生存率９５％を有する、相乗的コーヒー組成物。
【請求項２４】
コーヒーが、カフェイン抜きコーヒー、未焙煎生コーヒー、および焙煎コーヒーを含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
水溶性繊維が、ＦＯＳ、ＧＯＳ、イヌリン、およびポリデキストロースからなる群から選択される、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２６】
バチルス・コアグランス株が、好ましくはバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６であり、バチルス・コアグランスハンマー株受託番号ＡＴＣＣ３１２８４およびＡＴＣＣ７０５０から誘導される株でもある、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２７】
胞子が、バチルス・コアグランスの、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２８】
バクテリアが、バチルス・コアグランスの、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２９】
プレバイオティクス水溶性繊維ならびに胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスを含む相乗的茶組成物であって、前記バクテリア胞子が、耐熱性であり、茶を抽出した後、９５％より高い生存率を有する、相乗的茶組成物。
【請求項３０】
茶が、緑茶、紅茶、ウーロン茶、黄茶、白茶、またはカフェイン抜き茶と、ローズヒップ茶、カモミール茶、アマチャヅル茶、ペパーミント茶、ルイボス茶、生姜茶、高麗人参茶、もしくはレモングラス茶からなる群から選択される薬草茶とからなる群から選択される、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
水溶性繊維が、ＦＯＳ、ＧＯＳ、イヌリン、およびポリデキストロースからなる群から選択される、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３２】
バチルス・コアグランス株が、好ましくはバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６であり、バチルス・コアグランスハンマー株受託番号ＡＴＣＣ３１２８４およびＡＴＣＣ７０５０から誘導される株でもある、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３３】
胞子が、バチルス・コアグランスの、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３４】
バクテリアが、バチルス・コアグランスの、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む、請求項２９に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
これは、２０１７年５月２６日出願の米国特許仮出願第６２５１１４１２号の優先権を主張する、通常の特許出願である。
本発明は、一般にプロバイオティクスに関連する。より詳細には、本発明は、プロバイオティクスのバチルス・コアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）株ＭＴＣＣ５８５６を含む飲料組成物に関連する。
【背景技術】
【０００２】
プロバイオティクスは、胃腸のミクロフローラを改質して健康上の利益を増す、その能力のために、栄養補助食品としての重要性を得ている。これらのプロバイオティクスは、胃および小腸の酸性環境を生き残ることができるが、胃腸管に定着することは認められていない。したがって、治療的利益が持続するために、プロバイオティクスを常に補う必要がある。
飲料は、広く消費される食品成分であり、プロバイオティクスを共投与するための源としてみなすことができる。飲料組成物は、極度のストレス、抽出または通気などの、温度条件および圧力条件の下で処理されることに留意すべきである。ただし、プロバイオティクス胞子の生存率は、処理後に維持されるべきであり、その結果、投与の成功がもたらされる。
米国特許出願第２００９０２３２９４１号に、バチルス・コアグランス株ＧＢＩ−３０、バチルス・コアグランス株ＧＢＩ−２０、およびバチルス・コアグランス株ＧＢＩ−４０を含む飲料組成物が開示されている。米国特許出願第２０１３０２９５２２６号に、ラクトバチルス・パラカセイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐａｒａｃａｓｅｉ）を含む果実飲料組成物が開示されている。これらの出願は共に、抽出の方法および厳しい条件でのプロバイオティクスバクテリアの生き残りを開示していない。また、学術的分野で、プロバイオティクスまたはその製品の生物学的効果は、株特異性であり、属、種、および株の間で一般化することはできないことが周知である（プロバイオティクス：Ｄｅｐｔｈ／ＮＣＣＩＨ、アメリカ合衆国保健福祉省、アメリカ国立衛生研究所において）。したがって、極度のストレス、温度条件および圧力条件を受けるとき、より効率的であり、生存可能であるプロバイオティクス株を見つける必要が依然としてある。
本発明では、飲料と共投与されるときに、生存可能であり、効率的であるプロバイオティクス株を開示することによって、上記の技術的問題を解決する。
本発明の原則的な目的は、胞子生存率が処理後に維持されるバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含む飲料組成物を開示することである。
本発明は、前述された目的を満たし、さらに関連する利点をもたらす。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明は、極度のストレス、抽出または通気などの、温度条件および圧力条件の下、処理された飲料組成物であって、胞子生存率が前記処理後に維持される、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子および水溶性プレバイオティクス繊維を含む、飲料組成物を開示する。
【発明を実施するための形態】
【０００４】
原則的な一実施形態において、本発明は、胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含む飲料組成物であって、前記バクテリア胞子が、前記飲料組成物の極度のストレス、温度処理および通気処理に生き残る能力を有する、飲料組成物を開示する。関連する一実施形態において、飲料は、コーヒー、茶、果汁、炭酸ソーダ、麦芽、栄養飲料、チョコレート、ココア、果実飲料、スムージー、ミルクセーキ、ミネラルウォーター、コーラ、チーズスプレッド、蜂蜜、トマトケチャップ、ジャム、マヨネーズ、タンパク質飲料、およびアイスクリームからなる群から選択される。別の関連する実施形態において、胞子は、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む。さらに別の関連する実施形態において、バクテリアは、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞（ｌｙｓｅｄ  ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ  ｃｅｌｌ）を含む。
【０００５】
別の好ましい実施形態において、本発明は、胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含むコーヒー組成物であって、前記バクテリア胞子が、耐熱性であり、コーヒーを抽出した後、９５％より高い生存率を有する、コーヒー組成物を開示する。関連する一実施形態において、コーヒーは、カフェイン抜きコーヒー、未焙煎生コーヒー、および焙煎コーヒーからなる群から選択される。別の関連する実施形態において、胞子は、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む。さらに別の関連する実施形態において、バクテリアは、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む。
【０００６】
別の関連する実施形態において、本発明は、胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含む茶組成物であって、前記バクテリア胞子が、耐熱性であり、茶を抽出した後、９５％より高い生存率を有する、茶組成物を開示する。関連する一実施形態において、茶は、緑茶、紅茶、ウーロン茶、黄茶、白茶、またはカフェイン抜き茶と、ローズヒップ茶、カモミール茶、アマチャヅル茶、ペパーミント茶、ルイボス茶、生姜茶、高麗人参茶、もしくはレモングラス茶からなる群から選択される薬草茶とを含む。別の関連する実施形態において、胞子は、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む。さらに別の関連する実施形態において、バクテリアは、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む。
【０００７】
別の実施形態において、果汁の果実成分は、オレンジ、リンゴ、ナシ、イチゴ、ラズベリー、クランベリー、ブルーベリー、アプリコット、パイナップル、モモ、バナナ、マンゴー、ライム、ブドウ、トマト、ザクロ、パパイヤ、テンダーココナッツウォーター、キウイ、および果実混合物からなる群から選択される。
別の好ましい実施形態において、本発明は、胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含む炭酸ソーダ組成物であって、前記バクテリア胞子が、通気に生き残る能力を有する、炭酸ソーダ組成物を開示する。別の関連する実施形態において、胞子は、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む。さらに別の関連する実施形態において、バクテリアは、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む。
【０００８】
別の好ましい実施形態において、本発明は、水溶性プレバイオティクス繊維ならびに胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスを含む相乗的飲料組成物であって、前記バクテリア胞子が、前記飲料組成物の極度のストレス、温度処理および通気処理に生き残る能力を有する、相乗的飲料組成物を開示する。関連する一実施形態において、飲料は、コーヒー、茶、果汁、炭酸ソーダ、麦芽、栄養飲料、チョコレート、ココア、果実飲料、スムージー、ミルクセーキ、ミネラルウォーター、コーラ、チーズスプレッド、蜂蜜、トマトケチャップ、ジャム、マヨネーズ、タンパク質飲料、およびアイスクリームからなる群から選択される。別の関連する実施形態において、水溶性プレバイオティクス繊維は、フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、イヌリン、およびポリデキストロースからなる群から選択される。別の関連する実施形態において、胞子は、バチルス・コアグランスの、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む。さらに別の関連する実施形態において、バクテリアは、バチルス・コアグランスの、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む。
【０００９】
別の好ましい実施形態において、本発明は、プレバイオティクス水溶性繊維ならびに胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスを含む相乗的コーヒー組成物であって、前記バクテリア胞子が、耐熱性であり、コーヒーを抽出した後、９５％より高い生存率を有する、相乗的コーヒー組成物を開示する。関連する一実施形態において、コーヒーは、カフェイン抜きコーヒー、未焙煎生コーヒー、および焙煎コーヒーを含む。別の関連する実施形態において、水溶性プレバイオティクス繊維は、フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、イヌリン、およびポリデキストロースからなる群から選択される。別の関連する実施形態において、胞子は、バチルス・コアグランスの、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む。さらに別の関連する実施形態において、バクテリアは、バチルス・コアグランスの、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む。好ましい関連する一実施形態において、バチルス・コアグランス株は、好ましくはバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６であり、バチルス・コアグランスハンマー株受託番号ＡＴＣＣ３１２８４およびＡＴＣＣ７０５０から誘導される株でもある。
【００１０】
別の関連する実施形態において、本発明は、プレバイオティクス水溶性繊維ならびに胞子およびバクテリアの形態のバチルス・コアグランスを含む相乗的茶組成物であって、前記バクテリア胞子が、耐熱性であり、茶を抽出した後、９５％より高い生存率を有する、相乗的茶組成物を開示する。関連する一実施形態において、茶は、緑茶、紅茶、ウーロン茶、黄茶、白茶、またはカフェイン抜き茶と、ローズヒップ茶、カモミール茶、アマチャヅル茶、ペパーミント茶、ルイボス茶、生姜茶、高麗人参茶、もしくはレモングラス茶からなる群から選択される薬草茶とを含む。別の関連する実施形態において、水溶性プロバイオティクス繊維は、フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、イヌリン、およびポリデキストロースからなる群から選択される。別の関連する実施形態において、胞子は、バチルス・コアグランスの、生存胞子または加熱死胞子または死亡胞子を含む。さらに別の関連する実施形態において、バクテリアは、バチルス・コアグランスの、生細胞または加熱死細胞または死細胞または溶解した栄養細胞を含む。好ましい関連する一実施形態において、バチルス・コアグランス株は、好ましくはバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６であり、バチルス・コアグランスハンマー株受託番号ＡＴＣＣ３１２８４およびＡＴＣＣ７０５０から誘導される株でもある。
本発明の技術的特徴および技術的効果が組み込まれた、前述された最も好ましい実施形態は、本明細書で以下の、実例となる例によって説明される。
【００１１】
（例１）
バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含むコーヒーおよび茶の抽出に用いられる方法
コーヒー抽出中のバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の安定性
バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子の市販製剤は、１５×１０9ｃｆｕ（胞子）毎グラムで規格化され、挽いた未焙煎生コーヒーまたは焙煎コーヒーに添加され、室温で、低いｒ．ｐ．ｍ．で６０分間ブレンドされた。さらに、水溶性プレバイオティクス繊維（フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、イヌリン、およびポリデキストロース）１．０ｇを、未焙煎生コーヒーまたは焙煎コーヒー４．０ｇに添加し、室温で、低いｒ．ｐ．ｍ．で６０分間ブレンドした（表１）。組成物およそ５．０ｇを、電気ブルーワーを用いて抽出し、先行して説明された方法により生存胞子の総数を調べた（Majeed et al., World J Microbiol Biotechnol (2016) 32:60）。胞子の生存可能な総数の平均は、ｌｏｇ10ＣＦＵで表される。
【００１２】
【表１】
2020521468.tif 000002
【００１３】
茶（紅茶、緑茶、およびウーロン茶）抽出中のバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の安定性
バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の市販製剤は、１５×１０9ｃｆｕ（胞子）毎グラムで規格化され、紅茶、緑茶、またはウーロン茶に添加され、室温で、低いｒ．ｐ．ｍ．で６０分間ブレンドされた。さらに、水溶性プレバイオティクス繊維（フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、イヌリン、およびポリデキストロース）１．０ｇを、紅茶、緑茶、またはウーロン茶４．０ｇに添加し、室温で、低いｒ．ｐ．ｍ．で６０分間ブレンドした（表２）。これらの茶組成物およそ５．０ｇを、電気ブルーワーを用いて抽出し、先行して説明された方法により生存胞子の総数を調べた（Majeed et al., World J Microbiol Biotechnol (2016) 32:60）。胞子の生存可能な総数の平均は、ｌｏｇ１０ＣＦＵで表される。
【００１４】
【表２】
2020521468.tif 000003
【００１５】
胃によるストレスおよび抽出条件の、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子の発芽への影響
胃によるストレスの、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子への影響は、抽出済みの、コーヒーまたは茶（上記の段落で説明されたように）を酸性条件で処理することによって調べた。抽出済みの、コーヒーまたは茶のｐＨを、無菌で、２ＮのＨＣｌを用いて１．５に調節し、３７℃で、低いｒ．ｐ．ｍ．で３時間インキュベートした。インキュベート３時間後、再びｐＨを、無菌で、２ＮのＮａＯＨを用いて７．０に調節して戻し、牛胆汁０．５％（ｗ／ｖ）を茶またはコーヒーのフラスコに添加した。酸素還元酵素オキシラーゼ（ブロス用のＯｘｙｒａｓｅ（登録商標）、Ｏｘｙｒａｓｅ，Ｉｎｃ、Ｍａｎｓｆｉｅｌｄ、ＯＨ、ＵＳＡ）もまた、それぞれのフラスコに添加した。さらに、フラスコを３７℃で、低いｒ．ｐ．ｍ．で２４時間インキュベートした。インキュベート０時間でのｐＨ値およびインキュベート２４時間後のｐＨ値も記録した。試料を殺菌された脱塩水で１：５に希釈することによって、６００ｎｍでの光学密度（ＯＤ）を、インキュベート０時間およびインキュベート２４時間後に記録した。
【００１６】
（例２）
バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含むコーヒーおよび茶を抽出した結果
バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含む抽出済みコーヒー
コーヒーのバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子の熱安定性および相溶性を、電気ブルーワーを用いて抽出する間に評価した。プロバイオティクス抽出の実行可能性を理解するために、ブルーワーでステンレス鋼フィルターおよびろ紙を用いた。抽出後、０．５Ｌｏｇ10ｃｆｕ（胞子）減少し、室温でのインキュベート１０分後でさえも、ほぼ同じのままであった（表３）。データによると、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子は、ステンレス鋼フィルターを用いた抽出の後、９４．８３％生存可能なままであったことが示唆された。コーヒーをステンレス鋼フィルターまたはろ紙を用いて抽出したとき、有意な違いは観測されなかった。
【００１７】
【表３】
2020521468.tif 000004
【００１８】
バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含む抽出済み茶
紅茶、緑茶、およびウーロン茶に、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子を補充し、抽出して、抽出中の胞子の生き残りを測定した。バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子は、高度に安定であり、生存率は、抽出の後、９９％より高いままであることが分かった（表４および表５）。
【表４】
2020521468.tif 000005
【００１９】
同じ抽出済み茶試料を７２時間冷やし、その後胞子生存率を測定した。７２時間冷やした後の、紅茶、緑茶、およびウーロン茶の、胞子の生存率はそれぞれ、９５．１３％、９３．５８％、および９４．５１％であった（表４および表５）。
【００２０】
【表５】
2020521468.tif 000006
【００２１】
胞子の発芽
生存可能なバチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子の、適切な量をヒトの胃腸に届けるために、抽出条件および胃によるストレスの、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子の発芽への影響を実施した。バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子を含む、茶およびコーヒーを抽出し、その後胃によるストレス（酸および胆汁）にさらし、続いて３７℃で胆汁塩と共に嫌気性インキュベーションを行って、模倣的なヒトの状態にした。この実験セットを実施して、バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６が抽出され、ヒトによって消化されるときの胞子発芽を理解した。さらに、茶およびコーヒーに併せて、Ｂ．コアグランスＭＴＣＣ５８５６を、水溶性プレバイオティクス繊維（フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、イヌリン、およびポリデキストロース）と共に抽出した。実験結果によると、Ｂ．コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子は、抽出され、茶またはコーヒーを唯一の栄養源として用いることによって、胃によるストレスの厳しい条件で生き残った後、発芽することができたことが明らかとなった（表６）。さらに、水溶性プレバイオティクス繊維を添加することによって、発芽がさらに増加した（表６）。これにより、可溶性プレバイオティクス繊維は、茶およびコーヒーに併せて、Ｂ．コアグランスＭＴＣＣ５８５６胞子の発芽に相乗的効果を有することが示唆された。
【００２２】
【表６】
2020521468.tif 000007
【００２３】
（例３）
バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６を含む飲料組成物
バチルス・コアグランスＭＴＣＣ５８５６の生存率を、炭酸ソーダ／コーラ、果汁、ミネラルウォーター、チョコレート、ココア、果実飲料、スムージー、ミルクセーキ、チーズスプレッド、蜂蜜、トマトケチャップ、ジャム、マヨネーズ、タンパク質飲料、およびアイスクリームなどの他の飲料でも調べた。結果を、表７および表８に一覧にする。
【００２４】
【表７】
2020521468.tif 000008
【００２５】
【表８】
2020521468.tif 000009
【００２６】
結果によると、Ｂ．コアグランスＭＴＣＣ５８５６は、全ての飲料組成物で安定であり、生存率および回復率が増大したことが示された。
【００２７】
本発明に対する、他の改変および変更は、先行の開示および教示より、当業者に明らかになるであろう。したがって、本発明の、ある特定の実施形態のみが、本明細書において詳細に説明されているが、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、本発明に多くの改変をすることができることが明らかになるであろう。
【国際調査報告】
2020521468.tif 000010