(57)【要約】日本国石川県内浦町沖合にて日本海の水深約３００ｍから深層水を採取し回転ドラム式の減圧室を有する濃縮装置に投入し、減圧下で周囲から水蒸気加熱して濃縮した。この濃縮液を抗癌剤原液とし、２００倍に希釈した試験液を用いてマウスを飼育した結果、ＨｃＬａ細胞移植に対して抗癌作用を示した。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
海洋深層水を原料とすることを特徴とする抗癌剤。
【請求項２】
海洋深層水が日本海の深層水であることを特徴とする請求の範囲１記載の抗癌剤。
【請求項３】
海洋深層水を減圧下で加熱濃縮して得られた高濃縮深層水を原料とすることを特徴とする抗癌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】  本発明は、深海から採取した海水（以下本明細書にて海洋深層水と称する）を原料とする抗癌剤に関する。
【背景技術】  水深２００〜３００ｍ以上の深海の海水には、通常の海水とは異なるミネラル成分や海洋細菌が認められることから、飲料水のみならず、各種食品加工に使用されつつある。
この場合に、海洋深層水を濃縮あるいは減塩又は淡水化処理が必要となる。
従来、深層水を淡水化ないし濃縮する方法として、イオン交換法（日本国特許出願公開公報２００１−２１１８６４号）、電気分解法（日本国特許出願公開公報２０００−２３６４６４号）が提案されているが、海洋深層水の本来的に有する効能が充分に発揮されていないのが現状である。
【発明の開示】
本願発明者らは、深層水の医薬的効能を各種調査研究を進めた結果、海洋深層水に抗癌作用を見い出した。
以下、マウスを用いて海洋深層水の抗癌作用の調査方法及び結果について説明する。
（海洋深層水の調製）
日本国石川県内浦町沖合にて日本海の水深約３００ｍから深層水を採取した。
この深層水を回転ドラム式の減圧室を有する濃縮装置に投入し、減圧下で周囲から水蒸気加熱して濃縮した。
減圧条件は水蒸気加熱温度や濃縮濃度、濃縮時間に影響を与え、減圧室の真空度を高めると低温で沸騰しやすくなるが、沸騰が激し過ぎると蒸留水側に成分が混入する恐れが高くなる。
また、濃縮率を高めるには比較的真空度を低くするのが良い。
また、加熱源として水蒸気を用いたのは加熱温度が所定以上に高くなるのを抑えるとともに、減圧室を外側から効率良く全周にわたって均一に加熱出来るからである。
水蒸気もボイラ等で得られた飽和水蒸気を高周波コイルを巻装した管内に通して高周波加熱すると常圧でも２００℃以上の加熱蒸気が得られ、このような加熱蒸気を減圧室の加熱源にすると効率的である。
なお、本出願人らは上記濃縮方法について日本国特許出願（特願２００２−１１２３３９号）及び米国特許出願（１０／２５４，５０３）をしている。
海洋深層水を減圧下で加熱濃縮する際に、加熱源として加熱蒸気の例を先に述べたが効率良く加熱する例である。
従って、熱源を限定するものでなく、電気・ガス等を用いてもよい。
濃縮の度合は深層水中の塩化ナトリウム分として約１５〜１８質量％にしたものを抗癌剤原液とした。
なお、塩化ナトリウム分として１５質量％以上を本明細書では高濃縮深層水と称する。
また、ヌードマウスによる抗癌作用の調査には約２００倍に希釈したものを用いた。
この抗癌剤原液の成分組成及び約２００倍希釈液を図１（表１）に示す。
なお、抗癌剤原液のｐＨは８．３であった。
一般海水に比較して各種ミネラル分が多いことが分かる。
（抗癌作用の調査）
本明細書にては海洋深層水を濃縮したものを抗癌剤原液と称し、これを約２００倍に脱イオン水で希釈したものを抗癌剤試験液と称する。
ヌードマウス（日本ＳＬＣ社．系統名ＢＡＬＢ／ｃＳｌｃ−ｎｕ／ｎｕ）を３つの群に分けて飼育調査した。
第１群には抗癌剤試験液を与える。
第２群には濾過滅菌した抗癌剤試験液を与える。
第３群には通常の飼育水（以下普通水という）を与える。
抗癌剤試験液は抗癌剤原液を濾過滅菌（フィルター：ＳＰＥＣＴＲＵＭ社、Ｍｅｄｉａｋａｐ−２  ＭＥ２Ｍ−０２０−１８Ｓ，ポンプ：ＦＵＲＵＥ社、ＳＣＩＥＮＣＥ  ＲＯＬＬＥＫ  ＰＵＮＰ  ＲＰ−ＮＥ３）した脱イオン水にて２００倍に希釈し、４℃に保存したものを飼育室前室のクリーンベンチで無菌的に空の給水瓶に２００ｍＬずつ移し、第１群の各ケージに２本ずつ設置した。
濾過滅菌抗癌剤試験液は抗癌剤原液を脱イオン水で２００倍に希釈したものを濾過滅菌した。
これを４℃に保温しておき、第１群と同様にクリーンベンチで給水瓶に移し、第２群の各ケージに２００ｍＬ入れた給水瓶を２本ずつ設置した。
第３群の各ケージには、普通水２００ｍＬ入れた給水瓶を２本ずつ設置した。
なお、ケージ交換は週１回の頻度で行い、その時に水の減量を測り記録した。
各群にそれぞれの水と、餌ＣＥ−２（日本クレア社）を与え、１０日間前飼育した。
１０日間の前飼育の後にＨｅＬａ細胞を移植し、週２回体重及び腫瘍サイズを測定し、腫瘍細胞移植３５日後に腫瘍組織と血液を採取した。
（ＨｅＬａ細胞の皮下移植方法）
培養室でＨｅＬａ細胞（ＨＳＲＲＢ：ヒューマンサイエンス研究資源バンク）をラバーポリスマンで剥がし、遠沈管に回収、２００ｇ、４℃、５ｍｉｎ遠心した。
上清を捨て、ＤＭＥＭ（＋）（ＳＩＧＭＡ社  Ｄ５７９６）で２×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍＬになるように調製した。
氷上で保存し動物舎へ移動し、一群、二群、三群のケージ順で以下の操作を行った。
麻酔用ふた付ガラス容器の中に脱脂綿を入れ、ジエチルエーテル（Ｎａｃａｌａｉ  Ｔｅｓｕｑｕｅ社  １５４０２−３５）を染み込ませ、麻酔を行った。
細胞浮遊液をシリンジ（ＴＥＲＵＭＯ社  ＳＳ−０２Ｓｚ）で吸い、２５Ｇの針（ＴＥＲＵＭＯ社  ＮＮ−２５２５Ｒ）を付け、細胞懸濁液０．１ｍＬ（２×１０６ｃｅｌｌｓ）を右横腹皮下に皮下移植した。
（調査結果）
マウスの体重変化を図２（グラフ１）に示す。
なお、比較用に日本ＳＬＣ社のデータをＸマークでプロットした。
この結果、マウスの体重の推移には差が認められなかった。
図３（グラフ２、３、４）に各群の個々のヌードマウスの腫瘍サイズの測定結果を示す。
腫瘍サイズはノギスを用いて長径ａ、短径ｂを測定し、
Ｖ＝４／３ａｂ２πで腫瘍容積を計算した。
第１群、第２群は６匹、第３群は５匹のマウスを飼育した結果、第１群（抗癌剤試験液）の３匹においては全く腫瘍が認められず、他の３匹についてもＨｅＬａ細胞移植後約１２日目以降に腫瘍が発生している。
［グラフ２にて左端から３つ目（１２日目）までのデータは、６匹の個体データが０で重なっていて、４つ目（１５日目）のデータから３匹に腫瘍が発現し、それ以降も残り３匹のデータは０で重なっていることを示す。］
これに対して第３群の普通水で飼育したものは、５匹共に腫瘍の増大が認められた。
第２群の濾過滅菌した抗癌試験液にては、１匹については腫瘍の発生は認められなかったものの、他の５匹には腫瘍の増大が認められ、全体として、第３群の普通水飼育と差がないと思われる。
これは、第１群には、第２群（濾過滅菌抗癌剤試験液）、第３群（普通水）に比較して、明らかに抗癌作用が認められたことになる。
なお、図４（グラフ５）には第１群と第３群の腫瘍容積の平均値（ｎ＝５〜６）及び標準偏差値の推移を示す。
これからも海洋深層水に抗癌作用があることが明らかである。
なお、海洋深層水を濾過滅菌すると抗癌作用が認められなくなる理由は今後の調査が必要と思われる。
【図面の簡単な説明】  図１（表１）は抗癌作用調査に供した海洋深層水の濃縮液（抗癌剤原液）及び２００倍希釈液（抗癌剤試験液）の成分分析結果を示す。
図２（グラフ１）は各群のマウスの週齢と体重の推移を示し、×印のプロットは日本ＳＬＣ社のデータを示す。
図３（グラフ２，３，４）は各群ｎ＝５〜６の個々の腫瘍容積測定データを示す。
図４（グラフ５）は第１群（抗癌剤試験液で飼育）及び第３群（普通水で飼育）の腫瘍容積平均値及び標準偏差値（ｎ＝５〜６）の推移を示す。
【産業上の利用可能性】  本発明により、海洋深層水に抗癌作用があることは明らかになり、抗癌剤としての応用が期待される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【手続補正書】
【提出日】平成18年4月17日(2006.4.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
日本海の水深２００ｍ以上の深層から採取した深層水を、深層水中の塩化ナトリウム分が１５〜１８質量％の範囲になるように減圧下で加熱濃縮して得られた濃縮水を原料とすることを特徴とする抗癌剤。
【国際調査報告】
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