(57)【要約】  動物飼料サプリメント及び前記動物飼料サプリメントを含む動物飼料組成物、並びに前記動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物の作成方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの有機硫黄化合物、及び
少なくとも１つのバイオフラボノイド
を含む、動物飼料サプリメント。
【請求項２】
各有機硫黄化合物が、独立して、アリシン、アリイン、アリルプロピル、ジスルフィド、ジアリルトリスルフィド、ｓ−アリルシステイン、ビニルジチイン（例えば、３−ビニル−４Ｈ−１，２−ジチイン、及び２−ビニル−４Ｈ−１，３−ジチイン）、並びにジアリルジスルフィドから選択される、請求項１に記載の動物飼料サプリメント。
【請求項３】
前記少なくとも１つの有機硫黄化合物がアリシンである、請求項１又は２に記載の動物飼料サプリメント。
【請求項４】
少なくとも２つのバイオフラボノイドを含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント。
【請求項５】
各バイオフラボノイドが、独立して、アントキサンチン、フラバノン（フラバノングリコシドを包含する）、フラバノール、フラバノノール、フラバン（例えば、フラバン−３−オール）、イソフラボン、アントシアニジン、及びプロアントシアニジンから選択される、請求項１から４のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント。
【請求項６】
各バイオフラボノイドが、独立して、ナリンジン、ネオヘスペリジン、エリオシトリン、イソナリンジン、ナリンゲニン、ヘスペリジン、ロイフォリン、ジオスミン、ジジミン、ヘスペレチン、ポンシリン、カテキン、ルチン、アカセチン、ゲニステイン、ケンペロール、エピカテキン、ガロカテキン、エピガロカテキン、エピカテキン、ガレート、エピガロカテキンガレート、及びガロカテキンガレートからなる群から選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント。
【請求項７】
前記少なくとも１つのバイオフラボノイドが、ナリンジン及びネオヘスペリジンの組み合わせである、請求項１から６のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント。
【請求項８】
前記動物飼料サプリメント中の総有機硫黄化合物に対する総バイオフラボノイドの比が、約１０：１から約１：３０の範囲である、請求項１から７のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント。
【請求項９】
アリシンなどの前記有機硫黄化合物が、アリウム属植物種の抽出物に由来する、請求項１から８のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント。
【請求項１０】
前記バイオフラボノイドが、ミカン属植物種の抽出物に由来する、請求項１から９のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント。
【請求項１１】
前記動物飼料サプリメントが固体又は液体である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント。
【請求項１２】
請求項１から１１のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメントを含む、動物飼料組成物。
【請求項１３】
前記動物飼料組成物が、前記動物飼料組成物の乾燥質量に基づいて、約０．３質量％から約１０質量％の総有機硫黄化合物を含む、請求項１２に記載の動物飼料組成物。
【請求項１４】
前記動物飼料組成物が、前記動物飼料組成物の乾燥質量に基づいて、約０．１質量％から約１０質量％の総バイオフラボノイドを含む、請求項１２又は１３に記載の動物飼料組成物。
【請求項１５】
前記動物飼料組成物が、固体又は液体である、請求項１２から１４のいずれか一項に記載の動物飼料組成物。
【請求項１６】
前記動物飼料組成物が、濃縮動物飼料組成物、粗飼料動物飼料組成物、又はそれらの混合物である、請求項１２から１５のいずれか一項に記載の動物飼料組成物。
【請求項１７】
反芻動物によるメタン生産を減少させるための、請求項１から１６のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物の使用。
【請求項１８】
反芻動物によるミルク及び／又は肉及び／又はウールの生産を増加させ及び／又は生産の効率を増加させるための、請求項１から１７のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物の使用。
【請求項１９】
動物への栄養素の利用可能性を増加させるための、請求項１から１８のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物の使用。
【請求項２０】
前記動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物が、反芻動物により消費される、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２１】
前記動物飼料が、反芻動物に、反芻動物が１日当たり最大で１０グラムの前記動物飼料サプリメントを消費するように提供される、請求項１７から２０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２２】
前記反芻動物が、雌牛、ヤギ、又はヒツジである、請求項１７から２１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２３】
少なくとも１つの有機硫黄化合物、及び少なくとも１つのバイオフラボノイドを組み合わせる工程を含む、請求項１から１１のいずれか一項に記載の動物飼料サプリメントの作成方法。
【請求項２４】
動物飼料組成物を、少なくとも１つの有機硫黄化合物及び少なくとも１つのバイオフラボノイドと組み合わせる工程を含む、請求項１２から１６のいずれか一項に記載の動物飼料組成物の作成方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、少なくとも１つの有機硫黄化合物及び少なくとも１つのバイオフラボノイドを含む動物飼料サプリメントに関連する。本発明は、さらに、前記動物飼料サプリメントを含む動物飼料組成物に関連する。本発明は、また、前記動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物の様々な使用、並びに前記動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物の作成方法にも関連する。
【背景技術】
【０００２】
家畜の排出量は、地球全体のすべての温室効果ガス排出量の約１５％の原因であり、エネルギー及び産業に次ぐ３番目に大きな温室効果ガスの誘因である。メタンの気候に対する悪影響は、二酸化炭素の効果よりも約２１倍高い。平均では、雌牛は一年間に８５から１７０ｋｇのメタンを放出する。
反芻動物の消化管の中の特定の種類の微生物は、動物により消費された栄養素を使用して、メタンを副産物として生産する。気候変化に対するメタンの悪影響に加え、これは動物が利用できる栄養素もまた減少させる。
したがって、メタン生産を減少させ、及び／又は動物への栄養素の利用可能性を増加させる、代替の及び／又は改善された組成物を提供することが望ましい。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明の第１の態様によると、少なくとも１つの有機硫黄化合物及び少なくとも１つのバイオフラボノイドを含む動物飼料サプリメントが提供される。
本発明の第２の態様によると、本発明の任意の態様又は実施形態による動物飼料サプリメントを含む動物飼料組成物が提供される。
【０００４】
本発明の第３の態様によると、動物によるメタン生産を減少させるための、本発明の任意の態様又は実施形態による動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物の使用が提供される。したがって、動物によるメタン生産を減少させる方法もまた提供され、当該方法は、本発明の任意の態様又は実施形態による動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物を動物に投与する工程を含む。
本発明の第４の態様によると、動物によるミルク及び／又は肉及び／又はウールの生産を増加させ及び／又は生産の効率を増加させるための、本発明の任意の態様又は実施形態による動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物の使用が提供される。したがって、動物によるミルク及び／又は肉及び／又はウールの生産を増加させ及び／又は生産の効率を増加させる方法もまた提供され、当該方法は、本発明の任意の態様又は実施形態による動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物を動物に投与する工程を含む。
本発明の第５の態様によると、動物への栄養素の利用可能性を増加させるための、本発明の任意の態様又は実施形態による動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物の使用が提供される。したがって、動物への栄養素の利用可能性を増加させる方法もまた提供され、当該方法は、本発明の任意の態様又は実施形態による動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物を動物に投与する工程を含む。
【０００５】
本発明の第６の態様によると、本発明の任意の態様又は実施形態による動物飼料サプリメントの作成方法が提供され、当該方法は、少なくとも１つの有機硫黄化合物及び少なくとも１つのバイオフラボノイドを組み合わせる工程を含む。
本発明の第７の態様によると、本発明の任意の態様又は実施形態による動物飼料組成物の作成方法が提供され、当該方法は、動物飼料組成物を、少なくとも１つの有機硫黄化合物及び少なくとも１つのバイオフラボノイドと組み合わせる工程を含む。
【０００６】
ここに記載の使用及び方法は、純粋に非治療的とみなされる。しかしながら、任意のここに記載の使用及び方法が治療的であるとみなされる範囲内で、治療的使用及び方法、並びに前記治療的使用及び方法で使用するための動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物もまた、本発明のさらなる態様として提供される。
本発明の任意の態様の一定の実施形態においては、少なくとも１つの有機硫黄化合物はアリシンであり、又はアリシンを包含する。
【０００７】
本発明の任意の態様の一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドの各々は、アントキサンチン、フラバノン（フラバノングリコシドを包含する）、フラバノール、フラバノノール、フラバン、イソフラボン、アントシアニジン及びプロアントシアニジンから独立して選択される。一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドの各々は、アントキサンチン及びフラバノン（フラバノングリコシドを包含する）から独立して選択される。
本発明の任意の態様の一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドは、ナリンジン、ネオヘスペリジン、エリオシトリン、イソナリンジン、ナリンゲニン、ヘスペリジン、ロイフォリン（ｒｏｉｆｏｌｉｎ）、ジオスミン、ジジミン、ヘスペレチン、ポンシリン、カテキン、ルチン、アカセチン、ゲニステイン、ケンペロール、エピカテキン、ガロカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート（ｅｐｉｃａｔｅｃｈｉｎ  ｇａｌｌａｔｅ）、エピガロカテキンガレート、及びガロカテキンガレートからなる群から選択される。一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドは、ナリンジン及びネオヘスペリジンから選択される。
【０００８】
本発明の任意の態様の一定の実施形態においては、動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物は、２以上のバイオフラボノイドを含む。一定の実施形態においては、動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物は、２つのバイオフラボノイドを含む。一定の実施形態においては、動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物は、ナリンジン及びネオヘスペリジンを含む。
本発明の任意の態様の一定の実施形態においては、動物は、反芻動物又は疑似反芻動物である。
本発明の実施形態を、詳細な説明によりさらに説明する。ここに記載の任意の実施形態、又はここに記載の実施形態の任意の組み合わせは、文脈により明らかに矛盾しない限り、本発明の任意の１以上の態様に適用可能である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明は、少なくとも一部は、少なくとも１つの有機硫黄化合物及び少なくとも１つのバイオフラボノイドの組み合わせが、反芻動物などの動物によるメタン生産及び／又は放出を減少させ得るという驚くべき発見に基づく。
以下、本発明を、本発明の好ましい実施形態に従って、添付の説明を参照することにより説明する。しかしながら、説明を本発明の好ましい実施形態に限定することは単に本発明の議論を容易にするためであり、当技術分野の当業者が添付の特許請求の範囲から逸脱することなく様々な修正を考案し得ることが想定されることを理解されたい。
上記又は下記に一般に使用される用語は、他に示さない限り以下に示す意味を優先し、それにより本発明の好ましい実施形態においては、一般的定義の代わりにより具体的な意味が互いに独立して使用され、これらのより具体的な意味は本発明の特に好ましい実施形態を説明する。
【００１０】
用語「少なくとも１つ」又は「１以上の」が上記及び下記に生じる場合には、これは列挙された成分などの特徴のうち特に１から１０個、好ましくは１から５個又は１から３個、特に１つ若しくは、さらには２つを意味する。質量パーセント範囲などの範囲が示されている場合、これらには示された境界値が包含され、したがって、例えば、「ＸとＹの間」は「ＸからかつＸを包含し、ＹまでかつＹを包含する」を意味する。
用語「製品」又は「組成物」は、医薬品、栄養補助食品、又は化粧品の製品又は組成物を指し得る。製品又は組成物は、例えば、固体、半固体（例えば、ゲル、軟膏、クリーム、ペースト）又は液体の、製品又は組成物であり得る。
【００１１】
用語「治療的処置」又は「治療的方法」は、美容的治療ではないが、対象における疾患及び／又は障害の症状の予防及び緩和もまた包含する。ここで使用される語句「治療又は予防」及び類似の用語は、疾患及び／又は障害を除去し若しくは回避すること、又はその症状を和らげることを意図するすべての形態の健康管理を指し、広く行われる医療行為に従う利用可能な任意の試験に従って判断される、予防的及び治癒的ケアを包含する。特定の結果を達成するために合理的な期待で目指すが、常にそうするわけではない介入は、語句「治療又は予防」に包含される。疾患及び／又は障害の進行を遅延させ又は停止させることに成功する介入は、語句「治療又は予防」に包含される。
用語「栄養補助食品」は、限定されないが、ダイエタリーサプリメント、機能性食品、及び薬用食品（ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  ｆｏｏｄｓ）を包含する食品又は食品の一部を指す。「機能性食品」は、対象の要望及び／又は要求に応じて治療的処置及び／又は非治療的処置に使用することができる。
【００１２】
用語「からなる」は、例えば、明示的に列挙されない任意の追加の要素、工程、又は因子を除外し得る。
用語「から本質的になる」は、例えば、追加の要素、工程、又は因子が本発明の基本的及び新規の特性に実質的に影響を与えない限り、明示的に列挙されない任意の追加の要素、工程、又は因子を除外し得る。１以上の追加の要素、工程、又は因子が組成物の１以上の追加の成分である場合には、組成物中の追加の成分の総量は、例えば２０質量％に制限される。例えば、組成物中の追加の成分の総量は、１９質量％、又は１８質量％、又は１７質量％、又は１６質量％、又は１５質量％、又は１４質量％、又は１３質量％、又は１２質量％、又は１１質量％、又は１０質量％、又は９質量％、又は８質量％、又は７質量％、又は６質量％、又は５質量％、又は４質量％、又は３質量％、又は２質量％、又は１質量％に制限される。
【００１３】
動物飼料サプリメント
ここでは、少なくとも１つの有機硫黄化合物及び少なくとも１つのバイオフラボノイドを含む動物飼料サプリメントが提供される。用語「サプリメント」は、製品又は組成物を指し、例えば、１以上の有益な効果を提供するために動物飼料に添加するのに好適な及び／又は添加することを意図した固体、半固体（例えばゲル、軟膏、クリーム、ペースト）若しくは液体製品（例えば、溶液、懸濁液、エマルジョン）又は組成物であり得る。しかしながら、動物飼料サプリメントは、単独では動物の栄養上の要求を満たすのに十分でない。動物飼料サプリメント及び動物飼料サプリメントの種々の成分は、例えば、様々な濃度で存在することが可能であり、例えば、動物飼料組成物への添加に際して希釈することが可能である。動物飼料サプリメントは通常の動物飼料とともに動物により消費されることが好まれ得るものの、例えば液体として（例えば水に希釈）又はボーラス若しくは錠剤の形態で、任意の動物飼料とは別個に動物により消費されてもよい。
【００１４】
ここに記載の動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、１以上の有機硫黄化合物を含む。例えば、動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、２以上の有機硫黄化合物、又は３以上の有機硫黄化合物、又は４以上の有機硫黄化合物、又は５以上の有機硫黄化合物を含み得る。例えば、動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、１つ、２つ、３つ、４つ、又は５つのバイオフラボノイドを含み得る。例えば、動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、アリシンであり得る単一の有機硫黄化合物を含み得る。
【００１５】
有機硫黄化合物は、硫黄を含有する有機化合物である。一定の実施形態においては、各有機硫黄化合物は、チオエーテル、チオエステル、チオアセタール、チオール、ジスルフィド、ポリスルフィド、スルホキシド、スルホン、チオスルフィネート、スルフィミド、スルホキシミド、スルホンジイミン、チオケトン、チオアルデヒド、スルフィン、スルフェン、チオカルボン酸（ジチオカルボン酸を包含する）、スルホン酸、スルフィン酸、スルフェン酸、スルホン酸エステル、スルフィン酸エステル、スルフェン酸エステル、スルホン酸アミド、スルフィン酸アミド、スルフェン酸アミド、スルホニウム化合物、オキソスルホニウム化合物、スルホニウムイリド、オキソスルホニウムイリド、チオカルボニルイリド、スルフラン、及びペルスルフランから独立して選択され得る。一定の実施形態においては、各有機硫黄化合物は、チオエステル、スルホキシド、チオエーテル、ジスルフィド、ポリスルフィド（トリスルフィドを包含する）、及びチオールから独立して選択される。一定の実施形態においては、各有機硫黄化合物は、チオエステル、スルホキシド、チオエーテル、ジスルフィド、及びポリスルフィド（トリスルフィドを包含する）から独立して選択される。
【００１６】
一定の実施形態においては、各有機硫黄化合物は、アリシン、アリイン、アリルプロピルジスルフィド、ジアリルトリスルフィド、ｓ−アリルシステイン、ビニルジチイン（３−ビニル−４Ｈ−１，２−ジチイン、及び２−ビニル−４Ｈ−１，３−ジチイン）、並びにジアリルジスルフィドから独立して選択される。一定の実施形態においては、少なくとも１つの有機硫黄化合物はアリシンであり、又はアリシンを包含する。
アリシンは、化学式Ｃ6Ｈ10ＯＳ2及び以下に示す構造を有する有機硫黄化合物である。
2020521503.tif 000002
アリシンなどの少なくとも１つの有機硫黄化合物は、例えばニンニク又は他のアリウム属植物種（Ａｌｌｉｕｍ  ｓｐｅｃｉｅｓ）から得ることができる。例えば、有機硫黄化合物（例えば、アリシン）は、ニンニク（Ａｌｌｉｕｍ  ｓａｔｉｖｕｍ）などのアリウム属植物種の抽出物から得ることができる。抽出物という用語は、水成抽出物、非水成抽出物、アルコール抽出物、濃縮物、オイル、浸軟、粉末、顆粒、及びそれらの２以上の組み合わせを包含する。例えば、有機硫黄化合物（例えば、アリシン）は、生のニンニクから得ることができる。
【００１７】
有機硫黄化合物（例えば、アリシン）は、例えば、ニンニク（Ａｌｌｉｕｍ  ｓａｔｉｖｕｍ）、ラムソン（Ａｌｌｉｕｍ  ｕｒｓｉｎｕｍ）、ネギ（Ａｌｌｉｕｍ  ｆｉｓｔｕｌｏｓｕｍ）、及びランプ（Ａｌｌｉｕｍ  ｔｒｉｃｏｃｃｕｍ）などの現在知られている又は後に発見されるアリウム属（Ａｌｌｉｕｍ）の任意の亜種及び変種に由来し得る。例えば、有機硫黄化合物（例えば、アリシン）は、亜種であるオフィオスコロドン（ｏｐｈｉｏｓｃｏｒｏｄｏｎ；ハードネックニンニク）及びサティバム（ｓａｔｉｖｕｍ；ソフトネックニンニク）に独立して由来し得る。例えば、有機硫黄化合物（例えば、アリシン）は、ポーセリンニンニク（ｐｏｒｃｅｌａｉｎ  ｇａｒｌｉｃｓ）、ロカンボールニンニク（ｒｏｃａｍｂｏｌｅ  ｇａｒｌｉｃｓ）、パープルストライプニンニク（ｐｕｒｐｌｅ  ｓｔｒｉｐｅ  ｇａｒｌｉｃｓ）、マーブルパープルストライプニンニク（ｍａｒｂｌｅｄ  ｐｕｒｐｌｅ  ｓｔｒｉｐｅ  ｇａｒｌｉｃｓ）、グレーズドパープルストライプニンニク（ｇｒａｚｅｄ  ｐｕｒｐｌｅ  ｓｔｒｉｐｅ  ｇａｒｌｉｃｓ）、アーティチョークニンニク（ａｒｔｉｃｈｏｋｅ  ｇａｒｌｉｃｓ）、シルバースキンニンニク（ｓｉｌｖｅｒｓｋｉｎ  ｇａｒｌｉｃｓ）、アジアチックニンニク（ａｓｉａｔｉｃ  ｇａｒｌｉｃｓ）、ターバンニンニク（ｔｕｒｂａｎ  ｇａｒｌｉｃｓ）、及びクレオールニンニク（ｃｒｅｏｌｅ  ｇａｒｌｉｃｓ）から独立して由来し得る。特に、有機硫黄化合物（例えば、アリシン）はニンニクから得ることができる。
【００１８】
有機硫黄化合物（例えば、アリシン）が由来し得るアリウム属は、例えば、処理され又は加工されていてもよい。例えば、アリウム属は「熟成された」又は「黒い」（例えば、熟成ニンニク又は黒ニンニク）ものであり得、これは制御された条件下でアリウム属を貯蔵し、かつ特定の温度、湿度、及び溶媒において、例えば数日又は数週間加熱して、メイラード反応又は褐変反応を受けた後、クローブの色を暗くすることにより得られる。例えば、アリウム属は「新鮮な」又は「非熟成の」（例えば、新鮮なニンニク又は非熟成ニンニク）のものであり得、これは意図的にその成分を異なる化合物に変換し又は転換するための、特別な処理または加工を受けることなく得られる。新鮮な又は非熟成のアリウム属は、例えば、匂いを除去するために処理又は加工されて（においを取り除かれて）いてもよい（例えば、匂いを除去したニンニク抽出物）。一般に、被包又は被覆方法を、ニンニクの匂いをマスクし又は減少させるために適用することができる。あるいは、緑茶、パセリ、バジル、ホウレンソウなどのような味覚マスキング成分（ｔａｓｔｅ−ｍａｓｋｉｎｇ  ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ）を、組成物中のニンニクの匂いをマスクし又は減少させるために加えてもよい。
【００１９】
有機硫黄化合物（例えば、アリシン）は、ここに記載の動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物に組み込む前に単離され及び／又は精製されても、されなくてもよい。したがって、一定の実施形態においては、ここに記載の動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物は、生のニンニク及び／又はニンニク抽出物を含み得る。
他の実施形態においては、有機硫黄化合物（例えば、アリシン）は化学的に合成される。一定の実施形態においては、アリシンは、アリナーゼの天然源を処理してアリナーゼを放出し、処理されたアリナーゼ源をアリインと接触させ、それによりアリインが酵素的にアリシンに変換され、かつ任意でアリシンを抽出することにより得ることができる。好適な方法は、例えばＷＯ０３／００４６６８にさらに記載されており、その内容は参照によりここに組み込まれる。他の実施形態においては、アリシンは完全に化学的に合成され得る。
【００２０】
バイオフラボノイドという用語は、植物及び真菌の二次代謝産物のクラスを指し、２つのフェニル環（Ａ及びＢ）並びに複素環（Ｃ）からなる１５炭素骨格の一般構造を有し、これはＣ６−Ｃ３−Ｃ６と略されることもある。バイオフラボノイドという用語は、アントキサンチン（フラボン及びフラボノールを包含する）、フラバノン、フラバノノール、フラバン、並びにアントシアニジンを包含する。バイオフラボノイドという用語は、フラボン骨格（２−フェニル−１，４−ベンゾピロン）、イソフラバン骨格（３−フェニルクロメン−４−オン）、又はネオフラバン骨格（４−フェニルクマリン）を有する化合物もまた包含する。
一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドは、アントキサンチン（フラボン及びフラボノールを包含する）、フラバノン（フラバノングリコシドを包含する）、フラバノール、フラバン、イソフラボン、アントシアニジン、及びプロアントシアニジンからそれぞれ独立して選択される。一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドのそれぞれは、アントキサンチン及びフラバノン（フラバノングリコシドを包含する）から独立して選択される。一定の実施形態においては、すべてのバイオフラボノイドは、アントキサンチン及び／又はフラバノンである。一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドは、独立してフラボン又はフラバノンである。一定の実施形態においては、すべてのバイオフラボノイドは、フラボン及び／又はフラバノンである。フラボン及びフラバノンは、例えば、独立してそれぞれフラボングリコシド及びフラバノングリコシドであり得る。一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドは、フラバノンである。一定の実施形態においては、すべてのバイオフラボノイドは、フラバノンである。一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドは、フラバノングリコシドである。一定の実施形態においては、すべてのバイオフラボノイドは、フラバノングリコシドである。
【００２１】
１以上のバイオフラボノイドは、例えば、ナリンジン、ネオヘスペリジン、ナリンジン、ネオヘスペリジン、エリオシトリン、イソナリンジン、ナリンゲニン、ヘスペリジン、ロイフォリン、ジオスミン、ジジミン、ヘスペレチン、ポンシリン、カテキン、ルチン、アカセチン、ゲニステイン、ケンペロール、エピカテキン、ガロカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレート、ガロカテキンガレートから選択され得る。一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドは、ナリンジン及びネオヘスペリジンを包含する。一定の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドは、ナリンジン及びネオヘスペリジンの組み合わせである。
ここに記載の動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、１以上のバイオフラボノイドを含む。例えば、動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、２以上のバイオフラボノイド、又は３以上のバイオフラボノイド、又は４以上のバイオフラボノイド、又は５以上のバイオフラボノイドを含み得る。例えば、動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、１つ、２つ、３つ、４つ、又は５つのバイオフラボノイドを含み得る。例えば、動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、ナリンジン及びネオヘスペリジンであり得る２つのバイオフラボノイドを含み得る。
【００２２】
１以上のバイオフラボノイドは、例えば、植物（例えば、果実又は野菜）の一部から得ることができる。例えば、フラボノールは、トマト、豆、アーモンド、及び／又はカブから得ることができる。例えば、フラバン−３−オールは、モモ、プラム、イチゴ、及び／又は緑茶から得ることができる。例えば、フラボンはスイカ及び／又はコショウから得ることができる。例えば、フラバノンは、ミカン属植物種（Ｃｉｔｒｕｓ  ｓｐｅｃｉｅｓ）の果実から得ることができる。例えば、アントシアニジンは、ブルーベリー、バナナ、イチゴ、クランベリー、及び／又はプラムから得ることができる。
１以上のバイオフラボノイドは、例えば、オレンジ、レモン、グレープフルーツ、ブンタン、又はライムなどのミカン属植物種の果実から得ることができる。特に、１以上のバイオフラボノイドは、オレンジから得ることができる。
例えば、１以上のバイオフラボノイドは、ミカン属植物種の果実の抽出物から得ることができる。抽出物という用語は、水成抽出物、非水成抽出物、アルコール抽出物、濃縮物、オイル、浸軟、粉末、顆粒、及びそれらの２以上の組み合わせを包含する。例えば、１以上のバイオフラボノイドは、生のミカン属果実から得ることができる。
１以上のバイオフラボノイドは、ここに記載の動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物に組み込む前に単離され及び／又は精製されても、されなくてもよい。したがって、一定の実施形態においては、ここに記載の動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物は、生のミカン属果実及び／又はミカン属果実抽出物を含み得る。
他の実施形態においては、１以上のバイオフラボノイドは、それぞれ独立して化学的に合成され得る。
【００２３】
一定の実施形態においては、ここに記載の動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は２つのバイオフラボノイドを含む。第１のバイオフラボノイドに対する第２のバイオフラボノイドの比は、例えば、約０．５：５から約３：１の範囲であり得る。例えば、第１のバイオフラボノイドに対する第２のバイオフラボノイドの比は、約０．５：５から約２．５：１、又は約０．５：５から約２：１、又は約０．５：５から約１．５：１、又は約０．５：５から約１：１の範囲であり得る。例えば、第１のバイオフラボノイドに対する第２のバイオフラボノイドの比は、約１：５から約３：１、又は約１．５：５から約３：１、又は約２：５から約３：１、又は約２．５：５から約３：１、又は約３：５から約３：１、又は約３．５：５から約３：１、又は約４：５から約３：１、又は約４．５：５から約３：１、又は約５：５から約３：１の範囲であり得る。
一定の実施形態においては、ここに記載の動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、ナリンジン及びネオヘスペリジンを含む。ナリンジンに対するネオヘスペリジンの比は、例えば、約０．５：５から約３：１の範囲であり得る。例えば、ナリンジンに対するネオヘスペリジンの比は、約０．５：５から約２．５：１、又は約０．５：５から約２：１、又は約０．５：５から約１．５：１、又は約０．５：５から約１：１の範囲であり得る。例えば、ナリンジンに対するネオヘスペリジンの比は、約１：５から約３：１、又は約１．５：５から約３：１、又は約２：５から約３：１、又は約２．５：５から約３：１、又は約３：５から約３：１、又は約３．５：５から約３：１、又は約４：５から約３：１、又は約４．５：５から約３：１、又は約５：５から約３：１の範囲であり得る。
【００２４】
一定の実施形態においては、総有機硫黄化合物に対する総バイオフラボノイドの比は、約１０：１から約１：３０の範囲である。例えば、総有機硫黄化合物に対する総バイオフラボノイドの比は、約９：１から約１：２５、又は約８：１から約１：２０、又は約７：１から約１：１５、又は約６：１から約１：１０、又は約５：１から約１：８、又は約４：１から約１：７、又は約３：１から約１：６、又は約２：１から約１：５、又は約１：１から約１：４の範囲であり得る。例えば、総有機硫黄化合物に対する総バイオフラボノイドの比は、約１：１から約１：３、又は約２：１から約１：４の範囲であり得る。例えば、総有機硫黄化合物に対する総バイオフラボノイドの比は、約１：３である。
一定の実施形態においては、アリシンに対する総バイオフラボノイドの比は、約１０：１から約１：３０の範囲であり得る。例えば、アリシンに対する総バイオフラボノイドの比は、約９：１から約１：２５、又は約８：１から約１：２０、又は約７：１から約１：１５、又は約６：１から約１：１０、又は約５：１から約１：８、又は約４：１から約１：７、又は約３：１から約１：６、又は約２：１から約１：５、又は約１：１から約１：４の範囲であり得る。例えば、アリシンに対する総バイオフラボノイドの比は、約１：１から約１：３、又は約２：１から約１：４の範囲であり得る。例えば、アリシンに対する総バイオフラボノイドの比は、約１：３である。
動物飼料サプリメントは、例えば、活性物質に加えて、例えば香料、着色料、安定剤、緩衝剤、乳化剤、分散剤、増粘剤、可溶化剤、微量栄養素（例えば、セレン）、ビタミン、飼料材料（例えば、炭水化物）、その他同類のものなどの他の成分を含み得る。
【００２５】
動物飼料組成物
ここに開示する動物飼料サプリメント（すべての実施形態、及び実施形態の任意の組み合わせを包含する）は、動物飼料と組み合わされて動物飼料組成物を形成し得る。
動物飼料は、例えば、動物、特に反芻動物に栄養を供給するのに好適な任意の組成物であり得る。例えば、動物飼料は任意の反芻動物、例えば雌牛、ヤギ、ヒツジ、ヤク、シカ、又はレイヨウに好適であり得る。例えば、動物飼料は任意の疑似反芻動物（ｐｓｅｕｄｏ−ｒｕｍｉｎａｎｔ  ａｎｉｍａｌ）、例えばラクダ及びカバに好適であり得る。例えば、動物飼料は任意の単胃動物、例えばカンガルー、ラット、イヌ、ブタ、ネコ、ウマ、及びウサギに好適であり得る。例えば、動物飼料はカンガルー、ウマ、及びウサギなどの単胃草食動物に好適であり得る。
【００２６】
動物飼料は、固体、半固体（例えば、ゲル、軟膏、クリーム、ペースト）、又は液体（例えば、溶液、懸濁液、エマルジョン）であり得る。動物飼料サプリメントは、独立して固体、半固体（例えば、ゲル、軟膏、クリーム、ペースト）、又は液体（例えば、溶液、懸濁液、エマルジョン）であり得る。例えば、動物飼料及び動物飼料サプリメントは、両方とも液体であり、又は両方とも半固体であり、又は両方とも固体であり得る。あるいは、動物飼料及び動物飼料サプリメントは、それぞれ異なる物理状態であり得る。例えば、動物飼料は固体又は半固体であり得、かつ動物飼料サプリメントは液体であり得る。動物飼料サプリメントは、例えば、反芻動物のフィードロットの飼料を「トップドレスする（ｔｏｐ−ｄｒｅｓｓ）」（表面に添加する）ために使用することができ、又は全体の混合飼料にブレンドするために使用することができる。動物飼料サプリメントは、例えば、動物の飲料水に添加することができる。一定の実施形態においては、動物飼料サプリメントは、摂取の直前、例えば最大で摂取の１時間前、又は最大で摂取の３０分前、又は最大で摂取の１５分前、又は最大で摂取の５分前に飲料水に添加することができる。
【００２７】
動物飼料の３つの主要な種類は、粗飼料、濃縮物及び混合飼料を包含する。一般に、粗飼料は、高率の粗繊維及び低率の可消化養分を含有する。例えば、粗飼料は、２０質量％以上の粗繊維及び６０質量％以下の総可消化養分を含有すると定義され得る。粗飼料は、例えば、乾燥粗飼料（例えば、干し草、わら、少なくとも９０質量％の乾物を含有する人工脱水かいば）、サイレージ（草、ムラサキウマゴヤシ、モロコシ、及びトウモロコシなどの緑色かいばから形成され、乾燥時にサイロに保存され、乾物含有量が２０から５０％である）、並びに牧草（例えば、高い水分含有量及びわずか２０から３０％の乾物を有する牧草を提供する、緑の牧草供給地）を包含し得る。粗飼料の２つの基本的な種類は、草及びマメ科植物を包含する。草は、一般に繊維及び乾物がマメ科植物よりも豊富である。マメ科植物は、一般にタンパク質、エネルギー、ビタミン、及びミネラルが豊富である。
濃縮物は粗飼料の反対であり、低率の粗繊維及び高率の可消化養分を含有する。例えば、濃縮物は、２０質量％未満の粗繊維及び６０質量％を超える総可消化養分を含有すると定義され得る。濃縮物は、例えば、エネルギーが豊富な穀物や糖蜜を包含し得る。トウモロコシ、カラス麦、大麦、及びミロ（モロコシの穀物）はエネルギーの豊富な穀物であり、約７０から８０質量％の消化可能な栄養素を含有する。濃縮物は、小麦ふすま、米ぬか、小麦ミドリング、ライ麦ミドリング、及び精米粉（ｒｉｃｅ  ｐｏｌｉｓｈ）もまた包含する。
混合飼料は、一般に「完全に」バランスの取れた飼料を供給するための粗飼料と濃縮物の混合物であり、エネルギー、タンパク質、又は繊維が多いか又は少ないかのいずれかであり得る。
【００２８】
少なくとも１つの有機硫黄化合物及び少なくとも１つのバイオフラボノイドは、例えば、動物に投与されることを意図した有機硫黄化合物及びバイオフラボノイドの総量に応じて、種々の量で動物飼料に組み合わされる。例えば、有機硫黄化合物及びバイオフラボノイドの総量は、最大で１０グラムの総有機硫黄化合物及びバイオフラボノイドを１日に一頭の動物に投与し得るのに十分な場合がある。
ここに記載の動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物に存在する総有機硫黄化合物の濃度は、例えば、アリウム属植物種（Ａｌｌｉｕｍ  ｓｐｐ）に天然にみられる各有機硫黄化合物のそれぞれの濃度よりも高い場合がある。
【００２９】
動物飼料組成物は、例えば、動物飼料組成物の総乾燥質量に基づいて約０．３質量％から約１０質量％の総有機硫黄化合物を含み得る。例えば、動物飼料組成物は、動物飼料組成物の総乾燥質量に基づいて約０．４質量％から約９．５質量％、又は約０．５質量％から約９質量％、又は約０．６質量％から約８．５質量％、又は約０．７質量％から約８質量％、又は約０．８質量％から約７．５質量％、又は約０．９質量％から約７質量％、又は約１質量％から約６質量％、又は約１．５質量％から約５．５質量％、又は約２質量％から約５質量％、又は約２．５質量％から約４．５質量％、又は約３質量％から約４質量％の総有機硫黄化合物を含み得る。
動物飼料組成物は、例えば、動物飼料組成物の総乾燥質量に基づいて約０．３質量％から約１０質量％のアリシンを含み得る。例えば、動物飼料組成物は、動物飼料組成物の総乾燥質量に基づいて約０．４質量％から約９．５質量％、又は約０．５質量％から約９質量％、又は約０．６質量％から約８．５質量％、又は約０．７質量％から約８質量％、又は約０．８質量％から約７．５質量％、又は約０．９質量％から約７質量％、又は約１質量％から約６質量％、又は約１．５質量％から約５．５質量％、又は約２質量％から約５質量％、又は約２．５質量％から約４．５質量％、又は約３質量％から約４質量％のアリシンを含み得る。
【００３０】
ここに記載の動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物に存在する総バイオフラボノイドの濃度は、例えば、植物又はミカン属果実に天然にみられる各バイオフラボノイドのそれぞれの濃度よりも高い場合がある。
動物飼料組成物は、例えば、動物飼料組成物の総乾燥質量に基づいて約０．１質量％から約１０質量％の総バイオフラボノイドを含み得る。例えば、動物飼料組成物は、約０．２質量％から約１０質量％、又は約０．３質量％から約１０質量％、又は約０．４質量％から約９．５質量％、又は約０．５質量％から約９質量％、又は約０．６質量％から約８．５質量％、又は約０．７質量％から約８質量％、又は約０．８質量％から約７．５質量％、又は約０．９質量％から約７質量％、又は約１質量％から約６質量％、又は約１．５質量％から約５．５質量％、又は約２質量％から約５質量％、又は約２．５質量％から約４．５質量％、又は約３質量％から約４質量％のバイオフラボノイドを含み得る。
【００３１】
動物飼料組成物は、例えば、例えばビタミン、ミネラル、抗生物質、成長促進剤、及びそれらの組み合わせを包含する他の動物飼料サプリメントをさらに含み得る。例えば、動物飼料組成物は、例えばメタンの生産／放出を減少させ、及び／又は動物への栄養素の利用可能性を増加させるのに好適な、他の生理活性動物飼料サプリメントを含み得る。ビタミンは、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、チアミン、リボフラビン、ピリドキシン、シアノコバラミン、カロテノイド（ベータカロテン、ゼアキサンチン、ルテイン、及びリコピンを包含する）、ナイアシン、葉酸、パントテン酸、ビオチン、ビタミンＣ、コリン、イノシトール、並びにそれらの塩及び誘導体のいずれか１以上であり得る。ミネラルは、カルシウム、リン、マグネシウム、鉄、亜鉛、マンガン、銅、コバルト、ホウ素、ヨウ素、ナトリウム、カリウム、モリブデン、セレン、クロム、フッ素、及び塩化物のいずれか１以上であり得る。動物飼料組成物は、例えば、約０．００１質量％から約５質量％の各追加の動物飼料サプリメント、又は約０．０１質量％から約５質量％、若しくは約０．１質量％から約５質量％の各追加の動物飼料サプリメントを含み得る。
動物飼料組成物は、例えば、活性物質に加えて、例えば香料、着色料、安定剤、緩衝剤、乳化剤、分散剤、増粘剤、可溶化剤、微量栄養素（例えば、セレン）、ビタミン、飼料材料（例えば、炭水化物）、その他同類のものなどの他の成分を含み得る。
【００３２】
使用
ここに記載の動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物（すべての実施形態及び実施形態の組み合わせを包含する）は動物によるメタンの生産及び／又は放出を減少させ、動物への栄養素の利用可能性を増加させ、及び／又は動物によるミルク及び／又は肉及び／又はウールの生産を増加させ及び／又は生産の効率を増加させるために使用することができる。理論に拘束されることを望まないが、動物飼料サプリメント又は動物飼料組成物は動物の消化管の中の微生物によるメタン生産を減少させ、それによりそれらの微生物により使用される栄養素を減少させ、かつ動物への栄養素の利用可能性を増加させる可能性があると考えられている。
一定の実施形態においては、動物は反芻動物である。反芻動物は、例えば、雌牛、ヤギ、ヒツジ、ヤク、シカ、又はレイヨウを包含する。一定の実施形態においては、動物は疑似反芻動物である。疑似反芻動物は、例えば、ラクダ及びカバを包含する。一定の実施形態においては、動物は単胃動物である。単胃動物は、例えば、カンガルー、ラット、イヌ、ブタ、ネコ、ウマ、及びウサギを包含する。一定の実施形態においては、動物は単胃草食動物である。単胃草食動物は、例えば、カンガルー、ウマ、及びウサギを包含する。
【００３３】
ここに記載の動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、動物に経口投与され得る。ここに記載の動物飼料サプリメント及び動物飼料組成物は、例えば、動物に毎日投与され得る。
動物に投与され又は動物により消費される動物飼料サプリメント及び／又は動物飼料組成物の量は、動物による要求及び動物によるメタン生産の深刻性に応じて変動し得る。例えば、動物に投与され又は動物により消費される動物飼料サプリメント及び／又は動物飼料組成物の量は、動物の種類、動物の大きさ、動物の年齢、及び／又は対象の消化管微生物に応じて変動し得る。特定の対象にとっての適量の決定は、当技術分野の技術の範囲内である。要望に応じて１日の総量を分割し、かつ１日を通して部分的に投与することが可能である（例えば、１日当たり２部分又は３部分）。一般に、活性剤の好適な１日当たりの用量は、要望される効果を生み出すために効果的な最小用量である量であろう。動物に投与され／動物により消費される活性剤（アリシン及びバイオフラボノイド）の量が増加するほど、例えば、メタン生産量が減少し得る。
【００３４】
各動物は、例えば、１日当たり最大で約１０グラムの総有機硫黄化合物及びバイオフラボノイドを消費し得る。例えば、各動物は、１日当たり最大で約９グラム、又は最大で約８グラム、又は最大で約７グラム、又は最大で約６グラム、又は最大で約５グラム、又は最大で約４グラム、又は最大で約３グラム、又は最大で約２グラムの総有機硫黄化合物及びバイオフラボノイドを消費し得る。各動物は、例えば、１日当たり少なくとも約０．５グラムの総有機硫黄化合物及びバイオフラボノイドを消費し得る。例えば、各動物は、１日当たり少なくとも約１グラム、又は少なくとも約１．５グラムの総有機硫黄化合物及びバイオフラボノイドを消費し得る。
【００３５】
ここに記載の動物飼料サプリメントは、例えば、メタン生産及び／又は放出を少なくとも約２０％減少させ得る（動物飼料サプリメントが消費されなかった場合のメタン生産及び／又は放出と比較して）。例えば、動物飼料サプリメントは、メタン生産及び／又は放出を少なくとも約２５％、又は少なくとも約３０％、又は少なくとも約３５％、又は少なくとも約４０％、又は少なくとも約４５％、又は少なくとも約５０％減少させ得る。ここに記載の動物飼料サプリメントは、例えば、メタン生産及び／又は放出を最大で１００％減少させ得る。例えば、動物飼料サプリメントは、メタン生産及び／又は放出を最大で約９５％、又は最大で約９０％、又は最大で約８５％、又は最大で約８０％、又は最大で約７５％、又は最大で約７０％減少させ得る。これは、例えば、以下の実施例に記載のホーエンハイムガステストにより測定することができる。
【００３６】
ここに記載の動物飼料サプリメントは、例えば、ミルク及び／又は肉及び／又はウール生産を少なくとも約２０％増加させ得る（動物飼料サプリメントが消費されなかった場合のミルク及び／又は肉及び／又はウール生産と比較して）。例えば、動物飼料サプリメントは、ミルク及び／又は肉及び／又はウール生産を少なくとも約２５％、又は少なくとも約３０％、又は少なくとも約３５％、又は少なくとも約４０％、又は少なくとも約４５％、又は少なくとも約５０％増加させ得る。ここに記載の動物飼料サプリメントは、例えば、ミルク及び／又は肉及び／又はウール生産を最大で１００％増加させ得る。例えば、動物飼料サプリメントは、ミルク及び／又は肉及び／又はウール生産を最大で約９５％、又は最大で約９０％、又は最大で約８５％、又は最大で約８０％、又は最大で約７５％、又は最大で約７０％増加させ得る。これは、例えば、１日当たりに生産されるミルクの容積、又は動物の体重、又はウールの質量により測定することができる。
【００３７】
ここに記載の動物飼料サプリメントは、例えば、ミルク及び／又は肉及び／又はウールの生産効率を少なくとも約２０％増加させ得る（動物飼料サプリメントが消費されなかった場合のミルク及び／又は肉及び／又はウールの生産効率と比較して）。例えば、動物飼料サプリメントは、ミルク及び／又は肉及び／又はウールの生産効率を少なくとも約２５％、又は少なくとも約３０％、又は少なくとも約３５％、又は少なくとも約４０％、又は少なくとも約４５％、又は少なくとも約５０％増加させ得る。ここに記載の動物飼料サプリメントは、例えば、ミルク及び／又は肉及び／又はウールの生産効率を最大で１００％増加させ得る。例えば、動物飼料サプリメントは、ミルク及び／又は肉及び／又はウールの生産効率を最大で約９５％、又は最大で約９０％、又は最大で約８５％、又は最大で約８０％、又は最大で約７５％、又は最大で約７０％増加させ得る。効率は、消費された栄養素の単位ごとに特定の生物学的プロセス（例えば、ミルク、肉、ウールの生産）が行われる度合いに関連する。これは、例えば、１日に生産されるミルクの容積、又は動物の体重、又はウールの質量における変化を、動物により消費される栄養素の合計で除算することにより測定することができる。
【００３８】
ここに記載の動物飼料サプリメントは、例えば、栄養素の利用可能性を少なくとも約２０％増加させ得る（動物飼料サプリメントが消費されなかった場合のミルク及び／又は肉及び／又はウール生産と比較して）。例えば、動物飼料サプリメントは、栄養素の利用可能性を少なくとも約２５％、又は少なくとも約３０％、又は少なくとも約３５％、又は少なくとも約４０％、又は少なくとも約４５％、又は少なくとも約５０％増加させ得る。ここに記載の動物飼料サプリメントは、例えば、栄養素の利用可能性を最大で１００％増加させ得る。例えば、動物飼料サプリメントは、栄養素の利用可能性を最大で約９５％、又は最大で約９０％、又は最大で約８５％、又は最大で約８０％、又は最大で約７５％、又は最大で約７０％増加させ得る。栄養素の利用可能性は、動物が生物学的／代謝機能に利用可能な栄養素の量を指す。
一定の実施形態においては、動物飼料サプリメント又は組成物に存在する有機硫黄化合物（例えば、アリシン）及びバイオフラボノイドは、相乗的に機能してメタン生産を減少させ、栄養素の利用可能性を増加させ、及び／又は肉及び／又はミルク及び／又はウール生産を増加させ得る。有機硫黄化合物（例えば、アリシン）及び少なくとも１つのバイオフラボノイドの相乗的な組み合わせは、個々の有機硫黄化合物及びバイオフラボノイド成分単独による効果の合計よりも大きな効果をもたらし、それにより改善されたパフォーマンスを提供することができる。
【００３９】
方法及び製造
ここに記載の動物飼料サプリメントは、１以上の有機硫黄化合物及び１以上のバイオフラボノイドを組み合わせる工程により作成することができる。ここに記載の動物飼料組成物は、動物飼料を１以上の有機硫黄化合物及び１以上のバイオフラボノイドと組み合わせる工程により作成することができる。成分を好適な量で組み合わせて、各成分の所望の量を有する組成物を得る。各成分を、１以上の他の成分と、所望の製品を得るのに好適な任意の順番及び組み合わせで組み合わせることができる。例えば、各成分を、混合及びブレンドすることにより組み合わせることができる。例えば、１以上の有機硫黄化合物及び１以上のバイオフラボノイドを、１以上の有機硫黄化合物及び１以上のバイオフラボノイドを動物飼料の表面に配置すること（トップドレッシング（ｔｏｐ−ｄｒｅｓｓｉｎｇ））により、動物飼料と組み合わせることができる。このような方法は、当技術分野で周知である。組成物は乾燥固体形態、例えば粉末形態に調製することができ、かつ目的の最終製品のための製剤の種類に応じて、さらなる加工工程の対象とすることができる。当該方法はさらなる形成工程を含むことができ、混合物は、好ましくはここに記載の種類の動物による消費に好適な寸法及び／又は質感を有する形状（例えば、棒、ボール、ペレット、クラスター、錠剤）に成形、圧縮、噴霧乾燥又は他の方法で形成することができる。当該方法は、動物飼料又は動物飼料サプリメントを注射器などの特定の送達装置に収容することを含み得る。当該方法は、動物飼料サプリメント又は動物飼料を、動物の胃（例えば、反芻動物の反芻胃）にとどまることを目的とするボーラス錠剤に形成することを含み得る。
ここで、以下の非限定的な実施例を参照のみすることにより、本発明を詳細に説明する。
【００４０】
実施例
すべての緩衝剤及び試薬を調製することを包含するインビトロのホーヘンハイムガステスト（ＨＧＴ）を、Ｍｅｎｋｅ及びＳｔｅｉｎｇａｓｓ（１９８８）、「Ｍｅｎｋｅ  Ｋ．Ｈ．，Ｓｔｅｉｎｇａｓｓ  Ｈ．，Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｎｅｒｇｅｔｉｃ  ｆｅｅｄ  ｖａｌｕｅ  ｏｂｔａｉｎｅｄ  ｆｒｏｍ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  ｇａｓ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｕｓｉｎｇ  ｒｕｍｅｎ  ｆｌｕｉｄ，Ａｎｉｍ．Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．２８，７−５５」のプロトコルに従って実行し、その内容は参照によりここに組み込まれる。
【００４１】
簡潔には、反芻胃液（ｒｕｍｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ）を、予熱した還元メンケ緩衝剤（Ｍｅｎｋｅ  ｂｕｆｆｅｒ）（Ｍｅｎｋｅ及びＳｔｅｉｎｇａｓｓ、１９８８）と混合する前に、４層のガーゼ（１ｍｍ孔径、ｔｙｐｅ  １７、Ｎｏｖａｍｅｄ  ＡＧ、スイス、フラウィル）に通して染色した。次いで反芻胃液／緩衝剤混合物を、それぞれの試験添加物を含有する予熱したインキュベーションユニットに分散させた。各気密注射器ユニットは、２５ｍｌの反芻胃液／緩衝剤混合物（１：３；  ｖ／ｖ）、３００ｍｇの乾燥及び粉砕された完全混合飼料（ｔｏｔａｌ  ｍｉｘｅｄ  ｒａｔｉｏｎ；ＴＭＲ）、及び所望の濃度ｍｌ-1を有するように調整された５０ｍｌの試験基質を含有していた。各試験基質及びコントロールを６反復試験し、各実験は基質コントロール（反芻胃液と、反芻胃液を得た瘻孔形成されたヒツジに与えた、３００ｍｇの乾燥及び粉砕された完全混合飼料（ＴＭＲ））を包含していた。また、微生物集団の変動性を見込んで、各基質を異なる日に試験した。この混合物を、３９℃の一定温度で８時間インキュベートした。８時間後、インキュベーションユニットに印刷されたキャリブレーションスケールから全体のガス及び液体の体積を記録し、かつ発酵ガスを内部に残す一方でインキュベーションユニットからインキュベーション液のみをデカントすることにより発酵を終了した。次いで、ハミルトンシリンジ（Ｈａｍｉｌｔｏｎ、ＡＧ、スイス、ボナドゥーツ）を使用して、１５０ｍｌのガスをインキュベーションユニットから改良されたユニットの２番目の出口を覆う気密隔膜に通した。フラボノイド混合物の主成分は、２．１０：０．９２の比のナリンジン及びネオヘスペリジンであった。ストレプトマイセスシンナモネンシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｃｉｎｎａｍｏｎｅｎｓｉｓ）から単離されたポリエーテル系抗生物質であるモネンシンを、ポジティブコントロールとして使用した。
【００４２】
発酵ガスを、メタン濃度について、Ｈｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋａｒｄガスクロマトグラフ（モデル５８９０シリーズＩＩ、アメリカ、ペンシルベニア州、アボンデール）で分析した。揮発性脂肪酸（ＶＦＡ）の分析のために、Ｄｏａｎｅら（１９９８）の方法に従ってサンプルを調製し、かつＥｈｒｌｉｃｈら（１９８１）のプロトコルに従ってＨＰＬＣ（ＬａＣｈｒｏｍ、Ｌ−７０００シリーズ、日立製作所、日本、東京）により決定した。メタン放出が減少すると、Ｈ2が蓄積し、アセテート：プロピオネートの比率及びアセテート：ブチレートの比率の低下がもたらされる。この低下した比率は、プロピオネート及びブチレートの増加を示唆する（プロピオネート及びブチレートの形成はＨ2を使用するため）。そしてプロピオネートの増加は反芻動物の肉の生産性の増加をもたらし、一方でブチレートの増加は反芻動物のミルクの生産性の増加をもたらす。
【００４３】
結果を、以下の表１及び表２に示す。
【表１】
2020521503.tif 000003
【００４４】
【表２】
2020521503.tif 000004
【国際調査報告】
2020521503.tif 000005
2020521503.tif 000006
2020521503.tif 000007
2020521503.tif 000008