(57)【要約】本発明は、主として、テーラーメード医療につながるものとして、個々の患者に対する、抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有するヌクレオチドまたはヌクレオシドによる治療の有効性を予め診断する方法、その診断のための医薬組成物、抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有し得る薬物を見出すためのスクリーニング法、及び抗腫瘍剤または抗ウイルス剤の生体内における作用メカニズムを探索する方法等を提供する。本発明は、該ヌクレオチドまたはヌクレオシドの投与前後における、主に配列番号１〜４に係る蛋白質の発現量ないし活性の変化を指標とすることを特徴とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有するヌクレオチドまたはヌクレオシドの特定の被検者における治療の有効性を診断する方法であって、
（ａ）予め被検者から採取した血液または組織試料中における配列番号１〜４に係る蛋白質の少なくとも一つの発現量ないし活性を測定すること、
（ｂ）前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドを被検者の組織内または該被検者から採取した組織内に投与し、投与３〜４８時間後に、血中または投与組織中における、（ａ）で測定されたものと同じ蛋白質の発現量ないし活性を測定すること、および
（ｃ）前記（ａ）で得た測定値と（ｂ）で得た測定値とを比較して当該蛋白質の発現量ないし活性の変化を調べること、を含む方法。
【請求項２】
抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有するヌクレオチドまたはヌクレオシドの特定の被検者における治療の有効性を診断する方法であって、
（ａ）予め被検者から採取した血液または組織試料中における配列番号５〜３０に係る蛋白質の少なくとも一つの発現量ないし活性を測定すること、
（ｂ）前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドを被検者の組織内または該被検者から採取した組織内に投与し、投与３〜４８時間後に、血中または投与組織中における、（ａ）で測定されたものと同じ蛋白質の発現量ないし活性を測定すること、および
（ｃ）前記（ａ）で得た測定値と（ｂ）で得た測定値とを比較して当該蛋白質の発現量ないし活性の変化を調べること、を含む方法。
【請求項３】
該ヌクレオチドまたはヌクレオシドが、少なくとも細胞内に入ることにより抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を発揮するものであり、細胞内へ移行させるのに有効な担体との複合体の形で用いられる、請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
該担体が、カチオン性リポソーム担体である請求項３記載の方法。
【請求項５】
該カチオン性リポソーム担体が、基本必須成分として２−Ｏ−（２−ジエチルアミノエチル）カルバモイル−１，３−Ｏ−ジオレオイルグリセロールとリン脂質とが１：３〜２：１（当該グリセロール誘導体：リン脂質）の重量比からなるカチオン性リポソーム担体、基本必須成分としてＮ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−ｎ，ｎ，ｎ−トリメチルアンモニウム  クロリド（ＤＯＴＭＡ）とジオレオイル  フォスフォチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）とが１：１の重量比からなるカチオン性リポソーム担体（リポフェクチン（登録商標））、基本必須成分として２，３−ジオレイルオキシ−Ｎ−［２−（スペルミンカルボキサミド）エチル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−プロパナミニウム  トリフルオロアセテート（ＤＯＳＰＡ）とジオレオイル  フォスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）とが３：１の重量比からなるカチオン性リポソーム担体（リポフェクトアミン（登録商標））、基本必須成分としてＮ，ＮＩ，ＮＩＩ，ＮＩＩＩ−テトラメチル−Ｎ，ＮＩ，ＮＩＩ，ＮＩＩＩ−テトラパルミチルスペルミン（ＴＭＴＰＳ）とジオレオイル  フォスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）とが１；１．５のモル比からなるカチオン性リポソーム担体（セルフェクチン（登録商標））、または基本必須成分として１，２−ジミリスチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシ  エチル  アンモニウム  ブロミド（ＤＭＲＩＥ）とコレステロールとが１：１のモル比からなるカチオン性リポソーム担体（ＤＭＲＩＥ−Ｃ（登録商標）である請求項４記載の方法。
【請求項６】
該ヌクレオチドまたはヌクレオシドが、ホモポリマー・ホモポリマー二本鎖ＲＮＡ、ホモポリマー・コポリマー二本鎖ＲＮＡ、コポリマー一本鎖ＲＮＡ、５−フルオロウラシル、またはシトシンアラビノシドである、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
該ホモポリマー・ホモポリマー二本鎖ＲＮＡが、ポリイノシン酸・ポリシチジル酸、ポリイノシン酸・ポリ（５−ブロモシチジル酸）、ポリイノシン酸・ポリ（２−チオシチジル酸）、ポリ（７−デアザイノシン酸）・ポリシチジル酸、ポリ（７−デアザイノシン酸）・ポリ（５−ブロモシチジル酸）、ポリ（２’−アジドイノシン酸）・ポリシチジル酸、ポリイノシン酸・ポリ（シチジン−５’−チオリン酸）、およびポリイノシン酸・ポリ（１−ビニルシチジル酸）からなる群から選択される二本鎖ＲＮＡである請求項６記載の方法。
【請求項８】
該ホモポリマー・コポリマー二本鎖ＲＮＡが、ポリイノシン酸・ポリ（シチジル酸、ウリジル酸）、またはポリイノシン酸・ポリ（シチジル酸、４−チオウリジル酸）である請求項６記載の方法。
【請求項９】
該コポリマー一本鎖ＲＮＡが、ポリ（アデニル酸、ウリジル酸）である請求項６記載の方法。
【請求項１０】
平均鎖長１００〜５００塩基対数（ｂｐ）の範囲内にあるポリイノシン酸・ポリシチジル酸と、基本必須成分として２−Ｏ−（２−ジエチルアミノエチル）カルバモイル−１，３−Ｏ−ジオレオイルグリセロールとリン脂質とが１：３〜２：１（当該グリセロール誘導体：リン脂質）の重量比からなるカチオン性リポソーム担体との複合体の特定の被検者における治療効果を診断する方法であって、
（ａ）予め被検者から採取した血液または組織試料中における配列番号１〜４に係る蛋白質の少なくとも一つの発現量ないし活性を測定すること、
（ｂ）前記ヌクレオチドを被検者の組織内または該被検者から採取した組織内に投与し、投与３〜４８時間後に、血中または投与組織中における、（ａ）で測定されたものと同じ蛋白質の発現量ないし活性を測定すること、および
（ｃ）前記（ａ）で得た測定値と（ｂ）で得た測定値とを比較して当該蛋白質の発現量ないし活性の変化を調べること、を含む方法。
【請求項１１】
抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有するヌクレオチドまたはヌクレオシドを含有するものであって、
（ａ）予め被検者から採取した血液または血液または組織試料中における配列番号１〜４に係る蛋白質の少なくとも一つの発現量ないし活性を測定すること、
（ｂ）前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドを被検者の組織内または該被検者から採取した組織内に投与し、投与３〜４８時間後に、血中または投与組織中における、（ａ）で測定されたものと同じ蛋白質の発現量ないし活性を測定すること、および
（ｃ）前記（ａ）で得た測定値と（ｂ）で得た測定値とを比較して当該蛋白質の発現量ないし活性の変化を調べること、
により該被検者における該ヌクレオチドまたはヌクレオシドによる治療の有効性を診断するための医薬組成物。
【請求項１２】
抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有するヌクレオチドまたはヌクレオシドを含有するものであって、
（ａ）予め被検者から採取した血液または血液または組織試料中における配列番号５〜３０に係る蛋白質の少なくとも一つの発現量ないし活性を測定すること、
（ｂ）前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドを被検者の組織内または該被検者から採取した組織内に投与し、投与３〜４８時間後に、血中または投与組織中における、（ａ）で測定されたものと同じ蛋白質の発現量ないし活性を測定すること、および
（ｃ）前記（ａ）で得た測定値と（ｂ）で得た測定値とを比較して当該蛋白質の発現量ないし活性の変化を調べること、
により該被検者における該ヌクレオチドまたはヌクレオシドによる治療の有効性を診断するための医薬組成物。
【請求項１３】
該ヌクレオチドまたはヌクレオシドが、少なくとも細胞内に入ることにより抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を発揮するものであり、細胞内へ移行させるのに有効な担体との複合体の形で含有する、請求項１１または１２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
該担体が、カチオン性リポソーム担体である請求項１３記載の医薬組成物。
【請求項１５】
該カチオン性リポソーム担体が、基本必須成分として２−Ｏ−（２−ジエチルアミノエチル）カルバモイル−１，３−Ｏ−ジオレオイルグリセロールとリン脂質とが１：３〜２：１（当該グリセロール誘導体：リン脂質）の重量比からなるカチオン性リポソーム担体、基本必須成分としてＮ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−ｎ，ｎ，ｎ−トリメチルアンモニウム  クロリド（ＤＯＴＭＡ）とジオレオイル  フォスフォチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）とが１：１の重量比からなるカチオン性リポソーム担体（リポフェクチン（登録商標））、基本必須成分として２，３−ジオレイルオキシ−Ｎ−［２−（スペルミンカルボキサミド）エチル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−プロパナミニウム  トリフルオロアセテート（ＤＯＳＰＡ）とジオレオイル  フォスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）とが３：１の重量比からなるカチオン性リポソーム担体（リポフェクトアミン（登録商標））、基本必須成分としてＮ，ＮＩ，ＮＩＩ，ＮＩＩＩ−テトラメチル−Ｎ，ＮＩ，ＮＩＩ，ＮＩＩＩ−テトラパルミチルスペルミン（ＴＭＴＰＳ）とジオレオイル  フォスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）とが１：１．５のモル比からなるカチオン性リポソーム担体（セルフェクチン（登録商標））、または基本必須成分として１，２−ジミリスチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシ  エチル  アンモニウム  ブロミド（ＤＭＲＩＥ）とコレステロールとが１：１のモル比からなるカチオン性リポソーム担体（ＤＭＲＩＥ−Ｃ（登録商標）である請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１６】
該ヌクレオチドまたはヌクレオシドが、ホモポリマー・ホモポリマー二本鎖ＲＮＡ、ホモポリマー・コポリマー二本鎖ＲＮＡ、コポリマー一本鎖ＲＮＡ、５−フルオロウラシル、またはシトシンアラビノシドである、請求項１１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１７】
該ホモポリマー・ホモポリマー二本鎖ＲＮＡが、ポリイノシン酸・ポリシチジル酸、ポリイノシン酸・ポリ（５−ブロモシチジル酸）、ポリイノシン酸・ポリ（２−チオシチジル酸）、ポリ（７−デアザイノシン酸）・ポリシチジル酸、ポリ（７−デアザイノシン酸）・ポリ（５−ブロモシチジル酸）、ポリ（２’−アジドイノシン酸）・ポリシチジル酸、ポリイノシン酸・ポリ（シチジン−５’−チオリン酸）、およびポリイノシン酸・ポリ（１−ビニルシチジル酸）からなる群から選択される二本鎖ＲＮＡである請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１８】
該ホモポリマー・コポリマー二本鎖ＲＮＡが、ポリイノシン酸・ポリ（シチジル酸、ウリジル酸）、またはポリイノシン酸・ポリ（シチジル酸、４−チオウリジル酸）である請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１９】
該コポリマー一本鎖ＲＮＡが、ポリ（アデニル酸、ウリジル酸）である請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項２０】
平均鎖長１００〜５００塩基対数（ｂｐ）の範囲内にあるポリイノシン酸・ポリシチジル酸と、基本必須成分として２−Ｏ−（２−ジエチルアミノエチル）カルバモイル−１，３−Ｏ−ジオレオイルグリセロールとリン脂質とが１：３〜２：１（当該グリセロール誘導体：リン脂質）の重量比からなるカチオン性リポソーム担体との複合体を含有するものであって、
（ａ）予め被検者から採取した血液または血液または組織試料中における配列番号１〜４に係る蛋白質の少なくとも一つの発現量ないし活性を測定すること、
（ｂ）前記複合体を被検者の組織内または該被検者から採取した組織内に投与し、投与３〜４８時間後に、血中または投与組織中における、（ａ）で測定されたものと同じ蛋白質の発現量ないし活性を測定すること、および
（ｃ）前記（ａ）で得た測定値と（ｂ）で得た測定値とを比較して当該蛋白質の発現量ないし活性の変化を調べること、
により該被検者における該ヌクレオチド含有複合体による治療の有効性を診断するための医薬組成物。
【請求項２１】
配列番号１〜４に係る蛋白質に対する被験薬物の結合能を調べることを特徴とする、抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有し得る薬物を見出すためのスクリーニング法。
【請求項２２】
配列番号５〜３０に係る蛋白質に対する被験薬物の結合能を調べることを特徴とする、抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有し得る薬物を見出すためのスクリーニング法。
【請求項２３】
配列番号１〜４に係る蛋白質に対する抗腫瘍剤または抗ウイルス剤の結合能を調べることにより、当該抗腫瘍剤または当該抗ウイルス剤の生体内における作用メカニズムを探索する方法。
【請求項２４】
配列番号５〜３０に係る蛋白質に対する抗腫瘍剤または抗ウイルス剤の結合能を調べることにより、当該抗腫瘍剤または当該抗ウイルス剤の生体内における作用メカニズムを探索する方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、個々の患者に対する、抗腫瘍剤または抗ウイルス剤による治療の有効性を診断または評価する方法に関するものである。また、本発明は、抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有し得る薬物を見出すためのスクリーニング法に関するものである。
例えばポリイノシン酸・ポリシチジル酸に代表される合成核酸重合体は、優れた抗腫瘍作用および抗ウイルス作用を有する。そして、かかる合成核酸重合体と適当なカチオン性リポソーム担体との複合体を生体内に投与すると、癌細胞のみを特異的に攻撃し、癌細胞内のヌクレアーゼを活性化させて癌細胞をアポトーシスに導くこと、また、肝炎ウイルスに顕著な効果を有することが知られている（例、国際公開第９９／２０２８３号パンフレット、国際公開第９９／４８５３１号パンフレット）。
しかしながら、いかに優れた抗腫瘍剤であっても、個々の患者によって投与薬剤に対する反応性は異なり、ある患者では十分に有効である場合でも、他の患者では有効性に乏しい場合がある。
昨今、個々の患者に応じた治療を行うことが、テーラーメード医療として期待されている。薬剤の作用を確認しながら、また副作用を予測しながら治療を続けるテーラーメード医療は、新しい治療体制として非常に有用である。
発明の開示
本発明は、主として、テーラーメード医療につながるものとして、個々の患者に対する、核酸含有抗腫瘍剤または抗ウイルス剤による治療の有効性を診断する方法、ないしはその診断のための医薬組成物を提供することを目的とする。また、本発明は、抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有し得る薬物を見出すためのスクリーニング法を提供することを目的とする。
本発明者らは、鋭意検討を重ねた結果、優れた抗腫瘍剤ないし抗ウイルス剤であるポリイノシン酸・ポリシチジル酸という二本鎖ＲＮＡと結合する蛋白質や、ポリイノシン酸・ポリシチジル酸の作用によって発現される蛋白質を見出し、本発明を完成した。本明細書では、前者として３種類の蛋白質、後者として１種類の蛋白質を開示する。
本発明として、例えば、以下の態様のものを挙げることができる。
（１）抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有するヌクレオチドまたはヌクレオシドの特定の被検者における治療の有効性を診断する方法であって、
（ａ）予め被検者から採取した血液または組織試料中における配列番号１〜４に係る蛋白質の少なくとも一つの発現量ないし活性を測定すること、
（ｂ）前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドを被検者の組織内または該被検者から採取した組織内に投与し、投与３〜４８時間後に、血中または投与組織中における、（ａ）で測定されたものと同じ蛋白質の発現量ないし活性を測定すること、および
（ｃ）前記（ａ）で得た測定値と（ｂ）で得た測定値とを比較して当該蛋白質の発現量ないし活性の変化を調べること、を含む方法。
（２）抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有するヌクレオチドまたはヌクレオシドの特定の被検者における治療の有効性を診断する方法であって、
（ａ）予め被検者から採取した血液または組織試料中における配列番号５〜３０に係る蛋白質の少なくとも一つの発現量ないし活性を測定すること、
（ｂ）前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドを被検者の組織内または該被検者から採取した組織内に投与し、投与３〜４８時間後に、血中または投与組織中における、（ａ）で測定されたものと同じ蛋白質の発現量ないし活性を測定すること、および
（ｃ）前記（ａ）で得た測定値と（ｂ）で得た測定値とを比較して当該蛋白質の発現量ないし活性の変化を調べること、を含む方法。
（３）抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有するヌクレオチドまたはヌクレオシドを含有するものであって、
（ａ）予め被検者から採取した血液または血液または組織試料中における配列番号１〜４に係る蛋白質の少なくとも一つの発現量ないし活性を測定すること、
（ｂ）前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドを被検者の組織内または該被検者から採取した組織内に投与し、投与３〜４８時間後に、血中または投与組織中における、（ａ）で測定されたものと同じ蛋白質の発現量ないし活性を測定すること、および
（ｃ）前記（ａ）で得た測定値と（ｂ）で得た測定値とを比較して当該蛋白質の発現量ないし活性の変化を調べること、
により該被検者における該ヌクレオチドまたはヌクレオシドによる治療の有効性を診断するための医薬組成物。
（４）抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有するヌクレオチドまたはヌクレオシドを含有するものであって、
（ａ）予め被検者から採取した血液または血液または組織試料中における配列番号５〜３０に係る蛋白質の少なくとも一つの発現量ないし活性を測定すること、
（ｂ）前記ヌクレオチドまたはヌクレオシドを被検者の組織内または該被検者から採取した組織内に投与し、投与３〜４８時間後に、血中または投与組織中における、（ａ）で測定されたものと同じ蛋白質の発現量ないし活性を測定すること、および
（ｃ）前記（ａ）で得た測定値と（ｂ）で得た測定値とを比較して当該蛋白質の発現量ないし活性の変化を調べること、
により該被検者における該ヌクレオチドまたはヌクレオシドによる治療の有効性を診断するための医薬組成物。
（５）配列番号１〜４に係る蛋白質に対する被験薬物の結合能を調べることを特徴とする、抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有し得る薬物を見出すためのスクリーニング法。
（６）配列番号５〜３０に係る蛋白質に対する被験薬物の結合能を調べることを特徴とする、抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有し得る薬物を見出すためのスクリーニング法。
（７）配列番号１〜４に係る蛋白質に対する抗腫瘍剤または抗ウイルス剤の結合能を調べることにより、当該抗腫瘍剤または当該抗ウイルス剤の生体内における作用メカニズムを探索する方法。
（８）配列番号５〜３０に係る蛋白質に対する抗腫瘍剤または抗ウイルス剤の結合能を調べることにより、当該抗腫瘍剤または当該抗ウイルス剤の生体内における作用メカニズムを探索する方法。
発明を実施するための最良の形態
本発明の方法によりその抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を評価されるヌクレオチドおよびヌクレオシドは、細胞内に入ることにより、活性を発揮するものである。これらは、例えば、そのまま含有する水溶液の形で、または適当な担体等との医薬組成物の形で組織内に投与される。また、本発明方法に用いる蛋白質は、例えば後述する試験例に記載の方法でスクリーニングすることができる。
Ｉ．蛋白質
本発明に係る蛋白質には、配列番号１〜３０に記載のアミノ酸配列を有する蛋白質が含まれる。
配列番号１ないし４に係る蛋白質は、全て既知の蛋白質である。
配列番号１に係る蛋白質は、生体内に存在し、４９０個のアミノ酸からなる。これをコードする遺伝子は、登録番号ＡＫ００２１６９としてジーンバンクに登録されている（遺伝子名：ＡＫ００２１６９）。この蛋白質は、リボヌクレアーゼＩＩＩファミリー（Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅ  ＩＩＩ  ｆａｍｉｌｙ）、レセプターチロシンキナーゼ  クラスＩＩＩ（Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｃｌａｓｓ  ＩＩＩ）、レセプターチロシンキナーゼ  クラスＶ（Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｃｌａｓｓ  Ｖ）、ｄｓＲＮＡバインディングモチーフ（ｄｓＲＮＡ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｍｏｔｉｆ）などのモチーフを有することが知られている。モチーフとしてヌクレアーゼやキナーゼを有することから、当該蛋白質が活性化すれば細胞はアポトーシスに誘導されるものと考えられる。
配列番号５〜１６に係る蛋白質は、すべて既知の蛋白質で、配列番号１に係る蛋白質と６０％以上の高い配列同一性を有するものであり、同等の機能を有するものと考えられるものである。因みに、配列番号５の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＬ１３６８６６としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＭ８０１８３４）、配列番号６の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＫ０２４２８５としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＫ０２４２８５）、配列番号７の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＦ１６７５６９としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＦ１６７５６９）、配列番号８の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＦ１４１８７０としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＦ１４１８７０）、配列番号９の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＪ２７１７４５としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＡ２７１７４５）、配列番号１０の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＪ２７１７４６としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＡ２７１７４６）、配列番号１１の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＦ１６７５７０としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＦ１６７５７０）、配列番号１２の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＪ２７１７４４としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＡ２７１７４４）、配列番号１３の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号Ｕ１０３２４としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＵ１０３２４）、配列番号１４の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号Ｘ９８２６５としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＭＰ  Ｐ  ４ＩＩ）、配列番号１５の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＦ１４７２０９としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＦ１４７２０９）、配列番号１６の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号Ｘ９８２６４またはＸ９８２６５としてジーンバンクに登録されている（遺伝子名：ＨＳＭＰ  Ｐ  ４Ｉ）。
配列番号２に係る蛋白質は、生体内に存在し、３６６個のアミノ酸からなり、ヒトＴＡＲ  ＲＮＡバインディングプロテイン２（ＴＲＢＰ２）とも呼ばれている。この蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号Ｕ０８９９８としてジーンバンクに登録されている（遺伝子名：ＨＳＵ０８９９８）。この蛋白質も、リボヌクレアーゼＩＩＩファミリー（Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅ  ＩＩＩ  ｆａｍｉｌｙ）というモチーフを持ち、他にｄｓＲＮＡバインディングモチーフ（ｄｓＲＮＡ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｍｏｔｉｆ）などのモチーフを有することが知られている。モチーフとしてヌクレアーゼやキナーゼを有することから、当該蛋白質が活性化すれば細胞はアポトーシスに誘導されるものと考えられる。
配列番号１７〜２４に係る蛋白質は、すべて既知の蛋白質で、配列番号２に係る蛋白質のｄｓＲＮＡバインディングモチーフ部分と高い配列同一性を示すアミノ酸配列を有するものであり、同等の機能を有するものと考えられるものである。因みに、配列番号１７の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号Ｍ６０８０１としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＵＭＴＲＢＰ）、配列番号１８の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＦ０８３０３３としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＦ０８３０３３）、配列番号１９の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号Ｘ９９２２７としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＨＲＥＤ１Ａ）、配列番号２０の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号Ｕ１８１２１としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＵ１８１２１）、配列番号２１の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＪ２７１７４５としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＡ２７１７４５）、配列番号２２の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＦ１４１８７０としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＦ１４１８７０）、配列番号２３の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＪ２７１７４７としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＡ２７１７４７）、配列番号２４の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＦ２０２４４５としてジーンバンクに登録されている（遺伝子名：ＡＦ２０２４４５）。
配列番号３に係る蛋白質は、生体内に存在し、８０３個のアミノ酸からなり、ヒトＴＲＡ１とも呼ばれている。この蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号Ｘ１５１８７としてジーンバンクに登録されている（遺伝子名：ＨＳＴＲＡ１）。この蛋白質は他の蛋白質と結合して細胞増殖や細胞死のシグナル伝達に関与していると推測されている（最新医学，５６，ｐ２１（２００１））。他の蛋白質としては、ヌクレアーゼモチーフを持つＩＲＥ１βという蛋白質が考えられ（例、Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．３，ｐ．１５８（２００１））、配列番号３に係る蛋白質が活性化すると、ＩＲＥ１βの機能が制御され、細胞はアポトーシスに誘導されると考えられる。ＩＲＥ１βのＤＮＡ配列の一部は、登録番号ＡＡ０８８５４７（蛋白質名：ＩＲＥ１β）としてジーンバンクに登録されている（配列番号３１）。
配列番号４に係る蛋白質は、生体内に存在し、１８１個のアミノ酸からなり、ＩＳＧ２０とも呼ばれている。この蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号Ｘ８９７７３としてジーンバンクに登録されている（遺伝子名：ＨＳＩＳＧ２０ＧＮ）。この蛋白質は、リボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）活性とデオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）活性の両方を有することが報告されている（例、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４０（２４），ｐ．７１７４（２００１））。今回、一定の癌細胞に、ポリイノシン酸・ポリシチジル酸二本鎖ＲＮＡと、２−Ｏ−（２−ジエチルアミノエチル）カルバモイル−１，３−Ｏ−ジオレオイルグリセロール（以下、「カチオン性グリセロール」という）とリン脂質とを必須構成成分とするカチオン性リポソーム担体との複合体を添加すると、当該蛋白質のｍＲＮＡが発現することを見出した（後述する試験例２参照）。
配列番号２５〜３０に係る蛋白質は、配列番号４に係る蛋白質のヌクレアーゼモチーフ部分と高い配列同一性を示すアミノ酸配列を有する既知の蛋白質である。因みに、配列番号２５の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＫ０２５４９３としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＫ０２５４９３）、配列番号２６の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＦ２７３３０４としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＦ２７３３０４）、配列番号２７の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＦ２９５７７４としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＦ２９５７７４）、配列番号２８の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＬ１３６８９４としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＨＳＭ８０１８６２）、配列番号２９の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＫ０２２７３３としてジーンバンクに登録されており（遺伝子名：ＡＫ０２２７３３）、配列番号３０の蛋白質をコードする遺伝子は、登録番号ＡＫ０２２５４６としてジーンバンクに登録されている（遺伝子名：ＡＫ０２２５４６）。
ＩＩ．ヌクレオチドもしくはヌクレオシド、またはそれらを含有する医薬組成物
本発明方法に用いられるヌクレオチドまたはヌクレオシドとしては、少なくとも細胞内に入ることにより抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を発揮するものであれば、特に限定されない。本発明に係るヌクレオチドには、モノ、オリゴ、ポリのものが存在するが、本発明においては特に制限なくいずれも含まれる。
例えば、下記のようなヌクレオチド、ヌクレオシドを挙げることができる。
（１）ホモポリマー・ホモポリマー二本鎖ＲＮＡ
ポリイノシン酸・ポリシチジル酸、
ポリイノシン酸・ポリ（５−ブロモシチジル酸）、
ポリイノジン酸・ポリ（２−チオシチジル酸）、
ポリ（７−デアザイノシン酸）・ポリシチジル酸、
ポリ（７−デアザイノシン酸）・ポリ（５−ブロモシチジル酸）、
ポリ（２’−アジドイノシン酸）・ポリシチジル酸、
ポリイノシン酸・ポリ（シチジン−５’−チオリン酸）、
ポリイノジン酸・ポリ（１−ビニルシチジル酸）。
（２）ホモポリマー・コポリマー二本鎖ＲＮＡ
ポリイノシン酸・ポリ（シチジル酸、ウリジル酸）、
ポリイノシン酸・ポリ（シチジル酸、４−チオウリジル酸）。
（３）コポリマー一本鎖ＲＮＡ
ポリ（アデニル酸、ウリジル酸）。
（４）その他
５−フルオロウラシル、
シトシンアラビノシド。
これらの中、一本鎖ないし二本鎖ＲＮＡについては、高分子であることから殆どのものが単独では細胞内へ入ることができないので、例えば、細胞内へ薬物を移行させるのに有効な担体と複合体を形成させることが必要である。一定の薬物担体と複合体を形成したポリヌクレオチドは、複合体の形態で細胞内へ移行することができる。そのような担体は当該技術分野で入手可能であるか、当業者に既知の方法で調整することができる。
細胞内へ薬物を移行させるのに有効な担体としては、例えば、カチオン性リポソーム担体を挙げることができる。カチオン性リポソーム担体の具体例としては、基本必須成分としてカチオン性グリセロールとリン脂質（例、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、レシチン）とが、例えば１：３〜２：１（カチオン性グリセロール：リン脂質）の重量比からなるカチオン性リポソーム担体、リポフェクチン（登録商標、基本必須成分としてＮ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−ｎ，ｎ，ｎ−トリメチルアンモニウム  クロリド（ＤＯＴＭＡ）とジオレオイル  フォスフォチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）とが１：１の重量比からなるカチオン性リポソーム担体）、リポフェクトアミン（登録商標、基本必須成分として２，３−ジオレイルオキシ−Ｎ−［２−（スペルミンカルボキサミド）エチル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−プロパナミニウム  トリフルオロアセテート（ＤＯＳＰＡ）とジオレオイル  フォスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）とが３：１の重量比からなるカチオン性リポソーム担体）、セルフェクチン（登録商標、基本必須成分としてＮ，ＮＩ，ＮＩＩ，ＮＩＩＩ−テトラメチル−Ｎ，ＮＩ，ＮＩＩ，ＮＩＩＩ−テトラパルミチルスペルミン（ＴＭＴＰＳ）とジオレオイル  フォスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）とが１：１．５のモル比からなるカチオン性リポソーム担体）、ＤＭＲＩＥ−Ｃ（登録商標、基本必須成分として１，２−ジミリスチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシ  エチルアンモニウム  ブロミド（ＤＭＲＩＥ）とコレステロールとが１：１のモル比からなるカチオン性リポソーム担体）を挙げることができる。また、基本必須成分として、国際公開第９４／１９３１４号パンフレットに記載された各種のグリセロール誘導体とリン脂質（前記と同じ）とからなるカチオン性リポソーム担体も挙げることができる。この中、基本必須成分としてカチオン性グリセロールとリン脂質（例えば、レシチン）とが１：２〜１：１（カチオン性グリセロール：リン脂質）の重量比からなるカチオン性リポソーム担体が好ましい。
カチオン性リポソーム担体は、一般的なリポソームと同様に脂質二分子膜からなり、水溶液中で正電荷を帯びる小胞体である。従って、水溶液中で負電荷を帯びる核酸のような化合物とは容易に複合体を形成することができる。
本発明において使用しうるヌクレオチドの中、ポリイノシン酸・ポリシチジル酸のようなポリヌクレオチドについては、あらゆる鎖長ないし分子量のものが存在するが、本発明においては特定の鎖長や分子量のものに制限されない。ポリ（シチジル酸、ウリジル酸）のようなコポリマーポリヌクレオチドについては、２つのヌクレオチドが種々の構成、比率で存在しうるが、本発明においては特定の構成、比率のものに制限されない。しかしながら、ポリイノシン酸・ポリ（シチジル酸、ウリジル酸）については、ほぼ１２個のシチジル酸に対して１個のウリジル酸が現れるポリ（シチジル酸、ウリジル酸）（ポリＣ１２Ｕ）が好ましい。ポリ（アデニル酸、ウリジル酸）のようなコポリマー一本鎖ＲＮＡについては、２つのヌクレオチドが交互に現れる構成のものが好ましい。
本発明方法は、あらゆるタイプのヌクレオチド、ヌクレオシドの治療有効性の判断に適用可能であるが、なかでもポリイノシン酸・ポリシチジル酸の治療有効性を診断するのに好適であり、特に平均鎖長１００〜５００ｂｐ（塩基対数）の範囲内にあるポリイノシン酸・ポリシチジル酸の治療効果を診断（予測）するのに適する。ただし、前記の通り、ポリイノシン酸・ポリシチジル酸は、単独では細胞内に入らないので、細胞内へ移行できるよう、例えば、カチオン性リポソーム担体、例えば、基本必須成分としてカチオン性グリセロールとリン脂質（例えば、レシチン）とが１：２〜１：１（カチオン性グリセロール：リン脂質）の重量比からなるカチオン性リポソーム担体との複合体として投与する必要がある。
本発明方法はインビボ、インビトロのいずれでも実施することができる。前者の場合、ヌクレオチドまたはヌクレオシドが投与される生体組織としては、例えば、静脈、肝動脈、門脈、腫瘍組織を挙げることができる。後者の場合、生体から採取される組織としては、例えば、癌組織、ウイルス感染組織を挙げることができ、具体的な癌組織としては、例えば、肝臓癌、肺癌、大腸癌、胃癌、膀胱癌、卵巣癌、子宮癌、乳癌、前立腺癌、脳腫瘍、腎臓癌、膵臓癌、皮膚癌、筋肉種の癌組織を挙げることができる。但し、上記に限定されず、目的に応じて適宜選択される。
通常、本発明においてヌクレオチドやヌクレオシドは、溶液状態で投与される。溶液状態にする前の剤形としては、例えば、溶液製剤、粉末製剤、凍結乾燥製剤などの形態を挙げることができるが、剤形は特に制限されない。
本発明の診断方法で用いる医薬組成物としては、例えば、ヌクレオチドまたはヌクレオシドが細胞内へ移行しうる状態のもの、例えば、ポリイノシン酸・ポリシチジル酸のような二本鎖ＲＮＡとカチオン性リポソーム担体との複合体を含有する、公知の医薬組成物をそのまま用いることができる。そのような医薬組成物を常法により製造することができるか、市販品から入手可能である。
ヌクレオチドまたはヌクレオシドの用量は、用いるヌクレオチドまたはヌクレオシドや疾病の種類、患者の状態等により異なり、適宜設定することができる。
ＩＩＩ．蛋白質の発現量の測定
本発明に係る診断方法において、本発明に係る蛋白質の発現量を測定する方法としては、例えば、▲１▼目的とする蛋白質の存在を直接測定する方法、▲２▼目的とする蛋白質をコードしているｍＲＮＡの発現を測定する方法といった公知の方法を挙げることができる。前者の具体例としては、適当な抗体を使用するいわゆるＥＬＩＳＡ法を挙げることができ、後者の具体例としては、いわゆるＲＴ−ＰＣＲ法を挙げることができる。
本発明方法の実施に際しては、ヌクレオチドまたはヌクレオシドを被検者の生体組織内または生体から採取した組織内に投与する前、および投与後に本発明に係る蛋白質の発現量を測定し、当該ヌクレオチドまたはヌクレオシドを投与することにより当該蛋白質の発現量が上昇すれば、当該ヌクレオチドまたはヌクレオシドないしそれを含有する医薬組成物は、当該患者に対して治療効果があり得ると診断することができる。
本発明に係る蛋白質の中、どのような蛋白質の発現量を測定するのが好ましいかについては、適用するヌクレオチドまたはヌクレオシドの種類や病気（例えば、腫瘍、感染ウイルス等）の種類、患者の状態等によって異なるが、ポリイノシン酸・ポリシチジル酸の二本鎖ＲＮＡとカチオン性リポソーム担体を含有する医薬組成物については、例えば、配列番号４に係る蛋白質の発現量を測定するのが、治療効果の診断に有効である。当該医薬組成物の投与により、配列番号４に係る蛋白質の発現量が上昇すれば、当該医薬組成物は当該患者の治療に対して治療効果を有する可能性があると考えることができる。
治療有効性の判断基準は、適用するヌクレオチドまたはヌクレオシドや患者、病気（例えば、腫瘍、感染ウイルス等）の種類、測定する蛋白質、測定手法等によって異なるが、ヌクレオチドまたはヌクレオシド投与により、蛋白質の発現量が投与前よりも１．５倍以上、好ましくは２．０倍以上に上昇すれは治療効果を有し得ると診断することができる。
ＩＶ．蛋白質の活性の測定
本発明に係る診断方法において、本発明に係る蛋白質の活性を測定する方法としては、公知の方法をそのまま応用することができる。当該活性としては、ヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ、ＲＮａｓｅ）活性、キナーゼ活性、蛋白質結合実験等を挙げることができる。具体的な当該活性測定方法としては、例えば、以下に示すヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ、ＲＮａｓｅ）の活性を測定する方法、キナーゼの活性を測定する方法を挙げることができる。
（１）ＤＮａｓｅ活性測定法例
基質：リン等の放射性同位元素で放射標識された細胞画分、同様な放射標識されたＤＮＡ、または同様な放射標識されたＤＮＡプラスミド
反応液：５０ｍＭ  ＭＥＳ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）または１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．８），３ｍＭ  ＣａＣｌ２，３ｍＭ  ＭｇＣｌ２，０．１ｍＭ  ＰＭＳＦ，１ｍＭメルカプトエタノール
上記基質、反応液に被験蛋白質を加え、３７℃で１０分〜６０分反応させる。２０，０００ｘｇで２０秒間遠心し、上清を取り除く。沈殿をＲＮａｓｅおよびプロテネースＫ処理し、アガロース電気泳動を行う。分解された放射標識ＤＮＡ量を指標に、ＤＮａｓｅ活性を測定することができる。
（２）ＲＮａｓｅ活性測定法例
基質：リン等の放射性同位元素で放射標識されたリボゾームＲＮＡ
反応液：１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４），３００ｍＭ  ＮａＣｌ，５ｍＭ  ＥＤＴＡ
上記基質、反応液に被験蛋白質を加え、３７℃で１０分〜６０分反応させる。グアジニウムチオシアネート法にて放射標識したリボゾームＲＮＡを抽出した後、アガロース電気泳動を行う。分解された放射標識ＲＮＡ量を指標に、ＲＮａｓｅ活性を測定することができる。
（３）キナーゼ活性測定法例
基質：ペプチド
反応液：２０〜５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４），５〜１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２，２５０〜５００μＭ［γ−３２Ｐ］ＡＴＰ，１５ｍＭメルカプトエタノール，０．１％Ｔｗｅｅｎ８０
上記基質、反応液に被験蛋白質を加え、３７℃で１０分〜６０分反応させる。基質ペプチドを抽出した後、放射標識されたペプチド量を指標にキナーゼ活性を測定することができる。
本発明方法の実施に際しては、ヌクレオチドまたはヌクレオシドを生体組織内または生体から採取した組織内に投与する前、及び投与後におけるヌクレアーゼ活性等を測定し、当該ヌクレオチドまたはヌクレオシドを投与することにより当該活性が上昇すれば、当該ヌクレオチドまたはヌクレオシドないしそれを含有する医薬組成物は、当該患者に対して治療効果があり得ると診断することができる。
本発明に係る蛋白質の中、どのような蛋白質の活性を測定するのが好ましいかについては、適用するヌクレオチドまたはヌクレオシドの種類や病気（例えば、腫瘍、感染ウイルス等）の種類、患者の状態等によって異なるが、ポリイノシン酸・ポリシチジル酸の二本鎖ＲＮＡとカチオン性リポソーム担体を含有する医薬組成物については、例えば、配列番号１〜４に係る蛋白質、好ましくは配列番号１、２、又は４に係る蛋白質の活性を測定するのが、治療効果の診断に有効である。当該組成物の投与により、配列番号１〜４に係る蛋白質の活性が上昇すれば、当該組成物は当該患者の治療に対して治療効果を有する可能性があると考えることができる。
有効性の判断基準は、適用するヌクレオチドまたはヌクレオシドや患者、病気（例えば、腫瘍、感染ウイルス等）の種類、測定する活性、測定手法等によって異なるが、ヌクレオチドまたはヌクレオシド投与により、蛋白質の活性が投与前よりも１．５倍以上、好ましくは２．０倍以上に上昇すれは治療効果を有し得ると診断することができる。
Ｖ．蛋白質に対する結合能の測定
本発明に係るスクリーニング法を実施する際の、本発明に係る蛋白質と被験薬物との結合能を調べる方法としては、例えば、適当な抗体を利用するウエストウエスタン法、免疫沈降法、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）という光学現象を測定原理とした自動解析装置ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標、ファルマシア  バイオテク社製）を用いて調べる方法を挙げることができる。これらの方法により被験薬物が本発明に係る蛋白質と結合することが判明すれば、当該被験薬物は、抗腫瘍剤または抗ウイルス剤となり得ることが期待できる。
抗腫瘍作用または抗ウイルス作用が既に知られている薬物についても、例えば上記と同様な方法により、本発明に係る蛋白質との結合能を調べ、結合することが判明すれば、該薬物は、生体内において少なくともポリイノシン酸・ポリシチジル酸と同様な作用メカニズムを有する可能性があると考えることができる。
以下の試験例では、本発明方法に係る蛋白質の検出・同定、並びに該蛋白質のｍＲＮＡの発現における核酸の影響について示す。なお、以下の実験では、核酸含有薬物として、ポリイノシン酸・ポリシチジル酸（以下、「ポリＩ・ポリＣ」という）の二本鎖ＲＮＡを用いた。ポリＩ・ポリＣは、ある種の癌細胞（例、ＨｅＬａＳ３，Ａ４３１）に有効であり、ある種の癌細胞（例、ＨｅＬａ，ＳＷ６２０）には有効でないことが知られている（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５９，ｐｐ．４３２５−４３３３（１９９９））。
試験例１  配列番号１〜３に係る蛋白質との結合能の検出
▲１▼クロンテック（ＣＬＯＮＴＥＣＨ）社製のヒトＨｅＬａ  ５’−ＳＴＲＥＴＣＨ  ＰＬＵＳ  ｃＤＮＡライブラリーを用い、シャーレにｃＤＮＡを含むファージをプレーティングし、各々の蛋白質を合成させた。
▲２▼合成された蛋白質をニトロセルロースメンブレンにトランスファーした。
▲３▼ニトロセルロースメンブレンに、［γ−３２Ｐ］ＡＴＰで放射標識したポリＩ・ポリＣ（鎖長１００〜５００ｂｐ）、を含む以下の溶液を加え、４２℃で５〜６時間ハイブリダイゼーションした。
＜試験溶液＞
１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．５
５０ｍＭ  ＮａＣｌ
１ｍＭ  ジチオスレイトール
１ｍＭ  ＥＤＴＡ
５％  グリセロール
１ｎｇ／ｍｌ〜１μｇ／ｍｌ［３２Ｐ］−ポリＩ・ポリＣ
▲４▼ニトロセルロースメンブレンを［３２Ｐ］−ポリＩ・ポリＣを含まない上記溶液で数回洗い、イメージングプレートで感光してポリＩ・ポリＣに結合した蛋白質を選別した。選別した蛋白質に対応するｃＤＮＡの塩基配列をシーケンサーで決定することにより、選別蛋白質を特定した。
その結果、対応するｃＤＮＡからポリＩ・ポリＣに結合した蛋白質が配列番号１〜３に係る蛋白質であることが判明した。
試験例２  配列番号４に係る蛋白質（ＩＳＧ２０）のｍＲＮＡ発現実験
▲１▼各々の癌細胞（ＨｅＬａ細胞、ＨｅＬａＳ３細胞、Ａ４３１細胞、ＳＷ６２０細胞）に、下記の試験複合体をポリＩ・ポリＣの濃度として１０−１００ｎｇ／ｍｌを添加した。
▲２▼ＨｅＬａおよびＨｅＬａＳ３細胞では薬物添加２、４時間後に、Ａ４３１細胞およびＳＷ６２０では０．５、１、２、４時間後に、総ＲＮＡをグアニジウムチオシアネート法で抽出した。
▲３▼抽出したＲＮＡをＲｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＲＴ−ＰＣＲ）法にて処理し、反応液をアガロース電気泳動した。図２および３中にある白矢印の方向のバンドがＩＳＧ２０のｍＲＮＡを表す。
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図２および図３から明らかなように、ポリＩ・ポリＣを含む当該複合体が有効である癌細胞（ＨｅＬａＳ３，Ａ４３１）ではＩＳＧ２０のｍＲＮＡ量が経時的に上昇した。一方、ポリＩ・ポリＣを含む当該複合体が有効でない癌細胞（ＨｅＬａ，ＳＷ６２０）ではＩＳＧ２０のｍＲＮＡは発現しなかった。この結果は、患者又は患者から得た組織標本に薬物を投与した後の、ＩＳＧ２０の発現の有無に基づいて、当該患者に対して当該薬物が治療薬として有効か否か診断することができることを示している。
産業上の利用可能性
本発明方法により、個々の患者に対する、核酸含有抗腫瘍剤または抗ウイルス剤による治療の有効性を予め診断することができるので、テーラーメード医療等を通して、より効果的に治療を行うことが可能である。また本発明により、抗腫瘍作用または抗ウイルス作用を有し得る薬物を見出すことができる。
【配列表】
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【図面の簡単な説明】
図１は、試験例１における配列番号１〜３の蛋白質を検出する方法を模式的に表した図面である。
図２は、ＨｅＬａＳ３癌細胞（左側）およびＨｅＬａ癌細胞（右側）にポリイノシン酸・ポリシチジル酸を含む複合体を添加した場合におけるＩＳＧ２０ｍＲＮＡの発現状態を示す電気泳動図である。上部数字は当該複合体投与後の時間（時間）を表す。右端のバンド群は、マーカーを表す。白矢印は、ＩＳＧ２０ｍＲＮＡの発現部位を示す。
図３は、Ａ４３１癌細胞（左側）およびＳＷ６２０癌細胞（右側）にポリイノシン酸・ポリシチジル酸を含む複合体を添加した場合におけるＩＳＧ２０ｍＲＮＡの発現状態を示す電気泳動図である。上部数字は当該複合体投与後の時間（時間）を表す。真中のバンド群は、マーカーを表す。白矢印は、ＩＳＧ２０ｍＲＮＡの発現部位を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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