(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式の化合物
0003798427.tif 000025
（式中、ｎは３乃至１２であり、かつｍは２または３である）。
【請求項２】
ｎが３乃至９である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
下記式の請求項１または２記載の化合物
0003798427.tif 000026
（式中、ｎは３乃至９である）。
【請求項４】
下記式の請求項１または２記載の化合物
0003798427.tif 000027
（式中、ｎは３乃至９である）。
【請求項５】
治療剤として使用するための請求項１乃至４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
製薬的に許容される担体またはアジュバントと共に請求項１乃至４のいずれかに記載の少なくとも１種の化合物からなる医薬組成物。
【請求項７】
さらに付加的に消炎作用を有する少なくとも１種の物質からなる請求項６記載の医薬組成物。
【請求項８】
炎症ならびにアレルギー症状の局所的および／または吸入的処置のための薬剤の製造のために請求項６記載の医薬組成物を使用する方法。
【請求項９】
炎症ならびにアレルギー性鎮痙症状の処置、ならびに乾癬、気管支喘息、動脈硬化および細胞増殖の不調を含む症状の処置のための薬剤の製造のために請求項１乃至４のいずれかに記載の化合物を使用する方法。
【請求項１０】
化粧品に許容される担体またはアジュバントと共に請求項１乃至４のいずれかに記載の化合物からなる化粧品組成物。
【請求項１１】
塩化チオニルの存在下で、式
0003798427.tif 000028
のアミノ酸を、式
0003798427.tif 000029
のアルコールと反応させて式（１）の化合物を生成させることを特徴とする方法であり、式（４）および（５）において、ｍは２または３であり、かつｎは３乃至１２である式（１）の化合物を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
本発明は新規なＤＬ−ヒドロキシフェニルアミノ酸エステル類、それら化合物の製造方法ならびにそれら化合物を含有する医薬組成物に関する。本発明はさらにそれら新規化合物を治療剤または化粧剤として使用する用法ならびにそれら化合物を炎症性およびアレルギー性症状を処置するための薬剤の製造のために使用する用法に関する。
炎症性ならびにアレルギー性症状の局所処置のために糖質コルチコイドを使用することは一般に行われていることである。これら化合物が好ましくない副作用を有することがあることも公知である。
ケトプロフェン、BW755c，ピロキシカム、ジクロフェナックまたはインドメサシンなどの治療剤を含有する非ステロイド性抗炎症薬は、それらの皮膚への浸透性が不十分であるので有効に局所的に適用することができず、もっぱら全身的に使用されている［たとえばジー．ビー．カスティング等、ファルマコール．スキン．第１巻、１３８〜１５３頁，カーガー，バーゼル、１９８７年（G.B. Kasting et al, Pharmacol. Skin., Vol.1,pp.138-153, Karger, Basel 1987）参照］。
本発明の目的は、特に局所的および／または吸入により投与された場合に、薬理学的に有用な特性、特に消炎、鎮痛、抗アレルギーおよび喘息抑制の特性を有する医薬組成物を提供することである。
驚くべきことながら、今回下記式の化合物が細胞の及び酵素のインビトロアッセイおよびインビボアッセイにおいて顕著な炎症抑制作用を示すことが見い出された。
0003798427.tif 000002
式中、
ｎは３乃至１２、及び
ｍは２または３である。
ｎが３乃至９である式（１）の化合物が特に興味あることが判明している。
とりわけ、下記式
0003798427.tif 000003
または下記式
0003798427.tif 000004
の化合物が非常に興味のある化合物である。上記式中、ｎは３乃至９である。
式（１）の化合物は炎症性症状およびアレルギー性鎮痙症状の処置ならびに乾癬、気管支喘息、動脈硬化症および細胞増殖の障害を含む症状の処置のために有用である。
本化合物の構造の１つの機能としてかつ全身的用量相関投与に関連して、式（１）の化合物はカラゲナンによってラットに誘発される足浮腫を抑制する（実施例１４参照）。
また、本化合物はクロトン油によって誘発されたマウスの耳の浮腫に対して局所的に使用された場合にも効果を示す（実施例１５参照）。
また、式（１）の化合物は鎮痛作用もある。たとえば、本化合物は酢酸のｉ．ｐ（＝intraperitoneal：腹腔内）投与によってマウスに誘発される苦痛反応を抑制する（実施例１６参照）。
式（１）の化合物がヒスタミン、アセチルコリンまたは塩化バリウムによって単離平滑筋器官（モルモットの回腸および気管）に誘発される収縮の非競合的抑制に効果があることを示すことができる。
インビトロアッセイにおいて、式（１）の化合物が炎症の重要なファクターである異なる複数のメディエーターの形成を抑制することが示されている。本化合物はＰＧＨシンターゼならびに５−および１５−リポキシゲナーゼの活性を低減する（実施例１７参照）。さらに、本化合物は過酸化水素の生成を抑制する（実施例１８参照）。
式（１）の化合物を含有する生薬製剤は特にエマルジョン、軟膏、ゲル、スプレー、粉末などを意味するものと理解されたい。また、式（１）の化合物はリポソームに含有させることあるいは常用担体と浸透促進剤たとえば尿素、プロピレングリコール、オレイン酸等［〔バーリー，ビー．ダブリュー．：シュルート，ビー．；シェーファー，エッチ．（編集者）（Barry,B.W. in:Schroot, B;Schaefer,H.(ed)）〕：ファルマコール．スキン．第１巻，１２１頁、カーガー，バーゼル，１９８７年（Pharmacol. Skin.,Vol. 1, pp. 121, Karger, Basel 1987）も参照されたい］を含む医薬組成物の形で使用することもできる。医薬組成物は通常式（１）の化合物を全混合物の０．０１乃至１５重量％、好ましくは０．１乃至５重量％の量で含有する。上記した症状の処置のためには、本発明の医薬組成物は式（１）の化合物のほかにさらに消炎作用を有する薬剤、たとえば、抗炎症剤、乾癬抑制剤、細胞増殖調整剤、抗アレルギー剤、腸管保護剤、喘息抑制剤などを含有することができる。
本発明は、また、化粧品に許容される担体またはアジュバンドと一緒に式（１）の化合物を含有する化粧品組成物にも関する。
式（１）の化合物は新規化合物である。それら化合物の製造方法も本発明の目的とするものである（実施例１と２）。その製造方法は塩化チオニルの存在下で下記式
0003798427.tif 000005
のアミノ酸を、下記式
(5)          HO-(CH2)n-CH3
のアルコールと反応させて式（１）の化合物を生成させる工程を包含する。
式（４）と（５）において、ｍは２または３、そしてｎは３乃至１２である。
反応時間は２乃至１０時間、好ましくは２．５乃至５時間である。反応温度は通常６０乃至８０℃であり、好ましくは７５乃至８０℃である。
塩化チオニルの存在下でのＤＬ−フェニルアミノ酸とアルコールとの一般的反応は〔ファルマジー，第４７巻，５５頁（１９９２年）（Pharmazie 47, 55(1992)）〕に記載されている。
以下の実施例は本発明を説明するものであり、本発明は以下の記載によって限定されるものではない。別途記載のない限り、実施例中のパーセントは重量パーセントである。
Ａ．新規化合物の製造
実施例１ ＤＬ−３、４−ジヒドロキシフェニルグリシンオクチルエステル塩酸塩の製造
ＤＬ−３、４−ジヒドロキシフェニルグリシン９．１６ｇ（０．０５モル）とｎ−オクチルアルコール９７．７（０．７５モル）との懸濁物に、撹拌しながら塩化チオニル９．５２ｇ（０．０８モル）を滴下添加した。この混合物を３時間８０℃に加熱し、そのあと冷却した。塩化チオニルをさらに３．５７ｇ（０．０３モル）を添加し、そしてこの反応混合物を再度８０℃に１時間加熱した。溶剤を真空蒸発し、そして精製のため残留物を(NH4)2CO3の飽和溶液１５０mlに吸収させ、ジエチルエーテル各１００mlで２回抽出した。エーテル抽出物を１つに集めて硫酸ナトリウムで乾燥してから濾過した。このあと、濾液に乾燥ＨＣｌを通じた。沈殿物を濾過単離しそしてｎ−プロパノール／ジエチルエーテル混合物から再結晶した。下記式の化合物４．１５ｇ（収率：理論値の２５％）を得た。
0003798427.tif 000006
0003798427.tif 000007
実施例２
実施例１の操作を繰り返した。ただし、ＤＬ−３、４−ジヒドロキシフェニルグリシン０．０５モルの代わりにＤＬ−３、４、５−トリヒドロキシフェニルグリシン０．０５モルを使用した。
下記式の化合物６．４４ｇ（収率：理論値の３７％）を得た。
0003798427.tif 000008
実施例３−５
実施例１の操作を繰り返した。ただし、ｎ−オクチルアルコール０．７５モルの代わりに下記のアルコールを使用した：
ｎ−ノニルアルコール（実施例３）、
ｎ−デシルアルコール（実施例４）、
ｎ−ドデシルアルコール（実施例５）。
下記式（１０３）−（１０６）の化合物を得た：
0003798427.tif 000009
Ｂ．医薬組成物ならびに化粧品組成物の製造
実施例６
式（１０２）の化合物２％を含有する軟膏を以下の処方により製造した：
0003798427.tif 000010
脂肪物質と乳化剤とを一緒に溶融し、そしてこの中に活性成分を溶解した。水に保存剤を溶解し、この溶液を高められた温度で溶融物内に乳化してエマルジョンを製造した。このエマルジョンを冷却するまで撹拌した。
実施例７
式（１０１）の化合物１％を含有するクリームを下記処方により製造した：
0003798427.tif 000011
脱イオン水と１、２−プロピレングリコールとの混合物の中にアクリル酸ポリマーを懸濁した。撹拌しながら、トリエタノールアミンを添加して粘液を形成した。イソプロピルパルミテート、セチルパルミテート、シリコーン油、ソルビタンモノステアレート、及びポリソルベートの混合物を約７５℃まで加熱し、そしてこの中に活性成分を溶解した。この脂肪層を撹拌して粘液とし、それを再度約７５℃まで加熱した。このバッチを冷えるまで撹拌した。
実施例８
式（１０２）の化合物０．５％を含有するクリームを下記処方により製造した：
0003798427.tif 000012
セチルアルコール、セチルパルミテート、トリグリセリド混合物、ステアリン酸、グリセロールステアレートを一緒に溶融し、そしてこの中に活性成分を溶解した。少量の水に微結晶セルロースを分散させた。水の残分とプロピレングリコールの中にセトマクロゴール（Cetomacrogol）を溶解し、そしてこれに上記粘液を混合した。このあと、脂肪層を水性層に撹拌導入し、冷えるまで撹拌した。
この製剤は加湿皮膚保護クリームとしての使用に適する。
実施例９
式（１０２）の化合物０．２％を含有する透明ヒドロゲルを下記処方により製造した：
0003798427.tif 000013
ヒドロキシプロピルメチルセルロースを水に膨潤させた。イソプロパノール及びプロピレングリコールの混合物に活性成分を溶解した。ついで、この活性成分溶液を上記膨潤させたセルロース誘導体と混合し、そして、所望の場合は、香料を添加する（約０．１％）。
この製剤は加湿スキンゲルとしての使用に適する。
実施例１０
式（１０２）の化合物０．０２％を含有する透明ヒドロゲルを下記処方により製造した：
0003798427.tif 000014
アクリル酸ポリマーを水に分散させ、そしてこの分散物をトリエタノールアミンで中和した。イソプロパノール及びプロピレングリコールの混合物に活性成分を溶解した。次いでこの活性成分溶液をゲルと混合し、そして、所望の場合は、香油を添加する（０．１％）。
実施例１１
式（１０２）の化合物１％を含有する泡沫スプレーを下記の処方により製造した：
0003798427.tif 000015
セチルアルコール、パラフィン油、イソプロピルミリステート、セトマクロゴール（Cetomacrogol）およびソルビタンステアレートを一緒に溶融し、そしてこの中に活性成分を溶解した、メチルパラベン及びプロピルパラベンをプロピレングリコールに溶解し、そしてこの溶液を湯水に加えた。その後溶融物と溶液を混合した。冷却後、ケモデルム（Chemoderm）を添加し、そして、所望の場合は、香油（０．１％）を添加する．この調合物を水で最終重量まで増量した。
充填
上記混合物をアルミ製ディスペンサーに充填する。次いで、ディスペンサーにノズルを取り付けそして加圧下で推進剤ガスを導入する。
実施例１２
式（１０１）の化合物０．０１％を含有する目薬軟膏を下記処方により製造した：
0003798427.tif 000016
上記成分を一緒に溶融して、無菌条件のもとで濾過した。
実施例１３
式（１０２）の化合物０．０２５％を含有する吸入のために適当なカプセルを下記処方により製造した：
0003798427.tif 000017
活性成分と微細ラクトースとをよく混合した。この粉末をふるいにかけ、そして０．０５ｇずつゼラチンカプセルに入れた。
Ｃ．使用例
実施例１４ 全身的適用後のカラゲナン浮腫に対する作用
実施例１及び２で製造したＤＬ−フェニルアミノ酸エステルを、メスとオスのウィスターラット（１００乃至１５０ｇ，１グループにつき８匹）を使用して作用効果について動物実験を行った。浮腫はラットの両後足にカラゲナン（ビスカリン（商標）（viscarin））の１％溶液０．１mlを足裏注射することによって誘発した。式（１０１）及び（１０２）の化合物を同時的腹腔内注射によって投与した。浮腫誘発前および誘発３時間後において足の直径を測定した。足の腫れの抑制率を対照グループと比較して測定した。下記ＥＤ50値（ＥＤ＝有効用量（effective dose））が回帰直線から得られた（表１）。
0003798427.tif 000018
実施例１５ 浮腫抑制作用
実施例１及び２で製造した式（１０１）と（１０２）の新規化合物の浮腫抑制作用を判定する動物実験を、オスＡＢマウス（１８乃至２２ｇ，１グループにつき９匹）を使用して行った。マウスの耳にクロトン油（アセトン中１％）２ｘ１０μｌを塗ることによって耳浮腫を誘発した。１時間後に新規化合物を投与した（各化合物の５％エタノール溶液２ｘ１０μｌ）。さらに５時間後（浮腫誘発後６時間目）に実験動物を殺し、直径８ｍｍの耳組織片を採取した。浮腫の重量を対側耳との差として測定した。パーセント抑制率を対照動物との比較から計算した（表２）。
0003798427.tif 000019
実施例１６ 苦痛症候群に対する作用
式（１０１）及び（１０２）の新規化合物の苦痛症候群に対する活性試験を、メスＣＢＡマウス（約２０ｇ，１グループにつき９匹）を使用して行った。苦痛反応は、１％酢酸０．１ml／１０ｇを腹腔内に注射して誘発し、そして注射後２０分間にわたって記録した。式（１０１）及び（１０２）の化合物は苦痛反応誘発３０分前に５ｘ１０-5モルの薬量で投与し、そして反応数のパーセント抑制率を測定した（表３）。
0003798427.tif 000020
実施例１７ アラキドン酸代謝の阻害
プロスタグランジンHシンターゼを羊の精嚢から調製し（エフ．エス．ファンデア  オーデラ，エム．バイテンヘーク；メソッド  エンザイモール．第８６巻，６０〜６８頁（１９８２年）（F. S. Van der Ouderra, M. Buytenhek:Methods Enzymol. 86, 60-68(1982)），１５−リポキシゲナーゼを兎の網赤血球から調製した（ティー．シュヴェー，アール．ウィスナー，エス．エム．ラポポルト；メソッド  エンザイモール．第７１巻，４３０〜４４１頁（１９８１年）（T. Schewe, R. Wiesner, S. M. Rapoport;Methods Enzymol. 71. 430-441(1991)））。両方の酵素活性を２５℃の温度でオキシグラフにより測定した。
プロスタグランジンＨシンターゼの活性は、ＥＤＴＡ−Ｎa ０．１マイクロモル／リットルおよびフェノール０．５マイクロモルとを含有するpH８．０の０．１モル  トリス−ＨＣl中で、基質として３０マイクロモル／リットルのアラキドン酸を含むミクロゾーム酵素製剤を使用して測定した（シーエッチ．シュヴェー，ピー．ルードヴィッヒ，エッチ．ジー．ホルツヒュッター，ティー．シュヴェー：ファルマジー，第４６巻，８０４〜８０９頁（１９９１年）
0003798427.tif 000021
１５−リポキシゲナーゼの活性は、pH７．４の０．１モルリン酸塩緩衝液中基質としてのリノール酸カリウム２６５マイクロモル／リットルおよび０．２％コラン酸ナトリウムを使用して測定した（ティー．シュヴェー，エッチ．キューン，エス．エム．ラポポルト，プロスタグランジン及び関連基質−プラクティカルアプローチ，２２９〜２４２頁、シー．ベネデット，アール．ジー．マクドナルド−ギブソン，エス．ニガム．，ティー．エフ．スラッター（編集者）；アイアールエル  プレス，オックスフォード，ワシントン（１９８７年）
0003798427.tif 000022
これらの化合物を２−メトキシエタノールに溶解し、酵素製剤を加えて５分間予備培養し、そして基質を添加して反応を開始させた。
１−14Ｃ−アラキドン酸（１０マイクロモル／リットル）を使用して、本化合物のヒト多形核白血球の５−リポキシゲナーゼによる５−ＨＥＴＥの生成に対する作用を測定した。測定は薄層クロマトグラフィー分離後に反応生成物の放射能分布を調べることによって行った（表４）（シーエッチ．シュヴェー，イー．シュルツ，ジー．ビーティングホフ，ダブリュ．−ディー．シュプラング，エム．コーボー，エス．ルーズ，ティー．シュヴェー；バイオメド．バイオキム．アクタ，第５０巻，１８９〜１９８頁（１９９１年）（CH.Schewe, E. Schulz, G.Vietinghoff、W.-D. Sprung, M. Kobow, S. Loose, T. Schewe:Biomed. Biochim. Acta 50 ,189-198(1991)））。
0003798427.tif 000023
実施例１８ 過酸化水素生成の阻害
式（１０１）及び（１０２）の新規化合物のネプソネーティッド  ザイモサン（opsonated zymosan）によって誘発した過酸化水素の生成に対する作用を、ラットのカゼイン刺激腹腔顆粒白血球（５×１０6セル／ml）を使用して測定した。このアッセイにおいては、H2O2によって起こされたフェノールレッドの酸化を６１０nmの吸収から測定した（イー．ピック，ワイ．ケイサリ；ジェー．イミノール．メソ．第３８巻，１６１〜１７０頁（１９８０年）（E. Pick. Y. Keisari:J.Immunol. Meth. 38, 161-170(1980)））。３０分間の培養時間後、過酸化水素の生成のパーセント阻害率およびＩＣ50を回帰直線によって計算した（表５）。
0003798427.tif 000024