(57)【要約】患者における血管新生能の検査手段として、患者の血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）又は塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ：ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）、及びエンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）の血中濃度を同時に測定することを特徴とする血管新生能の検査手段。【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者における血管新生能の検査手段として、患者の血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）又は塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ：ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）、及びエンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）の血中濃度を同時に測定することを特徴とする血管新生能の検査手段。
【請求項２】
患者の血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）を測定することを特徴とする癌の休眠状態であることを判断する検査手段。
【請求項３】
血管新生阻害剤及び／又は制癌剤と患者との適合性の検定を、請求の範囲１又は２に記載の検査手段によっておこなう該剤の有効性の検定又は判定手段。
【請求項４】
請求の範囲１又は２の測定をすることによって行う新規血管新生阻害剤のスクリーニング方法。
【請求項５】
請求の範囲１及び／又は請求の範囲２に記載の検査手段、及び／又は請求の範囲３に記載の検定手段を履行する機構と、検査結果を判定する機構と、判定をもとに治療手技を施す機構が、三位一体として癌治療を行う医療ビジネスシステム。
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、癌治療における非侵襲的治療手段の最適の手技を提供することにある。詳しくは、本件発明者が確立した新免疫治療法〔インターロイキン１２（ＩＬ−１２）の誘導、ナチュラルキラーＴ細胞（ＮＫＴ細胞）の活性化、及び血管新生阻害を指標にした生物学的応答調節剤（ＢＲＭ：ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｍｏｄｉｆｉｅｒｓ）による癌治療〕における血管新生阻害に着目した治療手段を提供することである。
従来の技術
癌の予防又は治療のために有用な物質の選別は、従来、癌細胞へのその直接的作用が重要視されていた。免疫賦活剤が癌治療に有用であることは認められていたが、免疫賦活剤として得られた化合物はいずれもその抗癌効果が微弱であり、免疫療法単独又は化学療法との併用治療によっても癌の十分な治療効果は達成されていない。
本発明者の医学博士八木田は、先に癌治療における画期的な手法として、インターロイキン１２（ＩＬ−１２）を生体内で誘発する物質の有用性に着目し、ＡＨＣＣがその機能を有することを発見し、新免疫療法ともいうべき癌治療法を確立した。従来ＩＬ−１２自体は、抗癌効果があるものの生体内にＩＬ−１２自体を直接投与した場合には副作用を生じ患者が治療に耐えられないという事実があり、抗癌剤として使用できなかった。しかし、八木田が報告したＡＨＣＣを含む製剤は、癌の治療において著しい治癒・延命効果を達成した。つまり八木田は、ＩＬ−１２を生体内で誘発できる有効量のＡＨＣＣを投与することにより、癌の治療目的を達成した（特開平１０−１３９６７０号公報）。
更に、一部の癌患者においては、ＡＨＣＣ投与によってもＩＬ−１２の産生が十分に誘発されず、治療効果が得られないこと、またＩＬ−１２の産生が誘発されても治療効果が得られないことがある。そのため、八木田はＡＨＣＣの有する抗癌効果とは別な機序で作用する新たな癌治療剤の開発を目指し、ＩＬ−Ｘ（椎茸２、スエヒロ茸２、霊芝１の比率で配合された菌糸体由来物）（特許出願中）、及びＮＫＴ細胞活性化剤（特許出願中）の開発に成功した。
また、八木田は、血管新生阻害剤としてサメ軟骨の有用性に着目し、その最適の製剤化を達成し（特許第３１０３５１３号）、１９９６年来癌患者への経口摂取（ベターシャークＭＣ／ＯＣ：株式会社　セイシン企業）により、ＩＬ−１２誘導剤との併用で、顕著な癌治療効果を達成した。固形癌にみられる血管新生は癌細胞を急速に増殖させ、また転移を引き起こし、癌が宿主に引き起こす症状が悪化する原因となる。近年、種々の研究から腫瘍細胞が血管新生を誘起する物質を産生しているとの知見が得られている。これまでに血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）、塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ：ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）等の多くの血管新生促進因子、及びエンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）等の血管新生抑制因子が報告されている。　なかでもＶＥＧＦ（血管内皮細胞増生因子）は血管新生が強力で、かつ血管透過性作用すなわち患者の予後を決定付ける胸水や腹水の産生を促すことから重要視されている。
発明の開示
本発明が解決しようとする課題は、前記新免疫療法における血管新生阻害剤による治療において、血管新生阻害因子と血管新生促進因子との生体内動態関係を解明し、血管新生阻害剤による癌治療のより確実な手段を提供することにある。さらに本発明の別の課題は、血管内皮細胞増殖因子と癌の状態の関係を解明する点にある。
上述の課題を解決するために、本発明者は前記新免疫療法を処置中の症例において、免疫学的測定と、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）、塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ：ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）、エンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）の血中動態の測定を行い、その治療効果との関係を分析することにより、本発明を完成させた。
つまり、本発明は、
１．患者における血管新生能の検査手段として、患者の血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）又は塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ：ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）、及びエンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）の血中濃度を同時に測定することを特徴とする血管新生能の検査手段、
２．患者の血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）を測定することを特徴とする癌の休眠状態であることを判断する検査手段。
３．血管新生阻害剤及び／又は制癌剤と患者との適合性の検定を、前項１又は２に記載の検査手段によっておこなう該剤の有効性の検定又は判定手段。
４．前項１又は２の測定をすることによって行う新規血管新生阻害剤のスクリーニング方法。
５．前項１及び／又は前項２に記載の検査手段、及び／又は請求項３に記載の検定手段を履行する機構と、検査結果を判定する機構と、判定をもとに治療手技を施す機構が、三位一体として癌治療を行う医療ビジネスシステム。
からなる。
発明の実施するための最良の形態
以下に本発明を詳述する。
医学博士八木田旭邦の実践する新免疫療法の概要は以下である。その柱は、ＩＬ−１２の誘導、ＮＫＴ細胞の活性化、及び血管新生阻害をマーカーにした生物学的応答調節剤（ＢＲＭ製剤）による免疫学的癌治療である。１）血管新生阻害剤としては、サメ軟骨製剤（特許第３１０３５１３号）であるベターシャークＭＣあるいはＬＯ（株式会社　セイシン企業）を２０ｇ／日、２）ＩＬ−１２誘導法としては、ａ）Ｔｈ１の患者にＩＬ−Ｘ（有限会社　東西医薬研究所）を３〜２０、好ましくは６．０ｇ／日（ＡＨＣＣ６．０ｇ／日：現在は使用中止）、ｂ）Ｔｈ２の患者にＰＳＫ（三共）１〜２０、好ましくは３．０ｇ／日又は隔日、３）ＮＫＴ細胞の活性化法としてはＮＫＲ−Ｐ１の刺激を施している。
第１の柱である血管新生阻害剤としてはさまざまな基礎的検討から、有効性、安全性、手軽さ、そして経済性などの点で最もすぐれたサメ軟骨を選択しかつ改良を加えてベターシャークＭＣあるいはＬＯを開発した。現時点では１日２０ｇを２〜３分割して空腹時に経口投与している。
第２の柱であるＩＬ−１２誘起物質としてはＴｈ１系免疫応答が主に機能しているマウスあるいはヒトに作用するＩＬ−Ｘ（従来はＡＨＣＣ）を、早期癌や術後症例には例えば約３ｇ／日で、進行癌に対しては例えば約６ｇ／日で経口投与している。ＩＬ−Ｘ投与とＡＨＣＣ投与における経時的なＩＬ−１２産生能力を比較した結果によると、無治療の担癌マウス（Ｂ１０）では７日目をピークに１０日目までにＩＬ−１２非産生となる。一方、ＡＨＣＣ（１ｇ／Ｋｇ／日）投与マウスでは、腫瘍（ＬＬＣａ）移植後７日目でＩＬ−１２産生能力はピークとなり、１０日目で著しく低下し、１４日目では著減している。ＩＬ−Ｘ（椎茸２、スエヒロ茸　２、霊芝　１の比率で配合された菌糸体成分からなり、Ｔｈ１系免疫応答が主に機能している患者の各種茸菌糸体加工物に対する感受性の差をもとに合理的に配合されているものである）（１ｇ／Ｋｇ／日）は、７日目、１０日目、１４日目でもＩＬ−１２産生能力が維持されている。
また、進行癌、末期癌やＴｈ２系のマウスやヒトにも反応するクレスチンを例えば約３ｇ／日あるいは隔日で投与した。これらを基本とし、各種天然型の総合ビタミンとウルソ（３００ｍｇあるいは６００ｍｇ／日）、活性ビタミンＤ３（１．０μｇ／日）を併用投与している。また、必要に応じて、ＰＳＫやＯＫ４３２あるいはＢＣＧ生ワクチンも加えている。
第３の柱であるＮＫＴ細胞については、上記２つの柱の治療を施行した症例の中で、ＩＬ−１２が産生されていないにもかかわらず完全治癒（ＣＲ：Ｃｏｍｐｌｅｔｅ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ）あるいは部分治癒（ＰＲ：Ｐａｒｔｉａｌ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ）と認められる症例が、ＩＬ−１２が産生されかつ治療が有効な症例と同じ割合で認められた。そこで、ＮＫＴ細胞がこの新免疫療法（ＮＩＴＣ）で活性化されているかどうかを検討するために、ＮＫＴ細胞のＴ細胞受容体Ｖα２４Ｖβ１１とＮＫ細胞受容体ＮＫＲ−Ｐ１（ＣＤ３×ＣＤ１６１）について検討した。その結果、ニゲロ糖、オリゴ糖等のα１−３構造をもつ糖類によって活性化されるＮＫＲ−Ｐ１受容体がＩＦＮγやＩＬ−１２と正の相関を示し、糖脂質で活性化されるＶα２４Ｖβ１１は負の相関を示した。また、ＣＲ及びＰＲ症例で、ＮＫＲ−Ｐ１と高い相関を示した。すなわちＮＩＴＣ療法が有効性を示す症例で細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ：ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　Ｔ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ）ともう一つのＮＫＴ細胞とがエフェクター細胞として働いている可能性が示唆された。
以下に上記のような新免疫療法（ＮＩＴＣ）を施した患者における血管新生阻害因子と血管新生促進因子の患者血中動態を検討した結果を説明する。
新免疫療法（ＮＩＴＣ）を施行している外来症例の２９例について、無作為に免疫学的測定と血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）と塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ：ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）及び血管新生阻害因子エンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）を酵素免疫固相法（ＥＬＩＳＡ：ｅｎｚｙｍｅ　ｌｉｎｋｅｄ　ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ　ａｓｓａｙ）（ＡＣＣＵＣＹＴＥ　Ｈｕｍａｎ　ＶＥＧＦ，ＡＣＣＵＣＹＴＥ　Ｈｕｍａｎ　ｂＦＧＦ，ＡＣＣＵＣＹＴＥ　Ｈｕｍａｎ　Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ：ＣＹＴＩＭＭＵＮＥ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　Ｉｎｃ．）で測定した。
症例は表１に示した如く完全治癒（ＣＲ）６例、部分治癒（ＰＲ）９例、変化無し（ＮＣ：ｎｏ　ｃｈａｎｇｅ）１１例〔このうち７例は６ヶ月以上腫瘍細胞増殖無しを意味する長期ＮＣ（ｌｏｎｇ　ｔｅｒｍ　ＮＣ／Ｌｏｎｇ　ＮＣ）群であり、残りの４例は６ヶ月未満腫瘍細胞増殖無しを意味する短期ＮＣ（ｓｈｏｒｔ　ｔｅｒｍ　ＮＣ／Ｓｈｏｒｔ　ＮＣ）群である〕、無効（ＰＤ：Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ　Ｄｉｓｅａｓｅ）３例の合計２９症例であった。ＣＲとＰＲとの合計が１５／２９（５１．７％）と半数の奏効率が得られた。しかも最も注目されるのはＮＣの１１例（３７．９％）と少なくないことであった。このうちｌｏｎｇ　ｔｅｒｍ　ＮＣが７例と多く、平均生存月数が１３．４３ヶ月と腫瘍静止（ｔｕｍｏｒ　ｄｏｒｍａｎｃｙ）の状態にある。最近ｌｏｎｇ　ｔｅｒｍ　ＮＣも奏効率に加えるべきだとの提唱もあるが、そうすると７５．９％の奏効率と考えられる（表１）。
【表１】
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（新免疫療法（ＮＩＴＣ）におけるＶＥＧＦ及びｂＦＧＦの血中動態）
血管新生促進因子のＶＥＧＦとｂＦＧＦの血清中濃度を図１に示した。治療前症例のＶＥＧＦ濃度に比較し、ＣＲ症例のそれは有意に低下していた。そして、ＮＣのなかでもｌｏｎｇ　ｔｅｒｍ　ＮＣでＶＥＧＦ濃度が低下傾向にあった。ここで注目されるのは、ｂＦＧＦ濃度及びＶＥＧＦ濃度においても、ＮＣの中でｌｏｎｇ　ｔｅｒｍ　ＮＣとｓｈｏｒｔ　ｔｅｒｍ　ＮＣとの差は血管新生促進因子がいかに抑制されているかによって決定されるのかもしれない。すなわち腫瘍がｄｏｒｍａｎｃｙの状態にあるか否かは、血管新生促進因子が抑制されているかどうかにかかっている可能性が示唆される。また同様に、ＣＲとＰＲとの差においても、血管新生促進因子がいかに抑制されているかによる可能性が示唆された。また、血管新生促進因子であるｂＦＧＦにおいても同様の傾向が認められた。従って、患者血清中の血管新生促進因子を測定することにより、患者の血管新生能の検査、さらには癌治療効果の検定を行うことができる。
（新免疫療法（ＮＩＴＣ）におけるＶＥＧＦの血中動態）
図７にＮＩＴＣ施行例においてＶＥＧＦを測定した結果を示した。治療前１９７例の平均４４２ｐｇ／ｍｌに比較し、ＮＣ（７７例）２９１ｐｇ／ｍｌと低下（ｐ＜０．００１）、ＰＲ（５５例）２９４．３ｐｇ／ｍｌと有意に低下（ｐ＜０．０１）、またＣＲ（４８例）２５１．８ｐｇ／ｍｌと有意に低下（ｐ＜０．０１）していた。また、ＰＤ６５例（５１６．８ｐｇ／ｍｌ）と比較しても、ＮＣ、ＰＲ、およびＣＲとで有意に低下していた。かくして、ＶＥＧＦの測定はＰＲ、ＣＲのみならずＮＣの休眠状態などにおける重要な評価方法と考えられる。
なお、サンプルは、採血後３０分以内に血清分離し、凍結保存し、用事測定した。ＶＥＧＦの測定法はＥＬＩＳＡ法（キット名：Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ　ｈｕｍａｎ　ＶＥＧＦ、Ｒ＆Ｄ　Ｓｙｓｔｅｍｓ社）によった。
（新免疫療法（ＮＩＴＣ）におけるエンドスタチンの血中動態）
エンドスタチンはアンジオスタチンと同様な考え方、すなわち腫瘍から産生されている血管新生阻害物としてマウスのヘマンジオエンドエリオーマから分離されたものである。分子量２０ＫＤａのタンパクで、アミノ酸の解析からＸＶＩＩＩ型コラーゲンのＣ末端側フラグメントである。治療前の１２例のエンドスタチン産生量と、ＮＩＴＣにおけるＣＲ６例のそれではＣＲが有意に低値を示した（ｐ＜０．０１）。また、ＰＤ症例とでは、有意差が認められた（ｐ＜０．０５）。血管新生促進因子のｂＦＧＦやＶＥＧＦもＣＲになると低下する傾向が認められ、サメ軟骨の作用として考えた場合に合目的である。しかし、同時にエンドスタチンの産生量も低下していることは興味深い（図１）。更にサメ軟骨の有効性あるいは免疫療法の有用性を判定する場合は、エンドスタチンの産生量の低下でもって判定すべきと考えられる。更に好ましくは血管新生促進因子のＶＥＧＦとエンドスタチンとの両者の低下でもって判定した方がより確実であると思料される。また、ＶＥＧＦの代わりにｂＦＧＦと、エンドスタチンとを測定することにより判定を行っても良い。
（ＶＥＧＦとエンドスタチンとの相関）
ＶＥＧＦとエンドスタチンとの相関を治療前の１２例、治療中の２９例及びＮＩＴＣにおけるＣＲとＰＲが認められた奏効例１５例で検討した（図２）。治療する経過のなかで、更にＮＩＴＣの有効性が増すに従って、エンドスタチンに比較してＶＥＧＦの産生量が低下していることが分かる。
ＮＩＴＣ施行例でＶＥＧＦ／エンドスタチンの比率で検討すると（図３）、治療後と治療前とでは前者が有意にその数値を下げていた。また、有効例（ＣＲ，ＰＲ，ＬｏｎｇＮＣ）においてその比率の数値をより下げていた。このことはＮＩＴＣ治療法によりＶＥＧＦのほうがエンドスタチンよりもより早期にかつ大量に減少することを示唆した。よって、このＶＥＧＦ／エンドスタチンの比率を検討することは、血管新生阻害の状況をより正確に把握できるものと考えられる。
（ＩＬ−１２とＶＥＧＦとの相関）
新免疫療法（ＮＩＴＣ）の施行例においてＩＬ−１２とＶＥＧＦとの相関を検討した（図４）。ＩＬ−１２はＩＦＮγの存在下に血管新生阻害作用も示すことが見出されている。治療前の１２例では正の相関の傾向が認められるが、治療後では負の相関の傾向を示した。すなわちこの事実から、腫瘍の縮小は、ＩＬ−１２が血管新生阻害的に作用した結果なのか、免疫学的抗腫瘍作用を発揮した結果なのかは不明であるが、何れにしろＩＬ−１２が抗腫瘍作用を示した結果と推察される。
（ＩＬ−１２とエンドスタチンとの相関）
ＮＩＴＣ施行例においてＩＬ−１２とエンドスタチンとの相関を治療前と治療後の症例で検討した。治療前では逆相関を示したが、治療後では正の相関の傾向を示した（図５）。この事実は新免疫療法（ＮＩＴＣ）の履行により、ＩＬ−１２もエンドスタチンも抗腫瘍性という点で有効に働いている可能性を示唆している。
（ＩＦＮγとＶＥＧＦとの相関）
新免疫療法（ＮＩＴＣ）を施行した症例においてＩＦＮγとＶＥＧＦとの相関を検討した。ＩＬ−１２との相関にも認められたように、治療前に比較して治療中の症例でもＩＦＮγとＶＥＧＦとの相関は逆相関を示した（図６）。この事から、ＩＬ−１２とＩＦＮγとが共同で血管新生抑制に作用すると同時に、ＣＴＬ及びＮＫＴ細胞が協調的に抗腫瘍作用を発揮しているものと考察された。
（新免疫療法（ＮＩＴＣ）に使用される物質の詳細）
新免疫療法（ＮＩＴＣ）で使用されるＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞の活性化能を有する癌の治療剤は、茸菌糸体加工物から選ばれる少なくとも一を活性成分とする。その具体例の一としては、ＳＰＧ（ｓｉｚｏｆｉｒａｎ：科研製薬）（スエヒロ茸菌糸体培養ロ液から得られる多糖体）、ＳＣＰ（スエヒロ茸菌糸体加工物の経口製剤）（有限会社　東西医薬研究所）等のスエヒロ茸（学名：Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ　Ｃｏｍｍｕｎｅ　Ｆｒｉｅｓ）菌糸体由来物、ＰＳＫ（クレスチン）等のカワラ茸菌子体加工物、ＡＨＣＣやＬＥＭ（野田食菌工業株式会社）等の椎茸菌子体加工物が有効である。スエヒロ茸菌糸体培養ロ液由来多糖体のＳＰＧ（ｓｉｚｏｆｉｒａｎ：科研製薬）は、一部限定された癌に対して制癌剤として使用されている（台糖株式会社、科研製薬株式会社）。ＰＳＫ（クレスチン）も同様である。
ＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞を活性化する能力を有する物質は、α−１，３及び／又はα−１，４グルコシド結合構造、特に好ましくは少なくともα−１，３グルコシド結合構造をもつ糖成分である。そしてＮＫＴ細胞の活性化能を有する物質は、この構造をもった多糖類及び／又は２〜１０個のオリゴ糖を含む物質であってもよい。
ＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞の活性化能を有するα１→３立体構造の糖類物質であるその他の物質は、ニゲロオリゴ糖（３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類）（例示商品：ニゲロオリゴ糖液糖／販売者　武田食品工業株式会社／含有する主なニゲロオリゴ糖：▲１▼ニゲロース　α−Ｄ−Ｇｌｃｐ−（１→３）−Ｄ−Ｇｌｃ　▲２▼ニゲロシルグルコース　α−Ｄ−Ｇｌｃｐ−（１→３）−α−Ｄ−Ｇｌｃｐ−（１→４）−Ｄ−Ｇｌｃ　▲３▼ニゲロシルマルトース　α−Ｄ−Ｇｌｃｐ−（１→３）−α−Ｄ−Ｇｌｃｐ−（１→４）−α−Ｄ−Ｇｌｃｐ−（１→４）−Ｄ−Ｇｌｃなお、Ｇｌｃはグルコース、ｐ（イタリック）はピラノースの略号である）、フコイダン（例示物質　沖縄もずく由来フコイダン（式１）
【式１】
2002031497.tif 000003
ガゴメコンブ由来Ｆ−フコイダン／硫酸化フカン：フコースだけからなる糖（式２）
【式２】
2002031497.tif 000004
、ガゴメコンブ由来Ｇ−フコイダン／硫酸化フコガラクタン：ガラクトースとフコースから成る糖（式３）
【式３】
2002031497.tif 000005
、ガゴメコンブ由来Ｕ−フコイダン／硫酸化フコグルクロンマンナン：グルクロン酸とマンノースとフュースからなる糖（式４）
【式４】
2002031497.tif 000006
）（フコイダンとは硫酸化フコース含有多糖類で、たてばコンブを破砕し、チップ化し、水溶液成分を抽出した後、抽出残渣を遠心分離により除去し、ヨードや塩化ナトリウム等の低分子物質を限外ろ過により除去して凍結乾燥化して製剤化される。販売者　宝酒造株式会社）、硫酸オリゴ糖（例えば販売会社／株式会社白子：スサビ海苔由来の抽出物で主成分はα１→３結合のガラクタン硫酸のオリゴ糖とα１→３結合およびβ１→４結合よりなるガラクタン硫酸のオリゴ糖）等から選ばれる少なくとも一を活性成分とする。
なお、化合物はこれらに限定されず、α１→３立体構造の糖類物質（α１→３グルコシド結合構造をもつ糖成分）であって、しかもＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞の活性化能を有する物質を広く対象とする。
これら組成物の投与量は、１日あたり、１〜２０００ｍｇ／Ｋｇ体重程度であり、１０日〜１２ヶ月、１〜数回／日で、好適には経口摂取される。無論、投与量を減少させ、癌の治療剤を非経口にたえうる品質に調製することで、非経口摂取も可能である。
新免疫療法（ＮＩＴＣ）で使用される茸菌糸体由来物を含む配合組成物の例示としては、ＳＣＰ等のスエヒロ茸菌糸体加工物又はＳＰＧ等のスエヒロ茸菌糸体培養ロ液由来多糖体、ＡＨＣＣやＬＥＭ等の椎茸菌糸体加工物、ＭＡＫ（野田食菌工業株式会社）やＳＭ等の万年茸菌糸体加工物から選ばれる少なくとも２種を配合する。これらのほとんどはこれまでにも免疫賦活剤として抗癌効果を目的として使用されたことは広く知られている。新免疫療法（ＮＩＴＣ）ではこれらの組合せとＩＬ−１２産生誘発能及びＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）に選択的に作用してＮＫＴ細胞を活性化する能力との関係を見出し、これらを組合せることでこれまでの一般的な制癌剤の抗癌効果（２０％有効率）とは比較の出来ない程の優位性を確立した。
最適の組合せは、スエヒロ茸菌糸体加工物又はスエヒロ茸菌糸体培養ロ液由来多糖体と、椎茸菌糸体加工物と、万年茸菌糸体加工物の３種を配合した組成物であり、詳しくはスエヒロ茸菌糸体加工物又はスエヒロ茸菌糸体培養ロ液由来多糖体の２０〜６０好ましくは３０〜５０重量％、椎茸菌糸体加工物の２０〜６０好ましくは３０〜５０重量％、万年茸菌糸体加工物５〜４０好ましくは１０〜３０重量％の配合組成物である。この配合組成物は、癌の治療剤又は抗癌効果を期待して摂取する経口摂取用健康補助食品製剤として有効である。
本発明の配合組成物の経口摂取量は、通常成人に対して、１日あたり、１〜２０００ｍｇ／Ｋｇ体重程度である。用法用量は、ＩＬ−１２の産生誘発量及び／又はＮＫＴ細胞のＮＫＲ−Ｐ１（ナチュラルキラーＰ１）への選択的作用によるＮＫＴ細胞の活性化度により調整されうる。投与期間は、１０日〜１２ヶ月、投与頻度は１〜数回／日である。
スエヒロ茸の菌糸体培養ロ液から得られる多糖体は、既にＳＰＧ（ｓｉｚｏｆｉｒａｎ）として科研製薬及び台糖株式会社が商業化している。その製法としては、特公昭５２−４６３４号公報、特公昭５２−４４６３４号公報等に記載の方法が例示される。
ＬＥＭ等の椎茸菌糸体加工物とＭＡＫ等の霊芝（万年茸）菌糸体加工物は、既に野田食菌工業株式会社が商業化している。これらの製法の一例は、バガス（砂糖黍の搾汁残査）に米糠を加え、良く配合し、水分調整した後、一定の容器につめて個体培養基を作り、高圧蒸気滅菌を行う。予め培養した、各菌の菌糸を培養基に接種し、２３℃の培養室で四ヶ月間菌糸を培養する。菌糸の蔓延した培養基を破砕し、自己消化処理をおこなった後、椎茸菌糸体加工物と万年茸菌糸体加工物の場合は温水で１５時間抽出する。抽出液をメンブランフィルターで除菌後、濾液を濃縮し、乾燥して粉末を得る（特公平７−１４３５号公報、特開平１−３１２９８０号公報、特公昭５１−１９０１３号公報、特公昭５３−１８５９１号公報）。
スエヒロ茸菌糸体加工物は菌糸体成分であり、油溶性である。そのため適当な有機溶媒例えばアセトン抽出処理等により抽出し、フィルターで除菌後、濾液を濃縮し、乾燥して粉末を得る。本発明では、この経口製剤〔ＳＣＰ（有限会社　東西医薬研究所）〕を使用した。その他の茸菌子体加工物もそれらの溶解性の特性（水溶性・油溶性）に応じて同様の処理で調製できる。
経口製剤は、錠剤、散剤、カプセル剤、シロップ剤等に調製される。製剤は、無論既知の賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤等必要な添加物を配合し、常套手段を使用することでも製剤化できる。更に必要に応じて、矯味剤、着色料、香料、安定剤、殺菌剤、防腐剤等の添加も可能である。
以上説示したように本発明は、新免疫療法（ＮＩＴＣ）において、血管新生阻害と血管新生促進機能に着目し、血管新生促進及び血管新生阻害に関する因子、例えばＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ、エンドスタチンの血中動態と癌の病態及び治療効果の関係を明らかにしたものである。すなわち、本発明は、患者のＶＥＧＦ又はｂＦＧＦ及びエンドスタチンの血中濃度を同時に測定することを特徴とする血管新生能の検査手段を提供するものである。
本発明の検査手段により得られる血中のＶＥＧＦ又はｂＦＧＦ及びエンドスタチン濃度についての値から、治療に用いた物質、例えば血管新生阻害剤の効果の検定を行うことができる。具体的には、例えば、血管新生阻害剤を投与する前、及び投与した後に患者の血液を採取し、その血清中のＶＥＧＦ又はｂＦＧＦ及びエンドスタチン濃度を測定する。投与前と比較して投与後のこれらの濃度が低下していれば、血管新生能が低下したと判定される。これら因子の濃度が変化しない、又は増加している場合は、用いた血管新生阻害剤が有効ではないと判定され、別な血管新生阻害剤を選択するという判定をすることができる。すなわち、本発明は、血管新生阻害剤と患者との適合性の検定を、上記検査手段によっておこなう血管新生阻害剤の検定手段を提供するものである。
更に、動物において、血中の血管新生促進因子及び血管新生阻害因子を測定することにより、これらの値を低下させることのできる物質をスクリーニングすることができる。例えば、上記のように担癌マウスを使用して、これに化合物を投与し、投与前と投与後にそれぞれ血液を採取し、血清を調製して、血清中の血管新生促進因子及び血管新生阻害因子の濃度を測定し、投与前と比較して投与後にこれらの濃度を低下させ得る化合物を選択する。得られた化合物は、血管新生能を低下させることのできる化合物であり、固形癌などの血管新生が係わる疾病に利用することができる。指標とする血管新生促進因子としては、ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−α、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）−β、インターロイキン１−β、Ｅ型プロスタグランジン等が挙げられる。好ましくは、ＶＥＧＦ又はｂＦＧＦを測定する。血管新生阻害因子としてはエンドスタチンを測定するのが好ましい。またスクリーニングに使用する動物は、血管新生が誘導されている状態にある動物であればよいが、例えば癌を移植したマウスやラットが好適に使用することができる。
また、本発明は、新免疫療法（ＮＩＴＣ）において血管新生阻害と血管新生促進機能に着目し、血管新生促進及び血管新生阻害に関する因子例えばＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ、エンドスタチンの血中動態と癌の病態及び治療効果の関係を明らかにしたものであるから、これらのことを商業的媒体に担持させれば、当該製品の価値について差別化手段となる。従って、これら情報を商業的媒体に担持させた物は、極めて有用性の高いものである。そのうえ、これら情報を商業的に利用すれば、当該製品の価値について差別化手段となるから、これら情報を利用した商業方法は、極めて有用性の高いものである。
この結果、本発明は新免疫療法（ＮＩＴＣ）を上記検査手段及び／又は上記検定手段を履行する機構と、検査結果を判定する機構と、その判定をもとに治療手技を施す機構が、三位一体として癌治療を行う医療ビジネスシステムとして提供可能である。例えば免疫機能検査機関、免疫機能評価機関、治療及び／又は処方機関（医療機関）の提携協力下で癌免疫治療を施すシステムを形成させる。そして例えば、そのシステムに基づき、癌患者の血液が採取後免疫機能検査機関に移送されると、該検査機関において少なくともＶＥＧＦ又はｂＦＧＦ及びエンドスタチンの測定が行われ、得られた測定結果は提携免疫機能評価機関に送られて検査結果に基づき評価がなされる。さらにＩＬ−１２、ＮＫＴ活性、ＩＦＮγ等の免疫機能の検査が行われることが好ましい。その結果、当該癌患者の血管新生に係わる因子の血中動態、免疫機能及び癌の進行段階に適合性を有する治療剤や治療方法が上述の各処方から選択され、その情報が治療及び／又は処方機関（医療機関）に伝達されて、その通知に基づき癌免疫治療を施す。このような新癌免疫治療システムは、有用性の極めて高いものである。また、上述の各処方による癌免疫治療方法も従前にない極めて高い有用性をもつ。
【実施例】
本発明を臨床例及び実施例によって示し、更に具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではなく、本発明の技術的思想を逸脱しない範囲内で種々の応用が可能である。
【臨床例１】
（製剤の調製と摂取）
スエヒロ茸菌糸体加工物（ＳＣＰ：有限会社　東西医薬研究所）を４０％重量部、椎茸菌糸体加工物（ＬＥＭ（登録商標）：野田食菌工業株式会社）を４０％重量部、霊芝（万年茸）菌糸体加工物（ＭＡＫ：野田食菌工業株式会社）を２０％重量部からなる配合組成物（ＩＬ−Ｘ）の１Ｋｇを均一に配合し、スプレードライ方式による流動造粒法により、３種配合粒剤を得た。この粒剤を６ｇ／日／体を経口摂取させた。また、サメ軟骨製剤（特許第３１０３５１３号）であるベターシャークＭＣ（株式会社　セイシン企業）を２０ｇ／日経口摂取させた。なお、Ｔｈ２の患者には、ＰＳＫ（三共）３．０ｇ／日を摂取させ、更にＩＬ−Ｘを併用摂取させた。患者症例数は２９例であり、その結果を以下に表２として表示した。
【表２】
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表中に示した各因子の測定方法を以下に示す。
（血管内皮細胞増殖因子／ＶＥＧＦと塩基性繊維芽細胞増殖因子／ｂＦＧＦ及び血管新生阻害因子エンドスタチン／ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎの測定）
市販キットの各酵素免疫固相法（ＥＬＩＳＡ：ｅｎｚｙｍｅ　ｌｉｎｋｅｄ　ｉｍｍｕｎｏ　ｓｏｒｂｅｎｔ　ａｓｓａｙ）（ＡＣＣＵＣＹＴＥ　Ｈｕｍａｎ　ＶＥＧＦ，ＡＣＣＵＣＹＴＥ　Ｈｕｍａｎ　ｂＦＧＦ，ＡＣＣＵＣＹＴＥ　Ｈｕｍａｎ　Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ：ＣＹＴＩＭＭＵＮＥ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　Ｉｎｃ．）で測定した。
（ＮＫＴ細胞の測定）
ＮＫＴ細胞の活性化のうち、ＮＫＲ−Ｐ１への作用による活性化の測定は、ＮＫＴ細胞の細胞表面に特異的に存在する細胞表面抗原（ＣＤ３及びＣＤ１６１）の測定により、ＮＫＴ細胞数の増加を調べることで行うことができる。具体的には、末梢血中のリンパ球について、ＣＤ３陽性細胞でかつＣＤ１６１陽性細胞の細胞を検定する。つまり、ＮＫＴ細胞の細胞表面抗原であるＣＤ３及びＣＤ１６１を、モノクローナル抗体を用いてフローサイトメトリーを使用するＴｗｏ　Ｃｏｌｏｒ検査により測定する。ＮＫＴ細胞が活性化されているとは、リンパ球の中でＮＫＴ細胞の割合が１０％以上であることをいう。ＮＫＴ細胞活性化能とは、ＮＫＴ細胞の割合を１０％以上に増加せしめる機能、又はある物質を投与する前のＮＫＴ細胞の割合より更に増強せしめる機能を意味する。
癌患者の血液を用いて、血中細胞について、細胞表面抗原であるＣＤ３及びＣＤ１６１が陽性である細胞の割合をフローサイトメトリーを用いたＴｗｏ　Ｃｏｌｏｒ検査により常法通り測定した。ＣＤ３及びＣＤ１６１に対するモノクローナル抗体は、それぞれコールター社製のＣＤ３−ＰＣ５並びにベクトンディッキンソン社製のＣＤ１６１を使用した。
ＮＫＴ細胞の活性化のうち、Ｖα２４Ｖβ１１への作用による活性化の測定は、ＮＫＴ細胞の細胞表面に特異的に存在する細胞表面抗原（Ｖα２４及びＶβ１１）の測定により、ＮＫＴ細胞数の増加を調べることで行うことができる。具体的には、末梢血中のリンパ球について、Ｖα２４陽性細胞でかつＶβ１１陽性細胞の細胞を検定する。つまり、ＮＫＴ細胞の細胞表面抗原であるＶα２４及びＶβ１１を、モノクローナル抗体（ＴＣＲ−Ｖα２４ＰＥ、ＴＣＲ−Ｖβ１１ＦＩＴＣ；Ｂｅｃｋｍａｎ　Ｃｏｕｌｔｅｒ社）を用いてフローサイトメトリーを使用するＴｗｏ　Ｃｏｌｏｒ検査により測定した。
（サイトカインを測定するための試料の調製）
まず、癌患者血液より単核球画分を分離調製する。癌患者から得たヘパリン加末梢血をリン酸緩衝生理食塩水（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　Ｂｕｆｆｅｒｅｄ　Ｓａｌｉｎｅ；ＰＢＳ）で２倍に希釈して混和した後、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｃｏｎｒａｙ液（比重１．０７７）上に重層し、４００Ｇで２０分遠沈後、単核球画分を採取した。洗浄後、１０％牛胎児血清（ＦＢＳ）を加えたＲＰＭＩ−１６４０培地を加え、細胞数を１×１０６個となるように調製した。得られた細胞浮遊液２００μｌにフィトヘマグルチニン（Ｐｈｙｔｏｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ；以下、ＰＨＡと略称する）（ＤＩＦＣＯ製）を２０μｇ／ｍｌの濃度となるように加え、９６穴マイクロプレートにて５％ＣＯ２存在下、３７℃で２４時間培養し、該培養した細胞溶液中のサイトカインを測定する試料とした。
（ＩＬ−１２の測定）
ＩＬ−１２は、Ｒ＆Ｄ　ＳＹＳＴＥＭＳ製のキットを用いたＥＬＩＳＡ法にて測定した。実際には９６穴マイクロプレートの各穴に測定用希釈液Ａｓｓａｙ　Ｄｉｌｕｅｎｔ　ＲＤ１Ｆを５０μｌ、標準液（ｓｔａｎｄａｒｄ）又は実施例１で調製した試料を２００μｌずつ分注した後、室温にて静置して２時間反応させた。その後、ｈｏｒｓｅ　ｒａｄｉｓｈ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（以下、ＨＲＰと略称する）標識抗ＩＬ−１２抗体を２００μｌずつ分注し２時間室温で静置した。各穴の反応液を除去し３回洗浄後、発色基質溶液を２００μｌずつ分注し、２０分室温静置後、酵素反応停止溶液を５０μｌずつ分注した。５５０ｎｍを対照として４５０ｎｍにおける各穴の吸光度をＥｍａｘ（和光純薬株式会社）にて測定した。ＩＬ−１２量は、ｐｇ／ｍｌとして表される。ＩＬ−１２産生誘発能とは、末梢血単核球が刺激により産生するＩＬ−１２量を、７．８ｐｇ／ｍｌ以上（７．８は測定限界値）に増強せしめる機能、又はある物質を投与する前のＩＬ−１２産生量より増強せしめる機能を意味する。
（ＩＦＮγの測定）
ＩＦＮγの測定は、ＢｉｏＳｏｕｒｃｅ　Ｅｕｒｏｐｅ　Ｓ．社のＩＦＮγ　ＥＡＳＩＡキットを用いて、酵素免疫測定法（ＥＩＡ法）で測定した。実際には９６穴マイクロプレートの各穴に標準液（ｓｔａｎｄａｒｄ）又は上記調製した試料を２倍希釈したものを５０μｌずつ分注し、ＨＲＰ標識抗ＩＦＮ−γ抗体を５０μｌずつ分注し更に振盪しながら２時間室温で反応させた。各穴の反応液を除去し３回洗浄後、発色基質溶液を２００μｌずつ分注し、振盪しながら１５分室温で反応させ、酵素反応停止溶液を５０μｌずつ分注した。６３０ｎｍを対照として４５０ｎｍ及び４９０ｎｍにおける各穴の吸光度をＥｍａｘ（和光純薬）にて測定した。ＩＦＮγ量は、ＩＵ／ｍｌとして表される。
（ＩＬ−１０の測定）
ＩＬ−１０の測定は、ＢｉｏＳｏｕｒｃｅ　Ｅｕｒｏｐｅ　Ｓ．社のＩＬ−１０　ＥＡＳＩＡキットを用いて、固相酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ法）で測定した。方法は、抗ＩＬ−１０抗体を用いる以外は、ＩＦＮγの測定方法に準じて行った。ＩＬ−１０量は、ｐｇ／ｍｌとして表される。
（Ｔｈ１／Ｔｈ２細胞比の測定）
Ｔｈ１／Ｔｈ２細胞比は、フローサイトメトリーによるヘルパーＴ（Ｔｈ）細胞系統Ｔｈｒｅｅ　ｃｏｌｏｒ解析検査によって常法により検定した。Ｔｈ１／Ｔｈ２とは、細胞表面抗原ＣＤ４を有するヘルパーＴ細胞のなかでＩＦＮγを産生する細胞（Ｔｈ１）とＩＬ−４を産生する細胞（Ｔｈ２）の比率を表すもので、ＣＤ４×ＩＦＮγ／ＩＬ−４と記す。
まず癌患者血液を、ホルボール１２−ミリステート−１３−アセテート（ｐｈｏｒｂｏｌ　１２−Ｍｙｒｉｓｔａｔｅ　１３　Ａｃｅｅｔａｔｅ）とイオノマイシン（Ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ）により３７℃で４時間処理し、血液中の細胞を刺激してサイトカインを産生させた。次いでブレフェルジンＡ（Ｂｒｅｆｅｒｄｉｎ　Ａ）を加えて産生反応を停止させ、抗ＣＤ４抗体であるＣＤ４−ＰＣ５（Ｂｅｃｋｍａｎ　Ｃｏｕｌｔｅｒ社）を用いて細胞表面マーカーであるＣＤ４を染色し、細胞を固定後、ＦＡＣＳ　Ｌｙｓｉｎｇ　Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（日本ベクトンディッキンソン社）を用いて溶血処理した。その後ＦＡＣＳ　Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｉｎｇ　Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（日本ベクトンディッキンソン社）により細胞膜透過処理を行い、更に抗ＩＦＮγ抗体／抗ＩＬ−４抗体（ＦＡＳＴＩＭＭＵＮＥ　ＩＦＮγ　ＦＩＴＣ／ＩＬ−４　ＰＥ，日本ベクトンディッキンソン社）で細胞内のサイトカインを染色して、フローサイトメーター（ＦＡＣＳ　Ｃａｌｉｂｕｒ、Ｂｅｃｔｏｎ　Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社）で測定及び解析を行った。
【実施例１】
免疫機能検査機関、医療機関、及び免疫能の検定と治療方針指導機関が、相互に業務の役割分担を明確化し業務提携を行う。
医療機関は、患者から血液を、該血液成分中の目的とする検査測定項目に対応した公知の採取方法で採取する。医療機関は、さらに目的とする検査測定項目に応じて必要とされれば、血液から血清と血球成分とを分取する。医療機関は、血液、血清、及び／又は血球成分とこれらの由来である患者を特定した後、直ちにこれらを提携している免疫機能検査機関に送付する。
免疫機能検査機関は、予め免疫能の検定と治療方針指導をなす機関（以下、指導機関）の指導によって決定された特定の免疫関連機能の検査（例えばＩＬ−１２産生能、ＮＫＴ細胞活性、ＩＦＮγ値、ＴＮＦα値など）を、医療機関から送付された血液、血清、及び／又は血球成分について行う。必要とされれば、血液から血清と血球成分とを分取する。免疫機能検査機関は、該免疫機能関連機能の検査に加えて、必要であれば癌マーカーの検査及び癌関連因子（例えば、血管新生促進因子や血管新生抑制因子）などの検査を行い、これらの検査結果を指導機関に通知する。
指導機関は通知された検査結果に基づいて、少なくとも対象患者のＩＬ−１２産生能、ＮＫＴ細胞活性、ＩＦＮγ値、ＴＮＦα値の検定、及び血管新生促進因子（例えばＶＥＧＦやｂＦＧＦ）や血管新生抑制因子（例えばエンドスタチン）、及び必要により各種癌マーカーの検定を行う。指導機関はさらにその検定結果に基づき、ＩＬ−１２誘導物質、ＮＫＴ細胞活性化物質、その他ＢＲＭ製剤、サメ軟骨製剤などの補助制癌剤の処方例から検定結果に適合するものを特定する。その検定結果と処方例は、直ちに提携している医療機関に伝達される。
医療機関は指定の処方例を参考に対象患者の癌治療を施す。
さらに指導機関は、治療経過において、上記同様の方法で患者血液成分について行われる各種検査結果を検定することによって、治療の有効性及び無効性を判定し、検定結果に適合したより適正な処方例をさらに医療機関に提示する。指導機関は、検定結果と処方例を医療機関へ提示することにより指導料を徴収する。
産業上の利用可能性
本発明では、血管新生能の検査手段として、患者のＶＥＧＦ（ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）又はｂＦＧＦ（ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）、及びｅｎｄｏｓｔａｔｉｎの血中濃度を同時に測定することにより、その相関を見出し、患者の病態及び治療手技の最適手段を提供したものである。また、癌の休眠状態（Ｃａｎｃｅｒ　ｄｏｒｍａｎｃｙ）を長期に維持すること、すなわちｌｏｎｇ・ＮＣ（６ヶ月以上ＮＣ）もＣＲやＰＲと共に奏功例に含めるとの考えもあり、この癌の休眠状態に導くためには血管新生阻害作用が注目され、なかでもＶＥＧＦ阻害が重要視されることを見いだした。
【図面の簡単な説明】
【図１】図の左からｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ、ＶＥＧＦ（ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）及びｂＦＧＦ（ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）の血中濃度の推移を示す図である。
【図２】ＶＥＧＦ（ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）とｅｎｄｏｓｔａｔｉｎの血中濃度の相関性を示す図である。図中、治療前（１２例）、治療後（２９例）、奏効例（ＣＲ、ＰＲ：１５例）、有効例（ＣＲ＋ＰＲ＋Ｌｏｎｇ　ＮＣ：２２例）、及びその他（Ｓｈｏｒｔ　ＮＣ：４例、ＮＣ／Ｓｈｏｒｔ　ＮＣ＋Ｌｏｎｇ　ＮＣ：１１例、ＰＤ：３例）の結果を示した。
【図３】ＶＥＧＦ／ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ比を示す図である。図中、治療前（１２例）、治療後（２９例）、奏効例（ＣＲ、ＰＲ：１５例）、有効例（ＣＲ＋ＰＲ＋Ｌｏｎｇ　ＮＣ：２２例）、及びその他（Ｓｈｏｒｔ　ＮＣ：４例、ＮＣ／Ｓｈｏｒｔ　ＮＣ＋Ｌｏｎｇ　ＮＣ：１１例、ＰＤ：３例）の結果を示した。
【図４】ＶＥＧＦ（ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）の血中濃度とＩＬ−１２誘導の相関性を示す図である。
【図５】ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎの血中濃度とＩＬ−１２誘導の相関性を示す図である。
【図６】ＶＥＧＦ（ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）の血中濃度とＩＦＮ−γの相関性を示す図である。
【図７】ＶＥＧＦ（ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）の血中濃度。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【手続補正書】
【提出日】平成14年6月21日(2002.6.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌患者における血管新生能を測定する癌の治癒状態の検査手段として、患者の血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）及びエンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）の血中濃度を同時に測定し、両ファクターの低下（対平均値）をもって有効性を判定することを特徴とする検査手段。
【請求項２】
エンドスタチンとＶＥＧＦの産生量の後者の低下傾向をもって有効性を判定することを特徴とする請求の範囲１の検査手段。
【請求項３】
癌患者における血管新生能を測定する癌の治癒状態の検査手段として、患者の塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ：ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）及びエンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）の血中濃度を同時に測定し、両ファクターの低下をもって判定することを特徴とする検査手段。
【請求項４】
癌患者における血管新生能を測定する癌の治癒状態の検査手段として、腫瘍細胞増殖無しの状態の癌患者の血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）を測定し、その低下をもって判定することを特徴とする検査手段。
【請求項５】
血管新生阻害剤及び／又は制癌剤と患者との適合性の検定を、請求の範囲１に記載の検査手段によっておこなう該剤の有効性の検定又は判定手段。
【請求項６】
血管新生阻害剤及び／又は制癌剤と患者との適合性の検定を、請求の範囲２に記載の検査手段によっておこなう該剤の有効性の検定又は判定手段。
【請求項７】
血管新生阻害剤及び／又は制癌剤と患者との適合性の検定を、請求の範囲３に記載の検査手段によっておこなう該剤の有効性の検定又は判定手段。
【請求項８】
血管新生阻害剤及び／又は制癌剤と患者との適合性の検定を、請求の範囲４に記載の検査手段によっておこなう該剤の有効性の検定又は判定手段。
【請求項９】
請求の範囲１の測定をすることによって行う新規血管新生阻害剤のスクリーニング方法。
【請求項１０】
請求の範囲２の測定をすることによって行う新規血管新生阻害剤のスクリーニング方法。
【請求項１１】
請求の範囲３の測定をすることによって行う新規血管新生阻害剤のスクリーニング方法。
【請求項１２】
請求の範囲４の測定をすることによって行う新規血管新生阻害剤のスクリーニング方法。
【請求項１３】
請求の範囲１〜４の何れか一に記載の検査手段、及び／又は請求の範囲５〜８の何れか一に記載の検定若しくは判定手段を履行する機構と、検査結果を判定する機構と、判定をもとに治療手技を施す機構が、三位一体として癌治療を行う医療ビジネスシステム。
【手続補正書】
【提出日】平成14年6月21日(2002.6.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌患者における血管新生能を測定する癌の治癒状態の検査手段として、患者の血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）及びエンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）の血中濃度を同時に測定し、両ファクターの低下（対平均値）をもって有効性を判定することを特徴とする検査手段。
【請求項２】
エンドスタチンとＶＥＧＦの産生量の後者の低下傾向をもって有効性を判定することを特徴とする請求の範囲１の検査手段。
【請求項３】
癌患者における血管新生能を測定する癌の治癒状態の検査手段として、患者の塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ：ｂａｓｉｃ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）及びエンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）の血中濃度を同時に測定し、両ファクターの低下をもって判定することを特徴とする検査手段。
【請求項４】
癌患者における血管新生能を測定する癌の治癒状態の検査手段として、腫瘍細胞増殖無しの状態の癌患者の血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ：ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）を測定し、その低下をもって判定することを特徴とする検査手段。
【請求項５】
血管新生阻害剤及び／又は制癌剤と患者との適合性の検定を、請求の範囲１に記載の検査手段によっておこなう該剤の有効性の検定又は判定手段。
【請求項６】
血管新生阻害剤及び／又は制癌剤と患者との適合性の検定を、請求の範囲２に記載の検査手段によっておこなう該剤の有効性の検定又は判定手段。
【請求項７】
血管新生阻害剤及び／又は制癌剤と患者との適合性の検定を、請求の範囲３に記載の検査手段によっておこなう該剤の有効性の検定又は判定手段。
【請求項８】
血管新生阻害剤及び／又は制癌剤と患者との適合性の検定を、請求の範囲４に記載の検査手段によっておこなう該剤の有効性の検定又は判定手段。
【請求項９】
請求の範囲１の測定をすることによって行う新規血管新生阻害剤のスクリーニング方法。
【請求項１０】
請求の範囲２の測定をすることによって行う新規血管新生阻害剤のスクリーニング方法。
【請求項１１】
請求の範囲３の測定をすることによって行う新規血管新生阻害剤のスクリーニング方法。
【請求項１２】
請求の範囲４の測定をすることによって行う新規血管新生阻害剤のスクリーニング方法。
【請求項１３】
請求の範囲１〜４の何れか一に記載の検査手段、及び／又は請求の範囲５〜８の何れか一に記載の検定若しくは判定手段を履行する機構と、検査結果を判定する機構と、判定をもとに治療手技を施す機構が、三位一体として癌治療を行う医療ビジネスシステム。
【国際調査報告】
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