(57)【要約】本発明は、ラミブジン長期投与中のラミブジン耐性Ｂ型肝炎ウイルスの増殖を抑制する薬剤に関する。ラミブジン長期投与中に生じたＹＭＤＤ変異ウイルスに対しＩＦＮ−βを投与することにより、Ｂ型肝炎ウイルスの再増殖が抑制され、抑制治療薬として有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
インターフェロン−βを有効成分とする、ラミブジン長期投与中の耐性ウイルス出現によるＢ型慢性肝炎の再燃あるいは増悪時におけるＢ型肝炎ウイルス増殖抑制剤。
【請求項２】
インターフェロン−βが天然型である請求項１に記載のＢ型肝炎ウイルス増殖抑制剤。
【請求項３】
ラミブジン長期投与中の患者に対し、Ｂ型慢性肝炎の再燃あるいは増悪時にインターフェロン−βを投与することを特徴とするＢ型肝炎ウイルスの増殖抑制方法。
【請求項４】
インターフェロン−βが天然型である請求項３に記載のＢ型肝炎ウイルスの増殖抑制方法。
【請求項５】
インターフェロン−βの投与量が３００〜６００万単位／日である請求項３または４に記載のＢ型肝炎ウイルスの増殖抑制方法。
【請求項６】
ラミブジン長期投与中の耐性ウイルス出現によるＢ型慢性肝炎の再燃あるいは増悪時におけるＢ型肝炎ウイルス増殖抑制剤を製造するためのインターフェロン−βの使用。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、インターフェロン−β（ＩＦＮ−β）を有効成分とする、ラミブジン長期投与中のラミブジン耐性Ｂ型肝炎ウイルスの増殖を抑制する薬剤に関する。
背景技術
Ｂ型慢性肝炎に対してラミブジンを長期投与すると５０％以上にＢ型肝炎ウイルスのポリメラーゼ遺伝子のＹＭＤＤモチーフに変異が生じた耐性ウイルスによるＢ型肝炎の再燃あるいは増悪（ｂｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈ）がみられる。現在、治療法としてインターフェロン−α、強力ネオミノファーゲンＣ（ＳＮＭＣ）などの併用療法が行われている（佐田通夫他：Ｂ型慢性肝疾患に対するＬａｍｉｖｕｄｉｎｅ療法．
肝胆膵４１（１）：１０１−１０７，２０００）、谷川久一：Ｂ型慢性肝炎に対するＧＧ７１４（Ｌａｍｉｖｕｄｉｎｅ）の長期使用経験．肝胆膵４１（１）：１１７−１２３，２０００）。
しかしながら、これらの併用による効果は不十分であり、ラミブジン耐性Ｂ型肝炎ウイルスの再増殖を来すことが認められている。すなわち、ラミブジン長期投与中にＢ型肝炎ウイルスの変異株出現により肝炎が再燃して肝不全に至る症例があることも明らかとなり、耐性ウイルスの出現が問題となっている。現在のところ、耐性ウイルスの増殖を十分に抑制する治療法はない。
本発明は、ラミブジン長期投与中のラミブジン耐性Ｂ型肝炎ウイルスの増殖を抑制する薬剤を提供することを目的とする。
発明の開示
本発明は、ＩＦＮ−βを有効成分とする、ラミブジン耐性Ｂ型肝炎ウイルスの増殖を抑制する治療薬である。
発明を実施するための最良の形態
本発明に用いられるＩＦＮ−βは、天然型のもの、化学合成により製造されるもの、遺伝子組み換え技術により製造されるもののいずれであってもよい。本発明では、ヒト二倍体線維芽細胞によって産生される天然型ＩＦＮ−βを特に好ましく用いる。
天然型ＩＦＮ−βは、腫瘍化細胞株およびウイルスを用いない生産方法が特徴である。通常、ガラスもしくはプラスチックなどの表面、またはＤＥＡＥ化デキストランやポリアクリルアミドあるいはポリスチレンの微小粒子表面上に細胞を吸着させ培養させる。培養されたＩＦＮ−β産生細胞はプライミング処理（ＩＦＮ−β産生時に少量のＩＦＮ−βで細胞を前処理するとしない場合に比較してＩＦＮ−βの産生量が増加する。ＩＦＮ自体がＩＦＮ産生増強などの産生調節機構に関与していることを示す。プライミングによりＩＦＮ  ｍＲＮＡ量が増加する、ＩＦＮ  ｍＲＮＡの転写速度が早くなる等の報告がある。）と超誘発法（細胞を誘発剤Ｐｏｌｙ  Ｉ：ＰｏｌｙＣ等の合成二本鎖ＲＮＡで刺激した後、代謝阻害物質であるアクチノマイシンＤ：ＡＭＤとシクロヘキシミド：ＣＨで処理することでＩＦＮ産生を増強する。まず、ＣＨによりｍＲＮＡから蛋白質が翻訳されるのを阻害し、ＩＦＮのｍＲＮＡを細胞内に蓄積させ、ＣＨ除去して一斉にＩＦＮ蛋白質を合成させる。この時にＡＭＤを加えることで逆にリプレッサーのｍＲＮＡの阻害を行いＩＦＮ合成阻害のフィードバックシステムを制御する。リプレッサーの存在は仮定であるが調節システムの存在は確認されている。）することで、培養液中に効率よく産生される。得られた産生液中のＩＦＮ−βは、一般的には低濃度であり、ＩＦＮ−βの他に細胞由来または添加物由来の多くの夾雑物を含む。ＩＦＮ−βの濃縮精製方法として、ブルー色素を結合させた不溶性担体および金属キレート基結合担体を用いるクロマトグラフィーによる方法が好ましい。すなわち、粗ＩＦＮ−β含有液をブルー色素を結合させた不溶性担体と接触させた後、溶出液を用いて該ＩＦＮ−βを溶液として回収し、ついでこのＩＦＮ−β溶液を亜鉛などの金属をキレート化させたキレート基結合担体と接触させた後、溶出液を用いて回収し、濃縮精製されたＩＦＮ−βを得るという方法である。
本発明に用いるＩＦＮ−βには、必要により安定剤を添加することができる。安定剤としては、ヒト血清アルブミン、特開昭５８−９２６１９号に開示されたポリオール、特開昭５８−９２６２１号に開示された有機酸緩衝剤などを例示することができる。さらに投与方法に応じて常用の担体などを適宜混合して製剤化してもよい。剤形としては、注射剤、カプセル剤、経鼻剤、座薬、経口薬、軟膏剤などの種々の形態のものが用いられる。投与量は、投与対象、投与方法、症状などに応じ適宜決定されるが、好ましくは３００〜６００万単位／日の範囲で投与される。
本発明に用いられるラミブジンは、Ｂ型慢性肝炎患者を対象に１００ｍｇ錠を１日１回投与される。本発明に用いるＩＦＮ−βは、ラミブジンが約８ヵ月間以上長期投与され、ＹＭＤＤ変異Ｂ型肝炎ウイルスの出現によりＢ型肝炎の再燃あるいは増悪（ｂｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈ）がみられた時にＩＦＮ−βを併用投与される。
【実施例】
以下、本発明を実施例に基づき更に具体的に説明する。
実施例１
Ｂ型慢性肝炎患者に対するＩＦＮ投与による効果の確認：
５４歳のＢ型慢性肝炎の男性に、ラミブジン投与（初回；１００ｍｇ，５２週間）を実施したが、血中Ｂ型肝炎ウイルスの再上昇及び肝機能の悪化（図１中、ＨＢＶ−ＤＮＡ及びＧＰＴの上昇）が認められため、再度ラミブジン投与（２回目；１００ｍｇ，３２週間）を実施した。ラミブジン投与中に耐性ウイルスが出現し（図１中、ＹＭＤＤ変異型ＹＩＤＤ  ＋）、血中Ｂ型肝炎ウイルスも再上昇した。
その後も血中Ｂ型肝炎ウイルスは高値を持続し、投与中止後約３ヶ月目に肝機能が急性増悪したため（ＧＰＴ５６７）、ＩＦＮ−α３００万単位を計２８日間投与した。しかし、投与終了後に血中Ｂ型肝炎ウイルスが再度上昇し肝機能が悪化したため、再々度ラミブジン投与（３回目；１００ｍｇ，９８週間）を実施した。この投与開始後１８週目に再び耐性ウイルス（ＹＭＤＤ変異型ＹＩＤＤ）が出現し、血中Ｂ型肝炎ウイルスの再上昇及び肝機能の悪化が認められた。ＩＦＮ−α３００万単位を併用投与したが、肝機能が更に悪化したためＩＦＮ−αの投与を中止した。
その後も血中Ｂ型肝炎ウイルスは陽性を持続し、肝機能も異常を持続したため、ＩＦＮ−β３００万単位を３０週間静脈内投与した。ＩＦＮ−β投与終了時に血中Ｂ型肝炎ウイルスは陰性化し、肝機能は正常化した（図１）。投与終了後約４ヶ月目においても血中Ｂ型肝炎ウイルスは陰性を持続し、肝機能も正常を持続している。
産業上の利用可能性
本発明のインターフェロン−βを有効成分とするＢ型肝炎ウイルス増殖抑制剤は、ラミブジン長期投与中のラミブジン耐性Ｂ型肝炎ウイルスに対して増殖抑制効果を示すことから、ラミブジン耐性Ｂ型肝炎ウイルスに対する増殖抑制剤として有用である。
【図面の簡単な説明】
図１は、ラミブジン長期投与中にＹＭＤＤ変異が生じたＢ型慢性肝炎症例に対するＩＦＮ−βの治療効果を示す。
【図１】
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【国際調査報告】
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