(57)【要約】本発明は、ＤＮＡあるいは蛋白質等の生体物質サンプルが結合していても、スポットが不明瞭で観察しにくいという問題点を解決することを目的とする。このため本発明のスライドグラスは、オリゴヌクレオチド断片等を表面に担持可能であって、ダイヤモンド、ダイヤモンドライクカーボン等の表面処理層が形成されていることを特徴とする。また、本発明の遺伝子を解析する方法は、表面処理層を形成させた被膜上にスライドグラスの表面に遺伝子等を担持させて遺伝子を解析することを特徴とする。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ガラス基体上の表面に表面処理層が形成されたスライドグラス。
【請求項２】
前記表面処理層が、ダイヤモンド、ダイヤモンドライクカーボン、炭素系物質のいずれか、それらの混合物、又はそれらを積層させたものである請求項１のスライドグラス。
【請求項３】
前記ダイヤモンドライクカーボンを形成させたスライドグラスの光透過率が、光波長が４００ｎｍ〜５００ｎｍの領域において、５０％以上である請求項１又は２のスライドグラス。
【請求項４】
前記ダイヤモンドライクカーボンを形成させたスライドグラスの光透過率が、光波長が６００ｎｍ〜７００ｎｍの領域において、７０％以上である請求項１又は２のスライドグラス。
【請求項５】
前記表面処理層の厚みが、１ｎｍ〜１０００ｎｍである請求項１又は２のスライドグラス。
【請求項６】
前記ダイヤモンドライクカーボンが、水素ガス１〜９９体積％、残りメタンガス９９〜１体積％を含んだ混合ガス中で、イオン化蒸着法により作製した請求項１〜５のいずれかのスライドグラス。
【請求項７】
ガラス基体上の裏面に反射層が形成されたスライドグラス。
【請求項８】
前記表面処理層上に、オリゴヌクレオチド断片を担持させた請求項１〜７のいずれかのスライドグラス。
【請求項９】
前記表面処理層上に、蛋白質又はペプチドを担持させた請求項１〜７のいずれかのスライドグラス。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれかに記載のスライドグラスを用いて、遺伝子、蛋白質、ペプチド等の生体物質を解析する方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、遺伝子解析、診断、治療等に使用される遺伝子あるいは蛋白質等の生体物質解析用等に用いられるスライドグラス及び該スライドグラスを用いて遺伝子、蛋白質、ペプチド等の生体物質等を解析する方法に関するものである。
背景技術
従来、遺伝子解析用等に用いられるスライドグラスとして、ガラスチップのスライドグラスであって、表面に１万以上のＤＮＡ断片（ＤＮＡプローブ）等の遺伝子を載せうるように加工がされているものが広く用いられている。
前記のようなチップを用いて、例えばあるＤＮＡサンプルの塩基配列を知りたい場合には、該スライドグラス上に、予め塩基配列が解明されており、互いに異なる塩基配列を有する数万本のＤＮＡ断片を、位置がわかるように結合させておいたものを用意し、これに蛍光標識したＤＮＡサンプルを流すと、ＤＮＡ断片は、該スライドグラス上につけたＤＮＡ断片（プローブ）のうちの相補的な配列を有するプローブとハイブリダイズする。ハイブリダイズ部分は、スライドグラスを蛍光測定することによりスポットとして識別でき、ＤＮＡサンプル中のＤＮＡ断片の配列を解明することができる。
このように、遺伝子解析用スライドグラスは、あるＤＮＡの塩基配列を簡単に特定することができることから、生体ゲノムの解析、遺伝子発現のモニタリング、ゲノムミスマッチング等の遺伝子解析等に利用されるほか、さらにガン遺伝子の突然変異の検出等遺伝子診断や医薬品の開発等に応用されている。
上記遺伝子解析用スライドグラスを利用してＤＮＡサンプルを増幅して、スライドグラスに蛍光照射することによるスポットの解析により判断される。
しかし、従来の遺伝子解析用スライドグラスは、前記スポットの解析をするにあたり、ガラスの洗浄等の前処理を行うため、スポットしたＤＮＡ断片が洗い流されてしまい、スポットが明瞭に検出できない場合が多かった。
本発明は、このような従来の遺伝子解析用スライドグラスの有する蛍光検出の不明瞭さという問題点を解決することを目的とするものである。
発明の開示
本発明のスライドグラスは、ＤＮＡプローブ、蛋白質、ペプチド等の生体物質等を載せる表面に特定の表面処理層を形成することにより、スライドグラスを洗浄してもスポットしたＤＮＡ断片、蛋白質、ペプチド等が洗い流されずに強固に固定化されているので、蛍光照射した際に、蛍光スポットが明瞭となることに特徴を有する。
すなわち。本発明のスライドグラスは、ガラス基体上の表面に表面処理層が形成されたものであることを特徴とする。
このようなスライドグラスは、前記表面処理層が、ダイヤモンド、ダイヤモンドライクカーボン、炭素系物質のいずれか、それらの混合物、又はそれらを積層させたものであることが好ましい。
このようなスライドグラスは、前記ダイヤモンドライクカーボンを形成させたスライドグラスの光透過率が、光波長が４００ｎｍ〜５００ｎｍの領域において、５０％以上であることが好ましい。
このようなスライドグラスは、前記ダイヤモンドライクカーボンを形成させたスライドグラスの光透過率が、光波長が６００ｎｍ〜７００ｎｍの領域において、７０％以上であることが好ましい。
このようなスライドグラスは、前記表面処理層の厚みが、１ｎｍ〜１０００ｎｍであることが好ましい。
このようなスライドグラスは、前記ダイヤモンドライクカーボンが、水素ガス１〜９９体積％、残りメタンガス９９〜１体積％を含んだ混合ガス中で、イオン化蒸着法により作製したものであることが好ましい。
本発明のスライドグラスは、ガラス基体上の裏面に反射層が形成されたものであることを特徴とする。
本発明のスライドグラスは、前記表面処理層上に、オリゴヌクレオチド断片を担持させたものであることを特徴とする。
本発明のスライドグラスは、前記表面処理層上に、蛋白質又はペプチドを担持させたものであることを特徴とする。
本発明のスライドグラスは、前記スライドグラスを用いて遺伝子、蛋白質、ペプチド等の生体物質を解析する方法として用いることができる。
発明を実施するための最良の形態
本発明のスライドグラスは、スライドガラスの最表面上に表面処理層が形成されており、遺伝子、蛋白質、ペプチド等の生体物質との親和性等が強固となっているので、表面処理層の上にＤＮＡサンプルを載せて様々な解析用に用いると好ましい。
このような表面処理としては、ダイヤモンドライクカーボン（ＤＬＣ）、ダイヤモンド、グラファイト等の炭素系物質を被覆したものが好ましい。
ダイヤモンド、ダイヤモンドライクカーボン、グラファイト等の炭素系物質からなる表面処理層を形成させたスライドグラスは、ＤＮＡプローブを強固に固定化させることができる。
すなわち、炭素は化学的安定性に優れており、ＤＮＡプローブ等を載せる際の反応等に耐えることができるのである。その理由は、炭素上にＤＮＡなどのプローブを固定化させたときに図１に示すように炭素原子との共有結合の形態を示すので、ＤＮＡプローブをスライドグラス表面に強固に固定化させることができるためであると考えられる。
さらに、上記のダイヤモンドライクカーボン（ＤＬＣ）、ダイヤモンド、グラファイト等の炭素系物質と他の物質との混合体、例えば金属やセラミックス等との混合体も表面処理層として用いることができる。
また、上記のダイヤモンドライクカーボン（ＤＬＣ）、ダイヤモンド、グラファイト等の炭素系物質と他の物質との積層体も表面処理層として用いることができる。
固定化されたプローブは、図１に示すように、スライドグラス表面上にほぼ垂直に林立させられるので、スライドグラス表面の単位面積あたりの固定化密度を上げることができる。
上記表面処理層のダイヤモンドの素材としては、合成ダイヤモンド、高圧形成ダイヤモンド、或いは天然のダイヤモンド等のいずれも使用できる。また、それらの構造が単結晶体或いは多結晶体のいずれでも差し支えない。生産性の観点よりマイクロ波プラズマＣＶＤ法などの気相合成法を用いてダイヤモンド膜を形成させることも好ましい。
また、表面処理層としては、ダイヤモンドと同等の性能を有し経済的にも有利な点で、非晶質のダイヤモンドライクカーボン（Ｄｉａｍｏｎｄ  Ｌｉｋｅ  Ｃａｒｂｏｎ）膜をガラス表面に形成することもできる。ダイヤモンドライクカーボン（Ｄｉａｍｏｎｄ  Ｌｉｋｅ  Ｃａｒｂｏｎ）は、ダイヤモンドやグラファイトと同様に炭素原子から構成され、ダイヤモンドに類似した特性を有することからＤＬＣと呼ばれている。ＤＬＣの結晶構造は、アモルファス（非晶質）である。
上記、表面処理層としては、グラファイト等の炭素系物質も好適に用いられる。ダイヤモンドは、中心及び四隅に炭素原子をもつ正四面体構造で、ｓｐ３混成軌道を形成するきわめて硬い立方晶系の結晶である。
本発明の炭素系物質としては、グラファイトや無定形炭素を挙げることができる。グラファイトは、ｓｐ２混成の六角形の網面がπ電子を介して層状に積み重なった構造の六方晶系結晶である。無定形炭素は明瞭な結晶構造を示さない。無定形炭素には結晶程度の低い微晶質炭素も含まれる。
また、結晶の大小やその配列の度合いなどによって、無定形炭素からグラファイトに至る中間的な構造の炭素系物質が存在するが、これらの間には明瞭な変態点が存在しない。本発明の炭素系物質とは、グラファイト又は無定形炭素の単体、グラファイトと無定形炭素との混合物、これらに無定形炭素及びグラファイトの中間的構造を示すものが含まれる。
本発明の表面処理層は、上記ダイヤモンド、ＤＬＣ、グラファイト等の炭素系物質が混合されたものも用いることができる。
また本発明の表面処理層は、ＤＬＣ膜、ダイヤモンド膜、炭素系物質膜とが交互に積層されたものも用いることができる。
本発明の表面処理層の厚みは、特に限定するものではないが、１ｎｍ〜１０００ｎｍの厚みがあればよい。１ｎｍ未満では、あまりに薄すぎて表面処理層の厚みが均一にはならずに、下地のガラス基体を被覆できない部分ができるので好ましくない。一方、１０００ｎｍを超える被覆は、表面処理層中の応力による剥離が生じやすくなるので好ましくない。
工業上の生産性からすると、表面処理層の厚みは、１０ｎｍ〜５００ｎｍとすることが好ましい。さらに好ましくは、３０〜２００ｎｍである。
表面処理層のダイヤモンドの形成割合は、上記プラズマＣＶＤ法で形成する場合には、反応槽内の圧力、バイアス電圧や基板温度等の条件により適宜設定することができる。
表面処理層中のダイヤモンド濃度の調整は、例えばプラズマＣＶＤ法でＤＬＣ膜を形成する場合、置換ガスとしてのＮ２ガスの供給量を調整することにより、供給原料としての炭化水素ガスにおけるＨ／Ｃ比を変更することに行うことができる。
Ｎ２ガスの供給量を多くするとＤＬＣ膜中のＨ２取り込み量が多くなるので、ＤＬＣにおけるダイヤモンド濃度を高くすることができ、一方Ｎ２ガスの供給量を少なくするとＤＬＣ膜中へのＨ２取り込み量が少なくなるので、ＤＬＣにおけるダイヤモンド濃度を低くすることができる。
ガラス基体へのダイヤモンド、ＤＬＣ、グラファイト等の表面処理層形成は、高周波プラズマＣＶＤ法、イオン化蒸着法、アーク式蒸着法、レーザ蒸着法等により形成することができる。
高周波プラズマＣＶＤ法では、１３．５６ＭＨｚの高周波によって電極間に生じるグロー放電により原料ガス（メタン）を分解し、基体上にＤＬＣ膜を合成する。イオン化蒸着法では、タングステンフィラメントで生成される熱電子を利用して、原料ガス（ベンゼン）を分解・イオン化し、バイアス電圧によって基体上に成膜する。また、水素ガス１〜９９体積％と残りメタンガス９９〜１体積％からなる混合ガス中で、イオン化蒸着法によりＤＬＣ膜を形成しても良い。
ＤＬＣ膜は、通常黒色を呈しているが、本発明のスライドグラスにおいては、透明膜であることが好ましい。すなわち、本発明のスライドグラスは、遺伝子解析用等に用いられるものであって、スライドグラス表面に蛍光照射し、その強度を測定するものであることから、光透過性が要求されるのである。
本発明の表面処理層を形成したスライドグラスの光透過率は、光波長が４００ｎｍ〜５００ｎｍの領域（Ｂｌｕｅ領域）における透過率が、５０％以上であることが好ましい。さらに好ましくは６０％以上である。
また  光波長が６００ｎｍ〜７００ｎｍの領域（Ｒｅｄ領域）における透過率が、７０％以上であることが好ましい。さらに好ましくは７５％以上である。上記のそれぞれの領域における光透過率を有することでスライドグラス上の蛍光標識の強度を効率よく測定できるのである。
このような光透過性を持ったダイヤモンドライクカーボンを製造するには、例えば、イオン化蒸着法において、炭化水素ガスと水素ガスとの混合ガス中の水素ガスの含有率を増すほど、光透過率を高くしたダイヤモンドライクカーボンを製造することができる。
上記のイオン化蒸着法とは、Ｗｅｉｓｓｍａｎｔｅｌらにより考案された方法で、炭化水素ガスソースＤＬＣ成膜法の一種であり、イオン源は陰極である熱フィラメントと対向する陽極グリッドとそれらを取り囲む金属円筒からなる。
イオン化蒸着法を用いて、スライドグラス上に光透過率を高くしたダイヤモンドライクカーボンを製造する実施態様を述べる。
例えば、厚み１ｍｍのスライドグラス（マツナミガラス（株）製Ｓ−１１１２）を用いて、この上にダイヤモンドライクカーボン（ＤＬＣ）膜を厚み１０ｎｍ形成した。そしてこのＤＬＣ膜を形成したスライドグラスの光透過率を調べた結果は次のようになった。すなわち、水素ガスを全く含まない雰囲気（０体積％）でＤＬＣ膜を形成したスライドグラスは、４００ｎｍの波長の光では８８．７％の光透過率であった。水素ガスを１体積％含んだ雰囲気でＤＬＣ膜を形成したスライドグラスは、４００ｎｍの波長では８９．４％の光透過率であった。更に、水素ガスを８０体積％含んだ雰囲気でＤＬＣ膜を形成したスライドグラスは、４００ｎｍの波長では９０．８％の光透過率であった。このように、水素ガスの割合を増すほど光透過率が高くなることが分かった。
また、７００ｎｍの波長の光で光透過率を測定してみると、水素ガスを全く含まない雰囲気（０体積％）でＤＬＣ膜を形成したスライドグラスは、９０．０％の光透過率であった。水素ガスを１体積％含んだ雰囲気でＤＬＣ膜を形成したスライドグラスは、９０．８％の光透過率であった。更に、水素ガスを８０体積％含んだ雰囲気でＤＬＣ膜を形成したスライドグラスは、９２％の光透過率であった。このように、７００ｎｍの波長の光で測定した場合も４００ｎｍの波長を用いて測定した結果と同じように、水素ガスの割合を増すほど光透過率が高くなることが分かった。
なお、表面処理層を全く形成していないスライドグラス自体（ブランク）の光透過率は、４００ｎｍの波長では９１．０％を示し、７００ｎｍの波長では９２％の光透過率を示した。
ここで、光透過率は以下の式に基づき計算した。
光透過率Ｔ＝（Ｉ／Ｉ０）×１００
Ｉ：ブランクでの透過光の強度
Ｉ０：表面処理層を形成したときの透過光の強度
水素ガスを含有すると透明になりやすいのは、水素ガスを含有しないとｓｐ２混成軌道を多量に含み着色の原因となるが、水素ガスを含むと、透明なｓｐ３軌道を多く含むようになるためと考えられる。しかし、水素ガスを多く含むとダイヤモンドライクカーボンの成膜速度が遅くなり、水素ガスの含有率は、より好ましくは１〜５０体積％が良い。
アーク式蒸着法では、固体のグラファイト原料（陰極蒸発源）と真空容器（陽極）の間に直流電圧を印加することにより真空中でアーク放電を起こして陰極から炭素原子のプラズマを発生させ蒸発源よりもさらに負のバイアス電圧を基体に印加することにより基体に向かってプラズマ中の炭素イオンを加速し成膜を行う。
また、レーザ蒸着法では、例えばＮｄ：ＹＡＧレーザ（パルス発振）光をグラファイトのターゲット板に照射して溶融させ、ガラス基板上に炭素原子を堆積させることにより形成することができる。
さらに、本発明の表面処理層を形成させたスライドグラスは、その裏面に例えば金属蒸着膜のような反射層が形成されていることが好ましい。
このような反射層をスライドグラスの裏面に形成させると、表面から蛍光照射をした場合の蛍光の反射効率を高める効果を有し、蛍光分析装置の感度を高めることができる。すなわち、蛍光スポットを明瞭に観察することができ、一度に多量の解析を行うことができる。
スライドグラスの裏面に形成させる反射層の種類としては、Ｔｉ、Ａｕ、Ｐｔ、Ｎｂ、ＷＣ、等の単層又はこれらの複合層が好ましい。反射層の厚みは、スライドグラス全体に均一に被覆されなければならないことから１００ｎｍ以上が好ましい。さらに好ましくは、１０００ｎｍ以上である。このような反射層を形成するには一般に真空蒸着法を用いることができる。その他、スパッタリング法、イオンビーム蒸着法などの上記の反射層を形成させるのに適した従来技術を適宜選択して用いることができる。
本発明のスライドグラスは、ＤＮＡプローブ等の遺伝子あるいは蛋白質等の生体物質を多数載せることができるものである。従って、スライドグラスの表面上に複数の微小区分が設けられ、１つの区分に多数のオリゴヌクレオチド断片を担持可能となっているものも好ましく採用される。微小区分のそれぞれにおいて、ＤＮＡプローブ等の種類を変えることについては特に制限はなく、用途に応じて適宜変化させることができる。
スライドグラスの形状は特に限定されず、例えば、フィルムまたはシートのような平板状のものであってもよく、また円盤状等のものであってもよい。また、スライドグラスの厚さ、大きさ等にも特に制限はなく、通常用いられるのと同様の範囲とすることができる。
スライドグラスの基体となるガラスの特性についても特に限定されるものではないが、基体表面につける反応性物質との親和性等の種々の特性を考慮して適宜選択できる。
なお、ガラス基体の表面は、Ｒａで１ｎｍ〜１０００ｎｍの範囲で意図的に粗面化されていることも望ましい。このような粗面化表面は基体の表面積が増えて多量のＤＮＡプローブ等を密度を上げて固定させることに好都合であるからである。
本発明のスライドグラスに載せることができるオリゴヌクレオチド断片（プローブ）については、１本鎖又は２本鎖のＤＮＡ、ＲＮＡ断片等、塩基数にも特に制限はない。オリゴヌクレオチド断片の固定は、スライドグラスの表面への化学結合等により行うことができる。例えば、ダイヤモンドライクカーボンによる表面処理層を形成させたスライドガラスを用いる場合、表面を活性化、すなわちＤＮＡと化学結合しやすくした後に、ＤＮＡの末端塩基のアミノ基を結合することができる。
この場合のスライドグラス表面活性化の一例を挙げると、該スライドグラスを塩素ガス中で固体支持体に紫外線照射してダイヤモンドライクカーボン膜表面を塩素化し、次いでアンモニアガス中で紫外線照射してアミノ化した後、適当な酸クロリド、あるいはジカルボン酸無水物を用いてカルボキシル化し、末端のカルボキシル基をカルボジイミド或いはジシクロヘキシルカルボジイミドおよびＮ−ヒドロキシスクシンイミドと脱水縮合する。この処理により、アミド結合を介して炭化水素基の末端に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル基等の活性エステル基が結合した基を固定化することができる。
このようにして、スライドグラス表面を活性化させておけば、例えば、塩基配列が既に解明されている数万本のＤＮＡ断片（プローブ）、蛋白質、ペプチド等を担持させることができる。
また、該スライドグラス上にオリゴｄＴプライマーを結合させておき、逆転写反応等で、目的のｃＤＮＡを伸張させると同時にスライドグラスに結合することもできる。
さらに、ＰＣＲ等を用いてスライドグラス上で多数のＤＮＡ鎖を伸張させ、かつ結合させることもできる。
このようにして、ＤＮＡ断片を結合させた後、これに蛍光標識したＤＮＡサンプルを流すと、ＤＮＡサンプルは、該スライドグラス上に結合させたＤＮＡ断片（プローブ）のうちの相補的な配列を有するプローブとハイブリダイズするので、蛍光スポットとしてＤＮＡサンプルの配列を解明することができる。
特に本発明の遺伝子解析用スライドグラスは、裏面に反射層が形成されていることから、蛍光スポットを明瞭に観察することができる。
このように、本発明のスライドグラスは、あるＤＮＡの塩基配列を従来と同様の方法をそのまま使いながら従来よりも格段に明瞭に解析、特定することができることから、生体ゲノムの解析、遺伝子発現のモニタリング、ゲノムミスマッチング等の遺伝子解析等に利用されるほか、さらにガン遺伝子の突然変異の検出等遺伝子診断や医薬品の開発等に有用である。以下、本発明を実施例によりさらに説明する。
実施例１
以下のようにして、遺伝子解析用に用いるためのスライドグラスを用意した。まず、ガラス基体として、２５ｍｍ（幅）×７５ｍｍ（長さ）×１ｍｍ（厚み）のものを用いた。このガラス基体の表面に、イオン化蒸着法により、メタンガス９５体積％、水素ガスを５体積％を混合したガスを原料として、ＤＬＣ膜を２５ｎｍ厚みに形成したスライドグラスを作成した。
次に、このスライドグラス表面を化学修飾し、活性化させた。
すなわち、ガラス基体表面を１分間塩素化した後、１０分間アミノ化し、さらに酸クロリドへ１０分間直接浸漬した。次に、超純水で洗浄後、活性化液へ浸漬して直接活性化を行った。活性化液の組成は、１，４−ジオキサン１ｍＬ、ハイドロゲンシアナミド２５ｍｇおよびＮ−ヒドロキシスクシンイミド１５０ｍｇであり、これらを溶解したものである。さらに超純水で洗浄後、６５℃で乾燥して活性化した。
前記のようにして作成したスライドグラス表面に、５００ｐｏｍｏｌ／ｍＬ濃度のＦＡＭｄＡ１７溶液２μＬを滴下した（スポット）。この際、バッファーとして超純水或いは１％ホルムアルデヒドを用いた。
次に、インキュベーションを行った。条件は、水／ホルムアミド＝１／１雰囲気中６５℃で１時間とした（乾燥）。
こうして得られた遺伝子解析用として用いるスライドグラスにつき、蛍光強度を測定した。測定時間は１分とし、装置はＬＡＳ−１０００Ｐｌｕｓを用いて、スポット後および乾燥（６５℃）後の蛍光強度を測定したが、従来用いられているスライドよりも優れた値であった。
本発明のスライドグラスは、スポット後および乾燥後の蛍光強度も、従来のスライドグラス上のスポット後および乾燥後の蛍光強度よりも優れていた。すなわち、本発明のスライドグラスは、スポットしたＤＮＡあるいは蛋白質等の生体物質断片が洗い流されずにスライドグラス上に残留しており、スポットが明瞭に検出できた。
一方、従来のスライドグラスは、スポットしたＤＮＡあるいは蛋白質等の生体物質の断片が洗い流されてしまい、スライドグラス上に残留していず、スポットが明瞭に検出できなかった。
実施例２
以下のようにして、遺伝子解析用に用いるためのスライドグラスを用意した。まず、ガラス基体として、２５ｍｍ（幅）×７５ｍｍ（長さ）×１ｍｍ（厚み）のものを用いた。次いでガラス基体の表面に、厚さ５００ｎｍのダイヤモンド膜を合成した。ダイヤモシド膜の合成はレーザーアプレージョン法を用いて行い、酸素ガス雰囲気中でダイヤモンドを含有するターゲットから炭素を飛散させて基板上に堆積させた。
次に、このスライドグラス表面に実施例１と同様にしてを化学修飾・活性化処理を施した。こうして得られた遺伝子解析用として用いるスライドグラスにつき、実施例１と同様にして蛍光強度を測定したところ、従来用いられているスライドグラスに比べてスポット後、乾燥後ともに従来のスライドグラスよりも優れた値を示した。
実施例３
以下のようにして、遭伝子解析用に用いるためのスライドグラスを用意した。まず、ガラス基体として、２５ｍｍ（幅）×７５ｍｍ（長さ）×１ｍｍ（厚み）のものを用いた。次いでガラス基体の表面に、スパッタリング法によりグラファイト膜を形成させた。アルゴンガス雰囲気中でグラファイトを含有するターゲットから炭素を飛散させて基板上に堆積させ、厚さ２５μｍのグラファイト膜を形成させた。
次に、このスライドグラス表面に実施例１と同様にしてを化学修飾・活性化処理を施した。こうして得られた遺伝子解析用として用いるスライドグラスにつき、実施例１と同様にして蛍光強度を測定したところ、従来用いられているスライドグラスに比べてスポット後、乾燥後ともに従来のスライドグラスよりも優れた値を示した。
産業上の利用可能性
本発明のスライドグラスは、従来と同様の装置や方法を用いて、ＤＮＡの塩基配列を来よりも格段に明瞭に解析、特定することができる。
本発明のスライドグラスは、生体ゲノムの解析、遺伝子発現のモニタリング、ゲノムミスマッチング等の遺伝子あるいは蛋白質等の生体物質の解析等に有効利用できる。
さらに、ガン遺伝子の突然変異の検出等遺伝子診断や医薬品の開発等に有用である。
【図面の簡単な説明】
図１は、本発明のスライドグラス上にプローブを固定化する場合の概略説明図である。
【図１】
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【国際調査報告】
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2001075447.tif 000005
2001075447.tif 000006