(57)【要約】この発明は、光学異性体混合物を生産性良く光学分割することのできる光学異性体分離用充填剤、及びそれを利用して光学分割を行う疑似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法を提供することを目的とし、光学活性な高分子化合物を特定の割合で担体に担持してなる光学異性体分離用充填剤を提供し、それを使用し、特定の保持容量比となる条件でクロマト分取を行うことを特徴とする疑似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
光学活性な高分子化合物を担体に担持させてなる光学異性体分離用充填剤において、光学活性な高分子化合物の担持量が前記光学異性体分離用充填剤の質量に対して少なくとも２３質量％である光学異性体分離用充填剤。
【請求項２】
光学活性な高分子化合物が多糖誘導体である請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤。
【請求項３】
多糖誘導体がセルロース　のエステル及びカルバメート誘導体、並びにアミロースのエステル及びカルバメート誘導体よりなる群から選択される少なくとも一種である前記請求項２に記載の光学異性体分離用充填剤。
【請求項４】
前記担体の平均粒径が５〜７０μｍである前記請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤。
【請求項５】
擬似移動床式クロマトグラフィーによる光学分割方法に使用される請求項１記載の光学異性体分離用充填剤。
【請求項６】
光学活性な高分子化合物を担体に担持してなる光学異性対分離用充填剤を使用する擬似移動床式クロマトグラフィーによる光学分割において、光学活性な前記高分子化合物の担持量が前記光学異性体分離用充填剤の質量に対して少なくとも２３質量％である光学異性体分離用充填剤を用いて光学分割を行う擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離法方法。
【請求項７】
以下の式（１）及び（２）により算出される保持容量比ｋ１’および／またはｋ２’の値が少なくとも１である条件で光学分割を行うことを特徴とする請求項６記載の擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法。
ｋ１’＝（ｖ１−ｖ０）／ｖ０……（１）
ｋ２’＝（ｖ２−ｖ０）／ｖ０……（２）
（ただし、ｖ１およびｖ２それぞれは、溶質成分である各光学異性体の保持容量、ｖ０はデッドボリュームを表す。）
【請求項８】
光学活性な高分子化合物が多糖誘導体である請求項６記載の擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法。
【請求項９】
多糖誘導体がセルロース　のエステルおよびカルバメート誘導体、並びにアミロースのエステルおよびカルバメート誘導体よりなる群から選択される少なくとも一種であることを特徴とする請求項８記載の擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法。
【請求項１０】
前記担体の平均粒径が５〜７０μｍである前記請求項６記載の擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、光学異性体分離用充填剤、及び光学異性体の分離方法に関する。本発明は、更に詳しくは、光学異性体混合物の分離に好適な光学異性体分離用充填剤、及びその光学異性体分離用充填剤を使用した擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法に関する。
従来の技術
従来、二種以上の成分を含有する異性体混合溶液等の原料の中から、必要な成分を分離する工業的な方法としては、クロマトグラフィー法、特に液体クロマトグラフィー法が広く採用されている。
この方法は、充填剤としてイオン交換樹脂、ゼオライト、シリカゲル等の吸着剤を使用し、原料混合物中に含有される各成分間の前記吸着剤に対する吸着性能の差を利用して分離する方法である。この方法においては、溶離液として水、もしくは有機溶媒またはこれらの混合物が使用される。そして、目的成分を含有する溶出液を濃縮することにより高純度の目的成分を得ることができる。
この液体クロマトグラフィー法としては、回分方式および擬似移動床方式が知られている。
回分方式の液体クロマトグラフィー法は、分析レベルのクロマトグラムの結果から相似形によるスケールアップによって、クロマト分取が行えるため、目的成分を短時間で得られるというメリットがある。しかしながら、使用する溶離液の量が多く、吸着剤の使用効率が低いことから生産性が低く、このため回分式の液体クロマトグラフィー法によるクロマト分取は一般に高コストである。一方、擬似移動床式クロマトグラフィーは、使用する溶離液量が回分方式と比べて少ないこと、および連続的に成分分離が可能であることから、回分式クロマト分取と比較すると分取生産性が高く、工業規模での異性体の分離には極めて有効な分離方法である。
光学異性体混合物の光学分割に擬似移動床式クロマトグラフィーを使用した具体的な例としては、特開平４−２１１０２１号公報及び特開平６−２３９７６７号公報に開示されているように、担体であるシリカゲルに多糖誘導体を担持させた光学分割用充填剤を使用する方法を挙げることができる。
一方で、擬似移動床法を用いた光学分割において、運転コストを下げる努力が行われている。例えばＵＳ５，５１８，６２５号公報に開示されている擬似移動床法を用いた光学分割では、０．１〈ｋ’〈１．０の条件で運転することによるコストダウンを試みている。なお、このｋ’は保持容量比を示す。しかしながら、その節減効果が小さくて根本的な解決方法とは言い難い。
したがって、より一層分取生産性の優れた光学異性体分離用充填剤、及び光学異性体の分離方法が強く望まれていた。
本発明は上記事情に基づいてなされたものである。すなわち本発明の目的は、より一層分取生産性の優れた、しかも光学異性体の分離に好適な光学異性体分離用充填剤を用いた擬似移動床式クロマトグラフィーを用いて、さらに高い分取生産性を持った光学異性体の分離方法を提供することにある。
発明の開示
本発明者らは前記課題を解決するべく鋭意研究した結果、光学活性な高分子化合物を担体に担持させてなる光学異性体分離用充填剤におけるその光学活性な高分子化合物の担持量を、例えば前述のＵＳ５，５１８，６２５号公報に記載されている従来市販の充填剤における多糖誘導体担持量が１０〜２０質量％であるのに対し、少なくとも２３質量％とすること、更には前記充填剤を擬似移動床式クロマトグラフィー法に用いて光学分割をする際、保持容量比ｋ１’および／またはｋ２’の値を少なくとも１とすることにより、光学異性体混合物の光学分割の生産性を向上させることを見出して、本発明を完成した。
すなわち、前記課題を解決するためのこの発明の手段は、光学活性な高分子化合物を担体に担持させてなる光学異性体分離用充填剤において、光学活性な高分子化合物の担持量が前記光学異性体分離用充填剤の質量に対して少なくとも２３質量％である光学異性体分離用充填剤である。
この発明に係る光学異性体分離用充填剤の好適な態様は、光学活性な高分子化合物が多糖誘導体である。
この発明に係る光学異性体分離用充填剤の好適な態様は、多糖誘導体がセルロースのエステル及びカルバメート誘導体、並びにアミロース　のエステル及びカルバメート誘導体よりなる群から選択される少なくとも一種である。
この発明に係る光学異性体分離用充填剤の好適な態様は、前記担体の平均粒径が５〜７０μｍである。
この発明に係る光学異性体分離用充填剤の好適な態様は、この光学異性体分離用充填剤が擬似移動床式クロマトグラフィーによる光学分割方法に使用される。
この発明の他の手段は、光学活性な高分子化合物を担体に担持してなる光学異性体分離用充填剤を使用する擬似移動床式クロマトグラフィーによる光学分割において、光学活性な前記高分子化合物の担持量が前記光学異性体分離用充填剤の質量に対して少なくとも２３質量％である光学異性体分離用充填剤を用いて光学分割を行う擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法である。
前記擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法の好適な態様は、以下の式（１）及び（２）により算出される保持容量比ｋ１’および／またはｋ２’が少なくとも１である条件で光学分割を行うことである。
ｋ１’＝（ｖ１−ｖ０）／ｖ０…（１）
ｋ２’＝（ｖ２−ｖ０）／ｖ０…（２）
（ただし、ｖ１およびｖ２それぞれは、溶質成分である各光学異性体の保持容量、ｖ０はデッドボリュームを表す。）
前記擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法の好適な態様は、前記光学活性な高分子化合物が多糖誘導体である。
前記擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法の好適な態様は、多糖誘導体がセルロース　のエステル及びカルバメート誘導体、並びにアミロースのエステル及びカルバメート誘導体よりなる群から選択される少なくとも一種である。
前記擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法の好適な態様は、前記担体の平均粒径が５〜７０μｍである。
発明を実施するための最良の形態
以下、本発明における実施の形態について詳細に説明する。
本発明における、光学異性体分離用充填剤は、光学活性な高分子化合物の担持量が光学異性体分離用充填剤の質量に対して少なくとも２３質量％である。前記担持量が２３質量％未満であると、負荷量が少ないため、光学異性体を分離する効率が低下して工業的でない。生産性を考慮すると、担体上への光学活性な高分子化合物の担持量は、光学異性体分離用充填剤に対して少なくとも２７質量％が好ましい。担持量の上限は特にないが、担持量が６０質量％になると段数の減少による分離効率の低下が起こるため好ましくない。ここでいう担持量とは、光学異性体分離用充填剤の質量に対する光学活性な高分子化合物の質量の割合で示される。
光学活性な高分子化合物としては、例えば光学活性な置換基を有していない（メタ）アクリル酸エステル又は（メタ）アクリルアミド、光学活性な置換基を有した（メタ）アクリル酸エステル又は（メタ）アクリルアミド、スチレン、アセチレン等の重合体又は共重合体、多糖及びその重合体、ペプチド、タンパク質等が挙げられる。分離対象化合物に対して不斉識別能力を有する高分子化合物が好ましく、特に不斉識別能力を有することで知られている（メタ）アクリル酸エステル又は（メタ）アクリルアミドの重合体又は共重合体、多糖及びその重合体、タンパク質が好ましい。なお、本明細書において、（メタ）アクリル酸エステルとは、アクリル酸エステル又はメタアクリル酸エステルを、（メタ）アクリルアミドとは、アクリルアミド又はメタアクリルアミドを意味する。これらの光学活性な高分子化合物の中でも、側鎖に光学活性な置換基を有する（メタ）アクリル酸エステル又は（メタ）アクリルアミドの重合体又は共重合体、多糖及びその誘導体が好ましく、特に多糖誘導体が好ましい。多糖としては、合成多糖、天然多糖、及び天然物変成多糖のいずれかを問わず、光学活性であれば特に制限がない。
該多糖を例示すれば、α−１，４−グルカン（アミロース　、アミロペクチン）、β−１，４−グルカン（セルロース　）、α−１，６−グルカン（デキストラン）、β−１，４−グルカン（プスツラン）、α−１，３−グルカン、β−１，３−グルカン（カードラン、ジソフィランなど）、β−１，２−グルカン（Ｃｒａｗｎ　Ｇａｌｌ多糖）、β−１，４−ガラクタン、α−１，６−マンナン、β−１，４−マンナン、β−１，２−フラクタン（イヌリン）、β−２，６−フラクタン（レバン）、β−１，４−キシラン、β−１，３−キシラン、β−１，４−Ｎ−アセチルキトサン（キチン）、プルラン、アガロース、アルギン酸、シクロデキストリン等が挙げられる。
これらの中では、高純度の多糖を容易に入手できるセルロース　、アミロース　、β−１，４−マンナン、イヌリン、カードラン等が好ましく、特にセルロース　、アミロース　等が好ましい。
これら多糖の数平均重合度（１分子中に含まれるピラノースあるいはフラノース環の平均数）は、通常、少なくとも５、好ましくは少なくとも１０である。一方、特に上限はないが、１，０００以下であるのが取り扱いの容易さにおいて好ましく、特に好ましくは５００以下である。さらに言うと、多糖の好適な数平均重合度は５〜１０００、特に１０〜１０００、さらには１０〜５００である。
好適に使用できる多糖誘導体としては、多糖エステル誘導体、および多糖カルバメート誘導体等を挙げることができる。
これらの中でも特に好ましい多糖エステル誘導体または多糖カルバメート誘導体としては、多糖の有する水酸基またはアミノ基上の水素原子の一部または全部を下記の式（１）、式（２）、式（３）および式（４）のいずれかで示される原子団の少なくとも一種と置換してなる化合物を挙げることができる。
2002030853.tif 000002
2002030853.tif 000003
ただし、式中、Ｒはヘテロ原子を含んでもよい芳香族炭化水素基であり、無置換であっても、または炭素数１〜１２のアルキル基、炭素数１〜１２のアルコキシ基、炭素数１〜１２のアルキルチオ基、シアノ基、ハロゲン原子、炭素数１〜８のアシル基、炭素数１〜８のアルコキシカルボニル基、ニトロ基、アミノ基および炭素数１〜８のアルキルアミノ基よりなる群から選択される少なくとも一種の基を置換していても良い。これらの中でも特に好ましい基としては、前記芳香族炭化水素基としては、フェニル基、ナフチル基、フェナントリル基、アントラシル基、インデニル基、フリル基、チオニル基、ピリル基、ベンゾフリル基、ベンズチオニル基、インジル基、ピリジル基、ピリミジル基、キノリル基、イシキノリル基などを挙げることができる。これらの中でも好ましいのは、フェニル基、ナフチル基、ピリジル基などであり、特に好ましいのはハロゲン化フェニル基およびアルキルフェニル基である。
Ｘは炭素数１〜４の炭化水素基であり、二重結合または三重結合を含んでいても良い。Ｘとしては、メチレン基、メチルメチレン基、エチレン基、エチリデン基、エテニレン基、エチニレン基、１，２−または１，３−プロピレン基、１，１−または２，２−プロピリジン基等を挙げることができる。
本発明で多糖誘導体として好適に採用することができる多糖のカルバメート誘導体は下記の式５または式６で示されるイソシアネートと多糖とを反応させることにより、多糖のエステル誘導体は下記の式７または式８で示される酸クロリドと多糖とを反応させることにより、いずれも公知の方法により製造することができる。
2002030853.tif 000004
【０００１】
2002030853.tif 000005
ただし、式中、ＲおよびＸは前記と同様の意味を示す。
本発明において、多糖誘導体における置換基の導入率は、通常１０％〜１００％であり、好ましくは３０％〜１００％であり、更に好ましくは８０％〜１００％である。前記導入率が１０％未満であると、光学分割能力をほとんど示さないことが多いので好ましくない。また、前記導入率が３０％未満であると、光学分割しようとする光学異性体混合物の種類、濃度によっては分離が不十分になることがあるので好ましくない。前記導入率が８０％を超えると、特に光学異性体の分離能に優れた粒子を得ることができるので好ましい。前記置換基の導入率は、例えば、置換基導入の前後における炭素、水素、および窒素の変化を元素分析により調べることによって求めることができる。
本発明における担体としては、多孔質有機担体および多孔質無機担体があげられ、好ましいのは多孔質無機担体である。多孔質有機担体として適当なものは、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、およびポリアクリレート等からなる群から選択される高分子物質であり、多孔質無機担体として適当なものは、シリカ、アルミナ、マグネシア、ガラス、カオリン、酸化チタン、珪酸塩、およびヒドロキシアパタイトなどである。特に好ましい担体はシリカゲルである。シリカゲルの平均粒径は５〜７０μｍ、好ましくは１０〜５０μｍである。この平均粒径が５μｍよりも小さいと運転圧が上昇し、また平均粒径が７０μｍよりも大きいと生産性が落ちるので好ましくない。シリカゲルの平均孔径は１０Å〜１００μｍ、好ましくは５０Å〜５０，０００Åである。表面は残存シラノールの影響を排除し、光学活性な高分子化合物との親和性を向上させるために表面処理が施されていることが望ましいが、全く表面処理が施されていなくても問題無い。
好適な表面処理の方法としては、例えば有機シラン化合物を用いたシラン化処理、プラズマ重合による表面処理法を挙げることができる。
本発明に係る光学異性体分離用充填剤は、光学活性な高分子化合物例えば多糖誘導体を直接担体に化学結合する方法、および光学活性な高分子化合物例えば多糖誘導体溶液を担体に塗布してから溶剤を留去する方法のいずれの方法によっても得られる。また、このとき、光学活性な高分子化合物例えば多糖誘導体の溶解に使用される溶剤は、光学活性な高分子化合物例えば多糖誘導体を溶解することができるのであれば、通常使用されている有機溶剤のいかなるものでも良い。
さらに担体と塗布された光学活性な高分子化合物例えば多糖誘導体との化学結合、担体上の光学活性な高分子化合物例えば多糖誘導体同士の化学結合、第三成分を使用した化学結合、および、担体上の光学活性な高分子化合物例えば多糖誘導体への光照射、γ線などの放射線照射、マイクロ波などの電磁波照射による反応、ラジカル開始剤などによるラジカル発生による反応等によるさらなる化学結合を形成させることで、光学活性な高分子化合物例えば多糖誘導体の担体上の一層強固な固定化を図ってもよい。
擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた本発明の分離方法は、光学異性体混合物の分離に好適である。ここで、光学異性体混合物としては、例えば７−［２−シクロプロピル−４−（４−フルオロフェニル）キノリン−３−イル］−３，５−ジヒドロキシ−６−ヘプテン酸エチルを挙げることができ、また、これを除く例えばジソピルアミド（Ｄｉｓｏｐｙｒａｍｉｄｅ）、ワルファリン（Ｗａｒｆａｒｉｎ）等の各種の光学異性体混合物を、この発明の方法の原料として採用することができる。この擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法は、分離対象である化合物に応じて有機溶媒を移動相とする順相系、及び水溶性溶媒を移動相とする逆相系の両方を採用することができる。更に、光学異性体混合物を分離するためには、超臨界流体を移動相とする超臨界流体クロマトグラフィーを用いることもできる。
次に、擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法の一例を示すが、擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた本発明の分離方法はこの方法のみに限らず、例えばＷＯ００／２５８８５号公報に開示されているように、運転の最適化のためにサイクル時間などの条件を任意に設定してもよい。
擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法による吸着分離は、基本的操作として次に示す吸着操作、濃縮操作、脱着操作および脱離回収操作が連続的に循環して実施される。
（１）吸着操作
光学異性体混合物が充填剤と接触し、吸着されやすい光学異性体（強吸着成分）が吸着され、吸着されにくい他の光学異性体（弱吸着成分）がラフィネート流れとして脱離液とともに回収される。
（２）濃縮操作
強吸着成分を吸着した充填剤は後で述べるエクストラクトの一部と接触させられ、充填剤上に残存している弱吸着成分が追い出され、強吸着成分が濃縮される。
（３）脱着操作
濃縮された強吸着成分を含む充填剤は脱離液と接触させられ、強吸着成分が充填剤から追い出され、脱離液を伴ってエクストラクト流れとして回収される。
（４）脱離液回収操作
実質的に脱離液のみを吸着した充填剤は、ラフィネート流れの一部と接触し、充填剤に含まれる脱離液の一部が脱離液回収流れとして回収される。
以下、図面に基づいて本発明における方法を説明する。図１は、本発明で使用する擬似移動床式クロマトグラフ装置の一例を示す模式図であり、図２は本発明で使用する擬似移動床式クロマトグラフ装置の別の例を示す模式図である。
図１においては擬似移動床式クロマトグラフ装置の主要部である充填床の内部は１２個の単位充填床に区分されており、図２においては８個の単位充填床に区別されているが、それらの数や大きさは光学異性体混合物含有液の組成、流量、圧損、装置の大きさなどの要因によって決まるものであり、限定されるものではない。
図１において１〜１２は充填剤の入った室（吸着室）であり、相互に連結されている。１３は脱離液供給ライン、１４はエクストラクト抜き出しライン、１５は光学異性体混合液供給ライン、１６はラフィネート抜き出しライン、１７はリサイクルライン、１８はポンプを示す。
図１で示した吸着室１〜１２と各ライン１３〜１６の配置の状態では、吸着室１〜３で脱着操作、吸着室４〜６で濃縮操作、吸着室７〜９で吸着操作、吸着室１０〜１２で脱離液回収操作がそれぞれ行われている。このような擬似移動床では、一定時間間隔ごとにバルブ操作により各供給液および抜き出しラインを液流れ方向に吸着室１室分だけそれぞれ移動させる。したがって、次の吸着室の配置状態では、吸着室２〜４で脱着操作、吸着室５〜７で濃縮操作、吸着室８〜１０で吸着操作、吸着室１１〜１で脱離液回収操作がそれぞれ行われるようになる。このような操作を順次行うことによって光学異性体の混合物の分離処理が連続的に効率よく達成される。
また、図２に示した吸着室１〜８と各ライン１３〜１６の配置の状態では、吸着室１で脱離液回収操作、吸着室２〜５で吸着操作、吸着室６〜７で濃縮操作、吸着室８で脱着操作がそれぞれ行われている。このような擬似移動床では、一定時間間隔ごとにバルブ操作により各供給液および抜き出しラインを液流れ方向に吸着室１室分だけそれぞれ移動させる。従って、次の吸着室の配置状態では、吸着室２で脱着操作、吸着室３〜６で濃縮操作、吸着室７〜８で吸着操作、吸着室１で脱離液回収操作がそれぞれ行われるようになる。このような操作を順次行うことによって光学異性体の混合物の分離処理が連続的に効率よく達成される。
擬似移動床式クロマトグラフィーを使用した本発明の分離方法において、保持容量比ｋ’が少なくとも１となる（換言すると、１以上となる）条件でクロマト分取を行うことが好ましい。ここでいうｋ１’およびｋ２’は下式で算出される保持容量比である。
ｋ１’＝（ｖ１−ｖ０）／ｖ０……（１）
ｋ２’＝（ｖ２−ｖ０）／ｖ０……（２）
このとき、ｖ１およびｖ２それぞれは、溶出成分である各光学異性体の保持容量、ｖ０はデッドボリュームを表す。
全ての保持容量比ｋ１’およびｋ２’が１未満の場合は、生産性が下がるので好ましくない。保持容量比ｋ１’およびｋ２’は、いずれかが少なくとも１であることが好ましいが、保持容量比ｋ１’およびｋ２’の両方が少なくとも１であるのが生産性向上の点からより好ましい。
実施例
（合成例１）
担持量２４質量％であるセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）担持充填剤からなるＨＰＬＣカラムの作製
▲１▼シリカゲル表面処理
多孔質シリカゲル（平均粒径２０μｍ）を公知の方法により、３−アミノプロピルトリエトキシシランと反応させることによりアミノプロピルシラン処理（ＡＰＳ処理）を施した。得られたＡＰＳ処理シリカゲルを３，５−ジメチルフェニルイソシアネートと反応することでカルバモイル表面処理が施されたシリカゲルを得た。このカルバモイル表面処理シリカゲルを元素分析した結果として得られた炭素含有率（Ｃ％）を表１に示した。
▲２▼セルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）の合成
窒素雰囲気下、セルロース　１００ｇを乾燥ピリジン３．８Ｌ中、４−クロロフェニルイソシアネート７１４．１ｇ（２．５当量）とピリジン還流温度下、６０時間加熱攪拌を行った後、２−プロパノール４０Ｌに注ぎ込んだ。析出した固体はグラスフィルターで濾取し、２−プロパノールで数回の洗浄後、真空乾燥（８０℃、１５時間）を行った。その結果、若干黄色がかった白色固体、２８７ｇ（７５％）が得られた。このセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）の元素分析を行った結果として得られた炭素含有率（Ｃ％）を表１に示した。
▲３▼担持量２４質量％であるセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）のシリゲル担持充填剤の作製
上記▲２▼で得たセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）１２０ｇをアセトン６００ｍｌに溶解させ、このポリマードープの半量を均一に▲１▼のシリカゲル３８０ｇに塗布した。塗布後、４０℃および４０ＫＰａの条件下で４５分間かけてアセトンを減圧留去した。さらにポリマードープの残り半量を均一にシリカゲルに塗布し、同様の条件で減圧留去を行うことで目的である２４質量％の担持量をもったセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）担持型充填剤を得た。この充填剤の元素分析を行った結果として得られた炭素含有率（Ｃ％）及び炭素含有量から算出されるセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）の充填剤に対する担持量を表１に示した。
▲４▼作製充填剤からのＨＰＬＣ用充填カラム作製
上記▲３▼で作製したセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）担持型充填剤を、長さ２５ｃｍおよび内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムに、スラリー充填法で充填し、光学異性体用分離カラムを作製した。
（合成例２）
担持量３０質量％であるセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）担持充填剤からなるＨＰＬＣカラムの作製
▲１▼シリカゲル表面処理
合成例１の▲１▼と同じ方法によって表面処理を行った。
▲２▼セルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）の合成
前記合成例１の▲２▼と同じ方法によってセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）を合成した。
▲３▼担持量３０質量％であるセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）のシリゲル担持充填剤の作製
上記▲２▼で得たセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）１５０ｇをアセトン８００ｍｌに溶解させ、このポリマードープを均一に前記▲１▼のシリカゲル３５０ｇに塗布した。塗布後、４０℃および４０ＫＰａの条件下で３０分間かけてアセトンを減圧留去することで目的の３０質量％担持量をもったセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）担持型充填剤を得た。この充填剤の元素分析を行った結果として得られた炭素含有率（Ｃ％）及び炭素含有量から算出されるセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）の充填剤に対する担持量を表１に示した。
▲４▼作製充填剤からのＨＰＬＣ用充填カラム作製
上記▲３▼で作製したセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）担持型充填剤を、長さ２５ｃｍおよび内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムに、スラリー充填法で充填し、光学異性体用分離カラムを作製した。
（合成例３）
担持量２０質量％であるセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）担持充填剤からなるＨＰＬＣカラムの作製
▲１▼シリカゲル表面処理
合成例１の▲１▼と同じ方法によって表面処理を行った。
▲２▼セルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）の合成
上記合成例１の▲２▼と同じ方法によってセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）を合成した。
▲３▼担持量２０質量％であるセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）のシリゲル担持充填剤の作製
上記▲２▼で得たセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）１００ｇをアセトン６００ｍｌに溶解させ、このポリマードープを均一に▲１▼のシリカゲル４００ｇに塗布した。塗布後、４０℃および４０ＫＰａの条件下で３０分間かけてアセトンを減圧留去することで目的の２０質量％担持量をもったセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）担持型充填剤を得た。この充填剤の元素分析を行った結果として得られた炭素含有率（Ｃ％）及び炭素含有量から算出されるセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）の充填剤に対する担持量を表１に示した。
▲４▼作製充填剤からのＨＰＬＣ用充填カラム作製
上記▲３▼で作製したセルロース　トリス（４−クロロフェニルカルバメート）担持型充填剤を、長さ２５ｃｍおよび内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムに、スラリー充填法で充填し、光学異性体用分離カラムを作製した。
2002030853.tif 000006
なお、元素分析から求められた炭素含有量（Ｃ％）から担持量を算出する計算式は、以下のとおりである。
｛［Ｃ％（セルローストリス（４−クロロフェニルカルバメート）担持型充填剤）−Ｃ％（カルバモイル化シリカゲル）］／［Ｃ％（セルローストリス（４−クロロフェニルカルバメート）−Ｃ％（カルバモイル化シリカゲル））］｝×１００
（実施例１）
合成例１作製カラム及び充填剤を使用した保持容量比の測定と擬似移動床式クロマトグラフィー分離
液体クロマトグラフ装置を用いて、合成例１で作製したＨＰＬＣ用カラムにより下式（９）で示されるＤｉｓｏｐｙｒａｍｉｄｅの分析を行った。分析条件及び分析の結果得られた保持容量比を表２に記載した。クロマトグラムを図３に示した。
合成例１で作製した充填剤を８本のφ１．０ｃｍ×Ｌ１０ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置に取り付け、分取を行った。操作条件を下に記載した。小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置を運転した結果、得られた前成分（Ｒａｆｆｉｎａｔｅ）の光学純度、後成分（Ｅｘｔｒａｃｔ）の光学純度及び前成分の生産性を表３に記載した。
移動相：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール／ジエチルアミン＝２５／７５／０．１（ｖ／ｖ）
カラム温度：４０℃
Ｆｅｅｄ流速：１．７９ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｒａｆｆｉｎａｔｅ流速：３．１２ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｅｘｔｒａｃｔ流速：９．６３ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｅｌｕｅｎｔ流速：１０．９６ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｓｔｅｐ　ｔｉｍｅ：２．５ｍｉｎ．
Ｆｅｅｄ濃度：５０（ｍｇ／ｍｌ−移動相）
Ｚｏｎｅ−Ｉ流速：１３．９７ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＩ流速：４．３４ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＩＩ流速：６．１３ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＶ流速：３．００ｍｌ／ｍｉｎ．
2002030853.tif 000007
（実施例２）
合成例２作製カラム及び充填剤を使用した保持容量比の測定と擬似移動床式クロマトグラフィー分離
液体クロマトグラフ装置を用いて、合成例２で作製したＨＰＬＣ用カラムにより前記式（９）で示される化合物の分析を行った。分析条件及び分析の結果得られた保持容量比を表２に記載した。クロマトグラムを図４に示した。
合成例２で作製した充填剤を８本のφ１．０ｃｍ×Ｌ１０ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置に取り付け、分取を行った。操作条件を下に記載した。小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置を運転した結果、得られた前成分（Ｒａｆｆｉｎａｔｅ）の光学純度、後成分（Ｅｘｔｒａｃｔ）の光学純度及び前成分の生産性を表３に記載した。
移動相：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール／ジエチルアミン＝２５／７５／０．１（ｖ／ｖ）
カラム温度：４０℃
Ｆｅｅｄ流速：１．８３ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｒａｆｆｉｎａｔｅ流速：４．２４ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｅｘｔｒａｃｔ流速：１４．５５ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｅｌｕｅｎｔ流速：１６．９６ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｓｔｅｐ　ｔｉｍｅ：２．５ｍｉｎ．
Ｆｅｅｄ濃度：５０（ｍｇ／ｍｌ−移動相）
Ｚｏｎｅ−Ｉ流速：２０．４４ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＩ流速：５．８９ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＩＩ流速：７．７２ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＶ流速：３．４８ｍｌ／ｍｉｎ．
（比較例１）
合成例３作製カラム及び充填剤を使用した保持容量比の測定と擬似移動床式クロマトグラフィー分離
液体クロマトグラフ装置を用いて、合成例３で作製したＨＰＬＣ用カラムにより（９）で示される化合物の分析を行った。分析条件及び分析の結果得られた保持容量比を表２に記載した。クロマトグラムを図５に示した。
合成例３で作製した充填剤を８本のφ１．０ｃｍ×Ｌ１０ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置に取り付け、分取を行った。操作条件を下に記載した。小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置を運転した結果、得られた前成分（Ｒａｆｆｉｎａｔｅ）の光学純度、後成分（Ｅｘｔｒａｃｔ）の光学純度及び前成分の生産性を表３に記載した。
移動相：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール／ジエチルアミン＝２５／７５／０．１（ｖ／ｖ）
カラム温度：４０℃
Ｆｅｅｄ流速：１．６０ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｒａｆｆｉｎａｔｅ流速：２．９０ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｅｘｔｒａｃｔ流速：７．９３ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｅｌｕｅｎｔ流速：９．２２ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｓｔｅｐ　ｔｉｍｅ：２．５ｍｉｎ．
Ｆｅｅｄ濃度：５０（ｍｇ／ｍｌ−移動相）
Ｚｏｎｅ−Ｉ流速：１２．２４ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＩ流速：４．３１ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＩＩ流速：５．９１ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＶ流速：３．０２ｍｌ／ｍｉｎ．
2002030853.tif 000008
表２中における分析条件
▲１▼移動相：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール／ジエチルアミン＝２５／７５／０．１（ｖ／ｖ／ｖ）、流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、温度：４０℃、検出：２５４ｎｍ、打込み量：１．５ｍｇ／ｍｌ（移動相）×２．５μｌ
▲２▼移動相：２−プロパノール＝１００／０．１（ｖ／ｖ）、流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、温度：４０℃、検出：２５４ｎｍ、打込み量：１．５ｍｇ／ｍｌ（移動相）×２．５μｌ
ｋ１’およびｋ２’は下式から算出した。
ｋ１’＝（ｖ１−ｖ０）／ｖ０、ｋ２’＝（ｖ２−ｖ０）／ｖ０、ｖ０はトリ−ｔｅｒｔ−ベンジルベンゼンの保持容量、ｖ１およびｖ２は溶質成分である各光学異性体の保持容量。
2002030853.tif 000009
表３中における移動相の種類
▲１▼：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール／ジエチルアミン＝２５／７５／０．１（ｖ／ｖ／ｖ）、
▲２▼：２−プロパノール／ジエチルアミン＝１００／０．１（ｖ／ｖ）
＊１：前成分、＊２：後成分
＊３：充填剤１ｋｇあたり１日に処理可能なラセミ体質量（ｋｇ）
（合成例４）
担持量３０質量％アミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）担持充填剤からなるＨＰＬＣカラムの作製
▲１▼シリカゲル表面処理
前記合成例１におけるのと同様にしてカルバモイル表面処理シリカゲルを得た。
▲２▼アミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）の合成
窒素雰囲気下、アミロース５０ｇを乾燥ピリジン、３．８Ｌ中、３，５−ジメチルイソシアネート３４０．７ｇ（２．５当量）とピリジン還流温度下、６０時間加熱攪拌を行った後、メタノール４０Ｌに注ぎ込んだ。析出した固体はグラスフィルターで濾取し、メタノールで数回の洗浄後、真空乾燥（８０℃、１５時間）を行った。その結果、若干黄色がかった白色固体、１７７ｇ（９５％）が得られた。
▲３▼担持量３０質量％であるアミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）のシリゲル担持充填剤の作製
上記▲２▼で得たアミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）１５．０ｇを酢酸エチル、１２０ｍｌに溶解させ、このポリマードープをシリカゲル３５．０ｇに塗布した。塗布後、酢酸エチルの減圧留去を行うことで目的の３０質量％担持量をもったアミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）担持型充填剤を得た。この充填剤の元素分析を行った結果として得られた炭素含有率（Ｃ％）及び炭素含有量から算出されるアミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）の充填剤に対する担持量を表４に示した。
▲４▼　作製充填剤からのＨＰＬＣ用充填カラム作製
上記▲３▼で作製したアミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）担持型充填剤を用い長さ２５ｃｍ、内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、光学異性体用分離カラムを作製した。
（合成例５）
担持量２０質量％アミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）担持充填剤からなるＨＰＬＣカラムの作製
▲１▼シリカゲル表面処理
合成例１の▲１▼と同じ方法によって表面処理を行った。
▲２▼アミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）の合成
合成例１の▲２▼と同じ方法によってアミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）を合成した。
▲３▼担持量２０質量％であるアミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）のシリゲル担持充填剤の作製
上記▲２▼で得たアミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）１０．０ｇを酢酸エチル７０ｍｌに溶解させ、このポリマードープを均一に上記▲１▼のシリカゲル４０．０ｇに塗布した。塗布後、酢酸エチルを減圧留去を行うことで目的の２０質量％担持量をもったアミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）担持型充填剤を得た。
▲４▼作製充填剤からのＨＰＬＣ用充填カラム作製
上記▲３▼で作製したアミロース　トリス（３，５−ジメチルフェニルカルバメート）担持型充填剤を用い長さ２５ｃｍ、内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、光学異性体用分離カラムを作製した。
（実施例３）
合成例４作製カラム及び充填剤を使用した保持容量比の測定と擬似移動床式クロマトグラフィー分離
液体クロマトグラフ装置を用いて、合成例１で作製したＨＰＬＣ用カラムにより、下記式（ＩＩ）で示されるＷａｒｆａｒｉｎ（ＩＩ）の分析を行った。分析条件及び分析の結果得られた保持容量比を表５に記載する。
2002030853.tif 000010
合成例４で作製した充填剤を８本のφ１．０ｃｍ×Ｌ１０ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置に取り付けて分取を行った。操作条件を下に記載した。小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置を運転した結果、得られた前成分（Ｒａｆｆｉｎａｔｅ）の光学純度、後成分（Ｅｘｔｒａｃｔ）の光学純度及び前成分生産性を表５に記載した。
移動相：エタノール／酢酸＝１００／０．１（ｖ／ｖ）
カラム温度：２５℃
Ｆｅｅｄ流速：３．１５ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｒａｆｆｉｎａｔｅ流速：５．２０ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｅｘｔｒａｃｔ流速：１９．２０ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｅｌｕｅｎｔ流速：２１．２５ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｓｔｅｐ　ｔｉｍｅ：２．５ｍｉｎ．
Ｆｅｅｄ濃度：２０（ｍｇ／ｍｌ−移動相）
Ｚｏｎｅ−Ｉ流速：２５．７９ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＩ流速：６．５９ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＩＩ流速：９．７４ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＶ流速：４．５４ｍｌ／ｍｉｎ．
（比較例２）
合成例５作製カラム及び充填剤を使用した保持容量比の測定と擬似移動床式クロマトグラフィー分離
液体クロマトグラフ装置を用いて、合成例２で作製したＨＰＬＣ用カラムによりＷａｒｆａｒｉｎ（ＩＩ）の分析を行った。分析条件及び分析の結果得られた保持容量比を表４に記載した。
合成例５で作製した充填剤を８本のφ１．０ｃｍ×Ｌ１０ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置に取り付けて、分取を行った。操作条件を下に記載した。小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置を運転した結果、得られた前成分（Ｒａｆｆｉｎａｔｅ）光学純度、後成分（Ｅｘｔｒａｃｔ）光学純度及び前成分生産性を表５に記載した。
移動相：エタノール／酢酸＝１００／０．１（ｖ／ｖ）
カラム温度：２５℃
Ｆｅｅｄ流速：２．１４ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｒａｆｆｉｎａｔｅ流速：４．１４ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｅｘｔｒａｃｔ流速：１５．３７ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｅｌｕｅｎｔ流速：１７．３４ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｓｔｅｐ　ｔｉｍｅ：２．５ｍｉｎ．
Ｆｅｅｄ濃度：５０（ｍｇ／ｍｌ−移動相）
Ｚｏｎｅ−Ｉ流速：２１．７６ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＩ流速：６．３９ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＩＩ流速：８．５４ｍｌ／ｍｉｎ．
Ｚｏｎｅ−ＩＶ流速：４．４２ｍｌ／ｍｉｎ．
2002030853.tif 000011
表４中の分析条件
▲１▼移動相：エタノール／酢酸＝１００／０．１（ｖ／ｖ／ｖ）、流速：０．５ｍｌ／ｍｉｎ、温度：２５℃、検出：２５４ｎｍ、打込み量：５．０ｍｇ／ｍｌ（移動相）×２．０μＬ
ｋ１’およびｋ２’は前記と同様である。
2002030853.tif 000012
移動相▲１▼：エタノール／酢酸＝１００／０．１（ｖ／ｖ／ｖ）
＊１：前成分、＊２：後成分
＊３：充填剤１ｋｇあたり１日に処理可能なラセミ体質量（ｋｇ）
産業上の利用分野
この発明によると、優れた光学分割能力を有する充填剤を光学分割用充填剤として使用することによって、連続的にかつ生産性よく光学異性体の光学分割を行うことができる光学異性体分離用充填剤及びこれを利用した擬似移動床式クロマトグラフィーを用いた光学異性体の分離方法を提供することができ、工業的に大幅なコストダウンが期待できる。
【図面の簡単な説明】
図１はこの発明を実施する擬似移動床式クロマト分離装置の一例を示す説明図である。図１において、１〜１２は単位カラム、１３は溶離液供給ライン、１４はエクストラクト抜き出しライン、１５は光学異性体混合溶液供給ライン、１６はラフィネート抜き出しライン、１７はリサイクルライン、及び１８は循環ポンプである。
図２はこの発明を実施する擬似移動床式クロマト分離装置の他の例を示す説明図である。
図３は実施例１で得られたクロマトグラムである。
図４は実施例２で得られたクロマトグラムである。
図５は比較例１で得られたクロマトグラムである。
図６は実施例３で得られたクロマトグラムである。
図７は比較例２で得られたクロマトグラムである。
【図１】
2002030853.tif 000013
【図２】
2002030853.tif 000014
【図３】
2002030853.tif 000015
【図４】
2002030853.tif 000016
【図５】
2002030853.tif 000017
【図６】
2002030853.tif 000018
【図７】
2002030853.tif 000019
【国際調査報告】
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2002030853.tif 000021
2002030853.tif 000022
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