(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料注入のためのインジェクションバルブと試料吸引ノズルの間の流路に、フィルターが設置されており、インジェクションバルブと試料吸引ノズルとフィルターを同一洗浄液で、かつ測定を実施中に洗浄する機構を有することを特徴とする液体クロマトグラフ。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、液体クロマトグラフに関する。
【０００２】
【従来の技術】
有機化学、生化学、医学などの分野における試料中の成分の分離や分取に液体クロマトグラフが汎用されている。この液体クロマトグラフは、通常、図４のような装置から構成されている。すなわち、溶離液などの移動相が収容される移動相容器１、移動相を送液するための送液ポンプ２、試料導入装置３、分離カラム４及び検出器５からなる。また、試料導入装置３は、通常、六方バルブからなるインジェクションバルブ６、吸引器７、試料吸引ノズル８及び試料容器９からなる。
【０００３】
上記の液体クロマトグラフを用いて試料の分離を行うには、溶離液などの移動相１１が送液ポンプ２により試料導入装置３を経由して、分離カラム４に入り、この分離カラム４により試料中の各成分が分離される。分離された各成分は検出器５によって、例えば、吸光度を測定する等によって検出され、その結果がクロマトグラム（図示せず）として表される。
【０００４】
上記液体クロマトグラフには、通常、その流路にフィルターが設置されて、試料中や溶離液中の不溶物を除去可能とされている。このようなフィルターの設置例としては、以下の例がある。
（１）インジェクションバルブ６とカラム４の間の流路に設置されるフィルターＦ１：この場合は、主に、インジェクションバルブ６から導入された試料に由来する不溶物の除去を目的とする。
（２）送液ポンプ２とインジェクションバルブ６の間の流路に設置されるフィルターＦ２：この場合は、主に、送液ポンプ２のプランジャーから出る摩耗物などの除去を目的とする。
（３）移動相吸入ノズルの先端部に設置されるフィルターＦ３：この場合は、主に、移動相中に混在するゴミなどの除去を目的とする。
【０００５】
これらのフィルターは、単独又は併用して用いられているが、いずれのフィルターにおいても、寿命があり、詰まって圧力が上昇すれば交換する必要がでてくる。しかしながら、液体クロマトグラフ用フィルターは高価であり、また、その交換作業も面倒である。そのため、フィルターの長寿命化の検討がされている。フィルターの長寿命化に関して、例えば、特開平２−２６２０５４号公報には、フィルターの孔径が溶離液の通液方向に順次変化しているフィルターが開示されている。しかし、このフィルターはその製造が煩雑であり、また、価格も高くなる。また、このフィルターでは、常に、一方の方向からのみ液体が通流される構造のため、フィルターに詰まったものが抜けにくいという問題もある。
【０００６】
また、インジェクションバルブ６とカラム４の間の流路に設置されるフィルターＦ１にあっては、フィルター部で測定すべき試料の拡散が起こり、分離性能が低下するという問題もある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記問題点に鑑みてなされたものであり、その目的は、フィルターの長寿命化が図られ、かつ、分離性能を低下させない液体クロマトグラフを提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明の液体クロマトグラフは、試料注入のためのインジェクションバルブと試料吸引ノズルの間の流路に、フィルターが設置されており、インジェクションバルブと試料吸引ノズルとフィルターを同一洗浄液で、かつ測定を実施中に洗浄する機構を有することを特徴とする。
【０００９】
図１に基づいて本発明の液体クロマトグラフを説明する。本発明の液体クロマトグラフは、試料注入のためのインジェクションバルブ６と試料吸引ノズル８の間の流路に、フィルターＦが設置されている。なお、本発明の液体クロマトグラフは、上記の位置にフィルターＦが設置されていることの他は、従来の液体クロマトグラフと同様の装置からなるので、図４の従来の液体クロマトグラフと同一の装置には同一の参照番号を付することにより、その説明を省略する。
【００１０】
本発明で用いられるフィルターは、従来から液体クロマトグラフに用いられている公知のフィルターが使用可能であり、材質としては、ステンレス鋼などの金属の焼結体；セラミック；フッ素樹脂などの合成高分子などが挙げられる。
【００１１】
上記フィルターの形状としても、特に制限はなく公知の形状でよく、例えば、円盤状、円柱状などが挙げられる。
【００１２】
上記フィルターの設置方法も公知の方法と同様であり、フィルター本体がホールダーに収納されて上記の流路に設置される。
【００１３】
本発明のクロマトグラフにおいて、上記のフィルターＦの他に、従来から使用されている前述のフィルターＦ１、フィルターＦ２及びフィルターＦ３などが設置されてもよく、その場合は、液体クロマトグラフのカラムの耐久性が更に向上する。
【００１４】
【作用】
本発明の液体クロマトグラフにおいては、試料吸入時には、図２に示すように、インジェクションバルブ６の接続口ａとｂ、ｃとｄが該バルブ内で接続され、吸引器７によって試料容器９中の試料が吸引され、フィルターＦで濾過されて、試料はループｂ−ｃの間に貯えられる。一方、この時、インジェクションバルブ６の接続口ｅとｆが該バルブ内で接続されており、移動相がカラムに通流し、カラムに注入済の試料の分離が行われる。
【００１５】
そして、カラムに試料の注入に際しては、図３に示すように、インジェクションバルブ６の接続口ｅとｂ、ｃとｆが該バルブ内で接続され、ループｂ−ｃの間に貯えられていた試料がカラムに注入される。一方、この時、インジェクションバルブ６の接続口ａとｄが該バルブ内で接続されているので、吸引器７側から洗浄液（図示せず）をフィルターＦ側に向けて流すことによりフィルターＦの洗浄を行なうことができる。フィルターＦを洗浄した後の洗浄液は廃液容器（図示せず）に送られる。
【００１６】
このように、本発明のクロマトグラフにおいては、試料が流れる方向と逆方向に洗浄液を流すことにより、フィルターの洗浄を行うことができるので、フィルターの詰まりを効果的に除去できるため、フィルターの寿命が延びる。
【００１７】
また、インジェクションバルブとカラムの間の流路にフィルターを設置する必要がないので、フィルター部で測定すべき試料の拡散が起こることによる分離性能の低下もない。
【００１８】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の実施例及び比較例を挙げることにより、本発明を詳細に説明する。
【００１９】
（実施例１）
以下の装置を用いて、図１に示した液体クロマトグラフを組み立てた。
移動相容器１
送液ポンプ２：島津製作所製、ＬＣ−９Ａ
試料導入装置３：六方バルブからなるインジェクションバルブ６、吸引器７、試料吸引ノズル８及び試料容器９からなる、自動試料導入装置（積水化学工業社製、ＡＳＵ−４２０）を用い、その自動試料導入装置のインジェクションバルブ６と試料吸引ノズル８の間の流路にフィルターＦ（孔径１０μｍ、直径５ｍｍ、厚さ３ｍｍのステンレス焼結フィルター）を設置して使用した。
カラム４：積水化学工業社製、商品名「Ｍｉｃｒｏｎｅｘ  Ａ１ｃ  ＨＳ−II」検出器５：島津製作所製、ＳＰＤ−６ＡＶ
更に、インジェクションバルブ６とカラム４の間の流路に、図４に示したフィルターＦ１（孔径５μｍ、直径５ｍｍ、厚さ３ｍｍのステンレス焼結フィルター）を設置した。
【００２０】
（比較例１）
自動試料導入装置３のインジェクションバルブ６と試料吸引ノズル８の間の流路にフィルターＦを設置しなかったことの他は、実施例１と同様にして液体クロマトグラフを組み立てた。
【００２１】
性能評価
実施例１及び比較例１の液体クロマトグラフの性能を以下のようにして評価した。
移動相容器１に移動相１１として、溶離液（１００ｍＭリン酸緩衝液）を収容した。試料容器９には試料として、健常人血液を溶血液〔トリトンＸ−１００（ポリエチレングリコールオクチルフェニルエーテル、和光純薬社製）が、濃度０．１重量％で溶解された、０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７）〕で３０倍に溶血希釈したものを入れた。この移動相１１を送液ポンプ２を用いて、流速２ｍｌ／分で通液しておき、この状態で、自動試料導入装置３により、３分毎に５００μｌの試料をカラム４に注入し、ヒトヘモグロビンＡ１ｃの分析を行った。実施例１のフィルターＦの洗浄は、３分毎に自動で行った。分析中の送液ポンプの表示する圧力について、その上昇値をモニターし、試料注入回数との関係を求め、表１に示した。
【００２２】
【表１】
0003838711.tif 000002
【００２３】
表１において、圧力上昇が早ければ早いほどフィルターＦ１の寿命が短いことを示すものである。従って、表１より、実施例１のクロマトグラフでは、フィルターＦを効果的に洗浄でき寿命が延びることに加え、フィルターＦ１の寿命も延びることが分かった。
【００２４】
【発明の効果】
本発明の液体クロマトグラフの構成は、上記の通りであり、試料注入のためのインジェクションバルブと試料吸引ノズルの間の流路に、フィルターが設置されているので、試料が流れる方向と逆方向に洗浄液を流すことにより、フィルターの洗浄を行うことができ、フィルターの詰まりを効果的に除去できるため、フィルターの長寿命化が図られ、かつ、分離性能を低下させない液体クロマトグラフを提供する。また、通常の液体クロマトグラフィー用自動試料導入装置には、逆洗浄のための装置が具備されているので、本発明の液体クロマトグラフは、従来の液体クロマトグラフ装置を僅かに改良するだけで製造できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の液体クロマトグラフの構成を示す図である。
【図２】試料吸入時の、インジェクションバルブの接続状態を示す図である。
【図３】カラムに試料の注入時の、インジェクションバルブの接続状態を示す図である。
【図４】従来の液体クロマトグラフの構成を示す図である。
【符号の説明】
１  移動相容器
２  送液ポンプ
３  試料導入装置
４  カラム
５  検出器
６  インジェクションバルブ
７  吸引器
８  試料吸入ノズル
９  試料容器
１１  移動相
Ｆ  フィルター
Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３  フィルター
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ  接続口
【図１】
0003838711.tif 000003
【図２】
0003838711.tif 000004
【図３】
0003838711.tif 000005
【図４】
0003838711.tif 000006