(57)【要約】本発明の目的は、光学異性体混合物を分離性能よく分離することのできる光学異性体分離用充填剤、その製造方法及びその使用方法を提供することである。本発明は、担体と光学活性な高分子化合物溶液を２軸縦型撹拌装置で撹拌することを特徴とする光学異性体分離用充填剤の製造方法、その製造方法により製造されたところの光学異性体分離用充填剤及びその光学異性体分離用充填剤を液体クロマトグラフィー分離方法及び擬似移動床式クロマトグラフィー分離方法に使用する使用方法である。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
担体及び光学活性な高分子化合物溶液を槽内に仕込み、２軸縦型撹拌装置により前記槽内の撹拌操作を伴って前記担体に光学活性な高分子化合物を担持させることを特徴とする光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項２】
前記２軸縦型撹拌装置は、それぞれ自転しつつ槽内を公転する２本の撹拌翼を有する前記請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項３】
前記２軸縦型撹拌装置は、その撹拌翼の自転と公転との回転方向が異なる方向、又は同じ方向である前記請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項４】
前記２軸縦型撹拌装置は、その撹拌翼の軌跡がハイポサイクロイド曲線又はハイパーサイクロイド曲線である前記請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項５】
前記２軸縦型撹拌装置は、その撹拌翼が湾曲状撹拌棒又は湾曲状撹拌リングである前記請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項６】
前記高分子化合物溶液は光学活性な高分子化合物を含み、その高分子化合物が多糖誘導体である前記請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項７】
前記多糖誘導体が、セルロースのエステルおよびカルバメート誘導体、並びにアミロースのエステルおよびカルバメート誘導体よりなる群から選択される少なくとも一種であることを特徴とする前記請求項６に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項８】
前記担体が、多孔質無機担体である前記請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項９】
前記担体は、その平均粒径が１μｍ〜３００μｍであり、平均細孔径が２００Å〜８，０００Åである前記請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項１０】
前記担体は、その平均粒径が１５μｍ〜１００μｍであり、平均細孔径が２００Å〜４，０００Åである前記請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項１１】
前記担体がシリカゲルである前記請求項１に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法。
【請求項１２】
前記請求項１に記載の製造方法により製造されてなる光学異性体分離用充填剤。
【請求項１３】
前記請求項１２に記載の光学異性体分離用充填剤がクロマトグラフィー分離方法に使用されることを特徴とする光学異性体分離用充填剤の使用方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
この発明は光学異性体分離用充填剤の製造方法、光学異性体分離用充填剤及びその使用方法に関し、さらに詳しくは、担体に光学活性な高分子化合物を均一に効率良く担持することのできる光学異性体分離用充填剤の製造方法、分離性能の向上した光学異性体分離用充填剤及びその使用方法に関する。
背景技術
従来から、二種以上の成分を含有する異性体混合溶液等の原料の中から、必要な成分を分離する技術として液体クロマトグラフィー、超臨界クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー等が、環境分析、代謝分析、不純物分析等の様々な分析に用いられている。これらの分離技術は分析技術の一つであり、複数の成分を含む混合物から特定の成分を高純度で分離する技術とは異なる側面を有する。つまり、分析技術における「分離」という概念は、複数の成分を含有する混合物中の各成分を同定するに必要な精度で分離することを意味し、したがって「分離」するとはいっても不純物の混入を避けることができない。一方、生理活性物質の分離、光学活性物質の対掌体の分離という場合の分離は、高純度で単一物質を分離することを意味する。したがって、例えば光学活性物質を分離する場合、化学分析レベルの分離技術では、高純度で光学活性物質を分離することはできないのである。ところで、近年、高純度で工業的な分離を目指して擬似移動床式クロマトグラフィー分離方法が行われ始めている。
このような状況において、光学異性体分離用充填剤の需要は増加し、安定した品質を有する光学異性体分離用充填剤を大量に生産する技術が必要になってきた。
光学異性体分離用充填剤を製造する方法としては、岡本らによる多糖誘導体溶液にシリカゲルを浸漬させ、溶剤を溜去する方法（Ｙ．Ｏｋａｍｏｔｏ，Ｍ．Ｋａｗａｓｈｉｍａ  ａｎｄ  Ｋ．Ｈａｔａｄａ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．，１０６，５３５７，１９８４）、特公昭３−２００９号公報に記載されている高速気流中衝撃法、特開昭６３−８４６２６号公報に記載されているような、噴霧により担持する方法等を挙げることができる。
これらの方法は、数１００ｇ程度の光学異性体分離用充填剤を製造すると言った実験室レベルで追試を行うと、ある程度満足できる分離性能を有する光学異性体分離用充填剤を形成することができる。
しかしながら、製造規模を拡大して例えば約１ｋｇ〜数十ｋｇ程度の規模で光学異性体分離用充填剤を製造しようとすると、分離性能の良好な光学異性体分離用充填剤を必ずしも得ることができないことが判明した。例えば、規模を拡大したこれらの方法で得られる光学異性体分離用充填剤は、担体に多糖誘導体等を均一に担持することが困難であること、担体における細孔の内部にまで多糖誘導体等を担持させることが困難であること、担持した後において担体に残留する溶剤が不均一になっていること、担体に担持されずに多糖誘導体等が凝集してなる粒子が生じること、等が原因となって分離性能が実用的とは言えない程度に低かった。
また、光学異性体分離用充填剤をカラムに充填して光学異性体を分離する際に、液やガス、超臨界流体を流通させるためには圧力損失が少ない方が好ましい。したがって、担体を破壊してしまうような製造方法は、一般に、採用することができない。したがって、実験室レベルで良好ではあっても、規模を拡大して工業的生産レベルで光学異性体分離用充填剤を製造する場合には、担体と多糖誘導体等との混合撹拌動力が大きくなり、あるいはその他の諸条件の変化により、必ずしも良好な結果が得られるとは言えないのである。
この発明の目的は、工業的生産レベルであっても分離性能の良好な光学異性体分離用充填剤を製造する方法、工業的レベルで製造された分離性能の良好な光学異性体分離用充填剤及びそれを使用する方法を提供することにある。
この発明の他の目的は、光学活性な高分子化合物を担体に担持してなる光学異性体分離用充填剤を製造する方法、そのような光学異性体分離用充填剤、それを使用する方法を提供することにある。
発明の開示
前記課題を解決するためのこの発明の手段は、
（１）  担体及び光学活性な高分子化合物溶液を槽内に仕込み、２軸縦型撹拌装置により前記槽内の撹拌操作を伴って前記担体に光学活性な高分子化合物を担持させることを特徴とする光学異性体分離用充填剤の製造方法であり、
（２）  前記（１）に係る光学異性体分離用充填剤の製造方法において、前記２軸縦型撹拌装置は、それぞれ自転しつつ槽内を公転する２本の撹拌翼を有してなり、
（３）  前記（１）又は（２）に係る光学異性体分離用充填剤の製造方法において、前記２軸縦型撹拌装置は、その撹拌翼の自転と公転との回転方向が異なる方向、又は同じ方向である撹拌装置であり、
（４）  前記（３）に係る光学異性体分離用充填剤の製造方法において、前記２軸縦型撹拌装置は、その撹拌翼の軌跡がハイポサイクロイド曲線又はハイパーサイクロイド曲線であり、
（５）  前記（１）〜（４）のいずれかに一つに係る光学異性体分離用充填剤の製造方法において、前記２軸縦型撹拌装置は、その撹拌翼が湾曲状撹拌棒又は湾曲状撹拌リングであり、
（６）  前記（１）〜（５）のいずれか一つに係る光学異性体分離用充填剤の製造方法において、前記光学活性な高分子化合物溶液が高分子化合物を含み、その高分子化合物が、多糖誘導体であり、
（７）  前記（６）に係る光学異性体分離用充填剤の製造方法において、前記多糖誘導体が、セルロースのエステルおよびカルバメート誘導体、並びにアミロースのエステルおよびカルバメート誘導体よりなる群から選択される少なくとも一種であり、
（８）  前記（１）〜（７）のいずれか一つに係る光学異性体分離用充填剤の製造方法において、前記担体が、多孔質無機担体であり、
（９）  前記（１）〜（８）のいずれか一つに係る光学異性体分離用充填剤の製造方法において、前記担体は、その平均粒径が１μｍ〜３００μｍであり、平均細孔径が２００Å〜８，０００Åであり、
（１０）  前記（１）〜（８）のいずれか一つに係る光学異性体分離用充填剤の製造方法において、前記担体は、その平均粒径が１５μｍ〜１００μｍであり、平均細孔径が２００〜４，０００Åであり、
（１１）  前記担体がシリカゲルである前記（１）に記載の光学異性体分離用充填剤の製造方法であり、
（１２）  前記課題を解決するためのこの発明の他の手段は、前記（１）〜（１０）のいずれか一つに係る光学異性体分離用充填剤の製造方法により製造されてなる光学異性体分離用充填剤であり、
（１３）  前記課題を解決するためのこの発明のさらに他の手段は、前記（１１）に係る光学異性体分離用充填剤が、クロマトグラフィー分離方法に使用されることを特徴とする光学異性体分離用充填剤の使用方法である。
発明を実施するための最良の形態
この発明における２軸縦型撹拌装置は、少なくとも担体及び光学活性な高分子化合物溶液を収容する槽と、この槽内の内容物を撹拌する２本の撹拌翼とを備え、前記槽内の内容物を前記２本の撹拌翼で撹拌することができるように形成されてなる。
この２軸縦型撹拌装置における槽の容積としては、通常０．０３〜３ｍ３である。
２本の撹拌翼は、各々自転しながら槽内を公転するように動作するのが好ましい。２本の撹拌翼が自転と公転とを組み合わせた撹拌運動をすることにより、担体に光学活性な高分子化合物を均一に担持することができ、担体における細孔にまで光学活性な高分子化合物を担持させることができ、また光学活性な高分子化合物の粒子形成がなくなるという技術的効果がよく奏されることができる。
また、２本の撹拌翼それぞれの自転の方向は互いに同じ方向であっても、また互いに相違する方向であっても良い。
２本の撹拌翼の公転軌跡は、図１に示されるようなハイポ・サイクロイド曲線又は図２に示されるようなハイパー・サイクロイド曲線であるのが好ましい。
２本の撹拌翼の形状としては、湾曲状撹拌棒であっても、また、湾曲状撹拌リングであっても良い。
撹拌翼が湾曲状撹拌棒である場合には、その撹拌翼はフック状、碇型フック状であるのが好ましい。
このような撹拌翼を採用することにより、槽内での撹拌を死点なく、つまり満遍なく行うことができ、微粒子の担体と光学活性な高分子を含有する溶液とを均一に混合することができる。また、上記のような翼形状を有していると、撹拌に際し、撹拌力が押しつけ、或いは練り込むように作用するので、ジャケットでの加熱部の充填剤の置き換わりが円滑になる。これによって溶剤を系外へと除去する効率が高まり、光学活性異性体分離用充填剤の乾燥を容易に行うことができると共に、粒子の凝集物の低減を図ることができる。
この発明の方法に供される光学活性異性体分離用充填剤は、担体に光学活性な高分子化合物例えば多糖誘導体を担持してなる。
前記多糖誘導体としては天然多糖、天然物変成多糖および合成多糖のいずれかを問わず、光学活性であれば特に制限がない。
該多糖を例示すれば、α−１，４−グルカン（アミロース、アミロペクチン）、β−１，４−グルカン（セルロース）、α−１，６−グルカン（デキストラン）、β−１，４−グルカン（プスツラン）、α−１，３−グルカン、β−１，３−グルカン（カードラン、ジソフィランなど）、β−１，２−グルカン（Ｃｒａｗｎ  Ｇａｌｌ多糖）、β−１，４−ガラクタン、α−１，６−マンナン、β−１，４−マンナン、β−１，２−フラクタン（イヌリン）、β−２，６−フラクタン（レバン）、β−１，４−キシラン、β−１，３−キシラン、β−１，４−Ｎ−アセチルキトサン（キチン）、プルラン、アガロース、アルギン酸、シクロデキストリン等が挙げられる。また、この多糖の中には、アミロースを含有する澱粉も含まれる。
これらの中では、高純度の多糖を容易に入手できるセルロース、アミロース、β−１，４−キシラン、β−１，４−キトサン、キチン、β−１，４−マンナン、イヌリン、カードラン等が好ましく、特にセルロース、アミロース等が好ましい。
これら多糖の数平均重合度（１分子中に含まれるピラノースあるいはフラノース環の平均数）は、通常、少なくとも５、好ましくは少なくとも１０である。一方、特に上限はないが、１，０００以下であるのが取り扱いの容易さにおいて好ましく、特に好ましくは５００以下である。さらに言うと、多糖の好適な数平均重合度は５〜１０００、特に１０〜１０００、さらには１０〜５００である。
好適に使用できる多糖誘導体としては、上記のような多糖の水酸基の一部又は全部に該水酸基と反応可能な官能基を有する化合物を従来から公知の方法によりエステル結合、ウレタン結合、及びエーテル結合等させることにより誘導体化して得られる化合物を挙げることができる。ここで、水酸基と反応可能な官能基を有する化合物としては、イソシアン酸誘導体、カルボン酸、エステル、酸ハライド、酸アミド、ハロゲン化物、エポキシ化合物、アルデヒド、アルコール及びその他の脱離基を有する化合物も含めることができる。その他の脱離基を有する化合物として、脂肪酸化合物、脂環族化合物、芳香族化合物、ヘテロ芳香化合物等を挙げることができる。
これらの中でも特に好ましい多糖誘導体として、多糖エステル誘導体及び多糖カルバメート誘導体を挙げることができる。この多糖エステル誘導体又は多糖カルバメート誘導体としては、多糖の有する水酸基またはアミノ基上の水素原子の一部または全部を下記の式（化１）、（化２）、（化３）および（化４）のいずれかで示される原子団の少なくとも一種と置換してなる化合物を挙げることができる。
【化１】
2002083298.tif 000003
【化２】
2002083298.tif 000004
【化３】
2002083298.tif 000005
【化４】
2002083298.tif 000006
ただし、式中、Ｒはヘテロ原子を含んでもよい芳香族炭化水素基であり、無置換であっても、または炭素数１〜１２のアルキル基、炭素数１〜１２のアルコキシ基、炭素数１〜１２のアルキルチオ基、シアノ基、ハロゲン原子、炭素数１〜８のアシル基、炭素数１〜８のアルコキシカルボニル基、ニトロ基、アミノ基および炭素数１〜８のアルキルアミノ基よりなる群から選択される少なくとも一種の基を置換していても良い。これらの中でも特に好ましい基としては、前記芳香族炭化水素基としては、フェニル基、ナフチル基、フェナントリル基、アントラシル基、インデニル基、フリル基、チオニル基、ピリル基、ベンゾフリル基、ベンズチオニル基、インジル基、ピリジル基、ピリミジル基、キノリル基、イシキノリル基などを挙げることができる。これらの中でも好ましいのは、フェニル基、ナフチル基、ピリジル基などであり、特に好ましいのはハロゲン化フェニル基およびアルキルフェニル基である。
Ｘは炭素数１〜４の炭化水素基であり、二重結合または三重結合を含んでいても良い。Ｘとしては、メチレン基、メチルメチレン基、エチレン基、エチリデン基、エテニレン基、エチニレン基、１，２−または１，３−プロピレン基、１，１−または２，２−プロピリジン基等を挙げることができる。
本発明で多糖誘導体として好適に採用することができる多糖のカルバメート誘導体は下記の式（化５）または（化６）で示されるイソシアネートと多糖とを反応させることにより、また、多糖のエステル誘導体は下記の式（化７）または（化８）で示される酸クロリドと多糖とを反応させることにより、いずれも公知の方法により製造することができる。
【化５】
2002083298.tif 000007
【化６】
2002083298.tif 000008
【化７】
2002083298.tif 000009
【化８】
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（ただし、式中、ＲおよびＸは前記と同様の意味を示す。）
本発明において、多糖誘導体における置換基の導入率は、通常１０％〜１００％であり、好ましくは３０％〜１００％であり、更に好ましくは８０％〜１００％である。前記導入率が１０％未満であると、光学分割能力をほとんど示さないことが多いので好ましくない。また、前記導入率が３０％未満であると、光学分割しようとする光学異性体混合物の種類、濃度によっては分離が不十分になることがあるので好ましくない。前記導入率が８０％を超えると、特に光学異性体の分離能に優れた粒子を得ることができるので好ましい。前記置換基の導入率は、例えば、置換基導入の前後における炭素、水素、および窒素の変化を元素分析により調べることによって求めることができる。
光学活性な高分子化合物は、２軸縦型撹拌装置の槽内に溶液又は分散液の形態で供給される。溶液又は分散液を形成するための溶媒としては、例えば、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類、安息香酸メチル等の安息香酸アルキルエステル等を含む芳香族カルボン酸アルキルエステル、メチルアセトアミド、塩化メチレン、及びクロロホルム等のハロゲン化合物等を挙げることができる。
光学活性な高分子化合物と溶媒との混合比率は、光学活性な高分子化合物１００重量部に対して溶媒が３００〜１０，０００重量部、好ましくは３００〜１，０００重量部である。光学活性な高分子化合物と溶媒との混合比率が前記範囲内にあると、２軸縦型撹拌装置によって担体表面に光学活性な高分子化合物を均一に担持させることができる。
本発明における担体としては、多孔質有機担体および多孔質無機担体が挙げられ、好ましいのは多孔質無機担体である。多孔質有機担体として適当なものは、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、およびポリアクリレート等からなる群から選択される高分子物質であり、多孔質無機担体として適当なものは、シリカ、アルミナ、マグネシア、ガラス、カオリン、酸化チタン、珪酸塩、およびヒドロキシアパタイトなどである。特に好ましい担体はシリカゲルである。担体の平均粒径例えばシリカゲルの平均粒径は１μｍから３００μｍ、好ましくは１５μｍ〜１００μｍである。シリカゲルの平均粒径が１μｍよりも小さいとカラム圧が非常に高くなって実用的ではなく、逆に平均粒径が３００μｍよりも大きくなるとカラムの段数が低くて良好な分離性能を得ることができないことがある。シリカゲルの平均細孔径は２００Å〜８，０００Å、好ましくは２００Å〜４，０００Åである。前記平均細孔径を有する担体は、数平均重合度が５〜５０００の多糖誘導体を、高担持量で、例えば４０重量％もの担持割合で担持させることができる。表面は残存シラノールの影響を排除し、多糖誘導体との親和性を向上させるために表面処理が施されていることが望ましいが、全く表面処理が施されていなくても問題無い。
好適な表面処理の方法としては、例えば有機シラン化合物を用いたシラン化処理、プラズマ重合による表面処理法を挙げることができる。このシラン化処理の中でも、アミノプロピルシランを用いたシラン化処理が好ましい。
担体が前記平均細孔径を有していると、２軸縦型撹拌装置の槽内で担体と光学活性な高分子化合物を含有する溶液とを混合、撹拌すると、担体の細孔内に前記溶液を十分に浸透させることができ、光学活性な高分子化合物が細孔内壁に均一にコートされた光学異性体分離用充填剤が得られ、このような光学異性体分離用充填剤は、細孔が閉塞されていないので圧力損失の低い充填剤となる。
この発明の方法では、２軸縦型撹拌装置の槽内に担体と光学活性な高分子化合物含有液（溶液又は分散液）とを仕込んで２軸撹拌翼で撹拌すると、担体に光学活性な高分子化合物が担持される。担持は、担体及び光学活性な高分子化合物の種類によって、担体に光学活性な高分子化合物が単に付着する場合もあるし、槽内で反応することにより担体に光学活性な高分子化合物が化学的に結合する場合もある。
なお、２軸縦型撹拌装置の槽内で担体と光学活性な高分子化合物とを撹拌する際に槽内の内容物に光照射、γ線などの放射線照射、マイクロ波などの電磁波照射を行って、担体に対する光学活性な高分子化合物の一層強固な固定化を図ってもよい。
また、２軸縦型撹拌装置の槽内に仕込む担体と光学活性な高分子化合物含有液との仕込み割合は、担体１００重量部に対して光学活性な高分子化合物含有液が１００〜５００重量部であるのが好ましい。
撹拌時の温度条件としては、通常、室温〜８０℃、好ましくは室温〜６０℃である。
この発明の方法においては、２軸縦型撹拌装置で撹拌操作を行い、その後、振動ふるい、サイクロン、風力分級、湿式分級等の通常の分級操作、洗浄操作及び乾燥等の操作を経て、光学異性体分離用充填剤が製造される。
この発明に係る方法により調製された光学異性体分離用充填剤は、理由は明確ではないが、２軸撹拌翼で撹拌することにより、またより一層良好なこととして前記条件下に２軸撹拌翼で撹拌することにより、担体に少なくとも１０重量％、さらには１５〜５０重量％、さらには１５〜４５重量％の光学活性な高分子化合物、特に多糖誘導体を担持してなるところの、分離性能の良好な光学異性体分離用充填剤を得ることができる。なお、この発明の方法により、担体に５０重量％もの担持量で分離剤である高分子化合物を担持することができることは、驚異的である。
ここで、担持量とは、光学異性体分離用充填剤の重量中の、光学活性な高分子化合物例えば多糖誘導体重量の割合で示される。担持量の上限は特にないが、担持量が６０重量％を超えると段数の減少による分離効率の低下が起こるので好ましくない。
担体上への前記光学活性な高分子化合物、特に多糖誘導体の担持量が前記範囲内にあると、大きな分離性能でもって光学異性体の分離を行うことのできる光学異性体分離用充填剤となる。
この発明の方法により製造される光学異性体分離用充填剤は、ガスクロマトグラフィー分離方法、超臨界クロマトグラフィー分離方法、液体クロマトグラフィー分離方法及び擬似移動床式クロマトグラフィー分離方法に好適に使用される。これらの中でも、液体クロマトグラフィー分離方法及び擬似移動床式クロマトグラフィー分離方法、特に擬似移動床式クロマトグラフィー分離方法にこの光学異性体分離用充填剤を使用すると、高い分離性能で光学異性体の分離を行うことができる。
以下において、この発明を実施例により詳細に説明するが、この発明は以下の実施例に限定されるものではない。
（実施例１）
＜２軸縦型撹拌装置を用いてセルロース  トリｐ−メチルベンゾエートをシリカゲルに担持してなる光学異性体分離用充填剤の調製＞
セルロース  トリｐ−メチルベンゾエート１，０００ｇを塩化メチレン５．３ｋｇ及び安息香酸メチル１．１ｋｇの混合溶媒に溶解した。得られた溶液７．４ｋｇと平均粒径２０μｍ及び平均細孔径１，０００Åであるシリカゲル４ｋｇとを２軸縦型撹拌装置（ダルトン（株）製、型式２５ＡＭＶ−ｒｒ、２軸撹拌翼の形状：湾曲状撹拌棒、２本の撹拌翼の回転方向：同方向、２軸回転翼の公転軌跡：ハイポサイクロイド）の槽（容積６０Ｌ）内に挿入した。撹拌の回転数を自転４５ｒｐｍ、公転２３ｒｍｐにして１時間かけて常温で撹拌操作を行った。その後、温水を通して槽内を加熱し、真空ポンプで減圧にすることにより、槽内の溶剤を除去した。
撹拌操作の終了後に、この２軸縦型撹拌装置の槽内から光学異性体分離用充填剤を取り出した。
この光学異性体分離用充填剤を、内径１ｃｍ、長さ２５ｃｍのカラムに充填した。この光学異性体分離用充填剤を詰めたカラムを備えた液体クロマトグラフィー分離装置を用いて、インダパミドの光学分割を行った。
移動相：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール／ジエチルアミン＝７０／３０／０．１（ｖ／ｖ）
カラム温度：４０℃
流速：４．７ｍｌ／分
ＵＶ検出器：２１４ｎｍ
液体クロマトグラフィー分離装置における分離係数αは以下により定義される。上記条件の下での液体クロマトグラフィー分離装置における分離係数αを表１に示した。
分離係数αは、α＝ｋ２’／ｋ１’により求めることができる。ただし、ｋ１’及びｋ２’は、ｋ１’＝（ｔ１−ｔ０）／ｔ０、ｋ２’＝（ｔ２−ｔ０）／ｔ０で求めることができる。このｔ１及びｔ２は各光学異性体の溶出時間を示し、ｔ０はトリ−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼンの溶出時間を示す。この分離係数αは、ｋ２’及びｋ１’により示される二つのピークの離れ具合を示し、値が大きい程分離性能が優れていることを示す。
また、この液体クロマトグラフィー分離装置におけるカラムの段数Ｎを表１に示した。
（比較例１）
＜単軸撹拌装置を使用することによる、セルロース  トリｐ−メチルベンゾエートをシリカゲルに担持してなる光学異性体分離用充填剤の、実験室レベルでの調製＞
セルロース  トリｐ−メチルベンゾエート１０ｇを塩化メチレン５０ｍｌ及び安息香酸メチル１０ｍｌに溶解して得られる溶液と、前記実施例１におけるのと同様のシリカゲル４０ｇとを、容量１００ｍＬの丸底フラスコに仕込んだ。この丸底フラスコ内にプロペラ型撹拌棒を挿入して２時間の撹拌操作を行った。フラスコ内を減圧にすることにより、溶剤を除去することにより、光学異性体分離用充填剤を得た。
前記実施例１と同様にしてこの光学異性体分離用充填剤の分離係数α及び段数Ｎを表１に示した。
【表１】
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（実施例２）
＜２軸縦型撹拌装置を用いてセルロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメートをシリカゲルに担持してなる光学異性体分離用充填剤の調製＞
前記実施例１における、セルロース  トリｐ−メチルベンゾエート１，０００ｇを塩化メチレン５．３ｋｇ及び安息香酸メチル１．１ｋｇの混合溶媒に溶解して得られた溶液とシリカゲル４０００ｇとを使用する代わりに、セルロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート２０００ｇをアセトン１０．３ｋｇ（１３Ｌ）に溶解してなる溶液とシリカゲル８０００ｇとを使用する他は、前記実施例１と同様に実施した。
液体クロマトグラフィー分離装置の分離係数α及び段数Ｎを表２に示した。
（比較例２）
＜単軸縦型撹拌装置を用いてセルロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメートをシリカゲルに担持してなる光学異性体分離用充填剤の調製＞
セルロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート２０ｇをアセトン１０３ｇ（１３０ｍＬ）に溶解してなる溶液とシリカゲル８０ｇとを、容量５００ｍＬの丸底フラスコに仕込んだ。この丸底フラスコ内にプロペラ型撹拌棒を挿入して２時間の撹拌操作を行った。フラスコ内を減圧にすることにより、溶剤を除去することにより、光学異性体分離用充填剤を得た。
前記実施例１と同様にしてこの光学異性体分離用充填剤の分離係数α及び段数Ｎを表２に示した。
【表２】
2002083298.tif 000012
（実施例３）
＜２軸縦型撹拌装置を用いてアミロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメートをシリカゲルに担持してなる光学異性体分離用充填剤の調製＞
前記実施例１における、セルロース  トリｐ−メチルベンゾエート１，０００ｇを塩化メチレン５．３ｋｇ及び安息香酸メチル１．１ｋｇの混合溶媒に溶解して得られた溶液とシリカゲル４０００ｇとを使用する代わりに、アミロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート２０００ｇをクロロホルムとＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドとの混合溶媒（クロロホルム／Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドの容量比：９９／１）２０．７ｋｇ（１４Ｌ）に溶解してなる溶液とシリカゲル８，０００ｇとを使用する他は、前記実施例１と同様に実施した。
液体クロマトグラフィー分離装置の分離係数α及び段数Ｎを表３に示した。
（比較例３）
＜単軸縦型撹拌装置を用いてアミロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメートをシリカゲルに担持してなる光学異性体分離用充填剤の調製＞
アミロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート２０ｇをクロロホルム１３７ｍＬとＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド２０７ｇ（１４０ｍＬ）この混合溶媒に溶解してなる溶液とシリカゲル８０ｇとを、容量５００ｍＬの丸底フラスコに仕込んだ。この丸底フラスコ内にプロペラ型撹拌棒を挿入して撹拌操作を行った。フラスコ内を減圧にすることにより、溶剤を除去することにより、光学異性体分離用充填剤を得た。
前記実施例１と同様にしてこの光学異性体分離用充填剤の分離係数α及び段数Ｎを表３に示した。
【表３】
2002083298.tif 000013
（実施例４）
＜２軸縦型撹拌装置を用いてアミロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメートをシリカゲルに担持してなる光学異性体分離用充填剤の調製＞
前記実施例１における、セルロース  トリｐ−メチルベンゾエート１，０００ｇを塩化メチレン５．３ｋｇ及び安息香酸メチル１．１ｋｇの混合溶媒に溶解して得られた溶液とシリカゲル４０００ｇとを使用する代わりに、アミロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート２８００ｇを酢酸エチル２１Ｌに熔解してなる溶液と平均粒径２０μｍ及び平均細孔径１，３００Åのシリカゲル４２００ｇとを使用する他は、前記実施例１と同様に実施した。
液体クロマトグラフィー分離装置のクロマトグラムを図３に、単カラム法における分取生産性を表４に示した。ここで、液体クロマトグラフィー分離装置における移動相はエタノールであり、移動相の流速は１．０ｍｌ／分であり、温度は２５℃であり、検出器における波長は２５４ｎｍであった。また、単カラムにおける移動相はエタノールであり、移動相の流速は１．０ｍｌ／分であり、温度は２５℃であった。
（比較例４）
＜単軸縦型撹拌装置を用いてアミロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメートをシリカゲルに担持してなる光学異性体分離用充填剤の調製＞
アミロース  トリス（３，５−ジメチルフェニル）カルバメート２０ｇを酢酸エチル１５０ｍＬに溶解してなる溶液とシリカゲル３０ｇとを、容量５００ｍＬの丸底フラスコに仕込んだ。この丸底フラスコ内に１本のプロペラ型撹拌棒を挿入して撹拌操作を行った。フラスコ内を減圧にすることにより、溶剤を除去することにより、光学異性体分離用充填剤を得た。
液体クロマトグラフィー分離装置のクロマトグラムを図３に、単カラム法における分取生産性を表４に示した。ここで、液体クロマトグラフィー分離装置における移動相はエタノールであり、移動相の流速は１．０ｍｌ／分であり、温度は２５℃であり、検出器における波長は２５４ｎｍであった。また、単カラムにおける移動相はエタノールであり、移動相の流速は１．０ｍｌ／分であり、温度は２５℃であった。
【表４】
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産業上の利用可能性
この発明によると、高担持量で光学異性体分離用分離剤を担持した均一で良好な光学異性体分離用充填剤を製造することのできる光学異性体分離用充填剤の製造方法を提供することができ、分離性能に優れた光学異性体分離用充填剤を提供することができ、この光学異性体を良好に分離することのできる光学異性体分離用充填剤の使用方法を提供することができる。特に、この発明によると、従来においては製造が困難であるとされていた高担持量で分離剤を担体に担持する光学異性体分離用充填剤を効率良く製造することができる。
【図面の簡単な説明】
図１は、ハイポサイクロイド曲線を示す説明図である。
図２は、ハイパーサイクロイド曲線を示す説明図である。
図３は、実施例４における液体クロマトグラフィー分離装置のクロマトグラムである。
図４は、比較例４における液体クロマトグラフィー分離装置のクロマトグラムである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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