(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）
【化１】
0003761958.tif 000010
〔式中、Ｂはシトシン、ウラシル、４−Ｎ−メチルシトシン又は４−Ｎ，Ｎ−ジメチルシトシンの核酸塩基を示し、Ｚは一般式−ＣＨ2ＣＯＮＲ4Ｒ5 （Ｒ4 及びＲ5 は同一又は相異なって、水素原子、炭素数１〜６の直鎖状又は分枝状アルキル基又はベンジル基を示す）で表される基を示し、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 は同一又は相異なって、水素原子、一般式（２）
【化２】
0003761958.tif 000011
（式中、Ｒa 、Ｒb 及びＲc は同一又は相異なって、炭素数１〜６の直鎖状又は分枝状のアルキル基又はフェニル基を示す）で表される置換シリル基又は生体内で容易に脱離しうるエステル形成基を示す〕で表される３′−カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｚがカルバモイルメチル、メチルカルバモイルメチル、エチルカルバモイルメチル、ベンジルカルバモイルメチル又はジメチルカルバモイルメチル基である請求項１記載の３′−カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体又は薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｚがカルバモイルメチル基である請求項１又は２記載の３′−カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ1、Ｒ2及びＲ3で示される生体内で容易に脱離しうるエステル形成残基がアシル基である請求項１〜３の何れか１項記載の３'− カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 が水素原子である請求項１〜４の何れか１項記載の３′−カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｂがシトシン、ウラシル、４―Ｎ−メチルシトシン又は４−Ｎ，Ｎ−ジメチルシトシンであり、Ｚがカルバモイルメチル、メチルカルバモイルメチル、エチルカルバモイルメチル、ベンジルカルバモイルメチル又はジメチルカルバモイルメチル基であり、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3が水素原子である請求項１記載の３'− カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体で又はその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｂがシトシン、ウラシル、４−Ｎ−メチルシトシン又は４−Ｎ，Ｎ−ジメチルシトシンであり、Ｚがカルバモイルメチル基であり、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3が水素原子である請求項１記載の３'− カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体又はその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
請求項１〜７の何れか１項記載の３′−カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体又はその薬学的に許容される塩、薬学的担体とを含有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項９】
請求項１〜７の何れか1項記載の３′−カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体又はその薬学的に許容される塩を有効成分とする医薬。
【請求項１０】
抗腫瘍剤である請求項９記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は新規な核酸誘導体に関し、更に詳細には、優れた抗腫瘍活性を有し、抗腫瘍剤等の医薬として有用な３′−カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、核酸系の代謝拮抗剤である抗腫瘍剤としては、５−フルオロウラシル、テガフール、ユーエフテイ（ＵＦＴ）、ドキシフルリジン、カルモフール、シタラビン、エノシタビン等のピリミジン系化合物が知られている。
一方、糖部分の３位にアルキル基を有するピリミジンもしくはプリンヌクレオシドは、特公昭４５−１１９０８号及び特公昭４６−４３７６号公報に記載されているが、その抗腫瘍効果は極めて弱く、制癌剤としての利用価値はないのが現状である。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の目的は、優れた抗腫瘍活性を有し、抗腫瘍剤等の医薬として有用な新規な核酸誘導体を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
かかる実情において、本発明者は鋭意研究を重ねた結果、糖の３位に置換基を導入した特定の核酸誘導体が優れた抗腫瘍活性を示し、抗腫瘍剤として有用なものであることを見出し、本発明を完成した。
【０００５】
すなわち、本発明は、下記一般式（１）
【０００６】
【化３】
0003761958.tif 000002
【０００７】
〔式中、Ｂはシトシン、ウラシル、４−Ｎ−メチルシトシン又は４−Ｎ，Ｎ−ジメチルシトシンの核酸塩基を示し、Ｚは一般式−ＣＨ2ＣＯＮＲ4Ｒ5 （Ｒ4 及びＲ5 は同一又は相異なって、水素原子、炭素数１〜６の直鎖状又は分枝状アルキル基又はベンジル基を示す）で表される基を示し、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 は同一又は相異なって、水素原子、後記の一般式（２）で表される置換シリル基又は生体内で容易に脱離しうるエステル形成残基を示す〕で表される３′−カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体又はその薬学的に許容される塩を提供するものである。
【０００８】
上記一般式（１）で表わされる本発明化合物は、優れた抗腫瘍活性を有し、種々の腫瘍の治療剤等の医薬として有効である。
従って、また、本発明は、上記一般式（１）の化合物又はその薬学的に許容される塩と、薬学的担体とを含有する医薬組成物を提供するものである。
更に、本発明は、上記一般式（１）の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分とする医薬、特に抗腫瘍剤を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
上記一般式（１）中、Ｂで示される核酸残基は、シトシン、ウラシル、４−Ｎ−メチルシトシン又は４−Ｎ，Ｎ−ジメチルシトシンである。
【００１５】
また、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 で示される置換シリル基は下記一般式（２）
【００１６】
【化４】
0003761958.tif 000003
【００１７】
（式中、Ｒa 、Ｒb 及びＲc は同一又は相異なって、低級アルキル基又はフェニル基を示す）で表される基であって、具体的には、例えばトリメチルシリル、トリエチルシリル、トリプロピルシリル、トリイソプロピルシリル、トリｔｅｒｔ−ブチルシリル、トリヘキシルシリル、ジメチルエチルシリル、ジメチルイソプロピルシリル、ジエチルイソプロピルシリル、ジイソプロピルメチルシリル、ジｔｅｒｔ−ブチルメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基等の炭素数１〜６の直鎖状又は分枝状のアルキル基でトリ置換されたシリル基、ジフェニルメチルシリル、ジメチルフェニルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル、トリフェニルシリル基等が挙げられる。
【００１８】
Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 で示される生体内で容易に脱離しうるエステル形成残基とは、ヒトを含む哺乳動物の血液及び組織内で容易に開裂して対応する水酸基化合物（すなわち、Ｒ1 、Ｒ2 及び／又はＲ3 が水素原子となる化合物）を放出する無毒のエステル残基を意味し、該エステル形成残基としては、通常よく知られるヌクレオシドの水酸基を保護しエステルを形成するものであればよく、例えば置換基を有してもよい脂肪族アシル基又は置換基を有してもよい芳香族アシル基等のアシル基、低級アルキルカルバモイル基、アミノ酸残基等が挙げられる。
【００１９】
置換基を有していてもよい脂肪族又は芳香族のアシル基としては、例えば低級アルカノイル基、アリールカルボニル基、ヘテロ環カルボニル基、アリールオキシカルボニル基、低級アルコキシカルボニル基、アシルオキシアシル基等が挙げられる。
低級アルカノイル基としては、例えばホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、ペンタノイル、ヘキサノイル、クロロアセチル、ジクロロアセチル、トリクロロアセチル、トリフルオロアセチル、メトキシアセチル、エトキシアセチル基等の置換基としてハロゲン原子、低級アルコキシ基等を有することのある炭素数１〜６のアルカノイル基が挙げられる。
【００２０】
アリールカルボニル基としては、例えばベンゾイル、α−ナフチルカルボニル、β−ナフチルカルボニル、２−メチルベンゾイル、３−メチルベンゾイル、４−メチルベンゾイル、２，４−ジメチルベンゾイル、４−エチルベンゾイル、２−メトキシベンゾイル、３−メトキシベンゾイル、４−メトキシベンゾイル、２，４−ジメトキシベンゾイル、４−エトキシベンゾイル、２−メトキシ−４−エトキシベンゾイル、４−プロポキシベンゾイル、２−クロロベンゾイル、３−クロロベンゾイル、４−クロロベンゾイル、２，３−ジクロロベンゾイル、２−ブロモベンゾイル、４−フルオロベンゾイル、２−カルボキシベンゾイル、３−カルボキシベンゾイル、４−カルボキシベンゾイル、２−シアノベンゾイル、４−シアノベンゾイル、２−ニトロベンゾイル、４−ニトロベンゾイル又は２，４−ジニトロベンゾイル基等の置換基として低級アルキル基、低級アルコキシ基、ハロゲン原子、カルボキシル基、ニトロ基及びシアノ基等を有することのあるベンゾイル又はナフチルカルボニル基が挙げられる。
【００２１】
ヘテロ環カルボニル基としては、例えば２−フラニルカルボニル、４−チアゾリルカルボニル、２−キノリルカルボニル、２−ピラジニルカルボニル、２−ピリジルカルボニル、３−ピリジルカルボニル、４−ピリジルカルボニル基等が挙げられる。
アリールオキシカルボニル基としては、例えばフェノキシカルボニル、α−ナフチルオキシカルボニル、β−ナフチルオキシカルボニル、２−メチルフェノキシカルボニル、３−メチルフェノキシカルボニル、４−メチルフェノキシカルボニル、２，４−ジメチルフェノキシカルボニル、４−エチルフェノキシカルボニル、２−メトキシフェノキシカルボニル、３−メトキシフェノキシカルボニル、４−メトキシフェノキシカルボニル、２，４−ジメトキシフェノキシカルボニル、４−エトキシフェノキシカルボニル、２−メトキシ−４−エトキシフェノキシカルボニル、２−クロロフェノキシカルボニル、３−クロロフェノキシカルボニル、４−クロロフェノキシカルボニル、２，３−ジクロロフェノキシカルボニル、２−ブロモフェノキシカルボニル、４−フルオロフェノキシカルボニル、β−メチル−α−ナフチルオキシカルボニル、β−クロロ−α−ナフチルオキシカルボニル基等が挙げられる。
【００２２】
低級アルコキシカルボニル基としては、例えばメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ペンチルオキシカルボニル、ヘキシルオキシカルボニル基等の炭素数２〜７の直鎖状又は分枝状のアルコキシカルボニル基が挙げられる。
アシルオキシアシル基としては、例えばアセチルオキシアセチル、プロピオニルオキシアセチル、α−（アセチルオキシ）プロピオニル、β−（プロピオニルオキシ）プロピオニル基等が挙げられる。
【００２３】
低級アルキルカルバモイル基としては、例えばメチルカルバモイル、エチルカルバモイル、プロピルカルバモイル、ブチルカルバモイル、ペンチルカルバモイル、ヘキシルカルバモイル、ジメチルカルバモイル、ジエチルカルバモイル基等の炭素数１〜６の直鎖状又は分枝状のアルキル基でモノ又はジ置換されたカルバモイル基が挙げられる。
アミノ酸残基としては、アミノ酸のカルボキシル基から水酸基を除いて形成される基を示し、天然又は合成のアミノ酸のいずれの由来のものでもよく、該アミノ酸としては、例えばグリシン、アラニン、β−アラニン、バリン、イソロイシン等が挙げられるが、特開平１−１０４０９３号記載のアミノ酸残基であればいずれであってもよい。
【００２４】
その他エステル形成残基としては、例えばＴＨＥＯＤＯＲＡ  Ｗ．ＧＲＥＥＮＥ，”ＰＲＯＴＥＣＴＩＶＥ  ＧＲＯＵＰＳ  ＩＮ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ”，ＪＯＨＮ  ＷＩＬＥＹ  ＆  ＳＯＮＳ，ＩＮＣ．（１９９１）、日本化学会編＜新実験化学講座４＞「有機化合物の合成と反応（Ｖ）」１１章  ｐ２４９５  丸善（１９８３）、特開昭６１−１０６５９３号、特開昭６２−１４９６９６号、特開平１−１５３６９６号に記載の通常のエステル形成残基として慣用されるもののいずれであってもよい。
【００２６】
Ｚとしては、好適にはカルバモイルメチル、メチルカルバモイルメチル、エチルカルバモイルメチル、ベンジルカルバモイルメチル又はジメチルカルバモイルメチル基が挙げられ、更に好適にはカルバモイルメチル基が挙げられる。
Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 で示される生体内で容易に脱離しうるエステル形成残基としては、好適にはアシル基が挙げられ、更に好適にはアセチル基、ベンゾイル基が挙げられる。
Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 としては、好適には水素原子が挙げられる。
【００２７】
本発明の好ましい化合物は、Ｂがシトシン、ウラシル、４―Ｎ−メチルシトシン又は４−Ｎ，Ｎ−ジメチルシトシンであり、Ｚがカルバモイルメチル、メチルカルバモイルメチル、エチルカルバモイルメチル、ベンジルカルバモイルメチル又はジメチルカルバモイルメチル基であり、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3が水素原子である３'− カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体である。
【００２８】
また更に好ましい化合物は、一般式（１）において、Ｂがシトシン、ウラシル、４−Ｎ−メチルシトシン又は４−Ｎ，Ｎ−ジメチルシトシンであり、Ｚがカルバモイルメチル基であり、Ｒ1 、Ｒ2 及びＲ3 が水素原子である３′−カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体である。
【００２９】
本発明化合物は塩の形態をも包含するものであり、かかる塩としては薬学的に許容される塩であれば特に制限はなく、例えばＲ3 が水素原子であるものの場合には塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩等の無機酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩等の有機スルホン酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、トリフルオロ酢酸塩等の脂肪族カルボン酸塩等の有機酸塩等の酸付加塩が例示される。また、本発明化合物はその水和物をも包含するものである。
【００３０】
一般式（１）で表される本発明化合物は、例えば下記反応工程式１〜３に従い製造することができる。
【００３１】
【化５】
0003761958.tif 000004
【００３２】
（式中、Ｂ、Ｒ4 及びＲ5 は前記に同じ。Ｒ1′は置換シリル基を示す。）
置換シリル基としては、前記の一般式（２）で表される基及びテトライソプロピルジシロキシル（ＴＩＰＤＳ）基等が挙げられる。好ましくはトリメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、メチルジイソプロピルシリル及びトリイソプロピルシリル基挙げられる。
【００３３】
（Ａ工程）
一般式（３）で表される化合物をテトラヒドロフラン中、ヨウ化サマリウムと反応させることにより一般式（４）で表されるラクトン体化合物を得る。
一般式（３）で表される化合物は、公知の化合物であるかもしくは公知の方法により得られるが、具体的には後記反応工程式４に従い製造することができる。反応の割合は一般式（３）の化合物に対し、ヨウ化サマリウムを１〜１０倍モル量、好ましくは１〜５倍モル量使用するのがよい。反応温度は最初−７８℃で混合し、次に０〜５０℃、好ましくは室温付近で行われ、反応時間は０．１〜５０時間、好ましくは１〜２４時間で反応は有利に進行する。
【００３４】
（Ｂ工程）
Ａ工程で得られた一般式（４）で表される化合物を、適当な溶媒中、Ｒ4Ｒ5ＮＨで表されるアミン化合物と反応させることにより、一般式（１−ａ）で表される本発明化合物を得る。
溶媒としては反応に関与しないものであれば特に限定されず、いずれのものでもよく、例えばメタノール、エタノール等の低級アルコール類、ジメチルホルムアミド等が挙げられる。
またこの反応の際、更にジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン等のアミン類を触媒として添加してもよい。
【００３５】
反応の割合は一般式（４）で表される化合物に対し、アミン化合物を１〜１０倍モル量、触媒を使用する時は触媒量を使用するのが好ましい。反応温度はメタノール性アンモニアを使用した場合、−７０℃付近であり、置換アミン化合物を使用した場合は室温付近である。反応時間は０．１〜５０時間、好ましくは１〜２４時間で反応は有利に進行する。
【００３６】
（Ｃ工程）
一般式（１−ａ）で表される化合物を、低級アルコール中、アンモニウムフルオリドと反応させることにより、一般式（１−ｂ）で表される本発明化合物を得る。
反応の割合は一般式（１−ａ）で表される化合物に対し、アンモニウムフルオリドを５〜５０倍モル量、好ましくは１０〜３０倍モル量使用するのがよい。反応は加熱還流で行い、反応時間は０．１〜２０時間、好ましくは１〜１０時間で反応は有利に進行する。
【００３７】
【化６】
0003761958.tif 000005
【００３８】
（式中、Ｂ及びＲ1′は前記に同じ。Ｒ2′及びＲ3′は置換シリル基を示す。）Ｒ2′及びＲ3′で示されるシリル基としては、前記のＲ1′と同様のものが挙げられる。
【００３９】
（Ｄ工程）
反応工程式１のＢ工程で得られた一般式（１−ａ）で表される化合物中、Ｒ4 及びＲ5 が水素原子である化合物（１−ａ′）を、ジメチルホルムアミド中、イミダゾールの存在下、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリドと反応させることにより、一般式（１−ｃ）で表される本発明化合物を得る。
反応の割合は一般式（１−ａ′）で表される化合物に対し、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリドを１〜１０倍モル量、好ましくは１〜５倍モル量、イミダゾールを１〜１０倍モル量、好ましくは２〜７倍モル量使用するのがよい。反応温度は０〜１００℃、好ましくは室温付近であり、反応時間は０．１〜５０時間、好ましくは０．５〜２４時間で反応は有利に進行する。
【００４０】
（Ｅ工程）
Ｄ工程で得られた一般式（１−ｃ）で表される化合物を、ピリジン中、ｐ−トルエンスルホニルクロリドと反応させることにより、一般式（１−ｄ）で表される本発明化合物を得る。
反応の割合は一般式（１−ｃ）で表される化合物に対し、ｐ−トルエンスルホニルクロリドを１〜１０倍モル量、好ましくは１〜５倍モル量使用するのがよい。反応は加熱還流で行い、反応時間は０．１〜５０時間、好ましくは０．５〜２４時間で反応は有利に進行する。
【００４１】
（Ｆ工程）
反応工程式１のＣ工程と同様に反応させることにより、一般式（１−ｅ）で表される本発明化合物を得る。
【００４２】
【化７】
0003761958.tif 000006
【００４３】
（式中、Ｚ、Ｒ1′及びＲ3′は前記に同じ。Ｒ6 及びＲ7 は同一又は相異なって、水素原子、低級アルキル基又は置換基を有してもよいベンジル基を示す。）
【００４４】
（Ｇ工程）
反応工程式２で得られた一般式（１−ｃ）及び（１−ｄ）で表される化合物中、Ｂがウラシルである化合物（１−ｆ）を、アセトニトリル中、２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニル、ジメチルアミノピリジン及びトリエチルアミンの存在下、Ｒ6Ｒ7ＮＨで表されるアミン水溶液と反応させることにより、一般式（１−ｇ）で表されるシトシン誘導体である本発明化合物に変換することができる。
【００４５】
反応の割合は一般式（１−ｆ）で表される化合物に対し、アミン化合物を１〜１０倍モル量、好ましくは１〜５倍モル量、２，４，６−トリイソプロピルベンゼンスルホニル、ジメチルアミノピリジン及びトリエチルアミンをそれぞれ１〜１０倍モル量、好ましくは１〜５倍モル量使用するのがよい。反応温度は０〜１００℃、好ましくは室温付近であり、反応時間は０．１〜１００時間、好ましくは１〜５０時間で反応は有利に進行する。
【００４６】
反応工程式１〜３で得られた一般式（１−ｂ）及び（１−ｅ）の化合物の２′位、３′位及び５′位水酸基へのエステル形成残基の導入を、従来公知の方法、例えば上記で挙げた”ＰＲＯＴＥＣＴＩＶＥ  ＧＲＯＵＰＳ  ＩＮ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ”や日本化学会編＜新実験化学講座４＞「有機化合物の合成と反応（Ｖ）」に従うか、又は特開昭５８−１５２８９８号、特開昭６０−５６９９６号、特開昭６１−１０６５９３号、特開昭６２−１４９６９６号、特開平１−１５３６９６号等に記載の方法に従い行うことにより、他の本発明化合物へと導くことができる。
【００４７】
また、上記反応により得られた本発明化合物は、これを適当な溶媒中、前記無機酸又は有機酸と反応させる等の従来公知の方法により、塩の形態とすることができる。溶媒としては、例えば水、メタノール、エタノール、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、ヘキサン等が例示できる。反応温度は０〜５０℃で行われるのが好ましい。
また、前記反応工程式１で用いる原料化合物（３）は、例えば下記の反応工程式４に従って製造される。
【００４８】
【化８】
0003761958.tif 000007
【００４９】
（式中、Ｂ、Ｒ1′及びＲ3′は前記に同じ。）
【００５０】
（Ｈ工程）
一般式（５）で表される化合物を部分加水分解、例えばＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５５、４１０−４１２（１９９０）に記載の方法、すなわちトリフルオロ酢酸−水混合液中、０℃で反応させることにより、５′位の選択的な脱シリル化反応を行ない一般式（６）で表される化合物を得る。
一般式（５）で表される化合物は、公知の化合物であるかもしくは公知の方法、例えば上記のＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ、２８３−２８８（１９９１）、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ４７、１７２７−１７３６（１９９１）に記載の方法により得られる。
【００５１】
（Ｉ工程）
Ｈ工程で得られた一般式（６）で表される化合物を適当な溶媒中、ブロモアセチルブロミドと反応させることにより、一般式（３）で表される化合物を得る。溶媒としては反応に関与しないものであれば特に限定されず、いずれのものでもよく、例えばクロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類、ジメチルホルムアミド等が挙げられる。
またこの反応の際、更にジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン、２，６−ルチジン等のアミン類を触媒として添加してもよい。
【００５２】
反応の割合は一般式（６）で表される化合物に対し、ブロモアセチルブロミドを１〜１０倍モル量、好ましくは１〜５倍モル量、触媒を使用する時は触媒量を使用するのが好ましい。反応温度は−７８℃付近がよい。反応時間は１分〜２４時間、好ましくは１分〜１時間で反応は有利に進行する。
【００５３】
上記方法により得られる本発明化合物及び各化合物は、通常公知の分離精製手段、例えば濃縮、溶媒抽出、濾過、再結晶、各種クロマトグラフィー等を用いることにより単離精製することができる。
【００５４】
本発明の化合物は、適当な薬学的担体を用いて通常の方法に従い、医薬組成物とすることができる。ここで用いられる担体としては、通常の薬剤に汎用される各種のもの、例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤、界面活性剤等を使用することができる。
【００５５】
本発明医薬又は医薬組成物をヒトを含む哺乳動物の腫瘍の治療剤として使用する際の投与単位形態は特に限定されず、治療目的に応じて適宜選択でき、具体的には注射剤、坐剤、外用剤（軟膏剤、貼付剤等）、エアゾール剤等の非経口剤、錠剤、被覆錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、液剤（懸濁剤、乳剤等）等の経口剤が挙げられる。
上記各種組成物は、この分野で通常知られた製剤化方法により製剤化される。
【００５６】
注射剤の形態にするに際しては、担体として、例えば水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等の希釈剤、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等のｐＨ調整剤及び緩衝剤、ピロ亜硫酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸、チオグリコール酸、チオ乳酸等の安定化剤などを使用できる。尚、この場合、等張性の溶液を調製するに充分な量の食塩、ブドウ糖或いはグリセリンを医薬製剤中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、無痛化剤、局所麻酔剤等を添加してもよい。これらの担体を添加して、常法により、皮下、筋肉内、静脈内用注射剤を製造することができる。
【００５７】
坐剤の形態にするに際しては、担体として、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、ラノリン、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド、ウィテップゾール（登録商標：ダイナマイトノーベル社）等に適当な吸収促進剤を添加して使用できる。
【００５８】
軟膏剤、例えばペースト、クリーム及びゲルの形態に調製する際には、通常使用される基剤、安定剤、湿潤剤、保存剤等が必要に応じて配合され、常法により混合、製剤化される。基剤としては、例えば白色ワセリン、パラフィン、グリセリン、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト等を使用できる。保存剤としては、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル等を使用できる。
【００５９】
貼付剤を製造する場合には、通常の支持体に上記軟膏、クリーム、ゲル、ペースト等を常法により塗布すればよい。支持体としては、綿、スフ、化学繊維からなる織布、不織布や軟質塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン等のフィルムあるいは発泡体シートが適当である。
【００６０】
錠剤、散剤、顆粒剤等の経口用固形製剤の形態にするに際しては、担体として、例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、メチルセルロース、グリセリン、アルギン酸ナトリウム、アラビアゴム等の賦形剤、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、エチルセルロース、水、エタノール、リン酸カリウム等の結合剤、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステアリン酸、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤、第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、グリセリン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等を使用できる。更に錠剤は、必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠、二重錠、多層錠等とすることができる。
【００６１】
カプセル剤は上記で例示した各種の担体と混合し、硬質ゼラチンカプセル、軟質カプセル等に充填して調製される。
丸剤の形態にするに際しては、担体として、例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナラン、カンテン等の崩壊剤などを使用できる。
液体製剤は水性又は油性の懸濁液、溶液、シロップ、エリキシル剤であってもよく、これらは通常の添加剤を用いて常法に従い、調製される。
【００６２】
上記製剤中に含有されるべき本発明化合物の量は、剤型、投与経路、投与計画等により異なり一概には言えず、広い範囲から適宜選択されるが、通常製剤中に１〜７０重量％程度とするのが好ましい。
【００６３】
上記製剤の投与方法は特に限定されず、製剤の形態、患者等の投与対象の年齢、性別その他の条件、症状の程度等に応じて、例えば経腸投与、経口投与、直腸投与、口腔内投与、経皮投与等が適宜決定される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤の場合には経口投与され、坐剤の場合には直腸内投与される。注射剤の場合には単独で又はブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、更に必要に応じて単独で動脈内、筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与される。軟膏剤は、皮膚、口腔内粘膜等に塗布される。
【００６４】
本発明の化合物の投与量は、用法、患者等の投与対象の年齢、性別、状態、腫瘍の種類、投与される本発明化合物の種類、その他の条件等に応じて適宜選択されるが、一般に投与単位形態当たり経口剤では約１〜１０００ｍｇ、注射剤では約０．１〜５００ｍｇ、坐剤では約５〜１０００ｍｇとするのが望ましい。また、上記投与形態を有する薬剤の１日当たりの投与量は、通常０．１〜２００ｍｇ／ｋｇ体重／日程度、好ましくは０．５〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日程度の範囲となる量を目安とするのがよい。これら本発明製剤は１日に１回又は２〜４回程度に分けて投与することができる。
【００６５】
本発明化合物を含有する製剤を投与することにより治療できる悪性腫瘍としては、特に制限はなく、例えば頭頚部癌、食道癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、肝臓癌、胆のう・胆管癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、睾丸腫瘍、骨・軟部肉腫、悪性リンパ腫、白血病、子宮頚癌、皮膚癌、脳腫瘍等が挙げられる。
【００６６】
【発明の効果】
本発明の３′−カルバモイルアルキルヌクレオシド誘導体は優れた抗腫瘍作用を有し、種々の腫瘍の治療剤等の医薬として有用である。
【００６７】
【実施例】
以下に参考例、実施例及び薬理試験例を示し、本発明を更に詳しく説明するが、本発明は何らこれらによって限定されるものではない。
【００６８】
参考例１
1-(5-O-ブロモアセチル-2-O-tert-ブチルジメチルシリル-β-D-エリスロ-ペントフラン-3-ウロシル)ウラシルの合成：
1-(2-O-tert-ブチルジメチルシリル-β-D-エリスロ-ペントフラン-3-ウロシル)ウラシル 4.48 g (12.6 mmol) をジクロロメタン 30 mlに溶解し、アルゴン雰囲気下、-78℃に冷却後、2,6-ルチジン 2.20ml(17.6 mmol)及び臭化ブロモアセチル1.41ml(15.1mmol)を滴下し、５分間撹拌した。反応混合液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液10mlを加え、ジクロロメタン層を抽出し、水 (３×30ml）、飽和食塩水（30ml）で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後、濾液を減圧下留去し、残渣を少量の酢酸エチルに溶解し、シリカゲルに吸着させ溶媒を留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー (４×20cm，30％酢酸エチル/ヘキサン) により精製し、標記化合物4.12g （収率70％）を黄色泡状物質として得た。
【００６９】
FAB-MS : m/z 478 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 9.67 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
7.49(d, 1H, H-6, J6,5 = 8.2Hz), 5.97 (d,1H, H-1', J1',2'= 7.1Hz),
5.84 (d, 1H, H-5, J5,6 = 8.2Hz),
4.51 (d, 1H, H-5'a, J5'a,5'b = 11.9Hz),
4.47 (d, 1H, H-2', J2', 1' = 7.1Hz),
4.44 (dd, 1H, H-4', J4',5'a = 2.0, J4' ,5'b = 3.5Hz),
4.41 (dd, 1H, H-5b', J5'b,4' = 3.5, J5'b,5'a = 11.9Hz),
0.83 (s, 9H, t-Bu), 0.09, 0.02 (各 s, 各 3H, Me) .
13C-NMR (CDCl3) δ： 206.2, 166.4, 163.2, 150.6, 140.3, 104.1,
87.93, 78.77, 75.35, 64.54, 25.81, 25.64,
25.54, 18.33, -4.4, -5.01.
【００７０】
参考例２
一般式（４）で表されるラクトン体（Ｂはウラシル、Ｒ1′はtert-ブチルジメチルシリル）の合成：
0.1Nヨウ化サマリウム-テトラヒドロフラン溶液14.2ml(1.24mmol)をアルゴン雰囲気下、-78℃に冷却後、参考例１で得た化合物338mg(0.567mmol)をテトラヒドロフラン6mlに溶解したものを、ゆっくり滴下した。反応混合液を室温に戻し、1N塩酸4mlを加えて撹拌した後、酢酸エチル50mlで抽出し、水 (２×20ml) 、飽和食塩水 (20ml) で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後、濾液を減圧下留去し、残渣を少量の酢酸エチルに溶解し、シリカゲルに吸着させ溶媒を留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー (２×11cm, 30％酢酸エチル/ヘキサン) により精製し、標記のラクトン体219mg(収率75％)を黄白色グラス状物質として得た。分析用試料として酢酸エチル-ヘキサンより結晶化し淡黄色結晶を得た。
【００７１】
FAB-MS : m/z 399 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.19 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
7.16 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.1Hz),
5.98 (d,1H, H-1', J1',2' = 7.5Hz),
5.84 (d, 1H, H-5, J5,6 = 8.1Hz),
4.46 (d, 1H, H-5'a,  J5'a,5'b = 13.1Hz), 4.41 (br s, 1H, H-4'),
4.37 (dd, 1H, H-5'b, J5'b, 4' = 2.4, J5'b,5'a = 13.1Hz),
3.66 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.5Hz),
3.49 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
2.78, 2.71( 各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 15.3Hz),
0.91 (s, 9H, t-Bu), 0.11, -0.02 (各 s, 各 3H, Me).
13C-NMR (CDCl3) δ： 169.6, 162.4, 150.3, 131.6, 104.4, 85.02,
81.39, 74.08, 68.36, 40.63, 25.68, 17.97, 11.68, -4.52, -4.64.
【００７２】
実施例１
1-(2-O-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-カルバモイルメチル-β-D-リボフラノシル)ウラシル（化合物１）の合成：
参考例２で得たラクトン化合物808mg(2.03mmol)をメタノール5mlに溶解し、-7０℃に冷却したアンモニア飽和メタノール溶液20mlを加え、-70℃で3時間放置した。反応混合液を減圧下留去し、残渣を少量のメタノールに溶解し、シリカゲルに吸着させ溶媒を留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー (４×10cm)により精製し、標記化合物１を825mg(収率98％)を白色粉状物質として得た。分析用試料としてメタノール/クロロホルムより結晶化し淡黄色針状結晶を得た。
【００７３】
FAB-MS : m/z 415 (MH+)
元素分析：
計算値（C17H29N3O7Siとして）：C, 49.26; H, 6.81; N, 10.14.
実測値：C, 49.10; H, 7.02; N, 10.13.
【００７４】
実施例２
1-(2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-カルバモイルメチル-β-D-リボフラノシル)ウラシル（化合物２）の合成：
実施例１で得た化合物１の1.50g(3.62mmol)をジメチルホルムアミド50mlに溶解し、イミダゾール738mg(10.7mmol)及びtert-ブチルジメチルシリルクロリド819mg(5.43mmol)を加え、室温で１２時間撹拌した。反応混合液にエタノール5mlを加えて15分間撹拌し、溶媒を減圧下留去した。残渣に酢酸エチル100ml及び水100mlを加えて分配し、さらに酢酸エチル層を水(３×50ml)、飽和食塩水(50ml)で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後、濾液を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (４×8.5cm,４％メタノール/クロロホルム)により精製し、標記化合物２を1.9g(収率99％)黄色泡状物質として得た。
【００７５】
FAB-MS : m/z 529 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.14 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
8.00 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.2Hz),
6.88 (br s, 1H, アミド, exchanged with D2O),
6.17 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.2Hz),
5.74 (dd, 1H, H-5, J5,6 = 8.2Hz, J5,NH-3 = 2.0Hz),
5.42 (br s, 1H, アミド, exchanged with D2O),
4.27 (br s, 1H, H-4'), 4.07 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.2Hz),
3.91 (dd, 1H, H-5'a,  J5'a,4' = 2.1, J5'a,5'b = 12.1Hz),
3.87 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 2.2, J5'b,5'a = 12.1Hz),
3.47 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
2.64, 2.56 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 15.9Hz),
0.97, 0.91 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.23, 0.22, 0.06, -0.05 (各 s, 各 3H, Me).
13C-NMR (CDCl3) δ： 172.3, 163.19, 151.0, 140.54, 103.49, 86.12,
85.10, 78.84, 78.31, 63.31, 40.68, 26.24, 25.80, 18.54, 18.00,
11.69, -4.35, -4.50, -5.10, -5.52.
【００７６】
実施例３
1-(2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-カルバモイルメチル-β-D-リボフラノシル)シトシン（化合物３）の合成：
実施例２で得た化合物２の1.05g(2mmol)をアルゴン雰囲気下、アセトニトリル50mlに溶解し、塩化2,4,6-トリイソプロピルベンゼンスルホニル1.21g(4.00mmol)、ジメチルアミノピリジン487mg(4.00mmol)及びトリエチルアミン0.28ml(4.00mmol)を加え室温で24時間撹拌後、濃アンモニア水 (28％,20ml)を加えて更に室温で2 時間撹拌した。反応混合液を減圧下溶媒留去し、残渣を少量のメタノールに溶解し、シリカゲルに吸着させ溶媒を留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー (２×18cm, 20％メタノール/クロロホルム) により精製し、標記化合物３を830mg(収率76％)白色結晶として得た。分析用試料としてメタノール/クロロホルムより再結晶し、白色平板状結晶を得た。
【００７７】
FAB-MS : m/z 530 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.04 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.2Hz),
7.23 (br s, 1H, アミド a, exchanged with D2O),
6.31 (d, 1H, H-1', J1',2' =7.2Hz), 5.95 (br s, 1H, H-5),
5.49 (br s, 1H, アミド b, exchanged with D2O),
4.24 (br s, 1H, H-4'), 4.06 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.2Hz),
4.01 (d, 1H, H-5'a, J5'a,5'b = 11.8Hz),
3.89 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 2.0, J5'b,5'a = 12.2Hz),
2.59 (t, 2H, H-3''a, H-3''b, J = 15.1Hz),
0.96, 0.85 ( 各 s, 各 9H, t-Bu),
0.17, -0.01,  -0.10 (各 s, 各 3H, Me).
【００８２】
実施例６
1-(3-C-カルバモイルメチル-β-D-リボフラノシル)ウラシル（化合物６）の合成：
実施例１で得た化合物１の281mg(0.678mmol)をメタノール20mlに溶解し、アンモニウムフロリド502mg(13.6mmol)を加え、2時間加熱還流した。反応混合液を減圧下溶媒留去し、残渣に水50ml及びクロロホルム50mlを加えて分配し、さらに水層をクロロホルム (２×30ml)で洗浄後、減圧下20mlまで濃縮し、上清にUV吸収がなくなるまで活性炭を加え、カラムにつめて水100mlで洗浄し、50％メタノール水溶液で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、標記化合物６を205mg(収率99％)白色粉状物質として得た。分析用試料として水/メタノールより結晶化し、白色針状結晶を得た。
【００８３】
FAB-MS : m/z 302 (MH+)
1H-NMR (DMSO-d6) δ： 9.45 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
8.05 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.0Hz),
7.47, 7.06 (各 br s, 各 1H, アミド, exchanged with D2O),
5.91 (d, 1H, H-1', J1', 2' = 7.9Hz),
5.67 (d, 1H, H-5, J5,6 = 8.1Hz),
5.56 (d, 1H, 2'-OH, J2'-OH,2' = 6.1Hz, exchanged with D2O),
5.23 (t, 1H, 5'-OH, J 5'-OH,5' = 3.9Hz, exchanged with D2O),
5.19 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O), 3.96 (br s, 1H, H-4'),
3.94 (dd, 1H, H-2', J2',2'-OH = 6.3, J2',1' = 7.8Hz),
3.71 (ddd, 1H, H-5'a, J5'a,4' = 1.5,
J5'a,5'b = 12.0, J 5'a,5'-OH = 3.4Hz),
3.59 (ddd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 3.0,
J5'b,5'a = 12.0, J5'b,5'-OH = 3.4Hz),
2.57, 2.50 (各 d, 各 1H, H-3''a, 3''b, J = 15.3Hz).
【００８４】
実施例７
1-(3-C-カルバモイルメチル-β-D-リボフラノシル)シトシン (化合物７) の合成：
実施例３で得た化合物３の105mg(0.2mmol)をメタノール5mlに溶解し、アンモニウムフロリド148mg(4.00mmol)を加え、2時間加熱還流した。反応混合液を減圧下溶媒留去し、残渣に水10ml及びクロロホルム10mlを加えて分配し、さらに水層をクロロホルム (２×10ml)で洗浄後、減圧下5mlまで濃縮し、上清にUV吸収がなくなるまで活性炭を加え、カラムにつめて水50mlで洗浄し、50％メタノール水溶液で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、標記化合物７を47.5mg(収率79％)白色粉状物質として得た。分析用試料として水/メタノールより結晶化し白色粉末を得た。
【００８５】
FAB-MS : m/z 301 (MH+)
1H-NMR (DMSO-d6) δ： 7.90 (d, 1H, H-6, J6,5 = 7.4Hz),
7.47 (br s, 1H, アミド a, exchanged with D2O),
7.17 (br s, 2H, NH2, exchanged with D2O),
7.05 (br s, 1H, アミド b, exchanged with D2O),
5.88 (d, 1H, H-1',  J1',2' = 7.9Hz), 5.75 (br s, 1H, H-5) ,
5.41 (d, 1H, 2'-OH, J2'-OH,2' = 6.2Hz, exchanged with D2O),
5.22 (t, 1H, 5'-OH, J5'-OH,5' = 4.5Hz, exchanged with D2O),
5.13 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
3.98 (dd, 1H, H-2', J2',2'-OH = 7.1, J2',1' = 7.1Hz),
3.93 (br s, 1H, H-4'),
3.66 (ddd, 1H, H-5'a,
J5'a,4' = 2.9, J 5'a,5'b = 9.8, J5'a,5'-OH = 4.5Hz),
3.57 (ddd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 2.4,
J5'b,5'a = 9.7, J5'b,5'-OH = 4.5Hz),
2.55, 2.49 (各 d, 各 1H, H-3''a, 3''b, J = 16.3Hz).
【００９０】
実施例１０
1-[2-O-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N-メチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]ウラシル（化合物１０）の合成：
参考例２で得たラクトン化合物398mg(1mmol)をジメチルホルムアミド5mlに溶解し、メチルアミン塩酸塩333mg(5mmol)及びトリエチルアミン700 μl(5.00mmol)を加え室温で7時間撹拌した。反応混合液を減圧下留去し、残渣を酢酸エチル100ml及び水50mlで分配し、さらに酢酸エチル層を水 (３×50ml)、飽和食塩水(50ml)で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後、濾液を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (２×６cm,４％メタノール/クロロホルム) により精製し、標記化合物１０を456mg(収率99％)黄色グラス状物質として得た。
【００９１】
FAB-MS : m/z 430 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.15 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
7.70 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.2Hz),
6.60 (d, 1H,アミド, J NH,Me = 4.7Hz, exchanged with D2O),
5.79 (dd, 1H, H-5, J5,6 = 8.2, J5,NH-3 = 2.2Hz),
6.17 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.3Hz),
4.07 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.3Hz),
4.27 (br s, 1H, H-4'),
3.88 (dd, 1H, H-5'a,  J5'a,4' = 2.4, J5'a,5'b = 12.6Hz),
3.76 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 1.2, J5'b,5'a = 12.6Hz),
3.54 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
2.83 (d, 3H, Me, JMe,NH = 4.7Hz),
2.80, 2.56 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 15.7Hz),
0.89 (s, 9H, t-Bu), 0.63, -0.01 (各 s, 各 3H, Me).
【００９２】
実施例１１
1-[2-O-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N,N-ジメチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]ウラシル（化合物１１）の合成：
参考例２で得たラクトン化合物398mg(1mmol)から実施例１０と同様にして、黄色グラス状物質として標記化合物１１を収率99％で得た。
【００９３】
FAB-MS : m/z 444 (MH+)
1H-NMR (CDCl3)δ： 8.19 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
7.32 (d 1H, H-6, J6,5 = 8.0Hz),
5.77 (dd, 1H, H-5, J5,6 = 8.0, J5,NH-3 = 2.2Hz),
5.41 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.7Hz),
4.75 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.7Hz),
4.39 (br s, 1H, H-4'),
3.83 (dd, 1H, H-5'a,  J5'a,4' = 2.3, J5'a,5'b = 13.1Hz),
3.57 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 1.0, J5'b,5'a = 1.3Hz),
3.03, 2.97 (各 s, 各 3H, Me),
2.99, 2.75 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 16.5Hz),
0.89 (s, 9H, t-Bu), 0.86, -0.06 (各 s, 各 3H, Me) .
【００９４】
実施例１２
1-[2-O-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N-エチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]ウラシル（化合物１２）の合成：
参考例２で得たラクトン化合物398mg(1mmol)から実施例１０と同様にして、黄色グラス状物質として標記化合物１２を収率99％で得た。
【００９５】
FAB-MS : m/z 444 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 9.28 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
7.78 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.1Hz),
6.80 (d, 1H,アミド, JNH,CH2 = 5.3Hz, exchanged with D2O),
5.79 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.3Hz),
5.71 (dd, 1H, H-5, J5,6 = 8.1, J5,NH-3 = 2.2Hz),
4.40 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.3Hz),
4.20 (br s, 1H, 5'-OH, exchanged with D2O),
4.17 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
4.01 (br s, 1H, H-4'),
3.80 (br d, 1H, H-5'a,  J5'a,4' = 1.0, J5'a,5'b = 12.1Hz),
3.73 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 5.0, J5'b,5'a = 12.1Hz),
3.26 (dq, 2H, CH2CH3, JCH2,NH = 5.3, J = 7.1Hz),
2.73, 2.51 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 15.7Hz),
1.12 (t, 1H, Me, J = 7.1Hz), 0.89 (s, 9H, t-Bu),
0.63, -0.01 (各 s, 各 3H, Me).
【００９６】
実施例１３
1-[2-O-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N-ベンジルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]ウラシル（化合物１３）の合成：
参考例２で得たラクトン化合物398mg(1mmol)から実施例１０と同様にして、無色グラス状物質として標記化合物１３を収率80％で得た。
【００９７】
FAB-MS : m/z 506 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.10 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
8.05 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.3Hz), 7.37-7.33 (m, 5H, aromatic),
7.15 (t, 1H,アミド, JNH,CH = 5.6Hz, exchanged with D2O),
6.15 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.3Hz),
5.72 (dd, 1H, H-5, J5,6 = 8.1, J5,NH-3 = 2.3Hz),
4.56 (d, 2H, PhCH2, J = 5.6Hz), 4.19 (br s, 1H, H-4'),
4.07 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.3Hz),
3.87 (dd, 1H, H-5'a,  J5'a,4' = 1.2, J 5'a,5'b = 12.5Hz),
3.82 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 2.1, J5'b,5'a = 12.5Hz),
3.40 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
2.68, 2.44 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 15.5Hz),
0.96, 0.89 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.18, 0.17, 0.03, -0.07 (各 s, 各 3H, Me).
【００９８】
実施例１４
1-[2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N-メチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]ウラシル（化合物１４）の合成：
実施例１０で得た化合物１０の300mg(0.7mmol)をジメチルホルムアミド20mlに溶解し、イミダゾール190mg(2.8mmol)及びtert-ブチルジメチルシリルクロリド211mg(1.4mmol)を加え室温で１時間撹拌した。反応混合液にエタノール 2mlを加えて15分間撹拌し、溶媒を減圧下留去した。残渣に酢酸エチル50ml及び水20mlを加えて分配し、さらに酢酸エチル層を水 (３×20ml)、飽和食塩水(20ml)で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後、濾液を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (２×6cm,40％酢酸エチル/ヘキサン) により精製し、標記化合物１４を398mg(収率100％) 白色泡状物質として得た。
【００９９】
FAB-MS : m/z 544 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.06 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
8.03 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.2Hz),
6.79 (d, 1H, アミド, JNH,Me = 4.7Hz, exchanged with D2O),
6.16 (d , 1H, H-1', J1',2' = 7.2Hz),
5.73 (dd, 1H, H-5, J5,6 = 8.1, J5,NH-3 = 2.2Hz),
4.22 (br s, 1H, H-4'), 4.06 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.2Hz),
3.88 (br s, 2H, H-5'a,b),
3.52 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
2.81 (d, 3H, Me, JMe,NH = 4.7Hz),
2.63, 2.51 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 15.5Hz),
0.96, 0.89 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.18, 0.10, 0.03, -0.06 (各 s, 各 3H, Me).
【０１００】
実施例１５
1-[2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N,N-ジメチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]ウラシル（化合物１５）の合成：
実施例１１で得た化合物１１の192mg(0.44mmol)から実施例１４と同様にして、白色泡状物質として標記化合物１５を収率85％で得た。
【０１０１】
FAB-MS : m/z 558 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 7.97 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
7 .88 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.1Hz),
6.23 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.5Hz),
5.71 (dd, 1H, H-5, J5,6 = 8.1, J5,NH-3 = 2.3Hz),
4.46 (br s, 1H, H-4'), 4.04 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.4Hz),
3.88 (dd, 1H, H-5'a, J5'a,4' = 1.2, J5'a,5'b = 12.0Hz),
3.86 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 2.4, J5'b,5'a = 12.0Hz),
3.51 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
3.00, 2.98 (各 s, 各 3H, Me),
2.80, 2.71 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 16.3Hz),
0.95, 0.90 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.12, 0.11, 0.04, -0.07 (各 s, 各 3H, Me).
【０１０２】
実施例１６
1-[2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N-エチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]ウラシル（化合物１６）の合成：
実施例１２で得た化合物１２の222mg(0.5mmol)から実施例１４と同様にして、白色泡状物質として標記化合物１６を257mg(収率92％)得た。
【０１０３】
FAB-MS : m/z 558 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 7.97 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
7.88 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.1Hz),
6.23 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.5Hz),
5.71 (dd, 1H, H-5, J5,6 = 8.1, J5,NH-3 = 2.3Hz),
4.46 (br s, 1H, H-4'), 4.04 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.4Hz),
3.88 (dd, 1H, H-5'a,  J5'a,4' = 1.2, J5'a,5'b = 12.0Hz),
3.86 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 2.4, J5'b,5'a = 12.0Hz),
3.51 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
3.00, 2.98 (各 s, 各 3H, Me),
2.80, 2.71 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 16.3Hz),
0.95, 0.90 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.12, 0.11, 0.04, -0.07 (各 s, 各 3H, Me).
【０１０４】
実施例１７
1-[2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N-ベンジルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]ウラシル（化合物１７）の合成：
実施例１３で得た化合物１３の404mg(0.8mmol)から実施例１４と同様にして、白色泡状物質として標記化合物１７を460mg(収率93％) 得た。
【０１０５】
FAB-MS : m/z 620(MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.06 (br s, 1H, NH-3, exchanged with D2O),
8.01 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.3Hz), 7.37-7.26 (m, 5H, aromatic),
7.13 (t, 1H,アミド, JNH,CH = 5.7Hz, exchanged with D2O),
6.15 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.3Hz),
5.72 (dd, 1H, H-5, J5,6 = 8.1, J5,NH-3 = 2.3Hz),
4.46-4.45 (各 d, 各 1H, PhCH 2, J = 5.8Hz),
4.19 (br s, 1H, H-4'), 4.07 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.3Hz),
3.87 (dd, 1H, H-5'a,  J5'a,4' = 1.2, J5'a,5'b = 12.5Hz),
3.82 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 2.1, J 5'b,5'a = 12.5Hz),
3.40 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
2.68, 2.44 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 15.5Hz),
0.96, 0.89 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.18, 0.17, 0.03, -0.07 (各 s, 各 3H, Me).
【０１０６】
実施例１８
1-[2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N-メチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]シトシン（化合物１８）の合成：
実施例１４で得た化合物１４の217mg(0.4mmol)をアルゴン雰囲気下、アセトニトリル10mlに溶解し、塩化2,4,6-トリイソプロピルベンゼンスルホニル242mg(0.8mmol)、ジメチルアミノピリジン97mg(0.8mmol)及びトリエチルアミン0.056ml(0.8mmol)を加え室温で24時間撹拌後、濃アンモニア水 (28％, 10ml)を加えて更に室温で２時間撹拌した。反応混合液を減圧下溶媒留去し、残渣を少量のメタノールに溶解し、シリカゲルに吸着させ溶媒を留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー (２×8cm, 10％メタノール/クロロホルム) により精製し、標記化合物１８を157mg(収率73％)白色結晶として得た。分析用試料としてメタノール/クロロホルムより再結晶し、白色平板状結晶を得た。
【０１０７】
FAB-MS : m/z 543 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.06 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.2Hz),
7.05 (d, 1H,アミド, J NH,Me = 4.5Hz, exchanged with D2O),
6.23 (d, 1H, H-1', J1',2' = 6.7Hz), 6.15 (br s, 1H, H-5),
4.19 (br s, 1H, H-4'), 4.05 (d, 1H, H-2', J2',1' = 6.7Hz),
3.99 (d, 1H, H-5'a, J5'a,5'b = 11.5Hz),
3.87 (d, 1H, H-5'b, J5'b,5'a = 11.5Hz),
2.80 (d, 3H, Me, JMe,NH = 4.5Hz),
2.60, 2.53 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 15.1Hz),
0.95, 0.84 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.17, 0.16, -0.01, -0.03 (各 s, 各 3H, Me).
【０１０８】
実施例１９
1-[2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N,N-ジメチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]シトシン（化合物１９）の合成：
実施例１５で得た化合物１５の167mg(0.3mmol)から実施例１８と同様にして、白色粉状物質として標記化合物１９を115mg(収率69％) 得た。
【０１０９】
FAB-MS : m/z 557(MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.15 (d, 1H, H-6, J6,5 = 6.5Hz),
6.30 (br s, 1H, H-5), 6.23 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.3Hz),
4.43 (br s, 1H, H-4'), 4.03 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.3Hz),
3.87 (br s, 2H, H-5'a, b), 2.98, 2.96 (各 s, 各 3H, Me),
2.76, 2.74 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 16.8Hz),
0.93, 0.88 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.12, 0.10, 0.02, -0.01 ( 各 s, 各 3H, Me).
【０１１０】
実施例２０
1-[2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N-エチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]シトシン（化合物２０）の合成：
実施例１６で得た化合物１６の280mg(0.5mmol)から実施例１８と同様にして、無色グラス状物質として標記化合物２０を280mg(収率100％)得た。
【０１１１】
FAB-MS : m/z 557(MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.02 (d, 1H, H-6, J6,5 = 7.5Hz),
7.10 (br s, 1H, アミド, exchanged with D2O),
6.31 (d, 1H, H-5, J5,6 = 7.5Hz),
6.31 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.1Hz),
4.15 (br s, 1H, H-4'), 4.05 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.1Hz),
3.95 (d, 1H, H-5'a, J5'a,5'b = 11.8Hz),
3.85 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 11.8Hz),
3.27 (dq, 2H, NCH2 , J = 7.2Hz),
2.59, 2.52 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 16.8Hz),
1.13 (t, 3H, NCH2CH3, J = 7.2Hz),
0.95, 0.86 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.16, 0.15, -0.04, -0.10 (各 s, 各 3H, Me).
【０１１２】
実施例２１
1-[2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-(N-ベンジルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]シトシン（化合物２１）の合成：
実施例１７で得た化合物１７の402mg(0.640mmol)から実施例１８と同様にして、白色粉状物質として標記化合物２１を352mg(収率89.0％)得た。
【０１１３】
FAB-MS : m/z 619 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.03 (d, 1H, H-6, J6,5 = 7.4Hz),
7.56 (br s, 1H, アミド, exchanged with D2O),
7.34-7.24 (m, 5H, aromatic),
6.31 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.3Hz),
5.88 (br s, 1H, H-5), 4.44 (s, 2H, PhCH2),
4.15 (br s, 1H, H-4'), 4.06 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.3Hz),
3.97 (d, 1H, H-5'a, J5'a,5'b = 11.8Hz),
3.82 (dd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 1.9, J 5'b,5'a = 11.8Hz),
2.65, 2.59 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 15.1Hz),
0.95, 0.82 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.16, 0.15, -0.04, -0.06 (各 s, 各 3H, Me)
【０１１４】
実施例２２
1-[3-C-(N-メチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]シトシン（化合物２２）の合成：
実施例１８で得た化合物１８の108mg(0.2mmol)をメタノール5mlに溶解し、アンモニウムフルオリド74mg(4mmol)を加え、２時間加熱還流した。反応混合液を減圧下溶媒留去し、残渣に水10ml及びクロロホルム10mlを加えて分配し、さらに水層をクロロホルム (２×10ml)で洗浄後、減圧下10mlまで濃縮し、上清にUV吸収がなくなるまで活性炭を加え、カラムにつめて水50mlで洗浄し、50％メタノール水溶液で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、標記化合物２２を54mg(収率86％)白色粉状物質として得た。分析用試料として水/メタノールより結晶化し白色粉状結晶を得た。
【０１１５】
FAB-MS : m/z 315 (MH+)
1H-NMR (DMSO-d6) δ： 8.05 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.1Hz),
7.90 (q, 1H,アミド, J = 4.5Hz, exchanged with D2O),
7.28 (d, 2H, 4-NH2, exchanged with D2O),
5.91 (d, 1H, H-1', J1',2' = 8.0Hz),
5.68 (d, 1H, H-5, J5,6 = 8.1Hz),
5.58 (d, 1H, 2'-OH, J2'-OH,2' = 6.0Hz, exchanged with D2O),
5.25 (t, 1H, 5'-OH, J5'-OH,5' = 3.9Hz, exchanged with D2O),
5.10 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
3.96-3.93 (m, 2H, H-2',4'),
3.75 (ddd, 1H, H-5'a, J5'a,4' = 1.5, J5,a,5'b = 12.1, J5'a,5'-OH 
= 3.9Hz),
3.59 (ddd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 3.5, J5'b,5'a=
12.1, J 5'b,5'-OH = 3.9Hz),
2.55, 2.54 (各 d, 各 1H, H-3''a, 3''b, J = 16.2Hz).
【０１１６】
実施例２３
1-[3-C-(N, N-ジメチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]シトシン（化合物２３）の合成：
実施例１９で得た化合物１９の111mg(0.2mmol)から実施例２２と同様にして、白色粉状物質として標記化合物２３を60.5mg(収率92％)得た。
【０１１７】
FAB-MS : m/z 329 (MH+)
1H-NMR (DMSO-d6) δ：7.96 (d, 1H, H-6, J6,5 = 7.3Hz),
7.26 (br d, 2H, 4-NH2, exchanged with D2O),
5.91 (d, 1H, H-1', J1',2' = 8.1Hz),
5.75 (d, 1H, H-5, J5,6 = 7.3Hz),
5.27 (t, 1H, 5'-OH, J5'-OH,5' = 3.9Hz, exchanged with D2O),
5.26 (d, 1H, 2'-OH, J2'-OH,2' = 5.4Hz, exchanged with D2O),
5.17 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
4.03 (br s, 1H, H-4'),
3.97 (dd, 1H, H-2', J2',2'-OH = 5.4, J2',1' = 7.3Hz),
3.58 (br s, 2H, H-5'a,b), 2.99, 2.85 (各 d, 各 3H, Me),
2.80, 2.70 (各 d, 各 1H, H-3''a, 3''b, J = 15.3Hz)
【０１１８】
実施例２４
1-[3-C-(N-エチルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]シトシン（化合物２４）の合成：
実施例２０で得た化合物２０の111mg(0.2mmol)から実施例２２と同様にして、白色粉状物質として標記化合物２４を56.9mg(収率86％)得た。
【０１１９】
FAB-MS : m/z 329 (MH+)
1H-NMR (DMSO-d6) δ： 8.32 (d, 1H, H-6, J6,5 = 7.8Hz),
8.03 (t, 1H,アミド, JNH,CH2 = 5.4Hz, exchanged with D2O),
6.95 (br s, 2H, 4-NH2, exchanged with D2O),
6.08 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.8Hz),
5.93 (d, 1H, H-5, J5,6 = 7.8Hz),
5.76 (d, 1H, 2'-OH, J2'-OH,2' = 6.5Hz, exchanged with D2O),
5.33 (t, 1H, 5'-OH, J5'-OH,5' = 3.2Hz, exchanged with D2O),
5.21 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
4.56 (dq, 2H, CH2CH3 , JCH2,NH = 5.4, J = 7.3Hz),
4.02 (br s, 1H, H-4'),
3.96 (dd, 1H, H-2', J2',2'-OH = 6.5, J2',1' = 7.8Hz),
3.77 (ddd, 1H, H-5'a, J5'a,4' = 1.3, J5'a,5'b =
12.5, J5'a,5'-OH = 3.2Hz),
3.61 (ddd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 3.2, J 5'b,5'a =
12.5, J 5'b,5'-OH = 3.2Hz),
2.55, 2.54 (各 d, 各 1H, H-3''a, 3''b, J = 15.3Hz),
1.01 (t, 3H, CH3 , J = 7.3Hz).
【０１２０】
実施例２５
1-[3-C-(N-ベンジルカルバモイルメチル)-β-D-リボフラノシル]シトシン（化合物２５）の合成：
実施例２１で得た化合物２１の124mg(0.2mmol)から実施例２２と同様にして、白色粉状物質として標記化合物２５を55.4mg(収率71％)得た。
【０１２１】
FAB-MS : m/z 391 (MH+)
1H-NMR (DMSO-d6) δ： 8.45 (br t, 1H,アミド, JNH,CH2 = 5.8Hz,
exchanged with D2O), 7.91 (d, 1H, H-6, J6,5 = 7.4Hz),
7.33-7.22 (m, 5H, aromatic),
7.16 (br s, 2H, 4-NH2 , exchanged with D2O),
5.99 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.9Hz),
5.78 (br s, 1H, H-5),
5.42 (d, 1H, 2'-OH, J2'-OH,2'= 6.1Hz, exchanged with D2O),
5.20 (t, 1H, 5'-OH, J5'-OH,5' = 4.4Hz, exchanged with D2O),
5.02 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
4.30 (d, 2H, PhCH2 , JCH2,NH = 5.8Hz),
4.02 (dd, 1H, H-2', J2',2'-OH = 6.1, J2',1' = 7.9Hz),
3.96 (br s, 1H, H-4'),
3.70 (ddd, 1H, H-5'a, J5'a,4' = 1.2, J5'a,5'b =
11.9, J5'a,5'-OH = 4.4Hz),
3.58 (ddd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 3.1, J5'b,5'a =
11.9, J5'a,5'-OH = 4.4Hz),
2.65, 2.61 (各 d, 各 1H, H-3''a, 3''b, J = 15.1Hz)
【０１２２】
実施例２６
1-(2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-カルバモイルメチル-β-D-リボフラノシル)-4-N-メチルシトシン（化合物２６）の合成：
実施例２で得た化合物２の265mg(0.5mmol)をアルゴン雰囲気下、アセトニトリル20mlに溶解し、塩化2,4,6-トリイソプロピルベンゼンスルホニル450mg(1.5mmol)、ジメチルアミノピリジン182mg(1.5mmol)及びトリエチルアミン0.105ml(1.5mmol)を加え室温で24時間撹拌後、50％メチルアミン水溶液5mlを加え、更に室温で2時間撹拌した。反応混合液を減圧下溶媒留去し、残渣をクロロホルム50ml及び水20mlで分配し、クロロホルム層をさらに水 (２×20ml)、飽和食塩水(20ml)で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過後、濾液を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (２×15cm, 5％メタノール/クロロホルム) により精製し、標記化合物２６を256mg(収率94％) 黄色結晶として得た。分析用試料としてクロロホルムより再結晶し、白色平板状結晶を得た。
【０１２３】
FAB-MS : m/z 543 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 8.13 (br s, 1H,アミド a, exchanged with D2O),
7.79 (d, 1H, H-6, J6,5 = 8.1Hz),
7.05 (br s, 1H, 4-NH, exchanged with D2O),
6.24 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.2Hz), 5.71 (br s, 1H, H-5),
5.47 (br s, 1H, アミド b, exchanged with D2O),
4.21 (br s, 1H, H-4'), 4.10 (d, 1H, H-2', J2',1' = 7.2Hz),
3.86 (br s, 2H, H-5'a,b), 2.81 (d, 3H, Me),
2.60 (t, 2H, H-3''a, H-3''b, J = 15.8Hz),
0.93, 0.86 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.18, 0.17, -0.01, -0.10 (各 s, 各 3H, Me).
【０１２４】
実施例２７
1-(2,5-O-ジ-tert-ブチルジメチルシリル-3-C-カルバモイルメチル-β-D-リボフラノシル)-4-N,N-ジメチルシトシン（化合物２７）の合成：
実施例２で得た化合物２の167mg(0.3mmol)と50％ジメチルアミン水溶液5mlから実施例２６と同様にして、黄色グラス状物質として標記化合物２７を240mg(収率86％)得た。
【０１２５】
FAB-MS : m/z 543 (MH+)
1H-NMR (CDCl3) δ： 7.99 (d, 1H, H-6, J6,5 = 7.9Hz),
7.10 (br s, 1H, アミド a, exchanged with D2O),
6.27 (d, 1H, H-1', J1',2' = 6.7Hz),
5.82 (d, 1H, H-5, J = 7.6Hz),
5.39 (br s, 1H, アミド b, exchanged with D2O),
4.18 (br s, 1H, H-4'), 4.08 (d, 1H, H-2', J2',1' = 6.7Hz),
3.38 (dd, 1H, H-5'a, J5'a,4' = 2.9, J 5'a,5'b = 12.2Hz),
3.28, 3.12 (各 br s, 各 3H, Me),
2.62, 2.54 (各 d, 各 1H, H-3''a, H-3''b, J = 15.7Hz),
0.97, 0.86 (各 s, 各 9H, t-Bu),
0.17, 0.16, -0.00, -0.05 (各 s, 各 3H, Me).
【０１２６】
実施例２８
1-(3-C-カルバモイルメチル-β-D-リボフラノシル)-4-N-メチルシトシン（化合物２８）の合成：
実施例２６で得た化合物２６の108mg(0.2mmol)をメタノール5mlに溶解し、アンモニウムフルオリド74mg(4mmol)を加え、2時間加熱還流した。反応混合液を減圧下溶媒留去し、残渣に水10ml及びクロロホルム10mlを加えて分配し、さらに水層をクロロホルム (２×10ml)で洗浄後、減圧下10mlまで濃縮し、上清にUV吸収がなくなるまで活性炭を加え、カラムにつめて水50mlで洗浄し、50％メタノール水溶液で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、標記化合物２８を50mg(収率80％)白色粉状物質として得た。分析用試料として水/メタノールより結晶化し白色粉状結晶を得た。
【０１２７】
FAB-MS : m/z 315 (MH+)
1H-NMR (DMSO-d6) δ： 7.96 (d, 1H, H-6, J6,5 = 7.4Hz),
7.24 (br d, 1H, 4-NH, exchanged with D2O),
7.28 (d, 2H, アミド, exchanged with D2O),
5.93 (d, 1H, H-5, J5,6 = 7.9Hz),
5.78 (d, 1H, H-1', J1',2' = 7.4Hz),
5.50 (d, 1H, 2'-OH, J2'-OH,2' = 6.0Hz, exchanged with D2O),
5.32 (t, 1H, 5'-OH, J 5'-OH,5' = 4.2Hz, exchanged with D2O),
5.10 (s, 1H, 3'-OH, exchanged with D2O),
4.03 (t, 2H, H-2', J2',1' = 7.4, J2',2'-OH = 4.2Hz),
3.97 (br s, 1H, H-4'),
3.74 (ddd, 1H, H-5'a, J 5'a,4' = 3.0, J5'a,5'b =
11.9, J5'a,5'-OH = 4.2Hz),
3.62 (ddd, 1H, H-5'b, J5'b,4' = 3.2, J5'b,5'a =
11.9, J5'b,5'-OH = 4.2Hz), 2.63 (d, 3H, Me, JMe,NH = 4.5Hz),
2.57 (s, 2H, H-3''a, 3''b). 
【０１２８】
薬理試験例１（殺細胞作用）
ヒトＫＢ細胞を１×１０5 cells/wellで９６穴プレートに播種した。本発明化合物を精製水に溶解させた後、ＲＰＭＩ  １６４０メディウムで種々の濃度に希釈し、各wellに添加して培養した。５％ＣＯ2 インキュベーターで３７℃、３日間の接触後、ＭＴＴ法により細胞数を計測した。
各化合物の殺細胞作用を、コントロールの細胞数を５０％減少させる薬剤濃度（ＩＣ50)として表した。結果を表１に示す。
【０１２９】
【表１】
0003761958.tif 000008
【０１３０】
この結果から明らかなように、本発明化合物は、既知化合物である１−（３−Ｃ−エチル−β−Ｄ−リボフラノシル）ウラシルと比較して極めて強力な殺細胞活性を示した。
【０１３１】
薬理試験例２（殺細胞作用）
表２に示す癌細胞を使用し、薬理試験例１と同様にして、化合物７のＩＣ50を求めた。結果を表２に示す。
【０１３２】
【表２】
0003761958.tif 000009
【０１３３】
以下に本発明化合物を用いた製剤例を示す。
製剤例１（カプセル剤）
カプセル剤を下記配合割合で常法に従い調製した。
【表３】
化合物３                                        ２００mg
乳糖                                              ３０mg
トウモロコシデンプン                              ５０mg
結晶セルロース                                    １０mg
ステアリン酸マグネシウム                            ３mg
１カプセル当たり                                ２９３mg
【０１３４】
製剤例２（錠剤）
錠剤を下記配合割合で常法に従い調製した。
【表４】
化合物７                                        １００mg
乳糖                                              ４７mg
トウモロコシデンプン                              ５０mg
結晶セルロース                                    ５０mg
ヒドロキシプロピルセルロース                      １５mg
タルク                                              ２mg
ステアリン酸マグネシウム                            ２mg
エチルセルロース                                  ３０mg
不飽和脂肪酸グリセリド                              ２mg
二酸化チタン                                        ２mg
１錠当たり                                      ３００mg
【０１３５】
製剤例３（顆粒剤）
顆粒剤を下記配合割合で常法に従い調製した。
【表５】
化合物２４                                        ２００mg
マンニトール                                      ５４０mg
トウモロコシデンプン                              １００mg
結晶セルロース                                    １００mg
ヒドロキシプロピルセルロース                        ５０mg
タルク                                              １０mg
１包当たり                                      １０００mg
【０１３６】
製剤例４（細粒剤）
細粒剤を下記配合割合で常法に従い調製した。
【表６】
化合物２８                                        ２００mg
マンニトール                                      ５２０mg
トウモロコシデンプン                              １００mg
結晶セルロース                                    １００mg
ヒドロキシプロピルセルロース                        ７０mg
タルク                                              １０mg
１包当たり                                      １０００mg
【０１３７】
製剤例５（注射剤）
注射剤を下記配合割合で常法に従い調製した。
【表７】
化合物７                                          １００mg
注射用蒸留水                                        適量  
１管中                                                ２ml
【０１３８】
製剤例６（坐剤）
坐剤を下記配合割合で常法に従い調製した。
【表８】
化合物６                                          ２００mg
ウイテップゾールＳ−５５
（ラウリン酸からステアリン酸までの飽和脂肪酸
のモノ−、ジ−、トリ−グリセライド混合物、
ダイナマイトノーベル社製）                    １３００mg
１個あたり                                      １５００mg