(57)【要約】この発明は、自己免疫疾患の治療に有用な糖脂質、及びこれを有効成分とする自己免疫疾患のための治療薬を提供することを目的とする。即ち、本発明は下式（Ｉ）2003016326.tif 000011（式中、Ｒ１はアルドピラノース残基を表し、Ｒ２は水素原子又は水酸基を表し、Ｒ３は−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を表し、Ｒ４は水素原子又はＣＨ３を表し、ｘは０〜３５であり、ｙ及びｚは、ｙ＋ｚ＝０〜３を満たす整数を表す。）で表される糖脂質である。
2003016326.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式（Ｉ）
2003016326.tif 000010
（式中、Ｒ１はアルドピラノース残基を表し、Ｒ２は水素原子又は水酸基を表し、Ｒ３は−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を表し、Ｒ４は水素原子又はＣＨ３を表し、ｘは０〜３５であり、ｙ及びｚは、ｙ＋ｚ＝０〜３を満たす整数を表す。）で表される糖脂質。
【請求項２】
前記Ｒ１がα−Ｄ−ガラクトピラノシルを表す請求項１に記載の糖脂質。
【請求項３】
前記Ｒ３が−ＣＨ２−、又は−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−を表し、ｘが１０〜３２である請求項２に記載の糖脂質。
【請求項４】
前記Ｒ３が−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−を表す請求項３に記載の糖脂質。
【請求項５】
前記Ｒ２及びＲ４が水素原子を表し、ｘが１１〜２３であり、ｚが０である請求項１〜４のいずれか一項に記載の糖脂質。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の糖脂質を有効成分として含有する自己免疫疾患のための治療薬。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の糖脂質を有効成分として含有するＴｈ１／Ｔｈ２免疫バランスがＴｈ１に偏向した疾患、またはＴｈ１細胞が病態を悪化させる疾患の治療薬。
【請求項８】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の糖脂質を有効成分として含有する選択的ＩＬ−４産生誘導剤。
【発明の詳細な説明】
技術分野
この発明は、新規な糖脂質、及びこれを有効成分とする自己免疫疾患のための治療薬に関する。
従来技術
生体には自己免疫病の発症を予防し抑制する機能があり、これを「免疫調節能」という。「免疫調節能」をつかさどるリンパ球として近年注目されているものに、ＮＫＴ細胞がある（最新医学第５５巻第４号８５８−８６３）。発明者らはこれまで、ＮＫＴ細胞を標的とした治療薬（ＮＫＴ細胞を適切に刺激して、その免疫調節能を効果的に発現させる薬物）の開発に取り組んできた。
自己免疫疾患の従来の治療法は、グルココルチコイドや免疫抑制剤といった“非特異的な免疫抑制療法”が主体である。“非特異的な免疫抑制療法”とは、免疫細胞の持つ多くの生物学的機能を、特に選定せずに、無差別に抑制するような治療法である。これらの治療法は、したがって、病気を誘導・増悪させるような生物反応を抑制すると同時に、生体に必要な反応をも抑制する（副作用）。そこで、より特異的な免疫抑制剤（病気を誘導・増悪させるような生物反応のみを抑制する薬剤）の開発が切望されてきた。近年、この目標にそって、自己抗原のペプチド療法が試みられたが、ペプチドは個々人によっても異なる、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子によって提示されるために、個人ごとに効力の差が著しく、またアレルギー反応も問題になってくる。
ＮＫＴ細胞を刺激する能力のある物質として従来他の研究者によって同定されているものに、アルファ・ガラクトシルセラミドがある（Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｖｏｌ．２７８  １６２６−１６２９（１９９７）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ｖｏｌ．９５  ｐｐ５６９０−５６９３（１９９８）、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５，３８，２１７６−２１８７、特開平５−９１９３、特開平５−５９０８１、特許第３０８８４６１号、米国特許第５，９３６，０７６号等）。発明者らはこれら文献に記載されたアルファ・ガラクトシルセラミドを自己免疫疾患である多発性硬化症の動物モデル、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）や慢性関節リウマチの動物モデルであるコラーゲン関節炎に投与した。しかし、このアルファ・ガラクトシルセラミドは自己免疫病を抑制するサイトカインであるＩＬ−４とともに、自己免疫病を悪化させるサイトカインであるＩＦＮ−γを誘導するため、このアルファ・ガラクトシルセラミドには自己免疫病を抑制または治療する効果がないことを明らかにした（米国免疫学会誌ザ・ジャーナル・オブ・イミュノロジー２００１年１月１日号１６６巻６６２−６６８頁）。すなわち、従来のアルファ・ガラクトシルセラミドはＮＫＴ細胞の持つ相反する機能（病気を抑制する機能と悪化させる機能）を同時に発揮させるために自己免疫病治療薬としては適当でない。
発明が解決しようとする課題
本発明は、自己免疫疾患の治療に有用な糖脂質を提供することを目的とする。従来このような目的の基に研究されてきたアルファ・ガラクトシルセラミドは、確かにＮＫＴ細胞を刺激する能力のあることが認められているが、その効果には特異性がなく、自己免疫病の悪化をもたらすため、このような治療薬としては極めて不満足なものであった。しかるに、本発明の糖脂質は、自己免疫病を抑制するサイトカインを特異的に誘導し、その他の自己免疫病の悪化をもたらすような因子を誘導することがないため、自己免疫疾患の治療に極めて有効である。
課題を解決するための手段
本発明者らは、従来のアルファ・ガラクトシルセラミドの誘導体である複数の糖脂質を合成し、その生物活性を調べたところ、これらの糖脂質のスフィンゴシン塩基の炭素鎖の長さを短くする修飾を加えた物質に、ＮＫＴ細胞の持つ、自己免疫病抑制に有利な機能（ＩＬ−４産生）のみを誘導する能力のあることを見出した。これを多発性硬化症の動物モデルＥＡＥに投与したところ、ＥＡＥに対する予防および治療効果のあることがわかった。
即ち、本発明は、下式（Ｉ）
2003016326.tif 000003
で表される糖脂質である。
この式中、Ｒ１はアルドピラノース残基である。このアルドピラノース残基として、α−Ｄ−グルコシル、α−Ｄ−ガラクトシル、α−Ｄ−マンノシル、β−Ｄ−グルコシル、β−Ｄ−ガラクトシル、β−Ｄ−マンノシル、２−デオキシ−２−アミノ−α−Ｄ−ガラクトシル、２−デオキシ−２−アミノ−β−Ｄ−ガラクトシル、２−デオキシ−２−アセチルアミノ−α−Ｄ−ガラクトシル、２−デオキシ−２−アセチルアミノ−β−Ｄ−ガラクトシル、β−Ｄ−アロピラノシル、β−Ｄ−アルトロピラノシル、β−Ｄ−イドシル等が挙げられるが、本発明の糖脂質としてはα体を用いたほうが効果的である。これらのうち、Ｒ１としては下式
2003016326.tif 000004
で表されるα−Ｄ−ガラクトピラノシルが好ましい。
Ｒ２は水素原子又は水酸基を表すが、好ましくは水素原子である。
Ｒ３は−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−又は−ＣＨ＝ＣＨ−を表すが、好ましくは−ＣＨ２−又は−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−であり、最も好ましくは−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−である。
Ｒ４は水素原子又はＣＨ３を表すが、好ましくは水素原子である。
ｘは０〜３５、好ましくは０〜２６であり、より好ましくは１１〜２６、更に好ましくは１１〜２３、最も好ましくは１８〜２３である。
ｙ及びｚは、ｙ＋ｚ＝０〜３を満たす整数を表す。ここで−（ＣＨ２）ｙ（ＣＨ（ＣＨ３））ｚ−との記載は必ずしも（ＣＨ２）と（ＣＨ（ＣＨ３））とがこの記載の順に並ぶことを意味するものではなく、単にその量的関係を示すに過ぎない。例えば、ｙ＝２及びｚ＝１の場合には、−（ＣＨ２）ｙ（ＣＨ（ＣＨ３））ｚ−は、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、又は−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−のいずれかを表す。また、ｙ及びｚは、好ましくはｚが０であってｙが０〜３であり、より好ましくはｚが０であってｙが１〜３である。
また本発明は、これらの糖脂質を有効成分として含有する自己免疫疾患のための治療薬であり、また、これらの糖脂質を有効成分として含有するＴｈ１／Ｔｈ２免疫バランスがＴｈ１に偏向した疾患、またはＴｈ１細胞が病態を悪化させる疾患の治療薬であり、更に、これらの糖脂質を有効成分として含有する選択的ＩＬ−４産生誘導剤である。
発明の実施の形態
自己免疫疾患には全身性自己免疫疾患と臓器特異的自己免疫疾患とがある。このうち臓器特異的自己免疫疾患は、特定の臓器や組織（脳、肝臓、眼、関節）に慢性的な炎症を来たし、その原因が、当該臓器に特異的な自己抗原に対する免疫応答（自己免疫応答）に起因すると考えられる疾患をいう。多発性硬化症（脳、脊髄）、リウマチ様関節炎（関節）が代表的な疾患である。障害される臓器は異なっても、それらの疾患には共通点が多く、治療法も基本的に共通している。また、その多くで、ＩＦＮ−γを産生するＴ細胞が重要な役割を果たしている。
ＮＫＴ細胞はＮＫ細胞とＴ細胞の両方の性格を持つリンパ球で、Ｔ細胞抗原受容体を介してＣＤ１ｄ分子に結合した糖脂質を認識する。
ＮＫＴ細胞は、ａ）抗腫瘍活性（腫瘍細胞殺傷効果）、ｂ）ＩＦＮ−γ産生、ｃ）ＩＬ−４産生などの生理機能を発揮し、産生されたＩＦＮ−γによりｄ）ＮＫ細胞の活性増強やｅ）マクロファージ活性化が誘導される。すなわちａ）ｂ）ｃ）はＮＫＴ細胞の直接作用、ｄ）ｅ）はｂ）を介して誘導される間接作用である。
ところで、従来のアルファ・ガラクトシルセラミド（即ち、本発明の糖脂質よりもスフィンゴシン塩基の炭素鎖が長いものをいう。例えば、後述の実施例で比較として用いた糖脂質や、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｖｏｌ．２７８  １６２６−１６２９（１９９７）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ｖｏｌ．９５  ｐｐ５６９０−５６９３（１９９８）、特開平５−９１９３、特開平５−５９０８１、米国特許第５，９３６，０７６号等に記載のものを参照されたい。）はＮＫＴ細胞を活性化して、ａ）〜ｅ）のすべての作用を誘導する、非常に強い免疫賦活剤である。誘導される性質の中で、ｃ）ＩＬ−４産生は自己免疫病に抑制的に働くが、ｂ）ＩＦＮ−γ産生は自己免疫病を悪化させる機能であり、両者が相殺しあう結果、自己免疫病に対する治療効果は得られない。また、従来のアルファ・ガラクトシルセラミドで刺激されたＮＫＴ細胞の相当数は、細胞死（アポトーシス）により即座に死滅する。一方、本発明の糖脂質は、従来のアルファ・ガラクトシルセラミドよりも免疫賦活効果は弱く、ＮＫＴ細胞の機能のうちｃ）ＩＬ−４産生を選択的に誘導する。ＩＦＮ−γ誘導が回避された結果、臓器特異的自己免疫病疾患に対する抑制、治療効果が得られることとなる。また、ＮＫＴ細胞の細胞死も誘導されない点が優れている。
ＮＫＴ細胞の抗原受容体、糖脂質、ＣＤ１ｄ分子の相互関係については、近年研究が進んでいる（イミュノロジカル・レビュー誌１９９９年１７２巻２８５−２９６頁参照）。現在では、糖脂質のスフィンゴシン塩基及び脂肪酸由来の二つの疎水性炭素鎖部分がＣＤ１ｄ分子の深い二つの溝（ポケット）に入り込んで結合し、親水性の糖部分がＮＫＴ細胞の抗原受容体に結合すると考えられている。本発明の糖脂質では、従来のアルファ・ガラクトシルセラミドに比較してスフィンゴシン塩基の炭素鎖が短く、ＣＤ１ｄ分子への結合が弱くなる。その結果、糖部分の安定性が減弱し、抗原受容体に伝達されるシグナルの性質が修飾される。その結果、ＩＬ−４の選択的産生につながるものと考えられる。いかなる用量においても、本発明の糖脂質の効果はアルファ・ガラクトシルセラミドのそれと一致せず、両者は質的に異なるリガンドと考えられる（後述の実施例及び論文（Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．４１３，Ｎｏ．６８５５  ｐｐ．５３１−５３４（２００１））を参照されたい。）。
本発明の糖脂質は、上式（Ｉ）で表されるが、例えば、（１）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−トリアコンタノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（２）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ノナコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−オクタコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（４）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘプタコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ペンタコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（７）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（８）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−トリコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（９）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ドコサコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（１０）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘネイコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（１１）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−エイコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（１２）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ノナデカノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール、（１３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−トリアコンタノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（１４）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ノナコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（１５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−オクタコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（１６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘプタコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（１７）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（１８）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ペンタコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（１９）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（２０）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−トリコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（２１）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ドコサコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（２２）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘネイコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（２３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−エイコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（２４）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ノナデカノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール、（２５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−トリアコンタノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（２６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ノナコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（２７）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−オクタコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（２８）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘプタコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（２９）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（３０）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ペンタコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（３１）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（３２）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−トリコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（３３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ドコサコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（３４）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘネイコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（３５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−エイコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（３６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ノナデカノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール、（３７）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−トリアコンタノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（３８）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ノナコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（３９）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−オクタコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（４０）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘプタコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（４１）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（４２）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ペンタコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（４３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（４４）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−トリコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（４５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ドコサコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（４６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘネイコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（４７）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−エイコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオール、（４８）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ノナデカノイルアミノ）−１，３，４−ヘキサントリオールが挙げられるが、この中で（３）〜（９）、（１５）〜（２１）、（２７）〜（３３）及び（３９）〜（４５）が好ましい。
本発明の糖脂質は、種々の方法で製造することが可能であるが、例えば以下に記載する方法に従って製造することが出来る。その製造工程を第１図及び第２図に示す。即ち、既報（Ｍ．Ｍｏｒｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５，３８，２１７６等）の方法に従い、化合物（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）を得、（ＩＩａ）及び（ＩＩｂ）については二重結合部分を還元して化合物（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｂ）に変換する。化合物（ＩＩＩａ）、（ＩＩＩｂ）、（ＩＩｃ）の二級水酸基部分をメシル化、或いはトシル化後、アジド基へと置換させることにより化合物（ＩＶ）を得、アジド基のアミノ基への選択的還元と続くアミド化反応により化合物（Ｖ）を得る。化合物（Ｖ）の二級水酸基の保護基であるベンジル基をベンゾイル基やアセチル基等のアシル基へ変換すると共に一級水酸基部分を脱保護して化合物（ＶＩ）を得る。化合物（ＶＩ）をグリコシル化して化合物（ＶＩＩ）を得、残りの保護基を脱保護することにより、目的とする化合物（Ｉ）を得ることが出来る。
本発明の糖脂質は、自己免疫疾患のための治療薬、Ｔｈ１／Ｔｈ２免疫バランスがＴｈ１に偏向した疾患又はＴｈ１細胞が病態を悪化させる疾患の治療薬、更に、選択的ＩＬ−４産生誘導剤として用いることができる。ここで、自己免疫疾患とは、多発性硬化症、関節リウマチ、乾癬、クローン病、尋常性白斑、ベーチェット病、膠原病、Ｉ型糖尿病、ぶどう膜炎、シェーグレン症候群、自己免疫性心筋炎、自己免疫性肝疾患、自己免疫性胃炎、天疱瘡、ギラン・バレー症候群、ＨＴＬＶ−１関連脊髄症等の疾患を意味する。また、Ｔｈ１／Ｔｈ２免疫バランスがＴｈ１に偏向した疾患とは、多発性硬化症、関節リウマチ、乾癬、Ｉ型糖尿病、ぶどう膜炎、シェーグレン症候群等の自己免疫疾患に加え、劇症肝炎、移植片拒絶、細胞内感染病原体による感染症等の主として細胞性免疫による疾患を意味する。
本発明の糖脂質（式（Ｉ））は、低毒性であり、例えば化合物２５を５週齢のマウスに投与した実験では、一回あたり３００μｑ／ｋｑの週２回、４ヶ月間にわたる腹腔内投与を受けた１０例全例が生存していた。本発明の糖脂質（Ｉ）は、それ自体単独で投与しても良いが、所望により他の通常の薬理学的に許容される公知慣用の担体と共に、自己免疫疾患、或いはＴｈ１／Ｔｈ２免疫バランスがＴｈ１に偏向した疾患、或いはＴｈ１細胞が病態を悪化させる疾患に起因する症状の改善、治療を目的とする製剤に調整することが出来る。例えば、有効成分を単独、又は慣用の賦形剤と共にカプセル剤、錠剤、注射剤等の適宜な剤形として、経口的又は非経口的に投与することが出来る。例えば、カプセル剤は、粉末状の原体を乳糖、澱粉又はその誘導体、セルロース誘導体等の賦形剤と混合してゼラチンカプセルに詰めて調整する。また、上記賦形剤の他にカルボキシメチルセルロースナトリウム、アルギン酸、アラビアゴム等の結合剤と水を加えて混練し、必要により顆粒とした後、更にタルク、ステアリン酸等の潤滑剤を添加して通常の圧縮打錠機を用いて調整する。注射による非経口投与に際しては、有効成分を溶解補助剤と共に滅菌蒸留水又は滅菌生理食塩水に溶解し、アンプルに封入して注射製剤とする。必要により安定化剤、緩衝物質を含有させても良い。
本発明の医薬、自己免疫疾患、或いはＴｈ１／Ｔｈ２免疫バランスがＴｈ１に偏向した疾患の改善、治療薬及びＩＬ−４誘導剤の投与量は、種々の要因、例えば治療すべき患者の症状、年齢、投与経路、剤形、投与回数等に依存するが、通常、０．００１ｍｇ〜５０００ｍｇ／日／人、好ましくは０．０１ｍｇ〜５００ｍｇ／日／人、さらに好ましくは０．５ｍｇ〜１００ｍｇ／日／人が適当である。
発明の効果
本発明の糖脂質はＮＫＴ細胞の免疫調節能を効果的に発現させることによって自己免疫病を治療するはじめての治療薬である。また、本発明の糖脂質は自己免疫病抑制効果の証明されたはじめての糖脂質でもある。更に、本発明の糖脂質はＮＫＴ細胞の持つ自己免疫病の治療効果のみを選択的に誘導するという点で、きわめて斬新な治療薬である。
本発明の糖脂質は、ＩＬ−４が抑制的に働くような自己免疫疾患であれば、ただちにその治療薬として応用できる。また、ＩＬ−４は抗体産生を高める作用を持つので、ワクチン療法の補助剤として応用可能である。更に、肝炎ウイルスワクチンなどで、なかなか抗体価の上がらない患者に併用すると効果があると考えられる。更に、ＮＫＴ細胞の機能低下を来すような疾患に応用できる。
実施例
以下、実施例により本発明を例証するが、これらは本発明を制限することを意図したものではない。
参考例１：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−１，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−５−オクテン−１，２，３，４−トリオール（化合物１）の合成
３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−ガラクトース（０．９９ｇ）のエタノール／水（４／１）混合溶液（１２．５ｍｌ）に、氷冷下ＮａＩＯ４（７６０ｍｇ）を加え、室温下６時間攪拌した。塩化メチレンにて希釈後、水を加えて分液し、水層をさらに２回塩化メチレンにて抽出した。有機層をＭｇＳＯ４にて乾燥後、減圧下溶媒を溜去した。得られた油状物のＴＨＦ溶液（６ｍｌ）を別途調製したプロピリデン（トリフェニル）フォスフォラン（５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ−ヘキサン溶液（１１．２ｍｌ）へ、−１０℃にて滴下後、室温にて２２時間攪拌した。ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ混合溶液（４／１；５０ｍｌ）を加えた後、ヘキサンにて４回抽出し、得られた有機層をＮａ２ＳＯ４にて乾燥後減圧下溶媒を溜去した。得られた油状物をシリカゲルカラムにて精製し、表題化合物２７０ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．９２（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，３Ｈ），１．８５−２．０５（ｍ，２Ｈ），２．９７（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），３．５１（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，２Ｈ），３．５５−３．６０（ｍ，１Ｈ），４．０５−４．１０（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），４．４０−４．５０（ｍ，１Ｈ），４．５０−４．５５（ｍ，３Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），４．６９（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），５．４４（ｔ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ），５．７０−５．８０（ｍ，１Ｈ），７．２−７．４（ｍ，１５Ｈ）．
参考例２：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−１，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−５−ヘプテン−１，２，３，４−トリオール（化合物２）の合成
３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−ガラクトースとエチリデン（トリフェニル）フォスフォランから化合物１の合成と同様にして表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．５７（ｄｄ，Ｊ＝７Ｈｚ  ａｎｄ  ２Ｈｚ，３Ｈ），２．９５（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），３．５２（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，２Ｈ），３．５５−３．６０（ｍ，１Ｈ），４．０５−４．１０（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），４．４０−４．５５（ｍ，３Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），４．６９（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），５．５１（ｔ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ），５．８０−５．９０（ｍ，１Ｈ），７．２−７．４（ｍ，１５Ｈ）．
参考例３：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−１，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−５−ノネン−１，２，３，４−トリオール（化合物３）の合成
３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−ガラクトースとブチリデン（トリフェニル）フォスフォランから化合物１の合成と同様にして表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ：０．９０（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），１．３５−１．４２（ｍ，２Ｈ），１．８７−２．０４（ｍ，２Ｈ），３．０５（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），３．５５（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，２Ｈ），３．６０−３．６２（ｍ，１Ｈ），４．１０−４．１２（ｍ，１Ｈ），４．３８（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），４．４５−４．５６（ｍ，４Ｈ），４．６４（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），４．７２（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），５．５１（ｔ，Ｊ＝１０Ｈｚ），７．２６−７．３６（ｍ，１５Ｈ）．
参考例４：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−１，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−１，２，３，４−オクタンテトラオール（化合物４）の合成
化合物１（２７０ｍｇ）のＴＨＦ（３ｍｌ）溶液に１０％Ｐｄ−Ｃ（３０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下１時間室温にて攪拌した。触媒をろ過し、溶媒を溜去することにより表題化合物（２６２ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８８（ｔ，Ｊ＝３Ｈｚ，３Ｈ），１．２５−１．７５（ｍ，６Ｈ），３．１５（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），３．５−３．７（ｍ，４Ｈ），４．０５−４．１０（ｍ，１Ｈ），４．５０−４．７５（ｍ，６Ｈ），７．２５−７．４０（ｍ，１５Ｈ）．
参考例５：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタンテトラオール（化合物５）の合成
化合物４（２６２ｍｇ）のピリジン溶液にトリエチルアミン（２４０μｌ）、メタンスルホニルクロリド（１０８μｌ）を室温にて順次加えた後、１時間室温にて攪拌した。エーテルにて抽出し、有機層を飽和重硫酸カリウム、水、重曹水、飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸ナトリウムにて乾燥した。減圧下、溶媒を溜去し、２８２ｍｇの残渣を得た。残渣をＤＭＦ（２ｍｌ）に溶解し、ＮａＮ３（０．３ｇ）を加え、１００℃にて２４時間攪拌後、酢酸エチルで希釈した。得られた有機層を水洗、無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、溶媒を溜去して得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィーにて精製し（ヘキサン／酢酸エチル＝１００／０から９０／１０のグラジエント溶出）、表題化合物２００ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８９（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），１．２５−１．８０（ｍ，６Ｈ），３．６０−３．８５（ｍ，５Ｈ），４．４５−４．７５（ｍ，６Ｈ），７．２５−７．４０（ｍ，１５Ｈ）．
参考例６：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−ヘプタンテトラオール（化合物６）の合成
化合物２を用いて、化合物４の合成と同様の操作を行い、続いて化合物５の合成と同様の操作により表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ：０．９０（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），１．３０−１．７５（ｍ，４Ｈ），３．６０−３．８５（ｍ，５Ｈ），４．５０−４．７５（ｍ，６Ｈ），７．２５−７．４０（ｍ，１５Ｈ）．
参考例７：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−アジド−１，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−ノナンテトラオール（化合物７）の合成
化合物３を用いて、化合物４の合成と同様の操作を行い、続いて化合物５の合成と同様の操作により表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ：０．８８（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），１．２０−１．７２（ｍ，８Ｈ），３．５９−３．７２（ｍ，５Ｈ），４．５０−４．８０（ｍ，６Ｈ），７．２７−７．３６（ｍ，１５Ｈ）．
参考例８：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−オクタントリオール（化合物８）の合成
化合物５（２００ｍｇ）のＴＨＦ（７ｍｌ）溶液に１０％Ｐｄ−Ｃ（２０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下室温にて１４時間攪拌した。メンブレンフィルターにて触媒をろ別した後、減圧下溶媒を溜去した。得られた残渣を塩化メチレン（５ｍｌ）に溶解し、テトラコサン酸、１−メチル−２−クロロピリジニウム  ヨージド（２５２ｍｇ）、トリブチルアミン（１３６μｌ）を順次加え、２．５時間加熱攪拌した。反応液に酢酸エチルを加えた後、５％チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和硫酸水素カリウム水溶液にて洗浄、硫酸ナトリウムにて乾燥後、フラッシュクロマトグラフィーにて精製し（アセトン／ヘキサン＝４／９６から１／４のグラジエント溶出）、表題化合物２１３ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８０−０．９０（ｍ，６Ｈ），１．２０−１．７５（ｍ，４８Ｈ），２．０−２．１（ｍ，２Ｈ），３．４５−３．５５（ｍ，２Ｈ），３．７５−３．８５（ｍ，２Ｈ），４．２０−４．３０（ｍ，１Ｈ），４．４４（ｓ，２Ｈ），４．４５−４．６０（ｍ，３Ｈ），４．８２（ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ），５．７８（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．２５−７．４０（ｍ，１５Ｈ）．
参考例９：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−ヘプタントリオール（化合物９）の合成
化合物６を用いて化合物８の合成と同様の操作を行い、表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８５−０．９５（ｍ，６Ｈ），１．２０−１．７５（ｍ，４６Ｈ），２．０−２．１（ｍ，２Ｈ），３．５０−３．５５（ｍ，２Ｈ），３．８０−３．８５（ｍ，２Ｈ），４．２０−４．３０（ｍ，１Ｈ），４．４６（ｓ，２Ｈ），４．５０−４．６５（ｍ，３Ｈ），４．８３（ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ），５．７７（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．２５−７．４０（ｍ，１５Ｈ）．
参考例１０：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−１，３，４−ノナントリオール（化合物１０）の合成
化合物７を用いて化合物８の合成と同様の操作を行い、表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ：０．８５−０．９０（ｍ，６Ｈ），１．２６−１．７０（ｍ，５０Ｈ），２．００−２．０５（ｍ，２Ｈ），３．４９−３．５４（ｍ，２Ｈ），３．７９−３．８３（ｍ，２Ｈ），４．２２−４．２８（ｍ，２Ｈ），４．４５（ｓ，１Ｈ），４．４９−４．５４（ｍ，２Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），４．８２（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ），５．７６（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．２６−７．３４（ｍ，１５Ｈ）．
参考例１１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１−Ｏ−トリフェニルメチル−１，３，４−オクタントリオール（化合物１１）の合成
化合物８（２１０ｍｇ）、Ｐｄ−Ｃ（１０％，６０ｍｇ）、ＰｄＣｌ２（３０ｍｇ）の酢酸エチル（１０ｍｌ）混合物を水素雰囲気下、室温にて３０分攪拌した。ＴＨＦ−ＥｔＯＨ（１／１；２５ｍｌ）を加え、触媒を濾過後、溶媒を溜去した。得られた残渣のピリジン（１．７ｍｌ）混合物にトリフェニルメチルクロリド（５８７ｍｇ）、ジメチルアミノピリジン（２０ｍｇ）を加え、４０℃で９時間加熱攪拌した。減圧下ピリジンを溜去した後、フラッシュクロマトグラフィーにて精製し（塩化メチレン／アセトン＝１００／０から５０／１のグラジエント溶出）、ジオール誘導体を含むフラクションを得た。溶媒を溜去後、得られた残渣に、ピリジン（２ｍｌ）ジメチルアミノピリジン（２５ｍｇ）、ベンゾイルクロリド（２００μｌ）を加え、４０℃にて６６時間攪拌した。溶媒を減圧下溜去し、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィーにて精製し（ヘキサン／酢酸エチル＝９８／２から８０／２０のグラジエント溶出）、表題化合物１２８ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８０−０．９５（ｍ，６Ｈ），１．２０−１．４５（ｍ，４４Ｈ），１．５−２．０（ｍ，４Ｈ），２．１−２．３（ｍ，２Ｈ），３．２５−３．３５（ｍ，２Ｈ），４．５５−４．６５（ｍ，１Ｈ），５．３０−５．３５（ｍ，１Ｈ），５．７９（ｄｄ，Ｊ＝２Ｈｚ  ａｎｄ  ９Ｈｚ，１Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．０５−７．３５（ｍ，１５Ｈ），７．３５−７．６０（ｍ，６Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），７．９５−８．０（ｍ，２Ｈ）．
参考例１２：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１−Ｏ−トリフェニルメチル−１，３，４−ヘプタントリオール（化合物１２）の合成
化合物９を用いて、化合物１１の合成と同様の操作を行い表題化合物を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８５−０．９５（ｍ，６Ｈ），１．２０−１．５０（ｍ，４２Ｈ），１．５５−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．９５（ｍ，２Ｈ），２．１−２．３（ｍ，２Ｈ），３．３０−３．４０（ｍ，２Ｈ），４．５５−４．６５（ｍ，１Ｈ），５．３５−５．４０（ｍ，１Ｈ），５．８２（ｄｄ，Ｊ＝２Ｈｚ  ａｎｄ  ９Ｈｚ，１Ｈ），６．１３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．０５−７．６５（ｍ，２１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ）．
参考例１３：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１−Ｏ−トリフェニルメチル−１，３，４−ノナントリオール（化合物１３）の合成
化合物１０を用いて、化合物１１の合成と同様の操作を行い表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ：０．８２−０．９０（ｍ，６Ｈ），１．２６−１．４１（ｍ，４６Ｈ），１．６０−１．６５（ｍ，２Ｈ），１．７４−１．８９（ｍ，２Ｈ），２．１４−２．２４（ｍ，２Ｈ），３．２７−３．３５（ｍ，２Ｈ），４．５６−４．６０（ｍ，１Ｈ），５．３４−５．４０（ｍ，１Ｈ），５．７９（ｄｄ，Ｊ＝３Ｈｚ  ａｎｄ  ９Ｈｚ，１Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．１１−７．６９（ｍ，２１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ）．
参考例１４：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１，３，４−オクタントリオール（化合物１４）の合成
化合物１１（１２８ｍｇ）の塩化メチレン／メタノール（２／１）（１．８ｍｌ）溶液に、ｐ−トルエンスルホン酸１水和物（１４ｍｇ）を加え、３０℃にて２時間攪拌した。減圧下溶媒を溜去し、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィーにて精製し（ヘキサン／酢酸エチル＝８５／１５から５０／５０のグラジエント溶出）、表題化合物５４ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８５−０．９５（ｍ，６Ｈ），１．２０−１．５０（ｍ，４４Ｈ），１．６０−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．９５−２．１０（ｍ，２Ｈ），２．２９（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），２．７０−２．７５（ｍ，１Ｈ），３．６−３．７（ｍ，２Ｈ），４．３５−４．４５（ｍ，１Ｈ），５．３５−５．４５（ｍ，２Ｈ），６．３３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），７．５０−７．６０（ｍ，３Ｈ），７．６４（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），７．９５−８．００（ｍ，２Ｈ），８．０５−８．１０（ｍ，２Ｈ）．
参考例１５：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル―１，３，４−ヘプタントリオール（化合物１５）の合成
化合物１２を用いて化合物１４の合成と同様の操作を行い、表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８８（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），０．９７（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），１．２０−１．７５（ｍ，４４Ｈ），２．０−２．１（ｍ，２Ｈ），２．３０（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），３．６−３．７（ｍ，２Ｈ），４．３５−４．４５（ｍ，１Ｈ），５．３５−５．４５（ｍ，２Ｈ），６．３８（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），７．４５−７．７０（ｍ，３Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），８．０５−８．１０（ｍ，２Ｈ）．
参考例１６：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１，３，４−ノナントリオール（化合物１６）の合成
化合物１３を用いて化合物１４の合成と同様の操作を行い、表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８５−０．９０（ｍ，６Ｈ），１．２６−１．４８（ｍ，４６Ｈ），１．６５−１．７２（ｍ，２Ｈ），１．８９−２．１０（ｍ，２Ｈ），２．２９（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），２．７４−２．７７（ｍ，１Ｈ），３．５８−３．６８（ｍ，２Ｈ），４．３６−４．４１（ｍ，１Ｈ），５．３６−５．４３（ｍ，２Ｈ），６．３４（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），７．４８−７．５５（ｍ，３Ｈ），７．６４（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ）．
参考例１７：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−ガラクトシル）−１，３，４−オクタントリオール（化合物１７）の合成
化合物１４（５４ｍｇ）、塩化第１スズ（３８ｍｇ）、過塩素酸銀（４６ｍｇ）、モレキュラーシーブ（４Ａ，２７０ｍｇ）のＴＨＦ（２ｍｌ）混合物を室温にて１時間攪拌した。これに、テトラ−Ｏ−ベンジルガラクトシル  フルオリド（７０ｍｇ）を加えて、２．５時間攪拌した。反応液に酢酸エチル、飽和食塩水を加えて分液操作を行い、得られた有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥した。溶媒を減圧下溜去し、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィーにて精製し（ヘキサン／酢酸エチル＝９５／５から７５／２５のグラジエント溶出）、表題化合物４５ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．７５−０．９０（ｍ，６Ｈ），１．１５−１．４５（ｍ，４４Ｈ），１．５５−１．７０（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．８５（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），３．３０−３．３５（ｍ，１Ｈ），３．５０−３．５５（ｍ，１Ｈ），３．６−３．６５（ｍ，１Ｈ），３．８−４．１（ｍ，５Ｈ），４．４０−４．９０（ｍ，１０Ｈ），５．３５−５．４５（ｍ，１Ｈ），５．７０（ｄｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ  ａｎｄ  ３Ｈｚ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．１５−７．６０（ｍ，２６Ｈ），７．９０−７．９５（ｍ，２Ｈ），８．００−８．０５（ｍ，２Ｈ）．
参考例１８：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−ガラクトシル）−１，３，４−ヘプタントリオール（化合物１８）の合成
化合物１５を用い化合物１７の合成と同様の操作を行い表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８５−０．９０（ｍ，６Ｈ），１．１５−１．５０（ｍ，４２Ｈ），１．５５−１．７０（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．９０（ｍ，２Ｈ），２．１５（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），３．３０−３．３５（ｍ，１Ｈ），３．５０−３．５５（ｍ，１Ｈ），３．６−３．６５（ｍ，１Ｈ），３．８−３．９（ｍ，２Ｈ），３．９５−４．０５（ｍ，２Ｈ），４．０５−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．４０−４．９０（ｍ，１０Ｈ），５．４０−５．４５（ｍ，１Ｈ），５．６９（ｄｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ  ａｎｄ  ３Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．１５−７．６５（ｍ，２６Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），８．０３（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ）．
参考例１９：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−ガラクトシル）−１，３，４−ノナントリオール（化合物１９）の合成
化合物１６を用い化合物１７の合成と同様の操作を行い表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８７−０．９０（ｍ，６Ｈ），１．２５−１．３７（ｍ，４６Ｈ），１．６１−１．６４（ｍ，２Ｈ），１．７８−１．９１（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），３．３０−３．３５（ｍ，１Ｈ），３．４５−３．５４（ｍ，１Ｈ），３．６０−３．６４（ｍ，１Ｈ），３．８２−３．８７（ｍ，２Ｈ），３．９４−４．１０（ｍ，３Ｈ），４．３５−４．９３（ｍ，１０Ｈ），５．３９−５．４３（ｍ，１Ｈ），５．７０（ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ  ａｎｄ  ３Ｈｚ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ），７．１６−７．３８（ｍ，２２Ｈ），７．４５（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），８．０３（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ）．
参考例２０：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール（化合物２０）の合成
化合物１７（４５ｍｇ）、Ｐｄ−Ｃ（１０％，１２ｍｇ）、ＰｄＣｌ２（１２ｍｇ）の酢酸エチル（３ｍｌ）混合物を水素雰囲気下、室温にて１．５時間攪拌した。触媒をろ別した後、溶媒を減圧下溜去し、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィーにて精製し（アセトン／ヘキサン＝２／３）、表題化合物２４ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８０−０．９０（ｍ，６Ｈ），１．２０−１．５０（ｍ，４４Ｈ），１．６０−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．９０−２．００（ｍ，２Ｈ），２．２５−２．３５（ｍ，３Ｈ），２．６８（ｓ，１Ｈ），２．８８（ｓ，１Ｈ），３．４３（ｂｒ  ｔ，１Ｈ），３．６５−４．０５（ｍ，８Ｈ），４．６０（ｂｒ  ｔ，１Ｈ），４．７９（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，１Ｈ），５．２０−５．２５（ｍ，１Ｈ），５．７７（ｄｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ  ａｎｄ  ３Ｈｚ，１Ｈ），７．３５−７．６５（ｍ，７Ｈ），７．９０−７．９５（ｍ，２Ｈ），８．００−８．０５（ｍ，２Ｈ）．
参考例２１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール（化合物２１）の合成
化合物１８を用い、化合物２０の合成と同様の操作を行い表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：０．８８（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），０．９３（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），１．２０−１．４０（ｍ，４１Ｈ），１．４−１．５５（ｍ，１Ｈ），１．６０−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．８５−２．００（ｍ，２Ｈ），２．１１（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ），２．３２（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），２．５２（ｓ，１Ｈ），２．６４（ｓ，１Ｈ），３．４４（ｂｒ  ｔ，１Ｈ），３．６５−４．０５（ｍ，８Ｈ），４．６０（ｂｒ  ｔ，１Ｈ），４．８０（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，１Ｈ），５．２５−５．３０（ｍ，１Ｈ），５．７７（ｄｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ  ａｎｄ  ３Ｈｚ，１Ｈ），７．３５−７．６５（ｍ，７Ｈ），７．９０−７．９５（ｍ，２Ｈ），８．００−８．０５（ｍ，２Ｈ）．
参考例２２：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジ−Ｏ−ベンゾイル−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物２２）の合成
化合物１９を用い、化合物２０の合成と同様の操作を行い表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ：０．８３−０．９０（ｍ，６Ｈ），１．２５−１．３２（ｍ，４６Ｈ），１．６８−１．７３（ｍ，２Ｈ），２．２７−２．４７（ｍ，３Ｈ），２．６７（ｓ，１Ｈ），２．８７（ｓ，１Ｈ），３．４３（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），３．６６−４．０１（ｍ，８Ｈ），４．５９（ｔ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ），４．７９（（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，１Ｈ），５．２１−５．２５（ｍ，１Ｈ），５．７７（ｄｄ，Ｊ＝３Ｈｚ  ａｎｄ  １０Ｈｚ，１Ｈ），７．３７−７．６５（ｍ，７Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ）．
実施例１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタントリオール（化合物２３）の合成
化合物２０（２４ｍｇ）のＭｅＯＨ−ＴＨＦ（１／１，１．８ｍｌ）混合溶液に室温にて、１Ｍ−ナトリウムメトキシド・メタノール溶液（２５０μｌ）を加え３０分攪拌した。これにＡＧ  ５０Ｗｘ８（Ｈ＋型）（４３０ｍｇ）を加えて１０分攪拌の後、樹脂をろ別した。溶媒を溜去し、得られた残渣を少量のＭｅＯＨで洗った後、窒素ガス気流にて乾燥して表題化合物１５ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｐｙｒｉｄｉｎｅ−ｄ５）：０．８０−０．９０（ｍ，６Ｈ），１．１５−１．４５（ｍ，４２Ｈ），１．５５−１．７０（ｍ，１Ｈ），１．７５−１．９０（ｍ，４Ｈ），２．２０−２．３０（ｍ，１Ｈ），２．４２（ｔ，Ｊ−７Ｈｚ，２Ｈ），３．２０（ｂｒ  ｔ，１Ｈ），４．３０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）４．３５−４．５０（ｍ，４Ｈ），４．５０−４．６０（ｍ，２Ｈ），４．６０−４．７０（ｍ，２Ｈ），５．２０−５．３０（ｍ，１Ｈ），５．５７（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ  １Ｈ），６．００−６．１０（ｍ，１Ｈ），６．３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．４（ｂｒ  ｄ，１Ｈ），６．５５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．６５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．９５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．４３（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６９０．５（Ｍ＋Ｈ＋）．
実施例２：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−ヘプタントリオール（化合物２４）の合成
化合物２１を用いて化合物２３の合成と同様の操作を行い表題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｐｙｒｉｄｉｎｅ−ｄ５）：０．８７（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），１．１５−１．４０（ｍ，４０Ｈ），１．５７−１．７５（ｍ，１Ｈ），１．７５−１．９０（ｍ，４Ｈ），２．１５−２．２５（ｍ，１Ｈ），２．４２（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），４．３（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），４．３５−４．４５（ｍ，４Ｈ），４．４５−４．５７（ｍ，２Ｈ），４．５７−４．７０（ｍ，２Ｈ），５．２０−５．３０（ｍ，１Ｈ），５．５６（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，１Ｈ），６．００−６．０５（ｍ，１Ｈ），６．２５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．４（ｂｒ  ｄ，１Ｈ），６．５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．３８（ｄ．Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６７６．４（Ｍ＋Ｈ＋）．
実施例３：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物２５）の合成
化合物２２を用いて化合物２３の合成と同様の操作を行い化合物２５（下記構造式で表される。）を得た。
2003016326.tif 000005
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５４（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ＝３：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（Ｐｙｒｉｄｉｎｅ−ｄ５）：０．８０（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），０．８６（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，３Ｈ），１．２２−１．３１（ｍ，４４Ｈ），１．５８−１．６９（ｍ，１Ｈ），１．７９−１．８４（ｍ，４Ｈ），２．２０−２．３０（ｍ，１Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ），４．２９（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），４．３６−４．４５（ｍ，４Ｈ），４．５０−４．５５（ｍ，２Ｈ），４．６２−４．６９（ｍ，２Ｈ），５．２６（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），５．５７（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，１Ｈ），６．０４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．２９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．３９（ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，１Ｈ），６．５１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．６０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），６．９３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．４３（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０４．５（Ｍ＋Ｈ＋）．
実施例４：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ノナコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物２６）の合成
化合物７とノナコサン酸から、化合物８、１４、１７、２０、２３の合成と同様の操作を連続して行い、表題化合物を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２５（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝１０：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３：ＣＤ３ＯＤ＝３：１）：７．３４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），４．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），４．１７（ｍ，１Ｈ），３．９５−３．８８（ｍ，２Ｈ），３．８０−３．６８（ｍ，６Ｈ），３．６７−３．５５（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），１．６７−１．２６（ｍ，６０Ｈ），０．９１−０．８７（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：７７４（Ｍ＋）．
実施例５：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−オクタコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物２７）の合成
化合物７とオクタコサン酸から、化合物８、１４、１７、２０、２３の合成と同様の操作を連続して行い、表題化合物を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２４（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝１０：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３：ＣＤ３ＯＤ＝３：１）：４．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ），４．２０−４．１９（ｍ，１Ｈ），３．９６−３．８８（ｍ，２Ｈ），３．８１−３．６７（ｍ，６Ｈ），３．５６−３．５０（ｍ，２Ｈ），２．２０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），１．６７−１．２６（ｍ，５８Ｈ），０．９１−０．８６（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：７６０（Ｍ＋）．
実施例６：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘプタコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物２８）の合成
化合物７とヘプタコサン酸から、化合物８、１４、１７、２０、２３の合成と同様の操作を連続して行い、表題化合物を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２５（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝１０：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（Ｐｙｒｉｄｉｎｅ−ｄ５）：８．４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），５．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ），５．２５（ｍ，１Ｈ），４．７−４．６（ｍ，２Ｈ），４．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），４．５０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），４．４５−４．３（ｍ，４Ｈ），４．３−４．２（ｍ，２Ｈ），２．４２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．３−２．１５（ｍ，１Ｈ），１．９−１．７５（ｍ，４Ｈ），１．７−１．５５（ｍ，１Ｈ），１．４−１．１５（ｍ，５６Ｈ），０．８５（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），０．７８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）．ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：７４７（Ｍ＋Ｈ＋）．
実施例７：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物２９）の合成
化合物７とセロチン酸から、化合物８、１４、１７、２０、２３の合成と同様の操作を連続して行い、表題化合物を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２０（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝６：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（Ｐｙｒｉｄｉｎｅ−ｄ５）：８．４４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），５．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ），５．５０−５．１９（ｍ，１Ｈ），４．６９−４．６１（ｍ，２Ｈ），４．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），４．５２−４．４７（ｍ，１Ｈ），４．４５−４．３４（ｍ，４Ｈ），４．３１−４．２３（ｍ，２Ｈ），２．４３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．２８−２．１７（ｍ，１Ｈ），１．９２−１．７３（ｍ，４Ｈ），１．７０−１．５３（ｍ，１Ｈ），１．３８−１．１５（ｍ，５４Ｈ），０．８５（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），０．７３（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）．ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：７３２（Ｍ＋）．
実施例８：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ペンタコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物３０）の合成
化合物７とペンタコサン酸から、化合物８、１４、１７、２０、２３の合成と同様の操作を連続して行い、表題化合物を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５３（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝６：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３：ＣＤ３ＯＤ＝３：１）：４．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），４．２０−４．１５（ｍ，１Ｈ），３．９６−３．９３（ｍ，１Ｈ），３．９２−３．８５（ｍ，１Ｈ），３．８２−３．６５（ｍ，６Ｈ），３．６０−３．５２（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．６２−１．２６（ｍ，５２Ｈ），０．９０−０．８５（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：７１９（Ｍ＋Ｈ＋）．
実施例９：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−トリコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物３１）の合成
化合物７とトリコサン酸から、化合物８、１４、１７、２０、２３の合成と同様の操作を連続して行い、表題化合物を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．５１（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ＝４：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３：ＣＤ３ＯＤ＝３：１）：４．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），４．２３−４．１５（ｍ，１Ｈ），３．９５−３．８５（ｍ，２Ｈ），３．８１−３．６３（ｍ，６Ｈ），３．５９−３．５１（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），１．６１−１．２５（ｍ，４８Ｈ），０．９０−０．８５（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：６９０（Ｍ＋）．
実施例１０：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ドコサコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物３２）の合成
化合物７とドコサン酸から、化合物８、１４、１７、２０、２３の合成と同様の操作を連続して行い、表題化合物を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４７（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝５：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３：ＣＤ３ＯＤ＝３：１）：４．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），４．２７−４．２０（ｍ，１Ｈ），３．９６−３．９２（ｍ，１Ｈ），３．９１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ  ａｎｄ  ４．０Ｈｚ），３．８２−３．６５（ｍ，６Ｈ），３．５８−３．５１（ｍ，２Ｈ），２．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．７０−１．２１（ｍ，４６Ｈ），０．９０−０．８５（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：６７６（Ｍ＋）、
実施例１１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘネイコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物３３）の合成
化合物７とヘネイコサン酸から、化合物８、１４、１７、２０、２３の合成と同様の操作を連続して行い、表題化合物を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３３（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝６：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３：ＣＤ３ＯＤ＝３：１）：８．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），４．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），４．２２（ｍ，１Ｈ），３．９６（ｍ，１Ｈ），３．９０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ  ａｎｄ  ４．１Ｈｚ），３．８１−３．６９（ｍ，６Ｈ），３．５５（ｍ，２Ｈ），２．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．６８−１．６２（ｍ，４Ｈ），１．３１−１．２７（ｍ，４０Ｈ），０．９０−０．８７（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：６６２（Ｍ＋Ｈ＋）．
実施例１２：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−エイコサノイルアミノ）−１，３，４−ノナントリオール（化合物３４）の合成
化合物７とアラキジン酸から、化合物８、１４、１７、２０、２３の合成と同様の操作を連続して行い、表題化合物を得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３３（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝６：１）、１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３：ＣＤ３ＯＤ＝３：１）：４．８６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），４．１６（ｍ，１Ｈ），３．９０（ｍ，１Ｈ），３．８５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ  ａｎｄ  ４．６Ｈｚ），３．７４−３．６１（ｍ，６Ｈ，３．５０（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），１．６２−１．５６（ｍ，４Ｈ），１．２５−１．２１（ｍ，３８Ｈ），０．８５−０．８１（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：６４８（Ｍ＋Ｈ＋）．
また、生物活性評価の比較のための対照物質として、アルファ・ガラクトシルセラミド（α−ＧＣ）、ＮＨ及び３，４Ｄを実施例に記載した化合物の合成法に準じて合成した。ここで、α−ＧＣとは（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタデカントリオールであり、ＮＨとは（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタデカントリオールであり、３，４Ｄとは（２Ｓ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１−オクタデカノールである。これらの化合物の構造式とスペクトルデータを以下に示す。
2003016326.tif 000006
比較例１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（２−デオキシ−２−アミノ−α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物３５：ＮＨ）
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６７（ｔ−ＢｕＯＨ：ＣＨ３ＯＨ：Ｈ２Ｏ＝４：１：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３：ＣＤ３ＯＤ：Ｄ２Ｏ＝３：１：０．１）：５．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），３．４７−３．９４（ｍ，１１Ｈ），２．２４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．２６−１．５４（ｍ，７２Ｈ），０．８８（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８５７．７（Ｍ＋Ｈ＋）．
比較例２：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−ヘキサコサノイルアミノ）−１，３，４−オクタデカントリオール（化合物３６：α−ＧＣ）
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．７５（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ＝３：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３：ＣＤ３ＯＤ＝３：１）：４．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ），３．５６−３．９０（ｍ，１１Ｈ），２．２１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．２７−１．６１（ｍ，７２Ｈ），０．８９（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８８０．７（Ｍ＋Ｎａ＋）．
比較例３：（２Ｓ）−１−Ｏ−（α−Ｄ−ガラクトシル）−２−（Ｎ−テトラコサノイルアミノ）−１−オクタデカノール（化合物３７：３，４Ｄ）
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４８（ＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ＝７：１）．１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３：ＣＤ３ＯＤ＝３：１）：４．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．３Ｈｚ），３．４２−３．９５（ｍ，９Ｈ），２．１９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．２７−１．６２（ｍ，７２Ｈ），０．８９（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＭＡＬＤＩ）ｍ／ｚ：８２０．７４（Ｍ＋Ｎａ＋）．
生物活性評価
上記の合成化合物の生物活性を以下の方法で評価した。
まず、合成糖脂質（化合物２５及びα−ＧＣ（化合物３６））を用いて、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）の抑制の検討を行った。
６−８週齢の雌Ｃ５７ＢＬ６Ｊ（Ｂ６）マウスにミエリン・オリゴデンドロサイト糖蛋白（ＭＯＧ）の３５−５５残基に相当するペプチド（配列番号１）１００μｇを結核死菌（Ｈ３７Ｒａ）を併用下にエマルジョンとして尾根部に免疫した。同日に百日咳毒素２００ｎｇを尾静脈より、４８時間後に百日咳毒素２００ｎｇを経腹腔的に投与してＥＡＥを誘導し、臨床症状を観察するとともに、病理学的検討を行った。合成糖脂質は、経口投与（４００ｎｇ／ｋｇ）を行った。コントロールにはＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）のみ投与した。
その結果を表１に示す。評価には下記の臨床スコア及び病理スコアを用いた。
臨床スコア  ０：正常、１：尾のトーヌス低下、２：尾の下垂・歩行不安定、３：中等度後肢脱力、４：後肢完全脱力、５：四肢麻痺、６：死亡
病理スコア  ０：正常、１：軟膜・軟膜下細胞浸潤、２：中等度血管周囲細胞浸潤、３：高度血管周囲細胞浸潤、４：脳実質細胞浸潤
2003016326.tif 000007
化合物２５投与群でＥＡＥの抑制効果がみられたが、α−ＧＣ投与群では抑制効果はみられなかった。病理学的検索でも化合物２５投与群では抑制がみられた。化合物２５によるＥＡＥ抑制効果はＮＫＴノックアウトマウス（ＴＣＲ  Ｊ  ａｌｐｈａ２８１  ノックアウトマウス）では観察できなかったことから、ＮＫＴ細胞を介する効果であることがわかる。
次に、上記自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）の抑制試験に記載の方法でＥＡＥを誘導し、化合物２５（１００μｇ／ｋｇ）経腹腔投与によるＥＡＥ抑制効果を検討した。その結果を第３図に示す。経腹腔投与でも経口投与と同様にＥＡＥ抑制効果がみられた。
次に、合成糖脂質（化合物２５及びα−ＧＣ）及びＤＭＳＯを用いて、実験的自己免疫性能脊髄炎（ＥＡＥ）の抑制の機序の検討を行った。
上記方法でＥＡＥを誘導し、化合物２５投与によるＥＡＥ抑制効果がＩＬ−４を介するかどうかを調べる為に抗ＩＬ−４抗体（１ｍｇ／ｍｌ）の同時投与を腹腔的に行った。その結果を表２に示す。
2003016326.tif 000008
化合物２５投与によるＥＡＥ抑制効果は抗ＩＬ−４抗体の投与により消失することから、ＩＬ−４がＥＡＥ抑制に重要であることがわかった。
次にコラーゲン関節炎（ＣＩＡ）の抑制実験を行った。その結果を第４図に示す。
Ａ）６−８週齢の雄Ｃ５７ＢＬ６マウスにトリＴｙｐｅ  ＩＩコラーゲン１００μｇを結核死菌（Ｈ３７Ｒａ）を併用下にエマルジョンとして尾根部に免疫した。２１日めに同様のエマルジョンを尾根部に追加免疫し、臨床症状を観察した。合成糖脂質は、追加免疫時から週２回経腹腔投与（５００μｇ／ｋｇ）を行った。コントロールはＤＭＳＯのみ投与した。
臨床スコア  ０：症状なし、１：四肢の指など小関節が１本のみ腫脹発赤、２：小関節２本以上、あるいは手首や足首などの比較的大きな関節が腫脹発赤、３：１本の手や足全体が腫脹発赤、４：１本の手や足の全体的腫脹が最大限に達していると判断したとき、とし、両手、両足の合計を点数とする。
Ｂ６マウスにおけるコラーゲン関節炎において化合物２５投与で、疾患抑制効果がみられた。
Ｂ）６−８週齢の雄ＳＪＬマウスにウシリＴｙｐｅ  ＩＩコラーゲン２００μｇを結核死菌（Ｈ３７Ｒａ）を併用下にエマルジョンとして尾根部に免疫した。２１日めに同様のエマルジョンを尾根部に追加免疫し、臨床症状を観察した。合成糖脂質は、追加免疫時から週２回経腹腔投与（５００μｇ／ｋｇ）を行った。コントロールはＤＭＳＯのみ投与した。ＳＪＬマウスにおけるコラーゲン関節炎において化合物２５投与で、疾患抑制効果がみられた。
Ｃ）６−８週齢の雄ＳＪＬマウスにウシリＴｙｐｅ  ＩＩコラーゲン２００μｇを結核死菌（Ｈ３７Ｒａ）を併用下にエマルジョンとして尾根部に免疫した。２１日めに同様のエマルジョンを尾根部に追加免疫し、臨床症状を観察した。合成糖脂質は、追加免疫時ないし症状出現した２８日から週２回経腹腔投与（５００μｇ／ｋｇ）を行った。コントロールはＤＭＳＯのみ投与した。
症状出現後のコラーゲン関節炎において化合物２５の投与で、疾患抑制効果がみられた。
次に、ＮＯＤマウスにおける糖尿病発症の抑制実験を行った。その結果を第５図に示す。ＮＯＤマウスに、４週令より化合物２５を２回経腹腔投与（１００μｇ／ｋｇ）を行ったところ、糖尿病発症が著明に抑制された。
次に、血中サイトカイン測定を行った。その結果を第６図に示す。ＮＫＴ細胞は刺激されると短期間で大量のサイトカインを血中に放出することが知られているので、合成糖脂質をマウスに投与した際の血中のＩＮＦ−γとＩＬ−４を時間経過を追ってＥＬＩＳＡ法を用いて測定した。
従来の報告通り、α−ＧＣ投与ではＩＮＦ−γとが優位に産生されるが、化合物２５投与ではＩＬ−４が優位に産生されることがわかった。
続いて、脾細胞の増殖反応測定を行った。その結果を第７図に示す。マウス脾細胞を分離し、合成糖脂質に対する増殖反応をチミジンの細胞への取り込みを指標として測定した。脾細胞は化合物２５に対して有意な増殖反応を示した。
次に、脾細胞のサイトカイン測定を行った。その結果を第８図に示す。マウス脾細胞を分離し、合成糖脂質によるＩＮＦ−γとＩＬ−４の産生をＥＬＩＳＡ法を用いて測定した。マウス投与時と同様に、α−ＧＣ投与ではＩＮＦ−γとが優位に産生されるが、化合物２５投与ではＩＬ−４が優位に産生されることがわかった。
次に、脾細胞の増殖反応測定とサイトカイン測定を行った。その結果を第９図に示す。マウス脾細胞を分離し、合成糖脂質に対する増殖反応をチミジンの細胞への取り込みを指標として測定した。脾細胞は化合物２３、２４、２５に対して有意な増殖反応を示した。マウス脾細胞を分離し、合成糖脂質によるＩＮＦ−γとＩＬ−４の産生をＥＬＩＳＡ法を用いて測定した。α−ＧＣ投与ではＩＮＦ−γとが優位に産生されるが、化合物２３、２４、２５投与ではＩＬ−４が優位に産生されることがわかった。
次に、血中抗ＭＯＧ抗体測定を行った。その結果を第１０図に示す。合成糖脂質投与群のにおける抗ＭＯＧ抗体価ならびにそのアイソタイプの測定をＥＬＩＳＡを用いて行った。化合物２５投与群では抗ＭＯＧ抗体価の上昇がみられ、アイソタイプではＩｇＧ１が有意な上昇を認め、ＭＯＧに対する反応がＴｈ２に偏倚していることがわかった。
【配列表】
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【図面の簡単な説明】
第１，２図は、本発明の糖脂質（式（Ｉ））の製造工程の一例を示す。図中、Ｒ１はアルドピラノース残基を表し、Ｒ２は水素原子、又は水酸基を表し、Ｒ３は−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を表し、Ｒ４は水素原子、又はメチル基を表し、ｘは０〜３５の何れかの整数を表し、ｙ＋ｚは０〜３の何れかの整数を表し、Ｒ５は水素原子、メチル基、又は−（ＣＨ２）ｙ′（ＣＨ（ＣＨ３））ｚ′−ＣＨ（Ｒ４）２［ｙ′＋ｚ′は０〜２の何れかの整数を示す］を表し、Ｒ６は水素原子、又はメチル基を表し、Ｒ７は水酸基やアミノ基等の官能基が適切に保護されたアルドピラノースを表す。
第３図は、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）の抑制の検討結果を示すグラフである。
第４図は、コラーゲン関節炎（ＣＩＡ）の抑制の検討結果を示すグラフである。
第５図は、ＮＯＤマウスにおける糖尿病発症の抑制試験の結果を示す。
第６図は、血中サイトカインの測定結果を示すグラフである。
第７図は、脾細胞の増殖反応の測定結果を示すグラフである。
第８図は、脾細胞のサイトカインの測定結果を示すグラフである。棒グラフの右側はＩＬ−４を、左側はＩＮＦ−γを表す。
第９図は、脾細胞の増殖反応測定とサイトカイン測定の結果を示す。
第１０図は、血中抗ＭＯＧ抗体測定の測定結果を示すグラフである。右の棒グラフの右側はＩｇＧ１を、左側はＩｇＧ２ａを表す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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