(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（IX）
0003746070.tif 000006
の化合物の製造法であって、
ａ）式（XI）
0003746070.tif 000007
式中、Ｒ2は直鎖または分枝Ｃ1-4アルキル基である、
の化合物、あるいはその塩または付加化合物を、キラル還元剤または生化学的な還元手段を使用して還元し、式（Ｘ）
0003746070.tif 000008
式中、Ｒ2は前記定義の通りである、
の化合物を提供し；
ｂ）式（Ｘ）の化合物を式（XII）
0003746070.tif 000009
式中、Ｒ2は上記定義の通りであり、そしてＲ3はアルキル−または
アリールスルホニル基を表す、
の化合物に転換し；そして
ｃ）そのように生成した式（XII）の（Ｒ）異性体を環化して、所望の式（IX）の（Ｓ）異性体を提供する連続工程を含んで成る、上記方法。
【請求項２】
式（IX）
0003746070.tif 000010
の化合物の製造法であって、式（XII）
0003746070.tif 000011
式中、Ｒ2は直鎖または分枝Ｃ1-4アルキル基を表し、そしてＲ3はアルキルまたはアリールスルホニル基である、
の化合物の環化を含んで成る方法。
【請求項３】
式（Ｘ）
0003746070.tif 000012
式中、Ｒ2は直鎖または分枝Ｃ1-4アルキル基を表す、
の化合物の製造法であって、式（XI）
0003746070.tif 000013
式中、Ｒ2は前記定義の通りである、
の化合物、あるいはその塩または付加化合物を、キラル還元剤または生化学的還元手段を使用して還元することを含んで成る方法。
【請求項４】
式（XII）の化合物が求核性塩基を用いる処理により環化される、請求項１記載の方法。
【請求項５】
求核性塩基がアルカリ金属アルコキシドであり、そして反応がアルカノール溶媒中で行われる、請求項４記載の方法。
【請求項６】
式（Ｘ）の化合物を提供するための還元が、不斉ボラン誘導体を使用して化学的に行われる、請求項１または３に記載の方法。
【請求項７】
還元が−１０℃から−２０℃の温度で行われる、請求項６記載の方法。
【請求項８】
式（Ｘ）の化合物を提供するための還元が、微生物ハンセニューラポリモルファ（Hansenulla Polymorpha）の培養物を使用して生化学的に行われる、請求項１または３に記載の方法。
【請求項９】
式（Ｘ）
0003746070.tif 000014
式中、Ｒ2は直鎖または分枝Ｃ1-4アルキル基である、
の化合物またはその塩。
【請求項１０】
式（XII）
0003746070.tif 000015
式中、Ｒ2は直鎖または分枝1-4アルキル基であり、そしてＲ3はアルキル−またはアリールスルホニルである、
の化合物またはその塩。
【発明の詳細な説明】
本発明は、例えば抗−高血圧性のような有用な医薬特性を有する、(1R,2R)-2-(3-ピリジル)-N-アルキルテトラヒドロ-2H-チオピラン-2-カルボチオアミド 1-オキシドの製造において有用な中間体の製造法、ならびに該方法を使用して製造された中間体および医薬品に関する。
欧州特許出願公開第0097584号明細書およびそれに同等の米国特許第4568682号明細書は、以下に示す一般式Ｉの化合物を記載しており、式中、Ｒは水素原子または１−４個の炭素原子を含有するアルキル基を表し、Hetは芳香族複素環式基を表し、そしてＹは結合か、またはメチレン結合を表す。
２つの不斉中心の存在により、“Ａ型”（またはより極性の生成物）および“Ｂ型”（より極性がより低い生成物）と呼ばれる鏡像異性体の２つのラセミ対に分けることができる、４つのジアステレオマーを導き、その相対的極性は薄層クロマトグラフィーにより測定される。各々のこれら２つの形をその２つの鏡像異性体に分割することができる。
式Ｉの化合物の中で、2-(3-ピリジル)-N-メチルテトラヒドロ-2H-チオピラン-2-カルボチオアミド 1-オキシドのＡ型は、以下に示す式IIおよびIIIにより表すことができるトランス−異性体の混合物から成る。
異性体IIおよびIIIについて行われた研究で、より活性な状態は異性体IIIであり、その絶対配置は1R,2Rであることが示された。
欧州特許出願公開第0426557号明細書およびそれに同等の米国特許第5120852号明細書では、以下に示す一般式IVの化合物（式中、Ｒ1は１−４個の炭素原子を含有する直鎖−または分枝鎖アルキル基を表す）の製造法が記載され、その方法は一般式：−
Ｓ＝Ｃ＝Ｎ−Ｒ1                Ｖ
式中、Ｒ1は上記に示す、
のアルキルイソチオシアネートの、以下に記載する式VIまたはVIIのスルホキシドに由来するアニオンに対する、あるいはそれら混合物に由来するアニオンに対する作用による。
前記の欧州特許出願公開第0426557号明細書および米国特許第5120852号明細書により、式VIおよびVIIの化合物は、以下に示す式VIIIの化合物の化学的または生化学的手段による選択的酸化により製造でき、これは一般的にラセミ体を生じる。
式VIIの(1R,2S)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピラン 1-オキシドは、以下に示す式IXの(S)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピランのジアステレオ選択的な酸化により製造され、これは本発明の第一の特徴に従い、以下に示す一般式XIIの環化により製造され、式中、Ｒ2は直鎖または分枝Ｃ1-4アルキル基、好ましくはメチルを表し、そしてＲ3はアルキル−またはアリールスルホニル基（例えばメタンスルホニル基）を表し、これはさらなる本発明の特徴により、式（Ｘ）の化合物から、本発明の別の態様に従い、以下に示す一般式XIの化合物（式中、Ｒ2は上記のとおりである）あるいはその塩または付加化合物の、化学的または生化学的手段による立体選択的還元により製造される。
式IXの(S)-2-(3-ピリジル)-テトラヒドロ-2H-チオピランの酸化による式VIIの(1R,2S)-2-(3-ピリジル)-テトラヒドロ-2H-チオピラン 1-オキシドの製造は、例えば次亜塩素酸ナトリウムのような次亜塩素酸塩により、あるいは有機ヒドロペルオキシド（例えば過酢酸またはアルファ、アルファ−ジメチルベンジルヒドロペルオキシド）により、あるいはより特別には過酸化水素により、好ましくは例えば亜鉛、または例えばコバルト、モリブテン、鉄、バナジウムまたはチタン、あるいはより特別には銅またはその化合物、例えばそのアセチルアセトナト錯体のような遷移金属を初めとする金属のような触媒の存在下で行われる。
鏡像異性体的純度、すなわち式VIIの(1R,2S)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピラン 1-オキシドの鏡像異性体的過剰度は、例えば酢酸エチル、トルエン、メチルエチルケトン、メチルエチルケトンとtert-ブチルメチルエーテルの混合物、およびメチルエチルケトンとアセトンとの混合物のような適当な溶媒系からの再結晶により、100％に近づく値に上昇させることができる。
以下に記載する一般式XII（式中Ｒ2およびＲ3は上記に定義のものである）の製造は、好ましくは三級アミン（例えばトリエチルアミンまたはピリジン）のような塩基の存在下で、式Ｘの化合物をアルキルスルホニルまたはアリールスルホニルハライドで処理して行うことができる。続いて環化はアルカノール溶媒中のアルカリ金属アルコキシドのような求核性塩基（例えばメタノール中のナトリウムメトキシドまたはエタノール中のナトリウムエトキシド）で処理して行うことができる。好ましくはこの反応は不活性雰囲気下で行われる。
Ｒ2およびＲ3が上記に定義された一般式XIIの化合物、およびその塩は、新規化合物であり、そしてそれらおよびその製造法は本発明のさらなる態様である。
当業者に認められるように、(R)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピランは同様な様式で、しかし式Ｘの化合物の代わりにその(S)-鏡像異性体を使用して製造できる。
一般式Ｘの化合物（式中、Ｒ2は上記定義のものである）およびその塩も、新規化合物であり、そしてさらなる本発明の態様である。
それらは本発明の別の態様に従い、以下に示す一般式XIの化合物（式中、Ｒ2は上記定義のものである）あるいはその塩（例えば、アリールスルホン酸塩またはアルキルスルホン酸塩、例えばメタンスルホン酸塩、塩酸塩のようなヒドロハライド）、または三弗化硼素で形成された付加化合物のような付加化合物の、化学的または生化学的手段による立体選択的還元により製造される。
還元を行うための化学的手段の例として、好ましくは低温（例えば約−10℃から約−20℃）で、テトラヒドロフランのようなエーテル性溶媒中で、そして好ましくは不活性雰囲気中で、不斉ボラン誘導体（例えば(+)-B-クロロジイソピノ-カンフェイルボラン）のようなキラル還元剤を使用できる。
当業者に認められるように、化合物Ｘの(S)-鏡像異性体は同様な様式で、しかし(-)-B-クロロジイソピノカンフェイルボランを(+)-B-クロロジイソピノカンフェイルボランの代わりに使用して製造できる。
還元を行う生化学的手段の例として、微生物の培養物、特にハンセニューラ ポリモルファ（Hansenulla polymorpha）の培養物を使用でき、その試料は寄託番号NCYC1456で寄託されている（ナショナル  コレクション  オブ  イースト  カルチャー、コルネイレイン、ノルウッチ、ノルフォーク、NR4 7UA、英国）。
所望の立体選択的還元を行うことができる他の微生物は、小規模試験により、高性能液体クロマトグラフィー（HPLC）または他の適当な手段で式（Ｘ）の化合物を検出することにより確認できる。
式XIの化合物およびその塩は4-ヒドロキシブチル 3-ピリジル ケトンから、チオ酢酸、ジエチルアゾジカルボキシレートおよびトリフェニルホスフィンとの反応により、あるいは好ましくはトリエチルアミン、N,N-ジイソプロピルエチルアミンまたは1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデセ-7-エンのような三級塩基の存在下で、アリールスルホニルハライドまたはアルキルスルホニルハライド（例えばトルエン-p-スルフォニルクロライドまたはメタンスルホニルクロライド）と反応させ、続いてチオ酢酸またはそのアルカリ金属塩（例えば、チオ酢酸カリウム）と反応させ、続いて必要に応じて周知方法により所望の塩の形成、例えばアリールスルホン酸またはアルキルスルホン酸（例えばメタンスルホン酸）との反応を行うことにより製造できる。
4-ヒドロキシブチル 3-ピリジル ケトンは、以下に示す一般式XIII（式中、Ｒ4は低級アルキル、例えばメチルまたはエチル基を表す）のアルキルニコチネートを、アルカリ金属アルコキシド（例えばカリウムtert-ブトキシド）のような塩基の存在下、好ましくはジエチルエーテル、tert-ブチルメチルエーテルまたはテトラヒドロフランのようなエーテル性の溶媒中でデルタ-バレロラクトンと反応させることにより、あるいは3-ピリジルハライド（例えば3-ピリジルブロミド）を塩基（例えばブチル−リチウム）と反応させ、続いてデルタ−バレロラクトンと反応させることにより製造できる。
以下の実施例は本発明を具体的に説明する。核磁気共鳴（NMR）スペクトルは200MHzまたは400MHzで記録する。化学シフトはテトラメチルシランに対してppmで表す。略号は通常の意味を有する、例えば：−ｓ＝単重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｍ＝多重項、ｄｄ＝二重項の二重項、ｄｔ＝二重項の三重項。
0003746070.tif 000002
0003746070.tif 000003
0003746070.tif 000004
0003746070.tif 000005
実施例１
テトラヒドロフラン（500ml中）のカリウムtert-ブトキシド（83.55g）の撹拌溶液を、室温で窒素下にてニコチン酸メチル（68.5g）およびデルタ-バレロラクトン（75.0g）（テトラヒドロフラン、125ml中）で、１時間連続的に処理し、温度を22℃から32℃の間に維持する。混合物を２時間撹拌し、そして次に水（750ml）で処理する。生成した混合物をキシレン（125ml）で洗浄し、そして次に水層を濃塩酸（400ml）で15分間処理し、温度は23℃から44℃の間に維持する。溶液を90分間撹拌し、そしてジクロロメタン（250ml）で洗浄する。水層をpH8−pH9に水酸化ナトリウム水溶液（比重1.3;480ml）で処理して塩基性化し、そして次にキシレン（★）（125ml）で洗浄し、そしてジクロロメタン（3×250ml）で抽出する。合わせたジクロロメタン抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして溶媒を減圧下で蒸発させ、4-ヒドロキシブチル3-ピリジルケトン（49.1g）を黄色の油状物として得た。これは結晶して淡茶色の融点36-38℃の固体を生成する。
［ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：−１．７（ｍ，２Ｈ）、１．９（ｍ，２Ｈ）、３．１（ｔ，２Ｈ）、３．７（ｔ，２Ｈ）、７．４（ｍ，１Ｈ）、８．２（ｄｔ，１Ｈ）、８．８（ｍ，１Ｈ）、９．２（ｍ，１Ｈ）］。
（★）このキシレン溶液は水で抽出する（3×100ml）。水性抽出物を合わせ、塩化ナトリウムで飽和し、そしてジクロロメタン（3×50ml）で抽出する。合わせたジクロロメタン層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして溶媒を蒸発により減圧下で除去し、同生成物をさらに得る（14.0g）。
実施例２
テトラヒドロフラン（664ml中）の4-ヒドロキシブチル 3-ピリジルケトン（66.4g）の溶液を、室温で窒素下にてメタンスルホニルクロライド（31.6ml）で処理する。混合物を0℃に冷却し、そしてN,N-ジイソプロピルエチルアミン（155ml）で30分間、連続的に処理し、温度を5℃未満に維持し、そしてさらに10分間撹拌する。混合物を20℃に暖め、そして次に10分間、チオ酢酸で処理し、温度は25℃未満に維持する。混合物を35℃で２時間撹拌し、そして次に20℃に冷却し、そして水で処理する（660ｍｌ）。混合物をt-ブチルメチル エーテルで２回抽出する（660mlおよび300ml）。合わせた抽出物を水で洗浄し（2×1300ml）、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして脱色用活性炭（8.7g）で処理し、そして混合物を10分間撹拌する。濾過後、溶媒を減圧下で蒸発させ、S-(4-ニコチノイルブチル)チオアセテートを油状で得る（80.7g）。この油をt-ブチルメチルエーテル（1200ml）に溶解し、そして溶液をメタンスルホン酸（22.1ml）で撹拌しながら滴下処理し、次に１時間撹拌し、そして次に１時間０℃に冷却する。混合物を濾過し、生成した黄色固体を室温で吸引乾燥させ、融点103-105℃の3-(5-アセチルメルカプトペンタノイル)ピリジニウムメタンスルホネートを得る（91.4g）。
［ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：−１．６（ｍ，２Ｈ）、１．７（ｍ，２Ｈ）、２．３（ｓ，３Ｈ）、２．４（ｓ，３Ｈ）、２．９（ｔ，２Ｈ）、３．２（ｔ，２Ｈ）、７．９（ｄｄ，１Ｈ）、８．７（ｄｔ，１Ｈ）、９．０（ｄｄ，１Ｈ）、９．３（ｄ，１Ｈ）］。
実施例３
酢酸エチル（50ml中）の3-(5-アセチルメルカプトペンタノイル)ピリジニウム メタンスルホネート（7.0g）のスラリーを、水中（50ml）の重炭酸ナトリウム（5g）溶液と一緒に撹拌する。酢酸エチル相を水でpHが5になるまで3回洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過そして減圧下で蒸発させ、暗色油状のS-(4-ニコチノイルブチル)チオアセテート（4.3g）を得、これは静置すると固体化する（融点43℃）。
乾燥テトラヒドロフラン（20ml）中の(+)-B-クロロジイソピノカンフェイルボラン（12g）の溶液を、窒素雰囲気下で−20℃に冷却し、テトラヒドロフラン（10ml）中のS-(4-ニコチノイルブチル)チオアセテート（4g）溶液でシリンジを使用して処理する。反応混合物を窒素下、−20℃で20時間撹拌し、そして次にこれをジエチルエーテル（50ml）で処理し、続いてジエタノールアミン（6g）で処理する。混合物を20℃で4時間撹拌し、その間白色沈殿が生成する。この沈殿物を濾過し、そしてヘプタンで洗浄する（2×5ml）。合わせたエーテルおよびヘプタンの濾液を、減圧下で蒸発させ、明黄色の油状物を得る（10g）。この油状物をシリカゲル（300g）クロマトグラフィーに供し、酢酸エチルおよびヘプタンの混合物（700ml;1:4容量／容量）で溶出し、続いて酢酸エチル、イソプロパノールおよび0.880水酸化アンモニウムの混合物（700ml;84:15:1容量／容量）で溶出し、(R)-5-ヒドロキシ-5-(3-ピリジル)ペンチル チオアセテート（3.0g;94％ee）を淡黄色の油状物として得る。
［ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：−８．５（ｓ，１Ｈ）、８．４５（ｄ，１Ｈ）、７．７（ｄ，１Ｈ）、７．３（ｄｄ，１Ｈ）、４．７（ｔ，１Ｈ）、３．１（ｓ，１Ｈ）、２．８５（ｔ，２Ｈ）、２．３（ｓ，３Ｈ）、１．９−１．０（ｍ，６Ｈ）］。
元素分析:-Ｃ、６２．２；Ｈ、７．９；Ｎ、４．７；Ｓ、１１．２％
理論値:-Ｃ、６０．２；Ｈ、７．２；Ｎ、５．８；Ｓ、１３．３％。
（試料は2-3％のピネンを含有する）］。
鏡像異性体の過剰度（％ee）は、以下の条件を使用するキラルHPLCにより測定する：−Chiralcel OD 25cm×4.5mmカラム；イソプロパノール/ヘプタン（15:85容量／容量）の移動相；流速1.0ml/分；UV検出270nm。
実施例４
乾燥ジクロロメタン（15ml）中の(R)-5-ヒドロキシ-5-(3-ピリジル)ペンチルチオアセテート（2.8g）の溶液を、窒素雰囲気下で-15℃に冷却し、シリンジを使用してトリエチルアミン（1.4g）で処理する。これを次にシリンジを使用してメタンスルホニルクロライド（1.5g）で5分間処理する。この添加中に温度は自然に-8℃に上昇する。添加が完了した時、反応混合物を室温に暖める。2時間後、これをpHが7になるまで水で洗浄する（4×15ml）。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、そして減圧下で蒸発させ、(R)-5-メタンスルホニルオキシ-5-(3-ピリジル)ペンチルチオアセテート（3.66g）を黄色油状物として得る。この物質を、さらに精製することなく次の工程に使用する。
実施例５
乾燥メタノール（15ml中）の(R)-5-メタンスルホニルオキシ-5-(3-ピリジル)ペンチルチオアセテート（3.66g;実施例４に記載したように製造）の溶液を、窒素雰囲気下20℃でナトリウムメトキシド溶液（30％重量／容量;2.1ml）で処理する。1時間後、これを酢酸エチル（30ml）で希釈し、そして飽和ブライン（2×15ml）で洗浄する。次に有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で蒸発させ、黄色の油状物を得る（2.3g）。この油状物をシリカゲル（100g）でクロマトグラフィーを行い、酢酸エチルおよびヘプタン混合物（1:4容量/容量）を溶出液として使用し、(S)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピラン(1.8g;94％ee)を、白色固体状で得る、融点52℃。この物質をペンタンから再結晶化して、0.9gの94％eeの白色固体を得る。
［ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：−８．６（ｓ，１Ｈ）、８．５（ｄ，１Ｈ）、７．７（ｄ，１Ｈ）、７．２５（ｄｄ，１Ｈ）、３．９（ｄ，１Ｈ）、２．９（ｔ，１Ｈ）、２．７（ｄ，１Ｈ）、２．２−１．２（ｍ，６Ｈ）］。
元素分析：−Ｃ、６６．６；Ｈ、７．５；Ｎ、７．７；Ｓ、１８．４％
理論値：−Ｃ、６６．９；Ｈ、７．３；Ｎ、７．８；Ｓ、１７．８８％。
この％eeは、以下の条件を使用するキラルHPLCにより測定する：−Chiralcel OD 25cm×4.5mmカラム；イソプロパノール/ヘプタン（15:85容量／容量）の移動相；流速0.5ml/分；UV検出270nm。
実施例６
エタノール（15ml中）の(S)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピラン（0.6g）およびアセチルアセトナト銅（II）錯体（0.8g）溶液を、過酸化水素（2ml;27.5％）で、0.5mlの部分づつ20時間にわたって処理する。最後の添加から2時間後、この反応混合物を酢酸エチル（30ml）で希釈し、そして飽和ブライン（2×30ml）で洗浄する。合わせたブライン洗浄液を次に酢酸エチル（3×30ml）で抽出し、合わせた酢酸エチル相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過および減圧下で蒸発させ、(1R,2S)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピラン 1-オキシド（0.5g）を、白色固体状で得る、融点131℃。
［ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：−８．７（ｓ,２Ｈ）、７．７（ｄ,１Ｈ）、７．３（ｓ，１Ｈ）、３．６（ｄｄ，１Ｈ）、２．８（ｔ，１Ｈ）、２．３−１．５（ｍ，６Ｈ）］。
元素分析：−Ｃ、６１．３；Ｈ、６．７；Ｎ、６．９；Ｓ、１６．５％；
理論値：−Ｃ、６１．５；Ｈ、６．７；Ｎ、７．１；Ｓ、１６．４％。
この％eeは、以下の条件を使用するキラルHPLCにより測定する：−Chiralcel OD 25cm×4.5mmカラム；ヘプタン／メタノール／イソプロパノール（93:5:2容量／容量）の移動相；流速1.5ml/分；UV検出270nm。
実施例７
アンモニアガスを-50℃で濃縮して2mlの液体アンモニアを得、これを硝酸鉄（III）（0.0015g）で処理し、続いて金属ナトリウム（0.02g）で処理する。溶液は青色になり、そして20分後には暗灰色になる。これを次にテトラヒドロフラン（8ml）中の(1R,2S)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピラン 1-オキシド（0.06g）溶液で、-40℃にて2分間処理する。この混合物を２分間撹拌し、そして次にテトラヒドロフラン（2ml）中のメチルイソチオシアネート（0.033g）溶液でシリンジを使用して処理する。反応混合物を-35℃で5分間撹拌し、次に塩化アンモニウム（0.05g）で処理し、そして20℃に暖める。混合物をメタノール（0.3ml中）で処理し、そして減圧下で蒸発させる。残渣をブライン（10ml）とジクロロメタン（3×30ml）の間に分配する。有機相を合わせ、硝酸マグネシウムで乾燥し、濾過および減圧下で蒸発させ、(1R,2R)-2-(3-ピリジル)-N-メチルテトラヒドロ-2H-チオピラン-2-カルボチオアミド 1-オキシド（0.4g：99％ee）を融点215℃の白色固体状で得る。
［ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：−８．７（ｓ，１Ｈ）、８．５（ｓ，２Ｈ）、８．１（ｄ，１Ｈ）、７．３（ｓ，１Ｈ）、３．８（ｓ，１Ｈ）、３．１（ｄ，３Ｈ）、２．８（ｓ，１Ｈ）２．４−１．５（ｍ，６Ｈ）］。
この％eeは、以下の条件を使用するキラルHPLCにより測定する：−Chiralcel OD 25cm×4.5mmカラム；ヘプタン／メタノール／イソプロパノール（93:5:2容量／容量）の移動相；流速1.5ml/分；UV検出270nm。
実施例８
テトラヒドロフラン（500ml）中のカリウム tert-ブトキシド（83.55g）溶液を22℃で、テトラヒドロフラン（125ml）中のニコチン酸メチル（68.5g）およびデルタ-バレロラクトン（75.0g）溶液を滴下して1時間処理する。この溶液を次に23℃で２時間撹拌する。反応混合物を水で希釈し、そしてトルエン（125ml）で洗浄する。有機相を捨て、水相に濃塩酸（400ml；37％重量／容量）を滴下処理する。溶液をさらに２時間撹拌する。次にこの溶液をジクロロメタン（250ml）で洗浄する。有機相を捨て、そして水相を水酸化ナトリウム水溶液で処理し、pH8からpH9の間にする。水性相を次にトルエン（125ml）で洗浄し、そして有機相を水で逆洗する（3×100ml）。２つの水性相を合わせ、そしてジクロロメタンで抽出する。ジクロロメタン抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして蒸発乾固させ、4-ヒドロキシブチル 3-ピリジル ケトン（61.1g）を油状物として得、これを結晶化して融点36-38℃の淡茶色の固体を生成する。
［ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：−１．７（ｍ，２Ｈ）、１．９（ｍ，２Ｈ）、３．１（ｔ，２Ｈ）、３．７（ｔ，２Ｈ）、７．４（ｍ，１Ｈ）、８．２（ｄｔ，１Ｈ）、８．８（ｍ，１Ｈ）、９．２（ｍ，１Ｈ）］。
実施例９
テトラヒドロフラン（750ml）中の4-ヒドロキシブチル 3-ピリジル ケトン（89.6g）溶液を、窒素下の室温で、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（155.1g）で処理する。混合物を0℃に冷却し、そして連続的に10分間、メタンスルホニルクロライドで処理し、温度を5℃から10℃の間に維持し、そして次に混合物を10分間撹拌する。これを次に10分間、チオ酢酸（45.7g）で処理し、そして35℃に暖める。これを35℃で１時間撹拌し、そして20℃に冷却する。次にこれを水（750ml）で5分間処理し、そして混合物をトルエンで2回抽出する（750mlおよび350ml）。合わせた抽出物を水洗し、そして蒸発させ、S-(4-ニコチノイルブチル)チオアセテート（113.4g）を油状物として得る。
この油状物をtert-ブチル-メチル-エーテルで処理し、続いて脱色用活性炭で処理し、濾過後、メタンスルホン酸（48.1g）で滴下処理する。混合物を0℃に冷却し、そして濾過し、そして生成した固体を室温で吸引して乾燥させ、3-(5-アセチルメルカプト-ペンタノイル)ピリジニウムメタンスルホネート（139.4g）を、融点103-105℃の黄色／オレンジ色の固体として得る。
［ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：−１．６（ｍ,２Ｈ）、１．７（ｍ，２Ｈ）、２．３（ｓ，３Ｈ）、２．４（ｓ，３Ｈ）、２．９（ｔ，２Ｈ）、３．２（ｔ，２Ｈ）、７．９（ｄｄ，１Ｈ）、８．７（ｄｔ，１Ｈ）、９．０（ｄｄ，１Ｈ）、９．３（ｄ，１Ｈ）］。
実施例１０
乾燥ジクロロメタン（10ml）中のS-(4-ニコチノイルブチル)チオアセテート（1.0g）溶液（4Aモレキュラーシーブを含む）を、窒素下で、三弗化硼素トリエーテル錯化合物（0.5ml）で処理し、そして混合物を0℃に冷却し、そして１時間撹拌する。次に反応混合物を-20℃に冷却し、そしてジクロロメタン（10ml）中の(+)-B-クロロ-ジイソピノカンフェイルボラン（2.0g）溶液で処理し、そして20時間、-15℃から-20℃の間で撹拌する。これを次に室温に暖め、そしてアセトアルデヒド（0.3ml）で処理し、そして5時間撹拌する。これを10℃に冷却し、水酸化ナトリウム水溶液（15ml;3.05N）で処理し、そして2分間撹拌する。有機相を分離し、水（20ml）で洗浄し、10℃に冷却し、そして希釈した塩酸（2×15ml;1N）で抽出し、そして水（2×15ml）でpH7になるまで洗浄する。これらの洗浄物を酸抽出物と合わせ、tert-ブチルメチルエーテル（2×50ml）で洗浄し、5℃に冷却し、水酸化ナトリウム水溶液（9N）でpHが10になるまで滴下処理し、そしてtert-ブチルメチルエーテル（2×50ml）で抽出する。これらの有機抽出物を合わせ、水（2×15ml）でpH7になるまで洗浄し、そして硫酸マグネシウム上で乾燥し、(R)-5-ヒドロキシ-5-(3-ピリジル)ペンチルチオアセテート（0.76g;94％ee）を黄色油状物として得る。
実施例１１
ジクロロメタン（200ml）中の(R)-5-ヒドロキシ-5-(3-ピリジル)ペンチルチオアセテート（10.0g）溶液を、窒素下で0℃に冷却し、そしてトリエチルアミン（7ml）、続いてメタンスルホニルクロライド（3.8ml）で-5℃から0℃の間で5分間滴下処理する。この反応混合物を室温に暖める。60分後、混合物を10℃に冷却し、メタノール中のナトリウムメトキシド溶液（20ml；25％重量/容量）で10分間、滴下処理する。混合物を室温に暖める。30分後、混合物を水で9から10のpHになるまで間に洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥、蒸発させ、そしてクロマトグラフィーを行い、(S)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピラン（7.5g;91％ee）を琥珀色の油状物として得る。
実施例１２
ジクロロメタン（15ml）中の(S)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピラン（1.5g）溶液を、エタノール（15ml）で処理し、続いてアセチルアセトナト銅錯体（0.22g）で処理する。緑−青色の溶液を、エタノール（2ml）中の過酸化水素（2ml;27.5％）で処理する。2時間後、溶液をさらにエタノール（1ml中）の過酸化水素（1ml;27.5％）で、続いてさらに同量で１時間毎に7時間同様に処理する。このようにして全10mlの27.5％の過酸化水素を使用する。さらに4時間後、混合物をジクロロメタン（10ml）で処理し、そして水（4×25ml）で抽出する。合わせた水性抽出物をエチレンジアミンテトラ酢酸ナトリウム（0.5g）で処理し、続いて十分量の固体塩化ナトリウムで処理して飽和溶液を生成する。これを次にジクロロメタン（4×50ml）で抽出し、そして合わせた有機抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥、蒸発させ、(1R,2S)-2-(3-ピリジル)テトラヒドロ-2H-チオピラン 1-オキシド（1.1g）を黄色の固体として得る。
実施例１３
21g/l濃度の30mlの酵母モルト栄養培地（デフコ:Difco）を含有する、100mlの三角フラスコ中でハンセニューラ ポリモルファを培養する。40時間後、培養物をS-(4-ニコチノイルブチル)チオアセテート（30mg）と一緒にし、29時間震盪する。次に反応混合物を酢酸エチルで抽出し、抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、そして蒸発させる。生成した残渣を、ヘプタンおよびイソプロパノールの混合物（90:10容量/容量）に溶解し、そしてこの溶液をChiralcel ODカラムを使用してキラルHPLCにより検査し、その注入量は5μl、流速は1ml/分、移動相はヘプタンおよびイソプロパノールの混合物（90:10容量/容量）であり、そしてUV230nmで検出する。転換率は47％、(R)-5-ヒドロキシ-5-(3-ピリジル)ペンチルチオアセテートの収量は22％、そして鏡像異性体の過剰度は95％より高いことが分かる。培養物の活性［１リットルの培養物１時間あたりに生産される(R)-5-ヒドロキシ-5-(3-ピリジル)ペンチルチオアセテートのmg数］は11mg/hr.1である。生成物の構造はNMRスペクトルで確認されている。
実施例１４
テトラヒドロフラン（500ml）中のカリウムtert-ブトキシド（82.14g）およびニコチン酸メチル（68.5g）の溶液を、窒素雰囲気下で45℃から50℃で撹拌する。これを次にテトラヒドロフラン（125ml）中のデルタ−バレロラクトン（75.0g）溶液で2時間処理し、懸濁液を生成し、これを45℃から50℃で2時間撹拌する。これを次に水（400ml）で処理し、続いて濃塩酸（177.0g）で15分間処理する。反応混合物を45℃から50℃で75分間撹拌し、そして20℃に冷却し、トルエン（2×250ml）で洗浄する。水層を水酸化ナトリウム水溶液で処理してpH7.5に塩基性化し、そして次に一晩周囲温度で静置し、その後、混合物をトルエン（250ml）で抽出する。塩化ナトリウム（120g）を水層に溶解し、これを次にジクロロメタン（4×250ml）で抽出する。合わせたジクロロメタン抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして濾過する。このジクロロメタン溶液を窒素下で撹拌し、そしてN,N-ジイソプロピル-エチルアミン（105ml）で処理する。撹拌した溶液を0℃に冷却し、そして次にメタンスルホニルクロライド（42.6ml）で滴下処理し、温度を10℃未満に保つ。混合物を水（50ml）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして濾過する。濾液を撹拌し、そして氷浴で冷却する。次にこれをメタンスルホン酸（32.5ml）で5分間処理し、混合物を10分間撹拌し、次にtert-ブチルメチルエーテル（150ml）で20分間、滴下処理する。生成した懸濁液を氷浴中で冷却しながら結晶化が完了するまで撹拌し、3-(5-メタンスルホニル-ペンタノイル)ピリジニウムメタンスルホネート（112.1g）を、白色粉末状で得る、融点74℃。