(57)【要約】下記式［Ｉ］2002081503.tif 000020で表されるＫ９７−０２３９Ａ物質、および下記式［ＩＩ］2002081503.tif 000021で表されるＫ９７−０２３９Ｂ物質からなるＫ９７−０２３９物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、該培養物中にＫ９７−０２３９物質を蓄積せしめ、該培養物からＫ９７−０２３９物質を採取する。得られた物質は毒性が低くマクロファージ泡沫化を特異的に阻害することから、ヒトの動脈硬化症およびそれに起因する疾病の予防および治療に有用である。
2002081503.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式［Ｉ］
2002081503.tif 000018
で表される化合物であるＫ９７−０２３９物質、および下記式［ＩＩ］
2002081503.tif 000019
で表される化合物であるＫ９７−０２３９Ｂ物質、からなる新規Ｋ９７−０２３９物質。
【請求項２】
ストレプトミセス属に属し、Ｋ９７−０２３９物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養物中にＫ９７−０２３９物質を蓄積せしめ、該培養物からＫ９７−０２３９物質を採取することを特徴とする新規Ｋ９７−０２３９物質の製造法。
【請求項３】
ストレプトミセス属に属し、Ｋ９７−０２３９物質を生産する能力を有する微生物が、ストレプトミセス  エスピー  Ｋ９７−０２３９（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．Ｋ９７−０２３９）（ＦＥＲＭ  ＢＰ−７５１４）である請求の範囲第２項に記載の製造法。
【請求項４】
ストレプトミセス属に属し、Ｋ９７−０２３９物質を生産する能力を有する微生物。
【請求項５】
微生物が、ストレプトミセス  エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）Ｋ９７−０２３９（ＦＥＲＭ  ＢＰ−７５１４）である請求の範囲第４項に記載の微生物。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、マクロファージの泡沫化を特異的に阻害して動脈硬化症やそれに起因する疾病の予防や治療に有用な新規Ｋ９７−０２３９物質およびその製造法に関する。
背景技術
従来の技術
近年、食生活の向上に伴い成人の高脂血症や肥満などの生活習慣病が、粥状動脈硬化症、さらには心筋梗塞、脳溢血や脳卒中など死と直結した病態へと進展することが知られている。現在、動脈硬化の予防治療薬としてスタチン系の薬剤、例えばプラバスタチン、フルバスタチン、セリバスタチンやアトロバスタチンなどが用いられているが、これらの薬剤はすべて体内でのコレステロール生合成の律速酵素の１つであるＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害することにより、血中のコレステロール値を低下させる効果に起因する。しかし、動脈硬化症は複雑でかつ複合的な成因によることからも、作用機構の異なる薬剤の開発が強く望まれている。
粥状動脈硬化症の初期病変では、動脈内皮に侵潤したマクロファージが、血中を流れる低密度リポタンパク質（Ｌｏｗ  Ｄｅｎｓｉｔｙ  Ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ；以下ＬＤＬと呼称することもある）が酸化や糖化などのごとき何らかの変性を受けて生じる変性ＬＤＬを認識し、際限なく取り込み、加水分解して生成する遊離のコレステロールや脂肪酸をコレステリルエステルやトリアシルグリセロールに変換して脂肪滴として細胞質に蓄積し、泡沫化する過程を経て、動脈硬化を進展させることが知られている。従って、このマクロファージ泡沫化の過程を阻害する物質は、直接動脈硬化巣の進展を抑止することが期待されるが、スタチン系薬剤を含めてそのような効果を有する医薬品は知られていなかった。
発明が解決しようする課題
かかる実情において、マクロファージ泡沫化を阻害する物質を提供することは、動脈硬化症の病巣に直接働き、その進展を抑止する新しい医薬品として人類の健康への福音をもたらすことが期待される。
本発明はこのような期待を満足し得る新規Ｋ９７−０２３９物質およびその製造法を提供するものであり、更にＫ９７−０２３９物質を有効成分とする動脈硬化予防治療薬および該物質を生産するための微生物を提供するものである。
発明の開示
課題を解決するための手段
本発明者らは、微生物の生産する代謝産物を対象にマクロファージ泡沫化阻害剤の検索を行った結果、新たに土壌から分離した放線菌Ｋ９７−０２３９株の培養液中にマクロファージ泡沫化を阻害する活性を有する物質が産生されていることを見出した。次いで、該培養物からマクロファージ泡沫化阻害活性物質を分離、精製した結果、このような化学構造を有する物質は従来まったく知られていないことから、本物質を９７−０２３９物質と称することにした。
本発明は、かかる知見に基づいて完成されたものであって、下記式［Ｉ］
2002081503.tif 000003
で表される化合物であるＫ９７−０２３９Ａ物質、および下記式［ＩＩ］
2002081503.tif 000004
で表される化合物であるＫ９７−０２３９Ｂ物質からなる新規Ｋ９７−０２３９物質に関するものである。
本発明はまた、ストレプトミセス属に属し、Ｋ９７−０２３９物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養物中にＫ９７−０２３９物質を蓄積せしめ、該培養物からＫ９７−０２３９物質を採取する新規Ｋ９７−０２３９物質の製造法に関するものである。
本発明はまた、ストレプトミセス属に属し、Ｋ９７−０２３９物質を生産する能力を有する微生物が、ストレプトミセス  エスピー  Ｋ９７−０２３９（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．Ｋ９７−０２３９）に関するものである。本発明はさらに微生物がストレプトミセス  エスピー  Ｋ９７−０２３９（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）Ｋ９７−０２３９（ＦＥＲＭ  ＢＰ−７５１４）に関するものである。
前記の式［Ｉ］及び［ＩＩ］で表されるＫ９７−０２３９物質を生産する能力を有する微生物（以下「Ｋ９７−０２３９物質生産菌」と称する）は、ストレプトミセス属に属するが、例えば本発明者らが新たに東京都世田谷区の土壌から分離したストレプトミセス  エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）Ｋ９７−０２３９株は、本発明において最も有効に使用される株の一例である。本Ｋ９７−０２３９株の菌学的性状を示すと、以下のとおりである。
（Ｉ）形態的性質
栄養菌糸は各種寒天培地上でよく発達し、分断は観察されない。気菌糸はグリセロール・アスパラギン寒天培地、スターチ・無機塩寒天培地で豊富に着生し、グレー系の色調を呈する。顕微鏡下の観察では、気菌糸上に２０ケ以上の胞子の連鎖が認められ、その形態は直鎖状で、胞子の大きさは０．７〜０．９×１．０〜１．３μｍで円筒状である。胞子の表面は平滑である。菌核、胞子のうおよび遊走子は見出されない。
（ＩＩ）各種培地上での性状
イー・ビー・シャーリング（Ｅ．Ｂ．Ｓｈｉｒｌｉｎｇ）とデー・ゴットリーブ（Ｄ．Ｇｏｔｔｌｉｅｂ）の方法（インターナショナル・ジャーナル・オブ・システィマティック・バクテリオロジー、１６巻、３１３頁、１９６６年）によって調べた本生産菌の培養性状を下記に示す。色調は標準色として、カラー・ハーモニー・マニュアル第４版（コンテナー・コーポレーション・オブ・アメリカ・シカゴ、１９５８年）を用いて決定し、色票名とともに括弧内にそのコードを併せて記した。以下は特記しない限り、２７℃、２週間目の各培地における観察の結果である。
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（ＩＩＩ）生理学的諸性質
2002081503.tif 000009
（ＩＶ）細胞壁組成
細胞壁のジアミノピメリン酸はＬＬ型である。
以上、本菌に菌学的性状を要約すると次のとおりである。細胞壁中のジアミノピメリン酸はＬＬ型である。胞子連鎖の形態は直鎖状で、長い胞子鎖を形成し、胞子の表面は平滑である。培養状の諸性質としては、栄養菌糸はうすい黄色の色調を呈し、気菌糸はグレー系の色調を呈する。メラニン色素は単純ゼラチン培地（２１〜２３℃培養）で産生する。他の可溶性色素は産生しない。
以上のような形態的特徴、培養性状および生理学的性状を示す本菌株をストレプトミセス属に属する菌株と同定し、プリドハムとトレスナーの分類（バージス・マニュアル・オブ・デタミナーティブ・バクテリオロジー、第８版、７４８〜８２９頁、１９７４年）によるグレーシリーズに属する菌種であると考えられた。なお、本菌株は、ストレプトミセス・エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）Ｋ９７−０２３９として、日本国茨城県つくば市東１丁目１番３号に所在する経済産業省産業技術総合研究所生命工学工業技術研究所に平成１３年３月１９日付で寄託され、受託番号はＦＥＲＭ  ＢＰ−７５１４である。
本発明で使用されるＫ９７−０２３９物質生産菌としては、前述のストレプトミセス・エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）Ｋ９７−０２３９菌株は好ましい例として挙げられるが、菌は一般的性状として菌学上の性状は極めて変異し易く、一定したものではなく、自然的にあるいは通常行われる紫外線照射または変異誘導体、例えばＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン、エチルメタンスルホネート等を用いる人工的変異手段により変異することは周知の事実であり、このような人工的変異株は勿論、自然変異株も含め、ストレプトミセス属に属し、Ｋ９７−０２３９物質を生産する能力を有する菌株はすべて本発明に使用することができる。
また、融合細胞、遺伝子操作などの細胞工学的に変異させた菌株も含め、ストレプトミセス属に属し、前記の式［Ｉ］、［ＩＩ］で表されるＫ９７−０２３９物質（以下、特記しない限り「Ｋ９７−０２３９物質」と称する）を生産する菌株は、全て本発明において使用することができる。
本発明のＫ９７−０２３９物質を製造するにあたっては、先ずストレプトミセス属に属するＫ９７−０２３９物質生産菌を培地に培養することにより行われる。本発明のＫ９７−０２３９物質生産に適した栄養源としては、微生物が同化し得る炭素源、消化し得る窒素源、さらに必要に応じて無機塩、ビタミン等を含有させた栄養培地が使用される。炭素源としては、グルコース、フラクトース、マルトース、ラクトース、ガラクトース、デキストリン、澱粉等の糖類、大豆油等の植物性油脂類が単独または組み合わせて用いられる。
窒素源としては、ペプトン、酵母エキス、肉エキス、大豆粉、綿実粉、コーン・スチープ・リカー、麦芽エキス、カゼイン、アミノ酸、尿素、アンモニウム塩類、硝酸塩類などが単独または組み合わせて用いられる。その他必要に応じてリン酸塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩などの塩類、鉄塩、マンガン塩、銅塩、コバルト塩、亜鉛塩などの重金属塩類やビタミン類、その他Ｋ９７−０２３９物質の生産に好適なものが適宜添加される。
培養するに当たり、発泡の激しいときには、必要に応じて液体パラフィン、動物油、植物油、シリコン油、界面活性剤などの消泡剤を添加してもよい。上記の培養は、上記の栄養源を含有すれば、培地は液体でも固体でもよいが、通常は液体培地を用い、培養するのがよい、少量生産の場合にはフラスコを用いる培養が好適である。
培養を大きなタンクで行う場合は、生産工程において、菌の生育遅延を防止するため、はじめに比較的少量の培地に生産菌を接種培養した後、次に培養物を大きなタンクに移して、そこで生産培養するのが好ましい。この場合、前培養に使用する培地および生産培養に使用する培地の組成は、両者ともに同一であってもよいし、必要があれば両者を変えてもよい。
培養を通気攪拌条件で行う場合は、例えばプロペラやその他機械による攪拌、ファメーターの回転または振とう、ポンプ処理、空気の吹き込みなど既知の方法が適宜使用される。通気用の空気は、滅菌したものを使用する。培養温度は、本Ｋ９７−０２３９物質生産菌が本Ｋ９７−０２３９物質を生産する範囲内で適宜変更し得るが、通常は２０〜３０℃、好ましくは２７℃前後で培養するのがよい。培養ｐＨは、通常は５〜８、好ましくは７前後で培養するのがよい。培養時間は、培養条件によっても異なるが、通常は３日程度である。
このようにして得られたＫ９７−０２３９物質は、培養菌体および培養ろ液に存在する。培養物から目的とするＫ９７−０２３９物質を採取するには、全培養物をアセトンなどの水混和性有機溶媒で抽出し、抽出液を減圧下、有機溶媒を留去後、続いて残渣を酢酸エチルなどの水不混和性有機溶媒で抽出することによって行われる。
上記の抽出法に加え、脂溶性物質の採取に用いられる公知の方法、例えば吸着クロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、遠心向流分配クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィーなどを適宜組み合わせ、あるいは繰り返すことにより、Ｋ９７−０２３９物質を分離、精製することができる。
本発明のＫ９７−０２３９Ａ物質の理化学的性状は次のとおりである。
（１）性状    ：白色粉末
（２）分子量  ：７０７（高速原子衝撃質量分析による）
（３）分子式  ：Ｃ３７Ｈ５３Ｎ７Ｏ７
（４）比旋光度：［α］Ｄ２２＝＋１６４°（ｃ＝０．１、メタノール）
（５）紫外部吸収スペクトル（メタノール中）：第１図に示すとおり、２０４ｎｍ（ｌｏｇ  ε＝１５６００）、３００ｎｍ（ｌｏｇ  ε＝２５７００）に極大吸収を有する
（６）赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）：第２図に示すとおり、３４４２、１６３３、１５２５、１３６７、１２４２、１１６７ｃｍ−１に吸収極大を有する
（７）１Ｈ−プロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重ＤＭＳＯ＝４０：１）：第３図に示すとおりであり、その化学シフト（ｐｐｍ）を第１表に示す
（８）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重ＤＭＳＯ＝４０：１）：第４図に示すとおりであり、その化学シフト（ｐｐｍ）を第１表に示す
（９）溶剤に対する溶解性：メタノール、ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶、水、ヘキサンに難溶、
（１０）呈色反応：硫酸、リンモリブデン酸に陽性
（１１）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質
2002081503.tif 000010
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但し、ｄは二重線、ｄｄは四重線、ｄｄｄは八重線、Ｊはスピン結合定数、ｍは多重線、ｓは一重線を示す。
以上のように、Ｋ９７−０２３９Ａ物質の各種理化学的性状やスペクトルデータを詳細に検討した結果、本Ｋ９７−０２３９Ａ物質は下記式［Ｉ］で表される化学構造であることが決定された。
2002081503.tif 000013
本発明のＫ９７−０２３９Ｂ物質の理化学的性状は次のとおりである。
（１）性状    ：白色粉末
（２）分子量  ：６７３（高速原子衝撃質量分析による）
（３）分子式  ：Ｃ３４Ｈ５５Ｎ７Ｏ７
（４）比旋光度：［α］Ｄ２２＝＋６８°（ｃ＝０．１、メタノール）
（５）紫外部吸収スペクトル（メタノール中）：第５図に示すとおり、２０４ｎｍ（ｌｏｇ  ε＝１４８００）、３００ｎｍ（ｌｏｇ  ε＝２４５００）に極大吸収を有する
（６）赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）：第６図に示すとおり、３４４０、１６３７、１６１８、１５１８、１４００、１２５５、１１９４ｃｍ−１に極大吸収を有する
（７）１Ｈ−プロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重ＤＭＳＯ＝４０：１）：第７図に示すとおりであり、その化学シフト（ｐｐｍ）を第２表に示す
（８）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重ＤＭＳＯ＝４０：１）：第８図に示すとおりであり、その化学シフト（ｐｐｍ）を第２表に示す
（９）溶剤に対する溶解性：メタノール、ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶、水、ヘキサンに難溶
（１０）呈色反応：硫酸、リンモリブデン酸に陽性
（１１）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質
2002081503.tif 000014
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但し、ｄは二重線、ｄｄは四重線、ｄｄｄは八重線、Ｊはスピン結合定数、ｍは多重線、ｓは一重線を示す。
以上のように、Ｋ９７−０２３９Ｂ物質の各種理化学的性状やスペクトルデータを詳細に検討した結果、本Ｋ９７−０２３９Ｂ物質は下記式［ＩＩ］で表される化学構造であることが決定された。
2002081503.tif 000017
次に、本発明のＫ９７−０２３９物質のマウス腹腔マクロファージ内でのコレステリルエステル及び油滴形成に対する阻害作用について説明する。
マウス腹腔マクロファージ内でのコレステリルエステル形成および油滴形成は生田目らの方法（Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１２５巻、３１９〜３２７頁、１９９９年）に従い行った。
マウス腹腔より単離したマクロファージを６．８％リポ蛋白質欠乏血清を含むダルベッコ改変イーグル培地（６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥＭ培地）に２．０×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌで懸濁して、４８穴マイクロプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ社製）あるいはスライドチャンバー（Ｎｕｎｃ社製）に０．２５ｍｌずつまく。
次に５％炭酸ガスインキュベーター内で３７℃で２時間培養を行った後、付着しない細胞をハンクス液（Ｈａｎｋ’ｓ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で洗浄することにより除去する。洗浄後、６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥＭ培地で一時間培養した後、Ｋ９７−０２３９物質（２．５μｌメタノール溶液）、リポソーム（１０μｌの０．３Ｍグルコース中にホスファチジルコリン／ホスファチジルセリン／ジセチルホスフェート／コレステロール＝１０：１０：２：１５（ｎｍｏｌ）の組成から構成されている）及び［１−１４Ｃ］オレイン酸（５μｌ、０．０５μＣｉ、１ｎｍｏｌ）を添加し、さらに１４時間培養した。
培養後上清を除去し、細胞内中性脂質をヘキサン０．６ｍｌとイソプロパノール０．４ｍｌを加えて２回抽出した。これを濃縮後、ＴＬＣ（シリカゲルプレート、メルク社製、厚さ０．５ｍｍ）にスポットし、ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸（７０：３０：１：ｖ／ｖ）の溶媒で展開し、分離した［１４Ｃ］コレステリルオレートと［１４Ｃ］トリアシルグリセロールの量をラジオスキャナー（アンビス社製）で定量した。その結果、Ｋ９７−０２３９物質は［１４Ｃ］コステリルオレートの生成を比較的選択的に阻害し、そのＩＣ５０値はＫ９７−０２３９Ａ物質で１．５μＭ、Ｋ９７−０２３９Ｂ物質で１．７μＭとそれぞれ測定され、［１４Ｃ］トリアシルグリセロールの生成に対しても、Ｋ９７−０２３９Ａ物質は１５μＭで約３０％阻害を示し、Ｋ９７−０２３９Ｂ物質は１５μＭで約５０％阻害をそれぞれ示した。
一方、細胞内に形成した油滴は、マクロファージを６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥＭ培地でＫ９７−０２３９物質と上記リポソームで１４時間培養後、油滴および核をそれぞれオイルレッドＯ（ｏｉｌ  ｒｅｄ  Ｏ）及びヘマトキシリンで二重染色し、光学顕微鏡（オリンパス社製）で観察した。その結果、Ｋ９７−０２３９物質１０μＭ存在下で、細胞質に蓄積する油滴の量は薬剤無添加（コントロール）と比較すると約５０％に減少していた。
次に、本発明のＫ９７−０２３９物質の毒性試験について説明する。
本Ｋ９７−０２３９物質は、マウス腹腔マクロファージの生育に対して最終濃度２０μＭでも全く毒性を示さなかった。また、本Ｋ９７−０２３９物質を１００ｍｇ／ｋｇでマウスに経口投与したが、何ら毒性変化は認められなかった。
発明を実施するための最良の形態
次に、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれのみに限定されるものではない。
実施例
５０ｍｌ容大型試験管にグルコース０．１％、スターチ２．４％、ペプトン０．３％、肉エキス０．３％、イーストエクストラクト０．５％、ＣａＣＯ３  ０．４％を水道水で溶解した培地（ｐＨ７．０に調整）１０ｍｌを仕込み、スポンジ栓後、蒸気滅菌し、寒天培地上に生育させたストレプトミセス・エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）Ｋ９７−０２３９（ＦＥＲＭ  ＢＰ−７５１４）を白金耳にて無菌的に接種し、２７℃で３日間振とう培養して種培養液を得た。
一方、５００ｍｌ容三角フラスコにグルコース０．１％、スターチ２．４％、ペプトン０．３％、肉エキス０．３％、イーストエクストラクト０．５％、ＣａＣＯ３  ０．４％を水道水で溶解した培地（ｐＨ７．０に調整）１００ｍｌを仕込み、スポンジ栓後、蒸気滅菌し、前記の種培養した培養液２ｍｌを無菌的に移植し、２７℃で３日間振とう培養して第２種培養液を得た。
一方、３０リットル容ジャーファーメンター５基に可溶性澱粉４．０％、ハイプロトーストミール２．０％、Ｋ２ＨＰＯ４  ０．０５％、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．０５％、ＫＣｌ  ０．０３％、０．１Ｎチオ硫酸ナトリウム３２μｇ／ｌｉｔｅｒを水道水で溶解した培地（ｐＨ６．５に調整）２０リットル仕込み、蒸気滅菌し、前記の種培養した第２種培養液４００ｍｌを無菌的に移植し、２７℃で３日間通気攪拌培養した。
培養後、培養液１００リットルをシャープレス遠心器で分離した菌体をアセトン２０リットルで処理してろ過した後、ろ液を減圧濃縮してアセトンのみを留去し、水溶液を得た。次いで、その水溶液を酢酸エチル１０リットルで抽出し、抽出液を減圧濃縮して粗製物１６．９ｇを得た。この粗製物をＯＤＳゲル（２００ｇ、ペガシル、センシュー科学社製）のカラムにチャージし、３０％〜１００％アセトニトリル水（直線濃度勾配）で溶出するカラムクロマトグラフィーを行った。
各フラクションは１２．５ｍｌずつ分画し、活性成分を含む５０％〜６５％アセトニトリル画分を集め、減圧乾固して粗活性褐色物質３９６ｍｇを得た。更に、粗活性物質をＬＨ−２０（５０ｇ、ファルマシア社製）のカラムにチャージし、メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィーを行った。各フラクションは１ｍｌずつ分画し、活性成分を含む４９〜５８ｍｌ溶出画分を集め、減圧乾固して粗活性茶色物質１３１ｍｇを得た。
これを２０回に分けて高速液体クロマトグラフィーにより分離、精製した。装置はモデルＰＵ−１５８０（ＪＡＳＣＯ社製）を用い、カラムはＹＭＣ−Ｐａｃｋ  Ｓ−５（ＯＤＳ系樹脂、２０×２５０ｍｍ、山村科学研究所社製）を用い、溶媒系は３０％〜５０％アセトニトリル水（直線濃度勾配）を用い、検出はＵＶ３３５ｎｍ、流速は６ｍｌ／分で行った。その結果Ｋ９７−０２３９Ａ物質は４．３２ｍｇ、及びＫ９７−０２３９Ｂ物質は５．８０ｍｇを単離した。
産業上の利用分野
本発明の新規Ｋ９７−０２３９物質は、毒性が低く、マクロファージの泡沫化を特異的に阻害することから動脈硬化症やそれに起因する疾病の予防および治療に有用であると期待される。
【図面の簡単な説明】
第１図は本発明のＫ９７−０２３９Ａ物質の紫外部吸収スペクトル（メタノール中）を示したものである。
第２図は本発明のＫ９７−０２３９Ａ物質の赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）を示したものである。
第３図は本発明のＫ９７−０２３９Ａ物質の１Ｈ−プロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重ＤＭＳＯ＝４０：１）を示したものである。
第４図は本発明のＫ９７−０２３９Ａ物質の１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重ＤＭＳＯ＝４０：１）を示したものである。
第５図は本発明のＫ９７−０２３９Ｂ物質の紫外部吸収スペクトル（メタノール中）を示したものである。
第６図は本発明のＫ９７−０２３９Ｂ物質の赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）を示したものである。
第７図は本発明のＫ９７−０２３９Ｂ物質の１Ｈ−プロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重ＤＭＳＯ＝４０：１）を示したものである。
第８図は本発明のＫ９７−０２３９Ｂ物質の１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重ＤＭＳＯ＝４０：１）を示したものである。
【図１】
2002081503.tif 000022
【図２】
2002081503.tif 000023
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2002081503.tif 000028
【図８】
2002081503.tif 000029
【国際調査報告】
2002081503.tif 000030
2002081503.tif 000031