(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
菌床を構成する培地に菌を繁殖させ、該菌床に覆土を施して子実体を発生させるアガリクス・ブラゼイ茸の栽培方法において、
稲わらを含む培地原料を温度５５〜６５℃、水分６０〜７５重量％で７〜２０日間発酵させる予備発酵工程と、
前記予備発酵の途中で高温状態にある培地原料に有用微生物群から選択された好熱性放線菌を添加する工程と、
前記予備発酵が終了した半熟培地を５８〜６０℃で１日間、その後５０±３℃で２〜７日間発酵させて水分６０〜７０重量％に培地を調整することで、少なくともテルモモノスポラ・クロモゲラ（Thermomonospora chromogera）、ミクロポリスポラ・ファエニ（Micropolyspora faeni）、及びミクロポリスポラ・ビリジニグラ（Micropolyspora viridinigra）の好熱性放線菌が育成された完熟培地を形成する本発酵工程と、
を備えたことを特徴とするアガリクス・ブラゼイ茸の栽培方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はハラタケ属のきのこの一種であるアガリクス・ブラゼイ（Agaricus   blazei ）茸の栽培方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
本発明の方法で栽培されるアガリクス・ブラゼイ茸は、ブラジル、サンパウロ市の郊外ピエダーテを原産地とする担子菌類の茸であり、子実体の形状は釣鐘状で、傘の直径は５〜２０ｃｍ、茶褐色、柄は直径１〜３ｃｍ、長さ５〜１５ｃｍ、白色である。香気が強く、美味で甘い茸である。
【０００３】
アガリクス・ブラゼイ茸由来の多糖体はマウス等の細胞組織内でマクロファージやインターフェロンを活性化する力、すなわちインデュース（導入）効果を有し、ウイルスの細胞への侵入を防ぐ力も多いことが各種学会において発表され、ガンの免疫療法への応用が期待されており、また蛋白多糖体、または核酸成分を抗腫瘍剤として利用することも提案されている（例えば特開平２−７８６３０号公報、特開昭６４−６６１２７号公報）。
【０００４】
アガリクス・ブラゼイ茸の栽培方法についてはいくつか提案されており（特開昭５３−１３８８５３号公報、特公昭５８−３８１２６号公報、特公平７−３６７３３号公報）、特公昭５８−３８１２６号公報において稲藁（麦藁）に米糠、鶏糞、消石灰等を混合して発酵させて堆肥を作り、菌床枠に詰め込み前に消石灰又は過燐酸石灰を用いてｐＨ６．５〜６．８に調整すると共に、Ｃｕ2+、Ｍｎ2+、Ｚｎ2+のいずれかから選ばれる２価金属イオンを極微量加えることが記載されている。しかし、この公報には培地（堆肥）を作る際の発酵方法については説明されていないが、キノコの栽培では、培地の善し悪しが総収穫量に非常に大きく関与する。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
これまでに発表されているアガリクス・ブラゼイ茸の培地作成方法では、発酵温度、堆積方法が厳密ではなかったため、培地配合組成が毎回同じであっても収穫量を高く安定化させることは困難であった。その原因は、発酵温度の僅かな違いによって、発酵に関与する微生物が大きく異なるため、発酵終了時の微生物相と、それに伴う培地成分組成が大きく違ったものになるからである。他の栽培茸、例えばエノキ茸やシメジ茸では、滅菌した培地で栽培するため、培地は常に安定したものを得ることができる。反面、多量のエネルギーを消費するため、滅菌培地は経済的ではない。アガリクス・ブラゼイ茸にとっても同じことで、発酵培地を選ぶ方が経済的であるが、発酵の如何によって収穫量が大きく左右される。また、その発酵も、通常、天然微生物を用いるため、発酵に関与する微生物を制御するのは不可能であった。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究の結果、発酵に関与する幾つかの微生物を検出し、その微生物とアガリクス・ブラゼイ茸の関連を調べ、有用微生物と、有害微生物を見いだした。アガリクス・ブラゼイ茸に直接危害を及ぼす有害菌は見いだせなかったが、カビ類のほとんどはアガリクス・ブラゼイ茸にとって有害であり、また、好熱放線菌の多くは有用であった。また、拮抗作用の中で有用微生物が寡占した状態では有害微生物が抑制されることも明らかになった。さらに、有用微生物による発酵を行うための条件を検討し、培地温度、培地水分等を限定し、さらに積極的に有用微生物を添加する方法で本発明に到達した。
【０００７】
本発明は菌床を構成する培地に菌を繁殖させ、該菌床に覆土を施して子実体を形成させるアガリクス・ブラゼイ茸の栽培方法において、予備発酵、本発酵の温度と水分を制御することによって、発酵微生物を積極的に制御し、安定した高収量培地を作成することを特徴とするアガリクス・ブラゼイ茸の栽培方法である。具体的には、予め、温度５５〜６５℃、水分６０〜７５重量％で７〜２０日間発酵させた培地を用いて該菌床を形成することを特徴とする。
【０００８】
本発明において、予備発酵はいままで発表されている培地作成法とあまり変わりはない。すなわち稲藁、麦藁等の発酵基材に窒素、燐成分（硫安・過燐酸石灰等無機成分のほか、鶏糞等有機質肥料も可）を添加したうえ、水を添加して培地水分を６０〜７５％程度に調整し、よく混合する。混合した培地原料をよく通気できる状態に堆積し、２〜７日間隔、好ましくは４日間隔で切り返しを行いながら７〜２０日間発酵させる。通常、予備発酵時の中心温度は６０℃以上になる。予備発酵により培地は膨軟化し、高温により有害菌の多くは死滅する。
【０００９】
予備発酵の段階でも培地になり得るが、堆積時の表面部分は温度が低く有害菌が完全に死滅せず、また中心部分は温度が高すぎるために有用微生物まで死滅してしまうため、前述のように培地としては不安定である。とりわけ堆積の下部分は水分過多になり易く、また酸素も不足するため嫌気発酵層が形成され、アンモニア、メタン等、アガリクス・ブラゼイ茸の生育を阻害する物質が集積して、培地としては著しく不適である。
【００１０】
予備発酵が終了した培地を本発酵室に搬入する。搬入時の培地水分は７０％程度である。本発酵室は、ファン等により強制的に新鮮空気を供給、循環でき、ボイラー等の温度調整機、蒸気発生機等の加湿装置が自動制御される。この施設により、培地を搬入後１日は６０℃、その後５０℃±２℃で２〜７日間発酵する。発酵後、培地の水分は６０〜７０％、好ましくは６５％である。発酵終了した培地は直ちに栽培室に搬入し、温度下降後種菌を接種する。
【００１１】
本発酵行程によって、カビなどの有害微生物、ハエやダニ等の害虫は完全に死滅し、有用微生物が寡占し、アガリクス・ブラゼイ茸のみの生育に有効な栄養を蓄積することができる。
【００１２】
有害微生物や害虫を殺滅させるためには発酵中の温度をさらに高温にすることも考えられるが、６５℃を超えると適切な培地形成のために有用な微生物まで死滅してしまい、好ましくない。培地の水分は６０重量％以下だと放線菌等の有用微生物の生育に最適とは言えず、一方７５重量％を超えると酸素の供給に障害を来すなど、好ましくない。
【００１３】
上記条件下における発酵では、主として好熱性の放線菌、細菌が増殖する。培地の発酵中に発現する好熱性の放線菌としては、例えばテルモアクチノミセス属（Thermoactinomyces ）のブルガリス（T.vulgaris）、カンジダス（T.candidus）、アルバス（T.albus ）、タルポフィリス（T.thalpophilus）等、テルモモノスポラ属（Thermomonospora ）のクロモゲラ（T.chromogera）、クルバタ（T.curvata ）、フスカ（T.fusca ）、メソフィラ（T.mesophila ）等、ミクロポリスポラ属（Micropolyspora）のファエニ（M.faeni ）、ビリジニグラ（M.viridinigra ）等を挙げることができる。好熱性の細菌としてはバチルス属（Bacillus）のサブチルス（B.subtilis）、ステアロテルモフィラス（B.stearothermophilus）、コアグランス（B.coagulans ）等を挙げることができる。
【００１４】
上記条件を限定すれば有用微生物がほぼ自然発生、寡占するが、不確定要素が残る。有用微生物群は、培地原料に付着したり空気中に浮遊していることが多いが、必ず自然条件下に存在しているとは限らない。そこで本発明者らは、有用微生物群を積極的に添加することにより、培地全体に有用微生物群を蔓延させ、培地の品質を向上、安定化させる方法を発明した。
【００１５】
有用微生物群は、絶えず更新、改良される。連続的に生産する場合は、過去数回の培地の中で最も良い培地を選択し、それを種菌とする。予備発酵時の第一回目切り返しから発酵室に培地を搬入するまでの間に、培地の０．１〜１重量％になるように良質培地を添加する。また、それとは別に、良質培地から有用微生物を人口培地で分離し、菌株として斜面培地等に保管しておく。これは良質培地がなくなってしまった場合、例えば栽培を休んだ場合等に、保管してあった微生物群を添加して良質培地を作るためである。
【００１６】
培地発酵中の培地の水分のｐＨは６．５〜７．０であることが好ましい。ｐＨが著しく変化した場合には、石灰等で調整すると良い。
【００１７】
本発明において、培地原料としては、基本的にセルロース系の植物材料が使用可能であるが、好ましくは稲藁を少なくともその一部として含むものである。稲藁のほか、セルロース系原料としてバガス、コーンコブミール、麦藁、馬きゅう肥、馬糞等を挙げることができる。一般にこれらのセルロース系の植物材料を全原料中７０〜９９重量％用いて培地とする。
【００１８】
また、ミネラル及び窒素源として、燐酸カルシウム、炭酸カルシウム、過燐酸石灰、石灰、硫安、尿素、馬糞、牛糞、鶏糞、人糞、米糠、糖密等を培地原料として用いることができる。これらのミネラル及び窒素源はそれぞれ２〜４重量％添加される。
【００１９】
【発明の実施の形態】
次に、本発明のアガリクス・ブラゼイ茸の栽培方法を簡単に説明する。
まず、稲藁等のセルロース系原料とミネラル及び窒素源を混合し、散水して上記範囲に水分ｐＨを調整して堆積する。堆積の形は十分通気できるようにするために幅２ｍ、高さ２ｍの棒状にするのが好ましい。堆積して１〜４日すると発酵熱により堆積物の中心部分は６０℃以上に達する。温度が高温になってから２〜７日、好ましくは４日後、切り返しを行う。切り返しはその後、４〜７日間隔で行う。切り返しの都度、水分、ｐＨの調整をする。有用微生物群もしくは優良培地を切り返し時、好ましくは第一回目の切り返し時に添加する。３〜４回の切り返しで予備発酵が終了する。予備発酵期間は７〜２０日だが、その日数は原料によって異なり、通常１４日程度である。
【００２０】
予備発酵が終了した半熟培地を発酵室に搬入する。半熟培地のｐＨは６．５〜７．０、水分は６５〜７５％、好ましくは７０％である。発酵室は、例えば床は２ｃｍ程度のパンチ穴が空いた網状の鉄板になっており、穴から湿度９０％以上の熱風が出る構造となっている。また、壁や天井は断熱性が良く、耐水性や耐腐食性の強いものである。発酵室に培地を１〜２ｍ積み込む。新鮮な空気を十分送りながら１日目は培地温度を６０℃に保つ。２日目からは培地温度を５０±３℃に保つ。４〜７日目に完熟培地が完成する。
【００２１】
完成した培地を栽培室に搬入し、５〜４０ｃｍ、好ましくは２０ｃｍ厚さで棚や箱等に堆積する。直ちに、アガリクス・ブラゼイの種菌を培地の１％を目安に接種する。接種後、培地温度を２４〜２８℃、好ましくは２６℃、栽培室の湿度を７０〜１００％、好ましくは９５％に維持して１０〜３０日後、菌糸が蔓延したら覆土を行う。覆土用の土としては粒径０．１〜５ｍｍの保湿性の良いものが望ましく、例えば山土、ピートモス等を用いることができる。覆土は２〜１０ｃｍの厚さで菌床を被覆する。覆土後、７〜２０日で子実体が発生する。栽培管理としては、栽培室は常に上記温湿度条件を満たしていれば良く、覆土が乾燥したときには散水によって水分を補給する。接種してから子実体が発生するまでの期間は最短でも２５日であり、通常３５日である。子実体の収穫期間は１〜４ケ月、通常２ケ月程度である。総収穫量は培地の１０〜２０％、通常１５％重量である。
【００２２】
このようして栽培することにより、従来の方法より安定的に高収率を得ることができる。従来の培地作成方法でも、総収穫量が培地の２０％重量近くになることはあったが、１０重量％以下になってしまうことも珍しくなかった。キノコの栽培では、培地の出来が総収穫量に関与する割合が大きいのにも拘わらず、アガリクス・ブラゼイ茸を栽培するうえで安定的に良質の培地を得ることが出来なかったからである。本発明では、培地の徹底的な温度管理、有用微生物添加によって、良質で安定した培地を得ることが可能になったので、栽培管理が多少悪くても、総収穫量が培地の１０重量％を割ることはほとんど無くなった。
【００２３】
【実施例】
以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。なお、実施例中、部は特に断らない限り重量部である。
【００２４】
▲１▼培地予備発酵
乾燥したバガス７７．５部（全培地原料中）及び１０〜１５ｃｍに切断された稲藁１５．０部を良く混合し、この混合物と同重量程度散水して水分を馴染ませた。３日後、これに、別途、米糠３．０部、硫安１．０部、石灰１．０部、尿素０．５部及び過燐酸石灰２．０部を混合したものを散布し、さらに水分を調整しながら散水し、幅２ｍ、高さ２ｍの棒状に積み込んだ。水分は約７０重量％で、培地を握り締めると指の間からわずかに水が滲み出て、手が湿った。この水分のｐＨは６．８であった。
【００２５】
堆積１日後で堆積物の内部温度は５０℃、２日後には６０℃を越え、上部から湯気がでた。４日後、１回目の切り返しを行った。水分は完全に馴染み、表面が乾燥していたので水分を補給した。培地の水分のｐＨに変化はなかった。同様に４日間隔で２回切り返しを行った。水分は上記と同様な湿り具合まで補給した。堆積１４日後、ねじ切ったとき簡単に切れる位に膨軟化した半熟培地が得られた。この時水分約７０％、ｐＨ６．８であった。
【００２６】
▲２▼培地本発酵
上記の半熟培地を直ちに発酵室に搬入した。発酵室は２ｃｍ程度のパンチ穴が空いた鉄板の床で、穴から湿度９０％以上の熱風が出る構造になっている。熱源は蒸気発生機であり、電磁弁によりコンピューター制御で温度調整できる。壁や天井は断熱が良く耐水性、耐腐食性のよい発泡ウレタンボードである。そこに、半熟培地を１．５ｍ積み込み、培地の中に温度センサーを入れた。過熱しなくても、搬入後すぐに４５℃まで温度上昇した。温度を６０℃に設定して１日間発酵させた。この時点でサンプリングしたところ、ほとんどの病原菌と害虫は死滅し、検出はできなかったが、有用放線菌群の数はまだ多くなかった。２日目から新鮮空気をやや多めに吸入して温度５０℃に設定した。温度５０℃にしてから４日後、培地は白く霜降り状になった。この白いところから、T.chromogera、M.faeni 、M.viridinigra の３種の有用な好熱性放線菌が検出できた。できあがった完熟培地は水分６５％、ｐＨ６．７だった。
【００２７】
▲３▼接種及び栽培管理
上記の完熟培地を栽培室に搬入した。このとき培地温度は約４０℃であった。培地を４０×６０×２５（高さ）ｃｍ、下面に直径１０ｍｍの穴が６つ空いている発泡スチロール製の栽培箱に、厚さ２０ｃｍに詰め込んだ。培地の温度が２８℃程度まで下降したら、アガリクス・ブラゼイの種菌を接種する。接種量は培地に対して１重量％であった。栽培室に種菌を接種した栽培箱を並べて、室温を２５℃、湿度を９５％に維持した。そのとき培地温度は２６〜２８℃だった。接種１４日後、菌糸が全体に蔓延したので山土で培地を被覆した。厚さは３ｃｍ以上であった。
【００２８】
▲４▼収穫
接種３０日後、覆土表面に一箱あたり２００程度の子実体原基が誘導され、接種３３日後には子実体が収穫できた。フラッシュ（子実体が同時に大量に発生する時期）はおよそ１３日間隔で発生し、１回のフラッシュあたり培地の平均約５重量％ずつ収穫した。４回目以降のフラッシュでは子実体発生量は徐々に減った。収穫期間３ケ月を越えると、子実体はほとんど発生しなくなった。総収穫量は培地の約１８％であった。また、栽培期間中、特に注意することなく、病原性のカビ、ダニ、ハエ等はほとんど発生しなかった。
【００２９】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明によるアガリクス・ブラゼイ茸の栽培方法によれば、予め、温度５５〜６５℃、水分６０〜７５重量％で７〜２０日間発酵させた培地を用いて該菌床を形成したので、安定的な培地の作成が可能になると共に培地発酵管理が容易となり、アガリクス・ブラゼイの子実体を培地の２０重量％程度収穫することが可能となった。また、本発明によれば、培地が有用微生物群で寡占されているため、病原菌等に対して抵抗性が強く、培地の管理が極めて容易となった。