(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
魚類腸管から採取することができ、至適発育温度が２５〜３３℃のカンジダ属に属する酵母と、単糖類および／または二糖類とを含有する養魚飼料。
【請求項２】
酵母がカンジダ（Candida）ＮＳ−１（微工研菌寄第１３０９４号）と命名されたものである請求項１記載の養魚飼料。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は魚類腸管内の魚病細菌の増殖を抑制する酵母および糖類を含有する養魚飼料に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、２００海里規制による漁場の制限および天然資源の涸渇に伴い、栽培漁業、養殖漁業が盛んになってきており、これに伴い、稚仔魚生産用飼料、成魚育成用配合飼料についての多くの研究がなされている。
【０００３】
養魚飼料としては、近年、従来のイワシなどの生餌に代えて、魚粉を主体とした配合飼料が使用されるようになってきた。しかしながら、この配合飼料を投与したのみでは、稚仔魚の餌付きおよび嗜好性の点に問題があり、これを解決するために、最近、ビール酵母やパルプ廃液酵母を配合することが行われているが、これによっても、まだ充分に満足できる効果は得られていない。
さらに近年養殖魚において細菌性、ウイルス性および寄生虫性疾病が多発しており、魚病被害をいかにして軽減するかが大きな問題となっている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明は、魚類の嗜好性を高め、しかも生存率を高めることのできる養魚飼料を提供することを目的とするものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
斯かる実情において、本発明者は鋭意研究を行った結果、本発明者によって、鹿児島市の養鱒場に棲息するニジマスの腸管内から分離した酵母が、魚類腸管内の魚病細菌の増殖を抑制すること、従って、これを養魚飼料に配合すると、魚類の生存率が著しく向上することを見出し、先に特許出願した（特開平６−２３３６５８号）。そして、本発明者はさらに研究を重ねた結果、当該酵母に糖類を併用して配合すると上記効果がさらに増大することを見出し、本発明を完成した。
【０００６】
すなわち、本発明は、後述の特性を有する酵母と、単糖類および／または二糖類とを含有する養魚飼料を提供するものである。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明の酵母は、ニジマス等の魚類腸管から採取することのできるもので、次のような菌学的性質を有する。
【０００８】
（ａ）各培地における生育状態
（１）バレイショ片寒天培地
栄養細胞の大きさ：３〜５μm
型態：やや丸いだ円形
増殖の形式：出芽
（２）ＺＡＧ培地〔ポリペプトン５．００ｇ、酵母エキス１．００ｇ、ブトウ糖２０．００ｇ、寒天１５．００ｇ、１／６人工海水（ＮａＣｌ  ３０．０ｇ、ＫＣｌ  ０．７ｇ、ＭｇＣｌ2 ・６Ｈ2Ｏ  １０．８ｇ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2Ｏ  ５．４ｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2Ｏ  １．０ｇ、脱イオン水１０００ml）、pH７．６、１２０℃で２０分間高圧滅菌〕
白色コロニーを形成し、胞子形成は見られない。
【０００９】
（ｂ）子のう胞子の形成：形成しない。
（ｃ）射出胞子の形成：形成しない。
（ｄ）生理的性質
（１）至適生育条件：pH７〜８、温度２５〜３３℃。
（２）生育の範囲：pH２〜９、温度７〜３４℃。
（３）硝酸塩の同化：−
（４）脂肪の分解：−
（５）尿素の分解：−
（６）ゼラチンの液化：＋
（７）塩化ナトリウム濃度：最適０〜０．５％、最高７％。
（８）カロチノイドの生成：−
（９）顕著な有機酸の生成：＋
（10）デンプン様物質の生成：−
（11）ビタミンの要求性：ビオチン要求
【００１０】
（ｅ）同化性の有無
Ｄ−グルコース（＋）発酵、Ｄ−マンノース（＋）、Ｄ−ガラクトース（＋）発酵、Ｄ−フラクトース（＋）、麦芽糖（−）非発酵、ショ糖（＋）発酵、乳糖（−）非発酵、メリビオース（−）、セロビオース（−）、トレハロース（＋）、ラフィノース（−）、α−メチル−Ｄ−グルコシド（−）、可溶性デンプン（−）、イヌリン（＋）、イノシット（−）、Ｄ−マンニット（−）。
【００１１】
以上の菌学的性質を、「微生物の分類と同定（上）改訂版」学会出版センター（１９８４）を参照して検索した結果、本菌はカンジダ属に属する酵母であるが、従来公知の酵母は至適発育温度が３５〜４０℃であるのに対し、本菌のそれは２５〜３３℃と異っていることから、本菌は新規な酵母であると判定し、カンジダ（トルロプシス）ＮＳ−１〔Ｃａｎｄｉｄａ（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ）ＮＳ−１〕と命名し、工業技術院微生物工業技術研究所に微工研菌寄第１３０９４号（ＦＥＲＭ  Ｐ−１３０９４）として寄託した。
【００１２】
本発明の酵母は、例えばニジマスを放血殺し、開腹して腸内容物を絞り出し、生理食塩水で１０倍段階希釈し、酵母菌培養用寒天平板培地に塗抹し、２５〜３３℃で４８〜７２時間培養して、酵母菌を検出することにより採取することができる。この酵母は、ブドウ糖等の糖分を含む液体又は固形培地で、２５〜３３℃にて培養することにより増殖することができる。
【００１３】
また、単糖類および／または二糖類としては、ブドウ糖、マンノース、ガラクトース、果糖等の単糖類、ショ糖、麦芽糖、乳糖等の二糖類を挙げることができる。
【００１４】
本発明において、酵母と、単糖類および／または二糖類は何れの養魚飼料にも添加することができる。斯かる飼料としては、イワシ、アジ、サバ、サンマ等の魚肉をそのままあるいは凍結して与える生餌、これらの生餌にブラウンミールやホワイトミール等の魚粉や粘結剤を加えてなるモイストペレット、各種動植物タンパクを原料とするドライペレットやエクスパンデッドペレットなどの配合飼料があり、これにビタミン、無機塩類等を添加してさらに栄養価を高めるのが好ましい。
【００１５】
養魚飼料への酵母の添加量は、飼料１ｇ当りに酵母１０3〜１０7個を含むようにするのが好ましい。また、単糖類および／または二糖類は飼料中０．１〜２％、特に０．３〜１％になるように配合するのが好ましい。
【００１６】
本発明の飼料は成育状況に応じて１匹当り１日に魚類の体重の１〜２０％となるよう与えるのが好ましい。
【００１７】
【実施例】
次に実施例を挙げて説明する。
【００１８】
実施例１
平均体重１２５ｇのハマチをそれぞれ２５尾ずつの試験区および比較区とした。試験区には、おとひめ５号（日清製粉株式会社製）１５０ｇに本発明酵母の生菌体（ＦＥＲＭ  Ｐ−１３０９４）を生理食塩水に懸濁させた液（１０7ＣＦＵ／ml）１０mlおよび１０％ブドウ糖溶液１０mlを吸着させたものを試験開始日のみ、それ以降は上記ブドウ糖溶液のみを吸着させたものを毎日給餌した。一方、比較区には、おとひめ５号（日清製粉株式会社製）１５０ｇに本発明酵母の生菌体（ＦＥＲＭ  Ｐ−１３０９４）を生理食塩水に懸濁させた液（１０7ＣＦＵ／ml）１０mlのみを吸着させたものを試験開始日のみ、それ以降はいずれも吸着させないものを毎日給餌した。
試験開始より１２時間後、２４時間後、２日後、４日後（比較区のみ）および６日後（試験区のみ）に各区３尾ずつサンプリングし、腸管内容物中の酵母菌数の推移を測定した。その結果を図１に示す。なお、数値は３尾の平均値で示した。
【００１９】
実施例２
平均体重１４８ｇのハマチをそれぞれ２０尾ずつの試験区および比較区とした。試験区には、おとひめ５号（日清製粉株式会社製）１５０ｇに本発明酵母の生菌体（ＦＥＲＭ  Ｐ−１３０９４）を生理食塩水に懸濁させた液（１０7ＣＦＵ／ml）１０mlおよび１０％ブドウ糖溶液１０mlを吸着させたものを９日間毎日給餌した。一方、比較区には、おとひめ５号（日清製粉株式会社製）１５０ｇに本発明酵母の生菌体（ＦＥＲＭ  Ｐ−１３０９４）を生理食塩水に懸濁させた液（１０7ＣＦＵ／ml）１０mlのみを吸着させたものを９日間毎日給餌した。
試験開始より６時間後、２４時間後、２日後、３日後、５日後、７日後および９日後に各区２尾ずつサンプリングし、腸管内容物中の酵母菌数の推移を測定した。その結果を図２に示す。なお、数値は２尾の平均値で示した。
【００２０】
実施例３
平均体重６４２ｇのハマチをそれぞれ２０尾ずつの試験区および比較区とした。試験区には、おとひめ７号（日清製粉株式会社製）４００ｇに本発明酵母の生菌体（ＦＥＲＭ  Ｐ−１３０９４）を生理食塩水に懸濁させた液（１０7ＣＦＵ／ml）２０ml、レンサ球菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｓｅｒｉｏｌｉｃｉｄａ）を生理食塩水に懸濁させた液（１０5ＣＦＵ／ml）２０mlおよび１０％ブドウ糖溶液２０mlを吸着させたものを毎日給餌した。一方、比較区には、おとひめ７号（日清製粉株式会社製）４００ｇに本発明酵母の生菌体（ＦＥＲＭ  Ｐ−１３０９４）を生理食塩水に懸濁させた液（１０7ＣＦＵ／ml）２０mlおよびレンサ球菌（Ｅ．ｓｅｒｉｏｌｉｃｉｄａ）を生理食塩水に懸濁させた液（１０5ＣＦＵ／ml）２０mlを吸着させたものを８日間毎日給餌した。
試験開始より６時間後、２４時間後、２日後、３日後、４日後、６日後および８日後に各区２尾ずつサンプリングし、腸管内容物中のレンサ球菌数の推移を測定した。その結果を図３に示す。なお、数値は２尾の平均値で示した。
【００２１】
実施例４
平均体重１５０ｇのウナギをそれぞれ７０尾ずつ６区準備した。第１区には、ウナギニューハウス（日清製粉株式会社製）２００ｇに水２００ml、Ａ−オイル（日清製粉株式会社製）２０ml、本発明酵母の生菌体（ＦＥＲＭ  Ｐ−１３０９４）を生理食塩水に懸濁させた液（１０7ＣＦＵ／ml）１０mlおよび１０％ショ糖溶液１０mlを加え混合して練り餌を製造し、この練り餌を試験開始日に給餌した。それ以降は、ウナギニューハウス（日清製粉株式会社製）２００ｇに水２００ml、Ａ−オイル（日清製粉株式会社製）２０mlおよび１０％ショ糖溶液１０mlを加え混合して製造した練り餌を毎日給餌した。第２区は、第１区において使用した１０％ショ糖溶液に代えて１０％果糖溶液を加えたほかは、第１区と同様に給餌した。第３区は、第１区において使用した１０％ショ糖溶液に代えて１０％乳糖溶液を加えたほかは、第１区と同様に給餌した。第４区は、第１区において使用した１０％ショ糖溶液に代えて１０％麦芽糖溶液を加えたほかは、第１区同様に給餌した。第５区は、第１区において使用した１０％ショ糖溶液に代えて１０％フラクトオリゴ糖溶液を加えたほかは、第１区と同様に給餌した。第６区は、第１区において使用した１０％ショ糖溶液を加えなかったほかは、第１区と同様に給餌した。
試験開始より６時間後、２４時間後、２日後、３日後および４日後に各区２尾ずつサンプリングし、腸管内容物の酵母菌数の推移を測定した。その結果を図４および図５に示す。なお、数値は２尾の平均値で示した。
【００２２】
図４および図５から明らかなように、糖類を添加していない第６区においては、試験開始より３日後および４日後には酵母が検出されなかったのに対し、糖類を添加した第１区ないし第５区においては、試験開始より４日後においても酵母が生存しており、本発明の著しい効果が確認された。
【００２３】
【発明の効果】
本発明の養魚飼料を加えて魚類を飼育すると魚病の発生が予防・抑制され、魚類の生存率を向上させることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】ハマチに、本発明酵母とブドウ糖を配合した飼料を１日給餌し、以後ブドウ糖のみを配合した飼料を給餌したときの腸管内容物中の酵母菌の推移を示す。
【図２】ハマチに、本発明酵母とブドウ糖を配合した飼料を９日間給餌したときの腸管内容物中の酵母菌の推移を示す。
【図３】  レンサ球菌、本発明酵母およびブドウ糖を配合した飼料をハマチに８日間給餌したときの腸管内容物のレンサ球菌の推移を示す。
【図４】ウナギに、本発明酵母とショ糖又は果糖を配合した飼料を１日給餌し、以後ショ糖又は果糖のみを配合した飼料を給餌したときの腸管内容物中の酵母菌の推移を示す。
【図５】ウナギに、本発明酵母と乳糖、麦芽糖又はフラクトオリゴ糖を配合した飼料を１日給餌し、以後乳糖、麦芽糖又はフラクトオリゴ糖のみを配合した飼料を給餌したときの腸管内容物中の酵母菌の推移を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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