(57)【要約】一般式（Ｉ）2002034252.tif 000008［式中、Ｒ１は炭素数１〜４のアルキル基を示すか、または置換基を有してもよい炭素数６〜１０のアリール基を示し、Ｒ２とＲ３は同一または異なって、それぞれ水素または炭素数１〜４のアルキル基を示すか、あるいはＲ２とＲ３が連結して炭素数３〜７の環を形成してもよく、Ｒ４はアリール基、シクロアルキル基または芳香族複素環残基で置換されていてもよい低級アルキル基を示す。］で表される化合物またはその医薬上許容される塩を脂質と共存させることにより安定性が向上し、さらに吸収性および組織移行性が改善された製剤を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
2002034252.tif 000007
［式中、Ｒ１は炭素数１〜４のアルキル基を示すか、または置換基を有してもよい炭素数６〜１０のアリール基を示し、Ｒ２とＲ３は同一または異なって、それぞれ水素または炭素数１〜４のアルキル基を示すか、あるいはＲ２とＲ３が連結して炭素数３〜７の環を形成してもよく、Ｒ４はアリール基、シクロアルキル基または芳香族複素環残基で置換されていてもよい低級アルキル基を示す。］で表される化合物またはその医薬上許容される塩と脂質とを含有する医薬組成物。
【請求項２】
一般式（Ｉ）におけるＲ１がフッ素、塩素もしくはメチルで置換されていてもよいフェニルまたはナフチルである請求の範囲１記載の医薬組成物。
【請求項３】
一般式（Ｉ）におけるＲ１がメチル、４−フルオロフェニル、４−クロロフェニル、ｐ−トリルおよび２−ナフチルから選択される基である請求の範囲１記載の医薬組成物。
【請求項４】
一般式（Ｉ）におけるＲ２がプロピル、イソプロピルまたはｔｅｒｔ−ブチルであって、Ｒ３が水素である請求の範囲１記載の医薬組成物。
【請求項５】
一般式（Ｉ）におけるＲ２がイソプロピルであって、Ｒ３が水素である請求の範囲１記載の医薬組成物。
【請求項６】
一般式（Ｉ）におけるＲ２とＲ３とが連結してシクロペンチリデンまたはシクロヘキシリデンを形成する請求の範囲１記載の医薬組成物。
【請求項７】
一般式（Ｉ）におけるＲ４がイソブチル、ベンジル、シクロヘキシルメチルおよびインドール−３−イルメチルから選択される基である請求の範囲１記載の医薬組成物。
【請求項８】
一般式（Ｉ）で表される化合物が、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナールまたはその医薬上許容される塩である請求の範囲１記載の医薬組成物。
【請求項９】
一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩が１重量部に対して医薬組成物を構成する脂質の下限量が約５重量部であり上限量が約１４重量部である請求の範囲１〜８のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１０】
一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩と脂質とが複合体（コンプレックス）を形成する請求の範囲９記載の医薬組成物。
【請求項１１】
複合体がリポソームである請求の範囲１０記載の医薬組成物。
【請求項１２】
一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩が１重量部に対してリポソームを構成する脂質が約７〜約１４重量部である請求の範囲１１記載の医薬組成物。
【請求項１３】
虚血性疾患、免疫疾患、アルツハイマー病、骨粗鬆症、脳組織障害による疾患、白内障、緑内障、網脈絡膜疾患、光凝固による眼球後眼部合併症、血管新生を伴う疾患などの予防および治療用である請求の範囲１〜１２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１４】
経口用である請求の範囲１〜１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１５】
点眼用である請求の範囲１〜１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１６】
注射用である請求の範囲１〜１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１７】
一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩を脂質と共存させることを特徴とする、一般式（Ｉ）で表される化合物の安定性改善方法。
【請求項１８】
一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩を脂質と共存させることを特徴とする、一般式（Ｉ）で表される化合物の吸収促進方法。
【請求項１９】
一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩を脂質と共存させることを特徴とする、一般式（Ｉ）で表される化合物の組織移行性改善方法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、ジペプチジルアルデヒド誘導体と脂質を含有する医薬組成物に関する。また、本発明はジペプチジルアルデヒド誘導体の安定性改善方法、並びに吸収促進および組織移行性改善方法に関する。
背景技術
一般式（Ｉ）
2002034252.tif 000002
［式中、Ｒ１は炭素数１〜４のアルキル基を示すか、または置換基を有してもよい炭素数６〜１０のアリール基を示し、Ｒ２とＲ３は同一または異なって、それぞれ水素または炭素数１〜４のアルキル基を示すか、あるいはＲ２とＲ３が連結して炭素数３〜７の環を形成してもよく、Ｒ４はアリール基、シクロアルキル基または芳香族複素環残基で置換されていてもよい低級アルキル基を示す。］で表される化合物［以下、ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）ということもある。］またはその医薬上許容される塩は特開平１０−１４７５６４号（ＵＳＰ６，２１４，８００）公報に開示されている。この化合物は、カルパインなどのシステインプロテアーゼに対する阻害活性を有し、システインプロテアーゼが関与する疾患、例えば虚血性疾患、免疫疾患、アルツハイマー病、骨粗鬆症、脳組織障害による疾患（例えば脳血管攣宿、脳血栓症、脳梗寒、脳閉寒症、脳内出血、クモ膜下出血、高血圧性脳症、一過性脳虚血発作、多発性梗塞性痴呆、脳動脈硬化症、ハンチントン病など）、白内障、緑内障（例えば開放隅角緑内障、低眼圧緑内障、閉塞隅角緑内障など）、網脈絡膜疾患（例えば網膜血管閉塞症、網膜静脈周囲炎、Ｅａｌｅｓ病、虚血性眼症候群および網膜細動脈瘤などの網膜血管異常、高血圧または腎疾患による網膜症、糖尿病性網膜症、網膜色素上皮症、網膜ジストロフィー、黄斑ジストロフィー、網脈絡膜萎縮、網脈絡膜症、黄斑変性症、黄斑浮腫、網膜色素上皮剥離、網膜剥離、変性網膜分離症、網膜芽細胞種、網膜色素上皮腫瘍、視神経乳頭毛細血管腫など）、光凝固による眼球後眼部合併症（例えば黄斑部浮腫、網膜剥離、視神経炎、視野異常、光覚異常、色覚異常など）などの予防および治療用の医薬用製剤として、または血管新生、網膜剥離などの予防・治療剤として有用であることが知られている［特開平１０−１４７５６６（ＵＳＰ　６，２１４，８００）、ＷＯ９９／４８５２２、ＷＯ９９／４４６２６］。
しかし、ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）は水に難溶性であり、可溶化剤を用いて溶解すると不安定であった。また、経口投与または局所投与した場合において投与後の吸収や組織移行性も満足するものではなかった。このため、充分に薬効を発揮させるためには、投与量を多くする必要があった。
脂質を含有する医薬製剤としてリポソームがある。リポソームは、生体適合性に優れ、表面物性やサイズなどの制御が容易であり、物性の異なる種々の化合物を封入しうるなどの点から、薬物のターゲティングに利用することができる［Ｄ．Ｄ．Ｌａｓｉｃ，”Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ：ｆｒｏｍ　ｂａｓｉｃ　ｔｏ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，ｐｐ．２６１−４７１（１９９３）］。しかしながら、実際上リポソームへの薬物の封入効率が低く実用的でないなどの問題点があり、これまで臨床的にはドキソルビシンのリポソーム化製剤などのごく一部の成功例しかない［Ｄ．Ｄ．Ｌａｓｉｃ，Ｎａｔｕｒｅ　３８０，５６１−５６２（１９９６）］。
発明の開示
ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）の経口投与による吸収良好な医薬組成物、並びに局所投与による組織移行性を高める医薬組成物を創製することである。さらに、水中でも長期にわたり安定で注射あるいは点眼投与可能なジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）の医薬組成物を創製することである。
すなわち、本発明は、
（１）一般式（Ｉ）
2002034252.tif 000003
［式中、Ｒ１は炭素数１〜４のアルキル基を示すか、または置換基を有してもよい炭素数６〜１０のアリール基を示し、Ｒ２とＲ３は同一または異なって、それぞれ水素または炭素数１〜４のアルキル基を示すか、あるいはＲ２とＲ３が連結して炭素数３〜７の環を形成してもよく、Ｒ４はアリール基、シクロアルキル基または芳香族複素環残基で置換されていてもよい低級アルキル基を示す。］で表される化合物またはその医薬上許容される塩と脂質とを含有する医薬組成物、
（２）一般式（Ｉ）におけるＲ１がフッ素、塩素もしくはメチルで置換されていてもよいフェニルまたはナフチルである上記（１）記載の医薬組成物、
（３）一般式（Ｉ）におけるＲ１がメチル、４−フルオロフェニル、４−クロロフェニル、ｐ−トリルおよび２−ナフチルから選択される基である上記（１）記載の医薬組成物、
（４）一般式（Ｉ）におけるＲ２がプロピル、イソプロピルまたはｔｅｒｔ−ブチルであって、Ｒ３が水素である上記（１）記載の医薬組成物、
（５）一般式（Ｉ）におけるＲ２がイソプロピルであって、Ｒ３が水素である上記（１）記載の医薬組成物、
（６）一般式（Ｉ）におけるＲ２とＲ３とが連結してシクロペンチリデンまたはシクロヘキシリデンを形成する上記（１）記載の医薬組成物、
（７）一般式（Ｉ）におけるＲ４がイソブチル、ベンジル、シクロヘキシルメチルおよびインドール−３−イルメチルから選択される基である上記（１）記載の医薬組成物、
（８）一般式（Ｉ）で表される化合物が、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナールまたはその医薬上許容される塩である上記（１）記載の医薬組成物、
（９）一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩が１重量部に対して医薬組成物を構成する脂質の下限量が約５重量部であり上限量が約１４重量部である上記（１）〜（８）のいずれかに記載の医薬組成物、
（１０）一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩と脂質とが複合体（コンプレックス）を形成する上記（９）記載の医薬組成物、
（１１）複合体がリポソームである上記（１０）記載の医薬組成物、
（１２）一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩が１重量部に対してリポソームを構成する脂質が約７〜約１４重量部である上記（１１）記載の医薬組成物、
（１３）虚血性疾患、免疫疾患、アルツハイマー病、骨粗鬆症、脳組織障害による疾患、白内障、緑内障、網脈絡膜疾患、光凝固による眼球後眼部合併症、血管新生を伴う疾患などの予防および治療用である上記（１）〜（１２）のいずれかに記載の医薬組成物、
（１４）経口用である上記（１）〜（１３）のいずれかに記載の医薬組成物、
（１５）点眼用である上記（１）〜（１３）のいずれかに記載の医薬組成物、
（１６）注射用である上記（１）〜（１３）のいずれかに記載の医薬組成物、
（１７）一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩を脂質と共存させることを特徴とする、一般式（Ｉ）で表される化合物の安定性改善方法、
（１８）一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩を脂質と共存させることを特徴とする、一般式（Ｉ）で表される化合物の吸収促進方法、および
（１９）一般式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩を脂質と共存させることを特徴とする、一般式（Ｉ）で表される化合物の組織移行性改善方法、に関する。
上記一般式（Ｉ）中、Ｒ１で表される炭素数１〜４のアルキル基としては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどが挙げられる。好ましくはメチルである。Ｒ１で表される炭素数６〜１０のアリール基としては、例えばフェニル、ナフチル、インデニル、アズレニルなどが挙げられる。好ましくはフェニル、ナフチルである。アリール基が有してもよい置換基としてはハロゲン原子（フッ素、塩素など）、炭素数１〜５のアルキル、トリフルオロメチル、炭素数１〜５のアルコキシ、ヒドロキシ、炭素数２〜５のアシルオキシ、カルボキシルおよび炭素数２〜５のアシル基が挙げられる。好ましくはハロゲン原子および炭素数１〜５のアルキル基である。より好ましくはフッ素、塩素、メチルである。Ｒ１で表される置換基を有してもよい炭素数６〜１０のアリール基の好適な具体例としては、４−フルオロフェニル、４−クロロフェニル、ｐ−トリル、２−ナフチルである。
Ｒ２またはＲ３で表される炭素数１〜４のアルキル基としては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどが挙げられる。好ましくはプロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルである。より好ましくはイソプロピルである。Ｒ２とＲ３は、好ましくはＲ２またはＲ３の一方が水素であって、他方がプロピル、イソプロピル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルであり、より好ましくはＲ２がプロピル、イソプロピル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルであって、Ｒ３が水素であり、さらに好ましくはＲ２がイソプロピルであって、Ｒ３が水素である。
Ｒ２とＲ３が連結して形成してもよい炭素数３〜７の環としては、例えばシクロプロピリデン、シクロブチリデン、シクロペンチリデン、シクロヘキシリデン、シクロヘプチリデンなどが挙げられる。とりわけシクロペンチリデンおよびシクロヘキシリデンが好ましい。
Ｒ４で表される低級アルキル基としては、直鎖状または分枝状の炭素数１〜６のもの、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ヘキシル、４−メチルペンチル、１，１−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、２−エチルブチルなどが挙げられる。好ましくはメチルおよびイソブチルである。Ｒ４で表される、該低級アルキル基が置換されていてもよいアリール基としては、例えばフェニル、１−ナフチル、２−ナフチルなどが挙げられる。とりわけフェニルが好ましい。Ｒ４で表される、該低級アルキル基が置換されていてもよいシクロアルキル基としては、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどが挙げられる。とりわけシクロヘキシルが好ましい。Ｒ４で表される、該低級アルキル基が置換されていてもよい芳香族複素環残基としては、酸素、窒素およびイオウ原子で置換された単環式複素環残基および縮合型複素環残基が挙げられる。単環式複素環残基としては、例えばピロリル、フラニル、チオフェニル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジルなどが挙げられ、縮合型複素環残基としては、例えばインドリル、キノリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、インダゾリル、キナゾリニル、フタラジニル、キノキサリニルなどが挙げられる。とりわけインドリルが好ましい。Ｒ４で表される、アリール基、シクロアルキル基または芳香族複素環残基で置換されていてもよい低級アルキル基の好適な具体例としては、イソブチル、ベンジル、シクロヘキシルメチル、インドール−３−イルメチルである。
本発明における式（Ｉ）で表される化合物の塩としては生理学的に許容される塩が好ましく、例えば無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩などが挙げられる。無機塩基との塩の好適な例としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩、アンモニウム塩などが挙げられる。有機塩基との塩の好適な例としては、例えばトリメチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミンなどとの塩が挙げられる。無機酸との塩の好適な例としては、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などとの塩が挙げられる。有機酸との塩の好適な例としては、例えばギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマール酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などとの塩が挙げられる。塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えばアルギニン、リジン、オルニチンなどとの塩が挙げられ、酸性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えばアスパラギン酸、グルタミン酸などとの塩が挙げられる。
ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）の具体例としては、例えば、特開平１０−１４７５６４号公報（ＵＳＰ　６，２１４，８００）で製造される、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール、Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール、Ｎ−（４−メチルフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナール、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−ロイシナール、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｄ−バリル−Ｌ−ロイシナール、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−ノルロイシル−Ｌ−ロイシナール、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−ノルバリル−Ｌ−ロイシナール、１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロペンタンカルボニル−Ｌ−ロイシナール、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニナール、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール、Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール、Ｎ−（４−メチルフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニナール、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロヘキサンカルボニル−Ｌ−フェニルアラニナール、１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロペンタンカルボニル−Ｌ−フェニルアラニナール、Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−トリプトファナール、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−トリプトファナール、１−（２−ナフタレンスルホニルアミノ）シクロヘキサンカルボニル−Ｌ−トリプトファナール、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシル−Ｌ−トリプトファナール、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニナール、Ｎ−（２−ナフタレンスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニナール、Ｎ−（４−クロロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−シクロヘキシルアラニナール、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｄ−バリル−Ｌ−ロイシナール、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｄ−ロイシナール、Ｎ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニナールおよびＮ−メチルスルホニル−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナールなどが挙げられる。
本発明において使用できる脂質としては、グリセロリン脂質（ホスファチジルコリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、Ｎ−モノメトキシポリエチレングリコールサクシニルホスファチジルエタノールアミンなど）、グリセロ糖脂質（ジガラクトシルジグリセリド、ガラクトシルジグリセリドなど）、スフィンゴリン脂質（スフィンゴミエリンなど）、スフィンゴ糖脂質（セレブロシド、ガングリオシドなど）、ステロール類（コレステロール、コレステロールヘミサクシネート、３β−［Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノエタン）−カルバモイル］−コレステロール、エルゴステロール、ラノステロールなど）、炭素数１０〜２０のアルキル、アルケニル、アルカノイルまたはアルケノイル鎖を有する合成有機化合物（ステアリン酸、ステアリルアミン、ステアリン酸ヒドラジド、ステアリン酸エステル、Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロライド、Ｎ−α−トリメチルアンモニオアセチルドデシル−Ｄ−グルタメートクロライド、Ｏ−パルミトイルプルランなど）などの群から選ばれる化合物が挙げられる。
上記脂質（ホスファチジルコリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、ジガラクトシルジグリセリド、ガラクトシルジグリセリド、スフィンゴミエリン、セレブロシド、ガングリオシド、Ｎ−モノメトキシポリエチレングリコールサクシニルホスファチジルエタノールアミンなど）は各々二本ずつ飽和または不飽和の脂肪酸エステル鎖を有するが、その脂肪酸（アルカノイルまたはアルケノイル基）部分の炭素数が１０〜１８の脂質を本発明の構成成分として使用することができる。「炭素数１０〜１８のアルカノイルまたはアルケノイル」基としては、デシリル、ウンデシリル、ラウロイル、トリデシリル、ミリストイル、ペンタデシリル、パルミトイル、ヘプタデシリル、ステアロイル、オレオイル基などを挙げることができるが、これらのうち好適なものはラウロイル、ミリストイル、パルミトイルおよびステアロイル基である。
上記脂質は、通常試薬などとして販売されているものを入手して利用することができる。
また、卵黄レシチンおよび大豆レシチンなどのように、通常種々の炭素数および／または不飽和度の脂肪酸エステル鎖を有する脂質が混合した状態で入手できるものは、これらを単一成分に分離精製することなくそのまま使用することができる。
さらに、上記脂質および卵黄レシチン並びに大豆レシチンなどは単独で使用してもよく、また、２種以上を適宜組み合わせて使用してもよい。
また、本発明には、水溶性高分子鎖を有する脂質を使用することもできる。かかる水溶性高分子鎖としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリアクリルアミド、プルランのような多糖類などを挙げることができる。水溶性高分子鎖を有する脂質としては、例えばＮ−モノメトキシポリエチレングリコールサクシニルホスファチジルエタノールアミン、Ｏ−（Ｃ１０−１８アルカノイルまたはアルケノイル）プルラン、Ｎ−（Ｃ１０−１８アルカノイルまたはアルケノイル）ポリアクリルアミドなどを挙げることができる。好適にはＰＥＧ部分の平均分子量が１０００〜５０００のＮ−モノメトキシポリエチレングリコールサクシニルジ（Ｃ１０−１８アルカノイルまたはアルケノイル）ホスファチジルエタノールアミンまたはＯ−パルミトイルプルランであり、最も好適にはＰＥＧ部分の平均分子量が２０００のＮ−モノメトキシポリエチレングリコールサクシニルジステアロイルホスファチジルエタノールアミンである。
これら水溶性高分子を有する脂質を使用することにより、血中滞留性や目的組織への集積特性が優れた医薬組成物を製造することができる。
また、必要に応じて抗酸化作用などを目的として、α−トコフェロールなどの添加物を脂質構成成分として使用することができる。
本発明の医薬組成物は、ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩と脂質が混合物または複合体（コンプレックス）を形成している状態をいう。
上記「混合物」とは、均一または不均一を問わずジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩と脂質とが混じり合っている状態を意味し、水に分散させると、容易にジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩と脂質とが分離するものをいう。
混合物は、ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩と脂質をそれぞれ微細粒子としたものを、例えば乳鉢ですり合わせたり、攪拌機で機械的に混合したり、あるいはビニール袋などに入れて十分に振り混ぜて混合すればよい。
また、上記「複合体（コンプレックス）」とは、二分子膜状に集合した脂質とジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩とが分子間に働く凝集力（例えばファン・デル・ワールスカ、水素結合または静電気的相互結合など）などの相互作用によって凝集（分子やイオン、原子などが集合する現象をいう。）している状態を意味し、脂質の二分子膜の表面にジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩が単に結合している形態、ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩が部分的に脂質二分子膜に入り込んでいる形態およびジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩が脂質二分子膜内に完全に組み込まれている形態のいずれをも含む。この複合体は「リポソーム」を包含する概念である。「リポソーム」は、二分子膜状に集合した脂質および内部の水相から構成される閉鎖小胞を意味し、ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩はリポソームを構成する膜状に集合した脂質と通常は上記複合体の状態をとるが、リポソーム内部の水相に封入してもよい。リポソーム内部を構成する水相には、通常、塩化ナトリウム水溶液、緩衝液（リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウムなど）、単糖類もしくは二糖類の水溶液（グルコース水溶液、トレハロース水溶液など）を使用することができる。
複合体は、ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩と脂質を適当な溶媒に溶かし均一な溶液とし、溶媒を除去することによって調製することができる。例えばジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）とレシチンをエーテル、クロロホルム、メタノールまたはエタノールなどの有機溶媒に溶かし、均一な溶液とした後に溶媒を除去し、十分に乾燥することにより製造できる。
リポソームは、通常のリポソームの製法により得ることができ、例えばリン脂質または糖脂質などとジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）を均一化した後にリポソームを調製することによってジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）をリポソームに封入させてもよいし、あらかじめリン脂質または糖脂質などでリポソームを調製した後にジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）を封入させてもよい。リポソームの調製方法として具体的には、薄膜法、界面活性剤除去法、超音波法、エーテル注入法、高圧噴射乳化法、押し出し法などの公知の方法が挙げられる。具体的には、例えば薄膜法では、リン脂質をエーテルやクロロホルムなどの有機溶媒に溶かし、ナス型フラスコ等のガラス容器に入れる。エバポレーターや窒素気流下で有機溶媒を除き、ガラス表面に脂質薄膜を作成する。ここに水溶液を加えて機械的振動を加えるとリポソーム懸濁液が得られる。あらかじめ調製したリポソームにジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）を封入させるには固体のジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）とリポソーム懸濁液を混合し、凍結融解あるいは超音波処理を施せばよい。
本発明の医薬組成物において脂質の添加量は、ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩１重量部に対し、下限が約５重量部、好ましくは約６重量部、さらに好ましくは約７重量部であり、上限が約１４重量部、好ましくは約１３重量部、さらに好ましくは約１２重量部である。脂質の添加量が約５重量部より少ないとジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩の吸収性または組織移行性はある一定以上は向上せず、また、約１４重量部以上となると充分に薬効を発揮させるためには投与量を多くしなければならない。また、リポソームを調製する場合においては、脂質の添加量が約７重量部以上であるとジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩がリポソームに良好に封入される。また、脂質の添加量が約７重量部より少ないとジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩の一部しかリポソームに封入されなくなる。そのため、リポソームにおいて脂質の添加量は、ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩１重量部に対し、好ましくは約７〜約１４重量部、さらに好ましくは約１０〜約１２重量部の範囲となるよう調整するのがよい。
本発明の医薬組成物は、温血動物（例えばヒト、ラット、マウス、ウサギ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコなど）に全身的または局所的に投与される。
本発明の医薬組成物を、経口、点眼または注射用液剤として製造する場合、混合物または複合体、好ましくは複合体を、医薬上許容される添加物、例えば等張化剤（塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン、マンニトール、ソルビトール、ホウ酸、ブドウ糖、プロピレングリコールなど）、緩衝剤（リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、炭酸緩衝液、クエン酸緩衝液、トリス緩衝液、グルタミン酸、イプシロンアミノカプロン酸など）、保存剤（パラオキシ安息香酸エステル類、塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、ベンジルアルコール、デヒドロ酢酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、ホウ酸など）、増粘剤（ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコールなど）、安定化剤（亜硫酸水素ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、アスコルビン酸、ジブチルヒドロキシトルエンなど）、ｐＨ調整剤（塩酸、水酸化ナトリウム、リン酸、酢酸など）などを適宜添加した溶液に分散することによって調製することができる。
本発明の医薬組成物を、特に経口、点眼または注射用リポソーム製剤とする場合、調製したリポソーム懸濁液に、医薬上許容される添加物、例えば等張化剤（塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン、マンニトール、ソルビトール、ホウ酸、ブドウ糖、プロピレングリコールなど）、緩衝剤（リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、炭酸緩衝液、クエン酸緩衝液、トリス緩衝液、グルタミン酸、イプシロンアミノカプロン酸など）、保存剤（パラオキシ安息香酸エステル類、塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、ベンジルアルコール、デヒドロ酢酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、ホウ酸など）、増粘剤（ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコールなど）、安定化剤（亜硫酸水素ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、アスコルビン酸、ジブチルヒドロキシトルエンなど）、ｐＨ調整剤（塩酸、水酸化ナトリウム、リン酸、酢酸など）などを適宜添加することにより、経口、点眼、または注射用リポソーム製剤が製造できる。
本発明の医薬組成物を、経口、点眼または注射用液剤、あるいは経口、点眼または注射用リポソーム製剤にする場合の添加剤の添加量は、使用する添加剤の種類、用途などによって異なるが、添加剤の目的を達成し得る濃度を添加すればよく、等張化剤は、通常、浸透圧が約２２９〜約３４３ｍＯｓｍとなるよう、約０．５〜約５．０ｗ／ｖ％に添加する。また、緩衝剤は約０．０１〜約２．０ｗ／ｖ％程度、増粘剤は約０．０１〜約１．０ｗ／ｖ％程度、安定化剤は約０．００１〜約１．０ｗ／ｖ％程度添加する。ｐＨ調整剤は、適宜添加し、通常約３〜約９、好ましくは約４〜約８に調整される。
本発明の医薬組成物は、固形剤、例えば粉末、顆粒剤、錠剤およびカプセル剤などとすることができる。顆粒剤および錠剤とする場合は、混合物または複合体に適当な添加剤（乳糖、白糖、ブドウ糖、デンプン、結晶セルロースなど）、糖アルコール（マンニット、ソルビットなど）、結合剤（デンプン糊液、ヒドロキシプロピルセルロース液、カルメロース液、アラビアゴム液、ゼラチン液、アルギン酸ナトリウム液など）、崩壊剤（デンプン、カルメロースナトリウム、炭酸カルシウムなど）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウムなど）などを適宜混合し、例えば第１４改正日本薬局方の製剤総則に従って顆粒剤および錠剤とすることができる。これら顆粒剤および錠剤には必要に応じて着色剤、芳香剤、矯味剤などを加えることができる。また、これら顆粒剤および錠剤には、適当なコーティング剤（ゼラチン、白糖、アラビアゴム、カルナバロウなど）、腸溶性コーティング剤（例えば酢酸フタル酸セルロース、メタアクリル酸コポリマー、ヒドロキシプロピルセルロースフタレート、カルボキシメチルエチルセルロースなど）などで剤皮を施すこともできる。
カプセル剤とする場合は、混合物または複合体をそのまま、あるいは混合物または複合体に適当な賦形剤、例えば流動性と滑沢性を向上させるためのステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、軽質無水ケイ酸など、また加圧流動性のための結晶セルロースや乳糖などの他、上記崩壊剤などを適宜添加したものを均等に混合または粒状もしくは粒状としたものに適当なコーティング剤で剤皮を施したものを充填するか、混合物または複合体に適当な賦形剤などを加えたものを、適当なカプセル基剤（ゼラチンなど）にグリセリンまたはソルビトールなど加えて塑性を増したカプセル基剤で被包成形することもできる。これらカプセル剤には必要に応じて、着色剤、保存剤［二酸化イオウ、パラベン類（パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピルなど）］などを加えることができる。カプセル剤は通常のカプセルの他、腸溶性コーティングカプセル、胃内抵抗性カプセル、放出制御カプセルとすることもできる。腸溶性カプセルとする場合、例えば前記した腸溶性コーティング剤でコーティングした混合物を通常のカプセルに充填または、カプセル自身を腸溶性コーティング剤でコーティング、あるいは腸溶性高分子を基剤として成形することができる。
なお、複合体としてリポソームを用いて固形剤を製造する場合は、リポソームの懸濁液を濃縮または凍結乾燥したものをそのまま、または上記した適当な添加剤などを適宜混合することにより好適に固形剤を製造できる。リポソームを凍結乾燥する場合は、単糖、オリゴ糖、ソルビトールなどの糖アルコールやトレハロースなどの凍結保護物質を添加するのが好ましい。
発明を実施するための最良の形態
本発明を以下の実施例および試験例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれらにより何ら限定されるものではない。なお、以下の実施例、試験例および製剤例において、化合物１はＮ−（４−フルオロフェニルスルホニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−ロイシナールを意味する。
実施例１．化合物１含有複合体
化合物１（０．５ｇ）および卵黄レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有；３．５ｇ）を２００ｍＬナスフラスコに入れ、５０ｍＬのクロロホルムに溶かした。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）を用いてクロロホルムを除去した。棚式真空乾燥機で十分に乾燥し、化合物１と卵黄レシチンの複合体を得た。
実施例２．化合物１含有複合体
化合物１（１．０ｇ）、および卵黄レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有；１０．０ｇ）を３００ｍＬナスフラスコに入れ、１００ｍＬのクロロホルムに溶かした。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）を用いてクロロホルムを除去した。棚式真空乾燥機で十分に乾燥し、化合物１と卵黄レシチンの複合体を得た。
実施例３．化合物１含有複合体
化合物１（０．５ｇ）および卵黄レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有；２．５ｇ）を２００ｍＬナスフラスコに入れ、５０ｍＬのクロロホルムに溶かした。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）を用いてクロロホルムを除去した。棚式真空乾燥機で十分に乾燥し、化合物１と卵黄レシチンの複合体を得た。
実施例４．化合物１含有複合体
化合物１（０．５ｇ）およびホスファチジルコリンジパルミトイル（３．５ｇ）を２００ｍＬナスフラスコに入れ、５０ｍＬのクロロホルムに溶かした。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）を用いてクロロホルムを除去した。棚式真空乾燥機で十分に乾燥し、化合物１とホスファチジルコリンジパルミトイルの複合体を得た。なお、本実施例で得られたものについて熱分析を行い、複合体を形成していることを確認した。
実施例５．化合物１含有リポソーム
化合物１（０．５ｇ）、卵黄レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有；３．５ｇ）およびコレステロール（１．５ｇ）を２００ｍＬナスフラスコに入れ、５０ｍＬのクロロホルムに溶かした。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）を用いてクロロホルムを除去し、フラスコ壁面に脂質薄膜を作成した。このフラスコに滅菌精製水１００ｍＬ中に、リン酸二水素ナトリウム二水和物０．１ｇおよび塩化ナトリウム０．９ｇが溶解しｐＨが７．０である溶液を１００ｍＬ加えて、ボルテックスミキサーでよく振とうし、この液を超音波発生装置（ＭＯＤＥＬ　ＵＲ−２００Ｐ，ＴＯＭＹ　ＳＥＩＫＯ）を用いて１５分間超音波処理し、化合物１含有リポソームの懸濁液を調製した。本実施例で得られた懸濁液には化合物１が０．５ｗ／ｖ％の割合で含有することを確認した。
実施例６．化合物１含有リポソーム
化合物１（１．０ｇ）、卵黄レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有；７．０ｇ）およびコレステロール（３．０ｇ）を３００ｍＬナスフラスコに入れ、１００ｍＬのクロロホルムに溶かした。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）を用いてクロロホルムを除去し、フラスコ壁面に脂質薄膜を作成した。このフラスコに滅菌精製水を加えて、液の全量を２００ｍＬとした。ボルテックスミキサーでよく振とうし、この液を超音波発生装置（ＭＯＤＥＬ　ＵＲ−２００Ｐ，ＴＯＭＹ　ＳＥＩＫＯ）を用いて１５分間超音波処理し、化合物１含有リポソームの懸濁液を調製した。本実施例で得られた懸濁液には化合物１が０．５ｗ／ｖ％の割合で含有することを確認した。
実施例７．化合物１含有リポソーム
化合物１（０．５ｇ）および卵黄レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有；３．５ｇ）を２００ｍＬナスフラスコに入れ、５０ｍＬのクロロホルムに溶かした。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）を用いてクロロホルムを除去し、フラスコ壁面に脂質薄膜を作成した。このフラスコに０．１ｗ／ｖ％トレハロース水溶液１００ｍＬ加えて、ボルテックスミキサーでよく振とうし、この液を超音波発生装置（ＭＯＤＥＬ　ＵＲ−２００Ｐ，ＴＯＭＹ　ＳＥＩＫＯ）を用いて１０分間超音波処理した。得られたリポソームの懸濁液を真空凍結乾燥器（ＬＹＰＨ　ＬＯＣＫ６，ＬＡＢＣＯＮＣＯ）を用いて凍結乾燥し、化合物１含有リポソームの凍結乾燥品とした。
実施例８．化合物１含有混合物
化合物１（０．５ｇ）および卵黄レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有；３．５ｇ）を乳鉢に入れ、すり合わし、化合物１と卵黄レシチンの混合物を得た。
実施例９．化合物１含有混合物
化合物１（０．５ｇ）およびホスファチジルコリンジパルミトイル（３．５ｇ）を乳鉢に入れ、すり合わし、化合物１とホスファチジルコリンジパルミトイルの混合物を得た。
試験例１．安定性試験
（試験物質）
本発明組成物：実施例５で調製した化合物１含有リポソームの懸濁液を使用した。
対照液剤：基剤（０．９ｗ／ｖ％塩化ナトリウム、０．１ｗ／ｖ％リン酸二水素ナトリウム、０．１ｗ／ｖ％ポリソルベート８０、０．００５ｗ／ｖ％塩化ベンザルコニウム；ｐＨ７．０）に化合物１を添加し、超音波洗浄装置（ＳＵＳ−１０３，Ｓｈｉｍａｄｚｕ）を用いて２８ｋＨｚで５分間超音波処理して微細粒子とした０．５ｗ／ｖ％化合物１含有懸濁液剤を使用した。
（試験方法）
本発明組成物および対照液剤各５ｍＬをそれぞれ無色ガラスアンプルに充填し、６０℃に設定した卓上恒温器（ＣＨ−Ｍ，ナガノ科学機械製作所）に保存した。２週および４週保存後にサンプリングを行い、化合物１の残存量を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて測定した。
（試験結果）
その結果を表１に示した。
2002034252.tif 000004
６０℃、４週保存において本発明組成物および対照液剤中での化合物１の残存率はそれぞれ７６．７％および６４．１％であり、化合物１の安定性は、対照液剤より本発明組成物中のほうがよかった。本試験結果から、化合物１はリポソームに封入することにより安定性が向上することが分かった。
試験例２．眼内移行性試験
（試験物質）
本発明組成物（リポソーム点眼液）：実施例５で調製した化合物１含有リポソームの懸濁液を使用した。
対照点眼液：基剤（０．９ｗ／ｖ％塩化ナトリウム、０．１ｗ／ｖ％リン酸二水素ナトリウム、０．１ｗ／ｖ％ポリソルベート８０、０．００５ｗ／ｖ％塩化ベンザルコニウム；ｐＨ７．０）に化合物１を添加し、超音波洗浄装置（ＳＵＳ−１０３，Ｓｈｉｍａｄｚｕ）を用いて２８ｋＨｚで５分間超音波処理して微細粒子とした０．５ｗ／ｖ％化合物１含有懸濁液剤を使用した。
（試験方法）
リポソーム点眼液および対照点眼液をそれぞれウサギ（雄性、体重約２ｋｇ）の片眼に５０μＬずつ点眼した。点眼０．５、１および３時間後に房水を採取した。カラムスイッチングシステムによるＨＰＬＣ（ＮＡＮＯＳＰＡＣＥ　ＳＩ−１，ＳＨＩＳＥＩＤＯ）を用いて房水中の化合物１の濃度を測定した。
（試験結果）
その結果を表２に示した。
2002034252.tif 000005
リポソーム点眼液および対照点眼液において、房水中の化合物１の濃度は、共に点眼０．５時間後に最大（Ｃｍａｘ）を示した。Ｃｍａｘにおけるリポソーム点眼液の化合物１の房水移行量は、対照点眼液における房水移行量の約３．６倍であった。本試験結果から、化合物１はリポソームにすることにより房水移行性が向上することが分かった。
表３にリポソーム点眼液および対照点眼液における０〜３時間の房水中の化合物１の房水濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）を示した。
2002034252.tif 000006
リポソーム点眼液のＡＵＣは懸濁液剤に比べて約２．９倍高かった。
以上の結果から、本発明組成物は、眼内移行性に優れた製剤であることが分かった。
試験例３．眼内移行性試験
（試験物質）
本発明組成物：
▲１▼　複合体点眼液：実施例１で調製した化合物１含有複合体（１２．０ｇ）を滅菌精製水にリン酸二水素ナトリウム（０．３ｇ）および塩化ナトリウム（２．７ｇ）が溶解したｐＨ７．０の溶液（２７０ｍＬ）に加え、ホモミキサー（ＲＯＢＯＭＩＸ，特殊機化工業）を用いて１５００ｒｐｍで３０分間攪拌した。滅菌精製水で３００ｍＬにメスアップし、調製した。
▲２▼　リポソーム点眼液：実施例５で調製した化合物１含有リポソームの懸濁液を使用した。
▲３▼　混合物点眼液：滅菌精製水（２７０ｍＬ）にリン酸二水素ナトリウム（０．３ｇ）および塩化ナトリウム（２．７ｇ）を加えて溶かした。化合物１（１．５ｇ）および卵黄レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有；１０．５ｇ）を加え、ホモミキサー（ＲＯＢＯＭＩＸ，特殊機化工業）を用いて１５００ｒｐｍで３０分間攪拌した。水酸化ナトリウムを加えｐＨ７．０に調整し、滅菌精製水で３００ｍＬにメスアップし、調製した。
対照点眼液：滅菌精製水（８０ｍＬ）にポリソルベート８０（０．１ｇ）、リン酸二水素ナトリウム（０．１ｇ）、塩化ベンザルコニウム（０．００５ｇ）および塩化ナトリウム（０．９ｇ）を加えて溶かした。化合物１（０．５ｇ）を加え、超音波洗浄装置（ＳＵＳ−１０３，Ｓｈｉｍａｄｚｕ）により２８ｋＨｚで５分間超音波処理した。水酸化ナトリウムを加えｐＨを７．０に調整し、滅菌精製水で１００ｍＬにメスアップした０．５ｗ／ｖ％化合物１含有懸濁液剤を使用した。
（試験方法）
複合体点眼液、リポソーム点眼液、混合物点眼液および対照点眼液をそれぞれウサギ（雄性、体重約２ｋｇ）の片眼に５０μＬずつ点眼した。点眼０．５、１および３時間後にペントバルビタールで屠殺し、房水を採取した。カラムスイッチングシステムによるＨＰＬＣ（ＮＡＮＯＳＰＡＣＥ　ＳＩ−１，ＳＨＩＳＥＩＤＯ）を用いて房水中の化合物１の濃度を測定した。
（試験結果）
図１に複合体点眼液、リポソーム点眼液、混合物点眼液および対照点眼液を投与した後の化合物１の房水中濃度の測定結果を示した。全てのサンプルにおいて点眼０．５時間後に最大房水中濃度を示した。複合体点眼液、リポソーム点眼液および混合物点眼液は、対照点眼液よりもそれぞれ約３．２倍、約３．１倍および約２．０倍高かった。本試験結果から、本発明組成物は、組織移行性に優れた製剤であることが分かった。
試験例４．血中移行性試験
（試験物質）
本発明組成物（リポソーム液剤）：実施例６で調製した化合物１含有リポソームの懸濁液を使用した。
対照液剤：滅菌精製水１００ｍＬにカルボキシメチルセルロースを０．１ｇ溶かした溶液に化合物１を１．０ｇ加えて均一に分散させた１．０ｗ／ｖ％化合物１含有懸濁液剤を使用した。
（試験方法）
リポソーム液剤および対照液剤をそれぞれ体重約１０ｋｇのビーグル犬に化合物１が１００ｍｇ／ｋｇとなる量をカテーテルを用いて経口投与した。投与後０．５、１、２、４および８時間後に採血した。採取した血液から血漿を取り出し、カラムスイッチングシステムによるＨＰＬＣ（ＮＡＮＯＳＰＡＣＥ　ＳＩ−１，ＳＨＩＳＥＩＤＯ）を用いて血漿中の化合物１の濃度を測定して、化合物１の血中濃度とした。
（試験結果）
図２にリポソーム液剤および対照液剤を投与した後の化合物１の血中濃度の測定結果を示した。リポソーム液剤は、いずれの測定時間でも対照液剤よりも血中濃度が高かった。また、リポソーム液剤および対照液剤ともに投与後２時間において最大血中濃度を示したが、最大血中濃度においてリポソーム液剤のほうが対照液剤よりも約３．８倍高かった。本試験結果から、本発明組成物は、吸収性に優れた製剤であることが分かった。
試験例５．血中移行性試験
（試験物質）
本発明組成物：
▲１▼　複合体カプセル：実施例１で調製した化合物１含有複合体をカプセルに充填した。
▲２▼　リポソーム液剤：実施例５で調製した化合物１含有リポソームの懸濁液を使用した。
▲３▼　混合物カプセル：化合物１（１．０ｇ）および卵黄レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有；７．０ｇ）を乳鉢に入れ、すり合わしたものをカプセルに充填した。
対照液剤：化合物１（０．５ｇ）を乳鉢に入れ、０．５％カルボキシメチルセルロース水溶液５０ｍＬを加えてすり合わした化合物１含有懸濁液剤を使用した。
（試験方法）
体重約１０ｋｇのビーグル犬に複合体カプセル、リポソーム液剤および混合物カプセルをそれぞれ化合物１が５０ｍｇ／ｋｇ、対照液剤を化合物１が１００ｍｇ／ｋｇとなる量を経口投与した。投与後０．５、１、２、４および８時間後に採血した。採取した血液から血漿を取り出し、カラムスイッチングシステムによるＨＰＬＣ（ＮＡＮＯＳＰＡＣＥ　ＳＩ−１，ＳＨＩＳＥＩＤＯ）を用いて血漿中の化合物１の濃度を測定して、化合物１の血中濃度とした。
（試験結果）
図３に複合体カプセル、リポソーム液剤、混合物カプセルおよび対照液剤を投与した後の化合物１の血中濃度の測定結果を示した。全ての投与サンプルにおいて投与後２時間に最大血中濃度を示した。最大血中濃度は、複合体カプセルおよびリポソーム液剤はほぼ同じ値を示し、複合体カプセルおよびリポソーム液剤の倍量の化合物１を投与した対照液剤よりもそれぞれ約２．４および約２．６倍高かった。また、混合物カプセルでは、対照液剤の半量の化合物１の投与量であるにもかかわらず、対照液剤よりもわずかに血中移行量が低い程度であった。本試験結果から、本発明組成物は、吸収性に優れた製剤であることが分かった。
製剤例１．点眼剤
化合物１　　　　　　　　　　　　　　　　０．２ｇ
ホスファチジルコリン　　　　　　　　　　１．２ｇ
ホスファチジルエタノールアミン　　　　　１．２ｇ
酢酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　　０．１ｇ
塩化ナトリウム　　　　　　　　　　　　　０．９ｇ
パラオキシ安息香酸メチル　　　　　　　　０．００２６ｇ
パラオキシ安息香酸プロピル　　　　　　　０．００１５ｇ
滅菌精製水　　　　　　　　　　　　　　　全量１００ｍＬ
化合物１、ホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミンを１００ｍＬナスフラスコに入れ、ジエチルエーテルに溶かした。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）を用いてジエチルエーテルを除去し、フラスコ壁面に脂質薄膜を作成する。このフラスコに滅菌精製水に酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、パラオキシ安息香酸メチルおよびパラオキシ安息香酸プロピルが溶解した溶液（ｐＨ５．０）１００ｍＬを加えて、ボルテックスミキサーでよく振とうし、この液を超音波発生装置（ＭＯＤＥＬ　ＵＲ−２００Ｐ，ＴＯＭＹ　ＳＥＩＫＯ）を用いて１０分間超音波処理し、化合物１含有リポソーム点眼剤を調製する。
製剤例２．注射剤
化合物１　　　　　　　　　　　　　　　　０．１ｇ
ホスファチジルコリン　　　　　　　　　　０．７ｇ
コレステロール　　　　　　　　　　　　　０．３ｇ
リン酸二水素ナトリウム　　　　　　　　　０．１ｇ
塩化ナトリウム　　　　　　　　　　　　　０．９ｇ
注射用蒸留水　　　　　　　　　　　　　　全量１００ｍＬ
化合物１、ホスファチジルコリンおよびコレステロールを１００ｍＬナスフラスコに入れ、エタノールに溶かす。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）を用いてエタノールを除去し、フラスコ壁面に脂質薄膜を作成する。このフラスコに注射用蒸留水にリン酸二水素ナトリウムおよび塩化ナトリウムが溶解した溶液（ｐＨ７．０）１００ｍＬを加えて、ボルテックスミキサーでよく振とうし、この液を超音波発生装置（ＭＯＤＥＬ　ＵＲ−２００Ｐ，ＴＯＭＹ　ＳＥＩＫＯ）を用いて１０分間超音波処理し、化合物１含有リポソーム注射剤を調製する。
製剤例３．カプセル剤
化合物１　　　　　　　　　　　　　　　　５ｇ
卵黄レシチン　　　　　　　　　　　　　　５０ｇ
乳糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　４５ｇ
化合物１、卵黄レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有）を１００ｍＬナスフラスコに入れ、エタノールに溶かす。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）を用いてエタノールを除去し、フラスコ壁面に脂質薄膜を作成する。このフラスコに乳糖および滅菌精製水１００ｍＬを加えて、ボルテックスミキサーでよく振とうし、この液を超音波発生装置（ＭＯＤＥＬ　ＵＲ−２００Ｐ，ＴＯＭＹ　ＳＥＩＫＯ）を用いて１０分間超音波処理し、化合物１含有リポソームの懸濁液を調製する。得られた懸濁液を凍結乾燥し、２００カプセルに分散充填する。
製剤例４．点眼剤
化合物１　　　　　　　　　　　　　　　　０．０１ｇ
大豆レシチン　　　　　　　　　　　　　　０．１ｇ
リン酸二水素ナトリウム　　　　　　　　　０．１ｇ
塩化ナトリウム　　　　　　　　　　　　　０．９ｇ
塩化ベンザルコニウム　　　　　　　　　　０．００５ｇ
水酸化ナトリウム　　　　　　　　　　　　適量
滅菌精製水　　　　　　　　　　　　　　　全量１００ｍＬ
滅菌精製水（約９０ｍＬ）にリン酸二水素ナトリウム、塩化ベンザルコニウムおよび塩化ナトリウムを加えて溶かす。化合物１および大豆レシチン（ホスファチジルコリン約７０％、ホスファチジルエタノールアミン約３０％含有）を加え、ホモミキサー（ＲＯＢＯＭＩＸ，特殊機化工業）を用いて３０００ｒｐｍで３０分間攪拌する。水酸化ナトリウムを加えｐＨ７．０に調整し、滅菌精製水で１００ｍＬにメスアップし、調製する。
製剤例５．注射剤
化合物１　　　　　　　　　　　　　　　　０．２ｇ
ホスファチジルコリン　　　　　　　　　　０．６ｇ
コレステロール　　　　　　　　　　　　　０．６ｇ
ステアリルアミン　　　　　　　　　　　　０．４ｇ
塩化ナトリウム　　　　　　　　　　　　　０．９ｇ
リン酸二水素ナトリウム　　　　　　　　　０．１ｇ
注射用蒸留水　　　　　　　　　　　　　　全量１００ｍＬ
化合物１、ホスファチジルコリン、コレステロールおよびステアリルアミンをナスフラスコに入れ、クロロホルムを加え溶解する。ロータリーエバポレーター（ＲＥ１−ＮＳ，ＩＷＡＫＩ）でクロロホルムを除去し、脂質薄膜を調製する。そこに塩化ナトリウムおよびリン酸二水素ナトリウムが溶解した溶液（ｐＨ７．４）１００ｍＬを加えて、ボルテックスミキサーでよく攪拌し、調製する。
産業上の利用可能性
本発明の医薬組成物は、ジペプチジルアルデヒド誘導体（Ｉ）またはその医薬上許容される塩を脂質と共存させることにより安定性が向上し、さらに、吸収促進作用および組織移行性の改善が認められることから虚血性疾患、免疫疾患、アルツハイマー病、骨粗鬆症、脳組織障害による疾患（例えば脳血管攣縮、脳血栓症、脳梗塞、脳閉塞症、脳内出血、クモ膜下出血、高血圧性脳症、一過性脳虚血発作、多発性梗塞性痴呆、脳動脈硬化症、ハンチントン病など）、白内障、緑内障（例えば開放隅角緑内障、低眼圧緑内障、閉塞隅角緑内障など）、網脈絡膜疾患（例えば網膜血管閉塞症、網膜静脈周囲炎、Ｅａｌｅｓ病、虚血性眼症候群および網膜細動脈瘤などの網膜血管異常、高血圧または腎疾患による網膜症、糖尿病性網膜症、網膜色素上皮症、網膜ジストロフィー、黄斑ジストロフィー、網脈絡膜萎縮、網脈絡膜症、黄斑変性症、黄斑浮腫、網膜色素上皮剥離、網膜剥離、変性網膜分離症、網膜芽細胞種、網膜色素上皮腫瘍、視神経乳頭毛細血管腫など）、光凝固による眼球後眼部合併症（例えば黄斑部浮腫、網膜剥離、視神経炎、視野異常、光覚異常、色覚異常など）などの予防および治療用の医薬用製剤として、または血管新生、網膜剥離などの予防および治療用の医薬用製剤として非常に有用性が高い。
以上、本発明の態様のいくつかを詳細に説明したが、当業者であれば示された特定の態様には、本発明の新規な教示と利点から実質的に逸脱しない範囲で色々な修正と変更をなし得ることは可能であるので、そのような修正および変更も、全て後記の特許請求の範囲で定義される本発明の精神と範囲内に含まれるものである。
本出願は、日本で出願された特願２０００−３２７６７７号を基礎としており、その内容は本明細書に全て包含されるものである。
【図面の簡単な説明】
図１は、試験例３におけるウサギにおける化合物１の眼内移行性試験の結果を示す。
図２は、試験例４におけるビーグル犬における化合物１の血中移行性試験の結果を示す。
図３は、試験例５におけるビーグル犬における化合物１の血中移行性試験の結果を示す。
【図１】
2002034252.tif 000009
【図２】
2002034252.tif 000010
【図３】
2002034252.tif 000011
【国際調査報告】
2002034252.tif 000012
2002034252.tif 000013
2002034252.tif 000014
2002034252.tif 000015
2002034252.tif 000016
2002034252.tif 000017