(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ピロールニトリンと、ラノコナゾールまたはその塩およびアリルアミン系抗真菌剤から選ばれる少なくとも１つとを、有効成分として含有する抗真菌組成物。
【請求項２】
アリルアミン系抗真菌剤がブテナフィンまたはテルビナフィンである請求の範囲第１項記載の抗真菌組成物。
【請求項３】
ピロールニトリンとラノコナゾールとを有効成分として含有する請求の範囲第１項記載の抗真菌組成物。
【請求項４】
ピロールニトリンとアリルアミン系抗真菌剤とを有効成分として含有する請求の範囲第１項記載の抗真菌組成物。
【請求項５】
アリルアミン系抗真菌剤がブテナフィンまたはテルビナフィンである請求の範囲第４項記載の抗真菌組成物。
【発明の詳細な説明】
技術分野
この発明は、ピロールニトリンと、ラノコナゾール、ブテナフィンまたはその塩およびアリルアミン系抗真菌剤から選ばれる少なくとも１つとを、有効成分として含有する抗真菌組成物に関するものであり、医療の分野で利用される。
背景技術
ピロールニトリンは、以下の構造式（１）で示される抗真菌作用を有する薬物で、単剤あるいは他の抗真菌作用を有する薬物との合剤として広く利用されている。
その合剤としては、ピロールニトリンと、クロトリマゾールなどのイミダゾール系抗真菌物質とを有効成分として含有する抗真菌組成物が知られている（特開昭６１−５６１２７号公報）。
一方、以下の構造式（２）〜（４）でそれぞれ示されるラノコナゾールやブテナフィン、さらにアリルアミン系抗真菌剤であるテルビナフィンも、いずれもが抗真菌作用を有する薬物で、これらも単剤で利用されている。
しかしながら、ピロールニトリンと、ラノコナゾール、ブテナフィンまたはその塩、アリルアミン系抗真菌剤であるテルビナフィンまたはその塩から選ばれる少なくとも１つとを、有効成分として含有する抗真菌組成物は全く知られていない。
これらの抗真菌薬は、いずれも単独使用で優れた抗真菌作用を示すものであるが、副作用の軽減、患者のコンプライアンスの改善、主薬原末コストの低減などの点から、より強力な活性を有する抗真菌剤の開発が望まれている。
0003777499.tif 000002
発明の開示
この発明の発明者らは、ピロールニトリンとラノコナゾールとの併用、ピロールニトリンとブテナフィンまたはその塩との併用、およびピロールニトリンとアリルアミン系抗真菌剤、殊にテルビナフィンまたはその塩との併用により、それらをそれぞれ単独で使用する場合に比べて相乗効果が得られ、より強力な抗菌並びに殺菌活性を有する抗真菌剤が得られることを見出した。
この発明の抗真菌組成物は、ピロールニトリンと、ラノコナゾール、ブテナフィンまたはその塩およびアリルアミン系抗真菌剤から選ばれる少なくとも１つとを、有効成分として含有することを特徴とする。
好ましくは、この発明の抗真菌組成物は、ピロールニトリンとラノコナゾールとを有効成分として含有することを特徴とする。
また、好ましくは、この発明の抗真菌組成物は、ピロールニトリンとブテナフィンまたはその塩とを有効成分として含有することを特徴とする。
この発明の抗真菌組成物におけるブテナフィンの塩としては、例えば塩酸塩などが挙げられる。
また、好ましくは、この発明の抗真菌組成物は、ピロールニトリンとアリルアミン系抗真菌剤とを有効成分として含有することを特徴とする。
この発明の抗真菌組成物に適用されるアリルアミン系抗真菌剤としては、テルビナフィンまたはその塩が好ましい。
また、テルビナフィンの塩としては、例えば塩酸塩などが挙げられる。
発明を実施するための最良の形態
この発明のこれら抗真菌組成物におけるピロールニトリンとラノコナゾール、ピロールニトリンとブテナフィンまたはその塩、およびピロールニトリンとアリルアミン系抗真菌剤との含有重量比率は、いずれも１０：１〜１：１０、好ましくは、５：１〜１：５、さらに好ましくは、２：１〜１：２であるが、抗真菌剤の種類、対象となる病原菌や症状の程度などにより適宜増減される。
この発明のこれら抗真菌組成物に含有される有効成分、即ちピロールニトリンとラノコナゾール、ピロールニトリンとブテナフィンまたはその塩、ピロールニトリンとアリルアミン系抗真菌剤の含有割合は、いずれも０．０１〜１０重量％、好ましくは、０．０５〜５重量％である。
この発明のこれら抗真菌組成物における有効成分の投与量は、剤型、両有効成分の含有割合、対象となる病原菌や症状の程度等に応じて適宜選択されるが、一般的には、いずれも０．０１〜１０ｍｇ／日、好ましくは０．０５〜５ｍｇ／日の範囲で投与される。
さらに、この発明の抗真菌組成物には、これらの有効成分のほかに、例えば、クロタミトン、ジフェンヒドラミン、リドカイン、ジブカイン、サリチル酸メチル、メントール、カンフル、グリチルレチン酸、アズレンなどの鎮痒、消炎、鎮痛もしくは局所麻酔剤、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、クロルヘキシジン、フェノール、クロロブタノール、ヨードなどの殺菌剤、サリチル酸、ジエチルセバケート、尿素、イオウなどの角質軟化浸透剤、塩化亜鉛、アラントインなどの収斂剤もしくは修復剤などを適宜配合してもよい。
この発明の抗真菌組成物の剤型は特に限定されず、公知の抗真菌剤と同様の各種剤型で用いられ、例えば、液剤、ゲル剤、クリーム剤、軟膏剤、エアゾール剤、粉剤、膣坐剤などが挙げられ、好ましくは外用剤として用いられる。
この発明の抗真菌組成物は、次に示す各種の基剤や担体と配合して、慣用の方法、例えば第十三改正日本薬局方に記載の方法により上記の剤型に製造することができる。
一例を挙げれば、軟膏剤として成形する場合には、ワセリン、白ロウ、パラフィン、ポリエチレングリコールなどを、クリーム剤として成形する場合には、油脂、高級脂肪酸、高級アルコール、脂肪酸エステル、精製水、多価アルコール、乳化剤などを、ゲル剤として成形する場合には、カルボキシビニルポリマー、水溶性塩基物質（水酸化アルカリなど）、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、精製水、低級アルコール、多価アルコール、ポリエチレングリコールなどを、液剤として成形する場合には、低級アルコール、グリセリン、プロピレングリコール、精製水などをそれぞれ加えることができる。
次にこの発明の抗真菌組成物の効果を試験例により説明する。
試験例１
ピロールニトリン（以下、「ＰＹ」ともいう）とラノコナゾール（以下、「ＬＣ」ともいう）の併用による相乗効果
１．試験菌
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２．試験培地
サブローグルコース寒天培地（グルコース２％）
３．試験菌液の調製
Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｓｐｐ．については、サブロードグルコース寒天（グルコース２％）の斜面培地を用いて、２５℃で２〜３週間培養後、試験菌の斜面部に０．１％（Ｗ／Ｖ）ツイーン８０添加滅菌生理食塩水を約３〜５ｍｌ加え、白金耳で斜面部を擦って分生子を遊離させた。集めた分生子懸濁液をメッシュの細かな金網でろ過し、菌糸塊を除去した後、３０００ｘｇ．、１０分間の遠心処理によって分生子を濃縮後、上記滅菌生理食塩水に再懸濁させ、血球計算板で数え、所定の分生子数（１０５ｓｐｏｒｅｓ／ｍｌ）に調製し使用した。
Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｎｓは、サブロード液体培地（グルコース２％）で、３０℃、２４時間培養した菌液を、同培地で１０倍に希釈（１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）し、使用した。
４．使用薬剤
ＰＹはエチルアルコール、ＬＣはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）でそれぞれ１ｍｇ／ｍｌの液を作り、以下、ＰＹは２０％エチルアルコール、ＬＣは１０％ＤＭＳＯを希釈液として、所定濃度に調製した。
５．寒天平板希釈法による併用効果の測定
抑制効果の測定は、サブロードグルコース寒天を使用し、所定濃度としたＰＹ液０．５ｍｌとＬＣ液０．５ｍｌに培地９ｍｌを混和して薬剤含有平板を作成した（チェッカーボード法）。
所定菌液（ｃｅｌｌｓ  ｏｒ  ｓｐｏｒｅｓ／ｍｌ）をスタンプ法で接種し、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｓｐｐ．は、２５℃で２週間、Ｃａｎｄｉｄａ  ｓｐｐ．は、３０℃で２日培養後、それぞれ試験菌の発育の有無を判定した。
ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘの算出は、ＰＹおよびＬＣの単独、ならびに両剤の併用によって得られたＭＩＣ値から算出した。
結果を表１に示す。
0003777499.tif 000004
試験例２
ＰＹとＬＣを１：１併用時の殺菌効果
（実験条件）
使用培地：サブロード（グルコース２％）液体培地
試験菌：カンジダ・アルビカンス  １２０１２
接種菌量：約１０４ｃｅｌｌｓ／ｍｌ（サブロード液体培地で、３０℃、２４時間培養菌を１％接種）
（試験法）
所定の１０倍濃度に調製した薬液１容に、菌接種したサブロード液体培地９容を加え、混合後３０℃、２４時間培養し、ＭＩＣを判定した。
さらに、各種濃度の試験菌液を０．１ｍｌサンプリングし、予め作製したサブロー（グルコース２％）寒天平板培地に接種、コンラージ塗抹した。
３０℃で２日培養後、形成されたコロニー数をカウントして０．１ｍｌ当たりの残存生菌数を求めた。
残存生菌数の結果を表２に示す。
0003777499.tif 000005
試験例１の結果から明らかなように、この発明のＰＹとＬＣとを配合した抗真菌組成物は、試験菌に対して強い相乗効果を示す。
さらに、試験例２の結果から明らかなように、この発明のＰＹとＬＣとを配合した抗真菌組成物は、それぞれの単品に比べて低濃度で強い殺菌効果を示す。
試験例３
ピロールニトリン（以下、「ＰＹ」ともいう）とブテナフィン塩酸塩（以下、「ＢＴＦ」ともいう）の併用による相乗効果
１．試験菌
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２．試験培地
Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｓｐｐ．（トリコフィートン）については試験例１と同様の培地を使用した。
一般細菌（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）は、Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  Ａｇａｒを使用した。
３．試験菌液の調製
Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｓｐｐ．については、試験例１と同様に行った。
一般細菌は、Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ液体培地で、３７℃、２０時間培養後、同培地で１００倍に希釈（１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）し、使用した。
４．使用薬剤
ＰＹはエチルアルコール、ＢＴＦはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）でそれぞれ１ｍｇ／ｍｌの液を作り、以下ＰＹは２０％エチルアルコール、ＢＴＦは１０％ＤＭＳＯを希釈液として、所定濃度に調製した。
５．寒天平板希釈法による併用効果の測定
Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｓｐｐ．は、所定濃度としたＰＹ液０．５ｍｌとＢＴＦ液０．５ｍｌに培地９ｍｌを混和して薬剤含有平板を作成し、試験例１と同様に行った。
一般細菌は、Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ  Ａｇａｒを使用して平板を作成し、試験例１と同様に行い、３７℃で２０時間培養後、試験菌の発育の有無を判定した。
ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘの算出も、試験例１と同様に行った。
結果を表３に示す。
0003777499.tif 000007
試験例３の結果から明らかなように、この発明のＰＹとＢＴＦとを配合した抗真菌組成物は、試験菌に対して強い相乗効果を示す。
試験例４
ピロールニトリン（以下、「ＰＹ」ともいう）と塩酸テルビナフィン（以下、「ＴＦ」ともいう）の併用による相乗効果
１．試験菌
0003777499.tif 000008
２．試験培地
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．は、Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ寒天培地、真菌はサブロードグルコース寒天培地（グルコース２％）を使用した。
３．試験菌液の調製
Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｓｐｐ．については、サブロードグルコース寒天（グルコース２％）の斜面培地を用いて、２５℃で２〜３週間培養後、試験菌の斜面部に０．１％（Ｗ／Ｖ）ツイーン８０添加滅菌生理食塩水を約３〜５ｍｌ加え、白金耳で斜面部を擦って分生子を遊離させた。集めた分生子懸濁液をメッシュの細かな金網でろ過し、菌糸塊を除去した後、３０００ｘｇ．、１０分間の遠心処理によって分生子を濃縮後、上記滅菌生理食塩水に再懸濁させ、血球計算板で数え、所定の分生子数（１０５ｓｐｏｒｅｓ／ｍｌ）に調製し使用した。
Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓは、サブロード液体培地（グルコース２％）で、３０℃、２４時間培養した菌液を、同培地で１０倍に希釈（１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）し、使用した。
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ．は、Ｍｕｅｌｌｅｒ  Ｈｉｎｔｏｎ液体培地で３７℃、１８〜２０時間培養した菌液を、同培地で１００倍に希釈（約１０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）し、接種菌液とした。
４．使用薬剤
ＰＹはエチルアルコール、ＴＦはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）でそれぞれ１ｍｇ／ｍｌの液を作り、以下、ＰＹは２０％エチルアルコール、ＴＦは１０％ＤＭＳＯを希釈液として、所定濃度に調製した。
５．寒天平板希釈法による併用効果の測定
試験菌に対する発育抑制効果の測定は、該当培地を使用し、所定濃度としたＰＹ液０．５ｍｌとＴＦ液０．５ｍｌに培地９ｍｌを混和して薬剤含有平板を作成した。
これに所定菌液（ｃｅｌｌｓ  ｏｒ  ｓｐｏｒｅｓ／ｍｌ）をスタンプ法で接種し、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ  ｓｐｐ．は２５℃で２週間、Ｃａｎｄｉｄａ  ｓｐｐ．は３０℃で２日、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｏｃｕｓ  ｓｐｐ．は３７℃で２０時間培養後、それぞれ試験菌の発育の有無を判定した（チェッカーボード法）。
ＦＩＣ  ｉｎｄｅｘの算出は、ＰＹおよびＴＦの単独、ならびに両剤の併用によって得られたＭＩＣ値から算出した。
結果を表４に示す。
0003777499.tif 000009
試験例４の結果から明らかなように、この発明のＰＹとＴＦとを配合した抗真菌組成物は、試験菌に対して強い相乗効果を示す。
実施例１
ピロールニトリン          ２．５ｇ
ラノコナゾール            １．０ｇ
グリセリン                  ５０ｇ
エタノール              ３００ｍｌ
精製水                        適量
ピロールニトリン（２．５ｇ）とラノコナゾール（１．０ｇ）を、グリセリン（５０ｇ）およびエタノール（３００ｍｌ）に溶解し、精製水を加えて１０００ｍｌとし、攪拌し均一にして外用液剤を得た。
実施例２
ピロールニトリン          ２．５ｇ
ブテナフィン塩酸塩        ５．０ｇ
白色ワセリン              ２００ｇ
ステアリルアルコール      ２００ｇ
プロピレングリコール      １００ｇ
ラウリル硫酸ナトリウム      １５ｇ
メチルパラベン            ０．２ｇ
プロピルパラベン          ０．２ｇ
精製水                        適量
ピロールニトリン（２．５ｇ）、ブテナフィン塩酸塩（５．０ｇ）およびプロピルパラベン（０．２ｇ）を、白色ワセリン（２００ｇ）、ステアリルアルコール（２００ｇ）およびプロピレングリコール（１００ｇ）に加温して攪拌し、溶解した。
一方、ラウリル硫酸ナトリウム（１５ｇ）とメチルパラベン（０．２ｇ）を精製水に加温して溶解し、上記の主薬の溶解液を加えて攪拌乳化し、均一に混合して、軟膏剤（１０００ｇ）を得た。
実施例３
ピロールニトリン          ２．５ｇ
ブテナフィン塩酸塩        ２．５ｇ
グリセリン                  ５０ｇ
エタノール              ３００ｍｌ
精製水                        適量
上記各成分を実施例１と同様に処理して、外用液剤１０００ｍｌを得た。
実施例４
ピロールニトリン          ２．５ｇ
ラノコナゾール            ２．５ｇ
白色ワセリン              ２００ｇ
ステアリルアルコール      ２００ｇ
プロピレングリコール      １００ｇ
ラウリル硫酸ナトリウム      １５ｇ
メチルパラベン            ０．２ｇ
プロピルパラベン          ０．２ｇ
精製水                        適量
上記各成分を実施例２と同様に処理して、軟膏剤１０００ｇを得た。
実施例５
ピロールニトリン          ２．５ｇ
塩酸テルビナフィン        ５．０ｇ
グリセリン                  ５０ｇ
エタノール              ３００ｍｌ
精製水                        適量
ピロールニトリン（２．５ｇ）と塩酸テルビナフィン（５．０ｇ）を、グリセリン（５０ｇ）およびエタノール（３００ｍｌ）に溶解し、精製水を加えて１０００ｍｌとし、攪拌し均一にして外用液剤を得た。
実施例６
ピロールニトリン          ２．５ｇ
塩酸テルビナフィン        １．０ｇ
白色ワセリン              ２００ｇ
ステアリルアルコール      ２００ｇ
プロピレングリコール      １００ｇ
ラウリル硫酸ナトリウム      １５ｇ
メチルパラベン            ０．２ｇ
プロピルパラベン          ０．２ｇ
精製水                        適量
ピロールニトリン（２．５ｇ）、塩酸テルビナフィン（１．０ｇ）およびプロピルパラベン（０．２ｇ）を、白色ワセリン（２００ｇ）、ステアリルアルコール（２００ｇ）およびプロピレングリコール（１００ｇ）に加温して攪拌し、溶解した。
一方、ラウリル硫酸ナトリウム（１５ｇ）とメチルパラベン（０．２ｇ）を精製水に加温して溶解し、上記の主薬の溶解液を加えて攪拌乳化し、均一に混合して、軟膏剤（１０００ｇ）を得た。
産業上の利用可能性
以上のように、この発明の抗真菌組成物は、例えば、白癬、渦状癬、黄癬、深在性白癬などの皮膚糸状菌症、皮膚粘膜カンジダ症、深在性カンジダ症などの真菌感染症の治療に極めて有用である。
さらに、この発明の抗真菌組成物は、それぞれの単品に比べて強力な抗真菌効果を有し、副作用の軽減や、患者のコンプライアンスの改善などの点からも極めて有用である。